EA 028506B1 20171130

	Патентная документация ЕАПВ
Запрос:	ea000028506b*\id
Результат:	ID\|Номер и дата охранного документа

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

1. Соединение формулы (I) где R представляет собой водород или фтор; m равно 0, 1, 2 или 3; R1 представляет собой 4-6-членный гетероциклил и R2 представляет собой 3- или 6-членный циклоалкил, 4-6-членный гетероциклил или гетероарил; где гетероциклил представляет собой насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, где один или два атома углерода заменяются гетероатомами, выбранными из азота, кислорода и серы; гетероарил представляет собой 6- или 5-членное ароматическое гетероциклическое кольцо с 1-3 гетероатомами, выбранными из N, О или S; или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение формулы (I) по п.1, отличающееся тем, что m равно 0 или 1; R1 представляет собой 6-членный гетероциклил и R2 представляет собой 3- или 6-членный циклоалкил, 6-членный гетероциклил или гетероарил.

3. Соединение формулы (I) по п.2, отличающееся тем, что когда m равно 0, R1 представляет собой пиперидиновое кольцо и R2 представляет собой циклогексильное кольцо; когда m равно 1, R1 представляет собой пиперидиновое кольцо и R2 представляет собой пиридиновое кольцо; или его фармацевтически приемлемая соль.

4. Соединение формулы (I) по п.1, выбранное из группы, состоящей из амида 3-оксо-2-(1-пиридин-4-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 3-оксо-2-(1-тиофен-2-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 3-оксо-2-(1-пиридин-3-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 2-(1-фуран-2-илметилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 3-оксо-2-(1-тиофен-3-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 2-(1-фуран-3-илметилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 3-оксо-2-(1-пиридин-2-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 3-оксо-2-[1-(1Н-пиррол-2-илметил)пиперидин-4-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 2-(1-циклопропилметилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 3-оксо-2-[1-(тетрагидропиран-4-ил)пиперидин-4-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-6-фтор-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 2-(1-бензилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты или их фармацевтически приемлемой соли.

5. Способ получения соединения формулы (I) по п.1, который включает следующую последовательность стадий: стадия h) циклизация соединения формулы (V) где Т представляет собой (C ₁ -C ₆ )алкил или арил(C ₁ -C ₆ )алкил, посредством реакции с помощью соответствующего амина формулы (XIII) где R1 является таким, как определено в п.1, и X представляет собой либо а) R2-[CH ₂ ] _m -, где R2 и m являются такими, как определено в п.1, либо б) соответствующую защитную группу азота, когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот; в присутствии N-бромсукцинимида с помощью радикального инициатора; стадия с') гидролиз полученного в результате соединения формулы (IV) где R1 и X являются такими, как определено выше, с тем, чтобы получить соединение формулы (I), как определено в п.1, когда X представляет собой R2-[CH ₂ ] _m -, где R2 и m являются такими, как определено в п.1; или соединение формулы (III), когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота где R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота; стадия i) снятие защиты с соединения формулы (III), как определено выше, с тем, чтобы получить либо соединение формулы (I), как определено выше, либо соединение формулы (II) где R1 является таким, как определено выше; стадия I) восстановительное алкилирование полученного в результате соединения формулы (II), как определено выше, с помощью соответствующего алкилирующего агента формулы (XIV) где Y представляет собой либо формильную группу, либо, когда m=1, атом кислорода, соединенный с R2 с помощью двойной связи (=O), с тем, чтобы получить соединение формулы (I) по п.1.

6. Способ получения соединения формулы (I) по п.1, который включает следующую последовательность стадий: стадия m) осуществление восстановительного аминирования на фуран-2-карбальдегиде (XV) с помощью соответствующего амина формулы (XIII) где R1 является таким, как определено в п.1, и X представляет собой либо R2-[CH ₂ ] _m -, где R2 и m являются такими, как определено в п.1, либо соответствующую защитную группу азота, когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот; стадия n) осуществление реакции Дильса-Альдера на полученном в результате соединении формулы (XVI) где R1 и X являются такими, как определено выше, с помощью малеинового ангидрида; стадия o) ароматизирование полученного в результате соединения формулы (XVII) где R1 и X являются такими, как определено выше; стадия р) амидирование полученного в результате соединения формулы (XVIII) где R1 и X являются такими, как определено выше, с тем, чтобы получить соединение формулы (I), как определено выше, когда X представляет собой R2-[CH ₂ ] _m -, где R2 и m являются такими, как определено выше, или соединение формулы (XX), когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота где R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота; стадия i') снятие защиты с соединения формулы (XX), как определено выше; стадия I') алкилирование полученного в результате соединения формулы (XXI) где R1 является таким, как определено выше, с помощью соответствующего алкилирующего агента формулы (XIV) где Y представляет собой либо формильную группу, либо, когда m=1, атом кислорода, соединенный с R2 с помощью двойной связи (=О), с тем, чтобы получить соединение формулы (I), как определено выше; также, в случае, когда во время стадии o), соединение, полученное в результате ароматизации соединения формулы (XVII), представляет собой соединение формулы (XIX), т.е. когда X представляет собой лабильную защитную группу азота, после нее осуществляют стадию q): стадия q) размещение соответствующей защитной группы азота на полученном в результате соединении формулы (XIX) где R1 является таким, как определено выше, с тем, чтобы получить соединение формулы (XVIII), где R1 является таким, как определено выше, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота, которое затем подвергают воздействию последовательности реакций р), i') и I'), описанных выше, с тем, чтобы получить соединение формулы (I) по п.1.

7. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено в п.1, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель или разбавитель.

8. Фармацевтическая композиция по п.7, дополнительно содержащая один или несколько химиотерапевтических агентов, содержащих алкилирующие агенты.

9. Фармацевтическая композиция по п.8, где химиотерапевтический агент представляет собой алкилирующий агент, который представляет собой темозоломид.

10. Комбинированный препарат, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено в п.1, и один или несколько химиотерапевтических агентов, для одновременного, раздельного или последовательного использования в противораковой терапии.

11. Комбинированный препарат по п.10, где химиотерапевтический агент представляет собой алкилирующий агент, который представляет собой темозоломид.

12. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено в п.1, в качестве лекарственного препарата.

13. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено в п.1, при производстве лекарственного препарата с противораковой активностью.

Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

Евразийское 028506 (13) B1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.11.30
(21) Номер заявки 201590820
(22) Дата подачи заявки
2013.10.23
(51) Int. Cl.
C07D 405/14 (2006.01) C07D 413/14 (2006.0l) C07D 403/02 (2006.0l)
C07D 403/04 (2006.01) C07D 403/14 (2006.01) C07D 405/04 (2006.01) C07D 407/14 (2006.01)
C07D 409/14 (2006.0l) C07D 413/06 (2006.0l) C07D 209/46 (2006.0l) A61K31/4035 (2006.0l) A61K31/454 (2006.0l) A61P35/00 (2006.0l)
(54)
ПРОИЗВОДНЫЕ 4-КАРБОКСАМИДО-ИЗОИНДОЛИНОНА В КАЧЕСТВЕ СЕЛЕКТИВНЫХ ИНГИБИТОРОВ PARP-1, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И
ПРИМЕНЕНИЕ
(31) 12190130.0
(32) 2012.10.26
(33) EP
(43) 2015.11.30
(вв) PCT/EP2013/072165
(87) WO 2014/064149 2014.05.01
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
НЕРВИАНО МЕДИКАЛ САЙЕНСИЗ С.Р.Л. (IT)
(72) Изобретатель:
Папео Джанлука Мариано Энрико (IT), Красавин Михаил Юрьевич (AU), Орсини Паоло, Сколаро Алессандра (IT)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU) (56) WO-Al-20ll006794
GANDHI V.B. ЕТ AL.: "Discovery and SAR of Substituted 3-oxoisoindoline-4-carboxamides as potent inhibitors of poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) for the treatment of cancer", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, PERGAMON, GB, vol. 20, no. 3, 1 February 2010 (2010-02-01), pages 1023-1026, XP026861859, ISSN: 0960-894X [retrieved on 2010-01-19], cited in the application, the whole document
(57) Предлагаются замещенные производные 4-карбоксамидо-изоиндолинона, которые селективно ингибируют активность поли(ADP-рибоза) полимеразы PARP-1 по сравнению с поли(ADP-рибоза) полимеразой PARP-2. По этой причине соединения по настоящему изобретению являются пригодными для использования при лечении таких заболеваний, как рак, сердечно-сосудистые заболевания, повреждения центральной нервной системы и различные формы воспаления. Настоящее изобретение также предлагает способы получения этих соединений, фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, и способы лечения заболеваний с использованием фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.
Настоящее изобретение предлагает новые замещенные производные 4-карбоксамидо-изоиндолинона, которые, как показано, представляют собой сильнодействующие и селективные ингибиторы поли(ADP-рибоза) полимеразы-1 (PARP-1) по сравнению с поли(ADP-рибоза) полимеразой-2 (PARP-2), и, таким образом, являются пригодными для использования при терапии раковых заболеваний, сердечно-сосудистых заболеваний, повреждения нервной системы и воспаления. Настоящее изобретение также предлагает способы получения этих соединений, фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, и способы лечения заболеваний с использованием фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.
Поли(ADP-рибоза) полимеразы принадлежат к семейству из 18 членов, которые катализируют добавление единиц ADP-рибозы к ДНК или к различным акцепторным белкам, которые влияют на такие разнообразные клеточные процессы, как репликация, транскрипция, дифференциация, регуляция гена, деградация белка и поддержание веретена. PARP-1 и PARP-2 являются единственными ферментами среди PARP, которые активируются при повреждении ДНК и вовлечены в репарацию ДНК.
PARP-1 представляет собой ядерный белок, состоящий из трех доменов: N-конечного домена связывания ДНК, содержащего два цинковых пальца, домена аутомодификации и С-конечного каталитического домена. PARP-1 связывается с помощью домена с "цинковыми пальцами" с одноцепочечными разрывами ДНК (SSB), расщепляет NAD+ и присоединяет множество единиц ADP-рибозы к целевым белкам, таким как гистоны и различные ферменты для репарации ДНК. Это дает в результате сильно отрицательно заряженную мишень, что, в свою очередь, приводит к раскручиванию и репарации поврежденной ДНК через путь репарации с вырезанием оснований. В моделях нокаутированных мышей делеция PARP-1 ухудшает репарацию ДНК, но это не является эмбрионально летальным. Дважды нокаутированные относительно PARP-1 и PARP-2 мыши, вместо этого, гибнут в течение раннего эмбриогенеза, это говорит о том, что эти два фермента демонстрируют не полностью перекрывающиеся функции. Усиление экспрессии и/или активности PARP-1 показано в различных линиях опухолевых клеток, включая злокачественные лимфомы, гепатоклеточную карциному, карциному шейки матки, карциному ободочной и прямой кишки, лейкемию. Это может позволить опухолевым клеткам выдерживать генотоксиче-ский стресс и повысить их стойкость к агентам, повреждающим ДНК. Как следствие, ингибирование PARP-1 с помощью малых молекул, как показано, сенсибилизирует опухолевые клетки для цитотоксиче-ской терапии (например, для темозоломида, препаратов платины, ингибиторов топоизомеразы и излучения). Видимо существует значительное окно между способностью ингибитора PARP к усилению терапевтических преимуществ и нежелательными побочными воздействиями. Хотя терапевтическое применение ингибиторов PARP в сочетании с агентами, повреждающими ДНК, не является новым, использование этих агентов в качестве монотерапии на конкретном генетическом фоне опухоли, дефицитном относительно репарации при гомологичной рекомбинации ДНК, представляет собой новый подход. Индивидуумы с мутациями гетерозиготной зародышевой линии в генах репарации при гомологичной рекомбинации либо BRCA-1, либо BRCA-2 демонстрируют высокие риски в течение всего времени жизни относительно развития рака молочной железы и других раковых заболеваний. Опухоли, возникающие у носителей мутации, как правило, имеют потерянную аллель дикого типа и не экспрессируют функциональных белков BRCA-1 и BRCA-2.
Следовательно, потеря этих двух белков приводит к опухолеспецифичной дисфункции при репарации разрывов двойной нити посредством гомологичной рекомбинации. Известно, что, когда PARP-1 ин-гибируются, репарация с вырезанием оснований уменьшается и однонитевые разрывы, которые генерируются в течение нормального клеточного цикла, продолжают существовать. Установлено также, что репликационные вилки, которые встречают неотрепарированный разрыв, могут образовывать двухните-вые разрывы, которые обычно репарируются посредством гомологичной рекомбинации. Опухолевые клетки, которые являются дефицитными относительно репарации при гомологичной рекомбинации, такие как мутанты BRCA-1 и BRCA-2, являются по этой причине очень чувствительными к ингибирова-нию PARP по сравнению с клетками дикого типа. Это соответствует концепции синтетической летальности, при которой два дефекта пути сами по себе являются безопасными, но в сочетании становятся летальными: ингибиторы PARP могут быть более эффективными для пациентов с опухолями с конкретными дефектами репарации ДНК, не влияя на нормальные гетерозиготные ткани. Предполагаемая популяция пациентов включает, кроме мутантов BRCA, которым соответствует большинство случаев наследственного рака молочной железы и яичников, также значительную долю спорадических раковых заболеваний с дефектами репарации при гомологичной рекомбинации, явление, именуемое "BRCA-ция". Например, это метилирование промоторов генов BRCA-1 или FANCF и амплификация гена EMSY, который кодирует белок, взаимодействующий с BRCA-2. Посредством расширения рациональной и синтетической летальности PARP и BRCA-1 и BRCA-2, является вероятным, что дефицит любого гена, который не является избыточным при репарации двухнитевого разрыва, должен быть чувствительным к ингибиро-ванию PARP. Например, дефицит ATM, обнаруживаемый у пациентов с пролимфоцитарной лейкемией Т-клеток и хронической лимфоцитарной лейкемией В-клеток и с раком молочной железы, и мутации зародышевой линии CHK2, идентифицируемые при саркоме, раке молочной железы, раке яичников и при опухолях головного мозга, также, как показано, являются синтетически летальными в сочетании с
дефицитом PARP, а также с дефицитом других известных белков пути HR (включая RAD51, DSS1, RAD54, RPA1, NBS1, ATR, CHK1, CHK2, FANCD2, FANCA, FANCC и pTEN). Мутации FANCC и FANCG показаны при раке поджелудочной железы. Метилирование промотора FANCF обнаружено в карциномах яичников, молочной железы, шейки матки, легких. Первое клиническое доказательство того, что рак с мутацией BRCA может быть чувствительным к монотерапии с помощью ингибитора PARP, происходит от исследования фазы I перорального низкомолекулярного ингибитора PARP Olaparib. В популяции фазы I, обогащенной носителями мутации BRCA, наблюдается 47% объективная доля реакции у 19 пациентов с мутациями BRCA и раком молочной железы, яичников и простаты. Другие ингибиторы PARP, такие как Rucaparib и Veliparib, как известно в настоящее время, участвуют в клинических исследованиях фазы II в комбинации, а также как отдельные агенты. Более ранние показатели заключаются в том, что эти виды терапии показывают низкую токсичность в качестве отдельного агента. В любом случае, соединения с высокой селективностью относительно PARP-1, как ожидается, будут показывать меньшую токсичность с точки зрения временного графика хронического лечения или в сочетании.
PARP-1 также вовлечен в ангиогенез. В частности, ингибирование PARP-1 видимо дает в результате понижение аккумуляции индуцируемого гипоксией фактора транскрипции 1а, важного регулятора адаптации опухолевых клеток к гипоксии.
Провоспалительные стимулы запускают высвобождение провоспалительных медиаторов, которые индуцируют продуцирование пероксинитратных и гидроксильных радикалов, которые, в свою очередь, дают однонитевые разрывы ДНК с последующим активированием PARP-1. Сверхактивирование PARP-1 дает в результате обеднение NAD+ и накапливает энергию, что, в конечном счете, приводит к дисфункции и некрозу клеток. Этот механизм клеточного суицида вовлечен в патологический механизм инсульта, ишемии миокарда, диабета, сердечно-сосудистой дисфункции, связанной с диабетом, шока, травматического повреждения центральной нервной системы, артрита, колита, аллергического энцефаломиелита и различных других форм воспаления. Особый интерес представляет собой усиление с помощью PARP-1 транскрипции, медиируемой ядерным фактором KB, которая играет центральную роль в экс-прессировании воспалительных цитокинов, хемокинов и воспалительных медиаторов.
WO 2007/047646 на имя Janssen Pharmaceutica описывает замещенные дигидроизоиндолоны, пригодные для использования при лечении расстройств, связанных с киназой; Wender et al. Заявляют в патенте США № 7232842 аналоги изоиндолона в качестве ингибиторов киназы. Заявка на патент США 2008/0108659, Gandhi et al. описывает 3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндолы в качестве ингибиторов поли(ADP-рибоза) полимеразы, приведенные также в Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 1023-1026, WO 2011/006794 и WO 2011/006803, оба на имя Nerviano Medical Sciences, описывают 3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоксамиды в качестве селективных ингибиторов PARP-1.
Настоящее изобретение предлагает новые производные замещенного 4-карбоксамидо-изоиндолинона, которые, как показано, являются сильнодействующими и селективными ингибиторами PARP-1 по сравнению с PARP-2 и, таким образом, являются пригодными для использования при терапии раковых заболеваний, сердечнососудистых заболеваний, повреждения нервной системы и воспаления.
Настоящее изобретение также предлагает способ получения этих соединений, фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, и способы лечения заболеваний с использованием фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.
Соответственно, первой целью настоящего изобретения является получение соединения формулы
(I)
где R представляет собой водород или фтор и m, R1 и R2 имеют следующие значения:
a) m равно 0, 1, 2 или 3;
R1 представляет собой 4-6-членный гетероциклил и R2 представляет собой 3- или 6-членный цик-лоалкил, 4-6-членный гетероциклил или гетероарил;
где гетероциклил представляет собой насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, где один или два атома углерода заменяются гетероатомами, выбранными из азота, кислорода и серы;
гетероарил представляет собой 6- или 5-членное ароматическое гетероциклическое кольцо с 1-3 ге-тероатомами, выбранными из N, О или S; или
b) m равно 0 или 1;
R1 представляет собой 6-членный гетероциклил и R2 представляет собой 3- или 6-членный цикло-алкил, 6-членный гетероциклил или гетероарил;
или
c) когда m равно 0, R1 представляет собой пиперидиновое кольцо и R2 представляет собой цикло-гексильное кольцо;
когда m равно 1, R1 представляет собой пиперидиновое кольцо и R2 представляет собой пиридиновое кольцо;
или его фармацевтически приемлемой соли.
Соединения формулы (I), как определено выше, являются сильнодействующими и селективными ингибиторами PARP-1 по сравнению с PARP-2, и таким образом, являются пригодными для использования при терапии раковых заболеваний, сердечнососудистых заболеваний, повреждения нервной системы и воспаления.
Настоящее изобретение также предлагает способы синтеза замещенных производных 4-карбоксамидоизоиндолинона формулы (I), как определено выше, с помощью способа, состоящего из стандартных синтетических преобразований.
Соединение предназначено для лечения конкретных типов раковых заболеваний, включая, но не ограничиваясь этим, карциномы, такие как карциномы мочевого пузыря, молочной железы, толстой кишки, почек, печени, легких, включая мелкоклеточный рак легких, пищевода, желчного пузыря, яичников, поджелудочной железы, желудка, шейки матки, щитовидной железы, простаты и кожи, включая карциному сквамовых клеток; гематопоэтические опухоли лимфоидного происхождения, включая лейкемию, острую лимфоцитарную лейкемию, острую лимфобластную лейкемию, лимфому В-клеток, лим-фому Т-клеток, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточную лимфому и лимфо-саркому Беркитта; гематопоэтические опухоли миелоидного происхождения, включая острую и хроническую миелогенную лейкемию, миелодиспластический синдром и промиелоцитарную лейкемию; опухоли мезенхимального происхождения, включая фибросаркому и саркому Эвинга; опухоли центральной и периферической нервной системы, включая астроцитому, нейробластому, глиому и шванному; и другие опухоли, включая меланому, семиному, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксеродерму, кератоксантому, фолликулярный рак щитовидной железы и саркому Капоши.
Настоящее изобретение также предлагает фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель или разбавитель.
В дополнение к соединению формулы (I), фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может дополнительно содержать один или несколько химиотерапевтических агентов, например, цитостатических или цитотоксических агентов, агентов типа антибиотиков, алкилирующих агентов, ан-тиметаболитных агентов, гормональных агентов, иммунологических агентов, агентов типа интерферона, ингибиторов циклооксигеназы (например, ингибиторов СОХ-2), ингибиторов матричной металлопро-теиназы, ингибиторов теломеразы, ингибиторов тирозин киназы, агентов против рецепторов фактора роста, агентов анти-HEK2, агентов анти-EGFR, агентов против ангиогенеза (например, ингибиторов ан-гиогенеза), ингибиторов фарнезилтрансферазы, ингибиторов пути передачи сигналов ras-raf, ингибиторов клеточного цикла, других ингибиторов cdks, агентов для связывания тубулина, ингибиторов топои-зомеразы I, ингибиторов топоизомеразы II, и т.п.. Предпочтительно химиотерапевтический агент представляет собой алкилирующий агент. Еще более предпочтительно, алкилирующий агент представляет собой темозоломид.
Дополнительно, настоящее изобретение предлагает продукт, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, и один или несколько химиотерапев-тических агентов, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного использования при противораковой терапии. Предпочтительно химиотерапевтический агент представляет собой алкилирующий агент. Еще более предпочтительно, алкилирующий агент представляет собой темозоломид.
Кроме того, настоящее изобретение предлагает соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, для применения в качестве лекарственного препарата, предпочтительно, в качестве лекарственного препарата с противораковой активностью.
Наконец, настоящее изобретение предлагает использование соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, при производстве лекарственного препарата с противораковой активностью.
Как утверждается выше, соли соединений формулы (I) также находятся в рамках настоящего изобретения.
Под термином "галоген" авторы подразумевают атом фтора, хлора, брома или йода.
Под термином "линейный или разветвленный (C1-C4)алкил" авторы подразумевают любую из групп, такую, например, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил, н-гексил и т.п.
Под термином "3-6-членный циклоалкил" авторы подразумевают, если не предусмотрено иного, 3-6-членное полностью углеродное моноциклическое кольцо, которое может содержать одну или несколь
ко двойных связей, но не имеет полностью сопряженной п-электронной системы. Примеры циклоал-кильных групп, без ограничения, представляют собой циклопропил, циклобутил, циклопентил, цикло-пентенил, циклогексил, циклогексенил и циклогексаденил.
Под термином "4-6-членный гетероциклил" авторы подразумевают 4-6-членное, насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, где один или несколько атомов углерода заменяются гетероатомами, такими как азот, кислород и сера; гетероциклильное кольцо может быть необязательно слитым или связанным с ароматическими и неароматическими карбоциклическими и гетероциклическими кольцами. Неограничивающие примеры гетероциклильных групп представляют собой, например, пиранил, пирролидинил, пирролинил, имидазолинил, имидазолидинил, пиразолидинил, пиразолинил, тиазолинил, тиазолидинил, дигидрофуранил, тетрагидрофуранил, 1,3-диоксоланил, пиперидинил, пипе-разинил, морфолинил и т.п.
Термин "арил" относится к моно-, би- или поликарбоциклическому углеводороду с 1-4 кольцевыми системами, необязательно слитыми или связанными друг с другом одинарными связями, где по меньшей мере одно из карбоциклических колец является "ароматическим", где термин "ароматический" относится к полностью сопряженной системе п-электронной связи.
Неограничивающие примеры таких арильных групп представляют собой фенильную, а- или р-нафтильную или бифенильную группы.
Термин "гетероарил" относится к ароматическим гетероциклическим кольцам, как правило, 5-8-членным гетероциклам с 1-3 гетероатомами, выбранными среди N, О или S; гетероарильное кольцо может быть необязательно слитым или связанным с ароматическими и неароматическими карбоцикличе-скими и гетероциклическими кольцами. Неограничивающие примеры таких гетероарильных групп представляют собой, например, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, индолил, имидазолил, тиа-золил, изотиазолил, пирролил, фенил-пирролил, фурил, фенил-фурил, оксазолил, изоксазолил, пиразо-лил, тиенил, бензотиенил, изоиндолинил, бензоимидазолил, индазолил, хинолинил, изохинолинил, 1,2,3-триазолил, 1-фенил-1,2,3-триазолил, 2,3-дигидроиндолил, 2,3-дигидробензофуранил, 2,3-дигидробензотиофенил; бензопиранил, 2,3-дигидробензоксазинил, 2,3-дигидрохиноксалинил и т.п.
