|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Соединение формулы  или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Фармацевтическая композиция для ингибирования активности кинуренин-3-монооксигеназы, отличающаяся тем, что содержит соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент. 3. Применение соединения по п.1 для лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью кинуренин-3-монооксигеназы, у субъекта, нуждающегося в лечении. 4. Применение по п.3, где состояние или расстройство представляет собой болезнь Хантингтона. 5. Применение фармацевтической композиции по п.2 для лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью кинуренин-3-монооксигеназы, у субъекта, нуждающегося в лечении. 6. Применение по п.5, где состояние или расстройство представляет собой болезнь Хантингтона.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Фармацевтическая композиция для ингибирования активности кинуренин-3-монооксигеназы, отличающаяся тем, что содержит соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент. 3. Применение соединения по п.1 для лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью кинуренин-3-монооксигеназы, у субъекта, нуждающегося в лечении. 4. Применение по п.3, где состояние или расстройство представляет собой болезнь Хантингтона. 5. Применение фармацевтической композиции по п.2 для лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью кинуренин-3-монооксигеназы, у субъекта, нуждающегося в лечении. 6. Применение по п.5, где состояние или расстройство представляет собой болезнь Хантингтона.
Евразийское 027451 (13) B1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.07.31
(21) Номер заявки 201490277
(22) Дата подачи заявки 2012.08.28
(51) Int. Cl. A61K31/44 (2006.01) C07D 401/00 (2006.01)
(54) ИНГИБИТОРЫ КИНУРЕНИН-3-МОНООКСИГЕНАЗЫ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
(31) 61/528,998 (56) US-A1-20110183957
(32) 2011.08.30 US-A2-20080070937
(33) US
(43) 2014.08.29
(86) PCT/US2012/052648
(87) WO 2013/033085 2013.03.07
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
CХДИ ФАУНДЕЙШН, ИНК. (US)
(72) Изобретатель:
Кортни Стефен Мартин, Прайм Майкл, Митчелл Уильям, Браун Кристофер Джон, Де Агуиар Пена Паула С., Джонсон Питер (GB), Домингез Селия, Толедо-Шерман Летиция М., Мунос Игнасио (US)
(74) Представитель:
Липатова И.И., Рыбаков В.М., Хмара М.В., Новоселова С.В., Дощечкина В.В. (RU)
(57) Настоящее изобретение относится к соединению формулы
и к его фармацевтически приемлемым солям. Также предложены фармацевтические композиции для ингибирования активности кинуренин-3-монооксигеназы, включающие вышеуказанное соединение или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент. Описано применение вышеуказанного соединения и содержащей его фармацевтической композиции для лечения состояний или расстройств, опосредованных активностью кинуренин-3-монооксигеназы, таких как болезнь Хантингтона, у субъектов, нуждающихся в таком лечении.
Данная заявка испрашивает преимущество приоритета заявки США № 61/528998, поданной 30 августа 2011 г., которая включена сюда полностью путем ссылки на нее.
В данной заявке предложен конкретный ингибитор кинуренин-3-монооксигеназы, содержащие его фармацевтические композиции и их применение.
Кинуренин-3-монооксигеназа (КМО) представляет собой фермент, участвующий в процессе разрушения триптофана, который катализирует превращение кинуренина (KYN) в 3-гидроксикинуренин (3-НК), который затем разрушается до эксайтотоксичного агониста NMDA рецептора QUIN (3-гидрокси-антранилат оксигеназы). 3-OH-KYN и QUIN действуют синергетически, т.е. 3-OH-KYN значительно усиливает эксайтотоксичные эффекты QUIN. Исследования в некоторых лабораториях доказали, что сдвиг KYN в ходе метаболизма от линии 3-OH-KYN/QUIN до увеличения образования нейропротектора KYNA в головном мозге приводит к нейропротекции. В дополнение к влиянию на головной мозг, кроме того, предполагается, что ингибирование КМО воздействует на периферийные ткани. Таким образом, ингибирование КМО может быть полезно в лечении заболеваний периферийных тканей, а также заболеваний головного мозга. Кроме того, взаимосвязь между ингибированием КМО и увеличением АК (ан-траниловой кислоты) могла бы также оказывать значительные биологические действия.
Также сообщалось, что экспрессия КМО увеличивается при воспалительных состояниях или после иммуностимуляции. 3-OH-KYN, продукт собственной активности, накапливается в головном мозге не-онатальных крыс с дефицитом витамина В-6, и он вызывает цитотоксичность при добавлении в нейроны в первичных культурах, или когда локально вводится в головной мозг. В последнее время сообщалось, что относительно низкие концентрации (наномолярные) 3-OH-KYN могут вызывать апоптотичекую гибель нейронов в первичных нейронных культурах. Изучения структуры-активности в действительности показали, что 3-OH-KYN и другие о-аминофенолы могут подвергаться реакциям окисления, вызванным их превращением в хинонимины, способом, связанным с сопутствующей выработкой свободных радикалов кислорода. Включение этих реакционноспособных частиц в патогенез гибели нейронов при ишемии широко изучалось в последние несколько лет, и было показано, что свободные радикалы кислорода и глутамат опосредовали нейропередачу совместного действия в развитии гибели нейронов при ишемии.
Также недавно показали, что активность КМО чрезвычайно повышена в радужной оболочке и ресничном теле и что новообразованный 3-OH-KYN секретируется в жидкой среде хрусталика. Повышенное накопление 3-OH-KYN в хрусталике может вызвать катаракту.
QUIN является агонистом подгруппы NMDA рецепторов и при непосредственном введении в области головного мозга он разрушает большинство нейронных клеточных тел, щадя, между прочим, волокна и нейронные окончания. QUIN представляет собой относительно плохой агонист NMDA рецеп-торного комплекса, содержащего либо NR2C, либо NR2D субъсоединения, несмотря на то, что он взаимодействует с относительно высоким сродством с NMDA рецепторным комплексом, содержащим NR2A и NR2B субъсоединения. Профиль нейротоксичности, полученный после интрастриарного введения QUIN, сходен с тем, что обнаружен в базальных ядрах у пациентов с болезнью Хантингтона: несмотря на то, что большинство истинных стриарных нейронов разрушается, НАДН-диафораза-окрашивающие нейроны (которые, как считается в настоящее время, способны экспрессировать синтетазу оксида азота) и нейроны, содержащие нейропептид Y, по-видимому, щадят, между прочим, вместе с концевыми ветвями аксона и волокна.
Показано, что in vivo инфузия KYNA регулирует синаптическое высвобождение решающих нейро-медиаторов, участвующих в когнитивных процессах и аффективных умственных способностях, таких как ацетилхолин, дофамин и глутамат; следовательно, увеличение KYNA в головном мозге может влиять на когнитивные расстройства и расстройства, обусловленные или находящиеся под влиянием изменений в уровнях нейромедиаторов глутамата, дофамина или Ach (такие как болезнь Альцгеймера, MCI (умеренные когнитивные нарушения), PD (болезнь Паркинсона), шизофрения, HD (болезнь Хантингтона), OCD (обсессивно-компульсивное расстройство) и синдром Туретта).
In vitro были изучены нейротоксические эффекты соединения на разных модельных системах с переменными результатами: хроническое облучение органотипических кортикостриарных культур до суб-микромолярной концентрации QUIN вызывает гистологические признаки патологии, похожие результаты получены после хронического облучения культивируемых нейронов.
В моделях воспалительных неврологических расстройств, таких как экспериментальный аллергический энцефалит, бактериальные и вирусные инфекции, общая ишемия переднего мозга или травма спины, уровни QUIN в головном мозге чрезвычайно повышены. Эта увеличенная концентрация QUIN в головном мозге может быть вследствие либо высокой циркулирующей концентрации эксайтотоксина, либо повышенного новообразования в активированной микроглии или в инфильтрованных макрофагах. Предполагалось, что у макак, зараженных ретровирусом, большая часть повышенного содержания QUIN в головном мозге (приблизительно 98 %) обусловлена местной выработкой. В действительности сильное увеличение в активностях IDO, КМО и кинурениназы обнаружено в областях воспаления головного мозга.
Предыдущие изучения показали, что агенты, способные увеличить содержание KYNA в головном мозге, вызывают седативный эффект, умеренную анальгезию, увеличение в судорожном пороге и нейро
протекцию относительно эксайтотоксичного или ишемического повреждения. В дополнение к представленным выше доказательствам в последнее время было показано, что ряд соединений, способных повышать образование KYNA в головном мозге, может вызывать сильное уменьшение в глутамат (GLU) опосредованной нейропередачи, снижая концентрации GLU во внеклеточных пространствах головного мозга.
Это сохраняет потребность в соединениях, которые являются эффективными ингибиторами КМО и могут быть использованы в лечении нейродегенеративных расстройств. Предложено соединение формулы
или его фармацевтически приемлемая соль.
Также предложена фармацевтическая композиция для ингибирования активности кинуренин-3-монооксигеназы, включающая соединение, описанное в данном документе, или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
Также предложено применение соединения, описанного в данном документе, для лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью кинуренин-3-монооксигеназы, у субъекта, нуждающегося в лечении.
Также предложено применение фармацевтической композиции, описанной в данном документе, для лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью кинуренин-3-монооксигеназы, у субъекта, нуждающегося в лечении.
В некоторых вариантах осуществления изобретения состояние или расстройство, для лечения которого применяют соединение или фармацевтическую композицию, описанные в данном документе, представляет собой болезнь Хантингтона.
Как используется в настоящем описании, как правило, подразумевается, что следующие слова, фразы и символы имеют приведенные ниже значения, кроме случаев, когда в контексте, в котором они используются, не указано иное. Следующие аббревиатуры и термины имеют в данном описании указанные значения:
Штрих ("-"), который не находится между двух букв или символов, используется для указания точки присоединения заместителя. Например, -CONH2 присоединен через атом углерода.
