|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:      или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Способ ингибирования образования или накопления продуктов цикла превращений родопсина, включающий осуществление контактирования опсинового белка с соединением по п.1. 3. Способ по п.2, где указанным продуктом цикла превращений родопсина является токсический продукт цикла превращений родопсина. 4. Способ по п.2, где указанный продукт цикла превращений родопсина представляет собой липофусцин или N-ретинилиден-N-ретинилэтаноламин (A2E). 5. Способ лечения офтальмологических состояний у субъекта, подверженного такому риску, включающий введение соединения по п.1 субъекту. 6. Способ по п.5, где офтальмологическое состояние связано с неправильной локализацией опсинового белка. 7. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние выбирают из группы, состоящей из макулярной дегенерации, пигментного ретинита (RP), ретинальной или макулярной дистрофии, болезни Старгардта, дистрофии Сорсби, аутосомно-доминантных друз, дистрофии Беста, мутаций периферина, связанных с макулярной дистрофией, макулярной дистрофии Северной Каролины, светотоксичности, потери нормального зрения, связанной с возрастом, потери нормального ночного зрения, связанной с возрастом. 8. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние представляет собой макулярную дегенерацию. 9. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние представляет собой болезнь Старгардта. 10. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом макулярную дегенерацию (ARMD). 11. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом влажную макулярную дегениерацию. 12. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом сухую макулярную дегениерацию. 13. Способ по п.9, где болезнь Старгардта представляет собой доминантную форму болезни Старгардта.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Соединение, выбранное из группы, состоящей из: или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Способ ингибирования образования или накопления продуктов цикла превращений родопсина, включающий осуществление контактирования опсинового белка с соединением по п.1. 3. Способ по п.2, где указанным продуктом цикла превращений родопсина является токсический продукт цикла превращений родопсина. 4. Способ по п.2, где указанный продукт цикла превращений родопсина представляет собой липофусцин или N-ретинилиден-N-ретинилэтаноламин (A2E). 5. Способ лечения офтальмологических состояний у субъекта, подверженного такому риску, включающий введение соединения по п.1 субъекту. 6. Способ по п.5, где офтальмологическое состояние связано с неправильной локализацией опсинового белка. 7. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние выбирают из группы, состоящей из макулярной дегенерации, пигментного ретинита (RP), ретинальной или макулярной дистрофии, болезни Старгардта, дистрофии Сорсби, аутосомно-доминантных друз, дистрофии Беста, мутаций периферина, связанных с макулярной дистрофией, макулярной дистрофии Северной Каролины, светотоксичности, потери нормального зрения, связанной с возрастом, потери нормального ночного зрения, связанной с возрастом. 8. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние представляет собой макулярную дегенерацию. 9. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние представляет собой болезнь Старгардта. 10. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом макулярную дегенерацию (ARMD). 11. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом влажную макулярную дегениерацию. 12. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом сухую макулярную дегениерацию. 13. Способ по п.9, где болезнь Старгардта представляет собой доминантную форму болезни Старгардта.
Евразийское 032666 (13) B1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2019.06.28
(21) Номер заявки 201691400
(22) Дата подачи заявки 2012.06.13
(51) IntCl С07С25/18 (2006.01) С07С 31/13 (2006.01) С07С 33/34 (2006.01)
С07С 33/50 (2006.01) С07С 43/23 (2006.01)
С07С 49/317 (2006.01) С07С 49/792 (2006.01)
С07С 49/813 (2006.01) С07С 49/84 (2006.01) С07С 255/53 (2006.01)
С07С 255/56 (2006.01)
С07С 257/18 (2006.01)
С07Б 307/42 (2006.01) С07Б 307/46 (2006.01) С07Б 333/22 (2006.01) A61K 31/03 (2006.01) A61K 31/045 (2006.01)
A61K 31/085 (2006.01) A61K 31/12 (2006.01) A61K 31/155 (2006.01)
A61K 31/277 (2006.01)
A61K 31/381 (2006.01)
A61P 27/00 (2006.01)
(54) ОПСИНСВЯЗЫВАЮЩИЕ ЛИГАНДЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
(31) 61/520,709; 61/562,689; 61/564,453 (56) WO-A1-2010147653
(32) 2011.06.14; 2011.11.22; 2011.11.29 WO-A1-2°09058216
(33) US
(43) 2016.10.31
(62) 201490012; 2012.06.13
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
БИКАМ ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНК.
(US)
(72) Изобретатель:
Гарви Дэвид С. (US)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к соединениям и их применению для лечения и/или предупреждения офтальмологических заболеваний.
Уровень техники
Уменьшенная острота зрения или полная потеря зрения могут быть результатом ряда глазных заболеваний или нарушений, вызванных дисфункцией тканей или структур переднего сегмента глаза и/или заднего сегмента глаза. В тех заболеваниях, которые возникают как следствие дисфункции в переднем сегменте, часто принимают участие аберрации в цикле превращений родопсина. Цикл превращений родопсина (также часто называемый ретиноидным циклом) включает ряд происходящих под действием света и/или катализируемых ферментами реакций, в которых светочувствительный хромофор (называемый родопсином) образуется за счет ковалентного связывания опсинового белка и ретиноидного средства 11-цис-ретиналя, и затем, после экспонирования свету, 11-цис-ретиналь превращается в 11-транс-ретиналь, который может затем быть регенерированным в 11-цис-ретиналь, чтобы снова взаимодействовать с опсином. Ряд зрительных, офтальмологических проблем может возникать из-за нарушения указанного цикла. В настоящее время стало понятно, что, по меньшей мере, некоторые из указанных проблем вызваны неправильной укладкой белка, такой как у опсинового белка.
Основным фоторецептором света и темноты в глазах млекопитающих являются палочкоподобные клетки сетчатки, которые содержат складчатую мембрану, содержащую белковые молекулы, которые могут быть восприимчивы к свету, причем основной молекулой является опсин. Подобно другим белкам, присутствующим в клетках млекопитающих, опсин синтезируется в эндоплазмическом ретикулуме (т.е. на рибосомах) цитоплазмы, и затем поступает в клеточные мембраны палочкоподобных клеток. В некоторых случаях, таких как те, что связаны с генетическими дефектами и мутациями опсинового белка, опсин может демонстрировать неправильную укладку с образованием конформаций, которые или не могут соответствующим образом встраиваться в мембрану палочкоподобных клеток, или могут встраиваться, но затем не могут соответствующим образом взаимодействовать с 11-цис-ретиналем с образованием природного родопсина. В любом случае результатом является нарушение (от умеренного до сильного) зрительного восприятия животного с таким офтальмологическим нарушением.
Среди заболеваний и состояний, связанных с неправильной укладкой опсина, находится пигментный ретинит (RP), прогрессирующее окулярно-нейродегенеративное заболевание (или группа заболеваний), которое поражает, по существующим оценкам, от 1 до 2 миллионов человек во всем мире. При RP фоторецепторные клетки в сетчатке повреждаются или разрушаются, что приводит к утрате периферического зрения (т.е. туннельного зрения) и к последующей частичной или почти полной слепоте. У жителей Америки наиболее часто дефекты возникают как результат замещения пролинового остатка гистиди-новым остатком у аминокислоты номер 23 в полипептидной цепочке опсина (получившего название "P23H"), вызываемого мутацией в гене опсина. Результатом является продуцирование дестабилизированной формы белка, который оказывается неправильно свернутым и скорее агрегируется в цитоплазме, нежели транспортируется на клеточную поверхность. Подобно многим другим заболеваниям, обусловленным конформационными заболеваниями (PCD), клинически обычный опсиновый мутант P23H, связанный с аутосомально-доминантным RP, характеризуется неправильной укладкой и тем, что остается внутри клетки. Считают, что агрегация белков с неправильной укладкой приводит к повреждению фоторецепторов и к гибели клеток.
Недавние исследования обнаружили малые молекулы, которые стабилизируют неправильно упакованные мутантные белки, связанные с заболеванием. Некоторые из них, называемые "химическими ша-перонами", стабилизируют белки неспецифически. Примеры таких молекул включают глицерин и три-метиламиноксид. Их использование не очень желательно для лечения офтальмологических заболеваний, так как такая обработка обычно требует высоких доз, которые могут вызвать токсические побочные эффекты. Другие средства, именуемые "фармакологическими шаперонами" (которые включают природные лиганды и аналоги субстратов), действуют как стабилизаторы белков, путем связывания со специфическими сайтами, и были идентифицированы для многих белков с неправильной укладкой, например, G-белок-связанных рецепторов. Опсин представляет собой пример G-белок-связанного рецептора, и его канонические фармакологические шапероны включают класс соединений, называемых ретиноидами. Так, было показано, что некоторые ретиноидные соединения стабилизируют мутантные опсиновые белки (см., например, публикацию патента США 2004-0242704, а также Noorwez et al., J. Biol. Chem., 279(16): 16278-16284 (2004)).
Цикл превращений родопсина включает ряд катализируемых ферментами реакций, обычно инициируемых световым импульсом, в результате чего зрительный хромофор родопсина, состоящий из оп-синового белка, ковалентно связанного с 11-цис-ретиналем, превращается в 11-транс-изомер, который затем выделяется из активированного родопсина, образуя опсин и 11-транс-ретинальный продукт. Указанная часть цикла превращений родопсина происходит во внешней части палочкоподобных клеток сетчатки глаза. Дальнейшие части цикла происходят в пигментированном эпителии сетчатки (RPE). Компоненты указанного цикла включают различные ферменты, такие как дегидрогеназы и изомеразы, также как транспортные белки для передачи материалов между RPE и палочкоподобными клетками.
В результате цикла превращений родопсина образуются различные продукты, называемые продуктами цикла превращений родопсина. Одним из них является 11-транс-ретиналь, продуцируемый в палоч-коподобных клетках, как прямой результат контактирования световых импульсов с 11-цис-ретинальными фрагментами родопсина. 11-транс-ретиналь, после выделения из активированного родопсина, может быть регенерирован обратно в 11-цис-ретиналь или может взаимодействовать с дополнительной молекулой 11-транс-ретиналя и молекулой фосфатидилэтаноламина с образованием N-ретинилиден^-ретинилэтаноламина (именуемого "A2E"), флуорофора, эмитирующего в оранжевой области спектра, который может затем накапливаться в палочкоподобных клетках и в пигментированном эпителии сетчатки (RPE). Так как A2E накапливается (как нормальное следствие цикла превращений родопсина), он может также превращаться в липофусцин, токсичное вещество, которое могло принимать участие в некоторых анормальностях, включая офтальмологические нарушения, такие как влажная и сухая возрастные макулярные дегенерации (ARMD). Было также доказано, что A2E может быть токсичным для RPE и связан с сухой ARMD.
Поскольку накопление продуктов цикла превращений родопсина является нормальной частью физиологического процесса, вероятно, что все млекопитающие, особенно человек, расположены к таким накоплениям на протяжении всей жизни. Однако во время хирургических операций на глазе, особенно на сетчатке, где яркий свет требуется в течение более длительного времени, например, в конце оперирования катаракты и во время имплантирования новых хрусталиков, таким образом естественные процессы могут быть причиной заражения, благодаря накоплению естественных продуктов цикла превращений родопсина. Кроме того, стимулируется чрезмерная активация родопсина в результате яркого света, которая может быть причиной апоптоза фоторецепторных клеток посредством фактора копирования АР-1 обуславливающего механизма. Учитывая это, существует необходимость в средствах, которые могут быть введены до, во время или после (или другие их комбинации) хирургической операции и имеют эффект ингибирования активации родопсина, а также уменьшения продуцирования продуктов цикла превращений родопсина, которые таким образом будут накапливаться и в результате заражать глаз, особенно сетчатку.
Настоящее изобретение отвечает указанным потребностям, предлагая малые молекулы, которые нековалентно связываются с опсином или мутированными формами опсина, для лечения и/или облегчения таких состояний, если не для полного их предотвращения. Важно отметить, что такие средства не являются природными ретиноидами и поэтому тщательно не контролируются в отношении включения в палочкоподобные клетки, где синтезируются мутированные формы опсина и/или в другом случае накапливаются продукты цикла превращений родопсина. Поэтому чрезвычайно важно добавлять такие средства при необходимости для облегчения правильной укладки и миграции мутированных опсинов в клеточные мембраны или для предотвращения активации родопсина, которая может привести к избыточному накоплению продуктов цикла превращений родопсина, таких как 11-транс-ретиналь, что, в свою очередь, может привести к образованию токсичных продуктов метаболизма. Такие соединения могут конкурировать с 11-цис-ретиналем в отношении уменьшения количества 11-транс-ретиналя, закрывая доступ в ретиналь-связывающий карман опсина для предотвращения избыточного накопления 11-транс-ретиналя. Таким образом, соединения, предложенные в настоящем изобретении, обладают тем преимуществом, что они непосредственно не ингибируют ферментативные процессы, в результате которых в глазу продуцируется 11-цис-ретиналь (таким образом, не внося вклад в дегенерацию ретиналя). Вместо этого ограничивается образование 11-транс-ретиналя, и, тем самым, уменьшается образование A2E. Наконец, в результате ограничения способности 11-цис-ретиналя комбинироваться с опсином с образованием родопсина, также уменьшается активация родопсина, вызываемая стимуляцией ярким светом, особенно во время офтальмологических операций, и тем самым, в результате предотвращается гибель фоточувствительных клеток.
Неправильная локализация фоторецепторных клеток белков зрительного пигмента (опсинов) может происходить при различных глазных заболеваниях, и также при естественном старении. В обоих случаях накопление неправильной локализации опсина приводит к уменьшению жизнеспособности фоторецеп-торных клеток. Со временем такое накопление неправильно локализованного опсина приводит к гибели палочкоподобных и колбочковидных клеток, к дегенерации сетчатки и к потере зрения. Настоящее изобретение решает эту проблему способом корректировки неправильной локализации опсина внутри фото-рецепторных клеток, включающим осуществление контактирования неправильно локализованного опси-нового белка со связывающим опсин средством, которое обратимо и/или нековалентно связывается с указанным неправильно локализованным опсиновым белком, и промотируя соответствующий внутриклеточный процессинг и миграцию указанного опсинового белка. Такая корректировка неправильной локализации уменьшает стресс фоторецепторных клеток, предотвращает снижение жизнеспособности фоторецепторных клеток и их гибель при различных заболеваниях, ведущих к потере зрения, и при естественном возрастном снижении сумеречного зрения и периферического опосредованного палочкоподоб-ными клетками и центрального, опосредованного колбочковидными клетками зрения, и к потере ночного зрения.
Сущность изобретения
В одном аспекте в настоящем изобретении предложены нижеследующие соединения:
Соединение,No
Название
(S)-фенил ( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексил)метанол;
фенил ( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-фенил ( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексил)метанол;
(S)-п-толил ( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексил)метанол;
п-толил( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексил)метанон;
(S)-(З-хлор-4-метилфенил)( (1R, 6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(З-хлор-4-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-(З-хлор-4-метилфенил)( (1R, 6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)- (3-хлорфенил) ( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексил)метанол;
(3-хлорфенил)( (1R, 6S)-2, 2, 6-
триметилциклогексил)метанон;
(R)-(3-хлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)- (4-фторфенил) ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
(4-фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанон;
(R) -(4-фторфенил) ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
(R)-(4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
1-фтор-4-(((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензол;
(S) -(3, 4-дифторфенил) ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
(3,4-дифторфенил)((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанон;
(S)-фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)-тиофен-3-ил ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
тиофен-3-ил ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанон;
(R)-тиофен-3-ил((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
2-хлор-1-метил-4-(((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензол;
(S)-(4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(R)-(4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S) - (3,4,5-трифторфенил) ( (1R, 6S) -2,2,6-триме тилцикло г ексил)метанол;
(3, 4, 5-трифторфенил) ( (1R, 6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R) - (3, 4, 5-трифторфенил) ( (1R, 6S) -2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(R)-циклогексил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
циклогексил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
R)-(3,4-дифторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)-фуран-3-ил ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
фуран-3-ил ( (1R, 6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-фуран-3-ил ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)-(перфторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(перфторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
4-( (S)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
2-фтор-4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
4-((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил;
(S)-((R)-2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанол;
(2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанон;
(R)-((R)-2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанол;
(S)-(4-метокси-З-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(4-метокси-З-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
4-( (S)-гидрокси ( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексил)метил)-2-метилбензонитрил;
2-метил-4-( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил;
4-( (R)-гидрокси ( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
2-фтор-4- ( (S)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
(S)-(З-фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(З-фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон;
(R)-(З-фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол;
4-( (R)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)-2-метилбензонитрил;
(R)-(4-фторфенил)((1R,6S)-1,2,2,6-тетраметилциклогексил)метанол;
4-( (S)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
2-фтор-Ы'-гидрокси-4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метил)бензимидамид;
(S)-(3,4-дихлорфенил) ((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
(S) -(3, 4-диметилфенил) ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
(S)-(4-хлор-З-фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
4-( (R)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)-2-трифторметил)бензонитрил;
(3,4-дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанон;
(3,4-диметилфенил) ( (1R, 6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(4-хлор-З-фторфенил)( (1R,6S)-2,2, 6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-(3,4-дихлорфенил)( (1R,6S)-2,2, 6-триметилциклогексил)метанол;
2-фтор-5-((S)-гидрокси( (1R, 6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
(S)-(З-фтор-4-(трифторметил)фенил)((1R,6S) -2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(R)-(З-фтор-4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
3-( (S)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
2-хлор-4-( (S)-гидрокси( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
3-( (R)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
2-фтор-5-((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил;
(R)-(3,4-диметилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
2-хлор-4-((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил;
2-хлор-4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
(R)-(4-хлор-З-фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(R)-2-(3-фторфенил)-1-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)этанол;
(R)-1-(4-(трифторметил)фенил)-1-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)этанол; и
2-фтор-5-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил,
включая их фармацевтически приемлемые соли.
В другом аспекте предложен способ ингибирования образования или накопления продуктов цикла превращений родопсина, включающий осуществление контактирования опсинового белка с соединением, выбранным из приведенной выше группы соединений.
При этом, в одном из частных случаев осуществления настоящего изобретения, продуктом цикла превращений родопсина является токсический продукт цикла превращений родопсина.
В ещё одном частном случае осуществления настоящего изобретения, продукт цикла превращений родопсина представляет собой липофусцин или ^ретинилиден-^ретинилэтаноламин (A2E).
В ещё одном другом аспекте предложен способ лечения офтальмологических состояний у субъекта, подверженного такому риску, включающий введение субъекту соединения, выбранного из приведенной выше группы соединений.
При этом, в одном из частных случаев осуществления настоящего изобретения, офтальмологическое состояние связано с неправильной локализацией опсинового белка.
В частности, указанное офтальмологическое состояние выбирают из группы, состоящей макуляр-ной дегенерации, пигментного ретинита (RP), ретинальной или макулярной дистрофии, болезни Стар-гардта, дистрофии Сорсби, аутосомно-доминантных друз, дистрофии Веста, мутаций периферина, связанных с макулярной дистрофией, , макулярной дистрофии Северной Каролины, светотоксичности, потери нормального зрения, связанной с возрастом, потери нормального ночного зрения, связанной с возрастом.
В частности, макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом макулярную дегенерацию (ARMD). Причем макулярная дегенерация может представлять собой связаную с возрастом
влажную или сухую макулярную дегениерацию.
В ещё одном часчтном слечае Старгардта представляет собой доминантную форму болезни Стар-гардта.
Краткое описание чертежей
На чертеже показано увеличение регенерации пигмента, поглощающего на длине волны 500 нм, после обработки ретиналем из опсина P23H, который обрабатывают 20 мкМ р-ионона во время продуцирования мутантного белка, относительно образования пигмента в присутствии только носителя (ДМСО).
Определения
Как использовано на протяжении всего описания изобретения, следующие термины, если не указано иначе, имеют следующие значения.
Под термином "неправильная локализация" белка зрительного пигмента фоторецепторной клетки (например, опсина, особенно человеческого опсина) подразумевают, что синтезированный белок не локализован в нормальном или соответствующем месте клетки.
Термин "фармакологические шапероны" относится к химическим соединениям малого молекулярного веса, которые взаимодействуют с белком (обычно с неправильно упакованным или неупакованным белком) таким образом, что изменяют упаковку или конформацию указанного белка. Такое взаимодействие может привести к вредным последствиям для судьбы клеток белка, в том числе, но этим не ограничиваясь, приводя к повышенной стабильности и повышенным уровням содержания функционального белка, к повышенной стабильности и повышенным уровням содержания нефункционального белка, или к пониженной стабильности и пониженным уровням содержания функционального или нефункционального белка.
Термин "продуктивный шаперон" относится к фармакологическому шаперону, взаимодействие которого с белком приводит к повышенному уровню содержания функционального белка.
Термин "контрпродуктивный, разрушительный или деструктивный шаперон" относится к фармакологическому шаперону, который взаимодействует с белком (обычно с неправильно упакованным или с неупакованным белком), и указанное взаимодействие приводит к пониженной стабильности и/или пониженным уровням содержания функционального или нефункционального белка.
Под термином "ингибитор протеасомальной активности" подразумевают соединение, которое снижает протеасомальную активность, такую как разрушение убиквитинированного белка.
Под термином "ингибитор аутофагии" подразумевают соединение, которое уменьшает деградацию клеточного компонента клеткой, в которой расположен указанный компонент.
Под термином "лизосомальный ингибитор" подразумевают соединение, которое уменьшает внутриклеточный гидролиз макромолекул лизосомой. В одном варианте лизосомальный ингибитор снижает протеолитическую активность лизосом.
Под термином "ингибитор транспорта белка ER-Golgi" подразумевают соединение, которое уменьшает транспорт белка из ER (эндоплазматического ретикулума) в комплекс Гольджи, или из комплекса Гольджи в ER.
Под термином "ингибитор HSP90 шаперона" подразумевают соединение, которое уменьшает активность шаперона белка термического шока 90 (HSP90). В одном варианте указанный ингибитор изменяет связывание белка с HSP90 ATP/ADP карманом.
Под термином "активатор реакции термического шока" подразумевают соединение, которое повышает активность шаперона или экспрессию компонента пути термического шока. Компоненты пути термического шока включают, но ими не ограничиваются, HSP100, HSP90, HSP70, HASP60, HSP40 и члены семейства малых HSP.
Под термином "ингибитор гликозидазы" подразумевают соединение, которое уменьшает активность фермента, который расщепляет гликозидную связь.
Под термином "ингибитор гистондеацетилазы" подразумевают соединение, которое уменьшает активность фермента, который деацетилирует гистон.
Под терминами "уменьшает" или "увеличивает" подразумевают негативное и позитивное изменение, соответственно. В конкретных вариантах указанное изменение составляет, по меньшей мере, около 10, 25, 50, 75 или 100% от исходного уровня белка, продуцируемого в отсутствие опсинсвязывающего лиганда.
В том смысле, как здесь использован, термин "конформация дикого типа" относится к трехмерной конформации или форме
белка, который не содержит мутаций в своей аминокислотной последовательности. В случае опсина это означает, что белок не содержит мутаций, которые вызывают ошибочную регистрацию остатков, таких как мутации, обозначаемые P23H (что означает, что пролин заменен на гистидин у остатка 23, начиная с N-конца). Опсин в "конформации дикого типа" обладает биологическими функциями опсина, включая, но этим не ограничиваясь, связывание ретиноидов, функции цикла превращений родопсина и встраивание в фоторецепторные мембраны.
Под термином "средство" подразумевают малое соединение (называемое также просто "соединением"), полипептид, полинуклеотид или его фрагмент. Указанные термины "соединение" и "средство" ис
пользуют взаимозаменяемо, если конкретно не указано иначе для конкретного средства или соединения.
Под термином "корректирование конформации" белка подразумевают то, что индуцируют принятие белком конформации, обладающей по меньшей мере одной биологической активностью, связанной с белком дикого типа.
Под выражением "неправильно упакованный опсиновый белок" подразумевают белок, третичная структура которого отличается от конформации белка дикого типа, так что у неправильно упакованного белка отсутствует одна или более из биологических активностей, присущих белку дикого типа.
Под термином "селективно связывает" подразумевают соединение, которое распознает и связывается с полипептидом настоящего изобретения, таким как опсин, но практически не распознает и не связывается с другими молекулами, особенно неопсиновыми полипептидами, в образце, например, в биологическом образце.
Под термином "эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" подразумевают уровень средства, которого достаточно, чтобы оказать физиологическое воздействие на клетку, ткань, орган или пациента. В том смысле, как этот термин здесь использован, он представляет собой такое количество, которого достаточно, чтобы осуществить способы настоящего изобретения для достижения необходимого результата.
