[RU]

1. Соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, где Ar представляет собой арил, представляющий собой карбоциклический углеводородный радикал моноциклического кольца или конденсированных колец, содержащих 6-12 атомов углерода в кольце, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим и ни одно из других колец не представляет собой гетероарил; или гетероарил, представляющий собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде N-оксида; каждый из указанного арила и гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, C _1-6 галогеналкила, -(C _1-6 алкил)OH и -S(O) ₂ (C _1-6 алкил); W выбран из гетероарила и -N(R ₃ )гетероарила, где указанный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде N-оксида, и указанный гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), -COOH, -C(O)NH ₂ , -C(O)NH(C _1-6 алкил), -C(O)N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5- или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и каждый из указанного фенила или указанного 5- или 6-членного гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, -SH, C _1-6 алкила и -O(C _1-6 алкил); R ₁ независимо выбран из H, галогена, C _1-6 алкила; R ₂ выбран из C _1-6 алкила; R ₃ представляет собой H или C _1-6 алкил; m представляет собой 1 или 2.

2. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры и диастереомеры, отличающееся тем, что W выбран из азотсодержащего гетероарила и -N(R ₃ ) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 6 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома N, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 атомов в кольце и содержащий в кольцах 3 или 4 гетероатома N, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, и указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), -COOH, -C(O)NH ₂ , -C(O)NH(C _1-6 алкил), -C(O)N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5- или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и каждый из указанного фенила или указанного 5- или 6-членного гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -О(C _1-6 алкил).

3. Соединение формулы (I) по п.2, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры, отличающееся тем, что указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(C _1-6 алкил), -COOH, -С(О)NH ₂ , фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -O(C _1-6 алкил).

4. Соединение формулы (I) по п.3, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры, отличающееся тем, что указанный азотсодержащий гетероарил выбран из пиримидинила, пирролопиримидинила и пуринила и/или галоген выбран из фтора, хлора и брома.

5. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W выбран из: каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), -COOH, -C(O)NH ₂ , -C(O)NH(C _1-6 алкил), фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -О(C ₁ -C ₆ -алкил).

6. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W выбран из: каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из хлора, -CN, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -COOH, -C(O)NH ₂ , фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -O(C _1-6 алкил).

7. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W представляет собой который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(C _1-6 алкил), -COOH, -С(О)NH ₂ , фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -O(C _1-6 алкил).

8. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-7, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что Ar выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиразолила, хинолила, тиенила, бензотиазолила, индолила и 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксинила, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из D, галогена, -CN, C _1-6 алкила, -(C _1-6 алкил)OH, C _1-6 галогеналкила и -S(O) ₂ (C _1-6 алкил).

9. Соединение формулы (I) по п.8, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что Ar представляет собой фенил или пиридил, каждый из которых необязательно замещен одним или более атомами фтора.

10. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-9, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что R ₁ независимо выбран из H, галогена и C _1-6 алкила, и/или R ₂ представляет собой C _1-4 алкил, предпочтительно метил и этил, и/или R ₃ представляет собой H, и/или m представляет собой 1.

11. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-10, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что формула (I) представляет собой формулу (I-1)

12. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, выбранное из:

13. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI ₃ K, содержащая соединение формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

14. Способ in vivo или in vitro ингибирования активности PI ₃ K, включающий приведение в контакт PI ₃ K с количеством соединения формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его по меньшей мере одной фармацевтически приемлемой соли, эффективным для ингибирования активности PI ₃ K.

15. Способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI ₃ K у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, количества соединения формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для ингибирования указанного PI ₃ K у указанного субъекта.

16. Способ по п.15, отличающийся тем, что указанное заболевание, реагирующее на ингибирование PI ₃ K, представляет собой воспалительное заболевание, аутоиммунное заболевание или рак.

17. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанное воспалительное заболевание или аутоиммунное заболевание выбрано из ревматоидного артрита, хронической обструктивной болезни легких (COPD), аллергического ринита, астмы, волчанки, системной красной волчанки, псориаза и рассеянного склероза.

18. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанный рак представляет собой солидную опухоль или гематологическую злокачественную опухоль, выбранную из лейкоза, множественной миеломы (ММ) и лимфомы.

19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный лейкоз выбран из острого лимфоцитарного лейкоза (ALL), острого миелоидного лейкоза (AML), хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL) и хронического миелогенного лейкоза (CML); указанная лимфома выбрана из лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы (NHL), лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), фолликулярной лимфомы, В-клеточной лимфомы, Т-клеточной лимфомы и диффузной В-клеточной лимфомы (DLBCL).

20. Соединение формулы (II) в качестве промежуточного соединения и/или его соль, и/или его рацемическая смесь или энантиомер, где Ar и R ₂ определены в любом из пп.1-11.

21. Соединение формулы (II) в качестве промежуточного соединения по п.20 и/или его соль, выбранное из:

(57) Реферат / Формула:

1. Соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, где Ar представляет собой арил, представляющий собой карбоциклический углеводородный радикал моноциклического кольца или конденсированных колец, содержащих 6-12 атомов углерода в кольце, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим и ни одно из других колец не представляет собой гетероарил; или гетероарил, представляющий собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде N-оксида; каждый из указанного арила и гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, C _1-6 галогеналкила, -(C _1-6 алкил)OH и -S(O) ₂ (C _1-6 алкил); W выбран из гетероарила и -N(R ₃ )гетероарила, где указанный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде N-оксида, и указанный гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), -COOH, -C(O)NH ₂ , -C(O)NH(C _1-6 алкил), -C(O)N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5- или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и каждый из указанного фенила или указанного 5- или 6-членного гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, -SH, C _1-6 алкила и -O(C _1-6 алкил); R ₁ независимо выбран из H, галогена, C _1-6 алкила; R ₂ выбран из C _1-6 алкила; R ₃ представляет собой H или C _1-6 алкил; m представляет собой 1 или 2.

2. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры и диастереомеры, отличающееся тем, что W выбран из азотсодержащего гетероарила и -N(R ₃ ) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 6 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома N, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 атомов в кольце и содержащий в кольцах 3 или 4 гетероатома N, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, и указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), -COOH, -C(O)NH ₂ , -C(O)NH(C _1-6 алкил), -C(O)N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5- или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и каждый из указанного фенила или указанного 5- или 6-членного гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -О(C _1-6 алкил).

3. Соединение формулы (I) по п.2, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры, отличающееся тем, что указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(C _1-6 алкил), -COOH, -С(О)NH ₂ , фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -O(C _1-6 алкил).

4. Соединение формулы (I) по п.3, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры, отличающееся тем, что указанный азотсодержащий гетероарил выбран из пиримидинила, пирролопиримидинила и пуринила и/или галоген выбран из фтора, хлора и брома.

5. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W выбран из: каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(С _1-6 алкил), -COOH, -C(O)NH ₂ , -C(O)NH(C _1-6 алкил), фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -О(C ₁ -C ₆ -алкил).

6. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W выбран из: каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из хлора, -CN, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -COOH, -C(O)NH ₂ , фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -O(C _1-6 алкил).

7. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W представляет собой который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C _1-6 алкила, -NH ₂ , -NH(C _1-6 алкил), -N(C _1-6 алкил)(C _1-6 алкил), -COOH, -С(О)NH ₂ , фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C _1-6 алкила и -O(C _1-6 алкил).

8. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-7, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что Ar выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиразолила, хинолила, тиенила, бензотиазолила, индолила и 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксинила, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из D, галогена, -CN, C _1-6 алкила, -(C _1-6 алкил)OH, C _1-6 галогеналкила и -S(O) ₂ (C _1-6 алкил).

9. Соединение формулы (I) по п.8, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что Ar представляет собой фенил или пиридил, каждый из которых необязательно замещен одним или более атомами фтора.

10. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-9, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что R ₁ независимо выбран из H, галогена и C _1-6 алкила, и/или R ₂ представляет собой C _1-4 алкил, предпочтительно метил и этил, и/или R ₃ представляет собой H, и/или m представляет собой 1.

11. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-10, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что формула (I) представляет собой формулу (I-1)

12. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, выбранное из:

13. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI ₃ K, содержащая соединение формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

14. Способ in vivo или in vitro ингибирования активности PI ₃ K, включающий приведение в контакт PI ₃ K с количеством соединения формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его по меньшей мере одной фармацевтически приемлемой соли, эффективным для ингибирования активности PI ₃ K.

15. Способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI ₃ K у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, количества соединения формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для ингибирования указанного PI ₃ K у указанного субъекта.

16. Способ по п.15, отличающийся тем, что указанное заболевание, реагирующее на ингибирование PI ₃ K, представляет собой воспалительное заболевание, аутоиммунное заболевание или рак.

17. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанное воспалительное заболевание или аутоиммунное заболевание выбрано из ревматоидного артрита, хронической обструктивной болезни легких (COPD), аллергического ринита, астмы, волчанки, системной красной волчанки, псориаза и рассеянного склероза.

18. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанный рак представляет собой солидную опухоль или гематологическую злокачественную опухоль, выбранную из лейкоза, множественной миеломы (ММ) и лимфомы.

19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный лейкоз выбран из острого лимфоцитарного лейкоза (ALL), острого миелоидного лейкоза (AML), хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL) и хронического миелогенного лейкоза (CML); указанная лимфома выбрана из лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы (NHL), лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), фолликулярной лимфомы, В-клеточной лимфомы, Т-клеточной лимфомы и диффузной В-клеточной лимфомы (DLBCL).

20. Соединение формулы (II) в качестве промежуточного соединения и/или его соль, и/или его рацемическая смесь или энантиомер, где Ar и R ₂ определены в любом из пп.1-11.

21. Соединение формулы (II) в качестве промежуточного соединения по п.20 и/или его соль, выбранное из:

---

Евразийское du 032643 (13) Bl
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента (51) Int. CI.
2019.06.28
(21) Номер заявки 201790276
(22) Дата подачи заявки 2015.09.23
C07D 487/04 (2006.01) C07D 519/00 (2006.01) A61K31/5025 (2006.01) A61K31/505 (2006.01) A61K31/519 (2006.01) A61K31/52 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) A61P 37/00 (2006.01) A61P 29/00 (2006.01) A61P19/02 (2006.01) A61P11/00 (2006.01)
Рассмотрены новые имидазопиридазиновые соединения, их фармацевтические композиции, способы ингибирования активности PI3K и способы лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI3K с использованием указанных соединений, а также промежуточные соединения.
Полагают, что нарушения в PI3K (фосфатидилинозитол-3-киназа)опосредованном сигнальном пути играют важную роль в возникновении и развитии различных злокачественных опухолей.
PI3K представляют собой семейство липидкиназ, которые фосфорилируют 3'-гидроксильную группу в Ptdlns (фосфатидилинозитол) и фосфоинозитидах (фосфорилированные производные Ptdlns). Указанные ферменты подразделяют на 3 категории: класса I, класса II и класса III, на основании их целевого субстрата и структуры. Среди указанных 3-х категорий класс I был хорошо изучен. PI3K класса I включает два подкласса, называемые класс IA и класс IB. Существуют три гена, кодирующих каталитические изоформы класса IA. Каждый кодирует белковый продукт приблизительно 110 кДа, обозначаемый p110a, p110p и p1105. Указанные белковые продукты образуют стабильные гетеродимеры, т.е. PI3Ka, PI3Kp и PI3K5, с регуляторными субъединицами класса IA, имеющими по меньшей мере пять изоформ (р85а, р55а, р50а, p85p и p55y). Существует один фермент класса IB, р110у, который ассоциируется с уникальной регуляторной субъединицей, называемой р101. Вместе указанный димер иногда называют PI3Ky.
Все четыре каталитические изоформы PI3K класса I демонстрируют характерный паттерн экспрессии in vivo. P110a и р110р экспрессируются повсеместно, в то время как р110у и p1105 встречаются преимущественно в лейкоцитах (Sundstrom TJ. et al, Org. Biomol. Chem., 2009, 7, 840-850).
Каталитическая субъединица Р1105 PI3K класса IA может играть существенную роль в развитии и активации мышиных В-клеток. Р1105-дефицитные мыши демонстрировали частичное блокирование раннего развития В-клеток при переходе от про-В-клеток к пре-В-клеткам, заметное снижение количества зрелых В-клеток селезенки, а также почти полное отсутствие субпопуляции В1 зрелых В-клеток. Несколько В-клеток, которые могут быть выделены из селезенок p1105-дефицитных мышей, не пролифери-руют последующую кластеризацию BCR (рецептора В-клеток) с анти-IgM. Пролиферация также может быть ослаблена в ответ на поликлональные В-клеточные митогенные липополисахариды и анти-CD40. У мышей, лишенных p1105, также не возникал эффективный ответ антител в отношении антигенов TI-2 (Т-независимого типа II) (Okkenhaug K, Science. 2002, 297:1031-4).
Дисрегуляция и сверхактивация пути PI3K/Akt была обнаружена в раковых клетках. Специфическая роль p1105 в развитии В-клеток может сделать его перспективной мишенью для лекарственных средств для В-клеточных лимфопролиферативных нарушений, таких как CLL (хронический лимфоцитарный лейкоз) и NHL (неходжкинская лимфома).
PI3K5 внутренне задействована в функционировании иммунной системы млекопитающих, такой как сигнальная трансдукция Т-клеток, В-клеток, тучных клеток, дендритных клеток, нейтрофилов, NK-клеток и мононуклеарных фагоцитов. Большое количество экспериментов с использованием ингибитора PI3K5 или животных, дефицитных по PI3K5, доказали, что PI3K5 может играть важную роль в аутоиммунных заболеваниях, таких как респираторные заболевания и ревматоидный артрит, например аллергическом воспалении дыхательных путей [Nashed BF, et al. Eur J Immunol. 2007; 37(2):416-24] и остром повреждении легких [Puri KD, et al. Blood. 2004; 103(9):3448-56]. Вследствие его ключевой роли в функционировании иммунной системы PI3K5 также может быть вовлечена в ряд заболеваний, связанных с нежелательной иммунной реакцией, таких как аллергические реакции, воспалительные заболевания, ан-гиогенез, опосредованный воспалением, ревматоидный артрит, аутоиммунные заболевания, такие как волчанка, астма, эмфизема и другие респираторные заболевания.
Предыдущие исследования показали, что иделалисиб (CAL-101), активный и селективный ингибитор PI3K5, обладает широкой противоопухолевой активностью в отношении раковых клеток гематологического происхождения (Vanhaesebroeck В, Cancer Cell, 2014, 25:269-71). Заявки на патент, такие как WO 2005113556, US 20130071212 и US 20140179718, также раскрывают соединения, подходящие в качестве селективных ингибиторов PI3K5 для лечения аутоиммунных заболеваний и рака, особенно для лечения гематологических злокачественных новообразований.
Роль активности PI3K5 в патогенезе ХОБЛ известна из Srividya Sriskantharajah et al. "Targeting phos-phoinositide 3-kinase 5 for the treatment of respiratory diseases". Ann. N.Y. Acad. Sci. 1280 (2013) 35-39 и Timothy D. Cushing et al. "PI3K5 and PI3Ky as Targets for Autoimmune and Inflammatory Diseases". Journal of Medicinal Chemistry. Volume 55, Issue 20, р. 8559-8581, August 27, 2012, где также раскрыто влияние ин-гибирования PIK35 на лечение ревматоидного артрита и волчанки, а также лечение астмы и аллергии. Взаимосвязь ингибирования PI3K5 и лечения аллергической астмы также раскрыто в Wendy С. Rowan et al. "Targeting phosphoinositide 3-kinase 5 for allergic asthma". Biochemical Society Transactions. Volume 40, Issue 1, р. 240-245, 2012.
Ингибирование PIK35 для лечения системной красной волчанки, а также волчанки известно из Abel Suarez-Fueyo et al. "Inhibition of PI3K5 Reduces Kidney Infiltration by Macrophages and Ameliorates Systemic Lupus in the Mouse". The Journal of Immunology, 2014, 193(2): 544-554, pre-published online on 16 June
2014, Yanxia Wang et al. "Inhibition of PI3K5 Improves Systemic Lupus in Mice". Inflammation, vol. 37, No. 3, June 2014 и Abel Suarez-Fueyo et al. "Enhanced Phosphoinositide 3-Kinase 5 Activity Is a Frequent Event in Systemic Lupus Erythematosus That Confers Resistance to Activation-Induced T Cell Death". The Journal of Immunology. Volume 187, Issue 5, р. 2376-2385, 2011.
В публикации Anne Roller et al. "Blockade of Phosphatidylinositol 3-Kinase (PI3K) 5 or PI3Ky Reduces IL-17 and Ameliorates Imiquimod-lnduced Psoriasis-like Dermatitis". Journal of Immunology. Volume 189, Issue 9, р. 4612-4620, 2012 показано, что ингибиторы PI3K5 и/или PI3Ky могут быть использованы для лечения псориаза у мышей. Действие ингибирования PI3K5 на рассеянный склероз раскрыто в Sarah Hay-lock-Jacobs et al. "PI3K5 drives the pathogenesis of experimental autoimmune encephalomyelitis by inhibiting effector T cell apoptosis and promoting Th17 differentiation". Journal of Autoimmunity. Volume 36, Issue 3-4, р. 278-287, 2011. Согласно Khaled Ali et al. "Inactivation of PI(3)K p1105 breaks regulatory T-cell-mediated immune tolerance to cancer" Nature. 2014 June 19; 509(7505):407-411 ингибиторы PI3K5 можно использовать для лечения солидной опухоли.
Возможность применения ингибиторов PI3K5 для лечения острого лимфоцитарного лейкоза (ALL), острого миелоидного лейкоза (AML), и хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL) известна из документов Savona Vakkalanka et al. "TGR-1202 Suppresses AML and ALL Cells Via Selective Inhibition of PI3K-delta Kinase". 54th ASH Annual Meeting and Exposition, December 8-11, 2012. Abstract #2610; Yan Xing et al. "Selective small molecule inhibitors of p110a and 5 isoforms of phosphoinosityl-3-kinase are cytotoxic to human acute myeloid leukemia progenitors". Experimental Hematology (New York, NY, United States; С Bil-lottet et al. "A selective inhibitor of the p1105 isoform of PI 3-kinase inhibits AML cell proliferation and survival and increases the cytotoxic effects of VP16". Oncogene. 2006; 25:6648-6659; Anthony Markham "Ide-lalisib: First Global Approval". Drugs. Vol. 74, Issue14, р. 1701-1707, published online on 4 September 2014; Jennifer R. Brown et al. "Idelalisib, an inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase p1105, for relapsed/refractory chronic lymphocytic leukemia". Blood. 29 May 2014, Volume 123, Issue 22, р. 3390-3397; Yali CHEN et al. "Idelalisib induces G1 arrest and apoptosis in chronic myeloid leukemia K562 cells" ONCOLOGY REPORTS 36: 3643-3650, 2016.
В документе Hiroshi Ikeda et al. "PI3K/p1105 is a novel therapeutic target in multiple myeloma." BLOOD, 2 September 2010, 116(9): 1460-1468 продемонстрирована взаимосвязь между множественной миеломой и активностью PI3K/p1105.
Взаимосвязь между активностью PI3K5 и заболеваниями такими как лимфома Ходжкина, неход-
жкинская лимфома (NHL), лимфома из клеток мантийной зоны (MCL), фолликулярная лимфома, В-
клеточнаялимфома, Т-клеточная лимфома и диффузная В-клеточная лимфома (DLBCL) показана в пуб-
ликациях Sarah A. Meadows et al., "PI3K inhibitor, GS-1101 (CAL-101), attenuates pathway signaling, induces
apoptosis, and overcomes signals from the microenvironment in cellular models of Hodgkin lymphoma", Blood.
2012; 119(8): 1897-1900; ASH2016#1125, available from
http://www.tgtherapeutics.com/ASH%202016%20Ramchandren%20Final.pdf, 58th ASH, December 3-6, 2016; Non-Hodgkin's Lymphoma. с 216-222, December 2013; Brad S. Kahl etal. "A phase 1 study of the PI3K5 inhibitor idelalisib in patients with relapsed/refractory mantle cell lymphoma (MCL)". Blood. Volume 123, Issue 22, р. 3398-3405, March 10, 2014; Ajay K. Gopal et al. "PI3K5 Inhibition by Idelalisib in Patients with Relapsed Indolent Lymphoma" The New England Journal of Medicine. March 13, 2014, 370:1008-1018; ASH2016#4197, available from http://www.tgtherapeutics.com/ASH%202016%20Lunning%20Final.pdf, 58th ASH, December 3-6, 2016; Changchun Deng et al. "The PI3K Delta Inhibitor TGR-1202 and Proteasome Inhibitor Carfilzomib are Highly Synergistic in Killing Human B- and T-Cell Lymphoma Cells". 55th ASH Annual Meeting and Exposition, December 7-10, 2013. Abstract #4421 соответственно.
Предложены соединения, модулирующие PI3K, включая селективно модулирующие PI3K5, для лечения расстройств, связанных с аутоиммунными заболеваниями и раком, особенно гематологических злокачественных новообразований.
В частности, предложено соединение формулы (I)
W (|)
и/или его сольваты, рацемические смеси, энантиомеры, диастереомеры, таутомеры, и/или его фармацевтически приемлемая соль, где Ar, W, R1, R2 и m являются такими, как определено в настоящем документе.
Также предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель).
Также предложен способ in vivo или in vitro ингибирования активности PI3K, включающий приве
дение в контакт PI3K с эффективным количеством соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли.
Также предложен способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI3K, у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли.
Заболевание, реагирующее на ингибирование PI3K, выбрано из воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний и раковых заболеваний.
Субъект, описанный в настоящем документе, может представлять собой человека или животное. Согласно некоторым вариантам реализации субъект, описанный в настоящем документе, представляет собой человека.
Также предложено соединение формулы (II), которое можно применять для получения соединения формулы (I)
(II)
и/или его соли, и/или его рацемической смеси или энантиомера, где Ar и R2 являются такими, как определено в формуле (I), и оба определены ниже.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 показано действие соединения 4, полученного в примере 1, в отношении анти-IgD индуцированной активации В-клеток в зависимости от дозы и времени у самок крыс линии Вистар. Данные по активации В-клеток представлены как среднее ± SEM (n=3). Данные концентрации в плазме крови представлены как среднее ± SD (n=3). Данные анализировали с помощью ANOVA, с последующим тестом Даннетта в отношении группы (носитель+анти-IgD). ## показывает p <0,01 в отношении группы (но-ситель+PBS); ** показывает p <0,01 в отношении группы (носитель+анти-IgD).
На фиг. 2 показано действие соединения 4, полученного в примере 1, на объем задних лап крыс линии Вистар с коллаген-индуцированным артритом. Объемы задних лап измеряли ежедневно плетизмо-метром. Данные объемов лап представлены в виде среднего значения ± SEM (n=6 для ранее не исследовавшейся группы, n=8 для остальных групп), остальные группы представляли собой контрольные группы носителей, группы соединений 4 с различной дозой (QD) и группу положительного контроля (QOD). Площадь под кривой (AUC) среднего опухание лапы анализировали с помощью однофакторного дисперсионного анализа ANOVA с использованием статистического программного обеспечения SigmaStat, а затем теста наименее значимого различия (LSD) критерия Фишера, и вычисляли величину р. ## показывает p <0,01 в отношении группы с ранее не исследовавшейся группы; ** показывает p <0,01 в отношении контрольной группы.
Определения
В настоящем патенте следующие слова, фразы и символы, как правило, имеют значения, указанные ниже, за исключением случаев, что контекст, в котором они используются, указывает на иное.
Черточка ("-"), которая расположена не между двумя буквами или символами, используется для указания места присоединения заместителя. Например, -O(C1-4^CCM) присоединен через кислород. Тем не менее, когда место присоединения группы является очевидным для специалистов в данной области технички, например, в случае галогенового заместителя, знак "-" могут быть опущен.
Если явно не указано иное, термины единственного числа, относятся к одному или более.
Термин "алкил", используемый в настоящем описании, относится к прямому или разветвленному насыщенному углеводородному радикалу и выбран из радикала, содержащего 1-18 атомов углерода, такие как 1-12 атомов углерода, в том числе, например, 1-6 атомов углерода, и, например, 1-4 атома углерода. Например, "C^^ram" подпадает в объем "алкила" и относится к алкилу, содержащему 1-6 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил ("Me"), этил ("Et"), н-пропил ("n-Pr"), изопропил ("i-Pr"), н-бутил ("n-Bu"), изо-бутил ("i-Bu"), втор-бутил ("втор-Bu") и трет-бутил ("трет-Bu").
Термин "алкенил", используемый в настоящем описании, относится к прямому или разветвленному углеводородному радикалу, выбранному радикала, содержащего одну или более, например, 1, 2 или 3, C=C двойных связей, а также выбран из радикала, содержащего 2-10, например, 2-6 атомов углерода и, в частности 2-4 атомов углерода. Например, "О^-алкенил" подпадает в объем алкенила и относится к ал-кенилу, содержащему 2-6 атомов углерода. Примеры алкенильных групп включают, но не ограничиваются ими, винил, 2-пропенил и 2-бутенил.
Термин "алкинил", используемый в настоящем описании, относится к прямому или разветвленному углеводородному радикалу, выбранному радикала, содержащего одну или более, например, 1, 2 или 3, C=C тройных связей, а также выбран из радикала, содержащего 2-10 атомов углерода, например 2-6 ато
мов углерода, в частности 2-4 атомов углерода. Например, "CM-алкинил" относится к алкинилу, содержащему 1 C^C тройную связь и также содержащему 2-6 атомов углерода. Примеры алкинильных групп включают, но не ограничиваются ими, этинил, 2-пропинил и 2-бутинил.
Термин "гало", используемый в настоящем описании, включает фтор, хлор, бром и йод, и термин "галоген", используемый в настоящем описании, включает фтор, хлор, бром и йод.
Термин "галогеналкил", используемый в настоящем описании, относится к алкильному радикалу, как определено в настоящем описании, в котором один или более, например 1, 2, 3, 4 или 5, атомов водорода заменены атомом галогена, где все атомы галогена являются одинаковыми или отличаются друг от друга. Согласно некоторым вариантам реализации термин "галогеналкил", используемый в настоящем описании, относится к алкильному радикалу, как определено в настоящем описании, в котором два или более атомов водорода, например 2, 3, 4, или 5 атомов водорода, заменены атомами галогена, где все атомы галогена являются одинаковыми. Согласно другим вариантам реализации термин "галогеналкил", используемый в настоящем описании, относится к алкильному радикалу, как определено в настоящем описании, в котором два или более атомов водорода, например 2, 3, 4, или 5 атомов водорода, заменены атомами галогена, где атомы галогена отличаются друг от друга. Примеры галогеналкильных групп включают, но не ограничиваются ими, -CF3, -CHF2, -CH2CF3 и т.п.
Термин "алкокси", используемый в настоящем описании, относится к группе -O-алкила, где алкил определен выше. Примеры алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, н-пропилокси, изопропилокси, н-бутилокси, изобутилокси, трет-бутилокси, пентилокси и гексилокси, включая их изомеры.
Термин "циклоалкил", используемый в настоящем описании, относится к насыщенному или частично ненасыщенному циклическому углеводородному радикалу, который может содержать один или более, например 1 или 2, кольца, и которые также могут содержать от 3 до 12, например от 3 до 8, и в частности от 3 до 6 атомов углерода. Например, "C3-^murc^Mui" относится к циклоалкилу, содержащему 3-8 атомов углерода в кольце. Примеры циклоалкильных групп включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил.
Термин "арил", используемый в настоящем описании, относится к карбоциклическому углеводородному радикалу, содержащему моноциклическое кольцо или конденсированные кольца, содержащему 6-14 атомов углерода в кольце, например 6-12 атомов углерода в кольце, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим и ни один из других колец не представляет собой гетероарил, как определено ниже, и место присоединения может быть на ароматическом кольце или на других кольцах. Примеры арильных групп включают, но не ограничиваются ими, фенил, нафталенил, 1,2,3,4-тетрагидронафталенил, инденил, инданил, азуленил, например, фенил и нафталенил.
Используемый в настоящем описании термин "арил" или "ароматический" следует правилу Хюкке-ля, где число тт-электронов равно 4n+2, где n равно нулю или любому целому числу до 6.
Термин "гетероциклил" или "гетероциклический" в настоящем описании относится к кольцу, выбранному из 4-12-членных моноциклических, бициклических и трициклических насыщенных и частично ненасыщенных колец, содержащих по меньшей мере один атом углерода в дополнение к по меньшей мере одному гетероатому, например 1-4 гетероатомам, в частности 1-3, или, например, 1 или 2 гетероа-томам, выбранным, например, из О, S и N. Место присоединения гетероциклила может быть на гетероа-томе или углероде. Термин "гетероциклил" или "гетероциклический" также относится к моноциклическому кольцу, содержащему по меньшей мере один гетероатом, выбранный из О, S и N, или конденсированным кольцам, где в случае конденсированных колец, по меньшей мере одно кольцо содержит по меньшей мере один гетероатом, выбранный из О, S и N, и другие кольца не представляют собой гетероа-рил или арил, и место присоединения может быть на гетероциклическом кольце или на других кольцах.
Термин "гетероарил", используемый в настоящем описании, относится к моноциклическому ароматическому углеводородному радикалу, содержащему 5, 6 или 7 атомов в кольце, предпочтительно 6 атомов в кольце, и содержащему один или более, например 1, 2 или 3, например 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S (например, N) в кольце, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; и бициклическому ароматическому углеводородному радикалу, содержащему 8-12 атомов в кольце, например, содержащему 9 или 10 атомов в кольце, и содержащему один или более, например 1, 2, 3 или 4, например 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S (например, N) в кольцах, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем по меньшей мере одно из колец является ароматическим. Например, бициклический гетероарил содержит от 5-6-членное гетероциклическое ароматическое кольцо, конденсированное с 5-6-членным циклоалкильным кольцом, гетероциклическим кольцом или арильным кольцом, в котором место присоединения может быть на гете-роароматическом кольце или на циклоалкильном кольце/гетероциклическом кольце/арильном кольце.
Когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероато-мы не являются смежными друг с другом.
Гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде N-оксида, такие как пиримидинил N-оксиды.
Согласно некоторым вариантам реализации "гетероарил", в котором гетероатом(ы) в кольце пред
ставляет собой атом(ы) N, определен в настоящем описании как азотсодержащий гетероарил. Азотсодержащая гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде N-оксида, такие как пиридил N-оксиды.
Примеры гетероарильной группы включают, но не ограничиваются ими, пиридил, пиридил N-оксид; пиразинил; пиримидинил; пиразолил; имидазолил; оксазолил; изоксазолил; тиазолил; изотиазо-лил; тиадиазолил; тетразолил; триазолил; тиенил; фурил; пиранил; пирролил; пиридазинил; бен-зоВДтиазолил, бензодиоксолил, например, бензоВД[1,3]диоксолил; бензоксазолил, например бен-зо[d]оксазолил; имидазопиридил, например, имидазо[1,2-a]пиридил; триазолопиридил, напри-мер[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридил и [1,2,4]триазоло[1,5-a]пиридил; индазолил, 2H-индазолил; пирроло-пиримидинил, например, пирроло[3,4-d]пиримидинил, 7H-пирроло[2,3-d]пиримидинил; пиразолопири-мидинил, например, пиразоло[1,5-a]пиримидинил; тетразолопиридил, например, тетразоло[1,5-a]пиридил; бензотиенил; бензофурил; бензоимидазолинил; индолил; индолинил; пуринил, например, 9H-пуринил и 7H-пуринил; хинолинил, изохинолинил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолинил и 5,6,7,8-тетрагидроизохинолинил.
Примеры азотсодержащей гетероарильной группы включают, но не ограничиваются ими, пирро-лил; пиразолил; имидазолил; пиридил; пиразинил; пиримидинил, пиримидинил N-оксид; пиридазинил; пирролопиримидинил, например, пирроло[3,4^]пиримидинил, 7H-пирроло[2,3-d]пиримидинил; пуринил, например, 9H-пуринил и 7H-пуринил; хинолинил; индолил; и индазолил.
"Гидроксил", используемый в настоящем описании, относится к радикалу -OH. "Меркапто", используемый в настоящем описании, относится к радикалу -SH. "Оксо", используемый в настоящем описании, относится к радикалу =O. "Карбоксил", используемый в настоящем описании, относится к ради-калу-С(О)-OH. "Циано", используемый в настоящем описании, относится к радикалу -CN.
Когда структуры содержат звездочку "*", как описано в настоящем описании, соединения, представленные указанными структурами, представляют собой хиральные соединения, т.е. соединения имеют либо R-конфигурацию или S-конфигурацию. Конфигурация соединений может быть определена с помощью различных аналитических методов, например, монокристаллический рентгеновской кристаллографией и/или оптической поляриметрией в соответствии с рутинными протоколами для обычных специалистов в данной области техники.
Термин "необязательный" или "необязательно", используемый в настоящем описании, означает, что последовательно описываемая структура, случай или обстоятельство замещения может или не может произойти, и что описание включает случаи, когда структура замещения имеет место, и случаи, когда его нет. Например, "необязательно замещенный алкил" охватывает как "незамещенный алкил", так и "замещенный алкил", как определено в настоящем описании. Специалистам в данной области техники будет понятно в отношении к какой-либо группе, содержащей один или более заместителей, что такие группы не предназначены для введения каких-либо заместителей или структуры замещения, которые будут сте-рически невозможными, химически некорректными, синтетически не осуществимыми и/или нестабильными.
Термин "замещенный" или "замещенный используемый в настоящем описании, означает, что один или более водородов у указанного атома или группы замещены одним или более вариантов из указанной группы заместителей, при условии, что нормальная валентность указанного атома не превышена. Когда заместитель представляет собой оксо (т.е. =O), тогда 2 атома водорода на одном атоме заменены оксо. Комбинации заместителей и/или переменных допустимы, только если такие комбинации приводят к получению химически правильному и стабильному соединению. Химически правильное и стабильное соединение означает соединение, которое достаточно устойчивое, чтобы выдержать достаточную выделение из реакционной смеси и идентификации химической структуры соединения, а также достаточно устойчивое для последующего получения в виде агента, имеющего по меньшей мере одну практическую ценность.
Если не указано иное, заместители названы в основной структуре. Например, следует понимать, что когда (циклоалкил)алкил перечислен в качестве возможного заместителя, место присоединения указанного заместителя к основной структуре находится в алкильной части.
Термин "замещенный одним или более заместителями", используемый в настоящем описании, означает, что один или более водородов у указанного атома или группы, независимо замещены одним или более вариантами из указанной группы заместителей. Согласно некоторым вариантам реализации "замещенный одним или более заместителями" означает, что указанный атом или группа замещены 1, 2, 3 или 4 заместителями, независимо выбранными из указанной группы заместителей.
Специалистам в данной области техники ("person of ordinary skill in the art", далее "POSITA") будет понятно, что некоторые из соединений формулы (I) могут содержать один или более хиральных центров и, следовательно, существуют в двух или более стереоизомерных формах. Рацематы указанных изомеров, индивидуальные изомеры и смеси, обогащенные одним энантиомером, а также диастереомеры при наличии двух хиральных центров, а также смеси, частично обогащенные специфическими диастереоме-рами, включены в объем настоящего изобретения. Далее POSITA будет понятно, что настоящее изобретение включает все индивидуальные стереоизомеры (например, энантиомеры), рацемические смеси или
