|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Соединение, выбранное из группы, включающей      и его фармацевтически приемлемые сольваты, соли, таутомеры и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях.
(19)
Евразийское
патентное
ведомство
027416
(13) B1
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.07.31
(21) Номер заявки 201401062
(22) Дата подачи заявки 2013.03.19
(51) Int. Cl.
C07D 487/04 (2006.01) A61K31/4985 (2006.01) A61P 7/00 (2006.01)
(54) БИЦИКЛИЧЕСКИЕ ПИРАЗИНОНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ
(31) 12002215.7
(32) 2012.03.28
(33) EP
(43) 2015.04.30
(86) PCT/EP2013/000827
(87) WO 2013/143663 2013.10.03
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
МЕРК ПАТЕНТ ГМБХ (DE)
(72) Изобретатель:
Дорш Дитер, Бухшталлер Ханс-Петер (DE), Муане Жерар (FR), Вегенер Ансгар (DE)
(74) Представитель:
Веселицкая И.А., Кузенкова Н.В., Веселицкий М.Б., Каксис Р.А., Белоусов Ю.В., Куликов А.В., Кузнецова Е.В., Соколов Р.А., Кузнецова Т.В. (RU)
(56) US-A1-2011053929 US-A1-2009209523
(57) Соединения в соответствии с изобретением, указанные в п.1, являются ингибиторами танкиразы и могут применяться, среди прочего, для лечения заболеваний, таких как злокачественное новообразование, сердечно-сосудистые заболевания, поражения центральной нервной системы и различные формы воспаления.
Предпосылки создания изобретения
Задачей изобретения является обнаружение новых соединений, которые обладают ценными свойствами, в частности таких, которые можно применять для получения лекарственных средств.
Настоящее изобретение относится к бициклическим пиразиноновым производным, которые инги-бируют активность танкираз (TANK) и поли(ADP-рибоза)полимеразы PARP-1. Таким образом, соединения согласно настоящему изобретению пригодны для лечения заболеваний, таких как злокачественное новообразование, рассеянный склероз, сердечно-сосудистые заболевания, поражения центральной нервной системы и различные формы воспаления.
Ядерный фермент поли(ADP-рибоза) полимераза-1 (PARP-1) является представителем семейства ферментов PARP. Это семейство ферментов роста включает PARP, такие как, например, PARP-1, PARP-2, PARP-3 и Vault-PARP; и танкиразы (TANK), такие как, например, TANK-1 и TANK-2. PARP также обозначается как поли(аденозин-5'-дифосфорибоза)полимераза или PARS (поли(ADP-рибоза)синтетаза).
Полагают, что TANK-1 необходима для полимеризаций связанной с митотическим веретеном по-ли(ADP-рибозы). Поли(ADP-рибозил)ирующая активность TANK-1 должна быть решающей для точного образования и поддержания биполярности веретена. Кроме того, полагают, что PARP активность TANK-1 необходима для нормального разделения теломер перед анафазой. Интерференция с танкиразной PARP активностью приводит к аберрантному митозу, который вызывает временную остановку клеточного цикла, возможно, вследствие активации контрольной точки веретена, с последующей клеточной гибелью. Таким образом, полагают, что ингибирование танкираз имеет цитотоксическое действие на проли-ферирующие опухолевые клетки (WO 2008/107478).
Ингибиторы PARP описаны М. Rouleau и др. в Nature Reviews, т. 10, 293-301 в клинических исследованиях злокачественных новообразований (табл. 2, стр. 298).
В соответствии с обзором Horvath и Szabo (Drug News Perspect 20(3), April 2007, 171-181) в самых последних исследованиях было показано, что PARP ингибиторы усиливают гибель раковых клеток главным образом в связи с их препятствованием репарации ДНК на различных уровнях. В самых последних исследованиях также было показано, что PARP ингибиторы ингибируют ангиогенез либо путем ингиби-рования экспрессии фактора роста, либо путем ингибирования индуцированных фактором роста клеточных пролиферативных ответов. Эти данные также могут оказывать влияние на характер противораковых эффектов PARP ингибиторов in vivo.
Также в исследовании Tentori и др. (Eur. J. Cancer, 2007, 43 (14) 2124-2133) было показано, что PARP ингибиторы аннулируют индуцированную VEGF или плацентным фактором роста миграцию и предотвращают образование трубочкообразных сетей в клеточных системах и повреждают ангиогенез in vivo. В исследовании также показано, что индуцированный фактором роста ангиогенез является дефектным у PARP-1 "knock-out" мышей. Результаты исследования обеспечивают подтверждение для нацеливания PARP на антиангиогенез, добавляя новые терапевтические показания в применение PARP ингибиторов при лечении злокачественного новообразования.
Хорошо известно, дефекты в консервативных путях передачи сигналов играют ключевую роль в происхождении и поведении, по существу, всех злокачественных новообразований (E.A.Fearon, Cancer Cell, т. 16, изд. 5, 2009, 366-368). Wnt путь является мишенью для противораковой терапии. Ключевой особенностью Wnt пути является регулированный протеолиз (деградация) р-катенина с помощью комплекса, разрушающего р-катенин. Белки, такие как WTX, АРС или Axin, задействованы в процесс разложения. Правильное разложение р-катенина является важным для избегания несоответствующей активации Wnt пути, которая наблюдается при многих злокачественных новообразованиях. Танкиразы инги-бируют активность Axin и, следовательно, ингибируют разложение р-катенина. В результате этого ингибиторы танкиразы повышают разложение р-катенина. В недавнем издании журнала Nature были предложены не только важные новые сведения относительно белков, регулирующих Wnt передачу сигналов, а также дополнительно подтверждается подход антагонизации уровней р-катенина и локализации с помощью небольших молекул (Huang и др., 2009; Nature, т. 461, 614-620). Соединение XAV939 ингибирует рост DLD-1-раковых клеток. Они обнаружили, что XAV9393 блокирует Wnt-стимулированное накопление р-катенина путем повышения уровней белков AXIN1 и AXIN2. В последующей работе авторами было показано, что XAV939 регулирует уровни AXIN посредством ингибирования танкираз 1 и 2 (TNKS1 и TNKS2), которые обе являются членами семейства белков поли(ADP-рибоза)полимеразы (PARP) (S.J. Hsiao и др., Biochimie 90, 2008, 83-92).
Было обнаружено, что соединения в соответствии с изобретением и их соли обладают чрезвычайно ценными фармакологическими свойствами, а также хорошей переносимостью.
Настоящее изобретение в особенности относится к соединениям, которые ингибируют танкиразу 1 и 2 и применимы для лечения заболеваний и осложнений, индуцированных TANK.
Кроме того, соединения в соответствии с изобретением могут использоваться для выделения и исследования активности или экспрессии TANK. Дополнительно они особенно пригодны для применения в диагностических методах для заболеваний в связи с нерегулированной или нарушенной активностью
TANK.
Хозяин или пациент может принадлежать к любому из видов млекопитающих, например к видам приматов, в частности к людям; грызунам, включая мышей, крыс и хомяков; кроликам, лошадям, коровам, собакам, кошкам и т.д. Животные модели представляют интерес для экспериментальных исследований, обеспечивая модель для болезней человека.
Чувствительность определенной клетки к лечению с помощью соединений в соответствии с данным изобретением может определяться с помощью анализов in vitro. Типично, к культуре клеток прибавляют соединение в соответствии с данным изобретением при различных концентрациях в течение периода времени, который является достаточным для того, чтобы позволить активным агентам, таким как анти-IgM, индуцировать клеточный ответ, такой как экспрессия поверхностного маркера, обычно от одного часа до одной недели. In vitro анализ может осуществляться при использовании культивируемых клеток, полученных из крови или из образца биопсии. Количество экспрессированного поверхностного маркера оценивают с помощью проточной цитометрии при использовании специфических антител, которые узнают маркер.
Доза варьирует в зависимости от используемого специфического соединения, специфического заболевания, состояния пациента и т.д. Терапевтическая доза типично является достаточной для того, чтобы значительно уменьшить численность нежелательной клеточной популяции в целевой ткани при поддержании жизнеспособности пациента. Лечение в общем случае продолжается до возникновения значительного снижения, например снижения, которое составляет по крайней мере 50% клеточной нагрузки, и может продолжаться до отсутствия существенного обнаружения нежелательных клеток в организме.
Известный уровень техники
Другие пирролопиразиноны описаны в качестве антагонистов рецептора V1b и в качестве промежуточных соединений для получения этих соединений в WO 2009/130231 А1 и в WO 2009/130232 А1.
Другие пиразолопиразиноны описаны в качестве промежуточных соединений для получения ингибиторов GSK3 в WO 2009/007029 А1.
Другие пиразолопиразиноны описаны в качестве промежуточных соединений для получения ингибиторов киназы PI3 в WO 2011/089400 А1.
Краткое изложение сущности изобретения
Изобретение относится к соединениям, выбранным из группы, включающей
Название
"АГ
3-(4-бензилоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А2"
3-фенил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A3"
3-(3-хлорфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А4"
3-(3-метоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А5"
3-(5,5,8,8-тетраметил-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А6"
3-(4-нитрофенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А7"
3-(4-метоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А8"
3-(3,4-диметоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А9"
3-бензо[1,3]диоксол-5-ил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А10"
3-(4-фторфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"АН"
3-(4-дареда-бутилфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А12"
3-и-толил-2Н-пирроло[1,2-а] пиразин-1 -он
"А13"
3-(4-трифторметилфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А14"
3-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А15"
6-(4-дареда-бутилфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А16"
6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А17"
6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А18"
6-(4-да/?еда-бутилфенил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А19"
2-гидроксиметил-6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А20"
2-гидроксиметил-6-(4-изопропоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А2Г
2-гидроксиметил-6-[4-(5-метил-[1,2,4]оксадиазол-3-ил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А22"
2-гидроксиметил-6-(1-изопропил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А23"
6-циклогексил-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А24"
3-(4-бромфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А25"
3-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А26"
3-{4-[1-(2-метоксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А27"
3-{4-[1-(2-пирролидин-1-илэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А28"
сложный метиловый эфир 4-(1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-3-ил)-бензойной кислоты
"А29"
3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А30"
6-(4-дареда-бутилфенил)-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A3 Г
3-(4-{ 1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-фенил)-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
"А32"
3-{4-[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"АЗЗ"
2-хлорметил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А34"
2-метил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А35"
3-(4-да/?еда-бутилфенил)-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А36"
2-бромметил-6-(4-бромфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А37"
2-метил-6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А38"
3-(4-да/?еда-бутилфенил)-7-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А39"
6-(4-бромфенил)-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А40"
6-(4-бромфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А41"
2-гидроксиметил-6-(6-пирролидин-1-илпиридин-3-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А42"
6-(6-пирролидин-1-илпиридин-3-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А43"
6-[4-(5-метил-[1,2,4]оксадиазол-3-ил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А44"
6-(1-дареда-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А45"
2-(гидроксиметил)-6-[1-(4-метоксифенил)-4-пиперидил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А46"
6- [4-( 1 -гидрокси-1 -метилэтил)фенил] -2-метил-5Н-пиразоло[ 1,5 -а]пиразин-4-он
"А47"
6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А48"
2-метил-6-(6-пирролидин-1-ил-3-пиридил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А49"
2-метил-6-[4-(5-метил-[1,2,4]оксадиазол-3-ил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А50"
6-циклогексил-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А5Г
2-метил-6-(1-изопропил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А52"
2-метил-6-(1-дареда-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А53"
2-метил-6-[1-(4-метоксифенил)-4-пиперидил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А54"
2-метил-6-(2-пирролидин-1-илпиримидин-5-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А55"
6-(4-да/?еда-бутилфенил)-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А56"
3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-7-метил-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А57"
3-(1-шреш-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-7-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А58"
3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а] пиразин-1-он
"А59"
7-фтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А60"
7-хлор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А6Г
3-[4-(1-этил-1-гидроксипропил)-фенил]-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А62"
3-[4-( 1-гидрокси- 1-метилэтил)-фенил]-1 -оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-7-карбонитрил
"А63"
7-фтор-3-[4-(1-фтор-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А64"
6-(4-да/?еда-бутилфенил)-2-фторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А65"
2-гидроксиметил-6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А66"
6-(4-да/?еда-бутилфенил)-2-дифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А67"
6-(4-бромфенил)-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А68"
сложный метиловый эфир 4-(4-оксо-2-трифторметил-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-6-ил)-бензойной кислоты
"А69"
6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А70"
7-фтор-З - {4- [ 1 -(2-гидроксиэтокси)-1 -метилэтил] -фенил } -2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А7Г
7-фтор-З-{4-[1-(2-метоксиэтокси)-1-метилэтил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А72"
3-[4-(1-амино-1-метилэтил)-фенил]-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А73"
7-фтор-3-[4-(2-метилтетрагидрофуран-2-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А74"
7-фтор-3-[4-(4-гидрокси-1-метиленбутил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А75"
3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А76"
3-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А77"
7-фтор-3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а] пиразин-1-он
"А78"
7-хлор-3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а] пиразин-1-он
"А79"
3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А80"
3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-
1-OH
"А81"
7-фтор-3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А82"
7-хлор-3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А83"
6,7-дифтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А84"
6-фтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А85"
7-фтор-3-[4-(1-гидроксициклопентил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А86"
гидрохлорид 3-[4-(3-гидроксиазетидин-3-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она
"А87"
3 - [4-( 1 -гидрокси-1 -метилэтил)фенил] -6-метил-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А88"
7-хлор-3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А89"
6-(1-дареда-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А90"
7-фтор-3-[4-(1 -метил- 1Н-пиразол-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А91"
7-метил-3-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А92"
3-(4-дареда-бутилфенил)-1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-7-карбонитрил
"А93"
7-фтор-3-фенил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А94"
3-(4-бромфенил)-6-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А95"
3 - [4-( 1 -гидрокси-1 -метилэтил)фенил] -6-метил-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А96"
6-(дифторметил)-3-[4-(1 -гидрокси-1 -метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А97"
6-(трифторметил)-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А98"
3-[4-(3-гидроксипирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А99"
3-[4_(4-гидрокси-4-пипер идил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а] пиразин-1-он
"А100"
3-[4-(3-гидрокси-1-метилазетидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A101"
3-[4-(3-гидрокси-1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A102"
3-[4-(4-гидрокси-1-метил-4-пиперидил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A103"
7-фтор-3-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A104"
7-фтор-3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A105"
7-хлор-3-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A106"
7-хлор-3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A107"
7-хлор-3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A108"
3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A109"
7-фтор-3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A110"
3-[4-(3-гидроксиоксетан-3-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"Alll"
3-[4-(1-гидрокси-циклобутил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
и их фармацевтически приемлемым сольватам, солям, таутомерам и стереоизомерам, включая их смеси во всех соотношениях.
Изобретение также относится к оптически активным формам (стереоизомерам), энантиомерам, рацематам, диастереомерам и гидратам и сольватам этих соединений.
Термин сольваты соединений обозначает аддукты молекул инертного растворителя на соединениях, которые образуются благодаря их силе взаимного притяжения. Сольваты представляют собой, например, моно- или дигидраты или алкоголяты.
Подразумевается, что изобретение также относится к сольватам солей.
Термин фармацевтически приемлемые производные обозначает, например, соли соединений в соответствии с изобретением и также так называемые пролекарства соединений.
Как используется в настоящей заявке и если специально не указано иначе, термин "пролекарство" обозначает производное соединения в соответствии с изобретением, которое может быть гидролизовано, окислено или по-другому реагировать в биологических условиях (in vitro или in vivo) с обеспечением активного соединения, в частности соединения в соответствии с изобретением. Примеры пролекарств включают, но не ограничиваясь только ими, производные и метаболиты соединения в соответствии с изобретением, которые включают биогидролизируемые компоненты, такие как биогидролизируемые амиды, биогидролизируемые сложные эфиры, биогидролизируемые карбаматы, биогидролизируемые карбонаты, биогидролизируемые уреиды, и биогидролизируемые аналоги фосфата. В определенных вариантах осуществления пролекарства соединений с карбоксильными функциональными группами пред
ставляют собой низшие алкиловые сложные эфиры карбоновой кислоты. Карбоксилатные сложные эфи-ры легко образуются путем эстерификации любых фрагментов карбоновой кислоты, присутствующих в молекуле. Пролекарства типично можно приготавливать, используя хорошо известные методы, такие как методы, описанные в Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery 6-е изд. (Donald J. Abraham ред., 2001, Wiley) и Design and Application of Prodrugs (H.Bundgaard ред., 1985, Harwood Academic Publishers Gmfh).
Выражение "эффективное количество" обозначает количество лекарственного средства или фармацевтического активного компонента, которое вызывает в ткани, системе, животном или человеке биологическую или медицинскую ответную реакцию, которую предполагает или желает получить, например, исследователь или лечащий врач.
Дополнительно выражение "терапевтически эффективное количество" обозначает то количество, которое имеет следующие последствия по сравнению с соответствующим субъектом, который не получал этого количества: улучшение лечения, излечение, предотвращение или элиминация заболевания, синдрома, состояния, жалобы, расстройства или побочных действий или также уменьшение прогресси-рования заболевания, жалобы или расстройства.
Термин "терапевтически эффективное количество" также охватывает количества, которые эффективны для повышения нормальной физиологической функции.
Изобретение также относится к применению смесей соединений в соответствии с изобретением, например смесей двух диастереомеров, например, в соотношении 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 или 1:1000.
Особенно предпочтительными являются смеси стереоизомерных соединений.
"Таутомеры" относятся к изомерным формам соединения, которые находятся в равновесии друг с другом. Концентрации изомерных форм будут зависеть от окружения, в котором находится соединение, и могут отличаться в зависимости от того, например, будет ли соединение представлять собой твердое вещество или находится в органическом или водном растворе.
Соединения, раскрытые в изобретении, могут быть получены согласно способу получения, который отличается тем, что
а) соединение формулы II
в которой R1, X и Y имеют значения, указанные ниже,
А' представляет собой неразветвленный или разветвленный алкил, который имеет 1, 2, 3 или 4 атома С,
подвергают реакции с NH3, NH4OAc или (NH4)2CO3, или b) соединение формулы III
в которой R1, X и Y имеют значения, указанные в ниже,
циклизуют с помощью Н2О2 в основных условиях, или
c) радикал R1 и/или Y превращают в другой радикал R1 и/или Y путем
i) превращения COOH или CHO в Н,
ii) превращения сложноэфирной группы в спиртовую группу,
iii) превращения галогенированного фенильного кольца в реакции сочетания Сузуки в арилирован-ное фенильное кольцо,
iv) превращения галогенированой алкильной группы в алкильную группу, или
d) соединение формулы I
в которой R1 представляет собой Н, F, Cl, CN, СН3, СН2ОН, CH2Cl, CH2Br, CF3, CHF2 или CH2F,
представляет собой Н или А, R3 представляет собой Н, F, Cl, СН3, CF3 или CHF2,
X представляет собой CR3 или N,
Y представляет собой Ar1, Carb, Het1 или Cyc,
Ar1 представляет собой фенил или нафтил, который незамещен или моно-, ди- или тризамещен посредством Hal, A, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pN(R2)2, [C(R2)2]pHet2, NO2, CN, [C(R2)2]pCOOR2, [C(R2)2]pCON(R2)2, NR2COA, NR2SO2A, [C(R2)2]pSO2N(R2)2, S(O)nA, COHet3, O[C(R2)2]mN(R2)2, O[C(R2)2]pAr2, O[C(R2)2]pHet2, NHCOOA, NHCON(R2)2, Сус, СНО и/или СОА,
Ar2 представляет собой фенил, который незамещен или моно- или дизамещен посредством Hal, A, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pN(R2)2, [C(R2)2]pHet3, NO2, CN, [C(R2)dpCOOR, [C(R2)2]PN(R2)2, N(R2)2COA, NR2SO2A, [C(R2)2]PSO2N(R2)2, S(O)nA, COHet3, O[C(R2)2]mN(R2)2, O[C(R2)2]pHet3, NHCOOA, NHCON(R2)2,
CHO и/или СОА,
Het1 представляет собой пирролидинил, азетидинил, тетрагидроимидазолил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиразолил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолинил, гексагидропиридазинил, гекса-гидропиримидинил, [1,3]диоксоланил, пиперазинил, фурил, тиенил, пирролил, имидазолил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, тиазолил, триазолил, тетразолил, пиридил, пиримидил, пиридази-нил, индолил, изоиндолил, бензимидазолил, индазолил, хинолил, 1,3-бензодиоксолил, бензотиофенил, бензофуранил, имидазопиридил или ФУРО[3,2-Ь]ПИРИДИЛ, каждый из которых незамещен или моно- или
дизамещен посредством Hal, A, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pN(R2)2, [C(R2)2]pHet2, [C(R2)2]pAr2, NO2, CN, [C(R2)2]pCOOR2, [C(R2)2]pCON(R2)2, NR2COA, NR2SO2A, [C(R2)2]pSO2N(R2)2, S(O)nA, COHet3,
O[C(R2)2]mN(R2)2, O[C(R2)2]pAr2, O[C(R2)2]pHet2, NHCOOA, NHCON(R2)2, CHO, COA, =S, =NR и/или =O,
Carb представляет собой инданил или тетрагидронафтил, каждый из которых может быть незаме-щен или моно-, ди-, три- или тетразамещен посредством А,
Сус представляет собой циклический алкил, который имеет 3, 4, 5, 6 или 7 атомов С, который может быть незамещен или монозамещен посредством А, ОН, Hal, CN или Ar2 или Het2,
Het2 представляет собой пирролидинил, азетидинил, тетрагидроимидазолил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиразолил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолинил, гексагидропиридазинил, гекса-гидропиримидинил, [1,3]диоксоланил, пиперазинил, фурил, тиенил, пирролил, имидазолил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, тиазолил, триазолил, тетразолил, пиридил, пиримидил, пиридази-нил, индолил, изоиндолил, бензимидазолил, индазолил, хинолил, 1,3-бензодиоксолил, бензотиофенил, бензофуранил, имидазопиридил или ФУРО[3,2-Ь]ПИРИДИЛ, каждый из которых незамещен или моно- или
дизамещен посредством Hal, A, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pN(R2)2, [C(R2)2]pHet3, [C(R2)2]pOHet3, [C(R2)2]pAr2, NO2, CN, [C(R2)2]pCOOR2, [C(R2)2]pCON(R2)2, NR2COA, NR2SO2A, [C(R2)2]pSO2N(R2)2, S(O)nA, COHet3,
O[C(R2)2]mN(R2)2, O[C(R2)2]pAr2, O[C(R2)2]pHet3, NHCOOA, NHCON(R2)2, CHO, COA, =S, =NR и/или =O,
Het3 представляет собой дигидропирролил, пирролидинил, азетидинил, оксетанил, тетрагидроими-дазолил, дигидропиразолил, тетрагидропиразолил, тетрагидрофуранил, дигидропиридил, тетрагидропи-ридил, пиперидинил, морфолинил, гексагидропиридазинил, гексагидропиримидинил, [1,3]диоксоланил, тетрагидропиранил или пиперазинил, каждый из которых незамещен или моно- или дизамещен посредством Hal, CN, OR2, COOR2, CON(R2)2, S(O)nA, S(O)nAr, COA, А и/или =O,
А представляет собой неразветвленный или разветвленный алкил, который имеет 1-10 атомов С, где две расположенные рядом СН- и/или СН2-группы могут образовывать двойную связь и где одна или две СН- и/или СН2-группы, не расположенные рядом, могут быть заменены на атомы N-, О- и/или S и где 1-7 атомов Н могут быть заменены на F или Cl,
Hal представляет собой F, Cl, Br или I,
n представляет собой 0, 1 или 2,
m представляет собой 1, 2 или 3,
p представляет собой 0, 1, 2, 3 или 4,
высвобождают из одного из его функциональных производных путем обработки сольволизирую-щим или гидрогенолизирующим агентом, и/или
основание или кислоту формулы I превращают в одну из его(ее) солей.
