[RU]

1. Соединение формулы (I) где R ¹ выбран из (С ₁ -С ₄ )алкила, (С ₃ -С ₄ )циклоалкила, NH ₂ и группы NH(С ₁ -С ₄ )алкил и R ² представляет собой Н или R ¹ и R ² вместе представляют собой -СН ₂ -СН ₂ - или -N(СН ₃ )-СН ₂ -; R ³ выбран из Н, F, CHF ₂ , OCH ₃ и CN; R ⁴ выбран из Н, F, Cl, ОН, ОСН ₃ и CN; R ⁵ выбран из (С ₂ -С ₄ )алкила, (С ₃ -С ₅ )циклоалкила и замещенного метилом (С ₃ -С ₅ )циклоалкила, или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой (С ₂ -С ₄ )алкил и R ² представляет собой Н, или его фармацевтически приемлемая соль.

3. Соединение по п.1 или 2, где R ³ выбран из F и ОСН ₃ , или его фармацевтически приемлемая соль.

4. Соединение по любому из пп. 1-3, где R ⁴ выбран из Н и F, или его фармацевтически приемлемая соль.

5. Соединение по любому из пп.1-4, где R ⁵ представляет собой (С ₂ -С ₄ )алкил, или его фармацевтически приемлемая соль.

6. Соединение по п.1, выбранное из 7-этил-4-(6-фтор-4'-((1-метилэтил)сульфонил)бифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина; 7-этил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метоксибифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина; 7-циклопропил-4-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина и 4-[4'-(этилсульфонил)-2',6-дифторбифенил-3-ил]-7-(пропан-2-ил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина.

7. Соединение по п.1, которое представляет собой 7-этил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метоксибифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.

8. Применение соединения по любому из пп.1-7 в качестве лекарственного средства для лечения боли.

9. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью положительных аллостерических модуляторов GABA(гамма-аминомасляная кислота) _A рецепторов, содержащих либо α2, либо α3 субъединицу, содержащая соединение по любому из пп.1-7 и фармацевтически приемлемый эксципиент.

10. Способ лечения боли, включающий введение нуждающемуся в таком лечении субъекту эффективного количества соединения по любому из пп.1-7.

11. Применение соединения по любому из пп.1-7 для изготовления лекарственного средства для лечения боли.

12. Применение соединения по любому из пп.1-7 для лечения боли.

(57) Реферат / Формула:

1. Соединение формулы (I) где R ¹ выбран из (С ₁ -С ₄ )алкила, (С ₃ -С ₄ )циклоалкила, NH ₂ и группы NH(С ₁ -С ₄ )алкил и R ² представляет собой Н или R ¹ и R ² вместе представляют собой -СН ₂ -СН ₂ - или -N(СН ₃ )-СН ₂ -; R ³ выбран из Н, F, CHF ₂ , OCH ₃ и CN; R ⁴ выбран из Н, F, Cl, ОН, ОСН ₃ и CN; R ⁵ выбран из (С ₂ -С ₄ )алкила, (С ₃ -С ₅ )циклоалкила и замещенного метилом (С ₃ -С ₅ )циклоалкила, или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, где R ¹ представляет собой (С ₂ -С ₄ )алкил и R ² представляет собой Н, или его фармацевтически приемлемая соль.

3. Соединение по п.1 или 2, где R ³ выбран из F и ОСН ₃ , или его фармацевтически приемлемая соль.

4. Соединение по любому из пп. 1-3, где R ⁴ выбран из Н и F, или его фармацевтически приемлемая соль.

5. Соединение по любому из пп.1-4, где R ⁵ представляет собой (С ₂ -С ₄ )алкил, или его фармацевтически приемлемая соль.

6. Соединение по п.1, выбранное из 7-этил-4-(6-фтор-4'-((1-метилэтил)сульфонил)бифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина; 7-этил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метоксибифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина; 7-циклопропил-4-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина и 4-[4'-(этилсульфонил)-2',6-дифторбифенил-3-ил]-7-(пропан-2-ил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина.

7. Соединение по п.1, которое представляет собой 7-этил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метоксибифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.

8. Применение соединения по любому из пп.1-7 в качестве лекарственного средства для лечения боли.

9. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью положительных аллостерических модуляторов GABA(гамма-аминомасляная кислота) _A рецепторов, содержащих либо α2, либо α3 субъединицу, содержащая соединение по любому из пп.1-7 и фармацевтически приемлемый эксципиент.

10. Способ лечения боли, включающий введение нуждающемуся в таком лечении субъекту эффективного количества соединения по любому из пп.1-7.

11. Применение соединения по любому из пп.1-7 для изготовления лекарственного средства для лечения боли.

12. Применение соединения по любому из пп.1-7 для лечения боли.

