EA 032081B1 20190430

	Патентная документация ЕАПВ
Запрос:	ea000032081b*\id
Результат:	ID\|Номер и дата охранного документа

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

1. Соединение формулы (I) и его любая стереохимически изомерная форма где R ¹ представляет собой водород, гидрокси, C _1-4 алкил, моно- или ди(C _1-4 алкил)амино или гетероциклил ¹ ; R ² представляет собой водород или C _1-4 алкил; R ³ представляет собой C _1-4 алкил, галоген, C _3-6 циклоалкил, моно- или ди(C _1-4 алкил)амино или гетероциклил ² ; R ⁴ представляет собой водород, C _1-6 алкил, гидрокси или галоген; гетероциклил ¹ представляет собой азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил ¹ необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из C _1-4 алкила, гидрокси, галогена, полигалоген-C _1-4 алкила, C _1-4 алкилоксикарбонила, амино, С _1-4 алкиламинокарбонила или C _1-4 алкилсульфонила; гетероциклил ² представляет собой азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил ² необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из C _1-4 алкила, гидрокси, галогена, полигалоген-C _1-4 алкила, C _1-4 алкилоксикарбонила, амино, С _1-4 алкилоксикарбониламино или C _1-4 алкилсульфонила; Het выбран из фуранила, тиофенила, пиразолила, оксазолила, тиазолила, пиридила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила, хинолила, изохинолила, циннолинила, хиназолинила, хиноксалинила, 1,5-нафтиридинила, 1,6-нафтиридинила, 1,7-нафтиридинила, 1,8-нафтиридинила, пиридо[2,3-d]пиримидинила, пиридо[3,2-d]пиримидинила, 9H-пуринила, тиазоло[5,4-d]пиримидинила, 7H-пирроло[2,3-d]пиримидинила, оксазоло[5,4-d]пиримидинила, тиено[2,3-d]пиримидинила или тиено[3,2-d]пиримидинила; при этом каждый Het необязательно замещен одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, C _1-4 алкила, C _1-4 алкилокси, C _1-4 алкилтио, гидрокси, амино, моно- или ди(C _1-4 алкил)амино, гидроксикарбонила, C _1-4 алкилоксикарбонила, С _1-4 алкилсульфониламино, аминокарбонила, трифторметила, С _1-4 алкилоксикарбониламино, ди(C _1-4 алкилоксикарбонил)амино, С _1-4 алкилсульфониламинокарбонила, C _1-4 алкиламинокарбонила, С _1-4 алкилокси-C _1-6 алкилоксикарбониламино, ди(С _1-4 алкил)аминосульфониламинокарбонила, С _3-6 циклоалкилсульфониламинокарбонила, HO-NH-(C=NH)-; оксазолила или триазолила, каждый из которых необязательно замещен одним или двумя C _1-4 алкилами; или его фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты.

2. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой водород, C _1-4 алкил, моно- или ди(C _1-4 алкил)амино или гетероциклил ¹ ; R ² представляет собой водород или C _1-4 алкил; R ³ представляет собой C _3-6 циклоалкил или гетероциклил ² ; R ⁴ представляет собой водород; гетероциклил ¹ представляет собой пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил ¹ необязательно замещен одним заместителем, выбранным из C _1-4 алкилоксикарбонила, С _1-4 алкиламинокарбонила или C _1-4 алкилсульфонила; гетероциклил ² представляет собой азетидинил или пирролидинил; при этом каждый гетероциклил ² необязательно замещен одним заместителем, выбранным из гидрокси или амино; Het выбран из хиназолинила, пиридо[2,3-d]пиримидинила, тиазоло[5,4-d]пиримидинила, 7H-пирроло[2,3-d]пиримидинила, оксазоло[5,4-d]пиримидинила или тиено[2,3-d]пиримидинила; при этом каждый Het необязательно замещен одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, C _1-4 алкила, C _1-4 алкилокси, C _1-4 алкилтио, гидрокси, гидроксикарбонила, C _1-4 алкилоксикарбонила, С _1-4 алкилсульфониламино, аминокарбонила, трифторметила, С _1-4 алкилоксикарбониламино, ди(C _1-4 алкилоксикарбонил)амино, С _1-4 алкилсульфониламинокарбонила, C _1-4 алкиламинокарбонила, С _1-4 алкилоксиС _1-6 алкилоксикарбониламино, ди(С _1-4 алкил)аминосульфониламинокарбонила, С _3-6 циклоалкилсульфониламинокарбонила, HO-NH-(C=NH)-, оксазолила или триазолила, каждый из которых необязательно замещен одним или двумя C _1-4 алкилами.

3. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой гетероциклил ¹ , R ² представляет собой водород и R ³ представляет собой гетероциклил ² .

4. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой водород, R ² представляет собой C _1-4 алкил и R ³ представляет собой гетероциклил ² .

5. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой водород, R ² представляет собой водород и R ³ представляет собой гетероциклил ² .

6. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой C _1-4 алкил, R ² представляет собой водород и R ³ представляет собой гетероциклил ² .

7. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой водород, R ² представляет собой водород и R ³ представляет собой C _1-4 алкил.

8. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой водород, R ² представляет собой водород и R ³ представляет собой С _3-6 циклоалкил.

9. Соединение по любому из пп.1-8, где Het представляет собой хиназолинил.

10. Фармацевтическая композиция для лечения инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом, содержащая терапевтически активное количество соединения по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый носитель.

11. Способ получения фармацевтической композиции по п.10, где терапевтически активное количество соединения по любому из пп.1-9 тщательно смешивают с фармацевтически приемлемым носителем.

12. Применение соединения по любому из пп.1-9 в качестве лекарственного препарата для лечения инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом.

13. Применение соединения по любому из пп.1-9 для лечения инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом.

14. Применение фармацевтической композициия по п.10 для лечения инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом.

Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

9. Соединение по любому из пп.1-8, где Het представляет собой хиназолинил.

