EA 025672B1 20170130

	Патентная документация ЕАПВ
Запрос:	ea000025672b*\id
Результат:	ID\|Номер и дата охранного документа

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

1. Соединение формулы (I) где пунктирная линия обозначает, что может присутствовать простая связь или двойная связь при условии, что присутствуют две двойные связи и три простые связи в кольце, содержащем А ¹ , А ² и А ³ ; А ¹ , А ² и А ³ , каждый независимо, представляют собой С или S или N при условии, что один из А ¹ , А ² и А ³ представляет собой S; R ¹ представляет собой дизамещенный фенил, где фенильные заместители, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из галогена, нитрогруппы, цианогруппы, перфторметила, фторированного метила и C _1-4 алкоксигруппы; при условии, что фенил замещен в пара-положении C _1-4 алкоксигруппой; R ² представляет собой где волнистая линия обозначает точку присоединения; X представляет собой -NR'R" или -OR'"; R' представляет собой Н, C _1-4 алкил, н-гидрокси C _1-4 алкил, -SO ₂ -R ³ или -CO-R ³ ; R" представляет собой Н, -SO ₂ -R ⁵ , C _1-4 алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R ⁴ , или кольцевую группу, необязательно замещенную R ⁶ , где такая кольцевая группа представляет собой пиперидинил, циклогексил, морфолинил, тиазолил, пиразолил, пирролидинил, имидазолил или фенил; R'" представляет собой Н, C _1-4 алкил или -CO-R ³ ; или R' и R" вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл необязательно один или несколько раз замещен заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из -ОН, оксогруппы, -NH ₂ , н-гидрокси-C _1-4 алкила, -СООН, -(CH ₂ ) _m -COOH, -(CH ₂ ) _m -COOR ³ , -N(R ³ R ³ ) и -(CH ₂ ) _m -CO-N(R ⁷ R ⁷ ); каждый R ³ независимо представляет собой C _1-4 алкил или Н; каждый R ⁴ независимо представляет собой Н, галоген, ОН, оксогруппу, =NH, NH ₂ , -СООН, F, -NHR ³ , -N(R ⁷ R ⁷ ), -SO ₂ -R ³ , -SO ₂ -N(R ⁷ R ⁷ ), -N(R ³ )-SO ₂ -R ³ , -COOR ³ , -OCO-R ³ , -CO-N(R ⁷ R ⁷ ), -N(R ³ )-COR ³ , C _1-3 алкил, C _1-3 алкоксигруппу и кольцевую группу, необязательно замещенную R ⁶ , где такая кольцевая группа представляет собой пиперазинил, пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, пиразолил, имидазолил, бензимидазолил, азетидинил, циклобутинил или фенил; каждый R ⁵ независимо представляет собой R ⁴ , C _1-4 алкил, C _3-6 циклоалкил или C _1-4 алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R ⁴ ; каждый R ⁶ независимо представляет собой галоген, ОН, -NH ₂ , -NHR ³ , -N(R ³ R ³ ), -СООН, -COOR ³ , -NHCO-R ³ ; каждый R ⁷ независимо представляет собой C _1-4 алкил или Н или два R ⁷ вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл необязательно замещен -ОН, -NH ₂ , -N(R ³ R ³ ), н-гидрокси C _1-4 алкилом, -(CH ₂ ) _m COOH, -(CH ₂ ) _m -COOR ³ ; каждый m независимо обозначает 0, 1, 2 или 3.

2. Соединение по п.1, где структура соединения формулы (I) выбрана из группы, состоящей из формул a-i-а-х

3. Соединение по пп.1, 2, где R ¹ представляет собой R ³ представляет собой С _2-4 алкил и Y представляет собой -CN, -Cl, I, -O-R ³ , -СООН, -COOR ³ или -CF ₃ .

4. Соединение по пп.1-3, где R ² представляет собой

5. Соединение по п.4, где соединение, по существу, является энантиомерно чистым.

6. Соединение по пп.1-5, где X представляет собой -NR'R".

7. Соединение по п.1, где соединение выбрано из соединений 1-227

8. Применение соединения по любому из пп.1-7 для изготовления лекарственного средства для лечения рассеянного склероза.

Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

2. Соединение по п.1, где структура соединения формулы (I) выбрана из группы, состоящей из формул a-i-а-х

4. Соединение по пп.1-3, где R ² представляет собой

5. Соединение по п.4, где соединение, по существу, является энантиомерно чистым.

6. Соединение по пп.1-5, где X представляет собой -NR'R".