Выше и ниже радикалы R1, X и Y имеют значения, указанные для формулы I, если специально не указано иное.
А представляет собой алкил, который является неразветвленным (линейным) или разветвленным, и имеет 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 атомов С. А предпочтительно представляет собой метил, кроме того, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или mpem-бутил, кроме того, также пентил, 1-, 2-или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, гексил, 1-, 2-, 3- или 4-метилпентил, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- или 3,3-диметилбутил, 1- или 2-этилбутил, 1-этил-1-метилпропил, 1-этил-2-метилпропил, 1,1,2- или 1,2,2-триметилпропил, кроме того, предпочтительно, например, трифторметил.
А особенно предпочтительно представляет собой алкил, который имеет 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов С, предпочтительно метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, гек-сил, трифторметил, пентафторэтил или 1,1,1-трифторэтил.
Кроме того, А представляет собой предпочтительно СН2ОСН3, CH2CH2OH или СН2СН2ОСН3.
Циклический алкил имеет 3-7 атомов С, предпочтительно представляет собой циклопропил, цикло-бутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил.
Ar1 представляет собой предпочтительно о-, м- или п-толил, о-, м- или п-этилфенил, о-, м- или п-пропилфенил, о-, м- или п-изопропилфенил, о-, м- или п-трет-бутилфенил, о-, м- или п-гидроксифенил, о-, м- или п-нитрофенил, о-, м-или п-аминофенил, о-, м- или п-^-метиламино)фенил, о-, м- или n-(N-метиламинокарбонил)фенил, о-, м- или п-метоксифенил, о-, м- или п-этоксифенил, о-, м- или п-этоксикарбонилфенил, о-, м- или п-^^-диметиламино)фенил, о-, м- или п-^^-диметил-аминокарбонил)фенил, о-, м- или п-^-этиламино)фенил, о-, м- или п-^^-диэтиламино)фенил, о-, мили п-фторфенил, о-, м- или п-бромфенил, о-, м- или п-хлорфенил, о-, м- или п-(метилсуль-фонамидо)фенил, о-, м- или п-(метилсульфонил)фенил, о-, м- или п-цианофенил, о-, м- или п-карбоксифенил, о-, м- или п-метоксикарбонилфенил, о-, м- или п-формилфенил, о-, м- или п-ацетилфенил, о-, м- или п-аминосульфонилфенил, о-, м- или п-[2-(морфолин-4-ил)этокси]фенил, о-, мили п-[3-(^№диэтиламино)пропокси]фенил, кроме того, предпочтительно 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- или 3,5-дифторфенил, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- или 3,5-дихлорфенил, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- или 3,5-
дибромфенил, 2,4- или 2,5-динитрофенил, 2,5- или 3,4-диметоксифенил, 3-нитро-4-хлорфенил, 3-амино-4-хлор-, 2-амино-3-хлор-, 2-амино-4-хлор-, 2-амино-5-хлор- или 2-амино-6-хлорфенил, 2-нитро-4-^№ диметиламино- или 3-нитро-4-^^диметиламинофенил, 2,3-диаминофенил, 2,3,4-, 2,3,5-, 2,3,6-, 2,4,6-или 3,4,5-трихлорфенил, 2,4,6-триметоксифенил, 2-гидрокси-3,5-дихлорфенил, п-йодфенил, 3,6-дихлор-4-аминофенил, 4-фтор-3-хлорфенил, 2-фтор-4-бромфенил, 2,5-дифтор-4-бромфенил, 3-бром-6-метоксифенил, 3-хлор-6-метоксифенил, 3-хлор-4-ацетамидофенил, 3-фтор-4-метоксифенил, 3-амино-6-метилфенил, 3-хлор-4-ацетамидофенил или 2,5-диметил-4-хлорфенил.
Ar1, кроме того, предпочтительно представляет собой фенил, который незамещен или моно-, ди-
или тризамещен посредством Hal, A, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pN(R2)2, [C(R2)2]pHet2, NO2, Cyc, [C(R2)2]p2COOR2, O[C(R2)2]pAr2 и/или O[C(R2)2]pHet2.
Ar2 представляет собой предпочтительно о-, м- или п-толил, о-, м- или п-этилфенил, о-, м- или п-пропилфенил, о-, м- или п-изопропилфенил, о-, м- или п-трет-бутилфенил, о-, м- или п-гидроксифенил, о-, м- или п-нитрофенил, о-, м- или п-аминофенил, о-, м- или п-^-метиламино)фенил, о-, м- или n-(N-метиламинокарбонил)фенил, о-, м- или п-метоксифенил, о-, м- или п-этоксифенил, о-, м- или п-этоксикарбонилфенил, о-, м- или п-^^-диметиламино)фенил, о-, м- или n-(N,N-диметиламинокарбонил)фенил, о-, м- или п-^-этиламино)фенил, о-, м- или п-(N,N-диэтиламино)фенил, о-, м- или п-фторфенил, о-, м- или п-бромфенил, о-, м- или п-хлорфенил, о-, м- или п-(метилсульфонамидо)фенил, о-, м- или п-(метилсульфонил)фенил, о-, м- или п-цианофенил, о-, м- или п-карбоксифенил, о-, м- или п-метоксикарбонилфенил, о-, м- или п-формилфенил, о-, м- или п-ацетилфенил, о-, м- или п-аминосульфонилфенил, о-, м- или п-[2-(морфолин-4-ил)этокси]фенил, о-, мили п-[3-(^№диэтиламино)пропокси]фенил, кроме того, предпочтительно 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- или 3,5-дифторфенил, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- или 3,5-дихлорфенил, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- или 3,5-
дибромфенил, 2,4- или 2,5-динитрофенил, 2,5- или 3,4-диметоксифенил, 3-нитро-4-хлорфенил, 3-амино-4-хлор-, 2-амино-3-хлор-, 2-амино-4-хлор-, 2-амино-5-хлор- или 2-амино-6-хлорфенил, 2-нитро-4-^№ диметиламино- или 3-нитро-4-^^диметиламинофенил, 2,3-диаминофенил, 2,3,4-, 2,3,5-, 2,3,6-, 2,4,6-или 3,4,5-трихлорфенил, 2,4,6-триметоксифенил, 2-гидрокси-3,5-дихлорфенил, п-йодфенил, 3,6-дихлор-4-аминофенил, 4-фтор-3-хлорфенил, 2-фтор-4-бромфенил, 2,5-дифтор-4-бромфенил, 3-бром-6-метоксифенил, 3-хлор-6-метоксифенил, 3-хлор-4-ацетамидофенил, 3-фтор-4-метоксифенил, 3-амино-6-метилфенил, 3-хлор-4-ацетамидофенил или 2,5-диметил-4-хлорфенил.
Ar2, кроме того, предпочтительно представляет собой фенил, который незамещен или монозамещен посредством [C(R2)2]pOR2.
Het1 предпочтительно представляет собой пирролидинил, азетидинил, тетрагидроимидазолил, тет-рагидрофуранил, тетрагидропиразолил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолинил, гексагидропи-ридазинил, гексагидропиримидинил, [1,3]диоксоланил, пиперазинил, фурил, тиенил, пирролил, имидазо-лил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, тиазолил, триазолил, тетразолил, пиридил, пири-мидил, пиридазинил, индолил, изоиндолил, бензимидазолил, индазолил, хинолил, 1,3-бензодиоксолил, бензотиофенил, бензофуранил, имидазопиридил или фуроРД-^пиридил, каждый из которых незамещен или моно- или дизамещен посредством A, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pHet2 и/или [C(R2)2]pAr2.
Het1 особенно предпочтительно представляет собой пирролидинил, пиперидинил, морфолинил, пи-разолил, пиридил, пиримидил или 1,3-бензодиоксолил, каждый из которых незамещен или моно- или
дизамещен посредством A, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pHet2 и/или [C(R2)2]pAr2.
Het2 предпочтительно представляет собой пирролидинил, азетидинил, тетрагидроимидазолил, тет-рагидрофуранил, тетрагидропиразолил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолинил, гексагидропи-ридазинил, гексагидропиримидинил, [1,3]диоксоланил, пиперазинил, фурил, тиенил, пирролил, имидазо-лил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, тиазолил, триазолил, тетразолил, пиридил, пири-мидил, пиридазинил, индолил, изоиндолил, бензимидазолил, индазолил, хинолил, 1,3-бензодиоксолил, бензотиофенил, бензофуранил, имидазопиридил или фуроРД-^пиридил, каждый из которых незамещен или моно- или дизамещен посредством A, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pHet3 и/или [C(R2)2]pOHet3.
Het2 особенно предпочтительно представляет собой пирролидинил, пиперидинил, морфолинил, пи-разолил, оксазолил, изоксазолил или оксадиазолил, каждый из которых незамещен или моно- или диза
мещен посредством А, [C(R2)2]pOR2, [C(R2)2]pHet3 и/или [C(R2)2]pOHet3.
Het3 предпочтительно представляет собой дигидропирролил, пирролидинил, азетидинил, оксетанил, тетрагидроимидазолил, дигидропиразолил, тетрагидропиразолил, тетрагидрофуранил, дигидропиридил, тетрагидропиридил, пиперидинил, морфолинил, гексагидропиридазинил, гексагидропиримидинил, [1,3]диоксоланил, тетрагидропиранил или пиперазинил.
Het3 особенно предпочтительно представляет собой пирролидинил, пиперидинил, морфолинил или тетрагидропиранил.
Hal предпочтительно представляет собой F, Cl или Br, а также I, особенно предпочтительно F или
Cl.
Для всего изобретения все радикалы, которые встречаются более одного раза, могут быть одинаковыми или различными, то есть они независимы друг от друга.
Соединения в соответствии с изобретением могут иметь один или несколько хиральных центров и поэтому могут встречаться в различных стереоизомерных формах. Изобретение охватывает все эти формы.
Соединения в соответствии с изобретением, а также исходные вещества для их получения могут, кроме того, быть получены при помощи методов, известных per se, как описано в литературе (например, в стандартных работах, таких как Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie [Методы органической химии], Georg-Thieme-Verlag, Штутгарт), в условиях реакций, которые известны и являются подходящими для указанных реакций. Также при этом можно применять разнообразные модификации, которые известны per se, но о которых здесь подробно не упоминается.
Исходные соединения формулы II и формулы III, как правило, известны. Тем не менее, если они являются новыми, то их можно получить с помощью методов, известных per se.
Соединения в соответствии с изобретением предпочтительно можно получить по реакции соединения формулы II с NH3, NH4OAc или (NH4)2CO3.
В зависимости от применяемых условий, время реакции находится в интервале от нескольких минут до 14 дней, температура реакции находится в рамках между приблизительно -10 и 140°, обычно между 30 и 130°, в частности между приблизительно 60 и приблизительно 120°. Реакцию проводят в инертном растворителе.
Примерами подходящих инертных растворителей являются углеводороды, такие как гексан, петро-лейный эфир, бензол, толуол или ксилол; хлорированные углеводороды, такие как трихлорэтилен, 1,2-дихлорэтан, четыреххлористый углерод, хлороформ или дихлорметан; спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол, н-пропанол, н-бутанол или трет-бутанол; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, тетрагидрофуран (ТГФ) или диоксан; гликолевые простые эфиры, такие как монометиловый или моноэтиловый эфир этиленгликоля, диметиловый эфир этиленгликоля (диглим); кето-ны, такие как ацетон или бутанон; амиды, такие как ацетамид, диметилацетамид или диметилформамид (ДМФА); нитрилы, такие как ацетонитрил; сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид (ДМСО); сероуглерод; карбоновые кислоты, такие как муравьиная кислота или уксусная кислота; нитросоединения, такие как нитрометан или нитробензол; сложные эфиры, такие как этилацетат, или смеси вышеупомянутых растворителей.
Особое предпочтение отдают метанолу или уксусной кислоте.
Кроме того, соединения в соответствии с изобретением предпочтительно можно получить по реакции соединения формулы III с Н2О2 в основных условиях.
Реакцию проводят в инертном растворителе, в присутствии гидроксида щелочного или щелочноземельного металла, карбоната или бикарбоната или другой соли слабой кислоты и щелочного или ще-лочно-земельного металла, предпочтительно калия, натрия, кальция или цезия.
В зависимости от применяемых условий время реакции находится в интервале от нескольких минут до 14 дней, температура реакции находится в рамках между приблизительно -10 и 140°, обычно между 30 и 130°, в частности между приблизительно 60 и приблизительно 120°.
Примерами подходящих инертных растворителей являются углеводороды, такие как гексан, петро-лейный эфир, бензол, толуол или ксилол; хлорированные углеводороды, такие как трихлорэтилен, 1,2-дихлорэтан, четыреххлористый углерод, хлороформ или дихлорметан; спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол, н-пропанол, н-бутанол или трет-бутанол; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, тетрагидрофуран (ТГФ) или диоксан; гликолевые простые эфиры, такие как монометиловый или моноэтиловый эфир этиленгликоля, диметиловый эфир этиленгликоля (диглим); кето-ны, такие как ацетон или бутанон; амиды, такие как ацетамид, диметилацетамид или диметилформамид (ДМФА); нитрилы, такие как ацетонитрил; сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид (ДМСО); сероуглерод; карбоновые кислоты, такие как муравьиная кислота или уксусная кислота; нитросоединения, такие как нитрометан или нитробензол; сложные эфиры, такие как этилацетат, или смеси вышеупомянутых растворителей.
Особое предпочтение отдают CH2Cl2 и воде или метанолу и диметилсульфоксиду. Соединения в соответствии с изобретением, кроме того, можно получить путем превращения радикала R1 и/или Y в другой радикал R1 и/или Y путем i) превращения СООН или СНО в Н,
ii) превращения сложноэфирной группы в спиртовую группу,
iii) превращения галогенированного фенильного кольца в реакции сочетания Сузуки в арилирован-ное фенильное кольцо,
iv) превращения галогенированой алкильной группы в алкильную группу.
Стадия i).
Превращение СООН группы в Н предпочтительно проводят с помощью медного порошка в основных условиях, предпочтительно в органическом растворителе; предпочтительно в хинолине в стандартных условиях.
Превращение СНО группы в Н предпочтительно проводят в инертном растворителе, предпочтительно в диметиловом эфире диэтиленгликоля, в присутствии 3-дифенилфосфанилпропил(дифенил) фосфана и хлорида родия(Ш) в стандартных условиях.
Стадия ii).
Превращение сложноэфирной группы в спиртовую группу предпочтительно проводят в присутствии хлорида церия(Ш) с помощью алкилмагнийхлорида в ТГФ в стандартных условиях или с помощью алюмогидрида лития в ТГФ.
Стадия iii).
Превращение галогенированного фенильного кольца в арилированное фенильное кольцо проводят в условиях, стандартных для сочетания Сузуки. Стадия iv).
Превращения галогенированой алкильной группы в алкильную группу предпочтительно проводят с помощью LiAlH4 в ТГФ или с помощью цинка в уксусной кислоте в стандартных условиях.
Соединения в соответствии с изобретением, кроме того, можно получить путем высвобождения соединений формулы I из одного из их функциональных производных путем обработки сольволизирую-щим или гидрогенолизирующим агентом.
Предпочтительные исходные вещества для сольволиза или гидрогенолиза представляют собой вещества, которые соответствуют формуле I, но содержат соответствующие защищенные амино и/или гид-роксильные группы взамен одной или нескольких свободных амино и/или гидроксильных групп, предпочтительно вещества, которые несут аминозащитную группу взамен атома Н, связанного с атомом N, в частности вещества, которые несут R'-N-группу, в которой R' означает аминозащитную группу взамен HN-группы, и/или вещества, которые несут гидроксилзащитную группу взамен атома Н гидроксильной группы, например вещества, которые соответствуют формуле I, но несут -COOR''-групггу, в которой R" означает гидроксилзащитную группу, взамен -СООН-группы.
Предпочтительные исходные вещества также представляют собой оксадиазольные производные, которые могут быть превращены в соответствующие амидиносоединения.
Также в молекуле исходного вещества может присутствовать множество одинаковых или разных защищенных амино и/или гидроксильных групп. Если присутствующие защитные группы отличаются друг от друга, они во многих случаях могут быть отщеплены селективно.
Термин "аминозащитная группа" известен в общих чертах и относится к группам, которые пригодны для защиты (блокирования) аминогруппы от химических реакций, но которые легко удалить после проведения желаемой химической реакции в другой части молекулы. Типичными такими группами являются, в частности, незамещенные или замещенные ацильные, арильные, аралкоксиметильные или аралкильные группы. Кроме того, поскольку аминозащитные группы удаляют после желаемой реакции (или последовательности реакций), их тип и размер не являются решающими; однако предпочтение отдается группам, содержащим 1-20, в частности 1-8 атомов углерода. Термин "ацильная группа" следует понимать в самом широком смысле в связи с настоящим способом. Он включает ацильные группы, полученные из алифатических, аралифатических, ароматических или гетероциклических карбоновых кислот или сульфоновых кислот, и, в частности, алкоксикарбонильные, арилоксикарбонильные и особенно аралкоксикарбонильные группы. Примерами таких ацильных групп являются алканоил, такой как ацетил, пропионил и бутирил; аралканоил, такой как фенилацетил; ароил, такой как бензоил и толил; ари-локсиалканоил, такой как РОА; алкоксикарбонил, такой как метоксикарбонил, этоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, ВОС (трет-бутоксикарбонил) и 2-йодэтоксикарбонил; аралкоксикарбонил, такой как CBZ (карбобензокси), 4-метоксибензилоксикарбонил и FMOC; и арилсульфонил, такой как Mtr. Предпочтительными аминозащитными группами являются ВОС и Mtr, кроме того, CBZ, Fmoc, бензил и ацетил.
Термин "гидроксилзащитная группа" также известен в общих чертах и относится к группам, которые пригодны для защиты гидроксильной группы от химических реакций, но легко снимаются после проведения желаемой химической реакции в другой части молекулы. Типичными такими группами являются вышеупомянутые незамещенные или замещенные арильные, аралкильные или ацильные группы, кроме того, также алкильные группы. Природа и размер гидроксилзащитных групп не являются решающими, поскольку их удаляют после желаемой химической реакции или последовательности реакций; предпочтение отдают группам, содержащим 1-20, в частности 1-10 атомов углерода. Примерами гидро-ксилзащитных групп являются, среди прочего, бензил, 4-метоксибензил, п-нитробензоил, п- 9
толуолсульфонил, трет-бутил и ацетил, причем бензил, тетрагидропиранил и трет-бутил являются особенно предпочтительными.
Соединения в соответствии с изобретением высвобождают из их функциональных производных в зависимости от используемой защитной группы, например, при применении сильных кислот, преимущественно при применении ТФУ или перхлорной кислоты, а также при применении других сильных неорганических кислот, таких как хлористо-водородная кислота или серная кислота, сильных органических карбоновых кислот, таких как трихлоруксусная кислота, или сульфоновых кислот, таких как бензол- или п-толуолсульфоновая кислота. Присутствие дополнительного инертного растворителя возможно, но не является всегда необходимым. Пригодными инертными растворителями предпочтительно являются органические растворители, например карбоновые кислоты, такие как уксусная кислота, простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диоксан, амиды, такие как ДМФА, галогенированные углеводороды, такие как дихлорметан, кроме того, также спирты, такие как метанол, этанол или изопропанол, и вода. Кроме того, пригодными являются смеси вышеупомянутых растворителей. ТФУ предпочтительно используют в избытке, без добавления другого растворителя, а перхлорную кислоту предпочтительно используют в виде смеси уксусной кислоты и 70% перхлорной кислоты в соотношении 9:1. Температуры реакций для отщепления преимущественно находятся в диапазоне между приблизительно 0 и приблизительно 50°, предпочтительно между 15 и 30° (комнатная температура).
Группы ВОС, OBut и Mtr, например, предпочтительно можно отщепить при использовании ТФУ в дихлорметане или при использовании приблизительно 3-5н. HCl в диоксане при температуре 15-30°, a FMOC группу можно отщепить при использовании приблизительно 5-50%-го раствора диметиламина, диэтиламина или пиперидина в ДМФА при температуре 15-30°.
Защитные группы, которые могут быть удалены гидрогенолитически (например, CBZ, бензильная группа или при высвобождении амидиногруппы из ее оксадиазольного производного), могут быть отщеплены, например, путем обработки водородом в присутствии катализатора (например, катализатора на основе благородного металла, такого как палладий, преимущественно на носителе, таком как уголь). Пригодными растворителями в данном случае являются растворители, которые указаны выше, в частности, например, спирты, такие как метанол или этанол, или амиды, такие как ДМФА. Гидрогенолиз обычно проводят при температурах между приблизительно 0 и 100° и давлениях между приблизительно 1 и 200 бар, предпочтительно при температурах 20-30° и давлениях 1-10 бар. Гидрогенолиз CBZ группы успешно выполняют, например, на 5-10% Pd/C в метаноле или при применении формиата аммония (взамен водорода) на Pd/C в смеси метанол/ДМФА при 20-30°.
Примерами подходящих инертных растворителей являются углеводороды, такие как гексан, петро-лейный эфир, бензол, толуол или ксилол; хлорированные углеводороды, такие как трихлорэтилен, 1,2-дихлорэтан, тетрахлорметан, трифторметилбензол, хлороформ или дихлорметан; спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол, н-пропанол, н-бутанол или трет-бутанол; простые эфиры, такие как диэти-ловый эфир, диизопропиловый эфир, тетрагидрофуран (ТГФ) или диоксан; гликолевые простые эфиры, такие как монометиловый или моноэтиловый эфир этиленгликоля или диметиловый эфир этиленгликоля (диглим); кетоны, такие как ацетон или бутанон; амиды, такие как ацетамид, диметилацетамид, N-метилпирролидон (NMP) или диметилформамид (ДМФА); нитрилы, такие как ацетонитрил; сульфокси-ды, такие как диметилсульфоксид (ДМСО); сероуглерод; карбоновые кислоты, такие как муравьиная кислота или уксусная кислота; нитросоединения, такие как нитрометан или нитробензол; сложные эфи-ры, такие как этилацетат, или смеси вышеупомянутых растворителей.
Сложные эфиры можно омылить, например, применяя уксусную кислоту или применяя NaOH или KOH в воде, смеси вода/ТГФ или вода/диоксан, при температурах между 0 и 100°.
Свободные аминогруппы, кроме того, можно ацилировать обычным способом, используя хлоран-гидрид или ангидрид кислоты или алкилировать, используя незамещенный или замещенный алкилгало-генид, или подвергая реакции с CH3-C(=NH)-OEt, преимущественно в инертном растворителе, таком как дихлорметан или ТГФ и/или в присутствии основания, такого как триэтиламин или пиридин, при температурах между -60 и +30°.
Фармацевтические соли и другие формы.
