EA200602200A1 20070427 Номер и дата охранного документа [PDF] EAPO2007\TIT_PDF/200602200 Титульный лист описания [PDF] EAPO2007/PDF/200602200 Полный текст описания EA200602200 20050524 Регистрационный номер и дата заявки EPPCT/EP2004/050935 20040526 Регистрационные номера и даты приоритетных заявок EP2005/052373 Номер международной заявки (PCT) WO2005/118574 20051215 Номер публикации международной заявки (PCT) EAA1 Код вида документа [eaa] EAA20702 Номер бюллетеня [RU] МЕРКАПТОИМИДАЗОЛЫ В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ РЕЦЕПТОРОВ CCR2 Название документа C07D403/04, C07D233/84, C07D405/04, C07D413/04, C07D417/04, C07D401/04, A61K 31/4439, A61K 31/506, A61K 31/427, A61K 31/4164, A61K 31/4245, A61K 31/4178 Индексы МПК [BE] Букс Густаф Мария, Ван Ломмен Ги Розалия Эген, Дойон Жюльен Жорж Пьер-Оливье, Кусеманс Эрвин Сведения об авторах [BE] ЯНССЕН ФАРМАЦЕВТИКА Н.В. Сведения о заявителях
 

Патентная документация ЕАПВ

 
Запрос:  ea200602200a*\id

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

Настоящее изобретение относится к соединению формулы (I)

его N-оксиду, его фармацевтически приемлемой аддитивной соли, его четвертичному амину или стереохимически изомерной форме, где R 1 представляет собой водород, C 1-6 алкил, C 3-7 циклоалкил, C 1-6 алкилоксиC 1-6 алкил, ди(C 1-6 алкил)аминоC 1-6 алкил, арил или гетероарил; каждый R 2 независимо представляет собой галоген, C 1-6 алкил, C 1-6 алкилокси, C 1-6 алкилтио, полигалогенC 1-6 алкил, полигалогенC 1-6 алкилокси, циано, аминокарбонил, амино, моно- или ди(C 1-6 алкил)амино, нитро, арил или арилокси; R 3 представляет собой водород, циано, необязательно замещенный C 1-6 алкил, C(=O)-O-R 5 , C(=O)-NR 6a R 6b , C(=S)-NR 6a R 6b , S(=O) 2 -NR 6a R 6b или C(=O)-R 7 ; R 4 представляет собой водород или C 1-6 алкил; n равно 1, 2, 3, 4 или 5; Z представляет собой циклическую структуру. Кроме того, данное изобретение относится к способу получения соединений формулы (I), их использованию в качестве антагонистов CCR2 и фармацевтическим композициям, их содержащим.

 


Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:
изобретение относится к соединению формулы (I)

его N-оксиду, его фармацевтически приемлемой аддитивной соли, его четвертичному амину или стереохимически изомерной форме, где R 1 представляет собой водород, C 1-6 алкил, C 3-7 циклоалкил, C 1-6 алкилоксиC 1-6 алкил, ди(C 1-6 алкил)аминоC 1-6 алкил, арил или гетероарил; каждый R 2 независимо представляет собой галоген, C 1-6 алкил, C 1-6 алкилокси, C 1-6 алкилтио, полигалогенC 1-6 алкил, полигалогенC 1-6 алкилокси, циано, аминокарбонил, амино, моно- или ди(C 1-6 алкил)амино, нитро, арил или арилокси; R 3 представляет собой водород, циано, необязательно замещенный C 1-6 алкил, C(=O)-O-R 5 , C(=O)-NR 6a R 6b , C(=S)-NR 6a R 6b , S(=O) 2 -NR 6a R 6b или C(=O)-R 7 ; R 4 представляет собой водород или C 1-6 алкил; n равно 1, 2, 3, 4 или 5; Z представляет собой циклическую структуру. Кроме того, данное изобретение относится к способу получения соединений формулы (I), их использованию в качестве антагонистов CCR2 и фармацевтическим композициям, их содержащим.

 


2420-140357ЕА/042 МЕРКАПТОИМИДАЗОЛЫ В КАЧЕСТВЕ АНТАГОНИСТОВ РЕЦЕПТОРА CCR2
ОПИСАНИЕ
Настоящее изобретение относится к производным меркаптоимидазола, имеющих антагонистические свойства в отношении рецепторов CCR2. Кроме того, данное изобретение относится к способам их получения и фармацевтическим композициям, содержащим вышеуказанные соединения. Изобретение также относится к применению указанных соединений для получения лекарственного средства для профилактики или лечения заболеваний, опосредованных через активацию рецептора CCR2, в частности, рецептора CCR2B.
В международной публикации W0 02/066458 раскрываются производные 2-тиозамещенного имидазола, обладающие
иммуномодулирующей и/или ингибирующей активностью в отношении освобождения цитокинов, особенно TNF-a и IL-S.
Патент Франции 1487326 относится к производным тиоимидазола, используемым в качестве анальгетика и имеющим сосудорасширяющую активность.
FR 6751 М раскрывает производные тиоимидазола в качестве седативных средств и анальгезирующих средств.
Патент США 3850944 раскрывает производные 2-меркапто-5-(3-пиридил)имидазола, имеющие противовоспалительную активность.
Европейский патент 0277384 раскрывает производные 1Я-имидазол-5-карбоновой кислоты для сдерживания роста сорняков.
Соединения по данному изобретению отличаются от соединений предшествующего уровня по структуре, фармакологической активности и/или фармакологическому воздействию
(эффективности).
Один аспект настоящего изобретения относится к соединению формулы
его N-оксиду, фармацевтически приемлемой аддитивной соли, его четвертичному амину или стереохимически изомерной форме, где
Rx представляет собой водород, Ci-бал кил, С3-7циклоалкил, С1-6алкилоксиС1-балкил, ди (Сх-балкил) аминоСх-б^лкил, арил или гетероарил;
каждый R2 независимо представляет собой галоген, Сх-балкил, С1-6алкилокси, Ci-балкилтио, полигалогенС1-6алкил,
полигалогенСх-балкилокси, циано, аминокарбонил, амино, моно- или ди (Сх-4алкил) амино, нитро, арил или арилокси;
R3 представляет собой водород, циано, Сх-б^лкил, необязательно замещенный гидрокси или С1-6алкилокси, C(=0)-0-R5, С(=0)-NR6aR6b, C(=S) -NR6aR6b, S (=0) 2-NR6aR6b или C(=0)-R7;
R4 представляет собой водород или Сх-балкил;
R5 представляет собой водород, Сх-б^лкил, гидроксиСх-балкил, С2.6алкенил, С2-балкинил, полигалогенСх-бЭЛКил,
Сх-балкилоксиСх-бЗлкил, аминоСх-балкил, моно- или
ди (Сх-4алкил) аминоСх-балкил, аминокарбонилСх-балкил, моно- или ди (Сх-4алкил) аминокарбонилСх-балкил или арил;
R6a и R6b/ каждый, независимо представляет собой водород, Сх-б^лкил, амино, моно- или ди (Сх-4алкил) амино, арилШ-, аминоСх-б^лкил, моно- или ди (Сх-4алкил) аминоСх-бЭЛКил,
Сх-балкилкарбониламино, аминокарбониламино, Сх-б^лкилокси,
карбониламино или гидроксиСх-б^лкил; или
R6a и R6b, взятые вместе с азотом, с которым они связаны, образуют пирролидинил, имидазолидинил, пиразолидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил или пиперазинил, замещенный Сх-валкилом;
R7 представляет собой водород, Сх-бЭлкил, гидроксиСх-валкил, С2-балкенил, С2-6алкинил, полигалогенСх-бЭлкил,
Сх-б^лкилоксиСх-балкил, аминоСх-б^лкил, моно- или
ди (Сх-4алкил) аминоСх-балкил, аминокарбонилСх-б^лкил, моно- или ди (Сх-4алкил) аминокарбонилСх-балкил, арил или гетероарил;
Z представляет собой циклическую структуру, выбранную из
\\J Li L^R <
-|-N N-N (a-1) (a-2)
(a-3)
(a-5)
(a-6)
N-0
(a-7) (a-8) (a-9) (a-10) О""11) 0"-12)
3* i> E?
(ИЗ) (a-M) ("-'5) (a-I6)
N-0
(a-17)
N (a-18)
каждый R8 независимо представляет собой водород, галоген, Ci-балкил, Ci-балкилокси, полигалогенСх-валкил,
полигалогенСх-балкилокси, циано, аминокарбонил, моно- или ди (С1-4алкил) аминокарбонил, амино, моно- или ди (С^алкил) амино, гидроксиСх-балкиламино, арил, арилокси, пиперидинил,
пиперидиниламино, морфолинил, пиперазинил или нитро;
каждый R9 независимо представляет собой водород, галоген или Ci-балкил;
п равно 1, 2, 3, 4 или 5;
арил представляет собой фенил или фенил, замещенный одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, Ci-балкила, Ci-балкилокси, полигалогенС1-6алкила, полигалогенС1-6алкилокси, циано,
аминокарбонила, моно- или ди(С^алкил)аминокарбонила, амино, моно- или ди (Сх-4алкил) амино, фенилокси или нитро;
гетероарил представляет собой фуранил, тиенил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил,
изотиазолил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, при этом каждый из указанных гетероциклов является необязательно замещенным одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, С1-6алкила, Сх-6алкилокси, полигалогенСх-валкила, полигалогенСх-балкилокси, циано, аминокарбонила, моно- или ди (С1-4алкил) аминокарбонила, амино, моно- или ди (Сх-4алкил) амино или нитро.
Настоящее изобретение также относится к применению соединения для получения лекарственного средства для профилактики или лечения заболеваний, опосредованных через активацию рецептора CCR2, в частности, для профилактики или лечения воспалительных заболеваний, и это указанное соединение представляет собой соединение формулы (I)
его N-оксид, его фармацевтически приемлемую аддитивную соль, его четвертичный амин или стереохимически изомерную форму, где
Ri представляет собой водород, Сх-балкил, С3.7Циклоалкил, Сх-балкилоксиСх-балкил, ди (Сх-балкил) аминоСх-бЭлкил, арил или гетероарил;
каждый R2 независимо представляет собой галоген, Сх-б^лкил, Сх-балкилокси, Сх-б^лкилтио, полигалогенСх-б^лкил,
полигалогенСх-бЭлкилокси, циано, аминокарбонил, амино, моно- или ди (Сх-4алкил) амино, нитро, арил или арилокси;
R3 представляет собой водород, циано, Сх-балкил, необязательно замещенный гидрокси или Сх-валкилокси, C(=0)-0-R5/ С(=0)-NR6aR6b, C(=S) -NR6aR6b, S (=0) 2-NR6aR6b или C(=0)-R7;
R4 представляет собой водород или Сх-вэлкил;
R5 представляет собой водород, Сх-валкил, гидроксиСх-валкил, С2-балкенил, С2-6алкинил, полигалогенСх-валкил,
Сх-балкилоксиСх-бЭлкил, аминоСх-валкил, моно- или
ди (Сх-4алкил) аминоСх-б^лкил, аминокарбонилСх-валкил, моно- или ди (СХ-4ЙЛКИЛ) аминокарбонилСх-балкил или арил;
R.6a и R6bf каждый, независимо представляет собой водород, Сх-б^лкил, амино моно- или ди (Сх-4алкил) амино, арилКГН-, аминоСх-балкил, моно- или ди (Сх-4алкил) аминоСх-валкил,
Сх-бЭлкилкарбониламино, аминокарбониламино, Сх-валкилокси,
карбониламино или гидроксиСх-балкил; или
Иба и R6bf взятые вместе с азотом, с которым они связаны, образуют пирролидинил, имидазолидинил, пиразолидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил или пиперазинил, замещенный Сх-валкилом;
R7 представляет собой водород, Сх-валкил, гидроксиСх-валкил, Сг-валкенил, С2-балкинил, полигалогенСх-валкил,
Сх-валкилоксиСх-балкил, аминоСх-валкил, моно- или
ди (Сх-4алкил) аминоСх-валкил, аминокарбонилСх-валкил, моно- или ди (Сх-4алкил) аминокарбонилСх-валкил, арил или гетероарил;
Z представляет собой циклическую структуру, выбранную из
(в-1) (а-2) (а-3) СИ) (в-5) (а-*)
(а-7) (а-8) (а-9) (а-10) С""11) С9-12)
(а-18)
каждый R8 независимо представляет собой водород, галоген, Ci-балкил, Ci-балкилокси, полигалогенС1-6алкил,
полигалогенС1-6алкилокси, циано, аминокарбонил, моно- или ди (С1-4алкил) аминокарбонил, амино, моно- или ди (С^алкил) амино, гидроксиС1-балкиламино, арил, арилокси, пиперидинил,
пиперидиниламино, морфолинил, пиперазинил или нитро;
каждый R9 независимо представляет собой водород, галоген или Ci-балкил;
п равно 1, 2, 3, 4 или 5;
арил представляет собой фенил или фенил, замещенный одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, С1-6алкила, Сх-балкилокси, полигалогенСх-балкила, полигалогенСх-балкилокси, циано,
аминокарбонила, моно- или ди(Сх-4алкил)аминокарбонила, амино, моно- или ди (С1-4алкил) амино, фенилокси или нитро;
гетероарил представляет собой фуранил, тиенил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, при этом каждый из указанных гетероциклов является необязательно замещенным одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, С1-6алкила, Сх-бЭлкилокси, полигалогенСх-бЭлкила, полигалогенСх-балкилокси, циано, аминокарбонила, моно- или ди (С1-4алкил) аминокарбонила, амино, моно- или ди (С1-4алкил) амино или нитро.
Используемый в описании термин "Сх-4алкил" в качестве группы или части группы означает насыщенные углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, имеющие от 1 до 4 углеродных атомов, такие как метил, этил, пропил, 1-метилэтил, бутил; Ci-балкил в качестве группы или части группы означает насыщенные углеводородные радикалы с прямой или разветвленной цепью, имеющие от 1 до б углеродных атомов, такие как группа, определенная для С1-4алкила, и пентил, гексил, 2-метилбутил и т.п.; С3-7циклоалкил представляет собой циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил; С2-балкенил означает углеводородные радикалы с прямой и разветвленной цепью, имеющие
от 2 до б углеродных атомов, содержащие двойную связь, такие как этенил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил и т.п.; Сг-балкинил означает углеводородные радикалы с прямой и разветвленной цепью, имеющие от 2 до 6 углеродных атомов, содержащие тройную связь, такие как этинил, пропинил, бутинил, пентинил, гексинил и т.п.
Используемый в описании термин "(=0)" образует карбонильную часть при связывании с атомом углерода, сульфоксидную часть при связывании с атомом серы и сульфонильную часть когда два вышеуказанных термина связаны с атомом серы.
Термин "галоген" является общим обозначением для фтора, хлора, брома и йода. Термин "полигалогенметил", используемый в описании в качестве группы или части группы подразумевает моно-или полигалогензамещенный метил, в частности, метил с одним или несколькими атомами фтора, например, дифторметил или трифторметил; полигалогенС1-6алкил в качестве группы или части группы подразумевает моно- или полигалогензамещенный Ci-балкил, например, группы, определенные для полигалогенметила, 1,1-дифторэтила и т.п. В случае когда, в пределах определения "полигалогенметил" или "полигалогенС1-6алкил", с алкильной группой связаны больше чем один атом галогена, указанные атомы галогена могут быть одинаковыми или отличными друг от друга.
Подразумевается, что термин "гетероарил" в определении Rx или R7 включает все возможные изомерные формы гетероциклов, например, пирролил включает 1Я-пирролил и 2Я-пирролил.
Арильные, гетероарильные, гетероциклические кольцевые структуры или циклические кольцевые структуры, перечисленные в определениях заместителей соединений формулы (I) (см., например, Ri, R5, R7 и Z) , упомянутых выше или в дальнейшем, могут быть присоединены к остатку молекулы формулы (I) посредством любого кольцевого углерода или гетероатома, как целесообразно, если не оговорено особо. Так, например, когда гетероарил представляет собой имидазолил, это может быть 1-имидазолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил и т.п.
