EA 029775B9 20180928

	Патентная документация ЕАПВ
Запрос:	ea000029775b*\id
Результат:	ID\|Номер и дата охранного документа

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

1. 1,3,5-Триазин-2-ил фосфорамидат общей формулы (I) где R ¹ и R ² независимо представляют собой Н, C ₁ -C ₆ неразветвленный или разветвленный алкил, C ₁ -C ₆ неразветвленную или разветвленную алкоксигруппу, C ₁ -C ₆ неразветвленную или разветвленную алкилсульфанильную группу, C ₁ -C ₆ неразветвленную или разветвленную моноалкиламино- или диалкиламиногруппу, пирролидиногруппу, пиперидиногруппу или морфолиногруппу, а также его стереоизомеры, соли и кристаллические и аморфные формы.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R ¹ и R ² являются одинаковыми метокси-, этокси-, пропокси-, аллилокси-, изопропокси- или трет-бутоксигруппами.

3. Соединение по п.1 или 2, имеющее структуру формулы (Ia) название которого - изопропил 2-(S)-[(S)-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат.

4. Соединение по п.1 или 2, имеющее структуру формулы (Ib) название которого - изопропил 2-(S)-[(S)-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат.

5. Соединение по п.1 или 2, имеющее структуру формулы (Ic) название которого - изопропил 2-(S)-[(S)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат.

6. Соединение по п.1 или 2, имеющее структуру формулы (Id) название которого - изопропил 2-(S)-[(S)-(4,6-ди-трет-бутокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат.

7. Способ получения соединений формулы (I) определенных в любом из пп.1-6, включающий реакцию хлорпроизводного формулы (V) с производными триазина формулы (VI) в присутствии подходящего основания в подходящих растворителях, отличающийся тем, что отдельные изомеры, охарактеризованные в пп.1 и 6, получают из образующейся смеси диастереоизомеров соединения формулы (IX) или путем прямого отделения и/или путем индуцированного кристаллизацией динамического разделения и последующего отделения, где исходное соединение (V) получают in situ путем взаимодействия (S)-изопропил 2-аминопропаноата (изопропилового эфира L-аланина) с фенилдихлорфосфатом.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что указанное подходящее основание выбирают из группы, включающей триэтиламин, N,N-диизопропилэтиламин, 1,8-диазабицикло[5.4.0.]ундец-7-ен, 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан, 1-метилморфолин, 1-этилпиперидин, Na ₂ CO ₃ , K ₂ CO ₃ , Cs ₂ CO ₃ , NaHCO ₃ , KHCO ₃ , NaOAc и KOAc.

9. Способ по п.7 или 8, отличающийся тем, что указанный подходящий растворитель выбирают из группы, включающей дихлорметан, хлороформ, тетрагидрофуран, 2-метилтетрагидрофуран, циклопентилметиловый эфир, диметоксиэтан, трет-бутилметиловый эфир, толуол, трифтортолуол.

10. Способ по любому из пп.7-9, отличающийся тем, что из образующейся смеси диастереоизомеров соединения формулы (I) Sp-диастереоизомеры отделяют в виде кристаллов с хиральной чистотой 99% и выше.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что маточные растворы, полученные после отделения хирально чистых кристаллов Sp-диастереоизомеров соединения формулы (I), подвергают индуцированному кристаллизацией динамическому разделению и получают другую фракцию кристаллов Sp-диастереоизомеров соединения формулы (I) с хиральной чистотой 99% и выше.

12. Способ по п.7, отличающийся тем, что Sp-диастереоизомеры соединения формулы (I) получают путем индуцированного кристаллизацией динамического разделения, где получают единую фракцию Sp-диастереоизомеров соединения формулы (I) с хиральной чистотой 99% и выше.

13. Способ по п.11 или 12, отличающийся тем, что указанное индуцированное кристаллизацией динамическое разделение проводят путем обработки смесей диастереоизомеров подходящим основанием в подходящем растворителе.

14. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанное основание представляет собой триэтиламин, N,N-диизопропилэтиламин, 1,8-диазабицикло[5.4.0.]ундец-7-ен, 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан, имидазол, 1,2-бис-(диметиламино)этан, 1,2-бис-(диэтиламино)этан, 1,3-бис-(диметиламино)пропан или 1,3-бис-(диэтиламино)пропан.

15. Способ по п.13 или 14, отличающийся тем, что указанный растворитель представляет собой этилацетат, изопропилацетат, 2-метилтетрагидрофуран, тетрагидрофуран, диоксан, диметоксиэтан, диэтоксиэтан, трет-бутилметиловый эфир, циклопентилметиловый эфир, диэтиловый эфир, толуол, метилэтилкетон, ацетон, пентан, гексан, гептан, циклогексан, декалин, метилциклогексан, 2-метилбутан, 2-метилпентан, триэтилметан, изооктан, толуол, ксилол, бензол, трифтортолуол или их смеси.

16. Способ получения софосбувира формулы (II) отличающийся тем, что он включает реакцию промежуточного соединения (IV) активированного подходящим агентом, с соединениями формулы (I), как определено в пп.1-6, в подходящем растворителе при подходящей температуре.

17. Способ получения софосбувира формулы (II) по п.16, отличающийся тем, что в качестве активирующего агента используют реактив Гриньяра.

18. Способ по п.16 или 17, отличающийся тем, что указанный реактив Гриньяра представляет собой хлорид трет-бутилмагния, хлорид бензилмагния, хлорид циклогексилмагния, бромид циклогексилмагния, хлорид гептилмагния или хлорид октилмагния.

19. Способ по любому из пп.16-18, отличающийся тем, что реактив Гриньяра: промежуточное соединение (IV) используют в соотношениях от 1,1:1 до 2,9:1 мол.экв.

20. Способ по любому из пп.16-19, отличающийся тем, что указанный растворитель представляет собой тетрагидрофуран, 2-метилтетрагидрофуран, диоксан, трет-бутилметиловый эфир, циклопентилметиловый эфир, диэтиловый эфир, диметоксиэтан, диэтоксиэтан, диметоксипропан или диэтоксипропан.

21. Способ по любому из пп.16-20, отличающийся тем, что указанное активированное промежуточное соединение (IV) подвергают взаимодействию с соединениями формулы (I) при температурах от -20 до 20°C.

22. Способ по любому из пп.16-21, отличающийся тем, что указанное активированное промежуточное соединение (IV) подвергают взаимодействию с соединениями формулы (I) в мольных соотношениях от 10:1 до 1:10.

Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

Евразийское OD 029775 (13) В9
патентное
ведомство
(12) ИСПРАВЛЕННОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(15) Информация об исправлении (51) Int. Cl. C07F 9/6521 (2006.01)
Версия исправления: 2 (W2 В1) C07F 9/6558 (2006 01)
исправления в биб. данных, код ИНИД (57) исправления в описании: стр.1 исправления в формуле: п.1 Предшествующие публикации исправленных документов:
В9, 31.07.2018, Бюллетень №7'2018 (W1) (48) Дата публикации исправления
2018.09.28, Бюллетень №9'2018 (45) Дата публикации и выдачи патента
2018.05.31
(21) Номер заявки 201692065
(22) Дата подачи заявки 2015.04.15
(54) ПРИМЕНЕНИЕ 1,3,5-ТРИАЗИН-2-ИЛ ФОСФОРАМИДАТНОГО СОЕДИНЕНИЯ В СИНТЕЗЕ СОФОСБУВИРА
(31) PV2014-259
(32) 2014.04.15
(33) CZ
(43) 2017.05.31
(86) PCT/CZ2015/000037
(87) WO 2015/158317 2015.10.22 (71)(73) Заявитель и патентовладелец:
ЗЕНТИВА, К.С. (CZ)
(72) Изобретатель:
Стефко Мартин (SK), Ман Станислав, Радл Станислав (CZ)
(74) Представитель:
Харин А.В., Котов И.О., Буре Н.Н., Стойко Г.В. (RU)
(56) WO-A2-2011123645
(57) Изобретение относится к новому типу 1,3,5-триазин-2-ил фосфорамидатов общей формулы (I) с абсолютной конфигурацией (S) у атома фосфора, Sp-диастереоизомеру, где R1 и R2 могут независимо друг от друга представлять собой H, C1-C6 (не)разветвленный алкил, C1-C6 (не)разветвленную алкоксигруппу, C1-C6 (не)разветвленную алкилсульфанильную группу, C1-C6 (не)разветвленную моноалкиламино- или диалкиламиногруппу, включая циклические аминогруппы, например пирролидино-, пиперидино- или морфолиногруппу; и к их применению для получения биологически активных фосфорамидатных пролекарств, особенно софосбувира формулы (II). Софосбувир (II) является нуклеотидным ингибитором РНК полимеразы, который применяется для лечения гепатита C в форме пролекарства, высвобождающего активный противовирусный агент 2'-дезокси-2'-a-фтор-P-C-метилуридин-5'-трифосфат в организме.
Примечание: библиография отражает состояние при переиздании
с абсолютной конфигурацией (S) у атома фосфора, Sp-диастереоизомеру,
где R1 и R2 могут независимо друг от друга представлять собой Н, Ci-C6 (не)разветвленный алкил, Ci-C6 (не)разветвленную алкоксигруппу, C1-C6 (не)разветвленную алкилсульфанильную группу, C1-C6 (не)разветвленную моноалкиламино- или диалкиламиногруппу, включая циклические аминогруппы, например пирролидино-, пиперидино- или морфолиногруппу,
и их применению для получения биологически активных фосфорамидатных пролекарств, в частности софосбувира формулы II
Софосбувир II является нуклеотидным ингибитором РНК полимеразы, который применяется для лечения гепатита С в форме пролекарства, высвобождающего активный противовирусный агент 2'-дезокси-2'-а-фтор-Р-С-метилуридин-5'-трифосфат в организме.
Предшествующий уровень техники До сих пор наиболее удобные способы получения софосбувира II были основаны на реакции, заключающейся во взаимодействии фосфорамидатного предшественника (Sp-диастереоизомер III) с фторированным производным IV. Реакция проходит стереоспецифически, через так называемый механизм SN2 с инверсией конфигурации у хирального атома фосфора. Именно этот SN2 механизм позволяет получать диастереомерно чистый софосбувир II посредством реакции диастереомерно чистого промежуточного соединения III (Sp-диастереоизомер).
В литературе описан ряд подходящих уходящих групп (LG) предшественника III, включающий галогены (Cl, Br, I), сульфонаты (например, мезилат, тозилат, трифлат, камфоры сульфонат) и арилоксигруппы, предпочтительно несущие по меньшей мере одну группу, притягивающую электроны (WO 2008/121634, WO 2010/135569, WO 2011/123645, WO 2012/012465, WO 2014/008236). Следующие группы упоминаются в качестве наиболее часто используемых уходящих групп: 4-нитрофенокси, 2-нитрофенокси, 2,4-динитрофенокси, 2-хлор-4-нитрофенокси и пентафторфенокси группы (J. Org. Chem. 2011, 76, 8311). Общая схема получения софосбувира II с использованием фосфорамидатного предшественника общей формулы III показана на схеме 1.
Схема 1 Синтез софосбувира II
Для большинства уходящих групп соответствующий Sp-диастереоизомер фосфорамидатного предшественника общей формулы III выделяют из эквимолярной (1:1) смеси диастереоизомеров с помощью разделения (WO 2010/135569) или хроматографии. В случае фосфорамидатов, имеющих арилоксигруппу в качестве уходящей группы (LG), соответствующий Sp-диастереоизомер может быть получен кристаллизацией. Патентная заявка WO 2010/135569 описывает получение обогащенной Sp-диастереоизомером смеси 4-нитрофеноксифосфорамидата. Сырую реакционную смесь, содержащую смесь Sp- и Rp-диастереоизомеров (IIIa и IIIb) в соотношении 1:1, растворяли в подходящем растворителе (DCM/IPE) и затравливали чистым Sp-диастереоизомером. Продукт, полученный в результате последующей кристаллизации, преимущественно содержал желаемый Sp-диастереоизомер соответствующего фосфорамидата IIIa (Sp:Rp 48:1; схема 2).
Аналогичная методика, на этот раз описанная для пентафторфеноксизамещенного фосфорамидата, была раскрыта в патентной заявке WO 2011/123645. В этом документе соответствующий оптически чистый Sp-диастереоизомер IIIc (de более 99%) получали с общим выходом 37% кристаллизацией из сырой реакционной смеси, которая содержала оба диастереоизомера (IIIc и IIId) в соотношении 1:1 (Sp:Rp 1:1) (схема 3).
Схема 3
Другое относительно обширное исследование рассматривает влияние уходящей феноксигруппы на реакционную способность фосфорамидата в реакции с модифицированным нуклеиновым основанием (фторсахар), а также возможность получения диастереомерно чистого Sp фосфорамидата с помощью кристаллизации. Эта статья, уже упоминавшаяся выше, опубликованная в J. Org. Chem. 2011, 76, 8311, в частности, посвящена феноксигруппам типа 2,4-динитрофенола, пентафторфенола, 2-хлор-4-нитрофенола, 2-нитрофенола, 4-нитрофенола, 2,4-дихлорфенола. Одной из возможностей достичь увеличения выхода Sp-диастереоизомера фосфорамидатного предшественника является индуцированное кристаллизацией динамическое разделение. Эта методика была впервые описана в WO 2011/123645, где была использована уходящая пентафторфеноксигруппа, что позволило увеличить общий выход Sp-диастереоизомера IIIc до 53% (схема 4).
