|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль:  (I) где R 1 представляет собой группу  или группу  ,  обозначает точку присоединения; R 2 представляет собой C 1 -C 4 -алкил и n равняется 2 или 3. 2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R 1 представляет собой группу  ,  обозначает точку присоединения; R 2 представляет собой C 1 -C 4 -алкил и n равняется 2 или 3. 3. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R 1 представляет собой группу  ,  обозначает точку присоединения; R 2 представляет собой C 1 -C 4 -алкил и n равняется 2 или 3. 4. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R 1 представляет собой группу  ,  обозначает точку присоединения; R 2 представляет собой C 1 -C 4 -алкил и n равняется 2. 5. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, при этом соединение выбрано из 4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она, 1-(4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона, 4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-1,3-диметилпиперазин-2-она и 1-(4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона. 6. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, при этом соединение выбрано из (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она (называемого далее в данном документе соединением A), 1-((3S,5R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона, (R)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-1,3-диметилпиперазин-2-она и 1-((3R,5S)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона. 7. Соединение по п.6 или его фармацевтически приемлемая соль, представленные формулой (IA)  (IA). 8. Соединение по п.7, представленное формулой (IA). 9. Соединение по п.8 в кристаллической форме, которая имеет рентгенограмму XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками при 2-тета=20,9° и 16,7 ±0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuK?-излучения. 10. Сокристалл соединения формулы (IA) по п.7 и 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты в качестве молекулы коформера, где сокристалл имеет рентгенограмму XRPD по меньшей мере с двумя пиками приблизительно при 2-тета=19,4 и 12,5°, согласно измерениям с применением CuK?-излучения. 11. Способ получения сокристалла соединения формулы (IA) по п.7 и 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты, получаемого посредством стадий: i) смешивание раствора соединения формулы (IA) в подходящем растворителе с сокристаллом на основе 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты в подходящем растворителе при повышенной температуре; ii) добавление затравочного материала сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) к смеси, полученной на стадии (i); iii) охлаждение смеси, полученной на стадии (ii); iv) фильтрование смеси, полученной на стадии (iii); и v) высушивание твердого вещества, выделенного на стадии (iv), с получением твердого вещества. 12. Применение соединения по любому из пп.1-9 или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла по п.10 в предупреждении или лечении рака у человека. 13. Применение по п.12 в лечении рака яичников, острого миелолейкоза и недифференцированного лейкоза (AML), множественной миеломы (MM), диффузной В-крупноклеточной лимфомы (DLBCL), кастрационно-резистентного рака предстательной железы (CRPC), немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), мелкоклеточного рака легкого (SCLC), рака молочной железы, глиобластомы и нейробластомы у человека. 14. Способ предупреждения или лечения рака у человека, нуждающегося в таком лечении, который включает введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-9 или сокристалла по п.10. 15. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-9 или сокристалл по п.10 и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель, для применения в предупреждении или лечении рака у человека.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль: (I) где R 1 представляет собой группу или группу , обозначает точку присоединения; R 2 представляет собой C 1 -C 4 -алкил и n равняется 2 или 3. 2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R 1 представляет собой группу , обозначает точку присоединения; R 2 представляет собой C 1 -C 4 -алкил и n равняется 2 или 3. 3. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R 1 представляет собой группу , обозначает точку присоединения; R 2 представляет собой C 1 -C 4 -алкил и n равняется 2 или 3. 4. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R 1 представляет собой группу , обозначает точку присоединения; R 2 представляет собой C 1 -C 4 -алкил и n равняется 2. 5. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, при этом соединение выбрано из 4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она, 1-(4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона, 4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-1,3-диметилпиперазин-2-она и 1-(4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона. 6. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, при этом соединение выбрано из (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она (называемого далее в данном документе соединением A), 1-((3S,5R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона, (R)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-1,3-диметилпиперазин-2-она и 1-((3R,5S)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона. 7. Соединение по п.6 или его фармацевтически приемлемая соль, представленные формулой (IA) (IA). 8. Соединение по п.7, представленное формулой (IA). 9. Соединение по п.8 в кристаллической форме, которая имеет рентгенограмму XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками при 2-тета=20,9° и 16,7 ±0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuK?-излучения. 10. Сокристалл соединения формулы (IA) по п.7 и 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты в качестве молекулы коформера, где сокристалл имеет рентгенограмму XRPD по меньшей мере с двумя пиками приблизительно при 2-тета=19,4 и 12,5°, согласно измерениям с применением CuK?-излучения. 11. Способ получения сокристалла соединения формулы (IA) по п.7 и 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты, получаемого посредством стадий: i) смешивание раствора соединения формулы (IA) в подходящем растворителе с сокристаллом на основе 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты в подходящем растворителе при повышенной температуре; ii) добавление затравочного материала сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) к смеси, полученной на стадии (i); iii) охлаждение смеси, полученной на стадии (ii); iv) фильтрование смеси, полученной на стадии (iii); и v) высушивание твердого вещества, выделенного на стадии (iv), с получением твердого вещества. 12. Применение соединения по любому из пп.1-9 или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла по п.10 в предупреждении или лечении рака у человека. 13. Применение по п.12 в лечении рака яичников, острого миелолейкоза и недифференцированного лейкоза (AML), множественной миеломы (MM), диффузной В-крупноклеточной лимфомы (DLBCL), кастрационно-резистентного рака предстательной железы (CRPC), немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), мелкоклеточного рака легкого (SCLC), рака молочной железы, глиобластомы и нейробластомы у человека. 14. Способ предупреждения или лечения рака у человека, нуждающегося в таком лечении, который включает введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-9 или сокристалла по п.10. 15. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-9 или сокристалл по п.10 и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель, для применения в предупреждении или лечении рака у человека.
Евразийское 032654 (13) B9
патентное
ведомство
(12) ИСПРАВЛЕННОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(15) Информация об исправлении
Версия исправления: 1 (W1 B1) исправления в формуле: п.9
(48) Дата публикации исправления
2019.07.31, Бюллетень №7'2019
(45) Дата публикации и выдачи патента 2019.06.28
(21) Номер заявки
201790179
(22) Дата подачи заявки 2015.07.24
(51) Int. Cl. C07D 487/04 (2006.01) A61K31/5025 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01)
(31) 62/029,676
(32) 2014.07.28
(33) US
(43) 2017.07.31
(86) PCT/GB2015/052143
(87) WO 2016/016618 2016.02.04
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
АСТРАЗЕНЕКА АБ (SE)
(72) Изобретатель:
Брэдбери Роберт Хью, Рабоу Алфред Артур, Уэринг Майкл Джеймс, МакКабе Джеймс Фрэнсис, Глоссоп Стивен Кристофер, Махмуд Аршед, Коттер Зои Энн (GB)
(74) Представитель:
Поликарпов А.В., Соколова М.В., Путинцев А.И., Черкас Д.А., Игнатьев А.В. (RU)
(56) WO-A1-2010131022 WO-A1-2010092371
BRADBURY ROBERT H. ET AL.: "Discovery of AZD3514, a smal 1-molecule androgen receptor downregulator for treatment of advanced prostate cancer", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, PERGAMON, AMSTERDAM, NL, vol. 23, no. 7, 21 February 2013 (2013-02-21), pages 1945-1948, XP028997356, ISSN: 0960-894X, DOI: 10.1016/J.BMCL.2013.02.056, the whole document
JADAV PRADI P. ET AL.: "Design, synthesis and biological evaluation of novel aminomethyl-piperidones
based DPP-IV inhibitors", BIOORGANIC & MEDICINAL
CHEMISTRY LETTERS, vol. 24, no. 8, 12 March 2014 (2014-03-12), pages 1918-1922, XP028841757, ISSN: 0960-894X, DOI: 10.1016/J.BMCL.2014.03.009, the whole document
(57) Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I)
или их фармацевтически приемлемым солям, где R1, R2 и n имеют какое-либо из значений, определенных выше в настоящем описании; способам их получения, фармацевтическим композициям, содержащим их, и их применению в качестве антипролиферативных средств и/или средств, обеспечивающих гибель клеток.
Примечание: библиография отражает состояние при переиздании
Настоящее изобретение относится к конкретным замещенным триазолопиридазиновым (TPDZ) соединениям или их фармацевтически приемлемым солям, которые обладают противораковой активностью и, следовательно, являются пригодными в способах лечения организма человека или животного. Настоящее изобретение также относится к способу получения указанных TPDZ-соединений, фармацевтических композиций, содержащих указанные соединения или их фармацевтически приемлемые соли, и к способам лечения форм рака у теплокровных животных, таких как человек.
Настоящее изобретение также относится к TPDZ-соединениям, которые являются ингибиторами одного или нескольких бромодоменсодержащих белков, в частности семейства BET бромодоменсодер-жащих белков.
Бромодоменсодержащие белки вовлечены в разнообразные заболевания и представляют существенный интерес в качестве терапевтических мишеней. Бромодомен представляет собой высоконсерва-тивную структурную складку, которая распознает ацетилированные остатки лизина, и встречается в больших мультидоменных белках, ассоциированных с контролем транскрипции путем реконструкции хроматина, метил- или ацетилтрансферазной активностью или геликазами. Семейство BET бромодоменсодержащих белков состоит из четырех членов (BRD2, BRD3, BRD4 и BRDt), все из которых демонстрируют общую структуру домена N-концевых тандемных бромодоменов, способных к связыванию с аце-тилированными остатками лизина в гистонах и факторах транскрипции. BRD4 играет важную роль в регуляции транскрипции генов, о чем свидетельствует его ассоциация с позитивным транскрипционным фактором элонгации b (pTEFb) (Jang et al., Mol. Cell, 2005, 19, 523-534), общим транскрипционным кофактором Mediator (Chiang, F1000 Biol. Rep, 2009, 1, 98), ген-специфическим провоспалительным фактором NFkB (Huang et al., Mol. Cell Biol. 2009, 29, 1375-1387) и кодируемыми вирусами транскрипционными регуляторами (You et al., Cell, 2004, 117, 349-360). Было обнаружено, что BRD4 имеет асимметричную нагрузку на сверхбольших энхансерах, которые ассоциированы с небольшим подмножеством генов, которые зачастую составляют онкогенные и линиеспецифические транскрипционные программы в конкретном клеточном окружении (Loven et al., Cell, 2013, 153, 320-334). Подобным образом BRD2 и BRD3 описаны в качестве регуляторов транскрипции, связывающихся с гиперацетилированными участками хроматина генов, стимулирующих рост (LeRoy et al., Mol. Cell. 2008, 30, 51-60). Также сообщалось, что BRD4 или BRD3 может сливаться с NUT (ядерным белком в семеннике) с образованием новых онкогенов, BRD4-NUT или BRD3-NUT, при чрезвычайно злокачественной форме эпителиальной неоплазии (French et al., Cancer Research, 2003, 63, 304-307 и French et al. Journal Clinical Oncology, 2004, 22, 41354139). Данные показывают, что белки слияния BRD-NUT способствуют канцерогенезу (French et al., 2008, Oncogene, 27, 2237-2242). Также было обнаружено, что количество гена BRD4 изменяется при серозном раке яичников и других формах рака в ряде данных под названием "Атлас ракового генома" (TCGA). Сообщалось, что все члены семейства BET обладают некоторыми аспектами контроля функций или выполнения функций клеточного цикла, и было показано, что они остаются в комплексе с хромосомами в течение деления клеток, что указывает на функцию в сохранении эпигенетической памяти. Неудивительно, что члены семейства BET недавно были признаны как важные для поддержания многих видов опухолей, например острого миелолейкоза и недифференцированного лейкоза (AML), множественной миеломы (ММ), лимфомы, глиобластомы и нейробластомы. Ингибирование BRD4 эффективно подавляет Мус, ER, BC12 и другие онкогены, которые зачастую изменяются при раке. Как полагают, модуляция данных ключевых генов способствует возникновению противоопухолевого фенотипа ингиби-рования BET.
Кроме того, было показано, что ингибиторы BET обладают противовоспалительными свойствами (Nicodeme et al. Nature, 2010, 468, 1119-1123) и реактивируют транскрипцию латентного HIV в моделях клеточных линий в отношении латентности (Banerjee et al., J. Leukoc Biol, 2012, 92, 1147-1154).
В последнее время несколько соединений были описаны в качестве ингибиторов бромодомена, например, производные бензодиазепинов, такие как раскрытые в WO 2011/054553. Тем не менее, остается потребность в разработке новых и эффективных ингибиторов бромодомена, которые можно применять для лечения заболеваний и симптомов, в которые вовлечены бромодоменсодержащие белки.
Было обнаружено, что соединения по настоящему изобретению обладают активностью в качестве ингибиторов бромодоменсодержащих белков, таких как семейство BET бромодоменов, например BRD4,
BRD2, BRD3 и BRDt, и их тандемные домены, например BRD4(1) и BRD4(2).
В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль:
где R1 представляет собой группу ° или группу
обозначает точку присоединения;
R2 представляет собой Q-Q-алкил и n равняется 2 или 3.
В другом аспекте настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I), определенное
выше.
В дополнительном аспекте настоящего изобретения R2 представляет собой метил. В еще одном аспекте настоящего изобретения
N'~
R1 представляет собой группу ° R2 представляет собой Q-Q-алкил и n равняется 2.
В одном аспекте настоящего изобретения соединение формулы (I) представляет собой соединение, выбранное из
4-(2-(4-(1 -(3 -метокси-[ 1,2,4]триазоло[4,3 -Ь]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3 -диметилпиперазин-2-она,
1 -(4-(2-(4-(1 -(3 -метокси-[ 1,2,4]триазоло[4,3 -Ь]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона,
4-(3 -(4-(1-(3 -метокси-[ 1,2,4]триазоло[4,3 -Ь]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-1,3-диметилпиперазин-2-она и
1 -(4-(3 -(4-(1 -(3 -метокси-[ 1,2,4]триазоло[4,3 -Ь]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-
ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона. В другом аспекте настоящего изобретения соединение формулы (I) представляет собой соединение формулы (IA)
(ID).
Дополнительный аспект предусматривает какой-либо из аспектов, определенных в данном документе (например, аспект п.1 формулы изобретения), при условии, что один или несколько конкретных примеров (например, один, два или три конкретных примера), выбранные из группы, состоящей из примеров 1, 2, 3 и 4, по отдельности исключены.
Некоторые из соединений формулы (I) могут быть кристаллическими и могут иметь более одной кристаллической формы. Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает любую кристаллическую или аморфную форму или их смеси, при этом форма обладает свойствами, пригодными для ин-гибиторной активности в отношении BET и, например, ингибиторной активности в отношении BRD2, BRD3, BRD4 и BRDt. Хорошо известно как определить эффективность кристаллической или аморфной формы с помощью стандартных испытаний, описанных далее в данном документе.
В целом известно, что кристаллические материалы можно анализировать с применением традиционных методик, таких как, например, анализ порошковой рентгеновской дифракции (далее в данном документе XRPD) и дифференциальная сканирующая калориметрия (далее в данном документе DSC).
В качестве примера, было идентифицировано, что соединение примера 1 характеризуется кристалличностью и одною кристаллической формой, формой А.
Следовательно, дополнительный аспект настоящего изобретения представляет собой форму А соединения А (пример 1).