Под термином "фармакологический шаперон" подразумевают молекулу, которая, после осуществления контактирования с мутантным белком, способна облегчить/стабилизировать правильную укладку белка, таким образом, чтобы он действовал и функционировал гораздо более похоже на белок дикого типа, нежели это было бы в случае отсутствия указанной молекулы.
Под термином "контроль" подразумевают сравнительные условия. Например, если клетку, контактировавшую со средством настоящего изобретения, сравнивают с соответствующей клеткой, которая не контактировала с указанным средством, тогда последняя называется "контролем" или "контрольной клеткой".
Под термином "лечение" подразумевают снижение, подавление, ослабление, уменьшение, остановку или стабилизацию развития или прогресса заболевания, предпочтительно глазного заболевания, такого как RP, AMD и/или светотоксичность.
Под термином "предотвратить" подразумевают уменьшение риска того, что у субъекта разовьется состояние, заболевание или нарушение, предпочтительно глазное заболевание, такое как RP, AMD и/или светотоксичность.
Под термином "конкурирует за связывание" подразумевают, что соединение настоящего изобретения и эндогенный лиганд способны связываться с мишенью одновременно. Анализы, в которых измеряют конкурентное связывание, известны специалистам и включают измерение дозозависимого ингибиро-вания связывания соединения настоящего изобретения и эндогенного лиганда, измеряя, например, величину t1/2.
Термин "фармацевтически приемлемая соль" представляет собой соль, образованную кислотной или щелочной группой одного из соединений настоящего изобретения. Примеры солей включают, но ими не ограничиваются, сульфат, цитрат, ацетат, оксалат, хлорид, бромид, йодид, нитрат, бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, лактат, салицилат, кислый цитрат, тартрат, олеат, таннат, панто-тенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентисинат, фумарат, глюконат, глюкуронат, сахарат, фор-миат, бензоат, глутамат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат и памоат (т.е. 1,1 '-метилен-бис-(2-гидрокси-3 -нафтоат)).
Термин "фармацевтически приемлемая соль" также относится к соли, полученной из соединения настоящего изобретения, содержащего кислотную функциональную группу, такую как функциональная группа карбоновой кислоты, и фармацевтически приемлемого неорганического или органического основания. Подходящие основания включают, но ими не ограничиваются, гидроксиды щелочных металлов, таких как натрий, калий и литий; гидроксиды щелочноземельных металлов, таких как кальций и магний; гидроксиды других металлов, таких как алюминий и цинк; аммиак и органические амины, такие как незамещенные или гидроксизамещенные моно-, ди- или триалкиламины; дициклогексиламин; трибутила-мин; пиридин; ^метил-^этиламин; диэтиламин; триэтиламин; моно-, бис- или трис-2-гидрокси-низшие алкиламины), такие как моно-, бис- или трис-(2-гидроксиэтил)амин, 2-гидрокси-трет-бутиламин или трис-(гидроксиметил)метиламин, ^№ди-низший алкил-^(гидрокси-низший алкил)амины, такие как ^№диметил-^(2-гидроксиэтил)амин или три-(2-гидроксиэтил)амин; ^метил^-глюкамин; и аминокислоты, такие как аргинин, лизин и т.п. Термин "фармацевтически приемлемые соли" также относится к солям, полученным из раскрытых в настоящем изобретении соединений, например, солям соединений примера 1, содержащим основную функциональную группу, такую как аминофункциональная группа, и фармацевтически приемлемых неорганических или органических кислот. Подходящие кислоты включают, но ими не ограничиваются, гидросульфат, лимонную кислоту, уксусную кислоту, щавелевую кислоту, хлористоводородную кислоту, бромистый водород, йодистый водород, азотную кислоту, фосфорную кислоту, изоникотиновую кислоту, молочную кислоту, салициловую кислоту, винную кислоту, аскорбиновую кислоту, янтарную кислоту, малеиновую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, фумаровую кислоту, глюконовую кислоту, глюкуроновую кислоту, сахариновую кислоту, муравьиную кислоту, бен
зойную кислоту, глютамовую кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, бензол-сульфоновую кислоту и п-толуолсульфоновую кислоту.
Термин "фармацевтически приемлемый эксципиент" в том смысле, как здесь использован, означает один или более из совместимых твердых или жидких наполнителей, разбавителей или инкапсулирующих веществ, которые пригодны для введения человеку.
Термин "эксципиент" включает инертные вещества, которые добавляют к фармакологическим композициям для дальнейшего облегчения введения соединений. Примеры эксципиентов включают, но ими не ограничиваются, карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара и типы крахмала, производные целлюлозы, желатин, растительные масла и полиэтиленгликоли.
Термин "носитель" обозначает органический или неорганический ингредиент, природный или синтетический, с которым совместим активный ингредиент, используемый для облегчения введения.
Термин "парентеральный" включает подкожное, интратекальное, внутривенное, внутримышечное, внутрибрюшинное введение или вливание.
Термин "продукт цикла превращений родопсина" относится к химической единице, полученной как природный продукт одной или более из реакций цикла превращений родопсина (реактивного цикла, в котором белок опсина связывает 11-цис-ретиналь с образованием родопсина, который акцептирует световой импульс, превращая 11-цис-ретиналь в 11-транс-ретиналь, который затем выделяется из молекулы, регенерируя опсиновый белок с последующим связыванием нового 11-цис-ретиналя для регенерации родопсина). Такие продукты цикла превращений родопсина включают, но ими не ограничиваются, 11-транс-ретиналь, липофусцин и A2E.
Термин "светотоксичность" относится к любому состоянию, влияющему на зрение, которое связано с, относится к или вызвано продуцированием и/или накоплением продуктов цикла превращений родопсина. Продукты цикла превращений родопсина включают, но ими не ограничиваются, 11-транс-ретиналь, липофусцин или A2E. В одном конкретном варианте светотоксичность связана с экспонированием глаза большому количеству света или очень высокой интенсивности света, что происходит, например, во время хирургической операции на сетчатке.
Термин "опсин" относится к опсиновому белку, предпочтительно опсиновому белку млекопитающего, наиболее предпочтительно к опсиновому белку человека. В одном варианте опсиновый белок находится в конформации дикого типа (т.е. физиологически активной). Одним из способов анализа физиологической активности является анализ способности опсина связываться с 11-цис-ретиналем и образовывать активный родопсин. Мутантный опсин, такой как мутант P23H, который обычно неправильно упакован, обладает пониженной способностью связываться с 11-цис-ретиналем, и поэтому родопсина образуется мало или вовсе не образуется. Если конформация мутантного опсина оказывалась правильной (например, при связывании с фармакологическим шапероном), такой опсин правильно встроен в мембрану палочки сетчатки, так что его конформация такая же или практически такая же, как конформация немутантного опсина. Это позволяет мутантному опсину связываться с 11-цис-ретиналем и образовывать активный родопсин. Поэтому способы настоящего изобретения работают на уменьшение образования продуктов цикла превращений родопсина.
Подробное описание настоящего изобретения
В соответствии с настоящим изобретением было обнаружено, что некоторые малые молекулы - ли-ганды - способны обратимо связываться нековалентно с опсиновым белком и ингибировать связывание 11-цис-ретиналя с опсиновым карманом связывания ретиналя. Такое нарушение связывания ретиналя уменьшает образование продуктов цикла превращений родопсина, таких как 11-транс-ретиналь, и тем самым ингибирует продуцирование соединений, таких как липофусцин и A2E, что приводит к уменьшению риска и проявления токсичности, которая может возникнуть в результате накопления указанных веществ. Такие соединения, функционируя как фармакологические шапероны, также способны облегчить правильную укладку и миграцию мутантных опсинов, связанных с RP. Кроме того, за счет ингиби-рования связывания 11-цис-ретиналя и образования родопсина, избыточная стимуляция и результирующая активация родопсина, вызванная экспонированием сетчатки яркому свету, особенно во время хирургических операций на сетчатке, уменьшает гибель фоточувствительных клеток.
Сообщалось, что некоторые синтетические ретиноиды (соединения, структурно родственные ретинолу (спиртовой витамин А)) связываются с опсином. В некоторых вариантах настоящего изобретения было обнаружено, что неретиноидные малые молекулы (соединения с молекулярным весом менее чем около 1000 дальтон, менее чем 800, менее чем 600, менее чем 500, менее чем 400 или менее чем около 300 Дальтон) связываются с опсином.
Настоящее изобретение относится к соединениям и способами, которые можно использовать для уменьшения образования продуктов цикла превращений родопсина и уменьшения токсичности, связанной с накоплением таких продуктов in vivo, уменьшая вероятность апоптотических актов, связанных с избыточной активацией родопсина, а также предотвращая гибель палочкоподобных клеток, связанную с аберрантным процессингом и миграцией мутантных опсиновых белков, связанных с RP.
Неправильная локализация фоторецепторных клеток белков зрительного пигмента (опсинов) может происходить при различных глазных болезнях, и также может быть обусловлена старением. В таких слу
чаях накопление неправильно локализованного опсина приводит к снижению жизнеспособности фоторе-цепторных клеток. Со временем такое накопление неправильно локализованного опсина приводит к гибели палочкоподобных и колбочковидных клеток, дегенерации сетчатки и к потере зрения.
В конкретных вариантах опсинсвязывающее соединение формулы I представляет собой (номер каждого соединения соответствует номеру примера, в котором его получают):
(S)-фенил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение
1) ;
фенил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 2); (R)-фенил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 3) ;
(S)-п-толил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 4);
п-толил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 5) ;
(S)-(З-хлор-4-метилфенил)( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение б);
(З-хлор-4-метилфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 7);
(R)-(З-хлор-4-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 8);
(S)-(3-хлорфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 9);
(3-хлорфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 10);
(R)-(3-хлорфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 11);
(S)-(4-фторфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 12);
(4-фторфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 13);
(R)-(4-фторфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 14);
(S)-(4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 15); (4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон (соединение 16); (R)-(4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 17); 1-фтор-4-(((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метил)бензол (соединение 18);
(S)-(3,4-дифторфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 19);
(3,4-дифторфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 20);
(S)-фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 21);
фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 22);
(R)-фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 23);
(S)-тиофен-3-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 24);
тиофен-3-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 25) ;
(R)-тиофен-3-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 2 6);
2-хлор-1-метил-4-(((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензол (соединение 27); (S)-(4-(трифторметокси)фенил) ((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 28); (4-(трифторметокси)фенил)( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон (соединение 29); (R)-(4-(трифторметокси)фенил) ((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 30); (S) - (3, 4, 5-трифторфенил) ( (1R,6S)-2,2, 6-триметилциклогексил)метанол (соединение 31);
(3,4,5-трифторфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 32);
(R) - (3, 4, 5-трифторфенил) ( (1R,6S)-2,2, 6-триметилциклогексил)метанол (соединение 33); (R)-циклогексил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 34);
циклогексил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 35) ;
(R)-(3,4-дифторфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 36);
(S)-фуран-3-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 37);
фуран-3-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 38);
(R)-фуран-3-ил((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 39);
(S)-(перфторфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 40);
(перфторфенил) ((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 41);
4 - ( (S)-гидрокси( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 42); 2-фтор-4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 43); 4-((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил (соединение 44);
2-фтор-4-((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил (соединение 45);
(S)-((R)-2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанол (соединение 46);
(2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанон (соединение 47); (R)-((R)-2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанол (соединение 48);
(S)-(4-метокси-З-метилфенил) ( (1R,6S)-2,2, б-триметилциклогексил)метанол (соединение 49);
(4-метокси-З-метилфенил)((1R,6S)-2,2, б-триметилциклогексил)метанон (соединение 50);
4-((S)-гидрокси( (1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метил)-2-метилбензонитрил (соединение 51); 2-метил-4-((1R, 6S) -2, 2, 6-
триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил (соединение 52); 4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2, 6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 53); 2-фтор-4-( (S)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 54);
(S)-(З-фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 55);
(З-фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон (соединение 56);
(R)-(З-фтор-4-(трифторметокси)фенил) ((1R, 6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 57);
4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метил)-2
метилбензонитрил (соединение 58);
(R)-(4-фторфенил)((1R,6S)-1,2,2,б-тетраметилциклогексил)метанол (соединение 59) ;
4-((S)-гидрокси( (1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метил)-2-(трифторметил)бензонитрил (соединение 60); 2-(трифторметил)-4-((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил (соединение 61); (4-фторфенил)((1R,6S)-1,2,2,б-тетраметилциклогексил)метанон (соединение 62);
2-фтор-Ы'-гидрокси-4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензимидамид (соединение 63);
(S)-(3,4-дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол
(соединение 64);
(S)-(3,4-диметилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 65);
(S)-(4-хлор-З-фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 66);
4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метил)-2-трифторметил)бензонитрил (соединение 67);
(3,4-дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 68);
(3,4-диметилфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 69);
(4-хлор-З-фторфенил) ((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон (соединение 70);
(R)-(3,4-дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол (соединение 71);
2- фтор-5-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 72);
(S)-(З-фтор-4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 73);
(З-фтор-4-(трифторметил)фенил)((lR,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон (соединение 74);
(R)-(З-фтор-4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 75);
3- ((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 76);
2- хлор-4-( (S)-гидрокси( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 77);
3- ( (R)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 78); 2-фтор-5-((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил (соединение 79) ;
(R)-(3,4-диметилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 80);
2-хлор-4-((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил (соединение 81);
2-хлор-4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 82); (R)-(4-хлор-З-фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол (соединение 83);
(R)-2-(3-фторфенил)-1-((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)этанол (соединение 84);
(R)-1-(4-(трифторметил)фенил)-1-((1R, 6S)-2,2,6-триметилциклогексил)этанол (соединение 85); 2-фтор-5-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил (соединение 86), включая их фармацевтически приемлемые соли.
Названия всех соединений образованы в соответствии с ChemBioDraw 11.0.1. и стереохимией новых хиральных центров продуктов, полученных в результате добавления хиральных альдегидов или ке-тонов, и присвоены на основании Crams Rule асимметрической индукции (Cram и Elhafez, J. Am. Chem. Soc, 74:5828-5835 (1952)).
Способы осуществления настоящего изобретения
В настоящем изобретении предложен способ использования соединений формулы I для уменьшения образования токсических продуктов цикла превращений родопсина, включающий осуществление контактирования опсинового белка с лигандами малых молекул, которые обратимым образом связываются с указанным опсиновым белком для ингибирования связывания 11-цис-ретиналя в указанном кармане связывания, тем самым уменьшая образование токсических продуктов цикла превращений родопсина, связанных с влажной или сухой ARMD, и уменьшая апоптоз фоточувствительных клеток, связанный с избыточной активацией родопсина как результата стимуляции ярким светом.
В настоящем изобретении также предложен способ лечения офтальмологических состояний у субъекта, подверженного такому риску, включающий введение предложенных соединений субъекту.
В конкретных примерах таких способов малые молекулы лиганда селективны в отношении связывания с опсином, и/или малые молекулы лиганда связываются с указанным опсином в кармане связывания ретиналя указанного опсинового белка, и/или малые молекулы лиганда связываются с указанным опсиновым белком таким образом, что ингибируют ковалентное связывание 11-цис-ретиналя с указанным опсиновым белком, когда указанный 11-цис-ретиналь контактирует с указанным опсиновым белком, когда указанные малые молекулы лиганда присутствуют и/или когда млекопитающим является человек.
В одном варианте светотоксичность связана с офтальмологической процедурой, например, офтальмологической операцией. Указанное средство можно вводить до, во время или после указанной операции (или в любое одно или более из указанных времен).
В конкретных вариантах настоящего изобретения природный опсиновый белок присутствует в клетке, такой как палочкоподобная клетка, предпочтительно млекопитающего, и более предпочтительно в человеческой клетке. В конкретных вариантах малые молекулы лигандов настоящего изобретения связываются с 11-цис-ретиналем в кармане связывания опсина и замедляют цикл превращений родопсина, тем самым уменьшая образование 11-транс-ретиналя или токсичных продуктов цикла превращений родопсина, образующихся из него, таких как липофусцин или N-ретинилиден-К-ретинилзтаноламин (A2E). Альтернативно, апоптоз фоточувствительных клеток в результате избыточной активации родопсина
уменьшается или предотвращается за счет ингибирования образования родопсина. Кроме того, уменьшается неправильная укладка и миграция мутантных опсиновых белков, связанные с RP.
В способах настоящего изобретения введение предпочтительно осуществляют, используя местное введение (такое как глазная примочка) или системное введение (включая пероральное, интраокулярные инъекции или окологлазные инъекции).
Предпочтительным примером офтальмологических состояний, подлежащих лечению, является све-тотоксичность, такая, которая возникает при глазных операциях, например, операциях на сетчатке или при удалении катаракты.
Соединения настоящего изобретения можно вводить вместе с другими агентами, включая минеральные добавки, противовоспалительные средства, такие как стероиды, например, кортикостероиды, и/или антиоксиданты. Среди кортикостероидов, которые можно использовать для такого введения, находятся те, которые выбраны из группы, состоящей из кортизона, гидрокортизона, преднизона, преднизо-лона, метилпреднизолона, триамцинолона, бетаметазона, бекламетазона и дексаметазона. Подходящие антиоксиданты включают витамины А, С и Е. Указанные способы настоящего изобретения также включают уменьшение светотоксичности за счет использования по меньшей мере одного дополнительного средства (в дополнении к соединениям формулы I выбранным из группы, состоящей из протеасомально-го ингибитора, ингибитора аутофагии, лизосомального ингибитора, ингибитора транспорта из ER в комплекс Гольджи, ингибитора Hsp90 шаперона, активатора реакции теплового шока, ингибитора гликози-дазы, и ингибитора гистондиацетилазы, где связывающие опсин малые молекулы и дополнительное соединение вводят одновременно или с интервалов в четырнадцать дней в количествах, достаточных для лечения субъекта.
В конкретном примере способов настоящего изобретения, соединения настоящего изобретения и дополнительное соединение вводят с интервалом в десять дней, с интервалом в пять дней, с интервалом в двадцать четыре ч, и предпочтительно вводят одновременно. В одном примере связывающие опсин малые молекулы и дополнительное соединение вводят непосредственно в глаз. Такое введение может быть интраокулярным или интравитральным. В других примерах каждое из связывающие опсин малых молекул и дополнительного соединения включают в композиции, которые обеспечивают их длительное высвобождение, например, когда композиция представляет собой часть микросферы, наносферы, нано-эмульсии или импланта.
Как раскрыто в настоящем описании, соединения, которые можно использовать в указанных способах настоящего изобретения, являются доступными для использования или отдельно или в комбинации с одним или более из дополнительных соединений для лечения или предупреждения состояний, связанных с избыточной активацией родопсина, таких как светотоксичность, являющихся, например, результатом хирургических операций на глазах. Предпочтительно, чтобы в любом из способов настоящего изобретения опсинсвязывающее средс
В одном аспекте в настоящем изобретении предложен способ ингибирования образования или накопления продуктов цикла превращений родопсина, включающий осуществление контактирования оп-синового белка с соединением, которое уменьшает гидратацию указанного опсинового белка, предпочтительно, где указанное соединение конкурирует с одной или более из молекул воды для связывания с опсином. В конкретных вариантах таких способов указанное соединение связывается химически с опси-новым белком, например, за счет водородных связей.
Хотя использование любых соединений, раскрытых в описании как средств уменьшения гидратации кармана связывания опсина, следует рассматривать как предпочтительный вариант такого способа, уменьшение образования продуктов цикла превращений родопсина путем уменьшения образования родопсина является общим способом настоящего изобретения для уменьшения образования таких продуктов цикла превращений родопсина, особенно продуцирования липофусцина и/или A2E, и для лечения офтальмологического заболевания путем уменьшения указанной гидратации является общей целью настоящего изобретения и вовсе не обязательно ограничен в объеме только использованием химических средств, раскрытых в описании, но может включать использование других известных или тех, которые будут известны химических соединений, поскольку они будут функционировать в указанных способах настоящего изобретения и уменьшать гидратацию (т.е. связывание воды) в кармане связывания ретиналя опсина.
Следует отметить, что соединения, раскрытые в описании для использования в указанных способах настоящего изобретения, могут не функционировать уменьшение гидратации в кармане связывания ре-тиналя опсина, но могут еще функционировать в одном или более из способов настоящего изобретения. Например, соединение формулы I может связываться с аллостерическим сайтом белка, тем самым исключая ретиналь из сайта связывания ретиналя без необходимости уменьшения гидратации еще уменьшая образование продуктов цикла превращений родопсина, таких как липофусцин и/или A2E, за счет исключения ретиналя из кармана его связывания, таким образом нековалентно уменьшая активность цикла превращения родопсина.
В вариантах любой из композиций и любого из способов настоящего изобретения, связывающее опсин средство (например, неретиноидное связывающее средство) является селективным для связывания
с опсином. Такую селективность не следует рассматривать как требующую исключительности, при которой указанное средство может связываться с другими белками, также как с опсином, но его связывание с опсином будет по меньшей мере селективным, в результате чего константа связывания (или константа диссоциации) для связывания с опсином будет ниже, чем среднее значение для связывания с другими белками, которые также связываются с ретиноидами, такими как аналоги ретиналя. Предпочтительно, чтобы агенты связывания с опсином бели неретиноидными связывающими опсин средствами, которые нековалентно связываются с опсином. Предпочтительно, связывающий опсин агент связывается при или вблизи опсинового кармана связывания ретиналя, где обычно связывается природный лиганд, 11-цис-ретиналь. Не желая ограничиваться какой-либо конкретной теорией, в одном варианте карман связывания вмещает ретиналь или средство настоящего изобретения, но не оба. Соответственно, если средство настоящего изобретения связано при или вблизи кармана связывания ретиналя, другие ретиноиды, такие как 11-цис-ретиналь, не могут связываться с опсином. Связывание средства настоящего изобретения внутри кармана связывания ретиналя молекулы опсина с неправильной укладкой служит непосредственному образованию природной или дикого типа конформации молекулы опсина или стабилизации опси-нового белка с правильной укладкой, тем самым облегчая встраивание опсина теперь уже с правильной укладкой в мембраны палочкоподобных клеток. И снова, без желания быть связанными с какой-либо теорией, такое встраивание может помочь поддерживать конформацию опсина дикого типа и опсинсвя-зывающее средство может свободно диффундировать из кармана связывания, после чего указанный карман связывания оказывается доступным для связывания с ретиналом с образованием светочувствительного родопсина.
В других способах настоящего изобретения предложены средства для восстановления фоторецеп-торных функций в глазах млекопитающих, содержащих опсиновый белок с неправильной укладкой что вызывает снижение фоторецепторной функции, включающий осуществление контактирования указанного опсинового белка с неправильной укладкой со связывающим опсин средством (например, неретинои-дом), которое обратимо связывается (например, которое связывается нековалентно) при или вблизи кармана связывания ретиналя. В других вариантах связывание опсинсвязывающего средства с опсиновым белком с неправильной укладкой конкурирует с 11-цис-ретиналем за связывание в указанном кармане связывания. Желательно, чтобы связывание опсинсвязывающего средства восстанавливало природную конформацию указанного опсинового белка с неправильной укладкой.
В предпочтительных вариантах глазом млекопитающего является глаз человека. В дополнительных вариантах указанное осуществление контактирования происходит в результате введения указанного оп-синсвязывающего средства (например, неретиноида) млекопитающему страдающему офтальмологическим состоянием, таким как состояние, характеризующееся пониженной фоторецепторной
функцией. В различных вариантах указанное состояние представляет собой влажную или сухую дегенерацию сетчатки, диабетический RP, дистрофию сетчатки или желтого пятна, болезнь Старгардта, дистрофию Сорсби, аутосомно-доминантные друзы, дистрофию Беста, мутации периферина, связанные с дистрофией сетчатки, доминантную форму болезни Старгардта, макулярную дистрофию Северной Каролины, светотоксичность (например, связанную с хирургией на сетчатке) или пигментный ретинит. Такое введение может быть местным введением или системным введением, причем последнее включает перо-ральное введение, внутриглазные инъекции или окологлазные инъекции. Местное введение может включать, например, глазные капли, содержащие эффективное количество средства настоящего изобретения в подходящем фармацевтическом носителе.