---

(19)
Евразийское
патентное
ведомство
025635
(13) B1
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.01.30
(21) Номер заявки 201590761
(22) Дата подачи заявки 2013.12.04
(51) Int. Cl. C07D 487/04 (2006.01)
(54)
ПРОИЗВОДНЫЕ ИМИДАЗОПИРИДАЗИНА В КАЧЕСТВЕ МОДУЛЯТОРОВ GABAА РЕЦЕПТОРОВ
(31) 61/737,157
(32) 2012.12.14
(33) US
(43) 2015.12.30
(86) PCT/IB2013/060631
(87) WO 2014/091368 2014.06.19
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
ПФАЙЗЕР ЛИМИТЕД (GB)
(72) Изобретатель:
Омото Кийоюки, Оуэн Роберт МакКензи, Прайд Дэвид Кэмерон, Ватсон Кристин Энн Луиз, Такеучи Мифунэ (GB)
(74) Представитель:
Поликарпов А.В. (RU)
(56) WO-A2-2012004714 WO-A1-2005080355
(57) Изобретение относится к производным имидазопиридазина. Более конкретно оно относится к производным 4-(бифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина формулы (I) и их фармацевтически приемлемым солям, где R1, R2, R3, R4 и R5 являются такими, как раскрыто в описании изобретения. Производные имидазопиридазина по настоящему изобретению модулируют активность рецептора GABAA, они полезны в лечении ряда состояний, включая боль.
Область изобретения
Изобретение относится к производным имидазопиридазина. Более конкретнооно относится к производным 4-(бифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина. Производные имидазопиридазина по настоящему изобретению модулируют активность рецептора GABAA. Они полезны в лечении ряда состояний, включая боль.
Предпосылки изобретения
Гамма-аминомасляная кислота (GABA) была идентифицрована как главный ингибиторный ней-ротрансмиттер, и агенты, которые модулируют GABA-ергическую нейротрансмиссию, широко используются в лечении таких состояний, как эпилепсия, тревога и депрессия. Были описаны два семейства GABA рецепторов, называемые GABAA и GABAB.
Рецептор GABAA является членом суперсемейства управляемых лигандом ионных каналов. Функциональный рецептор обычно содержит ряд субъединиц. Были охарактеризованы по меньшей мере 16 таких субъединиц, включая 6 альфа субъединиц (а1-6), 3 бета субъединицы (Р1-3), 3 гамма субъединицы (у1-3) и дельта, эпсилон, пи и тета субъединицы (5, е, п, 8). Большинство рецепторов GABAA состоят из 2 альфа, 2 бета и одной гамма субъединцы. Было описано несколько сайтов связывания лекарственных средств. Они включают сайт связывания для эндогенного лиганда (GABA) и аллостерические сайты связывания. Лекарственные средства, которые связываются по аллостерическим сайтам связывания, могут представлять собой положительные аллостерические модуляторы, которые увеличивают выраженность ответа, отрицательные аллостерические модуляторы, которые снижают выраженность ответа рецептора, или нейтральными, где этот термин относится к соединениям, которые связываются с аллостерическими сайтами связывания без модулирования активности рецептора. Недавние свидетельства позволили предположить, что GABAA рецепторы, содержащие либо а2, либо а3 субъединицу (именуемые в данном описании как GABAA а2/3 рецепторы) могут быть вовлечены в определенные болевые состояния, и что положительные аллостерические модуляторы этих рецепторов могут являться полезными анальгетиками (Mirza, N.R. and Munro, G., Drug News and Perspectives, 2010, 23(6), 351-360).
О производных 4-(бифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина не сообщалось как о взаимодействующих с GABAA а2/3 рецепторами. В международных заявках на патент PCT/G B01/04948 (опубликована как WO 2002/038568) и PCT/GB 02/03114 (опубликована как WO 2003/008418) описаны производные 7-фенилимидазо[1,2-Ъ][1,2,4]триазина, которые обладают аффинностью в отношении а2, а3 и/или а5 субъединиц. В международной заявке на патент PCT/US 99/14935 (опубликована как WO 2000/001697) описаны среди прочего производные 4-фенил-7И-имидазо[4,5-с]пиридазина, которые являются антагонистами кортикотропин-высвобождающего фактора.
Существует постоянная заинтересованность в обнаружении новых соединений, которые взаимодействуют с GABAA рецепторами, и особенно соединений, которые имеют сниженную способность к вызыванию побочных эффектов, таких как сонливость, которые ассоциированы с доступными в настоящее время модуляторами GABAA, такими как бензодиазепины. Полагают, что эти побочные эффекты являются результатом модулирования а1 субъединица-содержащих рецепторов, и поэтому предпочтительные соединения будут иметь высокую аффинность в отношении а2/3 субъединица-содержащих рецепторов с хорошей эффективностью в качестве положительных аллостерических модуляторов, и при этом имеющих низкую эффективность в отношении рецепторов с другими а субъединицами, особенно а1 субъеди-ница-содержащих рецепторов.
Эти лекарственные средства - кандидаты должны дополнительно обладать одним или более из следующих свойств: быть хорошо абсорбируемыми из желудочно-кишечного тракта; быть метаболически стабильными; иметь хороший метаболический профиль, в частности, в отношении токсичности или ал-лергичности любых образующихся метаболитов; или проявлять благоприятные фармакокинетические свойства, но при этом все еще сохраняя их профиль активности. Они должны быть нетоксичными и демонстрировать моло побочных эффектов. Идеальные лекарственные срества - кандидаты должны существовать в такой физической форме, которая является стабильной, негигроскопичной и легко обрабаты-вемой.
Краткое изложение сущности изобретения
или его фармацевтически приемлемая соль, где
R1 выбран из (С1-С4)алкила, (С3-С4)циклоалкила, NH2 и группы №г[(С1-С4)алкил, и R2 представляет собой Н; или
R1 и R2 вместе представляют собой -СН2-СН2- или -N(CH3)-CH2-; R3 выбран из Н, F, CHF2, OCH3 и CN;
В первом аспекте настоящего изобретения предложено соединение формулы (I)
R4 выбран из Н, F, Cl, ОН, ОСН3 и CN; и
R5 выбран из (С2-С4)алкила, (С3-С5)циклоалкила и замещенного метилом (С3-С5)циклоалкила.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли именуются в настоящем описании как "соединения по изобретению". Вышеприведенное определение упоминается в данном описании как воплощение Е1 данного аспекта. Другие воплощения этого аспекта изобретения подробно раскрыты ниже.
В другом аспекте изобретения предложены соединение формулы (I), как оно описано выше или в любом из предпочтительных воплощений, или его фармацевтически приемлемая соль для применения в качестве лекарственного средства. В одном воплощении согласно этому аспекту соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль предназначены для применения в лечении боли.
В другом аспекте изобретения предложены фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I), как оно описано выше или в любом из предпочтительных воплощений, или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый эксципиент.
В другом аспекте изобретения предложен способ лечения боли, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I), как оно описано выше или в любом из предпочтительных воплощений, или его фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в таком лечении индивидууму.
В другом аспекте изобретения предложено применение соединения формулы (I), как оно описано выше или в любом из предпочтительных воплощений, или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения боли.
В другом аспекте изобретения предложено применение соединения формулы (I), как оно описано выше или в любом из предпочтительных воплощений, или его фармацевтически приемлемой соли для лечения боли.
В другом аспекте изобретения предложена комбинация, содержащая соединение формулы (I), как оно описано выше или в любом из предпочтительных воплощений, или его фармацевтически приемлемую соль и второй фармацевтически активный агент.
Подробное описание изобретения
Алкильные группы, содержащие требуемое количество атомов углерода, могут быть неразветвлен-ными или разветвленными. (С1-С4)алкил включает метил, этил, н-пропил (1-пропил) и изопропил (2-про-пил, 1-метилэтил), н-бутил (1-бутил), втор-бутил (2-бутил, 1-метилпропил), изобутил (2-метилпропил) и трет-бутил (1,1-диметилэтил).
(С3-С5)циклоалкил включает циклопропил, циклобутил и циклопентил. Замещенный метилом (С3-С5)циклоалкил включает 1-метилциклопропил, 2-метилциклопропил, 1-метилциклобутил, 2-метилцикло-бутил, 3-метилциклобутил, 1-метилциклопентил, 2-метилциклопентил и 3-метилциклопентил.
В соединениях формулы (I), где R1 и R2 вместе представляют собой -N(СН3)-СН2-, следует понимать, что атом азота соответствует "R1", а атом углерода метилена соответствует "R2", таким образом давая в результате соединение формулы (1А)
Дополнительными конкретными воплощениями соединений по изобретению являются следующие.
В воплощении Е2 предложено соединение согласно воплощению Е1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 представляет собой (С2-С4)алкил, и R2 представляет собой Н.
В воплощении Е3 предложено соединение согласно воплощению Е1 или Е2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 выбран из F и ОСН3.
В воплощении Е4 предложено соединение согласно любому из воплощений Е1, Е2 или Е3 или его фармацевтически приемлемая соль, где R4 выбран из Н и F.
В воплощении Е5 предложено соединение согласно любому из воплощений Е1, Е2, Е3 или Е4 или его фармацевтически приемлемая соль, где R5 представляет собой (С2-С4)алкил.
Предпочтительные соединения по изобретению включают следующие:
7-этил-4-(6-фтор-4'-((1-метилэтил)сульфонил)бифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин;
4-(4'-этансульфонил-6-фтор-2'-метоксибифенил-3-ил)-7-этил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин;
7-циклопропил-4-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин и
4-(4'-этансульфонил-2',6-дифторбифенил-3-ил)-7-(1-метилэтил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Особенно предпочтительным соединением по изобретению является 4-(4'-этансульфонил-6-фтор-2'-метоксибифенил-3-ил)-7-этил-7Н-имидазо[4,5-с]-пиридазин.
Ряд соединений формулы (I) включают один или более стереогенных центров и поэтому могут существовать как оптические изомеры, такие как энантиомеры и диастереомеры. Все такие изомеры и их смеси входят в объем настоящего изобретения.
Далее в данном описании все ссылки на соединения по изобретению включают соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли, сольваты или многокомпонентные комплексы, или фармацевтически приемлемые сольваты или многокомпонентные комплексы фармацевтически приемлемых солей соединений формулы (I), как обсуждается более подробно далее.
Предпочтительными соединениями по изобретению являются соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли.
Подходящие соли присоединения кислоты образованы с кислотами, которые образуют нетоксичные соли. Примеры включают соли ацетат, адипат, аспартат, бензоат, безилат, бикарбонат/карбонат, бисульфат/сульфат, борат, камзилат, цитрат, цикламат, эдисилат, эзилат, формиат, фумарат, глуцептат, глюко-нат, глюкуронат, гексафторфосфат, гибензат, гидрохлорид/хлорид, гидробромид/бромид, гидройодид/ йодид, изетионат, лактат, малат, малеат, малонат, мезилат, метилсульфат, нафтилат, 2-напсилат, никоти-нат, нитрат, оротат, оксалат, пальмитат, памоат, фосфат/гидрофосфат/дигидрофосфат, пироглутамат, са-харат, стеарат, сукцинат, таннат, тартрат, тозилат, трифторацетат и ксинофоат.
Также могут быть образованы гемисоли с кислотами и основаниями, например, соли гемисульфат.
Специалисту понятно, что вышеупомянутые соли включают соли, в которых противоион является оптически активным, например d-лактат или 1-лизин, или рацемическим, например dl-тартрат или dl-аргинин.
Обзор по подходящим солям смотри в "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002).
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) могут быть получены одним или более из трех способов:
(1) посредством взаимодействия соединения формулы (I) с желаемой кислотой или основанием;
(2) посредством удаления чувствительной к действию кислоты или основания защитной группы из подходящего предшественника соединения формулы (I), используя желаемую кислоту или основание; или
(3) посредством превращения одной соли соединения формулы (I) в другую посредством взаимодействия с соответствующими кислотой или основанием или с помощью подходящей ионообменной колонки.
Все три реакции обычно проводят в растворе. Полученная соль может быть осаждена и собрана фильтрованием или может быть выделена посредством выпаривания растворителя. Степень ионизации в полученной соли может варьировать от полностью ионизированной до почти неионизированной.
Соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли могут существовать как в не-сольватированной форме, так и в сольватированной формах. Термин "сольват" использован здесь для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и одну или более молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например этанола. Термин "гидрат" используется, когда указанным растворителем является вода. Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с изобретением включают сольваты, где растворитель кристаллизации может быть замещен изотопом, например D2O, с^-ацетон и d6-DMSO.
Признанной в настоящее время системой классификации органических гидратов является система, которая определяет гидраты изолированных сайтов, канальные гидраты или гидраты, координированные с ионом металла (смотри Polymorphism in Pharmaceutical Solids by K. R. Morris (Ed. H. G. Brittain, Marcel Dekker, 1995), включено посредством ссылки. Гидратами изолированных сайтов являются гидраты, в которых молекулы воды изолированы от прямого контакта друг с другом находящимися между ними органическими молекулами. В канальных гидратах молекулы воды расположены в каналах решетки, где они соседствуют с другими молекулами воды. В гидратах, координированных с ионами металла, молекулы воды связаны с ионом металла.
Если растворитель или вода связан(а) прочно, то комплекс будет иметь четко определенную стехиометрию независимо от влажности. Однако если растворитель или вода связан(а) слабо, как в канальных сольватах и гигроскопичных соединениях, то содержание воды/растворителя будет зависеть от влажности и условий сушки. В таких случаях нормой будет отсутствие стехиометрии.
Соединения по изобретению могут существовать в континууме твердых состояний в диапазоне от полностью аморфного состояния до полностью кристаллического состояния. Термин "аморфный" относится к состоянию, в котором у вещества отсутствует дальний порядок на молекулярном уровне и, в зависимости от температуры, вещество может проявлять физические свойства твердого вещества или жидкости. Обычно такие вещества не дают характерных картин дифракции рентгеновских лучей и, хотя они и проявляют свойства твердого вещества, их более формально описывают как жидкость. При нагревании происходит изменение свойств от свойств твердого вещества до свойств жидкости, которое характеризуется изменением состояния, обычно второго порядка ("стеклование"). Термин "кристаллический" относится к твердой фазе, в которой вещество имеет регулярную упорядоченную внутреннюю структуру на молекулярном уровне и дает картину дифракции рентгеновских лучей с характерными пиками. Такие вещества при достаточном нагревании также будут проявлять свойства жидкости, но переход от твердого состояния в жидкое состояние характеризуется фазовым превращением, обычно первого порядка
("точка плавления").
В объем изобретения также входят многокомпонентные комплексы (иные, чем соли и сольваты) соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей, в которых лекарственное средство и по меньшей мере один другой компонент присутствуют в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Комплексы этого типа включают клатраты (комплексы включения лекарственное средство-хозяин) и сокристаллы. Последние обычно определяют как кристаллические комплексы нейтральных молекулярных составляющих, которые связаны вместе посредством нековалентных взаимодействий, но которые также могут представлять собой комплекс нейтральной молекулы с солью. Сокристаллы могут быть получены в результате кристаллизации из расплава, перекристаллизации из растворителей или совместного физического измельчения компонентов, смотри Chem. Commun, 17, 1889-1896, by О. Almars-son and M. J. Zaworotko (2004), включено посредством ссылки. Общую информацию по таким многокомпонентным комплексам смотри в J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288, by Haleblian (August 1975), включено посредством ссылки.
Соединения по изобретению также могут существовать в мезоморфном состоянии (мезофаза или жидкий кристалл) под воздействием соответствующих условий. Мезоморфное состояние является промежуточным состоянием между истинным кристаллическим состоянием и истинным жидким состоянием (либо расплав, либо раствор). Мезоморфизм, возникающий в результате изменения температуры, описывают как "термотропный", а мезоморфизм, являющийся результатом добавления второго компонента, такого как вода или другой растворитель, описывают как "лиотропный". Соединения, способные образовывать лиотропные мезофазы, описывают как "амфифильные", и они состоят из молекул, которые обладают ионной (например -COO-Na+, -COOK+ или -SO3-Na+) или неионной (например -N-N+(Qr[3)3) полярной концевой группой. Дополнительную информацию смотри в Crystals and the Polarizing Microscope by N.H. Hartshorne and A. Stuart, 4th Edition (Edward Arnold, 1970), включено посредством ссылки.
Соединения по изобретению могут быть введены в виде пролекарств. Таким образом, некоторые производные соединений формулы (I), которые сами по себе могут иметь небольшую фармакологическую активность или не иметь ее, можно превращать в соединения формулы (I), имеющие желаемую активность, например гидролитическим расщеплением, при введении в или на организм. Такие производные упоминаются как "пролекарства". Дополнительную информацию о применении пролекарств можно найти в "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", Vol. 14, ACS Symposium Series (T. Higuchi и W. Stella) и "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987 (Ed. E. B. Roche, American Pharmaceutical Association).
Пролекарства можно, например, получать заменой подходящих функциональных групп, присутствующих в соединениях формулы (I), определенными группировками, известными специалистам как "про-группировки", как описано, например, в "Design of Prodrugs" by H. Bundgaard (Elsevier, 1985).
Примеры пролекарств включают фосфатные пролекарства, такие как пролекарства в виде дигидро-или диалкил- (например ди-трет-бутил)фосфатов. Другие примеры групп замещения в соответствии с вышеуказанными примерами и примеры других типов пролекарств могут быть найдены в вышеуказанных ссылках.
Также в объем изобретения включены метаболиты соединений формулы I, то есть соединения, образующиеся in vivo при введении лекарственного средства. Некоторые примеры метаболитов в соответствии с изобретением включают, в случае, когда соединение формулы (I) содержит фенильную (Ph) группировку, его фенольное производное (-Ph > -PhOH).
Соединения по изобретению, содержащие один или более асимметричных атомов углерода, могут существовать в виде двух или более стереоизомеров. В объем защиты согласно изобретению включены все стереоизомеры соединений по изобретению и смеси идного или более из них.
Общепринятые методики получения/выделения индивидуальных энантиомеров включают хираль-ный синтез из подходящего оптически чистого предшественника или разделение рацемата (или рацемата соли или другого производного) с использованием, например, хиральной жидкостной хроматографии высокого давления (ЖХВД).
Альтернативно, рацемат (или рацемический предшественник) можно подвергнуть взаимодействию с подходящим оптически активным соединением, например со спиртом, или в случае, когда соединение формулы (I) содержит кислотную или основную группировку, с кислотой или основанием, такими как 1-фенилэтиламин или винная кислота. Полученную диастереомерную смесь можно разделить хроматографией и/или фракционной кристаллизацией, а один или оба диастереоизомера превратить в соответст-вующий(е) чистый(е) энантиомер(ы) способами, хорошо известными специалисту в области техники.
Хиральные соединения по изобретению (и их хиральные предшественники) могут быть получены в энантиомерно обогащенной форме с использованием хроматографии, обычно ВЭЖХ, на смоле с асимметричной неподвижной фазой и с подвижной фазой, состоящей из углеводорода, обычно гептана или гексана, содержащего от 0 до 50% по объему изопропанола, обычно от 2 до 20% и от 0 до 5% по объему алкиламина, обычно 0,1% диэтиламина. Концентрирование элюата приводит к обогащенной смеси.
Смеси стереоизомеров можно разделить с помощью общепринятых методик, известных специалистам в области техники; смотри, например, "Stereochemistry of Organic Compounds", by E. L. Eliel and S.H.
Wilen (Wiley, New York, 1994).
Объем защиты согласно изобретению включает все кристаллические формы соединений по изобретению, включая рацематы и их рацемические смеси (конгломераты). Стереоизомерные конгломераты также могут быть разделены обычными методиками, раскрытыми в данном описании ранее.
Объем защиты согласно настоящему изобретению включает все фармацевтически приемлемые меченные изотопом соединения по изобретению, в которых один или более атомов заменены атомами, имеющими такое же атомное число, но с атомной массой или массовым числом, отличными от атомной массы или массового числа, обычно встречающимися в природе.
Примеры изотопов, подходящих для включения в соединения по изобретению, включают изотопы
водорода, такие как 2Н и 3Н, углерода, такие как 11С, 13С и 14С, хлора, такие как 36Cl, фтора, такие как 18F,
йода, такие как 123I и 125I, азота, такие как 13N и 15N, кислорода, такие как и 18О, фосфора, такие
как 32Р, и серы, такие как 35S.
Некоторые меченные изотопом соединения по изобретению, например такие, в которые включен радиоактивный изотоп, полезны в анализах распределения лекарственного средства и/или субстрата в ткани. Радиоактивные изотопы тритий, то есть 3Н, и углерод-14, то есть 14С, особенно полезны для этой цели вследствие легкости их включения и быстрых способов обнаружения. Замещение такими изотопами, как дейтерии, то есть 2Н, может давать некоторые терапевтические преимущества, вытекающие из повышенной метаболической стабильности, например увеличенный период полувыведения in vivo или потребность в сниженной дозировке, и, следовательно, в некоторых обстоятельствах может быть пред-
11 18 15 13
почтительным. Замещение позитрон-излучающими изотопами, такими как С, F, О и N, может быть полезно в исследованиях посредством позитронной эмиссионной томографии (PET) для изучения "оккупации" рецепторов субстратом.
Меченные изотопом соединения формулы (I) обычно могут быть получены по общепринятым методикам, известным специалистам в области техники, или способами, аналогичными способам, описанным в сопроводительных примерах и подготовительных примерах, с использованием подходящих меченных изотопом реагентов вместо ранее используемого реагента, не меченного изотопом.
Также в объем защиты по изобретению входят промежуточные соединения, как они определены в данном описании выше, все их соли, сольваты и комплексы и все сольваты и комплексы их солей, как они определены в данном описании выше для соединений формулы (I). Изобретение включает все полиморфы вышеупомянутых разновидностей и их кристаллические формы.
Соединения по изобретению могут быть получены любым способом, известным в данной области для получения соединений с аналогичной структурой. В частности, соединения по изобретению могут быть получены посредством процедур, раскрытых со ссылкой на следующие далее схемы, или посредством конкретных способоа, раскрытых в примерах, или способами, аналогичными любому из вышеперечисленного.
Для специалиста в данной области понятно, что экспериментальные условия, приведенные на следующих далее схемах, являются иллюстрацией подходящих условий для осуществления показанных трансформаций, и что может быть необходимо или желательно варьировать точные условия, использованные для получения соединений формулы (I). Также будет очевидно, что может быть необходимо или желательно осуществлять трансформации в порядке, отличном от того, который представлен на схемах, или модифицировать одну или более трансформаций для получения целевого соединения по изобретению.
Кроме того, для специалиста понятно, что может оказаться необходимым или желательным на любой стадии синтеза соединений по изобретению защитить одну или более чувствительных групп с тем, чтобы предотвратить нежелательные побочные реакции. В частности, может быть необходимо или желательно защитить аминогруппу или группу карбоновой кислоты. Защитные группы, используемые в получении соединений по изобретению, могут быть использованы традиционным образом, смотри, например, защитные группы, описанные в 'Greene's Protective Groups in Organic Synthesis' by Theodora W Greene and Peter G M Wuts, третье издание, (John Wiley and Sons, 1999), в частности части 7 ("Protection for Amino Group") и 5 ("Protection for Carboxyl Group"), включенной в данное описание посредством ссылки, где также раскрыты способы удаления таких групп.
Там, где приведены соотношения растворителей, они представляют собой объемные соотношения.
На следующих далее схемах, X представляет собой Cl, Br или I, и М представляет собой бороновый сложный эфир или бороновую кислоту.
Согласно первому способу, соединения формулы (I) могут быть получены способом, проиллюстрированным на схеме 1.