Описанные в данном документе соединения включают, но не ограничиваются этим, оптические изомеры, рацематы и другие смеси. В этих случаях отдельные энантиомеры или диастереомеры, т.е. оптически активные формы, могут быть получены в ходе асимметрического синтеза или в ходе повторного растворения рацематов. Повторное растворение рацематов может быть выполнено, например обычными способами, такими как кристаллизация в присутствии расщепляющего агента или хроматография, используя, например колонку для хиральной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Кроме того, подобные соединения включают Z- и Е-формы (или цис- и трансформы) соединений с двойными связями углерод-углерод. Когда соединения, описанные в данном описании, существуют в разных таутомерных формах, то подразумевается, что термин "соединение" включает все таутомерные формы соединения. Подобные соединения также включают кристаллические формы, включая полиморфы и кла-траты. Подобным образом подразумевается, что термин "соль" включает все таутомерные формы и кристаллические формы соединения.
Новое химическое соединение включает, но не ограничивается этим, соединение, описанное в данном документе, и все его фармацевтически приемлемые формы. Фармацевтически приемлемые формы соединения, описанного в данном документе, включают фармацевтически приемлемые соли и их смеси. В некоторых воплощениях соединение, описанное в данном документе, находится в форме фармацевтически приемлемых солей. Поэтому термин "химическое соединение" также охватывает фармацевтически приемлемые соли и их смеси.
"Фармацевтически приемлемые соли" включают, но не ограничиваются этим, соли с неорганическими кислотами, такие как гидрохлорат, фосфат, дифосфат, гидробромат, сульфат, сульфинат, нитрат и подобные соли; а также соли с органической кислотой, такие как малат, малеат, фумарат, тартрат, сукци-нат, цитрат, ацетат, лактат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, 2-гидроксиэтилсульфонат, бензоат, са-лицилат, стеарат и алканоат, такой как ацетат, НООС-(СН2)П-СООН, где n представляет собой 0-4, и подобные соли. Подобным образом фармацевтически приемлемые катионы включают, но не ограничиваются этим, натрий, калий, кальций, алюминий, литий и аммоний.
Кроме того, если соединение, описанное в данном документе, получают в виде кислотно-аддитивной соли, то свободное основание может быть получено при повышении основности раствора кислой соли. Напротив, если продукт представляет собой свободное основание, то соль присоединения, особенно фармацевтически приемлемая соль присоединения, может быть получена в ходе растворения свободного основания в подходящем органическом растворителе и обработки раствора кислотой в соот
ветствии с общепринятыми способами получения кислотно-аддитивных солей из основных соединений. Специалисты в данной области техники знают разные синтетические методики, которые можно использовать для получения нетоксичных фармацевтически приемлемых солей присоединения.
"Сольват" образуется в ходе взаимодействия растворителя и соединения. Считается, что термин "соединение" включает сольваты соединения. Подобным образом "соли" включают сольваты солей. Подходящими сольватами являются фармацевтически приемлемые сольваты, такие как гидраты, включая моногидраты и полугидраты.
"Хелат" образуется в ходе координации соединения с ионом металла в двух (или более) точках. Считается, что термин "соединение" включает хелаты соединения. Подобным образом "соли" включают хелаты солей.
"Нековалентный комплекс" образуется в ходе взаимодействия соединения и другой молекулы, где ковалентная связь не образуется между соединением и молекулой. Например, комплексообразование может происходить в результате ван-дер-ваальсовых взаимодействий, образования водородных связей и электростатических взаимодействий (также называемых ионной связью). Подобные нековалентные комплексы включены в термин "соединение".
Термин "водородная связь" относится к форме ассоциации между электроотрицательным атомом (также называемым акцептором водородной связи) и атомом водорода, присоединенным ко второму относительно электроотрицательному атому (также называемому донором водородной связи). Подходящие доноры и акцепторы водородной связи хорошо изучены в медицинской химии (G.C Pimentel and A.L. McClellan, The Hydrogen Bond, Freeman, San Francisco, 1960; R. Taylor and O. Kennard," Hydrogen Bond Geometry in Organic Crystals", Accounts of Chemical Research, 17, pp. 320-326 (1984)).
"Акцептор водородной связи" относится к группе, включающей кислород или азот, такой как кислород или азот, который находится в sp2-гибридизации, эфирный кислород или кислород сульфоксида или N-оксида.
Термин "донор водородной связи" относится к кислороду, азоту или гетероароматическому углероду, который имеет водород, группе, содержащей кольцевой азот, или гетероарильной группе, содержащей кольцевой азот.
Как используется в данном описании, термины "группа", "радикал" или "фрагмент" являются синонимами, и считается, что они указывают на функциональные группы или фрагменты молекул, присоединенных к связи или другим фрагментам молекул.
Термин "активный агент" используется для обозначения химического соединения, которое обладает биологической активностью. В некоторых воплощениях "активный агент" представляет собой соединение, имеющее фармацевтическую ценность. Например, активный агент может представлять собой анти-нейродегенеративное терапевтическое средство.
Термин "терапевтически эффективное количество" химического соединения, описанного в данном описании, означает количество, эффективное при введении человеку или не относящемуся к человеку субъекту для обеспечения терапевтической пользы, такой как улучшение симптомов, замедление развития болезни или предотвращение заболевания, например, терапевтически эффективным количеством может быть количество, достаточное для уменьшения симптомов заболевания, восприимчивого к инги-бированию активности КМО и регулированию метаболитов кинуренина в ходе метаболизма (таких как кинуренин, кинуреновая кислота, антраниловая кислота, 3-ОН-кинуренин, 3-ОН-антраниловая кислота или хинолиновая кислота). В некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством является количество, достаточное для лечения симптомов нейродегенеративного пути или заболевания. В некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством является количество, достаточное для уменьшения признаков или побочных эффектов нейродегенеративного заболевания. В некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством химического соединения является количество, достаточное для предотвращения значительного увеличения или значительного сокращения уровня гибели нейронов. В некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством химического соединения является количество, достаточное для предотвращения значительного увеличения или значительного сокращения уровня QUIN, связанного с гибелью нейронов. В некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством химического соединения является количество, достаточное для влияния на увеличение уровня KYNA, связанной со здоровым состоянием нейронов. В некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством химического соединения является количество, достаточное для увеличения противосудорожных и нейропротективных свойств, связанных с пониженными уровнями QUIN и увеличенными уровнями KYNA. В некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством является количество, достаточное для регулирования воспалительного процесса в теле, включая, но не ограничиваясь этим, воспаление в головном мозге, спинном мозге и периферической нервной системе, или оболочках головного мозга. В некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством является количество, достаточное для регулирования выработки цитокинов, ответственных за установку эффективного иммунного ответа (таких как ИЛ-1 бета или ФНО-альфа), или количество, достаточное для влияния на провоспалительную активность моноцитов/макрофагов на периферии или в головном мозге в условиях, когда гематоэнцефалический барьер нарушен, таких как при
множественном склерозе.
В описанных в данном описании способах лечения нейродегенеративного заболевания терапевтически эффективным количеством также может быть количество, достаточное при введении пациенту для поддающегося обнаружению замедления развития нейродегенеративного заболевания или предотвращения у пациента, который получает химическое соединение, изложенных симптомов нейродегенеративно-го заболевания. В некоторых описанных в данном описании способах лечения нейродегенеративного заболевания терапевтически эффективным количеством также может быть количество, достаточное для поддающегося обнаружению уменьшения уровня гибели нейронов. Например, в некоторых воплощениях терапевтически эффективным количеством является количество химического соединения, описанного в данном описании, достаточное для значительного снижения уровня гибели нейронов, заключающееся в поддающемся обнаружению уменьшении количества QUIN и увеличении количества кинуренина, KYNA или антраниловой кислоты.
Кроме того, считается, что количество является терапевтически эффективным количеством, если оно характеризуется по меньшей мере одним из вышеприведенных показателей или экспериментальных условий независимо от каких-либо несовместимых или противоречивых результатов в ходе разного набора критериев или экспериментальных условий.
Термин "ингибирование" означает значительное уменьшение основной активности биологической активности или процесса. "Ингибирование активности КМО" относится к уменьшению активности КМО в виде прямого или косвенного отклика на присутствие химического соединения, описанного в данном документе, относительно активности КМО при отсутствии химического соединения. Уменьшение активности может быть связано с непосредственным взаимодействием соединения с КМО, или связано с взаимодействием химического соединения, описанного в данном документе, с одним или более чем одним другим фактором, который в свою очередь воздействует на активность КМО. Например, присутствие химического соединения может уменьшать активность КМО, непосредственно связываясь с КМО, заставляя (прямо или косвенно) другой фактор уменьшать активность КМО, или (прямо или косвенно) уменьшая количество КМО, находящейся в клетках или организме.
"Ингибирование активности КМО" относится к уменьшению активности КМО в виде прямого или косвенного отклика на присутствие химического соединения, раскрытого в данном описании, относительно активности КМО при отсутствии химического соединения. Уменьшение активности может быть связано с непосредственным взаимодействием соединения с КМО или с одним или более чем одним другим фактором, который в свою очередь воздействует на активность КМО.
Ингибирование активности КМО также относится к наблюдаемому ингибированию выработки 3-НК и QUIN в стандартном анализе, таком как анализ, описанный ниже. Ингибирование активности КМО также относится к наблюдаемому увеличению выработки KYNA. В некоторых воплощениях химическое соединение, раскрытое в данном описании, имеет значение ИК50 меньше или равное 1 микромолю. В некоторых воплощениях химическое соединение имеет значение ИК50 меньше или равное 100 микромолям. В некоторых воплощениях химическое соединение имеет значение ИК50 меньше или равное 10 наномо-лям.
"Активность КМО" также включает активацию, перераспределение, преобразование или кэппинг одного или более разных КМО мембраноассоциированных белков (таких как те рецепторы, что находятся в митохондрии), или сайты связывания могут подвергаться перераспределению и кэппингу, которые могут вызывать передачу сигналов. Активность КМО также может регулировать доступность кинурени-на, который может влиять на синтез или выработку QUIN, KYNA, антраниловой кислоты и/или 3-НК.
