Патентная документация ЕАПВ

 
Запрос :  ea201691549a*\id

больше ...
Термины запроса в документе


Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

Настоящее изобретение, в общем, относится к соединениям, которые могут ингибировать AAK1 (адаптерсвязанную киназу 1), композициям, содержащим такие соединения, и к способам ингибирования AAK1.


Евразийское (21) 201691549 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2017.02.28
(22) Дата подачи заявки 2014.01.29
(51) Int. Cl.
A61K31/4375 (2006.01) C07D 471/04 (2006.01) A61P25/02 (2006.01) A61P25/16 (2006.01) A61P25/28 (2006.01)
(54) АРИЛЛАКТАМНЫЕ ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ
(86) PCT/US2014/013539
(87) WO 2015/116060 2015.08.06
(71) Заявитель: БРИСТОЛ-МАЙЕРС СКВИББ КОМПАНИ (US)
(72) Изобретатель:
Врудхула Вивекананда М., Пан Сенлян, Раджамани Рамкумар (US), Нара Сушеел Джетхананд, Каратолувху Махесваран Сивасамбан, Майшал Тарун Кумар (IN), Дитта Джонатан Л., Дзиерба Кэролин Дайан, Бронсон Джоанн Дж., Макор Джон Е.
(US)
(74) Представитель:
Угрюмов В.М., Строкова О.В., Карпенко О.Ю., Лыу Т.Н., Дементьев В.Н., Глухарёва А.О., Клюкин В.А., Христофоров А.А. (RU)
(57) Настоящее изобретение, в общем, относится к соединениям, которые могут ингибировать AAK1 (адаптерсвязанную киназу 1), композициям, содержащим такие соединения, и к способам ингибиро-вания AAK1.
АРИЛЛАКТАМНЫЕ ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ
Настоящее изобретение, в общем, относится к соединениям, которые могут ингибировать адаптер-связанную киназу 1 (adaptor associated kinase 1 (ААК1)), композициям, содержащим такие соединения, и к способам ингибирования ААК1. Адаптер-связанная киназа 1 (ААК1) является членом семейства Arkl/Prkl серин/треониновых киназ. ААК1 мРНК существует в двух формах, образующихся в результате сплайсинга и называемых короткой и длинной. Длинная форма превалирует и экспрессируется на высоком уровне в мозге и сердце (Henderson и Conner, Mol. Biol. Cell. 2007, 18, 2698-2706). Синаптосомальные препараты обогащены ААК1, и она локализуется совместно с эндоцитическими структурами в культивируемых клетках. ААК1 модулирует эндоцитоз покрытых клатрином везикул, в ходе процесса, играющего важную роль в синаптической рециркуляции везикул и рецептор-опосредованном эндоцитозе. ААК1 связывается с комплексом АР2 - гетеро-тетрамером, который связывает рецептор-карго со слоем покрытия из клатрина. Связывание клатрина с ААК1 стимулирует киназную активность ААК1 (Conner et. al., Traffic 2003, 4, 885-890; Jackson et. al., J. Cell. Biol. 2003, 163, 231-236). AAK1 фосфорилирует mu-2-субъединицу AP-2, что способствует связыванию mu-2 с тирозин-содержащими сортировочными мотивами в карго-рецепторах (Ricotta et. al., J. Cell Bio. 2002, 156, 791-795; Conner и Schmid, J. Cell Bio. 2002, 156, 921-929). Ми2-фосфорилирование не требуется для поглощения рецепторов, но фосфорилирование повышает эффективность интернализации (Motely et. al., Mol. Biol. Cell. 2006, 17, 5298-5308).
AAK1 была идентифицирована как ингибитор управляемого нейрегулином-1 сигнального пути (Neuregulin-l/ErbB4 signaling) в клетках PC 12. Потеря экспрессии ААК1, вызванная опосредованным РНК-интерференцией выключением генов или обработкой ингибитором киназы К252а (который ингибирует киназную активность ААК1), приводит к потенцированию нейрегулин-1 -индуцированного роста аксонов. Данные воздействия приводят к увеличению экспрессии ЕгЬВ4 и накоплению ЕгЬВ4 в плазматической мембране или вблизи нее (Kuai et. al., Chemistry и Biology 2011, 18, 891906). NRG1 и ErbB4 являются предполагаемыми генами, отвечающими за подверженность шизофрении (Buonanno, Brain Res. Bull. 2010, 83, 122-131). Была показана связь SNP (Single nucleotide polymorphism, однонуклеотидных полиморфизмов) в обоих генах с множественными эндофенотипами шизофрении (Greenwood et. al., Am. J. Psychiatry 2011, 168, 930-946). Использующие нейрегулин 1-й ErbB4 мышиные модели
характеризовались соответствующими шизофрении морфологическими изменениями и поведенческими фенотипами (Jaaro-Peled et. al., Schizophrenia Bulletin 2010, 36, 301-313; Wen et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010, 107, 1211-1216). Кроме того, была показана связь между однонуклеотидным полиморфизмом в интроне гена ААК1 и возрастом начала болезни Паркинсона (Latourelle et. al., ВМС Med. Genet. 2009, 10, 98). Данные результаты свидетельствуют о том, что ингибирование активности ААК1 может найти применение в лечении шизофрении, когнитивной недостаточности при шизофрении, болезни Паркинсона, невропатической боли, биполярном расстройстве и болезни Альцгеймера.
В первом аспекте настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I)
N N
или его фармацевтически приемлемую соль, где:
R1 выбран из водорода, Сг-С^-алкенила, Ci-Сз-алкокси, С1-Сз-алкоксиС1-Сз-алкила, Ci-Сз-алкила, Ci-Сз-алкиламино, арилС1-Сз-алкила, Сз-Сб-циклоалкила, Сз-Сб-циклоалкилС1-Сз-алкила, Ci-Сз-галоалкила и Ci-Сз-гидроксиалкила; R2 выбран из водорода, Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкоксикарбониламино, Ci-Сз-алкила, О-Сз-алкиламино, Ci-Сз-алкилкарбониламино, амино, ариламино, арилкарбониламино, Сз-Сб-циклоалкиламино, Сз-Сб-циклоалкилкарбониламино, Сз-Сб-циклоалкилоху, галогена, Ci-Сз-галоалкокси, Ci-Сз-галоалкила, Сг-Сз-галоалкиламино, С2-С3-галоалкилкарбониламино, гидрокси и фенилС1-Сз-алкиламино, где фенил необязательно замещен группой Ci-Сз-алкокси;
R3 и R4 независимо друг от друга выбраны из водорода, С1-С4-алкокси, С1-Сз-алкоксиС1-Сз-алкила, Ci-Сз-алкоксикарбонила, С1-С4-алкила, Ci-Сз-алкилсульфонила, аминокарбонила, циано, Сз-Сб-циклоалкила, ди(С1-Сз-алкил)аминокарбонила, галогена, Ci-Сз-галоалкокси, Ci-Сз-галоалкила, гетероарила, гидрокси, Ci-Сз-гидроксиалкила и фенила, необязательно замещенного галогенной группой;
R5 представляет собой С1-Сз-алкил-У или С2-С8-алкил, причем С2-С8-алкил необязательно замещен одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкиламино, С1-Сз-алкоксиС2-Сз-алкиламино, амино, арила, ди(С1-Сз-алкил)амино, галогена, Ci-Сз-галоалкиламино, С1-С3-
галоалкилкарбониламино, гидрокси, -NRxRy и Сз-Ся-циклоалкила, где циклоалкил дополнительно необязательно замещен одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкила, Ci-Сз-алкиламино, Сл-Сз-алкоксиСг-Сз-алкиламино, амино, арила, арилСл-Сз-алкила, галогена, Ci-Сз-галоалкила, Ci-Сз-галоалкиламино и гидрокси;
Rx и Ry, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют от трех до шести-членное кольцо; а также
Y выбран из
R7 d7 I (R6)n R7 (R6)n
R8' R6- R8 • R8 • R8 • R8 и > ^
где n равно 0, 1,2, или 3;
каждый R6 независимо выбран из водорода, Ci-Сб-алкила, арила, арилСл-Сз-алкила, Сз-Сб-циклоалкила, галогена и Ci-Сз-галоалкила; каждый R7 независимо выбран из водорода, Ci-Сз-алкокси и гидроксила; и R8 выбран из водорода, Ci-Сб-алкила, Сз-Сб-циклоалкила, и С1 -Сб-алкилкарбонила.
В первом варианте осуществления первого аспекта настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I), где R5 представляет собой С2-С8-алкил, причем С2-С8-алкил необязательно замещен одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из Ci-Сз-алкокси, амино, Ci-Сз-алкиламино, ди(С1-Сз-алкил)амино, галогена, и Сз-С8-циклоалкила; или R5 представляет собой Сл-Сз-алкил-Y, где Y
R6 R6 1
представляет собой R8 или где R6, R7 и R8 представляют собой
водород.
Во втором варианте осуществления первого аспекта настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I), в котором R5 представляет собой С2-С8-алкил, необязательно замещенный одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из амино и галогена.
Во втором варианте осуществления первого аспекта настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I), в котором R1 выбран из водорода, Сг-С^-алкенила,
С1-Сз-алкоксиС1-Сз-алкила, Ci-Сз-алкила, арилС1-Сз-алкила, Сз-Сб-циклоалкилСл-Сз-алкила, и Ci-Сз-гидроксиалкила;
R2 выбран из водорода, Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкила, Ci-Сз-алкилкарбониламино, амино, галогена, Ci-Сз-галоалкила и фенилС1-Сз-алкиламино, где фенил необязательно замещен группой Ci-Сз-алкокси;
R3 и R4 независимо друг от друга выбраны из водорода, Сл-С^-алкокси, Ci-Сз-алкоксиСл-Сз-алкила, Ci-Сз-алкоксикарбонила, С1-С4-алкила, О-Сз-алкилсульфонила, аминокарбонила, циано, Сз-Сб-циклоалкила, ди(С1-Сз-алкил)аминокарбонила, галогена, О-Сз-галоалкокси, Ci-Сз-галоалкила, гетероарила, гидрокси, Ci-Сз-гидроксиалкила и фенила, необязательно замещенного галогенной группой;
R5 представляет собой Сл-Сз-алкил-Y или С2-С8-алкил, причем С2-С8-алкил необязательно замещен одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкиламино, амино, ди(Сл-Сз-алкил)амино, галогена и Сз-Св-циклоалкила; и где Y выбран из
где R6, R7 и R8 представляют собой водород.
Во втором аспекте настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (II),
или его фармацевтически приемлемую соль, где:
R1 выбран из водорода, Сг-С4-алкенила, Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкоксиСл-Сз-алкила, Ci-Сз-алкила, Ci-Сз-алкиламино, арилС1-Сз-алкила, Сз-Сб-циклоалкила, Сз-Сб-циклоалкилСл-Сз-алкила и Ci-Сз-галоалкила;
R2 выбран из водорода, Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкоксикарбониламино, Ci-Сз-алкила, О-Сз-алкиламино, Ci-Сз-алкилкарбониламино, амино, ариламино, арилкарбониламино, Сз-Сб-циклоал кил амино, Сз-Сб-циклоалкилкарбониламино, Сз-Сб-циклоалкилоху, галогена, Ci-Сз-галоалкокси, Ci-Сз-галоалкила, Сг-Сз-галоалкиламино, С2-С3-галоалкилкарбониламино и гидрокси;
R3 и R4 независимо друг от друга выбраны из водорода, Сл-С^-алкила, циано, Сз-Сб-циклоалкила, галогена, Ci-Сз-галоалкила и гидрокси;
R5 представляет собой Сл-Сз-алкил-Y или С2-С8-алкил, причем С2-С8-алкил необязательно замещен одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкиламино, Сл-Сз-алкоксиСг-Сз-алкиламино, амино, арила, галогена, Ci-Сз-галоалкиламино, Ci-Сз-галоалкилкарбониламино, гидрокси, -NRxRy и Сз-С8-циклоалкила, причем циклоалкил дополнительно необязательно замещен одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из О-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкила, Ci-Сз-алкиламино, С1-Сз-алкоксиС2-Сз-алкиламино, амино, арила, арилСл-Сз-алкила, галогена, Ci-Сз-галоалкила, Ci-Сз-галоалкиламино и гидрокси;
Rx и Ry, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют от трех до шести-членное кольцо; а также Y выбран из
где п равно 0, 1,2, или 3;
каждый R6 независимо выбран из водорода, Ci-Сб-алкила, арила, арилСл-Сз-алкила, Сз-Сб-циклоалкила, галогена и Ci-Сз-галоалкила; каждый R7 независимо выбран из водорода, Ci-Сз-алкокси и гидроксила; и R8 выбран из водорода, Ci-Сб-алкила, Сз-Сб-циклоалкила, и С1 -Сб-алкилкарбонила.
В первом варианте осуществления второго аспекта настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, где R5 представляет собой Сг-С8-алкил, необязательно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкиламино, Сл-Сз-алкоксиСг-Сз-алкиламино, амино, арила, галогена, О-Сз-галоалкиламино, О-Сз-галоалкилкарбониламино, гидрокси, -NRxRy и Сз-С8-циклоалкила, причем циклоалкил дополнительно необязательно замещен одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из Ci-Сз-алкокси, Ci-Сз-алкила, Ci-Сз-алкиламино, С1-Сз-алкоксиС2-Сз-алкиламино, амино, арила, арилСл-Сз-алкила, галогена, Ci-Сз-галоалкила, Ci-Сз-галоалкиламино и гидрокси. Во втором варианте осуществления второго аспекта R5
представляет собой С2-С8-алкил, необязательно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из амино и галогена.
В третьем варианте осуществления второго аспекта настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, где R1 выбран из водорода, С2-С4-алкенила, Ci-Сз-алкоксиСл-Сз-алкила, Ci-Сз-алкила, арилСл-Сз-алкила, Сз-Сб-циклоалкилСл-Сз-алкила;
R2 выбран из водорода, Ci-Сз-алкила, Ci-Сз-алкилкарбониламино и амино;
R3 и R4 независимо друг от друга выбраны из водорода, Сл-С4-алкила, циано,
Сз-Сб-циклоалкила, галогена и гидрокси; а также
R5 представляет собой С2-С8-алкил, необязательно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из амино и галогена.
В третьем аспекте настоящего изобретения обеспечивается композиция, содержащая фармацевтически приемлемое количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель. В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к способу ингибирования активности адаптер-связанной киназы 1 (ААК1), включающему контактирование ААК1 с соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью. В пятом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или контроля заболевания или расстройства, опосредованного активностью ААК1, причем упомянутый способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. В первом варианте осуществления пятого аспекта заболевание или расстройство выбрано из болезни Альцгеймера, биполярного расстройства, боли, болезни Паркинсона и шизофрении. Во втором варианте осуществления пятого аспекта боль представляет собой невропатическую боль. В третьем варианте осуществления пятого аспекта невропатическая боль представляет собой фибромиалгию или периферическую невропатию.
Другие аспекты настоящего изобретения могут включать в себя подходящие комбинации вариантов осуществления, раскрытых в данном описании. Тем не менее, другие аспекты и варианты осуществления изобретения могут быть найдены в описании, предоставленном здесь.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР Аспекты настоящего изобретения проиллюстрированы на фигуре 1, которая показывает результаты, полученные при изучении модели вызванной формалином боли с
использованием гомозиготных по нокаутированному гену ААК1 (-/-) мышей и их однопометников дикого типа (+/+). Гомозиготные по нокаутированному гену ААК1 (-/-) мыши демонстрировали заметное снижение острой и тонической болевой реакции по сравнению с их однопометниками дикого типа (+/+).
Настоящее описание основано, частично, на обнаружении того факта, что мыши с нокаутом гена ААК1 проявляли высокую устойчивость к боли. Данное открытие побудило провести исследование, которое, в конечном итоге, привело к открытию ингибиторов ААК1, композиций, содержащих их, и способов их применения. Описание настоящего изобретения в данном документе следует толковать в совместимости с законами и принципами химического связывания. В некоторых случаях может возникнуть необходимость удалить атом водорода, с тем чтобы разместить заместитель в любом заданном месте.
Следует понимать, что соединения, охватываемые настоящим изобретением, являются такими, которые являются достаточно стабильными для применения в качестве фармацевтического средства.
Предполагается, что определение любого заместителя или варьируемой группы в определенном положении в молекуле не зависит от его определений в другом месте в данной молекуле. Например, если п равно 2, каждая из двух групп R6 могут быть одинаковыми или разными.
При использовании в настоящем описании, следующие термины имеют следующие значения:
Все патенты, заявки на патенты и литературные ссылки, цитированные в настоящем описании, включены в настоящее описание посредством ссылки во всей их полноте. В случае возникновения противоречий, настоящее раскрытие, включая определения, будет обладать приоритетом.
Используемые в данном описании формы единственного числа включают ссылки на множественное число, если контекст явно не диктует иное.
В некоторых случаях число атомов углерода в какой-либо конкретной группе обозначено перед обозначением группы. Например, термин "Ci-6-алкил" представляет собой алкильную группу, содержащую от одного до шести атомов углерода. Там, где существуют данные обозначения, они отменяют все другие определения, содержащиеся в настоящем документе.
Термин "алкенил", при использовании в настоящем описании, относится к группе с прямой или разветвленной цепью, содержащей по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь.
Термин "алкокси", при использовании в настоящем описании, относится к алкильной
группе, присоединенной к основной части молекулы через атом кислорода.
Термин "алкоксиалкил", при использовании в настоящем описании, относится к
алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя алкоксигруппами.
Термин "алкоксиалкиламино", при использовании в настоящем описании, относится к
-NHR, где R представляет собой алкоксиалкил.
Термин "алкоксикарбонил", при использовании в настоящем описании, относится к алкоксильной группе, присоединенной к основной части молекулы через карбонильную группу.
Термин "алкоксикарбониламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой алкоксикарбонильную группу.
Термин "алкил", при использовании в настоящем описании, относится к группе, полученной из группы насыщенного углеводорода с прямой или разветвленной цепью. Термин "алкиламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой алкильную группу.
Термин "алкилкарбонил", при использовании в настоящем описании, относится к алкильной группе, присоединенной к основной части молекулы через карбонильную группу.
Термин "алкилкарбониламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой алкилкарбонил.
Термин "алкилсульфонил", при использовании в настоящем описании, относится к алкильной группе, присоединенной к основной части молекулы через сульфонильную группу.
Термин "амино", при использовании в настоящем описании, относится к -NH2. Термин "аминокарбонил", при использовании в настоящем описании, относится к -C(0)NH2.
Термин "арил", при использовании в настоящем описании, относится к фенильной группе или бициклической конденсированной кольцевой системе, где одно или оба из колец представляет собой фенильную группу. Бициклические конденсированные кольцевые системы состоят из фенильной группы, слитой с от четырех до шести-членным ароматическим или неароматическим карбоциклическим кольцом. Арильные
группы по настоящему изобретению могут быть присоединены к основной части молекулы через любой замещаемый атом углерода в группе. Характерные примеры арильных групп включают, но не ограничиваются ими, инданил, инденил, нафтил, фенил и тетрагидронафтил.
Термин "арилалкил", при использовании в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя арильными группами. Термин "ариламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой арильную группу.
Термин "арилкарбонил", при использовании в настоящем описании, относится к арильной группе, присоединенной к основной части молекулы через карбонильную группу.
Термин "арилкарбониламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой арилкарбонильную группу.
Термин "карбонил", при использовании в настоящем описании, относится к -С(О)-. Термин "циано", при использовании в настоящем описании, относится к -CN. Термин "циклоалкил", при использовании в настоящем описании, относится к насыщенной моноциклической углеводородной кольцевой системе, имеющей О гетероатомов.
Типичные примеры циклоалкильных групп включают в себя, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклопентил и циклогексил.
Термин "(циклоалкил)алкил", при использовании в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя циклоалкильными группами. Термин "циклоалкиламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой циклоалкильную группу.
Термин "циклоалкилкарбонил", при использовании в настоящем описании, относится к циклоалкильной группе, присоединенной к основной части молекулы через карбонильную группу.
Термин "циклоалкилкарбониламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой циклоалкилкарбонильную группу. Термин " циклоалкилокси", при использовании в настоящем описании, относится к циклоалкильной группе, присоединенной к основной части молекулы через атом кислорода.
Термин "диалкиламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NR2, где R представляет собой алкил. Две R-группы могут быть одинаковыми или разными.
Термин "диалкиламинокарбонил", при использовании в настоящем описании, относится к -C(0)NR2, где R представляет собой алкил. Две R-группы могут быть одинаковыми или разными.
Термин "галоген", при использовании в настоящем описании, относится к Br, CI, F и/или I.
Термин "галогеналкокси", при использовании в настоящем описании, относится к галогеналкильной группе, присоединенной к основной части молекулы через атом кислорода.
Термин "галогеналкил", при использовании в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной одним, двумя, тремя или четырьмя атомами галогена. Термин "галоалкиламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой галогеналкильную группу.
Термин "галогеналкилкарбонил", при использовании в настоящем описании, относится к галогеналкильной группе, присоединенной к основной части молекулы через карбонильную группу.
Термин "галоалкилкарбониламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой галогеналкилкарбонильную группу. Термин "гетероарил", при использовании в настоящем описании, относится к пяти- или шестичленному ароматическому кольцу, содержащему один или два гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы.
Термин "гидрокси", при использовании в настоящем описании, относится к -ОН. Термин "гидроксиалкил", при использовании в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя гидроксильными группами. Термин "фенилалкиламино", при использовании в настоящем описании, относится к -NHR, где R представляет собой фенил ал кил ьную группу.
Термин "сульфонил", при использовании в настоящем описании, относится к -SO2. Асимметричные центры могут существовать в соединениях по настоящему изобретению. Следует понимать, что данное раскрытие охватывает все стереохимические изомерные формы или их смеси, которые обладают способностью ингибировать ААК1. Индивидуальные стереоизомеры соединений могут быть получены синтетически из коммерчески доступных исходных материалов, которые содержат хиральные центры, или путем приготовления смесей энантиомеров продуктов с последующим разделением, таким, как превращение в смесь диастереомеров с последующим разделением или перекристаллизацией, хроматографические способы,
или прямое разделение энантиомеров на хиральных хроматографических колонках. Исходные соединения определенной стереохимии являются либо коммерчески доступными, либо могут быть изготовлены и разделены с помощью способов, известных в данной области техники.
Определенные соединения по настоящему изобретению могут также существовать в различных устойчивых конформационных формах, которые могут быть разделяемыми. Торсионная асимметрия из-за ограниченного поворота вокруг асимметричной одинарной связи, например, из-за стерических затруднений или кольцевой деформации, может допустить разделение различных конформеров. Настоящее изобретение включает каждый конформационный изомер таких соединений и их смесей.
Термин "соединения по настоящему изобретению" и эквивалентные выражения предназначены для того, чтобы охватить соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые энантиомеры, диастереомеры и их соли. Аналогичным образом, ссылки на промежуточные соединения предназначены для того, чтобы охватить их соли, где это позволяет контекст.
Настоящее изобретение подразумевает включение всех изотопов атомов, встречающихся в присутствующих соединениях. Изотопы включают те атомы, которые имеют один и тот же атомный номер, но разные массовые числа. В качестве общего примера и без ограничения, изотопы водорода включают тритий и дейтерий. Изотопы углерода включают 13С и 14С. Меченные изотопами соединения по настоящему изобретению, как правило, могут быть получены обычными способами, известными специалистам в данной области техники, или способами, аналогичными способам, описанным в настоящем изобретении, с использованием соответствующим образом меченного изотопами реагента вместо немеченого реагента, применяемого в противном случае. Такие соединения могут иметь различные потенциальные применения, например, в качестве стандартов и реагентов при определении биологической активности. В случае стабильных изотопов, такие соединения могут иметь потенциал для того, чтобы положительно изменить биологические, фармакологические или фармакокинетические свойства.
Соединения по настоящему изобретению могут существовать в виде фармацевтически приемлемых солей. Термин "фармацевтически приемлемая соль", при использовании в настоящем описании, представляет соли или цвиттерионные формы соединений по настоящему изобретению, которые являются водорастворимыми или растворимыми в масле или мелкодисперсными, которые, в рамках здравого медицинского суждения,
являются подходящими для применения в контакте с тканями пациентов без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений, соизмеримых с разумным соотношением польза/риск, и эффективны для их применения по назначению. Данные соли могут быть получены в ходе окончательного выделения и очистки соединений или отдельно путем реакции взаимодействия соответствующего атома азота с подходящей кислотой. Типичные кислотно-аддитивные соли включают ацетат, адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, камфорсульфонат; биглюконат, дигидробромид, дигидрохлорид, дигидроиодид, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, формиат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, мезитиленсульфонат, метансульфонат, нафтиленсульфонат, никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, пальмоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпроприонат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, трихлорацетат, трифторацетат, фосфат, глутамат, бикарбонат, пара-толуолсульфонат и ундеканоат. Примеры кислот, которые могут быть использованы для получения фармацевтически приемлемых аддитивных солей, включают неорганические кислоты, такие как соляная, бромистоводородная, серная и фосфорная, а также органические кислоты, такие как щавелевая, малеиновая, янтарная и лимонная.
Основно-аддитивные соли могут быть получены в ходе окончательного выделения и очистки соединений путем взаимодействия карбоксильной группы с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат катиона металла или с аммиаком или органическим первичным, вторичным или третичным амином. Катионы фармацевтически приемлемых солей включают литий, натрий, калий, кальций, магний и алюминий, а также нетоксичные катионы четвертичных аминов, такие как аммоний, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний, метиламин, диметиламин, триметиламин, триэтиламин, диэтиламин, этиламин, трибутиламин, пиридин, Тч^ТЧ-диметиланилин, N-метилпиперидин, N-метилморфолин, дициклогексиламин, прокаин, дибензиламин, N, N-дибензилфенетиламин и М,№-дибензилэтилендиамин. Другие типичные органические амины, подходящие для образования основно-аддитивных солей, включают этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперидин и пиперазин. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения включает в себя способы ингибирования адаптер-связанной киназы 1 (ААК1), как in vitro, так и in vivo, которые включают контактирование ААК1 с соединением формулы I или его фармацевтически приемлемой солью.
Когда представляется возможным, что для применения в терапии терапевтически эффективные количества соединения формулы (I), а также его фармацевтически приемлемых солей могут быть введены в виде необработанного химического вещества, то возможно представить активный ингредиент в виде фармацевтической композиции. Соответственно, настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, которые включают терапевтически эффективные количества соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей и один или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или наполнителей. Если не указано иное, "терапевтически эффективное количество" соединения представляет собой количество, достаточное для обеспечения терапевтического эффекта при лечении заболевания или состояния или управлении заболеванием или состоянием, или для задержки или сведения к минимуму одного или нескольких симптомов, связанных с заболеванием или состоянием. Термин "терапевтически эффективное количество" может включать в себя некоторое количество, которое улучшает общую терапию, снижает или избегает симптомов или причин заболевания или состояния, или усиливает терапевтическую эффективность другого терапевтического средства. Термин "терапевтически эффективное количество", при использовании в настоящем описании, относится к количеству соединения или соединений, достаточному для обеспечения терапевтического эффекта при лечении заболевания или состояния или управлении заболеванием или состоянием, или для задержки или сведения к минимуму одного или нескольких симптомов, связанных с заболеванием или состоянием. Термин "терапевтически эффективное количество" соединения означает количество терапевтического средства, одного или в сочетании с другими видами терапии, которое обеспечивает терапевтический эффект при лечении заболевания или состояния или управлении заболеванием или состоянием. Термин "терапевтически эффективное количество" может включать в себя некоторое количество, которое улучшает общую терапию, снижает или избегает симптомов или причин заболевания или состояния, или усиливает терапевтическую эффективность другого терапевтического средства. Применительно к индивидуальному активному ингредиенту, вводимому в одиночку, данный термин относится к одному данному ингредиенту. Применительно к комбинированию, термин относится к комбинированным количествам активных ингредиентов, которые приводят к терапевтическому эффекту, независимо от того, вводимы ли они в сочетании, последовательно или одновременно. Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли таковы, как описано выше. Носитель(ли),
разбавитель(ли), или эксципиент(ы) должны быть приемлемыми в смысле совместимости с другими ингредиентами состава и безвредности по отношению к их реципиенту. В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения обеспечен также способ получения фармацевтического препарата, включающий смешивание соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами. Термин "фармацевтически приемлемый", при использовании в настоящем описании, относится к тем соединениям, материалам, композициям и/или лекарственным формам, которые, в пределах медицинских показаний, подходят для применения в контакте с тканями пациентов без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений, соразмерных с разумным соотношением польза/риск, и эффективны для их применения по назначению.
Фармацевтические препараты могут быть представлены в виде единичных дозированных форм, содержащих заранее определенное количество активного ингредиента на единицу дозы. Уровни доз, составляющие от около 0,01 до около 250 мг на килограмм ("мг/кг") массы тела в день, предпочтительно от около 0,05 до около 100 мг/кг массы тела в день соединений по настоящему изобретению, являются типичными в виде монотерапии для профилактики и лечения заболевания. Как правило, фармацевтические композиции по данному изобретению вводятся от около 1 до около 5 раз в день или, альтернативно, в виде непрерывной инфузии. Такое введение может быть использовано в качестве хронической или острой терапии. Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с материалами-носителями для получения единичной лекарственной формы, изменяется в зависимости от состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, времени введения, пути введения, скорости экскреции используемого соединения, продолжительности лечения, а также возраста, пола, массы и состояния пациента. Предпочтительны такие стандартные дозированные препараты, которые содержат дневную дозу или дневную субдозу, как упомянуто выше, или соответствующую фракцию активного ингредиента. Лечение может быть начато с малых доз, существенно меньших, чем оптимальная доза соединения. Затем дозу увеличивают небольшими приращениями, пока не будет достигнут оптимальный эффект при данных обстоятельствах. В общем, соединение наиболее желательно вводить в концентрации, которая обычно обеспечивает эффективные результаты, не вызывая каких-либо опасных или вредных побочных эффектов.
Когда композиции по настоящему изобретению содержат комбинацию соединения по настоящему изобретению и одного или более дополнительных терапевтических или профилактических средств, тогда как соединение, так и дополнительное средство обычно присутствуют в дозах, составляющих от около 10 до 150%, и более предпочтительно от около 10 до 80% от дозы, которую обычно вводят в режиме монотерапии.
Соединения по изобретению могут вводиться в сочетании с одним или несколькими дополнительными терапевтическими или профилактическими средствами. Например, при использовании для лечения боли, возможные дополнительные средства включают иммунодепрессанты, противовоспалительные средства и/или другие средства, используемые в лечении боли.
Иммунодепрессанты, подходящие для применения в способах и композициях по настоящему изобретению, включают в себя те, которые известны в данной области техники. Примеры включают аминоптерин, азатиоприн, циклоспорин A, D-пеницилламин, соли золота, гидроксихлорохин, лефлуномид, метотрексат, миноциклин, рапамицин, сульфасалазин, циклоспорин (FK506) и их фармацевтически приемлемые соли. Особый иммунодепрессант представляет собой метотрексат.
Дополнительные примеры включают в себя иммунодепрессанты, анти-ТТч[Б-антитела, такие как адалимумаб, цертолизумаб пегол, этанерцепт и инфликсимаб. Другие примеры включают интерлейкин-1-блокаторы, такие как анакинра. Другие примеры включают анти-В-клеточные (CD20) антитела, такие как ритуксимаб. Другие примеры включают блокаторы активации Т-клеток, такие как абатацепт.
Другие иммунодепрессанты включают ингибиторы инозинмонофосфатдегидрогеназы, такие как микофенолятмофетил (CellCept(r)) и микофенольная кислота (Myfortic(r)) Противовоспалительные средства, подходящие для применения в способах и композициях по настоящему изобретению, включают в себя те, которые известны в данной области техники. Примеры включают глюкокортикоиды и NSAID. Примеры глюкокортикоидов включают альдостерон, беклометазон, бетаметазон, кортизон, дезоксикортикостерон, дексаметазон, флудрокортизон, гидрокортизон, метилпреднизолон, преднизолон, преднизон, триамцинолон и их фармацевтически приемлемые соли.
Примеры NSAID включают салицилаты (например, аспирин, амоксиприн, бенорилат, холин-салицилат магния, дифлунизал, фаисламин, метилсалицилат, салицилат магния, салициловый эфир салициловой кислоты и их фармацевтически приемлемые соли),
арилалкановые кислоты (например, диклофенак, ацеклофенак, ацеметацин, бромфенак, этодолак, индометацин, мелоксикам, сулиндак, толметин и их фармацевтически приемлемые соли), арилпропионовые кислоты (например, ибупрофен, карпрофен, фенбуфен, фенопрофен, флурбипрофен, кетопрофен, кеторолак, локсопрофен, напроксен, оксапрозин, тиапрофеновая кислота, супрофен и их фармацевтически приемлемые соли), арилантраниловые кислоты (например, меклофенамовая кислота, мефенамовая кислота, и их фармацевтически приемлемые соли), пиразолидиновые производные (например, азапропазон, метамизол, оксифенбутазон, фенилбутазон, сульфинпразон и их фармацевтически приемлемые соли), оксикамы (например, лорноксикам, мелоксикам, пироксикам, теноксикам и их фармацевтически приемлемые соли), ингибиторы СОХ-2 (например, целекоксиб, эторикоксиб, лумиракоксиб, парекоксиб, рофекоксиб, вальдекоксиб и их фармацевтически приемлемые соли), и сульфонанилиды (например, нимесулид и его фармацевтически приемлемые соли ). Другие средства, используемые при лечении боли (включая, но без ограничения, нейропатическую и воспалительную боль), включают, но не ограничиваются ими, такие средства, как прегабалин, лидокаин, дулоксетин, габапентин, карбамазепин, капсаицин, и другие ингибиторы обратного захвата серотонина/норадреналина/дофамина, и снотворные препараты (такие как оксиконтин, морфин и кодеин).
При лечении боли, вызванной известным заболеванием или состоянием, таким как диабет, инфекция (например, опоясывающий герпес или ВИЧ-инфекция), или рак, соединения по изобретению могут вводиться в сочетании с одним или более дополнительными терапевтическими или профилактическими средствами, направленными против основного заболевания или состояния. Например, при использовании для лечения диабетической невропатии, соединения по изобретению могут вводиться в сочетании с одним или более противодиабетическими средствами, противогипергликемическими средствами, гиполипидемическими/ понижающими уровень липидов средствами, средствами против ожирения, гипотензивными средствами и средствами для подавления аппетита. Примеры антидиабетических средств включают бигуаниды (например, метформин, фенформин), ингибиторы глюкозидазы (например, акарбоза, Миглитол), инсулины (включая средства, усиливающие секрецию инсулина, и сенсибилизаторы инсулина), меглитиниды (например, репаглинид), сульфонилмочевины (например, глимепирид, глибенкламид, гликлазид, хлорпропамид и глипизид), сочетания бигуанидов/глибурида (например, Глюкованс), тиазолидиндионы (например, троглитазон, розиглитазон и пиоглитазон), PPAR-альфа-агонисты, PPAR
гамма-агонисты, PPAR альфа/гамма двойные агонисты, ингибиторы гликогенфосфорилазы, ингибиторы связывающего жирные кислоты белка (аР2), глюкагон-подобный пептид-1 (GLP-1) или другие агонисты рецептора GLP-1, ингибиторы дипептидилпептидазы IV (DPP4) и ингибиторы натрий-глюкозного котранспортера 2-го типа (SGLT2) (например, дапаглифлозин, канаглифлозин и LX-4211).
Фармацевтические препараты могут быть приспособлены для введения любым подходящим способом, например пероральным (включая трансбуккальный или подъязычный), ректальным, назальным, местным (включая трансбуккальный, сублингвальный или трансдермальный), вагинальным или парентеральным (включая подкожные, внутрикожные, внутримышечные, интраартикулярные, внутрисуставные, внутригрудинные, интратекальные, интралезиональные, внутривенные или внутрикожные инъекции или инфузии) путем. Такие композиции могут быть получены любым способом, известным в области фармации, например, путем приведения в контакт активного ингредиента с носителем(ями) или эксципиентом(ами). Пероральное введение или введение инъекцией являются предпочтительными.
Фармацевтические препараты, адаптированные для перорального введения, могут быть представлены в виде отдельных форм, таких как капсулы или таблетки; порошков или гранул; растворов или суспензий в водной или неводной жидкости; съедобных пен или кремов; или в виде жидких эмульсий типа "масло в воде" или эмульсий типа "вода в масле".
Например, для перорального введения в виде таблетки или капсулы активный лекарственный компонент может быть объединен с пероральным нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода и подобные. Порошки получают измельчением соединения до подходящего небольшого размера и смешиванием с аналогичным измельченным фармацевтическим носителем, таким как пищевой углеводород, как, например, крахмал или маннит. Могут также присутствовать ароматизатор, консервант, диспергатор и краситель. Капсулы изготавливают путем приготовления порошковой смеси, как описано выше, в заполнении формованных желатиновых оболочек. Перед операцией заполнения в порошковую смесь могут быть добавлены глиданты и смазывающие вещества, такие как коллоидный кремнезем, тальк, стеарат магния, стеарат кальция и твердый полиэтиленгликоль. Для улучшения доступности лекарственного средства после
проглатывания, в капсулы также могут быть добавлены разрыхлители и солюбилизаторы, такие как агар-агар, карбонат кальция и карбонат натрия. Более того, при желании или необходимости, в смесь могут быть также включены подходящие связующие вещества, смазывающие вещества, разрыхлители и красители. Подходящие связующие вещества включают крахмал, желатин, нейтральные сахара, такие как глюкоза или Р-лактоза, кукурузные подсластители, нейтральные или синтетические камеди, такие как акация, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски и тому подобное. Смазывающие вещества, используемые в данных дозированных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и тому подобное. Разрыхлители включают, но, не ограничиваясь ими, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и тому подобное. Таблетки производят, например, путем приготовления порошковой смеси, гранулирования или спекания, добавления смазывающего вещества и разрыхлителя и прессования в таблетки. Порошковую смесь приготавливают смешиванием соединения, подходящим образом измельченного, с описанным выше разбавителем или основой и необязательно со связующим веществом, таким как карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин или поливинилпирролидон, замедлителем растворения, таким как парафин, усилителем всасывания, таким как четвертичная соль, и/или поглощающим веществом, таким как бентонит, каолин или дикальцийфосфат. Порошковая смесь может быть подвергнута гранулированию путем увлажнения связующим веществом, таким как сироп, крахмальный клейстер, клейкая масса из акации или растворы целлюлозных или полимерных материалов, и продавливания через сито. Вместо гранулирования, порошковая смесь может быть пропущена через таблеточную машину, и результатом этого являются неидеально сформованные комки, разломанные до гранул. Гранулы могут быть смазаны для предотвращения прилипания к формирующим таблетки пресс-формам посредством добавления стеариновой кислоты, стеарата, талька или минерального масла. Затем смазанную смесь прессуют в таблетки. Соединения по настоящему изобретению также могут быть объединены со свободно-текучим инертным носителем и прессоваться в таблетки сразу без прохождения стадий гранулирования или комкования. Может быть обеспечено прозрачное или непрозрачное защитное покрытие, состоящее из уплотненного покрытия из шеллака, покрытия из сахара или полимерного материала и полированного покрытия из воска. Для различения различных стандартных дозировок в данные покрытия могут быть добавлены красители.
Жидкости для перорального введения, такие как раствор, сиропы и эликсиры, могут быть приготовлены в виде единичной дозированной формы таким образом, что заданное количество содержит заранее определенное количество соединения по изобретению. Сиропы могут быть приготовлены путем растворения соединения в ароматизированном подходящим образом водном растворе, тогда как эликсиры готовят с использованием нетоксичного спиртового растворителя. Суспензии могут быть получены путем диспергирования соединения в нетоксичном растворителе. Также могут быть добавлены солюбилизаторы и эмульгаторы, такие как этоксилированные изостеариловые спирты и простые эфиры полиоксиэтиленсорбита, консерванты, вкусовая добавка, такая как масло перечной мяты, и натуральные подсластители или сахарин, или другие искусственные подсластители и тому подобное.
Когда это целесообразно, единичные дозированные лекарственные формы для перорального введения могут быть микроинкапсулированы. Также может быть получена лекарственная форма для продления или задержки высвобождения, например, путем нанесения покрытия или погружения дисперсного материала в полимеры, воск и тому подобное.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть введены в виде систем липосомной доставки, таких как небольшие однослойные везикулы, большие однослойные везикулы и многослойные везикулы. Липосомы могут быть образованы из множества фосфолипидов, таких как холестерин, стериламин или фосфатидилхолины.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли также могут доставляться с использованием моноклональных антител в качестве индивидуальных носителей, с которыми связаны молекулы соединения. Соединения также могут быть связаны с растворимыми полимерами в качестве носителей нацеливаемого лекарственного средства. Такие полимеры могут включать в себя поливинилпирролидон, сополимер пирана, полигидроксипропилметакриламидфенол, полигидроксиэтиласпартамидфенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоиловыми остатками. Кроме того, соединения могут быть связаны с классом биодеградируемых полимеров, применимых в достижении регулируемого высвобождения лекарственного средства, например, полимолочной кислотой, полиэпсилонкапролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианоакрилатами и сшитыми или амфипатическими блок-сополимерами гидрогелей.
Фармацевтические препараты, адаптированные для трансдермального введения, могут быть представлены в виде отдельных пластырей, предназначенных для того, чтобы оставаться в тесном контакте с эпидермисом реципиента в течение длительного периода времени. Например, активный ингредиент может быть доставлен из пластыря путем ионофореза, как в целом описано в Pharmaceutical Research 1986, 3(6), 318. Фармацевтические препараты, адаптированные для местного введения, могут быть приготовлены в виде мазей, кремов, суспензий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.
Фармацевтические препараты, адаптированные для ректального введения, могут быть представлены в виде суппозиториев или клизм.
Фармацевтические препараты, адаптированные для назального введения, где носитель представляет собой твердое вещество, содержат крупный порошок, имеющий размер частиц, например, в диапазоне от 20 до 500 микрон, который вводят посредством вдыхания через нос, т.е. быстрой ингаляцией через носовой проход из контейнера с порошком, удерживаемого близко к носу. Подходящие композиции, в которых носитель представляет собой жидкость, для введения в виде назального спрея или в виде назальных капель, включают водные или масляные растворы активного ингредиента. Фармацевтические препараты, адаптированные для введения ингаляцией, содержат мелкие частицы пыли или аэрозоли, которые могут быть сгенерированы посредством различных типов дозирующих, находящихся под давлением распылителей, небулайзеров или инсуффляторов.
Фармацевтические препараты, адаптированные для вагинального введения, могут быть представлены в виде вагинальных суппозиториев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спрей-препаратов.
Фармацевтические препараты, адаптированные для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные инъекционные растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические факторы и растворенные вещества, делающие препарат изотоничным крови предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать в себя суспендирующие средства и загустители. Данные препараты могут быть представлены в контейнерах для однократного или многократного введения, например в герметично закрытых ампулах и флаконах, и могут храниться в высушенном сублимацией (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например, воды для инъекций, непосредственно перед применением.
Приготовленные для немедленного приема инъекционные растворы и суспензии могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток.
Следует понимать, что в дополнение к ингредиентам, в частности, упомянутым выше, препараты могут включать в себя другие традиционные в данной области средства, имеющие отношение к данному типу рассматриваемого препарата, например препараты, подходящие для перорального введения, могут включать ароматизирующие вещества. Термин "пациент" включает как человека, так и других млекопитающих. Если не указано иное, термины "управлять", "управляющий" и "управление" охватывают предотвращение рецидива упомянутого заболевания или расстройства у пациента, который уже страдал от заболевания или расстройства, и/или увеличения периода времени, в течение которого пациент, страдающий от заболевания или расстройства, остается в стадии ремиссии. Термины включают модулирование порога, развития и/или продолжительности заболевания или расстройства, или изменение способа, которым пациент реагирует на заболевание или расстройство.
Термин "лечение" относится к: (i) предотвращению заболевания, расстройства или состояния у пациента, который может быть предрасположен к заболеванию, расстройству и/или состоянию, но у которого оно еще не установлено; (ii) ингибированию заболевания, расстройства или состояния, т.е. прекращению его развития; и (iii) облегчению заболевания, расстройства или состояния, т.е. к регрессии заболевания, расстройства и/или состояния.
Данное раскрытие предназначено для того, чтобы охватить соединения, имеющие формулу (I), полученные синтетическими процессами или метаболическими процессами, включая те, которые происходят в организме человека или животного (in vivo) или процессы, происходящие in vitro.
Сокращения, используемые в настоящей заявке, включая, в частности, сокращения в иллюстративных схемах и примерах, которые следуют ниже, хорошо известны специалистам в данной области техники. Некоторые из используемых сокращений представляют собой следующее: RT или it или комн.темп. для комнатной температуры или времени удерживания (контекст будет диктовать); tr < для времени удерживания; ч или час или часы для часов; мин или мин для минут; МеОН для метанола; EtOH для этанола; ЕЮ Ас или ЕЮ АС для этилацетата; ОАс для ацетата; DCM для дихлорметана; DMA для Тч^ТЧ-диметилацетамида; DMF для Тч^ТЧ-диметилформамида; NMP для N-метилпирролидинона; MeCN или ACN для ацетонитрила; АсС1 для ацетилхлорида; THF для тетрагидрофурана; DMSO для диметилсульфоксида; MeOD для CD3OD; т-СРВА для
мета-хлорпероксибензойной кислоты; DCM для дихлорметана; Me для метила; Et для этила; Ас для ацетила; Ph для фенила; ВОС или Вое для трет-бутоксикарбонила; EDC для 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида; DBU для 1,8-диазабициклоундец-7-ена; НОВТ или HOBt для гидроксибензотриазола; NCS для N-хлорсукцинимида; TEA или Et3N для триэтиламина; DIPEA, DIEA, или i-Pr2NEt для диизопропилэтиламина; DEA для диэтиламина; DAST для диэтиламиносульфотрифторида; NBS для N-бромсукцинимида; TOSMIC для тозилметилизоцианида; DIBAL для диизобутилалюминийгидрида; LDA для диизопропиламида лития; TFA для трифторуксусной кислоты; dppf mniDPPF для 1,Г-бис(дифенилфосфино)ферроцена; dba для dibenzylidiendiacetone; n-BuLi для н-бутиллития; LHMDS или LiHMDS для гексаметилдисилазида лития; TMS для триметилсилила; и РМВ-С1 для пара-метоксибензил-хлорида.
ПРИМЕРЫ
Настоящее изобретение далее будет описано в связи с определенными вариантами осуществления, которые не предназначены для ограничения его объема. Напротив, настоящее изобретение охватывает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем формулы изобретения. Таким образом, следующие примеры, которые включают в себя конкретные варианты осуществления, иллюстрируют одну практику осуществления настоящего изобретения, следует понимать, что данные примеры приведены с целью иллюстрации некоторых вариантов осуществления и представлены для обеспечения того, что, как полагают, является наиболее применимым и легко понимаемым описанием процедур и концептуальных аспектов.
Соединения по настоящему изобретению могут быть получены с использованием реакций и методик, описанных в данном разделе, а также других синтетических способов, известным специалистам в данной области техники. Реакции проводят в растворителях, подходящих для используемых реагентов и материалов и подходящих для осуществляемой трансформации. Кроме того, в описании синтетических способов, описанных ниже, следует понимать, что все предлагаемые условия проведения реакции, включая выбор растворителей, реакционную температуру и продолжительность эксперимента и процедуры обработки, выбраны так, чтобы быть стандартными условиями для данной реакции, которые должны быть легко определены специалистом в данной области техники. Специалисту в области органического синтеза понятно, что
функциональные группы, присутствующие на различных участках молекулы, должны быть совместимы с предложенными реагентами и реакциями. Такие ограничения, предъявляемые к заместителям, которые совместимы с условиями реакции, будут легко очевидны специалисту в данной области техники, и тогда должны быть использованы альтернативные способы.
Схема 1:
Соединение формулы 9 получают по способу, представленному на схеме 1. 4-Хлорникотиновая кислота может быть подвергнута этерификации с использованием стандартных условий, таких как обработка с оксалилхлоридом и метанолом. Сложный эфир 2, полученный таким образом, может быть подвергнут реакции кросс-сочетания Сузуки (Suzuki) с соответствующим партнером по сочетанию, таким, как фторбороновая кислота 3, при стандартных условиях реакции Сузуки, с использованием основания, такого как карбонат цезия, и катализатора, такого как Pd(PPri3)4, как описано в Zhang, Lei et. al. (Journal of Medicinal Chemistry, 2011, 54, 1724 - 1739). Биарильный эфир 4 затем может быть подвергнут катализируемой палладием реакции синтеза эфира, включая условия реакции, известные специалистам в данной области техники, в соответствии с такими процедурами, как способы, описанные у Gowrisankar, et. al. (J. Am Chem. Soc.2010, 132, 11592-11598). Данные реакции могут быть выполнены с использованием соответствующим образом защищенных, рацемических или оптических аминоспиртов с
получением рацемических или оптически чистых эфиров. Биарильный эфир, представленный формулой 5, может быть подвергнут гидролизу с получением соответствующей карбоновой кислоты 6 при стандартных условиях омыления с использованием основания, такого как гидроксид лития, в растворителе, таком как вода, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.). Кислота 6 может быть преобразована в амид 7 с использованием стандартных условий реакции сочетания, таких как EDC, НОВТ и хлорид аммония. Амид 7, при обработке источником гидрида, таким как гидрид натрия, в растворителе, таком как THF, в атмосфере инертного газа может преобразоваться в напряженный лактам, 8. Аналог эфира напряженного лактама, представленный 8, может быть подвергнут реакции снятия защиты с аминогруппы боковой цепи с использованием соответствующих условий, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), с получением соединений, представленных формулой 9.
Соединения, представленные формулой 13 и 14, получают способами, изложенными на схеме 2. Биарильный эфир 4, полученный, как описано на схеме 1, может быть подвергнут гидролизу при стандартных условиях омыления с использованием основания, такого как гидроксид лития или натрия, в растворителе, таком, как вода, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), с получением соответствующих карбоновых кислот, которые при обработке при стандартных условиях амидного сочетания, таких как EDC, НОВТ и хлорид аммония
или замещенный амин, могут быть преобразованы в амиды 10. На циклизацию амидов 10 можно воздействовать обработкой источником гидрида, таким как гидрид натрия, в растворителе, таком как THF, в атмосфере инертного газа с получением напряженных лактамных ядер 11с атомом хлора. Ароматические ядра 11с атомом хлора могут быть подвергнуты катализируемой палладием реакции синтеза эфира с использованием условий реакции, известных специалистам в данной области техники, следуя процедурам, таким как те, которые описаны у Gowrisankar, et. al. (J. Am. Chem. Soc.2010, 132, 11592-11598), с получением соединений, представленных формулой 12. Реакции могут быть выполнены с использованием соответствующим образом защищенных, рацемических или оптически чистых (S) или (К)-аминоспиртов с получением рацемических или оптически чистых эфиров 12. Эфирные аналоги могут быть подвергнуты реакции снятия защиты с аминогруппы боковой цепи с использованием соответствующих условий, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), с получением соединения формулы 13, В тех случаях, когда R2 выступает в качестве защитной группы, данная группа может быть удалена с использованием соответствующих условий, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.).
Соединения, представленные формулой 17 и 19, получают способами, изложенными на схеме 3. Эфир напряженного лактама, 15, синтезированный, как показано на схеме 2, может быть подвергнут галогенированию, с использованием N-галосукцинимида в полярных апротонных растворителях, таких как ацетонитрил, в темноте, с образованием моногало (X = галоген, R3 = Н) или дигалозамещенных (R3 = X = галоген) простых эфиров 16. Боковая цепь простых эфиров 16 может быть подвергнута снятию защиты с использованием соответствующих условий, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), с получением соединения формулы 17. Альтернативно, соединение 16 может быть подвергнуто катализируемой палладием реакции сочетания, такой как реакция кросс-сочетания Сузуки, с соответствующим партнером по сочетанию, таким как триметилбороксин или циклопропилбороновая кислота, при стандартных условиях проведения реакции Сузуки, с использованием основания, такого как карбонат цезия, и катализатора, такого как Pd(PPli3)4, как описано у Zhang, Lei et. al. (Journal of Medicinal Chemistry, 2011, 54, 1724 - 1739), или катализируемой медью реакции цианирования, как описано у Miroslav et.al. (Collection of Czechoslovak Chemical Communications, 1983, 48, 1765-1773), чтобы установить R4 у соединений, представленных формулой 18. Лактам 16 может быть подвергнут катализируемой медью реакции гидроксилирования с использованием условий, таких как те, которые описаны у Punniyamurthy et. al. (Synthesis, 2010, 4268 -4272), чтобы обеспечить соединение 18, где R4 = ОН. Эфирные аналоги 18 могут быть подвергнуты реакции снятия защиты с аминогруппы боковой цепи с использованием
Соединения, представленные формулой 29, могут быть получены, как показано на схеме 4. Вос-защита соединения 20 с использованием основания, такого как LiHMDS и Вос-ангидрида, давала соединение 21. Направленное ордао-металлирование с последующей обработкой диметилформамидом может предоставить альдегидное производное 22 пиридина с использованием таких способов, как те, которые описаны у Charles et. al. (J. Med.Chem., 2010, 53, 3330 - 3348). Альдегид может быть подвергнут реакции кросс-сочетания Сузуки с соответствующим партнером для сочетания, таким, как фторбороновая кислота 3, при стандартных условиях реакции Сузуки, с использованием основания, такого как карбонат цезия, и катализатора, такого как Pd(PPli3)4, как описано у Zhang, Lei et. al. (Journal of Medicinal Chemistry, 2011, 54, 1724 - 1739), чтобы произвести биарильный альдегид 23. Обработка биарильного альдегида 23 с метиламином может обеспечить фторид циклического иминия 24, который при окислении реагентами, такими как КМп04, дает лактам 25. Обработка лактама 25 с трифторуксусной кислотой может предоставить 26, который может быть защищен группой, такой как п-метоксибензил, с использованием соответствующих условий, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), и может предоставить лактам 27. Лактамное ядро 27 может быть подвергнуто
катализируемой палладием реакции синтеза эфира с использованием условий реакции, известных специалистам в данной области техники, следуя процедурам, таким как те, которые описаны у Gowrisankar, et. al. (J. Am. Chem. Soc.2010, 132, 11592-11598), с получением соединения, представленного формулой 28. Аналог эфира может быть подвергнут реакции глобального снятия защиты с аминогруппы боковой цепи с использованием соответствующих условий, как описано в Protective Groups в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), с получением соединения 29.
Схема 5:
Соединения, представленные формулой 39, могут быть получены, как показано на схеме 5. Бромирование соединения 30 с NBS, с последующим ацилированием с ацетилхлоридом и пиридином, может предоставить бромид 31. Реакция кросс-сочетания Сузуки бромида 31 с комплексом винилового ангидрида бороновой кислоты и пиридина, при стандартных условиях реакции Сузуки с использованием основания, такого как карбонат натрия, и катализатора, такого как Pd(PPli3)4, как описано у Zhang, Lei et. al. (Journal of Medicinal Chemistry, 2011, 54, 1724 - 1739), может предоставить винилпиридин 32. Винилпиридин 32 может быть окислен с использованием тетроксида осмия и метапериодата натрия с образованием соответствующего альдегида 33, который затем может быть подвергнут реакции кросс-сочетания Сузуки с соответствующим партнером для сочетания, таким как фторбороновая кислота 3, при стандартных условиях реакции Сузуки с использованием основания, такого как карбонат цезия, и
катализатора, такого как Рс1(РРпз)4, как описано у Zhang, Lei et. al. (Journal of Medicinal Chemistry, 2011, 54, 1724 - 1739), с получением биарильного альдегида 34. Обработка биарильного альдегида 34 с метиламином может привести к фториду циклического иминия 35, который может быть восстановлен до соответствующего напряженного пиперидина 36 с использованием агента, такого как боргидрид натрия. Напряженный пиперидин 36 при окислении КМп04 может дать лактам 37. Лактамное ядро 37 может быть подвергнуто катализируемой палладием реакции синтеза эфира с использованием условий реакции, известных специалистам в данной области техники, следуя процедурам, таким как те, которые описаны у Gowrisankar, et. al. (J. Am. Chem. Soc.2010, 132, 11592-11598), с получением соединения, представленного формулой 38. Аналог эфира может быть подвергнут реакции снятия защиты с аминогруппы боковой цепи с использованием соответствующих условий, как описано в Protective Groups в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), с получением соединений 39.
