|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Способ лечения пневмонии у пациента, включающий периодическое внутривенное введение фармацевтической композиции, содержащей 1,0 г тазобактама и 2,0-г цефтолозана, приблизительно каждые 8 ч. 2. Способ по п.1, где фармацевтическую композицию вводят в виде инфузии. 3. Способ по п.2, где фармацевтическую композицию вводят в течение 60 мин. 4. Способ по любому из пп.1-3, где пневмония представляет собой связанную с ИВЛ пневмонию или внутрибольничную пневмонию. 5. Способ по любому из пп.1-4, где цефтолозан находится в виде свободного основания. 6. Способ по любому из пп.1-4, где цефтолозан находится в виде соли. 7. Способ по п.6, где цефтолозановая соль находится в виде гидросульфата. 8. Способ по любому из пп.1-7, где фармацевтическую композицию вводят в течение по меньшей мере 7 дней.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Способ лечения пневмонии у пациента, включающий периодическое внутривенное введение фармацевтической композиции, содержащей 1,0 г тазобактама и 2,0-г цефтолозана, приблизительно каждые 8 ч. 2. Способ по п.1, где фармацевтическую композицию вводят в виде инфузии. 3. Способ по п.2, где фармацевтическую композицию вводят в течение 60 мин. 4. Способ по любому из пп.1-3, где пневмония представляет собой связанную с ИВЛ пневмонию или внутрибольничную пневмонию. 5. Способ по любому из пп.1-4, где цефтолозан находится в виде свободного основания. 6. Способ по любому из пп.1-4, где цефтолозан находится в виде соли. 7. Способ по п.6, где цефтолозановая соль находится в виде гидросульфата. 8. Способ по любому из пп.1-7, где фармацевтическую композицию вводят в течение по меньшей мере 7 дней.
(19)
Евразийское
патентное
ведомство
028342
(13) B1
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.11.30
(21) Номер заявки 201490590
(22) Дата подачи заявки 2012.09.07
(51) Int. Cl. A61K31/397 (2006.01)
(54) СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ПНЕВМОНИИ
(31) 61/532,914; 61/657,386
(32) 2011.09.09; 2012.06.08
(33) US
(43) 2015.04.30
(86) PCT/US2012/054191
(87) WO 2013/036783 2013.03.14
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
МЕРК ШАРП И ДОУМ КОРП. (US)
(72) Изобретатель:
Чандоркар Гурудатт А., Хантингтон Дженнифер А., Парсонз Тара, Умех Обиамиве К. (US)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
(56) SADER Helio S. et al., Antimicrobial Activity of CXA-101, a Novel Cephalosporin Tested in Combination with Tazobactam against Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, and Bacteroides fragilis Strains Having Various Resistance Phenotypes. Antimicrob. Agents Chemother, 2011, 55(5), p. 2390-2394, реферат, с. 2390, 2394, табл. 3
EP-A1-2062581
UZ-B-5089
(57) Описание относится к способу лечения пневмонии у пациента, включающему периодическое внутривенное введение фармацевтической композиции, содержащей 1,0 г тазобактама и 2,0-грамма цефтолозана, приблизительно каждые 8 ч. Данный способ обеспечивает безопасное и эффективное лечение внутрилегочной инфекции.
Смежные заявки
Настоящая заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке США № 61/532,914, поданной 9 сентября 2011 г. и озаглавленной "Способы лечения внутрилегочных инфекций", а также по предварительной заявке США № 61/657,386, поданной 8 июня 2012 г. и озаглавленной "Способы лечения внутрилегочных инфекций". Содержание любых патентов, патентных заявок и литературных источников, цитируемых в тексте настоящего описания, полностью включено в настоящей документ путем ссылки.
Область техники
Настоящее описание относится к лечению внутрилегочных бактериальных инфекций, включая лечение инфекций нозокомиальной пневмонии, цефалоспорином.
Предпосылки создания изобретения
Цефалоспорин, (6К,7К)-3-[5-амино-4-[3-(2-аминоэтил)уреидо]-1-метил-1Н-пиразол-2-иум-2-илме-тил]-7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-[(2)-1-карбокси-1-метилэтоксиимино]ацетамидо]-3-цефем-4-карбоновая кислота (также называемый "СХА-101" и ранее обозначаемый как FR264205), представляет собой антибактериальное средство. СХА-101 можно представить в виде соединения, показанного на фиг. 1. Считается, что антибактериальная активность СХА-101 вызвана его взаимодействием с пенициллин-связывающими белками (ПСБ) с последующим ингибированием биосинтеза стенки бактериальной клетки, что приводит к прекращению деления бактерий. СХА-101 можно комбинировать (например, смешать) с ингибитором р-лактамазы (BLI), таким как тазобактам. Тазобактам представляет собой BLI к р-лактамазам класса А и некоторым р-лактамазам класса С с хорошо установленной в условиях in vitro и in vivo эффективностью в комбинации с активными р-лактамными антибиотиками. Комбинация СХА-101 и тазобактама в соотношении 2:1 по массе представляет собой фармацевтическую композицию-антибиотик (СХА-201) для парентерального введения. СХА-201 проявляет высокую антибактериальную активность in vitro в отношении распространенных грамотрицательных и некоторых грамположительных микроорганизмов. СХА-201 представляет собой антибактериальный препарат широкого спектра действия с активностью in vitro против Enterobacteriaceae, включая штаммы, демонстрирующие расширенный спектр р-лактамазной резистентности (МИК90 (минимальная ингибирующая концентрация) = 1 мкг/мл), а также против Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), включая штаммы, резистентные ко многим лекарственным средствам (МИК90 = 2 мкг/мл). СХА-201 представляет собой комбинированный антибактериальный препарат с активностью против многих грамотрицательных патогенов, известных способностью вызывать внутрилегочные инфекции, включая нозокомиальную пневмонию, вызываемую P. aeruginosa.