"Заболевание, реагирующее на ингибирование активности КМО" является заболеванием, при котором ингибирование КМО приводит к терапевтической пользе, такой как улучшение симптомов, уменьшение развития заболевания, предотвращение или замедление начала заболевания, предотвращение или улучшение воспалительной реакции, или ингибирование аберрантной активности и/или гибели конкретных типов клеток (таких как нейроны).
"Лечение" или "лечить" означает любое лечение заболевания у пациента, включая:
a) предотвращение заболевания, иными словами, клинические симптомы заболевания не развиваются;
b) ингибирование развития заболевания;
c) замедление или прекращение развития клинических симптомов; и/или
d) облегчение заболевания, иными словами, регрессия клинических симптомов.
"Субъект" или "пациент" относится к животному, такому как млекопитающее, которое было или будет субъектом лечения, наблюдения или эксперимента. Способы, описанные в данном описании, могут быть полезными как в лечении людей, так и ветеринарии. В некоторых воплощениях субъектом является млекопитающее; и в некоторых воплощениях субъектом является человек.
Способы получения химического соединения, раскрытого в данном описании, очевидны квалифицированным специалистам в данной области техники, подходящие способы описаны в примерах ниже и в приводимых в данном описании ссылках.
Предложен способ ингибирования каталитической активности КМО, согласно которому подверга
ют взаимодействию указанную КМО с эффективным количеством химического соединения, раскрытого в данном описании.
Также предложен способ лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью КМО, у субъекта, нуждающегося в подобном лечении, согласно которому вводят субъекту терапевтически эффективное количество химического соединения, раскрытого в данном описании.
Также предложен способ лечения нейродегенеративной патологии, опосредованной активностью КМО, у субъекта, нуждающегося в подобном лечении, согласно которому вводят субъекту терапевтически эффективное количество химического соединения, раскрытого в данном описании.
Также предложен способ лечения расстройств, опосредованных (или по меньшей мере частично) присутствием 3-OH-KYN, QUIN и/или KYNA. Также предложен способ лечения дегенеративного или воспалительного состояния, при котором происходит повышенный синтез в головном мозге QUIN, 3-OH-KYN или повышенное выделение GLU и которое может вызывать повреждение нейронов.
Подобные заболевания включают, например, болезнь Хантингтона и другие полиглутаминовые расстройства, такие как спиноцеребеллярная атаксия, нейродегенеративные заболевания, психиатрические неврологические заболевания или расстройства, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, болезнь Крейтцфельдта-Якоба, вызванная травмой нейродегенерация, неврологический синдром высокого давления, дистония, оливопонтоцеребеллярная атрофия, множественный склероз, эпилепсия, последствия инсульта, ишемия головного мозга, ишемические расстройства, включая инсульт (очаговую ишемию), гипоксия, мультиинфарктная деменция, последствия черепно-мозговой травмы или повреждения, повреждение спинного мозга, слабоумие, такое как старческое слабоумие и слабоумие при СПИДе, вызванная СПИДом энцефалопатия, другая связанная с инфекцией энцефалопатия, вирусный или бактериальный менингит, инфекционные заболевания, вызванные вирусами, бактериями и другими паразитами, например, инфекциями общей центральной нервной системы (ЦНС), такими как вирусы, бактерии или паразиты, например, полиомиелит, септический шок при болезни Лайма (инфекционном заболевании, вызываемом Borrelia burgdorferi) и малярия, рак, рак с локализацией в головном мозге, печеночная энцефалопатия, системная волчанка, аналгезия и симптомы опиатной абстиненции, пищевое поведение, психические расстройства, такие как бессонница, депрессия, шизофрения, жестокий дефицит кратковременной памяти, жестокий дефицит хранения информации в долговременной памяти, ослабление познавательной способности, жестокий дефицит внимания, жестокий дефицит исполнительного функционирования, замедление обработки информации, замедление нервной активности, тревога, генерализованные тревожные расстройства, паническая тревога, обсессивно-компульсивные расстройства, социофобия, страх перед возможной неудачей, посттравматическое стрессовое расстройство, острая стрессовая реакция, реакция адаптации, тревожное расстройство, вызванное разлукой, тревога, вызванная синдромом похмелья, депрессивные расстройства, расстройства развивающегося или стареющего головного мозга, диабет и его осложнения, синдром Туретта, синдром ломкой Х-хромосомы, расстройства аутистического спектра, расстройства, которые вызывают тяжелое и глубокое нарушение в мышлении, речи и способности устанавливать отношения с другими, расстройства настроения, психологические расстройства, характеризующиеся нарушениями в эмоциональном состоянии, такие как, без ограничения, биполярное расстройство, униполярная депрессия, глубокая депрессия, эндогенная депрессия, инволюционная депрессия, реактивная депрессия, психотическая депрессия, депрессия, вызванная фоновыми заболеваниями, депрессивные расстройства, циклотимические расстройства, дистимические расстройства, расстройства настроения, связанные с общим состоянием здоровья, расстройства настроения, определенно не указанные, и расстройства настроения, вызванные химическими веществами. Подобные заболевания также включают, например, острый некротизирующий панкреатит, СПИД (заболевание), аналгезию, асептический менингит, заболевание головного мозга, например, синдром Жилль де ла Туретта, синдром Аспергера, синдром Ретта, первазивные расстройства развития, заболевание головного мозга, связанное со старением, и заболевание головного мозга, связанное с развитием, синдром эмоционального выгорания, отравление угарным газом, остановку сердца или сердечную недостаточность и геморрагический шок (глобальная ишемия головного мозга), образование катаракты и старение глаз, заболевание центральной нервной системы, цереброваскулярное заболевание, синдром хронической усталости, хронический стресс, когнитивные расстройства, судорожные расстройства, такие как варианты припадка эпилепсии и малый эпилептический припадок, и сложные парциальные припадки, сахарный диабет, заболевание нервной системы (например, дискинезия, L-ДОФА вызванные двигательные расстройства, лекарственное привыкание, боль и катаракта), лекарственную зависимость, заболевания, связанные с отменой лекарственного средства, расстройства приема пищи, синдром Гийена-Барре и другие нейропатии, печеночную энцефалопатию, иммунное заболевание, иммунные расстройства и терапевтическое лечение, направленное на изменение биологических реакций (например, введение интерферонов или интерлейкинов), воспаление (синдром системной воспалительной реакции), воспалительные заболевания центральной и/или периферической нервной системы, повреждение (травма, политравма), психические расстройства и расстройства поведения, нарушение обмена веществ, боль или расстройство, выбранное из группы воспалительной боли, нейропатической боли или мигрени, аллодинии, гипералгезии, фантомной боли, нейропатической боли, связанной с диабетической нейропатией, полиорганную недос
таточность, близкую к утоплению, некроз, новообразования головного мозга, неопластические расстройства, включая лимфомы и другие злокачественные заболевания крови, заболевание нервной системы (нервный синдром повышенного давления, инфекцию), никотиновую зависимость и другие расстройства, связанные с зависимостью, включая алкоголизм, зависимость от конопли, бензодиазепина, барбитуратов, морфина и кокаина, изменение в аппетите, расстройства сна, изменения в характере сна, упадок сил, усталость, заниженную самооценку, самообвинение в неуместном чувстве вины, частые мысли о смерти или суициде, планы или попытки совершить самоубийство, ощущения безвыходности и несостоятельности, психомоторное возбуждение или торможение, ограниченную способность думать, концентрироваться или принимать решения, боль, посттравматическое стрессовое расстройство, сепсис, заболевание спинного мозга, спиноцеребеллярную атаксию, системную красную волчанку, травматическое повреждение головного мозга и спинного мозга, и синдромы тремора, и разные двигательные расстройства (дискинезию), плохое душевное равновесие, брадикинезию, оцепенелость, тремор, изменение в речи, потерю мимики, мелкий неразборчивый почерк, затрудненное глотание, слюнотечение, слабоумие, спутанность сознания, страх, сексуальную дисфункцию, нарушение речи, нарушение процесса принятия решений, вспышки ярости, агрессию, галлюцинации, апатию, нарушение в абстрактном мышлении.
Подобные заболевания включают, например, сердечно-сосудистые заболевания, которые относятся к заболеваниям и расстройствам сердца и кровеносной системы. Эти заболевания часто связаны с дисли-попротеинемиями и/или дислипидемиями. Сердечно-сосудистые заболевания включают, но не ограничиваются этим, кардиомегалию, атеросклероз, инфаркт миокарда и застойную сердечную недостаточность, коронарную болезнь сердца, гипертонию и гипотонию.
Другие подобные заболевания включают гиперпролиферативные заболевания доброкачественного или злокачественного характера, при которых клетки разных тканей и органов проявляют аберрантные схемы роста, пролиферации, перемещения, передачи сигналов, старения и отмирания. Как правило, ги-перпролиферативное заболевание относится к заболеваниям и расстройствам, связанным с неконтролируемой пролиферацией клеток, включая, но не ограничиваются этим, неконтролируемый рост клеток органа и ткани, приводящий к раку и доброкачественным опухолям. Гиперпролиферативные заболевания, связанные с эндотелиальными клетками, могут приводить к заболеваниям ангиогенеза, таким как ангиомы, эндометриоз, ожирение, возрастная дегенерация макулы и разные ретинопатии, а также пролиферации ECs (эндотелиальных клеток) и клеток гладкой мускулатуры, что вызывает рестеноз в результате стентирования при лечении атеросклероза. Гиперпролиферативные заболевания, включая фибробла-сты (т.е. фиброгенез), включают, но не ограничиваются этим, расстройства чрезмерного рубцевания (т.е. фиброз), такие как возрастная дегенерация макулы, ремоделирование сердца и нарушение, связанное с инфарктом миокарда, чрезмерное заживление ран, которые обычно имеют место в результате операции или повреждения, ожоговых рубцов и фиброзных опухолей, и стентирования.
