|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Соединение формулы  или его фармацевтически приемлемая соль; где каждый Q представляет собой О; каждый R 1 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный C 1-10 алкил, необязательно замещенный С 2-10 алкенил, необязательно замещенный C 2-10 алкинил или группу формулы (iv)  при условии, что по меньшей мере один R 1 представляет собой группу формулы (iv); L представляет собой необязательно замещенный C 1-10 алкилен; каждый из R 6 и R 7 независимо представляет собой водород или группу формулы (i) или (ii)  при условии, что по меньшей мере один из R 6 и R 7 представляет собой группу формулы (i) или (ii); каждый R 2 представляет собой водород; где формула (i) представляет собой независимо формулу (i-a) или (i-b)  каждый R' независимо представляет собой водород или необязательно замещенный C 1-10 алкил; X представляет собой О, S, NR X , где R X представляет собой водород или защитную группу азота; Y представляет собой О; R P представляет собой водород или защитную группу кислорода; R L представляет собой необязательно замещенный C 6-20 алкил, необязательно замещенный C 6-20 алкенил, необязательно замещенный C 6-20 алкинил, необязательно замещенный гетероС 6-20 алкил, необязательно замещенный гетероС 6-20 алкенил или необязательно замещенный гетероС 6-20 алкинил; причем когда C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 1-10 алкилен, C 6-20 алкил, C 6-20 алкенил, C 6-20 алкинил, гетероС 6-20 алкил, гетероС 6-20 алкенил или гетероС 6-20 алкинил замещен одним или более заместителем на атоме углерода, один или более заместитель на атоме углерода является независимо галогеном, -CN, -NO 2 , -N 3 , -SO 2 H, -SO 3 H, -ОН, -OR aa , -N(R bb ) 2 , -SH, -SR aa , -SSR cc , -C(=O)R aa , -CO 2 H, -CHO, -CO 2 R aa , -OC(=O)R aa , -OCO 2 R aa , -C(=O)N(R bb ) 2 , -OC(=O)N(R bb ) 2 , -NR bb C(=O)R aa , -NR bb CO 2 R aa , -NR bb C(=O)N(R bb ) 2 , -C(=O)NR bb SO 2 R aa , -NR bb SO 2 R aa , -SO 2 N(R bb ) 2 , -SO 2 R aa , -SO 2 OR aa , -OSO 2 R aa , -S(=O)R aa , -OS(=O)R aa , -Si(R aa ) 3 , C 1-10 алкилом, C 2-10 алкенилом, C 2-10 алкинилом, C 3-10 карбоциклилом, 3-14-членным гетероциклилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-14 арилом или 5-14-членным гетероарилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; или два геминальных водорода на атоме углерода замещены группой =O, =S, =NR bb ; когда гетероС 6-20 алкил, гетероС 6-20 алкенил или гетероС 6-20 алкинил замещен одним или более заместителем на атоме азота, один или более заместитель на атоме азота является независимо защитной группой азота -ОН, -OR aa , -C(=O)R aa , -C(=O)N(R cc ) 2 , -CO 2 R aa , -SO 2 R aa , C 1-10 алкилом, C 2-10 алкенилом, C 2-10 алкинилом, C 3-10 карбоциклилом, 3-14-членным гетероциклилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-14 арилом или 5-14-членным гетероарилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; когда гетероС 6-20 алкил, гетероС 6-20 алкенил или гетероС 6-20 алкинил замещен заместителем на атоме кислорода, заместитель на атоме кислорода является защитной группой кислорода; и когда гетероС 6-20 алкил, гетероС 6-20 алкенил или гетероС 6-20 алкинил замещен заместителем на атоме серы, заместитель на атоме серы является защитной группой серы, где каждая из защитных групп серы является независимо -R aa , -N(R bb ) 2 , -C(=O)SR aa , -C(=O)R aa , -CO 2 R aa , -C(=O)N(R bb ) 2 , -C(=NR bb )R aa , -C(=NR bb )OR aa , -C(=NR bb )N(R bb ) 2 , -S(=O)R aa , -SO 2 R aa , -Si(R aa ) 3 , -P(R cc ) 2 , -P(R cc ) 3 , -P(=O) 2 R aa , -P(=O)(R aa ) 2 , -P(=O)(OR cc ) 2 или -P(=O)(NR bb ) 2 ; причем каждый R aa независимо представляет собой C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, С 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-14 арил или 5-14-членный гетероарил, или две R aa группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; каждый R bb независимо представляет собой водород, -ОН, -OR aa , -N(R cc ) 2 , -CN, -C(=O)R aa , -C(=O)N(R cc ) 2 , -CO 2 R aa , -SO 2 R aa , -SO 2 N(R cc ) 2 , -SO 2 R cc , -SO 2 OR cc , -SOR aa , C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, С 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-14 арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две R bb группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; каждый R cc независимо представляет собой водород, C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С 6-14 арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две R cc группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; каждый R dd независимо представляет собой галоген, -CN, -NO 2 , -N 3 , -SO 2 H, -SO 3 H, -ОН, -OR ee , -N(R ff ) 2 , -SH, -SR ee , -SSR ee , -C(=O)R ee , -CO 2 H, -CO 2 R ee , -OC(=O)R ee , -OCO 2 R ee , -C(=O)N(R ff ) 2 , -OC(=O)N(R ff ) 2 , -NR ff C(=O)R ee , -NR ff CO 2 R ee , -NR ff C(=O)N(R ff ) 2 , -NR ff SO 2 R ee , -SO 2 N(R ff ) 2 , -SO 2 R ee , -SO 2 OR ee , -OSO 2 R ee , -S(=O)R ee , -Si(R ee ) 3 , C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-10 арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R gg группами, или два геминальных R dd заместителя соединены, образуя =O; каждый R ee независимо представляет собой C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, C 6-10 арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R gg группами; каждый R ff независимо представляет собой водород, C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-10 арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две R ff группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R gg группами; и каждый R gg независимо представляет собой галоген, -CN, -NO 2 , -N 3 , -SO 2 H, -SO 3 H, -ОН, -ОС 1-10 алкил, -N(C 1-10 алкил) 2 , -SH, -SC 1-10 алкил, -SS(C 1-10 алкил), -C(=O)(C 1-10 алкил), -СО 2 Н, -CO 2 (C 1-10 алкил), -OC(=O)(C 1-10 алкил), -OCO 2 (C 1-10 алкил), -C(=O)NH 2 , -C(=O)N(C 1-10 алкил) 2 , -OC(=O)NH(C 1-10 алкил), -NHC(=O)(C 1-10 алкил), -N(C 1-10 алкил)С(=О)(C 1-10 алкил), -NHCO 2 (C 1-10 алкил), -NHC(=O)N(C 1-10 алкил) 2 , -NHC(=O)NH(C 1-10 алкил), -NHC(=O)NH 2 , -NHSO 2 (C 1-10 алкил), -SO 2 N(C 1-10 алкил) 2 , -SO 2 NH(C 1-10 алкил), -SO 2 NH 2 , -SO 2 C 1-10 алкил, -SO 2 OC 1-10 алкил, -OSO 2 C 1-6 алкил, -SOC 1-6 алкил, -Si(C 1-10 алкил) 3 , C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, C 6-10 арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота; или два геминальных R gg заместителя связаны, образуя =O; каждая защитная группа азота независимо выбрана из группы, состоящей из -ОН, -OR aa , -N(R cc ) 2 , -C(=O)R aa , -C(=O)N(R cc ) 2 , -CO 2 R aa , -SO 2 R aa , -C(=NR cc )R aa , -C(=NR cc )OR aa , -C(=NR cc )N(R cc ) 2 , -SO 2 N(R cc ) 2 , -SO 2 R cc , -SO 2 OR cc , -SOR aa , -C(=S)N(R cc ) 2 , -C(=O)SR cc , -C(=S)SR cc , C 1-10 алкил, аралкил, гетероалкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, C 6-14 арил или 5-14-членные гетероарильные группы, причем каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, алкил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; и каждая защитная группа кислорода независимо выбрана из группы, состоящей из -R aa , -N(R bb ) 2 , -C(=O)SR aa , -C(=O)R aa , -CO 2 R aa , -C(=O)N(R bb ) 2 , -C(=NR bb )R aa , -C(=NR bb )OR aa , -C(=NR bb )N(R bb ) 2 , -S(=O)R aa , -SO 2 R aa и -Si(R aa ) 3 . 2. Соединение по п.1, где каждый R 1 представляет собой группу формулы (iv). 3. Соединение по п.1, где группа формулы (iv) характеризуется формулой  где q представляет собой целое число от 1 до 10 включительно. 4. Соединение по п.1, где соединение характеризуется формулой       или его фармацевтически приемлемая соль, причем р является 1. 5. Соединение по п.1, где соединение характеризуется формулой      или его фармацевтически приемлемая соль. 6. Соединение по п.1, которое характеризуется формулой  или его фармацевтически приемлемая соль. 7. Соединение по любому из пп.1-3, где группа формулы (i) является группой формулы (i-a1)  8. Соединение по любому из пп.1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-а2)  9. Соединение по любому из пп.1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-b1)  10. Соединение по любому из пп.1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-b2)  11. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-10, где R L необязательно замещен C 6-20 алкилом. 12. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-11, где R 6 и R 7 , каждый независимо, представляют собой водород или группу формулы (i)  при условии, что по меньшей мере один из R 6 и R 7 представляет собой группу формулы (i). 13. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-11, где R 6 и R 7 , каждый независимо, представляют собой водород или группу формулы (ii)  при условии, что по меньшей мере один из R 6 и R 7 представляет собой группу формулы (ii). 14. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является фармацевтической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклеотид. 15. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является косметической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклеотид. 16. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является нутрицевтической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклеотид. 17. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является фармацевтической композицией и средство представляет собой пептид или белок. 18. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является косметической композицией и средство представляет собой пептид или белок. 19. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является нутрицевтической композицией и средство представляет собой пептид или белок. 20. Композиция по любому из пп.14-16, отличающаяся тем, что средство представляет собой полинуклеотид и полинуклеотид представляет собой ДНК или РНК. 21. Композиция по п.20, отличающаяся тем, что полинуклеотид представляет собой РНК и РНК представляет собой dsRNA, siRNA, shRNA, miRNA или антисмысловую РНК. 22. Композиция по любому из пп.14-16, отличающаяся тем, что агент является полинуклеотидом и полинуклеотид кодирует белок или пептид. 23. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает холестерин. 24. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает ПЭГилированный липид. 25. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает фосфолипид. 26. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает аполипопротеин. 27. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.14, 17 и 20-26 для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий. 28. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.14, 17 и 20-26 для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий. 29. Применение соединения по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий. 30. Применение соединения по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий. 31. Применение композиции по любому из пп.14-16 и 20-26 для доставки полинуклеотида в клетку. 32. Применение по п.31, отличающееся тем, что полинуклеотид представляет собой РНК, и при доставке РНК в клетку РНК способна препятствовать экспрессии определенного гена в клетке. 33. Применение по п.31, отличающееся тем, что полинуклеотид кодирует белок или пептид.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль; где каждый Q представляет собой О; каждый R 1 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный C 1-10 алкил, необязательно замещенный С 2-10 алкенил, необязательно замещенный C 2-10 алкинил или группу формулы (iv) при условии, что по меньшей мере один R 1 представляет собой группу формулы (iv); L представляет собой необязательно замещенный C 1-10 алкилен; каждый из R 6 и R 7 независимо представляет собой водород или группу формулы (i) или (ii) при условии, что по меньшей мере один из R 6 и R 7 представляет собой группу формулы (i) или (ii); каждый R 2 представляет собой водород; где формула (i) представляет собой независимо формулу (i-a) или (i-b) каждый R' независимо представляет собой водород или необязательно замещенный C 1-10 алкил; X представляет собой О, S, NR X , где R X представляет собой водород или защитную группу азота; Y представляет собой О; R P представляет собой водород или защитную группу кислорода; R L представляет собой необязательно замещенный C 6-20 алкил, необязательно замещенный C 6-20 алкенил, необязательно замещенный C 6-20 алкинил, необязательно замещенный гетероС 6-20 алкил, необязательно замещенный гетероС 6-20 алкенил или необязательно замещенный гетероС 6-20 алкинил; причем когда C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 1-10 алкилен, C 6-20 алкил, C 6-20 алкенил, C 6-20 алкинил, гетероС 6-20 алкил, гетероС 6-20 алкенил или гетероС 6-20 алкинил замещен одним или более заместителем на атоме углерода, один или более заместитель на атоме углерода является независимо галогеном, -CN, -NO 2 , -N 3 , -SO 2 H, -SO 3 H, -ОН, -OR aa , -N(R bb ) 2 , -SH, -SR aa , -SSR cc , -C(=O)R aa , -CO 2 H, -CHO, -CO 2 R aa , -OC(=O)R aa , -OCO 2 R aa , -C(=O)N(R bb ) 2 , -OC(=O)N(R bb ) 2 , -NR bb C(=O)R aa , -NR bb CO 2 R aa , -NR bb C(=O)N(R bb ) 2 , -C(=O)NR bb SO 2 R aa , -NR bb SO 2 R aa , -SO 2 N(R bb ) 2 , -SO 2 R aa , -SO 2 OR aa , -OSO 2 R aa , -S(=O)R aa , -OS(=O)R aa , -Si(R aa ) 3 , C 1-10 алкилом, C 2-10 алкенилом, C 2-10 алкинилом, C 3-10 карбоциклилом, 3-14-членным гетероциклилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-14 арилом или 5-14-членным гетероарилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; или два геминальных водорода на атоме углерода замещены группой =O, =S, =NR bb ; когда гетероС 6-20 алкил, гетероС 6-20 алкенил или гетероС 6-20 алкинил замещен одним или более заместителем на атоме азота, один или более заместитель на атоме азота является независимо защитной группой азота -ОН, -OR aa , -C(=O)R aa , -C(=O)N(R cc ) 2 , -CO 2 R aa , -SO 2 R aa , C 1-10 алкилом, C 2-10 алкенилом, C 2-10 алкинилом, C 3-10 карбоциклилом, 3-14-членным гетероциклилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-14 арилом или 5-14-членным гетероарилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; когда гетероС 6-20 алкил, гетероС 6-20 алкенил или гетероС 6-20 алкинил замещен заместителем на атоме кислорода, заместитель на атоме кислорода является защитной группой кислорода; и когда гетероС 6-20 алкил, гетероС 6-20 алкенил или гетероС 6-20 алкинил замещен заместителем на атоме серы, заместитель на атоме серы является защитной группой серы, где каждая из защитных групп серы является независимо -R aa , -N(R bb ) 2 , -C(=O)SR aa , -C(=O)R aa , -CO 2 R aa , -C(=O)N(R bb ) 2 , -C(=NR bb )R aa , -C(=NR bb )OR aa , -C(=NR bb )N(R bb ) 2 , -S(=O)R aa , -SO 2 R aa , -Si(R aa ) 3 , -P(R cc ) 2 , -P(R cc ) 3 , -P(=O) 2 R aa , -P(=O)(R aa ) 2 , -P(=O)(OR cc ) 2 или -P(=O)(NR bb ) 2 ; причем каждый R aa независимо представляет собой C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, С 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-14 арил или 5-14-членный гетероарил, или две R aa группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; каждый R bb независимо представляет собой водород, -ОН, -OR aa , -N(R cc ) 2 , -CN, -C(=O)R aa , -C(=O)N(R cc ) 2 , -CO 2 R aa , -SO 2 R aa , -SO 2 N(R cc ) 2 , -SO 2 R cc , -SO 2 OR cc , -SOR aa , C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, С 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-14 арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две R bb группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; каждый R cc независимо представляет собой водород, C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С 6-14 арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две R cc группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; каждый R dd независимо представляет собой галоген, -CN, -NO 2 , -N 3 , -SO 2 H, -SO 3 H, -ОН, -OR ee , -N(R ff ) 2 , -SH, -SR ee , -SSR ee , -C(=O)R ee , -CO 2 H, -CO 2 R ee , -OC(=O)R ee , -OCO 2 R ee , -C(=O)N(R ff ) 2 , -OC(=O)N(R ff ) 2 , -NR ff C(=O)R ee , -NR ff CO 2 R ee , -NR ff C(=O)N(R ff ) 2 , -NR ff SO 2 R ee , -SO 2 N(R ff ) 2 , -SO 2 R ee , -SO 2 OR ee , -OSO 2 R ee , -S(=O)R ee , -Si(R ee ) 3 , C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-10 арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R gg группами, или два геминальных R dd заместителя соединены, образуя =O; каждый R ee независимо представляет собой C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, C 6-10 арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R gg группами; каждый R ff независимо представляет собой водород, C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C 6-10 арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две R ff группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R gg группами; и каждый R gg независимо представляет собой галоген, -CN, -NO 2 , -N 3 , -SO 2 H, -SO 3 H, -ОН, -ОС 1-10 алкил, -N(C 1-10 алкил) 2 , -SH, -SC 1-10 алкил, -SS(C 1-10 алкил), -C(=O)(C 1-10 алкил), -СО 2 Н, -CO 2 (C 1-10 алкил), -OC(=O)(C 1-10 алкил), -OCO 2 (C 1-10 алкил), -C(=O)NH 2 , -C(=O)N(C 1-10 алкил) 2 , -OC(=O)NH(C 1-10 алкил), -NHC(=O)(C 1-10 алкил), -N(C 1-10 алкил)С(=О)(C 1-10 алкил), -NHCO 2 (C 1-10 алкил), -NHC(=O)N(C 1-10 алкил) 2 , -NHC(=O)NH(C 1-10 алкил), -NHC(=O)NH 2 , -NHSO 2 (C 1-10 алкил), -SO 2 N(C 1-10 алкил) 2 , -SO 2 NH(C 1-10 алкил), -SO 2 NH 2 , -SO 2 C 1-10 алкил, -SO 2 OC 1-10 алкил, -OSO 2 C 1-6 алкил, -SOC 1-6 алкил, -Si(C 1-10 алкил) 3 , C 1-10 алкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, C 6-10 арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота; или два геминальных R gg заместителя связаны, образуя =O; каждая защитная группа азота независимо выбрана из группы, состоящей из -ОН, -OR aa , -N(R cc ) 2 , -C(=O)R aa , -C(=O)N(R cc ) 2 , -CO 2 R aa , -SO 2 R aa , -C(=NR cc )R aa , -C(=NR cc )OR aa , -C(=NR cc )N(R cc ) 2 , -SO 2 N(R cc ) 2 , -SO 2 R cc , -SO 2 OR cc , -SOR aa , -C(=S)N(R cc ) 2 , -C(=O)SR cc , -C(=S)SR cc , C 1-10 алкил, аралкил, гетероалкил, C 2-10 алкенил, C 2-10 алкинил, C 3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, C 6-14 арил или 5-14-членные гетероарильные группы, причем каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, алкил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R dd группами; и каждая защитная группа кислорода независимо выбрана из группы, состоящей из -R aa , -N(R bb ) 2 , -C(=O)SR aa , -C(=O)R aa , -CO 2 R aa , -C(=O)N(R bb ) 2 , -C(=NR bb )R aa , -C(=NR bb )OR aa , -C(=NR bb )N(R bb ) 2 , -S(=O)R aa , -SO 2 R aa и -Si(R aa ) 3 . 2. Соединение по п.1, где каждый R 1 представляет собой группу формулы (iv). 3. Соединение по п.1, где группа формулы (iv) характеризуется формулой где q представляет собой целое число от 1 до 10 включительно. 4. Соединение по п.1, где соединение характеризуется формулой или его фармацевтически приемлемая соль, причем р является 1. 5. Соединение по п.1, где соединение характеризуется формулой или его фармацевтически приемлемая соль. 6. Соединение по п.1, которое характеризуется формулой или его фармацевтически приемлемая соль. 7. Соединение по любому из пп.1-3, где группа формулы (i) является группой формулы (i-a1) 8. Соединение по любому из пп.1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-а2) 9. Соединение по любому из пп.1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-b1) 10. Соединение по любому из пп.1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-b2) 11. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-10, где R L необязательно замещен C 6-20 алкилом. 12. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-11, где R 6 и R 7 , каждый независимо, представляют собой водород или группу формулы (i) при условии, что по меньшей мере один из R 6 и R 7 представляет собой группу формулы (i). 13. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-11, где R 6 и R 7 , каждый независимо, представляют собой водород или группу формулы (ii) при условии, что по меньшей мере один из R 6 и R 7 представляет собой группу формулы (ii). 14. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является фармацевтической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклеотид. 15. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является косметической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклеотид. 16. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является нутрицевтической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклеотид. 17. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является фармацевтической композицией и средство представляет собой пептид или белок. 18. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является косметической композицией и средство представляет собой пептид или белок. 19. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является нутрицевтической композицией и средство представляет собой пептид или белок. 20. Композиция по любому из пп.14-16, отличающаяся тем, что средство представляет собой полинуклеотид и полинуклеотид представляет собой ДНК или РНК. 21. Композиция по п.20, отличающаяся тем, что полинуклеотид представляет собой РНК и РНК представляет собой dsRNA, siRNA, shRNA, miRNA или антисмысловую РНК. 22. Композиция по любому из пп.14-16, отличающаяся тем, что агент является полинуклеотидом и полинуклеотид кодирует белок или пептид. 23. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает холестерин. 24. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает ПЭГилированный липид. 25. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает фосфолипид. 26. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает аполипопротеин. 27. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.14, 17 и 20-26 для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий. 28. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.14, 17 и 20-26 для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий. 29. Применение соединения по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий. 30. Применение соединения по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий. 31. Применение композиции по любому из пп.14-16 и 20-26 для доставки полинуклеотида в клетку. 32. Применение по п.31, отличающееся тем, что полинуклеотид представляет собой РНК, и при доставке РНК в клетку РНК способна препятствовать экспрессии определенного гена в клетке. 33. Применение по п.31, отличающееся тем, что полинуклеотид кодирует белок или пептид.
Евразийское ои 032088 (13) В1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2019.04.30
(21) Номер заявки 201490847
(22) Дата подачи заявки 2012.10.26
(51) Int. Cl.
C07D 207/16 (2006.01) C07C 229/22 (2006.01) C07C 229/26 (2006.01) C07C 229/28 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N15/87 (2006.01) C07D 209/20 (2006.01) C07D 233/64 (2006.01) C07D 241/08 (2006.01) C07D 403/06 (2006.01) C07D 487/06 (2006.01)
C07C 227/18 (2006.01) C07C 229/12 (2006.01) C07C 229/16 (2006.01)
(54)
(31) 61/552,423
(32) 2011.10.27
(33) US
(43) 2014.12.30
(86) PCT/US2012/062222
(87) WO 2013/063468 2013.05.02 (71)(73) Заявитель и патентовладелец:
МАССАЧУСЕТС ИНСТИТЬЮТ ОФ ТЕКНОЛОДЖИ (US)
(72)
Изобретатель:
Дун Ичжо, Лав Кевин Томас, Лэнгер Роберт С., Андерсон Дэниэл Гриффит, Чэнь Делай, Чэнь И, Вегас Артуро Хосе, Алаби Акинлейи, Чжан Юнлун
(74)
(US)
Представитель:
Дементьев В.Н., Клюкин В.А., Христофоров А.А., Угрюмов В.М., Лыу Т.Н., Глухарёва А.О., Карпенко О.Ю., Гизатуллина Е.М., Строкова О.В. (RU)
(56)
US-A-5976569
KAUR NAVNEET ET AL.: "A Delineation of Diketopiperazine Self-Assembly Processes: Understanding the Molecular Events Involved in N.epsilon.(Fumaroyl)diketopiperazine of L-Lys (FDKP) Interactions", MOLECULAR PHARMACEUTICS, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, US, vol. 5, no. 2, 7 April 2008 (2008-04-07), pages 294-315, XP002570931, ISSN: 1543-8384, DOI: 10.1021/MP700096E [retrieved on 2008-02-07] compounds 26b, 9d, 9e
MEREDITH A. MINTZER ET AL.: "Nonviral Vectors for Gene Delivery", CHEMICAL REVIEWS, vol. 109, no. 2, 11 February 2009 (2009-02-11), pages 259-302, XP055006821, ISSN: 0009-2665, DOI: 10.1021/cr800409e page 262; figure 1; compound DOGS functionalization of terminal amino groups by michael addition to acrylates: see schemes 9B, 23, 28
WO-A1-2010114789
ZAUGG H.E. ET AL.: "3-Carboxy-2,5-piperazinedione and Derivatives", JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, vol. 78, no. 11, 5 June 1956 (1956-06-05), pages 2626-2631, XP055046825, ISSN: 0002-7863, DOI: 10.1021/ja01592a082 N-[2-diethylaminoethyl]-3,6-dioxo-2-pipera zinecarboxamide; table II; compound 10th
EP-A1-2045251
WO-A2-2011012746
WO-A2-2004048345
PARRISH D.A. ET AL.: "FIXE- AND SIX-
MEMBERED RING OPENING OF PYROGLUTAMIC DIKETOPIPERAZINE", JOURNAL OF ORGANIC
CHEMISTRY, ACS, US, vol. 67, no. 6, 1 January 2002 (2002-01-01), pages 1820-1826, XP008048103, ISSN: 0022-3263, DOI: 10.1021/J00160928 entries 5-7; page 1823; table 2. Suitability of diketopiperazine derived tetrapeptides to form microcapsules for drug delivery; page 1820, right-hand column, paragraph 1st
Формулы (i) и (ii) представляют собой
Родственные заявки
Настоящая заявка испрашивает приоритет в соответствии с § 119(e) Патентного закона США раздела 35 на основании предварительной заявки на патент США U.S.S.N. 61/552423, подданной 27 октября 2011 г., которая включена в данный документ посредством отсылки.
Государственная поддержка
Настоящее изобретение было осуществлено при государственной поддержке по гранту № R37 ЕВ000244, предоставленному Национальными институтами здравоохранения США. Правительство имеет определенные права на настоящее изобретение.
Предпосылки изобретения
В 1998 г. Мелло и Фаер сообщили о возможности сайленсинга генов с помощью РНК-интерференции. См. Fire et al., Nature (1998) 391:806-811. С тех пор ученые поспешили воспользоваться огромными лечебными возможностями, обусловленными целевым нокдауном гена. Это подтверждается тем фактом, что первое сообщение о RNAi, опосредованной малыми интерферерирующими РНК (siRNA), у человека было опубликовано всего лишь через двенадцать лет после того, как этот феномен был описан у Caenorhabditis elegans. См. Davis et al., Nature (2010) 464:1067-1070. Хорошо понятно, что разработка генетических лекарственных средств замедляется из-за невозможности эффективно доставлять нуклеиновые кислоты in vivo. Будучи незащищенным, введенный в кровоток генетический материал может разрушаться ДНКазами и РНКазами, или, если он не разрушается, генетический материал может вызывать иммунную реакцию. См., например, Whitehead et al., Nature Reviews Drug Discovery (2009) 8:129-138; Robbins et al., Oligonucleotides (2009) 19:89-102. Затем интактная siRNA должна попасть в ци-тозоль, где антисмысловая нить встраивается в комплекс сайленсинга, индуцируемый РНК (RISC) (Whitehead supra). RISC связывается с комплементарными последовательностями мРНК и разрушает их, тем самым предотвращая трансляцию целевой мРНК в белок, т.е. осуществляет "сайленсинг" гена.
Для преодоления сложностей в доставке нуклеотиды включали в комплексы с различными системами доставки, в том числе полимерами, липидами, неорганическими наночастицами и вирусами. См., например, Peer et al. Nature Nanotechnology, (2007) 2:751-760. Однако несмотря на многообещающие данные продолжающихся клинических испытаний в отношении лечения респираторно-синцитиального вируса и типов рака печени (см., например, Zamora et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. (2011) 183:531-538), для клинического применения siRNA все еще требуется разработка более безопасных и более эффективных систем доставки. С этой целью были разработаны многочисленные липидоподобные молекулы, в том числе сложные поли-(3-аминоэфиры и аминоспирт-липиды. См., например, публикации заявок по РСТ №№ WO 2002/031025; WO 2004/106411; WO 2008/011561; WO 2007/143659; WO 2006/138380 и WO 2010/053572. Аминокислота-, пептид-, полипептид-липиды (APPL) также были изучены для множества применений, в том числе применения их в качестве лечебных средств, биологических сурфактантов и систем доставки нуклеотидов. См., например, Giuliani et al., Cellular and Molecular Life Sciences (2011) 68:2255-2266; Ikeda et al., Current Medicinal Chemistry (2007) 14: 111263-1275; Sen, Advances in Experimental Medicine and Biology (2010) 672:316-323; и Damen et al., Journal of Controlled Release (2010) 145:33-39. Однако остается потребность в исследовании и разработке новых APPL-систем с улучшенными свойствами, таких как новые и улучшенные APPL-системы доставки нуклеотидов.
Краткое изложение сущности изобретения
В данном документе описаны соединения и композиции по настоящему изобретению, в определенных вариантах осуществления характеризующиеся конъюгацией различных групп, таких как липофиль-ные группы, с аминогруппой или амидной группой аминокислоты, линейного или циклического пептида, линейного или циклического полипептида или их структурного изомера для получения соединений по настоящему изобретению, совместно называемых в данном документе "APPL". Считается, что такие APPL пригодны для множества применений, таких как, например, улучшенная доставка нуклеотидов. Иллюстративные APPL представляют собой соединения формулы
или его фармацевтически приемлемую соль; где каждый Q представляет собой О;
каждый R1 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный C1-1(^IOM, необязательно замещенный С2 юалкенил, необязательно замещенный С2 юалкинил или группу формулы (iv)
R6 /
-L-N
R7 (iv);
при условии, что по меньшей мере один R1 представляет собой группу формулы (iv); L представляет собой необязательно замещенный C1-10алкилeн;
каждый из независимо представляет собой водород или группу формулы (i) или (ii)
R' R"
(i) (H) при условии, что по меньшей мере один из R6 и R7 представляет собой группу формулы (i) или (ii); каждый R2 представляет собой водород; и
где формула (i) представляет собой независимо формулу (i-a) или (i-b)
RLv R' R'v )-YRP
-YRP \-\
n";" 1 (i-b),
каждый R' независимо представляет собой водород или необязательно замещенный ^^алкал;
X представляет собой О, S, NRX, где RX представляет собой водород или защитную группу азота;
Y представляет собой О;
представляет собой водород;
RL представляет собой необязательно замещенный ^^алкал, необязательно замещенный C6-2(^-кенил, необязательно замещенный ^^ал^нил, необязательно замещенный гетероС6-20алкил, необязательно замещенный гетероС6-20алкенил, необязательно замещенный гетероС6-20алкинил; причем
когда C1-10алкил, ^^ал^нил, C2-10алкинил, C1-10алкилeн, C6-20алкил, C6-20алкeнил, ^^ал^нил, ге-тероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил, или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме углерода, один или более заместителей на атоме углерода является независимо галогеном, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORaa, -N(Rbb)2, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -CO2H, -CHO, -CO2Raa, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -OC(=O)N(Rbb)2, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)2,
-C(=Oaa)NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N(Rbb)2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S(=O)Raa, -OS(=O)Raa,
-Si(Raa)3, C1-10алкил, ^^алкен^т, С2-10алкинил, C3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, ^^арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами; или два геминальных водорода на атоме углерода замещены группой =O, =S, =NRbb;
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме азота, один или более заместителей на атоме азота является независимо защитной группой азота -ОН, -ORaa, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, ^шалкил, ^шалкенил, C2-1(^(tm)-нил, C3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, впарил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме кислорода, один или более заместителей на атоме кислорода является независимо защитной группой кислорода; и
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме серы, один или более заместителей на атоме серы является независимо защитной группой серы, где каждая из защитных групп серы является независимо -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa,
-C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa,
-Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)a, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2 или -P(=O)(NRbb)2;
причем каждый Raa независимо представляет собой ^шалюи, C2-10алкeнил, C2-10алкинил, C3-10кар-боциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, впарил или 5-14-членный гетероарил, или две Raa группы связаны, образуя 3-14-членный гете-роциклил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rbb независимо представляет собой водород, -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, d-юалкил, C2-loалкeнил, C2-loал-кинил, C3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, впарил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, вы
бранных из кислорода, серы и азота, или две Rbb группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rcc независимо представляет собой водород, ^шалюи, ^^алкеши, C^^Menm, ^шкар-боциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, ^^арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rcc группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rdd независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORee, -N(Rff)2, -SH, -SRee, -SSRee, -C(=O)Ree, -CO2H, -CO2Ree, -OC(=O)Ree, -OCO2Ree, -C(=O)N(Rff)2, -OC(=O)N(Rff)2, -NRffC(=O)Ree, -NRffCO2Ree, -NRffC(=O)N(Rff)2, -NRffSO2Ree, -SO2N(Rf%, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S(=O)Ree, -Si(Ree)3, C1-10алкил, C2-10алкeнил, C2-10алкинил, C3-10карбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C6-10 арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами, или два геминальных Rdd заместителя соединены, образуя =O;
каждый Ree независимо представляет собой ^шалки, ^^алкети, C2-10алкинил, C3-10карбоциклил, C6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами;
каждый Rff независимо представляет собой водород, ^шалки, ^^алкени, С2-10алкинил, ^шкар-боциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C6-10арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rff группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами; и
каждый Rgg независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -OC1-1(^-кил, -N(C1-10алкил)2, -SH, -SC1-10алкил, -SS(C1-10алкил), -C(=O)(C1-10алкил), -CO2H, -CO2(C1-10алкил), -OC(=O)(C1-10алкил), -OCO2(C1-10алкил), -C(=O)NH2, -C^O^CM^^)^ -OC(=O)Nн(c1-10алкил), -NHC(=O)(Cl-loалкил), -N(Cl-loалкил)С(=О)(Cl-loалкил), -NHCO2(Cl-loалкил), -NHC(=O)N(Cl-loалкил)2, -NHC(=o)NH(Cl-loалкил), -NHC(=O)NH2, -NHSO2(Cl-loалкил), -SO2N(Cl-loалкил)2, -SO2NH(Cl-loалкил), -SO2NH2, -SO2C1-10алкил, -SO2OC1-10алкил, -OSO2C1-6алкил, -SOCb^raM, -Si(C1-10алкил)3, C1-10алкил, C2-10 алкенил, C2-10алкинил, C3-10карбоциклил, C6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гете-роатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероа-томов, выбранных из кислорода, серы и азота; или два геминальных Rgg заместителя связаны, образуя =O;
каждая защитная группа азота независимо выбрана из группы, состоящей из -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, Cl-юалкил, аралкил, гетероалкил, C2-10 алкенил, C2-10алкинил, C3-10карбоциклил, 3-14 членный гетероциклил, Оз^арил или 5-14 членные гете-роарильные группы, причем каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, алкил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами; и
каждая защитная группа кислорода независимо выбрана из группы, состоящей из -Raa, -N(Rbb)2,
-C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa,
-SO2Raa и -Si(Raa)3.
