[RU]

1. Применение глюкокортикоида (GC) для облегчения, лечения или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных введением CD3-связывающего домена, у пациента, нуждающегося в этом, где указанный GC следует вводить перед первой дозой CD3-связывающего домена и следует вводить перед второй дозой и/или третьей дозой CD3-связывающего домена.

2. Применение по п.1, где указанный GC представляет собой дексаметазон.

3. Применение по п.1 или 2, где указанное нежелательное неврологическое явление представляет собой одно или более из нарушений чувств, судорог, энцефалопатии, отека мозга, спутанности сознания, атаксии, апраксии, нарушения речи, галлюцинаций, парезов, тремора, головной боли или дезориентации.

4. Применение по любому из пп.1-3, где указанный CD3-связывающий домен представляет собой биспецифическое одноцепочечное антитело.

5. Применение по п.4, где указанное биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой CD19 ×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело.

6. Применение по п.5, где указанное CD19 ×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой МТ103.

7. Применение по любому из пп.1-6, где указанный пациент представляет собой человека.

8. Применение по любому из пп.1-7, где указанный пациент характеризуется соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5.

9. Способ облегчения, лечения или профилактики неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных введением CD3-связывающего домена, где указанный способ включает введение глюкокортикоида (GC) пациенту, нуждающемуся в этом, где GC вводят перед введением первой дозы CD3-связывающего домена и перед введением второй дозы и/или третьей дозы CD3-связывающего домена.

10. Способ по п.9, где указанный GC представляет собой дексаметазон.

11. Способ по п.9 или 10, где первую дозу CD3-связывающего домена вводят в течение первого периода времени и затем вторую дозу CD3-связывающего домена вводят в течение второго периода времени, и где вторая доза превышает первую дозу.

12. Способ по п.11, где после первой и второй доз CD3-связывающего домена в течение первого и второго периодов времени вводят третью дозу CD3-связывающего домена, где третья доза превышает первую и вторую дозы.

13. Способ по любому из пп.9-12, где указанное нежелательное неврологическое явление представляет собой одно или более из нарушений чувств, судорог, энцефалопатии, отека мозга, спутанности сознания, атаксии, апраксии, нарушения речи, галлюцинаций, парезов, тремора, головной боли или дезориентации.

14. Способ по любому из пп.9-13, где указанный CD3-связывающий домен представляет собой биспецифическое одноцепочечное антитело.

15. Способ по п.14, где указанное биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой CD19 ×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело.

16. Способ по п.15, где указанное CD19 ×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой МТ103.

17. Способ по любому из пп.9-16, где указанный пациент представляет собой человека.

18. Способ по любому из пп.9-17, где указанный пациент характеризуется соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5.

19. Набор для облегчения, лечения или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных введением CD3-связывающего домена, содержащий GC, CD3-связывающий домен и инструкции по применению и/или напечатанный текст, указывающие, что GC следует использовать перед указанным CD3-связывающим доменом для лечения, уменьшения и/или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных указанным CD3-связывающим доменом.

(57) Реферат / Формула:

1. Применение глюкокортикоида (GC) для облегчения, лечения или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных введением CD3-связывающего домена, у пациента, нуждающегося в этом, где указанный GC следует вводить перед первой дозой CD3-связывающего домена и следует вводить перед второй дозой и/или третьей дозой CD3-связывающего домена.

2. Применение по п.1, где указанный GC представляет собой дексаметазон.

3. Применение по п.1 или 2, где указанное нежелательное неврологическое явление представляет собой одно или более из нарушений чувств, судорог, энцефалопатии, отека мозга, спутанности сознания, атаксии, апраксии, нарушения речи, галлюцинаций, парезов, тремора, головной боли или дезориентации.

4. Применение по любому из пп.1-3, где указанный CD3-связывающий домен представляет собой биспецифическое одноцепочечное антитело.

5. Применение по п.4, где указанное биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой CD19 ×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело.

6. Применение по п.5, где указанное CD19 ×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой МТ103.

7. Применение по любому из пп.1-6, где указанный пациент представляет собой человека.

8. Применение по любому из пп.1-7, где указанный пациент характеризуется соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5.

9. Способ облегчения, лечения или профилактики неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных введением CD3-связывающего домена, где указанный способ включает введение глюкокортикоида (GC) пациенту, нуждающемуся в этом, где GC вводят перед введением первой дозы CD3-связывающего домена и перед введением второй дозы и/или третьей дозы CD3-связывающего домена.

10. Способ по п.9, где указанный GC представляет собой дексаметазон.

11. Способ по п.9 или 10, где первую дозу CD3-связывающего домена вводят в течение первого периода времени и затем вторую дозу CD3-связывающего домена вводят в течение второго периода времени, и где вторая доза превышает первую дозу.

12. Способ по п.11, где после первой и второй доз CD3-связывающего домена в течение первого и второго периодов времени вводят третью дозу CD3-связывающего домена, где третья доза превышает первую и вторую дозы.

13. Способ по любому из пп.9-12, где указанное нежелательное неврологическое явление представляет собой одно или более из нарушений чувств, судорог, энцефалопатии, отека мозга, спутанности сознания, атаксии, апраксии, нарушения речи, галлюцинаций, парезов, тремора, головной боли или дезориентации.

14. Способ по любому из пп.9-13, где указанный CD3-связывающий домен представляет собой биспецифическое одноцепочечное антитело.

15. Способ по п.14, где указанное биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой CD19 ×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело.

16. Способ по п.15, где указанное CD19 ×CD3-биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой МТ103.

17. Способ по любому из пп.9-16, где указанный пациент представляет собой человека.

18. Способ по любому из пп.9-17, где указанный пациент характеризуется соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5.

19. Набор для облегчения, лечения или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных введением CD3-связывающего домена, содержащий GC, CD3-связывающий домен и инструкции по применению и/или напечатанный текст, указывающие, что GC следует использовать перед указанным CD3-связывающим доменом для лечения, уменьшения и/или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных указанным CD3-связывающим доменом.