7. Соединение по п.1, где соединение выбрано из соединений 1-227

(19)
Евразийское
патентное
ведомство
025672 (13) B1
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации
и выдачи патента: 2017.01.30
(51) Int. Cl. A01N43/78 (2006.01) A61K31/425 (2006.01)
(21) Номер заявки:
(22) Дата подачи:
201290329
2010.11.15
(54) СЕЛЕКТИВНЫЕ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ МОДУЛЯТОРЫ РЕЦЕПТОРА СФИНГОЗИН-1-ФОСФАТА
(31) 61/261,295; 61/262,474
(32) 2009.11.13; 2009.11.18
(33) US
(43) 2012.12.28
(86) PCT/US2010/056759
(87) WO 2011/060391 2011.05.19
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
РЕЦЕПТОС ЛЛК (US)
(72) Изобретатель:
Боэм Маркус Эф, Мартинборуг Эстер, Брэнчмери Ингурти, Мурджани Маниша, Тамийя Юнко, Хуанг Лиминг, Йегер Адам
Ричард (US)
(74) Представитель:
Нюховский В.А. (RU)
(56) US-B1-6511975
US-A1-20080009534 US-A1-20060161005 US-A1-20080249093
(57) В изобретении описаны соединения, которые селективно модулируют рецептор сфингозин-1-фосфата, соединения, которые модулируют подтип 1 рецептора S1P, имеющие следующую структурную формулу:
включая
где пунктирная линия обозначает, что может присутствовать простая связь или двойная связь, при условии, что присутствуют две двойные связи и три простые связи в кольце, содержащем А1, А2 и А3; А1, А2 и А3, каждый независимо, представляют собой С или S или N при условии, что один из А1, А2 и А3 представляет собой S; R представляет собой дизамещенный фенил, где фенильные заместители, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из галогена, нитрогруппы, цианогруппы, перфторметила, фторированного метила и C^-алкоксигруппы; при условии, что фенил замещен в пара-положении C^-алкоксигруппой; R2 представляет собой
где волнистая линия обозначает точку присоединения; X представляет собой -NR'R" или -OR'"; R' представляет собой Н, С1-4-алкил, н-гидрокси С1-4-алкил, -SO2-R3 или -CO-R3; R" представляет собой Н, -SO2-R5, C^-алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R4, или кольцевую группу, необязательно замещенную R6, где такая кольцевая группа представляет собой пиперидинил, циклогексил, морфолинил, тиазолил, пиразолил, пирролидинил, имидазолил или фенил; R'" представляет собой Н, С1-4-алкил или -CO-R3; или R' и R" вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл необязательно один или несколько раз замещен заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из -ОН, оксогруппы, -NH2,
н-гидрокси-С1-4-алкила, -СООН, -(CH2)m-COOH, -(CH2)m-COOR3, -N(R3R3) и -(CH2)m-CO-N(R7R7); каждый R3 независимо
представляет собой C^-алкил или Н; каждый R4 независимо представляет собой Н, галоген, ОН, оксогруппу, =NH, NH2, -СООН, F, -NHR3, -N(R7R7), -SO2-R3, -SO2-N(R7R7), -N(R3)-SO2-R3, -COOR3, -OCO-R3, -CO-N(R7R7), -N(R3)-COR3, C1-3^-кил, C^-алкоксигруппу и кольцевую группу, необязательно замещенную R6, где такая кольцевая группа представляет собой пиперазинил, пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, пиразолил, имидазолил, бензимидазолил, азетидинил, циклобутинил или фенил; каждый R5 независимо представляет собой R4, C^-алкил, C^-циклоалкил или С1-4-алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R4; каждый R6 независимо представляет собой галоген, ОН, -NH2, -NHR3, -N(R3R3), -СООН, -COOR3, -NHCO-R3; каждый R7 независимо представляет собой С1-4-алкил или Н или два R7 вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл необязательно замещен -ОН, -NH2, -N(R3R3), н-гидрокси d-4-алкилом, -(СЩщ-СООН, -(CH2VCOOR3; каждый m независимо обозначает 0, 1, 2 или 3. Описано применение для лечения или профилактики заболеваний, злокачественных состояний и нарушений, для которых медицински показано модулирование рецептора сфингозин-1-фосфата, а именно рассеянного склероза.
Перекрестные ссылки на родственные заявки
Данная заявка является продолжением заявки US 61/261295, поданной 13.11.2009 г., и заявки US 61/262474, поданной 18.11.2009 г., описание которых сюда полностью включено.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к соединениям, которые являются агонистами рецептора сфинго-зин-1-фосфата подтипа 1, способам их получения и способам их терапевтического и/или профилактического применения.
Уровень техники
Рецептор S1P1/EDG1 представляет собой G-белоксвязанный рецептор (GPCR) и является членом семейства рецепторов гена дифференциации эндотелиальных клеток (ЭДГ). Эндогенные лиганды рецепторов ЭДГ включают лизофосфолипиды, такие как сфингозин-1-фосфат (S1P). Как и все GPCR, лигиро-вание рецептора вызывает сигналы вторичного мессенджера через активацию G-белков (альфа, бета и гамма).
Разработка низкомолекулярных агонистов и антагонистов S1P1 дала представление о некоторых физиологических ролях системы передачи сигнала рецептора S1P1/S1P. Агонизм рецептора S1P1 нарушает движение лимфоцитов, изолируя их в лимфатических узлах и других вторичных лимфоидных тканях. Это приводит к быстрой и обратимой лимфопении и, вероятно, обусловлено лигированием рецептора как в лимфатических эндотелиальных клетках, так и в самих лимфоцитах (Rosen и др., Immunol. Rev., 2003, 195, с. 160-177). Клинически ценным следствием секвестрирования лимфоцитов является исключение их из проявлений воспалительных и/или аутоиммунных реакций в периферических тканях.
Сообщалось также, что агонизм S1P1 способствует выживанию предшественников олигодендроци-тов (Miron и др., Ann. Neurol., 2008, 63, с. 61-71). Эта активность в сочетании с секвестрированием лимфоцитов может быть полезна при лечении воспалительных и аутоиммунных заболеваний центральной нервной системы.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится
к гетероциклическим соединениям, подходящим для воздействия в качестве агонистов S1P рецептора подтипа 1, S1P1;
способам получения и способам применения, таким как лечение злокачественностей, опосредованных активацией S1P1, или при медицинском показании активации S1P1.
Некоторые варианты осуществления настоящего изобретения включают соединение структурной формулы I-R или I-S
А1 А2
(I)
Пунктирная линия обозначает, что может присутствовать простая связь или двойная связь при условии, что присутствуют две двойные связи и три простые связи в кольце, содержащем А1, А2 и А3. А1, А2 и А3, каждый независимо, могут представлять собой С или S или N при условии, что один из А1, А2 и А3 представляет собой S.
R1 может представлять собой дизамещенный фенил, где фенильные заместители, каждый независимо, могут быть выбраны из галогена, нитрогруппы, цианогруппы, перфторметила, фторированного метила, -СООН, -COOR3 и C1 -4алкоксигруппы. Фенил замещен в пара-положении C1-4алкоксигруппой.
может представлять собой
где волнистая линия обозначает точку присоединения; X может представлять собой -NR'R" или -OR'";
R' может представлять собой Н, C1-4алкил, н-гидрокси C1-4^CCM, -SO2-R3 или -СО-R3. R" может представлять собой Н, -SO2-R5, C1 -4алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R4, или кольцевую группу, необязательно замещенную R6, где такая кольцевая группа представляет собой пипериди-нил, циклогексил, морфолинил, тиазолил, пиразолил, пирролидинил, имидазолил или фенил. R'" может представлять собой Н, C1-4алкил или -CO-R3. R' и R" вместе с атомом азота, с которым они связаны, мо
гут образовывать 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее О или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл необязательно один или несколько раз замещен заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из -ОН, оксогруппы, -NH2, н-гидрокси-C1-4алкила, -СООН, -(CH2)m-COOH, -(CH2)m-COOR3, -N(R3R3) и -(CH2)m-CO-N(R7R7). Каждый R3 независимо может представлять собой C1-4^COUI или Н. Каждый R4 независимо может представлять собой Н, галоген, ОН, оксогруппу, =NH, NH2, -СООН, F, -NHR3, -N(R7R7), -SO2-R3, -SO2-N(R7R7), -N(R3)-SO2-R3, -COOR3, -OCO-R3, -CO-N(R7R7), -N(R3)-COR3, C1-3алкил, C1-3алкоксигруппу и кольцевую группу, необязательно замещенную R6, где такая кольцевая группа представляет собой пиперазинил, пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, пиразолил, имида-золил, бензимидазолил, азетидинил, циклобутинил или фенил. Каждый R5 независимо может представлять собой R4, C1 -4алкил, C3-6циклоалкил или C1-4^COUI, необязательно замещенный 1 или несколькими R4. Каждый R6 независимо может представлять собой галоген, ОН, -NH2, -NHR3, -N(R3R3), -СООН, -COOR3, -NHCO-R3. Каждый R7 независимо может представлять собой C1-4алкил или Н, или два R7 вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее О или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гете-роатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл может быть необязательно замещен -ОН, -NH2, -N(R3R3), н-гидрокси C1-4алкилом, -(CH2)m-COOH, -(CH2)m-COOR3. Каждый m независимо может обозначать 0, 1, 2 или 3.
В некоторых вариантах осуществления предложено применение соединения по изобретению для изготовления лекарственного средства.
Подробное описание изобретения
Некоторые варианты осуществления настоящего изобретения включают соединение структурной формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сложный эфир, пролекарство, гомолог, тауто-мер, стереоизомер, гидрат или сольват
А1 А2
Пунктирная линия обозначает, что может присутствовать простая связь или двойная связь при условии, что присутствуют две двойные связи и три простые связи в кольце, содержащем А1, А2 и А3. А1, А2 и А3, каждый независимо, могут представлять собой С или S или N при условии, что один из А1, А2 и А3 представляет собой S;
R1 может представлять собой дизамещенный фенил, где фенильные заместители, каждый независимо, могут представлять собой галоген, нитрогруппу, цианогруппу, перфторметил, фторированный метил, -СООН, -COOR3 и C1 4алкоксигруппу. Фенил замещен в пара-положении C14алкоксигруппой.
может представлять собой
где волнистая линия обозначает точку присоединения; X может представлять собой -NR'R" или -OR'";
R' может представлять собой Н, C1-4алкил, н-гидрокси C1-4^CCM, -SO2-R3 или -CO-R3. R" может представлять собой Н, -SO2-R5, C1 -4алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R4, или кольцевую группу, необязательно замещенную R6, где такая кольцевая группа представляет собой пипериди-нил, циклогексил, морфолинил, тиазолил, пиразолил, пирролидинил, имидазолил или фенил. R'" может представлять собой Н, C1-4алкил или -CO-R. R' и R" вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гете-роцикл необязательно один или несколько раз замещен заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из -ОН, оксогруппы, -NH2, н-гидрокси-C1-4алкила, -СООН, -(СН^щ-СООН, -(СН^щ-COOR3, -N(R3R3) и -(CH2)m-CO-N(R7R7). Каждый R3 независимо может представлять собой C1-4^COUI или Н. Каждый R4 независимо может представлять собой Н, галоген, ОН, оксогруппу, =NH, NH2, -СООН, F, -NHR3, -N(R7R7), -SO2-R3, -SO2-N(R7R7), -N(R3)-SO2-R3, -COOR3, -OCO-R3, -CO-N(R7R7), -N(R3)-COR3, C1-3алкил, C1-3алкоксигруппу и кольцевую группу, необязательно замещенную R6, где такая кольцевая группа представляет собой пиперазинил, пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, пиразо
лил, имидазолил, бензимидазолил, азетидинил, циклобутинил или фенил. Каждый R5 независимо может представлять собой R4, C1 -4алкил, C3-6циклоалкил или C1-4алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R4. Каждый R6 независимо может представлять собой галоген, ОН, -NH2, -NHR3, -N(R3R3), -СООН, -COOR3, -NHCO-R3. Каждый R7 независимо может представлять собой C1-4^COUI или Н, или два R7 вместе с атомом азота, с которым они связаны, могут образовывать 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл может быть необязательно замещен -ОН, -NH2, -N(R3R3), н-гидрокси C1-4алкилом, -(CH2)m-COOH, -(CH2)m-COOR3. Каждый m независимо может представлять собой 0, 1, 2 или 3.
В некоторых вариантах осуществления соединения по изобретению представляют собой структуру формулы (I) или ее фармацевтически приемлемую соль, сложный эфир, пролекарство, гомолог, гидрат или сольват. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, которые, по существу, являются энантиомерно чистыми. В некоторых таких вариантах осуществления соединения являются энантиомерно чистыми в отношении хирального атома углерода в инданильной или тетрагид-ронафталенильной группе.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, которые имеют значение ЕС50 в качестве агониста рецептор S1P подтипа 1 дикого типа, которое по крайней мере в 10 раз меньше, чем значение ЕС50 такого соединения в качестве агониста мутантного рецептора S1P подтипа 1, имеющего единичную мутацию относительно рецептора S1P подтипа 1 дикого типа, такую, что 101-й аминокислотный остаток изменен с аспарагина на аланин.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, которые имеют значение EC50 в качестве агониста рецептор S1P подтипа 1 дикого типа, которое по крайней мере в 20 раз меньше, чем значение EC50 такого соединения в качестве агониста мутантного рецептора S1P подтипа 1, имеющего единичную мутацию относительно рецептора S1P подтипа 1 дикого типа, такую, что 101-й аминокислотный остаток изменен с аспарагина на аланин.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, которые имеют терапевтический индекс по крайней мере 5, измеренный на крысах через 5 или 14 дней введения крысам соединения, где терапевтический индекс рассчитывают как соотношение (i) наиболее высокой дозы такого соединения, которая вызывает равное десяти процентам или менее повышение отношения веса легких к туловищу в конце 5 или 14 дней введения, к (ii) дозе такого соединения, вызывающей 50% лимфо-пении у крыс. В некоторых вариантах осуществления, такой терапевтический индекс составляет по крайней мере 10, и в некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс составляет по крайней мере 20. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения по крайней мере в пять раз больше, чем терапевтический индекс энантиомера такого соединения.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к соединениям, которые имеют терапевтический индекс по крайней мере 5, измеренный на крысах через 5 или 14 дней введения крысам соединения, где терапевтический индекс рассчитывают как соотношение (i) наиболее высокой дозы такого соединения, которая вызывает равное десяти процентам или менее повышение отношения веса легких к туловищу в конце 5 или 14 дней введения, к (ii) дозе такого соединения, вызывающей 50% лимфопении у крыс. В некоторых вариантах осуществления, такой терапевтический индекс составляет по крайней мере 10, и в некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс составляет по крайней мере 20. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения больше, чем терапевтический индекс энантиомера такого соединения. В некоторых вариантах осуществления терапевтический индекс для соединения составляет по крайней мере 150% терапевтического индекса энантиомера такого соединения.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, где структура формулы (I) выбрана из группы, состоящей из формул a-i-a-x
ХУ" лУ* Xh Л-*
a-ii a-iil a-lv
R2 JI'VR2
R1 N a-x
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых А представляет собой S, в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых А
представляет собой S, и в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых А представляет собой S. В некоторых вариантах осуществления А1 представляет собой N и А2 представляет собой С или N; в некоторых таких вариантах осуществления А2 представляет собой С и в других А2 представляет собой N.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R1 представляет собой
каждый R3 независимо представляет собой C1-4^COUI и Y представляет собой -CN, -Cl, I, -O-R3, -СООН, -COOR3 или -CF3. В некоторых таких вариантах осуществления R3 представляет собой изопро-пил или этил. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой -CN или -О-С2Н5. В некоторых вариантах осуществления Y представляет собой -COOR3.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R2 представляет собой
В некоторых таких вариантах осуществления соединение, по существу, является энантиомерно чистым.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых Y представляет собой Cl, в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых Y представляет собой CF3, и в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых Y представляет собой CN. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых Y представляет собой I. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых Y представляет собой -СООН. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых Y представляет собой -COOR3.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых X представляет собой -NR'R", в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых X представляет собой -OR'". В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых X представляет собой -OR'". В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых X представляет собой -ОН, и в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых X представляет собой -OCO-R3.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R3 представляет собой ^^алсшл; в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R' представляет собой Н.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R' представляет собой -COR3; в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R' представляет собой SO2-R3. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R" представляет собой Н.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R" пред- 4
ставляет собой -SO2-R5; в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R" представляет собой C1-4^Kffii, где C1-4алкил необязательно замещен 1 или несколькими заместителями, обозначенными R4. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R" представляет собой -(CRaRb)n-R4, и каждый Ra и каждый Rb может независимо представлять собой Н, гидроксил и метил, или где Ra и Rb связаны с одним атомом углерода, они могут вместе образовывать оксогруппу (то есть с атомом углерода, с которым они связаны, образуя карбонильную группу). В некоторых таких вариантах осуществления n может обозначать 0, 1, 2 или 3, и в некоторых вариантах осуществления n обозначает 2. В некоторых таких вариантах осуществления R2 может представлять собой -ОН, -NH2, -NHR3, -N(R7R7) или -СООН.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R5 представляет собой C1-4^COUI, необязательно замещенный 1 или несколькими R4. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R4 представляет собой ОН; в других вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R4 представляет собой C1-3алкоксигруппу. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R5 представляет собой (CH2)2-OR3.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых Y представляет собой CN и X представляет собой -NH-SO2-R5. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых R5 представляет собой -C2H5-N((R7R7) или -CH2-CO-N(R7R7). В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к соединениям, в которых Y представляет собой CN и X представляет собой -NH-CO-N(R7R7).
В некоторых вариантах осуществления X представляет собой -NH2 и в некоторых таких вариантах осуществления Y представляет собой CN.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к одному или нескольким соединениям 1-227
или любой его фармацевтически приемлемой соли, таутомеру, стереоизомеру, сольвату, гидрату или пролекарству. В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению, выбранному из соединений 43, 46, 47, 56, 58, 166, 172 и 186, или любой его фармацевтически приемлемой соли, сложному эфиру, таутомеру, стереоизомеру, сольвату, гидрату, гомологу или пролекарству. В некоторых таких вариантах осуществления изобретение относится к соединению 43, 46 или 166 или любой его фармацевтически приемлемой соли, сложному эфиру, таутомеру, стереоизомеру, сольвату, гидрату, гомологу или пролекарству.
В некоторых вариантах осуществления изобретения описано соединение формулы (I), где соединение содержит по крайней мере один хиральный центр и является, по существу, энантиомерно чистым.
В других вариантах осуществления описана фармацевтическая композиция, включающая соединение по изобретению формулы (I) и подходящий эксципиент.
В других вариантах осуществления описана фармацевтическая комбинация, включающая соединение по изобретению и второе лекарственное средство. В других вариантах осуществления описана фармацевтическая комбинация, включающая соединение по изобретению и второе лекарственное средство, где второе лекарственное средство медицински показано для лечения рассеянного склероза.
В некоторых вариантах осуществления описан способ применения соединения по изобретению для изготовления лекарственного средства.
В некоторых вариантах осуществления описан способ активации или агонизма рецептора сфинго-зин-1-фосфата подтипа 1 путем контактирования рецептора подтипа 1 с соединением по изобретению в эффективном количестве. В других вариантах осуществления описан способ активации или агонизма рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1 путем контактирования рецептора подтипа 1 с соединением по изобретению в эффективном количестве, где соединение активирует или агонизирует рецептор сфин-гозин-1-фосфата подтипа 1 в большей степени по сравнению с тем, как соединение активирует или агонизирует рецептор сфингозин-1-фосфата подтипа 3. В других вариантах осуществления описан способ активации или агонизма рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1 путем контактирования рецептора подтипа 1 с соединением по изобретению в эффективном количестве, где рецептор сфингозин-1-фосфата подтипа 1 находится в млекопитающем.
В некоторых вариантах осуществления описан способ лечения злокачественности у пациента, которому медицински показана активация или агонизм рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1, путем введения соединения по изобретению в эффективном количестве пациенту с частотой и длительностью, достаточной для обеспечения благоприятного воздействия на пациента. В других вариантах осуществления описан способ лечения злокачественности у пациента, которому медицински показана активация или агонизм рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1, путем введения соединения по изобретению в эффективном количестве пациенту с частотой и длительностью, достаточной для обеспечения благоприят
ного воздействия на пациента, где медицински показана селективная активация или агонизм S1P подтипа 1 рецептора в отношении других подтипов рецептора S1P. В других вариантах осуществления описан способ лечения злокачественности у пациента, которому медицински показана активация или агонизм рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа 1, путем введения соединения по изобретению в эффективном количестве пациенту с частотой и длительностью, достаточной для обеспечения благоприятного воздействия на пациента, где злокачественность включает рассеянный склероз.
В некоторых вариантах осуществления описаны способы применения соединения по изобретению для изготовления лекарственного средства, подходящего для лечения нарушения или злокачественности, в которых медицински показана активация или ингибирование рецептора сфингозин-1-фосфата подтипа
Как используется в описании и формуле изобретения, формы единственного числа включают множественные формы, если из контекста ясно не предполагается иное.
Как используется здесь, "пациент" (в отношении лечения) означает млекопитающих и немлекопитающих. Млекопитающие включают, например, людей; нечеловекообразных приматов, например приматов и обезьян; крупный рогатый скот; лошадей; овец и коз. Немлекопитающие включают, например, рыб и птиц.
Используемый здесь термин "S1P1" относится к подтипу 1 рецептора сфингозин-1-фосфата, в то время как другие подтипы рецептора сфингозин-1-фосфата обозначены соответствующим образом, например рецептор сфингозин-1-фосфата подтипа 3 обозначен как "S1P3".
"Рецептор", как хорошо известно в данной области, представляет собой биомолекулярную группу, обычно содержащую белок, который специфически связывает структурный класс лигандов или единичный нативный лиганд в живом организме, связывание с которыми заставляет рецептор преобразовывать связывающий сигнал в другой вид биологического действия, такой как сигнализация клетки, в которой произошло связывание, которой заставляет клетки изменять свою функцию в некоторой степени. Примером трансдукции является рецепторное связывание лиганда, вызывающее изменение активности "G-белка" в цитоплазме живой клетки. Любая молекула, естественным или нет, что связывает рецептор и активирует его для передачи сигнала, называется "состязания" или "активатор". Любая молекула, природная или нет, которая связывается с рецептором, но не вызывает передачи сигнала, и которая может блокировать связывание агонистов и их последующую передачу сигнала, называется "антагонистом".
"Соединение S1P1" или "агонист S1P1" или "активатор S1P1" или "ингибитор S1P1" или "антагонист S1P1" являются терминами, используемыми здесь для описанных соединений, которые взаимодействуют в некотором роде с рецептором S1P подтипа 1. Они могут быть агонистами или активаторами, или они могут быть антагонистами или ингибиторами. "Соединение S1P1" по изобретению могут обладать селективным действием на подтип 1 S1P рецепторного семейства, например соединение по изобретению может работать при более низкой концентрации в отношении подтипа 1 S1P рецепторного семейства по сравнению с другими подтипами S1P рецепторного семейства, в частности "соединение S1P1" по изобретению могут селективно воздействовать на подтип 1 рецепторов по сравнению с их действием на подтип 3 или рецепторы "S1P3".
В некоторых вариантах осуществления соединения по изобретению являются ортостатическими агонистами. В некоторых других вариантах осуществления соединения по изобретению являются алло-стерическими агонистами. Агонисты рецептора могут быть классифицированы как ортостерические или аллостерические. Ортостерические агонисты связываются с сайтом рецептора, что существенно перекрывается со связыванием природного лиганда и повторяет ключевые взаимодействия рецептора с природным лигандом. Ортостерические агонисты активируют рецептор с помощью молекулярного механизма, похожего на природный лиганд, и будут конкурировать с природным лигандом, и будут конкурентно антагонизироваться фармакологическими средствами, которые являются конкурентными антагонистами для природного лиганда. Аллостерические агонисты связываются с сайтом рецептора, что вызывает некоторые существенные взаимодействия, которые не перекрываются частично или полностью естественным лигандом. Аллостерические агонисты являются истинными агонистами и не являются ал-лостерическими усилителями. Следовательно, они активируют сигнализацию рецептора отдельно и без необходимости субмаксимальной концентрации природного лиганда. Аллостерические агонисты могут быть идентифицированы, когда известно, что антагонист является конкурентоспособными относительно ортостерического лиганда, показывающего неконкурентный антагонизм. Сайт аллостерического агони-ста может отражаться на рецепторном мутагенезе. Введение точечных мутаций в рецепторы, которые сохраняют рецепторную активацию аллостерическим агонистом, тогда как ослабление или отмена передачи сигнала, индуцированного ортостерическим агонистом или наоборот, обеспечивает формальные доказательства различия во взаимодействиях связывания. Ортостерические агонисты могут дестабилизировать структуры и конформации GPCR, в то время как аллостерические агонистов могут стабилизировать или дестабилизировать структуры и конформации GPCR. Аллостерические агонисты, в силу их различных взаимодействий с рецептором, могут быть фармацевтически полезны, поскольку аллостериче-ский сайт может предоставлять дополнительные возможности для активности агониста и селективности в соответствующем семействе подтипов рецептора, которые разделяют аналогичный ортостерический
лиганд. Кроме того, аллостерический сайт может потребовать различные физико-химические свойства агонистов по сравнению с ортостерическим лигандом. Эти химико-физические свойства, в том числе гидрофобность, ароматичность, распределение заряда и растворимость, могут также обеспечивать преимущества при производстве агонистов различных профилей фармакокинетики, биодоступности, распределения и метаболизма, которые способствуют разработке эффективных фармацевтических веществ.
Термин "по существу", как здесь используется, означает полностью или почти полностью, например композиция, которая является "по существу, свободной" от компонента, не содержит ни одного компонента или содержит такое следовое количество, что любое соответствующее функциональное свойство композиции не зависит от присутствия следового количества, или если соединение является "по существу, чистым", то присутствуют лишь незначительные следы примесей.
По существу, энантиомерно чистый обозначает уровень энантиомерного обогащения одного энан-тиомера по отношению к другому энантиомеру, по крайней мере 90, 95, 98, 99, 99,5 или 99,9%.
"Лечение" или "лечить" здесь относится к облегчению симптомов, связанных с расстройствами или заболеваниями, или ингибирование дальнейшего прогрессирования или ухудшения этих симптомов, или предупреждение или профилактику заболевания или расстройства.
Выражение "эффективное количество", когда используется для описания применения соединения по изобретению для обеспечения лечения пациентов, страдающих расстройствами или злокачественно-стями, опосредованными рецептором сфингозин-1-фосфата подтипа 1, относится к количеству соединения по изобретению, которое является эффективным для связывания в качестве агонистов или антагонистов рецептора S1P1 в тканях человека, где S1P1 участвует в нарушении, при котором такое связывание происходит на уровне, необходимом для обеспечения полезного терапевтического воздействия на пациента. Аналогично, как здесь используется, "эффективное количество" или "терапевтически эффективное количество" соединения по изобретению относится к количеству соединения, которое облегчает, в целом или в части, симптомы, связанные с нарушением или состоянием, или останавливает, или замедляет дальнейшее прогрессирование или ухудшение этих симптомов, или препятствует, или обеспечивает профилактику нарушения или состояния. В частности, "терапевтически эффективное количество" относится к количеству, эффективному, при дозах и в течение определенного необходимого времени, для достижения желаемого терапевтического результата, действуя как агонист активности рецептора сфин-гозин-1-фосфата подтипа 1 (S1P1). Терапевтически эффективное количество является также тем, при котором токсичные или вредные эффекты соединения по изобретению превышают терапевтически благоприятные эффекты. Например, в контексте лечения злокачественности, опосредованной активацией S1P1, терапевтически эффективное количество агониста S1P1 по изобретению представляет собой количество, достаточное для контроля злокачественностью, чтобы смягчить ход злокачественности, или для облегчения симптомов злокачественности. Примеры злокачественностей, которые могут быть излечены, включают рассеянный склероз.
Особенно предпочтительным заболеванием и состоянием, которое может излечиваться соединениями по изобретению, является рассеянный склероз.
Кроме того, соединения формулы I-R или I-S также полезны в комбинации с одним или несколькими иммунодепрессантами для лечения заболеваний, нарушений и состояний, связанных с активированной иммунной системой, и выбранных из приведенного выше списка. В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления изобретения, указанные иммунодепрессанты выбраны из группы, включающей или состоящей из циклоспорина, даклизумаба, басиликсимаба, эверолимуса, такролимуса (FK506), азатиопирена, лефлуномида, 15-дезоксиспергуалина или других иммунодепрессантов.
Подразумеваются все хиральные, диастереомерные, рацемические формы структур, если специально не указана конкретная стереохимия или изомерная форма. Соединения, используемые в настоящем изобретении, могут включать обогащенные или разделенные оптические изомеры при любых или всех асимметричных атомах, как указано в изображении, в любой степени обогащения. Рацемическая и диа-стереомерная смеси, а также индивидуальные оптические изомеры могут быть синтезированы так, чтобы быть, по существу, свободными от их энантиомерных или диастереомерных партнеров, и все это включено в объем конкретных вариантов осуществления изобретения.
Изомеры, полученные при наличии хирального центра, включают пары неналагаемых изомеров, которые называют "энантиомеры". Отдельные энантиомеры чистого соединения являются оптически активными, то есть они способны вращать плоскость поляризованного света. Отдельные энантиомеры обозначены в соответствии с системой Кана-Ингольда-Прелога. После определения приоритета в четырех группах, молекулы ориентируют так, что группа с самой низкой степенью важности отворачивается от зрителя. Затем, если убывание степени важности других групп происходит по часовой стрелке, то молекулу обозначают (R), и если убывание степени важности других групп происходит против часовой стрелки, то молекулу обозначают (S). В примерах степень важности Кана-Ингольда-Прелога представлена как А> В> С> D. Атом с самой низкой степенью важности D ориентирован от зрителя.