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком приблизительно при 2-тета=20,9°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком приблизительно при 2-тета=16,7°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками приблизительно при 2-тета=20,9° и 16,7°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется рентгенограммой XRPD с характерными пиками приблизительно при 2-тета=20,9, 16,7, 20,2, 21,2, 27,4, 18,0, 16,8, 23,6, 15,1 и 15,5°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется рентгенограммой XRPD, практически такой же, что и XRPD, показанная на фиг. А, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета=20,9±0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета=16,7±0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками при 20,9 и 16,7±0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, соединения А, которая характеризуется порошковой рентгенограммой с характерными пиками при 20,9, 16,7, 20,2, 21,2, 27,4, 18,0, 16,8, 23,6, 15,1 и 15,5±0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
Когда указано, что настоящее изобретение относится к кристаллической форме соединения А, форме А, степень кристалличности преимущественно составляет более приблизительно 60%, более преимущественно более приблизительно 80%, предпочтительно более приблизительно 90% и более предпочтительно более приблизительно 95%. В наиболее предпочтительном случае степень кристалличности со
ставляет более приблизительно 98%.
Некоторые из соединений формулы (I) могут образовывать сокристаллы с определенными молекулами коформера. Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает любые такие сокристаллы, которые обладают свойствами, пригодными для ингибиторной активности в отношении BET и, например, ингибиторной активности в отношении BRD2, BRD3, BRD4 и BRDt. Хорошо известно как определять эффективность таких сокристаллов с помощью стандартных испытаний, описанных далее в данном документе.
Следовательно, в настоящем изобретении предусматривают сокристалл соединения формулы (I) и молекулу коформера.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают сокристалл соединения А и молекулу коформера, 6-гидрокси-2-нафтойную кислоту.
Во избежание неоднозначности толкования термин "сокристалл" относится к многокомпонентной системе, в которой присутствует молекула-хозяин или молекулы-хозяева API (активного фармацевтического ингредиента) и молекула-гость или молекулы-гости (или коформер) в той же кристаллической решетке. В сокристалле как молекула API, так и молекула-гость (или коформер) присутствуют в виде твердых веществ при комнатной температуре по отдельности в их чистой форме (с целью обособления со-кристалла от сольватов или гидратов). В сокристалле молекулы API и коформера взаимодействуют посредством образования водородных связей и, возможно, других нековалентных взаимодействий.
При получении сокристаллов соединения А с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой, где соединение А представляет собой API, может быть достигнут диапазон молярных соотношений/стехиометрических составов API:коформер, например, совокупное молярное соотношение API: коформер составляет 1:1, тем не менее, оно может слегка варьироваться, например, в зависимости от измерений характеристик. Следовательно, в настоящем изобретении предусматривают сокристалл соединения А и молекулы коформера, 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты, при молярном соотношении соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, находящемся в диапазоне от 1:0,8 до 1:1,2. В одном аспекте настоящего изобретения предусматривают сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1).
В дополнительном аспекте настоящего изобретения сокристалл соединения А с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой находится в кристаллической форме, форме А.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1).
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком приблизительно при 2-тета=19,4°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком приблизительно при 2-тета=12,5°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками приблизительно при 2-тета=19,4° и 12,5°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD с характерными пиками приблизительно при 2-тета=19,4, 12,5, 12,8, 18,1, 24,2, 23,4, 14,0, 18,6, 17,0 и 17,9°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD, практически такой же, что и рентгенограмма XRPD, показанная на фиг. I, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком при 19,4+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD, по меньшей мере с одним характерным пиком при 12,5+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками при 2-тета=19,4 и 12,5°, где указанные
значения могут составлять +0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму А, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD с характерными пиками при 2-тета=19,4, 12,5, 12,8, 18,1, 24,2, 23,4, 14,0, 18,6, 17,0 и 17,9°, где указанные значения могут составлять +0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В дополнительном аспекте настоящего изобретения сокристалл соединения А с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой находится в кристаллической форме, форме В. В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1).
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком приблизительно при 2-тета=15,2°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком приблизительно при 2-тета=6,1°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками приблизительно при 2-тета=15,2 и 6,1°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD с характерными пиками приблизительно при 2-тета=15,2, 6,1, 16,8, 12,2, 26,1, 28,4, 18,3, 3,1 и 20,7°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD, практически такой же, что и порошковая рентгенограмма, показанная на фиг. K, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета=15,2+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета=6,1+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками при 15,2 и 6,1+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD с характерными пиками при 2-тета=15,2, 6,1, 16,8, 12,2, 26,1, 28,4, 18,3, 3,1 и 20,7°, где указанные значения могут составлять +0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В дополнительном аспекте настоящего изобретения сокристалл соединения А с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой находится в кристаллической форме, форме С.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму С, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1).
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму С, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком приблизительно при 2-тета=8,2°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком приблизительно при 2-тета=24,8°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму С, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгено
граммой XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками приблизительно при 2-тета=8,2 и 24,8°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму В, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD с характерными пиками приблизительно при 2-тета=8,2, 24,8, 18,9, 29,0, 14,8, 15,5 и 16,3°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму С, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD, практически такой же, что и порошковая рентгенограмма, показанная на фиг. M.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму С, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета=8,2+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму С, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с одним характерным пиком при 2-тета=24,8+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму С, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками при 8,2 и 24,8+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают кристаллическую форму, форму С, сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), которая характеризуется рентгенограммой XRPD с характерными пиками при 2-тета=8,2, 24,8, 18,9, 29,0, 14,8, 15,5 и 16,3°, где указанные значения могут составлять +0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
Когда указано, что настоящее изобретение относится к кристаллической форме сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1), степень кристалличности преимущественно составляет более приблизительно 60%, более преимущественно более приблизительно 80%, предпочтительно более приблизительно 90% и более предпочтительно более приблизительно 95%. В наиболее предпочтительном случае степень кристалличности составляет более приблизительно 98%.
Следует понимать, что значения 2-тета порошковой рентгенограммы могут слегка варьировать от одного аппарата к другому или от одного образца к другому, и, таким образом, приведенные значения не должны истолковываться как абсолютные.
Известно, что может быть получена порошковая рентгенограмма, которая характеризуется одной или несколькими погрешностями измерения в зависимости от условий измерения (таких как применяемое оборудование или аппарат). В частности, в целом известно, что значения интенсивности на порошковой рентгенограмме могут колебаться в зависимости от условий измерения. Следовательно, необходимо понимать, что соединение А, форма А, по настоящему изобретению не ограничивается кристаллами, которые обеспечивают порошковые рентгенограммы, идентичные порошковой рентгенограмме, показанной на фиг. А, и любые кристаллы, обеспечивающие порошковые рентгенограммы, практически такие же, что и порошковая рентгенограмма, показанная на фиг. А, попадают в объем настоящего изобретения. Подобным образом следует понимать, что форма А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) по настоящему изобретению не ограничивается кристаллами, которые обеспечивают порошковые рентгенограммы, идентичные порошковой рентгенограмме, показанной на фиг. С или I, и любые кристаллы, обеспечивающие порошковые рентгенограммы, практически такие же, что и порошковые рентгенограммы, показанные на фиг. C или I, попадают в объем настоящего изобретения. Подобным образом следует понимать, что формы В и С сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) по настоящему изобретению не ограничиваются кристаллами, которые обеспечивают порошковые рентгенограммы, идентичные порошковой рентгенограмме, показанной соответственно на фиг. K и M, и любые кристаллы, обеспечивающие порошковые рентгенограммы, практически такие же, что и порошковые рентгенограммы, показанные на фиг. K и M, попадают в объем настоящего изобретения. Специалист в области порошковой рентгеновской дифракции способен оценивать существенную идентичность порошковых рентгенограмм.
Специалистам в области порошковой рентгеновской дифракции будет понятно, что на относительную интенсивность пиков могут влиять, например, зерна размером более 30 микрон и неунитарными соотношениями сторон, которые могут влиять на анализ образцов. Специалисту в данной области также будет понятно, что на положение отражений могут влиять точная высота, на которой находится образец в дифрактометре, и калибровка нуля дифрактометра. Плоскостность поверхности образца также может оказывать незначительный эффект. Следовательно, представленные данные дифрактограммы не следует принимать как абсолютные значения. (Jenkins, R & Snyder, R.L. "Introduction to X-Ray Powder Diffracto-metry" John Wiley & Sons 1996; Bunn, C.W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London;
Klug, H. P. & Alexander, L. E. (1974), X-Ray Diffraction Procedures).
Как правило, погрешность измерения угла дифракции на рентгеновской порошковой дифракто-грамме составляет примерно +0,2° 2-тета, и такая степень погрешности измерения должна быть принята во внимание при рассмотрении порошковой рентгенограммы на фиг. A, C, I, K и M и при чтении табл. А-Е (см. пример 1). Кроме того, следует понимать, что значения интенсивности могут колебаться в зависимости от экспериментальных условий и способа получения образца (предпочтительной ориентации).
Соединения формулы (I) включают один или несколько хиральных центров. В тех случаях, когда структура или химическое название в настоящем описании не указывает на хиральность, предполагается, что структура или название охватывает какой-либо отдельный стереоизомер (т.е. какой-либо отдельный хиральный изомер), соответствующий такой структуре или названию, а также какую-либо смесь стерео-изомеров (например, рацемат). Из уровня техники хорошо известно как можно получать такие оптически активные формы. Например, отдельный стереоизомер можно получать посредством выделения его из смесей изомеров (например, рацемата) с применением, например, хирального хроматографического разделения. В других вариантах осуществления отдельный стереоизомер получают путем прямого синтеза, например, из хирального исходного материала.
Конкретный энантиомер или диастереоизомер соединения, описанного в данном документе, может быть более активным, чем другие энантиомеры или диастереоизомеры того же соединения.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, которое представляет собой отдельный энан-тиомер, находящийся в энантиомерном избытке (% ее), составляющем > 95, > 98 или > 99%. Преимущественно отдельный энантиомер присутствует в энантиомерном избытке, составляющем > 99%.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, которое представляет собой отдельный энан-тиомер, находящийся в энантиомерном избытке (% ее) в диапазоне 95-100%.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают фармацевтическую композицию, которая содержит соединение формулы (I), которое представляет собой отдельный энантиомер, находящийся в энантиомерном избытке (% ее), составляющем > 95, > 98 или > 99%, или его фармацевтически приемлемую соль в сочетании с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Преимущественно отдельный энантиомер присутствует в энантиомерном избытке, составляющем > 99%.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают фармацевтическую композицию, которая содержит соединение формулы (I), которое представляет собой отдельный энантиомер, находящийся в энантиомерном избытке (% ее) в диапазоне 95-100%, или его фармацевтически приемлемую соль в сочетании с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Подразумевается, что настоящее изобретение включает все изотопы атомов, присутствующих в соединениях по настоящему изобретению. Следует понимать, что изотопы включают такие атомы, которые имеют одинаковое атомное число, но отличающееся массовое число. Например, изотопы водорода включают тритий и дейтерий, а изотопы углерода включают 13С и 14С.
Термин "фармацевтически приемлемый" применяется для указания того, что объект (например, соль, лекарственная форма, разбавитель или носитель) подходит для применения пациентами. Перечень примеров фармацевтически приемлемых солей можно найти в Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, P. H. Stahl and С G. Wermuth, editors, Weinheim/Zurich:Wiley-VCH/VHCA, 2002. Подходящей фармацевтически приемлемой солью соединения формулы (I) является, например, соль присоединения кислоты. Соль присоединения кислоты соединения формулы (I) может быть образована посредством приведения соединения в контакт с подходящей неорганической или органической кислотой в условиях, известных специалисту. Например, соль присоединения кислоты может быть образована с применением неорганической кислоты, выбранной из группы, состоящей из хлористоводородной кислоты, бромистоводородной кислоты, серной кислоты и фосфорной кислоты. Соль присоединения кислоты также может быть образована с применением органической кислоты, выбранной из группы, состоящей из трифторуксусной кислоты, лимонной кислоты, малеиновой кислоты, щавелевой кислоты, уксусной кислоты, муравьиной кислоты, бензойной кислоты, фумаровой кислоты, янтарной кислоты, винной кислоты, молочной кислоты, пировиноградной кислоты, метансульфоновой кислоты, бензол-сульфоновой кислоты и пара-толуолсульфоновой кислоты.
Следует понимать, что соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут существовать в сольватированной и несольватированной формах. Например, сольватированная форма может представлять собой гидратированную форму. Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает все такие сольватированные и несольватированные формы.
Соединения формулы (I) можно вводить в форме пролекарства, которое представляет собой соединение, которое разрушается в организме человека или животного с высвобождением соединения по настоящему изобретению. Такие фармацевтически приемлемые пролекарства соединений формулы (I) также составляют аспект настоящего изобретения. Различные формы пролекарств известны из уровня
техники. Например, см.:
a) Design of Pro-drugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985);
b) A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Pro-drugs", by H. Bundgaard p. 113-191 (1991);
c) Н. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);
d) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988) и
e) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984).
В другом аспекте настоящего изобретения предусматривают способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Подходящий способ проиллюстрирован следующим иллюстративным способом, при котором, если не указано иное, R1, R2 и n имеют значения, определенные выше в данном документе. Необходимые исходные материалы можно получать с помощью стандартных процедур органической химии. Получение таких исходных материалов описано совместно со следующими вариантами иллюстративного способа и в пределах прилагаемых примеров. В качестве альтернативы, необходимые исходные материалы могут быть получены с помощью процедур, аналогичных проиллюстрированным процедурам, и являются известными рядовому специалисту в области органической
химии.
Соединения формулы (I) преимущественно получают с помощью реакции сочетания, например, реакции соединения формулы (II) с соединением формулы (IIIa) или формулы (IIIb) в присутствии триал-килфосфина, такого как триалкил трибутилфосфин, и диазенового реагента, такого как (Е)-диазен-1,2-диил-бис-(пиперидин-1-илметанон), в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, и при подходящей температуре, такой как 5°С.
Соединения формулы (II) можно получать, например, с помощью реакции соединения формулы (IV) с 4-(пиперидин-4-ил)фенолом в присутствии основания, такого как ^^диизопропилэтиламин, в подходящем растворителе, таком как этанол, и при подходящей температуре, такой как 55°С.
Соединения формулы (IV) можно получать, например, с помощью реакции 3-хлор-6-
гидразинилпиридазина с тетраметоксиалканом, таким как тетраметоксиметан, при подходящей темпера-
туре, такой как 90°С.
Соединения формулы (IIIa) можно получать посредством осуществления реакции гидрохлорида 1,3-диметилпиперазин-2-она с 2-бромэтанолом в присутствии основания, такого как карбонат калия, в растворителе, таком как 2-метилтетрагидрофуран, при подходящей температуре, такой как 100°С.
Соединения формулы (IIIb) можно получать посредством осуществления реакции 1-(3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона (соединения V) с 2-бромпропан-1-олом в присутствии основания, такого как карбонат калия, в растворителе, таком как 2-метилтетрагидрофуран, при подходящей температуре, такой как 80°С.
(V)
1-(3,5-Диметилпиперазин-1-ил)этанон можно получать посредством осуществления реакции N-ацетил^-(2-(трифторметил)фенил)ацетамида с 2,6-диметилпиперазином в растворителе, таком как этанол, при подходящей температуре, такой как температура окружающей среды.
№ацетил^-(2-(трифторметил)фенил)ацетамид можно получать посредством осуществления реакции ацетилхлорида с 2-(трифторметил)анилином и пиридином в подходящем растворителе, таком как толуол, при подходящей температуре, такой как 50°С.
4-(Пиперидин-4-ил)фенол можно получать, например, в соответствии со следующей схемой реакций (схема).