---

Евразийское 026075 (13) B1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.02.28
(21) Номер заявки 201390621
(22) Дата подачи заявки
2011.10.27
(51) Int. Cl.
A61K31/573 (2006.01) A61K39/395 (2006.01) C07K16/28 (2006.01)
(54) ПРЕДОТВРАЩЕНИЕ НЕБЛАГОПРИЯТНЫХ ЭФФЕКТОВ, ВЫЗВАННЫХ CD3-СПЕЦИФИЧЕСКИМИ СВЯЗЫВАЮЩИМИ ДОМЕНАМИ
(31) 61/412,229
(32) 2010.11.10
(33) US
(43) 2014.05.30
(86) PCT/EP2011/068862
(87) WO 2012/062596 2012.05.18
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
ЭМДЖЕН РИСЕРЧ (МЬЮНИК) ГМБХ (DE)
(72) Изобретатель:
Цугмайер Герхард, Нагорзен Дирк, Шеле Йюрген (DE)
(74) Представитель:
Поликарпов А.В. (RU)
(56) WO-A1-9954440
WO-A1-2007068354
GOEBELER M. ET AL.: "CD3/CD19 BISPECIFIC BITE (R) ANTIBODY BLINATUMOMAB TREATMENT OF NON-HODGKIN LYMPHOMA (NHL) PATIENTS: 60 mu G/M-2/D BY CONTINUOUS
INFUSION IS TOLERABLE AND RESULTS IN
DURABLE RESPONSES", HAEMATOLOGICA-THE HEMATOLOGY JOURNAL, vol. 95, no. Suppl. 2, 10 June 2010 (2010-06-10), 13 June 2010 (2010-06-13), page 230, XP002667641, & 15TH ANNUAL MEETING OF THE EUROPEAN-HEMATOLOGY-ASSOCIATION; BARCELONA, SPAIN the whole document
CHRISTIAN BRANDL ET AL.: "The effect of dexamethasone on polyclonal T cell activation and redirected target cell lysis as induced by a CD19/CD3-bispecific single-chain antibody construct", CANCER IMMUNOLOGY, IMMUNOTHERAPY, vol. 56, no. 10, 20 February 2007 (2007-02-20), pages
1551-1563, XP019539092, SPRINGER, BERLIN, DE
ISSN: 1432-0851, DOI: 10.1007/S00262-007-0298-Z the whole document
DATABASE BIOSIS [Online] BIOSCIENCES INFORMATION SERVICE, PHILADELPHIA, PA, US; November 2009 (2009-11), NAGORSEN DIRK ET AL.: "Confirmation of Safety, Efficacy and Response Duration in Non-Hodgkin Lymphoma Patients Treated
with 60 mu g/m(2)/d of BiTE (R) Antibody
Blinatumomab.", XP002668994, Database accession no.
PREV201000353716 abstract & NAGORSEN DIRK
ET AL.: BLOOD, vol. 114, no. 22, November 2009
(2009-11), page 1066, 51ST ANNUAL MEETING OF
THE AMERICAN-SOCIETY-OF-HEMATOLOGY; NEW ORLEANS, LA, USA; DECEMBER 05-08-2009
- & Nagorsen et al.: "Confirmation of Safety, Efficacy and Response Duration in Non-Hodgkin Lymphoma Patients treated with 60 microg/m2/d of BiTE(r) Antibody Blinatumomab", Micromet - ASH Poster, 7 December 2009 (2009-12-07), XP002667643, Retrieved from the Internet: URL:http://www.micromet.com/ Assets/ASH_poster_final_Dec_7_2009.aspx [retrieved on
2012-01-19] the whole document
HOFFMANN PATRICK ET AL.: "Serial killing of tumor cells by cytotoxic T cells redirected with a CD19-/CD3-bispecific single-chain antibody construct", INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER, vol. 115, no. 1, 20 May 2005 (2005-05-20), pages 98-104, XP002335808,
JOHN WILEY & SONS, INC, UNITED STATES,
SWITZERLAND, GERMANY ISSN: 0020-7136, DOI: 10.1002/IJC.20908 the whole document
WOLF ET AL.: "BiTEs: bispecific antibody constructs with unique anti-tumor activity", DRUG DISCOVERY TODAY, vol. 10, no. 18, 15 September
2005 (2005-09-15), pages 1237-1244, XP005103829, ELSEVIER, RAHWAY, NJ, US ISSN: 1359-6446, DOI:
10.1016/51359-6446(05)03554-3 the whole document
BAEUERLE P.A. ET AL.: "BiTE: a new class of antibodies that recruit T-cells", DRUGS OF THE FUTURE, vol. 33, no. 2, February 2008 (2008-02), pages 137-147,
XP002667644, ISSN: 0377-8282 the whole document
WO-A1-2011051307
R. Bargou: "1Blinatumomab (CD3/CD19 BiTE antibody) results in a high response rate in patients with relapsed non-hodgkin lymphoma (NHL) including
MCL and DLBCL", June 2011 (2011-06), XP002667645,
11th International Conference on Malignant Lymphoma, Lugano Switzerland, June 15-18, 2011 Retrieved from the Internet: URL:http://www.mi cromet.com/Assets/ FN_Micromet_ICML-NHL-Oral-15 June.aspx [retrieved on
2012-01-18] the whole document
DATABASE BIOSIS [Online] BIOSCIENCES INFORMATION SERVICE, PHILADELPHIA, PA, US;
November 2010 (2010-11), VIARDOT ANDREAS ET AL.: "Treatment of Patients with Non-Hodgkin
Lymphoma (NHL) with CD19/CD3 Bispecific Antibody
Blinatumomab (MT103): Double-Step Dose Increase to Continuous Infusion of 60 mu g/m(2)/d Is Tolerable and Highly Effective", XP002667646, Database accession no. PREV201100425423 Abstract & BLOOD, vol. 116, no. 21, November 2010 (2010-11), pages 1186-1187,
52ND ANNUAL MEETING OF THE AMERICAN-SOCIETY-OF-HEMATOLOGY (ASH); ORLANDO, FL,
USA; DECEMBER 04-07, 2010, ISSN: 0006-4971(print)
- & Viardot et al.: "Treatment of Patients DIRK NAGORSEN ET AL.: "Immunotherapy
With Non-Hodgkin Lymphoma With CD19/CD3Bispecific of lymphoma and leukemia with T-cell engaging
Antibody Blinatumomab (MT103)", Micromet 6 December BiTE antibody blinatumomab", LEUKEMIA AND
2010 (2010-12-06), XP002667647, Retrieved from the LYMPHOMA, vol. 50, no. 6, 1 January 2009 (2009-01-01),
Internet: t_Viardot_poster_6DEC2010.aspx [retrieved on pages 886-891, XP008128752, HARWOOD ACADEMIC
2012-01-19] the whole document PUBLISHERS, CHUR, CH, ISSN: 1042-8194, DOI:
10.1080/10428190902943077
(57) Изобретение относится к глюкокортикоиду (GC) для применения в облегчении, лечении и профилактике нежелательных неврологических/психиатрических явлений, вызванных CD3-связывающим доменом. Кроме того, раскрыты наборы, содержащие GC, CD3-связывающий домен и инструкции по применению, в которых указано, что GC следует использовать для лечения, облегчения и/или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных указанным CD3-связывающим доменом.
Настоящее изобретение относится к глюкокортикоиду (GC) для применения в облегчении, лечении и профилактике неврологических/психиатрических нежелательных явлений, вызванных CD3-связывающим доменом. Также описаны наборы, содержащие GC, CD3-связывающий домен и инструкции для применения, которые указывают, что GC следует использовать для лечения, облегчения и/или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных указанным CD3-связывающим доменом.
В терапии рака на основе антител необходимо, чтобы для проявления активности целевой антиген был прочно связан с поверхностью раковых клеток. Связываясь с поверхностной мишенью, антитело может либо непосредственно передать смертельный сигнал раковым клеткам, либо опосредованно, например вовлекая цитотоксические Т-клетки в случае, если это биспецифическое антитело. При идеальном сценарии лечения целевой антиген присутствует в большом количестве и доступен на каждой опухолевой клетке и отсутствует, замаскирован или присутствует в значительно меньшем количестве на нормальных клетках. Эта ситуация обеспечивает основу для терапевтического диапазона, в котором определенная доза терапевтического средства на основе антител эффективно поражает раковые клетки, но щадит нормальные клетки.
Хотя связывающие домены, такие как домены антител, являются эффективным средством в лечении многих расстройств, в частности рака, их введение не всегда не имеет побочных эффектов. Неблагоприятные эффекты могут привести к обратимым или необратимым изменениям в состоянии здоровья пациента. Так как неблагоприятные эффекты могут быть вредными и нежелательными, крайне желательно их избегать. Однако, хотя известно, что лекарственное средство может вызывать неблагоприятные эффекты, его предписания и введения нельзя избежать или его следует принимать, так как это лекарственное средство обеспечивает исключительно благоприятный терапевтический эффект или даже может спасти жизнь.
В клинических испытаниях можно осуществить общее разграничение неблагоприятных эффектов (АЕ) и серьезных неблагоприятных эффектов (SAE). В частности, неблагоприятные эффекты можно разделить на 5 степеней в соответствии с общими терминологическими критериями нежелательных явлений (СТСАЕ). Степень 1 относится к незначительным АЕ, степень 2 - к умеренным АЕ, степень 3 - к серьезным АЕ, степень 4 - к опасным для жизни или приводящим к потере трудоспособности АЕ, в то время как степень 5 означает смерть, связанную с АЕ.
Неблагоприятным эффектом, наблюдаемым в терапии на основе антител, является возникновение связанных с инфузией побочных эффектов, таких как синдром выброса цитокинов (CRS). Другими описанными неблагоприятными побочными эффектами, ассоциированными с CRS, являются усталость, рвота, тахикардия, гипертензия, боль в спине, а также реакции центральной нервной системы (CNS реакции, неврологические и/или психиатрические), такие как судороги, энцефалопатия, отек мозга, асептический менингит и головная боль.
Нежелательные явления, такие как выброс цитокинов и неврологические/психиатрические реакции наблюдались не только с антителами, связывающимися с Т-клеточным рецептором, но также с CD19xCD3-биспецифическим одноцепочечным антителом, связывающимся с CD3-частью Т-клеточного рецептора (называемым блинатумомабом (МТ103)). Блинатумомаб (МТ103) представляет собой лимфо-ма-направленное, рекомбинантное, биспецифическое одноцепочечное CD19xCD3-антитело, которое связывается с CD19 на поверхности почти всех В-клеток и опухолевых В-клеток и одновременно может вступать в контакт с Т-клеткой, тем самым инициируя Т-клетку убивать целевую В-клетку или опухолевую В-клетку. Блинатумомаб состоит из четырех иммуноглобулиновых вариабельных доменов, собранных в одну полипептидную цепь. Два из этих вариабельных доменов формируют связывающий сайт для CD19, клеточного поверхностного антигена, экспрессируемого на большинстве В-клеток и опухолевых В-клеток. Два других вариабельных доменов формируют связывающий сайт для CD3-комплекса на Т-клетках. Блинатумомаб предназначен для направления цитотоксических или уничтожающих клетки организма Т-клеток против опухолевых клеток и представляет новый терапевтический подход к терапии рака. Блинатумомаб в настоящее время проходит клинические испытания.
Как описано, например, в WO 99/54440, неблагоприятные эффекты были отмечены в предыдущем исследовании, выполненном с блинатумомабом, применяемом в повторных болюсных инфузиях пациенту с В-клеточным хроническим лимфолейкозом (B-CLL). Как показано на фиг. 19 и 20 в WO 99/54440, выброс TNF, IL-6 и IL-8 обнаруживался в ответ на каждую из введенных 20-минутных инфузий 3 и 10 мкг упомянутого биспецифического одноцепочечного антитела соответственно с выбросом цитокинов после каждого введения. Максимальный выброс цитокинов наблюдался после введения 10 мг биспеци-фического одноцепочечного антитела. В следующем клиническом исследовании, в котором возрастающие дозы CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела вводили в виде болюсных инфузий пациентам с В-клеточными злокачественными образованиями, также наблюдались неблагоприятные эффекты. По данным ретроспективного анализа 7 из 22 пациентов продемонстрировали раннюю неврологическую реакцию, включающую, например, спутанность сознания, атаксию, расстройство речи или дезориентацию.