Схема 4
Использование индуцированного кристаллизацией динамического разделения в синтезе
Sp-диастереоизомера
Сущность изобретения
В изобретении предложен новый усовершенствованный способ получения биологически активных фосфорамидатных пролекарств, в частности софосбувира формулы II. Эта новая синтетическая стратегия использует хорошую доступность диастереоизомерно чистых фосфорамидатных предшественников типа I в качестве ключевых промежуточных соединений при промышленном получении софосбувира формулы II (схема 5).
Схема 5
Синтез софосбувира II с использованием алкокси-1,3,5-триазин-2-ил фосфорамидатов I Фосфорамидатный предшественн
и R2 независимо друг от друга могут представлять собой Н, C1-C6 неразветвленный или разветвленный алкил, C1-C6 неразветвленную или разветвленную алкоксигруппу, C1-C6 неразветвленную или разветвленную алкилсульфанильную группу, C1-C6 неразветвленную или разветвленную моноалкиламино- или диалкиламиногруппу, пирролидиногруппу, пиперидиногруппу или морфолиногруппу, а также ее стерео-изомерами, солями, сольватами, гидратами и кристаллическими и аморфными формами, может привести к достижению как улучшения региоселективного замещения (задача, изложенная в документе WO 2010/135569), так и увеличения выходов и упрощенной процедуры очистки конечных продуктов. Помимо реакционной способности, подходящий выбор групп R1, R2 может существенно повлиять на растворимость 1,3,5-триазинов формулы VI в воде и органических растворителях, что является способом облегчения выделения и очистки конечных продуктов. 1,3,5-триазины формулы VI, замещенные короткими С1-С2 алкильными группами, метокси-, этокси- или диметиламино-, или несущие полярные группы, например N-метилпиперазино- или триалкиламмоний, относительно хорошо растворимы в воде, и после завершения реакции могут быть удалены из реакционной смеси путем простой экстракции из органического растворителя в воду без использования каких-либо других средств.
В других аспектах настоящего изобретения предложены следующие соединения:
а) соединение, имеющее структуру формулы (1а)
название которого - изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-
окси)феноксифосфориламино]пропионат;
Ь) соединение, имеющее структуру формулы (lb)
(lb)
название которого - изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диэтокси-1,3,5-триазин-2-
окси)феноксифосфориламино]пропионат;
с) Соединение, имеющее структуру формулы (1с)
название которого - изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-
окси)феноксифосфориламино]пропионат;
d) соединение, имеющее структуру формулы (Id)
название которого - изопропил 2-^)-[^)-(4,6-ди-трет-бутокси-1,3,5-триазин-2-
окси)феноксифосфориламино]пропионат.
Подходящим образом выбранная постановка эксперимента - выбор подходящих заместителей -впоследствии позволяет в случае водной обработки реакционной смеси перенести вторичный продукт реакции - гидрокситриазин формулы VI в водную фазу, в то время как продукт формулы II остается в органическом слое, который представляет собой исходный материал следующей технологической стадии - кристаллизации (схема 5).
Тем не менее, если 1,3,5-триазины формулы VI замещены заместителями с более длинными (С3-С6) или разветвленными алкильными цепями (например, пропокси-, изопропокси-, аллилокси-, бутокси-, изобутокс, трет-бутокси-, диэтиламино-), они сильно липофильны и, следовательно, хорошо растворяются в органических растворителях. Но если в ходе получения софосбувира формулы II получают такой липофильный триазин формулы VI, то, с другой стороны, он не переходит или только частично перехо
дит в водную фазу в процессе обработки и промывки. Вышеуказанные липофильные триазины формулы VI в отличие от водорастворимых триазинов формулы VI легко удаляются из соединения формулы II путем кристаллизации благодаря их высокой растворимости в органических растворителях. Это еще одно из неожиданных преимуществ гидрокситриазинов формулы VI. По сути, гидрокситриазины формулы VI по сравнению с пентафторфенолом в качестве уходящей группы обеспечивают более чистый конечный продукт в обоих случаях (с использованием и липофильного, и гидрофильного триазина), чем при использовании вышеупомянутого пентафторфенола. Это происходит потому, что пентафторфенол остается в продукте независимо от того, используется ли для очистки кристаллизация или экстракция. Наиболее удобными R1, R2 группами замещенных гидрокситриазинов формулы VI являются алкоксигруппы, предпочтительно где, в частности, R1 = R2 является метокси-, этокси-, пропокси-, аллилокси-, изопропокси- или трет-бутокси.
В соответствии со способом, описанном в данном изобретении, триазины формулы VI получали с высокими выходами из соответствующих 2,4,6-триалкокси-1,3,5-триазинов формулы VII, полученных в результате реакции соответствующих алкоголятов с цианурхлоридом. Получение соединения формулы VI из цианурхлорида может быть осуществлено не только двухстадийным способом, эти вещества могут быть преимущественно получены однореакторно. Высокоселективное замещение только одной алкокси-группы гидроксильной группой может быть осуществлено путем обработки гидроксидами в соответствующем спирте, трет-бутаноле или в воде (схема 6).
Схема 6
Однореакторное получение гидрокситриазинов VI
1 NaOH N^N
Д. ^ ROH
CI N CI
OR N^N RO^N^OR
KOH 1
N^4l
ROH Д
HO N OR
VII VI
Основным преимуществом данного способа является низкая стоимость исходных сырьевых материалов, что является одним из ключевых критериев для его промышленного применения. Другие бесспорные преимущества включают очень легкое обращение с триазинами формулы VI, которые, по сравнению с фенольными субстратами, нелетучи, не вызывают раздражения и являются твердыми кристаллическими веществами, не обладающими каким-либо запахом. Соответствующие триазины формулы VI с точки зрения технологического процесса и их использования для получения софосбувира формулы II представляют собой побочный продукт реакции (схема 5). Благодаря своим уникальным физико-химическим характеристикам они могут быть легко отделены от реакционной смеси, а затем легко разложены под действием минеральных кислот на нетоксичную циануровую кислоту. Кроме того, эти триазины могут безопасно сжигаться без каких-либо лишних рисков. Этот способ и его применение представляют собой экологичную альтернативу оригинальным описанным в литературе способам, использующим фенольные производные.