Схема 6:
Соединения, представленные формулой 42 - 46, получают способами, изложенными на схеме 6. Эфир напряженного лактама, 40, синтезированный, как показано на схеме 2, может быть подвергнут галогенированию с использованием N-галосукцинимида в полярных апротонных растворителях, таких как ацетонитрил, в темноте, с образованием моногало (X = галоген, R3 = Н) или дигалозамещенных (R3 = X = галоген) простых эфиров 41. Соединение 41 может быть подвергнуто катализируемой палладием реакции сочетания, такой как реакция кросс-сочетания Сузуки, с соответствующим партнером по сочетанию, таким как триметилбороксин или циклопропилбороновая кислота, при стандартных условиях проведения реакции Сузуки, с использованием основания, такого как карбонат цезия, и катализатора, такого как Рс1(РРпз)4, как описано у Zhang, Lei et. al. (Journal of Medicinal Chemistry, 2011, 54, 1724 - 1739), или катализируемой медью реакции цианирования, как описано у Miroslav et.al. (Collection of Czechoslovak Chemical Communications, 1983, 48, 1765-1773), чтобы установить R4 у соединений, представленных формулой 42. Лактам 41 может быть подвергнут катализируемой медью реакции гидроксилирования с использованием условий, таких как те, которые описаны у Punniyamurthy et. al. (Synthesis, 2010, 4268 - 4272), чтобы обеспечить соединение 42, где R4 = ОН. В случаях промежуточных соединений 42, где R4 = винил, окислительное расщепление винильной группы с такими реагентами, как тетроксид осмия и периодат натрия, может обеспечить альдегиды 44. Альдегид может быть превращен в дифторметиловый аналог 45 обработкой с Deoxo-Fluor(r). Если R5 содержит аминогруппу или другую функциональную группу, которая защищена, то защитную группу в аналогах 42 и 45 удаляют обработкой субстрата с соответствующими реагентами, как описано в Protective Groups в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), с получением соединений формулы 43 и 46, соответственно.
2. Снятие защиты при необходимости
1. TOSMIC, к2со3
и 2. Снятие защиты при Q необходимости
Соединения, представленные формулой 47 и 48, получают способами, изложенными на схеме 7. Альдегид 44, синтезированный, как показано на схеме 6, может быть подвергнут воздействию TOSMIC и основания, такого как карбонат калия, с получением оксазолов 47. Альтернативно, альдегиды 44 можно подвергнуть восстановлению с реагентами, такими как боргидрид натрия или боргидрид лития, в растворителе, таком как EtOH или МеОН, с получением соединений, представленных формулой 48. Если R5 содержит аминогруппу или другую функциональную группу, которая защищена, защитную группу удаляют с помощью обработки субстрата с соответствующими реагентами, как описано в Protective Groups в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), чтобы обеспечить соединения формулы 47 и 48 с удаленной защитной группой.
Соединения, представленные формулой 52 - 53, получают способами, изложенными на схеме 8. Эфир напряженного лактама, 49, синтезированный, как показано на приведенных выше схемах, может быть подвергнут галогенированию с использованием N-галосукцинимида в полярных апротонных растворителях, таких как ацетонитрил, в темноте, получая галоэфиры 50. Соединение 50 может быть подвергнуто катализируемой палладием реакции сочетания, такой как реакция кросс-сочетания Сузуки, с соответствующим партнером по сочетанию, таким как триметилбороксин или циклопропилбороновая кислота, при стандартных условиях проведения реакции Сузуки, с использованием основания, такого как карбонат цезия, и катализатора, такого как Pd(PPh3)4, как описано у Zhang, Lei et. al. (Journal of Medicinal Chemistry, 2011, 54, 1724 - 1739), или реакции сочетания Stille (Стилле) с соответствующим партнером для сочетания, таким как трибутиламин (1-этоксивинил)станнан, или при стандартных условиях проведения реакции Stille с применением катализатора, такого как трис(дибензилиденацетон)-дипалладий, и лиганда, такого как DPPF, при повышенных
температурах, с получением соединений, представленных формулой 51. Виниловая группа из соединения 51 может быть подвергнута гидрированию в присутствии палладия на угле, с получением соединений, представленных формулой 52. Альтернативно, если R представляет собой алкокси-группу, соединение 51 может быть подвергнуто гидролизу с водной кислотой, такой как НС1, чтобы обеспечить кетоновые соединения, представленные формулой 53. Если R1 содержит аминогруппу или другую функциональную группу, которая защищена, защитную группу удаляют обработкой субстрата с подходящими реагентами, описанными в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), чтобы обеспечить соединения формулы 52 и 53 с удаленной защитной группой.
Схема 9:
Соединения, представленные формулой 54, получают способами, изложенными на схеме 9. Эфир напряженного лактама, 53, синтезированный, как показано на схеме 8, можно обработать с помощью реактива Гриньяра в растворителе, таком как диэтиловый эфир или THF, с получением соединений, представленных формулой 54. Если R5 содержит аминогруппу или другую функциональную группу, которая защищена, защитную группу удаляют обработкой субстрата с соответствующими реагентами, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), чтобы обеспечить соединения формулы 54 со снятой защитой.
2. Снятие защиты
О при необходимости
,^R1
Соединения, представленные формулой 56 - 58, получают способами, изложенными на схеме 10. Эфир напряженного лактама, 50, синтезированный, как показано на схеме 8, может быть подвергнут цианированию с применением стандартной реакции сочетания Негиши (Negishi) с использованием Zn(CN)2 и катализатора, такого, как Рс1(РРггз)4, в растворителе, таком как DMF, или с помощью CuCN при температурах в интервале от 50 до 120°С, с получением соединений, представленных формулой 55. Нитрильное соединение 55 может быть гидролизовано с помощью водного раствора НС1 при повышенной температуре с последующим образованием сложного эфира с тионилом или оксалилхлоридом с последующим гашением спиртом, с получением соединений, представленных формулой 57. Альтернативно, нитрильное соединение 55 можно гидролизовать до амида с использованием основания, такого как карбонат цезия, в растворителе, таком как DMF, при температуре в интервале от 100 до 120°С, с получением соединений, представленных формулой 58. Если R5 содержит аминогруппу или другую функциональную группу, которая защищена, защитную группу удаляют обработкой субстрата с соответствующими реагентами, как описано в Protective Groups in Organic Synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), чтобы обеспечить соединения формулы 56 - 58,
\ у
-Si- <- F ' F 1. Cul, KF, NMP
2. Снятие
• защиты,
^ если OR необходимо
Соединения, представленные формулой 60 - 62, получают способами, изложенными на схеме 11. Эфир напряженного лактама, 50, синтезированный, как показано на схеме 8, может быть подвергнут медь-катализируемому трифторметилированию с использованием иодида меди(1) и триметил(трифторметил)силана в растворителе, таком как NMP, при высоких температурах, с получением соединений, представленных формулой 59. Альтернативно, галогеновое соединение 50 может быть подвергнуто медь-катализируемой реакции сочетания с использованием иодида меди(1), 1Н-пиразола, №,К2-диметилэтан-1,2-диамина и основания, такого как фосфат калия, в растворителе, таком как DMF и 1,4-диоксан, при высоких температурах, с получением соединений, представленных формулой 60. Альтернативно, галогеновое соединение 50 может быть подвергнуто медь-катализируемому метоксилированию с использованием L-пролина, метоксида натрия и основания, такого как карбонат калия, в растворителе, таком как DMSO, при повышенных температурах с получением соединений, представленных формулой 61. Альтернативно, галогеновое соединение 50 может быть подвергнуто медь-катализируемой реакции сульфоксилирования с использованием иодида меди(1), L-пролина, натриевой соли метансульфиновой кислоты и основания, такого как гидроксид натрия, в растворителе, таком как DMSO, при повышенных температурах с получением соединений, представленных формулой 62. Если R5 содержит аминогруппу или другую функциональную группу, которая защищена, защитную группу удаляют обработкой субстрата с соответствующими реагентами, как описано в Protective Groups in Organic
Synthesis (Greene, Wuts; 3 ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.), чтобы обеспечить соединения формулы 60 - 62.
Схема 12:
Промежуточные соединения, представленные формулой 65, получают способами, изложенными на схеме 12. Амид 11 биарильного соединения, полученный, как описано на схеме 2, может быть подвергнут окислению с т-СРВА в растворителе, таком как DCM, с получением соединений, представленных формулой 63, Промежуточные соединения 63 можно обрабатывать с РООз с последующей обработкой метоксидом натрия в метаноле, с получением промежуточных соединений, представленных формулой 65.
Промежуточные соединения, представленные формулой 67, получают способами, изложенными на схеме 13. Биарилмид 11, полученный, как описано на схеме 2, может быть подвергнут окислению с диоксидом селена в растворителе, таком как уксусная кислота, с получением соединений, представленных формулой 66. Промежуточные соединения 66 можно обрабатывать с помощью трифторида бис-(2-метоксиэтил)аминосеры в растворителе, таком как DCM, с получением промежуточных соединений, представленных формулой 67.
Промежуточные соединения, представленные формулой 68, получают способами, изложенными в схеме 14. Биарилмиды 8, полученные, как описано на схеме 1, могут быть подвергнуты алкилированию с алкилгалогенидом в присутствии основания, такого как NaH или карбонат калия, в растворителе, таком как DMF, или в случае R1 = СН2СН2ОН, амид может быть подвергнут воздействию этилкарбоната в присутствии 18-краун-6 и основания, такого как карбонат калия, с получением промежуточных соединений, представленных формулой 68,
Промежуточные соединения, представленные формулой 71 и 72, получают способами, приведенными на схеме 15. Биарилмид 11, полученный, как описано на схеме 2, может быть подвергнут галогенированию с использованием N-галосукцинимида в полярных апротонных растворителях, таких как ацетонитрил, в темноте, с выходом галогенидов 69. Соединения 69 можно обрабатывать с иодидом меди(1) и гидроксидом калия в присутствии 1,10-фенантролина с получением промежуточных соединений, представленных формулой 70. Промежуточные соединения 70 можно обрабатывать с помощью 2-хлор-2,2-дифторацетата натрия и основания, такого как карбонат калия, с
получением промежуточных соединений, представленных формулой 71. Альтернативно, соединения 70 можно обработать основанием, таким как гидрид натрия, и алкилирующим агентом, таким как метилиодид, в растворителе, таком как DMF, с получением промежуточных соединений, представленных формулой 72.
Схема 16:
Соединения, представленные формулой 74 и 75, получают способами, изложенными на схеме 16. Промежуточное соединение 73, полученное, как описано на схеме 2, может быть подвергнуто алкилированию с йодистым метилом и основанием, таким как гидрид натрия, в растворителе, таком как DMF, с последующим удалением защитной группы с помощью TFA или НС1, с получением соединений формулы 74. Альтернативно, с промежуточного соединения 73 может быть снята защита с помощью TFA или НС1, с последующей обработкой с формальдегидом в муравьиной кислоте, с получением соединений формулы 75.
Промежуточное соединение 80 получают способами, изложенными на схеме 17. Промежуточное соединение 80 может быть этерифицировано обработкой TMS-диазометаном в растворителе, таком как THF, при низкой температуре, или путем превращения кислоты в хлорангидрид кислоты с тионилхлоридом или оксалилхлоридом и гашением спиртом, таким как метанол или ЕЮН, с получением сложного эфира 77. Промежуточное соединение 77 может быть подвергнуто воздействию осмия и периодата натрия в присутствии 2,6-лутидина в растворителе, таком как 1,4-диоксан и вода, с получением промежуточного соединения 78. Промежуточное соединение 78 можно обрабатывать с помощью DAST с получением промежуточного соединения 79. Промежуточное соединение 79 может быть подвергнуто восстановлению с реагентом, таким как алюмогидрид лития или боргидрид лития, в растворителе, таком как THF, с получением промежуточного соединения 80. Схема 18:
Промежуточное соединение 83 получают способами, изложенными на схеме 18, Промежуточное соединение 81 может быть этерифицировано путем обработки с НС1 в этаноле, чтобы обеспечить сложный эфир 82. Промежуточное соединение 82 может быть подвергнуто восстановлению с реагентом, таким как алюмогидрид лития или боргидрид натрия, в растворителе, таком как THF, с получением промежуточного соединения 83. Схема 19:
Промежуточное соединение 90 получают способами, изложенными на схеме 19. Промежуточное соединение 84 может быть этерифицировано обработкой TMSC1 в МеОН, чтобы обеспечить сложный эфир 85. Промежуточное соединение 85 можно обрабатывать с В0С2О и DMAP в растворителе, таком как ацетонитрил, с получением промежуточного соединения 86. Промежуточное соединение 86 можно подвергнуть восстановлению с реагентом, таким как DIBAL, в растворителе, таком как THF или диэтиловый эфир, с получением промежуточного соединения 87. Промежуточное соединение 87 может быть моно-деблокировано обработкой с LiBr в ацетонитриле с получением промежуточного соединения 88. Промежуточное соединение 88 может быть подвергнуто воздействию 2-хлор-2,2-дифторацетата натрия в DMF с получением промежуточного соединения 89. Промежуточное соединение 89 может быть восстановлено с LiBH4 в THF с получением промежуточного соединения 90.
Различные аналоги, синтезированные с использованием схем 1-19, перечислены в таблице 1. Значения функциональной активности ААК1 для отдельных соединений перечислены в виде диапазонов IC50, где а = <1 нМ; b = 1-10 нМ; с = 1001-100 нМ; d = 10001-2000 нМ.
Пример
Стерео-хим.
(M+H)+
AAK1 ICso (нМ)
клетке ICso (нМ)
NH2 '
312,2
5,7
NH2 '
326,2
7,0
NH2 '
404,0
2,7
1,6
NH2 '
340,2
2,4
NH2 '
351,2
2,5
cycPr
NH2 1
366,2
2,1
NH2 '
342,2
i-Pr
NH2 1
354,2
Ал-
ЛИЛ
NH2 '
352,2
9,7
NH2 '
394,2
х-г-Y
NH2 '
402,2
CH2 CH2 OM
NH2 '
370,2
CH2
cyc-Pr
NH2 '
366,2
NH2 '
344,2
7,0
Y^y^^CF3
NH2
366,1
4-Me
NH2 '
340,2
4-NH2
x^Y
NH2 '
341,2
3,0
2-NHA с
x-hr
NH2 '
383,2
4-Me
"YY
NH2 1
340,2
4-Me
NH2 1
374,2
4-Me
NH2
338,2
4-Me
NH2 ^
352,3
4-Me
NH2 V
372,2
0,12
4-Me
NH2 ^
386,2
4-Me
NH2 V
366,3
0,55
4-Me
X^Y\
NH2 ^
352,2
2,9
4-Me
CHF2
х-г-у
NH2 '
390,2
0,3
' NH2I
340,0
1,1
4-Me
7 NH2I
372,0
Диа-1
4-Me
CH(0 H)Me
NH2 '
384,2
1,7
Диа-2
4-Me
CH(0 H)Me
NH2 '
384,2
4-Me
' NH2I
354,2
3,9
Диа мик с
4-Me
NH2 '
354,0
4-Me
OCH
^XY
' NH2I
384,2
5,9
4-Me
C(OH
)Me2
NH2 '
398,0
114
4-Me
х-г-Y
NH2 '
368,4
0,35
Энт -1
4-Me
^XY
' NH2I
354,2
3,9
Энт -2
4-Me
^XY
' NH2I
354,2
354,0
4-Me
368,0
123
4-Me
' NH2I
388,0
0,64
3,3
4-OCH
NH2 '
356,0
NH2 '
360,2
5,0
CH2 CH2 OH
ir^Y
NH2 '
356,2
CH2 CF3
х-г-Y
NH2 '
394,2
ir^Y
NH2 '
354,2
3,1
iPr
х-г-Y
NH2 '
368,2
4,5
5-oxazo le
NH2 '
393,2
1,8
4-Me
X^Y
NH2 '
402,0
0,6
4-NHP MB
х-г-Y
NH2 1
461,0
4-F-Ph
NH2 1
420,0
4-NH2
NH2 '
359,2
2,4
NH2
342,2
119
HN^ 1
340,2
NH2 1 F
348,2
NH2
391,2
324,2
229
Энт -1
' NH2I
340,0
Энт -2
^XY
' NH2I
340,0
4-CHF2
NH2 '
376,2
4-Me
х-г-Y
NH2 '
373,8
126
4-Me
ir^Y
NH2 '
373,8
4-Me
х-г-Y
NH2 '
353,9
4-Me
NH2 '
365,2
0,6
4-Me
HN^ 1
379,0
2-Me
NH2 '
418,0
2-Me
х-г-Y
NH2 '
340,2
893
2-Me
х-г-Y
NH2 '
373,8
NH2
314,2
4-Me
х-г-Y
NH2 '
358,2
4-Me
CH20 H
NH2 '
370,2
4-Me
5-окса-зол
х-г-Y
NH2 1
407,2
4-Me
NH2
405,4
4-Me
N-пиразол
x-^Y
NH2 1
406,2
4-Me
CF3
NH2 '
408,2
4-Me
S02 Me
NH2 '
466,1
4-Me
NH2 '
326,2
4-Me
"YY
NH2 1
365,2
0,8
CH2 CH2 OM
4-Me
ir^Y
NH2 '
384,2
CH2 CH2 OM
4-Me
NH2 '
418,2
134
4-Me
X^Y
NH2 '
358,2
4-Me
х-г-Y
NH2 '
342,2
150
4-Me
5-тиа-зол
х-г-Y
NH2 1
423,2
4-Me
C02 Me
NH2 '
398,2
1-F
х-г-Y
NH2 1
344,2
4-Me
2-пири-
ДИЛ
NH2 '
417,6
Диа-1
4-Me
NH2 '
394,6
Диа-2
4-Me
NH2 '
394,6
4-Me
OMe
NH2 '
370,2
4-Me
OCH
X^Y
NH2 '
406,2
Энт -1
4-Me
NH2
366,1
Энт -2
4-Me
NH2
366,1
NH2
352,0
4-Me
CON H2
х-г-Y
NH2 '
383,2
4-Me
^,NH 1
354,0
4-Me
СОН
Me2
ir^Y
NH2 '
411,2
1-F
' NH2I
358,2
1-ОСНз
NH2 '
356,0
4-Me
NH2 '
356,2
100
4-Me
х-г-Y
NH2 '
423,0
101
4-Me
ir^Y
NH2 '
344,0
5,2
102
4-Me
' NH2I
358,0
103
4-Me
ir^Y
NH2 '
378,0
104
4-Me
CH20 Me
х-г-Y
NH2 '
384,2
105
4-Me
' NH2I
358,0
106
4-Me
NH2
385,3
107
4-Me
x-irr
NH2 '
392,2
Пример
Стерео-хим.
(M+
H)+
AAK1 ICso (нМ)
клетке ICso (нМ)
108
390,0
109
Jryv
NH2 '
326,2
110
iso-Bu
382,2
111
Энт 1
NH2
366,2
112
Энт 2
NH2
366,2
113
NH2
444,0
114
5-окса-
ЗОЛ
NH2
433,2
115
NH2
400,6
116
Энт 1
NH2
400,0
117
Энт 2
NH2
400,0
118
4-NH2
NH2
381,2
119
Энт 1
4-NH2
NH2
381,2
120
Энт 2
4-NH2
NH2
381,2
121
CHF2
NH2 1
376,2
122
4-Me
NH2 '
418,0
123
4-Me
NH2
380,2
124
4-Me
5 <\j^^^CF3 NH2
414,0
125
4-Me
cyc-Pr
NH2 '
379,9
126
Энт 1
5 <\j^^^CF3 NH2
391,0
127
Энт 2
NH2
391,0
128
4-Me
5 <\j^^^CF3 NH2
458,4
129
4-Me
i-Pr
NH2 1
382,2
130
CH2-CH2-OH
4-Me
NH2 '
370,2
131
CH2-CH2-OMe
4-Me
NH2 '
463,2
132
CH2-CH2-OH
4-Me
NH2 1
404,2
133
4-Me
NH2 1
418,2
0,4
2,3
134
4-Me
NH2 1
436,0
135
Энт 1
NH2
352,2
136
Энт 2
NH2
352,2
137
4-Me
NH2
443,9
138
Энт 1
4-Me
NH2
443,9
139
Энт 2
4-Me
> Ог^СР3 NH2
443,9
140
> Or^CF3 NH2
429,9
141
> Or^CF3 NH2
386,0
142
4-Me
NH2 '
346,0
143
CH2-CH2-OH
4-Me
NH2 1
448,0
144
4-Me
OMe
255,2
145
4-NH C(O) NH Me
NH2 1
416,2
146
OH H
342,2
147
4-Me
oh H
356,2
1330
148
4-Me
OH H
420,0
149
4-Me
OH H
434,0
150
325,2
151
311,2
152
4-Me
341,0
153
4-Me
357,1
154
402,1
155
4-Me
339,0
156
4-Me
325,0
157
Энт 1
325,0
158
Энт 2
325,0
ОПИСАНИЕ КОНКРЕТНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
В следующих примерах протонные спектры ЯМР (NMR) снимали на ЯМР-спектрометре
Bruker 400 МГц или Bruker 500 МГц. Химические сдвиги представлены значениями в 8-
шкале относительно тетраметилсилана. Измерения LC/MS выполняли на Shimadzu LC,
соединенном с масс-спектрометром Waters Micromass ZQ. Времена удерживания при выполнении ВЭЖХ были получены с использованием по меньшей мере одного из следующих способов:
Способы LC/MS (ЖХ-МС):
LC/MS Способ А: Колонка: PUROSPHER@star RP-18 (4X55 мм), 3 мкм; Буфер: 20 мм NH4OAC в воде; Подвижная фаза А: Буфер + ACN (90+10); Подвижная фаза В: Buffer + MeCN (10+90); Скорость потока: 2,5 мл/мин)
LC/MS Способ В: Колонка: ZORBAX SB С18 (46X50 мм), 5 мкм; Положительный режим Подвижная фаза А: 10% МеОН - 90% Н20 - 0,1% ТФК; Подвижная фаза В: 90% МеОН -10% Н20 - 0,1% TFA; Скорость потока: 5 мл/мин).
LC/MS Способ С: Колонка - Ascentis Express С8 (5X2,1 мм), 2,7 мкм; Подвижная фаза А: 2% MeCN - 98% Н20 - 10 мМ NH4COOH; Подвижная фаза В: 98% ACN - 2% Н20 - 10 мМ NH4COOH; Скорость потока: 1 мл/мин).
LC/MS Способ D: Колонка -ACQUITY UPLC ВЕН С18 (2,1 X 50 мм), 1,7 мкм; Подвижная фаза А: 0,1% TFA в воде; Подвижная фазаВ: 1% TFA в ACN; Скорость потока: 1 мл/мин) LC/MS Способ Е: Колонка -ACQUITY UPLC ВЕН CI8 (2,1 X 50 мм), 1,7 мкм; Подвижная фаза А: 5 мМ NH4OAc: ACN (95: 5); Подвижная фаза В: 5 мМ NH4OAc: ACN (5:95); Скорость потока: 1 мл/мин).
LC/MS Способ F: Колонка: X-Bridge ВЕН С18 (50 х 2,1 мм), 2,5 мкм; Подвижная фаза А: ACN+ Н20 (2+98)+0,1% TFA; Подвижная фаза В: ACN+ Н20 (98+2)+0,05% TFA; Скорость потока: 1,2 мл/мин.
LC-MS Способ G: Колонка: Kinetex С18 (50 х 2,1 мм), 2,6 мкм: Подвижная фаза А: 2% ACN - 98% Н20 - 10; Подвижная фаза В: 98% ACN - 2% Н20 - 10 мМ NH4COOH; Скорость потока: 1 мл/мин).
LC/MS способ Н: Колонка: ВЕН С18 (50 х 3,0 мм), 1,7 мкм: Подвижная фаза А: 5% ACN - 95% Н20 -10 мМ; Подвижная фаза В: 95% ACN - 5% Н20 -10 мМ NH4COOH; Скорость потока: 1,2 мл/мин).
Способ LC-MS I Колонка: Асе Excel 2 С18 (50 х 3,0 мм), 2,0 мкм: Подвижная фаза А: 2% ACN - 98% Н20 - 10; Подвижная фаза В: 98% ACN - 2% Н20 - 10 мМ NH4COOH; Скорость потока: 1,2 мл/мин).
Способы хиральной ВЭЖХ:
Способ A: CHIRALCEL OJH (250x4,6) мм 5 микрон
Подвижн. Фаза: 0,2% DEA в н-гексан: этанол (80:20) Способ В: CHIRALPAK AD-H (250x4,6) мм 5 микрон
Подвижн. Фаза А: 0,2% DEA в н-гексан (70) В: этанол (30) Способ С: CHIRALPAK- ASH (250x4,6) мм 5 мкм
Подвижн. Фаза: 0,2% DEA в н-гексан: этанол (90:10)
Способы аналитической ВЭЖХ:
Способ A: Waters analytical С18 sunfire колонка (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм); подвижная фаза: Буфер: 0,05% TFA в Н20 рН = 2,5, отрегулированный аммиаком
А = буфер и ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил и буфер (95:5); 0-15 мин, 0% В -> 50% В; 15 - 18 мин, 50% В -> 100% В; 18 - 23 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения = 28 мин.
Способ В: Waters analytical phenil xbridge колонка (4,6 x 150 мм, 3,5 мкм), подвижная фаза: Буфер: 0,05% TFA в ШО рН = 2,5, отрегулированный аммиаком А = буфер и ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил и буфер (95:5); 0-15 мин, 0% В -> 50% В; 15 - 18 мин, 50% В -> 100% В; 18 - 23 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения = 28 мин.
Способ С: Waters analytical С18 sunfire колонка (3,0 х 150 мм, 3,5 мкм); подвижная фаза: А = 10 мМ амм. бикарбонат (рН=9,5)/95% Н20/5% метанол, В = 10 мМ амм. бикарбонат (рН = 9,5)/5% Н20/95% метанола; 0 - 15 мин, 0% В -> 100% В; 15 - 18 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм; время выполнения =18 мин. Способ D: Waters analytical phenil xbridge колонка (3,0 x 150 мм, 3,5 мкм), подвижная фаза: А = 10 мМ амм. бикарбонат (рН = 9,5)/95% Н20/5% метанол, В = 10 мМ амм. бикарбонат (рН = 9,5)/5% Н20/95% метанола; 0-15 мин, 0% В -> 100% В; 15 - 18 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм; время выполнения =18 мин.
Пример 1
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)бензо[с][2,7] нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. Метил-4-хлорникотинат Раствор 4-хлорникотиновой кислоты (20 г, 127 ммоль) в дихлорметане (600 мл) и DMFA (15 мл), охлажденный до 0 °С, обрабатывали оксалилхлоридом (27,8 мл, 317 ммоль). После добавления смесь перемешивали еще в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем смесь охлаждали до 0 °С и медленно добавляли МеОН (30 мл). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 0,5 ч. Смесь разбавляли дихлорметаном (500 мл) и насыщенным водным раствором NaHC03 (100 мл) и затем экстрагировали DCM (3x1000 мл). Слой DCM промывали насыщенным солевым раствором (2x100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт в виде желтого масла (20 г, выход 92%) был принят на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 172,0 [(М+Н)+, вычислено для C7H7CINO2: 172,6]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,21 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн. 9,27 (с, Ш), 8,86 (шир.с, Ш), 7,98 (шир.с, Ш), 4,05 (с, ЗН).
Часть В. Метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)никотинат Метил-4-хлорникотинат (20 г, 117 ммоль), (4-хлор-2-фторфенил)бороновую кислоту (22,4 г, 128 ммоль), Pd(Ph3P)4 (9,4 г, 8,16 ммоль) и Cs2C03 (114 г, 350 ммоль) помещали в смеси растворителей 1,4-диоксана (400 мл) и воды (30 мл) и продували азотом в течение 5 мин и нагревали до 85°С. После перемешивания в течение ночи при данной температуре реакционную смесь разбавляли этилацетатом и фильтровали через слой диатомовой земли (Celite(r)). Данный слой дополнительно промывали этилацетатом.
Объединенный фильтрат промывали водой (1x100 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью флэш-хроматографии (градиент метанола и хлороформа) с получением метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)никотината (13 г, 48,9 ммоль, 42%, с чистотой 77% по данным LC/MS) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 266,0 [(М+Н)+, вычислено для C13H10CIFNO2 266,1]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,69 мин.
Часть С. (8)-метил-4-(4-((2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпентил)окси-2-
Часть D. (8)-4-(4-((2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпентил)окси)-2-
фторфенил)никотиновая кислота 58
фторфенил)никотинат Метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)никотинат (50 мг, 0,188 ммоль) в толуоле (1 мл) обрабатывали карбонатом цезия (92 мг, 0,282 ммоль) и N-Boc-L-Leucinol (121 мг, 0,565 ммоль). Смесь продували газообразным азотом в течение 5 мин и обрабатывали ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-бифенил]-2-ил)фосфином (48,0 мг, 0,113 ммоль). После продувки смеси с азотом в течение еще 5 мин добавляли палладий (II) ацетат (42,3 мг, 0,188 ммоль) и азот барботировали в течение еще 10 мин. Смесь плотно закрывали и нагревали при 80 °С в течение 12 ч. Смесь фильтровали через слой диатомовой земли (Celite(r)) и промывали этилацетатом (2x3 мл). Промывные воды концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (этилацетат и петролейный эфир) с получением (8)-метил-4-(4-((2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпентил)окси)-2-фторфенил)никотината (50 мг, 0,112 ммоль, выход 60%). LC/MS (ESI) м/е 441,2 [(М+Н)+, вычислено для C24H32FN2O5 447,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,17 мин.
(8)-метил-4-(4-((2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпентил)окси)-2-фторфенил)никотинат (50,0 мг, 0,112 ммоль) растворяли в смеси тетрагидрофурана (1 мл), метанола (1 мл) и воды (1 мл). К полученному раствору добавляли гидроксид лития (8,05 мг, 0,336 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток разбавляли водой и значение рН доводили до 4 с помощью 1,5 н водного раствора НС1. Неочищенный продукт из водного слоя экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x5 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-4-(4-((2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпентил)окси)-2-фторфенил)никотиновой кислоты (30 мг, 0,060 ммоль, выход 53%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 433,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H30FN2O5 433,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,74 мин.
Часть Е. (8)-трет-бутил-(1-(4-(3-карбамоилпиридин-4-ил)-3-фторфенокси)-4-
метилпентан-2-ил)карбамат
(8)-4-(4-((2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпентил)окси)-2-
фторфенил)никотиновую кислоту (75 мг, 0,173 ммоль) растворяли в DMFA (2 мл) и
охлаждали до 0 °С. К полученному раствору добавляли EDC (49,9 мг, 0,260 ммоль) и
НОВТ (53,1 мг, 0,347 ммоль). После перемешивания реакционной смеси в течение 5 мин
добавляли раствор хлорида аммония (55,7 мг, 1,040 ммоль) и полученную смесь
перемешивали в течение 5 мин. Добавляли диизопропилэтиламин (0,121 мл, 0,694
ммоль) и смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре дополнительно в
течение 12 ч. Смесь затем гасили льдом и остаток фильтровали и сушили в вакууме с
получением (8)-трет-бутил-( 1 -(4-(3 -карбамоилпиридин-4-ил)-3 -фторфенокси)-4-
метилпентан-2-ил)карбамата (50 мг, 0,098 ммоль, выход 57%) в виде светло-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 432,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H31FN3O4 432,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,83 мин.
Часть F. (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)
окси)пентан-2-ил)карбамат Гидрид натрия (5,56 мг, 0,232 ммоль, 60% в минеральном масле) помещали в тетрагидрофуране (1 мл) и охлаждали до 0 °С. Суспензию обрабатывали (З)-трет-бутил-(1-(4-(3-карбамоилпиридин-4-ил)-3-фторфенокси)-4-метилпентан-2-ил)карбаматом (50 мг, 0,116 ммоль) в THF (1 мл) по каплям, и температуру поддерживали при 0 °С в течение 30 мин. Реакционную смесь затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакцию гасили льдом и экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x5 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-трет-бутил-(4-метил-1-((5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (40 мг, 0,097 ммоль, выход 84%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 412,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H30N3O4 412,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,97 мин.
Часть G. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат (10 мг, 0,024 ммоль) в дихлорметане (1 мл) охлаждали до 0 °С. К полученному раствору по каплям добавляли хлористый водород (0,886 мг, 0,012 мл, 0,024 ммоль, 2MB ДИЭТИЛОВОМ эфире). Температуру реакционной смеси поддерживали при 0 °С в течение 30 мин, а затем реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (4 мг, 0,012 ммоль, 49% выход) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 312,2 [(М+Н)+, вычислено
для C18H22N3O2 312,2]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,1 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 6,85 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,51 мин *Н-ЯМР (400 МГц, D20) 5 част./млн 9,30 (шир.с, Ш), 8,77 (шир.с, Ш), 8,36 (шир.с, Ш), 8,07 (шир.с, Ш), 6,95 (шир.с, Ш), 6,72 (шир.с, Ш), 4,41 (д, J = 9,03 Гц, Ш), 4,26 (шир.с, Ш), 3,89 (шир.с, Ш), 3,38 (с, Ш), 1,72 - 1,88 (м, 2Н), 1,05 (д, J = 2,51 Гц, 6Н).
Пример 2
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотиновая кислота
Часть В. 4-(4-хлор-2-фторфенил)-гЧ-метилникотинамид
К раствору метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)никотината (15 г, 56,5 ммоль) (полученного в примере 1, часть В) в смеси растворителей метанола (150 мл) и воды (150 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли раствор гидроксида натрия (9,03 г, 226 ммоль) и смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и рН полученного водного раствора доводили до рН = 4 с использованием 1,5 н соляной кислоты, в течение данного времени продукт выпадал в виде твердого вещества. После фильтрации смеси получали 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотиновую кислоту (9 г, 35,8 ммоль, выход 63%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 252,0 [(М+Н)+, вычислено для C12H8CIFNO2 252,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR= 0,97 мин.
К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотиновой кислоты (2 г, 7,95 ммоль) в дихлорметане (40 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли оксалилхлорид (2,09 мл, 23,8 ммоль), затем DMF (2 мл). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и обрабатывали дихлорметаном (25 мл). Данный раствор добавляли к смеси гидрохлорида метиламина (5,37 г, 79 ммоль) и триэтиламина (11,08 мл, 79 ммоль) в дихлорметане (25 мл), охлажденной до 0 °С. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, а затем промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой отделяли, сушили (Na2S04> и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-М-метилникотинамида (1,3 г, 4,91 ммоль, 62%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (EST}M/e 265,1 [(М+Н)+, вычислено для C13H11CIFN2O 265,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,69 мин.
Часть С. 8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Гидрид натрия (80 мг, 3,32 ммоль) растворяли в THF (1 мл) и охлаждали до 0 °С. К суспензии добавляли по каплям 4-(4-хлор-2-фторфенил)-гЧ-метилникотинамид (440 мг, 1,66 ммоль) в THF (1 мл), и температуру поддерживали при 0 °С в течение 30 мин. Реакционную смесь затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили льдом и экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x5 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (440 мг, 1,798 ммоль) в виде светло-коричневого масла. LC/MS (ESI) м/е 245,1 [(М+Н)+, вычислено для C13H10CIN2O 245,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,79 мин.
Часть D. (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат К раствору 8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (440 мг, 1,80 ммоль) в толуоле (8 мл) при комнатной температуре добавляли карбонат цезия (879 мг, 2,70 ммоль) и ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-дифенил]-2-ил)фосфин (458 мг, 1,079 ммоль), и полученную смесь дегазировали в течение 5 мин. Полученную смесь затем обрабатывали N-Boc-L-Leucinol (1160 мг, 5,39 ммоль), а затем палладий (II) ацетатом (121 мг, 0,54 ммоль), и смесь дегазировали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь герметично закрывали и нагревали при 80 °С. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Слой промывали этилацетатом и объединенный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью флэш-хроматографии (градиент этилацетата и петролейного эфира), получая (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат (190 мг, 0,34 ммоль, 19%-ный выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 426,2 [(М+Н)+, вычислено для C24H32N3O4 426,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,10 мин.
NH2 1
Часть Е. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-метилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-
К раствору (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (190 мг, 0,447
ммоль) в дихлорметане (4 мл) при 0 °С по каплям добавляли хлористый водород (81 мг,
0,558 мл, 2,233 ммоль) в 1,4-диоксане (4 М), и реакционную смесь перемешивали при 0
°С в течение 30 мин, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в
течение 2 ч. Растворители удаляли при пониженном давлении с получением
неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (0,1% TFA
в воде) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (51 мг, 0,157 ммоль, выход 35%) в виде
желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 326,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H24N3O2 326,2]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,21 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,39 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,40 мин. ^-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,48 (с, Ш), 8,77 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,43 (д, J = 8,78 Гц, Ш), 8,26 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 7,09 - 7,16 (м, 2Н), 4,20 (дд, J = 9,41, 3,89 Гц, Ш), 4,02 (дд, J = 9,29, 7,03 Гц, Ш), 3,81 (с, ЗН), 3,35 - 3,39 (м, Ш), 1,81 - 1,91 (м, Ш), 1,41 - 1,56 (м, 2Н), 0,98 - 1,05 (м, 6Н).
Пример 3
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-бром-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
N' "^^T^N'
Часть А. (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат
К раствору (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (0,100 г, 0,235
ммоль) (полученного в примере 2, часть D) в безводном ацетонитриле (5 мл) добавляли
N-бромсукцинимид (0,042 г, 0,235 ммоль) и смесь нагревали при 85°С в течение 5 ч.
Реакционную смесь разбавляли водой (10 мл), экстрагировали этилацетатом (2x20 мл).
Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и упаривали при
пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с
помощью препаративной ТСХ (градиент этилацетата и петролейного эфира) с
получением (8)-трет-бутил-( 1 -((9-бром-6-метил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (80 мг, 0,159 ммоль, выход 68% ) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е
504,2 [(М+Н)+, вычислено для С24Нз1Вг1Чз04 504,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 2,23 мин.
Часть В. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси) -9-бром-6-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
раствору (8)-трет-бутил-( 1 -((9-бром-6-метил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (80 мг, 1,586 ммоль) в безводном метаноле (5 мл) добавляли 4 М раствор НС1 в 1,4-диоксане (2 мл, 8 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (10 мМ ацетата аммония в воде, ацетонитрил) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (20 мг, 0,049 ммоль, выход 30%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 404,1 [(М+Н)+, вычислено для СлэШзВгКзСЪ 404,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,47 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,55 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,23 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,48 (с, Ш), 8,80 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,67 (с, Ш), 8,26 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 7,15 (с, Ш), 4,37 (дд, J = 9,54, 3,76 Гц, Ш), 4,18 (дд, J = 9,66, 6,40 Гц, Ш), 3,83 (с, ЗН), 3,48 - 3,56 (м, Ш), 1,89 (м, Ш), 1,51 - 1,72 (м, 2Н), 1,05 (т, J = 6,27 Гц, 6Н).
Пример 4
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6,9-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-( 1 -((6,9-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7] нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат В круглодонной колбе емкостью 10 мл (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (полученный в примере 3, часть А) (150 мг, 0,297 ммоль), 2,4,6-триметил-1,3,5,2,4,6-триоксатриборинан (41,1 мг, 0,327 ммоль), CS2CO3 (291 мг, 0,892 ммоль) и PdCl2(dppf) (21,76 мг, 0,030 ммоль) растворяли в смеси 1,4-диоксана (2 мл) и воды (0,1 мл). Реакционную смесь продували азотом в течение 5 мин и нагревали при 90 °С в течение 15 ч. 1,4-диоксан удаляли при пониженном давлении и остаток растворяли в этилацетате (20 мл). Этилацетатный слой промывали водой (10x2 мл) и сушили над сульфатом натрия. После удаления растворителя получали неочищенный продукт (0,08 г), который фильтровали через колонну с силикагелем (24 г силикагеля, МеОН-СНСЬ, смесь). Продукт был выделен в виде не совсем белого твердого вещества (0,05 г, 0,11 ммоль, выход 38%). LC/MS (ES-API), м/е 440,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O4, 440,3]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,95 мин.
Часть В. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6,9-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
В круглодонной колбе емкостью 25 мл (8)-трет-бутил-(1-((6,9-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (80 мг, 0,182 ммоль) растворяли в метаноле (6 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0 °С и добавляли 4М раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (3,75 мл, 12 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. МеОН удаляли и неочищенный продукт растворяли в этилацетате (20 мл). Этилацетатный слой промывали водой (10 мл) и сушили над сульфатом натрия. После удаления растворителя получали неочищенный
продукт, который очищали на колонке с силикагелем (смесь МеОН-СНСЬ) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6,9-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,03 г, 0,09 ммоль, выход 49%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 340,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O2, 340,4]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,33 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,58 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,12 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,51 (с, Ш), 8,79 (д, J = 6,02 Гц, Ш), 8,40 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,33 (с, Ш), 7,10 (с, Ш), 4,50 (дд, J = 10,67, 3,14 Гц, Ш), 4,36 (дд, J = 10,67, 5,90 Гц, Ш), 3,77-3,87 (м, 4Н), 2,46 (с, ЗН), 1,79 -1,92 (м, 2Н), 1,66-1,77 (м, Ш), 1,08 (дд, J = 6,27, 4,02 Гц, 6Н).
Пример 5
Часть А. (8)-трет-бутил-(1-((9-циано-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат В запаянной ампуле объемом 25 мл (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (150 мг, 0,297 ммоль) (полученный в примере 3, часть А) растворяли в DMA (4 мл). К данной смеси добавляли CuCN (53,3 мг, 0,595 ммоль), и полученную смесь нагревали при 150 °С в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (20 мл) и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Этилацетатный раствор промывали насыщенным раствором соли (10 мл) и водой (10 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде смолистого вещества, которое
передавали на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 451,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H31N4O4, 451,5]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 2,02 мин.
Часть В. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
В круглодонной колбе емкостью 25 мл (8)-трет-бутил-(1-((9-циано-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (75 мг, 0,167 ммоль) растворяли в МеОН (4 мл) и охлаждали до 0 °С. Смесь обрабатывали 4 М раствором НС1 в 1,4-диоксане (2 мл, 8 ммоль) и перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. МеОН удаляли и неочищенный продукт растворяли в ЕЮ Ас (20 мл). Этилацетатный слой промывали водой (2x10 мл) и сушили над сульфатом натрия. После удаления растворителя получали неочищенный продукт, который очищали хроматографией на колонке с силикагелем (смесь МеОН-СНСЬ), чтобы получить (S)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-9-карбонитрил (4 мг, 0,01 ммоль, выход 7% за 2 стадии) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 351,2, [(М+Н)+, вычислено для C20H23N4O2, 351,4]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,43 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,69 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,31 мин. ^-ЯМР (400 МГц, CD3OD) част./млн 9,56 (шир.с, Ш), 8,93 (с, 2Н), 8,37 (д, J = 4,77 Гц, Ш), 7,25 (с, Ш), 4,63 (дд, J = 10,67 , 3,14 Гц, Ш), 4,47 (дд, J = 10,79, 6,02 Гц, Ш), 3,81-3,89 (м, 4Н), 1,83-1,91 (м, 2Н), 1,72 (т, J = 6,53 Гц, Ш), 1,08 (д, J = 5,02 Гц, 6Н).
Пример 6
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси) -9-циклопропил-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А: (З)-трет-бутил (1-((9-циклопропил-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Смесь (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (150 мг, 0,297 ммоль) (полученного в примере 3, часть А), циклопропилбороновой кислоты (28,1 мг, 0327 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия (17,2 мг, 0,015 ммоль) и CS2CO3 (291 мг, 0,892 ммоль) в смеси толуола (5 мл) и воды (0,43 мл) продували азотом в течение 5 мин, затем нагревали при 90°С в течение ночи (16 ч). После охлаждения толуол удаляли при пониженном давлении и полученный продукт экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (2x20 мл), сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали силикагельной колоночной хроматографией (EtOAc-гексан) с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-циклопропил-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (70 мг, 0,150 ммоль, выход 51%) в виде не совсем белого клейкого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/з 466,4 [(М+Н)+, вычислено для C27H36N3O4 466,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,19 мин.
Часть В: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-циклопропил-6-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((9-циклопропил-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (60 мг, 0,129 ммоль) в МеОН (4 мл) при 0 °С добавляли 4М раствор НС1 в 1,4-диоксане (2 мл, 8 ммоль). Полученный раствор перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Метанол удаляли при пониженном давлении и остаток экстрагировали этилацетатом
(2x5 мл). Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaHC03 (2x5 мл), сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на колонке с силикагелем (МеОН-СНСЬ) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-циклопропил-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (8 мг, 0,022 ммоль, выход 17%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/з 366,2 [(М+Н)+, вычислено для C22H28N3O2 366,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,34 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 4,87 мин и ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,18 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 9,47 (с,
Ш), 8,75 (д, J = 5,7 Гц, Ш), 8,28 (д, J = 5,7 Гц, Ш), 7,96 (с, Ш), 7,06 (с, Ш), 4,27 (м, Ш), 4,06-4,15 (м, Ш), 3,84 (с, ЗН), 3,38-3,48 (м, Ш), 2,23-2,38 (м, Ш), 1,83-1,94 (м, Ш), 1,561,67 (м, Ш), 1,46-1,55 (м, Ш), 1,00-1,08 (м, 6Н), 0,79-0,94 (м, 4Н).
Пример 7
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-гидрокси-6-метилбензо[с] [2,7]
нафтиридин-5(6Н)-он
Смесь (8)-трет-бутил-( 1 -((9-бром-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,05 г, 0,099 ммоль) (полученного в примере 3, часть А), тетра-н-бутиламмоний гидроксида.30 НгО (0,463 г, 1,784 ммоль) и воды (1,5 мл) добавляли в течение 0,1 ч при перемешивании к раствору иодида меди (I) (1,89 мг, 9,91 мкмоль) и 2-метил-8-хинолинола (3,16 мг, 0,020 ммоль) в DMSO (1 мл). Реакционную смесь нагревали до 120 °С и перемешивали в течение 14 ч. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры. Неочищенный продукт очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (10 мМ ацетата аммония) с получением (S)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-гидрокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,004 г, 0,011 ммоль, выход 12%) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 342,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H24N3O3, 342,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ F): tR = 1,62 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,88 мин. ^-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 9,39 (с, Ш), 8,62 (д, J = 6,00 Гц, Ш), 7,96 (д, J = 5,60 Гц, Ш), 7,56 (с, Ш), 6,73
(с, Ш), 3,80 (с, ЗН), 3,67-3,70 (м, Ш), 3,49-3,59 (м, 2Н), 1,81-1,85 (м, Ш), 1,56-1,63 (м, 2Н), 1,05 ((д, J = 6,80 Гц, ЗН), 0,98 (д, J = 6,80 Гц, ЗН).
Пример 8
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-изопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть В. 8-хлор-6-изопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. 4-(4-хлор-2-фторфенил)-гЧ-изопропилникотинамид К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотиновой кислоты (400 мг, 1,590 ммоль) (полученной, как в примере 2, часть А) в DMF (6 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли EDC (457 мг, 2,384 ммоль) и НОВТ (487 мг, 3,18 ммоль), и полученную смесь перемешивали в течение 5 мин. К полученному раствору добавляли DIPEA (0,83 мл, 4,77 ммоль) с последующим добавлением пропан-2-амина (470 мг, 7,95 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь обрабатывали льдом и экстрагировали этилацетатом (3 х 10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x10 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-гЧ-изопропилникотинамида (480 мг, 1,64 ммоль, 100%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 293,2 [(М+Н)+, вычислено для C15H15CIFN2O 293,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,84 мин.
К суспензии гидрида натрия (79 мг, 3,28 ммоль) в THF (8 мл) при О °С по каплям добавляли раствор 4-(4-хлор-2-фторфенил)-Ы-изопропилникотинамида (480 мг, 1,640 ммоль) в THF (10 мл) в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 1 ч, а затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали дополнительно в течение 1 ч. Реакционную смесь затем обрабатывали льдом и экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x5 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 8-хлор-6-
изопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (250 мг, 0,917 ммоль, выход 56%). LC/MS (ESI) м/е 273,0 [(М+Н)+, вычислено для C15H14CIN2O 273,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,98 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 9,67 (с, Ш), 8,70 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,17 - 8,19 (д, J = 8,4 Гц, Ш), 7,92 -7,94 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,62 (д, J = 1,6 Гц, Ш), 7,26 - 7,31 (дд, J = 8,8, 2,0 Гц, Ш), 3,21 - 3,28 (м, Ш), 1,71 (д, J = 6,8 Гц, 6Н).
Часть С. (Б)-трет-бутил-( 1 -((6-изопропил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-
8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К раствору 8-хлор-6-изопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (250 мг, 0,917 ммоль) в толуоле (2 мл) при комнатной температуре добавляли карбонат цезия (448 мг, 1,375 ммоль) и ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-дифенил]-2-ил)фосфин (234 мг, 0,550 ммоль), и полученную смесь дегазировали в течение 5 мин. Полученную смесь затем обрабатывали N-Boc-L-leucinol (591 мг, 2,75 ммоль) с последующей обработкой палладий (П) ацетатом (61,7 мг, 0,275 ммоль) и дегазировали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь герметично закрывали и нагревали при 80 °С. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Слой промывали этилацетатом и объединенный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью флэш-хроматографии (градиент этилацетата и петролейного эфира) и получали (8)-трет-бутил-(1-((6- изопропил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (160 мг, 0,198 ммоль, выход 21%) в виде не
совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 454,2 [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O4 454,3]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,17 мин.
Часть D. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-изопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
раствору
((8)-трет-бутил-(1-((6-изопропил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (160 мг, 0,353 ммоль) в безводном дихлорметане (4 мл) по каплям добавляли 2 М раствора НС1 в диэтиловом эфире (0,88 мл, 1,76 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (10 мМ ацетата аммония в воде, ацетонитрил) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-изопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (45 мг, 0,127 ммоль, выход 36%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/е 354,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O2 354,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,81 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,85 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,50
мин. ^-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,43 (д, J = 0,75 Гц, Ш), 8,75 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,42 (д, J. = 9,04 Гц, Ш), 8,22 (д, J = 5,52 Гц, Ш), 7,30 (д, J = 2,26 Гц, Ш), 7,10 (дд, J = 8,78, 2,26 Гц, Ш), 5,26 - 5,43 (м, Ш), 4,16 (дд, J = 9,16, 3,89 Гц, Ш), 3,98 (дд, J = 9,29, 7,03 Гц, Ш), 3,27 - 3,31 (м, Ш), 1,81 - 1,92 (м, Ш), 1,73 (д, J = 7,03 Гц, 6Н), 1,41 - 1,51 (м, 2Н), 1,02 (дд, J = 9,54, 6,53 Гц, 6Н).
Пример 9
(8)-6-аллил-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. 4-(4-хлор-2-фторфенил)-1Ч-циклопропилникотинамид К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотиновой кислоты (500 мг, 1,987 ммоль) (полученной, как в примере 2, часть А) в DMF (6 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли EDC (571 мг, 2,98 ммоль) и гидроксибензотриазол (609 мг, 3,97 ммоль), и полученную смесь перемешивали в течение 5 мин. К полученному раствору добавляли DIPEA (1,04 мл, 5,96 ммоль) с последующим добавлением циклопропанамина (567 мг, 9,93 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь обрабатывали льдом и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x10 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-гЧ-циклопропилникотинамида (480 мг, 1,65 ммоль, выход 83%). LC/MS (ESI) м/е 291,0 [(М+Н)+, вычислено для C15H13CIFN2O 291,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,79 мин.
Часть В. 8-хлор-6-циклопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К суспензии гидрида натрия (72,6 мг, 3,03 ммоль) в THF (8 мл) при 0 °С по каплям добавляли раствор 4-(4-хлор-2-фторфенил)-1Ч-циклопропилникотинамида (440 мг, 1,51 ммоль) в THF (10 мл) в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 1 ч, а затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 1 ч. Реакционную смесь затем обрабатывали льдом и экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (2x5 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 8-хлор-6-циклопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (340 мг, 1,26 ммоль, выход 83%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 271,0 [(М+Н)+, вычислено для C15H12CIN2O 271,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,89 мин.
Часть С. (8)-трет-бутил-(1-((6-циклопропил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К раствору 8-хлор-6-циклопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (200 мг, 0,739 ммоль) в толуоле (2 мл) при комнатной температуре добавляли карбонат цезия (361 мг, 1,108 ммоль) и ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[ 1,1 '-дифенил]-2-ил)фосфин (188 мг, 0,443 ммоль), и полученную смесь дегазировали азотом в течение 5 мин. Полученную смесь затем обрабатывали N-Boc-L-leucinol (477 мг, 2,216 ммоль) с последующей обработкой палладий (II) ацетатом (49,8 мг, 0,222 ммоль) и дегазировали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь герметично закрывали и нагревали при 80 °С. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Слой промывали этилацетатом и объединенные фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью флэш-хроматографии (этилацетат и петролейный эфир) с получением (8)-трет-бутил-(1-((6-циклопропил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,195 ммоль, выход 26%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 452,2 [(М+Н)+, вычислено для C26H34N3O4 452,3]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,11 мин.
NH2 1
Часть D. (8)-6-аллил-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)бензо
[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((6-циклопропил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,221 ммоль) в безводном дихлорметане (2 мл) добавляли 2 М раствор НС1 в диэтиловом эфире (0,176 мл, 0,353 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли нагреваться до
комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (0,1% TFA в воде) с получением (8)-6-аллил-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (8 мг, 22,76 ммоль, выход 10%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 352,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H26N3O2 352,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,80 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,06 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,21 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,56 (с, Ш), 8,85 (д, J = 6,27 Гц, Ш), 8,55 (д, J = 9,04 Гц, Ш), 8,48 (д, J = 6,27 Гц, Ш), 7,20 (дд, J = 8,91, 2,38 Гц, Ш), 7,14 (д, J = 2,26 Гц, Ш), 6,08 (дд, J = 17,32, 10,54 Гц, Ш), 5,28 (дд, J = 10,54, 1,00 Гц, Ш), 5,18 (дд, J = 17,32, 1,25 Гц, Ш), 5,09 - 5,13 (м, 2Н), 4,44 (дд, J = 10,54, 3,26 Гц, Ш), 4,27 (дд, J = 10,42, 6,40 Гц, Ш), 3,77 (дд, J = 6,78, 3,51 Гц, Ш), 1,64 -1,88 (м, ЗН), 1,07 (дд, J = 6,40, 4,89 Гц, 6Н).
Пример 10
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-7,9-дихлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-(1-((7,9-дихлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К перемешиваемому раствору (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (0,120 г, 0,282 ммоль) (полученного, как в примере 2, часть D) в безводном ацетонитриле (2 мл) в атмосфере азота добавляли N-хлорсукцинимид (0,045 г, 0,338 ммоль) и раствор
нагревали при 85°С в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ТСХ (этилацетат в петролейном эфире) с получением (8)-трет-бутил-(1-((7,9-дихлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (120 мг, 0,243 ммоль, выход 86%, с 55%-ной чистотой по данным LC/MS) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (EST) м/е 494,2 [(М+Н)+, вычислено для С24НзоСЬКз04494,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 2,24 мин.