В другом варианте опсинсвязывающее средство вводят для облегчения офтальмологического состояния, связанного с неправильной укладкой опсинового белка. В одном варианте настоящее изобретение предназначено для лечения субъекта с сухой формой возрастной дегенерации желтого пятна, при которой по меньшей мере часть опсина присутствующего в фоторецепторных клетках глаза (например, в палочкоподобных или колбочковидных клетках) имеет неправильную укладку. Белок с неправильной укладкой невозможно встроить в мембрану фоторецепторных клеток, где его функция необходима для зрения. Введение опсинсвязывающего средства субъекту, имеющему опсиновый белок неправильной упаковкой, восстанавливает, по меньшей мере частично локализацию опсина. Соответственно, настоящее изобретение можно использовать для предупреждения или лечения офтальмологических состояний, связанных с неправильной укладкой опсина, и для облегчения их симптомов.
В настоящем изобретении предложен способ лечения и/или предупреждения офтальмологических состояний или их симптомов, включая, но ими не ограничиваясь, влажную или сухую формы дегенерации сетчатки, пигментный ретинит, дистрофию сетчатки или желтого пятна, болезнь Старгардта, дистрофию Сорсби, аутосомно-доминантные друзы, дистрофию Беста, мутации периферина, связанные с дистрофией желтого пятна, доминантную форму болезни Старгардта, макулярную дистрофию Северной Каролины, светотоксичность (например, связанную с хирургией на сетчатке) или пигментный ретинит у субъекта, такого как человек-пациент, включающий введение субъекту страдающему или находящемуся при риске развития одного из вышеуказанных состояний или других офтальмологических состояний, связанных с экспрессией опсинового белка с неправильной укладкой или неправильно локализованного опсинового белка, используя терапевтически эффективное количество опсинсвязывающего средства,
например, средства, которое проявляет позитивную активность при тестировании в одном или более из анализов скринирования настоящего изобретения.
Такой способ может также включать введение указанному субъекту по меньшей мере одного дополнительного средства, выбранного из группы, состоящей из протеасомного ингибитора, ингибитора аутофагии, лизосомального ингибитора, ингибитора транспорта белка из ER в комплекс Гольджи, ингибитора Hsp90 шаперона, активатора реакции на тепловой шок, ингибитора гликозидазы и ингибитора гистондеацетилазы, где опсинсвязывающее соединение и дополнительное соединение вводят одновременно или с интервалом в четырнадцать дней в количествах, достаточных для лечения субъекта.
Здесь снова пациент может иметь мутацию, которая влияет на укладку белка, где указанная мутация вызывает неправильную укладку, например, опсинового белка, и может быть любой из мутаций, указанных где-либо в описании, такой как мутация P23H. В других вариантах у пациента наблюдается офтальмологическое состояние, которое связано с неправильной локализацией опсинового белка. Неправильная локализация опсина не дает возможности встраиваться в мембраны фоторецепторных клеток (например, в палочкоподобные или колбочковидные клетки). Обычно такая неправильная локализация влияет только на часть опсина, присутствующего в клетках глаз пациента.
В конкретных примерах способов настоящего изобретения, опсинсвязывающее соединение и дополнительное соединение вводят с интервалом в десять дней друг от друга, более предпочтительно с интервалом в пять дней друг от друга, еще более предпочтительно с интервалом в двадцать четыре ч друг от друга, и наиболее предпочтительно вводят одновременно. В одном примере опсинсвязывающее соединение и дополнительное соединение вводят непосредственно в глаз. Такое введение может быть ин-траокулярным. В других примерах каждое из опсинсвязывающего соединения и дополнительного соединения включены в композицию, которая обеспечивает их длительное высвобождение, такую как в случае, когда композиция является частью микросферы, наносферы или наноэмульсии. В одном примере композицию вводят с помощью устройства для доставки лекарственного средства, которое обеспечивает длительное высвобождение. Такие способы также включают введение дополнительно витамина А вместе со средством настоящего изобретения.
Как раскрыто в настоящем описании, опсинсвязывающее агенты, которые можно использовать в указанных способах настоящего изобретения доступны для использования отдельно или в комбинации с одним или более из дополнительных соединений для лечения или предупреждения состояний, связанных с влажной или сухой формой макулярной дегенерации, пигментным ретинитом, дистрофией сетчатки или желтого пятна, болезнью Старгардта, дистрофией Сорсби, аутосомно-доминантными друзами, дистрофией Веста, мутациями периферина, связанными с дистрофией желтого пятна, доминантной формой болезни Старгардта, макулярной дистрофией Северной Каролины, светотоксичностью (например, связанной с хирургией на сетчатке) или пигментным ретинитом или другим офтальмологическим состоянием, связанным с экспрессией опсиновым белком с неправильной укладкой или с его неправильной локализацией. В одном варианте опсинсвязывающее соединение настоящего изобретения (например, нерети-ноид или ретиноид, который не может ковалентно связаться с опсином) вводят субъекту, у которого идентифицировано или который подвержен риску возникновения такого состояния. Необязательно опсинсвязывающее средство вводят вместе с другим терапевтическим средством. В другом варианте нере-тиноидное опсинсвязывающее соединение настоящего изобретения используют в комбинации с синтетическим ретиноидом (например, как раскрыто в патентной публикации США № 2004-0242704), и необязательно с другим активным соединением (например, как обсуждают в настоящем описании). В еще оном примерном варианте опсинсвязывающее соединение вводят в комбинации с протеасомным ингибитором MG132, ингибитором аутофагии 3-метиладенином, лизосомальным ингибитором, таким как аммоний-хлорид, ингибитором транспорта ER-комплекс Гольджи брефелдином А, ингибитором шаперона Hsp90 гелдамицином, активатором реакции теплового шока целастролом, ингибитором гликозидазы и ингибитором гистондеацетилазы скриптаидом, или любым другим средством, которое способно стабилизировать мутантный P23H опсиновый белок в биохимически функциональной конформации, что позволяет осуществить ассоциацию с 11-цис-ретиналем с образованием родопсина.
В специфических вариантах опсинсвязывающее соединение представляет собой неполимерное (например, малую молекулу, такую как те, что раскрыты в описании для использования в способах настоящего изобретения) соединение с молекулярной массой менее чем около 1000 Да, менее чем 800, менее чем 600, менее чем 500, менее чем 400, или менее чем около 300 Да. В некоторых вариантах соединение настоящего изобретения повышает количество (например, из клетки или в клетке) мутантного белка со стабильной укладкой и/или закомплексованного мутантного белка по меньшей мере на 10, 15, 20, 25, 50, 75 или 100% по сравнению с необработанными контрольными клетками или белками.
Протеасомные ингибиторы
Протеасома 26S представляет собой мультикаталитическую протеазу, которая расщепляет убикви-тинированные белки на короткие пептиды. MG-132 представляет собой один протеасомный ингибитор, который можно использовать. MG-132 наиболее подходит для лечения светотоксичности и других глазных болезней, связанных с накоплением продуктов цикла превращений родопсина (например, 11-транс-ретиналя, A2E, липофусцина), агрегаций белка или с неправильной укладкой белка. Другие протеасом
ные ингибиторы, которые можно использовать в комбинации с настоящим изобретением в способах настоящего изобретения, включают лактоцистин (LC), класто-лактоцистин-бета-лактон, PSI (N-карбобензоил-Ile-Glu-(OtBu)-Ala-Leu-CHO), MG-132 (N-карбобензоил-Leu-Leu-Leu-CHO), MG-115 (N-карбобензоил-Leu-Leu-Nva-CHO), MG-101 (N-ацетил-Leu-Leu-norLeu-СНО), ALLM ^-ацетил^и^и-Met-CHO), N-карбобензоил-Gly-Pro-Phe-leu-CHO, N-карбобензоил-Gly-Pro-Ala-Phe-CHO, N-карбобензоил-Leu-Leu-Phe-CHO и их соли или аналоги. Другие протеасомные ингибиторы и их использование раскрыты в патенте США № 6492333.
Ингибиторы аутофагии Аутофагия представляет собой эволюционно консервативный механизм деградации клеточных компонентов в цитоплазме и является механизмом выживания клеток в голодающих клетках. Во время аутофагии частицы цитоплазмы инкапсулируются клеточными мембранами, образуя аутофагические вакуоли, которые впоследствии сливаются с лизосомами, для деградации их содержимого. Ингибиторы аутофагии можно использовать в комбинации с опсинсвязывающими или опсинстабилизирующими соединениями настоящего изобретения. Ингибиторы аутофагии, которые можно использовать в комбинации с настоящим изобретением в способах настоящего изобретения, включают, но ими не ограничиваются, 3-метиладенин, 3-метиладенозин, аденозин, окадаиковую кислоту, ^-меркаптопуринрибозид (N6-MPR), аминотиолированный аналог аденозина, 5-амино-4-имидазолкарбоксамидрибозид (AICAR), бафи-ломицин А1 и их соли или аналоги.
Лизосомные ингибиторы
Лизосомы представляют собой основной сайт деградации клеточного белка. Деградация белков, попадающих в клетку за счет рецептор-опосредованного эндоцитоза или пиноцитоза и плазменных мембранных белков происходит в лизосомах. Лизосомные ингибиторы, такие как аммонийхлорид, леупеп-тин, транс-зпоксисакцинил-L-лейциламид-(4-гуанидино)бутан, метиловый сложный эфир L-метионина, аммонийхлорид, метиламин, хлорохин и их соли или аналоги можно использовать в комбинации с оп-синсвязывающими или опсинстабилизирующими соединениями настоящего изобретения.
Ингибиторы HSP90 шаперона
Белок теплового шока 90 (Hsp90) ответственен за шаперонирование белков, участвующих в сигнальной системе, пролиферации и выживании клеток, и важен для конформационной стабильности и функционирования ряда белков. Ингибиторы HSP-90 можно использовать в комбинации с опсинсвязы-вающими или опсинстабилизирующими соединениями в способах настоящего изобретения. Ингибиторы HSP-90 включают бензохинон, ансамициновые антибиотики, такие как гелданамицин и 17-аллиламино-17-деметоксигелданамицин (17-AAG), которые специфически связываются с Hsp90, изменяют его функции и промотируют протеолитическое расщепление субстратных белков. Другие ингибиторы HSP-90 включают, но ими не ограничиваются, радицикол, новобиоцин и любые ингибиторы Hsp90, которые связываются с Hsp90 ATP/ADP карманом.
Активаторы реакции термического шока
Целастрол, хинонметидтритерпен, активирует реакцию термического шока человека. В комбинации с опсинсвязывающими или опсинстабилизирующими соединениями в способах настоящего изобретения, целастрол и другие активаторы реакции термического шока можно использовать для лечения PCD. Активаторы реакции термического шока включают, но ими не ограничиваются, целастрол, метиловый сложный эфир целастрола, дигидроцеластролдиацетат, бутиловый сложный эфир целастрола, дигидро-целастрол и их соли или аналоги.
Ингибиторы гистондеацетилазы
Регулирование генной экспрессии опосредовано несколькими механизмами, включая посттрансляционные модификации гистонов за счет динамического ацетилирования и деацетилирования. Ферменты, ответственные за обратимые процессы ацетилирования/деацетилирования представляют собой гистонацетилтрансферазы (HAT) и гистондеацетилазы (HDAC), соответственно. Ингибиторы гис-тондеацетилазы включают скриптаид, АРНА соединение 8, апицидин, бутират натрия, (-)-депудецин, сиртинол, трихостатин А и их соли или аналоги. Такие ингибиторы можно использовать в комбинации с соединениями настоящего изобретения в раскрытых здесь способах.
Ингибиторы гликозидазы
Ингибиторы гликозидазы представляют собой один класс соединений, которые можно использовать в способах настоящего изобретения, если вводить в комбинации с опсинсвязывающими или опсин-стабилизирующими соединениями настоящего изобретения. Кастаноспермин, полигидроксиалкалоид, выделенный из растительных источников, ингибирует ферментативный гидролиз гликозидов. Кастанос-пермин и его производные особенно пригодны для лечения светотоксичности или нарушений, связанных с конформацией белка глаза, таких как RP. Также можно использовать в способах настоящего изобретения другие ингибиторы гликозидаз, включая австралийский гидрохлорид, 6-ацетамидо-6-дезоксикастаноспермин, который представляет собой эффективный ингибитор гексозаминидаз, дезокси-фуконоджиримицина гидрохлорид (DFJ7), дезоксиноджиримицин (DNJ), которые ингибируют глюкози-дазы I и II, дезоксигалактоноджиримицина гидрохлорид (DGJ), который ингибирует a-D-галактозидазу, дезоксиманноноджиримицина гидрохлорид (DM1), 2R,5R-бис(гидроксиметил)-3R,4R-дигидрокси
пирролидин (DMDP), известный также как 2,5-дидезокси-2,5-имино-0-маннит, 1,4-дидезокси-1,4-имино-О-маннита гидрохлорид, (3R,4R,5R,6R)-3,4,5, 6-тетрагидроксиазепана гидрохлорид, который ингибирует b-N-ацетилглюкозаминидазу, 1,5-дидезокси-1,5-иминоксилитол, который ингибирует р-глюкозидазу, и кифуненсин, ингибитор маннозидазы 1. В комбинации с опсинсвязывающим или опсинстабилизирую-щим соединением можно использовать также N-бутилдезоксиноджиримицин (EDNJ), N-нонил DNJ (NDND, N-гексил DNJ (15TDNJ), N-метилдезоксиноджиримицин (MDNJ), и другие ингибиторы глико-зидазы, известные специалистам в данной области. Ингибиторы гликозидазы коммерчески доступны, например, из Industrial Research Limited (Wellington, New Zealand) и способы их использования раскрыты, например, в патентах США №№ 4894388, 5043273, 5103008, 5844102 и 6831176; и в патентной публикации США № 20020006909.
Способы доставки в глаза
Соединения настоящего изобретения особенно пригодны для лечения глазных заболеваний или состояний, таких как светотоксичность, характерная светотоксичность, связанная с офтальмологическими процедурами.
В одном варианте соединения настоящего изобретения вводят, используя офтальмологическое устройство, подходящее для прямой имплантации в стекловидное тело глаза. Композиции настоящего изобретения можно представить в виде композиций с непрерывным высвобождением, таких, как те, что раскрыты, например, в патентах США №№ 5672659 и 5595760. Оказалось, что такие устройства обеспечивают непрерывное, контролируемое высвобождение различных композиций для лечения глаз без риска возникновения вредных локальных или системных побочных эффектов. Целью рассматриваемого офтальмологического способа доставки является максимальное увеличение количества лекарственного средства, заключенного в офтальмологическом устройстве или импланте, при минимизации его размера для пролонгирования длительности действия импланта. См., например, патенты США №№ 5378475, 6375972 и 6756058 и патентные публикации США 20050096290 и 200501269448. Такие импланты могут быть биодеградируемыми и/или биосовместимыми имплантами, или могут быть небиодеградируемыми имплантами.
Биодеградируемые офтальмологические импланты раскрыты, например, в патентной публикации США № 20050048099. Импланты могут быть проницаемыми или непроницаемыми для активного средства, и могут быть помещены в камеры глаза, такие как передняя и задняя камеры, или могут быть имплантированы в белочную оболочку глаза, в трансхороидальное пространство или в неваскуляризиро-ванный участок перед стекловидным телом. Альтернативно, для доставки лекарственного средства можно использовать контактные линзы, которые действуют как резервуар для композиции настоящего изобретения.
В предпочтительном варианте имплант может быть расположен поверх неваскуляризованного участка, такого как белочная оболочка, с тем, чтобы обеспечить диффузию лекарственного средства через белочную оболочку к нуждающемуся в лечении сайту, например, в интраокулярное пространство и в пятно сетчатки глаза. Кроме того, сайт транссклеральной диффузии расположен предпочтительно поблизости с макулой. Примеры имплантов для доставки композиций настоящего изобретения включают, но ими не ограничиваются, устройства, раскрытые в патентах США №№ 3416530, 3828777,
4014335,4300557, 4327725,4853224, 4946450, 4997652, 5147647,164188, 5178635, 5300114,5322691, 5403901, 5443505, 5466466, 5476511, 5516522, 5632984,5679666, 5710165, 5725493, 5743274,5766242, 5766619, 5770592, 5773019, 5824072, 5824073, 5830173, 5836935, 5869079, 5902598, 5904144,5916584,
6001386, 6074661, 6110485, 6126687, 6146366, 6251090 и 6299895, и в WO 01/30323 и WO 01/28474, которые включены в настоящее описание в виде ссылок в полном объеме. Примеры включают, но ими не ограничиваются, следующие: систему доставки с непрерывным высвобождением лекарственного средства, включающую внутренний резервуар, содержащий эффективное количество средства, которого достаточно для достижения желательного локального или системного физиологического или фармакологического эффекта, внутренней трубки, непроницаемой для указанного средства, внутренней трубки с первым и вторым концами и покрывающей по меньшей мере часть внутреннего резервуара, причем внутренняя трубка выбрана такого размера и из такого материала, что указанная внутренняя трубка может поддерживать собственный вес, непроницаемый элемент, расположенный у первого конца внутренней трубки, причем указанный непроницаемый элемент предотвращает поступление средства из резервуара через первый конец внутренней трубки, и проницаемый элемент, расположенный у второго конца внутренней трубки, причем указанный проницаемый элемент обеспечивает диффузию указанного средства из резервуара через второй конец внутренней трубки; способ введения соединений настоящего изобретения в сегмент глаза, причем указанный способ включает стадию имплантирования устройства для непрерывного высвобождения для доставки полученного соединения настоящего изобретения в стекловидное тело глаза или имплантируемое устройство с непрерывным высвобождением для введения соединения настоящего изобретения в сегмент глаза; устройство доставки лекарственного средства с непрерывным высвобождением, включающее: а) лекарственное ядро, включающее терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного первого средства, эффективного для достижения диагностического эффекта или эффективного для достижения необходимого локального или системного физиологического
или фармакологического эффекта; b) по меньшей мере одну "крышку" существенно непроницаемую для прохождения средства, которая окружает и определяет внутреннее отделение для приема ядра лекарственного средства, причем указанная крышка включает открытый верхний конец с по меньшей мере одной канавкой вокруг по меньшей мере части открытого верхнего конца крышки; с) проницаемую пробку, которая проницаема для прохождения средства, причем проницаемая пробка расположена у верхнего открытого конца крышки, где указанная канавка взаимодействует с проницаемой пробкой, удерживая ее в положении и закрывая открытый верхний конец, причем проницаемая пробка дает возможность средству поступать из ядра лекарства через проницаемую пробку и из открытого конца верхнего конца крышки; и d) по меньшей мере одно второе средство, эффективное для достижения диагностического эффекта или эффективное для достижения необходимого локального физиологического или фармакологического эффекта; или устройство доставки лекарственного средства с непрерывным высвобождением, включающее: внутреннее ядро, содержащее эффективное количество средства, обладающего необходимой растворимостью, и слоя полимерного покрытия, причем полимерный слой является проницаемым для указанного средства, где слой полимерного покрытия полностью покрывает внутреннее ядро.
Другие подходы к офтальмологической доставке включают использование липосом для направления соединения настоящего изобретения в глаз и предпочтительно в пигментные эпителиальные клетки сетчатки и/или в мембрану Бруха. Например, полученное соединение может быть закомплексовано с липосомами раскрытым выше способом, и такой комплекс соединение/липосома вводят пациенту с офтальмологическим нарушением, таким как светотоксичность, с использованием внутривенной инъекции для направления соединения настоящего изобретения в нужные ткани или клетки глаза. Прямая инъекция липосомного комплекса вблизи пигментных эпителиальных клеток сетчатки или мембраны Бруха также предложено для использования указанного комплекса при некоторых формах офтальмологических PCD. В конкретных вариантах полученное соединение вводят, используя системы интраокулярной доставки с непрерывным высвобождением (такие как VITRASERT или ENVISION). В конкретном варианте соединение настоящего изобретения вводят, используя инъекцию под теноновую капсулу. В другом конкретном варианте частицы микроэмульсии, содержащие композиции настоящего изобретения, доставляют в ткани глаза для удаления липидов из мембраны Бруха, пигментных эпителиальных клеток сетчатки, или и тех, и других.
Наночастицы представляют собой коллоидную систему носителя, которая, как было показано, повышает эффективность инкапсулированных лекарственных средств за счет пролонгирования времени сывороточной полужизни. Наночастицы полиалкилцианоакрилатов (РАСА) представляют собой полимерную коллоидную систему доставки лекарственных средств, которая находится в клинической разработке, как раскрыто Stella et al, J. Pharm. Sci, 2000. 89: p. 1452-1464; Brigger et al., Tnt. J. Pharm., 2001. 214: p. 37-42; Calvo et al., Pharm. Res., 2001. 18: p. 1157-1166; и Li et al., Biol. Pharm. Bull., 2001. 24: p. 662-665. Биодеградируемые поли(гидрокси)кислоты, такие как сополимеры поли(молочной кислоты) (PLA) и сополимер молочной и гликолевой кислот (PLGA), широко используют в биомедицинских применениях, и они утверждены FDA для некоторых клинических применений. Кроме того, PEG-PLGA наночастицы обладают многими желательными характеристиками носителей, включая (i) то, что подлежащее инкапсулированию средство включает достаточно высокомолекулярную часть (загрузку) от полной системы носителя; (ii) то, что количество средства, используемое на первой стадии процесса инкапсулирования, включено в конечный носитель (эффективность включения) в достаточно высоком уровне; (iii) то, что носитель обладает способностью быть высушенным замораживанием и быть восстановленным в растворе без образования агрегатов; (iv) то, что носитель является биодеградируемым; (v) то, что система носителя имеет небольшие размеры; и (vi) то, что носитель повышает устойчивость частиц.
Наночастицы синтезируют, используя практически любые биодеградируемые оболочки, известные в области техники. В одном варианте используют полимеры, такие как поли(молочная кислота) (PLA) или сополимер молочной и гликолевой кислот (PLGA). Такие полимеры являются биосовместимыми и биодеградируемыми и служат объектом модификации, которая повышает фотохимическую эффективность и циркуляционное время жизни наночастиц. В одном варианте полимер модифицируют концевой группой карбоновой кислоты (COOH), которая увеличивает отрицательный заряд частиц и тем самым ограничивает взаимодействие с отрицательно заряженными аптамерами нуклеиновых кислот. Наноча-стицы также модифицируют полиэтиленгликолем (PEG), что также увеличивает срок полу-жизни и повышает стабильность частиц в циркуляции. Альтернативно, СООН группа превращается в сложный эфир N-гидроксисукцинимида (NHS) для ковалентной конъюгации с амин-модифицированными аптамерами.
Биосовместимые полимеры, которые можно использовать в указанных композициях и способах настоящего изобретения, включают, но ими не ограничиваются, полиамиды, поликарбонаты, полиалкиле-ны, полиалкиленгликоли, полиалкиленоксиды, полиалкилентерефталаты, поливиниловые спирты, поливиниловые эфиры, поливиниловые сложные эфиры, поливинилгалогениды, поли(винилпирролидон), полигликолиды, полисилоксаны, полиуретаны и их сополимеры, алкилцеллюлозу, гидроксиалкилцеллю-лозы, эфиры целлюлозы, сложные эфиры целлюлозы, нитроцеллюлозы, полимеры акрилового и метак-рилового сложных эфиров, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипро-пилметилцеллюлозу, гидроксибутилметилцеллюлозу, ацетат целлюлозы, пропионат целлюлозы, ацетат
бутират целлюлозы, ацетатфталат целлюлозы, карбоксиэтилцеллюлозу, триацетат целлюлозы, сульфат целлюлозы натриевую соль поли(метилметакрилат), поли(этилметакрилат), поли(бутилметакрилат), по-ли(изобутилметакрилат), поли(гексилметакрилат), поли(изодецилметакрилат), поли(лаурилметакрилат), поли(фенилметакрилат), поли(метилакрилат), поли(изопропилакрилат), поли(изобутилакрилат), по-ли(октадецилакрилат), полиэтилен, полипропилен, поли(этиленгликоль), поли(этиленоксид), по-ли(этилентерефталат), поли(виниловые спирты), поли(винилацетат), поливинилхлорид, полистирол, по-ли(винилпирролидон), полигиалуроновые кислоты, казеин, желатин, глутин, полиангидриды, полиакриловую кислоту, альгинат, хитозан, поли(метилметакрилаты), поли(этилметакрилаты), по-ли(бутилметакрилат), поли(изобутилметакрилат), поли(гексилметакрилат), поли(изодецилметакрилат), поли(лаурилметакрилат), поли(фенилметакрилат), поли(метилакрилат), поли(изопропилакрилат), по-ли(изобутилакрилат), поли(октадецилакрилат) и комбинации любых из них. В одном варианте наночастицы настоящего изобретения включают PEG-PLGA полимеры.