Соединения, раскрытые в изобретении, могут использоваться в своей заключительной, несолевой форме. С другой стороны, настоящее изобретение также относится к применению таких соединений в форме их фармацевтически приемлемых солей, которые могут быть получены с помощью разнообразных органических и неорганических кислот и оснований в соответствии со способами, хорошо известными в данной области техники. Фармацевтически приемлемые формы солей соединений в соответствии с изобретением готовят, главным образом, при использовании традиционных способов. В случае, если соединение в соответствии с изобретением содержит группу карбоновой кислоты, то его приемлемая соль может быть образована с помощью реакции соединения с приемлемым основанием для получения соответствующей соли присоединения основания. Примерами таких оснований являются гидроксиды щелочных металлов, включая гидроксид калия, гидроксид натрия и гидроксид лития; гидроксиды ще-лочно-земельных металлов, такие как гидроксид бария и гидроксид кальция; алкоксиды щелочных металлов, например этанолят калия и пропанолят натрия; а также различные органические основания, такие
как пиперидин, диэтаноламин и N-метилглутамин. Сюда также включены соли алюминия соединений в соответствии с изобретением. Для некоторых соединений в соответствии с изобретением соли присоединения кислоты могут быть образованы путем обработки указанных соединений фармацевтически приемлемыми органическими и неорганическими кислотами, например гидрогалогенидами, такими как гидрохлорид, гидробромид или гидройодид; другими минеральными кислотами и их соответствующими солями, такими как сульфат, нитрат или фосфат и др.; и алкил- и моноарилсульфонатами, такими как этан-сульфонат, толуолсульфонат и бензолсульфонат; и другими органическими кислотами и их соответствующими солями, такими как ацетат, трифторацетат, тартрат, малеат, сукцинат, цитрат, бензоат, салици-лат, аскорбат и др. Таким образом, фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты соединений в соответствии с изобретением включают следующие соли, но не ограничиваясь только ими, ацетат, адипат, альгинат, аргинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат (безилат), бисульфат, бисульфит, бромид, бутират, камфорат, камфорсульфонат, каприлат, хлорид, хлорбензоат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, дигидрофосфат, динитробензоат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, галактерат (из слизевой кислоты), галактуронат, глюкогептаноат, глюконат, глутамат, глицерофосфат, гемисукцинат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, йодид, изетионат, изобутират, лактат, лактобионат, малат, малеат, малонат, манделат, метафосфат, метансульфонат, метилбензоат, моногидрофосфат, 2-нафталинсульфонат, нико-тинат, нитрат, оксалат, олеат, пальмоат, пектинат, персульфат, фенилацетат, 3-фенилпропионат, фосфат, фосфонат, фталат.
Кроме того, основные соли соединений в соответствии с изобретением включают, но не ограничиваясь только ими, соли алюминия, аммония, кальция, меди, железа(Ш), железа(П), лития, магния, мар-ганца(Ш), марганца(П), калия, натрия и цинка. Предпочтительными среди перечисленных выше солей являются аммонийные; соли щелочных металлов натрия и калия; и соли щелочно-земельных металлов кальция и магния. Соли соединений в соответствии с изобретением, которые имеют происхождение от фармацевтически приемлемых органических нетоксических оснований, включают, но не ограничиваясь только ими, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, также включая природные замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, например аргинин, бетаин, кофеин, хлорпрокаин, холин, ^№-дибензилэтилендиамин (бензатин), дициклогексиламин, ди-этаноламин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, N-этилморфолин, N-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабамин, изопропиламин, лидо-каин, лизин, меглумин, N-метил-Б-глюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминные смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтаноламин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин и трис-(гидроксиметил)метиламин (трометамин).
Соединения в соответствии с настоящим изобретением, которые включают основные азотсодержащие группы, могут быть кватернизированы с помощью таких агентов, как Q-Q-алкилгалогениды, например метил-, этил-, изопропил-, трет-бутилхлорид, бромид и йодид; ди-С1-С4-алкилсульфаты, например диметил-, диэтил- и диамилсульфат; С10-С18-алкилгалогениды, например децил-, додецил-, лаурил-, миристил-, стеарилхлорид, бромид и йодид; и арил-С1-С4-алкилгалогениды, например бензилхлорид и фенетилбромид. Указанные соли позволяют получать как растворимые в воде, так и растворимые в масле соединения в соответствии с изобретением.
Предпочтительные фармацевтические соли, указанные выше, включают, но не ограничиваясь только ими, ацетат, трифторацетат, безилат, цитрат, фумарат, глюконат, гемисукцинат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, изетионат, манделат, меглумин, нитрат, олеат, фосфонат, пивалат, фосфат натрия, стеарат, сульфат, сульфосалицилат, тартрат, тиомалат, тозилат и трометамин.
Особенно предпочтительными являются гидрохлорид, дигидрохлорид, гидробромид, малеат, мези-лат, фосфат, сульфат и сукцинат.
Кислотно-аддитивные соли основных соединений в соответствии с изобретением получают путем приведения в контакт формы свободных оснований с достаточным количеством желаемой кислоты для получения соли традиционным способом. Свободное основание можно регенерировать путем приведения в контакт формы соли с основанием и выделения свободного основания традиционным способом. Формы свободного основания в некоторой степени отличаются от своих соответствующих форм солей своими определенными физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, однако во всем остальном соли являются эквивалентными своим соответствующим формам свободных оснований для целей настоящего изобретения.
Как было указано, фармацевтически приемлемые соли присоединения основания соединений в соответствии с изобретением образуются с металлами или аминами, такими как щелочные металлы и ще-лочно-земельные металлы или органические амины. Предпочтительные металлы представляют собой натрий, калий, магний и кальций. Предпочтительные органические амины представляют собой N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, N-метил-Б-глюкамин и про-каин.
Соли присоединения основания кислых соединений в соответствии с изобретением получают путем приведения в контакт формы свободной кислоты с достаточным количеством желаемого основания для
получения соли традиционным способом. Форма свободной кислоты может быть регенерирована путем приведения в контакт формы соли с кислотой и выделения формы свободной кислоты известным способом. Формы свободной кислоты в некоторой степени отличаются от своих соответствующих форм солей определенными физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях, однако во всем остальном соли являются эквивалентными своим соответствующим формам свободных кислот для целей настоящего изобретения.
Если соединение в соответствии с изобретением включает более чем одну группу, которая способна к образованию фармацевтически приемлемых солей этого типа, то изобретение также охватывает составные соли. Примеры типичных составных форм солей включают, но не ограничиваясь только ими, битартрат, диацетат, дифумарат, димеглумин, дифосфат, динатрий и тригидрохлорид.
В свете описанного выше можно увидеть, что выражение "фармацевтически приемлемая соль" в контексте данной заявки предназначено для обозначения активного компонента, который включает соединение в соответствии с изобретением в форме одной из его солей, особенно в том случае, если указанная форма соли обеспечивает указанному активному компоненту улучшенные фармакокинетические свойства по сравнению со свободной формой указанного активного компонента или любой другой солью указанного активного компонента, которые использовались ранее. Фармацевтически приемлемая форма соли активного компонента может также изначально обеспечивать желаемое фармакокинетическое свойство указанному активному компоненту, которым он ранее не обладал, а также может даже положительно влиять на фармакодинамику указанного активного компонента в отношении его терапевтической активности в организме.
Изотопы.
Далее также предполагается, что соединение в соответствии с изобретением включает его изотопно-меченные формы. Изотопно-меченная форма соединения в соответствии с изобретением является идентичной указанному соединению за исключением того факта, что один или более атомов указанного соединения были замещены атомом или атомами, которые имеют атомную массу или атомное число, отличное от атомной массы или атомного числа упомянутого атома, которое обычно существует в природе. Примеры изотопов, которые являются легко доступными коммерчески и которые могут быть введены в соединение в соответствии с изобретением в соответствии с хорошо известными способами, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, например 2Н, 3Н, 13С, 14С, 15N, 18О, 17О, 31Р, 32Р, 35S, 18F и 36Cl соответственно. Соединение в соответствии с изобретением, его пролекарственная форма или фармацевтически приемлемая соль, которые содержат один или более указанных выше изотопов и/или другие изотопы других атомов, также составляют объем настоящего изобретения. Изотопно-меченное соединение в соответствии с изобретением может использоваться в ряде способов. Например, меченное изотопами соединение в соответствии с изобретением, например, в которое введен радиоактивный изотоп, такой как 3H или 14C, будет полезным в анализах исследования распределения лекарственного средства и/или субстрата в ткани. Такие радиоактивные изотопы, например тритий (3Н) и углерод-14 (14С), являются особенно предпочтительными вследствие простоты получения и высокой способности к выявлению. Введение более тяжелых изотопов, например дейтерия (2Н), в соединение в соответствии с изобретением, будет обеспечивать терапевтические преимущества, основывающиеся на большей метаболической стабильности указанного соединения, меченного изотопами. Большая метаболическая стабильность проявляется непосредственно в повышении времени полураспада in vivo или снижении требуемой дозы, что при большинстве условий будет составлять предпочтительное воплощение указанного изобретения. Меченное изотопом соединение в соответствии с изобретением обычно получают путем осуществления процедур, раскрытых в схемах синтеза и в описании, относящемся к ним, в разделах, касающихся примеров и способов получения, описанных в данной заявке, путем замены немеченого изотопами реагента его соответствующим легко доступным реагентом, меченным изотопом.
Дейтерий (2Н) также может быть введен в соединение в соответствии с изобретением с целью изменения окислительного метаболизма соединения путем первичного кинетического изотопного эффекта. Первичный кинетический изотопный эффект представляет собой изменение скорости химической реакции, которое происходит по причине замещения изотопного ядра, что, в свою очередь, вызывается изменением энергий основного состояния, что необходимо для образования ковалентной связи после указанного изотопного замещения. Замещение тяжелым изотопом будет обычно приводить к снижению энергии основного состояния для химической связи, вызывая, таким образом, уменьшение скорости ско-рость-лимитирующего этапа разрушения связи. Когда происходит разрушение связи в или поблизости участка седлообразной конфигурации вдоль координаты реакции образования нескольких продуктов, коэффициент распределения продуктов может существенно изменяться. Например, в случае, если дейтерий связывается с атомом углерода в положении, в котором не происходит обмен, различия скорости kM/kD=2-7 являются типичными. Такое отличие в скорости, которое успешно применяется к соединению в соответствии с изобретением, чувствительному к окислению, может в значительной степени влиять на профиль указанного соединения in vivo и приводит к улучшению фармакокинетических свойств.
В процессе обнаружения и совершенствования терапевтических агентов средний специалист в дан
ной области ищет пути оптимизации фармакокинетических параметров до тех пор, пока не получит желательные in vitro свойства. Является рациональным предположить, что многие соединения со слабыми фармакокинетическими профилями страдают неустойчивостью к окислительному метаболизму. Анализы in vitro микросом печени, которые сейчас являются доступными, обеспечивают ценную информацию о процессе окислительного метаболизма, что, в свою очередь, позволяет получить рациональную модель меченных дейтерием соединений в соответствии с изобретением с улучшенной стабильностью вплоть до резистентности к такому окислительному метаболизму. Таким образом, получают значительное улучшение фармакокинетических профилей соединений в соответствии с изобретением, что может быть количественно выражено в величинах увеличения периода полураспада in vivo (t/2), в концентрации при максимальном терапевтическом эффекте (Cmax), площадью под кривой ответа на определенную дозу (AUC) и F; в величинах уменьшения клиренса, дозе и материальных затрат.
Приведенное далее предназначено для иллюстрации сказанного выше: соединение в соответствии с изобретением, которое имеет многочисленные потенциальные сайты для окислительного метаболизма, например атомы водорода бензила и атомы водорода, соединенные с атомом азота, получают как серии аналогов, в которых различные комбинации атомов водорода заменяются атомами дейтерия так, что некоторые, большинство или все указанные атомы водорода заменяются на атомы дейтерия. Определение периода полураспада обеспечивает подходящее и точное определение степени улучшения резистентности к окислительному метаболизму. Таким образом, определяют, что период полураспада исходного соединения может быть продлен вплоть до 100% как результат такого замещения водорода дейтерием.
Замещение водорода дейтерием в соединении в соответствии с изобретением может также использоваться для достижения благоприятного изменения в профиле метаболита исходного соединения как пути уменьшения или устранения нежелательных токсических метаболитов. Например, когда токсический метаболит возникает при окислительном расщеплении углерод-водородной связи С-Н, то с достаточной вероятностью предполагается, что меченный дейтерием аналог значительно уменьшит или устранит выработку нежелательного метаболита, даже в случае, когда отдельное окисление не является ско-рость-лимитирующим этапом. Кроме того, информация, относящаяся к уровню техники в отношении замещения водорода дейтерием, может быть найдена у Hanzlik и др. , J. Org. Chem. 55, 3992-3997, 1990; Reider и др. , J. Org. Chem. 52, 3326-3334, 1987; Foster, Adv. Drug Res. 14, 1-40, 1985; Gillette и др., Biochemistry 33 (10) 2927-2937, 1994; и Jarman и др. Carcinogenesis 16 (4), 683- 688, 1993.
Соединения по изобретению могут использоваться в лекарственных средствах, содержащих по меньшей мере одно соединение в соответствии с изобретением и/или их фармацевтически приемлемые производные, сольваты и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях, и необязательно наполнители и/или вспомогательные вещества.
Фармацевтические составы могут вводиться в виде дозированных единиц, которые содержат заранее установленное количество активного компонента на дозированную единицу. Такая единица может включать, например, от 0,5 мг до 1 г, предпочтительно от 1 до 700 мг, более предпочтительно от 5 до 100 мг соединения в соответствии с изобретением, в зависимости от состояния, подвергаемого лечению, способа введения, а также возраста, веса тела и состояния пациента, или фармацевтические составы могут вводиться в виде дозированных единиц, которые содержат заранее установленное количество активного компонента на дозированную единицу. Предпочтительными дозированными единицами лекарственных препаратов являются те, которые содержат суточную дозу или часть суточной дозы, как указано выше, или соответствующую порцию их активного компонента. Фармацевтические составы этого типа также могут быть получены способом, который хорошо известен в области фармацевтики.
Фармацевтические составы могут адаптироваться для введения при помощи любого подходящего способа, например путем перорального (включая буккальное или подъязычное), ректального, назального, местного (включая буккальное, подъязычное или трансдермальное), вагинального или парентерального (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное или внутрикожное) введения. Такие препараты могут быть приготовлены с помощью любого способа, известного в области фармацевтики, например путем объединения активного компонента с наполнителем(ями) или вспомогательным(ыми) вещест-вом(ами).
Фармацевтические составы, адаптированные для перорального введения, могут вводиться в виде отдельных единиц, таких как, например, капсулы или таблетки; порошки или гранулы; растворы или суспензии в водных или неводных жидкостях; пищевых пен или пенистых пищевых продуктов; или жидких эмульсий масло-в-воде или жидких эмульсий вода-в-масле.
Так, например, в случае перорального введения в виде таблетки или капсулы, активный компонент может быть объединен с пероральным, нетоксичным и фармацевтически приемлемым инертным наполнителем, таким как, например, этанол, глицерин, вода и т.п. Порошки получают путем измельчения соединения до подходящего небольшого размера и смешивания его с фармацевтическим наполнителем, измельченным аналогичным способом, таким как, например, пищевой углеводород, такой как, например, крахмал или маннит. Также можно добавлять ароматизатор, консервант, диспергирующее вещество и краситель.
Капсулы получают путем приготовления порошковой смеси, как описано выше, и заполняют ею
желатиновые капсулы определенной формы. Перед заполнением капсул к порошковой смеси можно добавлять скользящие и смазывающие вещества, такие как, например, высокодисперсная кремниевая кислота, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или полиэтиленгликоль в твердой форме. Для улучшения доступности лекарственного средства, заключенного в капсулу, также можно добавлять дезинтегрирующее вещество или солюбилизатор, такой как, например, агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия.
Дополнительно, если это является желательным или необходимым, в смесь также можно добавлять подходящие связующие, смазывающие вещества, дезинтеграторы, а также красители. Подходящими связующими являются крахмал, желатин, природные сахара, такие как, например, глюкоза или р-лактоза, подсластители, приготовленные из кукурузы, природных и синтетических смол, такие как, например, аравийская камедь, трагакантовая камедь или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленг-ликоль, воски и т.п. Смазывающие вещества, которые могут применяться в таких дозированных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Дезинтеграторы включают, но не ограничиваясь только ими, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и т.п. Лекарственные средства в виде таблеток получают, например, путем приготовления порошковой смеси, гранулирования или сухого прессования смеси, добавления смазывающего вещества и дезинтегратора и прессования полученной смеси в таблетки. Порошковую смесь готовят путем смешивания соединения, измельченного подходящим образом, с разбавителем или основанием, как описано выше, и необязательно со связующим, таким как, например, карбоксиметилцеллюлоза, аль-гинат, желатин или поливинилпирролидон, замедлителем растворения, таким как, например, парафин, усилителем поглощения, таким как, например, четвертичная соль, и/или абсорбентом, таким как, например, бентонит, каолин или дикальцийфосфат. Порошковую смесь можно гранулировать путем смачивания со связующим, таким как, например, сироп, крахмальная паста, слизь акации или растворы целлюлозы или полимерных веществ и прессования ее через сито. В качестве альтернативы грануляции, порошковую смесь можно пропускать через таблетировочную машину, получая куски неправильной формы, которые распадаются, образуя гранулы. Гранулы можно замасливать путем добавления стеариновой кислоты, стеарата, талька или минерального масла для предотвращения слипания в таблетировочной литейной форме. После этого смазанную смесь спрессовывают, получая таблетки. Соединения в соответствии с изобретением также можно объединять с сыпучим инертным наполнителем и затем подвергать прямому прессованию, получая таблетки без осуществления стадий грануляции или сухого прессования. Таблетки также можно покрывать прозрачным или светонепроницаемым защитным слоем, состоящим из шеллакового запечатывающего слоя, слоя сахара или полимерного вещества и глянцевого слоя воска. К этим покрытиям также можно добавлять красители для возможности различения между разными дозируемыми единицами.
Жидкости для перорального введения, такие как, например, раствор, сиропы и эликсиры, могут быть приготовлены в виде дозируемых единиц таким образом, чтобы они содержали заранее установленное количество соединения. Сиропы могут быть получены путем растворения соединения в водном растворе с подходящим ароматизатором, тогда как эликсиры готовят с применением нетоксичного спиртового наполнителя. Суспензии могут быть приготовлены путем диспергирования соединения в нетоксичном наполнителе. Также можно добавлять солюбилизаторы и эмульсификаторы, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленовые эфиры сорбита, консерванты, ароматические добавки, такие как, например, масло мяты перечной, или натуральные заменители сахара или сахарин или другие искусственные заменители сахара и т.п.
Лекарственные препараты для перорального введения в виде дозированных единиц могут быть инкапсулированы в микрокапсулы, если это является желательным. Также лекарственный препарат может быть приготовлен таким образом, чтобы пролонгировать или замедлить высвобождение, например, путем применения покрытий или заделывания требуемого вещества в полимеры, воск и т.п.
Соединения в соответствии с изобретением и их соли, сольваты и физиологически функциональные производные также могут вводиться в виде липосомных систем доставки, таких как, например, небольшие однослойные пузырьки, большие однослойные пузырьки и многослойные пузырьки. Липосомы могут быть образованы с помощью различных фосфолипидов, таких как, например, холестерин, стеарила-мин или фосфатидилхолины.
Соединения в соответствии с изобретением и их соли, сольваты и физиологически функциональные производные также могут доставляться с помощью моноклональных антител в качестве индивидуальных носителей, к которым присоединены молекулы соединения. Соединения также могут быть соединены с растворимыми полимерами в качестве нацеливающих носителей лекарственных средств. Такими полимерами могут являться поливинилпирролидон, сополимер пирана, полигидроксипропилметакриламидо-фенол, полигидроксиэтиласпартамидофенол или полиэтиленоксид полилизина, замещенный пальмитои-ловыми радикалами. Кроме того, соединения можно связывать с биоразлагаемыми полимерами, которые пригодны для обеспечения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например полимолочной кислотой, поли-6-капролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, поли
ацеталями, полидигидроксипиранами, полицианоакрилатами и перекрестно-сшитыми или амфипатиче-скими блок-сополимерами гидрогелей.
Фармацевтические составы, адаптированные для трансдермального введения, могут вводиться в виде независимых пластырей для удлиненного, тесного контакта с эпидермисом реципиента. Таким образом, например, активный компонент может доставляться из пластыря путем ионофореза, как в общем описано в Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).
Фармацевтические составы, адаптированные для местного введения, могут быть приготовлены в виде мазей, кремов, суспензий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.
Для лечения глаз или других наружных тканей, например рта и кожи, предпочтительно применяются лекарственные препараты в виде местной мази или крема. Для приготовления лекарственного препарата в виде мази активный компонент может применяться с парафиновым или смешивающимся с водой мазевым основанием. Альтернативно, для получения крема активный компонент может быть приготовлен с основой для крема типа "масло-в-воде" или основой "вода-в-масле".
Фармацевтические составы, адаптированные для местного введения в глаза, включают глазные капли, в которых активный компонент растворен или суспендирован в подходящем носителе, предпочтительно в водном растворителе.
Фармацевтические составы, адаптированные для местного введения в полость рта, включают лепешки, пастилки и жидкости для полоскания рта.
Фармацевтические составы, адаптированные для ректального введения, могут вводиться в виде суппозиториев или клизм.
Фармацевтические составы, адаптированные для интраназального введения, в которых носитель представляет собой твердое вещество, включают крупный порошок, имеющий размер частичек, например, в интервале 20-500 мкм, который вводится путем вдыхания, то есть путем быстрого вдоха через нос из контейнера, содержащего порошок, который придерживают возле носа. Подходящие лекарственные препараты для введения в виде интраназального аэрозоля или носовых капель с жидкостью в качестве носителя включают растворы активного вещества в воде или в масле.
Фармацевтические составы, адаптированные для введения путем ингаляции, включают тонкоиз-мельченные частички в виде пыли или тумана, которые могут быть получены с помощью различных диспергирующих устройств под давлением с аэрозолями, распылителями или инсуффляторами.
Фармацевтические составы, адаптированные для вагинального введения, могут вводиться в виде пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или аэрозолей.
Фармацевтические составы, адаптированные для парентерального введения, включают водные или неводные стерильные растворы для инъекций, содержащие антиоксиданты, буферы, бактериостатиче-ские вещества и растворенные вещества, с помощью которых лекарственное средство поддерживается изотоническим по отношению к крови реципиента, подвергаемого лечению; и водные или неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспензионную среду и загустители. Лекарственные препараты могут вводиться с помощью емкостей для однократного или многократного введения, например запечатанных ампул и флаконов, и храниться в лиофилизированном состоянии, при этом непосредственно перед введением необходимо только добавить стерильную жидкость-носитель, например, воду для инъекций. Растворы и суспензии для инъекций, приготовленные согласно рецептуре, могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток.
Также является очевидным, что дополнительно к предпочтительным вышеописанным составляющим, лекарственные препараты также могут содержать другие вещества, которые используются в данной области для конкретных типов лекарственных средств; например, лекарственные препараты, пригодные для перорального введения, могут содержать ароматизаторы.
Терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с изобретением зависит от многих факторов, включая, например, возраст и вес животного, определенное состояние, которое необходимо лечить, и его тяжесть, природу лекарственного средства и способ введения, и в конечном счете оно может быть определено лечащим врачом или ветеринаром. Тем не менее, эффективное количество соединения в соответствии с изобретением, как правило, находится в интервале от 0.1 до 100 мг/кг веса тела реципиента (млекопитающего) в сутки и предпочтительно обычно находится в интервале от 1 до 10 мг/кг веса тела в сутки. Следовательно, действующее суточное количество для взрослого млекопитающего весом 70 кг обычно может составлять от 70 до 700 мг, причем это количество может вводиться в виде отдельной дозы один раз в день или обычно в виде циклов частичных доз (таких как, например, два, три, четыре, пять или шесть раз) в день, таким образом, что общая суточная доза является аналогичной. Эффективное количество его соли, сольвата или физиологически функционального производного может быть определено в виде доли эффективного количества соединения в соответствии с изобретением per se. Также можно предположить, что аналогичные дозы пригодны для лечения других состояний, описанных выше.