N' "^^T^N'
Часть В. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-7,9-дихлор-6-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((7,9-дихлор-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,120 г, 0,243 ммоль) в безводном метаноле (5 мл) по каплям добавляли раствор 4М НС1 в 1,4-1,4-диоксане (2 мл, 8 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенное соединение, которое очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (10 мМ ацетата аммония в воде, ацетонитрил) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-7,9-дихлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (28 мг, 0,063 ммоль, 26% выход) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 394,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H22CI2N3O2 394,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,48 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,21 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,73 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,50 (д, J = 0,75 Гц, Ш), 8,87 (д, J = 5,52 Гц, Ш), 8,58 (с, Ш), 8,32 (д, J = 5,27 Гц, Ш), 4,17 (дд, J = 9,03, 4,02 Гц, Ш), 4,05 (дд, J = 9,03, 7,28 Гц, Ш), 3,93 (с, ЗН), 3,37 - 3,43 (м, Ш), 1,82 - 1,93 (м, Ш), 1,38 - 1,57 (м, 2Н), 0,99 -1,05 (м, 6Н).
Пример 11 77
Часть А. К-бензил-4-(4-хлор-2-фторфенил)никотинамид (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-бензилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотиновой кислоты (600 мг, 2,38 ммоль) (полученной в примере 2, часть А) в DMF (6 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли EDC (457 мг, 2,38 ммоль) и гидроксибензотриазол (365 мг, 2,38 ммоль), и полученную смесь перемешивали в течение 5 мин. К полученному раствору добавляли DIPEA (0,416 мл, 2,384 ммоль) с последующим добавлением бензиламина (307 мг, 2,86 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь обрабатывали льдом и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x10 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением N-бензил-4-(4-хлор-2-фторфенил)никотинамида (680 мг, 2,00 ммоль, выход 84% ). LC/MS (ESI) м/е 341,0 [(М+Н)+, вычислено для C19H15CIFN2O 341,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,73 мин.
Часть В. 6-бензил-8-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К суспензии гидрида натрия (96 мг, 3,99 ммоль) в THF (13 мл) при температуре 0 °С добавляли по каплям раствор гЧ-бензил-4-(4-хлор-2-фторфенил)никотинамида (680 мг, 1,995 ммоль) в THF (10 мл) в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 1 ч, а затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение
еще 1 ч. Реакционную смесь затем обрабатывали льдом и экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x5 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 6-бензил-8-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (640 мг, 2,00 ммоль, 100%). LC/MS (EST) м/е 321,0 [(М+Н)+, вычислено для C19H14CIN2O 321,0]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,95 мин.
Часть С. (8)-трет-бутил-(1-((6-бензил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К раствору 6-бензил-8-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (640 мг, 2,00 ммоль) в толуоле (12 мл) при комнатной температуре добавляли карбонат цезия (975 мг, 2,99 ммоль) и N-Boc-L Leucinol (1287 мг, 5,99 ммоль), и полученную смесь дегазировали азотом в течение 5 мин. Полученную смесь затем обрабатывали ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-бифенил]-2-ил)фосфином (508 мг, 1,197 ммоль) с последующим добавлением палладия (П)ацетата (448 мг, 2,00 ммоль) и дегазировали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь герметично закрывали и нагревали при 80 °С. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Слой промывали этилацетатом и объединенные фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью флэш-хроматографии (этилацетат/петролейный эфир) с получением (8)-трет-бутил-(1-((6-бензил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (500 мг, 0,738 ммоль, выход 37%) в виде твердого вещества не совсем белого цвета. LC/MS (ESI) м/е 502,3 [(М+Н)+, вычислено для C30H36N3O4 502,4]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,26 мин.
Часть D. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-бензилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((6-бензил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (35 мг, 0,070 ммоль) в безводном дихлорметане (1 мл) по каплям добавляли 2 М раствор НС1 в диэтиловом эфире (0,17 мл, 0,349 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуре и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ТСХ (этилацетат в петролейном эфире) с получением (S)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-бензилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (10 мг, 0,024 ммоль, выход 35%) в виде светло-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 402,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H28N3O2 402,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,77 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,54 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,17 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 8 част./млн 9,61
(шир.с, Ш), 8,87 (д, J = 4,52 Гц, Ш), 8,53 (д, J = 9,04 Гц, Ш), 8,47 (д, J = 6,02 Гц, Ш), 7,28 - 7,38 (м, 5Н), 7,15 (дд, J = 8,91, 2,38 Гц, Ш), 7,04 (д, J = 2,26 Гц, Ш), 5,72 (д, J = 5,77 Гц, 2Н ), 4,27 (дд, J = 10,54, 3,26 Гц, Ш), 4,10 (дд, J = 10,42, 6,40 Гц, Ш), 3,69 (дд, J = 6,65, 3,14 Гц, Ш), 1,68 - 1,81 (м, Ш), 1,57 - 1,67 (м, 2Н), 1,00 - 1,05 (м, 6Н).
Пример 12
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6- (2-метоксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Часть А. 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотинамид
К перемешиваемому раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотиновой кислоты (1,1 г, 4,37 ммоль) (полученной в примере 2, часть А) в безводном DMF (10 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли гидроксибензотриазол (1,339 г, 8,74 ммоль), EDC (1,257 г, 6,56 ммоль), DIEA (3,05 мл, 17,49 ммоль) с последующим добавлением хлорида аммония (1,169 г, 21,86 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотинамида (0,900 г, 3,59 ммоль, выход 82%) LC/MS (ESI) м/е 251 [(М+Н)+, вычислено для C12H9CIFN2O 251]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,34 мин.
Часть В. 8-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотинамида (0,9 г, 3,59 ммоль) в THF (20 мл) при 0 °С добавляли гидрид натрия (0,258 г, 10,77 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение при 0 °С в течение 1 ч, а затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи (14 ч). Реакционную смесь затем гасили льдом и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x100 мл), сушили (Na2S04) и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 8-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,80 г, 3,47 ммоль, 97%-ный выход). LC/MS (ESI) м/е 231,2 [(М+Н)+, вычислено для Ci2H8ClN20 231]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,61 мин.
Часть С. 8-хлор-6- (2-метоксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 8-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,150 г, 0,650 ммоль) в безводном DMF (2 мл) при 0 °С добавляли 2-бромэтилметиловый эфир (0,090 г, 0,650 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры
и перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2 х 20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-6-(2-метоксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (150 мг, 0,520 ммоль, выход 80%). LC/MS (ESI) м/е 289,1 [(М+Н)+, вычислено для C15H13CIN2O2 289,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,65 мин.
Часть D. (8)-трет-бутил-(1-((6-(2-метоксиэтил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К раствору 8-хлор-6-циклопропилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (100 мг, 0,346 ммоль) в толуоле (5 мл) при комнатной температуре добавляли карбонат цезия (169 мг, 0,520 ммоль) nN-Boc-L-leucinol (226 мг, 1,039 ммоль), и полученную смесь дегазировали азотом в течение 5 мин. Полученную смесь затем обрабатывали ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-бифенил]-2-ил)фосфином (47,8 мг, 0,208 ммоль) с последующим добавлением палладия(П) ацетата (23,3 мг, 0,104 ммоль) и дегазировали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь герметично закрывали и нагревали при 80 °С. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Слой промывали этилацетатом (15 мл) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью флэш-хроматографии (градиент этилацетата и петролейного эфира) и получали (З)-трет-бутил-(1-((6-(2-метоксиэтил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (80 мг, 0,170 ммоль, 49% выход) в виде коричневой смолы. LC/MS (ESI) м/е 470,3 [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O5 470,3]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 2,02 мин.
Часть Е. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(2
метоксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((6-(2-метоксиэтил)-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,080 г, 0,170 ммоль) в безводном метаноле (5 мл) по каплям добавляли раствор 4М НС1 в 1,4-диоксане (0,21 мл, 0,85 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенное соединение, которое очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (10 мМ ацетата аммония в воде: ацетонитрил) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(2-метоксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (20 мг, 0,054 ммоль выход, 32%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 370,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O3 370,2]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,34 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,36 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,78 мин. ^-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,45 (с, Ш), 8,76 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,40 (д, J = 9,03 Гц, Ш,), 8,23 (д, J = 6,02 Гц, Ш), 7,29 (д, J = 2,26 Гц, Ш), 7,11 (д, J = 8,78 Гц, Ш), 4,61 (т, J = 5,65 Гц, 2Н), 4,36 (с, Ш), 4,20 (с, Ш), 3,81 (т, J = 5,77 Гц, 2Н), 3,63 - 3,71 (м, Ш), 3,37 (с, ЗН), 1,86 (м, Ш), 1,67 (qt, J = 14,01, 7,09 Гц, 2Н), 1,06 (д, J = 5,77 Гц, 6Н).
Пример 13
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(циклопропилметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. 8-хлор-6-(циклопропилметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К перемешиваемому раствору 8-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (100 мг, 0,434 ммоль) (полученного в примере 12, часть В) в безводном DMF (2 мл) при 0 °С добавляли
циклопропилметилбромид (0,088 г, 0,650 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении до 8-хлор-6-(циклопропилметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (100 мг, 0,351 ммоль, 81% выход, 53% чистоты по данным LC/MS). LC/MS (EST) м/е 285,1 [(М+Н)+, вычислено для C16H14CIN2O 285,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,91 мин.
Часть В. (8)-трет-бутил-(1-((6-(циклопропилметил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К раствору 8-хлор-6-(циклопропилметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (100 мг, 0,351 ммоль) в безводном толуоле (5 мл) при комнатной температуре добавляли карбонат цезия (172 мг, 0,527 ммоль) и Boc-L-leucinol (229 мг, 1,054 ммоль) и полученную смесь дегазировали азотом в течение 5 мин. Полученную смесь затем обрабатывали ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-бифенил]-2-ил)фосфином (48,5 мг, 0,211 ммоль) с последующим добавлением палладия (II) ацетата (23,65 мг, 0,105 ммоль) и дегазировали в течение еще 10 мин. Реакционную смесь герметично закрывали и нагревали при 80 °С. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Слой промывали этилацетатом (15 мл) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенное соединение, которое очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (этилацетат в петролейном эфире) с получением (8)-трет-бутил-(1-((6-(циклопропилметил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (80 мг, 0,172 ммоль, 49%-ный выход) в виде коричневого смолистого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 466,3 [(М+Н)+, вычислено для C27H36N3O4 466,3]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 2,199 мин.
Часть С. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6
(циклопропилметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
раствору (8)-трет-бутил-( 1 -((6-(циклопропилметил)-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,08 г,
0,172 ммоль) в безводном метаноле (5 мл) по каплям добавляли раствор 4М НС1 в 1,4-
диоксане (2 мл, 65,8 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли нагреваться до
комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь
концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенное соединение, которое
очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (10 мМ ацетата аммония в воде:
ацетонитрил) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-
(циклопропилметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (22 мг, 0,060 ммоль, 35% выход) в виде желтой смолы. LC/MS (HST)M/e 366,2 [(М+Н)+, вычислено для C22H28N3O2 366,2]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,47 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,470 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,250 мин. ^-ЯМР
(400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,47 (д, J = 0,50 Гц, Ш), 8,78 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,46 (д, J = 9,04 Гц, Ш), 8,26 (д, J = 5,52 Гц, Ш), 7,28 (д, J = 2,26 Гц, Ш), 7,14 (дд, J = 9,03, 2,26 Гц, Ш), 4,39 (д, J = 6,78 Гц, 2Н), 4,31 (дд, J = 9,79, 3,76 Гц, Ш), 4,13 (дд, J = 9,79, 6,78 Гц, Ш), 3,53 (дд, J = 7,15, 3,64 Гц, Ш), 1,87 (м, Ш), 1,59 (д, J = 13,72,7,03 Гц, 2Н), 1,36 -1,45 (м, Ш), 1,04 (дд, J = 7,28, 6,78 Гц, 6Н), 0,57 - 0,63 (м, 4Н).
Пример 14
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. 2-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан К раствору 1-бром-4-хлор-2,5-дифторбензола (200 мг, 0,879 ммоль) в THF (10 мл), охлажденному до -10 °С, по каплям добавляли изопропилмагнийбромид (1 М раствор в THF, 1,055 мл, 1,055 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при данной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь затем нагревали до 0 °С и перемешивали в течение еще 1 ч. Полученную смесь снова охлаждали до -10 °С и обрабатывали, добавляя по каплям раствор 2-изопропокси-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (196 мг, 1,055 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и обрабатывали насыщенным раствором хлорида аммония (3 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали дихлорметаном (2x2 мл). Объединенный органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенное соединение, которое очищали с помощью хроматографии на колонке с диоксидом кремния (7:3 - этилацетат:гексан) с получением 2-(4-хлор-2, 5-дифторфенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (150 мг, 0,546 ммоль, выход 62%) в виде масла. ^-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 7,46 - 7,49 (м,
Ш), 7,09 - 7,13 (м, Ш), 1,35 (с, 12Н).
Часть В. Метил-4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)никотинат
К перемешиваемому раствору метил-4-хлорникотината (100 мг, 0,583 ммоль) в смеси растворителей 1,4-диоксан:вода (4:1, 20 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота добавляли карбонат калия (62,6 мг, 0,453 ммоль) с последующим добавлением тетрабутиламмоний бромида (73,0 мг, 0,226 ммоль). Полученную смесь дегазировали азотом в течение 10 мин и обрабатывали К-(6-хлор-4-(триметилстаннил)пиридин-2-ил)ацетамидом (60,4 мг, 0,181 ммоль) с последующим добавлением бис(трифенилфосфин)палладий(П)хлорида (10,60 мг, 0,015 ммоль). Смесь дегазировали снова в течение 10 мин и нагревали при 80 °С в течение 8 ч. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры и гасили водой (20 мл) и экстрагировали
этилацетатом (5 мл). Органический слой отделяли и промывали водой (3x5 мл), сушили (Na2S04> и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного метил-4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)никотината (400 мг, 0,592 ммоль, 20%-ный выход, 42% чистоты по данным LC/MS). Он был принят на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 284,0 [(М+Н)+, вычислено для C13H9CIF2NO2 284,02]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,82 мин.
N'V^OH
F ^ CI
Часть С. 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)никотиновая кислота К раствору метилового эфира 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)никотиновой кислоты (400 мг, 1,41 ммоль) в воде:ТНР (1:1, 8 мл) добавляли LiOH (67,5 мг, 2,82 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь гасили водой (5 мл) и промывали этилацетатом (2x5 мл). Водный слой отделяли и подкисляли 1,5 н НС1 и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)никотиновой кислоты (180 мг, 0,541 ммоль, выход 38%) в виде твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 270 [(М+Н)+, вычислено для C12H7CIF2NO2 270]; LC/MS время удерживания (способ В): tR= 1,48 мин.
F ^ XI
Часть D. 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-гЧ-метилникотинамид 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)никотиновую кислоту (170 мг, 0,630 ммоль) растворяли в тионилхлориде (0,14 мл, 1,89 ммоль) и нагревали при температуре 65 °С в течение 1 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного масла, которое растворяли в дихлорметане и по каплям добавляли к смеси гидрохлорида метанамина (63,9 мг, 0,946 ммоль) и DIEA (0,11 мл, 0,63 ммоль) в DCM (8 мл) при 0 °С. Реакционную смесь затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 7 часов. Реакционную смесь разбавляли DCM (5 мл) и промывали водой (3x5 мл), затем насыщенным солевым раствором (1x10 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта,
который очищали с помощью препаративной тонкослойной хроматографии (3:2 этилацетат:гексан) с получением 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-гЧ-метилникотинамида (90 мг, 0,264 ммоль, выход 42%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 283,0 [(М+Н)+, вычислено для C13H10CIF2N2O 283,0]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,46 мин.
Часть Е. 8-хлор-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К суспензии гидрида натрия (56,6 мг, 1,42 ммоль) в THF (5 мл) при 0 °С медленно добавляли 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-гЧ-метилникотинамида (100 мг, 0,354 ммоль) в THF (5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем реакционную смесь гасили путем добавления холодной воды (1 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x2 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (1:1 этилацетат в петролейном эфире) с получением 8-хлор-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (82 мг, 0,297 ммоль, 84%-ный выход) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 262,5 [(М+Н)+, вычислено для C13H9CIFN2O 263,0]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,79 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,35 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,07 мин.
Часть F (8)-трет-бутил-(1-((9-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К перемешиваемой суспензии 8-хлор-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (40 мг, 0,152 ммоль), (8)-трет-бутил-1-(гидрокси-4-метилпентан-2-ил)карбамата (39,7 мг, 0,183 ммоль), ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-дифенил]-2-ил)фосфина (38,8 мг, 0,091 ммоль) и карбоната цезия (74,4 мг, 0,228 ммоль) в толуоле (4
мл) добавляли палладий (II) ацетат (10,26 мг, 0,046 ммоль). Газообразный азот
барботировали через смесь в течение 5 мин, а затем реакционную смесь нагревали до
85°С в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и
разбавляли этилацетатом (2 мл) и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)).
Фильтрат промывали водой (2x2 мл) и насыщенным солевым раствором (2x2 мл),
сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток
очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (60% этилацетата в
гексане) с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (28 мг, 0,023 ммоль, выход 15%). LC/MS (EST) м/е 444,2 [(М+Н)+, вычислено для C24H31IFN3O4 444,2]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 2,02 мин.
Часть G. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
К перемешиваемому раствору (8)-трет-бутил-(1-((9-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (25 мг, 0,056 ммоль) в диэтиловом эфире (4 мл) по каплям добавляли 2М раствор хлористоводородной кислоты в диэтиловом эфире (42,5 мкл, 0,085 ммоль) при 0 °С в течение 10 мин. Баню со льдом удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли и неочищенный материал переносили в воду (5 мл). Водный слой промывали этилацетатом (3 мл) и обрабатывали 10%-ным раствором NaHC03 (20 мл). Полученный раствор экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2x10 мл), сушили (сульфат натрия), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного вещества, которое очищали с помощью препаративной ТСХ (40% этилацетат в гексане) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (15 мг, 0,041 ммоль, выход 73%) в виде твердого вещества белого цвета. LC/MS (ESI) м/е 344,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H23FN3O2 344,2]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,35 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,31 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,85
мин; *Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 9,66 - 9,71 (м, Ш), 8,83 - 8,87 (м, Ш), 7,90 -7,95 (м, Ш), 7,79 - 7,83 (м, Ш), 6,91 - 6,95(м, Ш), 4,10 - 4,14 (м, Ш), 3,89 - 3,95(м, Ш), 3,76 - 3,80 (м, ЗН), 3,35 - 3,44 (м, Ш), 1,78 - 1,86 (м, Ш), 1,39 (т, J = 7,00 Гц, 2Н), 0,96 -1,03 (м, 6Н).
Пример 15
-(2-амино-5,5,5-трифторпентилокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
I 0
N^Ph Ph
Часть А. Трет-бутил-2-(дифенилметиленеамино)-5,5,5-трифторпентоат К перемешиваемому раствору трет-бутил-2-((дифенилметилен)амино)ацетата (1 г, 3,39 ммоль) в THF (20 мл), охлажденному до -78 °С, в атмосфере азота по каплям добавляли раствор 2М LDA в THF (2,54 мл, 5,08 ммоль) в течение 30 мин. К данной смеси затем добавляли 3,3,3-трифторметансульфонат (1,083 г, 4,40 ммоль). Реакционную смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 ч. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водного раствора хлорида аммония при 0 °С. Реакционную смесь затем экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (1x10 мл) и насыщенным солевым раствором (1x10 мл), сушили над сульфатом натрия и затем концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное масло очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (2% этилацетат в гексане) с получением трет-бутил-2-((дифенилметилен)амино)-5,5,5-трифторпентоата (800 мг, 2,02 ммоль, 60%-ный выход) в виде желтого масла. LC/MS (ESI) м/е 391,9 [(М+Н)+, вычислено для C22H25F3NO2, 392,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 2,49 мин.
NH2
Часть В. 2-амино-5,5,5-трифторпентановая кислота (хлористоводородная соль)
Перемешиваемый раствор трет-бутил-2-((д ифенилметилен)амино)-5,5,5-
трифторпентоата (800 мг, 2,023 ммоль) в 50%-ном водном растворе НС1 (0,123 мл, 2,023 ммоль) нагревали с обратным холодильником при 100 °С в течение 8 час. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением гидрохлорида 5,5,5-2-амино-трифторпентановой кислоты (400 мг, 1,82 ммоль, выход 90%, 78% чистоты по данным LC/MS) в виде белого твердого вещества. LC/MS (EST) м/е 171,7 [(М+Н)+, вычислено для C5H7F3O2, 172,1]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,80 мин.
ho^Y^CF3
Вое
Часть С. 2-(трет-бутоксикарбониламино)-5,5,5-трифторпентановая кислота К перемешиваемому раствору гидрохлорида 5,5,5-2-амино-трифторпентановой кислоты (400 мг, 1,503 ммоль, 78 по данным LC/MS) в THF (8 мл) и воде (8 мл) при комнатной температуре добавляли К2СО3 (831 мг, 6,01 ммоль), и раствор перемешивали в течение 10 мин. К данной смеси добавляли ВосгО (656 мг, 3,01 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 8 ч при комнатной температуре, затем концентрировали при пониженном давлении. Водный слой промывали этилацетатом (3x5 мл). Водный слой подкисляли насыщенным раствором лимонной кислоты (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x8 мл). Объединенные органические слои промывали водой (3x5 мл), затем насыщенным солевым раствором (1x10 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5,5,5-трифторпентановой кислоты (500 мг, 1,84 ммоль, выход 100%) в виде бесцветного масла. Материал был взят на следующей стадии без дополнительной очистки. *Н-ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 5,04 (с, Ш), 4,38 (с, Ш), 2,15-2,28 (м, 2Н), 1,91-1,95(м, 2Н), 1,46 (с, 9Н).
Часть D. Трет-бутил 5,5,5-трифтор-1-гидроксипентан-2-илкарбамат К перемешиваемому раствору 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5,5,5-трифторпентановой кислоты (500 мг, 1,843 ммоль) в THF (15 мл), охлажденному до -10 °С, в атмосфере азота добавляли N-метилморфлин (0,223 мл, 2,028 ммоль), а затем изобутилхлорформиат (0,266 мл, 2,028 ммоль). Затем раствор перемешивали в течение
30 мин, затем фильтровали. Фильтрат добавляли к боргидриду натрия (147 мг, 3,87 ммоль) в воде (10 мл), перемешивали в течение 5 мин и разбавляли этилацетатом (10 мл). Органический слой отделяли и промывали насыщенным солевым раствором (2x10 мл), сушили (Na2S04> и упаривали при пониженном давлении с получением трет-бутил-(5,5,5-трифтор-1-гидроксипентан-2-ил)карбамата (400 мг, 1,555 ммоль, 84% выход) в виде белого твердого вещества, которое было принято на следующей стадии без дополнительной очистки. *Н-ЯМР (400 МГц, MeOD) 8 3,44-3,56 (м, ЗН), 2,16-2,26 (м, 2Н), 1,83-1,92 (м, Ш), 1,57-1,67 (м, Ш), 1,47 (с, 9Н).
Часть Е. Трет-бутил-(5,5,5-трифтор-1-(6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-илкарбамат Реакцию проводили, как в примере 2, часть D, с получением продукта трет-бутил-(5,5,5-трифтор-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (160 мг, 0,237 ммоль, выход 23%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 466,31 [(М+Н)+, вычислено для H27F3N3O4, 466,19]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,04 мин.
Часть F. 8-(2-амино-5,5,5-трифторпентилокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
К раствору трет-бутил-(5,5,5-трифтор-1-((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (150 мг, 0,322 ммоль) в диэтиловом эфире (10 мл) в атмосфере азота, охлажденному до 0 °С, добавляли 4 М НС1 в 1,4-диоксане (0,098 мл, 0,392 ммоль) медленно в течение периода 5 мин. Светло-желтую реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 5 мин, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаточное желтое масло разбавляли водой (3 мл) и
экстрагировали EtOAc (2x4 мл). Водный слой отделяли и обрабатывали насыщенным раствором Na2C03 (3 мл). Полученный водный слой экстрагировали EtOAc (3x5 мл). Объединенный органический слой с отделяли и промывали водой (2x5 мл), насыщенным раствором соли (1x5 мл) и сушили над сульфатом натрия. Фильтрат выпаривали при пониженном давлении и очищали с помощью SFC (СО2 и 0,5% DEA в метаноле) с получением 8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-6-метилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5(6Н)-она (102,8 мг, 0,278 ммоль, выход 86%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 366,2 [(М+Н)+, вычислено для C18H19F3N3O2 366,13]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,77 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,79 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR= 8,20 мин. ^-ЯМР (400 МГц, MeOD) 5 9,48 (д, J = 0,80 Гц, Ш), 8,78 (д, J = 5,60 Гц, Ш), 8,44 (д, J = 8,80 Гц, Ш), 8,27 (д, J = 5,60 Гц, Ш), 7,17 (д, J = 2,40 Гц, Ш), 7,12 (дд, J = 2,40, 8,80 Гц, Ш), 4,17-4,20 (м, Ш), 4,09 (дд, J = 6,00, 9,40 Гц, Ш), 3,82 (с, ЗН), 3,28-3,28 (м, Ш), 2,33-2,49 (м, 2Н), 1,92-1,99 (м, Ш), 1,73-1,80 (м, Ш).
Пример 16
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: 2,4-дихлорникотиновая кислота К раствору 2,4-дихлорпиридина (7 г, 47,3 ммоль) в THF (70 мл) при -78°С добавляли 2М раствор LDA в THF (28,4 мл, 56,8 ммоль) и перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь гасили избытком сухого льда и перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. После нейтрализации с помощью 1,5 н НС1 реакционную смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и промывали насыщенным солевым раствором (2x50 мл) и водой (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 2,4-дихлорникотиновой
кислоты (4,5 г, 23,44 ммоль, выход 50%) в виде коричневого твердого вещества. ^-ЯМР (400 МГц, DMSO-de) 5 част./млн 8,47 (д, Ш), 7,74 (д, Ш).
CI О
Часть В: Метил 2,4-дихлорникотинат К раствору 2,4-дихлорникотиновой кислоты (500 мг, 2,60 ммоль) в ацетонитриле (10 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли DBU (0,981 мл, 6,51 ммоль) с последующим добавлением йодистого метила (0,814 мл, 13,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи (14 ч). После завершения реакции растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате (10 мл) и промывали водой (1x5 мл), сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc-гексан) с получением метил 2,4-дихлорникотината (260 мг, 1,262 ммоль, 49%-ный выход) в виде бледно-желтого масла. LC/MS (ESI): м/з 206,1 [(М+Н)+, вычислено для C7H6CI2NO2 205,97]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,85 мин. *Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) 5 част./млн 8,42 (д, J = 5,4 Гц, Ш), 7,59 (д, J = 5,4 Гц, Ш), 3,99 (с, ЗН).
N V^OMe
Часть С: Метил-4-хлор-2-метилникотинат Смесь метил-2,4-дихлорникотината (2 г, 9,71 ммоль), триметилбороксина (1,462 г, 11,65 ммоль), CS2CO3 (6,33 г, 19,42 ммоль) и PdCi2(dppf) (0,710 г, 0,971 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) и воде (2 мл) продували азотом в течение 5 мин и нагревали при 70 °С в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc-гексан) с получением метил-4-хлор-2-метилникотината (550 мг, 2,94 ммоль, выход 31%) в виде красного масла. *Н-ЯМР (300 МГц, CD3OD) 5 част./млн 8,44 (д, J = 5,7 Гц, Ш), 7,43 (д, J = 5,7 Гц, Ш), 3,98 (с, ЗН), 2,54 (с, ЗН).
Часть D: Метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотинат
Смесь метил-4-хлор-2-метилникотината (4 г, 21,55 ммоль), (4-хлор-2-фторфенил)бороновой кислоты (4,13 г, 23,71 ммоль), трициклогексилфосфина (1,813 г, 6,47 ммоль), Pd(OAc)2 (0,484 г, 2,155 ммоль) и Cs2C03 (14,04 г, 43,1 ммоль) в DMA (15 мл) продували азотом в течение 5 мин и нагревали при 100 °С в течение ночи (14 ч). После охлаждения реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). DMA удаляли при пониженном давлении и остаток разбавляли этилацетатом (10 мл). Органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (EtOAc-гексан) с получением метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотината (1 г, 3,58 ммоль, выход 17%) в виде красного масла. LC/MS (ESI): м/з 280,1 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIFNO2 280,0]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,80 мин.
Часть Е: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотиновая кислота
Часть F: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-ГЧ,2-диметилникотинамид
К раствору метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотината (40 мг, 0,143 ммоль) в МеОН (2 мл) и воде (3 мл) добавляли NaOH (11,44 мг, 0,286 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч . Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и подкисляли 1,5 н НС1 и извлекали этилацетатом (5 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором NaHC03 (2x10 мл) и водой (10 мл); сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенной 4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотиновой кислоты (30 мг, 0,113 ммоль, выход 79%) в виде коричневого твердого вещества. Оно было принято в следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/з 266,1 [(М+Н)+, вычислено для Ci3HioClFN02, 266,0]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,64 мин.
К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотиновой кислоты (180 мг, 0,678 ммоль) в DCM (5 мл) и DMFA (0,2 мл) при 0 °С добавляли оксалилхлорид (0,178 мл, 2,033 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре, затем разбавляли DCM (5 мл) и обрабатывали раствором гидрохлорида метиламина (457 мг, 6,78 ммоль) в DCM (5 мл), охлажденным до 0 °С. Смесь перемешивали в течение еще 1 ч при комнатной температуре. Раствор экстрагировали с помощью DCM (20 мл), промывали насыщенным раствором NaHCCb (2x10 мл) и водой (20 мл); сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-ГЧ,2-диметилникотинамида (50 мг, 0,179 ммоль, выход 27%) в виде коричневой смолы. LC/MS (ESI): м/з 279,2 [(М+Н)+, вычислено для C14H13CIFN2O 279,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,62 мин.
Часть G: 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)-гЧ,2-диметилникотинамида (40 мг, 0,144 ммоль) в THF (3 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли NaH (10,33 мг, 0,431 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч. После завершения реакции реакционную смесь гасили водой со льдом, и продукт экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органический слой сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (30 мг, 0,116 ммоль, выход 81%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 259,2 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIN2O 259,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,65 мин.
Часть Н: (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Смесь 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (60 мг, 0,232 ммоль), (S)-трет-бутил-(1-гидрокси-4-метилпентан-2-ил)карбамата (101 мг, 0,464 ммоль), CS2CO3
(113 мг, 0,348 ммоль), Pd(OAc)2 (15,6 мг, 0,070 ммоль) и 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-три-изо-пропил-1,Г-бифенила (5,91 мг, 0,014 ммоль) в толуоле (5 мл) продували азотом в течение 5 мин и нагревали при 100 °С в течение ночи (14 ч). После охлаждения реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)), концентрировали при пониженном давлении и растворяли в этилацетате (5 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (2x10 мл) и водой (20 мл); сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (55 мг неочищенный) в виде клейкого твердого вещества. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/з 440,4 [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O4, 440,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,89 мин.
Часть I: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (30 мг, 0,068 ммоль) в МеОН (3 мл) при 0 °С добавляли НС1 (4N в 1,4-диоксане, 3 мл, 12,00 ммоль). Раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении и остаток растворяли в этилацетате (10 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором NaHC03 (2х 10 мл) и водой (20 мл); сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (DCM-MeOH смеси) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (8 мг, 0,021 ммоль, 31% выход) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 340,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O2, 340,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,27 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,30 и ВЭЖХ время удерживания (способ В):
tR = 8,97 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 8,53 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,33 (д, J = 9,54 Гц, Ш), 8,08 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 7,00-7,06 (м, 2Н), 4,21 (м, Ш), 4,02 (м, Ш), 3,73
(с, ЗН), 3,47-3,52 (м, Ш), 3,06 (с, ЗН), 1,82-1,93 (м, Ш), 1,67-1,76 (м, 2Н), 1,26-1,56 (м, 6Н).
Пример 17
(8)-4-амино-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
NH2 О
Часть А. трет-бутил-(4-хлорпиридин-2-ил)карбамат
К раствору LHMDS (1 М раствор в THF, 17,11 мл, 17,11 ммоль) в THF (5 мл) при -5 ° С добавляли раствор 4-хлорпиридин-2-амина (1 г, 7,78 ммоль) в THF (5 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 5 мин. К данной смеси добавляли раствор В0С2О (1,898 мл, 8,18 ммоль) в THF (5 мл). Смесь перемешивали при 0 °С в течение 2 ч и реакцию останавливали добавлением водного раствора NH4CI. Значение рН раствора доводили до 6 добавлением 1,5 н НС1 и экстрагировали этилацетатом (3x15 мл). Объединенные органические экстракты промывали раствором бикарбоната натрия (15 мл), водой (15 мл) и насыщенным солевым раствором (15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с силикагелем (этилацетат, петролейный эфир градиент) с получением трет-бутил-(4-хлорпиридин-2-ил)карбамата (1,435 г, 6,28
ммоль, выход 81%). *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10,10 (с, Ш), 8,23 (д, J = 5,20 Гц, Ш), 7,88 (д, J = 2,00 Гц, Ш), 7,15 (дд, J = 2,00, 5,20 Гц, Ш), 1,48 (с, 9Н).
Часть В. трет-бутил-4-хлор-3-формилпиридин-2-илкарбамат К раствору трет-бутил-(4-хлорпиридин-2-ил)карбамата (1,00 г, 4,37 ммоль) в THF (30 мл), охлажденному до -78 °С, добавляли н-бутиллитий (2,55 М в гексане, 4,1 мл , 10,06
ммоль). После завершения добавления раствор перемешивали при -78 ° С в течение 1 ч. DMF (1,591 мл, 20,55 ммоль) добавляли по каплям и полученный раствор перемешивали при -78 °С в течение еще 1 ч. Реакционную смесь затем гасили добавлением насыщенного водного раствора хлорида аммония (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным солевым раствором (1x20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали с помощью хроматографии на нейтральной окиси алюминия (этилацетат/гексан) с получением трет-бутил-(4-хлор-3-формилпиридин-2-ил)карбамата (530 мг, 2,06 ммоль, выход 27%) в виде желтого твердого вещества. *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 10,73 (с, Ш), 10,55 (с, Ш), 8,52 (д, J = 5,3 Гц, Ш), 7,06 (д, J = 5,3 Гц, Ш), 1,56 (с, 9 Н); LC/MS (EST) м/е 255,2 [(М-Н)", вычислено для C11H12CIN2O3 255,1]. LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,75 мин.
Часть С. трет-бутил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-3-формилпиридин-2-илкарбамат К перемешиваемой суспензии трет-бутил-(4-бром-3-формилпиридин-2-ил)карбамата (100 мг, 0,332 ммоль), (4-хлор-2-фторфенил)бороновой кислоты (57,9 мг, 0,332 ммоль) и карбоната цезия (216 мг, 0,664 ммоль) в THF (50 мл) и воде (8 мл) добавляли Pd(PPli3)4 (19,19 мг, 0,017 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 85°С в течение ночи (14 ч). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным солевым раствором (1x25 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (этилацетат/гексан), получая трет-бутил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-3-формилпиридин-2-илкарбамат (60 мг, 0,17 ммоль, выход 35%), LC/MS (ESI) м/е 351,2 [(М+Н)+, вычислено для C17H17CIFN2O3 351,1]. LC/MS время удерживания (способ A): tR = 2,07 мин.
Часть D. 4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-
иум-фторид
К раствору трет-бутил-(4-(4-хлор-2-фторфенил)-3-формилпиридин-2-ил)карбамата (700 мг, 1,996 ммоль) в этаноле (10 мл) при 0 °С добавляли метиламин (8М в этиловом спирте) (620 мг, 2,49 мл, 19,96 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. После потребления исходного материала растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток промывали гексаном (50 мл) и полученное таким образом твердое вещество сушили в вакууме с получением соли 4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-иум-фторида (900 мг, 1,69 ммоль, выход 84%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 344,2 [(М)+, вычислено для C18H19CIN3O2 344,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,90 мин.
Часть Е. 8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-илкарбаминовая
кислота
К перемешиваемому раствору 4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-иум-фторида (0,35 г, 0,65 ммоль) nNaOH (0,162 г, 4,06 ммоль) в смеси DCM (10 мл) и воды (10 мл) добавляли КМп04 (0,642 г, 4,06 ммоль) порциями при комнатной температуре и реакционную смесь нагревали до 90 °С в течение 1 ч. Раствор разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали DCM (2x20 мл). Объединенные органические слои промывали 50 мл воды, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением (8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-ил)карбаминовой кислоты (305 мг, 0,422 ммоль, выход 65%) в виде желтого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 304,1 [(М+Н)+, вычислено для C14H11CIN3O3 304,04]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,01 мин.
Часть F. 4-амино-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Раствор (8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-ил)карбаминовой кислоты (300 мг, 0,415 ммоль) в конц. НС1 (15 мл, 494 ммоль) нагревали при 90 °С в течение 2 ч. Значение рН реакционной смеси доводили до 8 с помощью насыщенного раствора бикарбоната натрия и экстрагировали DCM (2x30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (0,1% TFA в МеОН) с получением 4-амино-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (30 мг, 0,110 ммоль, выход 27%) в виде моно-TFA соли. LC/MS (ESI) м/е 260,0 [(М+Н)+, вычислено для C13H11CIN3O 260,05]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,18 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,24 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,31 мин; 400 МГц, *Н-ЯМР (DMSO-de) 5 9,95(с, Ш), 8,75 (с, Ш), 8,56 (д, J = 8,80 Гц, Ш), 8,23 (д, J = 6,80 Гц, Ш), 7,82 (дд, J = 6,80, 7,20 Гц, 2Н), 7,54 (дд, J = 2,00, 8,80 Гц, Ш), 3,72 (с, ЗН).
Часть G. 8-хлор-4-(4-метоксибензиламино)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К перемешиваемому раствору 4-амино-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (30 мг, 0,059 ммоль) в DMF (10 мл) при температуре 0 °С добавляли NaH (7,09 мг, 0,295 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин. К данной смеси добавляли 1-(хлорметил)-4-метоксибензол (0,026 мл, 0,191 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакцию останавливали добавлением льда и реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (2x10 мл). Объединенные органические слои промывали водой (25 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-4-((4-метоксибензил)амино)-6-метилбензо[с][2,7 ]нафтиридин-5(6Н)-она (29 мг, 0,044 ммоль, выход 75%). LC/MS (ESI) м/е 380,27 [(М+Н)+, вычислено для C21H19CIN3O2 380,11]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,86 мин.
Часть G. (Б)-трет-бутил-1 -(4-(4-метоксибензиламино)-6-метил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Реакцию проводили, как в примере 2, часть D, с получением неочищенного продукта, который очищали хроматографией на колонке с силикагелем с использованием (этилацетата и гексана) с получением (8)-трет-бутил-(1-((4-((4-метоксибензил)амино)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,29 г, 0,422 ммоль, выход 61%) в виде желтого масла. LC/MS (ESI) м/е 561,5 [(М+Н)+, вычислено для C32H41N4O5 561,3]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,03 мин.
Часть I. (8)-4-амино-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
К перемешиваемому раствору (8)-трет-бутил-(1-((4-((4-метоксибензил)амино)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,145 ммоль) в DCM (10 мл) при комнатной температуре добавляли TFA (4 мл, 51,9 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 45 °С в течение 12 ч. После завершения реакции летучие органические вещества выпаривали при пониженном давлении и полученный остаток очищали с помощью препаративной. ВЭЖХ (0,1% TFA в воде/ацетонитрил в качестве подвижной фазы) с получением (8)-4-амино-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (16 мг, 0,046 ммоль, выход 32%) в виде моно-TFA СОЛИ В виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 341,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H25N4O2 341,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,08 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,02 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,40 мин; 1И-ЯМ? (400 МГц, MeOD) 5 8,44 (д, J =
8,80 Гц, Ш), 8,00 (д, J = 7,20 Гц, Ш), 7,71 (д, J = 7,20 Гц, Ш), 7,24 (д, J = 2,40 Гц, Ш),
7,21-7,22 (м, Ш), 4,51 (дд, J = 3,20, 10,80 Гц, Ш), 4,34 (дд, J = 6,40, 10,40 Гц, Ш), 3,84 (с, ЗН), 3,78-3,82 (м, Ш), 1,65-1,89 (м, ЗН), 1,08 (д, J = 4,40 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 4,40 Гц, ЗН).
Пример 18
(8)-К-(8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-2-ил)ацетамид
Часть А. 4-хлорпиридин-2-амин К перемешиваемому раствору 4-хлорпиридин-2-амина (8 г, 62,2 ммоль) в ацетонитриле (600 мл) при комнатной температуре порциями добавляли N-бромсукцинимид (11,08 г, 62,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 14 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), насыщенным раствором соли (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Органическую фазу концентрировали при пониженном давлении с получением 5-бром-4-хлорпиридин-2-амина в виде желтого твердого вещества (13 г, 99%), которое использовали без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 207,0 [(М+Н)+, вычислено для СбШВгСШг 206,9]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 0,8 мин.
Часть В. гЧ-(5-бром-4-хлорпиридин-2-ил)ацетамид
К перемешиваемому раствору 5-бром-4-хлорпиридин-2-амина (11,6 г, 55,9 ммоль) в
пиридине (100 мл) при 0 °С добавляли ацетилхлорид (3,98 мл, 55,9 ммоль) и
реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч.
Реакционную смесь гасили холодной водой и концентрировали при пониженном
давлении. Остаток разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3x50 мл).
Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), насыщенным раствором
соли (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Органическую фазу концентрировали при
103
пониженном давлении с получением М-(5-бром-4-хлорпиридин-2-ил)ацетамида (14,6 г, 55,9 ммоль, выход 100%) в виде белого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 249 [(М+Н)+, вычислено для СуНуВгСПЧгО 248,9], LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,64 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10,87 (с, Ш), 8,58 (с, Ш), 8,33 (с, Ш), 2,11 (с, ЗН).
Часть С. гЧ-(4-хлор-5-винилпиридин-2-ил)ацетамид К перемешиваемому раствору гЧ-(5-бром-4-хлорпиридин-2-ил)ацетамида (7 г, 28,1 ммоль) добавляли комплекс 2,4,6-тривинил-1,3,5,2,4,6-триоксатриборинана с пиридином (1: 1) (8,78 г, 36,5 ммоль), раствор карбоната натрия (5,95 г, 56,1 ммоль) в 7 мл воды и тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,973 г, 0,842 ммоль) в смеси толуола (50 мл) и этанола (8 мл), продували газообразный азот в течение 5 мин. Реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 14 часов. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл), фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Фильтрат разбавляли водой и органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и остаток, полученный таким образом, очищали с помощью флэш-хроматографической колонки 120 г с использованием смеси гексан/этилацетат. Продукт элюировали 30% EtOAc в гексане и требуемые фракции концентрировали с получением гЧ-(4-хлор-5-винилпиридин-2-ил)ацетамида (5,92 г, 27,7 ммоль, выход 99%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 197,2 [(М+Н)+, вычислено для C9H10CIN2O 197,04]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,50 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-de) 5 10,79 (с, Ш), 8,64 (с, Ш), 8,18 (д, J = 6,40 Гц, Ш), 6,88 (дд, J = 11,20, 17,60 Гц, Ш), 5,99 (дд, J = 0,80, 17,60 Гц, Ш), 5,47 (дд, J = 0,80, 11,40 Гц, Ш), 2,12 (с, ЗН).
AcHN^^^XI Часть D. М-(4-хлор-5-формилпиридин-2-ил)ацетамид К перемешиваемому раствору гЧ-(4-хлор-5-винилпиридин-2-ил)ацетамида (6 г, 30,5 ммоль) и 2,6-лутидина (7,11 мл, 61,0 ммоль) в смеси 1,4-диоксана (110 мл) и воды (25 мл) при 0 °С добавляли тетроксид осмия (2,5% в 2-метил-2-пропаноле, 9,58 мл, 30,5 ммоль) с последующим добавлением периодата натрия (19,58 г, 92 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч. Реакционную смесь разбавляли водой
и экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, концентрировали при пониженном давлении и остаток, полученный таким образом, очищали с помощью флэш-хроматографической колонки с 120 г диоксида кремния, используя смесь гексан/EtOAc в качестве элюента. Целевой продукт был выделен при 30% EtOAc в гексане. Требуемые фракции концентрировали при пониженном давлении с получением 1Ч-(4-хлор-5-формилпиридин-2-ил)ацетамида в виде не совсем белого твердого вещества (5,8 г, 28,1 ммоль, выход 92%). LC/MS (ESI) м/е 197,0 [(М)\ вычислено для C8H6CIN2O2 197,04]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,21 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 11,20 (с, Ш), 10,18 (с, Ш), 8,76 (с, Ш), 8,27 (с, Ш), 2,16 (с, ЗН).
N '
AcHN'
F' ^ XI
Часть Е. К-(4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-формилпиридин-2-ил)ацетамид К перемешиваемому раствору 1Ч-(4-хлор-5-формилпиридин-2-ил)ацетамида (3 г, 15,11 ммоль), (4-хлор-2-фторфенил)бороновой кислоты (2,63 г, 15,11 ммоль), карбоната цезия (9,84 г, 30,2 ммоль) в смеси воды (8 мл) и THF (25 мл) добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (19,19 мг, 0,017 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 85°С в течение ночи (14 ч). Реакционную смесь разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали с EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические слои промывали водой (25 мл), насыщенным раствором соли (25 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан/EtOAc в качестве элюента) с получением N-(4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-формилпиридин-2-ил)ацетамида в виде не совсем белого твердого вещества (2,8 г, 9,01 ммоль, выход 60%). LC/MS (ESI) м/е 291,0 [(М)", вычислено для C14H9CIFN2O2 291,0], LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,69 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-de) 5 11,14 (с, Ш), 9,84 (д, J = Гц, Ш), 8,88 (с, Ш), 8,13 (с, Ш), 7,61 (дд, J = 2,00 , 10,00 Гц, Ш), 7,46-7,48 (м, 2Н), 2,11 (с, ЗН).
Часть F. 2-Ацетамидо-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-иум-фторид
К перемешиваемому раствору К-(4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-формилпиридин-2-
ил)ацетамида (0,39 г, 1,332 ммоль) и молекулярных сит 4 А (50 мг) в дихлорметане (35
мл) при О °С добавляли по каплям метиламин (8М в этаноле, 0,041 г, 0,166 мл, 1,332 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи (12 ч). Реакционную смесь разбавляли DCM (40 мл) и фильтровали через слой диатомовой земли (Celite(r)). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 2-ацетамидо-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-иум-фторида (450 мг, 1,24 ммоль, выход 93%) в виде желтого твердого вещества, который был использован на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 286,1 [(М)+, вычислено для C15H13CIN3O 286,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,71 мин.
Часть G. ]М-(8-хлор-6-метил-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-2-ил)ацетамид К перемешиваемому раствору 2-ацетамидо-8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-иум-фторида (2,1 г, 2,47 ммоль) в смеси THF (20 мл) и МеОН (5 мл) при 0 °С добавляли NaBH4 (0,199 г, 5,27 ммоль) тремя порциями, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 мин. Летучие органические вещества удаляли при пониженном давлении; добавляли насыщенный раствор хлорида аммония (30 мл) и раствор экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (25 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением М-(8-хлор-6-метил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-2-ил)ацетамида (0,71 г, 2,29 ммоль, выход 93%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 288,2 [(М+Н)+, вычислено для C15H15CIN3O 288,1]; LC/MS время удерживания (способ С); tR = 1,87 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 12,76 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 13,07 мин; 1Н-
ЯМР (400 МГц, DMSO-de) 5 10,46 (с, Ш), 8,36 (с, Ш), 8,16 (д, J = 0,40 Гц, Ш), 7,63 (д, J = 8,40 Гц, Ш), 6,88 (дд, J = 2,00, 8,00 Гц, Ш), 6,82 (д, J = 2,00 Гц, Ш), 4,26 (с, 2Н), 2,89 (с, ЗН), 2,11 (с, ЗН).
Часть Н. К-(8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-2-ил)ацетамид К перемешиваемому раствору К-(8-хлор-6-метил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-2-ил)ацетамида (0,6 г, 1,199 ммоль) в DCM (20 мл) при комнатной температуре добавляли манганат бария (1,536 г, 5,99 ммоль) тремя порциями, и реакционную смесь нагревали при 45 °С в течение 60 часов. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли DCM (70 мл) и пропускали через диатомовую землю (Celite(r)). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (DCM/MeOH в качестве элюента), получая 1Ч-(8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-2-ил)ацетамид (0,4 г, 1,071 ммоль, выход 89%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 302,1 [(М+Н)+, вычислено для C15H13CIN3O2 2 302,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,88 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A); tR = 8,82 мин; ВЭЖХ время удерживания
(способ В): tR = 7,99 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 11,01 (с, Ш), 9,24 (с, Ш), 8,92 (с, Ш), 8,26 (д, J = 8,80 Гц, Ш), 7,69 (д, J = 2,00 Гц, Ш), 7,48 (дд, J = 2,00, 8,80 Гц, Ш), 3,68 (с, ЗН), 2,20 (с, ЗН).
Часть I. (8)-трет-бутил-1-(2-ацетамидо-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Реакцию проводили, как в примере 2, часть D, с получением неочищенного (Б)-трет-бутил-1-(2-ацетамидо-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (160 мг, 0,33 ммоль, 20,5% чистоты по данным LC/MS) в виде коричневого масла. Оно было принято на следующей стадии без очистки. LC/MS (ESI) м/е 483,34 [(М+Н)+, вычислено для C26H35N4O 483,25]; LC/MS время удерживания (Способ Е): tR = 1,13 мин.
Часть J. (8)-М-(8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-2-ил)ацетамид К перемешиваемому раствору (8)-трет-бутил-(1-((2-ацетамидо-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (140 мг, 0,059 ммоль) в CH2CI2 (15 мл) при 0 °С добавляли TFA (1,2 мл, 15,58 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин. После завершения реакции летучие органические вещества выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (0,1% TFA в воде/ацетонитрил) с получением (S)-N-(8-((2-aMHHO-4- метилфенил)окси)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-2-ил)ацетамида (2 мг, 3,93 мкмоль, выход 6,6%) в виде моно-соли TFA. LC/MS (ESI) м/е 383,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H27N4O3 383,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,80 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,14 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,62 мин; ^-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 9,28 (с, Ш), 8,93 (с, Ш), 8,35 (д, J = 8,80 Гц, Ш), 7,17 (с, Ш), 7,15 (д, J = 2,00 Гц, Ш), 4,46 (д, J = 8,80 Гц, Ш), 4,28 (дд, J = 6,40, 10,80 Гц, Ш), 3,76-3,79 (м, 4Н), 2,29 (с, ЗН), 1,65-1,88 (м, ЗН), 1,08 (д, J = 4,40 Гц, ЗН), 1,07 (д, J = 4,40 Гц, ЗН).
Пример 19
(К)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (К)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Упомянутое в заголовке соединение получали, как описано в примере 16, с использованием (К)-трет-бутил-(1-гидрокси-4-метилпентан-2-ил)карбамата, в части Н, с
получением (К)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (620 мг, 0,564 ммоль, выход 49%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 440,3 [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O4 440,3].
NH2
Часть В. (К)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
При температуре окружающей среды раствор (К)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (102 мг, 0,232 ммоль) в дихлорметане (1 мл) обрабатывали раствором НС1 (1,160 мл, 4,64 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч. Полученную смесь концентрировали до масла и очищали с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (Phenomenex Luna С18 30x100 мм 10 мкм; градиентное элюирование вода/метанол/0,1% TFA). Фракции, содержащие продукт, нейтрализовали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток распределяли между этилацетатом и насыщенным раствором соли и слои разделяли. Водный слой дважды экстрагировали этилацетатом и объединенные органические слои промывали один раз насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением (К)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (11,5 мг, 0,033 ммоль, выход 14%) в виде масла молочного цвета. LC/MS (ESI): м/з 340,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O2 340,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ С): tR = 13,02 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ D): tR = 13,05 мин; *Н-ЯМР (500 МГц, метанол-сЦ) 5 8,68 - 8,63 (м, 2Н), 8,58 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 7,22 (дд, J = 9,0, 2,3 Гц, Ш), 7,20 (д, J = 2,3 Гц, Ш), 4,52 (дд, J = 10,5, 3,3 Гц, Ш), 4,34 (дд, J = 10,7, 6,6 Гц, Ш), 3,82 (с, ЗН), 3,80 - 3,75 (м, Ш), 3,25 (с, ЗН), 1,91 -1,81 (м, Ш), 1,80 - 1,73 (м, Ш), 1,72 - 1,64 (м, Ш), 1,07 (д, J = 5,8 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 5,8 Гц, ЗН).
Пример 20
(К)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. (К)-трет-бутил-(1-((9-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Смесь (К)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (248 мг, 0,564 ммоль), полученного, как описано в примере 19, часть A, NCS (151 мг, 1,128 ммоль) и ацетонитрила (5 мл) нагревали при 90 °С в течение 1 ч, а затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Неочищенный продукт концентрировали при пониженном давлении с получением (R)-трет-бутил-(1-((9-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (15 мг, 0,032 ммоль, 6% выход неочищенного продукта). Смесь использовали без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/з 474,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H33CIN3O4 474,2].
CI NH2 1
Часть В. (К)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он При температуре окружающей среды раствор (К)-трет-бутил-(1-((9-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (15 мг, 0,032 ммоль) в дихлорметане (0,5 мл) обрабатывали НС1 (4MB 1,4-диоксане)
(0,396 мл, 1,58 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч. Полученную смесь концентрировали и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (Phenomenex Luna С18 ЗОх 100 мм 10 микрон; градиентное элюирование вода/ацетонитрил/10 мМ ацетат аммония). Фракции, содержащие продукт, концентрировали при пониженном давлении с получением (R)-трет-бутил-(1-((9-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат-она (9,0 мг, 0,023 ммоль, выход 73%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 373,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H25CIN3O2 373,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ С): tR = 14,21 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ D): tR = 14,30 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-D) 5 8,70 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,21 (с, Ш), 7,79 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,83 (с, Ш), 4,18 (дд, J = 8,8, 3,8 Гц, Ш), 4,04 - 3,97 (м, Ш), 3,76 (с, ЗН), 3,48 (qd, J = 6,9, 3,5 Гц, Ш), 3,17 (с, ЗН), 1,84 (dquin, J = 13,7, 6,7 Гц, Ш), 1,49 (т, J = 7,0 Гц, 2Н), 1,03 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 21
(8)-8-(2-амино-3-циклопропилргороху)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: (8)-трет-бутил-( 1 -циклопропил-3-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси) пропан-2-ил)карбамат Упомянутое в заголовке соединение получали, как описано в примере 16, с использованием (8)-трет-бутил-( 1 -циклопропил-3 -гидроксипропан-2-ил)карбамата (0,287 г, 1,334 ммоль) в части Н, с получением (8)-трет-бутил-(1-циклопропил-3-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (230 мг, 0,526 ммоль, выход 59%) в виде бесцветного масла. LC/MS (ESI): м/з 438,3
[(М+Н)+, вычислено для C25H32N3O4 438,2]; *Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 8,61 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,09 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 7,77 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 6,96 - 6,79 (м, 2Н), 4,92 (шир.с, Ш), 4,35 - 3,98 (м, ЗН), 3,70 (с, ЗН), 3,13 (с, ЗН), 1,63 (т, J = 6,9 Гц, 2Н), 1,47 (с, 9Н), 0,83 - 0,70 (м, Ш), 0,61 - 0,42 (м, 2Н), 0,21 - 0,04 (м, 2Н).