Как показано в Bargou et al. (Science 321 (2008): 974-7), непрерывное введение таких низких доз, как 0,005 мкг/м2/сутки, пациентам с неходжкинской лимфомой в течение четырех недель приводит к ликвидации клеток-мишеней лимфомы в крови. Частичную и полную регрессию опухолей впервые наблюдали при уровне дозы 0,015 мкг/м2/сутки, и все семь пациентов, которых лечили дозой 0,06 мкг/м2/сутки, имели регрессию опухоли (Bargou et al., выше). CD19xCD3-биспецифическое одноцепочечное антитело также приводило к очистке костного мозга и печени от опухолевых клеток. Однако несмотря на то что в этом исследовании (все еще продолжающемся) было получено клиническое доказательство концепции терапевтической эффективности формата CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела в лечении рака, производного от клеток крови, в ходе вышеупомянутых клинических испытаний наблюдались неврологические реакции. Для того чтобы контролировать эти нежелательные побочные эффекты, изменили способ введения CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела, переключившись с болюсной инфузии на непрерывное внутривенное введение указанного антитела в течение более длительного периода времени. Соответственно так как блинатумомаб является очень перспективным кандидатом на роль лекарственного средства для лечения неходжкинской лимфомы (NHL), такой как диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома (DLBCL), фолликулярная лимфома и лимфома из клеток мантии (MCL), острый лимфобластный лейкоз (ALL) и/или хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), весьма желательно уменьшить или даже полностью избежать нежелательных побочных эффектов в лечении пациентов, нуждающихся в этом, с помощью CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела.
Однако трудно разработать терапию на основе антител CD19xCD3, которая не вызывает CNS (неврологических и/или психиатрических) реакций или, другими словами, желательно предложить медикаментозную терапию на основе антител CD19xCD3 с повышенной переносимостью для пациентов, то есть уменьшить или даже полностью исключить нежелательные неблагоприятные эффекты, такие как реакции CNS.
Хотя фармацевтические средства и методы, которые обеспечивают возможность более постепенной активации Т-клеточных популяций (см. WO 2007/068354), уже помогли избежать значительных неблагоприятных побочных эффектов у пациентов, подвергнутых лечению CD19xCD3-биспецифическим одно-цепочечным антителом, к сожалению, посредством этого нельзя было предотвратить неврологические реакции, в частности, в случае введения дозы выше чем 5-10 мкг антитела на квадратный метр в сутки (то есть 24 ч).
Таким образом, техническая задача, лежащая в основе настоящего изобретения, заключается в предложении способов и методов, позволяющих преодолеть вышеуказанные проблемы.
Настоящее изобретение обращено к этой потребности и, таким образом, предлагает воплощения, касающиеся способов и методов, применяемых для облегчения, лечения и профилактики неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных CD3-связывающим доменом, таким как CD19xCD3-биспецифическое антитело.
Эти воплощения охарактеризованы и описаны в данной заявке и отражены в формуле изобретения.
Следует отметить, что используемые здесь формы единственного числа "a", "an" и "the" включают ссылки на множественное число, если из контекста ясно не следует иное. Таким образом, например, ссылка на "реагент" включает один или более таких разных реагентов, а ссылка на "метод" включает ссылку на эквивалентные стадии и методы, известные специалистам в данной области, которые можно модифицировать или заменить методами, описанными в данной заявке.
Все публикации и патенты, указанные в данном описании, включены посредством ссылки во всей полноте. В части, в которой материал, включенный посредством ссылки, противоречит или не соответствует данному описанию, описание заменяет любой такой материал. Если не указано иное, термин "по меньшей мере", предшествующий ряду элементов, следует понимать как относящийся к любому элементу в этом ряду. Специалистам в данной области понятно или они способны установить на основании не более чем рутинных экспериментов многие эквиваленты конкретных воплощений изобретения, описанного в данной заявке. Предполагается, что такие эквиваленты включены в настоящее изобретение.
В описании и следующей за ним формуле изобретения, если контекст не предполагает иное, слово "содержать" и его варианты, такие как "содержит" и "содержащий", следует понимать как включение указанного целого или стадии или группы целых или стадий, но не исключение любого другого целого или стадии или группы целых или стадий.
В каждом случае в данной заявке любой из терминов "содержащий", "по существу состоящий из" и "состоящий из" можно заменить любым другим из двух терминов.
В тексте данного описания указаны несколько документов. Каждый из указанных здесь документов (включая все патенты, заявки на патенты, научные публикации, спецификации производителя, инструкции и т. д.), представленных выше или ниже, включен в настоящее описание посредством ссылки во всей их полноте. Ничто в данном описании изобретения не следует толковать как допущение, что данное изобретение не имеет права отнести такое раскрытие к более ранней дате посредством более раннего изобретения.
В связи с нежелательными явлениями, описанными в разделах выше, в частности с неблагоприятными CNS эффектами, включая неврологические реакции, наблюдаемые с CD3-специфическими связывающими доменами, обнаружение того, что эти неблагоприятные эффекты могут быть уменьшены или даже предупреждены, если введение CD3-специфического связывающего домена предваряется или сопровождается введение глюкокортикоида, безусловно, является знаменательным.
В частности, авторы настоящего изобретения наблюдали, что пациенты, которым вводили CD19xCD3-биспецифическое антитело, сталкивались с неврологическими побочными эффектами и, кроме того, что эти неврологические побочные эффекты можно было предупредить или смягчить с помощью глюкокортикоидной (предварительной) и/или (сопровождающей) терапии.
Соответственно в настоящем изобретении впервые установлено, что глюкокортикоиды, такие как дексаметазон, уменьшают или даже предупреждают неврологические/психиатрические неблагоприятные эффекты, которые могут появиться в процессе лечения с помощью CD3-специфических связывающих доменов (см. также раздел примеры).
Глюкокортикоиды (GCs) до сих пор являются наиболее широко используемыми иммуносупрессив-ными агентами для лечения воспалительных расстройств и аутоиммунных заболеваний. Глюкокортикои-ды (GC) представляют собой класс стероидных гормонов, которые связываются с глюкокортикоидным рецептором (GR), присутствующим почти в каждой клетке позвоночных животных, включая людей. Эти соединения являются эффективными противовоспалительными средствами независимо от причины воспаления. Глюкокортикоиды подавляют, среди прочего, клеточно-опосредованный иммунитет путем ин-гибирования генов, кодирующих цитокины IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8 и IFN-y.
Кортизон, который принадлежит к группе GCs, представляет собой важное терапевтическое лекарственное средство, которое используют для борьбы со многими заболеваниями, начиная от болезни Ад-дисона и кончая ревматоидным артритом. С момента открытия его противоревматических свойств, что привело к признанию его чудодейственным лекарственным средством, было получено много производных кортизона с улучшенными свойствами для более эффективной борьбы с определенным заболеванием. Кортизон принадлежит к группе стероидов, известных как кортикостероиды. Эти стероиды производятся корой надпочечников, которая является внешней частью надпочечников, расположенной рядом с почками. Кортикостероиды делятся на две основные группы: глюкокортикоиды (GCs), которые контролируют обмен жира, белка, кальция и углеводов, и минералокортикоиды, контролирующие уровни натрия и калия. Кортизон принадлежит к первой группе, т. е. к GCs. Кортизон и его многочисленные производные используют при различных заболеваниях. Кортизон также помогает в осуществлении трансплантации органов благодаря его способности минимизировать защитную реакцию организма на чужеродные белки, присутствующие в имплантированном органе, и, таким образом, повреждение функциональных возможностей имплантированного органа. Однако несмотря на клиническое применение в течение более 50 лет, специфические противовоспалительные эффекты GC на разные клеточные отделы иммунной системы все еще неочевидны. GCs влияют почти на каждую клетку иммунной системы и появляются новые свидетельства в пользу механизмов, специфических к типу клеток.
В первом воплощении настоящее изобретение относится к глюкокортикоиду (GC) для применения в облегчении, лечении и профилактике неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных CD3-связывающим доменом. Как отмечалось выше, эти нежелательные неблагоприятные эффекты часто сопровождают терапию CD3-связывающим доменом. Настоящее изобретение исправляет эти недостатки и предлагает глюкокортикоид(ы) для применения в облегчении, лечении и профилактике неврологических неблагоприятных эффектов у пациента, где указанный пациент подлежит терапии CD3-связывающим доменом. Соответственно настоящее изобретение относится к глюкокортикоиду (GC) для применения в способе облегчения, лечения и профилактики неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных CD3-связывающим доменом.
Настоящее изобретение, таким образом, относится к GC для применения в облегчении, лечении и профилактике неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных CD3-связывающим доменом у пациента-человека, где указанный GC следует вводить до, одновременно с и/или после введения указанного связывающего домена.
Также настоящее изобретение относится к способу облегчения, лечения и профилактики неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных CD3-связывающим доменом, где указанный способ включает введение глюкокортикоида (GC) пациенту, нуждающемуся в этом. GC предпочтительно вводят в количестве, достаточном для облегчения, лечения или предупреждения указанных неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных CD3-связывающим доменом.
Неврологические побочные эффекты "вызваны" введением CD3-связывающего домена пациенту. Термин "вызваны" означает, что CD3-связывающий домен является причиной неврологических побочных эффектов. Специалист в данной области может легко установить, является введение CD3-связывающего домена причиной неврологического эффекта или нет. С этой целью следует внимательно следить за пациентом в ходе введения с тем, чтобы определить, вызывает ли введение CD3-связывающего домена неврологические побочные эффекты. Также предусматривается прекратить введе
ние CD3-связывающего домена и оценить, уменьшаются ли в результате этого или даже исчезают неврологические побочные эффекты, что также указывает на то, что неврологические побочные эффекты вызваны указанным CD3-связывающим доменом.