Синтез диастереоизомерно чистых фосфорамидатов формулы I основан на реакции ^)-изопропил 2-аминопропаноата (изопропилового эфира L-аланина) с фенилдихлорфосфатом в присутствии подходящего основания в подходящих растворителях и последующей реакции полученного промежуточного соединения формулы V с подходящим триазином формулы VI (схема 7). Основания, подходящие для этой стадии реакции, включают в частности основания из рядов аминов, такие как триэтиламин (Et3N), ^^диизопропилэтиламин (DIPEA), 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (DBU), 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (DABCO), 1-метилморфолин, 1-этилпиперидин, карбонаты и гидрокарбонаты, такие как Na2CO3, K2CO3, Cs2CO3, NaHCO3, KHCO3 или ацетаты NaOAc и KOAc в широком диапазоне растворителей и их смесей. В предпочтительном воплощении для этой стадии реакции используют триэтиламин или DIPEA. Дихлорметан, хлороформ, тетрагидрофуран, 2-метилтетрагидрофуран, цикло-пентилметиловый эфир, диметоксиэтан, трет-бутилметиловый эфир (MTBE), толуол, трифтортолуол (TFT) оказались подходящими растворителями для данной реакции. В предпочтительном воплощении эту реакцию проводят в дихлорметане, тетрагидрофуране, 2-метилтетрагидрофуране, циклопентилмети-ловом эфире. Вышеупомянутую стадию реакции проводят при температурах от -70 до 20°C, предпочтительно от -40 до 0°C. При получении соединения формулы I промежуточное соединение формулы V не требует выделения и образуется in situ. Последующее взаимодействие соединения формулы V с подходящим образом выбранным триазином формулы VI обычно приводит к получению эквимолярной смеси диастереоизомеров Sp:Rp формулы IX в соотношении 1:1. Тем не менее, в зависимости от выбранных условий также могут быть получены и другие соотношения диастереоизомеров Sp:Rp формулы IX. Эту реакцию проводят при температуре от -10 до 10°C, предпочтительно при 0°C.
Прямое отделение целевого Sp-диастереоизомера формулы I с помощью кристаллизации является основным преимуществом указанного выше способа. С помощью этого способа Sp-диастереоизомер фосфорамидатного предшественника формулы I может быть получен с хорошими общими выходами (более 50%) и превосходной оптической чистотой (более 99% de) из сырой реакционной смеси (схема 7).
Кроме того, было неожиданно обнаружено, что триазиновые фосфорамидаты также подвержены индуцированному кристаллизацией динамическому разделению, таким образом, что выход прямо полученного продукта формулы I по-прежнему может быть увеличен. Чистый Sp-диастереоизомер предшественника формулы I может быть получен из Rp-диастереоизомера, начиная от чистого Rp-изомера или любой смеси Sp:Rp диастереоизомеров формулы IX, предпочтительно из смеси, содержащей большее количество Rp-изомера. Путем обработки Rp или любой смеси Sp:Rp основаниями, такими как Et3N, DIPEA, DABCO, DBU, имидиазол, 1,2-бис-(диметиламино)этан, 1,2-бис-(диэтиламино)этан, 1,3-бис-(диметиламино)пропан, 1,3-бис-(диэтиламино)пропан, изменения абсолютной конфигурации при атоме фосфора могут быть достигнуты в подходящих растворителях; Et3N или DIPEA используют в качестве основания в предпочтительных воплощениях. Подходящие растворители для индуцированного кристаллизацией динамического разделения включают, в частности, этилацетат (EtOAc), изопропилаце-тат (i-PrOAc), 2-метилтетрагидрофуран, тетрагидрофуран (THF), диоксан, диметоксиэтан, диэтоксиэтан, трет-бутилметиловый эфир (МТВЕ), циклопентилметиловый эфир, диэтиловый эфир, толуол, метилэ-тилкетон (MEK), ацетон; неполярные растворители, в частности углеводороды в целом -пентан, гексан, гептан, циклогексан, декалин, метилциклогексан, 2-метилбутан, 2-метилпентан, триэтилметан, изооктан; ароматические растворители - толуол, ксилол, мезитилен, бензол, трифтортолуол (TFT), и комбинации указанных выше растворителей. EtOAc, i-PrOAc, 2-метилтетрагидрофуран (2-MeTHF), тетрагидрофуран, гексан, гептан, циклогексан и их смеси используют в предпочтительных воплощениях.
Условия для получения чистых Sp-диастереоизомеров формулы I в соответствии с данным изобретением просты и приводят к высокому выходу хирально очень чистых продуктов. Настоящее изобретение также описывает удобное воплощение, где индуцированное кристаллизацией динамическое разделение проводили без отделения чистых Sp-диастереоизомеров формулы I из реакционной смеси, и эти Sp-диастереоизомеры формулы I выделяли только после него. Новые триазинфосфорамидаты общей формулы I, описанные в настоящем патенте, являются стабильными, достаточно реакционноспособны-ми, селективными и в целом пригодными для промышленного получения биологически активных фос-форамидатных пролекарств, в частности софосбувира формулы II. Наиболее удобными R1, R2 группами соединений формулы I являются алкоксигруппы, предпочтительно где, в частности, R1 = R2 представляют собой метокси-, этокси-, пропокси-, аллилокси-, изопропокси- или трет-бутоксигруппу.
Настоящее изобретение включает также применение новых триазинфосфорамидатов общей формулы I в получении софосбувира формулы II. В этом процессе промежуточное соединение формулы IV может быть активировано путем обработки практически любым реактивом Гриньяра (схема 5). Как правило, могут быть использованы любые первичные, вторичные и третичные хлориды, бромиды и йодиды магния, такие как хлорид трет-бутилмагния, хлорид бензилмагния, хлорид циклогексилмагния, бромид циклогексилмагния, хлорид гептилмагния, хлорид октилмагния. В предпочтительных воплощениях используют хлорид гептилмагния и хлорид трет-бутилмагния. В одном воплощении в соответствии с настоящим изобретением реактив Гриньяра:промежуточное соединение формулы IV используют в соотношениях от 1,1:1 до 2,9:1 мол.экв., предпочтительно в соотношениях от 1,8:1 до 2,2:1. Подходящие растворители или их смеси включают в особенности THF, 2-MeTHF, диоксан, MTBE, циклопентилметило-вый эфир, Et2O, диметоксиэтан, диэтоксиэтан, диметоксипропан, диэтоксипропан; предпочтительно используют THF, 2-MeTHF и циклопентилметиловый эфир. Кроме того, было неожиданно обнаружено, что