Иллюстративный APPL по настоящему изобретению представляет собой соединение (сКК-Е12)
(сКК-Е12),
или его соль.
В другом аспекте предусмотрены композиции, содержащие APPL или его соль.
Например, в определенных вариантах осуществления предусмотрена композиция, содержащая
C10H2i'
APPL или его соль и необязательно вспомогательное вещество, где APPL представляет собой аминокислоту, линейный или циклический пептид, линейный или циклический полипептид или их структурный изомер, и где аминогруппа или амидная группа APPL конъюгирована с группой формулы (i), (ii) или (iii). В определенных вариантах осуществления группа формулы (i), (ii) или (iii) присоединена к аминогруппе, расположенной на остове APPL. В определенных вариантах осуществления композиция представляет собой фармацевтическую композицию, косметическую композицию, нутрицевтическую композицию или композицию, которая не применяется в медицине. В определенных вариантах осуществления композиция, которая не применяется в медицине, представляет собой эмульсию или эмульгатор, пригодные в качестве компонента пищи, для тушения пожаров, для дезинфекции поверхностей или для очистки нефти.
В определенных вариантах осуществления композиция дополнительно содержит средство. В определенных вариантах осуществления средство представляет собой органическую молекулу, неорганическую молекулу, нуклеиновую кислоту, белок, пептид, полинуклеотид, нацеливающее средство, изотопно-меченное химическое соединение, вакцину, иммунологическое средство или средство, пригодное для биотехнологии, например внутриклеточного производства белков. В определенных вариантах осуществления средство представляет собой полинуклеотид, и полинуклеотид представляет собой ДНК или РНК. В определенных вариантах осуществления РНК представляет собой RNAi, dsRNA, siRNA, shRNA, miRNA или антисмысловую РНК. В определенных вариантах осуществления средство и APPL не соединены ковалентной связью, например средство и APPL не образуют комплекс с помощью нековалентной связи. Однако в определенных вариантах осуществления средство и APPL соединены ковалентной связью.
В определенных вариантах осуществления композиция находится в форме частицы. В определенных вариантах осуществления частица представляет собой наночастицу или микрочастицу. В определенных вариантах осуществления частица представляет собой мицеллу, липосому или липоплекс. В определенных вариантах осуществления частица инкапсулирует средство, например средство, которое необходимо доставить.
В другом аспекте предусмотрен способ доставки полинуклеотида в биологическую клетку, включающий получение композиции, содержащей APPL или его соль и полинуклеотид, и воздействие композицией на биологическую клетку при условиях, достаточных для облегчения доставки полинуклеотида внутрь биологической клетки; где APPL представляет собой аминокислоту, линейный или циклический пептид или линейный или циклический полипептид или их структурный изомер, где аминогруппа или амидная группа APPL конъюгирована с группой формулы (i), (ii) или (iii). В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой ДНК или РНК. В определенных вариантах осуществления РНК является PHKi, dsRNA, siRNA, shRNA, miRNA или антисмысловой РНК. В определенных вариантах осуществления при доставке РНК в клетку РНК способна препятствовать экспрессии определенного гена в биологической клетке.
В еще одном аспекте предусмотрены способы применения APPL по настоящему изобретению для лечения различных заболеваний, нарушений или состояний. Например, в определенных вариантах осуществления предусмотрен способ лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества APPL или его соли, где APPL представляет собой аминокислоту, линейный или циклический пептид, или линейный или циклический полипептид, или их структурный изомер, где аминогруппа или амидная группа APPL конъюгирована с группой формулы (i), (ii) или (iii).
Подробное описание одного или нескольких вариантов осуществления настоящего изобретения изложено в данном документе. Другие признаки, объекты и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из подробного описания, фигур, примеров и формулы изобретения.
Определения
Химические определения.
Определения конкретных функциональных групп и химических терминов более подробно описаны ниже. Химические элементы указаны в соответствии с Периодической таблицей элементов, версия CAS в Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed., на форзаце, и конкретные функциональные группы, как правило, определяются, как описано в данном документе. Кроме того, общие принципы органической химии, а также конкретные функциональные фрагменты и реакционная способность описаны в Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999; Smith and March March's Advanced Organic Chemistry, 5th Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York, 2001; Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., New York, 1989; и Carruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3rd Edition, Cambridge University Press, Cambridge, 1987.
Соединения, описанные в данном документе, могут содержать один или несколько центров асимметрии и, таким образом, могут существовать в различных изомерных формах, например энантиомеров и/или диастереомеров. Например, соединения, описанные в данном документе, могут находиться в форме отдельного энантиомера, диастереомера или геометрического изомера или могут находиться в форме смесей стереоизомеров, в том числе рацемических смесей и смесей, обогащенных одним или нескольки
ми стереоизомерами. Изомеры можно выделять из смесей с помощью способов, известных специалистам в данной области, в том числе с помощью хиральной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЕЖХ) и образования и кристаллизации хиральных солей; или предпочтительные изомеры можно получать с помощью асимметрических синтезов. См., например, Jacques et al., Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981); Wilen et al., Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); и Wilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972). Настоящее изобретение дополнительно охватывает соединения как отдельные изомеры, фактически не содержащие другие изомеры, так и смеси различных изомеров.
При перечислении диапазона значений подразумевается, что он охватывает каждое значение, а также поддиапазон внутри диапазона. Например, подразумевается, что "Cb^com" охватывает C1, C2, C3, C4, C5, C6, C1-6, C1-5, C1-4, C1-3, С1-2, C2-6, C2-5, C2-4, C2-3, C3-6, C3-5, C3-4, С4-6, C4-5 и C5-6алкил.
Как используется в данном документе, "алкил" относится к радикалу насыщенной углеводородной группы с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащей от 1 до 50 атомов углерода ("С1-50ал-кил"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 40 атомов углерода ("C1-40^ccffii"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 30 атомов углерода ("C1-3(^caur"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 20 атомов углерода ("С1-20алкил"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 10 атомов углерода ("C1-10^ccffii"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 9 атомов углерода ("С1-9алкил"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 8 атомов углерода ("С1-8алкил"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 7 атомов углерода ("С1-7алкил"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 6 атомов углерода ("Cb^caui"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 5 атомов углерода ("С1-5алкил"). В некоторых вариантах осуществления алкиль-ная группа содержит от 1 до 4 атомов углерода ("C1-4^caui"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 3 атомов углерода ("C^^Km"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 1 до 2 атомов углерода ("С1-2алкил"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит 1 атом углерода ("С1алкил"). В некоторых вариантах осуществления алкильная группа содержит от 2 до 6 атомов углерода ("С2-6алкил"). Примеры C1-6алкильных групп включают метильную (С1), этильную (С2), н-пропильную (С3), изопропильную (С3), н-бутильную (С4), трет-бутильную (С4), втор-бутильную (С4), изобутильную (С4), н-пентильную (С5), 3-пентанильную (С5), амильную (С5), неопентильную (С5), 3-метил-2-бутанильную (С5), третичную амильную (С5) и н-гексильную (С6). Дополнительные примеры алкильных групп включают н-гептильную (С7), н-октильную (С8) и т. п. Если не указано иное, каждый представитель алкильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный алкил") или замещенным ("замещенный алкил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления алкильная группа представляет собой незамещенный С1-50алкил. В определенных вариантах осуществления алкильная группа представляет собой замещенный С1-50алкил. Как используется в данном документе, "гетероалкил" относится к алкильной группе, как определено в данном документе, которая дополнительно содержит по меньшей мере один гете-роатом (например, от 1 до 25, например 1, 2, 3 или 4 гетероатома), выбранный из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора, в пределах основной цепи (т. е. вставленный между смежными атомами углерода) и/или помещенный в одно или несколько конечных положений основной цепи. В определенных вариантах осуществления гетероалкильная группа относится к насыщенной группе, имеющей от 1 до 50 атомов углерода и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС1-50алкил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкильная группа относится к насыщенной группе, имеющей от 1 до 40 атомов углерода и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС1-40алкил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкильная группа относится к насыщенной группе, имеющей от 1 до 30 атомов углерода и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС1-30 алкил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкильная группа относится к насыщенной группе, имеющей от 1 до 20 атомов углерода и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС1-20алкил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкильная группа относится к насыщенной группе, имеющей от 1 до 10 атомов углерода и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС1-10алкил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкильной группой является насыщенная группа, имеющая от 1 до 9 атомов углерода и 1 или несколько гетероато-мов в пределах основной цепи ("гетероС1-9алкил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкиль-ной группой является насыщенная группа, имеющая от 1 до 8 атомов углерода и 1 или несколько гете-роатомов в пределах основной цепи ("гетероС1-8алкил"). В некоторых вариантах осуществления гетеро-алкильной группой является насыщенная группа, имеющая от 1 до 7 атомов углерода и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС1-7алкил"). В некоторых вариантах осуществления ге-тероалкильной группой является насыщенная группа, имеющая от 1 до 6 атомов углерода и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС1-6алкил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкильной группой является насыщенная группа, имеющая от 1 до 5 атомов углерода и 1
или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гетероС1-5алкил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкильной группой является насыщенная группа, имеющая от 1 до 4 атомов углерода и 1 или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гетероС1-4алкил"). В некоторых вариантах осуществления гете-роалкильной группой является насыщенная группа, имеющая от 1 до 3 атомов углерода и 1 гетероатом в пределах основной цепи ("гетероС1-3алкил"). В некоторых вариантах осуществления г гетероалкильной группой является насыщенная группа, имеющая от 1 до 2 атомов углерода и 1 гетероатом в пределах основной цепи ("гетероС1-2алкил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкильной группой является насыщенная группа, имеющая 1 атом углерода и 1 гетероатом ("гетероС1алкил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкильной группой является насыщенная группа, имеющая от 2 до 6 атомов углерода и 1 или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гетероС2-6алкил"). Если не указано иное, каждый представитель гетероалкильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный ге-тероалкил") или замещенным ("замещенный гетероалкил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления гетероалкильная группа представляет собой незамещенный ге-тероС1-50алкил. В определенных вариантах осуществления гетероалкильная группа представляет собой замещенный гетероС1-50алкил. Как используется в данном документе, "алкенил" относится к радикалу насыщенной углеводородной группы с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащей от 2 до 50 атомов углерода и одну или несколько углерод-углеродных двойных связей (например, 1, 2, 3 или 4 двойные связи) ("С2-50алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 40 атомов углерода ("С2-40алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 30 атомов углерода ("С2-30алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 20 атомов углерода ("С2-20алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкениль-ная группа имеет от 2 до 10 атомов углерода ("C2-10алкeнил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 9 атомов углерода ("С2-9алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 8 атомов углерода ("С2-8алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 7 атомов углерода ("С2-7алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 6 атомов углерода ("C2-6алкeнил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 5 атомов углерода ("С2-5алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 4 атома углерода ("С2-4алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет от 2 до 3 атомов углерода ("С2-3алкенил"). В некоторых вариантах осуществления алкенильная группа имеет 2 атома углерода ("С2алкенил"). Одна или несколько углерод-углеродных двойных связей могут быть внутренними (такими как в 2-бутениле) или концевыми (такими как в 1-бутениле). Примеры С2-4алкенильных групп включают этенильную (С2), 1-пропенильную (С3), 2-пропенильную (С3), 1-бутенильную (С4), 2-бутенильную (С4), бутадиенильную (С4) и т.п. Примеры C2-6алкeнильных групп включают вышеупомянутые С2-4алкенильные группы, а также пентенильную (С5), пентадиенильную (С5), гексенильную (С6) и т.п. Дополнительные примеры алке-нила включают гептенил (С7), октенил (C8), октатриенил (C8) и т.п. Если не указано иное, каждый представитель алкенильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный алкенил") или замещенным ("замещенный алкенил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления алкенильная группа представляет собой незамещенный C2-50алкeнил. В определенных вариантах осуществления алкенильная группа представляет собой замещенный C2-50алкeнил. Как используется в данном документе, "гетероалкенил" относится к алкенильной группе, как определено в данном документе, которая дополнительно содержит по меньшей мере один гетероатом (например, от 1 до 25, например 1, 2, 3 или 4 гетероатома), выбранный из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора, в пределах основной цепи (т.е. вставленный между смежными атомами углерода) и/или помещенный в одно или несколько конечных положений основной цепи. В определенных вариантах осуществления ге-тероалкенильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 50 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-50алкенил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкенильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 40 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-40алкенил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкенильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 30 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-30алкенил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкенильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 20 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гете-роС2-20алкенил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкенильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 10 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-10алкенил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкенильная группа имеет от 2 до 9 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-9алкенил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкенильная группа имеет от 2 до 8 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-8алкенил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкенильная группа имеет от 2 до 7 атомов углерода, по меньшей мере
одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-7алкенил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкенильная группа имеет от 2 до 6 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-6 алкенил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкенильная группа имеет от 2 до 5 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гете-роС2-5алкенил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкенильная группа имеет от 2 до 4 атома углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гете-роС2-4алкенил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкенильная группа имеет от 2 до 3 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 гетероатом в пределах основной цепи ("гетероС2-3алкенил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкенильная группа имеет от 2 до 6 атомов углерода, по меньшей мере одну двойную связь и 1 или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гете-роС2-6алкенил"). Если не указано иное, каждый представитель гетероалкенильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный гетероалкенил") или замещенным ("замещенный гетероалке-нил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления гетероалке-нильная группа представляет собой незамещенный гетероС2-50алкенил. В определенных вариантах осуществления гетероалкенильная группа представляет собой замещенный гетероС2-50алкенил.
Как используется в данном документе, "алкинил" относится к радикалу насыщенной углеводородной группы с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащей от 2 до 50 атомов углерода и одну или несколько углерод-углеродных тройных связей (например, 1, 2, 3 или 4 тройные связи) и необязательно одну или несколько двойных связей (например, 1, 2, 3 или 4 двойные связи) ("C2-50алкинил"). Ал-кинильная группа, которая имеет одну или несколько тройных связей и одну или несколько двойных связей, также относится к "ен-ин". В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 40 атомов углерода ("C2-40алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 30 атомов углерода ("С2-30алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 20 атомов углерода ("С2-20алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алки-нильная группа имеет от 2 до 10 атомов углерода ("C2-10алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 9 атомов углерода ("С2-9алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 8 атомов углерода ("С2-8алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 7 атомов углерода ("С2-7алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 6 атомов углерода ("C2-6алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 5 атомов углерода ("С2-5алкинил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 4 атомов углерода ("C2-4^cannui"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет от 2 до 3 атомов углерода ("С2-3алки-нил"). В некоторых вариантах осуществления алкинильная группа имеет 2 атома углерода ("С2алкинил"). Одна или несколько углерод-углеродных тройных связей могут быть внутренними (такими как в 2-бутиниле) или концевыми (такими как в 1-бутиниле). Примеры C2-4алкинильных групп включают, без ограничения, этинильную (C2), 1-пропинильную (С3), 2-пропинильную (С3), 1-бутинильную (С4), 2-бутинильную (С4) и т.п. Примеры C2-6алкeнильных групп включают вышеупомянутые C2-4алкинильныe группы, а также пентинильную (С5), гексинильную (С6) и т.п. Дополнительные примеры алкинила включают гептинил (С7), октинил (C8) и т. п. Если не указано иное, каждый представитель алкинильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный алкинил") или замещенным ("замещенный ал-кинил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления алкинильная группа представляет собой незамещенный C2-5l^cannM. В определенных вариантах осуществления алкинильная группа представляет собой замещенный C2-50алкинил. Как используется в данном документе, " гетероалкинил" относится к алкинильной группе, как определено в данном документе, которая дополнительно содержит по меньшей мере один гетероатом (например, от 1 до 25, например 1, 2, 3 или 4 гете-роатома), выбранный из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора в пределах основной цепи (т.е. вставленный между смежными атомами углерода) и/или помещенный в одно или несколько конечных положений основной цепи. В определенных вариантах осуществления гетероалкинильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 50 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-50алкинил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкинильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 40 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-40 алкинил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкинильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 30 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько гетероа-томов в пределах основной цепи ("гетероС2-30алкинил"). В определенных вариантах осуществления гете-роалкинильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 20 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-20алкинил"). В определенных вариантах осуществления гетероалкинильная группа относится к группе, имеющей от 2 до 10 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-10алкинил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкинильная группа имеет от 2 до 9 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько гетероатомов в
пределах основной цепи ("гетероС2-9алкинил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкиниль-ная группа имеет от 2 до 8 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько ге-тероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-8алкинил"). В некоторых вариантах осуществления ге-тероалкинильная группа имеет от 2 до 7 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-7алкинил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкинильная группа имеет от 2 до 6 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или несколько гетероатомов в пределах основной цепи ("гетероС2-6алкинил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкинильная группа имеет от 2 до 5 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гетероС2-5алкинил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкинильная группа имеет от 2 до 4 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гетероС2-4алкинил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкинильная группа имеет от 2 до 3 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 гетероатом в пределах основной цепи ("гетероС2-3алкинил"). В некоторых вариантах осуществления гетероалкинильная группа имеет от 2 до 6 атомов углерода, по меньшей мере одну тройную связь и 1 или 2 гетероатома в пределах основной цепи ("гетероС2-6алкинил"). Если не указано иное, каждый представитель гетероалкинильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный гетероалкинил") или замещенным ("замещенный гетероалкинил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления гетероалкинильная группа представляет собой незамещенный гетероС2-50алкинил. В определенных вариантах осуществления гетероалкинильная группа представляет собой замещенный гетероС2-50алкинил.
Как используется в данном документе, "карбоциклил" или "карбоциклический" относится к радикалу неароматической циклической углеводородной группы, содержащей от 3 до 10 атомов углерода в кольце ("C3-10карбоциклил") и ни одного гетероатома в неароматической кольцевой системе. В некоторых вариантах осуществления карбоциклильная группа имеет от 3 до 8 атомов углерода в кольце ("C3-8 карбоциклил"). В некоторых вариантах осуществления карбоциклильная группа имеет от 3 до 7 атомов углерода в кольце ("C3-7карбоциклил"). В некоторых вариантах осуществления карбоциклильная группа имеет от 3 до 6 атомов углерода в кольце ("C3-6карбоциклил"). В некоторых вариантах осуществления карбоциклильная группа имеет от 4 до 6 атомов углерода в кольце ("С4-6карбоциклил"). В некоторых вариантах осуществления карбоциклильная группа имеет от 5 до 6 атомов углерода в кольце ("C5-6карбо-циклил"). В некоторых вариантах осуществления карбоциклильная группа имеет от 5 до 10 атомов углерода в кольце ("C5-10карбоциклил"). Иллюстративные C3-6карбоциклильныe группы включают, без ограничения, циклопропильную (С3), циклопропенильную (С3), циклобутильную (С4), циклобутенильную (C4), циклопентильную (С5), циклопентенильную (С5), циклогексильную (C6), циклогексенильную (C6), циклогексадиенильную (C6) и т.п. Иллюстративные C3-8карбоциклильныe группы включают, без ограничения, вышеупомянутые C3-6карбоциклильныe группы, а также циклогептильную (С7), циклогептениль-ную (С7), циклогептадиенильную (С7), циклогептатриенильную (С7), циклооктильную (C8), циклоокте-нильную (C8), бицикло[2.2.1]гептанильную (С7), бицикло[2.2.2]октанильную (C8) и т.п. Иллюстративные C3-10карбоциклильныe группы включают, без ограничения, вышеупомянутые C3-8карбоциклильныe группы, а также циклононильную (С9), циклононенильную (С9), циклодецильную (C10), циклодеценильную (C10), октагидро-1H-индeнильную (С9), декагидронафталенильную (C10), спиро[4.5]деканильную (C10) и т. п. Как показано в вышеизложенных примерах, в определенных вариантах осуществления карбоцик-лильная группа является или моноциклической ("моноциклический карбоциклил"), или полициклической (например, содержит конденсированную, соединенную мостиковой связью или спирокольцевую систему, такую как бициклическая система ("бициклический карбоциклил") или трициклическая система ("трициклический карбоциклил")) и может быть насыщенной или может содержать одну или несколько углерод-углеродных двойных или тройных связей. "Карбоциклил" также включает кольцевые системы, где карбоциклильное кольцо, как определено выше, конденсировано с одной или несколькими арильны-ми или гетероарильными группами, где точка присоединения находится на карбоциклильном кольце, и в таких случаях число углеродных атомов продолжает обозначать число углеродных атомов в карбоцик-лической кольцевой системе. Если не указано иное, каждый представитель карбоциклильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный карбоциклил") или замещенным ("замещенный карбоциклил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления кар-боциклильная группа представляет собой незамещенный C3-10карбоциклил. В определенных вариантах осуществления карбоциклильная группа представляет собой замещенный C3-10карбоциклил.
В некоторых вариантах осуществления "карбоциклил" или "карбоциклический" относится к "цик-лоалкильной", т.е. моноциклической насыщенной карбоциклильной группе, имеющей от 3 до 10 атомов углерода в кольце ("C3-10циклоалкил"). В некоторых вариантах осуществления циклоалкильная группа имеет от 3 до 8 атомов углерода в кольце ("C3-8циклоалкил"). В некоторых вариантах осуществления циклоалкильная группа имеет от 3 до 6 атомов углерода в кольце ("C3-^muK^caui"). В некоторых вариантах осуществления циклоалкильная группа имеет от 4 до 6 атомов углерода в кольце ("С4-6цик-лоалкил"). В некоторых вариантах осуществления циклоалкильная группа имеет от 5 до 6 атомов углерода в кольце ("C5-6micuTC^caui"). В некоторых вариантах осуществления циклоалкильная группа имеет
от 5 до 10 атомов углерода в кольце ("C5-10циклоалкил"). Примеры C5-6циклоалкильных групп включают циклопентильную (С5) и циклогексильную (С5). Примеры C3-6циклоалкильных групп включают вышеупомянутые C5-6циклоалкильныe группы, а также циклопропильную (С3) и циклобутильную (С4). Примеры C3-8циклоалкильных групп включают вышеупомянутые C3-6циклоалкильныe группы, а также цикло-гептильную (С7) и циклооктильную (C8). Если не указано иное, каждый представитель циклоалкильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный циклоалкил") или замещенным ("замещенный циклоалкил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления циклоалкильная группа представляет собой незамещенный C3-1^muK^caui. В определенных вариантах осуществления циклоалкильная группа представляет собой замещенный C3-1^murc^caui.
Как используется в данном документе, "гетероциклил" или "гетероциклический" относится к радикалу 3-14-членной неароматической кольцевой системы, имеющей атомы углерода в кольце и 1 или несколько (например, 1, 2, 3 или 4) гетероатома в кольце, где каждый гетероатом независимо выбран из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора ("3-14-членный гетероциклил"). В гетероциклильных группах, которые содержат один или несколько атомов азота, точкой присоединения может быть атом углерода или азота, как допускает валентность. Гетероциклильная группа может быть или моноциклической ("моноциклический гетероциклил"), или полициклической (например, конденсированной, соединенной мостиковой связью или спирокольцевой системой, например бициклической системой ("бицик-лический гетероциклил") или трициклической системой ("трициклический гетероциклил")), и может быть насыщенной или может содержать одну или несколько углерод-углеродных двойных или тройных связей. Гетероциклильные полициклические кольцевые системы могут включать один или несколько гетероатомов в одном или двух кольцах. "Гетероциклил" также включает кольцевые системы, где гете-роциклильное кольцо, как определено выше, конденсировано с одной или несколькими карбоциклиль-ными группами, где точка присоединения находится или на карбоциклильном кольце или гетероцик-лильном кольце, или кольцевые системы, где гетероциклильное кольцо, как определено выше, конденсировано с одной или несколькими арильными или гетероарильными группами, где точка присоединения находится на гетероциклильном кольце, и, в таких случаях, число членов в кольце продолжает обозначать число членов в кольце в гетероциклильной кольцевой системе. Если не указано иное, каждый представитель гетероциклила независимо является незамещенным ("незамещенный гетероциклил") или замещенным ("замещенный гетероциклил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления гетероциклильная группа представляет собой незамещенный 3-14-членный гетеро-циклил. В определенных вариантах осуществления гетероциклильная группа представляет собой замещенный 3-14-членный гетероциклил.
В некоторых вариантах осуществления гетероциклильная группа представляет собой 5-10-членную неароматическую кольцевую систему, имеющую атомы углерода в кольце и 1 или несколько (например, 1, 2, 3 или 4) гетероатомов в кольце, где каждый гетероатом независимо выбран из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора ("5-10-членный гетероциклил"). В некоторых вариантах осуществления гетероциклильная группа представляет собой 5-8-членную неароматическую кольцевую систему, имеющую атомы углерода в кольце и 1 или несколько (например, 1, 2, 3 или 4) гетероатомов в кольце, где каждый гетероатом независимо выбран из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора ("5-8-членный гетероциклил"). В некоторых вариантах осуществления гетероциклильная группа представляет собой 5-6-членную неароматическую кольцевую систему, имеющую атомы углерода в кольце и 1 или несколько (например, 1, 2, 3 или 4) гетероатомов в кольце, где каждый гетероатом независимо выбран из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора ("5-6-членный гетероциклил"). В некоторых вариантах осуществления 5-6-членный гетероциклил имеет 1 или несколько (например, 1, 2 или 3) гетероатомов в кольце, выбранных из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора. В некоторых вариантах осуществления 5-6-членный гетероциклил имеет 1 или 2 гетероатома в кольце, выбранных из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора. В некоторых вариантах осуществления 5-6-членный гетероцик-лил содержит 1 гетероатом в кольце, выбранный из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора. Иллюстративные 3-членные гетероциклильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения, азирдинил, оксиранил, тиоренил. Иллюстративные 4-членные гетероциклильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения, азетидинил, оксетанил и тиетанил. Иллюстративные 5-членные гетероциклильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения, тетра-гидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиофенил, дигидротиофенил, пирролидинил, дигидропирро-лил и пирролил-2,5-дион. Иллюстративные 5-членные гетероциклильные группы, содержащие 2 гетероа-тома, включают, без ограничения, диоксоланил, оксатиоланил и дитиоланил. Иллюстративные 5-членные гетероциклильные группы, содержащие 3 гетероатома, включают, без ограничения, триазоли-нил, оксадиазолинил и тиадиазолинил. Иллюстративные 6-членные гетероциклильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения, пиперидинил, тетрагидропиранил, дигидропиридинил и тианил. Иллюстративные 6-членные гетероциклильные группы, содержащие 2 гетероатома, включают, без ограничения, пиперазинил, морфолинил, дитианил, диоксанил. Иллюстративные 6-членные гетеро-циклильные группы, содержащие 2 гетероатома, включают, без ограничения, триазинанил. Иллюстративные 7-членные гетероциклильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения,
азепанил, оксепанил и тиепанил. Иллюстративные 8-членные гетероциклильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения, азоканил, оксеканил и тиоканил. Иллюстративные бицикличе-ские гетероциклильные группы включают, без ограничения, индолинил, изоиндолинил, дигидробензо-фуранил, дигидробензотиенил, тетрагидробензотиенил, тетрагидробензофуранил, тетрагидроиндолил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, декагидрохинолинил, декагидроизохинолинил, окта-гидрохроменил, октагидроизохроменил, декагидронафтиридинил, декагидро-1,8-нафтиридинил, окта-ГИДРОПИРРОЛО[3,2-Ь]ПИРРОЛ, индолинил, фталимидил, нафталимидил, хроманил, хроменил, 1H-бензо[е][1,4]диазепинил, 1,4,5,7-тeтрагидропирано[3,4-b]пирролил, 5,6-ДИГИДРО-4Н-ФУРО[3,2-Ь]ПИРРОЛИЛ, 6,7-дигидро-5Н-фуро[3,2-b]пиранил, 5,7-дигидро-4Н-тиено[2,3-с]пиранил, 2,3-дигидро-Ш-пирроло[2,3-Ь]ПИРИДИНИЛ, 2,3-ДИГИДРОФУРО[2,3-Ь]ПИРИДИНИЛ, 4,5,6,7-тeтрагидро-1H-пирроло[2,3-b]пиридинил, 4,5,6,7-тетрагидро-фуро[3,2-с]пиридинил, 4,5,6,7-тeтрагидротиeно[3,2-b]пиридинил, 1,2,3,4-тетрагидро-1,6-нафтиридинил и т.п.
Как используется в данном документе, "арил" относится к радикалу моноциклической или полициклической (например, бициклической или трициклической) 4n+2 ароматической кольцевой системы (например, имеющей 6, 10 или 14 тт-электронов, обобществленных в циклической структуре), содержащей 6-14 атомов углерода в кольце и предусматривающей наличия гетероатомов в ароматической кольцевой системе ("C6-14арил"). В некоторых вариантах осуществления арильная группа имеет 6 атомов углерода в кольце ("С6арил"; например фенил). В некоторых вариантах осуществления арильная группа имеет 10 атомов углерода в кольце ("С10арил"; например нафтил, такой как 1-нафтил и 2-нафтил). В некоторых вариантах осуществления арильная группа имеет 14 атомов углерода в кольце ("С14арил"; например антрацил). "Арил" также включает кольцевые системы, где арильное кольцо, как определено выше, конденсировано с одной или несколькими карбоциклильными или гетероциклильными группами, где радикал или точка присоединения находится на арильном кольце, и в таких случаях число атомов углерода продолжает обозначать число атомов углерода в арильной кольцевой системе. Если не указано иное, каждый представитель арильной группы независимо является незамещенным ("незамещенный арил") или замещенным ("замещенный арил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления арильная группа представляет собой незамещенный C6-14арил. В определенных вариантах осуществления арильная группа представляет собой замещенный С5-14арил. Как используется в данном документе, "гетероарил" относится к радикалу 5-14-членной моноциклической или полициклической (например, бициклической или трициклической) 4n+2 ароматической кольцевой системы (например, имеющей 6, 10 или 14 т -электронов, обобществленных в циклической структуре), имеющей атомы углерода в кольце и 1 или несколько (например, 1, 2, 3 или 4 гетероатома в кольце) гетероатомов в кольце, предусмотренных в ароматической кольцевой системе, где каждый гетероатом независимо выбран из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора ("5-14-членный гетероарил"). В гетероарильных группах, которые содержат один или несколько атомов азота, точкой присоединения может быть атом углерода или азота, как допускает валентность. Гетероарильные полициклические кольцевые системы могут включать один или несколько гетероатомов в одном или обоих кольцах. "Гетероарил" включает кольцевые системы, где гетероарильное кольцо, как определено выше, конденсировано с одной или несколькими карбоциклильными или гетероциклильными группами, где точка присоединения находится на гетероарильном кольце, и в таких случаях число членов кольца продолжает обозначать число членов кольца в гетероарильной кольцевой системе. "Гетероарил" также включает кольцевые системы, где гете-роарильное кольцо, как определено выше, конденсировано с одной или несколькими арильными группами, где точка присоединения находится или на арильном, или на гетероарильном кольце, и в таких случаях число членов кольца обозначает число членов кольца в конденсированной полициклической (арильной/гетероарильной) кольцевой системе. Полициклические гетероарильные группы, где одно кольцо не содержит гетероатом (например, индолил, хинолинил, карбазолил и т. п.), точка присоединения может быть на любом кольце, т.е. или на кольце, несущем гетероатом (например, 2-индолил), или на кольце, которое не содержит гетероатом (например, 5-индолил).
