EA 027444B1 20170731

	Патентная документация ЕАПВ
Запрос:	ea000027444b*\id
Результат:	ID\|Номер и дата охранного документа

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

1. Фосфатное соединение формулы (I) в которой X и Y представляют собой атом углерода или атом азота, при этом они не могут одновременно представлять собой два атома углерода или два атома азота, A ₁ и А ₂ вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют необязательно замещенный ароматический или неароматический гетероцикл Het, состоящий из 6 кольцевых членов, или A ₁ и А ₂ независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )полигалогеналкильную или линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу, Т представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу, необязательно замещенную одним-тремя атомами галогена, группу (С ₁ -С ₄ )алкил-NR ₁ R ₂ или группу (С ₁ -С ₄ )алкил-OR ₆ , R ₁ и R ₂ независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу, или R ₁ и R ₂ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклоалкил, R ₃ представляет собой циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или гетероарильную группу, при этом один или несколько атомов углерода указанных групп или их возможных заместителей могут быть дейтерированными, R ₄ представляет собой фенильную или пиримидин-5-ильную группу, обе замещенные в пара-положении одной из следующих фосфатных групп: -ОРО(ОМ)(ОМ'), -OPO(OM)(O ^- M ₁ ⁺ ), -OPO(O ^- M ₁ ⁺ )(O ^- M ₂ ⁺ ), -ОРО(О ^- )(О ^- )М ₃ ²⁺ , -OPO(OM)(O[CH ₂ CH ₂ O] _n CH ₃ ) или -ОРО(О ^- М ₁ ⁺ )(О[СН ₂ СН ₂ О] _n CH ₃ ), где М и М' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу, линейную или разветвленную (С ₂ -С ₆ )алкенильную группу, линейную или разветвленную (С ₂ -С ₆ )алкинильную группу, циклоалкил или гетероциклоалкил, оба состоящие из 5 или 6 кольцевых членов, тогда как M ₁ ⁺ и М ₂ ⁺ независимо друг от друга представляют собой фармацевтически приемлемый однозарядный катион, а М ₃ ²⁺ представляет собой фармацевтически приемлемый двухзарядный катион, и n означает целое число от 1 до 5, где один или несколько атомов углерода фенильной и пиримидин-5-ильной группы или их возможных заместителей могут быть дейтерированными, R ₅ представляет собой водород или атом галогена, линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу или линейную или разветвленную (C ₁ -С ₆ )алкоксигруппу, R ₆ представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу, R _a , R _b , R _c и R _d , каждый независимо от других, представляет собой R ₇ , атом галогена, линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкоксигруппу, гидроксигруппу, NR ₇ R ₇ '-CO-(C ₀ -C ₆ )алкил-O-, или заместители пары (R _b ,R _c ) вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из кислорода и серы, при этом один или несколько атомов углерода кольца, определенного выше, могут быть дейтерированными или замещенными 1-3 группами, выбранными из галогена и линейного или разветвленного (С ₁ -С ₆ )алкила, R ₇ и R ₇ ' независимо друг от друга представляют собой водород, линейный или разветвленный (С ₁ -С ₆ )алкил, или R ₇ и R ₇ ' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероцикл, состоящий из 5-7 кольцевых членов, где "арил" означает фенильную, нафтильную, бифенильную или инденильную группу, "гетероарил" означает любую моно- или бициклическую группу, состоящую из 5-10 кольцевых членов, имеющую по меньшей мере один ароматический фрагмент и содержащую от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы и азота (включая четвертичные атомы азота), "циклоалкил" означает любую моно- или бициклическую, неароматическую, карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 10 кольцевых членов, "гетероциклоалкил" означает любую моно- или бициклическую, неароматическую, конденсированную или спирогруппу, состоящую из 3-10 кольцевых членов и содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы, SO, SO ₂ и азота, причем арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклоалкильные группы и группы алкил, алкенил, алкинил и алкокси могут быть замещены 1-3 группами, выбранными из линейного или разветвленного (С ₁ -С ₆ )алкила, (С ₃ -С ₆ )спиро, линейного или разветвленного (C ₁ -С ₆ )алкокси, (С ₁ -С ₆ )алкил-S-, гидрокси, оксо (или N-оксида, в соответствующих случаях), нитро, циано, -COOR', -OCOR', NR'R", линейного или разветвленного (С ₁ -С ₆ )полигалогеналкила, трифторметокси, (С ₁ -С ₆ )алкилсульфонила, галогена, арила, гетероарила, арилокси, арилтио, циклоалкила, гетероциклоалкила, необязательно замещенного одним или несколькими атомами галогена или алкильными группами, где R' и R" независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу, причем Het группа, определенная в формуле (I), может быть замещена 1-3 группами, выбранными из линейного или разветвленного (С ₁ -С ₆ )алкила, гидрокси, линейного или разветвленного (С ₁ -С ₆ )алкокси, NR ₁ 'R ₁ " и галогена, где R ₁ ' и R ₁ " принимают значения, определенные для групп R' и R", упомянутых выше, его энантиомеры и диастереоизомеры и его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.

2. Соединение формулы (I) по п.1, в которой R ₄ представляет собой фенил, замещенный в пара-положении группой формулы -ОРО(ОМ)(ОМ'), -OPO(OM)(O ^- M ₁ ⁺ ), -OPO(O ^- M ₁ ⁺ )(O ^- M ₂ ⁺ ), -ОРО(О ^- )(О ^- )М ₃ ²⁺ , -OPO(OM)(O[CH ₂ CH ₂ O] _n CH ₃ ) или -ОРО(О ^- М ₁ ⁺ )(О[СН ₂ СН ₂ О] _n CH ₃ ), где М и М' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу, линейную или разветвленную (С ₂ -С ₆ )алкенильную группу, линейную или разветвленную (С ₂ -С ₆ )алкинильную группу, циклоалкил или гетероциклоалкил, оба состоящие из 5 или 6 кольцевых членов, тогда как M ₁ ⁺ и М ₂ ⁺ независимо друг от друга представляют собой фармацевтически приемлемый однозарядный катион, а М ₃ ²⁺ представляет собой фармацевтически приемлемый двухзарядный катион, и n означает целое число от 1 до 5, где фенильная группа необязательно может быть замещена одним или несколькими атомами галогенов.

3. Соединение формулы (I) по п.1, в которой R ₄ представляет собой фенил, замещенный в пара-положении группой формулы -OPO(O ^- Na ⁺ )(O ^- Na ⁺ ).

4. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-3, в которой X представляет собой атом углерода и Y представляет собой атом азота.

5. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-3, в которой группа представляет собой 5,6,7,8-тетрагидроиндолизин, индолизин или диметилированный пиррол.

6. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-5, в которой Т представляет собой метильную, (морфолин-4-ил)метильную или 3-(морфолин-4-ил)пропильную группу.

7. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-6, в которой R _a и R _d , каждый, представляет собой атом водорода и (R _b ,R _c ) вместе с атомами углерода, несущими их, образуют 1,3-диоксолановую группу или 1,4-диоксановую группу; или R _a , R _c и R _d , каждый, представляет собой атом водорода и R _b представляет собой водород или галоген.

8. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-6, в которой R _a и R _d , каждый, представляет собой атом водорода, R _b представляет собой атом галогена и R _c представляет собой метоксигруппу.

9. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-6, в которой R _a , R _b и R _d , каждый, предпочтительно представляет собой атом водорода и R _c представляет собой группу NR ₇ R ₇ '-CO-(C ₀ -C ₆ )алкил-O-.

10. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-9, в которой R ₃ предпочтительно представляет собой группу, выбранную из фенила, 1Н-индола, 1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, пиридина, 1Н-пиразола, 1Н-пиррола и 2,3-дигидро-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, причем эти группы необязательно имеют один или несколько заместителей, выбранных из линейного или разветвленного (C ₁ -С ₆ )алкила, циано и тридейтерометила.

11. Соединение формулы (I) по п.1, выбранное из следующих: 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат, 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил] карбонил}(пиридин-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат, 4-({[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}[1-(тридейтерометил)-1Н-пиразол-4-ил]амино)фенил динатрийфосфат, 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрийфосфат, 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1-метил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрийфосфат, 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат, 4-[(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил){[5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}амино]фенил динатрийфосфат, 4-[{[5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат, их энантиомеры и диастереоизомеры и их соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.

12. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат.

13. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.

14. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-({[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}[1-(тридейтерометил)-1Н-пиразол-4-ил]амино)фенил динатрийфосфат.

15. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрийфосфат.

16. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1-метил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрийфосфат.

17. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.

18. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил){[5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил} фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}амино]фенил динатрийфосфат.

19. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.

20. Способ получения соединений формулы (I) по п.1, характеризующийся тем, что в качестве исходного вещества используют соединение формулы (II) в которой R _a , R _b , R _c и R _d принимают значения, определенные в п.1, причем соединение формулы (II) подвергают реакции Хека, в водной или органической среде, в присутствии палладиевого катализатора, основания, фосфина и соединения формулы (III) в которой А ₁ , А ₂ , X и Y принимают значения, определенные в п.1, и Alk представляет собой линейную или разветвленную (С ₁ -С ₆ )алкильную группу, с получением соединения формулы (IV) в которой А ₁ , А ₂ , X, Y, R _a , R _b , R _c и R _d принимают значения, определенные в п.1, и Alk принимает значения, определенные выше, альдегидную группу соединения формулы (IV) окисляют до карбоновой кислоты с образованием соединения формулы (V) в которой A ₁ , A ₂ , X, Y, R _a , R _b , R _c и R _d принимают значения, определенные в п.1, и Alk принимает значения, определенные выше, соединение формулы (V) затем подвергают пептидному сочетанию с соединением формулы (VI) в которой Т и R ₅ принимают значения, определенные в п.1, с получением соединения формулы (VII) в которой А ₁ , А ₂ , X, Y, R _a , R _b , R _c , R _d , T и R ₅ принимают значения, определенные в п.1, и Alk принимает значения, определенные выше, сложноэфирную группу соединения формулы (VII) гидролизуют с получением соответствующей карбоновой кислоты или карбоксилата, которые могут быть превращены в производное по кислотной группе, такое как соответствующий ацилхлорид или ангидрид, перед сочетанием с амином NHR ₃ R ₄ , где R ₃ и R ₄ имеют те же значения, что и в п.1, прежде чем подвергнуть действию пирофосфатного, фосфонатного или фосфорильного соединения в основных условиях, причем соединение, полученное таким образом, может быть необязательно гидролизовано или гидрогенолизировано с получением соединения формулы (I), соединение формулы (I) может быть очищено в соответствии с обычными методами разделения, превращено, при необходимости, в его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием и необязательно разделено на его изомеры в соответствии с обычными методами разделения, где в любое время, признанное подходящим в ходе описанного выше способа, подходящие группы (такие как гидрокси, амино) реагентов или промежуточных соединений синтеза могут быть защищены и затем лишены защиты в соответствии с требованиями синтеза.

21. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) по любому из пп.1-19 или его соль присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями.

22. Фармацевтическая композиция по п.21 для применения в качестве пролекарства проапоптотического агента.

23. Фармацевтическая композиция по п.22 для применения для лечения злокачественных новообразований, аутоиммунных заболеваний и заболеваний иммунной системы.

24. Фармацевтическая композиция по п.23 для применения для лечения рака мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, колоректального рака, рака пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, неходжкинских лимфом, меланом, злокачественных заболеваний крови, миелом, рака яичников, немелкоклеточного рака легкого, рака предстательной железы и мелкоклеточного рака легкого.

25. Применение фармацевтической композиции по п.21 для изготовления лекарственного средства для использования в качестве проапоптотического агента.

26. Применение фармацевтической композиции по п.21 для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения злокачественных новообразований, аутоиммунных заболеваний и заболеваний иммунной системы.

27. Применение по п.26 фармацевтической композиции для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения рака мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, колоректального рака, рака пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, неходжкинских лимфом, меланом, злокачественных заболеваний крови, миелом, рака яичников, немелкоклеточного рака легкого, рака предстательной железы и мелкоклеточного рака легкого.

28. Применение соединения формулы (I) по любому из пп.1-19 или его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения рака мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, колоректального рака, рака пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, неходжкинских лимфом, меланом, злокачественных заболеваний крови, миелом, рака яичников, немелкоклеточного рака легкого, рака предстательной железы и мелкоклеточного рака легкого.

29. Фармацевтическая комбинация соединения формулы (I) по любому из пп.1-19 с противоопухолевым средством, выбранным из генотоксичных средств, митотических ядов, антиметаболитов, ингибиторов протеосом, ингибиторов киназ и антител.

30. Фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию по п.29 в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями.

31. Фармацевтическая комбинация по п.29 для лечения злокачественных новообразований.

32. Применение фармацевтической комбинации по п.29 для изготовления лекарственного средства для лечения злокачественных новообразований.

33. Применение соединения формулы (I) по любому из пп.1-19 в сочетании с радиотерапией для лечения злокачественных новообразований.

Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

22. Фармацевтическая композиция по п.21 для применения в качестве пролекарства проапоптотического агента.

31. Фармацевтическая комбинация по п.29 для лечения злокачественных новообразований.