частично разделенные смеси соединений формулы (I) и, в случае необходимости, индивидуальные тау-томерные формы.
Другими словами, согласно некоторым вариантам реализации в настоящем изобретении предложены соединения различной стереоизомерной чистоты, т.е. диастереомерной или энантиомерной чистоты, с различным "эи" или "ди". Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) (например, описанное в настоящем документе) имеет энантиомерную чистоту, составляющую по меньшей мере 60% эи (например, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 99,5, 99,9% эи, или любые диапазоны между указанными перечисленными значениями). Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) (например, описанное в настоящем документе) имеет энантиомерную чистоту более 99,9% эи, возрастающую до 100% эи. Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) (например, описанное в настоящем документе) имеет диастереомерную чистоту, составляющую по меньшей мере 60% ди (например, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99,
99,5, 99,9% ди, или любые диапазоны между указанными перечисленными значениями). Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) (например, описанное в настоящем документе) имеет диастереомерную чистоту более 99,9% ди.
Термин "энантиомерный избыток" или "эи" обозначает, сколько одного энантиомера присутствует по сравнению с другим. Для смеси R и S энантиомеров процент энантиомерного избытка определяется как |R-S|x 100, где R и S являются соответствующими мольными или массовыми долями энантиомеров в смеси, таким образом, что R+S=1. Зная об оптическом вращении хирального вещества, процент энантио-мерного избытка определяется как ([a]obs/[a]max)x100, где [a]obs представляет собой оптическое вращение смеси энантиомеров и [a]max представляет собой оптическое вращение чистого энантиомера.
Термин "диастереомерной избыток" или "ди" обозначает, сколько из одного диастереомера присутствует по сравнению с другим, и определяется по аналогии с энантиомерным избытком. Таким образом, для смеси диастереомеров, D1 и D2, процент диастереомерного избытка определяется как |D1-D2|x 100, где D1 и D2 являются соответствующими мольными или массовыми долями диастереоизомеров в смеси, таким образом, что D1+D2=1.
Определение диастереомерного и/или энантиомерного избытка возможно с использованием различных аналитических методов, в том числе ЯМР-спектроскопии, хиральной колоночной хроматографии и/или оптической поляриметрии в соответствии с рутинными протоколами, известными POSITA.
Рацематы могут быть использованы как таковые или могут быть разделены на индивидуальные изомеры. Разделение может привести к стереохимически чистым соединениям или смесям, обогащенным одним или более изомерами. Способы разделения изомеров хорошо известны (см. Allinger N. L. and Eliel E. L. in "Topics in Stereochemistry", vol. 6, Wiley Interscience, 1971), и включают физические методы, такие как хроматография с использованием хирального адсорбента. Индивидуальные изомеры могут быть получены в хиральной форме из хиральных предшественников. Альтернативно, индивидуальные изомеры могут быть отделены химически из смеси путем образования диастереоизомерных солей с хиральной кислотой, например индивидуальными энантиомерами 10-камфорсульфоновой кислоты, камфорной кислоты, альфа-бромкамфорной кислоты, винной кислоты, диацетилвинной кислоты, яблочной кислоты, пирролидон-5-карбоновой кислоты и т.п., фракционной кристаллизации солей, с последующим выделением одного или обоих разделенных оснований, необязательно повторяя процесс, с получением, таким образом, одного из двух или обоих по существу, не содержащих друг друга; т.е. в форме, имеющей оптическую чистоту, например по меньшей мере 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 или 99,5 мас.%, требуемых стереоизомеров. Альтернативно, рацематы могут быть ковалентно связаны с хиральным соединением (вспомогательным веществом) для получения диастереомеров, которые могут быть разделены с помощью хроматографии или с помощью фракционной кристаллизации, после чего хиральное вспомогательное вещество химически удаляют с получением чистых энантиомеров, как известно POSITA.
Также предложена фармацевтически приемлемая соль соединения формулы (I), такая как соль, описанная ниже, и например, фармацевтически приемлемая соль конкретных соединений, примеры которых приведены в настоящем описании, и способы применения таких солей.
"Фармацевтически приемлемая соль" означает соль свободной кислоты или основания соединения формулы (I), которая является нетоксичной, биологически переносимой или иным образом биологически приемлемой для введения субъекту. Примеры см. в целом в S S. М. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 1977, 66:1-19, and Handbook of Pharmaceutical Salts, Properties, Selection, and Use, Stahl and Wermuth, Eds., Wiley-VCH and VHCA, Zurich, 2002.
"Фармацевтически приемлемая соль" включает, но не ограничивается ими, соли присоединения кислоты, образованные соединением формулы (I) с неорганической кислотой, например, гидрохлорид, гидробромид, карбонат, бикарбонат, фосфат, сульфат, сульфит, нитрат и т.п.; а также с органической кислотой, например, формиат, ацетат, малат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, цитрат, лактат, метансульфо-нат, п-толуолсульфонат, 2-гидроксиэтилсульфонат, бензоат, салицилат, стеарат, и соли с алкандикарбо-новой кислотой формулы HOOC^Qrl^-COOH, где n представляет собой 0-4, и т.п. Кроме того, "фармацевтически приемлемая соль" включает соли присоединения основания, образованные соединением
формулы (I), содержащим кислотный фрагмент, с фармацевтически приемлемыми катионами, например, соли натрия, калия, кальция, алюминия, лития и аммония. Молярное отношение соединения формулы (I) к кислоте или катиону в полученной фармацевтически приемлемой соли включает, но не ограничиваясь ими, 1:1, 1:2, 1:3 и 1:4.
Кроме того, если соединение, описанное в настоящем описании, получают в виде соли присоединения кислоты, свободное основание может быть получено путем подщелачивания раствора соли присоединения кислоты. И наоборот, если продукт является свободным основанием, соль присоединения кислоты, в частности фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты, может быть получена путем растворения свободного основания в подходящем растворителе и обработки раствора кислотой в соответствии с традиционными методиками получения солей присоединения кислоты из основных соединений. POSITA будет понятны различные синтетические методологии, которые могут быть использованы без излишних экспериментов для получения нетоксичных фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот.
Термин "сольваты" означает формы с присоединенным растворителем, которые содержат либо сте-хиометрические, либо нестехиометрические количества растворителя. Некоторые соединения склоны удерживать фиксированное молярное отношение молекул растворителя в твердом состоянии, образуя тем самым сольват. Если растворитель представляет собой воду, сольват представляет собой гидрат, если растворитель представляет собой спирт, образованный сольват представляет собой алкоголят. Гидраты образуются путем объединения одной или более молекул воды с одним из веществ, где вода сохраняет свое молекулярное состояние в виде H2O, причем подобное объединение позволяет образовывать один или более гидратов, например, полугидраты, моногидрат и дигидрат, а также переменные гидраты.
Используемые в настоящем описании термины "группа", "радикал" и "фрагмент" являются синонимами и означают функциональных группы или фрагментов молекул, присоединяемые к другим фрагментам молекул.
Термин "активный ингредиент" используется для указания химического вещества, обладающего биологической активностью. Согласно некоторым вариантам реализации "активный ингредиент" представляет собой химическое вещество, имеющее фармацевтическое применение. Практическая фармацевтическая активность в Соединенных Штатах может быть установлена с помощью соответствующих доклинических in vitro или in vivo анализов. Фармацевтическая активность достаточная для принятия регулирующим органом, таким как FDA в США, имеет более высокий стандарт, чем доклинический анализ. Такой более высокий стандарт фармацевтической активности, успех которой, в целом, не может обоснованно ожидаться от доклинических результатов, может быть установлен с помощью соответствующего и успешного рандомизированного двойного слепого контролируемого клинического испытания на людях.
Термины "лечение", "лечить" или "излечение" заболевания или расстройства, в контексте достижения терапевтического эффекта, относятся к введению одного или более фармацевтических веществ, в частности соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, субъекту, например, субъекту, представляющему собой человека, который имеет заболевание или расстройство, или имеет симптом заболевания или расстройства, или имеет предрасположенность к заболеванию или расстройству, с целью вылечить, лечить, облегчить, ослабить, изменить, поправить, смягчить, улучшить или повлиять на заболевание или расстройство, симптомы заболевания или расстройства, или предрасположенность к заболеванию или нарушению. Согласно некоторым вариантам реализации заболевание или расстройство представляет собой рак.
Термины "лечение", "приведение в контакт" и "реагирующий", в контексте химической реакции, означают добавление или смешивание двух или более реагентов при соответствующих условиях для получения указанного и/или требуемого продукта. Следует понимать, что реакция, которая приводит к указанному и/или требуемому продукту, не обязательно осуществляется непосредственно после объединения двух реагентов, которые были первоначально добавлены, т.е. может существовать одно или более промежуточных соединений, которые образуются в смеси и которые, в конечном счете, приводят к образованию указанного и/или требуемого продукта.
Термин "эффективное количество", используемый в настоящем описании, относится к количеству или дозе P^K-ингибирующего агента, которое достаточно, чтобы в целом обеспечить терапевтический эффект у пациентов, нуждающихся в лечении заболевания или расстройства, опосредованного активностью PI3K. Эффективные количества или дозы активного ингредиента согласно настоящему изобретению можно установить с помощью способов, таких как моделирование, исследования эскалации дозы или клинические испытания, а также принимая во внимание факторы, например, режим или способы введения или доставки лекарственных средств, фармакокинетики агента, тяжести и течения заболевания или расстройства, предыдущей или продолжающейся терапии субъекта, состояния здоровья субъекта и реакции на лекарственные средства, а также суждение лечащего врача. Т.е. эффективная доза, как правило, не предсказуема в Соединенных Штатах по результатам доклинических экспериментов. Фактически, дозировки могут быть достаточно непредсказуемыми, поскольку новые, непредсказуемые режимы дозирования разрабатывают после того, как дозы первоначально используют в рандомизированном, двойном слепом, контролируемом клиническом исследовании.
Примерная доза составляет от примерно 0,0001 до примерно 200 мг активного вещества на 1 кг массы тела субъекта в сутки, например, от примерно 0,001 до 100 мг/кг/сутки, или приблизительно от 0,01 до 35 мг/кг/сутки или примерно от 0,1 до 10 мг/кг в сутки в виде одной или раздельных единиц дозировки (например, BID, TID, QID). Для 70-килограммового человека, иллюстративный диапазон подходящей дозировки составляет от примерно 0,05 до приблизительно 7 г/сутки, или примерно от 0,2 до 5 г/сутки. После улучшения заболевания или расстройства пациента доза может быть изменена для поддерживающей терапии. Например, доза или частота приема или и то и другие могут быть уменьшены в зависимости от симптомов, до уровня, при котором обеспечивается требуемый терапевтический эффект. Конечно, если симптомы были облегчены до соответствующего уровня, лечение может быть прекращено. Однако пациентам может потребоваться интермиттирующая терапия на долговременной основе при любом рецидиве симптомов.
Термин "ингибирование" или "ингибирующий" указывает на уменьшение базовой биологической активности или процесса. Термин "ингибирование активности PI3K" представляет собой практическую фармацевтическую активность для целей данного описания и относится к снижению активности PI3K, в виде как прямого, так и косвенного ответа на присутствие соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, по отношению к активности PI3K в отсутствие соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли. Снижение активности может быть связано с прямым взаимодействием соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, в отношении PI3K, или вследствие взаимодействия соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, с одним или более другими факторами, которые в свою очередь влияют на активность PI3K. Например, присутствие соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, может уменьшить активность PI3K путем непосредственного связывания с PI3K, вызывая (прямо или косвенно) еще один фактор снижения активности PI3K, или путем (прямого или косвенного) уменьшения количества PI3K, присутствующей в клетке или организме.
Термин "субъект", используемый в настоящем описании, означает млекопитающих и немлекопитающих. Млекопитающие означает любого члена класса млекопитающих, в том числе, но не ограничиваются ими, человека; приматов, не относящихся к человеку, таких как шимпанзе и другие виды обезьян и мартышек; сельскохозяйственных животных, таких как крупный рогатый скот, лошади, овцы, козы и свиньи; домашних животных, таких как кролики, собаки и кошки; лабораторных животных, включая грызунов, таких как крысы, мыши и морские свинки; и тому подобное. Примеры немлекопитающих включают, но не ограничиваются ими, птиц и тому подобное. Термин "субъект" не означает конкретный возраст или пол. Согласно некоторым вариантам реализации субъектом является человек.
В целом, термин "примерно" используется в настоящем описании для модификации числового значения, выше и ниже указанного значения посредством 20% отклонения.
Технические и научные термины, используемые в настоящем документе и не определенные конкретно, имеют значения, обычно понимаемые POSITA, к которой настоящее изобретение относится.
В одном из вариантов реализации описания предложено соединение формулы (I)
(I)
и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемические смеси, энантиоме-ры, диастереомеры и таутомеры,
где Ar представляет собой арил, представляющий собой карбоциклический углеводородный радикал моноциклического кольца или конденсированных колец, содержащих 6-14 атомов углерода в кольце, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим и ни одно из других колец не представляет собой гетероарил; или
гетероарил, представляющий собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероа-том N присутствует в виде N-оксида;
каждый из указанного арила и гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, -CN, -OH, -SH, C1-6алкила, C1-6галогеналкила, -(C^^ccm^OH и
-S(О)2(Cl-6алкил);
W выбран из гетероарила и -^К3)гетероарила, где указанный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероа-рильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде N-оксида, и указанный гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, Cl-6алкила, -NH2, -NH(d^Km), -N(Cl-6алкил)(Сl-6алкил), -COOH, -C(O)NH2, -C(O)NH(Q^-кил), -C^N^b^KmiXCb^Kffii), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5- или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом, и каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя W необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, -SH, ^^алсшта и -O^^^ram);
R1 независимо выбран из H, галогена, ^^алкала;
R2 выбран из ^^кила;
R3 представляет собой H или C^^Kmi;
m представляет собой 1 или 2.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I), где W выбран из азотсодержащего гетероарила или -N(R3) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероа-рил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, C1-6алкила, C1-6галогеналкила, -О^^алкил), -(C1-(^Kmi)OH, -NH2, -МЩ^^алкил), -N^Cb^raMXCb^KM), -COOH, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1^Kmi), -C(O)N(C1^KmiXC1^Kmi), -SO2(C1^ccmi), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя W необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, Cb^Kmra, C1-6галогеналкила, -O^b^Kmi), -(C^^Km^OH, -NH2, -NH^Cb^Kmi) и
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I), где W выбран из азотсодержащего гетероарила или -N(R3) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероа-рил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, ^^алскла, C1-6галогеналкила, -NH2, -NH(C1-6алкил), -N(C1-6алкил)(C1-6алкил), -COOH, -C(O)NH2, фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя W необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, ^^кила и -О^^алкил).
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) указанный азотсодержащий гетероарил представляет собой пиримидинил, пирролопиримидинил и пуринил.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I), W выбран из:
каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C1-6алкила, C1-6галогеналкила, -NH2, -NH(C1-6алкил), -N^Cb^raMXCb^KM), -COOH, -С(О)NH2, -C^NH^b^caM), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя W необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, C1-6алкила, C1-6галогеналкила, -O(Cb^raM), -(C1-6алкил)OH, -NH2, -NH(C1-6алкил) и -N(C1-6алкил)(C1-6алкил).
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) W представляет собой
который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C1-6алкила, C1-6галогеналкила, -NH2, -NH(C1-6алкил), -N(C1-6алкил)(C1-6алкил), -COOH, -C(O)NH2, фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором каждый из указанного фенила или 5- или 6-членного гетероарила в качестве заместителя W необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C1-6алкила и -O(C1-6алкил).
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) W выбран из:
каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из хлора, -CN, -NH2, -NH(C1-6алкил), -COOH, -C(O)NH2, фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила или тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C^^raum и -O^^^ram).
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) W представляет собой
который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из хлора, -CN, -NH2, M^C^^Km), -COOH, -C(O)NH2, фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила или тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C^^raum и -O^^^KIUI).
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) Ar выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиразолила, хинолила, тиенила, бензотиазолила, индолила и 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксинила, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, -CN, C^^raum, -(Cb^KuOOH, C1-6галогеналкила или -S(O)2(C1-^KIUI).
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) Ar представляет собой фенил или пиридил, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN и C1-6галогеналкила.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) Ar представляет собой фенил или пиридил, каждый из которых необязательно замещен одним или более галогенами, например, необязательно замещен одним или более атомами фтора.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) R1 независимо выбран из H, галогена и C^^raum.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) R2 представляет собой C^^Km, например, C1-4^KIUI, в частности метил и этил.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) R3 представляет собой Н.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) m представляет собой 1.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I) формула (I) представляет собой формулу (1-1)
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы W выбран из азотсодержащего гетероарила или -N(R3) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C^^Kum, C1-6галогеналкила, -NH2, -NH(C1-6алкил), -N(C1-6алкил)(C1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного
гетероарила.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I-1) указанный азотсодержащий гетероарил выбран из пиримидинила, пирролопиримидинила и пуринила.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I-l) W выбран из:
каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C^^raum, C1-6галогеналкила, -NH2, -NH(C1-6алкил), -N(C1-6алкил)(C1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I-l) W выбран из:
тетразолила.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I-l) W представляет собой
¦ который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, О^алюш, (^.бгалогеналкила, -NH2, -NH(C1.6алкил), -N(C1.6алкил)(C1.6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I-l) W представляет собой
который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из-CN, -NH2 и тетразолила.
Согласно некоторым вариантам реализации соединения формулы (I-l) Ar выбран из фенила, нафти-ла, пиридила, пиразолила, хинолила, тиенила, бензотиазолила, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, C^^ram, -(C1-6алкил)OH и ^^галоген-алкила.
Также предложено соединение, выбранное из соединений 1-9 и 11-82, пронумерованных в экспериментальной части, и/или его фармацевтически приемлемая соль.
Согласно другому аспекту предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель).
Согласно другому аспекту предложен способ in vivo или in vitro ингибирования активности PI3K, включающий приведение в контакт PI3K с эффективным количеством соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли.
Согласно другому аспекту, предложен способ in vivo или in vitro ингибирования активности PI3K, включающий приведение в контакт PI3K с количеством фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель), эффективным для ингибирования активности PI3K.
Согласно другому аспекту предложен способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирова-ние PI3K, у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, количества соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для ингибирования PI3K у указанного субъекта.
Согласно другому аспекту предложено способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирова-ние PI3K у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, количества фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель), эффективного для ингибирования PI3K у указанного субъекта.
Согласно другому аспекту предложено применение соединения формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанного в настоящем документе, для лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI3K, путем ингибирования указанной PI3K у указанного субъекта.
Согласно другому аспекту предложено применение соединение формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанного в настоящем документе, для получения лекарственного средства для лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI3K.
Согласно некоторым вариантам реализации указанное заболевание, реагирующее на ингибирование PI3K, представляет собой воспалительное заболевание, аутоиммунное заболевание или раковое заболевание.
Согласно некоторым вариантам реализации указанный воспалительное заболевание или аутоиммунное заболевание выбрано из ревматоидного артрита, хронической обструктивной болезни легких (COPD), аллергического ринита, астмы, волчанки, системной красной волчанки, псориаза и рассеянного склероза.
Согласно некоторым вариантам реализации указанный раковое засоление представляет собой солидную опухоль или гематологическую злокачественную опухоль, выбранную из лейкоза, множественной миеломы (ММ) и лимфомы.
Согласно некоторым вариантам реализации указанный лейкоз выбран из острого лимфоцитарного
лейкоза (ALL), острого миелоидного лейкоза (AML), хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL) и хронического миелогенного лейкоза (CML).
Согласно некоторым вариантам реализации указанная лимфома выбрана из лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы (NHL), лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), фолликулярной лимфомы, В-клеточной лимфомы, Т-клеточной лимфомы и диффузной В-клеточной лимфомы (DLBCL).
Согласно другому аспекту предложено соединение формулы (II), и/или его соль, и/или его рацемическая смесь или энантиомер, которое можно применять для получения соединений формулы (I) (например, любого из соединений, описанных в настоящем документе)
Общие способы синтеза для описанных вариантов реализации
Соединение формулы (I), описанное в настоящем документе и/или его фармацевтически приемлемую соль, описанную в настоящем документе, можно синтезировать из коммерчески доступного исходного вещества способами, хорошо известными в данной области техники,
принимая во внимание описание настоящей заявки на патент. Следующие схемы иллюстрируют общие способы получения некоторых соединений, описанных в настоящем документе.
i-11 (I)
Как показано на схеме I, соединение формулы i-1 взаимодействует с ^О-диметилгидроксиламином с получением амидного соединения формулы i-2. В результате реакции соединения формулы i-2 с M-H получают соединение формулы i-3, которое в результате сочетания Сузуки с соединением формулы ArB(OH)2 (Ar определен в настоящем описании) в присутствии подходящего палладиевого катализатора приводит к получению соединения формулы i-4. Pd-катализируемая реакция сочетания С-С может быть осуществлена в подходящих полярных растворителях, таких как ДМФА, ACN, ТГФ или ДМСО и т.п., в подходящих основаниях, таких, как TEA, DIPEA, Cs2CO3, KOAc и т.п., с использованием катализаторов, таких как Pd(OAc)2, Pd(dppf)Cl2, Pd(PPhi3)4 или Pd2(dba)3 и т.п. Затем следующие реакции проводят следующим образом:
1) реакция соединения формулы i-4 с реактивом Гриньяра (алкилгалогенидом магния) в подходящих условиях приводит к образованию соединения i-5, которое в результате конденсации с (R)-2-метилпропан-2-сульфинамидом и после восстановления в присутствии подходящих восстанавливающих реагентов приводит к получению соединения формулы i-7; или
2) восстановление соединения формулы i-4 в присутствии подходящих восстанавливающих реагентов приводит к образованию соединения i-5', которое в результате конденсации с (К)-2-метилпропан-2-сульфинамидом и после реакции с реактивом Гриньяра (алкилгалогенидом магния) в подходящих условиях приводит к получению соединения формулы i-7.
Соединение формулы i-7 в результате удаления защитной группы приводит к образованию соединения формулы i-8, которое в результате циклизации с хлорацетальдегидом в присутствии оснований, таких, как NaHCO3 и тому подобного, приводит к получению соединения формулы i-9, которое в результате удаления защитной группы приводит к получению соединения формулы i-10. Соединение формулы i-10 взаимодействует с CI-V в присутствии основания, такого как DIPEA, и тому подобного, в соответствующих условиях, что приводит к получению соединения формулы которое подвергают дальнейшей реакции(ям), такой как галогенирование, в подходящих условиях с получением соединения формулы (I).
i-11 i-12 С)
Как показано на схеме II, соединение формулы i-1 взаимодействует с N,O-диметилгидроксиламином с получением амидного соединения формулы i-2. В результате реакции соединения формулы i-2 с M-H получают соединение формулы i-3. Затем следующие реакции проводят следующим образом:
1) восстановление соединения формулы i-3 в присутствии подходящих восстанавливающих реагентов приводит к образованию соединения i-4, которое в результате конденсации с (Я)-2-метилпропан-2-сульфинамидом и после реакции с реактивом Гриньяра (алкилгалогенидом магния) в подходящих условиях приводит к получению соединения формулы i-6; или
2) реакция соединения формулы i-3 с реактивом Гриньяра (алкилгалогенидом магния) в подходящих условиях приводит к образованию соединения i-4', которое в результате конденсации с (R)-2-метилпропан-2-сульфинамидом и после восстановления в присутствии подходящих восстанавливающих реагентов приводит к получению соединения формулы i-6.
Соединение формулы i-6 в результате удаления защитной группы приводит к образованию соединения формулы i-8, которое в результате циклизации с хлорацетальдегидом в присутствии оснований, таких, как NaHCO3 и тому подобного, приводит к получению соединения формулы i-9. Соединение формулы i-9 в результате сочетания Стилле или сочетания Сузуки со станнанами или ArB(OH)2 (Ar определен в настоящем описании), в присутствии подходящего палладиевого катализатора, такого как Pd2(dba)3 и тому подобного, подходящих лигандов, таких X-phos и тому подобного, в стандартных условиях сочетания Стилле или сочетания Сузуки, приводит к получению соединения формулы i-10, которое в результате удаления защитной группы приводит к получению соединения формулы Соединение формулы взаимодействует с CI-V в присутствии основания, такого как DIPEA и тому подобного, в соответствующих условиях, что приводит к получению соединения формулы i-12, которое подвергают дальнейшей реакции(ям), такой как галогенирование, в подходящих условиях с получением соединения формулы (I).
Соединения, полученные таким образом, могут быть дополнительно модифицированы в по перифе
рийным положениям с обеспечением требуемых соединений. Синтетические химические превращения описаны, например, в R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons (1999); L. Fie-ser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) и последующих изданиях.
Перед использованием, соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанные в настоящем документе, могут быть очищены с помощью колоночной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии, кристаллизации или других подходящих способов.
Фармацевтические композиции и практическое применение
Соединение формулы (I) (например, любое из соединений, описанных в настоящем документе) и/или его фармацевтически приемлемую соль, описанное в настоящем документе, применяют, по отдельности или в комбинации с одним или более дополнительными активными ингредиентами, с получением фармацевтических композиций. Фармацевтическая композиция содержит (а) эффективное количество соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемую соль, описанное в настоящем документе; и (b) фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество (например, фармацевтически приемлемый носитель).
Фармацевтически приемлемый носитель относится к носителю, который совместим с активными ингредиентами композиции (и согласно некоторым вариантам реализации, способен стабилизировать активные ингредиенты) и безвреден по отношению к субъекту, подлежащего лечению. Например, солю-билизирующие агенты, такие как циклодекстрины (которые образуют специфические, более растворимые комплексы с соединением формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой солью, рассмотренными в настоящем описании), могут быть использованы в качестве фармацевтических вспомогательных веществ для доставки активных ингредиентов. Примеры других носителей включают коллоидный диоксид кремния, стеарат магния, целлюлозу, лаурилсульфат натрия и пигменты, такие как D &C Желтый #10. Подходящие фармацевтически приемлемые носители описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences, A. Osol, стандартный справочник в данной области.
Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) (например, любое из описанных в настоящем описании), и/или его фармацевтически приемлемую соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть введены различными известными способами, например перорально, местно, рек-тально, парентерально, путем ингаляционного спрея или через имплантированный резервуар. Термин "парентеральный", используемый в настоящем описании, включает подкожное, внутрикожное, внутривенное, внутримышечное, внутрисуставное, внутриартериальное, внутрисиновиальное, внутригрудин-ное, интратекальное, внутриочаговое и внутричерепное введение инъекцией или инфузией.
Фармацевтическая композиция, описанная в настоящем описании, может быть получена в форме таблеток, капсул, саше, драже, порошка, гранул, таблеток для рассасывания, порошка для восстановления, жидкого препарата или суппозиториев. Согласно некоторым вариантам реализации фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемую соль, получают для внутривенной инфузии, местного введения или перорального введения.
Композиция для перорального введения может представлять собой любую перорально приемлемой лекарственную форму, включая, но не ограничиваясь ими, таблетки, капсулы, эмульсии и водные суспензии, дисперсии и растворы. Обычно используемые носители для таблеток, включают лактозу и кукурузный крахмал. Смазывающие агенты, такие как стеарат магния, также обычно добавляют в таблетки. Для перорального введения в форме капсулы, походящие разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. Когда водные суспензии или эмульсии вводят перорально, активный ингредиент может быть суспендирован или растворен в масляной фазе в сочетании с эмульгирующими или суспендирующими агентами. При необходимости, могут быть добавлены определенные подсластители, ароматизаторы или красители.
Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль может присутствовать в количестве от 1, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 200, 250, 300, 400 и 500 мг в таблетке. Согласно некоторым вариантам реализации соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль может присутствовать в количестве от 1, 5, 10, 15, 20, 25, 50, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 200, 250, 300, 400 и 500 мг в капсуле.
Стерильная композиция для инъекций (например, водная или масляная суспензия) может быть получена в соответствии с методиками, известными в данной области, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов (таких как, например, Tween 80) и суспендирующих агентов. Стерильный промежуточный состав для инъекций может также представлять собой стерильный раствор или суспензию для инъекций в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди фармацевтически приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, могут быть упомянуты маннит, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используют в качестве растворителя или суспендирующей среды (например, синтетические моно- или диглицериды). Жир
ные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, подходят для в промежуточных составов для инъекций, в виде природных фармацевтически приемлемых масел, таких как оливковое масло или касторовое масло, особенно в их полиоксиэтилированных вариантах. Указанные масляные растворы или суспензии могут также содержать разбавитель на основе длинноцепочечного спирта или диспергатор, или карбоксиметилцеллюлозу или аналогичные диспергирующие агенты.
Композиции для ингаляции могут быть получены в соответствии с методиками, хорошо известными в области фармацевтических составов, и могут быть получены в виде растворов в физиологическом растворе с использованием бензилового спирта или других подходящих консервантов, промоторов абсорбции для повышения биодоступности, фторуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих агентов, известных в данной области техники.
Композиция для местного применения может быть получена в виде масла, крема, лосьона, мази и тому подобного. Подходящие носители для композиции включают растительные или минеральные масла, белый вазелин (белый мягкий парафин), жиры или масла с разветвленной цепью, животные жиры и высокомолекулярные спирты (более С12). Согласно некоторым вариантам реализации фармацевтически приемлемый носитель представляет собой носитель, в котором активный ингредиент является растворимым. Эмульгаторы, стабилизаторы, увлажнители и антиоксиданты также могут быть включены, а также могут быть включены агенты придания окраски или аромата, если это необходимо. Кроме того, агенты, усиливающие трансдермальные проникновение, могут быть использованы в указанных составах для местного применения. Примеры таких усиливающих агентов можно найти в патентах США 3989816 и
4444762.
Кремы могут быть получены из смеси минерального масла, самоэмульгирующегося пчелиного воска и воды, куда примешивают смесь активного ингредиента, растворенного в небольшом количестве масла, такого как миндальное масло. Примером такого крема является крем, включающий, по массе, примерно 40 частей воды, примерно 20 частей пчелиного воска, примерно 40 частей минерального масла и примерно 1 часть миндального масла. Мази могут быть получены путем смешивания раствора активного ингредиента в растительном масле, таком как миндальное масло, с теплым мягким парафином и выдерживанием смеси для остывания. Примером такой мази является мазь, включающая примерно 30 мас.% миндального масла и примерно 70 мас.% белого мягкого парафина.
Подходящие анализы in vitro могут быть использованы для оценки практической применимости соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании, для ингибирования активности PI3K5. Соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании,
могут быть дополнительно исследованы в отношении дополнительной практической применимости для лечения рака или аутоиммунных заболеваний с помощью анализов in vivo. Например, соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть введены животному (например, в мышиной модели), имеющему рак или аутоиммунное заболевание и его терапевтические эффекты может быть оценен. Если предположить, что доклинические результаты прошли успешно, диапазон дозировки и способы введения животным, таким как люди, могут быть предсказаны.
Соединение формулы (I) (например, любое из описанных в настоящем описании) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут иметь достаточную доклиническую практическую полезность для начала клинических исследований, в результате которых можно продемонстрировать положительное терапевтического или профилактического действие, например, у пациентов с раком.
Используемый в настоящем описании термин "рак" относится к клеточному нарушению, характеризующемуся неконтролируемой или разрегулированной пролиферацией клеток, уменьшенной клеточной дифференцировкой, несоответствующей способностью вторгаться в окружающие ткани и/или способностью установить новый рост в эктопических участках. Термин "рак" включает, но не ограничивается ими, солидные опухоли и гематологические злокачественные новообразования. Термин "рак" охватывает заболевания кожи, тканей, органов, костей, хрящей, крови и сосудов. Термин "рак" дополнительно охватывает первичные и метастатические раковые заболевания.
Неограничивающие примеры солидных опухолей включают рак поджелудочной железы; рак мочевого пузыря; колоректальный рак; рак молочной железы, в том числе метастатический рак молочной железы; рак предстательной железы, в том числе андроген-зависимый и андроген-независимый рака предстательной железы; рак почек, в том числе, например, метастатический почечно-клеточный рак; гепаток-леточный рак; рак легкого, в том числе, например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), бронхиоло-альвеолярную карциному (ВАС) и аденокарциному легких; рак яичников, в том числе, например, эпителиальный прогрессирующий или первичный перитонеальный рак; рак шейки матки; рак желудка; рак пищевода; рак головы и шеи, в том числе, например, плоскоклеточную карциному головы и шеи; рак кожи, в том числе, например, злокачественную меланому; нейроэндокринный рак, в том числе метастатические нейроэндокринные опухоли; опухоли головного мозга, в том числе, например, глиому, анапла-стическую олигодендроглиому, взрослую мультиформную глиобластому и взрослую анапластическую
астроцитому; рак кости; саркому мягких тканей; и карциному щитовидной железы.
Неограничивающие примеры гематологических злокачественных новообразований включают острый миелоидный лейкоз (AML); хронический миелогенный лейкоз (CML), включая ускоренный CML и CML бласт фазы (CML-BP); острый лимфобластный лейкоз (ALL); хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL); лимфому Ходжкина; неходжкинскую лимфому (NHL), включая фолликулярную лимфому и лим-фому из клеток мантийной зоны; В-клеточную лимфому; Т-клеточную лимфому; множественную мие-лому (ММ); макроглобулинемию Вальденстрема; миелодиспластические синдромы (MDS), включая рефрактерную анемию (RA), рефрактерную анемию с кольцевидными сидеробластами (RARS), рефрактерную анемию с избытком бластов (RAEB) и RAEB в трансформации (RAEB-T); и миелопролиферативные синдромы.
Согласно некоторым вариантам реализации, примеры гематологических злокачественных новообразований включают лейкоз, такой как, острый лимфоцитарный лейкоз (ALL), острый миелоидный лейкоз (AML), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), и хронический миелогенный лейкоз (CML); множественную миелому (ММ); и лимфому, такую как лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому (NHL), лимфому из клеток мантийной зоны (MCL), фолликулярню лимфому, В-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому и диффузную В-клеточную лимфому (DLBCL).
Термин "воспалительное заболевание" относится к патологическим состояниям, в результате воспаления, как правило, вызванного хемотаксисом нейтрофилов. Примеры таких заболеваний включают воспалительные заболевания кожи, включая псориаз и атопический дерматит; системную склеродермию и склероз; реакции, связанные с воспалительным заболеванием кишечника (IBD) (например, болезнь Крона и неспецифический язвенный колит); ишемические реперфузионные нарушения, включая хирургическое реперфузионные повреждения ткани, сердечные ишемические состоянич, такие как инфаркт миокарда, остановка сердца, реперфузия после хирургии сердца и сужением после чрескожной транслю-минальной коронарной ангиопластики, инсульт и аневризмы брюшной аорты; отек головного мозга после инсульта; черепно-мозговую травму, гиповолемический шок; асфиксию; синдром расстройства дыхания у взрослых; острые травмы легкого; болезнь Бехчета; дерматомиозит; полимиозит; рассеянный склероз (MS); дерматит; менингит; энцефалит; увеит; остеоартроз; волчаночный нефрит; аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит (RA), синдром Шегрена, васкулит; заболевания, связанные с диапедезом лейкоцитов; воспалительное нарушение центральной нервной системы (ЦНС), синдром полиорганной недостаточности, вторичный по отношению к септицемии или травме; алкогольный гепатит; бактериальную пневмонию; заболевания, опосредованные комплексом антиген-антитело, включая гломерулонефрит; сепсис; саркоидоз; иммунопатологические реакции на трансплантацию тканей/органов; воспаления легких, в том числе плеврит, альвеолит, васкулит, пневмонию, хронический бронхит, бронхоэктаз, диффузный панбронхиолит, гиперчувствительный пневмонит, идиопатический фиброз легких (IPF) и кистозный фиброз; и т.д. Предпочтительные показания включают, без ограничения, хроническое воспаление, аутоиммунный диабет, ревматоидный артрит (РА), ревматоидный спондилит, подагрический артрит и другие артритные состояния, рассеянный склероз (MS), астму, системную красную волчанку, синдром расстройства дыхания у взрослых, болезнь Бехчета, псориаз, хроническое воспаление легких, реакцию трансплантат против хозяина, болезнь Крона, язвенный колит, воспалительное заболевание кишечника (IBD), болезнь Альцгеймера и жар.
Соединение формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть использованы для достижения благоприятного терапевтического или профилактического эффекта, например, у пациентов с аутоиммунным заболеванием.
Термин "аутоиммунное заболевание" относится к заболеванию или расстройству, вытекающему из и/или направленному против собственных тканей или органов индивидуума, или косегрегации или проявлениям, или состоянию в результате указанных проявлений. Примеры аутоиммунных заболеваний включают, но не ограничиваются ими, COPD (хроническая обструктивная болезнь легких), аллергический ринит, волчанку, миастению, рассеянный склероз (PC), ревматоидный артрит (РА), псориаз, воспалительное заболевание кишечника (ВЗК), астму и идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру и миелоидное пролиферативное расстройство, такое как миелофиброз, PV/ET (после миелофиброз в результате полицитемии/эссенциальной тромбоцитемии).
Согласно некоторым вариантам реализации воспалительное заболевание и аутоиммунное заболевание включает ревматоидный артрит, хроническую обструктивную болезнь легких (COPD), аллергический ринит, астму, волчанку, системную красную волчанку, псориаз и рассеянный склероз.
Кроме того, соединение формулы (I) (например, любой из описанных в настоящем описании) и/или его фармацевтически приемлемая соль, рассмотренные в настоящем описании, могут быть использованы в комбинации с дополнительными активными ингредиентами для лечения рака, воспалительных или аутоиммунных заболеваний. Дополнительные активные ингредиенты могут быть введены раздельно с соединением формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой солью, рассмотренными в настоящем описании, или включены с таким ингредиентом в фармацевтическую композицию согласно описанию, например, в виде лекарственного средства с фиксированной дозой, В примерном варианте реализации дополнительные активные ингредиенты представляют собой ингредиенты, которые, как известно или
обнаружено, являются эффективными для лечения заболеваний, опосредованных активностью PI3K, например другие модуляторы PI3K или соединения, являющиеся активными в отношении другой мишени, связанной с конкретным заболеванием. Комбинация может служить для повышения эффективности (например, путем включения в комбинации соединения, усиливающего активность или эффективность соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании), уменьшающего один или более побочных эффектов, или уменьшающего требуемую дозу соединения формулы (I) и/или его фармацевтически приемлемой соли, описанных в настоящем описании.
Примеры
Приведенные ниже примеры предназначены для иллюстрации и не должны рассматриваться как ограничивающие каким-либо образом. Если не указано иное, части являются частями по массе, температура выражена градусах Цельсия, и давление равно или близко к атмосферному. Все данные MC были получены с помощью Agilent 6120 и/или Agilent 1100. Все реагенты, за исключением промежуточных соединений, используемых в данном описании, являются коммерчески доступными. Все названия соединений, кроме реагенто, были получены с помощью Chemdraw 12.0.
В следующих примерах используются приведенные ниже сокращения:
ACN
Ацетонитрил
Вое
mpem-бутоксикарбонил
Вос20
дт-трет-бутил-дикарбонат
DAST
трифторид диэтиламиносеры
ДХМ
дихлорметан
DEA
диэтиламин
ДМФА
Л/,Л/-диметилформамид
DMA
диметилацетамид
DIBAL-H
DIPEA
EDCI
EtOAc/EA
Et3N
HATU гексафторфосфат
HBTU
HOAc
HOBT
ЭИ МЛ
МГ НГ
моль
ммоль
мин
mCPBA
MeOH
NaH
NCS
NMP
Pd(dppf)CI2
Pd2(dba)3 Pd(PPh3)4
PMB
PPh3
THF
TFA
TFE
TsOH
Xphos
Гидрид диизобутилалюминия Л/,Л/-диизопропилэтиламин
1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид
этилацетат
триэтиламин
0-(7-азабензотриазол-1-ил)-Л/,Л/,Л/',Л/'-тетра-метилурония
0- бензотриазол-Л/,Л/,Л/',Л/-тетраметилурония гексафторфосфат
уксусная кислота
1- гидроксибензотриазол
энантиомерный избыток
миллилитр
грамм
миллиграмм
нанограмм
моль
миллимоль
минута
час
3- хпорпербензойная кислота
метанол
гидрид натрия Л/-хлорсукцинимид 1\1-метил-2-пиролидон Петролейный эфир
[1,1 '-бис(д ифенилфосфино)ферроцен]паллад ий(11)д ихлорид
три(дибензилиденацетон)дипалладий (0) тетракис(трифенилфосфин)палладий (0)
п-метоксибензил
трифенилфосфин
тетраги дрофу ран
трифторуксусная кислота
трифторэтанол
4- метилбензолсульфоновая кислота
2- дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил
Пример 1
Синтез соединений 1-9 и 11-82. Соединение 1.
4-Амино-6-((1-(6-фенилимидазоГ1,2-Ыпиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
(A) 3-Хлор-6-гидроксипиридазин-4-карбоновая кислота.
Раствор 3,6-дихлорпиридазин-4-карбоновой кислоты (10 г, 51,8 ммоль) в водн. NaOH (2 н., 200 мл) кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционный раствор подкисляли с раствором соляной кислоты до pH "1-2. Раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (H2O/MeOH) с получением продукта (5,2 г, выход 57%) в виде желтого твердого вещества. MC (m/z):175 [M+H]+.
(B) Метил-3 -хлор-6-гидроксипиридазин-4-карбоксилат.
К раствору 3-хлор-6-гидроксипиридазин-4-карбоновой кислоты (5 г, 28,7 ммоль) в MeOH (30 мл) добавляли концентрированную H2SO4 (1 мл). Раствор перемешивали при 100°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционный раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (H20:MeOH=100:0-0:100) с получением продукта (5 г, выход 93%) в виде белого твердого вещества. MC (m/z): 189 [M+H]+.
(C) Метил-6-гидрокси-3-фенилпиридазин-4-карбоксилат.
К смеси метил-3-хлор-6-гидроксипиридазин-4-карбоксилата (5 г, 26,6 ммоль), фенилборной кислоты (6,49 г, 53,2 ммоль) и KOAc (5,21 г, 53,2 ммоль) в диоксане (60 мл) и H2O (6 мл) в атмосфере N2 в колбу добавляли Pd(dppf)Cl2 (1,08 г, 13,3 ммоль). Смесь перемешивали при 120°С в атмосфере N2 в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционный раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/ЕА=1/1) с получением неочищенного продукта, который очищали снова с помощью колоночной флэш-хроматографии (H20/MeOH= 100:0 до 0:100) с получением продукта (2,3 г, выход 37,6%) в виде белого твердого вещества. MC (m/z): 231 [M+H]+.
(D) Метил-6-хлор-3-фенилпиридазин-4-карбоксилат.
Смесь метил-6-гидрокси-3-фенилпиридазин-4-карбоксилата (2,3 г, 10 ммоль) в POCl3 (10 мл) перемешивали при 110°С в течение 6 ч. Избыток POCl3 удаляли в вакууме и добавляли водн. NaHCO3. Смесь концентрировали с получением неочищенного продукта, который затем очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ/ЕА=3/1) с получением продукта (2 г, выход 80,6%) в виде красного твердого вещества. MC (m/z): 249 [M+H]+.
(E) 6-Хлор-3-фенилпиридазин-4-карбоновая кислота.
NaOH (0,64 г, 16,12 ммоль) добавляли к раствору метил-6-хлор-3-фенилпиридазин-4-карбоксилата (2 г, 8,06 ммоль) в MeOH (10 мл) и H20 (1 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционный раствор доводили с помощью раствора соляной кислоты до pH ~3. Смесь концентрировали с получением красного твердого вещества неочищенного продукта, который использовали для
следующей стадии реакции без дополнительной очистки. MC (m/z): 235 [M+H]+.
(F) 6-Хлор-^метокси-^метил-3 -фенилпиридазин-4-карбоксамид.
Смесь 6-хлор-3-фенилпиридазин-4-карбоновой кислоты (1,89 г, 8,06 ммоль), гидрохлорида N,O-диметилгидроксиламина (1,56 г, 16,12 ммоль), HBTU (6,11 г, 16,12 ммоль) и Et3N (2,44 г, 24,18 ммоль) в ДХМ (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (РЕ/ЕА=3/1) с получением продукта (1,75 г, выход 78,4%) в виде желтого твердого вещества. MC (m/z): 278 [M+H]+.
(G) N-Метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-N-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамид.
Смесь (4-метоксифенил)метанамина (1,74 г, 12,68 ммоль) и 6-хлор-^метокси-^метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида (1,75 г, 6,32 ммоль) в NMP (30 мл) перемешивали при 130°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры раствор экстрагировали ЕА. Органическую фазу концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (H20/MeOH=100:0-0:100) с получением продукта (1,8 г, выход 75%) в виде желтого твердого вещества. MC (m/z): 379 [M+H]+.