Термин "глюкокортикоид" означает соединения, которые связываются предпочтительно специфически с глюкокортикоидным рецептором. Указанный термин включает соединение(я), выбранное(ые) из группы, состоящей из кортизона, кортизола (гидрокортизона), клопреднола, преднизона, преднизолона, метилпреднизолона, дефлазакорта, флуокортолона, триамцинолона (включая триамцинолона ацетонид), дексаметазона, бетаметазона, кортивазола, параметазона, флутиказона пропионата, триамцинолона аце-тонида и/или флутиказона (включая флутиказона пропионат), включая их фармацевтически приемлемые производные. В контексте воплощений настоящего изобретения указанные соединения можно использовать отдельно или в комбинации. Предпочтительным является дексаметазон. Настоящее изобретение, однако, не ограничено вышеупомянутыми специфическими GCs. Предполагается, что все вещества, которые уже классифицированы или будут классифицированы как "глюкокортикоиды", также можно использовать в контексте настоящего изобретения. Такие будущие глюкокортикоиды включают соединения, которые специфически связываются с глюкокортикоидным рецептором и активируют его. Термин "специфически связывается с GC-рецептором" означает в соответствии с настоящим изобретением, что GC (или соединение, которое, как предполагается, действует подобно GC) ассоциирует с (например, взаимодействует с) рецептором GC (также известным, как NR3C1) в статистически значимой степени по сравнению с ассоциацией с белками/рецепторами вообще (то есть неспецифическое связывание). Когда GC-рецептор связывается с глюкокортикоидами, его основной механизм действия заключается в регуляции транскрипции генов. В отсутствие GC глюкокортикоидный рецептор (GR) находится в цитозоле в комплексе с разнообразными белками, включая белок теплового шока 90 (hsp90), белок теплового шока 70 (hsp70) и белок FKBP52 (PK506-связывающий белок 52). Связывание GC с глюкокортикоидным рецептором (GR) приводит к высвобождению белков теплового шока. Предполагается, что перспективный GC или фармацевтически приемлемое производное или соль GC предпочтительно способно связываться с рецептором GC и высвобождать вышеупомянутые белки теплового шока. Активированный комплекс GR активирует экспрессию противовоспалительных белков в ядре или подавляет экспрессию провоспа-лительных белков в цитозоле (путем предотвращения транслокации других факторов транскрипции из цитозоля в ядро).
В предпочтительном воплощении указанный GC выбран из наиболее часто используемых в клинике и релевантных GCs, таких как дексаметазон, флутиказона пропионат, преднизолон, метилпреднизо-лон, бетаметазон, триамцинолона ацетонид или их комбинации.
В еще более предпочтительном воплощении указанный GC представляет собой дексаметазон.
Дексаметазон имеет самую высокую глюкокортикоидную эффективность из наиболее часто используемых стероидов и также имеет самое продолжительное время полувыведения (см. таблицу ниже). Однако специалист в данной области может выбрать один из других известных глюкокортикоидов, некоторые из которых описаны здесь, и подобрать подходящую эффективную дозу для облегчения или предупреждения нежелательных неврологических явлений, являющихся результатом лечения нуждающегося в этом пациента, такого как пациент с DLBCL (диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома), с помощью биспецифической молекулы антитела, которая содержит CD3-связывающий домен, такой как СВ19хСВЗ-биспецифическое одноцепочечное антитело.
Прибл
Относительная
Отн.
Биол.время
Агент
экв.доза
противовоспалит.
минералокортикоид-
полувыдени;
<мг)
(глюкокортикоидная)ная активность
(часы)
активность
(Na+удержание)
Кортизон
0.8
Гидрокортизон
Преднизон
18-36
Преднизолон
18-36
Метилпреднизолон
0 5
18-36
Дексаметазон
0.75
36-54
Дексаметазон также оказывает полезный эффект при злокачественном заболевании центральной нервной системы (CNS) (например лимфомы CNS или метастазов головного мозга) - возможно благодаря специфическому проникновению в CNS. Он также предпочтительно используется (по сравнению с другими стероидами) для лечения отека мозга. Хотя кортикостероиды уменьшают проницаемость капилляров в самой опухоли, на модели животных было обнаружено, что дексаметазон может действовать по-разному и уменьшает отек путем воздействий на массовый отток из опухоли (Molnar, Lapin, &Goothuis, 1995, Neurooncol. 1995; 25(1): 19-28).
Для клинических испытаний в связи с применением CD19xCD3-биспецифического одноцепочечно-го антитела для лечения опухолевой массы ткани лимфатического узла и/или внеузловой лимфомы, вы
званных DLBCL, авторы настоящего изобретения должны были разработать схему лечения, которое будет эффективным и переносимым большинством пациентов. Для этого авторы настоящего изобретения использовали ступенчатое применение CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела, при котором пациентам вводили 5/15/60 мкг/м2/24 ч. Таким образом, неблагоприятные эффекты, в частности неврологические/психиатрические явления, могут быть уменьшены в количестве, облегчены и даже предупреждены. Также предусмотрен при ступенчатом введении CD19xCD3-биспецифического одноцепо-чечного антитела режим лечения с использованием двух доз, таких как 5/15, 5/60 или 15/60 мкг/м2/24 ч во время лечения пациентов. Подходящая доза может быть выбрана лечащим врачом на основании эффективности, переносимости и безопасности с минимальными неблагоприятными эффектами для пациента.
Однако авторы изобретения также предполагают, что лечение опухолевой массы ткани лимфатического узла и/или внеузловой лимфомы, вызванных DLBCL, включает непрерывное введение постоянной дозы без повышения до следующей более высокой дозы. Например, схема лечения по настоящему изобретению включает введение 5, 15 или 60 мкг/м2/24 ч CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела вплоть до завершения курса лечения в течение 8 недель [56 суток] при хорошей переносимости и без неблагоприятных эффектов, и даже дольше, если определено, что это безопасно и эффективно.
В целом, предпочтительно, что каждая из доз, описанных здесь, могла быть переведена из количества (в мкг)/м2/сутки в мкг/суткипосредством умножения соответствующей дозы на коэффициент 1,9. Соответственно каждую из доз, описанных здесь, можно использовать в способах и применениях посредством умножения ее на фактор 1,9. Например, дозу 5 мкг/м2/сутки переводят в 9,5 мкг/сутки, дозу 15 мкг/м2 переводят в 28,5 мкг/м2/ и дозу 60 мкг/м2/ переводят в 114 мкг/м2. Предпочтительно, чтобы десятичную цифру, получаемую в результате умножения, округляли или в большую, или меньшую сторону соответственно до целого числа. Например, дозу 9,5 мкг/сутки можно округлить в меньшую сторону до 9 мкг/сутки и дозу 28,5 мкг/м2 можно округлить в меньшую сторону до 28 мкг/сутки. Аналогично, дозу 9,5 мкг/сутки можно округлить в большую сторону до 10 мкг/сутки и дозу 28,5 мкг/м2 можно округлить в большую сторону до 29 мкг/сутки.
Термин "фармацевтически приемлемые производные" включает соли, сложные эфиры, енольные эфиры, сложные эфиры енолов, ацетали, кетали, ортоэфиры, полуацетали, полукетали, кислоты, основания, сольваты, гидраты или их пролекарства. Такие производные могут быть легко получены специалистами в данной области с помощью известных методов получения таких производных.
Доза GC, которую следует использовать в соответствии с воплощениями настоящего изобретения, не ограничена, то есть она зависит от положения дел у отдельного пациента. GC можно вводить внутривенно или перорально. Предпочтительные дозы GC включают, однако, от 1 до 6 мг (эквивалент дексаме-тазона) на нижнем уровне дозирования до 40 мг/сутки (эквивалент дексаметазона). Указанную дозу можно вводить целиком за один раз или разделить на меньшие дозы (см. прилагаемые примеры). Особенно предпочтительной является доза от 4 до 24 мг/сутки. Суточные дозы 4, 8, 12, 16, 20 или 24 мг/сутки являются даже более предпочтительными. Доза 1x4, 2x4, 1x8; 1x4 плюс 1x8, 2x8, 2x10 или 5x4 и 3x8 мг/сутки дексаметазона является особенно предпочтительной. Дополнительные режимы дозирования можно вывести из прилагаемых примеров. Все дозы, приведенные в данном абзаце, относятся к эквивалентам дексаметазона.
"Неблагоприятный эффект", который также иногда называют "побочный эффект" или "неблагоприятное явление (в клинических исследованиях)" представляет собой вредный и нежелательный эффект, являющийся результатом воздействия лекарственного препарата со CD3-связывающим доменом при лечении пациента. "Неврологический/психиатрический неблагоприятный эффект", который иногда также называют неврологический симптом или неблагоприятный для CNS эффект, включает такие состояния пациента-человека как все формы боли, включая головную боль и боль спины, мышечную слабость или нарушение координации, необычные ощущения в коже и нарушения ощущений, судороги, энцефалопатию, отек мозга, спутанность сознания, атаксию, нарушение речи, галлюцинации, апраксию, парез, тремор, головную боль или дезориентацию. Неврологический эффект при использовании здесь предпочтительно включает психиатрические неблагоприятные эффекты. Иногда, однако, термины "неврологический неблагоприятный эффект" и "психиатрические неблагоприятные эффекты" можно использовать взаимозаменяемо.
Более конкретно, неврологические/психиатрические реакции, наблюдаемые при лечении с помощью CD3-связывающего домена, включают, например, спутанность сознания и дезориентацию. "Спутанность сознания", используемая здесь, относится к потере ориентации, представляющей собой способность размещать себя правильно в окружающей среде с точки зрения времени, местоположения и самоопределения личности, и часто памяти, представляющей собой способность правильно вспоминать предыдущие события или усваивать новый материал. Пациенты обычно имеют сложности с концентрацией внимания, и их мышление является не только туманным и неясным, но и часто в значительной степени замедленным. Пациенты с неврологическими/психиатрическими реакциями также страдают от потери памяти. Часто спутанность сознания приводит к потере способности узнавать людей и/или места или
определять время и дату. Ощущения дезориентации являются распространенными при спутанности сознания, кроме того, нарушена способность принимать решения. Неврологические реакции также включают невнятную речь и/или трудности с нахождением слов. Это расстройство может ухудшить как язык выражений, так и понимание языка, а также чтение и письмо. Неврологические реакции у некоторых пациентов в дополнение к недержанию мочи могут сопровождаться также вертиго и головокружением.
Упоминаемый здесь "пациент" представляет собой млекопитающее, предпочтительно человека, который будет или (уже) подвергнут лечению CD3-связывающим доменом.
Также предполагается, что этот пациент характеризуется соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5 (см. РСТ/ЕР 2010/066207).
В предпочтительном воплощение предполагается/допускается, что пациент может содержать или уже содержит злокачественные CD19-положительные лимфоциты (в частности В-клетки). В последнем случае уже диагностировано, что указанный пациент содержит такие клетки. Такие злокачественные CD19-положительные лимфоциты (в частности В-клетки) присутствуют у пациента с развивающейся лейкемией и/или лимфомой или страдающих от лейкемии и/или лимфомы.
"CD3-Связывающий домен" характеризует в связи с настоящим изобретением связывающий домен, который содержит каркасную область и "антиген-связывающий сайт" или "сайт взаимодействия с антигеном", который способен специфически взаимодействовать с CD3-антигеном. Также понятно, что указанное связывание/взаимодействие означает "специфическое узнавание". Термин "специфически взаимодействовать/взаимодействующий" означает в соответствии с данным изобретением, что связывающий домен способен связываться по меньшей мере с двумя, предпочтительно по меньшей мере тремя, более предпочтительно по меньшей мере четырьмя аминокислотами CD3-антигена, предпочтительно эпсилон-цепи CD3-антигена и более предпочтительно эпсилон цепи CD3-антигена человека. Такие CD3-связывающие домены, а также специфические эпитопы эпсилон-цепи CD3 хорошо известны специалисту и подробно проиллюстрированы, например, в WO 2008119567 или в WO 2008119566, обе из которых включены в данное описание изобретения посредством ссылки.
При использовании здесь "CD3" означает молекулу, экспрессируемую как часть Т-клеточного рецептора, и имеет значение, обычно приписываемое ему в уровне техники. У человека он охватывает отдельные или независимо комбинируемые формы всех известных CD3-субъединиц, например эпсилон-цепь CD3, дельта-цепь CD3, гамма-цепь CD3, дзета-цепь CD3, альфа-цепь CD3 и бета-цепь CD3. Эпсилон-цепь CD3 человека указана в GenBank под учетным номером NM_000733.