Схема
Согласно схеме можно применять следующие условия реакций:
стадия (а): основание, такое как бис-(триметилсилил)амид лития, и сульфонилирующее средство, такое как 1,1,1-трифтор-N-фенил-N-(трифторметилсульфонил)метансульфонамид, в присутствии растворителя, такого как THF, при подходящей температуре, такой как от -78 до 0°С;
стадия (b): 4-гидроксифенилбороновая кислота в присутствии катализатора на основе палладия II, такого как 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцендихлорпалладий(И), основания, такого как карбонат натрия, и растворителя, такого как смесь диоксан-вода, при подходящей температуре, такой как 80°С, и
стадия (с): водород в присутствии катализатора гидрирования, такого как 5% палладий на угле, в растворителе, таком как метанол.
Соединения формулы (I) также можно получать, например, с помощью реакции соединения формулы (VIa) или соединения формулы (VIb) с соединением формулы (IV), как описано выше, в присутствии основания, такого как триэтиламин, в подходящем растворителе, таком как диметилформамид, и при подходящей температуре, такой как 56°С.
(VIb)
Соединения формулы (VIa) можно получать посредством осуществления реакции соединений формулы (VIIa) с кислотой, такой как хлороводород, в присутствии подходящего растворителя, такого как диоксан, и при подходящей температуре, такой как 20°С.
(Vila)
Соединения формулы (VIIa) можно получать посредством осуществления реакции соединений формулы (VIIIa) с 1,3-диметилпиперазин-2-оном в присутствии основания, такого как N,N-диизопропилэтиламин, в присутствии катализатора, такого как иодид калия, и растворителя, такого как диметилацетамид, и при подходящей температуре, такой как 120°С.
Соединения формулы (VIIa) можно получать посредством осуществления реакции трет-бутил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилата с 1-бром-3-хлоралканом и в присутствии основания, такого как карбонат калия, и растворителя, такого как дихлорметан, и при подходящей температуре, такой как 80°С.
трет-Бутил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилат можно получать посредством осуществления реакции 4-(пиперидин-4-ил)фенола (полученного как было описано выше в данном документе) с ди-трет-бутилдикарбонатом в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, и при подходящей температуре, такой как 0°С.
Соединения формулы (VIb) можно получать посредством осуществления реакции соединений формулы (VIIb) в присутствии подходящего растворителя, такого как метанол, и подходящего катализатора, такого как 10% палладий на угле, в атмосфере водорода.
(VIIb)
Соединения формулы (VIIb) можно получать посредством осуществления реакции соединений формулы (VIIIb) с 1-(3,5-диметилпиперазин-1-ил)этаноном, полученным, как описано выше, в присутствии подходящего основания, такого как ^^диизопропилэтиламин, в присутствии катализатора, такого как иодид калия, и растворителя, такого как диметилацетамид, и при подходящей температуре, такой как 120°С.
(VIIIb)
Соединения формулы (VIIIb) можно получать посредством осуществления реакции бензил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилата с 1-бром-3-хлоралканом и в присутствии основания, такого как карбонат калия, и растворителя, такого как дихлорметан, и при подходящей температуре, такой как 80°С.
Бензил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилат можно получать посредством осуществления реакции 4-(пиперидин-4-ил)фенола (полученного как было описано выше в данном документе) с бензил-хлорформиатом и DIPEA в подходящем растворителе, таком как дихлорметан, и при подходящей температуре.
Как указано выше, один аспект настоящего изобретения представляет собой сокристалл соединения А с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой.
Сокристалл можно получать посредством смешивания соединения А в подходящем растворителе с
6-гидрокси-2-нафтойной кислотой в подходящем растворителе. Таким образом, в соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают способ получения сокристалла соединения А с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой, причем способ включает стадию смешивания раствора соединения А, которое находится в подходящем растворителе, с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой, которая находится в подходящем растворителе. Подходящие растворители будут включать растворители, которые растворяют оба компонента и не образуют сольваты либо с соединением А, либо с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой. В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, получаемый с помощью стадий:
i) смешивание раствора соединения А в подходящем растворителе с 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой в подходящем растворителе и
ii) высушивание полученной на стадии (i) смеси с получением твердого вещества.
В одном аспекте настоящего изобретения подходящим растворителем является метанол.
Было обнаружено, что сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) обладает рядом преимущественных свойств по сравнению с формой свободного основания соединения А. В частности, было обнаружено, что он значительно менее гигроскопичен, чем свободное основание соединения А. Также было обнаружено, что сокристалл является более устойчивым, чем свободное основание соединения А при подвергании диапазону температур и условий влажности.
Биологические анализы
Следующие анализы применяли для измерения эффектов соединений по настоящему изобретению.
Анализ BROMOscan(tm) (от Discoverx)
Способность соединений связываться с содержащим бромодомен белком испытывали с помощью Discoverx, применяя сайт-направленный анализ конкурентного связывания с лигандом их собственной разработки. Поставляемые соединения делали анонимными.
Анализ BROMOscan основан на принципе, что испытуемые соединения, которые связывают содержащий бромодомен белок, предотвращают его связывание с иммобилизованным лигандом, снижая, таким образом, количество белка, захваченного на твердой подложке. Наоборот, испытуемые молекулы, которые не связывают бромодомен, не влияют на количество белка, захваченного на твердой подложке. "Пики" скрининга идентифицируют посредством измерения количества бромодомена, захваченного в испытании, по сравнению с контрольными образцами путем применения количественного, точного и сверхчувствительного способа qPCR, с помощью которого выявляют связанную ДНК-метку. Аналогичным образом рассчитывают константы диссоциации (Kd) для взаимодействий испытуемое соединение-бромодомен посредством измерения количества содержащего бромодомен белка, захваченного на твердой подложке, в зависимости от концентрации испытуемого соединения.
Анализ Alpha-screen
Способность соединений связываться с содержащим бромодом белком испытывали с помощью анализа AlphaScreen(r). Анализ основан на взаимодействии между меченным гистидином, содержащим бромодомен белком, который может связываться с никель-хелатными микросферами-донорами, и содержащим ацетиллизин биотинилированным пептидом, соответствующим аминокислотной последовательности гистона, который может связываться с конъюгированными со стрептавидином микросферами-акцепторами. Взаимодействие белок-пептид можно выявлять с помощью излучения света при 520-620 нм. В присутствии соединений, которые связываются с BRD4, наблюдают более низкий сигнал, поскольку взаимодействие белок-пептид снижается.
1. Анализ осуществляли следующим образом: применяли планшеты для соединений Greiner BioOne (№ по кат. 784075). Соединения получали с применением акустического диспергатора Echo от Labcyte, при этом соединения в конечном объеме 40 нл на лунку нормализовали до 0,5% (об./об.) DMSO в конечных условиях анализа. Соединения испытывали в 12-точечном формате ответа при одной концентрации.
2. 4 мкл белка BRD4 (6His-TEV-BRD4, аминокислотные остатки 42-169, соответствующие домену BD1) (концентрация при конечном анализе=50 нМ) на лунку добавляли с применением микрожидкостной установки для распыления микроколичеств реагентов (Flying Reagent Dispensor Microfluidic Workstation) BioRAPTR(r) от Beckman Coulter.
3. Инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре.
4. Добавляли 4 мкл пептида с ацетиллизином (H4K5,8,12,16(Ac)4-биотин:(NH2-)YSGRG(K-
Ac)GG(K-Ac)GLG(K-Ac)GGA(K-Ac)RHR(K-биотин)(-COOH)) (концентрация при конечном анализе=
50 нМ) на лунку с применением микрожидкостной установки для распыления микроколичеств реагентов
(Flying Reagent Dispensor Microfluidic Workstation) BioRAPTR(r) от Beckman Coulter.
5. Инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре.
6. Добавляли 4 мкл предварительно смешанного раствора с микросферами с никелем и стрептави-дином (микросферы поставляются компанией Perkin Elmer) на лунку с применением BioRaptr, как и ранее (концентрация при конечном анализе=4 мкг/мл). После добавления планшеты выдерживали в темноте.
7. Инкубировали в течение 60 мин при комнатной температуре, выдерживая анализируемый план-
шет в темноте.
8. Затем планшеты считывали с применением планшет-ридера Envision от Perkin Elmer, возбуждение лазера при 680 нм и испускание, выявленное при 520-620 нм.
9. Данные анализировали с применением программного обеспечения Genedata и рассчитывали значения IC50.
Анализ антипролиферативных свойств
Антипролиферативный эффект соединений оценивали с помощью анализа с использованием ала-мара синего в клетках MM1.S, которые исходно получали от пациента с множественной миеломой. В основе данного анализа лежит применение резазурина, нефлуоресцирующего индикаторного красителя, превращающегося в ярко-красный флуоресцирующий резоруфин посредством реакций восстановления в метаболически активных клетках. Количество полученного флуоресцентного излучения пропорционально числу живых клеток. Клетки ММ. 1S культивировали в среде RPMI-1640 (Gibco(r)) с 10% фетальной бычьей сывороткой (FBS) и 1 мМ L-глутамина. За 12-24 ч до введения соединения высеивали 90 мкл суспензии клеток (18750 клеток) в 96-луночные титрационные микропланшеты (черные, с лунками с плоским дном). В день введения соединения соединения последовательно разбавляли 1:3 в 100% DMSO с использованием столбцов 2-10 96-луночного титрационного микропланшета. Столбец 11 планшета с последовательно разбавленными соединениями содержал только DMSO. Затем содержимое всех лунок дополнительно разбавляли 1:30 в среде. 10 мкл соединения или DMSO отдельно в среде добавляли в лунки столбцов 2-11 планшетов с клетками в трех повторностях. Кроме того, 1 планшет содержал 10 мкл добавленной среды и был проявлен с применением аламара синего. Планшеты, проявляемые в день добавления соединения, упоминались как день 0. Планшеты с введенным соединением культивировали 3 дня в нормальных условиях (RPMI-1640 с 10% FBS и 1 мМ L-глутамина). Через 3 суток культивирования планшеты с введенным соединением проявляли с применением либо MTS, либо аламара синего. Для каждой концентрации соединения % чистого прироста рассчитывали по формуле: (Значение флуоресценции в день 3 для лунок с введенным соединением - среднее значение флуоресценции в день 0)/(среднее значение флуоресценции в день 3 для лунок с DMSO в качестве контроля - среднее значение флуоресценции в день 0). GI50, концентрацию, которая вызывает 50% ингибирование роста, для каждого соединения рассчитывали с применением % чистого прироста, как определено Национальным институтом рака (NCI).
Анализ для отслеживания модуляции белка cMyc
Клетки множественной миеломы MM1.S культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 10% FBS и 1% L-глутамина, в стандартных условиях в инкубаторе с увлажнением (37°С и 5% CO2). Влияние модуляции белка cMyc, индуцированной ингибиторами бромодомена, оценивали с помощью окрашивания и количественного определения уровня белка с-Мус после обработки соединением с применением анализа с использованием проточного цитометра, осуществляемого в планшете 96-луночного формата с 200К клеток на лунку. Клетки обрабатывали последовательно разбавленными соединениями за 16 часов до фиксации с помощью 2% параформальдегида (конечная концентрация) в течение 10 мин при 37°С. После пермеабилизации с помощью ледяного 90% метанола при 4°С в течение 30 мин. клетки промывали, блокировали буфером (0,5% FBS в фосфатно-солевом буферном растворе (PBS)) в течение 10 мин при комнатной температуре и окрашивали с помощью антитела к cMyc в течение 1 ч (Cell Signaling Technology(r)5605, разбавление 1:200). Клетки промывали и окрашивали посредством инкубирования с конъюгированным с Alexa-488 антителом к IgG кролика (Cell Signaling Technology(r), №4412, разбавление 1:1000) при к. т. в течение 30 мин. После окрашивания клетки промывали снова и фиксировали с помощью 2% параформальдегида в PBS и подготавливали к анализу с помощью проточного цитометра BD FACSCalibur(tm). Среднее геометрическое значение флуоресценции рассчитывали с помощью FlowJo (TreeStar Inc), причем сигнал максимального ингибирования определяли посредством обработки высокой дозой контрольного соединения каждого планшета, а сигнал минимального ингибирования определяли посредством обработки с помощью DMSO. IC50 рассчитывали посредством аппроксимации точек данных доза-эффект, которые нормализовали по отношению к максимальному и минимальному сигналам в виде процента ингибирования с применением стандартной логистической модели нелинейной регрессии с 4-мя параметрами.
Несмотря на то что, как и предполагалось, фармакологические свойства соединений формулы (I) варьируют при изменении структуры, в целом активность, которой обладают соединения формулы (I), может быть продемонстрирована при следующих значениях концентрации или дозах в одном или нескольких из вышеуказанных испытаний.
Следующие данные были получены для примеров (данные ниже могут представлять собой результат одного эксперимента или среднее значение многократно повторяемых экспериментов).
Ксенотрансплантатные модели
Соединение А также исследовали в ксенотрансплантатной модели, как описано ниже.
Самок мышей СВ17 SCID возрастом 6-8 недель получали из лаборатории Чарльза Ривера (Charles River) (Уилмингтон, Массачусетс) и содержали в условиях отсутствия специфических патогенов в аккредитованном AAALAC (Международной ассоциацией по аттестации и аккредитации содержания лабораторных животных) центре. Облученную пищу и стерилизованную в автоклаве воду обеспечивали в неограниченном количестве.
Клетки MV-4-11 (Американская коллекция типовых культур) ресуспендировали в 0,1 мл среды без сыворотки и матригеля (Becton Dickinson) при соотношении 1:1. Клетки (107/мышь) вводили посредством подкожной инъекции в правый бок мышей. Опухолям давали расти до достижения ими среднего объема 200 мм3 для эффективности и затем мышей распределяли случайным образом в группы по 8 особей. Соединение А солюбилизировали в 0,5% НРМС/0,1% Tween80 для введения. Для эффективности или среду-носитель, или соединение А вводили РО один раз в сутки (qd) в течение 21 дня при 10 мг/кг (mpk). Вес тела и объем опухоли измеряли два раза в неделю в течение 21 дня. Результаты показаны на фиг. E и демонстрируют эффект соединения А в отношении объема опухоли.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают фармацевтическую композицию, которая содержит соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, определенные в данном документе, в сочетании с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают фармацевтическую композицию, которая содержит сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенный в данном документе, в сочетании с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Композиции по настоящему изобретению могут находиться в форме, подходящей для перорального применения (например, в виде таблеток, пастилок, твердых или мягких капсул, водных или масляных суспензий, эмульсий, диспергируемых порошков или гранул, сиропов или крепких настоек), для местного применения (например, в виде кремов, мазей, гелей или водных или масляных растворов или суспензий), для введения путем ингаляции (например, в виде мелкодисперсного порошка или жидкого аэрозоля), для введения путем инсуффляции (например, в виде мелкодисперсного порошка) или для парентерального введения (например, в виде стерильного водного или масляного раствора для внутривенного, подкожного, внутримышечного или внутримышечного введения доз или в виде суппозитория для ректального введения доз). В одном аспекте настоящего изобретения фармацевтическая композиция по настоящему изобретению представляет собой композицию, подходящую для перорального применения.
Композиции по настоящему изобретению можно получать с помощью традиционных процедур, с применением традиционных фармацевтических наполнителей, хорошо известных из уровня техники. Таким образом, композиции, предназначенные для перорального применения, могут содержать, например, одно или несколько красящих, подслащивающих, вкусовых и/или консервирующих средств.