для достижения высокой степени конверсии и региоселективности вводимое промежуточное соединение формулы IV не нужно полностью растворять в растворителе или смеси растворителей, используемой перед добавлением реактива Гриньяра. С промышленной точки зрения использование таких реактивов Гриньяра, которые в ходе реакции образуют более высококипящие углеводороды (например, толуол, циклогексан, гептан, октан), может иметь большое практическое преимущество и преимущество с точки зрения безопасности. Триазинфосфорамидаты формулы I очень хорошо реагируют с промежуточным соединением формулы IV после активации реактивом Гриньяра при температурах от -20 до 20°C, предпочтительно от -10 до 10°C. В соответствии со способом получения, предложенным в настоящем патенте, триазинфосфорамидаты формулы I вступают в реакцию с промежуточным соединением формулы IV в молярных соотношениях от 10:1 до 1:10, предпочтительно от 2:1 до 1:2. Этот способ и применение триазинфосфорамидатов формулы I при получении софосбувира формулы II обеспечивают хорошие выходы с превосходной химической и оптической чистотой полученного софосбувира. Эти характеристики, очевидно, являются предпосылками для использования всего способа для промышленного получения софосбувира формулы II такого качества, который может быть непосредственно использован для получения конечной лекарственной формы.
Изобретение раскрыто более подробно с помощью рабочих примеров, приведенных ниже. Эти примеры, иллюстрирующие усовершенствование методики в соответствии с изобретением, имеют только иллюстративный характер и не ограничивают объем настоящего изобретения в любом отношении.
Примеры
Реакции обычно контролировали с использованием прибора Agilent 1100 ВЭЖХ с УФ матричными фотодиодными детекторами, оснащенными колонкой Ascentis Express C18 (2,7 мкм) (100x4,6 мм) при скорости потока 1 мл/мин, подвижная фаза А: фосфатный буфер (рН ~ 3) и фаза В: ацетонитрил (0-2 мин 10% MeCN, 2-18 мин градиент 10 -> 90% MeCN). 1H, 13С и 31Р-ЯМР спектры регистрировали с помощью 250 или 500 МГц спектрометров ЯМР Bruker Avance.
2,4,6-Триалкокси-1,3,5-триазины.
Пример 1. 2,4,6-Триметокси-1,3,5-триазин формулы Vila
Vila
Цианурхлорид (92 г, 0,5 моль) добавляли к смеси NaOH (60 г, 1,5 моль) и MeOH (500 мл) небольшими порциями при температуре 0-5°C. После добавления всего цианурхлорида смесь перемешивали при 20°C в течение 2 ч. Растворитель выпаривали in vacuo и остаток после перегонки суспендировали в H2O (500 мл). Продукт отсасывали, промывали H2O (2x40 мл) и сушили при комнатной температуре и давлении. 2,4,6-Триметокси-1,3,5-триазин формулы VIIa получали в виде твердого бесцветного вещества
(79 г, 92%).
1Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО-d,,): 3,92 (s, 9H; ОСН3) млн-1. 13С-ЯМР (63 МГц, ДМСО-d,,): 173,1, 55,1 млн-1. ВЭЖХ (200 нм): R = 6,072 мин.
Пример 2. 2,4,6-Триэтокси-1,3,5-триазин формулы Vllb
1 NaOH 1
N^N > N^N
A #L EtOH ^ A <*L
CI^N^CI ^^T^N^CT^
Vllb
Используя методику, описанную в примере 1, получали 2,4,6-триэтокси-1,3,5-триазин формулы VIIb в виде медленно кристаллизующегося бесцветного масла с выходом 93% (99 г, 93%).
1Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО-d,,): 4,34 (q, J=7,1 Гц, 6Н, ОСН2), 1,30 (t, J=6,2 Гц, 18Н; СН3) млн-1. 13С-ЯМР (63 МГц, ДМСО-d,,): 172,5,63,6, 14,0 млн-1. ВЭЖХ (200 нм): R = 11,383 мин.
Vile
Используя методику, описанную в примере 1, получали 2,4,6-триизопропокси-1,3,5-триазин формулы VIIc в виде твердого бесцветного вещества с выходом 69%.
1Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО-d,,): 5,35 (sept, J=6,2 Гц, 3Н; ОСН), 1,37 (d, J=6,2 Гц, 18Н; СН3) млн-1.
Пример 3. 2,4,6-Триизопропокси-1,3,5-триазин формулы VIIc
13С-ЯМР (63 МГц, ДМСО^): 172,6, 71,3, 21,8 млн-1. ВЭЖХ (200 нм): R = 14,625 мин. Пример 4. 2,4,6-Три(трет-бутокси)-1,3,5-триазин формулы Vlld
Раствор tBuOK в THF (1 М, 32 мл) добавляли по каплям к раствору цианурхлорида (1,84 г, 0,01 моль) в THF (7 мл) при температуре 20°C в течение 90 мин. Реакционную смесь перемешивали при 20°C в течение 4 ч, а затем концентрировали под вакуумом. Продукт выпаривания суспендировали в H2O (20 мл). Твердый продукт выделяли фильтрацией, промывали водой (3x10 мл), а затем сушили под давлением 0,1 кПа и при температуре 20°C. Триазин формулы VIId получали в виде бесцветного твердого вещества с выходом 87% (2,58 г).
1Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО-d^: 1,53 (s, 27Н; СН3) млн-1.
13С-ЯМР (63 МГц, ДМСО-d^: 171,2, 81,8, 27,9 млн-1.
ВЭЖХ (200 нм): R = 16,815 мин.
2-Гидрокси-4,6-диалкокси-триазины.
ОН N^N
Пример 5. 4,6-Диметокси-1,3,5-триазин-2-ол формулы Via
1. кон
ОМе МеОН
JL обратный холодильник
N^N
МеСГ N "ОМе
2. HCI Н90
МеО' N "ОМе
Vila Via
Смесь 2,4,6-триметокси-1,3,5-триазина формулы VIIa (34 г, 0,2 моль) и KOH (14 г, 0,25 моль) в MeOH (150 мл) нагревали до кипения в течение 20 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворитель выпаривали in vacuo и остаток после перегонки помещали в воду (50 мл). Смесь подкисляли АсОН до pH около 6 при температуре ниже 15°C. Отделившийся продукт отсасывали, промывали H2O (2x35 мл) и сушили при комнатной температуре и давлении. 2-Гидрокси-4,6-диметокси-1,3,5-триазин формулы VIa получали в виде бесцветного кристаллического вещества (27 г, 87%).
1Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО-d^: 12,42 (bs, 1Н), 3,86 (s, 6Н; OCH3) млн-1.
13С-ЯМР (63 МГц, ДМСО-d^: 168,1, 157,3, 55,2 млн-1.
ВЭЖХ (200 нм): Rt = 1,475 мин.
Пример 6. 4,6-Диэтокси-1,3,5-триазин-2-ол формулы VIb
Vllb VIb