Соединения формулы (I) могут быть получены из соединений формулы (II) или (IV) согласно стадии (i) способа, реакции перекрестного сочетания Сузуки (Suzuki) с соединениями формулы (V) или (VI). Типичные условия для катализируемой металлом реакции перекрестного сочетания включают палладие-вый катализатор, такой как дихлор[1,1-бис(ди-трет-бутилфосфино)]ферроценпалладий(И), или тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0), или трис(дибензилиденацетон)палладий(0), с подходящим лигандом, таким как трициклогексилфосфин, с основанием, таким как карбонат натрия, калия или цезия, в смеси диоксан/вода или DMF/вода, либо термическое нагревание до начала флегмообразования, либо нагревание вплоть до 120°С под действием микроволнового излучения. Предпочтительные условия включают тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) с карбонатом натрия в смеси диоксан/вода при 110°С. В ходе этой стадии, если соединения формулы (V) и (VI) нуждаются в превращении в бороновую кислоту или сложный эфир, может быть использована дополнительная стадия для превращения X в М. Типичные условия включают дихлор[1,1-бис(ди-трет-бутилфосфино)]-ферроценпалладий(И) с ацетатом калия в диок-сане при 110°С.
Соединения формулы (VI) либо имеются в продаже, либо хорошо известны специалистам в данной области со ссылкой на литературные прецеденты и/или раскрытые в данном описании подготовительные примеры, либо могут быть получены согласно схеме 4.
Соединения формулы (IV) либо имеются в продаже, либо хорошо известны специалистам в данной области со ссылкой на литературные прецеденты и/или раскрытые в данном описании подготовительные примеры, либо могут быть получены согласно схемам 2 и 3.
Соединения формулы (V) могут быть получены согласно схеме 4.
Соединения формулы (II) могут быть получены из соединений формулы (III) согласно стадии (ii) способа, реакции электрофильного галогенирования. Типичные условия включают 1,3-дийод-5,5-диметилгидантоин или 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин в концентрированной серной кислоте при температуре от 0°С до комнатной температуры. Соединения формулы (III) могут быть получены из соединений формулы (IV) и (VII) согласно стадии способа (i), реакции перекрестного сочетания Сузуки, как она описана выше. Предпочтительные условия включают тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) и карбонат натрия в DMF и воде при кипячении с обратным холодильником.
Соединения формулы (VII) либо имеются в продаже, либо хорошо известны специалистам в данной области со ссылкой на литературные прецеденты и/или раскрытые в данном описании подготовительные примеры.
Согласно второму способу, соединения формулы (IV) могут быть получены способом, проиллюстрированным на схеме 2.
Соединения формулы (IV) могут быть получены из соединений формулы (VIII) согласно стадии (iii) способа, реакции конденсации при повышенной температуре.
Схема 2
Типичные условия включают нагревание соединений формулы (VIII) самих по себе с триэтилорто-формиатом при 130°С.
Соединения формулы (VIII) могут быть получены из соединений формулы (IX) согласно стадии (iv) способа посредством реакции нуклеофильного ароматического замещения с соединениями формулы (XII). Типичные условия включают нагревание соединений формулы (XII) с соединениями формулы (IX) либо в запаянном сосуде, либо под действием микроволнового излучения при температуре в диапазоне 100-150°С либо самих по себе, либо в подходящем растворителе, таком как вода или уксусная кислота.
Соединения формулы (XII) имеются в продаже.
Соединения формулы (IX) могут быть получены из соединений формулы (X) согласно стадии (v) способа, реакции нуклеофильного ароматического замещения с аммиаком. Предпочтительные условия включают нагревание соединений формулы (X) с аммиаком в подходящем растворителе, таком как этанол, под воздействием микроволнового излучения при 120°С.
Соединения формулы (X) могут быть получены из соединений формулы (XI) согласно стадии (vi) способа, реакции дегидратирующего хлорирования. Типичные условия включают нагревание соединений формулы (XI) самих по себе в POCl3 при 110°С.
Соединение формулы (XI) имеется в продаже.
Согласно третьему способу, соединения формулы (IV) также могут быть получены способом, проиллюстрированным на схеме 3.
Схема 3
Соединения формулы (IV) могут быть получены из соединений формулы (XIII) согласно стадии
(vii) способа, реакции ароматической циклизации. Предпочтительные условия включают подходящий катализатор, такой как бромид меди(!) с подходящим лигандом, таким как 1,10-фенантролин, в растворителе, таком как DMF, в присутствии неорганического основания, такого как карбонат цезия, при повышенной температуре.
Соединения формулы (XIII) могут быть получены из соединений формулы (XIV) согласно стадии
(viii) способа, реакции нуклеофильного замещения с соединениями формулы (XII), в присутствии подходящего основания, такого как гидрид натрия, в растворителе, таком как THF, при температуре от 0°С до комнатной температуры.
Соединения формулы (XIV) могут быть получены из соединений формулы (IX) согласно стадии (ix) способа, реакции алкилирования с триэтилортоформиатом. Типичные условия включают пара-толуолсульфонат пиридиния с триэтилортоформиатом при 100°С.
Соединения формулы (IX) могут быть получены, как поерсдтавлено на схеме 2.
Согласно четвертому способу, соединения формул (VI) и (V) также могут быть получены способами, проиллюстрированными на схеме 4.
Схема 4
Соединения формулы (V) могут быть получены из соединений формулы (VI) согласно стадии (i) способа, реакции перекрестного сочетания Сузуки, как представлено на схеме 1.
Соединения формулы (VI) могут быть получены из соединений формулы (XVII) согласно стадии (xii) способа, замены сульфонилхлорида алкилгалогенидом формулы (XVIII) через сульфонилгидразид. Типичные условия включают моногидрат гидразина в THF при 0°С, а затем ацетат натрия и соединениями формулы (XVIII) в IMS при 85°С.
Соединения формулы (VI) также могут быть получены из соединений формулы (XV) согласно стадии (х) способа, реакции окисления в присутствии подходящего окисляющего реагента. Предпочтительные условия включают мета-хлорпероксибензойную кислоту в DCM при температуре от 0°С до комнатной температуры.
Соединения формулы (XV) могут быть получены из соединений формулы (XVI) и (XIX) согласно стадии (xi) способа, реакции нуклеофильного ароматического замещения. Предпочтительные условия включают натриевую соль соединений формулы (XIX) в DMSO при повышенной температуре.
Соединения формулы (XV) также могут быть получены из соединений формулы (XX) и (XVIII) согласно стадии (xiii) способа, и реакции алкилирования в присутствии подходящего основания. Типичные условия включают трет-бутоксид калия или карбонат цезия в DMSO при 70-90°С.
Соединения формулы (XIX), (XVIII), (XVI) и (XX) либо имеются в продаже, либо хорошо известны специалистам в данной области со ссылкой на литературные прецеденты и/или раскрытые в данном описании подготовительные примеры.
Соединения по изобретению, предназначенные для фармацевтического применения, могут быть введены в виде кристаллических или аморфных продуктов или могут существовать в континууме твердых состояний в диапазоне от полностью аморфных до полностью кристаллических. Они могут быть получены, например, в виде твердых брикетов, порошков или пленок такими методами, как осаждение, кристаллизация, сушка замораживанием, распылительная сушка или сушка выпариванием. Для этой цели может быть использована сушка на частоте микроволн или радиочастотная.
Они могут быть введены по отдельности или в комбинации с одним или более другими соединениями по изобретению или в комбинации с одним или более другими лекарственными средствами (или в виде любой их комбинации). Обычно их будут вводить в виде композиции вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Термин "эксципиент" используют здесь для описания любого ингредиента, отличающегося от соединения(й) по изобретению. Выбор эксципиента будет в большой степени зависеть от таких факторов, как конкретный способ введения, влияние эксципиента на растворимость и стабильность и природа лекарственной формы.
В другом аспекте изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение по изобретению вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми эксципиентами.
Фармацевтические композиции, подходящие для доставки соединений по настоящему изобретению, и способы их приготовления будут понятны специалистам в данной области. Такие композиции и способы их приготовления можно найти, например, в "Remington's Pharmaceutical Sciences", 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995).
Подходящие пути введения включают пероральное, парентеральное, местное, ингаляционное/ин-траназальное, ректальное/интравагинальное введение и введение в глаз/ухо.
Композиции, пригодные для вышеупомянутых путей введения, могут быть приготовлены с возможностью немедленного и/или модифицированного высвобождения. Композиции с модифицированным высвобождением включают композиции с отсроченным, замедленным, пульсирующим, контролируемым, нацеленным и программируемым высвобождением.
Соединения по изобретению можно вводить перорально. Пероральное введение может включать проглатывание, когда соединение поступает в желудочно-кишечный тракт, или можно использовать трансбуккальное или сублингвальное введение, в результате которого соединение поступает в кровоток прямо из ротовой полости. Композиции, подходящие для перорального введения, включают как твердые композиции, такие как таблетки, капсулы, содержащие твердые частицы, жидкости или порошки, пастилки (включая пастилки с жидким наполнителем), жевательные резинки, мульти- и наночастицы, гели, твердый раствор, липосомы, пленки, овули, спреи, жидкие композиции и буккальные/мукоадгезивные плстыри.
Жидкие композиции включают суспензии, растворы, сиропы и эликсиры. Такие композиции могут быть использованы в качестве наполнителей в мягких или твердых капсулах и обычно содержат носитель, например воду, этанол, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, метилцеллюлозу или подходящее масло, и один или более эмульгаторов и/или суспендирующих агентов. Жидкие композиции могут быть также приготовлены путем разведения твердого вещества, например из саше.
Соединения по изобретению можно также использовать в быстрорастворимых, быстрораспадаю-щихся лекарственных формах, таких как формы, описанные в Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986, by Liang and Chen (2001).
В таблеточных лекарственных формах в зависимости от дозы содержание лекарственного средства может составлять от 1 до 80 мас.% от массы лекарственной формы, более типично от 5 до 60 мас.% от массы лекарственной формы. В дополнение к лекарственному средству таблетки обычно содержат разрыхлитель. Примеры разрыхлителей включают крахмалгликолят натрия, натрийкарбоксиметилцел-люлозу, кальцийкарбоксиметилцеллюлозу, натрийкроскармелозу, кросповидон, поливинилпирролидон, метилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, замещенную низшим алкилом гидроксипропил-целлюлозу, крахмал, прежелатинизированный крахмал и альгинат натрия. Как правило, содержание раз
рыхлителя будет составлять от 1 до 25 мас.%, предпочтительно от 5 до 20 мас.% от массы лекарственной формы.
Связывающие вещества обычно используют для придания когезионных свойств композициям в форме таблетки. Подходящие связывающие вещества включают микрокристаллическую целлюлозу, желатин, сахара, полиэтиленгликоль, натуральные и синтетические камеди, поливинилпирролидон, преже-латинизированный крахмал, гидроксипропилцеллюлозу и гидроксипропилметилцеллюлозу. Таблетки могут также содержать разбавители, такие как лактоза (моногидрат, подвергнутый распылительной сушке моногидрат, безводный и т.п.), маннит, ксилит, декстроза, сахароза, сорбит, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал и дигидрат двухосновного фосфата кальция.
Таблетки возможно могут также содержать поверхностно-активные агенты, такие как лаурилсуль-фат натрия и полисорбат 80, и скользящие вещества, такие как диоксид кремния и тальк. Содержание поверхностно-активных веществ, если они присутствуют, может составлять от 0,2 до 5 мас.% от массы таблетки, и содержание скользящих веществ может составлять от 0,2 до 1 мас.% от массы таблетки.
Таблетки также обычно содержат смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеарат кальция, стеарат цинка, стеарилфумарат натрия и смеси стеарата магния с лаурилсульфатом натрия. Содержание смазывающих веществ составляет от 0,25 до 10 мас.%, предпочтительно от 0,5 до 3 мас.% от массы таблетки. Другие возможные ингредиенты включают антиоксиданты, красители, корригенты, консерванты и агенты, маскирующие вкус.
Иллюстративные таблетки содержат вплоть до примерно 80% лекарственного средства, от примерно 10 до примерно 90 мас.% связывающего вещества, от примерно 0 до примерно 85 мас.% разбавителя, от примерно 2 до примерно 10 мас.% разрыхлителя и от примерно 0,25 до примерно 10 мас.% смазывающего вещества. Таблеточные смеси можно прессовать непосредственно или с помощью валика для формования таблеток. Таблеточные смеси или порции смесей перед таблетированием могут быть альтернативно подвергнуты влажному, сухому гранулированию или гранулированию из расплава, застыванию расплава или экструзии. Конечная композиция может содержать один или более слоев и может быть покрыта оболочкой или может не иметь оболочки; она может даже быть инкапсулированной. Приготовление таблеток обсуждается в "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets", Vol. 1, by H. Lieberman and L Lachman (Marcel Dekker, New York, 1980).
Подходящие для целей данного изобретения композиции с модифицированным высвобождением описаны в патенте США № 6106864. Подробности других подходящих технологий высвобождения, таких как высокоэнергетические дисперсии и осмотические и покрытые оболочкой частицы, можно найти в "Pharmaceutical Technology On-line", 25(2), 1-14, by Verma et al (2001). Применение жевательной резинки для достижения контролируемого высвобождения описано в WO 00/35298.
Соединения по изобретению можно также вводить прямо в кровоток, в мышцу или во внутренний орган. Подходящие способы парентерального введения включают внутривенное, внутриартериальное, интраперитонеальное, интратекальное, интравентрикулярное, интрауретральное, интрастернальное, ин-тракраниальное, внутримышечное и подкожное введение. Подходящие устройства для парентерального введения включают игольные (включая микроигольные) шприцы, безыгольные инъекторы и оборудование для инфузий.
Парентеральные композиции обычно представляют собой водные растворы, которые могут содержать эксципиенты, такие как соли, углеводы и буферные агенты (предпочтительно до рН от 3 до 9), но для некоторых применений их предпочтительно готовят в виде стерильного неводного раствора или в виде высушенной формы для использования с подходящим разбавителем, таким как стерильная апиро-генная вода.
Приготовление парентеральных композиций в стерильных условиях, например путем лиофилиза-ции, без труда может быть осуществлено с использованием стандартных фармацевтических методов, известных специалистам в данной области.
Растворимость соединений по настоящему изобретению, используемых в приготовлении парентеральных растворов, может быть увеличена за счет использования соответствующих методов приготовления композиций, таких как введение в композицию увеличивающих растворимость агентов. Композиции для парентерального введения могут быть приготовлены с возможностью немедленного и/или модифицированного высвобождения. Композиции модифицированного высвобождения включают композиции замедленного, отсроченного, импульсного, контролируемого, направленного и программируемого высвобождения. Так, соединения по изобретению могут быть приготовлены в виде твердого вещества, полутвердого вещества или тиксотропной жидкости для введения в виде имплантированного депо, обеспечивающего модифицированное высвобождение активного соединения. Примеры таких композиций включают стенты, покрытые лекарственным средством, и микросферы из сополимера dl-молочной кислоты и гликолевой кислоты (PGLA).
Соединения по изобретению можно также вводить местно на кожу или слизистую оболочку, т.е. дермально или трансдермально. Типичные композиции для этой цели включают гели, гидрогели, лосьоны, растворы, кремы, мази, присыпки, повязки, пенки, пленки, пластыри, облатки, имплантаты, губки, фибры, бандажи и микроэмульсии. Липосомы также могут быть использованы. Типичные носители
включают спирт, воду, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, глицерин, полиэтиленгли-коль и пропиленгликоль. В композицию могут быть включены усилители проницаемости, смотри, например, J Pharm Sci, 88 (10), 955-958, by Finnin and Morgan (October 1999).
Другие способы местного введения включают доставку посредством электропорации, ионофореза, фонофореза, сонофореза и микроигольную или безыгольную (например Powderject(tm), Bioject(tm) и т.д.) инъекции.
Соединения по изобретению также можно вводить интраназально или ингаляцией, обычно в форме сухого порошка (либо по отдельности, либо в виде смеси, например в сухой смеси с лактозой, либо в виде частицы из смешанных компонентов, например смешанных с фосфолипидами, такими как фосфа-тидилхолин) из ингалятора сухого порошка или в виде аэрозольного спрея из контейнера под давлением, насоса, пульверизатора, распылителя (предпочтительно распылителя, использующего электродинамический метод получения мелкодисперсного тумана) или небулайзера с использованием или без использования подходящего пропеллента, такого как 1,1,1,2-тетрафторэтан или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан. Для интраназального применения порошок может содержать биоадгезивный агент, например хитозан или циклодекстрин.
Контейнер под давлением, насос, пульверизатор, распылитель или небулайзер содержит раствор или суспензию соединения(й) по изобретению, содержащий(ую), например, этанол, водный этанол или подходящий альтернативный агент для диспергирования, солюбилизации или продления высвобождения активного агента, пропеллент(ы) в качестве растворителя и возможное поверхностно-активное вещество, такое как сорбитантриолеат, олеиновая кислота или олигомолочная кислота.
Перед применением в сухой порошковой или суспендированной композиции лекарственный продукт микронизируют до размера, подходящего для доставки путем ингаляции (обычно менее 5 микрон). Это можно осуществить любым подходящим способом измельчения, таким как размол на спиральной струйной мельнице, размол на струйной мельнице с псевдоожиженным слоем, обработка сверхкритической жидкости с образованием наночастиц, гомогенизация при высоком давлении или распылительная сушка.
Капсулы (изготовленные, например, из желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы), блистеры и картриджи для применения в ингаляторе или инсуффляторе можно приготовить так, чтобы они содержали порошковую смесь соединения по изобретению, подходящей порошковой основы, такой как лактоза или крахмал, и модификатора характеристик, такого как l-лейцин, маннит или стеарат магния. Лактоза может быть безводной или находиться в форме моногидрата, предпочтительно в последней форме. Другие подходящие эксципиенты включают декстран, глюкозу, мальтозу, сорбит, ксилит, фруктозу, сахарозу и трегалозу.
Подходящая композиция в виде раствора для применения в распылителе, использующем электродинамический метод получения мелкодисперсного тумана, может содержать от 1 мкг до 20 мг соединения по изобретению на срабатывание, и объем при срабатывании может изменяться от 1 мкл до 100 мкл. Типичная композиция может содержать соединение формулы (I), пропиленгликоль, стерильную воду, этанол и хлорид натрия. Альтернативные растворители, которые можно использовать вместо пропиленг-ликоля, включают глицерин и полиэтиленгликоль.
К этим композициям по изобретению, предназначенным для ингаляционного/интраназального введения, можно добавлять подходящие корригенты, такие как ментол и левоментол, или подсластители, такие как сахарин или сахарин натрия.
В случае ингаляторов сухого порошка и аэрозолей дозируемая единица определяется посредством клапана, который доставляет отмеренное количество. Единицы согласно изобретению обычно приспособлены для введения измеренной дозы или "пшика" ("puff), содержащей(го) от 1 мкг до 100 мг соединения формулы (I). Суммарная суточная доза обычно будет находиться в диапазоне от 1 мкг до 200 мг, которые можно вводить в однократной дозе или, в более типичных случаях, разделенными дозами на всем протяжении суток.
Соединения по изобретению можно вводить ректально или во влагалище, например в форме суппозитория, пессария, микробицида, вагинального кольца или клизмы. Традиционной основой суппозитория является масло какао, но можно использовать различные хорошо известные альтернативы, если это целесообразно.
Соединения и по изобретению также можно вводить непосредственно в глаз или ухо, обычно в форме капель микронизированной суспензии или раствора в изотоническом, с откорректированным рН, стерильном физиологическом растворе. Другие композиции, подходящие для глазного и ушного введения, включают мази, биоразлагаемые (например, губки из абсорбируемого геля, коллаген) и неподверженные биологическому разложению (например, силиконовые) имплантаты, пластины, линзы и системы из частиц или везикул, таких как ниосомы или липосомы. Полимер, такой как поперечно сшитая полиакриловая кислота, поливиниловый спирт, гиалуроновая кислота, целлюлозный полимер, например гидро-ксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза или метилцеллюлоза, или гетерополисахаридный полимер, например гелановая камедь, можно вводить вместе с консервантом, таким как хлорид бензал-кония. Такие композиции также можно доставлять ионофорезом.
Соединения по изобретению можно объединять с растворимыми макромолекулярными веществами, такими как циклодекстрин и его подходящие производные, или полиэтиленгликольсодержащими полимерами для того, чтобы улучшить их растворимость, скорость растворения, маскировку вкуса, биодоступность и/или стабильность для применения в любом из вышеуказанных способов введения.
Например, обнаружено, что комплексы лекарственного средства с циклодекстрином обычно полезны для большинства лекарственных форм и путей введения. Можно использовать как комплексы включения, так и комплексы без включения. В качестве альтернативы прямому комплексообразованию с лекарственным средством циклодекстрин можно использовать в качестве вспомогательной добавки, то есть в качестве носителя, разбавителя или солюбилизатора. Наиболее обычно используемыми для этих целей являются альфа-, бета- и гамма-циклодекстрины, примеры которых можно обнаружить в международных заявках на патент WO 91/11172, WO 94/02518 и WO 98/55148.
Для введения пациентам-людям суммарная суточная доза соединений по изобретению обычно находится в диапазоне от 1 до 10 мг, например от 10 мг до 1 г, например от 25 до 500 мг в зависимости конечно от способа введения и эффективности. Например, пероральное введение может требовать общей суточной дозы от 50 до 100 мг. Суммарную суточную дозу можно вводить в однократной дозе или разделенными дозами, и она может, по усмотрению врача, выходить за рамки типичного диапазона, приведенного в данном описании. Эти дозировки основаны на среднем субъекте-человеке, имеющем массу от приблизительно 65 до 70 кг. Врач может легко определить дозы для субъектов, чья масса находится вне этого диапазона, таких как младенцы и пожилые люди.
Соединения по изобретению являются полезными, поскольку они проявляют фармакологическую активность, а именно, модулирования GABAA каналов. Более конкретно, соединения по изобретению являются положительными аллостерическими модуляторами GABAA канала. Предпочтительно соединения по изобретению являются селективными модуляторами а2, а3 и/или а5 субтипов с более низкой эффективностью и/или аффинностью в отношении а1, а4 и а6 субтипов. Соединения по изобретению соответственно находят применение в лечении расстройств у животных, для которых показан положительный аллостерический модулятор GABAA. Предпочтительно животное представляет собой млекопитающее, более предпочтительно человека.
В другом аспекте изобретения предложено соединение по изобретению для применения в качестве лекарственного средства.
В другом аспекте изобретения предложено соединение по изобретению для лечения расстройства, для которого показан положительный аллостерический модулятор GABAA.
В другом аспекте изобретения предложено применение соединения по изобретению для изготовления лекарственного средства для лечения расстройства, для которого показан положительный аллосте-рический модулятор GABAA.
В другом аспекте изобретения предложен способ лечения расстройства у животного (предпочтительно млекопитающего, более предпочтительно человека), для которого показан положительный алло-стерический модулятор GABAA, включающий введение указанному животному терапевтически эффективного количества соединения по изобретению.
Положительные аллостерические модуляторы GABAA формулы (I) могут быть использованы:
в качестве анальгетиков, например для лечения боли, включая острую боль, хроническую боль, невропатическую боль, ноцицептивную (включая воспалительную) боль, соматическую боль, висцеральную боль и дисфункциональную боль, как будет обсуждаться далее, и в частности для болевых состояний, где имеет место мозговой или спинальный компонент лежащего в основе механизма;
в качестве антиконвульсантов, например для лечения эпилепсии и расстройств, ассоциированных с эпилепсией, включая синдром Леннокса-Гасто (Lennox-Gastaut), болезнь Дравета (Dravet), и генерализованной эпилепсии с фибрилльными припадками плюс (GEFS+);
в качестве анксиолитических агентов, например для лечения панического расстройства, генерализованного тревожного расстройства, стрессовых расстройств, таких как посттравматическое стрессовое расстройство, острое стрессовое расстройство и стрессовое расстройство, индуцированное приемом веществ, фобий, таких как агорафобия, социальная фобия и животная фобия, и обсессивно-компульсивного расстройства; и
в качестве мышечных релаксантов, например для лечения мышечного спазма, дистонии, спастично-сти (включая генерализованную и фокальную спастичность) и эссенциального тремора.
Положительные аллостерические модуляторы GABAA формулы (I) могут также быть использованы для лечения аутизма или в качестве антипсихотических агентов, например для лечения шизофрении.