(Д)-конфигурацня ^-конфигурация
"Выделенный оптический изомер" обозначает соединение, которое было, по существу, очищено от соответствующего оптического изомера (изомеров) той же формулы. Предпочтительно выделенные изомеры имеют чистоту по крайней мере около 80, более предпочтительно по крайней мере 90, еще более предпочтительно по крайней мере 98, наиболее предпочтительно по крайней мере около 99 вес.%.
Поворотная изомерия.
Понятно, что вследствие химических свойств (например, резонансное придание некоторого характера двойной связи C-N) ограниченного вращения вокруг амидной связи (как показано ниже) можно наблюдать отдельные виды ротамера, и даже, при определенных обстоятельствах, выделить такие виды, пример показан ниже. Далее ясно, что определенные структурные элементы, включая пространственные или объемные заместители на атоме азота амида, могут повысить стабильность ротамера до такой степени, что соединение может быть выделено, и существовать независимо, как отдельный стабильный рота-мер. Настоящее изобретение, следовательно, включает любые возможные стабильные ротамеры соединений по изобретению, которые являются биологически активными при лечении заболевания, нарушения или состояния, при котором соединение по изобретению может быть эффективно, как здесь описано.
Региоизомерия.
Предпочтительно соединения настоящего изобретения имеют особое пространственное расположение заместителей в ароматических кольцах, что связано с взаимосвязью структуры и активности, демонстрируемой классом соединения. Часто такой механизм замещения обозначается системой нумерации, однако система нумерации часто не согласуется с различными циклическими системами. В шестичлен-ных ароматических системах пространственные расположения определяются общей номенклатурой "пара" для 1,4-замещения, "мета" для 1,3-замещения и "орто" для 1,2-замещения, как показано ниже.
пара мета орто
Все структуры, входящие в объем формулы изобретения, являются "химически осуществимыми", это подразумевает, что структуры, приведенные в любых комбинациях или субкомбинациях необязательных заместителей, перечисленных в формуле изобретения, физически способны существовать, по крайней мере, с некоторой стабильностью, что может быть определено законами структурной химии и экспериментами. Структуры, которые являются химически неприемлемыми, не входят в объем заявляемых соединений.
Обычно "замещенный" обозначает органическую группу, как здесь определено, в которой одна или несколько содержащихся связей с атомом водорода замещены одной или несколькими связями с атомом, отличными от водорода, таким как, но не ограничиваясь ими, галоген (то есть F, Cl, Br и I); атом кислорода в группах, таких как гидроксильные группы, алкоксигруппы, арилоксигруппы, аралкилоксигруппы, оксо(карбонил)группы, карбоксильные группы, включая карбоновые кислоты, карбоксилаты и эфиры карбоксилатов; атом серы в группах, таких как тиольные группы, алкильные и арилсульфидные группы, сульфоксидные группы, сульфоновые группы, сульфонильные группы и сульфонамидные группы; атом азота в группах, таких как амины, гидроксиламины, нитрилы, нитрогруппы, N-оксиды, гидразиды, азиды и енамины; и другие гетероатомы в различных других группах. Неограничивающие примеры заместителей, которые могут быть связаны с замещенным атомом углерода (или другим атомом), включают F, Cl, Br, I, OR', OC(O)N(R')2, CN, CF3, OCF3, R', О, S, C(O), S(O), метилендиокси, этилендиокси, N(R'b, SR', SOR', SO2R', SO2N(R')2, SO3R', C(O)R', C(O)C(O)R', C(O)CH2C(O)R', C(S)R', C(O)OR', OC(O)R', C(O)N(R')2, OC(O)N(R')2, C(S)N(R')2, (CH2)o-2NHC(O)R', (CH2)o-2N(R')N(R'b, N(R')N(R')C(O)R',
N(R')N(R')C(O)OR', N(R')N(R')CON(R')2, N(R')SO2R', N(R')SO2N(R')2, N(R')C(O)OR', N(R')C(O)R',
N(R')C(S)R', N(R')C(O)N(R')2, N(R')C(S)N(R')2, N(COR')COR', N(OR')R', C(=NH)N(R')2, C(O)N(OR')R' или C(=NOR')R', где R' может представлять собой водород или углеродсодержащую группу, и где углеродсо-держащая группа сама может быть замещена.
Замещенные алкильные, алкенильные, алкинильные, циклоалкильные и циклоалкенильные группы, а также другие замещенные группы также включают группы, в которых одна или несколько связей с атомом водорода замещены одной или несколькими связями, включая двойные или тройные связи, с
атомом углерода или с гетероатомом, таким как, но не ограничиваясь ими, кислород в группах карбонила (оксо), карбоксила, сложного эфира, амида, имида, уретана и мочевины; и азот в иминах, гидроксиими-нах, оксимах, гидразонах, амидинах, гуанидинах и нитрилах. Заместители замещенных групп далее могут быть замещены алкильными, алкенильными, циклоалкильными, арильными, гетероарильными и ал-кинильными группами, как здесь определено, которые сами могут быть замещены. Например, C1-4алкильная группа может быть замещена амидом, и амид может быть далее замещен другим C1-4алкилом, который может быть замещен.
Замещенные циклические группы, такие как замещенные арильные, гетероциклильные и гетероа-рильные группы также включают кольца и конденсированные циклические системы, в которых связь с атомом водорода замещена связью с атомом углерода. Следовательно, замещенные арильные, гетеро-циклильные и гетероарильные группы также могут быть замещены алкильными, алкенильными, цикло-алкильными, арильными, гетероарильными и алкинильными группами, как здесь определено, которые сами могут быть замещены.
Термин "гетероатомы", как здесь используется, обозначает атомы, отличные от углерода и водорода, способные образовывать ковалентные связи с углеродом, и не ограничены иным образом. Обычными гетероатомами являются N, О и S. Когда описан атом (S), подразумевается, что сера может присутствовать в любой степени окисления, в которой она обнаружена, включая сульфоксиды (R-S(O)-R') и суль-фоны (R-S(O)2-R'), если конкретно не указана степень окисления; так, термин "сульфон" включает только сульфоновую форму серы; термин "сульфид" включает только сульфидную (R-S-R') форму серы. Когда используется фраза "гетероатомы, выбранные из группы, состоящей из О, NH, NR' и S," или "[вариант] представляет собой О, S...", подразумевается включение всех сульфидных, сульфоксидных и сульфоно-вых степеней окисления серы.
Алкильные группы включают линейные и разветвленные алкильные группы и циклоалкильные группы, содержащие от 1 до около 20 атомов углерода (^^алюш), обычно от 1 до 12 атомов углерода (^^алкал), или в некоторых вариантах осуществления от 1 до 8 атомов углерода (^^алсшл), или в некоторых вариантах осуществления от 1 до 4 атомов углерода (C1-4алкил), или в некоторых вариантах осуществления от 1 до 3 атомов углерода (C1-3алкил). Примеры линейных алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил, н-гептил и н-октил. Примеры разветвленных алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, изопропил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, неопентил, изопентил и 2,2-диметилпропил. Некоторые замещенные алкильные группы могут быть замещены один или несколько раз любыми группами, представленными выше, например аминогруппами, гидроксигруппами, цианогруппами, карбоксигруппами, нитрогруппами, тиогруппами, алкоксигруппами и группами галогена. Группа "н-гидрокси C1-4^COUI" представляет собой C1-4алкил, замещенный терминальной гидроксигруппой.
Циклоалкильные группы представляют собой алкильные группы, образующие кольцевые структуры, которые могут быть замещенными или незамещенными. Примеры циклоалкила включают, но не ограничиваются ими, циклопропильную, циклобутильную, циклопентильную, циклогексильную, цикло-гептильную и циклооктильную группу. В некоторых вариантах осуществления циклоалкил содержит от 3 до 8 членов в кольце, тогда как в других вариантах осуществления количество атомов углерода в кольце составляет от 3 до 5, от 3 до 6, или от 3 до 7. Циклоалкильные группы также включают полициклические циклоалкильные группы, такие как, но не ограничиваясь ими, норборнил, адамантил, борнил, кам-фенил, изокамфенил и каренил, и конденсированные кольца, такие как, но не ограничиваясь ими, дека-линил и им подобные. Циклоалкильные группы также включают кольца, которые замещены линейными или разветвленными алкильными группами, как определено выше. Примерные замещенные циклоал-кильные группы могут быть монозамещенными или замещены более одного раза, такие как, но не ограничиваясь ими, 2,2-, 2,3-, 2,4-, 2,5- или 2,6-дизамещенные циклогексильные группы или моно-, ди-или тризамещенные норборнильные или циклогептильные группы, которые могут быть замещены, например аминогруппами, гидроксигруппами, цианогруппами, карбоксигруппами, нитрогруппами, тиогруппами, алкоксигруппами и группами галогена.
Термины "карбоциклический" и "карбоцикл" обозначают циклические структуры, в которых атомами кольца являются атомы углерода. В таких вариантах осуществления карбоцикл содержит от 3 до 8 членов в кольце, тогда как в других вариантах осуществления количество атомов углерода в кольце составляет 4, 5, 6 или 7. Если конкретно не указано иное, карбоциклическое кольцо может быть замещено N заместителями, где N обозначает размер карбоциклического кольца, например аминогруппами, гидро-ксигруппами, цианогруппами, карбоксигруппами, нитрогруппами, тиогруппами, алкоксигруппами и группами галогена.
(Циклоалкил)алкильные группы, также обозначающие циклоалкилалкил, представляют собой ал-кильные группы, как определено выше, в которых водородная или углеродная связь алкильной группы замещена связью с циклоалкильной группой, как определено выше.
Алкенильные группы включают линейные и разветвленные и циклические алкильные группы, как определено выше, за исключением того, что существует по крайней мере одна двойная связь между двумя атомами углерода. Так, алкенильные группы содержат от 2 до около 20 атомов углерода, обычно от 2
до 12 атомов углерода или в некоторых вариантах осуществления от 2 до 8 атомов углерода. Примеры среди прочих включают, но не ограничиваются ими, -CH=CH(CH3), -СН=С(СН3)2, -С(СН3)=СН2, -С(СН3)=СН(СН3), -С(СН2СН3)=СН2, винил, циклогексенил, циклопентенил, циклогексадиенил, бутадие-нил, пентадиенил и гексадиенил.
Термин "циклоалкенил" отдельно или в комбинации обозначает циклическую алкенильную группу, где присутствует по крайней мере одна двойная связь в кольцевой структуре. Циклоалкенильные группы включают циклоалкильные группы, содержащие по крайней мере одну двойную связь между двумя соседними атомами углерода. Так, например, циклоалкенильные группы включают, но не ограничиваются ими, циклогексенил, циклопентенил и циклогексадиенил.
(Циклоалкенил)алкильные группы представляют собой алкильные группы, как определено выше, в которых водородная или углеродная связь алкильной группы замещена связью с циклоалкенильной группой, как определено выше.
Алкинильные группы включают линейные и разветвленные алкильные группы, за исключением того, что существует по крайней мере одна тройная связь между двумя атомами углерода. Так, алкиниль-ные группы содержат от 2 до около 20 атомов углерода, обычно от 2 до 12 атомов углерода или в некоторых вариантах осуществления от 2 до 8 атомов углерода. Примеры среди прочих включают, но не ограничиваются ими, -ОСН, -ОС(СН3), -ОС(СН2СН3), -СН2ОСН, -СН2ОС(СН3) и -СН2ОС(СН2СН3).
Арильные группы представляют собой циклические ароматические углеводороды, которые не содержат гетероатомов. Такие арильные группы включают, но не ограничиваются ими, фенил, азуленил, гепталенил, бифенил, индаценил, флуоренил, фенантренил, трифениленил, пиренил, нафтаценил, хризе-нил, бифениленил, антраценил и нафтил. В некоторых вариантах осуществления арильные группы содержат 6-14 атомов углерода в кольцевой части групп. Фраза "арильные группы" включает группы, содержащие конденсированные кольца, такие как конденсированные ароматически-алифатические циклические системы (например, инданил, тетрагидронафтил и им подобные), а также включает замещенные арильные группы, которые содержат другие группы, включая, но не ограничиваясь ими, алкил, галоген, амино, гидрокси, циано, карбокси, нитро, тио или алкоксигруппы, связанные с одним из кольцевых атомов. Примерные замещенные арильные группы могут быть монозамещенными или замещены более одного раза, такие как, но не ограничиваясь ими, 2-, 3-, 4-, 5- или 6-замещенные фенильные или нафтиль-ные группы, которые могут быть замещены группами, включая, но не ограничиваясь ими, перечисленные выше группы.
Аралкильные группы представляют собой алкильные группы, как определено выше, в которых водородная или углеродная связь алкильной группы замещена связью с арильной группой, как определено выше. Примерные аралкильные группы включают бензильные и фенилэтильные группы и конденсированные (циклоалкиларил)алкильные группы, такие как 4-этилинданил. Арильная группа или алкильная группа или они обе необязательно замещены другими группами, включая, но не ограничиваясь ими, ал-кил, галоген, амино, гидрокси, циано, карбокси, нитро, тио или алкоксигруппы. Аралкенильная группа представляет собой алкенильные группы, как определено выше, в которых водородная или углеродная связь алкильной группы замещена связью с арильной группой, как определено выше.
Гетероциклические группы включают ароматические и неароматические циклические соединения (гетероциклические кольца), содержащие 3 или более членов в кольце, из которых один или несколько представляют собой гетероатомы, такие как, но не ограничиваясь ими, N, О, S или Р. В некоторых вариантах осуществления гетероциклические группы включают от 3 до 20 членов в кольце, тогда как другие такие группы содержат от 3 до 15 членов в кольце. По крайней мере одно кольцо содержит гетероатом, но каждое кольцо в полициклической системе должно содержать гетероатом. Например, диоксоланиль-ная кольцевая и бенздиоксоланильная кольцевая система (метилендиоксифенильная кольцевая система) обе являются гетероциклическими группами в свете данных значений. Гетероциклическая группа, обозначенная как О^гетероциклил, может быть 5-членным кольцом с двумя атомами углерода и тремя гете-роатомами, 6-членным кольцом с двумя атомами углерода и четырьмя гетероатомами, и так далее. Аналогично, С4-гетероциклилом может быть 5-членное кольцо с одним гетероатомом, 6-членное кольцо с двумя гетероатомами, и так далее. Количество атомов углерода плюс количество гетероатомов должно равняться общему количеству атомов в кольце. Насыщенное гетероциклическое кольцо обозначает гетероциклическое кольцо, не содержащее ненасыщенных атомов углерода.
Фраза "гетероциклическая группа" включает конденсированное кольцо, включая кольцо, содержащее конденсированные ароматические и неароматические группы. Фраза также включает полициклические кольцевые системы, содержащие гетероатом, такой как, но не ограничиваясь ими, хинуклидил, а также включает гетероциклильные группы, которые содержат заместители, включая, но не ограничиваясь ими, алкил, галоген, амино, гидрокси, циано, карбокси, нитро, тио или алкоксигруппы, связанные с одним из членов кольца. Гетероциклильная группа, как здесь определено, может быть гетероарильной группой или частично или полностью насыщенной циклической группой, включая по крайней мере один гетероатом в кольце. Гетероциклильные группы включают, но не ограничиваются ими, пирролидинил, фуранил, тетрагидрофуранил, диоксоланил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, пирролил, пиразо-лил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, пиридинил, тиофенил, бензотиофенил,
бензофуранил, дигидробензофуранил, индолил, дигидроиндолил, азаиндолил, индазолил, бензимидазо-лил, азабензимидазолил, бензоксазолил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, имидазопиридинил, изокса-золопиридинил, тианафталенил, пуринил, ксантинил, аденинил, гуанинил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидрохинолинил, хиноксалинил и хиназолинил. Гетероциклильные группы могут быть замещены. Примерные замещенные гетероциклильные группы могут быть монозамещенными или замещены более одного раза, включая но не ограничиваясь ими, кольца, содержащие по крайней мере один гетероатом, который моно-, ди-, три-, тетра-, пента-, гекса- или выше замещен заместителями, такими как перечисленные выше заместители, включая, но не ограничиваясь ими, алкил, галоген, амино, гидрокси, циано, карбокси, нитро, тио и алкоксигруппы.
Гетероарильные группы представляют собой ароматические циклические соединения, содержащие 5 или более членов в кольце, из которых один или несколько являются гетероатомами, такими как, но не ограничиваясь ими, N, О и S. Гетероарильная группа, обозначенная как C2-гетероарил, может быть 5-членным кольцом с двумя атомами углерода и тремя гетероатомами, 6-членным кольцом с двумя атомами углерода и четырьмя гетероатомами и так далее. Аналогично, С4-гетероарил может представлять собой 5-членное кольцо с одним гетероатомом, 6-членное кольцо с двумя гетероатомами и так далее. Количество атомов углерода плюс количество гетероатомов должно быть равно общему количеству атомов в кольце. Гетероарильные группы включают, но не ограничиваются ими, группы, такие как пирролил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, пиридинил, тиофенил, бензотиофе-нил, бензофуранил, индолил, азаиндолил, индазолил, бензимидазолил, азабензимидазолил, бензоксазо-лил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, имидазопиридинил, изоксазолопиридинил, тианафталенил, пури-нил, ксантинил, аденинил, гуанинил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизо-хинолинил, хиноксалинил и хиназолинил. Термины "гетероарил" и "гетероарильные группы" включает конденсированные циклические соединения, в которых по крайней одно кольцо, но необязательно все кольца являются ароматическими, включая тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, индолил и 2,3-дигидроиндолил. Термин также включает гетероарильные группы, которые содержат другие группы, связанные с одним из членов кольца, включая, но не ограничиваясь ими, алкил, галоген, амино, гидро-кси, циано, карбокси, нитро, тио или алкоксигруппы. Примерные замещенные гетероарильные группы могут быть замещены один или несколько раз группами, такими как описанные выше группы.
Дополнительные примеры арильных и гетероарильных групп включают, но не ограничиваются ими, фенил, бифенил, инденил, нафтил (1-нафтил, 2-нафтил), N-гидрокситетразолил, N-гидрокситриазолил, N-гидроксиимидазолил, антраценил (1-антраценил, 2-антраценил, 3-антраценил), тиофенил (2-тиенил, 3-тиенил), фурил (2-фурил, 3-фурил), индолил, оксадиазолил, изоксазолил, хиназо-линил, флуоренил, ксантенил, изоинданил, бензгидрил, акридинил, тиазолил, пирролил (2-пирролил), пиразолил (3-пиразолил), имидазолил (1-имидазолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, 5-имидазолил), триа-золил (1,2,3-триазол-1-ил, 1,2,3-триазол-2-ил 1,2,3-триазол-4-ил, 1,2,4-триазол-3-ил), оксазолил (2-оксазолил, 4-оксазолил, 5-оксазолил), тиазолил (2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил), пиридил (2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил), пиримидинил (2-пиримидинил, 4-пиримидинил, 5-пиримидинил, 6-пиримидинил), пиразинил, пиридазинил (3-пиридазинил, 4-пиридазинил, 5-пиридазинил), хинолил (2-хинолил, 3-хинолил, 4-хинолил, 5-хинолил, 6-хинолил, 7-хинолил, 8-хинолил), изохинолил (1-изохинолил, 3-изохинолил, 4-изохинолил, 5-изохинолил, 6-изохинолил, 7-изохинолил, 8-изохинолил), бензо[Ь]фуранил (2-бензо[Ь]фуранил, 3-бензо[Ь]фуранил, 4-бензо[Ь]фуранил, 5-бензо[Ь]фуранил, 6-бензо[Ь]фуранил, 7-бензо[Ь]фуранил), 2,3-дигидробензо[Ь]фуранил (2-(2,3-дигидробензо[Ь]фуранил), 3-(2,3-дигидробензо[Ь]фуранил), 4-(2,3-дигидробензо[Ь]фуранил), 5-(2,3-дигидробензо[Ь]фуранил), 6-(2,3-дигидробензо[Ь]фуранил), 7-(2,3-дигидробензо[Ь]фуранил), бензо[Ь]тиофенил (2-бензо[Ь]тиофенил, 3-бензо[Ь]тиофенил, 4-бензо[Ь]тиофенил, 5-бензо[Ь]тиофенил, 6-бензо[Ь]тиофенил, 7-бензо[Ь]тиофенил), 2,3-дигидробензо[Ь]тиофенил, (2-(2,3-дигидробензо[Ь]тиофенил), 3-(2,3-дигидробензо[Ь]тиофенил), 4-(2,3-дигидробензо[Ь]тиофенил), 5-(2,3-дигидробензо[Ь]тиофенил), 6-(2,3-дигидробензо[Ь]тиофенил), 7-(2,3-дигидробензо[Ь]тиофенил), индолил (1-индолил, 2-индолил, 3-индолил, 4-индолил, 5-индолил, 6-индолил, 7-индолил), индазол (1-индазолил, 3-индазолил, 4-индазолил, 5-индазолил, 6-индазолил, 7-индазолил), бензимидазолил (1-бензимидазолил, 2-бензимидазолил, 4-бензимидазолил, 5-бензимидазолил, 6-бензимидазолил, 7-бензимидазолил, 8-бензимидазолил), бензоксазолил (1-бензоксазолил, 2-бензоксазолил), бензотиазолил (1-бензотиазолил, 2-бензотиазолил, 4-бензотиазолил, 5-бензотиазолил, 6-бензотиазолил, 7-бензотиазолил), карбазолил (1-карбазолил, 2-карбазолил, 3-карбазолил, 4-карбазолил), 5Н-дибенз[Ь,х]азепин (5Н-дибенз[Ь,х]азепин-1-ил, 5Н-дибенз[Ь,х]азепин-2-ил, 5Н-дибенз[Ь,х]азепин-3-ил, 5Н-дибенз[Ь,х]азепин-4-ил, 5Н-дибенз[Ь,х]азепин-5-ил), 10,11-дигидро-5Н-дибенз[Ь,х]азепин (10Д1-дигидро-5Н-дибенз[ЪД]азепин-1-ил, 10,11-дигидро-5Н-дибенз[Ь,1]азепин-2-ил, 10,11-дигидро-5Н-дибенз[Ь,1]азепин-3-ил, 10,11-дигидро-5Н-дибенз[Ь,1]азепин-4-ил, 10,11-дигидро-5Н-дибенз[Ь,х]азепин-5-ил) и им подобные.
Гетероциклилалкильные группы представляют собой алкильные группы, как определено выше, в которых водородная или углеродная связь алкильной группы замещена связью с гетероциклильной группой, как определено выше. Примерные гетероциклилалкильные группы включают, но не ограничиваются ими, фуран-2-илметил, фуран-3-илметил, пиридин-2-илметил (а-пиколил), пиридин-3-илметил
(Р-пиколил), пиридин-4-илметил (у-пиколил), тетрагидрофуран-2-илэтил и индол-2-илпропил. Гетеро-циклилалкильные группы могут быть замещены в гетероциклильной группе, алкильной группе или в обеих.
Гетероарилалкильные группы представляют собой алкильные группы, как определено выше, в которых водородная или углеродная связь алкильной группы замещена связью с гетероарильной группой, как определено выше. Гетероарилалкильные группы могут быть замещены в гетероарильной группе, ал-кильной группе или обеих.
Под "циклической системой" в качестве используемого здесь термина понимают группу, включающую одно, два, три или более колец, которые могут быть замещены нециклическими группами или другими циклическими системами, или ими обеими, которая может быть полностью насыщенной, частично ненасыщенной, полностью ненасыщенной или ароматической, и когда кольцевая система включает более одного кольца, кольца могут быть конденсированы, связаны мостиковой связью или спироцикличе-скими. Под "спироциклическими" понимают класс структур, где два кольца конденсированы при одном тетраэдральном атоме углерода, что хорошо известно из предшествующего уровня техники.
"Моноциклическое, бициклическое или полициклическое, ароматическое или частично ароматическое кольцо" в качестве используемого термина обозначает циклическую систему, включающую ненасыщенное кольцо, имеющее 4n+2 pi электронов, или его частично восстановленную (гидрированную) форму. Ароматическое или частично ароматическое кольцо может включать дополнительные конденсированные, мостиковые или спирокольца, которые сами не являются ароматическими или частично ароматическими. Например, нафталин и тетрагидронафталин оба являются "моноциклическим, бицикличе-ским или полициклическим, ароматическим или частично ароматическим кольцом" в данных значениях. Также, например, бензо-[2,2,2]-бициклооктан также представляет собой "моноциклическое, бицикличе-ское или полициклическое, ароматическое или частично ароматическое кольцо" в данных значениях, содержащее фенильное кольцо, конденсированное с мостиковой бициклической системой. Полностью насыщенное кольцо не содержит двойных связей, и является карбоциклическим или гетероциклическим в зависимости от присутствия гетероатомов в данных значениях.
Термин "алкокси" обозначает атом кислорода, связанный с алкильной группой, включая циклоал-кильную группу, как определено выше. Примеры линейных алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, н-пропокси, н-бутокси, н-пентилокси, н-гексилокси и им подобные. Примеры разветвленных алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, изопропокси, втор-бутокси, трет-бутокси, изопентилокси, изогексилокси и им подобные. Примеры циклических алкоксигрупп включают, но не ограничиваются ими, циклопропилокси, циклобутилокси, циклопентилокси, циклогексилокси и им подобные.
Термины "арилокси" и "арилалкокси" обозначают соответственно арильную группу, связанную с атомом кислорода, и аралкильную группу, связанную с атомом кислорода алкильной группы. Примеры включают, но не ограничиваются ими, фенокси, нафтилокси и бензилокси.
"Ацильная" группа в качестве используемого термина обозначает группу, содержащую карбонильную группу, где группа связана через карбонильный атом углерода. Карбонильный атом углерода также связан с другим атомом углерода, который может составлять часть алкила, арила, аралкилциклоалкила, циклоалкилалкила, гетероциклила, гетероциклилалкила, гетероарила, гетероарилалкила или им подобных. В конкретном случае, когда карбонильный атом углерода связан с атомом водорода, группа представляет собой "формильную" группу, ацильную группу, в качестве определенного здесь термина. Ацильная группа может включать от 0 до около 12-20 дополнительных атомов углерода, связанных с карбонильной группой. Ацильная группа может включать двойные или тройные связи в приведенных значениях. Акрилоильная группа является примером ацильной группы. Ацильная группа также может включать гетероатомы в приведенных значениях. Никотиноильная группа (пиридил-3-карбонильная) группа является примером ацильной группы в приведенных значениях. Другие примеры включают ацетил, бензоил, фенилацетил, пиридилацетил, циннамоил и акрилоил и им подобные. Когда группа, содержащая атом углерода, который связан с карбонильным атомом углерода, содержит атом галогена, группа обозначается как "галогенацильная" группа. Примером является трифторацетильная группа.
Термин "амин" включает первичные, вторичные и третичные амины, имеющие, например, формулу ^группа)3, где каждая группа независимо может представлять собой Н или группу, отличную от Н, такую как алкил, арил и им подобные. Амины включают, но не ограничиваются ими, RNH2, например ал-киламины, ариламины, алкилариламины; R2NH, где каждый R выбирают независимо, такие как диалки-ламины, диариламины, аралкиламины, гетероциклиламины и им подобные; и R3N, где каждый R выбирают независимо, такие как триалкиламины, диалкилариламины, алкилдиариламины, триариламины и им подобные. Термин "амин" также включает ионы аммония, как здесь используется.
"Аминогруппа" представляет собой заместитель формы -NH2, -NHR, -NR2, -NR3+, где каждый R выбирают независимо, и протонированные формы каждого. Соответственно любое соединение, замещенное аминогруппой, может рассматриваться как амин.
Ион "аммония" включает незамещенный ион аммония NH4+, но если не указано иное, он также включает любые протонированные или кватернизированные формы аминов. Так, гидрохлорид тримети
ламмония и хлорид тетраметиламмония оба представляют собой ионы аммония и амины, в приведенных значениях.
Термин "амид" (или "амидо") включает С- и N-амидные группы, то есть -C(O)NR'R" и -NR'C(O)R" группы соответственно. R' и R" в С-амиде могут быть связаны вместе с образованием гетероциклического кольца с атомом азота. Амидные группы, следовательно, включают, но не ограничиваются ими, кар-бамоильные группы (-C(O)NH2) и формамидные группы (-NHC(O)H). "Кабоксамидогруппа " представляет собой группу формулы C(O)NR2, где R может представлять собой Н, алкил, арил и т.д.
Термин "уретан" (или "карбамил") включает N- и О-уретановые группы, то есть -NRC(O)OR и -OC(O)NR2 группы соответственно.
Термин "сульфонамид" (или "сульфонамидо") включает S- и N-сульфонамидные группы, то есть -SO2NR2 и -NRSO2R группы соответственно. Сульфонамидные группы следовательно включают, но не ограничиваются ими, сульфамоильные группы (-SO2NH2).
Термин "амидин" или "амидино" включает группы формулы -C(NR)NR2. Обычно амидиногруппа представляет собой -C(NH)NH2.
Термин "гуанидин" или "гуанидино" включает группы формулы -NRC(NR)NR2. Обычно гуаниди-ногруппа представляет собой -NHC(NH)NH2.
"Галоген," "гало" и "галид" включают фтор, хлор, бром и йод.
Термины "включающий", "включая", "имеющий", "состоящий из" являются открытыми терминами, используемыми в настоящем документе, и не исключают наличия дополнительных элементов или компонентов. В заявленном элементе использование формы "включающий", "включая", "имеющий", "состоящий из" означает, что из какого бы элемента ни был он составлен, имеет, включает или состоит, он необязательно представляет собой единственный элемент, охватываемый заявленным термином, который содержит это слово.
"Соль", как хорошо известно в данной области техники, включает органическое соединение, такое как карбоновая кислота, сульфокислота, или амин, в ионной форме, в комбинации с противоионом. Например, кислоты в анионной форме могут образовывать соли с катионами, такими как катионы металла, например натрия, калия и им подобных; с солями аммония, такими как NH4+ или катионы различных аминов, в том числе тетраалкильные соли аммония, такие как тетраметиламмониевые и алкиламмоние-вые соли, такие как соли трометамина, или другие катионы, такие как триметилсульфоний и им подобные. "Фармацевтически приемлемая" или "фармакологически приемлемая" соль представляет собой соль, полученную из иона, который был одобрен для использования человеком, и, как правило, нетоксичную, такую как хлорид или натриевая соль. "Цвиттерион" является внутренней солью, такой, которая может быть получена в молекуле, которая имеет по крайней мере две ионизируемые группы, одну - образующую анион, а другую - катион, которые служат для уравновешивают друг друга. Например, аминокислоты, такие как глицин, могут существовать в цвиттерионной форме. "Цвиттерион" является солью в приведенном значении. Соединения настоящего изобретения могут присутствовать в форме солей. Термин "соли" включает дополнительные соли свободных кислот или свободных оснований, которые являются соединениями по изобретению. Соли могут быть "фармацевтически приемлемыми солями". Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, которые обладают токсичностью в пределах, которые обеспечивают применимость для фармацевтического применения. Фармацевтически неприемлемые соли, тем не менее, могут обладать такими свойствами, как высокая кристалличность, которые находят применение при осуществлении настоящего изобретения, таких как, например, удобство в процессе синтеза, очистки или получения состава из соединений по изобретению.
Подходящие фармацевтически приемлемые соли кислот могут быть получены из неорганических кислот или из органических кислот. Примерами неорганических кислот являются соляная, бромистово-дородная, иодистоводородная, азотная, угольная, серная и фосфорная кислоты. Соответствующие органические кислоты могут быть выбраны из алифатических, циклоалифатических, ароматических, арали-фатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых классов органических кислот, примерами которых являются муравьиная, уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, глюконовая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, глюкуроновая, малеиновая, фумаровая, пировиноградная, аспарагиновая, глутаминовая, бензойная, антраниловая, 4-гидроксибензойная, фенилуксусная, миндальная, эмбоновая (памовая), метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, пантотеновая, триф-торметансульфокислота, 2-гидроксиэтансульфоновая, n-толуолсульфокислота, сульфаниловая, циклогек-силаминосульфоновая, стеариновая, альгиновая, Р-гидроксибутановая, салициловая, галактаровая и га-лактуроновая кислота. Примеры фармацевтически неприемлемых кислотных аддитивных солей включают, например, перхлораты и тетрафторбораты.
Подходящие фармацевтически приемлемые основные аддитивные соли соединений по изобретению включают, например, соли с металлом, в том числе щелочным металлом, щелочно-земельным металлом и соли переходных металлов, такие как, например, соли кальция, магния, калия, натрия и цинка. Фармацевтически приемлемые основные аддитивные соли также включают органические соли, полученные из основных аминов, таких как, например, ^№-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэта-ноламин, этилендиамин, меглумин (N-метилглюкамин) и новокаин. Примеры фармацевтически непри
емлемых основных аддитивных солей включают соли лития и цианаты. Хотя фармацевтически неприемлемые соли обычно не являются полезными в качестве лекарственных средств, такие соли могут быть полезны, например, в качестве промежуточных соединений в синтезе соединений, например, для их очистки перекристаллизацией. Все эти соли могут быть получены с помощью традиционных средств из соответствующего соединения реакцией, например соответствующей кислоты или основания с соединением. Термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к нетоксичным неорганическим или органическим кислотным и/или основным солям, см., например, статью Lit и др., Salt Selection for Basic Drugs, 1986, Int J. Pharm., 33, c. 201-217, приведенную в качестве ссылки.