Часть В: (8)-8-(2-амино-3-циклопропилргороху)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
При температуре окружающей среды суспензию (8)-трет-бутил-(1-циклопропил-3-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (50 мг, 0,114 ммоль) (полученного, как описано в примере 16, с использованием (8)-трет-бутил-(1-циклопропил-3-гидроксипропан-2-ил)карбамата (0,287 г, 1,334 ммоль) в части Н) в диэтиловом эфире (1 мл) обрабатывали НС1 (4MB 1,4-диоксане) (0,571 мл, 2,286 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении до желтого твердого вещества. Неочищенный продукт очищали с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (Phenomenex Luna С18 30 х 100 мм 10 микрон; градиентное элюирование вода/метанол/TFA). Фракции, содержащие продукт, концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток распределяли между насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом. Слои разделяли и водную фазу дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали один раз насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением (8)-8-(2-амино-3-циклопропилргороху)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (9,0 мг, 0,025 ммоль, выход 22% на конечной стадии) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 338,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H24N3O2 338,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ С): tR = 13,05 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ D): tR = 13,88 мин; ^-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d)
5 8,65 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,16 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 7,83 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 6,92 (дд, J = 8,9, 2,4 Гц, Ш), 6,87 (д, J = 2,3 Гц, Ш), 4,15 (дд, J = 8,9, 3,9 Гц, Ш), 3,97 (дд, J = 8,8, 7,0 Гц, Ш), 3,75 (с, ЗН), 3,48 - 3,35 (м, Ш), 3,17 (с, ЗН), 1,59 - 1,42 (м, 2Н), 0,87 - 0,74 (м, Ш), 0,64 - 0,47 (м, 2Н), 0,25 - 0,17 (м, Ш), 0,16 - 0,10 (м, Ш).
Пример 22
(8)-8-(2-амино-3-циклобутилпропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: (8)-трет-бутил-(1-циклобутил-3-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамат
Упомянутое в заголовке соединение получали, как описано в примере 16, с использованием (8)-трет-бутил-( 1 -циклобутил-3 -гидроксипропан-2-ил)карбамата (0,359 г, 1,566 ммоль) в части Н, с получением (8)-трет-бутил-(1-циклобутил-3-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (400 мг, 0,886 ммоль, выход 85%) в виде бесцветного масла. LC/MS (ESI): м/з 452,3 [(М+Н)+,
вычислено для C26H34N3O4 452,3]; ^-ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 8,62 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,11 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 7,79 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 6,94 - 6,79 (м, 2Н), 4,76 (д, J = 7,5 Гц, Ш), 4,07 (д, J = 3,5 Гц, 2Н), 3,93 (шир.с, Ш), 3,71 (с, ЗН), 3,14 (с, ЗН), 2,55 -2,35 (м, Ш), 2,15 -2,05 (м, 2Н), 1,97 - 1,59 (м, 7Н), 1,47 (с, 9Н).
Часть В: (8)-8-(2-амино-3-циклобутилпропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
При температуре окружающей среды суспензию (8)-трет-бутил-(1-циклобутил-3-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (70 мг, 0,155 ммоль) в диэтиловом эфире (1 мл) обрабатывали НС1 (4MB 1,4-диоксане)
(0,775 мл, 3,10 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении до желтого твердого вещества. Неочищенный продукт очищали с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (Phenomenex Luna С18 ЗОх 100 мм 10 микрон; градиентное элюирование вода/метанол/TFA). Фракции, содержащие продукт, концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток распределяли между насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом. Слои разделяли и водную фазу дважды экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали один раз насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-8-(2-амино-3-циклобутилпропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (17 мг, 0,046 ммоль, выход 30%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 352,3 [(М+Н)+, вычислено для C21H26N3O2 352,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ С): tR = 14,15 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ D): tR = 14,78 мин; ^-ЯМР (400 МГц, хлороформ-D)
5 8,64 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,15 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 7,82 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,89 (дд, J = 8,9, 2,4 Гц, Ш), 6,84 (д, J = 2,3 Гц, Ш), 4,04 (дд, J = 8,9, 3,9 Гц, Ш), 3,86 (дд, J = 8,8, 7,5 Гц, Ш), 3,73 (с, ЗН), 3,23 (тдд, J = 7,5, 5,5, 3,8 Гц, Ш), 3,16 (с, ЗН), 2,60 -2,43 (м, Ш), 2,21 -2,08 (м, 2Н), 2,01 - 1,81 (м, 2Н), 1,80 - 1,55 (м, 4Н).
Пример 23
(8)-8-(2-амино-3-циклопропилргороху)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
Упомянутое в заголовке соединение получали, как описано в примере 20, с получением (8)-8-(2-амино-3-циклопропилргороху)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (12,5 мг, 0,030 ммоль выход, 24% для конечной стадии) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 372,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H23CIN3O2 372,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ С): tR = 14,16 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ D): tR = 15,03 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-D) 5 8,66 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,17 (с, Ш), 7,74 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,81 (с, Ш), 4,22 (дд, J = 8,7, 3,9 Гц, Ш), 4,05 (дд, J = 8,5, 7,0
Гц, Ш), 3,73 (с, ЗН), 3,49 (qd, J = 6,8, 4,0 Гц, Ш), 3,20 - 3,12 (м, ЗН), 1,63 - 1,46 (м, 2Н), 0,89 - 0,75(м, Ш), 0,67 - 0,45 (м, 2Н), 0,25 - 0,18 (м, Ш), 0,17 - 0,10 (м, Ш),
Пример 24
(8)-8-(2-амино-3-циклобутилпропокси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
I 0
Упомянутое в заголовке соединение получали, как описано в примере 20, с получением (8)-8-(2-амино-3-циклобутилпропокси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (10,5 мг, 0,027 ммоль, выход 24% для конечной стадии) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 386,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H25CIN3O2 386,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ С): tR = 14,92 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ D): tR =15,61 мин; 1Я-ЯМР (400 МГц, хлороформ-D) 5 8,68 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,20 (с, Ш), 7,77 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,81 (с, Ш), 4,14 (дд, J = 8,7, 3,9 Гц, Ш), 4,01 - 3,91 (м, Ш), 3,75 (с, ЗН), 3,34 (д, J = 4,5 Гц, Ш), 3,17 (с, ЗН), 2,62 -2,44 (м, Ш), 2,22 -2,06 (м, 2Н), 2,01 - 1,82 (м, 2Н), 1,82 - 1,63 (м, 4Н).
Пример 25
(8)-8-(2-амино-3-циклопропилргороху)-4,6,9-триметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Часть А: (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-3-циклопропан-2-ил)карбамат Смесь (8)-трет-бутил-(1-циклопропил-3-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,229 ммоль), полученного, как описано в примере 21, часть А, в ацетонитриле (5 мл) нагревали до 90 °С в течение 1 ч, в результате получая однородный оранжевый раствор. Раствор обрабатывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток распределяли между солевым раствором и этилацетатом и слои разделяли. Водный слой экстрагировали дополнительно дважды этилацетатом и объединенные органические слои промывали один раз насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали до твердого вещества. Твердый продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле (1% аммиака в смеси метанол/дихлорметан) с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-3-циклопропан-2-ил)карбамата (53 мг, 0,103 ммоль, выход 45%) в виде бесцветного масла, которое затвердевало при стоянии. LC/MS (ESI): м/з 516,2, 518,2 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для C2sH3iBrN304 516,2].
Часть В: (8)-трет-бутил-(1-циклопропил-3-((4,6,9-триметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамат При температуре окружающей среды смесь (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-3-циклопропан-2-ил)карбамата (51 мг, 0,099 ммоль), триметилбороксина (0,015 мл, 0,109 ммоль), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 Adduct (8,06 мг, 9,88 мкмоль), карбоната цезия (64,4 мг, 0,198 ммоль), 1,4-диоксана (1 мл) и воды (0,33 мл) загружали в рассчитанный на высокое давление сосуд и продували потоком азота в течение 10 минут. Сосуд герметично закрывали и проводили перемешивание в атмосфере азота при 75 °С в течение 12 ч. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали под вакуумом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток распределяли между этилацетатом и насыщенным раствором соли. Слои разделяли и водный слой дважды
экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали до масла. Масло очищали с помощью хроматографии на силикагеле (1% 2М аммиака в смеси метанол/дихлорметан) с
получением
(8)-трет-бутил-( 1 -циклопропил-3 -((4,6,9-триметил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (41 мг, 0,091 ммоль, выход 92%) в виде бесцветного масла. LC/MS (ESI): м/з 452,3 [(М+Н)+, вычислено для C26H34N3O4 452,3]; Ш-ЯМР (400 МГц, хлороформ-D) 5 8,59 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,90 (с, Ш), 7,78 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,74 (с, Ш), 4,91 (д, J = 7,3 Гц, Ш), 4,35 - 4,04 (м, ЗН), 3,71 (с, ЗН), 3,14 (с, ЗН), 2,31 (с, ЗН), 1,72 - 1,59 (м, 2Н), 1,48 (с, 9Н), 0,86 - 0,70 (м, Ш), 0,60 -0,44 (м, 2Н), 0,21 - 0,00 (м, 2Н).
Часть С: (8)-8-(2-амино-3-циклопропилргороху)-4,6,9-триметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
При температуре окружающей среды раствор (8)-трет-бутил-(1-циклопропил-3-((4,6,9-триметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (41 мг, 0,091 ммоль) в метаноле (0,5 мл) обрабатывали НС1 (4MB 1,4-диоксане) (0,454 мл, 1,816 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении до желтого твердого вещества. Неочищенный продукт очищали с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (Phenomenex Luna С18 30x100 мм 10 микрон; градиентное элюирование вода/метанол/TFA). Фракции, содержащие продукт, нейтрализовали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток распределяли между водой и этилацетатом и слои разделяли. Водный слой дважды экстрагировали этилацетатом и объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением (8)-8-(2-амино-3-циклопропилргороху)-4,6,9-триметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (10,7 мг, 0,028 ммоль, выход 93%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 352,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H26N3O2 352,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ С): tR = 13,71 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ D): tR = 14,29 мин; ^-ЯМР (400 МГц, хлороформ-D) 5 8,63 (д, J =
5,5 Гц, Ш), 7,98 (с, Ш), 7,84 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,74 (с, Ш), 4,15 (дд, J = 8,8, 4,0 Гц, Ш), 4,00 (дд, J = 8,7, 6,9 Гц, Ш), 3,76 (с, ЗН), 3,50 - 3,37 (м, Ш), 3,17 (с, ЗН), 2,37 (с, ЗН), 1,61 - 1,44 (м, 2Н), 1,02 - 0,74 (м, Ш), 0,68 - 0,45 (м, 2Н), 0,30 - 0,06 (м, 2Н).
Пример 26
(8)-8-(2-амино-3-циклобутилпропокси)-4,6,9-триметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Упомянутое в заголовке соединение получали, как описано в примере 25, исходя из (S)-трет-бутил-( 1 -циклобутил-3 -((4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7 ]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата, полученного, как описано в примере 22, часть А, с получением (8)-8-(2-амино-3-циклобутилпропокси)-4,6,9-триметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (18 мг, 0,046 ммоль, выход 26% для конечной стадии) в виде мутной пленки. LC/MS (ESI): м/з 366,3 [(М+Н)+, вычислено для C22H28N3O2 366,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ С): tR = 14,65 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ D): tR = 15,04 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, хлороформ-D) 5 8,62 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,95 (с, Ш), 7,82 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,69 (с, Ш), 4,05 (дд, J = 8,8, 4,0 Гц, Ш), 3,88 (дд, J = 8,5, 7,3 Гц, Ш), 3,74 (с, ЗН), 3,34 - 3,20 (м, Ш), 3,16 (с, ЗН), 2,63 -2,46 (м, Ш), 2,36 (с, ЗН), 2,23 -2,08 (м, 2Н), 2,01 - 1,59 (м, 6Н).
Пример 27
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметил)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: 8-хлор-9-иод-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1 г, 3,87 ммоль), полученного, как описано в примере 16, часть G, в уксусной кислоте (30 мл) добавляли H2SO4 (0,021 мл, 0,387 ммоль) и йодную кислоту (0,881 г, 3,87 ммоль). Раствор нагревали при 80 °С в течение 20 мин, затем добавляли иод (0,294 г, 1,160 ммоль). Смесь перемешивали в течение еще 3 ч при 80 °С. Раствор охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали при пониженном давлении. EtOAc, добавляли к остатку, и слой промывали насыщенным водным раствором NaHC03, затем Н2О. Объединенные органические слои сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-9-иод-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1,2 г, 3,12 ммоль, 81%-ный выход неочищенного продукта) в виде не совсем белого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (EST) м/е 385,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H11CIIN2O, 385,0]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,09 мин.
Часть В: 8-хлор-4,6-диметил-9-винилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Раствор 8-хлор-9-иод-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1,2 г, 2,71 ммоль), пиридинового комплекса 2,4,6-тривинилциклотрибороксана (,784 г, 3,26 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия (0,157 г, 0,136 ммоль) и ШгСОз (0,575 г, 5,43 ммоль) в толуоле (30 мл) и воде (0,5 мл) продували азотом и нагревали при 90 °С в течение 16 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Этилацетатный слой промывали насыщенным солевым раствором и водой. Объединенные органические слои сушили над Na2S04, фильтровали
и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием смеси этилацетата и гексана в качестве элюента с получением 8-хлор-4,6-диметил-9-винилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,6 г, 1,43 ммоль, выход 68%)) в виде коричневого клейкого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 285,0 [(М+Н)+, вычислено для Ci6Hi4ClN20, 285,1]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 2,25 мин.
Часть С: 8-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-
карбальдегид
К раствору 8-хлор-4,6-диметил-9-винилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (600 мг, 2,107 ммоль), осмия (2,5% в 2-метил-2-пропаноле) (0,794 мл, 0,063 ммоль) и 2,6-диметилпиридина (0,491 мл, 4,21 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) и воде (30 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли периодат натрия (1803 мг, 8,43 ммоль). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч. Смесь разбавляли этилацетатом и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Органический слой концентрировали при пониженном давлении с получением твердого вещества коричневого цвета. Твердое вещество промывали гексаном (3x20 мл) и сушили в вакууме с получением 8-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбальдегида (0,6 г, 2,107 ммоль, выход 84%) в виде клейкого коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 287,0 [(М+Н)+, вычислено для C15H12CIN2O2, 287,1]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 2,03 мин.
Часть D: 8-хлор-9-(дифторметил)-4,6-диметилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 8-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбальдегида (600 мг, 1,779 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли трифторид бис-(2-метоксиэтил)аминосеры (Deoxo-Fluor) (1,968 г, 8,89 ммоль). Смесь затем нагревали при
40 °С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли DCM и DCM-слой промывали насыщенным водным раствором NaHCCb, затем ШО, сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием смеси этилацетата и гексана в качестве элюента, с получением 8-хлор-9-(дифторметил)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,7 г, 1,519 ммоль, выход 84%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 309,0 [(М+Н)+, вычислено для
C15H12CIF2N2O, 309,1]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 2,38 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-с14) 5 част./млн 8,68 - 8,74 (м, 2Н), 8,32 (д, Ш), 7,78 (с, Ш), 7,00 - 7,33 (м, 1Н),3,79 (с, ЗН),3,13(с, ЗН).
Часть Е: (8)-трет-бутил-(1-((9-(дифторметил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Раствор 8-хлор-9-(дифторметил)-4,6-диметилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (700 мг, 1,519 ммоль), (8)-трет-бутил-( 1-гидрокси-4-метилпентан-2-ил)карбамата (660 мг, 3,04 ммоль), 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-три-изо-пропил-1,Г-дифенила (387 мг, 0,912 ммоль), РсЮАсг (34,1 мг, 0,152 ммоль) и Cs2C03 (990 мг, 3,04 ммоль) в толуоле (20 мл) нагревали при 80 °С в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Органический слой промывали насыщенным раствором соли и водой; сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием смеси этилацетата и гексана в качестве элюента с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-(дифторметил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,6 г, 0,58 ммоль, выход 54%) в виде коричневого смолистого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 490,2 [(М+Н)+, вычислено для C26H34F2N3O4, 490,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 2,72 мин.
CHF2 NH2 1
Часть F: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметил)-4,6-
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((9-(дифторметил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (500 мг, 0,480 ммоль) в МеОН (10 мл) при 0 °С добавляли 4N НС1 в 1,4-диоксане (20 мл, 80 ммоль). Раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Затем смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в EtOAc и этилацетатный слой промывали насыщенным водным раствором NaHC03, затем ШО, сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной. ВЭЖХ с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметил)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (60 мг, 0,149 ммоль, выход 31%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 390,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H26F2N3O2, 390,2]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 2,09 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 10,1 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,18 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,73 (с, Ш), 8,66 (с, 2Н), 7,07 - 7,41 (м, 2Н), 4,66 - 4,53 (м, Ш), 4,52 - 4,49 (м, Ш), 3,78 -3,89 (м, 4Н), 3,22 (с, ЗН), 1,74 - 1,88 (м, 2Н), 1,63 - 1,71 (м, Ш), 1,04 (м, 6Н).
Пример 28
трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)пентан-2-ил)карбамат
Часть А. трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат 8-Хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (0,15 г, 0,613 ммоль), полученный, как описано в примере 2, часть С, и трет-бутил-(1-гидрокси-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат (0,284 г, 1,226 ммоль) подвергали синтезу эфира, как описано в примере 2, часть D, с получением трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (0,3 г, выход 28%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 440,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O4 440,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,67 мин.
Часть В. 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат далее брали для удаления защитной группы Вое, как описано в примере 2, часть Е, с получением 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (30 мг, выход 12%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 340,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O2, 340,2]; LC/MS время удерживания (способ G): tR = 1,88 мин. Ш-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 9,43 (с, Ш), 8,73 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,35 (д, J = 8,5 Гц, Ш), 8,19 (д, J = 6,0Гц, Ш), 7,12 -7,01 (м, 2Н), 4,05 - 3,92 (м, 2Н), 3,77 (с, ЗН), 1,95 - 1,80 (м, Ш), 1,58 (qd, J= 14,2, 5,5 Гц, 2Н), 1,30 (с, ЗН), 1,04 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,5 Гц, ЗН). Хиральная ВЭЖХ (способ CHIRALPAK AD-H (250x4,6) мм, 5 микрон, Подвижн. Фаза СОг (65%), сорастворитель 0,3% DEA в МеОН (35%), обратное давление 101), хиральная SFC время удерживания tR = 5,44 мин; хиральная SFC время удерживания tR = 7,77 мин.
Пример 29
8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. Метил-4-хлор-2-метилникотинат К раствору метил-2,4-дихлорникотината (10,0 г, 48,5 ммоль) в смеси растворителей, состоящей из 1,4-диоксана (400 мл) и воды (40 мл), добавляли триметилбороксин (6,79 мл, 48,5 ммоль) с последующим добавлением аддукта PdCl2(dppl)-CH2Cl2 (1,982 г, 2,427 ммоль) и карбоната цезия (31,6 г, 97 ммоль). Реакционную смесь дегазировали аргоном в течение 5 минут. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 8 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Слой промывали этилацетатом и объединенный фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью хроматографии на колонке с силикагелем (градиент этилацетата и петролейного эфира) с получением метил-4-хлор-2-метилникотината (5,20 г, 28 ммоль, 58% выход) в виде желтой жидкости. LC/MS (ESI) м/е 185,7 [(М+Н)+, вычислено для CsHsClN02l85,6]; LC/MS время удерживания (способ G): tR = 1,90 мин.
Часть В. Метил-4-иод-2-метилникотинат К раствору метил-4-хлор-2-метилникотината (6,00 г, 32,3 ммоль) в ацетонитриле (80 мл) добавляли ацетилхлорид (3,45 мл, 48,5 ммоль) с последующим добавлением иодида натрия (48,5 г, 323 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80 °С в течение 16 ч. Реакционную смесь упаривали досуха и остаток доводили до рН 6 добавлением насыщенного раствора карбоната калия. Продукт экстрагировали дихлорметаном (250 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (2x100 мл),
сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением метил-4-иод-2-метилникотината (2,00 г, 7,22 ммоль, 22%-ный выход неочищенного продукта) в виде бесцветного полутвердого вещества, которое использовали без дополнительных очисток. LC/MS (EST) м/е 278,0 [(М+Н)+, вычислено для C8H9IN02 278,0]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,13 мин.
Часть С. Метил-4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-2-метилникотинат В микроволновом сосуде метил-4-иод-2-метилникотинат (1,00 г, 3,61 ммоль) растворяли в смеси 1,4-диоксана (18 мл) и воды (2 мл) в инертной атмосфере. (4-бром-2,3-дифторфенил)бороновую кислоту (1,03 г, 4,33 ммоль) и Na2C03 (765 мг, 7,22 ммоль) добавляли к реакционной смеси и дегазировали в течение 5 минут. Рс1(РпзР)4 (83 мг, 0,072 ммоль) добавляли к реакционной смеси, и нагревали в микроволновой печи при 110 °С в течение 90 мин. Реакционную смесь разбавляли водой (150 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (2x100 мл), сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (градиент этилацетата и петролейного эфира) с получением метил-4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-2-метилникотината (540 мг, 1,58 ммоль, выход 44%) в виде желтой жидкости. LC/MS (ESI) м/е 344,0 [(М+2Н)+, вычислено для Ci4Hi2BrF2N02 344,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,48 мин.
Часть D. 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-2-метилникотиновая кислота К раствору метил-4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-2-метилникотината (800 мг, 2,34 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли NaOH (935 мг, 23,38 ммоль) в воде (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении и полученный остаток доводили до рН ~ 3 добавлением 1,5 н раствора НС1. Продукт экстрагировали дихлорметаном и слои
125
разделяли. Органическую фазу сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-2-метилникотиновой кислоты (700 мг, 2,133 ммоль, выход неочищенного продукта 91%) в виде не совсем белого твердого вещества, которое брали без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 330,0 [(М+2Н)+, вычислено для Ci3HioBrF2N02 330,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,34 мин.
Часть Е. 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-ГЧ,2-диметилникотинамид К раствору 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-2-метилникотиновой кислоты (700 мг, 2,13 ммоль) в дихлорметане (20 мл) при 0 °С добавляли по каплям оксалилхлорид (0,56 мл, 6,40 ммоль) с последующим добавлением DMF (0,03 мл, 0,43 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 45 °С в течение 4 часов. Реакционную смесь упаривали досуха. Остаток растворяли в дихлорметане (50 мл) при 0 °С и добавляли к нему гидрохлорид метиламина (1,56 г, 23,08 ммоль), а затем триэтиламин (4,83 мл, 34,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали дихлорметаном (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-ГЧ,2-диметилникотинамида (600 мг, 1,76 ммоль, 76%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтого полутвердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 343,0 [(М+2Н)+, вычислено для СмШзВгЕгКгО 343,0]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,61 мин.
Часть F. 8-бром-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-ГЧ,2-диметилникотинамида (600 мг, 1,76 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) при 0 °С добавляли NaH (176 мг, 4,40 ммоль) и реакционную смесь постепенно доводили до комнатной температуры. Реакционную смесь
перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-бром-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (400 мг, 1,24 ммоль, выход 71%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 322,8 [(М+2Н)+, вычислено для Ci4Hi2BrFN20 322,9]; LC/MS время удерживания (способ G): tR = 2,21 мин.
Часть G. трет-бутил-(1-((7-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат
К раствору 8-бром-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (350 мг, 1,090
ммоль) и трет-бутил-(1-гидрокси-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамата (504 мг, 2,180
ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли карбонат цезия (355 мг, 1,09 ммоль) и 2-ди-трет-
бутилфосфино-2',4',6'-три-изо-пропил-1,Г-бифенил (28 мг, 0,065 ммоль). Реакционную
смесь дегазировали аргоном в течение 5 мин и затем добавляли к нему ацетат палладия
(7,34 мг, 0,033 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100 °С в течение 18 часов. Затем
смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и фильтрат выпаривали с
получением трет-бутил-( 1 -((7-фтор-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамата, который брали на следующей стадии без очистки. LC/MS (ESI) м/е 472,2 [(М+Н)+, вычислено для C26H35FN3O4 472,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,17 мин.
Часть Н. 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-7-фтор-4,6-
диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он
К раствору трет-бутил-(1-((7-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамата (200 мг,
0,424 ммоль) в МеОН (6 мл) при 0 °С добавляли 4М НС1 в 1,4-диоксане (3 мл, 99,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 2 часов. Через 2 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, получая 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (10 мг, 0,024 ммоль, 6%-ный выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 372,0 [(М+Н)+, вычислено для C21H27FN3O2 372,2]; LC/MS время удерживания (способ G): tR = 1,99 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,37 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,72 мин. ^-ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 част./млн 8,58 (д, J = 6 Гц, Ш), 8,22 (дд, J = 9,2 Гц, J = 2 Гц, Ш), 8,14 (д, J = 6 Гц, Ш), 7,23 (м, Ш), 4,31 (д, J = 10 Гц, Ш), 4,23 (д, J = 10,4 Гц, Ш), 3,88 (д, J = 9,2 Гц, ЗН), 3,06 (с, ЗН), 1,90 (м, 2Н), 1,73 (м, Ш), 1,52 (с, ЗН), 1,05 (м, 6Н).
Пример 30 & Пример 31 8-(((8)-2-амино-4-метилфенил)окси)-9-(1-гидроксиэтил)-4,6 диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (Б)-трет-бутил-( 1 -((4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтирид ин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат, полученный, как описано в примере 16, часть Н, подвергали бромированию, следуя условиям, упомянутым в примере 3, часть А, с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (1,6 г, 2,62
ммоль, выход 77%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 518,2 [(М)+, вычислено для СНззВг1Чз04 518,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,46 мин.
Часть В. (8)-трет-бутил-( 1 -((9-( 1 -этоксивинил)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (500 мг, 0,964 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) добавляли трибутил(1-этоксивинил)станнан (697 мг, 1,929 ммоль), трис(дибензилиденацетон)-дипалладий (0) (88 мг, 0,096 ммоль) и DPPF (53,5 мг, 0,096 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при температуре 100 °С в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали, что давало (8)-трет-бутил-(1-((9-(1-этоксивинил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (0,3 г, 0,33 ммоль, выход неочищенного продукта 34%) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 510,2 [(М+Н)+, вычислено для C29H40N3O5,510,3]; LC/MS время удерживания (Способ = С): tR = 2,60 мин.
Часть С. (8)-9-ацетил-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8)-трет-бутил-( 1 -((9-( 1 -этоксивинил)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (200 мг, 0,392 ммоль) обрабатывали соляной кислотой в 1,4-диоксане (981 мкл, 3,92 ммоль) при
О °С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч, а затем выпаривали досуха. Неочищенный продукт нейтрализовали 10%-ным водным раствором NaHCCb и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над Na2S04 и концентрировали с получением (8)-9-ацетил-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,11 г, 0,164 ммоль, выход 42%) в виде коричневого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 382,2 [(М+Н)+, вычислено для C22H28N3O3,382,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,78 мин.
Часть D. 8-(((8)-2-амино-4-метилфенил)окси)-9-(1-гидроксиэтил)-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он раствору (8)-9-ацетил-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (100 мг, 0,257 ммоль) в этаноле (2 мл) добавляли NaBH4 (97 мг, 2,57 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем ее гасили NH4CI, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над Na2S04 и концентрировали. Неочищенную реакционную смесь очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, которая давала 8-(((8)-2-амино-4-метилфенил)окси)-9-(1-гидроксиэтил)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (0,03 г, выход 27%) в виде бледно-желтого полутвердого продукта. LC/MS (EST) м/е 384,1 [(М+Н)+, вычислено для C22H30N3O3,384,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,73 мин. Было выполнено 96533-072-хиральное разделение, что давало два диастереомера в виде не совсем белого твердого вещества. Диастереомер-1 элюировали при времени удерживания (ВЭЖХ Колонка: (250X3 0X5 ц) М.Фаза А: 0,2% DEA Гексан; М. фаза В: Этанол): tR = 21,9 мин.
96533-072-11 - ЧТЯМР (400 МГц, метанол-сЦ): част./млн 1,01 - 1,07 (м, 6Н), 1,55 (д, J = 6,46 Гц, 4Н), 1,58 - 1,68 (м, Ш), 1,83 - 1,92 (м, Ш), 3,09 (с, ЗН), 3,35 (д, J = 1,69 Гц, Ш), 3,80 (с, ЗН), 4,13 - 4,19 (м, Ш), 4,28 - 4,34 (м, Ш), 5,32 (д, J = 6,46 Гц, Ш), 7,04 (с, Ш), 8,16 (д, J = 5,84 Гц, Ш), 8,47 (с, Ш), 8,58 (д, J = 5,77 Гц, Ш),
Диастереомер-2 элюировали при времени удерживания (ВЭЖХ Колонка: (250Х30Х5д) М.Фаза А: 0,2% DEA Гексан; М. фаза В: Этанол) tR = 24,9 мин.
96533-072-12 - ЧТЯМР (400 МГц, метанол-сЦ): част./млн 1,03 (т, J = 6,84 Гц, 6Н), 1,43 -1,58 (м, 5Н), 1,88 (дт, J = 13,73, 6,97 Гц, Ш), 3,09 (с, ЗН), 3,35 (д, J = 1,69 Гц, Ш), 3,80 (с, ЗН), 4,03 - 4,13 (м, Ш), 4,21 - 4,29 (м, Ш), 5,31 (д, J = 6,40 Гц, Ш), 7,03 (с, Ш), 8,15 (д, J = 5,84 Гц, Ш), 8,47 (с, Ш), 8,57 (д, J = 5,77 Гц, Ш).
Пример 32
8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с] [2,7]нафтиридин
-5(6Н)-он
Часть А. трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат 8-Хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (0,15 г, 0,580 ммоль), полученный, как описано в примере 16, часть G, и трет-бутил-(1-гидрокси-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат (0,161 г, 0,696 ммоль) подвергали сочетанию Бухвальда, как описано в примере 16, часть Н, с получением трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамата (0,22 г, 0,199 ммоль, 34% выход неочищенного продукта). Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 454,1 [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O4,454,3]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,93 мин.
Часть В. 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтири-
дин-5(6Н)-он
Трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат (0,22 г, 0,199 ммоль) подвергали реакции удаления защитной Вос-группы по методике, описанной в примере 2, часть Е, чтобы дать 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8 мг, 0,022 ммоль, 11% выход) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 354,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O2, 354,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,57 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,67 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,46 мин. *Н ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,54 (с, Ш), 8,34-8,36 ; (шир.с, Ш), 8,10 (шир.с, Ш), 7,06 (с, Ш), 4,11-4,17 (м, 2Н ), 3,73 (с, ЗН), 3,06 (с, ЗН), 1,70 - 1,98 (м, 2Н), 1,68 (с, Ш), 1,45 (с, ЗН), 1,02 - 1,08 (м, 6Н).
Пример 33
8-(((2S, 38)-3-амино-5-метилгексан-2-ил)окси)-4,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-(4-метил-1-охопентан-2-ил)карбамат К раствору (8)-трет-бутил-(1-гидрокси-4-метилпентан-2-ил)карбамата (2 г, 9,20 ммоль) в DCM (30 мл) добавляли периодинан Десс-Мартина (5,86 г, 13,81 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь гасили раствором NaHCCb, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над Na2S04 и концентрировали с получением (8)-трет-бутил-(4-метил-1-охопентан-2-ил)карбамата в виде бесцветного масла (1,4 г, 6,50 ммоль, выход неочищенного продукта 71%). Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ^-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 5 0,8-0,96 (м, 6Н), 1,31-1,49 (м, ПН), 1,57-1,66 (м, Ш), 3,81-3,89 (м, Ш). 7,27 (д, Ш), 9,43 (с, Ш).
Часть В. трет-бутил-((38)-2-гидрокси-5-метилгексан-3-ил)карбамат
(8)-трет-бутил-(4-метил-1-охопентан-2-ил)карбамат (1,3 г, 6,04 ммоль) в диэтиловом эфире (50 мл) охлаждали до -78 °С и обрабатывали бромидом метилмагния (1,4 М в диэтиловом эфире) (8,63 мл, 12,08 ммоль). Суспензию перемешивали при 0 °С в течение 1 ч, а затем перемешивали в течение еще одного часа при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили NH4CI. Реакционную смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (3 х 100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над MgS04 и концентрировали с получением продукта, трет-бутил-((38)-2-гидрокси-5-метилгексан-3-ил)карбамата (1 г, 4,32 ммоль, выход неочищенного продукта 72%) в виде бесцветного масла. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ^-ЯМР (300 МГц, DMSO-d6): 8 0,78-
0,93 (м, 6Н), 0,98 (д, ЗН), 1,11-1,41 (м, 2Н), 1,42 (с, 9Н), 1,45-1,64 (м, Ш), 3,30-3,63 (м, 2Н), 4,37 (д, Ш), 6,19 (д, Ш).
Часть С. трет-бутил-((38)-2-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-
8-ил)окси)-5-метилгексан-3-ил)карбамат Смесь 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,05 г, 0,193 моль), трет-бутил-((38)-2-гидрокси-5-метилгексан-3-ил)карбамата (0,067 г, 0,290 ммоль), CS2CO3 (0,315 г, 0,966 моль), 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-три-изо-пропил-1,Г-бифенила (8,21 мг, 0,019 моль) и Pd(OAc)2 (2,60 мг, 0,012 моль) помещали в толуол (2 мл) и нагревали в течение ночи при 90 °С. После охлаждения реакционную смесь концентрировали, а затем разбавляли этилацетатом и водой. Этилацетатный слой собирали, сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали с получением трет-бутил-((38)-2-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5-метилгексан-3-ил)карбамата, (70 мг, 0,154 ммоль, 80%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого твердого вещества. Неочищенный продукт использовали
NH2 1
Часть D. 8-(((38)-3-амино-5-метилгексан-2-ил)окси)-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он Трет-бутил-((38)-2-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5-метилгексан-3-ил)карбамат (0,16 г, 0,353 ммоль) подвергали реакции удаления защитной Вос-группы (согласно методике, описанной в примере 2, часть Е), которая давала диастереомерную смесь 8-(((38)-3-амино-5-метилгексан-2-ил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (17 мг, 0,017 ммоль, выход 5%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 354,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O2, 354,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,56 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,40 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,36 мин. *Н ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8,57 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,41 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 8,15 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,15 - 7,06 (м, 2Н), 4,68 (quin, J = 5,9 Гц, Ш), 3,76 (с, 4Н), 3,09 (с, ЗН), 1,88 - 1,50 (м, ЗН), 1,44 (с, ЗН), 1,03 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,98 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 34
8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. 9-бром-8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,2 г, 0,773 ммоль) в ацетонитриле (4 мл) при -30 °С добавляли трифторуксусную кислоту (0,089 мл, 1,160 ммоль) и 1-бромопирролидин-2,5-дион (0,151 г, 0,850 ммоль). Смесь нагревали до 80 °С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли этилацетатом и избытком 10%-ного водного раствора NaHCCb. Этилацетатный слой концентрировали. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, получая 9-бром-8-хлор-4,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (120 мг, 0,351 ммоль, выход 45%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 337,0 [(М+Н)+, вычислено для Ci4HiiBrClN20, 337,0]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 2,55 мин; *Н ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) част./млн 3,11 (с, ЗН), 3,75 (с, ЗН), 7,81 (с, Ш), 8,20-8,26 (м, Ш), 8,68 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,79 (с, Ш).
Часть В. 8-хлор-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Смесь 9-бром-8-хлор-4,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,05 г, 0,148 ммоль), иодида меди(1) (0,031 г, 0,163 ммоль), L-пролина (0,020 г, 0,178 ммоль), метоксида натрия (0,040 г, 0,741 ммоль) и К2СО3 (0,041 г, 0,296 ммоль) перемешивали в диметилсульфоксиде (1,5 мл). Смесь нагревали до 80 °С в течение 16 часов. После охлаждения неочищенную реакционную смесь разбавляли метанолом, фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она, в виде коричневого твердого вещества (40 мг). LC/MS (ESI) м/е 289,0 [(М)+, вычислено для C15H14CIN2O2, 289,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,89 мин.
Часть С. трет-бутил-(1-((9-метокси-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат 8-Хлор-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (0,04 г, 0,139 ммоль) подвергали реакции сочетания Бухвальда (пример 16, часть Н) с трет-бутил-(1-гидрокси-2,4-диметилпентан-2-ил)карбаматом (0,048 г, 0,208 ммоль), что давало трет-бутил-(1-((9-метокси-4,6-диметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат в виде белого твердого вещества (15 мг, 0,029 ммоль, выход 21%). LC/MC (ESI): м/е 484,2 [(М+Н)+, вычислено для C27H38N3O5, 484,3]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 2,42 мин.
ОМе 7 NH2I Часть D. 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-9-метокси-4,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Трет-бутил-(1-((9-метокси-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат (0,015 г, 0,031 ммоль) подвергали реакции удаления защитной Вос-группы, как описано в примере 2, часть Е, с получением 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-9-метокси-4,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (8 мг, 0,02 ммоль, выход 63%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 384,2 [(М+Н)+, вычислено для C22H30N3O3, 384,5]; LC/MS время удерживания (способ С), tR = 6,57 мин. *Н ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8,63 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,51 (шир.с, Ш), 8,02 (с, Ш), 7,23 (с, Ш), 4,39 (д, J = 10,5 Гц, Ш), 4,32 - 4,24 (м, Ш), 4,10 (с, ЗН), 3,83 (с, ЗН), 3,19 (с, ЗН), 1,99 - 1,86 (м, 2Н), 1,73 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 1,55 (с, ЗН), 1,09 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,05 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 35
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(2-гидроксипропан-2-ил)-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он
Часть А. (8)-2-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-
4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3 -д ион 8-Хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (1,4 г, 5,41 ммоль) и (S)-2-(l-гидрокси-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-дион (4,01 г, 16,23 ммоль) подвергали реакции сочетания Бухвальда, как описано в примере 16, часть Н), с получением (S)-2-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона в виде желтого твердого вещества (1,4 г, 2,62 ммоль, выход 49%). LC/MS (ESI) м/е 470,2 [(М+Н)+, вычислено для CISHISNSCM 470,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,05 мин.
Часть В. (8)-2-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3 -дион
К раствору (8)-2-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (1 г, 1,917 ммоль) в ацетонитриле
(20 мл) добавляли NBS (0,341 г, 1,917 ммоль), и раствор нагревали до 80 °С в течение
ночи с получением (8)-2-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (1,2 г, 1,69 ммоль, 88%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 548,0 [(М+Н)+, вычислено для CisFbBrNsCU 548,1; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,76 мин.
Часть С. (8)-2-(1-((9-(1-этоксивинил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-дион Раствор (8)-2-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (100 мг, 0,182 ммоль), трибутил(1-этоксивинил)станнана (132 мг, 0,365 ммоль), DPPF (20,22 мг, 0,036 ммоль) и РсЬ(с1Ьа)з (16,70 мг, 0,018 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) продували азотом в течение 5 мин, затем нагревали при 100 °С в течение ночи. После охлаждения до температуры окружающей среды летучие вещества концентрировали при пониженном давлении. Остаток помещали в этилацетат и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Органический фильтрат промывали ШО, затем насыщенным солевым раствором, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-2-(1-((9-(1-этоксивинил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (0,15 г, 0,131 ммоль, 72%-ный выход неочищенного продукта) в виде черного клейкого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую
Часть D. (8)-2-(1-((9-ацетил-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3 -дион (8)-2-(1-((9-(1-этоксивинил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-дион (150 мг, 0,278 ммоль), подвергали кислотному гидролизу с получением (8)-2-(1-((9-ацетил-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (0,1 г, 0,14 ммоль, выход 51%) в виде коричневого твердого вещества. Неочищенный материал переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 512,1 [(М+Н)+, вычислено для C30H30N3O5 512,2; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,89 мин.
Часть Е. (8)-2-(1-((9-(2-гидроксипропан-2-ил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-дион
К раствору (8)-2-(1-((9-ацетил-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-
8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (220 мг, 0,430 ммоль) в THF (6 мл)
добавляли метилмагнийбромид (1,4 М в диэтиловом эфире) (0,922 мл, 1,290 ммоль) при
-10 °С и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь
осторожно гасили водой и разбавляли с EtOAc. Органический слой отделяли, сушили
над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали
139
с помощью хроматографии на силикагеле с получением (8)-2-(1-((9-(2-гидроксипропан-2-ил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (0,2 г, 0,152 ммоль, выход 35%) в виде коричневого смолистого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 528,2 [(М+Н)+, вычислено для C31H34N3O5 528,2; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,89 мин.
Часть F (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(2-гидроксипропан-2-ил)-4,6-
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6//)-он
К раствору (8)-2-(1-((9-(2-гидроксипропан-2-ил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (200 мг, 0,152 ммоль) в этаноле (5 мл) добавляли гидразин (4,76 мкл, 0,152 ммоль) при комнатной температуре, затем смесь нагревали до 60 °С в течение 4 часов. Реакционную смесь фильтровали, концентрировали и очищали с помощью препаративной. ВЭЖХ с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(2-гидроксипропан-2-ил)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6//)-она в виде белого твердого вещества (9 мг, 0,021 ммоль, выход 14%). LC/MS (ESI) м/е 398,0 [(М+Н)+, вычислено для C23H32N3O3 398,2]; LC/MS время удерживания (способ G): tR = 1,99 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,63 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,79 мин. *НЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) част./млн 0,94 - 1,10 (м, 6Н), 1,25 - 1,37 (м, Ш), 1,49 - 1,78 (м, 7Н), 1,82 - 1,93 (м, Ш), 2,96 - 3,19 (м, 2Н), 3,56 - 3,65 (м, Ш), 3,80 (с, ЗН), 4,16 - 4,29 (м, Ш), 4,34 - 4,49 (м, Ш), 7,01 - 7,15 (м, Ш), 8,10 - 8,22 (м, Ш), 8,51 - 8,64 (м, 2Н).
Пример 36
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-этил-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А: (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-9-винил-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (300 мг, 0,579 ммоль), полученного, как описано в примере 3, часть А, в смеси растворителей толуола (10 мл), воды (0,5 мл) и этанола (2 мл) добавляли карбонат натрия (184 мг, 1,736 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий (33,4 мг, 0,029 ммоль) и 2,4,6-тривинил-1,3,5,2,4,6-триоксатриборинан с пиридином (1:1) (167 мг, 0,694 ммоль). Реакционную смесь дегазировали в течение 30 мин. Затем реакционную смесь оставляли перемешиваться при 90 °С в течение 16 ч. с элюированием EtOAc. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в EtOAc и воде. Раствор экстрагировали этилацетатом (2 х 15 мл). Объединенные органические слои промывали водой (10 мл), насыщенным раствором соли (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (60% этилацетат в гексане) с получением (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-9-винил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (300 мг, 0,110 ммоль, выход 19%) в виде бледно-желтого полутвердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 466,5 [(М+Н)+, вычислено для C27H36N3O4 466,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,18 мин.
Часть В: (8)-трет-бутил-(1-((9-этил-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Раствор (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-9-винил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (50 мг, 0,107 ммоль) в МеОН (3 мл) дегазировали азотом в течение 5 мин, затем добавляли палладий на угле (1,143 мг, 10,74 мкмоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться под баллоном газообразного водорода в течение 16 часов. Реакционную смесь затем фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (2% МеОН в хлористом метилене) с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-этил-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (31 мг, 0,058 ммоль, выход 54%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 468,5 [(М+Н)+, вычислено для C27H38N3O4 468,3]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,31 мин.
Часть С: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-этил-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке соединения (4 мг, 10,62 мкмолей, выход 33%) в виде бледно-желтой смолы. LC/MS, (ESI): м/з 368,4 [(М+Н)+, вычислено для C22H30N3O2 368,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 2,18 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,87 мин; время удерживания ВЭЖХ (способ В): tR = 9,53 мин. *НЯМР (400 МГц, МеОН-сЦ) 5 част./млн 8,51 (д, J = 5,60 Гц, Ш), 8,17 (с, Ш), 8,13 (д, J = 5,60 Гц, Ш), 6,97 (с, Ш), 4,17-4,20 (м,
Ш) 4,04 - 4,04 (м, Ш) 3,76 (с, ЗН), 3,31 - 3,38 (м, Ш) 3,06 (с, ЗН), 2,80 -2,82 (м, 2Н), 1,811,89 (м, Ш), 1,53-1,58 (м, Ш), 1,45-1,50 (м, Ш), 1,27 -1,31 (м, ЗН), 0,98-1,02 (м, 6Н).
Пример 37 (Энантиомер 1) и пример 38 (Энантиомер 2) (К)-8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он и (8)-8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтири-
дин-5(6Н)-он
Разделение 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-4,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она, полученного в примере 32, проводили хиральной ВЭЖХ (способ: Сорастворитель: 0,3% DEA в метаноле, Колонка: Chiralpak AD Н (250 х 21 мм) 5 мкм), давая в результате два энантиомера. Абсолютная стереохимия каждого энантиомера не была определена.
Энантиомер-1: LC/MS (ESI) м/е 354,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O2, 354,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,57 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,67 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,46 мин. *НЯМР (400 МГц, МеОН-сЦ) 5 част./млн 8,54 (с, Ш), 8,34-8,36 ; (шир.с, Ш), 8,10 (шир.с, Ш), 7,06 (с, Ш), 4,11-4,17 (м, 2Н ), 3,73 (с, ЗН), 3,06 (с, ЗН), 1,70 - 1,98 (м, 2Н), 1,68 (шир. с, Ш), 1,45 (с, ЗН), 1,02 - 1,08 (м, 6Н); Хиральная ВЭЖХ время удерживания, tR = 9,36 мин. Энантиомер-2: LC/MS (ESI) м/е 354,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O2, 354,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,57 мин. ВЭЖХ (способ В) время удерживания (способ A): tR = 8,67 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,46 мин. *НЯМР (400 МГц, МеОН-сЦ) 5 част./млн 8,54 (с, Ш), 8,34-8,36 ; (шир.с, Ш), 8,10 (шир.с, Ш), 7,06 (с, Ш), 4,11-4,17 (м, 2Н ), 3,73 (с, ЗН), 3,06 (с, ЗН), 1,70 - 1,98 (м, 2Н), 1,68 (шир. с, Ш), 1,45 (с, ЗН), 1,02 - 1,08 (м, 6Н); Хиральная ВЭЖХ (способ В) время удерживания: tR = 10,68 мин.
Пример 39
(8)-8-((2-(диметиламино)-4-метилфепентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он 143
К перемешиваемому раствору (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,06 г, 0,184 ммоль) (синтез, описанный в примере 2, часть Е) в муравьиной кислоте (0,035 мл, 0,922 ммоль) добавляли формальдегид (0,025 мл, 0,922 ммоль) при температуре окружающей среды. Затем реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли 50 мл воды и экстрагировали 80 мл дихлорметана. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (ацетонитрил/вода/10 мМ NH^OAc) с получением (8)-8-((2-(диметиламино)-4-метилфепентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (8 мг, 0,021 ммоль, выход 11%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 354,0 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O2, 354,5]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,85 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,02 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,19 мин *НЯМР (400 МГц, MeOH-d4) 5 част./млн 1,01 (д, J = 6,80 Гц, 6Н), 1,50-1,61 (м, 2Н), 1,73-1,80 (м, Ш), 2,52 (с, Ш), 3,15-3,16 (м, Ш), 3,73 (с, ЗН), 4,23-4,31 (м, 2Н), 7,04 (д, J = 8,00 Гц, 2Н), 8,15 (с, Ш), 8,30 (д, J = 8,00 Гц, Ш), 8,71 (с, Ш), 8,39 (с, Ш).
Пример 40
(8)-8-((2-(диметиламино)-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
I 0
К суспензии (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,1 г, 0,295 ммоль) (синтез, описанный в примере 16, часть I) в муравьиной кислоте (0,011 мл, 0,295 ммоль) добавляли формальдегид (8,12 мкл, 0,295 ммоль) при
комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали до 100 °С в течение 16 ч в герметично закрытой пробирке. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем распределяли между водой (50 мл) и дихлорметаном (80 мл). Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (10 мм ацетата аммония/AcCN) с получением (S)-8-((2-(диметиламино)-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (30 мг, 0,078 ммоль, выход 26%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/е 368,0 [(М+Н)+, вычислено для C22H30N3O2, 368,2]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 1,86 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,98 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,44 мин. *Н ЯМР (400 МГц, МеОН-сЦ) 5 част./млн 1,01 ЦБК (д, J = 6,80 Гц, 6Н), 1,61-1,95(м, ЗН); 2,66-2,69 (м, 6Н), 3,06 (с, ЗН), 3,37-3,43 (м, Ш), 3,74 (с, ЗН), 4,37 (д, J = 4,80 Гц, 2Н), 7,04-7,08 (м, 2Н), 8,10 (д, J = 5,60 Гц, Ш), 8,36 (д, J = 8,80 Гц, Ш), 8,53 (д, J = 5,60 Гц, Ш).
Пример 41
8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
К перемешиваемому раствору 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (полученного в примере 32, часть В ) (0,08 г, 0,226 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) добавляли NCS (0,030 г, 0,226 ммоль)) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Затем смесь упаривали досуха. Остаток очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (0,1% TFA в воде/AcCN) с получением 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (12 мг, 0,030 ммоль выход, 13%). LC/MS (ESI) м/е 388,0 [(М+Н)+, вычислено для C21H27CIN3O2, 388,2] в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,13 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,97 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,16 мин. *НЯМР (400 МГц, МеОН-сЦ) 5 част./млн 0,99-1,02 (м, 6Н), 1,30 (с, ЗН), 1,54-1,66 (м,
145
2Н), 1,84-1,90 (м, Ш), 3,05(с, Ш), 3,73 (с, Ш), 4,04 (д, J = 23,20 Гц, 2Н), 7,03 (с, Ш), 8,06 (д, J = 6,00 Гц, Ш), 8,39 (с, Ш), 8,54 (д, J = 6,00 Гц, Ш).
Пример 42
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4-метокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Часть А. 8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-3-оксид К раствору 8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1,0 г, 4,09 ммоль), полученного, как описано в примере 2, часть С, в DCM (20 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли м-СРВА (1,763 г, 10,22 ммоль). Реакционную смесь затем нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 4 ч. Затем реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (100 мл) и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (200 мл), насыщенным солевым раствором (50 мл). Органический слой затем сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением 8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-3-оксида (1,0 г, 3,84 ммоль, 94%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (EST) м/е 261,0, [(М+Н)+, вычислено для C13H10CIN2O2, 261,0]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,65 мин.
Часть В. 4,8-дихлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Перемешиваемый раствор 8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-3-оксида (0,5 г, 1,918 ммоль) в РООз (3,58 мл, 38,4 ммоль) нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 6 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток затем распределяли между
дихлорметаном (100 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (200 мл). Органический слой отделяли и снова промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали с получением 4,8-дихлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,3 г, 1,075 ммоль, 56%-ный выход неочищенного продукта). Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (EST) м/е 280,8, [(М+2Н)+, вычислено для C13H9CI2N2O, 280,8]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,06 мин.
ОМе О
Часть С. 8-хлор-4-метокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 4,8-дихлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1,0 г, 3,58 ммоль) в МеОН (1 мл) добавляли метоксид натрия (0,806 мл, 3,58 ммоль). Полученную смесь нагревали в микроволновой печи при 80 °С в течение 25 мин. Реакционную смесь затем разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл). Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха с получением 8-хлор-4-метокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,4 г, 1,391 ммоль, 39%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 274,8 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIN2O2, 275,0]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,06 мин.
ОМе О
Часть D. (8)-трет-бутил-(1-((4-метокси-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке продукта (0,1 г, 0,135 ммоль, выход 62%) в виде полутвердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 456,0, [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O5, 456,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,26 мин.
Часть Е. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4-метокси-6 метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке продукта (10 мг, 0,027 ммоль, выход 20%) в виде смолы. LC/MS (ESI) м/е 356,0, [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O3, 356,4]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,83 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,48 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,61 мин. *Н ЯМР (400 МГц, МеОН-сЦ) 5 част./млн 8,24 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,13 (д, J =(д, J = 9,0 Гц, Ш), 7,62 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 6,99 - 6,91 (м, Ш), 6,90 (д, J = 2,5 Гц, Ш), 4,11 (дд, I = 9,5, 4,0 Гц, Ш), 4,06 (с, ЗН), 3,92 (дд, I = 9,3, 7,3 Гц, Ш), 3,65 (с, ЗН), 1,93 -1,81 (м, Ш), 1,45 (тд, J = 7,7, 6,3 Гц, 2Н), 1,03 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 43
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-(1 -((9-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат (0,4 г, 0,714 ммоль), полученный, как описано в примере 19, Часть В, подвергали хлорированию с использованием NCS, как описано в примере
41,
получением
(8)-трет-бутил-(1-((9-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,3 г, 0,437 ммоль, выход 61%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 460,2 [(М+Н)+, вычислено для C24H31CIN3O4, 460,2]; LC/MS время удерживания (способ С) tR = 2,17 мин.
Часть В. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6 метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
(8)-трет-бутил-(1-((9-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат подвергали реакции удаления защитной группы Вое, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,1 г, 0,27 ммоль, выход 72%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 360,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H23CIN3O2, 360,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,94 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,4 мин. ^ЯМР (400 МГц, МеОН-d4) 5 част./млн 9,43 (д, J = 0,50 Гц, Ш), 8,76 (д, J = 5,52 Гц, Ш), 8,42 (с, Ш), 8,16 - 8,20 (м, Ш), 7,10 (с, Ш), 4,23 - 4,27 (м, Ш), 4,02 - 4,08 (м, Ш), 3,78 (с, ЗН), 3,34 - 3,40 (м, Ш), 1,84 - 1,94 (м, Ш), 1,42 - 1,58 (м, 2Н), 1,03 (дд, J = 8,66, 6,65 Гц, 6Н).
Пример 44
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-(2-гидроксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Часть А. 8-хлор-6-(2-гидроксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 8-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (80 мг, 0,347 ммоль) в безводном DMF (5 мл) в атмосфере азота добавляли этилкарбонат (122 мг, 1,387 ммоль), К2СО3 (96 мг, 0,694 ммоль) и 18-краун-6 (18,31 мг, 0,069 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80 °С в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x20 мл). Объединенные этилацетатные слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-6-(2-гидроксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (80 мг, 0,291 ммоль, 84%-ный выход неочищенного продукта). Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 275,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIN2O2, 275,1]; *Н-ЯМР (400 МГц, MeOD) 5 9,55 (с, Ш), 8,87 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,50 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,34 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,88 (д, J = 1,6 Гц, Ш), 7,44 (дд, J = 8,4, 2,0 Гц, Ш), 4,57 (т, J = 6,0 Гц, 2Н), 3,96 (т, J = 6,0 Гц, 2Н).
Часть В. (8)-трет-бутил-(1-((6-(2-гидроксиэтил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением (8)-трет-бутил-(1-((6-(2-гидроксиэтил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (60 мг, 0,132 ммоль, выход 45%) в виде белого масла. LC/MS (ESI) м/е 456,2, [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O5, 456,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR= 1,81 мин.
Часть С. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(2-гидроксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(2-гидроксиэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (6 мг, 0,015 ммоль, выход 12%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (EST) м/е 356,2, [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O3, 356,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,59 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,66 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,99 мин. 1Я-ЯМР (400 МГц, MeOD) 5 9,50 (с, Ш), 8,79 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,47 (д, J = 8,8 Гц, 1Н), 8,29 (д, J = 5,6 Гц, 1Н), 7,34 (д, J = 2,0 Гц, 1Н), 7,14 (дд, J = 8,8, 2,4 Гц, Ш), 4,59 (т, J = 6,4 Гц, 2Н), 4,34 (дд, J = 10,0, 3,6 Гц, Ш), 4,17 (дд, J = 10,0, 6,4 Гц, Ш), 3,98 (т, J = 6,0 Гц, 2Н), 3,63-3,53 (м, Ш), 1,92-1,80 (м, Ш), 1,66 - 1,59 (м, 2Н), 1,06 - 1,03 (м, 6Н).