Комбинированное лечение этого типа можно осуществлять с помощью одновременного, последовательного или раздельного дозирования индивидуальных компонентов лечения. В комбинированных продуктах такого типа применяются соединения в соответствии с изобретением.
Кроме того, соединения по изобретению могут использоваться в лекарственных средствах, содержащих по меньшей мере одно соединение в соответствии с изобретением и/или его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях, и по меньшей мере один дополнительный активный компонент лекарственного средства.
Соединения по изобретению могут использоваться в комплекте (наборе), состоящему из отдельных упаковок
(a) эффективного количества соединения в соответствии с изобретением и/или его фармацевтиче-
ски приемлемых солей, сольватов и стереоизомеров, включая их смеси во всех соотношениях, и
(b) эффективного количества дополнительного активного компонента лекарственного средства.
Комплект включает подходящие емкости, такие как коробки, индивидуальные бутылки, пакеты или
ампулы. Комплект может включать, например, отдельные ампулы, каждая из которых содержит эффективное количество соединения в соответствии с изобретением и/или его фармацевтически приемлемых солей, сольватов и стереоизомеров, включая их смеси во всех соотношениях, и эффективное количество дополнительного активного компонента лекарственного средства в растворенной или лиофиллизирован-ной форме.
"Лечение", как используется в настоящей заявке, обозначает облегчение, полностью или частично, симптомов, связанных с нарушением или заболеванием, или замедление, или остановку дальнейшего прогрессирования, или ухудшения этих симптомов, или предотвращение или профилактику заболевания или нарушения у субъекта, имеющего риск развития такого заболевания или нарушения.
Термин "эффективное количество" применительно к соединению в соответствии с изобретением может обозначать количество, способное облегчать, полностью или частично, симптомы, связанные с нарушением или заболеванием, или замедление или остановку дальнейшего прогрессирования, или ухудшения этих симптомов, или предотвращать или обеспечивать профилактику заболевания или нарушения у субъекта, имеющего или с риском развития заболевания, описанного в настоящей заявке, такого как воспалительные состояния, иммунологические состояния, злокачественные новообразования или метаболические состояния.
Эффективное количество соединения в соответствии с изобретением представляет собой количество, которое ингибирует танкиразу в клетке, такое как, например, in vitro или in vivo. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество соединения в соответствии с изобретением ингибирует тан-киразу в клетке на 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или 99% по сравнению с активностью танкиразы в необработанной клетке. Эффективное количество соединения в соответствии с изобретением, например, в фармацевтической композиции может находиться на уровне, который превышает желательный эффект; например от приблизительно 0,005 до приблизительно 10 мг/кг веса тела субъекта в единичной лекарственной форме как для перорального, так и для парентерального введения.
Применение
Соединения согласно настоящему изобретению пригодны в качестве фармацевтически активных компонентов для млекопитающих, в особенности для людей, для лечения злокачественного новообразования, рассеянного склероза, сердечно-сосудистых заболеваний, поражений центральной нервной системы и различных форм воспаления.
Соединения в соответствии с изобретением и/или их физиологически приемлемые соли и сольваты могут применятся для приготовления лекарственного средства для лечения или предотвращения злокачественного новообразования, рассеянного склероза, сердечно-сосудистых заболеваний, поражений центральной нервной системы и различных форм воспаления.
Примеры воспалительных заболеваний включают ревматоидный артрит, псориаз, контактный дерматит, аллергическая реакция замедленного типа и другие.
Также соединения в соответствии с изобретением и/или их физиологически приемлемые соли и сольваты могут применятся для приготовления лекарственного средства для лечения или предотвращения заболевания, индуцированного танкиразой, или состояния, индуцированного танкиразой, у млекопитающего, при котором в этом способе терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с изобретением вводят больному млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении. Терапевтическое количество изменяется в зависимости от конкретного заболевания и легко может быть определено специалистом в данной области.
Выражение "заболевания или состояния, индуцированные танкиразой" относится к патологическим состояниям, которые зависят от активности одной или нескольких танкираз. Заболевания, связанные с активностью танкиразы, включают злокачественное новообразование, рассеянный склероз, сердечнососудистые заболевания, поражения центральной нервной системы и различные формы воспаления.
В особенности, соединения в соответствии с изобретением и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты, таутомеры и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях, могут использоваться для лечения заболеваний, при которых ингибирование, регуляция и/или модуляция ингибирования танкиразы играет роль.
В особенности соединения в соответствии с изобретением и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты, таутомеры и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях, могут использоваться
для ингибирования танкиразы.
В особенности соединения в соответствии с изобретением и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты, таутомеры и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях, могут использоваться для лечения злокачественного новообразования, рассеянного склероза, сердечно-сосудистых заболеваний, поражений центральной нервной системы и различных форм воспаления.
Соединения по изобретению могут использоваться в способе лечения или предотвращения злокачественного новообразования, рассеянного склероза, сердечно-сосудистых заболеваний, поражений центральной нервной системы и различных форм воспаления, которые включают введение субъекту, который в этом нуждается, эффективного количества соединения в соответствии с изобретением или его фармацевтически приемлемой соли, таутомера, стереоизомера или сольвата.
Характерные злокачественные новообразования, для лечения или предотвращения которых являются полезными соединения в соответствии с изобретением, включают, но не ограничиваются таковыми, рак головы, шеи, глаз, рта, горла, пищевода, бронхов, гортани, глотки, груди, костей, легких, ободочной кишки, прямой кишки, желудка, предстательной железы, мочевого пузыря, матки, шейки матки, молочной железы, яичников, яичек или других репродуктивных органов, кожи, щитовидной железы, крови, лимфатических узлов, почек, печени, поджелудочной железы, головного мозга, центральной нервной системы, солидных опухолей и злокачественного перерождения крови.
Характерные сердечно-сосудистые заболевания, для лечения или предотвращения которых являются полезными соединения в соответствии с изобретением, включают, но не ограничиваются таковыми, рестеноз, атеросклероз и его последствия, такие как инсульт, инфаркт миокарда, ишемические повреждения сердца, легких, кишечника, почек, печени, поджелудочной железы, селезенки или мозга.
Настоящее изобретение относится к способу лечения пролиферативного, аутоиммунного, противовоспалительного или инфекционного заболевания нарушения, который включает введение субъекту, который в этом нуждается, терапевтически эффективного количества соединения в соответствии с изобретением.
Предпочтительно настоящее изобретение относится к способу, где заболевание представляет собой злокачественное новообразование.
Особенно предпочтительно настоящее изобретение относится к способу, где заболевание представляет собой злокачественное новообразование, где введение является одновременным, последовательным или чередующимся с введением по меньшей мере одного другого активного лекарственного средства.
Описанные соединения в соответствии с изобретением могут вводиться в комбинации с другими известными лекарственными средствами, включая противораковые средства. Как используется в настоящем изобретении, термин "противораковое средство" относится к любому средству, которое вводят пациенту со злокачественным новообразованием для лечения рака.
Противоопухолевое лечение, описанное в изобретении, может применяться в виде монотерапии, или дополнительно к соединению по изобретению можно также применять обычные хирургические методы или радиотерапию или химиотерапию. Такая химиотерапия может включать один или несколько следующих классов противоопухолевых средств:
(i) антипролиферативные/противоопухолевые/повреждающие ДНК лекарственные средства и их комбинации, которые применяются в медицинской онкологии, такие как алкилирующие средства (например, цисплатин, карбоплатин, циклофосфамид, азотный иприт, мельфалан, хлорамбуцил, бусульфан и нитрозомочевины); антиметаболиты (например, антифолаты, такие как фторпиримидины, такие как 5-фторурацил и тегафур, ралтитрексед, метотрексат, арабинозид цитозина, гидроксимочевина и гемцита-бин); противоопухолевые антибиотики (например, антрациклины, такие как адриамицин, блеомицин, доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, митомицин-С, дактиномицин и митрамицин); ан-тимитотические средства (например, алкалоиды барвинка, такие как винкристин, винбластин, виндезин и винорелбин и таксоиды, такие как таксол и таксотер); ингибиторы топоизомеразы (например, эпиподо-филлотоксины, такие этопозид и тенипозид, амсакрин, топотекан, иринотекан и камптотецин); и средства, влияющие на дифференциацию клеток (например, ретиноевая кислота, полностью находящаяся в транс-конфигурации, 13-цис-ретиноевая кислота и фенретинид);
(ii) цитостатические средства, такие как антиэстрогены (например, тамоксифен, торемифен, ралок-сифен, дролоксифен и йодоксифен), ингибиторы рецептора эстрогена (например, фульвестрант); антиан-дрогены (например, бикалутамид, флутамид, нилутамид и ципротерон ацетат), антагонисты LHRH или агонисты LHRH (например, гозерелин, лейпрорелин и бузерелин), прогестогены (например, мегестрол ацетат), ингибиторы ароматазы (например, анастрозол, летрозол, воразол и эксеместан) и ингибиторы 5а-редуктазы, такие как финастерид;
(iii) средства, которые ингибируют инвазию злокачественных клеток (например, ингибиторы ме-таллопротеиназы, такие как маримастат, и ингибиторы функции рецептора урокиназного активатора плазминогена);
(iv) ингибиторы действия фактора роста, например, такие ингибиторы включают антитела к фактору роста, антитела к рецептору фактора роста (например, анти-erbb2 антитело трастузумаб [Herceptin(tm)]
(i)
и анти-erbb! антитело цетуксимаб [С225]), ингибиторы фарнезилтрансферазы, ингибиторы тирозинкина-зы и ингибиторы серин/треонинкиназы, например ингибиторы семейства фактора роста эпидермиса (например, ингибиторы EGFR семейства тирозинкиназ, такие как К-(3-хлор-4-фторфенил)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-амин (гефитиниб, AZD1839), К-(3-этинилфенил)-6,7-бис(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин (эрлотиниб, OSI-774) и 6-акриламидо-К-(3-хлор-4-фторфенил)-7-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-амин (CI 1033)), например ингибиторы семейства фактора роста производных тромбоцитов и, например, ингибиторы семейства фактора роста гепатоцитов;
(v) антиангиогенные вещества, такие как те, которые ингибируют действие фактора роста эндотелия сосудов, (например, антитело к фактору роста клеток эндотелия сосудов бевацизумаб [Avastin(tm)], соединения, которые описаны в опубликованных международных заявках на патент WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 и WO 98/13354), и соединения, которые действуют по другому механизму (например, линомид, ингибиторы действия интегрина тф3 и ангиостатин);
(vi) вещества, повреждающие сосуды, такие как комбретастатин А4 и соединения, описанные в международных заявках на патент WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 и
WO 02/08213;
(vii) антисмысловая терапия, например такая, которая направлена на вышеперечисленные мишени, такая как ISIS 2503, антисмысловая терапия на основе гена Ras;
(viii) способы генной терапии, включая, например, способы замены аберрантных генов, такие как способы аберрации р53 или аберрации BRCA1 или BRCA2, GDEPT (пролекарственная терапия, направленная на ген фермента), способы с использованием деаминазы цитозина, тимидинкиназы или бактериальной нитроредуктазы и способы повышения устойчивости пациента к химиотерапии или радиотерапии, такие как генная терапия резистентности ко многим лекарственным средствам; и
(ix) способы иммунотерапии, включая, например, способы повышения иммуногенности опухолевых клеток пациента в условиях ex vivo и in vivo, такие как трансфекция цитокинами, такими как интер-лейкин 2, интерлейкин 4 или фактор стимуляции колоний гранулоцитов-макрофагов, способы снижения активности Т-клеток, способы с использованием трансфектированных иммунных клеток, таких как ци-токин-трансфектированные дендритные клетки, способы с использованием цитокин-трансфектированных линий опухолевых клеток и способы с использованием антиидиотипичных антител.
Лекарственные средства, приведенные ниже в табл. 1, предпочтительно, но не исключительно, комбинируют с соединениями в соответствии с изобретением.
Таблица 1.
Алкилирующие агенты
Циклофосфамид Ломустин Бусульфан Прокарбазин Ифосфамид Алтретамин Мелфалан Эстрамустин фосфат Гексаметилмеламин Мехлороэтамин Тиотепа Стрептозоцин Хлорамбуцил Темозоломид Дакарбазин Семустин Кармустин
Платиновые агенты
Цисплатин Карбоплатин Оксалиплатин ZD-0473 (AnorMED) Спироплатин Лобаплатин (Aetema) Карбоксифталатоплатинум Сатраплатин (Johnson Matthey) Тетраплатин BBR-3464 (Hoffrnann-La Roche) Ормиплатин SM-11355 (Sumitomo) Ипроплатин AP-5280 (Access)
Антиметабо литы
Азацитидин Томудекс Гемцитабин Триметрексат Капецитабин Деоксикоформицин
5- фторурацил Флударабин
Флоксуридин Пентостатин
2-хлордезоксиаденозин Ралтитрексед
6- Меркаптопурин Гидроксимочевина
6-Тиогуанин Децитабин (SuperGen)
Цитарабин Клофарабин (Bioenvision)
2-фтордезоксицитидин
Ирофулвен (MGI Pharrna)
Метотрексат
DMDC (Hoffmann-La
Идатрексат
Roche)
Этинилцитидин (Taiho )
Ингибиторы
Амсакрин
Рубитекан (SuperGen)
топоизомеразы
Эпирубицин
Эксатекан мезилат
Этопозид
(Daiichi)
Тенипозид или
Хинамед (ChemGenex)
митоксантрон
Гиматекан (Sigma- Tau)
Иринотекан (СРТ-11)
Дифломотекан (Beaufour-Ipsen)
7-этил-Ю- гидроксикамптотецин
TAS-103 (Taiho)
Топотекан
Элзамитруцин (Spectrum)
Дексразоксанет
J-107088 (Merck & Co)
(TopoTarget)
BNP-1350 (BioNumerik)
Пиксантрон (Novuspharrna)
CKD-602 (Chong Kun
Аналог ребеккамицина (Exelixis)
Dang)
BBR-3576 (Novuspharrna)
KW-2170 (Kyowa Hakko)
Противоопухолевые
Дактиномицин (Актиномицин D)
Амонафид
антибиотики
Доксорубицин (Адриамицин)
Азонафид
Деоксирубицин
Антрапиразол
Валрубицин
Оксантразол
Даунорубицин (Дауномицин)
Лозоксантрон
Эпирубицин
Блеомицин сульфат (Бленоксан)
Терарубицин
Блеомициновая кислота
Идарубицин
Блеомицин А
Рубидазон
Блеомицин В
Пликамицинп
Митомицин С
Порфиромицин
MEN-10755 (Menarini)
Цианоморфо лино доксо -рубицин
GPX-100 (Gem Pharmaceuticals)
Митоксантрон (Новантрон)
Антимитотические агенты
Паклитаксел
SB 408075 (GlaxoSmithKline)
Доцетаксел
E7010 (Abbott)
Колхицин
PG-TXL (Cell Therapeutics)
Винбластин
IDN 5109 (Bayer)
Винкристин
A 105972 (Abbott)
Винорелбин
A 204197 (Abbott)
Виндезин
LU 223651 (BASF)
Доластатин 10 (NCI)
D 24851 (ASTA Medica)
Ризоксин (Fujisawa)
ER-86526 (Eisai)
Мивобулин (Warner-Lambert)
Комбретастатин A4 (BMS)
Цемадотин (BASF)
Изогомогалихондрин-В
RPR 109881A (Aventis)
(PharmaMar)
TXD 258 (Aventis)
ZD 6126 (AstraZeneca)
Эпотилон В (Novartis)
PEG-Паклитаксел (Enzon)
Т 900607 (Tularik)
AZ10992 (Asahi)
Т 138067 (Tularik)
IDN-5109 (Indena)
Криптофицин 52 (Eli Lilly)
AVLB (Prescient NeuroPharma)
Винфлунин (Fabre)
Азаэпотилон В (BMS)
Ауристатин РЕ (Teikoku
BNP-7787 (BioNumerik)
Hormone)
СА-4-пролекарство (OXiGENE)
BMS 247550 (BMS)
Доластатин-10 (NrH)
BMS 184476 (BMS)
CA-4 (OXiGENE)
BMS 188797 (BMS)
Таксопрексин (Protarga)
Ингибиторы ароматазы
Аминоглутетимид
Эксеместан
Летрозол Атаместан (BioMedicines) Анастразол YM-511 (Yamanouchi) Форместан
Ингибиторы тимидилат-синтазы
Пеметрексед (Eli Lilly) Нолатрексед (Eximias) ZD-9331 (BTG) CoFactor(tm) (BioKeys)
Антагонисты ДНК
Трабектедин (PharmaMar) Мафосфамид (Baxter Глуфосфамид (Baxter International) International) Апазиквон (Spectrum Альбумин + 32P (Isotope Pharmaceuticals) Solutions) Об-бензилгуанин (Paligent) Тимектацин (NewBiotics) Эдотреотид (Novartis)
Ингибиторы фарнезил-трансферазы
Арглабин (NuOncology Labs) Типифарниб (Johnson & Johnson) Лонафарниб (Schering-Plough) Периллиловый спирт (DOR BAY-43-9006 (Bayer) BioPharma)
Ингибиторы насоса
CBT-1 (CBA Pharma) Зосуквидар тригидрохлорид (Eli Тариквидар (Xenova) Lilly)
MS-209 (Schering AG) Бирикодар дицитрат (Vertex)
Ингибиторы гистон-ацетил- трансферазы
Тацединалин (Pfizer) Пивалоилоксиметил бутират
SAHA (Aton Pharma) (Titan)
MS-275 (Schering AG) Депсипептид (Fujisawa)
Ингибиторы
металлопротеиназы
Ингибиторы
рибонуклеозид- редуктазы
Неовастат (Aeterna Laboratories) CMT -3 (CollaGenex) Маримастат (British Biotech) BMS-275291 (Celltech) Галлия мальтолат (Titan) Тезацитабин (Aventis) Триапин (Vion) Дидокс (Molecules for Health)
TNF-альфа агонисты/ антагонисты
Вирулизин (Lorus Therapeutics) Ревимид (Celgene) CDC-394 (Celgene)
Антагонисты рецептора эндотелин-А
Атразентан (Abbot) YM-598 (Yamanouchi) ZD-4054 (AstraZeneca)
Агонисты рецептора ретиноевой кислоты
Фенретинид (Johnson & Johnson) Алитретиноин (Ligand) LGD-1550 (Ligand)
Иммуномодуляторы
Интерферон Дексосомная терапия (Anosys) Онкофаг (Antigenics) Пентрикс (Australian Cancer GMK (Progenies) Technology) Аденокарциномная вакцина JSF-154 (Tragen) (Biomira) Раковая вакцина (Intercell) CTP-37 (AVI BioPharma) Норелин (Biostar) JRX-2 (Immuno-Rx) BLP-25 (Biomira) PEP-005 (Peplin Biotech) MGV (Progenies) Синхроваксные вакцины (CTL !3-Алетин (Dovetail) Immuno) CLL-тера (Vasogen) Меланомная вакцина (CTL Immuno)
p21-RAS вакцина (GemVax)
Гормональные и антигормональные агенты
Эстрогены Преднизон Коньюгированные эстрогены Метилпреднизолон Этинилэстрадиол Преднизолон
хлортрианизен Аминоглутетимид
Иденестрол Леупролид
Гидроксипрогестерон капроат Гозерелин
Медроксипрогестерон Леупорелин
Тестостерон Бикалутамид
Тестостерон пропионат Флутамид
Флуоксиместерон Октреотид
Метилтестостерон Нилутамид
Диэтилстилбестрол Митотан
Мегестрол Р-04 (Novogen)
Тамоксифен 2-Метоксиэстрадиол (EntreMed)
Торемофин Арзоксифен (Eli Lilly)
Дексаметазон
Фотодинамические агенты
Талапорфин (Light Sciences) Pd-Бактериофеофорбид (Yeda) Тералюкс (Theratechnologies) Лютеций-Тексафирин Мотексафин-Гадо линий (Pharmacyclics) (Pharmacyclics) Гиперицин
Ингибиторы тирозин-киназы
Иматиниб (Novartis) Кахалид F (PharmaMar) Лефлуномид (Sugen/Pharmacia) СЕР-701 (Cephalon) ZD1839 (AstraZeneca) СЕР-751 (Cephalon) Эрлотиниб (Oncogene Science) MLN518 (Millenium) Канертьюниб (Pfizer) PKC412 (Novartis) Скваламин (Genaera) Феноксодиол О SU5416 (Pharmacia) Трастузумаб (Genentech) SU6668 (Pharmacia) C225 (ImClone) ZD4190 (AstraZeneca) rhu-Mab (Genentech) ZD6474 (AstraZeneca) MDX-H210 (Medarex) Ваталаниб (Novartis) 2C4 (Genentech) РКП66 (Novartis) MDX-447 (Medarex) GW2016 (GlaxoSmithKline) ABX-EGF (Abgenix) EKB-509 (Wyeth) IMC-1С11 (ImClone) EKB-569 (Wyeth)
Разные агенты
SR-27897 (CCK-A ингибитор, BCX-1777 (PNP ингибитор,
Sanofi-Synthelabo) BioCryst)
Токладезин (цАМФ-агонист, Ранпирназа (стимулятор
Ribapharm) рибонуклеазы, Alfacell)
Алвоцидиб (CDK ингибитор, Галарубицин (ингибитор синтеза
Aventis) РНК, Dong-A)
CV-247 (СОХ-2 ингибитор, Ivy Тирапазамин
Medical) (восстанавливающий агент, SRI
Р54 (СОХ-2 ингибитор, International)
Phytopharm) N-Ацетилцистеин
CapCell(tm) (CYP450 стимулятор, (восстанавливающий агент,
Bavarian Nordic) Zambon)
GCS-IOO (gal3 антагонист, R-Флурбипрофен (ингибитор
GlycoGenesys) NF-каппаВ, Encore)
G17DT иммуноген (ингибитор ЗСРА (ингибитор NF-каппаВ,
гастрина, Aphton) Active Biotech)
Эфапроксирал (оксигенатор, Сеокальцитол (агонист
Alios Therapeutics) рецептора витамина D, Leo)
PI-88 (ингибитор гепараназы, 131-I-TM-601 (ДНК антагонист,
Progen) TransMolecular)
Тесмилифен (антагонист Эфлорнитин (ODC ингибитор,
гистамина, YM Biosciences) ILEX Oncology)
Гистамин (агонист рецептора Минодроновая кислота
гистамина Н2, Maxim) (ингибитор остеокласта,
Тиазофурин (IMPDH ингибитор, Yamanouchi)
Ribapharm)
Циленгитид (антагонист интегрина, Merck KGaA) SR-31747 (IL-1 антагонист, Sanofi-Synthelabo) CCI-779 (ингибитор mTOR киназы, Wyeth)
Эксисулинд (PDE-V ингибитор, Cell Pathways)
CP-461 (PDE-V ингибитор, Cell Pathways)
AG-2037 (GART ингибитор, Pfizer)
WX-UK1 (ингибитор активатора плазминогена, Wilex) PBI-1402 (PMN стимулятор, ProMetic LifeSciences) Бортезомиб (ингибитор протеасомы, Millennium) SRL-172 (стимулятор Т-клеток, SR Pharma)
TLK-286 (ингибитор глутатион-S трансферазы, Telik) PT-100 (агонист фактора роста, Point Therapeutics) Мидостаурин (PKC ингибитор, Novartis)
Бриостатин-1 (PKC стимулятор, GPC Biotech)
CDA-II (промотор апоптоза, Everlife)
SDX-101 (промотор апоптоза, Salmedix)
Цефлатонин (промотор апоптоза, ChemGenex)
Индисулам (р53 стимулятор, Eisai)
Аплидин (РРТ ингибитор, PharmaMar)
Ритуксимаб (CD20 антитело, Genentech)
Гемтузумаб (CD33 антитело, Wyeth Ayerst)
PG2 (промотор гематопоеза, Pharmagenesis) Immunol(tm) (триклозановая жидкость для промывания ротовой полости, Endo) Триацетилуридин (уридиновое пролекарство, Wellstat) SN-4071 (саркомный агент, Signature Bioscience) TransMID-107(tm) (иммунотоксин, KS Biomedix)
PCK-3145 (промотор апоптоза, Procyon)
Доранидазол (промотор апоптоза, Pola) CHS-828 (цитотоксический агент, Leo)
Транс-ретиновая кислота (дифференциатор, NIH) МХ6 (промотор апоптоза, MAXIA)
Апомин (промотор апоптоза,
ILEX Oncology)
Уроцидин (промотор апоптоза,
Bioniche)
Ro-31-7453 (промотор апоптоза, La Roche)
Бросталлицин (промотор
апоптоза, Pharmacia)
Следующие сокращения относятся соответственно к определениям, приведенным ниже:
водн. (водн), ч (час), г (грамм), л (литр), мг (миллиграмм), МГц (мегагерц), мин (минута), мм (миллиметр), ммоль (миллимоль), мМ (миллимолярный), tnjL (температура плавления), экв. (эквивалент), мл (миллилитр), мкл (микролитр), ACN (ацетонитрил), АсОН (уксусная кислота), CDCl3 (дейтерированный хлороформ), CD3OD (дейтерированный метанол), CH3CN (ацетонитрил), c-hex (циклогексан), DCC (ди-циклогексил карбодиимид), ДХМ (дихлорметан), DIC (диизопропил карбодиимид), DIEA (диизопропи-лэтил-амин), ДМФА (диметилформамид), ДМСО (диметилсульфоксид), ДМСО-ё6 (дейтерированный диметилсульфоксид), EDC (1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид), ЭРИ (электрораспылительная ионизация), EtOAc (этилацетат), Et2O (простой диэтиловый эфир), EtOH (этанол), HATU гексафтор-фосфат (диметиламино-([1,2,3]триазоло[4,5-b]пиридин-3-илокси)метилен]диметиламмония), ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография), i-PrOH (2-пропанол), K2CO3 (карбонат калия), ЖХ (жидкостная хроматография), МеОН (метанол), MgSO4 (сульфат магния), МС (масс-спектрометрия), МТВЕ (метил-трет-бутиловый эфир), NaHCO3 (бикарбонат натрия), NaBH4 (борогидрид натрия), NMM (N-метилморфолин), ЯМР (ядерный магнитный резонанс), РуВОР (гексафторфосфат бензотриазол-1-ил-окси-трис-пирролидинофосфония), КТ (комнатная температура), Rt (время удержания), SPE (твердофазная экстракция), TBTU (тетрафторборат 2-(1-Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония), TEA (три-этиламин), ТФУ (трифторуксусная кислота), ТГФ (тетрагидрофуран), ТСХ (тонкослойная хроматография), УФ (ультрафиолет).
