EA 027281B1 20170731

	Патентная документация ЕАПВ
Запрос:	ea000027281b*\id
Результат:	ID\|Номер и дата охранного документа

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

1. Соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, где R ₁ представляет собой -CH ₂ CH ₂ CF ₃ ; R ₂ представляет собой -CH ₂ CH ₂ CF ₃ или -CH ₂ CH ₂ CH ₂ CF ₃ ; R ₃ представляет собой Н, -СН ₃ или R _x ; R ₄ представляет собой Н или R _y ; R _x представляет собой R _y представляет собой: -SCH ₂ CH(NH ₂ )C(O)OH, -SCH ₂ CH(NH ₂ )C(O)OCH ₃ или -SCH ₂ CH(NH ₂ )C(O)OC(CH ₃ ) ₃ ; кольцо А представляет собой фенил или пиридинил; каждый R _a представляет собой независимо Cl, C _1-3 алкил, -CH ₂ OH, -CF ₃ , циклопропил, -ОСН ₃ и/или -О(циклопропил); каждый R _b представляет собой независимо F, Cl, -СН ₃ , -CH ₂ OH, -CF ₃ , циклопропил и/или -ОСН ₃ ; у представляет собой ноль, 1 или 2 и z представляет собой ноль, 1 или 2; в случае если кольцо А представляет собой фенил и z представляет собой ноль, тогда у представляет собой 1 или 2 и по меньшей мере один R _a представляет собой C _1-3 алкил, -СН ₂ ОН, -CF ₃ , циклопропил или -О(циклопропил); в случае если R ₃ представляет собой R _x , тогда R ₄ представляет собой Н, и в случае если R ₄ представляет собой R _y , тогда R ₃ представляет собой Н или -СН ₃ .

2. Соединение по п.1 и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, где кольцо А представляет собой фенил; R ₃ представляет собой Н и z имеет значения 1 или 2.

3. Соединение по п.1 и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, где R ₂ представляет собой -CH ₂ CH ₂ CF ₃ ; кольцо А представляет собой фенил и z имеет значения 1 или 2.

4. Соединение по п.1 и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, где R ₂ представляет собой -CH ₂ CH ₂ CF ₃ ; кольцо А представляет собой фенил; R _a представляет собой C _1-3 алкил или -СН ₂ ОН; каждый R _b представляет собой независимо F и/или Cl; у имеет значение 1 и z имеет значения 1 или 2.

5. Соединение по п.4, имеющее структуру

6. Соединение по п.1 и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, имеющее структуру где R ₃ представляет собой Н или R _x ; R ₄ представляет собой Н или R _y ; в случае если R ₃ представляет собой R _x , тогда R ₄ представляет собой Н; и в случае если R ₄ представляет собой R _y , тогда R ₃ представляет собой Н.

7. Соединение по п.1, имеющее структуру

8. Соединение по п.1, выбранное из (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (1); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (2); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-изопропил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (3); (2R,3S)-N-(9-хлор-5-(3,4-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (4); (2R,3S)-N-(9-хлор-5-(3,5-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (5); (2R,3S)-N-((3S)-9-этил-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (6); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (7); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (8); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-9-(трифторметил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (9); (2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3,5-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (10); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-9-(трифторметил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (11); (2R,3S)-N-((3S)-9-изопропил-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (12); (2R,3S)-N-((3S)-9-изопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (13); (2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилокси)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (14); (2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилокси)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (15); (2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилокси)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (16); (2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (17); (2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-(3-(трифторметил)фенил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (18); (2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилокси)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (19); (2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-(3-(трифторметил)фенил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (20); (2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(2-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (21); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (22); (2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (23); (2R,3S)-N-((3S)-9-циклопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (24); (2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-циклопропилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (25); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (26); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-хлорфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (27); (2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (28); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (29); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-(гидроксиметил)фенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (30); (2R,3S)-N-((3S)-5-(2-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (31); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (32); (2R,3S)-N-((3S)-9-метокси-2-оксо-5-(5-(трифторметил)-2-пиридинил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (33); (2R,3S)-N-((3S)-5-(5-хлор-2-пиридинил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (34); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-метоксифенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (35); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (36); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-фторфенил)-9-(гидроксиметил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (37); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-валината (38); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-аланината (39); S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеина (40); трет-бутил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеината (41); метил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеината (42); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил (4-(фосфонокси)фенил)ацетата (43); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-валил-L-валината (44) и их фармацевтически приемлемых солей.

9. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения заболевания или расстройства, ассоциированного с активностью рецептора Notch, содержащая соединение по п.1 и/или по меньшей мере одну его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

10. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения заболевания или расстройства, ассоциированного с активностью рецептора Notch, содержащая: (i) по меньшей мере одно соединение формулы (I), имеющее структуру где R ₃ представляет собой Н, -СН ₃ или R _x ; R ₄ представляет собой Н или R _y ; R _x представляет собой R _y представляет собой -SCH ₂ CH(NH ₂ )C(O)OH, -SCH ₂ CH(NH ₂ )C(O)OCH ₃ или -SCH ₂ CH(NH ₂ )C(O)OC(CH ₃ ) ₃ ; в случае если R ₃ представляет собой R _x , тогда R ₄ представляет собой Н; и в случае если R ₄ представляет собой R _y , тогда R ₃ представляет собой Н или -СН ₃ ; и/или по меньшей мере одну его фармацевтически приемлемую соль; (ii) соединение формулы (I), имеющее структуру и фармацевтически приемлемые носители.

11. Применение соединения по любому из пп.1-8 или его фармацевтически приемлемых солей в терапии для лечения рака.

12. Применение по п.11, где указанная терапия дополнительно включает одно или более дополнительных лекарственных средств для лечения рака, выбранных из дазатиниба, паклитаксела, тамоксифена, дексаметазона и карбоплатина, вводимых последовательно или одновременно.

13. Применение соединения по любому из пп.1-8 или его фармацевтически приемлемых солей в производстве лекарственного средства для лечения рака.

Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

5. Соединение по п.4, имеющее структуру

7. Соединение по п.1, имеющее структуру

(19)
Евразийское
патентное
ведомство
027281
(13) B1
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.07.31
(21) Номер заявки 201590581
(22) Дата подачи заявки
2013.09.20
(51) Int. Cl.
C07D 401/04 (2006.01) C07D 243/18 (2006.01) C07D 243/26 (2006.01) C07F 9/38 (2006.01) A61K31/55 (2006.01)
(54)
СОЕДИНЕНИЯ БИС (ФТОРАЛКИЛ)-1,4-БЕНЗОДИАЗЕПИНОНА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ NOTCH
(31) 61/703,912
(32) 2012.09.21
(33) US
(43) 2015.07.30
(86) PCT/US2013/060790
(87) WO 2014/047372 2014.03.27
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
БРИСТОЛ-МАЙЕРС СКВИББ КОМПАНИ (US)
(72) Изобретатель:
Гаваи Ашвиникумар В., Делукка Джордж В., О'Мэлли Даниэль, Гилл Патрис, Куэснел Клауд А., Финк Брайан Е., Чжао Юфэнь, Ли Фрэнсис Ю. (US)
(74) Представитель:
Лыу Т.Н., Угрюмов В.М. (RU)
(56) US-A1-2012245151 US-A1-2003134841 US-B1-6737038 WO-A2-0038618 WO-A1-0007995 WO-A2-0160826
(57) Изобретение относится к соединениям формулы (I) и/или их солям
где R1 представляет собой -CH2CH2CF3; R2 представляет собой -CH2CH2CF3 или -CH2CH2CH2CF3; R3 представляет собой Н, -СН3 или Rx; R4 представляет собой Н или Ry; кольцо А представляет собой фенил или пиридинил; и Rx, Ry, Ra, Rb, у и z являются такими, как определено в данном документе. Также описаны способы применения таких соединений для ингибирования Notch рецептора и фармацевтические композиции, содержащие такие соединения. Эти соединения используются для лечения, предупреждения или замедления развития болезни или расстройства в различных разделах медицины, таких как раковые опухоли; или как пролекарства этих соединений.
Область техники
Изобретение, в общем, относится к бензодиазепиноновым соединениям, используемым в качестве ингибиторов Notch. Кроме того, изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим, по меньшей мере, одно соединение по изобретению, которые используются для лечения патологических состояний, связанных с сигнальным путем Notch, таких как рак и другие пролиферативные заболевания.
Уровень техники
Сигнальный путь Notch вовлечен в разнообразные клеточные процессы, такие как определение судьбы клеток, дифференцировка, пролиферация, апоптоз и ангиогенез. (Bray, Nature Reviews Molecular Cell Biology, 7:678-689 (2006); Fortini, Developmental Cell 16:633-647 (2009)). Белки Notch представляют собой одноходовые гетеродимерные трансмембранные молекулы. Семейство Notch включает в себя 4 рецептора Notch 1-4, которые активируются после связывания с лигандами из семейства DSL (Delta-подобные 1, 3, 4 и Jagged 1 и 2 лиганды).
Активация и созревание Notch требуют определенной последовательности шагов в процессинге, включающем стадию протеолитического расщепления, опосредованного гамма-секретазным многобелковым комплексом, содержащим пресенилин 1 или пресенилин 2, никастрин, АРН1 и PEN2. После того, как Notch расщепляется, внутриклеточный домен (NICD) Notch высвобождается из мембраны. Высвобо-ждившийся NICD транслоцируется в ядро, где он функционирует как активатор транскрипции совместно с членами семейства CSL (RBPSUH "suppressor of hairless" и LAG-1). Гены-мишени Notch включают членов семейства HES, таких как HES-1. HES-1 функционирует как репрессор транскрипции генов, таких как HERP1 (известный также как HEY2), HERP2 (известный также как HEY1) и НАТН1 (известный также как АТОН1). Аберрантная активация сигнального пути Notch способствует онкогенезу. Активация Notch сигнального пути вовлечена в патогенез различных твердых опухолей, включая опухоли яичников, поджелудочной железы, а также рак молочной железы и гематологические опухоли, такие как лейкозы, лимфомы, множественная миелома. Роль ингибирования Notch и его полезность при лечении различных твердых и гематологических опухолей описаны в Miele, L. et al, Current Cancer Drug Targets, 6:313-323 (2006); Bolos, V. et al., Endocrine Reviews, 28:339-363 (2007); Shih, I-M. et al., Cancer Research, 67:18791882 (2007); Yamaguchi, N. et al., Cancer Research, 68:1881-1888 (2008); Miele, L., Expert Review Anticancer Therapy, 8:1197-1201 (2008); Purow, В., Current Pharmaceutical Biotechnology, 10:154-160 (2009); Nefedova, Y. et al., Drug Resistance Updates, 11:210-218 (2008); Dufraine, J. et al., Oncogene, 27:5132-5137 (2008); и Jun, H.T. et al., Drug Development Research, 69:319-328 (2008).
Таким образом, остается потребность в соединениях, которые могут быть использованы в качестве ингибиторов Notch и которые имеют достаточную метаболическую стабильность, чтобы обеспечить эффективные уровни воздействия лекарственного средства. Кроме того, существует потребность в соединениях, используемых в качестве ингибиторов Notch, которые могут вводиться пациенту перорально или внутривенно. В патенте США No. 7,053,084 В1 описаны сукциноиламино бензодиазепиновые соединения, используемые для лечения неврологических расстройств, таких как болезнь Альцгеймера. В ссылке показано, что эти сукциноиламино бензодиазепиновые соединения ингибируют активность гамма секре-тазы и процессинг амилоидного белка-предшественника, связанного с образованием неврологических отложений амилоидного белка.
Авторы обнаружили сильнодействующие соединения, которые обладают активностью в качестве ингибиторов Notch и имеют достаточную метаболическую стабильность, чтобы обеспечить эффективные уровни воздействия лекарственного средства при внутривенном или пероральном введении. Эти соединения, как показано, являются полезными в качестве лекарственных средств с желаемой стабильностью, биодоступностью, терапевтическим индексом и значениями токсичности, которые являются важными показателями пригодности лекарственных средств.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение выполняет вышеизложенную потребность, обеспечивая соединения бис(фторалкил) 1,4-бензодиазепинона, которые являются полезными в качестве селективных ингибиторов сигнального пути Notch, включая их пролекарства. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически приемлемый носитель; и по меньшей мере одно соединение формулы (I).
Настоящее изобретение также относится к способу лечения заболевания или расстройства, ассоциированного с активностью рецептора Notch, способу, включающему введение пациенту-млекопитающему по меньшей мере одного соединения формулы (I).
Настоящее изобретение также относится к способам получения и промежуточным продуктам для получения соединений формулы (I).
Настоящее изобретение также относится к соединениям формулы (I) для применения в терапии.
Настоящее изобретение также относится к применению соединений формулы (I) для изготовления лекарственных средств для лечения злокачественной опухоли.
Соединения формулы (I) и композиции, содержащие эти соединения, могут применяться для лечения, предупреждения или исцеления различных патологических состояний, ассоциированных с Notch рецепторами. Фармацевтические композиции, содержащие эти соединения, являются полезными для
лечения, предупреждения или замедления прогрессирования заболевания или расстройства в различных областях медицины, таких как злокачественная опухоль.
Эти и другие признаки изобретения будут изложены в развернутом виде в продолжение описания.
Краткое описание чертежей
Настоящее изобретение проиллюстрировано ссылками на прилагаемые чертежи, описанные ниже.
На фиг. 1 показана противоопухолевая эффективность Примера 1 в отношении TALL1 Т-клеточ-ного острого лимфобластного лейкоза человека. Пероральное дозирование в сутки, показанные РО (перорально), QD (каждый день)х10. Каждый символ представляет среднюю опухолевую массу группы, состоящей из 8 мышей. (•) Контрольный; (О) Пример 1, 0.625 мг/кг/введение; (¦) Пример 1, 1.25 мг/кг/введение; (Р) Пример 1, 2.5 мг/кг/введение; Пример 1, 10 мг/кг.
На фиг. 2 показана противоопухолевая эффективность Примера 1 в отношении MDA-MB-157 карциномы молочной железы человека. Пероральное дозирование в сутки, показанные РО, BID (два раза в сутки)х15 (10 суток введение; 2 суток перерыв; 5 суток введение). Каждый символ представляет среднюю опухолевую массу группы, состоящей из 8 мышей. (*) Контрольный; Пример 1, 2.5 мг/кг/введение, BID; Пример 1, 5 мг/кг/введение, BID; (*) Пример 1, 7.5 мг/кг/введение, BID.
На фиг. 3 показана противоопухолевая эффективность Примера 1 в отношении MDA-MB-157 карциномы молочной железы человека. Пероральное дозирование в сутки, показанные (I4); РО, QDxl5 (10 суток введение; 2 суток перерыв; 5 суток введение). Каждый символ представляет среднюю опухолевую массу группы, состоящей из 8 мышей. (•) Контрольный; (О) Пример 1, 5 мг/кг/введение, QD; Пример 1, 10 мг/кг/введение, QD; <п> Пример 1, 20 мг/кг/введение, QD.
На фиг. 4 показана противоопухолевая эффективность Примера 3 в отношении TALL1 Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза человека. Пероральное дозирование в сутки, показанные (Ф); РО, QDx10. Каждый символ представляет среднюю опухолевую массу группы, состоящей из 8 мышей. Контрольный; t^) Пример 1, 0.625 мг/кг/введение; (¦) Пример 1, 1.25 мг/кг/введение; (п) Пример 1, 2.5 мг/кг/введение; (*) Пример 1, 10 мг/кг.
На фиг. 5 показана противоопухолевая эффективность Примера 1 в отношении НСС-1599 тройного негативного рака молочной железы человека с транслокацией Notch 1. Пероральное дозирование в сутки, показанные ('l4); РО, QDxl5 (10 суток введение; 2 суток перерыв; 5 суток введение). Каждый символ представляет среднюю опухолевую массу группы, состоящей из 8 мышей. (*) Контрольный; Пример 1, 5 мг/кг/введение, QD; <Р) Пример 1,10 мг/кг/введение, QD; (А) Пример 1, 20 мг/кг/введение, QD.
На фиг. 6 показана синергичная противоопухолевая эффективность при объединенной химиотерапии с применением Примера 1 и паклитаксела в клетках MDA-MB-468 карциномы молочной железы человека. Каждый символ представляет среднюю опухолевую массу группы, состоящей из 8 мышей. (•) Контрольный; Паклитаксел, 12 мг/кг/введение, Q7D x 3, IV; (?) Пример 1, 2.5 С мг/кг/введение, РО, BID х 15 (10 суток введение; 2 суток перерыв; 5 суток введение); (¦) Пример 1, 5 мг/кг/введение, РО, BID х 15 (10 суток введение; 2 суток перерыв; 5 суток введение); Комбинация Паклитаксела и Примера 1, 2.5 мг/кг/введение; (^) Комбинация Паклитаксела и Примера 1, 5 мг/кг/введение.
Подробное описание изобретения
Первый аспект настоящего изобретения относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I)
и/или по меньшей мере к одной его соли; где
R1 представляет собой -CH2CH2CF3;
R2 представляет собой -CH2CH2CF3 или -CH2CH2CH2CF3;
R3 представляет собой Н, -СН3 или Rx;
Рм представляет собой Н или Ry;
Rs представляет собой -CH2OC(0)CH(CHj)NH2, -CH2OC(0)CH(NH2)CH(CHj)2.
-СН2ОС(0)СН2-V V- ОР(0)(ОН)2 -CH,OC(0)CH{(CH(CH3b)NHC(0)CH(NH2)CH(CH3)2[ \=/
н3с
-СН2ОС(0)- ¦СН2ОС(0)СН2С(СН3)2-? J> -сн3 (НО)2(0)РО
Ry представляет собой -SCH2CH(NH2)C(O)OH, -SCH2CH(NH2)C(O)OCH3 или -SCH2CH(NH2)C(O)OC(CH3)3;
кольцо А представляет собой фенил или пиридинил;
каждый Ra представляет собой независимо Cl, C1-3 алкил, -СН2ОН, -CF3, циклопропил, -ОСН3 и/или -О(циклопропил);
каждый Rb представляет собой независимо F, Cl, -CH3, -CH2OH, -CF3, циклопропил и/или -ОСН3; у представляет собой ноль, 1 или 2; и z представляет собой ноль, 1 или 2;
в том случае, когда кольцо А представляет собой фенил и z представляет собой ноль, тогда у представляет собой 1 или 2 и по меньшей мере один Ra представляет собой C1-3 алкил, -CF3, циклопропил или -О(циклопропил);
в том случае, когда R3 представляет собой Rx, тогда R4 представляет собой Н и
в том случае, когда R4 представляет собой Ry, тогда R3 представляет собой Н или -СН3.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I), где R3 представляет собой Н или -СН3;
R4 представляет собой Н; и R1, R2, кольцо A, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте.
В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где либо (i) R3 представляет собой Rx, и R4 представляет собой Н; либо (ii) R4 представляет собой Ry, и R3 представляет собой Н или -СН3; и R1, R2, кольцо A, Ra, Rb, Rx, Ry, у и z являются такими как определено в первом аспекте.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где кольцо А представляет собой фенил; и Rb R2, R3, R4, Rx, Ry, Ra, Rb, y и z являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой H. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н, и z имеет значения 1 или 2. В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I), где кольцо А представляет собой фенил; R3 представляет собой Н или СН3; R4 представляет собой Н; и R1, R2, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н, и z имеет значения 1 или 2. В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к одному соединению Формулы (I) и/или, по меньшей мере, к одной его соли, где R2 представляет собой -CH2CH2CF3, и R1, R3, R4, кольцо A, Rx, Ry, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых кольцо А представляет собой фенил. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых z имеет значения 1 или 2.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или, по меньшей мере, к одной его соли, где R2 представляет собой -CH2CH2CH2CF3, и R1, R3, R4, кольцо A, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых кольцо А представляет собой фенил. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых z имеет значения 1 или 2.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где кольцо А представляет собой пиридинил; и R1, R2, R3, R4, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н, и z имеет значения 1 или 2. В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где R2 представляет собой -CH2CH2CF3; кольцо А представляет собой фенил; Ra представляет собой C1-3 алкил или -СН2ОН; каждый Rb представляет собой независимо F и/или Cl; у имеет значение 1; z имеет значения 1 или 2; и R1, R3 и R4 являются такими как определено в первом аспекте. В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где у представляет собой 1, z имеет значения 1 или 2, и R1, R2, R3, R4, кольцо A, Ra и Rb являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых кольцо А представляет собой фенил. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых кольцо А представляет собой фенил и z представляет собой
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к его соли, имеющему структуру:
где R1 представляет собой -CH2CH2CF3;
R2 представляет собой -CH2CH2CF3 или -CH2CH2CH2CF3;
R3 представляет собой Н, -СН3 или Rx;
R4 представляет собой Н или Ry;
Rx представляет собой:
Ry представляет собой -SCH2CH(NH2)C(O)OH, -SCH2CH(NH2)C(O)OCH3 или -SCH2CH(NH2)C(O)OC(CH3)3;
Ra представляет собой Cl, -CH3, -CH(CH3)2, -СН2ОН, -CF3, циклопропил, -ОСН3 или -О(циклопропил);
каждый Rb независимо представляет собой F, Cl, -CH2OH, -CF3, циклопропил и/или -ОСН3; у представляет собой ноль или 1; z представляет собой ноль, 1 или 2;
в том случае, когда z представляет собой ноль, тогда у представляет собой 1, и Ra представляет собой -СН3, -СН2ОН, -CF3, циклопропил или -О(циклопропил). Этот вариант осуществления включает соединения, в которых у имеет значение 1; и z представляет собой ноль, 1 или 2. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых у представляет собой 1, и z представляет собой 1.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к его соли, имеющему структуру:
где R1, R2, R3, R4, Ra и Rb являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых Ra представляет собой Cl, -СН2ОН или С1-3 алкил, и Rb представляет собой F, Cl, -CH3, -CF3, циклопропил или -ОСН3. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых Ra представляет собой метил, и Rb представляет собой F, Cl или CF3.
В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к одному соединению формулы (I) и/или, по меньшей мере, к его соли, имеющему структуру:
где Ra представляет собой C1-3 алкил; Rb представляет собой F или Cl; и R1, R2, R3 и R4 являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R2 представляет собой -CH2CH2CF3. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R2 представляет собой -CH2CH2CF3, Ra представляет собой метил, и Rb представляет собой F или Cl.
В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к его соли, имеющему структуру:
где у представляет собой ноль и R1, R2, R3, R4 и Rb являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых Rb представляет собой -СН3, -СН2ОН или -ОСН3. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н или -СН3, и R4 представляет собой Н.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, имеющему структуру:
где R3 и R4 являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н или -СН3, и R4 представляет собой Н.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, имеющему структуру:
где R3 представляет собой Н, -СН3 или Rx, где Rx является таким, как определено в первом аспекте. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Rx.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, имеющему структуру:
где R3 представляет собой Н или -СН3, и Ry является таким, как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой -СН3.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, имеющему структуру:
где Ra представляет собой -СН3 или -СН2ОН; R3 представляет собой Н или -СН3, и Ry является та-
ким, как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представ-
ляет собой -СН3.
В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к одному соединению формулы (I) и/или к его соли, имеющему структуру:
где R3 представляет собой Н или Rx; R4 представляет собой Н или Ry; в том случае, когда R3 представляет собой Rx, тогда R4 представляет собой Н; и в том случае, когда R4 представляет собой Ry, тогда R3 представляет собой Н; и где Rx и Ry являются такими как определено в первом аспекте.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I), имеющему структуру:
где R3 представляет собой Н или -СН3.
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), имеющему структуру:
Н ,0 о ~
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), имеющему структуру:
=N п | о
или к соединению формулы (I), имеющему структуру:
NH,
но.
или к любой смеси этих двух соединений.
В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к одному соединению формулы (I) и/или его соли, имеющему структуру:
где Rx является таким, как определено в первом аспекте.
В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к одному соединению формулы (I) и/или егосоли, имеющему структуру:
CF3
где R3 представляет собой Н или -СН3; и Ry является таким, как определено в первом аспекте. В одном варианте осуществления изобретение относится к композиции, содержащей: (i) по меньшей мере одно соединение формулы (I), имеющее структуру:
и/или его соль; (ii) соединение формулы (I), имеющее структуру:
или (iii) смесь (i) и (ii); где R3 представляет собой Н или Rx; R4 представляет собой Н или Ry; в том случае, когда R3 представляет собой Rx, тогда R4 представляет собой Н; и в том случае, когда R4 представляет собой Ry, тогда R3 представляет собой Н; и где Rx и Ry являются такими как определено в первом аспекте.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или к его соли, имеющему структуру:
где R3 представляет собой Н или Rx; R4 представляет собой Н или Ry; в том случае, когда R3 представляет собой Rx, тогда R4 представляет собой Н; и в том случае, когда R4 представляет собой Ry, тогда R3 представляет собой Н; и где Rx и Ry являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н или -СН3; и R4 представляет собой Н. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой Н, и R4 представляет собой Н.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где Ri, R2, R3, R4, кольцо A, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте, и в том случае, когда кольцо А представляет собой фенил и z представляет собой ноль, тогда у представляет собой i или 2, и по меньшей мередин Ra представляет собой метил, изопропил, -СН2ОН, циклопропил и/или -О(циклопропил).
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где R3 представляет собой Н; и Ri, R2, R4, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте. Этот вариант осуществления включает соединения, в которых R3 представляет собой дейтерий (D) или тритий (Т). Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R2 представляет собой -CH2CH2CF3.
В одном варианте осуществления изобретение относится, по меньшей мере, к соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где R3 представляет собой -СН3; и Ri, R2, R4, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте. R3 включает метальные группы, в которых один или более водородных атомов изотопно замещены дейтерием (D) и/или тритием (Т). В одном примере этого варианта осуществления R3 представляет собой -CD3. Также этот вариант осуществления включает соединения, в которых R2 представляет собой -CH2CH2CF3.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли, где Ri, R2, R3, R4, кольцо A, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте, при условии, что соединение формулы (I) или его соль не представляет собой:
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I), где R3 представляет собой Н или -СН3; R4 представляет собой Н; Ri, R2, кольцо A, Ra, Rb, у и z являются такими как определено в первом аспекте, при условии, что соединение формулы (I) не представляет собой:
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), выбранному
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (i);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (2);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-изопропил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3, 3,3-трифторпропил)сукцинамида (3);
(2R,3S)-N-(9-хлор-5-(3,4-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (4);
(2R,3S)-N-(9-хлор-5-(3,5-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (5);
(2R,3S)-N-((3S)-9-этил-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (6);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (7);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (8);
(2R,3 S)-N-((3 S)-5 -(3 -метилфенил)-2-оксо-9-(трифторметил)-2,3-дигидро-1H- i ,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (9);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3,5-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3, 3,3-трифторпропил)сукцинамида (10);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-9-(трифторметил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (11);
(2R,3S)-N-((3S)-9-изопропил-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3, 3,3-трифторпропил)сукцинамида (12);
(2R,3S)-N-((3S)-9-изопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (13);
(2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилоху)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (14);
(2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилоху)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (15);
(2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилоху)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (16);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (17);
(2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-(3-(трифторметил)фенил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (18);
(2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилоху)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (19);
(2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-(3-(трифторметил)фенил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (20);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(2-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (21);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (22);
(2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (23);
(2R,3S)-N-((3S)-9-циклопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (24);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-циклопропилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (25);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (26);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-хлорфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (27);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (28);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (29);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-(гидроксиметил)фенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (30);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(2-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (31);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (32);
(2R,3S)-N-((3S)-9-метокси-2-оксо-5-(5-(трифторметил)-2-пиридинил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензоди-азепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (33);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(5-хлор-2-пиридинил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (34);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-метоксифенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (35);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (36);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-фторфенил)-9-(гидроксиметил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (37);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фтор-фенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил-L-валината (38);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фтор-фенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил-L-аланината (39);
S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензо-диазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеина (40);
трет-бутил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеината (41);
метил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бен-зодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеината (42);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фтор-фенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил (4-(фосфонокси)фенил)ацетата
(43);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-валил-L-валината (44) и их солей.
В одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (I), выбранному
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамида (1);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-валината (3 8);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-аланината (3 9);
S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3 -(((3 S)-5-(3 -фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-Ш-1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеина (40);
трет-бутил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеината (41);
метил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бен-зодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеината (42);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фтор-фенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил (4-(фосфонокси)фенил)ацетата
(43);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-валил-L-валината (44) и их солей.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I), где R3 представляет собой Н или -СН3; и R4 представляет собой Н; где соединение формулы (I) имеет продолжительность метаболического полувыведения у человека по меньшей мере 45 мин, согласно определению периода полувыведения в описанном здесь анализе устойчивости к инактивации в процессе метаболизма.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I), где R3 представляет собой Н или -СН3; и R4 представляет собой Н; где соединение формулы (I) имеет продолжительность метаболического полувыведения по меньшей мере 60 мин, согласно определению периода полувыведения в описанном здесь анализе устойчивости к инактивации в процессе метаболизма.
В одном варианте осуществления изобретение относится по меньшей мере к одному соединению формулы (I), где R3 представляет собой Н или -СН3; и R4 представляет собой Н; где соединение формулы
(I) имеет продолжительность метаболического полувыведения по меньшей мере 70 мин, согласно определению периода полувыведения в описанном здесь анализе устойчивости к инактивации в процессе метаболизма.
Настоящее изобретение может осуществляться в других конкретных формах без отступления от его сущности или его существенных признаков. Настоящее изобретение охватывает все комбинации аспектов и/или вариантов осуществления изобретения, упомянутых в настоящем документе. Понятно, что любой и все варианты осуществления по настоящему изобретению могут быть выполнены в сочетании с любым другим вариантом осуществления или вариантами осуществления, чтобы описать еще дополнительные варианты осуществления. Также следует понимать, что каждый отдельный элемент вариантов осуществления предназначен для комбинирования с любым и всеми другими элементами из любого варианта осуществления, чтобы описать дополнительный вариант осуществления.
Определения
Отличительные признаки и преимущества настоящего изобретения могут быть более понятны специалистам в данной области техники после прочтения нижеследующего подробного описания. Следует понимать, что определенные признаки изобретения, которые, для наглядности, описаны выше и ниже в контексте отдельных вариантов осуществления, также могут быть объединены в единый вариант осуществления. Наоборот, различные признаки изобретения, которые, по причинам краткости описаны в контексте одного варианта осуществления, могут также быть объединены для образования его под-комбинаций. Варианты осуществления, определенные в данном описании в качестве примерных или предпочтительных, предназначены для иллюстрации и не являются ограничивающими.
Если специально не указано иное, ссылки, сделанные в единственном числе, могут также включать множественное число.
Если не указано иное, любой гетероатом с ненасыщенными валентностями, как предполагается, имеет достаточное количество атомов водорода для насыщения валентностей.
Определения, изложенные в настоящем описании, имеют приоритет над определениями, изложенными в любом патенте, патентной заявке и/или опубликованной заявке на патент, которые включены в настоящую заявку путем ссылки.
Ниже приведены определения некоторых терминов, используемых для описания настоящего изобретения. Эти определения применимы к терминам, как они использованы в данном описании (если они не ограничены иным образом в определенных случаях) либо по отдельности, либо как часть большей группы.
Во всем описании группы и их заместители могут быть выбраны специалистом в данной области для получения стабильных функциональных групп и соединений. Термины "гало" и "галоген", использованные здесь, относятся к F, Cl, Br или I. Термин "алкил", использованный здесь, относится к алифатическим углеводородным группам как с разветвленной, так и с линейной цепью, содержащим, например, от 1 до 12 атомов углерода, от 1 до 6 атомов углерода и от 1 до 4 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил (Me), этил (Et), пропил (например, н-пропил и i-пропил), бутил (например, n-бутил, i-бутил, вторичный бутил и трет-бутил), и пентил (например, n-пентил, изопентил, неопентил), н-гексил, 2-метилпентил, 2-этилбутил, 3-метилпентил и 4-метилпентил. Когда появляются числа в индексе после символа "С", индекс определяет с большей конкретностью количество атомов углерода, которое может содержать определенная группа. Например, "С1-3 алкил" обозначает линейные и разветвленные алкильные группы с от одного до трех атомами углерода.
Термин "фармацевтически приемлемый" используется здесь для обозначения таких соединений, веществ, композиций и/или лекарственных форм, которые, с медицинской точки зрения, пригодны для использования в контакте с тканями человека и животных без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, соразмерного с разумным соотношением польза/риск.
Соединения формулы (I) могут образовывать соли, которые также входят в объем настоящего изобретения. Если не указано иное, следует понимать, что ссылка на соединение по изобретению включает ссылку на одну или более его солей. Термин "соль (и)" обозначает кислотные и/или основные соли, образованные неорганическими и/или органическими кислотами и основаниями. Кроме того, термин "соль(и)" может включать цвиттерионы (внутренние соли), например, когда соединение формулы (I) содержит как основную группу, такую как амин, или пиридин, или имидазольное кольцо, и кислотную функциональную группу, такую как карбоновая кислота. Предпочтительными являются фармацевтически приемлемые (т.е. нетоксичные, физиологически приемлемые) соли, такие, как, например, приемлемые соли металла и амина, в которых катион не вносит значительного вклада в токсичность или биологическую активность соли. Однако могут использоваться другие соли, например, на стадиях выделения или очистки, которые могут применяться в процессе получения, и, таким образом, рассматриваются в пределах объема настоящего изобретения. Соли соединений формулы (I) могут быть образованы, например, путем взаимодействия соединения формулы (I) с таким количеством кислоты или основания, которое является эквивалентным, в такой среде, в которой соль выпадает в осадок, или в водной среде с последующей лиофилизацией.
Типичные соли присоединения кислоты включают ацетаты (такие как соли, образованные уксусной кислотой или тригалоуксусной кислотой, например, трифторуксусной кислотой) адипаты, альгинаты, аскорбаты, аспартаты, бензоаты, бензолсульфонаты, бисульфаты, бораты, бутираты, цитраты, камфора-ты, камфорсульфонаты, циклопентанпропионаты, диглюконаты, додецилсульфаты, этансульфонаты, фу-мараты, глюкогептаноаты, глицерофосфаты, хемисульфаты, гептаноаты, гексаноаты, гидрохлориды (образованные с хлористо-водородной кислотой), гидробромиды (образованные с бромистым водородом), гидроиодиды, малеаты (образованные с малеиновой кислотой), 2-гидроксиэтансульфонаты, лактаты, ме-тансульфонаты (образованные с метансульфоновой кислотой), 2-нафталинсульфонаты, никотинаты, нитраты, оксалаты, пектинаты, персульфаты, 3-фенилпропионаты, фосфаты, пикраты, пивалаты, пропиона-ты, салицилаты, сукцинаты, сульфаты (такие, как соли, образованные с серной кислотой), сульфонаты (такие как те, которые упомянуты в данном документе), тартраты, тиоцианаты, толуолсульфонаты, такие как тозилаты, ундеканоаты, и тому подобное. Примеры основных солей включают соли аммония, соли щелочных металлов, такие как соли натрия, лития и калия; соли щелочно-земельных металлов, такие как соли кальция и магния; соли бария, цинка и алюминия; соли с органическими основаниями (например, органическими аминами), такими как триалкиламины, такие как триэтиламин, прокаин, дибензиламин, N-бензил-р-фенэтиламин, 1-эфенамин, N,N'- дибензилэтилен-диамин, дегидроабиетиламин, N-этилпипе-ридин, бензиламин, дициклогексиламин или аналогичными фармацевтически приемлемыми аминами, и соли с аминокислотами, такими как аргинин, лизин и тому подобное. Основные азотсодержащие группы могут быть кватернизованы с агентами, такими как низшие алкилгалогениды (например, метил, этил-, пропил- и бутил- хлориды, бромиды и иодиды), диалкилсульфаты (например, диметил-, диэтил-, дибу-тил- и диамилсульфаты), галогениды с длинной цепью (например, децил-, лаурил-, миристил- и стеарил-хлориды, бромиды и йодиды), аралкильные галогениды (например, бензил- и фенэтил- бромиды) и другие. Предпочтительные соли включают моногидрохлорид, гидросульфат, метансульфонат, фосфатные или нитратные соли.
Соединения формулы (I) могут быть получены в виде аморфных твердых веществ или кристаллических твердых веществ. Лиофилизация может быть использована для получения соединений формулы (I) в виде твердого вещества.
Кроме того, следует понимать, что сольваты (например, гидраты) соединений формулы (I) также включены в объем настоящего изобретения. Термин "сольват" означает физическую ассоциацию соединения формулы (I) с одной или более молекулами растворителя, как органического, так и неорганического. Это физическая ассоциация включает образование водородных связей. В некоторых случаях сольват может быть выделен, например, когда молекулы одного или более растворителей включены в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. Термин "сольват" включает как жидкую фазу, так и отделяемые сольваты. Примеры сольватов включают гидраты, этанолаты, метанолаты изопропано-латы, сольваты ацетонитрила и сольваты этилацетата. Способы сольватации известны в данной области техники.
Любое соединение, которое может быть преобразовано in vivo с получением биологически активного вещества (например, соединение формулы (I)), является пролекарством в пределах объема и сущности изобретения. Соединения формулы (I), в которых либо R3 представляет собой Rx, либо R4 представляет собой Ry, могут быть использованы в качестве пролекарств соединений формулы (I), в которых R3 представляет собой Н или -СН3 и R4 представляет собой Н. Различные формы пролекарств хорошо известны в данной области и описаны в:
a) Wermuth, C.G. et al., The Practice of Medicinal Chemistry, Chapter 31, Academic Press (1996);
b) Bundgaard, H. ed., Design ofProdrugs, Elsevier (1985);
c) Bundgaard, H., Chapter 5, "Design and Application of Prodrugs", Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Harwood Academic Publishers (1991); and
d) Testa, B. et al., Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism, Wiley-VCH (2003).
Кроме того, соединения формулы (I) после их получения могут быть выделены и очищены с получением композиции, содержащей количество по массе, равное или большее, чем 99% соединения формулы (I) ("по существу чистое"), которая затем используется или скомбинирована, как здесь описано. Такие "по существу чистые" соединения формулы (I) также рассматриваются здесь как часть настоящего изобретения. Термины "стабильное соединение" и "стабильная структура" означают, чтобы указать соединение, которое достаточно устойчиво, чтобы выдержать выделение до пригодной степени чистоты из реакционной смеси и изготовление эффективной терапевтической лекарственной формы. Настоящее изобретение предназначено для осуществления стабильных соединений.
Термин "терапевтически эффективное количество" предназначен для включения количества соединения по настоящему изобретению в чистом виде, или количества комбинации заявленных соединений, или количества соединения по настоящему изобретению в комбинации с другими активными ингредиентами, действенными в качестве ингибитора рецептора NOTCH, или эффективного для лечения или профилактики пролиферативных заболеваний, таких как рак.
Использованный данном описании термин "лечение" или "терапия" охватывает лечение болезненного состояния у млекопитающего, прежде всего, у человека, и включает: (а) предупреждение возникно
вения болезненного состояния у млекопитающего, в частности, если указанное млекопитающее предрасположено к болезненному состоянию, но еще не диагностировано, что имеет таковое; (б) ингибирование болезненного состояния, то есть остановку его развития; и/или (с) облегчение болезненного состояния, т.е. регрессию болезненного состояния.
Соединения по настоящему изобретению предназначено для включения всех изотопов атомов, встречающихся в настоящих соединениях. Изотопы включают атомы, имеющие одинаковый атомный номер, но разные массовые числа. В качестве общего примера и без ограничения, изотопы водорода включают дейтерий (D) и тритий (Т). Изотопы углерода включают 13С и 14С. Меченные изотопами соединения по настоящему изобретению, в общем случае, могут быть получены обычными способами, известными специалистам в данной области техники, или способами, аналогичными тем, которые описаны в данном документе, с помощью соответствующего изотопно-меченого реагента вместо немеченого реагента, используемого в других случаях.