Композиции настоящего изобретения можно также доставлять местно. Для местной доставки предложены композиции в любых фармацевтически приемлемых эксципиентах, которые разрешены для офтальмологической доставки. Предпочтительно, если указанную композицию доставляют в форме капель на поверхность глаза. Для некоторых вариантов доставка указанной композиции основана на диффузии соединений через роговицу во внутреннюю часть глаза. Специалистам в данной области должно быть понятно, что схему лечения с использованием соединений настоящего изобретения для лечения свето-токсичности или других офтальмологических состояний (например, RP) можно определить непосредственно. Это не вопрос эксперимента, но скорее вопрос оптимизации, которая легко осуществляется в медицине. In vivo исследования на голых мышах часто являются исходной точкой, с которой начинают оптимизацию определения дозировки и схем приема. Частота инъекций вначале составляет один раз в неделю, что соответствует схеме в некоторых исследованиях на мышах. Однако такую частоту можно оптимизировать, доводя до приема от ежедневного до одного раза в две недели и до ежемесячного, в зависимости от достигнутых результатов в начальных клинических испытаниях и потребностей конкретного пациента.
Дозовые количества для человека вначале определяют путем экстраполяции данных, полученных для количества соединения, используемого для мышей, так как специалисту известны рутинные способы модификации доз для человека относительно доз, определенных в моделях на животных. Для некоторых вариантов предполагается, что величины доз могут варьироваться между около 1 мг соединения/кг веса тела до около 5000 мг соединения/кг веса тела; или от около 5 мг/кг веса тела до около 4000 мг/кг веса тела или от около 10 мг/кг веса тела до около 3000 мг/кг веса тела; или от около 50 мг/кг веса тела до около 2000 мг/кг веса тела; или от около 100 мг/кг веса тела до около 1000 мг/кг веса тела; или от около 150 мг/кг веса тела до около 500 мг/кг веса тела. В других вариантах указанная доза может составлять
около 1, 5, 10, 25, 50, 75, 100, 150, 10 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1050, 1100, 1150, 1200, 1250, 1300, 1350, 1400, 1450, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, 2000,
2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000 мг/кг веса тела. В других вариантах предполагается, что можно использовать более низкие дозы, и такие дозы могут быть в интервале значений от около 5 мг соединения/кг веса тела до около 20 мг соединение/кг веса тела. В других вариантах дозы могут составлять около 8, 10, 12, 14, 16, 15 или 18 мг/кг веса тела. Естественно, что дозовые количества могут изменяться как в большую, так и в меньшую сторону, как это обычно происходит в таких схемах лечения, в зависимости от результатов начальных клинических испытаний и потребностей конкретного пациента.
Скрининг-анализы
Подходящими соединениями настоящего изобретения являются соединения формулы (I), которые обратимо связываются с природными или мутированными опсиновыми белками, такими как белки внутри или вблизи кармана связывания 11-цис-ретиналя. Неотбеливаемые или медленно отбеливаемые пигменты родопсина, образованные из указанных опсинсвязывающих малых молекул, предотвращают све-тотоксичность, связанную, например, с накоплением продуктов цикла превращений родопсина, а также апоптотическую гибель фоточувствительных клеток в результате избыточной стимуляции родопсина. Такое связывание обычно ингибирует, если не предотвращает, связывание ретиноидов, особенно 11-цис-ретиналя, с карманом связывания и тем самым уменьшает образование продуктов цикла превращений родопсина, таких как 11-транс-ретиналь. Любое количество способов доступно для осуществления скрининг-анализов для идентификации таких соединений. В одном из подходов осуществляют контактирование опсинового белка с соединением-кандидатом или тестируемым соединением, которое является нере-тиноидом, в присутствии 11-цис-ретиналя или аналогом ретиноида, и определяют скорость образования или количество образующегося хромофора. При желании характеризуют связывание неретиноида с опсином.
Предпочтительно, чтобы связывание неретиноида с опсином было нековалентным и обратимыми. Таким образом, ингибирование образования ионов родопсина неретиноидами указывает на определение подходящего тестируемого соединения. Увеличение количества родопсина оценивают, например, измеряя поглощение белками на характеристической длине волны (например, на 498 нм для родопсина) или измеряя возрастание биологический активности белка, используя любой стандартный метод (например,
измеряя ферментативную активность, связанную с лигандом). Подходящие соединения ингибируют связывание 11-цис-ретиналя (и образование родопсина) по меньшей мере, на около 10, 15 или 20%, или предпочтительно на 25, 50 или 75%, или наиболее предпочтительно на вплоть до 90% или даже 100%.
Альтернативно, эффективность соединений, применимых в способах настоящего изобретения, можно определить, экспонируя глаз млекопитающего источнику света высокой интенсивности до, во время, или после введения тестируемого соединения, с последующим определением количества продуктов цикла превращений родопсина (например, 11-транс-ретиналя, A2E или липофусцина), образовавшихся в результате экспонирования источнику света высокой интенсивности, где соединение настоящего изобретения продемонстрирует уменьшенное количество продуктов цикла превращений родопсина, связанное с экспонированием свету. В итоге, предпочтительные тестированные соединения, идентифицированные скрининг-способами настоящего изобретения, представляющие собой неретиноиды, являются селективными в отношении опсина и связываются обратимо и нековалентно с опсиновым белком. Кроме того, их введение трансгенным животным, которые, в противном случае, продуцируют повышенные количества липофусцина, приводит к снижению скорости продуцирования или к уменьшению накопления липофусцина в глазах указанных животных. Соединения, идентифицированные способами настоящего изобретения, можно использовать для лечения светотоксичности или других офтальмологических состояний у субъектов, таких как пациенты-люди.
Композиции настоящего изобретения, которые можно использовать для предотвращения светоток-сичности, также как AMD и пигментного ретинита, можно необязательно комбинировать с дополнительными способами лечения, как ранее раскрыто в описании.
Примеры
Следующие нелимитирующие примеры далее раскрывают настоящее изобретение и помогают специалистам в данной области его использовать.
Пример 1. ^)-Фенил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол. Пример la. ^)-3,7-Диметилокта-1,6-диенилацетат.
В 50-мл круглодонную колбу, снабженную холодильником, загружают уксусный ангидрид (6,1 мл, 64,8 ммоль), ацетат калия (0,51 г, 5,18 ммоль) и триэтиламин (4,5 мл, 32,4 ммоль). К перемешиваемой смеси медленно добавляют ^)-3,7-диметилокт-6-енал (5,0 г, 32,4 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 120°C в течение 7,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры полученную реакционную смесь выливают в воду (25 мл) и затем экстрагируют толуолом (10 мл). Полученный органический слой промывают насыщенным водным раствором карбоната натрия (25 мл х2) и солевым раствором (25 мл). Полученный материал переносят в 50-мл круглодонную колбу, и делительную воронку промывают толуолом (1 мл). Раствор указанного в заголовке соединения в толуоле (11 мл) (15,7 г) используют непосредственно на следующей стадии.
Масс-спектр (ESI +ve) m/z 187 (M+H+).
Пример 1b. (Ж^)-2,2,6-Триметилциклогексанкарбальдегид.
К раствору сырого продукта примера 1а (6,36 г, 32,4 ммоль) в толуоле (11 мл) (15,7 г) добавляют 85% фосфорную кислоту (12 мл). Смесь нагревают до 100°C в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, и добавляют толуол (12 мл) вместе с водой (24 мл), и слои разделяют. Водный слой экстрагируют толуолом (12 мл х2). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл х2) и солевым раствором (50 мл х2). В результате концентрирования и дистилляции при пониженном давлении (Т.кипения 65-70°C) получают указанное в заголовке соединение в виде смеси эпимеров 9:1 в виде бесцветного масла (2,51 г, выход: 50%).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) (основной изомер) 5 9,63 (д, J=5,2 Гц, 1H), 2,03-1,91 (м, 1H), 1,83-1,75 (м, 1H), 1,64-1,60 (м, 1H), 1,54-1,48 (м, 1H), 1,40-1,35 (м, 1H), 1,24-1,14 (м, 1H), 1,02 (с, 3H), 0,97 (с, 3H), 0,950,84 (м, 2H), 0,81 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. [a]D24=+5,20° (c=l,00, дихлорметан).
Пример 1с. ^)-Фенил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору фенилмагнийбромида (3,0 М в диэтиловом эфире) добавляют безводный тетрагидрофу-ран (5 мл). Смесь охлаждают до -78°C. Раствор продукта примера 1b (154 мг, 1,0 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (2 мл) медленно добавляют при указанной температуре. Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 1,5 ч. Добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл) и смесь экстрагируют этилацетатом (15 мл х4). Объединенный органический слой промывают солевым раствором (30 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки на хроматографической колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир/ этил-ацетат 400:1) получают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (124 мг, выход: 53%). Т.плавления 32-34°C. R(=0,3 (25:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,40 (д, J=2H), 7,33-7,30 (м, 2H), 7,18 (т, J=7,4 Гц, 1H), 5,12 (д, J=5, 6 Гц, 1H), 1,88-1,78 (м, 1H), 1,72 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,64-1,59 (м, 1H), 1,51-1,43 (м, 4H), 1,32-1,25 (м, 1H), 1,15 (с, 3H), 1,07 (с, 3H), 1,00-0,88 (м, 1H), 0,59 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (APCI +ve) m/z 215 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+320,0° (с=0,22, дихлорметан).
Пример 2. Фенил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 1 (70 мг, 0,30 ммоль) в дихлорметане (2 мл), охлажденному до 0°C, добавляют периодинан Десса-Мартина (230 мг, 0,54 ммоль) одной порцией. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляют дихлорметан (30 мл) и смесь промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (30 мл х3), солевым раствором (30 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка на хроматографической колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 400:1) получают бесцветное масло, которое очищают далее, используя препаративную тонкослойную хроматографию (петролейный эфир/этилацетат 80:1), получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (41 мг, выход: 59%). R(=0,6 (25:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3+H2O) 5 7,97-7,94 (м, 2H), 7,54 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,47-7,43 (м, 2H), 3,03 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,14-2,02 (м, 1H), 1,81-1,77 (м, 1H), 1,64-1,55 (м, 2H), 1,44-1,41 (м, 1H), 1,34-1,25 (м, 1H),
1.07- 1,01 (м, 1H), 0,99 (с, 3H), 0,77 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 231
(M+H+). [a]D15=-2,87° (с=0,216, дихлорметан).
Пример 3. ^)-фенил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К перемешиваемому раствору продукта примера 2 (24 мг, 0,104 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (3 мл), охлажденном до 0°C, в атмосфере аргона добавляют литийалюминийгидрид (16 мг, 0,416 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 0°C в течение 3 ч. Реакцию гасят этилацетатом (5 мл) и затем водой (20 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (15 мл х3). Объединенные органические фракции промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка с помощью колоночной флеш-хроматографии (элюент: петролейный эфир/этилацетат 25:1) получают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (9,3 мг, выход: 39%). R(=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,41 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,31 (т, J=7,4 Гц, 2H), 7,20 (т, J=7,6 Гц, 1H), 5,27 (ушир., 1H), 1,92-1,85 (м, 1H), 1,77-1,73 (м, 1H), 1,67 (д, J=4,0 Гц, 1H), 1,50-1,39 (м, 3H), 1,25-1,17 (м, 1H), 1,13-1,10 (м, 2H), 1,07 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,38 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 255 (M+Na+). [a]D18=-35,5° (с=0,18б, дихлорметан).
Пример 4. ^)-п-Толил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору п-толилмагния (6,42 мл, 6,42 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (2 мл) при -78°C в атмосфере азота по каплям добавляют продукт примера 1b (220,0 мг, 1,43 ммоль). Полученный раствор перемешивают при -78°C в течение 1 ч. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммоний-хлорида (10 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом, и полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 50:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (110 мг, выход: 31%). Т.плавления 78-79°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,31 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,15 (д, J=8,0 Гц, 2H), 5,11 (д, J=5,6 Гц, 1H), 2,35 (с, 3H), 1,85-1,81 (м, 1H), 1,71 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,65-1,61 (м, 2H), 1,53-1,48 (м, 4H), 1,35-1,28 (м, 1H), 1,16 (с, 3H), 1,09 (с, 3H), 0,6 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 269 (M+Na+). [a]D25=+6,67° (с=0,36, дихлорметан).
Пример 5. п-Толил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 4 (50,0 мг, 0,2 ммоль) в дихлорметане (1,0 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (17,1 мг, 0,2 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (172,1 мг, 0,41 ммоль). Смесь перемешивают при 0°C в течение 1 ч, затем перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. К полученной реакционной смеси добавляют водный насыщенный бикарбонат натрия (10 мл) и затем смесь экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 80:1 - 50:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде масла желтого цвета (40 мг, выход: 82%). Rf=0,5 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,89 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,26 (д, J=8,8 Гц, 2H), 3,00-3,03 (д, J=11,2 Гц, 1H),
2.42 (с, 3H), 2,10-2,05 (м, 1H), 1,82-1,77 (м, 1H), 1,62-1,55 (м, 2H), 1,45-1,41 (м, 1H), 1,35-1,27 (м, 1H),
1.08- 0,97 (м, 1H), 1,00 (с, 3H), 0,79 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 245
(M+H+). [a]D25=-4,62° (с=0,52, дихлорметан).
Пример 6. (S)-(3-Хлор-4-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол. К раствору 3-хлор-4-метилфенилмагнийбромида (12,84 мл, 6,42 ммоль) в безводном тетрагидрофу-ране (3,0 мл) при -78°C в атмосфере азота по каплям добавляют раствор продукта примера 1b (220,0 мг,
1.43 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (4,0 мл). Полученный раствор перемешивают при -78°C в
течение 1 ч. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (10 мл). Реакционную
смесь экстрагируют этилацетатом, и полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом
натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке
с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 50:1) до получения указанного в заголовке
соединения в виде масла желтого цвета (250 мг, выход: 62%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,39 (с, 1H), 7,21-7,16 (м, 2H), 5,07 (д, J=5,2 Гц, 1H), 2,37 (с, 3H), 1,881,79 (м, 1H), 1,73 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,69-1,62 (м, 1H), 1,56-1,42 (м, 3H), 1,40 (д, J=10,8 Гц, 1H), 1,34-1,25 (м, 1H), 1,16 (с, 3H), 1,08 (с, 3H), 1,03-0,89 (м, 1H), 0,62 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (APCI +ve) m/z 263 (М-Н2О+Н+). [a]D25=8,42° (c=0,19, дихлорметан).
Пример 7. (3-Хлор-4-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 6 (50,0 мг, 0,18 ммоль) в дихлорметане (1,0 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (15,12 мг, 0,18 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (151 мг, 0,36 ммоль). Смесь перемешивают при 0°C в течение 1 ч и затем перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасят, добавляя водный раствор бикарбоната натрия (10 мл). Смесь экстрагируют ди-хлорметаном и полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 80:1 - 50:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (35,0 мг, выход: 70%). Т.плавления 59-60°C. Rf=0,5 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,94 (д, J=l,6 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=8,4, 1,6 Гц, 1H), 7,32 (д, J=8,4 Гц, 1H) 2,95 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,44 (с, 3H), 2,09-2,06 (м, 1H), 1,82-1,78 (м, 1H), 1,60-1,55 (м, 2H), 1,46-1,42 (м, 1H), 1,36-1,26 (м, 1H), 1,05-1,00 (м, 1H), 0,99 (с, 3H), 0,79 (с, 3H), 0,75 (д, J=6, 8 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 229 (M+H+). [a]D25=-3,50° (с=0,40, дихлорметан).
Пример 8. (R)-(3-Хлор-4-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (18,7 мг, 0,49 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (2 мл) при 0°C по каплям добавляют раствор продукта примера 7 (34,3 мг, 0,12 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя воду (0,1 мл), водный раствор гидроксида натрия (0,1 мл), затем воду (0,3 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 60:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (24 мг, выход: 71,23%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,39 (с, 1H), 7,18 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,15 (д, J=8,0 Гц, 1H), 5,20 (с, 1H), 2,34 (с, 3H), 1,86-1,85 (м, 1H), 1,77-1,73 (м, 1H), 1,67 (с, 1H), 1,57-1,08 (м, 6H), 1,09 (д, J=5,6 Гц, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,41 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 280 (М+). [a]D25=+34,5° (с=0,29, дихлорметан).
Пример 9. (S)-(3-Хлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору 3-бромхлорбензола (310,4 мг, 1,62 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (2 мл) при -78°C в атмосфере азота по каплям добавляют н-булиллитий (0,66 мл, 1,6 М в тетрагидрофуране). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 1 ч, поле чего добавляют продукт примера 1b (250,0 мг, 1,62 ммоль), и перемешивание продолжают в течение дополнительных 2 ч. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (15 мл), и смесь экстрагируют дихлорметаном, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 60:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (130,5 мг, выход: 30%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,41 (с, 1H), 7,29 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,24 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,17 (д, J=7,6 Гц, 1H), 5,14 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,89-1,79 (м, 2H), 1,66-1,61 (м, 1H), 1,53-1,45 (м, 2H), 1,41 (д, J=10,8 Гц, 1H), 1,34-1,31 (м, 1H), 1,16 (с, 3H), 1,08 (с, 3H), 1,02-0,92 (м, 1H), 0,60 (д, J=6, 8 Гц, 3H) м.д.; 13С-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 149,212, 132,980, 128,142, 124,919, 124,116, 122,012,69,464,58,649, 41,543,35,937, 33,427, 31,008, 28,083, 21,366, 21,114, 20,762 м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 266 (М+). [a]D25=+9, 44° (с=0,36, дихлорметан).
Пример 10. (3-Хлорфенил)((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 9 (50,0 мг, 0,19 ммоль) в дихлорметане (1,0 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (15,9 мг, 0,19 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (160,1 мг, 0,38 ммоль). Смесь перемешивают при 0°C в течение 1 ч, нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение дополнительных 2 ч. К полученной реакционной смеси затем добавляют водный раствор бикарбоната натрия (10 мл), и затем реакционную смесь экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 80:1 - 50:1) до получения указанного в заголовке продукта в виде бесцветного масла (36,5 мг, выход: 72%). Rf=0,5 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,92 (с, 1H), 7,82-7,83 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,50-7,52 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,387,42 (т, J=8,0 Гц, 1H), 2,94-2,97 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,05-2,08 (м, 1H), 1,77-1,81 (дд, J=13,2,2,8 Гц, 1H), 1,541,60 (м, 3H), 0,98-1,03 (м, 2H), 0,97 (с, 3H), 0,65-0,72 (м, 6H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 264,8 (М+). [a]D25=-l,25° (с=0,32, дихлорметан).
Пример 11. (R)-(3-Хлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (45,3 мг, 1,19 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (4 мл) при 0°C по каплям добавляют раствор продукта примера 10 (79 мг, 0,3 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя воду (0,2 мл), водный раствор гидроксида натрия (0,2 мл) и затем воду (0,6 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацета-том, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 60:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (54 мг, выход: 68%). Т.плавления 58-60°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,44 (с, 1H), 7,31 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,24 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,19 (д, J=7,6 Гц, 1H), 5,26 (с, 1H), 1,94-1,86 (м, 1H), 1,79-1,76 (м, 1H), 1,73 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,49-1,38 (м, 3H), 1,24-1,09 (м, 3H), 1,08 (д, J=6, 0 Гц, 3H), 1,07 (с, 3H), 0,40 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 289 (M+Na+). [a]D25=+32,0° (с=0,10, дихлорметан).
Пример 12. ^)-(4-Фторфенил)((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору 4-фторфенилмагнийбромида (8,04 мл, 6,44 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (2,0 мл) при -78°C в атмосфере азота по каплям добавляют раствор продукта примера 1b (220,0 мг, 1,43 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (4,0 мл). Полученный раствор перемешивают при -78°C в течение 1 ч. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (10 мл) при 0°C. Полученный раствор экстрагируют этилацетатом, сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 60:1), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (130 мг, выход 33%). Т.плавления 55-57°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,34-7,29 (м, 2H), 6,92 (т, J=8,4 Гц, 2H), 5,01 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,82-1,73 (м, 1H), 1,68 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,62-1,52 (м, 1H), 1,50-1,20 (м, 4H), 1,18 (с, 3H), 1,09 (с, 3H), 0,84-1,32 (м, 2H), 0,6 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д.; 13С-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 162,4, 159,9, 143,5, 143,5, 126,3, 114,7,114,5, 70,5, 59,7, 42,6, 37,0, 34,4, 32,0, 29,1,22,4, 22,2,21,7 м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 265 (М+). [a]D25=+7, 37° (с=0,38, дихлорметан).
Пример 13. (4-Фторфенил)((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 12 (60,0 мг, 0,24 ммоль) в дихлорметане (1,0 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (20,1 мг, 0,24 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (203,2 мг, 0,48 ммоль). Смесь перемешивают при 0°C в течение 1 ч, затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение дополнительных 2 ч. Реакцию гасят, добавляя водный раствор бикарбоната натрия (10 мл). Смесь экстрагируют дихлорметаном, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 80:1 - 50:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (60,0 мг, выход: 100%). Rf=0,5 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,99 (дд, J=8,4,5,2 Гц, 2H), 7,12 (дд, J=8,8, 7,6 Гц, 2H), 2,97 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,09-2,02 (м, 1H), 1,82-1,77 (м, 1H), 1,57-1,54 (м, 2H), 1,46-1,42 (м, 1H), 1,33-1,25 (м, 1H), 1,060,95 (м, 1H), 0,98 (с, 3H), 0,6-0,89 (м, 6H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 249 (M+H+). [a]D25=-4,80° (с=0,50, дихлорметан).
Пример 14. (R)-(4-Фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (33,0 мг, 0,87 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл) при 0°C по каплям добавляют продукт примера 13 (54,0 мг, 0,22 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя воду (0,1 мл), водный раствор гидроксида натрия (0,1 мл), затем воду (0,3 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/ этил-ацетат 70:1 - 60:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (37 мг, выход: 67%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,37 (дд, J=8,4,5,6 Гц, 2H), 7,0 (т, J=8,8 Гц, 2H), 5,25 (с, 1H), 1,88-1,83 (м, 1H), 1,77-1,73 (м, 1H), 1,69 (д, J=4,4 Гц, 1H), 1,57-1,08 (м, 6H), 1,06 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,02 (с, 3H), 0,38 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 250 (М+). [a]D25=+26,0° (с=0,47, дихлорметан).
Пример 15. ^)-(4-(Трифторметил)фенил) ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
4-Бромбензотрифторид (2,18 г, 9,70 ммоль) растворяют в безводном тетрагидрофуране (10 мл) и добавляют к перемешиваемой смеси Мд (232,8 мг, 9,70 ммоль) и йода (5 мг) в безводном тетрагидрофу-ране (2 мл), при 40°C в атмосфере азота медленно добавляют безводный раствор (10 мл) 4-бромбензотрифторида (2,18 г, 9,7 0 ммоль). После завершения добавления реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционный раствор охлаждают до -78°C и затем добавляют
продукт примера 1b (300 мг, 1,94 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл). После нагревания до комнатной температуры, смесь экстрагируют этилацетатом. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 80:1 - 50:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (270 мг, выход: 46%). Т.плавления 63-66°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,58 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,54 (д, J=8,0 Гц, 2H), 5,16 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,891,83 (м, 1H), 1,81 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,64 (д, J=13,2 Гц, 1H), 1,50-1,43 (м, 4H), 1,35-1,28 (м, 1H), 1,18 (с, 3H), 1,10 (с, 3H), 1,02-0,92 (м, 1H), 0,58 (д, J=6,0 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 283 (М-Н2О+Н+). [CX]D25=+7,74° (с=0,31, дихлорметан).
Пример 16. (4-(Трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 15 (217 мг, 0,72 ммоль) в дихлорметане (3 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (60,8 мг, 0,72 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (613,3 мг, 1,45 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. К полученной реакционной смеси добавляют водный раствор бикарбоната натрия (20 мл), затем смесь экстрагируют дихлорметаном, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 60:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде воскообразного твердого вещества (160 мг, выход: 74%). Т.плавления 16-20°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,05 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,72 (д, J=8,0 Гц, 2H), 3,02 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,15-2,04 (м, 1H), 1,80 (д, J=13,6 Гц, 1H), 1,61-1,55 (м, 2H), 1,46-1,43 (м, 1H), 1,34-1,27 (м, 1H), 1,08-1,00 (м, 1H), 0,98 (с, 3H), 0,76 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,0 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 299 (M+H+). [a]D25=+1,00° (с=0,20, дихлорметан).