Смесь 2,4,6-триэтокси-1,3,5-триазина формулы VIIb (21 г, 0,1 моль) и KOH (7,7 г, 0,137 моль) в tBuOH (100 мл) нагревали до 70°C в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворитель выпаривали in vacuo и остаток после перегонки помещали в воду (100 мл). Смесь подкисляли концентрированной водной соляной кислотой до pH около 3 при температуре ниже 15°C. Отделившийся продукт отсасывали, промывали H2O (2x25 мл) и сушили при комнатной температуре и давлении. 2-Гидрокси-4,6-диэтокси-1,3,5-триазин формулы VIb получали в виде бесцветного кристаллического вещества (15,3 г, 84%).
1Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО-d^: 12,31 (bs, 1Н), 4,31 (q, J=7,1 Гц, 4Н; СН2), 1,27 (t, J=7,1 Гц, 6Н; СН3) млн-1.
13С-ЯМР (63 МГц, ДМСО-d^: 168 (bs), 157,1, 64,1, 14,0 млн-1. ВЭЖХ (200 нм): Rt = 5,154 мин.
Пример 7. 4,6-Диизопропокси-1,3,5-триазин-2-ол формулы Vic
Vile Vic
Смесь 2,4,6-триизопропокси-1,3,5-триазина формулы VIIc (88 г, 0,345 моль) и KOH (24 г, 0,43 моль) в изопропиловом спирте (260 мл) нагревали до кипения в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворитель выпаривали in vacuo и остаток после перегонки помещали в воду (260 мл). Смесь подкисляли концентрированной водной соляной кислотой до pH около 3 при температуре ниже
15°C. Отделившийся продукт отсасывали, промывали H2O (3x150 мл) и сушили при комнатной температуре и давлении. 2-Гидрокси-4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин формулы VIc получали в виде бесцветного кристаллического вещества (64 г, 87%).
1Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО-d,,): 12,19 (bs, 1Н), 5,18 (sept, J=6,2 Гц, 2Н; ОСН), 1,27 (d, J=6,2 Гц, 12Н; СН3) млн-1.
13С-ЯМР (63 МГц, ДМСО-d,,): 167 (bs), 157,1, 71,7, 21,4 млн-1. ВЭЖХ (200 нм): Rt = 7,883 мин.
Пример 8. 4,6-Ди(трет-бутокси)-1,3,5-триазин-2-ол формулы VId
-^о он
1 кон 1
¦ N^N | > I N^N -
Vlld VId
Смесь 2,4,6-три(трет-бутокси)-1,3,5-триазина формулы VIId (0,6 г, 2 ммоль) и KOH (0,14 г, 2,5 ммоль) в tBuOH (260 мл) нагревали до 70°C в течение 5 ч. После охлаждения до 20°C смесь концентрировали in vacuo. Продукт выпаривания смешивали с H2O (5 мл) и подкисляли до pH около 6 водным раствором уксусной кислоты (10%). Отделившийся твердый продукт отсасывали, промывали водой (3x5 мл) и сушили в вакууме (0,1 кПа) при температуре 20°C. Продукт формулы VId получали в виде светло-желтого твердого вещества с выходом 55% (0,27 г).
1Н-ЯМР (250 МГц, ДМСО-d,,): 11,99 (bs, 1Н), 1,54 (s, 18Н; CH3) млн-1.
13С-ЯМР (63 МГц, ДМСО^): 167 (bs), 156,5, 84 (bs), 27,8 млн-1.
Фосфорные промежуточные соединения.
Пример 9. Изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-окси)фенокси фосфорилами-
но]пропионат формулы 1а
Раствор Et3N (55 г, 0,55 моль) в CH2Cl2 (300 мл) добавляли по каплям к смеси изопропилового эфира аланина гидрохлорида (44 г, 0,26 моль) и фенилдихлорфосфата (57 г, 0,27 моль) в CH2Cl2 (300 мл) при температуре от -50 до -60°C. Через 30 мин перемешивания при температуре от -50 до -60°C реакционную смесь нагревали до -5°C за 2 ч. Раствор 2-гидрокси-4,6-диметокси-1,3,5-триазина формулы VIa (41 г, 0,26 моль) и Et3N (29 г, 0,29 моль) в CH2Cl2 (160 мл) добавляли к реакционной смеси по каплям при температуре от -10 до 0°C. Реакционную смесь перемешивали при температуре от -10 до 0°C в течение 16 ч. Реакционную смесь промывали H2O (4x300 мл). Растворитель выпаривали in vacuo и продукт кристаллизовали из смеси диэтилового эфира и циклогексана. Изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат Ia получали в виде светло-желтого кристаллического вещества (21 г, 19%).
1Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d,,): 7,41 (t, J=7,9 Гц, 2Н; Ph), 7,27 (d, J=7,3 Гц, 1Н; Ph), 7,23 (t, J=7,4 Гц, 1H; Ph), 6,55 (dd, J=13,0 Гц, J=10,1 Гц, 1H, NH), 4,81 (sept, J=6,3 Гц, 1H; OCH), 4,11-4,00 (m, 1H, NH-CH), 3,96 (s, 6H, OCH3), 1,24 (d, J=7,1 Гц, 3H; NHCHCH3), 1,14 (d, J=6,3 Гц, 3H; OCHCa^), 1,11 (d, J=6,3 Гц, 3H; OCHCbH3) млн-1.
31Р-ЯМР (101 МГц, ДМСО-df,): -3,24 млн-1.
13С-ЯМР (126 МГц, ДМСО^): 173,3, 172,2 (d, J=5,3 Гц), 168,3 (d, J=2,5 Гц), 150,0 (d, J=6,1 Гц), 129,8, 125,1, 120,2 (d, J=4,9 Гц), 72,0, 68,0, 50,0 (d, J=1,1 Гц), 21,26, 21,25, 19,9 (d, J=6,6 Гц) млн-1. ВЭЖХ (210 нм): Rt = 12,295 мин.
Используя методику, описанную в примере 9, изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диэтокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат формулы Ib получали в виде бесцветного кристаллического вещества с выходом 38%.
Пример 10. Изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диэтокси-1,3,5-триазин-2-окси)фенокси фосфорилами-но]пропионат формулы lb
1Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-df,): 7,41 (t, J=7,9 Гц, 2Н; Ph), 7,26 (d, J=8,6 Гц, 1H; Ph), 7,23 (d, J=7,4 Гц, 1H; Ph), 6,54 (dd, J=13,2 Гц, J=10,0 Гц, 1H; NH), 4,81 (sept, J=6,4 Гц, 1H; OCH), 4,39 (q, J=7,1 Гц, 4H, OCH2), 4,07-3,97 (m, 1H, NH-CH), 1,32 (t, J=7,1 Гц, 6H, 2xOCH2CH3), 1,23 (d, J=7,1 Гц, 3H; NHCHCH3), 1,13 (d, J=6,3 Гц, 3H; OCHCaH3), 1,11 (d, J=6,2 Гц, 3H; OCHCbH3) млн-1.
31Р-ЯМР (101 МГц, ДМСО-df,): -3,34 млн-1.
13С-ЯМР (126 МГц, ДМСО-df,): 172,7, 172,2 (d, J=5,4 Гц), 168,2 (d, J=2,3 Гц), 150,0 (d, J=6,1 Гц), 129,8, 125,1, 120,2 (d, J=4,9 Гц), 68,1, 64,4, 50,1 (d, J=1,5 Гц), 21,31, 21,26, 19,9 (d, J=6,7 Гц), 13,9 млн-1. ВЭЖХ (210 нм): Rt = 13,954 мин.
Пример 11. Изопропил 2-(S)-[(S)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфорил-амино]пропионат формулы 1с
ческого вещества с выходом 47%.
1Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 7,41 (t, J=7,9 Гц, 2Н; Ph), 7,25 (d, J=8,6 Гц, 1Н; Ph), 7,22 (t, J=7,5 Гц, 1H; Ph), 6,52 (dd, J=13,4 Гц, J=10,0 Гц, 1H; NH), 5,21 (sept, J=6,2 Гц, 1H; N=C-OCH), 4,82 (sept, J=6,3 Гц, 1H; O=C-OCH), 4,05-3,95 (m, 1H; NH-CH), 1,312 (d, J=6,1 Гц, 6H; N=C-OCHCaH3), 1,310 (d, J=6,3 Гц, 6H; N=C-OCHCbH3), 1,24 (d, J=7,1 Гц, 3H; NHCHCH3), 1,13 (d, J=6,2 Гц, 3H; O=C-OCHCaH3), 1,10 (d, J=6,2 Гц,
3H; O=C-OCHCbH3) млн-1.
31Р-ЯМР (101 МГц, ДМСО-df,): -3,45 млн-1.
13С-ЯМР (126 МГц, ДМСО-d6): 172,3, 172,1 (d, J=5,6 Гц), 168,3 (d, J=2,5 Гц), 150,0 (d, J=6,1 Гц),
129,8, 125,1, 120,2 (d, J=4,9 Гц), 72,0, 68,2, 50,0 (d, J=1,1 Гц), 21,38, 21,36, 21,34, 21,24, 19,9 (d, J=6,6 Гц) -1
млн .
ВЭЖХ (210 нм): Rt = 15,272 мин.