Другие терапевтические показания для положительных аллостерических модуляторов GABAA формулы (I) включают применение в качестве антидепрессантов, например для лечения депрессивных и биполярных расстройств и циклотимии; в качестве противорвотных агентов, например для лечения рвоты, индуцированной химитерапией или облучением, послеоперационной тошноты и срыгивания, и болезни движения; в качестве агентов, усиливающих познавательную способность, например для лечения нейро-дегенеративных расстройств, таких как болезнь Альцгеймера и церебральная ишемия; агентов для улуч
шения сна, например для лечения расстройств сна, таких как инсомния и нарушения циркадного ритма, такие как синдром смены часовых поясов, или для применения в качестве премедикаторов перед анестезией или эндоскопией; и применения в лечении аддикционных фенотипов, таких как алкоголизм, синдрома Ангельмана (Angelman), расстройства дефицита внимания с гиперактивностью, напряженный мочевой пузырь, кишечных аномалий, расстройств приема пищи, таких как анорексия и булимия, синдром ломкой X хромосомы, нарушений слуха, таких как шум в ушах и возрастное ухудшение слуха, рассеянного склероза, неврозов, гиперактивного мочевого пузыря с сенсорным нарушением, предменструального синдрома, синдрома усталых ног и недержание мочи.
Предпочтительным применением для соединений формулы (I) является лечение боли. Боль может быть либо острой, либо хронической, и дополнительно может быть центрального и/или периферического происхождения. Боль может быть невропатической, и/или ноцицептивной, и/или воспалительной природы, такой как боль, воздействующая на соматическую или висцеральную системы, а также дисфункциональная боль, воздействующая на многие системы.
Физиологическая боль представляет собой важный защитный механизм, предназначенный для предупреждения об опасности от потенциально вредных стимулов из внешней среды. Эта система действует через специфическую совокупность первичных сенсорных нейронов и активируется вредоносными стимулами через периферические механизмы передачи (смотри Meyer et al., 2006, Wall and Melzack's Textbook of Pain (5th Ed), Chapterl). Эти сенсорные волокна известны как ноцицепторы и типично представляют аксоны малого диаметра с медленными скоростями проведения, которые представлены двумя основными типами, волокнами типа А-дельта (миелинизированные) и волокна типа С (не миелинизирован-ные). Ноцицепторы кодируют интенсивность, длительность и качество вредоносного стимула и, благодаря их топографически организованным проекциям в спинной мозг, местоположение стимула. Активность, генерируемая сигналом с ноцицептора, передается после сложной обработки в дорзальном роге либо прямо, либо через релейные ядра ствола мозга в вентро-базальный таламус и в кору, где генерируется ощущение боли.
Боль в общем можно классифицировать как острую или хроническую. Острая боль начинается внезапно и является краткой (обычно двенадцать недель или менее). Она обычно, хотя и не всегда, ассоциирована со специфической причиной, такой как определенное повреждение, и часто является острой и сильной и может являться результатом разнообразных причин, таких как хирургическое вмешательство, зубоврачебные действия, напряжение или растяжение. Острая боль обычно не приводит к какому-либо стойкому психологическому ответу. Когда в ткани организма имеет место значительное повреждение по причине заболевания или травмы, характеристики активации ноцицепторов могут быть изменены, и происходит повышение чувствительности на периферии, локально вокруг повреждения и центрально, где ноцицепторы заканчиваются. Эти эффекты приводят к усиленному ощущению боли. При острой боли эти механизмы могут быть полезными, способствуя защитным видам поведения, которые могут лучше задействовать репаративные процессы. Нормально ожидать, что чувствительность возвращается к норме, как только повреждение оказывается залеченным. Однако при многих состояниях хронической боли повышенная чувствительность длится много дольше процесса излечения и часто имеет место по причине повреждения нервной системы. Это повреждение часто приводит к аномалиям в волокнах сенсорного нерва, ассоциированным с неправильной адаптации и аберрантной активностью (Woolf & Salter, 2000, Science, 288, 1765-1768). Как таковая, хроническая боль является длительной болью, в типичных случаях сохраняющейся в течение более чем трех месяцев и приводящей к значительным психологическим и эмоциональным проблемам. Обычными примерами хронической боли являются нейропатическая боль (например, болезненная диабетическая нейропатия, постгерпетическая невралгия), запястный синдром, боль в спине, головная боль, онкологическая боль, артритная боль и хроническая послеоперационная боль, но может включать любое хроническое болезненное состояние, поражающее любую систему, такие, как те, что описаны Международной Ассоциацией по изучению боли (International Association for Study of Pain) (Classification of Chronic Pain, publication freely available for download at http://www.iasp-pain.org).
Клинические прояления боли имеют место, когда у пациента в число симптомов входят дискомфорт и аномальная чувствительность. Пациентам свойственно быть весьма гетерогенными, и они могут иметь различные болевые симптомы. Такие симптомы включают: 1) спонтанную боль, которая может быть тупой, жгучей или колющей; 2) чрезмерные болевые ответы на вредоносные стимулы (гипералге-зия) и 3) боль, вызываемую стимулами, которые в норме не являются вредоносными (аллодиния) (Meyer et al., 2006, Wall and Melzack's Textbook of Pain (5th Ed), Chapter 1). Хотя пациенты, страдающие различными формами острой и хронической боли, могут иметь одни и те же симптомы, механизмы в их основе могут быть разными и поэтому могут требовать разных стратегий лечения. Помимо деления на острую и хроническую, боль можно также подразделять на ноцицептивную, поражающую соматическую или висцеральную систему, которая может быть воспалительной по своей природе (ассоциированной с повреждением ткани и инфильтрацией иммунных клеток); или нейропатическую боль.
Ноцицептивная боль может быть определена как процесс, посредством которого интенсивные термические, механические или химические стимулы детектируются субпопулляцией периферических
нервных волокон, называемых ноцицепторами, и может быть индуцирована повреждением ткани или интенсивными стимулами с потенциалом вызывать повреждение. Болевые афференты активируются передачей стимулов ноцицепторами в месте повреждения и активируют на уровне их терминации нейроны в спинном мозге. Затем это поступает вверх по спинальным трактам в мозг, где происходит восприятие боли (Meyer et al., 2006, Wall and Melzack's Textbook of Pain (5th Ed), Chapter 1). Миелинизированные волокна А-дельта осуществляют передачу быстро и отвечают за ощущения острой и колющей боли, в то время как немиелинизированные С-волокна осуществляют передачу с пониженной скоростью и передают тупую или ноющую боль. Умеренная до тяжелой острая ноцицептивная боль представляет собой явный признак боли по причине напряжений/растяжений, ожогов, инфаркта миокарда и острого панкреатита, послеоперационной боли (боли после любого типа хирургической процедуры), посттравматической боли, почечной колики, онкологической боли и боли в спине. Онкологическая боль может быть хронической болью, такой как боль, имеющая отношение к опухоли (например, боль в кости, головная боль, лицевая боль или висцеральный боль), или болью, ассоциированной с лечением ракового заболевания (например в ответ на химиотерапию, иммунотерапию, гормональную терапию или радиотерапию). Боль в спине может иметь место по причине грыжи или разрушения межпозвоночных дисков или аномалий поясничных сочленений, крестцово-подвздошных сочленений, параспинальных мышц или задней продольной связки. Боль в спине может проходить естественным путем, но у некоторых пациентов, у которых она длится на протяжении 12 недель, она становится хроническим состоянием, которое может быть особенно ослабляющим здоровье.
Ноццептивная боль также может быть связана с воспалительными состояниями. Воспалительный процесс представляет собой комплексные серии биохимических и клеточных событий, активированных в ответ на повреждение ткани или присутствие чужеродных веществ, что имеет результатом опухание и боль (McMahon et al., 2006, Wall and Melzack's Textbook of Pain (5th Ed), Chapter3). Общим воспалительным состоянием, ассоциированным с болью, является артрит. Было установлено, что почти 27 миллионов американцев имеют симптоматический остеоартрит (ОА) или дегенеративное заболевание суставов (Lawrence et al., 2008, Arthritis Rheum, 58, 15-35); большинство пациентов с остеоартритом требуют медицинского внимании из-за ассоиированной боли. Артрит оказывает значительное влияние на психосоциальную и физическую функцию и известен как лидирующая причина инвалидности в поздний период жизни. Ревматоидный артрит представляет собой иммуно-опосредованное, хроническое, воспалительное полиартритное заболевание, поражающее главным образом периферические синовиальные суставы. Он является одним из наиболее распространенных хронических воспалительных состояний в развитых странах и является главной причиной боли.
В отношении ноцицептивной боли висцерального происхождения, висцеральная боль является результатом активации ноцицепторов торакальных, тазовых или брюшных органов (Bielefeldt и Gebhart, 2006, Wall and Melzack's Textbook of Pain (5th Ed), Chapter48). Они включают репродуктивные органы, селезенку, печень, желудочно-кишечного тракта и мочевыводящих путей, дыхательные структуры, сердечнососудистую систему и другие органы, расположенные в брюшной полости. Как таковая висцеральная боль относится к боли, ассоциированной с условиями таких органов, такой как синдром болезненного мочевого пузыря, интерстициальный цистит, простатит, язвенный колит, болезнь Крона, почечная колика, синдром раздраженного кишечника, эндометриоз и дименорея (Classification of Chronic Pain, available at http://www.iasp-pain.org). В настоящее время потенциал для нейропатического вклада (либо через центральные изменения, либо поражение/повреждение нервов) в состояния висцеральной боли плохо понятно, но может играть роль при определенных состояниях (Aziz et al., 2009, Dig Dis 27, Suppl 1,
31-41).
Нейропатическю боль в настоящее время определяют как боль, происходящую как прямое следствие повреждения или заболевания, поражающего соматосенсорную систему. Повреждение нервов может быть вызвано травмой и заболевания и, таким образом, термин 'невропатическая боль' охватывает многие расстройства с разнообразной этиологией. Они включают, без ограничения ими, периферическую невропатию, диабетическую невропатией, постгерпетическую невралгию, невралгию тройничного нерва, боль в спине, раковую невропатию, ВИЧ (вирс иммунодефицита человека) невропатию, боль в фантомных конечностях, запястный сухожильный синдром, центральную постинсультную боль и боль, ассоциированную с хроническим алкоголизмом, гипотиреоидизмом, уремией, рассеянным склерозом, повреждением спинного мозга, болезнью Паркинсона, эпилепсией и дефицитом витаминов. Невропатическая боль является патологической, поскольку она не играет защитной роли. Она часто сохраняется после того, как первоначальная причина исчезает, обычно длится годами, в значительной степени снижая качество жизни пациентов (Dworkin 2009, Am J Med, 122, S1-S2; Geber et al., 2009, Am J Med, 122, S3-S12; Haanpaa et al., 2009, Am J Med, 122, S13-S21). Симптомы невропатической боли тяжело поддаются лечению, поскольку они зачастую являются гетерогенными даже между пациентами с одним и тем же заболеванием (Dworkin, 2009, Am J Med, 122, S1-S2; Geber et al., 2009, Am J Med, 122, S3-S12; Haanpaa et al., 2009, Am J Med, 122, S13-S21). Они включают спонтанную боль, которая может быть непрерывной и пароксизмальной или аномально индуцируемой болью, такой как гипералгезия (повышенная чувствительность к вредному стимулу) и аллодиния (чувствительность к нормально безвредному стимулу).
Следует отметить, что некоторые типы боли имеют множественную этиологию и поэтому могут быть классифицированы в более чем одной области, например боль в спине, раковая боль и даже головная боль при мигрени могут включать как ноцицептивный, так и невропатический компоненты.
Аналогичным образом другие типы хронической боли, возможно менее хорошо понятные, нелегко определить простыми определениями ноцицептивный или невропатический. Такие состояния включают, в частности, фибромиалгию и хронический региональный болевой синдром, которые часто описывают как дисфункциональные болезненные состояния, например фибромиалгия или комплексный региональный болевой синдром (Woolf, 2010, J Clin Invest, 120, 3742-3744), но которые включены в классификации хронических болевых состояний (Classification of Chronic Pain, available at http://www.iasp-pain.org).
Положительный аллостерический модулятор GABAA может быть полезным образом объединен с другим фармакологически активным соединением, или с двумя или более другими фармакологически активными соединениями, особенно в лечении боли. Такие комбинации обеспечивают возможность значительных преимуществ, включая удобство для пациентов, легость дозирования и синергетическую активность.
В комбинациях, которые следуют далее, соединение по изобретению может быть введено одновременно, последовательно или раздельно в комбинации с другим(и) терапевтическим(м) агентом или агентами.
Для лечения боли положительный аллостерический модулятор GABAA формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, как они определены выше, могут быть введены в комбинации с одним или более агентами, выбранными из следующего:
селективный модулятор Nav1.3 канала, такой как соединение, описанное в WO 2008/118758;
селективный модулятор Nav1.7 канала, такой как соединение, описанное в WO 2010/079443, например 4-[2-(5-амино-1H-пиразол-4-ил)-4-хлорфенокси]-5-хлор-2-фтор-N-1,3-тиазол-4-илбензолсуль-фонамид или 4-[2-(3-амино-1H-пиразол-4-ил)-4-(трифторметил)фенокси]-5-хлор-2-фтор-N-1,3-тиазол-4-илбензолсульфонамид, или фармацевтически приемлемая соль любого из них;
селективный модулятор Nav1.8 канала;
селективный модулятор Nav1.9 канала;
соединение, которое модулирует активность по более чем одному Nav каналу, включая неселективный модулятор, такой как бупивакаин, карбамазепин, ламотриджин, лидокаин, мексилетин или фенито-ин;
любой ингибитор передачи сигнала фактора роста нервов (NGF), такой как агент, который связывается с NGF и ингибирует биологическую активность NGF и/или расположенный(е) ниже метаболиче-ский(е) путь(и), опосредованный(е) NGF передачей сигнала (например танезумаб), TrkA антагонист или р75 антагонист, или агент, который ингибирует расположенную ниже передачу сигнала в отношении NGF стимулированной TrkA или Р75 передачи сигнала;
ингибитор нейротрофических путей, где такое ингибирование достигается посредством: (а) агента, который связывается с фактором роста нервов (NGF) (например танезумаб, фазинумаб или фулранумаб), мозговым нейротрофическим фактором (BDNF), нейротрофином-3 (NT-3) или нейроторофином-4 (NT-4), или с более чем одним из вышеупомянутых нейротрофинов (например растворимый Р75); или (b) агента, который ингибирует рецепторную функцию по одному или более из TrKA, TrKB, TrKC или Р75, или по ортостерическому сайту, аллостерическому сайту или посредством ингибирования каталитической активности рецептора(ов);
соединение, которое увеличивает уровни эндоканнабиноида, такое как соединение с ингибиторной активностью в отношении гидролазы амидов жирных кислот (FAAH) или моноацилглицеринлипазы
(MAGL);
анальгетик, в частности парацетомол;
опиоидный анальгетик, такой как бупренорфин, буторфанол, кокаин, кодеин, дигидрокодеин, фен-танил, героин, гидрокодон, гидроморфон, леваллорфан, леворфанол, меперидин, метадон, морфин, на-лмефен, налорфин, нолоксон, налтресон, налбуфин, оксикодон, оксиморфон, пропоксифен или пентазо-цин;
опиоидный анальгетик, который преимущественно стимулирует специфический внутриклеточный метаболический путь, например G-белок в противовес рекрутменту бета-аррестина, такой как TRV130; опиоидный анальгетик с дополнительной фармакологией, такой как: ингибиторная активность в отношении обратного захвата норадреналина (норэпинефрина) (NRI), например тапентадол; ингибиторная активность в отношении обратного захвата серотонина и норэпинефрина (SNRI), например трамадол; или агонистическая активность в отношении рецептора ноцицептина (NOP), например GRT6005;
нестероидное противовоспалительное лекарственное средство (NSAID), такое как неселективный ингибитор циклооксигеназы (СОХ), например аспирин, диклофенак, дифлузинал, этодолак, фенбуфен, фенопрофен, флуфенизал, флурбипрофен, ибупрофен, индометацин, кетопрофен, кеторолак, меклофена-мовая кислота, мефенамовая кислота, мелоксикам, набуметон, напроксен, нимесулид, нитрофлурбипро-фен, олсалазин, оксапрозин, фенилбутазон, пироксикам, сульфасалазин, сулиндак, толметин или зомепи-рак; или селективный ингибитор СОХ-2, например целекоксиб, деракоксиб, эторикоксиб, мавакоксиб
или парекоксиб;
антагонист простагландина Е2 субтипа 4 (ЕР4);
ингибитор микросомальной синтазы простагландина Е типа 1 (mPGES-1);
седативное средство, такое как глутетимид, мепробамат, метаквалон или дихлоральфеназон;
модулятор GABAA С широким спектром субтиповых модуляторных эффектов, опосредованных через сайт связывания бензодиазепина, такой как хлордиазероксид, алпразолам, диазепам, лоразепам, окса-зепам, темазепам, триазолам, клоназепам или клобазам;
модулятор GABAA С селективными в отношении субтипа модулирующими эффектами, опосредованными через сайт связывания бензодиазепина, с пониженными побочными эффектами, например седа-тивным эффектом, такой как ТРА023, ТРА023В, L-838,417, CTP354 или NSD72;
модулятор GABAA, действующий через альтернативные сайты связывания на рецепторе, такой как барбитураты, например амобарбитал, апробарбитал, бутабитал, мефобарбитал, метогекситал, пентобар-битал, фенобарбитал, секобарбитал или тиопентал; нейростероиды, такие как альфаксалон, алфадолон или ганаксолон; лиганды 5-субъединицы, такие как этифоксин; или 5-предпочитающие лиганды, такие как габоксадол;
агонист GlyR3 или позитивный аллостерический модулятор;
скелетно-мышечный релаксант, например баклофен, каризопродол, хлорзоксадон, циклобензаприн, метаксолон, метокарбамол или орфренадин;
антагонист глутаматных рецепторов или отрицательный аллостерический модулятор, такой как антагонист NMDA (N-метил-D-аспарагиновая кислота) рецепторов, например декстрометорфан, декстро-фан, кетамин или мемантин; или антагонист или модулятор mGluR;
альфа-адренергическое средство, такое как клонидин, гуанфацин или дексметатомидин;
бета-адренергическое средство, такое как пропранолол;
трициклический антидепрессант, например деспрамин, имипрамин, амитриптилин или нортрипти-
лин;
антагонист тахикинина (NK), такой как апрепитал или маропитант;
антагонист мускариновых рецепторов, например оксибуинин, толтеродин, пропиверин, хлорид тропсия, дарифенацин, золифенацин, темиверин и ипратропий;
холинэргические (никотиновые) анальгетики, такие как испрониклин (ТС-1734), варениклин или никотин;
агонист (например резинфератоксин или капсаицин) или антагонист (например капсазепин или ма-ватрап) рецептора с транзиторным рецепторным потенциалом V1 (TRPV1));
агонист (например коричный альдегид или масло горчицы) или антагонист (например GRC17536 или СВ-625) рецептора с транзиторным рецепторным потенциалом A1 (TRPA1);
агонист (например ментол или ицилин) или антагонист рецептора с транзиторным рецепторным потенциалом М8 (TRPM8);
агонист или антагонист рецептора с транзиторным рецепторным потенциалом V3 (TRPV3) (например GRC-15300);
кортикостероид, такой как дексаметазон;
агонист или антагонист 5-НТ рецептора, в частности 5-HT1B/1D агонист, такой как элетриптан, су-матриптан, наратриптан, золмитриптан или ризатриптан; антагонист 5-НТ2А рецептора;
PDEV (фосфодиэстераза V) ингибитор, такой как силденафил, тадалафил или варденафил;
альфа-2-дельта лиганд, такой как габапентин, габапентин энакарбил или прегабалин;
ингибитор обратного захвата серотонина (SRI), такой как сертралин, деметилсертралин, флуоксе-тин, норфлуоксетин, флувоксамин, пароксетин, циталопрам, десметилциталопрам, эсциталопрам, d,l-фенфурамин, фемоксетин, ифоксетин, цианодотиепин, литоксетин, дапоксетин, нефазодон, церикламин и тразодон;
NRI (ингибитор обратного захвата норэпинефрина), такой как мапротилин, лофепрамин, миртазе-пин, оксапротилин, фезоламин, томоксетин, миансерин, бупроприон, метаболит бупроприона гидрокси-бупроприон, номифенсин и вилоксазин, особенно селективный ингибитор обратного захвата норадрена-лина, такой как ребоксетин;
SNRI (ингибитор обратного захвата серотонина-норэпинефрина), такой как венлафаксин, О-дезметилвенлафаксин, кломипрамин, десметилкломипрамин, дулоксетин, милнаципран и имипрамин;
индуцибельный ингибитор синтазы оксида азота (iNOS);
антагонист лейкотриена В4;
ингибитор 5-липоксигеназы, такой как зилейтон;
открыватель или положительный модулятор калиевого канала, такой как открыватель или положительный модулятор KCNQ/Kv7 (например ретигабин или флупиртин), слитого с G белком калиевого канала внутреннего выпрямления (GIRK), активируемого кальцием калиевого канала (Кса) или управляемого напряжением калиевого канала, такого как член субсемейства А (например Kv1.1), субсемейства В (например Kv2.2) или субсемейства К (например TASK, TREK или TRESK);
антагонист Р2Х3 рецептора (например AF219) или антагонист рецептора, который содержит как одну из его субъединиц, субъединицу Р2Х3, такого как Р2Х2/3 гетеромерный рецептор; блокатор кальциевого канала Cav2.2 (N-тип), такой как зиконотид; и блокатор кальциевого канала Cav3.2 (Т-тип), такой как этозуксимид.
В объем настоящего изобретения включены комбинации соединения по изобретению вместе с одним или более дополнительных терапевтических агентов, которые замедляют скорость метаболизма соединения по изобретению, приводя тем самым к усиленному воздействию на пациентов. Усиление воздействия таким образом известно как бустинг. Это обеспечивает преимущество повышения эффективности соединения по изобретению или снижения дозы, требующейся для достижения такой же эффективности, как и для дозы, не подвергнутой бустингу. Метаболизм соединений по изобретению включает оксилительные процессы, осуществляемые ферментами Р450 (CYP450), в частности CYP 3A4, и конъю-гирование UDP глюкуронозилтрансферазой и сульфатирующими ферментами. Таким образом, среди агентов, которые могут быть использованы для усиления воздействия на пациента соединением по настоящему изобретению, находятся те агенты, которые могут действовать как ингибиторы по меньшей мере одной изоформы ферментов цитохрома Р450 (CYP450). Изоформы CYP450, которые могут быть с пользой подвергнуты ингибированию, включают, без ограничения ими, CYP1A2, CYP2D6, CYP2C9, CYP2C19 и CYP3A4. Подходящие агенты, которые могут быть использованы для ингибирования CYP 3A4, включают ритонавир, саквинавир, кетоконазол, ^(3,4-дифторбензил)-^метил-2-{[(4-метоксипири-дин-3-ил)амино]сульфонил}бензамид и ^(1-(2-(5-(4-фторбензил)-3-(пиридин-4-ил)-Ш-пиразол-1-ил) ацетил)пиперидин-4-ил)метансульфонамид.
В объем изобретения входят две или более фармацевтические композиции, по меньшей мере одна из которых содержит соединение по изобретению, которые могут быть удобным образом объединены в форме набора, подходящего для совместного введения композиций. Таким образом, набор по изобретению содержит две или более раздельные фармацевтические композиции, по меньшей мере одна из которых содержит соединение по изобретению, и средства для раздельного хранения указанных композиций, такие как контейнер, разделенная бутыль или разделенный пакет из фольги. Примером такого набора является простая блистерная упаковка, используемая для упаковки таблеток, капсул и тому подобного. Набор по изобретению особенно пригоден для введения разных лекарственных форм, например перо-ральных и парентеральных, для введения отдельных композиций с разными интервалами дозирования или для титрования отдельных композиций друг против друга. Для повышения удобства набор обычно содержит указания по введению и может быть снабжен так называемой памяткой.
В другом аспекте изобретения предложен фармацевтический продукт (например в форме набора), содержащий соединение по изобретению вместе с одним или более дополнительными терапевтически активными агентами в виде объединенного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении расстройства, для которого показан модулятор Nay1.8.
Следует понимать, что все ссылки в данном описании изобретения на лечение включают куратив-ное, паллиативное и профилактическое лечение.
В неограничивающих примерах и подготовительных примерах, которые представлены далее в описании изобретения, и на вышеупомянутых Схемах могут быть сделаны ссылки на следующие аббревиатуры, определения и аналитические процедуры:
АсОН означает уксусную кислоту;
ХИАД означает масс-спектр с химической ионизацией при атмосферном давлении; Arbocel представляет собой фильтрующий агент; br означает широкий;
Celit(r) представляет собой фильтрующий агент;
CDI означает ^№-карбонилдиимидазол;
Cs2CO3 означает карбонат цезия;
Cu(acac)2 означает ацетилацетонат меди (II);
CuI означает йодид меди (I);
Cu(OAc)2 означает ацетат меди (II);
5 означает химический сдвиг;
d означает дублет;
DABCO означает 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан;
DAD означает диодно-матричный детектор;
DCM означает дихлорметан; метиленхлорид;
DCC означает ^№-дициклогексилкарбодиимид;
DDQ означает 2,3-дихлор-5,6-дицианобензохинон;
DIPEA означает N-этилдиизопропиламин, N,N-диизопропилэтиламин;
DMAP означает 4-диметиламинопиридин;
DMF означает N,N-диметилформамид;
DMSO означает диметилсульфоксид;