В тех случаях, когда переменная (например, R6a/ &бь)
встречается больше чем один раз в значениях радикалов, каждое определение является независимым.
Линии, начерченные в направлении от заместителей внутрь циклических структур, указывают на то, что связь может быть присоединена к любому из подходящих атомов цикла. В тех случаях, когда линии начерчены в направлении внутрь бициклических структур, это означает, что связь может быть присоединена к любому из подходящих кольцевых атомов любого одного из двух колец бициклической структуры.
В случае терапевтического использования, соли соединений формулы (I) представляют собой соли, в которых противоион является фармацевтически приемлемым. Однако, соли кислот и оснований, которые не являются фармацевтически приемлемыми, могут также найти применение, например, для получения или очистки фармацевтически приемлемого соединения. Все соли, независимо от того, являются ли они фармацевтически приемлемыми или нет, входят в объем настоящего изобретения.
Упомянутые выше фармацевтически приемлемые аддитивные соли, как подразумевается, включают терапевтически активные нетоксичные формы аддитивных солей кислоты, которые способны образовывать соединения формулы (I). Последние могут быть удобно получены обработкой основной формы соответствующими кислотами, такими как неорганические кислоты, например, галогенводородные кислоты, например, хлористоводородная, бромистоводородная и т.п.; серная кислота; азотная кислота; фосфорная кислота и т.п.; или органические кислоты, например, уксусная, пропановая, гидроксиуксусная, 2-гидроксипропановая, 2-оксопропановая, щавелевая, малоновая, янтарная, малеиновая, фумаровая, яблочная, винная,
2.гидрокси.1, 2 , З.пропантрикарбоновая, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, 4-метилбензолсульфоновая, циклогексансульфаминовая, 2-гидроксибензойная, 4.амино.2.гидроксибензойная и тому подобные кислоты. И наоборот, солевая форма может быть превращена обработкой щелочью в свободную основную форму.
Соединения формулы (I) , содержащие кислые протоны, могут
быть превращены в соответствующие терапевтически активные нетоксичные формы аддитивных солей металлов или амина обработкой подходящими органическими и неорганическими основаниями. Подходящие солевые формы оснований включают, например, соли аммония, соли щелочных и щелочноземельных металлов, например, соли лития, натрия, калия, магния, кальция и т.п., соли с органическими основаниями, например, соли первичных, вторичных и третичных алифатических и ароматических аминов, таких как метиламин, этиламин, пропиламин, изопропиламин, четыре изомера бутиламина, диметиламин, диэтиламин, диэтаноламин, дипропиламин, диизопропиламин, ди-н-бутиламин, пирролидин, пиперидин, морфолин, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, хинуклидин, пиридин, хинолин и изохинолин, бензатин, М-метил-Б-глюкамин, 2-амино-2.
(гидроксиметил)-1,3-пропандиол, гидрабамин, и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и т.п. И наоборот, солевая форма может быть превращена обработкой кислотой в свободную кислотную форму.
Термин "аддитивная соль" также включает гидраты и аддитивные формы растворителя, которые могут образовывать соединения формулы (I) . Примерами таких форм являются, например, гидраты, алкоголяты и т.п.
Используемый ранее термин "четвертичный амин" означает соли четвертичного аммония, которые способны образовывать соединения формулы (I) путем взаимодействия основного азота соединения формулы (I) с подходящим четвертичным агентом, таким как, например, необязательно замещенный алкилгалогенид, арилгалогенид или арилалкилгалогенид, например, метилиодид или бензилиодид. Могут быть также использованы и другие реагенты с легко отщепляемыми группами, такие как
алкилтрифторметансульфонаты, алкилметансульфонаты и алкил-п-толуолсульфонаты. Четвертичный амин имеет положительно заряженный азот. Фармацевтически приемлемые противоионы включают хлор, бром, йод, трифторацетат и ацетат. Желаемый противоион может быть введен с использованием ионообменных смол (ионитов).
N- оксидные формы по данному изобретению подразумевают включение соединений формулы (I), в которых один или несколько третичных атомов азота окислены в так называемый N-оксид.
Следует иметь в виду, что некоторые из соединений формулы (I) и их N- оксидов, аддитивных солей, четвертичных аминов и стереохимически изомерных форм могут содержать один или несколько центров хиральности и поэтому могут существовать в виде стереохимически изомерных форм.
Используемый выше термин "стереохимически изомерные формы" означает все возможные стереоизомерные формы, которые могут иметь соединения формулы (I) , и их N-оксиды, аддитивные соли, четвертичные амины или физиологически функциональные производные. Если не упомянуто выше или не оговорено особо, химическое обозначение соединений означает смесь всех возможных стереохимически изомерных форм, при этом указанные смеси содержат все диастереомеры и энантиомеры основной молекулярной структуры, а также каждую из индивидуальных изомерных форм (соединений) формулы (I) и их N-оксидов, солей, сольватов или четвертичных аминов, в основном, в свободном состоянии, т.е. связанную с меньше чем 10%, предпочтительно меньше чем 5%, в частности, меньше чем 2% и наиболее предпочтительно меньше чем 1% других изомеров. Таким образом, когда соединение формулы (I) определяют, например, как (Е) , это означает, что соединение, по существу, не содержит изомера (Z) .
В частности, стереогенные центры могут иметь R- или S-конфигурацию; заместители на двухвалентных циклических (частично) насыщенных радикалах могут иметь либо цис-, либо транс-конфигурацию. Соединения, заключающие в себе двойные связи, могут иметь Е ( 'против')- или Z (лвместе')-стереохимию при указанной двойной связи. Термины "цис, транс, R, S, Ей Z" общеизвестны специалисту средней квалификации в данной области.
Предполагается, что все стереохимически изомерные формы соединений формулы (I) включены в объем данного изобретения.
Некоторые из соединений формулы (I) могут также существовать в соответствующей таутомерной форме.
Предполагается, что такие формы, хотя они и не представлены в
явном виде в вышеупомянутой формуле (I), входят в объем настоящего изобретения. Например, подразумевается, что формула
(I) включает таутомерную форму *(r), которая представляет
собой N. Таким образом, соединения по данному изобретению
включают соединения формулы
Используемый в дальнейшем термин "соединения формулы (I)", как предполагается, также включает их N-оксидные формы, их аддитивные соли, их четвертичные амины и их стереохимически изомерные формы. Особый интерес представляют собой соединения формулы (I), которые являются стереохимически чистыми.
Всякий раз при использовании в описании термина, заместители могут быть выбраны, каждый независимо, из перечня многочисленных определений, так, например, для Rea или Reb предполагаются все возможные комбинации, которые химически возможны.
Первый предпочтительный вариант осуществления настоящего изобретения относится к соединению формулы
где
Ri представляет собой водород, Сх-валкил, С3-7циклоалкил, Сх-балкилоксиСх-балкил, ди (Сх-валкил) аминоСх-бЭлкил, арил или гетероарил;
каждый R2 независимо представляет собой галоген, Сх-валкил, Сх-валкилокси, Сх-валкилтио, полигалогенСх-балкил,
полигалогенС1_балкилокси, циано, аминокарбонил, амино, моно- или ди (С1-4алкил) амино, нитро, арил или арилокси;
R3 представляет собой водород, циано, Сд.-6алкил, необязательно замещенный гидрокси или Сх^алкилокси, C(=0)-0-R5, С(=0)-NR6aR6b, C(=S)-NR6aR6b, S (=0) 2-NR6aR6b или C(=0)-R7;
R4 представляет собой водород или Ci-еалкил;
R5 представляет собой водород, С1-6алкил, гидроксиС1-балкил, С2-балкенил, С2-6алкинил, полигалогенС1-6алкил,
С1.балкилоксиС1-6алкил, аминоС1-6алкил, моно- или
ди (С1-4алкил) аминоС1-6алкил, аминокарбонилСл._балкил, моно- или ди (Сх-4алкил) аминокарбонилСх-бЭлкил или арил/
R6a и R6b, каждый, независимо представляет собой водород, Ci-балкил, амино, моно- или ди (С1-4алкил) амино, арилЫН-, аминоСх-балкил, моно- или ди (С:.-4алкил) аминоСх-балкил,
Ci-балкилкарбониламино, аминокарбониламино, С1-6алкилокси,
карбониламино или гидроксиС1-6алкил; или
R6a и R6b, взятые вместе с азотом, с которым они связаны, образуют пирролидинил, имидазолидинил, пиразолидинил,
пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил или пиперазинил, замещенный С1-6алкилом;
R7 представляет собой водород, С1-6алкил, гидроксиС1-6алкил, С2.6алкенил, С2-балкинил, полигалогенС1-балкил,
С1-балкилоксиС1-6алкил, аминоС1-балкил, моно- или
ди (С1-4алкил) аминоС1-6алкил, аминокарбонилС1-6алкил, моно- или ди (С1-4алкил) аминокарбонилС1-балкил, арил или гетероарил;
Z представляет собой циклическую структуру, выбранную из
(И) ("-2) <И) (а-5) (а-б)
(а-7) (а-8) (а-5> ) (а"10) С"-11)
*9 Rp *"
(a-13) (e-14) (a-15) (a-l6)
(a-17)
N (a-18)
каждый R8 независимо представляет собой водород, галоген, Ci-балкил, Ci-балкилокси, полигалогенС1-6алкил,
полигалогенСх-балкилокси, циано, аминокарбонил, моно- или ди (С^алкил) аминокарбонил, амино, моно- или ди (С1-4алкил) амино, гидроксиСх-балкиламино, арил, арилокси, пиперидинил,
пиперидиниламино, морфолинил, пиперазинил или нитро;
каждый R9 независимо представляет собой водород, галоген или Ci-балкил;
п равно 1, 2, 3, 4 или 5;
арил представляет собой фенил или фенил, замещенный одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, Сх-балкила, С1-6алкилокси, полигалогенС1-6алкила, полигалогенС1-6алкилокси, циано,
аминокарбонила, моно- или ди(С^алкил)аминокарбонила, амино, моно- или ди (С1-4алкил) амино, фенилокси или нитро;
гетероарил представляет собой фуранил, тиенил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, при этом каждый из указанных гетероциклов является необязательно замещенным одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, Сх-балкила, Ci-валкилокси, полигалогенСх-валкила, полигалогенСх-балкилокси, циано, аминокарбонила, моно- или ди (С1-4алкил) аминокарбонила, амино, моно- или ди (С].-4алкил) амино или нитро.
Второй предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше
в качестве предпочтительного варианта, где R3 представляет собой водород, циано, C(=0)-0-R5, С (=0)-NR6aR6b, C(=S)- S(=0)2-NR6aR6b или C(=0)-R7.
Третий предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где R3 представляет собой циано, Ci-балкил, необязательно замещенный гидрокси или С^балкилокси, C(=0)-0-R5, С(=0)-NR6aR6b, С(=S)-NR6aR6b, S(=0)2-NR6aR6b или C(=0)-R7.
Четвертый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где R3 представляет собой циано, C(=0)-0.R5, С(=0)-NR6aR6b, С (=S)-NR6aR6b, S(=0)2-NR6aR6b или C(=0).R7.
Пятый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где R3 представляет собой водород, циано, C(=0)-0-R5, С (=0)-NR6aR6b или C(=0)-R7; предпочтительно водород, С1-6алкил, замещенный С1-6алкилокси, или C(=0)-0-R5; более предпочтительно водород или C(=0)-0-R5; еще более предпочтительно C(=0)-0-R5, в частности, С(=0)-0-С1-6алкил; наиболее предпочтительно С(=0)-0-СН3.
Шестой предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где Z не является 3-пиридилом.
Седьмой предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где п равно 2 или 3, в частности, п равно 2.
Восьмой предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где п равно 2 и указанные два заместителя находятся в мета- и пара-положении.
Девятый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше
в качестве предпочтительного варианта, где Z представляет собой циклическую структуру, выбранную из (а-1), (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-б), (а-7), (а-9), (а-10), (а-11), (а-12), (а-13), (а-14), (а-15), (а-16) или (а-18); предпочтительно циклическую структуру, выбранную из (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-6), (а-7), (а-11), (а-12), (а-13), (а-14) или (а-15); более предпочтительно циклическую структуру, выбранную из (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-6), (а-7), (а-11), (а-13), (а-14) или (а-15); еще более предпочтительно циклическую структуру, выбранную из (а-2), (а-11) или (а-15); наиболее предпочтительно циклическую структуру, выбранную из (а-2) или (а-15). Также представляют интерес соединения формулы (I) или любая подгруппа их, упомянутая выше в качестве предпочтительного варианта, где Z представляет собой циклическую структуру (а-9).
Десятый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где Z представляет собой циклическую структуру, выбранную из (а-2) или (а-15) и R3 представляет собой водород.
Одиннадцатый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где R2 представляет собой галоген, Сх-балкил, Сх-6алкилокси, полигалогенС1-6алкил или арилокси, предпочтительно галоген, полигалогенСх-валкил или арилокси, более предпочтительно галоген или
полигалогенС1.балкил, в частности, хлор, фтор или трифторметил, наиболее предпочтительно галоген, в частности, хлор или фтор.
Двенадцатый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где Ri представляет собой водород, метил, этил, н-пропил, метоксиметил, циклогексил, циклопропил, диметиламинометил, 2-тиенил, 3,4-дихлорфенил; предпочтительно Ri представляет собой Сх-6алкил или Сх-балкилоксиСх-балкил, в частности, метил, этил, пропил, метоксиметил, более конкретно, метил, этил, н-пропил или метоксиметил; более предпочтительно Rx представляет собой
Ci-балкил, в частности, метил, этил и пропил, более конкретно, метил, этил или н-пропил; наиболее предпочтительно Ri представляет собой этил.
Тринадцатый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где R4 представляет собой водород.
Четырнадцатый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, которые являются стереохимически чистыми.
Пятнадцатый предпочтительный вариант представляет собой соединения формулы (I) или любую подгруппу их, упомянутую выше в качестве предпочтительного варианта, где атом углерода, несущий Ri и R4 заместитель, имеет конфигурацию (S), т.е. соединение формулы (I')
его N-оксид, его фармацевтически приемлемую аддитивную соль, его четвертичный амин или стереохимически изомерную форму.
Также предпочтительными соединениями являются соединения формулы (I), где используют одно или несколько, предпочтительно все из нижеследующих ограничений:
a) Ri представляет собой Сц-валкил или Сх-балкилоксиСх-балкил, особенно метил, этил, пропил или метоксиметил;
b) R2 представляет собой галоген, полигалогенСх-балкил или арилокси, особенно галоген, например, хлор или фтор;
c) R3 представляет собой водород, циано, C(=0)-0-R5, С(=0)-NR6aR6b или C(=0)-R7;
d) Z представляет собой циклическую систему, выбранную из
(а-1), (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-6), (а-7), (а-9), (а-10), (а-11), (а-12), (а-13), (а-14), (а-15), (а-16) или (а-18);
e) R4 представляет собой водород;
f) л равно 2 или 3.
Кроме того, предпочтительные соединения состоят из соединений формулы (I) , где используют одно или несколько из нижеследующих ограничений:
a) Rj. представляет собой С1-6алкил, особенно этил или н.пропил, более особенно этил;
b) R2 представляет собой галоген, полигалогенС1-6алкил или арилокси, особенно галоген, например, хлор и фтор;
c) R3 представляет собой водород, С1-6алкил, замещенный Ci-балкилокси, или C(=0)-0-R5;
d) Z представляет собой циклическую систему, выбранную из (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-6), (а-7), (а-11), (а-13), (а.14), (а-15) ;
e) R4 представляет собой водород;
f) п равно 1, 2 или 3, в частности, 2 или 3, более конкретно, 2.
Другие предпочтительные соединения состоят из соединений формулы (I), где используют одно или несколько из нижеследующих ограничений:
a) Ri представляет собой Сх-бЭлкил, особенно этил;
b) R2 представляет собой галоген, полигалогенСх-валкил или арилокси;
c) R3 представляет собой водород;
d) Z представляет собой циклическую систему, выбранную из (а-2), (а-7) или (а-15) или (а-2), (а-11) или (а-15) ;
e) R4 представляет собой водород;
f) п равно 2 или 3, в частности 2.