Дополнительные заболевания включают отторжение трансплантата (супрессия Т-клеток) и болезнь "трансплантат против хозяина", хроническое заболевание почек, систематические воспалительные заболевания, воспалительные заболевания головного мозга, включая малярию и африканский трипаносомоз, инсульт и пневмококковый менингит.
Также предложены способы лечения, в которых химическое соединение, раскрытое в данном описании, представляет собой единственный активный агент, даваемый субъекту, и также включены способы лечения, в которых химическое соединение, описанное в данном описании, дают субъекту в сочетании с одним или более дополнительными активными агентами.
В общем, химическое соединение, раскрытое в данном описании, будут вводить в терапевтически эффективном количестве любым из принятых способов введения агентов, которые обладают подобной пользой. Действующее количество соединения, т.е. активного ингредиента, будет зависеть от ряда факторов, таких как тяжесть подвергаемого лечению заболевания, возраст и относительное здоровье субъекта, эффективность используемого соединения, способ и форма введения, и других факторов, известных специалисту в данной области. Лекарство можно вводить по меньшей мере один раз в день, так один или два раза в день.
В некоторых воплощениях химическое соединение, описанное в данном описании, вводят в виде фармацевтической композиции. Соответственно предложены фармацевтические композиции, включающие химическое соединение, раскрытое в данном описании, вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым наполнителем, выбранным из носителей, адъювантов и эксципиентов.
Фармацевтически приемлемые наполнители должны иметь достаточно высокую чистоту и достаточно низкую токсичность, чтобы подойти для введения подвергаемому лечению животному. Наполнитель может быть инертным или он может иметь фармацевтическую пользу. Количество наполнителя, используемого вместе с химическим соединением, достаточно для обеспечения действительного количества вещества при введении однократной дозы химического соединения.
Примерными фармацевтически приемлемыми носителями или их компонентами являются сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и метил-целлюлоза; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; твердые смазывающие вещества, такие
как стеариновая кислота и стеарат магния; сульфат кальция; синтетические масла; растительные масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, кунжутное масло, оливковое масло и кукурузное масло; полиолы, такие как пропиленгликоль, глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; альгиновая кислота; эмульгаторы, такие как Твины; увлажняющие агенты, такие как лаурилсульфат натрия; красящие агенты; ароматизирующие агенты; таблетирующие агенты; стабилизаторы; антиоксиданты; консерванты; апирогенная вода; изотонический солевой раствор и фосфатно-буферные растворы.
В фармацевтическую композицию могут быть включены возможные активные агенты, которые, по существу, не мешают активности химического соединения, раскрытого в данном описании.
Эффективные концентрации химического соединения, раскрытого в данном описании, смешивают с подходящим фармацевтически приемлемым наполнителем. В случаях, когда химическое соединение проявляет недостаточную растворимость, можно использовать способы повышения растворимости соединений. Подобные способы известны специалистам в данной области техники и включают, но не ограничиваются этим, использование совместных растворителей, таких как диметилсульфоксид (ДМСО), использование поверхностно-активных веществ, таких как Твин, или растворение в водном гидрокарбонате натрия.
После смешивания или добавления химического соединения, раскрытого в данном описании, полученная в результате смесь может представлять собой раствор, суспензию, эмульсию или подобное. Форма полученной в результате смеси зависит от ряда факторов, включая предполагаемый способ введения и растворимость химического соединения в выбранном наполнителе. Эффективную концентрацию, достаточную для улучшения симптомов подвергаемого лечению заболевания, можно определить опытным путем.
Химическое соединение, раскрытое в данном описании, можно вводить перорально, местно, парентерально, внутривенно, в ходе внутримышечной инъекции, в ходе ингаляции или впрыскивания, под язык, трансдермально, посредством буккального введения, ректально, в виде офтальмологического раствора или другими способами в составе единиц дозирования.
Фармацевтические композиции могут быть разработаны для перорального использования, в виде, например таблеток, пастилок, леденцов, водных или масляных суспензий, дисперсных порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул, или сиропов, или эликсиров. Фармацевтические композиции, предназначенные для перорального использования, могут быть получены в соответствии с любым способом, известным в данной области техники, для изготовления фармацевтических композиций, и подобные композиции могут содержать один или более агентов, таких как подсластители, ароматизаторы, красители и консерванты, для получения фармацевтически превосходных и приятных на вкус препаратов. В некоторых воплощениях пероральные фармацевтические композиции содержат от 0,1 до 99% химического соединения, раскрытого в данном описании. В некоторых воплощениях пероральные фармацевтические композиции содержат по меньшей мере 5% (мас.%) химического соединения, раскрытого в данном описании. Некоторые воплощения содержат от 25 до 50% или от 5 до 75% химического соединения, раскрытого в данном описании.
Перорально вводимые фармацевтические композиции также включают жидкие растворы, эмульсии, суспензии, порошки, гранулы, эликсиры, настойки, сиропы и подобное. Фармацевтически приемлемые носители, подходящие для получения подобных композиций, известны в данной области техники. Перо-ральные фармацевтические композиции могут содержать консерванты, ароматизаторы, подсластители, такие как сахароза или сахарин, корригенты и красители.
Обычные компоненты носителей для сиропов, эликсиров, эмульсий и суспензий включают этанол, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, жидкую сахарозу, сорбит и воду. Сиропы и эликсиры могут быть получены с посластителями, например глицерином, пропиленгликолем, сорбитом или сахарозой. Такие фармацевтические композиции также могут содержать смягчающее средство.
Химическое соединение, раскрытое в данном описании, может быть включено в пероральные жидкие препараты, такие как, например водные или масляные суспензии, растворы, эмульсии, сиропы или эликсиры. Кроме того, фармацевтические композиции, содержащие это химическое соединение, могут быть приготовлены в виде сухого продукта для разбавления с водой или другим подходящим наполнителем перед использованием. Подобные жидкие препараты могут содержать обычные добавки, такие как суспендирующие агенты (например сорбитный сироп, метилцеллюлоза, глюкоза/сахар, сироп, желатин, гидроксиэтилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, гель стеарата алюминия и гидрогенизированные пищевые жиры), эмульгаторы (например лецитин, сорбитан моноолеат или гуммиарабик), неводные наполнители, которые могут включать пищевые масла (например, миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, силиловые эфиры, пропиленгликоль и этиловый спирт), и консерванты (например, метил или пропил п-гидроксибензоат и сорбиновая кислота).
Для суспензии обычные суспендирующие агенты включают метилцеллюлозу, карбоксиметилцел-люлозу натрия, авицел RC-591, трагакант и альгинат натрия; обычные увлажняющие агенты включают лецитин и полисорбат 80; и обычные консерванты включают метилпарабен и бензоат натрия.
Водные суспензии содержат активное вещество в смеси с эксципиентами, подходящими для изготовления водных суспензий. Подобные эксципиенты представляют собой суспендирующие агенты, на
пример карбоксиметилцеллюлоза натрия, метилцеллюлоза, гидропропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и аравийская камедь; диспергирующие или увлажняющие агенты; могут представлять собой природный фосфатид, например лецитин, или продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, например стеарат полиоксиэтилена, или продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например гептадекаэтиленок-сицетанол, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такие как заместитель сорбита полиоксиэтилена, или продукты конденсации этиленок-сида с неполными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гексита, например заместитель сорбитана полиэтилена. Водные суспензии могут также содержать один или более консервантов, например этил- или н-пропил-п-гидроксибензоат.
Масляные суспензии можно получать суспендированием активных ингредиентов в растительном масле, например арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном масле или кокосовом масле, или в минеральном масле, таком как вазелиновое масло. Масляные суспензии могут содержать загуститель, например пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Подсластители, такие как те, что приведены выше, и вкусовые добавки можно добавлять для получения обладающих приятным вкусом перо-ральных препаратов. Эти фармацевтические композиции можно сохранять путем добавления антиокси-данта, такого как аскорбиновая кислота.
Фармацевтические композиции также могут быть в виде эмульсий "масло-в-воде". Масляная фаза может представлять собой растительное масло, например оливковое масло или арахисовое масло, или минеральное масло, например вазелиновое масло, или их смеси. Подходящими эмульгирующими агентами могут быть камеди природного происхождения, например аравийская камедь или трагакантовая камедь, фосфатиды природного происхождения, например соевые бобы, лецитин, и сложные эфиры или неполные эфиры, полученные из жирных кислот и гексита, ангидридов, например сорбитан моноолеат, и продукты конденсации указанных неполных эфиров с этиленоксидом, например полиоксиэтилен сорби-тан моноолеат.
Диспергируемые порошки и гранулы, подходящие для приготовления водной суспензии путем добавления воды, дают активный ингредиент в смеси с диспергирующим или увлажняющим агентом, суспендирующим агентом и одним или более консервантами. В качестве примеров подходящих диспергирующих или увлажняющих агентов и суспендирующих агентов приведены уже упомянутые выше вещества.
Таблетки обычно включают общепринятые фармацевтически приемлемые адъюванты в виде инертных разбавителей, таких как карбонат кальция, карбонат натрия, маннит, лактоза и целлюлоза; связующих веществ, таких как крахмал, желатин и сахароза; разрыхлителей, таких как крахмал, альгиновая кислота и кроскармеллоза; смазывающих веществ, таких как стеарат магния, стеариновая кислота и тальк. Скользящие вещества, такие как диоксид кремния, можно использовать для улучшения характеристик текучести порошкообразной смеси. Красители, такие как красители для химической и пищевой промышленности, можно добавить для улучшения наружного вида. Подсластители и ароматизаторы, такие как аспартам, сахарин, ментол, мята и фруктовые корригенты, могут быть полезными адъювантами для жевательных таблеток. Капсулы (включая составы с медленным высвобождением и замедленным высвобождением) обычно включают один или более твердых разбавителей, раскрытых выше. Выбор компонентов носителей часто зависит от вторичных признаков, подобных вкусу, стоимости и сроку хранения.
