EA 032138B1 20190430

	Патентная документация ЕАПВ
Запрос:	ea000032138b*\id
Результат:	ID\|Номер и дата охранного документа

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

1. Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, где X представляет собой -NH- и R ¹ представляет собой -СН(ОН)-Y или X представляет собой -СН ₂ - и R ¹ представляет собой -СН(ОН)-Y или -SO ₂ R ² , где R ² представляет собой С ₁ -С ₃ алкил; R ³ представляет собой Н; Y выбирают из 5-членного гетероарильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранных из N, О и S в качестве членов кольца, фенила и C _1-3 алкила, и каждый Y необязательно замещен от одного до трех R ⁴ ; каждый R ⁴ независимо выбирают из галогена, C _1-3 алкила и С _3-6 циклоалкила, где C _1-3 алкил и С _3-6 циклоалкил, каждый, необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из галогена, CN и -ОН; L представляет собой -С ≡С- или -CR ⁵ =CR ⁵ -; R ⁵ в каждом случае независимо выбирают из H, галогена и метила; Z выбирают из C _1-6 алкила, С ₃ -С ₆ циклоалкила и фенила, каждый из которых необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, С _1-4 алкокси, С _1-4 галоалкокси, CN и С _1-4 алкила, которые необязательно замещены от одной до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, амино, CN и C _1-3 алкокси; или, если L представляет собой -CR ⁵ =CR ⁵ -, Z, взятый вместе с одной из групп R ⁵ и любыми атомами, соединяющими Z с группой R ⁵ , могут образовывать 3-7-членную циклоалкильную или циклоалкенильную группу, которая необязательно замещена вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, С _1-4 алкокси, С _1-4 галоалкокси, CN и С _1-4 алкила, которые необязательно замещены от одной до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, амино, CN и C _1-3 алкокси.

2. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой -CH(OH)-Y.

3. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой -SO ₂ R ₂ .

4. Соединение по любому из пп.1-3, где X представляет собой -СН ₂ -.

5. Соединение по любому из пп.1, 2, где X представляет собой -NH-.

6. Соединение по пп.2, 4 или 5, где Y представляет собой изоксазол, необязательно замещенный одним или двумя R ⁴ .

7. Соединение по п.6, где Y представляет собой

8. Соединение по любому из пп.1-7, где Z представляет собой фенил, замещенный вплоть до трех групп, выбранных из галогена, С _1-4 алкокси, С _1-4 галоалкокси, CN и С _1-4 алкила, необязательно замещенных от одной до трех группами, выбранными из галогена, гидрокси, амино, CN и C _1-3 алкокси.

9. Соединение по любому из пп.1-7, где Z представляет собой С ₁ -С ₄ алкил или С ₃ -С ₆ циклоалкил и Z необязательно замещен вплоть до трех группами, выбранными из галогена, С _1-4 алкокси, С _1-4 галоалкокси, CN и С _1-4 алкила, необязательно замещенных от одной до трех группами, выбранными из галогена, гидрокси, амино, CN и C _1-3 алкокси.

10. Соединение по любому из представленных выше пунктов, где L представляет собой -С ≡С-.

11. Соединение по п.1, где соединение имеет формулу (II)

12. Соединение по любому из представленных выше пунктов, где соединение имеет формулу (III)

13. Соединение по п.1, которое выбрано из (R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-(3,3-диметилбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(проп-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)бутанамида; (R)-4-(5-(бут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-2-метил-4-(5-(3-метилбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(пент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-2-метил-4-(5-((1-метилциклопропил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-(5-фторбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-(5-фторпент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-(5,5-дифторпент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-((3,3-дифторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-((3-фторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-4-(5-(5-гидрокси-5-метилгекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-4-(5-((3-(метоксиметил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-4-(5-((3-(2-гидроксипропан-2-ил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; N-гидрокси-4-(5-((4-(гидроксиметил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; N-гидрокси-4-(5-((4-(2-гидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; N-гидрокси-4-(5-((4-(2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)бутанамида; N-гидрокси-4-(5-((4-((R)-2-гидроксипропил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-4-(5-((4-((S)-2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-((4-((S)-1,2-дигидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-((4-((R)-1,2-дигидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (2S,3R)-2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропанамида; (2S,3R)-2-(((5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропанамида; (2S,3R)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)-2-(((5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)пропанамида; N,3-дигидрокси-3-(5-(гидроксиметил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(((5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)пропанамида; (2S,3R)-N,3-дигидрокси-2-(((5-(6-метоксигекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропанамида; 2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-3-(5-циклопропилизоксазол-3-ил)-N,3-дигидрокси-2-метилпропанамида; (R,Е)-4-(5-(бут-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R,Е)-4-(5-(2-циклопропилвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R,Е)-4-(5-(бут-2-ен-2-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R,Z)-4-(5-(бут-2-ен-2-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R,Е)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-2-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида и (R)-4-(5-(циклогекс-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида, или его фармацевтически приемлемая соль.

14. Соединение по п.1, где соединение представляет собой (R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид или его фармацевтически приемлемую соль.

15. Фармацевтическая композиция для лечения грамотрицательной бактериальной инфекции, содержащая соединение по любому из пп.1-14 и фармацевтически приемлемый носитель.

16. Фармацевтическая комбинированная композиция для лечения грамотрицательной бактериальной инфекции, содержащая соединение по любому из пп.1-12, антибактериальное эффективное количество второго терапевтического агента, выбранного из группы, состоящей из ампициллина, пиперациллина, пенициллина G, тикарциллина, имипенема, меропенема, азитромицина, эритромицина, азтреонама, цефепима, цефотаксима, цефтриаксона, цефтазидима, ципрофлоксацина, левофлоксацина, клиндамицина, доксициклина, гентамицина, амикацина, тобрамицина, тетрациклина, тигециклина, рифампицина, ванкомицина и полимиксина, и фармацевтически приемлемый носитель.

17. Способ лечения субъекта с грамотрицательной бактериальной инфекцией, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таковом, антибактериально эффективного количества соединения по любому из пп.1-14.

18. Применение соединения по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для лечения грамотрицательной бактериальной инфекции у субъекта, где бактериальную инфекцию выбирают из семейств Pseudomonadales и Enterobacteriaceae, которые выбирают из группы, состоящей из Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas, Burkholderia, Serratia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Salmonella, Shigella, Providencia, Morganella, Cedecea, Yersina и виды Edwardsiella и Escherichia coli.

19. Применение соединения по п.16, где соединение формулы (I) используют в комбинации с иммуномодулятором.

20. Способ ингибирования фермента деацетилазы в грамотрицательной бактерии, включающий контактирование грамотрицательной бактерии с соединением по любому из пп.1-14.

Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

2. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой -CH(OH)-Y.

3. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой -SO ₂ R ₂ .

4. Соединение по любому из пп.1-3, где X представляет собой -СН ₂ -.

5. Соединение по любому из пп.1, 2, где X представляет собой -NH-.

6. Соединение по пп.2, 4 или 5, где Y представляет собой изоксазол, необязательно замещенный одним или двумя R ⁴ .

7. Соединение по п.6, где Y представляет собой

10. Соединение по любому из представленных выше пунктов, где L представляет собой -С ≡С-.

11. Соединение по п.1, где соединение имеет формулу (II)

12. Соединение по любому из представленных выше пунктов, где соединение имеет формулу (III)

19. Применение соединения по п.16, где соединение формулы (I) используют в комбинации с иммуномодулятором.