Другие предпочтительные соединения состоят из соединений формулы (I), где используют одно или несколько из нижеследующих ограничений:
a) Rx представляет собой Сх-б^лкил, особенно этил;
b) R2 представляет собой галоген, особенно хлор или фтор;
c) R3 представляет собой водород;
d) Z представляет собой циклическую систему, выбранную из (а-2) или (а-15);
e) R4 представляет собой водород/
f) п равно 2 или 3, в частности 2.
Предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения 5, 26, 1, 20, 21 и 9.
Наиболее предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения 1, 20, 21 и 9.
В общем, соединения формулы (I) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (II) с подходящей кислотой, такой как хлористоводородная кислота или уксусная кислота, необязательно в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, 1,4-диоксан.
Промежуточные соединения формулы (I) , где R3 представляет собой водород, и эти указанные соединения представлены формулой (1-а), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (III) с промежуточным соединением формулы (IV) в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, 1,4-диоксан и вода.
Соединения формулы (I) могут быть также получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (V) с
подходящей кислотой, такой как, например, трифторуксусная кислота.
(V) СО
Соединения формулы (I) , где Z представляет собой необязательно замещенный 1,3,4-оксадиазол, и эти указанные соединения представлены формулой (1-Ь), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (VI) с хлорангидридом фосфорной кислоты (Р0С13) или реагентом Бюргесса в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, ацетонитрил или тетрагидрофуран.
Соединения формулы (I) , где Z представляет собой 1,3,4-оксадиазол, и эти указанные соединения представлены формулой (I-b-1), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (VII) с S0C12 и HC(=0)NH-NH2 в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран.
Соединения формулы (I), где Z представляет собой необязательно замещенный 1,2,4-оксадиазол, и эти указанные соединения представлены формулой (1-е), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (VIII) с промежуточным соединением формулы (IX) в присутствии подходящего основания, такого как, например, NaOCH3, и подходящего растворителя, такого как спирт, например, метанол.
Соединения формулы (I) , где Z представляет собой тетразолил и где R3 представляет собой водород, и эти указанные соединения представлены формулой (1-а-1), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (X) с метилформиатом в присутствии подходящего основания, такого как, например, трег-BuOK, NaOCH3 ИЛИ NaOC(CH3)3, KSCN, в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, хлористоводородная кислота и т.п., и в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран, спирт, такого как, например, метанол, и воды с последующим взаимодействием полученного таким образом промежуточного соединения формулы (Х-а) с Bu3SnN3 в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, толуол.
Соединения формулы (I') можно получить согласно вышеописанным реакциям, но исходя из промежуточного соединения, в котором углеродный атом, несущий Ri и R4 заместитель, имеет конфигурацию (S) .
Альтернативно, соединения формулы (I), где углеродный атом, несущий Rx и R4 заместитель, имеет конфигурацию (R), можно получить согласно вышеописанным реакциям, но исходя из промежуточного соединения, в котором углеродный атом, несущий Ri и R4 заместитель, имеет конфигурацию (R).
Кроме того, соединения формулы (I) можно получить путем превращения соединений формулы (I) друг в друга в соответствии с известными в данной области техники реакциями превращения групп.
Соединения формулы (I) могут быть превращены в соответствующие N-оксидные формы, следуя общеизвестным способам превращения трехвалентного азота в его N-оксидную форму. Указанная реакция N-окисления может быть осуществлена путем взаимодействия исходного продукта формулы (I) с соответствующим органическим или неорганическим пероксидом. Подходящие неорганические пероксиды включают, например, пероксид водорода, пероксиды щелочных металлов или щелочноземельных металлов, например, пероксид натрия, пероксид калия; подходящие органические пероксиды могут включать пероксикислоты, такие как, например, бензолкарбопероксовая кислота или
галогензамещенная бензолкарбопероксовая кислота, например, 3-хлорбензолкарбопероксовая кислота, пероксоалкановые кислоты, например, пероксоуксусная кислота, алкилгидропероксиды, например, трет-бутилгидропероксид. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например, этанол и т.п., углеводороды, например, толуол, кетоны, например, 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например,
дихлорметан, и смеси таких растворителей.
Соединения формулы (I) , где R3 представляет собой С (=0)--О.С1-6алкил, могут быть превращены в соединение формулы (I) , где R3 представляет собой СН2-0Н, реакцией с подходящим восстановителем, таким как, например, LiHBEt3 в присутствии
подходящего растворителя, такого как, например,
тетрагидрофуран.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой С(=0)-0-Сх-балкил, может быть также превращены в соединение формулы (I) , где R3 представляет собой С(=0)-ОН, путем реакции с подходящим основанием, таким как NaOH, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, Н20, тетрагидрофуран или подходящий спирт, например, метанол и т.п.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой С(=0)-0-С1-6алкил, могут быть также превращены в соединение формулы (I) , где R3 представляет собой С (=0) -ШбаНбы реакцией с соответствующим основанием формулы NHR6aR6b в подходящем растворителе, таком как, например, Н20.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой С(=0)-0-Н, могут быть превращены в соединение формулы (I), где R3 представляет собой С (=0) -NR6aR6bf реакцией с соответствующим основанием формулы NHR6aReb в присутствии N' -
(этилкарбонимидоил)-N, .М-диметил-1,3-пропандиамина, 1-гидрокси-1Н-бензотриазола и подходящего растворителя, такого как, например, N,iV-диметилформамид.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой С(=0)-0-Н, могут быть также превращены в соединение формулы (I), где R3 представляет собой C(=0)-NH2, реакцией с NH40H в присутствии S0C12.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой С(=0)-0-С1-6алкил, могут быть превращены в соединение формулы (I) , где R3 представляет собой С (=0) -0-С1-6алкил-0-С1-6алкил, реакцией с НО-С1-6алкил-0-С1-6алкилом в присутствии NaBH4.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой циано или С (=0) -O-Ci-балкил, могут быть превращены в соединение формулы (I), где R3 представляет собой аминокарбонил, реакцией с NH40H.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой циано, могут быть также превращены в соединение формулы (I) , где R3 представляет собой С (=S)NR6aR6br реакцией с гидросульфидом в присутствии N-ЭТИЛ-Ы- (1-метилэтил)-2-пропанамина в подходящем
растворителе, таком как пиридин.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой С(=0)-Шба^бы могут быть превращены в соединение формулы (I) , где R3 представляет собой С (=0) -С1-6алкил, реакцией с хлорС1.6алкилМд в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
Соединения формулы (I), где R3 представляет собой С(=0)-С1-6алкил, могут быть превращены в соединения формулы (I) , где R3 представляет собой гидроксиС1-балкил, реакцией с подходящим восстановителем, таким как NaBH4, в присутствии подходящего растворителя, такого как метанол.
Некоторые из соединений формулы (I) и некоторые из промежуточных соединений в настоящем изобретении могут содержать асимметричный атом углерода. Чистые стереохимически изомерные формы указанных соединений и указанных промежуточных соединений можно получить, применяя известные в данной области способы. Например, диастереоизомеры могут быть разделены физическими методами, такими как селективная кристаллизация или хроматографические методы, например, противоточное
распределение, жидкостная хроматография и т.п. методы. Энантиомеры могут быть получены из рацемических смесей, сначала превращением указанных рацемических смесей с подходящими разделяющими агентами, такими как, например, хиральные кислоты, в смеси диастереомерных солей или соединений; затем разделением указанных смесей диастереомерных солей или соединений физическими методами путем, например, селективной
кристаллизации или хроматографическими методами, например, жидкостной хроматографией и т.п. методами; и, наконец, превращением указанных разделенных диастереомерных солей или соединений в соответствующие энантиомеры. Чистые
стереохимически изомерные формы можно также получить из чистых стереохимически изомерных форм соответствующих промежуточных соединений и исходных продуктов при условии, что промежуточные (интервенирующие) реакции происходят стереоспецифически.
Альтернативный способ разделения энантиомерных форм соединений формулы (I) и промежуточных соединений включает жидкостную хроматографию, в частности, жидкостную хроматографию
с использованием хиральной стационарной фазы.
Некоторые из промежуточных соединений и исходных продуктов являются известными соединениями и могут быть коммерчески доступными или их можно получить известными в данной области техники способами.
Промежуточные соединения формулы (II) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (III) с промежуточным соединением формулы (XI) в присутствии подходящего основания, такого как, например, карбонат калия, и подходящего растворителя, такого как, например, диоксан или тетрагидрофуран и вода.
(П)
Промежуточные соединения формулы (III) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XII) с C(=S)C12 в присутствии подходящего основания, такого как, например, N,W-диизопропилзтанамин, и подходящего растворителя, такого как, например, метиленхлорид.
H2N I
<ХП) S
<Ш)
Промежуточные соединения формулы (XII), где R4 представляет собой водород, и эти указанные промежуточные соединения представлены формулой (ХИ-а), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XIII) с подходящим восстановителем, таким как, например, Н2, в присутствии подходящего катализатора, такого как, например,
никель Ренея, необязательно подходящего каталитического яда, такого как, например, раствор тиофена, подходящего основания, такого как, например, NH3, и подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например, метанол.
-CR-2> n
восстановление / ;^(К2)п
HaN
(ХШ) (ХП-а)
Промежуточные соединения формулы (XIII) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XIV) с HO-NH2 в присутствии подходящего основания, такого как, например, Na2C03 или ацетат натрия, и подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например, этанол, и воды.
HO-NH
ч* -¦
(XTV)
Промежуточные соединения формулы (XII) могут быть получены, как описано выше. Промежуточные соединения формулы (XII) могут содержать хиральный центр при атоме углерода, несущем Ri и R4 заместитель, в зависимости от природы заместителей, представляющих Ri и R4. В случае, если указанный углеродный атом представляет собой хиральный центр, стереоспецифические промежуточные соединения формулы (XII), представленные формулой (XII-b), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XV) с трифенилфосфином, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран и вода, или путем взаимодействия промежуточного соединения формулы (XV) с подходящим восстановителем, таким как, например, Н2, в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, Pt на угле или Pd на угле, и подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например, метанол.
NH2
(XV)
(ХП-Ъ)
* обозначает хиральный центр и может представлять (R) или (S) в зависимости от заместителей R2 и R4
Когда стереоспецифическое промежуточное соединение формулы (XII-b) затем подвергают взаимодействию согласно способам, описанным выше, то образующиеся при этом промежуточные соединения также являются стереоспецифическими и, наконец, образующиеся конечные соединения также являются
стереоспецифическими.
Промежуточные соединения формулы (XV) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XVI) с дифенилфосфорилазидом в присутствии 2,3,4,6,7,8,9,10-октагидропиримидо[1,2-а]азепина и в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, толуол.
* обозначает хиральный центр и может представлять (R) или (S) в зависимости от заместителей Rx и R4
Стереоспецифические промежуточные соединения формулы (XVI), где R4 представляет собой водород и Ri представляет собой метил, этил или н-пропил, и этот указанный Ri представлен Alk и указанные промежуточные соединения представлены формулой (XVI-а) и (XVI-b), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XVII) с ZnAlk2, где Alk представляет собой метил, этил или н-пропил, в присутствии стереоспецифического катализатора, такого как, например, N, N'-(1R,2R)-1,2-циклогександиилбис[1,1,1-трифтор]метансульфонамид, соответственно N, N' - (IS,2S)-1,2-циклогександиилбис[1,1,1
(XVI)
(XV)
трифтор]метансульфонамид, Ti(iPrO)4 и подходящего растворителя, такого как, например, толуол.
(XV11) 1S.2S (XVI-Ъ)
Промежуточные соединения формулы (V) , где Z представляет собой необязательно замещенный тиазолил, и эти указанные промежуточные соединения представлены формулой (V-a), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XVIII) с промежуточным соединением формулы (XIX), где Wi представляет собой подходящую отщепляемую группу, такую как, например, галоген, например, хлор, бром и т.п., в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например, этанол.
Промежуточные соединения формулы (XVIII) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XX) с H2S в присутствии подходящего основания, такого как, например, N, W-диизопропилэтанамин, и подходящего растворителя, такого как, например, пиридин.
HSC~4
poo
(XVUJ)
Промежуточные соединения формулы (XX) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXI) с 4-метоксибензолметанолом в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, трифторуксусная кислота, и подходящего растворителя, такого как, например, метиленхлорид.
B> cYi ~
(XXI)
(XX)
Промежуточные соединения формулы (XXI) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (X) с СН3-СН(=0) в присутствии KSCN, в присутствии подходящего
основания, такого как, например, метанолат натрия, и
подходящего растворителя, тетрагидрофуран.
такого как, например,
(X) + KSCN + СН3СН(Ю)
(XXI)
Промежуточные соединения формулы (X) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXII) с н-бутилформиатом
н-бутилформиат
(ХХЩ
(X)
Промежуточные соединения формулы (XXII) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XII) с промежуточным соединением формулы (XXIII), где W2 представляет собой подходящую отщепляемую группу, такую как, например, галоген, например, хлор и т.п., в присутствии подходящего основания, такого как, например,
N, N-диэтилэтанамин, и подходящего растворителя, такого как, например, N, N-диметилформамид или тетрагидрофуран.
(ХП) (ХХШ)
UN,
N^-CN
где Z представляет
Промежуточные соединения формулы (V) собой пиразолил или необязательно замещенный пиримидин, и эти указанные промежуточные соединения представлены формулой (V-b) или (V-c), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXIV) с NH2-NH2 или R8-C(=NH)NH2 в присутствии Na и подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например, этанол.
(XXTV) (V+)
N-NH
(XXIV)
(V-o)
Промежуточные соединения формулы (XXIV) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXV) с N(CH3)2-CH(OCH3)2.
(XXV) (XXIV)
Промежуточные соединения формулы (XXV) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXVI) с промежуточным соединением формулы (XXVII), где W3 представляет собой подходящую отщепляемую группу, такую как, например, галоген, например, хлор, в присутствии NaH и подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран.
(XXVII)
(XXVI)
(XXV)
Промежуточные соединения формулы (XXVI) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXVIII) с СН3МдС1 в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран.
HS- < г IFN;
CHjMgCl
(XXVUI)
(XXVI)
Промежуточные соединения формулы (XXVIII) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXIX), где W4 представляет собой подходящую отщепляемую
группу, такую как, например, галоген, например, хлор и т.п., с NH(CH3) (ОСН3) в присутствии подходящего основания, такого как, например, N, W-диэтилэтанамин, и подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран.
NH(CH3XOCH3)
HS-^ о-
(XXIX)
Промежуточные представляет собой
(xxvm)
соединения формулы (XXIX), где W4 хлор, и эти указанные промежуточные соединения представлены формулой (XXIX-а), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (VII) с SOCl2.
HN-\ О
(VD) (XXEX-a)
Промежуточные соединения формулы (VII) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (VIII) с подходящим основанием, таким как, например, гидроксид натрия, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например, метанол, или тетрагидрофуран.
cm (ущ
Промежуточные соединения формулы (VIII), где R3 представляет собой водород, и эти указанные промежуточные
соединения представлены формулой (VIII-а), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXX) с метиловым эфиром муравьиной кислоты или метиловым эфиром уксусной кислоты в присутствии KSCN, подходящего основания, такого как, например, NaOCH3 или трет-BuONa, и подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран или спирт, например, метанол.
/ мпм -кт
X / ИЛИ N
n-?'N'N_HN- О
4 А^ч
(УШ-а)
(XXX)
Промежуточные соединения формулы (XXX) могут быть получены из промежуточного соединения формулы (XXXI) в присутствии муравьиной кислоты или формиата, такого как, например, н-бутилформиат, и в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, ксилол или диэтиловый эфир.