Внутрилегочные инфекции, такие как нозокомиальная пневмония, остаются одной из основных причин заболеваемости и смертности, в особенности инфекции, вызванные фармакорезистентными патогенами, такими как P. aeruginosa. Одна проблема при лечении внутрилегочных инфекций путем системного введения антибиотика связана с определением такой дозы антибиотика, которая обеспечит терапевтически безопасную и эффективную концентрацию антибиотика в месте инфекции на слизистой поверхности бронхов в легких (т.е. в бронхиальном секрете). Многие антибиотики плохо диффундируют из кровотока через бронхи [см., например, Pennington, J. E., Penetration of antibiotics into respiratory secretions, Rev Infect Dis 3(1):67-73 (1981)], что может приводить к введению более высоких доз антибиотика по сравнению с назначаемыми в случае истинно системной инфекции. Более того, гнойная мокрота, характерная для инфицированных пациентов, нередко понижает активность многих антибиотиков (см., например, Levy, J., et al., Bioactivity of gentamicin in purulent sputum from patients with cystic fibrosis or bronchiectasis: comparison with activity in serum, J Infect Dis 148 (6):1069-76 (1983)). В некоторых случаях результатом становится назначение больших количеств системно вводимого антибиотика для лечения внутрилегочной инфекции.
Эффективность антибиотика частично зависит от концентрации препарата в месте воздействия. Для эффективности антимикробной терапии в месте бактериальной инфекции необходимы соответствующие концентрации антибиотика, и некоторые специалисты полагают, что концентрации в жидкости эпителиальной выстилки (ELF) являются приемлемым параметром при прогнозировании эффективных концентраций для лечения внутрилегочных инфекций, таких как пневмония. Для многих антибиотиков клинические данные по корреляции концентраций в ELF с клиническим исходом недоступны, а клиническая значимость различий в проникновении антибиотиков в легкие неизвестна или недостаточно охарактеризована. Лишь в нескольких исследованиях количественно определялось проникновение р-лактамных средств в легкие, которое оценивали по отношению площади под кривой зависимости концентрации от времени (AUC) в ELF к AUC в плазме крови (отношение AUC(ELF)/AUC(плазма)). В некоторых опубликованных исследованиях концентрация антибиотика, измеряемая в ELF легких, менялась в широких пределах. Например, опубликованные значения коэффициента проникновения телаванцина у здоровых добровольцев варьировались в широком диапазоне от 0,43 до 1,24 (см. Lodise, Gottfreid, Drusano, 2008 Antimicrobial Agents and Chemotherapy). Таким образом, сложно прогнозировать проникновение препарата в ELF a priori на основе структуры, молекулярной массы, размера и растворимости вследствие ограниченности доступных данных по воздействию физико-химических свойств лекарственных препаратов на их
проникновение в легкие.
Соответственно, эффективность конкретного лекарственного препарата при лечении внутрилегоч-ных инфекций, в частности, нозокомиальной пневмонии, невозможно прогнозировать только на основе данных, таких как данные in vitro, связанные с активностью этого лекарственного препарата против конкретной бактерии, которые не дают никаких указаний на то, будет ли лекарственный препарат накапливаться в терапевтически безопасной и эффективной концентрации в месте инфекции на слизистой поверхности бронхов в легких (т. е. в бронхиальном секрете). Например, тигециклин, глицилциклиновый антимикробный препарат, проявляет активность in vitro против многих видов грамположительных и гра-мотрицательных бактерий, включая P. aeruginosa, и он был утвержден Управлением по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США (FDA) для лечения осложненных инфекций кожи и кожных структур, осложненных внутрибрюшинных инфекций, а также внебольничной пневмонии. Однако тигециклин не был утвержден для лечения нозокомиальной пневмонии из-за повышенного риска смертности, связанного с применением тигециклина по сравнению с другими препаратами, у пациентов, получавших лечение при нозокомиальной пневмонии.
Изложение сущности изобретения
В настоящем изобретении предложен способ лечения пневмонии, у пациента, включающий периодическое внутривенное введение фармацевтической композиции, содержащей 1,0 г тазобактама и 2,0-грамма цефтолозана, приблизительно каждые 8 ч.
Предпочтительно, фармацевтическую композицию вводят в виде инфузии, при этом фармацевтическую композицию вводят в течение 60 мин.
Пневмония может представлять собой связанную с ИВЛ пневмонию или внутрибольничную пневмонию.
Согласно изобретению, цефтолозан может находиться в виде свободного основания или в виде соли. В одном из вариантов, цефтолозановая соль находится в виде гидросульфата.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения, фармацевтическую композицию вводят в течение по меньшей мере 7 дней.
Настоящее изобретение частично основано на результатах клинического исследования с участием людей, разработанного с целью оценить проникновение СХА-201 в ELF по сравнению с пиперацилли-ном/тазобактамом, показанными для лечения нозокомиальной пневмонии. В описанном в настоящем документе исследовании количественно определяли проникновение СХА-201 в легкие, которое измеряли по отношению площади под кривой зависимости концентрации от времени (AUC) в жидкости эпителиальной выстилки (ELF) к AUC в плазме крови (отношение AUC(ELF)/AUC(плазма)). Результаты исследования указывают на то, что СХА-201 проникал в ELF пациентов-людей, при этом отношение концентраций цефтолозана в ELF/плазме по AUC составляло 0,48. Измеренные концентрации цефтолозана в ELF в течение 60% 8-часового интервала дозирования превышали 8 мкг/мл, концентрацию, для которой по текущим данным наблюдений ожидается ингибирование 99% Pseudomonas aeruginosa.
Исследование показало, что СХА-201 хорошо проникал в ELF здоровых добровольцев по сравнению с пиперациллином/тазобактамом, которые широко применяются для лечения инфекций нижних дыхательных путей. Измеренная в ходе исследования внутрилегочная фармакокинетика подтверждает возможность применения СХА-201 в качестве парентерального (например, внутривенного) антибиотика для лечения внутрилегочных инфекций, таких как нозокомиальная пневмония, или других инфекций нижних дыхательных путей.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 представлена химическая структура гидросульфатной соли цефтолозана.
На фиг. 2A представлен график, на котором показан профиль зависимости концентрации гидросульфатной соли цефтолозана в ELF от времени (медиана и диапазон значений) для СХА-201.
На фиг. 2B представлен график, на котором показан профиль зависимости концентрации тазобак-тама в ELF от времени (медиана и диапазон значений) для СХА-201.
На фиг. 3A представлен график, на котором показан профиль (сравнительной) зависимости концентрации пиперациллина в ELF от времени (медиана и диапазон значений) для препарата сравнения пипе-рациллин/тазобактам (ZOSYN(r)).
На фиг. 3B представлен график, на котором показан профиль (сравнительной) зависимости концентрации тазобактама в ELF от времени (медиана и диапазон значений) для препарата сравнения пипера-циллин/тазобактам (ZOSYN(r)).
На фиг. 4A и 4B представлены схемы синтеза для получения гидросульфатной соли цефтолозана.