Неограничивающие примеры возможных солей по изобретению включают, но не ограничиваются ими, гидрохлорид, цитрат, гликолат, фумарат, малат, тартрат, мезилат, эзилат, циннамат, изетионат, сульфат, фосфат, дифосфат, нитрат, гидробромид, гидроиодид, сукцинат, формиат, ацетат, дихлорацетат, лактат, п-толуолсульфонат, памитат, пидолат, памоат, салицилат, 4-аминосалицилат, бензоат, 4-ацетамидобензоат, глутамат, аспартат, гликолат, адипат, альгинат, аскорбат, безилат, камфорат, камфор-сульфонат, камсилат, капрат, капроат, цикламат, лаурилсульфат, эдисилат, гентисат, галактарат, глуцеп-тат, глюконат, глюкуронат, оксоглутарат, гиппурат, лактобионат, малонат, малеат, миндалат, напсилат, нападисилат, оксалат, олеат, себакат, стеарат, сукцинат, тиоцианат, ундециленат и ксинафоат.
"Гидрат" представляет собой соединение, которое существует в композиции с молекулами воды. Композиция может включать воду в стехиометрических количествах, таких как моногидрат или дигид-рат, или может включать воду в произвольном количестве. Как здесь используется, термин "гидрат" относится к твердой форме, то есть соединение в водном растворе, хотя оно может быть гидратировано, не является гидратом в смысле используемого в данном документе термина.
"Гомолог" соединения по изобретению представляет собой соединение, содержащее один или несколько атомов соединения, замещенных изотопом такого атома. Например, гомологи включают соединения с дейтерием вместо некоторых атомов водорода соединения, такие как соединения по изобретению, в которых метальные группы в изопропоксигруппу формулы I-R и I-S полностью или частично дейтерированы (например, ф^^С-О-). Изотопные замещения, которые могут быть проведены для получения гомологов по изобретению, включают нерадиоактивные (стабильные) атомы, такие как дейтерий и углерод 13, а также радиоактивные (нестабильные) атомы, такие как тритий, углерод 14, йод 123, йод 125 и т.д.
"Сольват" представляет собой ту же композицию, за исключением того, что растворитель, отличный от воды, заменен водой. Например, этанол или метанол может образовывать "алкоголят", который снова может быть стехиометрическим или нестехиометрическим. Как здесь используется, термин "соль-ват" относится к твердой форме, то есть соединение в растворе в растворителе, хотя оно может быть сольватировано, не является сольватом в смысле термина, используемого в данном документе.
"Пролекарство", как хорошо известно специалисту в данной области техники, является веществом, которое может быть введено пациенту, где вещество превращается in vivo под действием биохимических средств внутри организма пациента, например ферментов, в активный фармацевтический ингредиент. Примеры пролекарств включают эфиры карбоновых кислот, которые могут быть гидролизованы эндогенными эстеразами, которые находятся в крови человека и других млекопитающих.
Любое соединение, которое может быть превращено in vivo в активный лекарственный препарат путем химических или биохимических превращений, функционирует в качестве пролекарства. Проле-карства заявленных соединений включены в объем настоящего изобретения.
Некоторые примеры пролекарств в объеме настоящего изобретения включают следующее.
i. Если соединение содержит гидроксильную группу, гидроксильная группа может быть модифицирована с получением сложного эфира, карбоната или карбамата. Примеры включают ацетат, пивалат, метил- и этилкарбонаты и диметилкарбамат. Сложный эфир может быть получен из аминокислот, таких как глицин, серин или лизин.
ii. Если соединение содержит аминогруппу, аминогруппа может быть модифицирована с получением амида. Примеры включают ацетамид или производные с аминокислотами, такими как глицин, серин или лизин.
Некоторые соединения по изобретению и их соли могут существовать в более чем одной кристаллической форме, и настоящее изобретение включает каждую кристаллическую форму и их смеси. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут существовать в несольватированной, а также сольвати-рованной формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, образуя гидраты или аддукты со спиртами, такими как ^^спирты, и им подобные. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть выделены в смеси с молекулами растворителя путем кристаллизации при выпаривании соответствующего растворителя. Такие растворители включают, но не ограничиваются ими, толуол, тетрагидрофуран, диоксан, диметилформамид, ацетонитрил, ацетат, такой как метилацетат, этил-ацетат, бутилацетат, изобутилацетат, пропил- и изопропилацетат, простые эфиры, такие как диэтиловый эфир и этиловый эфир, спирты, такие как метанол, этанол, 1- или 2-бутанол, 1- или 2-пропанол, пента-нол, и диметилсульфоксид. Обычно изображение соединения структурой или наименованием подразумевает включение соединения в любой форме (например, само по себе, в виде гидрата, сольвата или в
иной смеси).
Кроме того, когда особенности или аспекты изобретения описаны в терминах групп Маркуша, специалистам в данной области понятно, что изобретение также описывается терминами отдельных членов или подгрупп членов группы Маркуша. Например, если X описывается как выбранный из группы, состоящей из брома, хлора и йода, притязания распространяются на X, представляющий собой бром, и на X, представляющий собой хлор и бром. Кроме того, когда особенности или аспекты изобретения описаны в терминах группы Маркуша, специалистам в данной области понятно, что изобретение также описывается в терминах любой комбинации отдельных членов или подгруппы членов группы Маркуша. Таким образом, например, если X описывается как выбранный из группы, состоящей из брома, хлора, и йода, и Y выбран из группы, состоящей из метила, этила и пропила, подробно описаны притязания, где X представляет собой бром и Y представляет собой метил.
Композиции и комбинации для лечения.
Соединения S1P1, их фармацевтически приемлемые соли или гидролизуемые сложные эфиры настоящего изобретения могут объединяться с фармацевтически приемлемым носителем для получения фармацевтических композиций, полезных для лечения описанных здесь биологических состояний или нарушений у млекопитающего, и более предпочтительно человека. Конкретный носитель, используемый в этих фармацевтических композициях, может изменяться в зависимости от типа нужного введения (например, внутривенного, перорального, местного, суппозиторного или парентерального).
При получении композиций в пероральных жидких лекарственных формах (например, суспензии, эликсиры и растворы) могут использоваться обычные фармацевтические средства, такие как вода, глико-ли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, красители и им подобное. Кроме того, при получении пероральных твердых лекарственных форм (например, порошки, таблетки и капсулы) могут использоваться носители, такие как крахмалы, сахара, разбавители, гранулирующие агенты, смазывающие вещества, связующие, разрыхлители и им подобные.
Другой аспект варианта осуществления по изобретению относится к композициям соединений по изобретению, отдельно или в комбинации с другим ингибитором S1P1 или терапевтическим агентом другого типа, или ими обоими. Как указано в настоящем документе, соединения по изобретению включают стереоизомеры, таутомеры, сольваты, гидраты, соли, в том числе фармацевтически приемлемые соли, и их смеси. Композиции, содержащие соединение по изобретению, могут быть получены обычными методами, например, как описано в книге The Science and Practice of Pharmacy, 19-e изд., 1995, включенной в качестве ссылки. Композиции могут присутствовать в обычных формах, например капсулах, таблетках, аэрозолях, растворах, суспензиях или составах местного применения.
Типичные композиции включают соединение по изобретению и фармацевтически приемлемый экс-ципиент, которым может быть носитель или разбавитель. Например, активное соединение, как правило, смешивают с носителем, или разбавляют носителем, или заключают в носитель, который может присутствовать в виде ампул, капсул, саше, бумаги или других контейнеров. Когда активное соединение смешивают с носителем, или когда носитель выступает разбавителем, он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который выступает в качестве носителя, эксципиента или среды для активного соединения. Активное соединение может быть адсорбировано на гранулированном твердом носителе, например, содержащемся в саше. Некоторыми примерами подходящих носителей являются вода, растворы солей, спирты, полиэтиленгликоль, полигидроксиэтоксилированное касторовое масло, арахисовое масло, оливковое масло, желатин, лактоза, терра альба, сахароза, декстрин, карбонат магния, сахар, цик-лодекстрин, амилоза, стеарат магния, тальк, желатин, агар, пектин, камедь, стеариновая кислота или низшие алкильные эфиры целлюлозы, кремниевая кислота, жирные кислоты, амины жирных кислот, мо-ноглицериды и диглицериды жирных кислот, пентаэритритовые эфиры жирных кислот, полиоксиэтилен, гидроксиметилцеллюлоза и поливинилпирролидон. Кроме того, носитель или разбавитель может включать любой материал замедленного высвобождения, известный в данной области, такой как глицерилмо-ностеарат или глицерилдистеарат, отдельно или в смеси с воском.
Составы могут быть смешаны с добавками, которые не реагируют с активными соединениями. Такие добавки могут включать увлажняющие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, соль для регулирования осмотического давления, буферы и/или красители, консерванты, подсластители или ароматизаторы. При желании композиции можно стерилизовать.
Способом введения может быть любой способ, который эффективно транспортирует активное соединение по изобретению, которое ингибирует активность фермента киназы фокальной адгезии, в соответствующий нужный сайт действия, такой как пероральный, назальный, легочный, буккальный, подкожный, внутрикожный, трансдермальный или парентеральный, например ректальный, жировой, подкожный, внутривенный, внутриуретральный, внутримышечный, интраназальный, глазной раствор или мазь, причем пероральный путь является предпочтительным.
Для парентерального введения носитель, как правило, включает стерильную воду, хотя также могут быть включены другие ингредиенты, которые облегчают растворимость или выступают в качестве консервантов. Кроме того, также могут быть получены инъекционные суспензии, и в этом случае могут использоваться соответствующие жидкие носители, суспендирующие агенты и тому подобные.
Для местного введения соединения настоящего изобретения могут быть составлены с помощью мягких увлажняющих основ, таких как мази или кремы.
Если для перорального введения используется твердый носитель, препарат может быть таблетиро-ван, помещен в твердую желатиновую капсулу в виде порошка или гранул, или он может присутствовать в форме пастилок или таблеток. Если используется жидкий носитель, препарат может присутствовать в виде сиропа, эмульсии, мягких желатиновых капсул или стерильной инъекционной жидкости, такой как водная или неводная жидкая суспензия или раствор.
Инъекционные дозированные формы, как правило, включают водные суспензии или масляные суспензии, которые могут быть получены с использованием подходящего диспергирующего или увлажняющего агента и суспендирующего агента. Инъекционные формы могут присутствовать в растворенной фазе или в форме суспензии, которую получают с растворителем или разбавителем. Приемлемые растворители или носители включают стерилизованную воду, раствор Рингера или изотонический водный солевой раствор. Альтернативно, стерильные масла могут использоваться в качестве растворителей или суспендирующих агентов.
Предпочтительно масло или жирная кислота является нелетучей, включая природные или синтетические масла, жирные кислоты, моно-, ди- или триглицериды.
Для инъекций состав также может представлять собой порошок, подходящий для восстановления соответствующим раствором, как описано выше. Примеры их включают, но не ограничиваются ими, порошки, высушенные замораживанием-сушкой, роторной сушкой или сушкой спреем, аморфные порошки, гранулы, осадки или твердые частицы. Для инъекций составы необязательно могут содержать стабилизаторы, модификаторы рН, поверхностно-активные вещества, модификаторы биодоступности и их комбинации. Соединения могут быть составлены для парентерального введения путем инъекции, такой как болюсная инъекция или инфузия. Единичной дозированной формой для инъекций могут быть ампулы или многодозовые контейнеры.
Составы по изобретению могут быть разработаны с получением быстрого, длительного или отсроченного высвобождения активного ингредиента после введения пациенту, используя методики, хорошо известные в данной области техники. Таким образом, составы можно получать для контролируемого высвобождения или для медленного высвобождения.
Композиции, предусмотренные настоящим изобретением, могут включать, например, мицеллы или липосомы или другие инкапсулированные формы, или могут вводиться в форме длительного высвобождения для обеспечения длительного хранения и/или эффективной доставки. Следовательно, составы могут быть спрессованы в шарики или цилиндры и имплантированы подкожно или внутримышечно в качестве депонируемых инъекций. Такие имплантаты могут включать известные инертные материалы, такие как силиконы и биоразлагаемые полимеры, например полилактид-полигликолиды. Примеры других био-разлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды).
Для назального введения препарат может содержать соединение по изобретению, который ингиби-рует активность киназы фокальной адгезии, растворенный или суспендированный в жидком носителе, предпочтительно водном носителе, для аэрозольного применения. Носитель может содержать добавки, такие как солюбилизирующие агенты, например пропиленгликоль, поверхностно-активные вещества, усилители абсорбции, такие как лецитин (фосфатидилхолин) или циклодекстрин, или консерванты, такие как парабены.
Для парентерального применения особенно подходят инъекционные растворы или суспензии, предпочтительно водные растворы с активным соединением, растворенным в полигидроксилированном касторовом масле.
Дозированные формы могут вводиться один раз в день или более одного раза в день, например дважды или трижды в день. Альтернативно, лекарственные формы могут вводиться реже, чем один раз в день, например на любой другой день или один раз в неделю, если установлено, что это целесообразно по назначению врача.
Вариант осуществления изобретения также включает пролекарства соединения по изобретению, которые при введении подвергаются химическому превращению метаболическими или другими физиологическими процессами, прежде чем стать активными фармакологическими веществами. Превращение метаболическими или другими физиологическими процессами включает, без ограничения, ферментативное (например, катализируемое конкретным ферментом) и неферментативное (например, вызванное общей или конкретной кислотой или основанием) химическое превращение пролекарства в активное фармакологическое вещество. Обычно такие пролекарства являются функциональными производными соединения по изобретению, которые легко превращаются in vivo в соединение по изобретению. Обычные методики отбора и получения подходящих пролекарственных производных описаны, например, в книге Design of Prodrugs, под ред. Н. Bundgaard, Elsevier, 1985.
В другом варианте осуществления описаны способы получения композиции описанного здесь соединения, включающие объединение соединения по изобретению с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. В некоторых вариантах осуществления фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель предназначен для перорального введения. В некоторых таких вариантах осуществления
способы могут также включать стадию введения композиции в капсулу или таблетку. В других вариантах осуществления фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель предназначен для парентерального введения. В некоторых таких вариантах осуществления способы также включают стадию лио-филизации композиции с получением лиофилизированного препарата.
Соединения по изобретению могут использоваться терапевтически в комбинации с i) одним или несколькими другими ингибиторами S1P1 и/или ii) одним или несколькими другими типами ингибиторов протеинкиназы и/или одним или несколькими другими типами терапевтических агентов, которые могут вводиться перорально в той же дозированной форме, в отдельной пероральной лекарственной форме (например, последовательно или непоследовательно) или в виде инъекции вместе или раздельно (например, последовательно или непоследовательно).
Соответственно в другом варианте осуществления изобретение относится к комбинациям, включающим:
a) соединение по изобретению, как описано выше, и
b) одно или несколько соединений, включающих:
i) другие соединения настоящего изобретения,
ii) другие лекарственные средства, пригодные для лечения злокачественности, для которых медицински показана активация S1P1, например рассеянного склероза.
Комбинации по изобретению включают смеси соединений из (а) и (b) в одном составе и соединения из (а) и (b) в виде отдельных составов. Некоторые комбинации по изобретению могут быть упакованы в отдельных составах в наборе. В некоторых вариантах осуществления два или более соединений из (b) составлены вместе, соединение по изобретению составлено отдельно.
Дозы и составы для других используемых агентов, где возможно, приведены в последнем выпуске Physicians' Desk Reference, включенном в качестве ссылки.
Способы лечения.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает перорально биодоступные соединения, которые специфично агонизируют S1P1 без связывания (S1P2, S1P3 и S1P4), или имеют существенную специфичность по отношению к (S1P5), другим рецепторам EDG. Селективный агонист S1P1 может использоваться для лечения заболеваний с аутоиммунным компонентом, компонентом гиперактивного иммунного ответа, ангиогенеза или воспалительного компонента, но не ограничиваются такими состояниями. Селективные агонисты S1P1 имеют преимущества по сравнению с обычными терапиями благодаря повышенному терапевтическому окну, благодаря пониженной токсичности вследствие привлечения других рецепторов EDG.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение включает соединения, которые связываются с высоким сродством и специфичностью с рецептором S1P1 в качестве агониста. После лиги-рования рецептора S1P1 агонистом, передача сигнала происходит через Gai, ингибируя выработку цАМФ аденилатциклазой.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу активации или агонизма (то есть проявления агонизирующего действия, действию в качестве агонистов) подтипа рецептора сфингозин-1-фосфата, такого как S1P1, соединением по изобретению. Способ включает контактирование рецептора с соединением по изобретению в соответствующей концентрации, чтобы вызвать активацию рецептора. Контактирование может происходить in vitro, например при проведении анализа, чтобы определить активность в отношении активации рецептора S1P соединением по изобретению, проходящим эксперименты, связанные с представлением официального одобрения.
В некоторых вариантах осуществления способ активации рецептора S1P, такого как S1P1, может также осуществляться in vivo, то есть в живом организме млекопитающего, такого как человек или тестируемое животное. Соединение по изобретению может вводиться в живой организм одним из способов, описанных выше, например перорально, или может вводиться локально в ткань организма, например в виде инъекции в опухоль организма. В присутствии соединения по изобретению имеет место активация рецептора, и может быть изучена его эффективность.
Вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения злокачественности у пациентов, для которых медицински показана активация рецептора S1P, такого как S1P1, в котором пациенту вводят соединение по изобретению в дозе, с частотой и длительностью достаточными для обеспечения благоприятного воздействия на пациента. Соединение по изобретению может вводиться любыми подходящими средствами, примеры которых описаны выше.
Реагенты: (i) KH2PO4, H2O2, NaClO2, CH3CN; (ii) H2NNHCSNH2, POC13; (iii) CuBr2, изоамилонитрит, CH3CN.
Схема 2
Реагенты: (i) ^-бороновая кислота, K2CO3, Pd(PPh3)4, DME, H2O; (ii) NBS, DMF.
Схема 3
-Br
Реагенты: (i) R1-!, Pd(PPh3)2Cl2, ТГФ; (ii) Br2, AcOK, AcOH.
Схема 4
HO-
JO*
Реагенты: (i) (S)-2-метил-CBS-оксазаборолидин, BH3-Me2S, толуол, ДХМ; (ii) PG-Cl, (где PG представляет собой защитную группу), например TBSCl, имидазол, DMF; (iii) бис-(пинаколато)дибор, PdCl2(dppf)-CH2Cl2, KOAc, 1,4-диоксан.
(S)-Энантиомер получали аналогично методике, приведенной на схеме 5, используя ^)-2-метил-CBS-оксазаборолидин на стадии i. Рацемический материал может быть получен аналогично, используя NaBH4 в качестве восстанавливающего агента на стадии i.
Схема 6
Реагенты: (i) ^)-2-метилпропан-2-сульфинамид, NaBH4, ТГФ, толуол; (ii) 4 N HCl, 1,4-диоксан; (iii) PG=ди-трет-бутилдикарбонат, триэтиламин, ДХМ; (iv) бис-(пинаколато)дибор, PdCl2(dppf)-CH2Cl2, KOAc, 1,4-диоксан.
(S)-Энантиомер получали аналогично методике, приведенной на схеме 6, используя (S)-2-метилпропан-2-сульфинамид на стадии i.
Схема 7
Реагенты: (i) K2CO3, Pd(PPh3)4, DME, H2O; (ii) NaOiPr, iPrOH; (iii) снятие защитных групп, например, с помощью TBAF, ТГФ или HCl, 1,4-диоксан.
^)-Энантиомеры получали аналогично методике, приведенной на схеме 7, используя ^)-трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)силан на стадии i. Рацемический инданол получали аналогично, используя рацемический трет-
Реагенты: (i) K2CO3, Pd(PPh3)4, DME, H2O; (ii) NaOiPr, iPrOH; (iii) 4 N HCl, 1,4-диоксан; (iv) (a) R'-LG или R"-LG, где LG представляет собой уходящую группу, K2CO3, CH3CN; (b) R3-CO2H или R4-CO2H, HOBt, EDC, DMF или R3-COCl или R4-CO2H, ТЭА, ДХМ; (c) R3-SO2Cl или R5-SO2Cl, ТЭА, ДХМ; (d) R4-CHO, HOAc, NaBH4 или NaCNBH3 или Na(OAc)3BH, MeOH; (e) R3-OCOCl или R4-OCOCl, DIEA, DMF; (f) HN(R7R7), CDI, ТЭА, ДХМ; (g) H2NSO2NH2, D, диоксан; (h) диметилоксиран, D, EtOH; (x) (а) если R' или R"=H, затем могут осуществляться реакции (ix)(a-d); (b) если R' или R" содержит сложный эфир, затем может осуществляться (i) гидролиз NaOH, EtOH или (ii) восстановление NaBH4, MeOH; (с) если R' или R" содержит кислоту, затем могут осуществляться конденсации HN(R7R7), HOBt, EDC, DMF; (d) если R' или R" содержат подходящий активированный алкен, затем может осуществляться реакция Михаэля HN(R7R7), DMF.
(S)-Энантиомеры получали аналогично методике, приведенной на схеме 8, используя ^)-трет-бутил(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамат на стадии i.
Реагенты: (i) (3-циано-4-изопропоксифенил)бороновая кислота, K2CO3, Pd(PPh3)4, DME, H2O; (ii) (R)-, (S)- или рацемический трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)силан, K2CO3, Pd(PPh3)4, DME, H2O; (iii) TBAF, ТГФ.
Схема 10
Реагенты: (i) (ii) (R)-, (S)- или рацемический трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)силан, K2CO3, Pd(PPh3)4, DME, H2O; (ii) (3-циано-4-изопропоксифенил)бороновая кислота, K2CO3, Pd(PPh3)4, DME, H2O; (iii) TBAF, ТГФ.
Примеры
Общие способы.
1Н ЯМР (400 МГц) и 13С ЯМР (100 МГц) получали в растворе дейтериохлороформа (CDCl3), дейте-риометанола (CD3OD) или диметилсульфоксида -D6 (ДМСО). ЯМР-спектры обрабатывали с помощью Mestrec 5,3,0 и 6,0,1. Пики 13С ЯМР, которые помещены в скобки, представляют собой два ротамера одного углерода. Масс-спектры (LCMS) получали с помощью Agilent 1100/6110 ВЭЖХ системы, оснащенной Thompson ODS-A, 100A, 5 мкм (50 х 4,6 мм) колонка, используя воду с 0,1% муравьиной кислоты в качестве подвижной фазы А, и ацетонитрил с 0,1% муравьиной кислоты в качестве подвижной фазы В. Градиент составлял 20-100% подвижной фазы В в течение 2,5 мин, затем при 100% в течение 2,5 мин.
Скорость потока составляла 1 мл/мин. Если не указано иное, данные LCMS приведены с помощью этого способа. Для более гидрофобных соединений использовали следующий градиент, обозначенный как способ 1: 40-95% в течение 0,5 мин, выдерживали при 95% в течение 8,5 мин, затем возвращали до 40% в течение 2 мин со скоростью потока 1 мл/мин. Конечные соединения проверяли на чистоту с помощью способа 2: 5% в течение 1 мин, 5-95% в течение 9 мин, затем выдерживали при 95% в течение 5 мин со скоростью потока 1 мл/мин. Способ 3: 20-100% в течение 2,5 мин, затем выдерживали при 100% в течение 4,5 мин со скоростью потока 1 мл/мин. Энантиомерный избыток определяли объединением пиков, которые разделяли на колонке Chiralpak AD-H, 250 х 4,6 мм со скоростью потока 1 мл/мин и изократной подвижной фазой. Если не указано иное, хиральные данные приведены с помощью этого способа. Альтернативно, хиральные разделения осуществляли в следующих условиях, обозначенных как хиральный способ 1: колонка Chiralpak AY-H, 250 х 4,6 мм со скоростью потока 1 мл/мин и изократной подвижной фазой. Хиральный способ 2: колонка Chiralcel OZ-3, 150 х 4,6 мм со скоростью потока 0,75 мл/мин и изократной подвижной фазой. Пиридин, дихлорметан (ДХМ), тетрагидрофуран (ТГФ) и толуол используют в методиках от Aldrich в надежно закрытых бутылках, хранящихся в атмосфере азота (N2). Все реакционные смеси перемешивали магнитной мешалкой, и температурами являются внешние температуры реакции. Хроматографии осуществляли с помощью Combiflash Rf ускоренной системы очистки (Tele-dyne Isco), оснащенной Redisep (Teledyne Isco), на колонках с силикагелем (SiO2). Препаративные ВЭЖХ очистки осуществляли в системе Varian ProStar/PrepStar, используя воду, содержащую 0,05% трифторук-сусной кислоты в качестве подвижной фазы А, и ацетонитрил с 0,05% трифторуксусной кислотой в качестве подвижной фазы В. Градиент составлял 10-80% с подвижной фазой В в течение 12 мин, выдерживали при 80% в течение 2 мин и затем восстанавливали до 10% в течение 2 мин со скоростью потока 22 мл/мин. Могут использоваться другие методы, аналогичные описанному. Фракции собирали с помощью коллектора фракций Varian Prostar, и упаривали с помощью вакуумного насоса Savant SpeedVac Plus. Соединения с солеобразующими центрами являлись солями с трифторуксусной кислотой (ТФУК). Микроволновое облучение осуществляли с помощью микроволнового реактора Biotage Initiator, оснащенного сосудами для микроволнового излучения Biotage. Использовали следующие сокращения: этилацетат (ЕА), триэтиламин (ТЭА), диэтиламин (DEA), гидроксибензотриазол (HOBt), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC), изопропанол (IPA), диметилформамид (DMF), диметилаце-тамид (DMA). Норит представляет собой активированный уголь.
Экспериментальные методики.
З-Циано-4-фторбензойная кислота
К раствору 3-циано-4-фторбензальдегида (45 г, 301 ммоль) в CH3CN (450 мл) добавляли моноосновный фосфат калия (24 г, 176 ммоль) в воде (225 мл) и 30% пероксида водорода в воде (30 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0°С, и по каплям добавляли хлорит натрия (60 г, 663 ммоль) в воде (450 мл) в течение 2 ч. Полученную желтую суспензию перемешивали при комнатной температуре до прекращения выделения кислорода (4 ч). Добавляли сульфит натрия (30 г, 238 ммоль) в воде (100 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Реакцию гасили 2 N раствором HCl (500 мл) и полученное твердое вещество отфильтровывали и промывали водой. Водную фазу экстрагировали ЕА (2 х 500 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором хлорида натрия (200 мл), сушили MgSO4, концентрировали и объединяли с собранным твердым веществом с получением всего 48,5 г (97%) сырой 3-циано-4-фторбензойной кислоты в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рас-счит. для C8H4FNO2: 165,0; обнаруж. 166,1 [М+Н]+, tR=2,54 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 13,60 (s, 1H), 8,41 (dd, J=6,3, 2,1 Гц, 1H), 8,30 (ddd, J=8,8, 5,3, 2,2 Гц, 1H), 7,66 (t, J=9,0 Гц, 1H).
5-(5-Амино-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрил (TDZ INT-1)
К перемешиваемой смеси 3-циано-4-фторбензойной кислоты (37,3 г, 225 ммоль) и тиосемикарбази-да (22,6 г, 248 ммоль) добавляли POCl3 (148 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем нагревали при 85°С в течение 6 ч. Полученный желтый раствор охлаждали до комнатной температуры и концентрировали до 50% объема. Остаток охлаждали до 0°С и по каплям добавляли воду (300 мл). (Осторожно: экзотермическая и интенсивная реакция с выделением газа). Смесь нагревали при 90°С в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли ЕА (300 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин и отфильтровывали. Собранные твердые вещества диспергировали в воде (270 мл), охлаждали до 0°С и нейтрализовали 50% водным раствором NaOH до значения рН8. Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали тщательно водой и сушили в
высоком вакууме с получением 26 г (52%) 5-(5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила TDZ INT-1 в виде бледно-желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C9H5FN4S: 220,0; обнаруж. 221,1 [М+Н]+, tR=2,44 мин. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,29 (dd, J=6,1, 2,3 Гц, 1H), 8,19 (ddd, J=8,9, 5,2, 2,4 Гц, 1H), 7,64 (t, J=9,0 Гц, 1H), 7,58 (s, 2H). 13С ЯМР (101 МГц, ДМСО) 5 169,82, 164,25, 161,68, 133,68, 131,65, 128,96, 117,96, 113,77, 101,59.
5-(3,4-Диэтоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-амин TDZ INT-2 синтезировали аналогично 5-(5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрилу TDZ INT-1, используя 3,4-диэтоксибензойную кислоту.
LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C12H15N3O2S: 265,3; обнаруж. 266,1. [М+Н]+, tR=2,58 мин. 1Н ЯМР (400
МГц, ДМСО) 5 7,45-7,31 (m, 1H), 7,23 (dd, J=8,3, 2,1 Гц, 1H), 7,06 (d, J=8,4 Гц, 1H), 4,31-3,94 (m, 4Н), 3,4 (s, 2Н), 1,42 (qd, J=6,8, 3,3 Гц, 6Н).
5-(5-Бром-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрил (TDZ INT-3)
К перемешиваемому раствору 5-(5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила TDZ INT-1 (25 г, 113 ммоль) и бромиду меди (30,4 г, 136 ммоль) в CH3CN (400 мл) добавляли изоамилонитрит (15,9 г, 136 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Реакционную смесь разделяли между ЕА (2 х 250 мл) и 1 N HCl (250 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали. Сырой продукт перекристал-лизовывали из ЕА с получением 23,5 г (73%) 5-(5-бром-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила TDZ INT-3 в виде бледно-желтого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C9H3BrFN3S: 284,1; обнаруж. 285,9 [М+Н]+, tR=3,27 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,58 (dd, J=6,0, 2,3 Гц, 1H), 8,40 (ddd, J=8,9, 5,1, 2,4 Гц, 1H), 7,76 (t, J=9,0 Гц, 1Н); 13С ЯМР (101 МГц, ДМСО) 5 168,61, 162,47, 140,32, 134,88, 133,38, 126,13, 117,88, 112,91.
2-Бром-5-(3,4-диэтоксифенил)-1,3,4-тиадиазол TDZ INT-4 синтезировали аналогично, как описано для синтеза 2-бром-5-(3,4-диэтоксифенил)-1,3,4-тиадиазола TDZ INT-3, используя 5-(3,4-диэтоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-амин. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C12H13BrN2O2S: 328,0; обнаруж. 329,1 [М+Н]+, tR=2,58 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,47 (d, J=2,1 Гц, 1H), 7,25 (d, J=2,1 Гц, 1H), 6,84 (d, J=8,4 Гц, 1H), 4,10 (dq, J=8,9, 7,0 Гц, 4H), 1,42 (t, J=7,0 Гц, 6Н).
2-Фтор-5-(тиазол-2-ил)бензонитрил (THZ INT-1)
Раствор 2-бромтиазола (25 г, 153,4 ммоль), (3-циано-4-фторфенил)бороновой кислоты (25,3 г, 153,3 ммоль), K2CO3 (63,6 г, 460 ммоль) и смесь 3:1 DME/H2O (205 мл) насыщали N2 в течение 1 ч, затем добавляли Pd(PPh3)4 (9,2 г, 7,9 ммоль). Смесь затем дегазировали N2 в течение 5 мин и затем нагревали при 85°С в течение 7 ч в атмосфере N2. После охлаждения реакционную смесь разбавляли ЕА (250 мл), промывали водой (200 мл) и насыщенным раствором хлорида натрия (200 мл) и сушили MgSO4. Реакционную смесь отфильтровывали и концентрировали с получением бежевого твердого вещества. Сырой продукт очищали перекристаллизацией из смеси 20% ЕА/гексан с получением 22 г (71%) 2-фтор-5-(тиазол-2-ил)бензонитрила THZ INT-1 в виде бледно-желтого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H5FN2S: 204,2; обнаруж. 205,0 [М+Н]+, tR=3,26 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,21-8,16 (m, 1H), 8,15-8,08 (m, 1H), 7,86-7,81 (m, 1H), 7,36-7,32 (m, 1H), 7,27-7,21 (m, 1H). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 164,31, 162,22, 143,73, 132,68, 131,28, 128,34, 119,94, 116,98, 113,10.
5-(5-Бромтиазол-2-ил)-2-фторбензонитрил (THZ INT-2)
К 2-фтор-5-(тиазол-2-ил)бензонитрилу (21,8 г, 106,7 ммоль) в безводном DMF (200 мл) добавляли перекристаллизованный N-бромсукцинимид (22,7 г, 128 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч в атмосфере N2. Реакционную смесь подщелачивали 1 N NaOH и промывали ЕА и насыщенным раствором хлорида натрия. Объединенные органические слои сушили MgSO4, отфильтровывали и концентрировали с получением оранжевого масла. Сырой продукт очищали ускоренной хроматографией на силикагеле (20% ЕА/гексан) с получением 21 мг (70%) 5-(5-бромтиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила THZ INT-2 в виде полубелого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H4BrFN2S: 283,1; обнаруж. 284,9 [М+Н]+, tR=3,82 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,15 (dd, J=5,9, 2,3 Гц, 1H), 8,08 (ddd, J=8,8, 4,9, 2,3 Гц, 1H), 7,78 (d, J=4,8 Гц, 1H), 7,31 (t, J=8,6 Гц, 1Н).