Описание исследований in vitro.
Сокращения:
GST = глутатион^-трансфераза,
FRET = резонансный перенос энергии флуоресценции,
HTRF(r) = (гомогенная флуоресценция с временным разрешением),
HEPES = буфер 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазин - этансульфоновая кислота,
DTT = дитиотреитол,
BSA = бычий сывороточный альбумин,
CHAPS = детергент,
CHAPS = 3-[(3-холамидопропил)диметиламмонио]-1-пропансульфонат.
Стрептавидин-XLent(r) представляет собой конъюгат стрептавидин-ХЬ665, для которого были оптимизированы условия сочетания для получения конъюгата с улучшенными характеристиками для некоторых исследований, в частности тех, для которых требуется высокая чувствительность.
Тестирование биохимической активности танкираз 1 и 2 Исследование аутопарсилирования Исследование аутопарсилирования осуществляют за две стадии: ферментативная реакция, в кото
рой GST-меченая танкираза-1, соотв. танкираза-2, переносит биотинилированную ADP-рибозу на себя из биотинилированного NAD в качестве косубстрата, и реакция обнаружения, где анализируют FRET с временным разрешением между меченными криптатом анти-GST, которые связаны с GST меткой фермента, и Xlent(r) меченным - стрептавидинсвязанным биотинпарсилированным остатком. Аутопарсили-рующую активность определяют непосредственно путем повышения HTRF сигнала.
Исследование аутопарсилирования осуществляют в формате анализа на 384 лунок HTRF(r) (Cisbio, Codolet, France) в микротитровальных низкообъемных планшетах на 384 лунки Greiner nb и используют для экрана с высокой пропускной способностью. 250 нМ GST-меченную танкиразу-1 (1023-1327 а/к), соответственно приблизительно 250 нМ GST-меченную танкиразу-2 (873-1166 а/к) и 5 мкМ bio-NAD (Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany) в качестве косубстрата инкубируют в общем объеме 5 мкл (50 мМ HEPES, 4 мМ Mg-хлорид, 0.05% Pluronic F-68, 1.4 мМ DTT, 0.5% ДМСО, рН 7.7) при отсутствии или в присутствие тестируемого соединения (10 концентраций разведения) в течение 90 мин при 30°С. Реакцию останавливают путем добавления 1 мкл 50 мМ EDTA раствора. Добавляют 2 мкл раствора для обнаружения (1.6 мкМ SA-Xlent(r) (Cisbio, Codolet, France), 7.4 нМ Анти-GST-K(r) (Eu-меченные анти-GST, Cisbio, Codolet, France) в 50 мМ HEPES, 800 мМ KF, 0.1% BSA, 20 мМ EDTA, 0.1% CHAPS, pH 7.0). После инкубирования в течение 1 ч при комнатной температуре HTRF измеряют с помощью многорежимного планшет-ридера Envision (Perkin Elmer LAS Germany GmbH) при длине волны возбуждения 340 нм (лазерный режим) и длинах волн эмиссии 615 и 665 нм. Определяют соотношение сигналов эмиссии. Полное используемое значение представляло реакцию без ингибитора. Используемое значение фармакологического нуля представляло собой XAV-939 (Tocris) в конечной концентрации 5 мкМ. Ингиби-рующие значения (IC50) определяют, используя либо программу Symyx Assay Explorer(r), или Condosseo(r) от GeneData.
Измерение клеточного ингибирования танкиразы
Поскольку было описано, что танкиразы модулируют клеточный уровень Axin2 (Huang и др., 2009; Nature), то повышение уровня Axin2 используют в качестве анализируемых данных для определения клеточного ингибирования танкираз в анализе на основе Luminex.
Клетки клеточной линии карциномы ободочной кишки DLD1 высевают в планшеты на 96 лунок при плотности 1.5х104 клеток на лунку. На следующий день клетки обрабатывают серийными разведениями тестируемого соединения за семь стадий в виде трех повторов с конечной концентрацией ДМСО 0.3%. Через 24 ч клетки лизируют в лизирующем буфере (20 мМ Tris/HCl pH 8.0, 150 мМ NaCl, 1% NP40, 10% глицерин) и лизаты очищают путем центрифугирования через фильтровальный планшет на 96 лунок (0.65 мкм). Белок Axin2 выделяют из клеточных лизатов путем инкубирования с моноклональным анти-Axin2 антителом (R &D Systems #MAB6078), которое связывается с флуоресцентными карбоксишарика-ми. После этого связанный Axin2 специфически обнаруживают с помощью поликлонального анти-Axin2 антитела (Cell Signaling #2151) и подходящего РЕ-флуоресцентного вторичного антитела. Количество выделенного Axin2 белка определяют с помощью прибора Luminex200 (Luminex Corporation) в соответствии с инструкциями производителя путем подсчитывания 100 событий на лунку. Ингибирование танки-разы тестируемыми соединениями приводит к более высоким уровням Axin2, которые прямо коррелируют с повышением обнаруживаемой флуоресценции. В качестве контролей клетки обрабатывают только растворителем (нейтральный контроль) и сравнительным ингибитором танкиразы IWR-2 (3Е-06 М), который служит в качестве контроля для максимального повышения Axin2. Для анализа полученные данные нормализуют по отношению к необработанному контролю с растворителем и подгоняют для определения значений EC50, используя программное обеспечение Assay Explorer (Accelrys).
Описание исследования PARP1 Тестирование биохимической активности PARP-1: исследование аутопарсилирования
Исследование аутопарсилирования осуществляют за две стадии: ферментативная реакция, в которой His-меченная Parp-1 переносит биотинилированную ADP-рибозу/ADP-рибозу на себя с биотинили-рованного NAD/NAD в качестве косубстрата, и реакция обнаружения, где анализируют FRET с временным разрешением между меченным криптатом анти-His антителом, связанным с His меткой фермента, и Xlent(r) меченным-стрептавидинсвязанным биотинпарсилированным остатком. Аутопарсилирующую активность определяют непосредственно путем повышения HTRF сигнала.
Исследование аутопарсилирования осуществляют в формате анализа на 384 лунок HTRF(r) (Cisbio, Codolet, France) в микротитровальных низкообъемных планшетах на 384 лунки Greiner nb. 35 нМ His-меченную Parp-1 (человеческая, рекомбинантная, Enzo Life Sciences GmbH, Lorrach, Germany) и смесь 125 нМ bio-NAD (Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany) и 800 нМ NAD в качестве косубстрата инкубируют в общем объеме 6 мкл (100 мМ Tris/HCl, 4 мМ Mg-хлорид, 0,01% IGEPAL(r) CA630, 1 мМ DTT, 0,5% ДМСО, рН 8, 13 нг/мкл активированной ДНК (BPS Bioscience, San Diego, US)) при отсутствии или в присутствие тестируемого соединения (10 концентраций разведения) в течение 150 мин при 23°С. Реакцию останавливают путем добавления 4 мкл раствора стоп/обнаружение (70 нМ SA-Xlent(r) (Cisbio, Codolet, France), 2.5 нМ анти-His-K(r) (Eu-меченные анти-His, Cisbio, Codolet, France) в 50 мМ HEPES, 400 мМ KF, 0.1% BSA, 20 мМ EDTA, pH 7.0). После инкубирования в течение 1 ч при комнатной темпе
ратуре HTRF измеряют с помощью многорежимного планшет-ридера Envision (Perkin Elmer LAS Germany GmbH) при длине волны возбуждения 340 нм (лазерный режим) и длинах волн эмиссии 615 и 665 нм. Определяют соотношение сигналов эмиссии. Полное используемое значение представляло реакцию без ингибитора. Используемое значение фармакологического нуля представляло собой Olaparib (LClabs, Woburn, US) в конечной концентрации 1 мкМ. Определяют ингибирующие значения (IC50), используя либо программу Symyx Assay Explorer(r), либо Condosseo(r) от GeneData.
Описание ELISA исследования TNKS1 и TNKS2 Тестирование биохимической активности TNK 1 и 2: активности ELISA (исследование аутопарсилирования)
Для анализа аутопарсилирующей активности TNKS 1 и 2 осуществляют ELISA: на первой стадии GST меченную TNKS захватывают на покрытом глутатионом планшете. После этого осуществляют анализ активности с биотинилированным NAD при отсутствии/в присутствие соединений. В процессе ферментативной реакции GST меченная TNKS переносит биотинилированную ADP-рибозу на себя с биоти-нилированного NAD в качестве косубстрата. Для обнаружения добавляют конъюгат стрептавидин-HRP, который связывается с биотинилированной TNKS и, таким образом, захватывается на планшеты. Определяют количество биотинилированной соотв. аутопарсилированной TNKS с люминесцентным субстратом для HRP. Уровень сигнала люминесценции прямо коррелируется с количеством аутопарсилирован-ной TNKS и, следовательно, с активностью TNKS.
Активность ELISA осуществляют в микротитровальных планшетах на 384 лунки, покрытых глута-тионом (планшеты для захвата Express, покрытые глутатионом, Biocat, Heidelberg, Germany). Планшеты предварительно уравновешивают с помощью PBS. Затем планшеты инкубуют с 50 мкл 20 нг/лунку GST-меченной Tnks-1 (1023-1327 а/к, собственного производства), соответственно GST-меченной Tnks-2 (8731166 а/к, собственного производства) в буфере для анализа (50 мМ HEPES, 4 мМ Mg-хлорид, 0.05% Plu-ronic F-68,2 мМ DTT, рН 7.7) в течение ночи при 4°С. Планшеты промывают 3 раза с помощью PBS-Tween-20. Лунки блокируют путем инкубирования при комнатной температуре в течение 20 мин с 50 мкл блокирующего буфера (PBS, 0.05% Tween-20, 0.5% BSA). После этого планшеты промывают 3 раза с помощью PBS-Tween-20. Ферментативную реакцию осуществляют в 50 мкл реакционного раствора (50 мМ HEPES, 4 мМ Mg-хлорид, 0.05% Pluronic F-68, 1.4 мМ DTT, 0.5% ДМСО, рН 7.7) с 10 мкМ bio-NAD (Biolog, Life science Inst., Bremen, Germany) в качестве косубстрата при отсутствии или присутствие тестируемого соединения (10 концентраций разведения) в течение 1 ч при 30°С. Реакцию останавливают путем промывания 3 раза с PBS-Tween-20. Для обнаружения добавляют 50 мкл 20 нг/мкл стрептавидин, HRP конъюгата (MoBiTec, Gottingen, Germany) в PBS/0.05% Tween-20/0.01% BSA и планшеты инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре. После трехразового промывания PBS-Tween-20 добавляют 50 мкл SuperSignal ELISA Femto Maximum чувствительного субстратного раствора (ThermoFish-erScientific (Pierce), Bonn, Germany). После инкубирования в течение 1 мин при комнатной температуре измеряют люминесцентные сигналы с помощью многорежимного планшет-ридера Envision (Perkin Elmer LAS Germany GmbH) при 700 нм. Полное используемое значение представляло реакцию без ингибитора. Используемое значение фармакологического нуля представляло собой XAV-939 (Tocris) в конечной концентрации 5 мкМ. Определяют ингибирующие значения (IC50), используя либо программу Symyx Assay Explorer(r) либо Condosseo(r) от GeneData.
Выше и ниже все температуры указаны в градусах Цельсия, °С. В последующих примерах "обычная обработка" обозначает: при необходимости добавляют воду, рН устанавливают, при необходимости, на значение от 2 до 10, в зависимости от состава конечного продукта, смесь экстрагируют этилацетатом или дихлорметаном, фазы разделяют, органическую фазу высушивают над сульфатом натрия и упаривают и остаток очищают при помощи хроматографии на силикагеле и/или кристаллизации. Rf значения на сили-кагеле; элюент: этилацетат/метанол 9:1.
ВЭЖХ/МС условия А:
колонка: Chromolith Performance ROD RP-18e, 50x4.6 мм2,
градиент: А:В = 96:4 - 0:100 за 2.8 мин,
скорость потока: 2.40 мл/мин,
элюент А: вода + 0.05% муравьиной кислоты,
элюент В: ацетонитрил + 0.04% муравьиной кислоты,
длина волны: 220 нм,
масс-спектроскопия: положительный режим;
ВЭЖХ/МС условия В:
колонка: Chromolith Performance ROD RP-18e, 100х3 мм2,
градиент: А:В = 99:1 - 0:100 за 3.5 мин,
скорость потока: 2.0 мл/мин,
элюент А: вода + 0.05% муравьиной кислоты,
элюент В: ацетонитрил + 0.04% муравьиной кислоты,
длина волны: 220 нм,
масс-спектроскопия: положительный режим; ВЭЖХ/МС условия С:
колонка: Chromolith Performance ROD RP-18e, 100x3 мм2,
градиент: А:В = 99:1 - 0:100 за 1.8 мин,
скорость потока: 2.0 мл/мин,
элюент А: вода + 0.05% муравьиной кислоты,
элюент В: ацетонитрил + 0.04% муравьиной кислоты,
длина волны: 220 нм,
масс-спектроскопия: положительный режим.
1H ЯМР записывали на спектрометре Bruker DPX-300, DRX-400 или AVII-400, используя остаточный сигнал дейтерированного растворителя в качестве внутреннего стандарта. Химические сдвиги (5) представлены в виде м.д. относительного остаточного сигнала растворителя (5 = 2.49 м.д. для ЯМР в ДМСО-dfs). 1Н ЯМР данные представлены следующим образом: химический сдвиг (мультиплетность, константы взаимодействия и количество водородов). Мультиплетность сокращали следующим образом: s (синглет), d (дублет), t (триплет), q (квартет), m (мультиплет), br (широкий).
Микроволновую химию осуществляют в однорежимном микроволновом реакторе Emrys(tm) Opti-miser от Personal Chemistry.
Пример 1. Синтез 3-(4-бензилоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("Al")
Суспензию 200 мг (1.60 ммоль) сложного метилового эфира 1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты и 1.56 г (4.79 ммоль) карбоната цезия в 3 мл ДМФА нагревают до 50°С при перемешивании. Затем в течение 3 мин добавляют раствор 488 мг (1.60 ммоль) 1-(4-бензилоксифенил)-2-бромэтанона в 1 мл ДМФА. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при 50°С. Реакционную смесь фильтруют с отсасыванием и фильтрат упаривают. Остаток кристаллизуют из диэтилового эфира с получением сложного метилового эфира 1-[2-(4-бензилоксифенил)-2-оксоэтил]-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в виде бежевых кристаллов; ВЭЖХ/МС 2.51 мин (А), [М+Н] 350.
Суспензию 100 мг (0.286 ммоль) сложного метилового эфира 1-[2-(4-бензилоксифенил)-2-оксоэтил]-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в 7М растворе аммиака в метаноле облучают в микроволновом аппарате при 90°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью петролейный эфир/этилацетат в качестве элюента с получением 3-(4-бензилоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде бежевых кристаллов; ВЭЖХ/МС 2.26 мин (А), [М+Н] 317.
Аналогично получают следующие соединения:
Раствор 1.15 г (9.19 ммоль) сложного метилового эфира 1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты и 2.70 г (10.1 ммоль) 2-бром-(1-(4-трифторметилфенил)этанона в 20 мл ацетонитрила обрабатывают 3.30 г (10.1 ммоль) карбоната цезия. Полученную суспензию перемешивают при 35°С в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением сложного метилового эфира 1-[2-оксо-2-(4-трифторметилфенил)этил]-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в виде желтого масла; ВЭЖХ/МС 2.52 (А), [М+Н] 312.
Раствор 106 мг (0.34 ммоль) сложного метилового эфира 1-[2-оксо-2-(4-трифторметилфенил)этил]-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты и 789 мг (10.2 ммоль) ацетата аммония в 2 мл уксусной кислоты нагревают до 80°С при перемешивании. Смесь перемешивают при этой температуре в течение 5 ч и затем охлаждают до комнатной температуры. Смесь распределяют между ТГФ и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу два раза промывают 25%-м водным раствором аммиака и два раза насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюен-та с получением 3-(4-трифторметилфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде бесцветных кристаллов; ВЭЖХ/МС 2.11 (А), [М+Н] 279;
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 10.91 (s, 1H), 7.90 (m, 3Н), 7.82 (d, J=8.4, 2Н), 7.49 (dd, J=2.4, 1.5, 1Н), 6.95 (m, 1H), 6.61 (dd, J=3.8, 2.6, 1H).
Аналогично получают следующие соединения:
3-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-2Н-пирроло [ 1,2-а]пиразин-1 -он ("А14")
ВЭЖХ/МС 1.66 мин (В), [М+Н] 215;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 10.62 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.86 (d, J=0.6, 1Н), 7.66 (s, 1H), 7.37 (dd, J=2.5, 1.5, 1H), 6.87 (m, 1H), 6.53 (dd, J=3.9, 2.5, 1H), 3.86 (s, 3H);
3-(4-трет-бутилфенил)-7-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он ("A38")
ВЭЖХ/МС 2.94 мин (В), [М+Н] 281;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 10.64 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.59 (d, J=8.6, 2Н), 7.46 (d, J=8.6, 2Н), 7.24 (dd, J=1.5, 0.8, 1H), 6.72 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.30 (s, 10H);
3-(4-трет-бутилфенил)-1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-7-карбонитрил ("А92")
Раствор 849 мг (4.00 ммоль) диэтилпиразол-3,5-дикарбоксилата и 1.02 г (4.00 ммоль) 2-бром-1-(4-трет-бутилфенил)этанона в 4 мл ацетона обрабатывают 663 мг (4.80 ммоль) карбоната калия. Полученную суспензию перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают с получением сложного диэтилового эфира 1-[2-(4-трет-бутилфенил)-2-оксоэтил]-1Н-пиразол-3,5-дикарбоновой кислоты в виде светло-желтой пены; ВЭЖХ/МС 2.77 (А), [М+Н] 387.
Раствор 1.04 г (2.71 ммоль) сложного диэтилового эфира 1-[2-(4-трет-бутилфенил)-2-оксоэтил]-1Н-пиразол-3,5-дикарбоновой кислоты и 2.08 г (27.1 ммоль) ацетата аммония в 20 мл уксусной кислоты перемешивают в течение 44 ч при 110°С. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют избыток воды. Полученный осадок отфильтровывают и промывают водой. Остаток хроматогра-фируют на колонке с силикагелем смесью дихлорметан/метанол в качестве элюента с получением сложного этилового эфира 6-(4-трет-бутилфенил)-4-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-карбоновой кислоты в виде бесцветных кристаллов; ВЭЖХ/МС 2.41 (А), [М+Н] 340.
Раствор 547 мг (1.61 ммоль) сложного этилового эфира 6-(4-трет-бутилфенил)-4-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-карбоновой кислоты в 10 мл 1,2-диметоксиэтана обрабатывают 5 мл 1н. водного раствора NaOH. Полученную суспензию нагревают до 100°С и полученный раствор перемешивают при этой температуре в течение 48 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и упаривают. Остаток растирают с водой и твердые вещества отфильтровывают и промывают водой. Фильтрат подкисляют с помощью 2н. HCl. Полученный осадок отфильтровывают, промывают с помощью 2н. HCl и воды и сушат в вакууме с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-4-оксо-4,5-дигидро-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-карбоновой кислоты в виде бесцветного твердого вещества; ВЭЖХ/МС 2.03
(А), [М+Н] 312.
28.9 мг (0.454 ммоль) медного порошка добавляют к раствору 70.7 мг (0.227 ммоль) 6-(4-трет-бутилфенил)-4-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-карбоновой кислоты в 2 мл хинолина. Смесь перемешивают при 190°С в течение 20 ч. Хинолин отгоняют в вакууме и остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде бесцветных кристаллов; ВЭЖХ/МС: 1.88 (С),
[М+Н] 268;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 11.49 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.92 (d, J=2.2, 1Н), 7.69 (d, J=8.5, 2H), 7.49 (d, J=8.6, 2H), 7.01 (d, J=1.6, 1H), 1.32 (s, 9H). Аналогично получают следующие соединения:
Соед. №
Название и/или структура
"А16"
6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
Ч\ н
ВЭЖХ/МС 1.76 мин (С), [М+Щ 296;
"А17"
6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ВЭЖХ/МС 2.47 мин (В), [М+Н] 281
Пример 4. Синтез 6-(4-трет-бутилфенил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("А18") и альтернативный синтез "А15"
В атмосфере азота 43.4 мг (1.14 ммоль) алюмогидрида лития добавляют к раствору 194 мг (0.571 ммоль) сложного этилового эфира 6-(4-трет-бутилфенил)-4-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-карбоновой кислоты (получение см. предыдущий пример) в 20 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляют несколько капель метанола и затем медленно 2 мл 2н. водного раствора HCl. Смесь затем фильтруют через набивку целита. Фильтрат упаривают и остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогек-сан/этилацетат в качестве элюента с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("А18") в виде белого порошка; ВЭЖХ/МС: 1.72 (С), [М+Н] 298;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d,,) 5 [м.д.] 11.46 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.67 (d, J=8.5, 2Н), 7.49 (d, J=8.5, 2Н), 6.91 (s, 1Н), 5.28 (bs, 1H), 4.59 (s, 2H), 1.31 (s, 9H).