(H) 6-((4-Метоксибензил)амино)-3 -фенилпиридазин-4-карбальдегид.
К раствору N-метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-N-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида (1,8 г,4,76 ммоль) в сухом THF (30 мл) при - 20°С в атмосфере N2 по каплям добавляли DIBAL-H (14,3 г,14,28 ммоль). И затем смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение дополнительных 4 ч. После чего смесь гасили водн. NH4Cl и экстрагировали ЕА. Органическую фазу концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (PE:EA=100:0 до 1:1) с получением продукта (0,7 г, выход 46%) в виде желтого масла. MC (m/z): 320 [M+H]+.
(I) (Е)-N-((6-((4-Метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2-
сульфинамид.
Ti(OEt)4 (3 мл) добавляли к раствору 6-((4-метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-карбальдегида (700 мг, 2,2 ммоль) и 2-метилпропан-2-сульфинамида (399 мг, 3,3 ммоль) в сухом THF (30 мл) в атмосфере N2. Смесь перемешивали при 100°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь обрабатывали 2 мл H2O и фильтровали, фильтрат экстрагировали ЕА и органический слой концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (H20:MeOH=100:0-0:100) с получением продукта (450 мг, выход 48%) в виде желтого твердого вещества. MC (m/z): 423 [M+H]+.
(J) N-(1-(6-((4-Метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
MeMgBr (1,07 мл, 3,21 ммоль) добавляли по каплям к раствору (E)-N-((6-((4-метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2-сульфинамида (450 мг, 1,07 ммоль) в сухом THF (30 мл) в атмосфере N2 при 0°С. Затем смесь перемешивали при 0°C в течение дополнительных 2 ч. После чего водн. NH4Cl добавляли с гашением реакции, реакционную смесь экстрагировали ЕА. 0рганическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным Na2SO4, и концентрировали. 0статок использовали для следующей стадии реакции без дополнительной очистки. MC (m/z): 439
[M+H]+.
(K) Бензил-( 1 -(6-((4-метоксибензил)амино)-3 -фенилпиридазин-4-ил)этил)карбамат.
Концентрированный раствор соляной кислоты (1 мл) добавляли к раствору N-(1-(6-((4-метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамиду (469 мг, 1,07 ммоль) в MeOH (15 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем концентрировали с удалением избытка растворителя, сушили с получением 5-(1-аминоэтил)-№(4-метоксибензил)-6-фенилпиридазин-3-амина в виде неочищенного продукта, который затем смешивали с бензил-(2,5-диоксопирролидин-1-ил)карбонатом (533 мг, 2,14 ммоль) и Et3N (3 мл) в ДХМ (20 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После чего реакционную смесь обрабатывали H2O, экстрагировали ДХМ. 0рганическую фазу сушили над безводным Na2SO4, концентрировали с получением неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии реакции без дополнительной очистки. MC (m/z): 469 [M+H]+.
(L) 5-(1-Аминоэтил)-6-фенилпиридазин-3-амин.
Раствор бензил-(1-(6-((4-метоксибензил)амино)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)карбамата (501 мг, 1,07 ммоль) в CF3COOH (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После чего раствор доводили водн. Na2CO3 до pH ~7, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (H20:MeOH=100:0-0:100) с получением продукта (214 мг, выход 93%). MC (m/z): 215 [M+H]+.
(М) трет-Бутил-(1-(6-амино-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)карбамат.
К раствору 5-(1-аминоэтил)-6-фенилпиридазин-3-амина (214 мг, 1 ммоль) и Et3N (0,5 мл) в EtOH (10 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (218 мг, 1 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, после чего смесь концентрировали с получением неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии реакции без дополнительной очистки. MC (m/z): 315 [M+H]+.
(N) трет-Бутил-( 1 -(6-фенилимидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамат.
К раствору трет-бутил-(1-(6-амино-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)карбамата (314 мг, 1 ммоль) в
EtOH (10 мл) добавляли и NaHCO3 (252 мг, 3 ммоль) 2-хлорацетальдегид (3 мл, 40%). Смесь перемешивали при 80°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры в раствор добавляли водн. NaHCO3 до pH ~8. Смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (H20:MeOH=100:0-0:100) с получением продукта (90 мг, выход 27%) в виде желтого твердого вещества. MC (m/z): 339 [M+H]+.
(О) 1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамин
К раствору трет-бутил-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамата (45 мг, 0,13 ммоль) в MeOH (3 мл) добавляли конц. раствор HCl (0,2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем концентрировали с получением неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии реакции без дополнительной очистки. MC (m/z): 239 [M+H] .
(P) 4-Амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
Смесь 1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамина (31 мг, 0,13 ммоль) и 4-амино-6-хлорпиримидин-5-карбонитрила (20 мг, 0,13 ммоль), DIPEA (50 мг, 0,39 ммоль) в n-BuOH (5 мл) перемешивали при 130°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры раствор концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (H20:MeOH=100:0-0:100) с получением продукта (45 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества. MC (m/z): 357 [M+H]+.
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5: 8,055 (s, 1H), 8,012 (s, 1H), 7,881 (s, 1H), 7,711 (d, J=1,2 Hz, 1H), 7,6427,618 (m, 2H), 7,494-7,441 (m, 3H), 5,440-5,389 (m, 1H), 1,401 (d, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 2.
4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
Смесь 4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (35 мг, 0,1 ммоль) и NCS (26 мг, 0,2 ммоль) в CHCl3 (10 мл) перемешивали при 80°С в течение 6 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ДХМ/MeOH) с получением 15 мг целевого продукта. MC (m/z)=391 [M+H]+.
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5: 8,032 (s, 1H), 7,882 (s, 1H), 7,715 (s, 1H), 7,667-7,643 (m, 2H), 7,4917,474 (m, 3H), 5,445-5,391 (m, 1H), 1,408 (d, J=7,2 Гц, 3H).
Соединения 3 и 4.
(К)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил и (S)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
3 &4
Рацемическое соединение 2 разделяли с помощью хиральной ВЭЖХ с получением оптически чистых энантиомеров соединения 3 и 4 (условия ВЭЖХ: колонка: daicel IA 4,6x250 мм; подвижная фаза: EtOH/DEA=100/0,10; скорость потока=1,0 мл/мин; детектор: UV 254 нм). Первый элюент (соединение 4, S изомер, Rt=6,833 мин) составлял 100% эи, MC (m/z): 391 [M+H]+. Второй элюент (соединение 3, R изомер, Rt=12,51 мин) составлял 98,07% эи, MC (m/z): 391 [M+H]+.
Соединение 3:
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5: 8,03 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,68-7,61 (m, 2H), 7,51-7,44 (m, 3H), 5,44-5,39 (m, 1H), 1,40 (d, J=6,9 Гц, 3H). Соединение 4:
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5: 8,04 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,89 (d, J=1,7 Гц, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,69-7,64 (m, 2H), 7,53-7,44 (m, 3H), 5,48-5,37 (m, 1H), 1,40 (d, J=6,9 Гц, 3H). Соединение 4.
(S)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
(A) 3,6-Дихлор-^метокси-^метилпиридазин-4-карбоксамид.
К раствору 3,6-дихлорпиридазин-4-карбоновой кислоты (80,0 г, 0,41 моль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (58,0 г, 0,59 моль) и HBTU (302,0 г, 0,80 моль) в ДХМ (1,0 л) добавляли Et3N (160,0 г, 1,58 моль) при 0 C. Реакционную смесь перемешивали при 0 C в течение дополнительного 1 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 7 ч. Смесь промывали водой (200 млх3). 0рганический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (PE:EA=5:1-1:2) с получением 60 г 3,6-дихлор-^метокси-^метилпиридазин-4-карбоксамида. MC (m/z)=236 [M+H]+.
(B) 3-Хлор-N-метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-N-метилпиридазин-4-карбоксамид.
Смесь №метокси-^метилпиридазин-4-карбоксамида (20,0 г, 0,08 моль) и (4-метоксифенил)метанамина (34,5 г, 0,25 моль) в DMA (200 мл) перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Смесь выливали в воду (200 мл), экстрагировали ЕА (200 мл). 0рганическую фазу промывали насыщ. раствором NaCl (200 млх3). 0рганический слой концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EA=5:1-1:5) с получением 30 г неочищенного продукта. MC (m/z)=337 [M+H]+, 339 [М+2+Щ+.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5: 7,30-7,16 (m, 2H), 6,89-6,76 (m, 2H), 6,59 (s, 1H), 5,46 (s, 1H), 4,50 (d, J=5,6 Гц, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,43 (s, 3H), 3,30 (s, 3H).
(C) N-Метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-N-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамид.
К раствору 3-хлор-N-метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-N-метилпиридазин-4-карбоксамида (30,0 г, 0,09 моль) и фенилборной кислоты (16,0 г, 0,13 моль) в диоксане (300 мл) и воды (30 мл) добавляли Pd(PPh3)4 (5,1 г, 4,45 ммоль) и KOAc (26,0 г, 0,26 моль) в атмосфере азота. Реакционную смесь переме
шивали при 110°С в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду (300 мл), экстрагировали ЕА (500 млх3). 0рганический слой концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 40 г целевого продукта. MC (m/z)=379 [M+H]+.
(D) 6-Амино-^метокси-^метил-3 -фенилпиридазин-4-карбоксамид.
Смесь N-метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-N-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида (40,0 г, 0,10 моль) в CF3COOH (150 мл) перемешивали при 80°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток растворяли в ДХМ (200 мл), промывали насыщ. раствором NaHCO3. Водный слой экстрагировали (ДХМ+30% MeOH). 0бъединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали в вакууме с получением 30 г неочищенного продукта. MC (m/z)=259 [M+H]+.
(E) 6-(2,5-Диметил-1H-пиррол-1-ил)-N-метокси-N-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамид.
К раствору 6-амино^-метокси-№метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида (30,0 г, 0,11 моль) и гексан-2,5-дион (66,0 г, 0,58 моль) в толуоле (300 мл) добавляли TsOH (2,0 г, 0,01 моль). Смесь перемешивали при 120°С в течение ночи с ловушкой Дина-Старка и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EA=5:1-2:1) с получением 14 г продукта. MC (m/z)=337 [M+H]+.
(F) 1-(6-(2,5-Диметил-Ш-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этанон.
К раствору 6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-N-метокси-N-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида (14,0 г, 0,04 моль) в сухом THF (150 мл) добавляли MeMgBr (27,7 мл, 0,082 моль) при -5~0°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0~10°C в течение дополнительных 2 ч. Смесь выливали в насыщ. раствор NH4Cl, водный слой экстрагировали ЕА (100 млх3). 0рганический слой концентрировали в вакууме с получением 15 г неочищенного продукта. MC (m/z)=292 [M+H]+.
(G) (R,E)-N-(1-(6-(2,5-Диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этилиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
К раствору 1-(6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этанона (15,0 г, 0,05 моль) и ^)-2-метилпропан-2-сульфинамида (9,3 г, 0,08 моль) в сухом THF (150 мл) добавляли Ti(OEt)4 (23,0 г, 0,10 моль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 80°С в течение ночи, и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду (100 мл), осадок фильтровали и фильтрат экстрагировали ЕА. 0рганический слой концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EA=5:1-1:1) с получением 12 г продукта. MC (m/z)=395 [M+H]+.
(H) (R)-N-((S)-1-(6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-
сульфинамид.
К раствору (R,E)-N-(1-(6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этилиден)-2-метилпропан-2-сульфинамида (12,0 г, 0,03 моль) в сухом THF (150 мл) добавляли LiB(GH7)3 (6,08 мл, 0,06 моль) при -78°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительных 2 ч. Смесь выливали в насыщ. раствор NH4Cl, водный слой экстрагировали ЕА (100 млх3), органический слой концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силика-геле (PE:EA=5:1-1:1) с получением 10 г указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=397 [M+H]+.
(I) ^)-^(^)-1-(6-Амино-3 -фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
К раствору (R)-N-((S)-1-(6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (8,0 г, 0,02 моль) в EtOH (40 мл) и воды (40 мл) добавляли NH2OH-HCl (13,8 г, 0,20 моль) и NaHCO3 (13,5 г, 0,16 моль). Смесь перемешивали при 90°С в течение ночи, и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь обрабатывали водн. NH3-H2O до pH 8~9. Смесь концентрировали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O +0,5% NH3-H2O) с получением 4,2 г указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=319 [M+H]+.
(J) (R)-2-Метил-N-((S)-1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)пропан-2-сульфинамид.
К раствору (R)-N-((S)-1-(6-амино-3-фенилпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (4,2 г, 0,013 моль) в EtOH (50 мл) добавляли 2-хлорацетальдегид (5,15 г, 0,065 моль) и NaHCO3 (2,1 г, 0,026 моль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь выливали в воду (50 мл), водные слои экстрагировали ДХМ (50 млх3). 0бъединенный органический слой концентрировали в вакууме с получением 6,5 г неочищенного продукта. MC (m/z)=343 [M+H]+.
К раствору (R)-2-метил-N-((S)-1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)пропан-2-сульфинамида (6,5 г, 0,019 моль) в ЕА (20 мл) добавляли раствор HCl в ЕА (20 мл, 2,44 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем смесь концентрировали в вакууме
(К) (S)-1 -(6-Фенилимидазо[ 1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этанамин
и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O+0,5% NH3H2O) с получением 4,2 г неочищенного продукта. MC (m/z)=239 [M+H]+.
(L) (8)-4-Лмино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
К раствору (8)-1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этанамина (3,8 г, 0,016 моль) и 4-амино-6-хлорпиримидин-5-карбонитрила (3,7 г, 0,024 моль) в n-BuOH (40 мл) добавляли DIPEA (6,1 г, 0,048 моль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O+0,5% NH3H2O) с получением 2,6 г указанного в заголовке
продукта. MC (m/z)=357 [M+H]+.
(М) (8)-4-Лмино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
Смесь (8)-4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (4 г, 0,011 моль) и NCS (2,3 г, 0,017 моль) в CHCl3 (40 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ/MeOH) с получением 1,8 г целевого продукта. MC (m/z)=391 [M+H]+.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5: 8,06 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,74-7,63 (m, 3H), 7,56-7,47 (m, 3H), 5,46 (d, J=5,9 Гц, 1H), 5,43-5,37 (m, 1H), 5,36 (s, 2H), 1,38 (d, J=6,8 Гц, 3H).
Следующие соединения получали согласно процедурам для соединения 4 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны POSITA.
Соединении
Структура
MC(M+H)+
ЯМР
Промежуточное соединение
¦Vs
415
1H ЯМР (400 МГц, CDCb) 5: 8,29 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,78 - 7,76 (m, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,51 -7,49 (m, 3H), 5,85 (d, J = 5,8 Гц, 1H), 5,56 - 5,46 (m, 1H), 1,43 (d, J =6,8 Гц, 3H).
CO?
NH2
V-NH
391
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5: 8,16 (s, 1H), 8,09 (s, 2H), 7,78 - 7,77 (m, 2H), 7,71 (s, 1H), 7,55 - 7,41 (m, 3H), 5,59 - 5,45 (m, 1H), 1,46 (d, J = 6,8 Гц, 3H).
NH2
NH2
409
1H ЯМР (400 МГц, flMCO-d6) 5: 8,31 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,79 - 7,63 (m, 2H), 7,60 - 7,45 (m, 2H), 7,30 (t, J= 7,4 Гц, 2H), 7,13 (s, 2H), 5,09 (s, 1H), 1,45 (d, J = 6,8 Гц, 3H).
NH2
MC (M+H)+ : 257
409
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5: 8,16 (s, 1H), 8,04 (s, 2H), 7,75 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,47-7,38 (m, 1H), 7,19 (s, 2H), 5,32 (br, 1H), 1,60 (d, J = 6,9 Гц, 3H).
, ^N. J^J
NH2
MC (M+H)+ : 257
CI f\
NH2
409
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-С16) 5: 8,30 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,71 (d, J = 7,4 Гц, 1H), 7,57 - 7,44 (m, 3H), 7,31 (dd, J= 8,7 Гц, 2,0 Гц, 1H), 7,22 (s, 2H), 5,18 (t, Л=7,0Гц, 1H), 1,39 (d, Л=6,9Гц, ЗН).
N " N^s/^"'^ F NH2
MC (М+Н)+ : 257
^-NH
409
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5: 8,28 (s, 2Н), 8,09 (d, J = 6,8 Гц, 2Н), 7,88 (s, 1Н), 7,76 - 7,48 (m, 4Н), 7,36 (dd, J = 9,0 Гц, 6,6 Гц, 1Н), 5,30 (s, 1Н), 1,40 (d, J = 5,7 Гц, ЗН).
N*^^
fsj|
NH2
MC (M+H)+ : 257
CI f\
390
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5: 8,30 (s, 1Н), 8,21 (s, 1Н), 8,02 (s, 1Н), 7,72 - 7,70 (т, ЗН), 7,50 - 7,48 (т, ЗН), 7,30 (s, 1Н), 6,75 (d, J = 6,8 Гц, 1Н), 5,35 - 5,21 (т, 1Н), 1,43 (d, Л=6,8Гц, ЗН).
NH2
tec?
NH2
371
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5: 7,98 (s, 1Н), 7,89 (s, 1Н), 7,66 - 7,64 (т, 2Н), 7,53 - 7,44 (т, 4Н), 5,45 -5,40 (т, 1Н), 2,53 (s, ЗН), 1,40 (d, J= 6,9 Гц, ЗН).
NH2
to?
^NH
371
1Н ЯМР (400 МГц, CDsOD) 5: 8,04 (s, 1Н), 8,00 (s, 1Н), 7,84 (s, 1Н), 7,78 - 7,71 (т, 2Н), 7,50 - 7,42 (т, 4Н), 5,52 - 5,47 (т, 1Н), 2,53 (s, ЗН), 1,42 (d, J = 6,8 Гц, ЗН).
NH2
cC?
NH2
371
1Н ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 8,02 (s, 1Н), 7,89 (s, 1Н), 7,71 (s, 1Н), 7,61 - 7,60 (т, 2Н), 7,52 - 7,47 (т, ЗН), 5,57 - 5,56 (т, 1Н), 5,53 (s, 2Н), 5,45 - 5,32 (т, 1Н), 2,48 (s, ЗН), 1,38 (d, J = 6,4 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 253
ci ril
HN N.
NH2
405
1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 8,03 (s, 1Н), 7,83 (s, 1Н), 7,66 - 7,64 (т, 2Н), 7,51 - 7,48 (т, ЗН), 5,43 (d, J = 6,1Hz, 1Н), 5,40 - 5,36 (т, 1Н), 5,33 (s, 2Н), 2,48 (s, ЗН), 1,36 (d, J = 6,7 Гц, ЗН).
NH2
Соединения 5 и 6.
(Я)-4-Лмино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5-карбонитрил и (8)-4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
5 &6
(Л) 6-Лмино-3-хлор-К-метокси-К-метилпиридазин-4-карбоксамид.
Раствор 3-хлор-№метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-№метилпиридазин-4-карбоксамида (Соединение 4 (В), 7,4 г, 21,97 ммоль) в TFA (20 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток выливали в насыщ. раствор NaHCO3. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, экстрагировали ЕЛ и органический слой затем концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 3,84 г 6-амино-3-хлор-№метокси-^метилпиридазин-4-карбоксамида. MC (m/z)=217 [M+H]+, 219 [М+2+Н]+.
(B) 3-Хлор-6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-N-метокси-N-метилпиридазин-4-карбоксамид.
К раствору 6-амино-3-хлор-^метокси-№метилпиридазин-4-карбоксамида (3,84 г, 17,73 ммоль) и гексан-2,5-диона (8,45 г, 65,91 ммоль) в толуоле (100 мл) добавляли TsOH (2,0 г, 0,01 моль). Смесь перемешивали при 120°С в течение ночи с ловушкой Дина-Старка и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 4,2 г указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=295 [M+H]+, 297 [М+2+Н]+.
(C) 6-(2,5-Диметил-1H-пиррол-1-ил)-N-метокси-N-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамид.
К раствору 3-хлор-6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-N-метокси-N-метилпиридазин-4-карбоксамида (4,2 г, 14,25 ммоль) и фенилборной кислоты (2,61 г, 21,37 ммоль) в диоксане (80 мл) и воды (8 мл) добавляли Pd(PPh3)4 и KOAc в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду (300 мл), экстрагировали ЕЛ (100 млх3). Объединенный органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 4,3 г продукта. MC (m/z)=337 [M+H]+.
(D) 6-(2,5-Диметил-Ш-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-карбальдегид.
К раствору 6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-N-метокси-N-метил-3-фенилпиридазин-4-карбоксамида
(4,3 г, 12,78 ммоль) в сухом THF (30 мл) добавляли DIBAL-H (19 мл, 19,17 ммоль) в атмосфере азота при -20°С. Реакционную смесь перемешивали при -20°С в течение дополнительного 1 ч, и затем выливали в воду (300 мл), экстрагировали ЕЛ. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 0,95 г указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=310 [M+MeOH+H]+.
(E) (Я,Е)-^((6-(2,5-Диметил-1 H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
К раствору 6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-карбальдегида (0,95 г, 3,43 ммоль) и (Я)-2-метилпропан-2-сульфинамида (0,62 г, 5,14 ммоль) в сухом THF (20 мл) добавляли Ti(OEt)4 (1,56 г, 6,85 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду (5 мл), осадок фильтровали и фильтрат экстрагировали ЕЛ. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 1,2 г указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=381 [M+H]+.
(F) (R)-N-((S)-1-(6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид и (R)-N-((R)-1-(6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
К раствору (R,E)-N-((6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2-сульфинамида (1,2 г, 3,15 ммоль) в сухом THF (20 мл) добавляли EtMgBr (1,58 мл, 4,73 ммоль) при -78°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Смесь выливали в воду (5 мл), экстрагировали ЕЛ. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (PE:EA=1:0-0:1) с получением двух продуктов (первый элюент составлял 0,47 г промежуточного соединения I-7, второй элюент i составлял 0,18 г промежуточного соединения I-8), где один представлял собой (R)-N-((S)-1-(6-(2,5-диметил-Ш-пиррол-1 -ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид, и другой представлял собой (R)-N-((R)-1-(6-(2,5-диметил-1H-пиррол-1-ил)-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид. MC (m/z)=411 [M+H]+.
(G) (R)-N-((R)-1-(6-Лмино-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид и (R)-N-((S)-1-(6-амино-3-фенилпиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
К раствору промежуточного соединения I-8, полученного на последней стадии реакции (0,18 г, 0,04 ммоль), в EtOH (2,5 мл) и воды (2,5 мл) добавляли NH2OHHCl (0,46 г, 6,58 ммоль) и Et3N (0,44 г, 4,38 ммоль). Смесь перемешивали при 90°С в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. В смесь добавляли водн. NH3-H2O до pH 8-9, и затем смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O+0,5% NH3-H2O) с получением 0,08 г промежуточного соединения I-10. MC (m/z)=333 [M+H]+. Промежуточное соединение I-9 получали с использованием промежуточного соединения I-7 в тех же условиях.
(H) (R)-2-Mетил-N-((R)-1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)пропан-2-сульфинамид и (R)-2-метил-N-((S)-1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)пропан-2-сульфинамид.
К раствору промежуточного соединения I-10 (80 мг, 0,24 ммоль) в EtOH (5 мл) добавляли 2-хлорацетальдегид (0,32 мл, 1,92 ммоль) и NaHCO3 (40 мг, 0,48 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь выливали в воду (10 мл), водные слои экстрагировали ЕЛ (20 млх3). Объединенный органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O+0,5% NH3-H2O) с получением 67 мг промежуточного соединения I-12. MC (m/z)=357 [M+H]+. Промежуточное соединение получали с использованием промежуточного соединения I-9 в тех же условиях.
(I) (R)-1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропан-1-амин и ^)-1-(6-фенилимидазо[1,2-
Ь]пиридазин-7-ил)пропан-1 -амин
К раствору промежуточного соединения I-12 (67 мг, 0,19 ммоль) в ЕЛ (3 мл) добавляли HCl раствор в ЕЛ (5 N, 1 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, и затем смесь концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в MeOH и затем подщелачивали водн. NH3-H2O. Избыточный растворитель выпаривали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O+0,5% NH3-H2O) с получением 30 мг промежуточного соединения I-14. MC (m/z)=253 [M+H]+. Промежуточное соединение I-13 получали с использованием промежуточного соединения в тех же условиях.
(J) (R)-4-Лмино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5-карбонитрил и (S)-4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5
карбонитрил.
К раствору промежуточного соединения I-14 (30 мг, 0,12 ммоль) и 4-амино-6-хлорпиримидин-5-карбонитрила (27 мг, 0,19 ммоль) в n-BuOH (3 мл) добавляли DIPEA (31 мг, 0,24 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O+0,5% NH3H2O) с получением 30 мг промежуточного соединения I-16. MC (m/z)=371 [M+H]+. Промежуточное соединение I-15 получали с использованием промежуточного соединения I-13 в тех же условиях.
(K) (Я)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5-
карбонитрил и (8)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-
ил)пропил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
Раствор промежуточного соединения I-16 (30 мг, 0,08 ммоль) и NCS (16 мг, 0,12 ммоль) в CHCl3 (4 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O+0,5% NH3H2O) с получением 24 мг одного целевого соединения 6. MC (m/z)=405 [M+H]+. Другое указанное в заголовке соединение 5 получали с использованием промежуточного соединения I-15 в тех же условиях.
Соединение 5:
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,03 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,73-7,69 (m, 3H), 7,53-7,50 (m, 3H), 5,29-5,25 (m, 1H), 1,83-1,71 (m, 2H), 0,80 (t, J=6,6 Гц, 3H). Соединение 6:
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,04 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,72 (dd, J=7,2 Гц, 2,4 Гц, 3H), 7,56-7,51 (m, 3H), 5,27 (dd, J=9,4 Гц, 5,0 Гц, 1H), 1,76 (qdd, J=12,4 Гц, 8,3 Гц, 6,1 Гц, 2H), 0,81 (t, J=7,3 Гц, 3H).
Следующие соединения получали согласно процедурам для соединения 5 и 6 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны POSITA. В частности, соединение 14 и 26 получали согласно процедурам для соединения 5; соединения 18, 19, 24 и 25 получали согласно процедурам для соединения 6.