В 3-горлую колбу объемом 100 мл, оснащенную внутренним термометром и капельной воронкой, добавляли (R)-(+)-2-метил-CBS-оксазаборолидин (1,6 мл, 1 М раствор в толуоле) и боран-диметилсульфид (150 мкл) в атмосфере N2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, затем разбавляли ДХМ (10 мл). Добавляли боран-диметилсульфид (6,0 мл), и реакционную смесь охлаждали до -20°С. По каплям добавляли раствор 4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-она (2,5 г, 11,8 ммоль) в ДХМ (10 мл) в течение 20 мин, поддерживая реакционную температуру при -20 ± 5°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч после окончания добавления, затем гасили добавлением по каплям МеОН (10 мл). Реакционную смесь разбавляли МеОН (20 мл), и растворитель отгоняли при атмосферном давлении. Добавляли МеОН (30 мл) двумя порциями, и перегонку повторяли дважды. Весь растворитель упаривали с получением твердого вещества, которое очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан) и перекристаллизацией из смеси 5:1 гексан/ЕА (30 мл) с получением 1,56 г (62%) ^)-4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ола в виде белого порошка IND INT-1. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C9H9BrO: 213,1; обнаруж. 196,9 [M-OH]+, tR=3,06 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,40 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 7,33 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 7,10 (t, J=7,7 Гц, 1H), 5,29 (dd, J=12,6, 6,9 Гц, 1H), 3,05 (ddd, J=16,6, 8,7, 4,6 Гц, 1H), 2,87-2,71 (m, 1H), 2,50 (dddd, J=13,2, 8,4, 7,0, 4,6 Гц, 1H), 1,94 (dddd, J=13,5, 8,8, 6,6, 5,5 Гц, 1H), 1,80 (d, J=7,1 Гц, 1H). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 146,82, 143,50, 131,24, 128,58, 123,21, 120,25, 76,83, 34,69, 31,19. Хиральная ВЭЖХ: ^)-4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ол элюировали 10% IPA в гексане: > 99,9%% ее, tR=6,27 мин.
^)-4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ол IND INT-2 получали аналогично, используя ^)-(-)-2-метил-CBS-оксазаборолидин: 97,6% ее, tR для ^)-энантиомера=5,83 мин.
(8)-((4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилан (IND INT-3)
К раствору ^)-4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ола IND INT-1 (1,56 г, 7,3 ммоль) в DMF (5 мл) добавляли TBDMSCl (1,3 г, 8,7 ммоль) и имидазол (1,24 г, 18,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (30 мл) и экстрагировали ЕА (2 х 50 мл). Органические слои промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, и сушили MgSO4. Сырой продукт очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 2,1 г (88%) (S)-((4-бром-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилана IND INT-3 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C15H23BrOSi: 327,3; не наблюдали М+, tR=5,73 мин (способ 2). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,35 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,22 (d, J=7,4 Гц, 1H), 7,07 (t, J=7,7 Гц, 1H), 5,28(t, 1=7,1Гц, 1H), 3,00 (ddd, J=16,4, 9,1, 2,9 Гц, 1H), 2,73 (dt, J=16,5, 8,3 Гц, 1H), 2,42 (dddd, J=12,8, 8,0, 7,1, 3,0 Гц, 1H), 1,91 (dtd, J=12,8, 8,9, 7,1 Гц, 1H), 0,98-0,88 (m, 9Н), 0,14 (d, J=7,4 Гц,
6Н).
(R)-((4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилан IND INT-4 получали аналогично, используя ^)-4-бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ол. (+)-4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ол (IND INT-5)
К перемешиавемому раствору 4-броминданона (3 г, 14,2 ммоль) в безводном EtOH (30 мл) добавляли боргидрид натрия (0,36 г, 9,5 ммоль) и силикагель (2 г) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 20 мин, и оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NaHCO3 (10 мл) и концентрировали для удаления EtOH. Водный слой экстрагировали ЕА (3х20 мл) и органическую фазу сушили MgSO4. После концентрирования сырой продукт очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением (+)-4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ола IND INT-5 (2,56 г, 85%) в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C9H9BrO: 213,07; обнаруж. 195,0 [M-H2O]+, tR=3,07 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,35 (d, J=7,9, 1H), 7,27 (d, J=7,4, 1H), 7,05 (t, J=7,7, 1H), 5,23 (t, J=6,2, 1H), 3,00 (ddd, J=16,6, 8,8, 4,6, 1H), 2,84-2,66 (m, 1H), 2,45 (dddd, J=13,2, 8,4, 7,0, 4,6, 1H), 1,96-1,70 (m, 2H).
Раствор (S)-((4-бром-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилана IND INT-3 (0,2 мг, 0,61 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-бис-(1,3,2-диоксаборолана) (0,17 г, 0,67 ммоль) и ацетата калия (1,8 г, 0,45 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (4 мл) дегазировали пропусканием N2 через раствор в течение 10 мин. Добавляли PdCl2(dppf).CH2Cl2 (99 мг, 0,12 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 85°С в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме. Остаток растворяли в ЕА (10 мл) и отфильтровывали через целит. Фильтрат промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и отфильтровывали. Сырой продукт очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 26 мг (45%) (S)-трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)силана IND INT-6 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H35BO3Si: 374,4; обнаруж. 245,0 [M-OTBS]+, tR=6,57 мин (способ 1). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,66 (d, J=7,2 Гц, 1H), 7,36 (dd, J=8,7, 4,3 Гц, 1H), 7,19 (dd, J=9,4, 5,4 Гц, 1H), 5,21 (t, J=7,0 Гц, 1H), 3,26 (ddd, J=16,9, 8,9, 3,0 Гц, 1H), 2,86 (dt, J=16,8, 8,3 Гц, 1H), 2,48-2,23 (m, 1H), 1,86 (dtd, J=12,6, 8,8, 7,0 Гц, 1H), 1,38-1,23 (m, 12Н), 1,00-0,81 (m, 9Н), 0,22-0,07 (m, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 149,59, 145,08, 134,83, 134,75, 126,92, 125,78, 83,39, 76,52, 36,29, 30,78, 25,96, 24,96, 18,28, -4,29, -4,55.
(R)-трет-Бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)окси)силан IND INT-7 получали аналогично, используя ^)-((4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилан IND INT-4. Рацемический (+)-трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)силан IND INT-8 получали аналогично из IND INT-5.
Общая методика 1. Конденсация гетероциклического бромида с инданолборонатом.
В сосуд для микроволнового излучения объемом 20 мл загружали последовательно гетероциклический бромид (1 экв.), (R)-, (S)- или рацемический инданолдиоксаборолан (IND INT-6, 7 или 8, 1 экв.), DME:H2O (3:1, 0,05 М) и карбонат калия (3 экв.). Смесь дегазировали пропусканием N2 через перемешиваемый раствор в течение 10 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,07 экв.) и смесь дегазировали в течение 2 мин. Сосуд закрывали и подвергали микроволновому излучению при 100°С до окончания реакции (40-60 мин). Добавляли дополнительно бромид при необходимости. Сосуд охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕА (10 х объемов), промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали. Сырой продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан).
(S)-5-(5-(1-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрил
Получали, используя общую методику 1. В сосуд для микроволнового излучения объемом 20 мл загружали 5-(5-бром-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрил TDZ INT-3 (30 мг, 0,1 ммоль), ^)-трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)силан IND INT-6 (43,6 мг, 0,11 ммоль), карбонат калия (44 мг, 0,32 ммоль) и 3:1 смесь DME/H2O (2 мл). Реакционную смесь дегазировали пропусканием N2 через перемешиваемый раствор в течение 10 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 и смесь дегазировали в течение 2 мин. Сосуд подвергали микроволновому излучению при 100°С в течение 40 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕА (10 мл) и промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили MgSO4, концентрировали и очищали хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан) с получением 25 мг (44%) (S)-5-(5-( 1 -((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензо-нитрила в виде светло-желтого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H26FN3OSSi: 451,15; обнаруж. 452,1 [М+Н]+, tR=4,53 мин (способ 1). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,34-8,25 (m, 2H), 7,85 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,49 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,44-7,34 (m, 2H), 5,34 (t, J=7,1 Гц, 1H), 3,46 (ddd, J=16,8, 9,0, 2,8 Гц, 1H), 3,13 (dt, J=16,8, 8,3 Гц, 1H), 2,61-2,50 (m, 1H), 2,08-1,96 (m, 1H), 0,98-0,95 (m, 9H), 0,22-0,17 (m, 6H).
(R)-5-(5-(1-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрил получали аналогично, используя ^)-трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)силан IND INT-7.
Получали, используя общую методику 1. Раствор 5-(5-бромтиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила THZ INT-2 (0,12 г, 0,42 ммоль), (8)-трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)окси)силана IND INT-6 (0,16 г, 0,42 ммоль), карбоната калия (0,176 г, 1,2 ммоль) и 3:1 смесь DME/H2O (2 мл) дегазировали N2 в течение 10 мин, затем добавляли Pd(PPh3)4 (0,034 г, 0,03 ммоль). Реакционную смесь дегазировали N2 в течение 2 мин, и затем нагревали при микроволновом излучении при 90°С в течение 1,5 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли ЕА (20 мл) и промывали насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл). Объединенные органические слои сушили MgSO4, отфильтровывали и концентрировали. Сырой продукт очищали ускоренной хроматографией на силикагеле (30% ЕА/гексан) с получением 0,116 г (60%) (8)-5-(5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H27FN2OSSi: 450,6; обнаруж. 451,1 [М+Н]+, tR=4,86 мин (способ 1). 1H ЯМР (400 МГц, CDCL3) 5 8,30-8,14 (m, 2H), 7,95 (s, 1H), 7,45 (dd, J=7,0, 0,9, 1H), 7,32 (ddd, J=23,9, 14,6, 11,0, 3H), 5,32 (t, J=7,0, 1H), 3,19 (ddd, J=15,9, 8,8, 2,7, 1H), 2,95 (dt, J=16,1, 8,1, 1H), 2,59-2,40 (m, 1H), 2,08-1,89 (m, 1H), 0,94 (s, 9H), 0,17 (dd, J=13,7, 7,8, 6Н).
(R)-5-(5-(1-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-фторбензо-нитрил получали аналогично, используя ^)-трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)окси)силан.
Общая методика 2. Замещение фтора изопропоксидом.
К перемешиваемому раствору (R)- или ^)-фторбензольного производного (1 экв.) в IPA (0,02 М) добавляли изопропоксид натрия (1,3 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в атмосфере N2 в течение 2 ч или до окончания реакции. После охлаждения растворитель упаривали досуха, и продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан).
(S)-5-(5-(1-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил
Получали, используя общую методику 2. К раствору ^)-5-(5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила (21 мг, 0,04 ммоль) в IPA (2 мл) добавляли изопропоксид натрия (5 мг, 0,06 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 2 ч. После охлаждения растворитель упаривали, и продукт очищали колоночной хроматографией на сили-кагеле (ЕА/гексан) с получением (S)-5-(5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила (15 мг, 68%). LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H34N2O2SSi: 491,7, обнаруж. 492,2 [М+Н]+, tR=5,17 мин (способ 1).
(R)-5-(5-(1-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрил.
(S)-5-(5-(1-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропокси-бензонитрил
Получали, используя общую методику 2. К раствору ^)-5-(5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила (116 мг, 0,25 ммоль) в IPA (2 мл) добавляли изопропоксид натрия (21,1 мг, 0,25 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 2 ч. После охлаждения растворитель упаривали, и продукт очищали колоночной хроматографией на силика-геле (ЕА/гексан) с получением 151 мг (88%) ^)-5-(5-(1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H34N2O2SSi: 490,7, обнаруж. 491,1 [М+Н]+, tR=6,81 мин (способ 1).
(R)-5-(5-(1-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропокси-бензонитрил получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-фторбензонитрил.
Общая методика 3. Снятие защит с силилзащищенных инданолов.
К перемешиваемому раствору (R)- или ^)-силилзащищенного инданола (1 экв.) в безводном ТГФ (0,06 М) добавляли 1 М тетрабутиламмонийфторид (5 экв.) в ТГФ, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение N2. После окончания реакционную смесь разбавляли ЕА (10х объемов) и промывали тщательно NaHCO3, водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали. Сырой продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан).
Соединения 1-3 и 69-70 получали, используя последовательность общих методик 1-3.
(S)-5-(5-(1-Гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 1)
К перемешиваемому раствору (S)-5-(5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила (21 мг, 0,06 ммоль) в безводном ТГФ (1 мл) добавляли 1 М тетрабутиламмонийфторид (0,3 мл, 0,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли ЕА (10 мл), промывали насыщенным раствором NaHCO3 и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили MgSO4. Продукт очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 8 мг (81%) ^)-5-(5-(1-гидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 1 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H19N3O2S: 377,1; обнаруж. 378,1 [М+Н]+, tR=3,67 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,28-8,07 (m, 2H), 7,86 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,57 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,40 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,08 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,41-5,18 (m, 1H), 4,74 (dd, J=12,2, 6,0 Гц, 1H), 3,48 (ddd, J=17,1, 8,7, 4,6 Гц, 1H), 3,30-3,06 (m, 1H), 2,722,40 (m, 1H), 2,04 (ddd, J=13,6, 8,7, 6,5 Гц, 1H), 1,64 (s, 2Н), 1,44 (d, J=6,1 Гц, 5Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 167,61, 166,22, 162,23, 147,58, 142,93, 134,04, 133,83, 129,81, 128,30, 127,45, 127,09, 123,37, 116,14, 114,45, 104,34, 77,23, 76,71, 73,09, 36,24, 31,69, 22,32.
(R)-5-(5-(1-Гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил 2 получали аналогично, используя (R)-5-(5-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил.
(S)-5-(5-(1-Гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 70)
Получали, используя общую методику 3. К раствору сырого ^)-5-(5-(1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила (0,11 г, 0,22 ммоль) в безводном ТГФ (3 мл) добавляли 1,0 М раствор TBAF (1,0 мл) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель концентрировали в вакууме, и остаток очищали хроматографией на силикагеле с получением 35 мг (41%) ^)-5-(5-(1-гидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изо1гоопоксибензонитрила 70 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z): рассчит. для: C22H20N2O2S: 376,4; обнаруж. 377,1 [М+Н]+, tR=3,66 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,14-7,89 (m, 2H), 7,82-7,62 (m, 1H), 7,35 (dd, J=7,5, 2,6 Гц, 2Н), 7,22 (dd, J=15,0, 7,5 Гц, 1H), 7,02-6,77 (m, 1H), 5,36-5,08 (m, 1H), 4,65 (hept, J=6,0 Гц, 1H), 3,10 (ddd, J=16,1, 8,5, 4,6 Гц, 1H), 2,932,80 (m, 1H), 2,68-2,54 (m, 1H), 2,44 (dddd, J=11,7, 8,3, 7,0, 4,7 Гц, 1H), 2,01-1,77 (m, 1H), 1,41-1,29 (m, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 164,98, 161,11, 146,82, 141,23, 140,87, 137,98, 132,11, 131,99, 128,40, 128,03, 127,91, 126,67, 124,62, 116,13, 113,98, 103,76, 76,43, 72,55, 35,89, 30,78, 22,01. Хиральная ВЭЖХ: (S)-5-(5-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил элюировали, используя 15% IPA в гексане: 100% ее; tR=24,19 мин.
(R)-5-(5-(1-Гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил 69 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил: 97% ее, tR для ^)-энантиомера=47,32 мин.
В высушенную в печи круглодонную колбу объемом 2 л загружали ^)-2-метилпропан-2-сульфинамид (31,5 г, 260 ммоль), тетраэтоксид титана (81 г, 355 ммоль) и безводный толуол (250 мл). Реакционную смесь нагревали при 90°С, и по каплям добавляли раствор 4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-она (50,0 г, 236 ммоль) в безводном толуоле в течение 90 мин. Реакционную смесь затем перемешивали
(8,Е)-М-(4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид (IND INT-9)
при 90°С в течение 4 ч, и затем в течение ночи при 70°С. Сырой (S,E)-N-(4-бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид IND INT-9 использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C13H18BrNOS: 315,0; обнаруж. 316,0 [М+Н]+, tR=3,65 мин.
(R,E)-N-(4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид IND INT-10 получали аналогично, используя ^)-2-метилпропан-2-сульфинамид.
(8)-М-((8)-4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамид (IND INT-11)
К перемешиваемой суспензии сырого (S,E)-N-(4-бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамида IND INT-9 в толуоле (250 мл) в атмосфере N2 добавляли безводный ТГФ (250 мл) и реакционную смесь охлаждали до -78°С. Добавляли боргидрид натрия (26,8 г, 710 ммоль) четырьмя порциями в течение 30 мин (внутреннюю температуру поддерживали ниже -65°С). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем нагревали до комнатной температуры в течение 1 ч и перемешивание продолжали в течение 1 ч. Реакционную смесь отфильтровывали через слой целита для удаления солей Ti. Фильтрат обрабатывали ЕА (500 мл), насыщенным тартратом натрия калия (200 мл) и насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь отфильтровывали через слой целита и фильтрат сушили MgSO4. Сырой продукт, полученный после концентрирования досуха, приводил к получению 46 г (61%) ^)^-(^)-4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)-2-метилггоопан-2-сульфинамида IND INT-11 в виде беловатого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C13H16BrNOS: 313,0; обнаруж. 314,0 [М+Н]+, tR=3,84 мин.
(R)-N-((R)-4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамид IND INT-12 получали аналогично, используя (R,E)-N-(4-бром-2,3-дигидро-1H-инден-1-илиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид IND INT-10.
(8)-4-Бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-амина гидрохлорид (IND INT-13)
К перемешиваемой суспензии сырого ^)^-(^)-4-бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамида IND INT-11 (46 г, 145 моль) в МеОН (100 мл) добавляли 4 N HCl в диок-сане (109 мл) и желтую суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Сырую реакционную смесь разбавляли МеОН (100 мл) и отфильтровывали. Фильтрат концентрировали, и полученное твердое вещество диспергировали в ацетонитриле (600 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 90 мин. Суспензию охлаждали до 0°С и твердое вещество отфильтровывали с получением 25 г (69%) (S)-4-бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-амина гидрохлорида IND INT-13, который использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C9H10BrN: 211,09; обнаруж. 197,0 [M-NH2]+, tR=1,76 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,76 (s, 2H), 7,71 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,57 (d, J=7,9 Гц, 1H), 7,26 (t, J=7,7 Гц, 1H), 4,80 (s, 1H), 3,06 (ddd, J=16,9, 8,9, 5,2 Гц, 1H), 2,93-2,76 (m, 1H), 2,57-2,39 (m, 1H), 2,11-1,92 (m, 1H); 13С ЯМР (101 МГц, ДМСО) 5 144,12, 141,60, 131,71, 129,02, 124,54, 119,29, 55,30, 31,52,
29,10.
^)-4-Бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-амина гидрохлорид IND INT-14 получали аналогично, используя (R)-N-((S)-4-бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-2-метилпропан-2-сульфинамид IND INT-12. (8)-трет-Бутил 4-бром-2,3-дигидро-1Н-инден-1-илкарбамат (IND INT-15)
К сырому гидрохлориду ^)-4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-амина IND INT-13 (16,6 г, 66 ммоль) в ДХМ (140 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (14,8 г, 146 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонат (16,0 г, 73 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили MgSO4 и продукт очищали перекристаллизацией из смеси 10% ЕА/гексан с получением 14 г (70%) ^)-трет-бутил 4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамата IND INT-15 в виде беловатого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C14H18BrNO2: 312,2; обнаруж. 197,0 [M-NH2Boc]+, tR=3,94 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,38 (d, J=7,9 Гц, 1H), 7,25 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,08 (t, J=7,7 Гц, 1H), 5,25 (dd, J=15,9, 7,9 Гц, 1H), 4,78 (d, J=7,6 Гц, 1H), 2,99 (ddd, J=16,5, 9,0, 3,4 Гц, 1H), 2,81 (dt, J=16,5, 8,2 Гц, 1H), 2,70-2,36 (m, 1H), 1,94-1,71 (m, 1H), 1,47 (d, J=5,2 Гц, 9Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5
155,99, 146,13, 143,83, 131,35, 129,02, 123,41, 120,64, 80,10, 57,21, 33,71, 31,82, 28,86; Хиральная ВЭЖХ:
^)-трет-бутил 4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамат элюировали, используя 2% IPA в гексане: > 99,9% ее, tR=11,08 мин.
(R)-трет-Бутил-4-бром-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамат IND INT-16 получали аналогично из ^)-4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-амина гидрохлорида IND INT-14: > 99,9% ее tR для (R)-энантиомера=9,98 мин.
(S)-трет-Бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамат (IND INT-17)
Раствор (S)-трет-бутил 4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамата IND INT-15 (13,1 г, 42 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-бис-(1,3,2-диоксаборолана) (11,7 г, 46 ммоль) и ацетата калия (12,3 мг, 125 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (100 мл) дегазировали пропусканием N2 через раствор в течение 30 мин, затем добавляли PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (6,8 г, 8,3 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 8 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток растворяли в ЕА (500 мл) и отфильтровывали через целит. Фильтрат промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 13 г (87%) ^)-трет-бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамата IND INT-17 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C20H30BNO4: 359,2; обнаруж. 382,2 [M+Na]+, tR=4,26 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,66 (d, J=7,3 Гц, 1H), 7,39 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,19 (t, J=7,4 Гц, 1H), 5,14 (dd, J=15,8, 7,8 Гц, 1H), 4,69 (d, J=8,7 Гц, 1H), 3,23 (ddd, J=17,0, 8,8, 3,5 Гц, 1H), 2,94 (dt, J=16,6, 8,2 Гц, 1H), 2,53 (ddd, J=11,4, 8,0, 3,9 Гц, 1H), 1,73 (ddd, J=16,4, 12,8, 8,6 Гц, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,36-1,25 (m, 12H). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 156,21, 150,64, 143,43, 135,37, 127,25, 126,43, 83,95, 79,78, 56,19, 34,60, 31,57, 28,88, 25,37,
25,34.
^)-трет-Бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамат IND INT-18 получали аналогично, используя ^)-трет-бутил 4-бром-2,3-дигидро-Ш-инден-1-илкарбамат IND INT-16.
Общая методика 4. Конденсация гетероциклических бромидов с инданамином.
В реакционную колбу для повышенного давления загружали последовательно гетероциклический бромид (1 экв.), (R)- или ^)-Вос-защищенный инданамин (1 экв.), DME:H2O (3:1, 0,07 М) и карбонат калия (3 экв.). Смесь дегазировали пропусканием N2 через перемешиваемый раствор в течение 20 мин. Затем добавляли Pd(PPh3)4 (0,07 экв.), и смесь дегазировали в течение 5 мин. Реакционную колбу плотно закрывали и смесь нагревали при 85°С в течение 12-24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (2х объема) и перемешивали в течение 30 мин. Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали гексаном и сушили в высоком вакууме. Сырой продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан) или использовали на следующей стадии без очи-
стки.
(S)-трет-Бутил ил)карбамат
(4-(5-(3-циано-4-фторфенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-
Получали, используя общую методику 4. Суспензию 5-(5-бром-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила TDZ INT-3 (1,5 г, 5,3 ммоль), ^)-трет-бутил (4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата IND INT-17 (1,9 г, 5,3 ммоль) и карбоната калия (2,2 г, 16 ммоль) в DME:H2O (3:1, 70 мл) дегазировали N2 в течение 20 мин, затем добавляли Pd(PPh3)4 (0,43 г, 0,3 ммоль). Смесь дегазировали N2 в течение 5 мин, и суспензию нагревали в N2 при 85°С в течение 12 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли водой (150 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили в высоком вакууме с получением 2,3 г (100%) сырого ^)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-фторфенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамата в виде светло-коричневого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H21FN4O2S: 436,1; обнаруж. 459,1 [M+Na]+, tR=4,19 мин.
^)-трет-Бутил (4-(5-(3-циано-4-фторфенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)карбамат получали аналогично, используя ^)-трет-бутил (4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамат IND INT-18.
Получали, используя общую методику 4. Раствор 5-(5-бромтиазол-2-ил)-2-фторбензонитрила THZ INT-2 (2,0 г, 7,0 ммоль), ^)-трет-бутил (4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата IND INT-17 (2,5 г, 7,0 ммоль), карбоната калия (2,9 г, 21 ммоль) и 3:1 смесь DME/H2O (30 мл) дегазировали N2 в течение 10 мин, затем добавляли Pd(PPh3)4 (0,57 г, 0,005 ммоль). Смесь дегазировали N2 в течение 2 мин и суспензию нагревали в атмосфере азота при 80°С в течение 12 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли ЕА (20 мл) и промывали насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл). Объединенные органические слои сушили MgSO4, отфильтровывали и концентрировали. Сырой продукт очищали ускоренной хроматографией на силикагеле (30% ЕА/гексан) с получением 3,0 г (83%) ^)-трет-бутил (4-(2-(3-циано-4-фторфенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H22FN3O2S: 435,5; обнаруж. 436,1 [М+Н]+, tR=4,14 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,20 (m, 2H), 7,93 (s, 1H), 7,44 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,32 (m, 3H), 5,26 (m, 1H), 4,76 (d, J=8,4 Гц, 1H), 3,09 (m, 2Н), 2,65 (ddd, J=12,5, 8,3, 4,6 Гц, 1H), 1,84 (dq, J=12,9, 8,5 Гц, 1H), 1,48 (s, 9H).
^)-трет-Бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамат
Получали, используя общую методику 2. К раствору (S)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-фторфенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамата (2,5 г, 5,7 ммоль) в IPA (30 мл) добавляли изопропоксид натрия (0,61 г, 7,4 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения смесь концентрировали до 50% объема, и суспензию охлаждали до 0°С. Полученное твердое вещество отфильтровывали и сушили в высоком вакууме с получением 1,14 г (42%) ^)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата в виде беловатого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H28N4O3S: 476,2; обнаруж. 477,2 (М+Н). tR=4,12 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,26-8,04 (m, 2H), 7,82 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,49 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,38 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,09 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,38-5,08 (m, 1H), 4,94-4,62 (m, 1H), 3,54-3,32 (m, 1H), 3,21 (s, 1H), 2,80-2,59 (m, 1H), 1,97-1,74 (m, 1H), 1,52-1,35 (m, 15Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 166,93, 165,54,
161,59, 155,65, 145,84, 142,05, 133,28, 128,71, 127,59, 126,64, 126,33, 122,72, 115,54, 113,86, 103,69, 79,59,
72,50, 60,35, 55,73, 33,78, 31,27, 28,39, 21,74.
^)-трет-Бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил) карбамат получали аналогично, используя ^)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-фторфенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамат.
^)-трет-Бутил (4-(5-(3 -циано-4-изопропоксифенил)тиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 -
ил)карбамат
Получали, используя общую методику 2. К раствору ^)-трет-бутил (4-(2-(3-циано-4-фторфенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата (2,5 г, 5,7 ммоль) в IPA (50 мл) добавляли изопропоксид натрия (0,61 г, 7,4 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения смесь концентрировали до 50% объема и суспензию охлаждали до 0°С. Полученное твердое вещество отфильтровывали и сушили в высоком вакууме с получением 2,66 г (98%) ^)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C27H29N3O3S: 475,1; обнаруж. 476,2 (М+Н). tR=4,30 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,19-8,05 (m, 2H), 7,89 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,39-7,28 (m, 2H), 7,04 (d, J=8,9 Гц, 1H), 5,39-5,15 (m, 1H), 4,73 (s, 2H), 3,20-2,94 (m, 2Н), 2,69-2,57 (m, 1H), 1,94-1,77 (m, 1H), 1,49 (s, 9Н), 1,44 (d, J=6,1 Гц, 6Н).
Общая методика 5. Получение гетероциклических инданаминов.
К перемешиваемой суспензии (R)- или (S)-Boc защищенного инданамина (1 экв.) в 1,4-диоксане (0,2 М) добавляли 4 N HCl в 1,4-диоксане (10 экв.) и смесь нагревали при 55°С до окончания реакции (35 ч). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли диэтиловым эфиром. Полученное твердое вещество отфильтровывали и сушили в вакууме с получением чистого продукта в виде гидрохлорида.
Соединения 4-6 и 71-72 получали с помощью общих методик 4, 2 и 5.
Получали, используя общую методику 5. К перемешиваемому раствору ^)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата (1,1 г, 2,3 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) добавляли 4 N HCl раствор в 1,4-диоксане (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 2,5 ч. После охлаждения до 0°С реакционную смесь разбавляли ди-этиловым эфиром (100 мл), полученное твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением 980 мг (96%) (S)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензо-нитрила гидрохлорида 4 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H20N4OS, 376,1; обнаруж. 377,1 (М+Н). tR=2,35 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,64-8,51 (m, 3H), 8,41 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,32 (dd, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 7,99 (d, J=7,4 Гц, 1H), 7,84 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,59-7,49 (m, 2Н), 4,95 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,84 (s, 1H), 3,54-3,32 (m, 1H), 3,30-3,15 (m, 1H), 2,65-2,53 (m, 1H), 2,12 (ddd, J=13,9, 5,6, 3,0 Гц, 1H), 1,37 (dd, J=10,4, 6,1 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 166,61, 166,11, 161,5,
143,05, 141,73, 134,16, 133,45, 129,74, 128,26, 127,84, 126,47, 122,33, 115,79, 115,2, 102,53, 72,43, 54,75,
31,48, 30,12, 21,74. Хиральная ВЭЖХ: (S)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 4 элюировали, используя 30% EtOH в гексане плюс 0,1%
DEA: 99,0% ее, tR=34,2 мин.
(R)-5-(5-(1-Амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 5 получали аналогично, используя ^)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамат: > 99,9% ее, tR=28,8 мин.
(S)-5-(2-(1-Амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид (соединение 71)
Получали, используя общую методику 5. К перемешиваемому раствору ^)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата (1,0 г, 2,1 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) добавляли 4 N HCl раствор в 1,4-диоксане (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 2,5 ч. После охлаждения до 0°С реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (50 мл), и полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали диэтиловым эфиром (20 мл) и сушили с получением 0,86 г (100%) ^)-5-(2-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 71. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H21N3OS: 375,1; обнаруж. 376,2 (М+Н). tR=2,45 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,64 (d, J=3,6 Гц, 2Н), 8,30 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,23 (dd, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,70 (dd, J=7,6, 2,6 Гц, 2Н), 7,45 (dd, J=8,4, 5,4 Гц, 2Н), 4,91 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,85-4,58 (m, 1H), 3,36-3,21 (m, 1H), 3,21-3,04 (m, 1H), 2,63-2,51 (m, 1H), 2,09 (td, J=8,3, 2,8 Гц, 1H), 1,43-1,28 (m, 6H). 13С ЯМР (101 МГц, ДМСО) 5 166,61, 166,11, 161,50, 143,05, 141,73, 134,16, 133,45,
129,74, 128,26, 127,84, 126,47, 122,33, 115,79, 115,20, 102,53, 72,43, 54,75, 31,48, 30,12, 21,74. Хиральная
ВЭЖХ: (S)-5-(2-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид элюировали в смеси 8% EtOH/гексан: > 99,9% ее, tR=67,15 мин (хиральный способ 1).
(R)-5-(2-(1-Амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 72 получали аналогично, используя ^)-трет-бутил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамат: 99,0% ее, tR для да-энантиомера=62,18 мин.
Общая методика 6. Получение инданамидов через конденсацию кислоты.