В некоторых вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой 5-10-членную ароматическую кольцевую систему, имеющую атомы углерода в кольце и 1 или несколько (например, 1, 2, 3 или 4) гетероатомов в кольце, предусмотренных в ароматической кольцевой системе, где каждый гетероатом независимо выбран из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора ("5-10-членный гетероарил"). В некоторых вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой 5-8-членную ароматическую кольцевую систему, имеющие атомы углерода в кольце и 1 или несколько (например, 1, 2, 3 или 4) гетероатомов в кольце, предусмотренных в ароматической кольцевой системе, где каждый гетероатом независимо выбран из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора ("5-8-членный гетероарил"). В некоторых вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой 5-6-членную ароматическую кольцевую систему, имеющую атомы углерода в кольце и 1 или несколько (например, 1, 2, 3 или 4) гетероатомов в кольце, предусмотренных в ароматической кольцевой системе, где каждый гетероатом независимо выбран из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора ("5-6-членный гетероарил"). В некоторых вариантах осуществления 5-6-членный гетероарил имеет
1 или несколько (например, 1, 2 или 3) гетероатомов в кольце, выбранных из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора. В некоторых вариантах осуществления 5-6-членный гетероарил имеет 1 или 2 гетероатома в кольце, выбранных из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора. В некоторых вариантах осуществления 5-6-членный гетероарил имеет 1 гетероатом в кольце, выбранный из кислорода, серы, азота, бора, кремния или фосфора. Если не указано иное, каждый представитель гетероариль-ной группы независимо является незамещенным ("незамещенный гетероарил") или замещенным ("замещенный гетероарил") одним или несколькими заместителями. В определенных вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой незамещенный 5-14-членный гетероарил. В определенных вариантах осуществления гетероарильная группа представляет собой замещенный 5-14-членный гете-роарил.
Иллюстративные 5-членные гетероарильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения, пирролил, фуранил и тиофенил. Иллюстративные 5-членные гетероарильные группы, содержащие 2 гетероатома, включают, без ограничения, имидазолил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, тиа-золил и изотиазолил. Иллюстративные 5-членные гетероарильные группы, содержащие 3 гетероатома, включают, без ограничения, триазолил, оксадиазолил и тиадиазолил. Иллюстративные 5-членные гете-роарильные группы, содержащие 4 гетероатома, включают, без ограничения, тетразолил. Иллюстративные 6-членные гетероарильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения, пириди-нил. Иллюстративные 6-членные гетероарильные группы, содержащие 2 гетероатома, включают, без ограничения, пиридазинил, пиримидинил и пиразинил. Иллюстративные 6-членные гетероарильные группы, содержащие 3 или 4 гетероатома, включают, без ограничения, триазинил и тетразинил соответственно. Иллюстративные 7-членные гетероарильные группы, содержащие 1 гетероатом, включают, без ограничения, азепинил, оксепинил и тиепинил. Иллюстративные 5,6-бициклические гетероарильные группы включают, без ограничения, индолил, изоиндолил, индазолил, бензотриазолил, бензотиофенил, изобен-зотиофенил, бензофуранил, бензоизофуранил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензизоксазолил, бензок-садиазолил, бензтиазолил, бензизотиазолил, бензтиадиазолил, индолизинил и пуринил. Иллюстративные 6,6-бициклические гетероарильные группы включают, без ограничения, нафтиридинил, птеридинил, хи-нолинил, изохинолинил, циннолинил, хиноксалинил, фталазинил и хиназолинил. Иллюстративные три-циклические гетероарильные группы включают, без ограничения, фенантридинил, дибензофуранил, кар-базолил, акридинил, фенотиазинил, феноксазинил и феназинил.
Как используется в данном документе, выражение "частично ненасыщенный" относится к кольцевому фрагменту, который включает по меньшей мере одну двойную или тройную связь. Подразумевается, что выражение "частично ненасыщенный" охватывает кольца, имеющие несколько центров ненасыщенности, но не подразумевает включения ароматических групп (например, арильных или гетероариль-ных фрагментов), как определено в данном документе.
Как используется в данном документе, выражение "насыщенный" относится к кольцевому фрагменту, который не содержит двойную или тройную связь, т. е. в кольце все связи одинарные.
Прибавление суфикса "-ен" к группе указывает на то, что группа представляет собой двухвалентный фрагмент, например алкилен представляет собой двухвалентный фрагмент алкила, алкенилен представляет собой двухвалентный фрагмент алкенила, алкинилен представляет собой двухвалентный фрагмент алкинила, гетероалкилен представляет собой двухвалентный фрагмент гетероалкила, гетероалкени-лен представляет собой двухвалентный фрагмент гетероалкенила, гетероалкинилен представляет собой двухвалентный фрагмент гетероалкинила, карбоциклилен представляет собой двухвалентный фрагмент карбоциклила, гетероциклилен представляет собой двухвалентный фрагмент гетероциклила, арилен представляет собой двухвалентный фрагмент арила и гетероарилен представляет собой двухвалентный фрагмент гетероарила.
Как понятно из вышесказанного, алкильные, алкенильные, алкинильные, гетероалкильные, гетеро-алкенильные, гетероалкинильные, карбоциклильные, гетероциклильные, арильные и гетероарильные группы, как определено в данном документе, являются в определенных вариантах осуществления необязательно замещенными. Необязательно замещенный относится к группе, которая может быть замещенной или незамещенной (например, "замещенная" или "незамещенная" алкильная, "замещенная" или "незамещенная" алкенильная, "замещенная" или "незамещенная" алкинильная, "замещенная" или "незамещенная" гетероалкильная, "замещенная" или "незамещенная" гетероалкенильная, "замещенная" или "незамещенная" гетероалкинильная, "замещенная" или "незамещенная" карбоциклильная, "замещенная" или "незамещенная" гетероциклильная, "замещенная" или "незамещенная" арильная или "замещенная" или " незамещенная" гетероарильная группа). Как правило, выражение "замещенный" означает, что по меньшей мере один водород, присутствующий в группе, замещен допустимым заместителем, например заместителем, при замещении которым получается устойчивое соединение, например соединение, которое самопроизвольно не подвергается трансформации, такой как перегруппировка, реакция замыкания кольца, отщепление или другой реакции. Если не указано иное, "замещенная" группа имеет заместитель в одном или нескольких замещаемых положениях группы, и если в любой указанной структуре замещено более одного положения, то заместитель в каждом положении одинаковый или различный.
Предполагается, что выражение "замещенный" включает замещение всеми допустимыми замести- 11
телями органических соединений, любыми из заместителей, описанных в данном документе, которое приводит к образованию устойчивого соединения. Настоящее изобретение предполагает любую и все такие комбинации для достижения устойчивого соединения. Для целей настоящего изобретения гетероа-томы, такие как азот, могут иметь водородные заместители и/или любой подходящий заместитель, как описано в данном документе, который удовлетворяет валентностям гетероатомов и приводит к образованию устойчивого фрагмента.
Иллюстративные заместители атома углерода включают, но без ограничения, галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORaa, -ON(Rbb)2, -N(Rbb)2, -N(Rbb)3+X-, -N(ORcc)Rbb, -SeH, -SeRaa, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -CO2H, -CHO, -C(ORcc)2, -CO2Raa, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -OC(=O)N(Rbb)2, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa,
-OC(=NRbb)Raa, -OC(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -OC(=NRbb)N(Rbb)2, -NRbbC(=NRbb)N(Rbb)2, -C(=O)NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N(Rbb)2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S(=O)Raa, -OS(=O)Raa,
-Si(Raa)3, -OSi(Raa)3 -C(=S)N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=S)SRaa, -SC(=S)SRaa, -SC(=O)SRaa, -OC(=O)SRaa, -SC(=O)ORaa, -SC(=O)Raa, -P(=O)2Raa, -OP(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -OP(=O)(Raa)2, -OP(=O)(ORcc)2, -P(=O)2N(Rbb)2, -OP(=O)2N(Rbb)2, -P(=O)(NRbb)2, -OP(=O)(NRbb)2, -NRbbP(=O)(ORcc)2, NRbbP(=O)(NRbb)2, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3, -OP(Rcc)2, -OP(Rcc)3, -B(Raa)2, -B(ORcc)2, -BRaa(ORcc), Cl-5oалкил, C2-5oалкeнил, C2-5oалки-нил, C3-14карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, впарил и 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd-группами;
или два геминальных водорода на атоме углерода замещены группой =O, =S, =NN(Rbb)2, =NNRbbC(=O)Raa, =NNRbbC(=0)ORaa, =NNRbbS(=O)2Raa, =NRbb или =NORcc;
каждый представитель Raa независимо выбран из ^^алсшла, C2-50алкeнила, C2-50алкинила, ^^кар-боциклила, 3-14-членного гетероциклила, C6-14арила и 5-14-членного гетероарила, или две Raa-группы объединены с образованием 3-14-членного гетероциклильного или 5-14-членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd-группами;
каждый представитель Rbb неазвисимо выбран из водорода, -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)2N(Rcc)2, -P(=O)(NRcc)2, С1-5оалкила, C2-50алкeнила, C2-50алкинила, C3-10карбоциклила, 3-14 членного гетероциклила, C6-14арила и 5-14-членного гетероарила, или две Rbb-группы объединены с образованием 3-14-членного гетероциклильного или 5-14-членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd-группами;
каждый представитель Rcc независимо выбран из водорода, С1-50алкила, C2-50алкeнила, C2-5(^KI-нила, C3-10карбоциклила, 3-14-членного гетероциклила, впарила и 5-14-членного гетероарила, или две Rcc-группы объединены с образованием 3-14-членного гетероциклильного или 5-14-членного гетероа-рильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd-группами;
каждый представитель Rdd независимо выбран из галогена, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORee, -ON(Rff)2, -N(Rff)2, -N(Rff)3+X-, -N(ORee)Rff, -SH, -SRee, -SSRee, -C(=O)Ree, -CO2H, -CO2Ree, -OC(=O)Ree, -OCO2Ree, -C(=O)N(Rff)2, -OC(=O)N(Rff)2, -NRffC(=O)Ree, -NRffCO2Ree, -NRffC(=O)N(Rff)2,
-C(=NRff)ORee, -OC(=NRff)Ree, -OC(=NRff)ORee, -C(=NRff)N(Rff)2, -OC(=NRff)N(Rff)2, NRffC(=NRff)N(Rff)2, -NRffSO2Ree, -SO2N(Rff)2, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S(=O)Ree, -Si(Ree)3, -OSi(Ree)3, -C(=S)N(Rff)2, -C(=O)SRee, -C(=S)SRee, -SC(=S)SRee, -P(=O)2Ree, -P(=O)(Ree)2, -OP(=O)(Ree)2, -OP(=O)(ORee)2, С1-50алкила,
С2-50алкенила, С2-50алкинила, C3-10карбоциклила, 3-10-членного гетероциклила, C6-10арила, 5-10-членного гетероарила, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rss-группами, или два геминальных Rdd заместителя могут быть объединены с образованием =O или =S;
каждый представитель Ree независимо выбран из С1-50алкила, C2-50алкeнила, C2-50алкинила, ^^кар-боциклила, C6-10арила, 3-10-членного гетероциклила и 3-10-членного гетероарила, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rss-группами;
каждый представитель Rff независимо выбран из водорода, С1-50алкила, C2-50алкeнила, C2-5(^-кинила, C3-10карбоциклила, 3-10-членного гетероциклила, C6-10арила и 5-10-членного гетероарила, или две Rff-группы объединены с образованием 3-14-членного гетероциклильного или 5-14-членного гете-роарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rss-группами; и
каждый представитель Rss независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ОС1-50алкил, -ON^^^caufb, -^С1-50алкил)2, -^С1-50алкил)3+Х-, -№г[(С1-50алкил)2+Х-, -№г[2(С1-50 алкил)+Х-, -NH3+X-, -N(ОС1-50алкил)(С1-50алкил), -N(ОН)(С1-50алкил), -NH(OH), -SH, -SC1-50алкил, -SS(C1-50 алкил), -С(=O)(С1-50алкил), -СО2Н, -CO2(С1-50алкил), -ОС(=O)(С1-50алкил), -OCO2(С1-50алкил), -C(=O)NH2, -С(=O)N(Сl-5oалкил)2, -ОС(=O)NH(Сl-5oалкил), -NHC(=O)(Сl-5oалкил), -N(Сl-5oалкил)С(=O))(Сl-5oалкил),
-NHCO2(Сl-5oалкил), -NHC(=O)N(Cl-5oалкил)2, -NHC(=O)NH(Cl-5oалкил), -NHC(=O)NH2, С(=NH)O(Сl-5o алкил), -ОС(=№1)(С1-50алкил), -ОС(=NH)ОС1-50алкил, C(=NH)N(C1-50алкил)2, -С(=NH)NH(С1-50алкил), -C(=NH)NH2, ОС(=NH)N(С1-50алкил)2, -ОС(NH)NH(С1-50алкил), -OC(NH)NH2, NHC(NH)N(С1-50алкил)2, -NHC(=NH)NH2, -NHSO2(С1-50алкил), -SO2N(С1-50алкил)2, -SO2NH(С1-50алкил), -SO2NH2, -SO2C1-5(^KUI, -SO2OC1-50алкил, -OSO2C1-6алкил, -SOC1-6алкил, -Si(С1-50алкил)3, -OSi(С1-6алкил)3 -С(=S)N(С1-50алкил)2, -С(=S)NH(Сl-5oалкил), -C(=S)NH2, -С(=О)S(Сl-6алкил), -^S^d^Kui, -SC(=S)SCl-6алкил, -Р(=O)2(Сl-5o алкил), -Р(=O)(С1-50алкил)2, ^P^OX^^^CC^^, -ОР(=O)(ОС1-50алкил)2, С1-50алкил, C2-50алкeнил, C2-5(^-кинил, C3-10карбоциклил, C6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, 5-10-членный гетероарил;
или два геминальных Rss заместителя могут быть объединены с образованием =O или =S;
где X- представляет собой противоион.
Как используется в данном документе, выражение "гало" или "галоген" относится к фтору (фтор, -F), хлору (хлор, -Cl), брому (бром, -Br) или йоду (йод, -I). Как используется в данном документе, "про-тивоион" представляет собой отрицательно заряженную группу, связанную с положительно заряженным четвертичным амином для поддержания электронной нейтральности. Иллюстративные противоионы включают галоидные ионы (например, F-, Cl-, Br-, I-), NO3-, ClO4-, ОН-, Н2РО4-, HSO4-, сульфонатные ионы (например, метансульфонат, трифторметасульфонат, п-толуолсульфонат, бензолсульфонат, 10-камфорасульфонат, нафталин-2-сульфонат, нафталин-1-сульфоновая кислота-5-сульфонат, этан-1-сульфоновая кислота-2-сульфонат и т.п.) и карбоксилат-ионы (например, ацетат, этаноат, пропаноат, бензоат, глицерат, лактат, татрат, гликолат и т. п.).
Атомы азота могут быть замещенными или незамещенными, как допускает валентность, и включают первичные, вторичные, третичные и четвертичные атомы азота. Иллюстративные заместители атомов азота включают, но без ограничения, водород, -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)2N(Rcc)2, -P(=O)(NRcc)2, С1-5оалкил, C2-50алкeнил, C2-50алкинил, C3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, ^^арил и 5-14-членный гетероарил, или две Rcc группы, присоединенные к атому N, объединяются с образованием 3-14-членного гетероциклильного или 5-14-членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами и где Raa, Rbb, Rcc и Rdd определены выше. Атомы азота могут быть замещенными или незамещенными, как допускает валентность, и включают первичные, вторичные, третичные и четвертичные атомы азота. Иллюстративные заместители атомов азота включают, но без ограничения, водород, -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)2N(Rcc)2, -P(=O)(NRcc)2, C1-10алкил, C1-10пeргалогeналкил, C2-10алкeнил, C2-10алкинил, ^шкарбо-циклил, 3-14-членный гетероциклил, впарил и 5-14-членный гетероарил или две Rcc-группы, присоединенные к атому азота, объединяются с образованием 3-14-членного гетероциклильного или 5-14-членного гетероарильного кольца, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd-группами, и где Raa, Rbb, Rcc и Rdd определены выше. В определенных вариантах осуществления заместитель, присутствующий на атоме азота, представляет собой защитную группу азота (также называемую аминозащитной группой). Защитные группы азота включают, но без ограничения, -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, C1-1(^caui (например, аралкил, гетероаралкил), C2-10алкeнил, C2-10 алкинил, C3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, ^^арил и 5-14-членные гетероарильные группы, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, аралкил, арил и гетероарил независимо замещены 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd-группами и где Raa, Rbb, Rcc и Rdd определены в данном документе.
Защитные группы азота хорошо известны в данной области техники и включают таковые, подробно описанные в Protectins Groups in Orsanic Synthesis, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999, включенном в данный документ посредством ссылки. Например, защитные группы азота, например амидные группы (например, -C(=O)Raa), включают, но без ограничения, формамид, ацетамид, хлорацетамид, трихлорацетамид, трифторацетамид, фенилацетамид, 3-фенилпропанамид, пиколинамид, 3-пиридилкарбоксамид, производное N-бензоилфенилаланила, бензамид, n-фенилбензамид, о-нитро-фенилацетамид, о-нитрофеноксиацетамид, ацетоацетамид, N'-дитиобeнзилоксиациламино)ацeтамид, 3-(n-гидроксифeнил)пропанамид, 3-(о-нитрофенил)пропанамид, 2-метил-2-(о-нитрофенокси)пропанамид, 2-метил-2-(о-фенилазофенокси)пропанамид, 4-хлорбутанамид, 3-метил-3-нитробутанамид, о-нитро-циннамид, производное N-ацетилметионина, о-нитробензамид и о-(бензоилоксиметил)бензамид.
Защитные группы азота, такие как карбаматные группы (например, -C(=O)ORaa), включают, но без ограничения, метилкарбамат, этилкарбамат, 9-фторенилметилкарбамат (Fmoc), 9-(2-сульфо)фторенилметилкарбамат, 9-(2,7-дибром)фторенилметилкарбамат, 2,7-ди-трет-бутил-[9-(10,10-диоксо-10,10,10,10-тетрагидротиоксантил)]метилкарбамат (DBD-Tmoc), 4-метоксифенацилкарбамат (Phenoc), 2,2,2-трихлорэтилкарбамат (Troc), 2-триметилсилилэтилкарбамат (Теос), 2-фенилэтилкарбамат (hZ), 1-(1-адамантил)-1-метилэтилкарбамат (Adpoc), 1,1-диметил-2-галогенэтилкарбамат, 1,1-диметил
2,2-дибромэтилкарбамат (DB-трет-ВОС), 1,1-диметил-2,2,2-трихлорэтилкарбамат (ТСВОС), 1-метил-1-(4-бифенилил)этилкарбамат (Врос), 1-(3,5-ди-трет-бутилфенил)-1-метилэтилкарбамат (t-Bumeoc), 2-(2'- и 4'-пиридил)этилкарбамат (Руос), 2-(N,N-дициклокарбоксамидо)этилкарбамат, трет-бутилкарбамат (ВОС), 1-адамантилкарбамат (Adoc), винилкарбамат (Voc), аллилкарбамат (Alloc), 1-изопропил-аллилкарбамат (Ipaoc), циннамилкарбамат (Coc), 4-нитроцинамилкарбамат (Noc), 8-хинолилкарбамат, N-гидроксипиперидинилкарбамат, алкилдитиокарбамат, бензилкарбамат (Cbz), n-метоксибензилкарбамат (Moz), n-нитробензилкарбамат, n-бромбензилкарбамат, n-хлорбензилкарбамат, 2,4-дихлорбензил-карбамат, 4-метилсульфинилбензилкарбамат (Msz), 9-антрилметилкарбамат, дифенилметилкарбамат, 2-метилтиоэтилкарбамат, 2-метилсульфонилэтилкарбамат, 2-(n-толуолсульфонил)этилкарбамат, [2-(1,3-дитианил)]метилкарбамат (Dmoc), 4-метилтиофенилкарбамат (Mtpc), 2,4-диметилтиофенилкарбамат (Bmpc), 2-фосфониоэтилкарбамат (Реос), 2-трифенилфосфониоизопропилкарбамат (Ррос), 1,1-диметил-2-цианоэтилкарбамат, м-хлор-n-ацилоксибeнзилкарбамат, n-(дигидроксиборил)бeнзилкарбамат, 5-бензизоксазолилметилкарбамат, 2-(трифторметил)-6-хромонилметилкарбамат (Tcroc), м-нитрофенил-карбамат, 3,5-диметоксибензилкарбамат, о-нитробензилкарбамат, 3,4-диметокси-6-нитробензилкарбамат, фенил(о-нитрофенил)метилкарбамат, трет-амилкарбамат, S-бензилтиокарбамат, n-цианобензилкарбамат, циклобутилкарбамат, циклогексилкарбамат, циклопентилкарбамат, циклопропилметилкарбамат, n-децилоксибензилкарбамат, 2,2-диметоксиацилвинилкарбамат, o-(N,N-димeтилкарбоксамидо)бeнзил-карбамат, 1,1-диметил-3 -(N,N-димeтилкарбоксамидо)пропилкарбамат, 1,1-диметилпропинилкарбамат, ди-(2-пиридил)метилкарбамат, 2-фуранилметилкарбамат, 2-йодэтилкарбамат, изоборнилкарбамат, изо-бутилкарбамат, изоникотинилкарбамат, п-(п'-метоксифенилазо)бензилкарбамат, 1-метилциклобутил-карбамат, 1-метилциклогексилкарбамат, 1-метил-1-циклопропилметилкарбамат, 1-метил-1-(3,5-диме-токсифенил)этилкарбамат, 1-мeтил-1-(n-фeнилазофeнил)этилкарбамат, 1-метил-1-фенилэтилкарбамат, 1-метил-1-(4-пиридил)этилкарбамат, фенилкарбамат, п-(фенилазо)бензилкарбамат, 2,4,6-три-трет-бутилфенилкарбамат, 4-(триметиламмоний)бензилкарбамат и 2,4,6-триметилбензилкарбамат.
Защитные группы азота, например сульфонамидные группы (например, -S(=O)2Raa), включают, но без ограничения, n-толуолсульфонамид (Ts), бензолсульфонамид, 2,3,6,-триметил-4-метоксибензолсульфонамид (Mtr), 2,4,6-триметоксибензолсульфонамид (Mtb), 2,6-диметил-4-метоксибензолсульфонамид (Pme), 2,3,5,6-тетраметил-4-метоксибензолсульфонамид (Mte), 4-метокси-бензолсульфонамид (Mbs), 2,4,6-триметилбензолсульфонамид (Mts), 2,6-диметокси-4-метил-бензолсульфонамид (iMds), 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сульфонамид (Pmc), метансульфонамид (Ms), Р-триметилсилилэтансульфонамид (SES), 9-антраценсульфонамид, 4-(4',8'-диметоксинафтилметил)бен-золсульфонамид (DNMBS), бензилсульфонамид, трифторметилсульфонамид и фенацилсульфонамид. Другие защитные группы азота включают, но без ограничения, производное фенотиазинил-(10)-ацила, производное N'-n-толуолсульфониламиноацила, производное N'-фениламинотиоацила, производное N-бензоилфенилаланила, производное N-ацетилметионина, 4,5-дифенил-3-оксазолин-2-он, N-фталимид, N-дитиасукцинимид (Dts), N-2,3-дифeнилмалeимид, №2,5-диметилпиррол, аддукт N-1,1,4,4-тeтрамeтил-дисилилазациклопентана (STABASE), 5-замещенный 1,3-диметил-1,3,5-триазациклогексан-2-он, 5-замещенный 1,3-дибензил-1,3,5-триазациклогексан-2-он, 1-замещенный 3,5-динитро-4-пиридон, N-метиламин, N-аллиламин, ^[2-(триметилсилил)этокси]метиламин (SEM), N-3-ацетоксипропиламин, N-(1-изопропил-4-нитро-2-оксо-3-пирролин-3-ил)амин, четвертичные соли аммония, N-бензиламин, N-ди-(4-метоксифенил)метиламин, N-5-дибензосубериламин, N-трифенилметиламин (Tr), №[(4-метокси-фенил)дифенилметил]амин (MMTr), N-9-фенилфторениламин (PhF), ^2,7-дихлор-9-фторенил-метиленамин, N-ферроценилметиламино (Fcm), N-2-пиколиламино-N'-оксид, №1,1-диметилтиомети-ленамин, N-бензилиденамин, N-n-метоксибензилиденамин, N-дифенилметиленамин, №[(2-пиридил)ме-зитил]метиленамин, N-(N',N'-димeтиламиномeтилeн)амин, N,N'-изопропилидeндиамин, N-n-нитробензи-лиденамин, N-салицилиденамин, N-5-хлорсалицилиденамин, №(5-хлор-2-гидроксифенил)фенил-метиленамин, N-циклогексилиденамин, №(5,5-диметил-3-оксо-1-циклогексенил)амин, производное N-борана, производное N-дифенилбориновой кислоты, N-[фeнил(пeнтаацилхром- или вольфрам)ацил]амин, N-хелат меди, N-хелат цинка, N-нитроамин, N-нитрозоамин, амин-N-оксид, дифенилфосфинамид (Dpp), диметилтиофосфинамид (Mpt), дифенилтиофосфинамид (Ppt), диалкилфосфорамидаты, дибензилфосфо-рамидат, дифенилфосфорамидат, бензолсульфенамид, о-нитробензолсульфенамид (Nps), 2,4-динитро-бензолсульфенамид, пентахлорбензолсульфенамид, 2-нитро-4-метоксибензолсульфенамид, трифенилме-тилсульфенамид и 3-нитропиридинсульфенамид (Npys).
В определенных вариантах осуществления заместитель, присутствующий при атоме кислорода, представляет собой защитную группу кислорода (также называемый защитной группой гидроксила). Защитные группы кислорода включают, но без ограничения, -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2, -P(=O)2N(Rbb)2 и -P(=O)(NRbb)2, где Raa, Rbb, и Rcc определены в данном документе. Защитные группы кислорода хорошо известны в данной области техники и включают таковые, подробно описанные в Protectins Groups in Orsanic Synthesis, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999, включенном в данный документ посредством ссылки. Иллюстративные защитные группы кислорода включают, но без ограничения, метил, метоксилметил (MOM),
метилтиометил (МТМ), трет-бутилтиометил, (фенилдиметилсилил)метоксиметил (SMOM), бензилокси-метил (BOM), n-метоксибензилоксиметил (РМВМ), (4-метоксифенокси)метил (р-АОМ), гваяколметил (GUM), трет-бутоксиметил, 4-пентенилоксиметил (РОМ), силоксиметил, 2-метоксиэтоксиметил (MEM), 2,2,2-трихлорэтоксиметил, бис-(2-хлорэтокси)метил, 2-(триметилсилил)этоксиметил (SEMOR), тетра-гидропиранил (ТНР), 3-бромтетрагидропиранил, тетрагидротиопиранил, 1-метоксициклогексил, 4-метокситетрагидропиранил (МТНР), 4-метокситетрагидротиопиранил, 4-метокситетрагидротиопиранил S,S-диоксид, 1-[(2-хлор-4-метил)фенил]-4-метоксипиперидин-4-ил (СТМР), 1,4-диоксан-2-ил, тетрагид-рофуранил, тетрагидротиофуранил, 2,3,3a,4,5,6,7,7а-октагидро-7,8,8-тримeтил-4,7-мeтанобeнзофуран-2-ил, 1-этоксиэтил, 1-(2-хлорэтокси)этил, 1-метил-1-метоксиэтил, 1-метил-1-бензилоксиэтил, 1-метил-1-бензилокси-2-фторэтил, 2,2,2-трихлорэтил, 2-триметилсилилэтил, 2-(фенилселенил)этил, трет-бутил, аллил, n-хлорфенил, n-метоксифенил, 2,4-динитрофенил, бензил (Bn), n-метоксибензил, 3,4-диметоксибензил, о-нитробензил, n-нитробензил, n-галогенобензил, 2,6-дихлорбензил, n-цианобензил, n-фенилбензил, 2-пиколил, 4-пиколил, 3-мeтил-2-пиколил-N-оксидо, дифенилметил, П,П'-ДИНИТРО-бензгидрил, 5-дибензосуберил, трифенилметил, а-нафтилдифенилметил, n-метоксифенилдифенилметил, ди-(n-мeтоксифeнил)фeнилмeтил, три-(n-мeтоксифeнил)мeтил, 4-(4'-бромфенацилоксифенил)дифенил-метил, 4,4',4"-трис-(4,5-дихлорфталимидофенил)метил, 4,4',4"-трис-(левулиноилоксифенил)метил, 4,4',4"-трис-(бензоилоксифенил)метил, 3-(имидазол-1-ил)бис-(4',4"-диметоксифенил)метил, 1,1-бис-(4-метоксифенил)-1'-пиренилметил, 9-антрил, 9-(9-фенил)ксантенил, 9-(9-фенил-10-оксо)антрил, 1,3-бензодисульфуран-2-ил, бeнзизотиазолил-S,S-диоксидо, триметилсилил (TMS), триэтилсилил (TES), триизопропилсилил (TIPS), диметилизопропилсилил (IPDMS), диэтилизопропилсилил (DEIPS), диметил-тексилсилил, трет-бутилдиметилсилил (TBDMS), трет-бутилдифенилсилил (TBDPS), трибензилсилил, ТРИ-П-КСИЛИЛСИЛИЛ, трифенилсилил, дифенилметилсилил (DPMS), трет-бутилметоксифенилсилил (TBMPS), формиат, бензоилформиат, ацетат, хлорацетат, дихлорацетат, трихлорацетат, трифторацетат, метоксиацетат, трифенилметоксиацетат, феноксиацетат, n-хлорфеноксиацетат, 3-фенилпропионат, 4-оксопентаноат (левулинат), 4,4-(этилендитио)пентаноат (левулиноилдитиоацеталь), пивалоат, адаманто-ат, кротонат, 4-метоксикротонат, бензоат, n-фенилбензоат, 2,4,6-триметилбензоат (мезитоат), алкилме-тилкарбонат, 9-фторенилметилкарбонат (Fmoc), алкилэтилкарбонат, алкил-2,2,2-трихлорэтилкарбонат (Troc), 2-(триметилсилил)этилкарбонат (TMSEC), 2-(фенилсульфонил)этилкарбонат (Psec), 2-(трифенилфосфонио)этилкарбонат (Реос), алкилизобутилкарбонат, алкилвинилкарбонат, алкилаллилкар-бонат, алкил-n-нитрофeнилкарбонат, алкилбензилкарбонат, алкил-n-мeтоксибeнзилкарбонат, алкил-3,4-диметоксибензилкарбонат, алкил-о-нитробензилкарбонат, алкил-n-нитробeнзилкарбонат, алкил-S-бензилтиокарбонат, 4-этокси-1-нафтилкарбонат, метилдитиокарбонат, 2-йодобензоат, 4-азидобутират, 4-нитро-4-метилпентаноат, о-(дибромметил)бензоат, 2-формилбензолсульфонат, 2-(метилтиометокси)этил, 4-(метилтиометокси)бутират, 2-(метилтиометоксиметил)бензоат, 2,6-дихлор-4-метилфеноксиацетат, 2,6-дихлор-4-(1,1,3,3-тетраметилбутил)феноксиацетат, 2,4-бис-(1,1-диметилпропил)феноксиацетат, хлорди-фенилацетат, изобутират, моносукциноат, (Е)-2-метил-2-бутеноат, о-(метоксиацил)бензоат, а-нафтоат, нитрат, алкил-N,N,N',N'-тeтрамeтилфосфородиамидат, алкил-H-фeнилкарбамат, борат, диметилфосфино-тиоил, алкил-2,4-динитрофенилсульфенат, сульфат, метансульфонат (мезилат), бензилсульфонат и този-лат (Ts).