Соединени е
Структура
MC(M+H)+
ЯМР
Промежуточное соединение
CI f\ \ Л Л хиральное HN
V-NH
405
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5: 8,19 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,83 (d, J= 3,6 Гц, 2H), 7,70 (s, 1H), 7,57 -7,50 (m,3H), 5,51-5,34 (m, 1H), 1,86-1,71 (m, 2H), 0,86 (t, J =7,3 Гц, ЗН).
fsjj NH2
MC (M+H)+: 253 и
fRJJ NH2
MC (M+H)+: 253
CI f\
\ J I хиральное N-> V-^4Y'\
HN N
405
1H ЯМР (400 МГц, CDCIs) 5: 8,32 (s, 1Н), 8,02 (s, 1Н), 7,93 (s, 1Н), 7,89 - 7,79 (m, 2Н), 7,65 (d, J = 1,4 Гц, 1H), 7,58 - 7,47 (m, 4Н), 6,53 - 6,41 (m, 1Н), 5,48 -5,37 (m, 1Н), 1,68- 1,59 (m, 2Н), 0,85 (s, ЗН).
> ,CO
\ I хиральное HN N
CNV
NH2
423
1Н ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 7,98 (s, 1Н), 7,93 (s, 1Н), 7,73 (s, 1Н), 7,58 - 7,46 (m, 2Н), 7,32 - 7,26 (т, 1Н), 7,22-7,18 (т, 1Н), 5,50-5,41 (т, 1Н), 5,10-4,98 (т, 1Н), 1,95 - 1,84 (т, 1Н), 1,83 - 1,75 (т, 1Н), 0,92 (t, J = 7,3 Гц, ЗН).
NH2
Колонка: daicel IA 4,6x250 мм; Подвижная фаза: EtOH/DEA=100/0,10; Скорость потока=1,0 мл/мин; Детектор: UV 254 нм.
Rt соединения 5 составляет 10,774 мин, Rt соединения 6 составляет 5,032 мин, Rt соединения 14 составляет 5,245 мин, Rt соединения 18 составляет 7,030 мин, Rt соединения 19 составляет 6,925 мин, Rt соединения 24 составляет 4,991 мин, Rt соединения 25 составляет 20,884 мин, Rt соединения 26 представляет собой 14,505 мин.
Соединения 7 и 8.
(R)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-
5-карбонитрил и (S)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-
NH2 NH2 7 &8
(А) 3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-карбальдегид.
ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
К раствору 3-хлор-К-метокси-6-((4-метоксибензил)амино)-К-метилпиридазин-4-карбоксамида (10 г, 29,75 ммоль) в сухом THF (120 мл) добавляли гидрид диизобутилалюминия (89 мл, 89,26 ммоль) по каплям при 0°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь гасили насыщ. раствором NH4Cl, фильтровали, фильтрат экстрагировали ЕА (50 млх3). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (PE:EA=4:6) с получением 2,4 г целевого продукта. MC (m/z)=310 [М+Н]+, 312 [М+2+Н]+.
(B) (R,E)-N-((3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2-
сульфинамид.
К раствору 3-хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-карбальдегида (2,4 г, 8,66 ммоль) и (R)-2-метилпропан-2-сульфинамида (1,6 г, 13 ммоль) в сухом THF (30 мл) добавляли Ti(OEt)4 (4 г, 17,32 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду (20 мл), фильтровали и фильтрат экстрагировали ЕА (30 млх3). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (PE:EA=4:6) с получением 1,4 г указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=381 [M+Н^, 383 [М+2+Н]+.
(C) (R)-N-(1-(3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-
сульфинамид.
К раствору (R,E)-N-((3-хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2-сульфинамида (1,4 г, 3,68 ммоль) в сухом THF (20 мл) добавляли MeMgBr (3,1 мл, 9,21 ммоль) при -5-0°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0~10°C в течение 2 ч. Смесь выливали в насыщ. раствор NH4Cl, экстрагировали ЕА (20 млх3). Органический слой концентрировали в вакууме с получением 1 г неочищенного указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=397 [M+Н^, 399 [М+2+Н]+.
(D) 5-(1-Аминоэтил)-6-хлорпиридазин-3-амин.
Раствор (R)-N-(1-(3-хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (1 г, 2,52 ммоль) в TFA (5 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 ч. Затем смесь концентрировали в вакууме и остаток разделяли между насыщ. раствором NaHCO3 и ЕА. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали ЕА (10 млх4). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали с получением 308 мг неочищенного указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=173 [M+H]+.
(E) трет-Бутил-( 1 -(6-амино-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)карбамат.
Раствор 5-(1-аминоэтил)-6-хлорпиридазин-3-амина (308 мг, 1,79 ммоль), (Boc)2O (586 мг, 2,68 ммоль) и Et3N(543 мг, 5,37 ммоль) в ДХМ (5 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь концентрировали при 20°С и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH: H2O=4:6) с получением 150 мг указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=273 [M+Н^, 275
[М+2+Н]+.
(F) трет-Бутил-(1-(6-хлоримидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)карбамат.
К раствору трет-бутил-(1-(6-амино-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)карбамата (150 мг, 0,55 ммоль) в EtOH (5 мл) добавляли 2-хлорацетальдегид (0,245 мл, 1,38 ммоль) и NaHCO3 (185 мг, 2,2 ммоль). Затем смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь охлаждали, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:MeOH=4:96) с получением 76 мг указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=297 [M+Н^, 299
[М+2+Н]+.
(G) трет-Бутил-(1-(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)карбамат.
К раствору трет-бутил-(1-(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)карбамата (20 мг, 0,059 ммоль) в ЕА/MeOH (20 мл) добавляли 4N HCl раствор в ЕА (0,059 мл, 0,236 ммоль) при 0°С. Смесь нагревали до 40°С и перемешивали в течение дополнительных 0,5 ч. Затем смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/Н2О+0,5% NH3-H2O) с
К раствору трет-бутил-(1-(6-хлоримидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)карбамата (56 мг, 0,19 ммоль) и 2-(дибутил(пентил)станнил)пиридина (140 мг, 0,38 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли Pd2(dba)3 (17 мг, 0,019 тммоль), X-phos(18 мг, 0,038 ммоль) и Na2CO3 (61 мг, 0,57 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение 4 ч. Затем смесь охлаждали, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=55:45) с получением 20 мг указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=340 [M+Н^.
(H) 1-(6-(Пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этанамин
(H)
получением 9 мг указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=240 [M+Н^.
(I) 4-Амино-6-((1-(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
К раствору 1-(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этанамина (9 мг, 0,037 ммоль) и 4-амино-6-хлорпиримидин-5-карбонитрила (9 мг, 0,056 ммоль) в n-BuOH (3 мл) добавляли DIPEA (24 мг, 0,185 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=65:5 +0,5% NH3-H2O) с получением 9 мг указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=358 [M+ttf.
(J) (R)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)амино)пирими-
дин-5-карбонитрил и (S)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-
ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
Раствор 4-амино-6-((1-(6-(пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (9 мг, 0,025 ммоль) и NCS (7 мг, 0,05 ммоль) в CHCl3 (2 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью хиральной преп-ВЭЖХ (колонка: Daicel IA: 20*250 мм; подвижная фаза: 100% EtOH+0,1% DEA; скорость потока: 8 мл/мин; длина волны детектирования: UV 254 нм;) с получением 1,8 мг соединения 7 (Rt=25,2 мин) и 2 мг соединения 8 (Rt=29,1 мин).
Соединение 7:
MC (m/z)=392 [M+НГ,
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,70 (d, J=4,9 Гц, 1H), 8,16 (s, 1H), 8,01 (td, J=7,8 Гц, 1,8 Гц, 1H), 7,91 (d, J=7,9 Гц, 1H), 7,85 (d, J=1,9 Гц, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,53-7,52 (m, 1H), 5,76 (q, J=7,1 Гц, 1H), 1,51 (d, J=7,0
Гц, 3H).
Соединение 8:
MC (m/z)=392 [M+ttf,
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,70 (ddd, J=4,9 Гц, 1,7 Гц, 0,9 Гц, 1H), 8,16 (d, J=0,7 Гц, 1H), 8,01 (td, J=7,7 Гц, 1,8 Гц, 1H), 7,91 (dt, J=7,8 Гц, 1,1 Гц, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,54-7,50 (m, 1H), 5,76 (q, J=7,0 Гц,1 H), 1,51 (d, J=7,0 Гц, 3H).
Следующие соединения получали согласно процедурам для соединения 7 и 8 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны POSITA.
Соединение
Структура
MC (M+H)+
ЯМР
NcV
NH2
406
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,71 (d, J = 4,8, 1H),8,33(s, 1H), 8,02 (t, J = 7,7, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,87 (t, J = 6,9, 2H), 7,72 (s, 1H), 7,60-7,52 (m, 1H), 7,15 (s, 2H), 5,42 -5,33 (m, 1H), 1,87- 1,81 (m, 2H), 0,84 (t, J = 7,3, 3H).
CI ^
N*=:\^vN^\XMPaJ1bHOe HN
NCV
NH2
406
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,71 (dd, J = 4,9, 0,9, 1H), 8,33 (s, 1H), 8,04-8,01 (m, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,89-7,85 (m, 2H), 7,72 (s, 1H), 7,57-7,54 (m, 1H), 7,15 (s, 2H), 5,40-5,34 (m, 1H), 1,90 - 1,78 (m, 2H), 0,84 (t, J = 7,3, 3H).
Rt соединения 28 составляло 9,443 мин. Rt соединения 29 составляло 11,080 мин. Указанные два соединения были разделены в соответствии с условиями процедуры (J) для соединения 7 и 8.
Соединение 20 (S)-9-(1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-9H-пурин-6-амин
NH3H20
(A) (S)-6-Хлор-N4-(1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4,5-диамин. Указанное в заголовке соединение получали согласно процедурам для соединения 4(L). MC
(m/z)=366 [M+Н^.
(B) (S)-6-Хлор-9-(1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-9H-пурин.
Раствор (S)-6-хлор-N4-(1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4,5-диамина (59 мг, 0,16 ммоль) и триэтоксиметана (0,5 мл) в EtOH (5 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 30 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH/H2O +0,5% NH3-H2O) с получением 42 мг указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=376 [M+Н^.
(C) (S)-9-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-9H-пурин-6-амин.
Раствор (S)-6-хлор-9-(1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-9H-пурина (42 мг, 0,11 ммоль) в NH3-H2O (2 мл) подвергали реакции в микроволновой печи при 110°С в течение 30 мин. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 26 мг указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=357 [M+ttf.
(D) (S)-9-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-9H-пурин-6-амин.
Указанное в заголовке соединение получали согласно процедурам для соединения 4 (М). MC (m/z)=391 [M+Н^.
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,24 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,93 (d, J=5,2 Гц, 2H), 7,45-7,35 (m, 5H), 7,12 (s, 2H), 5,79 (q, J=6,9 Гц, 1H), 1,81 (d, J=7,0 Гц, 3H). Соединение 21.
(S)-N4-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-5-(2H-тетразол-5-ил)пиримидин-4,6-диамин
NC^fN NH9
NaN3 NH4CI
ДМФА
NCS
CHCU
(A) (S)-N4-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-5-(2H-тетразол-5-ил)пиримидин-4,6-
диамин.
Смесь соединения 4 (L) (150 мг, 0,42 ммоль), азида натрия (165 мг, 2,55 ммоль) и хлорида аммония (135 мг, 2,55 ммоль) в сухом ДМФА (4 мл) герметизировали в пробирке и подвергали реакции в микроволновой печи при 140°С в течение 40 мин. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 36 мг указанного в заголовке продукта. MC (m/z)=400 [M+Н]+.
(B) (S)-N4-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-5-(2H-тетразол-5-ил)пиримидин-
4,6-диамин.
Указанное в заголовке соединение получали согласно процедурам для соединения 4 (М). MC (m/z)=434 [M+Н^.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,13 (d, J=6,4 Гц, 2H), 7,90 (s, 1H), 7,67-7,62 (m, 2H), 7,55-7,49 (m, 3H), 5,39-5,23 (m, 1H), 1,50 (d, J=6,8 Гц, 3H). Соединение 27.
(S)-7-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амин
(A) (S)-2-(4-Хлор-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-ил)этанол. К раствору (S)-1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этанамина (соединение 4(K), 100 мг, 0,42
ммоль) и 2-(4,6-дихлорпиримидин-5-ил)этанола (122 мг, 0,63 ммоль) в n-BuOH (5 мл) добавляли DIPEA (109 мг, 0,84 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 120°С в течение ночи и затем перемешивали при комнатной температуре. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O+0,5% NH3-H2O) с получением 142 мг продукта. MC (m/z)=395
(B) (S)-4-Хлор-7-(1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин.
К раствору (S)-2-(4-xnop-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-ил)этанола (100 мг, 0,25 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли реагент Десса-Мартина (322 мг, 0,76 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч и затем выливали в насыщ. раствор Na2S2O3 (10 мл), экстрагировали ДХМ (30 мл). Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O+0,5% NH3-H2O) с получением 55 мг продукта. MC (m/z)=375 [M+R|+.
(C) (S)-7-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-7H-пирроло[2,3-с]пиримидин-4-амин. Смесь (S)-4-хлор-7-(1-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-7H-пирроло[2,3-с(]пиримидина
(55 мг, 0,15 ммоль) в растворе аммиака (3 мл) герметизировали в реакционной пробирке, облучали в микроволновом реакторе при 120°С в течение 30 мин, и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O+0,5% NH3-H2O) с получением 35 мг продукта. MC (m/z)=356 [M+Н^.
(D) (S)-7-(1-(6-Фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-4-амин. Указанное в заголовке соединение получали согласно процедурам для соединения 4 (М). MC
(m/z)=390 [M+Н^.
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,10 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,79-7,78 (m, 1H), 7,27 (s, 5H), 6,98 (s, 1H), 6,11-6,06 (m, 1H), 1,76 (d, J=6,9 Гц, 4H). Соединение 30.
^)-4-Амино-6-(( 1 -(3-хлор-6 -(3,5 -дифторфенил)имидазо [1,2-b] пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
(A) 3,6-Дихлор-N-метокси-N-метилпиридазин-4-карбоксамид.
К смеси 3,6-дихлорпиридазин-4-карбоновой кислоты (100,0 г, 0,52 моль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлорида (60,6 г, 0,62 моль) и EDCl (118,8 г, 0,62 моль) в ДХМ (800 мл) по каплям добавляли Et3N (288 мл, 2,08 моль) при 0°С. Затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь промывали насыщенным водным раствором NaHCO3 (1 л) и насыщенным солевым раствором (1 л). Органический слой отделяли, сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали с получением 99,7г неочищенного продукта. Выход: 81%. MC (m/z)=236 [M+Н^, 238 [М+2Н]+.
(B) 6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-хлор-N-метокси-N-метилпиридазин-4-карбоксамид. Раствор 3,6-дихлор-N-метокси-N-метилпиридазин-4-карбоксамида (100 г, 0,42 моль), HOBT (68 г,
0,51 моль) и Et3N (149 г, 1,48 моль) в DMA (800 мл) нагревали до 50°C. Через 2 ч ТСХ и ЖХ-MC показали, что исходное вещество было израсходовано. Затем добавляли ^^Бис(4-метоксибензил)амин (163 г, 0,64 моль) и смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Затем смесь обрабатывали насыщенным солевым раствором (1 л) и экстрагировали ЕА (1 лх3). Объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EA=3:1-1:1) с получением 75 г продукта. Выход: 40%. MC (m/z)=457 [M+Н^.
(C) 1-(6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этан-1-он.
К перемешиваемому раствору 6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-хлор-^метокси-^ метилпиридазин-4-карбоксамида (9 г, 19,73 ммоль) в сухом THF (100 мл) медленно добавляли MeMgBr (9,9 мл, 29,6 ммоль) при 5~10°С в защитной атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь выливали в насыщ. водный раствор NH4Cl (30 мл), водные слои экстрагировали ЕА (100 млх2), органический слой сушили над безводным Na2SO4 и концентрировали в вакууме с получением 7,7 г неочищенного продукта, который получали для следующей стадии без очистки. MC (m/z)=412 [M+ttf.
(D) (R,E)-N-(1-(6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этилиден)-2-метилпропан-
2-сульфинамид.
К раствору 1-(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этан-1-он (7,7 г, 18,73 ммоль) и ^)-(+)-2-Метил-2-пропансульфинамида (2,5 г, 20,6 ммоль) в сухом THF (80 мл) добавляли Ti(OEt)4 (6,4 г, 28,1 ммоль) по каплям в атмосфере азота. Смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь выливали в воду (100 мл), осадок фильтровали и фильтрат экстрагировали ЕА (100 млх2), объединенный органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (PE:EA=2:1) с получением 7,9 г целевого соединения в виде бледно-желтого масла. Выход: 81%. MC (m/z)=515 [M+H]+.
(E) (R)-N-((S)-1-(6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-
сульфинамид.
К раствору LiB(GH7)3 (39 мл, 38,42 ммоль) в сухом THF (80 мл) добавляли (R,E)-N-1-(6-(6K;-(4-метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этилиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид (7,9 г, 15,37 ммоль) при -78°C в атмосфере азота. Смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч. Смесь выливали в насыщ. водный раствор NH4Cl (200 мл), водный слой экстрагировали ЕА (100 млх2), органический слой сушили и концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (PE:EA=65%:35%) с получением 3,8 г соединения в виде бледно-желтого масла. Выход: 48%. MC (m/z)=518 [M+H]+.
(F) (R)-N-((S)-1-(6-(бис-(4-Метоксибензил)амино)-3-(3,5-дифторфенил)пиридазин-4-ил)этил)-2-
метилпропан-2-сульфинамид.
К раствору (R)-N-((S)-1 -(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3 -хлорпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (900 мг, 1,74 ммоль) и 3,5-дифторфенилборной кислоты (551 мг, 3,49 ммоль) в диоксане (6 мл) и воды (2 мл) добавляли Pd(PPh3)4 (201 мг, 0,174 ммоль) и КОАС (511 мг, 5,22 ммоль) в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь обрабатывали водой, экстрагировали ЕА (10 млх2). Органический слой сушили и концентрировали в вакууме, остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (PE:EA=7:3) с получением 635 мг целевого соединения. Выход: 61%. MC (m/z)=595 [M+H]+.
(G) (R)-N-((S)-1-(6-Амино-3-(3,5-дифторфенил)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-
сульфинамид.
К раствору (R)-N-((S)-1-(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-(3,5-дифторфенил)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (635 мг, 1,07 ммоль) в AcOH (3,2 мл) по каплям добавляли концентрировали серную кислоту (1,6 мл) при 10°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь медленно обрабатывали водным раствором NaOH (2 М, 45 мл) при 0°С до pH 8-9, и затем экстрагировали ДХМ (30 млх3), органический слой сушили над безводным Na2SO4, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=6 :4 (+0,5% аммиака)) с получением 165 мг целевого соединения. Выход: 44%. MC (m/z)=355 [M+H]+.
(H) (R)-N-((S)-1 -(6-(3,5-Дифторфенил)имидазо [ ^-^пиридазин^-ил^тил^-метилпропан^-
сульфинамид.
К раствору (R)-N-((S)-1-(6-амино-3-(3,5-дифторфенил)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (165 мг, 0,47 ммоль) в EtOH (3 мл) добавляли 2-хлорацетальдегид (55 мг, 0,70 ммоль) и NaHCO3 (79 мг, 0,94 ммоль). Затем смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь охлаждали, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=7:3 (+0,5% аммиака)) с получением 150 мг соединение в виде твердого вещества. Выход: 84%. MC (m/z)=379 [M+H]+.
(I) (S)-1 -(6-(3,5-Дифторфенил)имидазо[ 1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этан-1 -амина гидрохлорид
К раствору (R)-N-((S)-1 -(6-(3,5-дифторфенил)имидазо[^-ЭДпиридазин^-щфтил^-метилпропан-2-сульфинамида (150 мг, 0,4 ммоль) в ЕА (3 мл) добавляли HCl-EA (2 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем смесь концентрировали в вакууме с получением 99 мг неочищенного продукта в виде бледно-желтого твердого вещества, которое использовали для следующей стадии без очистки. MC (m/z)=275 [M+H]+.
(J) ^)-4-Амино-6-(( 1 -(6-(3,5-дифторфенил)имидазо [ 1 Д-ЭДпиридазин^-щ^этщ^амино^иримидин^-карбонитрил.
К раствору (S)-1-(6-(3,5-дифторфенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-7-ил)этан-1-амина гидрохлорида (99 мг, 0,36 ммоль) и 4-амино-6-хлорпиримидин-5-карбонитрила (84 мг, 0,54 ммоль) в n-BuOH (3 мл) добавляли DIPEA (186 мг, 1,44 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником
в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=55:45 (+0,5% аммиака)) с получением 95 мг целевого соединения в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 67%. MC (m/z)=393 [M+Н]*
(K) (8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(3,5-дифторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пири-мидин-5-карбонитрил.
Раствор (S)-4-амино-6-((1-(6-(3,5-дифторфенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пирими-дин-5-карбонитрила (95 мг, 0,24 ммоль) и NCS (35 мг, 0,27 ммоль) в CHCl3 (3 мл) перемешивали при 70°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=7:3 (+0,5% аммиака)) с получением 77 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества. Выход: 75%. MC (m/z)=427 [M+Н]*
1H ЯМР(400 МГц, CD3OD) 5 8,10 (t, J=1,8 Гц, 1H), 7,96-7,86 (m, 1H), 7,82-7,72 (m, 1H), 7,40-7,26 (m,2H), 7,12-6,98 (m, 1H), 5,44 (q, J=6,8 Гц, 1H), 1,48 (d, J=6,9 Гц, 3H).
ci r^il
NH2
425
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,08 (d, J = 0,7 Гц, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,70 - 7,65 (m, 1H), 7,59 -7,54 (m, 1H), 7,48 - 7,43 (m, 2H), 5,42 (d, J = 6,6 Гц, 1H), 1,46 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
^N'V^Xi NH2
MC (М+Н)+ : 273/275
NH2
459
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,21 (s, 0.29Н), 8,13 (s, 0.67H), 7,86 - 7,83 (m, 0.65H), 7,80 (s, 0.62H), 7,78 (s, 0.27H), 7,77 (s, 0,61 H), 7,73-7,69 (m, 1H), 7,69 -7,57 (m, 2.69H), 5,35 - 5,23 (m, 1H), 1,58 (d, J = 6,8 Гц, 1H), 1,42 (d, J = 6,9 Гц, 2H).
NH2
MC (М+Н)+ : 307
o=s=o
ci Ai
CN'i!YN NH2
469
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,39 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,09 - 8,04 (m, 1H), 8,01-7,96 (m, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,80-7,73 (m, 2H), 5,35 (q, J = 7,0 Гц, 1H), 3,16 (s, ЗН), 1,46 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
o=s=o
NH2
MC(M+H)+ : 317
CI f\
NH2
459
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,12 (s, 1Н), 8,01 (s, 1Н), 7,91 (d, J = 7,6 Гц, 1H), 7,84 (s, 1Н), 7,77-7,76 (m, 2Н), 7,68 (t, J = 7,7 Гц, 1H), 5,42 - 5,31 (m, 1Н), 1,46 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 307
NH2
407
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 7,98 (s, 1Н), 7,92 (d, J = 0,5 Гц, 1Н), 7,68 (d, J = 0,5 Гц, 1Н), 7,52 (dd, J = 6,6, 5,0 Гц, 2Н), 6,90 (dd, J = 6,5, 5,0 Гц, 2Н), 5,48 (q, J = 6,8 Гц, 1Н), 1,38 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 255
CI ril
tec?
CN-V NH2
407
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,00 (s, 1Н), 7,91 (s, 1Н), 7,69 (s, 1Н), 7,29-7,25 (m, 1Н), 7,10-7,02 (т, 2Н), 6,91-6,83 (т, 1Н), 5,47 (q, J = 6,8 Гц, 1Н), 1,41 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH* MC
(M+H)+ : 255
397
1H ЯМР (400 МГц, дмсо-6с1) 5 8,26 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,78 (d, J = 7,3 Гц, 1H), 7,76-7,69 (m, 1H), 7,47 (d, J = 4,0 Гц, 1H), 7,23 (s, 2H), 5,36-5,29 (m, 1H), 1,36 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (М+Н)+ : 245
CI f^f\
442
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD)5 8,91 (d, J = 4,0 Гц, 1H), 8,43 (d, J = 7,8 Гц, 1H), 8,29 (s, 1Н), 8,13 (s, 1Н), 8,07 (d, J = 8,4 Гц, 1H), 7,87 (d, J = 8,4 Гц, 1H), 7,78 (s, 1Н), 7,68 (s, 1Н), 7,60 (dd, J = 8,3, 4,3 Гц, 1H), 5,54-5,47 (m, 1Н), 1,48 (d, J = 6,9 Гц, 4H).
NH2
MC (M+H)+ : 290
HN N^
CN^fN NH2
405
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,03 (s, 1Н), 7,87 (s, 1Н), 7,72 (s, 1Н), 7,43 - 7,38 (m, 2Н), 7,34 (t, J = 7,5 Гц, 1Н), 7,25 (d, J = 7,3 Гц, 1Н), 5,46-5,44 (т, 1Н), 2,38 (s, ЗН), 1,42 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 253
NH2
427
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,08 (s, 1Н), 7,91 (d, J = 1,3 Гц, 1Н), 7,75 (d, J = 1,4 Гц, 1Н), 7,70 - 7,60 (т, 1Н), 7,54 - 7,46 (т, 1Н), 7,42-7,38 (т, 1Н), 5,41-5,39 (т, 1Н), 1,45 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 275
CI f^X^
> NWF
NH2
443
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,09 (s, 1Н), 7,90 (d, J = 1,2 Гц, 1Н), 7,75 (d, J = 1,2 Гц, 1Н), 7,64 - 7,55 (т, 2Н), 7,47 (d, J = 8,2 Гц, 1Н), 5,42-5,41 (т, 1Н), 1,46 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 291
> N'NYC^CN
NH2
416
1Н ЯМР (400 МГц, flMCO-6d) 5 8,34 (s, 1Н), 8,11 (s, 1Н), 8,00 - 7,88 (т, ЗН), 7,84 (s, 1Н), 7,71 - 7,64 (т, 2Н), 7,18 (s, 2Н), 5,19-5,05 (т, 1Н), 1,41 (d, J = 6,8 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 264
ci fHl k'NsY^F
HN N
CN-V NH2
443
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,10 (s, 1Н), 7,90 (s, 1Н), 7,77 (s, 1Н), 7,52 (s, 1Н), 7,42 - 7,36 (т, 1Н), 7,29-7,26 (т, 1Н), 5,44 (q, J = 6,8 Гц, 1Н), 1,49 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+: 291
III?
NH2
423
1Н ЯМР (400 МГц, flMCO-6d) 5 8,27 (s, 1Н), 7,90 (d, J = 1,3 Гц, 1Н), 7,85 (d, J = 0,8 Гц, 1Н), 7,66 (d, J = 7,4 Гц, 1Н), 7,26-7,20 (т, 4Н), 7,09 (d, J = 10,0 Гц, 1Н), 5,21 (t, J = 7,0 Гц, 1Н), 2,33 (s, ЗН), 1,38 (d, J = 6,7 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 271
о, о4гЬ
> уу°
V^As..-'4
HN^N^
CN^V NH2
469
1H ЯМР (400 МГц, CDsOD) 5 8,25-8,22 (m, 0.27H), 8,20 - 8,16 (m, 0.74H), 8,10-8,08 (m, 0.76H), 7,967,91 (m, 1H), 7,88-7,86 (m, 0,7H), 7,82-7,80 (m, 0.49H), 7,78-7,74 (m, 2.27H), 7,77 - 7,64 (m, 0.56H), 7,55-7,53 (m, 0.23H), 5,65-5,55 (m, 0.25H), 5,30 -5,19 (m, 0.81H), 3,25 (s,2,12H), 3,23 (s, 0.77H), 1,60 (d, J = 6,8 Гц, 0,7H), 1,41 (d, J = 6,9 Гц, 2,2H).
NH2
MC(M+H)+ : 317
> N'NY^O^ HN
449
1H ЯМР (400 МГц, flMCO-6d) 5 8,19 (s, 1H), 7,86 (s, 2H), 7,70 (d, J = 7,4 Гц, 1H), 7,23 (s, 2H), 7,13-7,07 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,2 Гц, 1H), 5,30-5,26 (m, 1H), 4,25 (s, 4H), 1,34 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 297
441
1H ЯМР (400 МГц, flMCO-6d) 5 8,33 (s, 1Н), 8,21 (s, 1Н), 8,10-7,95 (m, ЗН), 7,92 (s, 1Н), 7,85-7,73 (m, ЗН), 7,59 (р, J = 6,4 Гц, 2Н), 7,21 (s, 2Н), 5,22 (t, J = 7,1 Гц, 1Н), 1,37 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 289
395