EDCI.HCl означает гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида; EDCI.Mel означает метилйодид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида; EDTA означает этилендиаминтетрауксусную кислоту; ДРСИ означает детектор рассеивания света при испарении; ЭР означает ионизацию электрораспылением; Et2O означает диэтиловый эфир; EtOAc означает этилацетат; EtOH означает этанол;
HATU означает гексафторфосфат 2-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония;
HBTU означает гексафторфосфат О-бензотриазол-1-ил-^^№,№-тетраметилурония;
HCl означает соляную кислоту;
НОВТ означает гидрат N-гидроксибензотриазола;
ЖХВД означает жидкостную хроматографию высокого давления;
IPA означает изопропанол;
Ir2(OMe)2COD2 означает бис(1,5-циклооктадиен)ди-ц-метоксидииридий (I);
K2CO3 означает карбонат калия;
KHSO4 означает гидросульфат калия;
KOAc означает ацетат калия;
KOH означает гидроксид калия;
K3PO4 означает трехосновный фосфат калия;
л означает литр
ЖХ-МС означает сочетание жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии (Rt обозначает время удерживания);
LiOH означает гидроксид лития;
m означает мультиплет;
МеОН означает метанол;
2-MeTHF означает 2-метилтетрагидрофуран;
MgSO4 означает сульфат магния;
m/z означает пик масс-спектра;
NaH означает гидрид натрия;
NaHCO3 означает гидрокарбонат натрия;
Na2CO3 означает карбонат натрия;
NaHSO3 означает бисульфит натрия;
NaHSO4 означает гидросульфат натрия;
NaOH означает гидроксид натрия;
Na2SO4 означает сульфат натрия;
NBS означает N-бромсукцинимид
NH4Cl означает хлорид аммония;
NMP означает N-Метил-2-пирролидон;
ЯМР означает ядерный магнитный резонанс;
Pd-118 означает дихлор[1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)]ферроцен палладия (II); PdCl2(dtbpf) означает дихлор[1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)]ферроцен палладия (II); Pd/C означает палладий на углероде; Pd(PPh3)4 означает тетракис(трифенилфосфин)палладий;
Pd(dppf)2Cl2.DCM означает [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]-дихлорпалладия(И), комплекс с дихлорметаном;
Pd2(dba)3 означает трис(дибензилиденацетон)d диалладия(0);
Pd(OAc)2 означает ацетат палладия;
Pd(OH)2/C означает гидроксид палладия на углероде;
Преп. означает препаративный;
POBr3 означает оксибромид фосфора;
Ф.-сила/кв. дюйм означает фунт-сила на квадратный дюйм;
РуВор означает гексафторфосфат (бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфония;
q означает квартет;
Rt означает время удерживания;
s означает синглет;
SPhos означает 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенил; t означает триплет;
TBAF означает фторид тетрабутиламмония; ТВМЕ означает трет-бутил-диметиловый эфир; THF означает тетрагидрофуран; ТНР означает тетрагидропиран;
ТСХ означает тонкослойную хроматографию; УФ означает ультрафиолет и
WSCDI означает гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида.
Подготовительные примеры и примеры, которые далее иллюстрируют изобретение, никоим образом его не ограничивают. Все исходные вещества имеются в продаже или описаны в литературе. Все температуры приведены в °С. Флэш-колоночную хроматографию осуществляли с использованием сили-кагеля 60 от Merck (9385). Тонкослойную хроматографию (ТСХ) проводили на пластинах силикагеля 60 от Merck (5729). "Rf" представляет собой преодолеваемое соединением расстояние, деленное на расстояние, преодолеваемое фронтом растворителя на ТСХ пластине. Точки плавления определяли с использованием прибора Gallenkamp MPD350 и не корректировали. ^-ЯМР спектры снимали на Varian Mercury 300 или 400 МГц, Bruker Avarice 400 МГц NMR или Jeol ЕСХ 400 МГц. ЯМР спектры получали как DMSO-d6 растворы (приведены в м.д.). Другие ЯМР растворители использовали по необходимости. Когда приводятся множественности пиков, используются следующие аббревиатуры: s означает синглет, d означает дублет, t означает триплет, m означает мультиплет, br означает уширенный, dd означает дублет дублетов, dt означает дублет триплетов.
ЖХ-МС означает сочетание жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии (Rt означает время удерживания). Там, где приведены соотношения растворителей, эти соотношения являются объемными соотношениями.
Масс-спектры (МС) снимали, используя либо ионизацию электрораспылением (ИЭР), либо химическую ионизацию при атмосферном давлении (ХИАД). Масс-спектроскопию осуществляли с использованием одноквадрупольного масс-спектрометра Finnigan Navigator с ионизацией электрораспылением, масс-спектрометр Finnigan aQa APCI или Applied Biosystem Q-Trap.
В тех случаях, когда утверждается, что соединения получены способом, описанным ранее в подготовительном примере или примере, специалист в области техники поймет, что времена реакций, количество эквивалентов реагентов и температуры реакций можно модифицировать для каждой конкретной реакции, и что, тем не менее, может быть необходимым или желательным использование различных условий обработки или очистки.
ЖХ-МС системы
В тех случаях, когда одиночные соединения были проанализированы посредством ЖХ-МС, использовали 16 методов. Эти методы проиллюстрированы ниже. Система 1.
А: 0,1%-ная муравьиная кислота в воде;
В: 0,1%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле.
Колонка: Agilent Extend C18 фаза 50x3 мм с размером частиц 3 мкм.
Градиент: 95-0% А за 3,5 мин, задержка 1 мин, повторное приведение в равновесие 0,4 мин, скорость потока 1,2 мл/мин.
УФ: 210-450 нм DAD (диодно-матричный детектор). Температура: 50°С. Система 2.
А: 0,1%-ная муравьиная кислота в воде;
В: 0,1%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле.
Колонка: С18 фаза Waters Sunfire 50x4,6 мм с размером частиц 5 мкм.
Градиент: 95-5% А за 3 мин, задержка 1 мин, повторное приведение в равновесие 2 мин, скорость потока 1,5 мл/мин.
УФ: 210-450 нм DAD. Температура: 50°С. Система 3.
А: 0,1%-ная муравьиная кислота в воде;
В: 0,1%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле.
Колонка: С18 фаза Phenomenex 20x4,0 мм с размером частиц 3 мкм.
Градиент: 98-2% А за 1,5 мин, задержка 0,3 мин, повторное приведение в равновесие 0,2, скорость потока 1,8 мл/мин.
УФ: 210- 450 нм DAD. Температура: 75°С. Система 4.
А: 0,1%-ная муравьиная кислота в воде;
В: 0,1%-ная муравьиная кислота в смеси 70% МеОН:30% IPA.
Колонка: С18 фаза Phenomenex 20x4,0 мм с размером частиц 3 мкм.
Градиент: 98-10% А за 1,5 мин, задержка 0,3 мин, повторное приведение в равновесие 0,2, скорость потока 2 мл/мин.
УФ: 210-450 нм DAD.
Температура: 75°С. Система 5.
А: 0,05%-ная муравьиная кислота в воде;
В: 0,05%-ная муравьиная кислотав ацетонитриле.
Колонка: С18 фаза Phenomenex Gemini, 50x4,60 мм с размером частиц 3 мкм.
Градиент: от 5% В до 95% В за 3,5 мин. Задержка до 4,5 мин. Скорость потока 2,0 мл/мин.
УФ: 200-400 нм DAD.
Температура: 40°С. Система 6. А: вода;
В: ацетонитрил;
D: 1,0%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле. Колонка: XBridge C18 2,1x30 мм с размером частиц 5 мкм.
Градиент: от 5% В до 95% В за 2,3 мин. Задержка до 3,5 мин. Скорость потока 1,0 мл/мин. УФ: 215-350 нм DAD. Температура: 25°С. Система 7.
А: 10 мМ ацетат аммония в воде (основной буфер); В: ацетонитрил.
Колонка: Xbridge C18 4,6x50 мм с размером частиц 5мкм.
Градиент: от 90% [буфер] и 10% [MeCN] до 70% [буфер] и 30% [MeCN] за 1,5 мин, дополнительно до 10% [буфер] и 90% [MeCN] за 3,0 мин, задержка 4 мин и снова к исходным условиям за 5 мин. Скорость потока 1,2 мл/мин.
УФ: 220 нм.
Температура: 25°С. Система 8.
А: 0,1%-ная муравьиная кислота в воде (об./об.) [буфер].
В: 0,1%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле (об./об.) [MeCN].
Колонка: Phenomenex Gemini-NX С18 4,6x50 мм с размером частиц 3 мкм.
Градиент: от 95% [буфер] и 5% [MeCN] до 0% [буфер] и 100% [MeCN] от 0,0-4,1 мин, задержка от 4,1-4,5 мин и в заключение снова к исходным условиям от 4,5-5,0 мин, скорость потока 1,5 мл/мин.
УФ: 200-450 нм DAD.
Температура: 60°С. Система 9.
А: 0,05%-ная муравьиная кислота в воде (кислотный буфер). В: ацетонитрил.
Колонка: Gemini C18 4,6x50 мм с размером частиц 5 мкм.
Градиент: от 90% [буфер] и 10% [MeCN] до 70% [буфер] и 30% [MeCN] за 1,5 мин, далее до 10% [буфер] и 90% [MeCN] за 3,0 мин, задержка 4 мин и в заключение снова к исходным условиям за 5 мин, скорость потока 1,2 мл/мин.
УФ: 220 нм.
Температура: 25°С. Система 10.
А: 20 мМ формиат аммония в воде (основной буфер); В: ацетонитрил;
Колонка: Gemini-NX 5 мкм С18 110А, колонка 50x4,6 мм.
Градиент: 5-95% А за 3,5 мин, задержка 1 мин, 95-5% А за 0,1 мин, скорость потока 2 мл/мин. УФ: 210-450 нм DAD, скорость потока 2 мл/мин.
УФ: 260 нм.
Температура: 40°С. Система 11.
А: 20 мМ формиат аммония в воде (основной буфер); В: ацетонитрил.
Колонка: XBridge C18 5 мкм, колонка 50x4,6 мм.
Градиент: 5-95% А за 3,5 мин, задержка 1 мин, 95-5% А за 0,1 мин, скорость потока 2 мл/мин. УФ: 210-450 нм DAD, скорость потока 2 мл/мин. Температура: 25°С. Система 12.
А: 0,05%-ная муравьиная кислота в воде (кислотный буфер); В: 0,05%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле.
Колонка: Gemini-NX 5 мкм С18 110А, колонка 50x4,6 мм 5-95% А за 3,5 мин, задержка 1 мин, 95
5% А за 0,1 мин, скорость потока 2 мл/мин.
УФ: 210-450 нм DAD, скорость потока 2 мл/мин. Температура: 40°С. Система 13.
А: 0,05%-ная муравьиная кислота в воде (кислотный буфер). В: 0,05%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле.
Колонка: XBridge C18 5 мкм, колонка 50x4,6 мм 5-95% А за 3,5 мин, задержка 1 мин, 95-5% А за 0,1 мин, скорость потока 2 мл/мин.
УФ: 210-450 нм DAD, скорость потока 2 мл/мин. Температура: 25°С. Система 14.
А: 0,1%-ная муравьиная кислота в воде (об./об.);
В: 0,1%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле (об./об.).
Колонка: кислота: Waters Acquity UPLC ВЕН, 2,1x50 мм, С18, 1,7 мкм.
Профили градиента: поток - 1,25 мл/мин.
Прогон 1,5 мин: исходные условия: А-95%:В-5%; задержка на начале от 0,0-0,1 мин; линейное изменение до А-5%:В-95% за 0,1-1,0 мин; задержка при А-5%:В-95% от 1,0-1,1 мин; возвращение к исходным условиям 1,1-1,5 мин.
Температура: 60°С.
Система 15.
Колонка: Waters symmetry 2,1 x50 мм, 5 мкм.
Подвижная фаза: от 0% MeCN (0,1% TFA) в воде (0,1% TFA) до 60% MeCN (0,1% TFA) в воде (0,1% TFA).
Длина волны: 220 нм. Система 16.
А: 0,0375%-ная TFA в воде;
В: 0,01875%-ная TFA в MeCN.
Колонка: Welch XB-C18 2,1x50 мм, 5 мкм.
Градиент: от 99% [А] и 1% [В] до 95% [А] и 5% [В] за 1 мин, далее до 100% [В] за 4,0 мин и в заключение возврат к исходным условиям за 4,30 мин, скорость потока 0,8 мл/мин. УФ: ИАД-ЭР. Температура 50°С.
Препаративная ЖХВД
Когда отдельные соединения очищали посредством препаративной ЖХВД, использовали два метода, представленные ниже.
Метод 1, кислотные условия.
Колонка Gemini NX С18, 5 мкм, 21,2x100 мм.
Температура окружающей среды.
Детектирование ДРСИ-МС (масс-спектрометрия с детектированием рассеяния света при испарении).
Подвижная фаза А 0,1%-ная муравьиная кислота в воде; подвижная фаза В 0,1%-ная муравьиная кислота в ацетонитриле.
Начальный градиент 0% В, 1 мин - 5% В; 7 мин - 98% В; 9 мин - 98% В; 9,1 мин - 5% В; 10 мин - 5%
Скорость потока 18 мл/мин.
Инъецируемый объем 1000 мкл.
Метод 2, основные условия.
Колонка Gemini NX С18, 5 мкм, 21,2x100 мм.
Температура окружающей среды.
Детектирование ДРСИ-МС.
Подвижная фаза А 0,1%-ный диэтиламин в воде;
подвижная фаза В 0,1%-ный диэтиламин в ацетонитриле.
Начальный градиент 0% В, 1 мин - 5% В; 7 мин - 98% В; 9 мин - 98% В; 9,1 мин - 5% В; 10 мин - 5%
Скорость потока 18 мл/мин. Инъецируемый объем 1000 мкл.
Пример 1. 7-Этил-4-[6-фтор-4'-(пропан-2-илсульфонил)бифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин
//\\
о О
К раствору 7-этил-4-(4-фтор-3-йодфенил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 10, 41 мг, 0,11 ммоль) и 4-(изопропилсульфонил)фенилбороновой кислоты (38 мг, 0,17 ммоль) в безводном диоксане (2,0 мл) добавляли водный Na2CO3 (1M раствор, 0,56 мл, 0,56 ммоль) и раствор дегазировали. Добавляли тетракис(трифеиилфосфин)палладий(0) (6,9 мг, 0,0060 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 2 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, затем добавляли EtOAc (10 мл) и воду (10 мл). Слои разделяли и органический слой сушили над безводным MgSO4, фильтровали и выпаривали в вакууме. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ (метод 1) с получением указанного в заголовке соединения с 64%-ным выходом, 29,7 мг.
ЖХ-МС (система 6) Rt составляет 1,47 мин, МС m/z 425 [М+Н]+.
Пример 2. 4-[2',6-Дифтор-4'-(метилсульфонил)бифенил-3-ил]-7-этил-7Н-имидазо-[4,5-с]пиридазин
S F N
//\\
О О
Получали в соответствии со способом, описанным выше для примера 1, используя 4-(3-йод-4-фторфенил)-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 11, 50 мг, 0,16 ммоль) и 2-фтор-4-(метилсульфонил)фенилбороновую кислоту (68 мг, 0,31 ммоль). Неочищенный продукт очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя EtOAc, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 83%-ным выходом, 53,8 мг.
IH-ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.69 (t, 3H), 3.14 (s, 3H), 4.59 (q, 2H), 7.43 (dd, 1H), 7.72 (dd, 1H), 7.79-7.83 (m, 1H), 7.85-7.88 (m, 1H), 8.28-8.32 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.32-8.36 (m, 1H), 9.38 (s, 1H). ЖХ-МС (система 5) Rt составляет 1,19 мин, МС m/z 415 [М+Н]+.
Пример 3. 5'-(7-Этил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)-2'-фторбифенил-4-сульфонамид
Получали в соответствии со способом, описанным выше для примера 1, используя 7-этил-4-(4-фтор-3-йодфенил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 10) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (подготовительный пример 80), с получением указанного в заголовке соединения с 57%-ным выходом, 24,8 мг.
ЖХ-МС (система 6) Rt составляет 1,27 минуты, МС m/z 398 [М+Н]+.
Пример 4. 7-Этил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метоксибифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пири-дазин
Перемешиваемый раствор 7-этил-4-(4-фтор-3-йодфенил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 10, 100 мг, 0,27 ммоль), 2-(4-этилсульфонил-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2] диоксаборолана (подготовительный пример 21, 88 мг, 0,27 ммоль) и карбоната цезия (177 мг, 0,54 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (1 мл) дегазировали аргоном в течение 10 мин с последующим добавлением ди-хлорида 1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроценпалладия (4,4 мг, 0,005 ммоль). Полученную смесь нагревали при 100°С в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и разбавляли EtOAc (15 мл). Органический слой промывали водой (10 мл) и насыщенным раствором рассола (10 мл), затем сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки колоночной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью CH2Cl2:МеОН в соотношении 98:2 получали указанное в заголовке соединение в виде не совсем белого твердого вещества с 13%-ным выходом, 15 мг.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.36 (t, 3Н), 1.68 (t, 3Н), 3.18 (q, 2Н), 3.90 (s, 3Н), 4.58 (q, 2Н), 7.35 (t, 1Н), 7.50 (s, 1Н), 7.54-7.60 (m, 2Н), 8.21 (dd, 1Н), 8.26 (s, 1Н), 8.27-8.29 (т, 1Н), 9.35 (s, 1Н). ЖХ-МС (система 7) Rt составляет 2,94 мин, МС m/z равно 441 [М+Н]+.
Пример 5. 5'-(7-Этил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)-2'-фтор-4-(изопропилсульфонил)-[1,1'-би-фенил]-2-карбонитрил
Раствор 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-этил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 11, 58 мг, 0,18 ммоль), бис(пинаколато)дибора (69 мг, 0,27 ммоль) и ацетата калия (35 мг, 0,35 ммоль) в диоксане (5,0 мл) при комнатной температуре продували газообразным азотом в течение 30 мин. К реакционной смеси, которую продували газообразным азотом в течение дополнительных 10 минут, добавляли [1,Г-бис(дифенилфосфино)ферроцен]-дихлорпалладий(П) (15 мг, 0,02 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 110°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до 40°С и добавляли 2-бром-5-(изопропилсульфонил)бензонитрил (подготовительный пример 25, 60 мг, 0,21 ммоль), карбонат натрия (74 мг, 0,70 ммоль) в Н2О (0,3 мл) и [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]-дихлорпалладий(П) (16,0 мг, 0,02 ммоль) и реакционную смесь продували газообразным азотом в течение 30 мин. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали через набивку целита, элюируя EtOAc (20 мл). Фильтрат промывали водой (20 мл), рассолом (10 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении с получением темно-коричневого масла. Масло очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя EtOAc, с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого масла. Материал дополнительно очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:CH2Cl2:МеОН в соотношении 1:1:0,1 с последующим элюированием через SCX-2 картридж, используя CH2Cl2, МеОН и смесь NH3/MeOH. Указанное в заголовке соединение получали в виде не совсем белого твердого вещества, 26%-ный выход, 21 мг.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.39 (d, 6Н), 1.70 (t, 3Н) 3.30 (q, 2Н) 4.61 (m, 1Н) 7.50 (m, 1Н) 7.85 (m, 1Н) 8.19 (m, 1Н) 8.33-8.43 (m, 4Н) 9.45 (s, 1Н). ЖХ-МС (Система 12) Rt составляет 2,46 мин, МС m/z 450 [М+Н]+.
Пример 6. 4-(4'-Циклобутилсульфонил)-6-фтор-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-7-этил-7Н-имидазо [4,5-с] пир ид аз ин
Смесь 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-этил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 11, 50 мг, 0,156 ммоль), 2-(4-(циклобутилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диокса-боролана (подготовительный пример 30, 82 мг, 0,233 ммоль) и карбоната натрия (50 мг, 0,468 ммоль) в диоксане (2,5 мл) и воде (0,5 мл) продували азотом в течение 10 мин. Добавляли тетракис(трифенил-фосфин)палладий(0) (18 мг, 0,02 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 98°С в течение 16 ч. Смесь разбавляли CH2Cl2 (30 мл), промывали водой (10 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме. Полученную смолу очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя EtOAc, с последующей препаративной ЖХВД с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества, 44%-ный выход, 32 мг.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCb): 5 м.д. 1.70 (t, 3Н), 2.05(m, 2Н), 2.27 (m, 2Н), 2.65 (m, 2Н), 2.82-2.95, (m, 4Н), 4.61 (q, 2H), 6.38 (m, 1H), 6.42-6.58 (m, 3Н), 8.25 (m, 1H), 8.33 (m, 1H), 8.42 (s, 1H), 9.42 (s, 1H). ЖХ-МС (система 11) Rt составляет 2,88 мин, МС m/z 467 [М+Н]+.
Пример 7. 4-(4'-Циклопропилсульфонил)-6-фтор-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-7-этил-7Н-ими-дазо[4,5-с]пиридазин
Стадия 1.
К дегазированному раствору 1-бром-4-(циклопропилсульфонил)-2-метоксибензола (подготовительный пример 33, 85 мг, 0,29 ммоль), бис(пинаколато)дибора (111 мг, 0,44 ммоль) и ацетата калия (86 мг, 0,88 ммоль) в диоксане (2 мл) добавляли дихлорид 1,Г-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(П) (24 мг, 0,03 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 100°С в течение 3 ч.
Стадия 2.
После охлаждения до комнатной температуры добавляли 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-этил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 11, 84 мг, 0,26 ммоль), карбонат натрия (96 мг, 0,88 ммоль) и воду (0,5 мл) и полученную смесь дегазировали и продували газообразным азотом с последующим добавлением тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (34 мг, 0,03 ммоль). После перемешивания при 90°С в течение 1,5 ч смесь охлаждали до комнатной температуры и оставляли стоять в течение 16 ч. Добавляли воду (3 мл) и этилацетат (3 мл) и полученную смесь пропускали через короткую набивку arbocel, затем разделяли. Водную фазу экстрагировали этилацетатом (2x3 мл) и объединенные органические слои сушили над MgSO4, затем концентрировали в вакууме. В результате очистки посредством колоночной хроматографии на силикагеле с элюированием смесью 1:39:60 МеОН/EtOAc/CH^b получали коричневое твердое вещество, которое растирали с метанолом с получением указанного в заголовке соединения в
виде не совсем белого твердого вещества, 37%-ный выход, 49 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.15 (m, 2Н), 1.41 (m, 2Н), 1.71 (t, 3H), 2.54 (m, 1H), 3.91 (s, 3Н), 4.59 (q, 2Н), 7.40 (t, 1H), 7.53 (m, 2Н), 7.60 (m, 1Н), 8.30 (m, 1H), 8.36 (m, 1H), 8.47 (s, 1H), 9.46 (s, 1H).
ЖХ-МС (система 12): Rt составляет 2,51 мин, МС m/z 453 [М+Н]+.
Примеры 8-15 получали в соответствии со способом, раскрытым выше для примера 7, используя либо объединенные стадию 1 и стадию 2, либо только одну стадию 2, как раскрыто, используя 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-этил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 11) или 4-хлор-7-этил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 8) и соответствующий арилбромид или бороновый сложный эфир, как раскрыто.
Пример
5'-1'7-Этил-7Я-имидазоГ4.5-с1тгоилазин-4-ил)-2'-Фтоо-Лг-метил6и(Ьенил-4-
сульФонамид
Используя 4-бром-К-метилбензолсульфон-f^^^f амид.
Аг= Х^Ь^ ЖХ-МС (Система 16): Rt составляет 2,73 мин, 3 0У/ мс 412 [М+Н]+
7-Этил-4-Г6-фтор-4 '-(метил сульфонил)бифенил-3-ил1-7#-имидазоГ4.5-с1-
шшидазин
^\jf Используя 4-6 ромфенил метил сульфон дг_ H^c J М2'.6-Ди(Ьтог-4Ч изошюпилсулыЬонил )-Г 1.1 '-би <Ьенил1-3-ил)-7-этил-7Н-
имидазоГ4.5-с1 пиоидазин
Используя 1-бром-2-фтор-4-(изопропил-sf^jsf сульфонил)бенгол (Подготовительный 1 3 | пример 34), H3 5'-(7-Этил-7Н-имидазоГ4,5-с1пиридазин-4-ил)-4-(этилсуль <Ьонил)-2'-6тоо-Г1.Г-
бифенил1-2-карбонитрил
Используя 4-(этилсульфонил)-2'-фтор-5'-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1-бифенил]-2-карбонитрил
Аг |
/^tv (Подготовительный пример 79) и Стадию 2
н3сг "^s-; CN
^0 ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,42 мин МС m/z 436 [М+Н]+
Примеры 16 и 17 получали в соответствии со способом, раскрытым выше для стадии 2 примера 7, используя 3-(7-этил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)бензолбороновую кислоту (подготовительный пример 63), карбонат цезия в качестве основания и соответствующий арилбромид, как раскрыто. Неочищенные остатки очищали препаративной ЖХВД (метод 1), элюируя в диапазоне 33-67% органики за градиентное время 10 мин.
Использовавшиеся условия ЖХ-МС: система 16
Стадия 1.
Раствор 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-циклопропил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 84, 50,0 мг, 0,150 ммоль), бис(пинаколато)дибора (57,0 мг, 0,23 ммоль), ацетата калия (29,0 мг, 0,30 ммоль) в диоксане (3,5 мл) при комнатной температуре продували азотом в течение 30 мин. К реакционной смеси, которую дополнительно продували азотом в течение 20 мин, добавляли[1,1'-бис(дифе-нилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (11,0 мг, 0,02 ммоль). Реакционную смесь нагревали до флегмообразования в течение 62 ч.
Стадия 2.
Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли 2-бром-5-(изопропил-сульфонил)бензонитрил (Подготовительный пример 25, 48,0 мг, 0,165 ммоль), карбонат натрия (56,0 мг, 0,530 ммоль) в воде (0,2 мл). Смесь продували азотом в течение 20 мин. Добавляли [1,1'-бис(дифенил-фосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (11,0 мг, 0,0150 ммоль) и смесь продували азотом в течение 10 мин и нагревали до 110°С. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры спустя 1,5 ч, фильтровали через целит и концентрировали в вакууме. Остаток очищали, используя колоночную хроматографию на силикагеле, элюируя смесью EtOAc/гептаны от 1:1 до 1:0, с получением оранжевого раствора, который кристаллизовался при концентрировании. Твердое вещество промывали EtOAc (3x5 мл), после чего разбавляли в ацетонитриле и концентрировали в вакууме 3 раза. Указанное в заголовке соединение получли в виде не совсем белого твердого вещества, 13%-ный выход, 10 мг.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.25 (br s, 2H), 1.30-1.39 (m, 8H), 3.29 (m, 1H), 3.70 (br s, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.84 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.32-8.45 (m, 3Н), 9.49 (s, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3 с каплей CD3OD): 5 -111,27 м.д. ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,59 минуты, МС m/z 462 [М+Н]+.
Пример 19. 7-Циклопропил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фторбифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пири-дазин.
4-Этилсульфонилфенилбороновую кислоту (19 мг, 0,09 ммоль) и 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-циклопропил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 84, 25 мг, 0,075 ммоль) обрабатывали, как описано в Примере 18, с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества с 38%-ным выходом, 12 мг.
1H ЯМР (400МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.24-1.35 (m, 7H), 3.17 (q, 2H), 3.69-3.72 (m, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.83 (d, 2H), 8.01 (d, 2H), 8.18-8.20 (m, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.37 (dd, 1H), 9.39 (s, 1H). ЖХ-МС (система 7): Rt составляет 2,99 мин, МС m/z 423 [М+Н]+.
Примеры 20-25 получали в соответствии со способом, раскрытым выше для примера 18, используя 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-циклопропил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 84) или 6-(3-йод-4-фторфенил)-9-циклопропил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 94) или, альтернативно, как раскрыто и с соответствующей бороновой кислотой или сложным эфиром, как раскрыто.
Пример
5'-(7-Циклопропил-7Н-имидазоГ4.5-с1пиридазин-4-ил)-2'-фтор-Г1Л'-бифенил1-4-
сульфонамид
j^^^s* Используя 4-бром-М-метилбензолсульфон-
н JLs. \ амид. ЖХ-МС (Система 11) Rt составляет
Аг= н3С < 2.32 мин; МС m/z равно 410 [М+Н]+ 0 О
7-Циклопоопил-4- <6- <Ьтоо-4'-( метил суль <Ьонил)би <Ьенил-3-ил 1-7Н-имидазоГ4.5 -
cl пиридазин
Используя 6-(3-хлор-4-фторфенил)-9-циклопро-пил-9Н-имидазо[4.5-с]пиридазин (Подготови-- тельный пример 92) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1Т " 1 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бен-золсульфонамид Ar= / - (Подготовительный пример 80) и Стадию 2. ° ° используя ацетат палладия. cataCXium А и фторид цезия в метаноле, ЖХ-МС (Система 14): Rt составляет 0,74 минуты, МС m/z 409 [М+Н]+