(19)
Евразийское
патентное
ведомство
027444
(13) B1
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.07.31
(21) Номер заявки 201400754
(22) Дата подачи заявки
2014.07.22
(51) Int. Cl.
C07F 9/62 (2006.01) A61K 31/661 (2006.01) A61P35/00 (2006.01)
(54)
НОВЫЕ ФОСФАТНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ИХ
(31) 1357259
(32) 2013.07.23
(33) FR
(43) 2014.12.30
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
ЛЕ ЛАБОРАТУАР СЕРВЬЕ (FR); ВЕРНАЛИС (ЭР &ДИ) ЛИМИТЕД (GB)
(72) Изобретатель:
Ле-Тиран Арно, Ле-Дигаре Тьерри, Старк Жером-Бенуа, Анлен Жан-Мишель, Гийузи Анне-Франсуа, Де-Нантёй Гийом, Женес Оливье (FR), Дейвидсон Джеймс Эдуард Пол (GB), Марри Джеймс Брук (NZ), Чэнь Ицзэнь (GB)
(74) Представитель:
Веселицкая И.А., Кузенкова Н.В., Веселицкий М.Б., Каксис Р.А., Белоусов Ю.В., Куликов А.В., Кузнецова Е.В., Соколов Р.А., Кузнецова Т.В. (RU)
(56) RU-C2-2468010 US-B2-7713994 US-B2-7902218
(57) Соединения формулы (I)
Настоящее изобретение относится к новым фосфатным соединениям, к способу их получения и к фармацевтическим композициям, содержащим их.
Соединения настоящего изобретения являются новыми и обладают чрезвычайно ценными фармакологическими и фармакокинетическими характеристиками для применения в области апоптоза и онко-
логии.
Апоптоз, или запрограммированная гибель клеток, является ключевым физиологическим процессом для эмбрионального развития и поддержания тканевого гомеостаза.
Гибель клеток по типу апоптоза вызывает морфологические изменения, такие как конденсация ядра, фрагментация ДНК, а также биохимический феномен, такой как активация каспаз, которые вызывают повреждение ключевых структурных компонентов клетки, вызывая, таким образом, ее разборку и смерть. Регуляция процесса апотоза является комплексной и задействует активацию или репрессию нескольких внутриклеточных путей передачи сигналов (Cory S. и др., Nature Review Cancer, 2002, 2, 647656).
Дерегулирование апоптоза вовлечено в определенные патологии. Повышенный апоптоз связан с нейродегенеративными заболеваниями, такими как болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера и ишемия. Наоборот, недостаточности осуществления апоптоза играют важную роль в развитии злокачественных новообразований и их резистентности к химиотерапии, при аутоиммунных заболеваниях, воспалительных заболеваниях и вирусных инфекциях. Следовательно, отсутствие апоптоза является одним из характерных фенотипических признаков злокачественного новообразования (Hanahan D. и др., Cell 2000, 100,
57-70).
Антиапоптозные белки семейства Bcl-2 связаны с многочисленными патологиями. Задействование белков семейства Bcl-2 описано для многочисленных видов злокачественных новообразований, таких как колоректальный рак, рак молочной железы, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, рак мочевого пузыря, рак яичников, рак предстательной железы, хронический лимфоидный лейкоз, фолликулярная лимфома, миелома и т.д. Сверхэкспрессия антиапоптозных белков семейства Bcl-2 связана с онкогенезом, с устойчивостью к химиотерапии и с клиническим прогнозом пациентов, страдающих злокачественным новообразованием. Таким образом, существует терапевтическая потребность в соединениях, которые ингибируют антиапоптотическую активность белков семейства Bcl-2.
Помимо того что соединения настоящего изобретения являются новыми, они обладают фармакологическими и фармакокинетическими свойствами, которые позволяют их применение при патологиях, в которые вовлечен дефект апоптоза, как, например, для лечения злокачественного новообразования, аутоиммунных заболеваний и заболеваний иммунной системы.
Более конкретно, настоящее изобретение относится к фосфатному соединению формулы (I)
в которой
X и Y представляют собой атом углерода или атом азота, при этом они не могут одновременно представлять собой два атома углерода или два атома азота,
A1 и А2, вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют необязательно замещенный, ароматический или неароматический гетероцикл Het, состоящий из 6 кольцевых членов,
или A1 и А2 независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)полигалогеналкильную или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,
Т представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, необязательно замещенную одним-тремя атомами галогена, группу (С^СОалкил-М*.^ или группу (С1-С4)алкил-(Ж <5,
R1 и R2 независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,
или R1 и R2 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклоалкил,
R3 представляет собой циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или гетероарильную группу, при этом один или несколько атомов углерода указанных групп или их возможных заместителей могут быть дейтерированными,
R4 представляет собой фенильную или пиримидин-5-ильную группу, обе замещенные в пара
положении одной из следующих фосфатных групп: -ОРО(ОМ)(ОМ'), -OPO(OM)(O-M1+), -OPO(O-M1+)(O-M2+), -OPO(O-)(O-)Ms2+, -OPO(OM)(O[CH2CH2O]nCHs) или -OPO(O-Mi+)(O[CH2CH2O]nCH3), где М и М' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, циклоалкил или гетероциклоалкил, оба состоящих из 5 или 6 кольцевых членов, тогда как M1+ и М2+ независимо друг от друга представляют собой фармацевтически приемлемый однозарядный катион, а М32+ представляет собой фармацевтически приемлемый двухзарядный катион, и n означает целое число от 1 до 5, где один или несколько атомов углерода фенильной и пири-мидин-5-ильной группы, или их возможных заместителей могут быть дейтерированными,
R5 представляет собой водород или атом галогена, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу или линейную или разветвленную (C1-С6)алкоксигруппу,
R6 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, Ra, Rb, Rc и Rd, каждый независимо от других, представляет собой R7, атом галогена, линейную или разветвленную (С1-С6)алкоксигруппу, гидроксигруппу, NR7R7'-CO-(C0-C6)алкил-O-, или заместители пары (Rb,Rc) вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из кислорода и серы, при этом один или несколько атомов углерода кольца, определенного выше, могут быть дейтерирован-ными или замещенными 1-3 группами, выбранными из галогена и линейного или разветвленного (С1-С6)алкила,
R7 и R7' независимо друг от друга представляют собой водород, линейный или разветвленный (С1-С6)алкил, или R7 и R7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероцикл, состоящий из 5-7 кольцевых членов, где
"арил" означает фенильную, нафтильную, бифенильную или инденильную группу,
"гетероарил" означает любую моно- или бициклическую группу, состоящую из 5-10 кольцевых членов, имеющую по меньшей мере один ароматический фрагмент и содержащую от 1 до 4 гетероато-мов, выбранных из кислорода, серы и азота (включая четвертичные атомы азота),
"циклоалкил" означает любую моно- или бициклическую, неароматическую, карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 10 кольцевых членов,
"гетероциклоалкил" означает любую моно- или бициклическую, неароматическую, конденсированную или спирогруппу, состоящую из 3-10 кольцевых членов и содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы, SO, SO2 и азота,
причем арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклоалкильные группы, и группы ал-кил, алкенил, алкинил и алкокси могут быть замещены 1-3 группами, выбранными из линейного или разветвленного (С1-С6)алкила, (С3-С6)спиро, линейного или разветвленного (^-С^алкокси, (С^С^алкил^-, гидрокси, оксо (или N-оксида, в соответствующих случаях), нитро, циано, -COOR', -OCOR', NR'R", линейного или разветвленного (С1-С6)полигалогеналкила, трифторметокси, (С1-С6)алкилсульфонила, галогена, арила, гетероарила, арилокси, арилтио, циклоалкила, гетероциклоалкила, необязательно замещенного одним или несколькими атомами галогена или алкильными группами, где R' и R" независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,
причем Het группа, определенная в формуле (I), может быть замещена 1-3 группами, выбранными из линейного или разветвленного (С1-С6)алкила, гидрокси, линейного или разветвленного (С1-С6)алкокси, NR1'R1" и галогена, где R1' и R1" принимают значения, определенные для групп R' и R", упомянутых выше,
к его энантиомерам и диастереоизомерам, и к его солям присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
Среди фармацевтически приемлемых кислот могут быть упомянуты, без какого-либо ограничения, соляная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, фосфоновая кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, молочная кислота, пировиноградная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, глутаровая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, малеиновая кислота, лимонная кислота, аскорбиновая кислота, щавелевая кислота, метансульфоновая кислота, камфорная кислота и т.д.
Среди фармацевтически приемлемых оснований могут быть упомянуты, без какого-либо ограничения, гидроксид натрия, гидроксид калия, триэтиламин, трет-бутиламин и т.д.
Предпочтительные соединения изобретения включают соединения формулы (I), в которой R4 представляет собой фенил, замещенный в пара-положении группой формулы -ОРО(ОМ)(ОМ'), -OPO(OM)(O-M1+), -OPO(O-M1+)(O-M2+), -OPO(O-)(O-)M32+, -ОРО(ОM)(О[СН2СН2О]nCHз), или -OPO(OM^) (O[CH2CH2O]nCH3), где М и М' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1 -С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, циклоалкил или гетероциклоалкил, оба состоящие из 5 или 6 кольцевых членов, тогда как M1+ и М2+ независимо друг от друга представляют собой фармацевтически приемлемый однозарядный катион, и М32+ представляет собой фармацевтически приемлемый двухзарядный катион и n означает целое число от 1 до 5, где фенильная группа необязательно может быть замещена одним или несколькими атомами галогенов.
представляет собой 5,6,7,8-тетрагидроиндолизин, индолизин или диметилированный пиррол;
Т предпочтительно представляет собой метильную, (морфолин-4-ил)метильную или 3-(морфолин-4-ил)пропильную группу.
В предпочтительных соединениях изобретения Ra и IRj, каждый, представляет собой атом водорода и (Rb,Rc), вместе с атомами углерода, несущими их, образуют 1,3-диоксолановую группу или 1,4-диоксановую группу; или Ra, Rc и Rd, каждый, представляет собой атом водорода и Rb представляет собой водород или галоген.
В другом варианте осуществления изобретения Ra и Rj, каждый, представляет собой атом водорода, Rb представляет собой атом галогена и Rc представляет собой метоксигруппу.
Альтернативно, Ra, Rb и Rd, каждый, предпочтительно представляет собой атом водорода и Rc представляет собой группу NR^'-CO^Co-Q^raui-O-, еще более предпочтительно Rc представляет собой 2-оксо-2-(пиперидин-1-ил)этоксигруппу.
Кроме того, R3 предпочтительно представляет собой группу, выбранную из фенила, 1Н-индола, 1Н-пирролор^-^пиридина, пиридина, 1Н-пиразола, 1Н-пиррола и 2,3-дигидро-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, причем эти группы необязательно имеют один или несколько заместителей, выбранных из линейного или разветвленного (С1-С6)алкила (более предпочтительно метила), циано и тридейтерометила.
Среди предпочтительных соединений изобретения могут быть упомянуты
- 4-[{[3-(6-{[(35)-3-{морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-
ил]карбонил} - 1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-
ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат,
- 4-[( [5-(5-хлор-2-{ [(33)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил} фенил )-1,2-диметил- 1Н-пиррол-3-ил] карбонил }(пиридин-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат,
- 4-{( [5-(5-хлор-2-{ [(38)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2( 1 Н)-ил]карбонил} фенил)-1,2-диметил-1 Н-пиррол-3-ил]карбонил} [ 1 -(тридейтерометил)-1Н-пиразол-4-ил]амино)фенил динатрийфосфат,
- 4-[([5-(5-хлор-2-{[(33)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил} фенил )-1,2-диметил- 1Н-пиррол-3-ил] карбонил} (5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрийфосфат,
- 4-[( [5-{5-хлор-2-{ [(33)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил} фенил)-1,2-диметил- 1Н-пиррол-3-ил] карбонил} (5-циано-1-метил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрийфосфат,
- 4-[([5-(5-хлор-2-{ [(33)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил} фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат,
- 4-[(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил){[5-(5-фтор-2-{[(38)-3-(морфолин-4-илметил )-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил] карбонил} фенил)- 1,2-диметил- 1Н-пиррол-3-ил]карбонил}амино]фенил динатрийфосфат,
- 4-[([5-(5-фтор-2-{[(38)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил} фенил)-1.2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат,
их энантиомеры и диастереоизомеры и их соли присоединения с фармацевтически приемлемой ки
слотой или основанием.
Фармакокинетическое исследование фосфатных соединений формулы (I) показало, что in vivo они были превращены в соединения формулы (I'), отличающиеся тем, что фосфатная группа была метаболи-зирована в гидроксигруппу. Соответственно, соединения формулы (I) ведут себя в качестве пролекарств соединений формулы (Г), имеющих следующую формулу:
в которой
X и Y представляют собой атом углерода или атом азота, при этом они не могут одновременно представлять собой два атома углерода или два атома азота,
A1 и А2, вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют необязательно замещенный, ароматический или неароматический гетероцикл Het, состоящий из 6 кольцевых членов,
или A1 и А2 независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)полигалогеналкильную или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,
Т представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, необязательно замещенную одним-тремя атомами галогена, группу (С1-С4)алкил-№1^2 или группу (С1-С4)алкил-OR6,
R1 и R2 независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,
или R1 и R2 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклоалкил,
R3 представляет собой циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или гетероарильную группу, при этом один или несколько атомов углерода указанных групп или их возможных заместителей могут быть дейтерированными,
R4 представляет собой фенильную или пиримидин-5-ильную группу, где один или несколько атомов углерода фенильной и пиримидин-5-ильной группы или их возможных заместителей могут быть дейтерированными,
R5 представляет собой водород или атом галогена, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу или линейную или разветвленную (C1-С6)алкоксигруппу,
R6 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, Ra, Rb, Rc и Rd, каждый независимо от других, представляет собой R7, атом галогена, линейную или разветвленную (С1-С6)алкоксигруппу, гидроксигруппу, NR7R7'-CO-(C0-C6)алкил-O-, или заместители пары (Rb,Rc) вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из кислорода и серы, при этом один или несколько атомов углерода кольца, определенного выше, могут быть дейтерирован-ными или замещенными 1-3 группами, выбранными из галогена и линейного или разветвленного (С1-С6)алкила,
R7 и R7' независимо друг от друга представляют собой водород, линейный или разветвленный (С1-С6)алкил, или R7 и R7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероцикл, состоящий из 5-7 кольцевых членов, где
"арил" означает фенильную, нафтильную, бифенильную или инденильную группу,
"гетероарил" означает любую моно- или бициклическую группу, состоящую из 5-10 кольцевых членов, имеющую по меньшей мере один ароматический фрагмент и содержащую от 1 до 4 гетероато-мов, выбранных из кислорода, серы и азота (включая четвертичные атомы азота),
"циклоалкил" означает любую моно- или бициклическую, неароматическую, карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 10 кольцевых членов,
"гетероциклоалкил" означает любую моно- или бициклическую, неароматическую, конденсированную или спирогруппу, состоящую из 3-10 кольцевых членов и содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы, SO, SO2 и азота,
причем арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклоалкильные группы и группы ал-кил, алкенил, алкинил и алкокси могут быть замещены 1-3 группами, выбранными из линейного или раз
ветвленного (С1-С6)алкила, (С3-С6)спиро, линейного или разветвленного (^-С^алкокси, (С1-С6)алкил-S-, гидрокси, оксо (или N-оксида, в соответствующих случаях), нитро, циано, -COOR', -OCOR', NR'R", линейного или разветвленного (С1-С6)полигалогеналкила, трифторметокси, (С1-С6)алкилсульфонила, галогена, арила, гетероарила, арилокси, арилтио, циклоалкила, гетероциклоалкила, необязательно замещенного одним или несколькими атомами галогена или алкильными группами, где R' и R" независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, причем Het группа, определенная в формуле (I), может быть замещена 1-3 группами, выбранными из линейного или разветвленного (С1-С6)алкила, гидрокси, линейного или разветвленного (С1-С6)алкокси, NR1'R1" и галогена, где R1' и R1" принимают значения, определенные для групп R' и R", упомянутых выше,
их энантиомеров и диастереоизомеров и их солей присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
Соединения формулы (I') обладают проапоптотическими свойствами и в результате этого имеют важное терапевтическое значение для лечения злокачественных новообразований, аутоиммунных заболеваний и заболеваний иммунной системы. В настоящем изобретении показано, что путем введения фосфатных соединений формулы (I), in vivo воздействие соединений формулы (I') оптимизировалось. Фактически растворимость соединений формулы (I) является значительно большей, чем растворимость соединений формулы (I'). Следовательно, применение соединений формулы (I) для изготовления фармацевтических композиций с точки зрения галеновых препаратов особенно предпочтительно.
Изобретение относится также к способу получения соединений формулы (I), который отличается тем, что в качестве исходного вещества используют соединение формулы (II)
в которой Ra, Rb, Rc и Rd принимают значения, определенные для формулы (I'),
причем соединение формулы (II) подвергают реакции Хека, в водной или органической среде, в присутствии палладиевого катализатора, основания, фосфина и соединения формулы (III)
Alk
в которой группы A1, A2, X и Y принимают значения, определенные для формулы (I') и Alk представляет собой линейный или разветвленный (^-С^алкил, с получением соединения формулы (IV)
в которой А1, А2, X, Y, Ra, Rb, Rc и Rd принимают значения, определенные для формулы (I') и Alk принимает значения, определенные выше,
альдегидную группу соединения формулы (IV) окисляют до карбоновой кислоты с образованием соединения формулы (V)
в которой Ab A2, X, Y, Ra, Rb, Rc и R принимают значения, определенные для формулы (I') и Alk принимает значения, определенные выше,
Alk \
в которой Аь А2, X, Y, Ra, Rb, Rc, Rj, T и R5 принимают значения, определенные для формулы (I') и Alk принимает значения, определенные выше,
сложноэфирную группу соединения формулы (VII) гидролизуют с получением соответствующей карбоновой кислоты или карбоксилата, которые могут быть превращены в производное по кислотной группе, такое как соответствующий ацилхлорид или ангидрид, перед сочетанием с амином NHR3R4, где R3 и R4 имеют те же значения, что и для формулы (I'), прежде чем подвергнуть действию пирофосфатно-го, фосфонатного или фосфорильного соединения в основных условиях, причем соединение, полученное таким образом, может быть необязательно гидролизовано или гидрогенолизировано с получением соединения формулы (I),
соединение формулы (I) может быть очищено в соответствии с обычными методами разделения, превращено, при необходимости, в его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием и необязательно разделено на его изомеры в соответствии с обычными методами разделения,
где в любое время, признанное подходящим в ходе описанного выше способа, подходящие группы (такие как гидрокси, амино) реагентов или промежуточных соединений синтеза могут быть защищены и затем лишены защиты в соответствии с требованиями синтеза.
Соединения формул (II), (III), (VI) и амин NHR3R4 либо доступны для приобретения, либо могут быть получены специалистом в данной области техники с использованием обычных химических реакций, описанных в литературе.
Более конкретно, фосфатные соединения формулы (I) в соответствии с изобретением будут полезны для лечения хемо- или радиорезистентных злокачественных новообразований, а также при злокачественных заболеваниях крови и мелкоклеточном раке легкого.
Среди намеченных для лечения злокачественных заболеваний могут быть упомянуты, без какого
либо ограничения, рак мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронические лим-фоидные лейкозы, колоректальный рак, рак пищевода и печени, лимфобластные лейкозы, неходжкин-ские лимфомы, меланомы, злокачественные заболевания крови, миелы, рак яичников, немелкоклеточный рак легкого, рак предстательной железы и мелкоклеточный рак легкого. Среди неходжкинских лимфом более предпочтительно могут быть упомянуты фолликулярные лимфомы, лимфомы из клеток мантийной зоны, диффузные В-крупноклеточные лимфомы, мелкоклеточные лимфоцитарные лимфомы и В-клеточные лимфомы из клеток маргинальной зоны.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим по меньшей мере одно соединение формулы (I) в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями.