Соединения в соответствии с формулой (I) и/или их соли могут быть введены любым способом, подходящим для состояния, подлежащего лечению, которое может зависеть от потребности в сайт-специфическом лечении или от доставляемого количества соединения формулы (I).
Кроме того, настоящее изобретение охватывает класс фармацевтических композиций, содержащих соединение формулы (I) и/или его соль; и один или более нетоксичные, фармацевтически приемлемые носители и/или разбавители, и/или адъюванты (совместно именуемые здесь как вещества "носители") и, при желании, другие активные ингредиенты. Соединения формулы (I) могут быть введены любым подходящим путем, предпочтительно, в форме фармацевтической композиции, адаптированной к такому способу введения, и в дозе, эффективной для предполагаемого лечения. Соединения и композиции по настоящему изобретению могут быть, например, введены перорально, через слизистую оболочку или парентерально, в том числе, интраваскулярно, внутривенно, внутрибрюшинно, подкожно, внутримышечно и внутригрудинно в дозированных единицах составов, содержащих обычные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и наполнители. Например, фармацевтический носитель может содержать смесь маннита или лактозы и микрокристаллической целлюлозы. Смесь может содержать дополнительные компоненты, такие как смазывающий агент, например, стеарат магния и разрыхлитель, такой как кросповидон. Смесь носителя может быть насыпана в желатиновую капсулу или спрессована в таблетки. Фармацевтическая композиция, например, может быть введена в виде пероральной лекарственной формы или инфузией. Для перорального введения фармацевтическая композиция может быть в форме, например, таблетки, капсулы, жидкой капсулы, суспензии или жидкости. Фармацевтическая композиция, предпочтительно, выполнена в виде дозированной единицы, содержащей определенное количество активного ингредиента. Например, фармацевтическая композиция может быть представлена в виде таблетки или капсулы, содержащей количество активного ингредиента в интервале от около 1 до 2000 мг, предпочтительно от около 1 до 500 мг и более предпочтительно от около 5 до 150 мг. Подходящая суточная доза для человека или другого млекопитающего может широко варьироваться в зависимости от состояния пациента и других факторов, но может быть определена с помощью стандартных методик.
Любая фармацевтическая композиция, рассматриваемая здесь, может, например, быть доставлена перорально с помощью каких-либо приемлемых и подходящих пероральных препаратов. Примеры перо-ральных препаратов включают, но не ограничиваются ими, например, таблетки, драже, пастилки, водные и масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые и мягкие капсулы, жидкие капсулы, сиропы и эликсиры. Фармацевтические композиции, предназначенные для перорально-го введения, могут быть получены в соответствии с любыми способами, известными в области для изготовления фармацевтических композиций, предназначенных для перорального введения. Для получения фармацевтически приятных на вкус препаратов, фармацевтическая композиция в соответствии с изобретением может содержать, по меньшей мере, одно вещество, выбранное из подсластителей, ароматизаторов, красителей, мягчительных веществ, антиоксидантов и консервантов.
Таблетка может, например, быть получена путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним нетоксичным фармацевтически приемлемым наполнителем, пригодным для изготовления таблеток. Примеры наполнителей включают, но не ограничиваются ими, например, инертные разбавители, такие как, например, карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция и фосфат натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие вещества, такие как, например, микрокристаллическая целлюлоза, натрий-кроскармеллоза, кукурузный крахмал и альгиновая кислота; связующие вещества, такие как, например, крахмал, желатин, поливинилпирролидон и камедь; и смазывающие вещества, такие как, например, стеарат магния, стеариновая кислота и тальк. Кроме того, таблетка может быть либо без покрытия, либо покрыта известными способами, чтобы либо замаскировать неприятный вкус лекарственного средства с неприятным вкусом, либо задержать дезинтеграцию и абсорбцию активного ингредиента в желудочно-кишечном тракте, тем самым сохранить воздействие активного ингредиента в течение более длительного периода. Примеры водорастворимых маскирующих вкус веществ включают, но не ограничиваются ими, гидроксипропил-метилцеллюлозу и гидроксипро-пил-целлюлозу. Примеры задерживающих по времени веществ включают, но не ограничиваются ими, этилцеллюлозу и ацетобутират целлюлозу.
Твердые желатиновые капсулы могут, например, быть получены путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним инертным твердым разбавителем, таким как, например, карбонат кальция; фосфат кальция и каолин. Мягкие желатиновые капсулы могут, например, быть получены путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним водорастворимым носителем, таким как, например, полиэтиленгликоль; и по меньшей мере одной масляной средой, такой как, например, арахисовое масло, жидкий парафин и оливковое масло.
Водная суспензия может быть получена, например, путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним наполнителем, пригодным для изготовления водной суспензии. Примеры наполнителей, пригодных для изготовления водной суспензии, включают но не ограничиваются ими, например, суспендирующие вещества, такие как, например, натрий-карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, альгино-вая кислота, поливинилпирролидон, трагант и аравийская камедь; диспергирующие или смачивающие вещества, такие как, например, природные фосфатиды, например, лецитин; продукты конденсации алки-леноксида с жирными кислотами, такие как, например, стеарат полиоксиэтилена; продукты конденсации этиленоксида с алифатическими спиртами с длинной цепью, такие как, например, гептадекаэтилен-оксицетанол; продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такие как, например, моноолеат полиоксиэтилен сорбита; и продукты конденсации этиленоксида с неполными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гексита, таких как, например, моноолеат полиэтилен сорбита. Водная суспензия можно также содержать, по меньшей мере, один консервант, такой как, например, этил- и н-пропил-п-гидроксибензоат; по меньшей мере, одно окрашивающее вещество; по меньшей мере, один ароматизатор; и/или, по меньшей мере, один подсластитель, включая, но не ограничиваясь ими, например, сахарозу, сахарин и аспартам.
Масляные суспензии могут, например, быть получены путем суспендирования по меньшей мере одного соединения формулы (I) либо в растительном масле, таком как, например, арахисовое масло; оливковое масло; кунжутное масло и кокосовое масло; либо в минеральном масле, таком как, например, жидкий парафин. Масляная суспензия может также содержать по меньшей мере один загуститель, такой как, например, пчелиный воск; твердый парафин и цетиловый спирт. Для того, чтобы обеспечить приятный вкус масляной суспензии по меньшей мере один из подсластителей, уже описанных выше, и/или, по меньшей мере, один ароматизатор может быть добавлен к масляной суспензии. Масляная суспензия может дополнительно содержать по меньшей мере один консервант, включая, но не ограничиваясь им, например, антиоксидант, такой как, например, бутилированный гидроксианизол и альфа-токоферол.
Диспергируемые порошки и гранулы могут, например, быть получены путем смешивания по меньшей мере одного соединения формулы (I) по меньшей мере с одним диспергирующим и/или смачивающим веществом; по меньшей мере одним суспендирующим веществом; и/или по меньшей мере одним консервантом. Подходящие диспергирующие, смачивающие и суспендирующие вещества являются такими, как уже было описано выше. Примеры консервантов включают, но не ограничиваются ими, например, антиоксиданты, например, аскорбиновую кислоту. Кроме того, диспергируемые порошки и гранулы могут также содержать по меньшей мере один наполнитель, включая, но не ограничиваясь ими, например, подсластители; ароматизирующие агенты и красители.
Эмульсия по меньшей мере одного соединения формулы (I) может, например, быть получена в виде эмульсии типа масло-в-воде. Масляная фаза эмульсий, содержащих соединения формулы (I), может быть образованы из известных ингредиентов известным способом. Масляная фаза может быть получена, но не ограничивается ими, из, например, растительного масла, такого как, например, оливковое масло и арахисовое масло; минерального масла, такого как, например, жидкий парафин; и их смесей. Вместе с тем как фаза может содержать только эмульгатор, она может содержать смесь, по меньшей мере, одного эмульгатора с жиром или маслом, или как с жиром, так и с маслом. Подходящие эмульгаторы включают, но не ограничиваются ими, например, природные фосфатиды, например, соевый лецитин; сложные эфиры или неполные сложные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гексита, такие как, например, моноолеат; и продукты конденсации неполных эфиров с этиленоксидом, такие как, например, моноолеат полиоксиэтилен сорбитан. Предпочтительно гидрофильный эмульгатор вводится в состав вместе с липо-фильным эмульгатором, который действует в качестве стабилизатора. Также является предпочтительным включать как масло, так и жир. Совместно эмульгатор(ы) с или без стабилизатора(ов) образуют так называемый эмульгирующий воск, и воск вместе с маслом и жиром образуют так называемый эмульгирующую мазевую основу, которая образует масляную дисперсную фазу композиций крема. Эмульсия может также содержать подсластитель, ароматизатор, консервант и/или антиоксидант. Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, пригодные для использования в композиции по настоящему изобретению, включают Tween 60, Span 80, цетостеариловый спирт, миристиловый спирт, глицерилмоностеарат, лау-рилсульфат натрия, глицерилдистеарат в чистом виде или с воском, или другие вещества, хорошо известные в данной области техники.
Соединения формулы (I) могут, например, также быть введены внутривенно, подкожно и/или внутримышечно с помощью любой фармацевтически приемлемой и подходящей инъекционной формы. Примеры форм для инъекций включают, но не ограничиваются ими, например, стерильные водные растворы,
содержащие приемлемые носители и растворители, такие как, например, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия; стерильные микроэмульсии масло-в-воде и водные или масляные суспензии.
Композиции для парентерального введения могут быть в форме водных или неводных изотонических стерильных растворов или суспензий для инъекций. Эти растворы и суспензии могут быть получены из стерильных порошков или гранул с использованием одного или более носителей или разбавителей, указанных для использования в композициях для перорального введения, или с помощью других подходящих диспергирующих или смачивающих веществ и суспендирующих веществ. Соединения могут быть растворены в воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, этаноле, кукурузном масле, хлопковом масле, арахисовом масле, кунжутном масле, бензиловом спирте, хлориде натрия, траганте и/или различных буферах. Другие адъюванты и способы введения хорошо и широко известны в фармацевтической области. Активный ингредиент может быть также введен путем инъекции в виде композиции с подходящими носителями, включая физиологический раствор, декстрозу или воду, или с циклодекстрином (т.е. CAPTI-SOL(r)), сорастворителем солюбилизации (например, пропиленгликоль) или солюбилизацией мицелл (например, Tween 80).
Стерильный инъекционный препарат может также быть стерильным инъекционным раствором или суспензией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, как раствор в 1,3-бутандиоле. К приемлемым носителям и растворителям, которые могут быть использованы, относятся вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для этой цели может быть использовано любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицери-ды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, находят применение в приготовлении лекарственных форм для инъекций.
Стерильная инъецируемая микроэмульсия типа масло-в-воде может, например, быть получена путем 1) растворения по меньшей мере одного соединения формулы (I) в масляной фазе, такой как, например, смесь соевого масла и лецитина; 2) объединения соединения формулы (I), содержащего масляную фазу, со смесью воды и глицерина; и 3) обработка комбинации с образованием микроэмульсии.
Стерильная водная или масляная суспензия может быть получена в соответствии со способами, уже известными в данной области. Например, стерильный водный раствор или суспензия может быть изготовлена с нетоксичным парентерально приемлемым разбавителем или растворителем, таким как, например, 1,3-бутандиол; и стерильная масляная суспензия может быть изготовлена со стерильным нетоксичным приемлемым растворителем или суспендирующей средой, такой как, например, стерильные нелетучие масла, например, синтетические моно- или диглицериды; и жирные кислоты, такие как, например, олеиновая кислота.
Фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и среды, которые могут быть использованы в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, ионообменные вещества, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, самоэмульгирующиеся системы доставки лекарственных средств (SEDDS), такие как д-альфа-токоферол полиэтиленгликоль 1000 сукци-нат, поверхностно-активные вещества, используемые в фармацевтических лекарственных формах, такие как Tweens, полиэтоксилированное касторовое масло, такое как поверхностно-активное вещество CRE-MOPHOR(r) (BASF), или другие подобные полимерные матрицы доставки, сывороточные белки, такие как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как протамин сульфат, динатрий гидрофосфат, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный диоксид кремния, магния трисиликат, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропилен-блок-полимеры, полиэтиленгликоль и ланолин. Циклодекстрины, такие как альфа-, бета- и гамма-циклодекстрин, или химически модифицированные производные, такие как гидроксиалкилциклодекстрины, в том числе 2- и 3-гидроксипропил-циклодекстрины, или другие солю-билизированные производные также могут быть с успехом использованы для улучшения доставки соединений композиции, описанных в настоящем документе. Фармацевтически активные соединения по настоящему изобретению могут быть обработаны в соответствии с обычными способами фармацевтики для получения лекарственных препаратов для введения пациентам, в том числе людям и другим млекопитающим. Фармацевтические композиции могут быть подвергнуты обычным фармацевтическим операциям, таким как стерилизация, и/или могут содержать обычные адъюванты, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие вещества, эмульгаторы, буферы и т.д. Таблетки и пилюли могут быть дополнительно изготовлены с энтеросолюбильным покрытием. Такие композиции могут также содержать адъюванты, такие как смачиватели, подсластители, вкусовые и ароматизирующие вещества.
Количества соединений, которые вводят, и режим дозирования для лечения болезненного состояния с помощью соединений и/или композиций по настоящему изобретению зависят от множества факторов, в том числе от возраста, веса, пола, состояния здоровья субъекта, типа заболевания, тяжести заболе
вания, пути и частоты введения и конкретного применяющегося соединения. Таким образом, режим дозирования может изменяться в широких пределах, но может быть определен в установленном порядке с использованием стандартных методик. Адекватной может быть суточная доза от около 0,001 до 100 мг/кг массы тела, предпочтительно от около 0,005 до около 50 мг/кг массы тела и наиболее предпочтительно от около 0,01 до 10 мг/кг массы тела. Суточная доза может быть введена от одной до четырех доз в день.
Для терапевтических целей активные соединения по данному изобретению обычно объединяют с одним или несколькими адъювантами, соответствующими указанному пути введения. При пероральном введении соединения могут быть смешаны с лактозой, сахарозой, крахмалом, эфирами целлюлозы алка-новых кислот, алкиловыми эфиры целлюлозы, тальком, стеариновой кислотой, стеаратом магния, оксидом магния, натриевыми и кальциевыми солями фосфорной и серной кислот, желатином, камедью акации, альгинатом натрия, поливинилпирролидоном и/или поливиниловым спиртом, а затем таблетирова-ны или инкапсулированы для подходящего способа введения. Такие капсулы или таблетки могут содержать композицию с контролируемым высвобождением, которая может быть получена в виде дисперсии активного соединения в гидроксипропилметилцеллюлозе.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одну его соль и, необязательно, дополнительное вещество, выбранное из любого фармацевтически приемлемого носителя, адъюванта и наполнителя. Альтернативные композиции по настоящему изобретению содержат соединение формулы (I), описанное здесь, или его пролекарство и фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель.
Полезность
Соединения формулы (I) применимы для лечения раковой опухоли, например, раковые опухоли зависят от активации Notch. Активация Notch участвует в патогенезе различных плотных опухолей, включая рак яичников, поджелудочной железы, а также рак молочной железы и гематологические опухоли, такие как лейкозы, лимфомы и множественные миеломы.
В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) и/или его соли. Способ по данному варианту осуществления может быть использован для лечения различных видов раковых опухолей, включая, но не ограничиваясь ими, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, колоректальный рак, рак желудка, рак головы и шеи, рак почек, рак печени, рак легких, включая немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), рак яичника, рак поджелудочной железы, рак желчного пузыря, рак предстательной железы, рак щитовидной железы, остеосаркому, рабдомиосаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому (MFH), фибросаркому, глиобластому/астроцитому, нейробластому, меланому, Т-клеточный острый лимфобласт-ный лейкоз (T-ALL) и мезотелиому. Например, способ по настоящему варианту осуществления используется для лечения рака молочной железы, рака толстой кишки или рака поджелудочной железы. Предпочтительно, млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в соответствии со способом по настоящему варианту осуществления. Способ по данному варианту осуществления включает введение соединения, имеющего структуру
и/или по меньшей мереодну его соль. Способы введения в настоящем варианте осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение. В одном варианте осуществления приводится способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или, по меньшей мере, одной его соли, где указанная раковая опухоль представляет собой рак ободочной и прямой кишки. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в соответствии со способом по настоящему варианту осуществления. Способы введения по настоящему варианту осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение.
В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли, где указанная раковая опухоль представляет собой трижды негативный рак молочной железы. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в соответствии со способом по настоящему варианту осуществления. Способы введения по настоящему варианту осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение. В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного
соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли, где указанный вид рака имеет транслокацию по меньшей мере одного из Notch рецепторов. Например, трижды негативный рак молочной железы человека НСС-1599 имеет Notch 1 транслокацию. В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли, где указанный рак представляет собой немелкоклеточный рак легких. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в соответствии со способом по настоящему варианту осуществления. Способы введения по настоящему варианту осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение.
В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или, по меньшей мере, одной его соли, где указанный рак представляет собой рак поджелудочной железы. Предпочтительно, млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в соответствии со способом по настоящему варианту осуществления. Способы введения по настоящему варианту осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение.
В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, по меньшей мере, одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли, где указанный рак представляет собой рак яичников. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в соответствии со способом по настоящему варианту осуществления. Способы введения по настоящему варианту осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение.
В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли, где указанный рак представляет собой меланому. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения рака может быть введено в соответствии со способом по настоящему варианту осуществления. Способы введения по настоящему варианту осуществления включают парентеральное введение и пероральное введение.
В одном варианте осуществления предусмотрено использование по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли в изготовлении лекарственного средства для лечения рака. Предпочтительно в настоящем варианте осуществления раковые опухоли, подлежащие лечению, включают один или более видов из рака мочевого пузыря, рака молочной железы, колоректального рака, рака желудка, рака головы и шеи, рака почек, рака печени, рака легких, включая немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), рака яичников, рака поджелудочной железы, рака желчного пузыря, рака предстательной железы, рака щитовидной железы, остеосаркомы, рабдомиосаркомы, злокачественной фиброзной гистиоцитомы (MFH), фибросаркомы, глиобластомы/астроцитомы, нейробластомы, меланомы, Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза (T-ALL) и мезотелиомы. Подходящие лекарственные средства по настоящему варианту осуществления включают лекарственные средства для парентерального введения, такие как, например, растворы и суспензии, и лекарственные средства для перорального введения, такие как, например, таблетки, капсулы, растворы и суспензии.
В одном варианте осуществления предлагается по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль для использования в терапии при лечении рака. В настоящем варианте осуществления раковые опухоли, подлежащие лечению, включают один или более видов рака мочевого пузыря, рака молочной железы, колоректального рака, рака желудка, рака головы и шеи, рака почек, рака печени, рака легких, включая немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), рака яичников, рака поджелудочной железы, рака желчного пузыря, рака предстательной железы, рака щитовидной железы, остео-саркому, рабдомиосаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому (MFH), фибросаркому, глиобла-стому/астроцитому, нейробластому, меланому, Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз (T-ALL) и мезотелиому. В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака у млекопитающего, где рак зависит от активации Notch, включающий введение пациенту, по меньшей мере, одного соединения формулы (I) и/или, по меньшей мере, одной его соли. Способ по настоящему варианту осуществления может быть использован для лечения различных видов рака, включая, но не ограничиваясь ими, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, колоректальный рак, рак желудка, рак головы и шеи, рак почек, рак печени, рак легких, включая немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), рак яичников, рак поджелудочной железы, рак желчного пузыря, рак предстательной железы, рак щитовидной железы, остеосарко-му, рабдомиосаркому, злокачественную фиброзную гистиоцитому (MFH), фибросаркому, глиобласто-му/астроцитому, нейробластому, меланому, Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз (T-ALL) и ме-зотелиому. Предпочтительно, способ по этому варианту осуществления используется для лечения рака молочной железы, рака толстой кишки или рака поджелудочной железы. Предпочтительно, млекопитающее представляет собой человека. Например, терапевтически эффективное количество для лечения
рака может быть введено в соответствии со способом по настоящему варианту осуществления. Подходящие способы введения включают парентеральное введение и пероральное введение. При лечении рака часто предпочтительной является комбинация химиотерапевтических веществ и/или других видов терапии (например, лучевая терапия). Второе (или третье) вещество может иметь такой же или другой механизм действия по сравнению с первым терапевтическим средством. Например, комбинации лекарственных средств могут применяться там, где два или более лекарственных средства для введения действуют различными способами и в разных фазах клеточного цикла, и/или где два или более лекарственных средства имеют неперекрывающиеся токсичности или побочные эффекты, и/или где лекарственные средства, которые объединяются друг с другом, имеют продемонстрированную эффективность в лечении конкретного болезненного состояния, обнаруженного у пациента.
В одном варианте осуществления предлагается способ лечения рака, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли; и введение одного или нескольких дополнительных противораковых средств.
Фраза "дополнительное противораковое средство" относится к лекарственному средству, выбранному из одного или более нижеследующих: алкилирующих веществ (включая хлорметины, алкилсуль-фонаты, нитрозомочевины, производные этиленимина и триазены); антиангиогенных (включая ингибиторы матриксных металлопротеиназ); антиметаболитов (включая ингибиторы аденозиндезаминазы, антагонистов фолиевой кислоты, пуриновые аналоги и пиримидиновые аналоги); антибиотиков или антител (включая моноклональные антитела, антитела CTLA-4, антрациклины); ингибиторов ароматазы; модификаторов клеточного цикла; ферментов; ингибиторов фарнезил-трансферазы; гормональных и антигормональных средств и стероидов (включая синтетические аналоги, глюкокортикоиды, эстрогены/антиэстрогены [например, SERMs], андрогены/антиандрогены, прогестины, агонистов рецептора прогестерона и агонистов и антагонистов лютеинизирующего гормона [LHRH]); инсулиноподобного фактора роста (ЮР)/модуляторов системы инсулин-подобного рецептора фактора роста (IGFR) (включая ингибиторы IGFR1); ингибиторов сигнальной системы интегрина; ингибиторов киназы (включая мульти-ингибиторы киназы и/или ингибиторы киназы Src или Src/abl, ингибиторы циклин-зависимой киназы [CDK], panHer, антитела Her-1 и Her-2, ингибиторы VEGF, в том числе анти-VEGF антитела, ингибиторы EGFR, ингибиторы митоген-активированного протеина [MAP], ингибиторы МЕТ, ингибиторы МЕК, ингибиторы киназы Aurora, ингибиторы PDGF и другие ингибиторы тирозинкиназы или ингибиторы серин/треонин киназы), веществ, дезинтегрирующих микротрубочки, таких как эктеинасцидины или их аналоги и производные; веществ, стабилизирующих микротрубочки, таких как таксаны и природные эпотилоны и их синтетические и полусинтетические аналоги; веществ, дестабилизирующих связывание микротрубочек (в том числе алкалоиды барвинка розового); ингибиторов топоизомеразы, ингибиторов пренил-протеиновой трансферазы; координационных комплексов платины, ингибиторов передачи сигнала и других веществ, используемых в качестве противораковых и цитотоксических средств, таких как модификаторы биологического ответа, факторы роста и иммунные модуляторы.
Соответственно, соединения по настоящему изобретению могут быть введены в сочетании с другими противораковыми терапиями, которые применяются при лечении рака или других пролиферативных заболеваний. Настоящее изобретение далее включает применение по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли для изготовления лекарственных средств для лечения рака, и/или оно включает способ упаковки соединения формулы (I) вместе с инструкциями, согласно которым соединение может быть использовано в комбинации с другими противораковыми или цитоток-сическими средствами для лечения рака. Настоящее изобретение дополнительно содержит комбинации, по меньшей мере, одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли; и по меньшей мере одного дополнительного средства в форме набора, например, когда они упакованы вместе или помещены в отдельные упаковки так, что должны быть проданы вместе в виде набора, или когда они упакованы так, чтобы изготовить их смесь.
В одном варианте осуществления изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли; введение дазатиниба; и необязательно одного или более дополнительных противораковых средств.
В одном варианте осуществления изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли; введение паклитаксела; и, необязательно, одного или более дополнительных противораковых средств.
В одном варианте осуществления изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли; введение тамоксифена; и, необязательно, одного или более дополнительных противораковых средств.
В одном варианте осуществления изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли; введение глюкокортикоида; и, необязательно, одного или более
дополнительных противораковых средств. Примером подходящего глюкокортикоида является дексаме-тазон.
В одном варианте осуществления изобретение относится к способу лечения рака, включающему введение млекопитающему, нуждающемуся в этом по меньшей мере одного соединения формулы (I) и/или по меньшей мере одной его соли; введение карбоплатина; и, необязательно, одного или более дополнительных противораковых средств.
Соединения по настоящему изобретению могут быть изготовлены или совместно введены с другими терапевтическими средствами, которые выбираются для обеспечения их конкретной применимости в связи с возможностью возникновения побочных эффектов, связанных с вышеупомянутыми условиями. Например, соединения по настоящему изобретению могут быть изготовлены вместе со средствами, предупреждающими тошноту, повышенную чувствительность и раздражение желудка, такими как противо-рвотные и H1 и Н2 антигистаминные средства.
В одном варианте осуществления изобретения фармацевтические композиции относятся по меньшей мере к одному соединению формулы (I) и/или по меньшей мере к одной его соли; к одному или более дополнительному средству, выбранному из ингибира киназы (низкомолекулярной молекулы, полипептида и антитела), иммунодепрессанта, противоракового средства, противовирусного средства, противовоспалительного средства, противогрибкового средства, антибиотика или антисосудистого гиперпро-лиферативного соединения; и к любому фармацевтически приемлемому носителю, вспомогательному средству или связующему.
Приведенные выше другие терапевтические средства при использовании в комбинации с соединениями по настоящему изобретению, могут быть использованы, например, в таких количествах, как указано в Physicians' Desk Reference (PDR), или в количествах, определенных иным образом любым специалистом в данной области техники. В способах по настоящему изобретению такое другое терапевтическое средство(а) может вводиться до, одновременно или после введения соединений по изобретению.
Конкретный уровень доз и частота дозирования для любого конкретного субъекта, однако, может быть изменена и обычно зависит от множества факторов, включая, но не ограничиваясь этим, например, биологическую доступность конкретного соединения формулы (I) в водимой форме, метаболическую стабильность и продолжительность действия конкретного соединения формулы (I), вид, массу тела, общее состояние здоровья, пол, диету субъекта, способ и время введения, скорость экскреции, комбинацию лекарственных средств и серьезность конкретного состояния. Например, может быть оптимальной суточная доза от около 0,001 до 100 мг/кг массы тела, предпочтительно, от около 0,005 до около 50 мг/кг массы тела и, наиболее предпочтительно, от около 0,01 до 10 мг/кг массы тела. Суточная доза может быть введена в режиме от одной до четырех доз в сутки.
Ведение может быть непрерывным, то есть каждый день, или периодическим. Термины "прерывистое" или "дробное", используемые здесь, означают, остановки и начало введения либо с регулярными, либо с нерегулярными интервалами. Например, прерывистое введение включает введение от одного до шести дней в неделю; введение циклами (например, ежедневное введение в течение от двух до восьми последовательных недель с последующим периодом отдыха, исключающим какое-либо введение на срок до одной недели); или введение через день.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одну его соль вводят непрерывно пациенту, нуждающемуся в этом, один или несколько раз в сутки. Например, терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) вводят пациенту, нуждающемуся в этом, один или несколько раз в сутки в течение нескольких последовательных суток.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одну его соль вводят с перерывами пациенту, нуждающемуся в этом, один или несколько раз в сутки. Например, терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) вводят пациенту, нуждающемуся в этом, один или несколько раз в сутки в соответствии с режимом прерывистого введения.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одну его соль вводят пациенту, нуждающемуся в этом, один или несколько раз в сутки в течение нескольких последовательных суток с последующим перерывом в одни или более суток без какого-либо введения. Предпочтительно вводится терапевтически эффективное количество соединения формулы (I). Примеры непрерывного дозирования лекарственного средства с перерывами представляют собой циклы: 7 дней лечения, затем 7 дней без лечения; 14 дней лечения, затем 7 дней без лечения; и 7 дней лечения, затем 14 дней без лечения. Цикл лечение/без лечения может быть повторен несколько раз, столько, сколько потребуется для лечения пациента. В одном варианте осуществления изобретения по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одну его соль вводят пациенту, нуждающемуся в этом, в соответствии с прерывистым режимом дозирования. Прерывистые режимы дозирования представляют собой повторяющиеся режимы, включающие сутки, в которые пациенту вводится соединение формулы (I), и сутки, в которые пациенту не вводится соединение формулы (I).
Примерами прерывистых схем введения являются: дозирование четыре дня в неделю в течение трех непрерывных недель, сопровождаемое одной неделей без дозирования, и повторение после четырех недельного интервала; дозирование пять дней в неделю в течение двух непрерывных недель, сопровождае
мое одной неделей без дозирования, и повторение после трех недельного интервала; и дозирование четыре дня в неделю в течение одной недели, сопровождаемое двумя неделями без дозирования, и повторение после трехнедельного интервала. Предпочтительно вводится терапевтически эффективное количество соединения формулы (I).
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль вводится в одни сутки, сопровождается 6 сутками отдыха и цикл повторяется согласно недельному режиму.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль вводится в одни сутки, сопровождается 6 сутками отдыха, и этот цикл повторяется согласно недельному режиму в течение от 1 до 4 недель и затем сопровождается одной неделей дозирования или отдыха. Например, соединение формулы (1) вводится в одни сутки, сопровождается 6 сутками отдыха в течение трех недель и затем сопровождается одной неделей отдыха. Этот четырехнедельный цикл может быть повторен один или несколько раз.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль вводится в одни сутки, затем 6 суток отдыха и повторение согласно недельному режиму в течение от 1 до 4 недель и затем сопровождается одной неделей дозирования или отдыхом. Например, соединение формулы (I) вводится в одни сутки, сопровождается 6 днями отдыха в течение трех недель и затем сопровождается одной неделей отдыха. Этот цикл из четырех недель может быть повторен один или несколько раз.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль вводится в течение двух последовательных суток, сопровождается 5 сутками отдыха и повторяется согласно недельному режиму.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль вводится в течение трех последовательных суток, сопровождается четырьмя сутками отдыха и цикл повторяется согласно недельному режиму.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или, по меньшей мере одна его соль вводится в одни сутки, сопровождается от 10 до 13 сутками отдыха.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль вводится один раз каждый день (QD). Этот вариант осуществления изобретения включает пероральное введение один раз в сутки.
В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль вводится два раза каждый день (BID). Этот вариант осуществления изобретения включает пероральное введение два раза в сутки. В одном варианте осуществления по меньшей мере одно соединение формулы (I) и/или по меньшей мере одна его соль вводится в разные дни поочередно: один день введения сопровождается одним днем отдыха. Этот двухдневный цикл может быть повторен один или несколько раз.
Способы получения
Соединения по настоящему изобретению могут быть получены несколькими способами, хорошо известными специалисту в области органического синтеза. Соединения по настоящему изобретению могут быть синтезированы с использованием методик, описанных ниже, вместе со способами синтеза, известными в области синтетической органической химии, или их вариантов, как понятно специалистам в данной области техники. Предпочтительные методики включает, но не ограничиваются ими, те, которые описаны ниже. Все противопоставленные материалы, приведенные здесь, включены в настоящий документ во всей своей полноте посредством ссылки.
Соединения по настоящему изобретению могут быть получены с использованием реакций и методик, описанных в данном разделе. Реакции проводятся в растворителях, подходящих для используемых реагентов и материалов и пригодных для осуществления преобразования. Кроме того, в описании способов синтеза, описанных ниже, следует понимать, что все предлагаемые реакционные условия, в том числе выбор растворителя, реакционной атмосферы, температуры реакции, продолжительности эксперимента, и разработка методики, выбираются так, чтобы данная реакции выполнялась в стандартных условиях, которые должны быть легко определены специалистом в данной области техники. Специалисту в области органического синтеза будет понятно, что функциональные группы, присутствующие на различных участках молекулы должны быть совместимы с реагентами и предполагаемыми реакциями. Такие ограничения заместителей, которые совместимы с условиями реакции, будут очевидны для специалиста в данной области техники и, следовательно, должны быть использованы альтернативные методики. Для этого иногда потребуется решение изменить порядок стадий синтеза или выбрать одну конкретную схему процесса вместо другой для того, чтобы получить целевое соединение по изобретению. Кроме того, следует признать, что другим важным фактором в планировании любого способы синтеза в этой области является разумный выбор защитной группы, используемой для защиты реакционноспособных функциональных групп, присутствующих в соединениях по настоящему изобретению. Авторитетное сообщение, описывающее многие альтернативы для опытного практикующего специалиста, представляет Greene et al. (Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley and Sons (1999)).