(XXXJ)
(XXX)
Промежуточные соединения формулы (XXXI) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XII) с промежуточным соединением формулы (XXXII), где W5 представляет собой подходящую отщепляемую группу, такую как, например, галоген, например, хлор или бром, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран или N, N- диметилформамид, и необязательно в присутствии подходящего основания, такого как, например, N,W-диэтилэтанамин и N,N-диметил-4-пиридинамин.
(XXXI)
Промежуточные соединения формулы (V) , где Z представляет собой триазолил, и эти указанные промежуточные соединения представлены формулой (V-d), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXXIII) с NH2-NH2 в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, уксусная кислота.
(ХХХШ) ^
Промежуточные соединения формулы (XXXIII) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXXIV) с N, М-диметилформамид/.М, W-диметилацетамид.
t*0^ (ХХХШ)
Промежуточные соединения формулы (XXXIV) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXXV), где W6 представляет собой подходящую отщепляемую группу, такую как, например, галоген, например, хлор, с Ш3 в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран.
NH,
NH,
-fir
(XXXV) (XXXW)
Промежуточные соединения формулы (XXXV), где W6 представляет собой хлор, и эти указанные промежуточные соединения представлены формулой (XXXV-a), могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXXVI) с S0C12.
SOCl2
(XXXVI)
(XXXV-a)
Промежуточные соединения формулы (XXXVI) могут быть получены гидролизом соответствующего сложного эфира (XXXVII) с подходящим основанием, таким как, например, гидроксид натрия, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например, метанол.
(ХХХУП) (XXXVI)
Промежуточные соединения формулы (XXXVII) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXXVIII) с 4-метоксибензолметанолом в присутствии подходящей кислоты, такой как, например, трифторуксусная кислота, и подходящего растворителя, такого как, например, метиленхлорид.
Р000^ раосщ
Промежуточные соединения формулы (VI) могут быть получены взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXIX) или (VII) с промежуточным соединением формулы (XXXIX) в присутствии подходящего основания, такого как, например,
N, W-диизопропилэтанамин, подходящего диимида, такого как, например, N'- (этилкарбонимидоил) -2\7,2^-диметил-1, 3-пропандиамин или дициклогексилкарбондиимид, 1-гидрокси-1Я-бензотриазола и подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран или N, W-диметилформамид.
(ХХХГХ)
(УД)
Для получения соединений по данному изобретению предпочтительными промежуточными соединениями являются промежуточные соединения формулы (XII)
(ХП)
их N-оксиды, фармацевтически приемлемые аддитивные соли, четвертичные амины или стереохимически изомерные формы.
Как уже упоминалось выше, промежуточные соединения формулы
(II) могут содержать хиральный центр при атоме углерода, несущем заместитель Rx и R4, в зависимости от характера заместителей, представляющих Rx и R4. В случае, если указанный углеродный атом представляет собой хиральный центр, предпочтительный вариант промежуточных соединений формулы (XII) представляют собой промежуточные соединения, где промежуточное соединение является стереоспецифическим, т.е. где промежуточное соединение имеет конфигурацию (R) или (S) при углеродном атоме, несущем заместитель Ri и R4 (промежуточные соединения формулы
(XII-b). Особенно предпочтительными являются промежуточные соединения формулы (XII-b), которые имеют (S)-конфигурацию
(промежуточные соединения формулы (XII-b-1).
Таким образом, настоящее изобретение также относится к промежуточным соединениям формулы (XII-b-1)
(ХП-М)
их N-оксидам, фармацевтически приемлемым аддитивным солям или их четвертичным аминам.
Кроме того, настоящее изобретение относится к промежуточным соединениям формулы (XII-b-1) при условии, что когда п=2 и каждый R2 представляет собой хлор и указанные два хлор-заместителя находятся в мета- и пара-положении, тогда Ri не является этилом.
Другой предпочтительный вариант представляют собой промежуточные соединения формулы (XII-b-1), где каждый R2 независимо выбран из галогена, d-балкила, Ci-балкилокси или полигалогенСх-валкила, при условии, что когда п=2 и каждый R2 представляет собой хлор и указанные два хлор-заместителя находятся в мета- и пара-положении, тогда Ri не является этилом.
Дополнительный вариант представляют собой промежуточные соединения формулы (XII-b-1), где п равно 1, 2 или 3, в частности 2, и при условии, что когда п=2 и каждый R2 представляет собой хлор и указанные два хлор-заместителя находятся в мета- и пара-положении, тогда Ri не является этилом.
Следующий вариант представляют собой промежуточные соединения формулы (XII-b-1), где п равно 2 и два заместителя R2, расположены в мета- и пара-положении, при условии, что когда каждый R2 представляет собой хлор, тогда Ri не является этилом.
Другой вариант представляют собой промежуточные соединения формулы (XII-b-1), описанные выше, где R4 представляет собой водород.
Интерес представляют также промежуточные соединения формулы (XII) и (XII-b-1), где Ri представляет собой водород, метил, этил, н-пропил, метоксиметил, циклогексил, циклопропил, диметиламинометил, 2-тиенил, 3,4-дихлорфенил, в частности, метил, этил, н-пропил, метоксиметил, более предпочтительно метил, этил и н-пропил, при условии, что когда п равно 2 и R2 представляет собой хлор, и указанные два хлор-заместителя находятся в мета- и пара-положении и R4 представляет собой водород, тогда Ri не является этилом, циклопропилом, фенилом, и при условии, что когда п равно 2 и R2 представляет собой хлор, и указанные два хлор-заместителя расположены в мета- и пара-положении и R4 представляет собой метил, тогда Ri не является метилом, и при условии, что когда п равно 2 и указанные два заместителя R2 расположены в мета- и пара-положении и R2 в мета-положении представляет собой трифторметил и R2 в пара-положении представляет собой фтор и R4 представляет собой водород, тогда Ri не является этилом.
Также представляют интерес промежуточные соединения формулы (XII) или (XII-b-1), описанные выше, где R2 представляет собой хлор, фтор или трифторметил, в особенности, хлор.
Особенно предпочтительными промежуточными соединениями
являются промежуточные соединения формулы (XII-а) или (XII-b-1), имеющие нижеследующую формулу
их N-оксиды, фармацевтически приемлемые аддитивные соли или четвертичные амины, где Alk такой, как определен выше, т.е., Alk представляет собой метил, этил и н-пропил, и каждый R2a и R2b независимо представляет собой хлор, фтор, трифторметил.
Представляют интерес промежуточные соединения формулы (Х11-а-1) при условии, что когда R2a и R2b представляют собой, оба, хлор или когда R2a представляет собой трифторметил и R2b представляет собой фтор, тогда Alk не является этилом.
Следующими предпочтительными промежуточными соединениями формулы (Х11-а-1) являются промежуточные соединения (Х11-а-1) при условии, что когда R2a и R2b представляют собой, оба, хлор, тогда Alk не является метилом, этилом, н-пропилом, и при условии, что когда R2a и R2b представляют собой, оба, фтор или R2a представляет собой трифторметил и R2b представляет собой фтор или R2a представляет собой фтор и R2b представляет собой трифторметил, тогда Alk не является этилом.
Кроме того, представляют интерес промежуточные соединения формулы (XII-b-1-l) при условии, что когда R2a и R2b представляют собой, оба, хлор, тогда Alk не является этилом.
Соединения формулы (I) и (I') демонстрируют антагонистические свойства в отношении рецептора CCR2.
Рецептор 2 С-С хемокина (CCR2) и его лиганд, белок моноцитов со свойствами хемоатрактанта (хемотаксическими свойствами) (МСР-1; в новой номенклатуре хемокинов также называемый CCL2), как признано, вовлечены как в острые, так и хронические воспалительные процессы.
Хемокины (сокращение "хемотаксические цитокины") являются
(ХП-а-1)
(ХП-Ь-1-1)
наиболее важными регуляторами направленной миграции лейкоцитов. Эта биологическая роль проявляется при взаимодействии - на клетках-мишенях - с рецепторами семитрансмембранного домена, которые связаны с гетеродимерными G-белками. Хемокины классифицируют, главным образом, по 2 основным семействам (С-С или С-Х-С семейство) в зависимости от присутствия аминокислоты (представленной X) между двумя консервативными остатками цистеина (представленными С) вблизи аминоконца. В общем, хемокины из С-С семейства притягивают моноциты, макрофаги, Т-клетки и NK-клетки.
Хемокин, который действует через рецептор CCR2, представляет собой МСР-1, указанный выше. Поэтому рецептор CCR2 также известен как рецептор МСР-1. МСР-2, МСР-3 и МСР-4 могут также действовать, по крайней мере частично, через этот рецептор.
Признано, что рецептор CCR2 и МСР-1 играют роль в патофизиологии различных воспалительных заболеваний. Поэтому антагонисты рецептора CCR2, которые блокируют рецептор CCR2, имеют потенциал в качестве фармацевтических средств для борьбы с воспалителительными состояниями, такими как артрит, остеоартрит, ревматоидный артрит, гломерулонефрит,
диабетическая нефропатия, пневмофиброз, идиопатический пневмофиброз, саркоидоз, васкулит, гепатит, неалкогольный стеатогепатит, воспалительные состояния головного мозга, такие как болезнь Альцгеймера, рестеноз, альвеолит, астма, аллергический ринит, аллергический конъюнктивит, атеросклероз, псориаз, аллергические реакции кожи замедленного типа, воспаление кишечника, острое или хроническое воспаление головного мозга, например, рассеянный склероз, аутоиммунный энцефаломиелит, хроническая обструктивная болезнь легких (COPD), увеит, дерматит, диффузный нейродермит. Антагонисты рецептора CCR2 могут быть также использованы для лечения аутоиммунных заболеваний, таких как диабет или отторжение трансплантата, инсульт, поражение, вызванное реперфузией, ишемия, рак, инфаркт миокарда, боль, в частности, нейропатическая боль.
Соединения по данному изобретению могут быть также использованы для ингибирования вторжения вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) в моноциты и лимфоциты, тем самым играя терапевтическую роль в лечении СПИД (синдрома приобретенного иммунодефицита).
Рецептор CCR2 существует в двух изоформах, а именно, рецептор CCR2A и CCR2B.
Благодаря своей антагонистической активности в отношении рецептора CCR2, в частности, свойственной им антагонистической активности в отношении рецептора CCR2B, соединения формулы (I), их N-оксиды, фармацевтически приемлемые аддитивные соли, четвертичные амины или стереохимически изомерные формы являются полезными для лечения или профилактики, в частности, для лечения заболеваний или состояний, опосредованных через активацию рецептора CCR2, в частности, рецептора CCR2B. Заболевания или состояния, связанные с активацией рецептора CCR2, включают воспалительные состояния, такие как артрит, остеоартрит, ревматоидный артрит, гломерулонефрит,
диабетическая ретинопатия, пневмофиброз, идиопатический пневмофиброз, саркоидоз, васкулит, гепатит, неалкогольный стеатогепатит, воспалительные состояния головного мозга, такие как болезнь Альцгеймера, рестеноз, альвеолит, астма, аллергический ринит, аллергический конъюнктивит, атеросклероз, псориаз, аллергические реакции кожи замедленного типа, воспаление кишечника, острое или хроническое воспаление головного мозга, например, рассеянный склероз, аутоиммунный энцефаломиелит, хроническая обструктивная болезнь легких (COPD), увеит, дерматит, диффузный нейродермит, аутоиммунные заболевания, такие как диабет или отторжение трансплантата, инсульт, поражение, вызванное реперфузией, ишемия, рак, инфаркт миокарда, боль (нейропатическая боль). В частности, соединения формулы (I) используют для лечения или профилактики воспалительных заболеваний и аутоиммунных заболеваний, в особенности, ревматоидного артрита, атеросклероза, рассеянного склероза, воспаления кишечника и хронической обструктивной болезни легких (COPD). Кроме того, соединения формулы (I)
представляют особый интерес для лечения или профилактики псориаза, астмы, ревматоидного артрита или боли (нейропатической боли), и особенно псориаза, астмы или ревматоидного артрита.
Принимая во внимание вышеописанные фармакологические свойства, соединения формулы (I), их N-оксиды, фармацевтически приемлемые аддитивные соли, четвертичные амины и стереохимически изомерные формы, могут быть использованы в качестве лекарственного средства. В частности, предлагаемые соединения могут быть использованы для получения лекарственного средства для лечения или профилактики заболеваний, опосредованных через активацию рецептора CCR2, в частности, рецептора CCR2B. Более конкретно, соединения по данному изобретению могут быть использованы для получения лекарственного средства для лечения или профилактики воспалительных заболеваний, в особенности ревматоидного артрита, атеросклероза, рассеянного склероза, воспаления кишечника и хронической обструктивной болезни легких (COPD). Кроме того, соединения по данному изобретению могут быть, в частности, использованы для получения лекарственного средства для лечения или профилактики псориаза, астмы, ревматоидного артрита или боли (нейропатической боли), и особенно псориаза, астмы или ревматоидного артрита.
С учетом полезности соединений формулы (I) , предлагается способ профилактики или способ лечения теплокровных животных, включая людей, страдающих заболеваниями, опосредованными через активацию рецептора CCR2, в частности, опосредованных через рецептор CCR2B. Указанные способы включают введение эффективного количества соединения формулы (I) , его N-оксидной формы, фармацевтически приемлемой аддитивной соли, четвертичного амина или его возможной стереоизомерной формы, теплокровным животным, включая людей.
Блокада рецептора CCR2 предлагаемыми соединениями формулы (I) ингибирует нормальную функцию МСР-1. Поэтому предлагаемые соединения могут быть также описаны (охарактеризованы) как ингибиторы МСР-1, и, следовательно, могут быть использованы для
предотвращения или лечения заболеваний, опосредованных через МСР-1.
Кроме того, настоящее изобретение относится к композициям для профилактики или лечения заболеваний, опосредованных через активацию рецептора CCR2, в частности рецептора CCR2B. Указанные композиции содержат терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
С целью обеспечения введения лекарственного средства соединения по данному изобретению могут быть объединены в соответствующие составы с получением различных фармацевтических форм. В качестве подходящих композиций могут быть указаны все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций по данному изобретению эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме аддитивной соли, в качестве активного компонента тщательно смешивают с фармацевтически приемлемым носителем с получением однородной смеси, и этот носитель может способствовать получению разнообразных форм в зависимости от того, какая форма препарата требуется для введения. Желательно, чтобы эти фармацевтические композиции находились в стандартной лекарственной форме, подходящей, в частности, для введения перорально, ректально, чрескожно или с помощью парентеральной инъекции. Например, для получения композиций в пероральной лекарственной форме можно использовать любую из обычных фармацевтических сред, таких как, например, вода, гликоли, масла, спирты и т.п. в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, разбавители, смазки, связующие средства, дезинтегрирующие средства и т.п. в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Из-за легкости введения таблетки и капсулы являются наиболее предпочтительными пероральными дозированными лекарственными формами, и в этом случае очевидно использование твердых фармацевтических носителей. В случае парентеральных композиций, носитель обычно включает стерильную
воду, по крайней мере в значительной степени, хотя могут быть включены и другие ингредиенты, например, чтобы способствовать растворимости. Например, можно получить растворы для инъекции, в которых носитель включает физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Можно получить суспензии для инъекции, и в этом случае могут быть использованы соответствующие жидкие носители, суспендирующие средства и т.п. Также включены и препараты в твердой форме, которые, как подразумевается, превращают, непосредственно перед использованием, в препараты в жидкой форме. В композициях, подходящих для чрескожного введения, носитель необязательно включает средство, усиливающее проникновение через кожу, и/или подходящее увлажняющее средство, необязательно смешанные с подходящими добавками любой природы в незначительных пропорциях, при этом эти добавки не оказывают значимого вредного воздействия на кожу. Вышеуказанные добавки могут облегчать введение (лекарственного средства) в кожу и/или могут быть полезными для получения требуемых композиций. Эти композиции можно вводить различными способами, например, в виде трансдермального пластыря, нанесением в виде пятна, в виде мази.