В соответствии с настоящим изобретением и если не предусмотрено иного, когда любая из рассмотренных выше групп является необязательно замещенной, она может быть замещенной в любом из ее свободных положений одной или несколькими линейными или разветвленными (C1-C6)алкильными группами.
Термин "фармацевтически приемлемая соль" соединений формулы (I) относится к тем солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства исходного соединения, следовательно, фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) включают кислотно-аддитивные соли с неорганическими или органическими кислотами, например, азотной, хлористо-водородной, бромисто-водородной, серной, перхлорной, фосфорной, уксусной, трифторуксусной, пропионовой, гликолевой, (D) или (L) молочной, щавелевой, аскорбиновой, фумаровой, малоновой, яблочной, малеиновой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной, метансульфоновой, этансульфоновой, п-толуолсульфоновой, изетионовой, янтарной и салициловой кислотой.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) также включают соли с неорганическими или органическими основаниями, например, со щелочными или щелочно-земельными металлами, в частности натрием, калием, кальцием, гидроксиды, карбонаты или бикарбонаты аммония или магния, ациклических или циклических аминов, предпочтительно, метиламина, этиламина, диэтиламина, триэти-ламина, пиперидина и т.п.
В первом предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение предлагает соединения формулы (I), как определено выше, отличающиеся тем, что
R представляет собой водород или фтор и
m, R1 и R2 имеют следующие значения:
a) m равно 0, 1, 2 или 3;
R1 представляет собой 4-6-членный гетероциклил и
R2 представляет собой 3- или 6-членный циклоалкил, 4-6-членный гетероциклил или гетероарил;
где гетероциклил представляет собой насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, где один или два атома углерода заменяются гетероатомами, выбранными из азота, кислорода и серы;
гетероарил представляет собой 6- или 5-членное ароматическое гетероциклическое кольцо с 1-3 ге-тероатомами, выбранными из N, О или S; или
b) m равно 0 или 1;
R1 представляет собой 6-членный гетероциклил и R2 представляет собой 3- или 6-членный цикло-алкил, 6-членный гетероциклил или гетероарил; или
c) когда m равно 0, R1 представляет собой пиперидиновое кольцо и R2 представляет собой цикло
гексильное кольцо;
когда m равно 1, R1 представляет собой пиперидиновое кольцо и R2 представляет собой пиридиновое кольцо;
или их фармацевтически приемлемую соль.
Конкретные предпочтительные соединения по настоящему изобретению перечислены ниже: амид 3 -оксо-2-( 1 -пиридин-4-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 3-оксо-2-(1-тиофен-2-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 3 -оксо-2-( 1 -пиридин-3 -илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 2-(1 -циклогексилпиперидин-4-ил)-3 -оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амид 2-(1 -фуран-2-илметилпиперидин-4-ил)-3 -оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 3 -оксо-2-( 1 -тиофен-3 -илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 2-(1 -фуран-3 -илметилпиперидин-4-ил)-3 -оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 3 -оксо-2-( 1 -пиридин-2-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 3 -оксо-2-[1 -(1Н-пиррол-2-илметил)пиперидин-4-ил] -2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 2-(1 -циклопропилметилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 3-оксо-2-[1-(тетрагидропиран-4-ил)пиперидин-4-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амид 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-6-фтор-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; и.
амид 2-(1-бензилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты или их фармацевтически приемлемая соль.
Настоящее изобретение также предлагает способы получения соединений формулы (I), как определено выше. Соответственно, способ по настоящему изобретению включает следующую последовательностей стадий.
Последовательность А (когда R представляет собой фтор): либо
стадия а) галогенирование 4-фтор-2-метилфениламина (XI)
(XI)
где Hal представляет собой галоген, такой как Cl, Br и I;
стадия с) гидролиз полученного в результате соединения формулы (IX)
где Hal является таким, как определено выше, и
стадия d) гидролиз полученного в результате соединения формулы (VIII)
стадия Ь) циано-деаминирование полученного в результате соединения формулы (X)
где Т является таким, как определено выше,
посредством реакции с соответствующим амином формулы (XIII)
X-RI-NH2 (XIII) ,
где R1 является таким, как определено выше, и X представляет собой либо R2-[CH2]m-, когда R2 и m являются такими, как определено выше, либо соответствующую защитную группу азота, когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот;
в присутствии N-бромсукцинимида с помощью радикального инициатора;
стадия с') гидролиз полученного в результате соединения формулы (IV)
где R1, n и X являются такими, как определено выше, с тем, чтобы получить
соединение формулы (I), как определено выше, когда X представляет собой R2-[CH2]m-, где R2 и m являются такими, как определено выше, или
соединение формулы (III), когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота
где R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота;
стадия i) снятие защиты с соединения формулы (III), как определено выше, с тем, чтобы получить
либо
соединение формулы (I), как определено выше, либо соединение формулы (II)
где R1 является такими, как определено выше;
стадия I) восстановительное алкилирование полученного в результате соединения формулы (II), как определено выше, с помощью соответствующего алкилирующего агента формулы (XIV)
R2-[CH2].
-i-Y (XIV) ,
где Y представляет собой либо формильную группу, либо, когда m=1, атом кислорода, соединенный с R2 с помощью двойной связи (=O),
с тем, чтобы получить соединение формулы (I). Последовательность В (когда R представляет собой водород):
стадия т) осуществление восстановительного аминирования на фуран-2-карбальдегиде (XV)
(XV)
с помощью соответствующего амина формулы (XIII)
X-RI-NH2 (XIII),
где R1 является таким, как определено выше, и X представляет собой либо R2-[CH2]m-, где R2 и m являются такими, как определено выше, либо соответствующую защитную группу азота, когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот;
стадия n) осуществление реакции Дильса-Альдера на полученном в результате соединении формулы (XVI)
где R1, X являются такими, как определено выше;
стадия о) ароматизирование полученного в результате соединения формулы (XVII)
где R1, X являются такими, как определено выше;
стадия р) амидирование полученного в результате соединения формулы (XVIII)
где R1, X являются такими, как определено выше, с тем, чтобы получить
соединение формулы (I), как определено выше, когда X представляет собой R2-[CH2]m-, где R2 и m являются такими, как определено выше, или
соединение формулы (XX), когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота
где R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота;
стадия i') снятие защиты с соединения формулы (XX), как определено выше; стадия I') алкилирование полученного в результате соединения формулы (XXI)
где R1 является таким, как определено выше, с помощью соответствующего алкилирующего агента формулы (XIV)
R2-[CH2]m-i-Y (XIV) ,
где Y представляет собой либо формильную группу, либо, когда m=1, атом кислорода, соединенный с R2 с помощью двойной связи (=O),
с тем, чтобы получить соединения формулы (I), как определено выше.
В случае, когда на стадии о) соединение, полученное от ароматизации соединения формулы (XVII), представляет собой соединение формулы (XIX), т.е. когда X представляет собой лабильную защитную группу азота, осуществляют следующую стадию q):
стадия q) размещение соответствующей защитной группы азота на полученном в результате соединении формулы (XIX)
где R1 является таким, как определено выше,
с тем, чтобы получить соединения формулы (XVIII), где R1 и n являются такими, как определено выше, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота, которую затем подвергают воздействию последовательности реакций р), i') и I'), описанных выше, с тем, чтобы получить соединения формулы (I), как определено выше.
Если это необходимо или желательно, способы, описанные выше, включают преобразование соединения формулы (I) в другое соединение формулы (I) с помощью известных химических реакций; и/или, по желанию, преобразование соединения формулы (I) в его фармацевтически приемлемую соль или преобразование соли в свободное соединение формулы (I).
Такие известные химические реакции для возможных преобразований соединений в другие соединения включают, например, восстановительное аминирование (Cv1).
Все приведенные выше способы представляют собой аналогичные способы, которые могут быть осуществлены в соответствии с хорошо известными способами и при соответствующих условиях, известных в данной области.
Синтез соединения формулы (I), в соответствии со способами синтеза, описанными выше, может осуществляться постадийным способом, когда каждое промежуточное соединение выделяется и очищается с помощью стандартных технологий очистки подобных, например, колоночной хроматографии, перед осуществлением следующей реакции. Альтернативно, две или более стадий последовательности синтеза могут осуществляться в так называемой процедуре "в одной емкости", как известно в данной области, при этом только соединение, полученное в результате двух или более стадий, выделяется и очищается.
В соответствии со стадией а), соединение формулы (X) может быть получено посредством галоге-нирования 4-фтор-2-метилфениламина (XI) различными путями и при экспериментальных условиях, известных в данной области. Предпочтительно эту реакцию осуществляют в присутствии N-бромсукцинимида, N-иодсукцинимида, N-хлорсукцинимида, брома, иода, бромисто-водородной кислоты/перекиси водорода, в соответствующем растворителе, таком как ацетонитрил, N,N-диметилформамид, диоксан, диметилсульфоксид, уксусная кислота или вода, при температуре, находящейся в пределах примерно от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение периода времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией b), соединение формулы (IX) может быть получено посредством двух-стадийной последовательности реакций из соединения формулы (X) различными путями и при экспериментальных условиях, известных в данной области. Первую стадию предпочтительно осуществляют в присутствии нитрита натрия/хлористо-водородной кислоты или трет-бутилнитрита в соответствующем растворителе, таком как тетрагидрофуран, диметоксиэтан, диметилсульфоксид, уксусная кислота или вода, при температуре, находящейся в пределах примерно от -20°С до комнатной температуры, и в течение периода времени, изменяющегося от 10 мин примерно до 24 ч. Вторую стадию предпочтительно осуществляют в присутствии цианида натрия, меди или калия, часто в присутствии добавки, такой как хлорид меди или калия, в соответствующем растворителе, таком как тетрагидрофуран, диметоксиэтан, диметилсульфоксид, уксусная кислота, толуол или вода, при температуре, находящейся в пределах примерно от -20°С до температуры дефлегмации, и в течение периода времени, находящегося в пределах
примерно от 10 мин примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией с), гидролиз соединения формулы (IX) с получением соединения формулы (VIII) может осуществляться различными путями, в соответствии с обычными способами для преобразования цианогруппы в амид. Предпочтительно эту реакцию осуществляют в соответствующем растворителе, таком, например, как метанол, этанол, бутанол, 1,4-диоксан, толуол, вода или их смесь, в присутствии соответствующей кислоты или основания, таких, например, как серная кислота, метансульфо-новая кислота, хлористо-водородная кислота, трифторуксусная кислота, гидроксид натрия, карбонат натрия, или в соответствующем реагенте, таком как перекись водорода, перборат натрия или соли ин-дия(Ш), в присутствии ацетальдоксима. Как правило, реакцию осуществляют при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией d) соединение формулы (VIII) может быть преобразовано в соединение формулы (VII) в соответствии с обычными способами. Предпочтительно реакцию осуществляют в присутствии воды с помощью обработки основанием, таким как карбонат калия или натрия, гидроксид калия или натрия, в соответствующем растворителе, таком, например, как метанол или этанол, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, в течение времени, находящегося в пределах примерно от 30 мин примерно до 96 ч. Альтернативно, эту реакцию можно осуществлять в присутствии нитрита натрия/уксусной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией е) галогенирование 4-фтор-2-метилбензойной кислоты (XII) до соединения формулы (VII) может осуществляться различными путями, в соответствии с обычными способами для реакций галогенирования. Предпочтительно эту реакцию осуществляют с помощью тетрабутилам-монийбромида и/или йода в присутствии фенилиода(Ш) бис-(трифторацетата) или фенилиода(Ш) диаце-тата в качестве источника галогена в соответствующем растворителе, таком как, например, N,N-диметилформамид или дихлорэтан, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 48 ч. Катализатор обычно представляет собой металл, чаще всего, производное палладия, такое, например, как палладий(П) хлорид или палладий(П) ацетат.
В соответствии со стадией f) соединение формулы (VII) может быть преобразовано в соединение формулы (VI) в соответствии с обычными способами. Предпочтительно реакцию осуществляют в присутствии хлористо-водородной кислоты, серной кислоты или уксусной кислоты с использованием в качестве растворителя метанола, этанола, воды или их смеси, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч. Альтернативно, эту реакцию можно осуществлять с помощью алкилиодида, бромида или толуолсульфоната в присутствии соответствующего основания, такого как карбонат натрия или калия и гидроксид натрия, лития или калия, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией g) преобразование соединения формулы (VI) в соединение формулы (V) может осуществляться различными путями, в соответствии с обычными способами для реакций цианирования. Предпочтительно эту реакцию осуществляют в присутствии цианида меди(Ц или калия гекса-цианоферрата(П) в качестве источника циано в соответствующем растворителе, таком, например, как метанол, этанол, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, толуол, ксилол, №метил-2-пирролидон, N,N-диметилформамид, ^^диметилацетамид или их смесь, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч. Если требуется катализатор, он обычно представляет собой металл, чаще всего, производное палладия, такое, например, как тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0), палладий(П) хлорид или палладий(П) ацетат, в присутствии соответствующего основания, такого, например, как карбонат натрия, калия или цезия, или фторида цезия.
В соответствии со стадией h) соединение формулы (IV) может быть получено посредством двухста-дийной последовательности реакций из соединения формулы (V) в присутствии соединения формулы (XIII) различными путями и при экспериментальных условиях, известных в данной области. Первую стадию предпочтительно осуществляют в присутствии N-бромсукцинимида с помощью радикального инициатора, такого как бензоилпероксид или азобисизобутиронитрил, в соответствующем растворителе, таком как четыреххлористый углерод, хлороформ, дихлорметан или метилпивалат, при температуре, находящейся в пределах примерно от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение периода времени, изменяющегося от 10 мин примерно до 24 ч. Вторую стадию можно осуществлять как при основных, так и при кислотных условиях, например, в присутствии карбоната натрия или калия, 1, 8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ена, триэтиламина, диизопропилэтиламина, пиридина или уксусной кислоты, хлористо-водородной кислоты, в соответствующем растворителе, таком как тетрагидрофуран, диме-токсиэтан, 1,4-диоксан или толуол, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры
до температуры дефлегмации, и в течение периода времени, изменяющегося от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией c') гидролиз соединения формулы (IV) с получением либо соединения формулы (I), либо соединения формулы (III) может осуществляться различными путями и при экспериментальных условиях. Предпочтительно его осуществляют способом, аналогичным тому, который приведен для стадии с).
В соответствии со стадией i), когда в соединении формулы (III) X представляет собой защитную группу азота, такую как трет-бутоксикарбонильная, 4-метоксибензильная, 2,4-диметоксибензильная и трифенилметильная защитные группы, либо соединение формулы (I), либо соединение формулы (II) может быть получено посредством удаления этих защитных групп при кислотных условиях, предпочтительно, в присутствии неорганической или органической кислоты, такой как хлористо-водородная, триф-торуксусная или метансульфоновая кислота, трибромида бора или трихлорида алюминия, в соответствующем растворителе, таком как дихлорметан, дихлорэтан, диоксан, или низшего спирта, такого как метанол или этанол, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации. Когда в соединении формулы (III) X представляет собой защитную группу азота, такую как бензилоксикарбонил и т.п., либо соединение формулы (I), либо соединение формулы (II) может быть получено посредством удаления этих защитных групп при восстановительных условиях, таких, например, как в присутствии водорода и катализатора гидрирования в соответствующем растворителе, таком как этанол, метанол, этилацетат или их смесь. Катализатор обычно представляет собой металл, чаще всего, производное палладия, такое, например, как палладий на угле, гидроксид палладия или палладиевая сажа. Когда в соединении формулы (III) X представляет собой защитную группу азота, такую как меток-сикарбонил, этоксикарбонил, 9-флуоренилметоксикарбонил и т.п., либо соединение формулы (I), либо соединение формулы (II) может быть получено посредством удаления этих защитных групп при основных условиях, таких, например, как использование карбоната натрия, калия или цезия, гидроксида натрия, калия или бария, гидразина, пиперидина, морфолина или что-либо подобного, в соответствующем растворителе, таком как метанол, этанол, вода, ^^диметилформамид, ^^диметилацетамид или что-либо подобное, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации.