В определенных вариантах осуществления заместитель, присутствующий на атоме серы, представляет собой защитную группу серы (также называемую защитной группой тиола). Защитные группы серы
включают, но без ограничения, -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2, -P(=O)2N(Rbb)2 и -P(=O)(NRbb)2, где Raa, Rbb, и Rcc определены в данном документе. Защитные группы серы хорошо известны в данной области техники и включают таковые, подробно описанные в Protectins Groups in Orsanic Synthesis, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, 3rd edition, John Wiley & Sons, 1999, включенном в данный документ посредством ссылки.
Как используется в данном документе, "уходящая группа" представляет собой выражение, понятное в данной области техники, относящееся к молекулярному фрагменту, который уходит с парой электронов при гетеролитическом расщеплении связи, где молекулярный фрагмент является анионом или нейтральной молекулой. См., например, Smith, March Advanced Orsanic Chemistry 6th ed. (501-502). Иллюстративные уходящие группы включают, но без ограничения, галогены (например, хлор, бром, йод) и сульфонилзамещенные гидроксильные группы (например, тозил, мезил, безил). Эти и другие иллюстративные заместители описаны более подробно в подробном описании, примерах, фигурах и формуле изобретения. Предусматривается, что настоящее изобретение не ограничивается, каким бы то ни было образом, выше приведенным иллюстративным списком заместителей.
Другие определения.
Как используется в данном документе, применение фразы "по меньшей мере один представитель" относится к одному представителю, но также охватывает два или более представителей, например 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 представителей и до 100 представителей.
"Аминокислота" относится к D/L а-аминокислотам природного и синтетического происхождения, а
также к Р- и у-аминокислотам природного и синтетического происхождения. "Пептид" относится к двум аминокислотам, соединенным пептидной связью. "Полипептид" относится к трём или более аминокислотам, соединенным пептидными связями. "Боковая цепь аминокислоты" относится к группе(ам), зависимой от а-углеродного атома (в случае а-аминокислоты), а- и Р-углеродного атома (в случае Р-аминокислоты) или а-, Р- и у-углеродного атома (в случае у-аминокислоты). Иллюстративные боковые цепи аминокислоты изображены в данном документе; см., например, табл. 1 в примерах.
Как используется в данном документе, "полимер" относится к соединению, содержащему по меньшей мере 3 (например, по меньшей мере 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 и т.д.) повторяющихся структурных единиц, связанных ковалентной связью. "Конъюгированный" и "присоединенный" относится к присоединению группы ковалентной связью, и они используются в данном документе взаимозаменяемо. Как используется в данном документе, "липофильный" относится к способности группы растворяться в жирах, маслах, липидах и липофильных неполярных растворителях, таких как гексан или толуол. Как правило, липофильная группа относится к незамещенной н-алкильной или незамещенной н-алкенильной группе, имеющей от 6 до 50 атомов углерода, например от 6 до 40, от 6 до 30, от 6 до 20, от 8 до 20, от 8 до 19, от 8 до 18, от 8 до 17, от 8 до 16 или от 8 до 15 атомов углерода. Подразумевается, что использование выражений "структурный изомер", "органическая молекула" и "неорганическая молекула" охватывает общепринятое значение каждого выражения, как известно в данной области техники. Как используется в данном документе, "малая органическая молекула" или "малая молекула" относится к органической молекуле с молекулярным весом 800 г/моль или меньше (например, меньше 700 г/моль, меньше 600 г/моль, меньше 500 г/моль, меньше 400 г/моль, меньше 300 г/моль, меньше 200 г/моль, меньше 100 г/моль, от 50 до 800 г/моль включительно, от 100 до 800 г/моль включительно или от 100 до 500 г/моль включительно). В определенных вариантах осуществления малая органическая молекула представляет собой терапевтически активное средство, такое как лекарственное средство (например, малая органическая молекула, утвержденная Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов, как это предусмотрено в Своде федеральных нормативных актов (CFR)). Малая органическая молекула может также образовывать комплексное соединение с металлом. В таком случае, малая органическая молекула также называется "малой металлорганической молекулой".
Как используется в данном документе, "органическая макромолекула" или "макромолекула" относится к органическому соединению с молекулярным весом больше 800 г/моль (например, больше 800 г/моль, больше 900 г/моль, больше 1000 г/моль, больше 2000 г/моль, от 801 до 2000 г/моль включительно, от 900 до 2000 г/моль включительно, от 1000 до 2000 г/моль включительно или от 801 до 1000 г/моль включительно). В определенных вариантах осуществления органическая макромолекула представляет собой терапевтически активное средство, такое как лекарственное средство (например, органическая макромолекула, утвержденная Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов, как это предусмотрено в Своде федеральных нормативных актов (CFR)). Органическая макромолекула может также образовывать комплексное соединение с металлом. В таком случае, органическая макромолекула также называется "металлоорганическим макросоединением".
Как используется в данном документе, "малая неорганическая молекула" относится к неорганическому соединению с молекулярным весом 800 г/моль или меньше (например, меньше 700 г/моль, меньше 600 г/моль, меньше 500 г/моль, меньше 400 г/моль, меньше 300 г/моль, меньше 200 г/моль, меньше 100 г/моль, от 50 до 800 г/моль включительно, от 100 до 800 г/моль включительно или от 100 до 500 г/моль включительно). В определенных вариантах осуществления малая неорганическая молекула представляет собой терапевтически активное средство, такое как лекарственное средство (например, малая неорганическая молекула, утвержденная Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов, как это предусмотрено в Своде федеральных нормативных актов (CFR)).
Как используется в данном документе, "неорганическая макромолекула" относится к неорганическому соединению с молекулярным весом больше 800 г/моль (например, больше 800 г/моль, больше 900 г/моль, больше 1000 г/моль, больше 2000 г/моль, от 801 до 2000 г/моль включительно, от 900 до 2000 г/моль включительно, от 1000 до 2000 г/моль включительно или от 801 до 1000 г/моль включительно). В определенных вариантах осуществления неорганическая макромолекула представляет собой терапевтически активное средство, такое как лекарственное средство (например, неорганическая макромолекула, утвержденная Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов, как это предусмотрено в Своде федеральных нормативных актов (CFR)).
Как используется в данном документе, выражение "соль" или "фармацевтически приемлемая соль" относится к тем солям, которые, с медицинской точки зрения, пригодны для применения в контакте с тканями людей и низших животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.п., и соответствуют приемлемому соотношению польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области техники. Например, S.M. Berse et al. подробно описывают фармацевтически приемлемые соли в J. Pharmaceutical Sciences (1977) 66:1-19. Фармацевтически приемлемые соли соединений по настоящему изобретению включают соли, полученные за счет приемлемых неорганических и органических кислот и оснований. Примерами фармацевтически приемлемых, нетоксичных солей
присоединения кислоты являются соли аминогруппы, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромисто-водородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлор-ная кислота, или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, щавелевая кислота, малеино-вая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или с помощью других способов, применяемых в данной области техники, таких как ионный обмен. Другие фармацевтически приемлемые соли включают адипатные, альгинатные, аскорбатные, аспартатные, бензол-сульфонатные, бензоатные, бисульфатные, боратные, бутиратные, камфоратные, камфорсульфонатные, цитратные, цисслопентанпропионатные, диглюконатные, додецилсульфатные, этансульфонатные, форми-атные, фумаратные, глюкогептонатные, глицерофосфатные, глюконатные, гемисульфатные, гептаноат-ные, гексаноатные, йодгидратные, 2-гидроксиэтансульфонатные, лактобионатные, лактатные, лауратные, лаурилсульфатные, малатные, малеатные, малонатные, метансульфонатные, 2-нафталинсульфонатные, никотинатные, нитратные, олеатные, оксалатные, пальмитатные, памоатные, пектинатные, персульфат-ные, 3-фенилпропионатные, фосфатные, пикратные, пивалатные, пропионатные, стеаратные, сукцинат-ные, сульфатные, тартратные, тиоцианатные, п-толуолсульфонатные, ундеканоатные, валератные соли и т.п. Соли, полученные за счет подходящих оснований, включают соли щелочных металлов, щелочноземельных металлов, аммония и ^(С1-4алкил)4. Представленные соли щелочных или щелочно-земельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и т.п. Дополнительные фармацевтически приемлемые соли включают, при необходимости, катионы нетоксического аммония, четвертичного аммония и амина, образованные с применением противоионов, таких как галоид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, сульфонат и арилсульфонат. Дополнительные фармацевтически приемлемые соли включают соли, образованные за счет кватернизации амина с помощью приемлемого электрофила, например алкилгалоида, с образованием четвертичной алкилированой аминной соли.
Краткое описание графических материалов
На фиг. 1 изображена разработка и оптимизация структуры при помощи in vivo оценки на мышах. Производные липидов с одиночной аминокислотой тестировали при дозе 1 мг/кг на мышах, при этом было показано, что наиболее предпочтительной аминокислотой являлся лизин. Затем лизиновые пептидные и полипептидные производные липидов исследовали при той же дозе. Показатель соответствия улучшался от 1,7 до 23% (включая те соединения, скрининг которых не проводили из-за нестабильности частиц или отсутствия захвата siRNA). Самые лучшие совпадения и их аналоги обследовали при более низкой дозе 0,1 мг/кг, в результате чего cKK-E12 был выбран в качестве соединения-прототипа. K-E12; K: аббревиатура лизина, Е: эпоксид, А: альдегид, О: акрилат, 12: длина углеродного хвоста. cKK-E12; с: циклический; контроль, фосфатно-солевой буфер.
На фиг. 2 изображено биораспределение свободной Су5.5-меченой siRNA и состава Су5.5-меченой siRNA-cKK-E12 у мышей через 1 и 24 ч.
На фиг. 3 изображены влияние аполипопротеинов на сайленсинг с cKK-E12 в клетках HeLa. Апо-липопротеины включали АроА-I (рекомбинантный человеческий белок АроА-I), АроА-II (нативный человеческий белок АроА-II), АроВ (нативный человеческий белок АроВ), АроС-I (нативный человеческий белок АроС-I), АроС-II (нативный человеческий белок АроС-II), АроС-III (нативный человеческий белок АроС-III), АроЕ (нативный человеческий белок АроЕ), АроЕ2 (рекомбинантный человеческий белок АроЕ2), ApoE3 (рекомбинантный человеческий белок ApoE3), АроЕ4 (рекомбинантный человеческий белок АроЕ4), АроН (нативный человеческий белок АроН).
На фиг. 4 изображено влияние АроЕ на сайленсинг гена и поглощение клеткой. А). Влияние АроЕ на сайленсинг с cKK-Е12, cKK-А12 и cKK-O12 in vitro (siRNA: 50 нг/лунку). При добавлении АроЕ влияние на сайленсинг располагалось в следующем порядке: cKK-Е12 > dCK^^ > cKK-O12, что хорошо согласовывалось с in vivo активностью. В). Интернализация cKK-Е12 с siRNA, меченной Alex-647, клеткой после 3 ч инкубации показана с помощью НТ автоматизированной конфокальной микроскопии. АроЕ улучшал поглощение клеткой и выделение cKK-Е12 из эндосом; масштабная полоска: 20 мкм. Подробное описание определенных вариантов осуществления настоящего изобретения
В данном документе описаны соединения и композиции по настоящему изобретению, определенные варианты осуществления которых включают конъюгацию различных групп, таких как липофильные группы, с аминогруппой или амидной группой аминокислоты, линейного или циклического пептида, линейного или циклического полипептида или их структурого изомера для получения соединений по настоящему изобретению, совместно называемых в данном документе "APPL". Считается, что такие APPL пригодны для множества применений, таких как, например, улучшенная доставка нуклеотидов.
а также их фармацевтически приемлемые соли, как описано в данном документе, где
Иллюстративные APPL включают, соединения формулы
каждый Q представляет собой О;
каждый R1 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный С1-10алкил, необязательно замещенный С2_юалкенил, необязательно замещенный С2_юалкинил или группу формулы (iv)
R6 s / |-L-N
при условии, что по меньшей мере один R1 представляет собой группу формулы (iv); L представляет собой необязательно замещенный С1-10алкилен;
каждый из R6 и R' независимо представляет собой водород или группу формулы (i) или (ii)
pi R'\ XR'-
R'A-YRP
?\ ? I"R
R' R'
(i) 6 7 (И)
при условии, что по меньшей мере один из представляет собой группу формулы (i) или (ii);
каждый R2 представляет собой водород; и
где формула (i) представляет собой независимо формулу (i-a) или (i-b)
R'v
YRP
0-а) (i-b),
каждый R' независимо представляет собой водород или необязательно замещенный С1-10алкил;
X представляет собой О, S, NRX, где RX представляет собой водород или защитную группу азота;
Y представляет собой О;
представляет собой водород и
RL представляет собой необязательно замещенный C6-20алкил, необязательно замещенный С6-20ал-кенил, необязательно замещенный С6-20алкинил, необязательно замещенный гетероС6-20алкил, необязательно замещенный гетероС6-20алкенил, необязательно замещенный гетероС6-20алкинил; причем
когда С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С1-10алкилен, С6-20алкил, С6-10алкенил, С6-20алкинил, ге-тероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме углерода, один или более заместитель на атоме углерода является независимо галогеном, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORaa, -N(Rbb)2, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -СО2Н, -СНО, -СС^аа, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -OC(=O)N(Rbb)2, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)2, -C(=(O)NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N(Rbb)2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S(=O)Raa, -OS(=O)Raa, -Si(Raa)3, С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами; или два геминальных водорода на атоме углерода замещены группой =O, =S, =NRbb;
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме азота, один или более заместитель на атоме азота является независимо защитной группой азота -ОН, -ORaa, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гете-роарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил, или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме кислорода, один или более заместитель на атоме кислорода является независимо защитной группой кислорода; и
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме серы, один или более заместитель на атоме серы является независимо защитной группой серы, где каждая из защитных групп серы является независимо -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2, или -P(=O)(NRbb)2; причем
каждый Raa независимо представляет собой С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14
арил или 5-14-членный гетероарил, или две Raa группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rbb независимо представляет собой водород, -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, Сыоалкил, С^оалкенил, С^оал-кинил, С3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rbb группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rcc независимо представляет собой водород, С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10кар-боциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rcc группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rdd независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORee, -N(Rff)2,-SH, -SRee, -SSRee, -C(=O)Ree, -CO2H, -CO2Ree, -OC(=O)Ree, -OCO2Ree, -C(=O)N(Rff)2, -OC(=O)N(Rff)2, -rNRffC(=O)IRee, -NRffCO2Ree, -NRffC(=O)N(Rff)2, -NRffSO2Ree, -SO2N(Rff)2, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S(=O)Ree, -Si(Ree)3, С1-юалкил, С2-юалкенил, С2-юалкинил, С3-юкарбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-10 арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами, или два геминальных Rdd заместителя соединены, образуя =O;
каждый Ree независимо представляет собой С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, С6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами;
каждый Rff независимо представляет собой водород, С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10 карбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-10арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rff группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероа-рил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами; и
каждый Rgg независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, ЮСыоал-кил, -^С1-10алкил)2, -SH, ^С1-10алкил, ^S^^^iam), -C^OKC^^M!!), -СО2Н, -О^Сы^люш), -OC(=O)(Cl-lоалкил), -OCO2(Cl-lоалкил), -C(=O)NH2, -C(=O)N(Cl-lоалкил)2, -OC(=O)NH(Cl-lоалкил), -NHC(=O)(Сl-lоалкил), -N(Cl-lоалкил)С(=О)(Cl-lоалкил), -NHCO2(Cl-lоалкил), -NHC(=O)N(Cl-lоалкил)2, -NHC(=O)NH(Cl-lоалкил), -NHC(=O)NH2, -NHSO2(Cl-lоалкил), -SO2N(Cl-lоалкил)2, -SO2NH(Cl-lоалкил), -SO2NH2, -SO2C1-10алкил, -SO2OC1-10алкил, -OSO2C1-6алкил, -SOC1-6алкил, -Si(C1-10алкил)3, С1-10алкил, С2-10 алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, С6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гете-роатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероа-томов, выбранных из кислорода, серы и азота; или два геминальных Rgg заместителя связаны, образуя
=O; aa cc
каждая защитная группа азота независимо выбрана из группы, состоящей из -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, Сыоалкил, аралкил, гетероалкил, C2-10 алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, 3-14 членный гетероциклил, С6-14арил, или 5-14 членные гете-роарильные группы, причем каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, алкил, арил и гетероарил и независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами; и
каждая защитная группа кислорода независимо выбрана из группы, состоящей из -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, и -SiCRaa)L.
Различные RL-группы, например липофильные группы, можно присоединять к APPL с помощью конъюгации первичной или вторичной аминогруппы или амидной группы аминокислоты, пептида или предшественника полипептида или их структурного изомера, с эпоксидом, тиираном или азиридином формулы (i-x), присоединения по Михаэлю к сф-ненасыщенному сложному эфиру, сложному тиоэфиру или амиду формулы (ii-x), или восстановительного аминирования до альдегида формулы (iii-x) (схема 1).
Схема 1
R' R\ RL
R'^vR,(i-x) r> \^YRP HR\U RPY ^r:a
j-чЦвлн |-NH2 hN4 I \ rL
R' R'
R' О (ii.x) R' R'
I П R'4 I vrL R- XRl RLx I R' R' XF
\ N j или j-NH2 ^ > I-N-^ 6 |-N-x6 б f-N~(^R, Ъ
R' R'
II (iii-x) RL RL^
г V i < н AR^ , ( 4 j H /R ,1
\ N } или j-NH2 Л 2 > \-^-' \-N
моноприсоединение двойное присоединение
Таким образом, в самом широком аспекте в настоящем изобретении предусмотрены APPL и в определенных вариантах осуществления соединения формулы
R2 R1
содержащие по меньшей мере одного представителя группы, присоединенной к ней, с формулой
R. R'4 XRL
RLsJ-YRp
или
(i) (ii)
где каждый R2 представляет собой водород; и
где формула (i) представляет собой независимо формулу (i-a) или (i-b)
RL4 R' R"v )-YRP
-YRP
¦ .-.ti-a) .v.- -:-;:. ,¦ : | (i_b),
каждый R' независимо представляет собой водород или необязательно замещенный С1-10алкил; X представляет собой О, S, NRX, где RX представляет собой водород или защитную группу азота; Y представляет собой О;
представляет собой водород;
представляет собой необязательно замещенный С6-20алкил, необязательно замещенный С6-20ал-кенил, необязательно замещенный С6-20алкинил, необязательно замещенный гетероС6-20алкил, необязательно замещенный гетероС6-20алкенил, необязательно замещенный гетероС6-20алкинил; причем
когда С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С1-10алкилен, С6-20алкил, С6-20алкенил, С6-20алкинил, ге-тероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме углерода, один или более заместитель на атоме углерода является независимо галогеном, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORaa, -N(Rbb)2, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -CO2H, -CHO, -CO2Raa, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -OC(=O)N(Rbb)2, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)2, -C(=0)NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N(Rbb)2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S(=O)Raa, -OS(=O)Raa, -Si(Raa)3, С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами; или два геминальных водорода на атоме углерода замещены группой =O, =S, =NRbb;
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме азота, один или более заместитель на атоме азота является независимо защитной группой азота -ОН, -ORaa, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, Cl-юалкил, С^юалкенил, С^юалкинил,
С3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гете-роарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил, или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме кислорода, один или более заместитель на атоме кислорода является независимо защитной группой кислорода; и
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме серы, один или более заместитель на атоме серы является независимо защитной группой серы, где каждая из защитных групп серы является независимо -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2 или -P(=O)(NRbb)2; причем
каждый Raa независимо представляет собой С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14 арил или 5-14-членный гетероарил, или две Raa группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rbb независимо представляет собой водород, -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, Cl-юалкил, С2-юалкенил, С^оал-кинил, С3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rbb группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rcc независимо представляет собой водород, С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10кар-боциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил, или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rcc группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rdd независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORee, -N(Rff)2,-SH, -SRee, -SSRee, -C(=O)Ree, -CO2H, -CO2Ree, -OC(=O)Ree, -OCO2Ree, -C(=O)N(Rff)2, -OC(=O)N(Rff)2, -]NRffC(=O)Ree, -NRffCO2Ree, -NRffC(=O)N(Rff)2, -NRffSO2Ree, -SO2N(Rff)2, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S(=O)Ree, -Si(Ree)3, Cl-юалкил, С2-юалкенил, С^юалкинил, С3-юкарбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-10 арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами, или два геминальных Rdd заместителя соединены, образуя =O;
каждый Ree независимо представляет собой С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, С6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами;
каждый Rff независимо представляет собой водород, С1-10алкил, С2-10алкенил, С2-10алкинил, С3-10кар-боциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-10арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rff группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами; и
каждый Rgg независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, ЮСыоал-кил, -^С1-10алкил)2, -SH, ^С1-10алкил, -SS(C1-10алкил), -C(=O)(C1-10алкил), -СО2Н, -CO2(C1-10алкил), -OC(=O)(Cl-lоалкил), -OCO2(Cl-lоалкил), -C(=O)NH2, -C(=O)N(Cl-lоалкил)2, -OC(=O)NH(Cl-lоалкил), -NHC(=O)(Cl-lоалкил), -N(Cl-lоалкил)С(=О)(Cl-lоалкил), -NHCO2(Cl-lоалкил), -NHC(=O)N(Cl-lоалкил)2, -NHC(=O)NH(Cl-lоалкил), -NHC(=O)NH2, -NHSO2(Cl-lоалкил), -SO2N(Cl-lоалкил)2, -SO2NH(Cl-lоалкил), -SO2NH2, -SO2C1-10алкил, -SO2OC1-10алкил, -OSO2C1-6алкил, -SOC1-6алкил, ^(С1-10алкил)3, С1-10алкил, С2-10 алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, С6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гете-роатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероа-томов, выбранных из кислорода, серы и азота; или два геминальных Rgg заместителя связаны, образуя
=O; aa cc
каждая защитная группа азота независимо выбрана из группы, состоящей из -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2,
-S02Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, d-юалкил, аралкил, гетероалкил, С2-10 алкенил, С2-10алкинил, С3-10карбоциклил, 3-14 членный гетероциклил, С6-14арил или 5-14 членные гете-роарильные группы, причем каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, алкил, арил и гетероарил и независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами; и
каждая защитная группа кислорода независимо выбрана из группы, состоящей из -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa и -Si(Raa)3.
Иллюстративные соединения по настоящему изобретению
В данном документе особым образом подразумеваются определенные соединения по настоящему изобретению. Иллюстративные соединения включают
или их фармацевтически приемлемые соли, причем р является 1. Композиции.
Настоящее изобретение предусматривает APPL в качестве компонента композиции. Например, в определенных вариантах осуществления предусмотрена композиция, содержащая APPL или его соль и вспомогательное вещество, где APPL представляет собой аминокислоту, линейный или циклический пептид, или линейный или циклический полипептид, или их структурный изомер, и где аминогруппа или амидная группа APPL конъюгирована с группой формулы (i) или (ii). Описываемые в данном документе композиции, содержащие APPL и какое-либо вспомогательное вещество, могут быть пригодны для различных медицинских и немедицинских применений. Например, фармацевтические композиции, содержащие APPL и вспомогательное вещество, могут быть пригодными при доставке эффективного количества средства субъекту, нуждающемуся в этом. Нутрицевтические композиции, содержащие APPL и вспомогательное вещество, могут быть пригодными при доставке эффективного количества нутрицевти-ка, например диетической добавки, субъекту, нуждающемуся в этом. Косметические композиции, содержащие APPL и вспомогательное вещество, можно составлять в виде крема, мази, бальзама, пасты, пленки или жидкости и т.д., и они могут быть пригодны в нанесении косметики, средств для волос, а также в качестве материалов для личной гигиены и т.д. Композиции, содержащие APPL и вспомогательное вещество, могут быть пригодны в немедицинских применениях, например в качестве эмульсии или эмульгатора, пригодных, например, в качестве компонента пищи, для тушения пожаров, для дезинфекции поверхностей, для очистки нефти и т.д.
Пептиды играют важные роли в эндогенных клеточных путях проведения сигнала и путях перемещения веществ и создают огромный потенциал для максимального использования таких взаимодействий с целью усиления эффективности доставки у систем, в которые внедрены пептидные фрагменты. Таким образом, композиции, содержащие APPL и вспомогательное вещество, могут также быть пригодными в биотехнологии, такой как клеточная биотехнология важных с хозяйственной точки зрения химических веществ или топлива. Например, внутриклеточная доставка APPL или средства, образующего комплекс с ним, может быть пригодной в биотехнологии за счет поддержания жизнеспособности и/или роста клетки, например, при производстве белков.
Композиция может содержать один тип APPL, но может также содержать любое количество различных типов APPL, например 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более различных типов APPL.
В определенных вариантах осуществления композиция дополнительно содержит средство, как описано в данном документе. Например, в определенных вариантах осуществления средство представляет собой малую молекулу, металлоорганическое соединение, нуклеиновую кислоту, белок, пептид, поли-нуклеотид, металл, нацеливающее средство, изотопно меченое химическое соединение, лекарственное средство, вакцину, иммунологическое средство или средство, пригодное в биотехнологии. В определенных вариантах осуществления средство представляет собой полинуклеотид. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой ДНК или РНК. В определенных вариантах осуществления РНК представляет собой RNAi, dsRNA, siRNA, shRNA, miRNA или антисмысловую РНК. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид и один или несколько APPL не соединены ковалент-ной связью.
В определенных вариантах осуществления один или несколько APPL находятся в форме частицы. В
определенных вариантах осуществления частица представляет собой наночастицу или микрочастицу. В определенных вариантах осуществления один или несколько APPL находятся в форме липосом или мицелл. Понятно, что в определенных вариантах осуществления такие APPL самособираются с образованием частицы, мицеллы или липосомы. В определенных вариантах осуществления частица, мицелла или липосома инкапсулируют средство. Средство, которое необходимо доставить с помощью частицы, мицеллы или липосомы, может находиться в форме газообразного вещества, жидкости или твердого вещества. APPL можно объединять с полимерами (синтетическими или природными), сурфактантами, холестерином, углеводами, белками, липидами и т.д. с образованием частиц. Эти частицы можно дополнительно объединять с вспомогательным веществом для образования композиции.
"Вспомогательные вещества" включают любой и все растворители, разбавители или другие жидкие наполнители, добавки для образования дисперсии или суспензии, поверхностно-активные вещества, изотонические средства, загустители или эмульгирующие средства, консерванты, твердые связующие материалы, скользящие вещества и т.п., подбираемые в зависимости от конкретной необходимой лекарственной формы. Общие соображения в отношении составления и/или производства можно найти, например, в Remington's Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E.W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980), и Remington: The Science и Practice of Pharmacy, 21st Edition (Lippincott Williams & Wilkins, 2005).
Иллюстративные вспомогательные вещества включают, но без ограничений, любой нетоксичный, инертный твердый, полужидкий или жидкий заполнитель, разбавитель, инкапсулирующий материал или вспомогательные ингредиенты состава любого типа. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве вспомогательных веществ, включают, но без ограничений, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и ацетатцеллюлоза; порошкообразную трагакантовую камедь; солод; желатин; тальк; вспомогательные вещества, такие как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло; сафлоровое масло; кунжутное масло; оливковое масло; кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгли-коль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; детергенты, такие как Tween 80; буферные вещества, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт и раствор фосфатного буфера, а также другие нетоксичные совместимые скользящие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красящие вещества, разделительные средства, покрывающие средства, подсластители, вкусовые и ароматизирующие средства, консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композиции, исходя из решения специалиста, занимающегося разработкой состава. Как будет понятно специалисту в данной области техники, вспомогательные вещества можно выбирать на основании того, для каких целей пригодна композиция. Например, в случае фармацевтической композиции или косметической композиции выбор вспомогательного вещества будет зависеть от пути введения, средства, которое доставляют, периода времени доставки средства и т.д., и ее можно вводить людям и/или животным перо-рально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, интраназально, внутрибрю-шинно, местно (например, с помощью порошков, кремов, мазей или капель), трансбуккально или в виде перорального или назального спрея.
Иллюстративные разбавители включают карбонат кальция, карбонат натрия, фосфат кальция, ди-кальцийфосфат, сульфат кальция, вторичный кислый фосфат кальция, фосфат натрия, лактозу, сахарозу, целлюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, каолин, маннит, сорбит, инозит, хлорид натрия, сухой крахмал, кукурузный крахмал, сахарную пудру и т. д., а также их комбинации.
Иллюстративные гранулирующие и/или диспергирующие средства включают картофельный крахмал, кукурузный крахмал, маниоковый крахмал, крахмалгликолят натрия, глины, альгиновую кислоту, гуаровую камедь, цитрусовый жом, агар, бентонит, целлюлозу и продукты из древесины, природную губку, катионообменные смолы, карбонат кальция, силикаты, карбонат натрия, сшитый поливинилпир-ролидон (кросповидон), карбоксиметилкрахмал натрия (крахмалгликолят натрия), карбоксиметилцеллю-лозу, сшитую карбоксиметилцеллюлозу натрия (кроскармеллозу), метилцеллюлозу, предварительно же-латинизированный крахмал (крахмал 1500), микрокристаллический крахмал, водонерастворимый крахмал, карбоксиметилцеллюлозу кальция, алюмосиликат магния (Veegum), лаурилсульфат натрия, соединения четвертичного аммония и т.д., а также их комбинации. Иллюстративные поверхностно-активные средства и/или эмульгаторы включают природные эмульгаторы (например, аравийскую камедь, агар, альгиновую кислоту, альгинат натрия, трагакант, экстракт Chondrux, холестерин, ксантан, пектин, желатин, яичный желток, казеин, ланолин, холестерин, воск и лецитин), коллоидные глины (например, бентонит [алюмосиликат] и Veegum [алюмосиликат магния]), производные аминокислот с длинной цепью, высокомолекулярные спирты (например, стеариловый спирт, цетиловый спирт, олеиловый спирт, три-ацетинмоностеарат, этиленгликольдистеарат, глицерилмоностеарат и пропиленгликольмоностеарат, поливиниловый спирт), карбомеры (например, карбоксиполиметилен, полиакриловую кислоту, полимер акриловой кислоты и полимер карбоксивинила), каррагинан, производные целлюлозы (например, кар-боксиметилцеллюлозу натрия, порошкообразную целлюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксипро-пилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, метилцеллюлозу), сложные эфиры жирной кислоты и
сорбита (например, полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат [Tween 20], полиоксиэтиленсорбитан [Tween 60], полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат [Tween 80], сорбитанмонопальмитат [Span 40], сорбитанмоно-стеарат [Span 60], сорбитантристеарат [Span 65], глицерилмоноолеат, сорбитанмоноолеат [Span 80]), сложные эфиры полиоксиэтилена (например, полиоксиэтиленмоностеарат [Myrj 45], полиоксиэтилен-гидрогенизованное касторовое масло, полиэтоксилированное касторовое масло, полиоксиметиленстеарат и Solutol), сложные эфиры жирной кислоты и сахарозы, сложные эфиры жирной кислоты и полиэтиленг-ликоля (например, Cremophor), полиоксиэтиленовые эфиры (например, полиоксиэтиленовый эфир лау-рилового спирта [Brij 30]), поливинилпирролидон, диэтиленгликольмонолаурат, триэтаноламинолеат, олеат натрия, олеат калия, этилолеат, олеиновую кислоту, этиллаурат, лаурилсульфат натрия, Pluronic F 68, Poloxamer 188, бромид цетримония, хлорид цетилпиридиния, хлорид бензалкония, докузат натрия и т. д. и/или их комбинации.
Иллюстративные связующие средства включают крахмал (например, кукурузный крахмал и крахмальную пасту), желатин, сахара (например, сахарозу, глюкозу, декстрозу, декстрин, мелассу, лактозу, лактит, маннит и т. д.), природные и синтетические смолы (например, аравийскую камедь, альгинат натрия, экстракт ирландского мха, камедь панвар, камедь гхатти, слизь из шелухи подорожника, карбокси-метилцеллюлозу, метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, ацетатцеллюлозу, поливинилпир-ролидон, алюмосиликат магния (Veegum) и арабиногалактан лиственницы), альгинаты, полиэтиленок-сид, полиэтиленгликоль, неорганические соли кальция, кремниевую кислоту, полиметакрилаты, воски, воду, спирт и т. д. и/или их комбинации.