Евразийское 032138 (13) B1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2019.04.30
(21) Номер заявки 201791353
(22) Дата подачи заявки
2015.12.15
(51) Int. Cl.
C07D 413/06 (2006.01) A61K31/42 (2006.01) C07D 413/12 (2006.01) C07D 261/08 (2006.01)
(54) СОЕДИНЕНИЯ ИЗОКСАЗОЛГИДРОКСАМИНОВОЙ КИСЛОТЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ LpxC
(31) 62/092,402 (56) WO-A1-2012137094
(32) 2014 12 16 WO-A1-2011073845
(32) US WO-A2-2010032147
(43) 2017.10.31
(86) PCT/IB2015/059631
(87) WO 2016/097995 2016.06.23
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
НОВАРТИС АГ (CH)
(72) Изобретатель:
Фу Цзипин, Цзинь Сяньмин, Карур
Субраманиан, Лапуант Гийом,
Мадера Анн Мари, Суини Закари i Кевин (US)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
(57) Это изобретение относится, в общем, к соединениям формулы (I), описанным здесь, и композициям, содержащим такие соединения, а также к способам применения таких соединений для лечения бактериальных инфекций. В определенных аспектах в изобретении представлены способы и композиции, содержащие эти соединения для лечения инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями.
Область техники
Настоящее изобретение, в общем, относится к соединениям и композициям и способам лечения бактериальных инфекций. В определенных аспектах данное изобретение относится к лечению инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями. Более конкретно, данное изобретение относится к лечению грамотрицательных инфекций с применением описанных здесь соединений. Не будучи связанными какой-либо теорией, полагают, что соединения действуют через ингибирование активности UDP-3-O-(R-3-гидроксидеканоил)-№ацетилглюкозаминдеацетилазы (LpxC). Изобретение включает соединения формулы (I), которые ингибируют LpxC, фармацевтические составы, содержащие такие ингибиторы, способы лечения пациентов такими соединениями и фармацевтическими составами и способы получения таких фармацевтических составов и ингибиторов. Ингибиторы могут применяться для лечения бактериальных инфекций, особенно грамотрицательных инфекций, у субъектов, включая человека. Эти соединения могут применяться отдельно или в сочетании с другими антибактериальными агентами.
Уровень техники
За последние несколько десятилетий частота резистентности к противомикробным препаратам и ее связь с серьезными инфекционными заболеваниями повышается с пугающей скоростью. Возрастающая распространенность патогенов, устойчивых к одному или нескольким одобренным антибиотикам для лечения агентов, вызывающих внутрибольничные инфекции, также называемые внутригоспитальными инфекциями, особенно расстраивает. Из более чем 2 млн внутрибольничных инфекций, ежегодно возникающих в Соединенных Штатах, от 50 до 60% вызываются резистентными к противомикробным препаратам штаммами бактерий. Высокая скорость резистентности к широкоприменяемым антибактериальным агентам повышает заболеваемость, смертность и затраты, связанные с внутрибольничными инфекциями. В Соединенных Штатах считают, что внутрибольничные инфекции способствуют или вызывают более 77000 смертей в год и стоят приблизительно от 5 до 10 млрд долларов в год. Только несколько классов одобренных антибактериальных агентов являются эффективными в отношении грамотрицатель-ных бактерий. Важные причины грамотрицательной резистентности включают расширенный спектр (ESBL) в Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli и Proteus mirabilis, резистентность в-лактамазы к цефа-лоспорину третьего поколения (Amp С) высокого уровня среди видов Enterobacter и Citrobacter freundii и гены с множественной лекарственной устойчивостью, найденные в видах Pseudomonas, Acinetobacter и Stenotrophomonas.
Проблема резистентности к антибактериальным препаратам усугубляется наличием штаммов бактерий, устойчивых к множеству семейств антибактериальных средств. Например, Pseudomonas aeruginosa изоляты, резистентные к фторхинолонам, практически все устойчивы к дополнительным антибактериальным лекарственным средствам. Большая часть открытий антибактериальных агентов в фармацевтической промышленности направлена на разработку лекарственных средств, эффективных против грампо-ложительных бактерий. Однако также существует необходимость в новых грамотрицательных антибактериальных агентах, которые, в общем, более резистентны к большому количеству антибактериальных агентов и химиотерапевтических агентов, чем грамположительные бактерии. Такие антибактериальные соединения, действующие на биосинтез липополисахарида, были описаны, включая различные соединения гидроксаминовой кислоты: см., например, WO2004/062601, WO2010/032147, WO2011/073845, WO2012/120397 и WO2012/137094. Один из ферментов биосинтеза липополисахарида, UDP-3-O-(R-3-гидроксидеканоил)-№ацетилглюкозаминдеацетилаза (LpxC), был описан как признанная мишень для антибактериальных агентов (Mdluli, et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 50(6), 2178-84 (2006). Хотя ингибиторы LpxC описаны, существует необходимость в новых ингибиторах LpxC. Данное изобретение представляет новые антибактериальные соединения гидроксаминовой кислоты, которые, как полагают, действуют через ингибирование LpxC и избегают по меньшей мере некоторых из распространенных механизмов резистентности к известным антибактериальным агентам.
Сущность изобретения
В данном изобретении представлены новые соединения, фармацевтические составы, содержащие соединения, и способы ингибирования UDP-3-O-(R-3-гидроксидеканоил)-N-ацетилглюкозаминдеаце-тилазы (LpxC) и лечения грамотрицательных бактериальных инфекций с применением этих новых соединений.
В одном аспекте в данном изобретении представлены соединения формулы (I)
O-N R1 л
или их фармацевтически приемлемая соль,
где X является -NH- и R1 является -CH(OH)-Y или X является -СН2- и R1 является -CH(OH)-Y или -SO2R2, где R2 является С1-С3-алкилом; R3 является H или галогеном;
Y выбирают из 5-членного гетероарильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранных из N, О и S в качестве членов кольца, фенила и С1-3алкила, и каждый Y необязательно замещен от одного до
трех R4;
каждый R4 независимо выбирают из галогена, С1-3алкила и С3-6циклоалкила, где С1-3алкил и С3-6циклоалкил, каждый, необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из галогена, CN и -ОН;
L является -С=С- или -CR5=CR5-;
R5 в каждом случае независимо выбирают из H, галогена и метила;
Z выбирают из C^^raum, С3-С6-циклоалкила, пиридинила и фенила, каждый из которых необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, C^z^^^m, C1-4галоалкокси, CN и C1-4алкила, которые необязательно замещены от одного до трех группами, выбранными из галогена, гидрокси, амино, CN и ^^жокси;
или, если L является -CR5=CR5-, Z, взятый вместе с одной из R5 групп и любыми атомами между Z и R5 группой, может образовывать 3-7-членную циклоалкильную или циклоалкенильную группу, которая необязательно замещена вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, ^^лижси, C1-4галоалкокси, CN и ^^ажила, которые необязательно замещены от одной до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, амино, CN и С1-3алкокси.
Различные варианты этих соединений описаны ниже.
В одном аспекте в изобретении представлен способ ингибирования фермента деацетилазы в грам-положительной бактерии, что влияет на рост бактерии, включающий контакт бактерии с соединением формулы (I). Здесь и в остальных кратких аспектах и вариантах данного изобретения, соединения формулы (I) включают любые подвиды или конкретные примеры таких соединений, которые описаны здесь.
В другом аспекте в изобретении представлен способ ингибирования LpxC, что позволяет модулировать вирулентность бактериальной инфекции, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком ингибировании (или нуждающемуся в лечении такой бактериальной инфекции) соединения формулы (I).
В другом аспекте в изобретении представлен способ лечения пациента с грамотрицательной бактериальной инфекцией, где способ включает введение субъекту антибактериально эффективного количества соединения формулы (I); необязательно, соединение может быть объединено с фармацевтически приемлемым носителем для такого введения. В определенных вариантах, субъектом является млекопитающее, и в некоторых вариантах, субъектом является человек. Грамотрицательные бактериальные инфекции, подходящие для лечения соединениями и композициями в соответствии с данным изобретением, описаны ниже.
В другом аспекте в изобретении представлен способ введения ингибирующего количества соединения формулы (I) в сбраживающие и не сбраживающие грамотрицательные бактерии, которое может проводиться in vivo, например, в субъекте, зараженном грамотрицательными бактериями, или in vitro, например, в клеточной культуре. В определенных вариантах способа введения ингибирующего количества соединения формулы (I) в сбраживающие и не сбраживающие грамотрицательные бактерии, грамотри-цательные бактерии выбирают из группы, включающей Pseudomonas aeruginosa и другие Pseudomonas spp., Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia и другие Burkholderia spp., Alcaligenes xylosoxi-dans, Acinetobacter spp., Achromobacter spp., Aeromonas spp., Enterobacter spp., Eschericia coli, Haemophilus spp., Klebsiella spp., Moraxella spp., Bacteroides spp., Francisella spp., Shigella spp., Proteus spp., Porphyro-monas spp., Prevotella spp., Mannheimia haemolyiticus, Pastuerella spp., Providencia spp., Vibrio spp., Salmonella spp., Bordetella spp., Borrelia spp., Helicobacter spp., Legionella spp., Citrobacter spp., Cedecea spp., Ser-ratia spp., Campylobacter spp., Yersinia spp., Fusobacterium spp. и Neisseria spp.
В другом варианте в изобретении представлен способ введения ингибирующего количества соединения формулы (I) в грамотрицательные бактерии, такие как члены семейств Pseudomonadales и Entero-bacteriaceae, которые выбирают из группы, включающей такие организмы, как Pseudomonas, Acinetobac-ter, Stenotrophomonas, Burkholderia, Serratia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Salmonella, Shig-ella, Providencia, Morganella, Cedecea, Yersina и виды Edwardsiella и Escherichia coli.
В другом варианте данного изобретения представлена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем. Необязательно, фармацевтическая композиция может содержать по меньшей мере два фармацевтически приемлемых носителя и/или наполнителя. В определенных вариантах, фармацевтическую композицию получают для введения в форме стандартной лекарственной формы, которая содержит терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) для лечения субъекта, имеющего грамотрицательную бактериальную инфекцию. Обычно стандартная лекарственная форма имеет форму, подходящую для инъекции, инфузии, ингаляции или перорального введения.
Представлены фармацевтические составы в соответствии с данным изобретением, которые включают любые описанные выше соединения и фармацевтически приемлемый носитель. В определенных таких вариантах фармацевтическая композиция включает два или более фармацевтически приемлемых носителя и/или наполнителя.
В изобретении также представлено применение соединений формулы (I) для получения лекарственных средств и фармацевтических составов для применения соединений для ингибирования LpxC и
для применения соединений в качестве лекарственных средств, особенно для лечения бактериальных инфекций у субъекта.
Данное изобретение также относится к способам комбинированной терапии для лечения или профилактики грамотрицательной бактериальной инфекции в пациентов с применением соединений в соответствии с данным изобретением или их фармацевтических композиций, или наборов, содержащих такие соединения или фармацевтические композиции, в сочетании по меньшей мере с одним другим терапевтическим агентом. Другие аспекты данного изобретения обсуждаются ниже.
Подробное описание
Для целей интерпретации данного описания применяют следующие определения и, если это применимо, термины, используемые в единственном числе, также включают множественное число.
Термины, применяемые в описании, имеют следующие значения, если контекст четко не указывает на иное: "LpxC" аббревиатура, обозначающая UDP-3-O-(R-3-гидроксидеканоил)-N-ацетилглюкозаминдеацетилазу. Не будучи ограниченными теорией, полагают, что соединения в соответствии с данным изобретением оказывают антибактериальное действие преимущественно через ингиби-рование LpxC.
В данном описании термин "субъект" означает животное. В определенных аспектах животным является млекопитающее. Субъект также относится, например, к приматам (например, человеку), коровам, овцам, козам, лошадям, собакам, кошкам, кроликам, крысам, мышам, рыбе, птицам и подобным. В определенных вариантах, субъектом является человек. "Пациентом" в данном описании является человек.
В данном описании термин "ингибировать", "ингибирование" или "ингибирующее" относится к снижению или подавлению данного состояния, симптома или расстройства или заболевания, или значительному снижению базовой активности биологической активности или процесса.
В данном описании термин "лечить", "лечащий" или "лечение" любого заболевания или расстройства относится в одном варианте к облегчению заболевания или расстройства (т.е. замедлению или остановке или снижению развития заболевания или по меньшей мере одного из его клинических симптомов). В другом варианте "лечащий" или "лечение" относится к облегчению или ослаблению по меньшей мере одного физического параметра, включая такие, которые могут не различаться пациентом. В других вариантах "лечащий" или "лечение" относится к модулированию заболевания или расстройства, либо физически (например, стабилизация различимого симптома), физиологически (например, стабилизация физического параметра) или оба варианта. В других вариантах "лечащий" или "лечение" относится к профилактике или задержке наступления или развития или прогресса заболевания или расстройства.
В данном описании термины в единственном и множественном числе, применяемые в контексте данного изобретения (особенно в контексте формулы изобретения) должны рассматриваться как относящиеся и к единственному, и к множественному числу, если не указано иное или явно не противоречит контексту.
Все описанные здесь способы могут проводиться в любом подходящем порядке, если не указано иное или явно не противоречит контексту. Применение любого и всех примеров или примерных выражений (например, "такой как") в данном описании предназначено только для лучшего объяснения данного изобретения и не является ограничивающим объем данного изобретения, представленного в формуле изобретения.
Термин "антибактериальный агент" относится к агентам, синтезированным или модифицированным в лаборатории, которые обладают бактерицидным или бактериостатическим действием. "Активный" агент в контексте ингибирует рост P. aeruginosa и/или другой грамотрицательной бактерии. Термин "ин-гибирование роста" означает, что скорость увеличения количества популяции конкретной бактерии снижается. Таким образом, термин включает ситуации, в которых популяция бактерий растет, но пониженными темпами, а также ситуации, когда рост популяции останавливается, а также ситуации, когда количество бактерий в популяции снижается или даже популяция исчезает. Если для скрининга ингибиторов применяют анализ активности фермента, можно внести изменения в поглощение/отток бактерий, растворимость, период полураспада и т.д. соединений, чтобы коррелировать ингибирование фермента с инги-бированием роста.
"Необязательно замещенный" означает, что группа может быть замещена на одном или более положений любым одним или сочетанием радикалов, подходящих для замещения этой группы. Количество, размещение и выбор заместителей охватывает только те замещения, которые, по мнению специалиста в области химии, будут приемлемо стабильными; таким образом, "оксо" не является заместителем на арильном или гетероарильном кольце, например, и один атом углерода не имеет три гидрокси- или ами-нозаместителя.
"Гало" или "галоген" в данном описании может быть фтором, хлором, бромом или йодом.
"C1-C6-Алкил" или "C1-6алкил" в данном описании означает прямой или разветвленный алкил, содержащий 1-6 атомов углерода. Если указано другое количество атомов углерода, например С4 или C3, то определение соответствующим образом меняется, например "Q-Ci-алкил" означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил.
"C1-C6-Алкокси" или "C1-6алкокси" в данном описании означает прямой или разветвленный алкок
си, содержащий 1-6 атомов углерода. Если указано другое количество атомов углерода, например С4 или С3, то определение соответствующим образом меняется, например "C1-C4-алкокси" означает метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, втор-бутокси и трет-бутокси.
"С1-С4-Галоалкил" или "C1-4галоалкил" в данном описании означает прямой или разветвленный ал-кил, содержащий 1-4 атома углерода, где по меньшей мере один атом водорода замещен галогеном. Количество замещений галогеном может составлять от одного вплоть до количества атомов водорода в незамещенной алкильной группе. Если указано другое количество атомов углерода, например С6 или С3, то определение соответствующим образом меняется. Таким образом, "Q-Q-галоалкил" представляет метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, которые имеют по меньшей мере один атом водорода, замещенный галогеном, например, где галогеном является фтор: CF3CF2-, (CF3)2CH-, CH3-CF2-, CF3CF2-, CF3, CF2H-, CF3CF2CHCF3 или CF3CF2CF2CF2-.
"CrQ-Циклоалкил" в данном описании относится к насыщенному моноциклическому углеводородному кольцу из 3-8 атомов углерода. Примеры таких групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Если указано другое количество атомов углерода, например С3-С6, то определение соответствующим образом меняется.
"4-8-членный гетероциклил", "5-6-членный гетероциклил", "3-10-членный гетероциклил", "3-14-членный гетероциклил", "4-14-членный гетероциклил" и "5-14-членный гетероциклил", относится соответственно к 4-8-членному, 5-6-членному, 3-10-членному, 3-14-членному, 4-14-членному и 5-14-членному гетероциклическим кольцам; если не указано иначе, где такие кольца содержат от 1 до 7, от 1 до 5 или от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из группы, включающей азот, кислород или серу в качестве членов кольца, и кольца могут быть насыщенными или частично насыщенными, но не ароматическими. Гетероциклическая группа может быть присоединена на гетероатоме или атоме углерода. Термин "гете-роциклил" включает группы с одним кольцом, группы с конденсированным кольцом и мостиковые группы. Примеры таких гетероциклилов включают, но не ограничены ими, пирролидин, пиперидин, пипера-зин, пирролидин, пирролидинон, морфолин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, тетрагидротиопиран, тетрагидропиран, 1,4-диоксан, 1,4-оксатиан, 8-азабицикло[3.2.1]октан, 3,8-диазабицикло[3.2.1]октан, 3-окса-8-азабицикло[3.2.1]октан, 8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан, 2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан, 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан, азетидин, этилендиоксо, оксетан или тиазол.
"Гетероарил" является полностью ненасыщенным (арматическим) кольцом. Термин "гетероарил" относится к 5-14-членной моноциклической или бициклической или трициклической ароматической системе, содержащей от 1 до 8 гетероатомов, выбранных из N, О или S. Обычно гетероарилом является 5-10-членное кольцо или система колец (например, 5-7-членная моноциклическая группа или 8-10-членная бициклическая группа), часто, 5-6-членное кольцо. Типовые гетероарильные группы включают фуран, изотиазол, тиадиазол, оксадиазол, индазол, индол, хинолин, 2- или 3-тиенил, 2- или 3-фурил, 2- или 3-пирролил, 2-, 4- или 5-имидазолил, 3-, 4- или 5-пиразолил, 2-, 4- или 5-тиазолил, 3-, 4- или 5-изотиазолил, 2-, 4- или 5-оксазолил, 3-, 4- или 5-изоксазолил, 3- или 5-(1,2,4-триазолил), 4- или 5-(1,2,3-триазолил), тетразолил, триазин, пиримидин, 2-, 3- или 4-пиридил, 3- или 4-пиридазинил, 3-, 4- или 5-пиразинил, 2-пиразинил и 2-, 4- или 5-пиримидинил.
Термин "гидрокси" или "гидроксил" относится к группе -ОН.
Различные варианты данного изобретения описаны здесь. Должно быть понятно, что характеристики, указанные в каждом варианте, могут быть объединены с другими определенными характеристиками с получением других вариантов. Представленные ниже пронумерованные варианты являются типовыми.
1. Соединение формулы (I)
o-N R1 л
или его фармацевтически приемлемая соль,
где X является -NH- и R1 является -CH(OH)-Y или X является -СН2- и R1 является -CH(OH)-Y или -SO2R2, где R2 является С1-С3-алкилом; R3 является H или галогеном;
Y выбирают из 5-членного гетероарильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранных из N, О и S в качестве членов кольца, фенила и С1-3алкила, и каждый Y необязательно замещен от одного до трех R4;
каждый R4 независимо выбирают из галогена, С1-3алкила и С3-6циклоалкила, где С1-3алкил и С3-6циклоалкил каждый необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из гало, CN и -ОН; L является -С=С- или -CR5=CR5-;
R5 в каждом случае независимо выбирают из H, галогена и метила;
Z выбирают из C1-6алкила, С3-С6-циклоалкила, пиридинила и фенила, каждый из которых необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, ^^люкси, C1-4галоалкокси, CN и ^^кила, которые необязательно замещены от одной до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, амино, CN и ^^люкси;
или, если L является -CR5=CR5-, Z, взятый вместе с одной из R5 групп и любыми атомами, соединяющими Z с R группой, может образовывать 3-7-членную циклоалкильную или циклоалкенильную группу, которая необязательно замещена вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, C1-4алкокси, C1-4галоалкокси, CN и C1-4алкила, которые необязательно замещены от одной до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, амино, CN и C1-3алкокси.
В определенных вариантах соединением является соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемая соль,
где X является -NH- и R1 является -CH(OH)-Y или X является -СН2- и R1 является -CH(OH)-Y или -SO2R2, где R2 является С1-С3-алкилом; R3 является H или гало;
Y выбирают из 5-членного гетероарильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранных из N, О и S в качестве членов кольца, фенила и С1-3алкила, и каждый Y необязательно замещен от одного до трех R4;
каждый R4 независимо выбирают из гало, С1-3алкила и С3-6циклоалкила, где С1-3алкил и С3-6циклоалкил каждый необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из гало, CN и -ОН; L является -С=С- или -CR5=CR5-;
в каждом случае независимо выбирают из H, гало и метила;
Z выбирают из ^^алкала, С3-С6-циклоалкила, пиридинила и фенила, каждый из которых необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, ^^люкси, ^^галоалкокси, CN и ^^алкала, которые необязательно замещены от одной до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, амино, CN и ^^люкси.
В некоторых из этих вариантов R3 является Н.
Конкретные соединения в соответствии с данным изобретением включают, но не ограничены ими, представленные в таблице, например, любые из подмножества этих соединений:
(R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-М-гидрокси-2-
метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)-Ы-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-(3,3-диметилбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-Ы-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(проп-1-ин-
1- ил)изоксазол-3-ил)бутанамид
(R)-4-(5-(бут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-Ы-гидрокси-2-метил-
2- (метилсульфонил)бутанамид
(R)-Ы-гидрокси-2-метил-4-(5-(3-метилбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-Ы-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(пент-1-ин-
1- ил)изоксазол-3-ил)бутанамид
(R)-Ы-гидрокси-2-метил-4-(5-((1-метилциклопропил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-(5-фторбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-(5-фторпент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-
2- метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-(5,5-дифторпент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-((3,3-дифторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-((3-фторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-Ы-гидрокси-4-(5-(5-гидрокси-5-метилгекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-Ы-гидрокси-4-(5-((3-(метоксиметил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-Ы-гидрокси-4-(5-((3-(2-гидроксипропан-2-ил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
Ы-гидрокси-4-(5-((4-(гидроксиметил)фенил)этинил)изоксазол-
3- ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
N-гидрокси-4-(5-((4-(2-гидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
Ы-гидрокси-4-(5-((4-(2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
Ы-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)бутанамид
Ы-гидрокси-4-(5-((4-((R)-2-гидроксипропил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2
(метилсульфонил)бутанамид
(R)-Ы-гидрокси-4-(5-((4-((S)-2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)-изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-( (4-( (S)-1,2-дигидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-Ы-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-( (4-( (R)-l,2-дигидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-Ы-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(2S,3R)-2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-N,З-дигидрокси-2-метил-З-(5-метилизоксазол-З-ил)пропанамид
(2S,3R)-2-(((5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-N,З-дигидрокси-2-метил-З-(5-метилизоксазол-З-ил)пропанамид
(2S,3R)-N,З-дигидрокси-2-метил-З-(5-метилизоксазол-З-ил)-2-(((5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)пропанамид
N,З-дигидрокси-3-(5-(гидроксиметил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(((5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)пропанамид] (2S,3R)-N,З-дигидрокси-2-(((5-(6-метоксигекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-2-метил-З-(5-метилизоксазол-З-ил) пропанамид
2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-3-(5-циклопропилизоксазол-3-ил)-N,З-дигидрокси-2-метилпропанамид
(R,Е)-4-(5-(бут-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-Ы-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R,Е)-4-(5-(2-циклопропилвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R,Е)-4-(5-(бут-2-ен-2-ил)изоксазол-3-ил)-Ы-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R,Z)-4-(5-(бут-2-ен-2-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид и
(R,Е)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-2-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
(R)-4-(5-(циклогекс-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид.
2. Соединение по варианту 1, где R1 является -CH(OH)-Y. В определенных таких вариантах Y является изоксазолом, таким как ^ В некоторых из этих вариантов R4 выбирают из метила, этила, изопро-пила и циклопропила.
3. Соединение по варианту 1, где R1 является -SO2R2. В некоторых из этих вариантов R2 является метилом.
4. Соединение по любому из вариантов 1-3, где X является -CH2-.
5. Соединение по любому из вариантов 1, 2, где X является -NH-.
6. Соединение по вариантам 2, 4 или 5, где Y является изоксазолом, необязательно замещенным одним или двумя R4.
2.
7. Соединение по варианту 6, где Y является В определенных таких вариантах R4 является Сь 3алкилом или С3-5 циклоалкилом; например, R4 является метилом или циклопропилом. Пунктирная линия в этой и других замещающих группах, нарисованных в виде частичных структур, показывает какое положение группы присоединено к остатку молекулы.