В соответствии со стадией I) восстановительное алкилирование соединения формулы (II), в присутствии соединения формулы (XIV), с получением соединения формулы (I), может осуществляться различными путями, в соответствии с обычными способами осуществления восстановительного аминиро-вания. Предпочтительно эту реакцию осуществляют в соответствующем растворителе, таком как, например, метанол, ^^диметилформамид, дихлорметан, тетрагидрофуран, бензол, толуол или их смесь, в присутствии соответствующего восстанавливающего агента, такого, например, как боргидрид натрия, тетраалкиламмоний боргидрид, натрий цианоборгидрид, натрий триацетоксиборгидрид, тетраметилам-моний триацетоксиборгидрид, и в присутствии кислотного или основного катализатора, такого, например, как уксусная кислота, трифторуксусная кислота, хлорид цинка, бромид цинка, хлорид олова^\0, хлорид титана(!\0, трифторид бора или триэтиламин, диизопропилэтиламин или пиридин, при температуре, находящейся в пределах примерно от 0°С до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией m) соединение формулы (XVI) может быть получено из фуран-2-карбальдегида (XV) с помощью восстановительного аминирования в присутствии соединения формулы (XIII). Предпочтительно эту реакцию осуществляют в соответствующем растворителе, таком, например, как метанол, ^^диметилформамид, дихлорметан, тетрагидрофуран, бензол, толуол или их смесь, в присутствии соответствующего восстанавливающего агента, такого, например, как боргидрид натрия, тетраалкиламмоний боргидрид, натрий цианоборгидрид, натрий триацетоксиборгидрид или тетрамети-ламмоний триацетоксиборгидрид, и в присутствии кислотного или основного катализатора, такого, например, как уксусная кислота, трифторуксусная кислота, хлорид цинка, бромид цинка, хлорид олова(!\0, хлорид титана(!\0, трифторид бора или триэтиламин, диизопропилэтиламин или пиридин, при температуре, находящейся в пределах примерно от 0°С до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией n) реакция Дильса-Альдера, осуществляемая на соединении формулы (XVI), с получением соединения формулы (XVII), может осуществляться различными путями, в соответствии с обычными способами осуществления этих реакций. Предпочтительно эту реакцию осуществляют в соответствующем растворителе, таком, например, как тетрагидрофуран, бензол, толуол или о-ксилол, в присутствии малеинового ангидрида при температуре, находящейся в пределах примерно от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией o) преобразование соединения формулы (XVII) либо в соединение формулы (XVIII), либо в соединение формулы (XIX), может осуществляться различными путями, в соответствии с обычными способами. Предпочтительно эту реакцию осуществляют в соответствующем растворителе, таком, например, как тетрагидрофуран, толуол или вода, в присутствии хлористо-водородной кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты или фосфорной кислоты, при температуре, находящейся в пре
делах примерно от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 24 ч.
В соответствии со стадией p) соединение формулы (XVIII) может взаимодействовать с получением либо соединения формулы (I), либо соединения формулы (XX) различными путями и при экспериментальных условиях, которые широко известны в области реакций конденсации. Предпочтительно соединение формулы (XVIII) взаимодействует с аммиаком или источником аммиака, таким как соли аммония, в присутствии активирующего агента, такого как карбонилдиимидазол, бензотриазол-1-илокси)-трис-(диметиламино)фосфоний гексафторфосфат, 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний тетраф-торборат), О-(7-азабензотриазол-1-ил)-^^№,№-тетраметилуроний гексафторфосфат, дициклогексил карбодиимид, диизопропил карбодиимид, 1-этил-3-(3'-диметиламино)соль карбодиимида и хлористоводородной кислоты, необязательно, в присутствии гидроксибензотриазола. Предпочтительно эту реакцию осуществляют в соответствующем растворителе, таком, например, как ^^диметилформамид, N,N-диметилацетамид, тетрагидрофуран, дихлорметан или 1,4-диоксан, и в присутствии поглотителя протонов, таком, например, как пиридин, триэтиламин или диизопропилэтиламин, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, в течение времени, находящегося в пределах примерно от 30 мин примерно до 96 ч.
В соответствии со стадией i'), снятие защиты с соединения формулы (XX), с получением соединения формулы (XXI), может осуществляться различными путями и при различных экспериментальных условиях. Предпочтительно его осуществляют способом, аналогичным тому, который приводится для стадии i).
В соответствии со стадией I') восстановительное алкилирование соединения формулы (XXI), в присутствии соединения формулы (XIV), с получением соединения формулы (I), может осуществляться различными путями и при различных экспериментальных условиях. Предпочтительно его осуществляют способом, аналогичным тому, который приводится для стадии I).
В соответствии со стадией q), защита соединения формулы (XIX) с получением соединения формулы (XVIII), где X представляет собой соответствующую защитную группу азота, может осуществляться различными путями и при различных экспериментальных условиях. Предпочтительно когда защитная группа представляет собой трет-бутоксикарбонил, реакция может осуществляться в присутствии ди-трет-бутилдикарбоната в различных растворителях, таких как метанол, этанол, ацетонитрил, тетрагид-рофуран или дихлорметан, в присутствии основания, такого как пиридин, ^^диметиламинопиридин, триэтиламин, диизопропилэтиламин, карбонат натрия или калия, при температуре, находящейся в пределах от комнатной температуры до температуры дефлегмации, и в течение времени, изменяющегося примерно от 1 примерно до 96 ч.
В соответствии с преобразованием 1 (Cv1), восстановительное алкилирование соединения формулы (I) с получением другого соединения формулы (I) может осуществляться различными путями и при различных экспериментальных условиях. Предпочтительно его осуществляют способом, аналогичным тому, который приводится для стадии I).
Замещенные производные изоиндолинона могут быть получены с использованием стандартных процедур органического синтеза, как приводится, например, в Smith, Michael-March's Advanced Organic Chemistry: reaction mechanisms and structure - 6th Edition, Michael B. Smith and Jerry March, John Wiley & Sons Inc., New York (NY), 2007. Специалистам в данной области известно, что преобразование химической функциональной группы в другую группу может потребовать защиты одного или нескольких химически активных центров в соединении, содержащем эту функциональную группу, для устранения нежелательных побочных реакций. Защита таких химически активных центров и последующее снятие защиты в конце преобразований синтеза может осуществляться, следуя стандартным процедурам, описанным, например, в: Green, Theodora W. and Wuts, Peter G.M. - Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, John Wiley & Sons Inc., New York (NY), 1999.
В случаях, когда соединение формулы (I) содержит один или несколько асимметричных центров, указанное соединение может разделяться на отдельные изомеры с помощью процедур, известных специалистам в данной области. Такие процедуры включают стандартные хроматографические технологии, включая хроматографию с использованием хиральной неподвижной фазы или кристаллизацию. Общие способы разделения соединений, содержащих один или несколько асимметричных центров, приводятся, например, в Jacques, Jean; Collet, Andre; Wilen, Samuel H. - Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley & Sons Inc., New York (NY), 1981.
Соединение формулы (I) может также преобразоваться в его фармацевтически приемлемую соль в соответствии со стандартными процедурами, которые известны специалистам в данной области. Альтернативно, соединение формулы (I), которое получается в виде соли, может преобразовываться в свободное основание или свободную кислоту в соответствии со стандартными процедурами, которые известны специалистам.
Исходные материалы способа по настоящему изобретению, т.е., 4-фтор-2-метилфениламин (XI), 4-фтор-2-метилбензойная кислота (XII), фуран-2-карбальдегид (XV) и соединения формулы (XIII) и (XIV), либо являются коммерчески доступными, либо могут быть получены с использованием хорошо извест
ных способов.
Фармакология
PARP-1 представляет собой полимеразу, индуцируемую повреждением ДНК, которая катализирует расщепление NAD+ на никотинамид и ADP-рибозу, а затем использует последнюю для синтеза разветвленных, подобных нуклеиновым кислотам, полимеров поли(ADP-рибозы). In vivo, присутствующий при самой высокой концентрации поли(ADP-рибозилированный) белок представляет собой сам PARP-1, за ним следуют гистоны. PARP-1 является ответственным за 90% активности, индуцируемой повреждением ДНК, в то время как оставшиеся 10% связаны с PARP-2.
Биохимический анализ.
Оценка сродства исследуемых соединений и их селективности относительно различных изоформ PARP, представляющих интерес, оценивают при вытеснительном анализе.
Идентификация соединений, способных связывать несколько белков PARP, осуществляется с помощью способа скрининга, включающего стадии:
а) получение реакционной смеси, содержащей
исследуемую изоформу белка PARP,
соединение формулы (IP)
где R11 представляет собой водород или метильную группу, В представляет собой группу (CH2)n-NH, где n равно 2-6; m равно 0 или 1 и X- представляет собой противоион, и последовательные разбавления исследуемого соединения;
b) сравнение сигнала поляризации, генерируемого в отсутствие исследуемого соединения, с сигналом, генерируемым в присутствии различных концентраций исследуемого соединения, и
c) оценка способности исследуемого соединения к вытеснению соединения формулы (IP), как определено выше, полученной из понижения уровня поляризации флуоресценции.
Предпочтительно для способа скрининга, упомянутого выше, как белок PARP, так и зонд формулы (IP), полученный из 5Н-фенантридин-6-она, предварительно смешиваются, или предварительно смешиваются белок PARP и исследуемое соединение. В другом предпочтительном способе скрининга, белки PARP представляют собой PARP-1, PARP-2 и PARP-3. Термин "белок PARP" охватывает полноразмерные нативные белки, а также их фрагменты. Более предпочтительно R11 представляет собой водород или метил, m равно 0 или 1; когда m равно 1, n равно 3 или 6, X- представляет собой трифторацетат. Зонд (IP), полученный из 5Н-фенантридин-6-она, выбирают из-за его способности к связыванию белков PARP, охватывающих как полноразмерные нативные белки, так и их фрагменты. Сигнал поляризации может быть измерен, например, с помощью устройства для считывания планшетов, такого как Saphire2 (Tecan). Анализ данных осуществляют, например, с использованием программного обеспечения Dynafit. Данные по вытеснению также подгоняются, например, с использованием электронной таблицы Excel (Microsoft Inc. Seattle, USA), к четырехпараметрической логистической модели (4PL) или модели Hill-Slope. Анализ используют для исследования соединений по настоящему изобретению. Способность к вытеснению исследуемых соединений формулы (I) коррелирует со сродством соединений к карману NAD фермента. Конкретные зонды формулы (IP), используемые при анализе, представляют собой:
Р1) 9-диметиламино-11,11-диметил-1-(3-{метил-[(6-оксо-5,6-дигидрофенантридин-2-илкарбамоил)метил]карбамоил}пропил)-2,3,4,11-тетрагидронафто[2,3-g]хинолиний трифторацетат;
Р2) 9-диметиламино-11,11 -диметил-1-[3-(3-{ [(6-оксо-5,6-дигидрофенантридин-2-
илкарбамоил)метил]амино}пропилкарбамоил)пропил]-2,3,4,11 -тетрагидронафто[2,3^]хинолиний триф-торацетат;
Р3) 9-диметиламино-11,11 -диметил-1-[3-(6-{ [(6-оксо-5,6-дигидрофенантридин-2-
илкарбамоил)метил]амино}гексилкарбамоил)пропил]-2,3,4,11-тетрагидронафто[2,3^]хинолиний триф-торацетат.
Соединение формулы (IP), как определено выше, может быть получено, как описано в WO 2010/133647.
Анализ основывается на использовании зонда формулы (IP), который связывается с карманом связывания NAD, и использует преимущества значительного изменения сигнала поляризации, наблюдаемого при связывании зонда с PARP-1, -2 и -3. О способности зонда формулы (IP) связывать полноразмерные PARP-1, -2 и - 3 сообщалось ранее (WO 2010/133647). Анализ проверяют, как описано в WO
2010/133647.
Константы сродства связывания (Kd) и значения DC50 (концентрации соединения, при которой сигнал поляризации уменьшается на 50% по сравнению с необработанными контролями) исследуемых соединений можно определить, как описано в WO 2010/133647. Анализ, с использованием либо зонда Р1, либо зонда Р3, используют для оценки биохимического сильнодействия соединения формулы (I), как приведено в табл. 1.
Таблица 1
Соединение
PARP-1 (DC50 мкМ)
PARP-1 (Kd мкМ)
PARP-2 (DC50 мкМ)
PARP-2 (Kd мкМ)
PARP-3 (DC50 мкМ)
PARP-3 (Kd мкМ)
(2)
<0,25t
<0,03t
0, 34
0,18
(3)
<0,25
<0, 03
7,1
5,8
(4)
0,39
1, 92
(5)
0, 33
1, 64
(6)
<0,25
0, 04
7,44
5,87
(7)
<0,25
0,06
0,76
0, 42
(8)
<0,25
0, 05
> 10
(9)
<0,25
<0, 03
4, 94
1,44
(10)
<0,25
0, 07
8,4
6, 8
(11)
<0,25
<0,01 *t
2, 53
1,4
2,06
(12)
<0,25
<0, 03
3, 37
1,7
(13)
<0,25
<0, 03
5,08
(14)
<0,25
<0, 03
1,25
0,58
(15)
<0,25
0, 04
> 10
0,9
(16)
<0,25
<0, 03
2,88
0,98
(17)
<0,25
<0, 03
0, 63
0,29
(19)
<0,25
<0, 03
2,76
1,39
(20)
<0,25
<0, 03
0,58
0,19
(21)
0,28
> 10
(22)
<0,25
<0, 03
2, 12
(23)
<0,25
<0, 03
2,00
(24)
<0,25
<0, 03
0,83
044
(25)
<0,25
5, 57
(26)
3, 33
> 10
(27)
1, 05
> 10
(28)
<0,25
<0, 03
1,81
5,48
(29)
<0,25
<0, 014
2, 92
1,00
(30)
<0,25
> 10
0, 35
(31)
<0,25
> 10
(32)
<0,25
0, 048
1,88
0, 66
* Анализ осуществляют с соединением Р3 в качестве зонда. Во всех остальных случаях в качестве зонда используют соединение Р1.
t Границы чувствительности анализа на основании ошибки подгонки <50%. Из приведенных выше данных, специалисту в данной области очевидно, что соединения формулы (I) по настоящему изобретению являются очень сильнодействующими в качестве ингибиторов PARP-1 и являются исключительно селективными по отношению к PARP-2 и PARP-3 (сравните значения DC50 и
Kd для PARP-1, PARP-2 и PARP-3 в табл. 1 выше).
Клеточные анализы. Анализ PAR.
Клеточную активность ингибиторов PARP-1 оценивают посредством измерения ингибирования образования PAR, индуцированного перекисью водорода, в клетках HeLa (ECACC). Клеточные уровни PAR измеряют с помощью иммуноцитохимии и количественно определяют с использованием инструмента ArrayScan vTi (Cellomics Thermo Scientific).
Исследования осуществляют следующим образом: 6000 клеток/лунка высевают в 96-луночные планшеты (Perkin Elmer) в MEM/10% FCS и инкубируют в течение 24 ч при 37°С, 5% диоксида углерода. Затем добавляют исследуемые соединения при требуемой концентрации в течение 30 мин. Затем инду
цируют повреждение ДНК, добавляя перекись водорода при концентрации 0,1 мМ в течение 15 мин. Кривые концентрации получают в MEM/10% FCS из бульонов с соединением в ДМСО, и конечная концентрация ДМСО составляет 0,002% (об./об.). Сдвоенные лунки для каждой точки концентрации получают при типичной самой высокой концентрации соединения 20 мкМ и при последовательном разбавлении 1:3. Планшеты сушат и фиксируют, добавляя холодный раствор метанол-ацетон (70:30) в течение 15 мин при комнатной температуре, фиксирующий раствор отсасывают и лунки сушат на воздухе в течение 5 мин, а затем дегидратируют в PBS. Сайты неспецифичного связывания блокируют посредством инкубирования лунок в течение 30 мин в PBS, содержащем 5% (мас./об.) FBS, 0,05% Tween-20. Затем лунки инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре в PBS, содержащем моноклональное антитело анти-PAR мыши (Анти-PAR, Mouse mAb 10Н, Tulip, каталожный №1020), разбавленное 1:200 в блокирующем растворе. После 3 промывок в PBS, лунки инкубируют в PBS (мас./об.) 5% FBS 0,05% Tween-20, содержащем 2 мкг/мл Су2-конъюгированного вторичного антитела козы против мыши (Amersham Pharmacia Biotech, каталожный № PA 42002) (максимум поглощения на 489 нм, максимум флуоресценции на 506 нм) и 1 мкг/мл DAPI (максимум поглощения на 359 нм, максимум флуоресценции на 461 нм) (4',6-диамидино-2-фенилиндолдилактат) (Sigma, каталожный № D9564), высокочувствительного красителя для окрашивания нуклеиновых кислот. После еще 3 промывок в PBS, иммунную активность клеточного PAR оценивают с использованием инструмента ArrayScan vTi, с объективом Zeiss 10X 0,5 N.A. и с применением алгоритма Cytotoxicity. V3 (Cellomics/Thermo Fisher) с фильтром XF100. Считывают по меньшей мере 10 полей, соответствующих по меньшей мере 900 клеткам, для каждой лунки. Значения IC50 представляют концентрацию соединения, при которой сигнал клеточного PAR уменьшается на 50% по сравнению с необработанными контролями.
Используют следующую формулу:
1С5о=низ + (верх-низ) / (1 + 10Л ( (LogECso-X) )) ;
где X представляет собой логарифм концентрации, IC50 представляет собой ответ; IC50 начинается от нижнего значения и идет до верхнего значения, имея сигмовидную форму. Согласно приведенным выше анализам, соединения формулы (I) по настоящему изобретению ингибируют образование PAR со значениями IC50 ниже чем 5 мкМ, как показано в табл. 2.
(14)
0, 011
(23)
0, 56
(15)
0,1
(29)
0,5
(16)
0, 02
(31)
0,2
(17)
1, 51
(32)
0, 17
(19)
0, 33
Анализ образования колоний.
Клетки с мутациями BRCA-1 рака молочной железы MDA-MB-436 выращивают при плотности 600 клеток/см2 в среде RPMI, дополненной 10% фетальной сывороткой теленка. Через 24 ч добавляют различные дозы соединений, начиная от концентрации 10 мкМ, по две лунки. Через десять дней клетки фиксируют и окрашивают кристаллическим фиолетовым. Колонии считают с использованием инфракрасного сканера (Odyssey Li-Cor). Антипролиферативные IC50 вычисляют с использованием Prism.
Фармакокинетика.
Фармакокинетический профиль и пероральная биологическая доступность соединений исследуются на мышах (Balb, Nu/Nu, Harlan, Italy) в фармакокинетических исследованиях ad hoc. Соединения приготавливают в смеси 10% Tween 80/декстроза для внутривенного введения болюса, в то время как перо-ральное введение осуществляют с использованием соединений, приготовленных в 0,5% растворе метил-целлюлозы. Осуществляют единственное введение при дозе 10 мг/кг и используют три животных самца для каждого опыта. Все образцы крови отбирают из ретроорбитальной вены через 5, 30 мин, 1 ч, 3, 6, 24 ч после внутривенного введения и через 15, 30 мин, 1 ч, 3, 6, 24 ч после перорального введения. Образцы плазмы получают посредством преципитации белков плазмы, при добавлении 200 мкл ацетонит-рила к 20 мкл плазмы в 96-луночном планшете. После накрывания крышкой и вихревого перемешивания планшет центрифугируют в течение 15 мин при 4000 об/мин. Супернатант считают конечным экстрак
том и инжектируют в систему LC-MS-MS (система UPLC: Waters Acquity с использованием аналитической колонки ВЕН С18 50x2,1 мм 1,7 мкм; инструмент для MS: Waters TQD, оборудованный электрораспылительным источником, работающим в режиме положительных ионов). Нижний предел количественного определения составляет 5,0 нг/мл, верхний предел количественного определения составляет 5000 нг/мл. Используют неблочный метод (линейный метод трапеций и линейный регрессионный анализ натуральных логарифмов данных о концентрации в плазме как функции времени). Абсолютную биологическую доступность (F) вычисляют из отношения средних значений пероральных и IV (внутривенных) концентраций в плазме, нормированных на дозу AUC (площадь под кривой).
Сокращенные наименования, используемые в настоящем документе, имеют следующие значения:
AUC - площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени до последней детектируемой концентрации;
CI - коэффициент очищения плазмы;
Cmax - максимальная концентрация в плазме;
Т1/2 - конечное половинное время жизни;
Vdss - объем распределения в стационарном состоянии.
Некоторые репрезентативные соединения формулы (I) оцениваются относительно их фармакокине-тических параметров, как приведено в табл. 3, как среднее значение.