Среди фармацевтических композиций в соответствии с изобретением могут быть упомянуты особенно те, которые подходят для перорального, парентерального, назального, чрес- или транскожного, ректального, перлингвального, офтальмологического или респираторного введения, главным образом таблетки или драже, сублингвальные таблетки, саше, пакеты, капсулы, глоссеты, лепешки, суппозитории, кремы, мази, кожные гели, и питьевые или инъекционные ампулы.
Дозировка варьируется в зависимости от пола, возраста и веса пациента, пути введения, природы терапевтического показания или каких-либо связанных лечений и находится в диапазоне от 0.01 мг до 1 г в 24 ч за одно или несколько введений.
Кроме того, настоящее изобретение также относится к ассоциации соединения формулы (I) с противоопухолевым средством, выбранным из генотоксичных средств, митотических ядов, антиметаболитов, ингибиторов протеосом, ингибиторов киназ и антител, а также к фармацевтическим композициям, содержащим такой тип ассоциации, и к их применению для изготовления лекарственных средств для применения для лечения злокачественного новообразования.
Соединения настоящего изобретения также могут использоваться в ассоциации с радиотерапией для лечения злокачественного новообразования.
Следующие методики получения и примеры иллюстрируют изобретение, не ограничивая его каким-либо образом.
Методика получения 1. 6-[1-(Метоксикарбонил)-5,6,7,8-тетрагидро-3-индолизинил]-1,3-бензо-диоксол-5-карбоновая кислота.
Стадия A. 1-Формил-2-пиперидинкарбоновая кислота.
К раствору 40 г рацемической смеси 2-пиперидинкарбоновой кислоты (0.310 ммоль) в 300 мл муравьиной кислоты, помещенному на баню с температурой 0°С, по каплям добавляют 200 мл (2.15 ммоль) уксусного ангидрида. Загрузочную порцию затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение ночи. Затем реакционную смесь охлаждают до 0°С, гидролизуют путем добавления 250 мл воды и перемешивают в течение получаса при 0°С перед выполнением концентрирования досуха. Полученное таким образом масло переносят в 200 мл метанола и затем концентрируют досуха. Указанный в заголовке продукт получают в виде масла с выходом 98%. Его используют непосредственно без очистки иным способом на следующей стадии.
1H ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСО-с16; 300 К): 13.0 (m, 1H ОН); 8.0-8.05 (2s, 1H альдегид); 4.9-4.5 (2d, 1Н а к N и СООН); 4.1-2.6 (m, 2Н а к N); 2.2-1.2 (m, 6Н пиперидин).
ИК: v: -ОН: 2000-3000 см-1 кислота; v: > C=O 1703 см-1 широкая полоса.
Стадия В. Метил 5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизинкарбоксилат.
К раствору 10 г карбоновой кислоты, полученной на стадии А (63.6 ммоль), в 65 мл дихлорэтана последовательно добавляют 13.4 г тозилхлорида (70.4 ммоль), 11.5 мл метил 2-хлоракрилата (113.5 ммоль) и затем по каплям 17.8 мл N,N,N-триэтиламина (127.2 ммоль). Реакционную смесь затем нагревают с обратным холодильником в течение 1 ч 30 мин. Ее затем доводят до температуры окружающей среды и затем добавляют 5 мл метил 2-хлоракрилата (48.9 ммоль) и по каплям 9 мл N,N,N-триэтиламина (64 ммоль). Загрузочную порцию нагревают с обратным холодильником в течение ночи.
Реакционную смесь затем разбавляют метиленхлоридом, последовательно промывают 1М раствором HCl, насыщенным водным раствором NaHCO3 и затем соляным раствором до тех пор, пока не достигают нейтрального значения рН. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют, концентрируют досуха и очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент гептан/AcOEt). Указанный в заголовке продукт получают в виде масла.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; CDCl3; 300 К): 6.55-6.40 (d, 2H тетрагидроиндолизин); 3.91 (t, 3Н сложный метиловый эфир); 3.78 (s, 3Н тетрагидроиндолизин); 3.08 (t, 2H тетрагидроиндолизин); 1.95-1.85 (m, 4H тетрагидроиндолизин).
ИК: v: > C=O 1692 см-1 сложный эфир.
Стадия С. Метил 3-(6-формил-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизинкарбоксилат.
К раствору 6.4 г сложного эфира, полученного на стадии В (35.7 ммоль), в 12 мл N,N-диметилацетамида последовательно добавляют 12.3 г 6-бром-1,3-бензодиоксол-5-карбальдегида (53.6 ммоль) и 7 г ацетата калия (71.4 ммоль) и затем загрузочную порцию перемешивают под аргоном в тече
ние 20 мин. К ней затем добавляют 1.3 г палладиевого катализатора дихлорбис(трифенил-фосфин)палладия(П) (PdCl2(PPh3)2) (1.8 ммоль). Реакционную смесь затем нагревают при 130°С в течение 1 ч перед добавлением к ней 139 мкл Н2О. Нагревание продолжают, поддерживая такую же температуру в течение ночи. Температуре смеси позволяют вернуться к температуре окружающей среды и ее затем разбавляют с помощью AcOEt. Добавляют животный уголь (25 г на 1 г продукта) и загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1 ч и затем фильтруют. Затем органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют досуха. Полученный таким образом сырой продукт очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент гептан/AcOEt). Указанный в заголовке продукт получают в виде масла.
1H ЯМР: 5: (400 МГц; ДМСО-dfe 353 К): 9.65 (s, 1H, Н альдегид); 7.3-7.15 (2s, 2H, ароматические Н); 6.45 (s, 1H тетрагидроиндолизин); 6.20 (s, 2H метилендиокси); 3.70 (s, 3H сложный метиловый эфир); 3.54.0 (m, 2H тетрагидроиндолизин); 3.05 (m, 2H тетрагидроиндолизин); 1.85 (m, 4H тетрагидроиндолизин).
ИК: v: > C=O 1695 см-1 сложный эфир; v: > C=O 1674 см-1.
Стадия D. 6-[1-(Метоксикарбонил)-5,6,7,8-тетрагидро-3-индолизинил]-1,3-бензодиоксол-5-карбо-новая кислота.
Получают раствор, содержащий 3.37 г соединения, полученного на стадии С (10.3 ммоль), в 9.3 мл ацетона и 8.8 мл (80.24 ммоль) 2-метил-2-бутена, и помещают его на баню с температурой 0°С. К нему по каплям добавляют 9.3 мл водного раствора, содержащего смесь 3.3 г хлорита натрия (NaClO2) (36.05 ммоль) и 3.6 г моногидрата дигидрофосфата натрия (NaH2PO4) (25.75 ммоль). Загрузочную порцию затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение 7 ч. Реакционную смесь затем концентрируют для удаления ацетона. Полученное твердое вещество затем отфильтровывают, промывают водой и затем сушат при 40°С в вакууме в течение ночи. Указанный в заголовке продукт получают в виде твердого вещества, которое впоследствии используют без очистки иным способом.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОЧ16; 300 К): 12.10 (m, 1H, Н карбоновая кислота); 7.40-6.88 (2s, 2H, ароматические Н); 6.20 (s, 1H, Н тетрагидроиндолизин); 6.18 (s, 2H, Н метилендиокси); 3.70 (s, 3H сложный метиловый эфир); 3.55 (t, 2H тетрагидроиндолизин); 3.00 (t, 2H тетрагидроиндолизин); 1.80 (m, 4H, Н тетрагидроиндолизин).
ИК: v: -ОН: 3000-2000 см-1 кислота; v: > C=O 1686-1676 см-1 сложный эфир+кислота; v: > C=C < 1608
см-1.
Методика получения 2. 2-[1-(Метоксикарбонил)-5,6,7,8-тетрагидро-3-индолизинил]бензойная кислота.
Методика соответствует протоколу, описанному в методике получения 1, с заменой 6-бром-1,3-бензодиоксол-5-карбальдегида, используемого на стадии С, на 2-бромбензальдегид.
Методика получения 3. 6-[1-(Метоксикарбонил)-3-индолизинил]-1,3-бензодиоксол-5-карбоновая кислота.
Стадия А. Бромид 1-(карбоксиметил)-1,2-дигидропиридиния.
К раствору 16.2 мл пиридина (200 ммоль) в 120 мл этилацетата порциями добавляют 27.8 г (200 ммоль) бромуксусной кислоты. Загрузочную порцию затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение ночи. Полученный таким образом осадок отфильтровывают и затем промывают холодным этилацетатом. После сушки указанный в заголовке продукт получают в виде порошка, который непосредственно используют на следующей стадии.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОч16; 300 К): 9.15 (d, 2H, ароматические Н, пиридин); 8.7 (t, 1H, ароматический Н); 8.25 (t, 2H, ароматический Н); 5.65 (s, 2Н, Н СН2СООН).
ИК: v: C=O: 1732 см-1; -ОН кислота: 2800 см-1.
Стадия В. Метил 1-индолизинкарбоксилат.
К суспензии 6.55 г соли пиридиния, полученной на стадии А (30 ммоль), в 240 мл толуола последовательно добавляют 16.7 мл метилакрилата (150 ммоль), 4.2 мл триэтиламина (30 ммоль) и затем порциями 20.9 г MnO2 (240 ммоль).
Загрузочную порцию затем нагревают при 90°С в течение 3 ч. После охлаждения реакционную смесь фильтруют через слой целита и концентрируют досуха. Указанный в заголовке продукт затем выделяют путем очистки на силикагеле (градиент гептан/AcOEt: 0-10%) в виде масла, которое кристаллизуется в холодном состоянии.
1Н ЯМР: 5 (300 МГц; ДМСОЧ16; 300 К): 8.5 (d, 1H, Н индолизин); 8.05 (d, 1Н, Н индолизин); 7.6 (s, 1H, Н индолизин); 7.15 (m, 2Н, Н индолизин); 6.85 (m, 1H, Н индолизин); 4.25 (q, 2H, -С(О)СН2СН3); 1.35
(t, 3Н, -С(О)СН2СН3).
ИК: v: C=O сложный эфир: 1675 см-1; ароматический С=С фрагменты: 1634 см-1. Стадия С. 6-[1-(Метоксикарбонил)-3-индолизинил]-1,3-бензодиоксол-5-карбоновая кислота. Методика соответствует протоколу, описанному на стадиях С и D методики получения 1. Методика получения 4. 4-Хлор-2-[4-(этоксикарбонил)-1,5-диметил-1H-пиррол-2-ил]бензойная кислота.
Стадия А. Этил 1,2-диметил-1Н-пиррол-3-карбоксилат.
К раствору 10 г этил 2-метил-Ш-пиррол-3-карбоксилата (65.3 ммоль) и 8.95 мл (130.6 ммоль) ме-тилйодида в 70 мл диметилформамида, помещенному на баню с температурой 0°С, тремя порциями добавляют 2.61 г (65.3 ммоль) 60%-го гидрида натрия. Загрузочную порцию затем перемешивают при 0°С в течение 1 ч. Затем реакционную смесь гидролизуют путем добавления 420 мл ледяной воды. Реакционную смесь затем разбавляют этилацетатом, последовательно промывают 0.1М раствором HCl, насыщенным водным раствором LiCl и затем соляным раствором. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют, концентрируют досуха и очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент пет-ролейный эфир/AcOEt).
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСО-dfe 300 К): 6.65 (d, 1H пиррол); 6.3 (1d, 1H пиррол); 4.1 (1q, 2Н, ОСН2СН3); 3.5 (s, 3H N-пиррол); 2.4 (s, 3H пиррол); 1.5 (1t, 3Н ОСН2СН3). ИК: v: > СЮ: 1688 см-1; v: C-O-C: 1172 см-1.
Стадия В. Этил 5-(5-хлор-2-формилфенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-карбоксилат.
К раствору 10.5 г соединения, полученного на стадии А (62.8 ммоль), в 65 мл N,N-диметилацетамида последовательно добавляют 15.2 г 2-бром-4-хлорбензальдегида (69 ммоль), 12.3 г ацетата калия (125.6 ммоль) и затем загрузочную порцию перемешивают под аргоном в течение 20 мин. К ней затем добавляют 2.2 г палладиевого катализатора PdCl2(PPh3)2 (3.14 ммоль). Реакционную смесь затем нагревают при 130°С в течение ночи. Температуре смеси позволяют вернуться к температуре окружающей среды и ее затем разбавляют дихлорметаном. Добавляют животный уголь (30 г) и загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1 ч и затем фильтруют. Затем органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют досуха. Полученный таким образом сырой продукт очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент петро-лейный эфир/AcOEt). Указанный в заголовке продукт получают в виде твердого вещества.
1H ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОЧ16; 300 К): 9.8 (s, 1H формил); 7.91-7.69-7.61 (d, 3Н, ароматические Н); 6.5 (s, 1H пиррол); 4.2 (q, 2H, ОСН2СН3); 3.4 (s, 3Н, СН^-пиррол); 2.55 (s, 3Н пиррол); 1.28 (t, 3Н,
ОСН2СН3).
Стадия С. 4-Хлор-2-[4-(этоксикарбонил)-1,5-диметил-1Н-пиррол-2-ил]бензойная кислота.
Получают раствор, содержащий 12.85 г соединения, полученного на стадии В (42 ммоль), и 35.7 мл (336 ммоль) 2-метил-2-бутена в смеси, содержащей 20 мл ацетона и 20 мл тетрагидрофурана. К нему по каплям добавляют 200 мл водного раствора, содержащего смесь 13.3 г хлорита натрия (NaClO2) (147 ммоль) и 14.5 г моногидрата дигидрофосфат натрия (NaH2PO4-H2O) (105 ммоль). Загрузочную порцию затем энергично перемешивают при температуре окружающей среды в течение 7 ч. Реакционную смесь затем концентрируют для удаления ацетона. Добавляют этилацетат и органическую фазу промывают водой и затем концентрируют досуха. Остаток затем переносят в минимальное количество этилового эфира. Полученное твердое вещество затем отфильтровывают, промывают эфиром и затем сушат в вакууме при 40°С в течение ночи. Указанный в заголовке продукт получают в виде твердого вещества, которое впоследствии используют без очистки иным способом.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСО-16; 300 К): 13 (m, 1H СООН); 7.85-7.6-7.41(d,dd, wd, 3Н, ароматические Н); 6.3 (s, 1H, Н пиррол); 4.15 (q, 2Н, ОСН2СН3); 3.25 (s, 3Н, СН3-N-пиррол); 2.5 (s, 3Н, СН3-пиррол); 1.25
(t, 3Н, ОСН2СН3).
ИК: v: -ОН: 3100-2500 см-1 кислота; v: > C=O: 1681 см-1 сложный эфир + кислота. Методика получения 5. 6-[4-(Этоксикарбонил)-1,5-диметил-1Н-пиррол-2-ил]-1,3-бензодиоксол-5-карбоновая кислота.
Методика соответствует методике получения 4 с заменой 2-бром-4-хлорбензальдегида, используемого на стадии В, на 6-бром-1,3-бензодиоксол-5-карбальдегид.
Методика получения 6. 4-Фтор-3-метокси-2-[4-(этоксикарбонил)-1,5-диметил-1H-пиррол-2-ил]бензойная кислота.
Методика соответствует методике получения 4 с заменой 2-бром-4-хлорбензальдегида, используемого на стадии В, на 2-бром-4-фтор-3-метоксибензальдегид.
Методика получения 7. 4-Фтор-2-[4-(этоксикарбонил)-1,5-диметил-1H-пиррол-2-ил]бензойная кислота.
Методика соответствует методике получения 4 с заменой 2-бром-4-хлорбензальдегида, используемого на стадии В, на 2-бром-4-фторбензальдегид.
Методика получения 8. 7-[4-(Метоксикарбонил)-1,5-диметил-1H-пиррол-2-ил]-2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-карбоновая кислота.
Методика соответствует методике получения 4 с заменой этил 2-метил-Ш-пиррол-3-карбоксилата на стадии А на метил 2-метил-Ш-пиррол-3-карбоксилат и 2-бром-4-хлорбензальдегида, используемого на стадии В, на 7-бром-2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-карбальдегид.
Методика получения 9. 5-Бензилокси-2-(1-метоксикарбонил-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-3-ил)бензойная кислота.
Стадия А. Метил 3-(4-бензилокси-2-формилфенил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксилат. 5-Бензилокси-2-бромбензальдегид (12.3 г, 42.2 ммоль) вводят в колбу в присутствии ацетата калия
(8.3 г; 84.2 ммоль) и 120 мл диметилацетамида. После дегазирования под аргоном добавляют дихлор-бис(трифенилфосфин)палладий(П) (1.04 г, 1.5 ммоль) и смесь дегазируют в атмосфере аргона перед осуществлением нагревания при 100°С в течение 16 ч. После возвращения к температуре окружающей среды реакционную смесь выливают в 200 мл этилацетата, фильтруют через целит и промывают водой и затем соляным раствором. Объединенные водные фазы экстрагируют этилацетатом. Органические фазы сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток очищают с помощью хроматографии на силикагеле с целью получения указанного в заголовке продукта.
Стадия В. 5-Бензилокси-2-(1-метоксикарбонил-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-3-ил)бензойная кислота.
К раствору соединения, полученного на стадии В (4.63 г, 11.89 ммоль), в 300 мл ацетона добавляют 2-метил-2-бутен (6.31 мл, 59 ммоль). Затем по каплям вливают раствор моногидрата дигидрофосфата натрия (6.56 г, 47.6 ммоль) и хлорита натрия (2.69 г, 23.8 ммоль) в 40 мл воды при поддержании температуры ниже 20°С. После перемешивания в течение 30 мин при температуре окружающей среды смесь подкисляют с помощью 2М раствора HCl и затем фазы разделяют. Водную фазу экстрагируют этилаце-татом. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия, фильтруют и упаривают досуха с обеспечением ожидаемого соединения.
Методика получения 1'. (38)-3-(4-Морфолинилметил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.
Стадия А. Бензил (38)-3-(4-морфолинилкарбонил)-3,4-дигидро-2(1Н)-изохинолинкарбоксилат.
К раствору 5 г (38)-2-[(бензилокси)карбонил]-1,2,3,4-тетрагидро-3-изохинолинкарбоновой кислоты (16 ммоль) в 160 мл дихлорметана добавляют 1.5 мл морфолина (17.6 ммоль), затем 9 мл N,N,N-триэтиламина (64 ммоль), 3.3 г 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC) (19.2 ммоль) и 2.6 г гидроксибензотриазола (HOBt) (19.2 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение ночи; затем ее выливают в водный раствор хлорида аммония и экстрагируют этилацетатом. Затем органическую фазу сушат над сульфатом магния и затем фильтруют и упаривают досуха. Полученный таким образом сырой продукт затем очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/метанол). Продукт получают в виде пены.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСО-16; 353 К): 7.30 (m, 5H бензил); 7.15 (m, 4H, ароматические Н); 5.2-5.0 (m, 3Н, 2Н бензил, 1Н дигидроизохинолин); 4.75-4.5 (2d, 2Н дигидроизохинолин); 3.55-3.3 (m, 8Н мор-фолин); 3.15-2.9 (2dd, 2H дигидроизохинолин).
ИК: v: > C=O: 1694;1650 см-1.
Стадия В. Бензил (38)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1Н)-изохинолинкарбоксилат.
К раствору 5.3 г продукта, полученного на стадии А (13.9 ммоль), в 278 мл тетрагидрофурана добавляют 14 мл комплекса боран-диметилсульфид (BH3Me2S) (27.8 ммоль) при температуре окружающей среды. Загрузочную порцию нагревают в течение 4 ч при 80°С. Температуре позволяют вернуться к температуре окружающей среды и затем добавляют 7 мл (14 ммоль) BH3Me2S. Реакционную смесь вновь нагревают при 80°С в течение 2 ч. Затем упаривают тетрагидрофуран и затем медленно добавляют метанол и затем 5.6 мл 5М соляной кислоты (27.8 ммоль). Смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение ночи и затем при 80°С в течение 1 ч. Затем к реакционной смеси, помещенной на баню с температурой 0°С, добавляют насыщенный водный раствор NaHCO3 до тех пор, пока не достигают значения рН 8, и затем осуществляют экстрагирование этилацетатом. Затем органическую фазу сушат над сульфатом магния и затем фильтруют и упаривают досуха. Указанный в заголовке продукт получают в виде масла.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОч16; 353 К): 7.43-7.30 (неразрешенный пик, 5Н бензил); 7.19 (m, 4Н, ароматические Н); 5.16 (m, 2Н, 2Н бензил); 4.79-4.29 (d, 2H дигидроизохинолин); 4.58 (m, 1Н дигидрои-зохинолин); 3.50 (m, 4Н морфолин); 3.02-2.80 (dd, 2Н дигидроизохинолин); 2.42-2.28 (неразрешенный пик, 5Н, 4Н морфолин, 1Н морфолин); 2.15 (dd, 1H морфолин).
ИК: v: > CH: 2810 см-1; v: > C=O: 1694 см-1; v: > C-O-C <: 1114 см-1; v: > Ш-Аг: 751; 697 см-1.
Стадия С. (3S)-3-(4-Морфолинилметил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.
К раствору 4.9 г соединения стадии В (13.4 ммоль) в 67 мл этанола добавляют 0.980 г дигидроксида палладия (20 мас.%) при температуре окружающей среды. Реакционную смесь помещают под давление водорода 1.2 бар при температуре окружающей среды на 4 ч. Ее затем пропускают через фильтр Whatman и палладий затем промывают несколько раз этанолом. Фильтрат упаривают досуха. Указанный в заголовке продукт получают в виде масла.
1H ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОч16; 300 К): 7.12-7.0 (неразрешенный пик, 4Н, ароматические Н); 3.92 (s, 2H тетрагидроизохинолин); 3.60 (t, 4H морфолин); 2.98 (m, 1H тетрагидроизохинолин); 2.68 (dd, 1H тет-рагидроизохинолин); 2.5-2.3 (неразрешенный пик, 8Н, 1Н тетрагидроизохинолин, 6Н морфолин, 1Н NH).
ИК: v: > NH: 3322 см-1; v: > C-O-C <: 1115 см-1; v: > CH-Ar: 742 см-1.
Методика получения 2'. Гидрохлорид (3R)-3-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина.
Стадия A. {(3S)-2-[(4-Метилфенил)сульфонил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил}метил 4-метилбензолсульфонат.
К раствору 30.2 г [(3S)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил]метанола (185 ммоль) в 750 мл дихлор
метана последовательно добавляют 91.71 г тозилхлорида (481 ммоль) и затем по каплям 122.3 мл N,N,N-триэтиламина (740 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение 20 ч. Ее затем разбавляют дихлорметаном, последовательно промывают 1М раствором HCl, насыщенным водным раствором NaHCO3 и затем соляным раствором до нейтральной среды. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют и концентрируют досуха. Полученное твердое вещество затем растворяют в минимальном объеме дихлорметана и затем до тех пор, пока не образуется осадок, добавляют циклогексан. Этот осадок затем отфильтровывают и промывают циклогексаном. После сушки, указанный в заголовке продукт получают в виде кристаллов.
1H ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСО-16; 300 К): 7.75 (d, 2H, ароматические Н, орто О-тозил); 7.6 (d, 2H, ароматические Н, орто N-тозил); 7.5 (d, 2H, ароматические Н, мета О-тозил); 7.3 (d, 2H, ароматические Н, мета N-тозил); 7.15-6.9 (m, 4H, ароматические Н, тетрагидроизохинолин); 4.4-4.15 (dd, 2H, алифатические Н, тетрагидроизохинолин); 4.25 (m, 1H, алифатический Н, тетрагидроизохинолин); 4.0-3.8 (2dd, 2H, алифатические Н, СН2-О-тозил); 2.7 (2dd, 2H, алифатические Н, тетрагидроизохинолин); 2.45 (s, 3Н, O-
SO2-Ph- СН3); 2.35 (s, 3Н, N-SO2-Ph- CH3).
ИК: v: -SO2: 1339-1165 см-1.
Стадия В. (3R)-3 -Метил-2-[(4-метилфенил)сулъфонил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.