Соединения формулы (I) могут быть получены путем ссылки на методики, показанные на следующих схемах. Как показано на схемах, конечный продукт представляет собой соединение, имеющее ту же самую структурную формулу, как формула (I). Следует понимать, что любое соединение формулы (1) может быть получено согласно схемам путем надлежащего выбора реагентов с соответствующим замещением. Растворители, температуры, давления и другие условия реакции могут быть легко выбраны обычным специалистом в данной области. Исходные материалы являются коммерчески доступными или могут быть легко получены обычным специалистом в данной области. Составляющие компоненты соединений являются такими, как определено здесь или в другом месте в описании.
Синтез соединений формулы (1) может быть осуществлен с использованием методик, представленных на схемах 1-7.
Схема 1
Получение бензодиазепинона (iv) может быть осуществлено многими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, как показано на схеме 1 соответствующим образом замещенный 2-аминобензофенон (i) (например, из Walsh, D.A., Synthesis, 677 (1980); и ссылок, цитированных здесь, или другими способами, известными специалистам в данной области техники) может быть соединен с защищенным производным глицина (ii) (PG = защитная группа, например, PG = CBz см. Kat-ritzky, A.R. et al., Org. Chem., 55:2206-2214 (1990)), обработан реагентом, таким как аммиак, и подвергнут циклизации с получением бензодиазепинона (iii) в соответствии с методикой, описанной в литературе (например, Sherrill, R.G. et al., J. Org. Chem., 60:730 (1995); или другими способами, известными специалистам в данной области техники). Полученная рацемическая смесь может быть разделена (используя методики, известные специалисту в данной области техники) с получением раздельных энантиомеров или использована как рацемат. Кроме того, если R3 представляет собой Н, (iii) может быть, например, обработан реагентом, таким как Mel, и основанием, таким как К2СО3, в растворителе, таком как DMF, чтобы получить R3 метил.
Стадия 2. Снятие защиты (iii) может быть осуществлено несколькими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, в случае PG = Cbz, соединение (iii) может быть обработано реагентом, таким как HBr, в растворителе, таком как АсОН. Соединение (iv) может быть использовано как рацемат. В качестве альтернативы соединение (iv) может быть подвергнуто энантиомерному разделению, используя стандартные методики (например, препаративную хиральную хроматографию).
Схема 2
Соединение (xii) на схеме 2 может быть получено посредством последовательного синтеза, представленного на схеме 2.
Стадия 1. Кислота (v) может быть превращена в соединение (vii) многими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, обработка кислоты (v) реагентом, таким как оксалил хлорид, в растворителе, таком как DCM, дает хлорангидрид (vi). Соединение (vi) может быть обработано оксазолидиноном (а) в стандартных условиях с получением соединения (vii) (Evans, D.A. et al., J. Am. Chem Soc, 112:4011 (1990)).
Стадия 2. Вторая стадия на схеме 2 осуществляется посредством обработки соединения (vii) основанием, таким как бис(триметилсилил)амид натрия или диизопропиламид лития, в растворителе, таком как THF, при низкой температуре, такой как -78°С, в инертной атмосфере. Полученный энолят (vii) обрабатывается реагентом, таким как трет-бутилбромацетат, для получения соединения (viii, Ry = t-бутил).
Стадия 3. Преобразование соединения (viii) в (ix) может осуществляться посредством обработки соединения (viii) пероксидом водорода и гидроксидом лития при подходящей температуре с использованием смеси растворителей, такой как THF/вода.
Стадия 4. Соединение (ix) может быть преобразовано в смесь соединения (х) и соединения (xi) посредством образования энолята (ix) с основанием, таким как LDA, в растворителе, таком как THF, при низкой температуре, такой как -78°С, в инертной атмосфере и дополнительной обработки реагентом (R2-LG), имеющим соответствующую уходящую группу (например, LG = трифлат). Полученная смесь диа-стереомеров (x/xi) может быть затем использована в последующих стадиях синтеза.
Стадия 5. В качестве альтернативы смесь (x/xi) может быть подвергнута эпимеризации, например, посредством обработки LDA и диэтилалюминий хлоридом с последующим быстрым охлаждением метанолом или уксусной кислотой для обогащения целевым диастереомером. Полученная диастереомерно обогащенная смесь соединения (x/xi) может быть затем использована в последующих стадиях синтеза, или эта смесь диастереоизомеров может быть разделена, если необходимо, с использованием подходящих условий, таких как препаративная ВЭЖХ, препаративная хиральная ВЭЖХ или хроматография с силикагелем, и полученный чистый целевой диастереоизомер (xi) использован в последующих стадиях.
Стадия 6. В качестве альтернативы смесь диастереомерных кислот (х) и (xi) может быть защищена посредством обработки, например, бромистым бензилом в присутствии основания, такого как K2CO3, в растворителе, таком как DMF. Полученная смесь диастереоизомеров может быть разделена, если необходимо, с использованием подходящих условий, таких как препаративная ВЭЖХ, препаративная хи-ральная ВЭЖХ или хроматография с силикагелем, и полученное чистое целевое диастереоизомерное соединение (xii) использовано на следующей стадии.
Стадия 7. Эта последняя стадия схемы 2 представляет собой стадию снятия защиты и может быть осуществлена несколькими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, в случае Rw = бензил в соединении (xii) обработкой в условиях гидрирования с использованием катализатора, такого как палладий на угле, в растворителе, таком как МеОН, в атмосфере водорода можно получить соединение (xi), которое может быть использовано в последующем.
В качестве альтернативы соединение (xi) может быть получено согласно последовательности стадий, представленных на схеме 3.
Стадия 1. Первая стадия схемы 3 осуществляется посредством преобразования соединения (xiii) в сложный эфир (xv) с использованием одного из многих способов, известных специалисту в данной области техники, такого как обработка замещенным ацетимидатом, таким как соединение (xiv), в присутствии реагента, такого как эфират трехфтористого бора, при подходящей температуре в растворителе, таком как THF.
Стадия 2. Кислота (v) может быть преобразована в соединение (vi) многими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, обработка кислоты (v) реагентом, таким как оксалил хлорид в растворителе, таком как DCM, дает хлорангидрид (vi). Соединение (vi) может быть обработано оксазолидиноном (а) в стандартных условиях с получением соединения (vii) (Evans, D.A. et al, J. Am. Chem Soc, 112:4011 (1990)).
Стадия 3. Соединение (vii) может быть преобразовано в смесь диастереомеров (xvi) многими способами (Baran, P. et al., J. Am. Chem. Soc, 130(34): 11546 (2008)). Например, соединение (xv) обрабатывается основанием, таким как LDA, в растворителе, таком как толуол, при низкой температуре, такой как -78°С, в инертной атмосфере, такой как N2. Полученная смесь добавляется к раствору соединения (vii), обрабатывается хлоридом лития и основанием, таким как LDA, в растворителе, таком как толуол, в инертной атмосфере, такой как N2. К полученной смеси энолятов соединений (xv) и (vii) добавляется бис(2-этилгексаноилокси) медь при низкой температуре, такой как -78°С, в инертной атмосфере, такой как N2, и смесь нагревается до комнатной температуры, чтобы обеспечить соединение (xvi).
Стадия 4. Преобразование соединения (xvi) в смесь соединения (х) и соединения (xi) может быть осуществлено посредством обработки ее пероксидом водорода и гидроксидом лития при подходящей температуре с использованием смеси растворителей, такой как THF/вода. Полученная смесь диастерео-меров затем может быть использована в последующих стадиях синтеза. Если необходимо, полученная смесь диастереомеров может быть разделена на этой точке посредством хроматографии с силикагелем или препаративной ВЭЖХ.
Стадия 5. В качестве альтернативы смесь (x/xi) может быть подвергнута эпимеризации, например, посредством обработки LDA и диэтилалюминий хлоридом с последующим резким охлаждением метанолом или уксусной кислотой для обогащения целевым диастереомером. Полученная диастереомерно обогащенная смесь соединения затем может быть использована на следующих стадиях синтеза, или смесь диастереоизомеров может быть разделена, если необходимо, используя подходящие условия, такие как
препаративная ВЭЖХ, препаративная хиральная ВЭЖХ или хроматография силикагелем, и полученный чистый целевой диастереоизомер (xi) использован на следующих стадиях.
Стадия 6. В качестве альтернативы смесь диастереомерных кислот (х) и (xi) может быть защищена посредством обработки, например, бромистым бензилом в присутствии основания, такого как K2CO3 в растворителе, таком как DMF. Полученная смесь диастереоизомеров может быть разделена, если желательно, с использованием подходящих условий, таких как препаративная ВЭЖХ, препаративная хираль-ная ВЭЖХ или хроматография с силикагелем, и полученное чистое целевое диастереоизомерное соединение (xii) использовано на следующих стадиях.
Стадия 7. Эта последняя стадия на схеме 3 представляет собой стадию снятия защиты и может быть осуществлена несколькими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, в случае Rw = бензил в соединении (xii) обработкой в условиях гидрирования с использованием катализатора, такого как палладий на угле, в растворителе, таком как МеОН, в атмосфере водорода получают соединение (xi), которое может быть в последующем использовано, например, на стадии 1 схемы 4.
Схема 4
Стадия 1. Соединения структуры (iv) могут быть объединены либо с чистым диастереомерным соединением (xi), либо с диастереомерной смесью соединений (x/xi) в присутствии связующего реагента, такого как TBTU, и основания, такого как TEA, в растворителе, таком как DMF, чтобы обеспечить соединение (xiii) в виде любого диастереомерно чистого соединения или в виде смеси диастереоизомеров, соответственно, в зависимости от энантиомерной и/или диастереомерной чистоты объединяющихся партнеров. Эта смесь может быть использована в следующих стадиях или, если необходимо, может быть очищена с использованием подходящей методики разделения, такой как препаративная хиральная хроматография, чтобы обеспечить диастереомерно чистые соединения.
Стадия 2. Обработка соединения (xiii) кислотой, такой как TFA, при подходящей температуре, такой как 0°С, в растворителе, таком как DCM, обеспечивает соединение (xiv) в виде любого диастерео-мерно чистого соединения или в виде смеси диастереоизомеров. Эта смесь может быть использована как таковая в следующей стадии или, если необходимо, может быть очищена с использованием подходящей методики разделения, такой как препаративная хиральная хроматография, чтобы обеспечить диастерео-мерно чистые соединения.
Стадия 3. Преобразование соединения (xiv) до соединения (xv, R4 = Н) может быть осуществлено посредством объединения соединения (xiv) с подходящим источником амина, таким как аммоний хлорид или аммиак, карбодиимид, таким как EDC, НОВТ, и основанием, таким как TEA в растворителе, таком как DMF. Если необходимо, диастереомерная смесь может быть разделена с использованием подходящей методики разделения, такой как препаративная хиральная хроматография.
Дополнительные соединения по настоящему изобретению могут быть получены из соединения xv (R4 = Н), согласно схеме 5.
Схема 5
Стадия 1. Подходящая функционализированная карбоновая кислота (PG-L-СО^Н) или соль карбо-новой кислоты (xvi) может быть обработана алкилирующим веществом, таким как хлорметиловый хлор-сульфат, в присутствии основания, такого как Na2CO3, и четвертичной аммонийной соли, такой как тет-рабутил аммония сульфат, в двухфазной смеси воды и подходящего органического растворителя, такого как DCM, при низкой температуре, такой как 0°С, с получением соединения xvii.
Стадия 2. Обработка соединения xv соединением xvii в подходящем растворителе, таком как DCM, в присутствии основания, такого как К2СО3, позволяет получить соединение xviii.
Стадия 3. Снятие защиты с соединения xviii может быть осуществлено несколькими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, если PG = tBu или Boc, соединение xviii может быть обработано реагентом, таким как трифторуксусная кислота, в растворителе, таком как DCM, с получением соединения xix (-СН2ОС(О^ = Rx).
В качестве альтернативы соединения xix могут быть получены как описано в схеме 6.
Схема 6
Стадия 1. Для получения соединений xix могут быть использованы различные методики, известные специалисту в данной области. Например, как показано на схеме 6, подходящим образом замещенный бензодиазепин (xv) может быть обработан галоалкильным тиоэфиром, таким как (хлорме-тил)(метил)сульфан в присутствии основания, такого как карбонат цезия, в подходящем растворителе, таком как ^^диметилформамид (DMF), с получением соединений формулы хх.
Стадия 2. Обработка соединения хх реагентом, таким как сульфурил хлорид, в присутствии амин-ной соли, такой как триэтиламмония хлорид, в апротонном растворителе, таком как дихлорметан (DCM), может быть использована, чтобы осуществить трансформацию до соединений формулы xxi (Гал = хлор).
Стадия 3. Соединения формулы xviii затем могут быть получены из соединения xxi посредством обработки подходящим образом замещенной карбоновой кислотой или солью карбоновой кислоты в присутствии основания (если начинается с карбоновой кислоты), такого как карбонат калия, в апротон-ном растворителе, таком как ацетонитрил или DMF.
Стадия 4. Снятие защиты с соединения xviii может быть осуществлено несколькими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, если PG = tBu или Boc, соединение xviii может быть обработано реагентом, таким как трифторуксусная кислота, в растворителе, таком как DCM, с получением соединения xix (-СН2ОС(О^ = Rx).
Получение пролекарств исходного соединения xv на основе сульфенамида представлено на схеме 7.
Схема 7
Стадия 1. Смесь серебряной соли, такой как нитрат серебра, и дисульфида, такого как трет-бутил 2,2'-дисульфандиилбис(этан-2,1-диил)дикарбамат, в спиртовом растворителе, таком как МеОН, может быть обработан соединением i в присутствии основания, такого как триэтиламин, с получением соединения xxii.
Стадия 2. Снятие защиты с соединения xxii может быть осуществлено несколькими способами, известными специалисту в данной области техники. Например, если PG = tBu или Boc, соединение xxii может быть обработано реагентом, таким как трифторуксусная кислота, в растворителе, таком как DCM, с получением соединения xxiii (-S-M = Ry).
Примеры
Далее изобретение характеризуется следующими примерами. Следует понимать, что эти примеры даны только в качестве иллюстрации. Из вышеизложенного и примеров специалист в данной области может установить существенные характеристики настоящего изобретения и без отступления от сущности и объема изобретения сможет осуществить различные изменения и модификации, чтобы адаптировать изобретение к различным условиям и способам использования. Вследствие этого, изобретение не ограничивается иллюстративными примерами, изложенными ниже, но скорее определяется прилагаемой формулой изобретения.
Сокращения
ACN - ацетонитрил; АсОН - уксусная кислота; AlMe3 - триметилалюминий; aq - водный; Bn - бензил;
Boc - трет-бутоксикарбонил;
Вос2О - ди-трет-бутил дикарбонат;
CBz - бензилоксикарбонил;
DCC - 1,3-дициклогексилкарбодиимид;
DCM - дихлорметан;
DIEA - диизопропилэтиламин;
DMAP - диметиламинопиридин;
DME - 1,2-диметоксиэтан;
DMF - диметилформамид;
DMSO - диметилсульфоксид;
Pd(dppf)2Cl2 - [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий (II);
EDC - 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид;
Et2AlCl - диэтилалюминийхлорид;
Et3N - триэтиламин;
Et2O - диэтиловый эфир;
EtOH - этанол;
EtOAc - этилацетат;
equiv. - эквивалентность(и);
g - грамм(ы);
h или hr - час(ы);
HOBt - гидроксибензотриазол;
ВЭЖХ - жидкостная хроматография высокого давления; iPrOH - изопропиловый спирт; KOtBu - трет-бутоксид калия;
LCMS -жидкостная хроматография - масс-спектроскопия;
LDA - диизопропиламид лития;
LiHMDS - бис(триметилсилил)амид лития;
Me - метил;
Mel - метил иодид;
МеОН - метанол;
min - минута(ы);
мл - миллилитр(ы);
ммоль - миллимоль;
МТВЕ - метил трет-бутиловый эфир;
NaHMDS - бис(триметилсилил)амид натрия;
n-BuLi - n-бутил литий;
NH4OAc - ацетат аммония;
NMP - N-метилпирролидинон;
Pd(OAc)2 - ацетат палладия;
RT или Rt - время удерживания;
sat - насыщенный;
t-Bu - третичный бутил;
t-BuLi - трет-бутиллитий;
tBuOH - третичный бутиловый спирт;
tBuOMe - трет-бутилметиловый эфир;
TBTU - О-(Ш-бензотриазол-1-ил)-^ N, ^'№-тетраметилмочевина тетрафторборат;
TEA - триэтиламин;
TFA - трифторуксусная кислота;
Tf2O - трифторметилсульфоновый ангидрид;
THF - тетрагидрофуран.
Промежуточное соединение S-1. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)капроновая кислота
(S-1)
Промежуточное соединение S-1A. 3,3,3-Трифторпропилтрифторметансульфонат
К холодному (-25°С) перемешанному раствору 2,6-лутидина (18.38 мл, 158 ммоль) в DCM (120 мл) добавляли Tf2O (24.88 мл, 147 ммоль) на протяжении 3 мин, и смесь перемешивали в течение 5 мин. К реакционной смеси добавляли 3,3,3-трифторпропан-1-ол (12 г, 105 ммоль) на протяжении 3 мин. Через 2 ч реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали до половины ее объема, затем очищали путем загрузки непосредственно на колонку с силикагелем (330 г ISCO), и продукт элюировали DCM с получением Промежуточного соединения S-1A (13.74 г, 53%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 4.71 (2 Н, t, J= 6.15 Гц), 2.49-2.86 (2 Н, m).
Промежуточное соединение S-1B. (48)-4-Бензил-3-(5,5,5-трифторпентаноил)-1,3-оксазолидин-2-он
о о
(S-1B)
К перемешиваемому раствору 5,5,5-трифторпентановой кислоты (14.76 г, 95 ммоль) и DMF (0.146 мл) в DCM (50 мл) медленно добавляли оксалилхлорид (8.27 мл, 95 ммоль). Через 2 ч смесь концентрировали досуха. В отдельную колбу загружали ^)-4-бензилоксазолидин-2-он (16.75 г, 95 ммоль) в THF (100 мл) и затем охлаждали до -78°С. К раствору медленно добавляли n-BuLi (2.5 М, 37.8 мл, 95 ммоль) на протяжении 10 мин, перемешивали в течение 10 мин и затем медленно добавляли раствор полученного выше хлорангидрида в THF (50 мл) на протяжении 5 мин. Смесь перемешивали в течение 30 мин и затем нагревали до комнатной температуры. Реакцию быстро охлаждали насыщенным водным NH4Cl. Далее, к смеси затем добавляли 10% водного LiCl и смесь экстрагировали Et2O. Органический слой промывали насыщенным водным NaHCO3, затем рассолом, высушивали (MgSO4), фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали с помощью SiO2 хроматографии (ISCO, колонка 330 г, элюируя с градиентом от 100% гексана до 100% EtoAc) с получением промежуточного соединения S-1B; (25.25 г, 85%): 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 7.32-7.39 (2 Н, m), 7.30 (1 Н, d, J= 7.05 Гц), 7.18-7.25 (2 Н, m), 4.64-4.74 (1 Н, m), 4.17-4.27 (2 Н, m), 3.31 (1 Н, dd, J= 13.35, 3.27 Гц), 3.00-3.11 (2Н, m), 2.79 (1 Н, dd, J= 13.35, 9.57 Гц), 2.16-2.28 (2 Н, m), 1.93-2.04 (2 Н, m).
Промежуточное соединение S-1C. трет-Бутил (3R)-3-(((4S)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазолидин-3
ил)карбонил)-6,6,6-трифторгексаноат
К холодному (-78°С), перемешанному раствору промежуточного соединения S-1B (3.03 г, 9.61 ммоль) в THF (20 мл) добавляли NaHMDS (1.0 М в THF) (10.6 мл, 10.60 ммоль) в атмосфере азота. Через 2 ч добавляли трет-бутил 2-бромацетат (5.62 г, 28.8 ммоль) аккуратно с помощью шприца при -78°С и продолжали перемешивание при этой же температуре. Через 6 ч реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь разделяли между насыщенным NH4Cl и EtOAc. Органическую фазу разделяли и водную фазу экстрагировали EtOAc (3х). Объединенные органические вещества промывали рассолом, высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 5 до 100% растворитель А/В = гексаны/EtOAc, REDISEP(r) SiO2 120 г). Концентрированием соответствующих фракций получали Промежуточное соединение S-1C (2.79 г, 67.6%) в виде бесцветного вязкого масла: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 7.34 (2 Н, d, J= 7.30 Гц), 7.24-7.32 (3 Н, m), 4.62-4.75 (1 Н, m, J= 10.17, 6.89, 3.43, 3.43 Гц), 4.15-4.25 (3 Н, m), 3.35 (1 Н, dd, J= 13.60, 3.27 Гц), 2.84 (1 Н, dd, J= 16.62, 9.57 Гц), 2.75 (1 Н, dd, J= 13.35, 10.07 Гц), 2.47 (1 Н, dd, J= 16.62, 4.78 Гц), 2.11 -2.23(2Н, m), 1.90-2.02 (1 Н, m), 1.72-1.84 (1 Н, m), 1.44 (9 H,s).
Промежуточное соединение S-1D. (2R)-2-(2-трет-Бутокси-2-оксоэтил)-5,5,5-трифторпентановая ки-
слота
К охлажденному (0°С) перемешанному раствору Промежуточного соединения S-1C (2.17 г, 5.05 ммоль) в THF (50 мл) и воды (15 мл) добавляли раствор LiOH (0.242 г, 10.11 ммоль) и Н2О2 (2.065 мл, 20.21 ммоль) в Н2О (2 мл). Через 10 мин реакционную смесь удаляли из ледяной бани, перемешивали в течение 1 ч, и затем охлаждали до 0°С. К реакционной смеси добавляли насыщенный водный NaHCO3 (25 мл) и насыщенный водный Na2SO3 (25 мл), смесь перемешивали в течение 10 мин, и затем частично концентрировали. Полученную в результате смесь экстрагировали DCM (2х), охлаждали льдом и подкисляли концентрированной HCl до рН 3. Смесь насыщали твердым NaCl, экстрагировали EtOAc (3х), и затем высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали до бесцветного масла с получением Промежуточного соединения S-1D, 1.2514 г, 92%): 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 2.83-2.95 (1 Н, m), 2.62-2.74 (1 Н, m), 2.45 (1 Н, dd, J= 16.62, 5.79 Гц), 2.15-2.27 (2 Н, m), 1.88-2.00 (1 Н, m), 1.75-1.88 (1 Н, m), 1.45 (9 Н, s).
Промежуточное соединение S-1. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-три-фторпропил)капроновая кислота.
Промежуточное соединение S-1E. (2R,3R)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-три-фторпропил)капроновая кислота
К холодному (-78°С) перемешанному раствору Промежуточного соединения S-1D (5 г, 18.50 ммоль) в THF (60 мл) медленно добавляли LDA (22.2 мл, 44.4 ммоль, 2.0 М) на протяжении 7 мин. После перемешивания в течение 2 ч к реакционной смеси добавляли Промежуточное соединение S-1A (6.38 г, 25.9 ммоль) на протяжении 3 мин. Через 60 мин реакционную смесь нагревали до -25°С (лед/МеОН/сухой лед) и перемешивали в течение дополнительных 60 мин, и в это время добавляли насыщенный водный NH4Cl. Отделенную водную фазу подкисляли 1н. HCl до рН 3 и затем экстрагировали Et2O. Объединенные органические слои промывали рассолом (2х), высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением 1:4 (I1:I1E) смеси (как определено по данным 1Н ЯМР) Промежуточного соединения S-1 и Промежуточного соединения S-1E (6.00 г, 89%) в виде бледно-желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 ppm 2.81 (1 Н, ddd, J = 10.17, 6.32, 3.85 Гц), 2.63-2.76 (1 Н, m), 2.022.33 (4 Н, m), 1.86-1.99 (2 Н, m), 1.68-1.85 (2 Н, m), 1.47 (9 Н, s).
К холодному (-78°С) перемешанному раствору смеси промежуточного соединения S-1 и промежуточного соединения S-1E (5.97 г, 16.30 ммоль) в THF (91 мл) добавляли LDA (19 мл, 38.0 ммоль, 2.0 М в THF/гексан/этилбензол) по каплям с помощью шприца на протяжении 10 мин (внутренняя температура
не превышала -65°С, датчик J-KEM(r) в реакционном растворе). Смесь перемешивали в течение 15 мин и затем нагревали до комнатной температуры (24°С водяная баня), перемешивали в течение 15 мин и затем охлаждали до -78°С в течение 15 мин. К реакционной смеси добавляли Et2AlCl (41 мл, 41.0 ммоль, 1М в гексане) с помощью шприца (внутренняя температура не превышала -55°С), и смесь перемешивали в течение 10 мин, и затем нагревали до комнатной температуры (24°С баня) в течение 15 мин и затем охлаждали до -78°С в течение 15 мин. В это время в 1000 мл круглодонную колбу загружали МеОН (145 мл) и предварительно охлаждали до -78°С. Энергично перемешивая, реакционную смесь переносили в МеОН через канюлю на протяжении 5 мин. Колбу удаляли из бани, добавляли лед с последующим медленным добавлением 1н. HCl (147 мл, 147 ммоль). Наблюдалось выделение газа во время добавления HCl. Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры, в течение этого времени выделение газа уменьшалось.
Реакционную смесь разбавляли EtOAc (750 мл), насыщали NaCl, и органическую фазу разделяли, промывали раствором фторида калия (8.52 г, 147 ммоль) и 1н. HCl (41 мл, 41.0 ммоль) в воде (291 мл), рассолом (100 мл), и затем высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под вакуумом. Анализ 1Н ЯМР показал, что продукт представлял собой смесь 9:1 Промежуточного соединения S-1 и Промежуточного соединения S-1E. Обогащенную смесь Промежуточного соединения S-1 и Промежуточного соединения S-1E (6.12 г, выход > 99%) получали в виде темно-янтарного твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 2.64-2.76 (2 Н, m), 2.04-2.35 (4 Н, m), 1.88-2.00 (2 Н, m), 1.71-1.83 (2Н, m), 1.48 (9 H,s).
Альтернативный способ получения промежуточного соединения S-1.
Промежуточное соединение S-1F. (2R,3S)-1-Бензил 4-трет-бутил 2,3-бис(3,3,3-трифторпропил) сук-
цинат
К перемешанному раствору 9:1 обогащенной смеси промежуточного соединения S-1 и промежуточного соединения S-1E (5.98 г, 16.33 ммоль) в DMF (63 мл) добавляли карбонат калия (4.06 г, 29.4 ммоль) и бензилбромид (2.9 мл, 24.38 ммоль), смесь затем перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (1000 мл), промывали 10% LiCl (3x200 мл), рассолом (200 мл), высушивали (Na2SO4), фильтровали, концентрировали, и затем высушивали под вакуумом. Остаток очищали с помощью SiO2 хроматографии, используя градиент толуолтексан. Диасте-реомерно чистое Промежуточное соединение S-1F (4.81 г, 65%) получали в виде бесцветного твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.32-7.43 (m, 5H), 5.19 (d, J= 12.10 Гц, 1H), 5.15 (d, J= 12.10 Гц, 1H), 2.71 (dt, J= 3.52, 9.20 Гц, 1H), 2.61 (dt, J = 3.63, 9.63 Гц, 1H), 1.96-2.21 (m, 4Н), 1.69-1.96 (m, 3Н), 1.56-1.67 (m, 1H), 1.45 (s, 9H).
Промежуточное соединение S-1. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)капроновая кислота
К раствору промежуточного соединения S-1F (4.81 г, 10.54 ммоль) в МеОН (100 мл) добавляли 10% палладий на угле (влажный, тип Degussa, 568.0 мг, 0.534 ммоль) в колбе под давлением Н2. Сосуд продували N2 (4х), затем продували Н2 (2х), и, в заключение, создавали давление 50 psi (фунтов на квадратный дюйм) и встряхивали на протяжении ночи. Реакционный сосуд разгерметизировали и продували азотом. Смесь фильтровали через CELITE(r), промывали МеОН и затем концентрировали и высушивали под вакуумом. Промежуточное соединение S-1 (3.81 г, выход 99%) получали в виде бесцветного твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 2.62-2.79 (m, 2H), 2.02-2.40 (m, 4Н), 1.87-2.00 (m, 2Н), 1.671.84 (m, 2Н), 1.48 (s, 9H).
Альтернативный способ получения промежуточного соединения S-1.
Промежуточное соединение S-1 в виде смеси с промежуточным соединением S-1E получали анало-
Промежуточное соединение S-1. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)капроновая кислота
гичным способом, что и выше, из промежуточного соединения S-1D с получением смеси 1:2.2 промежуточного соединения S-1 и промежуточного соединения S-1E (8.60 г, 23.48 ммоль), которое обогащали, применяя LDA (2.0 М раствор в THF, этилбензоле и гептане, 28.2 мл, 56.4 ммоль) и диэтилалюминий-хлорид (1.0 М раствор в гексане, 59 мл, 59.0 ммоль) в THF (91 мл). После обработки как описано выше, было обнаружено, что полученный в результате остаток представляет собой смесь 13.2:1 (по данным 1Н ЯМР) промежуточного соединения S-1 и промежуточного соединения S-1E, которую обрабатывали следующим образом: сырое вещество растворяли в МТВЕ (43 мл). к реакционной смеси медленно добавляли гексаны (26 мл), в то же время поддерживая температуру ниже 30°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. Далее медленно загружали трет-бутиламин (2.7 мл, 1.1 экв.) на протяжении 20 минут, в то же время поддерживая температуру ниже 30°С. Было обнаружено, что этот процесс добавления является экзотермическим. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при температуре ниже 30°С и затем фильтровали. Твердое вещество промывали 5:3 МТВЕ:гексаном (80 мл), и фильтрат концентрировали и откладывали в сторону. Отфильтрованное твердое вещество растворяли в дихлорметане (300 мл), промывали 1н. HCl (100 мл), и органический слой промывали рассолом (100 мл х 2), и затем концентрировали под пониженным давлением при температуре ниже 45°С с получением промежуточного соединения S-1 (5.46 г, 64%).
Второй альтернативный способ получения промежуточного соединения S-1.
Промежуточное соединение S-1G. трет-Бутил 5,5,5-трифторпентаноат
О МеМе
F3C^^4-> AM^ (S-1G)
К перемешанному раствору 5,5,5-трифторпентановой кислоты (5 г, 32.0 ммоль) в THF (30 мл) и гек-сане (30 мл) при 0°С добавляли mpem-бутил 2,2,2-трихлорацетимидат (11.46 мл, 64.1 ммоль). Смесь перемешивали в течение 15 мин при 0°С. Добавляли эфират трехфтористого бора (0.406 мл, 3.20 ммоль), и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры на протяжении ночи. К прозрачной реакционной смеси добавляли твердый NaHCO3 (5 г) и перемешивали в течение 30 мин. Смесь фильтровали через MgSO4 и промывали гексанами (200 мл). Раствор оставляли на 45 мин, и полученное в результате твердое вещество снова удаляли фильтрованием через тот же MgSO4 фильтр, промывали гекса-нами (100 мл) и концентрировали под пониженным давлением без нагревания. Объем уменьшали до около 30 мл, фильтровали через чистую пористую воронку, промывали гексаном (5 мл), и затем концентрировали под пониженным давлением без нагревания. Полученное в результате чистое масло фильтровали через 0.45 мкм найлоновый мембранный фильтровальный диск с получением Промежуточного соединения S-1G (6.6 г, 31.4 ммоль, выход 98%) в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 1.38 (s, 9 Н) 1.74-1.83 (m, 2 Н) 2.00-2.13 (m, 2 Н) 2.24 (t, J= 7.28 Гц, 2 H).
Промежуточное соединение S-1H. ^)-4-(Пропан-2-ил)-3-(5,5,5-трифторпентаноил)-1,3-оксазо-лидин-2-он
о о 0AN^^CF3
НзС (S-1H)
К перемешанному раствору 5,5,5-трифторпентановой кислоты (5.04 г, 32.3 ммоль) в DCM (50 мл) и DMF (3 капли) добавляли оксалилхлорид (3.4 мл, 38.8 ммоль) по каплям на протяжении 5 мин. Раствор перемешивали, пока не прекратилось выделение пузырьков. Реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением с получением бледно-желтого масла. В отдельную колбу, заполненную раствором ^)-4-(1гоопан-2-ил)-1,3-оксазолидин-2-она (4.18 г, 32.4 ммоль) в THF (100 мл) при -78°С добавляли n-BuLi (2.5 М в гексане) (13.0 мл, 32.5 ммоль) по каплям с помощью шприца на протяжении 5 мин. После перемешивания в течение 10 мин, вышеуказанный хлорангидрид, растворенный в THF (20 мл), добавляли через канюлю на протяжении 15 мин. Реакционную смесь нагревали до 0°С и оставляли нагреваться до комнатной температуры, так как баня была нагрета, и перемешивали на протяжении ночи. К реакционной смеси добавляли насыщенный NH4Cl, и смесь экстрагировали EtOAc (2х). Объединенные органические вещества промывали рассолом, высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 5 до 60% растворителя А/В = гексаны/EtOAc, REDISEP(r) SiO2 120 г). Концентрированием соответствующих фракций получали Промежуточное соединение S-1H (7.39 г, 86%) в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 4.44 (1 Н, dt, J= 8.31, 3.53 Гц), 4.30 (1 Н, t, J= 8.69 Гц), 4.23 (1 Н, dd, J = 9.06, 3.02 Гц), 2.98-3.08 (2 Н, m), 2.32-2.44 (1 Н, m, J= 13.91, 7.02, 7.02, 4.03 Гц), 2.132.25 (2 Н, m), 1.88-2.00 (2 Н, m), 0.93 (3 Н, d, J= 7.05 Гц), 0.88 (3 Н, d, J= 6.80 Гц).
Промежуточное соединение S-1I. (2S,3R)-трет-Бутил 6,6,6-трифтор-3-(^)-4-изопропил-2-оксоокса-золидин-3-карбонил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноати.
Промежуточное соединение S-1J. (2R,3R)-трет-Бутил 6,6,6-трифтор-3-(^)-4-изопропил-2-оксоокса-
К холодному (-78°С) перемешанному раствору диизопропиламина (5.3 мл, 37.2 ммоль) в THF (59 мл) в атмосфере азота добавляли n-BuLi (2.5 М в гексане) (14.7 мл, 36.8 ммоль). Смесь затем нагревали до 0°С с получением 0.5 М раствора LDA. В отдельный сосуд загружали промежуточное соединение S-1H (2.45 г, 9.17 ммоль). Вещество дважды подвергали азеотропной перегонке с бензолом (в роторном испарителе RotoVap входное отверстие для воздуха было оснащено входом для азота, чтобы полностью исключить влажность), и затем добавляли толуол (15.3 мл). Этот раствор добавляли в колбу, содержащую сухой хлорид лития (1.96 г, 46.2 ммоль). К полученной в результате смеси, охлажденной до -78°С, добавляли раствор LDA (21.0 мл, 10.5 ммоль), и смесь перемешивали при -78°С в течение 10 мин, затем нагревали до 0°С в течение 10 мин, и затем охлаждали до -78°С. В отдельном реакционном сосуде, содержащем Промежуточное соединение S-1G (3.41 г, 16.07 ммоль), также дважды подвергали азеотропной перегонке с бензолом, добавляли толуол (15.3 мл), охлаждали до -78°С и добавляли LDA (37.0 мл, 18.5 ммоль). Полученный в результате раствор перемешивали при -78°С в течение 25 мин. В это же время енолят, полученный из сложного эфира, переносили через канюлю в раствор енолята оксазолидинона и перемешивали при -78°С в течение дополнительных 5 мин, в это время мембрану удаляли, и твердый порошкообразный бис(2-этилгексаноилокси)меди (9.02 г, 25.8 ммоль) быстро добавляли в реакционный сосуд и мембрану возвращали на место. Сосуд немедленно удаляли из охлаждающей бани и погружали в теплую водяную баню (40°С) с быстрым взбалтыванием и с одновременным изменением цвета от начального бирюзового до коричневого. Реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин, затем выливали в 5% водный NH4OH (360 мл) и экстрагировали EtOAc (2х). Объединенные органические вещества промывали рассолом, высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 0 до 60% растворителя А/В = гексаны/EtOAc, REDISEP(r) SiO2 120 г). Концентрированием соответствующих фракций получали смесь Промежуточного соединения S-1I и промежуточного соединения S-1J (2.87 г, 66%) в виде бледно-желтого вязкого масла. 1Н ЯМР показал, что продукт представлял собой 1.6:1 смесь диастере-омеров S-1I:S-1J как определено по данным интегрирования мультиплетов при 2.74 и 2.84 ppm: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 4.43-4.54 (2 Н, m), 4.23-4.35 (5 Н, m), 4.01 (1 Н, ddd, J= 9.54, 6.27, 3.51 Гц), 2.84 (1 Н, ddd, J= 9.41, 7.28, 3.64 Гц), 2.74 (1 Н, ddd, J= 10.29, 6.27, 4.02 Гц), 2.37-2.48 (2 Н, m, J= 10.38, 6.98, 6.98, 3.51, 3.51 Гц), 2.20-2.37 (3 Н, m), 1.92-2.20 (8 Н, m), 1.64-1.91 (5 Н, m), 1.47 (18 Н, s), 0.88-0.98 (12 Н,
m).
Промежуточное соединение S-1. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)капроновая кислота.
Промежуточное соединение S-1E. (2R,3R)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-три-фторпропил)капроновая кислота
(S-1) ^г3 (S-1E)
К охлажденному (0°С) перемешиваемому раствору промежуточного соединения S-1I и промежуточного соединения S-1J (4.54 г, 9.51 ммоль) в THF (140 мл) и воде (42 мл) последовательно добавляли пероксид водорода (30% в воде) (10.3 г, 91 ммоль) и LiOH (685.3 мг, 28.6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч. В это же время реакционный сосуд удаляли из охлаждающей бани и затем перемешивали в течение 1.5 ч. К реакционной смеси добавляли насыщенный NaHCO3 (45 мл) и насыщенный Na2SO3 (15 мл), и затем смесь частично концентрировали под пониженным давлением. Полученный в результате сырой раствор экстрагировали DCM (3х). Водную фазу подкисляли до рН~1-2 1н. HCl, экстрагировали DCM (3х) и затем EtOAc (1х). Объединенные органические вещества промывали рассолом, высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением смеси промежуточных соединений S-1 и S-1E (3.00 г, 86%) в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 2.76-2.84 (1 Н, m, диастереомер 2), 2.64-2.76 (3 Н, m), 2.04-2.35 (8 Н, m), 1.88-2.00 (4 Н, m), 1.71-1.83 (4 Н, m), 1.48 (9 Н, s, диастереомер 1), 1.46 (9 Н, s, диастереомер 2); 1Н ЯМР показал 1.7:1 смесь S-1E:S-1F путем интеграции пиков для трет-бутил групп.
Промежуточное соединение S-1. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)капроновая кислота.
К холодному (-78°С) перемешанному раствору диизопропиламина (1.7 мл, 11.93 ммоль) в THF (19 мл) в атмосфере азота добавляли n-BuLi (2.5 М в гексанах) (4.8 мл, 12.00 ммоль). Смесь перемешивали в течение 5 мин и затем нагревали до 0°С. В отдельном сосуде к холодному (-78°С) перемешанному раствору смеси Промежуточных соединений S-1 и S-1E (1.99 г, 5.43 ммоль) в THF (18 мл) медленно добавляли раствор LDA, полученный выше, через канюлю на протяжении 25 мин. Смесь перемешивали в течение 15 мин, затем нагревали до комнатной температуры (помещали в 24°С водяную баню) в течение 15 мин, и затем снова охлаждали до -78°С в течение 15 мин. К реакционной смеси добавляли Et2AlCl (1Мв гексане) (11.4 мл, 11.40 ммоль) с помощью шприца. Смесь перемешивали в течение 10 мин, нагревали до комнатной температуры в течение 15 мин и затем снова охлаждали до -78°С в течение 15 мин. Быстро добавляли метанол (25 мл), энергично взбалтывали, пока нагревали до комнатной температуры, и затем концентрировали до ~1/4 первоначального объема. Смесь растворяли в EtOAc и промывали 1н. HCl (50 мл) и льдом (75 г). Водную фазу разделяли и экстрагировали EtOAc (2х). Объединенные органические вещества промывали смесью KF (2.85 г в 75 мл воды) и 1н. HCl (13 мл) [полученный в результате раствор имел рН 3-4], затем рассолом, высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением 9:1 (S-1:S-1E) обогащенной диастереомерной смеси (как определено по данным 1Н ЯМР) Промежуточного соединения S-1 и промежуточного соединения S-1E (2.13 г, > 99%) в виде бледно-желтого вязкого масла: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 ppm 2.64-2.76 (2 Н, m), 2.04-2.35 (4 Н,
m), 1.88-2.00 (2 Н, m), 1.71-1.83 (2 Н, m), 1.48 (9 Н, s).
Промежуточное соединение S-2. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(3-фторпропил) капроновая кислота
Промежуточное соединение S-2. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-7,7,7-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)гептановая кислота.
Промежуточное соединение S-2A. (2R,3R)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-7,7,7-трифтор-2-(3,3,3-три-фторпропил)гептановая кислота
К холодному (-78°С) перемешиваемому раствору Промежуточного соединения S-1D (1.72 г, 6.36 ммоль) в THF (30 мл) медленно добавляли LDA (7.32 мл, 14.6 ммоль) на протяжении 7 мин. После перемешивания в течение 1 ч, к реакционной смеси добавляли 4,4,4-трифторбутилтрифторметансульфонат (2.11 г, 8.11 ммоль) на протяжении 2 мин. Через 15 мин реакционную смесь нагревали до -25°С (лед/МеОН/сухой лед) в течение 1 ч, и затем охлаждали до -78°С. Через 80 мин реакцию быстро охлаждали насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл). Реакционную смесь далее разбавляли рассолом, и раствор доводили до значения рН 3 с помощью 1н. HCl. Водный слой экстрагировали простым эфиром. Объединенные органические вещества промывали рассолом, высушивали над безводным сульфатом магния и концентрировали под пониженным давлением с получением смеси Промежуточных соединений S-2 и S-2A (2.29 г, 95%) в виде бесцветного масла. 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 2.83-2.75 (m, 1H), 2.64 (ddd, J = 9.9, 6.7, 3.6 Гц, 1H), 2.32-2.03 (m, 5Н), 1.98-1.70 (m, 3Н), 1.69-1.52 (m, 3Н), 1.50-1.42 (m, 9Н). 1Н ЯМР показал смесь 1:4.5 (S-2:S-2A) диастереомеров путем интегрирования пиков для t-Bu групп.