Подробное описание изобретения
Настоящее описание относится к лечению внутрилегочных инфекций, включая нозокомиальную пневмонию, путем системного введения фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан, включая парентеральное введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан и тазобактам. Используемый в настоящем документе термин "цефтолозан" означает СХА-101 в виде свободного основания или соли, предпочтительно в виде гидросульфата (пред
ставлен на фиг. 1). В одном варианте осуществления цефтолозан представляет собой СХА-101 в виде свободного основания. В другом варианте осуществления цефтолозан представляет собой СХА-101 в виде соли, предпочтительно в виде гидросульфата.
В предпочтительном варианте осуществления цефтолозан (в виде свободного основания или соли, предпочтительно в виде гидросульфата) и тазобактам находятся в соотношении 2:1 (цефтоло-зан:тазобактам) по массе. В конкретном варианте осуществления предложены способы лечения внутри-легочных инфекций, включая нозокомиальную пневмонию, путем системного введения фармацевтической композиции, содержащей гидросульфат цефтолозана и тазобактам в соотношении 2:1 по массе. В настоящем разделе и в примерах комбинацию гидросульфата цефтолозана и тазобактама в соотношении 2:1 по массе указывают как "СХА-201".
В одном аспекте в настоящем изобретении предложен способ лечения внутрилегочной инфекции, содержащий введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан. Способ может содержать введение фармацевтической композиции, содержащей цеф-толозан в комбинации с тазобактамом.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложен способ лечения внутрилегочной инфекции, содержащий этап внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту фармацевтической композиции, содержащей 3,0 г цефтолозана, приблизительно каждые 8 ч. Способ может содержать введение фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан в комбинации с тазобактамом. В одном варианте осуществления способ содержит введение СХА-201, а инфекция вызвана грамотрицательными бактериями. В другом аспекте в настоящем изобретении предложен способ лечения внутрилегочной инфекции, содержащий этап внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту фармацевтической композиции, содержащей 3,0 г цефтолозана, каждые 8 ч.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложен способ обеспечения наличия тазобактама или цефтолозана в жидкости эпителиальной выстилки пациента в количестве, эффективном для лечения внутрилегочной инфекции, содержащий этап внутривенного введения пациенту фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан. Способ может содержать введение фармацевтической композиции, дополнительно содержащей тазобактам, причем фармацевтическая композиция необязательно представляет собой СХА-201. Способ может содержать введение в общем приблизительно 1,5 г цефтолозана и тазобактама каждые 8 ч. В одном варианте осуществления количество цефтолозана в ELF пациента, эффективное для лечения внутрилегочной инфекции, составляет по меньшей мере приблизительно 8 мкг/мл. Концентрация цефтолозана в ELF после введения фармацевтической композиции может достигать по меньшей мере приблизительно 8 мкг/мл. Как правило, пациентом является человек, имеющий нозокомиальную пневмонию или предположительно имеющий риск развития нозокомиальной пневмонии. В некоторых вариантах осуществления пациент (или субъект) может иметь связанную с ИВЛ пневмонию или внутрибольничную пневмонию.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложено применение цефтолозана при производстве лекарственного препарата для лечения внутрилегочной инфекции, содержащее введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан. Применение может содержать введение фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан в комбинации с тазобакта-мом.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложено применение цефтолозана при производстве лекарственного препарата для лечения внутрилегочной инфекции, содержащее внутривенное введение нуждающемуся в этом пациенту фармацевтической композиции, содержащей 3,0 г цефтолозана, каждые 8 ч. Применение может содержать введение фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан в комбинации с тазобактамом. В одном варианте осуществления применение содержит введение цефтоло-зана и тазобактама, а инфекция вызвана грамотрицательными бактериями.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложено применение цефтолозана при производстве лекарственного препарата для лечения внутрилегочной инфекции, содержащее внутривенное введение фармацевтической композиции, содержащей цефтолозан, причем в жидкости эпителиальной выстилки пациента обеспечивают наличие такого количества тазобактама или цефтолозана, которое эффективно для лечения внутрилегочной инфекции. Применение может содержать введение фармацевтической композиции, дополнительно содержащей тазобактам, причем фармацевтическая композиция необязательно представляет собой СХА-201. Применение может содержать введение приблизительно 1,5 г цефтолозана и тазобактама каждые 8 ч. В одном варианте осуществления количество цефтолозана в ELF пациента, эффективное для лечения внутрилегочной инфекции, составляет по меньшей мере приблизительно 8 мкг/мл. Концентрация цефтолозана в ELF после введения фармацевтической композиции может достигать по меньшей мере приблизительно 8 мкг/мл. Как правило, пациентом является человек, имеющий нозокомиальную пневмонию или предположительно имеющий риск развития нозокомиальной пневмонии. В некоторых вариантах осуществления пациент (или субъект) может иметь связанную с ИВЛ пневмонию или внутрибольничную пневмонию. В способах и применениях настоящего изобретения фармацевтическую композицию можно вводить парентерально. Фармацевтическую композицию можно вводить внутривенно. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию вводят внут
ривенно в виде инфузии приблизительно каждые 8 ч. Фармацевтическую композицию можно вводить внутривенно в виде 60-минутной инфузии.
В способах и применениях настоящего изобретения внутрилегочная инфекция может представлять собой инфекцию легких. Внутрилегочная инфекция может представлять собой пневмонию. В предпочтительном варианте осуществления внутрилегочная инфекция представляет собой нозокомиальную пневмонию. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана Pseudomonas aeruginosa, Enterobacteriaceae или их комбинацией. Как правило, внутрилегочная инфекция вызвана Pseudomonas aeruginosa. Внутрилегоч-ная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной ингибирующей концентрацией СХА-201 <8 мкг/мл. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной ингибирующей концентрацией цефтолозана <8 мкг/мл.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложен цефтолозан для применения в способе лечения внутрилегочной инфекции. В одном варианте осуществления цефтолозан вводят парентерально. Как правило, цефтолозан вводят внутривенно. В некоторых вариантах осуществления цефтолозан вводят приблизительно каждые 8 часов в виде инфузии. В некоторых вариантах осуществления цефтолозан вводят внутривенно в виде 60-минутной инфузии.