CD3-связывающая молекула, которая связывается с эпсилон-цепью CD3 человека, является предпочтительной. Эпитоп эпсилон-цепи CD3, подробно описанный в WO 2008119567 или в WO 2008119566, является еще более предпочтительным.
Термин "каркас" включает каркас для антиген-связывающих сайтов. Например, такой каркас может быть представлен протеином А, в частности его Z-доменом (аффитела), lmmE7 (белки иммунитета), ВРТ1(основной панкреатический ингибитор трипсина)/АРР1(домен-ингибитор предшественника бета-амилоидного белка) (домены Кунитца), Ras-связывающим белком AF-6 (PDZ-доменами), харибдотокси-ном (токсином скорпиона), CTLA-4 (цитотоксический Т-лимфоцит-ассоциированный белок 4, Min-23 (ноттинсы), липокалинами (антикалины), неокарциностатином, доменом фибронектина, доменом повторов анкиринового консенсуса или тиоредоксинов (Skerra, Curr. Opin. Biotechnol. 18, 295-304 (2005); Hosse et al., Protein Sci. 15, 14-27 (2006); Nicaise et al., Protein Sci. 13, 1882-1891 (2004); Nygren and Uhlen, Curr.
Opin. Struc. Biol. 7, 463-469 (1997)).
Предпочтительным "каркасом" в контексте настоящего изобретения являются признанные в данной области техники части вариабельной области антитела, которые существуют между более отличными (то есть гипервариабельными) участками, определяющими комплементарность (CDR) в пределах вариабельной области антитела. Такие участки каркаса обычно называются каркас 1-4 (FR1, FR2, FR3 и FR4) и обеспечивают каркас для представления шести CDR (трех из тяжелой цепи и трех из легкой цепи) в трехмерном пространстве для создания антигенсвязывающей поверхности.
Предпочтительным примером CD3-связывающего домена в соответствии с настоящим изобретением является антитело. Связывающий домен может представлять собой моноклональное или поликло-нальное антитело или может быть полученным из моноклонального или поликлонального антитела. Термин "антитело" включает его производные или функциональные фрагменты, которые все еще сохраняют специфичность связывания. Способы получения антител хорошо известны в данной области и описаны, например, в Harlow и Lane "Antibodies, A Laboratory Manual", Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988 и Harlow and Lane "Using Antibodies: A Laboratory Manual" Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999. Термин "антитело" также включает иммуноглобулины (Ig's) разных классов (то есть IgA, IgG, IgM, IgD и IgE) и подклассов (такие как lgG1, lgG2 и т. д.).
Определение термина "антитело" также включает такие воплощения, как химерные, одноцепочеч-ные, деиммунизированные и гуманизированные антитела, а также фрагменты антител, такие как, среди прочего, фрагменты Fab. Фрагменты или производные антител также включают фрагменты F(ab')2, Fv, scFv или однодоменные антитела, антитела с одиночным вариабельным доменом или одиночный вариабельный домен иммуноглобулина, содержащий только один вариабельный домен, который может пред
ставлять собой VH или VL, который специфически связывает антиген или эпитоп независимо от других V-областей или доменов; см., например, Harlow and Lane (1988) и (1999), упоминавшихся выше. Такой одиночный вариабельный домен иммуноглобулина охватывает не только выделенный полипептид одиночного вариабельного домена антитела, но также более крупные полипептиды, которые содержат один или более мономеров полипептидной последовательности одиночного вариабельного домена антитела.
Форматы биспецифического антитела являются предпочтительными; однако не исключены форматы других мультиспецифических антител (триспецифические, тетратела и т. д.).
В еще одном предпочтительном воплощение настоящее изобретение относится к способам лечения/режиму дозирования, в которых используются CD19xCD3-биспецифические антитела, содержащие первый связывающий домен, способный связываться с эпитопом эпсилон-цепи CD3 человека, и второй связывающий домен, способный связываться с CD19 человека. Примеры биспецифических молекул согласно способам по изобретению подробно описаны в WO 99/54440, WO 2004/106381 и WO 2008/119565. Все конкретные CD19xCD3-биспецифические антитела, описанные здесь, включая их варианты, фрагменты, эквиваленты и т. д., являются особенно предпочтительными CD19xCD3-биспецифическими антителами по настоящему изобретению.
При использовании здесь "CD19xCD3-биспецифическое антитело" (включая CD19xCD3-биспецифическое одноцепочечное антитело) означает одну полипептидную цепь, содержащую два связывающих домена. Такие одноцепочечные антитела являются предпочтительными в контексте способов/режима дозирования по настоящему изобретению. Каждый связывающий домен содержит по меньшей мере одну вариабельную область тяжелой цепи антитела ("VH или Н область"), где VH область первого связывающего домена специфически связывается с молекулой эпсилон-цепи CD3, и VH область второго связывающего домена специфически связывается с CD19. Два связывающих домена возможно соединены друг с другом с помощью короткого спейсера. Неограничивающий пример полипептидного спейсера представляет собой Gly-Gly-Gly-Gly-Ser (G-G-G-G-S) и его повторы. Каждый связывающий домен может дополнительно содержать одну вариабельную область легкой цепи антитела ("VL или L область"), VH область и VL область внутри каждого из первого и второго связывающих доменов, соединенных друг с другом посредством полипептидного линкера, например, такого типа, как описан и заявлен в ЕР 623679 В1, но в любом случае достаточно длинного, чтобы позволить VH области и VL области первого связывающего домена и VH области и VL области второго связывающего домена образовать пару друг с другом, так, чтобы вместе они могли специфически связываться с соответствующими первым и вторым связьтающими доменами. Такие CD19x CD3-биспецифические одноцепочечные антитела очень подробно описаны в WO 99/54440 и WO 2004/106381.
Человеческий белок CD19 указан в GenBank с учетным номером ААА69966.
Предпочтительно биспецифическое антитело, применяемое в способах/режимах дозирования по настоящему изобретению, имеет структуру домена VL(CD19)-VH(CD19)-VH(CD3)-VL(CD3).
Однако также предусмотрено, что способы по изобретению можно осуществлять с помощью СВ19хСВЗ-биспецифических одноцепочечных антител с другими структурами домена, такими как
VH(CD19)-VL(CD19bVH(CD3)-VL(CD3),
VL(CD19)-VH(CD19bVL(CD3)-VH(CD3),
VH(CD19)-VL(CD19)-VL(CD3)-VH(CD3),
VL(CD3)-VH(CD3)-VH(CD19)-VL(CD19),
VH(CD3)-VL(CD3)-VH(CD19)-VL(CD19),
VL(CD3)-VH(CD3)-VL(CD19)-VH(CD19), или
VH(CD3)-VL(CD3)-VL(CD19)-VH(CD19).
Предпочтительное CD19xCD3-биспецифическое антитело, применяемое в способах по настоящему изобретению, содержит:
а) анти^3 CDR тяжелой цепи, показанные как CD3 CDR-H1 в SEQ ID NO: 11 (RYTMH), более
предпочтительно в SEQ ID NO: 11 (GYTFTRYTMH), CD3 CDR-H2 в SEQ ID NO: 12 (YINPSRGYT-
NYNQKFKD) и CD3 CDR-H3 в SEQ ID NO: 13 (YYDDHYCLDY); и/или
б) анти^3 CDR легкой цепи, показанные как CD3 CDR-L1 в SEQ ID NO: 14 (RASSSVSYMN),
CD3 CDR-L2 в SEQ ID NO: 15 (DTSKVAS) и CD3 CDR-L3 в SEQ ID NO: 16 (QQWSSNPLT); и/или
в) анти-СО19 CDR тяжелой цепи, показанные как CD19 CDR-H1 в SEQ ID NO: 17 (SYWMN), более
предпочтительно в SEQ ID NO: 17 (GYAFSSYWMN), CD19 CDR-H2 в SEQ ID NO: 18
(QIWPGDGDTNYNGKFKG) и CD19 CDR-H3 в SEQ ID NO: 19 (RETTTVGRYYYAMDY); и/или
г) анти-СО19 CDR легкой цепи, показанные как CD19 CDR-L1 в SEQ ID NO: 20 (KASQSVDYDG-
DSYLN), CD19 CDR-L2 в SEQ ID NO: 21 (DASNLVS) и CD19 CDR-L3 в SEQ ID NO: 22 (QQSTEDPWT).
Более предпочтительно, чтобы CD19xCD3-биспецифическое антитело, применяемое в способах по настоящему изобретению, содержало CD3 CDR тяжелой и легкой цепи. Еще более предпочтительно, чтобы CD19xCD3-биспецифическое антитело, применяемое в способах по настоящему изобретению,
содержало CD3 CDR тяжелой и легкой цепи, а также CD19 CDR тяжелой и легкой цепи.
CDR, упоминаемые здесь, соответствуют системе нумерации Kabat. Система нумерации Kabat представляет собой широко применяемый стандарт последовательной нумерации остатков антитела (Ka-bat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 1991).
Альтернативно, предпочтительно, чтобы CD19xCD3-биспецифическое антитело, применяемое в способах по настоящему изобретению, содержало:
а) CD19 вариабельную область тяжелой цепи, показанную в SEQ ID NO: 3 (нуклеотидная последо-
вательность показана в SEQ ID NO: 4); и/или
б) CD19 вариабельную область легкой цепи, показанную в SEQ ID NO: 5 (нуклеотидная последова-
тельность показана в SEQ ID NO: 6); и/или
в) CD3 вариабельную область тяжелой цепи, показанную в SEQ ID NO: 7 (нуклеотидная последова-
тельность показана в SEQ ID NO: 8); и/или
г) CD3 вариабельную область легкой цепи, показанную в SEQ ID NO: 9 (нуклеотидная последова-
тельность показана в SEQ ID NO: 10).
Более предпочтительно CD19xCD3-биспецифическое антитело, применяемое в способах по настоящему изобретению, содержит вариабельную область тяжелой и легкой цепи CD19 и/или вариабельную область тяжелой и легкой цепи CD3. Еще более предпочтительно CD19xCD3-биспецифическое антитело, применяемое в способах по настоящему изобретению, содержит вариабельную область тяжелой и легкой цепи CD19, а также вариабельную область тяжелой и легкой цепи CD3.
В другом альтернативном воплощении также предпочтительно, чтобы указанное биспецифическое одноцепочечное антитело включало аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из
а) аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO: 1;
б) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты,
показанной в SEQ ID NO: 2;
в) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты,
имеющей по меньшей мере 70, 80, 90, 95 или 99%-ную идентичность с последовательностью нуклеино-
вой кислоты б), где указанная аминокислотная последовательность способна специфически связываться
с CD3 и CD19; и
г) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты,
которая является результатом вырожденности генетического кода нуклеотидной последовательности б),
где указанная аминокислотная последовательность способна специфически связываться с CD3 и CD19.
Следует иметь в виду, что идентичность последовательности определяется по всей аминокислотной последовательности. Для выравнивания последовательностей можно использовать, например, программы Gap или BestFit (Needleman and Wunsch J. Mol. Biol. 48 (1970), 443-453; Smith and Waterman, Adv. Appl. Math 2 (1981), 482-489), которые содержатся в пакете программного обеспечения GCG (Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, USA 53711 (1991). Для специалистов в данной области это является обычным способом определения и идентификации аминокислотной последовательности, имеющей, например, 70, 80, 90, 95, 96, 97, 98 или 99%-ную идентичность последовательности с аминокислотными последовательностями CD19xCD3-биспецифического антитела, описанными здесь (предпочтительно МТ103). Например, согласно гипотезе "качелей" Крика 5'-основание на антикодоне пространственно не ограничено, как другие два основания и может, таким образом, обеспечивать нестандартное образование пар оснований. Говоря другими словами: третье положение в кодоне (триплете) может варьироваться так, что два триплета, которые различаются этим третьим положением, могут кодировать тот же самый аминокислотный остаток. Указанная гипотеза хорошо известна специалисту в данной области (см., например, http://en.wikipedia.org/wiki/WobbleJ_Hypothesis; Crick, J Mol Biol 19 (1966): 548-55). Кроме того, обычной процедурой для специалистов в данной области является определение цитотоксической активности аминокислотной последовательности, имеющей, например, 70, 80, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичность последовательности с нуклеотидными или аминокислотными последовательностями CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела, описанного здесь. Цитоток-сическую активность CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела или антительной конструкции, имеющей, например, 70, 80, 90, 95, 96, 97, 98 или 99%-ную идентичность последовательности с аминокислотными последовательностями CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела, можно определить способами, проиллюстрированными, например, в WO 99/54440.