Пример 17. да-(4-(Трифторметил)фенил) ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (50,9 мг, 1,34 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (4 мл) при 0°C по каплям добавляют продукт примера 16 (100 мг, 0,34 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (6 мл). Полученную реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1,5 ч. Реакцию гасят, добавляя воду (0,1 мл), водный раствор гидроксида натрия (0,1 мл) и воду (0,3 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом, и полученный органический слой сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 60:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (78 мг, выход: 76%). Т.плавления 76-79°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,56 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,53 (д, J=8,0 Гц, 2H), 5,31 (с, 1H), 1,94-1,84 (м, 1H), 1,79-1,76 (м, 2H), 1,48-1,41 (м, 3H), 1,24-1,11 (м, 3H), 1,08 (д, J=6, 0 Гц, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,33 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 300 (М+). [a]D25=+17,1° (с=0,21, дихлорметан).
Пример 18. 1-Фтор-4-(((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензол.
К раствору продукта примера 12 (70 мг, 0,28 ммоль) в трифторуксусной кислоте (0,30 мл) при 0°C добавляют триэтилсилан (71,6 мг, 0,62 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь обрабатывают водным раствором бикарбоната натрия (5 мл), затем смесь экстрагируют этилацетатом. Объединенный органический слой промывают насыщенным солевым раствором, сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир) и затем используя препаративную ВЭЖХ до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (35 мг, выход: 53%). Rf=0,7 (петролейный эфир).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,16 (дд, J=7,2,6,0 Гц, 2H), 6,93 (дд, J=8,8, 8,4 Гц, 2H), 2,80 (д, J=15,2 Гц, 1H), 2,32 (дд, J=15,6, 6,8 Гц, 1H), 1,60 (д, J=13,6 Гц, 1H), 1,49-1,39 (м, 4H), 1,26-1,14 (м, 2H), 0,98-0,91 (м, 1H), 0,96 (с, 3H), 0,87 (с, 3H), 0,72 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 234 (М+). [a]D25=+4,21° (с=0,19, дихлорметан).
Пример 19. ^)-(3,4-Дифторфенил) ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси йода (5 мг), магния (0,26 г, 11 ммоль) тетрагидрофурана (5 мл) при комнатной температуре по каплям добавляют 4-бром-1,2-дифторбензол (1,93 г, 10 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин и затем нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Полученную реакционную смесь охлаждают до -78°C и добавляют продукт примера 1b (300 мг, 1,95 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч. Реакционную смесь гасят, используя водный раствор аммонийхлорида (5 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом (30 мл х3), и полученную органическую фазу промывают водой (20 мл), солевым раствором (20 мл) и сушат над безводным сульфатом натрия. После концентрирования в вакууме, остаток очищают, используя хромато
графическую обработку на силикагеле, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (40 мг, выход: 8%). Т.плавления 43,3-45,8°C. Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/ этилаце-тат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,26-7,21 (м, 1H), 7,11-7,08 (м, 2H), 5,04 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,82-1,74 (м, 1H), 1,75 (д, J=5, 6 Гц, 1H), 1,64-1,60 (м, 1H), 1,50-1,44 (м, 3H), 1,36-1,25 (м, 2H), 1,12 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,96-0,94 (м, 1H), 0,57 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 251 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+5,56° (с=0,18, дихлорметан).
Пример 20. (3,4-Дифторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера (18 мг, 0,067 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (6 мг, 0,067 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (57 мг, 0,134 ммоль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Реакцию гасят, используя 5% хлористоводородную кислоту (5 мл) и затем экстрагируют дихлорметаном (20 мл х3). Объединенные органические фазы промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл), солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную тонкослойную хроматографию до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (11 мг, выход: 62%). Rf=0,7 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3+D2O) 5 7,82-7,73 (м, 2H), 7,25-7,22 (м, 1H), 2,91 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,082,01 (м, 1H), 1,81-1,77 (м, 1H), 1,57-1,54 (м, 2H), 1,44 (д, J=12,8 Гц, 1H), 1,32-1,28 (м, 1H), 1,02-0,95 (м, 4H), 0,77 (с, 3H), 0,73 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 267,6 (M+H+). [a]D25=-3,33° (с=0,12, дихлорметан).
Пример 21. (S)-Фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору фурана (198,6 мг, 2,92 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (12 мл) в атмосфере аргона при -78°C по каплям добавляют н-булиллитий (1,83 мл, 1,6 М). Затем к реакционному раствору добавляют раствор продукта примера 1b (300 мг, 1,94 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч, нагревают до комнатной температуры и дополнительно перемешивают в течение 1 ч. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл), и реакционную смесь экстрагируют этилацетатом. Полученный органический слой сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 60:1 - 40:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (210 мг, выход: 48%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,34 (с, 1H), 6,33 (с, 1H), 6,17 (с, 1H), 5,07 (д, J=6,4 Гц, 1H), 1,89 (д, J=6,4 Гц, 1H), 1,86-1,77 (м, 1H), 1,66 (д, J=13,6 Гц, 1H), 1,53-1,38 (м, 4H), 1,30-1,22 (м, 1H), 1,06-0,95 (м, 1H), 1,03 (с, 3H), 1,01 (с, 3H), 0,74 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 205 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+0,87° (с=0,23, дихлорметан).
Пример 22. Фуран-2-ил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 21 (120 мг, 0,54 ммоль) в дихлорметане (2 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (45,3 мг, 0,54 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (4 57,7 мг, 1,0 8 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2,5 ч. К полученной реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл), и затем смесь экстрагируют ди-хлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 60:1), и затем очищают, используя препаративную ВЭЖХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (36 мг, выход: 30%). Т.плавления 81-84°C. Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,58 (с, 1H), 7,17 (д, J=3,6 Гц, 1H), 6,52 (т, J=3,2 Гц, 1H), 2,75 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,07-2,02 (м, 1H), 1,77 (д, J=13,2 Гц, 1H), 1,59-1,53 (м, 2H), 1,44-1,40 (м, 1H), 1,32-1,25 (м, 1H), 1,04-0,93 (м, 1H), 1,00 (с, 3H), 0,85 (с, 3H), 0,76 (д, J=6,0 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 221 (M+H+). [a]D25=-25,7° (с=0,21, дихлорметан).
Пример 23. ^)-Фуран-2-ил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (20,7 мг, 0,54 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (1,5 мл) при 0°C по каплям добавляют раствор продукта примера 22 (100 мг, 0,40 ммоль) в безводном тетрагидрофу-ране (2,5 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 1 ч, после чего дополнительно добавляют литийалюминийгидрид (10 мг, 0,26 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч. Реакцию гасят, добавляя воду (0,1 мл), водный раствор гидроксида натрия (0,1 мл) и затем дополнительное количество воды (0,3 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем концентрируют в вакууме. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 50:1), получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (4,5 мг, выход: 14%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,36 (с, 1H), 6,34 (с, 1H), 6,27 (с, 1H), 5,17-5,16 (м, 1H), 1,82-1,78 (м, 2H), 1,69 (д, J=13,6 Гц, 1H), 1,44-1,39 (м, 2H), 1,25-1,23 (м, 3H), 1,10 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,06-0,98 (м, 1H), 0,82 (с, 3H), 0,81 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI+ve) m/z 205 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+37,3° (с=0,15, дихлорметан).
Пример 24. ^)-тиофен-3-ил((Ж^)-2,2,6-триме тилцикло г ексил)метанол.
К раствору 3-бромтиофена (476 мг, 2,92 ммоль) в сухом гексане (5 мл) в атмосфере азота при -40°C по каплям добавляют н-бутиллитий. Безводный тетрагидрофуран (0,5 мл) переносят в колбу и перемешивают 2 ч. Добавляют безводный гексан (1,5 мл), затем реакционный раствор охлаждают до -78°C, и затем медленно добавляют продукт примера 1b (300 мг, 1,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч и затем при комнатной температуре в течение ночи. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом, и полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 60:1 - 40:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде масла светло желтого цвета (27 0 мг, выход: 58%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,26 (с, 1H), 7,10 (с, 1H), 7,00 (д, J=4,8 Гц, 1H), 5,11 (д, J=6,0 Гц, 1H), 1,86-1,78 (м, 2H), 1,64 (д, J=12,8 Гц, 1H), 1,50-1,38 (м, 4H), 1,29-1,22 (м, 1H), 1,08 (с, 3H), 1,03 (с, 3H), 1,03-0,94 (м, 1H), 0,66 (д, J=6,4 Гц, 3H)) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 221 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+15,8° (с=0,24, дихлорметан).
Пример 25. Тиофен-3 -ил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 23 (17 0 мг, 0,71 ммоль) в дихлорметане (3,5 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (60,0 мг, 0,71 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (605,7 мг, 1,43 ммоль). Смесь перемешивают, нагревая до комнатной температуры, и перемешивают в течение 2 ч. К полученной реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл), и затем ее экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 80:1 - 60:1), затем очищают, используя препаративную тонкослойную хроматографию, для получения указанного в заголовке соединения вместе с тио-фен-2-ил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метаноном в виде твердого вещества белого цвета в соотношении около 11 к 1 (100 мг, выход: 60%). Т.плавления 119-121°C. Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,03 (с, 1H), 7,57 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,30-7,29 (м, 1H), 2,75 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,09-2,02 (м, 1H), 1,78 (д, J=12,8 Гц, 1H), 1,60-1,54 (м, 2H), 1,44-1,41 (м, 1H), 1,32-1,24 (м, 1H), 1,040,95 (м, 1H), 1,00 (с, 3H), 0,83 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,8 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 237 (M+H+). [a]D25=-14,0° (с=0,28, дихлорметан).
Пример 26. ^)-Тиофен-3-ил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (38,6 мг, 1,02 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (3 мл) при 0°C по каплям добавляют раствор продукта примера 24 (60 мг, 0,25 ммоль) в безводном тетрагидрофура-не (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя воду (0,1 мл), водный раствор гидроксида натрия (0,1 мл) и воду (0,3 мл). Смесь экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 50:1), и затем очищают далее, используя препаративную ВЭЖХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (30 мг, выход: 50%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,26 (с, 1H), 7,19 (с, 1H), 7,03 (д, J=4,8 Гц, 1H), 5,28 (с, 1H), 1,88-1,78 (м, 1H), 1,73-1,71 (м, 2H), 1,45-1,43 (м, 2H), 1,35 (д, J=10,4 Гц, 1H), 1,27-1,20 (м, 2H), 1,11-1,04 (м, 1H), 1,05 (д, J=6,0 Гц, 3H), 0,96 (с, 3H), 0,63 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 221 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+46,4° (с=0,28, дихлорметан).
Пример 27. 2-Хлор-1-метил-4-(((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензол.
К раствору продукта примера 6 (80 мг, 0,28 ммоль) в трифторуксусной кислоте (0,30 мл) при 0°C добавляют триэтилсилан (72,9 мг, 0,63 ммоль). Смесь затем перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакцию гасят насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл) и затем экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы промывают солевым раствором и затем сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и затем выпаривают при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир), и затем очищают, используя препаративную ВЭЖХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (49 мг, выход: 6 6%). Rf=0,7 (10:1 петролейный эфир).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,19 (с, 1H), 7,08 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,00 (д, J=7,6 Гц, 1H), 2,78 (д, J=15,6 Гц, 1H), 2,32 (с, 3H), 2,32-2,25 (м, 1H), 1,60 (д, J=13,2 Гц, 1H), 1,47-1,39 (м, 4H), 1,27-1,15 (м, 2H), 0,96 (с, 3H), 0,96-0,90 (м, 1H), 0,86 (с, 3H), 0,73 (д, J=6,0 Гц, 3H) м.д. [a]D25=+5,71° (с=0,35, дихлорметан).
Пример 28. (S)-(4-(Трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
1-Бром-4-(трифторметокси)бензол (1,95 г, 8,10 ммоль) растворяют в безводном тетрагидрофуране (8 мл). К перемешиваемой смеси магния (194,4 мг, 8,10 ммоль) и йода (5 мг) в безводном тетрагидрофу-ране (2 мл) в атмосфере азота добавляют раствор 1-бром-4-(трифторметокси)бензола (2 мл) в атмосфере N2 при 0°C, и затем полученный раствор нагревают до 40°C, по каплям добавляют остальной раствор 1-бром-4-(трифторметокси)бензола (6 мл). Полученную реакционную смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч и затем охлаждают до -78°C перед добавлением продукта примера 1b (250 мг, 1,62 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при указанной температуре в течение 2 ч. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл) при 0°C. Полученный раствор нагревают до комнатной температуры и затем экстрагируют этилацетатом, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 80:1 - 60:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (190 мг, выход: 39%). Т.плавления 29-33°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,42 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,15 (д, J=8,0 Гц, 2H), 5,10 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,871,80 (м, 1H), 1,77 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,62 (д, J=13,2 Гц, 1H), 1,50-1,38 (м, 4H), 1,31-1,23 (м, 1H), 1,14 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 1,00-0,89 (м, 1H), 0,58 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 316 (М+). [a]D25=-1,00° (с=0,20, дихлорметан).
Пример 29. (4-(Трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 28 (160 мг, 0,50 ммоль) в дихлорметане (3,0 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (42,5 мг, 0,50 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (428,9 мг, 1,01 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. К полученной реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (15 мл), и органическую часть экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 80:1 - 60:1), затем очищают далее, используя препаративную тонкослойную хроматографию для получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (125 мг, выход: 79%). Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,02 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,28 (д, J=8,8 Гц, 2H), 2,99 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,10-2,03 (м, 1H), 1,80 (д, J=12,8 Гц, 1H), 1,61-1,55 (м, 2H), 1,46-1,42 (м, 1H), 1,34-1,26 (м, 1H), 1,04-0,98 (м, 1H), 0,98 (с, 3H), 0,78 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,8 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 315 (M+H+). [a]D25=-12,9° (с=0,20, дихлорметан).
Пример 30. (R)-(4-(Трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (48,2 мг, 1,27 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (4 мл) при 0°C по каплям добавляют раствор продукта примера 29 (100 мг, 0,32 ммоль) в безводном тетрагидрофу-ране (6 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 1,5 ч. Реакцию гасят, добавляя воду (0,1 мл), водный раствор гидроксида натрия (0,1 мл) и дополнительное количество воды (0,3 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом. Органические слои собирают, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 50:1), получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (55 мг, выход: 54%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,43 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,16 (д, J=8,8 Гц, 2H), 5,26 (с, 1H), 1,91-1,83 (м, 1H), 1,77-1,75 (м, 2H), 1,50-1,36 (м, 3H), 1,26-1,10 (м, 3H), 1,06 (д, J=6, 0 Гц, 3H), 1,03 (с, 3H), 0,36 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 299 (М-Н2О+Н+). [a]D25=-1,82° (с=0,44, дихлорметан).
Пример 31. (S)-(3,4,5-Трифторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси йода (5 мг) и магния (0,26 г, 11 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (5 мл) по каплям добавляют 5-бром-1,2,3-трифторбензол (2,11 г, 10 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин и затем нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч, причем за это время магний расходуется. К полученному раствору (3,4,5-трифторфенил)магнийбромида, охлажденному до -78°C, добавляют продукт примера 1b (300 мг, 1,95 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч. Реакционную смесь гасят, используя водный раствор аммонийхлорида (5 мл), и затем его экстрагируют этилацетатом (30 мл х3), промывают водой (20 мл), солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (300 мг, выход: 54%).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,02 (т, J=7,2 Гц, 2H), 4,99 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,81-1,76 (м, 2H), 1,65-1,61 (м, 1H), 1,49-1,44 (м, 3H), 1,32-1,25 (м, 2H), 1,11 (с, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,96-0,93 (м, 1H), 0,57 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 269 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+8,24° (c=0,68, дихлорметан).
Пример 32. (3,4,5-Трифторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 31 (240 мг, 0,84 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (71 мг, 0,84 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (712 мг, 1,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасят, используя 5% хлористоводородную кислоту (5 мл), и затем органическую часть экстрагируют этилацетатом (20 мл х3). Полученную органическую фазу промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл), солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную тонкослойную хроматографию, и затем далее очищают, используя препаративную ВЭЖХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (100 мг, выход: 42%). Т.плавления 5б,7°С Rf=0,7 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3+D2O) 5 7,61 (т, J=7,2 Гц, 2H), 2,84 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,07-2,03 (м, 1H), 1,82-1,77 (м, 1H), 1,59-1,55 (м, 2H), 1,44 (д, J=12,8 Гц, 1H), 1,33-1,28 (м, 1H), 1,02-0,98 (м, 1H), 0,96 (с, 3H), 0,78 (с, 6H), 0,73 (д, J=6, 0 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 285 (M+H+). [a]D25=-7,69° (с=0,13, дихлорметан).
Пример 33. ^)-(3,4,5-Трифторфенил) ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси продукта примера 32 (52 мг, 0,18 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) при 0°C добавляют литийалюминийгидрид (21 мг, 0,55 ммоль). Смесь перемешивают при 0°C в течение 3 ч, и затем реакцию гасят водой. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (20 мл х3), и полученную органическую фазу промывают солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую обработку на силикагеле, получая указанное в заголовке соединение в виде воскообразного твердого вещества (29 мг, выход: 56%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,05 (т, J=7,6 Гц, 2H), 5,18 (с, 1H), 1,90-1,79 (м, 2H), 1,75 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,50-1,45 (м, 2H), 1,32 (д, J=11,2 Гц, 1H), 1,25-1,09 (м, 3H), 1,06 (с, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,40 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 286 (М+). [a]D25=+28,5° (с=0,40, дихлорметан).
Пример 34. (R)-Циклогексил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К перемешиваемому раствору циклогексилмагнийбромида (1 М в тетрагидрофуране) (4,9 мл, 4,88 ммоль), охлажденному до -78°C, медленно добавляют раствор продукта примера 1b (300 мг, 1,95 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (10 мл). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 3 ч и затем оставляют нагреваться до комнатной температуры и дополнительно перемешивают в течение 1 ч. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида (30 мл) и затем воду (20 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (50 мл х3), и объединенные органические фазы промывают солевым раствором (50 мл х2), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка на хроматографической колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 250:1 - 100:1), получают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (243 мг, выход: DZ.-6 j. Rf=0,7 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 3,42 (дд, J=10,0, 4,8 Гц, 1H), 2,10 (д, J=12,8 Гц, 1H), 1,80-1,60 (м, 6H), 1,54-1,34 (м, 4H), 1,25-1,11 (м, 5H), 1,07-0,94 (м, 2H), 0,98 (д, J=6, 0 Гц, 3H), 0,89 (с, 3H), 0,83 (с, 3H), 0,890,72 (м, 2H) м.д.; 13С-ЯМР (100 МГц, CDCl3) 5 75,5, 52,7, 44,1, 42,6, 37,2, 34,1, 31,6, 30,7,29,9, 29,1,26,5, 26,2,26,1,23,0, 22,4, 21,1 м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 261 (M+Na+). [a]D25=+4,07° (с=1,08, дихлорметан).
Пример 35. Циклогексил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К перемешиваемому раствору продукта примера 26 (150 мг, 0,63 ммоль) в дихлорметане (4 мл), охлажденному до 0°C, добавляют периодинан Десса-Мартина (535 мг, 1,26 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 3 ч. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (30 мл). Смесь экстрагируют дихлор-метаном (30 мл х3), и объединенные органические фазы промывают солевым раствором (100 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 250:1), получают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (120 мг, выход: 81%). Rf=0,7 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 2,36 (т, J=11,6 Гц, 1H), 2,19 (д, J=11,2 Гц, 1H), 1,95 (д, J=12,8 Гц, 1H), 1,90-1,80 (м, 3H), 1,73-1,68 (м, 3H), 1,52-1,42 (м, 3H), 1,40-1,33 (м, 1H), 1,31-1,16 (м, 4H), 1,07-0,98 (м, 1H), 0,95 (с, 3H), 0,91-0,84 (м, 1H), 0,86 (с, 3H), 0,71 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д.; 13С-ЯМР (100 МГц, CDCl3) 5 217,9, 64,9, 53,8, 42,1, 35,0, 34,3,32,1, 30,2,29,0, 26,6, 26,4, 25,9, 25,5, 21,8, 21,5, 20,9 м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 237 (M+H+). [a]D25=-90,0° (с=0,90, дихлорметан).
Пример 36. (R)-(3,4-Дифторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси продукта примера 20 (52 мг, 0,2 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл) при 0°C добавляют ли-тийалюминийгидрид (23 мг, 0,6 ммоль), и смесь перемешивают при 0°C в течение 3 ч. Реакцию гасят водой, и затем органическую часть экстрагируют этилацетатом (20 мл х3). Полученную органическую фазу промывают солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и затем концен
трируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую обработку на силикагеле, до получения указанного в заголовке соединения в виде воска (10 мг, выход: 19%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,37-7,26 (м, 1H), 5,22 (с, 1H), 1,90-1,74 (м, 2H), 1,71 (д, J=4,4 Гц, 1H), 1,50-1,44 (м, 2H), 1,37-1,32 (м, 1H), 1,23-1,08 (м, 3H), 1,06 (д, J=6, 0 Гц, 3H), 1,03 (с, 3H), 0,38 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 268 (М+). [a]D25=+43,3° (с=0,12, дихлорметан).
Пример 37. (S)-Фуран-3-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору 3-бромфурана (429,2 мг, 2,92 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (13 мл) в атмосфере азота при -78°C добавляют н-бутиллитий (1,83 мл, 1,6 М). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч и затем добавляют продукт примера 1b (300 мг, 1,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл), и органическую часть экстрагируют этилацетатом. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 60:1 - 40:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде масла светло желтого цвета (175 мг, выход: 40%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,37 (с, 1H), 7,30 (с, 1H), 6,31 (с, 1H), 5,03 (д, J=6,4 Гц, 1H), 1,84-1,77 (м, 1H), 1,67-1,65 (м, 2H), 1,49-1,39 (м, 3H), 1,28-1,20 (м, 2H), 1,05-0,97 (м, 7H), 0,77 (д, J=6,0 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 205 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+1,33° (с=0,30, дихлорметан).
Пример 38. Фуран-3-ил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 37 (155 мг, 0,70 ммоль) в дихлорметане (3,5 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (58,8 мг, 0,70 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (591,2 мг, 1,39 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. К полученной реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл), и затем органическую часть экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 60:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (90 мг, выход: 58%). Т.плавления 114-116°C. Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,01 (с, 1H), 7,42 (с, 1H), 6,78 (с, 1H), 2,41 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,07-1,99 (м, 1H), 1,76 (д, J=13,2 Гц, 1H), 1,59-1,53 (м, 2H), 1,44-1,40 (м, 1H), 1,28-1,21 (м, 1H), 1,01-0,92 (м, 1H), 0,99 (с, 3H), 0,86 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 237 (M+H+). [a]D25=-24,0° (c=0,20, дихлорметан).
Пример 39. ^)-Фуран-3-ил((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (48,2 мг, 1,27 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (4 мл) при 0°C по каплям добавляют раствор продукта примера 3 8 (70 мг, 0,32 ммоль) в безводном тетрагидрофу-ране (б мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя воду (0,1 мл), водный раствор гидроксида натрия (0,1 мл) и воду (0,3 мл). Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1 - 50:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (49 мг, выход: 69%). Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,39-7,37 (м, 2H), 6,41 (с, 1H), 5,13 (с, 1H), 1,75-1,68 (м, 2H), 1,57 (с, 1H), 1,47-1,40 (м, 2H), 1,32-1,24 (м, 3H), 1,06-1,01 (м, 4H), 0,96 (с, 3H), 0,85 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 223 (M+H+). [a]D25=+8,31° (с=0,14, дихлорметан).
Пример 40. (S)-(Перфторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси йода (5 мг) и магния (0,26 г, 11 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (5 мл) по каплям добавляют 1-бром-2,3,4,5,6-пентафторбензол (2,47 г, 10 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин и затем кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. К образовавшемуся in situ раствору (перфторфенил)магнийбромида, охлажденному -78°C, добавляют продукт примера 1b (300 мг, 1,95 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч. Реакционную смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (5 мл), и затем полученную смесь экстрагируют этилацетатом (30 мл х3), и объединенные органические фазы промывают водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем для получения указанного в заголовке соединения в виде полутвердого вещества (50 мг, выход: 8%).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 5,49 (д, J=8,4 Гц, 1H), 2,11-2,08 (м, 1H), 1,94-1,86 (м, 1H), 1,71-1,67 (м, 1H), 1,49-1,45 (м, 2H), 1,37-1,25 (м, 4H), 1,11 (с, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,85 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д.