Евразийское 032081 (13) B1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2019.04.30
(21) Номер заявки 201791274
(22) Дата подачи заявки 2015.12.07
(51) Int. Cl.
C07D 487/04 (2006.01) A61K31/519 (2006.0l) A61P 31/14 (2006.01)
(54) ЗАМЕЩЕННЫЕ ПИПЕРИДИНОМ ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРАЗОЛО[1,5-а]ПИРИМИДИНА С ИНГИБИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ РЕПЛИКАЦИИ РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОГО ВИРУСА (RSV)
(31) 14196782.8 (56) WO-A1-2013158776
(32) 2014.12.08
(33) EP
(43) 2017.10.31
(86) PCT/EP2015/078762
(87) WO 2016/091774 2016.06.16
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
ЯНССЕН САЙЕНСИЗ АЙРЛЭНД K)CH (IE)
(72) Изобретатель:
Тахри Абделлах, Вендевилль Сандрин Мари Элен, Йонкерс Тим Хьюго Мария, Рабуассон Пьер Жан-Мари Бернар, Демен Самюэль Доминик, Ху Лили, Коиманс Людвиг Поль (BE)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
(57) Изобретение относится к новым замещенным бициклическим пиразолопиримидиновым соединениям формулы (I) с противовирусной активностью, в частности, обладающим ингибирующей активностью в отношении репликации респираторно-синцитиального вируса (RSV). Изобретение дополнительно относится к получению таких новых соединений, композиций, содержащих такие соединения, а также к соединениям для применения при лечении инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым замещенным бициклическим пиразолопиримидиновым соединениям с противовирусной активностью, в частности, обладающим ингибирующей активностью в отношении репликации респираторно-синцитиального вируса (RSV). Настоящее изобретение дополнительно относится к получению таких новых соединений, композиций, содержащих такие соединения, а также к соединениям для применения при лечении инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом.
Уровень техники
RSV человека, или респираторно-синцитиальный вирус, представляет собой крупный РНК-вирус, входящий в семейство Paramyxoviridae, подсемейства Pneumoviridae, вместе с RSV-вирусом крупного рогатого скота. RSV человека вызывает ряд заболеваний дыхательных путей у людей всех возрастов во всем мире. Он является основной причиной заболеваний нижних дыхательных путей в младенчестве и детстве. Более половины всех младенцев сталкиваются с RSV в свой первый год жизни и почти все - в течение их первых двух лет. Инфекция у маленьких детей может приводить к повреждению легких, которое сохраняется годами и может способствовать развитию хронического заболевания легких в дальнейшей жизни (хроническая бронхолегочная обструкция, астма). Подростки и взрослые часто страдают от (сильной) простуды при RSV-инфекции. В старости восприимчивость вновь возрастает, RSV был вовлечен во множество вспышек пневмонии у пожилых людей, что приводило в результате к значительной смертности.
Инфицирование вирусом из данной подгруппы не защищает от последующего инфицирования изо-лятом RSV из той же подгруппы в следующий зимний сезон. Повторное инфицирование RSV, таким образом, является распространенным, несмотря на существование только двух подтипов, А и В.
На данный момент было одобрено только три лекарственных средства для применения против RSV-инфекции. Первым таковым является рибавирин, нуклеозидный аналог, который обеспечивает аэрозольное средство для лечения тяжелой RSV-инфекции у госпитализированных детей. Аэрозольный путь введения, токсичность (риск тератогенного воздействия), стоимость и крайне изменчивая эффективность ограничивают его применение. Другие два лекарственных средства, RespiGam(r) (RSV-IG) и Synagis(r) (паливизумаб), иммуностимуляторы на основе поликлональных и моноклональных антител, предназначены для профилактического применения. Оба являются очень дорогостоящими и требуют парентерального введения.
Другие попытки создания безопасной и эффективной вакцины против RSV до сих пор терпели неудачу. Инактивированные вакцины не способны защитить от заболевания и фактически в некоторых случаях осложняли течение болезни при последующем инфицировании. Живые ослабленные вакцины были апробированы с ограниченным успехом. Очевидно, что существует потребность в эффективном, нетоксичном и простом в применении лекарственном средстве, подавляющем репликацию RSV. Особенно предпочтительным было бы получение лекарственных средств, подавляющих репликацию RSV, которые можно было бы вводить перорально.
Соединения, которые проявляют активность против RSV, раскрыты в WO-2011/163518, WO-2013/096681 и WO-2013/158776.
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение относится к соединению формулы (I), в том числе к его любой стереохими-чески изомерной форме
где R1 представляет собой водород, гидрокси, С1-4алкил, моно- или ди(С1-4алкил)амино или гетероцик-лил1;
R2 представляет собой водород или С1-4алкил;
R3 представляет собой С1-4алкил, галоген, Cз-6циклоалкил, моно- или ди(С1-4алкил)амино или гете-роциклил2;
R4 представляет собой водород, ^^алюш, гидрокси или галоген;
гетероциклил1 представляет собой азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил1 необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из С1-4алкила, гидрокси, галогена, полигалоген-С1-4алкила, С1-4алкилоксикарбонила, амино, С1-4алкиламинокарбонила или С1-4алкилсульфонила;
гетероциклил2 представляет собой азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил2 необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из С1-4алкила, гидрокси, галогена, полигалоген-C1-4алкила, С1-4алкилоксикарбонила, амино, С1-4алкилоксикарбониламино или C1-4алкилсульфонила;
Het выбран из фуранила, тиофенила, пиразолила, оксазолила, тиазолила, пиридила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила, хинолила, изохинолила, циннолинила, хиназолинила, хиноксалинила, 1,5-нафтиридинила, 1,6-нафтиридинила, 1,7-нафтиридинила, 1,8-нафтиридинила, пиридо[2,3-d]пиримидинила, пиридо[3,2^]пиримидинила, 9H-пуринила, тиазоло[5,4-d]пиримидинила, 7H-пирроло[2,3-d] пиримидинила, оксазоло[5,4^]пиримидинила, тиено[2,3-d] пиримидинила или тиено[3,2^]пири-мидинила; при этом каждый Het необязательно замещен одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, 01-4алкила, 01-4алкилокси, 01-4алкилтио, гидрокси, амино, моно- или ди(С1-4алкил)амино, гидроксикарбонила, С1-4алкилоксикарбонила, С1-4алкилсульфониламино, аминокарбонила, трифторметила, С1-4алкилоксикарбониламино, ди(С1-4алкилоксикарбонил)амино, С1-4 алкилсульфониламинокарбонила, С1-4алкиламинокарбонила, С1-4алкилокси-01-6алкилоксикарбонил-амино, ди(С1-4алкил)аминосульфониламинокарбонила, 03-6циклоалкилсульфониламинокарбонила, HO-NH-(C=NH)-; оксазолила или триазолила, каждый из которых необязательно замещен одним или двумя С1-4алкилами;
или к его фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты. Как используется в вышеизложенных определениях, галоген является общим для фтора, хлора, брома и йода;
С1-4алкил обозначает насыщенные углеводородные радикалы с прямой и разветвленной цепью, содержащие от 1 до 4 атомов углерода, такие как, например, метил, этил, пропил, бутил, 1-метилэтил, 2-метилпропил и т.п.;
01-6алкил подразумевает включение С1-4алкила и его высших гомологов, содержащих 5 или 6 атомов углерода, таких как, например, 2-метилбутил, пентил, гексил и т.п.;
03-6циклоалкил является общим для циклопропила, циклобутила, циклопентила и циклогексила;
полигалоген-С1-4алкил определен как полигалогензамещенный 01-4алкил, в частности С1-4алкил (как определено выше в данном документе), замещенный 2-6 атомами галогена, такой как дифторметил, три-фторметил, трифторэтил и т.п.
Подразумевается, что термин "соединения согласно настоящему изобретению", используемый в данном документе, включает соединения формулы (I), а также их соли и сольваты.
Применяемая в данном документе любая химическая формула со связями, показанными только в виде сплошных линий, а не в виде сплошных клиновидных или пунктирных клиновидных связей, или иным образом показанная как имеющая конкретную конфигурацию (например, R, S) вокруг одного или нескольких атомов, предусматривает каждый возможный стереоизомер или смесь двух или более сте-реоизомеров.
Выше и ниже в данном документе подразумевается, что термины "соединение формулы (I)" и "промежуточные соединения синтеза формулы (I)" включают их стереоизомеры и их таутомерные формы.
Термины "стереоизомеры", "стереоизомерные формы" или "стереохимически изомерные формы" выше или ниже в данном документе применяют взаимозаменяемо.
Настоящее изобретение включает все стереоизомеры соединений согласно настоящему изобретению либо в виде чистого стереоизомера, либо в виде смеси двух или более стереоизомеров. Энантиоме-ры представляют собой стереоизомеры, которые представляют собой несовпадающие при наложении зеркальные отображения друг друга. Смесь 1:1 пары энантиомеров представляет собой рацемат или рацемическую смесь. Диастереомеры (или диастереоизомеры) представляют собой стереоизомеры, которые не являются энантиомерами, т.е. они не относятся к зеркальным отображениям. Если соединение содержит двойную связь, то заместители могут находиться в Е- или Z-конфигурации. Заместители на двухвалентных циклических (частично) насыщенных радикалах могут находиться либо в цис-, либо в транс-конфигурации; например, если соединение содержит дизамещенную циклоалкильную группу, то заместители могут находиться в цис- или транс-конфигурации.
Таким образом, настоящее изобретение включает энантиомеры, диастереомеры, рацематы, Е-изомеры, Z-изомеры, цис-изомеры, транс-изомеры и их смеси во всех случаях, когда это возможно с точки зрения химии.
Значения всех этих терминов, т.е. энантиомеры, диастереомеры, рацематы, Е-изомеры, Z-изомеры, цис-изомеры, транс-изомеры и их смеси, известны специалисту в данной области.
Абсолютную конфигурацию определяют согласно системе Кана-Ингольда-Прелога. Конфигурация при асимметричном атоме определяется как R или как S. Выделенные стереоизомеры, абсолютная конфигурация которых не является известной, могут быть обозначены как (+) или (-) в зависимости от направления, в котором они вращают плоскость поляризации света. Например, выделенные энантиомеры, абсолютная конфигурация которых не является известной, могут обозначаться как (+) или (-) в зависимости от направления, в котором они вращают плоскость поляризации света.
Если указан конкретный стереоизомер, это означает, что указанный стереоизомер практически не содержит другие стереоизомеры, т.е. связан с менее 50%, предпочтительно с менее 20%, более предпочтительно с менее 10%, еще более предпочтительно с менее 5%, в частности с менее 2% и наиболее предпочтительно с менее 1% других изомеров. Таким образом, если соединение формулы (I), например, указано как (R), то это означает, что соединение практически не содержит изомера (S); если соединение
формулы (I), например, указано как Е, то это означает, что соединение практически не содержит Z-изомера; если соединение формулы (I), например, указано как цис-, то это означает, что соединение практически не содержит транс-изомера.
Некоторые соединения формулы (I) могут также существовать в их таутомерной форме. Предполагается, что такие формы, ввиду того, что они могут существовать, хотя явно и не показаны в вышеприведенной формуле (I), включены в объем настоящего изобретения.
Из этого следует, что одно соединение может существовать как в стереоизомерной, так и в тауто-мерной форме.
Во избежание неоднозначности толкования, соединения формулы (I) могут содержать указанные атомы в любой из их природных или искусственных изотопных форм. В этом отношении варианты осуществления настоящего изобретения, которые можно упомянуть, включают таковые, где (а) соединение формулы (I) не является изотопно-обогащенным или меченным по отношению к любому атому соединения, и (b) соединение формулы (I) является изотопно-обогащенным или меченным по отношению к одному или нескольким атомам соединения. Соединения формулы (I), которые обогащены изотопами или мечены (относительно одного или нескольких атомов соединения) одним или несколькими устойчивыми изотопами, включают, например, соединения формулы (I), которые обогащены изотопами или мечены одним или несколькими атомами, такими как дейтерий, 13C, 14C, 14N, 15O или подобные.
Подразумевается, что фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты, упоминаемые в данном документе выше, включают терапевтически активные нетоксичные формы солей присоединения кислоты, которые могут образовывать соединения формулы (I). Эти фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты можно легко получить путем обработки основной формы с помощью такой соответствующей кислоты. Соответствующие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например хлористо-водородная или бромисто-водородная кислота, серная, азотная, фосфорная и подобные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гидроксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая (т.е. этандиовая), малоновая, янтарная (т.е. бутандиовая кислота), малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфо-новая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, л-аминосалициловая, памовая и подобные кислоты.
И наоборот, указанные формы солей можно превратить путем обработки соответствующим основанием в форму свободного основания.
Соединения формулы (I) могут существовать как в несольватированной, так и в сольватированной формах. Термин "сольват" применяется в данном документе для обозначения ассоциации молекул, включающей соединение по настоящему изобретению и одну или несколько молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например воды или этанола. Термин "гидрат" используется, если указанным растворителем является вода.
Представляют интерес соединения формулы (I), которые являются такими соединениями формулы (I), где применяется одно или несколько из следующих ограничений:
a) R1 представляет собой водород; или
b) R1 представляет собой С1-4алкил, моно- или ди(01-4алкил)амино или гетероциклил1; или
c) R1 представляет собой гетероциклил1; или
d) R2 представляет собой водород; или
e) R2 представляет собой С1-4алкил; или
f) R3 представляет собой 03-6циклоалкил; или
g) R3 представляет собой С1-4алкил, моно- или ди(01-4алкил)амино; или
h) R3 представляет собой гетероциклил2; или
i) R4 представляет собой водород; или
j) гетероциклил1 представляет собой пиперазинил, необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из С1-4алкила, гидрокси, галогена, полигалоген-С1-4алкила, С1-4алкилоксикарбонила, амино, С1-4алкиламинокарбонила или С1-4алкилсульфонила; или
k) гетероциклил1 представляет собой морфолинил, необязательно замещенный одним заместителем, выбранным из С1-4алкила, гидрокси, галогена, полигалоген-01-4алкила, С1-4алкилоксикарбонила, амино, 01-4алкиламинокарбонила или С1-4алкилсульфонила; или
l) Het представляет собой хиназолинил, необязательно замещенный одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, 01-4алкила, 01-4алкилокси, 01-4алкилтио, гидрокси, амино, моно- или ди(01-4алкил)амино, гидроксикарбонила, 01-4алкилоксикарбонила, С1-4алкил-сульфониламино, аминокарбонила, трифторметила, С1-4алкилоксикарбониламино, ди(01-4алкилокси-карбонил)амино, С1-4алкилсульфониламинокарбонила, 01-4алкиламинокарбонила, С1-4алкилоксиС1-6ал-килоксикарбониламино, ди(С1-4алкил)аминосульфониламинокарбонила, С3-6циклоалкилсульфонил-аминокарбонила, HO-NH-(C=NH)-; оксазолил или триазолил, каждый из которых необязательно замещен одним или двумя 01-4алкилами.
В первом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I), в том числе к их любой стереохимически изомерной форме, где
R1 представляет собой водород, С1-4алкил, моно- или ди(01-4алкил)амино или гетероциклил1;
R2 представляет собой водород или С1-4алкил;
R3 представляет собой 03-6циклоалкил или гетероциклил2;
R4 представляет собой водород;
гетероциклил1 представляет собой пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил1 необязательно замещен одним заместителем, выбранным из С1-4алкилоксикарбонила, С1-4алкиламино-карбонила или С1-4алкилсульфонила;
гетероциклил2 представляет собой азетидинил или пирролидинил; при этом каждый гетероциклил2 необязательно замещен одним заместителем, выбранным из гидрокси или амино;
Het выбран из хиназолинила, пиридо[2,3^]пиримидинила, тиазоло[5,4ч!]пиримидинила, 7H-пирроло[2,3-d]пиримидинила, оксазоло[5,4-d]пиримидинила или тиено[2,3^]пиримидинила; при этом каждый Het необязательно замещен одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, 01-4алкила, 01-4алкилокси, 01-4алкилтио, гидрокси, гидроксикарбонила, 01-4ал-килоксикарбонила, С1-4алкилсульфониламино, аминокарбонила, трифторметила, С1-4алкилоксикар-бониламино, ди(01-4алкилоксикарбонил)амино, С1-4алкилсульфониламинокарбонила, 01-4алкиламинокар-бонила, С1-4алкилоксиС1-6алкилоксикарбониламино, ди(С1-4алкил)аминосульфониламинокарбонила, С3-6 циклоалкилсульфониламинокарбонила, HO-NH-(C=NH)-; оксазолила или триазолила, каждый из которых необязательно замещен одним или двумя 01-4алкилами;
или к их фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты.
Первая группа соединений формулы (I) представляет собой такие соединения формулы (I), где R1 представляет собой гетероциклил1, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой гетероцик-
лил2.
Вторая группа соединений формулы (I) представляет собой такие соединения формулы (I), где R1 представляет собой водород, R2 представляет собой 01-4алкил и R3 представляет собой гетероциклил2.
Третья группа соединений формулы (I) представляет собой такие соединения формулы (I), где R1 представляет собой водород, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой гетероциклил2.
Четвертая группа соединений формулы (I) представляет собой такие соединения формулы (I), где R1 представляет собой 01-4алкил, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой гетероциклил2.
Пятая группа соединений формулы (I) представляет собой такие соединения формулы (I), где R1 представляет собой водород, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой 01-4алкил.
Шестая группа соединений формулы (I) представляет собой такие соединения формулы (I), где R1 представляет собой водород, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой С3-6циклоалкил.
Седьмая группа соединений формулы (I) представляет собой такие соединения формулы (I), где Het представляет собой хиназолинил.
Соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли можно получать в соответствии со схемами реакций, рассмотренными в настоящем документе ниже, с применением способов синтеза, известных в области органической химии, или модификаций и вариантов, которые знакомы специалистам в данной области. Исходные вещества, применяемые в данном документе, являются коммерчески доступными или их можно получать обычными способами, известными из уровня техники, например такими способами, которые раскрыты в стандартных справочниках. Предпочтительные способы включают без ограничения способы, описанные ниже.
Во время какой-либо из следующих последовательностей синтеза может быть необходима и/или желательна защита чувствительных или реакционноспособных групп в какой-либо из рассматриваемых молекул. Этого можно достичь посредством применения традиционных защитных групп, хорошо известных специалисту.
Если не указано иное, заместители в схемах определены выше. Выделение и очистку продуктов осуществляют с помощью стандартных процедур, известных специалисту-химику.
Общие схемы 1-3 описывают способы, которые применяли для получения соединений согласно настоящему изобретению. Общие способы, описанные на этих схемах, можно также применять для получения дополнительных соединений согласно настоящему изобретению.
Исходное вещество I представляет собой защищенный (PG) пиперидин, содержащий карбоксильную группу на атоме углерода, смежном с атомом азота в кольце, который предпочтительно характеризуется ^-стереохимией. Этот пиперидин также может быть замещен различными группами. Защитные группы на атоме азота пиперидинового кольца предпочтительно представляют собой BOC или CBZ, и их можно вводить или удалять в ходе синтеза с применением способов, описанных в; Green and Wutts, protecting groups in Organic Synthesis 3rd Edition. На схеме 1 сначала группу карбоновой кислоты в N-защищенном циклическом аминогетероцикле I активируют с помощью уходящей группы. Типичные уходящие группы представляют собой алкиловые сложные эфиры (например, метиловый или этиловый сложный эфир), и их образуют путем обработки карбоновой кислоты соответствующим спиртом в неводных кислотных условиях или в кислотных условиях с низким содержанием воды или путем обработки метилйодидом в присутствии основания, такого как карбонат цезия или подобного. В качестве альтернативы кислоту можно активировать как амид Вайнреба с применением стандартных процедур для
образования пептидной связи, например EDCI/HOBT, HATU, DCC и т.д. Как только кислота активирована как сложный эфир или амид Вайнреба II, осуществляют добавление аниона ацетонитрила. Анион образуется из ацетонитрила и сильного основания, например гексаметилдисилазида лития или натрия (LiHMDS), или оснований алкиллития, например nBuLi, и при проведении реакции со сложным эфиром или амидом Вайнреба образует цианокетон III. Проведение реакции цианокетона с ацетатной солью гидразина затем обеспечивает образование аминопиразола, промежуточного соединения IV. Данное соединение является ключевым промежуточным соединением для образования бициклических гетероциклов VI с различными боковыми цепями посредством различных реакций конденсации. Конденсация аминопиразола IV с малонатом V обеспечивает образование бициклического аналога VI. Затем обработка соединения VI с помощью чистого POCl3 при повышенной температуре (в некоторых случаях органические основания, такие как диизопропилэтиламин или триэтиалмин, могут улучшить прохождение реакции) обеспечивает получение дихлорида VII. Неустойчивые к действию кислоты защитные группы, например BOC, как правило, удаляют в условиях присутствия POCl3, но если удаление является частичным, то можно применять дополнительную обработку кислотой, например 4 н. HCl в диоксане, для удаления оставшегося BOC-защищенного вещества. Если применяют другие защитные группы, то для удаления защитной группы можно применять процедуры, описанные в Green and Wutts, Protecting groups in Organic Synthesis 3rd Edition. Замещение хлорида, смежного с атомом азота в голове мостика соединения VII, можно осуществлять с помощью нуклеофилов VIII, как правило, при комнатной температуре с получением соединения IX. Типичный нуклеофил VIII может представлять собой амин, который можно вводить в реакцию в отсутствие или в присутствии основания, такого как триэтиламин. Второй и менее реакционноспособный хлорид затем замещают, как правило, при повышенных значениях температуры, выше 50°C. Результатом данных замещений нуклеофильным амином являются соединения структуры XI (схема 1).
Схема 1
Соединения XIII можно синтезировать согласно вариантам осуществления, раскрытым в настоящем документе, из соединения с аминогруппой XI и гетероциклического галогидного соединения XII. Реакцию можно проводить в присутствии основания и катализатора на основе переходного металла 8-10 групп. Один пример реакции между гетероциклическим галоидным соединением и амином с получением N-гетероциклического аминного соединения может быть представлен на схеме 2. Вкратце, гетероциклическое галоидное соединение XII вводят в реакцию с аминным соединением XI в присутствии основания и комплекса переходного металла (M) 8-10 групп, содержащего хелатирующий лиганд (LL), с получением N-ариламинного соединения. Катализатор на основе переходного металла согласно вариантам осуществления, раскрытым в настоящем документе, представляет собой комплекс переходного металла 8-10 групп. В определенных вариантах осуществления переходный металл 8-10 групп включает по меньшей мере один из палладия, платины и никеля. В некоторых вариантах осуществления переходный металл 810 групп представляет собой палладий.
Гетероциклическое соединение, используемое в способе по настоящему изобретению, может быть любым гетероциклическим соединением формулы XII
Het-) фор
Предпочтительные гетероциклические группы в соединении формулы XII
LA.
t.A.
N M vc
В формуле XII X может представлять собой любой атом галогена (F, Cl, Br, I) или любую серосодержащую уходящую группу (например, трифлат, сульфонат, тозилат и подобные), известные из уровня техники. Хлориды особенно предпочтительны в способе по настоящему изобретению.
Схема 2
Het-X
XII
основание
ЩМ)
Альтернативная конденсация аминопиразола IV с помощью сложных Р-кетоэфиров VIX (например, 2-метилацетоацетата) в присутствии кислоты (уксусной кислоты) при повышенной температуре приводит к получению пиразопиримидинонового остова XV. Затем обработка соединения XV с помощью чистого POCl3 при повышенной температуре (в некоторых случаях затрудненные основания, такие как дии-зопропилэтиламин, могут улучшить прохождение реакции) обеспечивает получение дихлорида XVI. Неустойчивые к действию кислоты защитные группы, например BOC, как правило, удаляют в условиях присутствия POCl3, но если удаление является частичным, то можно применять дополнительную обработку кислотой, например 4н. HCl в диоксане, для удаления оставшегося BOC-защищенного вещества. Если применяют другие защитные группы, то для удаления защитной группы можно применять процедуры, описанные в Green and Wutts, Protecting groups in Organic Synthesis 3rd Edition. Замещение хлорида, смежного с атомом азота в голове мостика соединения XVI, можно осуществлять с помощью нуклеофи-лов VIII, как правило, при комнатной температуре с получением соединений типа XVII. Типичный нук-леофил может представлять собой амин, который можно вводить в реакцию в отсутствие или в присутствии основания, такого как триэтиламин, затем позволяет свободному амину XVII алкилироваться рядом гетероциклов, как описано на схеме 2, с получением конечных соединений XVIII схемы 3.
Схема 3
Дополнительная альтернативная циклизация аминопиразола IV включает обработку акрилатом, например XIX, в присутствии основания, например карбоната цезия, и нагревание с получением соединения XX. Дополнительная обработка соединения XX с активацией, такой как ОН в качестве уходящей группы, может включать превращение в хлорид XXI с помощью POCl3 и нагревания. Кислотные защитные группы, например BOC, можно удалять при условиях присутствия POCl3 или, если нет, следуя процедурам, указанным в Green and Wurtts, Protecting groups in Organic Synthesis 3rd Edition, можно удалять любые защитные группы. Хлорид можно замещать нуклеофилами X с получением соединений XXII. Наконец, соединение XXII со свободным NH затем алкилируют, как описано ранее на схеме 2, с получением соединений типа XXIII (схема 4).