Пример 45
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-(2,2,2-трифторэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-
Часть А. 4-(4-хлор-2-фторфенил)-К-(2,2,2-трифторэтил)никотинамид
5(6Н)-он
К перемешиваемому раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)никотиновой кислоты (300 мг, 1,192 ммоль), полученной, как описано в примере 2, часть А, в безводном DMF (2 мл) в атмосфере азота добавляли НОВТ (365 мг , 2,384 ммоль), DIEA (0,927 мл, 4,77 ммоль) и EDC (343 мг, 1,788 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0 °С и обрабатывали, добавляя по каплям 2,2,2-трифторэтанамин (236 мг, 2,384 ммоль), и нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (2 х 50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-К-(2,2,2-трифторэтил)никотинамида (200 мг, 0,601 ммоль, 50% выход неочищенного продукта) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 333,2, [(М+Н)+, вычислено для C14H10CIF4N2O, 333,0]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,66 мин.
Часть В. 8-хлор-6-(2,2,2-трифторэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть С, с получением 8-хлор-6-(2,2,2-трифторэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (150 мг, 0,480 ммоль, 80%-ный выход) LC/MS (ESI) м/е 313,1, [(М+Н)+, вычислено для C14H9CIF3N2O, 313,0]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,95 мин.
Часть С. (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((5-оксо-6-(2,2,2-трифторэтил)-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((5-оксо-6-(2,2,2-трифторэтил)-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,203 ммоль, выход 42%) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 494,5, [(М+Н)+, вычислено для C25H31F3N3O4 494,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,17 мин.
Часть D. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(2,2,2-трифторэтил)бензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(2,2,2-трифторэтил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (25 мг, 0,061 ммоль, выход 30%), твердого вещества белого цвета. LC/MS (ESI) м/е 394,2, [(М+Н)+, вычислено для C20H23F3N3O2, 394,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,78 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,26 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,60 мин. ^ЯМР (400 МГц, MeOD) 5 9,49 (с, Ш), 8,81 (д, J = 5,6 Гц, 1Н), 8,46 (д, J = 8,8 Гц, 1Н), 8,28 (д, J = 5,6 Гц, 1Н), 7,23 (с, 1Н), 7,15 (дд, J = 8,8, 2,0 Гц, Ш), 5,32 (дд, J = 8,8, 6,4 Гц, 2Н), 4,21 (дд, J = 9,2, 3,6 Гц, Ш), 4,03 (дд, J = 9,2,7,2 Гц, Ш), 3,40-3,33 (м, Ш), 1,92-1,80 (quin, J = 6,8, Ш), 1,52 - 1,46 (м, 2Н), 1,02 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,00 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 46
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-этил-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-9-винил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат
Смесь (8)-трет-бутил-( 1 -((9-бром-6-метил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7]нафтирид ин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,250 г, 0,496 ммоль) (полученного, как описано в примере 3, часть В), пиридинового комплекса 2,4,6-тривинилциклотрибороксана (0,239 г, 0,991 ммоль), ШгСОз (0,158 г, 1,487 ммоль) и Рё(РРпз)4 (0,029 г, 0,025 ммоль) в толуоле (1 мл), воде (0,1 мл) и этаноле (0,3 мл) продували газообразным азотом и нагревали при 90 °С в течение 16 ч. После охлаждения реакционную смесь переносили в делительную воронку, содержащую воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (60% этилацетат: петролейный эфир) с получением (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-9-винил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (0,150 г, 0,166 ммоль, выход 34%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 452,4, [(М+Н)+, вычислено для C26H34N3O4, 452,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,95 мин.
Часть В. (8)-трет-бутил-(1-((9-этил-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Смесь (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-9-винил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (0,15 г, 0,332 ммоль) и палладия на угле (0,075 г, 0,070 ммоль) в МеОН (3 мл) и этилацетате (3 мл) перемешивали при комнатной температуре под баллоном газообразного водорода в течение 24 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (60% этилацетат и петролейный эфир) с получением (З)-трет-бутил-(1 -((9-этил-6-метил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,11 г, 0,133 ммоль, выход 40%) в виде желтого полутвердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 454,4, [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O4, 454,3]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,96 мин.
Часть С. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-этил-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке соединения (55 мг, 0,155 ммоль, выход 64%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 354,2, [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O2, 354,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,94 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,76 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,19 мин. ^ЯМР (400 МГц, MeOD) 5 9,52 (с, Ш), 8,81 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,51 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,33 (с, Ш), 7,11 (с, Ш), 4,52 (м, Ш), 4,36 (м, Ш), 3,86 (с, ЗН), 3,76-3,84 (м, Ш), 2,86-2,93 (м, 2Н), 1,81-1,90 (м, 2Н), 1,63 - 1,81 (м, Ш), 1,35 (м, ЗН), 1,05 (м, 6Н).
Пример 47
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-изопропил-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-(4-метил-1 -((6-метил-5 -оксо-9-(проп-1 -ен-2-ил)-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат Получали, как описано в примере 46, части А и В, с получением (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-9-(проп-1-ен-2-ил)-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,215 ммоль, выход 90%) в виде твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 466,4, [(М+Н)+, вычислено для C27H36N3O4, 466,3]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,22 мин.
Часть В. (8)-трет-бутил-(1-((9-изопропил-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат
Смесь (8)-трет-бутил-(4-метил-1 -((6-метил-5 -оксо-9-(проп-1 -ен-2-ил)-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата(0,1 г, 0,215 ммоль) и палладия на угле (0,07 г, 0,066 ммоль) в МеОН (3 мл) и этилацетате (3 мл) перемешивали при комнатной температуре под баллоном газообразного водорода в течение 24 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-изопропил-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,04 г, 2,464 ммоль, выход 1%) в виде коричневого масла, которое использовали без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 468,4, [(М+Н)+, вычислено для C27H38N3O4, 468,3]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,00 мин.
Часть С. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-изопропил-6-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке
продукта (12,05 мг, 0,033 ммоль, 99% (чистота)) в виде желтого твердого вещества.
LC/MS (ESI) м/е 368,2, [(М+Н)+, вычислено для C22H30N3O2, 368,2]; LC/MS время
удерживания (способ С): tR = 1,97 мин ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,28
мин; ВЭЖХ время удерживания (способ в): tR = 10,15 мин. ЧТЯМР (400 МГц, MeOD) 5
част./млн 9,54 (с, Ш), 8,82 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,60 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,36 (с, Ш), 7,12 (с,
156
Ш), 4,52 (м, Ш), 4,41 (м, Ш), 3,86 (с, ЗН), 3,74-3,84 (м, Ш), 3,61 (м, Ш), 1,80-1,90 (м, 2Н), 1,64 - 1,81 (м, Ш), 1,35-1,43 (м, 6Н), 1,02-1,11 (м, 6Н).
Пример 48
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-метил-9-(оксазол-5-ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-1-(9-формил-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Смесь (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-9-винил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (300 мг, 0,664 ммоль) (полученного, как описано в примере 46, часть А), тетроксида осмия (2,5% в 2-метил-2-пропаноле) (4,17 мкл, 0,013 ммоль) и 2,6-диметилпиридина (0,155 мл, 1,329 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и воде (2 мл), охлажденную до 0 °С, перемешивали в течение 15 мин. Добавляли метапериодат натрия (568 мг, 2,66 ммоль), и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)), элюируя с EtOAc. Этилацетатный слой промывали насыщенным водным раствором NaHC03, ШО, затем насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (EtOAc/петролейный эфир) с получением (З)-трет-бутил-1-(9-формил-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-
157
метилпентан-2-ил)карбамата (160 мг, 0,353 ммоль, выход 53%) в виде клейкого твердого вещества. LC/MS (EST) м/е 454,1, [(М+Н)+, вычислено для C25H32N3O5, 454,2].
Часть В. (8)-трет-бутил-(4-метил-1 -((6-метил-9-(оксазол-5-ил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат Смесь (З)-трет-бутил-1 -(9-формил-6-метил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7]нафтирид ин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,220 ммоль), К2СО3 (33,5 мг, 0,243 ммоль) и TOSMIC (47,4 мг, 0,243 ммоль) в МеОН (5 мл) нагревали при 60 °С в течение 2 ч. После охлаждения метанол удаляли при пониженном давлении и остаток растворяли в этилацетате. Органический слой промывали НгО, а затем насыщенным раствором NaHC03, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-9-(оксазол-5-ил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (50 мг, 0,054 ммоль, 24%-ный выход неочищенного продукта) в виде смолы. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 493,4, [(М+Н)+, вычислено для C27H33N4O5, 493,6]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,08 мин.
Часть С. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-6-метил-9-(оксазол-5-
ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-(2-амино-4-
метилпентилокси)-6-метил-9-(оксазол-5-ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (15 мг,
0,038 ммоль, выход 29%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 393,2,
[(М+Н)+, вычислено для C22H25N4O3, 393,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR =
1,70 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,89 мин; ВЭЖХ время
158
удерживания (способ В): tR = 9,12 мин. ^ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 1,07 -1,13 (м, 6Н), 1,75 (д, J = 6,78 Гц, Ш), 1,81 - 1,93 (м, 2 Н) 3,91 (с, ЗН), 3,94 - 4,00 (м, Ш), 4,55 (дд, J = 11,04, 6,53 Гц, Ш), 4,67 (дд, J = 10,92, 3,39 Гц, Ш), 7,30 (с, Ш), 7,71 (с, Ш), 8,43 (с, Ш), 8,55 (д, J = 5,52 Гц, Ш), 8,90 (с, 2Н), 9,59 (с, Ш).
Пример 49
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-бром-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. 4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотинамид 4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотиновую кислоту (9 г, 33,9 ммоль) (ранее описана в примере 16, часть Е) помещали в DCM (50 мл) и охлаждали до 0 °С. Раствор обрабатывали оксалилхлоридом (14,83 мл, 169 ммоль) с последующим медленным добавлением DMFA (1 мл). Смесь нагревали при 40 °С в течение 3 ч. После охлаждения летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в DCM (25 мл), охлаждали до 0 °С, и медленно добавляли TEA (22,08 мл, 158 ммоль) и хлорид аммония (16,94 г, 317 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 ч реакционную смесь промывали насыщенным водным раствором NaHC03 (10 мл), водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл). Органический слой отделяли и сушили с помощью Na2S04, с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотинамида (3,5 г, 13,2 ммоль, 42%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 264,4 [(М)+, вычислено для C13H10CIFN2O 264,0]. LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,58 мин.
Часть В. 8-хлор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть С, с получением 8-хлор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (800 мг, 3,14 ммоль, выход 24%, 96%-ной чистоты) в виде твердого вещества желтого цвета. LC/MS (ESI) м/е 245,1 [(М+Н)+, вычислено для C13H10CIN2O 245,04]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,52 мин.
Часть С. 8-хлор-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 17, часть G, с получением 8-хлор-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (710 мг, 1,362 ммоль, выход 56%) в виде коричневой смолы. LC/MS (EST) м/е 365,1 [(М+Н)+, вычислено для C21H18CIN2O2 365,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,8 мин.
Часть D. (8)-трет-бутил-1-(6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением (8)-трет-бутил-1-(6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (130 мг, 0,21 ммоль, выход 31%, 88%-ной чистоты) в виде коричневой смолы. LC/MS (ESI) м/е 546,2 [(М+Н)+, вычислено для C32H40FN3O5 546,3]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,94 мин.
Часть Е. (8)-трет-бутил-1-(9-бром-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 3, часть А, с получением (8)-трет-бутил-1-(9-бром-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (140 мг, 0,146 ммоль, выход 61%, 65%-ной чистоты) в виде твердого вещества оранжево-красного цвета. LC/MS (ESI) м/е 624,2 [(М+Н)+, вычислено для СзгНзэВгКзОб 624,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,98 мин.
Часть F (8)-трет-бутил-1-(9-бром-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-
8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Удаление защитной группы РМВ проводили с использованием нитрата аммония-церия, как описано в Protective Groups in organic synthesis (Greene, Wuts; 3rd ed., 1999, John Wiley & Sons, Inc.) с получением (8)-трет-бутил-1-(9-бром-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (60 мг, 0,12 ммоль, выход 93%) в виде красного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 504,1 [(М+Н)+, вычислено для СиШхВгГЧзСч 504,14]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,91 мин.
Часть G. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-бром-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он 161
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-бром-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (12 мг, 0,029 ммоль, выход 35%, чистота 98%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 402,0 [(М)", вычислено для Ci9H2iBrN3C> 2 402,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,19 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,52 мин и ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,02 мин. *Н ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,67 (с, Ш), 8,64 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,30 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 6,98 (с, Ш), 4,85 - 4,43 (м, Ш), 4,31 - 4,27 (м, Ш), 3,82 - 3,80 (м, Ш), 3,13 (с, ЗН), 1,88 - 1,80 (м, 2Н), 1,76 - 1,71 (м, Ш), 1,09 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,07 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 50
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4-((4-метоксибензил)амино)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 17, часть Н, и пример 2, часть Е, с получением гидрохлорида (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4-((4-метоксибензил)амино)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (19 мг, 0,038 ммоль, выход 26%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 461 [(М+Н)+, вычислено для C27H33N4O3, 461,25]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,42 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 11,09 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 12,68 мин. 1Я ЯМР (400 MHz, DMSO-d6) 8 10,09, (шс 1 Н) 8,40 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,24 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,07 (с, ЗН), 7,45 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,33 (д, J =8,4 Гц, 2Н), 7,07 - 7,06 (м, 2Н), 6,95-6,91 (м, 2Н), 4,67 (д, J = 5,2 Гц, Ш), 4,38 (дд, J = 10,4, 3,2 Гц, 2Н), 4,21 (дд, J = 10,8, 6,8 Гц, Ш), 3,75 (с, ЗН), 3,68 (с, ЗН), 3,62 (с, Ш), 1,80 (quin, J = 6,8, Ш), 1,59-1,55 (м, Н), 0,95 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 0,94 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 51
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(4-фторфенил)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-(1-((9-(4-фторфенил)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (150 мг, 0,297 ммоль) (полученный, как описано в примере 3, часть А), 4-фторфенилбороновую кислоту (49,9 мг, 0,357 ммоль), CS2CO3 (291 мг, 0,892 ммоль) и аддукт PdCh^ppfj-CFbCh (12,14 мг, 0,015 ммоль) в 1,4-диоксане (8 мл) и воде (0,4 мл) дегазировали с газообразным азотом в течение 5 мин, затем нагревали при 80 °С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в дихлорметане (10 мл) и воде (8 мл). Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-трет-бутил-(1-((9-(4-фторфенил)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,13 г, 0,09 ммоль, выход 31%) в виде коричневой смолы. Материал переносили для дальнейшего использования без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/з 520,4 [(М+Н)+, вычислено для C30H35FN3O4 520,25]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,08 мин.
Часть В. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(4-фторфенил)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(4-фторфенил)-6-метилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (19 мг, 0,043 ммоль, выход 47%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 420,0 [(М+Н)+, вычислено для C25H27FN3O2, 420,3]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,61 мин. ХН ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ), 5 част./млн 9,40 (с, 1Н), 8,69 (м, 1Н), 8,24 (с, Ш), 8,18 (м, Ш), 7,62 (м, 2Н), 7,22 (м, 2Н), 7,04 (с, Ш), 4,16 (м, Ш), 3,98 (м, Ш), 3,78 (с, ЗН), 3,20 (м, Ш), 1,78 (м, Ш), 1,35 (м, 2Н), 0,90-0,98 (м, 6Н).
Пример 52
(8)-4-амино-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. Трет-бутил-4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-3-формилпиридин-2-илкарбамат
Получали, как описано в примере 17, часть С, реакцией сочетания Сузуки между 2-(4-
хлор-2,5 -д ифторфенил)-4,4,5,5 -тетраметил-1,3,2-д иоксаборолан)препаратом,
164
описанным в примере 14, часть А, и трет-бутил-4-хлор-3-формилпиридин-2-илкарбаматом (получение описано в примере 17, часть В), с получением трет-бутил-4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-3-формилпиридин-2-илкарбамата (3,7 г, 8,91 ммоль, выход 76%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 367,1 [(М)", вычислено для C17H16CIF2N2O3 367,1]. LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,07 мин.
Часть В: 4-(трет-бутоксикарбониламино)-8-хлор-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-иум К раствору трет-бутил-(4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-3-формилпиридин-2-ил)карбамата (2,6 г, 6,26 ммоль) в DCM (10 мл) при температуре 0 °С добавляли по каплям метанамин (2М в метаноле) (75 мл, 6,26 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растирали в порошок с EtOAc/гексаном и полученное твердое вещество собирали вакуумной фильтрацией с получением 4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-8-хлор-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-иума (2,7 г, 2,399 ммоль, выход 38%) в виде желтого твердого вещества. Образец был взят на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/е 362,2 [(М+Н)+, вычислено для C18H18CIFN3O2 362,1]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,66 мин.
Часть С: 8-хлор-9-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-
илкарбаминовая кислота
К раствору 4-((трет-бутоксикарбонил)амино)-8-хлор-9-фтор-6-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-6-иума (2,6 г, 2,310 ммоль) в смеси DCM (10 мл) и воды
165
(50 мл) добавляли NaOH (0,370 г, 9,24 ммоль) тремя порциями, с последующим добавлением КМпСч (1,461 г, 9,24 ммоль) в пяти порциях, и реакционную смесь нагревали до 90 °С в течение 5 часов. После охлаждения растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в EtOAc (50 мл) и МеОН (50 мл) и перемешивали в течение 10 мин. Реакционную смесь затем пропускали через диатомовую землю (Celite(r)), элюируя с EtOAc. Фильтрат концентрировали с получением (8-хлор-9-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-ил)карбаминовой кислоты (2,35 г, 2,082 ммоль, 90%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтого твердого вещества, которое было принято на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (EST) м/е 322,1 [(М+Н)+, вычислено для C14H10CIFN3O3 322,0]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,05 мин.
Часть D: 8-хлор-9-фтор-4-(4-метоксибензиламино)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 17, часть F, чтобы дать 4-амино-8-хлор-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Я)-он, который затем защищали с РМВ, в соответствии с процедурой, описанной в примере 17, часть G, с получением упомянутого в заголовке продукта (0,45 г, 0,755 ммоль, выход 17%) в виде желтого масла. LC/MS (ESI) м/е 398,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H18CIFN3O2 398,1]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,23 мин.
Часть Е: (8)-трет-бутил-1-(9-фтор-4-(4-метоксибензиламино)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке продукта (910 мг, 0,405 ммоль, выход 54%) в виде желтого масла. LC/MS (EST) м/е 579,5
[(М+Н)+, вычислено для C32H40FN4O5 579,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,37 мин.
F NH2 1
Часть F: (8)-4-амино-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке продукта (27 мг, 0,045 ммоль, 11% выход) в виде светло-желтого твердого вещества в виде TFA-соли. LC/MS (ESI) м/е 359,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H24FN4O2 359,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,53 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,01 мин и ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,13 мин. ХН ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,33 (д, J = 12,0 Гц, Ш), 8,02 (д, J = 7,0 Гц, Ш), 7,67 (д, J = 7,3 Гц, Ш), 7,34 (д, J = 7,3 Гц, Ш), 4,60 (дд, J = 10,7, 3,1 Гц, Ш), 4,46 (дд, J = 10,8, 6,0 Гц, Ш), 3,87 (с, ЗН), 3,86 - 3,78 (м, Ш), 1,95 - 1,64 (м, ЗН), 1,08 (д, J = 4,3 Гц, ЗН), 1,07 (д, J = 4,3 Гц, ЗН).
Пример 53
(8)-8-(2-амино-3-изопропоксипропокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-метил-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3 -изопропоксипропаноат Получали, как описано в литературе Steven, M.S. et.al. Bioorg Med. Chem. Lett., 2009, 19, 981-985.
Часть В. (К)-бензил(1-гидрокси-3-изопропоксипропан-2-ил)карбамат (8)-метил-2-(((бензилокси)карбонил)амино)-3-изопропоксипропаноат (0,02 г, 0,068 ммоль) растворяли в 2-пропаноле (4 мл) и затем NaBFb (7,69 мг, 0,203 ммоль) добавляли и смесь перемешивали в течение ночи при 50 °С. После охлаждения до 0 °С смесь гасили с помощью 1н НС1 и затем экстрагировали диэтиловым эфиром (10 мл). Слой диэтилового эфира собирали и концентрировали при пониженном давлении с получением (К)-бензил(1-гидрокси-3 изопропоксипропан-2-ил)карбамата) (14 мг, 0,058 ммоль, 86%-ный выход неочищенного продукта) в виде бесцветного масла. Продукт использовали без дополнительной очистки. ^-ЯМР (400 МГц, MeOD) 8 7,31-7,48 (м, 5Н), 5,12 (с, Ш), 4,81 (шир.с, Ш), 3,41-3,91 (м, 6Н), 1,12-1,26 (м, 6Н).
Часть С: (8)-бензил(1-изопропокси-3-((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамат
Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке
продукта (8)-бензил( 1 -изопропокси-3 -((6-метил-5-оксо-5,6-
Часть D: (8)-8-(2-амино-3-изопропоксипропокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (220 мг, 0,130 ммоль, выход 10%) в виде светло-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 476,4, [(М+Н)+, вычислено для C27H30N3O5, 476,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,04 мин.
Раствор (S)-6eH3iui( 1 -изопропокси-3 -((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамата (220 мг, 0,130 ммоль) в МеОН (12 мл) дегазировали N2 в течение 5 мин. Добавляли Pd/C (68,9 мг, 0,065 ммоль) и полученную смесь перемешивали под баллоном Нг в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)), элюируя метанолом, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (10 мМ ацетата аммония в воде/AcCN) с получением (8)-8-(2-амино-3-изопропоксипропокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6//)-она (90 мг, 0,108 ммоль, 83% выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 342,2, [(М+Н)+, вычислено для C19H24N3O3, 342,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,50 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,20 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,00 мин. *Н ЯМР (400 МГц, MeOD) 5 част./млн 9,54 (с, Ш), 8,23 (д, J = 4,4 Гц, Ш), 8,52 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,44 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,20 (с, Ш), 7,18 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 4,52 (дд, J = 10,4, 3,6 Гц, Ш), 4,43 (дд, J - 10,4, 6,8 Гц, Ш), 3,88-3,75 (м, 7Н), 1,26 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,25 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 54
(8)-6-метил-8-((4-метил-2-(метиламино) пентил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
N' > 5*ir4N'
Часть А. (8)-трет-бутил-метил(4-метил-1-(6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат
К раствору (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (200 мг, 0,470
169
ммоль) (описание получения в примере 2, часть D) в THF (4 мл) при О °С добавляли NaH (37,6 мг, 0,940 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 30 мин, затем добавляли Mel (0,044 мл, 0,705 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивали при 0 °С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали ледяной водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x50 мл), сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием подвижной фазы петролейный эфир:этилацетат, с получением (8)-трет-бутил-метил(4-метил-1-(6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (180 мг, 0,409 ммоль выход, 87%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 440,4, [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O4, 440,3]; LC/MS время удерживания (способ I): tR = 2,4 мин.
Часть В: (8)-6-метил-8-((4-метил-2-(метиламино)
пентил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-метил(4-метил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (180 мг, 0,078 ммоль) в дихлорметане (4 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли НС1 в эфире (4 мл , 4,00 ммоль) медленно, в течение 1 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 5 мин, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 ч. Затем летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (0,1% TFA в воде:ацетонитрил) с получением (8)-6-метил-8-((4-метил-2-(метиламино)пентил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (15 мг, 0,025 ммоль, выход 32%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 340,2, [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O2, 340,2]; LC/MS Время удерживания (способ I): tR = 1,6 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,59 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,08 мин. *Н ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 9,54 (с, Ш), 8,83 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,53 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,46 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,27 - 7,16 (м, 2Н), 4,57 (дд, J =
11,3, 3,0 Гц, Ш), 4,44 (дд, J = 11,3, 5,3 Гц, Ш), 3,84 (с, ЗН), 3,78 - 3,68 (м, Ш), 2,84 (с, ЗН), 1,95 - 1,78 (м, 2Н), 1,75 - 1,61 (м, Ш), 1,08 (д, J = 6,5 Гц, 6Н).
Пример 55
(8)-8-((2-амино-4,4-дифторпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпент-4-еноат К раствору (8)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпент-4-еновой кислоты (550 мг, 2,399 ммоль) в тетрагидрофуране (11 мл) при 0 °С добавляли по каплям ТМС-диазометан (4,80 мл, 4,80 ммоль) в течение 5 мин. Реакционную смесь затем перемешивали при 0 °С в течение 15 мин. После того, как смесь постепенно нагревали до комнатной температуры, смесь перемешивали в течение 16 часов. Реакционную смесь упаривали досуха с получением (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпент-4-еноата (580 мг, 2,386 ммоль, 99%-ный выход неочищенного продукта) в виде темно-желтого масла, которое было принято на следующей стадии без дополнительной очистки. *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb): 5 част./млн 4,91 (с, Ш), 4,85 (с, Ш), 4,75 (с, Ш), 4,38 (д, J = 16,00 Гц, Ш), 3,73 (с, ЗН), 2,33-2,53 (м, 2Н), 1,71 (с, ЗН), 1,43 (с, 9Н).
Часть В: (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксопентаноат К раствору (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-метилпент-4-еноата (500 мг, 2,055 ммоль) в смеси растворителей, состоящей из 1,4-диоксана (10 мл) и воды (2,5 мл), при 0 °, добавляли 2,6-лутидин (0,479 мл, 4,11 ммоль) и тетроксид осмия (2,5% в 2-метил
2-пропаноле) (0,516 мл, 0,041 ммоль), с последующим добавлением метапериодата натрия (1,758 г, 8,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 15 мин и нагревали до комнатной температуры и перемешивали дополнительно в течение 3 часов. Смесь разбавляли этилацетатом (150 мл) и промывали 10%-ным водным раствором NaHCCb. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксопентаноата (500 мг, 2,040 ммоль, 100%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтой жидкости. Материал брали на следующую стадию без дополнительной очистки. ^-ЯМР (400 МГц, CDCb): 5 част./млн 5,48 (с, Ш), 4,51 (т, J = 8,00 Гц, Ш), 3,75 (с, ЗН), 3,23 (д, J = 4,00 Гц, Ш), 3,17 (д, J = 4,00 Гц, Ш), 2,18 (с, ЗН), 1,46 (с, 9Н).
Часть С: (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4,4-дифторпентаноат К (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксопентаноату (300 мг, 1,223 ммоль) при 0 °С добавляли DAST (М в) (323 мкл, 2,446 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 84 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0 °С, а затем гасили 10%-ным водным раствором NaHC03. Полученную суспензию экстрагировали этилацетатом (3 х 25 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (15 мл), сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с получением (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4,4-дифторпентаноата (70 мг, 0,26 ммоль, выход 19%) в виде желтого масла. *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb): 5 част./млн 5,15(с, Ш), 4,50 (с, Ш), 3,75 (с, ЗН), 3,23 (т, J = 8,00 Гц, Ш), 2,30-2,45 (м, 2Н), 1,60 (с, ЗН), 1,44 (с, 9Н).
Часть D: (8)-трет-бутил-(4,4-дифтор-1 -гидроксипентан-2-ил)карбамат К раствору (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4,4-дифторпентаноата (70 мг, 0,262 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) при -10 °С добавляли алюмогидрид лития, 2М в THF (0,262 мл, 0,524 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -10 °С в течение 2 ч, а затем гасили водным раствором хлорида аммония (5 мл) и экстрагировали
этилацетатом (2 х 10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (15 мл), сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-трет-бутил-(4,4-дифтор-1-гидроксипентан-2-ил)карбамата (38 мг, 0,159 ммоль, 61% выход неочищенного продукта) в виде бесцветного масла. Материал переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb): 5 част./млн 3,89 (д, J = 4,00 Гц, 2Н), 2,10-2,14 (м, Ш), 1,61-1,66 (м, 2Н), 1,51 (с, ЗН), 1,44 (с, 9Н).
Часть Е: (8)-трет-бутил-(4,4-дифтор-1-((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат
В герметично закрытую пробирку, содержащую 8-хлор-6-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (30 мг, 0,123 ммоль) и (8)-трет-бутил-(4,4-дифтор-1-гидроксипентан-2-ил)карбамат (35,2 мг, 0,147 ммоль), добавляли толуол (3 мл). Ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-дифенил]-2-ил)фосфин (31,2 мг, 0,074 ммоль) и карбонат цезия (59,9 мг, 0,184 ммоль) добавляли к реакционной смеси с последующим добавлением палладия (II) ацетата (8,26 мг, 0,037 ммоль). Реакционную смесь затем нагревали при 85°С в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)), элюируя этилацетатом. Фильтрат выпаривали при пониженном давлении и неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с получением (8)-трет-бутил-(4,4-дифтор-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (12 мг, 0,027 ммоль, выход 22%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 448,3 [(М+Н)+, вычислено для C23H28F2N3O4 448,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,96 мин.
Часть F: (8)-8-((2-амино-4,4-дифторпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(4,4-дифтор-1-((6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (15 мг, 0,024 ммоль) в дихлорметане (2 мл) при 0 °С по каплям добавляли 4 М НС1 в диэтиловом эфире (2 мл, 2,00 ммоль) в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 5 мин и нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в воде (10 мл) и промывали этилацетатом (2x5 мл). Водный слой лиофилизовали с получением (S)-8-((2-амино-4,4-дифторпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Я)-она, 2НС1 (6 мг, 0,018 ммоль, выход 72%, 93%-ной чистоты) в виде коричневого липкого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 348,2 [(М+Н)+, вычислено для C18H20F2N3O2 348,1]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,56 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 6,60 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,53 мин; *Н ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 9,60 (шир.с, Ш), 8,88 (шир.с, Ш), 8,73 (шир.с, Ш), 8,60 (шир.с, Ш), 7,23 (шир.с, 2Н), 4,63 - 4,36 (м, 2Н), 4,13 - 4,06 (м, Ш), 3,84 (шир, с, ЗН) 2,75 - 2,40 (м, 2Н), 1,78 ( т, J = 18,8 Гц, ЗН).
Пример 56
8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-6-метил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
Часть А: трет-бутил-(1-((9-бром-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-5,5,5 -трифторпентан-2-ил)карбамат Получали, как описано в примере 15, часть Е, и в примере 3, часть А, с получением упомянутого в заголовке продукта трет-бутил-(1-((9-бром-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5,5-трифторпентан-2-ил)карбамата (0,720 г, 0,807 ммоль, 60% выход) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 546,5, [(М+2Н)+, вычислено для СгзШуВгЕзКзСч, 546,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,90 мин.
Часть В: трет-бутил-(5,5,5 -трифтор-1 -((6-метил-5 -оксо-9-винил-5,6-
дигидро-бензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат
Получали, как описано в примере 46, часть В, с получением упомянутого в заголовке
продукта трет-бутил-(5,5,5 -трифтор-1 -((6-метил-5 -оксо-9-винил-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (0,6 г, 0,855 ммоль, выход 75%) в виде желтого твердого вещества.
LC/MS (ESI) м/е 492,6, [(М+Н)+, вычислено для C25H29F3N3O4, 492,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,90 мин.
Часть С: трет-бутил-(5,5,5-трифтор-1 -((9-формил-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат
Получали, как описано в примере 55, часть В, с получением упомянутого в заголовке
продукта трет-бутил-(5,5,5 -трифтор-1 -((9-формил-6-метил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (0,081 г, 0,079 ммоль, выход 62%) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е
Часть D: трет-бутил-( 1 -((9-циано-6-метил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-
8-ил)окси)-5,5,5 -трифторпентан-2-ил)карбамат
Иод (0,047 г, 0,184 ммоль) добавляли к раствору трет-бутил-(5,5,5-трифтор-1-((9-
формил-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-
ил)карбамата (0,165g, 0,167 ммоль) в водном растворе аммиака (4 мл, 48,1 ммоль) и
тетрагидрофурана (6 мл) при комнатной температуре. Темный раствор стал светло-
серого цвета после перемешивания в течение 3 ч, что служит указанием того, что реакция
была завершена. Реакционную смесь загружали водным раствором МагБгОз (25 мл 5%-
ного раствора) и экстрагировали этилацетатом (3 х 30 мл). Объединенные органические
слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с
получением трет-бутил-( 1 -((9-циано-6-метил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5,5-трифторпентан-2-ил)карбамата (0,14 г, 0,143 ммоль, 85%-ный выход неочищенного продукта) в виде бледно-желтого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 491,5 (М+Н)+, вычислено для C24H26F3N4O4, 491,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,87 мин.
Часть Е: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке
продукта 8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-6-метил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрила (0,027 г, 0,066 ммоль, выход 34%) в
виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 391,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H18F3N4O2, 391,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,61 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,09 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,36 мин. ЧТЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 9,50 (с, Ш), 8,87 - 8,78 (м, 2Н), 8,31 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,20 (с, Ш), 4,42 - 4,30 (м, Ш), 4,29 - 4,20 (м, Ш), 3,84 (с, ЗН), 3,40 - 3,38 (м, Ш), 2,58 -2,31 (м, 2Н), 2,09 - 1,94 (м, Ш), 1,90 - 1,72 (м, Ш).
Пример 57
6-метил-8-(пиперидин-2-ил-метокси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: трет-бутил-2-(гидроксиметил)пиперидин-1-карбоксилат К перемешиваемому раствору пиперидин-2-илметанола (1,5 г, 13,02 ммоль) в дихлорметане (25 мл) добавляли DIPEA (6,82 мл, 39,1 ммоль). После перемешивания в течение 5 мин добавляли В0С2О (3,63 мл, 15,63 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь гасили водой и разбавляли DCM (50 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали с получением трет-бутил-2-(гидроксиметил)пиперидин-1-карбоксилата (2 г, 9,29 ммоль, 71%-ный выход неочищенного продукта) в виде бесцветного масла, которое было принято к следующей стадии без дополнительной очистки. *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 4,27-4,28 (м, Ш), 3,80-3,82 (м, Ш), 3,753,77 (м, Ш), 3,56-3,58 (м, Ш), 2,63 (т, J = 7,20 Гц, Ш), 1,55-1,55 (м, 5Н), 1,43 (с, 9Н).
Часть В: трет-бутил-2-(((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси) метил)пиперидин-1 -карбоксилат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке продукта (380 мг, 0,332 ммоль, выход 41%), в виде желтого масла. LC/MS (EST)м/е 424,2, [(М+Н)+, вычислено для C24H30N3O4, 424,2]; LC/MS время удерживания (способ I): tR = 2,29 мин.
Часть В: 6-метил-8-(пиперидин-2-ил-метокси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке соединения (30 мг, 0,092 ммоль, выход 53%) в виде бледно-желтой моно-TFA СОЛИ. LC/MS (ESI): м/е 324,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H22N3O2 324,2]; LC/MS время удерживания (способ F): tR = 1,23 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,95 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,87 мин. 1ТТ ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 част./млн 9,52 (с, Ш), 8,82 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,51 (д, J = 9,3Гц, Ш), 8,42 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,25 - 7,15 (м, 2Н), 4,49 (дд, J = 10,5, 3,5 Гц, Ш), 4,30 (дд, J = 10,8, 7,3 Гц, Ш), 3,83 (с, ЗН), 3,70 (тд, J = 7,5, 3,6 Гц, Ш), 3,56 - 3,45(м, Ш), 3,21 - 3,07 (м, Ш), 2,19 -1,95(м, ЗН), 1,88 - 1,64 (м, ЗН).
Пример 58 и пример 59 (8)-трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат и (К)-трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат
Часть А: трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат Синтез 8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6#)-она был описан в примере 2, часть С. 8-Хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (0,15 г, 0,613 ммоль) и трет-бутил-(1-гидрокси-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамат (0,284 г, 1,226 ммоль) подвергали синтезу эфира, как описано в примере 16, часть Н, с получением продукта, трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (0,3 г, 28%-ный выход) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 440,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O4, 440,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,67 мин.
NH2 1
Часть В: 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Трет-бутил-(2,4-диметил-1-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат подвергали реакции удаления защитной Вос-группы, как описано в примере 2, часть Е, с получением 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (30 мг, выход 12%) в виде не совсем белого твердого вещества. Разделение 8-((2-амино-2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она с помощью хиральной ВЭЖХ (Сорастворитель: 0,3% DEA в метаноле, Колонка: Chiralpak AD Н (250 х 21 мм) 5 мкм) привело к получению двух энантиомеров.
Энантиомер-1: LC/MS (ESI) м/е 340,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O2, 340,2]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 1,88 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,29 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,19 мин. ^ЯМР (400 МГц,
метанол-сЦ) 9,43 (с, Ш), 8,73 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,35 (д, J = 8,5 Гц, Ш), 8,19 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,12 - 7,01 (м, 2Н), 4,05 - 3,92 (м, 2Н), 3,77 (с, ЗН), 1,95 - 1,80 (м, Ш), 1,58 (qd, J = 14,2, 5,5 Гц, 2Н), 1,30 (с, ЗН), 1,04 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,5 Гц, ЗН); ВЭЖХ время удерживания, tR = 5,44 мин.
Энантиомер-2: LC/MS (ESI) м/е 340,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O2, 340,2]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 1,88 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,29 мин; ВЭЖХ Время удерживания (способ A): tR = 8,19 мин. *Н ЯМР (400 МГц, метанолчЦ) 9,43 (с, Ш), 8,73 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,35 (д, J = 8,5 Гц, Ш), 8,19 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,12 - 7,01 (м, 2Н), 4,05 - 3,92 (м, 2Н), 3,77 (с, ЗН), 1,95 - 1,80 (м, Ш), 1,58 (qd, J = 14,2, 5,5 Гц, 2Н), 1,30 (с, ЗН), 1,04 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,5 Гц, ЗН); ВЭЖХ время удерживания: tR = 7,77 мин.
Пример 60
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4-(дифторметил)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А: 8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-карбальдегид
К раствору 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (100 мг, 0,387 ммоль),
полученного, как описано в примере 16, часть G, в АсОН (4 мл) добавляли диоксид
селена (51,5 мг, 0,464 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 70 °С
в течение 3 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и остаток,
полученный таким образом, растворяли в дихлорметане (2 мл). Смесь фильтровали через
диатомовую землю (Celite(r)) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с
получением упомянутого в заголовке продукта (0,1 г, 0,202 ммоль, 52%-ный выход
неочищенного продукта) в виде бледно-желтого твердого вещества. Материал
180
использовали дальше без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/з 273,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H10CIN2O2, 273,0]; LC/MS время удерживания (способ Н): tR = 1,89 мин.
Часть В: 8-хлор-4-(дифторметил)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору 8-хлор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-
карбальдегида (200 мг, 0,733 ммоль) в DCM (1 мл) добавляли трифтор ид бис-(2-метоксиэтил)аминосеры (811 мг, 3,67 ммоль). Пробирку герметично закрывали и реакционную смесь оставляли перемешиваться при 50 °С в течение ночи. Реакционную смесь подщелачивали насыщенным водным раствором NaHCCb (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-4-(дифторметил)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (43 мг, 0,092 ммоль, 13%-ный выход неочищенного продукта) в виде белого твердого вещества. Материал использовали дальше без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/з 295,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H10CIF2N2O, 295,0]; LC/MS время удерживания (Способ Н): tR = 1,96 мин.
Часть С: (8)-трет-бутил-(1-((4-(дифторметил)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат Получение, как описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке соединения (15 мг, 0,016 ммоль, выход 19%). LC/MS (ESI): м/з 476,3 [(М+Н)+, вычислено для C25H32F2N3O4 476,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,14 мин.
Часть D: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4-(дифторметил)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получение, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке продукта (1,5 мг, 3,95 мкМ, выход 9%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 376,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H24F2N3O2, 376,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,63 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,97 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,12 мин. *Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 част./млн 8,81 (д, J = 5,52 Гц, Ш), 8,42 - 8,48 (м, 2Н), 7,97 - 8,26 (м, Ш), 7,09 - 7,15 (м, 2Н), 4,22 (дд, J = 9,54, 4,02 Гц, Ш), 4,04 (дд, J = 9,29, 7,03 Гц, Ш), 3,79 (с, ЗН), 3,39 (дт, J = 3,33, 1,73 Гц, Ш), 1,81 - 1,92 (м, Ш), 1,43 - 1,57 (м, 2Н), 1,02 (дд, J = 8,78, 6,53 Гц, 6Н). 19F ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 120,45.
Пример 61
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-7-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А: (8)-трет-бутил-(1-((7- или 9-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К раствору (8)-трет-бутил-( 1 -((4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7]нафтирид ин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (50 мг, 0,114 ммоль), полученного, как описано в примере 16, часть Н, в ацетонитриле (2 мл) добавляли 1-хлорпирролидин-2,5-дион (15,19 мг, 0,114 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 55 °С в течение 16 ч в течение ночи. Реакционную смесь подщелачивали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2 мл) и водой (10 мл). Раствор экстрагировали метилендихлоридом (3 х 10 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением смеси (8)-трет-бутил-(1-((7-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата и (8)-трет-бутил-(1-((9-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (60 мг, 0,037 ммоль, 32%-ный выход объединенного неочищенного продукта) в виде бледно-желтого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 474,4, [(М+Н)+, вычислено для C25H33CIN3O4, 474,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,24 мин.
NH2 1
Часть В: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-7-хлор-4,6-
диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он
К смеси (8)-трет-бутил-(1-((7-хлор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата и (8)-трет-бутил-( 1 -((9-хлор-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7 ] нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (30 мг, 0,063 ммоль) добавляли НС1 в 1,4-диоксане (241 мкл, 0,964 ммоль) при 0 °С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 2 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (колонка Symmetry С18 (19 х 250 мм) 7,0 мкм; подвижная фаза А: 0,1% TFA в воде; подвижная фаза В: ацетонитрил; скорость потока: 14,0 мл). Фракции после ВЭЖХ концентрировали, подщелачивали NaHC03 и экстрагировали с
183
помощью DCM (2 раза). Объединенные органические слои концентрировали в вакууме с получением очищенной смеси конечных продуктов 7-С1 и 9-С1 в виде не совсем белого твердого вещества. Смесь подвергали второй очистке (для разрешения региоизомеров) с помощью ВЭЖХ с нормальной фазой (Chiralpak ODH, (4,6 х 250 мм) 5,0 мкм; подвижная фаза А: н-гексан; подвижная фаза В: этанол); Фракции после ВЭЖХ концентрировали в вакууме с получением 7-хлор-региоизомера: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-7-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (3 мг, 7,2 мкмоль, выход 11%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 373,8 [(М+Н)+, вычислено для C20H25CIN3O2, 374,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,64 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,44 мин; *Н ЯМР (400 MHz, DMSO-de) 5 част./млн 8,65 (д, J = 5,65 Гц, Ш), 8,44 (д, J = 9,22 Гц, Ш), 8,20 (д, J = 5,58 Гц, Ш), 7,22 (д, J = 9,04 Гц, Ш), 4,05 - 4,10 (м, Ш), 3,98 (дд, J = 9,25,6,43 Гц, Ш), 3,73 (с, ЗН), 3,13 - 3,18 (м, Ш), 2,99 (с, ЗН), 1,81 - 1,89 (м, Ш), 1,28 - 1,42 (м, 2Н), 0,91 (дд, J = 13,80, 6,59 Гц, 2 Н).
Пример 62
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7] нафтирид ин-
5(6Н)-он
Смесь продуктов 7-С1 и 9-С1, полученных в примере 61, часть В, очищали (для разделения региоизомеров), как показано выше, с помощью ВЭЖХ с нормальной фазой (Chiralpak ODH, (4,6 х 250 мм) 5,0 мкм; подвижная фаза А: N-гексан; подвижная фаза В: этанол); ВЭЖХ-фракции концентрировали в вакууме с получением 9-хлор-региоизомера: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (5 мг, 0,013 ммоль, выход 21%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 373,8 [(М+Н)+, вычислено для C20H25CIN3O2, 374,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,61 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,37 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,14 мин. 1Я ЯМР (400 MHz, DMSO-d6) 5 част./млн 8,63 (д, J = 5,65 Гц, Ш), 8,60 (с, Ш), 8,26 (д, J = 5,71 Гц, Ш), 7,12 (с, Ш) 4,11 - 4,16 (м, Ш), 4,00 - 4,06 (м, Ш), 3,70 (с, ЗН), 3,13-
3,16 (м, Ш), 3,00 (с, ЗН), 1,82 - 1,90 (м, Ш), 1,34 - 1,42 (м, Ш), 1,23 - 1,32 (м, Ш), 0,900,95 (м, 6Н).
Пример 63
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6,9-триметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: (8)-трет-бутил-(4-метил-1-((4,6,9-триметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамат Получали, как описано в примере 3, часть А, и в примере 4, часть А, с получением (S)-трет-бутил-(4-метил-1-((4,6,9-триметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)пентан-2-ил)карбамата (30 мг, 0,038 ммоль, выход 40%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 453,9 [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O4 454,3]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,16 мин.
1 NH2 1
Часть В: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6,9-триметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-
метилпентил)окси)-4,6,9-триметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (15 мг, 0,040
ммоль, выход 62%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 353,9
185
[(М+ Н)+, вычислено для C21H28N3O2 354,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,64 мин. время удерживания ВЭЖХ (способ A): tR = 8,21 мин. ЧТЯМР (400 MHz, DMSO-d6) 5 част./млн 8,59 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,27 (с, Ш), 8,15 (д, J = 5,60 Гц, Ш), 6,92 (с, Ш), 3,90 - 4,08 (м, 2Н), 3,68 (с, ЗН), 3,12 - 3,20 (м, Ш), 2,99 (с, ЗН), 2,24 (с, ЗН), 1,85 (тд, J = 13,68, 6,53 Гц, ЗН), 1,22 - 1,43 (м, ЗН), 0,86 - 0,95 (м, 6Н)
Пример 64
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
Часть А. (8)-трет-бутил-1-(9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат
Суспензию (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (2,4 г, 4,63
ммоль), полученного, как описано в примере 3, часть А, РсЬ(с1Ьа)з (0,212 г, 0,231 ммоль),
DPPF (0,257 г, 0,463 ммоль) и цианид цинка (II) (0,544 г, 4,63 ммоль) в DMF (20 мл) и
воде (1 мл) дегазировали азотом и нагревали до 130 °С в течение ночи. После охлаждения
до комнатной температуры летучие компоненты концентрировали при пониженном
давлении. Остаток восстанавливали в этилацетате и фильтровали через диатомовую
землю (Celite(r)). Органический слой промывали НгО, затем насыщенным раствором
соли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный
продукт очищали на колонке с силикагелем (петролейный эфир и этилацетат) с
получением (8)-трет-бутил-1-(9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
186
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (1,9 г, 4,09 ммоль, выход 88%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 465,2 [(М+Н)+, вычислено для C26H33N4O4, 465,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,74 мин.
CN NH2 1
Часть В. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7] нафтиридин-9-карбонитрила (1,6 г, 3,89 ммоль, выход 95%) в виде светло-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 365,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H25N4O2, 365,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,13 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,70 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,57 мин. *Н ЯМР (400 МГц, MeOD) 5 част./млн 9,07 (с, Ш), 8,75 (с, 2Н), 7,28 (с, Ш), 4,69 (м, Ш), 4,55 (м, Ш), 3,87 (м, 4Н), 3,27 (с, ЗН), 1,87 (м, 2Н), 1,74 (м, Ш), 1,08 (м, 6 Н).
Пример 65
(8)-4,6-диметил-8-(4-метил-2-(метиламино)пентилокси)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
Часть А. (8)-трет-бутил-(1-((9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)(метил)карбамат (8)-трет-бутил-(1-((9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (60 мг, 0,129 ммоль), полученный, как описано в примере 64, часть В, помещали в DMFA (3 мл) и охлаждали до 0 °С. Реакционную смесь обрабатывали NaH (10,33 мг, 0,258 ммоль) с последующим добавлением Mel (0,016 мл, 0,258 ммоль). После перемешивания при 0 °С в течение 10 мин реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Затем смесь гасили ледяной водой и экстрагировали этилацетатом (2x3 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)(метил)карбамата (70 мг, 0,127 ммоль, 99%-ный выход неочищенного продукта) в виде не совсем белого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/е 479,2 [(М+Н)+, вычислено для C27H35N4O4 479,3]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,16 мин.
Часть В. (8)-4,6-диметил-8-((4-метил-2-(метиламино)пентил)окси)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-4,6-диметил-8-((4-метил-2-(метиламино)пентил)окси)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрила (25 мг, 0,058 ммоль, выход 46%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 379,0, [(М+Н)+, вычислено для C22H27N4O2 379,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,87 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,59 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,88 мин. *Н ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 част./млн 1,03 (д, J = 22,80 Гц, 6Н), 1,56-1,62 (м, Ш), 1,67-1,72 (м, Ш), 1,841,87 (м, Ш), 2,67 (с, ЗН), 3,10 (с, ЗН), 3,28-3,30 (м, Ш), 3,81 (с, ЗН), 4,35 (с, Ш), 4,49 (с, Ш), 7,18 (с, Ш), 8,20 (д, J = 5,60 Гц, Ш), 8,82 (с, Ш).
Пример 66 188
Часть А: Метил-4-хлор-6-метилникотинат К раствору метил-4,6-дихлорникотината (3,00 г, 14,56 ммоль) и триметилбороксина (1,097 г, 8,74 ммоль) в 1,4-диоксане (70 мл) и воде (7 мл) добавляли карбонат цезия (14,23 г, 43,7 ммоль). Смесь дегазировали аргоном в течение 5 минут. Добавляли аддукт PdCi2(dppf)-CH2Cl2 (1,189 г, 1,456 ммоль) и реакционную смесь нагревали до ПО °С в течение 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (2x100 мл), сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием смеси этилацетат-петролейный эфир, с получением метил-4-хлор-6-метилникотината (700 мг, 2,87 ммоль, выход 20%) в виде желтой жидкости. LC/MS (ESI) м/е 186,0 [(М+Н)+, вычислено для C8H9C1N02 185,6]; LC/MS Время удерживания (способ I) tR = 1,79 мин.
Часть В: Метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотинат К раствору метил-4-хлор-6-метилникотината (660 мг, 3,56 ммоль) и (4-хлор-2-фторфенил)бороновой кислоты (620 мг, 3,56 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавляли карбонат цезия (3,48 г, 10,67 ммоль). Реакционную смесь дегазировали аргоном в течение 5 мин. Рс1(РпзР) 4 (205 мг, 0,178 ммоль) добавляли к реакционной смеси и
нагревали до температуры 80 °С в течение 16 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (2x50 мл), сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с получением метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотината (500 мг, 1,53 ммоль, выход 43%) в виде желтой жидкости. LC/MS (ESI) м/е 280,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIFNO2 279,6]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,87 мин.
Часть С: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотиновая кислота К раствору метилового эфира 4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотината (700 мг, 2,50 ммоль) в МеОН (5 мл) добавляли раствор NaOH (200 мг, 7,51 ммоль) в воде (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и полученный остаток доводили до рН ~ 3 добавлением 1,5 н НС1. Реакционную смесь экстрагировали дихлорметаном. Органическую фазу сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотиновой кислоты (500 мг, 1,730 ммоль, 92%-ный выход неочищенного продукта) в виде белого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 266,0 [(М+Н)+, вычислено для C13H10CIFNO2 266,03]; LC/MS (способ I), tR = 1,51 мин.
Часть D: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-ГЧ,6-диметилникотинамид К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотиновой кислоты (500 мг, 1,88 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при 0 °С по каплям добавляли оксалилхлорид (0,988 мл, 11,29 ммоль), затем DMF (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь упаривали досуха. Остаток
растворяли в дихлорметане до (50 мл) и охлаждали до 0 °С. Добавляли гидрохлорид метиламина (1,27 г, 18,82 ммоль) к последующим добавлением триэтиламина (2,62 мл, 18,82 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали дихлорметаном (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-1Ч,6-диметилникотинамида (520 мг, 1,43 ммоль, 76%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 279,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H13CIFN2O 279,1]; LC/MS время удерживания ((способ I) tR = 1,82 мин.
Часть F: (8)-трет-бутил-(1-((2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат
Часть Е: 8-хлор-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)-ГЧ,6-диметилникотинамида (520 мг, 1,86 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) при 0 °С добавляли NaH (224 мг, 5,60 ммоль). Реакционную смесь доводили до комнатной температуры и постепенно перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-2,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (480 мг, 1,51 ммоль, выход 81%) в виде кирпично-красного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 259,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIN2O 259,05]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,91 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 9,41 (с, Ш), 8,48 (д, J = 8,59 Гц, Ш), 8,23 (с, Ш), 7,69 (д, J = 1,98 Гц, 1 Н), 7,44 (дд, J = 8,64, 1,94 Гц, Ш), 3,78 (с, ЗН), 2,75 (с, ЗН).
К перемешиваемому раствору 8-хлор-2,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она
(100 мг, 0,387 ммоль) и трет-бутил (1-гидрокси-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамата (168
мг, 0,773 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли карбонат цезия (189 мг, 0,580 ммоль) и 2-
ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-три-ьпропил-1,Г-бифенил (9,85 мг, 0,023 ммоль).
Реакционную смесь дегазировали аргоном в течение 5 минут и добавляли ацетат
палладия (II) (26 мг, 0,116 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100 °С в течение 18
часов. Реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и фильтрат
концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью
хроматографии на силикагеле с использованием смеси этилацетат-петролейный эфир, с
получением (8)-трет-бутил-(1-((2,6-д иметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,171 ммоль, выход 44%) в виде темно-желтого полутвердого продукта. LC/MS (ESI)We 440,6 [(М+Н+)+, вычислено для C25H34N3O4 440,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,89 мин.
Часть G: (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К перемешиваемому раствору (8)-трет-бутил-(1-((2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (40 мг, 0,069 ммоль) в ацетонитриле (3 мл) при комнатной температуре добавляли NBS (12 мг, 0,069 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали дихлорметаном (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (30 мг, 0,027 ммоль, 40%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтого масла. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 518,2 [(М+Н)+, вычислено для Сг5НззВгКз04 518,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,25 мин.
Часть Н: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-2,6-диметилбензо
[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он
раствору (8)-трет-бутил-( 1 -((9-бром-2,6-д иметил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (30 мг, 0,058 ммоль) в МеОН (3 мл) при 0 °С добавляли 4М НС1 в 1,4-диоксане (0,362 мл, 1,447 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с получением (S)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (6 мг, 0,014 ммоль, выход 24%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 418,0 [(М+Н)+, вычислено для СгоШбВгКзОг 418,1]; LC/MS время удерживания (способ Н): tR = 1,70 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 6,33 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,19 мин. ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 9,31
(с, Ш), 9,28 - 9,33 (м, Ш), 8,58 (с, Ш), 8,08 (с, Ш), 7,09 (с, 1 Н), 4,42 (дд, J = 9,79, 3,26 Гц, Ш), 4,25 (дд, J = 9,91, 6,15 Гц, Ш), 3,78 (с, ЗН), 3,63 (шир.с, 1 Н), 2,73 (с, ЗН), 2,00 (шир.с, 4 Н), 1,85 - 1,92 (м, Ш), 1,71 - 1,80 (м, Ш), 1,57 - 1,66 (м, Ш), 1,06 (дд, J = 6,40, 4,64 Гц, 6 Н).
Пример 67
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-2,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: Метил-4-хлор-6-метилникотинат
'CI
К раствору метил-4,6-дихлорникотината (3,00 г, 14,56 ммоль) и триметилбороксина (1,097 г, 8,74 ммоль) в 1,4-диоксане (70 мл) и воде (7 мл), добавляли карбонат цезия (14,23 г, 43,7 ммоль). Смесь дегазировали аргоном в течение 5 мин. Аддукт PdCh(dppf)-CH2CI2 (1,189 г, 1,456 ммоль) добавляли к реакционной смеси и нагревали до 110 °С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (2 х 100 мл), сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием смеси этилацетат-петролейный эфир, с получением метил-4-хлор-6-метилникотината (700 мг, 2,87 ммоль, выход 20%) в виде желтой жидкости. LC/MS (ESI) м/е 186,0 [(М+Н)+, вычислено для C8H9C1N02 186,0]; LC/MS Время удерживания (способ I): tR = 1,79 мин.