Пример 12. Изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-
окси)феноксифосфориламино]пропионат формулы 1с
Изопропил 2-(S)-[(R)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат (1 г) (Rp:Sp больше 80:20) растворяли в 2-метилтетрагидрофуране (1 мл). К раствору добавляли гептан (5 мл) и DIPEA (0,2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение четырех суток. Отделившийся продукт отсасывали и промывали смесью 2-метилтетрагидрофуран/гептан. Изопропил 2-(S)-[(S)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат формулы Ic получали в виде бесцветного кристаллического вещества с выходом 45% (0,454 г).
Пример 13. Изопропил 2-(S)-[(S)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфорил-амино]пропионат формулы 1с
Используя методику, описанную в примере 9, изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат формулы Ic получали в виде бесцветного кристаллического вещества с выходом 46% (57 г). Маточные растворы, содержащие смесь Sp:Rp примерно 13:87, концентрировали in vacuo и снова растворяли в EtOAc (51 мл). К раствору медленно добавляли цикло-гексан (255 мл), а затем Et3N (10 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение двух суток. Отделившийся продукт отсасывали и промывали смесью EtOAc/циклогексан и сушили in vacuo с
выходом 27% (34 г) второй фракции кристаллического изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионата формулы Ic.
Пример 14. Изопропил 2-(S)-{(S)-[4,6-ди(трет-бутокси)-1,3,5-триазин-2-окси]феноксифосфорил-амино}пропионат формулы Id
Используя методику, описанную в примере 9, получали изопропил 2-^)-{^)-[4,6-ди(трет-бутокси)-1,3,5-триазин-2-окси]феноксифосфориламино}пропион ат (Id) в виде бесцветного кристаллического вещества с выходом 14%.
1Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО^6): 7,40 (t, J=7,9 Гц, 2Н; Ph), 7,28 (d, J=7,3 Гц, 1Н; Ph), 7,23 (t, J=7,4 Гц, 1H; Ph), 6,54 (dd, J=13,0 Гц, J=10,1 Гц, 1H; NH), 4,81 (sept, J=6,3 Гц, 1H; OCH), 4,11-4,00 (m, 1H; NH-CH), 1,53 (s, 18H; C(CH3)3), 1,24 (d, J=7,1 Гц, 3H; NHCHCH3), 1,14 (d, J=6,3 Гц, 3Н; ОСНСаН3), 1,12 (d, J=6,3 Гц, 3H; OCHCbH3) млн-1.
31Р-ЯМР (101 МГц, ДМСО^6): -3,48 млн-1.
13С-ЯМР (126 МГц, ДМСО-d6): 172,9, 172,2 (d, J=5,3 Гц), 168,2 (d, J=2,5 Гц), 150,5 (d, J=6,1 Гц), 129,8, 125,1, 120,2, (d, J=4,9 Гц), 81,8, 68,0, 50,3, (d, J=1,4 Гц), 27,8, 21,30, 21,25, 19,9 (d, J=6,7 Гц) млн-1. Целевые соединения.
Ic IV II
Раствор трет-BuMgCl (17,35 мл, 17,35 ммоль, 2,1 экв. 1 М раствор в THF) добавляли по каплям к раствору соединения формулы IV (2,15 г, 8,26 ммоль) в THF (66 мл) при -15°C в течение 1 ч. Реакционную смесь перемешивали при температуре от -15°C в течение 1 ч, затем нагревали до температуры 5°C в течение 30 мин и перемешивали в течение еще 2 ч. Затем добавляли по каплям раствор 2-(S)-[(S)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионата формулы Ic (3,99 мг, 8,26 ммоль, 1 экв.) в THF (16 мл) и реакционную смесь перемешивали при температуре -5°C. Через 48 ч к реакционной смеси в течение 30 мин добавляли 2 М HCl (100 мл) и затем EtOAc (100 мл). Органический слой промывали 2 М HCl (50 мл), 22x30 мл 2,5% Na2CO3, водой (50 мл), солевым раствором (50 мл) и сушили над Na2SO4. После удаления растворителя путем перегонки при пониженном давлении, получали 3,38 г сырого продукта в виде белой пены. Сырой продукт растворяли в смеси DCM/толуол (20 мл) при комнатной температуре, вносили затравку II и смесь перемешивали в течение 12 ч. Продукт отсасывали на фрит, промывали холодным дихлорметаном и сушили в вакуумном сушильном шкафу (40°C, 200 Па) в течение 8 ч, что привело к получению 3,02 г (69%) софосбувира формулы II в виде белого порошка (чистота 99,5%, оптическая чистота более 99,9%).
1Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО) 5 11,50 (s, 1Н), 7,53 (d, J=7,0 Гц, 1Н), 7,33-7,36 (m, 2H), 7,18-7,21 (m, 2Н), 7,117-7,20 (m, 1Н), 6,03 (dd, J=12,7, 10,4 Гц, 1Н), 5,83 (d, J=4,3 Гц, 1Н), 5,51 (dd, J=8,1, 1,6 Гц, 1Н), 5,51 (dd, J=8,1, 1,6 Гц, 1Н), 4,85 (hept, J=6,3 Гц, 1Н), 4,33 (dd, J=11,1, 5,7 Гц, 1Н), 4,20 (dt, J=11,6, 6,0 Гц, 1Н), 3,97 (dd, J=9,1, 4,7 Гц, 1Н), 3,85-3,76 (m, 1Н), 1,25 (d, J=22,6 Гц, 1Н), 1,22 (d, J=6,8 Гц, 1Н), 1,15 (dd, J=6,3, 0,8 Гц, 1Н).
13С-ЯМР (126 МГц, ДМСО) 5 172,64 (d, J=5,1 Гц), 162,78 (s), 150,71 (d, J=6,3 Гц), 150,47 (s), 129,67 (s), 124,63 (s), 120,09 (d, J=4,9 Гц), 102,28 (s), 101,04 (s), 99,60 (s), 79,47 (s), 71,51 (s), 68,02 (s), 64,66 (s), 49,79 (s), 26,86 (s), 21,42 (d, J=4,3 Гц), 19,81 (d, J=6,5 Гц), 16,56 (d, J=25,2 Гц).
31Р-ЯМР (101 МГц, ДМСО) 5 3,80 (s).
ВЭЖХ (210 нм): Rt = 9,853 мин.
Используя методику, описанную в примере 15, и изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат формулы Ia, получали софосбувир формулы II с выходом
63%.
Раствор н-гептил MgCl (2,7 мл, 2,71 ммоль, 2,05 экв. 1 М раствор в THF) добавляли по каплям к раствору соединения формулы IV (344 мг, 1,32 ммоль) в THF (10 мл) при температуре -15°C в течение 1 ч. Реакционную смесь перемешивали при температуре -15°C в течение 1 ч, затем нагревали до -5°C в течение 30 мин и перемешивали в течение еще 2 ч. Затем по каплям добавляли раствор 2-^)-[^)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионата формулы Ic
(606 мг, 1,26 ммоль, 0,95 экв.) в THF (2,6 мл) и реакционную смесь перемешивали при температуре -5°C. Через 48 ч к реакционной смеси добавляли в течение 30 мин 2 М HCl (15 мл) и затем EtOAc (15 мл). Органический слой промывали 2 М HCl (5 мл), 22x3 мл 2,5% Na2CO3, водой (5 мл), солевым раствором (5 мл) и сушили над Na2SO4. После удаления растворителя путем перегонки при пониженном давлении получали сырой продукт в количестве 489 мг в виде белой пены. При комнатной температуре неочищенный продукт растворяли в смеси DCM/толуол (5 мл), вносили затравку II и смесь перемешивали в течение 6 ч. Продукт отсасывали на фрит, промывали холодным DCM и сушили в вакуумном сушильном шкафу (40 °C, 200 Па) в течение 4 ч, что приводило к получению 426 г (61%) софосбувира формулы II в виде белого порошка (чистота 99,1%, оптическая чистота более 99,9%).