Аналогично получают следующие соединения:
Соед. №
Название и/или структура
"А19"
2-гидроксиметил-6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
ВЭЖХ/МС 2.20 мин (В), [М+Н1 311;
"А20"
2-гидроксиметил-6-(4-изопропоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
НО. > L ,N-' ^ '
ВЭЖХ/МС 2.17 мин (В), [М+Н] 300;
"А21"
2-гидроксиметил-6-[4-(5-метил-[1,2,4]оксадиазол-3-ил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
ВЭЖХ/МС 1.45 мин (С), [М+Н] 324;
"А22"
2-гидроксиметил-6-(1-изопропил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
ВЭЖХ/МС 1.62 мин (В), [М+Н] 274;
"А23"
6-циклогексил-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ВЭЖХ/МС 1.93 мин (В), [М+Н] 248;
"А41"
2-гидроксиметил-6-(6-пирролидин-1-илпиридин-3-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
2-(гидроксиметил)-6-[1-(4-метоксифенил)-4-пиперидил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А45"
599 мг (1.41 ммоль) перйодинана Десса-Мартина добавляют к раствору 140 мг (0.471 ммоль) 6-(4-трет-бутилфенил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в 5 мл дихлорметана и 1 мл ДМФА. Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат промывают насыщенным раствором тиосульфата натрия и насыщенным раствором гидрокарбоната натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток растирают с трет-бутилметиловым эфиром, твердое вещество отфильтровывают и сушат в вакууме с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-4-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-карбальде-гида в виде светло-желтых кристаллов; ВЭЖХ/МС: 1.93 (С), [М+Н] 296.
140 мг (0.473 ммоль) 6-(4-трет-бутилфенил)-4-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-карбаль-дегида растворяют в 1 мл диметилового эфира диэтиленгликоля. Добавляют 12 мг (0.028 ммоль) 3-дифенилфосфанилпропил(дифенил)фосфана и 3.7 мг (0.014 ммоль) хлорида родия(Ш). Реакционную смесь перемешивают в течение 42 ч при 160°С. Смесь охлаждают до комнатной температуры и распределяют между дихлорметаном и водой. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюен-та с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("А15") в виде бесцветных кристаллов; ВЭЖХ/МС: 1.88 (С), [М+Н] 268.
Аналогично получают следующие соединения:
6-(6-пирролидин-1-илпиридин-3-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("А42")
6-( 1 -трет-бутил- 1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[ 1,5-а]пиразин-4-он ("А44")
6-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("А89")
6-(4-бромфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("А40")
5.53 г (40.0 ммоль) карбоната калия добавляют к раствору 1.70 мл (20.0 ммоль) пиррол-2-карбонитрила и 8.34 г (30.0 ммоль) 2,4'-дибромацетофенона в 40 мл ДМФА. Полученную суспензию перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном и отфильтровывают с отсасыванием. Остаток промывают дихлорметаном. Фильтрат упаривают и остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 1-[2-(4-бромфенил)-2-оксоэтил]-1Н-пиррол-2-карбонитрила в виде светло-оранжевого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 2.80 (В), [М+Н] 289/291.
3.36 г (11.6 ммоль) 1-[2-(4-бромфенил)-2-оксоэтил]-1Н-пиррол-2-карбонитрила и 3.95 г (11.6 ммоль) гидросульфата тетрабутиламмония растворяют в 23 мл дихлорметана. При перемешивании медленно добавляют 12.3 мл (121 ммоль) водного раствора пероксида водорода (30 мас.%) и затем 4.63 мл (50.0 ммоль) водного раствора гидроксида натрия (32 мас.%). Реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 90 мин и затем распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат с получением двух продуктов:
3-(4-бромфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она; белый порошок; ВЭЖХ/МС 2.42 (В), [М+Н] 289/291; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-с16) 5 [м.д.] 10.80 (s, 1Н), 7.78 (s, 1Н), 7.64 (m, 4Н), 7.46 (m, 1Н), 6.92 (d, J=3.3, 1H), 6.58 (dd, J=3.8, 2.6, 1H);
3-(4-бромфенил)-3-гидрокси-3,4-дигидро-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она; белый порошок; ВЭЖХ/МС 2.17 (В), [М+Н] 307/309; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 8.30 (s, 1Н), 7.58 (m, 4Н), 6.95 (s, 1H), 6.70 (d, J=2.3, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.16 (m, 1H), 4.15 (m, 2H).
825 мг (2.69 ммоль) 3-(4-бромфенил)-3-гидрокси-3,4-дигидро-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она суспендируют в 6.6 мл дихлорметана. Затем добавляют 207 мкл (2.69 ммоль) трифторуксусной кислоты. После 10 мин перемешивания при комнатной температуре реакционную смесь упаривают. Остаток растирают с насыщенным раствором карбоната натрия. Твердые вещества отфильтровывают, промывают водой и сушат в вакууме с получением 3-(4-бромфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде белого порошка; ВЭЖХ/МС 2.42 (В), [М+Н] 289/291.
3-(4-Бромфенил)-7-метил-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он получают аналогично
В атмосфере азота суспензию 141 мг (0.486 ммоль) 3-(4-бромфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она, 111 мг (0.534 ммоль) 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола и 49 мг (0.58 ммоль) гидрокарбоната натрия в 1 мл ДМФА и 0.5 мл воды нагревают до 40°С. Затем добавляют
6.8 мг (0.010 ммоль) хлорида бис(трифенилфосфин)палладия(11). Реакционную смесь нагревают до 80°С и перемешивают при этой температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют избыток воды. Полученный осадок отфильтровывают и промывают водой. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью метанол/дихлорметан в качестве элюента с получением 3-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде светло-желтых кристаллов; ВЭЖХ/МС 2.09 мин (В), [М+Н] 291;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ16) 5 [м.д.] 10.73 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.76 (s, 1Н), 7.66 (m, 4Н), 7.46 (dd, J=2.3, 1.6, 1Н), 6.91 (d, J=3.2, 1H), 6.58 (dd, J=3.9, 2.6, 1H), 3.87 (s, 3H).
Аналогично получают следующие соединения:
Соед. №
Название и/или структура
"А26"
3-{4-[1-(2-метоксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
ВЭЖХ/МС 2.14 мин (В), [М+Н1 335
"А27"
3-{4-[1-(2-пирролидин-1-илэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1 -он
ВЭЖХ/МС 1.66 мин (В), [М+Н] 374
"А90"
7-фтор-3-[4-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
ВЭЖХ/МС 2.21 мин (В), [М+Н] 309
"А91"
7-метил-3-[4-(1 -метил- 1Н-пиразол-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
ВЭЖХ/МС 2.25 мин (В), [М+Н] 305
Пример 7. Синтез сложного метилового эфира 4-(1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-3-ил) бензойной кислоты ("А28") и 3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А29")
Раствор 285 мг (0.986 ммоль) 3-(4-бромфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она и 157 мг (1.55 ммоль) триэтиламина в 6 мл метанола и 6 мл толуола в автоклаве продувают азотом. Добавляют 24 мг (0.029 ммоль) (1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)дихлорпалладия(П) и 22 мг (0.040 ммоль) 1,1-бис-(дифенилфосфино)ферроцена. Затем автоклав заполняют монооксидом углерода и нагревают до 100°С. Автоклав выдерживают при этой температуре в течение 16 ч под давлением моноксида углерода 2-4 бар. Давление в автоклаве доводят до атмосферного. Твердые вещества отфильтровывают; остаток промывают метанолом и трет-бутилметиловым эфиром и сушат в вакууме с получением сложного метилового эфира 4-(1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-3-ил)бензойной кислоты в виде бледного желтовато-белого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 1.83 мин (А), [М+Н] 269;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ16) 5 [м.д.] 11.02 (s, 1H), 8.17 (d, J=8.4, 2H), 8.07 (s, 1H), 7.99 (d, J=8.4, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.10 (d, J=3.6, 1H), 6.76 (m, 1H), 4.03 (s, 3H).
К суспензии 99.0 мг (0.369 ммоль) сложного метилового эфира 4-(1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2
а]пиразин-3-ил)бензойной кислоты в 1.5 мл ТГФ добавляют 100 мг (0.406 ммоль) хлорида церия(Ш) и смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре окружающей среды в атмосфере аргона. Затем добавляют 517 мкл (1.55 ммоль) 3М раствора хлорида метилмагния в ТГФ и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь обрабатывают водой и распределяют между 10% водным раствором лимонной кислоты и этилацетатом. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ. Фракции, содержащие продукт, упаривают и распределяют между насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и этилацетатом. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают с получением 3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде белого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 1.67 мин (А), [М+Н] 269;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.69 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.60 (d, J=8.4, 2H), 7.53 (d, J=8.4, 2Н), 7.45 (s, 1Н), 6.90 (d, J=3.5, 1H), 6.57 (m, 1H), 5.05 (s, 1H), 1.45 (s, 6H).
Аналогично получают следующие соединения:
6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("А46")
ВЭЖХ/МС 1.69 мин (С), [М+Н] 284;
6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("А47")
ВЭЖХ/МС 1.81 мин (С), [М+Н] 283;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.62 (s, 1H), 7.63-7.56 (m, 3H), 7.54-7.50 (m, 2Н), 7.25-7.21 (m, 1Н), 6.73-6.69 (m, 1Н), 5.22-4.80 (m, 1Н), 2.18 (s, 3Н), 1.44 (s, 6H).
Пример 8. Синтез 6-(4-трет-бутилфенил)-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("A30")
Раствор 463 мг (3.00 ммоль) сложного этилового эфира 5-метил-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты и 765 мг (3.00 ммоль) 2-бром-1-(4-трет-бутилфенил)этанона в 4 мл ацетона обрабатывают 498 мг (3.60 ммоль) карбоната калия. Полученную суспензию перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривают досуха и остаток распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают с получением смеси двух изомеров в виде коричневой смолы, которую используют как таковую на следующей стадии: сложный этиловый эфир 2-[2-(4-трет-бутилфенил)-2-оксоэтил]-5-метил-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты; ВЭЖХ/МС 3.25 мин (В), [М+Н] 329; сложный этиловый эфир 1-[2-(4-трет-бутилфенил)-2-оксоэтил]-5-метил-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты; ВЭЖХ/МС 3.05 мин (В), [М+Н] 329.
Сырой продукт, полученный на предыдущей стадии, растворяют в 5 мл ледяной уксусной кислоты,
добавляют 1.99 г (25.8 ммоль) ацетата аммония и полученную суспензию перемешивают в течение 6 ч при 110°С. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры, и ее распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют с помощью препаративной ВЭЖХ с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде бесцветных кристаллов; ВЭЖХ/МС 2.76 мин (В), [М+Н] 282;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 11.40 (s, 1H), 7.91 (d, J=0.5, 1H), 7.66 (d, J=8.6, 2H), 7.48 (d, J=8.6, 2H), 6.80 (s, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.31 (s, 9H).
Следующее соединение получают аналогично 6-(4-трет-бутилфенил)-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("A55")
ВЭЖХ/МС 3.18 мин (В), [М+Н] 336.
Пример 9. Синтез 3-(4-{1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)этил]-1Н-пиразол-4-ил}фенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А31") и 3-{4-[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]фенил}-2Н-пирроло [ 1,2-а]пиразин-1 -она (" А32")
В атмосфере азота суспензию 145 мг (0.50 ммоль) 3-(4-бромфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она, 177 мг (0.55 ммоль) 1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)этил]-4-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диокса-боролан-2-ил)-1Н-пиразола и 50 мг (0.60 ммоль) гидрокарбоната натрия в 1 мл ДМФА и 0.5 мл воды нагревают до 40°С. Затем добавляют 7.0 мг (0.010 ммоль) хлорида бис(трифенилфосфин)палладия(11). Реакционную смесь нагревают до 80°С и перемешивают при этой температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют избыток воды. Полученный осадок отфильтровывают и промывают водой. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью ме-танол/дихлорметан в качестве элюента с получением 3-(4-{1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)этил]-1Н-пиразол-4-ил}фенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде белого порошка; ВЭЖХ/МС 2.39 мин (В),
[М+Н] 405;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 10.73 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.66 (s, 4H), 7.46 (s, 1H), 6.91 (d, J=3.9, 1H), 6.57 (m, 1H), 4.55 (t, J=3.3, 1H), 4.31 (m, 2H), 3.97 (dt, J=11.0, 5.5, 1H), 3.77 (dt, J=10.7, 5.3, 1H), 3.57 (ddd, J=11.4, 8.6, 3.0, 1H), 3.38 (m, 1H), 1.53 (m, 6H).
440 мкл 4н. раствора хлористо-водородной кислоты в диоксане добавляют к раствору 150 мг (0.371 ммоль) 3-(4-{1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)этил]-1Н-пиразол-4-ил}фенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в 6 мл дихлорметана. Полученной суспензии дают стоять в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем до достижения значения рН 9 добавляют воду и насыщенный раствор карбоната натрия. Ди-хлорметан удаляют в вакууме; твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и сушат в вакууме с получением 3-{4-[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде белых кристаллов; ВЭЖХ/МС 1.93 мин (В), [М+Н] 321;
1H ЯМР (300 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 10.73 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.77 (s, 1Н), 7.67 (s, 4Н), 7.46 (dd, J=2.5, 1.5, 1Н), 6.91 (dd, J=3.9, 0.8, 1H), 6.58 (dd, J=3.9, 2.5, 1H), 4.92 (t, J=5.2, 1H), 4.17 (t, J=5.6, 2H), 3.78 (q, J=5.4, 2H).
Пример 10. Синтез 2-хлорметил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она
82 мг (0.252 ммоль) 2-гидроксиметил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она обрабатывают тионилхлоридом в дихлорметане, как и в случае WO 2010/043676 (пример G02), с получением 2-хлорметил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде бледно-розовых кристаллов; ВЭЖХ/МС 1.91 мин (С), [М+Н] 344;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 11.68 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.87 (d, J=8.8, 2Н), 7.49 (d, J=8.2, 2Н), 7.10 (s, 1Н), 4.88 (s, 2H).
Раствор 18.9 мг (0.055 ммоль) 2-хлорметил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в 0.5 мл ТГФ продувают азотом. Добавляют 3.5 мг (0.092 ммоль) алюмогидрида лития и реакционную смесь перемешивают в течение 5 ч при комнатной температуре. Затем последовательно добавляют 1 мл ТГФ, 3.5 мкл воды, 3.5 мкл 15%-го водного раствора NaOH и 10.5 мкл воды. Полученную суспензию перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают и промывают с помощью ТГФ и этанола. Фильтрат упаривают и очищают с помощью препаративной ВЭЖХ с получением 2-метил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде бесцветных кристаллов; ВЭЖХ/МС 2.53 мин (В), [М+Н] 310;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 11.50 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.86 (d, J=8.8, 2Н), 7.47 (d, J=8.3, 2Н), 6.81 (s, 1Н), 2.36 (s, 3H).
Аналогично получают следующие соединения:
2-метил-6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("А37")
ВЭЖХ/МС 2.57 мин (В), [М+Н] 295;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ16) 5 [м.д.] 11.24 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.54 (d, J=8.8, 2Н), 6.74 (s, 1Н), 6.59 (d, J=8.9, 2H), 3.27 (t, J=6.6, 4H), 2.34 (s, 3H), 1.97 (t, J=6.6, 4H);
' N
6-циклогексил-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("A50")
2-метил-6-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("А52")
2-метил-6-(6-пирролидин-1-ил-3-пиридил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он ("A48")
Суспензию 93.7 мг (0.655 ммоль) сложного метилового эфира 4-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты (синтез описан в J. Leroy и др., Tetrahedron 58, с. 6713, 2002) и 640 мг (1.96 ммоль) карбоната цезия в 1.3 мл ДМФА нагревают до 50°С при перемешивании. Добавляют 167 мг (0.655 ммоль) 2-бром-1-(4-трет-бутилфенил)этанона и реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при 50°С. Реакционную смесь фильтруют с отсасыванием и фильтрат упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с сили-кагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением сложного метилового эфира 1-[2-(4-трет-бутилфенил)-2-оксоэтил]-4-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в виде коричневого аморфного твердого вещества; ВЭЖХ/МС 3.26 мин (В), [М+Н] 318.
Раствор 52.4 мг (0.165 ммоль) сложного метилового эфира 1-[2-(4-трет-бутилфенил)-2-оксоэтил]-4-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты и 382 мг (4.95 ммоль) ацетата аммония в 0.5 мл уксусной кислоты перемешивают в течение 18 ч при 110°С. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры и добавляют избыток воды. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат. Его хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 3-(4-трет-бутилфенил)-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде светло-коричневых кристаллов; ВЭЖХ/МС 2.88 мин (В), [М+Н] 285;
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 10.97 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.58 (d, J=8.5, 2H), 7.48 (m, 3Н), 6.75 (d, J=1.6, 1Н), 1.31 (s, 9H).
Аналогично получают следующее соединение:
7-фтор-3-фенил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он ("А93")
ВЭЖХ/МС 2.27 мин (В), [М+Н] 229.
Пример 12. Синтез 2-бромметил-6-(4-бромфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("А36") и 6-(4-бромфенил)-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("А39")
К суспензии 142 мг (0.445 ммоль) 6-(4-бромфенил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в 8 мл дихлорметана добавляют 52 мкл (0.56 ммоль) трибромида фосфора. Реакционную смесь перемешивают в течение 20 ч при комнатной температуре. Смесь распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Очистка с помощью препаративной ВЭЖХ (RP18 силикагель, элюент вода/ацетонитрил/муравьиная кислота) дает 2-бромметил-6-(4-бромфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он в виде не совсем белого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 2.21 мин (А), [М+Н] 384.
К раствору 64.4 мг (0.168 ммоль) бромметил-6-(4-бромфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в 2.5 мл уксусной кислоты добавляют 55 мг (0.84 ммоль) активированного цинкового порошка. Реакционную смесь перемешивают при 100°С в течение 18 ч. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры и ее распределяют между водой и этилацетатом. Органическую фазу промывают насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, сушат над сульфатом натрия и упаривают с получением 6-(4-бромфенил)-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде белого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 2.00 мин (А), [М+Н] 304/306;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 11.52 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.67 (m, 4H), 6.81 (s, 1H), 2.36 (s,
3Н).
Пример 13. Синтез 3-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-7-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А57")
К суспензии 5.00 г (29.7 ммоль) 1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты и 5.80 г (59.5 ммоль) гидрохлорида К,О-диметилгидроксиламина в 60 мл дихлорметана добавляют 12.5 г (65.4 ммоль) гидрохлорида К-(3-диметиламинопропил)-К'-этилкарбодиимида, 4.42 г (32.7 ммоль) 1-гидроксибензотриазола и 16.5 мл (119 ммоль) триэтиламина. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при комнатной температуре. Ее гасят насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюен-та с получением метоксиметиламида 1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты в виде бесцветных кристаллов; ВЭЖХ/МС 1.91 мин (В), [М+Н] 212.
В атмосфере азота раствор 5.87 г (27.7 ммоль) метоксиметиламида 1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты в 55 мл ТГФ охлаждают до 0°С и по каплям добавляют 18.5 мл (55.5 ммоль) 3М раствора бромида метилмагния в диэтиловом эфире при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяют между солевым раствором и этилацетатом. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографиру-ют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 1-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)этанона в виде белого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 1.87 мин (В), [М+Н] 167;
1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 8.44 (d, J = 0.7 Гц, 1H), 7.92 (d, J = 0.7 Гц, 1Н), 2.37 (s, 3H), 1.54 (s, 9H).
К раствору 1.66 г (10.0 ммоль) 1-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)этанона в 18 мл дихлорметана добавляют 5.86 мкл (0.10 ммоль) 32%-го раствора бромисто-водородной кислоты в уксусной кислоте. Затем по каплям добавляют раствор 3.20 г (20 ммоль) брома в 5 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 дней при комнатной температуре. Затем для уменьшения избытка брома добавляют водный гидросульфит натрия. Реакционную смесь уменьшают в объеме в вакууме и затем распре
деляют между водой и этилацетатом. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 2-бром-1-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)этанона в виде желтого масла, которое кристаллизуется при стоянии; ВЭЖХ/МС 2.28 мин (В), [М+Н] 245/247.
К суспензии 229 мг (1.50 ммоль) сложного этилового эфира 4-метил-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в 3.7 мл ДМФА порциями в атмосфере азота добавляют 185 мг (1.65 ммоль) трет-бутилата калия. Смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре и охлаждают до 0°С. Затем добавляют 367 мг (1.50 ммоль) 2-бром-1-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)этанона. Смесь перемешивают в течение 1 ч при 0°С и в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяют между дихлорметаном и водой. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хрома-тографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат с получением сложного этилового эфира 1-[2-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-2-оксоэтил]-4-метил-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в виде желтого масла; ВЭЖХ/МС 2.82 мин (В), [М+Н] 318.
Раствор 375 мг (1.18 ммоль) сложного этилового эфира 1-[2-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-2-оксоэтил]-4-метил-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты и 4.89 г (63.5 ммоль) ацетата аммония в 4.15 мл уксусной кислоты перемешивают в течение 28 ч при 110°С. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры и добавляют избыток воды. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат. Его хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 3-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-7-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде светло-желтого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 2.27 мин (В), [М+Н]
271;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.47 (s, 1H), 8.38 (d, J = 0.8 Гц, 1H), 7.88 (d, J = 0.8 Гц, 1H), 7.60 (d, J = 0.8 Гц, 1H), 7.15 (dd, J = 1.7, 0.9 Гц, 1H), 6.67 (dt, J = 1.6, 0.8 Гц, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.53 (s, 9H).
Пример 14. Синтез 3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А58") и 7-фтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А59")
К раствору 15.7 г (100 ммоль) сложного этилового эфира 4-фтор-Ш-пиррол-2-карбоновой кислоты и 27.8 г (100 ммоль) 2,4'-дибромацетофенона в 150 мл ацетона добавляют 16.6 г (120 ммоль) карбоната цезия. Полученную суспензию перемешивают при 35°С в течение 3 дней. Реакционную смесь при перемешивании добавляют к 600 мл воды. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат в вакууме с получением сложного этилового эфира 1-[2-(4-бромфенил)-2-оксоэтил]-4-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в виде светло-желтого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 3.14 (В), [М+Н] 354/356;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 7.97 (d, J = 8.6 Гц, 2Н), 7.82 (d, J = 8.6 Гц, 2Н), 7.13 (dd, J = 3.3, 2.2 Гц, 1Н), 6.72 (d, J = 2.2 Гц, 1H), 5.82 (s, 2H), 4.08 (q, J = 7.1 Гц, 2Н), 1.14 (t, J = 7.1 Гц, 3Н).
Суспензию 27.4 г (77.3 ммоль) сложного этилового эфира 1-[2-(4-бромфенил)-2-оксоэтил]-4-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты и 140 г (1.82 моль) ацетата аммония в 150 мл уксусной кислоты нагревают до 110°С и полученный раствор перемешивают в течение 18 ч при 110°С. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры и при перемешивании добавляют к 1.5 л воды. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат в вакууме. Его переносят в изопропил-ацетат, нагревают с обратным холодильником и фильтруют в горячем состоянии. Остаток промывают изопропилацетатом и сушат в вакууме с получением 3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде серых кристаллов; ВЭЖХ/МС 1.83 мин (А), [М+Н] 307/309;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 11.07 (s, 1H), 7.72-7.64 (m, 3Н), 7.63-7.57 (m, 2Н), 7.47 (dd, J = 3.4, 1.9 Гц, 1H), 6.77 (dd, J = 1.9, 0.6 Гц, 1H).