Иллюстративные консерванты включают антиоксиданты, хелатообразователи, противомикробные консерванты, противогрибковые консерванты, спиртовые консерванты, кислотные консерванты и другие консерванты.
Иллюстративные антиоксиданты включают сс-токоферол, аскорбиновую кислоту, аскорбилпальми-тат, бутилированный гидроксианизол, бутилированный гидрокситолуол, монотиоглицерин, метабисуль-фит калия, пропионовую кислоту, пропилгаллат, аскорбат натрия, бисульфит натрия, матабисульфит натрия и сульфит натрия.
Иллюстративные хелатообразователи включают этилендиаминтетрауксусную кислоту (EDTA) и ее соли и гидраты (например, эдетат натрия, эдетат динатрия, эдетат тринатрия, эдетат кальция динатрия, эдетат дикалия и т. п.), лимонную кислоту и ее соли и гидраты (например, моногидрат лимонной кислоты), фумаровую кислоту и ее соли и гидраты, яблочную кислоту и ее соли и гидраты, фосфорную кислоту и ее соли и гидраты и винную кислоту и ее соли и гидраты.
Иллюстративные противомикробные консерванты включают хлорид бензалкония, хлорид бензето-ния, бензиловый спирт, бронопол, цетримид, хлорид цетилпиридиния, хлоргексидин, хлорбутанол, хлор-крезол, хлорксиленол, крезол, этиловый спирт, глицерин, гексетидин, имидомочевину, фенол, фенокси-этанол, фенилэтиловый спирт, нитрат фенилртути, пропиленгликоль и тимеросал.
Иллюстративные противогрибковые консерванты включают бутилпарабен, метилпарабен, этилпа-рабен, пропилпарабен, бензойную кислоту, гидроксибензойную кислоту, бензоат калия, сорбат калия, бензоат натрия, пропионат натрия и сорбиновую кислоту.
Иллюстративные спиртовые консерванты включают этанол, полиэтиленгликоль, фенол, фенольные соединения, бисфенол, хлорбутанол, гидроксибензоат и фенилэтиловый спирт.
Иллюстративные кислотные консерванты включают витамин А, витамин С, витамин Е, Р-каротин, лимонную кислоту, уксусную кислоту, дегидроуксусную кислоту, аскорбиновую кислоту, сорбиновую кислоту и фитиновую кислоту.
Другие консерванты включают токоферол, токоферолацетат, детероксиммезилат, цетримид, бути-лированный гидроксианизол (ВНА), бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), этилендиамин, лаурил-сульфат натрия (SLS), лаурилэфирсульфат натрия (SLES), бисульфит натрия, матабисульфит натрия, сульфит калия, метабисульфит калия, Glydant Plus, Phenonip, метилпарабен, Germall 115, Germaben II, Neolone, Kathon и Euxyl. В определенных вариантах осуществления консервант представляет собой ан-тиоксидант. В других вариантах осуществления консервант представляет собой хелатообразователь.
Иллюстративные буферные вещества включают растворы цитратного буфера, растворы ацетатного буфера, растворы фосфатного буфера, хлорид аммония, карбонат кальция, хлорид кальция, цитрат кальция, глубионат кальция, глюцептат кальций, глюконат кальция, D-глюконовую кислоту, глицерофосфат кальция, лактат кальция, пропановую кислоту, левулинат кальция, пентановую кислоту, двухосновный фосфат кальция, фосфорную кислоту, трехосновный фосфат кальция, гидроксид-фосфат кальция, ацетат калия, хлорид калия, глюконат калия, калийные смеси, двухосновный фосфат калия, одноосновный фосфат калия, фосфатно-калийные смеси, ацетат натрия, бикарбонат натрия, хлорид натрия, цитрат натрия, лактат натрия, двухосновный фосфат натрия, одноосновный фосфат натрия, фосфатно-натриевые смеси, трометамин, гидроксид магния, гидроксид алюминия, альгиновую кислоту, апирогенную воду, изотонический раствор, раствор Рингера, этиловый спирт и т.д., а также их комбинации. Иллюстративные скользящие средства включают стеарат магния, стеарат кальция, стеариновую кислоту, диоксид кремния,
тальк, солод, глицерилбеганат, гидрогенизированные растительные масла, полиэтиленгликоль, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия, лейцин, лаурилсульфат магния, лаурилсульфат натрия и т.д., а также их комбинации.
Иллюстративные природные масла включают миндальное масло, масло из косточек абрикоса, масло авокадо, масло бабассу, бергамотовое масло, масло из семян черной смородины, масло бурачника, можжевеловое масло, ромашковое масло, масло канолы, тминное масло, масло карнаубы, касторовое масло, коричное масло, масло какао, кокосовое масло, жир печени трески, кофейное масло, кукурузное масло, хлопковое масло, жир эму, эвкалиптовое масло, масло примулы вечерней, рыбий жир, льняное масло, гераниол, масло горлянки, масло из виноградных косточек, масло фундука, масло иссопа, изопро-пилмиристат, масло жожоба, масло из плодов лакового дерева, лавандиновое масло, лавандовое масло, лимонное масло, масло литцея кубебы, масло из орехов макадамии, масло мальвы, масло из семян манго, масло из семян пенника лугового, норковый жир, масло из мускатного ореха, оливковое масло, апельсиновое масло, жир исландского берикса, пальмовое масло, пальмоядровое масло, масло из косточек персика, арахисовое масло, маковое масло, масло из семян тыквы, рапсовое масло, масло из рисовых отрубей, розмариновое масло, сафлоровое масло, сандаловое масло, масло Sasquana, масло чабера, облепихо-вое масло, кунжутное масло, масло из семян ши, силиконовое масло, соевое масло, масло подсолнечника, масло чайного дерева, масло чертополоха, масло камелии, ветиверовое масло, масло грецкого ореха и масло зародышей пшеницы. Иллюстративные синтетические масла включают без ограничения бутил-стеарат, каприловый триглицерид, каприновый триглицерид, циклометикон, диэтилсебацинат, димети-кон 360, изопропилмиристат, минеральное масло, октилдодеканол, олеиловый спирт, силиконовое масло и их комбинации. Дополнительно композиция может содержать фосфолипид. Иллюстративные фосфо-липиды включают, но без ограничений, дистеароилфосфатидилхолин (DSPC), димиристоилфосфатидил-холин (DMPC), дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC) и диолеоил-sn-глицеро-3-фосфохолин (DOPC), 1,2-дилауроил-sn-глицеро-3-фосфохолин (дилауроилфосфатидилхолин, DLPC), 1,2-ДИМИРИСТОИЛ^П-глицеро-3-фосфохолин (димиристоилфосфатидилхолин, DMPC), 1,2-дипентадеканоил-sn-глицеро-3-фосфохолин (дипентадеканоилфосфатидилхолин, DPDPC), 1,2-дипальмитоил-sn-глицеро-3-фосфохолин (дипальмитоилфосфатидилхолин, DPPC), 1-миристоил-2-пальмитоил-sn-глицеро-3-фосфохолин (1-миристоил-2-пальмитоилфосфатидилхолин, МРРС), 1,2-димиристоил-sn-глицеро-3-[фосфо-rac-(1-глицерол)] (DMPG) и 1,2-димиристоил-3-триметиламмоний-пропан.
Кроме того, композиция может дополнительно содержать полимер. Иллюстративные полимеры, предусматриваемые в данном документе, включают, но без ограничений, полимеры и сополимеры на основе целлюлозы, например простые эфиры целлюлозы, такие как метилцеллюлоза (МС), гидрокси-этилцеллюлоза (НЕС), гидроксипропилцеллюлоза (НРС), гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), ме-тилгидроксиэтилцеллюлоза (МНЕС), метилгидроксипропилцеллюлоза (МНРС), карбоксиметилцеллюло-за (CMC), и ее различные соли, в том числе, например, натриевую соль, гидроксиэтилкарбоксиметилцел-люлоза (НЕСМС) и ее различные соли, карбоксиметилгидроксиэтилцеллюлоза (СМНЕС) и ее различные соли, другие полисахариды и производные полисахаридов, такие как крахмал, декстран, производные декстрана, хитозан и альгиновая кислота и ее различные соли, каррагинан, различные смолы, в том числе ксантановую камедь, гуаровую камедь, гуммиарабик, камедь карайи, камедь гхатти, конжаковую камедь и трагакантовую камедь, гликозаминогликаны и протеогликаны, такие как гиалуроновая кислота и ее соли, белки, такие как желатин, коллаген, альбумин и фибрин, другие полимеры, например полиокси-кислоты, такие как полилактид, полигликолид, сополимер лактида и гликолида и сополимер эпсилон-капролактона и гликолида, карбоксивиниловые полимеры и их соли (например, карбомер), поливинил-пирролидон (PVP), полиакриловую кислоту и ее соли, полиакриламид, сополимер полиакриловой кисло-ты/акриламида, полиалкиленоксиды, такие как полиэтиленоксид, полипропиленоксид, сополимер этиле-ноксида и пропиленоксида и полимер Pluronic, полиоксиэтилен (полиэтиленгликоль), полиангидриды, поливиниловый спирт, полиэтиленамин и полипиридин, полимеры на основе полиэтиленгликоля (PEG), такие как ПЭГилированные липиды (например, ПЭГ-стеарат, 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфо-этаноламин-N-[метокси(полиэтиленгликоль)-1000], 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-[метокси(полиэтиленгликоль)-2000] и 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-[метокси(поли-этиленгликоль)-5000]), их сополимеры и соли.
Кроме того, композиция может дополнительно содержать эмульгирующее средство. Иллюстративные эмульгирующие средства включают, но без ограничений, полиэтиленгликоль (PEG), полипропи-ленгликоль, поливиниловый спирт, поли-N-винилпирролидон и их сополимеры, полоксамерные неионные сурфактанты, нейтральные водорастворимые полисахариды (например, декстран, фиколл, целлюлозы), некатионные полиметакрилаты, некатионные полиакрилаты, такие как поли(мет)акриловая кислота, и амиды сложных эфиров и их гидроксиалкиламиды, природные эмульгаторы (например, аравийскую камедь, агар, альгиновую кислоту, альгинат натрия, трагакант, экстракт Chondrux, холестерин, ксантан, пектин, желатин, яичный желток, казеин, ланолин, холестерин, воск и лецитин), коллоидные глины (например, бентонит [алюмосиликат] и Veegum [алюмосиликат магния]), производные аминокислот с длинной цепью, высокомолекулярные спирты (например, стеариловый спирт, цетиловый спирт, олеиловый спирт, триацетинмоностеарат, этиленгликольдистеарат, глицерилмоностеарат и пропиленгликольмоно
стеарат, поливиниловый спирт), карбомеры (например, карбоксиполиметилен, полиакриловую кислоту, полимер акриловой кислоты и полимер карбоксивинил), каррагинан, производные целлюлозы (например, карбоксиметилцеллюлозу натрия, порошкообразную целлюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидро-ксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, метилцеллюлозу), сложные эфиры жирной кислоты и сорбита (например, полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат [Tween 20], полиоксиэтиленсорбитан [Tween 60], полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат [Tween 80], сорбитанмонопальмитат [Span 40], сорби-танмоностеарат [Span 60], сорбитантристеарат [Span 65], глицерилмоноолеат, сорбитанмоноолеат [Span 80]), сложные эфиры полиоксиэтилена (например, полиоксиэтиленмоностеарат [Myrj 45], полиоксиэти-лен-гидрогенизованное касторовое масло, полиэтоксилированное касторовое масло, полиоксиметилен-стеарат и Solutol), сложные эфиры жирной кислоты и сахарозы, сложные эфиры жирной кислоты и поли-этиленгликоля (например, Cremophor), полиоксиэтиленовые эфиры (например, полиоксиэтиленовый эфир лаурилового спирта [Brij 30]), поливинилпирролидон, диэтиленгликольмонолаурат, триэтанолами-нолеат, олеат натрия, олеат калия, этилолеат, олеиновую кислоту, этиллаурат, лаурилсульфат натрия, Pluronic F 68, Poloxamer 188, бромид цетримония, хлорид цетилпиридиния, хлорид бен3алкония, докузат натрия и т. д., и/или их комбинации. В определенных вариантах осуществления эмульгирующее средство представляет собой холестерин. Кроме того, композиция может дополнительно содержать аполипопро-теин. В предыдущих исследованиях сообщалось, что аполипопротеин Е (АроЕ) был способен повышать поглощение клеткой и сайленсинг генов для определенного типа материалов. См., например, Akinc, A., et al., Targeted delivery of RNAi therapeutics with endogenous and exogenous ligand-based mechanisms. Mol Ther. 18(7): p. 1357-64. В определенных вариантах осуществления аполипопротеин представляет собой АроА, АроВ, АроС, АроЕ или АроН, или их изоформы.
Жидкие композиции включают эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и настойки. Кроме APPL жидкая композиция может содержать инертные разбавители, широко применяемые в данной области техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензи-ловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое масло, масло земляного ореха, кукурузное масло, масло зародышей, оливковое масло, касторовое масло и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбита, а также их смеси. Помимо инертных разбавителей перораль-ные композиции могут также содержать вспомогательные средства, такие как смачивающее средства, эмульгирующие и суспендирующие средства, подсластители, вкусовые и ароматизирующие средства.
Инъекционные композиции, например, инъекционные водные или масляные суспензии можно составлять в соответствии с известным уровнем техники с применением диспергирующих или смачивающих средств и суспендирующих средств. Стерильный инъекционный препарат также может представлять собой инъекционный раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе, например в виде раствора в 1,3-бутандиоле. К числу пригодных наполнителей и растворителей, которые можно применять для фармацевтических или косметических композиций, относятся вода, раствор Рингера, U.S.Р. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла традиционно применяют в качестве растворителя или суспендирующей среды. Можно применять любые безвкусные нелетучие масла, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, при получении инъекционных лекарственных форм применяют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. В определенных вариантах осуществления частицы суспендируют в жидкости-носителе, содержащей 1% (вес./об.) карбоксиметилцеллюлозы натрия и 0,1% (об./об.) Tween 80. Инъекционную композицию можно стерилизовать, например, с помощью фильтрации через фильтр, задерживающий бактерий, или путем внедрения стерилизующих средств в форме стерильных твердых композиций, которые можно расстворять или диспергировать в стерильной воде или в другой стерильной инъекционной среде перед применением.
Композиции для ректального или вагинального введения могут находиться в форме суппозиториев, которые можно получать путем смешивания частиц с подходящими нераздражающими вспомогательными веществами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль, или воском для суппозиториев, который является твердым при температуре окружающей среды, но жидким при температуре тела и, таким образом, тает в прямой кишке или вагинальной полости и высвобождает частицы. Твердые композиции включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых композициях частицы смешаны по меньшей мере с одним вспомогательным веществом и/или
a) заполнителями или сухими разбавителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота,
b) связующими веществами, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидинон, сахароза и аравийская камедь,
c) смачивателями, такими как глицерин,
d) веществами для улучшения распадаемости таблеток, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или маниоковый крахмал, альгиновая кислота, определенные силикаты и карбонат натрия,
e) средствами для замедления растворения, такими как парафин,
f) ускорителями всасывания, такими как соединения четвертичного аммония,
g) смачивающими средвами, такими как, например, цетиловый спирт и глицеринмоностеарат,
h) сорбентами, такими как каолиновая и бентонитовая глины, и
i) скользящими веществами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэти-
ленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси.
В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственная форма может также содержать буферные вещества. Твердые композиции аналогичного типа также можно применять в качестве заполнителей в твердых и мягких заполненных желатиновых капсулах с применением таких вспомогательных веществ, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярных полиэтиленгликолей и т.п.
Таблетки, драже, капсулы, пилюли и гранулы можно получать с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области составления лекарственных препаратов. Они необязательно могут содержать замутняющие средства, а также могут характеризоваться таким составом, что они высвобождают только активный ингредиент(ы), или предпочтительно в определенной части кишечника, необязательно с отсроченным высвобождением. Примеры композиций для заключения, которые можно применять, включают полимерные вещества и воски.
Твердые композиции аналогичного типа можно также применять в качестве заполнителей мягких и твердых заполненных желатиновых капсул, с применением таких вспомогательных веществ, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т. п.
Композиции для местного или трансдермального применения включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, лекарственные формы для ингаляций или пластыри. APPL примешивают к вспомогательному веществу и любому необходимому консерванту или буферу, который может потребоваться. Офтальмический состав, ушные капли и глазные капли также предусматриваются, как входящие в объем настоящего изобретения.
Мази, пасты, кремы и гели кроме APPL могут содержать вспомогательные вещества, такие как животный и растительный жиры, масла, воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремниевая кислота, тальк и оксид цинка или их смеси.
Порошки и спреи кроме APPL могут содержать вспомогательные вещества, такие как лактоза, тальк, кремниевая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и порошкообразный полиамид или смеси этих веществ. Спреи могут дополнительно содержать стандартные газы-вытеснители, такие как хлорфторуглеводороды. Трансдермальные пластыри обладают дополнительным преимуществом по обеспечению контролируемой доставки соединения в организм. Такие лекарственные формы можно получить путем растворения или диспергирования микрочастиц или наночастиц в подходящей среде. Также можно применять усилители поглощения для повышения потока соединения через кожу. Скорость можно контролировать либо путем получения мембраны, контролирующей скорость, либо путем диспергирования частиц в полимерной матрице или полимерном геле.
Средства.
Средства, которые необходимо доставлять с помощью систем, описанных в данном документе, могут представлять собой лечебные, диагностические или профилактические средства. Любое химическое соединение, которое необходимо ввести субъекту, можно доставлять с помощью комплексов, пикоча-стиц, наночастиц, микрочастиц, мицелл или липосом, описанных в данном документе. Средство может представлять собой органическую молекулу (например, лечебное средство, лекарственное средство), неорганическую молекулу, нуклеиновую кислоту, белок, аминокислоту, пептид, полипептид, полинук-леотид, нацеливающее средство, изотопно меченую органическую или неорганическую молекулу, вакцину, иммунологическое средство и т.д.
В определенных вариантах осуществления средства представляют собой органические молекулы с фармацевтической активностью, например лекарственное средство. В определенных вариантах осуществления лекарственное средство представляет собой антибиотик, противовирусное средство, анестетик, стероидное средство, противовоспалительное средство, противоопухолевое средство, средство против рака, антиген, вакцину, антитело, противоотечное средство, противогипертонический препарат, седатив-ное средство, противозачаточное средство, средство, способствующее наступлению или сохранению беременности, антихолинергическое средство, анальгетик, антидепрессант, средство, уменьшающее частоту, длительность и проявление психотических эпизодов, Р-адреноблокирующее средство, диуретик, сердечно-сосудистое активное средство, сосудистый препарат, нестероидное противовоспалительное средство, питательное вещество и т.д. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения, средство, которое необходимо доставить, может представлять собой смесь средств. Диагностические средства включают газы; металлы; коммерчески доступные визуализирующие средства, применяемые в позитронно-эмиссионной томографии (PET), компьютерной томографии (CAT), однофотонной эмиссионной компьютерной томографии, рентгенографии, флуороскопии и магнитно-резонансной томографии (MRI); а также контрастные средства. Примеры подходящих веществ для применения в качестве контрастных средств для MRI включают хелаты гадолиния, а также железо, магний, марганец, медь и хром. Примеры веществ, пригодных для CAT и рентгенологического исследования включают йодсодержащие вещества. Лечебные и профилактические средства включают, но без ограничений, антибиотики, биоло
гически активные добавки и вакцины. В состав вакцин могут входить выделенные белки или пептиды, инактивированные организмы и вирусы, мертвые организмы и вирусов, генетически измененные организмы и вирусы, а также экстракты клеток. Лечебные и профилактические средства можно объединять с интерлейкинами, интерфероном, цитокинами и адъювантами, такими как холерный экзотоксин, квасцы, адъювант Фрейнда и т.д. Профилактические средства включают антигены таких бактериальных организмов, как Streptococccus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyro-genes, Corynebacterium diphtheriae, Listeria monocytogenes, Bacillus anthracis, Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus mutans, Pseu-domonas aeruginosa, Salmonella typhi, Haemophilus parainfluenzae, Bordetella pertussis, Francisella tularensis, Yersinia pestis, Vibrio cholerae, Legionella pneumophila, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae, Treponema pallidum, Leptospirosis interrogans, Borrelia burgdorferi, Camphylobacter jejuni и т.п.; антигены таких вирусов, как вирус натуральной оспы, вирус гриппа А и В, респираторно-синцитиальный вирус, вирус парагриппа, вирус кори, ВИЧ, вирус ветряной оспы, вирус простого герпеса 1 и 2 типа, цитомега-ловирус, вирус Эпштейна-Барра, ротавирус, риновирус, аденовирус, папилломавирус, вирус полиомиелита, вирус эпидемического паротита, вирус бешенства, вирус краснухи, вирус Коксаки, вирус лошадиного энцефалита, вирус японского энцефалита, вирус желтой лихорадки, вирус лихорадки долины Рифт, вирус гепатита А, В, С, D и Е и т.п.; антигены грибов, простейших и паразитических организмов, таких как Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Candida albicans, Candida tropicalis, Nocardia aster-oides, Rickettsia ricketsii, Rickettsia typhi, Mycoplasma pneumoniae, Chlamydial psittaci, Chlamydial tra-chomatis, Plasmodium falciparum, Trypanosoma brucei, Entamoeba histolytica, Toxoplasma gondii, Trichomo-nas vaginalis, Schistosoma mansoni и т.п. Эти антигены могут находиться в форме цельных убитых организмов, пептидов, белков, гликопротеинов, углеводов или их комбинаций. Нацеливающие средства.
Поскольку зачастую необходимо нацеливаться на определенную клетку, скопление клеток или ткань APPL, а также комплексы, липосомы, мицеллы, микрочастицы, пикочастицы и наночастицы, полученные с ним, можно модифицировать таким образом, чтобы они включали нацеливающие средства или нацеливающие участки. Например, остов APPL может включать нацеливающий участок. Множество средств или участков, которые нацеливают на конкретные клетки, известны в соответствующей области техники. См., например, Cotten et al., Methods Enzym. 217:618, 1993. Нацеливающие средства могут быть включены по всему объему частицы или могут находиться только на поверхности. Нацеливающие средства могут представлять собой белок, пептид, углевод, гликопротеин, липид, малую молекулу, нуклеиновую кислоту и т.д. Нацеливающее средство можно применять для нацеливания на специфические клетки или ткани или можно применять для ускорения эндоцитоза или фагоцитоза частицы. Примеры нацеливающих средств включают, но без ограничения, антитела, фрагменты антител, липопротеины низкой плотности (LDL), трансферрин, асиалогликопротеины, белок gp120 оболочки вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), углеводы, лиганды рецепторов, сиаловую кислоту, аптамеры и т.д. Если нацеливающее средство включено по всему объему частицы, нацеливающее средство можно включать в смесь, которую применяют для образования частиц. Если нацеливающее средство находится только на поверхности, нацеливающее средство можно связывать (т. е. с помощью ковалентной связи, гидрофобного взаимодействия, водородной связи, ван-дер-ваальсового или других взаимодействий) с образованными частицами с применением стандартных химических методик.
Полинуклеотидные комплексы.
Настоящее изобретение предусматривает, что APPL особенно пригодны при введении полинуклео-тидов. Например, APPL содержат вторичные или третичные амины, и хотя эти амины являются пространственно затрудненными, они способны нековалентно взаимодействовать с полинуклеотидом (например, ДНК, РНК, синтетическими аналогами ДНК и/или РНК, гибридами ДНК/РНК и т. д.). Полинук-леотиды или их производные приводят в контакт с APPL при условиях, пригодных для образования не-ковалентного комплекса полинуклеотид/APPL. Полагают, что взаимодействие APPL с полинуклеотидом, по меньшей мере частично, препятствует разрушению полинуклеотида. Вследствие нейтрализации заряда на скелете полинуклеотида нейтральный или слабоположительно заряженный комплекс также легче способен проходить через гидрофобные мембраны клетки (например, цитоплазматическую, лизосомаль-ную, эндосомальную, ядерную). В определенных вариантах осуществления комплекс является слабоположительно заряженным. В определенных вариантах осуществления комплекс имеет положительный ?-потенциал. В определенных вариантах осуществления ^-потенциал составляет от 0 до +30. В одном аспекте предусматривается способ доставки полинуклеотида в биологическую клетку, включающий получение композиции, содержащей APPL или его соль и полинуклеотид; и воздействие композицией на биологическую клетку при условиях, достаточных для облегчения доставки полинуклеотида во внутреннюю часть биологической клетки; где APPL представляет собой аминокислоту, линейный или циклический пептид, или линейный или циклический полипептид, или их структурный изомер, где аминогруппа или амидная группа APPL конъюгирована с группой формулы (i), (ii) или (iii). В определенных вариантах осуществления способ представляет собой способ in vivo. В определенных вариантах осуществления
способ представляет собой способ in vitro.
APPL, по меньшей мере частично, может обеспечиваться в форме соли (например, протонирован-ной) так, чтобы образовывать комплекс с отрицательно заряженным полинуклеотидом. В определенных вариантах осуществления комплекс полинуклеотид/APPL образует частицы, которые пригодны для доставки полинуклеотидов в клетки. В определенных вариантах осуществления несколько APPL могут связываться с полинуклеотидной молекулой. Например, комплекс может включать 1-100 APPL, 1-1000 APPL, 10-1000 APPL или 100-10000 APPL, связанных с полинуклеотидной молекулой.
Было показано, что увеличение соотношения азот: фосфат положительно влияет на доставку генетического материала вследствие увеличения связывания нуклеиновых кислот и отрицательно влияет на доставку вследствие возрастающей токсичности. См., например, Incani et al., Soft Matter (2010) 6:21242138. В определенных вариантах осуществления соотношение азот:фосфат (т.е. соотношение между аминогруппами, присутствующими в APPL, и фосфатными группами, присутствующими в полинуклео-тиде) составляет от приблизительно 10:1 до приблизительно 50:1 включительно. В определенных вариантах осуществления соотношение азот: фосфат составляет от приблизительно 10:1 до приблизительно 45:1, от приблизительно 15:1 до приблизительно 45:1 или от приблизительно 20:1 до приблизительно 40:1 включительно. В определенных вариантах осуществления массовое соотношение APPL: полинуклеотид составляет от приблизительно 10:1 до приблизительно 20:1 включительно. В определенных вариантах осуществления отношение масс APPL: полинуклеотид составляет приблизительно 15:1. В определенных вариантах осуществления молярное соотношение APPL: полинуклеотид составляет от приблизительно 10:1 до приблизительно 400:1 включительно. В определенных вариантах осуществления молярное соотношение APPL: полинуклеотид составляет от приблизительно 10:1 до приблизительно 350:1, от приблизительно 15:1 до приблизительно 300:1 или от приблизительно 20:1 до приблизительно 250:1 включительно.
В определенных вариантах осуществления комплекс может образовывать частицу. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 500 мкм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 1200 мкм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 50 до 150 мкм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 500 нм, в определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 1200 нм и в определенных вариантах осуществления составляет от 50 до 150 нм. Частицы можно связывать с нацеливающим средством, как описано ниже. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 500 пм, в определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 1200 пм и в определенных вариантах осуществления составляет от 50 до 150 пм. Частицы можно связывать с нацеливающим средством, как описано ниже.
Конфигурация пленки разработана очень точно, и ее можно регулировать с точностью в 1 нм в диапазоне от 1 до 150000 нм и с определенным пониманием ее молекулярного состава.
Полинуклеотид может образовывать комплексное соединение, инкапсулироваться с помощью APPL или включаться в композицию, содержащую APPL. Полинуклеотид может представлять собой любую нуклеиновую кислоту, в том числе, но без ограничений, РНК и ДНК. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой ДНК. В определенных вариантах осуществления по-линуклеотид представляет собой РНК. В определенных вариантах осуществления при доставке РНК в клетку, РНК способна препятствовать экспрессии конкретного гена в биологической клетке.
В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой РНК, которая осуществляет РНК-интерференцию (RNAi). Феномен RNAi обсуждают подробнее, например, в следующих ссылках: Elbashir et al., 2001, Genes Dev., 15:188; Fire et al., 1998, Nature, 391:806; Tabara et al., 1999, Cell, 99:123; Hammond et al., Nature, 2000, 404:293; Zamore et al., 2000, Cell, 101:25; Chakraborty, 2007, Curr. Drug Targets, 8:469; и Morris and Rossi, 2006, Gene Ther., 13:553. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой dsRNA (двухцепочечную РНК). В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой siRNA (малую интерферирующую РНК). В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой shRNA (короткую шпилечную РНК). В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой miRNA (микро-РНК). Микро-РНК (miRNA) представляют собой закодированные в геноме некодирующие РНК длиной приблизительно 21-23 нуклеотида, которые помогают регулировать генную экспрессию, в частности, в ходе развития. См., например, Bartel, 2004, Cell, 116:281; Novina and Sharp, 2004, Nature, 430:161; и публикацию патента США 2005/0059005; также обзоры в Wang and Li, 2007, Front. Biosci., 12:3975; и Zhao, 2007, Trends Biochem. Sci., 32:189. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид представляет собой антисмысловую РНК.
В определенных вариантах осуществления полинуклеотид может обеспечиваться в виде антисмыслового средства или РНК-интерференции (RNAi). См., например, Fire et al., Nature 391:806-811, 1998. Подразумевается, что антисмысловая терапия включает, например, введение или обеспечение in situ одно- или двухцепочечных олигонуклеотидов или их производных, которые специфически гибридизиру-ются, например связываются, в условиях клетки с клеточной мРНК и/или геномной ДНК или их мутантами так, чтобы ингибировать экспрессию кодируемого белка, например, путем ингибирования транс
крипции и/или трансляция. См., например, Crooke "Molecular mechanisms of action of antisense drugs" Bio-chim. Biophys. Acta 1489(1):31-44, 1999; Crooke "Evaluating the mechanism of action of antiproliferative antisense drugs" Antisense Nucleic Acid Drug Dev. 10(2): 123-126, discussion 127, 2000; Methods in Enzymol-ogy volumes 313-314, 1999. Связывание может осуществляться при помощи стандартной комплементар-ности пар оснований или, например, в случае связывания с двуспиральной ДНК, специфических взаимодействий в большой бороздке двойной спирали (т. е. с образованием тройной спирали). См., например,
Chan et al., J. Mol. Med. 75(4):267-282, 1997.
В некоторых вариантах осуществления dsRNA, siRNA, shRNA, miRNA, антисмысловая РНК и/или RNAi можно разрабатывать и/или предсказывать с применением одного или нескольких из большого количества пригодных алгоритмов. В качестве нескольких примеров для разработки и/или предсказания полинуклеотидов можно использовать следующие источники: алгоритмы, находящиеся в Alnylum Online, Dharmacon Online, OligoEngine Online, Molecula Online, Ambion Online, BioPredsi Online, RNAi Web Online, Chang Bioscience Online, Invitrogen Online, LentiWeb Online GenScript Online, Protocol Online; Reynolds et al., 2004, Nat. Biotechnol., 22:326; Naito et al., 2006, Nucleic Acids Res., 34:W448; Li et al., 2007, RNA, 13:1765; Yiu et al., 2005, Bioinformatics, 21:144 и Jia et al., 2006, BMC Bioinformatics, 7: 271.
Полинуклеотиды могут иметь любой размер или последовательность, и они могут быть одно- или двухцепочечными. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид имеет длину более 100 пар оснований. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид имеет длину более 1000 пар оснований и может иметь длину более 10000 пар оснований. Полинуклеотид необязательно очищают и он является, по сути, чистым. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид является чистым более чем на 50%, в определенных вариантах осуществления является чистым более чем на 75% и в определенных вариантах осуществления является чистым более чем на 95%. Полинуклеотид можно получать любыми способами, известными в данной области техники. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид был сконструирован с применением методики рекомбинации. См., например, Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (John Wiley & Sons, Inc., New York, 1999); Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Ed., ed. by Sambrook, Fritsch, и Maniatis (Cold Spring Harbor Laboratory Press: 1989). Полинуклеотид также можно получать из природных источников и очищать от загрязняющих компонентов, обычно встречающихся в природе. Полинуклеотид также можно получать путем химического синтеза в лаборатории. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид синтезируют с помощью химии стандартного твердофазного синтеза. Полинуклеотид можно модифицировать химическими или биологическими способами. В определенных вариантах осуществления такие модификации приводят к повышенной стабильности полинуклеотида. Модификации включают метилирование, фос-форилирование, присоединение концевых функциональных групп и т.д. В настоящем изобретении также можно применять производные полинуклеотидов. Такие производные включают модификации в основаниях, сахарах и/или фосфатных связях полинуклеотида. Модифицированные основания включают, но без ограничений, основания, обнаруженные в следующих нуклеозидных аналогах: 2-аминоаденозин, 2-тиотимидин, инозин, пирролопиримидин, 3-метиладенозин, 5-метилцитидин, C5-бромуридин, С5-фторуридин, С5-йодуридин, С5-пропинилуридин, С5-пропинилцитидин, С5-метилцитидин, 7-деазааденозин, 7-деазагуанозин, 8-оксоаденозин, 8-оксогуанозин, О(6)-метилгуанин и 2-тиоцитидин. Модифицированные сахара включают, но без ограничений, 2'-фторрибозу, рибозу, 2'-дезоксирибозу, 3'-азидо-2',3'-дидезоксирибозу, 2',3'-дидезоксирибозу, арабинозу (2'-эпимер рибозы), ациклические сахара и гексозы. Нуклеозиды могут быть связаны связями, не являющимися фосфодиэфирной связью, которая встречается в ДНК и РНК природного происхождения. Модифицированные связи включают, но без ограничений, фосфотиоатную и 5'-^фосфорамидитную связи. В одном полинуклеотиде можно использовать сочетания различных модификаций. Такие модифицированные полинуклеотиды можно получать любыми способами, известными в данной области техники; однако, как будет понятно специалистам в данной области техники, модифицированные полинуклеотиды можно получать с помощью синтетической химии in vitro.