Для получения более подробной информации о составлении читателю дается ссылка на главу 25.2 тома 5 Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of editorial Board), Pergamon Press 1990.
Соединение формулы (I) или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота обычно будут вводить теплокровному животному в однократной дозе в диапазоне 5-5000 мг/м площади поверхности тела животного, т.е. примерно 0,1-100 мг/кг, и данное количество обычно обеспечивает терапевтически эффективную дозу. Единичная лекарственная форма, такая как таблетка или капсула, будет обычно содержать от 0,5 мг до 250 мг и, например, от 1 до 250 мг активного ингредиента. Суточная доза в обязательном порядке будет варьироваться в зависимости от хозяина-животного или хозяина-пациента, которого лечат, конкретного пути введения и тяжести заболевания, подлежащего лечению. Следовательно, практикующий врач, который лечит какое-либо конкретное животное или пациента, может определить оптимальную дозу. Соединения или сокристаллы по настоящему изобретению потенциально представляют ценность в качестве антипролиферативных средств и/или средств, обеспечивающих гибель клеток, при сдерживании распространения и/или лечении гематологических форм рака (также называемых гемобластозами) и заболеваний, связанных с солидными опухолями. В частности, предполагается, что соединения или сокристаллы по настоящему изобретению пригодны в предупреждении или лечении таких опухолей, которые ассоциированы с амплификацией одного или нескольких из семейства BET бромодоменсодержащих белков, соответственно с амплификацией BRD4, или зависят от ключевых онкогенов, которые можно регулировать с помощью одного или нескольких из семейства BET бромодо-менсодержащих белков, соответственно BRD4, как например, рак яичников, острый миелолейкоз и недифференцированный лейкоз (AML), множественная миелома (ММ), диффузная В-крупноклеточная лимфома (DLBCL), кастрационно-резистентный рак предстательной железы (CRPC), немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), мелкоклеточный рак легкого (SCLC), рак молочной железы, глиобластома и ней-робластома.
Термин "терапия" предназначен для обозначения своего обычного значения, когда он касается заболевания, для полного или частичного ослабления одного, нескольких или всех его симптомов или для устранения или купирования лежащей в основе патологии. Термин "терапия" также включает термин "профилактика", если нет конкретных указаний об обратном. Термины "терапевтический" и "терапевтически" должны интерпретироваться соответствующим образом.
Термин "профилактика" предназначен для обозначения своего обычного значения и включает первичную профилактику для предупреждения развития заболевания и вторичную профилактику, при которой заболевание уже развилось и пациент временно или постоянно защищен от обострения заболевания или ухудшения заболевания или развития новых симптомов, ассоциированных с заболеванием.
Термин "лечение" применяют синонимично с "терапией". Подобным образом термин "лечить" можно рассматривать в качестве "применение терапии", где "терапия" определена в данном документе.
Термин "эффективное количество" относится к количеству соединения формулы (I) или сокристал-ла, описанных в каком-либо из вариантов осуществления в данном документе, которое является эффективным для потенциального обеспечения терапии субъекта. В случае рака эффективное количество может вызывать какое-либо из изменений, наблюдаемых или измеряемых у субъекта, как описано в определении "терапии", "лечения" и "профилактики". Например, эффективное количество может потенциально снижать количество раковых или опухолевых клеток; потенциально снижать общий размер опухоли; потенциально ингибировать или останавливать инфильтрацию опухолевых клеток в периферические органы, включая, например, мягкую ткань и кость; потенциально ингибировать и останавливать метастазы опухолей; потенциально ингибировать и останавливать рост опухолей; потенциально ослаблять до некоторой степени один или несколько симптомов, ассоциированных с раком; потенциально снижать тяжесть заболевания и смертность; потенциально улучшать качество жизни; или обеспечивать комбинацию таких эффектов. Эффективное количество может представлять собой количество, достаточное для уменьшения симптомов заболевания, чувствительного к ингибированию одного или нескольких бромо-доменсодержащих белков. Для терапии рака эффективность in-vivo можно измерять, например, с помощью оценки продолжительности поддержания жизнедеятельности, периода время до прогрессирования заболевания (ТТР), значений частоты ответа (RR), продолжительности ответа и/или качества жизни.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение формулы (!):коформер, соответственно сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в терапии.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для изготовления лекарственного препарата.
В соответствии с настоящим изобретением предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в качестве лекарственного препарата у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2
нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в получении антипроли-феративного эффекта или эффекта, вызывающего гибель клеток, у теплокровного животного такого, как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе, при изготовлении лекарственного препарата для применения в получении антипролиферативного эффекта или эффекта, вызывающего гибель клеток, у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе, для получения антипролифера-тивного эффекта или эффекта, вызывающего гибель клеток, у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают способ получения антипролиферативного эффекта или эффекта, вызывающего гибель клеток, у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, который включает введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в предупреждении или лечении рака у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе, при изготовлении лекарственного препарата для применения в предупреждении или лечении рака у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают способ предупреждения или лечения рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, который включает введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в предупреждении или лечении гематологических форм рака (также называемых гемобластозами) и солидных форм рака у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе, при изготовлении лекарственного препарата для применения в предупреждении или лечении гематологических и солидных форм рака у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают способ предупреждения или лечения гематологических и солидных форм рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, который включает введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе.
В одном аспекте настоящего изобретения предусматривают соединения формулы (I), которые потенциально ингибируют один или несколько бромодоменсодержащих белков, т.е. семейство BET бромо-доменсодержащих белков и, например, BRD2, BRD3, BRD4 и BRDt, и соответственно BRD4. Преимущественно такие соединения могут быть пригодными для лечения пролиферативного нарушения, такого как рак, у пациента, где пролиферативное нарушение является нарушением, опосредованным бромодо-менсодержащим белком. Под "нарушением, опосредованным бромодоменсодержащим белком" подразумевают какое-либо заболевание или другое болезнетворное состояние, при которых известно, что один или несколько бромодоменсодержащих белков выполняют определенную функцию.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в предупреждении или лечении ВЕТ-зависимого рака у теплокровного животного, такого как человек.
Под BET-зависимым раком понимают какую-либо форму рака, при которой определенную функцию выполняют один или несколько из семейства BET бромодоменсодержащих белков, таких как BRD2,
BRD3, BRD4 и BRDt.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в предупреждении или лечении BRD4-зависимого рака у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе, при изготовлении лекарственного препарата для применения в предупреждении или лечении BET-зависимого рака у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе, при изготовлении лекарственного препарата для применения в предупреждении или лечении BRD4-зависимого рака у теплокровного животного, такого как человек.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают способ предупреждения или лечения BET-зависимого рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, который включает введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают способ предупреждения или лечения BRD4-зависимого рака у теплокровного животного, такого как человек, нуждающегося в таком лечении, который включает введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в обеспечении ингибитор-ного эффекта в отношении одного или нескольких из семейства BET бромодоменсодержащих белков.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенные выше в данном документе, для применения в обеспечение ингибитор-ного эффекта в отношении BRD4.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе, при изготовлении лекарственного препарата для применения в обеспечении ингибиторного эффекта в отношении одного или нескольких из семейства BET бромодоменсодержащих белков.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе, при изготовлении лекарственного препарата для применения в обеспечении ингибиторного эффекта в отношении BRD4.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают способ обеспечения ингибиторного эффекта в отношении одного или нескольких из семейства BET бромодо-менсодержащих белков, который включает введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают способ обеспечения ингибиторного эффекта в отношении BRD4, который включает введение указанному животному эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных выше в данном документе.
Сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота может находиться в форме А, В или С, как определено в данном документе, и, соответственно, в форме А.
Противораковое лечение, описанное в данном документе, может быть применено в виде монотерапии или может включать, в дополнение к соединениям по настоящему изобретению, традиционные хирургическое вмешательство, или лучевую терапию, или химиотерапию, или иммунотерапию. Такую химиотерапию можно вводить совместно, одновременно, последовательно или раздельно с лечением соединением по настоящему изобретению.
Если применяют комбинированную терапию, количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, описанных в настоящем описании, и количество другого (других) фармацевтически активного (активных) сред
ства (средств) при объединении являются совместно эффективными для лечения целевого нарушения у пациента-животного. В данном контексте объединенные количества представляют собой "терапевтически эффективное количество", если при объединении их достаточно для снижения интенсивности симптомов заболевания, чувствительного к ингибированию одного или нескольких бромодоменсодержащих белков. Как правило, такие количества могут быть определены специалистом в данной области, например, исходя из диапазона доз, описанного в настоящем описании, для соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенных в данном документе, и утвержденного (утвержденных) или иным способом опубликованного (опубликованных) диапазона (диапазонов) доз другого (других) фармацевтически активного (активных) соединения (соединений).
В дополнительном аспекте настоящего изобретения предусматривают фармацевтический продукт, содержащий соединение формулы (I) и дополнительное противоопухолевое вещество, для совместного лечения рака.
В таком аспекте настоящего изобретения предусматривают фармацевтический продукт, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, определенные выше в данном документе, и дополнительное противоопухолевое средство, для совместного лечения рака.
В таких аспектах фармацевтический продукт содержит соединение формулы (I) и коформер в форме сокристалла.
В дополнительном аспекте настоящего изобретения предусматривают фармацевтический продукт, содержащий сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота, определенный выше в данном документе, и дополнительное противоопухолевое вещество, для совместного лечения рака.
Такое совместное лечение может включать одно или несколько из следующих противоопухолевых средств:
(i) антипролиферативные/антинеопластические лекарственные средства и их комбинации, применяемые в терапевтической онкологии, такие как алкилирующие средства (например, цис-платин, окса-липлатин, карбоплатин, циклофосфамид, азотистый иприт, мелфалан, хлорамбуцил, бусульфан, темозо-ломид и нитрозомочевины); антиметаболиты (например, гемцитабин и антифолаты, такие как фторпири-мидины, например 5-фторурацил, пеметрексед и тегафур, ралтитрексед, метотрексат, цитозина арабино-зид и гидроксимочевина); противоопухолевые антибиотики (например, антрациклины, например адриа-мицин, блеомицин, доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, митомицин-С, дактиномицин и митрамицин) и ингибиторы топоизомеразы (например, эпиподофиллотоксины, например этопозид и тенипозид, амсакрин, топотекан, и камптотецин, и иринотекан); ингибиторы механизмов репарации ДНК, такие как киназа СНК; ингибиторы ДНК-зависимой протеинкиназы; ингибиторы mw^ADP-рибоза)полимеразы (ингибиторы PARP, включая олапариб) и ингибиторы Hsp90, такие как танеспими-цин и ретаспимицин;
(ii) соединения, которые ингибируют прогрессирование путем контроля клеточного цикла, такие как антимитотические средства (например, алкалоиды винка, например винкристин, винбластин, винде-зин и винорелбин; эпотилоны, такие как иксабепилон и патупилон; таксоиды, например таксол, таксотер и доцетаксел; ингибиторы polo-подобной киназы и ингибиторы двигательных белков-кинезинов, такие как ингибиторы белка Eg5); ингибиторы киназы aurora (например, AZD1152, РН739358, VX-680, MLN8054, R763, МР235, МР529, VX-528 и АХ39459); ингибиторы циклин-зависимой киназы, такие как ингибиторы CDK2 и/или ингибиторы CDK4, и ингибиторы функции центромерных белков, такие как ингибиторы CENP-E;
(iii) цитостатические средства, которые изменяют гормонозависимый рост, такие как антиэстрогены (например, тамоксифен, фулверстрант, торемифен, ралоксифен, дролоксифен и иодоксифен), антиандро-гены (например, бикалутамид, флутамид, нилутамид и ципротерона ацетат), антагонисты LHRH или аго-нисты LHRH (например, гозерелин, лейпрорелин и бусерелин), прогестогены (например, мегестрола ацетат), ингибиторы ароматазы (например, анастрозол, летрозол, воразол и эксеместан); ингибиторы 5а-редуктазы, такие как финастерид и ингибиторы CYP17A1, такие как абиратерон;
(iv) антиинвазивные средства, например, ингибиторы киназ семейства с-Src, например AZD0530 (саракатиниб); дазатиниб ((BMS-354825), J. Med. Chem., 2004, 47, 6658-6661) и бозутиниб (SKI-606) и ингибиторы металлопротеиназы, например маримастат, ингибиторы функции рецептора активатора плазминогена урокиназного типа или антитела к гепараназе; ингибиторы FAK, или киназы фокальной адгезии; низкомолекулярные ингибиторы рецепторной киназы МЕТ (например, волитиниб/AZD6904); антитела к рецепторной киназе МЕТ или лиганду МЕТ, фактору роста гепатоцитов (например, онартузу-маб);
(v) ингибиторы функции фактора роста: например, такие ингибиторы включают антитела к фактору роста и антитела к рецептору фактора роста (например, антитело к erbB2, трастузумаб [Herceptin(tm)], антитело к EGFR, панитумумаб, антитело к erbB1, цетуксимаб [Erbitux, C225], и антитела к какому-либо фактору роста или к рецептору фактора роста, раскрытые в Stern et al., Critical reviews in oncol-ogy/haematology, 2005, Vol. 54, p. 11-29); такие ингибиторы также включают ингибиторы тирозинкиназы, например ингибиторы семейства эпидермального фактора роста, например ингибиторы тирозинкиназы
(i)
семейства EGFR, такие как гефитиниб (ZD1839), эрлотиниб (OSI-774) и CI1033, ингибиторы тирозинки-назы erbB2, такие как лапатиниб; комбинированные ингибиторы erbB 1/2, такие как афатаниб; и необратимо действующие ингибиторы EGFR и Her2, такие как HKI-272, необратимо действующие ингибиторы EGFR, такие как AZD9291; ингибиторы членов семейства фактора роста гепатоцитов и их рецепторов; ингибиторы семейства факторов роста инсулинового типа, включая низкомолекулярные ингибиторы киназ и антитела, направленные на инсулиноподобные факторы роста и рецепторы инсулиноподобных факторов роста; ингибиторы членов семейства тромбоцитарного фактора роста и их рецепторов, такие как иматиниб и/или нилотиниб (AMN107); ингибиторы c-kit, ингибиторы AnLK, ингибиторы киназы Flt3, ингибиторы киназы c-abl, и ингибиторы киназы CSF-1R или киназы TRK;
(vi) ингибиторы киназ, участвующих в сигнальной трансдукции, например киназ FGFR (например, AZD4547), PIM (например, AZD1208), МЕК (например, селуметиниб (AZD6244), АКТ (например, AZD5363), ингибиторы киназ TOR (включая TORC1 и TORC2, например AZD2014) и ингибиторы киназы PI3, включая изоформы, такие как PI3K-a, PI3K-P или PI3K-5 (например, AZD8186); ингибиторы се-рин/треонинкиназ, таких как киназы Ras или Raf (например, сорафениб или вемурафениб); ингибиторы PDK, SGK, PI4K или PIP5K, JAK, STAT (включая STAT3, ингибитором которого является AZD9150) и IRAK4; ингибиторы ATR (например, AZD6738) или ингибиторы ATM; ингибиторы ВТК, такие как ибру-тиниб, ингибиторы SYK, такие как фостаматиниб, и ингибиторы циклин-зависимой киназы; ингибиторы фарнезилтрансферазы, такие как типифарниб (R115777), лонафарниб (SCH66336) и ингибиторы киназы Wee-li (например, AZD1775, как описано в WO 2007/126128);
(vii) антиангиогенные средства, такие как антиангиогенные средства, которые ингибируют эффекты фактора роста эндотелия сосудов, например антитело к фактору роста клеток эндотелия сосудов, беваци-зумаб (Avastin(tm)), и, например, ингибитор рецепторной тирозинкиназы VEGF, такой как вандетаниб (ZD6474), сорафениб, ваталаниб (РТК787), сунитиниб (SU11248), акситиниб (AG-013736), пазопаниб (GW 786034) и цедираниб (AZD2171), соединения, такие как соединения, раскрытые в WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 и WO 98/13354, и соединения, которые действуют посредством других механизмов (например, линомид, ингибиторы функции интегрина avp3 и ангиостатин);
(viii) средства, повреждающие сосуды, такие как комбретастатин А4, и соединения, раскрытые в
WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 и WO 02/08213;
(ix) антисмысловые терапевтические препараты, например антисмысловые терапевтические препараты, которые направлены на мишени, перечисленные выше, такие как ISIS 2503, антисмысловой олиго-мер к ras;
(x) подходы генной терапии, включая, например, подходы для замены аберрантных генов, таких как аберрантный р53 или аберрантные BRCA1 или BRCA2, подходы GDEPT (ген-направленная ферментная терапия с применением пролекарств), такие как подходы, в которых применяют цитозиндезаминазу, ти-мидинкиназу или бактериальный фермент нитроредуктазу, и подходы для повышения переносимости пациентом химиотерапии или лучевой терапии, такие как генная терапия при множественной лекарственной устойчивости;
(xi) подходы иммунотерапии, включая, например, подходы ex-vivo и in-vivo для повышения имму-ногенности опухолевых клеток пациента, такие как трансфекция цитокинами, такими как интерлейкин 2, интерлейкин 4 или гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор; подходы для снижения Т-клеточной анергии или функции регуляторных Т-клеток; подходы, которые обеспечивают усиление ответных реакций Т-клеток на опухоли, например, блокирующие антитела к CTLA4 (например, ипилимумаб и тремелимумаб), В7Н1, PD-1 (например, BMS-936558 или MEDI-4736) и антитела-агонисты к CD137; подходы с применением трансфицированных иммунных клеток, таких как цитокин-трансфицированные дендритные клетки; подходы с применением цитокин-трансфицированных опухолевых клеточных линий, подходы с применением антител к антигенам, ассоциированным с опухолями, и антител, которые обеспечивают уменьшение количества типов целевых клеток (например, неконъюгиро-ванных антител к CD20, таких как ритуксимаб, меченых радиоактивным изотопом антител к CD20, бек-ксар и зевалин, и антитела к CD54, кампат); химиотерапия по схеме R-СНОР (ритуксимаб вместе с цик-лофосфамидом, гидрохлоридом доксорубицина, сульфатом винкристина и преднизоном); подходы с применением антиидиотипических антител; подходы, которые обеспечивают усиление функции естественной клетки-киллера, и подходы, в которых используют конъюгаты антитело-токсин (например, антитело к CD33, милотарг); иммунотоксины, такие как моксетумумаб пасудотокс; агонисты толл-подобного рецептора 7 или толл-подобного рецептора 9;
(xii) ингибиторы деградации белков, опосредованной протеасомой, включая без ограничения ингибиторы протеасом, такие как Velcade (бортезомиб) или карфилзомиб, ингибиторы убиквитинлипаз, ингибиторы убиквитинпротеаз, ингибиторы неддилирования белка и ингибиторы сумоилирования белка, и
(xiii) другие стандартные средства лечения, такие как циклофосфамид, преднизон, леналидомид или талидомид.