Подобные фармацевтические композиции также могут быть покрыты оболочкой общепринятыми способами, обычно рН или времязависимыми оболочками, так что химическое соединение высвобождается в желудочно-кишечном тракте рядом с требуемым местом применения, или в разное время для продления требуемого действия. Подобные лекарственные формы обычно включают, но не ограничиваются этим, один или более чем один ацетат фталат целлюлозы, поливинилацетат фталат, фталат гидроксипро-пилметилцеллюлозы, этилцеллюлозу, эудрагиты, воски и шеллак.
Фармацевтические композиции для перорального применения также могут быть получены в виде твердых желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в виде мягких желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с водой или масляной средой, например арахисовым маслом, вазелиновым маслом или оливковым маслом.
Фармацевтические композиции могут находиться в форме стерильной инъецируемой водной или маслянистой суспензии. Данную суспензию можно получить в соответствии с известной областью техники, используя те подходящие диспергирующие или увлажняющие агенты и суспендирующие агенты, которые указаны выше. Стерильный инъецируемый препарат также может представлять собой стерильный инъецируемый раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом наполнителе, например в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Приемлемыми наполнителями, которые можно использовать, являются вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные жирные масла обычно используются в качестве растворителя или суспендирующей среды. С этой целью любое безвкусное жирное масло можно использовать, включая синтетические моно- или диглицериды.
Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, могут быть пригодными при получении инъецируемых препаратов.
Химическое соединение, раскрытое в данном описании, можно вводить парентерально в стерильной среде. Парентеральное введение включает подкожные инъекции, внутривенную, внутримышечную, интратекальную инъекцию или инфузионные методики. Химическое соединение, раскрытое в данном описании, в зависимости от используемых наполнителя и концентрации может быть либо суспендировано, либо растворено в наполнителе. Преимущественно адъюванты, такие как местные анестетики, консерванты и буферные агенты, могут быть растворены в наполнителе. Во многих фармацевтических композициях для парентерального введения носитель составляет по меньшей мере 90% от массы всей композиции. В некоторых воплощениях носитель для парентерального введения выбран из пропиленглико-ля, этилолеата, пирролидона, этанола и кунжутного масла.
Химическое соединение, описанное в данном описании, также может быть введено в форме суппозиториев для ректального введения лекарственного средства. Эти фармацевтические композиции могут быть получены в ходе смешивания лекарственного средства с подходящим нераздражающим эксципиен-том, который является твердым при обычной температуре, и жидким при ректальной температуре и, следовательно, будет плавиться в прямой кишке, высвобождая лекарственное средство. Подобные вещества включают какао-масло и полиэтиленгликоли.
Химическое соединение, раскрытое в данном описании, может быть разработано для локального или местного применения, например, для местного применения на коже и слизистых оболочках, в виде гелей, кремов и лосьонов и для применения на глаза. Местные фармацевтические композиции могут находиться в любой форме, включая, например, растворы, кремы, мази, гели, лосьоны, молочко, очищающие средства, увлажняющие средства, спреи, трансдермальные пластыри и подобное.
Подобные растворы могут быть разработаны в виде 0,01-10% изотонических растворов, рН 5-7, с соответствующими солями. Химическое соединение, раскрытое в данном описании, также может быть разработано для трансдермального введения в виде трансдермального пластыря.
Местные фармацевтические композиции, включающие химическое соединение, раскрытое в данном описании, могут быть смешаны с рядом носителей, хорошо известных в данной области техники, таких как, например вода, спирты, гель с алоэ, аллантоин, глицерин, масла с витаминами А и Е, минеральное масло, пропиленгликоль, ППГ-2 миристилпропионат и подобные.
Другие вещества, подходящие для применения в местных носителях, включают, например смягчающие средства, растворители, увлажнители, загустители и порошки. Примеры каждого из этих типов веществ, которые можно использовать отдельно или в виде смесей одного или более веществ, выглядят следующим образом.
Репрезентативные смягчающие средства включают стеариновый спирт, глицерилмонорицинолеат, глицерилмоностеарат, пропан-1,2-диол, бутан-1,3-диол, норковый жир, цетиловый спирт, изопропилизо-стеарат, стеариновую кислоту, изобутилпальмитат, изоцетилстеарат, олеиловый спирт, изопропиллаурат, гексиллаурат, децилолеат, октадекан-2-ол, изоцетиловый спирт, цетилпальмитат, диметилполисилоксан, ди-н-бутилсебацат, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, изопропилстеарат, бутилстеарат, полиэти-ленгликоль, триэтиленгликоль, ланолин, кунжутное масло, кокосовое масло, арахисовое масло, касторовое масло, ацетилированные ланолиновые спирты, углеводороды, минеральное масло, бутилмиристат, изостеариновую кислоту, пальмитиновую кислоту, изопропиллинолеат, лауриллактат, миристиллактат, децилолеат и миристилмиристат; пропелленты, такие как пропан, бутан, изобутан, диметиловый эфир, диоксид углерода и оксид одновалентного азота; растворители, такие как этиловый спирт, метиленхло-рид, изопропанол, касторовое масло, моноэтиловый эфир этиленгликоля, монобутиловый эфир диэти-ленгликоля, моноэтиловый эфир диэтиленгликоля, диметилсульфоксид, диметилформамид, тетрагидро-фуран; увлажнители, такие как глицерин, сорбит, 2-пирролидон-5-карбоксилат натрия, растворимый коллаген, дибутилфталат и желатин; и порошки, такие как мел, тальк, фуллерова земля, каолин, крахмал, смолы, коллоидный диоксид кремния, полиакрилат натрия, тетраалкиламмониевые смектиты, триалки-лариламмониевые смектиты, химически модифицированный силикат магния-алюминия, органически модифицированная монтмориллонитовая глина, гидратированный силикат алюминия, пирогенный кремнезем, карбоксивиниловый полимер, карбоксиметилцеллюлоза натрия и этиленгликольмоностеарат.
Химическое соединение, раскрытое в данном описании, также можно вводить местно в виде липо-сомных систем доставки, таких как маленькие моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и мультиламеллярные везикулы. Липосомы могут быть получены из ряда фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.
Другие фармацевтические композиции, пригодные для достижения систематической доставки химического соединения, включают подъязычные, буккальные и назальные лекарственные формы. Подобные фармацевтические композиции обычно содержат один или более растворимых наполнителей, таких как сахароза, сорбит и маннит, и связующих веществ, таких как гуммиарабик, микрокристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и гидроксипропилметилцеллюлоза. Также могут быть включены скользящие вещества, смазывающие вещества, подсластители, красители, антиоксиданты и ароматизаторы, раскрытые выше.
Фармацевтические композиции для ингаляции обычно могут быть созданы в виде раствора, суспензии или эмульсии, которые могут быть введены в виде сухого порошка или в виде аэрозоля при использовании общепринятого пропеллента (например дихлордифторметана или трихлорфторметана).
Фармацевтические композиции также возможно содержат активный усилитель. Активный усилитель может быть выбран из большого числа молекул, которые действуют по-разному для усиления, или не зависят от терапевтических эффектов химического соединения, раскрытого в данном описании. Особые классы активных усилителей включают усилители, проникающие через кожу, и абсорбционные усилители.
Фармацевтические композиции также могут содержать дополнительные активные агенты, которые могут быть выбраны из большого числа молекул, которые могут действовать по-разному для увеличения терапевтических эффектов химического соединения, раскрытого в данном описании. Эти возможные другие активные агенты, при наличии, обычно используются в фармацевтических композициях на уровне, изменяющемся от 0,01 до 15%. Некоторые воплощения содержат от 0,1 до 10% от массы композиции. Другие воплощения содержат от 0,5 до 5% от массы композиции.
Также предложены упакованные фармацевтические композиции. Подобные упакованные композиции включают фармацевтическую композицию, содержащую химическое соединение, раскрытое в данном описании, и инструкции по использованию композиции для лечения субъекта (обычно человека). В некоторых воплощениях инструкции предназначены для использования фармацевтической композиции для лечения субъекта, страдающего от состояния или заболевания, опосредованного активностью кину-ренин-3-монооксигеназы. Упакованная фармацевтическая композиция может включать вкладыш по применению препарата; например пациентом или лечащим врачом, или этикетку на упакованной фармацевтической композиции. Вкладыш по применению препарата может включать, например эффективность, дозировку и способ введения, противопоказания и информацию о побочных реакциях, касающихся фармацевтической композиции.
Во всех вышеизложенных вариантах химическое соединение может быть введено отдельно, в виде смесей или в сочетании с другими активными агентами.
Способы, описанные в данном описании, включают способы лечения болезни Хантингтона, включая лечение нарушения памяти и/или когнитивных функций, связанного с болезнью Хантингтона, согласно которым вводят субъекту одновременно или последовательно химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных агентов, используемых в лечении болезни Хантингтона, таких как, но не ограничиваясь этим, амитриптилин, имипрамин, деспрамин, нортриптилин, пароксетин, флуоксетин, сертралин, тетрабеназин, галоперидол, хлорпромазин, тиоридазин, сульпирид, кветиапин, клозапин и рисперидон. В способах, использующих одновременное введение, агенты могут находиться в комбинированной композиции или могут быть введены по отдельности. В результате также предложены фармацевтические композиции, включающие химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении болезни Хантингтона, таких как, но не ограничиваясь этим, амитриптилин, имипрамин, деспрамин, нортрип-тилин, пароксетин, флуоксетин, сертралин, тетрабеназин, галоперидол, хлорпромазин, тиоридазин, суль-пирид, кветиапин, клозапин и рисперидон. Подобным образом, также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтическую композицию, включающую химическое соединение, раскрытое в данном описании, и другую композицию, включающую один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении болезни Хантингтона, таких как, но не ограничиваясь этим, амитриптилин, имипрамин, деспрамин, нортриптилин, пароксетин, флуоксетин, сер-тралин, тетрабеназин, галоперидол, хлорпромазин, тиоридазин, сульпирид, кветиапин, клозапин и риспе-ридон.