8. Соединение по любому из вариантов 1-7, где Z является фенилом, замещенным вплоть до трех группами, выбранных из галогена, C1-4алкокси, C1-4галоалкокси, CN и ^^лютла, необязательно замещенного от одной до трех группами, выбранными из галогена, гидрокси, амино, CN и С^алкокси. В некоторых из этих вариантов Z является фенильной группой формулы , где Rz выбирают из Н, галогена, C1-4алкокси, C1-4галоалкокси, CN и C1-4алкила, необязательно замещенных от одной до трех группами, выбранными из галогена, гидрокси, амино, CN и C1-3алкокси. В некоторых из этих вариантов Rz является С1-3алкилом, замещенным одной или двумя группами, выбранными из гидрокси и C1-3алкокси.
9. Соединение по любому из вариантов 1-7, где Z является C1-С4-алкилом или С3-С6-циклоалкилом, и Z необязательно замещен вплоть до трех группами, выбранными из галогена, C1-4алкокси, C1-4галоалкокси, CN и C1-4алкила, необязательно замещенных от одной до трех группами, выбранными из галогена, гидрокси, амино, CN и С1-3алкокси. В некоторых из этих вариантов Z является циклопропилом или циклобутилом. В других таких вариантах, Z является ^^килом, замещенным от одной до трех группами, выбранными из гидрокси, CN и C1-3алкокси.
10. Соединение по любому из представленных выше вариантов, где L является -С=С-. Альтернативно, соединение по любому из представленных выше вариантов, где L является-CR^CR5-.
11. Соединение по варианту 1, где соединение имеет формулу (II)
13. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из вариантов 1-12 и фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель. В некоторых из этих вариантов фармацевтическая композиция содержит два или более фармацевтически приемлемых носителей.
14. Фармацевтическая комбинированная композиция, включающая соединение по любому из вариантов 1-12, антибактериально эффективное количество второго терапевтического агента и фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель.
15. Фармацевтическая комбинированная композиция по варианту 14, где второй терапевтический агент выбирают из группы, включающей ампициллин, пиперациллин, пенициллин G, тикарциллин, ими-пенем, меропенем, азитромицин, эритромицин, азтреонам, цефепим, цефотаксим, цефтриаксон, цефтази-дим, ципрофлоксацин, левофлоксацин, клиндамицин, доксициклин, гентамицин, амикацин, тобрамицин, тетрациклин, тигециклин, рифампицин, ванкомицин и полимиксин.
16. Способ ингибирования фермента деацетилазы в грамотрицательной бактерии, включающий контакт грамотрицательной бактерии с соединением по любому из вариантов 1-12.
17. Способ лечения субъекта с грамотрицательной бактериальной инфекцией, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таковом, антибактериально эффективного количества соединения по любому из вариантов 1-12. В некоторых из этих вариантов соединение смешивают с фармацевтически приемлемым носителем.
18. Способ по варианту 17, где грамотрицательной бактериальной инфекцией является инфекция, включающая по меньшей мере одну бактерию, выбранную из группы, включающей Pseudomonas aeruginosa и другие Pseudomonas spp., Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia и другие Burkholderia spp., Alcaligenes xylosoxidans, Acinetobacter spp., Achromobacter spp., Aeromonas spp., Enterobacter spp., Eschericia coli, Haemophilus spp., Klebsiella spp., Moraxella spp., Bacteroides spp., Francisella spp., Shigella spp., Proteus spp., Porphyromonas spp., Prevotella spp., Mannheimia haemolyiticus, Pastuerella spp., Providencia spp., Vibrio spp., Salmonella spp., Bordetella spp., Borrelia spp., Helicobacter spp., Legionella spp., Citro-bacter spp., Cedecea spp., Serratia spp., Campylobacter spp., Yersinia spp., Fusobacterium spp. и Neisseria spp.
19. Способ по варианту 18, где бактерия является членом семейств Pseudomonadales и Enterobacteri-aceae, которую выбирают из группы, включающей такие организмы, как Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas, Burkholderia, Serratia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Salmonella, Shigella, Providencia, Morganella, Cedecea, Yersina и виды Edwardsiella и Escherichia coli.
20. Соединение по любому из вариантов 1-12 или его фармацевтически приемлемая соль для при-
менения в качестве лекарственного средства.
21. Соединение по варианту 20, где лекарственное средство предназначено для лечения грамотри-цательной бактериальной инфекции.
22. Соединение по любому из вариантов 1-12 или его фармацевтически приемлемая соль для применения для лечения грамотрицательной бактериальной инфекции, где бактериальную инфекцию выбирают из семейств Pseudomonadales и Enterobacteriaceae, которые выбирают из группы, включающей такие организмы, как Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas, Burkholderia, Serratia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Salmonella, Shigella, Providencia, Morganella, Cedecea, Yersina и виды Ed-wardsiella и Escherichia coli.
23. Применение соединения по любому из вариантов 1-12 для получения лекарственного средства для лечения грамотрицательной бактериальной инфекции у субъекта, где бактериальную инфекцию выбирают из семейств Pseudomonadales и Enterobacteriaceae, которые выбирают из группы, включающей Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas, Burkholderia, Serratia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Salmonella, Shigella, Providencia, Morganella, Cedecea, Yersina и виды Edwardsiella и Es-cherichia coli.
24. Применение по варианту 23, где бактериальную инфекцию вызывают семейства Pseudomo-nadales и Enterobacteriaceae, которые выбирают из группы, включающей Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas, Burkholderia, Serratia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Salmonella, Shigella, Providencia, Morganella, Cedecea, Yersina и виды Edwardsiella и Escherichia coli.
Соединения и композиции, описанные здесь, могут применяться или вводиться в сочетании с одним или более терапевтическими агентами, которые действуют в качестве иммуномодуляторов, например активатором костимулирующей молекулы или ингибитором иммуноингибирующей молекулы или вакциной. Белок запрограммированной смерти клетки 1 (PD-1) представляет собой ингибирующий член расширенного CD28/CTLA4 семейства регуляторов Т-клетки (Okazaki et al. (2002) Curr Opin Immunol 14: 391779-82; Bennett et al. (2003) J. Immunol. 170:711-8). PD-1 экспрессируется на активированных В клетках, Т-клетках и моноцитах. PD-1 является иммуноингибирующим белком, который отрицательно регулирует сигналы TCR (Ishida, Y. et al. (1992) EMBO J. 11:3887-3895; Blank, C. et al. (Epub 2006 Dec. 29) Immunol. Immunother. 56(5):739-745) и активируется при хронических инфекциях. Взаимодействие между PD-1 и PD-L1 может действовать в качестве иммунных контрольных точек, которые могут привести, например, к снижению инфильтрующих лимфоцитов, снижению медиированной рецептором Т-клетки пролиферации и/или ускользанию от механизмов иммунологического контроля раковых или зараженных клеток (Dong et al. (2003) J. Mol. Med. 81:281-7; Blank et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307314; Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100). Подавление иммунитета может быть отменено ингибированием местного взаимодействия PD-1 с PD-L1 или PD-L2; эффект является аддитивным, если также блокируется взаимодействие PD-1 с PD-L2 (Iwai et al. (2002) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 99:12293-7; Brown et al. (2003) J. Immunol. 170:1257-66).
Иммуномодулирование может быть достигнуто связыванием иммуноингибирующего белка (например, PD-1) или связыванием белков, которые модулируют ингибирующий белок (например, PD-L1,
PD-L2).
В одном варианте комбинированные терапии в соответствии с данным изобретением включают иммуномодулятор, который является ингибитором или антагонистом ингибирующей молекулы иммунной контрольной точки. В другом варианте иммуномодулятор связывается с белком, который в природе ингибирует молекулу иммуноингибирующей контрольной точки. При применении в сочетании с антибактериальными соединениями, такие иммуномодуляторы могут улучшать противомикробную реакцию и, таким образом, улучшать эффективность по сравнению с лечением только антибактериальным агентом. Таким образом, соединение по любому из вариантов 1-12 или фармацевтическая композиция из варианта 13 могут вводиться субъекту, которого лечат иммуномодулятором; иммуномодулятор и соединение могут вводиться вместе или по отдельности, но одновременно применяются для лечения инфекции, лечимой соединениями формулы (I), описанными выше.
Термин "иммунные контрольные точки" относится к группам молекул на поверхности клетки CD4 и CD8 Т клеток. Эти молекулы могут эффективно служить в качестве "тормозов" и подавлять или инги-бировать адаптивную иммунную реакцию. Молекулы иммунных контрольных точек включают, но не ограничены ими, белок запрограммированной смерти клетки 1 (PD-1), цитотоксичный Т-лимфоцитный антиген 4 (CTLA-4), B7H1, В7Н4, ОХ-40, CD137, CD40 и LAG3, которые прямо ингибируют иммунные клетки.
Иммунотерапевтические агенты, которые могут действовать как ингибиторы иммунных контрольных точек, применяемые в способах в соответствии с данным изобретением, включают, но не ограничены ими, ингибиторы PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2В4 и/или TGFR бета. Ингибирование ингибирующей молекулы может осуществляться через ингибирование на уровне ДНК, РНК или белка. В некоторых вариантах ингибирующая нуклеиновая кислота (например, дсРНК, киРНК или кшРНК) может применяться для ингибирования экспрессии ингибирующей молекулы. В других вариантах ингибитором ингибирующего сигнала является полипептид, например раствори
мый лиганд или антитело или его антиген-связывающий фрагмент, которые связываются с ингибирую-щей молекулой.
Иммуномодулятор может вводиться одновременно, до или после одного или более соединений в соответствии с данным изобретением и, необязательно, одной или более дополнительных терапий или терапевтических агентов. Терапевтические агенты в сочетании могут вводиться в любом порядке. В общем, каждый агент вводится в дозе и/или во время, определенное для этого агента. Также должно быть понятно, что терапевтические агенты, применяемые в этом сочетании, могут вводиться вместе в одной композиции или вводиться отдельно в разных композициях. В общем, ожидается, что каждый из терапевтических агентов, применяемых в сочетании, может применяться в дозе, которая не превышает дозу, в которой его применяют индивидуально. В некоторых вариантах дозы, применяемые в сочетании, будут ниже, чем дозы, применяемые индивидуально.
В определенных вариантах описанные здесь антибактериальные соединения вводят в сочетании с одним или более иммуномодуляторами, которые являются ингибиторами PD-1, PD-L1 и/или PD-L2. Каждый такой ингибитор может быть антителом, его антиген-связывающим фрагментом, иммуноадгези-ном, слитым белком или олигопептидом. Примеры таких иммуномодуляторов известны в данной области техники.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является анти-PD-! антитело, выбранное из MDX-1106, Merck 3475 или СТ-011.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является иммуноадгезин (например, иммуноадгезин, содержащий внеклеточную или PD-1 связывающую часть PD-L1 или PD-L2, конденсированную с постоянной областью (например, Fc областью последовательности иммуноглобулина).
В некоторых вариантах иммуномодулятором является ингибитор PD-1, такой как АМР-224.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является ингибитор PD-L1, такой как анти-PD-L! антитело.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является анти-PD-Ll связывающий антагонист, выбранный из YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C или MDX-1105. MDX-1105, также известный как BMS-936559, является анти-PD-L! антителом, описанным в WO2007/005874. Антитело YW243.55.S70 является анти^^1, описанным в WO 2010/077634.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является ниволумаб (регистрационный номер CAS: 946414-94-4). Альтернативные наименования для ниволумаба включают MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538 или BMS-936558. Ниволумаб представляет собой цельное человеческое IgG4 моноклональное антитело, которое специфически блокирует PD-1. Ниволумаб (клон 5С4) и другие человеческие моно-клональные антитела, которые специфически связываются с PD-1, описаны в US 8008449, ЕР2161336 и
WO2006/121168.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является анти-PD-1 антитело пембролизумаб. Пем-бролизумаб (также называемый ламбролизумаб, MK-3475, MK03475, SCH-900475 или KEYTRUDA(r); Merck) является гуманизированным IgG4 моноклональным антителом, которое связывается с PD-1. Пем-бролизумаб и другие гуманизированные анти-PD-1 антитела описаны у Hamid, О. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44, US 8,354,509, WO2009/114335 и WO2013/079174.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является пидилизумаб (СТ-011; Cure Tech), гуманизированное IgG1k моноклональное антитело, которое связывается с PD1. Пидилизумаб и другие гуманизированные анти-PD-1 антитела описаны в WO2009/101611.
Другие анти-PDl антитела, применяемые в качестве иммуномодуляторов в способах, описанных здесь, включают AMP 514 (Amplimmune) и анти-PDl антитела, описанные в US 8,609,089, US 2010028330 и/или US 20120114649. В некоторых вариантах анти-PD-Ll антителом является MSB0010718C. MSB0010718C (также называемое А09-246-2; Merck Serono) представляет собой моноклональное антитело, которое связывается с PD-L1.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является MDPL3280A (Genentech/Roche), человеческое Fc оптимизированное IgG1 моноклональное антитело, которое связывается с PD-L1. MDPL3280A и другие человеческие моноклональные антитела к PD-L1 описаны в патенте США № 7943743 и публикации США № 20120039906. Другие анти-PD-L1 связывающие агенты, применяемые в качестве иммунмо-дуляторов для способов в соответствии с данным изобретением, включают YW243.55.S70 (см. WO2010/077634), MDX-1105 (также называемый BMS-936559) и анти^^1 связывающие агенты, описанные в WO2007/005874.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является АМР-224 (B7-DCIg; Amplimmune; например, описанный в WO2010/027827 и WO2011/066342), представляющий собой PD-L2 Fc слитый растворимый рецептор, который блокирует взаимодействие между PD1 и В7-Н1.
В некоторых вариантах иммуномодулятором является анти-LAG-3 антитело, такое как BMS-986016. BMS-986016 (также называемый BMS986016) представляет собой моноклональное антитело, которое связывается с LAG-3. BMS-986016 и другие гуманизированные анти-LAG-3 антитела описаны в US 2011/0150892, WO2010/019570 и WO2014/008218.
В определенных вариантах комбинированные терапии, описанные здесь, включают модулятор кос
тимулирующей молекулы или ингибирующей молекулы, например соингибирующий лиганд или рецептор.
В одном варианте модулятор состимулирования, например агонист состимулирующей молекулы выбирают из агониста (например, агонистического антитела или его антиген-связывающего фрагмента или растворимого слитого белка) ОХ40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1ВВ (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или CD83 лиганда.
В другом варианте комбинированные терапии, описанные здесь, включают иммуномодулятор, который является состимулирующей молекулой, например агонист, связанный с положительным сигналом, который включает состимулирующий домен CD28, CD27, ICOS и/или GITR.
Типовые агонисты GITR включают, например, GITR слитые белки и анти-GITR антитела (например, двухвалентные анти-GITR антитела), такие как GITR слитый белок, описанный в патенте США № 6111090, европейском патенте № 090505В1, патенте США № 8586023, публикациях РСТ №№ WO 2010/003118 и 2011/090754, или анти-GITR антитело, описанное, например, в патенте США № 7025962, европейском патенте № 1947183В1, патенте США № 7812135, патенте США № 8388967, патенте США № 8,591,886, европейском патенте № ЕР 1866339, публикации РСТ № WO 2011/028683, публикации РСТ № WO 2013/039954, публикации РСТ № WO2005/007190, публикации РСТ № WO 2007/133822, публикации РСТ № WO2005/055808, публикации РСТ № WO 99/40196, публикации РСТ № WO 2001/03720,
публикации РСТ № WO99/20758, публикации РСТ № WO2006/083289, публикации РСТ № WO
2005/115451, патенте США № 7,618,632 и публикации РСТ № WO 2011/051726.
В одном варианте применяемым иммуномодулятором является растворимый лиганд (например, CTLA-4-Ig) или антитело или фрагмент антитела, который связывается с PD-L1, PD-L2 или CTLA4. Например, молекула анти-PD-1 антитела может вводиться в сочетании с анти-CTLA-4 антителом, например ипилимумабом, например. Типовые анти-CTLA4 антитела включают тремелимумаб (IgG2 моноклональ-ное антитело, доступное от Pfizer, ранее известное как тицилимумаб, СР-675,206) и ипилимумаб (CTLA-
4 антитело, также известное как MDX-010, № CAS 477202-00-9).
В одном варианте молекулу анти-PD-1 антитела вводят после лечения соединением в соответствии с данным изобретением, как описано здесь.
В другом варианте молекулу анти-PD-1 или PD-L1 антитела вводят с анти-LAG-3 антителом или его антиген-связывающим фрагментом. В другом варианте молекулу анти-PD-1 или PD-L1 антитела вводят в сочетании с анти-TIM-3 антителом или его антиген-связывающим фрагментом. В других вариантах молекулу анти-PD-1 или PD-L1 антитела вводят в сочетании с анти-LAG-3 антителом и анти-TIM-3 антителом или их антиген-связывающими фрагментами. Сочетание антител, перечисленные здесь, могут вводиться отдельно, например в виде отдельных антител, или в связке, например, в виде биспецифиче-ской или триспецифической молекулы антитела. В одном варианте вводят биспецифическое антитело, которое включает молекулу анти-PD-1 или PD-L1 антитела и анти-TIM-3 или анти-LAG-3 антитела, или его антиген-связывающего фрагмента. В определенных вариантах, сочетание антител, указанное здесь, применяют для лечения бактериальной инфекции, выбранной из описанных здесь. Эффективность указанных выше сочетаний может быть протестирована на животных моделях, известных в данной области техники.
Типовые иммуномодуляторы, которые могут применяться в комбинированных терапиях, включают, но не ограничены ими, например, афутузумаб (доступный от Roche(r)); пегфилграстим (Neulasta(r)); лена-лидомид (СС-5013, Revlimid(r)); талидомид (Thalomid(r)), актимид (СС4047) и цитокины, например IL-21 или IRX-2 (смесь человеческих цитокинов, включающая интерлейкин 1, интерлейкин 2 и интерферон у, CAS 951209-71-5, доступная от IRX Therapeutics).
Типовые дозы таких иммуномодуляторов, которые могут применяться в сочетании с антибактериальными соединениями в соответствии с данным изобретением, включают дозу молекулы анти-PD-1 антитела от около 1 до 10 мг/кг, например 3 мг/кг, и дозу анти-CTLA-4 антитела, например ипилимумаба, около 3 мг/кг.
Примеры вариантов способов применения антибактериальных соединений в соответствии с данным изобретением в сочетании с иммуномодулятором включают следующее:
i) способ лечения бактериальной инфекции у субъекта, включающий введение субъекту соединения формулы (I), описанного здесь, и иммуномодулятор;
ii) способ по варианту i), где иммуномодулятором является активатор костимулирующей молекулы или ингибитор молекулы иммунной контрольной точки;
iii) способ по любому из вариантов i и ii, где активатором костимулирующей молекулы является агонист одного или более из ОХ40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 41ВВ (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 и CD83 лигандов;
iv) способ по любому из вариантов i-iii выше, где ингибитор молекулы иммунной контрольной точки выбирают из PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и
iii)
TGFR бета;
v) способ по любому из вариантов i-iii, где ингибитор молекулы иммунной контрольной точки вы-
бирают из ингибитора PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3 или CTLA4, или любого их сочетания;
vi) способ по любому из вариантов i-v, где ингибитором молекулы иммунной контрольной точки является растворимый лиганд или антитело или его антиген-связывающий фрагмент, который связывается с молекулой иммунной контрольной точки;
vii) способ по любому из вариантов i-vi, где антитело или его антиген-связывающий фрагмент представляет собой IgG1 или IgG4 (например, человеческий IgGl или IgG4);
viii) способ по любому из вариантов i-vii, где антитело или его антиген-связывающий фрагмент изменен, например мутирован, для повышения или понижения одного или более из: связывание Fc рецептора, гликозилирование антитела, количество цистеиновых остатков, функция клетки-эффектора или комплементарная функция;
ix) способ по любому из вариантов i-viii, где молекулой антитела является биспецифическая или мультиспецифическая молекула антитела, которая имеет первичную связывающую специфичность к PD-1 или PD-L1 и вторичную связывающую специфичность к TIM-3, LAG-3 или PD-L2;
x) способ по любому из вариантов i-ix, где иммуномодулятором является анти-PD-1 антитело, выбранное из ниволумаба, пембролизумаба или пидилизумаба;
xi) способ по любому из вариантов i-x, где иммуномодулятором является анти-PD-L1 антитело, выбранное из YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C или MDX-1105;
xii) способ по любому из вариантов i-x, где иммуномодулятором является молекула анти-LAG-3 антитела;
xiii) способ по варианту xii, где молекулой анти-LAG-3 антитела является BMS-986016;
xiv) способ по любому из вариантов i-x, где иммуномодулятором является молекула анти-PD-1 антитела, вводимая инъекцией (например, подкожно или внутривенно) в дозе от около 1 до 30 мг/кг, например от около 5 до 25 мг/кг, от около 10 до 20 мг/кг, от около 1 до 5 мг/кг или от около 3 мг/кг, например, от одного раза в неделю до одного раза каждые 2, 3 или 4 недели;
xv) способ по варианту xiv, где молекулу анти-PD-1 антитела вводят в дозе от около 10 до 20 мг/кг через неделю;
xvi) способ по варианту xv, где молекулу анти-PD-1 антитела, например ниволумаб, вводят внутривенно в дозе от около 1 до 3 мг/кг, например около 1, 2 или 3 мг/кг, каждые две недели;
xvii) способ по варианту xv, где молекулу анти-PD-1 антитела, например ниволумаб, вводят внут-
ривенно в дозе около 2 мг/кг с интервалом 3 недели.
Соединения в соответствии с данным изобретением, особенно описанные соединения из вариантов 1-12, описанных выше, демонстрируют большую эффективность против важных, резистентных к лекарственным средствам, грамотрицательных патогенов, по сравнению с соединениями гидроксаминовой кислоты, описанными ранее, или улучшенные профили побочных эффектов; таким образом, эти соединения особенно подходят для лечения субъектов с резистентными к лекарственным средствам инфекциями или исключения побочных эффектов.
Соединения в соответствии с данным изобретением содержат один или более хиральных центров. Эти соединения могут быть в виде отдельных изомеров или смесей изомеров. Способы разделения изомеров, включая диастереомеры и энантиомеры, известны в данной области техники, и примеры подходящих способов описаны здесь. В определенных вариантах соединения в соответствии с данным изобретением применяют в виде отдельного практически чистого изомера, что означает, по меньшей мере, то, что 90% образца соединения составляет указанный изомер, и менее 10% образца составляет любой другой изомер или смесь изомеров. Предпочтительно по меньшей мере 95% образца составляет отдельный изомер. Выбор подходящего изомера находится в компетенции специалиста в данной области техники, так как один изомер обычно является более активным в LpxC in vitro анализе, описанном здесь, и является предпочтительным изомером. Если разница в in vitro активности между изомерами относительно мала, например менее около коэффициента 4, предпочтительный изомер может быть выбран на основе уровня активности против грамотрицательных бактерий, таких как P. aeruginosa, в клеточной культуре, с применением таких способов, которые описаны здесь: предпочтителен изомер, имеющий более низкую МИК (минимальную ингибирующую концентрацию).
Эти соединения могут иметь или не иметь второй хиральный центр на замещенном гидроксилом атоме углерода, в зависимости от выбора Y. Если присутствует второй хиральный центр, предпочтительным диастереомером обычно является тот, который имеет большую эффективность в качестве ингибитора LpxC, по меньшей мере, на коэффициент 4; если два изомера не отличаются на коэффициент 4 по in
В определенных вариантах соединения в соответствии с данным изобретением имеют стереохи-мню, изображенную в формуле (IA).
vitro активности, каждый изомер или смесь двух изомеров подходит для применения в способах и композициях в соответствии с данным изобретением, или может быть предпочтителен изомер, имеющие более низкую МИК для целевых видов бактерий.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут быть синтезированы общими методами синтеза, описанными ниже, конкретные примеры которых более подробно описаны в разделе "Примеры".
Термин "оптический изомер" или "стереоизомер" относится к любой из различных стереоизомер-ных конфигураций, которые могут существовать для данного соединения в соответствии с данным изобретением, и включает геометрические изомеры. Понятно, что заместитель может быть присоединен на хиральном центре атома углерода. Термин "хиральный" относится к молекулам, которые обладают свойством не накладываемости друг на друга их зеркальных изображений, а термин "ахиральный" относится к молекулам, которые накладываются на их зеркальные изображения. Поэтому данное изобретение включает энантиомеры, диастереомеры или рацематы соединения. "Энантиомеры" представляют собой пару стереоизомеров, которые является не налагаемыми зеркальными изображениями друг друга. 1:1 смесь пары энантиомеров является "рацемической" смесью. Термин применяют для обозначения рацемической смеси, если это применимо. "Диастереоизомеры" представляют собой стереоизомеры, которые имеют по меньшей мере два асимметрических атома, но которые не являются зеркальными изображениями друг друга. Абсолютная стереохимия обозначена согласно R-S системе Кана-Ингольда-Прелога. Если соединение является чистым энантиомером, стереохимия на каждом хиральном атоме углерода может быть обозначена как R или S. Разделенные соединения, абсолютная конфигурация которых неизвестна, может быть обозначена (+) или (-), в зависимости от направления (право- или левовращающие), в котором они вращаются в плоско поляризованном свете при длине волны линии натрия D. Определенные соединения, описанные здесь, содержат один или более асимметрических центров или осей, и поэтому могут образовывать энантиомеры, диастереомеры и другие стереоизомерные формы, которые могут быть определены, в терминах абсолютной стереохимии, как (R)- или (S)-.
В зависимости от выбора исходных материалов и методов соединения в соответствии с данным изобретением могут быть в виде одного из возможных изомеров или их смесей, например в виде чистых оптических изомеров или изомерных смесей, таких как рацематы и диастереоизомерные смеси, в зависимости от количества асимметрических атомов углерода. Данное изобретение включает все такие возможные стереоизомеры, включая рацемические смеси, диастереомерные смеси и оптически чистые формы. Оптически активные (R)- и ^)-изомеры могут быть получены с применением хиральных синтонов или хиральных реагентов, или разделены с применением обычных методов. Если соединение содержит двойную связь, заместитель может быть в Е- или Z-конфигурации. Если соединение содержит двузаме-щенный циклоалкил, циклоалкильный заместитель может иметь цис- или транс-конфигурацию. Все тау-томерные формы также включены.
Любые полученные смеси изомеров могут быть разделены на основе физико-химических отличий составляющих, на чистые или практически чистые геометрические или оптические изомеры или диасте-реомеры, например, хроматографией и/или фракционной кристаллизацией.