1Н ЯМР (400 МГц, flMCO-6d) 5 8,23 (s, 2Н), 7,93 (s,1 Н),7,88 - 7,84 (m, ЗН), 7,28 (s, 2Н), 5,50-5,46 (m, 1Н), 3,91 (s, ЗН), 1,43 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
r-N/
r"MYN
NH2
MC (M+H)+ : 243
ci rYS
CN-JYN NH2
448
1Н ЯМР (400 МГц, AMCO-6d) 5 9,47 (s, 1Н), 8,36 (s, 4Н), 8,32 (s, 1Н), 8,30 (d, J = 8,3, 1Н), 7,92 (s, 1Н), 7,78-7,73 (m,3H), 7,21 (s, 2Н), 5,26-5,19 (m, 1Н), 1,38 (d, J = 6,9, 4H).
N=\ NH2
MC (M+H)+: 296
N=\
k^N^AJ
HN N^
CNJYN
NH2
448
1H ЯМР (400 МГц, AMCO-6d) 5 9,47 (d, J = 0,8, 1Н), 8,36 (s, 1Н), 8,32 (s, 1Н), 8,29 (d, J = 8,3, 1H), 7,92 (d, J = 1,2, 1H), 7,79-7,72 (m, 3H), 7,21 (s, 2H), 5,25 -5,21 (m, 1H), 1,38 (d, J = 6,8, 3H).
N=\ NH2
MC (M+H)+ : 296
ci rY
CN-JYN NH2
444
1H ЯМР (400 MRi.CDCb) 5 8,03 (s, 1H), 7,98 (d, J = 4,7 Гц, 2H), 7,77 (s, 1H), 7,72 (d, J = 8,3 Гц, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,47 (d, J = 8,4 Гц, 1H), 7,13 (s, 1H), 5,565,49 (m, 1H), 5,44- 5,43 (m, 1H), 5,32 (s, 2H), 3,80 (s, 3H), 1,37 (d, J = 6,7 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 292
HN N
CN-V NH2
392
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,85 (d, J = 1,5 Гц, 1H), 8,68 - 8,59 (m, 1Н), 8,20-8,18 (m, 1Н), 8,15 -8,12 (m, 1Н), 7,88 (d, J = 1,5 Гц, 1H), 7,78 (d, J = 2,6 Гц, 1H), 7,59-7,55 (m, 1Н), 5,36 (q, J = 6,8 Гц, 1H), 1,49 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+ : 293
Соединение 31.
(8)-4-Амино-6-((1-(3-хдор-6-(о-толил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
(A) (8)-5-(1-Аминоэтил)-6-(о-толил)пиридазин-3-амин.
Раствор (Я)-Н-((8)-1-(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-(о-толил)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (G)) (960 мг, 1,68 ммоль) в CF3COOH (5 мл) нагревали и перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Затем его охлаждали до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме, доводили pH 9 с помощью аммиака, концентрировали и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=4:6 (+0,5% аммиака)) с получением 140 мг целевого соединения в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 37%. MC (m/z)=229 [M+H]+.
(B) трет-Бутил-(8)-(1-(6-амино-3-(о-толил)пиридазин-4-ил)этил)карбамат.
Раствор (8)-5-(1-аминоэтил)-6-(о-толил)пиридазин-3-амин (140 мг, 0,61 ммоль) и (Boc)2O (200 мг, 0,92 ммоль) в ДХМ (2 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем смесь концентрировали при 20°С и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=4:6 (+0,5% аммиака)) с получением 140 мг целевого соединения в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 70%. MC (m/z)=329 [M+H]+.
(C) трет-Бутил-(8)-(1 -(6-(о-толил)имидазо[ 1,2-b] пиридазин-7-ил)этил)карбамат.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(H). MC (m/z)=353 [M+H]+.
(D) (S)-1 -(б-(о-Толил)имидазо[ 1,2-b]пиридазин-7-ил)этан-1 -амин
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (I). MC (m/z)=253 [M+H]+.
(E) (S)-4-Амино-6-((1-(6-(о-толил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-
карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(J). MC (m/z)=371 [M+H]+.
(F) ^)-4-Амино-6-(( 1 -(3 -хлор-6-(о-толил)имидазо[ 1,2-b] пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5 -
карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). MC (m/z)=405 [M+H]+.
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,08 (s, 1H), 7,90-7,66 (m, 2H), 7,53-7,16 (m, 4H), 5,33-5,22 (m, 1H), 2,25-2,14 (m, 3H), 1,45 (d, J=31,3 Гц, 3H).
Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для 31 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны POSITA.
Соединение
Структура
(M+H)+
ЯМР
Промежуточное соединение
CI f^N
NH2
392
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,70-8,66 (m, 2H), 8,16 - 8,15 (m, 1H), 7,90-7,88 (m, 1H), 7,81 -7,78 (m, 1H), 7,78 - 7,73 (m, 2H), 5,41 - 5,34 (m, 1H), 1,50 (d, J = 7,1 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+: 240
(A) (S)-4-Хлор-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
(S)-1-(6-Фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этан-1-амин получали в соответствии с процедурой
для соединения 30 (I). Указанное в заголовке соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (J). MC (m/z)=376 [Ы+Н]+.
(B) (S)-4-(Метиламино)-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-
карбонитрил.
Смесь (S)-4-хлор-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (55,0 мг, 0,146 ммоль) и CH3NH2 (35% in CH3OH) (2 мл) перемешивали в микроволновом реакторе при 120°С в течение 1,5 ч. После концентрирования, остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с (Н2О:MeOH=3:2-2:3) с получением 15,0 мг продукта в виде белого твердого вещества. Выход 28%. MC (m/z)=371 [M+Н]^
(C) (S)-4-((1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)-6-(метиламино)пирими-
дин-5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). MC (m/z)=405 [M+Н]*
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,03 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,69-7,65 (m, 2H), 7,51-7,45 (m, 3H), 5,42 (q, J=6,9 Гц, 1H), 2,90 (s, 3H), 1,38 (d, J=6,9 Гц, 3H).
Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для 33 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны POSITA.
Соединение
Структура
MC(M+H)+
ЯМР
391
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,08 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,71-7,66 (m, 3H), 7,53 - 7,48 (m, 3H), 5,24 (q, J = 6,7 Гц, 1H), 1,29 (d, J = 6,7 Гц, ЗН).
CI f^fl
NH2
400, 402
1H ЯМР (400 МГц, flMCO-6d) 5 8,19 (s, 1Н), 7,85 (s, 1Н), 7,71 (s, 1Н), 7,68 -7,66 (m, 2Н), 7,55-7,47 (m, ЗН), 7,01 (d, J = 7,5 Гц, 1H), 6,48 (s, 2Н), 5,155,11 (m, 1Н), 1,31 (d, J = 7,0 Гц, ЗН).
Соединение 37.
(S)-N4-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)-5-(3-фторфенил)пиримидин-4,6-диамин
(A) (8)-5-Бром-6-хлор-К-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4-амин. Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(J). MC (m/z)=431
[М+Н]+.
(B) (S)-5-Бром-N4-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4,6-диамин.
Смесь (S)-5-бром-6-хлор-N-(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4-амина (850 мг, 1,97 ммоль), раствора гидроксида аммония (5 мл, 36%) и EtOH (2 мл) облучали в микроволновом реакторе при 150°С в течение 4 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь концентрировали в вакууме с получением 1 г неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии без очистки. MC (m/z)=441 [М+Н]+.
(C) (S)-5-Бром-N4-(1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)пиримидин-4,6-диамин. Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4(М). MC (m/z)=446
[М+Н]+.
(D) (S)-N4-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)-5-(3-фторфенил)пиримидин-4,6-
диамин.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(F). MC (m/z)=460 [М+Н]+.
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 7,92 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,76-7,64 (m, 3H), 7,62-7,45 (m, 4H), 7,25-7,04 (m, 3H), 5,37 (q, J=7,0 Гц, 1H), 1,20 (d, J=6,9 Гц, 3H).
Следующие соединения получали в соответствии с процедурой 37 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны POSITA.
H0JU NH2
476
1H ЯМР(400МГц, CD3OD) 5 7,94 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,68 (m, 3H), 7,51 (m, 3H), 7,01-7,12 (m, 3H), 5,33 (q, J = 6,9 Гц, 1H), 1,20 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
CI f\ HN
N^W QXJ NH2
473
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,03 (s, 1Н), 7,97 (s, 1Н), 7,92 (s, 1Н), 7,75 - 7,66 (m, ЗН), 7,60 (s, 1Н), 7,56 - 7,47 (m, ЗН), 6,96 (d, J = 8,4 Гц, 1H), 5,37 (q, J = 6,9 Гц, 1H), 3,94 (s, ЗН), 1,22 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
HNvN^ /Oy^JyN Nv^ NH2
473
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,25 (d, J = 4,2 Гц, 1Н), 7,90-7,88 (m, 2Н), 7,76 - 7,61 (m, ЗН), 7,52 (m, ЗН), 6,89 (d, J = 5,2 Гц, 1Н), 6,78 (s, 1Н), 5,37 (q, J = 6,9 Гц, 1Н), 3,93 (s, ЗН), 1,21 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
Соединение 42.
(S)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)(метил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
[M+НГ
(B) (S)-4-Хлор-6-(метил(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
(S)-4-Хлор-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил (70 мг, 0,19 ммоль) растворяли в безводном THF (4 мл). Смесь охлаждали до 0°С, и затем к ней добавляли NaH (60% суспендированный в минеральном масле, 11,2 мг, 0,28 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 0,5 ч смесь снова охлаждали до 0°С, и затем к ней по каплям добавляли CH3I (39,6 мг, 0,28 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли H2O (8 мл) и перемешивали в течение 5 мин, затем экстрагировали ДХМ. Объединенные органические слои концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:MeOH=19:1-9:1) с получением 32,0 мг продукта в виде белого твердого вещества. Выход 45%о MC (m/z)=386 [M+НГ
(C) (S)-4-Амино-6-(метил(1-(6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 37(В). MC (m/z)=371 [M+НГ
(D) (S)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)(метил)амино)пирими-
дин-5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4(М). MC (m/z)=405 [M+НГ
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,12 (d, J=1,0 Гц, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,43-7,37 (m, 2H), 7,317,23 (m, 3H), 6,25 (q, J=6,7 Гц, 1H), 2,77 (s, 3H), 1,62 (d, J=6,7 Гц, 3H). Соединение 43.
(Я)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-фторфенил)имидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
(A) 3 -Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-карбальдегид.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 7 и 8 (А). MC (m/z)=310 [M+НГ, 312 [М+2+Н]+.
(B) (R,E)-N-((3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)метилен)-2-метилпропан-2-
сульфинамид.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 7 и 8 (В). MC (m/z)=381 [M+НГ, 383 [М+2+Н]+.
(C) (R)-N-(1-(3-Хлор-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 7 и 8 (С). MC (m/z)=411 [M+НГ, 413 [М+2+Н]+.
(D) (R)-N-((R)-1-(3-(3-Фторфенил)-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (С). MC (m/z)=471 [M+НГ.
(E) (R)-N-((R)-1-(6-Амино-3-(3-фторфенил)пиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
(R)-N-((R)-1-(3-(3-фторфенил)-6-((4-метоксибензил)амино)пиридазин-4-ил)пропил)-2-метилпропан-
2-сульфинамид (1,1 г, 2,34 ммоль) растворяли в HOAc (5,5 мл). Смесь охлаждали до 10°С и медленно по каплям добавляли конц. H2SO4 (2,75 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1
4 смесь добавляли по каплям к раствору NaOH (8,0 g) в ледяной воде (100 мл) и перемешивали в течение
5 мин, и затем экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические слои концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (H2O:MeOH=3:2-2:3 (+0,5%NH3-H2O)) с получением 545,0 мг целевого продукта в виде светло-коричневого твердого вещества. Выход 66%; MC (m/z)=351 [M+НГ.
(F) (R)-N-((R)-1 -(6-(3 -Фторфенил)имидазо[ 1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)-2-метилпропан-2-
сульфинамид.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (J). MC (m/z)=375 [M+НГ.
(G) (R)-1-(6-(3-Фторфенил)имидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропан-1-амина гидрохлорид
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (K). MC (m/z)=271 [Ы+Н]+.
(H) (К)-4-Амино-6-((1-(6-(3-фторфенил)имидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)амино)пиримидин-5-
карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (L). MC (m/z)=389 [М+Н]+.
(I) (К)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-фторфенил)имидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)пропил)амино)-
пиримидин-5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). MC (m/z)=423 [М+Н]+.
1H ЯМР(400 МГц, CD3OD) 5 8,06 (s, 1H), 7,91 (d, J=0,9 Гц, 1H), 7,73 (d, J=0,9 Гц, 1H), 7,55-7,48 (m, 3H), 7,28-7,21 (m, 1H), 5,24 (q, J=5,2 Гц, 1H), 1,89-1,70 (m, 2H), 0,83 (t, J=7,3 Гц, 3H).
Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для 43 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны POSITA.
Соединение
Структура
MC(M+H)+
ЯМР
CI f\
> NWF
^NH
423
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,17 (s, 1H), 8,08-8,07 (m, 2H), 7,69 (s, 1H), 7,64-7,62 (m,2H), 7,56-7,48 (m, 1H), 7,28-7,20 (m, 1H), 5,50 - 5,28 (m, 1H), 1,81 (p, J = 7,2 Гц, 2H), 0,87 (t, J = 7,3 Гц, ЗН).
CI f^jl
423
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,17 (s, 1Н), 8,08 (s, 2Н), 7,70 (s, 1Н), 7,67 - 7,59 (m, 2Н), 7,57 - 7,50 (m, 1Н), 7,29 - 7,22 (m, 1Н), 5,46 - 5,26 (m, 1Н), 1,82 (р, J = 7,2 Гц, 2Н), 0,89 (t, J = 7,3 Гц, ЗН).
Соединение 51.
(S)-6-Амино-4-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)-5-цианопиримидин 1-оксид
К раствору соединения 4 (40 мг, 0,10 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли mCPBA (53 мг, 0,30 ммоль) при 5°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H20 (+0,5% NH3-H2O)) с получением 15 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества, Выход:36%; MC (m/z)=407 [M+H]+.
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,20 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,60-7,58 (m, 2H), 7,50-7,47 (m, 3H), 5,44-5,39 (m, 1H), 1,47 (d, J=6,9 Гц, 3H). Соединение 52.
(S)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбоновая кислота
Соединение 4 (50,0 мг, 0,13 ммоль) растворяли в водном растворе NaOH (2,0 моль/л, 2 мл) и добавляли EtOH (0,4 мл). Смесь перемешивали при 60°С в течение ночи и затем охлаждали до комнатной температуры. Соляную кислоту (2 моль/л) добавляли для доведения значения pH до 8~9. Смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н2О:MeOH=3:2-1:2) с получением 60,0 мг продукта в виде белого твердого вещества. Выход 95%. MC (m/z)=410 [M+Н]+.
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 10,4 10,38 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,73-7,68 (m, 3H), 7,68-7,64 (m, 1H), 7,53-7,46 (m, 3H), 5,33-5,22 (m, 1H), 1,31 (d, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 53.
(8)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбоксамид
(S)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбоновую кислоту (20,0 мг, 0,049 ммоль), NH4Cl (10,4 мг, 0,19 ммоль) и HATU (37,2 мг, 0,098 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл), затем медленно добавляли DIPEA (12,7 мг, 0,098 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Н2О:MeOH=1:1-1:4) с получением 14,5 мг продукта в виде белого твердого вещества. Выход 72% MC (m/z)=409 [M+Н]^
1H ЯМР(400 МГц, CD3OD) 5 8,01-7,97 (m, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,73-7,68 (m, 2H), 7,67-7,64 (m, 1H), 7,52-7,47 (m, 3H), 5,33-5,24 (m, 1H), 1,31 (d, J=6,9 Гц, 3H).
Следующие соединения получали в соответствии с процедурой для 53 с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны
POSITA.
Соединение
Структура
MC(M+H)+
ЯМР
°Yt N
/N^ N
437
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,00 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,74 - 7,69 (m, 2H), 7,69 - 7,66 (m, 1H), 7,53 -7,48 (m, 3H), 5,38 - 5,31 (m, 1H), 3,05 (s, 3H), 3,03 (s, 3H), 1,30 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
И NH2
446
1 H ЯМР (400 МГц, cd 3 od) 5 7,92 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,76 - 7,67 (m, 4H), 7,58 - 7,48 (m, 4H), 5,37 -5,32 (m, 1H), 3,97 (s, ЗН), 1,22 (d, J = 6,9 Гц, ЗН).
Соединение 55.
(S)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)-2-гидроксипиримидин-5-карбонитрил
(A) (S)-4-Хлор-2-(метилтио)-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-
5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30(J). MC (m/z)=422 [M+ff]+.
(B) (S)-4-Амино-2-(метилтио)-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-
5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 37 (В). MC (m/z)=403 [M+№]+.
(C) (S)-4-Амино-2-(метилсульфонил)-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)-
пиримидин-5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 51. MC (m/z)=435 [M+№]+.
(D) (S)-4-Амино-2-гидрокси-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-
5-карбонитрил.
Смесь (S)-4-амино-2-(метилсульфонил)-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)-пиримидин-5-карбонитрила (150 мг, 0,34 ммоль) и водного раствора NaOH (2 мл, 2 N) в THF (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь экстрагировали ДХМ (20 млх3), объединенный органический слой концентрировали с получением 200 мг неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии без очистки. MC (m/z)=373 [M+Н].
(E) ^)-4-Амино-6-(( 1-(3 -хлор-6-фенилимидазо [1,2-b] пиридазин-7-ил)этил)амино)-2-гидрокси-
пиримидин-5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). MC (m/z)=407 [M+№]+.
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,00 (s, 1H), 7,78-7,67 (m, 3H), 7,55-7,40 (m, 3H), 5,44 (q, J=6,8 Гц, 1H), 1,36 (d, J=6,9 Гц, 3H). Соединение 69.
(S)-4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(2-гидроксифенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
К раствору (S)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(2-метоксифенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-
ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (120 мг, 0,28 ммоль, указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30) в ДХМ (3 мл) по каплям добавляли BBr3 (1,4 мл, 1,4 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали в течение 6 ч при комнатной температуре. Затем смесь гасили MeOH, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=7:3) с получением 36 мг указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества. Выход: 32%. MC (m/z)=411 [M+№]+.
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,08 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,31-7,19 (m, 2H), 6,93-6,82 (m, 2H), 5,39 (d, J=6,9 Гц, 1H), 1,53 (d, J=6,9 Гц, 3H).
Соединение 78
(S)-4-Амино-6-((1-(3-фтор-6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
К раствору (S)-4-амино-6-((1-(6-фенилимидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрила (100 мг, 0,28 ммоль) в CHCl3 (15 мл) добавляли №фтор-№ (фенилсульфонил)бензолсульфонамид (886 мг, 2,81 ммоль). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 32 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали с помощью тонкослойной хроматографии с получением 5 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. MC (m/z)=375 [M+Н^.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,05 (s, 1H), 7,87 (d, J=1,4 Гц, 1H), 7,67-7,64 (m, 2H), 7,53-7,49 (m, 3H), 7,49-7,43 (m, 1H), 7,37 (d, J=7,0 Гц, 1H), 5,46-5,31 (m, 3H), 1,37 (d, J=6,8 Гц, 3H).
Соединение 79.
(Хиральный)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил
(A) 5-(1-Аминоэтил)-6-хлорпиридазин-3-амин.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (G). ((R)-N-(1-(6-(бис-(4-метоксибензил)амино)-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамид получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (Е)).
(B) трет-Бутил-(1-(6-амино-3-хлорпиридазин-4-ил)этил)карбамат.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 31 (В).
(C) трет-Бутил-(1-(6-хлоримидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-ил)этил)карбамат. Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 31 (С).
(D) трет-Бутил-(1-(6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-7-
ил)этил)карбамат.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 30 (F). MC (m/z)=397 [M+НГ.
(E) 2-(3-(7-(1-Аминоэтил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-6-ил)фенил)пропан-2-ол
Смесь трет-бутил-(1-(6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)карбамата (120 мг, 0,30 ммоль) в TFE (3 мл) перемешивали при 140°С в течение 1 ч в микроволновом реакторе. Смесь концентрировали в вакууме с получением 95 мг неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии без очистки. MC (m/z)=297 [M+Н^.
(F) 4-Амино-6-((1-(6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-
ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (L). MC (m/z)=415 [M+НГ.
(G) 4-Амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-
ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М).
(H) (Хиральный)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-(3-(2-гидроксипропан-2-ил)фенил)имидазо[1,2-
Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбонитрил.
Рацемическое соединение G разделяли с помощью хиральной ВЭЖХ с получением оптически чистых энантиомеров соединения 79 (условия ВЭЖХ: колонка: CHIRALPAK la 20 mm I.D.x25 см L; подвижная фаза: EtOH/DEA=100/0,10; скорость потока=8,0 мл/мин; детектор: UV 254 нм). Элюент (Rf=3,958 мин) составлял 97,51% эи. MC (m/z): 449 [M+Н^.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 8,26 (s, 1H), 7,87 (d, J=5,3 Гц, 2H), 7,78-7,76 (m, 2H), 7,60-7,58 (m, 1H), 7,43-7,72 (m, 2H), 7,21 (s, 2H), 5,19-5,11 (m, 1H), 1,43 (s, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,34 (d, J=6,8 Гц, 3H). Соединение 79 могло представлять собой:
Следующее соединение получали в соответствии с процедурой для 79 (G) с использованием соответствующих промежуточных соединений и реагентов в соответствующих условиях, которые будут понятны POSITA.
Соединение
Структура
(M+H)+
ЯМР
Промежуточное соединение
NH2
396
1H ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 8,05 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 5,46-5,44 (m, 1H), 5,41-5,34 (m, 1H), 5,33 (s, 2H), 1,36 (d, J= 6,8 Гц, ЗН).
NH2
MC (M+H)+: 244
Соединение 81.
(S)-N4-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)-5-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)пиримидин-4,6-диамин
(A) (S)-N'-Ацетил-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пи-
римидин-5-карбогидразид.
К раствору (S)-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пири-мидин-5-карбоновой кислоты (88 мг, 0,21 ммоль), уксусного гидразида (19 мг, 0,25 ммоль), HATU (95 мг, 0,25 ммоль) в ДМФА (2 мл) по каплям добавляли Et3N (64 мг, 0,63 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ТСХ и ЖХ-MC показали, что исходное вещество было израсходовано. Затем смесь разделяли между воды (2 мл) и ЕА (5 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали ЕА (5 млх3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4, концентрировали с получением 70 мг неочищенного продукта, который использовали для следующей стадии без какой-либо очистки. MC (m/z)=466 [M+Н]+.
(B) (S)-N4-(1-(3-Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)-5-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-
ил)пиримидин-4,6-диамин.
К перемешиваемому раствору ^)-№-ацетил-4-амино-6-((1-(3-хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)амино)пиримидин-5-карбогидразида (70 мг, 0,15 ммоль) в сухом THF (3 мл) добавляли метил ^(триэтиламмонийсульфонил)карбамат (89 мг, 0,38 ммоль). Смесь нагревали и перемешивали в течение 3 ч при кипячении с обратным холодильником. Затем смесь охлаждали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=6:4) с получением 10 мг указанного в заголовке соединения. MC (m/z)=448 [M+Н]+.
1H ЯМР(400 МГц, ДМСО) 5 8,25 (d, J=6,4 Гц, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,71-7,66 (m,2H), 7,54-7,50 (m, 3H), 7,22 (s, 2H), 5,24-5,17 (m, 1H), 2,57 (s, 3H), 1,37 (d, J=6,9 Гц, 3H).
Соединение 82.
(S)-N4-( 1 -(3 -Хлор-6-фенилимидазо[1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)-5-(3 -метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиримидин-4,6-диамин
(A) Метил 4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксилат.
К раствору этил-4,6-дихлорпиримидин-5-карбоксилата (5 г, 22,73 ммоль) в MeOH (50 мл) партиями добавляли метоксид натрия (4,3 г, 79,55 ммоль). Реакционную смесь нагревали и перемешивали в течение ночи при кипячении с обратным холодильником. Затем смесь добавляли воды (50 мл) и экстрагировали ЕА (50 млх2). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4, концентрировали с получением 3,9 г неочищенного продукта. Выход: 88%. MC (m/z)=199 [M+Н]+.
(B) 4,6-Диметоксипиримидин-5-карбоновая кислота.
К раствору метил-4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксилата (3,9 г, 19,69 ммоль) в MeOH (40 мл) добавляли раствор NaOH (1,6 г, 39,38 ммоль) в воде (5 мл). Затем реакционную смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры, к смеси добавляли соляную кислоту (4 М, 10 мл) до pH 4-5. Осадок фильтровали с получением
3,5 г указанного в заголовке соединения. Выход: 95%. MC (m/z)=185 [M+Н^.
(C) 4,6-Диметоксипиримидин-5-карбоксамид.
К раствору 4,6-диметоксипиримидин-5-карбоновой кислоты (2,5 г, 13,58 ммоль), хлорида аммиака (864 мг, 16,3 ммоль), HATU (6,2 г, 16,3 ммоль) в ДМФА (30 мл) добавляли по каплям Et3N (4,1 г, 40,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ТСХ и ЖХ-MC показали, что исходное вещество было израсходовано. Затем смесь гасили водой (30 мл) и экстрагировали ДХМ (50 млх3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:MeOH=8:2) с получением 1,3 г указанного в заголовке соединения. Выход: 51%. MC (m/z)=184 [M+Н^.
(D) (Е)-N-(1-(Диметиламино)этилиден)-4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксамид.
Раствор 4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксамида (1,3 г, 7,1 ммоль) и диметилацеталя N,N-диметилацетамида (4,7 г, 35,5 ммоль) в сухом толуоле (20 мл) нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ЕА:MeOH=7:3) с получением 715 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 40%. MC (m/z)=253 [M+ffl+.
(E) 5-(4,6-Диметоксипиримидин-5-ил)-3-метил-1,2,4-оксадиазол.
(E) -N-(1-(Диметиламино)этилиден)-4,6-диметоксипиримидин-5-карбоксамид (715 мг, 2,83 ммоль) добавляли к раствору гидрохлорида гидроксиламина (254 мг, 3,68 ммоль) в водном растворе NaOH (2 М, 2,4 мл, 4,81 ммоль). Затем добавляли диоксан (8 мл) и AcOH (5,6 мл, 99,05 ммоль). Смесь нагревали с кипячением с обратным холодильником и перемешивали в течение ночи. Затем смесь охлаждали, концентрировали и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:H2O=6:4) с получением 131 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 21%. MC (m/z)=223 [M+Н^.