Соединения формулы (I) можно, кроме того, получать путем превращения соединений формулы (I) друг в друга согласно известным из уровня техники реакциям преобразования групп.
Исходные вещества и некоторые промежуточные соединения являются известными соединениями, и их можно приобрести или получить согласно традиционным процедурам реакций, как правило, известным из уровня техники.
Соединения формулы (I), полученные в описанных выше в данном документе способах, могут быть синтезированы в форме рацемических смесей энантиомеров, которые можно отделить друг от друга, следуя известным из уровня техники процедурам разделения. Такие соединения формулы (I), которые получают в рацемической форме, можно превращать в соответствующие формы диастереомерных солей путем реакции с подходящей хиральной кислотой. Указанные формы диастереомерных солей затем разделяют, например, с помощью селективной или фракционной кристаллизации, и энантиомеры выделяют оттуда с помощью щелочи. Альтернативным образом для разделения энантиомерных форм соединений формулы (I) применяют жидкостную хроматографию с использованием хиральной неподвижной фазы. Указанные чистые стереохимически изомерные формы можно также получать из соответствующих чистых стереохимически изомерных форм соответствующих исходных веществ при условии, что реакция протекает стереоспецифически. Если необходим определенный стереоизомер, предпочтительно, чтобы указанное соединение было синтезировано с помощью стереоспецифических способов получения. В данных способах преимущественно применяют энантиомерно чистые исходные вещества.
Соединения формулы (I) демонстрируют противовирусные свойства. Вирусные инфекции, которые можно лечить с применением соединений и способов по настоящему изобретению, включают инфекции, вызванные орто- и парамиксовирусами и, в частности, респираторно-синцитиальным вирусом (RSV) человека и крупного рогатого скота. Ряд соединений по настоящему изобретению, кроме того, является активным против мутантных штаммов RSV. Кроме того, многие из соединений по настоящему изобретению демонстрируют благоприятный фармакокинетический профиль и обладают привлекательными свойствами относительно биодоступности, включая приемлемый период полувыведения, AUC и пиковые значения, а также отсутствие неблагоприятных явлений, таких как недостаточно быстрое начало действия и удерживание в тканях.
Противовирусную активность in vitro соединений по настоящему изобретению в отношении RSV испытывали с помощью теста, который описан в экспериментальной части описания, и ее также можно продемонстрировать с применением анализа снижения урожая вируса. Противовирусную активность in vivo соединений по настоящему изобретению в отношении RSV можно продемонстрировать в тестовой модели с применением хлопковых хомяков, как описано Wyde и соавт. в Antiviral Research, 38, p. 31-42 (1998).
Кроме того, в настоящем изобретении предусматривают фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы (I).
С целью получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения в форме соли присоединения основания или кислоты в качестве активного ингредиента объединяют в однородной смеси по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, причем носитель может принимать широкое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, необходимой для введения. Данные фармацевтические композиции находятся предпочтительно в стандартной лекарственной форме, пригодной предпочтительно для перорального введения, ректального введения, чрескожного введения или парентеральной инъекции.
Например, при получении композиций в пероральной лекарственной форме можно использовать любой из обычных жидких фармацевтических носителей, таких как, например, вода, гликоли, масла, спирты и т. п., в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, крепкие настои и растворы; или твердых фармацевтических носителей, таких как крахмалы, сахара, каолин, смазывающие вещества, связующие вещества, разрыхлители и т.п., в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Из-за простоты их введения таблетки и капсулы представляют наиболее удобную пероральную стандартную лекарственную форму, и в таком случае, разумеется, используют твердые фармацевтические носители. В
случае композиций для парентеральных инъекций фармацевтический носитель в основном будет содержать стерильную воду, хотя с целью улучшения растворимости активного ингредиента могут быть включены и другие ингредиенты. Растворы для инъекций могут быть получены, например, путем использования фармацевтического носителя, содержащего физиологический раствор, раствор глюкозы или их смесь. Суспензии для инъекций также могут быть получены путем использования подходящих жидких носителей, суспендирующих средств и т.п. В композициях, приемлемых для чрескожного введения, фармацевтический носитель может необязательно содержать средство, повышающее проницаемость, и/или приемлемое смачивающее средство, необязательно объединенные с приемлемыми добавками в малых количествах, которые не оказывают значительного вредного эффекта на кожу. Упомянутые добавки могут быть выбраны с целью способствования введению активного ингредиента в кожу и/или для облегчения получения необходимых композиций. Данные композиции для местного применения можно вводить различными путями, например в виде трансдермального пластыря, точечного нанесения или мази. Соли присоединения соединений формулы (I) вследствие их повышенной растворимости в воде по сравнению с соответствующей формой основания являются более приемлемыми при получении водных композиций.
Особенно преимущественным является составление фармацевтических композиций по настоящему изобретению в стандартной лекарственной форме для простоты введения и однородности дозировки. "Стандартная лекарственная форма", как используется в данном документе, относится к физически дискретным единицам, пригодным в качестве стандартных доз, при этом каждая единица содержит предварительно определенное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения необходимого терапевтического эффекта, совместно с требуемым фармацевтическим носителем. Примерами таких стандартных лекарственных форм являются таблетки (в том числе делимые таблетки или таблетки, покрытые оболочкой), капсулы, пилюли, пакеты с порошкообразным продуктом, пластинки, растворы или суспензии для инъекций, чайные ложки с верхом, столовые ложки с верхом и т.п., а также их отдельные кратные количества.
В случае перорального введения фармацевтические композиции в соответствии с настоящим изобретением могут принимать форму твердых лекарственных форм, например таблеток (как в форме для проглатывания целиком, так и в жевательной форме), капсул или гелевых капсул, полученных традиционными способами с использованием фармацевтически приемлемых наполнителей и носителей, таких как связывающие средства (например, предварительно желатинизированный кукурузный крахмал, поли-винилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлоза и т.п.), наполнители (например, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза, фосфат кальция и т.п.), смазывающие вещества (например, стеарат магния, тальк, диоксид кремния и т.п.), разрыхлители (например, картофельный крахмал, натрия крахмала гли-колят и т.п.), смачивающие средства (например, лаурилсульфат натрия) и т.п. Такие таблетки также могут иметь покрытие, полученное способами, хорошо известными из уровня техники.
Жидкие препараты для перорального введения могут принимать форму, например, растворов, сиропов или суспензий или могут быть составлены в виде сухого продукта для смешивания перед употреблением с водой и/или другим подходящим жидким носителем.
Такие жидкие препараты могут быть получены традиционными способами, необязательно с другими фармацевтически приемлемыми добавками, такими как суспендирующие средства (например, сироп сорбита, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза или гидрогенизированные пищевые жиры), эмульгаторы (например, лецитин или аравийская камедь), неводные носители (например, миндальное масло, жирные сложные эфиры или этиловый спирт), подсластители, ароматизаторы, маскирующие средства и консерванты (например, метил- или пропил-п-гидроксибензоаты или сорбиновая кислота).
Фармацевтически приемлемые подсластители, пригодные для фармацевтических композиций по настоящему изобретению, включают по меньшей мере один интенсивный подсластитель, такой как ас-партам, ацесульфам калия, цикламат натрия, алитам, подсластитель дигидрохалькон, монеллин, стевио-зид, сукралоза (4,1',6'-трихлор-4,1',6'-тридеоксигалактосахароза) или предпочтительно сахарин, натрия сахарин или кальция сахарин, и необязательно по меньшей мере один объемный подсластитель, такой как сорбит, маннит, фруктоза, сахароза, мальтоза, изомальт, глюкоза, гидрогенизированный сироп глюкозы, ксилит, карамель или мед. Интенсивные подсластители обычно используют в низких концентрациях. Например, в случае натрия сахарина указанная концентрация может находиться в диапазоне от приблизительно 0,04 до 0,1% (вес./об.) от конечного состава. Объемный подсластитель может быть эффективно использован в более высоких концентрациях в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 35%, предпочтительно от приблизительно 10 до 15% (вес./об.).
Фармацевтически приемлемые ароматизаторы, которые могут маскировать ингредиенты с горьким вкусом в составах с низкой дозировкой, предпочтительно являются фруктовыми ароматизаторами, такими как черешневый, малиновый, черносмородиновый или клубничный ароматизаторы. Комбинация двух ароматизаторов может обеспечить очень хорошие результаты. В составах с высокой дозировкой могут потребоваться более сильные фармацевтически приемлемые ароматизаторы, такие как карамельно-шоколадный, мятный прохладный, Fantasy и т.п. Каждый ароматизатор может присутствовать в конечной композиции в концентрации в диапазоне от приблизительно 0,05 до 1% (вес./об.). Преимущественно
используют комбинации указанных сильных ароматизаторов. Предпочтительно применяют ароматизатор, который не претерпевает какого-либо изменения или потери вкуса и/или цвета в условиях составления препарата.
Соединения формулы (I) можно составлять в композиции для парентерального введения путем инъекции, предпочтительно внутривенной, внутримышечной или подкожной инъекции, например бо-люсной инъекции или непрерывной внутривенной инфузии. Составы для инъекции могут быть представлены в единичной лекарственной форме, например в ампулах или многодозовых контейнерах, включая добавленный консервант. Они могут принимать такие формы, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных средах-носителях, и могут содержать средства для составления препарата, такие как изотонирующие, суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие средства. В качестве альтернативы, активный ингредиент может быть представлен в порошкообразной форме для смешивания перед употреблением с подходящей средой-носителем, например стерильной апирогенной водой.
Соединения формулы (I) также могут быть составлены в композиции для ректального введения, такие как суппозитории или удерживающие клизмы, например, содержащие традиционные суппозиторные основы, такие как масло какао и/или другие глицериды.
В общем, предполагают, что суточное количество, эффективное против вируса, будет составлять от 0,01 до 500 мг/кг массы тела, более предпочтительно от 0,1 до 50 мг/кг массы тела. Может быть целесообразным введение требуемой дозы в виде двух, трех, четырех или более частей дозы через соответствующие интервалы на протяжении дня. Указанные части дозы можно составлять в виде единичных лекарственных форм, например, содержащих от 1 до 1000 мг и, в частности, от 5 до 200 мг активного ингредиента на единичную лекарственную форму.
Точная дозировка и частота введения зависят от конкретного применяемого соединения формулы (I), конкретного состояния, подвергаемого лечению, тяжести состояния, подвергаемого лечению, возраста, массы, пола, степени нарушения и общего физического состояния конкретного пациента, а также от другого медикаментозного лечения, которое индивидуум может получать, что хорошо известно специалистам в данной области. Более того, очевидно, что указанное эффективное суточное количество может быть снижено или увеличено в зависимости от реакции подвергаемого лечению субъекта и/или в зависимости от оценки врача, назначающего соединения согласно настоящему изобретению. Диапазоны эффективного суточного количества, приведенные далее в данном документе, следовательно, являются лишь рекомендательными.
Кроме того, в качестве лекарственного препарата можно применять комбинацию другого противовирусного лекарственного средства и соединения формулы (I). Таким образом, настоящее изобретение также относится к продукту, содержащему (а) соединение формулы (I) и (b) другое противовирусное соединение в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в составе противовирусной терапии. Различные лекарственные средства можно объединять в один препарат вместе с фармацевтически приемлемыми носителями. Например, соединения по настоящему изобретению можно объединять с интерфероном-Р или фактором некроза опухоли а для лечения или предупреждения RSV-инфекций.
Настоящее изобретение далее в данном документе будет проиллюстрировано со ссылкой на следующие неограничивающие примеры.
Сокращения.
(M+H)+ - протонированный молекулярный ион, водн. - водный,
Boc - трет-бутилоксикарбонил, br - широкий, CH3Cl - хлороформ, CH3CN - ацетонитрил, CH3OH - метанол, CH3ONa - метанолят натрия, d - дуплет, DCM - дихлорметан, DIEA - ^^диизопропилэтиламин, DIPE - диизопропиловый эфир, DMF - диметилформамид, DMSO - диметилсульфоксид, Et - этил, экв. - эквивалент, EtOAc - этилацетат, НОАс - уксусная кислота, LiHMDS - бис(триметилсилил)амид лития, масса/заряд - отношение массы к заряду, Me - метил,
MeCN - ацетонитрил, MeOH - метанол, EtOH - этанол, МГц - мегагерц, мин - минута(минуты), N2 - азот,
Na2SO4 - сульфат натрия,
ЯМР - ядерный магнитный резонанс (спектроскопия), Pd(OAc)2 - ацетат палладия(П), Ph - фенил, q - квартет,
к.т. - комнатная температура,
s - синглет,
нас. - насыщенный,
t - триплет,
TEA - триэтиламин,
TFA - трифторуксусная кислота,
THF - тетрагидрофуран,
ЯМР.
Для ряда соединений спектры 1H ЯМР регистрировали на спектрометре Bruker DPX-400 с рабочей частотой 400 МГц или на Bruker DPX-360 с рабочей частотой 360 МГц с применением хлороформа-d (дейтерированный хлороформ, CDCl3) или DMSO-d6 (дейтерированный DMSO, диметилсульфоксид-de) в качестве растворителя. Химические сдвиги (8) регистрировали в частях на миллион (ppm) относительно тетраметилсилана (TMS), который применяли в качестве внутреннего стандарта.
Угол оптического вращения.
Оптическое вращение измеряли с использованием поляриметра Perkin Elmer 341. [oc]D указывает на оптическое вращение, измеренное со светом при длине волны D-линии натрия (589 нм) при температуре 20°C. Длина оптического пути кюветы составляет 1 дм. Кроме фактического значения, упоминаются концентрация и растворитель для раствора, которые использовали для измерения оптического вращения.
Экспериментальная часть
А. Химический синтез промежуточных соединений и соединений формулы (I). Синтез 4-(5 -(азетидин-1 -ил)-2-( 1-(6-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1 ^^пирими-дин-7-ил)морфолина Р1.
Схема 5
Стадия 1. Синтез ^)-1-трет-бутил-2-метилпиперидин-1,2-дикарбоксилата 2.
Карбонат калия (108,50 г, 785,09 ммоль) добавляли к раствору ^)-1-(трет-бутоксикарбонил)пипе-ридин-2-карбоновой кислоты 1 (90 г, 392,55 ммоль) в DMF (900 мл). К смеси добавляли йодметан (83,58 г, 588,82 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К реакционной смеси добавляли этилацетат. Полученную смесь промывали водой и солевым раствором. Органический слой высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением промежуточного соединения 2 (90 г, выход: 85%).
Масса/заряд=244 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез трет-бутил-2-(2-цианоацетил)пиперидин-1-карбоксилата 3.
К раствору CH3CN (1,30 мл, 24,66 ммоль) в сухом THF (40 мл) по каплям добавляли LiHMDS (22,61 мл, 22,61 ммоль) при -78°C. Раствор перемешивали в течение 20 мин при -78°C. К смеси по каплям добавляли раствор соединения 2 (5 г, 22,55 ммоль) в сухом THF (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч. Затем смесь охлаждали до -78°C и к смеси по каплям добавляли раствор НОАс (5 мл, 76,67 ммоль) в THF (50 мл). Раствор нагревали до комнатной температуры. Растворитель удаляли под вакуумом. Остаток растворяли в этилацетате и промывали солевым раствором, высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного промежуточного соединения 3 (4 г, выход: 69%).
Масса/заряд=253 (M+H)+.
Стадия 3. трет-Бутил-2-(5-амино-1H-пиразол-3-ил)пиперидин-1-карбоксилат 4.
Гидрат гидразина (100 мл) и этанол (500 мл) добавляли к промежуточному соединению 3 (80 г, 317,70 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли под вакуумом. Остаток растворяли в этилацетате, промывали солевым раствором. Органический слой высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением промежуточного соединения 4 (80 г, выход: 76%).
Масса/заряд=267 (M+H)+.
Стадия 4. Синтез трет-бутил-2-(7-гидрокси-5-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-карбоксилата 5.
Промежуточное соединение 4 (70 г, 262,82 ммоль) растворяли в метаноле (700 мл), затем к раствору добавляли диметилмалонат (85,19 г, 394,23 ммоль) с последующим добавлением раствора CH3ONa в СН3ОН (25%, 85,19 г, 394,23 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель удаляли под вакуумом. К остатку добавляли воду, pH доводили до 6-7 добавлением уксусной кислоты, смесь экстрагировали этилацетатом, органический слой промывали солевым раствором, высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением промежуточного соединения 5 (85 г, выход: 63%), которое непосредственно использовали для следующей реакции.
Масса/заряд=335 (M+H)+.
Стадия 5. Синтез 5,7-дихлор-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидина 6.
Промежуточное соединение 5 (25 г, 74,77 ммоль) добавляли в чистый POCl3 (100 мл). Реакционную смесь нагревали до 100°C в течение 3 ч. Растворитель выпаривали с получением промежуточного соединения 6 (15 г, выход: 63%), которое непосредственно использовали для следующей реакции.
Масса/заряд=212 (M+H)+.
Стадия 6. Синтез 4-(5-хлор-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина 7.
Промежуточное соединение 6 (35 г, 129,08 ммоль) добавляли в CH3CN (100 мл) и Н2О (100 мл). К вышеуказанной смеси добавляли NaHCO3 (21,69 г, 258,16 ммоль) и морфолин (11,25 г, 129,08 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, растворители затем выпаривали, дихлорметан добавляли, смесь фильтровали и фильтрат выпаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: дихлорметан:этилацетат от 1:0 до 0:1) с получением промежуточного соединения 7 (25 г, выход: 51%).
Масса/заряд=322 (M+H)+.
Стадия 7. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфо-лина 8.
Гидрохлорид азетидина (29,07 г, 310,75 ммоль) и TEA (62,89 г, 621,49 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 7 (20 г, 62,15 ммоль) в этаноле (1000 мл). Полученную смесь нагревали до 80°C в течение 2 ч. Растворитель выпаривали. Полученное неочищенное вещество очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: метанол/этилацетат 1/10). Собранные фракции концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в CH3CN (200 мл). К раствору добавляли K2CO3 (100 г, 723,54 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Полученную смесь фильтровали и выпаривали для удаления растворителя под вакуумом. Остаток лиофилизировали. Промежуточное соединение 8 выделяли (6 г, выход: 27%).
Масса/заряд=343 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,52-1,66 (m, 4H), 1,90 (m, 1H), 1,97 (m, 1H), 2,37-2,40 (m, 2H), 2,79 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 3,55-3,58 (m, 4H), 3,81 (m, 1H), 3,93-3,95(m, 4H), 4,09-4,13 (m, 4H), 5,09 (s, 1H), 6,04 (s, 1H).
Стадия 8. Синтез 4,6-дихлорхиназолина 9
Синтез 6-хлорхиназолин-4-ола 9-b.
2-Амино-5-хлорбензойную кислоту 9-a (5 г, 29 ммоль) добавляли в формамид (30 мл). Реакционную смесь нагревали до 100°C в течение 3 ч. Твердое вещество собирали фильтрацией. Твердое вещество промывали несколько раз этанолом с получением промежуточного соединения 9-b (5 г, 86%).
Масса/заряд=181 (M+H)+.
Синтез 4,6-дихлорхиназолина 9.
Промежуточное соединение 9-b (3 г, 16,61 ммоль) растворяли в CHCl3 (30 мл). Добавляли оксалил-хлорид (2,8 г, 33,22 ммоль) и DMF (0,1 мл). Смесь нагревали до 100°C в течение 3 ч. Растворитель выпаривали с получением промежуточного соединения 9 (2,5 г, выход: 68%).
Масса/заряд=200 (M+H)+.
Стадия 9. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина Р1.
TFA-соль промежуточного соединения 8 (400 мг, 0,87 ммоль) растворяли в метоксиэтаноле (20 мл), добавляли промежуточное соединение 9 (235 мг, 1,18 ммоль) и диизопропилэтиламин (0,6 мл, 3,5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 24 ч. Смесь выливали в ледяной водный раствор и перемешивали в течение 15 мин. Твердое вещество последовательно отфильтровывали, промывали водой, растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и фильтровали. Полученный раствор концентрировали и твердое вещество высушивали в печи с получением желтоватого твердого соединения Р1 (380 мг, 85%).
Масса/заряд=506 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,66-1,86 (m, 5H), 1,99-2,12 (m, 1H), 2,25-2,37 (m, 3H), 3,47-3,58 (m, 6H), 3,63-3,75 (m, 5H), 3,96-4,07 (m, 5H), 4,21 (d, J=13,4 Гц, 1H), 5,25 (s, 1H), 5,81-5,86 (m, 1H), 5,89 (s, 1H), 7,72 (dd, J=9,0, 2,2 Гц, 1H), 7,78 (d, J=9,0 Гц, 1H), 8,07 (d, J=2,2 Гц, 1H), 8,57 (s, 1H).
Синтез (S)-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пири-мидин-7-ил)морфолина Р2 и ^)-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина РЗ
Стадия 1. Синтез 4-(5-хлор-2-(1-(6-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина 10.
К раствору промежуточного соединения 7 (1 г, 3,11 ммоль) и промежуточного соединения 9 (0,62 г, 3,11 ммоль) в DMF (20 мл) добавляли K2CO3 (2,15 г, 15,54 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли воду, смесь экстрагировали этилацетатом, органический слой промывали солевым раствором, высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: петролейный эфир:этилацетат от 10:1 до 0:1) с получением промежуточного соединения 10 (450 мг, выход: 27%).
Масса/заряд=485 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез ^)-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина Р2 и ^)-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина Р3.
Гидрохлорид азетидина (0,39 г, 4,13 ммоль) и TEA (0,84 г, 8,26 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 10 (0,4 г, 0,83 ммоль) в этаноле (50 мл). Раствор нагревали до 80°C в течение 2 ч. Растворитель выпаривали. Остаток очищали с помощью SFC. Необходимые фракции собирали и выпаривали. Остаток лиофилизировали с получением соединения Р2 (44,10 мг, выход: 10%) и соединения Р3 (43,30 мг, выход: 10%).
Масса/заряд=506 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,79-1,83 (m, 4H), 2,01-2,06 (m, 1H), 2,37-2,49 (m, 3H), 3,45-3,49 (m, 3H), 3,55-3,63 (m, 2H), 3,80-3,90 (m, 4H), 4,15 (m, 4H), 4,25 (m, 1H), 5,10 (s, 1H), 5,90 (s, 1H), 6,10 (s, 1H),
7,61 (dd, J1=9,2 Гц, J2= 2,4 Гц, 1H), 7,80(d, J=9,2 Гц, 2H), 8,03 (d, J=2,0 Гц, 1H), 8,68 (s, 1H). Р2: [o]D20=-280,83° (589 нм, с=0,24% вес./об., DMF, 20°C) Р3: [o]D20=+270° (589 нм, с=0,24% вес./об., DMF, 20°C).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пирими-дин-7-ил)морфолина P4
Vn О ^
1? Ч N CI NH.HCI / \ // У ^1
\ ЕЮН.ТЕА N ^^N^N^\
-NH ^^N'"^CI ~~\_/~N /=C />
7 ц ^Jf p4
Стадия 1. Синтез 4-(5-хлор-2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина 11.
Синтез 6-метилхиназолин-4-ола 12-b
О ОН CI
\^AOH H2N^p ^ \^-W^N (C0CI)2'DMF, "Y^| N 4^LNH 130°С,Зчаса ^^N^ DCM " ^^N^
12-a 12-b 12
2-Амино-5-метилбензойную кислоту 12-a (5 г, 33,08 ммоль) добавляли в формамид (30 мл). Реакционную смесь нагревали до 100°C в течение 6 ч. Твердое вещество собирали фильтрацией и промывали несколько раз этанолом с получением промежуточного соединения 12-b (4,5 г, 76%).
Масса/заряд=161 (M+H)+.
Синтез 4-хлор-6-метилхиназолина 12.
Промежуточное соединение 12-b (2,1 г, 13,11 ммоль) растворяли в CHCl3 (30 мл). Добавляли окса-лилхлорид (1,97 г, 23,26 ммоль) и DMF (0,1 мл). Смесь нагревали до 100°C в течение 3 ч. Растворитель выпаривали с получением промежуточного соединения 12 (1,5 г, 58%).
Масса/заряд=179 (M+H)+.
К раствору промежуточного соединения 7 (0,5 г, 1,55 ммоль) и промежуточного соединения 12 (0,28 г, 1,55 ммоль) в CH3CN (10 мл) добавляли K2CO3 (1,07 г, 7,77 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 72 ч при 50°C. Растворитель выпаривали и остаток растворяли в CH2Cl2. Полученную смесь фильтровали и фильтрат выпаривали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикаге-ле (элюент: петролейный эфир:этилацетат от 0:1 до 1:1) с получением промежуточного соединения 11
(350 мг, выход: 44%).
Масса/заряд=464 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез 4-(5-хлор-2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пири-мидин-7-ил)морфолина Р4.
Гидрохлорид азетидина (0,30 г, 3,24 ммоль) и TEA (0,66 г, 6,47 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 11 (0,3 г, 0,65 ммоль) в этаноле (10 мл). Раствор нагревали до 80°C в течение 2 ч. Растворитель выпаривали. Остаток очищали с помощью HPLC. Желаемую фракцию собирали и нейтрализовали до pH 8-9 раствором NaHCO3 и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток лиофилизировали с получением соединения Р4 (111,00 мг, 35%).
Масса/заряд=485 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, CDCb) 8 ppm 1,67-1,79 (m, 4H), 2,17 (m, 1H), 2,42 (m, 6H), 3,43-3,45 (m, 3H), 3,60-3,61 (m, 2H), 3,81 (m, 4H), 4,11 (m, 4H), 4,23 (m, 1H), 5,09 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 6,15 (s, 1H), 7,52 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,76-7,78 (m, 2H), 8,66 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-хлор-6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина P5
IACJ
Q EtOH, EtsN (3 экв.), 80°C
\\ n-N P5
-NH ^ N N^A FtOH FhNH i(tm)^ ШС \- м