Полинуклеотиды, которые необходимо доставить, могут находиться в любой форме. Например, по-линуклеотид может представлять собой кольцевую плазмиду, линеаризованную плазмиду, космиду, вирусный геном, модифицированный вирусный геном, искусственную хромосому и т.д.
Полинуклеотид может представлять собой любую последовательность. В определенных вариантах осуществления полинуклеотид кодирует белок или пептид.
Кодируемые белки могут быть ферментами, структурными белками, рецепторами, растворимыми рецепторами, ионными каналами, фармацевтически активными белками, цитокинами, интерлейкинами, антителами, фрагментами антител, антигенами, факторами свертывания крови, альбумином, факторами роста, гормонами, инсулином и т. д. Полинуклеотид может также включать регуляторные участки для контроля экспрессии гена. Такие регуляторные участки могут включать, но без ограничений, промоторы, энхансерные элементы, репрессорные элементы, ТАТА-бокс, сайты связывания рибосом, стоп-сайты для транскрипции и т. д. В определенных вариантах осуществления подразумевается, что полинуклеотид не кодирует белок. Например, полинуклеотид может использоваться для исправления ошибки в геноме клетки, которую подвергли трансфекции.
В определенных вариантах осуществления полинуклеотид, который необходимо доставить, включает последовательность, кодирующую антигенный пептид или белок. Наночастицы, содержащие такие полинуклеотиды, могут доставляться в организм индивидуума для индукции иммунного ответа, достаточного для снижения возможности последующей инфекции и/или уменьшения симптомов, ассоциированных с указанной инфекцией. Полинуклеотид в таких вакцинах можно объединять с интерлейкинами, интерфероном, цитокинами и адъювантами, такими как холерный экзотоксин, квасцы, адъювант Фрейн-да и т. д. Известно большое количество адъювантных соединений; полезный каталог-справочник множества таких соединений подготовлен Национальными институтами здравоохранения. См., например, Allison Dev. Biol. Stand. 92:3-11, 1998; Unkeless et al., Annu. Rev. Immunol. 6:251-281, 1998; и Phillips et al., Vaccine 10:151-158, 1992.
Антигенный белок или пептиды, кодируемые полинуклеотидом, могут происходить от таких бактериальных организмов, как Streptococccus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyrogenes, Corynebacterium diphtheriae, Listeria monocytogenes, Bacillus anthracis, Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus mutans, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhi, Haemophilus parainfluenzae, Bordetella pertussis, Francisella tularensis, Yersinia pestis, Vibrio cholerae, Legionella pneumophila, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae, Treponema pallidum, Leptospirosis interrogans, Borrelia burgdorferi, Camphylobacter jejuni и т.п.; из таких вирусов, как вирус натуральной оспы, вирус гриппа А и В, респираторно-синцитиального вируса, вируса парагриппа, вируса кори, ВИЧ, вируса ветряной оспы, вируса простого герпеса 1 и 2 типа, цитомегаловируса, вируса Эпштейна-Барра, ротавируса, риновируса, аденовируса, папилломавируса, вируса полиомиелита, вируса эпидемического паротита, вируса бешенства, вируса краснухи, вируса Коксаки, вируса лошадиного энцефалита, вируса японского энцефалита, вируса желтой лихорадки, вируса лихорадки долины Рифт, вируса гепатита А, В, С, D и Е и т.п.; и из таких грибов, простейших и паразитических организмов, как Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Candida albicans, Candida tropicalis, Nocardia asteroides, Rickettsia ricketsii, Rickettsia typhi, Mycoplasma pneumoniae, Chlamydial psittaci, Chlamydial trachomatis, Plasmodium falciparum, Trypanosoma brucei, Entamoeba histo-lytica, Toxoplasma gondii, Trichomonas vaginalis, Schistosoma mansoni и т.п.
Частицы.
Настоящее изобретение также предусматривает, что APPL пригодны в качестве средства доставки. APPL обладают некоторыми свойствами, которые делают их особенно пригодными для доставки, в том числе: 1) способность APPL образовывать комплексы и "защищать" лабильные средства; 2) способность забуферивать рН в эндосоме; 3) способность действовать в качестве "протонной губки" и вызывать эндо-сомолизис и 4) способность нейтрализовать заряд на отрицательно заряженных средствах.
В определенных вариантах осуществления APPL применяют для образования частиц, содержащих средство, которое необходимо доставить. APPL можно применять для инкапсулирования средств, в том числе, но без ограничений, органических молекул (например, холестерина, лекарственных средств), неорганических молекул, нуклеиновых кислот, белков, пептидов, полинуклеотидов, нацеливающих средств, изотопно меченых органических или неорганических молекул, вакцин, иммунологических средств и т.д. Другие иллюстративные средства описаны подробнее в данном документе. Такие частицы могут включать другие вещества, такие как полимеры (например, синтетические полимеры (например, PEG, PLGA), природные полимеры (например, фосфолипиды)). В определенных вариантах осуществления APPL смешивают с одним или несколькими средствами (например, холестерином) и/или одним или несколькими другими веществами (например, полимерами). В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 микрометра до 1000 микрометров. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 до 100 мкм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 до 10 мкм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 100 мкм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 100 до 1000 мкм. В определенных вариантах осуществления частицы варьируют от 1 до 5 мкм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 до 1000 нм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 до 100 нм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 до 10 нм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 100 нм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 100 до 1000 нм. В определенных вариантах осуществления частицы варьируют от 1 до 5 нм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 до 1000 пм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 до 100 пм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 1 до 10 пм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 10 до 100 пм. В определенных вариантах осуществления диаметр частиц варьирует от 100 до 1000 пм. В определенных вариантах осуществления частицы варьируют от 1 до 5 пм.
Частицы можно получать с помощью любого способа, известного в данной области техники. Они включают, но без ограничений, сушку распылением, испарение растворителя в одинарной и двойной эмульсии, экстракцию растворителем, разделение фаз, простую и сложную коацервацию и другие способы, хорошо известные специалистам в данной области техники. В определенных вариантах осуществле
ния способы получения частиц представляют собой способ двойного эмульгирования и сушку распылением. Условия, применяемые при получении частиц, можно менять для получения частиц с необходимым размером или свойством (например, гидрофобностью, гидрофильностью, внешней морфологией, "адгезивностью", формой и т.д.). Применяемый способ получения частицы и условия (например, растворитель, температура, концентрация, скорость потока воздуха и т. д.) также могут зависеть от средства, которое инкапсулируют, и/или состава матрицы.
Способы, разработанные для получения частиц для доставки инкапсулированных средств, описаны в литературе. См., например, Doubrow, M., Ed., "Microcapsules and Nanoparticles in Medicine and Pharmacy", CRC Press, Boca Raton, 1992; Mathiowitz and Langer, J. Controlled Release 5:13-22, 1987; Mathiowitz et al., Reactive Polymers 6:275-283, 1987; Mathiowitz et al., J. Appl. Polymer Sci. 35:755-774, 1988.
Если частицы, полученные любым из вышеуказанных способов, имеют диапазон размеров за пределами необходимого диапазона, частицы можно отсортировать по размеру, например, с помощью сита. Частица может также быть покрытой. В определенных вариантах осуществления частицы покрывают нацеливающим средством. В других вариантах осуществления частицы покрывают для достижения необходимых свойств поверхности (например, определенного заряда).
Мицеллы и липосомы.
Настоящее изобретение также предусматривает применение APPL при получении мицелл или ли-посом. Любое средство может быть дополнительно включено в мицеллу или липосому. Мицеллы и ли-посомы особенно пригодны при доставке гидрофобных средств, таких как гидрофобные малые молекулы. Когда мицелла или липосома образует комплекс с полинуклеотидом (например, инкапсулирует или покрывает его), ее также называют "липоплекс". В данной области техники известно множество методик получения мицеллы и липосом, и любой такой способ можно применять вместе с APPL для получения мицелл и липосом.
В определенных вариантах осуществления липосомы образуются посредством самопроизвольной сборки. В других вариантах осуществления липосомы образуются, когда гидратируют тонкие липидные пленки или липидные осадки и стопки липидных кристаллических бислоев становятся текучими и набухшими. Гидратированные липидные листы разделяются в процессе встряхивания и самозамыкаются с образованием крупных многослойных пузырьков (LMV). В результате этого вода не взаимодействует с углеводородным центральным слоем двухслойных структур по краям. Как только эти частицы образовались, можно регулировать уменьшение размера частицы путем применения энергии звуковой волны (разрушение ультразвуком) или механической энергии (экструдирование). См., например, Walde, P. "Preparation of Vesicles (Liposomes)" In Encylopedia of Nanoscience and Nanotechnology; Nalwa, H.S. Ed. American Scientific Publishers: Los Angeles, 2004; Vol. 9, pp. 43-79; Szoka et al., "Comparative Properties and Methods of Preparation of Lipid Vesicles (Liposomes)" Ann. Rev. Biophys. Bioeng. 9:467-508, 1980; каждая из которых включена в данной документ. Получение липосом включает получение APPL для гидратиро-вания, гидратирование APPL при встряхивании и доводку пузырьков по размеру для достижения однородного распределения липосом. APPL сначала растворяют в органическом растворителе, чтобы обеспечить однородную смесь APPL.
Затем растворитель удаляют, чтобы образовалась полимерная пленка. Эту полимерную пленку тщательно высушивают для удаления остаточного органического растворителя путем помещения сосуда или флакона под вакуумный насос на всю ночь. Гидратацию полимерной пленки завершают путем добавления водной среды и встряхивания смеси. При разрушении суспензий LMV с помощью энергии звуковой волны, как правило, образуются небольшие монослойные пузырьки (SUV) с диаметром в диапазоне 15-50 нм. Экструдирование липидов представляет собой методику, в ходе которой суспензию ли-пид/полимер продавливают через поликарбонатный фильтр с определенным размером пор с получением частиц, имеющих диаметр близкий к размеру пор применяемого фильтра. При экструдировании через фильтры с порами в 100 нм, как правило, образуются крупные монослойные полимерные пузырьки (LUV) со средним диаметром 120-140 нм. В определенных вариантах осуществления количество APPL в липосоме варьирует от 30 до 80 мол.%, в определенных вариантах осуществления от 40 до 70 мол.% и в определенных вариантах осуществления от 60 до 70 мол.%. В определенных вариантах осуществления применяемый APPL дополнительно образует комплекс со средством, таким как ДНК и РНК. В таких вариантах осуществления применение липосомы представляет собой доставку полинуклеотидов. В следующих научных публикациях описаны другие способы получения липосом и мицелл: Narang et al., "Cationic Lipids with Increased DNA Binding Affinity for Nonviral Gene Transfer in Dividing and Nondividing Cells" Bioconjugate Chem. 16:156-68, 2005; Hofland et al., "Formation of stable cationic lipid/DNA complexes for gene transfer" Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:7305-7309, July 1996; Byk et al., "Synthesis, Activity, and Structure-Activity Relationship Studies of Novel Cationic Lipids for DNA Transfer" J. Med. Chem. 41(2):224-235, 1998; Wu et al., "Cationic Lipid Polymerization as a Novel Approach for Constructing New DNA Delivery Agents" Bioconjugate Chem. 12:251-57, 2001; Lukyanov et al., "Micelles from lipid derivatives of water-soluble polymers as delivery systems for poorly soluble drugs" Advanced Drug Delivery Reviews 56:1273-1289, 2004; Tranchant et al., "Physicochemical optimisation of plasmid delivery by cationic lipids" J. Gene Med. 6:S24-S35, 2004; van Balen et al., "Liposome/Water Lipophilicity: Methods, Information Content, and Pharma-
ceutical Applications" Medicinal Research Rev. 24(3):299-324, 2004. Способы лечения.
Установлено, что более 10000 заболеваний человека вызваны генетическими нарушениями, которые представляют собой аномалии в генах или хромосомах. См., например, McClellan, J. and M.C. King, Genetic heterogeneity in human disease. Cell. 141(2): p. 210-7; Leachman, S.A., et al., Therapeutic siRNAs for dominant genetic skin disorders including pachyonychia congenita. J Dermatol Sci, 2008. 51(3): p. 151-7. Многие из этих заболеваний летальны, такие как рак, тяжелая гиперхолестеринемия и семейная амилоидоти-ческая полинейропатия. См., например, Frank-Kamenetsky, M., et al., Therapeutic RNAi targeting PCSK9 acutely lowers plasma cholesterol in rodents and LDL cholesterol in nonhuman primates. Proc Natl Acad Sci USA, 2008. 105(33): p. 11915-20; Coelho, Т., Familial amyloid polyneuropathy: new developments in genetics and treatment. Curr Opin Neural, 1996. 9(5): p. 355-9. С момента открытия Fire и Mello сайленсинга экспрессии генов посредством РНК-интерференции (RNAi) (Fire, A., et al., Potent and specific genetic interference by double-stranded RNAin Caenorhabditis elegans. Nature, 1998, 391(6669): p. 806-11) были проведен большой объем работ по разработке лечебных применений RNAi для людей. См., например, Davis, M.E., The first targeted delivery of siRNA in humans via a self-assembling, cyclodextrin polymer-based nanoparticle: from concept to clinic. Mol Pharm, 2009. 6(3): p. 659-68; Whitehead, K.A., R. Langer, and D.G. Anderson, Knocking down barriers: advances in siRNA delivery. Nat. Rev. Drug Discovery, 2009. 8(2): p. 129-138; Tan, S.J., et al., Engineering Nanocarriers for siRNA Delivery. Small. 7(7): p. 841-56; Castanotto, D. and J.J. Rossi, The promises and pitfalls of RNA-interference-based therapeutics. Nature, 2009. 457(7228): p. 426-33; Chen, Y. and L. Huang, Tumor-targeted delivery of siRNA by non-viral vector: safe and effective cancer therapy. Expert Opin Drug Deliv, 2008. 5(12): p. 1301-11; Weinstein, S. and D. Peer, RNAi nanomedicines: challenges and opportunities within the immune system. Nanotechnology. 21(23): p. 232001; Fenske, D.B. and P.R. Cullis, Liposomal nanomedicines. Expert Opin Drug Deliv, 2008. 5(1): p. 25-44; and Thiel, K.W. and P.H. Giangrande, Therapeutic applications of DNA and RNA aptamers. Oligonucleotides, 2009.19(3): p. 209-22. В настоящее время еще длятся или уже завершены более 20 клинических испытаний, в которых задействованы лечебные средства с siRNA, которые показали многообещающие результаты в лечении различных заболеваний. См., например, Burnett, J.C., J.J. Rossi, and K. Tiemann, Current progress of siRNA/shRNA therapeutics in clinical trials. Biotechnol J. 6(9): p. 1130-46. Однако, эффективная и безопасная доставка siRNA до сих пор является ключевой проблемой при разработке лечебных средств с siRNA. См., например, Juliano, R., et al., Biological barriers to therapy with antisense and siRNA oligonucleotides. Mol Pharm, 2009. 6(3): p. 686-95.
Таким образом, в другом аспекте предусмотрены способы применения APPL, например, для лечения заболевания, нарушения или состояния, которым страдает субъект. Предполагается, что APPL будут пригодны в лечении множества заболеваний, нарушений или состояний, в частности система для доставки средств будет пригодна для лечения такого конкретного заболевания, нарушения или состояния. "Заболевание", "нарушение" и "состояние" в данном документе используются взаимозаменяемо. В определенных вариантах осуществления заболевание, нарушение или состояние, от которого страдает субъект, вызвано аномалией в гене или хромосоме субъекта. Например, в одном варианте осуществления предусмотрен способ лечения заболевания, нарушения или состояния, которым страдает субъект, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, содержащей APPL или его соль. Предполагают, что иллюстративное заболевание, нарушение или состояния включают, но без ограничений, пролиферативные нарушения, воспалительные нарушения, аутоиммунные нарушения, болезненные состояния, заболевания печени и амилоидные невропатии.
Как используется в данном документе, "активный ингредиент" представляет собой любое средство, которое вызывает необходимую биологическую реакцию. Например, APPL может быть активным ингредиентом в композиции. Другие средства, например лечебные средства, как описано в данном документе, могут также классифицироваться как активный ингредиент. В определенных вариантах осуществления композиция кроме APPL дополнительно содержит лечебное средство, пригодное при лечении заболевания, нарушения или состояния. В определенных вариантах осуществления APPL инкапсулирует другое (лечебное) средство. В определенных вариантах осуществления APPL и другое (лечебное) средство образуют частицу (например, наночастицу, микрочастицу, мицеллу, липосому, липоплекс). В определенных вариантах осуществления состояние представляет собой пролиферативное нарушение, и в определенных вариантах осуществления композиция дополнительно включает средство против рака. Иллюстративные пролиферативные заболевания включают, но без ограничений, опухоли, доброкачественные новообразования, предзлокачественные новообразования (эпителиома in situ) и злокачественные новообразования (виды рака).
Иллюстративные виды рака включают, но без ограничений, невриному слухового нерва, аденокар-циному, рак надпочечников, рак анального канала, ангиосаркому (например, лимфангиосаркому, лим-фангиоэндотелиальную саркому, гемангиосаркому), рак аппендикса, доброкачественную моноклональ-ную гаммапатию, рак желчных путей (например, холангиокарциному), рак мочевого пузыря, рак молочной железы (например, аденокарциному молочной железы, папиллярную карциному молочной железы, грудной рак, медуллярный рак молочной железы), рак головного мозга (например, менингиому; глиому, например астроцитому, олигодендроглиому; медуллобластому), рак бронхов, карциноид, рак шейки мат
ки (например, аденокарциному шейки матки), хориокарциному, хордому, краниофарингиому, колорек-тальный рак (например, рак толстой кишки, рак прямой кишки, колоректальную аденокарциному), эпителиальную карциному, эпендимому, эндотелиальную саркому (например, ангиоматоз Капоши, множественную идиопатическую геморрагическую саркому), рак эндометрия (например, рак матки, саркому матки), рак пищевода (например, аденокарциному пищевода, аденокарциному Барретта), саркому Юин-га, рак глаза (например, внутриглазную меланому, ретинобластому), семейную гиперэозинофилию, рак желчного пузыря, рак желудка (например, аденокарциному желудка), гастроинтестинальную стромаль-ную опухоль (GIST), рак головы и шеи (например, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак полости рта (например, плоскоклеточную карциному полости рта (OSCC), рак горла (например, рак гортани, фарин-геальный рак, назофарингеальный рак, рак ротоглотки)), рак кроветворных клеток (например, лейкоз, такой как острый лимфоцитарный лейкоз (ALL) (например, В-клеточный ALL, Т-клеточный ALL), острый миелоцитарный лейкоз (AML) (например, В-клеточный AML, Т-клеточный AML), хронический ми-елоцитарный лейкоз (CML) (например, В-клеточный CML, Т-клеточный CML) и хронический лимфоци-тарный лейкоз (CLL) (например, В-клеточный CLL, Т-клеточный CLL); лимфому, такую как лимфома Ходжкина (HL) (например, В-клеточная HL, Т-клеточная HL) и неходжкинская лимфома (NHL) (например, В-клеточная NHL, такая как диффузная крупноклеточная лимфома (DLCL) (например, диффузная В-клеточная крупноклеточная лимфома (DLBCL)), фолликулярную лимфому, хронический лимфоцитар-ный лейкоз/мелкоклеточную лимфоцитарную лимфому (CLL/SLL), лимфому из клеток мантийной зоны (MCL), виды В-клеточной лимфомы маргинальной зоны (например, виды лимфомы лимфоидной ткани слизистых оболочек (MALT), B-клеточную лимфому маргинальной зоны лимфатического узла, В-клеточную лимфому маргинальной зоны селезенки), первичную медиастинальную В-клеточную лимфо-му, лимфому Беркитта, лимфоплазмоцитарную лимфому (т.е. "макроглобулинемию Вальденстрема"), злокачественный ретикулоэндотелиоз (HCL), иммунобластную крупноклеточную лимфому, В-лимфобластную лимфому из клеток-предшественников и первичную лимфому центральной нервной системы (CNS) и Т-клеточную NHL, такую как Т-лимфобластная лимфома/Т-лимфобластный лейкоз из клеток-предшественников, периферическую Т-клеточную лимфому (PTCL) (например, кожную Т-клеточную лимфому (CTCL) (например, грибовидный микоз, ретикулез Сезари), ангиоиммунобластную Т-клеточную лимфому, экстранодальную Т-клеточную лимфому из натуральных киллеров, Т-клеточную лимфому энтеропатического типа, Т-клеточную лимфому подкожной клетчатки по типу панникулита, анапластическую крупноклеточную лимфому); комбинацию одного или нескольких лейкозов/лимфом, которые описаны выше; а также множественную миелому (ММ)), болезнь тяжелых цепей (например, болезнь сс-цепей, болезнь у-цепей, болезнь и,-цепей), гемангиобластому, виды воспалительной миофиб-робластической опухоли, амилоидоз иммуноцитов, рак почки (например, нефробластому, называемую также опухоль Вильмса, гипернефрому), рак печени (например, гепатоцеллюлярный рак (НСС), злокачественную гепатому), рак легких (например, бронхогенный рак, мелкоклеточный рак легкого (SCLC), не-мелкоклеточный рак легкого (NSCLC), аденокарциному легкого), лейомиосаркому (LMS), мастоцитоз (например, системный мастоцитоз), миелодиспластический синдром (MDS), мезотелиому, миелопроли-феративные нарушения (MPD) (например, истинную полицитемию (PV), эссенциальную тромбоцитемию (ЕТ), агногенную миелоидную метаплазию (АММ), также называемую миелофиброз (MF), хронический идиопатический миелофиброз, хронический миелоцитарный лейкоз (CML), хронический нейтрофильный лейкоз (CNL), синдром гиперэозинофилии (HES)), нейробластому, нейрофиброму (например, нейрофиб-роматоз (NF) 1 типа или 2 типа, шванноматоз), нейроэндокринный рак (например, нейроэндокринную опухоль желудочно-кишечного тракта или поджелудочной железы (GEP-NET), карциноид), остеосарко-му, рак яичников (например, цистаденокарциному, эмбриональный рак яичников, аденокарциному яичников), папиллярную аденокарциному, рак поджелудочной железы (например, аденокарциному поджелудочной железы, внутрипротоковую папиллярно-муцинозную опухоль (IPMN), инсулиному), рак полового члена (например, болезнь Паджета полового члена и мошонки), пинеалому, примитивную нейроэк-тодермальную опухоль (PNT), рак предстательной железы (например, аденокарциному предстательной железы), рак прямой кишки, рабдомиосаркому, рак слюнных желез, рак кожи (например, плоскоклеточный рак (SCC), кератоакантому (KA), меланому, базальноклеточную карциному (ВСС)), рак тонкого кишечника (например, рак аппендикса), саркому мягких тканей (например, злокачественную фиброзную гистиоцитому (MFH), липосаркому, злокачественную опухоль оболочек периферических нервов (MPNST), хондросаркому, фибросаркому, миксосаркому), карциному сальной железы, карциному потовых желез, синовиому, рак яичка (например, семиному, эмбриональный рак яичка), рак щитовидной железы (например, папиллярную карциному щитовидной железы, папиллярную карциному щитовидной железы (РТС), медуллярный рак щитовидной железы), рак уретры, вагинальный рак и рак вульвы (например, болезнь Паджета наружных женских половых органов).
Средства против рака охватывают биотерапевтические средства против рака, а также химиотера-певтические средства.
Иллюстративные биотерапевтические средства против рака включают, но без ограничений, интер-фероны, цитокины (например, фактор некроза опухоли, интерферон с, интерферон у), вакцины, гемато
поэтические факторы роста, средства для серотерапии моноклональными антителами, иммуностимуляторы и/или иммуномодулирующие средства (например, IL-1, 2, 4, 6 или 12), факторы роста иммунных клеток (например, GM-CSF) и антитела (например, HERCEPTIN (трастузумаб), T-DM1, AVASTIN (бева-
цизумаб), ERBITUX (цетуксимаб), VECTIBIX (панитумумаб), RITUXAN (ритуксимаб), BEXXAR (този-
тумомаб)). Иллюстративные химиотерапевтические средства включают, но без ограничений, антиэстрогены (например, тамоксифен, ралоксифен и мегестрол), агонисты LHRH (например, госкрклин и лейпро-лид), антиандрогены (например, флутамид и бикалутамид), средства для фотодинамической терапии (например, вертопорфин (BPD-MA), фталоцианин, фотосенсибилизатор Рс4 и деметокси-гипокреллин A (2BA-2-DMHA)), азотистые иприты (например, циклофосфамид, ифосфамид, трофосфамид, хлорамбу-цил, эстрамустин и мелфалан), нитрозомочевины (например, кармустин (BCNU) и ломустин (CCNU)), алкилсульфонаты (например, бусульфан и треосульфан), триазены (например, дакарбазин, темозоломид), соединения, содержащие платину (например, цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин), алкалоиды барвинка (например, винкристин, винбластин, виндезин и винорелбин), таксаны (например, паклитаксел или эквивалент паклитаксела, такой как наночастицы паклитаксела, связанного с альбумином (ABRAXANE), паклитаксел, связанный с докозагексаеновой кислотой (DHA-паклитаксел, Taxoprexin), паклитаксел, связанный с полиглутаматом (PG-паклитаксел, паклитаксел полиглюмекс, СТ-2103, XYOTAX), пролекарст-во, активируемое опухолью (ТАР) ANG1005 (Angiopep-2, связанный с тремя молекулами паклитаксела), паклитаксел-ЕС-1 (паклитаксел, связанный с erbB2-распознающим пептидом ЕС-1) и паклитаксел, конъюгированный с глюкозой, например 2'-паклитаксел-метил-2-глюкопиранозилсукцинат; доцетаксел, таксол), эпиподофиллины (например, этопозид, фосфат этопозида, тенипозид, топотекан, 9-аминокамптотецин, камптоиринотекан, иринотекан, криснатол, митомицин С), ингибиторы обмена веществ, ингибиторы DHFR (например, метотрексат, дихлорметотрексат, триметрексат, эдатрексат), ингибиторы IMP-дегидрогеназы (например, микофеноловую кислоту, тиазофурин, рибавирин и EICAR), ингибиторы рибонуклеотидредуктазы (например, гидроксимочевину и дефероксамин), аналоги урацила (например, 5-фторурацил (5-FU), флоксуридин, доксифлуридин, ралтитрексед, тегафур-урацил, капеци-табин), аналоги цитозина (например, цитарабин (ara С), цитозинарабинозид и флударабин), аналоги пурина (например, меркаптопурин и тиогуанин), аналоги витамина D3 (например, ЕВ 1089, СВ 1093 и KH 1060), ингибиторы изопренилирования (например, ловастатин), допаминэргические нейротоксины (например, ион 1-метил-4-фенилпиридиний), ингибиторы клеточного цикла (например, стауроспорин), ак-тиномицин (например, актиномицин D, дактиномицин), блеомицин (например, блеомицин А2, блеоми-цин В2, пепломицин), антрациклин (например, даунорубицин, доксорубицин, пэгилированный липосо-мальный доксорубицин, идарубицин, эпирубицин, пирарубицин, зорубицин, митоксантрон), ингибиторы MDR (например, верапамил), ингибиторы Са2+ АТФазы (например, тапсигаргин), иматиниб, талидомид, леналидомид, ингибиторы тирозинкиназы (например, акситиниб (AG013736), босутиниб (SKI-606), це-дираниб (RECENTIN(tm), AZD2171), дазатиниб (SPRYCEL(r), BMS-354825), эрлотиниб (TARCEVA(r)), гефинитиб (IRESSA(r)), иматиниб (Gleevec(r), CGP57148B, STI-571), лапатиниб (TYKERB(r), TYVERB(r)), лестауртиниб (СЕР-701), нератиниб (HKI-272), нилотиниб (TASIGNA(r)), семаксаниб (семаксиниб, SU5416), сунитиниб (SUTENT(r), SU11248), тоцераниб (PALLADIA(r)), вандетаниб (ZACTIMA(r),
ZD6474), ваталаниб (PTK787, PTK/ZK), трастузумаб (HERCEPTIN(r)), бевацизумаб (AVASTIN(r)), ритук-симаб (RITUXAN(r)), цетуксимаб (ERBITUX(r)), панитумумаб (VECTIBIX(r)), ранибизумаб (Lucentis(r)), нилотиниб (TASIGNA(r)), сорафениб (NEXAVAR(r)), эверолимус (AFINITOR(r)), алемтузумаб (САМ-РАТН(r)), гемтузумаб озогамицин (MYLOTARG(r)), темсиролимус (TORISEL(r)), ENMD-2076, PCI-32765,
AC220, довитиниб лактат (TKI258, CHIR-258), BIBW 2992 (TOVOK(tm)), SGX523, PF-04217903, PF-
02341066, PF-299804, BMS-777607, АВТ-869, МР470, BIBF 1120 (VARGATEF(r)), AP24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, CEP-11981, тивозаниб (AV-951), OSI-930, MM-121, XL-
184, XL-647 и/или XL228), ингибиторы протеасомы (например, бортезомиб (VELCADE)), ингибиторы mTOR (например, рапамицин, темсиролимус (CCI-779), эверолимус (RAD-001), ридафоролимус,
АР23573 (Ariad), AZD8055 (AstraZeneca), BEZ235 (Novartis), BGT226 (Norvartis), XL765 (Sanofi Aventis), PF-4691502 (Pfizer), GDC0980 (Genetech), SF1126 (Semafoe) и OSI-027 (OSI)), облимерсен, гемцитабин,
карминомицин, лейковорин, пеметрексед, циклофосфамид, дакарбазин, прокарбизин, преднизолон, дек-саметазон, кампатецин, пликамицин, аспарагиназу, аминоптерин, метоптерин, порфиромицин, мелфалан, лейрозидин, лейрозин, хлорамбуцил, трабектедин, прокарбазин, дискодермолид, карминомицин, ами-ноптерин и гексаметил меламин. В определенных вариантах осуществления состояние представляет собой воспалительное нарушение, и в определенных вариантах осуществления композиция дополнительно включает противовоспалительное средство. Выражение "воспалительное нарушение" обозначает те заболевания, нарушения или состояния, которые характеризуются признаками боли (dolor в результате образования токсических веществ и раздражения нервов), повышения температуры тела (calor в результате вазодилятации), покраснения (rubor в результате вазодилятации и усиленного кровотока), припухлости (tumor в результате чрезмерного притока или ограниченного оттока жидкости) и/или потери функции (functio laesa, которая может быть частичной или полной, временной или постоянной). Воспаление принимает различные формы и включает, но без ограничений, острое, спаечное, атрофическое, катаральное,
хроническое, цирротическое, диффузное, диссеминированное, экссудативное, фибринозное, фибрози-рующее, очаговое, гранулематозное, гиперпластическое, гипертрофическое, интерстициальное, метастатическое, некротическое, облитерирующее, паренхиматозное, репаративное, продуктивное, пролифера-тивное, дифтеритическое, гнойное, склерозирующее, серозно-фибринозное, серозное, неспецифическое, специфическое, подострое, воспаление с нагноением, токсическое, травматическое и/или язвенное воспаление.