Также предложены способы лечения болезни Паркинсона, включая лечение нарушения памяти и/или когнитивных функций, связанного с болезнью Паркинсона, согласно которым вводят субъекту одновременно или последовательно химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных агентов, используемых в лечении болезни Паркинсона, таких как, но не ограничиваясь этим, леводопа, парлодел, пермакс, мирапекс, тасмар, контан, кемадрин, артан и когентин. В способах, использующих одновременное введение, агенты могут находиться в комбинированной композиции или могут быть введены по отдельности. Также предложены фармацевтические композиции, включающие химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении болезни Паркинсона, таких как, но не ограничиваясь этим леводопа, парлодел, пермакс, мирапекс, тасмар, контан, кемадрин, артан и когентин. Также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтическую композицию, включающую химическое соединение, раскрытое в данном описании, и другую композицию, включающую один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении болезни Пар-кинсона, таких как, но не ограничиваясь этим, леводопа, парлодел, пермакс, мирапекс, тасмар, контан, кемадрин, артан и когентин.
Также предложены способы лечения нарушения памяти и/или когнитивных функций, связанного с болезнью Альцгеймера, согласно которым вводят субъекту одновременно или последовательно химиче
ское соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных агентов, используемых в лечении болезни Альцгеймера, таких как, но не ограничиваясь этим, реминил, когнекс, арисепт, экселон, акатинол, неотропин, элдеприл, эстроген и клиохинол. В способах, использующих одновременное введение, агенты могут находиться в комбинированной композиции или могут быть введены по отдельности. Также предложены фармацевтические композиции, включающие химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении болезни Альцгеймера, таких как, но не ограничиваясь этим, реминил, когнекс, арисепт, экселон, акатинол, неотропин, элдеприл, эстроген и клиохинол. Подобным образом, также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтическую композицию, включающую химическое соединение, раскрытое в данном описании, и другую композицию, включающую один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении болезни Альцгеймера, таких как, но не ограничиваясь этим, реминил, когнекс, арисепт, экселон, акатинол, неотропин, элде-прил, эстроген и клиохинол.
Также предложены способы лечения нарушения памяти и/или когнитивных функций, связанного со слабоумием или когнитивным нарушением, согласно которым вводят субъекту одновременно или последовательно химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных агентов, используемых в лечении слабоумия, таких как, но не ограничиваясь этим, тиоридазин, галопе-ридол, рисперидон, когнекс, арисепт и экселон. В способах, использующих одновременное введение, агенты могут находиться в комбинированной композиции или могут быть введены по отдельности. Также предложены фармацевтические композиции, включающие химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении слабоумия, таких как, но не ограничиваясь этим, тиоридазин, галоперидол, рисперидон, когнекс, арисепт и экселон. Также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтическую композицию, включающую химическое соединение, раскрытое в данном описании, и другую композицию, включающую один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении слабоумия, таких как, но не ограничиваясь этим, тиоридазин, галоперидол, рисперидон, когнекс, арисепт и экселон.
Также предложены способы лечения нарушения памяти и/или когнитивных функций, связанного с эпилепсией, согласно которым вводят субъекту одновременно или последовательно химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных агентов, используемых в лечении эпилепсии, таких как, но не ограничиваясь этим, дилантин, люминол, тегретол, депакот, депакин, заронтин, нейронтин, Barbita, солфотон и фелбатол. В способах, использующих одновременное введение, агенты могут находиться в комбинированной композиции или могут быть введены по отдельности. Также предложены фармацевтические композиции, включающие химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении эпилепсии, таких как, но не ограничиваясь этим, дилантин, люминол, тегретол, депакот, депакин, зарон-тин, нейронтин, Barbita, солфотон и фелбатол. Также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтическую композицию, включающую химическое соединение, раскрытое в данном описании, и другую композицию, включающую один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении эпилепсии, таких как, но не ограничиваясь этим, дилантин, лю-минол, тегретол, депакот, депакин, заронтин, нейронтин, Barbita, солфотон и фелбатол.
Также предложены способы лечения нарушения памяти и/или когнитивных функций, связанного с множественным склерозом, согласно которым вводят субъекту одновременно или последовательно химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных агентов, используемых в лечении множественного склероза, таких как, но не ограничиваясь этим, детрол, дитропан XL, оксиконтин, бетаферон, авонекс, азатиоприн, метотрексат и копаксон. В способах, использующих одновременное введение, агенты могут находиться в комбинированной композиции или могут быть введены по отдельности. Также предложены фармацевтические композиции, включающие химическое соединение, раскрытое в данном описании, и один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении множественного склероза, таких как, но не ограничиваясь этим, детрол, дитропан XL, оксиконтин, бетаферон, авонекс, азатиоприн, метотрексат и копаксон. Также предложены упакованные фармацевтические композиции, содержащие фармацевтическую композицию, включающую химическое соединение, раскрытое в данном описании, и другую композицию, включающую один или более дополнительных фармацевтических агентов, используемых в лечении множественного склероза, таких как, но не ограничиваясь этим, детрол, дитропан XL, оксиконтин, бетаферон, авонекс, азатиоприн, ме-тотрексат и копаксон.
При использовании в сочетании с одним или более дополнительными фармацевтическими агентами раскрытое в данном описании химическое соединение может быть введено перед, одновременно или после введения дополнительного фармацевтического агента или агентов.
Дозировки соединений, описанных в данном описании, зависят от ряда факторов, включая конкретный синдром, подвергаемый лечению, тяжесть симптомов, способ введения, периодичность интервалов между введениями, конкретное используемое соединение, эффективность, токсикологический профиль,
фармакокинетический профиль соединения и наличие вредных побочных эффектов, наряду с другими факторами.
Химическое соединение, раскрытое в данном описании, обычно вводят на уровне доз и способом, характерным для ингибиторов КМО. Например, химическое соединение можно вводить в виде однократных или многократных доз в ходе перорального введения при уровне дозировки обычно 0,001-100 мг/кг/день, например 0,01-100 мг/кг/день, такой как 0,1-70 мг/кг/день, например 0,5-10 мг/кг/день. Стандартные лекарственные формы могут содержать, как правило, 0,01-1000 мг химического соединения, раскрытого в данном описании, например, 0,1-50 мг химического соединения, раскрытого в данном описании. Для внутривенного введения соединение может быть введено в виде однократных или многократных доз при уровне дозировки, например 0,001-50 мг/кг/день, такой как 0,001-10 мг/кг/день, например 0,01-1 мг/кг/день. Стандартные лекарственные формы могут содержать, например 0,1-10 мг химического соединения, раскрытого в данном описании.
Меченая форма химического соединения, раскрытого в данном описании, может быть использована в качестве диагностики для выявления и/или получения соединений, которые выполняют функцию модуляции активности КМО, как описано в данном описании. Химическое соединение, раскрытое в данном описании, кроме того, может быть использовано для подтверждения, оптимизации и стандартизации биоанализов.
Под "меченый" в данном описании понимают, что соединение либо непосредственно, либо опосредованно помечено маркером, который обеспечивает детектируемый сигнал, например радиоизотопом, флуоресцентным маркером, ферментом, антителами, частицами, такими как магнитные частицы, хеми-люминесцентным маркером или специфическими связывающими молекулами и т.д. Специфические связывающие молекулы включают пары, такие как биотин и стрептавидин, дигоксин и антидигоксин и т.д. Для членов специфического связывания дополнительный член обычно метят молекулой, которая обеспечивает детектирование, в соответствии с известными процедурами, как изложено выше. Метка может непосредственно или опосредовано обеспечивать детектируемый сигнал.
При осуществлении процедур способов, описанных в данном описании, конечно, следует понимать, что ссылка на конкретные буферы, среду, реагенты, клетки, условия культивирования и подобное не предназначена для ограничения, а подлежит прочтению, чтобы включить все сопутствующие вещества, которые один из средних специалистов в данной области техники может признать интересными или ценными в определенном контексте, в котором ведется данное обсуждение. Например, часто возможно заменить одну буферную систему или культуральную среду на другую и все же достигнуть подобных, если не одинаковых, результатов. Специалисты в данной области техники обладают достаточными знаниями подобных систем и методик, чтобы без чрезмерного экспериментирования осуществить подобные замещения, которые будут оптимально соответствовать своему назначению при использовании способов и процедур, раскрытых в данном описании.
Примеры
Химическое соединение, композиции и способы, описанные в данном описании, дополнительно проиллюстрированы следующими неограничивающими примерами.
Как используется в данном описании, следующие аббревиатуры имеют нижеприведенные значения. Если аббревиатура не определена, то она обычно имеет свое общепринятое значение.
CDI = карбонилдиимидазол
ДХМ = дихлорметан
ДМЭ = диметиловый эфир
DMEM = модифицированная по способу Дульбекко среда Игла ДМФА = ]Ч,]Ч-диметилформамид ДМСО = диметилсульфоксид
EDC-HCl = 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида гидрохлорид
EtOH = этанол
Et2O = диэтиловый эфир
EtOAc = этилацетат
г = грамм
ч = час
HOBt = 1-гидроксибензотриазол
LiHMDS = гексаметилдисилазид лития
ЖХ/МС = жидкостная хроматография/масс-спектрометрия
мг = миллиграмм
мин = минуты
мл = миллилитр
ммоль = миллимоли
мМ = миллимолярный
нг = нанограмм
нм = нанометр
нМ = наномолярный
ФБСР = фосфатно-буферный солевой раствор
к.т. = комнатная температура
ТБМЭ = трет-бутилметиловый эфир
ТГФ = тетрагидрофуран
TMOF = триметилортоформиат
мкл = микролитр
мкМ = микромолярный
1г/1мл = 1 об
Экспериментальный раздел
Имеющиеся в продаже реагенты и растворители (квалификация для ВЭЖХ) использовали без дополнительной очистки.