Смесь промежуточного соединения 8 (500 мг, 1,460 ммоль, 1 экв.), коммерчески доступного 2,4-дихлор-6-метилхиназолина 13 (622 мг, 2,920 ммоль, 2 экв.) и Et3N (443 мг, 4,38 ммоль, 3 экв.) в этаноле (20 мл) перемешивали при 80°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Осадок фильтровали и собирали. Твердое вещество промывали охлажденным этанолом (2x3 мл) с получением соединения Р5 (540 мг, 69%).
Масса/заряд=520 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,66-1,88 (m, 4H), 1,97-2,13 (m, 1H), 2,32-2,54 (m, 6H), 3,38-3,52 (m, 3H), 3,55-3,68 (m, 2H), 3,86 (m, 4H), 4,13 (t, J=7,53 Гц, 4H), 4,34 (d, J=12,80 Гц, 1H), 5,10 (s, 1H), 5,96 (br. s., 1H), 6,13 (s, 1H), 7,51 (dd, J1=8,53, J2=1,51 Гц, 1H), 7,69 (d, J=8,53 Гц, 1H), 7,74 (s, 1H).
Синтез №(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1 -ил)-6-метилхиназолин-2-ил)метансульфонамида Р6
H2N \
Xantphos, Pd(OAc)2,Cs2C03 диоксан, 90°С
Ацетат палладия (8,6 мг, 0,038 ммоль, 0,1 экв.) добавляли к смеси соединения Р5 (200 мг, 0,385 ммоль, 1 экв.), метансульфонамида (73 мг, 0,77 ммоль, 2 экв.), Xantphos (22 мг, 0,038 ммоль, 0,1 экв.) и Cs2CO3 (250 мг, 0,77 ммоль, 2 экв.) в диоксане (6 мл). Полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 1,5 ч при микроволновом облучении. Осадок фильтровали и промывали этилацетатом с получением указанного в заголовке соединения Р6 (98 мг, 42,34%).
Масса/заряд=518 (M+H)+.
1H ЯМР (400МГц, CDCl3): 8 ppm 1,89 (m, 4H), 1,90 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 2,40 (m, 2H), 2,51 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 3,50 (m, 3H), 3,68 (m, 1H), 3,89 (m, 4H), 4,13 (m, 4H), 4,62 (br, 1H), 5,13 (s, 1H), 6,12 (s, 1H), 7,41-7,43 (d, J= 8,4 Гц, 1H), 7,46-7,49 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,66 (s, 1H).
(R)-N-(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-метилхиназолин-2-ил)метансульфонамид Р7 и ^)-№(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-метилхиназолин-2-ил)метансульфонамид Р8.
Очистку проводили посредством препаративной SFC (неподвижная фаза: Chiralpak Diacel AS 20x250 мм, подвижная фаза: СО2, EtOH с 0,2% iPrNH2), что обеспечивало оба соответствующих энан-
тиомера.
о о
Масса/заряд=578 (M+H)+.
1H ЯМР (400МГц, CDCl3): 8 ppm 1,89 (m, 4H), 1,90 (m, 1H), 2,31 (s, 3 H) 2,40 (m, 2 H) 2,51 (m, 1H)
3,20 (s, 3H) 3,50 (
m, 3H) 3,68 (m, 1H) 3,89 (m, 4H) 4,13 (m, 4H) 4,62 (br, 1H) 5,13 (s, 1H) 6,12 (s, 1H) 7,41-7,43 (d, J= 8,4 Гц, 1H) 7,46-7,49 (d, J=8,8 Гц, 1H) 7,66 (s, 1H).
Синтез №(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1 -ил)-5-метилхиназолин-2-ил)метансульфонамида Р9
H2N \,
¦ CI " о
-",- -.,^ЕЮН- Et'N (3 экв.), 80"С \ )=N
Xantphos, Pd(0Ac)2,Cs2CO3 диоксан, 90°C
Синтез 2,4-дихлор-5-метилхиназолина 14
ДА,
H2N NH2
^ т
POCI3
14-а
2) NaOH
14-b
Стадия 1. Синтез 5-метилхиназолин-2,4(1Н,3Н)-диона 14-b.
2-Амино-6-метилбензойную кислоту 14-a (10 г, 66,15 ммоль) и мочевину (39,73 г, 661,54 ммоль) нагревали до 160°C и перемешивали в течение 6 ч, реакционную смесь охлаждали до 100°C и добавляли 40 мл Н2О. Обеспечивали перемешивание полученной суспензии в течение 10 мин и охлаждали до комнатной температуры. Осадок отфильтровали и растворяли в водном 0,2М растворе гидроксида натрия (100 мл). Раствор нагревали до 100°C в течение 5 мин, что привело к образованию белого осадка. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, раствор нейтрализовали до pH 7 с помощью концентрированной HCl и белое твердое вещество отфильтровывали. Полученное твердое вещество промывали водой, растирали с горячим этилацетатом (100 мл) и охлаждали до комнатной температуры. Фильтрат собирали и высушивали под вакуумом с получением промежуточного соединения 14-b (6,4 г, выход: 49%).
Масса/заряд=177 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 2,64 (s, 3H), 6,93 (d, J=7,48 Гц, 1H), 7,01 (d, J=8,14 Гц, 1H), 7,44 (t, J=7,81 Гц, 1H), 10,99 (s, 1H), 11,03 (br. s., 1H).
Стадия 2. Синтез 2,4-дихлор-5-метилхиназолина 14.
Смесь промежуточного соединения 14-b (1 г, 5,68 ммоль), диэтиланилина (2,267 мл, 14,19 ммоль) в POCl3 (5 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь осторожно выливали на дробленный лед. Смесь нейтрализовали до pH 7 с помощью насыщенного NaHCO3. Полученную смесь экстрагировали с помощью CH2Cl2 (2x15 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали под вакуумом с получением промежуточного соединения 14 (950 мг, выход: 68%).
Масса/заряд=214 (M+H)+.
Стадия 3. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-хлор-6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-a] пиримидин-7-ил)морфолина 15.
Смесь промежуточного соединения 8 (500 мг, 1,46 ммоль), промежуточного соединения 14 (933,13 мг, 4,38 ммоль) и триэтиламина (443,21 мг, 4,38 ммоль) в EtOH (20 мл) перемешивали при 80°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Осадок фильтровали и собирали. Твердое вещество промывали охлажденным этанолом (2x5 мл) с получением необходимого соединения 15 (400 мг, 48%).
Масса/заряд=520 (M+H)+.
Стадия 4. Синтез N-(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пипери-дин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-ил)метансульфонамида Р9.
К смеси соединения 15 (200 мг, 0,385 ммоль), метансульфонамида (73,24 мг, 0,77 ммоль), Xantphos (23,15 мг, 0,04 ммоль) и Cs2CO3 (250,88 мг, 0,77 ммоль) в диоксане (6 мл) добавляли Pd(OAc)2 (9 мг, 0,04 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 120°C в течение 1,5 ч при микроволновом облучении. Смесь фильтровали. Осадок обрабатывали с помощью MeOH и фильтровали. Объединенные фильтраты концентрировали под вакуумом. Остаток очищали и pH фракций, содержащих продукт, доводили до 7-8 насыщенным NaHCO3. Органический растворитель выпаривали под вакуумом. Водный концентрат экстрагировали с помощью CH2Cl2 (30 мл). Органический слой концентрировали под вакуумом с получением соединения Р9 (105 мг, выход: 45%).
Масса/заряд=578 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,55-1,85 (m, 4H), 2,10-2,62 (m, 5H), 2,69-2,85 (m, 5H), 3,35 (s, 3H), 3,59-3,86 (m, 8H), 4,07-4,17 (m, 4H), 5,21 (s, 1H), 5,75 (s, 1H), 7,17-7,23 (m, 2H), 7, 55-7, 58 (m, 1H).
Синтез N-(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил) хиназолин-2-ил)метансульфонамида P10
I P10
Стадия 1. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина 16.
Смесь соединения 8 (250 мг, 0,73 ммоль, 1 экв.), 2,4-дихлорхиназолина (290 мг, 1,46 ммоль, 2 экв.) и триэтиламина (221 мг, 2,19 ммоль, 3 экв.) в этаноле перемешивали при 90°C в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (50% EtOAc в петролейном эфире) с получением соединения 16 с чистотой 75%. После кристаллизации из EtOAc и петролейного эфира указанное в заголовке промежуточное соединение 16 получали в виде белого твердого вещества (160 мг,
43,42%).
Масса/заряд=506 (M+H)+.
1H ЯМР (CDCl3 400 МГц) 8 ppm 1,72-1,84 (m, 4H), 2,03 (m, 1H), 2,38-2,50 (m, 3H), 3,47-3,52 (m, 3H), 3,61-3,68 (m, 2H), 3,84-3,93 (m, 4H), 4,12-4,15 (t, J=7,4 Гц, 4H), 4,41-4,45 (d, J=12,80 Гц, 1H), 5,11(s, 1H),
5,96 (br.s, 1H), 6,15 (s, 1H), 7,29-7,33 (m, 1H), 7,66-7,70 (m, 1H), 7,78-7,80 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,98-8,00 (d, J=8,3 Гц, 1H).
Стадия 2. Синтез N-(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пипе-ридин-1 -ил)хиназолин-2-ил)метансульфонамида Р10.
Смесь промежуточного соединения 16 (60 мг, 119 мкмоль, 1 экв.), метансульфонамида (34 мг, 357 мкмоль, 3 экв.), 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантена (14 мг, 0,2 экв.), ацетата палладия(П) (5,3 мг, 0,2 экв.) и карбоната цезия (116 мг, 357 мкмоль, 3 экв.) в 1,4-диоксане (5 мл) перемешивали при 110°C в течение 18 ч в атмосфере N2. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали с помощью EtOAc (3x20 мл). Объединенные органические слои концентрировали. Остаток очищали с помощью HPLC и фракции лиофилизировали. Твердое вещество обрабатывали с помощью SAX-SPE с получением соединения Р10 в виде желтого твердого вещества (24 мг, 34%).
Масса/заряд=564 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD,): 8 ppm 1,89 (br, 4H), 2,22 (m, 1H), 2,58 (m, 3H), 3,08 (s, 3H), 3,59 (br, 1H), 3,89 (d, 4H), 3,91 (m, 4H), 4,38 (t, J =7,5 Гц, 4H), 4,62 (br, 1H), 5,27 (s, 1H), 6,29 (s, 1H), 6,33 (br, 1H), 7,39 (t, J=7,3 Гц, 1H), 7,49 (d, J= 8,5 Гц, 1H), 7,79 (t, J=7,3 Гц, 1H), 8,01 (d, J=8 Гц, 1H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1 -ил)-6-метилпиразоло[1,5-a] пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-метил-хиназолина Р11
Стадия 1. Синтез трет-бутил-2-(6-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-карбоксилата 18.
Промежуточное соединение 4 (5,00 г, 18,08 ммоль) растворяли в сухом DMF (112 мл), затем добавляли Cs2CO3 (9,00 г, 27,62 ммоль) и (Е)-этил-3-этокси-2-метилакрилат 17 (4,30 г, 27,18 ммоль) и смесь нагревали при 130°C в течение 3 дней. DMF выпаривали и темно-коричневое масло выливали в ледяную воду. После нагревания до комнатной температуры продукт экстрагировали с помощью EtOAc (3 раза). Органические слои высушивали над Na2SO4, фильтровали и выпаривали и полученный остаток очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0 до 10% MeOH и дихлорметана. После выпаривания интересующих фракций получали промежуточное соединение 18 в виде желтого твердого вещества (1100 мг, 18%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,35-1,71 (m, 13H), 1,73-1,88 (m, 1H), 2,09 (d, J=1,10 Гц, 3H), 2,32 (d, J=13,64 Гц, 1H), 2,70-2,92 (m, 1H), 3,93-4,13 (m, 1H), 5,35-5,54 (m, 1H), 5,71 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 10,5610,76 (m, 1H).
Масса/заряд=333,20 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез 5-хлор-6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидина 19.
POCl3 (6,15 мл, 66,19 ммоль) добавляли к промежуточному соединению 18 (1100 мг, 3,31 ммоль) при комнатной температуре, потом смесь нагревали при 100°C в течение 1,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и POCl3 выпаривали. Остаток совместно выпаривали 3 раза с толуолом с получением промежуточного соединения 19 в виде коричневой пены, которое использовали как таковое на следующей стадии.
Масса/заряд=250,96 (M+H)+.
Стадия 3. Синтез 4-(6-метил-2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)морфолина 20.
Неочищенное промежуточное соединение 19 (150 мг, 0,30 ммоль) и 4-хлор-6-метилхиназолин 12 (107 мг, 0,60 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (3,79 мл) и затем добавляли диизопропилэтиламин (619 мкл, 3,59 ммоль). Раствор нагревали при 100°C в течение ночи. Нагревание прекращали и смесь охлаждали до комнатной температуры. К реакционной смеси добавляли морфолин (1,035 мл, 11,97 ммоль) и смесь нагревали при 70°C в течение 3 ч. Затем ее выпаривали до сухого состояния. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией с элюированием с помощью 2,5% (MeOH/NH3) и дихлормета-на. Полученное масло перекристаллизовывали в диизопропиловом эфире. Полученные грязно-белые кристаллы фильтровали с получением промежуточного соединения 20 (52 мг, 38%).
Масса/заряд=444,25 (M+H)+.
Т.пл=180,64°С
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,57-1,80 (m, 4H), 1,92-2,08 (m, 1H), 2,24 (s, 3H), 2,34-2,46 (m, 4H), 3,20-3,28 (m, 4H), 3,45 (br. t, J=11,20, 11,20 Гц, 1H), 3,67-3,83 (m, 4H), 4,21 (br. d, J=13,90 Гц, 1H), 5,85 (br. s., 1H), 6,20 (s, 1H), 7,64 (br. d, J=8,40 Гц, 1H), 7,71 (d, J=8,58 Гц, 1H), 7,83 (br. s, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,71 (s, 1H).
Стадия 4. Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-6-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-метилхиназолина Р11.
Раствор промежуточного соединения 20 (145 мг, 0,37 ммоль), гидрохлорида азетидина (69 мг, 0,74 ммоль) и диизопропилэтилового эфира (191 мкл, 1,11 ммоль) в EtOH (10 мл) нагревали при 65°C в течение 3,5 ч. Весь растворитель выпаривали и желтое влажное твердое вещество нагревали с обратным холодильником в ацетонитриле. Оставшееся нерастворимое твердое вещество отфильтровывали горячим и фильтрат охлаждали до комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение ночи. Кристаллы отфильтровывали и промывали ацетонитрилом. Продукт снова перекристаллизовывали в MeOH и ацетонитриле. Белые кристаллы фильтровали и промывали ацетонитрилом с получением указанного в заголовке продукта Р11 (72 мг, 47%).
Масса/заряд=414,12 (M+H)+.
Т.пл.=205,49°С
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,58-1,79 (m, 4Н), 1,88-2,03 (m, 1Н), 2,15 (d, J=0,88 Гц, 3H), 2,27 (quin, J=7,59 Гц, 2H), 2,32-2,40 (m, 1Н), 2,42 (s, 3Н), 3,37-3,49 (m, 1Н), 4,15-4,28 (m, 5Н), 5,77-5,84 (m, 1Н), 5,96 (s, 1Н), 7,63 (dd, J=8,58, 1,76 Гц, 1H), 7,71 (d, J=8,58 Гц, 1H), 7,82 (br. s, 1H), 8,40-8,45 (m, 1H), 8,56 (s, 1H).
Синтез 1-(6-метил-2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ола Р12
скхг
N 1М--Д
// W
Р12
Соединение Р12 получали таким же образом, что и соединение Р11, используя промежуточное соединение 20 и азетидин-3-ол в качестве исходных веществ. Масса/заряд=430,12 (M+H)+. Т.пл.=233,08°С
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,53-1,80 (m, 4Н), 1,87-2,03 (m, 1Н), 2,14 (s, 3Н), 2,31-2,40 (m, 1Н), 2,42 (s, 3Н), 3,38-3,50 (m, 1Н), 3,93 (dd, J=9,13, 4,73 Гц, 2H), 4,16-4,28 (m, 1Н), 4,32-4,44 (m, 2Н), 4,46-4,59 (m, 1Н), 5,61-5,71 (m, 1Н), 5,76-5,84 (m, 1Н), 5,98 (s, 1Н), 7,58-7,67 (m, 1Н), 7,67-7,75 (m, 1н), 7,83 (br. s, 1H), 8,45 (br. s, 1H), 8,56 (s, 1H).
Синтез 1-(6-метил-2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)азетидин-3-амина P13
ннлхх CHXY CHIT
\=/ P13
Стадия 1. Синтез трет-бутил-1-(6-метил-2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-a]пиримидин-5-ил)азетидин-3-илкарбамата 21.
Промежуточное соединение 21 получали таким же образом, что и соединение Р11, используя промежуточное соединение 20 и трет-бутилазетидин-3-илкарбамат в качестве исходных веществ.
Масса/заряд=529,25 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,40 (s, 9Н), 1,67-1,89 (m, 4Н), 1,98-2,11 (m, 1Н), 2,15 (d, J=0,88 Гц, 3H), 2,41-2,46 (m, 4Н), 3,60-3,74 (m, 1н), 4,02-4,11 (m, 2Н), 4,27-4,37 (m, 1Н), 4,37-4,46 (m, 2Н), 4,614,75 (m, 1Н), 6,12 (s, 1Н), 6,22-6,35 (m, 1Н), 7,10-7,30 (m, 1Н), 7,80-7,88 (m, 2н), 7,97 (br. s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,74 (s, 1H).
Стадия 2. Синтез 1-(6-метил-2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пири-мидин-5-ил)азетидин-3-амин Р13.
Раствор промежуточного соединения 21 (215 мг, 0,39 ммоль) и 4М раствор HCl в диоксане (6 мл, 24 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Диоксан выпаривали и неочищенный материал очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0,5 до 10% (MeOH/NH3) и дихлорметана. После выпаривания растворителя получали указанное в заголовке соединение Р13 в виде белого твердого вещества (18 мг, 10%).
Масса/заряд=429,20 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,57-1,75 (m, 4Н), 1,88-2,03 (m, 1Н), 2,11-2,20 (m, 3Н), 2,31-2,40 (m, 1Н), 2,42 (s, 3Н), 3,37-3,49 (m, 1н), 3,70-3,89 (m, 3Н), 4,16-4,27 (m, 1Н), 4,29-4,39 (m, 2н), 5,76-5,84
(m, 1H), 5,96 (s, 1H), 7,63 (dd, J=8,58, 1,76 Гц, 1H), 7,71 (d, J=8,36 Гц, 1H), 7,82 (br. s, 1H), 8,42-8,46 (m, 1H), 8,55 (s, 1H).
Синтез 2-метоксиэтил-4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пипе-ридин- 1-ил)-6-морфолинохиназолин-2-илкарбамата P14
22-С 22
Стадия 1. Синтез этил-5-морфолино-2-нитробензоата 22-a.
Этил-5-фтор-2-нитробензоат (5 г, 23,46 ммоль) растворяли в DMF (150 мл), а затем добавляли мор-фолин (6,13 г, 70,37 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 4 ч при комнатной температуре. Растворитель удаляли под пониженным давлением и неочищенный материал повторно растворяли в дихлорме-тане, промывали 1М раствором HCl, высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали до сухого состояния с получением промежуточного соединения 22-a.
Стадия 2. Синтез этил-2-амино-5-морфолинобензоата 22-b.
Этил-5-морфолино-2-нитробензоат 22-a (6,574 г, 23,46 ммоль) растворяли в смеси EtOH (150 мл) и THF (250 мл), затем добавляли Pd/C (10%) (2,496 г, 2,35 ммоль) и реакционную смесь оставляли в атмосфере водорода на 2 ч. Реакционную смесь фильтровали через дикалит и фильтрат выпаривали до сухого состояния с получением необходимого промежуточного соединения 22-b в виде коричневого твердого вещества (6,24 г, количественный).
Стадия 3. Синтез метил-4-гидрокси-6-морфолинохиназолин-2-илкарбамата 22-c.
Этил-2-амино-5-морфолинобензоат 22-b (6,24 г, 24,93 ммоль), 1,3-бис(метоксикарбонил)-2-метил-2-тиопсевдомочевину (5,91 г, 28,67 ммоль) и уксусную кислоту (7,14 мл, 124,65 ммоль) растворяли в 100 мл MeOH и перемешивали в течение ночи при 75°C. Дополнительную уксусную кислоту (1 мл, 17,47 ммоль) добавляли и реакционную смесь перемешивали при 75°C в течение 7 дней. pH доводили до 5 уксусной кислотой. Летучие вещества выпаривали до сухого состояния. Затем остаток повторно растворяли в 15 мл MeOH и добавляли 100 мл воды. Осадок отфильтровывали, промывали диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 22-c в виде коричневого твердого вещества (5,28 г, 70%).
Стадия 4. Синтез метил-4-хлор-6-морфолинохиназолин-2-илкарбамата 22.
Метил-(4-гидрокси-6-морфолинохиназолин-2-ил)карбамат 22-c (1,00 г, 3,29 ммоль) суспендировали в сухом ацетонитриле (12,38 мл), затем добавляли POCl3 (1,15 мл, 12,4 ммоль) при комнатной температуре и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь выпаривали до сухого состояния. Остаток совместно выпаривали с толуолом. Неочищенный материал растворяли в DCM и его промывали насыщенным раствором гидрокарбоната натрия в воде. Органический слой высушивали над Na2SO4, фильтровали и выпаривали. Остаток растирали в диизопропиловом эфире. Твердое вещество отфильтровывали с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 22 в виде темно-коричневого твердого вещества.
Масса/заряд=323,15 (M+H)+.
Стадия 5. Синтез 2-метоксиэтил-4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-морфолинохиназолин-2-илкарбамата Р14.
Раствор промежуточного соединения 8 (80 мг, 0,23 ммоль), метил-(4-хлор-6-морфолинохиназолин-2-ил)карбамата 22 (152 мг, 0,23 ммоль) и диизопропилэтиламина (117 мкл, 0,68 ммоль) в 2
метоксиэтаноле (1,79 мл) нагревали при 100°C в течение ночи. Растворители выпаривали и остаток очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0,5 до 10% MeOH в DCM. После выпаривания растворителя получали масло, которое растирали в диизопропиловом эфире, и суспензию подвергали действию ультразвука в течение 5 мин. Твердое вещество фильтровали и промывали некоторым количеством диизопропилового эфира с получением указанного в заголовке соединения Р14 в виде коричневого порошка (38 мг, 24%). Масса/заряд=613, 34 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,58-1,80 (m, 4Н), 1,93-2,06 (m, 1Н), 2,24-2,40 (m, 3Н), 2,95-3,11 (m, 4Н), 3,28 (s, 3Н), 3,30-3,34 (m, 1Н), 3,42-3,59 (m, 6Н), 3,64-3,75 (m, 8Н), 4,01 (t, J=7,37 Гц, 4H), 4,144,22 (m, 2Н), 4,22-4,32 (m, 1Н), 5,33 (s, 1Н), 5,70-5,81 (m, 1Н), 6,00 (s, 1Н), 7,17 (d, J=2,20 Гц, 1H), 7,51 (d, J=9,24 Гц, 1H), 7,56 (dd, J=9,68, 2,64 Гц, 1H), 9,83 (br. s., 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1 -ил)-2-(1-(2-метил-7Н-пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил)пиперидин-2-ил)пи-разоло[ 1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина Р15
-NH
N Ц^у
Et3N
iPrOH
N N
Синтез 4-хлор-2-метил-7Н-пирроло[2,3-ё]пиримидина 23
23-а
2-Метил-3Н-пирроло[2,3^]пиримидин-4(7Н)-он 23-a (10,54 г, 70,6 ммоль) растворяли в толуоле (20 мл) в инертной атмосфере.
По каплям добавляли DIPEA (24 мл, 141 ммоль, 2 экв.) и POCl3 (19,5 мл, 212 ммоль, 3 экв.) при 70°C и смесь затем нагревали до 106°C. Через 16 ч раствор концентрировали in vacuo, экстрагировали этилацетатом и промывали насыщенным раствором NaHCO3. Объединенные органические слои высушивали над Na2SO4 и концентрировали in vacuo с получением серого масла, которое суспендировали в во-де/гептанах с получением белого твердого промежуточного соединения 23 (5,9 г, 50%).
Синтез 4-(5-(азетидин-1 -ил)-2-(1-(2-метил-7Н-пирроло [2,3-d] пиримидин-4-ил)пиперидин-2-ил)пи-разоло^^^пиримидин^-ш^морфолина Р15.
К раствору промежуточного соединения 8 (100 мг, 0,28 ммоль) в изопропаноле (3 мл) добавляли промежуточное соединение 23 (47 мг, 0,28 ммоль, 1 экв.) и Et3N (0,118 мл, 0,84 ммоль, 3 экв.) в герметизированной пробирке под давлением. Раствор нагревали до 140°C и перемешивали в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры раствор концентрировали под вакуумом и очищали препаративной HPLC с получением указанного в заголовке соединения Р15 (36 мг, 27%).
Масса/заряд=474 (M+H)+.
1Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,52-1,58 (m, 1Н), 1,58-1,69 (m, 2Н), 1,73 (d, J=11,74 Гц, 1H), 1,91 (br. s., 1H), 2,24-2,32 (m, 2H), 2,32-2,38 (m, 1H), 2,36 (s, 3H), 3,27 (t, J=12,03 Гц, 1H), 3,47 (br. s., 4H), 3,58-3,68 (m, 4H), 3,97 (t, J=7,34 Гц, 4H), 4,61 (d, J=11,74 Гц, 1н), 5,23 (s, 1H), 5,71 (s, 1H), 6,21 (br. s., 1н), 6,42 (br. s., 1H), 6,98 (br. s., 1H), 11,17 (br. s., 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-этоксипиридо[2,3-d]пиримидин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина PI 6
Стадия 1. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-хлорпиридо[2,3^]пиримидин-4-ил)пиперидин-2-ш^пиразоло^^^пиримидин^-ш^морфолина 25.
Промежуточное соединение 8 (200 мг, 0,584 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл), затем добавляли 2,4-дихлорпиридо[2,3^]пиримидин 24 (117 мг, 0,58 ммоль) и триэтиламин (177 мг, 1,75 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 12 ч. Растворитель выпаривали. Данный неочищенный
продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: метанол/этилацетат 1/10). Полученный остаток лиофилизировали с получением белого твердого вещества (78,3 мг, 27%).
Стадия 2. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-этоксипиридо[2,3^] пиримидин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a] пиримидин-7-ил)морфолина Р16.
К раствору промежуточного соединения 25 (67 мг, 0,13 ммоль) в EtOH (10 мл) добавляли 100 мкл HCl-iPrOH (6н.) и раствор нагревали до 40°C в течение 16 ч. Полученный раствор концентрировали под вакуумом и очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0 до 10% MeOH в DCM. После выпаривания получали указанное в заголовке соединение Р16 (20 мг, 25%).
Масса/заряд=516 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,33 (t, J=7,04 Гц, 3H), 1,71 (br. s., 4H), 1,92-2,11 (m, 1H), 2,232,39 (m, 3H), 3,40-3,58 (m, 5H), 3,61-3,74 (m, 4H), 4,01 (t, J=7,37 Гц, 4H), 4,20 (br. d, J=13,90 Гц, 1н), 4,40 (q, J=7,00 Гц, 2H), 5,28 (s, 1H), 5,79-5,88 (m, 1H), 5,91 (s, 1H), 7,19 (dd, J=8,58, 4,40 Гц, 1H), 8,38 (dd, J=8,14, 1,54 Гц, 1H), 8,76-8,82 (m, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пири-мидин-7-ил)морфолина P17
26-а 26-b 26
Стадия 1. Синтез 5-метилхиназолин-4-ола 26-b.
2-Амино-6-метилбензойную кислоту 26-a (4 г, 26 ммоль) растворяли в 10 мл формамида и раствор нагревали до 120°C. Через 4 ч воду добавляли и твердое вещество отфильтровывали. Твердое вещество дополнительно промывали водой и высушивали в печи с получением промежуточного соединения 26-b (3,25 г, 77%).
Масса/заряд=160 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 2,77 (s, 3Н), 7,25 (d, J=7,48 Гц, 1H), 7,46 (d, J=7,70 Гц, 1H), 7,62 (t, J=7,90 Гц, 1H), 7,98 (s, 1Н), 11,89 (br. s, 1H).
Стадия 2. Синтез 4-хлор-5-метилхиназолина 26.
К раствору промежуточного соединения 26-b (100 мг, 0,62 ммоль) в ацетонитриле (2 мл) добавляли DIPEA (0,23 мл, 1,88 ммоль, 3 экв.). Полученный раствор нагревали до 70°C и перемешивали в течение 10 мин. Затем к раствору по каплям добавляли POCl3. Через 16 ч раствор концентрировали in vacuo с получением промежуточного соединения 26.
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пирими-дин-7-ил)морфолина Р17.
К раствору промежуточного соединения 8 (230 мг, 0,67 ммоль) в CH3CN (10 мл) в герметизированной пробирке добавляли DIPEA (2,3 мл, 13,4 ммоль, 20 экв.) и 4-хлор-5-метилхиназолин 26 (120 мг, 0,67 ммоль, 1 экв.). Раствор нагревали при 120°C и перемешивали в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры раствор концентрировали под вакуумом и неочищенный материал очищали препаративной HPLC с получением соединения Р17 (28 мг, 9%).
Масса/заряд=485 (M+H)+.
1Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,54-1,86 (m, 4Н), 2,08-2,13 (m, 2Н), 2,28-2,33 (m, 2Н), 2,86 (s,
3H), 3,28-3,31 (m, 2H), 3,39-3,44 (m, 2H), 3,49-3,54 (m, 2H), 3,62-3,69 (m, 4H), 4,00 (t, J=7,41 Гц, 4H), 5,31
(s, 1H), 5,75 (t, J=4,40 Гц, 1H), 5,97 (s, 1H), 7,37 (d, J=6, 90 Гц, 1H), 7,60-7,63 (m, 1H), 7,67-7,71 (m, 1H), 8,53 (s, 1H).
Синтез (R)-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пири-мидин-7-ил)морфолина Р18 и ^)-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5 -a] пиримидин-7-ил)морфолина Р19.
Очистку проводили посредством препаративной SFC (неподвижная фаза: Chiralpak Diacel AS 20x250 мм, подвижная фаза: СО2, EtOH с 0,2% iPrNH2), что обеспечивало оба соответствующих энан-тиомера
N ""К ,NA
Р18: [a]D20=+210, 64° (589 нм, с=0,3855% вес./об., DMF, 20°C).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-метилтиазоло[5,4-d]пиримидин-7-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина P20
DIPEA
HO'
8 27
Синтез 7-хлор-2-метилтиазоло[5,4-с1]пиримидина 27 CI CI
H2N^AN H2N^AN
,AJ HSX.^
-ей
27-a
27-b
Стадия 1. Синтез 5-амино-6-хлорпиримидин-4-тиола 27-b.
К раствору гидрата сульфанилнатрия (2,48 г, 33,54 ммоль) в воде (6 мл) добавляли MeOH (50 мл) и 4,6-дихлорпиримидин-5-амин 27-a (5 г, 30,49 ммоль). Полученную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 1 ч и при температуре окружающей среды в течение ночи. Смесь выпаривали и остаток высушивали in vacuo с получением промежуточного соединения 27-b (3,63 г, 74%).
Масса/заряд=161 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез 7-хлор-2-метилтиазоло[5,4^]пиримидина 27.
Раствор 5-амино-6-хлорпиримидин-4-тиола 27-b (4,7 г, 29,1 ммоль) в триэтилортоацетате (150 мл) перемешивали при 150°C в течение 1 ч. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры и затем выпаривали до сухого состояния. Остаток растирали в диизопропиловом эфире с некоторым количеством ацетонитрила. Осадок собирали фильтрацией и высушивали in vacuo с получением промежуточного соединения 27 (0,9 г, 4,85 ммоль).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-метилтиазоло[5,4-d]пиримидин-7-ил)-пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-a] пиримидин-7-ил)морфолина Р20.