Таблица 3
Соединение
CI (IV
Vdss (IV
AUC
Cmax
Т1/2
F on
болюс)
болюс)
(перорально)
(перорально)
(перорально)
AUC
мл/мин/кг
л/кг
мкМ.час
мкМ
час
(3)
63, 1
1,54
2,51
3,06
0, 68
(11)
41,3
4,47
20, 4
3,87
2, 72
100
(14)
81,8
2, 68
3,22
2,29
0,89
(15)
16, 9
0,79
19,2
8,73
1,01
(16)
79,3
2,51
2, 13
2, 97
0, 63
Из приведенного выше, специалисту в данной области очевидно, что соединения формулы (I) имеют хорошие - превосходные профили фармакокинетики и пероральную биологическую доступность. Исследования эффективности in vivo.
Атимические самцы мышей Nu/Nu Balb от Harlan (Italy) содержатся согласно European Communities Council Directive no. 86/609/EEC относительно защиты животных, используемых для экспериментальных или других научных целей, в клетках с подстилкой из фильтровальной бумаги, со стерилизованным кормом и подстилкой и подкисленной водой. Фрагменты раковых опухолей поджелудочной железы человека Capan-1 имплантируются подкожно. Мыши, несущие пальпируемую опухоль (100-200 мм ), выбираются и рандомизируются на контрольные и лечебные группы. Каждая группа включает семь животных. Лечение начинают через один день после рандомизации. Соединение формулы (I) вводят с помощью перорального способа как суспензию метоцела, при указанных дозах и временах. Размер опухоли измеряют регулярно с помощью штангенциркулей во время эксперимента, и массу опухоли вычисляют, как описано в Simeoni M. et al., Cancer Res 64, 1094-1101 (2004). Ингибирование роста опухоли (TGI, %) вычисляют в соответствии с уравнением
%TGI=100-(средняя масса опухоли лечебной группы/средняя масса опухоли контрольной группы)х100.
Некоторые репрезентативные соединения формулы (I) оценивают на их противоопухолевую активность в качестве отдельного агента на модели мышей с мутациями BRCA-2 Capan-1, и результаты приводятся в табл. 4. Токсичность оценивают на основе уменьшения массы тела (для 7 леченых мышей не наблюдается уменьшение массы тела).
Таблица 4
Соединение
Доза
Временной график
TGI (%)
Токсичность
(11)
7 5 мг/кг
1-8 ежедневно
42%
0/7
(15)
7 5 мг/кг
1-10 ежедневно
54%
0/7
Репрезентативные соединения формулы (I) оценивают на их противоопухолевую активность на модели мышей с мутацией BRCA-2 Capan-1 в сочетании с темозоломидом. Как соединения формулы (I), так и темозоломид вводят пероральным способом. Рост опухоли оценивают с помощью штангенциркуля. Регистрируют два диаметра и вычисляют массу опухоли в соответствии со следующей формулой: длина (мм) х ширина2/2. Воздействие противоопухолевого лечения оценивают как задержку возникновения экспоненциального роста опухоли (относительно ссылок, см. Anticancer drug 7:437-60, 1996). Эту задержку (значение Т-С) определяют как разницу по времени (в днях), необходимую опухолям лечебной группы (Т) и контрольной группы (С) для достижения заданного размера (1 г). Токсичность оценивают на основе уменьшения массы тела и доли выживаемости животных. Величина Т-С, наблюдаемая, когда соединения формулы (I) объединяют с темозоломидом, превышает величину, ожидаемую при простом
сложении значений Т-С, получаемых при раздельных лечениях, указывая, таким образом, на сильный синергизм.
Следовательно, настоящее изобретение предлагает соединения формулы (I), пригодные для использования при терапии.
Соединения формулы (I) по настоящему изобретению, пригодные для введения млекопитающим, например людям, могут вводиться с помощью обычных путей, и уровень дозировки зависит от возраста, массы тела, состояния пациента и способа введения.
Например, пригодная для использования дозировка, принятая для перорального введения соединения формулы (I), может находиться в диапазоне примерно от 1 примерно до 1000 мг на дозу, от 1 до 5 раз в день. Соединения по настоящему изобретению могут вводиться в разнообразных дозированных формах, например, перорально, в форме таблеток, капсул, таблеток с сахарным или пленочным покрытием, жидких растворов или суспензий; ректально, в форме суппозиториев; парентерально, например, внутримышечно, или с помощью внутривенной и/или интратекальной и/или интраспинальной инъекции или инфузии.
Как сформулировано выше, настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в ассоциации с фармацевтически приемлемым наполнителем, который может представлять собой носитель или разбавитель.
Фармацевтические композиции, содержащие соединения по настоящему изобретению, обычно получают, следуя обычным способам, и их вводят в соответствующей фармацевтической форме. Например, твердые пероральные формы могут содержать, вместе с активным соединением, разбавители, например, лактозу, декстрозу, сахарозу, сахаробиозу, целлюлозу, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; смазывающие вещества, например, диоксид кремния, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния или кальция, и/или полиэтиленгликоли; связывающие агенты, например, крахмалы, аравийскую камедь, желатин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливинилпирролидон; разрыхляющие агенты, например, крахмал, альгиновую кислоту, альгинаты или натрий крахмал гликолят; шипучие смеси; красящие вещества; подсластители; смачивающие агенты, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфа-ты; и, в целом, нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, используемые в фармацевтических препаратах. Эти фармацевтические препараты могут приготавливаться известным способом, например, посредством способов смешивания, гранулирования, таблетирования, нанесения сахарного покрытия или нанесения пленочного покрытия.
Жидкие дисперсии для перорального введения могут представлять собой, например, сиропы, эмульсии и суспензии. В качестве примера, сиропы могут содержать, в качестве носителя, сахарозу или сахарозу с глицерином и/или маннитом и сорбитом.
Суспензии и эмульсии могут содержать, в качестве примеров носителей, природную смолу, агар, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт. Суспензии или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать, вместе с активным соединением, фармацевтически приемлемый носитель, например, стерильную воду, оливковое масло, этилолеат, гли-коли, например, пропиленгликоль, и, по желанию, соответствующее количество лидокаина гидрохлорида. Растворы для внутривенных инъекций или инфузий могут содержать, в качестве носителя, стерильную воду, или, предпочтительно, они могут находиться в форме стерильных, водных, изотонических, солевых растворов или они могут содержать пропиленгликоль в качестве носителя.
Суппозитории могут содержать, вместе с активным соединением, фармацевтически приемлемый носитель, например, масло какао, полиэтиленгликоль, поверхностно-активное вещество на основе сложного полиоксиэтиленсорбитанового эфира жирной кислоты или лецитин.
Экспериментальный раздел
Для упоминания любого конкретного соединения формулы (I) по настоящему изобретению, необязательно, в форме фармацевтически приемлемой соли, см. экспериментальный раздел и формулу изобретения. Обращаясь к примерам, которые следуют далее, соединения по настоящему изобретению синтезируют с использованием способов, описанных в настоящем документе, или других способов, которые хорошо известны в данной области.
Краткие формы и сокращенные наименования, используемые в настоящем документе, имеют следующие значения:
аем - атомная единица массы;
вычисл. - вычислено;
мкМ - микромоль;
мкл - микролитр;
мкм - микрометр;
моль - моль;
мМ - миллимоль;
ммоль - миллимоли;
нм - нанометры;
г - граммы;
мг - миллиграммы;
нг - нанограммы;
час - час/часы;
мин - минута/минуты;
DC50 - половинная максимальная вытесняющая концентрация;
IC50 - половинная максимальная ингибиторная концентрация;
PAR - поли(ADP-рибоза);
MEM - минимальная основная среда;
FCS - фетальная сыворотка теленка;
FBS - фетальная бычья сыворотка;
PBS - фосфатный буферный солевой раствор;
ЖХ-МС - жидкостная хроматография-масс-спектрометрия;
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография;
TLC - тонкослойная хроматография;
МГц - мегагерц;
Гц - герц;
ДМСОч16 - дейтерированный диметилсульфоксид; CDCl3 - дейтерированный хлороформ; ESI - электрораспылительная ионизация.
Теперь, с целью лучшего иллюстрирования настоящего изобретения, не накладывая на него никаких ограничений, приводятся следующие примеры.
Как используется в настоящем документе, символы и обозначения, используемые в способах и примерах, согласуются с теми, которые используют в современной научной литературе, например, в Journal of American Chemical Society или Journal of Biological Chemistry.
Если не отмечено иного, все материалы получают от коммерческих поставщиков, самого лучшего сорта, и они используются без дополнительной очистки. Безводные растворители, такие как N,N-диметилформамид, тетрагидрофуран, дихлорметан и толуол, получают от Aldrich Chemical Company. Все реакции, использующие соединения, чувствительные к воздуху или влажности, осуществляют в атмосфере азота или аргона.
Общие способы очистки и аналитические способы.
Флэш-хроматографию осуществляют на колонке с силикагелем (Merck grade 9395, 60А). ВЭЖХ осуществляют на колонке Waters X Terra RP 18 (4,6x50 мм, 3,5 мкм), используя систему ВЭЖХ Waters 2790, снабженную PDA детектором 996 Waters и одноквадрупольным масс-спектрометром Micromass mod. ZQ, снабженным электрораспылительным (ESI) источником ионов. Подвижная фаза А представляет собой 5 мМ аммоний-ацетатный буфер (рН 5,5 с уксусной кислотой-ацетонитрилом, 95:5), и подвижная фаза В представляет собой смесь вода-ацетонитрил (5:95). Градиент от 10 до 90% В поддерживают 8 мин, удерживают 90% В 2 мин. УФ-детектирование на 220 нм и на 254 нм. Скорость потока 1 мл/мин. Объем инжекции 10 мкл. Полный диапазон сканирования массы составляет от 100 до 800 аем. Напряжение на капилляре составляет 2,5 кВ; температура источника составляет 120°С; напряжение на конусе составляет 10 В. Времена удерживания (ВЭЖХ r.t.) приводятся в минутах на 220 нм или на 254 нм. Масса приводится как отношение m/z.
При необходимости, соединения очищают с помощью препаративной ВЭЖХ на колонке Waters Symmetry C18 (19x50 мм, 5 мкм) или на колонке Waters X Terra RP 18 (30x150 мм, 5 мкм) с использованием Waters preparative HPLC 600, снабженной детектором PDA 996 Waters и одноквадрупольным масс-спектрометром Micromass mod. ZMD, с электронной распылительной ионизацией, в режиме положительных ионов. Подвижная фаза А представляет собой воду - 0,01% трифторуксусную кислоту, а подвижная фаза В представляет собой ацетонитрил. Градиент от 10 до 90% В поддерживают 8 мин, удерживают 90% В 2 мин. Скорость потока 20 мл/мин. Альтернативно, подвижная фаза А представляет собой воду - 0,1% гидроксид аммония, и подвижная фаза В представляет собой ацетонитрил. Градиент от 10 до 100% В поддерживают 8 мин, удерживают 100% В 2 мин. Скорость потока 20 мл/мин.
1Н-ЯМР спектры регистрируют в ДМСОЧ16 или в CDCl3 на Varian Inova 400, работающем при 400,5 МГц, и на Varian Mercury 300, работающем при 300,0 МГц. 13С ЯМР спектр регистрируют в ДМСОЧ16 при 75,0 МГц.
Остаточный сигнал растворителя используют в качестве эталона (8=2, 50 или 7,27 м.д.). Химические сдвиги (8) регистрируют в миллионных долях (м.д.), а константы связывания (J) в Гц. Используют следующие сокращенные наименования для мультиплетностей: s = синглет; br.s. = уширенный сигнал; d = дублет; t = триплет; m = мультиплет; dd = дублет дублетов.
Масс-спектры высокого разрешения ESI(+) (HRMS) получают на Q-Tof Ultima (Waters, Manchester, UK), непосредственно соединенном с 1100 системой микро-ВЭЖХ (Agilent, Palo Alto, US), как описано ранее (Colombo, M., Sirtori, F. R., and Rizzo, V. (2004). Используют полностью автоматизированный спо
соб точного определения массы с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии с времяпролетным масс-спектрометром с квадрупольным/ортогональным ускорением. (Rapid Commun. Mass. Spectrom. 18, 511-517).
Пример 1.
Стадия а.
2-Бром-4-фтор-6-метилфениламин (X) [Hal представляет собой Br].
Раствор N-бромсукцинимида (18,7 г, 0,105 моль) в 70 мл ^^диметилформамида добавляют по каплям к раствору 4-фтор-2-метилфениламину (XI) (12,5 г, 0,1 моль) в 70 мл такого же растворителя при 20°С. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Темный раствор выливают в смесь воды (1000 мл), насыщенного раствора соли (50 мл) и этилацетата (300 мл). Смесь переносят в разделительную воронку, встряхивают и разделяют. Водную фазу экстрагируют этилацетатом (4x150 мл). Объединенные органические слои промывают водой (5x100 мл), насыщенным раствором соли (2x100 мл), сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют. Продукт очищают с помощью флэш-хроматографии (элюент этил-ацетат: н-гексан = 1:8). Чистые фракции объединяют и выпаривают с получением 14,9 г продукта. Фракции с примесями объединяют, концентрируют, повторно растворяют в диэтиловом эфире (30 мл) и экстрагируют 5% хлористо-водородной кислотой (5x10 мл). Кислотную фазу подщелачивают с помощью водного раствора гидроксида калия и экстрагируют диэтиловым эфиром с получением дополнительных 0,8 г указанного в заголовке соединения. Общий выход составляет 15,7 г (77%).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСОЧ16) 8 м.д. 2,16 (с, 3H), 4,83 (уш.с, 2H), 6,91 (дд, JH-F=9,3 Гц, JH-H=2,9 Гц, 1H), 7,16 (дд JH-F=8,3 Гц, JH-H=2,9 Гц, 1Н).
Стадия b.
2-Бром-4-фтор-6-метилбензонитрил (IX) [Hal представляет собой Br].
Раствор цианида калия (16,25 г, 0,25 моль) в 20 мл воды добавляют к суспензии свежеприготовленного хлорида меди(!) (9,5 г, 0,096 моль) в 40 мл воды. Затем добавляют толуол (30 мл), и смесь охлаждают до 0°С. 2-Бром-4-фтор-6-метилфениламин (X) (15,7 г, 0,077 моль) добавляют к смеси 16,5 мл 36% водной хлористо-водородной кислоты и 40 мл воды. Полученную в результате суспензию нагревают до тех пор, пока не образуется раствор. Раствор быстро охлаждают до 2°С, и амин гидрохлорид выпадает в осадок. Медленно добавляют раствор нитрита натрия (5,34 г, 0,078 моль) в 15 мл воды, поддерживая температуру реакционной смеси ниже 5°С. Добавляют порошкообразный карбонат декагидрат натрия малыми порциями для доведения рН реакционной смеси примерно до 7. Полученный в результате раствор диазониевой соли затем медленно добавляют к ранее приготовленному цианокупратному реагенту, опять поддерживая температуру реакции ниже 5°С. Образуется яркий красно-оранжевый осадок. Реакционной смеси предоставляют возможность для нагрева до 20°С и поддерживают при этой температуре в течение ночи. Затем медленно нагревают до 70°С в течение 1 ч. Осадок растворяется почти полностью. Реакционной смеси предоставляют возможность для охлаждения до 20°С и фильтруют. Органическую фазу отделяют, и водную фазу экстрагируют толуолом (3x70 мл). Объединенные органические слои промывают водой (2x 100 мл), насыщенным раствором соли (2x 100 мл), сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют. Сырой нитрил (IX) (13,9 г, 84%) используют без дополнительной очистки.
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО^) 8 м.д. 2,52 (с, 3H), 7,44 (дд, JH-F=9,4 Гц, JH-H=2,1 Гц, 1H), 7,73 (дд, JH-F=8,2 Гц, JH-H=2,1 Гц, 1Н).
13С ЯМР (75,0 МГц, ДМСО-16) 8 115,8, 112,7 (д, JC-F=3 Гц), 117,0 (д, JC-F=23 Гц), 118,4 (д, JC-F=27 Гц), 126,1 (д, JC-F=11 Гц), 147,8 (д, JC-F=11 Гц), 163,5 (д, JC-F=257 Гц).
Стадия с.
2-Бром-4-фтор-6-метилбензамид (VIII) [Hal представляет собой Br].
2-Бром-4-фтор-6-метилбензонитрил (IX) (0,428 г, 2 ммоль) нагревают в 70% водном растворе серной кислоты (2 мл) в течение ночи при 150°С. Реакционную смесь выливают на лед и экстрагируют этилацетатом (4x2 мл). Органическую фазу промывают водой (4x2 мл), насыщенным раствором соли (2x2 мл), сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют с получением 300 мг сырого 2-бром-4-фтор-6-метилбензамида (VIII). Чистый образец получают посредством перекристаллизации из бензола.
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО^) 8 м.д. 3,31 (с, 3H), 7,17 (дд, JH-F=9,8 Гц, JH-H=2,2 Гц, 1H), 7,41 (дд, JH-F=8,6 Гц, JH-H=2,2 Гц, 1H), 7,89 (уш.с, 1H), 7,65 (уш.с, 1Н).
Стадия d.
2-Бром-4-фтор-6-метилбензойная кислота (VII) [Hal представляет собой Br].
2-Бром-4-фтор-6-метилбензамид (VIII) (0,9 г, 3,9 ммоль) растворяют в 75% водном растворе серной кислоты (4 мл) при 80°С. Нитрит натрия (0,5 г, 7,2 ммоль) осторожно добавляют малыми порциями в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают до 20°С и добавляют к реакционной смеси холодную воду (15 мл). Продукт экстрагируют этилацетатом (6x2 мл). Органическую фазу промывают водой (4x2 мл), насыщенным раствором соли (2x 2 мл), сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют с получением 0,879 г (97%) чистой кислоты (VII).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО^) 8 м.д. 2,31 (с, 1H), 7,22 (дд, JH-F=9,6 Гц, JH-H=2,2 Гц, 1H), 7,47 (дд, JH-F=8,5 Гц, JH-H=2,4 Гц, 1H), 13,7 (уш.с, 1Н).
13С ЯМР (75,0 МГц, ДМСО-dd; + CCl4) 8 м.д. 19,5, 116,0 (д, JC-F=22 Гц), 116,8 (д, JC-F=24 Гц), 118,3 (д, JC-F=10 Гц), 134,0 (д, JC-F=3 Гц), 138,4 (д, JC-F=8 Гц), 163,0 (д, JC-F=250 Гц), 168,0.
Стадия f.
Метиловый эфир 2-бром-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (VI) [Hal представляет собой Br; Т представляет собой метил].
Смесь 2-бром-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (VII) (1,94 г, 8,33 ммоль), безводного карбоната калия (1,72 г, 12,5 ммоль), метилиодида (2,36 г, 17 ммоль) в ^^диметилформамиде (15 мл) энергично перемешивают в течение 23 ч при 20°С. Суспензию выливают в 70 мл воды. Густое масло отделяют. Продукт экстрагируют этилацетатом (4x25 мл). Органическую фазу промывают водой (5x20 мл), насыщенным раствором соли (2x 20 мл), сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют с получением 2,07 г (количественный выход) метилового эфира 2-бром-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (VI).
1Н ЯМР (400,5 МГц, CDCl3) 8 м.д. 2,35 (с, 3H), 3,96 (с, 3H), 6,91 (дд, JH-F=9,0 Гц, JH-H=2,2 Гц, 1H), 7,18 (дд, JH-F=8,1 Гц, JH-H=2,4 Гц, 1Н).
Стадия g.
Метиловый эфир 2-циано-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (V) [Т представляет собой метил].
Смесь метилового эфира 2-бром-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (VI) (275 мг, 1,12 ммоль), калия гексацианоферрата (II) (206 мг, 0,56 ммоль), безводного карбоната натрия (237 мг, 2,24 ммоль) и ацетата палладия(П) (5 мг, 0,0224 ммоль) в 3 мл N-метилпирролидона нагревают при 120°С в герметичной пробирке в атмосфере аргона в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном и фильтруют через пад целита. Органическую фазу промывают водой (13x6 мл), насыщенным раствором соли (2x6 мл), сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют. Колоночная хроматография (н-гексан/этилацетат: 7/3) дает метиловый эфир 2-циано-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (76 мг, 35%).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-16) 8 м.д. 2,42 (с, 3H), 3,93 (с, 3H), 7,65 (дд, JHF=9,6, JHH=2,6 Гц, 1H), 7,85 (дд, JHF=8,3, 2,6 Гц, 1Н).
Стадия h.
6-Фтор-2-(3-морфолин-4-ил-пропил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбонитрил (IV) [n=3; R1 представляет собой морфолин-4-ил; X отсутствует, когда m=0 и R2 отсутствует].