В одном варианте осуществления цефтолозан предназначен для применения в способе лечения внутрилегочной инфекции, причем внутрилегочная инфекция представляет собой инфекцию легких. Внутрилегочная инфекция может представлять собой пневмонию. В предпочтительном варианте осуществления цефтолозан предназначен для применения в способе лечения нозокомиальной пневмонии. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана Pseudomonas aeruginosa, Enterobacteriaceae или их комбинацией. Как правило, внутрилегочная инфекция вызвана Pseudomonas aeruginosa. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной ингибирующей концентрацией цефтолозана и тазобактама <8 мкг/мл. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной инги-бирующей концентрацией цефтолозана <8 мкг/мл.
В настоящем изобретении также предложен цефтолозан для применения в способе лечения внутри-легочной инфекции, содержащем введение цефтолозана в комбинации с тазобактамом. В одном варианте осуществления цефтолозан и/или тазобактам вводят парентерально. Как правило, цефтолозан и/или тазо-бактам вводят внутривенно. В некоторых вариантах осуществления цефтолозан и/или тазобактам вводят в виде инфузии приблизительно каждые 8 ч. В некоторых вариантах осуществления цефтолозан и/или тазобактам вводят внутривенно в виде 60-минутной инфузии. В одном варианте осуществления как цеф-толозан, так и тазобактам вводят парентерально. В другом варианте осуществления как цефтолозан, так и тазобактам вводят внутривенно. В некоторых вариантах осуществления как цефтолозан, так и тазобактам вводят в виде инфузии приблизительно каждые 8 ч. В некоторых вариантах осуществления как цефтоло-зан, так и тазобактам вводят внутривенно в виде 60-минутной инфузии. В одном варианте осуществления цефтолозан предназначен для применения в способе лечения внутрилегочной инфекции, причем внутрилегочная инфекция представляет собой инфекцию легких. Внутрилегочная инфекция может представлять собой пневмонию. В предпочтительном варианте осуществления цефтолозан предназначен для применения в способе лечения нозокомиальной пневмонии. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана Pseudomonas aeruginosa, Enterobacteriaceae или их комбинацией. Как правило, внутрилегочная инфекция вызвана Pseudomonas aeruginosa. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной ингибирующей концентрацией цефтолозана и тазобактама <8 мкг/мл. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной ингибирующей концентрацией цефтолозана <8 мкг/мл.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложен тазобактам для применения в способе лечения внутрилегочной инфекции, содержащем введение тазобактама в комбинации с цефтолозаном. В одном варианте осуществления тазобактам и/или цефтолозан вводят парентерально. Как правило, тазобак-там и/или цефтолозан вводят внутривенно. В некоторых вариантах осуществления тазобактам и/или це-фтолозан вводят в виде инфузии приблизительно каждые 8 ч. В некоторых вариантах осуществления тазобактам и/или цефтолозан вводят внутривенно в виде 60-минутной инфузии. В одном варианте осуществления как тазобактам, так и цефтолозан вводят парентерально. В другом варианте осуществления как тазобактам, так и цефтолозан вводят внутривенно. В другом варианте осуществления как тазобактам, так и цефтолозан вводят в виде инфузии приблизительно каждые 8 ч. В других вариантах осуществления как тазобактам, так и цефтолозан вводят внутривенно в виде 60-минутной инфузии.
В одном варианте осуществления тазобактам предназначен для применения в способе лечения внутрилегочной инфекции, причем внутрилегочная инфекция представляет собой инфекцию легких. Внутрилегочная инфекция может представлять собой пневмонию. В предпочтительном варианте осуществления тазобактам предназначен для применения в способе лечения нозокомиальной пневмонии. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана Pseudomonas aeruginosa, Enterobacteriaceae или их комбинацией. Как правило, внутрилегочная инфекция вызвана Pseudomonas aeruginosa. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной ингибирующей концентрацией цефтолозана и тазобактама <8 мкг/мл. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной инги
бирующей концентрацией цефтолозана <8 мкг/мл.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложены цефтолозан и тазобактам в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в способе лечения внутрилегочной инфекции. В одном варианте осуществления цефтолозан и тазобактам вводят парентерально. Как правило, цефтолозан и тазобактам вводят внутривенно. В некоторых вариантах осуществления цефтолозан и тазобактам вводят в виде инфузии приблизительно каждые 8 часов. В некоторых вариантах осуществления цефтолозан и тазобактам вводят внутривенно в виде 60-минутной инфу-зии.
В одном варианте осуществления цефтолозан и тазобактам предназначены для применения в способе лечения внутрилегочной инфекции, причем внутрилегочная инфекция представляет собой инфекцию легких. Внутрилегочная инфекция может представлять собой пневмонию. В предпочтительном варианте осуществления цефтолозан и тазобактам предназначены для применения в способе лечения нозо-комиальной пневмонии. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана Pseudomonas aeruginosa, Entero-bacteriaceae или их комбинацией. Как правило, внутрилегочная инфекция вызвана Pseudomonas aerugi-nosa. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной ингибирующей концентрацией цефтолозана и тазобактама <8 мкг/мл. Внутрилегочная инфекция может быть вызвана патогеном с минимальной ингибирующей концентрацией цефтолозана <8 мкг/мл.
В другом аспекте в настоящем изобретении предложен цефтолозан для применения в способе обеспечения наличия тазобактама или цефтолозана в жидкости эпителиальной выстилки пациента в количестве, эффективном для лечения внутрилегочной инфекции, содержащем этап внутривенного введения цефтолозана. В некоторых вариантах осуществления цефтолозан вводят в комбинации с тазобактамом. Предпочтительно вводят СХА-201. В предпочтительных вариантах осуществления приблизительно 1,5 г цефтолозана и тазобактама вводят каждые 8 ч. В одном варианте осуществления количество цефтолозана в ELF пациента, эффективное для лечения внутрилегочной инфекции, составляет по меньшей мере приблизительно 8 мкг/мл. Концентрация цефтолозана в ELF после введения цефтолозана может достигать по меньшей мере приблизительно 8 мкг/мл. Как правило, пациентом является человек, имеющий нозо-комиальную пневмонию или предположительно имеющий риск развития нозокомиальной пневмонии. В некоторых вариантах осуществления пациент (или субъект) может иметь связанную с ИВЛ пневмонию или внутрибольничную пневмонию.