Кроме того, соединения по данному изобретению можно вводить путем ингаляции или инсуффляции при помощи способов и препаратов, используемых в данной области для введения этим путем. Таким образом, в общем, соединения по данному изобретению могут быть введены в легкие в форме раствора, суспензии или в виде сухого порошка. Любая система, разработанная для доставки растворов, суспензий или сухих порошков путем ингаляции или инсуффляции через рот или нос является подходящей для введения предлагаемых соединений.
Соединения по данному изобретению можно также вводить местно в форме капель, в частности, глазных капель. Указанные глазные капли могут быть в форме раствора или суспензии. Любая система, разработанная для доставки растворов или суспензий в виде глазных капель, является подходящей для введения предлагаемых соединений.
Особенно целесообразно составление вышеупомянутых фармацевтических композиций в стандартной дозированной лекарственной форме из-за простоты введения и однородности дозирования. Используемый в описании термин "стандартная дозированная лекарственная форма" относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве стандартных доз, при этом каждая единица содержит предварительно установленное количество активного компонента в расчете на достижение желаемого терапевтического эффекта в связи с требуемым фармацевтическим носителем. Примерами таких стандартных дозированных лекарственных форм являются таблетки (включая таблетки с насечкой или таблетки с покрытием), капсулы, пилюли, пакетики с порошком, облатки, суппозитории, растворы или суспензии для инъекции и т.п., и их изолированные множества.
Как очевидно для специалистов в данной области, точная доза и частота введения зависят от конкретного используемого соединения формулы (I) , индивидуального состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, подлежащего лечению, возраста, массы тела, пола, степени (интенсивности) нарушения и общего (физического) состояния здоровья конкретного пациента, а также другого лекарственного препарата, который может принимать индивидуум. Кроме того, очевидно, что возможно уменьшение или увеличение указанного эффективного суточного количества (дозы) в зависимости от реакции лечимого субъекта и/или в зависимости от оценки лечащего врача, прописывающего соединения по данному изобретению.
Кроме того, соединения формулы (I) могут быть использованы в комбинации с другими обычными противовоспалительными или иммунодепрессивными средствами, такими как стероиды, ингибиторы циклооксигеназы-2, нестероидные противовоспалительные средства, антитела TNF-a, такие как, например, ацетилсалициловая кислота, буфексамак, диклофенак калий, сулиндак, диклофенак натрий, кеторолак трометамол, толметин, ибупрофен, напроксен, напроксен натрий, тиапрофеновая кислота, флурбипрофен, мефенамовая кислота, нифлуминовая кислота, меклофенамат, индометацин, проглуметацин, кетопрофен, набуметон, парацетамол, пироксикам,
теноксикам, нимесулид, фенилбутазон, трамадол, беклометазон, дипропионат, бетаметазон, бекламетазон, будесонид, флутиказон, мометазон, дексаметазон, гидрокортизон, метилпреднизолон, преднизолон, преднизон, триамцинолон, целекоксиб, рофекоксиб, валдекоксиб, инфликсимаб, лефлуномид, этанерцепт, СРН 82, метотрексат, сульфасалазин, антилимфоцитарные иммуноглобулины, антитимоцитарные иммуноглобулины, азатиоприн, циклоспорин, такролимус, аскомицин, рапамицин, муромонаб-СБЗ.
Таким образом, настоящее изобретение также относится к комбинации соединения формулы (I) и другого
противовоспалительного или иммунодепрессивного средства. Такая комбинация может быть использована в качестве лекарственного средства. Кроме того, настоящее изобретение относится к продукту, содержащему (а) соединение формулы (I) и (Ь) другое противовоспалительное или иммунодепрессивное соединение, как комбинированному препарату для одновременного, раздельного или последовательного использования для лечения заболеваний, опосредованных через активацию рецептора CCR2, в частности, опосредованного через рецептор CCR2B. В таких продуктах в одном препарате различные лекарственные средства могут быть смешаны вместе с фармацевтически приемлемыми носителями. Альтернативно, такие продукты могут включать, например, набор, включающий контейнер с подходящей композицией, содержащей соединение формулы (I), и другой контейнер с композицией, содержащей другое противовоспалительное или иммунодепрессивное соединение. Такой продукт может иметь преимущество, заключающее в том, что врач может подобрать, исходя из диагноза пациента, подлежащего лечению, соответствующие количества каждого компонента и последовательность и хронометраж его введения.
Нижеследующие примеры предназначены для иллюстрации настоящего изобретения.
Экспериментальная часть
В дальнейшем, "THF" означает тетрагидрофуран, "DEPE" означает диизопропиловый эфир, "DMF" обозначает
N, N-диметилформамид и "DMA" обозначает N, N- диметилацетамид.
А. Получение промежуточных соединений
Пример Al
а. Получение промежуточного соединения 1
Раствор Na2C03 (часть от 0,52 моля) в Н20 (150 мл) добавляют к перемешиваемой смеси 1-(3,4-дихлорфенил)-1-пропанона (0, 345 моль) в этаноле, р.а. (чистый для анализа)
(150 мл), затем добавляют остаток Na2C03 и порциями при энергичном перемешивании добавляют моногидрохлорид
гидроксиламина (0,345 моль). Реакционную смесь нагревают до температуры кипения с обратным холодильником и добавляют дополнительно Н20 (75 мл) , затем полученную смесь перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 6 часов. Добавляют дополнительное количество моногидрохлорида гидроксиламина (2,4 г) и смесь кипятят с обратным холодильником еще в течение 18 часов. Снова добавляют дополнительное количество
моногидрохлорида гидроксиламина (3 г) / реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 24 часов и перемешивают в течение 2 дней при комнатной температуре. Твердые вещества отфильтровывают, промывают смесью EtOH/H20
(1/1) и сушат (вакуум, поток воздуха) при 56°С. Выход: 71,8 г промежуточного соединения 1 (95,4%).
Ь. Получение промежуточных соединений 2 и 3
промежуточное промежуточное соединение 2 соединение 3
Смесь промежуточного соединения 1 (0,3 моль) в смеси CH3OH/NH3 (7N) (500 мл) гидрируют при 14°С в присутствии никеля Ренея (каталитическое количество) в качестве катализатора и в присутствии тиофена (6 мл). После поглощения Н2 (2 экв.) катализатор отфильтровывают и фильтрат упаривают, затем совместно упаривают с толуолом 2 раза. Остаток перемешивают в
кипящем 2-пропаноле (250 мл) и смесь фильтруют горячей. Фильтрату дают возможность достигнуть комнатной температуры и медленно добавляют смесь НС1/2-пропанол (6N, 150 мл) при энергичном перемешивании. Растворитель выпаривают и остаток перемешивают в DIPE, затем отфильтровывают, промывают и сушат (вакуум) при 60°С. Выход: 53 г промежуточного соединения 2 (73,4%). Часть этой фракции превращают в соответствующее свободное основание: промежуточное соединение 2 (18,0 г) перемешивают в СН2С12 (200 мл) и добавляют 15% водный раствор К2С03, затем полученную смесь перемешивают в течение 1 часа и добавляют 50% раствор NaOH для повышения рН. Органический слой отделяют, промывают Н20, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Выход: 12,4 г промежуточного соединения 3. с. Получение промежуточного соединения 4
Раствор промежуточного соединения 2 (полученного согласно Al.b) (0,0748 моль) и метилового эфира хлоруксусной кислоты (0,08 моль) в DMF, р.а., осушенном, с использованием молекулярных сит, (150 мл), перемешивают при комнатной температуре в атмосфере N2 и медленно добавляют Et3N (0,224 моль), затем реакционную смесь перемешивают в течение 20 часов при комнатной температуре и добавляют дополнительное количество метилового эфира хлоруксусной кислоты (3,3 мл). Смесь перемешивают в течение еще 20 часов при комнатной температуре и снова добавляют дополнительно метиловый эфир хлоруксусной кислоты (2 мл) . Полученную смесь перемешивают в течение 24 часов и затем отфильтровывают твердые вещества и промывают DMF. Добавляют Et20 (8 00 мл) и смесь промывают 3 раза Н20 (500 мл). Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают, затем выпаривают совместно с толуолом. Остаточное масло (23,4 г) фильтруют через силикагель (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 99/1) . Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают, наконец, выпаривают совместно с
толуолом. Выход: 20,6 г промежуточного соединения 4 (99,7%). d. Получение промежуточного соединения 5
Раствор муравьиной кислоты (7,5 мл) и промежуточного соединения 4 (полученного согласно Al.c) (0,0746 моль) в ксилоле, р.а. (225 мл) перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов и затем реакционной смеси дают возможность достигнуть комнатной температуры. Смесь промывают 2 раза Н20 (2x200 мл), насыщенным водным раствором NaHC03 (200 мл) и насыщенным раствором соли (200 мл), затем отделенный органический слой сушат (MgS04) и фильтруют. Наконец, растворитель выпаривают. Выход: 21,3 г промежуточного соединения 5 (93,9%).
е-1. Получение промежуточного соединения 6
NaOCH3 (0,07 моль) добавляют к перемешиваемому раствору промежуточного соединения 5 (полученного согласно Al.d) (0,066 моль) и метилового эфира муравьиной кислоты (0,19 моль) в THF, р.а. (100 мл) в атмосфере N2 и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 40 часов. Растворитель выпаривают и неочищенный остаток перемешивают в воде (90 мл). Водный слой промывают 2 раза Et20 (50 мл) и добавляют СН3ОН (60 мл). Добавляют НС1, 36%, р.а. (15,7 мл) и раствор нагревают на масляной бане и перемешивают при 45°С в течение 24 часов, затем добавляют KSCN (0,11 моль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 0 часов и при 80°С в течение 5 часов. Реакционной смеси дают возможность достигнуть комнатной температуры и твердые вещества отфильтровывают, промывают смесью Н20/СН3ОН (2/1), затем сушат при 60°С (вакуум). Выход: 19,35 г фракции, которую перекристаллизовывают из CH3CN
(200 мл) , отфильтровывают, промывают CH3CN и сушат при 50°С (вакуум). Выход: 17,2 г промежуточного соединения 6 (75,5%). е-2. Получение промежуточного соединения 44
Метил 2-[[1-(3, 4-дифторфенил)бутил]формил)амино]ацетат
(полученный согласно Al.d) (15,0 г, 53 ммоль), растворенный в 250 мл абсолютного эфира, охлаждают при перемешивании до -78°С в атмосфере аргона, и по каплям при -78°С добавляют 55 мл 2М раствора литийдиизопропиламида в смеси THF/гексан. Смесь перемешивают в течение еще 0,5 часа при той же температуре. К смеси по каплям добавляют хлорангидрид метоксиуксусной кислоты (6,9 г, 63,6 ммоль), растворенный в 40 мл сухого THF, и температуре реакционной смеси предоставляют возможность достичь комнатной температуры на протяжении 2 часов. К смеси добавляют смесь метанола (270 мл), воды (135 мл), KCNS (13,43 г) и 67 мл концентрированной НС1. Полученную смесь нагревают до 70°С и перемешивают в течение 18 часов при этой температуре. Затем смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры и нейтрализуют водным раствором NaHC03 и экстрагируют метиленхлоридом. Экстракт сушат над MgS04 и концентрируют в вакууме. Полученный остаток подвергают флэш-хроматографии на силикагеле 60/100 (СН2С12) • Фракцию, содержащую требуемый продукт (согласно ЖХ/МС), концентрируют и обрабатывают смесью гексан/эфир (1/1). Выход: 2,46 г (12,5%) промежуточного соединения 44.
f-1. Получение промежуточного соединения 7
Раствор промежуточного соединения 6 (полученного согласно Al.e) (0,004 моль) в NaOH (IN) (7,5 мл), метаноле, р.а. (10 мл)
и THF, p.а. (20 мл), перемешивают при комнатной температуре в течение 20 часов, затем перемешивают в течение 5 дней при 75°С. Добавляют дополнительное количество NaOH (IN) (7,5 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа при 75°С, затем смеси дают возможность достичь комнатной температуры. Добавляют Н20 (45 мл), затем Et20 (50 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 30 минут. Водный слой отделяют, промывают смесью EtOAc/гексан (2x50 мл, 1/1) и подкисляют НС1 (1N) до рН 3. Смесь экстрагируют смесью СН2С12/СН3ОН (95/5), затем органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток растворяют в смеси ЕЬ20/гексан/СН2С12 (1/1/1) и концентрируют при 60 °С (без вакуума) до тех пор, пока не начнется кристаллизация, затем смесь выдерживают при стоянии в течение 30 минут. Осадок отфильтровывают, промывают смесью гексан/ЕЬ20 (3/1) и сушат (вакуум, 50°С) с последующей сушкой при помощи вакуумного насоса в течение 5 часов). Выход: 0,55 г промежуточного соединения 7 (41,5%).
f-2. Получение промежуточного соединения 42
Смесь промежуточного соединения 42 (0,045 моль) и NaOH IN (0,025 моль) в метаноле (25 мл) перемешивают в течение 24 часов при 60°С, затем добавляют дополнительное количество NaOH IN (10 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 20 часов при 60°С. Часть растворителя выпаривают и к концентрату добавляют IN НС1 (36 мл). Продукт осаждается в виде масла и его экстрагируют СН2С12. Органический слой отделяют, сушат и фильтруют. Растворитель выпаривают и остаток сушат. Выход: 1,4 г промежуточного соединения 42.
д. Получение промежуточного соединения 8
Смесь промежуточного соединения 7 (полученного согласно Al.f) (0,001 моль) в SOCl2 (10 мл) перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 2 часов и затем растворитель выпаривают. К остатку добавляют 2 раза толуол (р.а.) и растворитель выпаривают после каждого добавления. Выход: 0,35 г промежуточного соединения 8.
h. Получение промежуточного соединения 9
Смесь W-метоксиметанамин.гидрохлорида (0,0017 моль) и Et3N (0,005 моль) в THF (10 мл) перемешивают при комнатной температуре и к ней по каплям добавляют смесь промежуточного соединения 8 (полученного согласно Al.g) (0,0015 моль) в THF (5 мл) на протяжении 15 минут, затем реакционную смесь перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре и растворитель выпаривают. Остаток перемешивают в Н20 и смесь экстрагируют СН2С12. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток растворяют в 2-пропаноне (15 мл, р.а.) и поток S02 пропускают через раствор в течение 20 минут. Растворитель выпаривают и остаток фильтруют через силикагель (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 95/5). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 0,310 г промежуточного соединения 9.
i. Получение промежуточного соединения 10
Смесь промежуточного соединения 9 (полученного согласно Al.h) (0, 0008 моль) в THF (10 мл) перемешивают при 0-5°С на
бане со льдом и по каплям добавляют СН3МдС1, 20% в THF (0,002 моль), затем реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа и добавляют по каплям дополнительное количество СН3МдС1, 20% в THF (0,0044 моль). Смесь перемешивают в течение 1 часа и снова по каплям добавляют еще СН3МдС1, 20% в THF (0,002 моль), затем реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа и добавляют, при охлаждении льдом, по каплям IN НС1 (10 мл). Добавляют Н20 и смесь экстрагируют СН2С12. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток растворяют в 2-пропаноне (р.а.) и поток S02 пропускают через раствор в течение 20 минут. Растворитель выпаривают и остаток очищают колоночной флэш-хроматографией (элюент: EtOAc). Фракции продукта собирают и растворяют в смеси СН2С12/СН3ОН (90/10) , затем смесь фильтруют и растворитель фильтрата выпаривают. Выход: 0,060 г промежуточного соединения 10.
j. Получение промежуточного соединения 11
Смесь промежуточного соединения 10 (полученного согласно Al.i) (0,005 моль) в сухом THF (40 мл) перемешивают при комнатной температуре и порциями добавляют 60% NaH (0,0055 моль) на протяжении 10 минут, затем смесь перемешивают в течение 30 минут и сразу добавляют смесь 1-(хлорметил)-4-метоксибензола (0,0055 моль) в сухом THF (10 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 дней и растворитель выпаривают. Остаток перемешивают в Н20 и экстрагируют СН2С12. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Выход: 2,2 г промежуточного соединения 11.