Промежуточное соединение S-2. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-7,7,7-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)гептановая кислота.
Промежуточное соединение S-2A. (2R,3R)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-7,7,7-трифтор-2-(3,3,3-три-фторпропил)гептановая кислота
и|"з (S-2) ^ (S-2A)
Смесь промежуточного соединения S-2 и промежуточного соединения S-2A (2.29 г, 6.02 ммоль) растворяли в THF (38 мл) с получением бесцветного раствора, который охлаждали до -78°С. Затем к реакционной смеси медленно добавляли LDA (7.23 мл, 14.5 ммоль) (2.0 М в гептане/THF/этилбензоле) на протяжении 3 мин. После перемешивания в течение 15 мин, реакционную смесь помещали в водяную баню комнатной температуры. Через 15 мин реакционную смесь снова помещали в баню при -78°С и затем медленно добавляли диэтилалюминий хлорид (14.5 мл, 14.5 ммоль) (1Мв гексане) на протяжении 5 мин. Реакционную смесь перемешивали при -78°С. Через 15 мин реакционную смесь помещали в водяную баню комнатной температуры в течение 10 мин и затем снова охлаждали до -78°С. Через 15 мин реакцию быстро охлаждали МеОН (30.0 мл, 741 ммоль), удаляли из бани при -78°С и концентрировали. К реакционной смеси добавляли лед и HCl (60.8 мл, 60.8 ммоль), и полученную в результате смесь экстрагировали EtOAc (2х200 мл). Органический слой промывали фторидом калия (3.50 г, 60.3 ммоль) в 55 мл Н2О и 17.0 мл 1н. HCl. Органические вещества высушивали над безводным сульфатом магния и концентрировали под пониженным давлением с получением обогащенной смеси промежуточного соединения S-2 и промежуточного соединения S-2A (2.25 г, выход 98%) в виде светло-желтого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 2.83-2.75 (m, 1H), 2.64 (ddd, J= 9.9, 6.7, 3.6 Гц, 1H), 2.32-2.03 (m, 5Н), 1.98-1.70 (m, 3Н), 1.69-1.52 (m, 3Н), 1.50-1.42 (m, 9Н). 1Н ЯМР показал соотношение 9:1 в пользу целевого диасте-реомера промежуточного соединения S-2.
Промежуточное соединение S-2B. (2R,3S)-1-Бензил 4-трет-бутил 2,3-бис(4,4,4-трифторбутил) сук-цинат
^CF3 CF3 (S-2B)
К перемешанной смеси 9:1 промежуточного соединения S-2 и промежуточного соединения S-2A (2.24 г, 5.89 ммоль) и карбоната калия (1.60 г, 11.58 ммоль) в DMF (30 мл) добавляли бензилбромид (1.20 мл, 10.1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (400 мл) и промывали 10% раствором LiCl (3х100 мл), рассолом (50 мл), и затем высушивали над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали досуха под вакуумом. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash, от 0% до 100% растворителя А/В = гексан/EtOAc, REDISEP(r) SiO2 220 г, детектирование при 254 нм и контроль при 220 нм). Концентрированием соответствующих фракций получали промежуточное соединение S-2B (1.59 г, 57.5%). ВЭЖХ: RT = 3.863 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6х50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.40-7.34 (m, 5Н), 5.17 (d, J= 1.8 Гц, 2Н), 2.73-2.64 (m, 1H), 2.55 (td, J= 10.0, 3.9 Гц, 1H), 2.16-1.82 (m, 5Н), 1.79-1.57 (m, 3Н), 1.53-1.49 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.37-1.24 (m, 1H).
Промежуточное соединение S-2. (2R,3S)-3-(трет-Бутоксикарбонил)-6,6,6-трифтор-2-(4,4,4-трифтор-бутил)капроновая кислота
(S-2)
К перемешанному раствору Промежуточного соединения S-2B (1.59 г, 3.37 ммоль) в МеОН (10 мл) и EtOAc (10 мл) в атмосфере азота добавляли 10% Pd/C (510 мг). Атмосферу заменяли водородом, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2.5 ч. Палладиевый катализатор отфильтровывали через 4 мкм поликарбонатную пленку и прополаскивали МеОН. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением промежуточного соединения S-2 (1.28 г, 99%). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 2.76-2.67 (m, 1H), 2.65-2.56 (m, 1H), 2.33-2.21 (m, 1H), 2.17-2.08 (m, 3Н), 1.93 (dtd, J= 14.5, 9.9, 5.2 Гц, 1H), 1.84-1.74 (m, 2Н), 1.70-1.52 (m, 3Н), 1.48 (s,9H).
Промежуточное соединение A-l. (2-Амино-3-метилфенил)(3-фторфенил)метанон
Промежуточное соединение А-1А. 2-Амино-К-метокси-Ы,3-диметилбензамид
N-^ NH2 Ме-О' О (А-1А)
В 1 л круглодонную колбу добавляли 2-амино-3-метилбензойную кислоту (11.2 г, 74.1 ммоль) и ^О-диметилгидроксиламин гидрохлорид (14.45 г, 148 ммоль) в DCM (500 мл) с получением бледно-коричневой суспензии. Реакционную смесь обрабатывали Et3N (35 мл), НОВТ (11.35 г, 74.1 ммоль) и EDC (14.20 г, 74.1 ммоль) и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Смесь затем промывали 10% LiCl, и затем подкисляли 1н. HCl. Органический слой последовательно промывали 10% LiCl и водным NaHCO3. Органический слой обесцвечивали углеродом, фильтровали, и фильтрат высушивали над MgSO4. Смесь фильтровали и концентрировали с получением 13.22 г (выход 92%) Промежуточного соединения А-1Л. MS(ES): m/z = 195.1 [М+Н+]; ВЭЖХ: RT = 1.118 мин. (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5 4.6 х 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); 1Н ЯМР (500 МГц, хлороформ-d) 8 7.22 (dd, J= 7.8, 0.8 Гц, 1H), 7.12-7.06 (m, 1H), 6.63 (t, J= 7.5 Гц, 1H), 4.63 (br. s., 2H), 3.61 (s, 3Н), 3.34 (s, 3Н), 2.17 (s, 3Н).
Промежуточное соединение A-l. (2-Амино-3-метилфенил)(3-фторфенил)метанон
Me-/ \
\=/ (A-l)
В 500 мл круглодонной колбе охлаждали раствор 1-фтор-3-иодобензола (13.61 мл, 116 ммоль) в THF (120 мл) на бане при -78°С. Раствор n-BuLi, (2.5 М в гексане, 46.3 мл, 116 ммоль) добавляли по каплям на протяжении 10 мин. Раствор перемешивали при -78°С в течение 30 минут и затем обрабатывали раствором Промежуточного соединения А-1А (6.43 г, 33.1 ммоль) в THF (30 мл). Через 1.5 ч реакционную смесь добавляли к смеси льда и 1н. HCl (149 мл, 149 ммоль), и реакцию колбу прополаскивали THF (5 мл) и объединяли с водной смесью. Полученную в результате смесь разбавляли 10% водным LiCl и рН доводили до значения 4 1н. NaOH. Смесь затем экстрагировали Et2O, промывали рассолом, высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Полученный в результате остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (220 г ISCO), элюируя с градиентом от 10% EtOAc/гексан до 30% EtOAc/гексан, с получением Промежуточного соединения А-1 (7.11 г, выход 94%) в виде масла. MS(ES): m/z = 230.1 [М+Н+]; ВЭЖХ: RT = 2.820 мин, чистота = 99%. (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5 4.6 х 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм).
Соединения, приведенные ниже в табл. 1 (Промежуточные соединения от А-2 до А-9) получали в соответствии с общим способом синтеза, описанным для промежуточного соединения А-1, с использованием соответствующего анилина и металлоорганического реагента.
Таблица 1
Промежуточное соединение
Структура
Наименование
вэжхат
(мин)
ЖХ/МС [М+Н]*
А-2
/"ме Me
(2-амино-З-хлорфенил X 3,4-диметилфенил)метанон
U51
260
А-3
(2-амино-З-хлорфенил )(3,5 -диметилфенил)метанон
1.161
260
А-4
(2-амино-З-метилфенилХЗ-хлорфенил)метанон
2.61"
246.2
Промежуточное соединение
Структура
Наименование
вэжхят
(мин)
ЖХ'МС [М+Н]+
А-5
CF3
(2-амино-З -(трифтор метил) фенил)(т-толил)метанон
2.71-
280.3
А-6
(2-амино-З-циклопропоксифенил) (фенил)метанон
3.32J
254
А-7
X. ,NH2
CF3
(2-амино-3-метилфенил)(3-(трифторметил)фенил) метанон
1.09*
279.9
А-8
(2-амино-3-метилфенил)(4-фторфенил )метанон
2.085
230.09
А-9
X. ,NH2
(2-амино-З-метилфенил) (фенил)метанон
0.981
212
1 H2O/CH3CN с TFA, ВЕН С18 1.75 мкм, 2.1x50 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм.
2 Н2О/МеОН с 0.1% TFA, Luna C18 3 мкм, 4.6x30 мм, градиент = 3.5 мин, длина волны = 220 нм.
3 МеОН/Н2О/0.1% TFA, Waters Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, 1 мл/мин, градиент 4 мин, длина волны = 254 нм.
4 H2O/CH3CN с 0.05% TFA, ВЕН С18 1.7 мкм, 2.1x50 мм, градиент (2%-98%) = 1 мин, длина волны = 220 нм.
5 Н2О/МеОН с 0.1% TFA, PHENOMENEX(r) 2.5 мкм, 2.0x30 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм.
Промежуточное соединение А-10. (2-Амино-3-изопропилфенил)(3-хлорфенил)метанон
О CI H2N К
Ме\_f \
Me (А-10)
2-Изопропиланилин (3 мл, 21.19 ммоль) добавляли по каплям к раствору трихлорборана (1 М в ди-хлорметане) (23.31 мл, 23.31 ммоль) и дихлорэтана (50 мл) при 0°С, и смесь перемешивали в течение 10 мин. Далее добавляли 3-хлорбензонитрил (5.83 г, 42.4 ммоль), с последующим добавлением алюминий трихлорида (3.11 г, 23.31 ммоль), и смесь перемешивали при 0°С в течение 25 мин. Ледяную баню удаляли, и смесь нагревали до 75 °С на протяжении ночи. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры. Далее добавляли 6н. HCl (60 мл, 10 экв.), и смесь нагревали до 75°С. Через 4 ч добавляли 12н. HCl (10 мл) и продолжали нагревание на протяжении ночи при 75°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры, переносили в колбу Эрленмейера, разбавляли этилацетатом, охлаждали до 0°С и осторожно доводили до значения рН 10 с помощью 50% водного NaOH. Полученную в результате смесь экстрагировали этилацетатом (4Х). Экстракты этилацетата объединяли, промывали рассолом, высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением прозрачного янтарного масла. Масло суспендировали в минимальном количестве гептана и очищали на ISCO совместимой хромато-графической системе (картридж 220 г диоксида кремния, элюируя 0-20% этилацетата/гептана, 150 мл/мин) с получением Промежуточного соединения А-10 (2.85 г, 10.41 ммоль, выход 49.1%). ВЭЖХ RT = 3.876 мин от 10/90 до 90/10 (МеОН/Н2О/0.1% TFA, Waters Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, 1 мл/мин, градиент 4 мин, длина волны = 254 нм); MS(ES): m/z = 274 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.63 (t, J = 1.7 Гц, 1H), 7.55-7.48 (m, 2H), 7.44-7.29 (m, 3Н), 6.65 (t, J = 7.7 Гц, 1H), 6.43 (br. s., 2Н), 3.112.87 (m, 1H), 1.34 (d, J = 6.8 Гц, 6Н).
Соединения, приведенные ниже в табл. 2 (промежуточные соединения от А-11 до А-14) получали в соответствии с общим способом синтеза, описанным для промежуточного соединения А-10, с использованием соответствующего анилина и арилнитрила, полученного с помощью способов, известных специалистам в данной области.
Таблица 2
Промежуточное соединение
Структура
Наименование
вэжхыт
(мин)1
ЖХ/МС [М+Н]+
А-11
(2-амино-3-этилфенил)(3-хлорфенил)метанон
3.65
260
А-12
(2-амино-3-этилфенил)(т-толил)метанон
3.59
240
А-13
(2-амино-З-
юопропилфенил)(т-
толил)метанон
3.68
254
А-14
Me Me
(2-амино-З-изопропилфенил) (фенил )метанон
3.45
240
МеОН/Н2О/0.1% TFA, Waters Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, 1 мл/мин, градиент 4 мин, длина волны = 254 нм.
Промежуточное соединение А-15. (2-Амино-3-циклопропоксифенил)(т-толил)метанон
V i II II
(А-15)
Промежуточное соединение А-15А. З-Гидрокси-2-нитробензойная кислота
НО NO,
'= < .о
ОН (А-15А)
В 250 мл колбу добавляли 3-хлор-2-нитробензойную кислоту (10 г, 49.6 ммоль) и раствор гидро-ксида калия (40 г, 727 ммоль) в воде (70 мл). Густую кашицу нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 12 ч. Раствор охлаждали на льду и осторожно доводили до рН 3 с помощью концентрированной HCl. Водную смесь экстрагировали EtOAc (3х). Органические слои объединяли, промывали рассолом, высушивали сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Смесь сырого продукта растворяли в дихлорметане, и полученный в результате желтый осадок фильтровали с получением Промежуточного соединения А-15А (6 г, 32.8 ммоль, выход 66.0%). ВЭЖХ: RT = 0.85 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1 x 30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 206 [M+Na]+; 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.56-7.35 (m, 1H), 7.23 (dd, J = 7.9, 1.5 Гц, 1H).
Промежуточное соединение А-15В. Метил З-гидрокси-2-нитробензоат
ОМе (А-15В)
В 100 мл колбу, содержащую МеОН (60 мл), при 0°С медленно добавляли тионилхлорид (9.96 мл, 137 ммоль). Раствор перемешивали при 0°С в течение 30 мин, и затем добавляли Промежуточное соединение А-15А (10 г, 54.6 ммоль). Реакционный раствор нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали досуха с получением ярко-желтого остатка. Смесь сырого продукта очищали с помощью хроматографии на силикагеле (от 0% до 100% EtOAc/гептана на протяжении 15 мин, колонка 80 г) с получением целевого продукта (10.2 г, выход 95%). ВЭЖХ: RT = 1.75 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 220 [M+Na]+; 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.60 (dd, J = 8.5, 7.4 Гц, 1H), 7.33-7.22 (m, 5H), 7.10 (dd, J = 7.5, 1.3 Гц, 1H), 3.96 (s, 3Н).
Промежуточное соединение A-15C. Метил 2-нитро-З-(винилокси)бензоат
(А-15С)
Смесь ацетата меди (II) (11.98 г, 65.9 ммоль) и дихлорметана (80 мл) перемешивали при комнатной
температуре в течение 10 минут перед добавлением 2,4,6-тривинил-1,3,5,2,4,6-триоксатриборинан соединения: пиридина (1:1) (10.63 г, 44.2 ммоль, 0.67 экв.), Промежуточного соединения А-15В (13 г, 65.9 ммоль), пиридина (26.7 мл, 330 ммоль) и молекулярных сит (1 г). Полученную в результате темно-синюю смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 дней, с открыванием реакционной смеси для воздуха. Реакционную смесь фильтровали через слой CELITE(r) и промывали дихлорметаном. Фильтрат промывали 3 М водным ацетатом аммония (2x), водой, рассолом, и затем высушивали и концентрировали под вакуумом. Смесь сырого продукта очищали с помощью хроматографии на силикагеле (от 0% до 20% EtOAC/DCM на протяжении 15 мин, колонка 120 г) с получением промежуточного соединения А-15С (7.42 г, 33.2 ммоль, выход 50.4%). ВЭЖХ: RT = 2.487 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1 x 30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 246 [M+Na]+; 1H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.77 (dd, J = 7.8, 1.2 Гц, 1H), 7.55 (t, J = 8.1 Гц, 1H), 7.38 (dd, J = 8.4, 1.3 Гц, 1H), 6.61 (dd, J = 13.6, 5.9 Гц, 1H), 4.95 (dd, J = 13.6, 2.4 Гц, 1H), 4.69 (dd, J = 5.9, 2.4 Гц, 1H), 3.93 (s, 3Н), 1.56 (s, 1H), 0.03 (s, 1H).
Промежуточное соединение A-15D. Метил З-циклопропокси-2-нитробензоат
Раствор 2,2,2-трихлоруксусной кислоты (16.30 г, 100 ммоль) в дихлорметане (100 мл) медленно добавляли через капельную воронку к раствору диэтилцинка (1 М гексаны, 100 мл, 100 ммоль) при -10°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, и затем добавляли по каплям дии-одометан (8 мл, 100 ммоль) с помощью шприца, и реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения А-15С (7.42 г, 33.2 ммоль) в дихлорметане (20 мл) через капельную воронку. Раствор оставляли нагреваться до комнатной температуры на протяжении ночи. Реакционную смесь затем охлаждали до 0°С и быстро охлаждали 1М HCl. Реакционную смесь переносили в делительную воронку, и водный слой экстрагировали дихлорметаном (3х). Объединенные экстракты промывали насыщенным бикарбонатом натрия, водой и рассолом, высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Смесь сырого продукта очищали с помощью хроматографии на силикагеле (0% EtOAC/гептан на протяжении 15 мин, колонка 220 г) с получением промежуточного соединения A-15D (4.7 г, 19.81 ммоль, выход 60.0%). ВЭЖХ: RT = 2.66 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 260 [M+Na]+; 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.68-7.57 (m, 2Н), 7.57-7.41 (m, 1H), 4.03-3.82 (m, 4Н), 0.940.78 (m, 4Н).
Промежуточное соединение А-15Е. З-Циклопропокси-2-нитробензойная кислота
Раствор Промежуточного соединения A-15D (4.7 г, 19.81 ммоль) в THF (30 мл) и МеОН (30 мл) обрабатывали раствором гидроксида лития (2.88 г, 120 ммоль) в воде (15 мл, 833 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Органические растворители удаляли под пониженным давлением. Полученную в результате водную кашицу разбавляли водой, подкисляли 1М HCl и экстрагировали этилацетатом (3x). Экстракты объединяли и промывали рассолом, высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения А-15Е (4.35 г, 19.8 ммоль, выход 98%). ВЭЖХ: RT = 2.186 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 246 [M+Na]+; 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.76 (dd, J = 7.7, 1.8 Гц, 1H), 7.68-7.46 (m, 2H), 4.02 (tt, J = 6.0, 2.9 Гц, 1H), 1.00-0.52 (m, 4H).
Промежуточное соединение A-15F. 2-Амино-З-циклопропоксибензойная кислота
Смесь промежуточного соединения А-15Е (420 мг, 1.882 ммоль), цинка (1230 мг, 18.82 ммоль) и хлорида аммония (1007 мг, 18.82 ммоль) в этаноле (10 мл) и воде (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и затем реакционную смесь разбавляли водой. Смесь слегка подкисляли и затем экстрагировали DCM (2x ). Объединенные органические вещества высушивали над Na2SO4 и концентрировали с получением Промежуточного соединения A-15F в виде рыжевато-коричневого масла. ВЭЖХ: RT = 1.96 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 194.12 [M+H]+; 1H ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.67-7.43 (m, 1H), 7.23 (dd, J= 7.9, 1.1 Гц, 1H), 6.62 (s, 1H), 3.82 (s, 1H), 0.82-0.63 (m,
4H).
Промежуточное соединение A-15G. 8-Цикло1гоопокси-2-метил-4Н-бензоВД[1,3]оксазин-4-он
О (A-15G)
Раствор Промежуточного соединения A-15F (1 г, 5.18 ммоль) и уксусного ангидрида (4.88 мл, 51.8 ммоль) нагревали до 140°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали под вакуумом, и остаток разбавляли толуолом и концентрировали с получением Промежуточного соединения A-15G. ВЭЖХ: RT = 1.22 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 218.12 [М+Н]+; 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.82 (dd, J= 7.9, 1.3 Гц, 1H), 7.71 (dd, J= 8.1, 1.3 Гц, 1H), 7.55-7.37 (m, 1H), 4.02-3.75 (m, 1H), 2.52 (s, 3Н), 1.08-0.74 (m, 4Н).
Промежуточное соединение A-15H. М-(2-Циклопропокси-6-(3-метилбензоил)фенил)ацетамид
(A-15H)
Раствор Промежуточного соединения A-15G (1 г, 4.60 ммоль) в простом эфире (5 мл) и толуоле (10 мл) охлаждали до -10°С (метанол/лед). Добавляли по каплям раствор m-толилмагния бромида (5.06 мл, 5.06 ммоль) на протяжении 10 мин. После завершения добавления колбу удаляли из ледяной бани, и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч. Раствор затем охлаждали до -10°С и добавляли 40 мл 1н. HCl. Смесь разбавляли этилацетатом (50 мл). Органическую фазу промывали 0.5 М NaOH, затем водой, и затем концентрировали под вакуумом. Остаток использовали как есть в следующей реакции. ВЭЖХ: RT = 2.808 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 310.05 [М+Н]+.
Промежуточное соединение А-15. (2-Амино-3-циклопропоксифенил)(т-толил)метанон
(А-15)
Раствор Промежуточного соединения А-15Н (495 мг, 1.6 ммоль) в этаноле (10 мл) и 6н. HCl (5 мл) нагревали при 90°С в течение 4.5 ч. Реакционную смесь концентрировали, и затем разбавляли 10 мл воды и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические фазы промывали 1 н. раствором гидроксида натрия, высушивали над Na2SO4 и концентрировали под вакуумом. Смесь сырого продукта очищали с помощью хроматографии на силикагеле (от 0 до 100% EtOAc/гептан на протяжении 10 мин, колонка 12 г) с выделением промежуточного соединения А-15 (250 мг, 0.935 ммоль, выход 58.4%) в виде желтого масла. ВЭЖХ: RT = 3.58 мин (Н2О/МеОН с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент
= 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 268.02 [М+Н]+.
1H2O/CH3CN с NH4OAc, PUROSPHER(r) STAR RP-18 3.5 мкм, 4x55 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм.
Соединения, приведенные ниже в табл. 3 (промежуточные соединения от А-16 до А-17) получали в соответствии с общим способом синтеза, описанным для промежуточного соединения А-15, с использованием соответствующего анилина и металлоорганического реагента, полученного с помощью способов, известных специалистам в данной области.
Раствор 3-хлор-2-нитробензойной кислоты (2.5 г, 12.40 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) обрабатывали оксалилхлоридом (1.194 мл, 13.64 ммоль) с последующим добавлением DMF (0.096 мл, 1.240 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После охлаждения до 0°С добавляли 1 М раствор m-толилмагния бромида (24.81 мл, 24.81 ммоль). Через 1 ч добавляли еще порцию m-толилмагния бромида (24.81 мл, 24.81 ммоль). Через 1 ч реакционную смесь разделяли между этилацетатом (200 мл) и 1н. HCl (150 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические фазы высушивали над Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 0 до 100% растворитель А/В = этилацетат/гептан, REDISEP(r) SiO2 120 г) с получением промежуточного соединения А-18А (0.700 г, 21%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 8.04 (dd, J= 8.1, 1.1 Гц, 1H), 7.82 (t, J = 7.9 Гц, 1H), 7.71 (dd, J= 7.7, 1.1 Гц, 1Н), 7.66-7.54 (m, 3Н), 7.52-7.46 (m, 1Н), 2.40 (s, 3Н).
Промежуточное соединение А-18.
Смесь промежуточного соединения А-18А (0.710 г, 2.58 ммоль) в THF (7.5 мл), этаноле (14.75 мл) и воде (3.7 мл) обрабатывали насыщенным водным хлоридом аммония (4 мл) и порошком железа (0.647 г, 11.59 ммоль). Смесь затем нагревали до 100°С с перемешиванием. Через 2 ч реакционную смесь фильтровали через CELITE(r), и фильтрат разделяли между этилацетатом (100 мл) и насыщенным водным NaHCO3 (75 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (1x50 мл). Объединенные органические фазы высушивали Na2SO4, фильтровали и концентрировали. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 0 до 100% растворитель А/В = этилацетат/гептан, REDISEP(r) SiO2 24 г) с получением Промежуточного соединения А-18 (0.417 г, 66%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 7.56 (dd, J= 7.8, 1.4 Гц, 1H), 7.47-7.35 (m, 4H), 7.31 (dd, J= 8.0, 1.4 Гц, 1H), 7.01 (s, 2H), 6.61 (t, J = 7.9 Гц, 1H), 2.39 (s, 3Н).
Промежуточное соединение A-19. (2-Амино-3-метоксифенил)(т-толил)метанон
Промежуточное соединение А-19 получали из 3-метокси-2-нитробензойной кислоты в соответствии с общим способом синтеза, описанным для промежуточного соединения А-18. ВЭЖХ RT = 2.21 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм). [М+Н+] =
246.
В 100 мл круглодонной колбе раствор 7-хлориндолин-2,3-диона (1 г, 5.51 ммоль) в THF (10 мл) охлаждали на бане лед/вода. Добавляли раствор о-толилмагния бромида (2 М, 5.51 мл, 11.01 ммоль), и реакционную смесь удаляли из охлаждающей бани и нагревали до комнатной температуры. Через 1 ч реакционную смесь быстро охлаждали насыщенным водным NH4Cl и экстрагировали EtOAc. Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением Промежуточного соединения А-20А. MS(ES): m/z = 272 [М-Н-]; ВЭЖХ: RT = 2.478 мин (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5 4.6 x 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм).
Промежуточное соединение А-20.
В 250 мл круглодонной колбе раствор ферроцианида калия (5.28 г, 14.33 ммоль), NaHCO3 (1.25 г, 14.88 ммоль) и NaOH (0.22 г, 5.51 ммоль) в воде (45 мл) нагревали до 100°С. Через 30 мин добавляли по каплям раствор промежуточного соединения А-20 А (1.5 г, 5.51 ммоль) в THF (2 мл) на протяжении 5 мин, и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 17 часов и затем охлаждали до комнатной
температуры. Смесь разбавляли насыщенным водным NaHCO3 и экстрагировали EtOAc. Органический слой обрабатывали активированным углем, высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения А-20 (1.208 г, 89%). MS(ES): m/z = 246 [М+Н+]; ВЭЖХ: RT = 3.208 мин (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5 4.6 х 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм). 1Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 7.55 (dd, J= 7.6, 1.5 Гц, 1H), 7.48-7.37 (m, 3Н), 7.33 (d, J= 7.5 Гц, 1H), 7.29 (t, J= 7.5 Гц, 1H), 7.22 (dd, J = 7.6, 1.2 Гц, 1H), 7.05 (dd,J= 8.2, 1.5 Гц, 1H), 6.54 (t, J= 7.9 Гц, 1H), 2.16 (s, 3Н).
Соединения, приведенные ниже в табл. 4 (промежуточные соединения от А-21 до А-22) получали в соответствии с общим способом синтеза, описанным для промежуточного соединения А-20 с использованием соответствующего изатина и металлоорганического реагента.
Таблица 4
Промежуточное
Структура
Наименование
ВЭЖХЯТ
ЖХ/МС
соединение
(мин)
[М+Н]+
А-21
(2-амино-3-хлорфенил)(3-циклопропилфенил)метанон
3.69'
272
А-22
(2-амино-З-
бромфенил)(фенил)метанон
1.S92
330
1 MeOH/H2O/0.1% TFA, Waters Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, 1 мл/мин, градиент 4 мин, длина волны = 254 нм.
2 H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм. Промежуточное соединение А-23. (2-Аминофенил)(т-толил)метанон
В 250 мл круглодонную колбу, заполненную магнием (0.947 г, 39.0 ммоль) и диэтиловым эфиром (50.0 мл) добавляли 2 капли дибромэтана. Реакционную смесь нагревали до 60°С в течение 5 мин и затем удаляли из источника нагрева. Далее медленно добавляли 1-бром-3-метилбензол (5 г, 29.2 ммоль) в ди-этиловом эфире (50 мл) порциями пока не появлялся обратный поток. Остальной бромид добавляли по каплям для поддерживания дефлегмации. После добавления реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч. Далее медленно добавляли 2-аминобензонитрил (1.151 г, 9.74 ммоль) в диэтиловом эфире (50.0 мл) на протяжении 10 мин. Полученную в результате смесь нагревали с обратным холодильником на протяжении ночи. Объем реакционной смеси уменьшали до 1/3 и добавляли, перемешивая, 100 г измельченного льда и 50 мл 6н. HCl. Через 3 ч при комнатной температуре значение рН доводили до рН 8 с помощью 5 н. NaOH, и реакцию разбавляли насыщенным NaHCO3 (50 мл). Две фазы разделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (2x200 мл). Объединенные органические слои высушивали MgSO4, фильтровали и концентрировали. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 0 до 70% растворитель А/В = этилацетат/гептан, RE-DISEP(r) SiO2 80 г) с получением Промежуточного соединения А-23 (1.84 г, 89%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 7.44-7.23 (m, 6H), 7.08 (br. s., 2H), 6.86 (d, J= 8.1 Гц, 1H), 6.50 (t, J= 7.5 Гц, 1H), 2.38 (s, 3Н).
Соединения, приведенные ниже в табл. 5 (промежуточные соединения от А-24 до А-27) получали в соответствии с общим способом синтеза, описанным для промежуточного соединения А-23, используя соответствующие арилгалид и арилонитрил.
Таблица 5
Промежуточное соединение
Структура
Наименование
ВЭЖХ RT1 (мин)
ЖХ/МС |М+Н]*
А-24
(2-аминофенил)(р-толил) метанон
1.90
212
А-25
МеО
(2-аминофенил)(4-метоксифенил)метанон
1 73
228
А-26
(2-аминофенил)(о-толил) метанон
1.90
212
А-27
OTBDMS
(2-аминофенил)(4-(((/ирт/и-бутилдиметилсилил)окси)мети л) фенил)метанон
2.55
342
1 H2O/CH3CN с TFA, Sunnre C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм. Промежуточное соединение А-28. (2-Амино-3-метоксифенил)(5-(трифторметил)пиридин-2-ил)ме-танон
^3 (А-28)
Промежуточное соединение А-28А. трет-Бутил (2-метокси-6-(5-(трифторметил)пиколиноил)фенил) карбамат
С л-ош
F3C-f ч)-( HN-^ Me ^=N О О-(-Me
Me (А-28А)
К холодному (-23°С) перемешанному раствору трет-бутил 2-метоксифенилкарбамата (443.3 мг, 1.986 ммоль) в простом эфире (5 мл) в атмосфере N2 добавляли t-BuLi (2.6 мл, 4.42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, и затем охлаждали до -78°С. К реакционной смеси добавляли по каплям раствор метил 5-(трифторметил)пиколината (501.3 мг, 2.44 ммоль) в простом эфире (10 мл) через канюлю на протяжении 5 мин. Через 2 ч реакционную смесь нагревали до комнатной температуры, перемешивали в течение дополнительного часа, и затем реакцию быстро охлаждали добавлением воды с энергичным перемешиванием. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, органическую фазу разделяли, промывали насыщенным NaCl, затем высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали до выхода желтого твердого вещества. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 0% до 100% растворитель А/В = гексан/EtOAc, REDISEP(r) SiO2 40 г) с получением Промежуточного соединения А-28А (546.8 мг, выход 69.5%) в виде желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 ppm 8.83-8.88 (1 Н, m), 8.24 (1 Н, d, J= 8.4 Гц), 8.07 (1 Н, dd, J= 8.4, 1.8 Гц), 7.25 (1 Н, d,J= 1.5 Гц), 7.18-7.24 (1 Н, m), 7.09 (1 Н, dd, J= 8.0, 1.7 Гц), 6.95 (1 Н, s), 3.93 (3 Н, s), 1.25 (9H, s).
Промежуточное соединение А-28
К перемешанному раствору промежуточного соединения А-28А (545 мг, 1.375 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли TFA (0.106 мл, 1.375 ммоль). Через 2 ч реакционную смесь разбавляли толуолом (30 мл) и затем концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 0 до 20% растворитель А/В = DCM/MeOH, REDISEP(r) SiO2 40 г, загружали в виде раствора DCM) с получением продукта, Промежуточного соединения А-28 (376.8 мг, выход 93%): 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 ppm 8.94-8.99 (1 Н, m), 8.11 (1 Н, dt, J= 8.1, 1.1 Гц), 7.86 (1 Н, d, J= 8.1 Гц), 7.17 (1 Н, dd,
J= 8.4, 1.1 Гц), 6.89 (1 Н, dd, J= 7.9, 1.1 Гц), 6.55 (1 Н, m, J= 16.1 Гц), 3.92 (3 Н, s).
Промежуточное соединение А-29. (2-Амино-3-метоксифенил)(5-хлорпиридин-2-ил)метанон
Промежуточное соединение А-28А. трет-бутил (2-(5-хлорпиколиноил)-6-метоксифенил)карбамат
К холодному (-23°С) перемешанному раствору трет-бутил 2-метоксифенилкарбамата (548 мг, 2.454 ммоль) в простом эфире (6 мл) в атмосфере N2 добавляли t-BuLi (3.2 мл, 5.44 ммоль). После перемешивания в течение 2.5 ч реакционную смесь охлаждали до -78°С. К реакционной смеси добавляли по каплям раствор этил 5-хлорпиколината (564.5 мг, 3.04 ммоль) в простом эфире (12 мл) через канюлю на протяжении 5 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение 60 мин, и затем нагревали до комнатной температуры. Через 1.5 ч к реакционной смеси добавляли Н2О с энергичным перемешиванием. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, и органическую фазу разделяли, промывали насыщенным NaCl, затем высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали до выхода продукта Промежуточное соединение А-29А (511.5 мг, выход 57.4%) в виде желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 ppm 8.55 (1 Н, dd, J= 2.3, 0.6 Гц), 8.08 (1 Н, dd, J= 8.4, 0.7 Гц), 7.80 (1 Н, dd, J= 8.4, 2.4 Гц), 7.16-7.25 (2 Н, m), 7.06 (1 Н, dd, J= 7.5, 2.2 Гц), 6.90 (1 Н, s), 3.92 (3 Н, s), 1.28 (9 Н, s).
Промежуточное соединение А-29.
К перемешанному раствору промежуточного соединения А-29А (511.5 мг, 1.410 ммоль) в DCM (14 мл) добавляли TFA (14 мл, 182 ммоль). Через 60 мин реакционную смесь концентрировали под вакуумом, повторно растворяли в DCM, промывали насыщенным NaHCO3, высушивали (MgSO4), фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения А-29 (402.1 мг, выход 100%) в виде янтарного твердого вещества: ВЭЖХ RT = 2.763 мин. (Waters Sunfire C18 2.5 мкм 2.1x30 мм, MeOH/ H2O/TFA, градиент 4 мин, длина волны = 254 нм), 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 ppm 8.66 (1 H, dd, J = 2.4, 0.7 Гц), 7.85 (1 H, dd, J = 8.4, 2.4 Гц), 7.75 (1 H, dd, J= 8.4, 0.7 Гц), 7.25 (1 H, dd, J= 8.4, 1.1 Гц), 6.89 (1 H, dd, J=7.7, 1.1 Гц), 6.55 (1 H, dd, J= 8.3, 7.8 Гц), 4.74 (2 H, br. s.), 3.91 (3 H, s). MS(ES): m/z = 263 [M+H+].
Промежуточное соединение В-1. ^)-3-Амино-5-(3-фторфенил)-9-метил-Ш-бензо[е][1,4]диазепин-2(ЗН)-он
^ ^ (В-1)
Промежуточное соединение В-1А. ^)-Бензил (5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-Ш-бензо [е] [ 1,4] диазепин-3 -ил)карбамат
В 1 л круглодонной колбе раствор 2-(Ш-бензоВД[1,2,3]триазол-1-ил)-2-((феноксикарбонил)амино) уксусной кислоты (J. Org. Chem., 55:2206-2214 (1990)) (19.37 г, 62.0 ммоль) в THF (135 мл) охлаждали на бане лед/вода и обрабатывали оксалилхлоридом (5.43 мл, 62.0 ммоль) и 4 каплями DMF. Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч. Далее добавляли раствор Промежуточного соединения А-1 (7.11 г, 31.0 ммоль) в THF (35 мл), и полученный в результате раствор удаляли из бани лед/вода и перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч. Смесь затем обрабатывали раствором аммиака (7М в МеОН) (19.94 мл, 140 ммоль). Через 15 мин добавляли еще порцию аммиака (7М в МеОН) (19.94 мл, 140 ммоль), и полученную в результате смесь герметично закрывали в атмосфере N2 и перемешивали на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь затем концентрировали до ~1/2 объема, затем разбавляли АсОН (63 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь затем концентрировали, и остаток разбавляли 500 мл воды с получением осадка. Добавляли гексан и Et2O, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч до образования оранжевого твердого вещества. Et2O удаляли в потоке азота, и водный слой сливали. Остаток растирали с 40 мл iPrOH и перемешивали при комнатной температуре с получением белого осадка. Твердое вещество фильтровали и промывали iPrOH, затем высушивали на фильтре в потоке азота с получением рацемического Промежуточного соединения В-1А (5.4 г, выход 41.7%). Рацемическое промежуточное соединение В-1А (5.9 г,
14.3 ммоль) разделяли, используя условия хиральной SFC, описанные ниже. Целевой стереоизомер собирали как второй пик в порядке элюирования: аппаратура: Berger SFC MGIII, колонка: CHIRALPAK(r) IC 25x3 см, 5 см; температура колонки: 45°С; подвижная фаза: СО2/МеОН (45/55); скорость потока: 160 мл/мин; детектирование при 220 нм.
После выпаривания растворителя промежуточное соединение В-1А (2.73 г, выход 46%) получали в
виде белого твердого вещества. ВЭЖХ: RT = 3.075 мин. (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5 4.6
x 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм). Хиральная ВЭЖХ RT: 8.661 мин (AD, 60% (EtOH/MeOH)/гептан) > 99% ее. MS(ES): m/z = 418.3 [M+H+]; 1H ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 10.21 (s, 1H), 8.38 (d, J = 8.3 Гц, 1H), 7.57-7.47 (m, 2H), 7.41-7.29 (m, 8H), 7.25-7.17 (m, 2H), 5.10-5.04 (m, 3Н), 2.42
(s, 3Н).
Промежуточное соединение В-1. (S)-3-Амино-5-(3-фторфенил)-9-метил-1H-бензо[е][1,4]диазепин-
2(3Н)-он.
В 100 мл круглодонной колбе раствор промежуточного соединения В-1А (2.73 г, 6.54 ммоль) в уксусной кислоте (12 мл) обрабатывали HBr, 33% в НОАс (10.76 мл, 65.4 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Раствор разбавляли Et2O с получением желтого осадка. Желтое твердое вещество фильтровали и прополаскивали Et2O в атмосфере азота. Твердое вещество переносили в 100 мл круглодонную колбу, и добавляли воду (образовывался белый осадок). Кашицу медленно подщелачивали насыщенным NaHCO3. Полученный в результате клейкий осадок экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали водой, высушивали над MgSO4, и затем фильтровали и концентрировали досуха с получением промежуточного соединения В-1 (1.68 г, выход 91%) в виде белого пенистого твердого вещества. MS(ES): m/z = 284.2 [М+Н+]; ВЭЖХ: RT = 1.72 мин (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5 4.6x50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.01 (br. s., 1H), 7.56-7.44 (m, 2Н), 7.41-7.26 (m, 3Н), 7.22-7.11 (m, 2Н), 4.24 (s, 1H), 2.55 (br. s., 2H), 2.41 (s, 3Н).
Соединения, приведенные ниже в табл. 6 (Промежуточные соединения от В-2 до В-3) получали в соответствии с общим способом синтеза, описанным для промежуточного соединения В-1, используя исходные материалы промежуточное соединение А-10 и промежуточное соединение А-4, соответственно.
1 МеОН/Н2О/0.1% TFA, Waters Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, 1 мл/мин, градиент 4 мин, длина волны = 254 нм.
2 H2O/CH3CN с 0.05% TFA, ВЕН С18 1.7 мкм, 2.1x50 мм, градиент (2-98%) = 1 мин, длина волны = 220 нм.
Условия хирального разделения:
а Оборудование: Berger SFC MGIII; колонка: Lux Cell-4, 250 x 30 мм ID, 5 мкм, температура колонки: 45°С; подвижная фаза: СО2/МеОН (70/30); скорость потока: 200 мл/мин; детектирование при 220 нм.
b Оборудование: Berger SFC MGIII, колонка: CHIRALPAK(r) IC 25 x 3 см, 5 мкм; температура колонки: 45°С; подвижная фаза: СО2/МеОН (55/45); скорость потока: 180 мл/мин; детектирование при 220 нм.
Промежуточное соединение В-4. (8)-3-Амино-9-метил-5-фенил-1Н-бензо[е][1,4]диазепин-2(ЗН)-он
Промежуточное соединение В-4А. ^)-Бензил (9-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-Ш-бензо [е] [ 1,4] диазепин-3 -ил)карбамат
(В-4А)
Смесь 2-(1H-бензо[(d][1,2,3]триазол-1-ил)-2-(((бензилокси)карбонил)амино)уксусной кислоты (5.50 г, 16.87 ммоль) суспендировали в THF (40.9 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли оксалилхлорид (1.477 мл, 16.87 ммоль) с последующим добавлением 50 мкл DMF. Наблюдалось выделение газа. Через 2 ч добавляли раствор Промежуточного соединения А-9 (1.62 г, 7.67 ммоль) и N-метилморфолин (2.53 мл, 23.00 ммоль) в THF (20 мл), и реакционную смесь оставляли постепенно нагреваться. Через 3.5 ч добавляли аммиак (7 М в МеОН) (21.29 мл, 149 ммоль), и реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре на протяжении ночи. К этой смеси добавляли 5 мл 7 М аммиака, и реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч. Смесь затем разбавляли EtOAc, промывали Н2О, 1 M NaOH и рассолом. Органический слой концентрировали и затем суспендировали в уксусной кислоте (15.34 мл), и добавляли ацетат аммония (2.96 г, 38.3 ммоль). Через 4.5 ч добавляли Н2О для осаждения продукта. Осадок собирали фильтрованием, промывали водой, и высушивали на воздухе с получением Промежуточного соединения В-4А (2.48 г, 81%). ВЭЖХ: RT = 1.01 мин (H2O/CH3CN с TFA, ВЕН С18 1.75 мкм, 2.1x50 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 400.3 [М+Н]+.
Рацемическое промежуточное соединение В-4А (10.8 г, 27.0 ммоль) разделяли, используя условия хиральной SFC, описанные ниже. Целевой стереоизомер собирали в качестве первого пика в порядке элюирования: Оборудование: Berger SFC MGIII, колонка: OJ-H 25 x 3 см, 5 см; температура колонки: 45°С; подвижная фаза: СО2/МеОН (70/30); скорость потока: 200 мл/мин; детектирование при 220 нм. После выпаривания растворителя.
Промежуточное соединение В-4А (2.67 г, 6.68 ммоль) получали в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ: RT = 2.761 мин (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) SpeedROD 4.6 x 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм). MS(ES): m/z = 400.3 [М+Н]+.
Промежуточное соединение В-4.
Раствор промежуточного соединения В-4А (2.6 г, 6.51 ммоль) в 33% НВ2 в НОАс (10.71 мл, 65.1 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли диэтиловый эфир, и полученное в результате желтое твердое вещество собирали фильтрованием и прополаскивали простым эфиром. Гигроскопичное твердое вещество растворяли в МеОН, концентрировали и высушивали под вакуумом с получением Промежуточного соединения В-4 (2.59 г, 93%). ВЭЖХ: RT = 1.433 мин (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) SpeedROD 4.6 х 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм). MS(ES): m/z = 266.0 [М+Н]+.
Промежуточное соединение В-5А. Бензил (5-(4-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)фенил)-2-оксо-2,3 -дигидро-Ш-бензо [е] [ 1,4] диазепин-3 -ил)карбамат
Промежуточное соединение В-5. 3-Амино-5-(4-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)фенил)-Ш-бензо[е] [1,4]диазепин-2(ЗН)-он