К суспензии 8.15 г (214.8 ммоль) LiAlH4 в 800 мл метил-трет-бутилового эфира (МТВЕ) добавляют 101.2 г дитозильного соединения, полученного на стадии А (214.8 ммоль), растворенного в 200 мл МТВЕ. Загрузочную порцию затем нагревают при 50°С в течение 2 ч. Ей позволяют охладиться и помещают на баню с температурой 0°С и затем по каплям добавляют 12 мл 5М раствора NaOH. Загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 45 мин. Полученное таким образом твердое вещество затем отфильтровывают и промывают с помощью МТВЕ и затем дихлорметаном. Фильтрат затем концентрируют досуха. Указанный в заголовке продукт затем получают в виде твердого вещества.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСО-16; 300 К): 7.70 (d, 2Н, ароматические Н, орто N-тозил); 7.38 (d, 2H, ароматические Н, мета N-тозил); 7.2-7.0 (m, 4Н, ароматические Н, тетрагидроизохинолин); 4.4 (m, 2H, алифатические Н, тетрагидроизохинолин); 4.3 (m, 1H, алифатический Н, тетрагидроизохинолин); 2.852.51 (2dd, 2H, алифатические Н, тетрагидроизохинолин); 2.35 (s, 3Н, N-SO2-Ph- СН3); 0.90 (d, 3H, тетра-гидроизохинолин-СН3).
ИК: v: -SO2: 1332-1154 см-1.
Стадия С. (3R)-3-Метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.
К раствору 31.15 г (103.15 ммоль) монотозильного соединения, полученного на стадии В, в 500 мл безводного метанола порциями добавляют 3.92 г (161 ммоль) магниевых стружек. Загрузочную порцию перемешивают под воздействием ультразвука в течение 96 ч. Реакционную смесь затем фильтруют и твердое вещество промывают несколько раз метанолом. Фильтрат затем концентрируют досуха. После очистки с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/EtOH/NH4OH) указанный в заголовке продукт получают в виде масла.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОч16; 300 К): 7.05 (m, 4H, ароматические Н, тетрагидроизохинолин); 3.90 (m, 2H, алифатические Н, тетрагидроизохинолин); 2.85 (m, 1Н, алифатический Н, тетрагидроизохинолин); 2.68-2.4 (2dd, 2H, алифатические Н, тетрагидроизохинолин); 1.12 (d, 3H, тетрагидроизохинолин-СН3); 2.9-2.3 (m, широкий, 1Н, HN (тетрагидроизохинолин)).
ИК: v: -NH: 3248 см-1.
Стадия D. Гидрохлорид (3R)-3-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина.
К раствору 14.3 г (97.20 ммоль) соединения, полученного на стадии С, в 20 мл безводного этанола по каплям добавляют 100 мл 1М раствора HCl в эфире. Загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1 ч и затем фильтруют. Полученные таким образом кристаллы промывают этиловым эфиром. После сушки указанный в заголовке продукт получают в виде кристаллов.
1H ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСО-16; 300 К): 9.57 (m, широкий, 2Н, NH2+ (тетрагидроизохинолин); 7.22 (m, 4H, ароматические Н, тетрагидроизохинолин); 4.27 (s, 2H, алифатические Н, тетрагидроизохинолин); 3.52 (m, 1H, алифатический Н, тетрагидроизохинолин); 3.03-2.85 (2dd, 2H, алифатические Н, тетрагид-роизохинолин); 1.39 (d, 3H, тетрагидроизохинолин-СН3).
ИК: v: -NH2+: 3000-2300 см-1; v: ароматическая -СН: 766 см-1.
Методика получения 3'. (3R)-3-[3-(Морфолин-4-ил)пропил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин. Стадия А. {(3S)-2-[(4-Метилфенил)сульфонил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил}метил 4-метилбензолсульфонат.
Методика является такой же, что и на стадии А методики получения 2'.
Стадия В. трет-Бутил 2-({(3R)-2-[(4-метилфенил)сульфонил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил}метил)-3-(морфолин-4-ил)-3-оксопропаноат.
К суспензии 1 г NaH (60%) (25.08 ммоль) в 30 мл МТВЕ по каплям добавляют раствор 5 г трет-бутил 3-морфолино-3-оксопропаноата (21.81 ммоль) в 20 мл безводного МТВЕ. Эту суспензию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1 ч и затем добавляют соединение, полученное
на стадии А, в виде порошка. Загрузочную порцию перемешивают при 60°С в течение 30 ч. Добавляют 100 мл насыщенного водного раствора хлорида аммония. Получающийся раствор экстрагируют дихлор-метаном. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют и концентрируют досуха. После очистки с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/МеОН), ожидаемый продукт получают в виде масла.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-dfO 5 м.д.: 7.63/7.59 (2d, 2 Н), 7.3/7.26 (2d, 2 Н), 7.13 (m, 2 Н), 7.09/6.97 (2t,
2 Н), 4.64/4.55/4.36/4.28 (2АВ, 2 Н), 4.25/4.11 (2m, 1 Н), 3.81 (m, 1 Н), 3.73-3.48 (m, 4 Н), 3.57-3.32 (m, 4
Н), 2.51 (m, 2 Н), 2.32/2.31 (2s, 3 Н), 1.88/1.79 (2m, 2 Н), 1.39/1.38 (2s, 9 Н)
ИК (ATR) см-1: v: > C=O: 1731 (сложный эфир); v: > С=О: 1644 (амид); v:-SO2: 1334-1156; v: > C-O-C <: 1115; у: > СН-Ar: 815-746-709.
Стадия С. 2-({(3R-2-[(4-Метилфенил)сульфонил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил}метил)-3-(морфолин-4-ил)-3-оксопропановая кислота.
К раствору 9.5 г (17.97 ммоль) соединения, полученного на стадии В, в 40 мл диоксана по каплям добавляют 20 мл 4М раствора HCl в диоксане. Загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 48 ч и затем раствор концентрируют досуха. После сушки ожидаемый продукт получают в виде масла.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 м.д.: 12.75 (m, 1 Н), 7.6 (2*d, 2 Н), 7.3 (2*d, 2 Н), 7.1/6.95 (2*m, 4 Н), 4.7-4.2 (d, 2 Н), 4.25/4.12 (2*m, 1 Н), 3.9-3.3 (m, 9 Н), 2.55 (d, 2 Н), 2.3 (2*s, 3 Н), 1.8 (t, 2 Н).
ИК (ATR) см-1: v: -ОН: 3500-2000; v: > C=O: 1727 (кислота); v: > C=O: 1634 (амид); v: -SO2: 13301155.
Стадия D. 3-{(3R)-2-[(4-Метилфенил)сульфонил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил}-1-(морфо-лин-4-ил)пропан-1-он.
К раствору 7.80 г (16.51 ммоль) соединения, полученного на стадии С, в 100 мл ДМСО добавляют 1.16 г (19.83 ммоль) твердого хлорида натрия и затем по каплям 5 мл воды. Загрузочную порцию перемешивают при 130°С в течение 1 ч и затем раствор концентрируют до 3/4. Реакционную смесь затем разбавляют дихлорметаном и последовательно промывают насыщенным водным раствором хлорида лития и затем соляным раствором. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют и концентрируют досуха. После очистки с помощью хроматографии на силикагеле (градиент циклогексан/этилацетат) ожидаемый продукт получают в виде масла.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОч16) 5 м.д.: 7.65 (d, 2 Н), 7.3 (d, 2 Н), 7.15/7 (2m, 4 Н), 4.6 (d, 1 Н), 4.25 (d, 1Н), 4.2 (m, 1 Н), 3.5 (m, 4 Н), 3.4 (2m, 4 Н), 2.6 (2 dd, 2 Н), 2.35 (s, 3 Н), 2.3 (m, 2 Н), 1.5 (quad., 2 Н).
ИК (ATR) см-1: v: > C=O: 1639; v: -SO2: 1331-1156; у: ^СН-Ar: 815-675.
Стадия E. (3R)-2-[(4-Метилфенил)сульфонил]-3-[3-(морфолин-4-ил)пропил]-1,2,3,4-тетрагидроизо-хинолин.
К раствору 6.0 г (14.0 ммоль) соединения, полученного на стадии D, в 60 мл МТВЕ и 14 мл дихлор-метана в течение 5 мин порциями добавляют 1.06 г (28 ммоль) LAH. Загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 15 ч. К ней по каплям добавляют 1.5 мл воды и перемешивание осуществляют в течение 15 мин. Затем по каплям добавляют 1.5 мл 5М раствора гидроксида натрия и перемешивание осуществляют в течение 15 мин. Реакционную смесь затем разбавляют с помощью МТВЕ и дихлорметана. Суспензию затем фильтруют и осадок промывают с помощью МТВЕ и ди-хлорметана. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют и концентрируют досуха. После очистки с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/EtOH/NH4OH), ожидаемый продукт получают в виде масла.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 м.д.: 7.68 (d, 2 Н), 7.32 (d, 2 Н), 7.1 (неразрешенный пик, 4 Н),
4.65/4.23 (АВ, 2 Н), 4.2 (m, 1 Н), 3.55 (t, 4 Н), 2.7/2.6 (АВх, 2 Н), 2.35 (s, 3 Н), 2.25 (t, 4 Н), 2.2 (t, 2 Н), 1.4/1.3 (2m, 4 Н).
ИК (ATR) см-1: v: -SO2: 1333-1158.
Стадия F. (3R)-3-[3-(Морфолин-4-ил)проп ил]-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.
К раствору 1.50 г (3.62 ммоль) соединения, полученного на стадии Е, в 20 мл безводного метанола порциями добавляют 2.0 г (82.3 ммоль) магниевых стружек. Загрузочную порцию перемешивают под воздействием ультразвука в течение 96 ч. Реакционную смесь затем фильтруют, твердое вещество промывают несколько раз метанолом и фильтрат концентрируют досуха. После очистки с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/EtOH/NH4OH), ожидаемый продукт получают в виде масла.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОч16) 5 м.д.: 7.3 (d, 2 Н), 7.1 (t, 2 Н), 7.1 (d+t, 3 Н), 7 (d, 2 Н), 3.9 (s, 2 Н), 3.55 (t, 4 Н), 2.75 (m, 1 Н), 2.72/2.45 (dd, 2 Н), 2.35 (t, 4 Н), 2.25 (t, 2 Н), 1.6 (m, 2 Н), 1.45 (m, 2 Н).
ИК (ATR) см-1: v: > NH2+/NH+: 3500-2300; v: > C-O-C <: 1115.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+/FIA/HR).
Эмпирическая формула: C16H24N2O [М+Н]+ рассчитано: 261.1961, [М+Н]+ найдено: 261.1959.
Методика получения 4'. (3R)-3-(4-Морфолинилметил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин.
Методика соответствует методике получения 1' с заменой (3S)-2-[(бензилокси)карбонил]-1,2,3,4
тетрагидро-3-изохинолинкарбоновой кислоты, используемой на стадии А, на (3Я)-2-[(бензил-окси)карбонил]-1,2,3,4-тетрагидро-3-изохинолинкарбоновую кислоту.
Методика получения 1". 4-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}-N-фениланилин.
К раствору 12 г 4-анилинофенола (64.7 ммоль) в 200 мл ацетонитрила при температуре окружающей среды добавляют 6.7 г имидазола (97.05 ммоль) и 11.7 г трет-бутил(хлор)диметилсилана (77.64 ммоль). Загрузочную порцию перемешивают при 70°С в течение 4 ч. Реакционную смесь затем выливают в воду и экстрагируют эфиром. Затем органическую фазу сушат над сульфатом магния, затем фильтруют и упаривают досуха. Полученный таким образом сырой продукт затем очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент петролейный эфир/дихлорметан). Указанный в заголовке продукт получают в виде порошка.
1H ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОч16; 300 К): 7.84 (s, 1H NH); 7.17 (t, 2H анилин); 6.98 (d, 2H фенокси); 6.94 (d, 2H анилин); 6.76 (d, 2H фенокси); 6.72 (t, 1H анилин); 0.95 (s, 9H трет-бутил); 0.15 (s, 6H диме-тил).
ИК: v: > NH: 3403 см-1; v:> Ar: 1597 см-1.
Методика получения 2". N-(4-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}фенил)-1-метил-1H-индол-5-амин.
Методика соответствует методике получения 5" с заменой 4-бром-1-метил-1Н-пиразола, используемого на стадии В, на 5-бром-1-метил-Ш-индол.
Методика получения 3". N-(4-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}фенил)-1-метил-1H-пирроло[2,3-b] пиридин-5 -амин.
Методика соответствует методике получения 5" с заменой 4-бром-1-метил-Ш-пиразола, используемого на стадии В, на 5-бром-1-метил-Ш-пирроло[2,3-Ь]пиридин (полученный в соответствии с протоколом из литературы: Heterocycles, 60(4), 865, 2003).
ИК: v: -NH-: 3278 см-1; v: ароматические -С=С-фрагменты: 1605 см-1.
Методика получения 4''. N-{4-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}фенил)пиридин-4-амин.
Методика соответствует методике получения 5" с заменой 4-бром-1-метилШ-пиразола, используемого на стадии В, на 4-бромпиридин.
ИК: v -NH-: 3200 и 2500 см-1; v -Si-O-: 902 см-1; v -Si-C-: 820 см-1.
Методика получения 5". N-(4-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}фенил)-1-метил-1H-пиразол-4-амин.
Стадия А. 4-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}анилин.
Указанное в заголовке соединение получают исходя из 4-аминофенола в ТГФ в присутствии имида-зола и трет-бутил(хлор)диметилсилана в соответствии с протоколом, описанным в литературе (S. Knaggs и др., Organic & Biomolecular Chemistry, 3(21), 4002-4010; 2005).
1H ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОч16; 300 К): 6.45-6.55 (dd, 4H, ароматические Н); 4.60 (m, 2H, NH2-Ph); 0.90 (s, 9H, Si (СН2)2СН(СН3)2); 0.10 (s, 6H, Si (СН2)2СН(СН3)2).
ИК: v: -NH2+: 3300-3400 см-1.
Стадия В. N-[4-[трет-Бутил(диметил)силил]оксифенил] -1 -метилпиразол-4-амин.
К раствору 30.8 г (0.137 моль) соединения стадии А в 525 мл безводного толуола последовательно добавляют 29.8 г трет-бутилата натрия (0.310 моль), 4.55 г Pd2(dba)3 (также называемого трис(дибензилиденацетон)дипалладием(0)) (4.96 ммоль), 4.81 г 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-триизопропил-1,1'-бифенила (9.91 ммоль) и 12.8 мл 4-бром-1-метил-Ш-пиразола (0.124 моль). Загрузочную порцию дегазируют под аргоном в течение 30 мин и затем нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч. Ей позволяют охладиться. Реакционную смесь концентрируют досуха и затем переносят в дихлорметан, фильтруют через целит и затем вновь концентрируют досуха. Остаток затем очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент CH2Cl2/AcOEt) с обеспечением ожидаемого продукта в виде твердого вещества.
1H ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСО-16; 300 К): 7.55 (s, 1H пиразол); 7.23 (s, 1H пиразол); 7.18 (широкий s,
1H, NH2-Ph); 6.64 (m, 4H, ароматические Н); 3.77 (s, 3Н, СН3-пиразол); 0.90 (s, 9H, Si (CH2)2CH(CH3)2);
0.12 (s, 6H, Si (СН2)2СН(СН3)2).
ИК: v -NH+: 3275 см-1; v Ar и C=N: 1577 и 1502 см-1; v -Si-C-: 1236 см-1; v -Si-O-: 898 см-1; v -Si-C-:
828, 774 см-1.
Методика получения 6". N-{4-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси]фенил}-1-тридейтерометил-1H-пиразол-4-амин.
Стадия А. 4-Бром-1-тридейтерометил-1Н-пиразол.
4-Бром-Ш-пиразол (9.05 г, 61.6 ммоль) порциями добавляют к суспензии гидрида натрия (60%-го в масле) (2.83 г, 70.8 ммоль) в тетрагидрофуране (90 мл), охлажденной на ледяной бане. После удаления ледяной бани раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 0.5 ч. Его вновь охлаждают на ледяной бане и добавляют йодметанч13 (5.0 мл, 80.3 ммоль). Раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение 19 ч. Суспензию затем концентрируют. Остаток после упаривания растирают с трет-бутилметиловым эфиром (90 мл) и фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме с получением ожидаемого соединения в виде масла.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 м.д.: 7.37 (s, 1H), 7.43 (s, 1H).
Стадия В. N-{4-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси]фенил}-1-тридейтерометил-1Н-пиразол-4-амин.
4-Бром-1-тридейтерометил-Ш-пиразол (9.6 г, 58.5 ммоль), 4-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]ани-лин (14.4 г, 64.6 ммоль) и толуол (150 мл) добавляют в 500-мл трехгорлую колбу. Раствор дегазируют азотом в течение 15 мин и затем последовательно добавляют трет-бутилат натрия (11.4 г, 0.12 моль), 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил (0.77 г, 1.81 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)ди-палладий(0) (1.64 г, 1.79 ммоль). Суспензию нагревают при 85°С в течение 1.5 ч. Реакционную смесь затем охлаждают до температуры окружающей среды и добавляют воду (270 мл). Смесь перемешивают в течение 30 мин. Затем добавляют целит (30 г) и суспензию фильтруют через набивку целита. Фазы фильтрата разделяют и водную фазу экстрагируют этилацетатом (3 х 200 мл). Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и фильтруют. Продукт очищают с помощью хроматографии на сили-кагеле (градиент этилацетат/гептан). Полученный продукт перекристаллизовывают из гептана (80 мл) с получением ожидаемого соединения.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 м.д.: 0.16 (s, 6 Н), 0.97 (s, 9 Н), 4.92 (s, 1H), 6.61 - 6.73 (m, 4 Н), 7.25 (s, 1H), 7.36 ^,Ш)з
13С ЯМР (100 МГц, CDCl3) 5 м.д.: -4.37, 18.28, 25.86, 38.67 (sept., 1JC-D = 21.0 Гц), 115.12, 120.73, 123.76, 126.52, 134.74, 141.07, 148.43. МС (ESI): [М+Н]+ 307.08.
Методика получения 7". 4-({4-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси]фенил}амино)-1,5-диметил-1H-пиррол-2-карбонитрил.
Стадия А. 4-Бром-1,5-диметил-Ш-пиррол-2-карбонитрил.
Раствор брома (6.58 мл, 0.13 моль) в уксусной кислоте (60 мл) добавляют по каплям с помощью капельной воронки к раствору 1,5-диметил-Ш-пиррол-2-карбонитрила (15.0 г, 0.12 моль) в уксусной кислоте (300 мл). Загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 24 ч. Реакционную смесь затем выливают в лабораторный стакан, содержащий 300 мл воды. Образованное твердое вещество отфильтровывают и промывают водой. Его затем растворяют в дихлорметане (300 мл) и органическую фазу промывают соляным раствором, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют в вакууме с получением ожидаемого продукта в виде твердого вещества.
1Н ЯМР (CDCl3) 5 м.д.: 2.25 (s, 3 Н), 3.67 (s, 3 Н), 6.74 (s, 1H).
Стадия В. 4-({4-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси]фенил}амино)-1,5-диметил-1Н-пиррол-2-карбонитрил.
Раствор соединения вышеприведенной стадии (1.5 г, 7.53 ммоль), 4-[(трет-бутилдиметилсилил)ок-си]анилин (2.02 г, 9.04 ммоль), трет-бутилат натрия (1.45 г, 15.06 ммоль) и 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил (0.13 г, 0.30 ммоль) в толуоле (20 мл) продувают азотом. Добавляют трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0.28 г, 0.30 ммоль) и затем реакционную смесь нагревают при 90°С до тех пор, пока реакция (контролируемая с помощью ТСХ) не завершится. Нагревание прекращают и температуре смеси позволяют вернуться к температуре окружающей среды. Добавляют воду (75 мл), и смесь экстрагируют этилацетатом (3х75 мл). Объединенные органические фазы промывают соляным раствором и затем концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (градиент этилацетат/гептан). Полученный таким образом продукт растворяют в гептане в горячем состоянии и позволяют выпасть в осадок при перемешивании, при температуре окружающей среды и затем при 0°С. Твердое вещество отфильтровывают и операцию повторяют на фильтрате с получением ожидаемого соединения в виде твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 м.д.: 0.15 (s, 6 Н), 0.97 (s, 9 Н), 2.13 (s, 3 Н), 3.66 (s, 3 Н), 4.68 (br. s, 1 Н), 6.49 (d, J= 8.5 Гц, 2 Н), 6.64 (s, 1H), 6.66 (d, J= 8.7 Гц, 2 Н).
13С ЯМР (100 МГц, CDCl3) 5 м.д.: 4.34, 9.72, 18.30, 25.88, 32.94, 101.27, 114.37, 114.70, 116.41, 120.73, 124.52, 131.23, 141.54, 148.27. МС (ESI+): [М+Н]+ найдено: 342.3.
Методика получения 8". 4-[(4-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}фенил)амино]-1-метил-1H-пиррол-2-карбонитрил.
Стадия А. 1-Метил-1Н-пиррол-2-карбонитрил.
N,N-Диметилформамид (3 мл) и 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (0.49 г, 4.3 ммоль) добавляют к раствору пиррол-2-карбонитрила (4 г, 43.4 ммоль) в диметилкарбонате (56 мл). Раствор перемешивают при 90°С в течение 15 часов, и затем нагревают при 110°С в течение 8 ч. Смесь охлаждают до температуры окружающей среды и затем добавляют этилацетат (80 мл). Фазы разделяют и органическую фазу промывают водой (2х80 мл) и 1М водным раствором соляной кислоты (1 х80 мл). Объединенные водные фазы вновь экстрагируют этилацетатом (1 х 80 мл). Объединенные органические фазы промывают соляным раствором (1 х 80 мл), сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме с получением ожидаемого продукта в виде жидкости.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 м.д.: 3.78 (m, 2 Н), 6.12 - 6.18 (m, 1H), 6.74 -6.82 (m, 1H).
Стадия В. 4-Бром-1-метил-1Н-пиррол-2-карбонитрил.
N-Бромсукцинимид (6.2 г, 34.9 ммоль) добавляют к раствору 1-метил-1Н-пиррол-2-карбонитрила
(3.7 г, 34.9 ммоль) в N,N-диметилформамиде (150 мл). Раствор перемешивают в течение 15 ч при температуре окружающей среды. Добавляют иное количество N-бромсукцинимида (2.0 г, 11 ммоль) и смесь перемешивают в течение 3 ч. Продукт очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент эти-лацетат/гептан) с получением ожидаемого продукта в виде твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 м.д.: 3.77 (s, 3 Н), 6.75 (d, J = 1.7 Гц, 1H), 6.80 (d, J= 1.7 Гц, 1H).
Стадия С. 4-[(трет-Бутилдиметилсилил)окси]фенил}амино)-1-метил-1Н-пиррол-2-карбонитрил.
Через раствор 4-бром-1-метил-Ш-пиррол-2-карбонитрила (2.82 г, 15.2 ммоль) и 4-[(трет-бутилдиметилсилил)окси]анилина (4.08 г, 18.3 ммоль) в толуоле (55 мл) в течение 5 мин барботируют азот. Затем к реакционной смеси добавляют трет-бутилат натрия (2.92 г, 30.4 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (556 мг, 0.6 ммоль) и 2-ди-трет-бутилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил (255 мг, 0.6 ммоль). Смесь перемешивают в течение 1 ч при 80°С под азотом. Суспензию затем охлаждают до температуры окружающей среды и фильтруют через целит. Осадок на целите затем промывают этилацетатом. Фильтрат промывают водой и затем соляным раствором. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме. Продукт очищают дважды с помощью хроматографии на силикагеле (градиент AcOEt/гептан) и затем с помощью растирания в гептане с получением ожидаемого продукта в виде твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 м.д.: 0.16 (s, 6 Н), 0.97 (s, 9 Н), 3.73 (s, 3 Н), 6.57 (d, J= 1.9 Гц, 1 Н), 6.646.66 (m, 1 Н), 6.70 (s, 4 Н);
13С ЯМР (100 МГц, CDCl3) 5 м.д.: -4.48, 18.17, 25.72, 35.46, 103.01, 113.56, 113.69, 115.92, 119.55, 120.67, 129.04, 139.94, 148.85. МС (ESI+): [М+Н]+ 328.25.
Амины NHR3R4, где R3 и R4, каждый независимо от другого, представляет собой арильную или ге-тероарильную группу, получают в соответствии со способами, описанными в литературе (Surry D.S. и др., Chemical Science, 2011, 2, 27-50, Charles M.D. и др., Organic Letters, 2005, 7, 3965-3968). Реакция защиты гидроксильной функции 4-анилинофенола, описанная в методике получения 1", может использоваться для различных вторичных аминов NHR3R4 (как определено выше), содержащих одну или несколько гидроксильных функций, когда они являются коммерчески доступными. Альтернативно, вторичные амины, содержащие по меньшей мере один гидроксизаместитель, могут быть синтезированы непосредственно в защищенной форме, то есть исходя из реагентов, чья гидроксильная функция была защищена заранее. Среди защитных групп трет-бутил(диметил)силилокси и бензилокси являются особенно предпочтительными.