(F) 5-(3-Метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиримидин-4,6-диол.
К перемешиваемому раствору 5-(4,6-диметоксипиримидин-5-ил)-3-метил-1,2,4-оксадиазола (131 мг, 0,59 ммоль) в AcOH (0,2 мл) медленно по каплям добавляли концентрированную соляную кислоту (0,2 мл). Затем смесь нагревали до 50°С и перемешивали в течение 3 ч. Затем смесь охлаждали и концентрировали, остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (MeOH:Н2О=15:85) с получением 71 мг указанного в заголовке соединения. Выход: 62%. MC (m/z)=195 [M+Н^.
(G) 5-(4,6-Дихлорпиримидин-5-ил)-3-метил-1,2,4-оксадиазол.
Раствор 5-(3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиримидин-4,6-диола (71 мг, 0,36 ммоль) в POCl3 (1 мл) нагревали до 100°С и перемешивали в течение 1 ч. Смесь охлаждали и очень медленно по каплям добавляли к ледяной воде. Водный слой экстрагировали ДХМ (5 млх3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4, концентрировали с получением 54 мг указанного в заголовке соединения, которое использовали для следующей стадии без какой-либо очистки. Выход: 64% MC (m/z)=231 [M+Н^. (H) 6-хлор-5 -(3 -метил-1,2,4-оксадиазол-5 -ил)пиримидин-4-амин.
Раствор 5-(4,6-дихлорпиримидин-5-ил)-3-метил-1,2,4-оксадиазола (54 мг, 0,23 ммоль) в THF (1 мл) барботировали через NH3 в течение 5 мин и перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем смесь концентрировали с получением 36 мг указанного в заголовке соединения, которое использовали для следующей стадии без какой-либо очистки. Выход: 75%. MC (m/z)=212 [M+Н^.
(I) (S)-5-(3 -Метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)-^-( 1 -(6-фенилимидазо [ 1,2-Ъ]пиридазин-7-
ил)этил)пиримидин-4,6-диамин.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (L). MC (m/z)=414 [M+НГ
(J) (S)-N4-( 1 -(3 -Хлор-6-фенилимидазо [ 1,2-Ъ]пиридазин-7-ил)этил)-5 -(3 -метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)пиримидин-4,6-диамин.
Указанное соединение получали в соответствии с процедурой для соединения 4 (М). MC (m/z)=448 [M+НГ
1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8,00 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,72-7,69 (m, 3H), 7,54-7,49 (m, 3H), 5,53-5,43 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 1,45 (d, J=6,9 Гц, 3H).
Пример 2. Флуоресцентное определение ферментативной активности PI3K.
PyK-киназы, включая р110а/р85а и р110у, были приобретены у Invitrogen, р1105/р85а и р110р/р85а были приобретены у Millipore.
Первичные данные скрининга и значения IC50 измеряли с использованием анализа Transcreener (tm) KINASE (Beltorook, Catalog # 3003-10K). Анализ может быть проведен в соответствии с процедурами, предложенными изготовителем. Это универсальная, однородная высокопроизводительная технология скрининга (HTS), использующая конкурентный иммуноанализ поляризации флуоресценции дальнего красного спектра, основанный на обнаружении ADP для контроля активности ферментов, которые катализируют реакции группового переноса. Вкратце, анализ Transcreener KINASE был разработан как простой состоящий из двух частей конечный анализ, включающий:
1) Получение 25 мкл киназной реакции: 25 мкл киназную реакцию осуществляли путем получения реакционной смеси, содержащей 10 мкл киназного буфера (50 мМ HEPES, 100 мМ NaCl, 1 мМ EGTA,
0,03% CHAPS, 3 мМ MgCl2 и свежеприготовленный 1 мМ DTT) и 10 мкл 30 мкМ PIP2 и 10 мкМ АТР, 5 мкл раствора испытуемого соединения (соединение растворяли в ДМСО, конечные концентрации соединения в реакционной смеси составляли 1, 0,3, 0,1, 0,037, 0,012, 0,0041, 0,0014 и 0,0005 мМ и конечная концентрация ДМСО в реакционной смеси составляла 2%) или 5 мкл контроля (2% ДМСО). Реакционную смесь добавляли в требуемые лунки 96-луночного планшета. Планшет герметизировали и инкубировали в течение 80 мин при комнатной температуре.
2) Затем в каждую лунку добавляли 25 мкл смеси для детектирования ADP. Планшет снова герметизировали и инкубировали в течение 60 мин при комнатной температуре. Затем поляризацию флуоресценции измеряли с помощью счетчика Tecan Infinite F500 Reader.
Данные анализировали и значения IC50 получали с использованием дополнительного программного обеспечения для Microsoft Excel, Xlfit(tm) (версия 5.3).
Скорости ингибирования вычисляли следующим образом: Ш%=(количество ADP при 2% ДМСО в лунке - количество ADP в лунке с испытуемым соединением)/количество ADP при 2% ДМСО в лун-кех100%.
Ниже приведены значения IC50 (мкМ) или скорости ингибирования (IH%) при 1 мкМ некоторых соединений:
Соеди нение
PI3K-5
PI3K-Y
PI3K-P
PI3K-Q
1С50 (мкМ)
IH%
1С50 (мкМ)
IH%
1С50 (мкМ)
IH%
1С50 (мкМ)
IH%
0,028
16,1%
28,1%
0,001
0,168
0,323
0,048
6,9%
4,810
0,0003
0,038
0,087
47,3%
4,1%
-10,7%
0,001
61,1%
0,303
12,5%
-2,3%
-2,7%
0,010
-1,4%
37,7%
0,002
0,046
0,158
0,003
0,094
55,7%
0,002
0,55
0,080
0,003
0,484
1,918
51,0%
22,5%
3,2%
0,001
0,393
59%
0,003
0,326
27,5%
0,026
61,2%
15,8%
0,004
0,617
42%
0,002
1,965
1,07
0,073
43,1%
17,4%
0,006
0,424
0,5
21,7%
0,002
0,322
76,7%
13,6%
0,006
0,343
28,7%
3,2%
0,002
44,5%
46,6%
0,004
2,593
22,8%
0,839
-7,5%
0,025
24,9%
9,5%
39,8%
18,8%
11,1%
0,003
35%
0,174
0,003
0,410
1,039
0,004
0,146
0,371
0,015
0,243
23,8%
0,288
-6,9%
2,2%
8,3%
-19,3%
3,7%
0,004
64,6%
67,6%
0,003
0,243
1,310
0,288
27,5%
-0,4%
0,066
54,3%
-2,2%
0,073
28,1%
-4,4%
0,002
> 0,333
0,277
0,003
0,499
1,331
0,339
18,2%
7,4%
0,132
27,2%
23,6%
0,283
36,0%
18,8%
0,003
0,195
0,450
0,004
0,050
1,318
0,018
55,2%
32,2%
0,009
1,331
4,083
0,001
0,146
0,001
68,9%
5,5%
-14,1%
0,957
36,7%
-15,5%
0,080
-26,1%
-6,3%
0,011
34,3%
30,5%
0,002
0,226
0,009
60,3%
-4,7%
8,5%
21,0%
1,0%
9,0%
0,062
30,3%
6,3%
0,138
20,2%
20,5%
0,005
2,393
1,161
0,001
0,048
0,034
0,007
26,5%
24,4%
0,002
0,247
1,232
0,006
0,105
48,1%
0,048
> 0,333
44,1%
0,002
0,611
1,257
0,009
1,119
4,298
0,005
1,145
3,584
0,002
0,345
0,963
0,001
0,023
0,133
0,022
1,979
37,4%
0,129
32,6%
35,2%
0,004
0,513
0,089
0,082
62,8%
60,8%
0,009
40,8%
49,4%
1,0%
31,7%
-7,1%
48,9%
-14,3%
54,9%
0,002
0,436
0,238
0,001
0,712
50,1%
0,002
56,2%
43,8%
0,0005
0,059
0,272
0,002
0,098
0,630
0,013
0,203
55,2%
Пример 3. Ингибирование фосфорилирования АКТ в клеточной линии Ramos.
6х104/мл клетки Ramos (ATCC, CRL-1596, клетки культивировали в среде RPMI1640 с 10% FBS) высевали на 96-луночный планшет (Beckman Dickinson, No. 356692) при 80 мкл/лунка, 4800 клеток/лунка. После инкубации в течение 3 ч при 37°С при 5% CO2 клетки Ramos с концентрацией 10 мкл/лунка обрабатывали различными концентрациями испытуемого соединения (конечные концентрации испытуемого соединения: 1, 0,3, 0,1, 0,037, 0,012, 0,0041, 0,0014 и 0,0005 мкМ) или 0,3% ДМСО в течение 30 мин, а затем стимулировали при 10 мкл/лунка 1 мкг/мл анти-IgM (Jackson Immunoresearch, 709-006-073) в течение 15-20 мин.
1) Клетки фиксировали 100 мкл 4% предварительно нагретого параформальдегида (2% конечной концентрации) и инкубировали в течение 45 мин при комнатной температуре.
2) Раствор параформальдегида удаляли. 100 мкл ледяного метанола добавляли в каждую лунку и планшет оставляли при 4°С в течение 30 мин.
3) Клетки трижды промывали 160 мкл PBS.
4) В каждую лунку добавляли 40 мкл разведения 1:350 антитела кролика анти-р-AKT(Ser473) (Cell Signaling Technology, 4060 л) в буфере для разведения антител (1% BSA, в PBS). Планшет инкубировали в течение ночи при 4°С.
5) Клетки промывали 3 раза 160 мкл PBS.
6) В каждую лунку добавляли 45 мкл козьего антикроличьего IgG Alexa488 антитела (Invitrogen, A11034) в разведении 1:1000 в буфере для разведения антител (1% BSA в PBS). Планшет покрывали фольгой для защиты от света и инкубировали в течение 90 мин при комнатной температуре.
7) Клетки промывали 3 раза 160 мкл PBS.
8) 50 мкл 1,5 мкМ раствора йодида пропидия (Sigma: P4170) добавляли в каждую лунку для определения количества клеток (1,5 мМ стоковый раствор пропидия разводили 1:1000 в PBS, а конечная концентрация составляла 1,5 мкМ).
9) Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем герметизировали с помощью защитного покрытия.
10) Планшет загружали в Acumen Explorer и сканировали с соответствующими настройками прибо-
ра.
Данные анализировали и значения IC50 получали с использованием дополнительного программного
2. Способы.
1) Гепаринизированную цельную кровь человека смешивали и пипетировали в 96-луночный планшет с v-образным дном, 100 мкл на лунку.
2) 10 мкл буфера для стимуляции (стоковый раствор 1 мг/мл, конечная концентрация рекомбинант-ного человеческого IL-3: 20 нг/мл) добавляли к образцам цельной крови каждой лунки и осторожно встряхивали. Образцы инкубировали в течение 20 мин при 37°C.
3) 10 мкл/лунку разведения испытуемого соединения (конечные концентрации испытуемого соединения в лунке: 1 мкМ, 0,3 мМ, 0,1, 0,037, 0,012, 0,0041, 0,0014 и 0,0005 мМ) или носитель (0,2% ДМСО) добавляли в каждую лунку планшета и планшет инкубировали в течение 1,5 ч при 37°С.
4) В каждую лунку планшета добавляли 100 мкл козий античеловеческий IgE (1 мг/мл стокового раствора, конечная концентрация IgE: 0,31 мкг/мл). Встряхивали все лунки еще раз и инкубировали в течение 20 мин при 37°С.
5) Маркировка окрашивающим антителом: дегрануляцию останавливали путем инкубирования образцов на льду в течение 5 мин. В каждую лунку добавляли 6 мкл смеси окрашивающих антител (анти-CD63-FITC и анти-IgE-PE). Встряхивали и инкубировали лунки в течение 20 мин на ледяной бане, закрытой для предотвращения воздействия света.
6) Образцы цельной крови лизировали с 300 мкл лизиса RBC (предварительно нагретый до комнатной температуры, от 20 до 25°С). Встряхивали и инкубировали образцы в течение 15 мин при комнатной температуре. Замедлять вращение клеток (5 мин, 250хg, 4°С). Супернатант отсасывали, оставляя приблизительно 100 мкл в каждой лунке.
7) Образцы крови снова лизировали как на этапе 6).
8) Промывка: образцы промывали один раз 0,5 мл промывочного раствора. Планшет центрифугировали (5 мин, 250хg, 4°С). Супернатант отсасывали, оставляя приблизительно 100 мкл в каждой лунке. Образец в каждой лунке промывали и снова центрифугировали, как описано выше.
9) 200 мкл фиксирующего раствора (1% паральдегида в 1% BSA/PBS) добавляли в каждую лунку. Планшет инкубировали в покрытой ледяной бане до анализа.
10) Проточный цитометрический анализ. Клетки анализировали методом проточной цитометрии с
использованием сине-зеленого возбуждающего света (488 нм аргоно-ионный лазер, FACSCalibur, про-
граммное обеспечение CELLQuest). 3. Анализ данных.
Данные анализировали и значения IC50 получали с использованием дополнительного программного обеспечения для Microsoft Excel, Xlfit(tm) (версия 5.3).
Ниже приведены значения 1С50 (мкМ) некоторых соединений:
Соединение
ICso (мкМ)
Соединение
ICso (мкМ)
Соединение
ICso (мкМ)
0,001
0,397
0,1
0,006
0,002
0,109
0,009
0,006
0,015
0,010
0,011
0,014
0,002
0,037
0,262
0,011
0,565
0,010
0,618
0,006
0,002
0,088
0,018
0,010
0,016
0,041
Пример 5. Анализ in vitro клеточной пролиферации в клеточной линии SU-DHL-6.
Анализы ингибирования роста проводили с использованием 10% FBS-дополненных сред. Клетки высевали при концентрации 15000 клеток на лунку в 96-луночном планшете. Разбавление испытуемого соединения в различных концентрациях (конечные концентрации испытуемого соединения: 1 мкМ, 0,3 мМ, 0,1 мМ, 0,037 мМ, 0,012 мМ, 0,0041 мМ, 0,0014 мМ и 0,0005 мМ) добавляли через 24 ч. Рост оценивали с использованием набора для подсчета клеток Cell Counting Kit-8 (CCK-8) (Dojindo, Cat# CK04) после того, как испытуемые соединения инкубировали в течение 72 ч. Поглощение считывали при длине волны 450 нм на аппарате Multiskan MK3 (Thermo).
Данные анализировали и значения IC50 получали с использованием дополнительного программного обеспечения для Microsoft Excel, Xlfit(tm) (версия 5.3).
Ниже приведены значения 1С50 (мкМ) некоторых соединений:
Соединение
ICso (мМ)
Соединение
ICso (мМ)
Соединение
ICso (мМ)
0,001
0,011
0,019
0,003
0,172
0,078
0,031
0,026
0,011
0,011
0,023
0,032
0,002
0,262
0,011
Пример 6. Действие соединения 4 на активацию В-клеток, индуцированных анти-IgD-антителами, в цельной крови крысы.
Известно, что активация В-клеток (В220+) в цельной крови крысы антителом анти-IgD, приводящая к активации через Ig-рецепторы, включает пути PI3K и чувствительна к модуляции ингибиторами PI3K5. Был разработан фармакодинамический анализ для оценки активности ингибиторов PI3K5 ex vivo после перорального введения ингибиторов крысам.
В экспериментах использовали крыс Wistar (самки, возраст 6-8 недель). Изучение зависимости от дозы и вермени и взаимосвязь с PKPD соединения 4 проводились у нормальных крыс Wistar. Соединение 4 (0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1, 3 мг/кг), растворенное или суспендированное в носителе (0,5% CMC-Na, pH 2,1), вводили крысам (3 крысам на дозу) перорально один раз. Контрольную группу (6 крыс) обрабатывали только одним носителем. В назначенные моменты времени (1, 8, 16 и 24 ч после введения) образцы крови собирали у крыс с помощью ретроорбитального кровотечения при изофлюрановой анестезии в гепа-ринизированные пробирки. Гепариновую антикоагулированную кровь смешивали с антикрысиным IgD, затем инкубировали при 37°С при 5% CO2 в течение ночи. Сигнал флуоресценции для CD86 на положительных клетках В220 (В-клетки) детектировали с использованием проточного цитометра (BD FAC-SCalibur, BD Biosciences) и данные анализировали с помощью программного обеспечения CellQuest. Плазму собирали для измерения уровней соединения 4.
Как показано на фиг. 1, соединение 4 ингибировало индуцированную анти-IgD активацию В-клеток в цельной крови крысы, ex vivo, зависимым от дозы и времени образом в интервале доз от 0,01 до 3 мг/кг (р <0,01). Значения ED50 через 2 ч после введения дозы составляли <0,01 мг/кг при соответствующем значении EC50, равном 1,487 нг/мл. Уровни концентрации соединения 4 были пропорциональны дозе в диа
пазоне доз от 0,01 мг/кг до 3 мг/кг. После однократного перорального введения дозы 0,1 мг/кг полное ингибирование активации В-клеток (> 90%-ное ингибирование) наблюдалось в течение 24 ч.
Пример 7. Эффект соединения 4 в модели артрита, вызванного коллагеном II (CIA), на крысиной модели.
Артрит, вызванный коллагеном, у крыс, является экспериментальной моделью полиартрита, которая широко используется для неклинического тестирования многочисленных противоартритных агентов, которые либо находятся в стадии неклинических, либо клинических исследований, или в настоящее время используются в качестве терапевтических средств при данном заболевании.
Защитный эффект соединения 4 оценивали в модели артрита, индуцированного коллагеном (CIA), у крыс. Крыс Wistar иммунизировали внутрикожно 200 мкг бычьего коллагена II, эмульгированного в неполном адъюванте Фрейнда (IFA, Sigma, США) на 0 и 7 день. Объем задних лапок измеряли до и после иммунизации. Для оценки противовоспалительного действия соединения 4 крыс-самок Wistar с установленным артритом, вызванным коллагеном типа II, перорально (РО) обрабатывали соединением 4 (0,03, 0,1 и 1 мг/кг) или носителем (0,5% CMC-Na, pH2.1) один раз в день (QD) в течение 7 дней (дни 10-16) после индукции коллагеном типа II. Наивной группе не вводили. YiSaiPu (10 мг/кг), слитый белок F75 рецептора фактора некроза человека р75 вводили путем внутрибрюшинной инъекции на 10, 12 и 14 день в качестве положительного контроля. Исследование было прекращено на 18-й день. Результаты исследования показаны на фиг. 2.
Как показано на фиг. 2, объем лапок для крыс, обработанных носителем, достиг максимума на 16 день. По окончанию периода лечения средний объем был значительно снижен для всех активных групп лечения по сравнению с больными животными, обработанными носителем (р <0,01), за исключением самой низкой дозы соединения 4 (0,03 мг/кг).
Площадь под кривой (AUC) от среднего набухания лапы по времени была использована в качестве параметра для оценки влияния соединения 4 на объем лапы в течение нескольких дней дозирования. Для каждой группы дозирования процентное снижение AUC по сравнению с обработанными носителем больными животными определялось в диапазоне от 0,03 до 1 мг/кг оцениваемого диапазона. AUC сокращения диаметра голеностопного сустава соединения 4 варьировалась от 15,5 до 99,5% по сравнению с контрольными носителями.
В том же исследовании лечение YiSaiPu (10 мг/кг, QOD) уменьшало набухание лапы AUC на 81,6% по сравнению с животными, обработанными носителем.
В заключение, ежедневное пероральное введение соединения 4 показало дозозависимое благоприятное воздействие на параметры, связанные с установленным артритом, вызванным коллагеном артритом II типа, у крыс.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы (I)
и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиоме-ры, диастереомеры и таутомеры,
где Ar представляет собой арил, представляющий собой карбоциклический углеводородный радикал моноциклического кольца или конденсированных колец, содержащих 6-12 атомов углерода в кольце, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим и ни одно из других колец не представляет собой гетероарил; или
гетероарил, представляющий собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероа-том N присутствует в виде N-оксида;
каждый из указанного арила и гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из дейтерия, галогена, -CN, -OH, -SH, ^^алкала, C1-6галогеналкила, -(^^алкш^ОН и ^(О^^^алкил);
W выбран из гетероарила и -^^3)гетероарила, где указанный гетероарил представляет собой моно
циклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 5, 6 или 7 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 или 10 атомов в кольце и содержащий в кольцах 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероа-рильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и указанная гетероарильная группа также включает группы, в которых гетероатом N присутствует в виде N-оксида, и указанный гетероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, Cl-6алкила, -NH2, -N^d^(tm)), -N^1^(tm))^^(tm)), -COOH, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-6алкил), -C(O)N(C1-6алкил)(С1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5-или 6-членный гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов S и О в гете-роарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и каждый из указанного фенила или указанного 5- или 6-членного гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, -SH, ^^кила и -O(C1-6алкил);
R1 независимо выбран из H, галогена, ^^кила;
R2 выбран из C^^ioum;
R3 представляет собой H или C1-6алкил;
m представляет собой 1 или 2.
каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C1-6алкила, -NH2, -NH^^(tm)), -N(C1-6алкил)(С1-6алкил), -COOH, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-6алкил), фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C1-6алкила и -О^-Оз-алкил).
2. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры и диастереомеры, отличающееся тем, что W выбран из азотсодержащего гетероарила и -N(R3) азотсодержащего гетероарила, где указанный азотсодержащий гетероарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 6 атомов в кольце и содержащий в кольце 1 или 2 гетероатома N, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод; или бициклический ароматический углеводородный радикал, содержащий 9 атомов в кольце и содержащий в кольцах 3 или 4 гетероатома N, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, и указанный азотсодержащий ге-тероарил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -CN, -OH, -SH, Cb^(tm)^ -NH2, -Мад^алкил), -N(C1-6алкил)(С1-6алкил), -COOH, -C(O)NH2, -C^M^C^^(tm)), -C(O)N(C1-6алкил)(С1-6алкил), фенила и 5- или 6-членного гетероарила; в котором 5- или 6-членный гете-роарил представляет собой моноциклический ароматический углеводородный радикал, содержащий в кольце 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из N, О и S, при этом остальные атомы в кольце представляют собой углерод, причем, когда общее количество атомов S и О в гетероарильной группе превышает 1, указанные гетероатомы не являются смежными друг с другом и каждый из указанного фенила или указанного 5- или 6-членного гетероарила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, ^^кила и -О^^алкил).
3. Соединение формулы (I) по п.2, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры, отличающееся тем, что указанный азотсодержащий гетероа-рил необязательно замещен одной или более группами, выбранными из фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, ^^кила, -NH2, -№[(^^^"1), -N(C1-6алкил)(C1-6алкил), -COOH, -С(О)NH2, фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C1-6алкила и -O^b^iaui).
4. Соединение формулы (I) по п.3, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры, отличающееся тем, что указанный азотсодержащий гетероа-рил выбран из пиримидинила, пирролопиримидинила и пуринила и/или галоген выбран из фтора, хлора и брома.
5. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольва-ты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W выбран из:
2.
6. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольва-ты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W выбран
из:
каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из хлора, -CN, -NH2, -NH(C1-6алкил), -COOH, -C(O)NH2, фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пиридила, оксадиазолила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C^^raum и -O^^^ram).
7. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольва-ты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что W представ-
ляет собой ' который необязательно замещен одной или более группами, выбранными из
фтора, хлора, брома, -CN, -OH, -SH, C1-6алкила, -NH2, -NH(C1-6алкил), -N(C1-6алкил)(C1-6алкил), -COOH, -С(О)> Щ2, фенила, пиридила, пиразолила и тетразолила; в котором каждый из указанного фенила, пири-дила, пиразолила и тетразолила необязательно замещен одной или более группами, выбранными из галогена, -OH, C^^raum и -O^^^rami).
8. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-7, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что Ar выбран из фенила, нафтила, пиридила, пиразолила, хинолила, тиенила, бензотиазолила, индолила и 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксинила, каждый из которых необязательно замещен одной или более группами, выбранными из D, галогена, -CN, C^^raum, -(C1-6алкил)OH, C1-6галогеналкила и -S(O)2(C1-6алкил).
9. Соединение формулы (I) по п.8, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольва-ты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что Ar представляет собой фенил или пиридил, каждый из которых необязательно замещен одним или более атомами фтора.
10. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-9, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что R1 независимо выбран из H, галогена и C1-6алкила, и/или R2 представляет собой C1-4алкил, предпочтительно метил и этил, и/или R3 представляет собой H, и/или m представляет собой 1.
11. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-10, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольваты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, отличающееся тем, что формула (I) представляет собой формулу (I-1)
12. Соединение формулы (I) по п.1, и/или его фармацевтически приемлемая соль, и/или его сольва-ты, рацемическая смесь, энантиомеры, диастереомеры и таутомеры, выбранное из:
13. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI3K, содержащая соединение формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
14. Способ in vivo или in vitro ингибирования активности PI3K, включающий приведение в контакт PI3K с количеством соединения формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его по меньшей мере одной фармацевтически приемлемой соли, эффективным для ингибирования активности PI3K.
15. Способ лечения заболевания, реагирующего на ингибирование PI3K у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, количества соединения формулы (I) по любому из пп.1-12 и/или его фармацевтически приемлемой соли, эффективного для ингибирования указанного PI3K у указанного субъекта.
16. Способ по п.15, отличающийся тем, что указанное заболевание, реагирующее на ингибирование PI3K, представляет собой воспалительное заболевание, аутоиммунное заболевание или рак.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанное воспалительное заболевание или аутоиммунное заболевание выбрано из ревматоидного артрита, хронической обструктивной болезни легких (COPD), аллергического ринита, астмы, волчанки, системной красной волчанки, псориаза и рассеянного склероза.
18. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанный рак представляет собой солидную опухоль
или гематологическую злокачественную опухоль, выбранную из лейкоза, множественной миеломы (ММ) и лимфомы.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный лейкоз выбран из острого лимфоцитарного лейкоза (ALL), острого миелоидного лейкоза (AML), хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL) и хронического миелогенного лейкоза (CML); указанная лимфома выбрана из лимфомы Ходжкина, неход-жкинской лимфомы (NHL), лимфомы из клеток мантийной зоны (MCL), фолликулярной лимфомы, В-клеточной лимфомы, Т-клеточной лимфомы и диффузной В-клеточной лимфомы (DLBCL).
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
032643
032643
- 1 -
032643
032643
- 1 -
032643
032643
- 1 -
032643
032643
- 1 -
032643
032643
- 1 -
032643
032643
- 1 -
032643
032643
- 1 -
032643
032643
- 4 -
032643
032643
- 8 -
- 9 -
032643
032643
- 20 -
- 20 -
032643
032643
- 20 -
- 20 -
032643
032643
- 24 -
032643
032643
- 27 -
- 27 -
032643
032643
- 34 -
- 34 -
032643
032643
- 34 -
- 34 -
032643
032643
- 34 -
- 34 -
032643
032643
- 34 -
- 34 -
032643
032643
- 55 -
- 55 -
032643
032643
- 57 -
- 57 -
032643
032643
- 63 -
- 63 -
032643
032643
- 66 -
- 66 -
032643
032643
- 69 -
- 69 -