В 100 мл круглодонной колбе суспензию 2-(1Н-бензоВД[1,2,3]триазол-1-ил)-2-(бензилоксикарбо-ниламино)уксусной кислоты (0.952 г, 2.92 ммоль) и промежуточного соединения А-27 (.83 г, 2.430 ммоль) в DCM (20 мл) обрабатывали раствором DCC (0.602 г, 2.92 ммоль) в DCM (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота на протяжении ночи. К реакционной смеси добавляли насыщенный Na2CO3 (25 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Суспензию фильтровали, слои разделяли, и органическую фазу концентрировали досуха. Сырую реакционную смесь разбавляли МеОН (10 мл) и добавляли 2н. аммиак в метаноле (14.58 мл, 29.2 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Затем добавляли АсОН (13.91 мл, 243 ммоль) непосредственно к реакционной смеси, и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 72 ч. рН реакции доводили до значения рН 12 насыщенным NaHCO3. Реакционную смесь разделяли между DCM (100 мл) и рассолом (50 мл). Водный слой снова экстрагировали DCM (2х50 мл). Объединенные органические фазы высушивали Na2SO4, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 0 до 75% растворитель А/В = этил ацетат/гептан, REDISEP(r) SiO2 80 г). Концентрированием соответствующих фракций получали образец, который снова очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, от 0% до 60% растворителя А/В = этилацетат/гептан, REDISEP(r) SiO2 40 г). Концентрированием соответствующих фракций получали Промежуточное соединение В-5А (0.368 г, 29%). ЖХ/МС RT = 2.472 мин, от 10/90 до 90/10 (Ме-ОН/Н2О/0.1% TFA, Waters Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, 1 мл/мин, градиент 2 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 530 [М+1]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.84 (s, 1H), 8.39 (d, J= 8.6 Гц, 1H), 7.64 (t, J= 7.7 Гц, 1H), 7.50-7.43 (m, 1H), 7.43-7.28 (m, 10Н), 7.29-7.21 (m, 1H), 5.09 (s, 1H), 5.05 (d, J= 8.4 Гц, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 0.95-0.88 (m, 9H), 0.13-0.03 (m, 6H).
Промежуточное соединение В-5.
Раствор промежуточного соединения В-5А (330 мг, 0.623 ммоль) в этилацетате (20 мл) обрабатывали 20% Pd/C (50% воды) (200 мг, 0.623 ммоль) с получением суспензии. Реакционную смесь 3 раза ва-куумировали и продували азотом, затем три раза вакуумировали и продували водородом. Смесь перемешивали в атмосфере водорода в течение 4 ч. Реакционную смесь фильтровали через CELITE(r), и фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением промежуточного соединения В-5 (0.190 г, 77%). ВЭЖХ: RT = 2.0.3 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм). ЖХ/МС: М+Н = 396; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.66 (br. s., 1H), 7.59 (ddd, J= 8.3, 7.1, 1.5 Гц, 1H), 7.49-7.43 (m, 2H), 7.41-7.34 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 3H), 7.24-7.17 (m, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.24 (s, 2H), 0.94-0.91 (m, 9H), 0.10 (s, 6H).
Соединения, приведенные ниже в табл. 7 (промежуточные соединения от В-6 до В-26) получали в соответствии с общим способом синтеза, описанным для промежуточного соединения В-1 и промежуточных соединений от В-4 до В-5, с использованием указанного исходного материала.
Промежуточное соединение
Структура
Наименование
ВЭЖХ
RT (мин)
ЖХ/МС [М+Н]*
Исходный материал
В-18
3-амино-9-хлор-5-(3-циклопропилфенил)-1Н-бензо[е][ 1 ,4]диазепин-2(ЗН)-он
2 292
326 12
А-21
В-19
З-амино-5-(3-хлорфенил)-9-метокси-1Н-бензо[е][1,4] диазепин-2(ЗН)-он
2 18*
316
А-16
В-20
(tm)ен о
З-амино-5-(4-хлорфенил)-9-мегокси-1Н-бензо[е][1,4] диазепин-2(ЗН)-он
2.234
316
А-17
B-21
3-амино-9-метокси-5-(т-
толил)-1Н-бензо[е1[1,4]
диазепин-2(ЗН)-он
1 45*
296
А-19
B-22
У^ЫН;
З-амино-5 -(т-толил)- 1H-бензо[е][ 1 .4]диазепин-2(ЗН)-он
1.394
266
А-23
В-23
3-амино-5-(р-толил)-1Н-бензо[е][ 1,4]диазепин-2(ЗН)-он
1.38"
266
А-24
В-24
F3C
3-амино-9-метокси-5-(5-(трифторметил)пиридин-2-ил)-1Н-
бензо[е][ 1,4]диазепин-2(ЗН)-он
1.795
351
А-28
Промежуточное соединение
Структура
Наименование
ВЭЖХ
RT (мин)
ЖХ/МС [М+Н]+
Исходный материал
В-25
н ,0
МеО
3-амино-5-(4-метоксифенил)-1Н-бензо[е][ 1 ?4]диазепин-2(ЗН)-он
1.284
282
А-25
В-26
ОМен 0
У 1 /"NH2
1^ \J
З-амино-5-(5-
хл о рпиридин -2-ил) -9-метокси-1 Н-бензо [е] [ 1 т4] диазепин-2(ЗН)-он
1.58*
317
А-29
В-27
3-амино-9-хлор-5-(3,5-ди метил фен ил)-1Н-бензо[е] [1,4]диазепин-2(ЗН)-он
0.721
314
А-3
1 H2O/CH3CN с TFA, ВЕН С18 1.75 мкм, 2.1x50 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм.
2 МеОН/Н2О/0.1% TFA, Waters Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, 1 мл/мин, градиент 4 мин, длина волны = 254 нм.
3 Н2О/МеОН с 0.1% TFA, Luna C18 3 мкм, 4.6x30 мм, градиент = 3.5 мин, длина волны = 220 нм.
4 H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм.
5 Waters Sunfire C18 2.1 x 30 мм 3.5 мкм; H2O/MeOH/TFA, градиент = 4 мин, длина волны = 254 нм.
6 H2O/CH3CN с 0.05% TFA, ВЕН С18 1.7 мкм, 2.1x50 мм, градиент (2%-98%) = 1 мин, длина волны = 220 нм.
7 Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5, 4.6x50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм.
Промежуточное соединение В-28. 3-Амино-9-цикло1гоопил-5-фенил-Ш-бензо[е][1,4]диазепин-2(ЗН)-он
(В-28)
Промежуточное соединение В-28А. Бензил (9-бром-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-Ш-бензо [е] [ 1,4] диазепин-3 -ил)карбамат
(В-28А)
Промежуточное соединение В-28А получали из промежуточного соединения А-22 с помощью общих способов, уазанных для промежуточного соединения В-1. ВЭЖХ: RT = 2.048 мин (Н2О/МеОН с TFA, Ascentis Express C18 2.7 мкм, 2.1x50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 464 [М+Н+].
Промежуточное соединение В-28В. Бензил (9-циклопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-бензо [е] [ 1,4] диазепин-3 -ил)карбамат
Р о
(В-28В)
К перемешанной смеси Промежуточного соединения В-28А (2.00 г, 4.31 ммоль), Pd(dppf)2Cl2 (946 мг, 1.29 ммоль), двухосновного фосфата калия (2.25 г, 12.9 ммоль) и циклопропилбороновой кислоты метилиминодиуксусной кислоты сложного эфира (1.70 г, 8.61 ммоль) в диоксане (12 мл) в атмосфере азота добавляли воду (3 мл). Реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 20 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли EtOAc (40 мл) и фильтровали через 1 дюймовый слой си-ликагеля, сверху которого находился 1/2 дюймовый слой CELITE(r). Ее дополнительно элюировали EtOAc. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением и очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash, от 0% до 17% растворитель А/В =
DCM/ацетон, REDISEP(r) SiO2 120 г, детектирование при 254 им и контроль при 220 нм). Концентрированием соответствующих фракций получали Промежуточное соединение В-28В (1.20 г, 65%). ВЭЖХ: RT = 3.246 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6 x 50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 минут, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм). MS(ES): m/z = 426.1 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.29 (s, 1H), 8.38 (d, J= 8.6 Гц, 1H), 7.57-7.32 (m, 10Н), 7.30 (d, J= 7.5 Гц, 1H), 7.20 (t, J= 7.6 Гц, 1H), 7.11 (d, J=7.3 Гц, 1H), 5.08 (s, 2H), 5.04 (d, J= 8.4 Гц, 1H), 2.26-2.13 (m, 1H), 1.09-0.95 (m, 2H), 0.87-0.78 (m, 1H), 0.61-0.52 (m, 1H).
Промежуточное соединение В-28.
Промежуточное соединение В-28 получали из промежуточного соединения В-28А обработкой 33% HBr/уксусная кислота в соответствии с общим способом, описанным для промежуточного соединения В-1. ВЭЖХ: RT = 2.085 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм). ЖХ/МС: М+Н = 292.1. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.78 (s, 1H), 9.01 (br. s., 3Н), 7.65-7.48 (m, 5H), 7.38 (dd, J= 7.6, 1.2 Гц, 1H), 7.26 (t, J = 7.8 Гц, 1H), 7.19-7.14 (m, 1H), 2.27-2.16 (m, 1H), 1.14-0.98 (m, 2H), 0.91-0.80 (m, 1H), 0.67-0.56 (m, 1H).
Следующие промежуточные соединения (от В-29 до В-30) получали с помощью общих способов, описанных для промежуточного соединения В-5 из указанного исходного материала.
Таблица 8
Промежуточное соединение
Структура
Наименование
ВЭЖХ
RT (мин)1
ЖХ/МС [М+Н]+
Исходный материал
B-29
3-амино-5-(о-толил)- 1Н-бензо[е][ 1,4]диазепин-2(ЗН)-он
1.33
266
А-26
Промежуточное соединение
Структура
Наименование
ВЭЖХ
RT (мин)1
ЖХ/МС [М+Н]+
Исходный материал
В-30
МеО
3-амино-5-(4-метоксифенил)-1Н-бензо [е] [ 1,4] диазепин-2{ЗН)-он
1.28
282
А-25
Промежуточное соединение 1А. (2S,3R)-трет-Бутил 6,6,6-трифтор-3-((^)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3 -дигидро- Ш-бензо[е] [ 1,4] диазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноат
H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 2.1x30 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм. Пример 1. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
F (1А)
В 100 мл круглодонной колбе раствор промежуточного соединения В-1 (1683 мг, 5.94 ммоль), Et3N (1.656 мл, 11.88 ммоль) и промежуточного соединения S-1 в DMF (20 мл) обрабатывали о-бензотриазол-Ьил-N, N, №,№-тетраметил мочевины тетрафторборатом (3815 мг, 11.88 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч.
Реакционную смесь разбавляли водой и насыщенным водным NaHCO3. Образовывался белый осадок, его фильтровали и промывали водой. Полученное в результате твердое вещество высушивали на фильтре в потоке азота с получением промежуточного соединения 1А (3.7 г, выход 99%). MS(ES): m/z = 632.4[М+Н+]; ВЭЖХ: RT = 3.635 мин, чистота = 98%. (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5 4.6 x 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм). 1Н ЯМР (400 МГц, метанолчЬ.) 5 7.53 (t, J = 4.5 Гц, 1H), 7.46-7.30 (m, 3Н), 7.28-7.23 (m, 1H), 7.23-7.18 (m, 2Н), 5.37 (s, 1H), 2.88 (td, J = 10.4, 3.4 Гц, 1H), 2.60 (td, J= 10.2, 4.1 Гц, 1H), 2.54-2.40 (m, 1H), 2.47 (s, 3 Н), 2.33-2.12 (m, 3Н), 1.98-1.69 (m, 4Н), 1.51 (s, 9H).
Промежуточное соединение 1В. (2S,3R)-6,6,6-Трифтор-3-(((S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-Ш-бензо [е] [ 1,4] диазепин-3 -ил)карбамоил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)капроновая кислота
F (1В)
В 250 мл круглодонной колбе раствор промежуточного соединения 1А (3.7 г, 5.86 ммоль) в DCM (25 мл) обрабатывали TFA (25 мл), и полученный в результате бледно-оранжевый раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч. Реакционную смесь затем концентрировали с получением промежуточного соединения 1В. ВЭЖХ: RT = 3.12 мин (Н2О/МеОН с TFA, CHROMOLITH(r) ODS S5 4.6 x 50 мм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм). MS(ES): m/z = 576.3 (М+Н)+. 1Н ЯМР (400 МГц, мета-нол-d.,) 5 7.54 (t, J= 4.5 Гц, 1H), 7.49-7.29 (m, 3Н), 7.28-7.15 (m, 3Н), 5.38 (br. s., 1H), 2.89 (td, J= 10.3, 3.7 Гц, 1H), 2.67 (td, J= 9.9, 4.2 Гц, 1H), 2.56-2.38 (m, 1H), 2.48 (s, 3 Н), 2.34-2.13 (m, 3Н), 2.00-1.71 (m, 4Н).
Пример 1. В 250 мл круглодонной колбе раствор промежуточного соединения 1В (4.04 г, 5.86 ммоль) в THF (50 мл) обрабатывали аммиаком (2Mв iPrOH) (26.4 мл, 52.7 ммоль) с последующим добавлением НОВТ (1.795 г, 11.72 ммоль) и EDC (2.246 г, 11.72 ммоль). Полученную в результате белую суспензию перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Реакционную смесь разбавляли водой и насыщенным водным NaHCO3. Полученное в результате твердое вещество фильтровали, прополаскивали водой и затем высушивали на фильтре в потоке азота. Сырое вещество суспендировали в 20 мл iPrOH, перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин и затем фильтровали и промыва- 48
ли iPrOH и высушивали под вакуумом с получением 2.83 г твердого вещества. Твердое вещество растворяли в нагревающемся с обратным холодильником EtOH (100 мл) и медленно обрабатывали 200 мг активированного угля, добавляя маленькими порциями. Горячую смесь фильтровали через CELITE(r) и прополаскивали горячим EtOH. Фильтрат уменьшали до половины объема, оставляли охлаждаться, и образовавшийся белый осадок фильтровали и прополаскивали EtOH с получением 2.57 г белого твердого вещества. Повторной перекристаллизацией из EtOH (70 мл) получали пример 1 (2.39 г, выход 70%) в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ: RT = 10.859 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 3.0x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 575.3 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, мета-нол-d.,) 5 7.57-7.50 (m, 1H), 7.47-7.30 (m, 3Н), 7.29-7.15 (m, 3Н), 5.38 (s, 1H), 2.85-2.75 (m, 1H), 2.59 (td, J= 10.5, 4.0 Гц, 1H), 2.53-2.41 (m, 4Н), 2.31-2.10 (m, 3Н), 1.96-1.70 (m, 4Н).
Пример 2. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Хлорфенил)-9-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
CF3
Me. I 3
] Н О о '
Промежуточное соединение 2А. (2S,3R)-трет-Бутил 3-((5-(3-хлорфенил)-9-этил-2-оксо-2,3-дигидро-Ш-бензо [е] [ 1,4] диазепин-3 -ил)карбамоил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3 -трифторпропил)гексаноат
К раствору промежуточного соединения В-7 дигидробромида (130 мг, 0.273 ммоль), промежуточного соединения S-1 (100 мг, 0.273 ммоль) и TBTU (105 мг, 0.328 ммоль) в DMF (2 мл) добавляли TEA (0.190 мл, 1.367 ммоль) по каплям. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь медленно выливали в перемешанный раствор воды с некоторым количеством насыщенного NaHCO3. Смесь продукта экстрагировали DCM, промывали 10% раствором LiCl, высушивали и концентрировали под вакуумом. Смесь сырого продукта очищали с помощью хроматографии на силика-геле (ISCO, от 0 до 50% EtOAC/гептан на протяжении 10 мин, используя 12 г колонку) с получением Промежуточного соединения 2А (116 мг, 0.175 ммоль, выход 64.1%). ВЭЖХ RT = 1.20 мин в H2O/CH3CN с TFA, ВЕН С18 1.75 мкм, 2.1x50 мм, градиент = 2 мин, длина волны = 220 нм. MS(ES): m/z = 662.3
[М+Н+].
Промежуточное соединение 2В. (2S,3R)-3-((5-(3-Хлорфенил)-9-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо [е] [ 1,4] диазепин-3 -ил)карбамоил)-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3 -трифторпропил)капроновая кислота
Раствор промежуточного соединения 2А (115 мг, 0.174 ммоль) в DCM (3 мл) обрабатывали TFA (0.668 мл, 1.737 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем концентрировали досуха. Сырую смесь разбавляли толуолом и снова концентрировали досуха с получением Промежуточного соединения 2В (87 мг, 0.144 ммоль, выход 83%). ВЭЖХ RT = 3.695 (H2O/CH3CN с TFA, Waters Sunfire C18 2.1x30 мм 3.5 мкм, градиент 4 мин, детектирование при 220 нм).
MS(ES): m/z = 606.1 [М+Н+].
Пример 2.
Раствор промежуточного соединения 2В (101 мг, 0.167 ммоль), НОВТ (77 мг, 0.500 ммоль) и EDC (96 мг, 0.500 ммоль) в THF (2381 мкл) обрабатывали 2н. аммиаком в IPA (583 мкл, 1.167 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь затем разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали DCM. Объединенные органические слои промывали рассолом, высушивали и затем концентрировали под вакуумом. Смесь сырого продукта очищали с помощью хроматографии на силикагеле (ISCO, от 0% до 100% EtOAC/гептан на протяжении 15 мин, используя колонку 12 г). После разделения диастереомеров (Berger SFC MGII, Chiral IC, 25x3 см ID, 5 мкм, 92/8 СО2/МеОН, 85 мл/мин, детектирование при 220 нм), получали пример 2 (38 мг, 38%). ВЭЖХ: RT = 9.656 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 605.1 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.70-7.63 (m, 1H), 7.61-7.56 (m, 1H), 7.55- 49
7.45 (m, 2Н), 7.44-7.37 (m, 1H), 7.33-7.19 (m, 2Н), 5.38 (s, 1H), 3.38-3.26 (m, 2Н), 3.08-2.88 (m, 1H), 2.872.70 (m, 2Н), 2.69-2.40 (m, 2Н), 2.36-2.02 (m, 3Н), 2.01-1.69 (m, 3Н), 1.34 (t, J= 7.5 Гц, 3Н).
Следующие примеры получали в соответствии с общими способами, описанными для примера 1 и примера 2.
Пример 3. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Хлорфенил)-9-изопропил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 3 получали из хирального промежуточного соединения В-2 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Получали пример 3. ВЭЖХ: RT = 10.134 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 619 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.67 (m, 2Н), 7.48 (m, 2Н), 7.42 (m, 1H), 7.33 (m, 1H), 7.23 (m, 1H), 5.38 (s, 1H), 3.56-3.38 (m, 1H), 2.92-2.74 (m, 1H), 2.68-2.42 (m, 2H), 2.38-2.09 (m, 3H), 2.00-1.69 (m, 4H), 1.41 (d, J = 6.6 Гц, ЗН), 1.29 (d, J = 6.8 Гц, 3Н).
Пример 4. (2R,3S)-N-(9-Хлор-5-(3,4-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 4 получали из Промежуточного соединения В-6 и Промежуточного соединения S-2 в соответствии с общими способами, описанными выше. После разделения диастереомеров с помощью хи-ральной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: Chiral IC 25x3 см, 5 мкм; подвижная фаза: 88/12 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм), получали пример 4. ВЭЖХ: RT = 9.771 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 619 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.76 (dd, J= 7.8, 1.7 Гц, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.34-7.15 (m, 4H), 5.35 (s, 1H), 2.75 (td, J= 10.6, 4.3 Гц, 1H), 2.58-2.48 (m, 1H), 2.32 (s, 3Н), 2.28 (s, 3Н), 2.25-2.05 (m, 3Н), 1.86-1.66 (m, 4Н), 1.65-1.45 (m, 3Н).
Пример 5. (2R,3S)-N-(9-Хлор-5-(3,5-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 5 получали из Промежуточного соединения В-27 и Промежуточного соединения S-2 в соответствии с общими способами, описанными выше. После разделения диастереомеров с помощью хи-ральной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: RR Whelk 01 25x3 см, 5 мкм; подвижная фаза: 85/15 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм), получали пример 5. ВЭЖХ: RT = 9.824 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 619 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.76 (dd, J = 7.7, 1.8 Гц, 1H), 7.32-7.23 (m, 2H), 7.16 (s, 3Н), 5.36 (s, 1H), 2.81-2.71 (m, 1H), 2.53 (d, J = 10.3 Гц, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.242.04 (m, 3Н), 1.84-1.69 (m, 3Н), 1.62-1.47 (m, 3Н), 1.29 (s, 1H).
Пример 6 получали из промежуточного соединения В-8 и промежуточного соединения S-1 в соот-
Пример 6. (2R,3S)-N-((3S)-9-!2frraj-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-Ш-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид
ветствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров (Berger SFC MGII, CHI-RALPAK(r) IC, 25x3 см ID, 5 мкм, 92/8 CO2/MeOH, 85 мл/мин, детектирование при 220 нм) получали
Пример 6. ВЭЖХ: RT = 9.556 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15
мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z 585.2 = [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.607.52 (m, 1H), 7.49-7.43 (m, 1H), 7.38-7.16 (m, 5Н), 5.37 (s, 1H), 3.04-2.89 (m, 1H), 2.87-2.71 (m, 2Н), 2.682.39 (m, 2Н), 2.37 (s, 3Н), 2.33-2.09 (m, 3Н), 1.99-1.65 (m, 4Н), 1.34 (t, J= 7.5 Гц, 3Н).
Пример 7. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Хлорфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 7 получали из промежуточного соединения В-3 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: Chiral OD-H 25x3 см, 5 мм; подвижная фаза: 90/10 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали Пример 7. ВЭЖХ: RT = 9.328 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 3.0x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 591.2 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанолчЬ.) 5 7.65 (t, J=1.9 Гц, 1H), 7.59-7.50 (m, 2Н), 7.50-7.44 (m, 1H), 7.44-7.37 (m, 1H), 7.27-7.20 (m, 2Н), 5.39 (s, 1H), 2.86-2.76 (m, 1H), 2.66-2.56 (m, 1H), 2.56-2.46 (m, 4Н), 2.33-2.14 (m, 3Н), 1.95-1.74 (m, 4Н).
Пример 8. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Хлорфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 8 получали из промежуточного соединения В-3 и промежуточного соединения S-2 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: Regis Welk-O R,R 25 x 3 см, 5 мм; подвижная фаза: 85/15 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали пример 8. ВЭЖХ: RT = 9.531 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 3.0x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 605.2 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол <1,) 5 7.69 (d, J= 1.8 Гц, 1H), 7.587.50 (m, 2H), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.27-7.19 (m, 2H), 5.37 (s, 1H), 2.78 (td, J= 10.3, 4.0 Гц, 1H), 2.60-2.46 (m, 5H), 2.30-2.11 (m, 3Н), 1.89-1.71 (m, 3Н), 1.67-1.50 (m, 3Н).
Пример 9. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Метилфенил)-2-оксо-9-(трифторметил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензо-диазепин-3 -ил) -2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 9 получали из промежуточного соединения В-9 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: Chiral OD-H 25 x 3 см, 5 мкм; подвижная фаза: 92/8 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали пример 9. ВЭЖХ: RT = 9.488 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 3.0x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 625.3[М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 8.03 (d, J= 6.8 Гц, 1H), 7.68-7.62 (m, 1H), 7.53-7.45 (m, 2Н), 7.40-7.30 (m, 3Н), 5.47 (s, 1H), 2.82 (td, J= 10.5, 4.0 Гц, 1H), 2.60 (td, J= 10.5, 3.7 Гц, 1H), 2.53-2.41 (m, 1H), 2.38 (s, 3Н), 2.32-2.14 (m, 3Н), 1.99-1.71 (m, 4Н).
Пример 10. (2R,3S)-N-((3S)-9-Хлор-5-(3,5-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазе-пин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид
Пример 10 получали из промежуточного соединения В-27 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров с помощью хиральной SFC (оборудование: Berger SFC MGIII, колонка: CHIRALCEL(r) OD-H 25x3 см, 5 мкм; подвижная фаза: 92/18 СО2/МеОН, скорость потока: 150 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали пример 10. ВЭЖХ: RT = 10.878 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 605 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.76 (dd,J= 7.7, 1.5 Гц, 1H), 7.33-7.23 (m, 2H), 7.15 (s, 3Н), 5.39 (s, 1H), 2.84-2.75 (m, 1H), 2.59 (td, J= 10.3, 4.2 Гц, 1H), 2.51-2.39 (m, 1H), 2.30 (s, 6Н), 2.26-2.12 (m, 3Н), 1.95-1.70 (m, 4Н).
Пример 11. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Метилфенил)-2-оксо-9-(трифторметил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бен-зодиазепин-3 -ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 11 получали из промежуточного соединения В-9 и промежуточного соединения S-2 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: Chiral OD-H 25 x 3 см, 5 мкм; подвижная фаза: 92/8 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали пример 11. ВЭЖХ: RT = 9.699 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 3.0x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 639.3 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 8.03 (d, J= 6.8 Гц, 1H), 7.67-7.61 (m, 1H), 7.52-7.44 (m, 2Н), 7.41-7.31 (m, 3Н), 5.45 (s, 1H), 2.83-2.74 (m, 1H), 2.61-2.42 (m, 2Н), 2.39 (s, 3Н), 2.35-2.05 (m, 3Н), 1.90-1.69 (m, 3Н), 1.68-1.48 (m, 3Н).
Пример 12. (2R,3S)-N-((3S)-9-Изопропил-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазе-пин-3 -ил) -2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)су кцинамид
(12)
Пример 12 получали из промежуточного соединения В-10 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров (оборудование: Berger SFC MGIII, колонка: Lux Cell-4, 250 x 30 мм, 5 мкм; температура колонки: 45°С, подвижная фаза: 88/12 CC2/MeOH; детектирование при 220 нм) получали пример 12. ВЭЖХ: RT = 15.924 мин (МеОН/Н2О с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 599 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанолчЬ.) 5 7.63 (dd, J = 7.7, 1.3 Гц, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.37-7.24 (m, 4H), 7.19 (d, J = 1.5 Гц, 1H), 5.36 (s, 1H), 3.52-3.37 (m, 1H), 2.86-2.74 (m, 1H), 2.64-2.42 (m, 2Н), 2.36 (s, 3Н), 2.32-2.11 (m, 3Н), 1.96-1.69 (m, 4Н), 1.39 (d, J = 6.8 Гц, 3Н), 1.28 (d, J = 6.8 Гц, 3Н).
Пример 13. (2R,3S)-N-((3S)-9-Изопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 13 получали из промежуточного соединения В-11 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: CHIRALPAK(r) IC 250 x 30 мм, 5 мкм; подвижная фаза: 90/10 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали пример 13. ВЭЖХ: RT = 15.481 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 586 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.70-7.56 (m, 3Н), 7.56-7.47 (m, 1H), 7.47
7.36 (m, 2Н), 7.36-7.25 (m, 1H), 7.25-7.12 (m, 1H), 5.39 (s, 1H), 3.53-3.38 (m, 1H), 2.83 (m, 1H), 2.70-2.41 (m, 2Н), 2.37-2.05 (m, 3Н), 2.00-1.69 (m, 4Н), 1.40 (d, J= 6.6 Гц, 3Н), 1.35-1.21 (m, 3Н).
Пример 14. (2R,3S)-N-((3S)-9-(Циклопропилокси)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
(14)
Пример 14 получали из промежуточного соединения В-12 и промежуточного соединения S-2 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров (Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25x3 см ID, 5 мкм, 80/20 СО2/МеОН, 85 мл/мин, детектирование при 220 нм) получали Пример 14. ВЭЖХ: RT = 10.064 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 627.20 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.65-7.56 (m, 1H), 7.46-7.39 (m, 1H), 7.37-7.16 (m, 4Н), 7.00-6.84 (m, 1H), 5.37 (s, 1H), 4.06-3.91 (m, 1H), 2.87-2.68 (m, 1H), 2.64-2.44 (m, 2Н), 2.37 (s, 3Н), 2.32-2.00 (m, 3Н), 1.98-1.50 (m, 4Н), 1.50-1.22 (m, 2Н), 1.05-0.84
(m, 4Н).
Пример 15. (2R,3S)-N-((3S)-9-(Циклопропилокси)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бен-зо диазепин-3 -ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 15 получали из промежуточного соединения В-12 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров (Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 x 3 см ID, 5 мкм, 80/20 CO2/MeOH, 85 мл/мин, детектирование при 220 нм) получали Пример 15. ВЭЖХ: RT = 9.844 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 613.25 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанолчЬ.) 5 7.637.58 (m, 1H), 7.47-7.39 (m, 1H), 7.38-7.20 (m, 4Н), 6.98-6.91 (m, 1H), 5.40 (s, 1H), 4.04-3.94 (m, 1H), 2.882.75 (m, 1H), 2.66-2.55 (m, 1H), 2.55-2.39 (m, 1H), 2.39-2.33 (m, 2Н), 2.32-2.09 (m, 3Н), 2.01-1.65 (m, 3Н), 1.52-1.23 (m, 3Н), 1.03-0.84 (m, 4Н).
Пример 16. (2R,3S)-N-((3S)-9-(Циклопропилокси)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазе-пин-3 -ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 16 получали из промежуточного соединения В-13 и промежуточного соединения S-2 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров (Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25x3 см ID, 5 мкм, 80/20 СО2/МеОН, 85 мл/мин, детектирование при 220 нм) получали пример 16. ВЭЖХ: RT = 9.74 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 613.2 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.64-7.55 (m, 3Н), 7.55-7.49 (m, 1H), 7.44 (d, J= 7.5 Гц, 2Н), 7.26 (s, 1H), 6.98-6.91 (m, 1H), 5.38 (s, 1H), 4.04-3.96 (m, 1H), 2.81-2.71 (m, 1H), 2.62-2.41 (m, 2H), 2.18 (s, 4H), 1.90-1.68 (m, 3Н), 1.68-1.33 (m, 3Н), 0.93-0.86 (m, 4Н).
Пример 17. (2R,3S)-N-((3S)-9-Хлор-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 17 получали из промежуточного соединения В-14 и промежуточного соединения S-2 в соответствии с общими способами, описанными выше. Это твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (Berger SFC MGII, AD-H 250 x 30 мм ID, 5 см, 75/25 СО/IPA, 150 мл/мин) с получением примера 17. ВЭЖХ: RT = 11.04 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15
мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 605.3 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.45 (s, 1H), 9.45 (d, J= 6.8 Гц, 1H), 7.84 (dd, J= 5.9, 3.3 Гц, 1H), 7.62 (br. s., 1H), 7.41 (s, 1H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.33-7.26 (m, 3Н), 7.03 (s, 1H), 5.21 (d, J= 6.8 Гц, 1H), 2.79-2.70 (m, 1H), 2.69-2.59 (m, 1H), 2.46-2.38 (m, 1H), 2.34 (s, 3Н), 2.31-2.19 (m, 2H), 2.18-2.07 (m, 1H), 1.65-1.53 (m, 3Н), 1.49-1.41 (m, 1H), 1.39-1.29 (m,
2H).
Пример 18. (2К,38)-М-((38)-9-Метил-2-оксо-5-(3-(трифторметил)фенил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензо-диазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид
Пример 18 получали из промежуточного соединения В-15 и промежуточного соединения S-2 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: Regis Welk-O R,R 25x3 см, 5 мм; подвижная фаза: 90/10 CO2/MeOH, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали пример 18. ВЭЖХ: RT = 9.678 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 3.0x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 639.4 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 8.01 (s, 1H), 7.83 (d, J= 7.7 Гц, 1H),7.77(d, 1=7.7Гц, 1H), 7.68-7.60 (m, 1H), 7.57 (d, J= 7.0 Гц, 1H), 7.28-7.17 (m, 2H), 5.40 (s, 1H), 2.79 (td, J= 10.5, 4.0 Гц, 1H), 2.62-2.45 (m, 5H), 2.35-2.18 (m, 2H), 2.16-2.03 (m, 1H), 1.91-1.70 (m, 3Н), 1.69-1.48
(m, 3Н).
Пример 19. (2R,3S)-N-((3S)-9-(Циклопропилокси)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазе-пин-3 -ил) -2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)су кцинамид
Пример 19 получали из промежуточного соединения В-13 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров (Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25x3 см ID, 5 мкм, 80/20 СО2/МеОН, 85 мл/мин, детектирование при 220 нм) получали пример 19. ВЭЖХ: RT = 14.967 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 599.1 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.61 (dd, J = 8.1, 1.3 Гц, 1H), 7.59-7.54 (m, 2Н), 7.54-7.47 (m, 1H), 7.47-7.37 (m, 2Н), 7.25 (t, J = 8.0 Гц, 1H), 6.95 (dd, J = 7.9, 1.1 Гц, 1H), 5.41 (s, 1H), 4.00 (t, J = 4.4 Гц, 1H), 2.82 (d, J = 4.0 Гц, 1H), 2.61 (d, J = 3.7 Гц, 1H), 2.552.38 (m, 1H), 2.36-2.11 (m, 3Н), 2.07-1.70 (m, 4Н), 0.91 (d, J = 4.4 Гц, 4Н).
Пример 20. (2R,3S)-N-((3S)-9-Метил-2-оксо-5-(3-(трифторметил)фенил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензо-диазепин-3 -ил) -2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
(20)
Пример 20 получали из промежуточного соединения В-15 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: PHENOMENEX(r) Lux Cellulose 2 25x3 см, 5 мкм; подвижная фаза: 92/8 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали пример 20. ВЭЖХ: RT = 9.483 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 3.0x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 625.1 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанолч14) 5 7.97 (s, 1H), 7.81 (dd, J= 13.1, 7.8 Гц, 2Н), 7.67-7.60 (m, 1H), 7.57 (dd, J= 6.8, 1.3 Гц, 1H), 5.43 (s, 1H), 2.83 (td, J= 10.5, 4.0 Гц, 1H), 2.61 (td, J= 10.3, 3.5 Гц, 1H), 2.57-2.46 (m, 4Н), 2.32-2.12 (m, 3Н), 1.98-1.74 (m, 4Н).
Пример 21. (2R,3S)-N-((3S)-9-Хлор-5-(2-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 21 получали из промежуточного соединения В-16 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Целевой стереоизомер собирали как второй пик в порядке элюирования, используя SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: Chiral OD-H 25x3 см, 5 мм; подвижная фаза: 85/15 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм), с получением примера 21. ВЭЖХ: RT = 11.11 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 591[М+Н+]; 1Н ЯМР (500 МГц, метанол-d.,) 5 7.73 (dd, J= 8.0, 1.4 Гц, 1H), 7.40-7.32 (m, 1H), 7.29-7.21 (m, 3Н), 7.18 (t, J = 7.9 Гц, 1H), 7.08 (dd, J= 7.9, 1.5 Гц, 1H), 5.45 (s, 1H), 2.79 (td, J= 10.5, 4.0 Гц, 1H), 2.59 (td, J= 10.4, 3.9 Гц, 1H), 2.51-2.38 (m, 1H), 2.30-2.08 (m, 3Н), 2.04 (s, 3Н), 1.94-1.67 (m, 4Н).
Пример 22. (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-Фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 22 получали из промежуточного соединения В-17 и Промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, колонка: Chiral IC 25x3 см, 5 мкм; подвижная фаза: 92/8 СО2/МеОН, скорость потока: 85 мл/мин; детектирование при 220 нм) получали пример 22. ВЭЖХ: RT = 9.016 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 3.0x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 575.1 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d.,) 5 7.69-7.60 (m, 2H), 7.53 (dd, J= 5.8,
2.5 Гц, 1H), 7.24-7.18 (m, 2Н), 7.17-7.09 (m, 2Н), 5.36 (s, 1H), 2.80 (td, J= 10.4, 4.1 Гц, 1H), 2.58 (td, J = 10.5,
3.5 Гц, 1H), 2.53-2.43 (m, 4Н), 2.31-2.11 (m, 3Н), 1.95-1.73 (m, 4Н).
Пример 23. (2R,3S)-N-((3S)-9-Метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3 -трифторпропил)су кцинамид
Пример 23 получали из промежуточного соединения В-4 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. ВЭЖХ: RT = 7.843 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 557.4 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол^) 5 7.63-7.57 (m, 1H), 7.56-7.47 (m, 1H), 7.46-7.37 (m, 1H), 7.25-7.18 (m, 1H), 5.39 (s, 1H), 2.82 (td, J= 10.5, 4.0 Гц, 1H), 2.61 (td, J= 10.5, 3.5 Гц, 1H), 2.56-2.40 (m, 4H), 2.36-2.07 (m, 3Н), 1.99-1.70 (m, 4Н).
Пример 24. (2R,3S)-N-((3S)-9-Циклопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 24 получали из промежуточного соединения В-28 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Это твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (Berger SFC MGII, Chiral IC 250x30 мм ID, 5 мкм, 85/15 СО2/МеОН, 85 мл/мин) с получением примера 24. ВЭЖХ: RT = 11.56 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 583.2 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.28 (s, 1H), 9.45 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 7.65 (br. s., 1H), 7.56-7.49 (m, 3Н), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.28 (dd, J = 7.7, 1.3 Гц, 1H), 7.20 (t, J= 7.7 Гц, 1H), 7.15-7.08 (m, 2H), 5.24 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 2.81 (td, J = 9.8, 5.1 Гц, 1H), 2.54 (br. s., 1H), 2.31-2.07 (m, 4H), 1.78-1.53 (m, 5H), 1.11-0.96 (m, 2H), 0.84-0.76 (m, 1H), 0.71-0.62 (m, 1H).
Пример 25. (2R,3S)-N-((3S)-9-Хлор-5-(3-циклопропилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазе-пин-3 -ил) -2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)су кцинамид
Пример 25 получали из промежуточного соединения В-18 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Разделением диастереомеров (оборудование: Berger SFC MGII, Chiral IC 25 x 3 см ID, 5 мкм, 90/10 CO2/MeOH, 85 мл/мин, детектирование при 220 нм) получали Пример 25. ВЭЖХ: RT = 8.81 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 617.0 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-с14) 5 7.88-7.70 (m, 1H), 7.45-7.11 (m, 6H), 5.46-5.31 (m, 1H), 2.82 (td, J = 10.4, 4.1 Гц, 1H), 2.69-2.40 (m, 2H), 2.36-2.06 (m, 3Н), 2.00-1.58 (m, 5H), 1.06-0.94 (m, 2H), 0.80-0.62 (m, 2H).
Пример 26. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Хлорфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 26 получали из промежуточного соединения В-19 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, AS-H 250x30 мм ID, 5 мкм, 82/18 СО2/МеОН, 85 мл/мин) с получением Примера 26. ВЭЖХ: RT = 9.32 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 607 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанол-d4) 5 10.13 (s, 1H), 9.51 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 7.68-7.59 (m, 3Н), 7.52-7.45 (m, 1H), 7.42-7.32 (m, 2Н), 7.30-7.24 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.92 (dd, J= 7.9, 1.1 Гц, 1H), 5.25 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 3.94 (s, 3Н), 2.85-2.75 (m, 1H), 2.63-2.54 (m, 1H), 2.31-2.09 (m, 4Н), 1.75-1.52 (m, 4Н).
Пример 27. (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-Хлорфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 27 получали из промежуточного соединения В-20 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, AS-H 250 x 30 мм ID, 5 мкм, 82/18 СО2/МеОН, 85 мл/мин) с получением примера 27. ВЭЖХ: RT = 9.44 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 607 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.12 (s, 1H), 9.51 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 7.66 (br. s., 1H), 7.58-7.50 (m, 4H), 7.36-7.31 (m, 1H), 7.30-7.22 (m, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.90 (dd, J= 7.8, 1.2 Гц, 1H), 5.24 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.82-2.74 (m, 1H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.30-2.08 (m, 4H), 1.76-1.51 (m, 4H).
Пример 28. (2R,3S)-N-((3S)-9-Хлор-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 28 получали из промежуточного соединения В-14 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, IC-H 250x30 мм ID, 5 мкм, 92/8 CO2/MeOH, 85 мл/мин) с получением Примера 28. ВЭЖХ: RT = 9.36 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 591 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.48 (br. s., 1H), 9.40 (br. s., 1H), 7.87-7.60 (m, 2H), 7.47-7.04 (m, 5H), 5.15 (br. s., 1H), 4.15 (dd, J= 5.7, 3.3 Гц, 1H), 2.81 (td, J= 9.9, 4.8 Гц, 1H), 2.40-2.02 (m, 5H), 1.83-1.53 (m, 4H), 1.45-1.18 (m, 3H), 0.98-0.79
(m, 2H).
Пример 29. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Метилфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 29 получали из промежуточного соединения В-21 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Сырое вещество очищали с помощью препаративной ВЭЖХ при следующих условиях: колонка: Waters XBridge С18, 19x250 мм, 5-мкм частицы; колонка Guard: Waters XBridge C18, 19 x 10 мм, 5-мкм частицы; подвижная фаза А: 5:95 ацетонитрил:вода с 10мМ ацетатом аммония; подвижная фаза В:95:5 ацетонитрил:вода с 10-мМ ацетатом аммония; градиент: 15-100% В на протяжении 25 мин, затем 5-минутное удерживание при 100% В; скорость потока: 20 мл/мин. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и высушивали путем центробежного выпаривания. Вещество дополнительно очищали с помощью препаративной ВЭЖХ при следующих условиях: колонка: Waters XBridge C18, 19 x 250 мм, 5-мкм частицы; колонка Guard: Waters XBridge C18, 19x10 мм, 5-мкм частицы; подвижная фаза А: 5:95 ацетонитрил:вода с 10-мМ ацетатом аммония; подвижная фаза В:95:5 ацетонитрил:вода с 10-мМ ацетатом аммония; градиент: 20-55% В на протяжении 40 мин, затем 15-минутное удерживание при 55% В; скорость потока: 20 мл/мин. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и высушивали путем центробежного выпаривания. Вещество дополнительно очищали с помощью препаративной ВЭЖХ при следующих условиях: колонка: Waters XBridge C18, 19x100 мм, 5-мкм частицы; колонка Guard: Waters XBridge C18, 19x10 мм, 5-мкм частицы; подвижная фаза А: 5:95 ацетонитрил:вода с 10-мМ ацетатом аммония; подвижная фаза В:95:5 ацетонитрил:вода с 10-мМ ацетатом аммония; градиент: 5-100% В на протяжении 10 мин, затем 5-минутное удерживание при 100% В; скорость потока: 20 мл/мин. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и высушивали путем центробежного выпаривания с получением Примера 29. ВЭЖХ: RT = 2.38 мин (H2O/CH3CN с TFA, SU-PELCO(r) Ascentis Express C18, 4.6x50 мм, 2.7 мкм, градиент = 4 мин, длина волны = 220 нм); MS(ES): m/z = 586 [М+Н+]; 1Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 10.12 (br. s., 1H), 9.53 (d, J= 7.4 Гц, 1H), 7.69 (d, J= 1.5 Гц, 1H), 7.43-7.10 (m, 7H), 6.87 (dd, J= 7.9, 1.0 Гц, 1H), 5.24 (d, J= 7.4 Гц, 1H), 3.93 (s, 3Н), 2.80 (td, J= 10.0, 4.7 Гц, 1H), 2.63-2.54 (m, 1H), 2.33 (s, 3Н), 2.30-2.09 (m, 3H), 1.78-1.53 (m, 4Н).
Пример 30. (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-(Гидроксиметил)фенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид
Пример 30 получали из промежуточного соединения В-5 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, Lux Cellulose-2 250x30 мм ID, 5 мкм, 85/15 СО2/МеОН, 85 мл/мин) с получением примера 30. ВЭЖХ: RT = 6.91 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 573 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.84 (s, 1H), 9.49 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 7.70-7.60 (m, 2H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.42-7.36 (m, 2H), 7.36-7.29 (m, 2Н), 7.29-7.22 (m, 1H), 7.14 (br. s., 1H), 5.30 (t, J= 5.7 Гц, 1H), 5.25 (d, J= 7.5 Гц, 1H), 4.57 (d, J= 5.7 Гц, 2Н), 2.88-2.73 (m, 1H), 2.64-2.54 (m, 2H), 2.31-2.00 (m, 3Н), 1.85-1.43 (m, 4H).
Пример 31. (2R,3S)-N-((3S)-5-(2-Метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3 -трифторпропил)су кцинамид
Пример 31 получали из промежуточного соединения В-29 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, Lux Cellulose-2 250x30 мм ID, 5 мкм, 90/10 CO2/MeOH, 85 мл/мин) с получением примера 31. ВЭЖХ: RT = 8.68 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 557 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.94 (br. s., 1H), 9.47 (d, J= 7.5 Гц, 1H), 7.69-7.55 (m, 2H), 7.41-7.21 (m, 4H), 7.20-7.11 (m, 3H), 7.05 (dd, J=7.9, 1.3 Гц, 1H), 5.29 (d, J= 7.5 Гц, 1H), 2.78 (td, J= 10.0, 4.7 Гц, 1H), 2.31-2.07 (m, 3Н), 2.02-1.94 (m, 3Н), 1.76-1.51 (m, 4H).