к. Получение промежуточного соединения 12
Смесь промежуточного соединения 11 (полученного согласно Al.j) (0,00115 моль) в 1,1-диметокси-.М, N-диметилме танами не (10 мл) перемешивают при 100 °С в течение 18 часов и затем растворитель выпаривают. Остаток растворяют в толуоле и растворитель снова выпаривают. Выход: 0,580 г промежуточного соединения 12.
1-1. Получение промежуточных соединений 13 и 14
Смесь Na (0,0008 моль) в этаноле (4 мл) перемешивают в атмосфере N2 при комнатной температуре до полного растворения и добавляют гуанидин (0,0004 моль), затем смесь перемешивают в течение 30 минут и добавляют смесь промежуточного соединения 12 (полученного согласно Al.k) (0,00055 моль) в этаноле (1 мл). Реакционную смесь перемешивают в закрытом сосуде при 100°С в течение 20 часов и упаривают. Сырое соединение (продукт) очищают, пропуская через Si02 (элюент: смесь СН2С12/СН30Н 98/2) и растворитель выпаривают, получая промежуточное соединение 13. Остаток растворяют в 2-пропаноле и превращают в соль хлористоводородной кислоты (1:1) с помощью обработки смесью HCl/2-пропанол. Кристаллизованную соль отфильтровывают, промывают DIPE и сушат. Выход: 0,320 г промежуточного
Промежуточное соединение 13
Промежуточное соединение 14
соединения 14.
1-2. Получение промежуточного соединения 15
Смесь промежуточного соединения 12 (полученного согласно Al.k) (0,00115 моль) и моногидрата гидразина (0,007 моль) в этаноле (20 мл) перемешивают и кипятят с обратным холодильником на масляной бане в течение 3 часов. Растворитель выпаривают и остаток подвергают фильтрации в силикагеле (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 98/2) . Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают при 50°С в потоке N2. Выход: 0,24 0 г промежуточного соединения 15.
Пример А2
а. Получение промежуточного соединения 16
трифторметансульфонамида] (0,005 моль) и Ti(i-PrO)4 (0,030 моль) в толуоле (достаточное количество) дегазируют и помещают в Ar-поток, затем реакционную смесь перемешивают в течение 20 минут при 4 0°С и охлаждают до -78°С. Добавляют по каплям Et2Zn (0,030 моль) и через 20 минут добавляют по каплям смесь 3,4-дихлорбензальдегида (0,0250 моль) в толуоле (достаточное количество). Реакционной смеси дают возможность достигнуть 0°С. Смесь перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре, затем гасят НС1 (2N) . Эту смесь экстрагируют СН2С12. Отделенный органический слой промывают, сушат, фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 98/2).
Смесь
N, N' -(1R,2R)-1,2-циклогександиилбис[1,1,1-
Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 5,1 г промежуточного соединения 16.
Изомер R можно получить согласно вышеупомянутой реакции, используя N,N' -(IS,2S)-1,2-циклогександиилбис[1,1,1-
трифторметансульфонамид] в качестве катализатора.
Ь. Получение промежуточного соединения 17
(R)
Смесь промежуточного соединения 16 (полученного согласно А2.а) (0,025 моль) и дифенилфосфорилазида (0,030 моль) в толуоле (50 мл) перемешивают при 0°С и добавляют 2,3,4,б,7,8,9,10-октагидропиримидо[1,2-а]азепин (0,030 моль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при 0°С, затем перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре. Смесь разбавляют водой и толуолом. Органический слой отделяют, промывают один раз водой, один раз 5% НС1 и растворитель выпаривают, получая промежуточное соединение 17, используемый на следующей стадии.
с. Получение промежуточного соединения 18
Смесь промежуточного соединения 17 (полученного согласно А2.Ь) (0,025 моль), трифенилфосфина (0,027 моль) в THF (70 мл) и Н20 (20 мл) перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре. Растворитель выпаривают. Остаток обрабатывают 10% НС1. Кислый слой промывают DIPE, затем подщелачивают, с последующей экстракцией СН2С12. Отделенный органический слой сушат, фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле. Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 1,1 г промежуточного соединения 18.
d. Получение промежуточного соединения 19
Раствор промежуточного соединения 3 (полученного согласно Al.b) (0,0116 моль) в Et3N (0,013 моль) и DMF, р.а., осушенный на молекулярных ситах (20 мл) , перемешивают на бане со льдом. Добавляют по каплям раствор хлорацетонитрила (0,0128 моль) в DMF, р.а., осушенный на молекулярных ситах, (2,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 часов. Добавляют по каплям еще хлорацетонитрил
(0,0063 моль) в DMF, р.а., осушенный на молекулярных ситах (1 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение еще 24 часов. Добавляют по каплям еще хлорацетонитрил (0,0063 моль) в DMF, р. а., осушенный на молекулярных ситах (1 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение еще 24 часов. Добавляют еще Et3N
(1 мл), затем добавляют по каплям еще хлорацетонитрил (0,0079 моль) в DMF, р.а., осушенный на молекулярных ситах, (1 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 20 часов. Осадок отфильтровывают. Фильтрат выливают в Et20 (200 мл) и промывают смесью H20/NaHC03 (10%; 100 мл) и Н20 (2х) . Отделенный органический слой сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают и затем выпаривают совместно с толуолом. Остаток очищают на силикагеле (элюент: смесь СН2С12/МеОН 99:1). Требуемые фракции собирают и растворитель выпаривают и совместно выпаривают с толуолом. Выход: 2,3 г промежуточного соединения 19 (81,6%).
е. Получение промежуточного соединения 20
Смесь промежуточного соединения 19 (полученного согласно A2.d) (0,021 моль) в н-бутилформиате (25 мл) перемешивают и
кипятят с обратным холодильником в течение 4 8 часов и затем охлаждают. Растворитель выпаривают и остаток разбавляют и остаток разбавляют СН2С12. Полученную смесь промывают водой, сушат и растворитель выпаривают. Выход: 5,25 г промежуточного соединения 20.
f. Получение промежуточного соединения 21
NaOMe (полученный in situ) (достаточное количество) добавляют по каплям к смеси промежуточного соединения 20 (полученного согласно А2.е) (0,022 моль) и ацетальдегида (0,022 моль) в THF (100 мл). Через 7 часов растворитель выпаривают и остаток распределяют между несмешивающимися растворителями, водой и эфиром. Водный слой подкисляют концентрированной НС1 до рН 2-3 и экстрагируют СН2С12. Экстракт упаривают и остаток растворяют в смеси СН3ОН/Н20. Добавляют KSCN (0,050 моль) с последующим добавлением концентрированной НС1 (5 мл) и затем реакционную смесь перемешивают и кипятят с обратным холодильником на протяжении выходных. Смесь охлаждают и растворитель выпаривают. Остаток распределяют между (несмешивающимися) водой и СН2С12, затем органический слой отделяют, сушат и растворитель выпаривают. Остаток очищают колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (элюент: смесь гексан/EtOAc 80/20). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 2 г промежуточного соединения 21. Примечание: NaOMe генерируют in situ при помощи NaH и СН3ОН в THF.
g. Получение промежуточного соединения 22
Смесь промежуточного соединения 21 (полученного согласно A2.f) (0,0128 моль) в трифторуксусной кислоте (5 мл) и СН2С12 (40 мл) перемешивают при 0-5°С на бане со льдом и добавляют по каплям раствор 4-метоксибензолметанола (0,017 моль) в СН2С12 (10 мл) на протяжении 30 минут при 0-5°С, затем реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при 0-5°С и растворитель выпаривают (вакуум). Остаток растворяют в СН2С12 и промывают Н20 и NaHC03. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают на силикагеле (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 99/1) . Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 4,3 г промежуточного соединения
Смесь промежуточного соединения 22 (полученного согласно А2.д) (0,01 моль) и М-этил-М- (1-метилэтил)-2-пропанамина (0,02 моль) в пиридине (100 мл) перемешивают при 80°С и затем через раствор пропускают H2S (газ) в течение 5 часов, затем, чтобы удалить H2S из раствора, через раствор пропускают N2 в течение 2 часов при 80°С. Растворитель выпаривают и остаток растворяют в СН2С12. Раствор промывают Н20 и IN НС1. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают.
22 .
h. Получение промежуточного соединения 23
Остаток очищают, пропуская через силикагель (элюент: смесь СН2С12/СН30Н 99/1) . Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 3 г промежуточного соединения 23. i-1. Получение промежуточного соединения 24
Смесь промежуточного соединения 23 (полученного согласно A2.h) (0,0005 моль) и 1-хлор-2-пропанона (0,00055 моль) в этаноле (4 мл) перемешивают при 80°С в течение 3 часов, затем смесь выдерживают при стоянии на протяжении ночи при комнатной температуре и растворитель выпаривают. Остаток очищают, пропуская через силикагель (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 97/3). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают, получая фракцию (I) . Фракции, содержащие промежуточное соединение 23, собирают и растворитель выпаривают. К остатку добавляют этанол (4 мл) и дополнительное количество 1-хлор-2-пропанона (0,04 мл) и реакционную смесь перемешивают в течение 3 часов. Растворитель выпаривают и остаток подвергают фильтрации в силикагеле (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 97/3) . Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают, получая фракцию (II). Наконец, фракцию (I) и фракцию (II) объединяют. Выход: 0,030 г промежуточного соединения 24.
i-2. Получение промежуточного соединения 25
Смесь промежуточного соединения 23 (полученного согласно
A2.h) (0,0005 моль) и 2-бром-1-(3,4-дихлорфенил)этанона (0,0007 моль) в этаноле (4 мл) перемешивают в закрытом сосуде в течение 18 часов при комнатной температуре и затем растворитель выпаривают. Остаток подвергают фильтрации 2 раза (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 99/1, 100/0), затем фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 0,120 г промежуточного соединения 25. Пример A3
а. Получение промежуточного соединения 26
Смесь промежуточного соединения 6 (полученного согласно Al.e) (0,03 моль) в трифторуксусной кислоте (20 мл) и СН2С12 (150 мл) перемешивают при 0-5 °С на бане со льдом и к ней добавляют по каплям смесь 4-метоксибензолметанола (0,033 моль) в СН2С12 (50 моль) на протяжении 30 минут при 0-5 °С, затем реакционную смесь перемешивают в течение 1 часа при 0-5°С и растворитель выпаривают. Остаток растворяют в СН2С12 и промывают Н20 и NaHC03. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают, наконец, остаток сушат. Выход: 13,9 г промежуточного соединения 26.
Ь. Получение промежуточного соединения 27
Смесь промежуточного соединения 26 (полученного согласно A3.а) (0,03 моль) в IN NaOH (150 мл) и метанола (150 мл)
перемешивают при 80°С в течение 18 часов и затем органический растворитель (метанол) выпаривают. К водному концентрату добавляют IN НС1 (150 мл), затем полученный осадок отфильтровывают и сушат. Выход: 12 г промежуточного соединения
Смесь промежуточного соединения 27 (полученного согласно АЗ.Ь) (0,026 моль) в S0C12 (100 мл) перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 2 часов, затем растворитель выпаривают и 2 раза совместно выпаривают с толуолом. Выход: 12,5 г промежуточного соединения 28.
d. Получение промежуточного соединения 2 9
Раствор промежуточного соединения 28 (полученного согласно A3, с) (0, 026 моль) в THF (200 мл) добавляют по каплям к перемешиваемой смеси Ш3/Н20 (50 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов. Растворитель частично (1/2) выпаривают и концентрат экстрагируют СН2С12. Органический слой . отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают, пропуская через силикагель (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 95/5). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 3,5 г промежуточного соединения 29.
27.
с. Получение промежуточного соединения 28
е. Получение промежуточного соединения 30
Смесь промежуточного соединения 29 (полученного согласно A3.d) (0,0022 моль) в смеси DMF/DMA (25 мл) перемешивают при 100° С в течение 18 часов и затем растворитель выпаривают. Остаток подвергают фильтрации в силикагеле 2 раза (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 99/1), затем фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 0,51 г промежуточного соединения 30.
f. Получение промежуточного соединения 31
Смесь промежуточного соединения 30 (полученного согласно АЗ.е) (0,001 моль) и моногидрата гидразина (0,0015 моль) в уксусной кислоте (5 мл) перемешивают в закрытом сосуде в течение 2 часов при 90°С и затем растворитель выпаривают. Остаток растворяют в СН2С12 и промывают Н20 и К2С03. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 97/3). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 0,200 г промежуточного соединения 31.
Пример А4
а. Получение промежуточного соединения 32
Смесь 1-(3,4,5-трифторфенил)-1-пропанона (0,106 моль), гидроксиламина (0,150 моль) и NaOAc (0,150 моль) в метаноле (достаточное количество) перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре, затем реакционную смесь фильтруют и фильтрат выпаривают. Выход: 21,5 г промежуточного соединения 32.
Ь. Получение промежуточного соединения 33
NH2
Смесь промежуточного соединения 32 (полученного согласно А4.а) (0,11 моль) в смеси CH3OH/NH3 (500 мл) гидрируют в присутствии никеля Ренея (2 г) в качестве катализатора. После поглощения Н2 (2 экв.), катализатор отфильтровывают и фильтрат упаривают. Выход: 20 г промежуточного соединения 33.
с. Получение промежуточного соединения 34
Смесь промежуточного соединения 33 (полученного согласно А4.Ь) (0,105 моль) и метилового эфира бромуксусной кислоты (0,196 моль) в Et3N (30 мл) подвергают взаимодействию на протяжении ночи при комнатной температуре и добавляют дополнительное количество метилового эфира бромуксусной кислоты (10 г) . Добавляют ^,17-диметил-4-пиридинамин (1 г) и реакционную смесь перемешивают в течение 3 дней при комнатной температуре. Растворитель выпаривают и остаток разбавляют СН2С12. Полученное твердое вещество отфильтровывают и сушат (вакуум) при 50 °С. Выход: 6,8 г промежуточного соединения 34.
d. Получение промежуточного соединения 35
Смесь ацетилхлорида (0,1 моль) и HC02Na (10 г) в Et20 (100 мл) перемешивают в течение 6 часов при комнатной температуре и
затем твердое вещество отфильтровывают.
Добавляют смесь
промежуточного соединения 34 (полученного согласно А4.с) (0,024 моль) в Et20 (достаточное количество) и реакционную смесь перемешивают в течение 4 часов при комнатной температуре. Растворитель выпаривают и остаток гасят NaHC03, затем экстрагируют СН2С12. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Выход: 4,4 г промежуточного соединения 35.
е. Получение промежуточного соединения 36
трет-BuONa (2 г) добавляют к смеси промежуточного соединения 35 (полученного согласно A4.d) (0,0052 моль) в метиловом эфире уксусной кислоты (3 мл) и THF (80 мл) при комнатной температуре и смесь подвергают взаимодействию в течение 20 минут, затем добавляют воду (20 мл) и раствор концентрируют до остаточного объема 30 мл. К остатку добавляют воду (20 мл) и метанол (40 мл), с последующим добавлением KSCN (3 г) и НС1 (3 мл) . Реакционную смесь нагревают в течение 3 часов и гасят Na2C03 (до нейтральности). Раствор концентрируют до остаточного объема 4 0 мл и концентрат экстрагируют СН2С12. Органический слой сушат над MgS04, фильтруют и упаривают. Выход: 1,5 г промежуточного соединения 36 (88%).
f. Получение промежуточного соединения 37
Смесь промежуточного соединения 36 (полученного согласно А4.е) (0,0015 моль) в 1М NaOH (5 мл) и метанола (3 мл) перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 24 часов при 100°С, затем реакционную смесь охлаждают и растворитель выпаривают. Остаток гасят концентрированной НС1 и требуемый продукт собирают. Выход: 360 мг промежуточного соединения 37.