Безопасное и эффективное лечение внутрилегочной инфекции с применением СХА-201 включает в себя введение количества СХА-201, выбранного так, чтобы обеспечить терапевтически эффективную дозу антибиотика СХА-201 в жидкости эпителиальной выстилки (ELF). Во время клинического исследования фазы 1 с участием здоровых взрослых добровольцев оценивали проникновение СХА-201 в ELF по сравнению с препаратом сравнения пиперациллин/тазобактам. Препарат сравнения пиперацил-лин/тазобактам содержал пиперациллин/тазобактам в соотношении 8:1 по массе с общим содержанием 2,79 мЭкв натрия на грамм пиперациллина, утвержденный FDA под торговой маркой ZOSYN(r) (Zosyn). В результатах исследования оценивали проникновение внутривенно введенного СХА-201 в легкие здорового человека, которое измеряли по отношению площади под кривой зависимости концентрации от времени (AUC) в жидкости эпителиальной выстилки (ELF) к AUC в плазме крови (отношение AUC(ELF)/AUC(плазма)).
В проведенном исследовании 4,5 г пиперациллина/тазобактама содержали такую же дозу тазобак-тама (0,5 г), что и 1,5 г СХА-201. В данном исследовании использовали схему с многократной дозой, чтобы к моменту проведения оценки добиться стабилизации концентраций аналитов как в плазме, так и в ELF. Здоровых добровольцев выбирали так, чтобы стандартизировать популяцию пациентов и свести к минимуму вариабельность, связанную с привлечением пациентов с активной фазой заболевания. Цели данного исследования включали: (1) определение и сравнение соотношений концентрации в ELF и в плазме при многократных дозах внутривенно вводимого СХА-201 по сравнению с пиперацилли-ном/тазобактамом у здоровых взрослых добровольцев и (2) оценку безопасности и переносимости многократных доз внутривенно вводимого СХА-201 у здоровых взрослых добровольцев.
Данное исследование представляло собой проспективное рандомизированное (1:1) открытое исследование фазы 1 с контролем по препарату сравнения с участием 50 здоровых взрослых добровольцев. Каждый взрослый доброволец получал 3 дозы СХА-201 (1,5 г каждые 8 ч в виде 60-минутной инфузии) или пиперациллина/тазобактама (4,5 г каждые 6 ч в виде 30-минутной инфузии). У пациентов, получивших 3 дозы исследуемого препарата, последовательно брали пробы крови в плановые временные точки отбора проб плазмы, а также в одну из плановых временных точек проводили однократную процедуру бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) (табл. 1).
Всего в исследование включили 51 пациента: 25 в группе СХА-201 и 26 в группе пиперацил-лин/тазобактам. Основные критерии для включения в исследование: (1) здоровые взрослые мужчины или небеременные женщины в возрасте от 18 до 50 лет включительно; (2) индекс массы тела от 18,5 до 30; и (3) объем форсированного выдоха за 1 с (FEV1) > 80%. Основные критерии для исключения из исследования: (1) беременность или лактация; (2) клинически значимое системное заболевание или наличие любых хирургических или медицинских показаний, которые могут оказывать влияние на распределение, метаболизм или выведение СХА-201; (3) астма или любое рестриктивное или обструктивное заболевание легких в анамнезе; (4) курение или злоупотребление наркотиками или алкоголем в анамнезе; (5) положительный анализ на вирус иммунодефицита человека, поверхностный антиген гепатита В или антитела к гепатиту С; (6) любое состояние или ситуация, в которых не рекомендуется проведение бронхоскопии; и (7) нарушение функции почек (CrCl (клиренс креатинина) <90 мл/мин).
Определение отношений концентрации в ELF к концентрации в плазме при многократных дозах внутривенно вводимого СХА-201 по сравнению с пиперациллином/тазобактамом у здоровых взрослых добровольцев Для построения одного профиля зависимости концентрации от времени в ELF с использованием средних концентраций в каждой временной точке использовали измерения плазмы и БАЛ. После дозирования получали одну пробу ELF путем бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) у каждого здорового добровольца в одну из 5 плановых временных точек (5 пациентов/временная точка/лечебная группа). Определяли отношение концентрации в ELF к концентрации в плазме для многократных доз. До и после лечения в течение 6-часового (пиперациллин/тазобактам) или 8-часового (СХА-201) периода собирали последовательные пробы плазмы. Для расчета концентраций препарата в ELF (см. табл. 1) использовали уровни мочевины в плазме и БАЛ. Фармакокинетические параметры для ELF рассчитывали с помощью некомпартментного анализа с использованием средних концентраций в каждой временной точке. Внут-рилегочное проникновение СХА-201 в ELF определяли путем деления AUC0-t в ELF на среднюю AUC0-t в плазме.
Концентрацию СХА-201 и пиперациллина/тазобактама в ELF оценивали по концентрации препарата в жидкости БАЛ, объему собранной жидкости БАЛ и отношению концентрации мочевины в жидкости БАЛ к концентрации в плазме. Расчет объема ELF проводили способом разведения мочевины, используя мочевину в качестве эндогенного маркера ELF, извлекаемой во время БАЛ. Концентрацию СХА-201 и пиперациллина/тазобактама в ELF оценивали по концентрации препарата в жидкости БАЛ, объему собранной жидкости БАЛ и отношению концентрации мочевины в жидкости БАЛ к концентрации в плазме. Расчеты проводили по следующим формулам:
СХА-201 (СХФ/Т) = [СХА/Т]БАЛXVБАЛ/VELF
[СХА/Т]БАЛ - концентрация СХА-201 в жидкости БАЛ; V^m - объем жидкости БАЛ после аспирации (общий);
VELF равен VБАлx[мочевина]БАл/[мочевина]плазма, где [мочевина]БАЛ - концентрация мочевины в жидкости БАЛ (супернатант), а [мочевина]плазма - концентрация мочевины в образцах плазмы.
Пиперациллин/тазобактам = [Р1Р/Т]БАЛх^АЛЛ^Еи? [Р1Р/Т]БАЛ - концентрация пиперациллина/тазобактама в жидкости БАЛ; V^m - объем жидкости БАЛ после аспирации (общий);
VELF равен VБАлx[мочевина]БАл/[мочевина]плазма,
где [мочевина]БАл - концентрация мочевины в жидкости БАЛ (супернатант), а [мочевина]плазма - концентрация мочевины в образцах плазмы.
Пероральная терапия с использованием антибиотиков была исключена. Безопасность контролировали с помощью анализа основных физиологических показателей, лабораторных и физических исследований, а также наличия нежелательных явлений (НЯ). В популяцию для анализа фармакокинетики (ФК) были включены пациенты, получившие три дозы исследуемого лекарственного препарата и у которых собирали как пробы БАЛ, так и пробы плазмы. В популяцию для анализа безопасности были включены все рандомизированные пациенты, получившие любую дозу (включая частичные дозы) исследуемого лекарственного препарата.