Раствор промежуточного соединения 8 (378,9 мг, 1 ммоль), 7-хлор-2-метилтиазоло[5,4-d]пиримидина 27 (185,6 мг, 1 ммоль), основания Хунига (0,7 мл, 4,22 ммоль) и 2-метоксиэтанола (10 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Смесь выпаривали и остаток растворяли в дихлорметане и промывали дважды водой. Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали. Остаток очищали через силикагель с помощью дихлорметана/метанола 100/0-95/5 в качестве градиента. Соответствующие фракции выпаривали. Остаток кристаллизовали с помощью диизопропилового эфира и 10% ацетонитрила. Белые кристаллы собирали фильтрацией и высушивали in vacuo с получением соединения Р20 (163 мг, 33%).
Масса/заряд=491,62 (M+H)+.
Т.пл.: 229,8°C.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,48-1,83 (m, 2Н), 1,91-2,06 (m, 1Н), 2,29 (quin, J=7,5 Гц, 1H), 2,39 (d, J=13,7 Гц, 1H), 2,72 (s, 3Н), 3,21 (m, J=2,4 Гц, 1H), 3,42-3,54 (m, 4Н), 3,56-3,70 (m, 4Н), 3,98 (t, J=7,5 Гц, 4H), 5,16-5,30 (m, 2Н), 5,73 (s, 1Н), 6,98 (br. s., 1H), 8,32 (s, 1H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)-пиперидин-1-ил)-6-метилхиназолина Р21
Стадия 1. Синтез 7-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5(4H)-она 29.
Коммерчески доступный ^)-этил-3-этоксибут-2-еноат 28 (33 г, 208,60 ммоль) и Cs2CO3 (54 г, 165,74 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 4 (30 г, 112,64 ммоль) в DMF (180 мл). Смесь перемешивали при 110°C в течение 12 ч. Осадок отфильтровывали и промывали этилацетатом (100 мл). Фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в этилацетате (300 мл) и промывали солевым раствором (2x100 мл). Органический слой высушивали (MgSO4), фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток промывали изопропиловым эфиром (200 мл), а затем высушивали (вакуум, 45°C, 1 ч) с получением промежуточного соединения 29 (25 г, 65,37%).
Масса/заряд=233 (м+Н)+.
Стадия 2. Синтез 5-хлор-7-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидина 30.
Смесь промежуточного соединения 29 (22,5 г, 67,69 ммоль) в POCl3 (377,5 г) перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Добавляли ацетонитрил (200 мл). Смесь нейтрализовали NH3 (7М в метаноле) до pH 8. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: дихлорметан/метанол 10/1) с получением промежуточного соединения 30 (13,97 г, 80,47%).
Масса/заряд=251 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,52-1,73 (m, 4Н), 1,76-1,86 (m, 1Н), 1,99-2,02 (m, 1Н), 2,70 (s, 3Н), 2,83-2,88 (m, 1Н), 3,15-3,18 (d, J=12,0 Гц, 1H), 4,14-4,17 (dd, J1=10,8, J2=2,8 Гц, 1H), 6,81 (s, 1н), 7,14 (s, 1H).
Стадия 3. Синтез 4-(2-(5-хлор-7-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-метил-хиназолина 31.
Раствор промежуточного соединения 30 (501,5 мг, 2 ммоль) и 4-хлор-6-метилхиназолина 12 (535,9 мг, 3 ммоль) в метоксиэтаноле (5 мл) перемешивали при 120°C в течение ночи. Смесь выпаривали и остаток растворяли в дихлорметане, промывали дважды водой, высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали. Остаток очищали через силикагель с применением дихлорметана/метанола-NH 98/2. Соответствующие фракции выпаривали и остаток кристаллизовали в диизопропиловом эфире с 10% ацето-нитрила. Зеленоватый осадок отфильтровывали и высушивали под вакуумом с получением промежуточного соединения 31 (645 мг, 82%).
Масса/заряд=392,9 (M+H)+.
Т.пл.: 154,2°C.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,62-1,81 (m, 2Н), 2,45 (s, 3Н), 2,69 (s, 2Н), 4,16 (br. s., 1H), 5,95 (br. s., 1H), 6,60 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 7,63 (d, J=1,6 Гц, 1H), 7,66-7,79 (m, 1н), 7,86 (s, 1н), 8,55 (s, 1H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1 -ил)-7-метилпиразоло [1,5 -a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-метил-хиназолина Р21.
Раствор промежуточного соединения 31 (196,45 мг, 0,5 ммоль), гидрохлорида азетидина (93,56 мг, 1 ммоль), основания Хунига (0,26 мл, 1,5 ммоль) и этанола (5 мл) перемешивали при 60°C в течение выходных. Смесь выпаривали и остаток растирали в воде и перемешивали в течение 1 ч. Осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали в ацетонитриле. Белые кристаллы собирали фильтрацией и высушивали in vacuo с получением соединения Р21 (175 мг, 84%).
Масса/заряд=413,5 (M+H)+.
Т.пл.: 192,43°C.
1Н ЯМР (360 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,58-1,78 (m, 4Н), 1,90-2,05 (m, 1Н), 2,25-2,39 (m, 3Н), 2,43 (s, 3Н), 2,54 (s, 3Н), 4,03 (t, J=7,5 Гц, 4H), 5,80 (br. s., 1н), 6,00 (s, 1H), 6,12 (d, J=1,1 Гц, 1H), 7,65 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7,68-7,74 (m, 1H), 7, 89 (s, 1H), 8,57 (s, 1H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-6-метил-7-(пиперидин-1-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пипе-ридин-1-ил)-6-метилхиназолина Р22
Стадия 1. Синтез трет-бутил-2-(7-гидрокси-6-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-карбоксилата 33.
Свежеприготовленный метанолят натрия (50 мл, 93,87 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 4 (5 г, 18,11 ммоль) и диэтил-2-метилмалоната 32 (3,93 г, 22,53 ммоль) в метаноле (50 мл). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение 15 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. К остатку добавляли воду, раствор доводили до pH 4-5 путем добавления уксусной кислоты. Смесь экстрагировали этилацетатом (3x300 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (2x100 мл), высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного промежуточного соединения 33 (8,5 г, выход: 91%).
Масса/заряд=349 (M+H)+.
Стадия 2. 5,7-Дихлор-6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a] пиримидин 34.
К промежуточному соединению 33 (6,5 г, 18,66 ммоль) добавляли трихлорид фосфора (30 мл) при 0°C. Смесь перемешивали при 100°C в течение 15 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток растворяли в CH3CN (30 мл). Раствор доводили до pH 7 путем добавления раствора аммиака в метаноле. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: дихлорметан/метанол 20/1 (0,5% раствор аммиака в метаноле)). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток промывали этилацетатом. Твердое вещество высушивали под вакуумом с получением промежуточного соединения 34 (1,12 г, 21%).
Масса/заряд=286 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,22-1,25 (m, 1Н), 1,65-1,68 (m, 2Н), 2,04-2,08 (m, 1Н). 2,24-2,28 (m, 2Н), 2,53 (s, 3Н), 3,08 (br. s., 1H), 3,57 (br. s., 1H), 3,69-3,80 (m, 1H), 4,48 (br. s., 1H), 7,21 (s, 1H).
Стадия 3. Синтез 5-хлор-6-метил-7-(пиперидин-1-ил)-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пири-мидина 35.
Раствор промежуточного соединения 34 (1120 мг, 3,93 ммоль), морфолина (377 мг, 4,32 ммоль), основания Хунига (1,35 мл, 7,85 ммоль) в этаноле (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выпаривали и остаток кристаллизовали в диизопропиловом эфире с приблизительно 50% ацетонитрила. Кристаллы собирали фильтрацией и высушивали in vacuo с получением промежуточного соединения 35 (1060 мг, 80%).
Масса/заряд=335,8 (M+H)+.
Стадия 4. 4-(2-(5-Хлор-6-метил-7-(пиперидин-1-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-метилхиназолин 36.
Раствор промежуточного соединения 35 (1060 мг, 3,16 ммоль), 4-хлор-6-метилхиназолина 12 (845,7 мг, 4,73 ммоль), основания Хунига (1,1 мл, 6,32 ммоль) и 2-метоксиэтанола (20 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Смесь выпаривали и остаток поглощали водой и экстрагировали дихлорметаном 3 раза. Объединенный органический слой последовательно высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с дихлорметаном/метанолом 98/2 в качестве элюента. Соответствующие фракции выпаривали с получением промежуточного соединения 36 (1400 мг, 92%).
Стадия 5. Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-6-метил-7-(пиперидин-1-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1 -ил)-6-метилхиназолина Р22.
Соединение Р22 получали таким же образом, что и соединение Р21, используя промежуточное соединение 36 в качестве исходного вещества.
Масса/заряд=498,6 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,58-1,87 (m, 4Н), 1,98-2,06 (m, 1Н), 2,07 (s, 3Н), 2,24 (quin, J=7,57 Гц, 2H), 2,34-2,40 (m, 1Н), 2,42-2,46 (m, 3Н), 3,34-3,40 (m, 4Н), 3,49 (br ddd, J=13,62, 10,60, 3,63 Гц, 1H), 3,64-3,71 (m, 4H), 4,10 (t, J=7,67 Гц, 4H), 4,19 (br d, J=14,13 Гц, 1H), 5,81-5,88 (m, 1H), 5,92 (s, 1H), 7,59 (dd, J=8,48, 1,61 Гц, 1H), 7,65-7,73 (m, 1H), 7, 86 (s, 1H), 8,53 (s, 1H).
Синтез 1-(6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ола Р23
-\ i^N
-NH ^^N^CI DIPEA, HO'^-"0^ У \ У EtOH,TEA
CO1 ocrr 6.
19 37
v> -он w > - он у* v> - OH
<Г > =N noo К > =N f > =N
Х=/ P23 \=/ P24 \=/ P25
Р24: [a]D20=+251,32° (589 нм, с=0,3975% вес./об., DMF, 20°C). Р25: [a]D20=-264, 8° (589 нм, с=0,375% вес. /об., DMF, 20°C).
Стадия 1. Синтез 4-(2-(5-хлор-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метил-хиназолина 37.
Промежуточное соединение 19 (500 мг, 1,72 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (30 мл). К раствору добавляли DIPEA (0,89 мл, 5,17 ммоль, 3 экв.) и 4-хлор-5-метилхиназолин 26 (324,26 мг, 1,72 ммоль, 1 экв.) и нагревали до 80°C. Через 16 ч перемешивания раствор концентрировали in vacuo и очищали колоночной хроматографией (DCM/(NH3/MeOH) 7н.): 9/1) с получением желаемого промежуточного соединения 37 (735 мг, 86%).
LCMS масса/заряд=393 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез 1-(6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пири-мидин-5-ил)азетидин-3-ола Р23.
Промежуточное соединение 37 (735 мг, 1,5 ммоль) растворяли в EtOH (50 мл). Азетидин-3-ола гидрохлорид (327 мг, 3 ммоль, 2 экв.) и DIPEA (0,77 мл, 4,5 ммоль, 3 экв.) добавляли и раствор нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры, добавляли лед и раствор перемешивали в течение 1 ч. Твердое вещество отфильтровывали и высушивали в печи с получением соединения Р23 (440 мг, 68%).
LCMS масса/заряд=430 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, 420 K, DMSO-d6) 5 ppm 1,41-1,70 (m, 3H), 1,76-1,89 (m, 1H), 2,11 (d, J=1,21 Гц, 3H), 2,13-2,31 (m, 2H), 2,81 (s, 3H), 3,42-3,60 (m, 2H), 3,90 (dd, J=9,28, 4,84 Гц, 2H), 4,34 (t, J=8,10 Гц, 2H), 4,46-4,55 (m, 1H), 4,73-5,12 (m, 1H), 5,47-5,58 (m, 1H), 5,64 (br. s., 1H), 7,21-7,33 (m, 1H), 7,46-7,63 (m, 2H), 8,10 (s, 1H), 8,45 (s, 1H).
(R)-1 -(6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)азети-дин-3-ол Р24 и (S)-l-(6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ол Р25.
Эти два энантиомера отделяли с помощью SFC-разделения с помощью соединения Р23.
Очистку проводили посредством препаративной SFC (неподвижная фаза: Chiralpak Diacel AS 20x250 мм, подвижная фаза: СО2, EtOH с 0,2% iPrNH2), что обеспечивало оба соответствующих энан-тиомера.
Синтез 1-(6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил) азетидин-3-амина Р26
~ W "ZKKM oar
СндХ -=--
N Cl EtOH, DIPEA й ° DIPEA
19 38
но-
Стадия 1. Синтез трет-бутил-(1-(6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ил)карбамата 38.
Раствор промежуточного соединения 19 (1300 мг, 5,185 ммоль), трет-бутилазетидин-3-илкарбамата (1786 мг, 10,37 ммоль) и основания Хунига (2 мл, 11,606 ммоль) в EtOH (30 мл) нагревали при 70°C в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли дикалит и смесь выпаривали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией. Колонку элюировали
градиентом, начиная со 100% DCM до 10% MeOH и 90% DCM. Фракции, содержащие продукт, выпаривали и остаток перекристаллизовывали в ACN. После фильтрации получали белое кристаллическое твердое вещество смесь необходимого указанного в заголовке промежуточного соединения 38 и исходного реагента трет-бутилазетидин-3-илкарбамата (2204 мг), которую использовали как таковую на следующей стадии.
Масса/заряд=387,26 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез трет-бутил-(1-(6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пира-золо [1,5-a] пиримидин-5 -ил)азетидин-3 -ил)карбамата 39.
Неочищенный материал, полученный на стадии 1, промежуточное соединение 38 (250 мг, 0,647 ммоль), 4-хлор-5-метилхиназолин 26 (182 мг, 0,97 ммоль) и основание Хунига (368 мкл, 2,135 ммоль) смешивали в 2-метоксиэтаноле (4,36 мл) и нагревали при 100°C в течение 3 ч. Реакционную смесь выпаривали и остаток очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 5% MeOH и 95% DCM. Все фракции, содержащие продукт, выпаривали с получением желтой пены, которая характеризовалась чистотой только 52% (315 мг). Неочищенный материал использовали как таковой на стадии 3.
Масса/заряд=529,28 (M+H)+.
Стадия 3. 1-(6-Метил-2-(1 -(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1 ^^пиримидин^-ил)азетидин-3-амин Р26.
Неочищенный материал, полученный на стадии 2, промежуточное соединение 39 (157 мг, 0,297 ммоль) растворяли в DCM (1,9 мл). Затем добавляли TFA (227 мкл, 2,97 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Повышали основность смеси с помощью 7М NH3 в MeOH и все растворители выпаривали. Остаток растирали в воде и образованное твердое вещество отфильтровывали и очищали колоночной хроматографией. Колонку элюировали градиентом, начиная со 100% DCM до 10% (MeOH/NH3) и 90% DCM. Все чистые фракции выпаривали с получением указанного в заголовке продукта Р26 в виде белого твердого вещества (76 мг, 59%).
Масса/заряд=429,30 (M+H)+.
Т.пл.=221,07°С
1H ЯМР в 150°C (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 8,46 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,64-7,53 (m, 2H), 7,28 (d, J=5,9 Гц, 1H), 5,75-5,37 (m, 2H), 4,41-4,22 (m, 2H), 3,87-3,71 (m, 3H), 3,60-3,37 (m, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,31-2,12 (m, 2H), 2,10 (s, 3H), 1,94-1,32 (m, 6H).
Синтез 1 -(2-( 1-(2,5-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метилпиразоло [1 ^^пиримидин^-ил)азетидин-3-амина P27
HO-
Синтез 4-хлор-2,5-диметилхиназолина 40
i^rr -
40-a 40-b 40-c 40
Стадия 1. Синтез 2,5-диметил-4H-бензо[d][1,3]оксазин-4-она 40-b.
Раствор 2-амино-6-метилбензойной кислоты 40-a (20,0 г, 132 ммоль) в уксусном ангидриде (100 мл) перемешивали при 140°C в течение 3 ч. Смесь концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 40-b (20,0 г, 77,7%).
Стадия 2. Синтез 2,5-диметилхиназолин-4(3ЕГ)-она 40-с.
Смесь промежуточного соединения 40-b (20,0 г, 114 ммоль) и гидроксида аммония (50 мл) нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали до 25°C. Твердое вещество собирали фильтрацией и промывали водой. Осадок на фильтре высушивали под вакуумом при 40°C в течение 1 ч с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 40-с (20 г, 90,5%).
Стадия 3. Синтез 4-хлор-2,5-диметилхиназолина 40.
К смеси промежуточного соединения 40-с (2,90 г, 16,7 ммоль) в оксихлориде фосфора (108 г, 709 ммоль) при 0°C добавляли триэтиламин (5,05 г, 49,9 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток растворяли в толуоле (50 мл) и раствор добавляли в ледяную воду (50 г). Органический слой отделяли и последовательно промывали водой (2x50 мл), 10% водным раствором NaHCO3 (2x50 мл), водой (2x50 мл), солевым раствором (50 мл). Органический слой высушивали (MgSO4), фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом с получением промежуточного соединения 40 (1,91 г, 58,61%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 2,80 (s, 3H), 3,00 (s, 3H), 7,41 (d, J=7,28 Гц, 1H), 7,68-7,76 (m, 1H), 7,78-7,85 (m, 1H).
Стадия 4. Синтез трет-бутил-(1-(2-(1-(2,5-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метил-пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ил) карбамата 41.
Неочищенное промежуточное соединение 38 (250 мг, 0, 647 ммоль), промежуточное соединение 40 (190 мг, 0,97 ммоль) и основание Хунига (368 мкл, 2,135 ммоль) смешивали в 2-метоксиэтаноле (4,36 мл) и нагревали при 100°C в течение 3 ч. Реакционную смесь выпаривали и остаток очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 5% MeOH и 95% DCM. Все фракции, содержащие продукт, выпаривали с получением желтой пены промежуточного соединения 41, которое имело чистоту только 55% (427 мг). Неочищенный материал использовали как таковой на стадии 5.
Масса/заряд=543,36 (M+H)+.
Стадия 5. Синтез 1-(2-(1-(2,5-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метилпиразоло[1,5-a]пи-римидин-5-ил)азетидин-3-амина Р27.
Неочищенное промежуточное соединение 41 (427 мг (чистота только 55%), 0,433 ммоль) растворяли в 4М растворе HCl в диоксане (21,64 мл, 86,551 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь разбавляли дихлорметаном, а затем повышали основность с помощью насыщенного раствора Na2CO3. Продукт экстрагировали дихлорметаном (3x15 мл). Органические слои высушивали над Na2SO4, фильтровали и выпаривали. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией. Колонку из силикагеля элюировали градиентом, начиная со 100% DCM до 4% (MeOH/NH3) и 96% DCM. Все чистые фракции выпаривали. Остаток растирали в DIPE с получением указанного в заголовке продукта Р27 в виде белого твердого вещества (11 мг, 6%).
Масса/заряд=443,6 (M+H)+.
Т.пл.=176,85°С
1H ЯМР в 150°C (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 8,10 (s, 1H), 7,56-7,43 (m, 2H), 7,19 (d, J=6,8 Гц, 1H),
5,74-5,44 (m, 2H), 4,39-4,25 (m, 2H), 3,83-3,71 (m, 3H), 3,53-3,38 (m, 2H), 2,79 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,262,13 (m, 2H), 2,11 (s, 3H), 1,94-1,38 (m, 6H).
Синтез диметил-(4-{2-[5-(азетидин-1-ил)-7-(морфолин-4-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил]пипе-ридин-1 -ил} -5-метилхиназолин-2-ил)имидодикарбоната Р28
о о о
Ч*ЧА0 р28
Стадия 1. Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-амина 42.
Суспензию промежуточного соединения 15 (1031 мг, 1,902 ммоль) в 7М растворе NH3 в MeOH (25 мл, 175 ммоль) нагревали в герметизированном металлическом реакторе при 120°C в течение 4 дней. После выпаривания остаток очищали посредством HPLC-очистки. Очищенный продукт растворяли в смеси DCM и DIPE и раствор выпаривали снова с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 42 в виде белого твердого вещества (473 мг, 47%).
Масса/заряд=500,3 (M+H)+.
Т.пл.=252,24°С
1H ЯМР в 150°C (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 7,36-7,27 (m, 1H), 7,16-7,10 (m, 1H), 6,90-6,83 (m, 1H), 5,71-5,60 (m, 1H), 5,54-5,41 (m, 2H), 5,31-5,22 (m, 1H), 5,17 (s, 1H), 3,98 (t, J=7,5 Гц, 4H), 3,78-3,28 (m,
10H), 2,76 (s, 3H), 2,28 (quin, J=7,4 Гц, 2H), 2,21-2,07 (m, 2H), 1,90-1,44 (m, 4H).
Стадия 2. Синтез диметил-(4-{2-[5-(азетидин-1-ил)-7-(морфолин-4-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил]пиперидин-1-ил}-5-метилхиназолин-2-ил)имидодикарбоната Р28.
Промежуточное соединение 42 (100 мг, 0,188 ммоль) растворяли в DCM (2,21 мл). Затем добавляли DIPEA (117 мкл, 0,678 ммоль) и метилхлорформиат (CAS=79-22-1, 29 мкл, 0,376 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. DCM выпаривали и остаток растирали в воде. Суспензию подвергали обработке ультразвуком в течение 30 мин и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Твердое вещество фильтровали и промывали водой и DIPE с получением указанного в заголовке соединения Р28 в виде белого порошка (40 мг, 31%).
Масса/заряд=616, 6 (M+H)+. Т.пл.=136,62°С
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 7,79-7,66 (m, 1H), 7,65-7,55 (m, 1H), 7,48-7,39 (m, 1H), 6,05-4,99
(m, 3H), 4,09-3,02 (m, 20H), 2,89-2,73 (m, 3H), 2,38-1,94 (m, 4H), 1,87-1,40 (m, 4H).
Синтез метил-(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-ил)карбамата P29
LiOH
Соединение Р28 (200 мг, 0,279 ммоль) растворяли в MeOH (6,0 мл) и THF (6,0 мл). Затем добавляли раствор LiOH (17 мг, 0,722 ммоль) в воде (4,3 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Затем ее нейтрализовали 1М раствором HCl и разбавляли некоторым количеством воды. Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Белое твердое вещество собирали фильтрацией и желаемый продукт высушивали в вакуумной печи в течение ночи с получением белого твердого вещества Р29 (71 мг, 43%).
1H ЯМР в 80°C (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 9,70-9,32 (m, 1H), 7,53 (dd, J=7,3, 8,1 Гц, 1H), 7,38 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,14 (d, J=7,0 Гц, 1H), 6,25-4,79 (m, 3H), 3,99 (t, J=7,4 Гц, 4H), 3,80-3,67 (m, 5H), 3,65 (s, 3H), 3,60-3,32 (m, 5H), 2,77 (s, 3H), 2,35-2,13 (m, 4H), 1,91-1,33 (m, 4H).
Масса/заряд=558,3 (M +H)+.
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-N-гидрокси-5-метилхиназолин-2-карбоксимидамида P30
О о о
43 \=/ РЗО
Стадия 1. Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-карбонитрила 43.
Желтый раствор соединения 15 (2000 мг, 3,689 ммоль), цианида цинка (CAS=557-21-1,521 мг, 4,433 ммоль) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцена (CAS=12150-46-8, 372 мг, 0,671 ммоль) в NMP (44,6 мл) дегазировали с помощью N2 в течение 30 мин. Затем добавляли трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (CAS=51364-51-3, 327 мг, 0,357 ммоль) и реакционную емкость герметизировали и нагревали при 90°C в течение 20 ч. Реакционную смесь гасили водой (176 мл) и сразу же образовывался осадок. Эту суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Твердое вещество отфильтровывали и промывали водой с получением темно-коричневого твердого вещества. Влажное коричневое твердое вещество растворяли в DCM и остаточную воду удаляли разделением и высушиванием над Na2SO4. Остаток перекристаллизовывали в ACN и смесь перемешивали в течение ночи. Черные кристаллы фильтровали, промывали с помощью ACN и MeOH с получением фиолетовых/серых кристаллов. Твердое вещество перекристаллизовывали снова в ACN и перемешивали в течение 6 ч. Затем образовавшиеся фиолетовые кристаллы промежуточного соединения 43 фильтровали, промывали небольшим количеством ACN и высушивали в вакуумной печи (1685 мг, 81%).
Масса/заряд=510, 3 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-Ы-гидрокси-5-метилхиназолин-2-карбоксимидамида P30.
К раствору гидрохлорида гидроксиламина (3753 мг, 54 ммоль) в воде (12,5 мл) добавляли Na2CO3 (625 мг, 5,9 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем суспензию промежуточного соединения 43 (1132 мг, 2 ммоль) в EtOH (50 мл) добавляли при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали в течение 16 ч. Добавляли ледяную воду. После перемешивания в течение 2 ч бежевое твердое вещество фильтровали и промывали с помощью DIPE. Неочищенный материал суспендировали в смеси 95% DCM и 5% MeOH и оставшийся осадок отфильтровывали. Фильтрат очищали колоночной хроматографией. Колонку из силикагеля элюировали градиентом, начиная со 100% DCM до 10% (MeOH/NH3) и 90% DCM. После выпаривания чистых фракций получали необходимый продукт P30 в виде бежевого твердого вещества (38 мг, 3%).
Масса/заряд=543,6 (M+H)+.
Т.пл.=205,46°С
!Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 9,82-9,46 (m, 1H), 7,71-7,56 (m, 2H), 7,32 (dd, J=1,4, 6,3 Гц, 1H), 5,97-5,40 (m, 4H), 5,20 (s, 1H), 3,98 (t, J=7,4 Гц, 4H), 3,81-3,29 (m, 10H), 2,84 (s, 3H), 2,28 (quin, J=7,4 Гц, 2H), 2,23-2,11 (m, 2H), 1,90-1,38 (m, 4H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-этокси-5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина РЗ1
EtONa
EtOH
Суспензию промежуточного соединения 15 (150 мг, 0,277 ммоль) в EtOH (2,39 мл) обрабатывали NaOEt (21% в EtOH) (525 мкл, 1,407 ммоль). Образец продували N2, герметизировали и нагревали при 80°C в течение 48 ч. Реакционную смесь выпаривали до сухого состояния и остаток очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 10% MeOH и 90% DCM. Все фракции, содержащие продукт, выпаривали с получением белой пены. Пену перекристаллизовывали с DIPE и 5% ACN и смесь перемешивали в течение 3 дней. Фильтрацией получали белое кристаллическое указанное в заголовке соединение Р31 (46 мг, 29%).
Масса/заряд=529, 3 (M+H)+.
Т.пл .=186,90°C.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 7,52-7,42 (m, 1Н), 7,35 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,09 (d, J=7,0 Гц, 1H), 5,70-5,58 (m, 1Н), 5,41-5,28 (m, 1Н), 5,18 (s, 1Н), 4,39-4,27 (m, 2Н), 4,05-3,90 (m, 4Н), 3,74-3,57 (m, 4н), 3,56-3,37 (m, 6Н), 2,80 (s, 3Н), 2,35-2,23 (m, 2Н), 2,22-2,11 (m, 2Н), 1,94-1,40 (m, 4Н), 1,27 (t, J=6, 9 Гц,
3H).
Синтез (S)-N-(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-хлорхиназолин-2-ил)метансульфонамида Р32
Р33: [a]D20=-209, 83° (589 нм, с=0,3765% вес./об., DMF, 20°C). Р34: [a]D20=+192, 15° (589 нм, с=0,242% вес./об., DMF, 20°C).
Стадия 1. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2,6-дихлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пира-золо[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина 45.
Промежуточное соединение 8 (1341 мг, 2,92 ммоль), 2,4,6-трихлорхиназолин 44 (CAS=20028-68-6, 768 мг, 2,83 ммоль) и DIPEA (CAS=7087-68-5, 1,24 мл, 7,183 ммоль) смешивали в 2-метоксиэтаноле (14,7 мл) и нагревали при 60°C в течение 2 ч. Охлажденную реакционную смесь медленно добавляли в ледяную воду и смесь нагревали до комнатной температуры. Образованный ярко-желтый осадок последовательно фильтровали, промывали водой и DIPE и высушивали в вакуумной печи. Продукт очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 5% MeOH и 95% DCM. После выпаривания фракций желтую пену выделяли в качестве промежуточного соединения 45 (781 мг,
49%).
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 8,12 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,85 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 7,74 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,07 (s, 1Н), 5,97-5,88 (m, 1Н), 5,35 (s, 1Н), 4,34-4,20 (m, 1Н), 4,02 (t, J=7,5 Гц, 4H), 3,77-3,60 (m, 4Н), 3,59-3,34 (m, 5Н), 2,42-2,22 (m, 3Н), 2,09-1,93 (m, 1Н), 1,79-1,59 (m, 4Н).
Масса/заряд=539,3 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез К-(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пипе-ридин-1 -ил)-6-хлорхиназолин-2-ил)метансульфонамида Р32.
Промежуточное соединение 45 (750 мг, 1,39 ммоль), метансульфонамид (264 мг, 2,781 ммоль), карбонат цезия (CAS=534-17-8, 1132 мг, 3,476 ммоль), 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (CAS=161265-03-8, 241 мг, 0,417 ммоль) и ацетат палладия(П) (CAS=3375-31-3, 94 мг, 0,417 ммоль) смешивали в диоксане (10 мл). Суспензию дегазировали с помощью N2 в течение 10 мин. Реакционную емкость герметизировали и затем нагревали при 110°C в течение 30 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат выпаривали до сухого состояния для очистки колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 10% (MeOH/NH3) и 90% DCM. После выпаривания интересующих фракций получали указанный в заголовке продукт Р32 в виде коричневого твердого вещества (507 мг, 59%).