Пример А5
а. Получение промежуточного соединения 38
Ы-ЭТИЛ-Ы- (1-метилэтил)-2-пропанамин (0,1 моль) добавляют к перемешиваемой смеси промежуточного соединения 3 (полученного согласно Al.b) (0,0415 моль) в СН2С12, р.а. (100 мл) в атмосфере N2. После перемешивания в течение 15 минут реакционную смесь помещают на баню со льдом и добавляют по каплям при 0°С раствор хлорангидрида тиокислоты (0, 0457 моль) в СН2С12, р.а. (15 мл). Смесь перемешивают при 0°С в течение 30 минут и при комнатной температуре в течение 18 часов, затем добавляют дополнительное количество Ы-ЭТИЛ-Ы- (1-метилэтил)-2-пропанамина (9 мл) и полученную смесь перемешивают в течение 2 часов. Смесь промывают 2 раза Н20, один раз HCl (1N) и снова Н20. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают, затем выпаривают совместно с толуолом. Остаток очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: смесь СН2С12/гексан 15/85). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 7,4 г промежуточного соединения
38 (72,4%).
b-1. Получение промежуточного соединения 39
К раствору промежуточного соединения 38 (полученного согласно А5.а) (0,00175 моль) в THF (20 мл) добавляют моногидрохлорид метилового эфира бета-оксофенилаланина (0,00175 моль), с последующим добавлением К2СОз (0,00175 моль) и затем Н20 (5 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. Смесь выливают в Н20 (50 мл) и экстрагируют СН2С12. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают колоночной флэш-хроматографией (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН) . Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 0,095 г промежуточного соединения 39 (12,4%).
Ь-2. Получение промежуточного соединения 4 0
Моногидрохлорид 2-амино-1-(2-фуранил)этанона (0,0014 6 моль) добавляют к раствору промежуточного соединения 38 (полученного согласно А5.а) (0,00122 моль) в 1,4-диоксане, р.а. (6 мл), затем добавляют Н20 (0,5 мл) с последующим добавлением К2С03 (0,00122 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов и растворитель выпаривают, получая промежуточное соединение 40. Остаток используют в дальнейшем на следующей стадии.
Пример А6
Получение промежуточного соединения 41
NH2
Моногидрохлорид гидразинкарбоксамида (О,0078 моль)
добавляют к раствору промежуточного соединения 8 (полученного согласно Al.g) (0, 0052 моль) в THF, р. а. осушенном на молекулярных ситах (40 мл), в атмосфере N2, затем добавляют N-этил-М-(1-метилэтил)-2-пропанамин (0,016 моль) и реакционную смесь перемешивают в течение 18 часов при комнатной температуре. Растворитель выпаривают и остаток перемешивают в полунасыщенном водном растворе К2С03. Полученную смесь промывают смесью СН2С12/СН3ОН (95/5) и подкисляют концентрированной НС1. Образовавшийся осадок отфильтровывают, промывают Н20 и DIPE и затем сушат (вакуум) при 50°С. Выход: 0,42 г промежуточного соединения 41. Пример А7
Получение промежуточного соединения 4 3
Смесь промежуточного соединения 42 (полученного согласно Al.f-2) (0,001 моль), W-этилкарбонимидоил)-N, Н-диметил-1,3-пропандиамина (0,001 моль) и 1-гидрокси-1Я-бензотриазола (0,001 моль) в DMF (5 мл) перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре, затем добавляют уксусный гидразид (0,003 моль) и реакционную смесь перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре. Растворитель выпаривают, затем остаток перемешивают в Н20 и смесь экстрагируют смесью СН2С12/СН30Н (90/10). Органический слой отделяют, сушат, отфильтровывают и растворитель выпаривают. Полученный остаток перемешивают в СН2С12 и после затвердевания требуемый продукт отфильтровывают и сушат. Выход: 0,170 г промежуточного соединения 43.
В. Получение конечных соединений
Пример В1
Получение соединения 1
Смесь промежуточного соединения 14 (полученного согласно А1.1-1) (0,00055 моль) в трифторуксусной кислоте (3 мл) перемешивают при 80°С в закрытом сосуде в течение 4 часов и затем растворитель выпаривают при 80°С в потоке N2. Остаток перемешивают в СН2С12 и обрабатывают Н20 и К2С03. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток перемешивают в EtOAc (2 мл) и после фильтрации требуемый продукт сушат. Выход: 0,020 г соединения 1.
Пример В2
Получение соединения 2
моль), Н20 (0,5 мл) и К2С03 (0, 000154 моль) добавляют к раствору промежуточного соединения 38 (полученного согласно А5.а)
(0, 000154 моль) в 1,4-диоксане, р.а. (2,5 мл) и затем реакционную смесь энергично перемешивают в течение 20 часов. Добавляют 36% НС1, р. а. (0,5 мл) и полученную смесь перемешивают в течение 4 часов при 75° С и затем дают возможность достигнуть комнатной температуры, добавляют Н20 и смесь экстрагируют EtOAc. Органический слой отделяют, сушат
(MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией с обращенной фазой. Фракции требуемого продукта собирают и органические летучие
Моногидрохлорид 2-амино-2-бензоилацетамида (0,000158
вещества выпаривают. Продукт экстрагируют СН2С12 и отделенный органический слой упаривают. Выход: 0,0076 г соединения 2. Пример ВЗ
а. Получение соединения 3
Раствор промежуточного соединения 39 (полученного согласно А5.Ь-1) (0,0002 моль) в уксусной кислоте (6 мл) перемешивают в течение 18 часов в герметизированной пробирке при 100°С, затем реакционной смеси дают возможность достигнуть комнатной температуры и выливают в Н20. Добавляют СН2С12, затем добавляют насыщенный раствор К2С03 до тех пор, пока не образуется прозрачный двухфазный раствор. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают, затем выпаривают совместно с толуолом. Остаток очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией на RP-18 (элюент: (10% NH4OAc в Н20) /CH3OH/CH3CN) . Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают на 50%. Концентрат экстрагируют СН2С12 и отделенный органический слой упаривают. Выход: 0,011 г соединения 3.
Ь. Получение соединения 4
36% НС1, р. а. (2 мл) добавляют к раствору промежуточного соединения 40 (полученного согласно А5.Ь-2) (0,0012 моль) в 1,4-диоксане, р.а. (12 мл) и полученный раствор перемешивают при 65°С в течение 18 часов. Добавляют Н20 (10 мл) и смесь экстрагируют EtOAc. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток растворяют в 2-пропаноне (15 мл, р.а.) и раствор обрабатывают S02 (газ) в
течение 15 минут. Растворитель выпаривают и остаток очищают колоночной флэш-хроматографией (градиентное элюирование: СН2С12/СНзОН 99,8/0,2-> 99,6/0,4). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 0,0134 г соединения 4. Пример В4
Получение соединения 5
Смесь промежуточного соединения 6 (полученного согласно Al.e) (0, 00072 моль) и W-гидроксиэтанимидамида (0,00181 моль) в метаноле (3 мл) и NaOCH3/CH3OH (30%) (1 мл) подвергают взаимодействию при 100°С в герметизированной пробирке в течение 18 часов и затем реакционную смесь гасят водным раствором NH4CI. Растворитель выпаривают и остаток экстрагируют СН2С12. Органический слой отделяют, фильтруют через осушающий картридж и растворитель выпаривают. Остаток очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией. Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 0,110 г соединения 5.
Пример В5
Получение соединения 6
Грет-ВиОК (10 г) добавляют по каплям к смеси промежуточного соединения 20 (полученного согласно А2.е) (0,063 моль) и метилового эфира муравьиной кислоты (0,32 моль) в THF
(300 мл) . Через 7 часов растворитель выпаривают и остаток распределяют между водой и эфиром. Водный слой подкисляют концентрированной НС1 до рН 2-3 и экстрагируют СН2С12. Экстракт упаривают и остаток растворяют в смеси СН3ОН/Н20. Добавляют KSCN
(15 г), а затем концентрированную НС1 (достаточное количество)
и затем реакционную смесь перемешивают и кипятят с обратным холодильником на протяжении выходных. Смесь охлаждают и растворитель выпаривают. Остаток распределяют между водой и СН2С12, затем органический слой отделяют, сушат и растворитель выпаривают. Остаток очищают колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (элюент: смесь гексан/EtOAc 80/20). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Затем фракции продукта
aXJ > -*
собирают и растворитель выпаривают, получая
Смесь 0,200 г указанного промежуточного соединения, 0,5 г Bu3SnN3 в 0,5 мл толуола нагревают на протяжении ночи при 130°С и смесь очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией с обращенной фазой, получая 20 мг соединения 6. Пример Вб
а. Получение соединения 7
Смесь промежуточного соединения 44 (полученного согласно Al.f-1) (0,00037 моль) в SOCl2 (25 мл) перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 4 часов, затем реакционную смесь охлаждают и растворитель выпаривают. Маслянистый остаток разбавляют THF (10 мл) и обрабатывают гидразинкарбоксальдегидом (0,0042 моль), затем смесь перемешивают в течение 30 минут при комнатной температуре и растворитель выпаривают. Остаток разбавляют СН2С12 и сушат твердофазной экстракцией. Растворитель выпаривают и остаток разбавляют CH3CN. Полученную смесь обрабатывают РОС13 (10% масс.) (1 мл) в CH3CN (5 мл) и нагревают в течение 5 часов. Смесь охлаждают и растворитель выпаривают. Остаток экстрагируют
СН2С12 и сушат твердофазной экстракцией, затем растворитель выпаривают и остаток очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией с обращенной фазой. Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 22 мг соединения 7. Ь. Получение соединения 8
Смесь промежуточного соединения 37 (полученного согласно A4.f) (0,001 моль) в SOCl2 (5 мл) нагревают при 7 0°С в течение 4 часов, затем смесь охлаждают и растворитель выпаривают. Часть (1/3) этой фракции поглощают в THF (4 мл) и обрабатывают гидразинкарбоксальдегидом (0,0025 моль), затем реакционную смесь нагревают в течение 1 часа. Растворитель выпаривают и остаток поглощают в воде (0,5 мл) и СН2С12. Полученную смесь экстрагируют при помощи картриджа для твердофазной экстракции и растворитель выпаривают. Остаток поглощают в CH3CN (5 мл), затем смесь обрабатывают 1М раствором РОС13 (0,0004 моль) и нагревают при 80°С в течение 12 часов. Полученную смесь охлаждают и гасят водным раствором NaHC03. Растворитель выпаривают и остаток очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией с обращенной фазой. Наконец, фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 20 мг соединения 8.
Пример В7
Получение соединения 9
Смесь промежуточного соединения 41 (полученного согласно Аб) (0, 0009 моль) в CH3CN (15 мл) перемешивают на бане с горячим маслом и добавляют при 50°С оксихлорид фосфора (0,00107
моль) и затем реакционную смесь перемешивают дополнительно в течение 2 часов при 90°С. Смеси дают возможность достигнуть комнатной температуры и выливают в полунасыщенный водный раствор NaHC03 и экстрагируют смесью СН2С12/СН3ОН 98/2. Органический слой отделяют, сушат (MgS04) , фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток (0,21 г) очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией с обращенной фазой (NH4HC03-буфер). Фракции продукта собирают и растворитель выпаривают. Выход: 0,069 г соединения 9. Пример В8
Получение соединения 10
Смесь промежуточного соединения 4 3 (полученного согласно А7) (0,0004 моль) и реагента Бюргесса (0,0012 моль) в THF (5 мл) перемешивают в течение 3 часов при 60"С. Добавляют СН2С12 и реакционную смесь промывают Н20. Органический слой отделяют, сушат, фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток подвергают фильтрации в силикагеле (элюент: смесь СН2С12/СН3ОН 98/2). Фракции чистого продукта собирают и растворитель выпаривают. Полученный остаток перемешивают в DIPE, затем требуемый продукт отфильтровывают и сушат. Выход: 0,044 г соединения 10 (т.пл.: 97,8-97,9°С).
В таблицах 1 и 2 представлен перечень соединений формулы (I), которые получают согласно одному из вышеуказанных образцов (Пр. No.).
Таблица 1
Соединение
No.
Пр. No.
Свойства
-СН2СН3
N-NH
-СН2СН3
-СН2СН3
N-N
ВЗ.Ъ
-СН2СН3
-СН2СН3
N-N
-СН2СН3
N V
-СН2СН3
N-N
г.пл.227-228.5вС
-СН2СН3
N-N
-СН2СН3
-СН2СН3
-СН2СН3
ВЗ.Ь
-СН2СН3
"а:
ВЗ.Ь
-СН2СН3
-СН2СН3
Соединение No.
Пр. No.
Свойства
-CH2CH3
т. пл. 230.2-235.5°C
-CH2CH3
-CH2CH3
-CH2CH3
-CH2CH3
-CH2CH3
-CH2CH3
ВЗ.а
-CH2CH3
Таблица 2
Соединение No.
Пр. No.
R2 b
Свойства
-CH2CH3
-CF3
Соединение No.
Пр. No.
R2 b
Свойства
-СН2СН3
N-N
-СН2СН3
N-N
Вб.Ъ
-СН2СН3
N-N
Вб.а
-СН2СН3
*?>
N-N
-СН2СН2СН3
N-N
г.пл.97.8-97.9
Вб.а
-СЦ2СН2СН3
N-N
С. Аналитическая часть Условия ЖХ-МС (LCMS) 1
Градиент ВЭЖХ обеспечивали разделительной системой Waters Alliance НТ 2790 с устройством для обогрева колонки при 40°С. Поток из колонки расщепляли и подавали на фотодиодный детектор (PDA) Waters 996 и масс-спектрометр Waters-Micromass ZQ с источником электрораспылительной ионизации, функционирующем в режиме регистрации положительных и отрицательных ионов. ВЭЖХ с обращенной фазой выполняли на колонке С18 Xterra MS (3,5 мкм, 4,6x100 мм) (12-минутная колонка) со скоростью потока 1,6 мл/минуту. Три подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 25 мМ ацетата аммония +5% ацетонитрила; подвижная фаза В: ацетонитрил; подвижная фаза С: метанол) использовали, чтобы выполнить условие градиента от 100% А до 50% В и 50% С через 6,5 минут, до 100% В в течение 1 минуты, 100% В в течение 1 минуты и вновь уравновесить систему при 100% А в течение 1,5 минут. Использовали объем инъекционной пробы 10 мкл.
Масс-спектры получали, сканируя от m/z 100 до 1000 в 1с, используя время задержки 0,1 с. Напряжение капиллярной иглы составляло 3 кВ и температуру источника поддерживали при 14 0°С. В качестве газа-распылителя использовали азот. Напряжение на
конусе составляло 10 В для реализации режима ионизации положительных ионов и 20 В для реализации режима ионизации отрицательных ионов. Сбор данных осуществляли с помощью информационной системы Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.
Таблица 3
ЖХ-МС (LCMS) основной пик ([М+] определяет массу соединения) и время удерживания (минуты)
Соединение №
[МН+]
Время удерживания
368
6,11
387
5, 53
369
5,40
355
5,31
337
4,49
323
4,37
421
6, 06
353
5, 10
377
6, 12
433
6, 58
353
5, 99
364
5, 74
380
4, 97
363
5, 98
516
б, 75
354
4, 78
384
6,50
341
4, 90
448
б, 73
394
5,47
463
4,47
379
5, 72
450
5, 84
449
4, 50
424
4, 86
370
3, 90
* [М+] означает массу соединения
Р. Фармакологический пример
Ингибирование МСР-1-индуцированного Са-притока (переноса) в человеческих ТНР-1 клетках
Связывание МСР-1 с рецептором CCR2 индуцирует быстрое и неустойчивое (переходное) внутриклеточное высвобождение Са2+ (вторичный мессенджер) в отдельных клеточных линиях (Charo et al., PNAS 1994). Уровни свободного Са2+ могут быть измерены, используя краситель, чувствительный к Са2+. Когда рецептор CCR2 блокируют антагонистом рецептора CCR2, индуцируемое МСР-1 высвобождение Са2+ подавляется.