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ 1. 1,3,5-Триазин-2-ил фосфорамидат общей формулы (I)
где R1 и R2 независимо представляют собой Н, C1-C6 неразветвленный или разветвленный алкил, C1-C6 неразветвленную или разветвленную алкоксигруппу, C1-C6 неразветвленную или разветвленную алкилсульфанильную группу, C1-C6 неразветвленную или разветвленную моноалкиламино- или диалки-ламиногруппу, пирролидиногруппу, пиперидиногруппу или морфолиногруппу,
а также его стереоизомеры, соли и кристаллические и аморфные формы.
2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R1 и R2 являются одинаковыми метокси-, этокси-, пропокси-, аллилокси-, изопропокси- или трет-бутоксигруппами.
3. Соединение по п.1 или 2, имеющее структуру формулы (Ia)
название которого - изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-окси)фенокси-фосфориламино]пропионат.
4. Соединение по п.1 или 2, имеющее структуру формулы (Ib)
название которого - изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-
окси)феноксифосфориламино]пропионат.
5. Соединение по п.1 или 2, имеющее структуру формулы (Ic)
название которого - изопропил 2-^)-[^)-(4,6-диизопропокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат.
6. Соединение по п.1 или 2, имеющее структуру формулы (Id)
название которого - изопропил 2-(S)-[(S)-(4,6-ди-трет-бутокси-1,3,5-триазин-2-окси)феноксифосфориламино]пропионат.
7. Способ получения соединений формулы (I)
определенных в любом из пп.1-6, включающий реакцию хлорпроизводного формулы (V) с производными триазина формулы (VI)
в присутствии подходящего основания в подходящих растворителях, отличающийся тем, что отдельные изомеры, охарактеризованные в пп.1 и 6, получают из образующейся смеси диастереоизомеров соединения формулы (IX)
или путем прямого отделения и/или путем индуцированного кристаллизацией динамического разделения и последующего отделения, где исходное соединение (V) получают in situ путем взаимодействия ^)-изопропил 2-аминопропаноата (изопропилового эфира L-аланина) с фенилдихлорфосфатом.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что указанное подходящее основание выбирают из группы, включающей триэтиламин, ^^диизопропилэтиламин, 1,8-диазабицикло[5.4.0.]ундец-7-ен, 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан, 1-метилморфолин, 1-этилпиперидин, Na2CO3, K2CO3, Cs2CO3, NaHCO3, KHCO3, NaOAc и KOAc.
9. Способ по п.7 или 8, отличающийся тем, что указанный подходящий растворитель выбирают из группы, включающей дихлорметан, хлороформ, тетрагидрофуран, 2-метилтетрагидрофуран, циклопен-тилметиловый эфир, диметоксиэтан, трет-бутилметиловый эфир, толуол, трифтортолуол.
нсЗ F
активированного подходящим агентом, с соединениями формулы (I), как определено в пп.1-6, в подходящем растворителе при подходящей температуре.
10. Способ по любому из пп.7-9, отличающийся тем, что из образующейся смеси диастереоизоме-ров соединения формулы (I) Sp-диастереоизомеры отделяют в виде кристаллов с хиральной чистотой 99% и выше.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что маточные растворы, полученные после отделения хи-рально чистых кристаллов Sp-диастереоизомеров соединения формулы (I), подвергают индуцированному кристаллизацией динамическому разделению и получают другую фракцию кристаллов Sp-диастереоизомеров соединения формулы (I) с хиральной чистотой 99% и выше.
12. Способ по п.7, отличающийся тем, что Sp-диастереоизомеры соединения формулы (I) получают путем индуцированного кристаллизацией динамического разделения, где получают единую фракцию Sp-диастереоизомеров соединения формулы (I) с хиральной чистотой 99% и выше.
13. Способ по п.11 или 12, отличающийся тем, что указанное индуцированное кристаллизацией динамическое разделение проводят путем обработки смесей диастереоизомеров подходящим основанием в подходящем растворителе.
14. Способ по п.13, отличающийся тем, что указанное основание представляет собой триэтиламин, ^^диизопропилэтиламин, 1,8-диазабицикло[5.4.0.]ундец-7-ен, 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан, имидазол, 1,2-бис-(диметиламино)этан, 1,2-бис-(диэтиламино)этан, 1,3-бис-(диметиламино)пропан или 1,3-бис-(диэтиламино)пропан.
15. Способ по п.13 или 14, отличающийся тем, что указанный растворитель представляет собой этилацетат, изопропилацетат, 2-метилтетрагидрофуран, тетрагидрофуран, диоксан, диметоксиэтан, ди-этоксиэтан, трет-бутилметиловый эфир, циклопентилметиловый эфир, диэтиловый эфир, толуол, мети-лэтилкетон, ацетон, пентан, гексан, гептан, циклогексан, декалин, метилциклогексан, 2-метилбутан, 2-метилпентан, триэтилметан, изооктан, толуол, ксилол, бензол, трифтортолуол или их смеси.
16. Способ получения софосбувира формулы (II)
17. Способ получения софосбувира формулы (II) по п.16, отличающийся тем, что в качестве активирующего агента используют реактив Гриньяра.
18. Способ по п. 16 или 17, отличающийся тем, что указанный реактив Гриньяра представляет собой хлорид трет-бутилмагния, хлорид бензилмагния, хлорид циклогексилмагния, бромид циклогексилмаг-ния, хлорид гептилмагния или хлорид октилмагния.
19. Способ по любому из пп.16-18, отличающийся тем, что реактив Гриньяра: промежуточное соединение (IV) используют в соотношениях от 1,1:1 до 2,9:1 мол.экв.
20. Способ по любому из пп.16-19, отличающийся тем, что указанный растворитель представляет собой тетрагидрофуран, 2-метилтетрагидрофуран, диоксан, трет-бутилметиловый эфир, циклопентилме-тиловый эфир, диэтиловый эфир, диметоксиэтан, диэтоксиэтан, диметоксипропан или диэтоксипропан.
21. Способ по любому из пп.16-20, отличающийся тем, что указанное активированное промежуточное соединение (IV) подвергают взаимодействию с соединениями формулы (I) при температурах от -20 до 20°C.
22. Способ по любому из пп.16-21, отличающийся тем, что указанное активированное промежуточное соединение (IV) подвергают взаимодействию с соединениями формулы (I) в мольных соотношениях от 10:1 до 1:10.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
029775
- 1 -
029775
- 1 -
029775
- 1 -
029775
- 2 -
029775
- 1 -
029775
- 4 -
029775
- 3 -
029775
- 3 -
029775
- 4 -
029775
- 4 -
029775
- 7 -
029775
- 7 -