К подходящей кислоте (1 экв.) в DMF (0,05 М) добавляли HOBt (1,3 экв.) и EDC (1,3 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч или до полной активации кислоты. (R)- или ^)-инданамин (1 экв.) добавляли одной порцией и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Сырую реакционную смесь подвергали препаративной ВЭЖХ очисткой. Продукты, которые содержали Вос-защищенные аминобоковые цепи, затем обрабатывали 4 N HCl в 1,4-диоксане, и нагревали при 55°С в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и отфильтровывали с получением целевых продуктов в виде гидрохлоридов.
Соединения 7-13, 49, 73, 74, 77-86 получали, используя общую методику 6.
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-гидроксиацетамид (соединение 7)
Получали, используя общую методику 6. Раствор 2-гидроксиуксусной кислоты (4 мг, 0,05 ммоль), HOBt (8,8 мг, 0,06 ммоль), EDC (12,5 мг, 0,06 ммоль) и DIEA (15 мг, 0,11 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали в течение 30 мин, затем добавляли (S)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 4 в DMF (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Сырую реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ с получением 10 мг (50%) (S)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)-2-гидроксиацетамида 7 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C23H22N4O3S: 434,1; обнаруж. 435,1 [М+Н]+, tR=3,11 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,19 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,12 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,79 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,42 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,34 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,09(d, 1=9,0Гц, 1Н), 6,85 (d, J=8,5 Гц, 1H), 5,71-5,46 (m, 1H), 4,76 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,21 (s, 2H), 3,46 (ddd, J=17,0, 8,7, 3,6 Гц, 1H), 3,30-3,09 (m, 1H), 2,69 (ddd, J=16,6, 8,3, 4,0 Гц, 1H), 2,08-1,80 (m, 2H), 1,46 (d, J=6,1 Гц, 6Н). 13C ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 167,44, 166,23, 162,20, 145,53, 142,82, 133,89, 133,79, 129,53, 128,28, 127,20, 126,93, 123,12, 116,03, 114,38, 104,22, 73,06, 62,72, 54,46, 33,91, 31,98, 22,24.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-гидроксиацетамид 8 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 5.
(S)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-гидрокси-ацетамид (соединение 73)
Получали, используя общую методику 6. Раствор 2-гидроксиуксусной кислоты (2 мг, 0,02 ммоль), HOBt (4,8 мг, 0,06 ммоль), EDC (7,0 мг, 0,06 ммоль) и DIEA (7,7 мг, 0,06 ммоль) в DMF (1 мл) перемешивали в течение 30 мин, затем добавляли ^)-5-(2-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 71 в DMF (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Сырую реакционную смесь подвергали препаративной ВЭЖХ с получением 5 мг (58%) ((S)-N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-гидроксиацетамида 73 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C24H23N3O3S: 433,2; обнаруж. 434,1 [М+Н]+, tR=3,11 мин.
Общая методика 7. Получение инданамидов через хлорангидриды кислот.
К перемешиваемому раствору гидрохлорида (R)- или ^)-инданамина (1 экв.) в безводном ДХМ (0,03 М) добавляли триэтиламин (3 экв.), затем подходящий хлорангидрид кислоты (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель упаривали и продукт очищали препаративной ВЭЖХ.
Соединения 14, 15, 75, 76, 87 и 88 получали, используя общую методику 7.
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)ацета-мид (соединение 14)
Получали, используя общую методику 7. К перемешиваемому раствору ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 4 (15 мг, 0,03 ммоль) в безводном ДХМ (1 мл) добавляли триэтиламин (11 мг, 0,1 ммоль), затем ацетилхлорид (4,2 мг, 0,05 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель упаривали и сырую смесь очищали препаративной ВЭЖХ с получением ^)^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)ацетамида 14. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C23H22N4O2S: 418,2; обнаруж. 419,3 [М+Н]+, tR=3,34 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,20 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,13 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,81 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,45 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,36 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,08 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,83 (d, J=8,4 Гц, 1H), 5,57 (q, J=7,9 Гц, 1H), 4,76 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 3,46 (ddd, J=17,1, 8,8, 3,8 Гц, 1H), 3,28-3,15 (m, 1H), 2,75-2,62 (m, 1H), 2,07 (s, 3H), 1,98-1,80 (m, 1H), 1,46 (d, J=6,1 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 170,36, 167,43, 166,14, 162,16, 145,92, 142,83, 133,89, 133,77, 129,44, 128,23, 127,18, 126,95, 123,21, 116,05, 114,36, 104,23, 73,03, 55,00, 34,03, 31,95, 23,92, 22,24.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)аце-тамид 15 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 5.
Получали, используя общую методику 7. К перемешиваемому раствору ^)-5-(2-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 71(15 мг, 0,03 ммоль) в безводном ДХМ (1 мл) добавляли триэтиламин (11 мг, 0,1 ммоль), затем 2-метоксиацетилхлорид (11,8 мг, 0,1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель упаривали и сырую смесь очищали препаративной ВЭЖХ с получением (S)-N-(4-(2-(3^mK> -4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-метоксиацетамида 76. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C25H25N3O3S: 447,2; обнаруж. 448,1 [М+Н]+, tR=3,70 мин.
Общая методика 8. Получение инданкарбаматов.
К перемешиваемому раствору (R)- или (S)-инданамина (1 экв.) в ДХМ (0,03М) добавляли ТЭА (3 экв.) и подходящий карбонохлоридат (1,5 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель упаривали и чистый продукт выделяли осаждением водой или препаративной ВЭЖХ.
Соединения 16, 68, 89 и 90 получали, используя общую методику 8.
^)-Метил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамат (соединение 16)
Получали, используя общую методику 8. К перемешиваемому раствору ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 4 (15 мг, 0,03 ммоль) и ТЭА (11 мг, 0,1 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли метилхлорформиат (10 мг, 0,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель упаривали и добавляли воду (2 мл). Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили в высоком вакууме с получением 12 мг (92%) ^)-метил (4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)карбамата 16 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N4O3S: 434,1; обнаруж. 435,3 [М+Н]+, tR=3,69 мин.
^)-Метил (4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамат (соединение 90)
Получали, используя общую методику 8. К перемешиваемому раствору ^)-5-(2-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 71 (15 мг, 0,03 ммоль) и ТЭА (11 мг, 0,1 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли метилхлорформиат (10 мг, 0,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель упаривали и добавляли воду (2 мл). Полученное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили в высоком вакууме с получением 6 мг (51%) ^)-метил(4-(2-(3-циано-4-изоггоопоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)карбамата 90 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H23N3O3S:
433,2; обнаруж. 434,1 [М+Н]+, tR=3,86 мин.
Общая методика 9. Алкилирование инданаминов.
К раствору (R)- или ^)-инданамина в CH3CN (0,2 М) добавляли K2CO3 (3 экв.) и подходящий ал-килгалогенид (1,2 экв.). В некоторых случаях использовали ТЭА (3 экв.) и DMF (0,1 М). Смесь нагревали при 80-95°С до исчезновения исходного материала или преобладания диалкилирования амина. При необходимости добавляли дополнительный алкилгалогенид для управления реакции. Реакционную смесь отфильтровывали для удаления неорганических твердых веществ и концентрировали, повторно суспендировали в ЕА и промывали водой. Органический слой сушили и концентрировали, затем очищали хроматографией (МеОН/ДХМ) или препаративной ВЭЖХ с получением целевого продукта. С TBS-защищенных спиртов снимали защитные группы с помощью 4 N HCl.
Соединения 17-20 и 91-95 получали, используя общую методику 9.
Получали, используя общую методику 9. К суспензии ^)-5-(5-(1-шино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 5 (50 мг, 0,12 ммоль) в безводном DMF (5 мл) добавляли ТЭА (36,7 мг, 0,36 ммоль) и (2-брометокси)(трет-бутил)диметилсилан (34,6 мг, 0,14 ммоль). Раствор перемешивали при 95°С. Через 16 ч добавляли еще (2-брометокси)(трет-бутил)диметилсилан (34,6 мг, 0,14 ммоль) и нагревание продолжали в течение 12 ч. Добавляли воду (5 мл) и реакционную смесь экстрагировали ЕА (2x5 мл). Органические слои промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили и очищали колоночной хроматографией (ЕА/гексан) с получением 10 мг (15%) (R)-5-(5-(1-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C29H38N4O2SSi: 534,3; обна-
руж. 535,3 [М+Н]+, tR=3,08 мин.
(S)-5-(5-(1-((2-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,3,4-тиа-диазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 4.
(R)-5-(5-(1-((2-Гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопро-поксибензонитрил (соединение 17)
К (R)-5-(5-( 1 -((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрилу (10 мг, 0,018 ммоль) в 1,4-диоксане (1,5 мл) добавляли 4 N HCl в диоксане (0,5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и растворитель упаривали. Сырой материал очищали препаративной ВЭЖХ с получением 7 мг (90%) (R)-5-(5-(1-((2-гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 17. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C23H24N4O2S: 420,2; обнаруж. 421,2 [М+Н]+, tR=2,38 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,19 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,15 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,97 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,88 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,48 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7,10 (d, J=9,0 Гц, 1H), 4,94 (d, J=4,2 Гц, 1H), 4,76 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 3,89 (d, J=16,3 Гц, 2Н), 3,68-3,20 (m, 2Н), 3,20-2,89 (m, 2Н), 2,72-2,53 (m, 2Н), 2,65-2,53 (m, 1H), 2,49-2,27 (m, 1H), 1,44 (d, J=6,1 Гц, 6Н).
(S)-5-(5-(1-((2-Гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопро-поксибензонитрил 18 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропокси-бензонитрил.
(S)-5-(5-(1-((2-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил
Получали, используя общую методику 9. К суспензии ^)-5-(2-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 71 (25 мг, 0,06 ммоль) в безводном DMF (2 мл) добавляли ТЭА (7,3 мг, 0,36 ммоль) и (2-брометокси)(трет-бутил)диметилсилан (6,9 мг, 0,14 ммоль). Раствор перемешивали при 100°С в течение 48 ч. Реакционную смесь разбавляли ЕА (10 мл), промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили. Концентрирование и очистка колоночной хроматографией (ЕА/гексан) приводила к получению 29 мг (90%) ^)-5-(5-(1-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонит-рила в виде темно-серого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C30H39N3O2SSi: 533,3; обна-руж. 534,3 [М+Н]+, tR=3,22 мин.
(R)-5-(5-(1-((2-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил получали аналогично, используя ^)-5-(2-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 72.
К раствору (S)-5-(5-(1-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила (10 мг, 0,018 ммоль) в диэтиловом эфире (1 мл) добавляли 2 N HCl в диэтиловом эфире (0,1 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч и растворитель упаривали. Сырой материал очищали препаративной ВЭЖХ с получением 6 мг (80%) (S)-5-(5-(1-((2-гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 92. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для: C24H25N3O2S: 419,2; обнаруж. 420,2 [М+Н]+, tR=2,43 мин.
(R)-5-(5-(1-((2-Гидроксиэтил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензо-нитрил 91 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-((2-((трет-бутилдиметилсилил)окси)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил.
(S)-Метил 2-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетат
Получали, используя общую методику 9. К суспензии ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 4 (150 мг, 0,36 ммоль) в CH3CN (5 мл) добавляли K2CO3 (150,9 мг, 1,09 ммоль) и метил 2-бромацетат (67 мг, 0,43 ммоль). Суспензию перемешивали при 80°С. Через 6 ч добавляли еще метил 2-бромацетат (6,7 мг, 0,043 ммоль) и нагревание продолжали в течение 12 ч. Реакционную смесь отфильтровывали и концентрировали. Остаток повторно суспендировали в ЕА (15 мл), промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили и концентрировали. Продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (МеОН/ДХМ) с получением 146 мг (90%) ^)-метил 2-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)амино)ацетата в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H24N4O3S: 448,2; обнаруж. 449,1 [М+Н]+, tR=2,48 мин.
^)-Метил 2-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетат получали аналогично, используя (R)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 5.
^)-Метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3 -дигидро-Ш-инден-1 -ил)амино)ацетат
К раствору ^)-метил 2-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)ацетата (146 мг, 0,35 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (85,3 мг, 0,39 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (10 мл) и промывали NaHCO3, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан) с получением 118 мг (66%) ^)-метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)амино)ацетата в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C29H32N4O5S: 548,2; не обнаруж. М+, tR=4,19 мин.
^)-Метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)амино)ацетат получали аналогично, используя ^)-метил 2-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетат.
(S)-2-((трет-Бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигид-ро- Ш-инден-1 -ил)амино)уксусная кислота
К перемешиваемому раствору ^)-метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетата (120 мг, 0,21 ммоль) в МеОН (2 мл) добавляли 6 N раствор гидроксида натрия (180 мкл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель упаривали, и остаток растворяли в воде (5 мл) и подкисляли 1 N HCl. Смесь экстрагировали ЕА (3x5 мл) и органические слои промывали насыщенным
раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали с получением 108 мг (92%) ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H30N4O5S: 534,2; не обнаруж. М+, tR=3,81 мин.
^)-2-((трет-Бутоксикарбонил)(4-(5-(3 -циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигид-ро-Ш-инден-1-ил)амино)уксусную кислоту получали аналогично, используя ^)-метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетат. (S)-Метил 2-((4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетат (соединение 99)
Получали, используя общую методику 9. К суспензии ^)-5-(2-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 71 (150 мг, 0,36 ммоль) в CH3CN (5 мл) добавляли K2CO3 (150,9 мг, 1,09 ммоль) и метил 2-бромацетат (66 мг, 0,43 ммоль). Суспензию перемешивали при 80°С в течение 16 ч. Реакционную смесь отфильтровывали и концентрировали. Остаток повторно суспендировали в ЕА (15 мл), промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили и концентрировали. Продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан) с получением 76 мг (47%) ^)-метил 2-((4-(2-(3-циано-4-изо1гоопоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)амино)ацетата в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H25N3O3S: 447,2; обнаруж. 448,2 [М+Н]+, tR=2,57 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,23-8,01 (m, 2H), 7,90 (s, 1H), 7,41 (dd, J=21,0, 7,4 Гц, 1H), 7,29 (dd, J=9,8, 5,2 Гц, 1H), 7,04 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7,04 (d, J=8,9 Гц, 1H), 4,74 (dt, J=12,1, 6,1 Гц, 1H), 4,33 (t, J=6,1 Гц, 1H), 3,76 (d, J=4,8 Гц, 3H), 3,55 (s, 2H), 3,24 (ddd, J=15,8, 8,2, 5,6 Гц, 1H), 3,05-2,86 (m, 1H), 2,47-2,25 (m, 2Н), 2,02-1,84 (m, 1H), 1,53-1,36 (m, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 173,14, 164,87, 161,08, 146,06, 141,45, 141,28, 138,20, 132,13, 131,96, 128,08, 127,98, 127,56, 126,77, 124,66, 116,17, 114,01, 103,76, 72,55, 62,94, 52,19, 48,53, 32,99, 31,34, 22,04.
^)-Метил 2-((4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетат получали аналогично, используя ^)-5-(2-(1-шино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 72.
^)-Метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)ацетат
К раствору ^)-метил 2-((4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)ацетата (76 мг, 0,17 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли ди-трет-бутилдикарбонат (44,5 мг, 0,20 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (10 мл) и промывали NaHCO3, водой, насыщенным раствором хлорида натрия и затем сушили. Концентрирование фильтрата приводило к получению 90 мг (96%) ^)-метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетата в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C30H33N3O5S: 547,21; не обнаруж. М+, tR=4,42 мин.
^)-Метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)амино)ацетат получали аналогично, используя ^)-метил 2-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил) амино)ацетат.
(S)-2-((трет-Бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусная кислота
К перемешиваемому раствору ^)-метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетата (120 мг, 0,22 ммоль) в МеОН (2 мл) добавляли 6 N гидроксид натрия (180 мкл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель упаривали, остаток растворяли в воде (5 мл) и подкисляли 1 N HCl. Смесь экстрагировали ЕА (3x5 мл) и органические слои промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и концентрировали с получением 110 мг (94%) ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C29H31N3O5S: 533,2; обнаруж. 534,2 [М+Н]+, tR=3,92 мин.
(R)-2-((трет-Бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусную кислоту получали аналогично, используя ^)-метил 2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)ацетат.
Общая методика 10. Получение инданаминоамидов.
К Вос-защищенной (R)- или (S)-инданаминокислоте (1 экв.) в DMF (2 М) добавляли HOBt (1,35 экв.) и EDC (1,35 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 мин. Добавляли подходящий амин (1,1 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Вос-защищенный аминоамид осаждали водой или экстрагировали ЕА и сушили MgSO4. Продукт очищали перекристаллизацией или препаративной ВЭЖХ. Полученное твердое вещество нагревали в смеси 4 М HCl/диоксан при 50°С до окончания реакции. Продукт осаждался в виде гидрохлорида добавлением диэтилового эфира.
Соединения 21-25, 39 и 98, 100-108 получали, используя общую методику 10.
(S)-2-((4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)ами-но)-1Ч,]Ч-диметилацетамида гидрохлорид (соединение 21)
Получали, используя общую методику 10. К ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислоте (25 мг, 0,04 ммоль) добавляли HOBt (9,4 мг, 0,07 ммоль) и EDC (13,3 мг, 0,07 ммоль) в безводном DMF (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 мин. Добавляли диметила-мин (2,3 мг, 0,05 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Сырую реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ с получением Вос-продукта амидоамида в виде белого твердого вещества. Этот материал обрабатывали 4 N HCl в диоксане при 50°С в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (5 мл) и полученное твердое вещество собирали с получением 10 мг (46% с двух стадий) (S)-2-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)шино)^^-диметилацетамида гидрохлорида 21. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H27N5O2S: 461,2; обнаруж. 462,1 [М+Н]+, tR=3,90 мин.
(R)-2-((4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)ами-но)-^^диметилацетамида гидрохлорид 22 получали аналогично, используя ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)уксусную кислоту.
5-(5-((S)-1-((2-((S)-3-Гидроксипирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)ти-азол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 104)
Получали, используя общую методику 10. К ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислоте (12 мг, 0,02 ммоль) и HOBt (4,5 мг, 0,03 ммоль) добавляли EDC (6,4 мг, 0,03 ммоль) в безводном DMF (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 мин. Добавляли ^)-пирролидин-3-ол (2,3 мг, 0,02 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Сырую реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ с получением Вос-продукта амидоамида в виде белого твердого вещества. Этот материал обрабатывали 4 N HCl в диоксане при 50°С в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (5 мл) и полученное твердое вещество собирали с получением 5 мг (50% с двух стадий) 5-(5-((S)-1-((2-((S)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 104. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H30N4O3S: 502,2; обнаруж. 503,2 [М+Н]+, tR=3,77 мин.
5-(5-((R)-1-((2-((S)-3-Гидроксипирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)ти-азол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 102 получали аналогично, используя ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусную кислоту.
(R)-2-((4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)ами-но)уксусная кислота (соединение 27)
1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты (20 мг, 0,03) ммоля в 1,4-диоксане (0,5 мл) добавляли 4 N HCl в 1,4-диоксане (0,2 мл). Смесь перемешивали при 50°С в течение 2 ч, затем смесь концентрировали и обрабатывали диэтиловым эфиром с получением 13 мг (R)-2-((4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты в виде желто-зеленого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N4O3S: 434,14, обнаруж.
435,2 [М+Н]+, tR=2,51 мин.
(S)-2-((4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)ами-но)уксусную кислоту 26 получали аналогично, используя ^)-2-((трет-бутоксикарбонил)(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксусную кислоту.
(R)-2-((4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксус-ная кислота (соединение 96)
К ^)-метил 2-((4-(2-(3 -циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5 -ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 -ил)амино)ацетату (100 мг, 0,22 ммоль) в этаноле добавляли 2 N NaOH (1,1 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Растворитель упаривали, остаток растворяли в воде и подкисляли 1 N HCl. Полученное твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением 60 мг (63%) (R)-2-((4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)амино)уксусной кислоты 96 в виде желто-зеленого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H23N3O3S: 433,1; обнаруж. 434,2 [M+l]+, tR=2,61 мин.
(S)-2-((4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)амино)уксус-ную кислоту 97 получали аналогично, используя ^)-метил 2-((4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5 -ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 -ил)амино)ацетат.
Общая методика 11. Восстановительное аминирование инданаминов.
К раствору первичного или необязательно замещенного вторичного (R)- или ^)-инданамина (1 экв.) в МеОН (0,01 М) добавляли уксусную кислоту (0,01 экв.) и подходящий альдегид (1,1 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 25-50°С до окончания образования имина (2-18 ч). Добавляли боргидрид натрия или триацетоксиборгидрид натрия (10 экв.), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре до окончания восстановления (2-8 ч). Растворитель упаривали и остаток разделяли между NaHCO3 и ЕА. Органический слой собирали, сушили и очищали препаративной ВЭЖХ.
Соединения 28-30, 109 и 110 получали, используя общую методику 11.
(S)-5-(5-(1-(((1H-Имидазол-2-ил)метил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 28)
Получали, используя общую методику 11. К ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлориду 4 (25 мг, 0,06 ммоль) и Ш-имидазол-2-карбальдегиду (6,4 мг, 0,06 ммоль) в безводном МеОН (1 мл) добавляли уксусную кислоту (1 капля). Раствор перемешивали при 55°С в течение 3 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли NaBH4 (4,6 мг, 0,12 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь гасили водой (0,5 мл) и разделяли между ЕА (5 мл) и водой (5 мл). Органические слои промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, и продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 22 мг (81%) (S)-5-(5-(1-(((1H-имидазол-2-ил)метил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 28 в виде полубелого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z)
рассчит. для C25H24N6OS: 456,2; обнаруж. 457,2 [М+Н]+, tR=2,38 мин.
(R)-5-(5-(1-(((1Н-Имидазол-2-ил)метил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил 29 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 5.
Получали, используя общую методику 11. К ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлориду 72 (20 мг, 0,05 ммоль) и Ш-имидазол-2-карбальдегиду (7 мг, 0,07 ммоль) в безводном МеОН (0,5 мл) добавляли уксусную кислоту (1 капля). Раствор переме-
(R)-5-(5-(1-(((1H-Имидазол-2-ил)метил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопро-поксибензонитрил (соединение 109)
шивали при 55°С в течение 3 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и добавляли NaBH4 (37,8 мг, 0,1 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь гасили водой (0,5 мл) и разделяли между ЕА (5 мл) и водой (5 мл). Органические слои промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия и продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 17 мг (77%) (R)-5-(5-(1-(((1H-имидазол-2-ил)метил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 109. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H25N5OS: 455,2; обнаруж. 456,2 [М+Н]+, tR=2,53 мин.
(S)-5-(5-(1-(((1H-Имидазол-2-ил)метил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопро-поксибензонитрил 110 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-шино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 71.
(S)-2-Изопропокси-5-(5-(1-((2-(метилсульфонил)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиа-диазол-2-ил)бензонитрил (соединение 31)
К перемешиваемому раствору (S)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 4 (25 мг, 0,06 ммоль) и DIEA (32 мг, 0,24 ммоль) в DMA (1 мл) добавляли (метилсульфонил)этен (20 мг, 0,18 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 24 ч. Растворитель упаривали, и продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 9 мг (31%) (S)-2-изопропокси-5-(5-(1-((2-(метилсульфонил)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиа-зол-2-ил)бензонитрила 31 в виде полубелого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H26N4O3S2: 482,1; обнаруж. 483,1 [М+Н]+, tR=2,49 мин.
(R)-2-Изопропокси-5-(5-(1-((2-(метилсульфонил)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиа-диазол-2-ил)бензонитрил 32 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-шино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 5.
(S)-2-Изопропокси-5-(5-(1-((2-(метилсульфонил)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)бензонитрил (соединение 221)
К перемешиваемому раствору ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 71 (60 мг, 0,15 ммоль) и DIEA (32 мг, 0,24 ммоль) в 1,4-диоксане (0,5 мл) добавляли (метилсульфонил)этен (92 мг, 0,88 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 24 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (5 мл) и промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (2x5 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2x5 мл) и затем сушили. Сырую реакционную смесь очищали на колонке с силикагелем (МеОН/ДХМ) с получением 44 мг (61%) (S)-2-изопропокси-5-(5-(1-((2-(метилсульфонил)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)бензонитрила 221 в виде коричневой жидкости. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H27N3O3S2: 481,1; обнаруж. 482,1 [М+Н]+, tR=2,49 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,19-8,08 (m, 2H),
7.92 (s, 1H), 7,46 (dd, J=7,4, 0,9 Гц, 1H), 7,33 (dt, J=14,9, 7,3 Гц, 2Н), 7,06 (d, J=8,9 Гц, 1H), 5,31 (s, 1H),
4,75 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,35 (t, J=6,6 Гц, 1H), 3,41-3,15 (m, 5Н), 3,10-2,96 (m, 4Н), 2,57-2,45 (m, 1H),
1.93 (ddd, J=12,8, 6,2, 1,7 Гц, 1H), 1,46 (d, J=6,1 Гц, 6Н).
(R)-2-Изопропокси-5-(5-(1-((2-(метилсульфонил)этил)амино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-
ил)бензонитрил 220 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 72.
Общая методика 12. Получение индансульфонамидов через сульфонилхлориды.
К перемешиваемому раствору (R)- или ^)-инданамина (1 экв.) в ДХМ (0,08М) добавляли ТЭА (3 экв.) и подходящий сульфонилхлорид (1,5 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель упаривали и чистый продукт выделяли препаративной ВЭЖХ очисткой.
Соединения 33-36 и 111-120 получали, используя общую методику 12.
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)ме-тансульфонамид (соединение 33)
м-N . , N-N s--^
^j^L -¦
CN CN н
Получали, используя общую методику 12. К перемешиваемому раствору ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 4 (20 мг, 0,04 ммоль) и ТЭА (14,7 мг, 0,14 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли метансульфонилхлорид (8,3 мг, 0,07 ммоль)
и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель упаривали и остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением 12 мг (55%) ^)-№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)метансульфонамида 33 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H22N4O3S2: 454,1; обнаруж. 455,1 [М+Н]+, tR=3,48 мин.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)ме-тансульфонамид 34 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 5.
(R)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)метансульфон-амид (соединение 111)
A^U, * Л^ &Ч
CN CN Н
Получали, используя общую методику 12. К ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлориду 72 (60 мг, 0,15 ммоль) и ТЭА (0,06 мл, 0,4 ммоль) в ДХМ (0,5 мл) добавляли метансульфонилхлорид (8,3 мг, 0,07 ммоль) при 0°С и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь разбавляли ДХМ (5 мл) и промывали водным раствором хлорида аммония и насыщенным раствором хлорида натрия. Сырой материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле (МеОН/ДХМ) с получением 39 мг (58%) (R)-N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)метансульфонамида 111 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H23N3O3S2: 453,1; обнаруж. 454,1 [М+Н]+, tR=3,64 мин.
(S)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)метансульфон-амид 112 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 71.
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)этен-сульфонамид
К перемешиваемому раствору (S)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 4 (40 мг, 0,5 ммоль) и ТЭА (49 мг, 0,48 ммоль) в ДХМ (2 мл) добавляли 2-хлорэтансульфонилхлорид (79 мг, 0,48 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакцию гасили добавлением NaHCO3. Продукт очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 30 мг (66%) ^)-№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)этенсульфонамида в виде желтого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N4O3S2: 466,1; обнаруж. 467,1 [М+Н]+, tR=3,63 мин.
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)этен-сульфонамид получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 5.
(R)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)этенсульфон-
амид
К (R)-5 -(5-( 1 -амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлориду 72 (0,5 г, 1,3 ммоль) в ДХМ (10 мл) добавляли ТЭА (0,88 мл, 6,3 ммоль), затем 2-хлорэтансульфонилхлорид (0,4 мл, 163 ммоль) при 0°С и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. В течение этого времени добавляли реагенты ТЭА (0,2 мл) и 2-хлорэтансульфонилхлорид (0,15 мл) до окончания реакции. Реакционную смесь концентрировали, и сырой остаток очищали на колонке с силикагелем (ЕА/гексан) с получением 378 мг ^)^-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)этенсульфонамида в виде тонкого желтого порошка. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H23N3O3S2: 465,12; обнаруж. 466,1 [М+Н]+, tR=3,82 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,10 (s, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,48-7,26 (m, 3H), 7,01 (d, J=7,3 Гц, 1H), 6,64 (dd, J=16,5, 9,8 Гц, 1H), 6,33 (d, J=16,5 Гц, 1H), 5,97 (d, J=9,8 Гц, 1H), 4,90 (d, J=7,3 Гц, 1H), 4,77-4,46 (m, 2Н), 3,32-2,83 (m, 2Н), 2,64 (s, 1H), 2,02-1,84 (m, 1H), 1,40 (t, J=5,8 Гц, 6H).
(S)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)этансульфон-амид получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2
изопропоксибензонитрила гидрохлорид 71.
Общая методика 13. Получение индансульфонамидов реакцией Михаэля.