Любые полученные рацематы конечных продуктов или промежуточных соединений могут быть разделены на оптические антиподы известными методами, например разделением диастереомерных солей, полученных с оптически чистой кислотой или основанием, и высвобождением оптически активного кислотного или основного соединения. В частности, основная группа, таким образом, может применяться для разделения соединений в соответствии с данным изобретением на их оптические антиподы, например, фракционной кристаллизацией соли, полученной с оптически активной кислотой, например винной кислотой, дибензоилвинной кислотой, диацетилвинной кислотой, ди-O,O'-п-толуоилвинной кислотой, миндальной кислотой, яблочной кислотой или камфор-10-сульфоновой кислотой. Рацемические продукты также могут быть разделены хиральной хроматографией, например жидкостной хроматографией высокого давления (ЖХВД) с применением хирального адсорбента.
Более того, соединения в соответствии с данным изобретением, включая их соли, также могут быть получены в виде их гидратов, или включать другие растворители, применяемые для кристаллизации. Соединения в соответствии с данным изобретением могут по своей природе или преднамеренно образовывать сольваты с фармацевтически приемлемыми растворителями (включая воду); поэтому предполагается, что данное изобретение охватывает сольватированные и не сольватированные формы. Термин "сольват" относится к молекулярному комплексу соединения в соответствии с данным изобретением (включая его фармацевтически приемлемые соли) с одной или более молекулами растворителя. Такими молекулами растворителя являются те, которые обычно применяют в области фармацевтики, которые известны как безвредные для пациента, например вода, этанол и подобные. Термин "гидрат" относится к комплексу, в котором молекулой растворителя является вода.
Соединения в соответствии с данным изобретением, включая соли, гидраты и сольваты, могут по природе или преднамеренно образовывать полиморфы.
В данном описании термины "соль" или "соли" относятся к кислотно-аддитивной или основно-аддитивной соли соединения в соответствии с данным изобретением. "Соли" включают, в частности,
"фармацевтически приемлемые соли". Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства соединений в соответствии с данным изобретением, и которые не являются нежелательными в биологическом или другом смысле. Во многих случаях, соединения в соответствии с данным изобретением способны образовывать кислотные и/или основные соли благодаря присутствию амино и/или карбоксильных групп или подобных им групп.
Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут быть получены с неорганическими кислотами и органическими кислотами, например ацетат, аспартат, бензоат, безилат, бромид/гидробромид, бикарбонат/карбонат, бисульфат/сульфат, камфорсульфонат, хлорид/гидрохлорид, хлортеофиллонат, цитрат, этандисульфонат, фумарат, глюцептат, глюконат, глюкуронат, гиппурат, гид-роиодид/йодид, изетионат, лактат, лактобионат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, миндалят, мези-лат, метилсульфат, нафтоат, напсилат, никотинат, нитрат, октадеканоат, олеат, оксалат, пальмитат, памо-ат, фосфат/гидрофосфат/дигидрофосфат, полигалактуронат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфосали-цилат, тартрат, тозилат и трифторацетат.
Неорганические кислоты, из которых могут быть получены соли, включают, например, хлористоводородную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и подобные.
Органические кислоты, из которых могут быть получены соли, включают, например, уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, щавелевую кислоту, малеиновую кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, толуолсульфоно-вую кислоту, сульфосалициловую кислоту и подобные. Фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли могут быть получены с неорганическими или органическими основаниями.
Неорганические основания, из которых могут быть получены соли, включают, например, аммониевые соли и металлы из столбцов I-XII Периодической таблицы. В определенных вариантах, соли получают из натрия, калия, аммония, кальция, магния, железа, серебра, цинка и меди; особенно подходящие соли включают соли аммония, калия, натрия, кальция и магния.
Органические основания, из которых могут быть получены соли, включают, например, первичные, вторичные и третичные амины, замещенные амины, включая природные замещенные амины, циклические амины, основные ионообменные смолы и подобные. Определенные органические амины включают изопропиламин, бензатин, холинат, диэтаноламин, диэтиламин, лизин, меглумин, пиперазин и тромета-мин.
Фармацевтически приемлемая соль в соответствии с данным изобретением может синтезироваться из основной или кислотной группы обычными химическими методами. В общем, такие соли могут быть получены взаимодействием свободной кислоты этих соединений со стехиометрическим количеством подходящего основания (такого как гидроксид, карбонат, бикарбонат Na, Ca, Mg или K или подобные) или взаимодействием свободного основания этих соединений со стехиометрическим количеством подходящей кислоты. Такие реакции обычно проводят в воде или органическом растворителе или смеси их двух. В общем, желательно применение не водной среды, такой как простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил, там, где это практикуется. Списки дополнительных подходящих солей могут быть найдены, например, в "Remington's Pharmaceutical Sciences", 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985) и в "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection и Use" by Stahl and
Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002).
Любая представленная здесь формула представляет не меченые формы, а также меченные изотопами формы соединений в соответствии с данным изобретением, содержащих вплоть до трех атомов и не природное распределение изотопов, например места, которые обогащены дейтерием или 13C или 15N. Меченные изотопами соединения в соответствии с изобретением имеют структуры, изображенные на представленных здесь формулах, за исключением того, что один или более атомов замещены атомом, имеющим выбранную атомную массу или массовое число, отличное от существующего в природе массового распределения. Примеры изотопов, которые могут быть полезно введены в соединения в соответствии с данным изобретением, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F 31P, 32P, 35S, 36Cl, 125I соответственно. Изобретение включает различные меченные изотопами соединения в соответствии с данным изобретением, например, такие, в которых радиоактивные изотопы, такие как 3H и 14C, или такие, в которых не радиоактивные изотопы, такие как 2H и 13C, присутствуют в количествах, значительно превышающих нормальное распределение изотопов. Такие меченные изотопами соединения применяют в метаболических исследованиях (с 14C, например), исследованиях реакционной кинетики (например, с 2H или 3Н), методиках определения или получения изображений, таких как позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ), включая анализы распределения лекарства или субстрата в ткани или радиоактивное лечение пациентов. В частности, меченное 18F соединение в соответствии с данным изобретением может быть особенно желательным для ПЭТ или ОФЭКТ исследований. Меченные изотопами соединения в соответствии с данным изобретением обычно получают обычными методами, известными специалистам в данной области техники, или способами, аналогичными тем, которые
описаны в прилагаемых примерах и примерах получения с применением подходящего меченного изотопами реагента вместо не меченного реагента, которые обычно применяют. Меченые образцы могут применяться при достаточно низком введении изотопов, так чтобы применять радиометку для определения следов соединения.
Далее, более значительное замещение более тяжелыми изотопами, в частности дейтерием (т.е. 2H или D), может давать определенные терапевтические преимущества благодаря большей метаболической стабильности, например увеличенному периоду полувыведения in vivo или пониженной дозировке или улучшению терапевтического индекса. Понятно, что дейтерий в этом контексте считается заместителем соединения в соответствии с данным изобретением и обычно образец, содержащий дейтерий в качестве заместителя, имеет по меньшей мере 50% введенного дейтерия в меченом положении. Концентрация такого более тяжелого изотопа, в частности дейтерия, может быть определена коэффициентом изотопного обогащения. Термин "коэффициент изотопного обогащения" в данном описании означает соотношение между распространенностью изотопа и распространенностью в природе указанного изотопа. Если заместителем в соединении в соответствии с данным изобретением обозначен дейтерий, такое соединение имеет коэффициент изотопного обогащения для каждого указанного атома дейтерия по меньшей мере 3500 (52,5% введения дейтерия в каждом указанном атоме дейтерия), по меньшей мере 4000 (60% введения дейтерия), по меньшей мере 4500 (67,5% введения дейтерия), по меньшей мере 5000 (75% введения дейтерия), по меньшей мере 5500 (82,5% введения дейтерия), по меньшей мере 6000 (90% введения дейтерия), по меньшей мере 6333,3 (95% введения дейтерия), по меньшей мере 6466,7 (97% введения дейтерия), по меньшей мере 6600 (99% введения дейтерия) или по меньшей мере 6633,3 (99,5% введения дейтерия).
Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с данным изобретением включают такие, где кристаллизационный растворитель может быть замещен изотопами, например D2O, с^-ацетон, d6-
ДМСО.
Соединения в соответствии с данным изобретением, которое содержат группы, способные действовать как доноры и/или акцепторы водородных связей, могут быть способны образовывать сокристаллы с подходящими образователями сокристаллов. Эти сокристаллы могут быть получены из соединений в соответствии с данным изобретением с применением известных методов получения сокристаллов. Такие методы включают измельчение, нагревание, совместную возгонку, совместное плавление или контакт в растворе соединений в соответствии с данным изобретением с образователем сокристаллов в условиях кристаллизации и выделение полученных сокристаллов. Подходящие образователи сокристаллов включают те, которые описаны в WO 2004/078163. Следовательно, в данном изобретении также представлены сокристаллы, содержащие соединение в соответствии с данным изобретением.
Все способы, описанные здесь, могут проводиться в любом подходящем порядке, если не указано иное или это не противоречит контексту. Применение любого или всех примеров или примерных терминов (например, "такой как") в данном описании предназначено только для лучшего освещения изобретения и не ограничивает объем данного изобретения, представленный в формуле изобретения.
В данном изобретении представлены новые соединения, фармацевтические составы, включая соединения, способы ингибирования UDP-3-O-(R-3-гидроксидеканоил)-N-ацетилглюкозаминдеацетилазы (LpxC) и способы лечения грамотрицательных бактериальных инфекций.
В другом аспекте в изобретении представлен способ ингибирования фермента деацетилазы в гра-мотрицательной бактерии, где способ включает стадию контакта грамотрицательной бактерии с соединением в соответствии с данным изобретением, например соединением формулы (I) или его соли.
В еще одном аспекте в данном изобретении представлен способ лечения субъекта с грамотрица-тельной бактериальной инфекцией, где способ включает стадию введения субъекту, нуждающемуся в таковом, антибактериально эффективного количества соединения в соответствии с данным изобретением, например соединения формулы (I) или его соли, с фармацевтически приемлемым носителем.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут вводиться известными способами, включая пероральный, парентеральный, ингаляции и подобные. В определенных вариантах соединение в соответствии с данным изобретением вводят перорально, в виде пилюли, пастилки, облатки, капсулы, раствора или суспензии. В других вариантах соединение в соответствии с данным изобретением вводят инъекцией или вливанием. Вливание обычно проводят внутривенно, часто в течение от около 15 мин до 4 ч. В других вариантах соединение в соответствии с данным изобретением вводят интраназально или ингаляцией; способы ингаляции особенно полезны для лечения респираторных инфекций. В других вариантах соединение в соответствии с данным изобретением вводят внутривенно, например, ВВ вливанием, где соединение может вводиться в растворенном виде в любом подходящем внутривенном растворителе, таком как лактат Рингера или изотонический раствор глюкозы или физиологический раствор.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут применяться для лечения состояний, вызванных тем, что бактерии образуют эндотоксин и, в частности, грамотрицательные бактерии и бактерии, которые используют LpxC в биосинтезе липополисахарида (ЛПС) или эндотоксина.
Соединения в соответствии с данным изобретением также применяют для лечения пациентов, страдающих или подверженных инфекциям дыхательных путей (пневмония, нагноение в легких, бронхоэк
таз), бактериемии (сепсис), кистозному фиброзу, инфекциям кожи и мягких тканей (раны, хирургические инфекции, осложненная диабетическая стопа, осложненные ожоги), осложненным внутрибрюшным инфекциям или осложненным инфекциям мочевыводящих путей и инфекциям, передаваемым половым путем, вызванным грамотрицательными патогенами. Соединения в соответствии с данным изобретением также применяют при состояниях, которые вызываются или усугубляются бактериальным образованием липида А и ЛПС или эндотоксина, таких как сепсис, септический шок, системное воспаление, локализованное воспаление, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ) и острые приступы хронического бронхита (ОПХБ). Для этих состояний лечение включает введение соединения в соответствии с данным изобретением или сочетания соединений в соответствии с данным изобретением необязательно со вторым агентом, где вторым агентом является второй антибактериальный агент или второй не антибактериальный агент.
Для сепсиса, септического шока, системного воспаления, локализованного воспаления, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) и острых приступов хронического бронхита (ОПХБ), предпочтительные вторые не антибактериальные агенты включают антиэндотоксины, включающие связывающие рецептор эндотоксина антитела, связывающие эндотоксин антитела, связывающие анти-CD14 белок антитела, связывающие антилипополисахарид антитела и ингибиторы тирозинкиназы.
При лечении острых или хронических инфекций дыхательных путей соединения в соответствии с данным изобретением также могут применяться со вторыми не антибактериальными агентами, вводимыми ингаляцией. Предпочтительные не антибактериальные агенты, применяемые при таком лечении, включают противовоспалительные стероиды, нестероидные противовоспалительные агенты, бронходи-лататоры, муколитики, противоастматические лекарственные средства и поверхностно-активные вещества для бронхоальвеолярного секрета. В частности, не антибактериальный агент может быть выбран из группы, включающей албутерол, салбутерол, будесонид, беклометазон, дексаметазон, недокромил, бек-лометазон, флутиказон, флунизолид, триамцинолон, ибупрофин, рофекоксиб, напроксен, целекоксиб, недокромил, ипратропий, метапротеренол, пирбутерол, салнетерол, бронхиодилататоры, муколитики, кальфактант, берактант, порактант альфа, сурфаксин и пульмозим (также называемый домаза альфа).
Соединения в соответствии с данным изобретением могут применяться отдельно или в сочетании со вторым антибактериальным агентом для лечения острой или хронической инфекции дыхательных путей, включая острые легочные и внутрибольничные инфекции, такие, которые вызываются Enterobac-ter aerogenes, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Proteus mir-abilis, Serratia marcescens, Stenotrophomonas maltophilia, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia, Aci-netobacter baumanii, Alcaligenes xylosoxidans, Flavobacterium meningosepticum, Providencia stuartii и Citro-bacter freundi, внебольничные легочные инфекции, такие, которые вызываются Haemophilus influenzae, Legionella species, Moraxella catarrhalis, виды Enterobacter, виды Acinetobacter, виды Klebsiella и виды Proteus, и инфекции, вызванные другими видами бактерий, такими как виды Neisseria, виды Shigella, виды Salmonella, Helicobacter pylori, виды Vibrionaceae и Bordetella, а также инфекции, вызываемые видами Brucella, Francisella tularensis и/или Yersinia pestis.
Соединение в соответствии с данным изобретением также может применяться в сочетании с другими агентами (партнеры для комбинирования), например дополнительным антибиотиком, который соответствует или нет формуле (I), для лечения бактериальной инфекции у субъекта.
Под термином "сочетание" понимают либо фиксированное сочетание в одной лекарственной форме, либо отдельные лекарственные формы, подходящие для применения вместе одновременно или последовательно, либо набор частей для объединенного введения, где соединение в соответствии с данным изобретением и партнер для комбинирования могут вводиться независимо в одно и то же время или отдельно через определенный промежуток времени, который обеспечивает совместный, например, синер-гетический эффект партнеров для сочетания, или любое их сочетание.
При применении для обработки грамотрицательных бактерий соединения в соответствии с данным изобретением могут применяться для того, чтобы сделать грамотрицательные бактерии более чувствительными ко второму агенту.
В определенных вариантах в соответствии с данным изобретением соединение в соответствии с данным изобретением применяют в сочетании со вторым антибактериальным агентом; не ограничивающие примеры вторых антибактериальных агентов для такого применения могут быть выбраны из следующих групп:
(1) макролиды или кетолиды, такие как эритромицин, азитромицин, кларитромицин и телитроми-
цин;
(2) бета-лактамы, включая пенициллин, такой как пенициллин G, пенициллин V, метициллин, окса-циллин, клоксациллин, диклоксациллин, нафциллин, ампициллин, амоксициллин, карбенициллин, ти-карциллин, мезлоциллин, пиперациллин, азлоциллин, темоциллин, цефалоспорин, такой как цепалотин, цефапирин, цефрадин, цефалоридин, цефазолин, цефамандол, цефуроксим, цефалексин, цефпрозил, це-факлор, лоракарбеф, цефокситин, цефинетазол, цефотаксим, цефтизоксим, цефтриаксон, цефоперазон, цефтазидим, цефиксим, цефподоксим, цефтибутен, цефдинир, цефпиром, цефепим и карбапенемы, такие как карбапенем, имипенем, меропенем и PZ-601;
(2)
(3) монобактамы, такие как азтреонам;
(4) хинолоны, такие как налидиксовая кислота, оксолиновая кислота, норфлоксацин, пефлоксацин, эноксацин, офлоксацин, левофлоксацин, ципрофлоксацин, темафлоксацин, ломефлоксацин, флерокса-цин, грепафлоксацин, спарфлоксацин, тровафлоксацин, склинафлоксацин, гатифлоксацин, моксифлокса-цин, ситафлоксацин, ганефлоксацин, гемифлоксацин и пазуфлоксацин;
(5) антибактериальные сульфонамиды и антибактериальные сульфаниламиды, включая пара-аминобензойную кислоту, сульфадиазин, сульфизоксазол, сульфаметоксазол и сульфаталидин;
(6) аминогликозиды, такие как стрептомицин, неомицин, канамицин, паромицин, гентамицин, тоб-рамицин, амикацин, нетилмицин, спектиномицин, сизомицин, дибекалин и изепамицин;
(7) тетрациклины, такие как тетрациклин, хлортетрациклин, демеклоциклин, миноциклин, окситет-рациклин, метациклин, доксициклин, тегациклин;
(8) рифамицины, такие как рифампицин (также называемый рифампин), рифапентин, рифабутин, безоксазинорифамицин и рифаксимин;
(9) линкозамиды, такие как линкомицин и клиндамицин;
(10) гликопептиды, такие как ванкомицин и тейкопланин;
(11) стрептограмины, такие как квинупристин и дафлопристин;
(12) оксазолидиноны, такие как линезолид и тедизолид;
(13) полимиксин, колистин и колимицин;
(14) триметоприм и бацитрацин;
(15) ингибиторы эффлюксной помпы.
Второй антибактериальный агент может вводиться в сочетании с соединениями в соответствии с данным изобретением, где второй антибактериальный агент вводят до, одновременно или после соединения в соответствии с данным изобретением. Если желательно одновременное введение соединения в соответствии с данным изобретением со вторым агентом и способ введения является одинаковым, соединение в соответствии с данным изобретением может быть составлено со вторым агентом в одну лекарственную форму. Примером лекарственной формы, содержащей соединение в соответствии с данным изобретением и второй агент, является таблетка или капсула.
В некоторых вариантах сочетание соединения в соответствии с данным изобретением и второго антибактериального агента может давать синергетическое действие. Например, применением соединения в соответствии с данным изобретением с ванкомицином или цефалоспорином может быть синергетиче-ским; таким образом, в некоторых вариантах, соединение в соответствии с данным изобретением применяют в сочетании с ванкомицином или цефалоспорином, обычно в виде вливания. Соединение в соответствии с данным изобретением и второй антибактериальный агент могут вводиться вместе, отдельно, но одновременно или по отдельности.
При применении для лечения острых или хронических инфекций дыхательных путей соединения в соответствии с данным изобретением могут применяться отдельно или в сочетании со вторым антибактериальным агентом; в некоторых вариантах второй антибактериальный агент вводят ингаляцией. Необязательно, сочетание может вводиться в виде единой композиции ингаляцией. В случае введения ингаляцией подходящий второй антибактериальный агент выбирают из группы, включающей тобрамицин, гентамицин, азтреонам, ципрофлоксацин, полимиксин, колистин, колимицин, ванкомицин, цефалоспо-рины, азитромицин и кларитромицин. Иногда предпочтительным является ванкомицин.
"Эффективным количеством" соединения является такое количество, которое необходимо или достаточно для лечения или профилактики бактериальной инфекции и/или заболевания или состояния, описанных здесь. В одном примере эффективным количеством ингибитора LpxC формулы (I) является количество, достаточное для лечения бактериальной инфекции у субъекта. В другом примере эффективным количеством ингибитора LpxC является количество, достаточное для лечения бактериальной инфекции, такой как, но не ограниченной ими, Pseudomonas aeruginosa и подобные, у субъекта. Эффективное количество может варьироваться в зависимости от таких факторов, как размер и масса тела субъекта, тип заболевания или конкретное соединение в соответствии с данным изобретением. Например, выбор соединения в соответствии с данным изобретением может влиять на "эффективное количество". Специалист в данной области техники может изучить факторы, содержащиеся здесь, и определить эффективное количество соединений в соответствии с данным изобретением без дополнительных экспериментов.
Режим введения может влиять на эффективное количество. Соединение в соответствии с данным изобретением может вводиться субъекту до или после наступления бактериальной инфекции. Далее, несколько поделенных доз, а также отсроченное по времени дозирование, могут вводиться ежедневно или последовательно, или доза может постоянно вливаться, также может быть болюсная инъекция. Далее, доза соединения в соответствии с данным изобретением может быть повышена или понижена в зависимости от обстоятельств терапевтической или профилактической ситуации.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут применяться для лечения состояний, расстройств или заболеваний, описанных здесь, или для производства фармацевтических композиций для применения для лечения этих заболеваний. В данном изобретении представлены способы применения соединений в соответствии с данным изобретением для лечения этих заболеваний или для получения
фармацевтических композиций, содержащих соединения в соответствии с данным изобретением, для лечения этих заболеваний.
Выражение "фармацевтическая композиция" включает препараты, подходящие для введения млекопитающим, например человеку. Если соединения в соответствии с данным изобретением вводят в виде лекарственного средства млекопитающим, например человеку, они могут даваться как таковые или в виде фармацевтической композиции, содержащей, например, от 0,1 до 99,5% (более предпочтительно от 0,5 до 90%) соединения формулы (I) в качестве активного ингредиента в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем или, необязательно, двумя или более фармацевтически приемлемыми носителями.
Фраза "фармацевтически приемлемый носитель" известна в данной области техники и включает фармацевтически приемлемый материал, композицию или носитель, подходящие для введения соединений в соответствии с данным изобретением млекопитающим. Носители включают жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, наполнитель, растворитель или инкапсулирующий материал, предназначенные для содержания или перемещения агента из одного органа или части тела в другой орган или часть тела. Каждый носитель должен быть "приемлемым" в смысле совместимости с другими ингредиентами композиции и не наносить вред пациенту. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошковый трагакант; солод; желатин; тальк; наполнители, такие как масло какао и воск для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, конопляное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль; многоатомные спирты, такие как глицерин, сорбит, манит и полиэтиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический физиологический раствор; раствор Рингера; этиловый спирт; растворы фосфатного буфера; и другие не токсичные совместимые вещества, применяемые в фармацевтических составах. Обычно фармацевтически приемлемые носители являются стерилизованными и/или практически апирогенными.
Смачивающие агенты, эмульгаторы и смазывающие агенты, такие как лаурилсульфат натрия и сте-арат магния, а также красящие агенты, разделительные агенты, покрытия, подсластители, вкусовые добавки и отдушки, консерванты и антиоксиданты также присутствуют в композициях.
Примеры фармацевтически приемлемых антиоксидантов включают водорастворимые антиоксидан-ты, такие как аскорбиновая кислота, гидрохлорид цистеина, бисульфат натрия, метабисульфит натрия, сульфит натрия и подобные; маслорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутили-рованный гидроксианизол (БГА), бутилированный гидрокситолуол (БГТ), лецитин, пропилгаллат, а-токоферол и подобные; и металл хелатирующие агенты, такие как лимонная кислота, этилендиаминтет-рауксусная кислота (ЭДТК), сорбит, винная кислота, фосфорная кислота и подобные.
Композиции в соответствии с данным изобретением включают композиции, подходящие для перо-рального, назального, ингаляционного, местного, чрезкожного, буккального, подъязычного, ректального, вагинального и/или парентерального введения. Композиции удобным образом могут быть представлены в виде стандартных лекарственных форм и могут быть получены способами, хорошо известными в области фармацевтики. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с носителем с получением стандартной лекарственной формы, обычно является таким количеством соединения, которое обеспечивает терапевтический эффект. В общем, из ста процентов, это количество будет составлять от около 1 до около 99% активного ингредиента, предпочтительно от около 5 до около 70%, наиболее предпочтительно от около 10 до около 30%.
Способы получения таких составов или композиций включают стадию объединения соединения в соответствии с данным изобретением с носителем и, необязательно, одним или более дополнительными ингредиентами. В общем, композиции готовят однородным и тщательным объединением соединения в соответствии с данным изобретением с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями или обоими с последующим формованием продукта при необходимости.
Составы в соответствии с данным изобретением, подходящие для перорального введения, могут быть в форме капсул, крахмальных капсул, пилюль, таблеток, пастилок (с применением вкусового основания, например обычно сахарозы и аравийской камеди или трагаканта), порошков, гранул или раствора или суспензии в водной или не водной жидкости, или в виде жидкой эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле, или в виде эликсира или сиропа, или в виде пастилок (с применением инертного основания, такого как желатин и глицерин или сахароза или аравийская камедь) и/или в виде полосканий для рта и подобных, каждая из которых содержит определенное заранее количество соединения в соответствии с данным изобретением в качестве активного ингредиента. Соединение в соответствии с данным изобретением также может вводиться в виде болюса, электуария или пасты.