Среди аминов NHR3R4, содержащих гидроксильный заместитель, которые используют для синтеза соединений согласно изобретению, могут быть упомянуты 4-(4-толуидино)фенол, 4-(4-хлорани-лино)фенол, 4-(3-фтор-4-метиланилино)фенол, 4-[4-(трифторметокси)анилино]фенол, 4-[4-гидрокси-анилино]фенол, {4-[(1 -метил-Ш-индол-6-ил)амино]фенил}метанол, 4-(2,3-дигидро-Ш-индол-6-илами-но)фенол, 4-[(1-метил-2,3-дигидро-Ш-индол-6-ил)амино]фенол, 4-[(1-метил-Ш-индол-6-ил)амино]фе-нол, 4-[(1-метил-1Н-индол-6-ил)амино]циклогексанол, 4-[(1-метил-1,2,3,4-тетрагидро-6-хинолинил)ами-но]фенол, 4-[(4-метил-3,4-дигидро-2H-1,4-бензоксазин-7-ил)амино]фенол, 4-[4-(диэтиламино)анилино] фенол, 4-(2,3-дигидро-Ш-инден-5-илшино)фенол, 4-[(1-метил-Ш-индазол-5-ил)амино]фенол, 4-[(1'-метил-1 ',2'-дигидроспиро [циклопропан- 1,3'-индол] -5 '-ил)амино] фенол, 4-[( 1,3,3-триметил-2,3-дигидро-Ш-индол-5-ил)амино]фенол, 4-[4-метокси-3-(трифторметил)анилино]фенол, 4-[4-(метилсульфанил)-3-(трифторметил)анилино]фенол, 2-фтор-4-[(1-метил-1Н-индол-5-ил)амино]фенол, 4-[(1-этил-Ш-индол-5-ил)амино]фенол, 4-[(1-этил-2,3-дигидро-1H-индол-5-ил)амино]фенол, 4-[(1-изо1гоопил-2,3-дигидро-Ш-индол-5-ил)амино]фенол, 4-(бутиламино)фенол, 3-[(1-метил-1H-индол-5-ил)амино]-1-пропанол, 4-[(1-метил-1H-индол-5-ил)амино] -1 -бутанол, 4-[(3 -фтор-4-метилфенил)амино] фенол, 4-[(3 -хлор-4-метил-фенил)амино] фенол, 4-[(4-фторфенил)амино] фенол, 4-[(1 -метил-1H-пирроло [2,3-Ь]пиридин-5-ил)амино] фенол, 4-[(4-фторфенил)амино]фенол, 4-[(2-фторфенил)амино]фенол, 4-[(3-фторфенил)амино]фенол, 4-[(2,4-дифторфенил)амино]фенол, 4-[(3,4-дифторфенил)амино]фенол, 3-[(4-гидроксифенил)амино]бензо-нитрил, 4-[(3-метоксифенил)амино]фенол, 4-[(3,5-дифторфенил)амино]фенол, 4-[(3-метилфенил)амино] фенол, 4-[(4-гидроксифенил)амино]бензонитрил, 4-[(3-хлорфенил)амино]фенол, 4-(пиримидин-2-иламино)фенол, 4-[(циклобутилметил)амино]фенол, 2-[(4-гидроксифенил)амино]бензонитрил, 4-{[(1-метил-1H-пиразол-4-ил)метил]амино}фенол, 4-[(циклопропилметил)амино]фенол, 4-{ [(1-метил-Ш-пиразол-3-ил)метил]амино}фенол, 4-(бут-2-ин-1-иламино)фенол, 4-(пиразин-2-иламино)фенол, 4-(пири-дин-2-иламино)фенол, 4-(пиридазин-3-иламино)фенол, 4-(пиримидин-5-иламино)фенол, 4-(пиридин-3-иламино)фенол, 4-[(3,5-дифтор-4-метоксифенил)амино]фенол, 4-(пиридин-4-иламино)фенол, 4-[(3-фтор-4-метоксифенил)амино]фенол, 2-(фениламино)пиримидин-5-ол, 5-[(4-гидроксифенил)амино]-2-метоксибензонитрил и 4-{[3-(трифторметил)фенил]амино}фенол.
Гидроксильную(ые) функцию(и) вторичных аминов, перечисленных выше, защищают заранее с помощью подходящих защитных групп перед любым сочетанием с производным соединения формулы (VII) по кислотной группе, как определено в предшествующем общем способе.
Пример 1. 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(Морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Метил 3-{6-[((3S)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1Н)-изохинолинил)карбонил]-1,3-бензодиоксол-5-ил}-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизинкарбоксилат.
К раствору 2 г соединения методики получения 1 (5.83 ммоль) в 20 мл дихлорметана при температуре окружающей среды добавляют 5.5 мл N,N,N-триэтиламина (6.96 ммоль), 2.12 г соединения методики получения 1' (6.96 ммоль) и затем 0.94 г гидроксибензотриазола (НОВТ) и 1.34 г 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC) (6.96 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивают при температуре окружающей среды в течение ночи и затем ее выливают в насыщенный водный раствор хлорида аммония и экстрагируют этилацетатом. Затем органическую фазу сушат над сульфатом магния и затем фильтруют и упаривают досуха. Полученный таким образом сырой продукт затем очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент гептан/AcOEt). Указанный в заголовке продукт получают в виде масла.
1Н ЯМР: 5 (500 МГц; ДМСО-16; 300 К): 7.2-6.9 (m, 4H, ароматические Н); 7.04-7.03-7.00 (m, 1H, ароматический Н); 6.85 (m, 1H, ароматический Н); 6.35-6.26-6.06 (m, 1H, H тетрагидроиндолизин); 6.156.12 (m, 2H, H метилендиокси); 5.06-4.84 (m, 1H, Н дигидроизохинолин); 4.86-4.17 (m, 2H, Н дигидроизо-хинолин); 3.65-3.6-3.55 (m, 3Н, Н сложный метиловый эфир); 3.43-4.26 (m, 2H, Н тетрагидроиндолизин); 3.58-3.5 (m, 4H, Н морфолин); 2.37-3.05 (m, 4Н, 2Н дигидроизохинолин, 2Н тетрагидроиндолизин); 1.682.56 (m, 4H, Н морфолин); 1.4-2.0 (m, 4Н, Н тетрагидроиндолизин).
ИК: v: > C=O 1695 см-1 сложный эфир; v: > C=O 1625 см-1 амид; v: > C-O-C < 1214-1176-1115 см-1; > d-Ar 772-744 см-1.
Стадия В. 3-[6-[(3S)-3-(Морфолинометил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбонил]-1,3-бензо-диоксол-5-ил]-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизинкарбоксилат лития.
К раствору 4.6 г соединения стадии А (8.26 ммоль) в 24 мл диоксана добавляют раствор гидроксида лития (675 мг, 16.1 ммоль). Загрузочную порцию помещают в микроволновую печь при мощности 140 Вт, 100°С на период 2 ч 30 мин. Реакционную смесь затем фильтруют и упаривают. Полученное таким образом твердое вещество сушат при 40°С в сушильном шкафу в присутствии Р2О5.
1Н ЯМР: 5 (400 МГц; ДМСОч16; 353 К): 6.7-7.15 (неразрешенный пик, 6Н, ароматические Н); 6.21 (s, 1H, ароматический Н); 6.03 (s, 2H, Н метилендиокси); 4.0-5.0 (неразрешенный пик, 3Н дигидроизохино-лин); 3.4-3.6 (неразрешенный пик, 3Н тетрагидроиндолизин, 3Н морфолин); 2.5-3.1 (неразрешенный пик, 4Н, 2Н тетрагидроиндолизин, 2Н морфолин); 1.5-2.4 (неразрешенный пик, 10Н морфолин).
ИК: v :> С=О широкий 1567 см-1 ацетат; v: 1236 см-1.
Стадия С. N-(4-{[трет-Бутил(диметил)силил]окси}фенил)-3-{6-[((3S)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1Н)-изохинолинил)карбонил]-1,3-бензодиоксол-5-ил}-N-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-1-индо-лизин карбоксамид.
К раствору 2.6 г соединения стадии В (4.73 ммоль) в 47 мл дихлорметана по каплям добавляют 1.2 мл оксалилхлорида (14.2 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 11 ч и затем несколько раз упаривают совместно с дихлорметаном. Полученный таким образом продукт суспендируют в 37 мл дихлорметана и затем добавляют к раствору 2.1 г соединения, полученного в методике получения 1" (7.1 ммоль) в 10 мл дихлорметана в присутствии 0.6 мл пиридина (7.1 ммоль). Загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение ночи.
Реакционную смесь концентрируют и очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/метанол). Указанный в заголовке продукт получают в виде пены.
1Н ЯМР: 5 (500 МГц; ДМСО-16; 300 К): 6.9-7.3 (9Н, ароматические Н); 6.88 (2Н, ароматические Н); 6.72-6.87 (2Н, ароматические Н); 6.64 (2Н, ароматические Н); 6.13 (2Н метилендиокси); 5.05-4.74 (1Н дигидроизохинолин); 4.25-4.13 (2Н дигидроизохинолин); 3.44-3.7 (4Н морфолин); 3.62-3.52 (2Н тетра-гидроиндолизин); 3.0-2.6 (4Н, 2Н тетрагидроиндолизин, 2Н дигидроизохинолин); 2.54-1.94 (6Н морфо-лин); 1.91-1.53 (4Н тетрагидроиндолизин); 0.92 (9Н трет-бутил); 0.17 (6Н диметил).
ИК: v:> C=O: 1632 см-1; v: > С-О-С <: 1237 см-1; v: -Si-O-C-: 1035 см-1; -Si-C-: 910 см-1; > QI-Ar: 806
см-1.
Стадия D. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-3-{6-[((3S)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1Н)-изохинолинил)карбонил]-1,3-бензодиоксол-5-ил}-N-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизин кар-боксамида.
К раствору 1.9 г соединения, полученного на стадии С (2.3 ммоль), в 4 мл метанола добавляют 0.646 г (11.5 ммоль) гидроксида калия, растворенного в 8 мл метанола. Загрузочную порцию перемешивают при температуре окружающей среды в течение 30 мин. Реакционную смесь затем разбавляют дихлорме-таном и последовательно промывают 1М раствором HCl, насыщенным водным раствором NaHCO3 и затем соляным раствором до тех пор, пока не будет достигнуто нейтральное значение рН. Затем органическую фазу сушат над сульфатом магния, фильтруют и упаривают. Полученный таким образом сырой продукт очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/метанол). Твердое вещество затем растворяют в дихлорметане и добавляют 2 мл 1М эфирной HCl. Загрузочную порцию перемешивают в течение 1 ч и затем упаривают досуха. Полученный таким образом гидрохлорид рас-
творяют в смеси вода/ацетонитрил до тех пор, пока растворение не завершится, и затем лиофилизируют. Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение найдено) %С=69.11:68.95; %Н=5.8:5.46; %N=7.5:7.51; %Cl-=4.74:4.48. Оптическое вращение: (a)D20 = +50.8° (с = 9 мг/мл, МеОН).
Стадия E. 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(Морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил дибензилфос-фат.
К суспензии 82 мг гидрида натрия (2.06 ммоль) в 10 мл безводного ТГФ порциями и при 0°С добавляют 700 мг соединения стадии D. После перемешивания в течение 30 мин при 0°С и в течение 30 мин при температуре окружающей среды при 0°С добавляют тетрабензилпирофосфат и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при температуре окружающей среды. После упаривания растворителя сырой продукт реакции разбавляют дихлорметаном (30 мл), промывают насыщенным водным раствором NaHCO3 и затем соляным раствором. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют, концентрируют досуха и очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент Указанный в заголовке продукт затем получают в виде твердого вещества.
1Н ЯМР: 5 (500 МГц; ДМСОч16; 300 К): 7.34 (m, 10Н фенил); 7.30-6.71 (m, 15Н арил); 6.06 (s, 1Н метилендиокси); 5.30-4.97 (m, 1Н пиррол); 5.11 (m, 4Н бензил): 5.03-3.64 (m, 1Н, третичный С THIQ); 4.914.09 (m, 2H, вторичный С THIQ); 3.99-3.48 (m, 2H, вторичный С THIQ); 3.54-3.44 (m, 4H морфолин); 2.89-2.65 (m, 3Н, вторичный С THIQ); 2.51-1.87 (m, 4H, вторичный С THID); 2.36-1.85 (m, 2H, вторичный С THIQ); 1.91-1.45 (m, 4H, вторичный С THID).
Стадия F. 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(Морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфос-фат.
50 мг Pd(OH)2 добавляют к раствору продукта, полученного на стадии Е (505 мг; 0.52 ммоль), в метаноле (10 мл) и затем реакционную смесь помещают в атмосферу водорода (1 бар) на 5 ч. После от-фильтровывания катализатора и концентрирования досуха сырой продукт реакции растворяют в метаноле (5 мл) и обрабатывают 0.95 мл 1М раствора гидроксида натрия. Растворители затем упаривают и сырой продукт реакции очищают с помощью хроматографии на фазе OASIS(r) (градиент ацетонитрил/Н2О) с получением белого твердого вещества.
Элементный микроанализ:
%С %Н %N %Na
Рассчитано 61.87 4.95 6.71 5.51
Найдено 61.45 4.46 6.61 5.38
ИК: v: -C=O: 1628 см-1; v: C-O-C: 1234 см-1; v: P=O: 115 см-1; v: P-O: 985 см-1; v: CH-Ar: 876 см-1. Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C43H41N4Na2O9P [М+Н]+ рассчитано: 835.2479, [М+Н]+ найдено: 835.2467.
Пример 2. 4-[{ [3-(6-{ [(3R)-3-Метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. N-(4-Гидроксифенил)-3-(6-{[(3R)-3-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-N-фенил-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксамид.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой продукта методики получения 1' на стадии А на соединение методики получения 2', при этом предполагается, что полученный таким образом продукт не подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии HCl в эфире.
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=74.86:74.88; %Н=5.64:5.31; %N=6.72:6.78.
Стадия В. 4-[{ [3-(6-{ [(3R)-3-Метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях Е и F примера 1. Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C39H36N3O8P [М+Н]+рассчитано: 706.2313 [М+Н]+, найдено: 706.2324.
Пример 3. 4-[(1-Метил-1H-индол-5-ил){[3-(2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизо-хинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}амино]фенил динат-рийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид 3-{5-хлор-2-[(^)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1Н)-изо-хинолинил)карбонил] фенил}-N-(4-гидроксифенил)-N-( 1 -метил-1Н-индол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1 -индолизин карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 2, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на ста-
дии С, на соединение методики получения 2". Элементный микроанализ:
%С %Н %N %СГ
Рассчитано 68.04 5.72 8.82 4.91
Найдено 67.84 5.46 8.64 5.21
Оптическое вращение: (a)D20 = +55.9° (с=7 мг/мл, МеОН).
Стадия В. 4-[(1-Метил-1Н-индол-5-ил){[3-(2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохино-лин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}амино]фенил динатрий-фосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях Е и F примера 1. Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C45H44N5Na2O7P [M-2Na+3H]+ рассчитано: 800.3208 [M-2Na+3H]+, найдено: 800.3211.
Пример 4. 4-[{ [3-(6-{ [(3R)-3-Метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)индолизин-1-ил]карбонил}(1-метил-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-3-(6-{[(3R)-3-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-N-(1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)индолизин-1-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединений методик получения 1 и 1', используемых на стадии А, на соединения методик получения 3 и 2', и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 3".
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=69.14:70.09; %Н=4.81:4.55; %N=9.83:10.09; %Cl-=4.98:3.26.
Стадия В. 4-[{ [3-(6-{ [(3R)-3-Метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5 -ил)индолизин-1 -ил] карбонил}( 1 -метил-1H-пирроло [2,3-b] пиридин-5 -ил)амино] фенил диэтилфосфат.
К суспензии соединения, полученного на стадии А (1.5 ммоль), в 10 мл безводного CH2Cl2 добавляют триэтиламин (0.42 мл; 3 ммоль) и затем по каплям диэтилцианофосфонат (0.24 мл; 1.65 ммоль) при температуре окружающей среды. После перемешивания в течение ночи при температуре окружающей среды реакционную смесь разбавляют с помощью CH2Cl2, промывают насыщенным водным раствором NaHCO3 и затем соляным раствором. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют, концентрируют досуха и очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент QH^Cb/МеОН). Указанный в заголовке продукт затем получают в виде твердого вещества.
Стадия С. 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-Метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)индолизин-1-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-5-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
0.4 мл триметилсилилбромида (3 ммоль) добавляют по каплям при температуре окружающей среды к раствору полученного на стадии В продукта (0.78 ммоль) в CH2Cl2 (12 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 5 ч и затем медленно добавляют раствор Na2CO3 (580 мг) в воде (4 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь концентрируют досуха, разбавляют безводным метанолом (25 мл) и подвергают микрофильтрованию. Фильтрат сушат и очищают с помощью хроматографии на фазе OASIS(r) (градиент ацетонитрил/Н2О).
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C45H44N5Na2O7P [M-2Na+3H]+ рассчитано: 800.3211. [M-2Na+3H]+ найдено: 800.3201.
Пример 5. 4-[{ [3-(6-{ [(3R)-3-Метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5 -ил)индолизин-1 -ил] карбонил}(пиридин-4-ил)амино] фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-3-(6-{[(3R)-3-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-N-(пиридин-4-ил)индолизин-1-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединений методик получения 1 и 1', используемых на стадии А, на соединения методик получения 3 и 2', и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 4".
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=69.24:69.12; %Н=4.74:4.23; %N=8.5:8.45; %Cl-=5.38:5.2.
Стадия В. 4-[{ [3-(6-{ [(3R)-3-Метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5 -ил)индолизин-1 -ил] карбонил}(пиридин-4-ил)амино] фенил диэтилфосфат.
К суспензии 950 мг соединения, полученного на стадии А (1.5 ммоль), в 10 мл безводного CH2Cl2 добавляют триэтиламин (0.42 мл; 3 ммоль) и затем по каплям диэтилцианофосфонат (0.24 мл; 1,65 ммоль) при температуре окружающей среды. После перемешивания в течение ночи при температуре окружающей среды реакционную смесь разбавляют с помощью CH2Cl2, промывают насыщенным водным
раствором NaHCO3 и затем соляным раствором. Затем органическую фазу сушат над MgSO4, фильтруют, концентрируют досуха и очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент QH^Cb/МеОН). Указанный в заголовке продукт затем получают в виде твердого вещества.
1Н ЯМР: 5 (500 МГц; ДМСО-16; 300 К): 8.5-8. 0 (m, 5Н); 7.2-7.1 (m, 1Н); 6.85-6.65 (m, 1Н); 7.3-6.8 (m, 10Н); 6.25-6.10 (bs, 1H); 6.2 (bs, 2H); 5.1-3.7 (6d, 2Н); 4.7-3.8 (m, 1Н); 4.15 (m, 4Н); 3.0-1.7 (m, 2Н); 1.25 (m, 6Н); 0.85-0.24 (m, 3Н).
Стадия С. 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-Метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5 -ил)индолизин-1 -ил] карбонил}(пиридин-4-ил)амино] фенил динатрийфосфат.
0.4 мл триметилсилилбромида (3 ммоль) добавляют по каплям при температуре окружающей среды к раствору полученного на стадии В продукта (591 мг; 0.78 ммоль) в CH2Cl2 (12 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 5 ч и затем медленно добавляют раствор Na2CO3 (580 мг) в воде (4 мл) при 0°С. После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь концентрируют досуха, разбавляют безводным метанолом (25 мл) и подвергают микрофильтрованию. Фильтрат сушат и очищают с помощью хроматографии на фазе OASIS(r) (градиент ацетонитрил/Н2О).
1Н ЯМР: 5 (500 МГц; D2O; 300 К): 8.23-7.98 (m, 2Н пиридил); 7.01-6.97 (m, 2Н пиридил); 7.88-7.80 (m, 1Н индолизин); 7.18-6.57 (m, 13Н, ароматические Н, THIQ+арил+индолизин+фенол); 6.17-6.15 (m, 1H индолизин): 5.96 (m, 2H метилендиокси); 4.61-3.76 (m, 1H, тернарный С THIQ); 4.16 (m, 2H, вторичный С THIQ); 2.86-2.31 (m, 2H, вторичный С THIQ); 0.94-0.76 (m, 3H, первичный С THIQ).
ИК: v: -C=O: 1620 см-1; v: C-O-C: 1218 см-1; v: P=O: 1107 см-1 v: P-O: 981 см-1 v: СН-Ar: 881-741 см-1.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C38H29N4Na2O8P [M-2Na+3H]+рассчитано: 703.1952. [M-2Na+3H]+ найдено:
703.1951.
Пример 6. 4-[{[3-(6-{[(35)-3-(Морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил дибензилфос-фат.
Методика соответствует протоколу, описанному на стадиях А-Е примера 1.
1H ЯМР: 5 (500 МГц; ДМСОч16; 300 К): 7.34 (m, 10H фенил); 7.30-6.71 (m, 15Н арил); 6.06 (s, 1Н метилендиокси); 5.30-4.97 (m, 1Н пиррол); 5.11 (m, 4Н бензил): 5.03-3.64 (m, 1Н, третичный С THIQ); 4.914.09 (m, 2H, вторичный С THIQ); 3.99-3.48 (m, 2H, вторичный С THIQ); 3.54-3.44 (m, 4H морфолин);
2.89-2.65 (m, 3Н, вторичный С THIQ); 2.51-1.87 (m, 4H, вторичный С THID); 2.36-1.85 (m, 2H, вторичный С THIQ); 1.91-1.45 (m, 4H, вторичный С THID).
Пример 7. Диэтил 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)индолизин-1-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)амино]фенил фосфат.
Методика соответствует протоколу, описанному на стадиях А и В примера 5.
1Н ЯМР: 5 (500 МГц; ДМСО-16; 300 К): 8.5-8. 0 (m, 5Н); 7.2-7.1 (m, 1H); 6.85-6.65 (m, 1Н); 7.3-6.8
(m, 10Н); 6.25-6.10 (bs, 1H); 6.2 (bs, 2H); 5.1-3.7 (6d, 2Н); 4.7-3.8 (m, 1Н); 4.15 (m, 4Н); 3.0-1.7 (m, 2Н);
1.25 (m, 6Н); 0.85-0.24 (m, 3Н).
Пример 8. Гидрохлорид 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил дигидрофосфата.
100 мг Pd(OH)2 добавляют к раствору полученного на стадии Е примера 1 продукта (500 мг; 0.51 ммоль) в метаноле (10 мл) и затем реакционную смесь помещают в атмосферу водорода (1 бар) на 5 ч. После отфильтровывания катализатора и концентрирования досуха сырой продукт реакции незамедлительно очищают с помощью хроматографии на фазе С18 (градиент ацетонитрил/Н2О +0.2% HCl) с получением твердого вещества.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C43H43N4O9P [М+Н]+ рассчитано: 791.2846, [М+Н]+ найдено: 791.2852.
Пример 9. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3R)-3-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-Ш-пиррол-3-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)шино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид 5-(5-хлор-2-{[(3R)-3-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбо-нил}фенил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-(пиридин-4-ил)-1Н-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединений методик получения 1 и 1', используемых на стадии А, на соединения методик получения 4 и 2', и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 4".
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=66.99:66.88; %Н=5.14:5.28; %N=8.93:8.87; %Cl-=5.65:4.98.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C35H32ClN4O3 [М+Н]+ рассчитано: 591.2157, [М+Н]+ найдено: 591.2178. Стадия В. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3R)-3-метил-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 4.
Пример 10. 4-[{[1,2-Диметил-5-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-(1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-5 -(6-{ [(3 S)-3 -(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензо-диоксол-5-ил)-1Н-пиррол-3 -карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 5, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 3".
Элементный микроанализ : (%, найдено (теоретическое значение))