Анализ тонкослойной хроматографии (ТСХ) проводили на пластинах Kieselgel 60 F254 (Merck) и проявляли, используя УФ-излучение. Реакции под воздействием микроволнового излучения проводили, используя СЕМ с фокусированным микроволновым излучением.
Аналитическую ВЭЖХ-МС проводили на системах Agilent HP1100 и Shimadzu 2010, используя об-ращенно-фазовые колонки Atlantis dC18 (5 мкм, 2,1 х 50 мм), градиент 5-100% В (А = вода/0,1% муравьиная кислота, В = ацетонитрил/0,1% муравьиная кислота) в течение 3 мин, объем вводимой пробы 3 мкл, скорость потока =1,0 мл/мин. УФ-спектры регистрировали при 215 нм, используя двухволновый УФ-детектор Waters 2487 или систему Shimadzu 2010. Масс-спектры получали в диапазоне m/z 150 до 850 при частоте регистрации 2 снимка в секунду, используя Waters ZMD, и в диапазоне m/z 100 до 1000 при частоте регистрации 2 Гц, используя ионизацию электрораспылением, с помощью ЖХ-МС системы Shi-madzu 2010, или аналитическую ВЭЖХ-МС проводили на системах Agilent НР1100 и Shimadzu 2010, используя обращенно-фазовые колонки Water Atlantis dC18 (3 мкм, 2,1 х 100 мм), градиент 5-100% В (А = вода/0,1% муравьиная кислота, В = ацетонитрил/0,1% муравьиная кислота) в течение 7 мин, объем вводимой пробы 3 мкл, скорость потока = 0,6 мл/мин. УФ-спектры регистрировали при 215 нм, используя Waters 2996 с фотодиодной матрицей или систему Shimadzu 2010. Масс-спектры получали в диапазоне m/z 150 до 850 при частоте регистрации 2 снимка в секунду, используя Waters ZQ, и в диапазоне m/z 100 до 1000 при частоте регистрации 2 Гц, используя ионизацию электрораспылением, с помощью ЖХ-МС системы Shimadzu 2010. Данные объединяли и записывали, используя программное обеспечение OpenLynx и OpenLynx Browser, или посредством программного обеспечения Shimadzu PsiPort.
Пример 4
Стадия 1
В реактор высокого давления загружали 4-бром-2-хлорфенол, карбонат цезия (2,7 экв.) и диметил-ацетамид. Затем одной порцией добавляли бромциклопропан (4 экв.) (при добавлении не было экзотермического эффекта). Реактор закрывали и нагревали при 130-135°С и выдерживали при этой температуре в течение 48 ч.
Реакционную смесь охлаждали до 25°С и переносили в реактор, содержащий холодную воду и ме-тил-трет-бутиловый эфир (МТБЭ); затем смесь перемешивали. Органический слой отделяли, а водный слой дополнительно экстрагировали МТБЭ. Объединенные органические слои промывали 50% солевым раствором, а впоследствии рассолом. Органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали с использованием целита, а затем концентрировали с получением целевого соединения.
Стадия 2
В реактор загружали 4-бром-2-хлор-1-циклопропоксибензол, бис-(пинаколато)дибор (1,2 экв.), ацетат калия (3 экв.) и диметилсульфоксид (ДМСО). Смесь дегазировали с использованием способа высвобождения азота в вакууме до добавления Pd(dppf)Cl2 (4 мол.%). Внутреннюю температуру реакционной
смеси доводили до 75-80°С и перемешивали в течение 3 ч. Смесь охлаждали до 20-25°С и переносили посредством вакуума в реактор, содержащий этилацетат (EtOAc) и воду. Разделяли две фазы, и водную фазу дважды экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали 50% солевым раствором и фильтровали. Органические слои промывали рассолом, сушили над безводным MgSO4 и фильтровали с использованием целита. Органические слои концентрировали с получением неочищенного целевого соединения, которое растворяли в ДХМ и очищали хроматографией на силикагеле (градиент от 100% гептана до 20% EtOAc в гептане) с получением целевого соединения.
Стадия 3
В реактор, снабженный нагревательным кожухом, загружали 2-(3-хлор-4-циклопропоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан, 4,6-дихлорпиримидин (1,4 экв.), 1,4-диоксан и 2 М водного раствора К2СО3 (2,85 экв.). Смесь дегазировали с использованием способа высвобождения азота в вакууме до добавления Pd(PPh3)4 (7 мол.%). Внутреннюю температуру реакционной смеси доводили до 87-90°С и перемешивали в течение 3 ч. Смесь охлаждали до 20-25°С и концентрировали. Остаток повторно растворяли в дихлорметане (ДХМ) и промывали водой. Органический слой промывали рассолом, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал очищали хроматографией на силика-геле (градиент от 100% гептана до 20% EtOAc в гептане) с получением целевого соединения.
Стадия 4
В сосуд высокого давления загружали 4-хлор-6-(3-хлор-4-циклопропоксифенил)пиримидин, Pd(dppf)Cl2 (4 мол.%), триметиламин (1,58 экв.) и метанол. Сосуд вакуумировали и троекратно повышали давление до 80 фунтов/кв.дюйм газообразным монооксидом углерода. Реакционную смесь нагревали до 50°С, и устанавливали давление на значении 80 фунтов/кв.дюйм. Реакционную смесь перемешивали при этих значениях температуры и давления в течение 12 ч. Реакционный сосуд охлаждали, и атмосферу монооксида углерода заменяли аргоном. Метанол удаляли и замещали EtOAc, сохраняя приблизительно 5 объемов во время замены растворителей. Для этого добавляли EtOAc, и органические слои промывали водой, а затем рассолом. Органический слой сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали. Неочищенный материал очищали хроматографией на силикагеле (градиент от 30% гептана до 100% EtOAc) с получением целевого соединения.
Стадия 5
Смешивали метил-6-(3-хлор-4-пропоксифенил)пиримидин-4-карбоксилат и изопропиловый спирт и нагревали до 50-55°С. Добавляли водный гидроксид натрия (2 М, 1,1 экв.) и перемешивали реакционную смесь в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до 20-25°С и выдерживали при этой температуре в течение 12-18 ч. Осадок отфильтровывали, отфильтрованный осадок дважды промывали изопропиловым спиртом и сушили с получением целевого соединения.
Следующее соединение получали, по существу, как описано выше.
Пример 28
Обобщенная процедура контроля гидроксилирования L-кинуренина (KYN) с образованием продукта 3-гидроксикинуренина (3OH-KYN) с помощью ЖХ/МС описана ниже. Количество продукта определяют в ходе мониторинга множественных реакций (ММР), используя МС.
Считывающее устройство: ЖХ/МС/МС
Основные реагенты
Протокол анализа
готовят последовательно разбавленные (делитель 3) растворы соединения в 100% ДМСО (верхняя концентрация = 6,67 мМ, 100% ДМСО) [8 точек: 6,67 мМ; 2,22 мМ; 0,74 мМ; 0,247 мМ; 0,082 мМ; 0,027 мМ; 0,009 мМ; 0,003 мМ]
готовят 300-кратный раствор каждой концентрации соединения (верхняя концентрация 22,22 мкМ, 0,3% ДМСО) в среде OptiMem [22,2 мкМ; 7,41 мкМ; 2,47 мкМ; 0,82 мкМ; 0,27 мкМ; 0,09 мкМ; 0,03 мкМ;
0,01 мкМ]
готовят субстрат (10 мМ) в концентрации 1,1 мМ в среде среду клеточного планшета отсасывают
клетки промывают OptiMem (100 мкл/лунка) и отсасывают снова аналитическая смесь: 90 мкл OptiMem/лунка + 90 мкл соединения/лунка каждой концентрации
[конечная верхняя концентрация соединения: 10 мкМ; 0,15% ДМСО] [конечная нижняя концентрация соединения: 0,004 мкМ; 0,15% ДМСО] предварительная инкубация: 30 мин при 37°С
добавляют 20 мкл/лунка 1,1 мМ раствор субстрата (конечная аналитическая концентрация: 100 мкМ)
положительный контроль: 200 мкл OptiMem
отрицательный контроль: 180 мкл OptiMem + 20 мкл 1,1 мМ субстрата инкубируют ~ 24 ч при 37°С
переносят по 100 мкл из каждой лунки в прозрачный 96-луночный планшет (Corning) добавляют 100 мкл/лунка 10% трихлоруксусной кислоты (ТХК) в воде центрифугируют планшет в течение 3 мин при 4000 об/мин
детектируют продукт с помощью ЖХ/МС (вводимый объем 50 мкл/лунка; 2,5-кратное переполнение 20 мкл пробоотборной петли)
Анализ данных: ИК50 вычисляют, используя автоматический алгоритм аппроксимации (А+ анализ). Пример 29
Способ контроля гидроксилирования L-кинуренина (KYN) с образованием продукта 3-гидрокси-кинуренина (3OH-KYN) с помощью ЖХ/МС описан ниже. Количество продукта определяют в ходе мониторинга множественных реакций.