Пример 41. (Перфторфенил)((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 40 (50 мг, 0,16 ммоль) в дихлорметане (4 мл) при 0°C добавляют бикарбонат натрия (13,4 мг, 0,16 ммоль) и периодинан Десса-Мартина (132 мг, 0,31 ммоль). Реакционную
смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Реакцию гасят, добавляя 5% хлористо-водородную кислоту (5 мл), и затем органическую часть экстрагируют этилацетатом (20 мл х 3), и полученную органическую фазу промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 мл) и солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем для получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества желтого цвета (22,8 мг, выход: 45%). Т.плавления 35,2-38°C. Rf=0,6 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3+D2O) 5 2,68 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,13-2,09 (м, 1H), 1,78 (дд, J=2,4, 13,2 Гц, 1H), 1,55-1,50 (м, 2H), 1,39 (д, J=12,8 Гц, 1H), 1,31-1,24 (м, 1H), 1,06-0,98 (м, 1H), 0,94 (с, 3H), 0,89 (д, J=6,4 Гц, 3H), 0,86 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 320 (М+). [a]D25=-88,0° (с=0,20, дихлорметан).
Пример 42. 4-(^)-Гидрокси ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К раствору 4-бромбензонитрила (708,0 мг, 3,89 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (15 мл) при -78°C в атмосфере аргона медленно добавляют н-бутиллитий (2,43 мл, 3,89 ммоль). После перемешивания при -78°C в течение 30 минут, медленно добавляют продукт примера 1b (300 мг, 1,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2,5 ч. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл). После нагревания до комнатной температуры, раствор экстрагируют этилацета-том, и полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 50:1 - 20:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества желтого цвета (260 мг, выход: 52%). Т.плавления 124-127°C. Rf=0,2 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,61-7,59 (м, 2H), 7,53 (д, J=7,6 Гц, 2H), 5,12 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,87-1,82 (м, 2H), 1,80-1,60 (м, 1H), 1,48-1,45 (м, 3H), 1,39 (д, J=10,8 Гц, 1H), 1,31-1,26 (м, 1H), 1,16 (с, 3H), 1,07 (с, 3H), 0,99-0,88 (м, 1H), 0,53 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 258 (M+H+). [a]D25=+6,84° (с=0,38, дихлорметан).
Пример 43. 2-Фтор-4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К раствору 4-бром-2-фторбензонитрила (505,5 мг, 2,53 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (7 мл) в атмосфере аргона при комнатной температуре добавляют изопропилмагнийхлорид (1,27 мл, 2,53 ммоль). После перемешивания в течение 40 мин, полученную реакционную смесь охлаждают до -78°C, и медленно добавляют раствор продукта примера 1b (300 мг, 1,94 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (2 мл). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл). После нагревания до комнатной температуры, полученный раствор экстрагируют этилацетатом и полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия, и затем ее концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 50:1 - 20:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (210 мг, выход: 39%). Т.плавления 114-116°C. Rf=0,2 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,57-7,53 (м, 1H), 7,34-7,26 (м, 2H), 5,09 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,86-1,81 (м, 2H), 1,66-1,60 (м, 1H), 1,51-1,43 (м, 3H), 1,37 (д, J=11,2 Гц, 1H), 1,32-1,26 (м, 1H), 1,14 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 1,00-0,93 (м, 1H), 0,54 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 276 (M+H+). [a]D25=+4,23° (с=0,52, дихлорметан).
Пример 44. 4-((1R,6S)-2,2,6-Триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил.
К раствору продукта примера 42 (190 мг, 0,74 ммоль) в дихлорметане (4,5 мл) при 0°C добавляют периодинан Десса-Мартина (626,0 мг, 1,48 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл), и затем смесь экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (150 мг, выход: 79%). Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,03 (д, J1=6, 8 Гц, J2=2,0 Гц, 2H), 7,77-7,75 (м, 2H), 2,99 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,12-2,05 (м, 1H), 1,83-1,78 (м, 1H), 1,61-1,56 (м, 2H), 1,47-1,42 (м, 1H), 1,33-1,25 (м, 1H), 1,07-0,97 (м, 4H), 0,75 (с, 3H), 0,74 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 256 (M+H+). [a]D25=+12,5° (с=0,41, дихлорметан).
Пример 45. 2-Фтор-4-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил.
К раствору продукта примера 43 (180 мг, 0,65 ммоль) в дихлорметане (4 мл) при 0°C добавляют пе-риодинан Десса-Мартина (554,3 мг, 1,31 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (20 мл), и затем смесь экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (160 мг, выход 90%). Т.плавления 53-56°C. Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,82 (дд, 1H=8,0 Гц, J2=l,6 Гц, 1H), 7,76-7,73 (м, 2H), 2,92 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,12-2,04 (м, 1H), 1,84-1,78 (м, 1H), 1,61-1,55 (м, 2H), 1,48-1,43 (м, 1H), 1,33-1,26 (м, 1H), 1,05-0,99 (м, 4H), 0,76 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 274 (M+H+). [a]D25=+10,0° (с=0,5б, дихлорметан).
Пример 46. (±)-(S)-((R)-2,2-Диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанол.
Пример 46а. Этил 6,6-диметил-2-(трифторметилсульфонилокси)циклогекс-1-енкарбоксилат.
К перемешиваемой суспензии гидрида натрия (2,08 г, 52 ммоль) в диэтиловом эфире (120 мл) при -20°C добавляют этил 2,2-диметил-6-оксоциклогексанкарбоксилат (5,2 г, 26 ммоль) [Helvetica Chimica Acta, 35, 1752-6; 1952]. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин. После охлаждения до -30°C, по каплям добавляют трифторметансульфоновый ангидрид (10 г, 35,44 ммоль), и полученную реакционную смесь затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 60 мин. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида, который затем экстрагируют диэтиловым эфиром (50 мл х3). Объединенные органические фазы промывают водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем для получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (6,4 г, выход: 75%). Rf=0,8 (10:1 петролейный эфир/этилацетат). Масс-спектр (ESI +ve) m/z 331 (M+H+).
Пример 46b. Этил 6,6-диметилциклогекс-1-енкарбоксилат.
К перемешиваемой смеси продукта примера 46а (6,4 г, 20 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин) палладия(0) (1,2 г, 1 ммоль) в диметилформамиде (100 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляют триэтилсилан (5,9 г, 8,1 мл, 50 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 60°C в течение 2 ч и затем охлаждают до комнатной температуры. Чтобы погасить реакцию, добавляют воду, затем экстрагируют диэтиловым эфиром (50 мл х3). Объединенные органические фазы промывают водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (5,3 г). Rf=0,7 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 6,81 (т, J=4,0 Гц, 1H), 4,17 (кв., J=7,2 Гц, 2H), 2,16-2,12 (м, 2H), 1,641,60 (м, 2H), 1,50-1,47 (м, 2H), 1,29 (т, J=7,2 Гц, 3H), 1,22 (с, 6H) м.д. Пример 46с. Этил 2,2-диметилциклогексанкарбоксилат.
Продукт примера 4 6b (5,3 г, 28 ммоль) в метаноле (20 мл) перемешивают при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение ночи. Смесь фильтруют, затем полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (1,7 г, выход: 32%). Rf=0,6 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
Ш-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 4,15-4,08 (м, 2H), 2,15 (дд, J=10,8, 4,4 Гц, 1H), 1,76-1,63 (м, 3H), 1,501,41 (м, 3H), 1,26 (т, J=3,6 Гц, 3H), 1,23-1,16 (м, 2H), 0,98 (с, 3H), 0,96 (с, 3H) м.д.
Пример 46d. (2,2-Диметилциклогексил)метанол.
К перемешиваемой смеси литийалюминийгидрида (416 мг, 11 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (15 мл) при -30°C в атмосфере аргона добавляют продукт примера 4бс (1,0 г, 5,5 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при -30°C в течение 2 ч перед тем, как медленно нагревают до комнатной температуры. Чтобы погасить реакцию, добавляют воду, и затем экстрагируют диэтиловым эфиром (50 мл х3). Объединенные органические фазы промывают водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (700 мг, выход: 70%). Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 3,85-3,81 (м, 1H), 3,34-3,29 (м, 1H), 1,80-1,71 (м, 2H), 1,51-1,13 (м, 8H), 0,97 (с, 3H), 0,80 (с, 3H) м.д.
Пример 46. 2,2-Диметилциклогексанкарбальдегид.
К перемешиваемой смеси продукта примера 46d (7 00 мг, 5,0 ммоль) и бикарбоната натрия (420 мг, 5,0 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при 0°C в атмосфере аргона добавляют периодинан Десса-Мартина (3,14 г, 7,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 ч и затем медленно нагревают до комнатной температуры. Смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем, получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (600 мг, выход: 85% выход). Rf=0,8 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 9,81 (д, J=2,4 Гц, 1H), 2,10-2,05 (м, 1H), 1,50-1,24 (м, 8H), 1,13 (с, 3H), 0,99 (с, 3H) м.д.
Пример 46. ^)-(^)-2,2-Диметилциклогексил) (4-фторфенил)метанол.
К раствору продукта примера 46е (200 мг, 1,43 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) при -78°C добавляют (4-фторфенил)магнийбромид (9,0 мл, 7,15 ммоль, 0,8 М). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч и затем медленно нагревают до комнатной температуры. Чтобы погасить реакцию, добав
ляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида, и затем экстрагируют этилацетатом (20 мл х3). Объединенные органические фазы промывают водой (20 мл) и солевым раствором (20 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хрома-тографической колонке с силикагелем до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (135 мг, выход: 40%). Т.плавления 105,2-108,5°C. Rf=0,6 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,29-7,25 (м, 2H), 7,03-6,99 (м, 2H), 5,09 (д, J=4,0 Гц, 1H), 1,73-1,69 (м, 1H), 1,53 (д, J=4,4 Гц, 1H), 1,47-1,35 (м, 5H), 1,32-1,28 (м, 1H), 1,23-1,19 (м, 1H), 1,09 (с, 3H), 1,08 (с, 3H), 1,06-0,98 (м, 1H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 236 (М)+.
Пример 47. (2,2-Диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанон.
К перемешиваемой смеси продукта примера 46 (125 мг, 0,53 ммоль) и бикарбоната натрия (45 мг, 0,53 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при 0°C в атмосфере аргона добавляют периодинан Десса-Мартина (44 9 мг, 1,0 6 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 ч перед тем, как ее медленно нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем, получая очищают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (103 мг, выход: 83%). Rf=0,8 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,00-7,95 (м, 2H), 7,14-7,09 (м, 2H), 3,24 (дд, J=11,2, 3,6 Гц, 1H), 1,831,74 (м, 2H), 1,60-1,49 (м, 4H), 1,35-1,28 (м, 2H), 1,02 (с, 3H), 0,86 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 235 (M+H+).
Пример 48. ^)-(^)-2,2-Диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанол.
К перемешиваемой смеси продукта примера 47 (97 мг, 0,41 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) при -78°C в атмосфере аргона добавляют литийалюминийгидрид (47 мг, 1,24 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч и затем нагревают до комнатной температуры. Чтобы погасить реакцию, добавляют воду, затем реакционную смесь фильтруют, и полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают на хроматографической колонке с силикагелем до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (60 мг, выход: 62%). Rf=0,6 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,28-7,24 (м, 2H), 7,03-6,99 (м, 2H), 4,58 (дд, J=8,0, 3,2 Гц, 1H), 1,64 (д, J=3,2 Гц, 1H), 1,59-1,49 (м, 2H), 1,44-1,24 (м, 4H), 1,22 (с, 3H), 1,06-0,98 (м, 2H), 0,93 (с, 3H), 0,90-0,86 (м, 1H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 236 (М)+.
Пример 49. (S)-(4-Метокси-3-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси соединения продукта примера 1b (150,0 мг, 0,972 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляют (4-метокси-3-метилфенил) магнийбромид (0,5 н, 3,9 мл, 1,95 ммоль) при 0°C, и смесь перемешивают в течение 2 ч. Затем добавляют 20 мл водного раствора аммонийхлорида, и реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (10 мл х3). Полученный органический слой промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 100:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (140 мг, выход: 50%). Rf=0,4 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,17 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,12 (с, 1H), 6,77 (д, J=8,4 Гц, 1H), 5,04 (д, J=5, 6 Гц, 1H), 3,81 (с, 3H), 2,22 (с, 3H), 1,86-1,77 (м, 1H), 1,66 (д, J=6,0 Гц, 1H), 1,63-1,58 (м, 1H), 1,50-1,36 (м, 4H), 1,31-1,25 (м, 1H), 1,13 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,96-0,93 (м, 1H), 0,63 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 276 (М)+. [a]D26,2=+7,14° (с=0,14, дихлорметан).
Пример 50. (4-Метокси-3-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 49 (60,0 мг, 0,217 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляют периодинан Десса-Мартина (165,7 мг, 0,391 ммоль) при -30°C, и смесь перемешивают в течение 2 ч. Дополнительно добавляют дихлорметан (10 мл), и полученную органическую фазу промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл х 2), солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ (элюент: петролейный эфир/этилацетат 30:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (49 мг, выход: 82%). Rf=0,6 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,84 (дд, J=2,4 Гц, J=8,8 Гц, 1H), 7,79 (д, J=l,6 Гц, 1H), 6,84 (д, J=8,4 Гц, 1H), 3,89 (с, 3H), 2,97 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,26 (с, 3H), 2,09-2,03 (м, 1H), 1,80-1,76 (м, 1H), 1,61-1,53 (м, 2H), 1,44-1,40 (м, 1H), 1,34-1,25 (м, 1H), 1,06-0,96 (м, 1H), 0,99 (с, 3H), 0,78 (с, 3H), 0,73 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 275 (M+H+). [a]D25=-7, 32° (с=0,41, дихлорметан).
Пример 51. 4-((S)-Гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)-2-метилбензонитрил.
К раствору 4-бром-2-метилбензонитрила (494,4 мг, 2,52 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл) при -78°C добавляют н-бутиллитий (1,6 мл, 2,52 ммоль), и смесь перемешивают в течение 1 ч. Затем добавляют продукт примера 1b (300 мг, 1,94 ммоль) в тетрагидрофуране (2 мл), и смесь перемешивают при -78°C в течение 1 ч. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида
(20 мл), и затем экстрагируют этилацетатом (10 мл х3). Объединенные органические фазы промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 50:1), до получения 150 мг твердого вещества белого цвета, которое очищают далее, используя препаративную ВЭЖХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (32 мг, выход: 6%). Т.плавления 111-113°C. Rf=0,4 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,53 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,36 (с, 1H), 7,32 (д, J=8,0 Гц, 1H), 5,08 (с, 1H), 2,55 (с, 3H), 1,86-1,77 (м, 1H), 1,68-1,57 (м, 2H), 1,52-1,47 (м, 3H), 1,39 (д, J=10,8 Гц, 1H), 1,31-1,25 (м, 1H), 1,15 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 0,96-0,93 (м, 1H), 0,54 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 272 (M+H+). [a]D26,2=+3,20° (c=0,25, дихлорметан).
Пример 52. 2-Метил-4-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил.
К перемешиваемому раствору продукта примера 51 (100,0 мг, 0,3 68 ммоль) в дихлорметане (10 мл) при -10°C добавляют периодинан Десса-Мартина (281,3 мг, 0,663 ммоль), и смесь перемешивают в течение 2 ч. Дополнительно добавляют дихлорметан (20 мл), и полученную органическую фазу промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл х 2) и солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 100:1), до получения 72 мг бесцветного масла, которое очищают, используя препаративную ВЭЖХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (50 мг, выход: 51%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/ этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,85 (с, 1H), 7,82 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,70 (д, J=8,0 Гц, 1H), 2,97 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,63 (с, 3H), 2,09-2,04 (м, 1H), 1,83-1,79 (м, 1H), 1,60-1,56 (м, 2H), 1,46-1,42 (м, 1H), 1,33-1,26 (м, 1H), 1,07-0,96 (м, 1H), 0,97 (с, 3H), 0,75 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 270 (M+H+). [a]D27,5=+7,43° (с=0,35, дихлорметан).
Пример 53. 4-((R)-Гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К смеси литийалюминийгидрида (10,8 мг, 0,26 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (1 мл) в атмосфере аргона при -78°C добавляют раствор продукта примера 44 (45 мг, 0,18 ммоль) в сухом тетрагидрофу-ране (1 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 5 ч. Реакцию гасят, добавляя смесь сульфата натрия и воды. Реакционную смесь фильтруют, и летучие органические соединения выпаривают при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ (элюент: петролейный эфир/этилацетат 10:1), получая 36 мг масла желтого цвета, которое затем очищают, используя препаративную ТСХ (элюент: петролейный эфир/дихлорметан 1:1 х3), до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (18 мг, выход: 39%). Т.плавления 10 6-108°C. Rf=0,2 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,62-7,60 (м, 2H), 7,55 (д, J=8,0 Гц, 2H), 5,32-5,30 (м, 1H), 1,91-1,88 (м, 1H), 1,81-1,76 (м, 2H), 1,51-1,40 (м, 3H), 1,25-1,10 (м, 3H), 1,08 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,29 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 240 (М-Н2О+Н+). [a]D26=+8,13° (с=0,32, дихлорметан).
Пример 54. 2-Фтор-4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К смеси литийалюминийгидрида (6,0 мг, 0,16 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (1 мл) в атмосфере аргона при -78°C добавляют раствор продукта примера 4 5 (36 мг, 0,16 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (1,5 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч, после чего добавляют дополнительный литий-алюминийгидрид (6,0 мг), и дополнительно перемешивание продолжают в течение 3 ч. Реакцию гасят, добавляя сульфат натрия и воду. Реакционную смесь фильтруют, и органические летучие соединения выпаривают при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ (элюент: петролейный эфир/дихлорметан 1:1 х2), до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (26 мг, выход: 59%). Т.плавления 124-126°C. Rf=0,2 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,57-7,54 (м, 1H), 7,37-7,30 (м, 2H), 5,29-5,27 (м, 1H), 1,94-1,77 (м, 3H), 1,49-1,39 (м, 3H), 1,25-1,09 (м, 3H), 1,07 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,06 (с, 3H), 0,33 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 276 (M+H+). [a]D26=+12,1° (с=0,12, дихлорметан).
Пример 55. (S)-(3-Фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору 4-бром-2-фтор-1-(трифторметокси)бензола (500 мг, 1,95 ммоль) в сухом тетрагидрофу-ране (5 мл) при -78°C добавляют н-бутиллитий (1,3 мл, 1,95 ммоль), и смесь перемешивают в течение 1 ч. Затем к смеси добавляют раствор продукта примера 1b (200 мг, 1,29 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (2 мл) и перемешивают при -78°C в течение 1 ч. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл), и затем органическую часть экстрагируют этилацетатом (10 мл х3). Объединенные органические фазы промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 200:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (49 мг, выход: 8%). Т.плавления 60,3-62,2°C. Rf=0,3 (30:1
петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,61-7,57 (м, 1H), 7,15-7,08 (м, 2H), 5,37 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,85-1,84 (м, 1H), 1,78 (м, 1H), 1,62-1,57 (м, 1H), 1,49-1,38 (м, 4H), 1,34-1,30 (м, 1H), 1,17 (д, J=2,8 Гц, 3H), 1,07 (с, 3H), 0,99-0,96 (м, 1H), 0,62 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. [a]D26,9=+37,7° (с=0,17, дихлорметан).
Пример 56. (3-Фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 55 (130 мг, 0,3 8 ммоль) в дихлорметане (5,0 мл) добавляют периоди-нан Десса-Мартина (329 мг, 0,77 ммоль) при -20°C, и полученную смесь перемешивают в течение 2 ч. Реакцию гасят, используя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (10 мл), и органическую часть экстрагируют этилацетатом (5 мл х3). Объединенные органические фазы промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 100:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде масла светло-розового цвета (35 мг, выход: 28 %). Rf=0,6 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,64-7,60 (м, 1H), 7,46-7,42 (м, 1H), 7,25-7,20 (м, 1H), 2,98 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,10-2,08 (м, 1H), 1,80-1,76 (м, 1H), 1,57-1,51 (м, 2H), 1,41-1,37 (м, 1H), 1,32-1,26 (м, 1H), 1,04-1,00 (м, 1H), 0,94 (с, 3H), 0,86 (д, J=6,4 Гц, 3H), 0,77 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 333 (M+H+). [a]D27,8=-21,8° (с=0,22, дихлорметан).
Пример 57. (R)-(3-Фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору продукта примера 56 (22,0 мг, 0,066 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) при -78°C добавляют литийалюминийгидрид (15 мг, 0,397 ммоль), и смесь перемешивают при -78°C в течение 7,0 ч, после чего добавляют влажный сульфат натрия вместе с дихлорметаном (10 мл). Реакционную смесь фильтруют, полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем, до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (18 мг, выход: 81%). Rf=0,3 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,66-7,62 (м, 1H), 7,19-7,13 (м, 2H), 5,50 (т, J=3,8 Гц, 1H), 1,97-1,89 (м, 1H), 1,79 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,77-1,74 (м, 1H), 1,60-1,58 (м, 1H), 1,50-1,43 (м, 2H), 1,27-1,20 (м, 1H), 1,171,06 (м, 2H), 1,13 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,32 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 317 (М-Н2О+Н+). [a]D27,8=+13,3° (с=0,15, дихлорметан).
Пример 58. 4-((R)-Гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)-2-метилбензонитрил.
К раствору продукта примера 52 (35,0 мг, 0,13 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) при -78°C добавляют литийалюминийгидрид (29,5 мг, 0,78 ммоль), и смесь перемешивают при -78°C в течение 7,0 ч. Добавляют влажный сульфат натрия вместе с дихлорметаном (10 мл). Реакционную смесь фильтруют, полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают, используя препаративную ТСХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (18 мг, выход: 51%). Т.плавления 126,3-128,1°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,53 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,38 (с, 1H), 7,33 (д, J=8,0 Гц, 1H), 5,26 (с, 1H), 2,55 (с, 3H), 1,90-1,80 (м, 1H), 1,77-1,76 (м, 2H), 1,47-1,38 (м, 3H), 1,25-1,10 (м, 3H), 1,07 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,31 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 272 (M+H+). [a]D25,9=+26,3° (с=0,16, дихлорметан).
Пример 59. ((R)-(4-Фторфенил)((1R,6S)-1,2,2,6-тетраметилциклогексил)метанол. Пример 59а. ^)-3,7-Диметил-2-метиленокт-6-енал.
К раствору ^)-3,7-диметилокт-б-енала (3,0 г, 19,45 ммоль) в изопропиловом спирте (20 мл) при комнатной температуре добавляют 37% водный формальдегид (14,46 мл, 194,5 ммоль), пирролидин (1,61 мл, 19,45 ммоль) и пропионовую кислоту (1,45 мл, 19,45 ммоль). Смесь нагревают до 45°C и перемешивают в течение 2 ч. Полученную реакционную смесь затем охлаждают до 0°C и гасят насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (100 мл). Смесь экстрагируют дихлорметаном, и объединенные органические фазы промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 160:1 - 110:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (3,2 г, выход: 98%). Rf=0,7 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 9,53 (с, 1H), 6,22 (с, 1H), 5,98 (с, 1H), 5,09-5,05 (м, 1H), 2,73-2,67 (м, 1H), 1,94-1,90 (м, 2H), 1,67 (с, 3H), 1,57 (с, 3H), 1,54-1,48 (м, 1H), 1,42-1,37 (м, 1H), 1,06 (д, J=6,8 Гц, 3H) м.д.
Пример 59b. ^)-2,3,7-Триметилокт-6-енал.
Смесь продукта примера 59а (2,4 г, 18,07 ммоль) и Pd/C (150 мг, 5%) в метаноле (16 мл) интенсивно перемешивают в атмосфере водорода (58 psi (400 кПа)) в течение ночи при 40°C. Смесь фильтруют, и твердое вещество промывают метанолом и дихлорметаном. Растворитель выпаривают при пониженном давлении, и остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 200:1 - 150:1), получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла, которое содержит смесь изомеров (520 мг, выход: 17%). Rf=0,7 (20:1 петролейный эфир/ этилаце-тат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) (основной изомер) 5 9,67 (д, J=10,8 Гц, 1H), 5,10-5,06 (м, 1H), 2,36-2,27 (м, 1H), 2,07-1,89 (м, 2H), 1,69 (с, 3H), 1,60 (с, 3H), 1,57-1,50 (м, 1H), 1,39-1,17 (м, 2H), 1,04 (д, J=6,8 Гц, 3H), 0,99 (д, J=6, 8 Гц, 3H) м.д.