Суспензию 20.4 г (66.5 ммоль) 3-(4-бромфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она и 15.1 мл (110 ммоль) триэтиламина в 240 мл метанола и 240 мл толуола в автоклаве продувают азотом. В атмосфере азота добавляют 1.69 г (2.07 ммоль) (1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)дихлорпалладия(11) и 1.53 г 2.76 ммоль) 1,1-бис-(дифенилфосфино)ферроцена. Затем автоклав заполняют монооксидом углерода под
давлением 4.5 бар и нагревают до 100°С. Автоклав выдерживают при этой температуре в течение 16 ч под давлением моноксида углерода 6.2-4.2 бар. Давление в автоклаве доводят до атмосферного. Твердые вещества отфильтровывают; остаток промывают метанолом и 2-пропанолом и сушат в вакууме с получением сложного метилового эфира 4-(7-фтор-1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-3-ил)бензойной кислоты в виде светло-розового порошка; ВЭЖХ/МС 2.32 мин (В), [М+Н] 287;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 11.14 (s, 1H), 8.02 (d, m, 2H), 7.85 -7.78 (m, 3Н), 7.50 (dd, J = 3.5, 1.9 Гц, 1H), 6.80 (d, J = 1.8 Гц, 1H), 3.88 (s, 3Н).
К суспензии 5.73 г (20.0 ммоль) сложного метилового эфира 4-(7-фтор-1-оксо-1,2-дигидро-пирроло[1,2-а]пиразин-3-ил)бензойной кислоты в 85 мл ТГФ добавляют 5.42 г (22.0 ммоль) хлорида це-рия(Ш) и смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре окружающей среды в атмосфере азота. Затем по каплям добавляют 30.5 мл (84.0 ммоль) 20%-го раствора хлорида метилмагния в ТГФ и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяют между ТГФ и солевым раствором и органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью метанол/дихлорметан в качестве элю-ента с получением 7-фтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде порошка кремового цвета; ВЭЖХ/МС 2.15 мин (В), [М+Н] 287;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.97 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Гц, 2Н), 7.54 (d, J = 8.5 Гц, 2Н), 7.47 (dd, J = 3.4, 1.9 Гц, 1H), 6.75 (d, J = 1.7 Гц, 1H), 5.06 (s, 1H), 1.45 (s, 6H).
Следующие соединения получали аналогично:
7-хлор-3-[4-(1 -гидрокси- 1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин- 1-он ("А60")
ВЭЖХ/МС 1.81 (С), [М+Н] 303;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 11.00 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.63 - 7.58 (m, 3Н), 7.56 (d, J = 8.6 Гц, 2Н), 6.94 (dd, J = 1.8, 0.7 Гц, 1Н), 5.09 (s, 1H), 1.46 (s, 6Н);
3-[4-( 1 -этил-1 -гидроксипропил)фенил]-7-фтор-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1 -он (" А61")
ВЭЖХ/МС 2.47 (В), [М+Н] 315;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.95 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.2 Гц, 2Н), 7.49 - 7.41 (m, 3Н), 6.75 (d, J = 1.9 Гц, 1Н), 4.60 (s, 1H), 1.73 (m, 4Н), 0.66 (t, J = 7.3 Гц, 6Н);
3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-7-карбонитрил ("A62")
ВЭЖХ/МС 1.70 (А), [М+Н] 294;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 11.15 (s, 1Н), 8.14 (d, J = 1.7 Гц, 1Н), 7.72 (s, 1Н), 7.64 - 7.53 (m, 4Н), 7.43 - 7.36 (m, 1Н), 5.10 (s, 1H), 1.45 (s, 6H).
Пример 15. Синтез 7-фтор-3-[4-(1-фтор-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("A63")
фторида диэтиламиносеры. Температуре реакционной смеси дают возможность достичь комнатной температуры в течение 30 мин. Реакционную смесь упаривают и остаток обрабатывают водой и насыщенным раствором гидрокарбоната натрия. Твердые вещества отфильтровывают и хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 7-фтор-3-[4-(1-фтор-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде белого порошка; ВЭЖХ/МС 2.60 мин
(В), [М+Н] 289;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 11.01 (s, 1H), 7.70-7.63 (m, 3H), 7.53 -7.44 (m, 3Н), 6.76 (d, J = 1.9 Гц, 1Н), 1.67 (d, J = 22.2 Гц, 6Н).
Пример 16. Синтез 6-(4-трет-бутилфенил)-2-фторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("А64")
Суспензию 149 мг (0.50 ммоль) 6-(4-трет-бутилфенил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в 1.25 мл дихлорметана охлаждают до -78°С. Затем добавляют 264 мкл (2.00 ммоль) трифторида диэтиламиносеры. Температуре реакционной смеси дают возможность достичь комнатной температуры в течение 30 мин. Реакционную смесь упаривают и остаток обрабатывают водой и насыщенным раствором гидрокарбоната натрия. Твердые вещества отфильтровывают и хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-2-фторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде белого порошка; ВЭЖХ/МС 2.80 мин
(В), [М+Н] 300;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 11.57 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.73 -7.64 (m, 2H), 7.55 - 7.46 (m, 2Н), 7.15 (d, J = 2.0 Гц, 1Н), 5.52 (d, J = 48.1 Гц, 2Н), 1.32 (s, 9H).
Пример 17. Синтез 2-гидроксиметил-6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("A65")
Суспензию 148 мг (0.50 ммоль 6-(4-трет-бутилфенил)-4-оксо-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-карбальдегида в 1.25 мл дихлорметана охлаждают до -78°С. Затем добавляют 264 мкл (2.00 ммоль) триф-торида диэтиламиносеры. Температуре реакционной смеси дают возможность достичь комнатной температуры в течение 30 мин. Реакционную смесь упаривают и остаток обрабатывают водой и насыщенным раствором гидрокарбоната натрия. Твердые вещества отфильтровывают и растирают с трет-бутилметиловым эфиром с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-2-дифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде бежевого порошка; ВЭЖХ/МС 2.95 мин (В), [М+Н] 318;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.79 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 2H), 7.56 - 7.47 (m, 2H), 7.23 (s, 1Н), 7.21 (t, J = 54.3 Гц, 1Н), 5.75 (s, 1H), 1.32 (s, 9H).
Пример 19. Синтез 6-(4-бромфенил)-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("А67"), сложного метилового эфира 4-(4-оксо-2-трифторметил-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-6-ил)бензой-ной кислоты ("А68") и 6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она ("А69")
К раствору 1.93 г (9,27 ммоль) сложного этилового эфира 5-трифторметил-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты и 2.58 г (9.27 ммоль) 2-бром-1-(4-бромфенил)этанона в 13 мл ацетона добавляют
1.54 г (11.1 ммоль) карбоната калия. Полученную суспензию перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривают досуха и остаток распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают с получением смеси двух изомеров в виде коричневой смолы, которую используют как таковую на следующей стадии.
Изомер А: сложный этиловый эфир 2-[2-(4-бромфенил)-2-оксоэтил]-5-трифторметил-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты; ВЭЖХ/МС 3.30 мин (В), [М+Н] 405/407.
Изомер В: сложный этиловый эфир 1-[2-(4-бромфенил)-2-оксоэтил]-5-трифторметил-1Н-пиразол-3-карбоновой кислоты; ВЭЖХ/МС 3.16 мин (В), [М+Н] 405/407.
Соотношение изомеров: А:В = 89:11.
Сырой продукт, полученный на предыдущей стадии, растворяют в 32 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют 13.6 г (176 ммоль) ацетата аммония и полученную суспензию перемешивают в течение 18 ч при 110°С. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры и добавляют избыток воды. Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат в вакууме с получением 6-(4-бромфенил)-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде светло-коричневого порошка; ВЭЖХ/МС 2.37 мин (С), [М+Н] 358/360;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ16) 5 [м.д.] 11.92 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.71 (s, 4H), 7.54 (t, J = 0.8 Гц, 1Н).
Суспензию 358 мг (1.00 ммоль) 6-(4-бромфенил)-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она и 210 мкл (1.5 ммоль) триэтиламина в 7 мл метанола и 7 мл толуола в автоклаве продувают азотом. В атмосфере азота добавляют 25 мг (0.03 ммоль) (1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен)дихлорпалладия(П) и 22 мг (0.04 ммоль) 1,1-бис-(дифенилфосфино)ферроцена. Затем автоклав заполняют монооксидом углерода под давлением 2 бар и нагревают до 100°С. Автоклав выдерживают при этой температуре в течение 18 ч под давлением моноксида углерода максимально 4.2 бар. Давление в автоклаве доводят до атмосферного. Твердые вещества отфильтровывают; остаток промывают метанолом и сушат в вакууме с получением сложного метилового эфира 4-(4-оксо-2-трифторметил-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-6-ил)бензойной кислоты в виде тонкозернистого красного порошка; ВЭЖХ/МС 2.20 мин (С), [М+Н] 338;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОчУ 5 [м.д.] 11.99 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.08-8.01 (m, 2Н), 7.96 - 7.89 (m, 2Н),
7.55 (s, 1H), 3.89 (s, 3Н).
К суспензии 223 мг (0.66 ммоль) сложного метилового эфира 4-(4-оксо-2-трифторметил-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-6-ил)бензойной кислоты в 2.8 мл ТГФ добавляют 178 мг (0.72 ммоль) хлорида церия(Ш). Смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре окружающей среды в атмосфере азота. Затем по каплям добавляют 1.31 мл (3.60 ммоль) 20%-го раствора хлорида метилмагния в ТГФ и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяют между ТГФ и солевым раствором и органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-она в виде светло-желтого порошка; ВЭЖХ/МС 2.46 мин (В), [М+Н] 338;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ16) 5 [м.д.] 11.84 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.5 Гц, 2Н), 7.58 (d, J = 8.5 Гц, 2Н), 7.53 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 1.46 (s, 6H).
Пример 20. Синтез 7-фтор-3-{4-[1-(2-гидроксиэтокси)-1-метилэтил]фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А70")
К суспензии 28.6 мг (0.10 ммоль) 7-фтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в 0.45 мл этан-1,2-диола добавляют 1.7 мг (0.01 ммоль) моногидрата толуол-4-сульфоновой кислоты. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 дней при температуре окружающей среды. Реакционную смесь распределяют между водой и этилацетатом. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением 7-фтор-3-{4-[1-(2-гидроксиэтокси)-1-метилэтил] фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде белого порошка; ВЭЖХ/МС 2.17 мин (В), [М+Н] 331;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-de,) 5 [м.д.] 10.99 (s, 1H), 7.68-7.61 (m, 3H), 7.55-7.50 (m, 2Н), 7.48 (dd, J = 3.4, 1.9 Гц, 1Н), 6.77 (d, J = 1.9 Гц, 1H), 4.55 (t, J = 5.6 Гц, 1Н), 3.50 (q, J = 5.5 Гц, 2Н), 3.19 (t, J = 5.6 Гц,
2Н), 1.50 (s, 6H).
Следующее соединение получают аналогично:
7-фтор-З-{4-[ 1 -(2-метоксиэтокси)-1 -метилэтил]фенил}-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1 -он ("А71")
ВЭЖХ/МС 2.47 мин (В), [М+Н] 345.
Пример 21. Синтез 3-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А72")
F F F
К суспензии 143 мг (0.5 ммоль) 7-фтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она и 71.5 мг (1.1 ммоль) азида натрия в 1 мл дихлорметана добавляют по каплям при внешнем охлаждении льдом раствор 316 мкл (4.1 ммоль) трифторуксусной кислоты в 0.6 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч при 0°С. Добавляют лед и 25%-й водный аммиак с получением двухфазной смеси с рН 11. Затем добавляют 1: 1 смесь циклогексан/этилацетат. Органическую фазу отделяют, сушат над сульфатом натрия и упаривают с получением 3-[4-(1-азидо-1-метилэтил)фе-нил]-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде бежевого порошка; ВЭЖХ/МС 2.29 мин (А), [М+Н] 312.
К взвеси 103 мг (0.33 ммоль) 3-[4-(1-азидо-1-метилэтил)фенил]-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она и 90 мг (1.38 ммоль) цинковой пыли в 2 мл ТГФ добавляют 175 мл (3.1 ммоль) уксусной кислоты и смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре. Суспензию гасят смесью ТГФ/дихлорметан/этилацетат. Смесь фильтруют с отсасыванием и остаток промывают метанолом. Фильтрат упаривают и остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ с получением формиата 3-[4-(1-амино-1-метилэтил)фенил]-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде белого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 1.57 мин (В), [М+Н] 268;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-de,) 5 [м.д.] 8.35 (s, 1H), 7.70 - 7.58 (m, 6H), 7.48 (dd, J = 3.4, 1.9 Гц, 1H), 6.76 (d, J = 1.7 Гц, 1Н), 4.57 (широкий пик), 1.52 (s, 6H).
Пример 22. Синтез 7-фтор-3-[4-(2-метилтетрагидрофуран-2-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А73") и 7-фтор-3-[4-(4-гидрокси-1-метиленбутил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А74")
В реакционную пробирку отвешивают 3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он (154 мг, 0.50 ммоль), ацетат палладия(П) (5.6 мг, 0.03 ммоль), 1,3-бис-(дифенилфосфино)пропан (21.3 мг, 0.05 ммоль), 4-пентен-1-ол (51.7 мг, 0.60 ммоль) и тетрафторборат диизопропиламмония (142 мг, 0.75 ммоль). Добавляют 1,4-диоксан (1 мл) и реакционную пробирку продувают азотом. Полученную суспензию перемешивают в течение 1 мин и добавляют триэтиламин (208 мкл, 1.50 ммоль) и реакционную пробирку продувают азотом и закрывают. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при 110°С. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры. Добавляют н-гептан (1.5 мл) и тетрафторборную кислоту (0.21 мл, 54% раствор в диэтиловом эфире, 1.5 ммоль), полученную двухфазную смесь энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляют триэтиламин (69 мкл, 0.5 ммоль), и реакционную смесь затем распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогексан/этилацетат в качестве элюента с получением двух продуктов:
7-фтор-3-[4-(2-метилтетрагидрофуран-2-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она; белое твердое вещество; ВЭЖХ/МС 2.52 (В), [М+Н] 313; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.97 (s, 1H), 7.66 - 7.58 (m, 3H), 7.52 - 7.44 (m, 3Н), 6.76 (d, J = 1.8 Гц, 1H), 3.99 - 3.89 (m, 1H), 3.83 (td, J = 8.0, 5.5 Гц, 1H), 2.17 -1.90 (m, 3Н), 1.82 - 1.67 (m, 1Н), 1.46 (s, 3Н);
7-фтор-3-[4-(4-гидрокси-1-метиленбутил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она (содержит некоторое количество изомера - 7-фтор-3-[4-((Е)-4-гидрокси-1-метил-бут-1-енил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она); ВЭЖХ/МС 2.32 (В), [М+Н] 313; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ16) 5 [м.д.] 10.98 (s, 1H), 7.69-7.53 (m, 3Н), 7.53 - 7.43 (m, 3Н), 6.75 (m, 1Н), 6.45 - 6.39 (m, 2Н), 4.41 (t, J = 5.2 Гц, 1Н), 3.45 (td, J = 6.4, 5.0 Гц, 2Н), 2.29 - 2.19 (m, 2Н), 1.66 - 1.54 (m, 2Н).
Пример 23. Синтез 3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А75")
4-Фенилпиперидин (4.0 г; 24.81 ммоль) растворяют в дихлорметане (50 мл), добавляют триэтиламин (3.44 мл; 24.8 ммоль) и раствор охлаждают до -78°С. При этой температуре в течение 2 мин по каплям добавляют ангидрид трифторуксусной кислоты (3.45 мл; 24.81 ммоль). Реакционную смесь оставляют перемешиваться при -78°С в течение 10 мин и затем дают ей возможность нагреться до комнатной температуры в течение 30 мин. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном и экстрагируют водой (2 раза). Органический слой один раз промывают насыщенным раствором NaHCO3, водой (три раза), сушат над Na2SO4, фильтруют с отсасыванием и упаривают досуха. Сырой продукт, 2,2,2-трифтор-1-(4-фенилпиперидин-1-ил)этанон, желтое прозрачное масло, используют без дополнительной очистки.
Для реакции 3-горлую круглодонную колбу промывают ацетоном, нагревают и охлаждают в экси
каторе. В эту колбу отвешивают хлорид алюминия (6.38 г; 47.83 ммоль), добавляют сухой дихлорметан (30 мл) и в атмосфере аргона при 0-5°С по каплям добавляют бромацетилбромид (2.60 мл; 29.9 ммоль), растворенный в сухом дихлорметане (20 мл). 2,2,2-Трифтор-1-(4-фенилпиперидин-1-ил)этанон (6.24 г; 23.92 ммоль) растворяют в 10 мл дихлорметана (сухого) и по каплям добавляют к реакционной смеси, поддерживая температуру в диапазоне 0-5°С. Смесь перемешивают при 0-5°С в течение 1.5 ч, нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь выливают на лед (200 г) и экстрагируют дихлорметаном (3 раза). Объединенные органические слои промывают насыщенным раствором NaHCO3, водой и солевым раствором, сушат над Na2SO4, фильтруют с отсасыванием и упаривают досуха. Сырое масло очищают с помощью флэш-хроматографии с получением 1-{4-[4-(2-бромацетил)фенил]пиперидин-1-ил}-2,2,2-трифторэтанона в виде бесцветного масла.
1Н-Пиррол-2-карбонитрил (0.84 мл; 9.42 ммоль) и 1-{4-[4-(2-бромацетил)фенил]пиперидин-1-ил}-2,2,2-трифторэтанон (2.74 г; 7.25 ммоль) растворяют в ацетоне (25 мл). К этому прозрачному коричневому раствору добавляют карбонат калия (2 г; 14.49 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь фильтруют с отсасыванием и промывают ацетоном. Фильтрат упаривают досуха. Остаток очищают с помощью флэш-хроматографии с получением 1-(2-оксо-2-{4-[1-(2,2,2-трифторацетил)пиперидин-4-ил]фенил}этил)-1Н-пиррол-2-карбонитрила в виде бледных не совсем белых кристаллов.
1-(2-Оксо-2-{4-[1-(2,2,2-трифторацетил)пиперидин-4-ил]фенил}этил)-1Н-пиррол-2-карбонитрил (1.40 г; 3.60 ммоль) суспендируют в метаноле (10 мл). Добавляют карбонат калия (2.49 г; 17.98 ммоль), сухой диметилсульфоксид (0.77 мл; 10.79 ммоль) и пероксид водорода (1.10 мл; 10.79 ммоль) (осторожно: сильно экзотермическая реакция после добавления пероксида водорода). Желтую суспензию перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют водой, осадок отфильтровывают с отсасыванием, промывают водой и сушат в вакууме при 50°С. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии. Объединенные фракции упаривают досуха. Остаток растирают с диэтиловым эфиром, фильтруют с отсасыванием и сушат в вакууме при 50°С с получением 3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде не совсем белого твердого вещества;
ВЭЖХ/МС 1.27 мин (А), [М+Н] 294;
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.47 (s, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.0 Гц, 2Н), 7.46 - 7.42 (m, 1Н), 7.30 (d, J = 8.0 Гц, 2Н), 6.90 (d, J = 4.0 Гц, 1Н), 6.56 (t, J = 3.2 Гц, 1H), 3.07 - 2.98 (m, 2H), 2.66 -2.46 (m, 3H), 1.73 - 1.65 (m, 2H), 1.52 (qd, J = 12.2 Гц, 3.9, 2H).
Следующее соединение синтезируют аналогично:
3-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он ("A76")
бледно-желтое твердое вещество; ВЭЖХ/МС 1.25 мин (А), [М+Н] 280;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 7.70 (s, 1H), 7.62 - 7.57 (m, 2H), 7.47 -7.44 (m, 1Н), 7.38 - 7.34 (m, 2Н), 6.92 - 6.89 (m, 1Н), 6.57 (dd, J = 4.0 Гц, 2.5, 1H), 3.27 - 3.13 (m, 2Н), 3.07 - 2.99 (m, 1Н), 2.97 - 2.89 (m, 1Н), 2.69 (dd, J = 10.0 Гц, 7.6, 1Н), 2.22 - 2.11 (m, 1Н), 1.77 - 1.68 (m, 1Н).
Пример 24. Синтез 7-фтор-3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А77")
Сложный этиловый эфир 4-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты (1.07 г; 6.83 ммоль) и 1-{4-[4-(2-бромацетил)фенил]пиперидин-1-ил}-2,2,2-трифторэтанон (2.00 г; 5.26 ммоль) растворяют в ацетоне (20 мл). К этому прозрачному коричневому раствору добавляют карбонат калия (1.45 г; 10.51 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение ночи. Реакционную смесь
разбавляют ацетоном, фильтруют с отсасыванием и промывают ацетоном. Фильтрат упаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью флэш-хроматографии с получением сложного этилового эфира 4-фтор-1-(2-оксо-2-{4-[1-(2,2,2-трифторацетил)пиперидин-4-ил]фенил}этил)-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 2.67 мин (А), [М+Н] 455.
Сложный этиловый эфир 4-фтор-1-(2-оксо-2-{4-[1-(2,2,2-трифторацетил)пиперидин-4-ил]фенил} этил)-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты (1.57 г; 3.42 ммоль) растворяют в уксусной кислоте (10 мл) и добавляют ацетат аммония (5.80 г; 75.25 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 110°С в течение ночи. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры, выливают в холодную воду (250 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органические слои отбрасывают. Водный слой подщелачивают 2н. NaOH (pH 11). Образуется осадок. Твердое вещество отфильтровывают с отсасыванием, промывают водой и небольшим количеством этилацетата. Затем твердое вещество растворяют в 150 мл этилацетата, сушат над Na2SO4, фильтруют с отсасыванием и упаривают досуха. Остаток растирают с диэтиловым эфиром, отфильтровывают и сушат в вакууме при 50°С (в течение ночи). Водный фильтрат 3 раза экстрагируют смесью этилацетат/МеОН (5%). Объединенные органические слои промывают солевым раствором, сушат над Na2SO4, фильтруют и упаривают досуха. Остаток растирают с диэтиловым эфиром, фильтруют с отсасыванием и сушат в вакууме с получением 7-фтор-3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде бежевого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 1.37 мин (А), [М+Н] 312;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-df,) 5 [м.д.] 7.63-7.53 (m, 3Н), 7.48-7.45 (m, 1Н), 7.35-7.26 (m, 2Н), 6.776.72 (m, 1Н), 3.06-2.98 (m, 2Н), 2.62-2.59 (m, 1Н), 2.59-2.53 (m, 2Н), 1.73-1.64 (m, 2Н), 1.51 (qd, J = 12.3, 3.9 Гц, 2Н).
Следующее соединение синтезируют аналогично:
бежевое твердое вещество; ВЭЖХ/МС 1.43 мин (А), [М+Н] 328;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 7.63 (s, 1H), 7.61 - 7.54 (m, 3H), 7.35 -7.28 (m, 2Н), 6.92 (d, J = 1.6 Гц, 1Н), 3.03 (dt, J = 12.0, 3.0 Гц, 2Н), 2.66 - 2.54 (m, 3Н), 1.74 - 1.65 (m, 2Н), 1.52 (qd, J = 12.3 Гц, 3.9,
2Н).