Часть В: Метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотинат
К раствору метил-4-хлор-6-метилникотината (660 мг, 3,56 ммоль) и (4-хлор-2-фторфенил)бороновой кислоты (620 мг, 3,56 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавляли карбонат цезия (3,48 г, 10,67 ммоль). Реакционную смесь дегазировали аргоном в течение 5 мин. Pd(Pli3P)4 (205 мг, 0,178 ммоль) добавляли к реакционной смеси и нагревали до 80°С в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (2 х 50 мл), сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с получением метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотината (500 мг, 1,53 ммоль, выход 43%) в виде желтой жидкости. LC/MS (ESI) м/е 280,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIFNO2 280,0]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 1,87 мин.
Часть С: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотиновая кислота К раствору метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотината (700 мг, 2,50 ммоль) в МеОН (5 мл) добавляли NaOH (200 мг, 7,51 ммоль) в воде (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем выпаривали при пониженном давлении и полученный остаток доводили до рН ~ 3 добавлением 1,5 н раствора НС1. Продукт экстрагировали дихлорметаном. Органическую фазу сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотиновой кислоты (500 мг, 1,730 ммоль, 69%-ный выход неочищенного продукта) в виде белого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 266,0 [(М+Н)+, вычислено для C13H10CIFNO2 266,0]; LC/MS Время удерживания (способ I): tR = 1,51 мин.
Часть D: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-1Ч,6-диметилникотинамид К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)-6-метилникотиновой кислоты (500 мг, 1,88 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при 0 °С по каплям добавляли оксалилхлорид (0,988 мл, 11,29 ммоль), с последующим добавлением DMF (0,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь упаривали досуха. Остаток растворяли в дихлорметане (50 мл) и охлаждали до 0 °С. Добавляли гидрохлорид метиламина (1,27 г, 18,82 ммоль) и триэтиламин (2,62 мл, 18,82 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали дихлорметаном (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-ГЧ,6-диметилникотинамида (520 мг, 1,43 ммоль, 76%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS
(ESI) We 279,0 [(M+H)+, вычислено для C14H13CIFN2O 279,1]; LC/MS время удерживания (способ I): tR = 1,82 мин.
Часть Е: 8-хлор-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)-г\Г,6-диметилникотинамида (520 мг, 1,86 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) при 0 °С добавляли NaH (224 мг, 5,60 ммоль). Реакционную смесь доводили до комнатной температуры и постепенно перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта, 8-хлор-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (480 мг, 1,51 ммоль, 81%-ный выход неочищенного продукта) в виде красного твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 259,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIN2O 259,0]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 1,74 мин.
*Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 9,41 (с, Ш), 8,48 (д, J = 8,59 Гц, Ш), 8,23 (с, Ш), 7,69 (д, J = 1,98 Гц, 1 Н), 7,44 (дд, J = 8,64, 1,94 Гц, Ш), 3,78 (с, ЗН), 2,75 (с, ЗН).
Часть F: (8)-трет-бутил-(1-((2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К перемешиваемому раствору 8-хлор-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (100 мг, 0,387 ммоль) и трет-бутил (1-гидрокси-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамата (168 мг, 0,773 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли карбонат цезия (189 мг, 0,580 ммоль) и 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-три-ьпропил-1,Г-бифенил (9,85 мг, 0,023 ммоль). Реакционную смесь дегазировали аргоном в течение 5 мин и добавляли к ней палладий (II) ацетат (26 мг, 0,116 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100 °С в течение 18 часов. Реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и фильтрат
выпаривали. Полученный остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием смеси этилацетат-петролейный эфир, с получением продукта, (Б)-трет-бутил-(1-((2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,171 ммоль, выход 44%) в виде темно-желтого полутвердого продукта. LC/MS (ESI) м/е 440,7 [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O4 440,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,89 мин.
Часть G. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-2,6 диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
(8)-трет-бутил-( 1 -((2,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтирид ин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (0,05 г, 0,114 ммоль) подвергали реакции удаления защитной Вос-группы, как описано в примере 2, часть Е, чтобы дать (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (13 мг, 0,037 ммоль, 33%) в виде бесцветного полутвердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 340,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O2 340,2]; LC/MS Время удерживания (способ I): tR = 1,62 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,17 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,50 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 9,33 (с, Ш), 8,38 (д, J = 8,78 Гц, Ш), 8,34 - 8,41 (м, Ш), 8,10 (с, Ш), 8,06 - 8,12 (м, Ш), 7,04 - 7,13 (м, 2Н), 4,17 (дд, J = 9,29, 4,02 Гц, Ш), 3,99 (дд, J = 9,29, 7,28 Гц, Ш), 3,77 (с, ЗН), 3,66 (д, J = 2,76 Гц, Ш), 2,72 (с, ЗН), 1,80 - 1,92 (м, Ш), 1,39 - 1,54 (м, 2Н), 1,01 (дд, J = 9,29, 6,53 Гц, 7Н).
Пример 68
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
Часть А. (8)-трет-бутил-(1-((9-хлор-2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (8)-трет-бутил-( 1 -((2,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтирид ин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (0,05 г, 0,114 ммоль), полученный, как описано в примере 67, часть F, подвергали хлорированию с использованием NCS (0,018 г, 0,137 ммоль), используя методику, описанную в примере 20, часть А, с получением (З)-трет-бутил (1-((9-хлор-2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (50 мг, 0,052 ммоль, выход 45%) в виде бесцветного масла. LC/MS (ESI) м/е 414,1 [(М+Н)+, вычислено для C25H32CIN3O4 474,2]; LC/MS время удерживания (способ Н): tR = 0,94 мин.
Часть В. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (Б)-трет-бутил (1-((9-хлор-2,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (0,04 г, 0,041 ммоль) подвергали реакции удаления защитной Вос-группы по методике, описанной в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-2,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,006 г, 0,015 ммоль, выход 37%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 373,8 [(М+Н)+, вычислено для C20H25CIN3O2 374,2]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 1,55 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR =10,18 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 15,48 мин. ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 9,37 (с, Ш), 8,46 - 8,53 (м, Ш), 8,14 (с,
Ш), 7,19 (с, Ш), 4,23 - 4,31 (м, Ш), 4,03 - 4,11 (м, Ш), 3,78 - 3,88 (м, ЗН), 2,73 (с, Ш), 2,70 -2,77 (м, ЗН), 1,81 -1,90 (м, Ш), 1,44 - 1,58 (м, 2Н), 0,96 - 1,06 (м, 6Н).
Пример 69
(8)-8-(2-амино-3-метоксипропокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
ОТ у "СГ NH2
Часть А: (К)-2-амино-3-метоксипропан-1-ол Получение, как описано в литературе, Kim, Н. J. et.al. Bioorg Med. Chem. Lett.,2011, 21, 3809-3812.
Часть В: (8)-бензил(1-метокси-3-((6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-
8-ил)окси)пропан-2-ил)карбамат Получение, как описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке продукта (0,12 г, 0,145 ммоль, выход 24%) в виде желтой смолы. LC/MS (ESI): м/з 448,6 [(М+Н)+, вычислено для C25H26N3O5, 448,5]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,74 мин.
Часть С: (8)-8-(2-амино-3-метоксипропокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке продукта (14 мг, 0,042 ммоль, выход 70%) в виде коричневой смолы. LC/MS (ESI): м/з 314,2 [(М+Н)+, вычислено для C17H20N3O3, 314,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,38 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,29 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,31 мин. ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 9,47 (с, Ш), 8,77 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,42 (д, J = 8,78 Гц, Ш), 8,25 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 7,04 -7,17 (м, 2Н), 4,26 (дд, J = 9,29, 4,77 Гц, Ш), 4,10 - 4,19 (м, Ш), 3,81 (с, ЗН), 3,52 - 3,65 (м, 2 Н) 3,44 (с, ЗН), 3,38 (дт, J = 3,33, 1,73 Гц, Ш).
Пример 70
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Часть А. Метил-4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-2-метилникотинат Получали, как описано в примере 16, часть D, проводя реакцию сочетания Сузуки между метил-4-хлор-2-метилникотинатом (полученным, как описано в примере 14, часть А) и 2-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксабороланом (полученным, как описано в примере 16, часть А-часть С) с получением метил-4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-2-метилникотината (3 г, 4,13 ммоль, выход 24%) в виде коричневого масла. *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 8,60 (д, J = 5,2 Гц, Ш), 7,36 (м, Ш), 7,20 (м, 2Н), 3,74 (с, ЗН), 2,49 (с, 3 Н).
Часть В. 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-2-метилникотиновая кислота Получали, как описано в примере 16, часть Е, проводя гидролиз метил-4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-2-метилникотината с получением 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-2-метилникотиновой кислоты (1,7 г, 4,02 ммоль, выход 97%) в виде белого твердого вещества. *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 13,38 (шир.с, Ш), 8,58 (д, J = 5,2 Гц, Ш), 7,74 (м, Ш), 7,53 (м, Ш), 7,41 (д, J = 4,8 Гц, Ш), 2,43 (с, ЗН).
Часть С. 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-1Ч,2-диметилникотинамид К перемешиваемому раствору 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-2-метилникотиновой кислоты (1,7 г, 4,02 ммоль) в DMFA (0,5 мл) добавляли DIEA (2,81 мл, 16,06 ммоль), НОВТ (1,230 г, 8,03 ммоль), EDC (1,155 г, 6,02 ммоль) при 0 °С с последующим добавлением гидрохлорида метиламина (0,488 г, 7,23 ммоль). После перемешивания в течение 10 минут баню со льдом удаляли и реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли этилацетатом (10 мл) и промывали водой (10 мл), затем насыщенным солевым раствором (10 мл). Органический слой отделяли и сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-1Ч,2-диметилникотинамида (1 г, 2,123 ммоль, 53%-ный выход неочищенного продукта ) в виде коричневого твердого вещества, которое было принято на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 297,,3 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIF2N2O 297,1]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 0,76 мин.
Часть D. 8-хлор-9-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 16, часть G, из 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-2-
метилникотиновой кислоты, с получением 8-хлор-9-фтор-4,6-
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (530 мг, 1,532 ммоль, выход 72%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 277,2 [(М+Н)+, вычислено для C14H11CIFN2O 277,04]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,83 мин.
Часть Е. (8)-трет-бутил-1-(9-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, из 8-хлор-9-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Я)-она, с получением (8)-трет-бутил-1-(9-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (350 мг, 0,367 ммоль, 24 %) в виде масла. LC/MS (ESI) м/е 458,6 [(М+Н)+, вычислено для Сг5НззРКз04458,23]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,24 мин.
F NH2 1
Часть F. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-фтор-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он Получали, как описано в примере 16, часть I, из (8)-трет-бутил-1-(9-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (57,6 мг, 0,095 ммоль, 91%) в виде желтого масла. LC/MS (EST) м/е 358,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H25FN3O2 358,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,53 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,16 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,58 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,23 (д, J = 12,0 Гц, Ш), 8,09 (д, J = 5,0 Гц, Ш), 7,19 (д, J = 6,8 Гц, Ш), 4,26 (дд, J = 9,5, 4,0 Гц, Ш), 4,08
(т, J = 8,2 Гц, Ш), 3,79 (с, ЗН), 3,41 - 3,38 (м, Ш), 3,10 (с, ЗН), 1,94 - 1,82 (м, Ш), 1,58 -1,39 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 71
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-(гидроксиметил)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-5-оксо-9-винил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 64, часть А и пример 46, часть В из (З)-трет-бутил-1 -(9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата с получением упомянутого в заголовке продукта (1,2 г, 1,985 ммоль, выход 64%). LC/MS (ESI) м/е 466,2 [(М+Н)+, вычислено для C27H36N3O4 466,3]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,79 мин.
Часть В. (8)-трет-бутил-1-(9-формил-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 55, часть В, из (8)-трет-бутил-1-(4,6-д иметил-5-оксо-9-винил-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата с получением упомянутого в заголовке продукта (1,2 г, 0,980 ммоль, выход 49%) в виде
Часть С. (8)-трет-бутил-1-(9-(гидроксиметил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 31, часть Е, с получением упомянутого в заголовке продукта (0,100 г, 0,160 ммоль, выход 87%) в виде коричневой смолы. LC/MS (ESI) м/е 410,2 [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O5 470,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,48 мин.
Часть D. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-(гидроксиметил)-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке продукта (28 мг, 0,073 ммоль, выход 34%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 370,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O3 370,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,03 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,46 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,13 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 част./млн 8,55 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,37 (с, Ш), 8,12 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,01 (с, Ш), 4,80 (с, 2Н), 4,28 (дд, J = 9,5, 3,5 Гц, Ш), 4,08 (дд, J = 9,5, 7,0 Гц, Ш), 3,78 (с, ЗН), 3,48 -3,40 (м, Ш), 3,08 (с, ЗН), 1,92 - 1,80 (м, Ш), 1,64 - 1,41 (м, 2Н), 1,05 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,03 (д, J = 6,8 Гц, ЗН).
Пример 72
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(оксазол-5-ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-9-(оксазол-5-ил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 71, часть D, и в примере 48, часть В, из (З)-трет-бутил-1-(9-формил-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата с получением упомянутого в заголовке продукта (150 мг, 0,068 ммоль, выход 56%) в виде желтой смолы. LC/MS (ESI) м/е 507,2 [(М+Н)+, вычислено для C28H35N4O5 507,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,64 мин.
Часть В. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(оксазол-5-ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, из (8)-трет-бутил-1-(9-формил-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата с получением упомянутого в заголовке продукта (20 мг, 0,045 ммоль, выход 67%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 407,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H27N4O3 407,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,64 мин. ВЭЖХ время удерживания
(способ A): tR = 7,46 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,89 мин ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,80 мин ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,66 (с, Ш), 8,57 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,34 (с, Ш), 8,15 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,60 (с, Ш), 7,08 (с, Ш), 4,38 - 4,26 (м, Ш), 4,24 - 4,17 (м, Ш), 3,76 (с, ЗН), 3,48 (дд, J = 3,3, 1,8 Гц, Ш), 3,05(с, ЗН), 1,93 - 1,82 (м, Ш), 1,65 - 1,44 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 2,5 Гц, ЗН), 1,02 (д, J = 2,5 Гц, ЗН).
Пример 73
8-(2-амино-5,5,5 -трифторпентилокси)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
Часть А. трет-бутил-1 -(4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтирид ин-8-ил)окси)-5,5,5 -трифторпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением трет-бутил-1-(4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5,5 -трифторпентан-2-илкарбамата (300 мг, 0,416 ммоль, выход 54%) в виде белого твердого вещества. !Н LC/MS (ESI) м/е 480,2 [(М+Н)+, вычислено для C24H29F3N3O4 480,2] LC/MC время удерживания (способ Н): tR = 2,22 мин.
Часть В. трет-бутил-1-(9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-5,5,5 -трифторпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 3, часть А, с получением упомянутого в заголовке продукта (50 мг, 0,06 ммоль, выход 58%) в виде бледно-желтого твердого вещества. *Н LC/MS (ESI) м/е 559,0 [(М+2Н)+, вычислено для CiJ^gBrFsNsCU 559,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,24 мин.
Часть С. трет-бутил-1-(9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-5,5,5 -трифторпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 64, часть В, с получением упомянутого в заголовке продукта (40 мг, 0,079 ммоль, выход 11%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 505,4 [(М+Н)+, вычислено для C25H28F3N4O4 505,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,1 мин.
Часть D. 8-(2-амино-5,5,5 -трифторпентилокси)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке продукта (50 мг, 0,036 ммоль, выход 45%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 405,4 [(М+Н)+, вычислено для C20H20F3N4O2 405,1]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,71 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,35
207
мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,38 мин. ^-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 8,98 (с, Ш), 8,67 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,30 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,12 (с, Ш), 4,19 (д, J = 6,0 Гц, 2Н), 3,71 (с, ЗН), 3,16 - 3,14 (м, Ш), 3,00 (с, ЗН), 2,45 -2,30 (м, 2Н), 1,89 -1,80 (м, Ш), 1,58 - 1,55 (м, Ш).
Пример 74
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(трифторметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-5-оксо-9-(1Н-пиразол-1-ил)-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (50 мг,
0,096 ммоль) и Ш-пиразола (7,88 мг, 0,116 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) и DMFA (0,5 мл)
добавляли иодид меди(1) (18,37 мг, 0,096 ммоль), №,К2-диметилэтан-1,2-диамин (17,00
мг, 0,193 ммоль) и фосфат калия (61,4 мг, 0,289 ммоль). Реакционную смесь дегазировали
азотом в течение 5 мин и нагревали до 170 °С в течение 1 ч в микроволновой печи.
Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через
диатомовую землю (Celite(r)) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении.
Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ (элюент: 2% МеОН: DCM) с
получением (З)-трет-бутил-1 -(4,6-д иметил-5 -оксо-9-( 1 Н-пиразол-1 -ил)-5,6
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (40 мг, 0,028 ммоль, выход 29%) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 406,5 [(М+Н)+, вычислено для C23H28N5O2 406,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,71 мин.
Часть В. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(трифторметил)бензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, из (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-5-оксо-9-(1Н-пиразол-1-ил)-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(трифторметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (2 мг, 0,005 ммоль, выход 24%) в виде зелено-желтого полутвердого продукта. LC/MS (ESI) м/е 406,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H28N5O2 406,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,37 мин ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,54 мин; *Н ЯМР рацемического соединения (400 МГц, DMSO-de) 5 част./млн 8,98 (с, Ш), 8,67 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,30 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,12 (с, Ш), 4,19 (д, J = 6,0 Гц, 2Н), 3,71 (с, ЗН), 3,16 - 3,14 (м, Ш), 3,00 (с, ЗН), 2,45 -2,30 (м, 2Н), 1,89 - 1,80 (м, Ш), 1,58 - 1,55 (м, Ш).
Пример 75
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(трифторметил)бензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он
I NH2 1
Часть A. (S)-2-( 1 -(4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-
4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3 -дион (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (300 мг, 0,683 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (15 мл) и обрабатывали йодной кислотой (156 мг, 0,683 ммоль) и H2SO4 (0,018 мл, 0,341 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80 °С в течение 20 мин, после чего добавляли иод (104 мг, 0,410 ммоль) и нагревание продолжали дополнительно в течение 3 ч. После охлаждения выпаривали летучие вещества. Остаток растворяли в этилацетате (25 мл) и органический слой промывали насыщенным водным раствором NaHC03 (10 мл), затем насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-2-(1-(4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (300 мг, 0,61 ммоль, 90%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого твердого вещества. Оно было принято на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 466,1 [(М+Н)+, вычислено для C20H25IN3O2 466,1]; LC/MS время удерживания (способ F): tR = 0,58 мин.
Часть В. (8)-2-(1-(9-иод-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3 -дион
К раствору (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-иод-4,6-
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (130 мг, 0,140 ммоль) в 1,4-диоксане (3 мл)
добавляли г> Г-этил-г\Г-изопропилпропан-2-амин (54,2 мг, 0,419 ммоль) и изобензофуран-
1,3-дион (24,83 мг, 0,168 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным
210
холодильником в течение 16 часов. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc (10 мл). Органические слои промывали водой, насыщенным водным раствором NaHC03. Объединенные водные слои экстрагировали этилацетатом (3 х 10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ТСХ-пластины с использованием 2%-ного раствора метанола в DCM в качестве системы элюента, с получением (8)-2-(1-(9-иод-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (85 мг, 0,084 ммоль, выход 60%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 596,5 [(М+Н)+, вычислено для C28H27IN3O4 596,1]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,3 мин.
Часть С. (8)-2-(1-(4,6-диметил-5-оксо-9-(трифторметил)-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-дион
Высушенный фторид калия (19,51 мг, 0,336 ммоль) и иодид меди (I) (64,0 мг, 0,336
ммоль) смешивали и нагревали до 200 °С при осторожном встряхивании при
пониженном давлении (1 мм рт.ст.) до появления светло-желто-зеленоватого цвета.
После охлаждения добавляли безводный гЧ-метил-2-пирролидон (1 мл) с последующим
добавлением (8)-2-(1-((9-иод-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-
8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (100 мг, 0,168 ммоль) и
триметил(трифторметил)силана (0,075 мл, 0,504 ммоль). Коричневый раствор,
полученный таким образом, нагревали при 90 °С в течение 16 ч. После охлаждения
добавляли водный раствор аммиака (10 мл) к реакционной смеси. Реакционную смесь
экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические слои промывали
насыщенным солевым раствором (1x10 мл), сушили над сульфатом натрия и
концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью
препаративной ТСХ (50% этилацетат: петролейный эфир в качестве системы элюента) с
получением (S)-2-( 1 -(4,6-д иметил-5 -оксо-9-(трифторметил)-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона
211
(80 мг, 0,033 ммоль, выход 20%, 22%-ной чистоты) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета. LC/MS (ESI) м/е 538,6 [(М+Н)+, вычислено для C29H27F3N3O4 538,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,27 мин.
CF3 NH2 1
Часть D. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-
(трифторметил)бензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-2-(1-((4,6-диметил-5-оксо-9-(трифторметил)-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (50 мг, 0,019 ммоль) в этаноле (4 мл) добавляли гидрат гидразина (6,52 мг, 0,130 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при температуре 45 °С в течение 2 ч. После охлаждения реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (колонка Symmetry С-18 (19,0 х 250 мм) 7,0 мкм; подвижная фаза А: ацетат аммония в воде; подвижная фаза В: ацетонитрил; скорость потока: 16,0 мл) с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(трифторметил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (5 мг, 0,012 ммоль, выход 64%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 408,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H25F3N3O2 408,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,25 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 10,10 мин ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,69 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,66 (с, Ш), 8,63 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,22 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,19 (с, Ш), 4,42 - 4,38 (м, Ш), 4,28 - 4,20 (м, Ш), 3,83 (с, ЗН), 3,58 - 3,49 (м, Ш), 3,11 (с, ЗН), 1,90 - 1,82 (м, Ш), 1,68 - 1,62 (м, Ш), 1,58 - 1,53 (м, Ш), 1,10 -1,00 (м, 6Н).
Пример 76
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(метилсульфонил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть A. (S)-2-( 1 -(4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-
4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3 -дион (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (300 мг, 0,683 ммоль) растворяли в уксусной кислоте (15 мл) и обрабатывали йодной кислотой (156 мг, 0,683 ммоль) и H2SO4 (0,018 мл, 0,341 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80 °С и выдерживали в течение 20 мин, после чего добавляли иод (104 мг, 0,410 ммоль) и продолжали нагревание при 80 °С в течение еще 3 ч. После охлаждения летучие вещества испаряли и остаток растворяли в этилацетате (25 мл). Органический слой промывали насыщенным водным раствором NaHC03 (10 мл), затем насыщенным солевым раствором (10 мл), сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (S)-2-(l-(4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)изоиндолин-1,3-диона (300 мг, 0,61 ммоль, 90%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого твердого вещества. Материал был взят на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 466,1 [(М+Н)+, вычислено для C20H25IN3O2 466,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,58 мин.
Часть В. (8)-трет-бутил-1-(9-иод-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 15, часть С, с получением (8)-трет-бутил-1-(9-иод-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (300 мг, 0,531 ммоль, выход 82%) в виде красно-оранжевого твердого
вещества. LC/MS (ESI) м/е 566,5 [(M+H)+, вычислено для C25H33IN3O4 566,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,27 мин.
N'> 5!Y^N'
S02Me HN4
Вое
Часть С. (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-9-(метилсульфонил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат (8)-трет-бутил-(1-((9-иод-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (100 мг, 0,177 ммоль), L-пролин (20,36 мг, 0,177 ммоль), натриевую соль метасульфоновой кислоты (181 мг, 1,769 ммоль), раствор NaOH (11,32 мг, 0,283 ммоль) и иодид меди (I) (33,7 мг, 0,177 ммоль) растворяли в DMSO (5 мл) и продували газообразным азотом в течение 5 мин. Полученную смесь герметично закрывали в микроволновой пробирке и нагревали при 100 °С в микроволновой печи в течение 2,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, обрабатывали ледяной водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-9-(метилсульфонил)-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (150 мг, 0,07 ммоль, 39%-ный выход неочищенного продукта, 24%-ной чистоты) в виде черного смолистого твердого вещества. Материал был взят на следующей стадии без очистки. LC/MS (ESI) м/е 518,2 [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O6S 518,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,51 мин.
S02Me NH2
Часть D. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(метилсульфонил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(метилсульфонил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она
(4 мг, 0,009 ммоль, выход 13%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 466,1 [(М+Н)+, вычислено для C20H25IN3O2 466,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,58 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ): tR = мин и ВЭЖХ время удерживания (способ): tR = мин. *НЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн - 8,85 (с Ш), 8,65 (д, J = 6 Гц, 1 Н), 8,25 (д, J = 6 Гц, Ш), 7,25 (с, Ш), 4,65 (м, Ш), 4,32 (м, Ш), 3,85 (с, 4Н), 3,1 (с, ЗН), 1,93 (с, ЗН), 1,92 (м, Ш), 1,65 (м, 2Н), 1,01 (м, 6Н).
Пример 77
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (500 мг, 0,192 ммоль) (полученного, как описано в примере 49), в ацетонитриле (5 мл) и воде (5 мл) добавляли нитрат аммония-церия (527 мг, 0,962 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (5 мл) и водой (5 мл). Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (1:1 этилацетат:гексан) с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (100 мг, 0,154 ммоль, выход 80%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 326,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H24N3O2 326,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,56 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 6,98 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,96 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 част./млн 6,32 (м, Ш), 8,44 (м, 2Н), 7,13 (м, Ш), 6,94 (д, J = 2,4 Гц, Ш), 4,4 (м, 1 Н), 4,3 (м, Ш), 3,75 (м, Ш), 3,2 (с, ЗН), 1,75 (м, ЗН), 1,10 (м, 6Н).
Пример 78
(К)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
Часть А. (К)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Реакцию сочетания Бухвальда выполняли, как это описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке соединения (900 мг, 1,58 ммоль, выход 54%, 77%-ной чистоты) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 440,3 [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O4 440,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,89 мин.
Часть В. (К)-трет-бутил-1-(9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 3, часть А, с получением упомянутого в заголовке соединения (750 мг, 0,94 ммоль, выход 79%, 65%-ной чистоты) в виде твердого вещества
оранжево-красного цвета. LC/MS (ESI) м/е 518,2 [(М+Н)+, вычислено для СгбНззВгКзСч 518,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,92 мин.
Часть С. (К)-трет-бутил-1-(9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 64, часть В, с получением упомянутого в заголовке соединения (300 мг, 0,18 ммоль, выход 47%, 28%-ной чистоты) в виде черной смолы. LC/MS (ESI) м/е 465,2 [(М+Н)+, вычислено для C26H33N4O4 465,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,74 мин.
CN NH2 1
Часть D. (R)-8 -(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением в заголовке соединение (20 мг, 0,051 ммоль, выход 59%, 93% чистоты) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 365,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H25N4O2 365,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,10 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,35 мин и ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,17 мин. ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,98 (с, Ш), 8,71 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 8,53 (д, J = 6,5 Гц, Ш), 7,23 (с, Ш), 4,65 (дд, J = 10,7, 3,1 Гц, Ш), 4,50 (дд, J = 10,8, 6,0 Гц, Ш), 3,85 (шир.с, Ш), 3,84 (с, ЗН), 3,20 (с, ЗН), 1,92 - 1,80 (м, 2Н), 1,78 - 1,66 (м, Ш), 1,09 (д, J = 1,8 Гц, ЗН), 1,07 (д, J = 1,5 Гц, ЗН).
Пример 79
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть В: 8-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-К-(2-метоксиэтил)-2-метилникотинамид Раствор 4-(4-хлор-2-фторфенил)-2-метилникотиновой кислоты (2 г, 5,19 ммоль), полученной, как описано в примере 16, часть Е, в тионилхлориде (5 мл, 68,5 ммоль) нагревали при температуре 70 °С в течение 2 ч. После охлаждения летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в 4 мл безводного дихлорметана и добавляли к предварительно охлажденному раствору 2-метоксиэтанамина (0,390 г, 5,19 ммоль) и триэтиламина (3,62 мл, 26,0 ммоль) в DCM (8 мл) при 0 °С. Полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Затем добавляли воду (30 мл) и раствор экстрагировали с помощью DCM (2 х 20 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле, используя градиент EtOAc и гексана в качестве элюента с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-гЧ-(2-метоксиэтил)-2-метилникотинамида (1,3 г, 2,88 ммоль, выход 56%) в виде желтого масла. LC/MS (ESI) м/е 323,1 [(М+Н)+, вычислено для C16H17CIFN2O2 323,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,61 мин.
4-(4-хлор-2-фторфенил)-К-(2-метоксиэтил)-2-метилникотинамид подвергали реакции циклизации, как описано в примере 2, часть С, получая 8-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (1,12 г, 2,55 ммоль, выход 89%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 303,2 [(М+Н)+, вычислено для CieHieClNiOi 303,1]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,38 мин.
Вое'
Часть С: (8)-трет-бутил-( 1 -((6-(2-метоксиэтил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат 8-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он подвергали реакции синтеза эфира, как описано в примере 16, часть Н, с получением (S)-TpeT бутил (1-((6-(2-метоксиэтил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (511 мг, 0,723 ммоль, выход 53%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 484,6 [(М+Н)+, вычислено для C27H38N3O5 484,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,17 мин.
NT "^Г^1\Г
Вое
Часть D: (8)-трет-бутил-(1-((9-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (8)-трет-бутил-(1-((6-(2-метоксиэтил)-4-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат подвергали хлорированию, как это описано в примере 41, часть А, с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (260 мг, 0,227 ммоль, 80%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 518,2 [(М+Н)+, вычислено для C27H37CIN3O5 518,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,91 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 1,84 мин.
Часть Е: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8)-трет-бутил-( 1 -((9-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-метил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат подвергали реакции удаления Вос-защитной группы, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6-(2-метоксиэтил)-4-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Я)-она, 2 НС1 (11,23 мг, 0,021 ммоль, выход 48%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 418,2 [(М+Н)+, вычислено для C22H29CIN3O3 418,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,91 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,29 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,79 -8,66 (м, ЗН), 7,51 (с, Ш), 4,70 (т, J = 4,9 Гц, 2Н ), 4,63 - 4,54 (м, Ш), 4,45 (дд, J = 10,4, 5,1 Гц, Ш), 3,89 - 3,86 (м, ЗН), 3,38 (с, ЗН), 3,28 (с, ЗН), 1,91 - 1,81 (м, 2Н), 1,80 - 1,69 (м, Ш), 1,11 - 1,08 (м, ЗН), 1,07 (шир.с, ЗН).
Пример 80
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Удаление Вос-защитной группы (8)-трет-бутил-(1-((6-(2-метоксиэтил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (полученного, как описано в примере 79, часть С) проводили, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-6-(2-метоксиэтил)-4 метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (31,3 мг, 0,081 ммоль, выход 77%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 384,2 [(М+Н)+, вычислено для C22H30N3O3
384,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,06 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,11 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,29 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,55 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,36 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 8,12 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,22 (д, J = 2,3 Гц, Ш), 7,04 (дд, J = 9,0, 2,5 Гц, Ш), 4,58 (т, J = 5,8 Гц, 2Н), 4,18 (дд, J = 9,4, 3,9 Гц, Ш), 4,00 (дд, J = 9,3, 7,0 Гц, Ш), 3,81 (т, J = 5,8 Гц, 2Н), 3,39 (с, ЗН), 3,38 - 3,36 (м, Ш), 3,08 (с, ЗН), 1,91 - 1,79 (м, Ш), 1,57 - 1,40 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,8 Гц, ЗН).
Пример 81
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Часть А: (8)-трет-бутил-1-(7-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, из 8-бром-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (полученного так, как описано в примере 29, часть F) с получением (8)-трет-бутил-1-(7-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (0,013 г, 0,028 ммоль, выход 37%) в виде белого твердого вещества. ЯМР (400 МГц, DMSO-aV) 8 част./млн 8,64 (д, J = 7,2 Гц, Ш), 8,36 (м, Ш), 8,21 (м, Ш), 7,23 (м, Ш), 6,84 (д, J = 11,2 Гц, Ш), 6,28 (с, Ш), 4,06 (м, 2Н), 3,92 (м, Ш), 3,78 (м, ЗН), 2,99 (с, Ш), 1,65 (м, Ш), 1,38 (м, ПН), 0,89 (м, 6Н).
Часть В: (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-7-фтор-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке продукта (8,5 мг, 0,024 ммоль, 98%-ный выход в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 358,2 [(М+Н)+, рассчитано дл C20H25FN3O2 358,2]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 3,58 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,68 мин и ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,02 мин. *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 8,69 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,36 (д, J = 7,5 Гц, Ш), 8,27 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,07 (шир.с, 2Н), 7,35 - 7,24 (м, Ш), 4,38 (дд, J = 10,7, 3,4 Гц, Ш), 4,26 (дд, J = 10,8, 6,0 Гц, Ш), 3,81 (д, J = 9,3 Гц, ЗН), 3,67 - 3,60 (м, Ш), 3,02 (с, ЗН), 1,87 - 1,72 (м, Ш), 1,59 (тд, J = 7,1, 3,9 Гц, 2Н), 0,96 (д, J = 2,8 Гц, ЗН), 0,94 (д, J = 2,8 Гц, ЗН).
Пример 82
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-К-(4-метоксибензил)-2-метилникотинамид
I 0
Получали, как описано в примере 29, часть Е, реакцией взаимодействия биариловой кислоты (описанной в примере 29, часть D) с РМВ-амином с получением 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-К-(4-метоксибензил)-2-метилникотинамида (0,16 г, 0,314 ммоль, 92%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 447,0 [(М+Н)+, вычислено для C2iHi8BrF2N202 447,1]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,94 мин.
Часть В: 8-бром-7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 29, часть F, с получением 8-бром-7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,12 г, 0,269 ммоль, 90%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 429,1 [(М+2Н)+, вычислено для C2iHi8BrFN202 429,0]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,15 мин.
Часть С. трет-бутил-1 -(7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением трет-бутил-1-(7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-илкарбамата (46 мг, 0,081 ммоль, выход 13%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 564,3 [(М+Н)+, вычислено для C32H39FN3O5 564,3]; LC/MS время удерживания (Способ Н): tR = 2,35 мин.
Часть D. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 17, часть I, с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (8 мг, 0,023 ммоль, выход 72%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 342,2 [(М)" Вычислено для C19H21FN3O2 342,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,99 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,91 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-6л) 5 част./млн 8,69 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 8,44 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 8,28 (дд, J = 9,3, 2,0 Гц, Ш), 7,26 (дд, J = 9,0, 7,8 Гц, 1Н), 4,51 (дд, J = 10,7, 3,1 Гц, Ш), 4,36 (дд, J = 10,7, 6,1 Гц, 1Н), 3,85 - 3,72 (м, Ш), 3,19 (с, ЗН), 1,92 - 1,63 (м, ЗН), 1,07 (д, J = 3,8 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 3,8 Гц, ЗН).
Пример 83
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(тиазол-5-ил)бензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-5-оксо-9-(тиазол-5-ил)-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат 5-бромтиазол (0,050 г, 0,305 ммоль) и гексаметилтин (0,158 мл, 0,762 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (1 мл) и продували азотом в течение 10 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,035 г, 0,030 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Добавляли (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (0,158 г, 0,305 ммоль) и хлорид лития (0,013 г, 0,305 ммоль), и полученную смесь продували N2 в течение 10 мин. Реакционную смесь затем нагревали в течение 16 ч при 90 °С. После охлаждения реакционную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с получением (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-5-оксо-9-(тиазол-5-ил)-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (40 мг, 0,053 ммоль, выход 18%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 23,6 [(М+Н)+, вычислено для C28H35N4O4S 523,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,09 мин.
Часть В. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-диметил-9-(тиазол-5-ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-4,6-д иметил-9-(тиазол-5 -ил)бензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-она (16 мг, 0,037 ммоль, выход 80%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/е 423,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H27N4O2S 423,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,04 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,1 мин; время удерживания (способ В): tR = 9,72 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 9,10 (с, Ш), 8,73 (с, Ш), 8,61 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,49 (с, Ш), 8,30 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,16 (с, Ш), 4,38 (дд, J = 9,5, 4,0 Гц, Ш), 4,25 (дд, J = 9,5,6,5 Гц, Ш), 3,82 (с, ЗН), 3,59 - 3,51 (м, Ш), 3,10 (с, ЗН), 1,91 - 1,82 (м, Ш), 1,69 - 1,46 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 5,5 Гц, ЗН), 1,03 (д, J = 5,8 Гц, ЗН).
Пример 84
(8)-метил 8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоксилат
Часть А: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоновая кислота В колбу, содержащую (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил (60 мг, 0,165 ммоль) (полученный так, как описано в примере 64), добавляли концентрированную НС1 (5 мл). Полученную смесь нагревали до 80 °С в течение 12 ч. После охлаждения летучие вещества удаляли при пониженном давлении с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоновой кислоты (40 мг, 0,104 ммоль, 63%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 384,1 [(М+Н)+, вычислено для C21H26N3O4 384,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,71 мин.
Часть В: (8)-метил 8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоксилат В колбу, содержащую (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоновую кислоту (40 мг, 0,104 ммоль) в МеОН (3 мл), при 0 °С добавляли по каплям SOCh (0,076 мл, 1,043 ммоль). Полученный раствор нагревали до 70 °С в течение 12 ч. После охлаждения летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (с использованием 0,1% TFA ACN: вода) с получением (8)-метил 8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоксилата, 2 TFA (1,65 мг, 2,427 мкмол, выход 2%) в виде бледно-коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 398,2 [(М+Н)+, вычислено для C22H28N3O4 398,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,58 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,14 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,58 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 9,01 (с, Ш), 8,68 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,40 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,23 (с, Ш), 4,69 (дд, J = 10,0, 3,0 Гц, Ш), 4,36 (дд, J = 10,5, 7,0 Гц, Ш), 4,02 (с, ЗН), 3,88 -3,81 (м, 4Н), 3,16 (с, ЗН), 1,93 - 1,65 (м, ЗН), 1,09 (д, J = 4,0 Гц, ЗН), 1,07 (д, J = 4,0 Гц, ЗН).
Пример 85
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси) -1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: метил-4-хлор-5-фторникотинат К раствору 4-хлор-5-фторникотиновой кислоты (1,7 г, 9,68 ммоль) в ацетонитриле (18 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли по каплям DBU (3,65 мл, 24,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. К данной смеси (3,03 мл, 48,4
ммоль) добавляли по каплям иодметан и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с силикагелем (гексан и этилацетат) с получением метил-4-хлор-5-фторникотината (1,2 г, 6,33 ммоль, выход 65%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 190,0 [(М+Н)+, вычислено для C7H6C1FN02 189,9]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,77 мин.
Часть В: Метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фторникотинат К раствору метил-4-хлор-5-фторникотината (1,2 г, 6,33 ммоль) в 1,4-диоксане (12 мл) и воде (0,5 мл) добавляли (4-хлор-2-фторфенил)бороновую кислоту (1,214 г, 6,96 ммоль). Затем смесь продували газообразным азотом в течение 5 мин. Добавляли гидроортофосфат калия (2,205 г, 12,66 ммоль) и PdCl2(dppf) (0,371 г, 0,506 ммоль) и смесь снова продували N2 в течение 5 мин. Реакционную смесь нагревали до 80 °С в течение 12 ч. После охлаждения добавляли воду и смесь экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием смеси гексана и этилацетата с получением метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фторникотината (900 мг, 3,17 ммоль, выход 50%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 284,0 [(М+Н)+, вычислено для C13H9CIF2NO2 284,02]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,01 мин.
Часть С: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фторникотиновая кислота К раствору метил-4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фторникотината (600 мг, 2,115 ммоль) в тетрагидрофуране (2,5 мл), МеОН (2,5 мл) и воде (2,5 мл) (50,7 мг, 2,115 ммоль) добавляли LiOH и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Летучие вещества удаляли и остаток разбавляли водой. Величину рН
доводили до 4 с помощью 1,5 н НС1. Продукт экстрагировали этилацетатом (2x5 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фторникотиновой кислоты (530 мг, 1,966 ммоль, 93% выход неочищенного продукта) в виде бледно-коричневого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 269,9 [(М+Н)+, вычислено для C12H7CIF2NO2 270,0]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,88 мин.
Часть D: 4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фтор-гЧ-метилникотинамид К раствору 4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фторникотиновой кислоты (530 мг, 1,966 ммоль) в DMF (5 мл), охлажденному при 0 °С, добавляли НОВТ (602 мг, 3,93 ммоль) и EDC (565 мг, 2,95 ммоль), а затем полученную смесь перемешивали в течение 5 мин. Добавляли гидрохлорид метиламина (531 мг, 7,86 ммоль) и DIEA (1,030 мл, 5,90 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Охлажденную льдом воду добавляли к реакционной смеси и полученное твердое вещество собирали вакуумной фильтрацией. Полученное таким образом твердое вещество промывали водой (50 мл) и сушили на воздухе с получением 4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фтор-г\Г-метилникотинамида (350 мг, 1,238 ммоль, выход 63%) в виде оранжевого масла. LC/MS (EST) м/е 282,9 [(М+Н)+, вычислено для C13H10CIF2N2O 283,0]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,83 мин.
1ST "^^r^Nf
Часть Е: 8-хлор-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он 4-(4-хлор-2-фторфенил)-5-фтор-1ч> [-метилникотинамид подвергали циклизации, как описано в примере 2 и части С, с получением 8-хлор-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (85 мг, 0,320 ммоль, выход 60%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/е 263,0 [(М+Н)+, вычисленное для C13H9CIFN2O 263,0]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,77 мин.
Часть F: (8)-трет-бутил-(1-((1-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат 8-хлор-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он подвергали реакции синтеза эфира, как описано в примере 16, часть Н, с получением (8)-трет-бутил-(1-((1-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (60 мг, 0,135 ммоль, 71%-ный выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 444,2 [(М+Н)+, вычислено для C24H31FN3O4 445,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 1,11 мин.
N/Y4N/
Часть G: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
(8)-трет-бутил-(1-((1-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат подвергали реакции удаления Вос-защитной группы, как описано в примере 2, часть Е. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с использованием 0,1% TFA АС№вода, с получением (S)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она, TFA (42,68 мг, 0,091 ммоль, выход 95%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 344,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H23FN3O2 344,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,07 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,52 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,63 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 9,38
(с, Ш), 8,77 (д, J = 5,0 Гц, Ш), 8,67 (дд, J = 9,0, 3,0 Гц, Ш), 7,21 (д, J = 2,0 Гц, Ш), 7,16 (дк, J = 9,1, 1,3 Гц, Ш), 4,48 (дд, J = 10,5, 3,0 Гц, Ш), 4,29 (дд, J = 10,5,6,0 Гц, Ш), 3,82 (с, ЗН), 3,80 - 3,73 (м, Ш), 1,94 - 1,82 (м, Ш), 1,82 - 1,63 (м, 2Н), 1,08 (д, J = 4,0 Гц, ЗН), 1,07 (д, 1=4,0 Гц, ЗН).
Пример 86
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-9-(пиридин-2-ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-( 1 -((4,6-диметил-5 -оксо-9-(пирид ин-2-ил)-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,193 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) добавляли 2-(трибутилстаннил)пиридин (85 мг, 0,231 ммоль) и Pd(PPli3)4 (11,14 мг, 9,64 мкмоль). Реакционную смесь дегазировали в течение 30 мин и нагревали до 120 °С в течение 1 ч в микроволновой печи. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 х 10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле (3% метанола в хлороформе) с получением (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-9-(пиридин-2-ил)-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (50 мг, 0,120 ммоль, выход 62%) в виде бледно-желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки LC/MS (EST) м/е 517,7 [(М+Н)+, вычислено для C30H37N4O4 517,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,19 мин.
Часть В. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-9-(пиридин-2-
ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-9-(пиридин-2-ил)-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (35 мг, 0,068 ммоль) в метаноле (4 мл) добавляли НС1 в 1,4-диоксане (0,169 мл, 0,677 ммоль) при 0 °С. Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Летучие продукты концентрировали при пониженном давлении. Остаток, полученный таким образом, подщелачивали насыщенным водным раствором NaHC03, разбавляли водой и экстрагировали DCM (3x5 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2S04 и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой (колонка Sunfire С18 (19,0 х 150 мм) 10,0 микрон; подвижная фаза А: 10 мМ ацетата аммония в воде, подвижная фаза В: ацетонитрил, скорость потока: 16,0 мл) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-9-(пиридин-2-ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (10 мг, 0,024 ммоль, выход 35%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 417,6 [(М+Н)+, вычислено для C25H29N4O2 417,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,84 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,61 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,29 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ). ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,70 (д, J = 4,3 Гц, Ш), 8,64 (с, Ш), 8,58 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,21 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,04 - 7,94 (м, Ш), 7,93 - 7,86 (м, Ш), 7,46 (дд, J = 7,3, 5,0, 1,3 Гц, Ш), 7,18 (с, Ш), 4,32 (дд, J = 9,5, 4,3 Гц, Ш), 4,13 (дд, J = 9,4, 6,7 Гц, Ш), 3,84 (с, ЗН), 3,36 - 3,34 (м, Ш), 3,11 (с, ЗН), 1,86 - 1,70 (м, Ш), 1,53 - 1,32 (м, 2Н), 0,97 (д, J = 6,8 Гц, ЗН), 0,93 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 87 и пример 88 (8)-8-((2-амино-5,5,5 -трифтор-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он; диастереомеры 1 и 2
Часть А. Этил-2-амино-5,5,5-трифтор-4-метилпентаноат гидрохлорид К 2-амино-5,5,5-трифтор-4-метилпентановой кислоте (50 мг, 0,270 ммоль) в колбу добавляли 2 н соляную кислоту в этаноле (1350 мкл, 5,40 ммоль). Раствор нагревали с обратным холодильником при температуре 80 °С в течение 5 часов. После охлаждения этанол удаляли при пониженном давлении. Остаток растирали с диэтиловым эфиром (2 раза). Твердое вещество, полученное таким образом (60 мг, 0,240 ммоль), растворяли в дихлорметане (5 мл). К данной суспензии, охлажденной до 0 °С, добавляли триэтиламин (0,167 мл, 1,202 ммоль) и ди-трет-бутилкарбонат (0,054 мл, 0,312 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением этил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5,5,5-трифтор-4-метилпентаноата (55 мг, 0,176 ммоль, 73%-ный выход неочищенного продукта) в виде белого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. GCMS (ESI): м/е 212 [(М)", вычислено для C8H13F3NO2 212] GC/MS (способ: Agilent GCMS Модуль-7890 (GC) 5975С (MSD) НР-5MS, 30 м х 0,25 мм Ш х 0,25 мкм Толщина пленки 0,9 мл/мин при постоянном токе гелия) время удерживания tR = 6,38 мин.
Часть В. Трет-бутил-(5,5,5 -трифтор-1 -гидрокси-4-метилпентан-2-ил)карбамат К раствору этил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5,5,5-трифтор-4-метилпентаноата (500 мг, 1,596 ммоль) в этаноле (2 мл) добавляли NaBH4 при 0 °С (604 мг, 15,96 ммоль).
Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили водным раствором аммиака. Раствор фильтровали через стеклянную воронку и полученный фильтрат концентрировали с получением трет-бутил-(5,5,5-трифтор-1-гидрокси-4-метилпентан-2-ил)карбамата (400 мг, 1,475 ммоль, 92%-ный выход неочищенного продукта) в виде бесцветного смолистого полутвердого материала. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 172,1 [(М+Н)+, вычислено для C6Hi3F3NO 172,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 2,1 мин.
Часть С: Трет-бутил-( 1 -((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-5,5,5 -трифтор-4-метилпентан-2-ил)карбамат
8-хлор-4,6-д иметилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5 (6Н)-он и трет-бутил-(5,5,5 -трифтор-1 -
гидрокси-4-метилпентан-2-ил)карбамат подвергали реакции эфира синтеза, как описано
в примере 16, часть Н. Соединение очищали с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой
(колонка Sunfire С18 (250 х 30 мм, 10 мкм); подвижная фаза А: 10 мМ ацетата аммония
в воде; подвижная фаза В: ацетонитрил; скорость потока: 25 мл) с получением продукта
в виде не совсем белого твердого вещества. Диастереомерную смесь, полученную таким
образом, подвергали диастереомерному разделению с помощью на колонке с
нормальной фазой для хиральной препаративной ВЭЖХ: 1С (250 х 30 мм, 5 мкм);
подвижная фаза А: 0,2% DEA: гексан; подвижная фаза В: этанол; скорость потока: 16
мл/мин) с получением трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5,5-трифтор-4-метилпентан-2-ил)карбамата в виде двух диастереомерных смесей (1 и 2). Абсолютная стереохимия диастереомеров не была определена.
Диастереомерная смесь 1: (30 мг, 0,061 ммоль, выход 10%) в виде не совсем белого
твердого вещества. LC/MS диастереомерной смеси (ESI): м/е 494,3 [(М+Н)+, вычислено
для C25H31F3N3O4 494,2]; LC/MS время удерживания (способ С) tR = 2,17 мин.
Диастереомерная смесь 2: (80 мг, 0,162 ммоль, выход 26%) в виде не совсем белого
твердого вещества. LC/MS диастереомерной смеси (ESI): м/е 494,2 [(М+Н)+, вычислено
для C25H31F3N3O4 494,2]; LC/MS время удерживания (способ С) tR = 2,16 мин.
234
Часть D: 8-((2-амино-5,5,5-трифтор-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он: (диастереомер 2) Диастереомерную смесь 1 (30 мг, 0,061 ммоль) подвергали реакции удаления Вос-защитной группы, как описано в примере 2, часть Е, с получением 8-((2-амино-5,5,5-трифтор-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (72,3 мг, 0,172 ммоль, выход 99%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 394,6 [(М+Н)+, вычислено для C20H23F3N3O2 394,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,62 мин; время удерживания ВЭЖХ (способ В): tR = 8,77 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-de) 5 част./млн 8,62 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,44 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,19 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,08 - 6,92 (м, 2Н), 4,11 - 3,90 (м, 2Н), 3,67 (с, ЗН), 3,01 (с, ЗН), 3,17 - 3,10 (м, Ш), 1,96 - 1,82 (м, Ш), 1,66 - 1,48 (м, 2Н), 1,10 (д, J = 6,8 Гц, ЗН).
Вос-защищенную диастереомерную смесь 2 (80 мг, 0,162 ммоль) подвергали реакции удаления Вос-защитной группы, как описано в примере 2, часть Е, с получением 8-((2-амино-5,5,5 -трифтор-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-она (10 мг, 0,025 ммоль, выход 50%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 394,6 [(М+Н)+, Рассчитано дл C20H23F3N3O2 394,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,75 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,8 мин; *Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 част./млн 8,64 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,16 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 7,83 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,89 (дд, J = 8,8, 2,3 Гц, Ш), 6,85 (д, J = 2,3 Гц, Ш), 4,05 (дд, J = 9,0, 4,0 Гц, Ш), 3,89 (дд, J = 8,8, 6,5 Гц, Ш), 3,73 (с, ЗН), 3,40 - 3,34 (м, Ш), 3,16 (с, ЗН), 2,60 -2,42 (м, Ш), 1,98 (дт, J = 14,3, 6,1 Гц, Ш), 1,50 - 1,40 (м, Ш), 1,23 (д, J = 7,0 Гц, ЗН).
Пример 89
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А. 8-хлор-9-иод-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К перемешиваемому раствору 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1,0 г, 3,87 ммоль) в уксусной кислоте (25 мл) добавляли H2SO4 (0,206 мл, 3,87 ммоль) с последующим добавлением йодной кислоты (0,881 г, 3,87 ммоль). Затем смесь нагревали до 80 °С в течение 20 мин. Ь (0,294 г, 1,160 ммоль) затем добавляли при 80 °С и перемешивали в течение 120 мин. После охлаждения до температуры окружающей среды уксусную кислоту удаляли при пониженном давлении. Остаток нейтрализовали 70 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученное таким образом твердое вещество собирали вакуумной фильтрацией и сушили на воздухе с получением 8-хлор-9-иод-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1,3 г, 3,21 ммоль, выход 83%) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 385,1 [(М+Н)+, вычислено для C14H11CIIN2O 384,9]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,09 мин; ^-ЯМР (400 МГц, DMSO-de) 5 част./млн 8,96 (с, Ш), 8,69 (д, J = 5,58 Гц, Ш), 8,36 (д, J = 5,52 Гц, Ш), 7,76 (с, Ш) 3,63 (с, ЗН), 3,00 (с, ЗН).
Часть В. 8-хлор-9-гидрокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К перемешиваемому раствору 8-хлор-9-иод-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1,0 г, 2,60 ммоль) в DMSO (5 мл) и воде (5 мл) в инертной атмосфере добавляли
иодид меди (I) (0,050 г, 0,260 ммоль) с последующим добавлением 1,10-фенантролина (0,047 г, 0,260 ммоль) и КОН (2,188 г, 39,0 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100 °С в течение 16 ч и контролировали с помощью LC/MS. После завершения реакции реакционную смесь охлаждали и рН доводили до от 3 до 4 с помощью 1 н НС1. Реакционную смесь разбавляли 50 мл воды и экстрагировали 80 мл дихлорметана. Органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором соли, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-9-гидрокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,6 г, 2,053 ммоль, 79%-ный выход неочищенного продукта) в виде зеленого твердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (HST)M/e 273,0 [(М)", вычислено для C14H10CIN2O2 273,05]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,06 мин.
Часть С. 8-хлор-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К перемешиваемому раствору 8-хлор-9-гидрокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,3 г, 1,092 ммоль) в DMF (10 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли NaH (0,052 г, 2,184 ммоль), а затем йодистый метил (0,205 мл, 3,28 ммоль). Полученную смесь оставляли перемешиваться при температуре окружающей среды в течение 10 ч. Реакционную смесь затем разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x80 мл). Объединенные органические слои отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 70% этилацетата в петролейном эфире с получением 8-хлор-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,12 г, 0,416 ммоль, выход 38%) в виде полутвердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 288,4 [(М)+, вычислено для C15H13CIN2O2 288,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,9 мин.
Часть D. (8)-трет-бутил-(1-((9-метокси-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат 8-хлор-9-метокси-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он подвергали реакции синтеза эфира, как описано в примере 16, часть Н, с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-метокси-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (90 мг, 0,073 ммоль, выход 18%) в виде полутвердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 470,3 [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O5 470,5]; LC/MS время удерживания (способ D) tR = 0,87 мин.
ОМе NH2 1
Часть Е. (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (Б)-трет-бутил-( 1 -((9-метокси-4,6-диметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат подвергали реакции удаления Вос-защитной группы, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (6 мг, 0,015 ммоль, выход 8%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 370,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O3 370,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,03 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,31 мин и ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,32 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,63 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 8,50 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 8,01 (с, Ш), 7,22 (с, Ш), 4,49 (дд, J = 10,7, 3,1 Гц, Ш), 4,35 (дд, J = 10,9, 6,4 Гц, Ш), 4,09 (с, ЗН), 3,83 (с, ЗН), 3,81 - 3,75 (м, Ш), 3,19 (с, ЗН), 1,92 - 1,74 (м, 2Н), 1,73 - 1,61 (м, Ш), 1,07 (д, J = 4,0 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 4,0 Гц, ЗН).
Пример 90
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: 8-хлор-9-(дифторметокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К перемешиваемому раствору 8-хлор-9-гидрокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-она (0,5 г, 1,456 ммоль), полученного, как описано в примере 89, часть В, в
ацетонитриле (5 мл) добавляли К2СО3 (0,604 г, 4,37 ммоль) с последующим добавлением
2-хлор-2,2-дифторацетата натрия (0,444 г, 2,91 ммоль). Смесь нагревали до 80 °С в
течение 18 часов. После охлаждения реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и
экстрагировали этилацетатом (2x80 мл). Органический слой промывали насыщенным
раствором соли, сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном
давлении с получением 8-хлор-9-(дифторметокси)-4,6-
Часть В: (8)-трет-бутил-( 1 -((9-(дифторметокси)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (50 мг, 0,154 ммоль, 11% выход неочищенного продукта) в виде полутвердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 325,0 [(М+Н)+, вычислено для C15H12CIF2N2O2 325,04]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,39 мин.