Масса/заряд=598,2 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 12,06 (br. s., 1H), 8,13-7,91 (m, 1H), 7,76 (dd, J=2,2, 9,0 Гц, 1H), 7,41 (d, J=8,8 Гц, 1H), 6,38-5,80 (m, 2H), 5,37 (s, 1H), 4,56-4,30 (m, 1H), 4,03 (t, J=7,5 Гц, 4H), 3,79-3,64 (m, 4H), 3,60-3,35 (m, 5H), 3,11-2,87 (m, 3H), 2,44-2,25 (m, 3H), 2,09-1,89 (m, 1H), 1,82-1,60 (m, 4H).
Стадия 3. Синтез ^^-^-^-^-(азетидин-Ьил^-морфолинопиразоло^^^пиримидин^-ш^пипе-ридин-1-ил)-6-хлорхиназолин-2-ил)метансульфонамида Р33 и ^)-№(4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1 -ил)-6-хлорхиназолин-2-ил)метансульфонамида
Р34.
Соединение Р32 (400 мг, 0,669 ммоль) очищали с помощью SFC с получением указанного в заголовке соединения, чистого энантиомера Р33 в виде желтоватого твердого вещества (173 мг, 43%) и чистого энантиомера Р34 в виде желтоватого твердого вещества (187 мг, 46%).
Р33, SFC: чистота 100%, Rt=1,94 мин.
Масса/заряд=598,2 (M+H)+.
Р34, SFC: чистота 98,65%, 1,35% Rt=1,89 мин. и 98,65% R=2,7 4 мин.
Масса/заряд=598,2 (M+H)+.
Синтез 4-(5-(азетидин-1 -ил)-2-( 1-(5-хлорхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5 -a] пирими-дин-7-ил)морфолина Р35
К раствору промежуточного соединения 8 (300 мг, 0,63 ммоль) в 2-метоксиэтаноле (20 мл) добавляли 4,5-дихлорхиназолин 46 (CAS: 2148-55-2, 1,1 экв., 139 мг, 0,7 ммоль) и DIPEA (3 экв., 0,33 мл, 1,9 ммоль). Раствор нагревали до 80°C в течение 16 ч. Раствор концентрировали под вакуумом, экстрагировали с помощью DCM и промывали водой. Объединенные органические вещества собирали и высушивали с помощью MgSO4, отфильтровывали и концентрировали под вакуумом. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0% до 10% MeOH в DCM. После выпаривания получали соединение Р35 (190 мг, 57%).
LCMS масса/заряд=505 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, 420 K, DMSO-d6) 8 ppm 1,48-1,90 (m, 4H), 2,22-2,35 (m, 4H), 3,43-3,56 (m, 5H), 3,64-3,76 (m, 4H), 3,84 (d, J=13,89 Гц, 1H), 3,93-4,04 (m, 4H), 5,18 (s, 1H), 5,62 (s, 1H), 5,66 (br. s., 1H), 7,51 (dd, J=7,16, 1,61 Гц, 1H), 7,61-7,66 (m, 1H), 7,67-7,70 (m, 1H), 8,45 (s, 1 H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-N-^,№диметилсульфамоил)хиназолин-2-карбоксамида Р36
CDI, DBU
Стадия 1. Синтез этил-4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пипе-ридин-1 -ил)хиназолин-2-карбоксилата 48.
К раствору промежуточного соединения 8 (1,2 г, 3,4 ммоль) в 2-метоксиэтаноле (40 мл) добавляли этил-4-хлорхиназолин-2-карбоксилат 47 (0,97 г, 4,06 ммоль) и DIPEA (3 экв., 1,75 мл, 10 ммоль). Раствор перемешивали при 80°C в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры раствор концентрировали под вакуумом и очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0 до 10% MeOH в DCM, с получением промежуточного соединения 48 (998 мг, чистота 75%, выход 40%), которое использовали как таковое на следующей стадии.
LCMS масса/заряд=543 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)хиназолин-2-карбоновой кислоты 49.
К раствору промежуточного соединения 48 (998 мг, чистота 75%, 1,3 ммоль) в 25 мл смеси THF/вода (3/1) добавляли LiOH (3 экв., 93 мг, 3,9 ммоль). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Раствор затем доводили до pH 6 и смесь концентрировали под вакуумом с получением промежуточного соединения 49 (828 мг, чистота 76%, выход 94%), которое использовали как таковое на следующей стадии.
LCMS масса/заряд=515 (M+H)+.
Стадия 3. Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-№(К^-диметилсульфамоил)хиназолин-2-карбоксамид Р36.
К раствору промежуточного соединения 49 (300 мг, 0,37 ммоль) добавляли CDI (120 мг, 0,73 ммоль) в 3 мл раствора THF/DMF (1/1). Раствор нагревали до 50°C и перемешивали в течение 1 ч. К раствору добавляли ^^диметилсульфамид (136 мг, 1,1 ммоль) и DBU (0,165 мл, 1,1 ммоль) и перемешивали в течение дополнительного часа при 50°C. Раствор экстрагировали с помощью DCM и промывали водой. Объединенные органические вещества высушивали с помощью MgSO4 и концентрировали под вакуумом. Неочищенный материал дополнительно очищали колоночной хроматографией с элюировани-ем градиентом, начиная с 0% до 10% MeOH в DCM. После выпаривания неочищенный материал поглощали водой и твердое вещество отфильтровывали и высушивали в печи с получением соединения Р36 (53 мг, 22%) в виде белого твердого вещества.
LCMS масса/заряд=621 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, 360 K, DMSO-d6) 8 ppm 1,69-1,81 (m, 4H), 2,02-2,13 (m, 1H), 2,26-2,35 (m, 3H), 2,35-2,42 (m, 1H), 2,90 (s, 6H), 3,49-3,57 (m, 5H), 3,62-3,72 (m, 4H), 4,01 (t, J=7,48 Гц, 4H), 4,37 (d, J=13,42 Гц, 1H). 5,27 (s, 1H), 5,94 (s, 1H), 6,05 (br. s, 1H), 7,57-7,61 (m, 1H), 7,83-7,88 (m, 1H), 7,93 (dd, J=8,36, 1,10 Гц, 1H), 8,15 (d, J=8,58 Гц, 1H).
Синтез 1 -(2-( 1-(2,5-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метилпиразоло [1,5^]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ола Р37
Стадия 1. Синтез 4-(2-(5-хлор-6-метилпиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-2,5-диме-
тилхиназолина 50.
К раствору промежуточного соединения 19 (200 мг, 0,58 ммоль) в 2-метоксиэтаноле (40 мл) добавляли 4-хлор-2,5-диметилхиназолин 40 (1 экв., 114 мг, 0,58 ммоль, № CAS 14700 6-57-3) и DIPEA (3 экв., 0,3 мл, 1,7 ммоль). Раствор нагревали до 80°C в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры раствор концентрировали под вакуумом и очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0 до 10% MeOH в DCM. После выпаривания неочищенный материал растирали с диэтиловым эфиром с получением промежуточного соединения 50 (140 мг, чистота 90%, выход 53%). Твердое вещество использовали как таковое на следующей стадии.
LCMS масса/заряд=407 (M+H)+.
Стадия 2. Синтез 1-(2-(1-(2,5-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метилпиразоло[1,5-а]пи-римидин-5-ил)азетидин-3-ола Р37.
Промежуточное соединение 50 (140 мг, 0,31 ммоль) растворяли в 5 мл EtOH при комнатной температуре. Затем добавляли гидрохлорид азетидин-3-ола (68 мг, 0,62 ммоль) и DIPEA (0,16 мл, 0,92 ммоль). Полученный раствор нагревали с обратным холодильником в течение 16 ч. Смесь затем концентрировали под вакуумом и поглощали водой/EtOH (3/1), полученное твердое вещество отфильтровывали и высушивали в печи с получением соединения Р37 (65 мг, 48%).
LCMS масса/заряд=444 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, 420 K, DMSO-d6) 8 ppm 1,41-1,70 (m, 3H), 1,76-1,89 (m, 1H), 2,12 (d, J=0,81 Гц, 3H), 2,23-2,33 (m, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), 3,53-3,64 (m, 2H), 3,94 (dd, J=9,69, 4,04 Гц, 2H), 4,36 (t, J=8,10 Гц, 2H), 4,48-4,56 (m, 1H), 5,74 (br. s., 1H), 5,79 (br. s., 1H), 7,27 (d, J=7,27 Гц, 1H), 7,43-7,54 (m, 1H), 7,55-7,63 (m, 1H), 8,12 (s, 1H).
Соединение Р37 (400 мг, 0,669 ммоль) очищали с помощью SFC с получением указанного в заголовке соединения, чистого энантиомера Р38 (44 мг)
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,47-1,77 (m, 4H), 1,86-2,00 (m, 1H), 2,13 (d, J=0,66 Гц, 3H), 2,25-2,43 (m, 4H), 2,50 (s, 3H), 3,32-3,46 (m, 1H), 3,92 (dd, J=9,79, 4,73 Гц, 2H), 4,20 (d, J=12,76 Гц, 1H), 4,28-4,42 (m, 2H), 4,43-4,57 (m, 1H), 5,65 (d, J=6,16 Гц, 1H), 5,78 (br. s, 1H), 5,96 (s, 1H), 7,56 (dd, J=8,80, 1,76 Гц, 1H), 7,60 (d, J=8,36 Гц, 1H). 7,76 (s, 1H), 8,45 (s, 1H)
и чистого энантиомера Р39 (55 мг)
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,45-1,77 (m, 4H), 1,89-2,03 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,28-2,43 (m, 4H), 2,51 (br. s., 3H), 3,35-3,47 (m, 1H), 3,94 (dd, J=9,79, 4,73 Гц, 2H), 4,23 (d, J=12,76 Гц, 1H), 4,38 (t, J=8,80 Гц, 2H), 4,45-4,62 (m, 1H), 5,62 (br. s, 1H), 5,83 (br. s., 1H), 5,98 (s, 1H), 7,57 (dd, J=8,58, 1,32 Гц, 1H), 7,62 (d, J=8,58 Гц, 1H), 7,78 (s, 1H), 8,46 (s, 1H).
Синтез N-(4-(2-(5-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-6-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-ил)метансульфонамида P41
Стадия 1. Синтез 1-(6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ола 51.
К раствору промежуточного соединения 19 (4,1 г, 11,9 ммоль) в EtOH (50 мл) добавляли гидрохлорид азетидин-3-ола (1,04 г, 14,3 ммоль, 1,2 экв.) и DIPEA (10,2 мл, 60 ммоль, 5 экв.) и раствор нагревали с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до температуры окружающей среды раствор концентрировали под вакуумом. Неочищенный материал растворяли в DCM/MeOH (9/1) и соли отфильтровывали. Фильтрат концентрировали под вакуумом и очищали посредством колоночной хроматографии (DCM/NH3(MeOH 7н.): 9/1) с получением промежуточного соединения 51 (1,9 г, 56%).
LCMS масса/заряд=288 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,56-1,84 (m, 5H), 1,96-2,07 (m, 1H), 2,16 (d, J=0,88 Гц, 3H), 2,82-2,96 (m, 1H), 3,16-3,23 (m, 1H), 3,95 (dd, J=9,57, 4,95 Гц, 2H), 4,12 (dd, J=11,11, 2,97 Гц, 1H), 4,34-4,44 (m, 2H), 4,48-4,58 (m, 1H), 6,16 (s, 1H), 8,40 (s, 1H).
Стадия 2. Синтез 1-(2-(1-(2-хлор-5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ола Р40.
К раствору промежуточного соединения 51 (500 мг, 1,74 ммоль) в 2-метоксиэтаноле (30 мл) добав
ляли 2,4-дихлор-5-метилхиназолин 14 (1,2 экв., 808 мг, 2,08 ммоль) и DIPEA (3 экв., 0,9 мл, 5,2 ммоль). Раствор перемешивали при 50°C в течение 2 ч и смесь концентрировали под вакуумом и экстрагировали с помощью DCM и промывали водой. Объединенные органические вещества высушивали с помощью MgSO4 и концентрировали под вакуумом. Неочищенный материал дополнительно очищали с помощью HPLC с получением указанного в заголовке продукта Р40 (130 мг, 16%). LCMS масса/заряд=464 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,39-1,55 (m, 1H), 1,55-1,70 (m, 2H), 1,73-1,89 (m, 1H), 2,05-2,20 (m, 4H), 2,23-2,32 (m, 1H), 3,43-3,70 (m, 2H), 3,89-3,98 (m, 2H), 4,32-4,41 (m, 2H), 4,47-4,56 (m, 1H), 5,065,18 (m, 1H), 5,59-5,68 (m, 1H), 5,68-5,79 (m, 1H), 7,25-7,33 (m, 1H), 7,44-7,52 (m, 1H), 7,58-7,66 (m, 1H), 8,11-8,19 (m, 1H).
Стадия 3. Синтез N-(4-(2-(5-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-6-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-ил)метансульфонамида Р41.
К раствору соединения Р40 (130 мг, 0,28 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) добавляли метансульфонамид (2 экв., 53 мг, 0,56 ммоль), карбонат цезия (2,5 экв., 0,7 ммоль, 228 мг), 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен (0,3 экв., 48,6 мг, 0,084 ммоль) и Pd(OAc)2 (0,3 экв., 18,87 мг, 0,084 ммоль) в герметизированной пробирке. Смесь нагревали до 120°C в течение 5 мин в микроволновой печи. Раствор фильтровали через дикалит, промывали дихлорметаном и концентрировали in vacuo. Неочищенный материал дополнительно очищали с помощью HPLC с получением соединения Р41 (42 мг, 30%) в виде белого порошка.
LCMS масса/заряд=523 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, 420 K, DMSO-d6) 8 ppm 1,46 (m, J=9,46 Гц, 1H), 1,62 (m, 2H), 1,80 (m, 1H), 2,072,18 (m, 4H), 2,24-2,36 (m, 1H), 2,63 (s, 3H), 2,97 (s, 3H), 3,57 (m, 1H), 3,68-3,80 (m, 1H), 3,90-3,98 (m, 2H), 4,33-4,41 (m, 2H), 4,45-4,59 (m, 1H), 5,05 (br. s., 1H), 5,82 (br. s., 1H), 5,94 (br. s., 1H), 7,05 (d, J=7,04 Гц, 1H), 7,22 (d, J=8,14 Гц, 1H), 7,47 (t, J=7,05 Гц, 1H), 8,16 (s, 1H), 9,88-11,04 (m, 1H).
Синтез 1-(2-(1-(2,6-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)азетидин-3-ола P42
Стадия 1. Синтез 2,6-диметилхиназолин-4-ола 52-b.
2-Амино-5-метилбензойную кислоту 52-a (8 г, 53 ммоль) растворяли в уксусном ангидриде (80 мл) и нагревали при 130°C в течение 2 ч. Раствор затем концентрировали под вакуумом с получением твердого промежуточного соединения, которое затем растворяли в растворе EtOH (100 мл) и NH3.H2O (80 мл) и нагревали до 80°C. Через 48 ч раствор охлаждали и твердое вещество отфильтровывали и высушивали в печи с получением 2,6-диметилхиназолин-4-ола 52-b (6,3 г, 70%).
LCMS масса/заряд=175 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 2,32 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 7,46 (d, J=8,36 Гц, 1H), 7,56 (dd, J=8,14, 1,98 Гц, 1H), 7,76-7,92 (m, 1H), 11,91 (br. s, 1H).
Стадия 2. Синтез 4-хлор-2,6-диметилхиназолина 52.
К раствору 2,6-диметилхиназолин-4-ола 52-b (500 мг, 2,87 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли DIPEA (0,989 мл, 5,74 ммоль, 2 экв.) и POCl3 (0,4 мл, 4,3 ммоль, 1,5 экв.). Раствор нагревали до 80°C и перемешивали в течение 2 ч. Смесь концентрировали под вакуумом и разбавляли дихлорметаном, затем промывали насыщенным водным раствором NaHCO3. Объединенные органические вещества высушивали с помощью MgSO4, концентрировали под вакуумом и очищали колоночной хроматографией (гептан/EtOAc: 1/1) с получением промежуточного соединения 52 (300 мг, чистота 90%, 48%).
LCMS масса/заряд=193 (M+H)+.
Стадия 3. Синтез 1-(2-(1-(2,6-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил) азетидин-3-ола Р42.
Промежуточное соединение 51 (240 мг, 0,83 ммоль) добавляли к раствору 4-хлор-2,6
диметилхиназолина 52 (1,7 экв., 300 мг, 1,4 ммоль) и DIPEA (3 экв. 0,43 мл, 2,5 ммоль) в 2-метоксиэтаноле (5 мл). Раствор нагревали при 140°C и перемешивали в течение 16 ч. После охлаждения до температуры окружающей среды смесь экстрагировали с помощью DCM и промывали водой. Объединенные органические вещества собирали и высушивали с помощью MgSO4, отфильтровывали и концентрировали под вакуумом. Неочищенный материал дополнительно очищали с помощью HPLC с получением соединения Р42 (167 мг, 45%).
LCMS масса/заряд=444 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,56-1,75 (m, 4H), 1,88-2,02 (m, 2H), 2,14 (s, 3H), 2,34 (s, 1H), 2,39 (s, 3H), 3,94 (dd, J=9,46, 5,28 Гц, 2H), 4,20 (d, J=12,76 Гц, 1H), 4,37 (t, J=8,10 Гц, 2H), 4,51 (br. s, 1H), 5,54-5,72 (m, 1H), 5,81 (br. s, 1H), 5,96 (s, 1H), 7,53-7,63 (m, 2H), 7,77 (s, 1H), 8,45 (s, 1H).
Синтез (S)-1-(2-(1-(2,6-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метил-пиразоло [1 ^^пири-мидин-5-ил)азетидин-3-ола Р43 и ^)-1-(2-(1-(2,6-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)-6-метилпиразоло [ 1,5 -а] пиримидин-5 -ил)азетидин-3-ол а Р44
Дополнительную очистку проводили посредством препаративной SFC (неподвижная фаза: chiralpak Diacel AS 20x250 мм, подвижная фаза: СО2, EtOH с 0,2% iPrNH2) с получением обоих соответствующих
энантиомеров:
Р43: LCMS масса/заряд=444 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,68 (s, 4H), 1,89-2,03 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 2,28-2,43 (m, 4H), 2,51 (br. s., 3H), 3,35-3,47 (m, 1H), 3,94 (dd, J=9,79, 4,73 Гц, 2H), 4,23 (d, J=12,76 Гц, 1H), 4,38 (t, J=8,80 Гц, 2H), 4,45-4,62 (m, 1H), 5,62 (br. s, 1H), 5,83 (br. s., 1H), 5,98 (s, 1H), 7,57 (dd, J=8,58, 1,32 Гц, 1H), 7,62 (d, J=8,58 Гц, 1H), 7,78 (s, 1H), 8,46 (s, 1H).
P44: LCMS масса/заряд=444 (M +H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,47-1,77 (m, 4H), 1,86-2,00 (m, 1H), 2,13 (d, J=0, 66 Гц, 3H), 2,25-2,43 (m, 4H), 2,50 (s, 3H), 3,32-3,46 (m, 1H), 3,92 (dd, J=9,79, 4,73 Гц, 2H), 4,20 (d, J=12,76 Гц, 1H), 4,28-4,42 (m, 2H), 4,43-4,57 (m, 1H), 5,65 (d, J=6,16 Гц, 1H), 5,78 (br. s, 1H), 5,96 (s, 1H), 7,56 (dd, J=8,80, 1,76 Гц, 1H), 7,60 (d, J=8,36 Гц, 1H), 7,76 (s, 1H), 8,45 (s, 1H).
P43: [a]D20=+295,23° (589 нм, с=0,377% вес./об., DMF, 20°C).
P44: [a]D20=-269,05° (589 нм, с=0,378% вес./об., DMF, 20°C).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-ола Р45
Раствор промежуточного соединения 15 (100 мг, 0,193 ммоль) в уксусной кислоте (2 мл) нагревали до 70°C в течение 3 ч. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры и добавляли воду. Полученную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали водным раствором бикарбоната натрия. Органические слои высушивали над MgSO4 и растворитель выпаривали с получением продукта Р45 (80 мг, 80%).
Масса/заряд=501,6 (M+H)+. Т.пл .=223,59°C.
1H ЯМР в 100°C (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 10,31 (br. s., 1H), 7,35 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7,02 (d, J=8,1 Гц, 1H), 6,90 (d, J=7,5 Гц, 1H), 6,24-5,34 (m, 2H), 5,24 (s, 1H), 4,10-3,43 (m, 14H), 2,65 (s, 3H), 2,37-2,06 (m, 4H), 1,89-1,39 (m, 4H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-карбоксамида Р46
К раствору промежуточного соединения 43 (100 мг, 0,17 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли 10 мл NaOH (1M в H2O) в герметизированной пробирке. Раствор нагревали до 130°C в течение 10 мин в микроволновой печи. Раствор затем доводили до pH 6-7 с помощью 1 молярного водного раствора хлористоводородной кислоты. Раствор затем экстрагировали с помощью DCM и объединенные органические вещества промывали насыщенным раствором NaHCO3 и солевым раствором. Органический слой затем высушивали с помощью MgSO4 и концентрировали под вакуумом. Полученное вещество очищали с помощью HPLC с получением соединения Р46 (68 мг, 73%).
LCMS масса/заряд=528 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,14-1,87 (m, 4H), 1,98-2,41 (m, 4H), 2,84 (s, 3H), 3,19-3,27 (m, 2H), 3,40-3,83 (m, 7H), 3,85-4,28 (m, 5H), 5,12-5,44 (m, 2H), 5,87 (s, 1H), 7,38-7,50 (m, 1H), 7,55-7,81 (m, 3H), 7,89-8,03 (m, 1H).
Синтез 4-(5-циклопропил-6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина P47
Стадия 1. Синтез 5-циклопропил-6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ола 54.
К раствору промежуточного соединения 4 (16 г, 60 ммоль) в уксусной кислоте (100 мл) добавляли метил-3-циклопропил-2-метил-3-оксопропаноат 53 (30 г, 180 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 100°C в течение ночи.
Полученную смесь концентрировали под вакуумом и остаток (46 г, 98%) применяли как таковой на следующей стадии.
Стадия 2. Синтез 7-хлор-5-циклопропил-6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидина 55.
Смесь промежуточного соединения 54 (45 г, 79 ммоль) и фосфорилтрихлорида (220 г) перемешивали при 110°C в течение 1 ч. Растворитель удаляли и остаток растворяли в ледяном водном растворе и повышали основность путем добавления карбоната натрия (19,8 г, 238 ммоль). Этот раствор использовали как таковой на следующей стадии.
Стадия 3. Синтез 4-(5-циклопропил-6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина 56.
В раствор промежуточного соединения 55 добавляли ацетонитрил (250 мл) и морфолин (20,7 г, 238 ммоль). Полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры и растворитель удаляли под вакуумом. Полученный водный раствор экстрагировали дихлорметаном и органические слои высушивали над Na2SO4 и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией с помощью дихлорметана и метанола в качестве элюента. Выделяли промежуточное соединение 56 (2 г, 7%).
Стадия 4. Синтез 4-(5-циклопропил-6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пира-золо[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина Р47.
К раствору промежуточного соединения 56 (200 мг, 0,56 ммоль) в 5 мл 2-метоксиэтаноле добавляли 4-хлор-5-метилхиназолин 26 (1,2 экв., 126 мг, 0,67 ммоль) и DIPEA (3 экв., 0,289 мл, 1,68 ммоль). Раствор перемешивали при 80°C в течение 48 ч. После охлаждения до комнатной температуры раствор концентрировали in vacuo и очищали с помощью HPLC с получением указанного в заголовке продукта Р47 (110
мг, 41%).
LCMS масса/заряд=484 (M+H)+.
1Н ЯМР (400 МГц, 420 K, DMSO-de) 8 ppm 0,90-1,11 (m, 4H), 1,50-1,61 (m, 1H), 1,61-1,76 (m, 2H), 1,80-1,92 (m, 1H), 2,07-2,18 (m, 1H), 2,20-2,32 (m, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,84 (s, 3H), 3,28-3,40 (m, 4H), 3,473,65 (m, 2H), 3,66-3,78 (m, 4H), 5,56-5,67 (m, 1H), 6,00 (br. s., 1H), 7,30 (d, J=6,46 Гц, 1H), 7,55-7,66 (m,
2H), 8,46 (s, 1H).
Синтез (3S)-1 -(6-метил-2-( 1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1 ^^пиримидин^-ил)пирролидин-3-амина Р48
I 57
Вое
100°С ^-NH ^^NT^CI EtN3, MeOH
Стадия 1. Синтез трет-бутил-2-(5-гидрокси-6-метилпиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-карбоксилата 58.
К раствору промежуточного соединения 4 (14,43 г, 54,18 ммоль) в DMF (270 мл) добавляли (Е)-этил-3-этокси-2-метилакрилат 57 (9,00 г, 56,9 ммоль) и Cs2CO3 (26,48 г, 81,27 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 130°C в течение 12 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток последовательно растворяли в этилацетате (300 мл), промывали насыщенным водным раствором NH4Cl, солевым раствором и высушивали над Na2SO4. После фильтрации фильтрат концентрировали под вакуумом до 100 мл. Через 16 ч осадок отфильтровывали. Осадок на фильтре промывали этилацетатом (2x30 мл) и высушивали (под вакуумом, 45°C, 1 ч) с получением промежуточного соединения 58 (11,80 г, 65,52%).
Стадия 2. Синтез 5-хлор-6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидина 59.
Смесь промежуточного соединения 58 (11,80 г, 35,50 ммоль) в фосфорилтрихлориде (178 мл) перемешивали при 80°C в течение 1 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток растворяли в ацето-нитриле (200 мл). Смесь нейтрализовали аммиаком (7М в метаноле) до pH 7-8. Осадок отфильтровывали и фильтрат концентрировали. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (элю-ент: дихлорметан/1% NH3 в метаноле 10/1). Собранные фракции концентрировали с получением промежуточного соединения 59 (3,715 г, 40,44%).
Стадия 3. Синтез трет-бутил-((3S)-1-(6-метил-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)пирролидин-3-ил)карбамата 61.
Раствор промежуточного соединения 59 (3,58 г, 10,0 ммоль, чистота 70%), ^)-трет-бутилпирролидин-3-илкарбамата 60 (2,33 г, 12,5 ммоль) и Et3N (3,04 г, 30,0 ммоль) в MeOH (50 мл) перемешивали в течение ночи при 70°C. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в CH2Cl2 и промывали солевым раствором. Отделенный органический слой высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: CH2Cl2/MeOH 10:1). После концентрирования неочищенный продукт растирали с CH3CN. Твердое вещество фильтровали и промывали с помощью CH3CN с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 62 (768 мг, 12% выход).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,45 (s, 9H), 1,62 (m, 1H), 1,90 (m, 3H), 2,16 (m, 3H), 2,26 (s, 3H), 3,12 (m, 1H), 3,47 (m, 1H), 3,49 (s, 3H), 3,65 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,84 (m, 1H), 4,26 (m, 1H), 4,37 (m, 1H), 4,90 (d, 1H, J=6,8 Гц) 6,39 (s, 1H), 7,99 (d, 1H, J=4,8 Гц).
Стадия 4. Синтез трет-бутил-((3S)-1-(6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил^иразоло^^^пиримидин-Зил) пирролидин-3-ил) карбамата 62.
Промежуточное соединение 61 (300 мг, 0,694 ммоль), 4-хлор-5-метилхиназолин 26 (170 мг, 0,902 ммоль) и основание Хунига (395 мкл, 2,291 ммоль) смешивали в 2-метоксиэтаноле (4,7 мл) и нагревали при 80°C в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь медленно добавляли в ледяной водный раствор. Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученный осадок отфильтровывали, промывали водой и затем высушивали в вакуумной печи в течение 16 ч. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 10% MeOH и 90% DCM. После выпаривания чистых фракций получали неочищенный материал указанного в заголовке промежуточного соединения 62 (238 мг).
Масса/заряд=543,4 (M+H)+.
Стадия 5. Синтез (3S)-1-(6-метил-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)пирролидин-3-амина Р48.
Промежуточное соединение 62 (238 мг, 0,386 ммоль) растворяли в DCM (2,5 мл) и добавляли триф
торуксусную кислоту (295 мкл, 3,859 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь по каплям добавляли к охлажденному насыщенному раствору NaHCO3. Продукт экстрагировали с помощью DCM (3 раза). Органические слои высушивали над Na2SO4, фильтровали и выпаривали до сухого состояния. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 10% (MeOH/NH3) и 90% DCM. После выпаривания чистых фракций выделяли желтую пену. Пену растирали в диэтиловом эфире с получением указанного в заголовке продукта Р48 в виде белого твердого вещества (152 мг, 85%).
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 8,46 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,68-7,51 (m, 2H), 7,29 (d, J=6,4 Гц, 1H), 5,79-5,42 (m, 2H), 3,85-3,19 (m, 7H), 2,80-2,75 (m, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,25-1,28 (m, 8H).
Масса/заряд=443,3 (M +H)+.
Т.пл.=124,92°С
Синтез (3 S)-1 -(2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)пир-ролидин-3 -амина P49
Стадия 1. Синтез трет-бутил-2-(5-гидроксипиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-карбоксилата 64.
К раствору промежуточного соединения 4 (5,00 г, 18,8 ммоль) и 1,3-диметилпиримидин-2,4(Щ,3И)-диона 63 (2,90 г, 20,7 ммоль) в этаноле (50 мл) добавляли этоксид натрия (22 мл, 66 ммоль). Полученный раствор нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель выпаривали под вакуумом. К остатку добавляли воду и pH доводили до 4-5 с помощью HCl (1 н.). Смесь экстрагировали этилацета-том, органический слой промывали солевым раствором, высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного промежуточного соединения 64 (5 г, 75%).
Стадия 2. Синтез 5-хлор-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидина 65.
Смесь промежуточного соединения 64 (5 г, 15,7 ммоль) в POCl3 (50 мл) перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток промывали трет-бутилметиловым эфиром с получением промежуточного соединения 65 (4,5 г, 19 ммоль).
Стадия 3. Синтез трет-бутил-((3S)-1-(2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил)пирролидин-3-ил)карбамата 66.
Смесь промежуточного соединения 65 (4,5 г, 19 ммоль), ^)-трет-бутилпирролидин-3-илкарбамата 60 (7,0 г, 38 ммоль) и триэтиламина (7,7 г, 76 ммоль) в метаноле (50 мл) нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в CH3CN и перемешивали с K2CO3 (5,0 г, 38 ммоль). Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток обрабатывали с помощью Н2О и CH2Cl2. Отделенный органический слой высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением промежуточного соединения 66 (1,65 г, 22%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,45 (s, 9H), 1,51-1,72 (m, 1H), 1,83-1,93 (m, 2H), 1,94-2,07 (m, 3H), 2,20-2,39 (m, 1H), 2,73-2,93 (m, 1H), 3,11-3,28 (m, 1H), 3,35-3,49 (m, 1H), 3,53-3,74 (m, 1H), 3,75-3,95 (m, 1H), 4,24-4,45 (m, 1H), 4,59-4,90 (m, 1H), 5,96-6,19 (m, 1H), 8,12-8,30 (m, 1H).
Стадия 4. Синтез трет-бутил-((3S)-1-(2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a] пиримидин-5-ил)пирролидин-3-ил)карбамата 67.
Промежуточное соединение 66 (250 мг, 0,624 ммоль), 4-хлор- 6-метилхиназолина 12 (145 мг, 0,811 ммоль) и DIPEA (355 мкл, 2,058 ммоль) смешивали в 2-метоксиэтаноле (4,2 мл) и нагревали при 80°C в течение 16 ч и при 90°C в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь медленно добавляли в ледяную воду. Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Коричневый осадок отфильтровывали, промывали водой и затем высушивали в вакуумной печи в течение 16 ч. Неочищенный материал указанного в заголовке промежуточного соединения 67 (250 мг) использовали как таковой на следующей стадии.