В соответствии с данным аспектом настоящего изобретения предусматривают комбинацию, подходящую для применения в лечении рака, содержащую соединение формулы (I) или его фармацевтически
приемлемую соль и дополнительное противоопухолевое средство, в частности, какое-либо средство из противоопухолевых средств, перечисленных в пунктах (i)-(xiii) выше.
В соответствии с данным аспектом настоящего изобретения также предусматривают комбинацию, подходящую для применения в лечении рака, содержащую сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота и дополнительное противоопухолевое средство, в частности, какое-либо средство из противоопухолевых средств, перечисленных в пунктах (i)-(xiii) выше.
В дополнительном аспекте настоящего изобретения предусматривают соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с дополнительным противоопухолевым средством, в частности, противоопухолевым средством, выбранным из средств, перечисленных в пунктах (i)-(xiii) выше.
В дополнительном аспекте настоящего изобретения предусматривают сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота в комбинации с дополнительным противоопухолевым средством, в частности, противоопухолевым средством, выбранным из средств, перечисленных в пунктах (i)-(xiii) выше.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают набор, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота в комбинации с противоопухолевым средством. В определенных вариантах осуществления набор дополнительно содержит инструкции по применению указанного (указанных) соединения (соединений) или сокристалла.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривают набор, содержащий:
a) соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль или сокристалл соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота в первой единичной лекарственной форме;
b) дополнительное противоопухолевое средство во второй единичной лекарственной форме и
c) средство-контейнер для содержания указанных первой и второй лекарственных форм.
Настоящее изобретение далее будет проиллюстрировано в следующих примерах, в которых, как
правило, придерживались следующего.
(i) Значения температуры приведены в градусах по Цельсию (°С); если не указано иное, действия осуществляли при комнатной температуре или температуре окружающей среды, т.е. при температуре в диапазоне 18-25°С.
(ii) Органические растворы высушивали над безводным сульфатом магния или безводным сульфатом натрия; выпаривание растворителя осуществляли с применением роторного испарителя при пониженном давлении (600-4000 Па; 4,5-30 мм рт. ст.) с температурой бани не более 60°С.
(iii) Хроматография означает флэш-хроматографию на силикагеле; тонкослойную хроматографию (TLC) осуществляли на пластинках с силикагелем.
(iv) Как правило, за ходом реакций следили с помощью TLC и/или аналитической LC-MS, и если приведены периоды времени реакции, то они приведены лишь для иллюстрации.
(v) Конечные продукты характеризовались удовлетворительными данными спектров протонного ядерного магнитного резонанса (ЯМР) и/или данными масс-спектров.
(vi) Значения выхода приведены лишь для иллюстрации и не обязательно являются значениями, которые можно получить при тщательной разработке способа; получение повторяли, если требовалось больше материала.
(vii) Если приведены, данные ЯМР представлены в форме значений дельта для основных диагностических протонов, приведенных в частях на миллион (ppm) относительно тетраметилсилана (TMS) в качестве внутреннего стандарта, определенных при 300, 400 или 500 МГц с применением пердейтероди-метилсульфоксида (DMSO-d6) в качестве растворителя, если не указано иное; были применены следующие сокращения: s, синглет; d, дублет; t, триплет; q, квартет; m, мультиплет; bs, широкий синглет; dd, двойной дублет; td, тройной дублет; qd, квартет дублетов.
(viii) Для углерода (13С) ЯМР-анализ твердого тела с кроссполяризацией и вращением под магическим углом осуществляли по примеру 1, спектры сокристалла, свободного основания соединения А и коформера регистрировали на ЯМР-спектрофотометре Bruker Avance, эксплуатируемом при частоте Н, составляющей 400 МГц. Образцы вращали приблизительно под магическим углом при частоте 9 кГц и использовали контактный импульс 2 мс для обеспечения переноса намагниченности от протона к углероду. Применяли задержку между циклами, составляющую 5 с, для обеспечения спин-решеточной релаксации.
(ix) Для азота (15N) ЯМР-анализ твердого тела с кроссполяризацией и вращением под магическим углом осуществляли по примеру 1, спектры сокристалла регистрировали на ЯМР-спектрофотометре Bruker Avance, эксплуатируемом при частоте 1H, составляющей 400 МГц. Образцы вращали приблизительно под магическим углом при частоте 5 кГц и использовали контактный импульс 200 мкс и 2 мс для обеспечения переноса намагниченности от протона к углероду. Применяли задержку между циклами, составляющую 5 с, для обеспечения спин-решеточной релаксации.
(x) Химические символы имеют их обычные значения; применяют единицы и символы системы SI.
(xi) Масс-спектры (MS) и данные LC-MS получали на LC-MS-системе, где HPLC-компонент вклю
(x)
чал, как правило, либо оборудование Agilent 1100, Waters Alliance НТ (2790 & 2795), либо насос HP 1100 и диодную матрицу с устройством автоматического отбора проб СТС, и работали на колонке Phenome-nex Gemini C18 5 мкм, 50x2 мм (или подобной) с элюированием посредством либо кислотного элюента (например, с применением градиента 0-95% вода/ацетонитрил с 5% 1%-й муравьиной кислоты в смеси 50:50 вода:ацетонитрил (об./об.)), либо основного элюента (например, с применением градиента 0-95% вода/ацетонитрил с 5% 0,1%-го аммиака 880 в смеси с ацетонитрилом); и MS-компонент включал, как правило, масс-спектрометр Waters ZQ, осуществляющий сканирование в соответствующем диапазоне массовых чисел. Получены хроматограммы для электрораспыления (ESI) с указанием интенсивности положительного и отрицательного основного пика и хроматограмма полного поглощения УФ при 220300 нм и приведены значения масса/заряд; как правило, описаны лишь ионы, которые указывают на массу недиссоциированной молекулы, и, если не указано иное, выражаемым значением является (М+Н)+ для режима детекции положительно заряженных ионов и (М-Н)- для режима детекции отрицательно заряженных ионов.
(xii) Если не указано иное, соединения, содержащие асимметрично замещенный атом углерода не были разделены.
(xiii) Препаративную высокоэффективную жидкостную хроматографию (HPLC) осуществляли с помощью устройства Gilson с применением следующих условий: колонка: С18 диоксид кремния с обращенной фазой, например, "Xbridge" от Waters, диоксид кремния 5 мкм, 19x100 мм, или 30x100 мм, с применением смесей растворителей с уменьшающейся полярностью в качестве элюента (уменьшающееся соотношение растворителя А и растворителя В); растворитель А: вода с 1% гидроксидом аммония; растворитель В: ацетонитрил; расход: 28 мл/мин, или 61 мл/мин; градиент: индивидуально для каждого соединения, как правило, продолжительностью 7-10 мин; длина волны: 254 нм.
(xiv) Хроматографию с сильным катионным обменом (SCX) осуществляли на предварительно заполненных картриджах (например, картриджах ISOLUTE SCX-2 на основе пропилсульфоновой кислоты, поставляемых International Sorbent Technology) с применением основного элюента (например, 1 М аммиака в метаноле).
(xv) Следующие сокращения были использованы в данном документе, если необходимо:
ADDP: 1,1 '-(азодикарбонил)дипиперидин;
DCM: дихлорметан;
DIPEA: ^^диизопропилэтиламин;
DMA: ^^диметилацетамид;
DMF: ^^диметилформамид;
DME: диметоксиэтан;
DMSO: диметилсульфоксид;
Et2O: диэтиловый эфир;
EtOAc: этилацетат;
EtOH: этанол;
HPLC: высокоэффективная жидкостная хроматография;
МеОН: метанол;
MgSO4: сульфат магния;
МТВЕ: метил-трет-бутиловый эфир;
NMR: ядерный магнитный резонанс;
SCX: сильный катионный обмен;
TFA: трифторуксусная кислота;
THF: тетрагидрофуран.
(xvii) Для анализа XRPD из примера 1 образец закрепляли с помощью крепления с кремний-содержащей подложкой и анализировали с применением дифрактометра CubiX PRO от PANalytical. Образцы измеряли в отношении геометрии отражения в конфигурации 8-28 диапазоне сканирования от 2 до 40° 28 с номинальной выдержкой 25 с на шаг 0,02°. Образец вращали при 30 об/мин (для улучшения статистики подсчета) и облучали рентгеновским излучением, генерируемым медной длинной острофокусной трубкой, эксплуатируемой при 45 кВ и 40 мА и длине волны 1,5418 А. Специалистам в области порошковой рентгеновской дифракции будет понятно, что на относительную интенсивность пиков могут влиять, например, зерна с размером более 30 микрон и неунитарными соотношениями сторон, которые могут влиять на анализ образцов. Специалисту в данной области также будет понятно, что на положение отражений могут влиять точная высота, на которой находится образец в дифрактометре, и калибровка нуля дифрактометра. Плоскостность поверхности образца также может оказывать незначительный эффект. Следовательно, представленные данные дифрактограммы не следует принимать как абсолютные значения.
(xviii) Дифференциальная сканирующая калориметрия: аналитическое устройство: Q1000 DSC от ТА Instruments.
Как правило, менее 5 мг материала, содержащегося в стандартном алюминиевом тигле, оснащен
ном крышкой, нагревали в диапазоне температур от 25 до 300°С при постоянной скорости нагрева, составляющей 10°С/мин. Применяли газ для продувки с применением азота; расход 50 мл/мин.
Пример 1. Получение формы А (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-Диметилпиперазин-2-она
К суспензии 4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенола (67,5 г, 207,46 ммоль) в дегазированном надлежащим образом, безводном DCM (1,7 л) при 5°С под азотом порциями добавляли трибутилфосфин (102 мл, 414,92 ммоль). Смесь охлаждали до 0°С и порциями добавляли (Е)-диазен-1,2-диил-бис-(пиперидин-1-ил-метанон) (105 г, 414,92 ммоль). Затем по каплям добавляли раствор (R)-4-(2-гидроксиэтил)-1,3-диметилпиперазин-2-она (46,4 г, 269,70 ммоль) в DCM (200 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин и фильтровали. Чистый раствор разбавляли с помощью дополнительного количества DCM (1 л) и затем подкисляли с помощью 2 М HCl (400 мл) и добавляли воду (400 мл). Объединенный водный раствор промывали с помощью DCM (3x1 л) и затем EtOAc (1 л). Затем повышали основность водного раствора с помощью твердого Na2CO3 до рН ~10 и экстрагировали с помощью DCM (3x1,5 л). Объединенный органической раствор промывали водой (500 мл) и насыщенным солевым раствором (500 мл), затем высушивали над MgSO4 и выпаривали до сухого состояния с получением неочищенного материала. Полученное очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния с элюированием с помощью смеси EtOH:EtOAc:гептан:NH3(водн.) 1,8:4:4:0,2. Фракции, содержащие необходимый продукт, выпаривали до сухого состояния с получением пены желтого цвета. Полученное дополнительно очищали с помощью препаративной HPLC (колонка Chiralpak AS, диоксид кремния 20 мкм, диаметр 100 мм, длина 250 мм), гептан/EtOH 50/50 при 400 мл/мин. Фракции, содержащие необходимый продукт, выпаривали до сухого состояния и полученное твердое вещество перемешивали в виде суспензии в диэтиловом эфире (300 мл) в течение 18 ч, фильтровали и высушивали с получением (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она (69 г, 69,4%) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,22 (3Н, d), 1,62 (2Н, qd), 1,82 (2Н, d), 2,6-2,79 (3Н, m), 2,79 (3Н, s), 2,85-3,09 (4Н, m), 3,13 (1H, q), 3,2-3,26 (2Н, m), 4,03 (2Н, t), 4,17 (3Н, s), 4,28 (2Н, d), 6,85 (2Н, d), 7,15 (2Н, d), 7,29 (1H, d), 7,85 (1H, d).
Масса/заряд ES+ [М+Н]+=480.
4-(1-(3-Метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенол, применяемый в качестве исходного материала, получали, как описано далее.