Результаты исследования (табл. 2) указывают на хорошее проникновение СХА-201 в ELF. Отношение AUC цефтолозанового компонента СХА-201 в ELF/плазме составило 0,48 по сравнению с 0,26 для пиперациллинового компонента пиперациллина/тазобактама. Концентрации цефтолозана в ELF в течение 60% 8-часового интервала дозирования превышали 8 мкг/мл. Концентрации цефтолозана в плазме соответствовали ранее наблюдаемым концентрациям при этой дозе.
Профили зависимости концентрации в ELF от времени для цефтолозанового и тазобактамового компонентов СХА-201 представлены на фиг. 2А и 2В соответственно. Сравнительные данные, показывающие профили зависимости концентрации в ELF от времени для пиперациллинового и тазобактамового компонентов препарата сравнения, представлены на фиг. 3А и 3В соответственно. Отношения проникновения в ELF к проникновению в плазму представлены в табл. 2.
Параметры ФК определяли с использованием некомпартментного анализа ФК. Для расчета всех отдельных показателей ФК для каждого пациента использовали программное обеспечение Phoenix(r) Win-Nonlin v 6.1 (Pharsight(r), г. Маунтин-Вью, штат Калифорния).
Параметры ФК для ELF рассчитывали путем взятия средних концентраций у 5 пациентов в каждой временной точке и построения одного профиля по всему периоду отбора проб. В случае если концентрации мочевины, определяемые в плазме или ELF, были ниже пределов количественного определения, то есть была возможна лишь оценка концентрации, эти значения не использовали для расчета средней концентрации в данной временной точке. Для цефтолозана, пиперациллина и тазобактама в плазме и ELF рассчитывали следующие параметры ФК:
Cmax (мкг/мл) - максимальная концентрация в плазме и ELF за всю фазу отбора проб, полученная непосредственно из экспериментальных данных по зависимости концентрации в плазме от времени, без интерполяции;
Tmax (Ч) - время отбора пробы, при котором достигалась Cmax,
полученная непосредственно из экспериментальных данных по зависимости концентрации в плазме и ELF от времени, без интерполяции;
Clast (мкг/мл) - концентрация в плазме или ELF в момент наблюдения последней количественно определяемой концентрации относительно окончания инфузии;
Tlast (ч) - время наблюдения последней количественно определяемой концентрации;
AUC0-t (мкг-ч/мл) - площадь под кривой зависимости концентрации от времени с момента дозирования до окончания интервала дозирования;
процент проникновения в ELF - рассчитываемый как отношение AUC0-tELF и средней AUC0-t плазма.
Таблица 2. Сводные данные по отношениям проникновения в ELF к проникновению в плазму
Аналит
Средняя AUCO-T в плазме (мкг*ч/мл)
AUCo-т в ELF (мкг*ч/мл)
Отношение проникнове ния в ELF
Цефтолозан (в СХА-2 01)
158, 5
75, 1
0,48
Аналит
Средняя AUCO-T в плазме (мкг*ч/мл)
AUCo-т в ELF (мкг*ч/мл)
Отношение проникнове ния в ELF
Тазобактам (в СХА-2 01)
19, 3
8,5
0,44
Пиперациллин (в пиперациллине/ тазобактаме)
357, 3
94, 5
0,26
Тазобактам
(в пиперациллине/
тазобактаме)
46, 1
24,7
0, 54
Отношение AUC цефтолозанового компонента СХА-201 в ELF/плазме составило 0,48 по сравнению с 0,26 для пиперациллинового компонента препарата сравнения (пиперациллин/тазобактам). Отношение AUC в ELF/плазме для тазобактама составило 0,44 и 0,54, когда он входил в состав СХА-201 и пипера-циллина/тазобактама соответственно.
Концентрации цефтолозана в ELF в течение 60% 8-часового интервала дозирования превышали 8 мкг/мл. Концентрации тазобактама в плазме и ELF при введении в виде пиперациллина/тазобактама были приблизительно в 2 раза выше, чем при введении эквивалентной дозы в виде СХА-201.
Результаты показывают, что цефтолозан и тазобактам (т. е. введенные в виде СХА-201) хорошо проникали в ELF здоровых добровольцев по сравнению с пиперациллином/тазобактамом, которые широко применяются для лечения инфекций нижних дыхательных путей. Внутрилегочная фармакокинетика СХА-201 свидетельствует в пользу применения СХА-201 в качестве парентерального (например, внутривенного) антибиотика для лечения инфекций нижних дыхательных путей, включая инфекции, вызванные патогенами с минимальными ингибирующими концентрациями <8 мкг/мл. Концентрации цефтолозана в ELF превышали концентрацию 8 мкг/мл, которая ингибирует 99% P. aeruginosa, в течение приблизительно 60% 8-часового интервала дозирования для схемы дозирования 1,5 г СХА-201 каждые восемь часов в виде 60-минутной инфузии.
Оценка безопасности и переносимости многократных доз вводимого внутривенно СХА-201 у здоровых взрослых добровольцев 50 из 51 (98%) пациентов получили все 3 дозы исследуемого лекарственного препарата и прошли процедуру БАЛ. Один пациент преждевременно прекратил прием пиперациллина/тазобактама и отказался от участия в исследовании в связи с НЯ в виде гиперчувствительности, проявившейся во время введения первой дозы. Демографические и исходные характеристики представлены в табл. 3; две группы лечения были хорошо сбалансированы. Таблица 3. Демографические и исходные характеристики (популяция для исследования безопасности)
СХА-2 01 1,5 грамма (N = 25)
Пиперациллин/ тазобактам 4,5 грамма (N = 26)
Пол, кол-во (%)
Женский
11 (44,0)
11 (42,3)
Мужской
14 (56,0)
15 (57,7)
Возраст, лет
Среднее значение (стандартное отклонение)
32,6 (7,8)
34,2 (8,5)
Минимум, максимум
21, 47
22, 49
Расовая принадлежность, кол-во (%)
Европеоидная
20 (80, 0)
21 (80,8)
Негроидная, или афроамериканцы
2 (8,0)
2 (7,7)
Монголоидная
1 (4,0)
0 (0,0)
Американские индейцы или коренные народы Аляски
0 (0,0)
1 (3,8)
Коренные народы Гавайев или уроженцы островов Тихого океана
1 (4,0)
0 (0,0)
Другая
1 (4,0)
2 (7,7)
ИМТ, кг/м2
Среднее значение (стандартное отклонение)
26,21 (2,6)
23, 23 (2, 4)
Минимум, максимум
22, 3, 30,0
20, 6, 29,9
Во время исследования возникшие после начала лечения НЯ (ТЕАЕ) наблюдались у 20,0% (5/25) пациентов, получавших СХА-201, и у 23,1% (6/26) пациентов, получавших пиперациллин/тазобактам. Серьезных НЯ не было отмечено ни в одной лечебной группе. Все НЯ были умеренной тяжести. Частота и характер НЯ были, как правило, аналогичными в 2 лечебных группах, см. табл. 4.