Иллюстративные воспалительные нарушения включают, но без ограничений, воспаление, ассоциированное с акне, анемию (например, гипопластическую анемию, гемолитическую аутоиммунную анемию), астму, артериит (например, множественный артериит, артериит височных артерий, узелковый пе-риартериит, синдром Такаясу), артрит (например, кристаллический артрит, остеоартрит, псориатический артрит, подагрический артрит, реактивный артрит, ревматоидный артрит и артрит Рейтера), анкилози-рующий спондилоартрит, амилоз, боковой амиотрофический склероз, аутоиммунные заболевания, аллергии или аллергические реакции, атеросклероз, бронхит, бурсит, хронический простатит, конъюнктивит, болезнь Шагаса, хроническое обструктивное заболевание легких, дерматомиозит, дивертикулит, диабет (например, сахарный диабет I типа, сахарный диабет 2 типа), заболевания кожи (например, псориаз, экзему, ожоги, дерматит, зуд (зудневую чесотку)), эндометриоз, синдром Гийена-Барре, инфекцию, ишемическую болезнь сердца, болезнь Кавасаки, гломерулонефрит, гингивит, повышенную чувствительность, головные боли (например, головные боли при мигрени, головные боли напряжения), непроходимость кишечника (например, непроходимость кишечника после оперативного вмешательства и непроходимость кишечника во время сепсиса), идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, интерстици-альный цистит (синдром болезненного мочевого пузыря), болезнь желудочно-кишечного тракта (например, выбранную из пептических язв, регионарного энтерита, дивертикулита, желудочно-кишечного кровотечения, эозинофильных болезней желудочно-кишечного тракта (например, эозинофильного эзофаги-та, эозинофильного гастрита, эозинофильного гастроэнтерита, эозинофильного колита), гастрита, диареи, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (GORD или ее синоним GERD), воспалительного заболевания кишечника (IBD) (например, болезни Крона, неспецифического язвенного колита, коллагенозного колита, лимфоцитарного колита, ишемического колита, колита отключенной кишки, синдрома Бехчета, недифференцированного колитв) и синдрома воспаленного кишечника (IBS)), волчанку, рассеянный склероз, кольцевидную склеродермию, тяжелую миастению, ишемию миокарда, нефротический синдром, обыкновенную пузырчатку, злокачественную анемию, пептические язвы, полимиозит, первичный билли-арный цирроз, нейровоспаление, ассоциированное с нарушениями мозговой деятельности (например, болезнь Паркинсона, болезнь Гентингтона и болезнь Альцгеймера), простатит, хроническое воспаление, ассоциированное с радиационным поражение головы, воспалительное заболевание тазовых органов, ре-перфузионное повреждение, регионарный энтерит, острый ревматизм, системную красную волчанку, склеродермию, болезнь Рейно, саркоидоз, спондилоартропатии, синдром Шегрена, тироидит, отторжение при трансплантации, тендинит, травму или повреждение (например, отморожение, под действием химических раздражителей, токсинов, рубцевание, ожоги, механическое травмирование), васкулит, витилиго и гранулематоз Вегенера.
В определенных вариантах осуществления воспалительное нарушение является воспалением, ассоциированным с пролиферативным заболеванием, например воспаление, ассоциированное с раком.
В определенных вариантах осуществления состояние представляет собой аутоиммунное нарушение, и в определенных вариантах осуществления композиция дополнительно включает иммуномодули-рующее средство. Иллюстративные аутоиммунные нарушения включают, но без ограничений, артрит (в том числе ревматоидный артрит, спондилоартропатии, подагрический артрит, дегенеративные заболевания суставов, такие как остеоартрит, системную красную волчанку, синдром Шегрена, анкилозирующий спондилоартрит, недифференцированный спондилит, болезнь Бехчета, виды гемолитической аутоиммунной анемии, рассеянный склероз, боковой амиотрофический склероз, амилоз, острый плечекистевой синдром, псориатический артрит и болезнь Стилла), астму, атеросклероз, остеопороз, бронхит, тендинит, бурсит, заболевание кожи (например, псориаз, экзему, ожоги, дерматит, зуд (зудневую чесотку)), энурез, эозинофильное заболевание, болезнь желудочно-кишечного тракта (например, выбранную из пептиче-ских язв, регионарного энтерита, дивертикулита, желудочно-кишечного кровотечения, эозинофильных болезней желудочно-кишечного тракта (например, эозинофильного эзофагита, эозинофильного гастрита, эозинофильного гастроэнтерита, эозинофильного колита), гастрита, диареи, гастроэзофагеальной реф-люксной болезни (GORD или ее синоним GERD), воспалительного заболевания кишечника (IBD) (например, болезни Крона, неспецифического язвенного колита, коллагенозного колита, лимфоцитарного колита, ишемического колита, колита отключенной кишки, синдрома Бехчета, недифференцированного колита) и синдрома воспаленного кишечника (IBS)) и нарушения, облегчаемые с помощью средств, улучшающих перельстатику желудочно-кишечного тракта (например, непроходимость кишечника, непроходимость кишечника после оперативного вмешательства и непроходимость кишечника во время сепсиса; гастроэзофагеальную рефлюксную болезнь (GORD или ее синоним GERD); эозинофильный эзофагит, парез желудка, такой как диабетический парез желудка; пищевая непереносимость и пищевые аллергии, а также другие функциональные нарушения пищеварительного тракта, такие как неязвенная
диспепсия (NUD) и некардиальная боль в грудной клетке (NCCP, в том числе костохондрит)). В определенных вариантах осуществления состояние представляет собой болезненное состояние, и в определенных вариантах осуществления композиция дополнительно включает болеутоляющее средство. "Болезненное состояние" включает без ограничения невропатическую боль (например, периферическую невропатическую боль), центральную боль, деафферентационную боль, хроническую боль (например, хроническую ноцицептивную боль и другие формы хронической боли, такие как послеоперационная боль, например боль, возникающая после реконструктивной хирургии на бедре, колене или других видов реконструктивной хирургии), дооперационную боль, раздражение ноцицептивных рецепторов (ноцицептив-ную боль), острую боль (например, фантомную и проходящую острую боль), боль невоспалительного характера, боль воспалительного характера, боль, ассициированную с раком, боль от раны, боль от ожогов, послеоперационную боль, боль, ассоциированную с медицинскими манипуляциями, боль, возникшую в результате зуда, синдром болезненного мочевого пузыря, боль, ассоциированную с предменструальным дисфорическим расстройством и/или предменструальным синдромом, боль, ассоциированную с синдромом хронического переутомления, боль, ассоциированную с преждевременными родами, боль, ассоциированную с симптомами отмены наркотических веществ, боль в суставах, артритическую боль (например, боль, ассоциированную с кристаллическим артритом, остеоартритом, псориатическим артритом, подагрическим артритом, реактивным артритом, ревматоидным артритом или артритом Рейтера), пояснично-крестцовую боль, скелетно-мышечную боль, головную боль, мигрень, мышечную боль, люмбаго, боль в шее, зубную боль, дентальную/ челюстно-лицевую боль, внутренностную боль и т.п. Одно или несколько болезненных состояний, рассматриваемых в данном документе, могут включать комбинации различных типов боли, предусмотренных выше и здесь (например, ноцицептивную боль, боль воспалительного характера, невропатическую боль и т.д.). В некоторых вариантах осуществления может преобладать отдельная боль. В других вариантах осуществления болезненное состояние включает два или более типов боли без преобладания одной. Опытный практикующий врач может определить дозировку, которая нужна для достижения терапевтически эффективного количества для конкретного субъекта, на основании болезненного состояния.
В определенных вариантах осуществления болезненное состояние представляет собой боль воспалительного характера. В определенных вариантах осуществления болезненное состояние (например, боль воспалительного характера) ассоциировано с воспалительным нарушением и/или аутоиммунным нарушением.
В определенных вариантах осуществления состояние представляет собой заболевание печени, и в определенных вариантах осуществления композиция дополнительно включает средство, применяемое для лечения заболевания печени. Иллюстративные заболевания печени включают, но без ограничений, повреждение печени, вызванное лекарственными средствами (например, повреждение печени, вызванное ацетаминофеном), гепатит (например, хронический гепатит, вирусный гепатит, гепатит, вызванный алкоголем, аутоиммунный гепатит, стеатогепатит), неалкогольную жировую дистрофию печени, заболевание печени, вызванное алкоголем (например, алкогольную печень, алкогольный гепатит, цирроз, связанный с чрезмерным употреблением алкоголя), гиперхолестеринемию (например, тяжелую гиперхолестерине-мию), наследственный амилоидоз, связанный с транстиретином, цирроз печени, рак печени, первичный биллиарный цирроз, холестаз, поликистозную болезнь печени и первичный склерозирующий холангит. В определенных вариантах осуществления заболевания печени ассоциированы с воспалением. В определенных вариантах осуществления состояние представляет собой наследственную амилоидную невропатию, и в определенных вариантах осуществления композиция дополнительно включает средство, применяемое при наследственной амилоидной невропатии.
Предполагается, что "субъект", которому проводят введение, включает, но без ограничений, человека (т.е. мужчину или женщину любой возрастной группы, например субъекта детского возраста (например, младенца, ребенка, подростка) или взрослого субъекта (например, молодого совершеннолетнего, взрослого средних лет или взрослого пожилого возраста)) и/или других животных, отличных от человека, например млекопитающих [например, приматов (например, яванских макаков, макаков-резус); и важных с хозяйственной точки зрения млекопитающих, таких как мыши, крысы, хомяки, крупный рогатый скот, свиньи, лошади, овцы, козлы, кошки и/или собаки], и птиц (например, птиц, важных с хозяйственной точки зрения, таких как куры, утки, гуси и/или индейки). В определенных вариантах осуществления субъект является животным, отличным от человека. Животное, отличное от человека, может быть самцом или самкой и находиться на любой стадии развития. Животное, отличное от человека, может быть трансгенным животным.
Как используется в данном документе и если не указано иное, выражения "лечить", "процесс лечения" и " лечение" предполагают действие, которое имеет место в то время, когда субъект страдает от определенного заболевания, нарушения или состояния, при этом действие уменьшает тяжесть заболевания, нарушения или состояния, или тормозит или замедляет развитие заболевания, нарушения или состояния ("терапевтическое лечение"), а также предполагает действие, которое имеет место до того, как субъект начинает страдать от определенного заболевания, нарушения или состояния ("профилактическое лечение").
В целом, "эффективным количеством" активного ингредиента называют количество, достаточное для вызывания необходимой биологической реакции. Как будет понятно специалистам в данной области техники, эффективное количество соединения по настоящему изобретению может варьировать в зависимости от таких факторов, как необходимый биологический ожидаемый результат, фармакокинетика активного ингредиента, заболевание, которое необходимо лечить, способ введения и возраст, состояние здоровья и состояние субъекта. Эффективное количество включает терапевтическое и профилактическое лечение.
Как используется в данном документе и если не указано иное, "терапевтически эффективное количество" активного ингредиента представляет собой количество, достаточное для того, чтобы обеспечить лечебное действие при лечении заболевания, нарушения или состояния, или чтобы отсрочить или свести к минимуму один или несколько симптомов, ассоциированных с заболеванием, нарушением или состоянием. Терапевтически эффективное количество активного ингредиента означает количество активного ингредиента, отдельно или в сочетании с другими средствами или терапиями, которое обеспечивает лечебное действие при лечении заболевания, нарушения или состояния. Выражение "терапевтически эффективное количество" может включать количество, которое улучшает терапию в целом, уменьшает или устраняет симптомы или причины заболевания или состояния, или повышает терапевтическую эффективность другого лечебного средства.
Как используется в данном документе и если не указано иное, "профилактически эффективное количество" активного ингредиента представляет собой количество, достаточное для того, чтобы предупредить заболевание, нарушение, или состояние, или один или несколько симптомов, ассоциированных с заболеванием, нарушением или состоянием, или предотвратить рецидив. Профилактически эффективное количество активного ингредиента означает количество активного ингредиента, отдельно или в сочетании с другими средствами или терапиями, которое обеспечивает профилактическое действие при предупреждении заболевания, нарушения или состояния. Выражение "профилактически эффективное количество" может включать количество, которое улучшает профилактику в целом или повышает профилактическую эффективность другого профилактического средства. Активный ингредиент можно вводить в таких количествах, в такое время и таким путем, которые считаются необходимыми для достижения необходимого результата. Точное количество активного ингредиента будет варьировать от субъекта к субъекту, в зависимости от вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести инфекции, конкретного активного ингредиента, его способа введения, его механизма действия и т.п. Активный ингредиент, либо APPL сам по себе, либо APPL в сочетании со средством, предпочтительно составляют в форму единицы дозирования для легкости введения и постоянства дозировки. Будет понятно, однако, что общесуточное применение активного ингредиента будет определяться лечащим врачом в рамках результатов тщательной медицинской оценки. Конкретный терапевтически эффективный уровень дозы для любого определенного субъекта будет зависеть от множества факторов, в том числе от нарушения, которое необходимо лечить, и тяжести нарушения; активности применяемого активного ингредиента; конкретной применяемой композиции; возраста, веса тела, общего состояния здоровья, пола и рациона пациента; времени введения, пути введения и скорости экскреции конкретного применяемого активного ингредиента; продолжительности лечения; лекарственных средств, используемых в сочетании с конкретным применяемым активным ингредиентом или совместно с ним; и аналогичных факторов, хорошо известных в области медицины.
Активный ингредиент можно вводить любым путем. В некоторых вариантах осуществления активный ингредиент вводят с помощью ряда путей, в том числе пероральным, внутривенным, внутримышечным, внутриартериальным, интрамедуллярным, внутриоболочечным, подкожным, внутрижелудочковым, трансдермальным, внутрикожным, ректальным, интравагинальным, внутрибрюшинным, местным (как с помощью порошков, мазей, кремов и/или капель), чрезслизистым, интраназальным, буккальным, кишечным, сублингвальным; с помощью интратрахеального вливания, бронхиального вливания и/или ингаляции; и/или как пероральный спрей, назальный спрей и/или аэрозоль. В целом, наиболее подходящий путь введения будет зависеть от ряда факторов, в том числе от природы активного ингредиента (например, его стабильности в желудочно-кишечном тракте), состояния субъекта (например, способен ли субъект переносить пероральное введение) и т.д.
Точное количество активного ингредиента, необходимое для достижения терапевтически или профилактически эффективного количества, будет варьировать от субъекта к субъекту в зависимости от вида, возраста и общего состояния субъекта, тяжести побочных эффектов или нарушения, отличительных признаков определенного соединения(соединений), способа введения и т. п. Количество, которое необходимо ввести, например, ребенку или подростку, может определять практикующий врач или специалист в данной области техники, и оно может быть ниже или таким же, как вводится взрослому.
Примеры
Следующие примеры изложены для того, чтобы можно было максимально полно понять настоящее изобретение, описанное в данном документе. Должно быть понятно, что эти примеры служат только для иллюстративных целей и не расцениваются как каким-либо образом ограничивающие настоящее изобретение.
Аминокислота-, пептид- и полипептид- липиды (APPL) для доставки лекарственных средств.
Для разрешения проблем, связанных с эффективностью доставки, специфичностью и токсичностью биологических средств, за счет использования рационального дизайна и оптимизации новых аминокислотных производных липидов была разработана высокоактивная и селективная система доставки siRNA с широким терапевтическим окном.
Ранее наша группа выполнила комбинаторный синтетический подход для разработки новых кати-онных липидов (липидоидов) для доставки siRNA. См., например, Akinc, A., et al., A combinatorial library of lipid-like materials for delivery of RNAi therapeutics. Nat Biotechnol, 2008. 26(5): p. 561-9; Love Kevin, Т., et al., Lipid-like materials for low-dose, in vivo gene silencing. Proc Natl Acad Sci USA. 107(5): p. 1864-9; Siegwart, D.J., et al., Combinatorial synthesis of chemically diverse core-shell nanoparticles for intracellular delivery. Proc Natl Acad Sci USA. 108(32): p. 12996-3001. Целый ряд этих соединений продемонстрировал значительные эффекты сайленсинга in vivo. См., например, Leuschner, F., et al., Therapeutic siRNA silencing in inflammatory monocytes in mice. Nat Biotechnol. 29(11): p. 1005-10. В ходе более ранних исследований были обнаружены ключевые химические и структурные признаки, а также способы получения составов для разработки новых веществ. См., например, Akinc, A., et al., Development of lipidoid-siRNA formulations for systemic delivery to the liver. Mol. Ther, 2009. 17(5): p. 872-9; Akinc, A., et al., Targeted delivery of RNAi therapeutics with endogenous and exogenous ligand-based mechanisms. Mol Ther. 18(7): p. 1357-64; Semple, S.C., et al., Rational design of cationic lipids for siRNA delivery. Nat Biotechnol. 28(2): p. 172-6. К примеру, активные соединения имеют хвост длиной в 12 или более атомов углерода, а также несколько хвостов. См., например, Love Kevin, Т., et al., Lipid-like materials for low-dose, in vivo gene silencing. Proc Natl Acad Sci USA. 107(5): p. 1864-9. Для того чтобы повысить эффективность, селективность в отношении ткани и типа клеток и переносимость, необходимо разрабатывать и исследовать новые химические остовы. Аминокислоты представляют собой природные строительные блоки пептидов и белков в природе. Производные аминокислот могут метаболизироваться в организме человека; следовательно, эти вещества, вероятнее всего, хорошо переносятся и безопасны в качестве лечебных средств. Кроме того, пептиды играют важные роли в транспорте через мембрану, эндогенных клеточных путях проведения сигнала и путях перемещения веществ и создают огромный потенциал для максимального использования таких взаимодействий с целью усиления эффективности доставки у систем, в которые внедрены пептидные фрагменты. Из-за их важных физиологических функций и безопасности для людей, вещества на основе аминокислот, такие как инсулин и трастузумаб, широко применялись в качестве добавок и лечебных медицинских препаратов при лечении различных заболеваний. Исследования показали, что целесообразно применять аминокислотные производные для доставки генов или доставки siRNA. См., например, Prata, CA., et al., Lipophilic peptides for gene delivery. Bioconjug Chem, 2008.19(2): p. 418-20; Adami, R.C., et al., An amino acid-based amphoteric liposomal delivery system for systemic administration of siRNA Mol Ther. 19(6): p. 1141-51; Margus, H., K. Padari, and M. Pooga, Cell-penetrating peptides as versatile vehicles for oligonucleotide delivery. Mol Ther. 20(3): p. 525-33. Объединяя преимущества как природных свойств аминокислот, так и структурных признаков липидоидов, была применена стратегия оптимизации структуры за счет использования способов итеративного скрининга и с помощью рационального дизайна получили целый ряд аминокислотных производных липидов. Сообщается о разработке, синтезе и биологической оценке этого нового ряда аминокислотных производных липидов. Эта эффективная и рациональная стратегия дала в результате вещество-прототип cKK-Е12. Систематически исследовалась его эффективность доставки, селективность в отношении ткани и типа клеток, переносимость и механизм действия. Текущие результаты показывают, что данная система доставки представляет собой новый носитель для эффективной, селективной и безопасной доставки siRNA, которая демонстрирует огромный потенциал для различных заболеваний.
Общие способы
Способ 1. Получение соединения формулы (I)-(III). Конъюгация с формулой (i).
Смесь аминокислот, пептидов или полипептидов и конъюгирующего реагента (эпоксида, тиирана или азиридина) (соотношение конъюгирующего реагента к амину составляло от 1,5:1 до 3:1) в EtOH подвергали воздействию излучения в СВЧ-печи при 150°С в течение 5 ч. Реакционную смесь очищали с помощью колоночной флеш-хроматографии. Если аминокислоты, пептиды или полипептиды находились в солевой форме, к раствору добавляли триэтиламин и перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре перед воздействием излучения.
Схема А
О О
X 150 °С RV^Y RV4)RA4
H,NL + Z\ > I I + I
К HY nL'^ - RL HY [/ ^
Y = O, S, NR
Способ 2. Получение соединений формулы (I)-(III). Конъюгация с формулой (ii).
Смесь аминокислот, пептидов или полипептидов и конъюгирующего реагента (акрилата или акри-ламида) (соотношение акрилатов или конъюгирующего реагента к амину составляло от 1,5:1 до 3:1) в этаноле (EtOH), изопропаноле (iPrOH) или ацетонитриле нагревали до 90°С и перемешивали в течение от 2 ч до 2 дней. Реакционный раствор концентрировали с помощью силикагеля и очищали с помощью колоночной флеш-хроматографии.
Схема F
о о
Способ 3. Получение соединений формулы (I)-(III). Конъюгация с формулой (iii).
К раствору аминокислот, пептидов или полипептидов и конъюгирующего реагента (альдегида) (соотношение альдегидов к амину составляло от 1,5:1 до 3:1) в THF добавляли триацетоксиборгидрид натрия (NaBH(OAc)3) при rt. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 дней при rt. Реакционный раствор концентрировали с помощью силикагеля и очищали с помощью колоночной флеш-хроматографии.
Схема K
Способ 4. Получение соединений формулы (IV).
Соединения формулы (IV) можно получать путем конденсации 1,2-диамина с активированной щавелевой кислотой, где X1 представляет собой уходящую группу, например бром, хлор или йод, с получением циклизированного продукта. Группы формул (i), (ii) или (iii) можно вводить после реакции замыкания кольца, например, в частности, путем добавления к R1 боковой цепи аминокислоты или к атому азота иминогрупп RQ. Другие группы на остове, например R2-группы, можно вводить перед реакцией замыка
ния кольца. В частности, R2 могут представлять собой группу формулы (i), (ii) или (iii), введенную перед реакцией замыкания кольца.
Схема Р
щавелевой кислоты Способ 5. Получение соединений формулы (V).
Соединения формулы (V) и (VI) можно получать путем конденсации 1,1-диамина с активированной малоновой кислотой, где X1 представляет собой уходящую группу, например бром, хлор или йод, с получением циклизированного продукта. Группы формул (i), (ii) или (iii) можно вводить после реакции замыкания кольца, например, в частности, путем добавления к R1, боковой цепи аминокислоты или к атому азота иминогрупп RQ. Другие группы на остове, например R2-группы, можно вводить перед реакцией замыкания кольца. В частности, R2 могут представлять собой группу формулы (i), (ii) или (iii), введенную перед реакцией замыкания кольца.
Схема Q
1,1-диамин малонильное (V)
производное
Способ 6. Получение соединений формулы (VI).
Соединения формулы (VI) можно получать путем конденсации гидразина с активированной янтарной кислотой, где X1 представляет собой уходящую группу, например бром, хлор или йод, с получением циклизированного продукта. Группы формул (i), (ii) или (iii) можно вводить после реакции замыкания кольца, например, в частности, путем добавления к R1, боковой цепи аминокислоты или к атому азота иминогрупп RQ. Другие группы на остове, например R2-группы, можно вводить перед реакцией замыкания кольца. В частности, R2 могут представлять собой группу формулы (i), (ii) или (iii), введенную перед реакцией замыкания кольца.
Схема R
Цисте ин
лллл лллл.
SR6, SH
^SH
Глицин
H2N^lORA4
Пролин
"6 О О
иллюстративная циклизированная группа Rx-R3
Алании
-СНз
Бета-аланин
-Н,Н
W2H^-^ORM
О II
Валин
-СН(СНз)2
H2N-AR"
о II
Изолейцин
-СН(СНз)(СН2СНз)
H2N^AoR"
Лейцин
-СН2СН(СН3)2
H2N^OR"
Метионин
лллл,
H2N^OR-
Фенилаланин
л.лл.
Тирозин
л.лл, -л.лл.
H2N\ JL л.
Триптофан
* R6 и R7 представляют собой водород в предшественнике и после конъюгации независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного карбоциклила,
необязательно замещенного гетероциклила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, защитной группы азота, когда присоединен к атому азота, защитной группы кислорода, когда присоединен к атому кислорода, и защитной группы серы, когда присоединен к атому серы, или группы формулы (i), (ii) или (iii).
Таблица 2. Пептиды и полипептиды
Название, символ
Аминокислота
линейный лизин-лизин
линейный Не-
NH2
циклический лизин-лизин
циклический К-К
H*N^ о
NH2
полилизин
к-к-к
H2N'"^N> -r^ORA4 NH2
n = 2
к-к-к-к
Как выше; n = 3
к-к-к-к-к
Как выше; n = 4
полилизин (500-2000 г/моль)
К-(К)"-К РК-500
Как выше; n = 3-12
полилизин (1000-5000 г/моль)
К-(К)"-К РК-1000
Как выше; п = 6-33
полилизин (4000-15000 г/моль)
К-(К)"-К РК4000
Как выше; п = 26-102
полилизин (15000-30000 г/моль)
К-(К)"-К РК-15000
Как выше; п = 102-204
полилизин (30000-70000 г/моль)
К-(К)"-К РК-30000
Как выше; п = 204-480
линейный
глутаминовая кислота-лизин
линейный ЕК
со2н
н2м^йАон
NH2
линейный фенилаланин-лизин
линейный FK
н2м\й^он
NH2
линейный глицин-лизин
линейный GK
H2N^|^NY^OH
NH2
линейный изолейцин-лизин
линейный ПС
NH2
линейный лейцин-лизин
линейный LK
H2NX^NY^OH
NH2
линейный метионин-лизин
линейный МК
SMe
NH2
линейный пролин-лизин
линейный РК
САиАон
NH2
линейный глутамин-лизин
линейный QK
CONH2
NH2
линейный серии-лизин
линейный SK
H2N^^OH NH2
линейный триптофан-лизин
линейный WK
hnCC
NH2
линейный тирозин-лизин
линейный YK
NH2
линейный лизин-треонин
линейный КТ
\ •
0 Л".
линейный лизин-валин
линейный KV
NH2
Таблица 3. Конъюгирующие реагенты
Название
Структура
Е11
Е12
Е13
Е14
Е15
Е16
А10
А12
А13
А14
О10
012
013
014
N10
N11
N12
N13
Методики синтеза
Пример 1. Синтез APPL.
На схемах A-R показаны общие пути синтеза APPL формул (I)-(VI) по настоящему изобретению. Применение таких способов приводит к множеству APPL, изображенных в табл. 4 и 5.
Соединения называли с помощью комбинирования обозначения аминокислоты, альдегидов (А), ак-рилатов (О), амидов (N) или эпоксидов (Е) и длины углеродной цепи. Например, К-Е12 представляет собой продукт реакции лизина с 1,2-эпоксидодеканом.
Ta6,iiiiia 4.
Способ
Предшест-
Pcsii CIIJ
ЛРИ.
венник
ГА 2
1А Основной 1В Второстепенный
^ о
- i-n-(следовые количества. RA+ - Н. Et)
к'-1.12
О О
2Л Основной 2В Второстспс ii
*^ I (следовые количества. R u = Н. Et)
.1-/. /_'
1:12
No \ О
CfcHj,
ЗА Ос {пой ЗВ Второстепенный
/ ' (следовые количества, RA4 = Н, Et)
l-l:J2
1-12
но 1 Н0С <Ч о
4Л Основной 4В Второстепенный
CioHf, I
НО^^О (следовые количества, RA4 = Н, Et)
hJ2
^y^s о H%^s о
5Л Основной 5В Второстепенный ОН
слгЧ О
С4(Н^ (следовые количества. RA4 = Н. Et)
Hi 2
6Л Ос мюй 6В Второстепенный
Gtft-Ц (следовые количества, RA4 = Н, Et)
H-/.7J
hi 2
7Л Основной 7В Второстепенный
с,^,,'4 о
Ha-T^H^fXQrt4
ОН (следовые количества, RA4 = Н, Et)
\-1 12
Г.12
" . SB Второстепенный 8А Основном
с^ы^ о
CKHJI (следовые количества, RA4 = Н, Et)
(XX. ?
9 Основной v _ J (следовые количества. Ru = Н. El)
/*-/. /2
1:12
Уд o
...... I OB Второстепенный
ЮЛ Основном
" (следовые количества, RA4 = Н, Et)
/ -/ /2
hi 2
HD"S
соо о ноос о
т-т^'Лл •**> •-'••с...
11Л Основной 11В Второстепенный ОН
но1Х"ту
QH (следовые количества, RA4 = Н, Et)
El 2
vo о он о
у у
12ЛОс "ной 12В Второстепенный
^txy^
^*фц (следовые количества. RA4 = Н. Et)
И 2
13А Основной 13В Вт0Р0Степенный
'ОН (следовые количества, RA4 = Н, Et)
T-EI2
HI 2
у^о уА0
14Л Основной 14В Второстепенный
"ОН
С-1;В:.-'ЛХ 0
У^-хуи
CirHj, (следовые количества. RA4 = Н. Et)
114 /2
Ell
он он
15Л Основной 15В Второстепенный
HO'^CiejHjt (следовые количества. RA4 = Н. Et)
V/ У2
If,
1:12
с" fH ..ОН
К)Л Основной К)В Второстепенный
\ он
-¦Чр-ОН
С*оН?, (следовые количества, RA4 = Н, Et)
о-иг
H12
17Л Ос шой 17В Второстепенный
\^ (следовые количества, R u = Н, Et)
r-i-:i2
EI2
ISA Основной 18В Второстепенный
G.CH;4\ О
(следовые количества, RA4 = Н. Et)
Ml 12
Hi 2
АЛ A^
ЮЛ Основной 19В Второстепенный
СвНя-Ч О
^-*^Ч (следовые количества, R u = Н, Et)
V -1,72
lit
Л12
°-Н:!> о
" I ц
Л-.У2
(следовые количества, RA4 = R. Et)
A12
с,.н^
til
С. 74 -'""А| ноА^
к--о уч.
,-tv N A HN. С н" :H <• С74.-,
22Л Основной 22В Второстепенный
А "ОН (следовые количества, RU = Et)
А / /2
Hi 2
циклический KK
"г- ад с -н."- NH
-л^^'сД. С^*Г--АА
°с *""> й 7 ' " Следовой ^
< АА-/72
c-t+y Xе'db
G"JV^'OH N= M2
||№/мА*"ю-?/2
112
PK-HMW
Как выше, n = 6-33
"гл/шЛ"т;"-?72
HI 2
Как выше, п = 66-102
полиКмы'г- Е!2
HI:
PK-I5 <*">
Как выше, п = 102-204
ntuiuKi man-El 2
112
|> JC-5 Как выше, и = 204-480
полиКмюпп-Е12
I-И i
циклический KK
Ос "ний • С. ic твой
i АА-/7"
циклический KK
он он
с^ "У"
Oc iiioii * C''(tm)
i АА-/
lilh
циклический KK
oil. on
'Y\ ^
^ N--4r..o. Y^V°M
H* Следовой ii6
ОСНОВНОМ
< АА-/ /г.
циклический KK
vy *^f*t " _ y^
HJ,^ ..-^ ~R
^ 'N •'x . C*" I
Ос "мой 1#Л Следовой j
i kk-l и
i:t3
циклический KK
t;;
-y ^Jr\
Основной *' > С иг"" Следовой * у СцНц
(M./.i.i
Hi 5
циклический KK
^> '"V°" '-м-'-.-он
Ос iiioii Ни Следовой ЧА
с АА-/ /5
HI:
HtH. 1л > -
н <> н Р и ?
°hS ?h4i
c^^^S c^f^^S c-^^^K
OieHjjA^OH СщНг(^ЪН С-;Ч:.^^о^
35Л Ос {пой 35В Второстене й Форма свободной кислоты
1:12
OXfc
/ о -
_ " 36В Второстене й
36А Основной
(N-lioc-защищенная боковая цепь) К-Е12
N12
cKK
С Н--
' V-
плюс соединения, где 1 хвост (R1) помещен водородом ,АА- N72
.ад
OI2
cKK
Со ^\^*н
< АА-О/2
Л 12
- KK
Г^ о
t-AA'-.-W*
* реакция может давать смесь из двух или более APPL; также включены соединения, где 1 или несколько хвостов (RL) замещены водородом.
Таблица 5.
Соединение
Химическая формула
Рассчитан.
Наблюд.