К перемешиваемому раствору (R)- или ^)-инданвинилсульфонамида (1 экв.) в DMF (0,1М) добавляли подходящий амин (10 экв.) Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 18 ч. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ.
Соединения 37-38 и 121-153 получали, используя общую методику 13.
N-((S)-4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-((К)-3-гидроксипирролидин-1-ил)этансульфонамид (соединение 37)
Получали, используя общую методику 13. К раствору ^)-№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)этенсульфонамида (40 мг, 0,5 ммоль) в DMF (0,5 мл) добавляли ^)-пирролидин-3-ол (18,7 мг, 0,21 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 18 ч. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 30 мг (56%) №(^)-4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-((R)-3-гидроксипирролидин-1-ил)этансульфонамида 37 в виде беловатого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C27H31N5O4S2: 553,2; обнаруж. 554,2 [М+Н]+, tR=2,52 мин.
N-((R)-4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-(^)-3-гидрокстирролидин-1-ил)этансульфонамид 38 получали аналогично, используя (R)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 -ил)этенсульфонамид.
N-((R)-4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-((R)-3-гидроксипиперидин-1-ил)этансульфонамид (соединение 143)
Получали, используя общую методику 13. К раствору ^)-^(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)этенсульфонамида (10 мг, 0,02 ммоль) в DMF (0,5 мл) добавляли ^)-пиперидин-3-ола гидрохлорид (20,6 мг, 0,15 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 18 ч. Продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 10 мг (80%) N-((R)-4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-((R)-3-гидрокси-пиперидин-1-ил)этансульфонамида 143. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C29H34N4O4S2: 566,2; обнаруж.
567,2 [М+Н]+, tR=2,62 мин.
N-((S)-4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-((R)-3-гид-роксипиперидин-1-ил)этансульфонамид 141 получали аналогично, используя ^)^-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -ил)этенсульфонамид.
Общая методика 14. Получение индансульфонамидных эфиров.
К перемешиваемому раствору (R)- или (S)-инданамина (1 экв.) в ДХМ (0,2 М) добавляли сульфо-нилхлорид (1,5 экв.) при комнатной температуре. Для менее реакционоспособных или затрудненных сульфонилхлоридных эфиров добавляли DIEA (2-3 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Сырую реакционную смесь разделяли между ДХМ и NaHCO3. Органический слой сушили MgSO4, концентрировали и очищали колоночной хроматографией.
Соединения 154-157 получали, используя общую методику 14.
^)-Этил 2-(N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетат
Получали, используя общую методику 14. К перемешиваемому раствору ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 4 (177 г, 0,47 ммоль) и DIEA (182 мг, 1,4 ммоль) в ДХМ (8 мл) добавляли свежеприготовленный этил-2-(хлорсульфонил)ацетат (131 мг, 0,7 ммоль). Через 45 мин сырую реакционную смесь разделяли между ДХМ и NaHCO3. Органический слой сушили MgSO4, концентрировали и очищали колоночной хроматографией (ЕА/гексан) с получением 75 мг (30%) ^)-этил 2-(N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамоил)ацетата в виде светло-желтого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N4O5S2: 526,1; обнаруж. 527,1 [М+Н]+, tR=3,71 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,16 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,09 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,76 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,57 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,35 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,03 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,46 (t, J=7,9 Гц, 1H), 4,70 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,26-4,17 (m, 2H), 4,00 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 3,49 (ddd, J=17,4, 9,5, 3,9 Гц, 1H), 3,26-3,05 (m, 1H), 2,56 (ddd, J=12,9, 9,0, 4,4 Гц, 1H), 2,23- 49
2,08 (m, 1H), 1,41-1,37 (m, 6H), 1,28 (dd, J=11,7, 4,6 Гц, 3H).
^)-Этил 2-(N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетат получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил 5.
(S)-Метил 2-(N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетат (соединение 155)
Получали, используя общую методику 14. К раствору ^)-5-(5-(1-шино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 71 (20 мг, 0,04 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли метил-2-(хлорсульфонил)ацетат (10 мг, 0,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем разбавляли ДХМ (5 мл), промывали насыщенным водн. раствором NaHCO3 и насыщенным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили MgSO4 и сырой продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением 11,2 мг (41%) ^)-метил 2-(№(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетата 155 в виде оранжево-коричневого масла. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H25N3O5S2: 511,1; обнаруж. 512,2 [М+Н]+, tR=3,71 мин.
^)-Метил 2-(N-(4-(2-(3 -циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5 -ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 -
ил)сульфамоил)ацетат 154 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил 72.
Общая методика 15. Получение индансульфонамидокислот.
К раствору (R)- или (S)-индансульфонамидного эфира (1 экв.) в смеси 2:1 EtOH/ТГФ (0,2 М) добавляли 6 N NaOH (5 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Сырую реакционную смесь концентрировали, затем разделяли между ДХМ/IPA и 1 N HCl.
Органический слой сушили MgSO4, концентрировали и выделяли препаративной ВЭЖХ очисткой. Соединения 40-41 и 158-161 получали, используя общую методику 15.
(S)-2-(N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)уксусная кислота (соединение 40)
Получали, используя общую методику 15. К перемешиваемому раствору ^)-этил 2-(N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетата (75 мг, 0,8 ммоль) в МеОН (4 мл) добавляли 6 N NaOH (0,12 мл). Через 3 ч сырую реакционную смесь концентрировали, затем разделяли между ДХМ/IPA и 1 N HCl. Органический слой сушили MgSO4 и концентрировали с получением 43 мг (60%) (S)-2-(N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)сульфамоил)уксусной кислоты 40 в виде светло-желтого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N4O5S2: 498,1; обнаруж. 499,1 [М+Н]+, tR=3,34 мин.
(R)-2-(N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)уксусную кислоту 41 получали аналогично, используя ^)-этил 2-(№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетат.
(S)-2-(N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамо-ил)уксусная кислота (соединение 159)
Получали, используя общую методику 15. К перемешиваемому раствору, содержащему ^)-метил 2-(N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетат (11,2 мг, 0,02 ммоль) в МеОН (1 мл) добавляли 6 N NaOH (100 мкл). Через 1 ч сырую реакционную смесь концентрировали и продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 5 мг (45%) (S)-2-(N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)уксусной кислоты 159 в виде светло-желтого твердого вещества.
LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H23N3O5S2: 497,1; обнаруж. 498,1 [М+Н]+, tR=3,44 мин.
(R)-2-(N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамо-ил)уксусную кислоту 158 получали аналогично, используя ^)-метил 2-(№(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5 -ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 -ил)сульфамоил)ацетат.
Общая методика 16. Получение индансульфонамидамидов.
К перемешиваемому раствору (R)- или ^)-индансульфонамидокислоты (1 экв.) в ДХМ (0,25 М) добавляли HATU (3 экв.) и DIEA (2 экв.). Через 30 мин добавляли амин и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водой и очищали препаративной ВЭЖХ.
Соединения 42-44, 162 и 163 получали, используя общую методику 16.
(R)-2-(N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)-М,М-диметилацетамид (соединение 43)
Получали, используя общую методику 16. К ^)-2-(№(4-(5-(3-циано-4-изо1гоопоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамоил)уксусной кислоте (20 мг, 0,04 ммоль) в ДХМ (0,4 мл) добавляли HATU (45 мг, 0,12 ммоль) и DIEA (10,3 мг, 0,08 ммоль). Через 30 мин добавляли ди-метиламин (2 М раствор в ТГФ, 200 мкл, 0,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водой (100 мкл) и растворитель упаривали. Сырой материал очищали препаративной ВЭЖХ с получением 14 мг (66%) ^)-2-(№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)-N,N-диметилацета-мида 43 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H27N5O4S2: 525,2; обнаруж. 526,2 [М+Н]+, tR=3,42 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,20 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,14 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,82 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,73 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,40 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7,09 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,50 (d, J=8,2 Гц, 1H), 5,07 (q, J=7,7 Гц, 1H), 4,76 (hept, J=6,1 Гц, 1H), 4,28 (d, J=14,6 Гц, 1H), 4,09 (d, J=14,6 Гц, 1H), 3,50 (ddd, J=17,0, 8,8, 3,4 Гц, 1H), 3,20 (dt, J=9,7, 7,1 Гц, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,02 (s, 3H), 2,72 (dtd, J=11,4, 8,0, 3.5 Гц, 1H), 2,20 (dq, J=13,1, 8,4 Гц, 1H), 1,46 (d, J=6,1 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 166,99, 165,73, 163,22, 161,71, 144,17, 141,92, 133,44, 133,34, 129,31, 127,92, 127,33, 126,37, 122,70, 115,57, 113,91, 103,71, 72,56, 59,23, 54,92, 38,30, 35,99, 31,36, 21,74. Хиральная ВЭЖХ: да-2-(№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)-N,N-диметилацета-мид элюировали 40% IPA в гексане, 100% ее, tR=22,87 мин.
(S)-2-(N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)-^^диметилацетамид 42 получали аналогично, используя (S)-2-(N-(4-(5-(3^mK> -4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)уксусную кислоту. Хиральная ВЭЖХ: 97,8% ее, tR для S-энантиомера=29,06 мин.
(R)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-морфолино-2-оксоэтансульфонамид (соединение 162)
Получали, используя общую методику 16. К ^)-2-^-(4-(2-(3-циано-4-изо1гоопоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамоил)уксусной кислоте 158 (15 мг, 0,03 ммоль) в ДХМ (0,4 мл) добавляли HATU (26 мг, 0,07 ммоль) и DIEA (7,8 мг, 0,06 ммоль). Через 30 мин добавляли морфолин (52 мг, 0,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили водой (10 мкл) и растворитель упаривали. Сырой материал очищали препаративной ВЭЖХ с получением 8 мг (47%) (R)-N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-морфолино-2-оксоэтансульфонамида 162. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H30N4O5S2: 566,1; обнаруж. 567,2 [М+Н]+, tR=3,77 мин.
Общая методика 17. Получение индансульфонамидных спиртов.
К перемешиваемому раствору (R)- или ^)-индансульфонамидного эфира (1 экв.) в ТГФ (0,06 М) добавляли боргидрид натрия (4 экв.) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали при 75°С и по каплям добавляли метанол (10 экв.). Через 1 ч реакционную смесь охлаждали и концентрировали. Чистый продукт получали препаративной ВЭЖХ очисткой.
Соединения 45, 46, 164 и 165 получали, используя общую методику 17.
Получали, используя общую методику 17. К перемешиваемому раствору ^)-метил 2-(N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетата (13 мг, 0,02 ммоль) в ТГФ (0,5 мл) добавляли боргидрид натрия (2,3 мг, 0,06 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали при 75°С, и по каплям добавляли метанол (0,03 мл, 0,7 ммоль). Через
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)-2-гидроксиэтансульфонамид (соединение 46)
1 ч реакционную смесь охлаждали и концентрировали. Очистка сырого материала препаративной ВЭЖХ приводила к получению 6 мг (60%) (R)-N-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)-2-гидроксиэтансульфонамида 46. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H24N4O4S2: 484,1; обнаруж. 485,1 [М+Н]+, tR=3,26 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,23 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,16 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,83 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,64 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,43 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,11 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,19-4,96 (m, 1H), 4,87-4,63 (m, 3H), 4,17 (dd, J=8,2, 4,4 Гц, 2Н), 3,53 (ddd, J=17,2, 8,8, 3,5 Гц, 1H), 3,463,34 (m, 2Н), 3,32-3,11 (m, 1H), 2,86-2,59 (m, 1H), 2,19-1,97 (m, 1H), 1,48 (d, J=6,1 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 166,83, 165,72, 161,71, 144,11, 141,85, 133,47, 133,26, 129,53, 127,99, 126,92, 126,58, 122,64,
115,51, 113,87, 103,79, 72,54, 58,86, 57,43, 55,67, 34,69, 31,27, 21,73. Хиральная ВЭЖХ: (R)-N-(4-(5-(3-
циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 -ил)-2-гидроксиэтансульфон-амид элюировали в МеОН, 96,2% ее, tR=12,58 мин (хиральный способ 2).
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-гидроксиэтансульфонамид 45 получали аналогично, используя ^)-метил 2-(№(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетат. Хиральная ВЭЖХ: 97,6% ее, tR для S-энантиомера=10,99 мин (хиральный способ 2).
(S)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-гидрокси-этансульфонамид (соединение 165)
Получали, используя общую методику 17. К перемешиваемому раствору ^)-метил 2-(N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамоил)ацетата (20 мг, 0,04 ммоль) в ТГФ (0,5 мл) добавляли боргидрид натрия (3,6 мг, 0,09 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали до 75°С и по каплям добавляли метанол (0,06 мл, 1,4 ммоль). Через 1 ч реакционную смесь охлаждали и концентрировали. Очистка сырого материала препаративной ВЭЖХ приводила к получению 12,2 мг (64%) ^)^-(4-(2-(3-циано-4-изо1гоопоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)-2-гидроксиэтансульфонамида 165. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C24H25N3O4S2: 483,1; обнаруж. 484,2 [М+Н]+, tR=3,45 мин.
(R)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-2-гидрокси-этансульфонамид 164 получали аналогично, используя ^)-метил 2-(№(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5 -ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1 -ил)сульфамоил)ацетат.
Общая методика 18. Получение индансульфамидов.
К перемешиваемому раствору (R)- или (S)-инданамина (1 экв.) в 1,4-диоксане (0,06 М) добавляли сульфамид (5 экв.) и реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 16 ч. Растворитель упаривали и реакционную смесь очищали препаративной ВЭЖХ.
Соединения 47, 48, 166 и 167 получали, используя общую методику 18.
(S)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)суль-фамид (соединение 47)
Получали, используя общую методику 18. К ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлориду 4 (25 мг, 0,06 ммоль) в диоксане (1 мл) добавляли сульфамид (30 мг, 0,3 ммоль) и смесь нагревали при 90°С. Через 16 ч растворитель упаривали и остаток очищали колоночной хроматографией. Дополнительная очистка перекристаллизацией из МеОН приводила к получению 15,9 мг (26%) ^)-№(4-(5-(3-циано-4-изо1гоопоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамида 47. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C21H21N5O3S2: 455,1; обнаруж. 456,1 [М+Н]+, tR=3,33 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,40 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,32 (dd, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 7,88 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,66 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,56-7,38 (m, 2H), 7,23 (d, J=9,0 Гц, 1H), 6,75 (s, 2H), 4,95 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 4,87 (dd, J=16,6, 8,2 Гц, 1H), 3,42-3,26 (m, 1H), 3,07 (dt, J=16,4, 8,3 Гц, 1H), 2,61 (dtd, J=11,0, 7,9, 3,0 Гц, 1H), 2,00 (dq, J=12,7, 8,8 Гц, 1H), 1,38 (d, J=6,0 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, ДМСО) 5 166,64, 165,62, 161,19, 146,08, 141,36, 133,89, 133,15, 127,97, 127,51, 127,27, 125,78, 122,22, 115,57, 114,95, 102,29, 72,17, 57,67, 33,41, 30,73, 21,52. Хиральная ВЭЖХ: ^)^-(4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамид элюировали в МеОН: 98,6% ее, tR=7,63 мин (хиральный способ 2).
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)суль-фамид 48 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид. Хиральная ВЭЖХ: 98% ее, tR для R-энантиомера=9,10 мин (хиральный способ 2).
Получали, используя общую методику 18. К ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-
2- ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлориду 72 (100 мг, 0,02 ммоль) в диоксане (1 мл) добавляли DIEA (58 мг, 0,32 ммоль) и сульфамид (115 мг, 1,2 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 4 ч. Растворитель упаривали, остаток разбавляли ЕА (10 мл) и промывали последовательно NH4Cl и насыщенным раствором хлорида натрия. Продукт очищали колоночной хроматографией (Ме-ОН/ДХМ) с получением 80 мг (73%) ^)-№(4-(2-(3-циано-4-изо1гоопоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)сульфамида 166. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C22H22N4O3S2: 454,1; обнаруж. 455,4 [М+Н]+, tR=3,46 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,29 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,23 (dd, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,55 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,47 (dd, J=18,4, 8,3 Гц, 2Н), 7,36 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,17 (d, J=9,0 Гц, 1H), 6,73 (s, 2H), 4,98-4,75 (m, 2H), 3,19-3,05 (m, 1H), 3,00 (dd, J=16,3, 8,0 Гц, 1H), 2,61-2,54 (m, 1H), 2,041,89 (m, 1H), 1,38 (t, J=5,5 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 165,43, 161,42, 144,43, 141,31, 140,70,
138,02, 132,43, 132,20, 128,52, 128,18, 128,08, 126,65, 124,98, 116,30, 114,25, 103,78, 72,82, 59,25, 34,62,
31,13, 22,14. Хиральная ВЭЖХ: (R)-N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамид элюировали 50% этанолом в гексане, 99,0% ее, tR=40,47 мин.
(S)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамид 167 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-шино-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил 71. Хиральная ВЭЖХ: 99,1% ее, tR для S-энантиомера=27,67 мин.
Общая методика 19. Получение инданмочевин.
К перемешиваемому раствору CDI (1,7 экв.) в ДХМ (0,16 М) добавляли перемешиваемую суспензию (R)- или ^)-инданамина (1 экв.) и Et3N (3 экв.) в ДХМ (0,16 М) и смесь перемешивали в течение 2 ч или до исчезновения всего инданамина. При необходимости добавляли дополнительно CDI. Этот раствор добавляли к подходящему амину и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель упаривали и чистый продукт выделяли препаративной ВЭЖХ.
Соединения 50-67 и 168-205 получали, используя общую методику 19.
(R)-N-((R)-4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-
3- (диметиламино)пирролидин-1-карбоксамид (соединение 56)
Получали, используя общую методику 19. К CDI ((13,4 мг, 0,08 ммоль) в ДХМ (0,5 мл) добавляли суспензию (R)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонит-рила гидрохлорида 5 (20,0 мг, 0,04 ммоль) и Et3N (14,7 мг, 0,14 ммоль) в ДХМ (0,5 мл), и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Полученный раствор добавляли к полученному раствору гидрохлорида азетидин-3-ола (15,9 мг, 0,14 ммоль)) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель упаривали и сырой материал очищали препаративной ВЭЖХ с получением 15 мг (62%) (R)-N-((R)-4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-3-(диметиламино)пирролидин-1-карбоксамида 56. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H32N6O2S: 516,2; обнаруж. 517,2 [М+Н]+, tR=2,43 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,40 (d, J=2,4 Гц, 1H), 8,32 (dd, J=9,0, 2,4 Гц, 1H), 7,99-7,76 (m, 1H), 7,51 (d, J=9,2 Гц, 1H), 7,49-7,34 (m, 2Н), 6,73 (d, J=8,4 Гц, 1H), 5,32 (d, J=8,2 Гц, 1H), 5,09-4,80 (m, 1H), 3,86 (dd, J=14,3, 7,0 Гц, 1H), 3,75 (dd, J=11,0, 7,5 Гц, 1H), 3,63-3,48 (m, 1H), 3,45-3,22 (m, 3H), 3,10 (dt, J=16,5, 8,3 Гц, 1H), 2,82 (t, J=5,1 Гц, 6Н), 2,56-2,40 (m, 1H), 2,32 (dd, J=9,8, 2,5 Гц, 1H), 2,15-2,02 (m, 1H), 2,00-1,81 (m, 1H), 1,38 (d, J=6,0 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 167,10, 165,84, 161,80, 145,94, 142,30, 133,54,
133,36, 128,86, 127,82, 126,94, 126,41, 122,72, 115,78, 114,01, 103,72, 72,71, 64,71, 55,95, 46,76, 44,20,
42,04, 34,06, 31,45, 27,30, 21,90, 21,89.
(S)-N-((R)-4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)-3-(диметиламино)пирролидин-1-карбоксамид 57 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид.
Получали, используя общую методику 19. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C26H27N5O3S: 489,2; обна-
(R)-N-(4-(5-(3-Циано-4-изопропоксифенил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)мор-фолин-4-карбоксамид (соединение 58)
руж. 490,2 [М+Н]+, tR=3,54 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,20 (dd, J=8,9, 2,3 Гц, 1H), 8,13 (d, J=2,2 Гц, 1H), 7,82 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,49 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,36 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,08 (d, J=9,0 Гц, 1H), 5,51 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,83-4,56 (m, 2Н), 3,71 (dd, J=10,0, 5,0 Гц, 4Н), 3,54-3,33 (m, 5Н), 3,29-3,05 (m, 1H), 2,81-2,56(m, 1H), 1,91 (ddd, J=16,4, 13,1, 7,9 Гц, 1H), 1,46 (d, J=6,1 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 167,45, 166,17, 162,16, 157,98, 146,58, 142,87, 133,90, 133,77, 129,34, 128,20, 127,29, 126,95, 123,21, 116,06, 114,36, 104,22, 73,03, 66,92, 56,41, 44,54, 34,72, 31,85, 22,25.
(R)-N-(4-(2-(3 -Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5 -ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1 -ил)пирролидин-1-карбоксамид (соединение 172)
Получали, используя общую методику 19. К CDI (117 мг, 0,72 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли суспензию (R)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорида 72 (150 мг, 0,36 ммоль), Et3N (145 мг, 1,44 ммоль) и ДХМ (1 мл) и смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Полученный раствор добавляли к полученному раствору пирроли-дина (77 мг, 1,08 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель упаривали и сырой материал очищали препаративной ВЭЖХ с получением 110 мг (78%) (R)-N-(4-(2-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-
1- ил)пирролидин-1-карбоксамида 172. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C27H28N4O2S: 472,1; обнаруж. 473,2 [М+Н]+, tR=3,79 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,28 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,22 (dd, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,53 (d, J=7,3 Гц, 1H), 7,44 (d, J=9,1 Гц, 1H), 7,36-7,24 (m, 2H), 6,42 (d, J=8,6 Гц, 1H), 5,29 (q, J=8,4 Гц, 1H), 4,91 (hept, J=5,9 Гц, 1H), 3,31-3,20 (m, 4Н), 3,17-2,95 (m, 2Н), 2,43 (ddd, J=10,7, 6,2, 2,8 Гц, 1H), 2,00-1,87 (m, 1H), 1,87-1,72 (m, 4Н), 1,37 (d, J=6,0 Гц, 6Н); 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 164,79, 160,90, 156,46, 146,16, 141,10, 140,75, 137,75, 131,89, 131,80, 127,75, 127,71, 127,63, 126,53, 124,27, 115,92, 113,78, 103,60, 72,34, 55,78, 45,61, 34,87, 30,80, 25,57, 21,81.
(S)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)пирролидин-1-карбоксамида 173 получали аналогично, используя ^)-5-(5-(1-шино-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-
2- ил)-2-изопропоксибензонитрила гидрохлорид 71.
(R)-N-(4-(2-(3-Циано-4-изопропоксифенил)тиазол-5-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)морфолин-4-карбоксамид (соединение 186)
Получали, используя общую методику 19. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C27H28N4O3S: 488,2; обнаруж. 489,2 [М+Н]+, tR=3,54 мин. 1H ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,28 (d, J=2,3 Гц, 1H), 8,22 (dd, J=8,9, 2,4 Гц, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,54 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7,44 (d, J=9,1 Гц, 1H), 7,36-7,24 (m, 2H), 6,89 (d, J=8,3 Гц, 1H), 5,30 (d, J=8,2 Гц, 1H), 4,99-4,83 (m, 1H), 3,61-3,50 (m, 4Н), 3,42-3,24 (m, 4Н), 3,23-2,91 (m, 2Н), 2,48-2,40 (m, 1H), 2,00-1,82 (m, 1H), 1,37 (d, J=6,0 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 165,23, 161,35, 157,93, 146,06,
141,53, 141,16, 138,11, 132,35, 132,20, 128,26, 128,14, 126,90, 124,68, 116,38, 114,20, 103,97, 72,80, 66,91,
56,53, 44,50, 34,89, 31,31, 22,26.
Общая методика 20. Получение инданаминов из инданолов.
В колбу, содержащую инданол (1 экв.) в ДХМ (0,14 М) при 0°С добавляли SOCl2 (2 экв.). После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь концентрировали в вакууме и помещали в высокий вакуум на 2 ч. Полученный сырой хлорид растворяли в DMA (0,02М). Добавляли амин (3 экв.), DIEA (3 экв.) и в некоторых случаях NaBr (3 экв.), полученные реакционные смеси перемешивали при 55-60°С в течение ночи и очищали препаративной ВЭЖХ или колоночной хроматографией.
Соединения 206-219 получали, используя общую методику 20.
5-(5-(1-(3-Гидроксиазетидин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензо-нитрил (соединение 207)
Получали, используя общую методику 20. К перемешиваемому раствору 5-(5-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила (20 мг, 0,05 ммоль) в ДХМ (1 мл) добавляли тионилхлорид (12,6 мг, 0,106 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитель упаривали и сырой хлорид повторно растворяли в диметилаце-тамиде (1 мл). Добавляли диизопропилэтиламин (20,5 мг, 0,16 ммоль) и этаноламин (9,7 мг, 0,16 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение ночи. Реакционную смесь гасили водой (200 мкл) и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 11 мг (46%) 5-(5-(1-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-2,3
дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 208. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H25N3O2S: 431,1; обнаруж. 432,1 [М+Н]+, tR=6,48 мин (способ 2). 2-Фтор-5-(тиазол-5-ил)бензонитрил (THZ INT-3)
х} Гу~*}
Bu3SrT s F'^T
К 5-(трибутилстаннил)тиазолу (1,00 г, 2,7 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли 2-фтор-5-йодбензонитрил (0,791 г, 3,2 ммоль). Раствор дегазировали N2 и добавляли бис-(трифенилфосфин)палладий(П) хлорид Pd(Ph)2Cl2 (0,187 г, 0,27 ммоль). Раствор затем дегазировали в течение 5 мин, затем нагревали при 85°С в течение 2 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 и промывали ЕА (3 х 50 мл). Объединенные органические слои сушили MgSO4, отфильтровывали и концентрировали. Сырой продукт очищали хроматографией (10% ЕА/гексан) с получением 0,450 г (82%) 2-фтор-5-(тиазол-5-ил)бензонитрила THZ INT-3 в виде желто-коричневого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H5FN2S: 204,2; обнаруж. 205,0 [М+Н]+, tR=3,00 мин.
5-(2-Бромтиазол-5-ил)-2-фторбензонитрил (THZ INT-4)
К перемешиваемому раствору 2-фтор-5-(тиазол-5-ил)бензонитрила THZ INT-3 (0,429 г, 2,1 ммоль) в уксусной кислоте (10,5 мл) добавляли ацетат калия (0,412 г, 4,2 ммоль). По каплям добавляли бром (0,647 мл, 12,6 ммоль) в течение 10 мин и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Реакционную смесь подщелачивали 1 N NaOH и промывали ЕА и насыщенным раствором хлорида натрия. Объединенные органические слои сушили MgSO4, отфильтровывали и концентрировали. Сырой продукт очищали хроматографией (20% ЕА/гексан) с получением 0,10 г (30%) 5-(2-бромтиазол-5-ил)-2-фторбензонитрила THZ INT-4. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C10H4BrFN2S: 283,1; обнаруж. 284,9 [М+Н]+, tR=3,33 мин.
5-(2-(1-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-фторбензо нитрил
CN CN
Получали, используя общую методику 1. К 5-(2-бромтиазол-5-ил)-2-фторбензонитрилу THZ INT-4 (0,100 г, 0,35 ммоль), трет-бутилдиметил(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илокси)силану IND INT-8 (0,143 г, 0,38 ммоль) и карбонату натрия (0,112 г, 1,1 ммоль) в ди-оксане (1,8 мл) и H2O (0,2 мл) добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0,041 г, 0,035 ммоль). Раствор дегазировали N2 и реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 6 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором хлорида натрия и промывали ДХМ (3 х 100 мл). Объединенные органические слои сушили MgSO4, отфильтровывали и концентрировали. Сырой продукт очищали хроматографией (30% ЕА/гексан) с получением 0,05 г (32%) 5-(2-(1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-фторбензонитрила в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H27FN2OSSi: 450,6; обнаруж. 451,1 [М+Н]+, tR=4,84 мин (способ 3).
5-(2-(1-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропокси-бензонитрил
Получали, используя общую методику 2. К раствору 5-(2-(1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-фторбензонитрила (0,043 г, 0,095 ммоль) в изопропаноле (2 мл) добавляли изопропоксид натрия (0,07 г, 0,090 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 12 ч. После охлаждения растворитель удаляли в потоке N2 и сырую реакционную смесь использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H34N2O2SSi: 490,7, tR=5,06 мин (способ 3).
Получали, используя общую методику 3. К сырому 5-(2-(1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрилу (0,043 г, 0,095 ммоль) добавляли 4 N HCl в диоксане (1,0 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель концентрировали в потоке N2 и смесь растворяли в МеОН (1,0 мл). Сырой продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением 0,02 г (43%) 5-(2-(1-гидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиазол-5-ил)-2-изопропоксибензонитрила 222.
LCMS-ESI (m/z): рассчит. для: C22H20N2O2S: 376,5; обнаруж. 377,1 [М+Н]+, tR=3,31 мин.
2-Изопропокси-5-(тиофен-2-ил)бензонитрил (THIO INT-1)
В сосуд для микроволнового излучения загружали 5-бром-2-изопропоксибензонитрил (200 мг, 0,83 ммоль), тиофен-2-илбороновую кислоту (106,5 мг, 0,83 ммоль), карбонат калия (345,3 мг, 2,49 ммоль) и смесь 3:1 диметилэтиленгликоля/H2O (2 мл). Реакционную смесь дегазировали пропусканием N2 через перемешиваемый раствор в течение 10 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (20,4 мг, 0,02 ммоль) и раствор дегазировали в течение 2 мин. Сосуд подвергали микроволновому излучению при 100°С в течение 30 мин. Растворитель удаляли и остаток растворяли в ЕА (10 мл), промывали насыщенным раствором хлорида натрия и сушили MgSO4. Продукт очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 165 мг (82%) 2-изопропокси-5-(тиофен-2-ил)бензонитрила THIO INT-1 в виде бесцветного масла. LCMS-ESI (m/z) рас-счит. для C14H13NOS: 243,1; обнаруж. 266,0 [M+Na]+, tR=3,90 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,74 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,69 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,28-7,23 (m, 1H), 7,19 (dd, J=3,6, 1,1 Гц, 1H), 7,05 (dd, J=5,1, 3,6 Гц, 1H), 6,95 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,65 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 1,43-1,37 (m, 6H).
5-(5-Бромтиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил (THIO INT-2)
К раствору 2-изопропокси-5-(тиофен-2-ил)бензонитрила THIO INT-1 (160 мг, 0,66 ммоль) в безводном DMF (5 мл) добавляли свежеперекристаллизованный N-бромсукцинимид (118 мг, 0,66 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч (более длительное время реакции и использование избытка NBS вызывало дибромирование). Реакционную смесь разбавляли ЕА (10 мл), промывали водой (2 х 10 мл) и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили MgSO4. Сырой продукт очищали на колонке с силикагелем (ЕА/гексан) с получением 126 мг (60%) 5-(5-бромтиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила THIO INT-2 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C14H12BrNOS: 320,9; не обнаруж. M+, tR=4,26 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,60 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,53 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 6,95 (d, J=3,9 Гц, 1H), 6,89 (t, J=6,2 Гц, 2Н), 4,60 (dt, J=12,1, 6,1 Гц, 1H), 1,35 (d, J=6,1 Гц, 6Н).
5-(5-(1-(трет-Бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропокси-бензонитрил
Получали из 5-(5-бромтиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила THIO INT-2 и (±)-((4-бром-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилана IND INT 8, используя общую методику 1. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C29H35NO2SSi: 489,2; не обнаруж. М+, tR=8,10 мин (способ 1). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,77 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,71 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,44 (t, J=4,4 Гц, 1H), 7,27 (d, J=4,5 Гц, 2Н), 7,17 (dd, J=12,5, 3,8 Гц, 2Н), 6,96 (d, J=8,9 Гц, 1H), 5,29 (t, J=7,1 Гц, 1H), 4,78-4,55 (m, 1H), 3,21 (ddd, J=15,9, 8,8, 2,8 Гц, 1H), 2,95 (dt, J=16,2, 8,1 Гц, 1H), 2,56-2,36 (m, 1H), 1,94 (dd, J=12,6, 7,3 Гц, 1H), 1,41 (d, J=6,1 Гц, 6Н), 1,01-0,86 (m, 9Н), 0,17 (d, J=9,3 Гц, 6Н).