Получение бензил-4-(трифторметилсульфонилокси)-5,6-дигидропиридин-1 (2Н)-карбоксилата
Раствор бензил-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (88,57 г, 379,70 ммоль) в THF (300 мл) добавляли по каплям к бис-(триметилсилил)амиду лития (1 M в THF) (418 мл, 417,67 ммоль) при -78°С под азотом в течение периода, составляющего 1 ч. Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 90 мин, затем в течение периода, составляющего 1 ч, по каплям добавляли раствор 1,1,1-трифтор ^фенил-^ (трифторметилсульфонил)метансульфонамида (142 г, 398,68 ммоль) в THF (600 мл). Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем обеспечивали нагревание до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили с помощью 2 М водного раствора гид-роксида натрия (450 мл). Слои разделяли и органический слой промывали 2 М водным раствором гидро-ксида натрия (360 мл). Растворитель выпаривали, затем остаток повторно растворяли в Et2O (1500 мл) и раствор промывали водой (500 мл) Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали с получением бензил-4-(трифторметилсульфонилокси)-5,6-дигидропиридин-1(2Н)-карбоксилата (124 г, 81%) в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 2,43 (2Н, m), 3,62 (2Н, m), 4,06 (2Н, m), 5,10 (2Н, s), 6,02 (1H, m),
7,34 (5Н, m).
Получение бензил-4-(4-гидроксифенил)-5,6-дигидропиридин-1 (2Щ-карбоксилата
К бензил-4-(трифторметилсульфонилокси)-5,6-дигидропиридин-1(2Н)-карбоксилату (123,1 г, 303,26 ммоль) и 4-гидроксифенилбороновой кислоте (46,0 г, 333,59 ммоль) в смеси диоксана (1000 мл) и воды (250 мл) добавляли карбонат натрия (96 г, 909,79 ммоль). Полученную смесь барботировали азотом в течение 10 мин, затем добавляли 1Д'-бис-(дифенилфосфино)ферроцендихлорпалладий(П) (5,49 г, 7,58 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли с помощью DCM (2 л) и промывали водой (2 л). Водный слой повторно экстрагировали с помощью DCM (1 л), затем объединенные органические вещества промывали насыщенным солевым раствором (500 мл), высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюирования 10-30% EtOAc в изогексане. Фракции, содержащие необходимый продукт, выпаривали до сухого состояния, затем растирали с помощью изогексана, фильтровали и высушивали с получением бензил-4-(4-гидроксифенил)-5,6-дигидропиридин-1(2Н)-карбоксилата (62,3 г, 66,4%) в виде твердого вещества белого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 2,44 (2Н, m), 3,61 (2Н, m), 4,05 (2Н, m), 5,12 (2Н, s), 5,99 (1H, m), 6,73 (2Н, d), 7,26 (2Н, d), 7,32-7,40 (5Н, m), 9,45 (1H, s). Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=310. Получение 4-(пиперидин-4-ил)фенола
Бензил-4-(4-гидроксифенил)-5,6-дигидропиридин-1(2Н)-карбоксилат (37,7 г, 121,86 ммоль) и 5% палладий на угле (7,6 г, 3,57 ммоль) в МеОН (380 мл) перемешивали в атмосфере водорода при 5 бар и 25°С в течение 2 ч. Катализатор удаляли посредством фильтрования, промывали с помощью МеОН и растворители выпаривали. Неочищенный материал растирали с помощью Et2O (200 мл), затем необходимый продукт собирали посредством фильтрования и высушивали под вакуумом с получением 4-(пиперидин-4-ил)фенола (20,36 г, 94%) в виде твердого вещества белого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,46 (2Н, m), 1,65 (2Н, m), 2,45 (1H, m), 2,58 (2Н, m), 3,02 (2Н, m), 6,68 (2Н, d), 7,00 (2Н, d), 9,15 (1H, s).
Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=178.
Получение 4-(пиперидин-4-ил)фенола гидробромида
К суспензии 4-(пиперидин-4-ил)фенола (0,4 г, 2,26 ммоль) в THF (23 мл) по каплям добавляли бро-моводород (48% в воде) (0,283 мл, 2,48 ммоль). Полученную суспензию перемешивали в течение 30 мин. Твердое вещество собирали посредством фильтрования, промывали с помощью THF (20 мл) и высушивали под вакуумом с получением 4-(пиперидин-4-ил)фенола гидробромида (0,580 г, 100%) в виде порошка белого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,74 (2Н, qd), 1,86 (2Н, d), 2,71 (1H, tt), 2,96 (2Н, td), 3,33 (2Н, d), 6,68-6,73 (2Н, m), 6,97-7,02 (2Н, m), 8,48 (2Н, brs), 9,18 (1H, brs).
Получение 6-хлор-3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-Ь]пиридазина
3-Хлор-6-гидразинилпиридазин (18 г, 124,51 ммоль) суспендировали в DME (330 мл) и обрабатывали с помощью тетраметоксиметана (26,5 мл, 199,22 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 90°С в течение 3 ч. DME выпаривали и остаток растворяли в 5% MeOH/DCM и затем фильтровали через тампон из диоксида кремния. Фильтрат выпаривали до сухого состояния и затем поглощали в МТВЕ (200 мл) и суспендировали в течение 1 ч. Твердое вещество отфильтровывали и высушивали под вакуумом с получением 6-хлор-3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазина (19,78 г, 86%) в виде порошка кремового цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 4,25 (3Н, s), 7,30 (1H, d), 8,22 (1H, d).
К 4-(пиперидин-4-ил)фенола гидробромиду (18,4 г, 71,28 ммоль) в EtOH (200 мл) добавляли 6-хлор-3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин (19,73 г, 106,91 ммоль). К данной смеси добавляли DIPEA (62,2 мл, 356,38 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 18 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды и выливали в интенсивно перемешиваемую воду (1600 мл) и перемешивали интенсивно в течение 2 ч. Твердый осадок отфильтровывали и последовательно промывали с помощью H2O (200 мл) и Et2O (200 мл). Полученное твердое вещество высушивали под вакуумом с получением 4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенола (15,30 г, 66,0%) в виде твердого вещества бледно-коричневого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,59 (2Н, qd), 1,81 (2Н, d), 2,67 (1H, ddt), 2,9-3,02 (2Н, m), 4,17 (3Н, s), 4,23-4,31 (2Н, m), 6,63-6,71 (2Н, m), 7,02 (2Н, dd), 7,29 (1H, d), 7,84 (1H, d), 9,14 (1H, s).
Масса/заряд ES+ [М+Н]+=326.
(Я)-4-(2-гидроксиэтил)-1,3-диметилпиперазин-2-он, применяемый в качестве исходного материала, получали, как описано далее.
Получение (Я)-4-(2-гидроксиэтил)-1,3-диметилпиперазин-2-она
К смеси (Я)-1,3-диметилпиперазин-2-она гидрохлорида (50 г, 303,71 ммоль) и карбоната калия (126 г, 911,12 ммоль) в 2-метилтетрагидрофуране (500 мл) добавляли 2-бромэтанол (108 мл, 1518,54 ммоль). Смесь перемешивали при 100°С в течение 16 ч. Смесь фильтровали и выпаривали до сухого состояния с получением неочищенного продукта. Полученное очищали с помощью флэш-хроматографии на силика-геле с элюированием с помощью 1-5% МеОН в DCM и чистые фракции объединяли и выпаривали до сухого состояния с получением (Я)-4-(2-гидроксиэтил)-1,3-диметилпиперазин-2-она (36,0 г, 68,8%) в виде масла тускло-желтого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,19 (3Н, d), 2,42 (1H, dt), 2,59 (2Н, tt), 2,79 (3Н, s), 2,93-3,1 (2Н, m), 3,17-3,25 (2Н, m), 3,47 (2Н, q), 4,41 (1H, t).
Конечный продукт, (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он, анализировали с помощью XRPD и DSC и устанавливали, что он являлся кристаллическим. XRPD образца материала приводила к получению дифрактограммы, показанной на фиг. А. Форма А (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она характеризуется по меньшей мере одним пиком при значении 20 20,9 или 16,7°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
Десять наиболее выраженных пиков XRPD показаны в табл. А.
Таблица А
Десять наиболее выраженных пиков XRPD для формы А ^)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она
Угол 2-тета (29)
Интенсивность
20,9
100,0
16,7
53,4
20,2
38,1
21,2
27,2
27,4
26,5
18,0
23,4
16,8
20,0
23,6
18,1
15,1
14,2
15,5
13,9
В таблице значения 2-тета (20) составляют ±0,2°.
Анализ с применением дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) формы А (R)-4-(2-(4-(1 -(3 -метокси[ 1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она продемонстрировал эндотерму плавления с началом при 106,4°С и пиком при 111,2°С. Кривая DSC показана на фиг. В.
Пример 1.1. Получение формы А сокристалла ^)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
В круглодонную колбу, содержащую 10 мл метанола, добавляли примерно 3 г формы А (R)-4-(2-(4-(1 -(3 -метокси[ 1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она. Затем в круглодонную колбу по каплям добавляли отдельный раствор, содержащий 1 мол.экв. (1,18 г) 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты в 5 мл метанола, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. На следующий день материал фильтровали и промывали метанолом (5 мл). Выделенное твердое вещество высушивали на воздухе и затем перемещали в вакуумную печь, где его дополнительно высушивали в течение ночи при 50°С. Сокристалл (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпипера-зин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) получали в виде твердого вещества грязно-белого цвета. Данную форму определяли как кристаллическую с помощью XRPD.
Данный материал анализировали с помощью XRPD и DSC. XRPD образца материала приводила к получению дифрактограммы, показанной на фиг. С. Форма А сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) характеризуется по меньшей мере одним пиком при значении 20 19,5 или 12,5°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения. Десять наиболее выраженных пиков XRPD показаны в табл. В.
Таблица В
Десять наиболее выраженных пиков XRPD для формы А сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-
он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
Угол 2-тета
Интенсивность
(20)
19,5
100
12,5
80,4
18,1
79,8
12,8
66,4
24,2
60,9
14,1
56,5
23,4
51,8
17,9
40,2
18,6
38,6
17,0
37,3
В таблице значения угла 2-тета (20) составляют ±0,2°.
Анализ с применением дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) формы А сокристал-ла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) продемонстрировал эндотерму плавления с началом при 186,3°С и пиком при 188,3°С. Кривая DSC показана на фиг. D.
Сокристаллы можно определять по показателю ApKa, т.е. (pKa(основания)-pKa(кислоты)). Если ApKa составляет < 1, молекулярный комплекс API:коформер классифицируют как сокристалл. (Regulatory Classification of Pharmaceutical Co-Crystals, US FDA Guidance, April 2013). pKa для основного центра на пиперазиноне в соединении А был определен как 4,8, а pKa для молекулы коформера, 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты, составлял 4,3, что давало показатель ApKa, составляющий <1, и, следовательно, соответствовало образованию сокристалла.
13С ЯМР-анализ твердого тела с кроссполяризацией и вращением под магическим углом осуществляли в отношении конечного продукта из примера 1.1, ^)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она с коформером, 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой. Спектры показаны на фиг. F. Нижний спектр на фиг. F (т.е. продукта из примера 1.1) не являлся объединением спектров ^)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-она (средний спектр) и коформера (верхний спектр). На верхнем спектре присутствовал пик приблизительно при 172 ppm, относящийся к полностью протонированной карбоновой кислоте в коформере (если карбоновая кислота в коформере не является протонированной, то пик можно было бы ожидать при 177 ppm, а не при 172 ppm). На среднем спектре присутствовал пик приблизительно при 169 ppm, относящийся к карбонилу в
(R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-оне. На спектре для продукта из примера 1.1 присутствовало 3 пика на участке кар-бонила, которые не соответствовали пикам на верхнем или среднем спектрах. Кроме того, на данном спектре не было пика при 177 ppm. Можно было ожидать, что такой пик присутствует, если карбоновая кислота коформера не является протонированной, и он свидетельствовал бы о том, что протон переместился между коформером и образованными свободным основанием и солью. Отсутствие данного пика соответствует образованию сокристалла.
15N ЯМР-анализ твердого тела с кроссполяризацией и вращением под магическим углом осуществляли в отношении конечного продукта из примера 1.1. Спектры регистрировали при значениях времени контакта 2 мс и 200 мкс, и они показаны на фиг. G. Спектр, зарегистрированный с более продолжительным временем контакта, соответствовал по меньшей мере 8 различным окружениям азота в сокристалле, при этом при менее продолжительном времени контакта пики не наблюдали. Это соответствовало тому, что ни один из атомов азота не демонстрировал сильное диполярное связывание с протоном, как было бы в случае, если протон полностью переместился между коформером и основанием, как наблюдалось бы для соли.
Стехиометрию сокристалла (R)-4-(2-(4-( 1 -(3 -метокси[1,2,4]триазоло [4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота определяли с помощью протонного ЯМР. Материал обеспечивал получение ЯМР-спектра, показанного на фиг.
H. Стехиометрию определяли с помощью интегрирования резонанса, обусловленного (R)-4-(2-(4-(1-(3-
метокси[1,2,4]триазоло [4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-
оном, например, с использованием резонанса при 6,85 ppm (2Н), и сравнения с резонансом, обусловлен-
ным 6-гидрокси-2-нафтойной кислотой, например, с использованием резонанса при 8,46 (1Н), и опреде-
ления соотношения пиков, принимая во внимание количество протонов, обеспечивающее получение ре-
зонансного сигнала. Стехиометрию (молярное соотношение) определяли как 1:1.
1H ЯМР (500 МГц, DMSO, 27°С) 1,22 (3Н, d), 1,62 (2Н, qd), 1,82 (2Н, d), 2,63-2,79 (3Н, m), 2,81 (3Н, s), 2,85-3,09 (4Н, m), 3,13 (1H, q), 3,20-3,28 (2Н, m), 4,03 (2Н, t), 4,17 (3Н, s), 4,28 (2Н, d), 6,85 (2Н, d), 7,12-7,21 (4Н, m), 7,29 (1H, d), 7,75 (1H, d), 7.83-7.89 (2Н, m), 7.96 (1H, d), 8.47 (1H, s), 10.15 (1H, bs),
12.81 (1H, bs)
Таким образом, 1Н ЯМР, 13С и 15N ЯМР твердого тела и ApKa, упоминаемые выше, соответствовали образованию сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1).
Пример 1.2. Получение формы А сокристалла ^)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1).
4-(1-(3-Метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенол (0,818 кг, 2,34 моль) смешивали с ADDP (1,19 кг, 4,67 моль) и DCM (9,8 л, 150 моль) и перемешивали приблизительно при 10°С. К реакционной смеси в течение 30 мин порциями добавляли трибутилфосфин (0,98 кг, 47,6 моль) и затем ее перемешивали в течение 30 мин. Затем по каплям добавляли раствор ^)-4-(2-гидроксиэтил)-1,3-диметилпиперазин-2-она (0,503 кг, 2,80 моль) в DCM (1,64 л, 25,6 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение 24 ч.