К раствору метилового эфира 2-циано-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (V) (208 мг, 1,07 ммоль) в метилпивалате (2 мл), добавляют N-бромсукцинимид (310 мг, 1,74 ммоль) и бензоилпероксид (20 мг, 0,097 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 85°С в атмосфере азота в течение час. Сырой материал фильтруют на фильтре Gooch и промывают толуолом. Летучие вещества выпаривают и остаток растворяют в ацетонитриле (3 мл). Добавляют триэтиламин (0,41 мл, 2,9 ммоль) и 3-морфолин-4-ил-пропиламин (XIII) (140 мг, 0,97 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при 90°С в течение 3 ч. Сырой материал разбавляют дихлорметаном и промывают 15% гидроксидом аммония. Органическую фазу сушат над Na2SO4, фильтруют и выпаривают. Колоночная хроматография (градиент от хлороформ/метанол: 96/4 до хлороформ/метанол: 94/6) дает 6-фтор-2-(3-морфолин-4-ил-пропил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбонитрил (IV) (130 мг, выход 40%).
1Н ЯМР (400,5 МГц, CDCl3) 8 м.д. 1,87 (квинтет, J=7,1 Гц, 2H), 2,34-2,49 (м, 6Н), 3,62-3,74 (м, 6Н), 4,45 (с, 2H), 7,42 (дд, JH-F=7,3 Гц, JH-H=2,0 Гц, 1H), 7,47 (дд, JH-F=8,3 Гц, JH-H=2,0 Гц, 1Н).
Стадия с'.
Амид 6-фтор-2-(3-морфолин-4-ил-пропил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 23 [R представляет собой F; n=3; R1 представляет собой морфолин-4-ил; m=0; R2 отсутствует]
Раствор 6-фтор-2-(3-морфолин-4-ил-пропил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбонитрила (IV) (100 мг, 0,33 ммоль) в 1,5 мл 36% хлористо-водородной кислоты нагревают при 50°С в течение 10 ч. Все летучие материалы выпаривают и остаток растворяют в 2 мл холодной воды. Раствор нейтрализуют с помощью твердого карбоната калия. Осажденный твердый продукт растворяют в дихлорметане, и органическую фазу промывают насыщенным водным раствором карбоната натрия (2x 1 мл), насыщенным раствором соли (2x1 мл), сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют с получением 73 мг (73%) амида 6-фтор-2-(3-морфолин-4-ил-пропил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСОч16) 8 м.д. 1,79 (квинтет, J=7,1 Гц, 2H), 2,28-2,35 (м, 6Н), 3,47-3,52 (м, 4Н), 3,59 (т, J=7,1 Гц, 2H), 4,58 (с, 2H), 7,68 (дд, JHF=7,8, JHH=2,6 Гц, 1H), 7,83 (уш.с, 1H), 7,89 (дд, JHF=10,9, 2,6 Гц, 1H), 10,81 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C16H21FN3O3 [M+H]+ 322,1562; найдено 322,1565
Пример 2. Стадия е.
4-Фтор-2-йод-6-метилбензойная кислота (VII) [Hal = I].
Смесь 4-фтор-2-метилбензойной кислоты (XII) (20,00 г, 0,130 моль), иодбензола диацетата (50,15 г, 0,156 моль), иода (39,52 г, 0,156 моль) и ацетата палладия(П) (1,46 г, 0,006 моль).в N,N-диметилформамиде (360 мл) дегазируют с помощью трехкратного циклирования вакуума и азота, а затем нагревают в течение 18 ч при внутренней температуре 100°С в атмосфере аргона. Полученную в результате темную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют метил-трет-бутиловым эфиром (200 мл) и обрабатывают раствором метабисульфита натрия (250 г) в воде (500 мл) при эффективном перемешивании. Затем эту смесь желтого цвета подкисляют посредством медленного добавления концентрированной хлористо-водородной кислоты (130 мл). Водный слой отделяют и экстрагируют два раза метил-трет-бутиловым эфиром (100x2 мл). Объединенные органические экстракты обрабатывают раствором хлопьев гидроксида натрия (80 г) в воде (300 мл) при перемешивании. Органический слой, содержащий только иодбензол, сливают, при этом в водный слой добавляют хлорид натрия, его охлаждают до температуры льда и доводят до очень низких рН с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты (130 мл). Из этой водной среды продукт экстрагируют метил-трет-бутиловым эфиром (100 мл x 3), и объединенные экстракты сушат над Na2SO4 и, наконец, концентрируют при пониженном давлении с получением 30,5 г (84%) 4-фтор-2-йод-6-метилбензойной кислоты в виде коричневого твердого вещества. Этот сырой материал используют на следующей стадии без очистки.
1Н ЯМР (300,0 МГц, CDCl3) 8 м.д. 2,46 (с, 3H), 6,96 (дд, JHF=9,1, JHH=2,6 Гц, 1H), 7,45 (дд, JHF=7,9, 2,3 Гц, 1Н).
Стадия f.
Метиловый эфир 4-фтор-2-йод-6-метилбензойной кислоты (VI) [Hal = I; Т представляет собой метил].
К раствору 4-фтор-2-йод-6-метилбензойной кислоты (VII) (30,05 г, 0,109 моль) в N,N-диметилформамиде (300 мл) добавляют безводный карбонат калия (22,0 г, 0,16 моль) при эффективном перемешивании с помощью магнитной мешалки. Через 15 мин добавляют метил п-толуолсульфонат (30,7 г, 0,16 моль). Коричневую суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем добавляют ацетат калия (12,4 г, 0,13 моль) для разрушения непрореагировавшего метил п-толуолсульфоната и смесь перемешивают в течение ночи. Густую реакционную смесь разбавляют метил-трет-бутиловым эфиром (100 мл) и промывают водой (600 мл); водный слой отделяют и экстрагируют два раза метил-трет-бутиловым эфиром (70 мл x2). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (50 мл), сушат над Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении до твердого остатка. Этот материал очищают с помощью хроматографии (элюент н-гексан/этилацетат 9:1), с получением 26,2 г (81%) продукта в виде бесцветного масла.
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-16) 8 м.д. 2,27 (с, 3H), 3,86 (с, 3H), 7,25 (дд, JHF=9,6, JHH=2,4 Гц, 1H), 7,63 (дд, JHF=8,2, JHH=2,4 Гц, 1Н).
Стадия g.
Метиловый эфир 2-циано-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (V) [Т представляет собой метил].
Раствор метилового эфира 4-фтор-2-йод-6-метилбензойной кислоты (VI) (26,02 г, 88,48 ммоль) в 260 мл ^^диметилформамида обрабатывают цианидом медиф (12,18 г; 0,136 моль) и перемешивают при 110°С в течение 5 ч. Смеси темного цвета предоставляют возможность для охлаждения примерно до 60°С, обрабатывают 105 г Celite(r) размера 560 (Fluka) при эффективном перемешивании и разбавляют этилацетатом (250 мл). После охлаждения до комнатной температуры смесь медленно выливают в 0,25н. водный раствор гидроксида натрия (500 мл), а затем фильтруют. Реакционную колбу и осадок промывают этилацетатом (100 мл). Водный слой отделяют и экстрагируют два раза этилацетатом (250 мл + 100 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (200 мл), сушат над Na2SO4 и концентрируют при пониженном давлении с получением 22,00 г сырого продукта в виде желтого твердого вещества. Этот материал кристаллизуют из н-гексана (40 мл): после охлаждения до комнатной температуры твердое вещество собирают посредством фильтрования и маточные жидкости концентрируют при пониженном давлении. Полученный таким образом твердый остаток кристаллизуют из н-гексана (20 мл) с получением, после отфильтровывания твердых веществ, второго сбора продукта. Объединенные сборы (14,15 г), наконец, очищают с помощью хроматографии, элюируя в градиенте от смеси н-гексан/метил-трет-бутиловый эфир, 9:1, до смеси н-гексан/этилацетат, 9:1. После выпаривания фракций получают 12,0 г (70%) метилового эфира 2-циано-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (V).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-16) 8 м.д. 2,42 (с, 3H), 3,93 (с, 3H), 7,65 (дд, JHF=9,6, JHH=2,6 Гц, 1H), 7,85 (дд, JHF=8,3, 2,6 Гц, 1Н).
Стадия h.
2-(1-Циклогексилпиперидин-4-ил)-6-фтор-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбонитрил (IV) [R представляет собой F; n=m=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; R2 представляет собой 1-циклогексил].
К раствору метилового эфира 2-циано-4-фтор-6-метилбензойной кислоты (V) (208 мг, 1,07 ммоль) в метилпивалате (2 мл) добавляют N-бромсукцинимид (310 мг, 1,74 ммоль) и бензоилпероксид (20 мг, 0,097 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 85°С в атмосфере азота в течение 3 ч. Сырой материал фильтруют и промывают толуолом. Летучие вещества выпаривают и остаток растворяют в ацето-нитриле (3 мл). Добавляют карбонат калия (670 мг, 4,85 ммоль) и 1-циклогексилпиперидин-4-иламин дигидрохлорид моногидрат (XIII) (265 мг, 0,97 ммоль), и реакционную смесь перемешивают при 90°С в течение 3 ч. Сырой материал разбавляют дихлорметаном и промывают 15% гидроксидом аммония. Органическую фазу сушат над Na2SO4, фильтруют и выпаривают. Колоночная хроматография (7н. раствор дихлорметана/метанола/аммиака, в метаноле: 97/2/1) дает 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-6-фтор-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбонитрил (IV) (100 мг, 30%).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСОч16) 8 м.д. 1,02-1,13 (м, 1H), 1,16-1,27 (м, 4Н), 1,55-1,62 (м, 1H), 1,68-1,80 (уш.с, 7H), 2,23-2,39 (м, 3H), 2,87-2,97 (м, 2H), 3,95 (уш.с, 1H), 4,52 (с, 2H), 7,86 (дд, JHF=8,3, JHH=2,2 Гц, 1H), 7,98 (дд, JHF=9,3, JHH=2,2 Гц, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C20H25FN3O [М+Н]+ 342,1976; найдено 342,1988.
Стадия с'.
Амид 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-6-фтор-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 29 [R представляет собой F; n=m=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; R2 представляет собой 1-циклогексил]
К перемешиваемому раствору 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-6-фтор-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбонитрила (IV) (100 мг, 0,3 ммоль) в уксусной кислоте (5 мл) добавляют по каплям концентрированную серную кислоту (2,7 мл) в течение 30 мин. Реакционную смесь затем нагревают при 80°С в течение 9 ч, охлаждают до комнатной температуры и выливают в холодную воду (10 мл). Затем водную фазу подщелачивают посредством добавления концентрированного водного раствора аммония и экстрагируют дихлорметаном (3x10 мл). Объединенные органические фазы промывают 2н. водным раствором гидроксида натрия (2x12 мл) и насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и выпаривают досуха в вакууме. Указанное в заголовке соединение получают в виде белого твердого вещества (43 мг, 40%) после очистки с помощью колоночной хроматографии (раствор дихлорметана/метанола/аммиака, 7н. в метаноле: 97/2/1).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСОч16) 8 м.д. 1,00-1,14 (м, 1H), 1,14-1,28 (м, 4Н), 1,53-1,61 (м, 1H), 1,67-1,80 (м, 6Н), 2,25-2,36 (м, 3H), 2,88-2,95 (м, 2H), 3,94-4,03 (м, 1H), 4,55 (с, 2H), 7,66 (дд, JHF=7,7, JHH=2,6 Гц, 1H), 7,85 (уш.с, 1H), 7,89 (дд, JHF=10,9, JHH=2,6 Гц, 1H), 10,78 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C20H27FN3O2 [M+H]+ 360,2082; найдено 360,2098.
Пример 3.
Стадия m.
трет-Бутиловый эфир 4-[(фуран-2-илметил)амино]пиперидин-1-карбоновой кислоты (XVI) [n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; X представляет собой трет-бутоксикарбонил].
К эквимолярному раствору фуран-2-карбальдегида (XV) (250 мг, 2,6 ммоль) и трет-бутилового эфира 4-амино-пиперидин-1-карбоновой кислоты (XIII) (473 мг, 2,6 ммоль) в дихлорметане (14 мл) добавляют 1 М раствор хлорида титана^Х^ в дихлорметане (1,3 мл, 1,3 ммоль) и триэтиламин (0,32 мл, 2,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в атмосфере азота в течение 2 дней. Затем добавляют по каплям натрий цианоборгидрид (493 мг, 7,8 ммоль) в метаноле (7 мл) при перемешивании и раствору предоставляют возможность для перемешивания в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют 35% раствор гидроксида натрия, и продукт экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу отделяют, промывают насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и выпаривают досуха в вакууме. Сырой материал очищают с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан/метанол 95:5) с получением указанного в заголовке соединения в виде красного масла (406 мг, 56%).
HRMS (ESI+): вычислено для C15H25N2O3 [М+Н]+ 281,1860; найдено 281,1867.
Работая аналогичным путем, но используя соответствующим образом замещенный исходный материал (XIII), получают следующие соединения:
Бензил-фуран-2-илметил-амин (XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C12H14NO [М+Н]+ 188, 1070; найдено 188,1075
Фуран-2-илметил-фенетил-амин (XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci3Hi6NO [М+Н]+ 202, 1226; найдено 202,1230
[2-(3,4-Дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)этил]фуран-2-илметил-амин (XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci6H2iN20 [М+Н]+ 257, 1648; найдено 257,1642
Фуран-2-илметил-(2-пиперидин-1-ил-этил)амин (XVI) HRMS (ESI+) : вычислено для C12H21N2O [М+Н]+ 209, 1648; найдено 209,1650
Фуран-2-илметил-(2-морфолин-4-ил-этил)амин (XVI) HRMS (ESI+) : вычислено для C11H19N2O2 [М+Н]+ 211,1441; найдено 211,1446
Фуран-2-илметил-(З-морфолин-4-ил-пропил)амин (XVI) HRMS (ESI+) : вычислено для C12H21N2O2 [М+Н]+ 225, 1598; найдено 225,1590
[2-(3,4-Дигидро-2Н-хинолин-1-ил)этил]фуран-2-илметил-амин
(XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci6H2iN20 [М+Н]+ 257, 1648; найдено 257,1652
Фуран-2-илметил-(3-фенил-пропил)амин (XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci4Hi8NO [М+Н]+ 216, 1383; найдено 216,1387
Фуран-2-илметил-(2-пиридин-2-ил-этил)амин (XVI) HRMS (ESI+) : вычислено для C12H15N2O [М+Н]+ 203, 1179; найдено 203,1181
[3-(3,4-Дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)пропил]фуран-2-илметил-амин (XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C17H23N2O [М+Н]+ 271, 1805; найдено 271,1799
[3-(3,4-Дигидро-2Н-хинолин-1-ил)пропил]фуран-2-илметил-амин (XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C17H23N2O [М+Н]+ 271, 1805; найдено 271,1811
Фуран-2-илметил-[3-(4-метил-пиперазин-1-ил)пропил]амин
(XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C13H24N3O [М+Н]+ 238, 1914; найдено 238,1912
Фуран-2-илметил-[3-(4-фенил-пиперазин-1-ил)пропил]амин
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci8H26N30 [М+Н]+ 300, 2070; найдено
300,2077
Фуран-2-илметил-(З-пиперидин-1-ил-пропил)амин (XVI) HRMS (ESI+) : вычислено для C13H23N2O [М+Н]+ 223, 1805; найдено 223,1802
(3-[1,4']Бипиперидинил-1'-ил-пропил)фуран-2-илметил-амин
(XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C18H32N3O [М+Н]+ 306, 2540; найдено 306,2544
[3-(2,б-Диметил-пиперидин-1-ил)пропил]фуран-2-илметил-амин
(XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C15H27N2O [М+Н]+ 251,2118; найдено 251,2120
Фуран-2-илметил-[1-(тетрагидро-пиран-4-ил)пиперидин-4-ил]-амин (XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C15H25N2O2 [М+Н]+ 265, 1911; найдено 265,1919
(1-Бензил-пиперидин-4-ил)фуран-2-илметил-амин (XVI) HRMS (ESI+) : вычислено для C17H23N2O [М+Н]+ 271, 1805; найдено 271,1807
[2-(1-Бензил-пиперидин-4-ил)этил]фуран-2-илметил-амин
(XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C19H27N2O [М+Н]+ 299, 2118; найдено 299,21222
[3-(4-Бензил-пиперидин-1-ил)пропил]фуран-2-илметил-амин
(XVI)
HRMS (ESI+) : вычислено для C20H29N2O [М+Н]+ 313, 2274; найдено 313,2280
(1-Циклогексилпиперидин-4-ил)фуран-2-илметиламин (XVI).
Эквимолярный раствор фуран-2-карбальдегида (XV) (1,3 г, 13,5 ммоль) и 1-циклогексилпиперидин-4-иламина (XIII) (2,46 г, 13,5 ммоль) в толуоле (140 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 8 ч посредством использования аппарата Дина-Старка. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и промывают этанолом (50 мл). Добавляют натрий триацетоксиборгидрид (3,8 г, 17,93 ммоль), и смесь оставляют в течение ночи при комнатной температуре. Затем ее подщелачивают водным раствором аммония (8%) и водный слой отделяют и экстрагируют диэтиловым эфиром. Органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла, с использованием на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.
HRMS (ESI+): вычислено для C16H27N2O [M+H]+ 263,2118; найдено 263,2120.
Стадия n.
3-(1-трет-Бутоксикарбонилпиперидин-4-ил)-4-оксо-10-окса-3-азатрицикло[5.2.1.015]дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII) [n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; X представляет собой трет-бутоксикарбонил].
К раствору трет-бутилового эфира 4-[(фуран-2-илметил)амино]пиперидин-1-карбоновой кислоты (XVI) (5,6 г, 21 ммоль) в толуоле (300 мл) добавляют малеиновый ангидрид (2,1 г, 21 ммоль). Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 6 ч и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Полученный твердый осадок фильтруют, промывают диэтиловым эфиром и сушат с получением желаемого соединения (6,5 г, 82%) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО^) 8 м.д. 1,40 (с, 9Н), 1,40-1,63 (м, 4Н), 2,45 (д, J=9,3 Гц, 1H), 2,75 (уш.с, 2H), 2,76 (д, J=9,3 Гц, 1H), 3,59 (д, J=11,6 Гц, 1H), 3,88 (д, J=11,60 Гц, 1H), 3,90 (м, 1H), 3,96-4,06 (м, 2H), 4,95 (д, J=1,6 Гц, 1H), 6,42 (дд, J=5,6, 1,7 Гц, 1H), 6,55 (д, J=5,6 Гц, 1H), 12,03 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C19H27N2O6 [М+Н]+ 379,1864; найдено 379,1876.
Работая аналогичным путем, но используя соответствующим образом замещенный исходный материал (XVI), получают следующие соединения:
3- Бензил-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло[5.2.1.О1'5]дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci6Hi6N04 [М+Н]+ 286, 1074; найдено 286,1078
4- Оксо-3-фенетил-10-окса-3-аза-трицикло[5.2.1.О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для CivHisNCm [М+Н]+ 300, 1230; найдено 300,1237
3- [2-(3,4-Дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)этил]-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 . 1. О1'5] дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C20H23N2O4 [М+Н]+ 355, 1652; найдено 355,1657
4- Оксо-З-(2-пиперидин-1-ил-этил)-10-окса-З-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C16H23N2O4 [М+Н]+ 307, 1652; найдено 307,1660
3-(2-Морфолин-4-ил-этил)-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C15H21N2O5 [М+Н]+ 309, 1445; найдено 309,1446
3- (З-Морфолин-4-ил-пропил)-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C16H23N2O5 [М+Н]+ 323, 1601; найдено 323,1609
3- [2-(3,4-Дигидро-2Н-хинолин-1-ил)этил]-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C20H23N2O4 [М+Н]+ 355, 1652; найдено 355,1660
4- Оксо-З-(3-фенил-пропил)-10-окса-З-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C18H20NO4 [М+Н]+ 314, 1387; найдено 314,1392
4-Оксо-З-(2-пиридин-2-ил-этил)-10-окса-З-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C16H17N2O4 [М+Н]+ 301, 1183; найдено 301,1179
3- [3-(3,4-Дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)пропил]-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло[5.2.1.О1'5]дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C21H25N2O4 [М+Н]+ 369, 1809; найдено
369,1811
3-[3-(3,4-Дигидро-2Н-хинолин-1-ил)пропил]-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C21H25N2O4 [М+Н]+ 369, 1809; найдено 369,1801
3- [3-(4-Метил-пиперазин-1-ил)пропил]-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C17H26N3O4 [М+Н]+ 336, 1918; найдено 336,1920
4- Оксо-З-[3-(4-фенил-пиперазин-1-ил)пропил]-10-окса-З-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислот (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C22H28N3O4 [М+Н]+ 398, 2074; найдено 398,2079
4-Оксо-З-(З-пиперидин-1-ил-пропил)-10-окса-З-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C17H25N2O4 [М+Н]+ 321, 1809; найдено 321,1812
3-(3-[1,4']Бипиперидинил-1'-ил-пропил)-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C22H34N3O4 [М+Н]+ 404, 2544; найдено 404,2540
3- [3-(2,б-Диметил-пиперидин-1-ил)пропил]-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C19H29N2O4 [М+Н]+ 349, 2122; найдено 349,2119