%C=66.41 (66.62); %H=5.08 (5.59); %N=10.85 (10.84); %Cl-=4.68 (4.57).
Стадия В. 4-[{[1,2-Диметил-5-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 4.
Пример 11. 4-[{[1,2-Диметил-5-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1H-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-5-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1Н-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 5, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 5".
Элементный микроанализ: (%, найдено (теоретическое значение))
%C=64.25 (64.59); %H=5.4 (5.7); %N=11.41 (11.59); %Cl-=4.93 (4.89).
Стадия В. 4-[{[1,2-Диметил-5-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях Е и F примера 1. ИК (см-1): v: С=О: 1628; v: (фосфат; простой эфир): 1238, 1143,1113, 985; у: > СН Ar: 740. Элементный микроанализ:
%С %Н %N
Рассчитано 57.64 4.84 10.34
Найдено 56.62 4.54 10.14
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+/FIA/HR): Эмпирическая формула: C39H39Cl6Na2O9P [M-Na+H]+рассчитано: 791.2565, [M-Na+H]+ найдено: 791.2564.
Пример 12. 4-[{[1,2-Диметил-5-(6-{[(3R)-3-[3-(морфолин-4-ил)пропил]-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1H-пирроло[2,3-b] пиридин-5 -ил)амино] фенил динатрийфосфат.
Стадия A. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-(1-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-5-(6-{[(3R)-3-[3-(морфолин-4-ил)пропил]-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1Н-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединений методик получения 1 и 1', используемых на стадии А, на соединения методик получения 5 и 3', и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 3".
Элементный микроанализ: (%, найдено (теоретическое значение))
%C=67.63 (68.06); %H=5.27 (5.95); %N=10.08 (10.13);%Cl-=4.53 (4.27).
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C35H32ClN4O3
[М+Н]+рассчитано: 793.3708,
[М+Н]+ найдено: 793.3704.
Стадия В. 4-[{[1,2-Диметил-5 -(6-{ [(3R)-3-[3 -(морфолин-4-ил)пропил] -3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пирроло[2,3
b] пиридин-5 -ил)амино] фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях Е и F примера 1.
Если не указано иное, соединения следующих примеров синтезируют в соответствии со способом примера 1, используя: (i) подходящую кислоту, полученную в соответствии с одной из методик получения 1- 9, и (ii) подходящее тетрагидроизохинолиновое соединение, полученное в соответствии с одной из методик получения 1'-4', и на стадии С: (iii) подходящий NHR3R4 амин (неполный перечень предлагается в методиках получения 1''-8'').
Пример 13. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]кар-бонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-(пиридин-4-ил)-1Н-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 4, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 4". Полученный продукт в заключение подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии 1М HCl в эфире. После фильтрования и лиофилизации в смеси ацетонитрил/вода получают ожидаемое соединение.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C39H38ClN5O4
[М+Н]+ рассчитано: 676.2685,
[М+Н]+ найдено: 676.2684.
Стадия В. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбо-нил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат. Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16. 31Р ЯМР (500 МГц, D2O) 5 м.д.: -0.05,
ИК (см-1): v: C=O: 1631; v: (фосфат; простой эфир): 1243, 1136, 1112, 982; у: > СН Ar: 883, 745. Элементный микроанализ:
%С %Н %N
Рассчитано 58.54 4.66 8.75
Найдено 58.23 4.51 8.76
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+): Эмпирическая формула: C39H37ClN5Na2O7P [M-Na+2H]+рассчитано: 778.2168, [M-Na+2H]+ найдено: 778.2169.
Пример 14. 4-[{[5-(5-Фтор-4-метокси-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1H-пиразол-4-ил)амино] фенил динатрийфосфат.
Пример 15. 4-[{[5-(5-Фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1H-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид 5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1Н-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 7, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 5". Полученный продукт в заключение подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии HCl в эфире. После фильтрования и лиофилизации в смеси ацетонитрил/вода получают ожидаемое соединение.
Элементный микроанализ: (%, найдено (теоретическое значение))
%C=65.69 (65.28); %H=5.38 (5.77); %N=11.18 (12.02); %Cl-=5.61 (5.07).
Стадия В. 4-[{[5-(5-Фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16. 31Р ЯМР (400/500 МГц, CD3OD) 5 м.д.: -0.5,
ИК (см-1): v: C=O: 1628; v: (фосфат; простой эфир): 1238, 1114, 983. Элементный микроанализ:
%С %Н %N
Рассчитано 58.02 4.87 10.68
Найдено 59.03 4.98 10.14
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+): Эмпирическая формула: C38H38FN6Na2O7P [M-2Na+3H]+ рассчитано: 743.2752, [M-2Na+3H]+ найдено: 743.2760.
Пример 16. 4-[{[1,2-Диметил-5-(7-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил)-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1H-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-5-(7-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-2,3-дигидро-1,4-бензо-диоксин-6-ил)-1Н-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 8, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 5". Полученный продукт в заключение подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии 1М HCl в эфире. После фильтрования и лиофилизации в смеси ацетонитрил/вода, получают ожидаемое соединение.
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=64.99:64.67; %Н=5.86:5.67; %N=11.37:11.27; %Cl-=4.8:4.71
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C40H43N6O6
[М+Н]+ рассчитано: 703.3236,
[М+Н]+ найдено: 703.3239.
Стадия В. 4-[{[1,2-Диметил-5-(7-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил)-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино] фенил N,N,N',N'-тетраметилфосфородиамидат.
К раствору 125 мг соединения стадии А (0.18 ммоль) в дихлорметане (6 мл) добавляют 55 мкл диа-забицикло[5.4.0]ундец-7-ена (DBU; 0,36 ммоль) и затем 33 мкл бисдиметиламинофосфорилхлорида (0.19 ммоль) и 2 мг диметиламино-4-пиридина (0.02 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 15 ч, разбавляют дихлорметаном и затем насыщенным водным раствором карбоната натрия. Водную фазу экстрагируют дихлорметаном; органические фазы затем объединяют, промывают водой и соляным раствором и сушат над сульфатом магния. После упаривания растворителей сырой продукт реакции непосредственно используют на следующей стадии.
Стадия С. 4-[{[1,2-Диметил-5-(7-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил)-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
4 мл трифторуксусной кислоты добавляют по каплям к раствору 125 мг соединения стадии В (0.15 ммоль) в 1:1 смеси ацетонитрила и воды (5 мл). После перемешивания в течение 20 ч при температуре окружающей среды реакционную смесь упаривают досуха, поддерживая температуру водяной бани ниже 40°С, и затем остаток обрабатывают раствором карбоната натрия (95 мг; 0.9 ммоль) в воде (4 мл). После перемешивания в течение 2 ч при температуре окружающей среды реакционную смесь упаривают досуха, и затем добавляют 6 мл безводного этанола. Твердое вещество отфильтровывают и фильтрат концентрируют досуха, затем очищают на фазе OASIS(r) (градиент ацетонитрил/вода).
31Р ЯМР (500 МГц, D2O) 5 м.д.: 0.9,
ИК (см-1): v: C=O: 1623; v: (фосфат; простой эфир): 1235, 1162,1115, 1065, 985; у: > СН Ar: 745. Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+): Эмпирическая формула: C40H41N6Na2O9P [M-2Na+3H]+ рассчитано: 783.2902, [M-2Na+3H]+ найдено: 783.2907.
Пример 17. 5-[{[5-(5-Фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)амино]пиримидин-2-ил ди-натрийфосфат.
Пример 18. 5-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)амино]пиримидин-2-ил ди-натрийфосфат.
Пример 19. 4-({[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}[1-(тридейтерометил)-1H-пиразол-4-ил]амино)фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-[1-(тридейтерометил)-1Н-пиразол-4-ил]-1Н-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 4, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 6". Полученный продукт в заключение подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии 1М HCl в эфире. После фильтрования и лиофилизации в смеси ацетонитрил/вода получают ожидаемое соединение.
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение найдено)
%С=63.51:63.41; %Н=5.63:5.42; %N=11.69:11.61; %Cl-=4.93:4.85.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+/FIA/HR, ESI-/FIA):
Эмпирическая формула: C38H36ClD3N6O4
[М+Н]+рассчитано: 682.2982, [М+Н]+ найдено: 682.2986.
Стадия В. 4-({[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}[1-(тридейтерометил)-1Н-пиразол-4-ил]амино)фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16.
31Р ЯМР (500 МГц, D2O) 5 м.д.: 4.8,
ИК (см-1): v: C=O: 1626; v: (фосфат; простой эфир): 1243, 1141,1115, 982; у: > СН Ar:880, 831. Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI/FIA/HR и MC/MC): Эмпирическая формула: C38H35ClD3N6Na2O7P
[М+Н]+рассчитано: 806.2285, [М+Н]+ найдено: 806.2280.
Пример 20. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил)амино] фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 4, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 7". Полученный продукт в заключение подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии 1М HCl в эфире. После фильтрования и лиофилизации в смеси ацетонитрил/вода получают ожидаемое соединение.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСОч16) 5 м.д.: 11.2 (bs, 1H), 9.39 (bs,1H), 7.83 (d, 1H), 7.54 (d, 1 Н), 7.33 (s, 1 Н), 7.14 (m, 2 Н), 7 (m, 2 Н), 6.8 (d, 2 Н), 6.62 (d, 2 Н), 6.57 (bs, 1 Н), 5.26 (s, 1 Н), 5.26 (m, 1 Н), 4.64/4.03 (АВ, 2 Н), 4.01/3.92 (2m, 4 Н), 3.75/3.43/3.15/3.02 (4m, 4 Н), 3.59 (s, 3 Н), 3.3/3.15 (2m, 2 Н), 2.97 (s, 3 Н), 2.69/2.52 (dd+d, 2 Н), 2.06 (s, 3 Н), 1.91 (s, 3 Н).
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=65.34:65.50; %Н=5.62:5.15; %N=11.15:10.84 %Cl-=4.70:4.44.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C41H41ClN6O4
[М+Н]+рассчитано: 717.2952,
[М+Н]+найдено: 717.2951.
Стадия В. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]кар-бонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фе-нил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16. 31Р ЯМР (500 МГц, ДМСО-16) 5 м.д.: 3.7,
ИК (см-1): v: -CN: 2210 см-1; v: C=O: 1623; v: (фосфат; простой эфир): 1227, 1133, 1110, 982; у: > СН
Ar :884-741.
Элементный микроанализ:
%С %Н %N
Рассчитано 58.54 4.79 9.99
Найдено 58.75 4.71 10.18
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+/FIA/HR): Эмпирическая формула: C41H40ClN6Na2O7P
[M-2Na+H]+рассчитано: 797.2614, [M-2Na+H]+ найдено: 797.2618.
Пример 21. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1-метил-1H-пиррол-3-ил)амино] фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-N-(5-циано-1-метил-1Н-пиррол-3 -ил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 4, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 8". Полученный продукт в заключение подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии 1М HCl в эфире. После фильтрования и лиофилизации в смеси ацетонитрил/вода получают ожидаемое соединение.
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=64.95:65.09; %Н=5.45:5.20; %N=11.36:11.26; %Cl-=4.79:4.62.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI/+):
Эмпирическая формула: C40H39ClN6O4
[М+Н]+рассчитано: 703.2794,
[М+Н]+ найдено: 703.2789.
Стадия В. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбо-нил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1-метил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил ди-натрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16. 31Р ЯМР (500 МГц, ДМСО-16) 5 м.д.: 4.5,
ИК (см-1): v: -CN: 2215 см-1; v: C=O 1626; v: (фосфат; простой эфир): 1227, 1141, 1112, 982; у > СН
Ar: 826-742.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+/FIA/HR): Эмпирическая формула: C40H38ClN6Na2O7P [M-2Na+3H]+рассчитано: 783.2457, [M-2Na+3H]+ найдено: 783.2462.
Пример 22. 4-[{ [3-(6-{ [(3R)-3-(Морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфос-фат.
Стадия А. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-3-{6-[((3R)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1H)-изохинолинил)карбонил]-1,3-бензодиоксол-5-ил}-N-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизин кар-боксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой соединения методики получения 1', используемого на стадии А, на соединение методики получения 4'. Твердое вещество затем растворяют в дихлорметане и добавляют 2 мл 1М HCl в эфире. Загрузочную порцию перемешивают в течение 1 ч и затем упаривают досуха. Полученный таким образом гидрохлорид растворяют в смеси вода/ацетонитрил до тех пор, пока растворение не завершится, и затем лиофили-зируют.
Элементный микроанализ:
%С %Н %N %СГ
Рассчитано 69.11 5.80 7.50 4.74
Найдено 68.89 5.23 7.41 4.62
Оптическое вращение: (a)D20 = - 45.1° (с = 9 мг/мл, МеОН).
Стадия В. 4-[{[3-(6-{[(3R)-3-(Морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфос-фат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16. 31Р ЯМР (400/500 МГц, ДМСО-16) 5 м.д.: 2.6. Элементный микроанализ:
%С %Н %N
Рассчитано 61.87 4.95 6.71
Найдено 61.33 4.93 7.14
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+/FIA/HR):
Эмпирическая формула: C43H41N4Na2O9P [M-2Na+H]+рассчитано: 791.2840, [M-2Na+H]+ найдено: 791.2845.
Пример 23. 4-[(1-Метил-2,3-дигидро-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил){[3-(2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-Дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-4-[2-оксо-2-(пиперидин-1-ил)этокси]фенил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}амино]фенил динатрийфосфат.
Стадия A. Метил 3-[4-бензилокси-2-[(3S)-3-(морфолинометил)-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-карбонил]фенил]-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксилат.
К раствору 14.19 г (35.0 ммоль) соединения, полученного в методике получения 9, в 200 мл диме-тилформамида последовательно добавляют 4-[[^)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-ил]метил]морфолин (методика получения 1'; 8.13 г; 35.0 ммоль), гидроксибензотриазол (6.15 г; 45,5 ммоль), гидрохлорид 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимида (6.70 г; 45.5 ммоль) и триэтиламин (21.95 мл; 0.16 моль). Загрузочную порцию затем перемешивают в течение ночи при температуре окружающей среды. Реакционную смесь затем выливают в 400 мл этилацетата и затем последовательно промывают насыщенным водным раствором NaHCO3, водой и соляным раствором. Объединенные водные фазы экстрагируют эти-лацетатом. Получающиеся органические фазы сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный продукт очищают с помощью хроматографии на силикагеле с обеспечением указанного в заголовке соединения.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-dfe 300 К) 5 м.д.: 7.5-7.3 (m, 5 Н), 7.38 (d, 1H), 7.2-6.9 (m, 4 Н), 7.15 (dd, 1H), 6.9 (d, 1H), 6.35/6.25/6.08 (3*s, 1H), 5.21/5.12 (3*s, 2 Н), 5.09/4.85/3.7 (3*m, 1 Н), 4.9-3.8 (8*d, 2 Н), 4.2-3.4 (m, 2 Н), 3.65/3.6/3.55 (3*s, 3 Н), 3.6-3.4 (m, 4 Н), 3-2.4 (m, 2 Н), 2.9-1.8 (6*dd, 2 Н), 2.5-1.95 (4*m, 4 Н), 2.35-1.7 (6*m, 2 Н), 2-1.45 (6*m, 4 Н).
Стадия В. 3-[4-Бензилокси-2-[(3S)-3-(морфолинометил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбонил] фенил]-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоновая кислота.
40.1 мл 1М водного раствора LiOH добавляют к раствору 12.7 г (20 ммоль) соединения, полученного на стадии выше, в 40 мл диоксана. Загрузочную порцию нагревают при 100°С в течение ночи. Реакционную смесь выливают в воду и затем экстрагируют этиловым эфиром. Эфирную фазу экстрагируют еще раз водой. Объединенные водные фазы подкисляют до рН 4 путем добавления порошкообразной лимонной кислоты и затем экстрагируют дихлорметаном. Дихлорметановую фазу промывают соляным раствором, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют досуха. Указанный в заголовке продукт получают в виде безе.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСОч16, 300 К) 5 м.д.: 11.35 (bs, 1 Н), 7.5-7.3 (m, 5 Н), 7.38 (m, 1 Н), 7.2-6.9 (m, 4 Н), 7.15 (m, 1 Н), 6.9 (m, 1 Н), 6.31/6.25/6.1 (3*s, 1H), 5.22/5.2/5.15 (3*s, 2 Н), 5.1/4.82/3.7 (3*m, 1 Н), 4.85-3.8 (8*d, 2 Н), 4.2-3.4 (m, 2 Н), 3.6-3.45 (m, 4 Н), 3-2.3 (m, 2 Н), 2.9-1.8 (m, 2 Н), 2.5-1.9 (6*m, 4 Н), 2.35-1.8 (6*m, 2Н), 1.9-1.3 (m, 4 Н).
Стадия С. 3-[4-Бензилокси-2-[(3S)-3-(морфолинометил)-3,4-дигидро-1Н-изохин ол ин-2-карбон ил]фенил]-N-[4-[трет-бутил(диметил)силил]оксифенил]-N-(1-метилпирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксамид.
Кислоту, полученную на стадии В (9 г, 11.8 ммоль), растворяют в 90 мл 1,2-дихлорэтана. К раствору добавляют 1.9 мл 1-хлор-N,N,2-триметилпропениламина (14 ммоль). После перемешивания в течение 3 ч при температуре окружающей среды добавляют 90 мл толуола и 4.62 г ^^-^трет-бутил(диметил)силил]оксифенил]-1-метил-1H-пирроло[2,3-b]пиридин-5-амина (методика получения 3", 13 ммоль). Реакционную смесь нагревают при 110°С в течение 20 ч. После возвращения к температуре окружающей среды реакционную смесь промывают соляным раствором, сушат над Na2SO4, фильтруют и концентрируют досуха. Полученный остаток очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/этанол) с получением ожидаемого продукта.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-dfe 300 К) 5 м.д.: 7.95/7.8/7.75 (3*d, 1H), 7.68/7.65/7.4 (3*d, 1 Н), 7.4/7.3 (2*d, 1 Н), 7.25-6.8 (m, 9 Н), 7.05/6.9 (2*m, 1H), 7-6.6 (3*bd, 2 Н), 6.9 (m, 1 Н), 6.75-6.45 (3*bd, 2 Н), 6.7 (m, 1 Н), 6.3 (2*d, 1H), 5.15-4.95 (m, 2 Н), 5.15/5.1/4.8 (3*s, 1 Н), 4.95/4.6/3.5 (3*m, 1 Н), 4.9-3.7 (8*d, 2 Н), 3.83.3 (3*m, 2 Н), 3.75/3.7/3.5 (3*s, 3 Н), 3.45/3.3 (2*m, 4 Н), 3-2.5 (3*m, 2 Н), 3-2.3 (m, 2 Н), 2.4-1.75 (5*m, 4 Н), 2.25-1.7 (6*m, 2 Н), 1.75-1.3 (m, 4 Н), 0.7 (bs, 9H), 0.1 (m, 6Н).
Стадия D. N-[4-[трет-Бутил(диметил)силил]оксифенил]-3-[4-гидрокси-2-[(3S)-3-(морфолинометил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбонил]фенил]-N-(1-метилпирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксамид.
К раствору 8.88 г (8.4 ммоль) соединения, полученного на стадии С, в 100 мл этанола, при барботи-ровании через него аргона добавляют 0.9 г Pd/C 10%. Реакционную смесь помещают под давление водорода 1.2 бар при температуре окружающей среды на 15 ч. Катализатор отфильтровывают и растворитель упаривают при пониженном давлении с обеспечением указанного в заголовке соединения.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-dfe 300 К) 5 м.д.: 8.06/7.92/7.87 (3*d, 1H), 7.75/7.5/7.39 (3*d, 1 Н), 7.5 (m, 1 Н), 7.28-6.9 (m, 5 Н), 6.87/6.7 (2*m, 2 Н), 6.76 (m, 1 Н), 6.75/6.67/6.62 (3*m, 2 Н), 6.67/6.46 (m, 1 Н), 6.4/6.36 (2*m, 1 Н), 5.19/5.13/4.9 (3*bs, 1 Н), 5.06/4.7/3.6 (3*m, 1 Н), 4.97/4.2/4.15/4.07 (4*m, 2 Н), 4.87/4.81
(bs, 1H), 3.86/3.56/3.39 (3*m, 2 Н), 3.78/3.57 (2*m, 3 Н), 3.59/3.44 (2*m, 4 Н), 2.96-2.61 (2*m, 2 Н), 2.88/2.6 (2*m, 2 Н), 2.59-1.81 (m, 6 Н), 1.87-1.42 (m, 4 Н), 0.89 (s, 9H), 0.12 (m, 6 Н).
Стадия Е. N-[4-[трет-Бутил(диметил)силил]оксифенил]-N-(1-метилпирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-3-[2-[(3S)-3-(морфолинометил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбонил]-4-[2-оксо-2-(1-пиперидил)эток-си]фенил]-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксамид.
Соединение стадии D (3.0 г, 2.9 ммоль) растворяют в 100 мл толуола. К раствору добавляют 1.53 г (5.8 ммоль) трифенилфосфина и 0.62 г (4.3 ммоль) 2-гидрокси-1-(1-пиперидил)этанона. Смесь нагревают до 50°С и затем добавляют 1.01 г (4.3 ммоль) ди-трет-бутилазодикарбоксилата. Реакционную смесь перемешивают при 50°С в течение 1 ч и затем температуре позволяют вернуться к температуре окружающей среды перед добавлением 1 мл трифторуксусной кислоты. После перемешивания в течение ночи при температуре окружающей среды смесь последовательно промывают водой, насыщенным раствором NaHCO3 и соляным раствором. Объединенные водные фазы экстрагируют этилацетатом. Получающиеся органические фазы сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают с помощью хроматографии на силикагеле (дихлорме-тан/этанол 98/2) с получением ожидаемого соединения.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-dfe 300 К) 5 м.д.: 8.06/7.92/7.87 (3*d, 1H), 7.75/7.51/7.4 (3*d, 1 Н), 7.49 (2*d, 1 Н), 7.29-6.89 (m, 5 Н), 6.93 (m, 1 Н), 6.88/6.7 (m, 2 Н), 6.75/6.67 (m, 1 Н), 6.75/6.68/6.59 (3*m, 2 Н), 6.4/6.36 (2*m, 1 Н), 5.2/5.16/4.92 (3*m, 1 Н), 5.06/4.69/3.58 (3*m, 1 Н), 4.97/4.25/4.16/4.03 (4*d, 2 Н), 4.89/4.81 (2*m, 2 Н), 3.79/3.59 (2*m, 3 Н), 3.59/3.43/3.4 (3*m, 6 Н), 3.58/3.43 (2*m, 4 Н), 3.03-2.61 (m, 2 Н), 2.97-2.65 (m, 2 Н), 2.57-1.74 (m, 6 Н), 1.89-1.3 (m, 10 Н), 0.89 (2bs, 9 Н), 0.11 (m, 6 Н).
Стадия F. N-(4-Гидроксифенил)-N-(1-метилпирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-3-[2-[(3S)-3-(морфолино-метил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбонил]-4-[2-оксо-2-(1-пиперидил)этокси]фенил]-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксамид.