У восьми пациентов наблюдали TEAE, которые по результатам оценки были связаны с исследуемым препаратом: два из группы СХА-201 (диарея и сонливость у 1 пациента в каждом случае) и шесть в группе пиперациллина/тазобактама (диарея у 3 пациентов, гиперчувствительность I типа у 1 пациента, повышенный уровень креатинфосфокиназы в крови у 1 пациента и повышенный уровень аланинаминотрансферазы, повышенный уровень аспартатаминотрансферазы и гиперкалиемия - все явления у 1 пациента). Один пациент, получавший пиперациллин/тазобактам, прекратил прием исследуемого препарата из-за нежелательного явления - гиперчувствительности I типа. В лабораторных оценках безопасности или основных физиологических показателях каких-либо клинически значимых изменений отмечено не было.
Результаты показали, что СХА-201 безопасен и хорошо переносится взрослыми здоровыми пациентами данной группы.
Определение надлежащей дозы
Для прогнозирования эффективной дозы СХА-201 для лечения нозокомиальной пневмонии проводили моделирование по методу Монте-Карло на основе данных клинического испытания с использованием программного обеспечения Phoenix(r) NLME (Pharsight(r), г. Маунтин-Вью, штат Калифорния), используемого для обработки данных и моделирования для популяционного анализа ФК/ФД. Популяцион-ную фармакокинетическую (ФК) модель разработали с использованием данных зависимости концентрации СХА-201 в плазме от времени на основе ранее проведенного исследования фазы 2 на пациентах с осложненными внутрибрюшинными инфекциями. По результатам этих анализов были получены оценки клиренса и объема распределения вместе с ассоциированной межиндивидуальной вариабельностью. Результаты популяционной модели ФК послужили исходными данными для моделирования клинического испытания, проводимого с использованием программного обеспечения Pharsight(r) Trial Simulator (Phar-sight(r)), используемого для определения и тестирования интерактивных моделей лекарственного препарата, изучения и представления характеристик дизайна исследования, а также проведения статистического анализа и анализа чувствительности с помощью графических и статистических обзоров. Исходя из средних данных по проникновению в ELF, использовали отношение AUC в ELF/плазме для цефтолозана, равное 0,48 (моделируемое как числовой диапазон 0,25-0,65) и рассчитанное на основе указанного выше исследования проникновения цефтолозана в ELF, для получения случайного отношения AUC в ELF/плазме из диапазона 0,25-0,65 для каждого моделируемого пациента. Этот диапазон отражает консервативную оценку потенциального распределения в популяции пациентов. Используя популяционную модель ФК и отношение AUC в ELF/плазме, моделировали профили зависимости концентрации СХА-201 в плазме и в ELF от времени для 1000 гипотетических пациентов с нозокомиальной пневмонией из клинического исследования. С помощью модели оценивали вероятность клинического успеха дозы СХА-201 3,0 г, вводимой каждые 8 ч (q8h), в отношении трех основных патогенов нозокомиальной пневмонии. Распределение МИК для этих патогенов условно брали из данных наблюдений в США в 2008 году. Клинический успех определяли как достижение концентрации цефтолозана в ELF или плазме выше МИК для патогена (-ов) нижних дыхательных путей у данного пациента. Модели in vivo продемонстрировали,
что, как и при использовании типичных цефалоспоринов, важным определяющим фактором ФК/ФД для СХА-201 является доля времени выше МИК в течение интервала дозирования. Целью является достижение концентраций, которые превышают МИК для патогена в течение 45-50% времени между каждой дозой q8H. Таким образом, использовали порог 50% времени с концентрацией выше минимальной инги-бирующей концентрации [Т> МИК] на день 7 лечения. Концентрации в плазме и ELF оценивали по 15 временным точкам после введения на день 7 при дозировании каждые 8 ч. Результаты этих моделирований представлены в табл. 5.
Таблица 5. Вероятность достижения целевого уровня в отношении основных патогенов нозокомиальной
пневмонии при использовании моделируемой дозы 3,0 г по сравнению
с дозой 1,5 г цефтолозана/тазобактама
Результаты этих моделирований демонстрируют, что доза СХА-201 3,0 г, вводимая каждые 8 ч, предположительно обеспечивает надлежащие концентрации для лечения подавляющего большинства инфекций нижних дыхательных путей, вызванных этими патогенами.
По результатам этих моделирований у здоровых людей-добровольцев оценивали безопасность и переносимость 10-дневного курса СХА-201, вводимого по 3,0 г внутривенно (в/в) q8h. Пациентов рандо-мизировали в группы, получавшие либо 3,0 г (2,0/1,0 г) СХА-201 (n = 8), 1,5 г (1,0/0,5 г) СХА-201 (n = 4), либо плацебо (n = 4). Данные показали общую безопасность и хорошую переносимость СХА-201 в данном исследовании. Серьезных нежелательных явлений или летальных исходов в данном исследовании отмечено не было.
В заключение можно отметить, что, с учетом проведенного фармакокинетического моделирования, благоприятные данные внутрилегочного исследования ФК и продемонстрированная безопасность и переносимость более высокой дозы СХА-201 в указанном выше исследовании фазы 1 дают основания для применения 3,0 г СХА-201 в/в q8h для лечения пациентов с нозокомиальной пневмонией, вызванной грамотрицательными патогенами.
Получение СХА-201
СХА-201 можно получить путем комбинирования цефтолозана и тазобактама в соотношении 2:1 по массе. СХА-201 можно получить способами, описанными в патенте США № 7,129,232 и работе Toda et al., Synthesis and SAR of novel parenteral anti-pseudomonal cephalosporins: Discovery of FR264205, Bioor-ganic & Medicinal Chemistry Letters, 18, 4849-4852 (2008), полностью включенных в настоящий документ путем ссылки.