В твердых лекарственных формах в соответствии с данным изобретением для перорального введения (капсулы, таблетки, пилюли, драже, порошки, гранулы и подобное) активный ингредиент смешивают с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, такими как цитрат натрия или вто
ричный кислый фосфат кальция, и/или любым из следующих: наполнители или добавками, такими как крахмалы, лактоза, глюкоза, манит и/или кремниевая кислота; связующие агенты, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и/или аравийская камедь; увлажнители, такие как глицерин; разрыхляющие агенты, такие как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, определенные силикаты и карбонат натрия; замедлители схватывания раствора, такие как парафин; усилители абсорбции, такие как соединения четвертичного аммония; смачивающие агенты, такие как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина; абсорбенты, такие как каолин и бентонитовая глина; смазывающие агенты, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси; и красящие агенты. В случае капсул, таблеток и пилюль, фармацевтические композиции также могут содержать буферные агенты. Твердые композиции подобного типа также могут применяться в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с применением таких наполнителей, как лактоза или молочные сахара, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и подобные.
Таблетка может быть получена прессованием или формованием, необязательно с одним или более дополнительными ингредиентами. Прессованные таблетки могут быть получены с применением связующего агента (например, желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы), смазывающего агента, инертного разбавителя, консерванта, консерванта, разрыхлителя (например, крахмалгликолята натрия или поперечно сшитой карбоксиметилцеллюлозы натрия), поверхностно-активного или диспергирующего агента. Формованные таблетки могут быть получены формованием в подходящей машине смеси порошкового соединения, увлажненного инертным жидким разбавителем.
Таблетки и другие твердые лекарственные формы фармацевтических композиций в соответствии с данным изобретением, такие как драже, капсулы, пилюли и гранулы, необязательно могут иметь насечки или быть покрыты оболочками и покрытиями, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области получения фармацевтических составов. Они также могут быть составлены так, чтобы обеспечивать медленное или контролируемое выделение активного ингредиента из них, с применением, например, гидроксипропилметилцеллюлозы в различных пропорциях с получением желаемого профиля выделения, других полимерных матриц, липосом и/иди микросфер. Они могут быть стерилизованы, например, фильтрацией через удерживающий бактерии фильтр или введением стерилизующих агентов, в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены в стерильной воде или другой стерильной среде для инъекций непосредственно перед применением. Эти композиции также могут необязательно содержать средства, придающие непрозрачность, и могут представлять собой композиции, которые выделяют активный ингредиент только или предпочтительно в определенной части желудочно-кишечного тракта, необязательно, в отсроченном порядке. Примеры оболочек, которые могут применяться, включают полимерные вещества и воски. Активный ингредиент также может быть в микроинкапсулированной форме, если это применимо, с одним или более описанными выше наполнителями.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения соединений в соответствии с данным изобретением включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активному ингредиенту жидкие лекарственные формы могут содержать инертный разбавитель, обычно применяемый в данной области техники, такой как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопро-пиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, зародышевое, оливковое, касторовое и конопляное масло), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и эфиры жирной кислоты сорбитана и их смеси.
Кроме инертных разбавителей, пероральные композиции также могут включать адъюванты, такие как смачивающие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, подсластители, вкусовые добавки, красители, отдушки и консерванты.
Суспензии в дополнение к активным соединениям могут содержать суспендирующие агенты, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сор-битана, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, и их смеси.
Композиции в соответствии с данным изобретением, которые подходят для вагинального введения, также включают пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или распыляемые композиции, содержащие подходящие носители, известные в данной области техники.
Лекарственные формы для местного или чрезкожного введения соединения в соответствии с данным изобретением включают порошки, спреи, мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, растворы, пластыри и ингаляции. Активное соединение может быть смешано в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и с любыми консервантами, буферами или пропеллентами, которые могут потребоваться.
Порошки и спреи могут содержать в дополнение к соединению в соответствии с данным изобретением наполнители, такие как лактоза, тальк, кремниевая кислота, гидроксид алюминия, силикаты каль
ция и полиамидный порошок или смеси этих веществ. Спреи могут дополнительно содержать обычные газы-вытеснители, такие как хлорфторуглеводороды и летучие незамещенные углеводороды, такие как бутан и пропан.
Офтальмологические составы, глазные мази, порошки, растворы и подобные также рассматриваются в объеме данного изобретения.
Фармацевтические композиции в соответствии с данным изобретением, подходящие для парентерального введения, содержат одно или более соединений в соответствии с данным изобретением в сочетании с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, такими как стерильные изотонические водные или не водные растворы, дисперсии, суспензии или эмульсии или стерильные порошки, которые могут быть восстановлены в стерильные растворы или дисперсии для инъекций непосредственно перед применением, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты, сорбаты, которые сохраняют состав изотоническим к крови предполагаемого реципиента, или суспендирующие или загущающие агенты.
Примеры подходящих водных и не водных носителей, которые могут применяться в фармацевтических композициях в соответствии с данным изобретением, включают воду, этанол, простые эфиры гликоля, многоатомные спирты (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и подобные) и их подходящие смеси, растительные масла, такие как оливковое масло, и органические сложные эфиры для инъекций, такие как этилолеат. Подходящая текучесть может сохраняться, например, с помощью применения материалов для покрытия, таких как лецитин, сохранением требуемого размера частиц в случае дисперсий и применением поверхностно-активных веществ.
Эти композиции также могут содержать адъюванты, такие как консерванты, смачивающие агенты, эмульгирующие агенты и диспергирующие агенты. Предотвратить воздействие микроорганизмов обеспечивается добавлением различных антибактериальных и противогрибковых агентов, например парабе-на, хлорбутанола, фенолсорбиновой кислоты и подобных. Также может быть желательно добавлять изотонические агенты, такие как сахара, хлорид натрия и подобные в композиции. Кроме того, пролонгированная абсорбция фармацевтической формы для инъекций может быть обеспечена добавлением агентов, которые замедляют абсорбцию, таких как монстеарат алюминия и желатин.
В некоторых случаях для пролонгирования действия лекарственного средства желательно замедлять абсорбцию лекарственного средства из подкожных или внутримышечных инъекций. Это может осуществляться применением жидкой суспензии кристаллического или аморфного материала, имеющего плохую растворимость в воде. Скорость абсорбции лекарственного средства затем зависит от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристалла и кристаллической формы. Альтернативно, замедленная абсорбция вводимого парентерально лекарственного средства осуществляется растворением или суспендированием лекарственного средства в масляном носителе.
Препараты в соответствии с данным изобретением могут даваться перорально, парентерально, местно или ректально. Конечно, они даются в формах, подходящих для каждого способа введения. Например, их вводят в форме таблеток или капсул, инъекций, ингаляций, глазного лосьона, мази, суппозитория и т.д., вводят в виде инъекции, инфузии или ингаляции; местно в виде лосьона или мази; и ректально в виде суппозиториев.
Фразы "парентеральное введение" и "вводится парентерально" в данном описании означают способы введения, отличные от энтерального и местного введения, обычно инъекцией, и включают, без ограничений, внутривенные, внутримышечные, внутриартериальные, подоболочечные, интратекальные, внутрисуставные, внутриглазничные, внутрисердечные, внутрикожные, внутрибрюшинные, транстрахе-альные, подкожные, внутрикожные, внутрисуставные, подкапсулярные, субарахноидальные, интраспи-нальные и интрастернальные инъекции и вливания. Внутривенное вливание иногда является предпочтительным способом доставки соединений в соответствии с данным изобретением. Вливание может применяться для доставки однократной суточной дозы или нескольких доз. В некоторых вариантах соединение в соответствии с данным изобретением вводят вливанием с интервалом от 15 мин до 4 ч, обычно от 0,5 до 3 ч. Такие вливания могут применяться один раз в сутки, два раза в сутки или вплоть до трех раз в сутки.
Фразы "системное введение", "вводят системно", "периферическое введение" и "вводят периферически" в данном описании означает введение соединения, лекарственного средства или другого материала не непосредственно в центральную нервную систему так, что оно попадает в систему пациента и, таким образом, становится предметом метаболизма и других подобных процессов, например подкожное введение.
Эти соединения могут вводиться человеку и другим животным для терапии любым подходящим способом введения, включая пероральный, назальный, например, в виде спрея, ректальный, интраваги-нальный, парентеральный, интрацистернальный и местный, например, в виде порошков, мазей или капель, включая буккальный и подъязычный.
Независимо от выбранного способа введения соединения в соответствии с данным изобретением, которые могут применяться в подходящей гидрированной форме и/или фармацевтические композиции в соответствии с данным изобретением, составляют в фармацевтически приемлемые лекарственные формы
обычными способами, известными специалистам в данной области техники.
Актуальные дозы активных ингредиентов в фармацевтических композициях в соответствии с данным изобретением могут варьироваться так, чтобы получить количество активного ингредиента, которое является эффективным для достижения желаемой терапевтической реакции для конкретного пациента, композиции и способа введения, не будучи токсичным для пациента.
Выбранная доза зависит от множества факторов, включая активность конкретного применяемого соединения в соответствии с данным изобретением или сложного эфира, соли или амида, способа введения, времени введения, скорости выведения конкретного применяемого соединения, длительности лечения других лекарственных средств, соединений и/или материалов, применяемых в сочетании с применяемым соединением, возраста, пола, массы тела, состояния, общего состояния здоровья и медицинского анамнеза лечимого пациента, и подобных факторов, известных в области медицины.
Терапевт или ветеринар, являющийся специалистом в данной области техники, может легко определить и прописать требуемое эффективное количество фармацевтической композиции. Например, терапевт или ветеринар может начать давать дозы соединений в соответствии с данным изобретением, применяемых в фармацевтической композиции, в количестве, ниже чем требуется для достижения желаемого терапевтического эффекта, и постепенно повышать дозу до достижения желаемого терапевтического эффекта.
В общем, подходящей суточной дозой соединения в соответствии с данным изобретением является такое количество соединения, которое представляет минимальную дозу, эффективную для получения терапевтического эффекта. Такая эффективная в основном доза зависит от описанных выше факторов. Обычно внутривенные и подкожные дозы соединений в соответствии с данным изобретением для пациента, при применении для указанного действия, варьируются от около 0,0001 до около 100 мг на 1 кг массы тела в сутки, часто от около 0,01 до около 50 мг на 1 кг массы тела в сутки и часто от около 1,0 до около 50 мг на 1 кг массы тела в сутки. Общая суточная доза при внутривенном введении обычно составляет 1-4 г/сутки для типичного субъекта (например, человек с массой тела 70 кг); общая суточная доза при ингаляции обычно составляет 50-500 мг в сутки или около 100-200 мг. Эффективным количеством является такое количество, которое лечит бактериальную инфекцию.
При желании эффективная суточная доза активного соединения может вводиться одной, двумя, тремя, четырьмя, пятью, шестью или более субдозами, вводимыми по отдельности с подходящими интервалами в течение суток, необязательно, в стандартных лекарственных формах. Соединения, вводимые перорально или ингаляцией, обычно вводят одной или четырьмя дозами в сутки. Соединения, вводимые инъекцией, обычно вводят один раз в сутки или один раз через сутки. Соединения, вводимые внутривенно, обычно вводят от одного до трех раз в сутки.
Хотя возможно вводить соединение в соответствии с данным изобретением в чистом виде, предпочтительно вводить соединение в виде фармацевтической композиции, такой как описана здесь.
Соединения, описанные здесь, могут быть синтезированы общими методами синтеза, описанными ниже, конкретные примеры которых описаны более подробно в примерах.
Общие методы синтеза
Соединения в соответствии с данным изобретением получают из широкодоступных соединений с применением методов, известных специалистам в данной области техники, с учетом примеров и схем, представленных ниже.
В контексте данного изобретения, только легко удаляемая группа, которая не является составляющей конкретного желаемого конечного продукта соединений в соответствии с данным изобретением, обозначена как "защитная группа", если контекст не указывает на иное. Защита функциональных групп такими защитными группами, сами защитные группы и реакции их отщепления описаны, например, в стандартных ссылках, таких как, например, Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformation. Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Germany, 2005, 41627 p. (URL: http://www.science-of-synthesis.com (Electronic Version, 48 Volumes)); J.F.W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London and New York 1973, в T.W. Greene and P.G.M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Third edition, Wiley, New York 1999, в "The Peptides"; Volume 3 (editors: E. Gross and J. Meien-hofer), Academic Press, London and New York 1981, в "Methoden der organischen Chemie" (Methods of Organic Chemistry), Houben Weyl, 4th edition, Volume 15/1, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, в H.-D. Ja-kubke and H. Jeschkeit, "Aminosauren, Peptide, Proteine" (Amino acids, Peptides, Proteins), Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach и Basel 1982, и в Jochen Lehmann, "Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccha ride und Derivate" (Chemistry of Carbohydrates: Monosaccharides and Derivatives), Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974. Защитные группы характеризуются тем, что они могут быть легко удалены (т.е. без возникновения нежелательных побочных реакций), например, сольволизом, восстановлением, фотолизом или, альтернативно, в физиологических условиях (например, ферментным отщеплением).
Соли соединений в соответствии с данным изобретением, имеющие по меньшей мере одну солеоб-разующую группу, могут быть получены известным способом. Например, соли соединений в соответствии с данным изобретением, имеющие кислотные группы, могут быть образованы, например, обработкой соединений соединениями металла, такими как соли щелочного металла подходящих органических
карбоновых кислот, например натриевая соль 2-этилгексановой кислоты, с органическими соединениями щелочного металла или щелочноземельного металла, такими как соответствующие гидроксиды, карбонаты или гидрокарбонаты, такие как гидроксид, карбонат или гидрокарбонат натрия, с соответствующими соединениями кальция или с аммиаком или подходящим органическим амином, предпочтительно применяя солеобразующий агент в стехиометрических количествах или в незначительном избытке. Кислотно-аддитивные соли соединений в соответствии с данным изобретением получают обычным способом, например обработкой соединений кислотой или подходящим анионообменным реагентом. Внутренние соли соединений в соответствии с данным изобретением, содержащие кислоту и основные соле-образующие группы, например свободную карбоксигруппу и свободную аминогруппу, могут быть образованы, например, нейтрализацией солей, таких как кислотно-аддитивные соли, до изоэлектрической точки, например, слабыми основаниями или обработкой ионообменными смолами.
Соли могут быть превращены обычными методами в свободные соединения; металлические и аммониевые соли могут быть превращены, например, обработкой подходящими кислотами и кислотно-аддитивные соли, например, обработкой подходящим основным агентом.
Смеси изомеров, получаемые в соответствии с данным изобретением, могут быть разделены известными методами на отдельные изомеры; диастереоизомеры могут быть разделены, например, разделением между смесями полифазных растворителей, перекристаллизацией и/или хроматографическим разделением, например, над силикагелем или, например, жидкостной хроматографией среднего давления над колонкой с обращенной фазой, и рацематы могут быть разделены, например, образованием солей с оптически чистыми солеобразующими реагентами и разделением смеси полученных диастереоизомеров, например, с помощью фракционной кристаллизации или хроматографией над оптически активными материалами колонки.
Промежуточные и конечные продукты могут быть обработаны и/или очищены стандартными методами, например, с применением хроматографических методов, методов распределения, (пере-) кристаллизацией и подобными.
Стадии процесса синтеза соединений в соответствии с данным изобретением могут проводиться в известных условиях реакции, включая такие, которые указаны отдельно, при отсутствии или, обычно, в присутствии растворителей или разбавителей, включая, например, растворители или разбавители, которые являются инертными к применяемым реагентам и растворяют их, при отсутствии или в присутствии катализаторов, конденсирующих или нейтрализующих агентов, например ионообменных смол, таких как катионообменные смолы, например, в форме Н+, в зависимости от природы реакции и/или реагентов при пониженной, нормальной или повышенной температуре, например в интервале температур от около -100 до около 190°C, включая, например, от около -80 до приблизительно 150°C, например от -80 до -60°C, при комнатной температуре от -20 до 40°С или при температуре кипения с обратным холодильником, при атмосферном давлении или в закрытом сосуде, если применимо, под давлением, и/или в инертной атмосфере, например в атмосфере аргона или азота.
На всех стадиях реакций смеси изомеров, которые могут быть получены, могут быть разделены на отдельные изомеры, например диастереоизомеры или энантиомеры, или на любые желаемые смеси изомеров, например рацематы или смеси диастереоизомеров, например, аналогично способам, описанным в Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformation. Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Germany. 2005.
Растворители, из которых могут быть выбраны растворители, подходящие для конкретных реакций, включают те, которые указаны отдельно или, например, воду, сложные эфиры, такие как низшие алкилы-низшие алканоаты, например этилацетат, простые эфиры, такие как алифатические простые эфиры, например диэтиловый эфир, или циклические простые эфиры, например тетрагидрофуран или диоксан, жидкие ароматические углеводороды, такие как бензол или толуол, спирты, такие как метанол, этанол или 1- или 2-пропанол, нитрилы, такие как ацетонитрил, галогенированные углеводороды, такие как ме-тиленхлорид или хлороформ, амиды кислота, такие как диметилформамид или диметилацетамид, основания, такие как гетероциклические азотные основания, например пиридин или №метилпирролидин-2-он, ангидриды карбоновой кислоты, такие как ангидриды низшей алкановой кислоты, например уксусный ангидрид, циклические линейные или разветвленные углеводороды, такие как циклогексан, гексан или изопентан, или смеси этих растворителей, например водные растворы, если не указано иначе в описании процессов. Такие смеси растворителей также могут применяться при обработке, например хроматографии или разделении.
Соединения, включая их соли, также могут быть получены в форме гидратов, или их кристаллы могут, например, включать растворитель, применяемый для кристаллизации. Могут присутствовать различные кристаллические формы.
Изобретение также относится к тем формам процесса, в которых соединение, получаемое в качестве промежуточного соединения на любой стадии процесса, применяют в качестве исходного материала и проводят оставшиеся стадии процесса, или в которых исходный материал образуется в условиях реакции или применяется в форме производного, например, в защищенной форме или в форме соли, или соединение, получаемое в способе в соответствии с данным изобретением получают в условиях процесса и
далее превращают in situ.
В соответствии с вышесказанным, в данном изобретении представлен еще один аспект фармацевтическая композиция, содержащая а) первый агент, который является соединением в соответствии с данным изобретением, например соединением формулы (I) или любой ее подформулы, и b) соагент, например второй лекарственный агент, описанный выше.
Описанный выше способ, включающий совместное введение, например одновременное или последовательное, терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с данным изобретением, например соединения формулы (I) или любой ее подформулы, и соагента, например второго терапевтического агента, такого как определен выше.
Термины "совместное введение" или "комбинированное введение" или подобные, применяемые здесь, охватывают введение выбранных терапевтических агентов отдельному пациенту, и включают режимы лечения, в которых агенты не обязательно вводят одинаковым способом введения или в одно и то же время. Фиксированные сочетания также включены в объем данного изобретения. Введение фармацевтической композиции в соответствии с данным изобретением оказывает благоприятное действие, например синергетическое терапевтическое действие, по сравнению с монотерапией, в которой применяют только один из фармацевтически активных ингредиентов.
Каждый компонент композиции в соответствии с данным изобретением может вводиться отдельно, вместе или в любом сочетании.
Соединение в соответствии с данным изобретением и любой дополнительный агент могут быть составлены в стандартных лекарственных формах. Альтернативно, для снижения количества лекарственных форм, вводимых пациенту, соединение в соответствии с данным изобретением и любой дополнительный агент могут быть составлены вместе в любом сочетании. Например, ингибитор в соответствии с данным изобретением может быть составлен в одну лекарственную форму, и дополнительный агент может быть составлен вместе с другую лекарственную форму. Любые отдельные лекарственные формы могут вводиться одновременно или в разное время.
Альтернативно, композиция в соответствии с данным изобретением содержит дополнительный агент, описанный здесь. Каждый компонент может присутствовать в индивидуальных композициях, комбинированных композициях или в одной композиции.
Примеры
Данное изобретение далее иллюстрировано следующими примерами, которые не должны рассматриваться как ограничивающие. Анализы, применяемые в примерах, хорошо известны в данной области техники: демонстрация эффективности в этих анализах обычно рассматривается как прогноз эффективности у субъектов.
Аббревиатуры:
Ас - ацетил,
ACN - ацетонитрил,
AcOEt/EtOAc - этилацетат,
АсОН - уксусная кислота,
водн. - водный,
Ar - арил,
Bn - бензил,
Bu - бутил (nBu^-бутил, Ш^трет-бутил),
КДИ - карбонилдиимидазол,
CH3CN - ацетонитрил,
ДБУ - 1,8-диазабицикло[5.4.0]-ундец-7-ен,
Boc2O - ди-трет-бутилдикарбонат,
ДХЭ - 1,2-дихлорэтан,
ДХМ - дихлорметан,
DiBAl-H - гидрид диизобутилалюминия,
ДИПЭА - N-этилдиизопропиламин,
ДМАП - диметиламинопиридин,
ДМФ - N,N'-диметилформамид,
ДМСО - диметилсульфоксид,
ИЭ - ионизация электрораспылением,
Et2O - диэтиловый эфир,
Et3N - триэтиламин,
эфир - диэтиловый эфир,
EtOAc - этилацетат,
EtOH - этанол,
ФХ - флэш-хроматография,
ч - час(ы),
ГАТУ - гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-^^№№-тетраметилурония,
ГБТУ - гексафторфосфат О-(бензотриазол-1-ил)-^^№,№-тетраметилурония, HCl - хлористоводородная кислота, ГМФА - гексаметилфосфорамид, HOBt - 1-гидроксибензотриазол,
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография, Н2О - вода, л - литр(ы),
ЖХ-МС - жидкостная хроматография масс-спектрометрия,
LiHMDS - бис-(триметилсили)амид лития,
MgSO4 - сульфат магния,
Me - метил,
MeI - йодметан,
MeOH - метанол,
мг - миллиграмм,
мин - минута(ы),
мл - миллилитр,
МС - масс-спектрометрия,
NaHCO3 - бикарбонат натрия,
Na2SO4 - сульфат натрия,
NH2OH - гидроксиламин,
Pd/C - палладий-на-угле,
Pd(OH)2 - гидроксид палладия,
ЗГ - защитная группа,
Ph - фенил,
Ph3P - трифенилфосфин,
преп. - препаративная,
Rf - соотношение фронтов,
ОФ - обращенная фаза,
Ву - время удержания,
кт - комнатная температура,
SiO2 - силикагель,
SOCl2 - тионилхлорид,
ФТБА - фторид тетрабутиламмония,
TBDMS - трет-бутилдиметилсилил,
ТЭА - триэтиламин,
ТФК - трифторуксусная кислота,
ТГФ - тетрагидрофуран,
ТСХ - тонкослойная хроматография,
TsCl - сульфонилхлорид толуола.
Соединения в соответствии с данным изобретением могут быть получены методами органического синтеза, известными специалисту в данной области техники, со ссылкой на следующие схемы реакций и примеры. Общие способы синтеза соединений формулы (I) представлены на схемах А-С ниже.
Общие схемы синтеза
Общий способ синтеза соединений формулы (II) изображен на схеме А. На первой стадии получают оксид нитрила in situ из альдоксима А-2, который подвергают циклоприсоединению с алкином А-1 с получением изоксазола А-3. Сложный эфир А-4 может быть превращен в гидроксаминовую кислоту II через прямой синтез амида в присутствии гидроксиламина и основания. Альтернативно, гидроксаминовая кислота II может быть синтезирована через омыление сложного эфира и амидирование свободной кислоты с О-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)гидроксиламином (THPONH2) с последующим снятием защиты ТНР в кислых условиях (стадия 3 и 4).
На схеме В показан альтернативный способ получения промежуточного изоксазола A3. Концевой алкин В2 может быть получен с применением бута-1,3-диин-1-илтриметилсилана В1 в качестве партнера для циклоприсоединения. Различные Z группы могут быть присоединены стандартными реакциями сочетания, катализированными переходным металлом.
Схема В
Общий способ синтеза соединений формулы (III) изображен на схеме С. Альдолная реакция между метиловым эфиром N-Boc глицина С1 и альдегидом С2 дает продукт присоединения C3. трет-Бутилоксикарбонильную группу отщепляют в кислых условиях с получением первичного амина С4, с которым может быть проведено сочетание с альдегидом С5 в условиях восстановительного аминирова-ния. Сложный эфир С6 может быть превращен в гидроксаминовую кислоту III прямым амидным синтезом в присутствии гидроксиламина и основания.