Масса/заряд=529,4 (M+H)+.
Стадия 5. Синтез (3S)-1-(2-(1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин
5-ил)пирролидин-3-амина Р49.
Промежуточное соединение 67 (250 мг, 0,473 ммоль) растворяли в DCM (3,0 мл) и добавляли TFA (362 мкл, 4,729 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором Na2CO3 и продукт экстрагировали 3 раза с помощью DCM. Органические слои выпаривали и продукт очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 10% (MeOH/NH3) и 90% DCM. После выпаривания чистых фракций получали необходимый продукт Р49 в виде желтой пены (122 мг, 56%).
Масса/заряд=429,3 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 8,63-8,53 (m, 2H), 7,82 (br. s, 1H), 7,71 (d, J=8,6 Гц, 1H), 7,63 (dd, J=1,5, 8,6 Гц, 1H), 6,30 (d, J=7,7 Гц, 1H), 5,91 (s, 1H), 5,84-5,77 (m, 1H), 4,29-4,17 (m, 1H), 3,72-2,99 (m, 6H), 2,47-1,58 (m, 13H).
1H ЯМР в 100°C (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 8,52 (s, 1H), 8,42 (dd, J=0,7, 7,7 Гц, 1H), 7,86-7,81 (m, 1H), 7,68 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,58 (dd, J=1,8, 8,6 Гц, 1H), 6,24 (d, J=7,7 Гц, 1H), 5,86 (s, 1H), 5,84-5,79 (m, 1H), 4,26-4,18 (m, 1H), 3,66-3,43 (m, 5H), 3,19-3,12 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,40-2,30 (m, 1H), 2,14-1,92 (m, 3H), 1,86-1,59 (m, 6H).
Синтез (S)-1-(2-((R)-1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-5-ил) пирролидин-3-амина P50
Продукт Р49 (100 мг, 0,233 ммоль) очищали с помощью SFC с получением указанного в заголовке соединения, чистого энантиомера в виде грязно-белого твердого вещества Р50 (51 мг, 51%). SFC: чистота 100% при Rt=2,64 мин.
Масса/заряд=429,2 (M+H)+.
Р50: [a]D20=-268,64° (589 нм, с=0,354% вес./об., DMF, 20°C).
Синтез (S)-1-(2-((S)-1-(6-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-5-ил) пирролидин-3-амина Р51
NH,
Продукт Р49 (100 мг, 0,233 ммоль) очищали с помощью SFC с получением указанного в заголовке соединения, чистого энантиомера в виде грязно-белого твердого вещества Р51 (17 мг, 17%). SFC: чистота 100% при Rt=3,68 мин.
масса/заряд=429,3 (M+H)+.
Синтез трет-бутил-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)пиперазин- 1-карбоксилата Р52
N-N
о=:>
Стадия 1. Синтез трет-бутил-4-(5-хлор-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)пиперазин-1-карбоксилата 69
Смесь промежуточного соединения 6 (40,0 г, 125 ммоль), трет-бутилпиперазин-1-карбоксилата 68 (25,7 г, 138 ммоль) и NaHCO3 (26,30 г, 313,5 ммоль) в CH3CN (300 мл) и H2O (300 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель концентрировали под вакуумом. Концентрат обрабатывали с помощью CH2Cl2 (500 мл). Отделенный органический слой промывали солевым раствором (200 мл), фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 69 (40 г, выход: 68%).
Стадия 2. Синтез трет-бутил-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)пиперазин-1-карбоксилата 70.
Смесь промежуточного соединения 69 (40 г, 95 ммоль), гидрохлорида азетидина (47,7 г, 510 ммоль) и TEA (155,0 г, 1530 ммоль) в этаноле (500 мл) нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток обрабатывали с помощью CH2Cl2 и Н2О. Отделенный органический слой концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: дихлорметан/метанол (содержал 1% TEA)=15/1). Фракции, содержащие продукт, собирали и растворитель выпаривали с получением указанного в заголовке промежуточного соединения 70 (17,96 г, выход 42,71%).
Масса/заряд=515 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,49 (s, 9H), 1,52-1,68 (m, 4H), 1,91-2,05 (m, 4H), 2,37-2,41 (m, 2H), 2,78-2,83 (m, 1H), 3,16-3,18 (m, 1H), 3,51-3,53 (m, 4H), 3,67-3,68 (m, 4H), 3,79-3,82 (m, 1H), 4,09-4,4.13 (m, 4H), 5,10 (s, 1 H) 6,04 (s, 1H).
Стадия 3. Синтез трет-бутил-4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил^иразоло^^^пиримидин^-ил^иперазин-Ькарбоксилата Р52.
Смесь промежуточного соединения 70 (3 г, 5,83 ммоль), промежуточного соединения 26 (1,56 г, 8,75 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (100 мл), затем добавляли диизопропилэтиламин (2 мл, 11,66 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение трех дней. Обеспечивали охлаждение смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока весь лед не расплавится, затем полученное твердое вещество отфильтровывали. Твердое вещество последовательно промывали водой, растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией с помощью дихлорметана и метанола с получением соединения Р52 (3,3 г, 87%) в виде белого-светло-желтого твердого вещества.
Масса/заряд=584 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,39-1,49 (m, 9H), 1,53-1,91 (m, 4H), 2,03-2,36 (m, 4H), 2,87 (s, 3H), 3,29-3,51 (m, 8H), 3,53-3,67 (m, 4H), 3,90-4,04 (m, 2H), 5,40-5,51 (m, 1H), 5,64 (s, 1H), 6,25 (br. s., 1H), 7,27-7,42 (m, 1H), 7,52-7,70 (m, 2H), 8,47 (s, 1H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-(пиперазин-l-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолина Р53
Соединение Р52 (3 г, 5,139 ммоль) растворяли в DCM (150 мл) и добавляли TFA (4 мл, 51 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 дней. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором Na2CO3 и продукт экстрагировали 3 раза с помощью DCM. Органические слои выпаривали и продукт очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная со 100% DCM до 10% (MeOH/NH3) и 90% DCM. После выпаривания интересующих фракций получали необходимый продукт Р53 в виде желтой пены (2,3 г, 92%).
Масса/заряд=484 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,57 (br. s., 1H), 1,63-1,76 (m, 2H), 1,80-1,95 (m, 1H), 2,15-2,27 (m, 2H), 2,32 (quin, J=7,4 Гц, 2H), 2,90-3,08 (m, 5H), 3,42-3,67 (m, 7H), 3,77-3,96 (m, 1H), 4,02 (t, J=7,4 Гц, 4H), 5,20 (s, 1H), 5,52 (br. s., 1H), 5,63 (s, 1H), 7,28-7,39 (m, 1H), 7,57-7,68 (m, 2H), 8,49 (s, 1H).
Синтез 4-(5 -(азетидин-1 -ил)-2-(1 -(5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a] пирими-дин-7-ил)-№изопропилпиперазин-1 -карбоксамида Р54
DIPEA
Соединение Р53 (550 мг, 1,058 ммоль) суспендировали в диоксане и добавляли основание Хунига. Полученную смесь перемешивали в течение 10 мин. Затем добавляли 2-изоцианатопропан (125 мкл, 1,269 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. К раствору добавляли избыток MeOH и смесь перемешивали в течение ночи. Растворитель выпаривали. Остаток растворяли в дихлорметане (50 мл) и полученный раствор промывали водой три раза (20 мл). Водные слои экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои высушивали над MgSO4 и фильтровали. Растворитель удаляли и остаток растирали в диэтиловом эфире и перемешивали в течение ночи в данном растворителе. Бледно-белый порошок фильтровали и высушивали в печи при 50°C с получением (85 мг, 14%) продукта Р54.
Масса/заряд=569 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) § ppm 1,11 (d, J=6,4 Гц, 6H), 1,52 (br. s., 1H), 1,66 (d, J=9,9 Гц, 2H), 1,84 (br. s., 1H), 2,21 (br. s., 2H), 2,28 (dt, J=14,5,7,2 Гц, 2H), 2,85 (br. s, 3H), 3,30-3,62 (m, 10H), 3,73-3,86 (m, 1H), 3,98 (t, J=7,3 Гц, 4H), 5,19 (s, 1H), 5,42-5,81 (m, 3H), 7,30 (d, J=5,7 Гц, 1H), 7,50-7,70 (m, 2H), 8,46 (s, 1H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-(4-(метилсульфонил)пиперазин-1-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолина P55
Соединение Р53 (500 мг, 1,03 ммоль) растворяли в дихлорметане (25 мл) и добавляли диизопропи-лэтиламин (0,445 мл, 2,58 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, затем добавляли метансульфонилхлорид (0,2 мл, 1,55 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученную смесь выливали в воду, экстрагировали дихлорметаном, высушивали над MgSO4 и концентрировали. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией с помощью дихлорметана и метанола в качестве элюента с получением соединения Р55 с чистотой 71%. Его дополнительно очищали с помощью HPLC с получением (28 мг, 5%) соединения Р55 в виде белого твердого вещества.
Масса/заряд=562 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) § ppm 1,58 (br. s., 1H), 1,65-1,77 (m, 2H), 1,78-1,94 (m, 1H), 2,20-2,27
(m, 2H), 2,27-2,38 (m, 2H), 2,87 (s, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,22-3,35 (m, 4H), 3,44-3,68 (m, 6H), 4,02 (t, J=7,4 Гц,
4H), 5,26 (s, 1H), 5,49 (br. s., 1H), 5,67 (br. s., 1H), 7,30-7,36 (m, 1H), 7,58-7,67 (m, 2H), 8,49 (s, 1H).
Синтез 7-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-2-метилоксазоло[5,4-с1]пиримидина P56
71-Ь
Стадия 1. Синтез 2-метилоксазоло[5,4-а]пиримидин-7-ола 71-b.
Раствор 5-аминопиримидин-4,6-диола 71-а (5 г, 39 ммоль) в уксусном ангидриде (80 мл) нагревали при 120°C в течение 16 ч. Раствор затем охлаждали и твердое вещество отфильтровывали и растирали с Et2O. После фильтрации твердое вещество высушивали в печи с получением промежуточного соединения 71-b (4 г, 68%).
Масса/заряд=152 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 2,54 (s, 3H), 8,18 (s, 1H), 12,84 (br. s., 1H). Стадия 2. Синтез 7-хлор-2-метилоксазоло[5,4^]пиримидина 71.
Промежуточное соединение 71-b (100 мг, 0,66 ммоль) растворяли в ацетонитриле (20 мл) в инертной атмосфере. По каплям добавляли DIPEA (0,28 мл, 2,5 экв.) и POCl3 (0,15 мл, 2,5 экв.) и смесь нагревали до 70°C. Через 3 ч раствор концентрировали in vacuo, экстрагировали этилацетатом и промывали насыщенным раствором NaHCO3. Объединенные органические слои высушивали над MgSO4, отфильтровывали и использовали как таковые на следующей стадии.
LCMS масса/заряд=170 (M+H)+.
Синтез 7-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-2-метилоксазоло[5,4^]пиримидина Р56.
К раствору промежуточного соединения 71 (20 мг, 0,12 ммоль) в iPrOH (2 мл) добавляли триэтила-мин (0,05 мл, 0,35 ммоль, 3 экв.) и промежуточное соединение 8 (40 мг, 0,12 ммоль, 1 экв.). Раствор подвергали воздействию микроволнового облучения в течение 3 ч при 120°C. Полученный раствор концентрировали in vacuo и очищали препаративной HPLC с получением указанного в заголовке соединения Р56 (21 мг, 37%) в виде белого твердого вещества.
Масса/заряд=476 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,49-1,79 (m, 4H), 1,84-2,02 (m, 1H), 2,20-2,34 (m, 2H), 2,40 (br. s., 1H), 2,53 (s, 3H), 3,15-3,27 (m, 1H), 3,36-3,54 (m, 4H), 3,55-3,69 (m, 4H), 3,99 (t, J=7,70 Гц, 4H), 4,99 (d, J=13,32 Гц, 1H), 5,22 (s, 1H), 5,73 (s, 1H), 6,53 (d, J=5,65 Гц, 1H), 8,24 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-метил-2-(метилтио)хиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [ 1,5 -а]пиримидин-7-ил)морфолина P5 7
Промежуточное соединение 8 (1000 мг, 2,41 ммоль), 4-хлор-6-метил-2-(метилтио)хиназолин 72 (649,2 мг, 2,89 ммоль) и DIPEA (0,83 мл, 4,8 ммоль) смешивали в 2-метоксиэтаноле (30 мл) и нагревали при 50°C в течение 16 ч. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Твердое вещество, которое образовывалось, отфильтровывали. Твердое вещество растворяли в дихлорметане и полученный раствор последовательно высушивали над MgSO4 и концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией с получением соединения Р57
(1,2 г, чистота 78%).
Масса/заряд=531 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,69 (br. s., 4H), 2,04 (dd, J=13,1, 5,2 Гц, 1H), 2,24-2,38 (m, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 3,37-3,41 (m, 1H), 3,49 (t, J=4,5 Гц, 4H), 3,62-3,76 (m, 4H), 4,00 (t, J=7,5 Гц, 4H), 4,13 (d, J=13,2 Гц, 1H), 5,30 (s, 1H), 5,82 (d, J=2,2 Гц, 1H), 5,93 (s, 1H), 7,76 (s, 1H).
Синтез 4-хлор-5-этилхиназолина 73
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-этилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пирими-дин-7-ил)морфолина P58
Стадия 1. Синтез 5-этилхиназолин-4-ола 73-b.
Смесь 2-амино-6-этилбензойной кислоты 73-a (18,0 г, 109 ммоль) в формамиде (200 мл) перемешивали при 130°C в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Осадок отфильтровывали и промывали водой. Осадок на фильтре высушивали под вакуумом при 45°C в течение 1 ч. Выделяли полученное твердое промежуточное соединение 73-b (8,5 г, чистота: 90%, выход: 40,3%).
Стадия 2. Синтез 4-хлор-5-этилхиназолина 73.
К смеси 5-этилхиназолин-4-ола 73-b (7,0 г, 40 ммоль) в оксихлориде фосфора (100 мл) при 0°C добавляли триэтиламин (19,51 мл, 140,0 ммоль). Полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток растворяли в толуоле (100 мл) и смесь по каплям добавляли в лед (100 г). Органический слой промывали последовательно водой (2x100 мл), 10% раствором бикарбоната натрия (2x100 мл), водой (2x100 мл) и солевым раствором (1x100 мл). Органический слой высушивали (Na2SO4), фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (элюент: петролейный эфир/этилацетат 10/1 с получением промежуточного соединения 73 (3,313 г, чистота: 96%, выход: 41,37%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCb) 8 ppm 1,39 (t, J=7,46 Гц, 3H), 3,48 (q, J=7,34 Гц, 2H), 7,56 (d, J=7,34 Гц, 1H), 7,84 (t, J=7,83 Гц, 1H), 7,95 (d, J=8,31 Гц, 1H), 8,96 (s, 1H).
Стадия 3. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-этилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина Р58.
Смесь HCl-соли промежуточного соединения 8 (500 мг, 1,2 ммоль) и промежуточного соединения 73 (348 мг, 1,5 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (15 мл) и добавляли триэтиламин (0,415 мл, 2,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 16 ч. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока не расплавится лед, затем отфильтровывали и твердое вещество промывали водой. Твердое вещество растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали. Твердое вещество очищали колоночной хроматографией с помощью дихлорметана и метанола с получением соединения Р58 в виде белого порошка (400 мг, 63%).
Масса/заряд=499 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,05-1,23 (m, 3H), 1,42-1,57 (m, 1H), 1,66 (d, J=8,1 Гц, 2H), 1,731,91 (m, 1H), 2,06-2,35 (m, 4H), 3,10-3,41 (m, 3H), 3,40-3,55 (m, 5H), 3,58-3,78 (m, 5H), 3,89-4,06 (m, 4H), 5,18 (s, 1H), 5,35-5,66 (m, 2H), 7,37 (d, J=7,0 Гц, 1H), 7,50-7,68 (m, 2H), 8,43 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5,7-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пи-римидин-7-ил)морфолина P59
Стадия 1. Синтез (Е)-N-(3,5-диметилфенил)-2-(гидроксиимино)ацетамида 74-b.
Сульфат натрия (390,7 г, 2,750 моль) добавляли к раствору гидрата хлораля (76,5 г, 0,520 моль) в воде (1500 мл) при комнатной температуре. Затем добавляли суспензию гидрохлорида гидроксиламина (91,8 г, 1,32 моль), 3,5-диметиланилина 74-a (50 г, 0,41 моль) и концентрированной хлористо-водородной
кислоты (36,5%, 50 мл). Смесь нагревали при 45°C в течение 1,5 ч, затем при 75°C в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Осажденное коричневое твердое вещество фильтровали и промывали холодной водой и гексаном. Неочищенное соединение высушивали под вакуумом с получением промежуточного соединения 74-b (70 г, выход: 83,78%). Стадия 2. Синтез 4,6-диметилиндолин-2,3-диона 74-с.
Промежуточное соединение 74-b (15,00 г, 78,04 ммоль) растворяли в концентрированной серной кислоте (75 мл). Смесь перемешивали при 80°C в течение 30 мин. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду. Промежуточное соединение 75-с осаждали, фильтровали и промывали водой (8,50 г, 49,74%).
Стадия 3. Синтез 2-амино-4,6-диметилбензойной кислоты 74-d.
К смеси промежуточного соединения 74-c (35,00 г, 199,8 ммоль) в растворе NaOH (1225 мл, 0,33 г/мл) при 70°C за 5 мин добавляли Н2О2 (123,7 г, 1200 ммоль). Смесь нагревали в течение дополнительных 15 мин, затем охлаждали до 15°C. К смеси добавляли лед. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (300 мл x2). pH раствора доводили до 8 добавлением концентрированной HCl при 0°C и подкисляли до pH ~6 уксусной кислотой. Смесь экстрагировали этилацетатом (300 мл x2). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором, высушивали над MgSO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением промежуточного соединения 74-d (17 г, выход: 41,20%).
Стадия 4. Синтез 5,7-диметилхиназолин-4-ола 74-е.
Смесь промежуточного соединения 74-d (15,0 г, 90,8 ммоль) и ацетата формамидина (94,5 г, 908 ммоль) перемешивали в течение 5 ч при 150°C. К смеси добавляли Н2О и смесь перемешивали 10 мин при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали и промывали водой. Осадок на фильтре высушивали под вакуумом с получением промежуточного соединения 74-c (17,5 г, выход: 39,83%).
Стадия 5. Синтез 4-хлор-5,7-диметилхиназолина 74.
Триэтиламин (30,50 мл, 301,4 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения 74-c (17,50 г, 100,5 ммоль) в POCl3 (300 г, 1,96 моль) при 0°C. Полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч, затем выливали в ледяную воду. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали раствором NaHCO3 (1%) и солевым раствором, высушивали над MgSO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикаге-ле (элюент: гексаны/этилацетат от 0/1 до 1:1). Необходимые фракции собирали и концентрировали с получением промежуточного соединения 74 (4,806 г, 23,69%).
1Н ЯМР (400 МГц, CDCy 8 ppm 2,53 (s, 3H), 3,00(s, 3H), 7,34 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 8,90 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5,7-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-7-ил)морфолина Р59.
Смесь TFA-соли промежуточного соединения 8 (300 мг, 0,66 ммоль) и промежуточного соединения 74 (177 мг, 0,92 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (15 мл) и добавляли триэтиламин (0,34 мл, 1,97 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 16 ч. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока не расплавится лед, затем отфильтровывали и твердое вещество промывали водой. Твердое вещество растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали. Твердое вещество очищали колоночной хроматографией с помощью дихлорметана и метанола с получением Р59 в виде белого порошка (212 мг, 64%).
Масса/заряд=499 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,52 (br. s., 1H), 1,65 (d, J=5,l Гц, 2H), 1,74-1,90 (m, 1H), 2,17 (br. s., 2H), 2,28 (quin, J=7,3 Гц, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,80 (s, 3H), 3,35-3,58 (m, 6H), 3,60-3,77 (m, 4H), 3,98 (t, J=7,3 Гц, 4H), 5,17 (s, 1H), 5,41 (br. s., 1H), 5,53-5,73 (m, 1H), 7,14 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 8,42 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-фторхиназолин-4-ил)пlИперидин-2-ил)пlиразоло[1,5-a]пlирими-дин-7-ил)морфолина P60
(ft
DIPEA
Смесь TFA-соли промежуточного соединения 8 (400 мг, 0,87 ммоль) и 4-хлор-5-фторхиназолина 75 (208 мг, 1,14 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (20 мл) и добавляли триэтиламин (0,604 мл, 3,5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 2 ч. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока не расплавится лед, затем отфильтровывали и твердое вещество промывали водой. Твердое вещество растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали с получением белого твердого вещества Р60 (145 мг, 34%).
Масса/заряд=489 (M+H)+.
ХЫ ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,57-1,90 (m, 4H), 2,06-2,20 (m, 1H), 2,26-2,43 (m, 3H), 3,38-3,51 (m, 1H), 3,54 (br. s., 4H), 3,65-3,79 (m, 4H), 3,92 (d, J=12,8 Гц, 1H), 4,02 (t, J=7,4 Гц, 4H), 5,23 (s, 1H), 5,75 (s, 1H), 5,80 (br. s., 1H), 7,23 (dd, J=11,7, 7,9 Гц, 1H), 7,61 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,68-7,79 (m, 1H), 8,51 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1 -ил)-2-(1 -(5-этоксихиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-a]пирими-дин-7-ил)морфолина Р61
Стадия 1. Синтез 5-этоксихиназолин-4-ола 76-b.
Гидрид натрия (8,00 г, 200 ммоль, 60% в минеральном масле) добавляли в этанол (300 мл) при 0°C. После перемешивания в течение 30 мин при 0°C добавляли 5-бромхиназолин-4-ол 76-a (15,00 г, 66,65 ммоль) и медь (1,70 г, 26,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 18 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали через подушку из целита. Фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток поглощали водой и pH доводили до 8 путем добавления раствора 37% хлористо-водородной кислоты. Раствор экстрагировали с помощью CH2Cl2. Органическую фазу высушивали над Na2SO4, фильтровали и выпаривали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: петролейный эфир/этилацетат 2/1) с получением промежуточного соединения 76-b (5 г, выход: 35%).
Стадия 2. Синтез 4-хлор-5-этоксихиназолина 76.
К раствору промежуточного соединения 76-b (5,00 г, 26,3 ммоль) и DMF (2,5 мл) в CH3Cl (100 мл) по каплям добавляли оксалилхлорид (12,5 ммоль). Раствор нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционный раствор концентрировали под вакуумом. Остаток очищали на силикагеле в стеклянном фильтре (элюент: CH^b/этилацетат 1/1). Необходимые фракции собирали и растворитель выпаривали с получением промежуточного соединения 77 (2,81 г, выход: 49%).
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,34-1,48 (m, 3H), 4,14-4,23 (m, 2H), 7,15-7,23 (m, 1H), 7,27-7,36 (m, 1H), 7,77-7,87 (m, 1H), 8,90 (s, 1H).
Смесь TFA-соли промежуточного соединения 8 (500 мг, 1,1 ммоль) и 4-хлор-5-этоксихиназолина 76 (320 мг, 1,5 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (20 мл) и добавляли триэтиламин (0,566 мл, 3,3 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 4 дней. Обеспечивали охлаждение реакционной смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока не расплавится лед, затем отфильтровывали и твердое вещество промывали водой. Твердое вещество растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали с получением остатка, который очищали препаративной HPLC с получением соединения Р61 в виде белого твердого вещества (76 мг, 13%).
Масса/заряд=515 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,33-1,49 (m, 3H), 1,51-1,92 (m, 4H), 2,08-2,24 (m, 1H), 2,25-2,43 (m, 3H), 3,27-3,47 (m, 1H), 3,48-3,63 (m, 4H), 3,65-3,82 (m, 4H), 3,87-4,10 (m, 5H), 4,15-4,35 (m, 2H), 5,22 (s, 1H), 5,67 (br. s., 1H), 5,83 (br. s., 1H), 6,98 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,31 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,55-7,69 (m, 1H), 8,38 (br. s., 1H).
Синтез 4-хлор-5-(трифторметил)хиназолина 77
Синтез 4-(5 -(азетидин-1 -ил)-2-(1 -(5-(трифторметил)хиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина Р62
CF3 ОН
77-a
NH2
HN^ NH2,AOOH
n-BuOH
POCI3, Et3N ^
нагревание с обратным
холодильником, 2 ч.
Стадия 1. Синтез 5-(трифторметил)хиназолин-4(3H)-она 77-b.
Смесь 2-амино-6-(трифторметил)бензойной кислоты 77-a (9,00 г, 43,9 ммоль) и ацетата формами-дина (22,84 г, 219,4 ммоль) в н-бутаноле (180 мл) перемешивали при 100°C в течение 5 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток промывали этанолом (2x50 мл), а затем высушивали под вакуумом при 45°C в течение 1 ч с получением промежуточного соединения 77-b (9 г, выход: 91%).
Стадия 2. Синтез 4-хлор-5-(трифторметил)хиназолина 77.
К смеси промежуточного соединения 77-b (8,00 г, 37,4 ммоль) в оксихлориде фосфора (331 г, 2,16 моль) при 0°C добавляли триэтиламин (29,3 мл, 210 ммоль). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток растворяли в этилацетате (200 мл) и смесь добавляли в лед (200 г). Отделенный органический слой промывали последовательно водой (1 x100 мл), 10% водным раствором бикарбоната натрия (2x100 мл), водой (1 x100 мл) и солевым раствором (1 x100 мл). Отделенный органический слой высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: петро-лейный эфир/этилацетат от 1/0 до 1/1) с получением промежуточного соединения 77 (7,97 г, 91,38%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 7,89-8,06 (m, 1H), 8,22 (d, J=7,50 Гц, 1H), 8,31 (d, J=8,38 Гц, 1H), 9,11 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5-(трифторметил)хиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина Р62.
Смесь TFA-соли промежуточного соединения 8 (300 мг, 0,65 ммоль), промежуточного соединения 77 (183 мг, 0,78 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (20 мл), затем добавляли диизопропилэтиламин (0,45 мл, 2,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Обеспечивали охлаждение смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока весь лед не расплавится, затем полученное твердое вещество отфильтровывали. Твердое вещество последовательно промывали водой, растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали с получением соединения Р62 (250 мг, 70%) в виде бледно-белого твердого вещества.
Масса/заряд=539 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,37-1,60 (m, 1H), 1,69 (br. s., 2H), 1,82 (d, J=11,9 Гц, 1H), 2,072,40 (m, 4H), 3,32-3,59 (m, 5H), 3,62-3,80 (m, 5H), 4,02 (t, J=7,4 Гц, 4H), 5,20 (s, 1H), 5,46-5,70 (m, 2H), 7,81-7,91 (m, 2H), 7,94-8,01 (m, 1H), 8,49 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-этил-5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина P63
81-1 78
Синтез 4-хлор-6-этил-5-метилхиназолина 78
HN <^NH2,AcOH
'NH2
DIPEA
HO,
P63 1-1
Pd(dppf)2CI2, K2C03, EtOH
Стадия 1. Синтез 6-йод-5-метилхиназолин-4-ола 78-b.
Раствор 6-амино-3-йод-2-метилбензойной кислоты 78-a (35,0 г, 126 ммоль) и ацетата формамидина (59,0 г, 567 ммоль) в EtOH (500 мл) нагревали с обратным холодильником в течение ночи.
Осадок отфильтровывали и промывали этанолом с получением промежуточного соединения 78-b (21 г, выход 52%).
Стадия 2. Синтез 5-метил-6-винилхиназолин-4-ола 78-с.
Раствор промежуточного соединения 78-b (15,0 г, 52,4 ммоль), трифтор(винил)бората калия (10,6 г, 79,0 ммоль), Pd(dppf)2d2 (1,7 г, 2,6 ммоль) и K2CO3 (21,74 г, 157,3 ммоль) в EtOH (150 мл) нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток обрабатывали с помощью Н2О и CH2Cl2. Отделенный органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и выпаривали под вакуумом. Остаток очищали посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии на SYNERGI (элюент: TFA вода/ацетонитрил 30/70 об./об.). Фракции, содержащие продукт, собирали и органический растворитель выпаривали. pH доводили до 7 с помощью насыщенного NaHCO3. Водный концентрат экстрагировали с помощью CH2Cl2. Отделенный органический слой концентрировали под вакуумом с получением промежуточного соединения 78-с (3 г, выход 29%).
Стадия 3. Синтез 6-этил-5-метилхиназолин-4-ола 78-d. Раствор промежуточного соединения 78-с (3,0 г, 16 ммоль) и HCl (11,5 мл) в MeOH (30 мл) подвергали гидрогенизации при комнатной температуре (50 фунтов/кв.дюйм) с Pd/C (0,6 г) в качестве катализатора в течение 15 ч. После поглощения Н2 (32,50 мг, 16,11 ммоль) катализатор отфильтровали и промывали метанолом. Растворитель выпаривали под вакуумом с получением промежуточного соединения 78-d (2,1 г, выход 66%).