1М раствор фторида тетрабутиламмония (3.14 мл, 3 ммоль) в тетрагидрофуране добавляют к раствору соединения, полученного на стадии Е (2.92 г, 2.9 ммоль), в 30 мл тетрагидрофурана при температуре окружающей среды. После перемешивания в течение 5 мин реакционную смесь выливают в 50/50 смесь этилацетата и насыщенного водного раствора NaHCO3. Отделенную органическую фазу промывают водой и затем соляным раствором. Объединенные водные фазы экстрагируют этилацетатом. Получающиеся органические фазы сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлорметан/этанол/аммиак) с получением указанного в заголовке соединения.
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-dfe 300 К) 5 м.д.: 9.4 (m, ОН), 8.1-7.8 (3*d, 1H), 7.7-7.3 (2*m, 1 Н), 7.5/7.4 (2*m, 1 Н), 7.3-6.9 (m, 4 Н), 7.2 (m, 1 Н), 6.9 (m, 1 Н), 6.8-6.5 (m, 2Н), 6.7-6.5 (m, 2 Н), 6.7 (m, 1 Н), 6.4 (m, 1 Н), 5.3-5 (m, 1 Н), 5.1/4.7/3.6 (3*m, 1 Н), 5-3.6 (m, 2 Н), 5-3.6 (m, 2 Н), 4.8 (m, 2 Н), 3.8-3.6 (m, 3 Н), 3.6/3.4 (m, 2 Н), 3.4 (m, 6 Н), 3.1-2.5 (m, 2 Н), 2.9-1.9 (m, 2 Н), 2.5-1.7 (m, 4 Н), 1.8-1.4 (m, 6 Н), 1.6-1.3 (m,
4 Н).
Стадия G. N-(4-Гидроксифенил)-N-(1-метил-2,3-дигидропирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-3-[2-[(3S)-3-(морфолинометил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбон ил] -4-[2-оксо-2-( 1 -пиперидил)этокси] фенил] -5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксамид.
0.71 г (11 ммоль) цианоборогидрида натрия добавляют к раствору соединения, полученного на стадии F (2.0 г, 2.2 ммоль), в 20 мл уксусной кислоты. После перемешивания в течение 14 ч при температуре окружающей среды вновь добавляют 0.36 г (5.5 ммоль) цианоборогидрида натрия и затем реакционную смесь нагревают при 50°С в течение 3 ч перед вторым добавление 0.1 экв. цианоборогидрида натрия для завершения реакции в течение 30 мин при 50°С. Уксусную кислоту упаривают при пониженном давлении и остаток затем переносят в дихлорметан и промывают насыщенным водным раствором NaHCO3, водой и соляным раствором. Объединенные водные фазы экстрагируют дихлорметаном. Получающиеся органические фазы сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищают с помощью хроматографии на силикагеле (градиент дихлор-метан/этанол/аммиак) с получением указанного в заголовке соединения в виде безе.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-dfe 300 К) 5 м.д.: 9.3 (bs, 1 Н), 7.5/7.4/7.3 (3*m, 1 Н), 7.2/6.7 (2*m, 1 Н), 7.2 (m, 1 Н), 7.1-6.8 (m, 4 Н), 6.9/6.7 (m, 1 Н), 6.9 (m, 1 Н), 6.8-6.5 (m, 2 Н), 6.7-6.5 (m, 2 Н), 5.3-5.1 (2*d, 1 Н), 5.1/4.7/3.6 (3*m, 1 Н), 4.9/4.2-3.5 (2*m, 1 Н), 4.9/4.2-3.5 (2*, 1 Н), 4.9-4.8 (m, 2 Н), 3.6/3.4 (2*m, 4 Н), 3.4/3.3 (m, 2 Н), 3.4 (m, 6 Н), 3.1-2.5 (m, 4 Н), 3-2.4 (m, 2 Н), 2.8/2.6 (m, 3 Н), 2.6-1.7 (m, 6 Н), 1.9-1.3 (m,
10Н).
Стадия Н. Гидрохлорид N-(4-гидроксифенил)-N-(1-метил-2,3-дигидропирроло[2,3-b]пиридин-5-ил)-3-[2-[(3S)-3-(морфолинометил)-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-карбонил]-4-[2-оксо-2-(1-пиперидил)эток-си]фенил]-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-карбоксамида.
Основание, полученное на стадии G (0.60 г, 0.69 ммоль), растворяют в ацетонитриле и затем превращают в солевую форму, используя 0.7 мл (0.7 ммоль) 1н. раствор HCl. Раствор фильтруют, замораживают и затем лиофилизируют с обеспечением указанного в заголовке соединения в виде порошка.
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=68.02:68.06; %Н=6.49:6.21; %N=10.89:10.87; %Cl=4.14:3.94. Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+): Эмпирическая формула: C51H57N7O6 [М+Н]+рассчитано: 864.4445, [М+Н]+ найдено: 864.4443.
Стадия I. 4-[(1-Метил-2,3-дигидро-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-ил){[3-(2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-4-[2-оксо-2-(пиперидин-1-ил)этокси]фенил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}амино]фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16.
ИК (см-1): v: С=О: 1625; v: (фосфат; простой эфир): 1229, 1138, 1115, 982; у: > СН Ar: 880-748-745.
Элементный микроанализ:
%С %Н %N
Рассчитано 62.00 5.71 9.92
Найдено 61.45 5.53 9.96
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+): Эмпирическая формула: C51H56N7Na2O9P [M-2Na+3H]+рассчитано: 944.4106, [M-2Na+3H]+ найдено: 944.4116.
Пример 24. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1H-пиразол-4-ил)амиио]фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид 5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил/карбонил}фенил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-N-( 1 -метил-1Н-пиразол-4-ил)-1Н-пиррол-3 -карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 4, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 5". Полученный продукт в заключение подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии HCl в эфире. После фильтрования и лиофилизации в смеси ацетонитрил/вода получают ожидаемое соединение.
Элементный микроанализ: (%, теоретическое значение: найдено)
%С=63.77:62.83; %Н=5.63:5.83; %N=11.74:11.29; %Cl-=4.95:5.42.
Стадия B. 4-[{[5-(5-Хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16. ИК (см-1): v: С=О: 1625; v: (фосфат; простой эфир): 1241, 1146, 1112, 983. Элементный микроанализ:
%С %Н %N
Рассчитано 56.83 4.77 10.46
Найдено 56.82 4.58 10.43
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+): Эмпирическая формула: C38H38ClN6Na2O7P [M-2Na+3H]+рассчитано: 759.2457, [M-2Na+3H]+ найдено: 759.2465.
Пример 25. 4-[(5-Циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил){[5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3 -ил]карбонил}амино] фенил динатрийфосфат.
Стадия А. Гидрохлорид N-(5-циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил)-5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}фенил)-N-(4-гидроксифенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3-карбоксамида.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях A-D примера 1, с заменой, с одной стороны, соединения методики получения 1, используемого на стадии А, на соединение методики получения 7, и, с другой стороны, соединения методики получения 1", используемого на стадии С, на соединение методики получения 7". Полученный продукт в заключение подвергают стадии превращения в солевую форму в присутствии HCl в эфире. После фильтрования и лиофилизации в смеси ацетонитрил/вода, получают ожидаемое соединение.
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI/FIA/HR и МС/МС):
Эмпирическая формула: C41H41FN6O4
[М+Н]+рассчитано: 701.3246, [М+Н]+ найдено: 701.3282.
Стадия В. 4-[(5-Циано-1,2-диметил-1H-пиррол-3-ил){[5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(Ш)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1H-пиррол-3 -ил]карбонил}амино] фенил динатрийфосфат.
Методика соответствует протоколу, аналогичному описанному на стадиях В и С примера 16. 31Р ЯМР (400/500 МГц, CD3OD) 5 м.д.: -0.5,
ИК (см-1): v: -CN: 2211 см-1; v: C=O: 1629; v: (фосфат; простой эфир): 1236, 1114, 984. Элементный микроанализ:
%С %Н %N
Рассчитано 59.71 4.89 10.19
Найдено 60.09 4.95 9.88
Масс-спектрометрия высокого разрешения (ESI+):
Эмпирическая формула: C41H40FN6Na2O7P
[M-2Na+3H]+рассчитано: 781.2909,
[M-2Na+3H]+ найдено: 781.2898.
Фармакологические и фармакокинетические исследования
В целях ясности и где-либо далее соединения формулы (I') будут называться "лекарственным средством примера х", из которого они были получены. Например, N-(4-гидроксифенил)-3-{6-[((3S)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(Ш)-изохинолинил)карбонил] - 1,3-бензодиоксол-5-ил}-N-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизинкарбоксамид будет называться "лекарственное средство примера 1".
Пример А1. Индукция активности каспазы in vivo соединениями формулы (I').
Способность соединений формулы (I') активировать каспазу 3 оценивают на ксенотрансплантатной модели лейкозных клеток RS4;11.
1х107 клеток RS4;11 трансплантируют под кожу иммуносупрессивным мышам (штамм SCID). Через 25-30 дней после трансплантации животные перорально получают лечение различными соединениями. Через 16 ч после введения опухолевые массы извлекают и лизируют и в опухолевых лизатах измеряют активность каспазы 3.
Ферментативное измерение осуществляют путем анализа появления флуоригенного продукта расщепления (DEVD-азная активность, Promega). Оно выражается в виде фактора активации, который равняется соотношению между двумя активностями каспазы: активности у мышей, получающих лечение, деленной на активность у контрольных мышей.
Исследовали N-(4-гидроксифенил)-3-{6-[((3S)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1H)-изохинолинил)карбонил]- 1,3-бензодиоксол-5-ил}-N-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизин карбоксамид (также называемый лекарственным средством примера 1). В дозе 100 мг/кг п/о, in vivo фактор активации каспазы составляет 29.3.
Полученные результаты показывают, что соединения формулы (I') способны индуцировать апоптоз in vivo в опухолевых клетках RS4; 11.
Пример А2: Количественное определение расщепленной формы каспазы 3 in vivo, обусловленной соединениями формулы (I').
Способность соединений формулы (I') активировать каспазу 3 оценивают на ксенотрансплантатной модели лейкозных клеток RS4; 11.
1х107 клеток RS4; 11 трансплантируют под кожу иммуносупрессивным мышам (штамм SCID). Через 25-30 дней после трансплантации животные перорально получают лечение различными соединениями. После лечения опухолевые массы извлекают и лизируют и количественно определяют расщепленную (активированную) форму каспазы 3 в опухолевых лизатах.
Количественное определение осуществляют с использованием "Meso Scale Discovery (MSD) ELISA platform" исследования, которое предназначено для проведения специфического анализа на расщепленную форму каспазы 3. Оно выражается в виде фактора активации, который равняется соотношению между количеством расщепленной каспазы 3 у мышей, получающих лечение, и количеством расщепленной каспазы 3 у контрольных мышей.
Результаты показывают, что соединения формулы (I') способны индуцировать апоптоз in vivo в опухолевых клетках RS4; 11.
Пример A3. Количественное определение расщепленной формы каспазы 3 in vivo, обусловленной соединениями формулы (I).
Способность соединений формулы (I) активировать каспазу 3 оценивают на ксенотрансплантатной модели лейкозных клеток RS4; 11 в соответствии с протоколом, приведенным в примере А2.
Таблица 2
Факторы активации каспазы (MSD исследование на расщепленную каспазу 3 в опухолях мышей, получающих лечение, по сравнению с контрольными мышами) in vivo,
Пример В. Растворимость соединений формулы (I).
Растворимость соединений формулы (I) в воде измеряли и сравнивали с растворимостью соединений формулы (I').
Более конкретно, 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбо-нил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динат-рийфосфат (также называемый соединением примера 1) исследовали и сравнивали с N-(4-гидроксифенил)-3-{6-[((3S)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1H)-изохинолинил)карбонил]-1,3-бензодиоксол-5-ил}-N-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизин карбоксамидом (также называемым лекарственным средством примера 1).
Растворимость соединения примера 1 в воде превышает или равна 10 мг/мл (12.6 мМ), тогда как сопряженного лекарственного средства только 40 мкг/мл (56.2 мкМ). Растворимости соединений также измеряли в среде, забуференной до физиологического значения рН (см. также табл. 3).
Результаты показывают, что соединения формулы (I) гораздо лучше растворимы, чем соединения формулы (I'). Только соединения формулы (I) демонстрируют растворимости выше или равные 100 мкМ. Пример С. In vivo превращение соединений формулы (I).
Фармакокинетический профиль фосфатных соединений формулы (I) оценивают в липидном составе и в водном растворе на самках SCID мышей. Его сравнивают с фармакокинетическим профилем соединений формулы (I') в липидном составе. Более конкретно, 4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1H)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]кар-бонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат (также называемый соединением примера 1) исследовали и сравнивали с N-(4-гидроксифенил)-3-{6-[((3S)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1H)-изохинолинил) карбонил]-1,3-бензодиоксол-5-ил}-N-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-1-индолизин карбоксамидом (также называемым лекарственным средством примера 1).
Липидный состав соединения примера 1.
Соединение примера 1 приготовляют в смеси безводный этанол/полиэтиленгликоль 300/вода (10/40/50, об./об./об.), предназначенной для введения п/о путем. Исследование осуществляют на 2 группах SCID мышей, которым соединение примера 1 вводят при следующих условиях:
группа 1: 3 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг),
группа 2: 25 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг).
Пробы крови отбирают в следующие моменты времени (3 пробы на животное и 3 животных на каждый момент времени): через 0.25 ч, 0.5 ч, 1 ч, 2 ч, 6 ч и 24 ч после перорального введения. Водный состав соединения примера 1.
Соединение примера 1 также вводят SCID мышам пероральным путем в водной среде при следующих условиях:
группа 1: 30 мг/кг п/о, растворенных в 1 мМ растворе карбоната натрия (желудочный зонд, 10 мл/кг),
группа 2: 100 мг/кг п/о в воде (желудочный зонд, 10 мл/кг).
Пробы крови отбирают в следующие моменты времени (3 животных на каждый момент времени и 1 образец на животное): через 0.25 ч, 0.5 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч и 24 ч после перорального введения.
В случае всех составов соединения примера 1 собранную таким образом кровь центрифугируют и плазму переносят в пробирки, содержащие 1М соляную кислоту. Концентрации в плазме фосфатного соединения (пролекарства) и его гидроксилированного гомолога (лекарственного средства) определяют одновременно, используя метод жидкостной хроматографии, сопряженной с масс-спектрометрическим детектированием (ТТХ-ЖХ-МС/МС). Граница детектирования для обоих соединений составляет 0.5 нг/мл.
Липидный состав лекарственного средства из соединения примера 1.
Лекарственное средство примера 1 приготовляют в смеси безводный этанол/полиэтиленгликоль 300/вода (10/40/50, об./об./об.), предназначенной для введения п/о путем. Исследование осуществляют на нескольких группах SCID мышей, которым вводят лекарственное средство примера 1 при следующих условиях:
группа 1: 3 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг), группа 2: 30 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг), группа 3: 25 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг),
группа 4: 100 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг).
Пробы крови отбирают в следующие моменты времени (3 животных на каждый момент времени и 3 пробы на животное для групп 1-2 и 1 проба на животное для групп 3 и 4):
п/о: перед введением и затем через 0.25 ч, 0.5 ч, 0.75 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 8 ч, 16 ч и 24 ч после перо-рального введения в дозе 3 и 30 мг/кг,
п/о: через 0.5 ч, 2 ч, 6 ч, 16 ч и 24 ч после перорального введения в дозе 25 мг/кг и через 0.5 ч, 1 ч, 2 ч, 6 ч, 16 ч, 30 ч и 48 ч после перорального введения в дозе 100 мг/кг.
Плазму из проб крови, собранных после введения липидных составов лекарственного средства из соединения примера 1, анализируют с помощью жидкостной хроматографии, сопряженной с масс-спектрометрическим детектированием. Граница количественного определения лекарственного средства из соединения примера 1 является меньшей или равна 0.5 нг/мл.
Некомпартментный фармакокинетический анализ осуществляют на средних значениях концентрации в плазме исследуемых соединений. Результаты приведены в табл. 4 и 5 ниже.
Результаты показывают, что при любой дозе (от 3 до 100 мг/кг) и любом носителе (липидный или водный состав) основная часть пролекарства формулы (I) быстро превращается in vivo в соответствующее лекарственное средство формулы (I') (см. табл. 4). Содержание в плазме крови пролекарства (Cmax, AUC) является низким по сравнению с содержанием соответствующего лекарственного средства. Результаты также показывают, что концентрация в плазме лекарственного средства, найденная подобным образом (после введения пролекарства), является эквивалентной или даже более высокой, чем концентрация, измеренная после прямого введения лекарственного средства пероральным путем (см. табл. 5).
Таблица 4
Введенное соединение
Найденное соединение
Пример 1
Лекарственное средство примера 1
Пример 1,3 мг/кг п/о
Липидный состав
Спа!1 (НГ/МЛ) = 16
Ттм(ч)=0.25 AUC, (н г. ч/мл) = 5
Cmax (нг/мл) = 342 Ттах(ч)= 0.25
AUCt (нг.ч/мл) = 314
Пример 1, 25 мг/кг п/о
Липидный состав
Ста!1 (нг/мл) = 244 Ттах (ч)= 0.25 AUC, (нг.ч/мл) = 92
Стах (нг/мл) = 6204 Ттах (Ч)= 0.5
AUC, (нг.ч/мл) = 20952
Пример 1,30 мг/кг п/о
Водный состав
Cmas (нг/мл) = 391 Ттм(ч)= 1.0 AUCt (нг.ч/мл) = 879
Стах (нг/мл) =11967
Ттах (Ч)= 0.5
AUCt (нг.ч/мл) = 49416
Пример 1, 100 мг/кг п/о
Водный состав
Сщах (нг/мл) = 359 Tmax(4)=2.0
AUC, (нг.ч/мл) = 797
Стах (НГ/МЛ) = 28066 Ттах (Ч)= 2.0
AUCt (нг.ч/мл) = 168478
Таблица 5
Введенное соединение
Найденное соединение
Лекарственное средство примера 1 1
Лекарственное средство примера 1,
Стах (нг/мл) = 295
3 мг/кг п/о
Ттах(ч)= 0.25
Липидный состав
AUCt (нг.ч/мл) = 225
Лекарственное средство примера 1,
Стах (нг/мл) = 5070
25 мг/кг п/о
Ттах(ч)=2.0
Липидный состав
AUCt (нг.ч/мл) = 20400
Лекарственное средство примера 1,
Стах (НГ/МЛ) = 8580
30 мг/кг п/о
Тта)((ч)= 1.0
Липидный состав
AUCt (нг.ч/мл) = 24200
Лекарственное средство примера 1,
Ста1( (нг/мл) = 25878
100 мг/кг п/о
Ттах(ч)= 0.5
Липидный состав
AUCt (нг.ч/мл) = 148046
Более конкретно, п/о введение пролекарства в водном носителе позволяет достичь концентраций лекарственного средства в плазме, которые эквивалентны или даже выше концентраций, полученных после прямого п/о введения лекарственного средства в липидном носителе. Следовательно, пролекарство дает преимущество в легкости получения состава в сравнении с соответствующим лекарственным средством, особенно в водной среде, что очень полезно в расчете на клинические исследования. Действительно, как показывает пример D, из лекарственного средства примера 1 трудно приготовить состав в водной среде.
Водный состав соединений примеров 20 и 25.
Соединения примеров 20 и 25 вводят пероральным путем в водной среде SCID мышам при сле
дующих условиях:
группа 1: 3 мг/кг п/о в растворе в 1М карбонате натрий (желудочный зонд, 10 мл/кг),
группа 2: 25 мг/кг п/о в растворе в 1М карбонате натрия (желудочный зонд, 10 мл/кг).
Пробы крови отбирают в следующие моменты времени (3 животных на каждый момент времени): через 0.25 ч, 0.5 ч, 1 ч, 2 ч, 6 ч и 24 ч после перорального введения.
Собранную таким образом кровь центрифугируют и плазму переносят в пробирки, содержащие 1М соляную кислоту. Концентрации в плазме фосфатного соединения (пролекарства) и его гидроксилиро-ванного гомолога (лекарственного средства) определяют одновременно, используя метод жидкостной хроматографии, сопряженной с масс-спектрометрическим детектированием (ТТХ-ЖХ-МС/МС). Граница детектирования для обоих соединений составляет 0.5 нг/мл.
Липидный состав лекарственного средства из соединений примеров 20 и 25.
Лекарственные средства из примерев 20 и 25 приготовляют в смеси полиэтиленгликоль 300/этанол/Р1то8а1 50PG (30/10/60, об./об./об.), предназначенной для введения п/о путем SCID мышам при следующих условиях:
группа 1: 3 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг),
группа 2: 25 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг).
Пробы крови отбирают в следующие моменты времени (3 животных на каждый момент времени): через 0.25 ч, 0.5 ч, 1 ч, 2 ч, 6 ч и 24 ч после перорального введения.
Собранную таким образом кровь центрифугируют и плазму переносят в пробирки, содержащие 1М соляную кислоту. Концентрации в плазме лекарственного средства определяют, используя метод жидкостной хроматографии, сопряженной с масс-спектрометрическим детектированием (ТТХ-ЖХ-МС/МС). Граница количественного определения составляет 0.5 нг/мл.
Осуществляют некомпартментный фармакокинетический анализ. Средние результаты приведены в табл. 6, 7, 8 и 9 ниже.
НО: не определено
НГКО: ниже границы количественного определения
Таблица 6
Таблица 7
Таблица 8
Результаты показывают, что, при любой дозе (3 или 25 мг/кг) основная часть пролекарств формулы (I) быстро превращается in vivo в соответствующие лекарственные средства формулы (I') (см. табл. 6, 7, 8 и 9). Содержание в плазме крови пролекарств (Cmax, AUC) является низким по сравнению с содержанием в плазме соответствующих лекарственных средств. Результаты также показывают, что концентрации в плазме лекарственных средств, найденные подобным образом (после введения пролекарств), эквивалентны концентрациям, найденным после прямого введения лекарственных средств пероральным путем (см. табл. 7 и 9).
Пример D. In vivo фармакокинетический профиль соединений формулы (I').
Фармакокинетический профиль N-(4-гидроксифенил)-3-{6-[((3S)-3-(4-морфолинилметил)-3,4-дигидро-2(1И)-изохинолинил)карбонил]-1,3-бензодиоксол-5-ил}-М-фенил-5,6,7,8-тетрагидро-1-индо-лизин карбоксамида (также называемого лекарственным средством примера 1) также оценивают в ли-пидном и водном составе на крысе Вистар.