Особенно предпочтительно указанное биспецифическое одноцепочечное антитело CD19xCD3 имеет аминокислотную последовательность, показанную в SEQ ID NO: 1.
Также особенно предпочтительным является CD19xCD3-биспецифическое антитело МТ103, описанное в WO 99/54440, а также CD19xCD3-биспецифические антитела, описанные в WO 2004/106381 и
WO 2008/119565.
Настоящее изобретение также относится к CD19xCD3-биспецифическому антителу для применения в лечении злокачественных CD19-положительных лимфоцитов у пациента-человека, где указанное анти-
тело следует вводить перед, одновременно с введением или после введения GC. Настоящее изобретение также относится к способу
1) введения CD3-связывающего домена, такого как CD19xCD3-биспецифическое антитело, пациенту-человеку, или
2) лечения злокачественных CD19-положительных лимфоцитов у пациента-человека посредством введения CD3-связывающего домена;
где указанное антитело следует вводить до, после и/или в комбинации с GC.
Введение CD3-связывающего домена или фармацевтической композиции, содержащей указанный CD3-связывающий домен, предпочтительно представляет собой внутривенное введение. Введение GC или фармацевтической композиции, содержащей указанный GC, предпочтительно является внутривенным или пероральным (п. о.). Их можно вводить в виде болюсной инъекции или непрерывно (постоянно), предпочтительно непрерывно. Непрерывное введение относится к введению, которое, по существу, осуществляется без перерыва. "По существу без перерыва" включает непрерывное введение обычно без непрерывного потока или пространственной протяженности. Например, в WO 2007/068354 раскрыт режим лечения, который прямо включен в данную заявку посредством ссылки. Другие режимы лечения, которые предусматриваются в контексте настоящего изобретения, раскрыты в РСТ/ЕР 2010/066207.
В предпочтительном воплощение первую дозу CD3-связывающего домена вводят в течение первого периода времени; и возможно последовательно вводят вторую дозу CD3-связывающего домена в течение второго периода времени, причем вторая доза превышает первую дозу.
Термин " превышает" означает, что второй период времени по меньшей мере на одни сутки больше, чем первый период времени.
В другом предпочтительном воплощении настоящей заявки третью дозу CD3-связывающего домена вводят в течение третьего периода времени после введения первой и второй доз в течение первого и второго периодов времени. Соответственно в настоящем изобретении предлагается трехстадийная (трех-этапная) схема введения (режим дозирования), используемая в применениях и способах, описанных здесь.
В еще одном предпочтительном воплощении настоящее изобретение включает непрерывное введение постоянной дозы CD3-связывающего домена без повышения до следующей более высокой дозы. Например, настоящее введение включает введение 60, 15 или 5 мкг/м2/24 ч CD3 -связывающего домена, в частности CD19xCD3-биспецифического одноцепочечного антитела, вплоть до завершения курса лечения в течение 8 недель (56 суток) и даже дольше, если установлена его безопасность и эффективность.
Более конкретно, в трехстадийной схеме введения дексаметазон вводят в интервале 6-48 ч перед введением первой дозы CD3-связывающего домена, более предпочтительно между 6 и 12 ч и более предпочтительно за 12 ч до введения первой дозы. Затем приблизительно за 1 ч до (промежуток 15 мин -2 ч, включающий 30, 45, 60, 75, 90 мин) введения первой дозы связывающего домена, пациенту еще раз вводят дозу дексаметазона. Затем дексаметазон вводят в течение 1 или более суток, предпочтительно 2-3 суток после первой дозы антитела, предпочтительно в течение двух суток после введения первого связывающего домена и вводят в течение 1 или более суток, предпочтительно 2 или более суток после увеличения каждой дозы, предпочтительно в течение 2 суток после введения увеличенной дозы связывающего домена. Каждая доза дексаметазона составляет предпочтительно от 6 до 40 мг и предпочтительно приблизительно 20 или 24 мг на дозу.
Временной диапазон между 6 и 48 ч включает введение дозы дексаметазона и означает, что время перед первым введением связывающего домена составляет 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 и 48 ч. Аналогично, предпочтительный диапазон времени между 6 и 12 ч включает введение дозы дексаметазо-на перед первым введением связывающего домена и включает 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 12 ч.
В еще одном воплощении дексаметазон вводят в течение двух, трех, четырех или пяти суток, в течение этого времени доза связывающего домена увеличивается. Например, дексаметазон вводят в первый момент времени в дозе 6-40 или 6-48 мг, предпочтительно 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44 или 48 мг, наиболее предпочтительно 20 или 24 мг, во второй момент времени в дозе предпочтительно 8, 12, 16, 20 или 24 мг, более предпочтительно 16 мг и/или в третий момент времени в дозе предпочтительно 2, 4, 6, 8, 10 или 12 мг, с наиболее предпочтительной дозой 8 мг. Он также может быть введен в четвертый момент времени или четвертый и пятый моменты времени в дозе предпочтительно 2, 4, 6, 8, 10 или 12 мг, с наиболее предпочтительной дозой 8 мг.
Кроме того, предполагается, что пациент-человек по настоящему изобретению характеризуется соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5 (см. РСТ/ЕР 2010/066207). Как подробно раскрыто в РСТ/ЕР 2010/066207, неврологические побочные эффекты часто сопровождают введение CD19xCD3-биспецифического антитела пациентам, которые характеризуются соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5. Предупреждение, облегчение или лечение неврологических побочных эффектов, вызванных CD3-связывающим доменом, посредством GC терапии, раскрытой здесь, несмотря на это также применимо к пациентам, которые характеризуются соотношением В/Т-клеток более чем 1:5 (см. РСТ/ЕР 2010/066207).
Настоящее изобретение также относится к (фармацевтическому) набору или упаковке, содержащим GC и/или CD3-связывающий домен и инструкции и/или напечатанный текст, указывающий, что GC следует применять для лечения, облегчения и/или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных указанным CD3-связьmающим доменом. Указанные GC и CD3-связывающий домен предпочтительно упакованы вместе в одной запечатанной упаковке или наборе. Также предполагается, что пакет или набор по настоящему изобретению дополнительно содержит средства для введения GC и/или CD3-связывающего домена пациенту и/или буферы, флаконы, тефлоновые пакеты или инфузионные пакеты, которые обычно используют для инфузий терапевтических агентов. "Средства" таким образом включают один или более изделий, выбранных из группы, состоящей из шприца, иглы для подкожного введения, канюли, катетера, инфузионного мешка для внутривенного введения, носителя для внутривенного введения, флаконов, буферов, стабилизаторов, письменных инструкций, которые помогают специалисту в приготовлении соответствующих доз и инфузий по изобретению и т. д.
Под "полным ответом" подразумевается отсутствие клинически выявляемого заболевания с нормализацией любых ранее аномальных визуализирующих исследований, таких как рентгенографические исследования. Такой ответ предпочтительно сохраняется в течение по меньшей мере 4-8 недель, иногда 6-8 недель или более чем 8, 10, 12, 14, 16, 18 или 20 недель или дольше, после лечения в соответствии с изобретением. Кроме того, улучшение при заболевании может быть классифицировано как частичный ответ.
Предпочтительно полная ремиссия в ALL (острый лимфобластный лейкоз) определяется как количество бластов в костном мозге ниже 5% и восстановление функции костного мозга. Подробное определение ремиссии и ответа для пациентов с NHL (неходжкинская лимфома) использовали согласно Cheson et al., 1999, J Clin Oncol. Apr; 17(4): 1244.
Под "частичным ответом" подразумевается по меньшей мере примерно 50%-ное уменьшение всей измеряемой опухолевой массы (то есть количества злокачественных клеток, присутствующих у пациента, или измеряемого объема опухолевых масс) при отсутствии новых повреждений, сохраняющееся в течение 4-8 недель или более чем 8, 10, 12, 14, 16, 18 или 20 недель или дольше. "Полный ответ", однако, не обязательно означает, что заболевание вылечено, так как у пациента может быть рецидив. Однако в этом случае пациента снова можно лечить композицией, содержащей CD19xCD3-биспецифическое антитело, как описано здесь.
Примеры
Следующие примеры иллюстрируют данное изобретение. Эти примеры не следует истолковывать как ограничивающие объем настоящего изобретения. Примеры включены в качестве иллюстрации и настоящее изобретение ограничено только формулой изобретения.
Пациентов лечили блинатумомабом, а сопутствующее лечение дексаметазоном выступало в качестве облегчения, лечения и профилактики неврологических и/или психиатрических нежелательных явлений.
Введение терапевтического дексаметазона было полезно тем, что неврологические и/или психиатрические симптомы исчезали без необходимости прерывать лечение блинатумомабом.
Пациент 109-015 с фолликулярной лимфомой получал блинатумомаб в дозе 60 мкг/м2/сутки непосредственно с начала лечения (то есть без стадии повышения дозы) в течение 4 недель, этот пациент дополнительно получал дексаметазон на 4-5 сутки: 3x8 мг перорально и на 6-7 сутки: 1x8 мг перорально для лечения головной боли. Этот цикл лечения не пришлось прерывать из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений.
Пациент 109-017 с фолликулярной лимфомой получал блинатумомаб в дозе 60 мкг/м2/сутки непосредственно с начала лечения (то есть без стадии повышения дозы) в течение 5 недель; для лечения тремора он получал перорально дексаметазон: сутки 7: 8-4-4 мг; сутки 8+9: 8-4-0 мг; сутки 10-11: 4-4-0 мг; сутки 12-15: 4-0-0 мг)). Этот цикл лечения не пришлось прерывать из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений.
Пациент 109-026 с MCL получал блинатумомаб в дозе 5 мкг/м2/сутки в течение 1 недели, затем 60 мкг/м2/сутки в течение оставшихся 6 недель. Пациент получал дексаметазон перорально для лечения ап-раксии на 11 сутки: 3x8 мг и на 12 сутки: 2x8 мг. Этот цикл лечения не пришлось прерывать из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений.
Пациент 135-001 с DLBCL (диффузная В-крупноклеточная лимфома) получал блинатумомаб в дозе 5 мкг/м2/сутки в течение одной недели, в дозе 15 мкг/м2/сутки в течение 2-й недели и 60 мкг/м2/сутки в течение еще 4 суток.