Схема С
Общие условия.
Масс спектры регистрировали на ЖХ-МС системах с применением ионизации электрораспылением. Они включают WATERS Acquity Single Quard Detector. [M+H]+ относится к моно-изотопным молекулярным массам.
ЯМР спектры регистрировали на ЯМР спектрометрах с открытым доступом Varian 400 или Varian 500. Спектры измеряют при 298K и относят, используя пик растворителя. Химические сдвиги для 1H ЯМР приведены в миллионных долях (м.д.).
Масс спектр делают на ЖХ-МС системах в одних их следующих условий.
1. Система Acquity UPLC-H class, оборудованная ИКС детектором.
Колонка: ACQUITY UPLC HSS C18 (50x2,1) мм, 1,8 u.
Температура колонки: температура окружающей среды.
Подвижная фаза: А) 0,1% FA+5 мМ ацетат аммония в воде.
В) 0,1% FA в ацетонитриле.
Градиент: 5-5% растворитель В за 0,40 мин, 5-35% растворитель В за 0,80 мин, 35-55% растворитель В за 1,2 мин, 55-100% растворитель В за 2,5 мин. Скорость потока: 0,55 мл/мин.
Соединения определяют с применением Waters Photodiode Array Detector.
2. Система Waters LCMS, оборудованная ZQ 2000 детектором. Колонка: X-BRIDGE C18 (50x4,6) мм, 3,5u.
Температура колонки: температура окружающей среды. Подвижная фаза: А) 0,1% NH3 в воде. В) 0,1% NH3 в ацетонитриле. Градиент: 5-95% растворитель В в 5,00 мин. Скорость потока: 1,0 мл/мин.
Соединения определяют с применением Waters Photodiode Array Detector.
3. Система Waters ACQUITY UPLC, оборудованная ZQ 2000 MS системой. Колонка: Kinetex от Phenomenex, 2,6 мкм, 2,1x50 мм.
Температура колонки: 50°С.
Градиент: 2-88% (или 00-45% или 65-95%) растворителя В за период 1,29 мин. Скорость потока: 1,2 мл/мин.
Соединения определяют с применением Waters Photodiode Array Detector.
Синтез (R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [1.1]
Способ А.
Стадия 1. Синтез (циклопропилбута-1,3-диин-1-ил)триметилсилана [1.1а].
К раствору (бромэтинил)циклопропана (60 г, 414 ммоль) в пиперидине (345 мл) при 0°С добавляют этинилтриметилсилан (44,7 г, 455 ммоль) и CuI (7,88 г, 41,4 ммоль). Затем раствор перемешивают при кт в течение 2 ч. Реакционную смесь гасят добавлением насыщ. водн. раствора NH4Cl и затем экстрагируют ТБМЭ. Органический слой промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат над MgSO4 и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем, применяя гептан в качестве элюента, с получением продукта (42 г, 62% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 0,13-0,24 (м, 9Н), 0,72-0,91 (м, 4Н), 1,25-1,36 (м, 1Н)
Стадия 2. Синтез этил 5-хлор-5-(гидроксиимино)-2-метил-2-(метилсульфонил)пентаноата [1.1b].
NCS (10,8 г, 81 ммоль, 1,2 экв.) добавляют к раствору этил 5-(гидроксиимино)-2-метил-2-(метилсульфонил)пентаноата (17 г, 67,6 ммоль) в ДМФ (34 мл), и полученную смесь перемешивают при кт в течение 3 ч. Затем растворитель удаляют в вакууме. Остаток растворяют в EtOAc, промывают водой,
насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют с получением продукта (19 г, 98% вы-
ход). Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей очистки. ЖХМС (m/z): 2
8 6,2 [М+Н]+.
Стадия 3. Синтез ^)-этил 4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутаноата [1.1с].
К раствору 1.1а (8,4 г, 51,8 ммоль) в MeOH (25 мл) добавляют K2CO3 (14,3 г, 104 ммоль) и смесь перемешивают при кт в течение 18 ч. Смесь затем разбавляют CH2Cl2 (75 мл) и фильтруют. Фильтрат затем помещают на баню с ледяной водой и добавляют 1.1.b (14,79 г, 51,8 ммоль). Затем к раствору добавляют ТЭА (14,43 мл, 104 ммоль) в течение более 30 мин и смесь перемешивают при кт в течение 4 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток разбавляют ТБМЭ и промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до 60%, с получением (±)-1.1с (9,0 г, 51%). Два энантиомера разделяют хиральной ВЭЖХ.
Условия разделения: хиральная колонка AD; скорость потока: 30 мл/мин; растворитель: геп-тан/EtOH=50/50; давление: 1263 ф/д . Продукт 1: Ву 3,76 мин, продукт 2: Ву 4,73 мин. Продукт 2 является желаемым изомером 1.1с (3,0 г). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 0,84-1,08 (м, 4Н), 1,32 (т, J=7,14 Гц, 3H), 1,45-1,56 (м, 2Н), 1,68 (с, 3H), 2,17 (с, 1H), 2,25-2,40 (м, 1H), 2,53-2,71 (м, 2H), 2,80 (д, J=5,04 Гц, 1H), 3,05 (с, 3H), 4,27 (кв, J=7,11 Гц, 2H), 6,17 (с, 1Н). ЖХМС (m/z): 340,3 [М+Н]+.
Стадия 4. Синтез (R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бута-новой кислоты [1.1 d].
LiOH-H2O (0,3 г, 2,0 ммоль) добавляют к раствору 1.1с (1,2 г, 3,5 ммоль) в ТГФ/МеОН/воде (12 мл, 1/1/1) и полученный раствор перемешивают при кт в течение 1 ч. Растворитель затем удаляют при пониженном давлении. Оставшийся продукт подкисляют 3,0 N HCl водн. раствором и экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют с получением продукта (1,1 г, количественный выход). Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей очистки. ЖХМС (m/z): 312,3 [М+Н]+.
Стадия 5. Синтез (2R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)-N-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)бутанамида [1.1e].
К раствору 1.1d (1,1 г, 3,53 ммоль) в ДМФ (6 мл) при кт добавляют аза-ГОБт (0,866 г, 6,36 ммоль), EDC (1,016 г, 5,30 ммоль) и О-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)гидроксиламин (0,621 г, 5,30 ммоль), ТЭА (1,477 мл, 10,60 ммоль). Раствор перемешивают при 45°С в течение 3 ч, затем при кт в течение 18 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток разбавляют EtOAc, промывают насыщ. водн. раствором NaHCO3. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до 70% с получением 1,2 г продукта (83% выход). ЖХМС (m/z): 411,3 [М+Н]+.
Стадия 6. Синтез (R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.1]
К раствору 1.1e (1,2 г, 2,92 ммоль) в MeOH (5,0 мл) и ДХМ (5,0 мл) при 0°С добавляют HCl (0,731 мл, 4,0 М в диоксане, 2,92 ммоль). Раствор перемешивают при кт в течение 1 ч. Затем раствор удаляют при пониженном давлении. Оставшийся продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем, ацетон/гептан от 0 до 60%, с получением 0,79 г продукта (81% выход). 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО): 10,97 (с, 1Н), 9,24 (с, 1Н), 6,73 (с, 1Н), 3,06 (с, 3H), 2,71 (дд, J=17,3, 9,1 Гц, 1Н), 2,56 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 2,47-2,40 (м, 1Н), 2,06-1,95 (м, 1Н), 1,69 (ддд, J=13,3, 8,3, 5,0 Гц, 1Н), 1,50 (с, 3H), 0,99 (тд, J=6,8, 4,0 Гц, 2Н), 0,880,82 (м, 2Н). ЖХМС (m/z): 327,3 [М+Н]+.
Способ В. Альтернативный синтез 1.1с.
Стадия 7. Синтез этил 2-метил-2-(метилсульфонил)гекс-5-еноата [1.1f].
К раствору этил 2-(метилсульфонил)пропаноата (50 г, 277 ммоль) в ДМФ (277 мл) при 0°С добавляют NaH (14,43 г, 60%, 361 ммоль) и смесь перемешивают при кт в течение 2 ч. Смесь затем охлаждают при 0°С и 4-бромбут-1-ен (41,2 г, 305 ммоль) добавляют в течение более 30 мин. Смесь затем перемешивают при кт в течение 18 ч. Растворитель удаляют в высоком вакууме. К остатку добавляют ТБМЭ и затем гасят насыщ. водн. раствором NH4Cl. Фазы разделяют и водный слой экстрагируют ТБМЭ. Объединенный органический слой промывают насыщенным раствором соли и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до 50%, с получением продукта. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 1,32 (т, J=7,14 Гц, 3H), 1,62 (с, 3H), 1,91-2,06 (м, 2H), 2,12-2,42 (м, 2H), 3,04 (с, 3H), 4,28 (кв, J=7,14 Гц, 2H), 4,92-5,14 (м, 2H), 5,64-5,86 (м, 1Н).
Стадия 8. Разделение 1.1f с получением 1.1f-I и 1.1f-II. Рацемический продукт 1.1f разделяют на энантиомер 1. 1 f-I и 1. 1 f-II хроматографией с псевдодвижужщимся слоем.
II.
Стадия 9. Синтез этил (К)-2-метил-2-(метилсульфонил)-5-оксопентаноат [1.1 g]
0=й-1.1д
К раствору 1. 1 f-II (6 г, 25,6 ммоль) в диоксане (128 мл) и воде (43 мл) добавляют 2,6-лутидин (5,49 г, 51,2 ммоль) и OsO4 (3,25 г, 4% в воде, 0,512 ммоль). Через 30 мин раствор помещают на баню с ледяной водой и добавляют NaIO4 (21,91 г, 102 ммоль). Смесь затем перемешивают при кт в течение 18 ч. Смесь затем фильтруют и фильтрат концентрируют. Остаток растворяют в EtOAc и промывают 1,0 HCl водн. раствором, насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей очистки. 1H ЯМР (400 МГц, растворитель): 1,32 (т, J=7,14 Гц, 3H), 1,61 (с, 3H), 2,22-2,36 (м, 1H), 2,43-2,62 (м, 2H), 2,63-2,76 (м, 1H), 3,07 (с, 3H), 4,28 (кв, J=7,14 Гц, 2Н) 9,69-9,92 (м, 1Н).
Стадия 10. Синтез этил (R)-5-(гидроксиимино)-2-метил-2-(метилсульфонил)пентаноата [1. 1h].
К раствору гидрохлорида гидроксиламина (2,0 г, 2 8,2 ммоль) в воде (26 мл) добавляют NaHCO3 (2,4 г). После перемешивания при кт в течение 10 мин добавляют раствор 1.1g (6,0 г, 25 ммоль) в EtOH (26 мл), и раствор перемешивают при кт в течение 18 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении. Оставшийся продукт экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют с получением 6,4 г продукта. Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей очистки. ЖХМС (m/z): 252,1 [М+Н]+.
Стадия 11. Синтез ^)-этил 4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [1.1с].
Соединение 1.1с синтезируют из 1.1h по методике из примера 1.1, стадия 2-3. Хиральное разделение на стадии 3 необязательно, так как соединение 1.1h является энантиомерно чистым.
I.2. Синтез (R)-4-(5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [1.2]
Стадия 1. Синтез (йодэтинил)циклобутана [1.2а].
n-BuLi (53,6 мл, 2,5 М в гексане, 86 ммоль) добавляют к раствору 6-хлоргекс-1-ина (5,21 мл, 42,9 ммоль) в ТГФ (107 мл) при -78°C, и полученный раствор перемешивают при кт в течение 24 ч. Затем добавляют йод (10,88 г, 42,9 ммоль), и раствор перемешивают при кт в течение 3 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении, и остаток разделяют между ТБМЭ и водой. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, гептан 100%, с получением продукта 3,4 г (38% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCI3): 1,79-1,96 (м, 2H), 2,08-2,31 (м, 4H), 3,16 (м, 1Н).
Стадия 2. Синтез (циклобутилбута-1,3-диин-1-ил)триметилсилана [1.2b].
В колбу загружают пиперидин (11 мл) и дегазируют. При 0°С добавляют соединение 1а (2,8 г, 13,59 ммоль), затем CuI (0,259 г, 1,359 ммоль) и этинилтриметилсилан (1,468 г, 14,95 ммоль). Смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и при кт в течение 1 ч. Смесь разбавляют ТБМЭ и промывают насыщ. водн. раствором NH4Cl, насыщенным раствором соли и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, гептан 100%, с получением 1,7 г продукта (выход 71%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCI3): 0,12-0,28 (м, 9Н), 1,92 (м, 2Н), 2,09-2,33 (м, 4Н), 3,06 (м, 1Н).
Стадия 3. Синтез ^)-бензил 2-метил-2-(метилсульфонил)пент-4-еноата [1.2с].
В 20-литровую 4-горлую круглодонную колбу, продутую и содержащую инертную атмосферу азота, помещают бензил 2-метансульфонилпропаноат (960 г, 3,96 моль, 1,00 экв.), CH3CN (14,4 л) и Cs2CO3 (2585 г, 7,93 моль, 2,00 экв.). Затем добавляют 3-бромпроп-1-ен (667 г, 5,51 моль, 1,40 экв.) по каплям, при перемешивании при 0°С в течение 30 мин. Полученный раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Твердые вещества отфильтровывают. Твердые вещества промывают EtOAc и органические слои объединяют. Полученную смесь концентрируют в вакууме. Остаток помещают в колонку с силикагелем с этилацетатом/петролейным эфиром (1:15) с получением 860 г продукта (77%). 1H ЯМР (300 МГц, CDCI3): 1,61 (с, 3H), 2,56-2,63 (м, 1Н), 2,97-3,05 (м, 4Н), 5,13-5,28 (м, 4Н), 5,54-5,68 (м, 1Н), 7,34-7,41 (м, 5Н). ЖХМС (m/z): 283 [М+Н]+.
Продукт разделяют хроматографией с псевдодвижужщимся слоем.
Колонка: CHIRALPAK AY-PREP.
Растворитель: гептан/EtOH 50/50.
Поток: 1,0 мл/мин.
Двигатель: Agilent 1200 DAD Magellan.
Первый пик является желаемым энантиомером 1.2с, Ву 6,9 мин. Второй пик является нежелательным энантиомером: Ву 9,6 мин.
Стадия 4. Синтез ^)-бензил 5-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)пентаноата [1.2d].
К раствору 1.2с (10 г, 35,4 ммоль) в ТГФ (38 мл) при 0°С добавляют ВН3ТГФ комплекс (39,0 мл, 1,0 М раствор в ТГФ, 39,0 ммоль), и раствор перемешивают при кт в течение 30 мин. Раствор затем помещают на баню с ледяной водой и добавляют H2O2 (10,85 мл, 30% в воде, 177 ммоль) в течение более 10 мин, сохраняя внутреннюю температуру ниже 10°С. Затем добавляют водн. раствор NaOH (35,4 мл, l,0N, 35,4 ммоль) в течение более 5 мин. После перемешивания при 0°С в течение 30 мин раствор разбавляют EtOAc. Фазы разделяют. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до 100%, с получением 7,2 г продукта (выход 67%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 1,131,70 (м, 4Н), 1,80-2,31 (м, 2Н), 3,01 (с, 3H), 3,62 (м, 2Н), 5,25 (с, 2Н), 7,29-7,44 (м, 5Н). ЖХМС (m/z): 301,3 [М+Н]+.
Стадия 5. Синтез ^)-бензил 2-метил-2-(метилсульфонил)-5-оксопентаноата [1.2е].
К раствору оксалилхлорида (2,62 мл, 30,0 ммоль) в ДХМ (82 мл) при -78°С добавляют ДМСО (4,25 мл, 59,9 ммоль). Через 10 мин добавляют раствор 1.2d (7,5 г, 24,97 ммоль) в ДХМ (5 мл), и полученный раствор перемешивают при -78°С в течение 20 мин. Затем добавляют ТЭА (13,92 мл, 100 ммоль) и смесь перемешивают при -78°С в течение 10 мин, затем медленно нагревают до 0°С. Реакционную смесь затем гасят добавлением насыщ. водн. раствора NH4Cl. Фазы разделяют, и водный слой экстрагируют ДХМ. Объединенный органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над MgSO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до 60%, с получением 5,3 г продукта (выход 71%). ЖХМС (m/z): 299,3 [М+Н]+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 1,62 (с, 3H), 2,23-2,39 (м, 1H), 2,43-2,55 (м, 2H), 2,58-2,70 (м, 1H), 2,99 (с, 3H), 5,15-5,34 (м, 2Н), 7,30-7,50 (м, 6Н) 9,71 (с, 1Н).
Стадия 6. Синтез ^)-бензил 5-(гидроксиимино)-2-метил-2-(метилсульфонил)пентаноата [1.2f].
NaHCO3 (1,6 г, 19,5 ммоль) добавляют к раствору гидрохлорида гидроксиламина (1,36 г, 19,5 ммоль) в воде (30,0 мл). После перемешивания при кт в течение 10 мин добавляют раствор 1.2d (5,3 г, 17,7 ммоль) в EtOH (30 мл), и полученный раствор перемешивают при кт в течение 18 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении, и оставшийся продукт экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над MgSO4 и концентрируют. Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей очистки. ЖХМС (m/z): 314,5 [М+Н]+.
Стадия 7. Синтез (R)-4-(5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсуль-фонил) бутанамид а [1.2]
Соединение 1.2 синтезируют из соединения 1.2b и 1.2f способом из примера 1.1, стадия 2-6. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО^): 10,98 (с, 1Н), 9,24 (с, 1Н), 6,77 (с, 1Н), 3,46-3,38 (м, 1Н), 3,06 (с, 3H), 2,70-2,76 (м, 1Н), 2,43-2,57 (м, 2Н), 2,30-2,35 (м, 2Н), 2,22-2,12 (м, 2Н), 2,06-1,88 (м, 3H), 1,51 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 341,3 [М+Н]+.
I.3. Синтез ^)-4-(5-(3,3-диметилбут-1 -ин-1 -ил)изоксазол-3-ил)-№гидрокси-2-метил-2-
Соединение 1.3 синтезируют по методике примера 1.2.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО^): 1,31 (с, 9Н), 1,51 (с, 3H), 1,84-2,10 (м, 1Н), 2,36-2,58 (м, 2Н), 2,67-2,80 (м, 1Н), 3,34 (с, 3H), 6,76 (с, 1Н), 9,12-9,31 (м, 1Н), 10,89-11,04 (м, 1Н). ЖХМС (m/z): 343,3 [М+Н]+.
(метилсульфонил)бутанамида [1.3]
I.4. Синтез ил)бутанамида [1.4]
(R)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(проп-1-ин-1-ил)изоксазол-3-
Соединение 1.4 синтезируют по методике примера 1.1, способ В. Промежуточный триметил(пента-1,3-диин-1-ил)силан синтезируют, как описано в Tetrahedron Lett. 1980, 21, 3111. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО): 1,49 (с, 3H), 1,93-2,03 (м, 1Н), 2,15 (с, 3Н), 2,39-2,45 (м, 1Н), 2,51-2,55 (м, 1Н), 2,64-2,78 (м, 1Н); 3,03 (с, 3Н), 6,45-7,09 (м, 1Н), 8,96-9,65 (м, 1Н), 10,75-11,32 (м, 1Н). ЖХМС (m/z): 300, 1 [М+Н]+.
I.5. Синтез ^)-4-(5-(бут-1 -ин-1 -ил)изоксазол-3 -ил)^-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [1.5]
Соединение 1.5 синтезируют по методике примера 1.1, способ В. Промежуточный гекса-1,3-диин-1-илтриметилсилан синтезируют, как описано в Tetrahedron Lett. 1980, 21, 3111. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 1,20-1,24 (т, 3H), 1,60 (с, 3H), 2,07-2,10 (м, 2H), 2,44-2,52 (м, 1H), 2,60-2,701, 90-2,11 (м, 2H), 2,78-2,83 (м, 1H), 3,03 (с, 3Н), 6,42 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 315,2 [М+Н]+.
I.6. Синтез (R)-N-гидрокси-2-метил-4-(5-(3-метилбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [1.6]
Соединение 1.6 синтезируют по методике примера 1.1, способ В. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^6): 1,11-1,25 (м, 6Н), 1,40-1,55 (м, 3Н), 1,88-2,09 (м, 1H), 2,37-2,58 (м, 4H), 2,63-2,80 (м, 1H), 2,82-2,96 (м, 1H), 3,03 (с, 3Н), 6,73 (с, 1Н), 10,93 (шс, 1Н). ЖХМС (m/z): 329,3 [М+Н]+.
I.7. Синтез да^-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил) -4-(5-(пент-1 -ин-1 -ил)изоксазол-3 -ил)бутанамида [1.7]
Соединение 1.7 синтезируют по методике примера 1.1, способ В. Промежуточный гепта-1,3-диин-1-илтриметилсилан синтезируют, как описано в Tetrahedron 2004, 60, 11421.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО^): 1,00 (т, J=7,39 Гц, 4Н), 1,46-1,55 (м, 4Н), 1,55-1,65 (м, 3H), 2,03 (с, 1H), 2,37-2,50 (м, 1H), 2,59-2,68 (м, 1H), 2,68-2,81 (м, 1H), 3,07 (с, 2H), 6,69-6,84 (м, 1Н). ЖХМС (m/z):
329,2 [М+Н]+.
I.8. Синтез (R)-N-гидрокси-2-метил-4-(5-((1-метилциклопропил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.8]
Стадия 1. Синтез триметил((1-метилциклопропил)бута-1,3-диин-1-ил)силана [1.8а].
К раствору (циклопропилбута-1,3-диин-1-ил)триметилсилана (600 мг, 3,70 ммоль) в Et2O (5 мл) добавляют по каплям BuLi (1,479 мл, 3,70 ммоль) при 0°C, и реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 6 ч. Затем по каплям добавляют диметилсульфат (0,883 мл, 9,24 ммоль) при -10°C, полученный раствор перемешивают при 10°С и затем при 20°С в течение 30 мин каждый. Реакцию гасят добавлением насыщ. водн. раствора NH4Cl, и смесь затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1 ч. Водную фазу экстрагируют диэтиловым эфиром (20 мл), и объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли (10 мл) и Н2О (10 мл), сушат (MgSO4) и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем,
гептан 100%, с получением продукта. (470 мг, 72,1% выход).
Стадия 2. Синтез 1-(бута-1,3-диин-1-ил)-1-метилциклопропана [1.8b].
К триметил((1-метилциклопропил)бута-1,3-диин-1-ил)силану (200 мг, 1,134 ммоль) добавляют ТГФ (1 мл), MeOH (0,5 мл), затем NaOH (0,681 мл, 3,40 ммоль). Полученную смесь перемешивают в течение 2 ч. Смесь разбавляют 3 мл ДХМ, сушат над Na2SO4, фильтруют и отфильтрованный раствор применяют сразу же на следующей стадии.
Стадия 3. Синтез (R)-N-гидрокси-2-метил-4-(5-((1-метилциклопропил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.8].
Соединение 1.8 синтезируют по методике примера 1.1, способ В. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОч16): 0,70-1,09 (м, 5Н), 1,21-1,57 (м, 7Н), 1,88-2,11 (м, 1H), 2,34-2,56 (м, 3H), 2,59-2,80 (м, 1H), 2,93-3,10 (м, 3Н), 6,59-6,84 (м, 1Н), 10,93 (шс, 1Н). ЖХМС (m/z): 341,2 [М+Н]+.
I.9. Синтез (R)-4-(5-(5-фторбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [1.9]
Соединение 1.9 синтезируют по методике примера 1.2. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d^): 10,95 (с, 1Н), 9,22 (с, 1Н), 6,81 (с, 1Н), 4,60 (дт, J=46,8, 5,8 Гц, 2Н), 3,05 (с, 3H), 3,05-2,92 (м, 2Н), 2,79-2,64 (м, 1Н), 2,51-2,39 (м, 2Н), 2,15-1,93 (м, 1Н), 1,51 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 333,1 [М+Н]+.
I.10. Синтез ^)-4-(5-(5-фторпент-1 -ин-1 -ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [1.10].
Стадия 1. Синтез (2R)-4-(5-(5-гидроксипент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфо-нил)^-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)бутанамида [1.10а]
Соединение 1.10а синтезируют из пент-4-ин-1-ола по методике примера 1.1. ЖХМС (m/z): 345,2 [М+Н-ТНР]+.
Стадия 2. Синтез (2R)-4-(5-(5-фторпент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)-N-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)бутанамида [1.10b]
К перемешиваемому раствору 1.10а (80 мг, 0,19 ммоль) при 0°С в ДХМ (2 мл) добавляют DAST (0,05 мл, 0,37 ммоль). После завершения реакции (1,5 ч) смесь разбавляют ДХМ и промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан, от 40 до 100%) с получением продукта 1.10b (11,5 мг, выход 14%). ЖХМС (m/z): 347,2 [М-ТНР+Н]+.
Стадия 3. ^)-4-(5-(5-Фторпент-1 -ин-1 -ил)изоксазол-3-ил)^-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [1.10]
Соединение 1.10 синтезируют из соединения 1.10b по методике примера 1.1, стадия 6. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^): 10,95 (с, 1Н), 9,21 (с, 1Н), 6,78 (с, 1Н), 4,54 (дт, J=47,3, 5,8 Гц, 2Н), 3,05 (с, 3H), 2,75-2,67 (м, 1Н), 2,64 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 2,52-2,43 (м, 2Н), 2,05-1,88 (м, 3H), 1,51 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 347,2
[М+Н]+.
Синтез соединения 1.11
Стадия 1. Синтез ^)-бензил 4-(5-(5-гидроксипент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [1.11а].
Соединение 1.11а синтезируют из пент-4-ин-1-ола по методике примера 1.1. ЖХМС (m/z): 420,1 [М+Н]+.
Стадия 2. Синтез ^)-бензил 2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(5-оксопент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)бутаноата [1.11b].
К раствору соединения 1.11а (100 мг, 0,238 ммоль) в ДХМ (0,9 мл) при 0°С добавляют ДИПЭА (0,200 мл, 1,14 ммоль), затем раствор PySO3 (114 мг, 0,715 ммоль) в ДМСО (0,3 мл). Раствор перемешивают при 0°С в течение 30 мин и затем гасят добавлением насыщенного водного раствора NH4Cl. Смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические фазы промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан от 40 до 90%) с получением продукта (73 мг, 73,4% выход). ЖХМС (m/z): 418,3 [М+Н]+.
Стадия 3. Синтез ^)-бензил 4-(5-(5,5-дифторпент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [1.11с]
К раствору соединения 1.11b (73 мг, 0,175 ммоль) в ДХМ (0,6 мл) добавляют DAST (0,069 мл, 0,525 ммоль) при температуре окружающей среды, и полученный раствор перемешивают в течение 1 ч. Реакцию гасят добавлением насыщенного водного NaHCO3, и смесь экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан, 10-70%) с получением продукта (67 мг, 87% выход).
ЖХМС (m/z): 440,3 [М+Н]+.
Стадия 4. Синтез (R)-4-(5-(5,5-дифторпент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.11]
Соединение 1.11 синтезируют из соединения 1.11с по методике примера 1.1, стадии 4-6. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 6,54 (с, 1H), 5,86-6,22 (м, 1H), 3,08 (с, 3H), 2,78-2,90 (м, 1H), 2,58-2,77 (м, 4H), 2,092,29 (м, 3H), 1,65 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 365,2 [М+Н]+.
1.12. Синтез (R)-4-(5-((3,3-дифторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.12]
Стадия 1. Синтез (3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)циклобутил)метанола [1.12а]. Раствор LiAiH4 в ТГФ (77 мл, 1,0 М в ТГФ, 1,1 экв. ) добавляют по каплям к раствору метил 3-
((трет-бутилдиметилсилил)окси)циклобутан-1-карбоксилата (17 г, 69,6 ммоль) в ТГФ (139 мл) при 0°C, и
полученный раствор перемешивают при кт в течение 2 ч. Реакционную смесь затем охлаждают на бане с
ледяной водой и гасят добавлением насыщ. водн. раствора Na2SO4 (10 мл). Затем перемешивают при кт в течение 30 мин, смесь фильтруют, и фильтрат концентрируют. Остаток растворяют в EtOAc и сушат над MgSO4 и концентрируют. Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей очи-
стки.
Стадия 2. Синтез 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)циклобутан-1-карбальдегида [1.12b].
К раствору оксалилхлорида (5,8 мл, 66,5 ммоль, 1,2 экв.) в ДХМ (165 мл) при -78°С добавляют ДМСО (9,4 мл, 133 ммоль, 2,4 экв.). После перемешивания в течение 10 мин добавляют раствор (3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)циклобутил)метанола (12 г, 55,5 ммоль) в ДХМ (20 мл), и полученный раствор перемешивают при -78°С в течение 20 мин. Добавляют ТЭА (23 мл, 166 ммоль, 3,0 экв.) и смесь перемешивают при -78°С в течение 10 мин, затем медленно нагревают до 0°С. Реакцию гасят добавлением насыщ. водн. раствора NH4Cl. Фазы разделяют, и водный слой экстрагируют ДХМ. Объединенный органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над MgSO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до 20%, с получением 5,2 г продукта (44% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): -0,2 (с, 6Н), 0,8 (с, 9Н), 1,94-2,27 (м, 2Н), 2,48-2,65 (м, 2Н), 2,93-3,15 (м, 1Н), 4,17-4,50 (м, 1Н), 9,8 (с, 1Н).
Стадия 3. Синтез трет-бутил(3-этинилциклобутокси)диметилсилана [1.12с].
К раствору 3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)циклобутан-1-карбальдегида (5,2 г, 24,2 ммоль, 1,0 экв.) и диметил (1-диазо-2-оксопропил)фосфоната (10,10 г, 48,5 ммоль, 2,0 экв.) в MeOH (81 мл) при 0°С добавляют K2CO3 (10,06 г, 72,8 ммоль, 3,0 экв.) и полученную смесь перемешивают при кт в течение 18 ч. Смесь фильтруют, и фильтрат концентрируют. Остаток растворяют в EtOAc и промывают водой, насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до 10%, с получением 4,0 г продукта (78 выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDO3): 0,04 (с, 6Н), 0,88 (с, 9Н), 2,1 (с, 1Н), 2,18-2,51 (м, 4H), 2,80-3,04 (м, 1H), 4,30-4,73 (м, 1Н).
Стадия 4. Синтез бензил (R)-4-(5-((3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)циклобутил)эти-нил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [1.12d]
Соединение 1.12d синтезируют из соединения 1.12с по методике примера 1,1, способ В. ЖХМС (m/z): 347,4 [М+Н]+.
Стадия 5. Синтез бензил (R)-4-(5-((3-гидроксициклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [1.12е].
Раствор ФТБА (1,0 М в ТГФ, 4,4 мл, 4,4 ммоль, 1,5 экв.) добавляют к раствору бензил (R)-4-(5-((3-((трет-бутилдиметилсилил)окси)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бута-ноата (1,6 г, 2,93 ммоль, 1,0 экв.) в ТГФ (5,8 мл) при кт, и полученный раствор перемешивают при кт в течение 30 мин. Смесь затем загружают непосредственно в силикагель и промывают ацетоном/гептаном, от 0 до 60%, с получением 0,86 г продукта (68% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 1,69 (с, 3H), 2,24-2,42 (м, 3H), 2,51-2,66 (м, 4Н), 2,72-2,85, (м, 1Н), 2,96 (с, 3H), 3,18-3,35 (м, 1Н), 4,46-4,74 (м, 1Н), 5,23 (м, 2Н), 6,14 (с, 1Н), 7,30-7,43 (м, 5Н). ЖХМС (m/z): 432,6 [М+Н]+.
Стадия 6. Синтез бензил ^)-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-((3-оксоциклобу-тил)этинил)изоксазол-3-ил)бутаноата [ 1.12f]
К раствору бензил (R)-4-(5-((3-гидроксициклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата (230 мг, 0,533 ммоль, 1,0 экв.) в ДХМ (2,0 мл) при 0°С добавляют ДИПЭА (0,465 мл, 2,67 ммоль, 5,0 экв.) и раствор триоксида пиридинсеры (255 мг, 1,6 ммоль, 3,0 экв.) в ДМСО (0,6 мл). После перемешивания при кт в течение 30 мин реакцию гасят добавлением насыщ. водн. раствора NaHCO3 и затем экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, ацетон/гептан от 0 до 50%, с получением 200 мг продукта (выход 87%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 1,70 (с, 3H), 2,26-2,40 (м, 1Н), 2,55-2,68 (м, 2Н), 2,78-2,87 (м, 1Н), 2,96 (с, 3H), 3,29-3,68 (м, 5Н), 5,24 (д, J=0,78 Гц, 2Н), 6,20 (с, 1Н), 7,38 (с, 5Н). ЖХМС (m/z): 430,3 [М+Н]+.
Стадия 7. Синтез бензил (R)-4-(5-((3,3-дифторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [ 1.12g]
К раствору бензил (R)-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-((3-оксоциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)бутаноата (170 мг, 0,396 ммоль) в ДХМ (1,3 мл) при кт добавляют DAST (0,157 мл, 1,187 ммоль, 3,0 экв.), и полученный раствор перемешивают при кт в течение 18 ч. Реакцию гасят добавлением насыщ. водн. раствора NaHCO3 и затем экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, ацетон/гептан от 0 до 60%, с получением 140 мг продукта (78% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 1,70 (с, 3Н), 2,23-2,41 (м, 1Н), 2,54-2,68 (м, 2Н), 2,74-2,88 (м, 3Н), 2,96 (с, 3Н), 2,99-3,06 (м, 2Н); 3,11-3,27 (м, 1Н); 5,12-5,43 (м, 2Н); 6,19 (с, 1Н); 7,37 (м, 5Н). ЖХМС (m/z): 452,0 [М+Н]+.