7-хлор-3-(4-гхиперидин-4-илфенил)-2Н-гшрроло[1,2-а]гшразин-1-он ("А78")
3-(4-Пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он (50.0 мг; 0.17 ммоль) растворяют в ацетонитриле (1.5 мл), добавляют 35%-ный водный раствор формальдегида (67.0 мкл; 0.84 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин. Небольшими порциями добавляют цианоборгидрид натрия (21.2 мг; 0.34 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют водой, обрабатывают насыщенным раствором NaHCO3 и экстрагируют этилацетатом (три раза). Объединенные органические слои промывают солевым раствором, сушат над Na2SO4, фильтруют и упаривают досуха. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ВЭЖХ. Объединенные фракции концентрируют в вакууме, водный остаток подщелачивают насыщенным раствором NaHCO3, обрабатывают NaCl (твердым) и экстрагируют этилацетатом (четыре раза). Объединенные органические слои промывают солевым раствором, сушат над Na2SO4, фильтруют с отсасыванием и упаривают досуха с получением 3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде бежевого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 1.28 мин (А), [М+Н] 308;
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d,,) 5 [м.д.] 10.69 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.61 - 7.57 (m, 2Н), 7.45 - 7.43 (m, 1Н), 7.34 - 7.30 (m, 2Н), 6.91 - 6.88 (m, 1Н), 6.56 (dd, J = 3.9 Гц, 2.5, 1Н), 2.90 - 2.84 (m, 2Н), 2.53 - 2.45 (m, 1Н), 2.20 (s, 3Н), 1.97 (td, J = 11.6 Гц, 2.7, 2Н), 1.79 - 1.62 (m, 4Н).
Следующие соединения получали аналогично:
3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он ("А80")
не совсем белое твердое вещество; ВЭЖХ/МС 1.21 мин (А), [М+Н] 294;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.77 (s, 1H), 7.79-7.73 (m, 1H), 7.69-7.61 (m, 2Н), 7.51 (dd, J = 2.6, 1.5 Гц, 1Н), 7.47 - 7.37 (m, 2Н), 6.96 (ddd, J = 3.9, 1.6, 0.7 Гц, 1H), 6.62 (dd, J = 4.0, 2.5 Гц, 1Н), 3.42 (dq, J = 9.7, 7.0 Гц, 1Н), 2.90 (dd, J = 9.0, 7.8 Гц, 1H), 2.77 - 2.62 (m, 2Н), 2.50 (dd, J = 9.0, 6.7 Гц, 1H), 2.40 -2.26 (m, 4Н), 1.82 (ddt, J = 12.9, 8.4, 6.6 Гц, 1H).
7-Фтор-3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он ("A81")
белое твердое вещество; ВЭЖХ/МС 1.39 мин (А), [М+Н] 326;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 10.96 (s, 1H), 7.62 - 7.53 (m, 3H), 7.46 (dd, J = 3.4, 1.9 Гц, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 2Н), 6.74 (d, J = 1.8 Гц, 1H), 2.91 - 2.82 (m, 2Н), 2.55 - 2.44 (m, 1Н), 2.19 (s, 3Н), 2.02 - 1.91 (m, 2Н), 1.79 - 1.59 (m, 4Н).
7-Хлор-3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он ("A82")
белое твердое вещество; ВЭЖХ/МС 1.46 мин (А), [М+Н] 342;
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО^) 5 [м.д.] 10.96 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.60 - 7.54 (m, 3Н), 7.37 -7.30 (m, 2Н), 6.92 (d, J = 1.7 Гц, 1Н), 2.87 (dt, J = 11.9, 3.1 Гц, 2Н), 2.55 - 2.45 (m, 1Н), 2.20 (s, 3Н), 1.97 (td, J = 11.7, 2.8 Гц, 2Н), 1.78 - 1.61 (m, 4Н).
Пример 26. Синтез 6,7-дифтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А83")
Сложный этиловый эфир 4-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты (1.57 г, 10.0 ммоль) растворяют в ацетонитриле (10 мл), добавляют бис(тетрафторборат) 1-хлорметил-4-фтор-1,4-диазонийбицикло [2.2.2]октана (Selectfluor(tm), 3.54 г, 10.0 ммоль), и смесь облучают в микроволновом блоке синтеза Biotage Initiator в течение 5 мин при 70°С. Реакционной смеси дают возможность охладиться до комнатной температуры и ее распределяют между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью циклогек-сан/этилацетат в качестве элюента с получением сложного этилового эфира 4,5-дифтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в виде белого твердого вещества; ВЭЖХ/МС 1.78 (С), [М+Н] 176;
1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 12.93 (s, 1H), 6.67 (d, J = 4.5 Гц, 1Н), 4.22 (q, J = 7.1 Гц, 2Н), 1.26 (t, J = 7.1 Гц, 3Н).
Сложный этиловый эфир 5-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты получают подобным образом; ВЭЖХ/МС 1.68 (С), [М+Н] 158; 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 12.58 (s, 1H), 6.69 (dd, J = 4.9, 4.0
Гц, 1Н), 5.69 (t, J = 4.0 Гц, 1H), 4.22 (q, J = 7.1 Гц, 2Н), 1.27 (t, J = 7.1 Гц, 3Н).
Следующие стадии осуществляют, как и в случае примера 14. Из сложного этилового эфира 4,5-дифтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты получают 6,7-дифтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он в виде бежевого порошка; ВЭЖХ/МС 1.70 (С), [М+Н] 305;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 11.04 (s, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 2Н), 7.57 - 7.51 (m, 2Н), 7.50 (s, 1Н), 6.90 (d, J = 4.7 Гц, 1H), 5.09 (s, 1H), 1.44 (s, 6H).
6-Фтор-З - [4-( 1 -гидрокси-1 -метилэтил)фенил]-2Н-пирроло [ 1,2-a] пиразин-1 -он (" А84")
получают подобным образом из сложного этилового эфира 5-фтор-1Н-пиррол-2-карбоновой кислоты в виде бежевого порошка; ВЭЖХ/МС 1.63 (С), [М+Н] 287;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ16) 5 [м.д.]10.78 (s, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 2H), 7.58 - 7.49 (m, 2Н), 7.44 (s, 1Н), 6.86 (dd, J = 5.1, 4.3 Гц, 1H), 6.25 (t, J = 4.1 Гц, 1Н), 5.08 (s, 1H), 1.45 (s, 6H).
Пример 27. Синтез 7-фтор-3-[4-(1-гидроксициклопентил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А85")
25 мл круглодонную колбу продувают азотом и в нее загружают 6.9 мл сухого ТГФ, 134 мг (5.50 ммоль) магниевой стружки и 49 мг (0.20 ммоль) хлорида церия(Ш). При перемешивании суспензию охлаждают до 0°С. Затем добавляют 378 мкл (3.20 ммоль) 1,4-дибромбутана, суспензии дают возможность достичь комнатной температуры, перемешивают в течение 30 мин при этой температуре и вновь охлаждают до 0°С. Затем по каплям добавляют раствор 286 мг (1.00 ммоль) сложного метилового эфира 4-(7-фтор-1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-3-ил)бензойной кислоты в 2.3 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при 0°С и в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасят насыщенным раствором хлорида аммония. К суспензии 5.73 г (20.0 ммоль) сложного метилового эфира 4-(7-фтор-1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-3-ил)бензойной кислоты в 85 мл ТГФ добавляют 5.42 г (22.0 ммоль) хлорида церия(Ш) и смесь перемешивают в течение 1 ч при температуре окружающей среды в атмосфере азота. Затем по каплям добавляют 30.5 мл (84.0 ммоль) 20%-го раствора хлорида метилмагния в ТГФ и реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяют между этилацетатом и водой. Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем смесью цик-логексан/этилацетат в качестве элюента с получением 7-фтор-3-[4-(1-гидроксициклопентил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она в виде светло-оранжевого порошка; ВЭЖХ/МС 2.37 (В), [М+Н] 313;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-16) 5 [м.д.] 10.99 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Гц, 2H), 7.54 (d, J = 8.5 Гц, 2H), 7.48 (dd, J = 3.4, 1.9 Гц, 1H), 6.75 (d, J = 1.8 Гц, 1H), 4.85 (s, 1H), 1.92 - 1.80 (m, 6H), 1.80 - 1.69
(m, 2H).
Пример 28. Синтез гидрохлорида 3-[4-(3-гидроксиазетидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А86")
ВЭЖХ/МС 1.13 (А), [М+Н] 282;
1H ЯМР (400 МГц, ДМСОЧ16) 5 [м.д.] 10.83 (s, 1H), 9.24 (s, 2H), 7.82 (s, 1H), 7.78-7.73 (m, 2H), 7.707.62 (m, 2H), 7.48 (dd, J = 2.5, 1.5 Гц, 1H), 6.93 (dd, J = 3.9, 1.3 Гц, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.59 (dd, J = 3.9, 2.5 Гц, 1H), 4.34 (d, J = 11.7 Гц, 2H), 4.11 (d, J = 11.7 Гц, 2H).
Пример 29. Синтез 3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-6-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она ("А87")
Реакцию проводят в соответствии с Y. Fujiwara и др., J. Am. Chem. Soc. 2012, 134, 1494-1497. Пример 30. Синтез 7-хлор-3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он ("А88")
"А95"
3-[4-(l-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-6-метил-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
ВЭЖХ/МС 1.80 (А), [М+Н] 283 1И ЯМР (400 МГц, ДМСО-ёб) 5 [м.д.] 10.64 (s, 1Н), 7.69 - 7.63 (m, 2Н), 7.57 - 7.50 (т, 2Н), 7.38 (s, 1Н), 6.85 (d, J=3.8, 1Н), 6.37 - 6.34 (т, 1Н), 5.06 (s, 1H), 2.44 (s, 3H), 1.45 (s, 6H)
"А96"
6-(дифторметил)-3- [4-( 1 -гидрокси-1 -метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
VN /=\ он
"А97"
6-(трифторметил)-3- [4-( 1 -гидрокси-1 -метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
VN /=Ч ОН
3-[4-(3-гидроксипирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он О н
VR /=\ он
"А98"
ВЭЖХ/МС 1.17 (А), [М+Н] 296 ХН ЯМР (400 МГц, ДМСО-ёб) 5 [м.д.] 10.77 (s, Ш), 9.28 (s, 2Н), 7.78 (s, 1Н), 7.71 (d, J = 8.5 Гц, 2Н), 7.65 - 7.57 (m, 2Н), 7.47 (dd, J = 2.5, 1.5 Гц, 1Н), 6.92 (ddd, J = 3.9, 1.5, 0.7 Гц, 1Н), 6.58 (dd, J = 3.9, 2.5 Гц, Ш), 5.93 (s, 1Н), 3.53 - 3.29 (т, 4Н), 2.28 (dtd, J = 24.9, 13.0, 8.4 Гц, 2Н)
3-[4-(4-гидрокси-4-пиперидил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
VN Г=\ ОН
"А99"
ВЭЖХ/МС 1.19 (А), [М+Н] 310 ХН ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 [м.д.] 10.75 (s, 1Н), 9.31 - 8.49 (т, 2Н), 7.75 (s, Ш), 7.72 - 7.65 (т, 2Н), 7.57 - 7.50 (т, 2Н), 7.48 - 7.44 (т, 1Н), 6.94 - 6.89 (т, 1Н), 6.58 (dd, J=4.0, 2.5, Ш), 5.52 (s, 1Н), 3.25 - 3.16 (т, 4Н), 2.29 - 2.21 (т, 2Н), 1.82 - 1.73 (т, 2Н)
"А100"
3-[4-(3-гидрокси-1-метилазетидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A101"
3-[4-(3-гидрокси-1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
"A102"
3-[4-(4-гидрокси-1-метил-4-пиперидил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A103"
7-фтор-З-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А104"
7-фтор-3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
°* н
"А105"
7-хлор-3-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
Я\ н
"А106"
7-хлор-3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
"А107"
7-хлор-3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
"А108"
3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
"А109"
7-фтор-З-[4-( 1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
"А110"
3-[4-(3-гидроксиоксетан-3-ил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
ВЭЖХ/МС 1.49 (А), [М+Н] 283
3-[4-(1-гидроксициклобутил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин- 1-он
"Alll"
ВЭЖХ/МС 1.76 (А), [М+Н] 281
1И ЯМР (400 МГц, ДМСО-с16) 5 [м.д.] 10.75 (s, 1Н),
7.74 - 7.72 (m, 1Н), 7.67 - 7.62 (т, 2Н), 7.58 - 7.53 (т,
2Н), 7.46 (dd, J=2.6, 1.5, 1Н), 6.92 - 6.89 (т, 1Н), 6.57
(dd, J=3.9, 2.5, 1H), 5.55 (s, 1H), 2.45 - 2.37 (m, 2H),
2.33 - 2.24 (m, 2H), 1.99 - 1.88 (m, 1H), 1.73 - 1.61 (m,
1H)
Фармакологические данные.
"А74"
"А75"
"А76"
"А77"
"А78"
"А79"
"А80"
"А81"
"А82"
"А86"
"А90"
"А91"
"А92"
"А94"
"А95"
"А98"
"А99"
"А110"
"Alll"
IC5o: <0.3 мкМ = A, 0.3-3 мкМ = В, 3-50 мкМ = С.
IC50: <0.3 мкМ = A, 0.3-3 мкМ = В, 3-50 мкМ = С. Соединения, представленные в табл. 1, являются особенно предпочтительными соединениями в соответствии с изобретением.
Следующие примеры относятся к лекарственным средствам. Пример А. Флаконы для инъекций.
рН раствора 100 г активного компонента соединения в соответствии с изобретением и 5 г Na2HPO4 в 3 л бидистиллированной воды устанавливают на 6.5, используя 2н. соляную кислоту, стерилизуют фильтрацией, переносят во флаконы для инъекций, лиофилизируют в стерильных условиях и запечатывают в стерильных условиях. Каждый флакон для инъекций содержит 5 мг активного компонента.
Пример Б. Суппозитории.
Смесь 20 г активного компонента соединения в соответствии с изобретением расплавляют с 100 г соевого лецитина и 1400 г какаового масла, разливают в пресс-формы и позволяют охладиться. Каждый суппозиторий содержит 20 мг активного компонента.
Пример В. Раствор.
Раствор приготавливают из 1 г активного компонента соединения в соответствии с изобретением, 9.38 г NaH2PO4-2 Н2О, 28.48 г Na2HPO4-12 Н2О и 0.1 г бензалконийхлорида в 940 мл бидистиллированной воды. рН раствора устанавливают на 6.8 и объем раствора доводят до 1 л и стерилизуют путем облучения. Этот раствор может использоваться в форме глазных капель.
Пример Г. Мазь.
500 мг активного компонента соединения в соответствии с изобретением смешивают с 99.5 г вазелина в асептических условиях. Пример Д. Таблетки.
Смесь 1 кг активного компонента соединения в соответствии с изобретением, 4 кг лактозы, 1.2 кг картофельного крахмала, 0.2 кг талька и 0.1 кг стеарата магния спрессовывают для получения таблеток обычным способом таким образом, чтобы каждая таблетка содержала 10 мг активного компонента.
Пример Е. Драже.
Таблетки спрессовывают аналогично примеру Д и затем покрывают обычным способом покрытием из сахарозы, картофельного крахмала, талька, трагаканта и красителя. Пример Ж. Капсулы.
2 кг активного компонента соединения в соответствии с изобретением помещают в твердые желатиновые капсулы обычным способом таким образом, чтобы каждая капсула содержала 20 мг активного компонента.
Пример З. Ампулы.
Раствор 1 кг активного компонента соединения в соответствии с изобретением в 60 л бидистилли-рованной воды стерилизуют фильтрацией, переносят в ампулы, лиофилизируют в стерильных условиях и запечатывают в стерильных условиях. Каждая ампула содержит 10 мг активного компонента.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ Соединение, выбранное из группы, включающей
Название
"АГ
3-(4-бензилоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А2"
3-фенил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A3"
3-(3-хлорфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А4"
3-(3-метоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А5"
3-(5,5,8,8-тетраметил-5,6,7,8-тетрагидронафталин-2-ил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А6"
3-(4-нитрофенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А7"
3-(4-метоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А8"
3-(3,4-диметоксифенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А9"
3-бензо[1,3]диоксол-5-ил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А10"
3-(4-фторфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"All"
3-(4-да/?еда-бутилфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A12"
3-и-толил-2Н-пирроло[1,2-а] пиразин-1-он
"A13"
3-(4-трифторметилфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A14"
3-(1 -метил- 1Н-пиразол-4-ил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин- 1-он
"A15"
6-(4-шреш-бутилфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A16"
6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A17"
6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A18"
6-(4-да/?еда-бутилфенил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A19"
2-гидроксиметил-6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A20"
2-гидроксиметил-6-(4-изопропоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A21"
2-гидроксиметил-6-[4-(5-метил-[1,2,4]оксадиазол-3-ил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A22"
2-гидроксиметил-6-(1-изопропил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A23"
6-циклогексил-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A24"
3-(4-бромфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A25"
3-[4-(1 -метил- 1Н-пиразол-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"A26"
3-{4-[1-(2-метоксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A27"
3-{4-[1-(2-пирролидин-1-илэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A28"
сложный метиловый эфир 4-(1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-3-ил)-бензойной кислоты
"A29"
3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A30"
6-(4-ш/?еш-бутилфенил)-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"A31"
3-(4-{ 1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)-этил]-1Н-пиразол-4-ил}-фенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A32"
3-{4-[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]-фенил}-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"АЗЗ"
2-хлорметил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А34"
2-метил-6-(4-трифторметоксифенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А35"
3-(4-да/?еда-бутилфенил)-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А36"
2-бромметил-6-(4-бромфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А37"
2-метил-6-(4-пирролидин-1-илфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А38"
3-(4-да/> еда-бутилфенил)-7-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А39"
6-(4-бромфенил)-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А40"
6-(4-бромфенил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А41"
2-гидроксиметил-6-(6-пирролидин-1-илпиридин-3-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А42"
6-(6-пирролидин-1-илпиридин-3-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А43"
6-[4-(5-метил-[1,2,4]оксадиазол-3-ил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А44"
6-(1-да/> еда-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А45"
2-(гидроксиметил)-6-[1-(4-метоксифенил)-4-пиперидил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А46"
6-[4-(1 -гидрокси- 1-метилэтил)фенил]-2-метил-5Н-пиразоло[ 1,5-а]пиразин-4-он
"А47"
6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А48"
2-метил-6-(6-пирролидин-1-ил-3-пиридил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А49"
2-метил-6-[4-(5-метил-[1,2,4]оксадиазол-3-ил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А50"
6-циклогексил-2-метил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А51"
2-метил-6-(1-изопропил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А52"
2-метил-6-(1-да/> еда-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А53"
2-метил-6-[1-(4-метоксифенил)-4-пиперидил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А54"
2-метил-6-(2-пирролидин-1-илпиримидин-5-ил)-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А55"
6-(4-да/> ега-бутилфенил)-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А56"
3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-7-метил-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А57"
3-(1-да/> еда-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-7-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А58"
3-(4-бромфенил)-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А59"
7-фтор-3-[4-(1 -гидрокси- 1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А60"
7-хлор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А61"
3-[4-(1-этил-1-гидроксипропил)-фенил]-7-фтор-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А62"
3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-7-карбонитрил
"А63"
7-фтор-3-[4-(1 -фтор- 1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А64"
6-(4-да/?еда-бутилфенил)-2-фторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А65"
2-гидроксиметил-6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А66"
6-(4-да/?еда-бутилфенил)-2-дифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А67"
6-(4-бромфенил)-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А68"
сложный метиловый эфир 4-(4-оксо-2-трифторметил-4,5-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-6-ил)-бензойной кислоты
"А69"
6-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2-трифторметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А70"
7-фтор-З-{4-[1-(2-гидроксиэтокси)-1-метилэтил]-фенил }-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А71"
7-фтор-З-{4-[1-(2-метоксиэтокси)-1-метилэтил]-фенил }-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А72"
3-[4-(1-амино-1-метилэтил)-фенил]-7-фтор-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А73"
7-фтор-3-[4-(2-метилтетрагидрофуран-2-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А74"
7-фтор-3-[4-(4-гидрокси-1-метиленбутил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А75"
3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А76"
3-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А77"
7-фтор-3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А78"
7-хлор-3-(4-пиперидин-4-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А79"
3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А80"
3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А81"
7-фтор-3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А82"
7-хлор-3-[4-(1-метилпиперидин-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А83"
6,7-дифтор-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А84"
6-фтор-3-[4-(1 -гидрокси- 1-метилэтил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А85"
7-фтор-3-[4-(1-гидроксициклопентил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А86"
гидрохлорид 3-[4-(3-гидроксиазетидин-3-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-она
"А87"
3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-6-метил-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А88"
7-хлор-3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А89"
6-(1-да/> еда-бутил-1Н-пиразол-4-ил)-2-гидроксиметил-5Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-4-он
"А90"
7-фтор-3-[4-(1 -метил- 1Н-пиразол-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А91"
7-метил-3-[4-(1 -метил- 1Н-пиразол-4-ил)-фенил]-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А92"
3-(4-да/> еда-бутилфенил)-1-оксо-1,2-дигидропирроло[1,2-а]пиразин-7-карбонитрил
"А93"
7-фтор-3-фенил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А94"
3-(4-бромфенил)-6-метил-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А95"
3-[4-(1 -гидрокси- 1-метилэтил)фенил]-6-метил-2Н-пирроло[ 1,2-а]пиразин-1-он
"А96"
6-(дифторметил)-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А97"
6-(трифторметил)-3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А98"
3-[4-(3-гидроксипирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А99"
3-[4-(4-гидрокси-4-пиперидил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А100"
3-[4-(3-гидрокси-1-метилазетидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A101"
3-[4-(3-гидрокси-1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A102"
3-[4-(4-гидрокси-1-метил-4-пиперидил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A103"
7-фтор-3-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A104"
7-фтор-3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A105"
7-хлор-3-(4-пирролидин-3-илфенил)-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A106"
7-хлор-3-[4-(1-метилпирролидин-3-ил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A107"
7-хлор-3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"A108"
3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А109"
7-фтор-3-[4-(1,3-дигидрокси-1-метилпропил)фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"А110"
3-[4-(3-гидроксиоксетан-3-ил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
"All!"
3-[4-(1-гидрокси-циклобутил)-фенил]-2Н-пирроло[1,2-а]пиразин-1-он
и его фармацевтически приемлемые сольваты, соли, таутомеры и стереоизомеры, включая их смеси во всех соотношениях.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
027416
027416
- 1 -
- 1 -
027416
027416
- 1 -
- 1 -
027416
027416
- 1 -
- 1 -
027416
027416
- 1 -
- 1 -
027416
027416
- 1 -
- 1 -
027416
027416
- 1 -
- 1 -
027416
027416
- 2 -
- 3 -
027416
027416
- 4 -
- 3 -
027416
027416
- 4 -
- 4 -
027416
027416
- 8 -
027416
027416
- 11 -
- 11 -
027416
027416
- 19 -
- 19 -
027416
027416
- 22 -
- 22 -
027416
027416
- 22 -
- 22 -
027416
027416
- 24 -
027416
027416
- 26 -
027416
027416
- 27 -
- 27 -
027416
027416
- 33 -
027416
027416
- 36 -
027416
027416
- 39 -
- 39 -
027416
027416
- 49 -
- 49 -
027416
027416
- 51 -
- 51 -
027416
027416
- 52 -
- 52 -
027416
027416
- 54 -
- 54 -
027416
027416
- 56 -
- 56 -
|