Основные реагенты
Соединение:
Фермент:
Субстрат:
Исходные концентрации: 10 мМ в 100% ДМСО фермент КМО, полученный от Evotec посредством выделения митохондрий из клеток CHO-GST HIS КМО L-кинуренин (Sigma: кат. № К3750) [исходная концентрация: 10 мМ в 100 мМ буфере фосфата калия, рН 7,4]
Аналитический объем: Структура планшета: Представление данных:
100 мМ фосфат калия, рН 7,4, 200 мкМ НАДФН, 0,4 Ед/мл G6P-DH (глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназа), 3 мМ G6P (D-глюкозо-б-фосфат) 40 мкл
384-ех луночный планшет, прозрачный (Matrix) определение количества продукта (ЗОН-KYN) при использовании специфического к продукту ММР
Считывающее устройство
ЖХ/МС/МС
Протокол анализа:
готовят последовательно разбавленные (делитель 3) растворы соединения в 100% ДМСО (верхняя концентрация = 10 мМ, 100% ДМСО) [8 точек: 10 мМ; 3,33 мМ; 1,11 мМ; 0,37 мМ; 0,12 мМ; 0,04 мМ; 0,0137 мМ; 0,0045 мМ, 0,0015 мМ]
готовят 3,33-кратный раствор каждой концентрации соединения (верхняя концентрация 300 мкМ, 3% ДМСО) в аналитическом буфере [концентрации: 300 мкМ; 100 мкМ; 33,3 мкМ; 11,1 мкМ; 3,70 мкМ; 1,23 мкМ; 0,41 мкМ; 0,137 мкМ]
готовят субстрат (10 мМ) в концентрации 1 мМ в аналитическом буфере
аналитическая смесь: 4 мкл соединения/лунка каждой концентрации + 24 мкл аналитического буфера/лунка + 8 мкл КМО фермента человека + 4 мкл 1 мМ субстрата (конечная концентрация = 100мкМ) [конечная верхняя концентрация соединения: 30 мкМ; 0,3% ДМСО] [конечная нижняя концентрация соединения: 0,0137 мкМ; 0,3% ДМСО]
положительный контроль: 4 мкл 50 мкМ FCE28833 в аналитическом буфере [0,5% ДМСО] (конеч
ная аналитическая концентрация = 5 мкМ) + 24 мкл аналитического буфера/лунка + 8 мкл КМО фермента человека + 4 мкл 1 мМ субстрата (конечная концентрация = 100 мкМ)
отрицательный контроль: 28 мкл аналитического буфера/лунка + 8 мкл КМО фермента человека + 4 мкл 1 мМ субстрата (конечная концентрация = 100 мкМ)
инкубируют 400 мин при к.т.
добавляют 40 мкл/лунка 10% трихлоруксусной кислоты в воде для завершения анализа и осаждения белка
центрифугируют планшет в течение 3 мин при 4000 об/мин
детектируют продукт с помощью ЖХ/МС (вводимый объем 50 мкл/лунка; 2,5-кратное переполнение 20 мкл пробоотборной петли)
Анализ данных: ИК50 вычисляют, используя автоматический алгоритм аппроксимации (А+ анализ). Пример 30
Описан способ контроля гидроксилирования L-кинуренина (KYN) с образованием 3-гидрокси-кинуренина (3OH-KYN) с помощью ЖХ/МС. Количество продукта определяют в ходе мониторинга множественных реакций (способ ММР).
Основные реагенты
Условия анализа Буфер:
Аналитический объем:
Соединение:
384-ех луночный планшет, прозрачный (Matrix) определение количества продукта (ЗОН-KYN) при
использовании специфического к продукту ММР
Считывающее устройство ЖХ/МС/МС Протокол анализа
готовят последовательно разбавленные (делитель 3) растворы соединения в 100% ДМСО (верхняя концентрация = 10 мМ, 100% ДМСО) [8 точек: 10 мМ; 3,33 мМ; 1,11 мМ; 0,37 мМ; 0,12 мМ; 0,04 мМ; 0,0137 мМ; 0,0045 мМ, 0,0015 мМ]
готовят 3,33-кратный раствор каждой концентрации соединения (верхняя концентрация 300 мкМ, 3% ДМСО) в аналитическом буфере [концентрации: 300 мкМ; 100 мкМ; 33,3 мкМ; 11,1 мкМ; 3,70 мкМ; 1,23 мкМ; 0,41 мкМ; 0,137 мкМ]
готовят субстрат (10 мМ) в концентрации 1 мМ в аналитическом буфере
аналитическая смесь: 4 мкл соединения/лунка каждой концентрации + 24 мкл аналитического буфера/лунка + 8 мкл КМО фермента мыши + 4 мкл 1 мМ субстрата (конечная концентрация = 100 мкМ) [конечная верхняя концентрация соединения: 30 мкМ; 0,3% ДМСО] [конечная нижняя концентрация соединения: 0,0137 мкМ; 0,3% ДМСО]
положительный контроль: 4 мкл 50 мкМ FCE28833 в аналитическом буфере, 0,5% ДМСО [конечная аналитическая концентрация = 5 мкМ] + 24 мкл аналитического буфера/лунка + 8 мкл КМО фермента мыши + 4 мкл 1 мМ субстрата [конечная концентрация =100 мкМ]
отрицательный контроль: 28 мкл аналитического буфера/лунка + 8 мкл КМО фермента мыши + 4 мкл 1 мМ субстрата [конечная концентрация = 100 мкМ]
инкубируют 40 мин при к.т.
добавляют 40 мкл/лунка 10% трихлоруксусной кислоты в воде для завершения анализа и осаждения белка
центрифугируют планшет в течение 3 мин при 4000 об/мин
детектируют продукт с помощью ЖХ/МС (вводимый объем 20 мкл/лунка; 2-кратное переполнение 10 мкл пробоотборной петли)
Анализ данных: ИК50 вычисляют, используя автоматический алгоритм аппроксимации (А+ анализ). Пример 31
Используя процедуры, подобные тем, что в данном описании описаны, соединение исследовали на активность.
Пример 32 Общие методики
Способ А. Амидное связывание. К раствору карбоновой кислоты (1 экв.) в ДМФА добавляли EDC.HCl (1 экв.) и HOBt (1 до 1,2 экв.) или HATU (1 до 1,2 экв.). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 мин, после чего добавляли соответствующий амин (1 экв.). Реакцию контролировали с помощью ЖХМС до завершения, после чего реакционную смесь выливали в воду. Полученный в результате осадок фильтровали, промывали водой (х 2), гептаном (х 2) и сушили в вакууме, что давало заданное соединение. Если осадок не образовывался, то реакционную смесь экстрагировали EtOAc (х 3) и объединенные органические слои промывали водой (х 2), насыщенным водным NaCl (х 2), сушили (Na2SO4 или MgSO4) и растворитель удаляли в вакууме, что давало неочищенный продукт. Очистку проводили с помощью флэш колоночной хроматографии, преп. ВЭЖХ или в ходе сочетания обоих методов.
Способ В. Амидное связывание. К раствору карбоновой кислоты (1 экв.) в ДХМ (20 об) в азоте добавляли оксалилхлорид (3 экв.) и 1 каплю ДМФА (кат.). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 мин, после чего растворители удаляли в вакууме. Добавляли ДХМ (20 об) или ТГФ (20 об), затем требуемый амин (1 до 3 экв.) и триэтиламин (2 экв.) или ДИПЭА (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды. Реакцию контролировали с помощью ЖХМС до завершения, после чего добавляли воду. Затем реакционную смесь экстрагировали ДХМ и органический слой промывали водой, насыщенным водным NaCl, сушили над Na2SO4 или MgSO4 и растворитель удаляли в вакууме, что давало неочищенный продукт. Очистку выполняли с помощью флэш колоночной хроматографии, преп. ВЭЖХ, сочетанием обоих методов или в ходе растирания с соответствующим растворителем.
Способ С. Амидное связывание. К раствору карбоновой кислоты (1 экв.) в ДМФА добавляли EDC.HCl (1 экв.) и HOBt (1 экв.). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 мин, после чего добавляли соответствующий амин. Реакцию контролировали с помощью ЖХМС. После завершения реакционную смесь выливали в воду, после чего осадок выпадал из раствора, и его фильтровали, промывали водой, гептаном и сушили в вакууме, что давало заданное соединение, или, если осадок не образовывался, реакционную смесь экстрагировали EtOAc (3 X) и объединенные органические слои промывали водой, насыщенным водным NaCl, сушили (Na2SO4 или MgSO4) и растворитель удаляли в вакууме, что давало неочищенный продукт. Очистку проводили с помощью флэш колоночной хроматографии, преп. ВЭЖХ или в ходе сочетания обоих методов.
Способ D. Амидное связывание. К раствору карбоновой кислоты (1 экв.) в ДХМ (20 об) в азоте добавляли оксалилхлорид (3 экв.) и ДМФА (кат). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 30 мин, после чего растворители удаляли в вакууме. Добавляли ДХМ (20 об.) или ТГФ (20 об.), затем требуемый амин (1 до 3 экв.) и триэтиламин (2 экв.) и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды. Реакцию контролировали с помощью ЖХМС до завершения, после чего добавляли воду. Затем реакционную смесь экстрагировали ДХМ и органический слой промывали водой, насыщенным водным NaCl, сушили над Na2SO4 или MgSO4 и растворитель удаляли в вакууме, что давало неочищенный продукт. Очистку выполняли с помощью флэш колоночной хроматографии, преп. ВЭЖХ, сочетанием обоих методов или в ходе растирания с соответствующим растворителем.
Хотя некоторые воплощения показаны и описаны, различные модификации и замещения могут быть сделаны, не отклоняясь от сущности и объема изобретения. Например, в целях составления пунктов формулы изобретения, не предполагается, что приведенные ниже пункты формулы изобретения будут истолкованы любым образом уже, чем их буквальное выражение, и таким образом не предполагается, что примерные воплощения из описания надо читать в пунктах формулы изобретения. Соответственно следует понимать, что настоящее изобретение описано посредством иллюстраций и отсутствуют ограничения объема пунктов формулы изобретения.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Фармацевтическая композиция для ингибирования активности кинуренин-3-монооксигеназы, отличающаяся тем, что содержит соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
3. Применение соединения по п.1 для лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью кинуренин-3-монооксигеназы, у субъекта, нуждающегося в лечении.
4. Применение по п.3, где состояние или расстройство представляет собой болезнь Хантингтона.
5. Применение фармацевтической композиции по п.2 для лечения состояния или расстройства, опосредованного активностью кинуренин-3-монооксигеназы, у субъекта, нуждающегося в лечении.
6. Применение по п.5, где состояние или расстройство представляет собой болезнь Хантингтона.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
027451
- 1 -
(19)
027451
- 1 -
(19)
027451
- 4 -
(19)
027451
- 15 -
027451
- 15 -
|