Пациент получал дексаметазон для лечения тремора в количестве 5 мкг/м2/сутки на 3 сутки (3x8 мг) с продолжением с уменьшенной дозой в течение менее недели. После повышения дозы до 15 мкг не наблюдалось никаких неврологических явлений, что можно было объяснить профилактическим эффектом дексаметазона. Однако на 4 сутки после ступени 60 мкг/м2/сутки пришлось остановить лечение из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений, которые происходят слишком быстро для того, чтобы вмешался дексаметазон.
Пациента 109-036 с фолликулярной лимфомой лечили с помощью 5 мкг/м2/сутки в течение первой недели с последующим лечением 60 мкг/м2/сутки блинатумомабом в течение оставшихся 6 недель лечения. Пациент испытывал неврологические нежелательные явления (тремор и апраксию) начиная с 11 суток, то есть через четверо суток после ступени 60 мкг/м2/сутки. Дексаметазон вводили внутривенно (3x8 мг) и неврологические нежелательные явления исчезали при непрерывном лечении блинатумома-бом.
Пациент 109-038 с DLBCL получал блинатумомаб в дозе 5 мкг/м2/сутки в течение одной недели, 15 мкг/м2/сутки в течение 2-й недели и 60 мкг/м2/сутки в течение оставшихся 6 недель лечения. На 15 сутки у пациента развивалось интенционное дрожание, которое исчезало после введения дексаметазона (3x8 мг внутривенно) (непрерывное лечение блинатумомабом).
Пациент 109-039 с MCL получал блинатумомаб в дозе 5 мкг/м2/сутки в течение одной недели, 15 мкг/м2/сутки в течение 2-й недели и 60 мкг/м2/сутки в течение оставшихся 12 суток лечения. На 17 сутки у пациента развивался тремор и незначительное нарушение речи, которое исчезало после дексаметазона; 3x8 мг дексаметазона вводили внутривенно (непрерывное лечение блинатумомабом).
Пациент 153-002 с MCL получал блинатумомаб в дозе 5 мкг/м2/сутки в течение одной недели, 15 мкг/м2/сутки в течение 2-й недели и 60 мкг/м2/сутки в течение одной недели. У пациента развивались незначительные проблемы с речью на 4 сутки, которые полностью исчезали после приема дексаметазона (3x8 мг перорально), в уменьшающихся дозах в течение нескольких суток. На 22 сутки пациенту пришлось прекратить лечение из-за пареза, который исчез без вмешательства.
Помимо терапевтического использования дексаметазона для уменьшения нежелательных неврологических явлений, дексаметазон также использовали для профилактики с целью предупреждения нежелательных неврологических явлений.
Пациент 135-002 с DLBCL получал блинатумомаб в дозе 5 мкг/м2/сутки в течение одной недели, 15 мкг/м2/сутки в течение 2-й недели и 60 мкг/м2/сутки в течение оставшихся 2 недель и, кроме того, получал в качестве профилактики дексаметазон (доза: 3x8 мг в сутки начала лечения блинатумомабом и в сутки ступеней увеличения дозы). Пациент не был вынужден прерывать лечение блинатумомабом из-за нежелательных неврологических явлений.
Пациента 155-001 в испытании 103-206 с рецидивом ALL лечили посредством непрерывной инфу-зии блинатумомабом в дозе 15 мкг/м2/сутки в течение 16 суток. Пациенту вводили дексаметазон перед введением блинатумомаба в соответствии с описанием настоящей заявки. Конкретно, дексаметазон давали профилактически (8 мг перед началом лечения): Пациент не был вынужден прерывать лечение из-за нежелательных явлений. Пациент достигал полной ремиссии.
Каждого из следующих 5 пациентов в испытании 103-104 (все с DLBCL) лечили посредством непрерывной инфузии блинатумомабом в дозе 5 мкг/м2/сутки в течение 1-й недели, затем 15 мкг/м2/сутки в течение 2-й недели и затем 60 мкг/м2/сутки в течение остального периода лечения, который может составлять еще 2-6 недель. Также каждого из следующих пациентов лечили профилактически с помощью 20 мг дексаметазона за 12 ч и за 1 ч до начала воздействия блинатумомабом и перед каждым увеличением дозы от 5 до 15 мкг и от 15 до 60 мкг.
Пациенты 135-003 не были вынуждены прерывать лечение из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений.
Пациент 108-007 не был вынужден прерывать лечение из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений. Этот пациент достиг полной ремиссии лимфомы.
Пациент 108-008 не был вынужден прерывать лечение из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений.
Пациент 108-009 не был вынужден прерывать лечение из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений. Этот пациент достиг объективного ответа лимфомы.
Пациент 108-010 дополнительно получал 100 мг преднизолона за один час до начала инфузии. Пациент не был вынужден прерывать лечение из-за неврологических/психиатрических нежелательных явлений.
Дексаметазон использовали в качестве профилактики нежелательных неврологических явлений у 14-летней пациентки с ALL, которую лечили 15 мкг/м2/сутки блинатумомаба на основе применения из соображений гуманности для указанной пациентки. 4 недели в первом цикле пациент получал дексамета-зон в первые сутки: 3x6 мг перорально, на вторые сутки: 2x6 мг перорально и на третьи сутки: 1x6 мг). Пациенту не был вынужден прерывать лечения из-за нежелательных явлений. Пациент достиг полной ремиссии.
Первую фазу клинических испытаний проводили на пациентах с различными B-NHL, включая DLBCL, для оценки конструкции CD19xCD3-биспецифического антитела у пациентов с DLBCL. Пациентов лечили в течение 4-8-недель путем непрерывного внутривенного введения антител с последующим ступенчатым дозовым режимом: первая неделя 5 мкг/м2/сутки, вторая неделя 15 мкг/м2/сутки и в течение оставшегося периода лечения 60 мкг/м2/сутки.
Были вовлечены две группы, каждая из 6 пациентов с DLBCL. Две группы отличались только дозой
и графиком введения глюкокортикоидного препарата в начале инфузии антитела для уменьшения нежелательных явлений.
Из 12 пациентов 5 являлись мужчинами и 7 женщинами. Средний возраст составлял 57 лет (в диапазоне от 24 до 78 лет). Пациенты получали в среднем 4 предварительных режима (в диапазоне от 2 до 6). Все пациенты были подвергнуты действию ритуксимаба. Восемь из 12 пациентов прошли ASCT (трансплантацию аутологичных стволовых клеток). Международный прогностический индекс (IPI) при скрининге варьировался от 1 до 3 со средним значением 2. В первой группе 100 мг преднизолона вводили за 1 ч до начала; и во второй группе пациенты получали дексаметазон (3x8 мг) на 1, 2 и 3 сутки. Перед началом лечения во второй группе 20 мг дексаметазона вводили за 12 ч и 1 ч до введения конструкции CD19xCD3-биспецифического антитела.
Хотя в группе DLBCL с преднизолоном произошел только один случай DLT (ограничивающая дозу токсичность) (обратимое событие CNS 3 степени) и, таким образом, группу рассматривали как безопасную, для оптимизации терапии CNS явлений открыли дополнительную DLBCL группу с профилактическим применением дексаметазона (3 x 8 мг в начале инфузии или при увеличении дозы и при уменьшение до 3x6 мг или 3x4 мг в следующие 2 суток соответственно). Так как для одного из первых двух пациентов, имевших DLT, из-за обратимого побочного эффекта на CNS была введена модифицированная схема "раннего дексаметазона" (20 мг за от 12 до 6 ч и 1 ч в начале инфузии или при увеличении дозы и 3x 8 мг во время последующих 2 суток) для проверки, вызывает ли более раннее и более интенсивное введение дексаметазона улучшение нежелательных явлений CNS. Никаких дополнительных DLT не наблюдалось после такой корректировки схемы приема дексаметазона. Таким образом, обе группы: и дексаметазона, и "раннего введения дексаметазона" считаются безопасными. Среди всех 5 пациентов с DLBCL, получавших лечение в соответствии со схемой "раннего дексаметазона", не наблюдалось DLT. Следовательно, был сделан вывод, что дополнительное введение "раннего дексаметазона" является наиболее безопасным способом введения блинатумомаба пациентам с DLBCL. Кроме того, у пациентов с "ранним дексамета-зоном" наблюдались объективные ответы.
Перечень последовательностей
<110> Micromet GmbH
<120> Предотвращение неблагоприятных эффектов, вызванных CD3-специфическими связывающими доменами <130> MIM13896PCT
<150> US 61/412,229 <151> 2010-11-10
<160> 22
<170> Patentln version 3.5
<210> 1 <211> 498 <212> PRT
<213> искусственная последовательность <220>
<223> С019хСПЗ-биспецифическое одноцепочечное антитело <400> 1
Asp lie Gin Leu Thr Gin Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
15 10 15
Gin Arg Ala Thr He Ser Cys Lys Ala Ser Gin Ser Val Asp Tyr Asp
20 25 30
Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gin Gin He Pro Gly Gin Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu He Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Ser Gly He Pro Pro
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn He His
Pro Val Glu Lys Val Asp Ala Ala Thr Tyr His Cys Gin Gin Ser Thr
Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu He Lys Gly
100 105 110
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gin Val
115 120 125
Gin Leu Gin Gin Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser Ser Val
130 135 140
Перечень последовательностей
<110> Micromet GmbH
<120> Предотвращение неблагоприятных эффектов, вызванных CD3-специфическими связывающими доменами <130> MIM13896PCT
<150> US 61/412,229
<151> 2010-11-10 <160> 22
<170> PatentIn version 3.5
498
<210> <211>
<212> PRT
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> CD19xCD3-биспецифическое одноцепочечное антитело
<400> 1
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp
20 25 30
Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Ser Gly Ile Pro Pro
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Lys Val Asp Ala Ala Thr Tyr His Cys Gln Gln Ser Thr
85 90 95
Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Gly
100 105 110
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val
115 120 125
Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser Ser Val
130 135 140
Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr Trp Met
145 150 155 160
Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly Gln
165 170 175
Ile Trp Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys Gly
180 185 190
Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln
195 200 205
Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg
210 215 220
Arg Glu Thr Thr Thr Val Gly Arg Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr Trp
225 230 235 240
Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp
245 250 255
Ile Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala Ser
260 265 270
Val Lys Met Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr
275 280 285
Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly
290 295 300
Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
305 310 315 320
Asp Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met
325 330 335
Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
340 345 350
Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
355 360 365
Thr Leu Thr Val Ser Ser Val Glu Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly
370 375 380
Ser Gly Gly Ser Gly Gly Val Asp Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro
385 390 395 400
Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg
405 410 415
Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly
420 425 430
Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly
435 440 445
Val Pro Tyr Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu
450 455 460
Thr Ile Ser Ser Met Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln
465 470 475 480
Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu
485 490 495
Leu Lys
<210> 2
<211> 1494
<212> ДНК
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> CD19xCD3-биспецифическое одноцепочечное антитело
<400> 2