Кол-во хвостов
А-Е12
C27H54N03+
440,4098
440,4336
С-Е12
C27H54N03S+
472,3819
472,4303
D-E12
C28H54N05+
484,3997
484,4327
Е-Е12
C29H56N05+
498,4153
498,4117
F-E12
C33H58N03+
516,4411
516,4332
G-E12
C26H52N03+
426,3942
426,3772
Н-Е12
C42H80N3O4+
690,6143
690,6016
I-E12
C30H60NO3+
482,4568
482,4461
К-Е12
C42H85N204+
681,6504
681,6009
L-E12
C30H60NO3+
482,4568
482,4771
М-Е12
C29H58N03S+
500,4132
500,4471
N-E12
C40H79N2O5+
667,5984
667,5894
Р-Е12
C17H32N02+
282,2428
282,2585
Q-E12
C29H57N204+
497,4313
497,4268
R-E12
C54H109N4O5+
893,8392
893,8400
S-E12
C27H54N04+
456,4047
456,3891
Т-Е12
C28H56N04+
470,4204
470,4186
V-E12
C29H58N03+
468,4411
468,4259
W-E12
< < < лкт
Y-E12
C33H58N04+
532,436
532,4149
CKG-E12
C32H64N304+
554,4891
554,4852
СКТ-Е12
C34H68N305+
598,5153
598,5179
CYK-E12
C39H70N3O5+
660,5310
660,5350
CLK-E12
C36H72N304+
610,5517
610,5556
CDK-E12*
C36H70N3O6+
640,5259
640,5316
СМК-Е12
C35H70N3O4S+
628,5082
628,5072
CKV-E12
C35H70N3O4+
596,5361
596,5330
САК-Е12
C33H66N304+
568,5048
568,4992
сСК-Е12
33H66N304S+
600,4769
600,6143
CQK-E12
C35H69N405+
625,5262
625,4733
СРК-Е12
C35H68N304+
594,5204
594,5169
CFK-E12
C39H70N3O4+
644,5361
644,5301
CWK-E12
C41H71N404+
683,5470
683,5367
СЕК-Е12
C35H68N306+
626,5103
626,5053
CIK-E12
C36H72N304+
610,5517
610,5501
CSK-E12
C33H66N305+
584,4997
584,5029
сКК-ЕЮ
C52H105N4O6+
881,8029
881,8042
СКК-Е12
C60H121N4O6+
993,9281
993,9224
СКК-Е14
C68H137N406+
1106,0533
1106,0709
Иллюстративные соединения из табл. 5
Синтез соединения В.
Соединение А (487 мг, 1,02 ммоль) загружали в 10 мл сосуд и добавляли по каплям трифторуксус-ную кислоту (TFA, 1,3 мл) при 0°С. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин. Растворители выпаривали под пониженным давлением и TFA-соли в DMF (3,5 мл) добавляли по каплям к пиридину (100 мл) при 0°С. Реакционную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали на протяжении ночи. Растворители выпаривали под пониженным давлением и белое твердое вещество промывали EtOAc с получением чистого В с выходом 69%.
MS: m/z 525 (М+Н+);
1Н ЯМР (500 МГц, DMSO, ppm): 5 1,29-1,40 (m, 8Н, СН2СН2), 1,61-1,68 (m, 4Н, СН2), 2,97 (dd, J= 6,0, 12,5 Гц, 4Н, NCH2), 3,79 (br, 2Н, СОСН), 7,22 (t, J = 5,5 Гц, 2Н, ароматический), 7,33-7,37 (m, 8H, ароматический), 8,10 (s, 2H, NH).
Синтез соединения С.
К непрозрачному раствору соединения В (95 мг, 0,18 ммоль) в 50% уксусной кислоте/CH^b (6 мг) добавляли Pd на угле (10 вес.%, 36,5 мг). Черную суспензию дегазировали в течение 5 мин и вводили газ-водород. Реакционную смесь перемешивали при rt в течение ночи и затем фильтровали через слой цели-та, который несколько раз промывали МеОН. Объединенные фильтраты концентрировали с получением желтого вязкого масла, которое отверждали добавлением EtOAc. Твердое вещество промывали этилаце-татом с получением соединения С с выходом 90%.
MS: m/z257 (M+H+);
1 H ЯМР (500 МГц, D2O, ppm): 5 1,39-1,52 (m, 4Н, СН2), 1,67-1,71 (m, 4Н, СН2), 1,84-1,88 (m, 4Н, СН2), 2,99 (t, J = 7,5 Гц, 4Н, NCH2), 4,14 (t, J = 5,0 Гц, 2Н, СОСН). Синтез соединения 23 (cKK-H12).
К смеси соединения С (169,2 мг, 0,45 ммоль) и 1,2-эпоксидодекана (523 мг, 2,7 ммоль) в EtOH добавляли триэтиламин (182 мг, 1,8 ммоль), который перемешивали в течение 30 мин при rt. Затем реакционную смесь подвергали воздействию излучения в СВЧ-печи при 150°С в течение 5 ч. Смесь очищали с помощью колоночной флеш-хроматографии с получением соединения 23 (с выходом 52%) в виде светло-желтого масла.
MS: m/z 993 (М+Н+);
1H ЯМР (500 МГц, DMSO, ppm): 5 0,87 (t, J = 7,0 Гц, 12Н, CH3), 1,21-1,39 (m, 80H, СН2), 1,64-1,67 (m, 4H, СН2), 2,25-2,44 (m, 12H, NCH2), 3,44 (br, 4H, СНОН), 3,79 (br, 2H, СОСН), 4,21 (d, J = 3,0 Гц, 2Н, СНОН), 4,27 (d, J = 3,0 Гц, 2Н, СНОН), 8,11 (br, 2H, CONH).
Пример 3. Синтез соединения D.
Это предполагаемое соединение D можно синтезировать с помощью реакции 23 с реагентом Ло-усона в сухом толуоле.
Биологические способы
Составы с siRNA. Состав А.
APPL, дистеароилфосфатидилхолин (DSPC), холестерин и mPEG2000-DMG растворяли в 90% этаноле при молярном соотношении 50:10:38,5:1,5. siRNA (против люциферазы светлячка или fVII) растворяли в 10 мМ цитратном буфере, рН 3, при концентрации 0,4 мг/мл. Этанольный раствор липидов и водный раствор siRNA прокачивали посредством шприцевой помпы через микрофлюидную смесительную камеру для самопроизвольного образования липидных наночастиц, содержащих siRNA. Липиды объединяли с siRNA при соотношении общих липидов к siRNA, составляющем 7:1 (вес.: вес.). Эти составы диа-лизировали против PBS для удаления этанола и замены буфера.
Состав В.
APPL составляли с холестерином (Sigma-Aldridi), DSPC (1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфохолин, Avanti), mPEG2000-DMG (синтезирован Alnylam) и siRNA с помощью смесительного устройства на микрофлюидной основе. См., например, Chen, D., et al., Rapid Discovery of Potent siRNA-Containing Lipid Nanoparticles Enabled by Controlled Mcrofluidic Formulation. J. Am Chem Soc. Затем составы диализирова-ли против PBS в 3500 MWCO кассетах для диализа (Pierce) на протяжении ночи. Частицы оценивали с помощью модифицированного анализа Ribogreen (Invitrogen) в отношении захвата siRNA и с помощью динамического рассеяния света (ZetaPALS, Brookhaven Instruments) в отношении среднего размера частиц. Составы ЙСК-Е^ получали из холестерина, DSPC и mPEG2000-DMG с применением аналогичного способа при молярном соотношении 50:10:38,5:1,5. В этом составе получали диаметр частиц 60-70 нм с приблизительно 65% захватом siRNA.
In Vitro сайленсинг генов люциферазы.
Клетки HeLa, стабильно экспрессирующие люциферазу светлячка и люциферазу Renilla, высевали (14000 клеток/лунка) в каждую лунку матово-белого 96-луночного планшета (Corning-Costar) и обеспечивали прикрепление в течение ночи в питательной среде. Питательную среду составляли из 90% DMEM, не содержащей феноловый красный, 10% FBS, 100 ед./мл пенициллина, 100 мг/мл стрептомицина (Invitrogen). Клетки трансфицировали с помощью LNP, составленных с антилюциферазной siRNA, путем добавления составленных частиц в питательную среду. Трансфекцию проводили в четырех по-вторностях. Клеткам обеспечивали рост в течение 1 дня при 37°С, 5% СО2 и затем анализировали в отношении экспрессии люциферазы. Контрольные эксперименты проводили с липофектамином 2000, как описано производителем (Invitrogen). Экспрессию люциферазы светлячка и Renilla анализировали с применением наборов для анализа Dual-Glo (Promega). Люминесценцию измеряли с применением люмино-метра Victor3 (Perkin Elmer).
In Vivo сайленсинг генов фактора VII у мышей.
Мышей C57BL/6 (Charles River Labs) использовали для экспериментов по siRNA-сайленсингу. Перед инъекцией составы разводили в PBS при концентрациях siRNA (SEQ ID NO 1 (смысловая siFVII): 5'-GGAucAucucAAGucuuAcT*T-3'; SEQ ID NO 2 (антисмысловая): 5'-GuAAGAcuuGAGAuGAuccT*T-3') так, что каждой мыши вводили дозу 0,01 мл/г веса тела. Составы вводили внутривенно с помощью инъекции в хвостовую вену. Через 48 или 72 ч измеряли прибавку/потерю веса тела и мышей анестезировали ингаляцией изофлюрана для сбора образцов крови с помощью сбора крови из ретроорбитального синуса глаза. Сыворотку отделяли с помощью пробирок для отделения сыворотки (Falcon tubes, Becton Dickinson) и уровни белка фактора VII анализировали с помощью хромогенного анализа (Biophen FVII, Aniara Corporation). Стандартную кривую строили с помощью образцов от мышей, которым инъецировали PBS, и относительную экспрессию фактора VII определяли сравнением обработанных групп с необработанным PBS-контролем.
Биораспределение составов с Су5.5-меченой siRNA-cKK-E12 у мышей.
Мышам, упомянутым выше, системно инъецировали составленную Су5.5-меченую siRNA при дозе общей siRNA 1 мг/кг. Мышей умерщвляли через 1 или 24 ч после инъекции; затем извлекали и визуализировали поджелудочную железу, селезенку, печень, почки, яичники, матку, сердце, легкие и тимус, а также фрагмент жировой ткани и мышечной ткани. Органы исследовали с помощью системы для визуализации Ivis от Caliper с применением длины волны возбуждения 675 нм и длины волны излучения 720 нм. Данные обрабатывали с помощью программного обеспечения Living Image от Caliper. Интенсивность сигнала для отдельных органов нормализовали по отношению к общей интенсивности сигнала для всех органов.
In Vitro анализ трансфекции siRNA и микроскопия.
Влияние алипопротеинов оценивали посредством in vitro анализа трансфекции siRNA на клетках HeLa, как сообщалось ранее. Клетки HeLa, стабильно экспрессирующие люциферазу светлячка и люциферазу Renilla, высевали на матово-белый 96-луночный планшет (Corning-Costar) на ночь. Клетки транс-фицировали с помощью ЙКС-Е^, составленных с 50 нг специфичной в отношении светлячка siLuc, в четырех повторностях. Аполипопротеины (Fitzgerald Industries) инкубировали с составами ЙСК-ЕН в течение 5 мин перед добавлением к клеткам. После 24 ч инкубации при 37°С, 5% CO2, клетки анализировали в отношении экспрессии с применением наборов для анализа Dual-Glo (Promega). Для визуализации поглощения клеткой ЙКС-Е^ составляли с siRNA, меченной Alexa-Fluor 647, и инкубировали с клетками Hela в течение 3 ч. Затем клетки фиксировали в 4% параформальдегиде, пермеабилизировали с помощью 0,1% сапонина и окрашивали с помощью Hoescht. Все изображения получали с помощью конфокальной системы с вращающимся диском Opera (Perkin Elmer), и данные анализировали с помощью программного обеспечения Acapella (Perkin Elmer).
Обсуждение.
Для получения APPL одиночные аминокислоты подвергали реакции с альдегидами, акрилатами и эпоксидами. Вновь синтезированные производные липидов с одиночными аминокислотами оценивали в отношении их способности к сайленсингу печеночных генов у мышей. В качестве маркера сайленсинга выбрали валидированную генетическую мишень, фактор VII (фактор свертывания крови). См., например, Akinc, A., et al., A combinatorial library of lipid-like materials for delivery of RNAi therapeutics. Nat Biotech-nol, 2008. 26(5): p. 561-9. Новые производные липидов составляли с холестерином, DSPC, ПЭГ-липидом, а также siRNA с помощью методики смешивания на микрофлюидной основе. См., например, Chen, D., et al., Rapid Discovery of Potent siRNA-Containing Lipid Nanoparticles Enabled by Controlled Mcrofluidic Formulation. J. Am Chem Soc. Составы, которые были нестабильны в растворе или не имели захваченной siRNA, скринингу не подвергали. Стабильные составы инъецировали мышам путем системного введения при дозе 1 мг/кг (фиг. 1). На основании этого первоначального скрининга установили, что К-Е12 был активнее остальных. Показатель соответствия (более 50% сайленсинга) составлял одно соединение из 60 (т.е. 1,7%, включая соединения, не подвергнутые скринингу из-за нестабильности частиц или отсутствия захвата siRNA).
Повышенная эффективность К-Е12 привела к тому, что разработали второй набор лизиновых пептидных и полипептидных производных липидов. Осуществляли реакцию лизиновых дипептидов с эпок-сидами с получением дикетопиперазиновых APPL. Для получения этих остовов использовали микроволновое излучение, что очень сильно уменьшило время реакции от 3 дней до 5 ч. Кроме того, чтобы дополнительно подтвердить химическую структуру и улучшить химическую доступность для крупномасштабного синтеза при синтезе ЙКС-Е^ разработали альтернативный синтетический путь (пример 2). Диамин 5 синтезировали в соответствии со способом, о котором сообщалось ранее (Bergeron, R.J., et al., Macro-molecular Self-Assembly of Diketopiperazine Tetrapeptides. J. Am. Chem. Soc, 1994. 116(19): p. 8479-84; Kaur, N., et al., A Delineation of Diketopiperazine Self-Assembly Processes: Understanding the Molecular Events Involved in N-(Fumaroyl)diketopiperazine of L-Lys (FDKP) Interactions. Mol. Pharmaceutics, 2008. 5(2): p. 294-315), его подвергали реакции с 1,2-эпоксидодеканом с получением cKK-Е12. Соединение (С) подвергали восстановительному аминированию или реакции присоединения по Михаэлю с додеканал-или додецилакрилатом с получением cKK-А12 и cKK-О12. Реакции между лизин-лизином и поли-L-лизином (молекулярная масса от 500 до 70000 г/моль) и альдегидами и акрилатами были аналогичны таковым с одиночными аминокислотами. Следующим шагом оценивали эффекты сайленсинга. Десять из 43 соединений показали приблизительно 50% сайленсинг при дозе 1 мг/кг. Показатель соответствия второго набора соединений составлял 23%, что более чем в 10 раз превышало эффективность первого набора веществ. Результаты позволяют предположить, что такой способ итеративного скрининга является эффективной стратегией для идентификации соединений-прототипов. Результаты, полученные на основании второго набора, также показали, что эпоксидные производные были активнее альдегидных и акри-латных производных (как, например, cKK-Е12 по сравнению с cKK-A12 и cKK-O12). Вещества с наилучшим соответствием дополнительно тестировали при более низкой дозе, составляющей 0,1 мг/кг. Длина хвоста значительно влияла на сайленсинг, и длины хвоста в 12-14 атомов углерода оказались предпочтительными (cKK-ЕЮ, -Е12, -Е14 и -Е16). cKK-Е12 оказалось наиболее высокоактивным веществом, и было выбрано для дальнейшего исследования.
Исследование биораспределения.
Исследование биораспределения проводили с незащищенной Су5.5-меченой siRNA и в составе с cKK-Е12. Без учета вклада свободной siRNA в составе cKK-Е12 через 1 ч более 80% частиц располагались в печени и большая часть остаточной siRNA выводилась не позднее 24 ч через почки (фиг. 2).
Влияние алипопротеинов на поглощение клеткой и сайленсинг генов В предыдущих исследования сообщалось, что аполипопротеин Е (АроЕ) способен улучшать поглощение клеткой и сайленсинг генов для определенного типа веществ. Akinc, A., et al., Targeted delivery of RNAi therapeutics with endogenous and exogenous ligand-based mechanisms. Mol Ther. 18(7): p. 1357-64. Для того чтобы протестировать влияние различных аполипопротеинов на поглощение клеткой и сайленсинг генов, а также изучить механизмы действия проводили эксперименты с cKK-Е12 и 11 изоформами АроА, АроВ, АроС, АроЕ и АроН. Результаты на клетках Hela показали, что большинство аполипопротеинов влияло на жизнеспособность клеток, за исключением АроВ. АроА, АроС и АроН не показали значительного влияния на сайленсинг в сравнении со свободным cKK-Е12 (фиг. 3). Однако четыре различные изоформы АроЕ значительно повышали сайленсинг люциферазы.
Активность cKK-Е12, cKK-А12 и cKK-O12 сравнивали в случае добавления и без добавления apoE3 (apoE3 представляет собой преобладающую изоформу у людей; фиг. 4А). Без добавления ApoE3 cKK-А12 был активнее cKK-Е12 и cKK-O12. Однако при добавлении ApoE3 влияние на сайленсинг располагалось в следующем порядке: cKK-Е12 > cKK-А12 > cKK-O12, что хорошо согласовывалось с in vivo активностью.
Результаты позволяют предположить, что анализ на клетках при добавлении АроЕ может служить практической и эффективной моделью для предварительного скрининга в отношении сайленсинга у ге-патоцитов печени. Кроме того, поглощение клеткой cKK-Е12, составленного с siRNA, меченной Alexa-Fluor 647, визуализировали с применением автоматизованной конфокальной микроскопии (фиг. 4В).
Другие варианты осуществления.
В пунктах формулы формы единственного числа могут означать один или несколько, если не указано обратное или из контекста не очевидно противоположное. Считается, что формула или описание, которые включают "или" между одним или несколькими членами группы, выполняется, если один, несколько или вся группа членов присутствуют в указанном продукте или способе, задействованы в них или иным образом относятся к ним, если не указано обратное или из контекста не очевидно противоположное. Настоящее изобретение включает варианты осуществления, в которых именно один член группы присутствует в указанном продукте или способе, задействован в них или иным образом относится к ним. Настоящее изобретение включает варианты осуществления, в которых несколько или все члены группы присутствуют в указанном продукте или способе, задействованы в них или иным образом относятся к ним.
Более того, настоящее изобретение охватывает все вариации, комбинации и перестановки, в которых одно или несколько ограничений, элементов, частей и описательных выражений из одного или нескольких перечисленных пунктов формулы вводится в другой пункт формулы. Например, любой пункт формулы, который зависит от другого пункта формулы, можно модифицировать таким образом, чтобы он включал одно или несколько ограничений, указанных в каком-либо другом пункте формулы, который является зависимым от того же основного пункта формулы. Если элементы представлены в качестве списков, например в формате группы Маркуша, каждая подгруппа элементов также раскрывается, и любой элемент(ы) может быть исключен из группы. Следует понимать, что, в целом, если упоминается, что настоящее изобретение или аспекты настоящего изобретения включают конкретные элементы и/или признаки, то определенные варианты осуществления настоящего изобретения или аспекты настоящего изобретения состоят или по сути состоят из таких элементов и/или признаков. С целью упрощения, такие варианты осуществления не были специально изложены in haec verba в данном документе. Следует также отметить, предполагается, что выражения "содержащий" и "состоящий" являются открытыми и допускают включение дополнительных элементов или этапов. Если приведены диапазоны, их конечные точки включены. Кроме того, если не указано обратное или из контекста не очевидно противоположное, и как понятно специалисту в данной области техники, значения, которые выражены в виде диапазонов, могут принимать любое конкретное значение или поддиапазон в пределах заявленных диапазонов в различных вариантах осуществления настоящего изобретения, до десятых единицы нижней границы диапазона, если контекст явно не указывает обратное.
Настоящая заявка ссылается на различные выданные патенты, опубликованные патентные заявки, статьи в журналах, книги, руководства и другие публикации, все из которых включены в данный документ посредством ссылки. Если имеется противоречие между любой включенной ссылкой и настоящим описанием, описание должно иметь преимущественную силу. В дополнение, любой конкретный вариант осуществления настоящего изобретения, который попадает в пределы известного уровня техники, может быть напрямую исключен из любого одного или нескольких пунктов формулы. Поскольку подразумевают, что такие варианты осуществления известны специалисту в данной области техники, они могут быть исключены, даже если такое исключение не указано напрямую в данном документе. Любой конкретный вариант осуществления настоящего изобретения может быть исключен из любого пункта формулы, на
любом основании, независимо от того, относится ли он или не относится к существованию известного уровня техники. Специалисты в данной области техники будут понимать или способны выяснить с помощью всего лишь обычного проведения экспериментов многие эквиваленты специфических вариантов осуществления, описанных в данном документе. Объем представленных вариантов осуществления, описанных в данном документе, не подразумевает ограничения вышеизложенным описанием, но скорее является таковым, как изложено в прилагаемой формуле изобретения. Специалисты в данной области техники будут понимать, что можно осуществлять различные изменения и модификации этого описания без отступления от существа и объема настоящего изобретения, как определено в следующей формуле изобретения.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы
или его фармацевтически приемлемая соль; где каждый Q представляет собой О;
каждый R1 независимо представляет собой водород, необязательно замещенный ^^алкал, необязательно замещенный С2_юалкенил, необязательно замещенный С2_юалкинил или группу формулы (iv)
|-L-N
при условии, что по меньшей мере один R1 представляет собой группу формулы (iv); L представляет собой необязательно замещенный C1-10алкилен;
каждый из R6 и R7 независимо представляет собой водород или группу формулы (i) или (ii)
R' XRL
R' R'
при условии, что по меньшей мере один из R6 и R7 представляет собой группу формулы (i) или (ii); каждый R2 представляет собой водород; где формула (i) представляет собой независимо формулу (i-а) или (i-b)
R'\
Rk R' R'v > -YRP
(i-a) I (i-b),
каждый R' независимо представляет собой водород или необязательно замещенный ^^алюш; X представляет собой О, S, NRX, где RX представляет собой водород или защитную группу азота; Y представляет собой О;
RP представляет собой водород или защитную группу кислорода;
RL представляет собой необязательно замещенный ^^алюш, необязательно замещенный C6-2(^-кенил, необязательно замещенный C6-20алкинил, необязательно замещенный гетероС6-20алкил, необязательно замещенный гетероС6-20алкенил или необязательно замещенный гетероС6-20алкинил; причем
когда C1-10алкил, C2-10алкенил, ^^ал^нил, C1-10алкилен, C6-20алкил, C6-20алкенил, C6-20алкинил, ге-тероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме углерода, один или более заместитель на атоме углерода является независимо галогеном, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORaa, -N(Rbb)2, -SH, -SRaa, -SSRcc, -C(=O)Raa, -CO2H, -CHO, -CO2Raa, -OC(=O)Raa, -OCO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -OC(=O)N(Rbb)2, -NRbbC(=O)Raa, -NRbbCO2Raa, -NRbbC(=O)N(Rbb)2,
-C(=Oaa)NRbbSO2Raa, -NRbbSO2Raa, -SO2N(Rbb)2, -SO2Raa, -SO2ORaa, -OSO2Raa, -S(=O)Raa, -OS(=O)Raa,
-Si(Raa)3, C1-10алкилом, C2-10алкенилом, C2-10алкинилом, C3-10карбоциклилом, 3-14-членным гетероцикли-лом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C6-14арилом или 5-14-членным гетероарилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где
каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами; или два геминальных водорода на атоме углерода замещены группой =O,
=S, =NRbb;
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен одним или более заместителем на атоме азота, один или более заместитель на атоме азота является независимо защитной группой азота -ОН, -ORaa, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, Cl-юалкилом, C2-loалкенилом, C2-10 ал-кинилом, C3-10карбоциклилом, 3-14-членным гетероциклилом, имеющим от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, ^парилом или 5-14-членным гетероарилом, имеющим от 1 до 4 гете-роатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен заместителем на атоме кислорода, заместитель на атоме кислорода является защитной группой кислорода; и
когда гетероС6-20алкил, гетероС6-20алкенил или гетероС6-20алкинил замещен заместителем на атоме серы, заместитель на атоме серы является защитной группой серы, где каждая из защитных групп серы
является независимо -Raa, -N(Rbb)2, -C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa, -SO2Raa, -Si(Raa)3, -P(Rcc)2, -P(Rcc)3, -P(=O)2Raa, -P(=O)(Raa)2, -P(=O)(ORcc)2 или -P(=O)(NRbb)2; причем
каждый Raa независимо представляет собой ^^алкею, ^^алкето, С2-10алкинил, C3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C6-14 арил или 5-14-членный гетероарил, или две Raa группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rbb независимо представляет собой водород, -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -CN, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, Cl-юалкил, C2-loалкенил, С^ал-кинил, C3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, ^^арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rbb группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rcc независимо представляет собой водород, C1-10алкил, ^^алкето, C2-10алкинил, C3-10 карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, С6-14арил или 5-14-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rcc группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероа-рил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами;
каждый Rdd независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ORee, -N(Rff)2, -SH, -SRee, -SSRee, -C(=O)Ree, -CO2H, -CO2Ree, -OC(=O)Ree, -OCO2Ree, -C(=O)N(Rff)2, -OC(=O)N(Rff)2, -NRffC(=O)Ree, -NRffCO2Ree, -NRffC(=O)N(Rff)2, -NRffSO2Ree, -SO2N(Rff)2, -SO2Ree, -SO2ORee, -OSO2Ree, -S(=O)Ree, -Si(Ree)3, Cl-loалкил, C2-loалкенил, C2-loалкинил, Cз-loкарбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, C6-10 арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами, или два геминальных Rdd заместителя соединены, образуя =O;
каждый Ree независимо представляет собой C1-10алкил, C2-10алкенил, C2-10алкинил, C3-10карбоциклил, C6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами;
каждый Rff независимо представляет собой водород, C1-10алкил, ^^алкето, C2-10алкинил, C3-10 карбоциклил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, ^^арил или 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, или две Rff группы связаны, образуя 3-14-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил, где каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероа-рил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rgg группами; и
каждый Rgg независимо представляет собой галоген, -CN, -NO2, -N3, -SO2H, -SO3H, -ОН, -ОС1-10ал-кил, -N(C1-10алкил)2, -SH, -SQ^^Mm, -SS(C1-10алкил), -C(=O)(C1-10алкил), -СО2Н, -CO2(C1-10алкил), -O^OnCl-^(tm)), -OO^Cl-^(tm)), -C(=O)NH2, -C(=O)N(Cl-loалкил)2, -OC(=O)NH(Cl-loалкил), -NHC(=O)(C1-10алкил), -N(C1-10алкил)С(=О)(C1-10алкил), -NHCO2(C1-10алкил), -NHC(=O)N(C1-10алкил)2, -NHC(=O)NH(C1-10алкил), -NHC(=O)NH2, -NHSO2(C1-10алкил), -SO2N(C1-10алкил)2, -SO2NH(C1-10алкил), -SO2NH2, -SO2C1-10алкил, -SO2OC1-10алкил, -OSO2C1-6алкил, -SOC1-6алкил, -Si(C1-10алкил)3, C1-10алкил, C2-10 алкенил, C2-10алкинил, C3-10карбоциклил, C6-10арил, 3-10-членный гетероциклил, имеющий от 1 до 4 гете
роатомов, выбранных из кислорода, серы и азота, 5-10-членный гетероарил, имеющий от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота; или два геминальных Rgg заместителя связаны, образуя =O;
каждая защитная группа азота независимо выбрана из группы, состоящей из -ОН, -ORaa, -N(Rcc)2, -C(=O)Raa, -C(=O)N(Rcc)2, -CO2Raa, -SO2Raa, -C(=NRcc)Raa, -C(=NRcc)ORaa, -C(=NRcc)N(Rcc)2, -SO2N(Rcc)2, -SO2Rcc, -SO2ORcc, -SORaa, -C(=S)N(Rcc)2, -C(=O)SRcc, -C(=S)SRcc, Cl-юалкил, аралкил, гетероалкил, C2-10 алкенил, C2-10алкинил, C3-10карбоциклил, 3-14-членный гетероциклил, впарил или 5-14-членные гете-роарильные группы, причем каждый алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, гетероциклил, алкил, арил и гетероарил независимо замещен 0, 1, 2, 3, 4 или 5 Rdd группами; и
каждая защитная группа кислорода независимо выбрана из группы, состоящей из -Raa, -N(Rbb)2,
-C(=O)SRaa, -C(=O)Raa, -CO2Raa, -C(=O)N(Rbb)2, -C(=NRbb)Raa, -C(=NRbb)ORaa, -C(=NRbb)N(Rbb)2, -S(=O)Raa,
-SO2Raa и -Si(Raa)3.
2. Соединение по п.1, где каждый R1 представляет собой группу формулы (iv).
3. Соединение по п.1, где группа формулы (iv) характеризуется формулой
Х 1 q
или его фармацевтически приемлемая соль.
7. Соединение по любому из пп. 1-3, где группа формулы (i) является группой формулы (i-al)
R* R'
-YRP
(i-al)
8. Соединение по любому из пп. 1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-a2)
YRP
R' (i-a2)
9. Соединение по любому из пп. 1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-b 1)
YRF
*R'* RL
(i-bl)
10. Соединение по любому из пп. 1-3, причем группа формулы (i) является группой формулы (i-b2)
(i-b2)
11. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-10, где R необязательно замещен C6-20алкилом.
12. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-11, где R6 и R7, каждый независимо, представляют собой водород или группу формулы (i)
R'\
Rv> - YRP R'
при условии, что по меньшей мере один из R6 и R7 представляет собой группу формулы (ii).
при условии, что по меньшей мере один из R и R представляет собой группу формулы (i).
13. Соединение по любому из пп.1-3 и 7-11, где R6 и R7, каждый независимо, представляют собой водород или группу формулы (ii)
13.
14. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является фармацевтической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклео-
тид.
15. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является косметической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклеотид.
16. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является нутрицевтической композицией и средство представляет собой нуклеиновую кислоту или полинуклео-
тид.
17. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является фармацевтической композицией и средство представляет собой пептид или белок.
18. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является косметической композицией и средство представляет собой пептид или белок.
19. Композиция для доставки средства, содержащая соединение по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемую соль, средство и вспомогательное вещество, причем композиция является нутрицевтической композицией и средство представляет собой пептид или белок.
20. Композиция по любому из пп.14-16, отличающаяся тем, что средство представляет собой поли-нуклеотид и полинуклеотид представляет собой ДНК или РНК.
21. Композиция по п.20, отличающаяся тем, что полинуклеотид представляет собой РНК и РНК представляет собой dsRNA, siRNA, shRNA, miRNA или антисмысловую РНК.
22. Композиция по любому из пп.14-16, отличающаяся тем, что агент является полинуклеотидом и полинуклеотид кодирует белок или пептид.
23. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает холестерин.
24. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает ПЭГилированный липид.
25. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает фосфолипид.
26. Композиция по любому из пп.14-22, отличающаяся тем, что композиция дополнительно включает аполипопротеин.
27. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.14, 17 и 20-26 для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий.
28. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.14, 17 и 20-26 для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий.
29. Применение соединения по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из пролиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий.
30. Применение соединения по любому из пп.1-13 или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения заболевания, нарушения или состояния, которыми страдает субъект, причем заболевание, нарушение или состояния выбраны из группы, состоящей из про-лиферативных нарушений, воспалительных нарушений, аутоиммунных нарушений, болезненных состояний, заболеваний печени и семейных амилоидных невропатий.
31. Применение композиции по любому из пп.14-16 и 20-26 для доставки полинуклеотида в клетку.
32. Применение по п.31, отличающееся тем, что полинуклеотид представляет собой РНК, и при доставке РНК в клетку РНК способна препятствовать экспрессии определенного гена в клетке.
33. Применение по п.31, отличающееся тем, что полинуклеотид кодирует белок или пептид.
17.
Скрининг при дозе 1 мг/кг
1 I
Скрининг при дозе 0,1 мг/кг
Серия 1 показатель соответствия: 1,7% (1 из 60)
Серия 2
показатель соответствия: 23% (10 из 43)
длины хвостов в 12-14 атомов углероды были предпочтительными
сШ <шо"шшоошш^ ш ш ш < < шш О О Ш LULU LU о шшш шишш <
2 a.
LLELULLELLI
i Свободная siRNA
' cKK~E12
сКК-Е12(50нг)
Фиг. 3
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
032088
032088
- 4 -
- 3 -
032088
032088
- 10 -
032088
032088
- 13 -
- 13 -
032088
032088
- 23 -
- 23 -
032088
032088
- 25 -
- 25 -
032088
032088
- 47 -
- 47 -
032088
032088
- 48 -
- 48 -
032088
032088
- 50 -
- 50 -
032088
032088
- 53 -
- 53 -
032088
032088
- 54 -
- 54 -
032088
032088
- 61 -
- 61 -
032088
032088
- 62 -
- 62 -
032088
032088
- 63 -
- 63 -
032088
- 64 -
- 65 -
032088
032088
- 67 -
- 67 -
032088
032088
- 74 -
- 74 -
032088
032088
- 76 -
- 76 -
032088
- 78 -
- 77 -
032088
- 78 -
- 77 -
032088
- 78 -
- 79 -
032088
032088
- 80 -
- 80 -
032088
032088
- 81 -
- 81 -
032088
032088
- 81 -
- 81 -
032088
032088
- 81 -
- 81 -
032088
032088
- 82 -
- 82 -
|