Реакционную смесь затем фильтровали посредством промывки с помощью DCM для удаления ADDP как побочного продукта. Фильтрат перемешивали с водным раствором хлористоводородной кислоты и нижний органический слой удаляли. Водный слой дополнительно промывали с помощью DCM и нижний органической слой удаляли. Затем повышали основность водного раствора с помощью Na2CO3 до рН 9-10 и экстрагировали с помощью DCM. Слой DCM дополнительно промывали водой и выпаривали и подвергали азеотропной перегонке с метанолом для удаления остаточной воды с получением неочищенного материала. Неочищенный материал растворяли в метаноле (7,5 л, 190 моль) и нагревали до 60°С в сосуде 1. 6-Гидроксинафтален-2-карбоновую кислоту (0,360 кг, 1,87 моль) растворяли в метаноле (3,8 л, 94 моль) в сосуде 2. Затем 10% раствора из сосуда 2 в течение 10 мин по каплям добавляли в сосуд
I. Температуру сосуда 1 поддерживали при примерно 60°С.
Затравочный материал сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) (1,2 г, 0,0018 моль), который можно получать, как описано в примере 1.1, добавляли в сосуд 1 и температуру удерживали на уровне 60°С в течение примерно 1 ч. Затем оставшееся содержимое сосуда 2 в течение примерно 16 ч по каплям добавляли в сосуд 1. Полученную взвесь охлаждали до комнатной температуры в течение 5 ч и затем фильтровали и промывали метанолом. Выделенное твердое вещество высушивали в вакуумной печи при 50°С с получением сокристалла ^)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) (выход 56,45%).
1H ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 1,43 (d, J=7,00 Гц, 3Н), 1,54-1,69 (m, 2Н), 1,80 (d, J=11,36 Гц, 2Н), 2,74 (tt, J=12,06, 3,41 Гц, 1Н), 2,84 (s, 3Н), 2,91-3,03 (m, 2Н), 3,25-3,63 (m, 6Н), 3,83 (d, J=6,88 Гц, 1Н), 4,10-4,34 (m, 7Н), 6,89 (d, J=8,69 Гц, 2Н), 7,09-7,22 (m, 4Н), 7,28 (d, J=10,34 Гц, 1Н), 7,72 (d, J=8,72 Гц, 1Н), 7,79-7,88 (m, 2Н), 7,92 (d, J=8,88 Гц, 1Н), 8,44 (d, J=0,63 Гц, 1Н), 10,12 (br. S., 1H).
Масса/заряд (ES+), [М+Н]+=480.
Данную форму определяли как кристаллическую с помощью XRPD.
Получение 4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенола.
3-Хлор-6-гидразинилпиридазин (0,753 кг) смешивали с тетраметоксиметаном (8,231 моль, 1,22 кг) в метаноле (5,7 л) и перемешивали. Полученную смесь затем нагревали и перемешивали при 55°С в течение 2 ч. После охлаждения до 45°С добавляли 4-(пиперидин-4-ил)фенола гидробромид (полученный как описано выше) (1,000 кг, 3,874 моль). Затем по каплям в течение периода приблизительно 10 мин добавляли DIPEA (2,03 л, 11,6 моль) и реакционную смесь дополнительно перемешивали. Добавляли метанол (5,1 л, 126 моль) и реакционную смесь перемешивали в течение по меньшей мере 48 ч при примерно 45°С. Смесь фильтровали и фильтрат промывали метанолом и водой. Отделенное твердое вещество высушивали в вакуумной печи при примерно 50°С с получением 4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенола (выход 65%).
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,59 (2Н, qd), 1,81 (2Н, d), 2,67 (1H, ddt), 2,9-3,02 (2Н, m), 4,17 (3Н, s), 4,23-4,31 (2Н, m), 6,63-6,71 (2Н, m), 7,02 (2Н, dd), 7,29 (1H, d), 7,84 (1H, d), 9,14 (1H, s).
Масса/заряд ES+ [М+Н]+=326.
Сокристалл (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) анализировали с помощью XRPD и DSC.XRPD образца материала приводила к получению дифрактограммы, показанной на фиг. I. Форма А сокристалла (11)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) характеризуется по меньшей мере одним пиком при значении 20 19,4 или 12,5°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения. Десять наиболее выраженных пиков XRPD показаны в табл. С.
Таблица С
Десять наиболее выраженных пиков XRPD для формы А сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-
он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
Угол 2-тета
Интенсивность
(20)
19,4
100
12,5
79,3
12,8
77,4
18,1
75,0
24,2
66,8
23,4
55,2
14,0
53,2
18,6
37,8
17,0
37,5
17,9
36,4
В таблице значения угла 2-тета (20) составляют ±0,2°.
Анализ с применением дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) формы А сокристал-ла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) продемонстрировал эндотерму плавления с началом при 184,9°С и пиком при 187,9°С (фиг. J).
Таким образом, анализ DSC продемонстрировал, что форма А сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) является тугоплавким твердым веществом с началом плавления в диапазоне 163-186°С и пиком в диапазоне 169-188°С.
Пример 1.1А. Материал, полученный при повторном получении по пути, описанном в примере 1.1, давал в результате дополнительную форму, форму В. Данную форму определяли как кристаллическую с помощью XRPD.XRPD образца материала приводила к получению дифрактограммы, показанной на фиг. К. Форма В сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) характеризуется по меньшей мере одним пиком при значении 20 15,2 или 6,1°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения. Девять наиболее выраженных пиков XRPD показаны в табл. D.
Таблица D
Девять наиболее выраженных пиков XRPD для формы В сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-
он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
Угол 2-тета
Интенсивность
(20)
15,2
40,9
6,1
58,1
16,8
64,3
12,2
44,0
26,1
43,9
28,4
41,0
18,3
34,2
30,6
20,7
25,4
В таблице значения угла 2-тета (20) составляют ±0,2°.
Анализ с применением дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) формы В сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) продемонстрировал эндотерму плавления с началом при 169,3°С и пиком при 172,7°С. Кривая DSC показана на фиг. L.
Пример 1.3. Получение формы С сокристалла ^)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1).
Образец формы А сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) анализировали с помощью высокотемпературной XRPD с применением дифрактометра Bruker D8 advance. Образец нагревали до 210°С, при этом дифрактограммы регистрировали каждые 3°С.
Затем образец охлаждали до 25°С при 10°С/мин и при обеспечении доступа к предметному столику в конце эксперимента наблюдали, что материал сублимировался и собирался на ограничителе размера пучка типа лезвия ножа дифрактометра в виде порошка белого цвета. Данный белый порошок собирали и анализировали, и было показано, что он имел отличную кристаллическую форму, форму С. Данную форму определяли как кристаллическую с помощью XRPD.XRPD образца материала приводила к получению дифрактограммы, показанной на фиг. M. Форма С сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) характеризуется по меньшей мере одним пиком при значении 20 8,2 или 24,8°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения. Семь наиболее выраженных пиков XRPD показаны в табл. E.
Таблица E
Семь наиболее выраженных пиков XRPD для формы С сокристалла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-
В таблице значения угла 2-тета (20) составляют ±0,2°.
Анализ с применением дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) формы С сокристал-ла (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-диметилпиперазин-2-он:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) продемонстрировал эндотерму плавления с началом при 156,8°С и пиком при 160,5°С. Кривая DSC показана на фиг. N.
Пример 2. Получение 1-((3S,5R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона
К 1-((3S,5R)-3,5-диметил-4-(2-(4-(пиперидин-4-ил)фенокси)этил)пиперазин-1-ил)этанону (1,502 г, 4,18 ммоль) и 6-хлор-3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазину (полученному, как описано в примере 1, получение исходных материалов) (1,003 г, 5,43 ммоль) в DMF (15 мл) добавляли DIPEA (1,455 мл, 8,36 ммоль). Полученный раствор перемешивали при 80°С в течение 18 ч и выпаривали до сухого состояния. Неочищенный продукт очищали с помощью ионообменной хроматографии с применением колонки SCX. Необходимый продукт элюировали из колонки с применением 1 М N^/МеОН и выпаривали до сухого состояния с получением смолы коричневого цвета. Полученное дополнительно очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюирования 0-10% 7 М М13/МеОН в EtOAc. Чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением 1-((3S,5R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона (0,991 г, 46,7%) в виде пены кремового цвета.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO, 100°С) 1,06-1,1 (6Н, m), 1,69 (2Н, qd), 1,91 (2Н, d), 1,97 (3Н, s), 2,56-2,68 (4Н, m), 2,78 (1H, tt), 2,99 (2Н, t), 3,06 (2Н, td), 3,84 (2Н, br s), 4,00 (2Н, t), 4,21 (3Н, s), 4,27 (2Н, d), 6,836,88 (2Н, m), 7,14-7,19 (3Н, m), 7,74 (1H, d).
Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=508.
1-((3S,5R)-3,5-Диметил-4-(2-(4-(пиперидин-4-ил)фенокси)этил)пиперазин-1-ил)этанон, применяемый в качестве исходного материала, получали, как описано далее.
Получение бензил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1 -карбоксилата
К 4-(пиперидин-4-ил)фенола гидробромиду (полученному, как описано в примере 1, получение исходных материалов) (9 г, 34,86 ммоль) и DIPEA (14,57 мл, 83,67 ммоль) в DCM (150 мл) добавляли бен-зилхлорформиат (5,97 мл, 41,84 ммоль). Полученную суспензию перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь промывали последовательно водой (2x100 мл) и 1 М водным раствором лимонной кислоты (100 мл). Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюирования 0-5% МеОН в DCM. Чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением бензил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилата (7,89 г, 72,7%) в виде бесцветной смолы, которая затвердевала при отстаивании.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,43 (2Н, qd), 1,71 (2Н, d), 2,57 (1H, tt), 2,79-2,93 (2Н, m), 4,11 (2Н, d), 5,08 (2Н, s), 6,64-6,69 (2Н, m), 6,98-7,02 (2Н, m), 7,28-7,33 (1H, m), 7,34-7,4 (4Н, m), 9,10 (1H, s).
Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=312.
Получение бензил-4-(4-(2-хлорэтокси)фенил)пиперидин-1 -карбоксилата
К бензил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилату (5,322 г, 17,09 ммоль) и карбонату калия (4,72 г, 34,18 ммоль) в MeCN (80 мл) добавляли 1-бром-2-хлорэтан (2,134 мл, 25,64 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 85°С в течение 18 ч. Реакция не была завершена, и добавляли дополнительное количество карбоната калия (4,72 г, 34,18 ммоль) и 1-бром-2-хлорэтана (2,134 мл, 25,64 ммоль) и смесь перемешивали при 85°С в течение дополнительных 48 ч. Реакция демонстрировала некоторый прогресс до ~50% завершения. Реакция не была завершена, поэтому температуру повышали до 95°С и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 24 ч. Реакционную смесь выпаривали до сухого состояния и повторно растворяли в EtOAc (200 мл) и промывали последовательно водой (2x100 мл) и насыщенным солевым раствором (100 мл). Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюирования 0-5% МеОН в DCM. Чистые фракции выпа
ривали до сухого состояния с получением бензил-4-(4-(2-хлорэтокси)фенил)пиперидин-1-карбоксилата (3,30 г, 51,7%) в виде смолы бледно-желтого цвета.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,47 (2Н, qd), 1,73 (2Н, d), 2,64 (1H, tt), 2,81-2,95 (2Н, m), 3,90 (2Н, dd), 4,12 (2Н, d), 4,20 (2Н, dd), 5,08 (2Н, s), 6,85-6,9 (2Н, m), 7,12-7,17 (2Н, m), 7,28-7,34 (1H, m), 7,34-7,4 (4Н, m).
Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=374.
Получение бензил-4-(4-(2-((2S,6R)-4-ацетил-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этокси)фенил)пиперидин-1-карбоксилата
К бензил-4-(4-(2-хлорэтокси)фенил)пиперидин-1-карбоксилату (2,18 г, 5,83 ммоль), 1-((3S,5R)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанону (1,366 г, 8,75 ммоль) и иодиду калия (0,968 г, 5,83 ммоль) в DMA (25 мл) добавляли DIPEA (3,05 мл, 17,49 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 125°С в течение 18 ч. Реакционную смесь выпаривали до сухого состояния и повторно растворяли в EtOAc (250 мл) и промывали последовательно водой (200 мл) и насыщенным солевым раствором (200 мл). Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали с получением неочищенного продукта. Полученное очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюирования 0-4% 7 М NH3/MeOH в DCM. Чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением бензил-4-(4-(2-((2S,6R)-4-ацетил-2,6-диметилпиперазин-1-ил)этокси)фенил)пиперидин-1-карбоксилата (2,180 г, 76%) в виде смолы коричневого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 100°С) 1,06-1,1 (6Н, m), 1,51 (2Н, qd), 1,76-1,83 (2Н, m), 1,97 (3Н, s), 2,572,72 (5Н, m), 2,93 (2Н, td), 2,99 (2Н, t), 3,85 (2Н, br s), 4,00 (2Н, t), 4,14 (2Н, d), 5,12 (2Н, s), 6,83-6,87 (2Н, m), 7,1-7,15 (2Н, m), 7,27-7,33 (1H, m), 7,34-7,38 (4Н, m).
Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=494.
Получение 1-((38,5К)-3,5-диметил-4-(2-(4-(пиперидин-4-ил)фенокси)этил)пиперазин-1-ил)этанона
Бензил-4-(4-(2-((2S,6R)-4-ацетил-2,6-диметилпиперазин-1 -ил)этокси)фенил)пиперидин-1 -карбоксилат (2,18 г, 4,42 ммоль) и 10% палладий на угле (0,470 г, 0,44 ммоль) в МеОН (45 мл) перемешивали в атмосфере водорода в течение 5 ч. Затем смесь фильтровали и выпаривали до сухого состояния с получением 1 -((3S,5R)-3,5-диметил-4-(2-(4-(пиперидин-4-ил)фенокси)этил)пиперазин-1 -ил)этанона (1,502 г, 95%) в виде смолы бледно-желтого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 100°С) 1,07-1,1 (6Н, m), 1,48 (2Н, qd), 1,70 (2Н, d), 1,97 (3Н, s), 2,5-2,66 (7Н, m), 2,99 (2Н, t), 3,01-3,07 (2Н, m), 3,85 (2Н, br s), 4,00 (2Н, t), 6,82-6,86 (2Н, m), 7,09-7,13 (2Н, m).
Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=360.
1-((3S,5R)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанон, применяемый в качестве исходного материала, получали, как описано далее.
Получение К-ацетил-К-(2-(трифторметил)(фенил)ацетамида
К 2-(трифторметил)анилину (100 г, 620,64 ммоль) и пиридину (200 мл, 2482,55 ммоль) в толуоле (500 мл), охлажденном до 0°С, в течение 30 мин по каплям добавляли ацетилхлорид (132 мл, 1861,91 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 50°С и перемешивали в течение 20 ч. Затем смесь охлаждали до температуры окружающей среды и дважды промывали 1 М водным раствором лимонной кислоты (250 мл). Затем смесь неочищенного продукта выпаривали до половинного объема и обрабатывали с помощью гептана (500 мл). Полученную взвесь перемешивали при 5°С в течение 4 ч и затем осадок собирали с помощью фильтрования, промывали гептаном (500 мл) и высушивали под вакуумом. В результате этого получали ^ацетил-^(2-(трифторметил)фенил)ацетамид (93 г, 59,1%) в виде твердого вещества светло-коричневого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 2,18 (6Н, s), 7,58-7,93 (4Н, m). Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=246.
Получение 1 -((3 S, 5R) -3,5 -диметилпиперазин-1 -ил)этанона
N-ацетил-N-(2-(трифторметил)фенил)ацетамид (13,28 г, 52,54 ммоль) добавляли к 2R,6S-2,6-диметилпиперазину (5 г, 43,79 ммоль) в EtOH (75 мл) и смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 24 ч. Затем полученное выпаривали до сухого состояния, повторно растворяли в DCM (25 мл) и промывали 2 М водным HCl (25 мл). Затем повышали основность водного раствора до рН 14 с помощью концентрированного водного раствора NaOH и экстрагировали с помощью DCM (2x25 мл). Объединенные органические вещества выпаривали до сухого состояния с получением жидкости желтого цвета. Полученное очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюирования 0-10% 7 М NH3/MeOH в DCM. Чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением 1-(^^)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона (4,00 г, 66,7%) в виде масла бледно-бежевого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 100°С) 0,98 (6Н, d), 1,78 (1H, br s), 1,96 (3Н, s), 2,26 (2Н, br s), 2,58-2,68 (2Н, m), 3,94 (2Н, br s).