Пример 32. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3 -трифторпропил)су кцинамид
Пример 32 получали из промежуточного соединения В-22 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Это твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, PHENOMENEX(r) Lux Cellulose-2 250 x 30 мм ID, 5 мкм, 90/10 СО2/МеОН, 85 мл/мин) с получением примера 32. ВЭЖХ: RT = 9.35 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 557 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.84 (s, 1H), 9.50 (d, J = 7.5 Гц, 1H), 7.69-7.61 (m, 2H), 7.40-7.18 (m, 7H), 7.14 (br. s., 1H), 5.26 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 2.87-2.75 (m, 1H), 2.55 (d, J= 2.0 Гц, 2Н), 2.33 (s, 3Н), 2.302.06 (m, 3Н), 1.80-1.50 (m, 4H).
Пример 33. (2R,3S)-N-((3S)-9-Метокси-2-оксо-5-(5-(трифторметил)-2-пиридинил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-З -ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 33 получали из промежуточного соединения В-24 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. После разделения диастереомеров (оборудование:
Berger SFC MGII, AS-H 250 x 46 мм ID, 5 мкм, 80/20 СО2/МеОН, 85 мл/мин) получали пример 33.
ВЭЖХ: RT = 9.364 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 642 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 10.19 (1 Н, s), 9.58 (1 Н, d, J= 7.5 Гц), 8.98 (1 Н, d, J= 0.9 Гц), 8.40 (1 Н, dd, J= 8.4, 2.0 Гц), 8.15 (1 Н, d, J= 8.4 Гц), 7.65 (1 Н, br. s.), 7.30 (1 Н, dd, J= 8.4, 1.1 Гц), 7.20 (1 H, t, J= 8.0 Гц), 7.14 (1 H, br. s.), 6.93 (1 H, dd, J= 7.9, 1.1 Гц), 5.35 (1 H, d, J= 7.3 Гц), 3.92 (3 H, s), 2.74-2.85 (1 H, m), 2.55-2.65 (1 H, m), 2.05-2.31 (4 H, m), 1.47-1.77 (4
H, m).
Пример 34. (2R,3S)-N-((3S)-5-(5-Хлор-2-пиридинил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензо-диазепин-3 -ил) -2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 34 получали из промежуточного соединения В-26 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Это твердое вещество очищали с помощью препаративной SFC (оборудование: Berger SFC MGII, AS-H 250x46 мм ID, 5 мкм, 75/25 CO2/MeOH, 85 мл/мин) с получением примера 34. ВЭЖХ: RT = 8.43 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 587 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.14 (s, 1H), 9.55 (d, J= 7.5 Гц, 1H), 8.68-8.58 (m, 1H), 8.11 (dd, J= 8.5, 2.5 Гц, 1H), 7.99 (d, J= 8.6 Гц, 1H), 7.66 (br. s., 1H), 7.33-7.26 (m, 1H), 7.21 (t, J= 8.0 Гц, 1H), 7.14 (br. s., 1H), 6.93 (dd, J = 7.9, 1.1 Гц, 1H), 5.30 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 3.92 (s, 3Н), 2.84-2.72 (m, 1H), 2.65-2.56 (m, 1H), 2.31-2.04 (m, 3Н), 1.76-1.47 (m,
4H).
Пример 35. (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-Метоксифенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
Пример 35 получали из промежуточного соединения В-25 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Диастереомеры разделяли с помощью хиральной ВЭЖХ (CHIRALPAK(r) AD 5 см x 50 см 10 мкм изократический 30% z-пропанол: гептан 100 мл/мин) с получением Примера 35. ВЭЖХ: RT = 8.68 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент =15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 573 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.81 (d, J= 6.6 Гц, 1H), 9.48 (d, J= 5.5 Гц, 1H), 7.64 (t, J= 6.4 Гц, 1H), 7.46 (dd, J= 8.7, 4.1 Гц, 2Н), 7.39-7.22 (m, 3Н), 7.00 (dd, J= 8.8, 3.3 Гц, 2Н), 5.22 (dd, J= 9.4, 7.6 Гц, 1H), 3.82 (s, 3H), 2.97-2.84 (m, 1H), 2.37-2.08 (m, 4Н), 1.85-1.55 (m, 4Н), 1.43-1.32 (m, 3Н).
Пример 36. (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-Метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-
бис(3,3,3-трифторпропил)су кцинамид
Пример 36 получали из промежуточного соединения В-23 и промежуточного соединения S-1 в соответствии с общими способами, описанными выше. Диастереомеры разделяли с помощью препаративной хиральной ВЭЖХ (CHIRALPAK(r) AD 5 см х 50 см 10 мкм изократический 20% 7-пропанол:гептан 100 мл/мин) с получением Примера 36. ВЭЖХ: RT = 9.32 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 557 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.80 (s, 1H), 9.46 (d, J= 7.5 Гц, 1H), 7.70-7.57 (m, 2Н), 7.39 (d, J= 8.1 Гц, 2Н), 7.35-7.19 (m, 5H), 7.12 (s, 1H), 5.23 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 2.84-2.74 (m, 1H), 2.36 (s, 3Н), 2.27-2.07 (m, 3H), 1.77-1.52 (m,
5H).
Промежуточное соединение 37А. М-Метокси-1Ч,3-диметил-2-нитробензамид
Пример 37. (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Фторфенил)-9-(гидроксиметил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензо-диазепин-3 -ил) -2,3 -бис(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамид
К суспензии 3-метил-2-нитробензойной кислоты (5 г, 27.6 ммоль) в DCM (50 мл) добавляли окса-лилхлорид (4.83 мл, 55.2 ммоль) с последующим добавлением 2 капель DMF. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч и затем концентрировали и подвергали азеотропной перегонке с DCM/толуолом с получением белого твердого вещества, которое высушивали под высоким вакуумом на протяжении ночи. К смеси ^О-диметилгидроксиламина, HCl (5.38 г, 55.2 ммоль) и TEA (11.54 мл, 83 ммоль) в DCM (80 мл) при 0°С медленно добавляли раствор полученного выше хлорангидрида в DCM (20 мл). Реакцию перемешивали в течение 30 мин и затем быстро охлаждали водой и экстрагировали DCM. Органический слой разделяли, промывали 1н. HCl, насыщенным NaHCO3 и рассолом и затем высушивали и концентрировали с получением Промежуточного соединения 37А (6.05 г, 98%). ВЭЖХ: RT = 1.27 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.52-7.45 (m, 1H), 7.42-7.35 (m, 2Н), 3.48 (br. s., 3Н), 3.33 (s, 3Н), 2.51 (s, 3Н).
Промежуточное соединение 37В. 3-(Бромметил)-М-метокси-М-метил-2-нитробензамид
Смесь промежуточного соединения 37А (5.5 г, 24.53 ммоль), NBS (5.24 г, 29.4 ммоль) и пероксида бензоила (0.594 г, 2.453 ммоль) в CCl4 (80 мл) продували азотом и затем нагревали до 80°С в течение 4.5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем быстро охлаждали водой. Смесь экстрагировали DCM, и объединенные экстракты промывали насыщенным NaHCO3 и рассолом и затем высушивали (Na2SO4), фильтровали и концентрировали досуха. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, колонка 80 г, EtOAc/гексан = 0-100%) с получением промежуточного соединения 37В.
Промежуточное соединение 37С. 3-(Гидроксиметил)-М-метокси-М-метил-2-нитробензамид
Смесь промежуточного соединения 37В (3.7 г, 4.88 ммоль) и карбоната кальция (2.93 г, 29.3 ммоль) в диоксане (25 мл)/воде (25 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 5 ч. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры, твердое вещество удаляли фильтрованием, и фильтрат экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом, высушивали
(MgSO4), фильтровали и концентрировали досуха. Сырой остаток очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, колонка 80 г, EtOAc/гексан = 20-100%) с получением Промежуточного соединения 37С (1.079 г, 78%). ВЭЖХ: RT = 0.75 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 минут, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 241.0 [М+Н+].
Промежуточное соединение 37D. 3-(((трет-Бутилдиметилсилил)окси)метил)^-метокси-^метил-2-нитробензамид
К раствору промежуточного соединения 37С (1.079 г, 4.49 ммоль) и TBDMS-C1 (1.016 г, 6.74 ммоль) в DMF (4 мл) добавляли имидазол (0.612 г, 8.98 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли воду, и смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные экстракты промывали 10% LiCl и рассолом, высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали досуха. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, колонка 40 г, EtOAc/гексан = 0-30%) с получением Промежуточного соединения 37D (1.25 г, 79%). ВЭЖХ: RT = 3.05 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 355.0 [М+Н+]. 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.90 (d, J= 7.7 Гц, 1H), 7.70 - 7.62 (m, 1H), 7.47 (d, J= 7.7 Гц, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.46 (br. s., 3H), 3.36 (br. s., 3H), 0.98 (s, 9H), 0.15 (s, 6H).
Промежуточное соединение 37Е. 2-Амино-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-№метокси-^ метилбензамид
Смесь промежуточного соединения 37D (1.25 г, 3.53 ммоль) и 10% Pd/C (200 мг, 0.188 ммоль) в EtOAc (50 мл) продували водородом. Смесь затем перемешивали в атмосфере водорода в течение 1.5 ч. Суспензию фильтровали, и фильтрат концентрировали досуха. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, колонка 24 г, EtOAc/гексан = 0-40%) с получением промежуточного соединения 37Е (939 мг, 82%). ВЭЖХ: RT = 2.986 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 1090% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 325.2 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 7.32 (dd, J= 7.7, 1.5 Гц, 1H), 7.11 (dd, J= 7.5, 1.5 Гц, 1H), 6.68 - 6.62 (m, 1H), 5.21 (br. s., 2H), 4.71 (s, 2H), 3.61 (s, 3Н), 3.36 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.09
(s, 6H).
Промежуточное соединение 37F. (2-Амино-3-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)фенил)(3-фторфенил)метанон
К раствору 1-фтор-3-иодобензола (0.782 мл, 6.66 ммоль) в THF (6 мл) при -78°С добавляли nBuLi (2.5 М в гексане, 2.66 мл, 6.66 ммоль) по каплям. После завершения добавления смесь перемешивали при -78°С в течение 40 мин. Затем добавляли по каплям раствор промежуточного соединения 37Е (540 мг, 1.664 ммоль) в THF (2.5 мл). Смесь затем перемешивали при -78°С в течение 2 ч. Полученную в результате смесь выливали в лед с HCl (7.49 мл, 7.49 ммоль) и экстрагировали EtOAc. Объединенные экстракты промывали рассолом, высушивали и концентрировали. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, колонка 12 г, EtOAc/гексан = 0-15%) с получением Промежуточного соединения 37F (271 мг, 45%) ВЭЖХ: RT = 3.70 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 минут, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES):
m/z = 360.4 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) d 7.49-7.33 (m, 4H), 7.27 - 7.20 (m, 2H), 6.84 (br. s., 2H), 6.57 (t, J= 7.6 Гц, 1H), 4.77 (s, 2H), 0.95 (s, 9H), 0.13 (s, 6H).
Промежуточное соединение 37G. (Бензил (9-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-5-(3-фторфе-нил)-2-оксо-2,3-дигидро-Ш-бензо [е] [1,4] диазепин-3-ил)карбамат
К раствору 2-(1H-бензо[(d][1,2,3]триазол-1-ил)-2-(((бензилокси)карбонил)амино)уксусной кислоты (608 мг, 1.864 ммоль) в THF (7 мл), охлажденному до 0°С, добавляли оксалилхлорид (0.157 мл, 1.789 ммоль) с последующим добавлением DMF (0.02 мл). Полученную в результате смесь перемешивали при 0°С в течение 1.5 ч. Затем медленно добавляли раствор промежуточного соединения 37F (268 мг, 0.745 ммоль) и 4-метилморфолин (0.246 мл, 2.236 ммоль) в THF (3 мл). После добавления реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Далее добавляли 7н. аммиак в Ме-ОН (4 мл, 28.0 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Полученную в результате смесь концентрировали, и остаток обрабатывали EtOAc и водой. Органический слой разделяли, и водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали 1н. NaOH, насыщенным NaHCO3 и рассолом, и затем высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток затем растворяли в уксусной кислоте (1.5 мл, 26.2 ммоль), и обрабатывали ацетатом аммония (287 мг, 3.73 ммоль). Смесь перемешивали при 40°С в течение 2 ч. Реакционную смесь затем обрабатывали водой и экстрагировали EtOAc. Объединенные экстракты промывали водой, насыщенным NaHCO3 и рассолом, и затем высушивали и концентрировали. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, колонка 12 г, EtOAc/гексан = 0-40%) с получением промежуточного соединения 37G (256 мг, 63%). ВЭЖХ: RT = 3.61 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES):
m/z = 548.5 [М+Н+].
Промежуточное соединение 37Н. 3-Амино-5-(3-фторфенил)-9-(гидроксиметил)-Ш-бензо[е][1,4]ди-азепин-2(ЗН)-он
Смесь промежуточного соединения 37G (255 мг, 0.466 ммоль) в 33% HBr в НОАс (1149 мкл, 6.98 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли простой эфир, и полученный в результате твердый осадок собирали фильтрованием и прополаскивали простым эфиром. Твердое вещество растворяли в МеОН (10 мл) и добавляли K2CO3 (1.3 г). Смесь перемешивали в течение 40 мин и затем фильтровали и концентрировали досуха с получением Промежуточного соединения 37Н (133 мг). ВЭЖХ: RT = 1.102 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 300.2 [М+Н+].
Промежуточное соединение 37I. (2S,3R)-трет-Бутил 6,6,6-трифтор-3-((5-(3-фторфенил)-9-(гидроксиметил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензо[е][1,4]диазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил) гексаноат
К раствору промежуточного соединения 37Н (130 мг, 0.434 ммоль), промежуточного соединения S-1 (159 мг, 0.434 ммоль) и TBTU (167 мг, 0.521 ммоль) в DMF (1.5 мл) добавляли TEA (0.133 мл, 0.956 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 мин. Воду добавляли, и твердое вещество собирали фильтрованием, прополаскивали водой и высушивали. Полученное в результате твердое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, колонка 12 г, EtOAc/гексан = 0-80%) с получением Промежуточного соединения 371 (66 мг, 23%). ВЭЖХ: RT = 3.27 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 648.3 [М+Н+].
Промежуточное соединение 37J. (2S,3R)-6,6,6-Трифтор-3-((5-(3-фторфенил)-9-(гидроксиметил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[е][1,4]диазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил) капроновая кисло-
К раствору промежуточного соединения 37I (65 мг, 0.100 ммоль) в DCM (2 мл) добавляли TFA (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и затем концентрировали досуха. Сырое вещество очищали с помощью препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ (водный МеОН, содержащий 0.1% TFA). Целевые фракции объединяли и концентрировали досуха с получением Промежуточного соединения 37J (30 мг, 51%). ВЭЖХ: RT = 2.680 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 592.3 [М+Н+].
Пример 37. К смеси промежуточного соединения 37J (30 мг, 0.051 ммоль), EDC (34.0 мг, 0.178 ммоль) и НОВТ (27.2 мг, 0.178 ммоль) в THF (2 мл) добавляли 2М аммиака d IPA (0.507 мл, 1.014 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи и затем концентрировали. К остатку добавляли воду, и смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным NaHCO3 и рассолом, и затем высушивали (MgSO4) и концентрировали с получением 30 мг сырого вещества в виде смеси двух диастереомеров. Диастереомеры разделяли с помощью хиральной SFC (Berger SFC MGII, Chiral ID 25x3 см ID, 5 мкм, 85/15 CO2/MeOH, 85 мл/мин, детектирование при 220 нм) с получением примера 37 (10 мг, 35%). ВЭЖХ: RT = 7.44 мин (H2O/CH3CN с TFA, Xbridge Phenyl 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 591.2 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, метанолчЬ.) 5 7.68-7.62 (m, 1H), 7.46-7.39 (m, 1H), 7.38-7.20 (m, 5Н), 5.43 (s, 1H), 4.94 - 4.88 (m, 1H), 4.80-4.73 (m, 1H), 2.80 (td, J= 10.3, 4.0 Гц, 1H), 2.59 (td, J= 10.5, 3.7 Гц, 1H), 2.54 - 2.39 (m, 1H), 2.31-2.10 (m, 3Н), 1.96-1.70 (m, 4H).
Пример 38. ((3S)-3-(((2R,3S)-3-Карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5 -(3 -фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3 -дигидро-Ш-1,4-бензодиазепин-1 -ил)метил L-валинат
Промежуточное соединение 38А. (8)-Хлорметил 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-метилбутаноат
Me Ме
(38А)
К энергично перемешиваемой смеси ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-метилбутановой кислоты (4 г, 18.41 ммоль), тетрабутиламмония гидросульфата (1.25 г, 3.68 ммоль) и Na2CO3 (9.76 г, 92 ммоль) в DCM 80 (мл) и воде (80 мл), охлажденной на бане лед/вода, медленно добавляли хлорметил-хлорсульфат (3.8 мл, 36.8 ммоль) на протяжении 4 мин. После перемешивания на бане лед/вода в течение 30 мин охлаждающую баню удаляли, и реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре. После перемешивания в течение 16 ч при комнатной температуре, реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали DCM. Водный слой снова экстрагировали DCM, и объединенные органические слои высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения 38А (5.45 г).
Промежуточное соединение 38В. (S)-((S)-3-((2R,3S)-3-Карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)гексанамидо)-5-(3 -фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-Ш-бензо [е] [ 1,4]диазепин-1 -ил)метил 2 -((трет-бутоксикарбонил)амино) -3 -метилбутаноат
К перемешанной смеси примера 1 (400 мг, 0.696 ммоль) и K2CO3 (289 мг, 2.089 ммоль) в DMF (4 мл) медленно добавляли промежуточное соединение 38А (555 мг, 2.089 ммоль) в DMF (3 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 22 ч, реакционную смесь разбавляли EtOAc и 3 раза промывали 10% водным раствором LiCl. Органический слой высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash, от 20 до 70% растворителя А/В = гексан/ацетон, REDISEP(r) SiO2 120 г, детектирование при 254 нм и контроль при 220 нм) с получением Промежуточного соединения 38В (213.3 мг, 38.1%). ВЭЖХ: RT = 3.428 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 минут, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 804.5 [М+Н+].
Пример 38. К перемешанной смеси промежуточного соединения 38В (213.3 мг, 0.265 ммоль) в DCM (6 мл) добавляли 4н. HCl в диоксане (0.663 мл, 2.65 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 1.5 ч реакционную смесь концентрировали, и сырое вещество очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (YMC C18, 30x100, 10-90% водный метанол на протяжении 12 мин, содержащий 0.1% TFA, 30 мл/мин, детектирование и контроль при 220 нм). Фракции, содержащие продукт, объединяли и затем концентрировали путем лиофилизации с получением примера 38 (154 мг, 70.3%) в виде TFA соли. ВЭЖХ: RT = 10.854 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 704.6[М+Н+]; 1Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 9.46 (d, J= 6.7 Гц, 1H), 8.14 (br. s., 3Н), 7.72-7.62 (m, 2H), 7.57-7.50 (m, 1H), 7.47-7.37 (m, 4H), 7.27 (d, J= 7.8 Гц, 1H), 7.13 (s, 1H), 6.15 (d, J= 10.3 Гц, 1H), 5.50 (d, J= 10.3 Гц, 1H), 5.38 (dJ = 6.7 Гц, 1H), 2.83 (td, J= 10.2, 4.3 Гц, 1H), 2.45 (s, 4H), 2.29-2.18 (m, 1H), 2.17-2.06 (m, 2H), 1.81-1.72 (m, 1H), 1.72-1.48 (m, 4H), 0.66 (d, J= 6.9 Гц, 3Н), 0.62 (d, 1=6.9Гц, 3Н).
Промежуточное соединение 39А. (8)-Хлорметил 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропаноат
Пример 39. ((3 S)-3 -(((2R,3 S)-3 -Карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3 -фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3 -дигидро- 1H-1,4-бензодиазепин-1 -ил)метил L-аланинат
К энергично перемешиваемой смеси ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропановой кислоты (1 г, 5.29 ммоль), тетрабутиламмония гидросульфата (0.359 г, 1.057 ммоль) и Na2CO3 (2.80 г, 26.4 ммоль) в DCM 20 (мл) и воде (20 мл), охлажденной на бане лед/вода, медленно добавляли хлорметилхлорсульфат (1.09 мл, 10.57 ммоль) на протяжении 4 мин. После перемешивания на бане лед/вода в течение 30 мин, охлаждающую баню удаляли, и реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре. После перемешивания в течение 16 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали DCM. Водный слой снова экстрагировали DCM, и объединенные органические слои высушивали над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Сырое вещество (1.64 г) использовали как есть без дополнительной очистки.
Пример 39.
Пример 39 получали из примера 1 и промежуточного соединения 39А в соответствии с общим способом, показанным для примера 38. ВЭЖХ: RT = 7.443 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 676 [М+Н+]; 1Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 9.45 (d, J= 6.7 Гц, 1H), 8.17 (br. s., 3Н), 7.72-7.63 (m, 2Н), 7.58-7.49 (m, 1H), 7.48-7.36 (m, 4Н), 7.25 (d, J= 6.9 Гц, 1H), 7.14 (br. s., 1H), 6.15 (d, J= 10.3 Гц, 1H), 5.50 (d, J= 10.3 Гц, 1H), 5.38 (d, J= 6.7 Гц, 1H), 2.83 (td, J= 10.1, 4.2 Гц, 1H), 2.45 (s, 3Н), 2.29-2.06 (m, 3Н), 1.77-1.48 (m, 4Н), 0.94 (d, J= 7.2
Гц, 3Н).
Пример 40. S-(((2S,3R)-6,6,6-Трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3 -ил)карбамоил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)гексаноил)амино)-Ь-цистеин
бутоксикарбонил)амино)пропаноат)
Суспензию (2R,2'R)-ди-трет-бутил 3,3'-дисульфандиилбис(2-аминопропаноат) дигидрохлорида (1.9 г, 4.47 ммоль) в DMF (50 мл) при комнатной температуре обрабатывали TEA (1.556 мл, 11.17 ммоль) с последующим добавлением ди-трет-бутил дикарбоната (2.437 г, 11.17 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Реакционную смесь выливали в EtOAc (100 мл) и промывали 0.1н. HCl (2x100 мл), с последующим добавлением насыщенного водного NaHCO3 (100 мл) и рассола (100 мл). Органический слой высушивали (Na2SO4) фильтровали и концентрировали досуха. Сырое вещество растворяли в небольшом количестве DCM и очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, от 0% этилацетата/гексанов до 20% этилацетата/гексанов, колонка 120 г, 30 мин градиент) с получением Промежуточного соединения 40А (1.65 г, 66.8%). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 5.34 (d, J= 5.9 Гц, 2Н), 4.46 (d, J= 5.9 Гц, 2Н), 3.27-3.07 (m, 4H), 1.49 (s, 18H), 1.46 (s, 18H).
Промежуточное соединение 40В. ^)-трет-Бутил 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[е][1,4]диазепин-3-ил)карба-моил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)гексанамидо)тио)пропаноат
Слабую суспензию нитрата серебра (118 мг, 0.696 ммоль) в метаноле (18 мл) обрабатывали промежуточным соединением 40А (385 мг, 0.696 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин и затем добавляли пример 1 (100 мг, 0.174 ммоль) и TEA (97 мкл, 0.696 ммоль). Реакцию перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи и затем концентрировали досуха. Сырое вещество растворяли в небольшом количестве DCM и очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, от 0% этил-ацетата/гексанов до 100% этилацетата/гексанов, колонка 24 г, 30 мин градиент) с получением промежуточного соединения 40В (78 мг, 52.7%). ВЭЖХ TR = 3.443 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD, 5.0 мкм, 4.6 мм x 50 мм, 10-90% водный метанол, содержащий 0.1% TFA, градиент 4 мин, контроль при 220 нм).
[М+Н+] = 850.5.
Пример 40. Раствор промежуточного соединения 40В (78 мг, 0.092 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°С обрабатывали TFA (0.5 мл, 6.49 ммоль) и медленно нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи и затем концентрировали досуха. Сырой реакционный продукт растворяли в небольшом количестве МеОН и очищали с помощью обра-щенно-фазовой ВЭЖХ (YMC ODS C18 5 мкм 30x100 мм, 10-90% водный метанол, содержащий 0.1% TFA, 15 мл/мин, 30 мин градиент, контроль при 220 нм). Продукт (время удерживания = 24.980 мин) выделяли и лиофилизировали досуха. Полученное в результате твердое вещество суспендировали в воде и обрабатывали 0.1н. HCl (1 мл) при 0°С. Раствор снова лиофилизировали досуха с получением примера 40 в виде соли HCl (29 мг, 41.5%). ВЭЖХ RT: = 9.328 мин (Sunfire С18 3.5 мкм, 3x150 мм, от 10% 95/5 вода/ACN с 0.05% TFA до 100% 5/95 вода/ACN с 0.05% TFA, градиент 15 минут, скорость потока = 0.5 мл/мин, контроль при 220 и 254 нм). MS(ES): m/z = 694.4 [М+Н+]. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.23 (s, 1H), 9.65 (s, 1H), 9.52 (d, J= 7.5 Гц, 1H), 8.44 (br. s., 2H), 7.55 (dd, J= 6.6, 1.5 Гц, 1H), 7.51-7.44 (m, 1H), 7.42-7.33 (m, 2H), 7.28-7.23 (m, 1H), 7.22-7.17 (m, 2H), 5.25 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 4.02-3.94 (m, 1H), 3.27 (dd, J= 15.1, 4.1 Гц, 1H), 3.02 (dd, J= 15.1, 8.9 Гц, 1H), 2.92 (td, J= 10.6, 3.3 Гц, 1H), 2.74-2.65 (m, 1H), 2.28-2.11 (m, 4H), 1.85-1.74 (m, 1H), 1.73-1.64 (m, 1H), 1.64-1.54 (m, 1H), 1.48-1.36 (m, 1H).
Пример 41. трет-Бутил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро- Ш-1,4-бензо диазепин-3 -ил)карбамоил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)гексаноил)амино)-Ь-цистеинат
раствор концентрировали досуха. Сырой реакционный продукт растворяли в небольшом количестве МеОН и очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (YMC ODS C18 5 мкм 20x100 мм, 10-90% водный метанол, содержащий 0.1% TFA, 15 мл/мин, 30 мин градиент, контроль при 220 нм). Продукт (время удерживания = 27.037 мин) выделяли и лиофилизировали досуха. Полученное в результате вещество подщелачивали насыщенным водным NaHCO3 с получением примера 41 (12 мг, 3.03%). ВЭЖХ: RT = 8.726 мин (Xbridge Phenyl 3.5 мкм, 3 x 150 мм, от 10% 95/5 вода/ACN с 0.05% TFA до 100% 5/95 вода/ACN с 0.05% TFA, градиент 15 минут, скорость потока = [скорость потока], контроль при 220 и 254 нм). MS(ES): m/z = 750.4.4 [М+Н+]. 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 10.25 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 9.54 (d, J= 7.3 Гц, 1H), 8.46 (br. s., 3Н), 7.56 (dd, J= 6.6, 1.8 Гц, 1H), 7.53-7.45 (m, 1H), 7.43-7.33 (m, 2H), 7.29-7.24 (m, 1H), 7.23-7.17 (m,2H), 5.26 (d,J= 7.3 Гц, 1H), 3.98 (br. s., 1H), 3.24 (dd, J= 15.0, 4.2 Гц, 1H), 3.03 (dd, J= 15.0, 9.0 Гц, 1H), 2.94 (td, J= 10.3, 3.4 Гц, 1H), 2.76-2.66 (m, 1H), 2.48-2.44 (m, 1H), 2.29-2.12 (m, 3Н), 1.871.77 (m, 1H), 1.75-1.67 (m, 1H), 1.65-1.54 (m, 1H), 1.49 (d, J = 2.2 Гц, 1H), 1.46 (s,9H).
Промежуточное соединение 42А. ^)-Метил 2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-бензо[е][1,4]диазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)гексанамидо)тио)пропаноат
Пример 42. Метил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-Ш-1,4-бензодиазепин-З -ил)карбамоил)-2-(3,3,3 -трифторпропил)гексаноил)амино)-Ь-цистеинат
Раствор нитрата серебра (118 мг, 0.696 ммоль) в метаноле (9 мл) обрабатывали (2R,2'R)-диметил 3,3'-дисульфандиилбис(2-((трет-бутоксикарбонил)амино)пропаноат) (326 мг, 0.696 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, и затем добавляли пример 1 (100 мг, 0.174 ммоль) и TEA (0.097 мл, 0.696 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи и затем концентрировали досуха. Сырое вещество растворяли в небольшом количестве CH2Cl2 и очищали с помощью флэш-хроматографии (SiO2, от 0% этилацетата/гексанов до 80% этилацетата/гексанов, колонка 4 г) с получением Промежуточного соединения 42А (80 мг, 57%). ВЭЖХ RT = 3.20 мин (CHROMOLITH(r)
SpeedROD, 5.0 мкм, 4.6 мм x 50 мм, 10-90% водный метанол, содержащий 0.1% TFA, градиент 4 мин,
контроль при 220 нм). MS(ES): m/z = 808.3 [М+Н+].
Пример 42.
К раствору промежуточного соединения 42А (80 мг, 0.099 ммоль) в DCM (2 мл) при 0°С добавляли TFA (0.5 мл). Смесь перемешивали в течение 2.5 ч, в то же время нагревая до комнатной температуры. Реакционную смесь затем концентрировали, и остаток очищали с помощью флэш-хроматографии на си-ликагеле (колонка 4 г, 0-8% MeOH/DCM с 0.1% NH4OH) с получением белого твердого вещества, которое дополнительно обрабатывали простым эфиром с получением очищенного продукта (29.5 мг, 41%). ВЭЖХ RT = 2.570 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD, 5.0 мкм, 4.6 мм x 50 мм, 10-90% водный метанол, содержащий 0.1% TFA, градиент 4 мин, контроль при 220 нм). MS(ES): m/z = 708.2 [М+Н+]. 1Н ЯМР (400 МГц, метанолчх4) 5 7.58-7.52 (m, 1H), 7.48-7.32 (m, 3Н), 7.30-7.19 (m, 3Н), 5.39 (s, 1H), 3.75 (s, 3Н), 3.63 (dd, J= 8.7, 4.1 Гц, 1H), 3.30-3.24 (m, 1H), 2.90 (td, J = 10.4, 3.6 Гц, 1H), 2.78 (dd, J= 14.3, 8.6 Гц, 1H), 2.69 (td, J= 10.0, 3.6 Гц, 1H), 2.57-2.38 (m, 4Н), 2.36-2.06 (m, 3Н), 2.05-1.90 (m, 1H), 1.89-1.74 (m, 2Н), 1.63 (tt, J= 12.5, 4.3 Гц, 1H).
Пример 43. ((3S)-3-(((2R,3S)-3-Карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил (4-(фосфоноокси)фенил)
ацетат
F (43А)
К смеси примера 1 (278 мг, 0.484 ммоль) в DMF (2.75 мл) добавляли Cs2CO3 (315 мг, 0.968 ммоль) и (хлорметил)(метил)сульфан (0.081 мл, 0.919 ммоль) в атмосфере азота. Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 110 мин, и затем разбавляли водой. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные EtOAc экстракты промывали рассолом. Органический слой высушивали над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением сырого вещества. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash, от 0 до 100% растворителя А/В = гексан/EtOAc, REDISEP(r) SiO2 40 г, детектирование при 254 нм и контроль при 220 нм). Концентрированием соответствующих фракций получали промежуточное соединение 43А (198 мг, 64.5%). ВЭЖХ: RT = 3.205 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6 х 50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 635.4 [M+H+]; 1И ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 9.49 (d, J= 7.3 Гц, 1И), 7.63 (d, J= 8.4 Гц, 2И), 7.57-7.51 (m, 1И), 7.49-7.36 (m, 4И), 7.23 (d, J= 7.5 Гц, 1И), 7.13 (s, 1И), 5.57 (d, J= 14.1 Гц, 1И), 5.33 (d, J= 7.0 Гц, 1И), 4.38 (d, J= 14.3 Гц, 1И), 2.80 (td, J= 9.8, 4.1 Гц, 1И), 2.61-2.54 (m, 1И), 2.46-2.44 (m, 1И), 2.42 (s, 3И), 2.30-2.06 (m, 4И), 1.68 (s, 3И), 1.64-1.48 (m,3H).
Промежуточное соединение 43В. Метил 2-(4-(ди-трет-бутоксифосфорилокси)фенил)ацетат
Перемешанный раствор метил 2-(4-гидроксифенил)ацетата (1.80 г, 10.83 ммоль) объединяли с 1И-тетразолом в MeCN (65 мл, 10.83 ммоль) и затем добавляли ди-трет-бутил-диэтилфосфорамидит (5.91 г, 23.70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 35 мин и затем концентрировали досуха. Сырое вещество растворяли в 50 мл DCM и добавляли 30% Н2О2 (30 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин, смесь разбавляли DCM и промывали водой, насыщенным раствором NaИCO3 и затем рассолом. Органический слой концентрировали и очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash, от 0 до 100% растворителя А/В = гексан/ EtOAc, REDISEP(r) SiO2 80 г, детектирование при 254 нм и контроль при 220 нм). Концентрированием соответствующих фракций получали промежуточное соединение 43В (3.94 г, количественный выход). 1Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 ppm 7.25-7.14 (m, 4Н), 3.69 (s, 3И), 3.59 (s, 2И), 1.51 (s, 18И).
Промежуточное соединение 43 С. 2-(4-(Ди-трет-бутоксифосфорилокси)фенил)уксусная кислота
о (ГуУ
t-Bu-O-Рч ОН t-Bu-o 0 (4зс)
К перемешанному раствору промежуточного соединения 43В (0.635 г, 1.772 ммоль) в THF (12.0 мл) и воде (3.00 мл) добавляли гидроксид лития (0.122 г, 2.14 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, и затем органические вещества удаляли под пониженным давлением. Полученную в результате смесь разбавляли 10 мл раствора фосфата с рН 4. Полученную в результате смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные EtOAc экстракты промывали рассолом, высушивали безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения 43С (0.462 г, 76%). 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 ppm 12.30 (br. s., 1И), 7.25 (d, J= 8.4 Гц, 2И), 7.13-7.03 (m, 2И), 3.55 (s, 2И), 1.44 (s, 1И).
F (43D)
К перемешанной смеси промежуточного соединения 43А (195 мг, 0.307 ммоль) и триэтиламина гидрохлорида (85.0 мг, 0.615 ммоль) в DCM (3.00 мл) в атмосфере азота добавляли сульфурилхлорид
Промежуточное соединение 43D. ((S,Z)-3-((R)-2-((S)-1-Амино-3-трифтор-1-оксопропан-2-ил)-5,5,5-трифторпентанамидо)-2-оксо-5-(3-фторфенил)-9-метил-2,3-дигидро-1И-бензо[е][1,4]диазепин-1-ил)ме-тил 2-(4-(ди-трет-бутоксифосфорилокси)фенил)ацетат
(0.037 мл, 0.461 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 25 мин и затем концентрировали досуха с получением желтого твердого вещества. Промежуточное соединение 43С (221 мг, 0.640 ммоль) и Cs2CO3 (417 мг, 1.281 ммоль) объединяли в DMF (1.50 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. К этой смеси добавляли полученный выше раствор желтого твердого вещества в DMF (2.00 мл). Полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 148 минут и затем разбавляли водой и EtOAc. Органический слой разделяли и промывали 10% раствором LiCl и затем рассолом. Органический слой высушивали безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали досуха. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash, от 0 до 100% растворителя А/В = гексан/EtOAc, REDISEP(r) SiO2 24 г, детектирование при 254 нм и контроль при 220 нм). Концентрированием соответствующих фракций получали промежуточное соединение 43D (152 мг, 53.5%). ВЭЖХ: RT = 3.640 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 1090% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 931.6 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 9.47 (d, J= 6.8 Гц, 1И), 7.68-7.60 (m, 2И), 7.54-7.46 (m, 1И), 7.44-7.33 (m, 4И), 7.20 (d, J= 7.5 Гц, 1И), 7.13 (br. s., 1И), 6.97-6.91 (m, 2И), 6.87-6.80 (m, 2И), 6.05 (d, J= 10.3 Гц, 1И), 5.38 (d, J= 4.0 Гц, 1И), 5.36 (s, 1И), 3.22 (t, J= 1.0 Гц, 2Н), 2.81 (dt, J= 9.8, 5.0 Гц, 1И), 2.45 (d, J = 3.3 Гц, 1И), 2.41 (s, 3Н), 2.30-2.20 (m, 1И), 2.18-2.06 (m, 3Н), 1.69 (d,J= 10.6 Гц, 1И), 1.63-1.51 (m, 3Н), 1.43 (s, 18И).
Пример 43.
К перемешанному раствору промежуточного соединения 43D (148 мг, 0.159 ммоль) в DCM (1.64 мл) добавляли TFA (0.16 мл, 2.077 ммоль) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин и затем при комнатной температуре в течение 40 мин, и затем концентрировали под пониженным давлением с получением примера 43 (126.6 мг, 94%). ВЭЖХ: RT = 9.95 мин (H2O/CH3CN с TFA, Sunfire C18 3.5 мкм, 4.6x150 мм, градиент = 15 мин, длина волны = 220 и 254 нм); MS(ES): m/z = 819.5 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 9.51 (d, J= 5.7 Гц, 1И), 7.66 (d, J= 7.7 Гц, 2Н), 7.54-7.49 (m, 1И), 7.48-7.40 (m, 3Н), 7.37 (d, J= 7.7 Гц, 1И), 7.22 (d, J= 8.4 Гц, 1И), 7.15 (br. s., 1И), 6.97 (d, J= 8.6 Гц, 2Н), 6.84 (d, J= 8.4 Гц, 2Н), 6.07 (d, J= 10.6 Гц, 1И), 5.40 (s, 1И), 5.38 (s, 1И), 3.32-3.15 (m, 2И), 2.83 (br. s., 1И), 2.58-2.56 (m, 1И), 2.43 (s, 3Н), 2.15 (dd, J= 19.7, 8.5 Гц, 4Н), 2.01 (s, 1И), 1.71 (s, 2И), 1.67-1.51 (m, 3Н).
Пример 44. ((3S)-3-(((2R,3S)-3-Карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2^ L-валил-Ь-валинат
Промежуточное соединение 44А. (2R,3S)-3-(Трифторпропил)-N1-((S,Z)-1-(метилтиометил)-2-оксо-5-(3-фторфенил)-9-метил-2,3-дигидро-1И-бензо[е][1,4]диазепин-3-ил)метил-2-(3,3,3-трифторпропил)
сукцинамид
К смеси примера 1 (278 мг, 0.484 ммоль) в DMF (2.75 мл) добавляли Cs2CO3 (315 мг, 0.968 ммоль) и (хлорметил)(метил)сульфан (0.081 мл, 0.919 ммоль) в атмосфере азота. Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 110 мин, и затем разбавляли водой. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные EtOAc экстракты промывали рассолом. Органический слой высушивали над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением сырого вещества. Его очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash, от 0% до 100% растворителя А/В = гексан/EtOAc, REDISEP(r) SiO2 40 г, детектирование при 254 нм и контроль при 220 нм). Концентрированием соответствующих фракций получали промежуточное соединение 44А (198 мг, 64.5%). ВЭЖХ: RT = 3.205 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6x50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 635.4 [М+Н+]; 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 9.49 (d, J = 7.3 Гц, 1И), 7.63 (d, J= 8.4 Гц, 2Н), 7.57-7.51 (m, 1И), 7.49-7.36 (m, 4И), 7.23 (d, J= 7.5 Гц, 1И), 7.13 (s, 1И), 5.57 (d, J = 14.1 Гц, 1И), 5.33 (d, J= 7.0 Гц, 1И), 4.38 (d, J= 14.3 Гц, 1И), 2.80 (td, J= 9.8, 4.1 Гц, 1И), 2.61-2.54 (m, 1И), 2.46-2.44 (m, 1И), 2.42 (s, 3Н), 2.30
2.06 (m, 4H), 1.68 (s, 3Н), 1.64-1.48 (m, 3Н).
Промежуточное соединение 44В. (8)-((8)-3-((2К,38)-3-Карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифтор-пропил)гексанамидо)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензо[е][1,4]диазепин-1-ил)метил 2-((8)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-метилбутанамидо)-3-метилбутаноат
К перемешанной смеси промежуточного соединения 44А (157 мг, 0.247 ммоль) и триэтиламина гидрохлорида (68.1 мг, 0.495 ммоль) в DCM (3.00 мл) в атмосфере азота добавляли сульфурилхлорид (0.030 мл, 0.371 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 мин и затем концентрировали досуха с получением желтого твердого вещества. Остаток растворяли в DMF (2 мл) и добавляли к перемешанной смеси (8)-2-((8)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-3-метилбутанамидо)-3-метилбутановой кислоты (313 мг, 0.989 ммоль) и Cs2CO3 (403 мг, 1.236 ммоль) в DMF (2.0 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2.5 ч, затем добавляли воду и насыщенный водный NaHCO3. Образовавшийся белый осадок, который собирали фильтрованием, прополаскивали водой и высушивали под вакуумом. Сырое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии (Teledyne ISCO CombiFlash от 20 до 70% растворителя А/В = гексан/ацетон, REDISEP(r) SiO2 80 г, детектирование при 254 нм и контроль при 220 нм). Концентрированием соответствующих фракций получали Промежуточное соединение 44В (148.4 мг, 66.5%). ВЭЖХ: RT = 3.486 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6 х 50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 минут, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 903.7 [М+Н+].
Пример 44.
К перемешанному раствору промежуточного соединения 44В (148 мг, 0.164 ммоль) в DCM (4.00 мл) в атмосфере азота добавляли 4н. HCl в диоксане (0.410 мл, 1.639 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 мин и затем концентрировали досуха с получением примера 44 (148 мг, 97%). ВЭЖХ: RT = 8.038 мин (CHROMOLITH(r) SpeedROD колонка 4.6 х 50 мм, 10-90% водный метанол на протяжении 4 мин, содержащий 0.1% TFA, 4 мл/мин, контроль при 220 нм), MS(ES): m/z = 803.6 [М+Н+]; 1Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 9.49 (d, J = 6.9 Гц, 1H), 8.35 (d, J = 7.8 Гц, 1H), 8.02 (d, J= 4.4 Гц, 3Н), 7.69-7.62 (m, 2H), 7.55-7.48 (m, 1H), 7.45-7.35 (m, 4H), 7.24 (d, J = 6.9 Гц, 1H), 7.12 (br. s., 1H), 6.03 (d,J = 10.3 Гц, 1H), 5.41-5.34 (m, 2H), 3.93 (dd, J= 7.6, 5.4 Гц, 1H), 3.66-3.62 (m, 1H), 2.82 (td, J= 10.2, 4.3 Гц, 1H), 2.43 (s, 4H), 2.29-2.07 (m, 3H), 1.99 (dq, J= 13.2, 6.8 Гц, 1H), 1.76-1.66 (m, 2Н), 1.63-1.49 (m, 3Н), 0.88 (dd, J= 10.0, 6.9 Гц, 6Н), 0.61 (d, J= 6.9 Гц, 3Н), 0.57 (d, J= 6.7 Гц, 3Н).
Сравнительные соединения от 45 до 48.
Сравнительные соединения от 45 до 48 могут быть получены в соответствии со способами, описанными в патенте США No. 7,053,084, для примеров 8, 12а, 38, и 45а, соответственно.
Сравнительное соединение
US 7,053,084
Структура
Пример 8
Г J) Н3С СНз
Пример 12а
Сравнительное соединение
US 7,053,084
Структура
Пример 38
HjC СИ,
Пример 45а
НзС
CLVrY"'
/ ^ Н3С CHj
Пример 49.
Фармацевтическая композиция, содержащая (2К,38)-М-((38)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид.
Инъекционный препарат был изготовлен, включая (2Я,38)-М-((38)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид, пример 1, в виде для однократного применения готового к использованию (RTU) стерильного раствора для внутривенного (IV) введения. Смесь для носителя изготовляли путем смешивания 80% объемного содержания полиэти-ленгликоля 400 и 20% объемного содержания воды при комнатной температуре. Пример 1 (0.2 мг/мл) добавляли к приготовленной смеси носителя. Композицию обрабатывали ультразвуком в течение около 20 мин до растворения примера 1.
Пример 50. Фармацевтическая композиция, содержащая (2Я,38)-М-((38)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид.
Лекарственный препарат был изготовлен, включая (2Я,38)-М-((38)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид, пример 1, в виде раствора или капсулы, подходящей для орального введения. Композиция для орального введения содержала 70% объемного содержания полиэтиленгликоля 300, 10% объемного содержания этанола, 10% объемного содержания TPG8, 10% объемного содержания CREMOPHOR(r) RH40 и пример 1 (концентрация лекарственного средства до 4 мг/мл).