4- Оксо-З-[1-(тетрагидро-пиран-4-ил)-пиперидин-4-ил]-10-окса-3-аза-трицикло[5.2.1.О1'5]дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C19H27N2O5 [М+Н]+ 363, 1914; найдено 363,1920
3-(1-Бензил-пиперидин-4-ил)-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C21H25N2O4 [М+Н]+ 369, 1809; найдено 369,1799
3-[2-(1-Бензил-пиперидин-4-ил)этил]-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C23H29N2O4 [М+Н]+ 397, 2122; найдено 397,2127
3- [3-(4-Бензил-пиперидин-1-ил)пропил]-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-б-карбоновая кислота (XVII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C24H31N2O4 [М+Н]+ 411, 2278; найдено 411,2283
3- (1-Циклогексил-пиперидин-4-ил)-4-оксо-10-окса-3-аза-трицикло [5 . 2 .1. О1'5] дец-8-ен-6-карбоновая кислота (XVII) 1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-ё6) 8 м.д. 11,98 (уш.с, 1H), 6,58 (д, J=5,6 Гц, 1H), 6,44 (дд, J=5,6, 1,6 Гц, 1H), 4,97 (д, J=1,6 Гц, 1H), 4,00-4,11 (м, 1H), 3,96 (д, J=11,0 Гц, 1н), 3,55 (д, J=11,0 Гц 1H), 3,38-3,48 (м, 2H), 3,04-3,2 (м, 3H), 2,79 (д, J=9,1 Гц, 1H), 2,48 (д, J=9,1 Гц, 1H), 1,55-2,01 (м, 8Н), 1,04-1,44 (м, 6Н). HRMS (ESI+): вычислено для C20H29N2O4 [М+Н]+ 361,2122; найдено 361,2129.
Стадия o.
Гидрохлорид 3-оксо-2-пиперидин-4-ил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (XIX) [n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил].
3-(1-трет-Бутоксикарбонилпиперидин-4-ил)-4-оксо-10-окса-3-азатрицикло[5.2.1.01,5]дец-8-ен-6-карбоновую кислоту (XVII) (6,35 г, 16,8 ммоль) растворяют в 37% растворе хлористо-водородной кислоты (80 мл), и полученный раствор нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении, и остаток разбавляют метанолом и декантируют с получением желаемого продукта (XIX) в виде белого твердого вещества (4,06 г, 82%).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО^) 8 м.д. 1,95-2,12 (м, 4Н), 3,01-3,18 (м, 2H), 3,36-3,45 (м, 2H), 4,36-4,46 (м, 1H), 4,72 (с, 2H), 7,85 (дд, J=7,7, 7,5 Гц, 1H), 7,95 (дд, J=7,5, 0,8 Гц, 1H), 8,17 (дд, J=7,7, 0,8 Гц, 1H), 8,53 (уш.с, 1H), 8,79 (уш.с, 1H), 15,86 (с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C14H17N2O3 [М+Н]+ 261,1234; найдено 261,1222.
Работая аналогичным путем, но используя соответствующим образом замещенный исходный материал (XVII), получают следующие соединения:
2- Бензил-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci6Hi4N03 [М+Н]+ 268, 0968; найдено 268,0972
3- Оксо-2-фенетил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci7Hi6N03 [М+Н]+ 282, 1125; найдено 282,1131
2- [2-(3,4-Дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)этил]-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C20H21N2O3 [М+Н]+ 337, 1547; найдено 337,1541
3- Оксо-2-(2-пиперидин-1-ил-этил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C16H21N2O3 [М+Н]+ 288, 1547; найдено 288,1552
2-(2-Морфолин-4-ил-этил)-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C15H19N2O4 [М+Н]+ 291, 1339; найдено 291,1335
2-(З-Морфолин-4-ил-пропил)-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C16H21N2O4 [М+Н]+ 305, 1496; найдено 305,1492
2- [2- (3,4-Дигидро-2Н-хинолин-1-ил)этил]-З-оксо-2, 3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C20H21N2O3 [М+Н]+ 337, 1547; найдено 337,1549
3- Оксо-2-(3-фенил-пропил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci8Hi8N03 [М+Н]+ 296, 1281; найдено 296,1290
З-Оксо-2-(2-пиридин-2-ил-этил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C16H15N2O3 [М+Н]+ 283, 1077; найдено 283,1080
2-[3-(3,4-Дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)пропил]-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C21H23N2O3 [М+Н]+ 351, 1703; найдено 351,1706
2-[3-(3,4-Дигидро-2Н-хинолин-1-ил)пропил]-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C2iH23N203 [М+Н]+ 351, 1703; найдено 351,1699
2- [3-(4-Метил-пиперазин-1-ил)пропил]-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci7H24N303 [М+Н]+ 318,1812; найдено 318,1820
3- Оксо-2-[3-(4-фенил-пиперазин-1-ил)пропил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для СггИге^Оз [М+Н]+ 380, 1969; найдено 380,1971
З-Оксо-2-(З-пиперидин-1-ил-пропил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci7H23N203 [М+Н]+ 303, 1703; найдено 303,1702
2-(3-[1,4']Бипиперидинил-1'-ил-пропил)-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C22H32N303 [М+Н]+ 386, 2438; найдено 386,2442
2- [3-(2,6-Диметил-пиперидин-1-ил)пропил]-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для Ci9H27N203 [М+Н]+ 331, 2016; найдено 331,2011
3- Оксо-2-[1-(тетрагидро-пиран-4-ил)-пиперидин-4-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C19H25N2O4 [М+Н]+ 345, 1809; найдено 345,1816
2-(1-Бензил-пиперидин-4-ил)-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C21H23N2O3 [М+Н]+ 351, 1703; найдено 351,1708
2-[2-(1-Бензил-пиперидин-4-ил)этил]-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C23H27N2O3 [М+Н]+ 379, 2016; найдено 379,2020
2-[3-(4-Бензил-пиперидин-1-ил)пропил]-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C24H29N2O3 [М+Н]+ 393, 2173; найдено 393,2177
2-(1-Циклогексил-пиперидин-4-ил)-З-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII)
HRMS (ESI+) : вычислено для C20H27N2O3 [М+Н]+ 343, 2016; найдено 343,2019
Стадия q.
2-(1-трет-Бутоксикарбонилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновая кислота (XVIII) [n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; X представляет собой трет-бутоксикарбонил].
К раствору 3-оксо-2-пиперидин-4-ил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (3,9 г, 13,2 ммоль) в пиридине (15 мл) последовательно добавляют карбонат калия (3,6 г, 26,5 ммоль) и метанол (40 мл). Затем добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (3,16 г, 14,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч до тех пор, пока анализ ВЭЖХ не покажет исчезновение исходного материала. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в дихлорме-тане. Раствор промывают два раза 5% раствором гидросульфата калия и органическую фазу сушат над Na2SO4 и концентрируют в вакууме. Полученный сырой комок разбавляют диэтиловым эфиром и декантируют с получением указанного в заголовке соединения (3,7 г, 78%) в виде белого твердого вещества.
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-ё6) 8 м.д. 1,42 (с, 9Н), 1,04-1,74 (м, 2H), 1,80-1,88 (м, 2H), 2,89 (уш.с, 2H), 4,04-4,12 (м, 2H), 4,23-4,32 (м, 1H), 4,73 (с, 2H), 7,83 (дд, J=7,5, 0,8 Гц, 1H), 7,91 (дд, J=7,5, 0,8 Гц, 1H), 8,17 (дд, J=7,7, 0,8 Гц, 1H), 16,03 (уш.с, 1Н).
Стадия р.
трет-Бутиловый эфир 4-(7-карбамоил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты (XX) [n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; X представляет собой трет-бутоксикарбонил].
Способ А. К раствору 2-(1-трет-бутоксикарбонилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (XVIII) (3,7 г, 10,3 ммоль) в N, N-диметилформамиде (60 мл) добавляют соль гидроксибензотриазола аммония (3,15 г, 20,7 ммоль), соль 1-этил-3-(3'-диметиламино)карбодиимида и хлористо-водородной кислоты (3,34 г, 20,7 ммоль) и диизопропилэтиламин (5,3 мл, 30,9 ммоль).
Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в этилацетате. Раствор промывают два раза насыщенным водным раствором карбоната натрия, и органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют в вакууме.
Сырой материал очищают с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан/метанол 97:3) с получением указанного в заголовке соединения (2,74 г, 74%) в виде белого твердого вещества.
Способ В. Раствор 2-(1-трет-бутоксикарбонилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (XVIII) (5,5 г, 15,3 ммоль) и карбонилдиимидазола (3,7 г, 22,8 ммоль) в сухом тетра-гидрофуране (80 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Затем добавляют концентрированный водный раствор аммония (25 мл), и реакционную смесь оставляют при комнатной температуре до тех пор, пока не исчезнет исходный материал (3 ч). Растворитель выпаривают при пониженном давлении и полученный в результате сырой первичный амид (1,1 г, 20%) используют без какой-либо дополнительной очистки.
HRMS (ESI+): вычислено для C19H26N3O4 [М+Н]+ 360,1918; найдено 360,1921.
Работая в соответствии со способом А, но используя соответствующим образом замещенный исходный материал, получают следующие соединения.
Амид 2-бензил-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 1 [R представляет собой Н; n=1; R1 представляет собой фенил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-с16) 8 м.д. 1,72-1,88 (м, 4Н), 2,04-2,13 (м, 2H), 2,88-2,96 (м, 2H), 3,51 (с, 2H), 4,00-4,11 (м, 1H), 4,56 (с, 2H), 7,20-7,30 (м, 1H), 7,31-7,37 (м, 4Н), 7,66 (уш.с, 1H), 7,71 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=7,6, 1,5 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,4, 1,5 Гц, 1H), 10,72 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C16H15N2O2 [М+Н]+ 267,1128; найдено 267,1120.
Амид 3-оксо-2-фенетил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 2
[R представляет собой Н; n=2; R1 представляет собой фенил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 8 м.д. 2,97 (т, J=7,6 Гц, 2H), 3,82 (т, J=7,6 Гц, 2H), 4,49 (с, 2H), 7,177,24 (м, 1H), 7,24-7,32 (м, 4Н), 7,66 (уш.с, 1H), 7,70 (дд, J=7,5, 7,3 Гц, 1H), 7,74 (дд, J=7,5, 1,5 Гц, 1H), 8,19 (дд, J=7,3, 1,5 Гц, 1H), 10,68 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C17H15N2O2 [М+Н]+ 281,1285; найдено 281,1295.
Амид 2-[2-(3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)этил]-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 3
[R представляет собой Н; n=2; R1 представляет собой 3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 8 м.д. 2,73-2,84 (м, 6Н), 3,65 (с, 2H), 3,81 (т, J=6,2 Гц, 2H), 4,65 (с, 2H), 7,00-7,12 (м, 4Н), 7,66 (уш.с, 1H), 7,69 (дд, J=7,6, 7,7 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=7,6, 1,2 Гц, 1H), 8,19 (дд, J=7,7, 1,2 Гц, 1H), 10,75 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C20H23N3O2 [М+Н]+ 336,1707; найдено 336,1722.
Амид 3-оксо-2-(2-пиперидин-1-ил-этил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 4
[R представляет собой Н; n=2; R1 представляет собой пиперидин-1-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 8 м.д. 1,33-1,40 (м, 2H), 1,43-1,50 (м, 4Н), 2,35-2,43 (м, 4Н), 2,54 (т, J=6,3 Гц, 2H), 3,68 (т, J=6,3 Гц, 2H), 4,63 (с, 2H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,7, 7,4 Гц, 1H), 7,78 (дд, J=7,4, 1,2 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,7, 1,2 Гц, 1H), 10,75 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C16H22N3O2 [М+Н]+ 288,1707; найдено 288,1712.
Амид 2-(2-морфолин-4-ил-этил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 5
[R представляет собой Н; n=2; R1 представляет собой морфолин-4-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 2,41-2,46 (м, 4Н), 2,59 (т, J=6,3 Гц, 2H), 3,52-3,57 (м, 4Н), 3,71 (т, J=6,3 Гц, 2H), 4,64 (с, 2H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,7, 7,6 Гц, 1H), 7,78 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,7, 1,3 Гц, 1H), 10,73 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C15H20N3O3 [М+Н]+ 290,1499; найдено 290,1507.
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-с16) 8 м.д. 1,80 (квинтет, J=7,1 Гц, 2H), 2,28-2,38 (м, 6Н), 3,47-3,54 (м, 4Н), 3,61 (т, J=7,1 Гц, 2H), 4,58 (с, 2H), 7,65 (уш.с, 1H), 7,71 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,4, 1,2 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,6, 1,2 Гц, 1H), 10,76 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C16H22N3O3 [М+Н]+ 304,1656; найдено 304,1664.
Амид 2-[2-(3,4-дигидро-2Н-хинолин-1-ил)этил]-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 7
[R представляет собой Н; n=2; R1 представляет собой 3,4-дигидро-2Н-хинолин-1-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 8 м.д. 1,79-1,89 (м, 2H), 2,64-2,70 (м, 2H), 3,27-3,31 (м, 2H), 3,56 (т, J=7,1 Гц, 2H), 3,76 (т, J=7,1 Гц, 2H), 4,65 (с, 2H), 6,44-6,49 (м, 1H), 6,70-6,75 (м, 1H), 6,85-6,89 (м, 1H), 6,92-6,97 (м, 1H), 7,69 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,6 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,6, 1,3 Гц 1H), 8,20 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 10,68 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C20H22N3O2 [М+Н]+ 336,1707; найдено 336,1692.
Амид 3-оксо-2-(3-фенил-пропил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой фенил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 8 м.д. 1,97 (квинтет, J=7,9 Гц, 2H), 2,64 (т, J=7,9 Гц 2H), 3,61 (т, J=7,9 Гц, 2H), 4,59 (с, 2H), 7,15-7,20 (м, 1H), 7,23-7,31 (м, 4Н), 7,67 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,6, 1,5 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=7,4, 1,5 Гц, 1H), 10,74 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C18H19N2O2 [М+Н]+ 295,1441; найдено 295,1433.
Амид 3-оксо-2-(2-пиридин-2-ил-этил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 18
[R представляет собой Н; n=2; R1 представляет собой пирид-2-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 8 м.д. 3,12 (т, J=7,3 Гц, 2H), 3,96 (т, J=7,3 Гц, 2H), 4,52 (с, 2H), 7,23 (ддд, J=7,5, 4,9, 1,2 Гц, 1H), 7,32 (ддд, J=7,8, 1,2, 0,8 Гц, 1H), 7,65 (уш.с, 1H), 7,71 (м, 1H), 7,70 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 8,19 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 8,48 (ддд, J=4,9, 1,8, 0,8 Гц, 1H), 10,66 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C16H16N3O2 [M+H]+ 282,1237; найдено 282,1243.
Амид 2-[3-(3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)пропил]-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 19
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой 3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-116) 8 м.д. 1,92 (квинтет, J=7,3 Гц, 2H), 2,52 (т, J=7,3 Гц, 2H), 2,64-2,70 (м, 2H), 2,76-2,82 (м, 2H), 3,57 (с, 2H), 3,64 (т, J=7,3 Гц, 2H), 4,60 (с, 2H), 7,00-7,70 (м, 4Н), 7,66 (уш.с, 1H), 7,70 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 8,19 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 10,76 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C21H24N3O2 [М+Н]+ 350,1863; найдено 350,1866.
Амид 2-[3-(3,4-дигидро-2Н-хинолин-1-ил)пропил]-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 20
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой 3,4-дигидро-2Н-хинолин-1-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 1,80-1,87 (м, 2H), 1,90 (квинтет, J=7,2 Гц, 2H), 2,65 (т, J=7,2 Гц, 2H), 3,22-3,26 (м, 2H), 3,27-3,30 (м перекрывается сигналом воды, 2H), 3,64 (т, J=7,2 Гц, 2H), 4,59 (с, 2H), 6,42-6,47 (м, 1H), 6,54-6,58 (м, 1H), 6,83-6,87 (м, 1H), 6,89-6,94 (м, 1H), 7,67 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,6 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 10,72 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C21H24N3O2 [М+Н]+ 350,1863; найдено 350,1868.
Амид 2-[3-(4-метилпиперазин-1 -ил)пропил]-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 21
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой 4-метилпиперазин-1-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 1,80 (квинтет, J=7,2 Гц, 2H), 2,11 (с, 3H), 2,15-2,43 (уш.с, 8Н), 2,33 (т, J=7,2 Гц, 2H), 3,60 (т, J=7,2 Гц, 2H), 4,58 (с, 2H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 10,79 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C17H25N4O2 [М+Н]+ 317,1972; найдено 317,1975.
Амид 3-оксо-2-[3-(4-фенил-пиперазин-1-ил)пропил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 22
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой пиперазин-1-ил; m=0; R2 представляет собой 4-фенил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 1,85 (квинтет, J=7,1 Гц, 2H), 2,39 (т, J=7,1 Гц, 2H), 3,02-3,10 (м, 4Н), 3,63 (т, J=7,1 Гц, 2H), 4,60 (с, 2H), 6,75 (т, J=7,3 Гц, 1H), 6,89 (д, J=7,9 Гц, 2H), 7,19 (дд, J=7,9, 7,3 Гц, 2H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,70 (дд, J=7,7, 7,4 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=7,4, 1,2 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,7, 1,2 Гц, 1H), 10,78 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C22H27N4O2 [М+Н]+ 379,2129; найдено 379,2145.
Гидрохлорид амида 3-оксо-2-(3-пиперидин-1-ил-пропил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 25
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой пиперидин-1-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-с16) 8 м.д. 1,29 (м, 1H), 1,50-1,73 (м, 3H), 1,75-1,85 (м, 2H), 2,00-2,09 (м, 2H), 2,79-2,92 (м, 2H), 3,03-3,14 (м, 2H), 3,40-3,50 (м, 2H), 3,66 (т, J=6,6 Гц, 2H), 4,59 (с, 2H), 7,71 (уш.с, 1H), 7,74 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,80 (дд, J=7,4, 1,1 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=7,6, 1,1 Гц, 1H), 8,93 (уш.с, 1H), 10,58 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C17H24N3O2 [М+Н]+ 302,1863; найдено 302,1865.
Дигидрохлорид амида 2-(3-[1,4']бипиперидинил-1 '-ил-пропил)-3-оксо-2,3-дигидро-1 Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 26
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой пиперидин-1-ил; m=0; R2 представляет собой 4-пиперидин-1 -ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-с16) 8 м.д. 1,33-1,49 (м, 1H), 1,57-1,74 (м, 3H), 1,74-1,94 (м, 4Н), 1,95-2,13 (м, 2H), 2,16-2,30 (м, 2H), 2,87-3,72 (м, 11H), 3,66 (т, J=6,5 Гц, 2H), 4,59 (с, 2H), 7,72 (уш.с, 1H), 7,75 (дд, J=7,6, 6,7 Гц, 1H), 7,80 (д, J=6,7 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=7,6, 1,2 Гц, 1H), 9,38 (уш.с, 2H), 10,58 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C22H33N4O2 [М+Н]+ 385,2598; найдено 385,2611.
Гидрохлорид амида 2-[3-(2,6-диметилпиперидин-1-ил)пропил]-3-оксо-2,3-дигидро- 1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 27
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой 2,6-диметилпиперидин-1-ил; m=0; R2 отсутствует]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 1,25 (д, J=6,3 Гц, 6Н), 1,40-1,55 (м, 3H), 1,80-1,91 (м, 2H), 1,95-2,05 (м, 2H), 3,02-3,46 (м, 4Н), 3,68 (м, 2H), 4,63 (с, 2H), 7,70 (уш.с, 1H), 7,74 (дд, J=7,6, 7,6 Гц, 1H), 7,80 (дд, J=7,6, 1,2 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=7,6, 1,2 Гц, 1H), 8,72 (уш.с, 1H), 10,58 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C19H28N3O2 [М+Н]+ 330,2176; найдено 330,2176.
Амид 3-оксо-2-[1-(тетрагидропиран-4-ил)пиперидин-4-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 28
[R представляет собой Н; n=m=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; R2 представляет собой 1-(тетрагидропиран-4-ил)]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 1,38-1,50 (м, 2H), 1,65-1,72 (м, 2H), 1,73-1,81 (м, 4Н), 2,18-2,28 (м, 2H), 2,43-2,47 (м, 1H), 2,97-3,04 (м, 2H), 3,30 (м перекрывается сигналом воды, 2H), 3,89 (дд, J=11,1, 3,9 Гц, 2H), 4,02 (м, 1H), 4,55 (с, 2H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,71 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=7,4, 1,5 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,6, 1,5 Гц, 1H), 10,74 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C19H26N3O3 [М+Н]+ 344,1969; найдено 344,1962.
Амид 2-(1-бензилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 30