Пример
7-Циклопоопил-4-С4'-ГэтилсулыЬонил^-2'.6-ди6тоо-Г1.Г-би6енил1-3-ил')-7Н-
имидазоГ4.5-с1пиридазин
Используя 2-[4'-(этилсульфонил)-2',6-
дифторбифенил-3-ил]-4,4,5.5-тетраметил-
1,3,2-диоксаборолан (Подготовительный
пример 47) и 4-хлор-7-циклопропил-7Н-
А.г= /\ /^s. /\ имидазо[4,5-с] пиридазин (Подготовитель-Н3СГ F
0х 4 о НЬ|" пРимвр 91) и Стадию 2
ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,55 мин,
МС m/z 441 [М+Н]+
7-Циклопоопил-4-(6-6тоо-4'-(изопропилсуль6онил)-2'-метокси-Г1.Г-би(Ьенил1-
3-ил)-7Н-имидазоГ4.5-с1 пиридазин
Используя 2-(4-(изопропилсульфонил)-2-
- метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-
сн3 г^^г
1 |1 диоксаборолан (Подготовительный H3C^^S^4:::I^'^OCH3 пример 36) и Стадию 2.
° 0 ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,62
мин, МС m/z 467 [М+Н]+
7-Циклопоопил-4-(6- <Ьтоо-2'-метокси-4'-( метил суль6онил)-Г1.Г-би <Ьенил1-3-ил)-
7Н-имидазоГ4.5-с1 пиридазин
Используя 2-(6-фтор-2'-метокси-4'-(метил-сульфонил)-[1,Г-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (Подготовительный пример 18) и 4-хлор-7-
A.r= Н3С /Us. циклопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин ^•S^ ОСИ,
QX 4 О (Подготовительный пример 91) и Стадию
2. ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,42 мин, МС m/z 439 [М+Н]+
1 1
s о. с
/As.
5Ч7-Циклопропил-7Н-имидазоГ4.5
с1ттидазин-4-ил)-4-('этилсуль(Ьонил)-2'-
d)TOD- Г1.1 '-биФенил 1-2-каобонитоил
Испол ьзуя 2 -бром-5 -(этил сул ьфон ил )-
г X
бензонитрил (Подготовительный пример
Аг= HjC^^S^^-^^CN О О
75). ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,45 мин. МС m/z 448 [М+Н]+
Пример с]пиридазин
26. 7-Циклобутил-4-(4'-(этилсульфонил)-2',6-дифтор-[1,1'-бифенил]-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-
Раствор 2-(4'-(этилсульфонил)-2',6-дифтор-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-дио-ксаборолана (Подготовительный пример 83, 64 мг, 0,16) в диоксане (2,5 мл) добавляли к 6-хлор-9-циклобутил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазину (подготовительный пример 99, 33 мг, 0,16 ммоль), тетра-кис(трифенилфосфин)палладию(0) (18 мг, 0,016 ммоль), карбонату натрия (50 мг, 0,471 ммоль) и воде (0,5 мл). Газообразный азот барботировали через раствор в течение 10 мин и реакционную смесь затем нагревали до 80°С и перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли EtOAc (10 мл), фильтровали через набивку целлита, промывая EtOAc (10 мл). Органический слой промывали водой (10 мл) и рассолом (10 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. Неочищенный материал пропускали через SCX-2 картридж, промывая сначала МеОН, а затем 25% 7 М NH3 (в МеОН) в МеОН (50 мл). Остаток дополнительно очищали препаративной ЖХВД (система X) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества 15%-ный выход, 11 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 8 м.д. 1.18 (t, 3Н), 1.92-2.00 (m, 2Н), 2.56 (m, 2Н), 2.82 (m, 2Н), 3.46 (q, 2Н), 5.33 (m, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.92 (m, 3Н), 8.62 (m, 2Н), 9.02 (s, 1H), 9.61 (s, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, DMSO-d6): 8 -111.4 (m, 1F), -112,6 (m, 1F) м.д. ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,77 мин; m/z равно 455 [M+H]+.
Пример 27. 4-[4'-(Этилсульфонил)-6-фторбифенил-3-ил]-7-(1-метилциклопропил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин
Получали в соответствии со способом, раскрытым для примера 26, используя 4-хлор-7-(1-метил-циклопропил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 97) и 2-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан (подготовительный пример 48), с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 32%-ным выходом,
20 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 8 м.д. 1.02 (t, 3H), 1.33 (t, 3H), 2.06-2.12 (m, 2H), 3.16 (q, 2H), 4.48 (q, 2H), 7.40 (t, 1H), 7.84 (d, 2H), 8.01 (d, 2H), 8.21-8.23 (t, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.42 (dd, 1H), 9.37 (s, 1H). ЖХ-МС (система 7): Rt составляет 3,10 минуты, МС m/z 437 [М+Н]+.
Пример 28. 7-Циклобутил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фторбифенил-3-ил]-7Н-имидазо-[4,5-с]пирида-
зин
Получали в соответствии со способом, раскрытым для примера 26, используя 4-хлор-7-циклобутил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 99) и 2-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]-диоксаборолан (подготовительный пример 48), с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 10%-ным выходом, 10 мг.
1H ЯМР (400МГц, CDCl3): 8 м.д. 1.33 (t, 3Н), 2.01-2.11 (m, 2H), 2.71-2.83 (m, 4H), 3.16 (q, 2H), 5.285.34 (m, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.83 (d, 2H), 8.01 (d, 2H), 8.21-8.23 (m, 1H)+ 8.34 (s, 1H), 8.39 (d, 1H), 9.36 (s, 1H).
ЖХ-МС (система 7): Rt составляет 3,35 минуты, МС m/z 437 [М+Н]+.
Пример 29. 7-Циклобутил-4-(6-фтор-2'-метокси-4'-(метилсульфонил)-[1,1'-бифенил]-3-ил)-7Н-ими-дазо [4,5 -с] пиридазин
Получали в соответствии со способом, раскрытым для примера 26, используя 2-(6-фтор-2'-метокси-4'-(метилсульфонил)-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетра-метил-1,3,2-диоксаборолан (подготовительный пример 18) и 6-хлор-9-циклобутил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 99), с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества с 50%-ным выходом,
200 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 8 м.д. 2.01-2.14 (m, 2Н), 2.69-2.85 (m, 4Н), 3.13 (s, 3Н), 3.91 (s, 3Н), 5.31 (m, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.55-7.57 (m, 2Н), 7.64 (dd, 1H), 8.22 (dd, 1H), 8.27-8.31 (m, 1H), 8.38 (s, 1H), 9.37 (s,
1H).
19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 8-111 м.д. ЖХ-МС (система 13): Rt составляет 2,61 мин, МС m/z 453 [М+Н]+.
Пример 30. 4-[4'-(Этилсульфонил)-6-фторбифенил-3-ил]-7-пропил-7Н-имидазо[4,5-с]-пиридазин
Получали согласно способу, раскрытому для примера 26, используя 4-хлор-7-пропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 101) и 2-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан (подготовительный пример 48), с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 10%-ным выходом, 10 мг.
1Н ЯМР (400МГц, CDCl3): 8 м.д. 1.02 (t, 3H), 1.33 (t, 3H), 2.06-2.12 (m, 2H), 3.16 (q, 2H), 4.48 (q, 2H), 7.40 (t, 1H), 7.84 (d, 2H), 8.01 (d, 2H), 8.21-8.23 (t, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.42 (dd, 1H), 9.37 (s, 1H) м.д. ЖХ-МС (система 7): Rt составляет 3,27 минуты, МС m/z 425 [М+Н]+.
Пример 31. 4-[4'-(Этилсульфонил)-6-фторбифенил-3-ил]-7-(пропан-2-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пирида-
зин
Перемешиваемый раствор 4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил-бороновой кислоты (подготовительный пример 65, 30 мг, 0,097 ммоль), 4-хлор-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 6, 15 мг, 0,077 ммоль) и фосфита калия (33 мг, 0,154 ммоль) в диоксане (3 мл) и воде (0,7 мл) дегазировали аргоном в течение 10 мин, после чего добавляли трициклогексилфосфин (1,72 мг, 0,006 ммоль) и трис(дибензилиден-ацетон)палладий(0) (2,82 мг, 0,003 ммоль). Полученную смесь нагревали при 100°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали для удаления неорганических веществ и фильтрат концентрировали в вакууме для удаления летучих веществ. В результате очистки неочищенного остатка посредством препаративной ТСХ с элюированием 2%-ным МеОН в DCM получали указанное в заголовке соединение в виде не совсем белого твердого вещества с 27%-ным выходом, 9 мг.
1Н ЯМР (400МГц, CDCl3): 8 м.д. 1.33 (t, 3H), 1.76 (d, 6H), 3.18 (q, 2H), 5.20-5.24 (m, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.82 (d, 2H), 8.00 (d, 2H), 8.20-8.23 (m, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.41 (d, 1H), 9.36 (s, 1H). ЖХ-МС (система 9): Rt составляет 3,27 мин, МС m/z 425 [М+Н]+.
Пример 32. 2'-Фтор-5'-(7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)бифенил-4-сульфонамид
К 4-хлор-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазину (подготовительный пример 6, 50 мг, 0,254 ммоль) и 2'-фтор-5'-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бифенил-4-сульфонамиду (подготовительный пример 2, 131 мг, 0,254 ммоль) в диоксане (2,5 мл) добавляли Na2CO3 (80 мг, 0,759 ммоль), предварительно растворенный в воде (0,5 мл), и [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалла-дий(П) (7,3 мг, 0,009 ммоль). Реакционную смесь дегазировали азотом и нагревали под действием микроволнового излучения при 90°С в течение 15 мин. После охлаждения добавляли этилацетат и Na2SO4 и смесь декантировали и промывали этилацетатом. В результате очистки посредством колоночной хроматографии на силикагеле с элюированием смесью DCM:МеОН в соотношении от 1:0 до 9:1 получали указанный в заголовке продукт с 50%-ным выходом, 57 мг.
1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 8 м.д. 1.68 (d, 6H), 5.13 (s, 1H), 7.46 (s, 2H), 7.62 (dd, 1H), 7.85-7.91 (m, 2Н), 7.94-8.01 (m, 2Н), 8.54 (s, 1H), 8.63 (dd, 1H), 8.95 (s, 1H), 9.62 (s, 1H). ЖХ-МС Rt составляет 0,68 мин; МС m/z 412 [М+Н]+.
К раствору 2'-фтор-N-метил-5'-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бифенил-4-сульфона-мида (подготовительный пример 44, 112 мг, 0,29 ммоль) и 4-хлор-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с] пири-
Пример 33. 2'-Фтор-N-метил-5'-[7-(пропан-2-ил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил]бифенил-4-сульфонамид
дазина (подготовительный пример 6, 54 мг, 0,27 ммоль) в безводном диоксане (1,6 мл) добавляли водный раствор Na2CO3 (2 М, 0,41 мл, 0,81 ммоль) и поток газообразного азота барботировали через суспензию в течение 5 мин. Добавляли тетракистрифенилфосфинпалладий(0) (5,8 мг, 0,005 ммоль) и смесь нагревали под действием микроволнового излучения при 120°С в течение 12 мин. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли EtOAc (15 мл) и водой (30 мл). Органическую фазу экстрагировали и водный слой снова экстрагировали EtOAc (2x15 мл). Органические слои объединяли, промывали рассолом, сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме с получением красно-коричневого твердого вещества, которое суспендировали в EtOAc (2,5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Твердое вещество отфильтровывали, промывали EtOAc (2x1 мл) и затем сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 82%-ным выходом, 120 мг.
1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3): 8 м.д. 1.79 (d, 6H), 2.75 (d, 3Н), 4.52 (q, 1H), 5.24 (spt, 1H), 7.42 (dd, 1H), 7.81 (m, 2H), 7.99 (d, 2H), 8.26 (ddd, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.43 (dd, 1H), 9.42 (s, 1H). МС m/z 426 [М+Н]+.
Пример 34. 4-[4'-(Этилсульфонил)-2',6-дифторбифенил-3-ил]-7-(пропан-2-ил)-7H-имидазо[4,5-с] пиридазин
К раствору 2-[4'-(этилсульфонил)-2',6-дифторбифенил-3-ил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборо-лана (подготовительный пример 47, 48 мг, 0,12 ммоль) и 4-хлор-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пири-дазина (подготовительный пример 6, 22 мг, 0,11 ммоль) в безводном диоксане (0,56 мл) добавляли водный раствор Na2CO3 (2 М, 0,17 мл, 0,34 ммоль) и поток газообразного азота барботировали через суспензию в течение 5 мин. Добавляли тетракистрифенилфосфинпалладий(0) (2,3 мг, 0,002 ммоль) и смесь нагревали под воздействием микроволнового излучения при 120°С в течение в общей сложности 15 мин. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3x15 мл). Органические слои объединяли, промывали рассолом, сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме с получением красно-коричневого вязкого твердого вещества, которое очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с элюированием смесью гептан: EtOAc с получением указанного в заголовке соединения в виде желто-коричневого твердого вещества с 80%-ным выходом, 40 мг.
1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3): 8 м.д. 1.37 (t, 3H), 1.78 (d, 6H), 3.21 (q, 2H), 5.23 (spt, 1H), 7.44 (t, 1H), 7.71-7.75 (m, 1H), 7.78 (dd, 1H), 7.83 (dd, 1H), 8.30-8.39 (m, 3Н), 9.40 (s, 1H). ЖХ-МС (система 8): Rt составляет 3,12 мин; МС m/z 443 [М+Н]+.
Пример 35. 2'-Фтор-5'-(7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)-4-(изопропилсульфонил)-[1,1 '-бифенил] -2-карбонитрил
Раствор 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-изопропил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 87, 50,0 мг, 0,150 ммоль), бис(пинаколато)дибора (57,0 мг, 0,225 ммоль), ацетата калия (29,0 мг, 0,300 ммоль) в диоксане (3,5 мл) при комнатной температуре продували азотом в течение 30 мин. К реакционной смеси, которую затем продували азотом в течение 10 мин, добавляли[1,1'-бис(дифенил-фосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (11,0 мг, 0,0150 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 62 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли 2-бром-5-(изопропилсульфонил)бензонитрил (Подготовительный пример 25, 48,0 мг, 0,165 ммоль), карбонат натрия (56,0 мг, 0,530 ммоль) в воде (0,2 мл), продували азотом в течение 0,25 ч. Добавляли [1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (11,0 мг, 0,0150 ммоль) и реакционную смесь продували азотом в течение 10 мин и нагревали до 110°С. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры спустя 1,5 ч, фильтровали через целит и концентрировали в вакууме. Остаток очищали, используя колоночную хроматографию на силикагеле, элюируя смесью EtOAc/гептаны в соотношении от 1:1 до 0:1 с получением желтого раствора, который кристаллизовался при конденсировании. Твердое вещество промывали EtOAc (3x5 мл), после чего разбавляли в ацетонитриле и концентрировали в вакууме. Указанное в заголовке соединение получали в виде не совсем белого твердого вещества с 12%-ным выходом, 9,1 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 8 м.д. 1.39 (d, 6H), 1.78 (d, 6H), 3.30 (br m, 1H), 5.22 (br m, 1H), 7.50 (br s, 1H), 7.84 (br s, 1H), 8.20 (br s, 1H), 8.30-8.49 (m, 4H), 9.44 (s, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 8-111.53 м.д. ЖХ-МС (система 13): Rt составляет 2,61 мин; МС m/z 464 [М+Н]+.
Примеры 36-41 получали в соответствии со способом, раскрытым выше для примера 35, начиная с 6-(3-бром-4-фторфенил)-9-циклопропил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 87), если не указано иное, и соответствующего бромида или бороновой кислоты, как описано.
Пример
II сн,
4-(2'.6-дисЬтоо-4'-(изопоопилсуль(Ьонил)-П.Г-би6енил1-3-ил)-7-изопсопил-7Н-
имидазоГ4.5-с1пиридазин
Используя 1-бром-2-фтор-4-(изопропил-Kt= 1 3 \ |1 сульфонил)бензОл (Подготовительный HjC^^S^^^^F пример 34). ЖХ-МС (Система 12): Rt ° 0 составляет 2,74 мин, МС m/z 457 [М+Н]+
4-{6-Фтоо-4'-ГизопоопилсулыЬонил)-2'-метокси-Г1.Г-би(Ьенил1-3-ил)-4-
изопвопил-4Н-имилазоГ4.5-с1пиоилазин
Используя 2-(4-(изопропилсульфонил)-2-- метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-
сн3 7г
| диоксаборолан (Подготовительный
Аг= щег^З^^^^^СХ^щ пример 36 и Стадия 2). ЖХ-МС (Система
0 0 13): Rt составляет 2,76 мин, МС m/z 469
[М+Н]"
4-(6-Фтос-2'-метокси-4'-(метилсулыЬонил)-П.Г-би6енил1-3-ил)-7-изопсопил-
7Н-имидазоГ4,5-с1пиридазин
Используя 4-хлор-7-изопропил-7Н-ими-дазо[4,5-с] пиридазин (Подготовительный ^f^jr пример 6) и 2-(6-фтор-2'-метокси-1 4'(метилсульфонил)-[1,Г-бифенил]-3-ил)-
н3с. Д^.
Ar= ОСН3 4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан
° ° (Подготовительный пример 18) и Стадия 2.
ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,51 мин, МС m/z 441 [М+Н]+
Пример
/ \ СН3 II СН3
4-(2'-Хлор-4'-{этилсульфонил)-6-фтор-Г1.Г-бифенил1-3-ил)-7-изопропил-7Н-
имидазоГ4.5-с1 пиридазин
Используя 1-бром-4-(этилсульфонил)-2-хлор-| бензол (Подготовительный пример 102).
Ar= H^C^^S^^^^F ЖХ-МС (Система 13): Rt составляет 2,76 мин, 00 МС m/z 459 [М35С1+Н]+
4-(4'-(Этилсульфонил)-6-фтор-2'-метокси-[1,Г-бифенил]-3-ил)-7-изопропил-7Н-имидазо[4.5-с] пиридазин
Используя 2-(4' -(этилсульфонил)-б-фтор-2'-метокси-[1; 1 ,-бифeнил]-3-Шl)-4,4,5.5-^^'s\> *' тетраметпл-1,3,2-диоксаборолан (Под-|1 готовительный пример 42) и 4-хлОр-7-Ar= H3C^^S'^^::::^^^CCH3 изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин
(Подготовительный пример о и Стадию 2), ЖХ-МС (Система 12): Rt составляет 2.66 мин, МС m/z 455 [М+Н]+
4-(Этилсуль <Ьонил)-2'-(Ьтор-5'-{7-изопоопил-7г1-имидазоГ4.5-с1пиоидазин-4-ил)-
Г1,1 '-би <Ьенил1-2-карбонитрил
-.. Используя 2-бром-5-(этилсульфонил)-| бензоннтрнл (Подготовительный при-мер
Ar= HjC^^S^^^^CN 75), ЖХ-МС (Система 12): Rt составляет ° ° 2,49 мин, МС m/z 450 [М+Н]+
К раствору 2-(6-фтор-2'-метокси-4'-(метилсульфонил)-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 18, 376 мг, 0,99 ммоль) и 6-хлор-9-циклопентил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 13, 200 мг, 0,90 ммоль) в диоксане (20 мл) добавляли Na2CO3 (286 мг, 2,70 ммоль) в воде (5 мл). Полученный раствор дегазировали азотом, затем добавляли тетракис(трифенил-фосфин)палладий(0) (104 мг, 0,09 ммоль) и реакционную смесь дегазировали снова и нагревали при 110°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc (100 мл) и промывали водой (150 мл). Водный слой повторно экстрагировали EtOAc (2x100 мл) и объединенные органические слои сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Этот материал очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью 30-60% EtOAc:гептан, с последующим элюированием через SCX картридж, используя CH2Cl2, EtOAc, THF, МеОН и 7н. аммиак в МеОН с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 26%-ным выходом, 108 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.81-1.93 (m, 2Н), 1.96-2.05 (m, 2Н), 2.12-2.21 (m, 2Н), 2.38-2.46 (m, 2Н), 3.13 (s, 3Н), 3.91 (s, 3Н), 5.25 (m, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.55-7.57 (m, 2Н), 7.64 (dd, 1H), 8.22 (dd, 1H), 8.27-8.31 (m, 1H), 8.33 (s, 1H), 9.37 (s, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 5-111 м.д. ЖХ-МС (система 13): Rt составляет 2,73 мин, МС m/z 467 [М+Н]+.
Пример 43. 7-Циклопентил-4-(4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-7Н-ими-дазо[4,5-с]пиридазин
Суспензию 6-хлор-9-циклопентил-9Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 13, 52 мг, 0,23 ммоль), 2-(4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 42, 100 мг, 0,24 ммоль), карбоната натрия (2,0 М водный раствор, 0,36 мл) в диоксане (6 мл) дегазировали азотом в течение 30 мин. Добавляли тетра-кис(трифенилфосфин)палладий(0) (28 мг, 0,024 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 110°С и перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и набивку целлита промывали CH2Cl2 (10 мл). Добавляли воду (10 мл) и продукт экстрагировали CH2Cl2 (2x10 мл). Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали, используя колоночную хроматографию на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:гептаны в соотношении 8:2 с последующим элюированием через SCX картридж, используя МеОН, EtOAc, THF, DCM и 7 н. NH3 в МеОН, с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого масла с 14%-ным выходом, 15,2 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.38 (t, 3Н), 1.88 (m, 2Н), 2.01 (m, 2Н), 1.20 (m, 2Н), 2.41 (m, 2Н), 3.19 (q, 2H), 3.89 (s, 3Н), 5.22 (m, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.63 (m, 2Н), 8.21 (dd, 1H), 8.38 (m, 2Н), 9.38 (s, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): -111,3 м.д. ЖХ-МС (система 12): Rt составляет 2,81 мин, МС m/z
481 [М+Н]+.
Пример 44. 7-Этил-4-(4'-(этилсульфонил)-2'-фтор-6-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с] пиридазин
К 2-(4'-(этилсульфонил)-2'-фтор-6-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диокса-боролану (подготовительный пример 69, 90 мг, 0,21 ммоль) в диоксане (2,5 мл) и воде (1 мл) добавляли 4-хлор-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин (подготовительный пример 8, 40 мг, 0,21 ммоль) и карбонат натрия (68 мг, 0,64 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и добавляли тетракис(трифенил-фосфин)палладий(0) (25 мг, 0,02 ммоль). Реакционную смесь дополнительно дегазировали и затем нагревали до 110°С в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь, разбавленную EtOAc (40 мл), пропускали через целит и растворитель удаляли в вакууме. Неочищенный материал очищали посредством колоночной хроматографии с обращенной фазой, элюируя градиентом 0,1% -ной муравьиной кислоты в смеси MeCN/вода. Полученный остаток растворяли в DMSO (1 мл) и очищали, используя препаративную ЖХВД, с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцвет
ного твердого вещества с 26%-ным выходом, 24 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.37 (t, 3H), 1.68 (t, 3H), 3.19 (q, 2H), 3.91 (s, 3Н), 4.57 (q, 2H), 7.22 (d, 1H), 7.64-7.72 (m, 2H), 7.76-7.78 (m, 1H), 8.23 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.33-8.36 (m, 1H) 9.37 (s, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt составляет 2,22 минуты, МС m/z 441 [М+Н]+.
Пример 45. 4-(6-Хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-7-этил-7Н-имидазо[4,5-с] пиридазин
Получали согласно способу, описанному в примере 45, с использованием 2-(6-хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 56) и 4-хлор-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 8) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 19%-ным выходом, 9,9 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.37 (t, 3H), 1.68 (t, 3H), 3.21 (q, 2H), 3.88 (s, 3Н), 4.57 (q, 2H), 7.50 (m, 2H), 7.60 (dd, 1H), 7.68 (d, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.24 (dd, 1H), 8.27 (s, 1H), 9.36 (s, 1H). ЖХ-МС (система 11): Rt равно 2,44 мин, МС: m/z 456 [М350+Н]+.
Пример 46. 7-Этил-4-(4'-(этилсульфонил)-2',6-диметокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с] пиридазин
Получали согласно способу, описанному в примере 45, с использованием 2-(4'-(этилсульфонил)-2',6-диметокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 59) и 4-хлор-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 8) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 13%-ным выходом, 14,7 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.38 (t, 3H), 1.68 (t, 3H), 3.19 (q, 2H), 3.87 (s, 6Н), 4.56 (q, 2H), 7.19 (d, 1H), 7.53 (m, 3H), 8.12 (d, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.35 (dd, 1H), 9.36 (s, 1H). ЖХ-МС (система 11): Rt равно
2,33 минут, МС: m/z 453 [М+Н]+.
Пример 47. 5-(7-Этил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифе-нил] -2 -кар бо нитрил
Получали согласно способу, описанному в примере 45, с использованием (6-циано-4'-(этилсульфо-нил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)бороновой кислоты (подготовительный пример 67) и 4-хлор-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 8) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 10%-ным выходом, 10,1 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.38 (t, 3H), 1.71 (t, 3H), 3.21 (q, 2H), 3.95 (s, 3Н), 4.61 (q, 2H), 7.567.58 (m, 2H), 7.60-7.66 (m, 1H), 7.96 (d, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.35-8.38 (m, 1H), 9.40 (s, 1H). ЖХ-МС (система
11): Rt равно 2,30 мин, МС: m/z 448 [М+Н]+.
Пример 48. 5-(7-Этил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифе-нил]-2-о л
К перемешиваемому раствору 4-хлор-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 8, 80 мг, 0,44 ммоль) и 4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ола (подготовительный пример 89, 167 мг, 0,44 ммоль) в диоксане (15 мл) и воде (5 мл) добавляли карбонат натрия (106 мг, 1,0 ммоль) и реакционную смесь дегазировали перед добавлением тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (46 мг, 0,04 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 18 ч. По окончании этого времени реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, фильтровали через целит и фильтрат упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2:МеОН в соотношении от 95:5 до 9:1, и затем дополнительно очищали препаративной ЖХВД с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества 11%, 19 мг.
1H ЯМР (400МГц CDCl3): 5 м.д. 1.38 (t, 3H), 1.69 (t, 3H), 3.21 (q, 2H), 4.03 (s, 3Н), 4.57 (q, 2H), 7.23
Получали согласно способу, описанному в примере 44, с использованием 4-хлор-7-этил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 8) и 2-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолана (подготовительный пример 48). Неочищенный остаток растирали с EtOAc с последующей перекристаллизацией из MeCN с получением указанного в заголовке соединения.
1H ЯМР (400МГц CDCl3): 5 м.д. 1.34 (t, 3H), 1.70 (t, 3H), 3.17 (q, 2H), 4.61 (q, 2H), 7.42 (dd, 1H), 7.85 (d, 2H), 8.03 (d, 2H), 8.24 (ddd, 1H), 8.42 (dd, 1H), 9.39 (s, 1H). ЖХ-МС: Rt равно 1,15 мин; МС: m/z 411 [М+Н]+.
Пример 50. 7-Этил-4-[4-фтор-3-(2-метил-1,1 -диоксидо-2,3-дигидро-1,2-бензизотиазол-5-ил)фенил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин
Раствор 7-этил-4-[4-фтор-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 95, 70 мг, 0,190 ммоль), 1,1-диоксида 5-бром-2-метил-2,3-дигидро-1,2-бензизотиазола (подготовительный пример 39, 50 мг, 0,190 ммоль), карбоната цезия (124 мг, 0,380 ммоль) в DMF (2 мл) дегазировали с азотом в течение 30 мин. Добавляли бис(дифенилфосфино) ферроцен]дихлорпалладий(И) (12 мг, 0,019 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 95°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали и очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя 0-100% EtOAc в DCM с получением указанного в заголовке соединения (26 мг, 32%).
1H ЯМР (400МГц CDCl3): 5 м.д. 1.68 (t, 3H), 3.00 (s, 3H), 4.42 (s, 2H), 4.59 (q, 2H), 7.41 (t, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.93 (d, 1H), 8.20-8.25 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.39 (d, 1H), 9.38 (s, 1H). ЖХ-МС Rt равно 2,19 мин; МС: m/z 424 [М+Н]+.
Раздел подготовительных примеров
Подготовительный пример 1. 5'-Бром-2'-фторбифенил-4-сульфонамид.