gatatccagc
tgacccagtc
tccagcttct
ttggctgtgt
ctctagggca
gagggccacc
atctcctgca
aggccagcca
aagtgttgat
tatgatggtg
atagttattt
gaactggtac
120
caacagattc
caggacagcc
acccaaactc
ctcatctatg
atgcatccaa
tctagtttct
180
gggatcccac
ccaggtttag
tggcagtggg
tctgggacag
acttcaccct
caacatccat
240
cctgtggaga
aggtggatgc
tgcaacctat
cactgtcagc
aaagtactga
ggatccgtgg
300
acgttcggtg
gagggaccaa
gctcgagatc
aaaggtggtg
gtggttctgg
cggcggcggc
360
tccggtggtg
gtggttctca
ggtgcagctg
cagcagtctg
gggctgagct
ggtgaggcct
420
gggtcctcag
tgaagatttc
ctgcaaggct
tctggctatg
cattcagtag
ctactggatg
480
aactgggtga
agcagaggcc
tggacagggt
cttgagtgga
ttggacagat
ttggcctgga
540
gatggtgata
ctaactacaa
tggaaagttc
aagggtaaag
ccactctgac
tgcagacgaa
600
tcctccagca
cagcctacat
gcaactcagc
agcctagcat
ctgaggactc
tgcggtctat
660
ttctgtgcaa
gacgggagac
tacgacggta
ggccgttatt
actatgctat
ggactactgg
720
ggccaaggga
ccacggtcac
cgtctcctcc
ggaggtggtg
gatccgatat
caaactgcag
780
cagtcagggg
ctgaactggc
aagacctggg
gcctcagtga
agatgtcctg
caagacttct
840
ggctacacct
ttactaggta
cacgatgcac
tgggtaaaac
agaggcctgg
acagggtctg
900
gaatggattg
gatacattaa
tcctagccgt
ggttatacta
attacaatca
gaagttcaag
960
gacaaggcca
cattgactac
agacaaatcc
tccagcacag
cctacatgca
actgagcagc
1020
ctgacatctg
aggactctgc
agtctattac
tgtgcaagat
attatgatga
tcattactgc
1080
cttgactact
ggggccaagg
caccactctc
acagtctcct
cagtcgaagg
tggaagtgga
1140
ggttctggtg
gaagtggagg
ttcaggtgga
gtcgacgaca
ttcagctgac
ccagtctcca
1200
gcaatcatgt
ctgcatctcc
aggggagaag
gtcaccatga
cctgcagagc
cagttcaagt
1260
gtaagttaca
tgaactggta
ccagcagaag
tcaggcacct
cccccaaaag
atggatttat
1320
gacacatcca
aagtggcttc
tggagtccct
tatcgcttca
gtggcagtgg
gtctgggacc
1380
tcatactctc
tcacaatcag
cagcatggag
gctgaagatg
ctgccactta
ttactgccaa
1440
cagtggagta
gtaacccgct
cacgttcggt
gctgggacca
agctggagct
gaaa
1494
<210> 3
<211> 124
<212> PRT
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> VH анти-CD^
<400> 3
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Gln Ile Trp Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe
50 55 60
Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Glu Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Glu Thr Thr Thr Val Gly Arg Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 4 <211> 372 <212> ДНК
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> VH анти-CD^
<400> 4
caggtgcagc
tgcagcagtc
tggggctgag
ctggtgaggc
ctgggtcctc
agtgaagatt
tcctgcaagg
cttctggcta
tgcattcagt
agctactgga
tgaactgggt
gaagcagagg
120
cctggacagg
gtcttgagtg
gattggacag
atttggcctg
gagatggtga
tactaactac
180
aatggaaagt
tcaagggtaa
agccactctg
actgcagacg
aatcctccag
cacagcctac
240
atgcaactca
gcagcctagc
atctgaggac
tctgcggtct
atttctgtgc
aagacgggag
300
actacgacgg
taggccgtta
ttactatgct
atggactact
ggggccaagg
gaccacggtc
360
accgtctcct
372
<210> 5
<211> 111
<212> PRT
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> VL анти-CD^
<400> 5
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp
20 25 30
Gly Asp Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Ile Pro Gly Gln Pro Pro
35 40 45
Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Val Ser Gly Ile Pro Pro
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His
65 70 75 80
Pro Val Glu Lys Val Asp Ala Ala Thr Tyr His Cys Gln Gln Ser Thr
85 90 95
Glu Asp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> <211> <212> <213>
333
ДНК
искусственная последовательность
<220> <223>
VL анти-CD^
<400> 6 gatatccagc
tgacccagtc
tccagcttct
ttggctgtgt
ctctagggca
gagggccacc
atctcctgca
aggccagcca
aagtgttgat
tatgatggtg
atagttattt
gaactggtac
caacagattc
caggacagcc
acccaaactc
ctcatctatg
atgcatccaa
tctagtttct
gggatcccac
ccaggtttag
tggcagtggg
tctgggacag
acttcaccct
caacatccat
cctgtggaga
aggtggatgc
tgcaacctat
cactgtcagc
aaagtactga
ggatccgtgg
acgttcggtg
gagggaccaa
gctcgagatc
aaa
60 120 180 240 300 333
<210> 7
<211> 119
<212> PRT
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> VH анти-CD3
<400> 7
Asp Ile Lys Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe
50 55 60
Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser 115
<210> <211> <212> <213>
357 ДНК
искусственная последовательность
<220> <223>
VH анти-CD3
<400> 8
gatatcaaac
tgcagcagtc
aggggctgaa
ctggcaagac
ctggggcctc
agtgaagatg
tcctgcaaga
cttctggcta
cacctttact
aggtacacga
tgcactgggt
aaaacagagg
120
cctggacagg
gtctggaatg
gattggatac
attaatccta
gccgtggtta
tactaattac
180
aatcagaagt
tcaaggacaa
ggccacattg
actacagaca
aatcctccag
cacagcctac
240
atgcaactga
gcagcctgac
atctgaggac
tctgcagtct
attactgtgc
aagatattat
300
gatgatcatt
actgccttga
ctactggggc
caaggcacca
ctctcacagt
ctcctca
357
<210> 9
<211> 106
<212> PRT
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> VL анти-CD3
<400> 9
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met
20 25 30
Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr
35 40 45
Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser Gly Val Pro Tyr Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu Ala Glu
65 70 75 80
Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr
85 90 95
Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 100 105
<210> 10
<211> 318 <212> ДНК
<213> искусственная последовательность
<220>
<223> VL анти-CD3
<400> 10
gacattcagc tgacccagtc tccagcaatc atgtctgcat ctccagggga gaaggtcacc 60
atgacctgca gagccagttc aagtgtaagt tacatgaact ggtaccagca gaagtcaggc 120
acctccccca aaagatggat ttatgacaca tccaaagtgg cttctggagt cccttatcgc 180
ttcagtggca gtgggtctgg gacctcatac tctctcacaa tcagcagcat ggaggctgaa 240
gatgctgcca cttattactg ccaacagtgg agtagtaacc cgctcacgtt cggtgctggg 300
accaagctgg agctgaaa 318
<210> 11
<211> 10
<212> PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD3 CDR-H1
<400> 11
Gly Tyr Thr Phe Thr Arg Tyr Thr Met His
1 5 10
<210> 12
<211> 17
<212> PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD3 CDR-H2
<400> 12
Tyr Ile Asn Pro Ser Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asp
<210> 13
<211> 10
<212> PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD3 CDR-H3
<400> 13
Tyr Tyr Asp Asp His Tyr Cys Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 14
<211> 10
<212> PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD3 CDR-L1
<400> 14
Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met Asn
1 5 10
<210> <211> <212>
15 7
PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD3 CDR-L2
<400> 15
Asp Thr Ser Lys Val Ala Ser 1 5
<210> <211> <212>
^ О 1 о ^
16 9
PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD3 CDR-L3
<400> 16
Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr 1 5
<210> 17
<211> 10
<212> PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD19 CDR-H1
<400> 17
Gly Tyr Ala Phe Ser Ser Tyr Trp Met Asn
1 5 10
<210> 18 <211> 17 <212> PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD19 CDR-H2
<400> 18
Gln Ile Trp Pro Gly Asp Gly Asp Thr Asn Tyr Asn Gly Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 19
<211> 15
<212> PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD19 CDR-H3
<400> 19
Arg Glu Thr Thr Thr Val Gly Arg Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 20
<211> 15
<212> PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD19 CDR-L1
<400> 20
Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp Gly Asp Ser Tyr Leu Asn
1 5 10 15
<210> <211> <212>
21 7
PRT
<213> искусственный
<220>
<223> CD19 CDR-L2
<400> 21
Asp Ala Ser Asn Leu Val Ser 1 5
<210> 22
<211> 9
<212> PRT
<213> искусственный
<223> CD19 CDR-L3
<400> 22
Gln Gln Ser Thr Glu Asp Pro Trp Thr 1 5
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Применение глюкокортикоида (GC) для облегчения, лечения или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных введением CD3-связывающего домена, у пациента, нуждающегося в этом, где указанный GC следует вводить перед первой дозой CD3-связывающего домена и следует вводить перед второй дозой и/или третьей дозой CD3-связывающего домена.
2. Применение по п.1, где указанный GC представляет собой дексаметазон.
3. Применение по п.1 или 2, где указанное нежелательное неврологическое явление представляет собой одно или более из нарушений чувств, судорог, энцефалопатии, отека мозга, спутанности сознания, атаксии, апраксии, нарушения речи, галлюцинаций, парезов, тремора, головной боли или дезориентации.
4. Применение по любому из пп.1-3, где указанный CD3-связывающий домен представляет собой биспецифическое одноцепочечное антитело.
5. Применение по п.4, где указанное биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой CD19xCD3-биспецифическое одноцепочечное антитело.
6. Применение по п.5, где указанное CD19xCD3-биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой МТ103.
7. Применение по любому из пп.1-6, где указанный пациент представляет собой человека.
8. Применение по любому из пп.1-7, где указанный пациент характеризуется соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5.
9. Способ облегчения, лечения или профилактики неврологических неблагоприятных эффектов, вызванных введением CD3-связывающего домена, где указанный способ включает введение глюкокорти-коида (GC) пациенту, нуждающемуся в этом, где GC вводят перед введением первой дозы CD3-связывающего домена и перед введением второй дозы и/или третьей дозы CD3-связывающего домена.
10. Способ по п.9, где указанный GC представляет собой дексаметазон.
11. Способ по п.9 или 10, где первую дозу CD3-связывающего домена вводят в течение первого периода времени и затем вторую дозу CD3-связывающего домена вводят в течение второго периода времени, и где вторая доза превышает первую дозу.
12. Способ по п.11, где после первой и второй доз CD3-связывающего домена в течение первого и второго периодов времени вводят третью дозу CD3-связывающего домена, где третья доза превышает первую и вторую дозы.
13. Способ по любому из пп.9-12, где указанное нежелательное неврологическое явление представляет собой одно или более из нарушений чувств, судорог, энцефалопатии, отека мозга, спутанности сознания, атаксии, апраксии, нарушения речи, галлюцинаций, парезов, тремора, головной боли или дезориентации.
14. Способ по любому из пп.9-13, где указанный CD3-связывающий домен представляет собой бис-пецифическое одноцепочечное антитело.
15. Способ по п.14, где указанное биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой CD19xCD3-биспецифическое одноцепочечное антитело.
16. Способ по п.15, где указанное CD19xCD3-биспецифическое одноцепочечное антитело представляет собой МТ103.
17. Способ по любому из пп.9-16, где указанный пациент представляет собой человека.
18. Способ по любому из пп.9-17, где указанный пациент характеризуется соотношением В/Т-клеток менее чем 1:5.
19. Набор для облегчения, лечения или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных введением CD3-связывающего домена, содержащий GC, CD3-связывающий домен и инструкции по применению и/или напечатанный текст, указывающие, что GC следует использовать перед указанным CD3-связывающим доменом для лечения, уменьшения и/или профилактики нежелательных неврологических явлений, вызванных указанным CD3-связывающим доменом.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
(19)
(19)
(19)
026075
026075
- 4 -
- 1 -
026075
026075
- 13 -
- 13 -
026075
026075
- 14 -
- 14 -
026075
026075
- 16 -
- 16 -
026075
026075
- 22 -
- 23 -
<220>
026075
026075
- 22 -
- 23 -
<220>
026075
026075
- 22 -
- 23 -
<220>
026075
026075
- 22 -
- 23 -
<220>
026075
026075
- 22 -
- 23 -
<220>
026075
026075
- 22 -
- 23 -
<220>
026075
026075
- 22 -
- 23 -
<220>
026075
026075
- 22 -
- 23 -
<220>
026075
026075
- 24 -
- 23 -
<220>