Пример 59с. ^)-2,3,7-Триметилокта-1,6-диенилацетат.
К смеси уксусного ангидрида (0,45 мл, 4,76 ммоль), ацетата калия (37,8 мг, 0,39 ммоль) и триэтила-мина (0,33 мл, 2,38 ммоль) медленно добавляют продукт примера 59b (400 мг, 2,38 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 120°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, полученную реакционную смесь выливают в воду (10 мл), и органическую часть экстрагируют дихлорметаном (15 мл). Полученную органическую фазу промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (15 мл х 2) и солевым раствором (15 мл), затем сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 140:1), получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (298 мг, выход: 60%). Rf=0,7 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) (основной изомер) 5 6,94 (с, 1H), 5,10-5,05 (м, 1H), 2,14 (с, 3H), 1,91-1,85 (м, 1H), 1,68 (с, 3H), 1,59 (с, 3H), 1,57 (с, 3H), 1,39-1,16 (м, 4H), 0,96 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д.
Пример 59d. (Ж^)-1,2,2,6-Тетршетилциклогексанкарбальдегид.
К раствору продукта примера 59с (292 мг, 1,39 ммоль) в толуоле (2 мл) добавляют 85% водный раствор фосфорной кислоты (2 мл). Смесь нагревают до 100°C в течение 6 ч. Добавляют воду (10 мл), и слои разделяют. Водный слой экстрагируют толуолом (15 мл х3). Объединенные органические фазы промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (15 мл х 2) и солевым раствором (15 мл х2), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 200:1 - 130:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (148 мг, выход: 63%). Rf=0,7 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) (основной изомер) 5 9,61 (с, 1H), 1,61-1,45 (м, 3H), 1,24-1,12 (м, 3H), 0,96-0,86 (м, 1H), 0,86 (с, 3H), 0,83 (с, 3H), 0,82 (с, 3H), 0,73 (д, J=6,8 Гц, 3H) м.д.
Пример 59е. ^)-(4-Фторфенил)((Ж^)-1,2,2,6-тетраметил1щклогексил)метанол.
К раствору 4-фторфенилмагнийбромида в сухом тетрагидрофуране (4,85 мл, 0,8 М, 3,88 ммоль) в атмосфере аргона при -78°C по каплям добавляют раствор продукта примера 59d (145 мг, 0,86 ммоль) в сухом ТГФ (2,5 мл). После перемешивания в течение 2 ч при -78°C, реакционную смесь постепенно нагревают до 0°C и затем дополнительно перемешивают в течение ч. Реакцию гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (15 мл). Полученную смесь экстрагируют этилацетатом, и органическую фазу промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 100:1 - 80:1), получая бесцветное масло, которое далее очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/ дихлорметан 90:1 - 50:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (25 мг, выход: 11%). Rf=0,5 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,34-7,33 (м, 2H), 6,99-6,94 (м, 2H), 4,97 (д, J=3,2 Гц, 1H), 2,36-2,30 (м, 1H), 1,76 (д, J=4,0 Гц, 1H), 1,54-1,50 (м, 2H), 1,46-1,43 (м, 2H), 1,25-1,15 (м, 2H), 1,13 (с, 3H), 1,01 (с, 3H), 0,92 (д, J=6, 8 Гц, 3H), 0,60 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 247 (М-Н2О+Н+). [a]D25,9=+0,91° (с=0,22, дихлорметан).
Пример 60. 4-((S)-Гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)-2-(трифторметил)бензонит-
рил.
К раствору 4-бром-2-(трифторметил)бензонитрила (486,3 мг, 1,94 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) добавляют изопропилмагнийхлорид (2 М, 0,97 мл, 1,94 ммоль) при -20°C, и смесь перемешивают в течение 1 ч. Затем добавляют раствор продукта примера 1b (200 мг, 1,29 ммоль) в тетрагидрофуране (1 мл), и смесь перемешивают при -20°C в течение 1 ч и затем нагревают до комнатной температуры в течение 1 ч. Добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида, и смесь экстрагируют этилацетатом (10 мл х3). Объединенные органические фазы промывают солевым раствором (25 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка, используя хроматографическую колонку с силикагелем, получают 200 мг твердого вещества бледно желтого цвета, которое далее очищают, используя препаративную ТСХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества бледно желтого цвета (170 мг, выход: 40%). Т.плавления 151-153,3°C. Rf=0,3 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,86 (с, 1H), 7,77 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,71 (д, J=8,0 Гц, 1H), 5,14 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,93 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,88-1,80 (м, 1H), 1,65-1,61 (м, 1H), 1,52-1,45 (м, 3H), 1,37 (д, J=11,2 Гц, 1H), 1,30-1,27 (м, 1H), 1,16 (с, 3H), 1,08 (с, 3H), 1,00-0,93 (м, 1H), 0,50 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 326 (M+H+). [a]D26,8=+4,35° (с=0,23, дихлорметан).
Пример 61. 2-(Трифторметил)-4-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил.
К раствору продукта примера 60 (35 мг, 0,11 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) при -10°C добавля
ют периодинан Десса-Мартина (82 мг, 0,19 ммоль), и смесь перемешивают при -10°C в течение 4 ч. Реакционную смесь фильтруют и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ, до получения 25 мг бесцветного масла, которое затем очищают, используя препаративную ВЭЖХ до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (16 мг, выход: 4 6%). Т.плавления 81,6-82,4°C. Rf=0,6 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,32 (с, 1H), 8,22 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,97 (д, J=8,0 Гц, 1H), 2,98 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,15-2,04 (м, 1H), 1,84-1,80 (м, 1H), 1,62-1,55 (м, 2H), 1,49-1,45 (м, 1H), 1,36-1,25 (м, 1H), 1,091,00 (м, 1H), 0,98 (с, 3H), 0,76 (с, 3H), 0,75 (д, J=7,2 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 323 (М+). [a]D27,6=+16,8° (с=0,19, дихлорметан).
Пример 62. (4-Фторфенил)((Ж^)-1,2,2,6-тетршетилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 59 (30 мг, 0,11 ммоль) в дихлорметане (1 мл) при 0°C добавляют пе-риодинан Десса-Мартина (96,4 мг, 0,23 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. К полученной реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (10 мл), и затем смесь экстрагируют дихлорметаном, промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/дихлорметан 90:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (19 мг, выход 6 6%). Т.плавления 49-51°C. Rf=0,6 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,52-7,49 (м, 2H), 7,06-7,02 (м, 2H), 2,68-2,62 (м, 1H), 1,59-1,49 (м, 4H), 1,29 (с, 3H), 1,20-1,11 (м, 2H), 1,03 (с, 3H), 0,90 (с, 3H), 0,74 (д, J=6, 8 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 263 (M+H+). [a]D26=-0, 84° (с=0,24, дихлорметан).
Пример 63. 2-Фтор-N,-гидрокси-4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензи-мидамид.
К раствору продукта примера 45 (26 мг, 0,095 ммоль) в пиридине (0,6 мл) добавляют гидрохлорид гидроксиламина (19,9 мг, 0,29 ммоль). Смесь перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 4 ч. Добавляют воду (10 мл), и органическую часть экстрагируют этилацетатом. Полученную органическую фазу промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают, используя препаративную ТСХ, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (7,6 мг, выход: 26%). Т.плавления 154-156°C. Rf=0,5 (1:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,82-7,68 (м, 3H), 5,17 (ушир.с, 2H), 2,94 (д, J=10,4 Гц, 1H), 2,11-2,02 (м, 1H), 1,81-1,77 (м, 1H), 1,61-1,54 (м, 2H), 1,45-1,41 (м, 1H), 1,33-1,25 (м, 2H), 1,06-0,97 (м, 1H), 0,97 (с, 3H), 0,77 (с, 3H), 0,74 (д, J=6, 8 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 307 (M+H+).
Пример 64. ^)-(3,4-Дихлорфенил)((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К перемешиваемому раствору соединения 4-бром-1,2-дихлорбензол (437,1 мг, 1,94 ммоль) в тетра-гидрофуране (4 мл) по каплям добавляют н-булиллития (1,6 М, 1,3 мл, 1,94 ммоль) при -78°C, и смесь перемешивают при -78°C в течение 30 мин. Добавляют раствор продукта примера 1b (200,0 мг, 1,29 ммоль) в тетрагидрофуране (1 мл), и смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры, и перемешивание продолжают в течение 1 ч. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида (10 мл), и затем полученную смесь экстрагируют этилацетатом (10 мл х3). Объединенные органические фазы промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 100:1), получая 250 мг твердого вещества белого цвета, которое очищают далее, используя хроматографическую колонку с силикагелем, до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (167 мг, выход: 43%). Т.плавления 94,2-96,2°C. Rf=0,4 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,49 (с, 1H), 7,37 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,22 (д, J=8,4 Гц, 1H), 5,03 (д, J=5, 6 Гц, 1H), 1,85-1,77 (м, 2H), 1,65-1,58 (м, 1H), 1,49-1,43 (м, 3H), 1,34 (д, J=10,8 Гц, 1H), 1,30-1,23 (м, 1H), 1,13 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 1,00-0,88 (м, 1H), 0,57 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 323 (M+Na+). [a]D27,3=+6, 90° (c=0,29, дихлорметан).
Пример 65. (S)-(3,4-Диметилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
В 50-мл сухую трехгорлую круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой, капельной воронкой (25 мл) и обратным холодильником, в атмосфере аргона помещают стружки магния (129 мг, 5,3 ммоль). Через капельную воронку добавляют безводный тетрагидрофуран (16 мл), затем 4-бром-1,2-диметилбензол (888 мг, 4,8 ммоль). В колбу добавляют безводный тетрагидрофуран (4 мл), затем порцию раствора 4-бром-1,2-диметилбензола (2 мл). Затем колбу нагревают до начала кипения растворителя, и в это время начинают перемешивание. В колбу по каплям добавляют остальной раствор 4-бром-1,2-диметилбензола с такой скоростью, чтобы растворитель продолжал умеренно кипеть (около 10 мин). После завершения добавления полученную реакционную смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 30 мин. Смесь охлаждают до -78°C, и по каплям добавляют через шприц раствор продукта примера 1b (185 мг, 1,2 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл). Реакционную смесь перемеши
вают при -78°C в течение 2 ч и затем оставляют постепенно нагреваться до комнатной температуры, и перемешивают в течение ночи. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида (10 мл). Добавляют воду (20 мл), и смесь экстрагируют этилацетатом (30 мл х3). Объединенные органические фазы промывают солевым раствором (60 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 200:1 - 20:1), получают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (67 мг, выход: 21%). Rf=0,5 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
Ш-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,14-7,06 (м, 3H), 5,06 (д, J=5, 6 Гц, 1H), 2,27 (с, 3H), 2,24 (с, 3H), 1,881,77 (м, 1H), 1,68 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,63-1,57 (м, 1H), 1,51-1,41 (м, 4H), 1,33-1,24 (м, 1H), 1,13 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 1,00-0,86 (м, 1H), 0,62 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 243 (М-Н2О+Н+). [a]D28,7=+5, 78° (с=0,45, дихлорметан).
Пример 66. ^)-(4-Хлор-3-фторфенил) ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
В 50-мл сухую трехгорлую круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой, капельной воронкой (25 мл) и обратным холодильником, в атмосфере аргона помещают стружки магния (129 мг, 5,3 ммоль). Через капельную воронку добавляют безводный тетрагидрофуран (16 мл), затем 4-бром-1-хлор-2-фторбензол (1,005 г, 4,8 ммоль). В колбу добавляют безводный тетрагидрофуран (4 мл), затем порциями добавляют раствор 4-бром-1-хлор-2-фторбензола (2 мл). Затем колбу нагревают до начала кипения растворителя, и в это время начинают перемешивание. В колбу по каплям добавляют остальной раствор 4-бром-1,2-диметилбензола с такой скоростью, чтобы растворитель кипел умеренно (около 10 мин). После завершения добавления полученную реакционную смесь нагревают при кипячении с обратным холодильником в течение 30 мин. Смесь охлаждают до -78°C, и по каплям через шприц добавляют раствор продукта примера 1b (185 мг, 1,2 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 2 ч и затем оставляют постепенно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида (10 мл). Добавляют воду (20 мл), и смесь затем экстрагируют этилацетатом (30 мл х3). Объединенные органические фазы промывают солевым раствором (60 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 200:1 - 50:1), получают указанное в заголовке соединение в виде масла желтого цвета (29 мг, выход: Rf=0,45 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,31 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,23 (д, J=11,6 Гц, 1H), 7,10 (д, J=8,4 Гц, 1H), 5,05 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,86-1,80 (м, 1H), 1,77 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,65-1,61 (м, 1H), 1,50-1,44 (м, 3H), 1,35 (д, J=10,8 Гц, 1H), 1,31-1,24 (м, 1H), 1,13 (с, 3H), 1,05 (с, 3H), 1,00-0,85 (м, 1H), 0,58 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 267 (М-Н2О+Н+). [a]D29,5=+5,41° (с=0,37, дихлорметан).
Пример 67. 4-((R)-Гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)-2-(трифторметил)бензо-нитрил.
К раствору продукта примера 61 (33 мг, 0,10 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) при -78°C добавляют литийалюминийгидрид (15,1 мг, 0,40 ммоль), и смесь перемешивают при -78°C в течение 4 ч. Добавляют влажный сульфат натрия, и реакционную смесь фильтруют. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают, используя препаративную ТСХ, до получения указанного в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (30 мг, выход: 91%). Т.плавления 118,5-119,2°C. Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,86 (с, 1H), 7,79-7,75 (м, 2H), 5,34 (с, 1H), 1,94-1,86 (м, 2H), 1,82-1,79 (м, 1H), 1,51-1,42 (м, 3H), 1,27-1,11 (м, 3H), 1,08 (д, 3H), 1,06 (с, 3H), 0,25 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 326 (M+H+). [a]D32,2=+26,7° (с=0,21, дихлорметан).
Пример 68. (3,4-Дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 64 (200 мг, 0,663 ммоль) в дихлорметане (4 мл) при 0°C добавляют периодинан Десса-Мартина (506,4 мг, 0,775 ммоль), и смесь перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (20 мл), и полученную органическую фазу промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл х 2) и солевым раствором (10 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 100:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (150 мг, выход: 75%). Rf=0,6 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,02 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,78 (дд, J=8,4 Гц, J=2,0 Гц, 1H), 7,53 (д, J=8,4 Гц, 1H), 2,91 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,10-2,01 (м, 1H), 1,81-1,77 (м, 1H), 1,59-1,54 (м, 2H), 1,45-1,41 (м, 1H), 1,331,25 (м, 1H), 1,06-0,98 (м, 1H), 0,96 (с, 3H) 0,76-0,72 (м, 6H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 298 (М+). [a]D32,8=+3,82° (с=0,68, дихлорметан).
Пример 69. (3,4-Диметилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
Раствор продукта примера 65 (75 мг, 0,29 ммоль) в дихлорметане (3 мл) обрабатывают периодина
ном Десса-Мартина (246 мг, 0,58 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляют воду (1,5 мл), затем водный раствор гидроксида натрия (1,0 М, 3 мл). Двухслойную смесь оставляют при интенсивном перемешивании при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляют дихлорметан (15 мл) и воду (15 мл), и полученный органический слой выделяют. Водный слой экстрагируют дихлорметаном (15 мл х2). Объединенные органические фазы сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка, используя препаративную ТСХ (элюент: петролейный эфир/этилацетат 50:1), получают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (31 мг, выход: 41%). Rf=0,7 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,74 (с, 1H), 7,70 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,20 (д, J=7,6 Гц, 1H), 3,00 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,33 (с, 3H), 2,31 (с, 3H), 2,12-2,01 (м, 1H), 1,80-1,76 (м, 1H), 1,58-1,54 (м, 2H), 1,44-1,40 (м, 1H), 1,34-1,25 (м, 1H), 1,10-0,98 (м, 1H), 0,99 (с, 3H), 0,77 (с, 3H), 0,74 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 259 (M+H+). [a]D27=-7,22° (с=0,36, дихлорметан).
Пример 70. (4-Хлор-3-фторфенил) ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
Раствор продукта примера 66 (35 мг, 0,12 ммоль) в дихлорметане (2 мл) обрабатывают периодина-ном Десса-Мартина (102 мг, 0,24 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляют воду (1 мл) затем водный раствор гидроксида натрия (1,0 М, 2 мл). Двухслойную смесь оставляют при интенсивном перемешивании при комнатной температуре в течение 30 мин. Добавляют дихлорметан (10 мл) и воду (15 мл), и органический слой выделяют. Водный слой экстрагируют дихлорметаном (15 мл х2). Объединенные органические фазы сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка, используя препаративную ТСХ, получают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (22 мг, выход: 65%). Rf=0,7 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,74-7,69 (м, 2H), 7,49 (т, J=7,8 Гц, 1H), 2,91 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,102,01 (м, 1H), 1,82-1,77 (м, 1H), 1,61-1,54 (м, 2H), 1,46-1,41 (м, 1H), 1,33-1,25 (м, 1H), 1,06-0,97 (м, 1H), 0,97 (с, 3H), 0,77 (с, 3H), 0,73 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 283 (М+). [a]D321=+1,00° (с=0,20, дихлорметан).
Пример 71. (R)-(3,4-Дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору продукта примера 68 (33 мг, 0,10 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) при -78°C добавляют литийалюминийгидрид (15,1 мг, 0,40 ммоль), и смесь перемешивают при -78°C в течение 7 ч. Затем добавляют влажный сульфат натрия, и реакционную смесь фильтруют. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают, используя хроматографическую колонку с си-ликагелем до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (12 мг, выход: 40%). Rf=0,4 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,52 (с, 1H), 7,37 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,24 (д, J=8,4 Гц, 1H), 5,21 (с, 1H), 1,92-1,82 (м, 1H), 1,79-1,74 (м, 2H), 1,51-1,43 (м, 2H), 1,37-1,34 (м, 1H), 1,21-1,09 (м, 3H), 1,06 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,04 (с, 3H), 0,39 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 300 (М+). [a]D23,8=+21,8° (с=0,11, дихлорметан).
Пример 72. 2-Фтор-5-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К раствору 2-фтор-5-иодобензонитрила (479,2 мг, 1,94 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) при -20°C добавляют изопропилмагнийхлорид (2н., 0,97 мл, 1,94 ммоль), и смесь перемешивают в течение 1 ч. Затем добавляют раствор продукта примера 1b (200 мг, 1,29 ммоль) в тетрагидрофуране (0,5 мл), и смесь дополнительно перемешивают при -20°C в течение 1 ч, затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 1 ч. Реакцию гасят насыщенным водным раствором аммонийхлорида (10 мл), и органическую часть экстрагируют этилацетатом (10 мл х3). Объединенную фазу промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 50:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (200 мг, выход: 48%). Т.плавления 117,9-119,2°C. Rf=0,2 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,69-7,67 (м, 1H), 7,64-7,60 (м, 1H), 7,15 (д, J=8,6 Гц, 1H), 5,06 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,85 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,83-1,76 (м, 1H), 1,64-1,60 (м, 1H), 1,50-1,44 (м, 3H), 1,32-1,23 (м, 2H), 1,14 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 1,00-0,89 (м, 1H), 0,53 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. (ESI +ve) m/z 276 (M+H+). [a]D27=+27,1° (с=0,31, дихлорметан).
Пример 73. (S)-(3-Фтор-4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К раствору 4-бром-2-фторбензотрифторида (410,7 мг, 1,69 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (6 мл) в атмосфере аргона при 0°C добавляют изопропилмагнийхлорид (0,85 мл, 1,69 ммоль). После нагревания до комнатной температуры, реакционную смесь перемешивают в течение 40 мин, и затем полученную реакционную смесь охлаждают до -78°C. Медленно добавляют раствор продукта примера 1b (200 мг, 1,30 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (1 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (15 мл), и после нагревания до комнатной температуры реакционную смесь экстрагируют этилацетатом. Полученную органическую фазу сушат
над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 90:1 - 80:1), получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета (89 мг, выход: 17%). Т.плавления 71-73°C. Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,55-7,51 (м, 1H), 7,30-7,25 (м, 2H), 5,09 (д, J=5,6 Гц, 1H), 1,84-1,79 (м, 2H), 1,65-1,61 (м, 1H), 1,50-1,46 (м, 3H), 1,39 (д, J=11,2 Гц, 1H), 1,31-1,25, (м, 1H), 1,15 (с, 3H), 1,07 (с, 3H), 1,0-0,90 (м, 1H), 0,57 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. [a]D22,7=+13,6° (с=0,22, дихлорметан).
Пример 74. (3-Фтор-4-(трифторметил)фенил) ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон.
К раствору продукта примера 73 (100 мг, 0,31 ммоль) в дихлорметане (2 мл) при 0°C добавляют пе-риодинан Десса-Мартина (266,3 мг, 0,63 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. К полученной реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (15 мл), и затем органическую часть экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 100:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (86 мг, выход: 88%). Rf=0,7 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,82-7,80 (м, 1H), 7,76-7,70 (м, 2H), 2,94 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,12-2,03 (м, 1H), 1,83-1,78 (м, 1H), 1,61-1,52 (м, 2H), 1,47-1,43 (м, 1H), 1,34-1,26 (м, 1H), 1,07-0,97 (м, 1H), 0,97 (с, 3H), 0,77 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 316 (М+). [a]D23,6=+2,03° (с=0,59, дихлорметан).
Пример 75. (R)-(3-Фтор-4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К смеси литийалюминийгидрида (35,1 мг, 0,92 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (3 мл) при 0°C по каплям добавляют раствор продукта примера 74 (73,0 мг, 0,23 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (5 мл). Реакционную смесь перемешивают при 0°C в течение 2 ч. Реакцию гасят, добавляя смесь сульфата натрия и воды. Реакционную смесь фильтруют, и полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 70:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (58 мг, выход: 79%). Т.плавления 75-77°C. Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,54-7,51 (м, 1H), 7,33-7,29 (м, 2H), 5,28 (с, 1H), 1,93-1,77 (м, 3H), 1,521,39 (м, 3H), 1,25-1,10 (м, 3H), 1,07 (д, J=7,2 Гц, 3H), 1,05 (с, 3H), 0,35 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 318 (М+). [a]D23,4=+22,0° (с=0,41, дихлорметан).
Пример 76. 3-((S)-Гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К перемешиваемому раствору 3-бромбензонитрила (229,5 мг, 1,26 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) при -78°C по каплям добавляют н-булиллитий (1,6 н, 0,78 мл, 1,26 ммоль), и полученную смесь перемешивают при -78°C в течение 1 ч. Добавляют раствор продукта примера 1b (150,0 мг, 0,97 ммоль) в тетрагидрофуране (1 мл), смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и дополнительно перемешивают в течение ч. К смеси добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида (10 мл), и органическую часть экстрагируют этилацетатом (10 мл х3). Объединенный органический слой промывают солевым раствором, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 50:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (100 мг, выход: 41%). Т.плавления 105-107°C. Rf=0,2 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,72 (с, 1H), 7,64 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,47 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,41 (т, J=7,6 Гц, 1H), 5,10 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,87-1,78 (м, 2H), 1,64-1,59 (м, 1H), 1,50-1,44 (м, 3H), 1,36 (д, J=10,8 Гц, 1H), 1,32-1,25 (м, 1H), 1,15 (с, 3H), 1,07 (с, 3H), 1,00-0,89 (м, 1H), 0,52 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. (ESI +ve) m/z 258 (M+H+). [a]D24,2=+18,3° (с=1,54, дихлорметан).
Пример 77. 2-Хлор-4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К раствору 4-бром-2-хлорбензонитрил (364,9 мг, 1,69 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (6 мл) в атмосфере аргона при 0°C добавляют изопропилмагнийхлорид (0,85 мл, 1,69 ммоль). Реакционную смесь нагревают и перемешивают при комнатной температуре в течение 40 мин. После охлаждения реакционной смеси до -78°C, медленно добавляют раствор продукта примера 1b (200 мг, 1,30 ммоль) в сухом тет-рагидрофуране (1 мл), и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч. Смесь гасят, добавляя насыщенный водный раствор аммонийхлорида (15 мл), и полученный раствор экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат над безводным сульфатом натрия и затем концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 40:1 - 20:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества светло желтого цвета (47 мг, выход: 12%). Т.плавления 139-141°C. Rf=0,2 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,60 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,59 (с, 1H), 7,40 (д, J=8,0 Гц, 1H), 5,08 (д, J=5,2 Гц, 1H), 1,87-1,78 (м, 2H), 1,65-1,61 (м, 1H), 1,50-1,45 (м, 3H), 1,36 (д, J=11,2 Гц, 1H), 1,31-1,23 (м, 1H), 1,14 (с, 3H), 1,06 (с, 3H), 1,02-0,90 (м, 1H), 0,53 (д, J=6,0 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 274 (М-
Н2О+Н+). [a]D28,4=+4,00° (с=0,35, дихлорметан).