Стадия 4. Синтез 4-хлор-6-этил-5-метилхиназолина 78.
Смесь промежуточного соединения 78-d (1,80 г, 9,56 ммоль), триэтиламина (2,220 мл, 15,95 ммоль) и оксихлорида фосфора (60 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток растворяли в этилацетате (200 мл) и смесь по каплям добавляли ко льду (200 г). Отделенный органический слой промывали последовательно водой (1x100 мл), 10% водным раствором бикарбоната натрия (2x100 мл), водой (1x100 мл) и солевым раствором (1x100 мл). Органический слой высушивали (MgSO4), фильтровали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: петролейный эфир/этилацетат от 1/0 до 5/1) с получением промежуточного соединения 78 (1,434 г, 68,94%).
1H ЯМР (400 МГц, CDG3) 8 ppm 1,27 (t, J=7,65 Гц, 3H), 2,88 (q, J=7,53 Гц, 2H), 2,94 (s, 3H), 7,75 (d, J=8,53 Гц, 1H), 7,87 (d, J=8,53 Гц, 1H), 8,89 (s, 1H).
Стадия 5. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(6-этил-5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил^иразоло^^^пиримидин^-шОморфолина Р63.
Смесь TFA-соли промежуточного соединения 8 (400 мг, 0,87 ммоль), промежуточного соединения 78 (235 мг, 1,14 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (20 мл), затем добавляли диизопропилэтиламин (0,604 мл, 3,5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 4 дней. Обеспечивали охлаждение смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока весь лед не расплавится, затем полученное твердое вещество отфильтровывали. Твердое вещество последовательно промывали водой, растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали, остаток очищали препаративной HPLC с получением соединения Р63 (198 мг, 44%) в виде бледно-белого твердого вещества.
Масса/заряд=513 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,26 (t, J=7,5 Гц, 3H), 1,37-1,58 (m, 1H), 1,67 (br. s., 2H), 1,771,94 (m, 1H), 2,12-2,39 (m, 6H), 2,75-2,89 (m, 6H), 3,52 (br. s., 5H), 3,65-3,80 (m, 4H), 4,02 (t, J=7,4 Гц, 4H), 5,21 (s, 1H), 5,61 (s, 2H), 7,49-7,63 (m, 2H), 8,40 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5,6-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина P64
DIPEA
Синтез 4-хлор-5,6-диметилхиназолина 79
OH Me4Sn, PdCI2(dppf)2, PPh3, Cul
POCI3/Et3N
нагревание с
78-b 7g_a обратным
холодильником, 2 ч.
Стадия 1. Синтез 5,6-диметилхиназолин-4-ола 79-a.
PdCl2(dppf)2 (114 мг, 0,180 ммоль) и PPh3 (183 мг, 0,700 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения 78-b (1,0 г, 3,5 ммоль), Me4Sn (940 мг, 5,20 ммоль) и CuI (67 мг, 0,35 ммоль) в NMP (15 мл) в
атмосфере N2. Смесь перемешивали при микроволновом облучении при 150°C в течение 0,5 ч. Полученную смесь выливали в воду. Осадок отфильтровывали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: метанол/этилацетат 1/10) с получением промежуточного соединения 79-a (0,7 г, выход: 27%).
Стадия 2. Синтез 4-хлор-5,6-диметилхиназолина 79.
Смесь промежуточного соединения 79-a (700 мг, 4,02 ммоль), оксихлорида фосфора (20 мл) и три-этиламина (2,80 мл, 20,1 ммоль) нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Растворитель выпаривали под вакуумом. Остаток растворяли в этилацетате (50 мл) и смесь добавляли в лед (20 г). Отделенный органический слой последовательно промывали водой (1x20 мл), 10% водным раствором бикарбоната натрия (2x20 мл), водой (1x20 мл) и солевым раствором (1x20 мл). Органический слой высушивали над сульфатом магния, фильтровали, концентрировали под вакуумом. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент: петролейный эфир/этилацетат от 1/0 до 10/1) с получением промежуточного соединения 79 (598,30 мг, 73%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCls) 8 ppm 2,53 (s, 3H), 2,92 (s, 3H), 7,68-7,78 (m, 1H), 7,80-7,89 (m, 1H), 8,89 (s, 1H).
Стадия 3. Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(5,6-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [^^пиримидин^-щ^морфолина Р64.
Смесь TFA-соли промежуточного соединения 8 (300 мг, 0,65 ммоль), промежуточного соединения 79 (183 мг, 0,95 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (15 мл), затем добавляли диизопропилэтиламин (0,45 мл, 2,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение трех дней. Обеспечивали охлаждение смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока весь лед не расплавится, затем полученное твердое вещество отфильтровывали. Твердое вещество последовательно промывали водой, растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали с получением соединения Р64 (150 мг, 45%) в виде бледно-белого твердого
вещества.
Масса/заряд=499 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,67 (br. s., 3H), 1,82 (d, J=11,7 Гц, 1H), 2,09-2,37 (m, 4H), 2,41 (s, 3H), 2,67-2,86 (m, 4H), 3,52 (br. s., 5H), 3,65-3,83 (m, 4H), 4,02 (t, J=7,4 Гц, 4H), 5,21 (s, 1H), 5,40-5,90 (m, 2H), 7,48-7,59 (m, 2H), 8,40 (s, 1H).
Синтез 7-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-2-метилоксазоло [ 5,4 -с1]пиримидина P6 5
К раствору промежуточного соединения 71 (20 мг, 0,12 ммоль) в iPrOH (2 мл) добавляли триэтила-мин (0,05 мл, 0,35 ммоль, 3 экв.) и промежуточное соединение 8 (40 мг, 0,12 ммоль, 1 экв.). Раствор подвергали воздействию микроволнового облучения в течение 3 ч при 120°C. Полученный раствор концентрировали под вакуумом и очищали препаративной HPLC с получением указанного в заголовке соединения Р65 (21 мг, 37%) в виде белого твердого вещества.
Масса/заряд=476 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,49-1,79 (m, 4H), 1,84-2,02 (m, 1H), 2,20-2,34 (m, 2H), 2,40 (br. s., 1H), 2,53 (s, 3H), 3,15-3,27 (m, 1H), 3,36-3,54 (m, 4H), 3,55-3,69 (m, 4H), 3,99 (t, J=7,70 Гц, 4H), 4,99 (d, J=13,32 Гц, 1H), 5,22 (s, 1H), 5,73 (s, 1H), 6,53 (d, J=5,65 Гц, 1H), 8,24 (s, 1H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1 -ил)-2-(1 -(5,8-диметилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-
Смесь TFA-соли промежуточного соединения 8 (300 мг, 0,65 ммоль), 4-хлор-5,8-диметилхиназолина 80 (175 мг, 0,9 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (15 мл), затем добавляли дии-зопропилэтиламин (0,45 мл, 2,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение трех дней. Обеспечивали охлаждение смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор.
а]пиримидин-7-ил)морфолина Р66
Полученную смесь перемешивали, пока весь лед не расплавится, затем полученное твердое вещество отфильтровывали. Твердое вещество не являлось чистым, его растворяли в дихлорметане, водный слой экстрагировали дихлорметаном, все органические вещества объединяли и высушивали над MgSO4.
Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией с помощью дихлорметана и метанола. Соединение Р66 выделяли в виде белого твердого вещества (150 мг, 46%).
Масса/заряд=499 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,51 (br. s., 1H), 1,64 (d, J=7,7 Гц, 2H), 1,82 (d, J=7,9 Гц, 1H), 2,18 (br. s., 2H), 2,28 (quin, J=7,4 Гц, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,78 (s, 3H), 3,35-3,56 (m, 6H), 3,61-3,74 (m, 4H), 3,98 (t, J=7,4 Гц, 4H), 5,17 (s, 1H), 5,46 (br. s., 1H), 5,62 (br. s., 1H), 7,18 (d, J=7,3 Гц, 1H), 7,46 (d, J=7,3 Гц, 1H), 8,50 (s, 1H).
Синтез метил-4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-карбоксилата P67
Промежуточное соединение 15 (100 мг, 0,13 ммоль) растворяли в 30 мл THF/MeOH (3/1) в автоклаве. Добавляли ацетат калия (20 мг, 0,20 ммоль, 1,5 экв.), Rd(OAc)2 (3 мг, 0,013 ммоль, 0,1 экв.) и 1,3-бис(дифенилфосфино)пропан (11 мг, 0,027 ммоль, 0,2 экв.). Автоклав нагревали до 120°C при давлении монооксида углерода 50 бар в течение 8 ч. После охлаждения до комнатной температуры раствор кон-
центрировали под вакуумом и разбавляли с помощью DCM, затем промывали насыщенным раствором
NaHCO3. Объединенные органические вещества высушивали с помощью MgSO4, отфильтровывали и концентрировали под вакуумом. Неочищенный материал дополнительно очищали с помощью HPLC с получением метильного соединения Р67 (43 мг, 60%). Масса/заряд= 543 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, 420 K, DMSO-d6) 8 ppm 1,42-1,59 (m, 1H), 1,62-1,70 (m, 2H), 1,77-1,88 (m, 1H), 2,14-2,33 (m, 4H), 2,80 (s, 3H), 3,43-3,55 (m, 5H), 3,64-3,74 (m, 5H), 3,85 (s, 3H), 3,99 (t, J=7,41 Гц, 4H), 5,18 (s, 1H), 5,61 (m, J=3,98 Гц, 1H), 5,66 (s, 1H), 7,39 (t, J=4,22 Гц, 1H), 7,66 (d, J=4,30 Гц, 2H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-5-метилхиназолин-2-карбоновой кислоты P68
К раствору соединения Р67 (300 мг, 0,38 ммоль) в 30 мл смеси THF/вода (3/1) добавляли LiOH (28 мг, 1,16 ммоль, 3 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь затем доводили до pH 6 с помощью HCl (1M в воде) и концентрировали под вакуумом. Неочищенный материал очищали с помощью HPLC с получением соединения Р68 (110 мг, 53%).
Масса/заряд= 529 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,44-1,62 (m, 1H), 1,64-1,76 (m, 2H), 1,78-1,91 (m, 1H), 2,16-2,37 (m, 4H), 3,24 (s, 3H), 3,46-3,59 (m, 5H), 3,68-3,77 (m, 5H), 4,02 (t, J=7,37 Гц, 4H), 5,22 (s, 1H), 5,54-5,88 (m, 2H), 7,39-7,44 (m, 1H), 7,68-7,73 (m, 2H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-6-метил-[\Г-(метилсульфонил)хиназолин-2-карбоксамида Р69
CDI, THF
DBU,
/ NH2
Соединение Р68 (150 мг, 0,28 ммоль) растворяли в 10 мл THF и добавляли CDI (92 мг, 0,56 ммоль, 2 экв.). Смесь нагревали до 50°C и через один час перемешивания к раствору добавляли DBU (0,08 мл, 0,56 ммоль, 2 экв.) и метилсульфонамид (70 мг, 0,74 ммоль, 2,6 экв.). Через 1 ч перемешивания при 50°C раствор концентрировали под вакуумом и очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0 до 10% MeOH в DCM, с получением соединения Р69 (65 мг, 38%).
Масса/заряд= 606 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,46-1,60 (m, 1H), 1,62-1,73 (m, 2H), 1,77-1,89 (m, 1H), 2,15-2,38 (m, 4H), 2,80 (s, 3H), 3,27 (s, 3H), 3,42-3,60 (m, 5H), 3,64-3,77 (m, 5H), 4,00 (t, J=7,42 Гц, 4H), 5,20 (s, 1H), 5,68-5,77 (m, 2H), 7,38-7,47 (m, 1H), 7,65-7, 6 (m, 2H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-а]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-N,5-диметилхиназолин-2-карбоксамида P70
О О
-NH2, HATU
DMF
К раствору соединения Р68 (240 мг, 0,45 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли DIPEA (0,23 мл, 1,36 ммоль, 3 экв.), метиламин (0,08 мл, 0,90 ммоль, 2 экв.) и HATU (431,5 мг, 1,135 ммоль, 2,5 экв.). Полученный раствор перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Добавляли воду (5 мл) и раствор концентрировали под вакуумом и очищали с помощью HPLC с получением соединения Р70 (87 мг,
36%). + Масса/заряд= 542 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,45-1,60 (m, 1H), 1,67 (br. s., 2H), 1,76-1,90 (m, 1H), 2,10-2,24 (m, 2H), 2,28 (quin, J=7,37 Гц, 2H), 2,79-2,87 (m, 6H), 3,35-3,62 (m, 6H), 3,61-3,75 (m, 4H), 3,98 (t, J=7,37 Гц, 4H), 5,19 (s, 1H), 5,54 (br. s., 1H), 5,68 (br. s., 1H), 7,29-7,42 (m, 1H), 7,58-7,72 (m, 2H), 8,04 (br. s., 1H).
Синтез 4-(2-(5-(азетидин-1-ил)-7-морфолинопиразоло[1,5-a]пиримидин-2-ил)пиперидин-1-ил)-N-(циклопропилсульфонил)-5 -метилхиназолин-2-карбоксамида P71
О о
CDI, THF
, H2N-S-4j
DBU
Соединение Р68 (150 мг, 0,28 ммоль) растворяли в 10 мл THF и добавляли CDI (92 мг, 0,56 ммоль, 2 экв.). Смесь нагревали до 50°C и через 1 ч перемешивания к раствору добавляли DBU (0,12 мл, 0,85 ммоль, 3 экв.) и циклопропилсульфонамид (85 мг, 0,709 ммоль, 2,5 экв.). Через 1 ч перемешивания при 50°C раствор концентрировали под вакуумом и очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом, начиная с 0 до 10% MeOH в DCM, и дополнительно очищали с помощью HPLC с получением соединения Р71 (65 мг, 44%).
Масса/заряд= 632 (M+H)+.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 0,99-1,10 (m, 2H), 1,13-1,26 (m, 2H), 1,44-1,93 (m, 4H), 2,12-2,35 (m, 4H), 2,81 (s, 3H), 2,95-3,02 (m, 1H), 3,41-3,60 (m, 5H), 3,63-3,75 (m, 5H), 3,99 (t, J=7,42 Гц, 4H), 5,19 (s,
1H), 5,65-5,77 (m, 2H), 7,42 (d, J=6,67 Гц, 1H), 7,67-7,75 (m, 2H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-(изоксазол-4-ил)-5-метилхиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пира-золо[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина P72
но'В~С
Промежуточное соединение 15 (200 мг, 0,369 ммоль), изоксазол-4-илбороновую кислоту (CAS=1008139-25-0, 83 мг, 0,738 ммоль) и K2CO3 (CAS=584-08-7, 102 мг, 0,738 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (3 мл) и воде (0,3 мл). Раствор дегазировали с помощью N2 в течение 5 мин. Реакционную пробирку герметизировали и смесь нагревали при 120°C в течение 30 мин в микроволновой печи. Затем раствор разбавляли с помощью DCM и воды. Продукт экстрагировали 2 раза с помощью DMC. Органические слои высушивали над Na2SO4, фильтровали и выпаривали до сухого состояния и неочищенный материал очищали колоночной хроматографией с элюированием градиентом MeOH в DCM, начиная с 0 до 5% MeOH. После выпаривания интересующих фракций получали коричневое твердое вещество. Твердое вещество растирали в горячем DIPE. После охлаждения до комнатной температуры осадок фильтровали. Поскольку продукт все еще не являлся чистым, коричневое твердое вещество растирали еще раз с горячим DIPE. После охлаждения указанное в заголовке соединение Р72 (21 мг, 10%) получали посредством фильтрации.
Масса/заряд=552,3 (M+H).
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 8 ppm 1,25-2,46 (m, 8H), 2,66 (s, 3H), 3,24-4,72 (m, 14H), 5,09-9,25 (m,
8H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1-ил)-2-(1-(2-(1,4-диметил-1Н- 1,2,3-триазол-5-ил)-5-метилхиназолин-4-
ил)пиперидин-2-ил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-7-ил)морфолина Р73
Соединение Р73 получали таким же образом, что и соединение Р72, используя промежуточное соединение 15 и 1,4-диметил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-1,2,3-триазол в качестве исходного вещества.
Масса/заряд=580 (M+H).
Т.пл.: 238,91°C.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 8 ppm 1,29-2,05 (m, 4Н), 2,12-2,49 (m, 4Н), 2,55-2,76 (m, 3Н), 2,82-3,00 (m, 3Н), 3,13-4,16 (m, 14Н), 4,30-4,49 (m, 3H), 4,93-6,11 (m, 3H), 7,27-7,34 (m, 1H), 7,53-7,79 (m, 2H).
Синтез 4-(5-(азетидин-1 -ил)-2-( 1-(5-метоксихиназолин-4-ил)пиперидин-2-ил)пиразоло [1,5-a]raqm-мидин-7-ил)морфолина Р74
о CI
DIPEA
Смесь TFA-соли промежуточного соединения 8 (300 мг, 0,65 ммоль), 4-хлор-5-метоксихиназолина 81 (153 мг, 0,78 ммоль) растворяли в 2-метоксиэтаноле (15 мл), затем добавляли диизопропилэтиламин (0,45 мл, 2,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. Обеспечивали охлаждение смеси до комнатной температуры и ее выливали в ледяной водный раствор. Полученную смесь перемешивали, пока весь лед не расплавится, затем полученное твердое вещество отфильтровывали. Твердое вещество последовательно промывали водой, растворяли в дихлорметане, высушивали над MgSO4 и концентрировали с получением соединения Р74 (267 мг, 81%) в виде бледно-белого твердого вещества.
Масса/заряд=501 (M+H).
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 1,58-1,82 (m, 4H), 2,02-2,14 (m, 1H), 2,22-2,39 (m, 3H), 3,28-3,41 (m, 1H), 3,45-3,56 (m, 4H), 3,66-3,75 (m, 4H), 3,92 (s, 3H), 3,99 (t, J=7,5 Гц, 5H), 5,18 (s, 1H), 5,63 (s, 1H), 5,68 (br. s., 1H), 6,95 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,28 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,59 (t, J=8,1 Гц, 1H), 8,35 (s, 1H).
В. Фармакологические примеры
В.1. Противовирусная активность.
Черные 384-луночные микропланшеты с прозрачным дном (Corning, Амстердам, Нидерланды) заполняли путем акустического выброса капель с использованием эхо-дозатора жидкости (Labcyte, Санни-вейл, Калифорния). 200 нл исходных растворов соединений (100% DMSO) переносили в планшеты для исследования. Выполняли 9 серийных 4-кратных разведений соединений, создавая одинаковую концентрацию соединений на сектор. Анализ инициировали путем добавления 10 мкл среды для культивирования в каждую лунку (среда RPMI без фенолового красного, 10% FBS, инактивированной нагреванием, 0,04% гентамицин (50 мг/мл). Все дополнительные стадии выполняли с использованием многоканального дозатора (Thermo Scientific, Эрембодегем, Бельгия). Затем вирус rgRSV224 (MOI=1), разведенный в среде для культивирования, вносили в планшеты. Вирус rgRSV224 представляет собой сконструированный вирус, который включает в себя дополнительный ген GFP (Hallak L.K., Spillmann D., Collins P.L., Peeples M.E. Glycosaminoglycan sulfation requirements for respiratory syncytial virus infection; Journal of virology (2000), 74(22), 10508-13), и лицензия на который была приобретена у NIH (Бетесда, Мэриленд, США). В конечном итоге, вносили 20 мкл суспензии клеток HeLa (3000 клеток/лунка). Среду, инфицированные вирусом контрольные образцы и контрольные образцы с имитацией инфицирования включали в каждый тест. Лунки содержали 0,05% DMSO на объем. Клетки инкубировали при 37°C в атмосфере 5% СО2. Через три дня после воздействия вируса количественно оценивали вирусную репликацию путем измерения экспрессии GFP в клетках с помощью собственной разработки - лазерного микроскопа MSM (Tibotec, Берсе, Бельгия). ЕС50 определяли как 50% ингибирующую концентрацию в отношении экспрессии GFP. Параллельно инкубировали соединения в течение трех дней в наборе белых 384-луночных титрационных микропланшетов (Corning) и определяли цитотоксичность соединений в клетках HeLa путем измерения содержания АТФ в клетках с применением набора ATPLite (Perkin Elmer, Завентем, Бельгия) в соответствии с инструкциями изготовителя. СС50 определяли как 50% концентрацию для ци-тотоксичности.
Таблица В-1
8,1
<4
Р46
6, 5
4,3
8,3
<4, 6
Р47
6, 3
4,6
Р10
6,2
<4, 3
Р48
7,9
4,5
Р11
6, 9
<4, 6
Р49
6,1
4,3
Р12
6,7
<4
Р50
6,2
4,3
Р13
6, 4
4,3
Р51
6, 5
4,3
Р14
6,1
<4
Р52
7,1
4,7
Р15
6, 6
4,0
Р53
7,3
4,6
Р16
7,1
4,3
Р54
7,6
4,5
Р17
8,4
4,4
Р55
7,8
4,3
Р18
<6
<4, 3
Р57
6,2
4,5
Р19
8,0
<4, 3
Р58
6, 3
<4
Р20
6,2
5,4
Р59
6, 4
4,3
Р21
6, 4
<4, 6
Р60
6, 9
4,3
Р22
7,1
4,5
Р61
7,5
<4
Р23
7,8
<4, 6
Р62
7,0
4,3
Р24
<4, 6
<4, 6
Р63
6, 4
4,4
Р25
7,5
<4, 6
Р64
7,8
<4, 6
Р26
7,6
4,3
Р65
7,8
<4, 6
Р27
6,2
4,5
Р66
7,0
Р28
6,1
<4
Р67
6, 9
<4, 3
Р29
6, 4
4,5
Р68
6, 5
<4, 6
РЗО
6,2
4,6
Р69
6, 5
<4
Р31
6, 8
4,8
Р70
6,2
4,3
Р32
7,3
<4
Р71
6, 4
<4
РЗЗ
7,88
4,2
Р72
7,6
4,5
Р34
6,2
4,3
Р73
6, 9
4,8
Р35
7,2
4,4
Р74
7,8
<4, 6
Р36
6, 3
<4
С. Примеры возможных композиций
"Активный ингредиент", как используется во всех данных примерах, относится к конечному соединению формулы (I), его фармацевтически приемлемым солям, его сольватам и стереохимически изомерным формам и таутомерам.
Типичными примерами рецептур для состава по настоящему изобретению являются следующие.
C.1. Таблетки.
Активный ингредиент - 5-50 мг. Фосфат дикальция - 20 мг. Лактоза - 30 мг. Тальк - 10 мг. Стеарат магния - 5 мг. Картофельный крахмал - до 200 мг.
В данном примере активный ингредиент можно заменить таким же количеством какого-либо из соединений в соответствии с настоящим изобретением, в частности таким же количеством какого-либо из соединений, приведенных в качестве примера.
C.2. Суспензия.
Водную суспензию для перорального введения получают таким образом, что каждый 1 мл содержит от 1 до 5 мг одного из активных соединений, 50 мг натрийкарбоксиметилцеллюлозы, 1 мг бензоата натрия, 500 мг сорбита и воду до 1 мл.
C.3. Форма для инъекций.
Композицию для парентерального введения получают путем перемешивания 1,5 вес.% активного ингредиента по настоящему изобретению в 10 об.% пропиленгликоля в воде. С.4. Мазь.
Активный ингредиент - 5-1000 мг. Стеариловый спирт - 3 г.
Ланолин - 5 г. Белый вазелин - 15 г. Вода - до 100 г.
В данном примере активный ингредиент можно заменить таким же количеством какого-либо из соединений в соответствии с настоящим изобретением, в частности таким же количеством какого-либо из соединений, приведенных в качестве примера.
Допустимые варианты не следует рассматривать как отклонение от объема настоящего изобретения. Будет очевидно, что специалисты в данной области могут изменять описанное таким образом изобретение различными способами.
где R1 представляет собой водород, гидрокси, C^^ram, моно- или ди^^алкш^амино или гетероциклил1;
R2 представляет собой водород или ^^алюш;
R3 представляет собой ^^алки!, галоген, C3-6циклоалкил, моно- или ди^^алкщ^амино или гете-роциклил2;
R4 представляет собой водород, ^^алюш, гидрокси или галоген;
гетероциклил1 представляет собой азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил1 необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из ^^алиша, гидрокси, галогена, полигалоген-C1-4алкила, C1-4алкилоксикарбонила, амино, С1-4алкиламинокарбонила или C1-4алкилсульфонила;
гетероциклил2 представляет собой азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил2 необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из C1-4алкила, гидрокси, галогена, полигалоген-C1-4алкила, C1-4алкилоксикарбонила, амино, С1-4алкилоксикарбониламино или C1-4алкилсульфонила;
Het выбран из фуранила, тиофенила, пиразолила, оксазолила, тиазолила, пиридила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила, хинолила, изохинолила, циннолинила, хиназолинила, хиноксалинила, 1,5-нафтиридинила, 1,6-нафтиридинила, 1,7-нафтиридинила, 1,8-нафтиридинила, пиридо[2,3^]пири-мидинила, пиридо[3,2^]пиримидинила, 9Н-пуринила, тиазоло[5,4^]пиримидинила, 7Н-пирроло[2,3-d] пиримидинила, оксазоло[5,4^]пиримидинила, тиено[2,3^]пиримидинила или тиено[3,2-d] пиримидинила; при этом каждый Het необязательно замещен одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, ^^кила, C1-4алкилокси, C1-4алкилтио, гидрокси, амино, моно- или ди^^алкщ^амино, гидроксикарбонила, C1-4алкилоксикарбонила, С1-4алкил-сульфониламино, аминокарбонила, трифторметила, С1-4алкилоксикарбониламино, ди^^алкилокси-карбонил)амино, С1-4алкилсульфониламинокарбонила, C1-4алкиламинокарбонила, С1-4алкилокси-C1-6ал-килоксикарбониламино, ди(С1-4алкил)аминосульфониламинокарбонила, С3-6циклоалкилсульфонил-аминокарбонила, HO-NH-(C=NH)-; оксазолила или триазолила, каждый из которых необязательно замещен одним или двумя ^^алк^ами;
или его фармацевтически приемлемая соль присоединения кислоты.
2. Соединение по п.1, где
R1 представляет собой водород, C^^ram, моно- или ди(C1-4алкил)амино или гетероциклил1;
R2 представляет собой водород или ^^алюш;
R3 представляет собой C^muarc^raM или гетероциклил2;
представляет собой водород;
гетероциклил1 представляет собой пиперазинил или морфолинил; при этом каждый гетероциклил1 необязательно замещен одним заместителем, выбранным из C1-4алкилоксикарбонила, С1-4алкиламинокарбонила или C1-4алкилсульфонила;
гетероциклил2 представляет собой азетидинил или пирролидинил; при этом каждый гетероциклил2 необязательно замещен одним заместителем, выбранным из гидрокси или амино;
Het выбран из хиназолинила, пиридо[2,3^]пиримидинила, тиазоло[5,4-d]пиримидинила, 7Н-пирроло[2,3-d]пиримидинила, оксазоло[5,4-d]пиримидинила или тиено[2,3-d]пиримидинила; при этом каждый Het необязательно замещен одним, двумя или тремя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, ^^кила, C1-4алкилокси, C1-4алкилтио, гидрокси, гидроксикарбонила, C1-4^-килоксикарбонила, С1-4алкилсульфониламино, аминокарбонила, трифторметила, С1-4алкил
оксикарбониламино, ди^^алкилоксикарбонщОамино, С1-4алкилсульфониламинокарбонила, C1-4^COUI-аминокарбонила, С1-4алкилоксиС1-6алкилоксикарбониламино, ди(С1-4алкил)аминосульфониламино-карбонила, С3-6циклоалкилсульфониламинокарбонила, HO-NH-(C=NH)-, оксазолила или триазолила, каждый из которых необязательно замещен одним или двумя ^^алсашами.
3. Соединение по п.1, где R1 представляет собой гетероциклил1, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой гетероциклил2.
4. Соединение по п.1, где R1 представляет собой водород, R2 представляет собой C1-4^COUI и R3 представляет собой гетероциклил2.
5. Соединение по п.1, где R1 представляет собой водород, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой гетероциклил2.
6. Соединение по п.1, где R1 представляет собой C1-4^COUI, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой гетероциклил2.
7. Соединение по п.1, где R1 представляет собой водород, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой C1-4алкил.
8. Соединение по п.1, где R1 представляет собой водород, R2 представляет собой водород и R3 представляет собой С3-6циклоалкил.
9. Соединение по любому из пп.1-8, где Het представляет собой хиназолинил.
10. Фармацевтическая композиция для лечения инфекции, вызванной респираторно-
синцитиальным вирусом, содержащая терапевтически активное количество соединения по любому из
пп.1-9 и фармацевтически приемлемый носитель.
11. Способ получения фармацевтической композиции по п.10, где терапевтически активное количество соединения по любому из пп.1-9 тщательно смешивают с фармацевтически приемлемым носителем.
12. Применение соединения по любому из пп.1-9 в качестве лекарственного препарата для лечения инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом.
13. Применение соединения по любому из пп.1-9 для лечения инфекции, вызванной респираторно-синцитиальным вирусом.
14. Применение фармацевтической композициия по п.10 для лечения инфекции, вызванной респи-раторно-синцитиальным вирусом.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
032081
032081
- 1 -
- 1 -
(19)
032081
032081
- 1 -
- 1 -
(19)
032081
032081
- 4 -
- 3 -
(19)
032081
032081
- 6 -
- 6 -
032081
032081
- 6 -
- 6 -
032081
032081
- 6 -
- 6 -
032081
032081
- 6 -
- 6 -
032081
032081
- 6 -
- 6 -
032081
032081
- 12 -
- 12 -
032081
032081
- 12 -
- 12 -
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
- 15 -
- 15 -
032081
032081
- 18 -
032081
032081
- 18 -
032081
032081
- 18 -
032081
032081
- 21 -
- 21 -
032081
032081
- 21 -
- 21 -
032081
032081
- 21 -
- 21 -
032081
032081
- 21 -
- 21 -
032081
032081
- 23 -
- 24 -
032081
032081
- 23 -
- 24 -
032081
032081
- 23 -
- 24 -
032081
032081
- 23 -
- 24 -
032081
032081
- 23 -
- 24 -
032081
032081
- 25 -
- 24 -
032081
032081
- 25 -
- 24 -
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
032081
- 29 -
032081
032081
- 29 -
032081
032081
- 29 -
032081
032081
- 29 -
032081
032081
- 29 -
032081
032081
032081
032081
- 32 -
- 32 -
032081
032081
- 35 -
- 35 -
032081
032081
- 35 -
- 35 -
032081
032081
- 39 -
032081
032081
- 39 -
032081
032081
- 39 -
032081
032081
- 39 -
032081
032081
- 39 -
032081
032081
- 42 -
- 42 -
032081
032081
- 42 -
- 42 -
032081
032081
- 42 -
- 42 -
032081
032081
- 44 -
- 44 -
032081
032081
- 44 -
- 44 -
032081
032081
- 45 -
- 45 -
032081
032081
- 45 -
- 45 -
032081
032081
- 48 -
032081
032081
- 48 -
032081
032081
- 48 -
032081
032081
- 48 -
032081
032081
- 48 -
032081
032081
- 48 -
032081
032081
- 51 -
- 51 -