Стадия 8. Синтез (R)-4-(5-((3,3-дифторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.12]
Соединение 1.12 синтезируют по методике примера 1.1, стадии 4-6. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО): 1,49 (с, 3H); 1,94-2,04 (м, 1Н), 2,4-2,51 (м, 1Н), 2,63-2,84 (м, 4Н); 3,03 (с, 3H); 3,05-3,14 (м, 2Н); 3,34-3,47 (м, 1Н); 5,53-5,95 (м, 1Н); 6,63-6,94 (м, 1Н), 8,98-9,56 (м, 1Н). ЖХМС (m/z): 377,5 [М+Н]+.
I.13. Синтез (R)-4-(5-((3-фторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метил-сульфонил)бутанамида [1.13]
Стадия 1. ^)-Бензил 4-(5-((3-фторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутаноата [1.13а].
К раствору 1.12е (55 мг, 0,13 ммоль) в ДХМ (1,2 мл) добавляют DeoxoFluor, 50% в толуоле (0,11 мл, 0,26 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, нагревая до температуры окружающей среды. Добавляют еще DeoxoFluor, 50% в толуоле (0,11 мл, 0,26 ммоль), и реакционную смесь перемешивают в течение 24 ч. Реакцию гасят этанолом (0,149 мл, 2,55 ммоль), затем водным pH 7 фосфатным буфером и экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией над силикагелем (EtOAc/гептан) с получением 16 мг продукта (29,0% выход). ЖХМС (m/z): 434,3
[М+Н]+.
Стадия 2. (R)-4-(5-((3-Фторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсуль-фонил)бутанамида [1.13]
Соединение 1.13 получают по методике примера 1.1, стадии 4-6. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD):
ЖХМС (m/z): 359,3 [М+Н]+.
1. 14. Синтез (R)-N-гидрокси-4-(5-(5-гидрокси-5-метилгекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.14]
Стадия 1. Синтез 6-(триметилсилил)гекс-5-ин-2-она [1.14а].
К перемешиваемому раствору димера дихлор(р-кумен)рутения(П) (0,919 г, 1,50 ммоль) в бензоле (150 мл) добавляют пирролидин (0,496 мл, 6,00 ммоль) и смесь затем перемешивают в течение 30 мин при температуре окружающей среды. Добавляют TMS-ацетилен (4,24 мл, 30,0 ммоль) и метилвинилке-тон (7,38 мл, 90,0 ммоль). После перемешивания при 60°С в течение 22 ч смесь охлаждают при кт и фильтруют. Фильтрат концентрируют и очищают хроматографией на силикагеле (диэтиловый эфир/пентан, 0-50%) с получением 1,47 г продукта (29,1% выход). ЖХМС (m/z): 286,2 [М+Н+Н2О]+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 2,62-2,73 (м, 2H), 2,42-2,53 (м, 2H), 2,17 (с, 3H) 0,13 (с, 9Н).
Стадия 2. Синтез 2-Метил-6-(триметилсилил)гекс-5-ин-2-ола [1.14b].
Бромид метилмагния (1,4 М в 1:3 ТГФ/толуоле, 9,36 мл, 13,1 ммоль) добавляют по каплям к раствору 1.14а (1,47 г, 8,73 ммоль) в ТГФ (40 мл) при 0°C, и полученный раствор перемешивают при 0°С в течение 1 ч. Реакцию гасят насыщенным водным NH4Cl и экстрагируют EtOAc. Объединенные органиче-
ские фазы промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют с получением
1,61 г продукта (100% выход). Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей
очистки. ЖХМС (m/z): 185,2 [М+Н]+.
Стадия 3. Синтез 2-Метилгекс-5-ин-2-ола [1.14с].
Раствор 1.14b (1,61 г, 8,73 ммоль) в метаноле (50 мл) обрабатывают карбонатом калия (3,62 г, 2 6,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре окружающей среды. Реакционную смесь разбавляют ДХМ (100 мл), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают флэш-хроматографией на колонке с силикагелем, гептан/EtOAc 0-60%, с получением продукта (0,64 г, 53% выход). ЖХМС (m/z): 113,1 [М+Н]+. 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 5 ч./млн. 2,31 (тд, J=7,75, 2,69 Гц, 1Н), 1,97 (т, J=2,67 Гц, 1Н), 1,70-1,79 (м, 2Н), 1,24 (с, 6Н).
Стадия 4. Синтез 2-Метил-8-(триметилсилил)окта-5,7-диин-2-ола [1.14d].
К раствору 1.14с (0,502 г, 4,48 ммоль) в пиперидине (3,8 мл) при 0°С добавляют (бромэти-нил)триметилсилан (0,872 г, 4,92 ммоль) и CuI (0,085 г, 0,448 ммоль). Раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 2,5 ч. Реакцию гасят добавлением насыщенного водного раствора NH4Cl и затем экстрагируют EtOAc. Объединенные органические слои промывают последовательно водой и насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан от 0 до 50%) с получением 395
мг продукта (42,4% выход). ЖХМС (m/z): 209,2 [М+Н]+.
Стадия 5. Синтез (R)-N-гидрокси-4-(5-(5-гидрокси-5-метилгекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.14]
Соединение 1.14 синтезируют из соединения 1.14d по методике примера 1.1, способ В. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 ч./млн. 6,45 (с, 1H), 3,06 (с, 3H), 2,73-2,88 (м, 1H), 2,52-2,72 (м, 4H), 2,09-2,23 (м, 1Н), 1,74-1,85 (м, 2Н), 1,62 (с, 3H), 1,23 (с, 6Н). ЖХМС (m/z): 373,3 [М+Н]+.
1.15. Синтез (R)-N-гидрокси-4-(5-((3-(метоксиметил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.15]
I. I J
Стадия 1. Синтез метил 3-оксоциклобутанкарбоксилата [1.15а].
К раствору оксалилхлорида (5,25 мл, 60,0 ммоль) в ДХМ (200 мл) при -78°С добавляют ДМСО (7,10 мл, 100 ммоль). Через 30 мин добавляют раствор метил 3-гидроксициклобутанкарбоксилата (6,51 г, 50 ммоль) в метиленхлориде (50 мл). Смесь перемешивают в течение 30 мин при -78°С и затем добавляют ТЭА (27,9 мл, 200 ммоль). Смесь нагревают до комнатной температуры в течение более 2 ч. К реакцион
ной смеси затем добавляют воду и слои разделяют. Органическую фазу промывают водой, сушат над Na2SO4 и концентрируют с получением продукта (количественный выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 3,14-3,32 (м, 3H), 3,32-3,46 (м, 2H), 3,73 (с, 3H).
Стадия 2. Синтез метил 3-(метоксиметилен)циклобутанкарбоксилата [1.15b].
Смесь бромида (метоксиметил)трифенилфосфина (16,02 г, 46,8 ммоль) и ТГФ (100 мл) помещают в баню лед/вода и добавляют трет-бутоксид калия (5,25 г, 46,8 ммоль). Смесь затем перемешивают в течение 15 мин при 0°С и в течение 90 мин при кт. Смесь охлаждают до 0°С и добавляют метил 3-оксоциклобутанкарбоксилат (3 г, 23,41 ммоль) в виде раствора в ТГФ (5мл). Полученную смесь перемешивают при кт в течение 3 ч, затем в течение еще 3 ч при 70°С. Смесь разбавляют EtOAc и промывают водой. Органический слой отделяют и сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем, (EtOAc/гептан, от 0 до 80%) с получением 1,2 г продукта (32,8% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 2,76-2,91 (м, 2H), 2,91-3,01 (м, 2H), 3,07-3,24 (м, 1H), 3,47-3,58 (м, 3H), 3,63-3,74 (м, 4H), 5,80 (квин., J=2,29 Гц, 1Н).
Стадия 3. Синтез метил 3-формилциклобутанкарбоксилата [1.15с].
К раствору метил 3-(метоксиметилен)циклобутанкарбоксилата (750 мг, 4,80 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляют ТФК (0,740 мл, 9,60 ммоль) и воду (2,2 мл). Полученную смесь перемешивают при кт в течение 3 ч. Фазы разделяют и водный слой экстрагируют ДХМ. Органические слои объединяют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан от 5 до 50%) с получением 640 мг продукта (94% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 2,28-2,66 (м, 4H), 2,953,38 (м, 2H), 3,57-3,81 (м, 3H) 9,49-10,11 (м, 1Н)
Стадия 4. Синтез метил 3-этинилциклобутанкарбоксилата [1.15d].
К раствору метил 3-формилциклобутанкарбоксилата (640 мг, 4,50 ммоль) в MeOH (14 мл) при 0°С добавляют диметил (1-диазо-2-оксопропил)фосфонат (1,107 мл, 7,20 ммоль) и карбонат калия (1244 мг, 9,00 ммоль). Смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и затем при кт в течение 3 ч. Смесь разбавляют EtOAc, промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан) с получением 350 мг продукта (56,3% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 2,07-2,26 (м, 1H), 2,30-2,67 (м, 4H), 2,82-3,06 (м, 1H), 3,06-3,35 (м, 1H), 3,63-3,71 (м, 3H).
Стадия 5. Синтез (3-этинилциклобутил)метанола [1.15е].
К раствору метил 3-этинилциклобутанкарбоксилата (377 мг, 2,73 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°С добавляют LiAlH4 (2,73 мл, 2,73 ммоль), и смесь перемешивают при 0°С в течение 2 ч. Реакцию затем гасят добавлением воды (0,45 мл) и раствора NaOH (0,115 мл, 5,0 М в воде, 0,573 ммоль). После перемешивания в течение 5 мин смесь обрабатывают Na2SO4, затем фильтруют через целит. Фильтрат концентрируют с получением продукта (290 мг, 96% выход). Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей очистки.
Стадия 6. Синтез 1-этинил-3-(метоксиметил)циклобутана [1.15f]
Раствор (3-этинилциклобутил)метанола (200 мг, 1,816 ммоль) и MeI (0,227 мл, 3,63 ммоль) в ТГФ (4 мл) добавляют по каплям к суспензии NaH (116 мг, 2,91 ммоль) в ТГФ (5 мл) при 0°С. После перемешивания при кт в течение 3 ч реакцию гасят добавлением воды (0,1 мл). Смесь затем сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без дальнейшей очистки. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 1,87-1,96 (м, 1H), 2,01-2,30 (м, 2H), 2,33-2,54 (м, 2H), 2,82-3,11 (м, 1H), 3,24-3,44
(м, 5Н)
Стадия 7. Синтез (3-(метоксиметил)циклобутил)бута-1,3-диин-1-ил)триметилсилана [1.15g].
К раствору 1-этинил-3-(метоксиметил)циклобутана (226 мг, 1,8 ммоль) в ТГФ (0,3 мл) при 0°С добавляют CuI (34,7 мг, 0,18 ммоль), пиперидин (2 мл) и (йодэтинил)триметилсилан (0,307 мл, 2,0 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 30 мин и затем при кт в течение 3 ч. К смеси затем добавляют насыщ. водн. раствор NH4Cl и ТБМЭ. Органическую фазу промывают водой и насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан, от 0 до 10%) с получением 215 мг продукта (53,6% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 0,18 (с, 9Н), 1,91 (д, J=9,39 Гц, 2H), 2,01-2,30 (м, 2H), 2,30-2,54 (м, 2H), 3,31 (шс,
5Н).
Стадия 8. Синтез 1-(бута-1,3-диин-1-ил)-3-(метоксиметил)циклобутана [1.15h].
К раствору ((3-(метоксиметил)циклобутил)бута-1,3-диин-1-ил)триметилсилана (215 мг, 0,976 ммоль) в ТГФ/MeOH (4,5 мл, 2/1) добавляют NaOH (5,0 М в воде, 0,585 мл, 2,93 ммоль), и полученную смесь перемешивают при кт в течение 2 ч. Смесь разбавляют ДХМ, сушат над Na2SO4 и концентрируют с получением 145 мг продукта (100% выход). Неочищенный продукт применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки.
К раствору 1-(бута-1,3-диин-1-ил)-3-(метоксиметил)циклобутана (142 мг, 0,957 ммоль) и (R,E)-бензил 5-(гидроксиимино)-2-метил-2-(метилсульфонил)пентаноата (200 мг, 0,638 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляют NaClO2 (0,5 М в воде, 2,57 мл, 1,276 ммоль), и смесь перемешивают при кт в течение 3 ч. Смесь затем разбавляют ДХМ, промывают водой, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан, от 10 до 80%) с получением 81 мг продукта (27,6% выход). ЖХ-МС (m/z): 460,3 [М+Н]+.
Стадия 10. Синтез (R)-N-гидрокси-4-(5-((3-(метоксиметил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.15-1 и 1.15-2]
К раствору ^)-бензил 4-(5-((3-(метоксиметил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата (80 мг, 0,174 ммоль) в ТГФ/MeOH (2,0 мл, 1/1) добавляют NH2OH (50% в воде, 0,460 мл) и NaOH (27,9 мг, 0,696 ммоль). Полученный раствор перемешивают при 25°С в течение 1 ч и затем разбавляют ДМСО (3,0 мл). Смесь помещают на баню с ледяной водой и нейтрализуют 5,0N водн. раствор HCl. Растворитель затем удаляют, и оставшийся продукт очищают на ВЭЖХ с обращенной фазой с получением продукта в виде двух разделенных изомеров, 1.15-1 (5,0 мг, 7,10% выход) и 1.15-2 (2 мг, 2,84% выход).
1.15-1: 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 1,53-1,64 (м, 3H), 1,98-2,05 (м, 1H), 2,09-2,24 (м, 1H), 2,38-2,49 (м, 3H), 2,49-2,66 (м, 5H), 2,69-2,85 (м, 3H), 2,95-3,03 (м, 3H), 3,29 (с, 3H), 3,34 (д, J=5,92 Гц, 2H), 6,35-6,49 (м, 1Н). ЖХМС (m/z): 385,2 [М+Н]+.
1.15-2: 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 1,59 (д, J=6,50 Гц, 3H), 2,08-2,36 (м, 4H), 2,60-2,85 (м, 6H), 2,923,02 (м, 4H), 3,27-3,35 (м, 3H), 3,40 (д, J=6,70 Гц, 2H), 6,28-6,51 (м, 1Н). ЖХМС (m/z): 385,2 [М+Н]+.
1.16. Синтез (R)-N-гидрокси-4-(5-((3-(2-гидроксипропан-2-ил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.16]
Стадия 1. Синтез 2-(3-(гидроксиметил)циклобутил)пропан-2ола [1.16а].
К раствору метил 3-(гидроксиметил)циклобутан-1-карбоксилата (1,5 г, 10,4 ммоль) при 0°С в ТГФ (50 мл) добавляют бромид метилмагния (27,7 мл, 1,5 М раствор, 41,6 ммоль), и полученную смесь перемешивают при кт в течение 1 ч. Реакционную смесь помещают на баню с ледяной водой и гасят добавлением насыщ. водн. раствора NH4Cl и EtOAc. Фазы разделяют, и водный слой экстрагируют EtOAc. Органические слои объединяют, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан, от 20 до 100%, с получением 1,16 г продукта (77% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDO3): 3,69 (д, J=7,3 Гц, 1H, 1 изомер), 3,56 (д, J=5,8 Гц, 1H, 1 изомер), 2,45-2,17 (м, 2Н), 2,12-1,92 (м, 2Н), 1,77-1,65 (м, 2Н), 1,13 (с, 3H), 1,10 (с, 3H).
Стадия 2. Синтез 3-(2-гидроксипропан-2-ил)циклобутан-1-карбальдегида [1.16b].
К раствору оксалилхлорида (0,84 мл, 9,6 ммоль) в ДХМ (30 мл) при -78°С добавляют ДМСО (1,36 мл, 19,1 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин добавляют раствор 1.16а (1,15 г, 7,97 ммоль) в ДХМ (10 мл), и полученный раствор перемешивают при -78°С в течение 20 мин. Затем добавляют Et3N (4,45 мл, 31,9 ммоль) и смесь перемешивают при -78°С в течение 10 мин, затем медленно нагревают до 0°С. К смеси затем добавляют насыщ. водн. раствор NH4Cl. Фазы разделяют, и водный слой экстрагируют ДХМ. Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат над MgSO4 и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до
50%, с получением 525 мг продукта (46% выход) в виде смесей цис/транс изомеров. 1H ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) 9,84 (д, J=1,7 Гц, 1H, 1 изомер), 9,66 (с, 1H, 1 изомер), 3,04-2,87 (м, 1Н), 2,42-2,31 (м, 1Н), 2,31-1,98 (м, 4Н), 1,12 (д, J=7,5 Гц, 6Н).
Стадия 3. Синтез 2-(3-этинилциклобутил)пропан-2-ола [1.16с].
К раствору 1.16b (168 мг, 1,18 ммоль) в MeOH (8 мл) при 0°С последовательно добавляют реагент Охира Бестманн (340 мг, 1,77 ммоль) и карбонат калия (327 мг, 2,36 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивают при кт в течение 2 ч. К реакционной смеси затем добавляют воду и Et2O. Фазы разделяют, и водный слой дважды экстрагируют Et2O. Органические слои промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 0 до 20%, с получением 138 мг продукта (85% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 2,93-2,85 (м, 0,5Н), 2,83-2,73 (м, 0,5Н), 2,67-2,53 (м, 0,5Н), 2,33-2,20 (м, 2,5Н), 2,16 (д, J=2,4 Гц, 0,5Н), 2,13 (д, J=2,3 Гц, 0,5Н), 2,08-2,00 (м, 2Н), 1,12 (с, 3H), 1,10 (с, 3H).
Стадия 4. Синтез (R)-N-гидрокси-4-(5-((3-(2-гидроксипропан-2-ил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [1.16]
Соединение 1.16 синтезируют из соединения 1.16с по методике примера 1.1, способ В. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^): 5 10,95 (с, 1Н), 6,74 (с, 1Н), 3,11-3,00 (м, 1Н), 3,05 (с, 3H), 2,77-2,67 (м, 1Н), 2,51-2,38 (м, 2Н), 2,24-1,95 (м, 6Н), 1,50 (с, 3H), 0,96 (с, 6Н). ЖХМС (m/z): 399,2 [М+Н]+.
Синтез N-гидрокси-4-(5-((4-(гидроксиметил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [2.1]
Стадия 1. Синтез бута-1,3-диин-1-илтриметилсилана [2.1а].
К охлажденному на ледяной бане раствору 1,4-бис-(триметилсилил)бута-1,3-диина (12,5 г, 64,3 ммоль) в диэтиловом эфире (400 мл) в инертной атмосфере добавляют через канюлю комплекс метилли-тий-бромид лития (1,5 М в простом эфире, 100 мл, 150 ммоль). Раствор перемешивают в течение 3,5 ч при температуре окружающей среды. Раствор охлаждают на бане с ледяной водой и гасят добавлением по каплям метанола (6,06 мл, 150 ммоль). Смесь промывают последовательно насыщенным водным раствором NH4Cl и насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом магния, фильтруют и частично концентрируют с получением продукта 2.1а (26 г приблизительно 23 мас.%раствор в простом эфире). 1H ЯМР (400 МГц, CDO3): 2,10 (с, 1Н), 0,20 (с, 9Н).
Стадия 2. Синтез этил 4-(5-этинилизоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [2.1b].
К раствору 1.1b (4,3 г, 15 ммоль) в MeOH (4 мл) и ДХМ (12 мл) добавляют неочищенный эфирный раствор соединения 2.1а (12 мл, 17 ммоль). Затем добавляют триэтиламин (4,2 мл, 30 ммоль) по каплям в течение более 30 мин и смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют водой (30 мл) и экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт выдерживают при температуре окружающей среды в течение ночи, позволяя отщепить TMS группу. Остаток затем очищают хроматографией на колонке с силикагелем, гептан/EtOAc 20-70%, с получением продукта 2.1b (1,8 г, 41%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 6,39 (с, 1Н), 4,28 (кв, J=7,16 Гц, 2H), 3,61 (с, 1H), 3,06 (с, 3H), 2,81-2,94 (м, 1H), 2,66-2,78 (м, 1H), 2,60 (ддд, J=13,52, 11,30, 5,26 Гц, 1Н), 2,33 (ддд, J=13,52, 11,40, 5,16 Гц, 1Н), 1,69 (с, 3H), 1,33 (т, J=7,14 Гц, 3H). ЖХМС (m/z): 300,0 [М+Н]+.
Стадия 3. Синтез этил 4-(5-(бромэтинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата
[2.1с]
Бром (0,114 мл, 2,21 ммоль) добавляют по каплям к 3,0 М водному гидроксиду натрия (1,67 мл, 5,01 ммоль), который охлаждают на ледяной бане. Предварительно охлажденный раствор соединения 2.1b (600 мг, 2,00 ммоль) в ТГФ (0,8 мл) добавляют по каплям в течение более 5 мин. Двухфазную смесь перемешивают энергично в течение 30 мин при 0°С. Реакцию гасят добавлением насыщенного водного хлорида аммония и экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенный экстракты промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан 10-50%, с получением 575 мг продукта (76% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 6,33 (с, 1H), 4,28 (кв, J=7,14 Гц, 2H), 3,06 (с, 3H), 2,79-2,94 (м, 1H), 2,65-2,78 (м, 1H), 2,59 (ддд, J=13,53, 11,24, 5,26 Гц, 1H), 2,33 (ддд, J=13,55, 11,37, 5,16 Гц, 1Н), 1,69 (с, 3H), 1,33 (т, J=7,12 Гц, 3H). ЖХМС (m/z): 377,9/379,9 [М+Н]+.
Стадия 4. Синтез этил 4-(5-((4-(гидроксиметил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [2,Id]
о=8-
К дегазированной смеси соединения 2.1с (120 мг, 0,317 ммоль) и (4-(гидроксиметил)фенил)бороновой кислоты (72,3 мг, 0,476 ммоль) в ДМФ (1,5 мл) и 2,0 М водном карбонате натрия (0,555 мл, 1,11 ммоль) добавляют продукт присоединения PdCl2(dppf)CH2Cl2 (25,9 мг, 0,032 ммоль). Реакционную смесь нагревают при 110°С в микроволновой печи в течение 15 мин. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют EtOAc. Объединенные экстракты сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикаге-лем, МеОН/ДХМ 0-8%, с получением соединения 2.1d (40 мг, 31% выход). ЖХМС (m/z): 406,1 [М+Н]+.
Стадия 5. Синтез N-гидрокси-4-(5-((4-(гидроксиметил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [2.1]
Порошковый гидроксид натрия (19,7 мг, 0,493 ммоль) добавляют к смеси соединения 2.1d (40 мг, 0,099 ммоль) и гидроксиламина (0,151 мл, 2,47 ммоль) в 1:1 ТГФ:MeOH (1 мл). Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 15 мин. Летучие соединения удаляют при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищают ВЭЖХ с обращенной фазой с получением соединения 2.1 (9 мг, 20% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 7,54-7,60 (м, 2H), 7,41-7,46 (м, 2Н), 6,64-6,67 (м, 1Н), 4,63-4,67 (м, 2Н), 3,08 (с, 3H), 2,81-2,92 (м, 1Н), 2,61-2,76 (м, 2Н), 2,14-2,28 (м, 1Н), 1,65 (с, 3H).
ЖХМС (m/z): 393,3 [М+Н]+.
II.2 Синтез N-гидрокси-4-(5-((4-(2-гидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [2.2]
о=8-
N /\ J a j Y
Соединение 2.2 получают по методике примера 2.1.1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 7,48-7,53 (м, 2Н),
7,30-7,35 (м, 2H), 6,63-6,65 (м, 1H), 3,75-3,83 (м, 2H), 3,05-3,09 (с, 3H), 2,78-2,93 (м, 3H), 2,59-2,76 (м, 2H), 2,13-2,27 (м, 1Н), 1,62-1,68 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 407,3 [М+Н]+.
11.3. Синтез N-гидрокси-4-(5-((4-(2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-
2-(метилсульфонил)бутанамида [2.3]
о=8-N JkT NH0H a J Y
НСГЪ- 2.3
Соединение 2.3 получают по методике примера 2.1.1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 7,56-7,62 (м, 2Н),
7.39- 7,45 (м, 2H), 6,65-6,68 (м, 1H), 4,27-4,36 (м, 1H), 3,52-3,71 (м, 2H), 3,04-3,10 (с, 3H), 2,79-2,93 (м, 1H),
2,60-2,76 (м, 2H), 2,14-2,26 (м, 1Н), 1,61-1,68 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 437,3 [М+Н]+.
11.4. Синтез N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)бутана-
мида [2.4]
о=8-
N /\ J а J X
Соединение 2.4 получают по методике примера 2.1. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 7,54-7,61 (м, 2Н),
7.40- 7,49 (м, 3Н), 6,64-6,68 (м, 1H), 3,07 (с, 3H), 2,79-2,91 (м, 1H), 2,60-2,76 (м, 2H), 2,13-2,26 (м, 1Н), 1,64
(с, 3H). ЖХМС (m/z): 363,1 [М+Н]+.
11.5. Синтез N-гидрокси-4-(5-((4-((R)-2-гидроксипропил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-
(метилсульфонил)бутанамида [2.5]
Соединение 2.5 получают по методике примера 2.1. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 7,48-7,53 (м, 2Н), 7,27-7,33 (м, 2H), 6,62-6,64 (м, 1H), 3,92-4,03 (м, 1H), 3,05-3,10 (с, 3H), 2,59-2,91 (м, 5H), 2,14-2,26 (м, 1Н), 1,60-1,68 (с, 3H), 1,12-1,22 (м, 3H). ЖХМС (m/z): 421,0 [М+Н]+.
II.6. Синтез (R)-N-гидрокси-4-(5-((4-((S)-2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-
2- метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [2.6].
Стадия 1. Синтез бензил (R)-4-(5-этинилизоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутаноата [2.6а].
Соединение 2.6а синтезируют из соединения 1.2f и 2.1а по методике примера 1.1, стадии 2-3. ЖХМС (m/z): 362,0 [М+Н]+.
Стадия 2. Синтез (R)-N-гидрокси-4-(5-((4-((S)-2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-
3- ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [2.6]
Соединение 2.6 получают из соединения 2.6а по методике примера 2.1, стадии 3-4, и примера 1.1, стадии 4-6. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^): 10,15 (д, J=0,88 Гц, 1Н), 8,40 (д, J=1,47 Гц, 1H), 6,82 (д, J=8,22 Гц, 2H), 6,59 (д, J=8,17 Гц, 2H), 6,15 (с, 1H), 4,04 (с, 1H), 3,44 (д, J=1,71 Гц, 1H), 2,68-2,79 (м, 1H), 2,582,67 (м, 1H), 2,39 (с, 3H), 2,25 (с, 3H), 1,90-2,03 (м, 1Н), 1,70-1,82 (м, 1Н), 1,17-1,31 (м, 1Н), 0,71 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 437,0 [М+Н]+.
II.7 Синтез (R)-4-(5-((4-((S)-1,2-дигидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3 -ил)-^гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [2.7]
0=8-
NHOH
Соединение 2.7 получают по методике примера 2.6. 1H ЯМР (500 МГц, CD3OD): 7,57 (д, J=8,20 Гц, 2Н), 7,47 (д, J=8,20 Гц, 2H), 6,67 (с, 1H), 4,73 (д, J=7,25 Гц, 1H), 4,61 (с, 1H), 3,57-3,68 (м, 1Н), 3,07 (с, 3H), 2,84 (м, 1H), 2,58-2,75 (м, 2H), 2,13-2,26 (м, 1Н), 1,64 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 423,2 [М+Н]+.
II.8. Синтез (R)-4-(5-((4-((R)-1,2-дигидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [2.8]
о=8-
N Jk.v4 nhoh о- у д
Соединение 2.8 получают по методике примера 2.6. 1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 7,55-7,64 (м, 2Н), 7,49 (д, J=8,17 Гц, 2H), 6,68 (с, 1H), 4,75 (дд, J=6,68, 5,06 Гц, 1H), 3,58-3,73 (м, 2H), 3,10 (с, 3H), 2,82-2,95 (м, 1H), 2,61-2,79 (м, 2H), 2,15-2,28 (м, 1Н), 1,67 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 423,2 [М+Н]+.
Синтез (2S,3R)-2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропанамида [3.1]
Стадия 1. Синтез этил 5-(трибутилстаннил)изоксазол-3-карбоксилата [3.1а].
Трибутил(этинил)станнан (4 г, 12,7 ммоль, 1,0 экв.) и этил (Е)-2-хлор-2-(гидроксиимино)ацетат (1,92 г, 12,7 ммоль, 1,0 экв.) растворяют в диэтиловом эфире (40 мл). По каплям добавляют ТЭА (6,41 г, 63,5 ммоль, 5,0 экв.), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакцию гасят водой и экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (10-15% EtOAc в гексане) с получением продукта (2,5 г, 45,7% выход). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 6,82 (с, 1Н), 4,46 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 1,62 (д, J=7,0 Гц, 2Н), 1,58-1,53 (м, 2Н), 1,44 (т, J=7,1 Гц, 3H), 1,34 (ддд, J=26,0, 16,7, 9,4 Гц, 8Н), 1,26-1,14 (м, 6Н), 0,92 (т, J=7,3 Гц, 9Н).
Стадия 2. Синтез этил 5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-карбоксилата [3.1b].
(Йодэтинил)циклопропан (8 г, 0,041 ммоль, 1,2 экв.) и соединение 3.1 (15 г, 34,0 ммоль, 1,0 экв.) растворяют в 1,4-диоксане (80 мл). Реакционную смесь дегазируют в течение 10 мин. Добавляют PdCl2(pph3)2 (0,48 г, 0,6 ммоль, 0,02 экв.), и реакционную смесь перемешивают при 100°С в течение 2 ч. Реакционную смесь гасят водой и экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Неочищенный остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (10-25% EtOAc/гексан) с получением продукта (4,02 г, 50% выход).
ЖХМС (m/z): 206,1 [М+Н]+.
Стадия 3. Синтез (5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метанола [3.1с].
Этил 5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-карбоксилат (4 г, 19,0 ммоль, 1,0 экв.) растворяют в ТГФ (40 мл) и охлаждают до 0°С. Порциями добавляют боргидрид натрия (1,52 г, 39,0 ммоль, 2,0 экв.). Затем добавляют метанол (4 мл), и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь гасят водой и экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Неочищенный остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (30-40% EtOAc/гексан) с получением продукта (1,72 г, 65% выход). ЖХМС (m/z): 163,8 [М+Н]+. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^): 5 ч./млн. 0,84-0,88 (м, 2Н), 0,97-1,02 (м, 2Н), 1,69 (м, 1H), 5,52 (т, J=5, 95 Гц, 1H), 6,67 (с, 1Н).
Стадия 4. Синтез 5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-карбальдегида [3.1d].
(5-(Циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метанол (1,72 г, 10,0 ммоль, 1,0 экв.) растворяют в дихлор-метане (50 мл) и охлаждают до 0°С. Порциями добавляют периодинан Десса-Мартина (6,71 г, 15,0
ммоль, 1,5 экв.) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 ч. Реакционную смесь гасят насыщенным водным раствором бикарбоната натрия:раствором тиосульфата натрия (1:1) и экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Неочищенный остаток очищают хроматографией на колонке с си-ликагелем (10-12% EtOAc/гексан) с получением продукта (1,2 г, 68% выход). ЖХМС (m/z): 162,1 [М+Н]+. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^): 5 ч./млн. 0,89-0,92 (м, 2Н), 1,01-1,05 (м, 2Н), 1,69-1,78 (м, 1Н), 7,15 (с, 1Н), 10,07 (с, 1Н).
Стадия 5. Синтез (2S,3R)-метил 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-гидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3 -ил)пропаноата [3.1 е]
К раствору диизопропиламина (16,97 мл, 119 ммоль) в ТГФ (60 мл) медленно добавляют бутилли-тий (74,4 мл, 119 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 1 ч, в это время добавляют раствор ^)-метил 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропаноата (11 г, 54,1 ммоль) в 40 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивают в течение еще 2 ч, в это время добавляют 5-метилизоксазол-3-карбальдегид (7,82 г, 70,4 ммоль) в 10 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение еще 2 ч и затем нагревают до -40°С. Реакцию гасят насыщенным водным раствором NH4Cl и затем нагревают до комнатной температуры. Смесь экстрагируют EtOAc. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом магния и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем (EtOAc/гептан, 0-30%) с получением (±)-3.1е (5,3 г, 31% выход) и (±)-3.1.е' (5,4 г, 17,18 ммоль, 31,7% выход). Менее полярной фракцией являются желаемые диа-стереомеры (±)-3.1е.
(±)-3.1е: 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 6,03-6,14 (м, 1Н), 6,00 (с, 1Н), 5,78-5,89 (м, 1Н), 5,31 (д, J=9,5 Гц, 1Н), 3,85 (с, 3H), 2,40 (д, J=0,6 Гц, 3H), 1,70 (с, 3H), 1,43 (с, 9Н). ЖХМС (m/z): 315, 3 [М+Н]+.
Диастереомер (±)-3.1е разделяют хиральной СФХ с получением двух энантиомеров: изомер 1: Ву 1,45 мин и изомер 2: Ву 2,76 мин. Изомер 2 является желаемым энантиомером 3.1е.
Условия разделения СФХ.
Хиральная AD колонка; скорость потока 100 мл/мин; CO2/EtOH=90/10; 293 бар. Стадия 6. Синтез (2S,3R)-метил 2-амино-3-гидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропаноат HCl соль [3.1f]
3"1f
Раствор соединения 3.1е (2,1 г, 6,68 ммоль) и HCl в MeOH (66,8 мл, 66,8 ммоль) перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме с получением 3.1f в виде HCl соли (1,5 г, 5,74 ммоль, 86% выход). 1H ЯМР (ДМСО^): 8,72 (шс, 3H), 7,05 (д, J=5,4 Гц, 1Н), 6,21 (с, 1Н), 5,00 (д, J=5,0 Гц, 1Н), 3,62-3,80 (м, 3H), 2,39-2,43 (м, 3H), 1,34-1,57 (м, 3H). ЖХМС (m/z):
216,3 [М+Н]+.