Лекарственное средство примера 1 приготовляют в водной суспензии в гидроксиэтилцеллюлозе 1% (мас./об.) в воде и сравнивают с липидным составом, состоящим из смеси безводный эта-нол/полиэтиленгликоль 400/Phosal 50PG (10/30/60, об./об./об.). Два состава вводят пероральным путем самцам крыс Вистара (3 крысы на состав) в дозе 100 мг/кг п/о (желудочный зонд, 10 мл/кг).
Пробы крови отбирают в следующие моменты времени у каждого животного (3 животных/момент времени): через 0.25 ч, 0.5 ч, 0.75 ч, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 8 ч и 24 ч после перорального введения.
Концентрации в плазме исследуемого соединения определяют после экстрагирования с последующим использованием жидкостной хроматографии, сопряженной с масс-спектрометрическим детектированием. Граница количественного определения составляет 0.1 нг/мл. Результаты представлены в табл. ниже.
Таблица 10
Введенное соединение
Найденное соединение
Лекарственное средство примера 1
Лекарственное средство примера 1,100 мг/кг п/о
Водный состав
Сгаах (НГ/МЛ) = 816
AUC, (нг.ч/мл) = 3480
Лекарственное средство 1 , , , ,","
1 <лл / , I Стах (НГ/МЛ) = 5070
примера 1,100 мг/кг п/о ,гго , , \
Кг \ ~ AUCt (нг.ч/мл) = 42900 Липидный состав v '
Результаты показывают, что липидный состав позволяет достичь значительно лучшего содержания лекарственного средства примера 1 в плазме крови, чем водный состав. Пример Е. In vitro исследование на клетках Caco-2 человека.
Клеточный транспорт от А к В (от апикального к базолатеральному) фосфатных соединений формулы (I) и соединений формулы (I') (соответствующих лекарственных средств) изучают на клетках Сасо-2 человека. Каждое соединение депонируют апикально при концентрациях 1 или 3 мкМ (в двух повтор-ностях) и затем инкубируют в течение 120 мин.
В ходе эксперимента отбирают несколько образцов:
апикальный: непосредственно после депонирования (t=0) и на 120 минуте, базолатеральный: в конце эксперимента (120 мин).
Концентрации фосфатного соединения (пролекарства) и/или его гидроксилированного гомолога
(лекарственного средства) определяют с помощью жидкостной хроматографии, сопряженной с масс-спектрометрическим детектированием (ЖХ-МС/МС). Граница количественного определения для обоих соединений составляет 2 нг/мл.
Кажущуюся проницаемость (Papp) и прогнозированную абсорбированную фракцию (Fabs) у людей рассчитывают для пролекарства, для лекарственного средства после инкубирования пролекарства и для лекарственного средства после инкубирования лекарственного средства (Hubatsch и др., Nat Protoc. 2007; 2(9), 2111-2119).
Также рассчитывают экспериментальный выход, который соответствует соотношению (в процентах) общего количества соединения, найденного в конце эксперимента, к инкубированному.
Результаты были сведены в табл. 11. Они показывают, что пролекарства соединений формулы (I) заметно разлагаются в ходе эксперимента (экспериментальные выходы <1.5%), таким образом, везде вызывая образование в значительных количествах сопряженных лекарственных средств.
В конечном итоге, прогнозированная абсорбированная фракция у людей для лекарственных средств, образованных после инкубирования пролекарств, аналогична таковой, полученной после инкубирования лекарственных средства.
Таблица 11
Введенное соединение
Найденные соединения
Пример 1
Лекарственное средство примера 1
Пример 1
РОРР (Ю* см/с) = 0.01
Fabs (%) = НО
Рарр{10*см/с) =0.83 Fate (%) = 71
Введенное соединение
Найденные соединения
Пример 1
Лекарственное средство примера 1
Выход (%) =0
Выход (%)=42
Лекарственное средство примера 1
Рарр (10"6 см/с) = 0.65
Fate (%) = 67
Выход (%) =37
Пример 4
Лекарственное средство примера 4
Пример 4
Рарр (Ю-6 см/с) = 0.33 Fabs (%) = НО
Выход (%)=1.3
Рарр (10"* см/с) = 0.43 Fabs (%) =69 Выход (%)=38
Лекарственное средство примера 4
Рарр (10"" см/с) = 0.21 Fate (%) =46
Выход (%)=20
Пример 5
Лекарственное средство примера 5
Пример 5
Р,рр (10* см/с) = 0.26 Fabs (%) = НО
Выход (%) =1.2
Рарр(10"Ь см/с) =2.3 Fabs (%) = 86
Выход (%) =78
Лекарственное средство примера 5
Рарр (10"* см/с) = 0.7
Fabs(%) = 68
Выход (%)=34
Пример 20
Лекарственное средство примера 20
Пример 20
Рарр (10 " см/с) = 0 Fate (%) = НО
Выход (%) = 0.94
Рарр (Ю-* СМ/С) =0.16 Fsbs(%)= 16 Выход (%) = 100
Лекарственное средство примера 20
Рарр(Ю* см/с) = 0.29 Fabs (%) = 25 Выход (%)= 91
Пример 21
Лекарственное средство примера 21
Пример 21
Рарр(Ю-Ь СМ/С) = 0
Fpbs (%) = НО Выход (%) = 0.83
Рарр (10* см/с) = 0.21 Fabs(%)= 19
Выход (%)= 100
Лекарственное средство примера 21
Р0рр (10"* см/с) = 0.27 Fabs (%) = 24 Выход (%)= 82
Пример 25
Лекарственное средство примера 25
Пример 25
Рарр (Ю"* СМ/С) = 0 Fabs (%) = НО
Выход (%)= 33
Рарр {10"* см/с) = 0.22 Fabs (%) = 20 Выход (%) = 48
Лекарственное средство примера 25
Рарр (10* см/с) = 0.49 Fabs (%) = 40 Выход (%)= 100
НО: не определено
Пример F. Антиопухолевая активность in vivo.
Антиопухолевую активность соединений настоящего изобретения оценивают на ксенотрансплан-татной модели лейкозных клеток RS4; 11.
1х107 клеток RS4; 11 трансплантируют под кожу иммуносупрессивным мышам (штамм SCID). Через 25-30 дней после трансплантации, когда масса опухоли достигнет приблизительно 150 мм3, мышей лечат пероральным путем различными соединениями в двух различных режимах (ежедневное введение в течение пяти дней в неделю в течение двух недель или два введения в неделю в течение двух недель). Массу опухоли измеряют дважды в неделю с начала лечения.
Соединения настоящего изобретения обладают антиопухолевой активностью при пероральном пути введения на модели лейкоза RS4; 11 (острый лимфобластный лейкоз). Полученные результаты показывают, что соединения настоящего изобретения способны индуцировать значительную регрессию опухолей.
1. Фосфатное соединение формулы (I)
Пример G. Фармацевтическая композиция.
в которой X и Y представляют собой атом углерода или атом азота, при этом они не могут одновременно представлять собой два атома углерода или два атома азота,
A1 и А2 вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют необязательно замещенный ароматический или неароматический гетероцикл Het, состоящий из 6 кольцевых членов,
или A1 и А2 независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)полигалогеналкильную или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,
Т представляет собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, необязательно замещенную одним-тремя атомами галогена, группу (С^СОалкил-М*.^ или группу (С1-С4)алкил-(Ж <5,
R1 и R2 независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,
или R1 и R2 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероциклоалкил,
R3 представляет собой циклоалкильную группу, гетероциклоалкильную группу, арильную группу или гетероарильную группу, при этом один или несколько атомов углерода указанных групп или их возможных заместителей могут быть дейтерированными,
R4 представляет собой фенильную или пиримидин-5-ильную группу, обе замещенные в пара-положении одной из следующих фосфатных групп: -ОРО(ОМ)(ОМ'), -OPO(OM)(O-M1+), -OPO(O-M1+)(O-M2+), -ОРО(О-)(О-)Мз2+, -OPO(OM)(O[CH2CH2O]nCH3) или -ОРО^М^ХО^С^О^Шз), где М и М' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветв
ленную (С2-С6)алкинильную группу, циклоалкил или гетероциклоалкил, оба состоящие из 5 или 6 кольцевых членов, тогда как M1+ и М2+ независимо друг от друга представляют собой фармацевтически приемлемый однозарядный катион, а М32+ представляет собой фармацевтически приемлемый двухзарядный катион, и n означает целое число от 1 до 5, где один или несколько атомов углерода фенильной и пири-мидин-5-ильной группы или их возможных заместителей могут быть дейтерированными,
R5 представляет собой водород или атом галогена, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу или линейную или разветвленную (C1-С6)алкоксигруппу,
R6 представляет собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, Ra, Rb, Rc и Rd, каждый независимо от других, представляет собой R7, атом галогена, линейную или разветвленную (С1-С6)алкоксигруппу, гидроксигруппу, NR7R7'-CO-(C0-C6)алкил-O-, или заместители пары (Rb,Rc) вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют кольцо, состоящее из 5-7 кольцевых членов, которое может содержать от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из кислорода и серы, при этом один или несколько атомов углерода кольца, определенного выше, могут быть дейтерирован-ными или замещенными 1-3 группами, выбранными из галогена и линейного или разветвленного (С1-С6)алкила,
R7 и R7' независимо друг от друга представляют собой водород, линейный или разветвленный (С1-С6)алкил, или R7 и R7' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют гетероцикл, состоящий из 5-7 кольцевых членов, где
"арил" означает фенильную, нафтильную, бифенильную или инденильную группу,
"гетероарил" означает любую моно- или бициклическую группу, состоящую из 5-10 кольцевых членов, имеющую по меньшей мере один ароматический фрагмент и содержащую от 1 до 4 гетероато-мов, выбранных из кислорода, серы и азота (включая четвертичные атомы азота),
"циклоалкил" означает любую моно- или бициклическую, неароматическую, карбоциклическую группу, содержащую от 3 до 10 кольцевых членов,
"гетероциклоалкил" означает любую моно- или бициклическую, неароматическую, конденсированную или спирогруппу, состоящую из 3-10 кольцевых членов и содержащую от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из кислорода, серы, SO, SO2 и азота,
причем арильные, гетероарильные, циклоалкильные и гетероциклоалкильные группы и группы ал-кил, алкенил, алкинил и алкокси могут быть замещены 1-3 группами, выбранными из линейного или разветвленного (С1-С6)алкила, (С3-С6)спиро, линейного или разветвленного (^-С^алкокси, (С1-С6)алкил-S-, гидрокси, оксо (или N-оксида, в соответствующих случаях), нитро, циано, -COOR', -OCOR', NR'R", линейного или разветвленного (С1-С6)полигалогеналкила, трифторметокси, (С1-С6)алкилсульфонила, галогена, арила, гетероарила, арилокси, арилтио, циклоалкила, гетероциклоалкила, необязательно замещенного одним или несколькими атомами галогена или алкильными группами, где R' и R" независимо друг от друга представляют собой атом водорода или линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу,
причем Het группа, определенная в формуле (I), может быть замещена 1-3 группами, выбранными из линейного или разветвленного (С1-С6)алкила, гидрокси, линейного или разветвленного (С1-С6)алкокси, NR1'R1" и галогена, где R1' и R1" принимают значения, определенные для групп R' и R", упомянутых выше,
его энантиомеры и диастереоизомеры и его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
2. Соединение формулы (I) по п.1, в которой R4 представляет собой фенил, замещенный в пара-положении группой формулы -ОРО(ОМ)(ОМ'), -OPO(OM)(O-M1+), -OPO(O-M1+)(O-M2+), -ОРО(О-)(О-)М32+, -OPO(OM)(O[CH2CH2O]nCH3) или -ОРО(О-Мl+)(О[СН2СН2О]nCHз), где М и М' независимо друг от друга представляют собой атом водорода, линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкенильную группу, линейную или разветвленную (С2-С6)алкинильную группу, циклоалкил или гетероциклоалкил, оба состоящие из 5 или 6 кольцевых членов, тогда как M1+ и М2+ независимо друг от друга представляют собой фармацевтически приемлемый однозарядный катион, а М32+ представляет собой фармацевтически приемлемый двухзарядный катион, и n означает целое число от 1 до 5, где фенильная группа необязательно может быть замещена одним или несколькими атомами галогенов.
3. Соединение формулы (I) по п.1, в которой R4 представляет собой фенил, замещенный в пара-положении группой формулы -OPO(O-Na+)(O-Na+).
4. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-3, в которой X представляет собой атом углерода и Y представляет собой атом азота.
5. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-3, в которой группа
представляет собой 5,6,7,8-тетрагидроиндолизин, индолизин или диметилированный пиррол.
6. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-5, в которой Т представляет собой метильную, (мор-фолин-4-ил)метильную или 3-(морфолин-4-ил)пропильную группу.
7. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-6, в которой Ra и R 8. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-6, в которой Ra и Rd, каждый, представляет собой атом водорода, Rb представляет собой атом галогена и Rc представляет собой метоксигруппу.
9. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-6, в которой Ra, Rb и Rd, каждый, предпочтительно представляет собой атом водорода и Rc представляет собой группу NR7R7'-CO-(Co-C6^ra№O-.
10. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-9, в которой R3 предпочтительно представляет собой группу, выбранную из фенила, 1Н-индола, 1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, пиридина, 1Н-пиразола, 1Н-пиррола и 2,3-дигидро-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, причем эти группы необязательно имеют один или несколько заместителей, выбранных из линейного или разветвленного (^-С^алкила, циано и тридейте-рометила.
11. Соединение формулы (I) по п.1, выбранное из следующих:
4-[{[3-(6-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензо-диоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат,
4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фе-нил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил] карбонил}(пиридин-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат,
4-({[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фе-нил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}[1-(тридейтерометил)-1Н-пиразол-4-ил]амино)фенил динат-рийфосфат,
4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фе-нил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динат-рийфосфат,
4-[{ [5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фе-нил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1-метил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрий-фосфат,
4-[{[5-(5-хлор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фе-нил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат,
4-[(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил){[5-(5-фтор-2-{ [^)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3 -ил]карбонил}амино] фенил динатрийфосфат,
4-[{[5-(5-фтор-2-{[(3S)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фе-нил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат,
их энантиомеры и диастереоизомеры и их соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
12. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[3-(6-{[^)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}-1,3-бензодиоксол-5-ил)-5,6,7,8-тетрагидроин-долизин-1-ил]карбонил}(фенил)амино]фенил динатрийфосфат.
13. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-хлор-2-{[^)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(пиридин-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
14. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-({[5-(5-хлор-2-{[^)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}[1-(тридейтерометил)-1Н-пиразол-4-ил]амино)фенил динатрийфосфат.
15. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-хлор-2-{[^)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
16. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-хлор-2-{[^)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(5-циано-1-метил-1Н-пиррол-3-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
13.
17. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-хлор-2-{[(38)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
18. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[(5-циано-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил){[5-(5-фтор-2-{[(38)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил} фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3 -ил] карбонил}амино] фенил динатрийфосфат.
19. Соединение формулы (I) по п.1, которое представляет собой 4-[{[5-(5-фтор-2-{[(38)-3-(морфолин-4-илметил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил]карбонил}фенил)-1,2-диметил-1Н-пиррол-3-ил]карбонил}(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)амино]фенил динатрийфосфат.
20. Способ получения соединений формулы (I) по п.1, характеризующийся тем, что в качестве исходного вещества используют соединение формулы (II)
в которой Ra, Rb, Rc и Rd принимают значения, определенные в п.1,
причем соединение формулы (II) подвергают реакции Хека, в водной или органической среде, в присутствии палладиевого катализатора, основания, фосфина и соединения формулы (III)
Alk
в которой А1, А2, X и Y принимают значения, определенные в п.1, и Alk представляет собой линейную или разветвленную (С1-С6)алкильную группу, с получением соединения формулы (IV)
в которой А1, А2, X, Y, Ra, Rb, Rc и Rd принимают значения, определенные в п.1, и Alk принимает значения, определенные выше,
альдегидную группу соединения формулы (IV) окисляют до карбоновой кислоты с образованием соединения формулы (V)
Alk \
(V)
в которой A1, A2, X, Y, Ra, Rb, Rc и R принимают значения, определенные в п.1, и Alk принимает значения, определенные выше,
соединение формулы (V) затем подвергают пептидному сочетанию с соединением формулы (VI)
в которой А1, А2, X, Y, Ra, Rb, Rc, Rd, T и R5 принимают значения, определенные в п.1, и Alk принимает значения, определенные выше,
сложноэфирную группу соединения формулы (VII) гидролизуют с получением соответствующей карбоновой кислоты или карбоксилата, которые могут быть превращены в производное по кислотной группе, такое как соответствующий ацилхлорид или ангидрид, перед сочетанием с амином NHR3R4, где R3 и R4 имеют те же значения, что и в п.1, прежде чем подвергнуть действию пирофосфатного, фосфо-натного или фосфорильного соединения в основных условиях, причем соединение, полученное таким образом, может быть необязательно гидролизовано или гидрогенолизировано с получением соединения формулы (I),
соединение формулы (I) может быть очищено в соответствии с обычными методами разделения, превращено, при необходимости, в его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием и необязательно разделено на его изомеры в соответствии с обычными методами разделения,
где в любое время, признанное подходящим в ходе описанного выше способа, подходящие группы (такие как гидрокси, амино) реагентов или промежуточных соединений синтеза могут быть защищены и затем лишены защиты в соответствии с требованиями синтеза.
21. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) по любому из пп.1-19 или его соль присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями.
22. Фармацевтическая композиция по п.21 для применения в качестве пролекарства проапоптотиче-ского агента.
23. Фармацевтическая композиция по п.22 для применения для лечения злокачественных новообразований, аутоиммунных заболеваний и заболеваний иммунной системы.
24. Фармацевтическая композиция по п.23 для применения для лечения рака мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, колоректального рака, рака пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, неходжкинских лимфом, меланом, злокачественных заболеваний крови, миелом, рака яичников, немелкоклеточного рака легкого, рака предстательной желе
21.
зы и мелкоклеточного рака легкого.
25. Применение фармацевтической композиции по п.21 для изготовления лекарственного средства для использования в качестве проапоптотического агента.
26. Применение фармацевтической композиции по п.21 для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения злокачественных новообразований, аутоиммунных заболеваний и заболеваний иммунной системы.
27. Применение по п.26 фармацевтической композиции для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения рака мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, колоректального рака, рака пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, неходжкинских лимфом, меланом, злокачественных заболеваний крови, миелом, рака яичников, не-мелкоклеточного рака легкого, рака предстательной железы и мелкоклеточного рака легкого.
28. Применение соединения формулы (I) по любому из пп.1-19 или его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения рака мочевого пузыря, головного мозга, молочной железы и матки, хронических лимфоидных лейкозов, колоректального рака, рака пищевода и печени, лимфобластных лейкозов, не-ходжкинских лимфом, меланом, злокачественных заболеваний крови, миелом, рака яичников, немелко-клеточного рака легкого, рака предстательной железы и мелкоклеточного рака легкого.
29. Фармацевтическая комбинация соединения формулы (I) по любому из пп.1-19 с противоопухолевым средством, выбранным из генотоксичных средств, митотических ядов, антиметаболитов, ингибиторов протеосом, ингибиторов киназ и антител.
30. Фармацевтическая композиция, содержащая комбинацию по п.29 в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми наполнителями.
31. Фармацевтическая комбинация по п.29 для лечения злокачественных новообразований.
32. Применение фармацевтической комбинации по п.29 для изготовления лекарственного средства для лечения злокачественных новообразований.
33. Применение соединения формулы (I) по любому из пп.1-19 в сочетании с радиотерапией для лечения злокачественных новообразований.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
027444
- 1 -
027444
- 1 -
027444
- 1 -
027444
- 1 -
027444
- 1 -
027444
- 4 -
027444
- 39 -
027444
- 39 -