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой фенил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 1,70-1,88 (м, 4Н), 1,99-2,13 (м, 2H), 2,89-2,96 (м, 2H), 3,51 (с, 2H), 4,00-4,11 (м, 1H), 4,56 (с, 2H), 7,20-7,30 (м, 1H), 7,30-7,36 (м, 4Н), 7,66 (уш.с, 1H), 7,71 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=7,6, 1,5 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,4, 1,5 Гц, 1H), 10,72 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C21H24N3O2 [М+Н]+ 350,1863; найдено 350,1874.
Гидрохлорид амида 2-[2-(1-бензилпиперидин-4-ил)этил]-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 31
[R представляет собой Н; n=2; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой фенил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 1,29-1,41 (м, 2H), 1,43-1,54 (м, 1H), 1,56-1,64 (м, 2H), 1,92-2,00 (м, 2H), 2,83-2,96 (м, 2H), 3,30 (м перекрывается сигналом воды, 2H), 3,61 (т, J=6, 8 Гц, 2H), 4,25 (д, J=5,1 Гц, 2H), 4,57 (с, 2H), 7,47 (с, 5H), 7,69 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 9,22 (уш.с, 1H), 10,68 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C23H28N3O2 [М+Н]+ 378,2176; найдено 378,2178.
Амид 2-[3-(4-бензилпиперидин-1-ил)пропил]-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 32
[R представляет собой Н; n=3; R1 представляет собой пиперидин-1-ил; m=1; R2 представляет собой фенил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-а6) 8 м.д. 0,93-1,12 (м, 2H), 1,34-1,53 (м, 3H), 1,68-1,82 (м, 4Н), 2,22-2,33 (м, 2H), 2,41 (д, J=6,8 Гц, 2H), 2,75-2,85 (м, 2H), 3,59 (т, J=6,9 Гц, 2H), 4,56 (с, 2H), 7,09-7,14 (м, 2H), 7,147,19 (м, 1H), 7,23-7,29 (м, 2H), 7,65 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,4, 7,4 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 10,78 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C24H30N3O2 [M+H]+ 392,2333; найдено 392,2346.
Стадия i'.
Гидрохлорид амида 3-оксо-2-пиперидин-4-ил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (XXI)
[n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил].
Раствор трет-бутилового эфира 4-(7-карбамоил-1-оксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пиперидин-1-карбоновой кислоты (XX) (2,7 г, 7,5 ммоль) в 4 М растворе хлористо-водородной кислоты в диоксане (18 мл, 75 ммоль) перемешивают при 50°С в течение 2 ч до тех пор, пока анализ ВЭЖХ не покажет исчезновение исходного материала. Растворитель удаляют при пониженном давлении, и продукт растворяют в диэтиловом эфире и фильтруют с получением указанного в заголовке соединения (2,09 г, 95%) в виде его гидрохлорида.
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-сУ 8 м.д. 1,93-2,09 (м, 4Н), 3,03-3,17 (м, 2H), 3,35-3,48 (м перекрывается сигналом воды, 2H), 4,32-4,45 (м, 1H), 4,56 (с, 2H), 7,71 (уш.с, 1H), 7,75 (дд, J=7,5, 7,5 Гц, 1H), 7,82 (дд, J=7,5, 1,1 Гц 1H), 8,21 (дд, J=7,5, 1,1 Гц, 1H), 8,59 (уш.с, 1H), 8,82 (уш.с, 1H), 10,58 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C14H18N3O2 [М+Н]+ 260,1394; найдено 260,1398
Стадия I'.
Амид 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 11
[R представляет собой Н; n=m=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; R2 представляет собой 1-циклогексил]
Способ А. К суспензии гидрохлорида амида 3-оксо-2-пиперидин-4-ил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (56 мг, 0,19 ммоль) в дихлорметане (2 мл), добавляют циклогексанон (XIV) (27,5 мг, 0,28 ммоль), ацетат натрия (32 мг, 0,38 ммоль) и метанол (0,3 мл). Полученный в результате раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 5 ч. Затем добавляют натрий цианоборгидрид (13 мг, 0,21 ммоль), и смесь перемешивают в течение ночи. Растворители удаляют при пониженном давлении, и остаток растворяют в дихлорметане и промывают два раза водой. Органическую фазу сушат над Na2SO4 и концентрируют в вакууме, и остаток очищают с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан/метанол 95:5) с получением 27 мг (40%) амида 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты.
Способ В. К раствору гидрохлорида амида 2-пиперидин-4-ил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (4,4 г, 14,8 ммоль) и циклогексанона (2,2 г, 22,45 ммоль) в ^^диметилформамиде (100 мл), добавляют ледяную уксусную кислоту (4,5 мл) и тетраметиламмоний триацетоксиборгидрид (11,8 г, 44,85 ммоль). Полученному в результате раствору предоставляют возможность для перемешивания в течение ночи при комнатной температуре.
Затем растворитель выпаривают при пониженном давлении и полученный в результате остаток раз-
бавляют 8% водным раствором аммиака и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют. Сырой материал очищают с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан/метанол 95:5), и впоследствии его растворяют в малом количестве метанола и он выпадает в осадок с помощью диэтилового эфира. Осадок фильтруют и промывают диэтиловым эфиром с получением 1,77 г желаемого продукта в виде белого твердого вещества (35%).
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-с16) 8 м.д. 1,00-1,14 (м, 1H), 1,14-1,32 (м, 4Н), 1,55-1,62 (м, 1H), 1,70-1,80 (м, 8Н), 2,25-2,37 (м, 3H), 2,88-2,98 (м, 2H), 3,95-4,06 (м, 1H), 4,55 (с, 2H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,71 (дд, J=7,6, 7,6 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=7,6, 1,5 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,6, 1,5 Гц, 1H), 10,74 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C20H28N3O2 [М+Н]+ 342,2176; найдено 342,2175.
Работая в соответствии со способом А, но используя соответствующим образом замещенный исходный материал (XIV), получают следующие соединения.
Амид 3-оксо-2-(1-пиридин-4-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 8
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой пирид-4-ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 8 м.д. 1,75-1,92 (м, 4Н), 2,11-2,22 (м, 2H), 2,88-2,95 (м, 2H), 3,56 (с, 2H), 4,02-4,14 (м, 1H), 4,58 (с, 2H), 7,33-7,38 (м, 2H), 7,68 (уш.с, 1H), 7,73 (дд, J=7,6, 7,6 Гц, 1H), 7,78 (дд, J=7,6, 1,5, 1H), 8,21 (дд, J=7,6, 1,4 Гц, 1H), 8,51-8,55 (м, 2H), 10,72 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C20H23N4O2 [М+Н]+ 351,1816; найдено 351,1817.
Амид 3-оксо-2-(1-тиофен-2-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 9
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой тиофен-2-ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 8 м.д. 1,73-1,88 (м, 4Н), 2,06-2,20 (м, 2H), 2,94-3,03 (м, 2H), 3,73 (с, 2H), 4,01-4,11 (м, 1H), 4,58 (с, 2H), 6,96-7,00 (м, 2H), 7,42-7,46 (м, 1H), 7,67 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,6, 1,5 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=7,4, 1,5 Гц, 1H), 10,72 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C19H22N3O2S [М+Н]+ 356,1427; найдено 356,1430.
Амид 3-оксо-2-(1-пиридин-3-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 10
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой
пирид-3-ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-116) 8 м.д. 1,70-1,80 (м, 4Н), 2,08-2,18 (м, 2H), 2,87-2,96 (м, 2H), 3,55 (с, 2H), 4,01-4,12 (м, 1H), 4,56 (с, 2H), 7,37 (дд, J=7,7, 4,8 Гц 1H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,71 (т, J=7,7, 7,4 Гц, 1H), 7,73 (сигнал перекрывается другими сигналами, 1H), 7,76 (дд, J=7,7, 1,3 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 8,48 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,52 (с, 1H), 10,71 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C20H23N4O2 [М+Н]+ 351,1816; найдено 351,1822.
Амид 2-(1 -фуран-2-илметилпиперидин-4-ил)-3 -оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 12
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой фур-2-ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-116) 8 м.д. 1,70-1,87 (м, 4Н), 2,07-2,16 (м, 2H), 2,90-2,97 (м, 1H), 3,53 (с, 2H), 3,98-4,06 (м, 1H), 4,55 (с, 2H), 6,30 (д, J=2,4 Гц, 1H), 6,41 (дд, J=2,4, 1,8 Гц, 1H), 7,59 (уш.с, 1H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,71 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 8,19 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 10,71 (уш.с,
1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C19H22N3O3 [М+Н]+ 340,1656; найдено 340,1651.
Амид 3-оксо-2-(1-тиофен-3-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 13
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой тиофен-3-ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-116) 8 м.д. 1,72-1,90 (м, 4Н), 2,00-2,12 (м, 2H), 2,90-2,99 (м, 2H), 3,53 (с, 2H), 4,00-4,09 (м, 1H), 4,57 (с, 2Н) 7,08 (д, J=4,6 Гц, 1H), 7,33 (уш.с, 1H), 7,49 (дд, J=4,6, 2,8 Гц, 1H), 7,67 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=7,6, 1,3, 1H), 8,21 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 10,73 (уш.с,
1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C19H22N3O2S [М+Н]+ 356,1427; найдено 356,1432. Амид 2-(1 -фуран-3 -илметилпиперидин-4-ил)-3 -оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 14
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой фур-3-ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСОч16) 8 м.д. 1,72-1,89 (м, 4Н), 2,02-2,12 (м, 2H), 2,90-3,02 (м, 2H), 3,37 (с, 2H), 4,00-4,10 (м, 1H), 4,56 (с, 2H), 6,45 (с, 1H), 7,58 (с, 1H), 7,62 (с, 1H), 7,67 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=7,4, 1,5 Гц, 1H), 8,21 (дд, J=7,6, 1,5 Гц, 1H), 10,73 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C19H22N3O3 [М+Н]+ 340,1656; найдено 340,1649.
Амид 3-оксо-2-(1-пиридин-2-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 15
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой пирид-2-ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-ёб) 5 м.д. 1,74-1,93 (м, 4Н), 2,12-2,28 (м, 2H), 2,91-3,00 (м, 2H), 3,65 (с, 2H), 4,02-4,13 (м, 1H), 4,58 (с, 2H), 7,28 (дд, J=6,8, 4,8 Гц, 1H), 7,47 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,67 (уш.с, 1H), 7,73 (дд, J=7,4, 7,4 Гц, 1H), 7,76-7,83 (м, 2H), 8,21 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 8,51 (д, J=4,8 Гц, 1H), 10,73 (уш.с,
1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C20H23N4O2 [М+Н]+ 351,1816; найдено 351,1815.
Амид 3-оксо-2-[1-(1Н-пиррол-2-илметил)пиперидин-4-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 16
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой Ш-пиррол-2-ил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО- <16) 5 м.д. 1,70-1,88 (м, 4Н), 1,96-2,09 (м, 2H), 2,88-2,99 (м, 2H), 3,44 (с, 2H), 3,94-4,09 (м, 1H), 4,55 (с, 2H), 5,89 (уш.с, 1H), 5,94 (уш.с, 1H), 6,65 (уш.с, 1H), 7,67 (уш.с, 1н), 7,72 (дд, J=7,6, 7,4 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,6, 1,3 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,4, 1,3 Гц, 1H), 10,65 (уш.с, 1H), 10,73 (уш.с, 1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C19H23N4O2 [М+Н]+ 339,1816; найдено 339,1812. Амид 2-(1-циклопропилметилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты (I), соединение 24
[R представляет собой Н; n=0; R1 представляет собой пиперидин-4-ил; m=1; R2 представляет собой циклопропил]
1Н ЯМР (400,5 МГц, ДМСО-с16) 5 м.д. 0,06-0,12 (м, 2H), 0,44-0,50 (м, 2H), 0,80-0,89 (м, 1H), 1,72-1,88 (м, 4Н), 2,00-2,11 (м, 2H), 2,21 (д, J=6,3 Гц, 2H), 3,04-3,13 (м, 2H), 3,98-4,09 (м, 1H), 4,56 (с, 2H), 7,66 (уш.с, 1H), 7,72 (дд, J=7,6, 7,6 Гц, 1H), 7,77 (дд, J=7,6, 1,2 Гц, 1H), 8,20 (дд, J=7,6, 1,2 Гц, 1H), 10,73 (уш.с,
1Н).
HRMS (ESI+): вычислено для C18H24N3O2 [M+H]+ 314,1863; найдено 314,1860.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы (I)
где R представляет собой водород или фтор; m равно 0, 1, 2 или 3;
R1 представляет собой 4-6-членный гетероциклил и
R2 представляет собой 3- или 6-членный циклоалкил, 4-6-членный гетероциклил или гетероарил; где гетероциклил представляет собой насыщенное или частично ненасыщенное карбоциклическое кольцо, где один или два атома углерода заменяются гетероатомами, выбранными из азота, кислорода и серы;
гетероарил представляет собой 6- или 5-членное ароматическое гетероциклическое кольцо с 1-3 ге-тероатомами, выбранными из N, О или S;
или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Соединение формулы (I) по п.1, отличающееся тем, что m равно 0 или 1;
R1 представляет собой 6-членный гетероциклил и
R2 представляет собой 3- или 6-членный циклоалкил, 6-членный гетероциклил или гетероарил.
3. Соединение формулы (I) по п.2, отличающееся тем, что
когда m равно 0, R1 представляет собой пиперидиновое кольцо и R2 представляет собой циклогек-сильное кольцо;
когда m равно 1, R1 представляет собой пиперидиновое кольцо и R2 представляет собой пиридиновое кольцо;
или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Соединение формулы (I) по п.1, выбранное из группы, состоящей из
амида 3-оксо-2-(1-пиридин-4-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 3-оксо-2-(1-тиофен-2-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 3-оксо-2-(1-пиридин-3-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты; амида 2-(1-фуран-2-илметилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 3-оксо-2-(1-тиофен-3-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 2-(1-фуран-3-илметилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 3-оксо-2-(1-пиридин-2-илметилпиперидин-4-ил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 3-оксо-2-[1-(1Н-пиррол-2-илметил)пиперидин-4-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 2-(1-циклопропилметилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 3-оксо-2-[1-(тетрагидропиран-4-ил)пиперидин-4-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 2-(1-циклогексилпиперидин-4-ил)-6-фтор-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты;
амида 2-(1-бензилпиперидин-4-ил)-3-оксо-2,3-дигидро- 1Н-изоиндол-4-карбоновой кислоты или их фармацевтически приемлемой соли.
5. Способ получения соединения формулы (I) по п.1, который включает следующую последовательность стадий:
стадия h) циклизация соединения формулы (V)
где Т представляет собой (С1-С6)алкил или арил(С1-С6)алкил, посредством реакции с помощью соответствующего амина формулы (XIII)
X-R1-NH.2 (XIII) , где R1 является таким, как определено в п.1, и X представляет собой либо
а) R2-[CH2]m-, где R2 и m являются такими, как определено в п.1, либо
б) соответствующую защитную группу азота, когда R1 представляет собой гетероциклил, содержа-
щий азот;
в присутствии N-бромсукцинимида с помощью радикального инициатора; стадия с') гидролиз полученного в результате соединения формулы (IV)
где R1 и X являются такими, как определено выше, с тем, чтобы получить
соединение формулы (I), как определено в п.1, когда X представляет собой R2-[CH2]m-, где R2 и m являются такими, как определено в п.1; или
соединение формулы (III), когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота
где R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота;
стадия i) снятие защиты с соединения формулы (III), как определено выше, с тем, чтобы получить
либо
соединение формулы (I), как определено выше, либо соединение формулы (II)
где R1 является таким, как определено выше;
стадия I) восстановительное алкилирование полученного в результате соединения формулы (II), как определено выше, с помощью соответствующего алкилирующего агента формулы (XIV)
R2- [CH2]m-i-Y
(XIV) ,
где Y представляет собой либо формильную группу, либо, когда m=1, атом кислорода, соединенный с R2 с помощью двойной связи (=0),
с тем, чтобы получить соединение формулы (I) по п.1.
6. Способ получения соединения формулы (I) по п.1, который включает следующую последовательность стадий:
стадия т) осуществление восстановительного аминирования на фуран-2-карбальдегиде (XV)
(XV)
с помощью соответствующего амина формулы (XIII)
X-R1-NH2
(XIII),
где R1 является таким, как определено в п.1, и X представляет собой либо R2-[CH2]m-, где R2 и m являются такими, как определено в п.1, либо соответствующую защитную группу азота, когда R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот;
стадия n) осуществление реакции Дильса-Альдера на полученном в результате соединении формулы (XVI)
где R1 и X являются такими, как определено выше, с помощью малеинового ангидрида;
стадия о) ароматизирование полученного в результате соединения формулы (XVII)
где R1 и X являются такими, как определено выше;
стадия р) амидирование полученного в результате соединения формулы (XVIII)
где R1 и X являются такими, как определено выше, с тем, чтобы получить
соединение формулы (I), как определено выше, когда X представляет собой R2-[CH2]m-, где R2 и m являются такими, как определено выше, или
где R1 представляет собой гетероциклил, содержащий азот, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота;
стадия i') снятие защиты с соединения формулы (XX), как определено выше; стадия Г) алкилирование полученного в результате соединения формулы (XXI)
где R1 является таким, как определено выше,
с помощью соответствующего алкилирующего агента формулы (XIV)
R2-[CH2]m-i-Y (XIV) , где Y представляет собой либо формильную группу, либо, когда m=1, атом кислорода, соединенный с R2 с помощью двойной связи (=О),
с тем, чтобы получить соединение формулы (I), как определено выше;
также, в случае, когда во время стадии о), соединение, полученное в результате ароматизации соединения формулы (XVII), представляет собой соединение формулы (XIX), т.е. когда X представляет собой лабильную защитную группу азота, после нее осуществляют стадию q):
стадия q) размещение соответствующей защитной группы азота на полученном в результате соединении формулы (XIX)
где R1 является таким, как определено выше,
с тем, чтобы получить соединение формулы (XVIII), где R1 является таким, как определено выше, и X представляет собой соответствующую защитную группу азота, которое затем подвергают воздействию последовательности реакций р), i') и I'), описанных выше, с тем, чтобы получить соединение формулы (I) по п.1.
7. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено в п.1, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент, носитель или разбавитель.
8. Фармацевтическая композиция по п.7, дополнительно содержащая один или несколько химиоте-рапевтических агентов, содержащих алкилирующие агенты.
9. Фармацевтическая композиция по п.8, где химиотерапевтический агент представляет собой алки-лирующий агент, который представляет собой темозоломид.
10. Комбинированный препарат, содержащий соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено в п.1, и один или несколько химиотерапевтических агентов, для одновременного, раздельного или последовательного использования в противораковой терапии.
11. Комбинированный препарат по п.10, где химиотерапевтический агент представляет собой алки-лирующий агент, который представляет собой темозоломид.
12. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено в п.1, в качестве лекарственного препарата.
13. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено в п.1, при производстве лекарственного препарата с противораковой активностью.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
028506
028506
- 1 -
- 1 -
(19)
028506
028506
- 1 -
- 1 -
(19)
028506
028506
- 1 -
- 1 -
(19)
028506
028506
- 4 -
- 3 -
(19)
028506
028506
- 21 -
- 22 -
(XVI)
028506
028506
- 21 -
- 22 -
(XVI)
028506
028506
- 23 -
- 22 -
(XVI)
028506
028506
- 24 -
- 24 -
028506
028506
- 25 -
- 25 -
028506
028506
- 27 -
- 27 -
028506
028506
- 28 -
- 28 -
028506
028506
- 30 -
028506
028506
- 33 -
- 33 -