Твердые TPG8 и CREMOPHOR(r) предварительно нагревали до жидкого состояния. Соответствующие количества каждого из вспомогательных веществ затем отмеряли и смешивали при комнатной температуре. Необходимое количество примера 1 добавляли к приготовленной смеси носителя. Композицию обрабатывали ультразвуком в течение около 20 мин до растворения примера 1.
Пример 51. Фармацевтическая композиция, содержащая (2R,38)-N-((38)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид.
Лекарственный препарат был изготовлен, включая (2R,38)-N-((38)-5-(3-фторфенил-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамид, пример 1, в виде раствора или капсулы, подходящей для орального введения. Композиция для орального введения содержала 80% объемного содержания полиэтиленгликоля 300, 10% объемного содержания этанола, 10% объемного содержания TPG8 и пример 1 (концентрация лекарственного средства до 4 мг/мл). Твердый TPG8 предварительно нагревали до жидкого состояния. Соответствующие количества каждого из вспомогательных веществ затем отмеряли и смешивали при комнатной температуре. Необходимое количество примера 1 добавляли к приготовленной смеси носителя. Композицию обрабатывали ультразвуком в течение около 20 мин до растворения примера 1.
Биологические анализы
Фармакологические свойства соединений по настоящему изобретению могут быть подтверждены рядом биологических анализов. Представленные в качестве примера биологические анализы, которые следуют далее, были выполнены с соединениями по настоящему изобретению.
Анализ трансактивации Notch-CBFL
Анализ Notch-CBFl (С-промотор связывающий фактор I) клеточной трансактивации основан на способности высвобожденых фрагментов внутриклеточного домена Notch (NICDs) функционировать в качестве транскрипционных факторов в сочетании с CBF1 и с другими ядерными факторами. Анализы люциферазы использовали, чтобы оценить антагонизм транскрипционной активности Notch-CBF 1.
Раковые клетки шейки матки HeLa кратковременно трансфицировали совместно с pCDNA3.1/Hygro плазмидами, содержащими процессированные рецепторы Notch 1, Notch 2, Notch 3 или Notch 4 и репор
терный вектор PGL3 люциферазы, содержащий 4 копии сайта связывания CBF1. Затем клетки тестировали для определения активности Notch-CBF1 при отсутствии или в присутствии испытуемых соединений.
HeLa клетки, сохраняемые в среде DMEM (высокое содержание глюкозы с HEPE8), 1X глутами-на/пенициллина/стрептомицина и 10% фетальной бычьей сыворотки, кратковременно трансфицировали в колбу Т175 (4,5 х 106 клеток/колбу), используя набор Monster Transfection (Mirus #MIR2906) в соответствии с требованиями производителя. В табл. 9 указано соответствующее количество ДНК для транс-фекций.
Таблица 9
ДНК (мкг)
CBF1 (мкг)
Вектор (мкг)
Суммарная ДНК (мкг)
Notch 1 человека
14.4
15.6
36.0
Notch 2 человека
14.4
19.6
36.0
Notch 3 человека
0.3
14.4
21.3
36.0
Notch 4 человека
14.4
17.6
36.0
Через шесть часов после трансфекций клетки обрабатывали трипсином и высевали в 384-луночные черные покрытые полиТЭ-лизином планшеты с культурами тканей с плотностью 5х10 клеток/лунка в 95 мкл среды для анализа (DMEM (высокое содержание глюкозы с HEPE8), 1X глютамин/пенициллин/ стрептомицин, 0,0125% B8A, 1X заменимые амино кислоты). Среду для анализа (5 мкл), содержащую тестируемые соединения в конечных концентрациях в диапазоне от 5 мкМ до 8.4х10-5 мкМ (3 кратные серийные разведения), добавляли к клеткам, и культуральные планшеты затем инкубировали в течение 18 часов при 37°С и 5% СО2. Контрольные лунки содержали DM8O носитель (общее количество) или 0,5 мкМ собственного низкомолекулярного ингибитора (показатель фона). Для каждого образца использовали дубликаты. Активность люциферазы измеряли после 20-минутного инкубирования с 50 мкл люцифе-разных реагентов 8TEADY-GLO(r) в соответствии с требованиями производителя (Promega, Cat. #Е2550) и анализировали с использованием Envision планшет-ридера (PerkinElmer, Boston, MA).
Антагонистический эффект соединений выражали как 100 х [1-(средняя проба-средний фон)/(сред-ний общий-средний фон)], где проба представляла собой активность люциферазы в присутствии тестируемого соединения, фон равнялся активности люциферазы в присутствии контрольного низкомолекулярного ингибитора, и общий представлял сигнал, индуцированный в лунках с DM8O. Данные отражали на графике, используя логистическое уравнение с четырьмя параметрами. Значение IC50 определеляли как концентрацию соединения, которое ингибирует 50% активности люциферазы. В табл. 10 ниже представлены значения IC50 для Notch 1 и Notch 3 для соединений из примеров 1-37 по настоящему изобретению и для сравнительных соединений 45-48, полученных в анализе трансактивации Notch-CBF1, указанном выше. В некоторых случаях это значение является средним из нескольких экспериментов, при этом N представляет собой число проведенных экспериментов. Соединения по настоящему изобретению, как подтверждается примерами 1-37, показали значения IC50 12,2 нМ или менее для Notch 1 и 15,0 нМ или менее для Notch 3.
Пример
Notch 1 (ICJO, нМ)
Notch 3 (ICJO, нМ)
8.2
15.0
3.0
3.2
4.9
7.7
12.6
4.4
4.4
5.8
3.7
5.7
4.6
7.7
4.8
4.0
1.6
1.4
3.3
6.1
3.1
6.3
4.7
8.3
1.4
2.1
1.7
2.9
3.7
3.4
2.8
2.7
4.8
7.2
3.9
5.7
4.3
4.2
2.8
4.6
6.4
6.1
4.3
7.4
4.8
13.4
4.8
7.9
12.2
3.0
6.2
9.3
сравнительное соединение 45
64 1
48.3
сравнительное соединение 46
42.4
74.5
Пример
Notch 1 (1С50, нМ)
Notch 3 (IC50, нМ)
сравнительное соединение 47
5.1
13.5
сравнительное соединение 48
12.3
12.5
Высокоэффективные анализы устойчивости к инактивации в процессе метаболизма Соединения, вводимые парентерально, проходили в кровоток и подвергались одному или более проходам через печень. Соединения, которые нелегко метаболизируются в печени, могут быть введены из расчета терапевтически эффективных плазменных уровней в течение терапевтически эффективных периодов времени.
Перорально вводимые соединения обычно абсорбируются стенками кишечника в кровяное русло и подвергаются первому проходу через печень. Соединения, которые нелегко метаболизируются в этом первом проходе через печень, могут распределиться в других участках тела в терапевтически эффективных количествах.
Для анализа устойчивости к инактивации в процессе метаболизма оценивали CYP-опосредованную
метаболическую стабильность in vitro, используя микросомы человека, крысы, мыши, собаки и/или обезьяны после десятиминутного инкубирования. Каждое соединение тестировали в двух повторах.
Результаты этих анализов выражали как часть исходного соединения, оставшегося в реакционной смеси после десятиминутного инкубирования (оставшееся в процентах). В общем, эти результаты использовали только для оценки степени CYP-опосредованного или NADPH-зависимого метаболизма тестируемого соединения. Когда соединение метаболизировалось в значительной степени (осталось <4050%), это указывало на высокий клиренс соединения in vivo вследствие CYP-опосредованного метаболизма. Однако если соединение демонстрировало умеренный (50-80%) или низкий (> 85%) уровень метаболизма в этих анализах in vitro, высокий клиренс был еще возможен in vivo по причине другого метаболизма и устранения сигнальных путей.
Полученный процент оставшегося соединения в этих анализах был предсказуемым из-за клиренса соединения in vivo, при допущении, что CYP-опосредованный метаболизм был преобладающим путем очищения. У разных видов микросом диапазоны результатов были приблизительно такими, как показано в табл. 11
Методики и материалы
Инкубирование с микросомами печени.
Тестируемое соединение получали в виде 3,5 мМ маточного раствора в 100% DM8O. Тестируемое соединение разводили для получения 50 мкМ раствора ацетонитрила (ACN), содержащего 1.4% DM8O, который затем использовали как 100х исходный раствор для инкубирования с микросомами. Каждое соединение испытывали в двух повторах отдельно для каждого из трех видов в серии анализов метаболической стабильности-человека, крысы и мыши, или как отдельных видов в сериях метаболической стабильности собаки или метаболической стабильности обезьяны. Соединение, NADPH и растворы мик-росом печени объединяли для инкубирования в три стадии:
1. 152 мкл суспензии микросом печени, белок концентрации 1.1 мг/мл в 100 мМ NaP1> pH 7.4, 5 мМ MgCl2 буфер предварительно нагревали при 37°С.
2. В ту же самую пробирку добавляли 1,7 мкл 50 мкМ соединения (98.6% ACN, 1.4% DM8O) и предварительно инкубировали при 37°С в течение 5 мин.
3. Реакцию инициировали добавлением 17 мкл предварительно нагретого раствора 10 мМ NADPH в 100 мМ NaP1, pH 7.4.
Компоненты реакции осторожно перемешивали и 75 мкл реакционной смеси сразу переносили в 150 мкл раствора для гашения реакции (нулевая временная точка, Т0). Реакции инкубировали при 37°С в течение 10 мин, и затем дополнительные 75 мкл аликвоты переносили в 150 мкл раствора для гашения реакции. В качестве гасящего раствора для прекращения метаболических реакций использовали ацето-нитрил, содержащий 100 мкМ DMN (УФ стандарт для контроля качества инъекций).
Погашенные смеси центрифугировали при 1500 оборотов в минуту (~ 500 X g) в центрифуге AL-LEGRA(r) Х-12, ротор 8X4750 (Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA) в течение пятнадцати минут, чтобы осадить денатурированные микросомы. Объем 90 мкл экстракта супернатанта, содержащего смесь исходного соединения и его метаболитов, затем переносили в отдельный 96-луночный планшет для UV-LC/M8-M8 анализа, чтобы определить процент исходного соединения, которое осталось в смеси.
Анализ образцов - технические средства.
ВЭЖХ: Hacoc-Thermo 8urveyor; Автоматический пробоотборник-CTC/LEAP HT8; УФ-детектор Thermo 8urveyor PDA плюс; Колонка-VARIAN(r) С18, 3 мкм, 2х20 мм с 0.5 мкм проходным фильтром; Подвижная фаза для предварительного анализа структурной целостности: (А) 98% воды, 2% ацетонит-рила с 10 мМ ацетата аммония; (В) 10% воды, 90% ацетонитрила с 10 мМ ацетата аммония; Подвижная фаза для анализа реакционного образца: (А) 98% воды, 2% ацетонитрила с 0.1% муравьиной кислоты; (В) 2% воды, 98% ацетонитрила с 0.1% муравьиной кислоты; (С) 0.1% гидроксида аммония в воде; (D) 0.1% гидроксида аммония в ацетонитриле.
Масс-спектрометр: Thermo T8Q QUANTUM(r) Ultra triple-quadrapole масс-спектрометр.
Анализ образцов - предварительный анализ структурной целостности.
Предварительный анализ устойчивсти к инактивации в процессе метаболизма и структурной целостности использовали для оценки чистоты анализируемых соединений. Соединения получали на 96-луночных планшетах в виде 57 мкл 3.5 мМ DM8O раствора. Исходные растворы DM8O, сдержащие 3.5 мМ соединения, разводили 18-кратно раствором, содержащим равные объемы ацетонитрила, изопропа-нола и MilliQ-H2O. Полученные растворы (200 мкм) анализировали для определения структурной целостности посредством LC-UV/M8 на Thermo LCQ Deca XP Plus с масс-спектрометрической ионной ловушкой, используя колонку Waters XBridge С18, 5 мкм, 2х50 мм с защитной колонкой Waters 8entry 2.1 мм, и условия LC, описанные в таблице ниже, с вводом пробы 5 мкл и скоростью потока 1 мл/мин. Полученные данные УФ-поглощения при 220 нм отражали чистоту соединения. Представлены результаты только для соединений с чистотой более 50%.
Таблица 13. Устойчивость к инактивации в процессе метаболизма. Градиент структурной целостности
Время градиентного элюирования (мин)
0.00
100
4.00
100
5.00
100
5.10
100
6.00
100
Анализ образов - инкубированные образцы.
Оптимизацию M8/M8 условий проводили на Thermo T8Q QUANTUM(r) triple-quadrapole масс-спектрометре, снабженном нагреваемым электрораспылительным источником (H-E8I), с автоматизированным введением с получением 8RM транзиций и их соответствующих значений энергии столкновения.
Растворы соединений с концентрацией 20 мкМ в смеси 1: 1 метанол:вода вводили при скорости потока 90 мкл/мин, затем объединяли с подвижной фазой при скорости потока 50 мкл/мин перед введением в источник. Все соединения оптимизировали, используя сначала подвижную фазу А и В (50% А и 50% В), и, если было необходимо, использовали подвижнуую фазу С и D (также в виде композиции 50:50). Оптимизированные параметры, включая полярность, 8RM транзицию и энергию столкновения, сохраняли в базе данных MICRO8OFT Access(r). Масс-спектрометрические условия, полученные в результате автоматизированного введения, использовали для подробного исследования инкубирования образцов из анализа метаболической стабильности. Инжекционный объем составлял 5 мкл, и скорость потока была 0,8 мл/мин. Используемый градиент показан в таблице ниже. Все образцы вводили используя сначала градиент подвижной фазы А и В. При необходимости (например, для хроматографических целей), образцы снова вводили с тем же самым градиентом, но использовали подвижную фазу С и D. Все параметры LC-M8/M8 анализов фиксировались электронно в файлах необработанных данных.
Таблица 14. Устойчивость к инактивации в процессе метаболизма. Градиент анализа образцов
Время градиентного
элюирования (мин)
(или С%)
(или D%)
0.00
0.20
0.30
100
1.05
100
1.10
1.50
Анализ данных.
Интегрирование пика выполняли с помощью программного обеспечения XCALIBUR(r). Расчет процента оставшегося соединния выполняли посредством сравнения LC-M8/M8 площадей пиков от Т10 минут образов до площадей пиков от Т0 минут образцов для каждого соединения.
Контроль качества.
Набор из трех соединений тестировали вместе с пробным соединением на каждом аналитическом планшете. Данные считали приемлемыми и загружали, только если результаты для этих контрольных соединений попадали в ожидаемые диапазоны, указанные ниже.
Анализ устойчивости к инактивации в процессе метаболизма, период полувыведения.
Скорость метаболизма и период полувыведения определяли in vitro. Использовали микросомы печени человека или животных, чтобы определить собственный клиренс (Clint) и печеночный клиренс (CLh,b) соединения. Эти параметры использовали для прогнозирования in vivo клиренса у человека, который определяет время действия лекарственного средства in vivo (Obach et al., 1997, 1999).
Анализ устойчивости к инактивации в процессе метаболизма и период полувыведения позволяет оценить время действия лекарственного средства и скорость CYP-опосредованного (NADPH-зависимого) метаболизма in vitro в микросомах человека, крысы, мыши, собаки и обезьяны. Период действия лекарственного средства охватывает 45-минут инкубации и включает временные точки 0, 5, 10, 15, 30 и 45, в каждой из которых измеряли количество тестируемого соединения, остающегося в смеси.
Рекомендации для интерпретации результатов.
Результаты анализа устойчивостии к инактивации в процессе метаболизма и полувыведения выражали как период полувыведения (T1/2, мин). В общем, эти результаты должны быть использованы только для оценки степени CYP-опосредованного или NADPH-зависимого метаболизма тестируемого соединения. Когда соединение в значительной степени подвергается метаболизму (T1/2 < 14 мин), это указывает на большой клиренс in vivo вследствие CYP-опосредованного метаболизма. Однако если соединение
демонстрировало умеренный (14-70 мин) или низкий (> 70 мин) метаболизм в этих анализах in vitro, высокий клиренс все еще был возможен in vivo вследствие другого процесса метаболизма и ликвидации сигнальных путей. Результаты этих анализов были предсказуемыми из-за клиренса соединения in vivo, при допущении, что CYP-опосредованный метаболизм был преобладающим путем выведения лекарственного средства из организма. В микросомах человека диапазоны результатов были примерно такими, как показано в следующей таблице.
Таблица 16. Устойчивость к инактивации в процессе метаболизма, период полувыведения. Рекомендации для интерпретации результатов
CYP-опосредованный клиренс
Т112, минуты
Человек
Низкий
> 70
Средний
14-70
Высокий
<14
Методики и материалы.
Микросомы печени приобретали у BD-Biosciences (Woburn, MA) и NADPH у AppliChem Inc; все другие реагенты были получены от 8igma. Инкубирование с микросомами печени.
Тестируемое соединение получали как 3,5 мМ исходный раствор в 100 процентах DM8O.
Тестируемое соединение разводили для получения 50 мкМ ацетонитрильного (ACN) раствора, содержащего 1.4% DM8O, который затем использовали в качестве 100-кратного исходного раствора для инкубирования с микросомами. Каждое соединение тестировали в микросомах печени человека, крысы, мыши, собаки и обезьяны. Соединение, NADPH и растворы микросом печени объединяли для инкубирования в три этапа.
1. 450 мкл суспензии микросом печени, белок концентрации 1.1 мг/мл в 100 мМ NaP1> pH 7.4, 5 мМ MgCl2 буфер предварительно нагревали при 37°С.
2. В ту же самую пробирку добавляли 5 мкл 50 мкМ соединения (98.6% ACN, 1.4% DM8O) и предварительно инкубировали при 37°С в течение 5 мин.
3. Реакцию инициировали добавлением 50 мкл предварительно нагретого раствора NADPH 10 мМ в 100 мМ NaP1, pH 7.4.
Компоненты реакции осторожно перемешивали и 65 мкл сразу переносили в 130 мкл раствора для гашения реакции (нулевая временная точка, Т0). Реакции инкубировали при 37°С в течение 5, 10, 15, 30 и 45 мин, и на каждой временной точке 65 мкл аликвоты переносили в 130 мкл раствора для гашения реакции. В качестве гасящего раствора для прекращения метаболических реакций использовали ацетонитрил, содержащий внутренний стандарт (100 нг/мл).
Погашенные смеси центрифугировали при 1500 оборотов в минуту (~ 500 X g) в центрифуге AL-LEGRA(r) Х-12, ротор 8X4750 (Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA) в течение пятнадцати минут, чтобы осадить денатурированные микросомы. Объем 90 мкл экстракта супернатанта, содержащего смесь исходного соединения и его метаболитов, затем переносили на отдельный 96-луночный планшет для LC/M8-M8 анализа, чтобы определить процент исходного соединения, которое осталось в смеси. Таблица 17. Анализ устойчивости к инактивации в процессе метаболизма и периода полувыведения.
Реакционные компоненты
Реакционные компоненты
Конечная концентрация в анализе метаболической стабильности
Соединение (Субстрат)
0.5 мкМ
NaPi Буфер, рН 7 4
100 мМ
DMSO
0.014%
Ацетонитрил
0.986%
Микросомы (человек, крыса, мышь) (BD/Гентест)
1 мг/мл белок
NADPH
1 ОмМ
MgCb
5 0мМ
37°С Время инкубирования
0, 5, 10, 15, 30 и 45 минут
Гашение/Раствор для остановки реакции (ACN+100MKMDMN)
130 мкл
Образец для реакции
65 мкл
Осаждение денату рированных микросом
15 минут
Анализ образцов - инструментарий.
ВЭЖХ: Насос - 8himadzu LC-20 AD 8eries Binary Pumps; автоматический пробоотборник -
CTC/LEAP HT8.
В табл. 18 ниже приведены значения CYP-опосредованного метаболического периода полувыведения для примеров 1-37 по настоящему изобретению и для сравнительных соединений 45-48, полученных в анализе устойчивости к инактивации в процессе метаболизма и периода полувыведения у человека. В некоторых случаях, значение является средним из нескольких экспериментов, где N представляет собой число проведенных экспериментов.
Соединения по настоящему изобретению, как подтверждается примерами 1-37, имели значения периода метаболического полувыведения (HLM) 31 мин или больше. В отличие от этого, сравнительные соединения 45-48 имели значения периода метаболического полувыведения (HLM) 8 мин или меньше.
Таблица18
Пример
HLM
(tl/2, МИН)
103
> 120
113
101
108
> 120
108
Пример
HLM (11/2, мин)
> 120
107
> 120
101
> 120
115
100
116
118
> 120
сравнительное соединение 45
сравнительное соединение 46
сравнительное соединение 47
сравнительное соединение 48
Иллюстративные соединения по изобретению показали неожиданное преимущество в анализе устойчивости к инактивации в процессе метаболизма и периода полувыведения в виде низкого клиренса вследствие CYP-опосредованного метаболизма у человека. Соединения по настоящему изобретению, как свидетельствуют примеры 1-37, имели время метаболического полувыведения в диапазоне от 31 мин до более чем 120 мин у человека в анализе устойчивости к инактивации в процессе метаболизма и периода полувыведения. В отличие от этого, сравнительные соединения 45-48 в анализе устойчивости к инактивации в процессе метаболизма у человека имели время метаболического полувыведения 8 мин или меньше. Сравнительные соединения 45-48 продемонстрировали высокий клиренс у человека в анализе метаболической стабильности, свидетельствуя о том, что соединения удалялись микросомами печени. Соединения по настоящему изобретению (примеры 1-37) сравнивали со сравнительными соединениями 45-48, описанными в патенте США No. 7,456,172, и было обнаружено, что они имели особенное преимущество. Соединения по настоящему изобретению имели удивительное преимущество в виде комбинации активности как ингибиторов Notch 1 и Notch 3, так и превосходной устойчивости к инактивации в процессе метаболизма в микросомах печени. Как показано в табл. 10 и 18, в представленных тестах соединения примеров 1-37 по настоящему изобретению имели значения IC50 для Notch 1 12.2 нМ или меньше и значения IC50 для Notch 3 15.0 нМ или меньше; и период метаболического полувыведения у человека составлял 31 мин или больше в анализе устойчивости к инактивации в процессе метаболизма и времени полувыведения. В отличие от этого, в аналогичных тестах сравнительные соединения 45-48 имели значения IC50 для Notch 1 в диапазоне от 5.1 нМ до 64.1 нМ и значения IC50 для Notch 3 в диапазоне от 12.5 нМ до 74.5 нМ; и период метаболического полувыведения у человека составлял 8 мин или меньше.
Ксенотрансплантатные мышиные модели опухоли человека.
Всех грызунов получали от Harlan 8prague Dawley Co. (Indianapolis, Indiana) и выдерживали в свободной от аммиака окружающей среде на ограниченной территории и в свободной от патогенов колонии. Все мыши проходили карантин примерно в течение 1 недели, перед тем как их использовали для выращивания опухоли и тестирования эффективности лекарственных средств. Мышей кормили и поили без ограничения. Программа по уходу за животными Bristol-Myers 8quibb Pharmaceutical Research Institute полностью аккредитована American Association for Accreditation of Laboratory Animal Care (AAALAC). Все эксперименты выполняли в соответствии с методиками испытаний на животных Bristol-Myers 8quibb (BM8) и основополагающими принципами. Ксенотрансплантатные опухоли выращивали и поддерживали подкожно (8C) у иммунодефицитных мышей линии BALB/c nu/nu nude или NOD-8CID мышей (Har-lan 8prague Dawley). Опухоли репродуцировали в виде подкожных трансплантатов у соответствующего вида мышей (табл. 19), используя фрагменты опухоли, полученные от мышей-доноров.
Таблица 19. Гистологические типы и вид мыши-хозяина/гендерная специфика для вьфащивания
Доклинические химиотерапевтические испытания.
Требуемое число животных, необходимых для получения исчерпывающего ответа, объединяли в начале эксперимента, и каждому животному подкожно вводили имплантат из фрагмента опухоли (~ 20 мг) с использованием троакара 13-го калибра. Опухоли позволяли вырасти до заранее заданного окна размерного допуска (опухоли вне диапазона исключали), и животных равномерно распределяли в различные терапевтические и контрольные группы. Обычно терапевтические и контрольные группы насчитывали 8 мышей, за исключением экспериментов, проведенных в 8AL-IGF (это не включено в табл. 19) модели опухоли, где обычно было 5 мышей на терапевтическую и контрольную группу. Обработка каждого животного базировалась на индивидуальной массе тела. Обработанные животные, ежедневно осматривались из-за обработки, сопряженной с токсичностью/летальностью. Каждую группу животных взвешивали до начала обработки (Wt1) и затем повторно после последней терапевтической дозы (Wt2). Разница в массе тела (Wt2-Wt1) определяла меру токсичности, связанной с обработкой. Ответ опухоли на лечение определяли путем измерения опухолей штангенциркулем дважды в неделю, до тех пор, пока опухоли не достигали заранее заданного "целевого" размера 0.5 г или 1 г в зависимости от типа опухоли. Массы опухоли (мг) оценивали в соответствии с формулой:
Масса опухоли = (длина х ширина2) - 2.
Критерии ответа опухоли выражали в терминах ингибирования роста опухоли (% TGI). Задержку роста опухоли определяли как разницу во времени (сутки), необходимого для того, чтобы обработанные опухоли (Т) достигли предварительно заданного целевого размера в сравнении с опухолями из контрольной групп (С). С этой целью массу опухоли мышей из группы выражали как среднюю массу опухоли (MTW). Ингибирование роста опухоли рассчитывали следующим образом:
% ингибирование роста опухоли = .
К)'
где Ct = средний размер контрольной опухоли в конце обработки;
Со = средний размер контрольной опухоли в начале обработки;
Tt = средний размер опухоли из обработанной группы в конце обработки;
То = средний размер опухоли из обработанной группы в начале обработки;
Активность определяли как достижение стойкого ингибирования роста опухоли на 50% или более (то есть, TGI > 50%) или как логарифм гибели клеток 0,5 или больше (LCK > 0.5) за период, эквивалентный по меньшей мере времени удвоения объема 1 опухоли, при этом медикаментозное лечение должно быть проведено за период, эквивалентный, по меньшей мере, времени удвоения объемов 2 опухолей.
Ответ опухоли также выражали в терминах задержки роста опухоли (значение TGD), которое определяли как разницу во времени (сутки), необходимого, чтобы обработанные опухоли (Т) достигли заданного целевого размера, в сравнении с опухолями из контрольной группы (С).
Когда возможно, противоопухолевую активность определяли при различных уровнях доз вплоть до максимально допустимой дозы (MTD), которую определяли как уровень дозы, ниже которого сразу же достигается чрезмерная токсичности (то есть, более чем один летальный исход). Когда наступал летальный исход, день смерти записывали. Обработанные мыши, погибающие до того, как их опухоли достигали целевого размера считались погибшими от токсичности лекарственного средства. Ни одна из контрольных мышей, имеющих опухоли меньше заданного размера, не погибла. Обработанные группы с более чем одним летальным исходом, вызванным токсичностью лекарственного средства, рассматривались как имевшие чрезмерно токсичную обработку, и их данные не включали в оценку противоопухолевой эффективности соединения. Возможное воздействие лекарственной токсичности, влияющей на переносимость лечения, является важным фактором в комбинированных химиотерапевтических испытаниях. Интерпретация комбинированных терапевтических результатов должна быть основана на противоопухолевой активности из лучших возможных ответов для отдельных лекарственных средств в сопоставлении с комбинацией при сравнительно допустимых дозах. Поэтому терапевтический синергизм определяли как терапевтический эффект, достигнутый при переносимом режиме комбинированных лекарственных средств, который превысил оптимальный эффект, достигнутый при любой переносимой дозе монотерапии. Статистические оценки данных выполняли, используя обобщённый Геханом критерий Вилкоксона. Статистическая значимость была показана при Р <0.05.
Введение лекарственного средства
В исследованиях in vitro все соединения растворяли в 100% DM8O и серийно разводили в среде/10% фетальной бычьей сыворотки. Для введения ингибиторов Notch грызунам использовали следующие вспомогательные вещества: ETOH/TPG8/PEG300 (10:10:80). Ингибиторы Notch обычно вводили перорально по схеме QD (каждый день)х 15, 10 дней введение, 2 дня перерыв, 5 дней введение, хотя оценивали и другие схемы, которые оказались также эффективными. Например, режим дозирования, состоящий из QDх12,4 дня введение, 3 дня перерыв, как было показано, являлся в равной степени эффек
тивным, как и QDх15, 10 дней введение, 2 дня перерыв, 5 дней введение. В исследованиях BID (два раза в сути) вторую дозу давали, спустя от 6 до 12 ч после первой дозы. Противоопухолевая активность In Vivo.
Противоопухолевую активность примера 1, введенного перорально (РО), оценивали у мышей, которым имплантировали ксенотрансплантаты опухоли человека. Как показано на фиг. 1-4, соединение примера 1 демонстрировало противоопухолевую активность.
В табл. 20 ниже приведены показатели противоопухолевой активности соединений из примеров по настоящему изобретению, полученные на ксенотрансплантатных моделях опухоли человека у мышей. Соединения по настоящему изобретению, как иллюстрируется примерами 1 и 3, проявляют противоопухолевую активность при пероральном введении (РО).
TALL1: - QDх10.
MDA-MD-157 и MDA-MB-468: - QDх 15, 10 дней введение - 2 дня-перерыв - 5 дней введение. QD-один раз в сутки. LCK-логарифм гибели клеток. TGI-ингибирование роста опухоли.
Оценка пролекарства: Фармакокинетика с однократным приемом лекарственного средства у крыс.
Для фармакокинетических исследований использовали самцов крыс 8PRAGUE DAWLEY(r) (250300 г). Крыс не кормили в течение ночи перед дозированием и кормили спустя 4 ч после введения дозы. В каждом исследовании группы животных (N = 2-3) получали тестируемое соединение через желудочный зонд. Образцы крови (~ 0.3 мл) отбирали из яремной вены в K2EDTA-содержащие пробирки через 0.5, 1, 3, 5, 7 и 24 ч после введения дозы. Образцы плазмы, полученные центрифугированием при 4°С (1500-2000хg), хранили при -20°С до анализа посредством LC/M8/M8.
Анализ данных фармакокинетических исследований.
Фармакокинетические параметры получали посредством некомпартментного анализа зависимости плазменной концентрации (определяется посредством LC/M8/M8) от временных данных (программное обеспечение ThermoKinetica версия 5.0). Пиковая концентрация (Cmax) и время для Cmax, Tmax записывали непосредственно из экспериментальных наблюдений. Площадь под кривой от времени ноль до последнего времени отбора проб (AUCo^) рассчитывали с использованием линейно-логарифмического метода трапеций. Общий плазменный клиренс (CLTp), стационарный объем распределения (Vss), кажущееся время полувыведения (t1/2) и среднее время удержания (MRT) оценивали после IV введений. Оценку t1/2 делали с использованием как минимум 3 временных точек с количественно определяемыми коцентра-циями. Абсолютную пероральную биодоступность F оценивали как меру дозо-нормализованных значений AUC после перорального введения и IV доз. Содержание в плазме крови примера 1 (AUCo^ или AUCo^) после введения пролекарств сравнивали с содержанием после введения примера 1. Оценивали относительные биодоступности этих пролекарств к примеру 1 (табл. 21).
(HO) (O)PO -CH2OC(0)- Ry представляет собой: -SCH2CH(NH2)C(O)OH, -SCH2CH(NH2)C(O)OCH3 или -SCH2CH(NH2)C(O)OC(CH3)3;
кольцо А представляет собой фенил или пиридинил;
каждый Ra представляет собой независимо Cl, C1-3 алкил, -CH2OH, -CF3, циклопропил, -ОСН3 и/или -О(циклопропил);
каждый Rb представляет собой независимо F, Cl, -СН3, -CH2OH, -CF3, циклопропил и/или -ОСН3; у представляет собой ноль, 1 или 2 и z представляет собой ноль, 1 или 2;
в случае если кольцо А представляет собой фенил и z представляет собой ноль, тогда у представляет собой 1 или 2 и по меньшей мере один Ra представляет собой C1-3 алкил, -СН2ОН, -CF3, циклопропил или -О(циклопропил);
в случае если R3 представляет собой Rx, тогда R4 представляет собой Н, и
в случае если R4 представляет собой Ry, тогда R3 представляет собой Н или -СН3.
2. Соединение по п.1 и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, где кольцо А представляет собой фенил; R3 представляет собой Н и z имеет значения 1 или 2.
3. Соединение по п.1 и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, где R2 представляет собой -CH2CH2CF3; кольцо А представляет собой фенил и z имеет значения 1 или 2.
4. Соединение по п.1 и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, где R2 представляет собой -CH2CH2CF3; кольцо А представляет собой фенил; Ra представляет собой C1-3 алкил или -СН2ОН; каждый Rb представляет собой независимо F и/или Cl; у имеет значение 1 и z имеет значения 1 или 2.
5. Соединение по п.4, имеющее структуру
6. Соединение по п.1 и/или по меньшей мере одна его фармацевтически приемлемая соль, имеющее структуру
где R3 представляет собой Н или Rx; R4 представляет собой Н или Ry;
в случае если R3 представляет собой Rx, тогда R4 представляет собой Н; и
8. Соединение по п.1, выбранное из
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (1);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-этил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (2);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-изопропил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3, 3,3-трифторпропил)сукцинамида (3);
(2R,3S)-N-(9-хлор-5-(3,4-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (4);
(2R,3S)-N-(9-хлор-5-(3,5-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (5);
(2R,3S)-N-((3S)-9-этил-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (6);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (7);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (8);
(2R,3 S)-N-((3 S)-5 -(3 -метилфенил)-2-оксо-9-(трифторметил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (9);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3,5-диметилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3, 3,3-трифторпропил)сукцинамида (10);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-9-(трифторметил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (11);
(2R,3S)-N-((3S)-9-изопропил-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3, 3,3-трифторпропил)сукцинамида (12);
(2R,3S)-N-((3S)-9-изопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (13);
(2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилокси)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (14);
(2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилокси)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (15);
(2R,3 S)-N-((3 S)-9-(циклопропилокси)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3 -ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (16);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3-(4,4,4-трифторбутил) -2-(3,3,3 -трифторпропил)сукцинамида (17);
(2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-(3-(трифторметил)фенил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-3 -(4,4,4-трифторбутил)-2-(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (18);
(2R,3S)-N-((3S)-9-(циклопропилокси)-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (19);
(2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-(3-(трифторметил)фенил)-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (20);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(2-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3, 3,3-трифторпропил)сукцинамида (21);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (22);
(2R,3S)-N-((3S)-9-метил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (23);
(2R,3S)-N-((3S)-9-циклопропил-2-оксо-5-фенил-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (24);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-циклопропилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (25);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-хлорфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (26);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-хлорфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (27);
(2R,3S)-N-((3S)-9-хлор-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис (3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (28);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (29);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-(гидроксиметил)фенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (30);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(2-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (31);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (32);
(2R,3S)-N-((3S)-9-метокси-2-оксо-5-(5-(трифторметил)-2-пиридинил)-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензоди-азепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (33);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(5-хлор-2-пиридинил)-9-метокси-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (34);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-метоксифенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (35);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-метилфенил)-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (36);
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-фторфенил)-9-(гидроксиметил)-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил)-2,3-бис(3,3,3-трифторпропил)сукцинамида (37);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-валината (38);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-аланината (39);
S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеина (40);
трет-бутил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеината (41);
метил S-(((2S,3R)-6,6,6-трифтор-3-(((3S)-5-(3-фторфенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бен-зодиазепин-3-ил)карбамоил)-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-L-цистеината (42);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фтор-фенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил (4-(фосфонокси)фенил)ацетата
(43);
((3S)-3-(((2R,3S)-3-карбамоил-6,6,6-трифтор-2-(3,3,3-трифторпропил)гексаноил)амино)-5-(3-фтор-фенил)-9-метил-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-1,4-бензодиазепин-1-ил)метил L-валил-L-валината (44) и их фармацевтически приемлемых солей.
9. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения заболевания или расстройства,
ассоциированного с активностью рецептора Notch, содержащая соединение по п.1 и/или по меньшей ме-
ре одну его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.
10. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения заболевания или расстройства,
ассоциированного с активностью рецептора Notch, содержащая: (i) по меньшей мере одно соединение
формулы (I), имеющее структуру
где R3 представляет собой Н, -СН3 или Rx; R4 представляет собой Н или Ry; Rx представляет собой
-CH2OC(0)CH(CHs)NH2, -CH20C(0)CH(NH2)CH(CH3)2, -СН2ОС(0)СН((СН(
или
Ry представляет собой -SCH2CH(NH2)C(O)OC(CH3)3;
в случае если R3 представляет собой Rx, тогда R4 представляет собой Н; и в случае если R4 представляет собой Ry, тогда R3 представляет собой Н или -СН3; и/или по меньшей мере одну его фармацевтически приемлемую соль; (й) соединение формулы (I), имеющее структуру
или
и фармацевтически приемлемые носители.
11. Применение соединения по любому из пп. 1 -8 или его фармацевтически приемлемых солей в терапии для лечения рака.
12. Применение по п.11, где указанная терапия дополнительно включает одно или более дополнительных лекарственных средств для лечения рака, выбранных из дазатиниба, паклитаксела, тамоксифена, дексаметазона и карбоплатина, вводимых последовательно или одновременно.
13. Применение соединения по любому из пп.1-8 или его фармацевтически приемлемых солей в производстве лекарственного средства для лечения рака.
11.
11.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
027281
027281
- 1 -
- 1 -
027281
027281
- 1 -
- 1 -
027281
027281
- 1 -
- 1 -
027281
027281
- 1 -
- 1 -
027281
027281
- 1 -
- 1 -
027281
027281
- 1 -
- 1 -
027281
027281
- 2 -
- 3 -
027281
027281
- 4 -
027281
027281
- 6 -
- 6 -
027281
027281
- 35 -
- 35 -
027281
027281
- 35 -
- 35 -
027281
027281
- 45 -
- 45 -
027281
027281
- 46 -
- 46 -
027281
027281
027281
027281
- 50 -
- 50 -
027281
027281
027281
027281
- 62 -
- 62 -
027281
027281
- 62 -
- 62 -
027281
027281
- 62 -
- 62 -
027281
027281
- 82 -
- 82 -
027281
027281
- 83 -
- 83 -
027281
027281
- 84 -
- 84 -