Пример 78. 3-((R)-Гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К раствору продукта примера 76 (77 мг, 0,299 ммоль) в дихлорметане (3 мл) при 0°C добавляют пе-риодинан Десса-Мартина (253,8 мг, 0,598 ммоль), полученную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. Смесь фильтруют, и полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (56 мг, выход: 74%). Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,23 (с, 1H), 8,18 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,82 (д, J=7,6 Гц, 1H), 7,60 (т, J=7,8 Гц, 1H), 2,96 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,14-2,02 (м, 1H), 1,83-1,79 (м, 1H), 1,61-1,55 (м, 2H), 1,46-1,43 (м, 1H), 1,34-1,25 (м, 1H), 1,08-0,99 (м, 1H), 0,97 (с, 3H), 0,76-0,74 (м, 6H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 256 (M+H+). [a]D26,2=+10,0° (с=0,74, дихлорметан).
Пример 79. 2-Фтор-5-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил.
К раствору продукта примера 72 (70 мг, 0,254 ммоль) в дихлорметане (3 мл) при 0°C добавляют пе-риодинан Десса-Мартина (215,5 мг, 0,508 ммоль), полученную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. Смесь фильтруют, и полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. В результате очистки остатка, используя хроматографическую колонку с силикагелем, получают указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (49,7 мг, выход: 72%). Rf=0,4 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,26-8,21 (м, 2H), 7,32 (т, J=8,4 Гц, 1H), 2,91 (д, J=10,8 Гц, 1H), 2,132,01 (м, 1H), 1,83-1,79 (м, 1H), 1,61-1,55 (м, 2H), 1,47-1,43 (м, 1H), 1,34-1,25 (м, 1H), 1,07-1,00 (м, 1H), 0,97 (с, 3H), 0,76 (с, 3H), 0,73 (д, J=6,4 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 273 (М+). [a]D25,8=+9,46° (с=0,93, дихлорметан).
Пример 80. ^)-(3,4-Диметилфенил) ((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К перемешиваемому раствору продукта примера 69 (42 мг, 0,16 ммоль) в безводном тетрагидрофу-ране (3 мл) в атмосфере аргона при -78°C добавляют литийалюминийгидрид (25 мг, 0,65 ммоль) одной порцией. Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 3 ч. Смесь разбавляют диэтиловым эфиром (20 мл), и чтобы погасить реакцию, добавляют влажный сульфат натрия. Полученную смесь дополнительно перемешивают в течение 30 мин и затем фильтруют. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают, используя препаративную ТСХ (элюент: петролейный эфир/этилацетат 30:1), получая 33,8 мг бесцветного масла, которое далее очищают, используя флеш-хроматографию (элюент: петролейный эфир/этилацетат 50:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (25,6 мг, выход: 61%, 10:1 смесь эпимеров спирта). Rf=0,5 (20:1 петролейный эфир/этилацетат). Rf=0,5 в смеси (20:1) PE:EA.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) (основной изомер) 5 7,14 (с, 1H), 7,12 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,07 (д, J=7,6 Гц, 1H), 5,19 (т, J=3,4 Гц, 1H), 2,26 (с, 3H), 2,24 (с, 3H), 1,91-1,81 (м, 1H), 1,75-1,71 (м, 1H), 1,60 (д, J=4,8 Гц, 1H), 1,51-1,36 (м, 3H), 1,25-1,17 (м, 1H), 1,13-1,05 (м, 2H), 1,05 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,02 (с, 3H), 0,45 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 243 (М-Н2О+Н+). [a]D25,8=+32,9° (с=0,31, дихлорметан).
Пример 81. 2-Хлор-4-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил.
К раствору продукта примера 77 (75 мг, 0,26 ммоль) в дихлорметане (2 мл) при 0°C добавляют пе-риодинан Десса-Мартина (217,9 мг, 0,51 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. К полученной реакционной смеси добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (10 мл), и затем органическую часть экстрагируют дихлорметаном. Полученную органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/ этил-ацетат 60:1) до получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (60 мг, выход: 80%). Rf=0,5 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,04 (с, 1H), 7,91 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,79 (д, J=8,8 Гц, 1H), 2,93 (д, J=11,2 Гц, 1H), 2,12-2,05 (м, 1H), 1,81 (дд, J1=13,6 Гц, J2=3,2 Гц, 1H), 1,61-1,55 (м, 2H), 1,47-1,43 (м, 1H), 1,341,29 (м, 1H), 1,04-1,0 (м, 1H), 0,96 (с, 3H), 0,76 (с, 3H), 0,75 (д, J=6,8 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (EI +ve) m/z 289 (М+). [a]D23 0=+11,3° (с=0,42, дихлорметан).
Пример 82. 2-Хлор-4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К смеси литийалюминийгидрида (10,8 мг, 0,26 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (1 мл) в атмосфере аргона при -78°C добавляют продукт примера 81 (51,2 мг, 0,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 78°C в течение 3 ч. Реакцию гасят, добавляя смесь сульфата натрия и воды. Реакционную смесь фильтруют, и полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ, получая 27 мг бесцветного масла, которое затем очищают, используя препаративную ТСХ до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (17,2 мг, выход: 33%). Т.плавления 116-118°C. Rf=0,2 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,62 (с, 1H), 7,61 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,43 (д, J=8,0 Гц, 1H), 5,27 (с, 1H), 1,90-1,78 (м, 3H), 1,51-1,38 (м, 3H), 1,24-1,09 (м, 3H), 1,07 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,06 (с, 3H), 0,33 (с, 3H) м.д.
Масс-спектр (EI +ve) m/z 291 (М+). [a]D25'6=+4,50° (c=0,22, дихлорметан).
Пример 83. (R)-(4-Хлор-3-фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол.
К перемешиваемому раствору продукта примера 70 (100 мг, 0,35 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (5 мл) в атмосфере аргона при -78°C добавляют литийалюминийгидрид (106 мг, 2,80 ммоль) одной порцией. Затем смесь перемешивают при -78°C в течение 3 ч. Смесь нагревают до 0°C и дополнительно перемешивают в течение 1,5 ч, после чего реакционную смесь разбавляют дихлорметаном и, чтобы погасить реакцию, добавляют влажный сульфат натрия. Полученную смесь дополнительно перемешивают в течение 30 минут и затем фильтруют. Полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении, и остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 100:1), до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (42 мг, выход: 42%). Т.плавления 61,1-63,6°C. Rf=0,45 (20:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,32 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,25 (д, J=11,2 Гц, 1H), 7,13 (д, J=8,4 Гц, 1H), 5,22 (с, 1H), 1,88-1,75 (м, 3H), 1,47-1,44 (м, 2H), 1,37-1,34 (м, 1H), 1,25-1,04 (м, 9H), 0,39 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 267 (М-Н2О+Н+). [a]D25,4=+27,5° (с=0,48, дихлорметан).
Пример 84. (R)-2-(3-Фторфенил)-1-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)зтанол.
B 25-мл сухую трехгорлую круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой, капельной воронкой (25 мл) и обратным холодильником, в атмосфере аргона помещают стружки магния (157,5 мг, 6,48 ммоль). Через капельную воронку добавляют безводный тетрагидрофуран (10 мл), затем добавляют 1-(бромметил)-3-фторбензол (1,23 г, 6,48 ммоль). В колбу добавляют безводный тетрагидрофуран (3 мл) и порцию раствора 1-(бромметил)-3-фторбензола (5 мл) и затем нагревают до 50°C, при этой температуре начинается кипение растворителя. В колбу при перемешивании по каплям добавляют остальную часть раствора 1-(бромметил)-3-фторбензола. После завершения добавления продолжают кипячение с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждают до 0°C и по каплям через шприц добавляют раствор продукта примера 1b (250 мг, 1,62 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида (20 мл), и органическую часть экстрагируют этилацетатом (20 мл х3). Органическую фазу промывают солевым раствором (20 мл) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем, получая 160 мг бесцветного масла, которое далее очищают, используя препаративную ВЭЖХ для получения указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (70 мг, выход: 16%). Rf=0,3 (30:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,29-7,24 (м, 1H), 7,99 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,94-6,90 (м, 2H), 4,07 (квинт., J=5,2 Гц, 1H), 2,99 (дд, J=9,6 Гц, J=13,6 Гц, 1H), 2,71 (дд, J=5,2 Гц, J=13,2 Гц, 1H), 1,80-1,72 (м, 1H), 1,701,66 (м, 1H), 1,48-1,41 (м, 2H), 1,35-1,30 (м, 1H), 1,26 (д, J=4,0 Гц, 1H), 1,16-1,09 (м, 1H), 1,15 (д, J=6,4 Гц, 3H), 1,06-0,97 (м, 1H), 0,94 (д, J=11,2 Гц, 1H), 0,88 (с, 3H), 0,79 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 247 (М-Н2О+Н+). [a]D25=+5,49° (с=0,51, дихлорметан).
Пример 85. (R)-1 -(4-(Трифторметил)фенил)-1 -((Ж^)-2,2,6-триметилциклогексил)этанол.
К перемешиваемому раствору продукта примера 16 (50 мг, 0,17 ммоль) в безводном тетрагидрофу-ране (4 мл) в атмосфере аргона при -78°C добавляют метиллитий (1,6 М в диэтиловом эфире, 0,53 мл, 0,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°C в течение 1 ч. Чтобы погасить реакцию, добавляют насыщенный водный раствор аммонийхлорида (25 мл). Органическую часть экстрагируют этил-ацетатом (20 мл х 3), объединенные органические фазы промывают солевым раствором (50 мл), сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя хроматографическую колонку с силикагелем (элюент: петролейный эфир/этилацетат 50:1) до получения бесцветного масла, которое далее очищают, используя препаративную ТСХ (элюент: петролейный эфир/этилацетат 30:1), получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла (32,7 мг, выход: 61%). Rf=0,6 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,63 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,57 (д, J=8,4 Гц, 2H), 1,81 (д, J=7,6 Гц, 1H), 1,72 (с, 3H), 1,72-1,60 (м, 2H), 1,51-1,45 (м, 3H), 1,40-1,28 (м, 2H), 1,21 (с, 3H), 1,15 (с, 3H), 1,10-1,01 (м, 1H), 0,56 (д, J=6,8 Гц, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 297 (M-H2O+H+).
Пример 86. 2-Фтор-5-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил.
К раствору продукта примера 79 (46,4 мг, 0,167 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) при -78°C добавляют литийалюминийгидрид (63,2 мг, 1,67 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2,5 ч. Реакционную смесь фильтруют, и полученный фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают, используя препаративную ТСХ до получения 21 мг материала, который далее очищают, используя препаративную ВЭЖХ до получения указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества белого цвета (12 мг, выход: 26%). Т.плавления 134,2-136,1°C. Rf=0,3 (10:1 петролейный эфир/этилацетат).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,72-7,70 (м, 1H), 7,64-7,61 (м, 1H), 7,61 (т, J=8,8 Гц, 1H), 5,25 (с, 1H), 1,90-1,76 (м, 3H), 1,50-1,44 (м, 2H), 1,34 (дд, J=2,8 Гц, J=10,8 Гц, 1H), 1,25-1,10 (м, 3H), 1,06 (т, J=10,4 Гц, 3H), 1,03 (с, 3H), 0,32 (с, 3H) м.д. Масс-спектр (ESI +ve) m/z 258 (М-Н2О+Н+).
Биологические примеры
При осуществлении способов настоящего изобретения, естественно, следует понимать, что ссылки на конкретные буферы, среды, реагенты, клетки, условия культивирования и т.п. не следует рассматривать как ограничивающие, но следует рассматривать как указание на то, что они включают все родственные материалы, которые специалисты в данной области сочтут представляющими интерес и ценность в конкретном контексте приведенного обсуждения. Например, часто представляется возможным заменить одну буферную систему или культуральную среду, и при этом все еще достичь аналогичных, если не идентичных, результатов. Специалисты в данной области обладают достаточными знаниями таких систем и способов, чтобы иметь возможность, без ненужных экспериментов, осуществить такие замены, которые оптимально служили бы их целям при использовании раскрытых здесь способов и процедур.
Настоящее изобретение более подробно раскрывается в следующих неограничивающих примерах. Следует понимать, что указанные конкретные способы и примеры никоим образом не ограничивают изобретение раскрытыми здесь вариантами и что другие варианты и применения, без сомнения, могут предложить специалисты в данной области.
Реагенты
Моноклональное антитело антиродопсин 1D4 можно получить из университета Британской Колумбии.
Клеточные линии и условия культивирования
Стабильные клеточные линии, экспрессирующие опсиновый белок, были созданы с использованием систем Flp-ln T-Rex. Стабильные клетки выращивают в среде DMEM с высоким содержанием глюкозы, дополненной 10% (об./об.) фетальной телячьей сывороткой, раствором антибиотика/антимикотика, 5 мкг/мл бластицидина и гигромицина при 37°C в присутствии 5% СО2. Во всех экспериментах клеткам дают возможность достичь конфлюэнтности, и индуцируют продуцирование опсина, добавляя 1 мкг/мл тетрациклина после замены среды, и затем добавляют соединения. Планшеты инкубируют в течение 48 ч, после чего клетки собирают.
SDS-PAGE и вестерн-блоттинг
Белки разделяют на гелях SDS-PAGE, и осуществляют вестерн-блоттинг, как раскрыто в (Noorwez et al., J. Biol. Chem. 279, 16278-16284 (2004)). In vivo эффективность соединений настоящего изобретения при лечении макулярной дегенерации можно продемонстрировать в различных тестах, хорошо известных специалистам в данной области. Например, людей-пациентов отбирают на основании диагноза ма-кулярной дегенерации, таких, которым поставлен серьезный диагноз указанного состояния, или, если было показано, что у них в глазах происходит накопление токсичных продуктов цикла превращений родопсина, таких как A2E, липофусцин или друзы. Соединения настоящего изобретения, такие как соединения формулы I, вводят тестируемой группе, тогда как плацебо, такие как PBS или ДМСО, вводят контрольной группе, которая может быть более многочисленной или менее многочисленной, чем тестируемая группа. Тестируемое соединение вводят или на разовой основе, или на поэтапной основе (например, еженедельно или ежедневно), или в соответствии с какой-либо другой заранее определенной схемой.
Введение тестируемого соединения обычно осуществляют перорально или парентерально и в количестве, которое эффективно для замедления развития и/или рецидива макулярной дегенерации. Количество эффективной дозы обычно находится в интервале от около 1 до 5000 мг или в интервале от 10 до 2000 мг/кг. Введение можно осуществлять, используя многократные дозы в день.
Эффективность тестируемого соединения в замедлении развития макулярной дегенерации обычно определяют, измеряя увеличение остроты зрения (например, используя карты для изучения раннего лечения диабетической ретинопатии (Early Treatment Diabetic RP Study) (ETDRS) (Lighthouse, Long Island, N.Y.)). Другим способом для прослеживания и оценки эффективности является измерение/контроль ау-тофлуоресценции или абсорбционных спектров таких индикаторов, как N-ретинилиденфосфатидил-этаноламин, дигидро^-ретинилиден^-ретинилфосфатидилэтаноламин, ^ретинилиден^-ретинил-фосфатидилэтаноламин, дигидро^-ретинилиден^-ретинилэтаноламин и/или N-ретинилиденфос-фатидилэтаноламин в глазу пациента.
Аутофлуоресценцию контролируют, используя различные типы инструментов, например, конфокальный сканирующий лазерный офтальмоскоп.
Накопление липофусцина в пигментном эпителии сетчатки (RPE) представляет собой обычный патологический признак, наблюдающийся при различных дегенеративных заболеваниях сетчатой оболочки. Токсичный флуорофор на основе витамина А (A2E), присутствующий внутри гранул липофусцина, имеет отношение к гибели RPE и фоторецепторных клеток. Такие эксперименты можно использовать в моделях на животных, которые проявляют ускоренное накопление липофусцина, для оценки эффективности терапевтических подходов, основанных на снижении сывороточного витамина А (ретинола). Введение тестируемого соединения мышам с нулевой мутацией в гене болезни Старгардта (АВСА4) вызывает уменьшение содержания сывороточного ретинола/ретинол-связывающего белка и прекращение накопления A2E и аутофлуоресценции липофусцина в RPE.
Доступны тестовые животные для тестирования эффективности тестируемых соединений в отношении накопления токсичных пигментов, таких как липофусцин. Например, были получены мыши, ко- 44
торые демонстрировали повышенное продуцирование таких токсичных продуктов. Такие мыши были описаны в литературе (см., например, Widder et al., патентная публикация US 2006/0167088) и их ценность и применимость хорошо известны специалистам в данной области.
Демонстрацию эффективности соединений настоящего изобретения в плане защиты против свето-токсичности обычно осуществляют способами, хорошо известными специалистам в данной области (см., например, Sieving et al, PNAS, Vol. 98, pp 1835-40 (2001)).
Биологический пример 1. Очистка и регенерация родопсина.
P23H-клетки выращивают до конфлюэнтности в 10-сантиметровых планшетах в среде DMEM, с высоким содержанием глюкозы, бластицидина (5 г/мл) и гигромицина (100 мкг/мл). Клетки индуцируют тетрациклином (1 г/мл) и обрабатывают или ДМСО (носителем), или различными концентрациями тестируемого соединения (0,3 мкМ, 1 мкМ, 3 мкМ, 10 мкМ, 30 мкМ и 80 мкМ).
Через 24 ч среду удаляют, и в планшеты добавляют свежую среду с соединениями; р-ионон (20 мкМ) используют в экспериментах в качестве положительного контроля. Клетки собирают через 48 ч после первой обработки. С этого момента все процедуры осуществляют при тусклом красном свете (больше 660 нм). Клетки дважды промывают PBS, и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре в 1 мл PBS, содержащем 9-цис-ретинал (20 мкМ). После регенерации клетки промывают PBS и инкубируют в течение 1 ч при 4°C в PBS, содержащем 1% н-додецил-р^-мальтозида и ингибиторы про-теазы (Roche) для лизиса. Клеточный лизат центрифугируют в настольной ультрацентрифуге Beckman при 36000хg в течение 10 минут. Надосадочную жидкость удаляют, и количество белка оценивают во всех образцах (DC анализ белка, Biorad). Равные количества белка (5 г) помещают на приготовленные заранее шарики сефарозы 4B, активированные цианогенбромидом с 1D4 в течение 1 ч при 4°C. Кратко, шарики сефарозы 4В оказываются конъюгированными с 1D4 антителом, которое распознает С-конец опсина. Шарики трижды интенсивно промывают PBS и дважды натрийфосфатным буфером (10 мМ, pH 6,0), причем оба содержат 0,1% н-додецил-р^-мальтозид. Белок элюируют натрийфосфатным буфером, содержащим синтетический пептид из 9 аминокислот, соответствующий С-концу опсинового белка. Элюированный родопсин анализируют на спектрофотометре, сканирующем УФ-видимый интервал с 250 до 650 нм с инкрементами 1 нм.
В табл. 1 приведены результаты для р-ионона (сравнительное соединение 1) и тестируемых соединений, где поглощение на длине волны 480-500 нм выражают как кратность увеличения относительно ДМСО контроля. На фиг. 1 приведены результаты спектральных исследований с использованием сравнительного соединения 1 в соответствии с биологическим примером 1.
триметилциклогексил)метил)бензол;
(S) -(3, 4-дифторфенил) ( (1R,6S)-2,2, 6-триметилциклогексил)метанол;
(3,4-дифторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(S)-фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-фуран-2-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)-тиофен-3-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
тиофен-3-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-тиофен-3-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
2-хлор-1-метил-4-(((1R, 6S) -2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензол;
(S)-(4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол;
(R)-(4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол;
(S) -(3, 4, 5-трифторфенил) ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(3,4,5-трифторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R) -(3, 4, 5-трифторфенил) ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(R)-циклогексил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
циклогексил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
R) -(3,4-дифторфенил) ( (1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метанол;
(S)-фуран-3-ил( (1R, 6S) -2, 2, 6-триме тилцикло г e ксил)метанол;
фуран-3-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-фуран-3-ил((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)-(перфторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(перфторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
2-фтор-4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
4- ( (1R, 6S) -2, 2, 6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил;
(S)-((R)-2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанол;
(2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанон;
(R)-((R)-2,2-диметилциклогексил)(4-фторфенил)метанол;
(S)-(4-метокси-З-метилфенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанол;
(4-метокси-З-метилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)-2-метилбензонитрил;
2-метил-4-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил;
4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
2-фтор-4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
(S)- (З-фтор-4-
(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(З-фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)метанон;
(R)-(З-фтор-4-(трифторметокси)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
4-( (R)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)-2-метилбензонитрил;
(R)-(4-фторфенил)( (1R, 6S) -1,2,2,6-тетраметилциклогексил)метанол;
4-( (S)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил) метил)-2-(трифторметил)бензонитрил;
2-фтор-Ы'-гидрокси-4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензимидамид;
(S)-(3,4-дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)-(3,4-диметилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(S)-(4-хлор-З-фторфенил) ((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
4-( (R)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил) метил)-2-трифторметил)бензонитрил;
(3,4-дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(3,4-диметилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(4-хлор-З-фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанон;
(R)-(3,4-дихлорфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
2-фтор-5-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-
триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
(S)-(З-фтор-4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(R)-(З-фтор-4-(трифторметил)фенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
3-( (S) -гидрокси( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
2-хлор-4-((S)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
3-( (R)-гидрокси ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
2-фтор-5- ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил;
(R)-(3,4-диметилфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
2-хлор-4- ( (1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексанкарбонил)бензонитрил;
2-хлор-4-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил;
(R)-(4-хлор-З-фторфенил)((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метанол;
(R)-2-(3-фторфенил)-1-((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)этанол;
(R) -1-(4-(трифторметил)фенил)-1- ( (1R,6S)-2,2,б-триметилциклогексил)этанол; и
2-фтор-5-((R)-гидрокси((1R,6S)-2,2,6-триметилциклогексил)метил)бензонитрил,
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Способ ингибирования образования или накопления продуктов цикла превращений родопсина, включающий осуществление контактирования опсинового белка с соединением по п.1.
3. Способ по п.2, где указанным продуктом цикла превращений родопсина является токсический продукт цикла превращений родопсина.
4. Способ по п.2, где указанный продукт цикла превращений родопсина представляет собой липофусцин или N-ретинилиден-К-ретинилэтаноламин (A2E).
5. Способ лечения офтальмологических состояний у субъекта, подверженного такому риску, включающий введение соединения по п. 1 субъекту.
6. Способ по п.5, где офтальмологическое состояние связано с неправильной локализацией опсино-вого белка.
7. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние выбирают из группы, состоящей из макулярной дегенерации, пигментного ретинита (RP), ретинальной или макулярной дистрофии, болезни Старгардта, дистрофии Сорсби, аутосомно-доминантных друз, дистрофии Беста, мутаций периферина, связанных с макулярной дистрофией, макулярной дистрофии Северной Каролины, светотоксичности, потери нормального зрения, связанной с возрастом, потери нормального ночного зрения, связанной с возрастом.
8. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние представляет собой макулярную дегенерацию.
9. Способ по п.5, где указанное офтальмологическое состояние представляет собой болезнь Стар-гардта.
2.
10. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом макуляр-ную дегенерацию (ARMD).
11. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом влажную макулярную дегениерацию.
12. Способ по п.8, где макулярная дегенерация представляет собой связанную с возрастом сухую макулярную дегениерацию.
13. Способ по п.9, где болезнь Старгардта представляет собой доминантную форму болезни Стар-гардта.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
032666
032666
- 1 -
- 1 -
(19)
032666
032666
- 1 -
- 1 -
(19)
032666
032666
- 2 -
- 3 -
032666
032666
- 4 -
- 3 -
032666
032666
- 6 -
- 5 -
032666
032666
- 8 -
- 9 -
032666
032666
- 11 -
- 11 -
032666
032666
- 14 -
- 14 -
032666
032666
- 43 -
032666
032666
- 46 -
- 46 -
032666
032666
- 47 -
- 47 -
032666
032666
- 51 -
- 51 -
|