В соответствии со способом, описанным в работе Toda et al., Synthesis and SAR of novel parenteral anti-pseudomonal cephalosporins: Discovery of FR264205, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 18, 4849-4852 (2008), цефтолозан можно получить по схемам синтеза, представленным на фиг. 4А и 4В. Как показано на фиг. 4А и 4В, синтез цефтолозана можно провести путем активации производного тиадиазо-лилоксиминоуксусной кислоты (I) метансульфонилхлоридом и K2CO3 в ДМА при 10°C и последующего сочетания с 7-аминоцефемом (II) с использованием Et3N в холодном EtOAc/H2O, что дает амид (III) (1). Затем замещение аллилхлорида соединения (III) 4-[(N-Boc-аминоэтил)карбамоиламино]-1-метил-5-тритиламинопиразолом (IV) в присутствии 1,3-бис(триметилсилил)мочевины (BSU) и KI в ДМФ дает защищенный пиразольный аддукт (V), который после полного снятия защиты трифторуксусной кислотой в анизоле/QH^Cb может быть выделен в виде гидросульфатной соли путем обработки с помощью H2SO4 в i-PrOH/H2O (1, 2).
Схема 1. Промежуточное соединение пиразолилмочевины (IV) можно получить следующим обра- 10
зом. При обработке 5-амино-1-метилпиразола (VI) с помощью NaNO2/HCl в воде при 5°C образуется 4-нитрозопиразольное производное (VII), которое можно восстановить до диаминопиразола (VIII) путем каталитического гидрирования на Pd/C в присутствии H2SO4. Затем при селективном ацилировании 4-аминогруппы соединения (VIII) фенилхлороформиатом в присутствии NaOH в H^/диоксане при 10°C образуется фенилкарбамат (IX). После защиты свободной аминогруппы карбамата (IX) хлортрифенилме-таном в присутствии Et3N в ТГФ полученное N-тритильное производное (X) можно ввести в реакцию сочетания с N-Boc-этилендиамином (XI) в присутствии Et3N в ДМФ с получением пиразолилмочевины
(IV).
Анализ биологической активности
Антибактериальную активность СХА-201 или других соединений можно измерить по минимальным ингибирующим концентрациям (МИК) соединений в отношении различных бактерий, которые измеряют способом микроразведения в питательной среде в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) с описанными ниже модификациями (рекомендации CLSI можно найти в документе CLSI M7-A8, опубликованном в январе 2009 г.: Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard-Eighth Edition).
Для подготовки к испытанию на МИК можно выделить отдельные колонии путем нанесения полосок замороженного глицерина, содержащего виды Staphylococcus или Pseudomonas, на насыщенный неселективный триптический соевый агар, содержащий 5% овечьей крови (TSAB), с последующей инкубацией при 37°C в течение 18-24 ч.
В день испытания первичные культуры можно инициировать путем соскабливания 5-10 колоний с планшетов с TSAB. Материал можно суспендировать в ~5 мл скорректированной по катионам питательной среды Мюллера-Хинтона (САМНВ) в культуральных пробирках емкостью 14 мл и инкубировать при 37°C с аэрацией (200 об/мин) в течение ~2 ч до достижения ОП600 > 0,1.
Посевные культуры можно приготовить путем стандартизации первичных культур до ОП600 = 0,1 с последующим добавлением 20 мкл скорректированной первичной культуры на 1 мл САМНВ для Pseu-domonas и САМНВ плюс 4% NaCl для МРЗС, так чтобы итоговая плотность посевного материала составляла ~105 колониеобразующих единиц на миллилитр. Разбавленные посевные культуры можно использовать для посева по 50 мкл на лунку в 96-луночные аналитические планшеты для микроразведения питательной среды. 50 мкл САМНВ, содержащего соединение в концентрациях в диапазоне 64-0,06 мкг/мл в двукратных разведениях, могут также быть добавлены на аналитические планшеты для микроразведения питательной среды до получения итогового объема 100 мкл на лунку; таким образом, в итоговой культуре ОП600 составляло приблизительно 0,001, а итоговая концентрация NaCl для штамма
МРЗС была равна 2%.
Планшеты можно инкубировать 18-20 ч при 37°С с аэрацией (200 об/мин). После инкубации можно визуально подтвердить рост, поместив планшеты на просмотровый аппарат (держатель с зеркалом внизу), после чего с помощью спектрофотометра вертикального сканирования SpectraMax 340PC384 (Molecular Devices, г. Саннивейл, штат Калифорния) можно измерить ОП600. Рост определяли как мутность, которую можно было видеть невооруженным глазом, или по достижению минимального значения ОП600, равного 0,1. Значения МИК определяли как наименьшую концентрацию, при которой не наблюдали видимой мутности.
Примеры и иллюстративные варианты осуществления, описанные в настоящем документе, представлены для иллюстрации и не представляют собой дополнительные ограничения объема формулы изобретения. Хотя в данном описании были показаны и описаны некоторые конкретные варианты осуществления, специалисту в соответствующей области после прочтения настоящего описания будет очевидно, что в нем также раскрыты различные модификации и замены в вариантах осуществления, явно описанных в настоящем документе. Примеры осуществлений, описанные в данном документе, не предполагают дополнительных ограничений формулы изобретения.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ лечения пневмонии у пациента, включающий периодическое внутривенное введение фармацевтической композиции, содержащей 1,0 г тазобактама и 2,0-г цефтолозана, приблизительно каждые 8 ч.
2. Способ по п.1, где фармацевтическую композицию вводят в виде инфузии.
3. Способ по п.2, где фармацевтическую композицию вводят в течение 60 мин.
4. Способ по любому из пп.1-3, где пневмония представляет собой связанную с ИВЛ пневмонию или внутрибольничную пневмонию.
5. Способ по любому из пп.1-4, где цефтолозан находится в виде свободного основания.
6. Способ по любому из пп.1-4, где цефтолозан находится в виде соли.
7. Способ по п.6, где цефтолозановая соль находится в виде гидросульфата.
8. Способ по любому из пп.1-7, где фармацевтическую композицию вводят в течение по меньшей мере 7 дней.
1.
1.
Аналит = тазобактам (пиперациллин)
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
028342
028342
- 1 -
- 1 -
028342
028342
- 1 -
- 1 -
028342
028342
- 1 -
- 1 -
028342
028342
- 1 -
- 1 -
028342
028342
- 4 -
- 3 -
028342
028342
- 9 -
028342
028342
- 12 -
- 12 -
028342
028342
- 13 -
- 13 -
|