Человеческие ТНР-1 клетки (моноцитарная клеточная линия, АТСС TIB-202) культивируют в RPMI 1640 среде, дополненной 10% фетальной телячьей сывороткой (FCS), 1% L-глутамина, пенициллином (50 Ед/мл) и стрептомицином (50 мкг/мл) (все GIBCO BRL, Gent). После центрифугирования клетки нагружают в течение 30 минут, чувствительным к Са2+, флуоресцентным красителем Fluo-3 AM (Molecular Probes, Leiden, Netherlands) (2 миллиона клеток/мл в среде RPMI, содержащей 4 мкМ Fluo-3 AM, 20 мМ HEPES, 0,1% бычьего сывороточного альбумина (BSA) и 5 мМ пробенецида). Избыточный краситель удаляют 3-кратным промыванием буфером (5 мМ HEPES, 14 0 мМ NaCl, 1 мМ МдС12, 5 мМ КС1, 10 мМ глюкозы, 2,5 мМ пробенецида, 1,25 мМ СаС12, 0,1% BSA; все дальнейшие инкубации проводят в этом буфере). Клетки высевают при плотности 150000 клеток/лунку в темно-стеночные 96-луночные планшеты (Costar, Cambridge, MA) и осаждают центрифугированием (1 минута). Клетки предварительно инкубируют в течение 20 минут с испытуемым соединением. Затем добавляют 10~7 М hMCP-1 (Bachera, Bubendorf, Switserland). Изменения концентрации внутриклеточного свободного Са2+ измеряют, используя планшет-ридер с детектированием по флуоресцентной метке (FLIPR, Molecular Devices, Munchen, Germany). Флуоресценцию регистрируют каждую секунду, начиная с 10 секунд до добавления МСР-1, до 2 минут после добавления (первая минута: 60 регистраций с интервалом 1 секунда, вторая минута: 20 регистраций с интервалом 3 секунды). Максимальную флуоресценцию, полученную в пределах этого промежутка времени,
используют для дальнейших вычислений.
В таблице 4 приводятся значения р1С50, полученные в вышеописанном тесте для соединений формулы (I) . р1С50 означает -log 1С50, где 1С50 представляет собой молярную концентрацию испытуемого соединения, которая ингибирует на 50%, индуцируемый специфическим МСР-1, приток (перенос) Са2+.
Таблица 4
Соединение №
PIC50
6,7
6, 66
6,38
6,14
7,45
6,4
7,38
6, 08
6,2
7,46
7,48
Анализ связывания радиоактивного лиганда
Анализы связывания 1251-МСР-1 осуществляли в 96-луночных планшетах с 4 0 мкг белка на лунку. Соединения растворяли и разбавляли в DMSO до 100Х разбавлений. Получают 10Х диапазон концентраций соединений в буфере для связывания (10% DMSO). Пробы для конкурентного связывания содержали нижеследующие компоненты в суммарном объеме 250 мкл: 25 мкл разбавления соответствующего соединения (конечная концентрация 1% DMSO), 200 мкл мембран из ССК2В-трансфицированных СНО клеток, растворенных в буфере для связывания, и 25 мкл 1251-МСР-1 (Bolton and Hunter labeled, Amersham, удельная активность=2000 Ки/ммоль, 0,15 нМ финальная). Буфер для связывания состоял из 25 мМ HEPES, 5 мМ MgCl2, 1 мМ СаС12, 0,5% не содержащего протеаз бычьего сывороточного альбумина, рН 7.4. После инкубации в течение 90 минут при 25°С мембраны собирали на GF/B фильтрах -предварительно замоченных в 0,5% полиэтиленимине, с последующей
промывкой буфером, содержащим 25 мМ HEPES, 5 мМ MgCl2, 1 мМ СаС12, 5 мМ NaCl, рН 7,4. Определяли связанную радиоактивность на фильтре подсчетом (импульсов) в жидкой фазе. Вычисляли значения ЕС50 (мкМ) и значения Ki (мкМ) . Значение ЕС50 обозначает концентрацию испытуемого соединения, которое конкурирует с МСР-1 за половину сайтов специфического связывания; значение Ki обозначает константу диссоциации при равновесии, т.е. концентрацию испытуемого соединения, которая может связаться с половиной сайтов связывания при равновесии в отсутствие радиолиганда или других конкурентов (связывания). Значения ЕС50 и значения Ki вычисляют, используя метод нелинейной регрессии с помощью программы Graphpad Prism. Prism вычисляет Ki или сродство рецептора к конкурирующему лекарственному средству, используя уравнение Cheng and Prusoff (Biochem. Pharmacol. 1973, 22: 3099-3108). Низкое (значение) Ki указывает на высокое сродство рецептора к испытуемому соединению.
? __^Qo_
' [радиолиганд]
1 +
где Kd определяет сродство радиолиганда в отношении рецептора, т.е. концентрацию радиолиганда, которая может связаться с половиной сайтов связывания при равновесии в отсутствие конкурентов (связывания).
Соединение 1 имеет Ki (мкМ) 0,17.
Хемотаксический ответ
Антагонистическую активность соединений по данному изобретению в отношении рецептора CCR2 можно также определить путем измерения влияния соединений на хемотаксический ответ клеток в присутствии хемокина, такого как, например, МСР-1.
Моноядерные клетки из человеческой гепаринизированной периферической крови (РВМС) выделяли, используя градиентное центрифугирование по Ficoll-Paque (Amersham Biosciences). Анализы хемотаксической реактивности осуществляли, используя имеющиеся в распоряжении 96-луночные планшеты для хемотаксиса (ChemoTx, Neuro Probe) с поликарбонатными (без PVP) фильтрационными мембранами с размером пор 5 мкм. В моноядерные клетки вводили флуоресцентную метку обработкой 5 мкг/мл
Calcein-AM (Molecular Probes, Eugene, OR) при 37°С в течение 30 минут. Меченые клетки промывали дважды и ресуспендировали при 5х10б клеток/лунку в сбалансированном солевом растворе Хэнкса (Gibco BRL), дополненном 0,2% бычьего сывороточного альбумина. Затем клетки предварительно инкубировали в течение 10 минут при комнатной температуре с серийными разбавлениями соединений в DMSO (диметилсульфоксид) (конечная концентрация DMSO 0,2%). Донные лунки планшета для хемотаксиса нагружали 28 мкл среды, содержащей 30 нг/мл рекомбинантного hMCP-1 (R &D) или только буфер. Предварительно обработанные клетки (100000 клеток) добавляли, в трех экземплярах, с наружной стороны фильтра (20 мкл) и инкубировали при 37 °С в увлажненном воздухе, содержащем 5% С02. После инкубации в течение 105 минут немигрировавшие клетки удаляли с верхней (наружной) поверхности фильтра, осторожно вытирая фильтр тканью. Мигрировавшие клетки измеряли, используя ридер-планшет с детектированием флуоресцентной метки (АВОзбуждения=485 нм; АИЗЛуЧения=538 нм) . Хемотаксический ответ может быть выражен в виде хемотаксического индекса (C.I.), который представляет собой отношение среднего значения числа мигрировавших клеток в присутствии МСР-1 и среднего значения) числа мигрировавших клеток в отсутствие хемокина. Процент ингибирования можно вычислить, используя формулу:
F -F
% ингибирования = (1--°^в^1-6УФ^ х 100 ,
^МСР-\ ~ Fбуфер
где Образец/ флуоресценция клеток, предварительно инкубированных с 10, 1, 0,1, 0,01 или 0,001 мкМ соединения и мигрировавших в среду, содержащую 30 нг/мл МСР-1, в донных лунках; FMCP-I> флуоресценция клеток, предварительно инкубированных с буфер-0,2% DMSO и мигрировавших к 30 нг/мл МСР-1, и Fbuffer, флуоресценция клеток, предварительно инкубированных со смесью буфер-0,2% DMSO и спонтанно мигрировавших в буфер в донных лунках.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы (I)
'(R2X1
его N-оксид, фармацевтически приемлемая аддитивная соль, его четвертичный амин или стереохимически изомерная форма, где
Rx представляет собой водород, Сх^алкил, С3-7циклоалкил, С1-6алкилоксиС1-6алкил, ди (С^алкил) аминоСх-6алкил, арил или гетероарил;
каждый R2 независимо представляет собой галоген, С1-6алкил, Ci-балкилокси, С1-6алкилтио, полигалогенС1-6алкил,
полигалогенСх-балкилокси, циано, аминокарбонил, амино, моно- или ди (Сх-4алкил) амино, нитро, арил или арилокси;
R3 представляет собой водород, циано, Сх-валкил, необязательно замещенный гидрокси или С1-6алкилокси, C(=0)-0-R5, С(=0)-NR6aR6b, C(=S) -NR6aR6b, S (=0) 2-NR6aR6b или C(=0)-R7;
R4 представляет собой водород или Ci-балкил;
R5 представляет собой водород, С1-6алкил, гидроксиСх-6алкил, С2-балкенил, С2.6алкинил, полигалогенС1-6алкил,
С1-6алкилоксиС1-балкил, аминоС1-балкил, моно- или
ди (С1-4алкил) аминоСх-балкил, аминокарбонилС1-6алкил, моно- или ди (С1-4алкил) аминокарбонилС1-6алкил или арил;
R6a и R6b> каждый, независимо представляют собой водород, Ci-балкил, амино моно- или ди (С1-4алкил) амино, арилЫН-, аминоСх-балкил, моно- или ди (С1-4алкил) аминоС1-6алкил,
Ci-балкилкарбониламино, аминокарбониламино, Ci-балкилокси,
карбониламино или гидроксиС1-6алкил; или
R6a и R6b/ взятые вместе с азотом, с которым они связаны, образуют пирролидинил, имидазолидинил, пиразолидинил,
пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил или пиперазинил, замещенный Ci-балкилом;
R7 представляет собой водород, Сх-валкил, гидроксиСх-балкил,
Сг-бЭлкенил, С2-балкинил, полигалогенСх-валкил,
Сх-валкилоксиСх-балкил, аминоСх-валкил, моно- или
ди (С1-4алкил) аминоСх.балкил, аминокарбонилСх-б^лкил, моно- или ди (СХ-4ЙЛКИЛ) аминокарбонилСх-б^лкил, арил или гетероарил;
Z представляет собой циклическую структуру, выбранную из
v/ vr Cf. -(/ "0. v/
R" III (a-1) (a-2) (B.3) (M> (a-5) (а-Ф
V 4*".
Rg R9 R9
N-0
(а-7) (a-8) (а-9) (a-10) О1'11) (a-*2>
R9 *9 R9
(a-!3) (a-H) (a-15) (a-16)
(a-18)
каждый R8 независимо представляет собой водород, галоген, Сх-балкил, Сх-6алкилокси, полигалогенСх-валкил,
полигалогенСх-балкилокси, циано, аминокарбонил, моно- или ди (Сх-4алкил) аминокарбонил, амино, моно- или ди (Сх-4алкил) амино, гидроксиСх-6алкиламино, арил, арилокси, пиперидинил,
пиперидиниламино, морфолинил, пиперазинил или нитро;
каждый R9 независимо представляет собой водород, галоген или Сх-бЭлкил;
п равно 1, 2, 3, 4 или 5;
арил представляет собой фенил или фенил, замещенный одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, Сх-б^лкила, Сх-валкилокси,
полигалогенС1-6алкила, полигалогенС1-6алкилокси, циано,
аминокарбонила, моно- или ди(С^алкил)аминокарбонила, амино, моно- или ди (С1-4алкил) амино, фенилокси или нитро;
гетероарил представляет собой фуранил, тиенил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, пиразолил, изоксазолил, изотиазолил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил; при этом каждый из указанных гетероциклов является необязательно замещенным одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, Ci-валкила, Сх-балкилокси, полигалогенС1-6алкила, полигалогенСа-балкилокси, циано, аминокарбонила, моно- или ди (С^алкил) аминокарбонила, амино, моно- или ди (С1_4алкил) амино или нитро.
2. Соединение по п.1, где R2 представляет собой галоген, полигалогенС1-6алкил или арилокси.
3. Соединение по п.1 или 2, где R2 представляет собой галоген.
4. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где Z представляет собой циклическую систему, выбранную из (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-б), (а-7), (а-11), (а-13), (а-14) или (а-15).
5. Соединение по п. 4, где Z представляет собой циклическую систему, выбранную из (а-2) или (а-15).
6. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где R3 представляет собой водород, циано, C(=0)-0-R5, С (=0)-NR6aRebf C(=S) -NR6aR6b, S(=0)2-NR6aR6b или C(=0)-R7.
7. Соединение по любому из п.п.1-5, где R3 представляет собой водород, Ci-балкил, замещенный Ci-балкилокси, или С(=0)-0-R5.
8. Соединение по п.7, где R3 представляет собой водород или С(=0)-0-R5 .
9. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где Ri представляет собой С1-6алкил.
10. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где R4 представляет собой водород.
11. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где п
равно 2.
12. Соединение по п.1, где Ri представляет собой С].-балкил; R2 представляет собой галоген, полигалогенС1-6алкил или арилокси; R3 представляет собой водород, Сх^алкил, замещенный Ci-балкилокси; или C(=0)-0-R5; Z представляет собой циклическую систему, выбранную из (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-6), (а-7), (а-11), (а-13), (а-14) или (а-15); R4 представляет собой водород; п равно 1, 2 или 3.
13. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где соединение является стереохимически чистым.
14. Соединение по любому из предшествующих пунктов для использования в качестве лекарственного средства.
15. Применение соединения по любому из п.п.1-13 для получения лекарственного средства для профилактики или лечения заболеваний, опосредованных через активацию рецептора CCR2.
16. Применение по п.15, где заболевание представляет собой воспалительное заболевание.
17. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного компонента терапевтически эффективное количество соединения по любому из п.п.1-13.
18. Способ получения композиции по п.17, отличающийся тем, что фармацевтически приемлемый носитель смешивают с терапевтически эффективным количеством соединения по любому из п.п.1-13 с получением однородной смеси.
19. Способ получения соединения по п.1, включающий
а) взаимодействие промежуточного соединения формулы (II) с соответствующей кислотой необязательно в присутствии подходящего растворителя
NH кислота 9?
кг2
(П)
где Ri, R2, R3, R4, Z и n такие, как определены в п.1;
b) взаимодействие промежуточного соединения формулы (III) с промежуточным соединением формулы (IV) в присутствии подходящего растворителя
им-2
(Ш) (по а"*}
где Ri, R2, R4, Z и n такие, как определены в п.1; с) взаимодействие промежуточного соединения формулы (V) с подходящей кислотой
кислота
(V)
где Ri, R2, R3, R4, Z и n такие, как определены в п.1;
d) взаимодействие промежуточного соединения формулы (VI) с хлорангидридом фосфорной кислоты (РОС13) или реагентом Бюргесса в присутствии подходящего растворителя
(vi) сн> >
где Ri# R2/ R3, R4/ Re и п такие, как определены в п.1; е) взаимодействие промежуточного соединения формулы (VII) с SOCl2 и HC(=0)NH-NH2 в присутствии подходящего растворителя
где Ri, R2, R3, R4 и п такие, как определены в п.1;
f) взаимодействие промежуточного соединения формулы (VIII) с промежуточным соединением формулы (IX) в присутствии подходящего основания и подходящего растворителя
где Ri, R2, R3, R4, R8 и n такие, как определены в п.1;
д) взаимодействие промежуточного соединения формулы (X) с метилформиатом, KSCN в присутствии подходящего основания, подходящей кислоты и подходящего растворителя, с последующим взаимодействием полученного таким образом промежуточного соединения формулы (Х-а) с Bu3SnN3 в присутствии подходящего растворителя
где Ri, R2, R4 и n такие, как определены в п.1;
или, если это требуется, превращение соединений формулы (I) в друг в друга, следуя известным в данной области техники превращениям, и далее, если это необходимо, превращение соединений формулы (I) в терапевтически активную нетоксичную аддитивную соль кислоты обработкой кислотой, или в терапевтически активную нетоксичную аддитивную соль основания путем обработки основанием, или наоборот, превращение формы аддитивной соли кислоты в свободное основание обработкой щелочью, или превращение аддитивной соли основания в свободную кислоту обработкой кислотой; и, если это требуется, получение его стереохимически изомерных форм, его четвертичных аминов или его N-оксидных форм.
По доверенности