8-Хлор-9-(дифторметокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он подвергали реакции синтеза эфира, как описано в примере 16, часть Н, с получением (З)-трет-бутил-(1-((9-(дифторметокси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,2 г, 0,033 ммоль, выход 27%) в виде бесцветного масла. LC/MS (ESI) м/е 506,3 [(М+Н)+, вычислено для C26H34F2N3O5 506,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,21 мин.
Часть С: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметокси)-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он (8)-трет-бутил-(1-((9-(дифторметокси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат подвергали реакции удаления Вос-защитной группы, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметокси)-4,6-
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (2 мг, 4,24 мкмоль, выход 13%) в виде зеленой смолы. LC/MS (ESI) м/е 406,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H26F2N3O3 406,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,75 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,11 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,3 (с, Ш), 8,2 (м, Ш), 7,25 (с, Ш), 6,9 (т, Ш), 4,55 (м, Ш), 4,45 (м, Ш), 3,8 (м, 4Н), 3,05-3,2 (м, ЗН), 1,8-1,95 (м, ЗН), 1,05-1,1 (м, 6Н).
Пример 91 и пример 92 (8)-8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он и (К)-8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть В. трет-бутил-( 1 -((4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-4,4,4-трифторбутан -2-ил)карбамат 8-Хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он и трет-бутил-(4,4,4-трифтор-1-гидроксибутан-2-ил)карбамат использовали для синтеза эфира, как описано в примере 16, часть Н, с получением трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4,4,4-трифторбутан-2-ил)карбамата (0,22 г, 0,473 ммоль, выход 49%) в виде полутвердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 466,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H27F3N3O4 466,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,82 мин.
Часть С. 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением рацемического 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (40 мг, 0,066 ммоль, выход 26%, чистота 98%) в виде не совсем белого твердого вещества. Рацемический продукт разделяли, используя условия хиральной препаративной очистки SFC: (CHIRALPAK IA (250x21 мм) 5 микрон Подвижная фаза: 60% С02, Сорастворитель: 40% (0,5% DEA в метаноле), скорость потока: 60 г в мин, обратное давление: 100 бар), с получением двух энантиомеров. Абсолютная стереохимия энантиомеров не была определена.
Энантиомер 1: (7 мг, 0,014 ммоль, выход 6%, 98%-ной чистоты) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (EST) м/е 366,1 [(М+Н)+, вычислено для C18H19F3N3O2 366,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,81 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,57 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,41 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 8,16 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,12 -7,05 (м, 2Н), 4,30 - 4,08 (м, 2Н), 3,77 (с, ЗН), 3,62 - 3,58 (м, Ш), 3,10 (с, ЗН), 2,74 -2,58 (м, Ш), 2,44 (м, Ш). Хиральная ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,08 мин; Хиральная SFC Способ (CHIRALPAK IA (250x4,6 мм) 5 микрон Подвижная фаза: 65% СО2, скорость потока: 2,6 г в минуту, сорастворитель: 35% (0,3% DEA в метаноле), скорость потока: 1,4 г в минуту, обратное давление: 100 бар) tR = 3,53 мин. Энантиомер 2: (7 мг, 0,014 ммоль, выход 6%, 98%-ной чистоты) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 366,1 [(М+Н)+, вычислено для C18H19F3N3O2 366,1]; LC/MS время удерживания (способ A): tR = 1,81 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,57 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,41 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 8,16 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,12 -7,05 (м, 2Н), 4,30 - 4,08 (м, 2Н), 3,77 (с, ЗН), 3,62 - 3,58 (м, Ш), 3,10 (с, ЗН), 2,74 -2,58 (м, Ш), 2,44 (м, Ш). Хиральная ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,93 мин. Хиральная SFC Способ (CHIRALPAK IA (250x4,6 мм) 5 микрон Подвижная фаза: 65% СОг, скорость потока: 2,6 г в минуту, сорастворитель: 35% (0,3% DEA в метаноле), скорость потока: 1,4 г в минуту, обратное давление: 100 бар) tR = 4,62 мин.
Пример 93
Часть А. Получали согласно литературной ссылке: Ling, F. et.al., J.Org. Chem., 2003, 68, 7544 - 7547.
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть В. трет-бутил-4,4,4-трифтор-1-(6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)бутан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением трет-бутил-4,4,4-трифтор-1-(6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)бутан-2-илкарбамата (200 мг, 0,221 ммоль, выход 45%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 452,2 [(М+Н)+, вычислено для C22H25F3N3O4 452,2]; LC/MS время удерживания (Способ С): tR = 2,01 мин.
Часть С. 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (35 мг, 0,098 ммоль, 44% выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 352,0 [(М+Н)+, вычислено для C17H17F3N3O2 352,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR= 1,92 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,07 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,44 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 9,46 (с, Ш), 8,76 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,40 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,23 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,14 (д, J = 2,4 Гц, Ш), 7,10 (дд, J = 8,8, 2,4 Гц, Ш), 4,22 - 4,13 (м, 2Н), 3,79 (с, ЗН), 3,67 - 3,57 (м, Ш), 2,71 -2,63 (м, Ш), 2,49 -2,40 (м, Ш).
Пример 94
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоксамид
CONH2 NH2 1
В круглодонной колбе емкостью 25 мл растворяли (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил (0,1 г, 0,274
ммоль) (полученный так, как описано в примере 64) и CS2CO3 (0,358 г, 1,098 ммоль) в DMFA (2 мл) и воде (0,6 мл). Смесь облучали в микроволновой печи при 120 °С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и разбавляли этилацетатом и водой. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (колонка: Xbridge Phenyl (150 х 4,6 мм) 3,5 мкм SC/749 с использованием буфера: 0,05% TFA в воде) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоксамида (5 мг, 0,012 ммоль, выход 5%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 383,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H27N4O3 383,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,74 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 10,51 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,58 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-си): 5 част./млн 8,64 (с, Ш), 8,46 (д, Ш), 8,12 (д, Ш), 6,67 (с, Ш), 3,72-3,79 (м, Ш), 3,69 (с, ЗН), 3,65-3,69 (м, 2Н), 3,04 (с, ЗН), 1,84-1,88 (м, Ш), 1,62-1,68 (м, Ш), 1,49-1,57 (м, Ш), 1,31 (д, ЗН), 1,29 (д, ЗН).
Пример 95
(8)-4,6-диметил-8-(4-метил-2-(метиламино)пентилокси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Часть А: (8)-трет-бутил-1-(4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-4-метилпентан-2-ил(метил)карбамат
(8)-трет-бутил-( 1 -((4,6-диметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтирид ин-8-ил)окси)-
4-метилпентан-2-ил)карбамат (0,150 г, 0,341 ммоль), полученный, как описано в примере
244
16, часть Н, растворяли в DMFA (1 мл) и охлаждали до О °С. Добавляли NaH (0,027 г, 0,683 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 45 мин при 0 °С. Затем добавляли йодистый метил (0,107 мл, 1,706 ммоль), и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 мин. Смесь гасили льдом и распределяли между этилацетатом (4 мл) и водой (2 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором (2 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с получением (S)-TpeT-бутил-1 -(4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил(метил)карбамата (60 мг, 0,125 ммоль, выход 37%) в виде светло-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 454,4 [(М+Н)+, вычислено для C26H36N3O2 454,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,21 мин.
Часть В: (8)-4,6-диметил-8-(4-метил-2-(метиламино)пентилокси)бензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке соединения (30 мг, 0,070 ммоль, выход 64%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 354,0 [(М+Н)+, вычислено для C21H28N3O2 354,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,81 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,22 мин и ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,21 мин. ^-ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 част./млн 8,74 (д, J = 7,0 Гц, Ш), 8,69 - 8,65 (м, Ш), 8,62 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 7,30 -7,22 (м, 2Н), 4,62 (дд, J = 11,0, 3,0 Гц, Ш), 4,49 (дд, J = 11,5, 5,0 Гц, Ш), 3,85 (с, ЗН), 3,74 (дд, J = 8,3, 3,8 Гц, Ш), 3,28 (с, ЗН), 2,84 (с, ЗН), 1,99 - 1,78 (м, 2Н), 1,76 - 1,63 (м, Ш), 1,07 (д, J = 6,0 Гц, 6Н).
Пример 96
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-гЧ,гЧ, 4,6-тетраметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоксамид
Часть А: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоновая кислота
К раствору (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрила (450 мг, 1,235 ммоль), полученного, как описано в примере 64, в этаноле (5 мл) и воде (5 мл) добавляли NaOH (494 мг, 12,35 ммоль). Смесь нагревали до 80 °С в течение 12 ч. Летучие вещества выпаривали и остаток разбавляли водой, рН доводили до 3 с помощью 1,5 н НС1. Раствор экстрагировали этилацетатом (2x5 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоновой кислоты (90 мг, 0,235 ммоль, 19%-ный выход неочищенного продукта) в виде желтого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 384,1 [(М+Н)+, вычислено для C21H26N3O4 384,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,72 мин.
CONMe2 NH2 1
Часть В: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-гЧ,гЧ, 4,6-тетраметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоксамид
246
Раствор
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоновой кислоты (90 мг, 0,070 ммоль) в DMFA (0,9 мл) охлаждали до 0 °С. Добавляли НОВТ (21,57 мг, 0,141 ммоль) и EDC (20,25 мг, 0,106 ммоль) и перемешивали в течение 5 мин. Затем добавляли диметиламин (0,282 мл, 0,563 ммоль) с последующим добавлением DIPEA (0,037 мл, 0,211 ммоль) и перемешивали в течение 30 мин. Затем реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Реакцию останавливали добавлением льда, выпавшее твердое вещество фильтровали. Твердое вещество промывали избытком воды и сушили полностью, с получением оранжевого масла, после нагревания до комнатной температуры. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (0,1% TFA в АСМ:вода) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-гЧ,гЧ, 4,6-тетраметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбоксамида, 2 TFA (3,36 мг, 4,95 мкмоль, выход 7%) в виде светло-зеленого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 411,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H31N4O3 411,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,22 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 10,98 мин и удержания ВЭЖХ время (способ В): tR = 11,63ё
*Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,44 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,31 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,25 (с, Ш), 6,76 (с, Ш), 3,76 (с, ЗН), 3,69 (дд, J = 4,8, 3,3 Гц, 2Н), 3,34 (с, ЗН), 3,20 - 3,08 (м, 7Н), 1,84 - 1,78 (м, Ш), 1,66 - 1,51 (м, 2Н), 1,05 (д, J = 7,0 Гц, ЗН), 0,99 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 97
8-(2-амино-2,4-диметилпентилокси)-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: трет-бутил-1-(1-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-илкарбамат
Получали, как описано в примере 16, часть Н, из 8-хлор-1-фтор-6-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она, полученного, как описано в примере 85, часть
Е, с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-7-фтор-4,6-
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (35 мг, 0,076 ммоль, 50%-ный выход). LC/MS (ESI) м/е 458,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H33FN3O4 458,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,15 мин.
NH2 1
Часть В: 8-(2-амино-2,4-диметилпентилокси)-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением 8-(2-амино-2,4-диметилпентилокси)-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (16,5 мг, 0,035 ммоль, выход 45% в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/е 358,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H25FN3O2 358,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,06 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 11,79 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,66 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 9,41 (с, Ш), 8,79 (д, J = 4,8 Гц, Ш), 8,71 (дд, J = 9,2, 2,9 Гц, Ш), 7,24 (д, J = 2,3 Гц, Ш), 7,22 - 7,15 (м, Ш), 4,36 (д, J = 10,3 Гц, Ш), 4,24 (д, J = 10,3 Гц, Ш), 3,84 (с, ЗН), 2,02 - 1,83 (м, 2Н), 1,80 - 1,70 (м, Ш), 1,55 (с, ЗН), 1,11 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 6,3 Гц, ЗН).
Пример 98
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-1-метокси-6-метилбензо[с] [2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
ОМе IJLC|
Часть А: 8-хлор-1-метокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он К раствору 8-хлор-1-фтор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (40 мг, 0,152 ммоль), полученного, как описано в примере 85, часть Е, в метаноле (0,2 мл), в микроволновой ампуле, добавляли 18-краун-6 (4,03 мг, 0,015 ммоль) и метилат натри (32,9 мг, 0,152 ммоль) в метаноле и нагревали в микроволновой печи при 100 °С в течение 30 мин. После завершения реакции реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (2x5 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 8-хлор-1-метокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (40 мг, 0,146 ммоль, 96%-ный выход неочищенного продукта) в виде белого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 275,0 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIN2O2 275,05]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,72 мин.
Часть В: (8)-трет-бутил-(1-((1-метокси-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат К раствору 8-хлор-1-метокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (40 мг, 0,146 ммоль) в толуоле (0,5 мл) добавляли карбонат цезия (71,2 мг, 0,218 ммоль) и ди-трет-бутил-(2',4',6'-триизопропил-[1,Г-дифенил]-2-ил)фосфин (6,18 мг, 0,015 ммоль). Раствор продували N2 в течение 5 мин. Затем добавляли палладий (II) ацетат (1,635 мг, 7,28 мкмоль) и раствор продували N2 в течение 10 мин. Полученную смесь нагревали при 90 °С в течение 21 ч. После охлаждения реакционную смесь фильтровали через диатомовую
землю (Celite(r)), элюируя с EtOAc. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием смеси гексан и этилацетат, с получением (8)-трет-бутил-(1-((1-метокси-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (40 мг, 0,041 ммоль, выход 28%). LC/MS (ESI) м/е 456,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H34N3O5 456,2]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,9 мин.
Часть С: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-1-метокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он раствору (8)-трет-бутил-(1-((1-метокси-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (40 мг, 0,041 ммоль) в DCM (0,9 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли по каплям TFA (0,2 мл, 2,60 ммоль) и перемешивали в течение 5 мин. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с использованием (0,1% TFA в АСМ:вода) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-1-метокси-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она, 2 TFA (17,11 мг, 0,028 ммоль, выход 69%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 356,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O3 356,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,82 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,44 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,78 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 9,17
(с, Ш), 9,14 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 8,54 (с, Ш), 7,09 (д, J = 2,5 Гц, Ш), 7,02 (дд, J = 9,0, 2,5 Гц, Ш), 4,21 (с, ЗН), 4,19 - 4,15 (м, Ш), 4,04 - 3,95(м, 2Н), 3,78 (с, ЗН), 1,97 - 1,80 (м, Ш), 1,51-1,42 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,02 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 99
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-7-метокси-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
Часть В. 1-бром-4-хлор-2-фтор-3-метоксибензол
Часть А. 3-бром-6-хлор-2-фторфенол К перемешиваемому раствору 1-бром-4-хлор-2-фторбензола (5 г, 23,87 ммоль) в тетрагидрофуране (40 мл), охлажденному до -78 °С, добавляли LDA (14,92 мл, 29,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при данной температуре в течение 30 мин, затем давали нагреться до -20 °С и перемешивали в течение 30 мин. Затем реакционную смесь охлаждали до -78 °С и добавляли по каплям триметилборат (3,47 мл, 31,0 ммоль), растворенный в THF (5 мл). Реакционную смесь нагревали до -20 °С и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь затем охлаждали до -78 °С и медленно добавляли по каплям надуксусную кислоту (16 мл, 84 ммоль). Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь снова охлаждали до 0 °С и гасили 5%-ным раствором хлорида аммония. Раствор экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 3-бром-6-хлор-2-фторфенола (4,99 г, 18,25 ммоль, 76%-ный выход неочищенного продукта), в виде желтого масла. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI): м/е 225,1 [(М+Н)+, вычислено для C6H4BrClFO 224,9]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,87 мин.
К перемешиваемому раствору 3-бром-6-хлор-2-фторфенола (4,2 г, 18,63 ммоль) в ацетонитриле (35 мл) добавляли карбонат калия (5,15 г, 37,3 ммоль) с последующим добавлением йодистого метила (2,330 мл, 37,3 ммоль) по каплям при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали до 85°С в течение 3 ч. После охлаждения летучие вещества концентрировали при пониженном давлении и остаток разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x80 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1-бром-4-хлор-2-фтор-3-метоксибензола (4 г, 16,7 ммоль, 90%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. ^-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 7,2 (м, Ш), 7,04 (м, Ш), 3,98 (с, ЗН).
Часть С. 2-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан К раствору 1-бром-4-хлор-2-фтор-3-метоксибензола (3 г, 12,53 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл), охлажденному до -10 °С, по каплям добавляли изопропилмагнийбромид (5,18 мл, 15,03 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при -10 °С в течение 1 ч. Реакционную смесь затем нагревали до 0 °С и перемешивали в течение 1 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до 10 °С и медленно добавляли по каплям 2-изопропокси-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (2,56 мл, 12,53 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 16 часов. Реакционную смесь гасили 5%-ным водным раствором гидроксида натрия и экстрагировали этилацетатом (2x25 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 2-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (2,3 г, 8,03 ммоль, 64%-ный выход неочищенного продукта) в виде коричневого масла. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. ^-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 7,35(м, Ш), 7,15 (м, Ш), 3,95 (с, ЗН), 1,33 (с, 6Н), 1,23 (с, 6Н).
Часть D. Метил-4-(4-хлор-2-фтор-3 -метоксифенил)-2-метилникотинат
Смесь метил-4-хлор-2-метил-никотината (1,5 г, 8,08 ммоль), 2-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (2,316 г, 8,08 ммоль), соли калия фосфорной кислоты (3,43 г, 16,16 ммоль) и аддукта PdC^dppfj-CfhCh (0,660 г, 0,808 ммоль) в 1,4-диоксане (25 мл) и воде (5 мл) продували азотом в течение 5 мин. Реакционную смесь затем нагревали до 100 °С в течение 18 часов. После охлаждения реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x75 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием 50% этилацетата в гексане, с получением метил-4-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-2-метилникотината (1,2 г, 2,52 ммоль, выход 31%) в виде бледно-коричневого масла. LC/MS (ESI) м/е 309,9 [(М+Н)+, вычислено для C15H14CIFNO3 310,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,84 мин.
Часть Е. 4-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-2-метилникотиновая кислота Получали, как описано в примере 16, часть Е, гидролизом метил-4-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-2-метилникотината с получением 4-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-2-метилникотиновой кислоты (780 мг, 2,137 ммоль, выход 93%) в виде коричневого масла. LC/MS (ESI) м/е 295,9 [(М+Н)+, вычислено для C14H12CIFNO3 296,04]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,61 мин.
Часть F. 4-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-К-(4-метоксибензил)-2-метилникотинамид К раствору (4-метоксифенил)метанамина (0,437 г, 3,18 ммоль) в CH2CI2 (25 мл) добавляли DIE А (0,556 мл, 3,18 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 15 мин. В реакционную смесь затем добавляли 4-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-2-метилникотиноил (1 г, 3,18 ммоль) (полученный обработкой карбоновой кислоты с тионилхлоридом), растворенный в 10 мл DCM, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Реакцию останавливали добавлением воды (50 мл) и раствор экстрагировали DCM (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором 50 мл, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с использованием этилацетата в гексане в качестве элюента с получением 4-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-гЧ-(4-метоксибензил)-2-метилникотинамида (800 мг, 1,109 ммоль, выход 35%) в виде коричневого масла. LC/MS (ESI) м/е 415,1 [(М+Н)+, вычислено для C22H21CIFN2O3 415,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,78 мин.
Часть G. 8-хлор-7-метокси-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть С, из 4-(4-хлор-2-фтор-3-метоксифенил)-гЧ-(4-метоксибензил)-2-метилникотинамида с получением 8-хлор-7-метокси-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (110 мг, 0,245 ммоль, выход
34%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (EST) м/е 395,1 [(М+Н)+, вычислено для C22H20CIN2O3 395,1]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,81 мин.
ОМе
Часть Н. (8)-трет-бутил-1-(7-метокси-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке соединения (325 мг, 0,119 ммоль, 49%-ный выход неочищенного продукта) в виде белого твердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 576,3 [(М+Н)+, вычислено для C33H42N3O6 576,3]; LC/MS время удерживания (способ D): tR = 0,99 мин.
N'V^NH
ОМе
Часть I. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-7-метокси-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-7-метокси-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (12,3 мг, 0,033 ммоль, выход 28%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/е 356,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O3 356,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,49 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,36 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,52 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,59 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,14 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,10 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 7,11 (д, J = 9,0 Гц, Ш), 4,18 (дд, J = 9,3, 4,3 Гц, Ш), 4,08 - 4,03 (м, Ш), 4,02 (с, ЗН), 4,01 - 3,96 (м, Ш), 3,10 (с, ЗН), 1,91 - 1,80 (м, Ш), 1,57 - 1,40 (м, 2Н), 1,03 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 7,0 Гц, ЗН).
Пример 100 255
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-бром-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А: (8)-трет-бутил-1-(9-бром-7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали из (8)-трет-бутил-1-(7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата, полученного, как описано в примере 82, часть С, с использованием способа, описанного в примере 3, часть А, с получением упомянутого в заголовке соединения (120 мг, 0,065 ммоль, выход 44%). LC/MS (ESI) м/е 642,4 [(М+Н)+, вычислено для CsiHssBrFNsOs 642,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,26 мин.
Часть В: (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-бром-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-бром-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (3,5 мг,
8,22 мкмоль, выход 13%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 423,0 [(М+Н)+, вычислено для СлдШгВгБКзСЪ 423,3]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,10 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,58 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,08 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,73 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,57 (д, J = 2,0 Гц, Ш), 8,40 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 4,51 (дд, J = 10,3, 2,5 Гц, Ш), 4,38 (дд, J = 10,4, 5,6 Гц, Ш), 3,78 - 3,73 (м, Ш), 3,17 (с, ЗН), 1,94 - 1,82 (м, 2Н), 1,73 - 1,60 (м, Ш), 1,08 (д, J = 2,5 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 2,8 Гц, ЗН).
Пример 101
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А: 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-К-(4-метоксибензил)-2-метилникотинамид Получали, как описано в примере 82, часть А, из 4-(4-хлор-2,5-дифторфенил)-2-метилникотиновой кислоты (полученной, как описано в примере 70, часть D) с получением упомянутого в заголовке соединения (440 мг, 1,015 ммоль, выход 87%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 403,1 [(М+Н)+, вычислено для C21H18CIF2N2O2 403,1]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,93 мин.
Часть В: 8-хлор-9-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 73, часть В, с получением 8-хлор-9-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (260 мг, 0,669 ммоль, 61% выход) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 383,0 [(М+Н)+, вычислено для C21H17CIFN2O2 383,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,04 мин.
Часть
(8)-трет-бутил-1-(9-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением (8)-трет-бутил-1-(9-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамата (0,2 г, 0,244 ммоль, выход 62%). LC/MS (ESI) м/е 564,4 [(М+Н)+, вычислено для C32H39FN3O5 564,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,25 мин.
Часть D: (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке соединения (55 мг, 0,158 ммоль, выход 87%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 344,0 [(М+Н)+, вычислено для C19H23FN3O2 344,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,76 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,88 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,92 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,60 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,15 (д, J = 12,0 Гц, Ш), 8,08 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,99 (д, J = 7,5 Гц, Ш), 4,22 - 4,12 (м, Ш), 4,06 - 3,92 (м, Ш), 3,40 (с, Ш), 3,10 (с, ЗН), 1,92 - 1,80 (м, Ш), 1,59 - 1,41 (м, 2Н), 1,03 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 102
8-(2-амино-2,4-диметилпентилокси)-9-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. трет-бутил-1-(9-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-илкарбамат
Получали из сочетания 8-хлор-9-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (синтез описан в примере 101, часть С), следуя процедуре, описанной в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке соединения (0,130 г, 0,123 ммоль, выход 47%) в виде коричневого масла. LC/MS (ESI) м/е 578,5 [(М+Н)+, вычислено для C33H41FN3O5 578,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,28 мин.
Часть В. 8-(2-амино-2,4-диметилпентилокси)-9-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением упомянутого в заголовке соединения (10 мг, 0,017 ммоль, выход 22%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/е 358,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H25FN3O2 358,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,69 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,87 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,59 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 част./млн 8,67 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 8,39 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 8,32 (д, J = 12,0 Гц, Ш), 7,08 (д, J = 7,3 Гц, 1Н), 4,44 - 4,15 (м, 2Н), 3,37 - 3,35 (м, 1Н), 3,19 (с, ЗН), 1,97 - 1,83 (м, 2Н), 1,81 - 1,70 (м, Ш), 1,56 (с, 2Н), 1,10 (д, J = 6,3 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 6,3 Гц, ЗН).
Пример 103
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-хлор-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А: (8)-трет-бутил-1-(9-хлор-7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат
Получали, как описано в примере 41, часть А, из (8)-трет-бутил-(1-((7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (синтез, описанный в примере 82, часть С) с получением упомянутого в заголовке соединения (2135 мг, 0,063 ммоль, 60%-ный выход неочищенного продукта) в виде твердого вещества желтого цвета. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 598,3 [(М+Н)+, вычислено для C32H38CIFN3O5 598,2]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,32 мин.
Часть В. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-хлор-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
К раствору (8)-трет-бутил-(1-((9-хлор-7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (0,08 г, 0,037 ммоль) в TFA (8 мл), охлажденному до 0 °С, добавляли метансульфоновую кислоту (0,243 мкл, 3,75 мкмоль). Реакционную смесь затем нагревали при 70 °С в течение 2 часов. Летучие вещества выпаривали. Остаток растворяли в воде и нейтрализовали 10%-ным водным раствором NaHC03. Раствор экстрагировали EtOAc (3x15 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (1x15 мл), сушили над Na2S04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка: X-Bridge (19X150 мм) 5 мкм, скорость потока: 15 мл/мин; растворитель А: 0,01% TFA, растворитель В: ACN) с получением (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-7-фтор-4-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она, 3 TFA (9,5 мг, 0,013 ммоль, выход 34,4%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 378,0 [(М+Н)+, вычислено для C19H22CIFN3O2 378,1]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 2,02 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,47 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,41 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол^4) 5 част./млн 8,70 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,40 (д, J = 2,0 Гц, Ш), 8,35 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 4,49 (дд, J = 10,7, 2,6 Гц, Ш), 4,35 (дд, J = 10,5, 5,8 Гц, Ш), 3,75 - 3,69 (м, Ш), 3,14 (с, ЗН), 1,90 - 1,74 (м, 2Н), 1,70 - 1,56 (м, Ш), 1,04 (д, J = 2,3 Гц, ЗН), 1,03 (д, J =2,5 Гц, ЗН).
Пример 104
(8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-(метоксиметил)-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он
Часть А. (8)-трет-бутил-1-(9-(метоксиметил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением упомянутого в заголовке соединения (8)-трет-бутил-(1-((9-(метоксиметил)-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (100 мг, 0,066 ммоль, выход 84%). LC/MS (EST) м/е 484,4 [(М+Н)+, рассчитано C27H38N3O5 484,3]; LC/MS время удерживания (способ В): tR = 1,65 мин.
Часть В. (8)-8-(2-амино-4-метилпентилокси)-9-(метоксиметил)-4,6-диметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть Е, с получением в заголовке соединение (9 мг, 0,022 ммоль, выход 33%) в виде желтого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/е 384,2
[(М+Н)+, вычислено для C22H30N3O3 384,2]; LC/MS время удерживания (способ С): tR = 1,66 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,96 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,01 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,54 (д, J = 5,9 Гц, Ш), 8,33 (с, Ш), 8,11 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,00 (с, Ш), 4,73 - 4,55 (м, 2Н), 4,33 (дд, J = 10,0, 3,5 Гц, Ш), 4,13 (дд, J = 9,9, 6,8 Гц, Ш), 3,75 (с, ЗН), 3,59 - 3,50 (м, Ш), 3,47 (с, ЗН), 3,06 (с, ЗН), 1,97 - 1,77 (м, Ш), 1,69 - 1,45 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 4,7 Гц, ЗН), 1,02 (д, 1=4,7 Гц, ЗН).
Пример 105
8-(2-амино-2,4-диметилпентилокси)-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Часть А. 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-К-(4-метоксибензил)-2-метилникотинамид Получали, как описано в примере 82, часть А, с получением 4-(4-бром-2,3-дифторфенил)-К-(4-метоксибензил)-2-метилникотинамида (0,320 г, 0,693 ммоль, выход 97%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 447,0 [(М+Н)+, вычислено для C2iHisBrF2N202 447,0]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 0,95 мин.
Часть В. 8-бром-7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он Получали, как описано в примере 2, часть С, с получением 8-бром-7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,12 г, 0,269 ммоль, 90% выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 427,1 [(М+Н)+, вычислено для CiiHnBrFNiCh 427,0]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR = 1,15 мин.
Часть D. 8-(2-амино-2,4-диметилпентилокси)-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он 264
Часть С. трет-бутил-1 -(7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-илкарбамат Получали, как описано в примере 16, часть Н, с получением (К)-трет-бутил-(1-((7-фтор-6-(4-метоксибензил)-4-метил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7] нафтирид ин-8-ил)окси)-2,4-диметилпентан-2-ил)карбамата (0,025 г, 0,042 ммоль, выход 13%). LC/MS (ESI) м/е 578,5 [(М+Н)+, вычислено для C33H41FN3O5 578,3]; LC/MS время удерживания (способ Е): tR= 1,28 мин.
Получали, как описано в примере 17, часть I, с получением 8-(2-амино-2,4-диметилпентилокси)-7-фтор-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,013 г, 0,030 ммоль, 69% выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 358,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H25FN3O2 358,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,71 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,57 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,75 - 8,70 (м, Ш), 8,70 - 8,63 (м, Ш), 8,36 (дд, J = 9,3, 1,8 Гц, Ш), 7,34 (дд, J = 9,3, 7,8 Гц, Ш), 4,47 - 4,39 (м, Ш), 4,38 - 4,30 (м, Ш), 3,26 (с, ЗН), 1,96 - 1,85 (м, 2Н), 1,81 - 1,70 (м, Ш), 1,55 (с, ЗН), 1,10 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 6,0 Гц, ЗН).
Пример 106
(8)-8-((2-амино-5,5 -дифторпент-4-ен-1 -ил)окси)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
Вое'
Часть А: (8)-диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)сукцинат Суспензию L-аспарагиновой кислоты (10,1 г, 76,0 ммоль) при 0 °С в безводном метаноле (100 мл) обрабатывали триметилсилилхлоридом (24,7 г, 228 ммоль) посредством быстрого добавления по каплям. Охлаждающую баню удаляли и полученный раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение ночи (16 ч), а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученное масло растворяли в дихлорметане (100 мл), обрабатывали ди-трет-бутилдикарбонатом (17,4 г, 80,1 ммоль) и диизопропилэтиламином (26,5 мл, 152 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи (16 ч). Полученный раствор промывали 0,25 н водным раствором соляной кислоты (3x50 мл), 0,25 н водным раствором гидроксида натрия (3x50 мл) и насыщенным солевым раствором (1x50 мл); сушили над MgS04 и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-диметил-2-((трет
бутоксикарбонил)амино)сукцината (15,9 г, 60,9 ммоль, 80%-ный выход неочищенного продукта) в виде почти бесцветного масла. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ^-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 5,50 (шир.с, Ш), 4,60 (шир.с, Ш), 3,78 (с, ЗН), 3,71 (с, ЗН), 3,02 (дд, J = 16,9, 4,4 Гц, Ш), 2,84 (дд, J = 16,8, 4,8 Гц, Ш), 1,47 (с, 9Н).
О Y С02Ме N
Вое" "Вое
Часть В: (8)-диметил-2-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино] бутан-1,4-диоат
Раствор (8)-диметил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)сукцината (15,8 г, 60,5 ммоль) при
0 °С в ацетонитриле (200 мл) обрабатывали ди-трет-бутилдикарбонатом (13,9 г, 63,5
ммоль) и 4-диметиламинопиридином (1,48 г, 12,1 ммоль). Охлаждающую баню удаляли
и реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи (18
ч). Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток
растворяли в этилацетате (200 мл), промывали 0,25 н водным раствором соляной
кислоты (2x50 мл), 0,25 н водным раствором гидроксида натрия (2x50 мл) и насыщенным
солевым раствором (1x50 мл); сушили над сульфатом магния и концентрировали при
пониженном давлении с получением (8)-диметил-2-[бис(трет-
бутоксикарбонил)амино] бутан-1,4-диоата (18,8 г, 52,0 ммоль, 86%-ный выход неочищенного продукта) в виде бледно-желтого масла. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки. ^-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 5,46 (т, J = 6,8 Гц, Ш), 3,72 (с, ЗН), 3,74 (с, ЗН), 3,26 (дд, J = 16,4, 7,2 Гц, Ш), 2,75 (дд, J = 16,3, 6,5 Гц, Ш), 1,52 (с, 18Н).
X' \ '"°
Вое" "Вое
Часть С: (8)-метил-2-{(трет-бутокси)-К-[(трет-бутил)оксикарбонил]карбониламино}-4-
оксобутаноат
Раствор (8)-диметил-2-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]бутан-1,4-диоата (9,07 г, 25,1 ммоль) при -78 °С в диэтиловом эфире (100 мл) обрабатывали по каплям 1 М диизобутилалюминийгидридом в дихлорметане (37,6 мл, 37,6 ммоль). Полученный раствор перемешивали в течение 15 мин, а затем гасили последовательно с интервалом в 15 минут с водой (3,3 мл), 1N водным раствором гидроксида натрия (10 мл) и снова
водой (3,3 мл). Полученную суспензию фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и концентрировали при пониженном давлении с получением (8)-метил-2-{(трет-бутокси)-К-[(трет-бутил)оксикарбонил]карбониламино}-4-оксобутаноата (8,26 г, 24,9 ммоль, 99%-ный выход неочищенного продукта) в виде бесцветного масла. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки. ^-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 9,81 (с, Ш), 5,55 (т, J = 6,4 Гц, Ш), 3,75, (с, ЗН), 3,43 (дд, J = 18,0, 5,9, 1,0 Гц, Ш), 2,85 (дд, J = 17,9, 6,0, 1,0 Гц, Ш), 1,52 (с, 18Н).
Вое
Часть D: (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксобутаноат Раствор (8)-метил-2-{(трет-бутокси)-К-[(трет-бутил)оксикарбонил]карбониламино}-4-оксобутаноата (29,2 г, 88,0 ммоль) в ацетонитриле (300 мл) обрабатывали бромидом лития (11,5 г, 132 ммоль), нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 2 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате (300 мл), промывали водой (1x50 мл) и насыщенным солевым раствором (1x50 мл); сушили над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении до темно-желтого масла. Неочищенный продукт очищали на Si02 (20-100% этилацетат/гексан, градиентное элюирование) с получением (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксобутаноата (12,5 г, 54,1 ммоль, 62%-ный выход неочищенного продукта) в виде бледно-янтарного масла. ^-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 9,76 (с, Ш), 5,41 (шир.с, Ш) 4,62 (дт, J = 8,1, 4,4 Гц, Ш), 3,77 (с, ЗН), 3,19 -2,94 (м, 2Н), 1,46 (с, 9Н).
О F
о ^ >
Вое
Часть Е: (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5,5-дифторпент-4-еноат Раствор (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-4-оксобутаноата (5,97 г, 25,8 ммоль), натрий-2-хлор-2,2-дифторацетата (11,8 г, 77,0 ммоль), трифенилфосфина (20,3 г, 77,0 ммоль) и гЧ,гЧ-диметилформамида (50 мл) загружали в 3-горлую колбу емкостью 500 мл и нагревали до 115 °С в течение 15 мин. Полученную смесь фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)) и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали на Si02 (5-40% этилацетат/гексан, градиентное
элюирование) с получением (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5,5-дифторпент-4-еноата (0,91 г, 3,43 ммоль, выход 13%) в виде бесцветного масла. ^-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 5,25 - 5,06, (шир.с, Ш), 4,42 (с, Ш), 4,24 - 4,10 (м, Ш), 3,78 (с, ЗН), 2,59 (дд, J = 14,4, 6,7 Гц, Ш), 2,51 -2,31 (м, Ш), 1,47 (с, 9Н).
Вое
Часть F: (8)-трет-бутил-(5,5 -дифтор-1 -гидроксипент-4-ен-2-ил)карбамат При температуре окружающей среды раствор (8)-метил-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-5,5-дифторпент-4-еноата (1,91 г, 7,20 ммоль) в тетрагидрофуране (25 мл) обрабатывали боргидридом лития (0,31 г, 14 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч. Полученный раствор охлаждали до 5 °С, гасили 0,1 н водным раствором соляной кислоты (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным солевым раствором (1x20 мл), сушили над MgS04 и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали на Si02 (20-100% этилацетат/гексан, градиентное элюирование) с получением (8)-трет-бутил-(5,5-дифтор-1-гидроксипент-4-ен-2-ил)карбамата (1,4 г, 5,90 ммоль, 82%-ный выход) в виде бесцветного масла. ТТЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 част./млн 4,75 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 4,35 - 4,05 (м, Ш), 3,82 - 3,51 (м, ЗН), 2,46 -2,16 (м, ЗН), 1,47 (с, 9Н).
1ЧН2 1
Часть G: (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-
ил)окси)-5,5 -дифторпент-4-ен-2-ил)карбамат Суспензию 8-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (1,26 г, 4,88 ммоль), полученного, как описано в примере 16, часть G, (8)-трет-бутил-(5,5-дифтор-1-гидроксипент-4-ен-2-ил)карбамата (1,39 г, 5,86 ммоль), 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенила (0,42 г, 0,98 ммоль), Pd(OAc)2 (0,11 г, 0,49 ммоль), CS2CO3 (3,18 г, 9,76 ммоль) и безводного толуола (15 мл) продували азотом в течение 10 мин и нагревали до 90 °С в течение ночи ( 15 ч). После охлаждения реакционную смесь
фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)), концентрировали при пониженном давлении и растворяли в этилацетате (50 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (1x100 мл) и водой (1x100 мл); сушили над Na2S04 и концентрировали при пониженном давлении с получением масла янтарного цвета. Неочищенный продукт очищали на Si02 (1-5% 2М аммиак в метанол/дихлорметан, градиентное элюирование) с получением (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5-дифторпент-4-ен-2-ил)карбамата (1,04 г, 2,26 ммоль, выход 46%) в виде рыжевато-коричневого твердого вещества. LC/MS
(ESI): м/з 460,0 [(М+Н)+, вычислено для C24H28F2N3 04, 460,2]; *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 8,59 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,05 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 7,73 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,83 (дд, J = 8,8, 1,8 Гц, Ш), 6,79 (с, Ш), 5,13 - 4,89 (м, Ш), 4,39 - 4,21 (м, Ш), 4,20 - 3,96 (м, ЗН), 3,66 (с, ЗН), 3,12 (с, ЗН), 2,61 - 2,31 (м, 2Н), 1,48 (с, 9Н).
Часть Н: (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5-дифторпент-4-ен-2-ил)карбамат Раствор (8)-трет-бутил-(1-((4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5-дифторпент-4-ен-2-ил)карбамата (1,03 г, 2,24 ммоль) в ацетонитриле (22 мл) обрабатывали N-бромсукцинимидом (0,44 г, 2,5 ммоль), нагревали до 80 °С в течение 45 мин, а затем концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали на БЮг (1-4% 2М аммиак в метанол/дихлорметан, градиентное элюирование) с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5-дифторпент-4-ен-2-ил)карбамата (0,81 г, 1,51 ммоль, выход 67%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 537,9
[(М+Н)+, вычислено для C24H27BrF2N304, 538,1]; *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 8,62 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 8,22 (с, Ш), 7,65 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 6,75 (с, Ш), 5,01 (д, J = 8,3 Гц, Ш), 4,41 - 4,26 (м, Ш), 4,24 - 4,04 (м, ЗН), 3,67 (с, ЗН), 3,12 (с, ЗН), 2,64 -2,34 (м, 2Н), 1,48 (с, 9Н).
Часть I: (8)-трет-бутил-(1-((9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5-дифторпент-4-ен-2-ил)карбамат
Суспензию
(8)-трет-бутил-(1-((9-бром-4,6-диметил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5-дифторпент-4-ен-2-ил)карбамата (0,48 г, 0,892 ммоль), цианида цинка (0,115 г, 0,981 ммоль), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцена (0,074 г, 0,134 ммоль), Pd2(dba) (0,041 г, 0,045 ммоль), гЧ,гЧ-диметилформамида (3 мл) и воды (0,3 мл) загружали в рассчитанный на высокое давление сосуд емкостью 20 мл и продували потоком азота в течение 10 минут. Сосуд герметизировали, продували кислородом и перемешивали в атмосфере азота в предварительно нагретом реакционном блоке при температуре 115 °С в течение ночи. После охлаждения реакционную смесь разбавляли этилацетатом (35 мл) и фильтровали через диатомовую землю (Celite(r)). Фильтрат промывали насыщенным раствором соли (3x50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали на SiOi (0-4% 2М аммиак в метанол/дихлорметан, градиентное элюирование) с получением (8)-трет-бутил-(1-((9-циано-4,6-диметил-5-оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7] нафтиридин-8-ил)окси)-5,5 -д ифторпент-4-ен-2-ил)карбамата (0,15 г, 0,280 ммоль, выход 32%) в виде рыжевато-коричневого твердого
Часть J: (8)-8-((2-амино-5,5 -дифторпент-4-ен-1 -ил)окси)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
вещества. LC/MS (ESI): м/з 485,1 [(М+Н)+, вычислено для C25H27F2N4O4, 485,2]; *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 част./млн 8,75 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,45 (с, Ш), 7,81 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 7,00 (с, Ш), 4,85 (д, J = 10,0 Гц, Ш), 4,40 - 4,21 (м, ЗН), 4,07 (с, Ш), 3,80 (с, ЗН), 3,17 (с, ЗН), 2,62 - 2,52 (м, Ш), 2,49 -2,38 (м, Ш), 1,49 (с, 9Н).
Раствор (8)-трет-бутил-( 1 -((9-циано-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-5,5-дифторпент-4-ен-2-ил)карбамата (60 мг, 0,124 ммоль) при температуре окружающей среды в метаноле (1 мл) обрабатывали 4 М НС1 в 1,4-диоксане (1,3 мл, 5,20 ммоль) и продержали всю ночь. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали препаративной LC/MS со следующими условиями: Колонка XBridge С18, 19 х 200 мм, частицы размером 5 мкм; подвижная фаза А: 5:95 ацетонитрил: вода с 10-мМ ацетатом аммония; подвижная фаза В: 95:5 ацетонитрил: вода с 10-мМ ацетатом аммония; Градиент: 10-50% В в течение 20 мин, затем с 5-минутной выдержкой при 100% В; Скорость потока: 20 мл/мин. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и концентрировали с помощью центробежного испарителя, получая (8)-8-((2-амино-5,5-д ифторпент-4-ен-1 -ил)окси)-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-д игидробензо[с] [2,7]нафтиридин-9-карбонитрил (7,6 мг, 0,020 ммоль, выход 16%) в виде белого твердого вещества. LC/MS (ESI): м/з 385,3 [(М+Н)+, вычислено для C20H19F2N4O2, 385,1]; *Н-ЯМР (500 МГц, DMSO) 5 част./млн 8,82 (с, Ш), 8,60 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,18 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 6,97 (с, Ш), 4,74 - 4,59 (м, Ш), 4,22 - 4,05 (м, 2Н), 3,62 (с, ЗН), 3,19 - 3,10 (м, Ш), 2,93 (с, ЗН), 2,36 -2,25 (м, Ш), 2,19-2,08 (м, Ш).
Пример 107
Часть А: (8)-трет-бутил-( 1 -((9-хлор-7-фтор-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
(8)-трет-бутил-(1-((7-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (0,08 г, 0,175 ммоль), полученный, как описано в примере 29, часть G, подвергали хлорированию с помощью NCS, с получением (S)-TpeT-бутил-(1-((9-хлор-7-фтор-4,6-диметил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с] [2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамата (80 мг, 0,104 ммоль, 60%-ный выход неочищенного продукта) в виде полутвердого вещества. Материал был перенесен на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI) м/е 492,2 [(М+Н)+, вычислено для C25H32CIFN3O4 492,2].
Часть В: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (Б)-трет-бутил-( 1 -((9-хлор-7-фтор-4,6-д иметил-5 -оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-8-ил)окси)-4-метилпентан-2-ил)карбамат (0,08 г, 0,104 ммоль)) подвергали реакции удаления защитной Вос-группы, как описано в примере 2, часть Е. Неочищенный материал очищали с помощью ВЭЖХ с обратной фазой (10 мМ аммония ацетата в вода/AcCN), чтобы обеспечить (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (0,006 г, 0,015 ммоль, 14%-ный выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 392,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H24CIFN3O2 392,1]; LC/MS время удерживания (LC/MS способ С) tR = 2,11 мин. ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,96 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 5,15 мин. ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8,62 (д, J =
5,8 Гц, Ш), 8,32 (д, J = 2,0 Гц, Ш), 8,12 (д, J = 5,8 Гц, Ш), 4,26 (дд, J = 9,3, 3,8, 1,0 Гц, Ш), 4,06 (дд, J = 8,7, 7,2 Гц, Ш), 3,87 (д, J = 9,3 Гц, ЗН), 3,67 - 3,64 (м, Ш), 3,08 (с, ЗН), 1,92 - 1,78 (м, Ш), 1,56 - 1,37 (м, 2Н), 1,02 (д, J = 5,3 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 5,3 Гц, ЗН). ОПИСАНИЕ КОНКРЕТНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
В следующих примерах спектры протонного ЯМР регистрировали либо на ЯМР-спектрометре Bruker 400 МГц, либо на ЯМР-спектрометре Bruker 500 МГц. Химические сдвиги приведены в виде 8 значений относительно тетраметилсилана. LC/MS проводили на Shimadzu LC, соединенном с Waters Micromass ZQ. Времена удерживания при
проведении ВЭЖХ были получены с использованием по меньшей мере одного из следующих способов: Способы LC/MS:
LC/MS Способ А: Колонка: PUROSPHER@ star RP-18 (4X55 мм), 3 мкм; Буфер: 20 мм NH4OAC в воде; Подвижная фаза А: Буфер+ ACN(90+10); Подвижная фаза В: Буфер+ MeCN (10+90); Скорость потока: 2,5 мл/мин)
LC/MS Способ В: Колонка: ZORBAX SB С18 (46X50 мм), 5 мкм; Положительный режим Подвижная фаза А: 10% МеОН - 90% Н20 - 0,1% TFA; Подвижная фаза В: 90% МеОН -10% Н20 - 0,1% TFA; Скорость потока: 5 мл/мин)
LC/MS Способ С: Колонка - Ascentis Express С8 (5X2,1 мм), 2,7 мкм; Подвижная фаза А: 2% MeCN - 98% Н20 - 10 мМ NH4COOH; Подвижная фаза В: 98% ACN -2% Н20 - 10 мМ NH4COOH; Скорость потока: 1 мл/мин)
LC/MS Способ D: Колонка -ACQUITY UPLC ВЕН С18 (2,1 X 50 мм), 1,7 мкм; Подвижная фаза А: 0,1% TFA в воде; Подвижная фазаВ: 1% TFA в ACN; Скорость потока: 1 мл/мин) LC/MS Способ Е: Колонка -ACQUITY UPLC ВЕН С18 (2,1 Х50 мм), 1,7 мкм; Подвижная фаза А: 5 мМ NH4OAc: ACN (95:5); Подвижная фаза В: 5 мМ NH4OAc: ACN (5:95); Скорость потока: 1 мл/мин)
LC/MS Способ F: Колонка: X-Bridge ВЕН С18 (50 х 2,1 мм), 2,5 мкм; Подвижная фаза А: ACN+ Н20 (2+98)+0,1% TFA; Подвижная фаза В: ACN+ Н20 (98+2)+0,05% TFA; Скорость потока: 1,2 мл/мин.
LC-MS Способ G: Колонка: Kinetex С18 (50 х 2,1 мм), 2,6 мкм: Подвижная фаза А: 2% ACN - 98% Н20 -10; Подвижная фаза В: 98% ACN-2%H20 -10 MMNH4COOH; Скорость потока: 1 мл/мин).
LC-MS Способ Н: Колонка: ВЕН С18 (50 х 3,0 мм), 1,7 мкм: Подвижная фаза А: 5% ACN - 95% Н20 -10 мМ; Подвижная фаза В: 95% ACN - 5% Н20 -10 мМ NH4COOH; Скорость потока: 1,2 мл/мин).
LC-MS Способ I Колонка: Асе Excel 2 С18 (50 х 3,0 мм), 2,0 мкм: Подвижная фаза А: 2% ACN - 98% Н20 -10; Подвижная фаза В: 98% ACN-2%H20 -10 MMNH4COOH; Скорость потока: 1,2 мл/мин).
Способы хиральной ВЭЖХ:
Способ A: CHIRALCEL OJH (250x4,6) мм 5 мкм
Подвижн. Фаза: 0,2% DEA в н-гексан: этанол (80:20) Способ В: CHIRALPAK AD-H (250x4,6) мм 5 микрон
Подвижн. Фаза А: 0,2% DEA в н-гексане (70) В: этанол (30) Способ С: CHIRALPAK- ASH (250x4,6) мм 5 микрон
Подвижн. Фаза А: 0,2% DEA в н-гексан: этанол (90:10) Способ D: CHIRALPAK- ODH (250x4,6) мм 5 микрон
Подвижн. Фаза: н-гексан: этанол/метанол (50:50) (80:20); время выполнения
50 мин
Способ Е: Chiralpak-IA (250x4,6) мм 5 мкм
Подвижн. Фаза: 35% (0,3% DEA в метаноле) в СО2; Скорость потока:
СО2: 2,6 г/мин; 0,3% DEA в смеси метанол: 1,4 мл/мин; время выполнения 10
мин
Способ F: CHIRALPAK AD-H (250x4,6) мм 5 мкм
Подвижн. Фаза: 40% (0,3% DEA в метаноле) в С02; : 4,0 г/мин; время выполнения 12 мин
Способы аналитической ВЭЖХ:
Способ A: Waters аналитическая колонка Sunfire (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм); Подвижная фаза:
Буфер: 0,05% TFA в Н2О рН = 2,5, отрегулированный аммиаком
А = буфер и ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил и буфер (95:5); 0-15 мин, 0% В -> 50% В; 15 - 18 мин, 50% В -> 100% В; 18 -23 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения = 28 мин.
Способ В: Waters аналитическая колонка phenyl xbridge (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм), подвижная фаза: Буфер: 0,05% TFA в НгО рН = 2,5, отрегулированный аммиаком А = буфер и ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил и буфер (95:5); 0-15 мин, 0% В -> 50% В; 15 - 18 мин, 50% В -> 100% В; 18 -23 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения = 28 мин.
Способ С: Waters аналитическая колонка Sunfire 08(3,0x150 мм, 3,5 мкм); подвижная фаза: А = 10 мМ аммония бикарбоната (рН = 9,5)/95% НгО/5% метанол, В = 10 мМ аммония бикарбоната (рН = 9,5)/5% Н20/95% метанола; 0-15 мин, 0% В -> 100% В; 15 -18 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм; время выполнения =18 мин.
Способ D: Waters аналитическая колонка phenyl xbridge (3,0 x 150 мм, 3,5 мкм), подвижная фаза: А = 10 мМ аммония бикарбоната (рН = 9,5)/95% Н20/5% метанол, В = 10 мМ аммония бикарбоната (рН = 9,5)/5% Н20/95% метанола; 0-15 мин, 0% В -"¦ 100% В; 15 - 18 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; Х = 254 нм; время выполнения = 18 мин.
Способ Е: Waters аналитическая колонка Sunfire С18 (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм); подвижная фаза: А = 0,05% TFA в воде: ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил: 0,05% TFA в воде (95:5); 0-15 мин, 10% В -> 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения =15 мин.
Способ F: Waters аналитическая колонка phenyl xbridge (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм), подвижная фаза: А = 0,05% TFA в воде: ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил: 0,05% TFA в воде (95:5); 0-15 мин, 0% В -> 50% В; 15 - 18 мин, 50% В -> 100% В, 18 -23 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения =15 мин.
Способ G: Waters аналитическая колонка phenyl xbridge (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм), подвижная фаза: А = 0,05% TFA в воде: ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил: 0,05% TFA в воде (95:5); 0 - 12 мин, 10% В -> 100% В; 12 - 15 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения =15 мин.
Способ Н: Waters аналитическая колонка Sunfire С18 (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм); подвижная фаза: А = 0,05% TFA в воде: ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил: 0,05% TFA в воде (95:5); 0-15 мин, 10% В -> 50% В; 15-18 мин, 50% В -> 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения =18 мин.
Способ I: Waters аналитическая колонка Sunfire С18 (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм); подвижная фаза: А = 0,05% TFA в воде: ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил: 0,05% TFA в воде (95:5); 0 - 12 мин, 10% В -> 100% В; 12 - 15 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения =15 мин.
Способ J: колонка Eclipse XDB С18 (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм); подвижная фаза: А = 10 мМ NH4OAc в воде, В = метанол; 0-15 мин, 15% В -> 100% В; 15 - 18 мин, 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения =15 мин.
Способ К: Waters аналитическая колонка Sunfire С18 (3,0 х 150 мм, 3,5 мкм); Подвижная фаза: А = 0,1% TFА/95% Н20/5% ацетонитрил, В = 0,1% TFA/5% Н20/95% ацетонитрил; 0-15 мин, 10% В -> 100% В; 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 220/254 нм; время выполнения =18 мин.
Способ L: Waters аналитическая колонка phenyl xbridge (3,0 х 150 мм, 3,5 мкм), подвижная фаза: А = 0,1% TFА/95% Н20/5% ацетонитрил, В = 0,1% TFA/5% Н20/95% ацетонитрил; 0-15 мин, 10% В -> 100% В; 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 220/254 нм; время выполнения =18 мин.
Способ М: Waters аналитическая колонка Sunfire С18 (4,6 х 150 мм, 3,5 мкм); Подвижная фаза: А = 0,05% TFA в воде: ацетонитрил (95:5), В = ацетонитрил: 0,05% TFA в воде (95:5); 0 -25 мин, 10% В -> 100% В; скорость потока = 1 мл/мин; X = 254 нм и 220 нм; время выполнения = 25 мин.
Пример 108
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бромбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бромбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (280 мг, 0,717 ммоль, 89% выход) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 390,0, 392,0 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для C18H21BrN302 390,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ Е): tR = 9,32 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ F): tR = 9,43 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 11,84 (шир.с, Ш), 9,37 (с, Ш), 8,84 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,71 (с, Ш), 8,39 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,00 (с, Ш), 3,84-3,95 (м, 2Н), 3,17 (м, Ш), 1,85 (м, Ш), 1,38 (м, Ш), 1,30 (м, Ш), 0,89 -0,96 (м, 6Н).
Пример 109
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 4: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (30 мг, 0,092 ммоль, 33% выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 326,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H24N3O2 326,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ F): tR = 8,35 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,86 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,46 (с, Ш), 8,80 (д, J = 5,20 Гц, Ш),. 8,28 (д, J = 4,00 Гц, Ш), 8,21 (с, Ш), 6,91 (с, Ш), 4,31-4,33 (м, Ш), 4,174,18 (м, Ш), 3,51-3,70 (м, Ш), 2,43 (с, ЗН), 1,82-1,87 (м, Ш), 1,69 -1,74 (м, 2Н), 1,07-1,31 (м, 6Н).
Пример 110
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-изобутил-б-метилбензо[с] [2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 4: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-изобутил-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (12 мг, 0,029 ммоль, выход 35%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 382,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H32N3O2 382,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ Е): tR = 6,15 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ F): tR = 5,23 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,44 (с, Ш), 8,74 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,23 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,14 (с, Ш), 7,01 (с, Ш), 4,18-4,15 (м, Ш), 4,094,05 (м, Ш), 3,81 (с, ЗН), 3,36-3,27 (м, Ш), 2,75-2,62 (м, 2Н), 2,03 - 1,90 (м, Ш), 1,89-1,87 (м, Ш), 1,63-1,51 (м, Ш), 1,49-1,44 (м, Ш), 1,03-0,94 (м, 12Н).