К перемешиваемому раствору 5-(5-(1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила (80 мг, 0,16 ммоль) в 1,4-диоксане (1 мл) добавляли 4 N HCl раствор в 1,4-диоксане (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель упаривали, и сырой продукт очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 26 мг (40%) 5-(5-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 223 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H21NO2S: 375,1; обнаруж. 398,1 [M+Na]+, tR=3,96 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,77 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,71 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,537,45 (m, 1H), 7,38 (d, J=7,4 Гц, 1H), 7,30 (t, J=7,5 Гц, 1H), 7,19 (q, J=3,8 Гц, 2Н), 6,97 (d, J=8,9 Гц, 1H), 5,28 (t, J=6,1 Гц, 1H), 4,66 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 3,28 (ddd, J=16,2, 8,5, 4,7 Гц, 1H), 3,11-2,91 (m, 1H), 2,53 (dddd, J=13,1, 8,2, 6,9, 4,7 Гц, 1H), 2,08-1,92 (m, 1H), 1,57 (s, 1H), 1,41 (d, J=6,1 Гц, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 159,37, 146,65, 142,74, 141,52, 140,36, 131,55, 131,08, 130,96, 130,79, 127,79, 127,54, 126,67, 123,82, 116,57, 114,40, 103,82, 76,59, 72,43, 36,07, 30,88, 22,08.
5-(5-(1-(2-Гидроксиэтиламино)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонит-рил (соединение 224)
Получали, используя общую методику 20 из 5-(5-(1-гидрокси-2,3-дигидро-Ш-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила и этаноламина. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C25H26N2O2S: 418,2; обна-
руж. 419,1 [М+Н]+, tR=2,73 мин.
^)-трет-Бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиофен-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамат
В сосуд для микроволнового излучения объемом 20 мл загружали ^)-трет-бутил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамат IND INT-18 (44 мг, 0,12 ммоль), 5-(5-бромтиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил THIO INT-2 (40 мг, 0,12 ммоль), карбонат калия (51 мг, 0,37 ммоль) и 3:1 смесь диметилэтиленгликоль/H2O (2 мл). Реакционную смесь дегазировали пропусканием N2 через перемешиваемый раствор в течение 10 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (10,1 мг, 0,008 ммоль) и раствор дегазировали в течение 2 мин. Сосуд подвергали микроволновому излучению при 100°С в течение 30 мин. Растворитель удаляли, и остаток растворяли в ЕА (10 мл), промывали насыщенным раствором хлорида натрия и сушили MgSO4. Продукт очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 15 мг (51%) ^)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиофен-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамата в виде беловатого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C28H30N2O3S: 474,2; не обнаруж. М+, tR=4,43 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,76 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,70 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,45 (dd, J=6,3, 2,2 Гц, 1H), 7,27 (d, J=6,6 Гц, 2Н), 7,17 (dd, J=11,9, 3,8 Гц, 2Н), 6,97 (d, J=8,9 Гц, 1H), 5,30-5,11 (m, 1H), 4,78 (d, J=8,6 Гц, 1H), 4,66 (dt, J=12,2, 6,1Гц, 1H), 3,18 (ddd, J=16,1, 8,7, 3,4 Гц, 1H), 3,02 (dt, J=16,1, 8,1 Гц, 1H), 2,68-2,51 (m, 1H), 1,90-1,73 (m, 1H), 1,47 (d, J=8,2 Гц, 9Н), 1,41 (d, J=6,1 Гц,
6Н).
(R)-5-(5-(1-Амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение 225)
Получали, используя общую методику 5. К перемешиваемому раствору ^)-трет-бутил 4-(5-(3-циано-4-изопропоксифенил)тиофен-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-илкарбамата (15 мг, 0,03 ммоль) в 1,4-диоксане (1 мл) добавляли 4 N HCl раствор в 1,4-диоксане (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель упаривали, полученное твердое вещество растворяли в смеси 1:1 ДМСО:МеОН (1 мл) и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 10 мг (90%) (R)-5-(5-(1-амино-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 225 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H22N2OS: 374,2; обнаруж. 358,1. [M-NH2]+, tR=2,69 мин.
В сосуд для микроволнового излучения объемом 2 мл загружали 2,4-дибромтиофен (20 мг, 0,08 ммоль), (3-циано-4-изопропоксифенил)бороновую кислоту (17 мг, 0,08 ммоль), карбонат калия (35 мг, 0,25 ммоль) и 3:1 смесь DME/H2O (4 мл). Реакционную смесь дегазировали пропусканием N2 через перемешиваемый раствор в течение 10 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (7 мг, 0,006 ммоль), и раствор дегазировали в течение 2 мин. Сосуд подвергали микроволновому излучению при 70°С в течение 30 мин или до исчезновения исходного материала. 5-(4-Бромтиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил THIO INT-3 использовали на следующей стадии без очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C14H12BrNOS: 320,9; не обнаруж. М+, tR=4,15 мин.
5-(4-(1-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропокси-бензонитрил
Получали из 5-(4-бромтиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила THIO INT-3 (0,08 ммоль) и трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)окси)силана IND INT-8 (31 мг, 0,08 ммоль), используя общую методику 1, с получением 12 мг (30%, с двух стадий) 5-(4-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонит-рила. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C29H35NO2SSi: 489,2; не обнаруж. М+, tR=6,66 мин (способ 1). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,76 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,70 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,36-7,31 (m, 2Н), 7,29-7,25 (m, 2Н), 7,25-7,19 (m, 1H), 6,96 (d, J=8,9 Гц, 1H), 5,28 (t, J=6,9 Гц, 1H), 4,73-4,50 (m, 1H), 3,09 (ddd, J=15,8, 8,7, 2,9 Гц, 1H), 2,88 (dt, J=16,0, 8,1 Гц, 1H), 2,47-2,30 (m, 1H), 1,96-1,81 (m, 1H), 1,40 (d, J=6,1 Гц, 6Н), 0,94 (s, 9Н), 0,16 (d, J=9,9 Гц, 6Н).
5-(4-(1-Гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение
226)
Получали, используя общую методику 3. К раствору 5-(4-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила (17 мг, 0,03 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли 1 М раствор TBAF в тетрагидрофуране (0,3 мл, 0,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 8 мг (46%) 5-(4-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила 226 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C23H21NO2S: 375,1; обнаруж. 398,1 [M+Na]+. tR=3,84 мин; 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,78 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,72 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7,43-7,36 (m, 2H), 7,35-7,28 (m, 1H), 7,26 (d, J=1,4 Гц, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,06-6,89 (m, 1H), 5,29 (t, J=6,1 Гц, 1H), 4,77-4,49 (m, 1H), 3,20 (ddd, J=16,0, 8,4, 4,7 Гц, 1H), 3,01-2,86 (m, 1H), 2,50 (dddd, J=13,0, 8,1, 6,8, 4,7 Гц, 1H), 2,11-1,88 (m, 1H), 1,58 (s, 1H), 1,41 (d, J=6,1 Гц, 6Н); 13С ЯМР (101 МГц, CDCl3) 5 159,51, 146,35, 142,55, 142,00, 140,88, 133,16, 131,79, 131,24, 128,14, 127,69, 127,56, 124,16, 123,54, 122,06, 116,54, 114,39, 103,84, 76,68, 72,45, 36,28, 30,50, 22,08.
((4-(4-Бромтиофен-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилан (THIO INT-4)
Получали, используя общую методику 1. В сосуд для микроволнового излучения объемом 2 мл загружали 2,4-дибромтиофен (15 мг, 0,06 ммоль), трет-бутилдиметил((4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)окси)силан IND INT-8 (23 мг, 0,06 ммоль), карбонат калия (26 мг, 0,18 ммоль) и 3:1 смесь DME/H2O (2 мл). Реакционную смесь дегазировали пропусканием N2 через перемешиваемый раствор в течение 10 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (5 мг, 0,004 ммоль) и раствор дегазировали в течение 2 мин. Сосуд подвергали микроволновому излучению при 70°С в течение 30 мин
или до исчезновения исходного материала. Полученный ((4-(4-бромтиофен-2-ил)-2,3-дигидро-1Н-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилан THIO INT-4 использовали на следующей стадии без обработки и очистки. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C19H25BrOSSi: 408,1; не обнаруж. М+, tR=6,50 мин (способ 1). 2-Изопропокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрил
Суспензию 5-бром-2-изопропоксибензонитрила (200 мг, 0,83 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-бис-(1,3,2-диоксаборолана) (233,7 мг, 920 ммоль) и ацетата калия (246 мг, 2,5 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (100 мл) дегазировали пропусканием N2 через раствор в течение 30 мин. Добавляли PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (136 мг, 0,16 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 6 ч. Растворитель удаляли в вакууме, остаток растворяли в ЕА (100 мл) и отфильтровывали через целит. Фильтрат промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили MgSO4 и очищали хроматографией (ЕА/гексан) с получением 40 мг (13%) 2-изопропокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрила в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C16H22BNO3: 287,2; обнаруж. 288,2 [М+Н]+, tR=4,07 мин. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,97 (d, J=1,5 Гц, 1H), 7,88 (dd, J=8,5, 1,7 Гц, 1H), 6,91 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,67 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 1,38 (d, 1=6,1Гц, 6Н), 1,30 (s, 12H).
5-(5-(1-((трет-Бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-3-ил)-2-изопропокси-бензонитрил (THIO INT-5)
К сырой реакционной смеси, содержащей ((4-(4-бромтиофен-2-ил)-2,3-дигидро-Ш-инден-1-ил)окси)(трет-бутил)диметилсилан THIO INT-4 (0,12 ммоль) в 3:1 смеси DME/H2O (4 мл), добавляли 2-изопропокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрил (17,9 мг, 0,06 ммоль) и раствор дегазировали в течение 2 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (7 мг, 0,006 ммоль) и реакционную смесь дегазировали в течение 2 мин. Реакционную смесь нагревали при микроволновом излучении при 100°С в течение 30 мин. Реакционную смесь разбавляли ЕА (10 мл), промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили MgSO4. Сырой продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (ЕА/гексан) с получением 12 мг (40%, с двух стадий) 5-(4-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила THIO INT-5. LCMS-ESI (m/z) рассчит. для C29H35NO2SSi: 489,2; не обнаруж. М+, tR=6,66 мин (способ 1).
5-(5-(1-Гидрокси-2,3-дигидро-1H-инден-4-ил)тиофен-3-ил)-2-изопропоксибензонитрил (соединение
227)
Получали, используя общую методику 3. К раствору 5-(4-(1-((трет-бутилдиметилсилил)окси)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиофен-2-ил)-2-изопропоксибензонитрила THIO INT-5 (12 мг, 0,02 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли 1 М раствор TBAF в тетрагидрофуране (0,2 мл, 0,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали и очищали препаративной ВЭЖХ с получением 3 мг (22%) 5-(5-(1-гидрокси-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)тиофен-3-ил)-2-изопропоксибензонитрила 227 в виде белого твердого вещества. LCMS-ESI (m/z) рас-счит. для C23H21NO2S: 375,1; обнаруж. 398,1 [M+Na]+, tR=3,85 мин; 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,77 (dd, J=6,9, 2,2 Гц, 1H), 7,74-7,68 (m, 1H), 7,51 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,45-7,36 (m, 1H), 7,36-7,28 (m, 1H), 7,27-7,22 (m, 2Н), 7,10-6,74 (m, 1H), 5,37-5,15 (m, 1H), 4,67 (dt, J=12,2, 6,1 Гц, 1H), 3,90 (ddd, J=16,2, 8,5, 4,7 Гц, 1H), 3,14-2,98 (m, 1H), 2,66-2,40 (m, 1H), 2,09-1,87 (m, 1H), 1,57 (s, 1H), 1,41 (d, J=6,1 Гц, 6Н).
Выбранные соединения и их соответствующие аналитические данные показаны в табл. 1, где данные LCMS собирали с помощью способа 2 (см. общие способы). Энантиомерную чистоту определяли для ключевых промежуточных соединений и выбранных конечных соединений, и она предполагалась из синтеза для остальных соединений.
8,70
6,43
8,26
-С-^Л-Л?
8,26
9,26
"С-О-Й
6,19
6,09
/ г?
6,42
6.48
6.34
6,30
6,50
J, н о
6,35
6.31
6.44
f #
6.41
6,21
6,10
г "У?
6,81
6,38
Ч-Q^j?
/ р
6,32
8,84
Ч-о-й.
нн-S-
8,80
Ч-п-г?
9,10
9.13
6.52
6,54
6,46
8,37
HN-S-
8,33
8.58
HN-S-' ;
8.55
7,95
jl Го
8,21
Ч-Л-н?!
8,18
8,29
8,26
6,23
7,75
7,81
" о
8,88
8,92
-Lry-tt
7,61
7,65
6,26
6,30
8,39
8,43
8,02
7,98
г"У?
7,75
7,79
7,60
7,55
8,55
8,58
9,25
9,11
9,12
6,20
6,29
8,22
8,22
9,23
9,22
6,47
В й
6,45
6,42
6,44
6,62
6,63
9,99
9,98
6.93
6,92
8.74
8,75
9.77
9.76
6.39
6,34
6,80
6,62
6,47
6,65
6,63
6,54
6,57
108
5,40
109
6,43
& ой-
110
6,51
111
9,24
112
9,25
113
9,54
114
9,56
Я "'ъ
115
9,44
9,55
117
9,72
118
9,70
119
10,32
120
10,33
121
7,15
122
6,99
Y4w
123
6,99
124
6,81
125
6,72
126
6,89
127
7,04
128
6,90
129
6,95
130
7,15
Y"H"
131
6,73
132
6,72
133
6,90
134
6,88
135
6,27
136
6,24
137
6,78
138
6,78
139
7,09
140
7,25
141
6,81
Y%~5
142
6,84
143
6,93
144
6,95
145
6,72
146
6,84
' " Cut
147
7,38
148
7,02
149
6,90
150
6,88
151
6,83
152
6,75
АГг^р
153
6,52
aV^,
154
9,50
155
9,48
156
9,54
157
9,50
158
8,73
159
8,69
160
8,71
¦YV-
161
8,74
if ^YbT
162
8,89
if WCf
163
8,39
164
8,66
165
8,66
166
8,66
167
8,65
168
9,05
169
9,06
170
7,95
171
7,93
172
9,40
Y%>
173
9.41
if Tl v> °"
174
8.01
175
7,99
176
8,02
if чв nO-°h
177
8,02
178
6,53
179
6,54
180
6,42
181
6,45
Y%n
182
6,51
183
6,62
184
6,55
T cv04
185
6,57
186
8,87
187
8,87
204
9,61
205
9,62
206
6,80
ill ^--^он
207
6,47
208
6,93
209
6,53
210
6,57
211
5,76
212
5,82
213
6,96
214
6,62
215
7,45
216
6,78
217
6,65
218
7,45
219
6,67
220
6,65
221
6,58
222
8,16
223
9,88
224
6,88
Лл7°М9
225
6,83
226
9,68
лу6
227
9,68
Биологические анализы. Методики анализа.
Генерирование репортерного анализа SiPi-опосредованного ингибирования цАМФ.
Экспрессионную плазмиду млекопитающих, содержащую S1Pi/EDG1, клонировали в pcDNA3,1 от Missouri S &T cDNA Resource Centre. Нуклеотидная и аминокислотная последовательность человеческого S1P1/EDG1 опубликованы в статье Hla и Maciag (J Biol Chem, 265(1990), с. 9308-9313). S1P1/pcDNA3,l трансфецировали в CRE-bla CHO K1 (Invitrogen) клеточную линию, и стабильные одиночные клеточные клоны отбирали с помощью стандартных методик. Экспрессию функционального рецептора S1P1/EDG1 подтверждали поверхностью клеток FACS с антителами S1P1 (R &D Systems, клон 218713) и S1P-опосредованным ингибированием индуцированного форсколином цАМФ.
S1P1 CRE-bla CHOK1 репортерный анализ - характеристика агонистов SUV
Клетки высевали в 384-луночные планшеты с черными стенками/прозрачным дном с плотностью 104 клеток/лунка/19,5 мкл среды для анализа (DMEM без фенола, 0,5% уголь/сыворотка без декстрана, 2 мМ глутамина, 0,1 мМ NEAA, 1 мМ Na-пирувата, 25 мМ HEPES), и выдерживали в течение 18 ч при 37°С в 5% СО2. Дозозависимые кривые (10 точек) получали в 10 мМ HEPES, 0,1% Pluronic F127 в присутствии форсколина. Клетки обрабатывали 0,5 мкл соединения в присутствии 2 мкМ форсколина в течение 4 ч при температуре 37°С. FRET-основанные р-лактамазные люминесцентные подложки (Live-BLAzer(tm)-FRET B/G Loading Kit СС4-АМ; Invitrogen) получали в соответствии с инструкцией производителя, и инкубировали с клетками в течение 2 ч при комнатной температуре. Планшеты обрабатывали на Ех:410/Em:458 и Ех:410/Em:522, и определяли соотношение отклика. Данные анализировали методом нелинейной регрессии для определения ЕС50 для ингибирования форсколином индуцированной цАМФ.
Специфичность по сравнению с другими рецепторами S1P.
Для оценки специфичности соединения в отношении других рецепторов S1P использовали следующие клеточные линии: S1P2 CRE-bla CHOK1, S1P3-Ga15 NFAT-bla Ж093Т (Invitrogen), S1P4-bla
TANGO U2OS (Invitrogen), S1P5-bla TANGO U2OS (Invitrogen). Тот же тест использовали для S1P1, но без форсколина. Анализы с S1P4 и S1P5 проводили в среде для экспрессии FreeStyle (Invitrogen). Клетки S1P5 инкубировали в течение 48 ч до обработки соединением. Определенная активность S1P1.
Данные по активности для отдельных агонистов S1P1 представлены в табл. 2. Диапазон активности обозначен следующим образом: ++++ означает агонистическую активность <0,05 нМ, +++ означает аго-нистическую активность от 0,05 до 0,50 нМ, ++ означает агонистическую активность между 0,50-5,00 нМ и + обозначает агонистическую активность > 5,00 нМ. N/A означает не доступны.
Таблица 2
Номер соединения
Активность в отношении SIPi
+++
+++
++++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
Номер соединения
Активность в отношении SIPi
115
+++
116
117
+++
118
+++
119
+++
120
121
122
123
124
125
126
127
128
129
130
131
132
133
134
135
136
137
138
+++
+++
+++
+++
+++
+++
++++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
++++
+++
+++
++++
+++
+++
++++
++++
+++
+++
+++
+++
+++
139
140
141
142
143
144
145
146
147
148
149
150
151
152
153
154
+++
155
156
+++
157
+++
158
I I I I
159
+++
160
I I I I
161
+++
162
+++
163
+++
164
+++
165
166
+++
167
+++
16S
+++
169
170
171
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
+++
172
+++
173
174
+++
175
176
177
+++
178
+++
179
180
181
182
183
184
185
186
+++
187
188
189
190
191
192
193
194
195
196
197
198
+++
199
+++
200
+++
201
+++
202
203
204
+++
+++
100
+++
101
102
+++
103
+++
104
105
106
107
108
109
110
111
+++
112
+++
113
+++
114
+++
205
206
+++
207
208
209
210
211
212
213
214
215
216
217
218
219
+++
220
+++
221
+++
222
223
224
225
226
227
Данные S1Pi-S1P5 для конкретных соединений представлены в табл. 3. Значения агонистической активности (ЕС50) приведены в нМ.
Таблица 3
Номер соединения
SIPi
S1P2
S1P3
S1P4
S1P5
0,07
> 10000
> 10000
> 10000
444
0,25
> 10000
> 10000
2171
194
0,03
> 10000
> 10000
> 10000
0,32
> 10000
> 10000
> 10000
139
0,29
> 10000
> 10000
> 10000
166
0,14
8448
> 10000
743
172
0,19
> 10000
> 10000
> 10000
203
186
0,41
> 10000
> 10000
> 10000
126
Анализы In Vivo.
Определение абсолютной пероральной биодоступности у крыс.
Фармакокинетические исследования проводили на неголодных самках крыс Sprague-Dawely (Si-monsen Laboratories или Harlan Laboratories). Крыс помещали в одобренные ALAAC условия, и исследования утверждались одобрением Institutional Animal Care и Use Committee (IACUC). Животные привыкали к лаборатории по крайней мере 48 ч до начала экспериментов.
Соединения растворяли в 5% ДМСО/5% Tween20 и 90% очищенной воды (внутривенное вливание) или 5% ДМСО/5% Tween20 и 90% 0,1 N HCl (пероральный зонд). Концентрацию дозированных растворов подтверждали с помощью ВЭЖХ-УФ. Для внутривенного дозирования соединения вводили инфузи-онным насосом в яремную вену в течение 1 мин вручную удерживаемым животным (n=4 крысы/соединение). Пероральное дозирование осуществляли через зонд с использованием стандартной иглы для зонда из нержавеющей стали (n=2-4 крысы/соединение). Для обоих способов введения кровь собирали в восемь временных точках после приема препарата с окончательной пробой, взятой через 24 ч после введения дозы. Аликвоты образцов крови переносили в полипропиленовые 96-луночные планшеты и замораживали при -20°С до анализа.
После оттаивания образцов крови при комнатной температуре 5 мкл ДМСО добавляли в каждую
лунку. Белки осаждали добавлением 150 мкл ацетонитрила, содержащего 200 нМ внутреннего стандарта (4-гидрокси-3-(альфаиминобензил)-1-метил-6-фенилпиримидин-2-(1Н)-она) и 0,1% муравьиной кислоты. Содержимое планшет перемешивали в течение 1 мин на планшетном шейкере для облегчения осаждения белков и затем центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин с белковым остатком. Супернатант переносили в чистую планшету и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 мин для осаждения оставшегося твердого материала до анализа LC/MS/MS. Стандартные калибровочные кривые получали введением 5 мкл соединения в ДМСО в свежесобранную кровь крысы ЭДТА. Восемь точек стандартной кривой, охватывающей диапазон от 5 до 10000 нМ, включали в каждый биоаналитический пробег. Стандарты обрабатывали идентично для фармакокинетических образцов крыс.
Концентрации в фармакокинетических образцах крыс определяли с помощью стандартизированного способа ВЭЖХ-LC/MS/MS по отношению к 8-точечной стандартной кривой. Система содержала инжектор Leap CTC Pal, ВЭЖХ Agilent 1200 с бинарным насосом в сочетании с Applied Biosystems 3200 QTrap. Соединения хроматографировали на Phenomenex Synergy Fusion RP 20 x 2 мм 2 um Mercury Cartridge с Security Guard. Градиентный способ использовали с подвижной фазой А, состоящей из 0,1% муравьиной кислоты в воде, и подвижной фазы В, состоящей из 0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле, при скорости потока от 0,7 до 0,8 мл/мин. Ионы образовывались в режиме положительной ионизации с использованием интерфейса ионизации электроспреем (ESI). Разработано несколько способов мониторинга реакции (MRM), специфичных для каждого соединения. Нагреватель распылителя устанавливали на 325°С с током распылителя 4,8 мкА. Энергию столкновения использовали для создания дочерних ионов в диапазоне от 29 до 39 В. Соотношения площади пикой получали из MRM массовых переходов, конкретных для каждого соединения, и использовали для количественной оценки. Предел количественного определения способа, как правило, составлял 5 нМ. Данные собирали и анализировали с помощью программного обеспечения Analyst версии 1, 4, 2.
Данные концентрации в крови и/или в плазме в зависимости от времени анализировали с использованием неблочных методов (WinNonlin версии 5,2; модель 200 для перорального приема и модель 202 внутривенной инфузии). Абсолютную пероральную биодоступность (%) рассчитывали по следующей формуле: (пероральный AUC x доза IV)/(AUC IV x пероральная доза) x 100.
Лимфопения.
На мышах: самок мышей C57BL6 (Simonsen Laboratories, Gilroy CA) помещали в одобренные ALAAC условия, и исследования утверждались одобрением Institutional Animal Care и Use Committee (IACUC). Животные привыкали к лаборатории по крайней мере в течение 5 дней до начала эксперимента. Мышам (^3/соединение/временная точка) вводили пероральным зондом 1 мг/кг соединения в носителе, состоящем из 5% ДМСО/5% Tween 20 и 90% 0,1 N HCl. Контрольным мышам вводили РО с носителем. Терминальные образцы цельной крови собирали у мышей с анестезией изофлураном пункцией сердца в EDTA. Цельную кровь инкубировали с антимышиным CD16/CD32 крысы (Mouse BD Fc Block, #553141), антимышиным PE-Rat CD45R/B220 (BD #553089), антимышиным APC-Cy7-Rat CD8a (BD #557654) и антимышиным Alexa Fluor647-Rat CD4 (BD #557681) в течение 30 мин на льду. Красные кровяные клетки подвергали лизису с помощью буфера BD Pharm Lyse Lysing (# 555899), и белые кровяные клетки анализировали с помощью FACS. Лимфопению выражали как % белых кровяных клеток, которые являлись CD4- или CD8-положительными Т-клетками. Общий ответ лимфопении в течение 24 ч оценивали путем расчета площади под кривой действия (AUEC) с помощью метода линейных трапеций.
На крысах: самок крыс (Simonsen Laboratories, Gilroy CA) помещали в одобренные ALAAC условия, и исследования утверждались одобрением Institutional Animal Care и Use Committee (IACUC). Животные привыкали к лаборатории по крайней мере в течение 5 дней до начала эксперимента. Крысам (^3/соединение/временная точка) вводили пероральным зондом 1 мг/кг соединения в носителе, состоящем из 5% ДМСО/5% Tween 20 и 90% 0,1 N HCl. Контрольным крысам вводили РО с носителем. Цельную кровь собирали у крыс с анестезией изофлураном пункцией сердца в EDTA. Цельную кровь инкубировали с антикрысиным CD32 (BD #550271) мыши, антикрысиным CD45R/B220 (BD #554881) РЕ-мыши, антикрысиным CD4 (BD #554839) РЕСу5-мыши и антикрысиным CD8a АРС-мыши (eBioscience #170084) в течение 30 мин на льду. Красные кровяные клетки подвергали лизису с помощью буфера BD Pharm Lyse Lysing (#555899) в течение 30 мин на льду. Красные кровяные клетки подвергали лизису с помощью буфера BD Pharm Lyse Lysing (# 555899) и белые кровяные клетки анализировали с помощью BD FACSArray. Лимфопению выражали как % белых кровяных клеток, которые являлись CD4- или CD8-положительными Т-клетками. Общий ответ лимфопении в течение 24 ч оценивали путем расчета площади под кривой действия (AUEC) с помощью метода линейных трапеций. В некоторых экспериментах общее количество лимфоцитов определяли с помощью стандартного волнового ветеринарного гематологического анализатора (IDEXX Preclinical Research Services, Sacramento, CA).
Данные для лимфопении крыс для конкретных соединений представлены в табл. 4. Записывали процент лимфопении через 24 ч после однократной дозы 0,2 мг/кг. Также записывали предполагаемую дозу, необходимую для 50% лимфопении (ED50) через 24 ч после 3-5 дней дозирования. N/A не доступны.
Оценка терапевтического индекса у крыс.
Исследования могут проводиться на неголодных самцах и самках крыс Sprague-Dawely (Simonsen Laboratories). Крыс можно поместить в одобренные ALAAC условия, и исследования утверждались одобрением Institutional Animal Care и Use Committee (IACUC). Животные должны привыкать к лаборатории, по крайней мере в течение 5 дней до начала эксперимента.
Соединения могут вводиться в виде суспензий в носителе, состоящем из 0,5% карбоксиметилцел-люлозы (Acros Organics) в очищенной воде (рН до ~ 2,2 соляной кислотой). Тот же состав используется в исследованиях с лимфопенией крысы и токсикологии, описанных ниже. Концентрация каждого соединения в суспензии должна составлять в пределах ± 10% от целевой концентрации ВЭЖХ-УФ.
До проведения токсикологических исследований может быть определено действие от трех до пяти суточных доз каждого соединения на периферических Т-клетках самок крыс (см. измерения лимфопении у крыс выше). В этих исследованиях лимфопении образцы крови собирали в ЭДТА с интервалом после дозы последнего исследования. Время сбора не обязательно должно быть одинаковым для каждого исследования, однако, все исследования могут включать образцы, собранные через 24 ч после последней дозы. Данные лимфопении использовали в качестве биомаркеров для выбора одинаково фармакологически активных доз для последующего исследования токсикологии. Низкая доза для исследования токсикологии представляет собой дозу каждого соединения, которая приводит к 50% снижению содержания Т-клеток через 24 ч после последней дозы в исследовании лимфопении относительно крыс, обработанных носителем.
В токсикологических исследованиях трех самцов и трех самок на группу распределяли в группы дозирования, используя рандомизацию на основе веса тела. Контрольная группа в каждом исследовании получала носитель. Всем животным вводили перорально через зонд на 5 или 14 день в объеме дозы 5 мл/кг/сутки. Животных наблюдали ежедневно на любые проявления негативного воздействия. Через 24 ч после последней дозы исследования крыс анестезировали изофлураном, и образец терминальной крови отбирали пункцией сердца для гематологической и биохимической оценки (IDEXX Laboratories, Sacramento, CA). Легкие с трахеей извлекали, взвешивали, и затем готовили на гистологию перфузией с 10% нейтральным буферным раствором формалина через трахею. Внутренне фиксированные легкие затем сохраняли в 10% нейтральном буферном растворе формалина и представляли для гистологического исследования (IDEXX).
Соотношение дозы каждого соединения, приводящей к 10% повышению в легких на терминальный вес тела, может быть рассчитано для каждого соединения с помощью линейной интерполяции. Затем может оцениваться терапевтический индекс как отношение дозы, приводящей к 10% повышению веса легкого, к дозе, приводящей к 50% расщеплению Т-клеток.
Описание модели колита Крона TNBS у крыс.
Самцам крыс Sprague-Dawley (180-200 г) давали привыкнуть в течение семи дней, и затем помещали по 8 крыс на группу так, что каждая группа имеет примерно один и тот же средний вес. За 24 ч до инициирования заболевания крыс лишали пищи. Крыс анестезировали и взвешивали, затем 80 мг/кг раствора TNBS (50% TNBS: 50% 200 чистого этанола) вводили в толстую кишку через питательную иглу 20g, вставленную в анус. Крыс держали вниз головой до восстановления от наркоза. Суточный перо-ральный прием начинали через 2 ч после введения TNBS в течение шести дней. Преднизолон выступал в качестве положительного контроля, и его вводили перорально ежедневно в количестве 10 мг/кг. Вес тела контролировали ежедневно, и через 24 ч после введения последней дозы все группы умерщвляли. Толстую кишку удаляли, очищали от фекалий и исследовали на заметные изменения, в том числе стриктуры, спайки и язвы. Записывали длину толстой кишки, вес отрезка 2 см и толщину стенки.
Описание модели гриппа H1N1 у мышей.
Самцам С57В1/6 (6-8 недель) можно дать привыкнуть в течение семи дней и затем помещать в группы по 5-8 мышей так, чтобы каждая группа имела примерно один и тот же средний вес. Мыши могут быть инфицированы 104 PFU вируса гриппа А, адаптированного для мышей (A/WSN/33) внутритрахе-альным способом. Мыши затем могут быть обработаны 0,2-1,5 мг/кг соединения перорально через 1 ч после инфицирования. Через 48 ч после инфицирования мыши могут быть умерщвлены переломом шеи и может быть собрана жидкость бронхоальвеолярного лаважа. Количественный анализ цитокинов может осуществляться с помощью иммуноферментного анализа ELISA. В некоторых экспериментах может осуществляться перфузия всего тела, и легкие могут собираться для клеточного подсчета воспалительных клеток. Исследования на долговечность могут осуществляться с помощью заражения 3-10x104 PFU вирусом гриппа А, адаптированным для мышей, в течение 14 дней.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение формулы (I)
где пунктирная линия обозначает, что может присутствовать простая связь или двойная связь при условии, что присутствуют две двойные связи и три простые связи в кольце, содержащем А1, А2 и А3;
А1, А2 и А3, каждый независимо, представляют собой С или S или N при условии, что один из А1, А2 и А3 представляет собой S;
R1 представляет собой дизамещенный фенил, где фенильные заместители, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из галогена, нитрогруппы, цианогруппы, перфторметила, фторированного метила и C1-4алкоксигруппы; при условии, что фенил замещен в пара-положении C1-4алкоксигруппой;
представляет собой
где волнистая линия обозначает точку присоединения; X представляет собой -NR'R" или -OR'";
R' представляет собой Н, C1-4^KUI, н-гидрокси C1-4^CCM, -SO2-R3 или -CO-R3;
R" представляет собой Н, -SO2-R5, C1 -4алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R4, или кольцевую группу, необязательно замещенную R6, где такая кольцевая группа представляет собой пипе-ридинил, циклогексил, морфолинил, тиазолил, пиразолил, пирролидинил, имидазолил или фенил;
R'" представляет собой Н, C1-4^KUI или -CO-R3;
или R' и R" вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл необязательно один или несколько раз замещен заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из -ОН, оксогруппы, -NH2, ^0^^-^^(tm)^ -СООН, -(CH2)m-COOH, -(CH2)m-COOR3, -N(R3R3) и -(CH2)m-CO-N(R7R7);
каждый R3 независимо представляет собой C1-4^Kmi или Н;
каждый R4 независимо представляет собой Н, галоген, ОН, оксогруппу, =NH, NH2, -СООН, F, -NHR3, -N(R7R7), -SO2-R3, -SO2-N(R7R7), -N(R3)-SO2-R3, -COOR3, -OCO-R3, -CO-N(R7R7), -N(R3)-COR3, C1-3алкил, C1-3алкоксигруппу и кольцевую группу, необязательно замещенную R6, где такая кольцевая группа представляет собой пиперазинил, пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, пиразолил, имида-золил, бензимидазолил, азетидинил, циклобутинил или фенил;
каждый R5 независимо представляет собой R4, C1-4алкил, C3-6циклоалкил или C1-4алкил, необязательно замещенный 1 или несколькими R4;
каждый R6 независимо представляет собой галоген, ОН, -NH2, -NHR3, -N(R3R3), -СООН, -COOR3,
-NHCO-R3;
каждый R7 независимо представляет собой C1-4^CCM или Н или два R7 вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют 4-, 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, содержащее 0 или 1 дополнительный гетероатом, где такой дополнительный гетероатом представляет собой О или N, где такой гетероцикл необязательно замещен -ОН, -NH2, -N(R3R3), н-гидрокси C1-4алкилом,
-(CH2)mCOOH, -(CH2)m-COOR3;
каждый m независимо обозначает 0, 1, 2 или 3.
2. Соединение по п.1, где структура соединения формулы (I) выбрана из группы, состоящей из формул a-i-a-x
a-ix a-x
3. Соединение по пп. 1, 2, где R1 представляет собой
представляет собой С2-4алкил и Y представляет собой -CN, -Cl, I, -O-R3, -СООН, -COOR3 или -CF3. 4. Соединение по nn. 1-3, где R2 представляет собой
5. Соединение по п.4, где соединение, по существу, является энантиомерно чистым.
6. Соединение по пп.1-5, где X представляет собой -NR'R".
7. Соединение по п.1, где соединение выбрано из соединений 1-227
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
025672
025672
- 1 -
- 1 -
025672
025672
- 1 -
- 1 -
025672
025672
- 1 -
- 1 -
025672
025672
- 1 -
- 1 -
025672
025672
- 1 -
- 1 -
025672
025672
- 1 -
- 1 -
025672
025672
- 1 -
- 1 -
025672
025672
- 1 -
- 1 -
025672
025672
- 2 -
- 3 -
025672
025672
- 4 -
025672
025672
- 5 -
025672
025672
- 8 -
- 8 -
025672
025672
- 15 -
- 15 -
025672
025672
- 28 -
- 28 -
025672
025672
- 28 -
- 28 -
025672
025672
- 28 -
- 28 -
025672
025672
- 42 -
025672
025672
- 45 -
- 45 -
025672
025672
- 48 -
025672
025672
- 51 -
025672
025672
- 54 -
- 54 -
222)
025672
222)
025672
- 56 -
- 56 -
223)
025672
223)
025672
- 57 -
- 57 -
025672
025672
- 58 -
025672
025672
- 60 -
025672
025672
- 61 -
- 61 -
025672
025672
- 87 -
- 87 -
025672
025672
- 88 -
- 88 -
025672
025672
- 89 -
025672
025672
- 91 -
025672
025672
- 92 -
- 92 -
025672
025672
- 96 -
- 96 -