Стадия 7. Синтез (2S,3R)-метил 2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-3-гидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропаноата [3.1g]
Триэтиламин (0,280 мл, 2,007 ммоль) добавляют к раствору соединения 3.1d (420 мг, 2,007 ммоль) и соединения 3.1f (528 мг, 2,107 ммоль) в ДХЭ. Через 10 мин добавляют AcOH (0,230 мл, 4,01 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при кт в течение 18 ч. Затем добавляют триацетоксиборгидрид натрия (1,2 г, 5,66 ммоль) и смесь перемешивают в течение 3 ч. Реакцию гасят добавлением воды и насыщ. водн. раствора NaHCO3. Смесь экстрагируют ДХМ. Органический слой сушат над Na2SO4 и концентрируют. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан, от 0 до 100%, с получением 436 мг продукта (выход 60%). ЖХМС (m/z): 360,4 [М+Н]+.
Стадия 8. Синтез (28,3Я)-2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-К,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропанамида [3.1]
Раствор гидроксиламина (50% в воде, 5662 мг, 86 ммоль) и гидроксида натрия (110 мг, 2,75 ммоль) добавляют к раствору соединения 3.1g (880 мг, 1,7 ммоль) в MeOH, и полученный раствор перемешивают при кт в течение 3 ч. Смесь затем концентрируют и остаток очищают ВЭЖХ с обращенной фазой (1050% MeCN-вода, 3,75 мМ буфер на основе ацетата аммония) с получением 177 мг продукта (выход 27%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCb): 0,82-1,05 (м, 4Н), 1,33 (с, 3H), 1,47-1,51 (м, 1Н), 2,39 (с, 3H), 3,68-4,03 (м, 2Н), 5,10 (с, 1H), 6,10 (с, 1H), 6,24 (с, 1Н). ЖХМС (m/z): 361,3 [М+Н]+.
III.2. Синтез (2S,3R)-2-(((5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропанамида [3.2]
Соединение 3.2 синтезируют по методике примера 3.1.1H ЯМР (500 МГц, CDCl3): 1,41 (с, 3H), 1,862,08 (м, 2Н), 2,16-2,43 (м, 5Н), 2,46 (с, 3H), 3,28-3,32 (м, 1Н), 3,83 (м, 1Н), 4,09 (м, 1Н), 5,06-5,31 (м, 1Н), 6,03-6,19 (м, 2H), 6,28 (с, 1Н). ЖХМС (m/z): 375,2 [М+Н]+.
III.3. Синтез (2S,3R)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)-2-(((5-(фенилэтинил)изок-сазол-3-ил)метил)амино)пропанамида [3.3]
РН 33
Соединение 3.3 синтезируют по методике примера 3.1. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-с16): 1,14 (с, 3H), 2,38 (с, 3H), 3,70-3,80 (м, 2Н), 4,76-4,77 (м, 1Н), 5,91-6,02 (м, 1H), 6,14 (с, 1Н), 6,97 (с, 1Н), 7,39-7,57 (м, 3H), 7,63-7,76 (м, 2Н), 8,68-8,88 (м, 1Н). ЖХМС (m/z): 397,3 [М+Н]+.
III.4. Синтез N,3-дигидрокси-3-(5-(гидроксиметил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(((5-(фенилэти-нил)изоксазол-3 -ил)метил)амино)пропанамида] [3.4]
N-0 ОН
РК 3"4
Соединение 3.4 синтезируют по методике примера 3.1. 1H ЯМР (метанол-сС4): 7,58-7,65 (м, 2Н), 7,42-7,53 (м, 3H), 6,77 (с, 1Н), 6,39 (с, 1Н), 4,96 (с, 1Н), 4,67 (с, 2Н), 3,90-3,95 (м, 1Н), 3,81-3,88 (м, 1Н), 1,36 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 413,2 [М+Н]+.
III.5. Синтез (2S,3R)-N,3-дигидрокси-2-(((5-(6-метоксигекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-2-метил-З -(5-метилизоксазол-3 -ил)пропанамида [3.5]
N-P
Соединение 3.5 синтезируют по методике примера 3.1. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 8 10,38 (с, 1Н), 8,76 (с, 1Н), 6,72 (с, 1Н), 6,12 (с, 1Н), 5,94 (с, 1Н), 4,75 (с, 1Н), 3,68 (с, 2Н), 3,36 (с, 2Н), 3,24 (с, 3H), 2,56 (с, 2Н), 2,37 (с, 3H), 1,62 (с, 4Н), 1,14 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 407,6 [М+Н]+.
III.6. Синтез 2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-3-(5-циклопропилизоксазол-3-ил)-1Ч,3-дигидрокси-2-метилпропанамида [3.6]
Соединение 3.6 синтезируют по методике примера 3.1. !И ЯМР (400 МГц, ДМСО): 8 6,66 (с, 1Н), 6,07 (с, 1Н), 5,99 (с, 1Н), 4,71 (с, 1Н), 3,65 (с, 2Н), 2,62 (м, 1Н), 2,10 (ддд, J=13,3, 8,4, 4,9 Гц, 1Н), 1,69 (ддд, J=13,2, 8,3, 5,1 Гц, 1Н), 1,11 (с, 3H), 1,08-0,93 (м, 4Н), 0,90-0,82 (м, 4Н). ЖХМС (m/z): 387,3 [М+Н]+.
IV. 1. Синтез (К,Б)-4-(5-(бут-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-К-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил) бутанамид а [4.1]
Стадия 1. Синтез (метилсульфонил)бутаноата [4.1а] 4-(5-(2-гидроксибутил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-
К раствору гекс-5-ин-3-ола (125 мг, 1,276 ммоль) и (Я,Б)-бензил 5-(гидроксиимино)-2-метил-2-(метилсульфонил)пентаноата (200 мг, 0,638 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляют NaClO2 (2,66 г, 1,276 ммоль) и смесь перемешивают при кт в течение 15 ч. Затем реакционную смесь разбавляют ДХМ и фазы разделяют. Органический слой промывают водой, сушат над Na2SO4 и концентрируют. Оставшийся продукт очищают хроматографией на колонке с силикагелем, EtOAc/гептан от 5 до 80%, с получением 91 мг продукта (34,8% выход). ЖХМС (m/z): 410,3 [М+Н]+.
Стадия 2. Синтез бензил (2Я)-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(2-((метилсульфо-нил)окси)бутил)изоксазол-3-ил)бутаноата [4.lb]
К раствору (2Я)-бензил 4-(5-(2-гидроксибутил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-
(метилсульфонил)бутаноата (92 мг, 0,225 ммоль) в дихлорметане (2 мл) при 0°С добавляют метансуль-фонилхлорид (0,021 мл, 0,270 ммоль) и ТЭА (0,063 мл, 0,449 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при кт в течение 3 ч, затем гасят добавлением воды. Фазы разделяют, и органический слой экстрагируют ДХМ. Органический слой промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют с получением 108 мг продукта (99% выход). Неочищенный продукт переносят на следующую стадию без
дальнейшей очистки. ЖХМС (m/z): 488,3 [М+Н]+.
Стадия 3. Синтез (R,E)-4-(5-(бут-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил) бутанамид а [4.1]
К раствору (2Я)-бензил 2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(2-((метилсульфонил)окси)бу-тил)изоксазол-3-ил)бутаноата (108 мг, 0,221 ммоль) в MeOH (1 мл) и ТГФ (1 мл) при кт добавляют NH2OH (0,585 мл, 50% в воде, 8,86 ммоль) и NaOH (89 мг, 2,215 ммоль). После перемешивания при кт в течение 1 ч смесь разбавляют ДМСО (1,5 мл) и летучий растворитель удаляют в вакууме. Смесь нейтрализуют 3 N HCl и затем фильтруют. Неочищенный продукт очищают преп. ВЭЖХ с обращенной фазой с получением 10 мг продукта (13,98% выход). 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО- <16): 1,02 (т, J=7,41 Гц, 3H), 1,411,54 (м, 3H), 1,97 (тд, J=12,36, 4,87 Гц, 1H), 2,13-2,28 (м, 2H), 2,32-2,45 (м, 2H), 2,58-2,74 (м, 1H), 2,98-3,10 (м, 3Н), 6,33-6,43 (м, 2H), 6,45-6,63 (м, 1Н), 10,94 (с, 1Н). ЖХМС (m/z): 317,2 [М+Н]+.
IV.2. Синтез (R,E)-4-(5-(2-циклопропилвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [4.2]
Стадия 1. Синтез (Е)-(4-циклопропилбут-3-ен-1-ин-1-ил)триметилсилана, ^)-(4-циклопропилбут-3-ен-1 -ин-1 -ил)триметилсилана [4.2а].
К суспензии бромида трифенил[3-(триметилсилил)проп-2-ин-1-ил]фосфония (1,4 г, 3,09 ммоль) в ТГФ (15 мл) при -78°С добавляют n-BuLi (1,360 мл, 2,5 М в гептане, 3,40 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 45 мин. Медленно добавляют раствор циклопропанкар-бальдегида (0,231 мл, 3,09 ммоль) в ТГФ (4,0 мл) и смесь затем перемешивают при -78°С в течение 30 мин и при кт в течение 2 ч. Летучий растворитель удаляют в вакууме. Остаток фильтруют через колонку с силикагелем и промывают гептаном. Фильтрат концентрируют в вакууме с получением 158 мг продукта (31,1% выход) в виде смесей цис- и транс-изомеров.
Стадия 2. Синтез (R,E)-4-(5-(2-циклопропилвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [4.2]
Соединение 4.2 синтезируют по методике примера 1.15, стадии 8-10. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-(16): 0,45-0,66 (м, 2Н), 0,77-0,94 (м, 2Н), 1,46-1,53 (м, 3H), 1,54-1,70 (м, 1Н), 1,84-2,10 (м, 2H), 2,26-2,44 (м, 2H), 2,57-2,74 (м, 2H), 3,03 (с, 3H), 5,91-6,07 (м, 1H), 6,26-6,36 (м, 1H), 6,39-6,55 (м, 1Н). ЖХМС (m/z): 329,0 [М+Н]+.
IV.3. Синтез (R,E)-4-(5-(бут-2-ен-2-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [4.3-1] и (R,Z)-4-(5-(бут-2-ен-2-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [4.3-2]
Соединение 4.3-1 и 4.3-2 синтезируют по методике примера 4.1, начиная с коммерчески доступного 3-метилпент-1-ин-3-ола. Два изомера разделяют ВЭЖХ с обращенной фазой.
4.3-1: 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-с16): 1,45-1,54 (м, 3H), 1,78 (д, J=7,04 Гц, 3H), 1,85-1,93 (м, 3H), 1,98 (тд, J=12,43, 4,82 Гц, 1H), 2,33-2,45 (м, 1H), 2,50-2,57 (м, 1H), 2,59-2,75 (м, 1H), 3,04 (с, 3Н), 6,26-6,38 (м, 1H), 6,44 (с, 1Н). ЖХМС (m/z): 317,3 [М+Н]+.
4.3-2: 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-с16): 1,09 (т, J=7,41 Гц, 3H), 1,43-1,54 (м, 4Н), 1,99 (тд, J=12,35, 4,89 Гц, 2H), 2,32-2,43 (м, 3H), 2,51-2,60 (м, 1H), 2,61-2,77 (м, 1H), 2,99-3,11 (м, 3H), 5,32 (с, 1H), 5,71 (с, 1H), 6,61 (с, 1Н). ЖХМС (m/z): 317,3 [М+Н]+.
IV.5 и IV.6. Синтез (R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида и (R,E)-4-(5-(2-циклопропил-1 -фторвинил)изоксазол-3-ил)^-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [4.5-1] и [4.5-2]
Стадия 1. Синтез (Е)-(2-бром-2-фторвинил)циклопропана [4.5а].
Смесь циклопропанкарбальдегида (0,897 мл, 12 ммоль), трибромфторметана (1,648 мл, 16,80 ммоль) и PPh3 (6,29 г, 24,00 ммоль) в ТГФ (7 мл) в 20 мл микроволновой пробирке (0 мл) герметично закрывают и перемешивают при 75°С в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждают до температуры окружающей среды и разбавляют пентаном. Смесь фильтруют, и летучий растворитель удаляют осторожно в вакууме с получением продукта в виде светло-желтого раствора в ТГФ. Продукт представляет собой смесь транс/цис изомера.
Стадия 2. Синтез (4-циклопропил-3-фторбут-3-ен-1-ин-1-ил)триметилсилана [4.5b].
К смеси 4.5а (0,5 г, 3,03 ммоль), CuI (0,029 г, 0,152 ммоль) и PdC^PPl^ (0,053 г, 0,076 ммоль) добавляют этинилтриметилсилан (0,476 г, 4,85 ммоль) и Et3N (2,71 мл, 21,21 ммоль). Полученную смесь
герметично закрывают и перемешивают при 25°С в течение 16 ч. Летучий растворитель затем удаляют в вакууме и к остатку добавляют ДХМ. Смесь фильтруют и фильтрат концентрируют. Неочищенный продукт применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки.
Стадия 3. Синтез (R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида и (R,E)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [4.5-1] и [4.5-2].
Соединение 4.5 синтезируют по методике примера 1.15, стадии 8-10. Неочищенный продукт очищают преп. ВЭЖХ с обращенной фазой с получением чистых изомеров 4.5-1 и 4.5-2.
4.5-1: 1H ЯМР (400 МГц, CD3CN): 0,49-0,60 (м, 4Н), 0,89-1,03 (м, 4Н), 1,61 (т, J=3,99 Гц, 7H), 2,002,10 (м, 2H), 2,10-2,27 (м, 4H), 2,51-2,70 (м, 8H), 2,72-2,90 (м, 3H), 2,93-3,04 (м, 5H), 5,12-5,34 (м, 2H), 6,36-6,63 (м, 2Н). ЖХМС (m/z): 347,2 [М+Н]+.
4.5-2: 1H ЯМР (400 МГц, CD3CN): 0,53-0,70 (м, 3H) 0,88-1,04 (м, 3H), 1,52-1,66 (м, 4Н), 1,76-1,90 (м, 2H), 2,05-2,29 (м, 2H), 2,47-2,67 (м, 4H), 2,71-2,86 (м, 2H), 2,91-3,06 (м, 4H), 5,20-5,41 (м, 1H), 6,31-6,45 (м, 1Н) 9,58 (шс, 1Н). ЖХМС (m/z): 347,2 [М+Н]+.
IV.7. Синтез (R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-2-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [4.7]
Стадия 1. Синтез ^)-(2-бром-1-фторвинил)циклопропана [4.7а].
К смеси NBS (2,3 г, 12,98 ммоль) и фторида серебра (3,71 г, 29,5 ммоль) в ацетонитриле/воде (18/1, 19 мл) добавляют этинилциклопропан (780 мг, 11,80 ммоль). Полученную смесь герметично закрывают и перемешивают при 80°С в течение 18 ч. Смесь охлаждают при комнатной температуре и фильтруют. К фильтрату добавляют EtOAc, и раствор снова фильтруют. Фильтрат сушат над Na2SO4 и концентрируют с получением 1,0 г продукта (51,4% выход). Неочищенный продукт применяют на следующей стадии без дальнейшей очистки. 1H ЯМР (500 МГц, CDCI3): 0,72-0,84 (м, 4Н), 1,60 (д, J=18,29 Гц, 1H), 5,16-5,43 (м, 1Н).
Стадия 2. Синтез (Z)-(4-циклопропил-4-фторбут-3-ен-1-ин-1-ил)триметилсилана [4.7b]. К смеси Ph3P (0,079 г, 0,303 ммоль), CuI (0,058 г, 0,303 ммоль) и PdCl2(PPh3)2 (0,106 г, 0,152 ммоль) добавляют ацетонитрил (8 мл), ^)-(2-бром-1-фторвинил)циклопропан (0,5 г, 3,03 ммоль) и этинилтриме-тилсилан (0,476 г, 4,85 ммоль), затем Et3N (1,356 мл, 10,61 ммоль). Полученную смесь герметично закрывают и перемешивают при 70°С в течение 10 ч. Смесь охлаждают до температуры окружающей среды и летучий растворитель удаляют в вакууме. Неочищенный продукт очищают хроматографией на колонке с двуокисью кремния с ДХМ в качестве элюата с получением 0,552 г продукта (100% выход). 1H ЯМР (500 МГц, CDCI3): 0,15-0,32 (м, 9Н), 0,75-0,92 (м, 4Н), 1,58 (с, 1H), 4,72-5,04 (м, 1Н).
Стадия 3. Синтез (R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-2-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида [4.7]
Соединение 4.7 синтезируют по методике примера 1.15, стадии 8-10. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d^: 0,75-0,97 (м, 4Н), 1,49 (с, 3H), 1,77-2,07 (м, 2H), 2,33-2,57 (м, 2H), 2,59-2,76 (м, 1H), 3,03 (с, 3H), 5,99-6,25 (м, 1H), 6,42 (д, J=1,66 Гц, 1Н), 10,93 (шс, 1Н). ЖХМС (m/z): 347,2 [М+Н]+.
IV.8. Синтез (R)-4-(5-(циклогекс-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида [4.8]
Соединение 4.8 синтезируют по методике примера 1.1, способ В, из 1-этинилциклогекс-1-ена. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО^): (т, J=4,0 Гц, 1Н), 6,44 (с, 1Н), 3,06 (с, 3H), 2,77-2,62 (м, 1Н), 2,60-2,36 (м, 7Н), 2,33-2,14 (м, 4Н), 2,00 (тд, J=12,5, 4,9 Гц, 1Н), 1,78-1,56 (м, 4Н), 1,52 (с, 3H). ЖХМС (m/z): 343,3 [М+Н]+.
Фармацевтическая активность.
Анализ ингибирования LpxC P. Aeruginosa.
LpxC белок P. aeruginosa получают общим способом из Hyland et al. (Journal of Bacteriology, 1997, 179, 2029-2037: Cloning, expression and purification of UDP-3-O-acyl-GlcNAc deacetylase from Pseudomonas aeruginosa: a metalloamidase of the lipid A biosynthesis pathway). ЖХ-МС/МС способ количественной оценки продукта LpxC проводят с применением ВЭЖХ системы Agilent 1200 Capillary в сочетании с масс спектрометром Applied Biosystems MDS Sciex 4000QTRAP. Оба инструмента контролируют с применением программного обеспечения Applied Biosystems MDS Sciex Analyst. Продукт реакции LpxC (UDP-3-O-(R-3-гидроксиацил)глюкозамин) получают гидролизом субстрата LpxC, катализированного LpxC P.a. и очищают с применением хроматографии с обращенной фазой на колонке Phenomenex Luna C18(2) 4,6x50 мм. Калибрационную кривую продукта LpxC создают для оценки чувствительности и динамического диапазона ЖХ-МС/МС способа. Коротко, соединения предварительно инкубируют в 1 нМ LpxC P. aeruginosa в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакции инициируют добавлением 2 мкМ UDP-3-O-(R-3-гидроксидеканоил)-GlcNAc. Реакции проводят в 384-луночном планшете с общим объемом 50 мкл в каждой лунке, содержащей 50 мМ фосфата натрия pH 7,5, 0,005% Trition X-100 в течение 20 мин при комнатной температуре. После гашения 1,8% НОАс (5 мкл 20% НОАс добавляют в каждую лунку) реакционные смеси анализируют с применением ЖХ-МС/МС способа и площади пиков превращают в концентрацию продукта с применением калибрационной кривой LpxC продукта. Общую активность (контроль 0% ингибирования) получают из реакций при отсутствии ингибиторов, и контролем 100% ингибирования является фон с применением погашенных образцов до начала реакции. Для определения IC50 площади пиков превращают в процент ингибирования в Microsoft Excel. Значения процента ингибирования наносят на график к log концентрации соединения с применением XLfit. Данные подгоняют под четырехпараметрическое логистическое уравнение с применением алгоритма не линейной регрессии в XLfit для возврата IC50 и значений углового коэффициента Хилла.
Бактериальный скрининг и культуры.
Бактериальные изоляты культивируют из замороженных при температуре -70°С исходных растворов двумя последовательными проходами в течение ночи при 35°С на воздухе в 5% кровяном агаре (Remel, Lenexa, Kans.). Качественные штаммы, P. aeruginosa ATCC 27853, A. baumannii ATCC 19606 и Е. coli ATCC 25922 получают от American Type Culture Collection (ATCC; Rockville, Md.) и РАО1 получают от Dr. K. Poole.
Тестирование чувствительности.
Минимальные ингибирующие концентрации (МИК) определяют методом микроразведения в бульоне в соответствии с инструкциями Clinical and Laboratories Institute (CLSI) (CLSI M100-S25, Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-fifth Informational Supplement). Коротко, свежие, выдержанные в течение ночи бактериальные культуры повторно суспендируют в стерильном солевом растворе, доводят до 0,5 стандарта мутности Мак-Фарланда и затем 2000-кратно разводят в скорректированном катионом бульоне Mueller-Hinton Broth II (МНВ; Remel BBL) с получением конечного инокулята приблизительно 5x105 колониеобразующих единиц (КОЕ)/мл. Двукратные серийные разведения соединений получают в 100% диметилсульфоксиде (ДМСО) при 100-кратной наивысшей конечной аналитической концентрации; полученные серийные разведения соединений разводят 1:10 стерильной водой. 10 мкл серийного разведения лекарственного средства в 10% ДМСО переносят в микротитровальные лунки, и 90 мкл бактериальной суспензии инокулируют в лунки. Для тестирования способности соединений потенцировать активность известных антибиотиков, анализ модифицируют следующим образом; известные антибиотики добавляют к бактериальному инокуляту в 1,1-кратном размере к конечной аналитической концентрации, указанной в табл. А. Все инокулированные лотки для микроразведения инкубируют на воздухе при 35°С в течение 20 ч. После инкубирования аналитические планшеты считывают в ридере для микротитровальных планшетов при 600 нм и визуально исследуют для подтверждения МИК конечной лунки со значением OD. Самую низкую концентрацию соединения, которая предотвращает видимый рост, записывают как МИК. Эффективность анализа отслеживают тестированием ципрофлоксацина против лабораторного качественного штамма в соответствии с инструкциями CLSI.
LpxC ингибирующее действие для выбранных соединений в соответствии с данным изобретением на LpxC из P. aeruginosa представлено в табл. А. Анализ МИК для P. aeruginosa, Е. coli и A. baumannii также проводят в присутствии субингибирующих концентраций рифампицина для того, чтобы продемонстрировать потенциал для синергии с другими противомикробными агентами, см. табл. В.
Таблица А
Биологические данные для выбранных соединений в соответствии с данным изобретением
Номер соединения
P. A. LpxC 1С50 [мкмоль л-1]
1.1
0, 003
1.2
<0,001
1.3
<0,001
1.4
0, 002
1.5
0, 001
1 . 6
<0,001
1.7
<0,001
1 . 8
<0,001
1 . 9
0, 003
1 . 10
<0,001
1 . 11
0, 001
1 . 12
<0,001
1 . 13
1 . 14
0, 002
1.15-1
1.15-2
1.16
<0,001
2 . 1
<0,001
2.2
<0,001
2.3
<0,001
2.4
<0,001
2.5
<0,001
2.6
<0,001
2.7
<0,001
2 . 8
<0,001
3.1
<0,001
3.2
<0,001
3.3
<0,001
3.4
<0,001
3.5
0, 003
3.6
0, 002
4.1
<0,001
4.2
4.3-1
0, 003
4.3-2
4.5-1
<0,001
4.5-2
4.7
<0,001
4 . 8
<0,001
Таблица В
Антибактериальная эффективность и синергия
Специалисты в данной области техники поймут или смогут удостовериться с помощью обычных экспериментов множество эквивалентов для конкретных примеров и способов, описанных здесь. Такие эквиваленты включены в объем представленной формулы изобретения.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемая соль,
где X представляет собой -NH- и R1 представляет собой -СН(ОН)-У или X представляет собой -СН2- и R1 представляет собой -СН(ОН)-У или -SO2R2, где R2 представляет собой С1-С3алкил; R3 представляет собой Н;
У выбирают из 5-членного гетероарильного кольца, содержащего 1-3 гетероатома, выбранных из N, О и S в качестве членов кольца, фенила и С1-3алкила, и каждый У необязательно замещен от одного до трех R4;
каждый R4 независимо выбирают из галогена, С1-3алкила и С3-6циклоалкила, где С1-3алкил и С3-6циклоалкил, каждый, необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из галогена, CN и
-ОН;
L представляет собой -С=С- или -CR5=CR5-;
в каждом случае независимо выбирают из H, галогена и метила;
Z выбирают из С1-6алкила, С3-С6циклоалкила и фенила, каждый из которых необязательно замещен вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, С1-4алкокси, С1-4галоалкокси, CN и С1-4алкила, которые необязательно замещены от одной до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, амино, CN и ^^кокси; или, если L представляет собой -CR5=CR5-, Z, взятый вместе с одной из групп R5 и любыми атомами, соединяющими Z с группой R5, могут образовывать 3-7-членную циклоалкильную или цик-лоалкенильную группу, которая необязательно замещена вплоть до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, С1-4алкокси, С1-4галоалкокси, CN и С1-4алкила, которые необязательно замещены от одной до трех групп, выбранных из галогена, гидрокси, амино, CN и ^^люкси.
2. Соединение по п.1, где R1 представляет собой -CH(OH)-Y.
3. Соединение по п.1, где R1 представляет собой -SO2R2.
4. Соединение по любому из пп.1-3, где X представляет собой -СН2-.
5. Соединение по любому из пп.1, 2, где X представляет собой -NH-.
6. Соединение по пп.2, 4 или 5, где У представляет собой изоксазол, необязательно замещенный одним или двумя R4.
7. Соединение по п. 6, где У представляет собой
8. Соединение по любому из пп.1-7, где Z представляет собой фенил, замещенный вплоть до трех групп, выбранных из галогена, С1-4алкокси, С1-4галоалкокси, CN и С1-4алкила, необязательно замещенных от одной до трех группами, выбранными из галогена, гидрокси, амино, CN и ^^кокси.
9. Соединение по любому из пп.1-7, где Z представляет собой С1-С4алкил или С3-С6циклоалкил и Z необязательно замещен вплоть до трех группами, выбранными из галогена, С1-4алкокси, С1-4галоалкокси, CN и С1-4алкила, необязательно замещенных от одной до трех группами, выбранными из галогена, гидрокси, амино, CN и ^^люкси.
(и) .
12. Соединение по любому из представленных выше пунктов, где соединение имеет формулу (III)
10. Соединение по любому из представленных выше пунктов, где L представляет собой -С=С-.
11. Соединение по п.1, где соединение имеет формулу (II)
(in) .
13. Соединение по п.1, которое выбрано из
(R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R)-4-(5-(3,3-диметилбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутан-амида;
(R)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(проп-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)бутанамида; да-4-(5-(бут-1 -ин-1 -ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; да-№гидрокси-2-метил-4-(5-(3-метилбут-1 -ин-1 -ил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфонил)бутанами-
да;
(R)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(пент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)бутанамида; (R)-N-гидрокси-2-метил-4-(5-(( 1 -метилциклопропил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-(метилсульфонил)бутан-амида;
(R)-4-(5-(5-фторбут-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанами-
да;
да-4-(5-(5-фторпент-1 -ин-1 -ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанами-
да;
(R)-4-(5-(5,5-дифторпент-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутан-амида;
(R)-4-(5-((3,3-дифторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида;
(R)-4-(5-((3-фторциклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бу-танамида;
(R)-N-гидрокси-4-(5-(5-гидрокси-5-метилгекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфо-нил)бутанамида;
(R)-N-гидрокси-4-(5-((3-(метоксиметил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсуль-фонил)бутанамида;
(R)-N-гидрокси-4-(5-((3-(2-гидроксипропан-2-ил)циклобутил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида;
N-гидрокси-4-(5-((4-(гидроксиметил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бу-танамида;
N-гидрокси-4-(5-((4-(2-гидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутан-амида;
N-гидрокси-4-(5-((4-(2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метил-сульфонил)бутанамида;
N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)-4-(5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)бутанамида;
N-гидрокси-4-(5-((4-((R)-2-гидроксипропил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсуль-фонил)бутанамида;
(R)-N-гидрокси-4-(5-((4-((S)-2-гидрокси-1-метоксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида;
(R)-4-(5-((4-((S)-1,2-дигидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метил-сульфонил)бутанамида;
(R)-4-(5-((4-((R)-1,2-дигидроксиэтил)фенил)этинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метил-сульфонил)бутанамида;
(2S,3R)-2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-ме-тилизоксазол-3-ил)пропанамида;
(2S,3R)-2-(((5-(циклобутилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-ме-тилизоксазол-3-ил)пропанамида;
(2S,3R)-N,3-дигидрокси-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)-2-(((5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)ме-тил)амино)пропанамида;
N,3-дигидрокси-3-(5-(гидроксиметил)изоксазол-3-ил)-2-метил-2-(((5-(фенилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)пропанамида;
(2S,3R)-N,3-дигидрокси-2-(((5-(6-метоксигекс-1-ин-1-ил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-2-метил-3-(5-метилизоксазол-3-ил)пропанамида;
2-(((5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)метил)амино)-3-(5-циклопропилизоксазол-3-ил)-N,3-ди-гидрокси-2-метилпропанамида;
(R,Е)-4-(5-(бут-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида;
(R,Е)-4-(5-(2-циклопропилвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутан
амида;
(R,Е)-4-(5-(бут-2-ен-2-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R,Z)-4-(5-(бут-2-ен-2-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида; (R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутан-
амида;
(R,Е)-4-(5-(2-циклопропил-1-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутан-
амида;
(R,Z)-4-(5-(2-циклопропил-2-фторвинил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутан-амида и
(R)-4-(5-(циклогекс-1-ен-1-ил)изоксазол-3-ил)-N-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамида, или его фармацевтически приемлемая соль.
14. Соединение по п.1, где соединение представляет собой (R)-4-(5-(циклопропилэтинил)изоксазол-3-ил)-К-гидрокси-2-метил-2-(метилсульфонил)бутанамид
или его фармацевтически приемлемую соль.
15. Фармацевтическая композиция для лечения грамотрицательной бактериальной инфекции, содержащая соединение по любому из пп.1-14 и фармацевтически приемлемый носитель.
16. Фармацевтическая комбинированная композиция для лечения грамотрицательной бактериальной инфекции, содержащая соединение по любому из пп.1-12, антибактериальное эффективное количество второго терапевтического агента, выбранного из группы, состоящей из ампициллина, пиперацилли-на, пенициллина G, тикарциллина, имипенема, меропенема, азитромицина, эритромицина, азтреонама, цефепима, цефотаксима, цефтриаксона, цефтазидима, ципрофлоксацина, левофлоксацина, клиндамици-на, доксициклина, гентамицина, амикацина, тобрамицина, тетрациклина, тигециклина, рифампицина, ванкомицина и полимиксина, и фармацевтически приемлемый носитель.
17. Способ лечения субъекта с грамотрицательной бактериальной инфекцией, включающий введение субъекту, нуждающемуся в таковом, антибактериально эффективного количества соединения по любому из пп.1-14.
18. Применение соединения по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для лечения грамотрицательной бактериальной инфекции у субъекта, где бактериальную инфекцию выбирают из семейств Pseudomonadales и Enterobacteriaceae, которые выбирают из группы, состоящей из Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas, Burkholderia, Serratia, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Salmonella, Shigella, Providencia, Morganella, Cedecea, Уersina и виды Edwardsiella и Escherichia coli.
19. Применение соединения по п.16, где соединение формулы (I) используют в комбинации с иммуномодулятором.
20. Способ ингибирования фермента деацетилазы в грамотрицательной бактерии, включающий контактирование грамотрицательной бактерии с соединением по любому из пп.1-14.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
032138
032138
- 1 -
- 1 -
(19)
032138
032138
- 1 -
- 1 -
(19)
032138
032138
- 4 -
- 3 -
(19)
032138
032138
- 6 -
- 6 -
032138
032138
- 7 -
- 7 -
032138
032138
- 37 -
032138
032138
- 40 -
- 40 -
032138
032138
- 48 -
- 48 -
032138
032138
- 49 -
- 49 -
032138
032138
- 50 -
- 50 -