Пример 111
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Материал из примера 15 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (Chiralpak-AD-H, (250 х 21 мм), 5 мкм: подвижная фаза: 60% СО2, 40% (0,5% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин). Первый элюируемый энантиомер: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (22,3 мг, 0,061 ммоль, выход 38%) в виде белого твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (EST) м/е 366,2 [(М+Н)+, вычислено для C18H19F3N302 366,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ F): tR = 8,24 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ A): tR = 3,75 мин; *Н ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,48 (д, J = 0,4 Гц, Ш), 8,78 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,44 (д, J = 8,8 Гц, 1Н), 8,27 (д, J = 5,6 Гц, 1Н), 7,17 (д, J = 2,0 Гц, 1Н), 7,12 (дд, J = 8,8, 2,4 Гц, Ш), 4,20 (дд, J = 9,2, 4,8 Гц, Ш), 4,09 (дд, J = 9,2, 6,0 Гц, Ш), 3,82 (с, ЗН), 3,293,28 (м, Ш), 2,50-2,33 (м, 2Н), 2,00 -1,93 (м, Ш), 1,82-1,74 (м, Ш).
Пример 112
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Материал из примера 15 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (Chiralpak-AD-H, (250 х 21 мм), 5 мкм: подвижная фаза: 60% СО2, 40% (0,5% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин). Второй элюируемый энантиомер: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (20,5 мг, 0,056 ммоль, 35%-ный выход) в виде белого твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 366,2 [(М+Н)+, вычислено для C18H19F3N3O2 366,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ F): tR = 8,25 мин; Хиральная
ВЭЖХ (способ A): tR = 5,80 мин; *Н ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,48 (д, J = 0,4 Гц, Ш), 8,77 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,43 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,27 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,17 (д, J = 2,0 Гц,
Ш), 7,12 (дд, J = 8,8, 2,4 Гц, Ш), 4,19 (дд, J = 9,2, 4,4 Гц, Ш), 4,09 (дд, J = 9,2, 6,0 Гц, Ш), 3,82 (с, ЗН), 3,29-3,25 (м, Ш), 2,46-2,34 (м, 2Н), 2,00- 1,93 (м, Ш), 1,81-1,76 (м, Ш).
Пример 113
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-бром-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-бром-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (24 мг, 0,053 ммоль, выход 48%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 444,0, 446,0 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для Ci8Hi8BrF3N302 444,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 5,45 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,24 мин; *Н ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 7,97 (с, Ш), 7,28 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,13 (с, Ш), 6,74 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 5,62 (с, Ш), 2,76-2,68 (м, 2Н), 2,31 (с, ЗН), 1,83-1,81 (м, Ш), 1,07-0,90 (м, 2Н). 0,59-0,22 (м, 2Н).
Пример 114
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-бром-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 4: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метил-9-
(оксазол-5-ил)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (14 мг, 0,043 ммоль, выход 72%) в виде
бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е АЪЪ/1 [(М+Н)+, вычислено для
C21H20F3N4O3 433,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ Н): tR = 9,04 мин; ВЭЖХ время
удерживания (способ F): tR = 9,12 мин; *НЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,54 (с, Ш), 8,86 (д,
J = 6,0 Гц, Ш), 8,85 (с, Ш), 8,48 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,41 (с, Ш), 7,68 (с, Ш), 7,29 (с, Ш),
4,70-4,58 (м, 2Н), 4,03-4,00 (м, Ш), 3,89 (с, ЗН), 2,59-2,52 (м, 2Н). 2,27-2,15 (м, 2Н).
Пример 115 279
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (30 мг, 0,044 ммоль, выход 39%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 400,6 [(М+Н)+, вычислено для CisHisClFsNsOi 400,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,94 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,01 мин; *НЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,54 (с, Ш), 8,85 (д, J = 5,6 Гц, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 8,36 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,28 (с, 1Н), 4,61-4,48 (м, 2Н), 3,71-3,82 (м, 4Н), 2,57-2,50 (м, 2Н), 2,30-2,16 (м, 2Н).
Пример 116
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-хлор-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Материал из примера 115 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (Chiralpak-AD-H, (250 х 21 мм), 5 мкм: подвижная фаза: 60% СО2, 40% (0,5% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин). Первый элюируемый энантиомер: 8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-9-хлор-6-метилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-он (40 мг, 0,094 ммоль, 8%-ный выход) в виде бледно-розового твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 400,0 [(М+Н)+, вычислено для C18H18CIF3N3O2 400,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,87 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,84 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ В с 0,3% DEA): tR = 7,15 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb): 5 9,68 (с, Ш), 8,85 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,23 (с, Ш), 7,87 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 6,85 (с, Ш), 4,14 - 3,98 (м, 2Н), 3,78 (с, ЗН), 3,36 - 3,33 (м, Ш), 2,49 -2,24 (м, 2Н), 1,99 - 1,70 (м, 2Н).
Пример 117
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-хлор-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Материал из примера 115 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (Chiralpak-AD-H, (250 х 21 мм), 5 мкм: подвижная фаза: 60% СО2, 40% (0,5% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин). Второй элюируемый энантиомер: 8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-9-хлор-6-метилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он (61 мг, 0,146 ммоль, 13% выход) в виде бледно-желтого твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 400,0 [(М+Н)+, вычислено для C18H18CIF3N3O2 400,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,86 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,84 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ В с 0,3% DEA): tR = 8,98 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb): 5 9,67 (с, Ш), 8,85 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,23 (с, Ш), 7,87 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 6,85 (с, Ш), 4,14 - 3,98 (м, 2Н), 3,78 (с, ЗН), 3,37 - 3,33 (м, Ш), 2,45 -2,27 (м, 2Н), 1,99 - 1,72 (м, 2Н).
Пример 118
4-амино-8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 17: 4-амино-8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (4,0 мг, 0,004 ммоль, 37%-ный выход) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 381,2 [(М+Н)+, вычислено для C18H20F3N4O2 381,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,83 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,02 мин; *Н ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 8,28 (д, J = 8,8 Гц,
Ш), 8,11 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,37 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,09 (с, Ш), 7,06 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 4,35-4,19 (м, 2Н), 3,76 (с, ЗН), 3,56-3,52 (м, Ш), 2,50-2,41 (м, 2Н), 2,07-1,93 (м, 2Н).
Пример 119
4-амино-8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Материал из примера 118 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (Chiralpak-AD-H, (250 х 21 мм), 5 мкм: подвижная фаза: 60% СО2, 40% (0,3% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин). Первый элюируемый энантиомер: 4-амино-8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-6-метилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5(6Н)-он (143 мг, 0,365 ммоль, выход 22%) в виде бесцветного твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 381,2 [(М+Н)+, вычислено для C18H20F3N4O2 381,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,81 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,90 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ В с 0,3% DEA): tR = 5,45 мин; *НЯМР (400 МГц, MeOD): 5 8,23 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,09 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,34 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,05 - 7,02 (м, 2Н), 4,16 (дд, J = 9,2, 4,8 Гц, Ш), 4,06 (дд, J = 9,2, 6,4 Гц, Ш), 3,74 (с, ЗН), 3,32 - 3,20 (м, Ш), 2,49 -2,33 (м, 2Н), 1,99 - 1,92 (м, Ш), 1,81 -1,72 (м, Ш).
Пример 120
4-амино-8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Материал из примера 118 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (Chiralpak-AD-H, (250 х 21 мм), 5 мкм: подвижная фаза 60% СОг, 40% (0,3% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин). Второй элюируемый энантиомер: 4-амино-8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (143 мг, 0,365 ммоль, 22% выход) в виде бесцветного твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 381,2 [(М+Н)+, вычислено для C18H20F3N4O2 381,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,79 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,84 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ В с 0,3% DEA): tR =
10,39 мин; *Н ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 8,23 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,09 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,34 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,05 - 7,02 (м, 2Н), 4,16 (дд, J = 9,2, 4,8 Гц, Ш), 4,06 (дд, J = 9,2, 6,4 Гц, Ш), 3,74 (с, ЗН), 3,34 - 3,20 (м, Ш), 2,50 -2,38 (м, 2Н), 1,99 - 1,70 (м, 2Н).
Пример 121
($)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметил)-6-метилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере 27: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметил)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (5 мг, 0,013 ммоль, выход 44%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 376,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H24F2N3O2 376,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,22 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,75 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,52 (с, Ш) 8,83 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,63 (с, Ш), 8,33 (д, J = 5,52 Гц, Ш), 6,98 - 7,37 (м, 2Н), 4,36 (дд, J = 9,54, 3,51 Гц, Ш), 4,19 (д, J = 6,53 Гц, Ш), 3,87 (с, ЗН), 3,51 (д, J = 1,51 Гц, Ш), 1,87 (с, Ш), 1,48 - 1,59 (м, 2Н), 1,05 (д, J = 6,6 Гц, ЗН), 1,03 (д, J = 6,6 Гц, ЗН).
Пример 122
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-4,б-диметилбензо[с] [2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (15 мг, 0,035 ммоль, выход 36%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 418,0, 420,0 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для СгоШбВгКзОг 418,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 4,52 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 5,19 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 8,70 (с, Ш), 8,62 (д, J = 5,67 Гц, Ш), 8,25 (д, J = 5,67 Гц, Ш), 7,06 (с, Ш), 4,16 - 4,07 (м, Ш), 4,05 - 3,96 (м, Ш), 3,69 (с, ЗН), 3,19-3,11 (м, Ш), 2,99 (с, ЗН), 1,90 - 1,71 (м, Ш), 1,42 - 1,27 (м, 2Н), 0,95 - 0,90 (м, 6Н).
Пример 123
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-4,б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
I 0
Получали, как описано в примере 15: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (10,0 мг, 0,026 ммоль, выход 25%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 380,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H21F3N3O2 380,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,81 мин; время удерживания ВЭЖХ (способ В): tR = 8,96 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 8,59 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 8,41 (д, J = 8,53 Гц, Ш), 8,15 (д, J = 5,77 Гц, Ш), 6,96 (д, J = 2,26 Гц, 2Н), 4,06 - 3,92 (м, 2Н), 3,64 (с, ЗН), 3,05 (дд, J = 8,91, 4,39 Гц, Ш), 2,97 (с, ЗН), 2,40 -2,28 (м, Ш), 1,86 - 1,71 (м, 2Н), 1,54 - 1,43 (м, Ш).
Пример 124
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-хлор-4,б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (2,5 мг, 0,006 ммоль, выход 20%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 414,0 [(М+Н)+, вычислено для C19H20CIF3N3O2 414,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,22 мин; время удерживания ВЭЖХ (способ I): tR = 8,24 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн
8,66 - 8,59 (м, 2Н), 8,28 (с, Ш), 7,15 - 7,12 (м, Ш), 4,17 - 4,12 (м, 2Н), 3,71 (с, ЗН), 3,11 -3,19 (м, Ш), 3,01 (с, ЗН), 2,36 -2,45 (м, Ш), 1,89 - 1,79 (м, 2Н), 1,62 - 1,53 (м, Ш).
Пример 125
(S)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-циклопропил-4,6-диметилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере 4: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-циклопропил-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (4 мг, 0,010 ммоль, выход 35%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 379,9 [(М+Н)+, вычислено для C23H30N3O2 380,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,56 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 5,45 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 8,58 (д, J = 5,65 Гц, Ш), 8,26 (д, J = 5,65 Гц, Ш), 7,88 (с, Ш), 6,94 (с, Ш) 4,093,92 (м, 2Н), 3,69 (с, ЗН), 3,18 - 3,12 (м, Ш), 2,99 (с, ЗН), 2,21 -2,14 (м, Ш), 1,92 - 1,82 (м, Ш), 1,43 - 1,20 (м, 2Н), 0,96 - 0,89 (м, 8Н), 0,87 - 0,82 (м, 2Н).
Пример 126
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с]'[2,7]нафтиридин-9-карбонитрил
Материал из примера 56 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (CHIRALPAK- ODH (250x21) мм 5 мкм; подвижная фаза: н-гексан: этанол: метанол (50:50) (80:20) в течение 50 мин); Скорость потока: 60 г/мин). Первый элюируемый энантиомер: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил (25 мг, 0,063 ммоль, выход 14%) в виде бесцветного твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 391,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H18F3N4O2 391,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,88 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ J): tR = 7,93 мин; Хиральная
ВЭЖХ (способ D): tR = 33,7 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 9,51 (д, J = 0,8 Гц, Ш), 8,70 (с, Ш), 8,84 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,33 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,22 (с, Ш), 4,37 - 4,24 (м, 2Н), 3,86 (с, ЗН), 3,38 - 3,34 (м, Ш), 2,57 -2,31 (м, 2Н), 2,06 - 1,83 (м, 2Н)
Пример 127
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с]'[2,7]нафтиридин-9-карбонитрил О
Материал из примера 56 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (CHIRALPAK- ODH (250x421) мм 5 мкм; подвижная фаза: н-гексан: этанол: метанол (50:50) (80:20) в течение 50 мин); Скорость потока: 60 г/мин). Второй элюируемый энантиомер: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрил (21 мг, 0,053 ммоль, выход 12%) в виде бесцветного твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 391,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H18F3N4O2 391,2]; ВЭЖХ время удерживания
(способ A): tR = 9,86 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ J): tR = 7,92 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ Е): tR = 41,6 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 9,51 (д, J = 0,8 Гц, Ш), 8,73 (с, Ш), 8,84 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,33 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,23 (с, Ш), 4,38 -4,24 (м, 2Н), 3,86 (с, ЗН), 3,38 - 3,34 (м, Ш), 2,57 -2,31 (м, 2Н), 2,06 - 1,83 (м, 2Н).
Пример 128
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-бром-4,б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: 8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (7 мг, 0,015 ммоль, выход 56%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 458,4, 460,4 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для СлэШоВгЕзКзСЪ 458,4]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,89 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,80 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 8,62 (с, Ш), 8,58 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,13 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,09 (с, Ш), 4,864,19 (м, 2Н), 3,78 (с, ЗН), 3,51 - 3,41 (м, Ш), 3,09 (с, ЗН), 2,52 -2,40 (м, 2Н), 2,09 -2,03 (м, Ш), 1,97 - 1,86 (м, Ш).
Пример 129
($)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-изопропил-4,6-диметилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере 4: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-изопропил-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (22 мг, 0,054 ммоль, выход 66%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 382,2 [(М+Н)+, вычислено для
C23H32N3O2 382,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,37 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,82 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 част./млн 8,60 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,25 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,20 (с, Ш), 6,95 (с, Ш), 4,06 - 4,02 (м, Ш), 4,00 - 3,96 (м, Ш), 3,70 (с, ЗН), 3,42 - 3,35 (м, Ш), 3,16 - 3,14 (м, Ш), 3,01 (с, ЗН), 1,88 -1,82 (м, Ш), 1,40 - 1,24 (м, 2Н), 1,25 (д, J = 6,4 Гц, 6Н), 0,95 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 0,90 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 130
($)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-изопропил-4,6-диметилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере 44: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-изопропил-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (25 мг, 0,066 ммоль, выход 77%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 382,2 [(М+Н)+, вычислено для C23H32N3O2 382,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 6,99 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,54 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,56
(д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,37 (д, J = 9,2 Гц, Ш), 8,13 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,23 (д, J = 2,4 Гц, Ш), 7,06 (д, J = 2,4 Гц, Ш), 7,05 (д, J = 9,2 Гц, Ш), 4,51 (т, J = 6,4 Гц, 2Н), 4,24 (дд, J = 9,6, 3,6 Гц, Ш), 4,05 (дд, J = 9,6, 6,8 Гц, Ш), 3,94 (т, J = 6,4 Гц, 2Н), 3,46 - 3,43 (м, Ш), 3,46 (с, ЗН), 3,08 (с, ЗН), 1,88 - 1,84 (м, Ш), 1,57 - 1,50 (м, 2Н), 1,05 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,03 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 131
($)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с]'[2,7Jнафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примерах 3 и 12: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (10 мг, 0,021 ммоль, выход 25%) в виде бледно-коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 462,2, 464,2 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для СггШвВгКзОз 462,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,25 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 11,97 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,64 (с, Ш), 8,59 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,14 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,33 (с, Ш), 4,00 (т, J = 5,6 Гц, 2Н), 4,25 - 4,06 (м, 2Н), 3,84 (т, J = 5,6 Гц, 2Н), 3,39 (с, ЗН), 3,09 (с, ЗН), 1,91 - 1,84 (м, Ш), 1,61 - 1,46 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,02 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 132
($)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6-(2-гидроксиэтил)-4-метилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере 44: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6-(2-гидроксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (6,2 мг, 0,015 ммоль, выход 35%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 404,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H27CIN3O3 404,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 8,02 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,91 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,56 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,44 (с, Ш), 8,10 (д, J = 7,6 Гц, Ш), 7,32 (с, Ш), 4,51 (т, J = 6,0 Гц, 2Н), 4,29 (дд, J = 9,6, 3,9 Гц, Ш), 4,11 (дд, J = 9,6, 3,9 Гц, Ш), 3,95 (т, J = 6,0 Гц, 2Н ), 3,36 - 3,10 (м, Ш), 3,07 (с, ЗН), 1,88 - 1,81 (м, Ш), 1,62 - 1,48 (м, 2Н), 1,02 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,00 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 133
(К)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: (К)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (13 мг, 0,030 ммоль, выход 46%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 418,2, 420,2 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для C2oH2sBrN302 418,l]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,27 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,51 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 част./млн 8,59 (с, Ш), 8,56 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,10 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,05 (с, Ш), 4,29 (дд, J = 9,6, 4,0 Гц, Ш), 4,09 (дд, J = 9,6, 6,4 Гц, Ш), 3,68 (с, ЗН), 3,45 - 3,30 (м, Ш), 3,06 (с, ЗН), 1,90 - 1,83 (м, Ш), 1,62 - 1,45 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 134
(S)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром- 7-фтор-4,6-диметилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере: 3 (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-7-фтор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (5 мг, 0,011 ммоль, 14%-ный выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 436,0, 438,0 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для C2oH24BrFN302 436,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 9,16 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 5,28 мин *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,61 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,44 (д, J = 2,0 Гц, Ш), 8,12 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 4,27 - 4,24 (м, Ш), 4,09 - 4,05 (м, Ш), 3,70 - 3,62 (м, Ш), 3,36 (с, ЗН), 3,07 (с, ЗН), 1,81 - 1,84 (м, Ш), 1,52 - 1,31 (м, 2Н), 1,02 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,01 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 135
Материал из примера 93 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (Chiralpak-IA (250 х 21 мм), 5 мкм; подвижная фаза: 60% СО2/40% (0,5% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин). Первый элюируемый энантиомер: 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8 мг, 0,022 ммоль, 10% выход) в виде не совсем белого твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 352,0 [(М+Н)+, вычислено для C17H17F3N3O2 352,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,19 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 6,80 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ Е): tR = 4,28 мин; *Н ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,40 (с, Ш), 8,72 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,32 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,17 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,08 (д, J = 2,4 Гц, Ш), 7,06 (дд, J = 8,8, 2,4 Гц, Ш), 4,20 - 4,11 (м, 2Н), 3,75 (с, ЗН), 3,65 - 3,55 (м, Ш), 2,70 -2,62 (м, Ш), 2,49 -2,40 (м, Ш).
Пример 136
Материал из примера 93 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC (Chiralpak-IA (250 х 21 мм), 5 мкм; подвижная фаза: 60% СОг/40% (0,5% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин). Второй элюируемый энантиомер: 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8 мг, 0,022 ммоль, 10%-ный выход) в виде не совсем белого твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 352,0 [(М+Н)+, вычислено для C17H17F3N3O2 352,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,2 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 6,79 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ Е): tR = 6,09 мин; *Н
ЯМР (400 МГц, MeOD): 5 9,47 (с, Ш), 8,77 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,41 (д, J = 8,8 Гц, Ш), 8,25 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 7,14 (д, J = 2,4 Гц, Ш), 7,10 (дд, J = 8,8, 2,4 Гц, Ш), 4,22 - 4,13 (м, 2Н), 3,80 (с, ЗН), 3,66 - 3,58 (м, Ш), 2,70 -2,62 (м, Ш), 2,48 -2,42 (м, Ш).
Пример 137
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-4,б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 93: 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (20 мг, 0,044 ммоль, 69% выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 443,9, 445,9 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для CisHisBrFsNsOi 444,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,64 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,95 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 8,57 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,55 (с, Ш), 8,08 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,02 (с, Ш), 4,32 - 4,16 (м, 2Н), 3,74 (с, ЗН), 3,69 - 3,61 (м, Ш), 3,07 (с, ЗН), 2,81 -2,64 (м, Ш), 2,55 -2,39 (м, Ш).
Пример 138
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-4,б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Материал из примера 137 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC ((Chiralpak-AD-H, (250 х 21 мм), 5 мкм; подвижная фаза: 60% СО2, 40% (0,3% DEA в метаноле); Скорость потока: 60 г/мин) Первый элюируемый энантиомер: 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8 мг, 0,018 ммоль, выход 32%) в виде не совсем белого твердого вещества. Абсолютная
стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 443,9, 445,9 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для CisHisBrFsNsCh 444,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,63 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,10 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ F): tR = 2,38 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 9,45 (д, J = 1,0 Гц, Ш), 8,78 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,59 (с, Ш), 8,20 (д, J = 5,0 Гц, Ш), 7,08 (с, Ш), 4,36 - 4,19 (м, 2Н), 3,79 (с, ЗН), 3,64 (дк, J = 8,0, 5,0 Гц, Ш), 2,85 -2,64 (м, Ш), 2,58 -2,36 (м, Ш).
Пример 139
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-4,б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Материал из примера 137 разделяли на соответствующие энантиомеры с помощью хиральной SFC ((Chiralpak-AD-H, (250 х 21 мм), 5 мкм: подвижная фаза: 60% СО2, 40% (0,3% DEA в метаноле); Скорость потока : 60 г/мин) Второй элюируемый энантиомер: 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8 мг, 0,018 ммоль, выход 32%) в виде не совсем белого твердого вещества. Абсолютная стереохимия не определялась. LC/MS (ESI) м/е 443,9, 445,9 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для CisHisBrFsNsCh 444,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,63 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,10 мин; Хиральная ВЭЖХ (способ F): tR = 4,85 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 9,47 (с, Ш), 8,79 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,48 (с, Ш), 8,23 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 7,15 (с, Ш), 4,33 - 4,17 (м, 2Н), 3,81 (с, ЗН), 3,71 - 3,61 (м, Ш), 2,71 (ддд, J = 15,2, 11,4, 5,0 Гц, Ш), 2,46 (dqd, J = 15,0, 11,2,7,5 Гц, Ш).
Пример 140
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примерах 93 и 3: 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8 мг, 0,018 ммоль, 32%-ный выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 429,9, 431,9 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для СпШбВгБзКзСЪ 430,0]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,66 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,97 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-
d4) 5 8,60 - 8,55 (м, 2Н), 8,10 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,05 (с, Ш), 4,35 - 4,17 (м, 2Н), 3,76 (с, ЗН), 3,69 - 3,58 (м, Ш), 3,07 (с, ЗН), 2,83 -2,61 (м, Ш), 2,46 (dqd, J = 15,0, 11,1, 7,8 Гц,
Ш).
Пример 141
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-хлор-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примерах 93 и 3: 8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (15 мг, 0,038 ммоль, 37%-ный выход) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 386,0 [(М+Н)+, вычислено для C17H16CIF3N3O2 386,1]; ВЭЖХ Время удерживания (способ A): tR = 8,37 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,63 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол^) 8 8,62 - 8,54 (м, 2Н), 8,10 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 7,05 (с, Ш), 4,33 - 4,12 (м, 2Н), 3,76 (с, ЗН), 3,69 - 3,59 (м, Ш), 3,07 (с, ЗН), 2,84 -2,61 (м, Ш), 2,47 (dqd, J = 15,0, 11,2,7,5 Гц, Ш).
Пример 142
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(бН)-он
Получали, как описано в примере 3: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (10 мг, 0,717 ммоль, 89% выход) в виде бледно-
желтого твердого вещества. LC/MS (EST) м/е 346,0 [(М+Н)+, вычислено для C18H21CIN3O2 346,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,13 мин, ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 9,00 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-^) 5 8,66 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,56 (с, Ш), 8,41 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,02 (с, Ш), 4,46 (д, J = 10,3, 3,3 Гц, Ш), 4,31 (дд, J = 10,5, 5,5 Гц, Ш), 3,87 - 3,80 (м, Ш), 3,18 (с, ЗН), 1,90 - 1,69 (м, ЗН), 1,08 (д, J = 3,5 Гц, ЗН), 1,07 (д, J = 3,5 Гц, ЗН).
Пример 143
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-6-(2-гидроксиэтил)-4-метилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере 44: (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-6-(2-гидроксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8 мг, 0,016 ммоль, выход 24%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 448,0, 450,0 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для СцТТпТЪх^ъОъ 448,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,66 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,05 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,62 (с, Ш), 8,57 (д, J = 5,7 Гц, Ш), 8,13 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,31 (с, Ш), 4,52 (т, J = 5,7 Гц, 2Н), 4,34 (дд, J = 9,6, 3,6 Гц, Ш), 4,15 (дд, J = 9,6, 6,3 Гц, Ш), 3,96 (т, J = 5,7 Гц, 2Н ), 3,55 - 3,52 (м, Ш), 3,07 (с, ЗН), 1,90 - 1,81 (м, Ш), 1,69 - 1,52 (м, 2Н), 1,04 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,02 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 144
8-метокси-4, б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2: 8-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (40 мг, 0,155 ммоль, выход 80%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS
(ESI) м/е 255,2 [(M+H)+, вычислено для C15H15N2O2 255,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 8,91 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,52 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 8,61 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,43 (д, J = 8,5 Гц, Ш), 8,17 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 7,04 - 6,90 (м, 2Н), 3,94 (с, ЗН), 3,67 (с, ЗН), 3,00 (с, ЗН).
Пример 145
(8)-1-(8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-фтор-б-метил-5-оксо-5,б-дигидробензо[с]'[2,7]нафтиридин-4-ил)-3-метилмочевина
Получали, как описано в примере 18: (8)-1-(8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-ил)-3-метилмочевина, TFA (147 мг, 0,264 ммоль, выход 26%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 416,2 [(М+Н)+, вычислено для C21H27FN5O3 416,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ К): tR = 5,53 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ 1): tR = 5,61 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 8,21 (д, J = 6,3 Гц, Ш), 8,00 (д, J = 11,8 Гц, Ш), 7,57 (шир.с, Ш), 7,20 (д, J =7,3 Гц, Ш), 4,57 (дд, J = 10,5, 3,0 Гц, Ш), 4,44 (дд, J = 10,7, 6,4 Гц, Ш), 3,88 - 3,79 (м, Ш), 3,76 (с, ЗН), 2,92 (с, ЗН), 1,89 (дт, J = 13,3, 6,7 Гц, Ш), 1,84 - 1,67 (м, 2Н), 1,09 (д, J = 4,0 Гц, ЗН), 1,07 (д, J = 4,0 Гц, ЗН).
Пример 146
8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-он
Часть А: 3-(изопропиламино)пропан-1,2-диол
К пропан-2-амину (0,399 г, 6,75 ммоль) в этаноле (2 мл) медленно добавляли оксиран-2-илметанол (0,5 г, 6,75 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Неочищенную реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 3-(изопропиламино)пропан-1,2-диола (0,82 г, 6,16 ммоль, 91%-ный выход неочищенного продукта) в виде полутвердого вещества коричневатого цвета, которое переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. LC/MS (ESI)
м/е 133,9 [(М+Н)+, вычислено для C6Hi6N02 134,2]; *Н-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 3,76 -3,49 (м, ЗН), 2,89 -2,60 (м, ЗН), 2,04 (шир.с, ЗН), 1,08 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,06 (д, J = 6,4
Гц, ЗН).
Часть В: 8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-6-метилбензо[с]'[2,7J нафтиридин-5 (6Н)-он
Получали, как описано в примере 2, с использованием 3-(изопропиламино)пропан-1,2-диола (0,082 г, 0,616 ммоль) и 8-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (0,1 г, 0,409 ммоль) с получением 8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она (55 мг, 0,159 ммоль, выход 39%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 342,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H24N3O3 342,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,48 мин; ВЭЖХ время
удерживания (способ В): tR = 6,17 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 9,41 (с, Ш), 8,82 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,48 (д, J = 9,5 Гц, Ш), 8,37 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 7,14 - 7,01 (м, 2Н), 4,28 - 4,09 (м, ЗН), 3,70 (с, ЗН), 3,35 (дт, J = 12,9, 6,3 Гц, 2Н), 3,10 -2,98 (м, Ш), 1,26 (д, J = 4,0 Гц, ЗН), 1,24 (д, 1 = 4,0 Гц, ЗН).
Пример 147
8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
Получали, как описано в примере 146: 8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (62 мг, 0,172 ммоль, выход 45%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 356,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H26N3O3 356,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 5,91 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 6,64 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 8,67 - 8,63 (м, 2Н), 8,55 (д, J = 8,0 Гц, Ш), 7,20 - 7,16 (м, 2Н), 4,38 - 4,30 (м, ЗН), 3,81 (с, ЗН), 3,52 - 3,50 (м, Ш), 3,38 - 3,36 (м, Ш), 3,26 (с, ЗН), 3,24 - 3,22 (м, Ш), 1,42 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,41 (д, J = 6,4 Гц, ЗН)
Пример 148
9-бром-8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-б-метилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: 9-бром-8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (12 мг, 0,028 ммоль, 24% выход) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 420,0, 422,0 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для СлэШзВгКзОз 420,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 7,21 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 8,13 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,50 (с, Ш), 8,83 (шир.с, Ш), 8,63 (с, Ш), 8,28 (д, J = 4,64 Гц, Ш), 7,11 (с, Ш), 4,25 - 4,45 (м, ЗН), 3,81 (с, ЗН), 3,51-3,58 (м, Ш), 3,32- 3,49 (м, 2Н), 1,44 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,43 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 149
9-бром-8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-4,б-диметилбензо[с]'[2,7]нафтиридин-5'(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: 9-бром-8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-4,6-д иметилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-он (10 мг, 0,021 ммоль, 19%-ный выход) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 434,0, 436,0 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для CioFfeBrNsOs 434,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ A): tR = 6,78 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 7,77 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 част./млн 8,61 (с, Ш), 8,59 (д, J = 5,6 Гц, Ш), 8,12 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,09 (с, Ш), 4,39 - 4,29 (м, ЗН), 3,78 (с, ЗН), 3,40 - 3,18 (м, ЗН), 3,09 (с, ЗН), 1,37 (д, J = 6,4 Гц, ЗН), 1,36 (д, J = 6,4 Гц, ЗН).
Пример 150
8-((2,4-диметилпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2: 8-((2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (8,5 мг, 0,026 ммоль, выход 13%) в виде коричневого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 325,2 [(М+Н)+, вычислено для C20H25N2O2 325,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 10,12 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 9,41 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 9,47 (с, Ш), 8,76 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,41 (д, J = 10,0 Гц, Ш), 8,35 (д, J = 6,0 Гц), 7,11 - 7,02 (м, 2Н), 4,14 -4,02 (м, Ш), 4,01 - 3,94 (м, Ш), 3,79 (с, ЗН), 2,23 -2,03 (м, Ш), 1,87 - 1,71 (м, Ш), 1,45 (дд, J = 13,6, 8,0, 5,5 Гц, Ш), 1,28 - 1,17 (м, Ш), 1,10 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,99 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,95 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 151
б-метил-8-((4-метилфенил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2: 6-метил-8-((4-
метилфенил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (3,2 мг, 0,009 ммоль, выход 5%) в виде бледно-желтого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 311,2 [(М+Н)+, вычислено для C19H23N2O2 311,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 9,62 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 8,70 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 9,47 (д, J = 1,0 Гц, Ш), 8,76 (д, 1 = 5,5 Гц, Ш), 8,41 (д, 1 = 9,0 Гц, Ш), 8,26 (д, 1 = 5,5 Гц, Ш), 7,11 - 7,09 (м, Ш), 7,07 (дд, 1 = 9,0, 2,5 Гц, Ш), 4,19 (т, 1 = 6,5 Гц, 2Н), 3,81 (с, ЗН), 1,98 - 1,83 (м, 2Н), 1,67 (дт, 1 = 13,4, 6,6 Гц, Ш), 1,50 - 1,41 (м, 2Н), 0,98 (д, 1 = 6,5 Гц, 6Н).
Пример 152
(8)-8-((2-гидрокси-4-метилпентил)окси)-4,б-диметилбензо[с] [2,7]нафтиридин
-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2: (8)-8-((2-гидрокси-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (26 мг, 0,074 ммоль, 19% выход) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 341,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H25N2O3 341,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ М): tR = 6,06 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 6,95 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-ё4) 5 8,54 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,36 (д, 1 = 8,5 Гц, Ш), 8,13 (д, 1 = 6,0 Гц, Ш), 7,13 - 6,97 (м, 2Н), 4,25 - 3,98 (м, ЗН), 3,75 (с, ЗН), 3,08 (с, ЗН), 2,05 - 1,84 (м, Ш), 1,65 - 1,52 (м, Ш), 1,50 - 1,38 (м, Ш), 1,01 (м, 6Н).
Пример 153
8-(2-гидрокси-3-изопропоксипропокси)-4,б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 146: 8-(2-гидрокси-3-изопропоксипропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (11 мг, 0,031 ммоль, выход 23% ) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 357,1 [(М+Н)+, вычислено для C20H25N2O4 357,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ В): tR = 10,82 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 9,66 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 8 7,04 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 6,75 (д, J = 9,5 Гц, Ш), 6,60 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 5,47 (дд, J = 9,0, 2,5 Гц, Ш), 5,33 (д, J = 2,5 Гц, Ш), 2,43 -2,26 (м, 2Н), 1,83 - 1,81 (м, Ш), 1,55 (с, ЗН), 0,37 - 0,24 (м, Ш), 0,11 - -0,05 (м, 2Н), -0,25(с, ЗН), -0,50 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), -0,53 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 154
9-бром-8-((2,4-диметилпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 3: 9-бром-8-((2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (15 мг, 0,037 ммоль, выход 60%) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 402,18, 404,8 Вг модель [(М+Н)+, вычислено для C2oH24BrN202 403,1]; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 10,69 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 11,69 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 9,48 (с, Ш), 8,78 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,65 (с, Ш), 8,26 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 7,09 (с, Ш), 4,22 - 4,02 (м, 2Н), 3,83 (с, ЗН), 2,18 (дк, J = 13,4, 6,6 Гц, Ш), 1,89 - 1,74 (м, Ш), 1,53 (дд, J = 13,4, 7,9, 5,8 Гц, Ш), 1,30 - 1,20 (м, Ш), 1,15 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 1,00 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,97 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 155
8-((2,4-диметилпентил)окси)-4, б-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2: 8-((2,4-диметилпентил)окси)-4,6-
диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (40 мг, 0,118 ммоль, 12%-ный выход) в виде
не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 339,0 [(М+Н)+, вычислено для
301
C21H27N2O2 339,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 9,62 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 8,27 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-ё4) 5 8,54 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,34 (д, J = 10,0 Гц, Ш), 8,12 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,06 - 6,93 (м, 2Н), 4,08 - 3,99 (м, Ш), 3,98 - 3,90 (м, Ш), 3,75 (с, ЗН), 3,08 (с, ЗН), 2,25 -2,04 (м, Ш), 1,87 - 1,70 (м, Ш), 1,44 (дд, J = 13,7, 8,2, 5,8 Гц, Ш), 1,27 - 1,17 (м, Ш), 1,10 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,99 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,95 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 156
4, б-диметил-8-((4-метилфенил)окси)бензо[с]'[2,7J нафтиридин-5 (6Н)-он
Получали, как описано в примере 2: 4,6-диметил-8-((4-метилфенил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (32 мг, 0,098 ммоль, выход 34% ) в виде не совсем белого твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 325,0 [(М+Н)+, вычислено для C22H25N2O2 325,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 9,13 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 7,80 мин; *Н-ЯМР (400 МГц, метанол-ё4) 5 8,52 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 8,36 - 8,23 (м, Ш), 8,08 (д, J = 5,5 Гц, Ш), 7,03 - 6,91 (м, 2Н), 4,15 (т, J = 6,5 Гц, 2Н), 3,72 (с, ЗН), 3,06 (с, ЗН), 1,94 - 1,81 (м, 2Н), 1,67 (dquin, J = 13,4, 6,6 Гц, Ш), 1,50 -1,37 (м, 2Н), 0,98 (д, J = 7,0 Гц, 6Н).
Пример 157
8-((2,4-диметилпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2: 8-((2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (18 мг, 0,055 ммоль, выход 7%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 325,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H25N2O2 325,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 9,54 мин; ВЭЖХ время
302
удерживания (способ I): tR = 9,44 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 9,47 (с, Ш), 8,76 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,41 (д, J = 10,0 Гц, Ш), 8,35 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,13 - 6,96 (м, 2Н), 4,14 - 4,02 (м, Ш), 4,01 - 3,93 (м, Ш), 3,79 (с, ЗН), 2,26 -2,03 (м, Ш), 1,88 - 1,70 (м, Ш), 1,45 (дд, J = 13,6, 8,0, 5,5 Гц, Ш), 1,27 - 1,17 (м, Ш), 1,10 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,99 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,95 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Пример 158
8-((2,4-диметилпентил)окси)-б-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он
Получали, как описано в примере 2: 8-((2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-он (20 мг, 0,061 ммоль, выход 7%) в виде бесцветного твердого вещества. LC/MS (ESI) м/е 325,0 [(М+Н)+, вычислено для C20H25N2O2 325,2]; ВЭЖХ время удерживания (способ G): tR = 9,54 мин; ВЭЖХ время удерживания (способ I): tR = 9,44 мин; ^-ЯМР (400 МГц, метанол-сЦ) 5 9,47 (с, Ш), 8,76 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 8,45 - 8,39 (м, Ш), 8,35 (д, J = 6,0 Гц, Ш), 7,22 - 6,89 (м, 2Н), 4,13 -4,02 (м, Ш), 4,01 - 3,92 (м, Ш), 3,79 (с, ЗН), 2,19 -2,04 (м, Ш), 1,89 - 1,66 (м, Ш), 1,45 (дд, J = 13,6, 8,0, 5,5 Гц, Ш), 1,28 - 1,17 (м, Ш), 1,10 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,99 (д, J = 6,5 Гц, ЗН), 0,95 (д, J = 6,5 Гц, ЗН).
Способы
Анализ ААК1 киназы
Анализы выполняли в 384-луночных планшетах с U-образным дном. Конечный объем анализируемой пробы составлял 30 мкл, приготовленных из 15 мкл добавок фермента и субстратов (меченный флуоресцином пептид (5-FAM)-Aha-KEEQSQITSQVTGQIGWR-NH2 и АТФ) и испытываемых соединений в буфере для анализа (10 мМ Трис-HCl, рН 7,4, 10 мМ MgCh, 0,01% твин-20 и 1,0 мМ ДТТ). Реакции инициировали комбинированием бактериально экспрессированной GST-Xa-hAAKl с субстратами и испытываемыми соединениями. Реакционные смеси инкубировали при комнатной температуре в течение 3 ч и реакции останавливали добавлением 60 мкл 35 мМ ЭДТА-буфера для каждого образца. Реакции анализировали на Caliper LabChip 3000 (Caliper,
Hopkinton, MA) путем электрофоретического разделения флуоресцентного субстрата и фосфорилированного продукта. Данные по ингибированию вычисляли сравнением с контрольными реакциями, остановленными ЭДТА, для определения 100%-ного ингибирования и реакциями с участием только носителя для определения ингибирования 0%. Конечные концентрации реагентов в анализах составляют АТФ, 22 мкМ; (5-FAM)-Aha-KEEQSQITSQVTGQIGWR-NH2, 1,5 мкМ; GST-Xa-hAAKl, 3,5 нМ; и DMSO, 1,6%. Кривые зависимости ответа от дозы были получены для определения концентрации, необходимой для 50%-ного ингибирования активности киназы (ICso). Соединения растворяли в 10 мМ в диметилсульфоксиде (DMSO) и оценивали в одиннадцати концентрациях. Значения ICso были получены с помощью нелинейного регрессионного анализа.
Анализ на основе клеток НЕК281
Клетки HEK293F культивировали в среде, содержащей DMEM (Gibco, кат. # 11965), 10% FBS (SAFC Biosciences, кат. # 12103С), IX GPS (глутамин, пенициллин и стрептомицин). В первый день клетки высевали на чашку диаметром 10 см таким образом, что в момент трансфекции они сливались на ~ 80%. Около 12 миллионов клеток было в чашке диаметром 10 см в момент трансфекции. На второй день каждую чашку трансфицировали 48 мкг ДНК и 144 мкл Lipofectamine 2000 (Invitrogen, кат. # 11668-019). ДНК состояла из смеси (в пересчете на чашку диаметром 10 см), содержащей 3 мкг AAKl/HA/pIRES (полноразмерная человека, NCBI номер доступа NP_055726,2), 45 MKrFlag/AP2MI/pcDNA (полноразмерная человека) и 1,5 мл OPTI-MEM. Lipofectamine 2000 состоит из смеси (в пересчете на чашку диаметром 10 см), содержащей 144 мкл Lipofectamine 2000 и 1,5 мл OPTI-MEM. Каждую смесь переносили в отдельные пробирки емкостью 15 мл и инкубировали при комнатной температуре в течение 5 минут, а затем две смеси объединяли и инкубировали при комнатной температуре в течение 20 минут. Питательную среду затем отсасывали из каждой чашки диаметром 10 см и заменяли на 10 мл DMEM+10% FBS (без GPS). И, наконец, 3 мл смеси ДНК/ Lipofectamine добавляли в каждую чашку диаметром 10 см и аккуратно перемешивали, после чего чашку инкубировали в течение ночи при 37 °С и в атмосфере 5% СО2. На третий день соединения разбавляли в 100% DMSO в конечной концентрации 1000Х, с последующими 3-кратными серийными разведениями, в общей сложности, для 5 испытанных концентраций. На одной чашке диаметром 10 см испытывали четыре соединения. Один мкл каждого разведения соединения затем добавляли пипеткой в 96304
луночный планшет с глубокими лунками с последующим добавлением 500 мкл DMEM+0,5% FBS в каждую лунку для 2Х (двухкратной) конечной концентрации каждого соединения. Клетки ресуспендировали в чашке диаметром 10 см просто с помощью пипетки (НЕК293 отрываются от чашки относительно легко), а затем переносили в коническую пробирку емкостью 50 мл и осаждали центрифугированием при 1000 оборотов в минуту в течение 5 мин. Клеточный осадок ресуспендировали в 2,75 мл DMEM+0,5% FBS в пересчете на одну чашку диаметром 10 см, и 100 мкл клеточной суспензии переносили в каждую лунку 96-луночного ТС планшета. И, наконец, 100 мкл 2Х соединения, разведенного в DMEM+0,5% FBS, затем добавляли в лунки, содержащие клеточную суспензию, до конечной концентрации IX. Затем планшеты инкубировали при 37 °С и 5% СО2 в течение 3-х часов с последующим переносом клеточных суспензий из каждой лунки в состоящие из 12 пробирок 1ТЦР-полоски. ГТПР-полоски центрифугировали в подставке для наконечников при 1000 оборотах в минуту в течение 5 минут, чтобы осадить клетки, и среду затем удаляли с помощью пипетки, не нарушая клеточный осадок.
Для подготовки к Вестерн-блоттингу клеточные осадки ресуспендировали в 40 мкл IX буфера LDS-PAGE для образца (Invitrogen, кат. # NP0008) + 2Х Halt фосфатазы и коктейля ингибиторов протеаз (Thermo Scientific, кат. # 1861284), а затем каждый клеточный осадок обрабатывали ультразвуком с микронаконечником на ультразвуковом приборе, установленном на уровне 5, в течение 8-10 секунд. Пять мкл 10Х NuPAGE Sample Reducing Ag3HT (с 50 мМ DTT) добавляли к каждому образцу, после чего проводили тепловую денатурацию при 70 °С в течение 10 мин на ПЦР-машине. В общей сложности, 10 мкл из расчета на одну пробу загружали в каждую полосу 4-20% трис-глицин 26-луночного геля Criterion (Biorad, кат. # 345-0034) для фосфо-ти2-блоттинга и 10 мкл на полосу в 4-12% бис-трис (+ MES буфер) NuPAGE 26-луночном геле (Invitrogen, кат. # WG1403BX10) для ти2-блоттинга. Для контролей 2 нг фосфорно-ти2 или 20 нг MU2/Flag белков загружали в последнюю лунку каждого геля. После выполнения SDS-PAGE образцы на каждом геле переносили на PVDF-мембрану с помощью iBlot и мембраны блокировали в течение одного часа в TBST+5% молока с последующей трехкратной промывкой в течение от 5 до 10 мин с ТВ ST. Гели Criterion зондировали кроличьим анти-фосфо-ти2 (1:5000; кроличье поликлональное антитело, продуцируемое фирмой New England Peptide и аффинно-очищенное на Lexicon) в TBST+5% BSA, в то время как гели NuPAGE зондировали мышиным анти-Flag (1:500;
фирма Sigma, Cat # F1804) в TBST+5% молока, и данные первичные антитела инкубировали в течение ночи при 4 °С на качалке.
На четвертый день Вестерн-блоты промывали три раза в течение от 5 до 10 минут с TBST, зондом с анти-кроличьим-HRP (1: 2000; Biorad, кат. # 170-6515) или анти-мышиным-HRP (1: 2000; Biorad, кат. # 170-6516) в TBST+5% молока в течение 1 часа при комнатной температуре, промывали 3 раза в течение 10 минут с ТВ ST и проявляли с реагентом ECL (GE Healthcare, кат. # RPN2132) на Versadoc. Наконец, устанавливали камеру, чтобы сделать снимок каждые 30 секунд в течение 10 минут, и для каждого блота сохраняли лучшее изображение без насыщенного сигнала (когда происходит насыщение сигнала, полосы будут выделены красным цветом). Объемный анализ на каждой полосе проводили для получения значений плотности. Процент ингибирования рассчитывали для каждого образца сначала нормализацией к общему числу уровней экспрессии Ми2 и затем, сравнивая с 0% и 100% контролями. Затем значения ICso рассчитывали с помощью программного обеспечения Excel для коррекции.
Мыши с нокаутом гена ААК1
Мыши, гомозиготные (-/-) по разрушению гена ААК1, были получены двумя способами: улавливанием гена и гомологичной рекомбинацией.
"Улавливание генов" представляет собой способ случайного инсерционного мутагенеза, который использует фрагмент ДНК, кодирующий репортерный ген, или ген селектируемого маркера в качестве мутагена. Векторы улавливания гена были разработаны с тем, чтобы они могли интегрироваться в интроны или гены таким образом, чтобы дать возможность клеточному аппарату сплайсинга сращивать закодированные в векторе экзоны с клеточными мРНК. Обычно векторы улавливания гена содержат последовательности селектируемых маркеров, предшествуемые сильными последовательностями акцепторов сплайсинга и не предшествуемые промотором. Когда такие векторы интегрируются в ген, клеточный аппарат сплайсинга проводит сплайсинг экзонов уловленного гена с 5'-концом последовательности селектируемого маркера. Обычно такие гены селектируемых маркеров могут экспрессироваться только в том случае, если вектор, кодирующий данный ген, интегрировался в интрон. Случившееся улавливание гена затем идентифицируют путем селекции клеток, которые могут выжить в селективной культуре.
Эмбриональные стволовые клетки (Lex-1 клетки из производного мышиного штамма А129) мутировали в процессе, включавшем вставку, по меньшей мере, части генетически
сконструированной векторной последовательности в представляющий интерес ген, мутантные эмбриональные стволовые клетки вводили микроинъекциями в бластоцисты, которые затем ввели самкам с ложной беременностью и стандартными способами доводили до родов. См., например, "Mouse Mutagenesis", 1998, Zambrowicz et al., eds., Lexicon Press, The Woodlands, TX. Полученных в результате химерных животных затем разводили для получения потомства, способного передавать зародышевую линию аллеля, содержащего сконструированную мутацию в гене, представляющем интерес. Мышей с разрушенным геном ААК1 получают также путем гомологичной рекомбинации. В данном случае второй кодирующий экзон гена мышиного ААК1 (см GenBank, номер доступа НМ_177762) удаляли способами, известными в данной области техники. См., например, патенты США No. 5487992, 5627059 и 5789215. Мышей, гомозиготных (-/-) по разрушению гена ААК1, изучали в сочетании с мышами, гетерозиготными (+/-) по разрушению гена ААК1, и однопометниками дикого типа (+/+). В ходе данного анализа мышей подвергали медицинской обработке с использованием интегрированного набора медицинских диагностических процедур, предназначенных для оценки функции основных систем органов у млекопитающего субъекта. Гомозиготных по "нокауту" (-/-) мышей в сочетании с их гетерозиготными (+/-) и дикого типа (+/+) однопометниками. Разрушение гена ААК1 было подтверждено Southern анализом. Экспрессию мышиного гомолога ААК1 определяли с помощью ОТ-ПЦР в мышиных головном мозге; спинном мозге; глазе; вилочковой железе; селезенке; легком; почке; печени; скелетной мышце; кости; желудке, тонкой кишке и толстой кишке; сердце; жировой ткани; астматическом легком; LPS печени; крови; перевязанном сердце; дереве аорте; предстательной железе; и молочной железе (5 недель девственница, зрелая девственница, 12 DPC, 3 дней после родов (в период лактации), 3 день после отъема (ранняя инволюция), и 7 дней после отъема (поздняя инволюция)).
ААК1-гомозиготные (-/-) мыши и их однопометники дикого типа (+/+) были протестированы с использованием теста воздействия формалина на лапу с целью оценки их острых и тонических ноцицептивных ответов. Для данных испытаний были использованы автоматические анализаторы ноцицепции (Automatic Nociception Analyzers) (приобретенные из лаборатории Ozaki в Университете Калифорнии, Сан-Диего). Металлическую полоску помещали вокруг левой задней лапы каждой мыши за 30 минут до начала испытаний. После 30-минутного периода акклиматизации 20 мкл 5%-ного формалина вводили подкожно в дорсальную поверхность левой задней лапы. Мышей содержали индивидуально в цилиндрических камерах в течение 45 минут.
Свежий 5%-ный раствор формалина готовили разведением формальдегида (Formalde-fresh 20%, Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) с дистиллированной водой. Исследуемые соединения вводили за 30 мин до инъекции формалина.
Компьютер регистрировал подергивания за минуту, общее число подергиваний для фазы I (острая фаза = первые 8 минут) и общее число подергиваний для фазы II (тоническая фаза = время от 20 до 40 минут) через электромагнитное поле. См. Yaksh TL, Ozaki G, McCumber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaksh MC. An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay. J Appl Physiol., 2001; 90:2386-402. Как показано на фигуре 1, данные для фазы 1 и фазы 2 были получены с использованием гомозиготных (-/-) самок мышей (п = 16), самок дикого типа (п = 15), гомозиготных (-/-) самцов мышей (п = 9) и самцов дикого типа (п = 18). Во всех группах и в обеих фазах ААК1-гомозиготные (-/-) мыши показали значительно меньше зарегистрированных подергиваний задних лап, чем их однопометники дикого типа (+/+). Исследования мышей с нокаутом гена ААК1 показали, что разрушение гена ААК1 влияет на болевую реакцию, как было измерено с помощью теста воздействия формалина на лапу, описанного выше. Тот же тест был использован, чтобы подтвердить, что введение ингибитора ААК1 может также повлиять на болевой ответ. Соединение по настоящему изобретению тестировали в данном анализе в различных дозах. Габапентин и прегабалин использовали в качестве положительных контролей. Результаты приведены ниже в таблице 2, причем эффект габапентина в дозе 200 мг/кг считается 100%-ным ответом, % ответа для других соединений дается относительно 200 мг/кг габапентина, "sc" обозначает подкожное введение; "ро" обозначает пероральное введение.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение, выбранное из
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бромбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она; (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она; (8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-изобутил-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-6-метилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-она; 8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-9-бром-6-метилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-она;
8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-9-хлор-6-метилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-она;
4-амино-8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-(дифторметил)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-4,6-д иметилбензо[с] [2,7] нафтирид ин-5 (6Н)-она;
8-((2-амино-5,5,5-трифторпентил)окси)-9-хлор-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-
5(6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-циклопропил-4,6-д иметилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-она; 8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-6-метил-5 -оксо-5,6-дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-9-карбонитрила;
8-((2-амино-5,5,5 -трифторпентил)окси)-9-бром-4,6-д иметилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5(6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-изопропил-4,6-д иметилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-6-(2-метоксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлор-6-(2-гидроксиэтил)-4-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
(К)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-7-фтор-4,6-д иметилбензо[с] [2,7] нафтиридин-5 (6Н)-она;
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-
она;
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-бром-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
8-(2-амино-4,4,4-трифторбутокси)-9-хлор-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-хлорбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
(8)-8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-бром-6-(2-гидроксиэтил)-4-
метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
8-метокси-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
(8)-1-(8-((2-амино-4-метилпентил)окси)-9-фтор-6-метил-5-оксо-5,6-
дигидробензо[с][2,7]нафтиридин-4-ил)-3-метилмочевины;
8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-6-метилбензо[с] [2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
8- (2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
9- бром-8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
9-бром-8-(2-гидрокси-3-(изопропиламино)пропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
8-((2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она; 6-метил-8-((4-метилфенил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она; (8)-8-((2-гидрокси-4-метилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
8- (2-гидрокси-3-изопропоксипропокси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
9- бром-8-((2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она; 8-((2,4-диметилпентил)окси)-4,6-диметилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она; 4,6-диметил-8-((4-метилфенил)окси)бензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она; и 8-((2,4-диметилпентил)окси)-6-метилбензо[с][2,7]нафтиридин-5(6Н)-она;
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Композиция, содержащая фармацевтически приемлемое количество соединения по пункту 1 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
3. Способ ингибирования активности адаптер-связанной киназы 1 (ААК1), включающий контактирование ААК1 с соединением по пункту 1 или его фармацевтически приемлемой солью.
4. Способ лечения или контроля заболевания или расстройства, опосредованного активностью ААК1, причем упомянутый способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по пункту 1 или его фармацевтически приемлемой соли.
5. Способ по пункту 4, в котором заболевание или расстройство выбрано из болезни Альцгеймера, биполярного расстройства, боли, болезни Паркинсона и шизофрении.
6. Способ по пункту 5, в котором боль представляет собой невропатическую боль.
7. Способ по пункту 6, в котором невропатическая боль представляет собой
фибромиалгию или периферическую невропатию.
ФАЗА I: САМКИ
ФАЗАН: САМКИ
40(h
ЗОО
200-
100'
WT (n=15)
НОМ (n=16)
o й
2001000-
300-
N Ы
w о
WT (n=15)
HOW (n"16)
ФАЗА I: САМЦЫ
ФАЗА II: САМЦЫ
700-1
600-
500-
400-
300-
200-
""Чи.
100-
WT (n=18)
ном М)
о ч
О Н
о 700 л 60050040030020010ОО-
Y Y
WT (п=18)
НОМ (п=9)
ФИГ. 1
(19)
(19)
(19)
Схема 7:
Схема 7:
Схема 7:
Схема 7:
Схема 8:
Схема 8:
Схема 11:
Схема 11:
Схема 11:
Схема 11:
Схема 14:
Схема 14:
Схема 17:
101
101
102
105
106
AcHN
108
108
119
118
121
121
124
127
127
138
141
141
142
147
147
150
150
151
152
155
155
159
159
160
163
163
166
166
168
171
171
176
179
182
189
189
193
193
195
195
198
198
NH2
199
NH2
199
200
200
206
209
209
213
212
215
215
221
222
224
224
229
230
232
232
233
236
236
243
249
248
251
251
253
252
256
256
263
263
263
266
266
269
270
272
272
277
277
280
280
284
284
287
287
303
306
306