Пример 3. Получение (R)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-1,3-диметилпиперазин-2-она
Триэтиламин (0,396 мл, 2,84 ммоль) добавляли к 6-хлор-3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазину (полученному, как описано в примере 1, получение исходных материалов) (350 мг, 1,90 ммоль) и (R)-1,3-диметил-4-(3-(4-(пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)пиперазин-2-ону (655 мг, 1,90 ммоль) в DMF (10 мл) и смесь нагревали до 56°С в течение 5 ч. Раствор неочищенного продукта очищали с помощью ионообменной хроматографии с применением колонки SCX. Необходимый продукт элюировали из колонки с применением 7 М №13/МеОН и выпаривали до сухого состояния с получением смолы коричневого цвета. Полученное дополнительно очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюирования 0-10% МеОН в DCM. Чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением (R)-4-(3 -(4-( 1 -(3 -метокси[1,2,4]триазоло [4,3-b] пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил) -1,3-диметилпиперазин-2-она (140 мг, 14,96%) в виде пены коричневого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,20 (3Н, d), 1,64 (2Н, m), 1,86 (4Н, m), 2,45 (2Н, m), 2,72 (2Н, m), 2,82 (3Н, s), 3,00 (4Н, m), 3,25 (2Н, m), 3,98 (2Н, tr), 4,19 (3Н, s), 4,30 (2Н, m), 6,87 (2Н, dd), 7,17 (2Н, dd), 7,30 (1H, d), 7,86 (1H, d).
Масса/заряд ES+ [М+Н]+=494.
(R)-1,3-диметил-4-(3-(4-(пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)пиперазин-2-он, применяемый в качестве исходного материала, получали, как описано далее.
Получение трет-бутил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилата
К 4-(пиперидин-4-ил)фенола гидробромиду (полученному, как описано в примере 1, получение исходных материалов) (40 г, 154,95 ммоль) в DCM (190 мл) при 0°С медленно добавляли триэтиламин (23,76 мл, 170,44 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 20 мин и затем добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (35,5 г, 162,69 ммоль). Ледяную баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Реакционную смесь промывали последовательно водой (2x200 мл) и насыщенным солевым раствором (200 мл). Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали с получением неочищенного продукта. Твердое вещество поглощали в МТВЕ (150 мл) и обрабатывали ультразвуком и суспендировали в течение 2 ч. Полученное твердое вещество собирали с помощью фильтрования, промывали гептаном (200 мл) и высушивали под вакуумом с получением трет-бутил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилата (36,0 г, 84%) в виде продукта, представляющего собой твердое вещество кремово-белого цвета.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO, 27°С) 1,40 (9Н, s), 1,44 (2Н, d), 1,68 (2Н, d), 2,49-2,59 (1H, m), 2,76 (2Н,
s), 4,03 (2Н, d), 6,63-6,7 (2Н, m), 6,96-7,04 (2Н, m), 9,13 (1H, s). Масса/заряд [ES-] М-=276.
Получение трет-бутил-4-(4-(3 -хлорпропокси)фенил)пиперидин-1 -карбоксилата
К перемешанному раствору трет-бутил-4-(4-гидроксифенил)пиперидин-1-карбоксилата (9,99 г, 36,02 ммоль) в MeCN (200 мл) добавляли 1-бром-3-хлорпропан (14,27 мл, 144,07 ммоль) и карбонат калия (19,91 г, 144,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (125 мл) и экстрагировали с помощью DCM (200 мл). Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали с получением трет-бутил-4-(4-(3-хлорпропокси)фенил)пиперидин-1-карбоксилата (12,75 г, 100%) в виде бесцветного масла.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3, 30°С) 1,48 (9Н, s), 1,54-1,65 (2Н, m), 1,79 (2Н, d), 2,20 (2Н, d), 2,59 (1H, tt), 2,78 (2Н, t), 3,56 (2Н, t), 4,02-4,13 (2Н, m), 4,23 (2Н, d), 6,8-6,87 (2Н, d), 7,03-7,17 (2Н, d).
Получение (R)-трет-бутил-4-(4-(3-(2,4-диметил-3-оксопиперазин-1-ил)пропокси)фенил)пиперидин-1-карбоксилата
К суспензии (R)-1,3-диметилпиперазин-2-она гидрохлорида (7,12 г, 43,23 ммоль), трет-бутил-4-(4-(3-хлорпропокси)фенил)пиперидин-1-карбоксилата (12,75 г, 36,03 ммоль) и иодида калия (5,98 г, 36,03 ммоль) в DMA (100 мл) добавляли DIPEA (28,2 мл, 162,13 ммоль). Раствор нагревали до 120°С в течение 24 ч. Реакционную смесь разбавляли водой (200 мл) и экстрагировали с помощью DCM (200 мл). Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали с получением неочищенного продукта. Полученное очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния с элюированием с помощью 10% МеОН в EtOAc. Чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением ^)-трет-бутил-4-(4-(3-(2,4-диметил-3-оксопиперазин-1-ил)пропокси)фенил)пиперидин-1-карбоксилата (15,50 г, 97%) в виде масла коричневого цвета.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,19-1,22 (3Н, d), 1,42 (9Н, s), 1,71 (2Н, d), 1,8-1,9 (2Н, m), 1,96 (2Н, s), 2,37-2,49 (1H, m), 2,60 (1H, ddt), 2,80 (5Н, d), 2,93-3,05 (4Н, m), 3,2-3,28 (2Н, m), 4,05 (2Н, dd), 6,8-6,9 (2Н, m), 7,12 (2Н, dd).
Масса/заряд ES+ [М+Н]+=446.
Получение 1(Я)-1,3-диметил-4-(3-(4-(пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)пиперазин-2-она
К суспензии (R)-трет-бутил-4-(4-(3-(2,4-диметил-3-оксопиперазин-1-ил)пропокси)фенил)-пиперидин-1-карбоксилата (15,5 г, 34,78 ммоль) в диоксане (20 мл) добавляли 4,0 М хлороводород в ди-оксане (34,8 мл, 139,14 ммоль). Раствор перемешивали до 20°С в течение 2 ч. Реакционную смесь выпаривали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью ионообменной хроматографии с применением колонки SCX. Необходимый продукт элюировали из колонки с применением 7 М №13/МеОН и чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением (R)-1,3-диметил-4-(3-(4-(пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)пиперазин-2-она (10,50 г, 87%) в виде масла коричневого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 1,21 (3Н, d), 1,73-1,93 (6Н, m), 2,4-2,46 (1H, m), 2,68-2,78 (2Н, m), 2,80 (3Н, s), 2,92-3,04 (4Н, m), 3,18 (1H, d), 3,22-3,27 (2Н, m), 3,35 (2Н, s), 3,98 (2Н, t), 6,89 (2Н, d), 7,13 (2Н, d), 8,79 (1H, bs).
Масса/заряд ES+ [М+Н]+=346.
Пример 4. Получение 1-((3S,5R)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона
К 4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенолу (полученному, как описано в примере 1, получение исходных материалов) (0,95 г, 2,92 ммоль), 1-((3R,5S)-4-(3-гидроксипропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанону (0,751 г, 3,50 ммоль) и (Е)-диазен-1,2-диил-бис-(пиперидин-1-ил-метанону) (1,473 г, 5,84 ммоль) в дегазированном DCM (20 мл) под азотом добавляли по каплям трибутилфосфин (1,441 мл, 5,84 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 90 мин и затем фильтровали. Раствор неочищенного продукта очищали с помощью ионообменной хроматографии с применением колонки SCX. Необходимый продукт элюировали из колонки с применением 1 М ЮТ3/МеОН и выпаривали до сухого состояния с получением смолы бледно-коричневого цвета. Полученное дополнительно очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюиро-вания 0-10% 7 М М13/МеОН в EtOAc. Чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением 1-((3R,5S)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона (0,868 г, 57,0%) в виде пены белого цвета.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 100°С) 1,04 (6Н, d), 1,69 (2Н, qd), 1,76-1,84 (2Н, m), 1,88-1,94 (2Н, m), 1,96 (3Н, s), 2,51-2,55 (2Н, m), 2,56-2,7 (2Н, m), 2,74-2,82 (3Н, m), 3,06 (2Н, td), 3,81 (2Н, br s), 3,98 (2Н, t), 4,21 (3Н, s), 4,27 (2Н, d), 6,83-6,87 (2Н, m), 7,13-7,18 (3Н, m), 7,74 (1H, d).
Масса/заряд: ES+ [М+Н]+=522.
1-((3R,5S)-4-(3-Гидроксипропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанон, применяемый в качестве ис-
ходного материала, получали, как описано далее.
Получение l-((ЗS,5R)-4-(3-гидpoкcипpoпил)-3,5-димeтилпипepaзин-l-ил)этaнoнa
К 1-((3R,5S)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанону (полученному, как описано в примере 2, получение исходных материалов) (6,51 г, 41,67 ммоль) и карбонату калия (14,40 г, 104,18 ммоль) в 2-метилтетрагидрофуране (40 мл) добавляли 3-бромпропан-1-ол (6,41 мл, 70,84 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 80°С в течение 18 ч, затем фильтровали и выпаривали до сухого состояния. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии на диоксиде кремния, градиент элюирования 0-6% 7 М ЮТ3/МеОН в DCM. Чистые фракции выпаривали до сухого состояния с получением 1-((3R,5S)-4-(3-гидроксипропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона (0,749 г, 8,39%) в виде бесцветного масла.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO, 30°С) 0,96-1,03 (6Н, m), 1,39-1,5 (2Н, m), 1,96 (3Н, s), 2,19-2,28 (1H, m), 2,28-2,36 (1H, m), 2,39-2,47 (1H, m), 2,67-2,77 (3Н, m), 3,36 (2Н, t), 3,60 (1H, dt), 4,12 (1H, dt), 4,36 (1H, br
s).
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль:
(I)
где R1 представляет собой группу о
обозначает точку присоединения;
R2 представляет собой CrQ-алкил и
или группу
n равняется 2 или 3.
R1 представляет собой группу о ,
обозначает точку присоединения;
представляет собой Q-Q-алкил и n равняется 2 или 3.
3. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 представляет собой группу ° ,
обозначает точку присоединения;
представляет собой Q-Q-алкил и n равняется 2 или 3.
4. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 представляет собой группу 0 ,
обозначает точку присоединения;
представляет собой Q-Q-алкил и n равняется 2.
5. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, при этом соединение выбрано из 4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-
диметилпиперазин-2-она,
1-(4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона,
4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-1,3-диметилпиперазин-2-она и
1-(4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона.
6. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, при этом соединение выбрано из (R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)этил)-1,3-
диметилпиперазин-2-она (называемого далее в данном документе соединением A),
1-((3S,5R)-4-(2-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-
ил)фенокси)этил) -3, 5 -диметилпиперазин-1 -ил)этанона,
(R)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-ил)фенокси)пропил)-
1,3-диметилпиперазин-2-она и
1-((3R,5S)-4-(3-(4-(1-(3-метокси[1,2,4]триазоло[4,3-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-4-
ил)фенокси)пропил)-3,5-диметилпиперазин-1-ил)этанона.
7. Соединение по п.6 или его фармацевтически приемлемая соль, представленные формулой (IA)
8. Соединение по п.7, представленное формулой (IA).
9. Соединение по п.8 в кристаллической форме, которая имеет рентгенограмму XRPD по меньшей мере с двумя характерными пиками при 2-тета=20,9° и 16,7+0,2° 2-тета, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
10. Сокристалл соединения формулы (IA) по п.7 и 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты в качестве молекулы коформера, где сокристалл имеет рентгенограмму XRPD по меньшей мере с двумя пиками приблизительно при 2-тета=19,4 и 12,5°, согласно измерениям с применением CuKa-излучения.
11. Способ получения сокристалла соединения формулы (IA) по п.7 и 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты, получаемого посредством стадий:
i) смешивание раствора соединения формулы (IA) в подходящем растворителе с сокристаллом на основе 6-гидрокси-2-нафтойной кислоты в подходящем растворителе при повышенной температуре;
ii) добавление затравочного материала сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) к смеси, полученной на стадии (i);
i)
iii) охлаждение смеси, полученной на стадии (ii);
iv) фильтрование смеси, полученной на стадии (iii); и
v) высушивание твердого вещества, выделенного на стадии (iv), с получением твердого вещества.
12. Применение соединения по любому из пп.1-9 или его фармацевтически приемлемой соли или сокристалла по п.10 в предупреждении или лечении рака у человека.
13. Применение по п.12 в лечении рака яичников, острого миелолейкоза и недифференцированного лейкоза (AML), множественной миеломы (MM), диффузной В-крупноклеточной лимфомы (DLBCL), кастрационно-резистентного рака предстательной железы (CRPC), немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), мелкоклеточного рака легкого (SCLC), рака молочной железы, глиобластомы и нейробластомы у человека.
14. Способ предупреждения или лечения рака у человека, нуждающегося в таком лечении, который включает введение эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-9 или сокристалла по п.10.
15. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1-9 или сокристалл по п.10 и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель, для применения в предупреждении или лечении рака у человека.
12.
12.
Многоуровневый график спектров 13С ЯМР твердого тела (нижний спектр: форма А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) средний спектр: соединение А (свободное основание)
верхний спектр: 6-гидрокси-2-нафтойная кислота)
Многоуровневый график спектра 15N ЯМР твердого тела формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1) (нижний спектр - время контакта 2 мс) (верхний спектр - время контакта 200 мкс)
Порошковая рентгенограмма формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
о , . . . , . . . , . . . ,
3 10 20 30 40
Шкала 2-тета Фиг. I
Температура (°С) Фиг. J
Термограмма DSC формы В сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
0,5
0,0
в "°'5'
о -1,0
1,5
-2,0
-2,5
100 150 200
Температура (°С) Фиг. L
250 300
Universal V4.5A ТА Instruments
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
032654
032654
- 1 -
- 1 -
(19)
032654
032654
- 1 -
- 1 -
(19)
032654
032654
- 1 -
- 1 -
(19)
032654
032654
- 2 -
- 1 -
(19)
032654
032654
- 1 -
- 1 -
(19)
032654
032654
- 1 -
- 3 -
032654
032654
- 7 -
032654
032654
- 10 -
- 10 -
032654
Таблица 1
032654
- 13 -
- 12 -
032654
032654
- 15 -
- 15 -
032654
032654
032654
032654
032654
032654
032654
032654
032654
2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где
032654
2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где
- 33 -
- 33 -
032654
Порошковая рентгенограмма формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
032654
- 35 -
- 34 -
032654
Спектр *Н ЯМР формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
032654
Спектр *Н ЯМР формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
- 37 -
- 37 -
032654
Термограмма DSC формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
032654
Термограмма DSC формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
- 38 -
- 38 -
032654
Термограмма DSC формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
032654
Термограмма DSC формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
- 38 -
- 38 -
032654
Термограмма DSC формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
032654
Термограмма DSC формы А сокристалла соединение А:6-гидрокси-2-нафтойная кислота (1:1)
- 38 -
- 38 -
032654
032654
- 39 -
- 39 -
|