К 4-бром-1-фтор-2-йодбензолу (361 мг, 1,2 ммоль) и 4-сульфамоилфенилбороновой кислоте (240 мг, 1,20 ммоль) в смеси диоксан/Н2О 4:1 (5 мл) добавляли Na2CO3 (382 мг, 3,60 ммоль) и [1,1'-бис(дифе-нилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (34,3 мг, 0,042 ммоль). Реакционную смесь нагревали в условиях микроволнового излучения при 120°С в течение 15 мин, охлаждали и разбавляли EtOAc и водой. Водный слой экстрагировали EtOAc и объединенные органические слои сушили над Na2SO4. Растворитель удаляли в вакууме и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:гептаны в соотношении от 0:1 до 1:1 с получением целевого продукта 55%, 218
мг, 55%.
ЖХ-МС: Rt равно 0,79 мин; МС: m/z 331 [М+Н]+.
Подготовительный пример 2. 2'-Фтор-5'-(4А5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бифенил-4-сульфонамид.
5'-Бром-2'-фторбифенил-4-сульфонамид (подготовительный пример 1, 118 мг, 0,303 ммоль) и бис(пинаколато)дибор (199 мг, 0,785 ммоль), КОАс (123 мг, 1,25 ммоль) и Pd(dppf)Cl2 (14,7 мг, 0,018 ммоль) суспендировали в диоксане (5 мл) и DMSO (0,2 мл). Реакционную смесь нагревали в условиях микроволнового излучения при 90°С в течение 20 мин и растворители удаляли при пониженном давлении. Очистка колоночной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью E^OAc^^^!)! в соотношении от 0:1 до 1:1 дала указанное в заголовке соединение с 81%-ным выходом, 110 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.25 (s, 12H), 6.20-6.29 (m, 2H), 7.04-7.11 (m, 1H), 7.56-7.61 (m, 2H), 7.69-7.74 (m, 1H), 7.77-7.81 (m, 1H), 7.89 (d, 2H). ЖХ-МС: Rt равно 0,89 мин; МС: m/z 378 [М+Н]+.
Подготовительный пример 3. 3,4,5-Трихлорпиридазин.
4,5-Дихлорпиридазин-3(2Н)-он (10,0 г, 60,6 ммоль) в POCl3 (60 мл, 642 ммоль) перемешивали при 110°С в течение 18 ч. Добавляли толуол и растворители удаляли при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли EtOAc (200 мл) и воду и органический слой промывали водой и рассолом и затем сушили над MgSO4. Концентрирование при пониженном давлении дало целевой продукт в виде не совсем белого твердого вещества с 90%-ным выходом, 10 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 9.10 (d, 1H). ЖХВД (метод 2): Rt равно 3,35 мин.
Подготовительный пример 4. 3,5-Дихлорпиридазин-4-амин.
Смесь 3,4,5-трихлорпиридазина (подготовительный пример 3, 500 мг, 2,73 ммоль) в EtOH (5,5 мл) и NH4OH (5,5 мл) нагревали в условиях микроволнового излучения при 120°С в течение 25 мин. Концентрирование при пониженном давлении и очистка колоночной хроматографией на силикагеле с элюиро-ванием смесью ацетон:дихлорметан (0-15% ацетон) дали указанный в заголовке продукт с 36%-ным выходом, 163 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 5.11 (br s, 2H), 8.74 (s, 1H). ЖХ-МС: Rt равно 0,27 мин; МС: m/z 164 [М+Н]+.
Подготовительный пример 5. 5-Хлор-^-изопропилпиридазин-3,4-диамин.
НОАс (2,47 мл, 42,7 ммоль) добавляли по каплям к смеси 3,5-дихлорпиридазин-4-амина (подготовительный пример 4, 1000 мг, 6,098 ммоль) и изопропиламина (7,27 мл, 85,4 ммоль), охлажденной до 0°С. Полученное твердое вещество/суспензию нагревали в условиях микроволнового излучения при 105°С в течение 5 ч. Реакционную смесь растворяли в минимальном количестве МеОН и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc: гептан 10%-90% с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-коричневого твердого вещества с 74%-ным выходом, 2,52 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.22-1.25 (m, 6H), 4.37 (d, 1H), 4.91 (d, 1H), 5.06 (s, 2H), 8.29 (s, 1H). ЖХ-МС Rt равно 0,4 мин; МС: m/z 187 [M^C^f.
Подготовительный пример 6. 4-Хлор-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Смесь 5-хлор-^-изопропилпиридазин-3,4-диамина (подготовительный пример 5, 1020 мг, 5,47 ммоль) в триэтилортоформиате (9 мл) нагревали при 130°С в течение 80 мин. Растворитель удаляли в вакууме и остаток растворяли в MeOH/DCM и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc: гептан 0-63% с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества с 76%-ным выходом, 816 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.76 (d, 6H), 5.10-5.23 (m, 1H), 8.34 (s, 1H), 9.14 (s, 1H).
ЖХ-МС Rt равно 1,1 минут; МС: m/z 197 [M^CH^lf.
Подготовительный пример 7. 5-Хлор-^-этилпиридазин-3,4-диамин.
Смесь 3,5-(дихлорпиридазин-4-ил)амина (Подготовительный пример 4, 15 г, 92 ммоль) и безводного этиламина (50 мл) нагревали до 120°С в течение 48 ч в герметично закрытой пробирке. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем добавляли к смеси воды (500 мл) и EtOAc (50 мл). Полученный осадок отделяли фильтрованием и осадок на фильтре промывали tBME и сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 51%-ным выходом, 8,1 г.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.18 (t, 3Н), 3.41 (q, 2Н), 6.08-6.11 (m, 3Н), 8.09 (s, 1H).
Подготовительный пример 8. 4-Хлор-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Смесь 5-хлор-^-этилпиридазин-3,4-диамина (подготовительный пример 7, 10,0 г, 58 ммоль) и три-этилортоформиата (60 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток растворяли в EtOAc (50 мл) и фильтровали. Осадок на фильтре промывали EtOAc и затем органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 45%-ным выходом, 4,8 г.
Подготовительный пример 9. 7-Этил-4-(4-фторфенил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин.
В раствор комнатной температуры 4-хлор-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 8, 9,6 г, 52,4 ммоль) в диоксане (300 мл) добавляли 4-фторбензолбороновую кислоту (8,8 г, 63 ммоль) и водный раствор Na2CO3 (1М, 260 мл, 262 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и продували газообразным азотом 3 раза. Затем добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (1,2 г, 1,0 ммоль) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Органический растворитель удаляли в вакууме и полученную водную смесь фильтровали. Осадок на фильтре сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 55%-ным выходом, 7 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.62 (t, 3Н), 4.50 (q, 2H), 7.19 (t, 2H), 8.14-8.18 (m, 2H), 8.21 (s, 1H), 9.27 (s, 1H).
Подготовительный пример 10. 7-Этил-4-(4-фтор-3-йодфенил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Концентрированную серную кислоту (10 мл) осторожно добавляли к 7-этил-4-(4-фторфенил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазину (подготовительный пример 9, 825 мг, 2,4 ммоль), погруженному в ледяную баню, и полученную реакционную смесь осторожно перемешивали при комнатной температуре до образования гомогенного раствора. К этому раствору порциями добавляли 1,3-дийод-5,5-диметилгидантоин (1,36 г, 3,58 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 5 мин. Вязкую смесь затем медленно вливали в водный раствор гидроксида натрия (1М, 10 мл) при 0°С при перемешивании. Черная суспензия медленно растворялась с образованием синего раствора. Добавляли CH2Cl2 (20 мл) и слои разделяли. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бисульфита натрия (20 мл), затем концентрировали в вакууме. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюи-руя смесью гептан: EtOAc от 1:1 до 0:100 с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 95%-ным выходом, 1,19 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.70 (t, 3H), 4.58 (q, 2H), 8.19-8.23 (m, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.65 (dd, 1H), 9.32 (s, 1H). ЖХ-МС Rt равно 1,44 мин; МС: m/z 369 [М+Н]+.
Подготовительный пример 11. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Концентрированную серную кислоту (66 г, 0,67 моль) осторожно добавляли к 7-этил-4-(4-фторфе-нил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазину (подготовительный пример 9, 2,3 г, 9,5 ммоль), помещенному в ледяную баню, и полученную реакционную смесь осторожно перемешивали при комнатной температуре до образования гомогенного раствора. К этому раствору порциями добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидан-тоин (2,7 г, 9,5 ммоль) и перемешивание продолжали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь осторожно вливали в водный раствор бисульфита натрия (200 мл) и затем подщелачивали водным раствором гидроксида натрия (2 М) до рН 8, поддерживая температуру ниже 20°С. Добавляли EtOAc (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир: CH2Cl2 в соотношении 1:1 с последующим растиранием с EtOAc с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 41%-ным выходом, 1,25 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.70 (t, 3H), 4.58 (q, 2H), 7.26-7.34 (m, 1H), 8.16-8.25 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.44-8.50 (m, 1H), 9.32 (s, 1H). ЖХВД (система 15): Rt равно 2,98 мин; LRMS МС m/z 323
Подготовительный пример 12. 5-Хлор-^-циклопентилпиридазин-3,4-диамин.
3,5-Дихлорпиридазин-4-амин (подготовительный пример 4, 1 г, 6,09 ммоль) добавляли к циклопен-тиламину (3,0 мл, 30,41 ммоль) и воде (1 мл) в герметичном контейнере из нержавеющей стали. Смесь нагревали в течение 16 ч при 150°С. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем упаривали в вакууме.
Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя EtOAc с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 90%-ным выходом, 1,17 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.43 (m, 2Н), 1.76 (m, 4Н), 2.21 (m, 2Н), 4.17 (m, 1H), 4.39 (br s, 2H), 4.48 (m, 1H), 8.39 (s, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 1,15 мин; МС m/z 213 [М+Н]+.
Подготовительный пример 13. 4-Хлор-7-циклопентил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Смесь 5-хлор^-3-циклопентилпиридазин-3,4-диамина (подготовительный пример 12, 1,2 г, 5,64 ммоль) и триэтилортоформиата (10 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 1,5 часов. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и растирали с EtOAc (20 мл). Твердое вещество отфильтровывали и фильтрат концентрировали досуха. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя EtOAc с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 51%-ным выходом, 902 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 5 м.д. 1.85 (m, 2Н), 2.07 (m, 2Н), 2.26 (m, 2Н), 2.44 (m, 2Н), 5.22 (dt, 1H), 8.82 (s, 1H), 9.19 (s, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 1,97 мин; МС m/z 223 [М+Н]+.
Подготовительный пример 14. 1-Бром-2-фтор-4-(метилсульфонил)бензол.
Раствор 4-бром-3-фторбензолсульфонилхлорида (10 г, 36,56 ммоль) в THF (100 мл) охлаждали до 0°С и добавляли по каплям моногидрат гидразина (6,2 мл, 127,96 ммоль). По окончании добавления реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 1 ч, затем добавляли гептан (500 мл). Образовавшийся осадок отфильтровывали и снова растворяли в промышленном метилированном спирте (200 мл). Добавляли ацетат натрия (18 г, 219,36 ммоль), а затем йодметан (11,38 мл, 182,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и растворитель концентрировали до половины начального объема. Добавляли воду (300 мл) и продукт экстрагировали EtOAc (3x300 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (300 мл) и сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя от 15% до 35% EtOAc/гептан с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества с 48%-ным выходом, 4,40 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 3.04 (s, 3H), 7.62 (dd, 1H), 7.70 (dd, 1H), 7.80 (dd, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 5 -102 м.д. ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,50 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 15. 1-Бром-2-метокси-4-(метилсульфонил)бензол.
К раствору 1-бром-2-фтор-4-(метилсульфонил)бензола (Подготовительный пример 14, 1,5 г, 5,93 ммоль) в МеОН (12 мл) добавляли метилат натрия (480 мг, 8,89 ммоль) и реакционную смесь подвергали облучению при 100°С в микроволновой печи в течение 1,5 ч. По истечении этого времени реакционную смесь гасили водой (50 мл) и продукт экстрагировали EtOAc (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 20-40% EtOAc в гептане с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества с 53%-ным выходом.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 3.06 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 7.39-7.41 (m, 2H), 7.75 (d, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,49 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 16. 2-(2-Метокси-4-(метилсульфонил)фенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
К раствору 1-бром-2-метокси-4-(метилсульфонил)бензола (подготовительный пример 15, 4,39 г, 16,56 ммоль) в диоксане (100 мл) добавляли бис(пинаколато)дибор (4,62 г, 18,21 ммоль) и ацетат калия (4,88 г, 49,68 ммоль). Полученную смесь дегазировали, затем добавляли [1,1'-бис(дифенилфос-фино)ферроцен]дихлорпалладий(П) (1,21 г, 1,66 ммоль) и снова дегазировали. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов и охлаждали до комнатной температуры в течение 18 ч. К этой реакционной смеси добавляли воду (300 мл), затем смесь фильтровали через целит и целит промывали EtOAc (300 мл). Фильтратные фазы отделяли и органический слой промывали рассолом (300 мл), затем сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 20-50% EtOAc :гептан с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 59%-ным выходом,
3,04 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 м.д. 1.36 (s, 12H), 3.04 (s, 3H), 3.91 (s, 3Н), 7.36 (d, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.82 (d, 1H). ЖХ-МС (система 13) Rt равно 2,71 мин, МС m/z 330 [M+NH4]+.
Подготовительный пример 17. 5'-Бром-2'-фтор-2-метокси-4-(метилсульфонил)-1,1'-бифенил.
Раствор 2-(2-метокси-4-(метилсульфонил)фенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 16, 3,04 г, 9,74 ммоль), 5-бром-2-фтор-йодбензола (2,66 г, 8,85 ммоль) и Na2CO3 (2,80 г, 26,55 ммоль) в диоксане (60 мл) и воде (15 мл) дегазировали, добавляли тетракис(трифенил-фосфин)палладий(0) и реакционную смесь снова дегазировали Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 3 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении Остаток распределяли между водой (100 мл) и EtOAc (100 мл) Органическую фазу отделяли и водный слой снова экстрагировали EtOAc (2x 100 мл) Объединенные органические слои сушили (Na2SO4), фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного материала Этот неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 10-30% EtOAc в гептане с получением указанного в заголовке соединения с 71%-ным выходом, 2,25 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 м.д. 3.11 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 7.04 (t, 1H), 7.43-7.51 (m, 4H), 7.60 (dd, 1H). 19F ЯМР (CDCl3, 376 МГц) 5-116 м.д. ЖХ-МС (система 13) Rt равно 3,10 мин, МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 18. 2-(6-Фтор-2'-метокси-4'-(метилсульфонил)-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
Раствор 5'-бром-2'-фтор-2-метокси-4-(метилсульфонил)-1,1'-бифенила (подготовительный пример 17, 2,25 г, 6,26 ммоль), бис(пинаколато)дибора (1,75 г, 6,89 ммоль) и ацетата калия (1,84 г, 18,78 ммоль, 3 экв) в диоксане (75 мл) дегазировали, затем добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпал-ладий(П) (511 мг, 0,626 ммоль) и смесь снова дегазировали Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли CH2Cl2 (100 мл), фильтровали через целит и целит промывали CH2Cl2 Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного материала, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя от 15% до 30% EtOAc в гептане с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла с количественным выходом, 2,80 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.33 (s, 12H), 3.10 (s, 3Н), 3.87 (s, 3H), 7.13 (dd, 1H), 7.46-7.49 (m, 2H), 7.58 (dd, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.81-7.85 (m, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 5 -109 м.д.
ЖХ-МС (Система 13): Rt равно 3,38 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 19. 1-Бром-4-(этилсульфонил)-2-фторбензол.
К раствору 4-бром-3-фторбензол-1-сульфонилхлорида (50 г, 0,184 моль) в THF (800 мл) при 0°С добавляли по каплям в течение 45 минут моногидрат гидразина (40-50%, 41,26 г, 0,644 моль). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре и затем растворитель удаляли при пониженном давлении для снижения объема. Добавляли гептан (100 мл) и твердое вещество отфильтровывали и промывали несколько раз гептанами. Полученное твердое вещество растворяли в этаноле (800 мл). Добавляли ацетат натрия (90,56 г, 1,104 моль) и этилйодид (143,49 г, 0,92 моль) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, растворитель удаляли при пониженном давлении до 30% от исходного объема. Реакционную смесь разбавляли водой (500 мл) и экстрагировали CH2Cl2 (3x250 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (2x 300 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали досуха с получением желтого масла. Неочищенный материал абсорбировали на диоксиде кремния и очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью циклогек-сан/EtOAc в соотношении 8/2 с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 64%-ным выходом, 31,70 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.29 (t, 3Н), 3.14 (q, 2Н), 7.57-7.59 (m, 1H), 7.65 (dd, 1H), 7.89 (dd, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,26 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 20. 1-Бром-4-(этилсульфонил)-2-метоксибензол.
В герметично закрытом сосуде 1-бром-4-(этилсульфонил)-2-фторбензол (Подготовительный пример 19, 34,89 г, 0,131 моль) растворяли в МеОН (400 мл) и добавляли метилат натрия (35,3 г, 0,653 моль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 12 ч и затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли водой (750 мл) и водный слой экстрагировали CH2Cl2 (2x 250 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (300 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали досуха с получением твердого вещества. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя градиентом циклогексан/EtOAc от 95/5 до 8/2 с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества с 75%-ным выходом,
27,32 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.29 (t, 3H), 3.12 (q, 2H), 3.97 (s, 3H), 7.35-7.38 (m, 2H), 7.74 (d, 1H). ЖХ-МС (Система 13): Rt равно 2,26 минут; МС m/z без ионизации.
1- Бром-4-(этилсульфонил)-2-метоксибензол также может быть получен согласно следующему по-
лучению.
Стадия 1. К предварительно охлажденной суспензии 2-бром-5-фторфенола (5 г, 26,18 ммоль) и карбоната калия (10,84 г, 78,54 ммоль) в DMF (15 мл) при 0-5°С добавляли метилйодид (4,75 мл, 39,27 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь распределяли между водой (20 мл) и EtOAc (50 мл). Органический слой отделяли и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc (3x50 мл). Органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором (20 мл) и сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 1-бром-4-фтор-2-метоксибензола в виде бесцветной жидкости с 93%-ным выходом, 5,00 г.
1H ЯМР (400МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 3.86 (s, 3Н), 6.74-6.79 (m, 1H), 7.06 (dd, 1H), 7.57-7.65 (m, 1H).
Стадия 2. В раствор 1-бром-4-фтор-2-метоксибензола (5,00 г, 24,39 ммоль) в DMF (15 мл) комнатной температуры добавляли этантиолат натрия (2,66 г, 31,71 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 72 ч. Реакционную смесь распределяли между водой (20 мл) и EtOAc (50 мл). Органический слой отделяли и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc (3x50 мл). Органические слои объединяли и промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), затем сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гексан:EtOAc в соотношении 98:2 с получением 1-бром-4-этилтио-2-метоксибензола в виде бесцветной жидкости с 17%-ным выходом, 1,00 г.
1H ЯМР (400МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.24 (t, 3Н), 3.01 (q, 2H), 3.85 (s, 3H), 6.82 (dd, 1H), 6.98 (s, 1H), 7.48 (d, 1H) м.д.
Стадия 3. В раствор 1-бром-4-этилтио-2-метоксибензола (1,00 г, 4,05 ммоль) в уксусной кислоте (60 мл) комнатной температуры добавляли моногидрат перборат натрия (889 мг, 8,91 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и полученный неочищенный материал распределяли между водой (20 мл) и CH2Cl2 (50 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), затем сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением указанного в заголовке продукта в виде бесцветной жидкости с 88%-ным выходом, 900 мг.
1H ЯМР (400МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.11 (t, 3H), 3.34 (q, 2H), 3.96 (s, 3H), 7.38 (dd, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.88 (d, 1H).
Подготовительный пример 21. 2-(4-(Этилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
Суспензию 1-бром-4-(этилсульфонил)-2-метоксибензола (Подготовительный пример 20, 2,00 г, 7,17 ммоль), бис(пинаколато)дибора (3,16 г, 10,75 ммоль), бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпал-ладия(П) (293 мг, 0,359 ммоль) и ацетата калия (1,76 г, 17,93 ммоль) в диоксане (40 мл) дегазировали с азотом в течение 20 мин и помещали на предварительно нагретую плитку при 100°С. Реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и промывали EtOAc (50 мл). Добавляли воду (75 мл) и продукт экстрагировали EtOAc (2x 50 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 15-65% tBME в гептанах с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества с 42%-ным выходом,
985 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.22 (t, 3H), 1.33 (s, 12H), 3.08 (q, 2H), 3.85 (s, 3Н), 7.27 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.99 (s, 1H).
Подготовительный пример 22. 2-Бром-5-(хлорсульфонил)бензойная кислота.
2- Бромбензойную кислоту (10,2 г, 50,8 ммоль) добавляли несколькими порциями к хлорсульфоно-
вой кислоте (50 мл) при 0°С и полученный раствор выдерживали при этой температуре в течение 15 мин.
Смесь затем нагревали при 115°С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной темпера-
туры и осторожно по каплям добавляли на лед. Полученную суспензию оставляли достигать комнатной
температуры и фильтровали. Твердое вещество сушили под вакуумом при 40°С в течение 16 ч. Указан-
- 37 -
ное в заголовке соединение получили в виде бежевого твердого вещества с 85%-ным выходом, 12,8 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 8.01 (m, 1H) 8.60 (s, 1H).
ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,26 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 23. 2-Бром-5-(изопропилсульфонил)бензойная кислота.
Гидрат гидразина (3,29 мл, 66,9 ммоль) добавляли по каплям к раствору 2-бром-5-(хлорсульфонил) бензойной кислоты (подготовительный пример 22, 10,0 г, 33,4 ммоль) в THF (100 мл) при 0°С. По окончании добавления смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и твердое вещество собирали фильтрованием. Твердое вещество промывали гептаном (3x20 мл) и сушили под вакуумом при 50°С в течение 18 ч. Твердое вещество растворяли в EtOH (100 мл) и добавляли NaOAc (16,4 г, 198 ммоль) и 2-йодпропан (16,7 мл, 165 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением не совсем белого твердого вещества. Это твердое вещество распределяли между EtOAc (50 мл) и 1М NaOH (100 мл). Водный слой отделяли, подкисляли до рН 1 с помощью 2М HCl и экстрагировали EtOAc (3x50 мл). Объединенные EtOAc экстракты сушили над MgSO4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением оранжевого масла. Это масло очищали колоночной хроматографией на силикаге-ле, элюируя смесью MeOH/CH2Cl2/AcOH в соотношении 5:95,5:0,5, с последующей дополнительной хроматографией, элюируя смесью гептаны/EtOAc в соотношении 4:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 8%-ным выходом, 0,78 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.34 (d, 6H) 3.24 (m, 1H) 7.86 (d, 1H) 7.92 (d, 1H) 8.45 (s, 1H). ЖХ-
МС (система 12): Rt равно 1,88 мин; МС m/z равно 307 [М+Н]+.
Подготовительный пример 24. 2-Бром-5-(изопропилсульфонил)бензамид.
2-Бром-5-(изопропилсульфонил)бензойную кислоту (подготовительный пример 23, 623 мг, 2,03 ммоль) и HATU (925 мг, 2,44 ммоль) растворяли в DMF (10 мл) и к этой смеси по каплям добавляли дии-зопропилэтиламин (1,74 мл, 10,0 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч и затем распределяли между водой (50 мл) и EtOAc (25 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2x10 мл) и объединенные органические экстракты промывали насыщенным рассолом (20 мл) и сушили (MgSO4). Растворитель удаляли при пониженном давлении с получением бледно-желтого твердого вещества.
Это вещество очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью МеОН/QH^C^ в соотношении 3:97 с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 59%-ным выходом, 362 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.15 (d, 6H) 3.50 (m, 1H) 7.76 (m, 3Н) 7.94 (dd, 1H) 8.08 (s, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 1,64 мин; МС m/z 306, 308 [M79Br+H]+.
Подготовительный пример 25. 2-Бром-5-(изопропилсульфонил)бензонитрил.
Триэтиламин (0,23 мл, 1,65 ммоль) добавляли к раствору 2-бром-5-(изопропилсульфонил)бензамида (подготовительный пример 24, 338 мг, 1,11 ммоль) в THF (10 мл) с последующим добавлением трифто-руксусного ангидрида (0,18 мл, 1,32 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, разбавляли EtOAc (30 мл) и промывали 2М NaHCO3 (20 мл), рассолом (20 мл) и органический слой сушили (MgSO4). Растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением бесцветного твердого вещества, 86%-ный выход, 273 мг. 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.32 (d, 6Н) 3.22 (m, 1H) 7.92 (m, 2Н) 8.15 (t, 1H).
ЖХ-МС (Система 12): Rt равно 2,45 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 26. 4-Бром-3-фторбензолтиол.
Перемешиваемый, охлаждаемый на льду раствор трифенилфосфина (23,0 г, 87,7 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) и DMF (1,6 мл) обрабатывали раствором 4-бром-3-фторбензол-1-сульфонилхлорида (8,00 г, 29,2 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь промывали 1н. водной HCl (80 мл) и концентрировали в вакууме. Полученное твердое вещество разбавляли 1н. водным NaOH (160 мл), твердое вещество фильтровали и фильтрат промывали 2-метокси-2-метилпропаном (3x150 мл) и подкисляли до рН 1 с помощью 1М водной HCl. Экстракция водного слоя 2-метокси-2-метилпропаном (3x100 мл) с последующей сушкой над сульфатом натрия и концентрированием в вакууме дала указанное в заголовке соединение в виде желтого масла с 66%-ным выходом, 3,97 г.
1ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 3.53 (s, 1H), 6.92 (m, 1H), 7.04 (m, 1H), 7.39 (m, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 3,17 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 27. (4-Бром-3-фторфенил)(циклобутил)сульфан.
Перемешиваемую смесь 4-бром-3-фторбензолтиола (подготовительный пример 26, 400 мг, 1,93 ммоль), карбоната цезия (691 мг, 2,12 ммоль) и бромциклобутана (287 мг, 2,12 ммоль) в DMSO (8 мл) нагревали при 70°С в течение 19 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, вливали в воду (30 мл) и экстрагировали 2-метокси-2-метилпропаном (30 мл), промывали водой (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. В результате получили указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла с 95%-ным выходом, 480 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.75-1.90 (m, 6H), 3.63 (m, 1H), 6.61 (m, 1H), 6.70 (m, 1H), 7.17 (m,
1Н) м.д.
Подготовительный пример 28. 1-Бром-4-(циклобутилсульфонил)-2-фторбензол.
3-Хлорбензопероксокислоту (1,12 г, 4,55 ммоль) добавляли порциями к охлажденному на льду раствору (4-бром-3-фторфенил)(циклобутил)сульфана (Подготовительный пример 27, 475 мг, 1,82 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Полученный осадок отфильтровывали и фильтрат промывали водным 1н. гидроксидом натрия (3x10 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме с получением твердого вещества. Этот материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2/гептаньI в соотношении от 1:1 до 3:1 и полученное твердое вещество растирали с гептаном (5x2 мл) и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 55%-ным выходом, 410 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 2.02 (m, 2Н), 2.22 (m, 2Н), 2.58 (m, 2Н), 3.81 (m, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.63 (m, 1H), 7.78 (m, 1H).
Подготовительный пример 29. 1-Бром-4-(циклобутилсульфонил)-2-метоксибензол.
Натрий (235 мг, 10,2 ммоль) добавляли к МеОН (6 мл) под азотом и смесь перемешивали до тех пор, пока весь натрий не прореагирует. Добавляли 1-бром-4-(циклобутилсульфонил)-2-фторбензол (подготовительный пример 28, 300 мг, 1,02 ммоль) и смесь перемешивали при 60°С в течение 10 ч. Добавляли 2%-ный водный бикарбонат натрия (36 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x36 мл), органические слои сушили над сульфатом натрия и затем концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2/EtOAc в соотношении 3:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 87%-ным выходом, 270 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 2.03 (m, 2Н), 2.20 (m, 2Н), 2.57(m, 2Н), 3.81 (m, 1H), 3.96, (m, 3Н), 7.34 (m, 2H), 7.71 (m, 1H). ЖХ-МС (система 11): Rt равно 3,07 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 30. 2-(4-(Циклобутилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
Смесь 1-бром-4-(циклобутилсульфонил)-2-метоксибензола (подготовительный пример 29, 345 мг, 1,13 ммоль), бис(пинаколато)дибора (316 г, 1,24 ммоль) и ацетата калия (332 мг, 2,26 ммоль) в диоксане (6 мл) продували азотом в течение 10 минут и затем обрабатывали дихлоридом 1,1'-бис(дифенилфосфи-но)ферроцен-палладия(П) (92 мг, 0,11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 90 мин. Добавляли дополнительное количество [1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(П) (300 мг, 0,04 ммоль) и бис(пинаколато)дибора (115 мг, 0,45 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 115°С в течение 6 ч. Смесь фильтровали через арбоцель и упаривали с получением смолы. Этот материал растирали с гептаном (15 мл) с получением черного твердого вещества, которое выделяли фильтрованием, и растирание затем повторяли. Полученное твердое вещество затем перемешивали в гептанах (20 мл) при 70°С в течение 30 мин, затем отфильтровывали и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде черного твердого вещества с 94%-ным выходом, 375 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.37 (s, 12H), 1.98 (m, 2H), 2.15(m, 2H), 2.55 (m, 2Н), 3.78, (m, 1H), 3.89 (s, 3Н), 7.30 (d, 1Н), 7.42 (m, 1H), 7.78 (m, 1H). ЖХ-МС (система 11): Rt равно 3,25 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 31. (4-Бром-3-фторфенил)(циклопропил)сульфан.
Перемешиваемую смесь 4-бром-3-фторбензолтиола (подготовительный пример 26, 400 мг, 1,93 ммоль), трет-бутилата калия (238 мг, 2,12 ммоль) и бромциклопропана (701 мг, 5,80 ммоль) в DMSO (10 мл) нагревали при 90°С в течение 16 ч. Добавляли дополнительное количество трет-бутилата калия (43 мг, 0,386 ммоль) и бромциклопропана (467 мг, 3,86 ммоль) и продолжали нагревание при 90°С в течение 30 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и вливали в 2-метокси-2-метилпропан (30 мл). Смесь промывали водой (2x30 мл), сушили над Na2SO4, концентрировали в вакууме и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя гептанами с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла с 27%-ным выходом, 130 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 0.71-1.90 (m, 2Н), 1.12 (m, 2Н), 2.16 (m, 1H), 6.98 (m, 1H), 7.15 (m, 1H), 7.42 (m, 1H).
Подготовительный пример 32. 1-Бром-4-(циклопропилсульфонил)-2-фторбензол.
3-Хлорбензопероксикислоту (307 мг, 1,25 ммоль) добавляли порциями к охлажденному на льду раствору (4-бром-3-фторфенил)(циклопропил)сульфана (подготовительный пример 31, 123 мг, 0,50 ммоль) в CH2Cl2 (3 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Полученный осадок отфильтровывали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением твердого вещества. Это твердое вещество растворяли в EtOAc (10 мл), промывали 1М водным гидроксидом натрия (8 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме с получением белого порошка. Этот материал растирали с гептаном (10 мл), фильтровали и сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 83%-ным выходом, 115 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.09 (m, 2Н), 1.38 (m, 2Н), 2.47 (m, 1H), 7.60 (m, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.78 (m, 1H).
Подготовительный пример 33. 1-Бром-4-(циклопропилсульфонил)-2-метоксибензол. Натрий (95 мг, 4,12 ммоль) добавляли порциями к МеОН (2 мл). После перемешивания при комнат- 39
ной температуре в течение 1 ч этот раствор добавляли по каплям к суспензии 1-бром-4-(циклопропил-сульфонил)-2-фторбензола (подготовительный пример 32, 115 мг, 0,41 ммоль) в МеОН (2 мл) и полученную смесь перемешивали при 60°С в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли воду (10 мл) и CH2Cl2 (10 мл) и полученную смесь распределяли. Водный слой экстрагировали CH2Cl2 (2x 10 мл) и объединенные органические слои промывали рассолом (20 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме. Очистка колоночной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью гептаны/CH2Cl2 в соотношении 1:2 дала указанное в заголовке соединение в виде бесцветного твердого вещества с 73%-ным выходом, 88 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.05 (m, 2Н), 1.35 (m, 2Н), 2.46 (m, 1H), 3.98 (s, 3Н), 7.36 (m, 2Н), 7.73 (d, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,76 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 34. 1-Бром-2-фтор-4-(изопропилсульфонил)бензол.
К раствору 4-бром-3-фторбензол-1-сульфонилхлорида (5,40 мл, 36,5 ммоль) в THF (150 мл) при 0°С добавляли по каплям в атмосфере азота моногидрат гидразина (6,20 мл, 63,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч. Растворитель удаляли в вакууме и заменяли на гептаны (150 мл) и полученный осадок собирали фильтрованием. Твердое вещество растворяли в промышленном метилированном спирте (150 мл) и к этому раствору добавляли ацетат натрия (17,9 г, 218 ммоль) и 2-бромпропан (17,2 мл, 183 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при 85°С в течение 16 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили водой (300 мл), а затем экстрагировали CH2Cl2 (3x300 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом (300 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc: гептаны в соотношении 20/80 с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества с 12%-ным выходом, 1,19 г.
1H ЯМР (400МГц CDCl3): 5 м.д. 1.30 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 3.20 (m, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.63 (dd, 1H), 7.78 (dd, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 2,71 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 35. 1-Бром-4-(изопропилсульфонил)-2-метоксибензол.
К диоксану (5 мл) и МеОН (0,216 мл) добавляли раствор трет-бутилата калия (1MB THF, 5,16 мл) и смесь перемешивали в течение 15 мин. К этой смеси добавляли 1-бром-2-фтор-4-(изопропилсульфонил) бензол (подготовительный пример 34, 500 мг, 1,78 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 60°С. Охлажденную реакционную смесь гасили водой (15 мл) и экстрагировали EtOAc (3x15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO4, фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc/гептаны в соотношении от 33/67 до 100/0 с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества с 75%-ным выходом.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.31 (d, 6H), 3.20 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 7.32-7.35 (m, 2Н), 7.74 (d,
1H).
Подготовительный пример 36. 2-(4-(Изопропилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
К раствору 1-бром-4-(изопропилсульфонил)-2-метоксибензола (подготовительный пример 35, 858 мг, 2,93 ммоль) добавляли ацетат калия (862 мг, 8,78 ммоль) и бис(пинаколато)дибор (817 мг, 3,22 ммоль) и реакционную смесь дегазировали с азотом в течение 30 мин. Добавляли дихлорид 1,1'-бис (ди-фенилфосфино)ферроценпалладия (119 мг, 0,15 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 16 ч в атмосфере азота. Охлажденную реакционную смесь фильтровали через целит, затем концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью E^OAc^^^!)! (в соотношении от 0:100 до 50:50 и до 100:0) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (1,30 g).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.28 (d, 6H), 1.37 (s, 12H), 3.18 (m, 1H), 3.89 (s, 3Н), 7.30 (d, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.81 (d, 1H).
Подготовительный пример 37. 5'-Бром-2'-фтор-4-(изопропилсульфонил)-2-метокси-1,1'-бифенил.
К раствору 2-(4-(изопропилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 36, 374 мг, 1,10 ммоль) и 5-бром-2-фторйодбензола (300 мг, 1,00 ммоль) в диоксане (6 мл) и воде (2,5 мл) добавляли карбонат натрия (317 мг, 3,00 ммоль). Смесь дегазировали с азотом в течение 20 мин, добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (58,0 мг, 0,05 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 100°С в атмосфере азота в течение 12 ч. Охлажденную реакционную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3 x 10 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO4, фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc/циклогексан в соотношении 25/75 с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла с 69%-ным выходом, 0,27 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.35 (d, 6H), 3.25 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 7.03 (t, 1H), 7.41-7.50 (m, 4Н), 7.54 (d, 1H). ЖХ-МС: (система 11): Rt равно 2,79 мин; МС m/z 406 [M81Br+NH4]+.
Подготовительный пример 38. 2-(6-Фтор-4'-(изопропилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)
4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
К раствору 5'-бром-2'-фтор-4-(изопропилсульфонил)-2-метокси-1,1'-бифенила (подготовительный пример 37, 267 мг, 0,69 ммоль) и бис(пинаколато)дибора (193 мг, 0,76 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли ацетат калия (202 мг, 2,07 ммоль) и реакционную смесь дегазировали с азотом в течение 20 мин. Добавляли дихлорид 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладия (28,0 мг, 0,03 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 14 ч в атмосфере азота. Охлажденную реакционную смесь фильтровали через целит, затем концентрировали в вакууме.
Дополнительную очистку не проводили, материал использовали непосредственно на следующей стадии. Указанное в заголовке соединения получили в виде темного масла с количественным выходом,
299 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.26 (s, 12H), 1.35 (d, 6H), 3.24 (m, 1H), 3.86 (s, 3Н), 7.14 (dd, 1H), 7.42-7.55 (m, 3Н), 7.76 (dd, 1H), 7.84 (m, 1H). ЖХ-МС (система 11): Rt равно 2,98 мин; МС m/z 452
[M+NH4]+.
Подготовительный пример 39. 1,1-Диоксид 5-бром-2-метил-2,3-дигидро-1,2-бензизотиазола.
К суспензии 1,1-диоксида 5-бром-2,3-дигидро-1,2-бензизотиазола (200 мг, 0,92 ммоль) и карбоната калия (128 мг, 0,92 ммоль) в EtOH (2 мл) добавляли йодметан (0,2 мл, 3,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч с последующим нагреванием до 50°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали, концентрировали в вакууме и разбавляли DCM (20 мл). Раствор промывали водой (20 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (1,75 г, 83%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 2.98 (s, 3Н), 4.34 (s, 2H), 7.58 (s, 1H), 7.70 (s, 2Н). ЖХ-МС: Rt равно 2,54 мин; МС m/z 262 [M79Br+H]+.
Подготовительный пример 40. Этил-(3,5-дихлорпиридазин-4-ил)имидоформиат.
К перемешиваемой суспензии 3,5-дихлор-4-аминопиридазина (5 г, 31 ммоль) в триэтилортоформиа-те (205 мл) добавляли пара-толуолсульфонат пиридиния (387 мг, 1,5 ммоль) и полученный раствор нагревали при 100°С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем упаривали в вакууме и неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью re^^^OAc (80:20) с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-коричневого масла с 60%-ным выходом, 4 г.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.34 (t, 3Н), 4.36 (q, 2Н), 8.17 (s, 1H), 9.28 (s, 1Н). ЖХ-МС (система 7): Rt равно 2,92 мин; МС m/z 220 [М+Н]+.
Подготовительный пример 41. 5'-Бром-4-(этилсульфонил)-2'-фтор-2-метокси-1,1'-бифенил.
Суспензию 4-бром-1-фтор-2-йодбензола (420 мг, 1,39 ммоль), 2-(4-(этилсульфонил)-2-метокси-фенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 21, 500 мг, 1,53 ммоль), 2М водного раствора карбоната натрия (2,5 мл) и диоксана (10 мл) дегазировали с азотом в течение 30 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (80 мг, 0,07 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 110°С и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (10 мл), экстрагировали EtOAc (2x 10 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептаны/EtOAc в соотношении 7/3 с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества с 73%-ным выходом, 418 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.37 (t, 3H), 3.18 (q, 2H), 3.82 (s, 3Н), 7.03 (1H, dd), 7.46 (m, 4H), 7.59 (d, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 3,21 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 42. 2-(4'-(Этилсульфонил)-6-фтор-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
Суспензию 5'-бром-4-(этилсульфонил)-2'-фтор-2-метокси-1,1'-бифенила.
(Подготовительный пример 41, 400 мг, 1,07 ммоль), бис(пинаколато)дибора (300 мг, 1,18 ммоль), бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(11) (87,4 мг, 0,107 ммоль) и ацетата калия (315 мг, 3,21 ммоль) в диоксане (20 мл) дегазировали с азотом в течение 20 мин и помещали на предварительно нагретую плитку при 100°С. Реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 18 ч, охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и промывали CH2Cl2 (10 мл). Добавляли воду (20 мл) и водный слой экстрагировали CH2Cl2 (2x 10 мл). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептаны:EtOAc в соотношении 8:2 с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества с 93%-ным выходом, 391 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.36 (t, 3Н), 1.37 (12Н, s), 3.19 (q, 2H), 3.82 (s, 3Н), 7.14 (dd, 1H), 7.41 (m, 2H), 7.49 (d, 1H), 7.73 (d, 1H), 7.82 (dd, 1H).
LC (Система 12): Rt равно 3,49 мин.
Подготовительный пример 43. 5'-Бром-2'-фтор-^метилбифенил-4-сульфонамид. К раствору 4-бром-1-фтор-2-йодбензола (207 мг, 0,69 ммоль) в безводном диоксане (3,4 мл) добавляли [4-(метилсульфамоил)фенил]бороновую кислоту (148 мг, 0,69 ммоль) и водный раствор Na2CO3
(2М, 1,03 мл, 2,06 ммоль). Поток газообразного азота барботировали через эту реакционную смесь в течение 6 мин. Добавляли тетракистрифенилфосфинпалладий(О) (24 мг, 0,021 ммоль) и смесь нагревали в условиях микроволнового излучения при 120°С в течение 12 мин. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли EtOAc, обрабатывали безводным Na2SO4 и фильтровали, промывая твердые вещества EtOAc до полного элюирования соединения. Фильтрат упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гептан:EtOAc в соотношении от 100:0 до 60:40 с получением указанного в заголовке соединения в виде прозрачного бесцветного остатка с 67%-ным выходом, 159 мг.
1H ЯМР (500 МГц, CDCl3): 5 м.д. 2.74 (d, 3H), 4.38 (q, 1H), 7.10 (dd, 1H), 7.51 (ddd, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.66-7.71 (m, 2Н), 7.93-7.98 (m, 2Н). ЖХ-МС (система 8) Rt равно 3,40 мин; МС m/z 344 [М+Н]+.
Подготовительный пример 44.
2'-Фтор-N-метил-5'-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бифенил-4-сульфонамид.
5'-Бром-2'-фтор^-метилбифенил-4-сульфонамид (подготовительный пример 43, 157 мг, 0,46 ммоль), бис(пинаколато)дибор (128 мг, 0,50 ммоль) и ацетат калия (134 мг, 1,37 ммоль) суспендировали в безводном диоксане, который содержал 1% диметилсульфоксида (об./об.) (2,30 мл), во флаконе для микроволновой обработки и через эту супензию барботировали в течение 5 мин газообразный азот. Затем добавляли дихлор[1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(П) (19 мг, 0,023 ммоль), флакон герметично закрывали и красную смесь нагревали при 100°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли EtOAc (30 мл) и водой (30 мл) и фильтровали через набивку целита. Органическую фазу экстрагировали и водный слой подвергали обратной экстракции EtOAc (2x 10 мл). Органические фазы объединяли, промывали рассолом (10 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат упаривали в вакууме. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан:EtOAc в соотношении от 100:0 до 60:40 с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-рыжего твердого вещества с 86%-ным выходом, 153 мг.
1H ЯМР (500 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.36 (s, 12H), 2.72 (d, 3Н), 4.25-4.43 (m, 1H), 7.19 (dd, 1H), 7.74 (dd, 2H), 7.82-7.87 (m, 1H), 7.89-7.96 (m, 3Н). ЖХ-МС (система 8) Rt равно 3,77 мин; МС m/z 392 [М+Н]+.
Подготовительный пример 45. 2-[4-(Этилсульфонил)-2-фторфенил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-дио-ксаборолан.
1-Бром-4-(этилсульфонил)-2-фторбензол (подготовительный пример 19, 200 мг, 0,75 ммоль), бис (пинаколато)дибор (200 мг, 0,79 ммоль) и ацетат калия (220 мг, 2,25 ммоль) суспендировали в диметил-сульфоксиде (5,0 мл) и через эту супензию барботировали в течение 5 мин газообразный азот. Затем добавляли дихлор[1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(П) (18 мг, 0,022 ммоль) и смесь нагревали при 90°С в течение 16,5 ч. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли EtOAc (30 мл) и полунасыщенным водным солевым раствором (10 мл). Органическую фазу экстрагировали и водный слой подвергали обратной экстракции EtOAc (10 мл). Органические слои объединяли, сушили над Na2SO4, фильтровали и фильтрат упаривали в вакууме. Полученный материал очищали колоночной хроматографией на силика-геле, элюируя смесью гептан:EtOAc в соотношении от 100:0 до 1:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества с 70%-ным выходом, 170 мг.
1H ЯМР (500 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.27-1.30 (m, 3Н), 1.39 (s, 12H), 3.13 (q, 2H), 7.58 (dd, 1H), 7.68 (dd, 1H), 7.95 (dd, 1H).
Подготовительный пример 46. 5'-Бром-4-(этилсульфонил)-2,2'-дифторбифенил.
К раствору 2-[4-(этилсульфонил)-2-фторфенил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 45, 102 мг, 0,33 ммоль) и 4-бром-1-фтор-2-йодбензола (108 мг, 0,36 ммоль) в толуоле (0,56 мл) и этаноле (0,14 мл) добавляли водный раствор Na2CO3 (1М, 0,55 мл, 0,55 ммоль). Через эту су-пензию барботировали в течение 5 мин газообразный азот. Затем добавляли дихлор[1,1'-бис(дифенил-фосфино)ферроцен]палладий(11) (13 мг, 0,016 ммоль) и смесь нагревали при 80°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3x20 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и фильтрат упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью геп-тан:EtOAc в соотношении от 100:0 до 70:30 с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества с 57%-ным выходом, 67 мг.
1H ЯМР (500 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.36 (t, 3Н), 3.19 (q, 2H), 7.12 (t, 1H), 7.53-7.59 (m, 2H), 7.61 (t, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.80 (dd, 1H). ГХМС: Rt равно 5,39 мин; МС m/z 361 [M79Br+H]+.
Подготовительный пример 47. 2-[4'-(Этилсульфонил)-2',6-дифторбифенил-3-ил]-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
Получали согласно способу, описанному для подготовительного примера 42, с использованием 5'-бром-4-(этилсульфонил)-2,2'-дифторбифенила (подготовительный пример 46) и бис(пинаколато)дибора с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества с 62%-ным выходом, 53 мг.
1H ЯМР (500 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.34 (t, 3Н), 1.36 (s, 12H), 3.18 (q, 2H), 7.21 (dd, 1H), 7.64 (m, 1H), 7.72 (dd, 1H), 7.77 (dd, 1H), 7.82-7.86 (m, 1H), 7.88-7.93 (m, 1H).
Подготовительный пример 48. 2-(4'-Этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил [1,3,2]
диоксаборолан.
Раствор дихлорида 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладия (314 мг, 0,38 ммоль), ацетата калия (2,26 г, 23,1 ммоль), бис(пинаколато)дибора (2,15 г, 8,46 ммоль) и 5'-бром-2'-фторбифенил-4-илэтилсульфона (подготовительный пример 49, 2,64 г, 7,71 ммоль) в безводном диоксане (80 мл) затем нагревали при 120°С в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали через целит и промывали CH2Cl2 (100 мл). Фильтрат упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде темно-коричневого масла. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гептан: EtOAc в соотношении 1:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 72%-ным выходом, 2,15 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.31 (t, 3Н), 1.35 (s, 12H), 3.15 (q, 2H), 7.18 (dd, 1H), 7.75-7.79 (m, 2H), 7.84 (ddd, 1H), 7.90 (dd, 1H), 7.94-7.98 (m, 2H). ЖХ-МС (система 1): Rt равно 2,95 мин; МС m/z 391[M+H]+.
Подготовительный пример 49. 5'-Бром-2'-фторбифенил-4-илэтилсульфон.
К дегазированному при комнатной температуре раствору 4-бром-1-фтор-2-йодбензола (2,80 г, 9,30 ммоль) и 4-(этилсульфонил)бензолбороновой кислоты (2,27 г, 10,6 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (120 мл) добавляли водный раствор Na2CO3 (1М, 46,5 мл, 46,5 ммоль), а затем тетракистрифенилфосфинпал-ладий(0) (537 мг, 0,465 ммоль). Слегка желтый раствор дегазировали 3 раза перезаполнением вакуума/ азота, затем нагревали до 100°С при перемешивании в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали, затем суспендировали в CH2Cl2 (50 мл) и фильтровали через набивку целита. Набивку тщательно промывали CH2Cl2 (100 мл) и фильтрат промывали водой (2x50 мл), затем сушили над безводным MgSO4 (s), фильтровали и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде желтого масла. Очистка колоночной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью гептан: EtOAc в соотношении 1:1 дала указанное в заголовке соединение в виде бесцветного масла с 84%-ным выходом, 2,696 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.32 (t, 3H), 3.19 (q, 2H), 7.09 (dd, 1H), 7.50 (ddd, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.98 (d, 2H). ЖХ-МС (система 4): Rt равно 1,37 мин; МС m/z 345 [M^B^f.
Подготовительный пример 50. 1-Бром-2-(дифторметил)-4-фторбензол.
К раствору 2-бром-5-фторбензальдегида (1,00 г, 4,92 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) при 0°С добавляли раствор трифторида диэтиламиносеры (0,98 мл, 7,38 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь вливали в насыщенный водный раствор NaHCO3 (10 мл) и органические фазы экстрагировали CH2Cl2 (2x20 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде оранжевого масла (928 мг, 84%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 6.81 (t, 1H), 7.04 (m, 1H), 7.37 (dd, 1H), 7.58 (m, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 5 -115.7 (d, 2F), -112.1 (s, 1F) м.д. ЖХ-МС (система 12): Rt равно 2,87 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 51. (4-Бром-3-(дифторметил)фенил)(этил)сульфан.
1-Бром-2-(дифторметил)-4-фторбензол (подготовительный пример 50, 772 мг, 3,43 ммоль) и этан-тиолат натрия (352,7 мг, 3,77 ммоль) в DMSO (5 мл) нагревали при 50°С в течение 18 ч. После охлаждения к этой реакционной смеси добавляли воду (70 мл) и продукт экстрагировали EtOAc (20 мл x 3). Объединенные органические слои концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя гептаном с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (260 мг, 28%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.33 (3Н, t), 2.98 (2Н, q), 6.88 (1H, t), 7.25 (1H, d), 7.50 (1H, d), 7.56 (1Н, s). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 3,40 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 52. 1-Бром-2-(дифторметил)-4-(этилсульфонил)бензол.
Раствор (4-бром-3-(дифторметил)фенил)(этил)сульфана (подготовительный пример 51, 260 мг, 0,97 ммоль) и 3-хлорпероксибензойной кислоты (722 мг, 2,92 ммоль) в CH2Cl2 (10 мл) перемешивали в течение 66 ч. Добавляли карбонат калия (2М, 20 мл) и водную фазу экстрагировали CH2Cl2 (20 мл x 2). Объединенные органические слои концентрировали и продукт очищали колоночной хроматографией с обращенной фазой, элюируя смесью ацетонитрил плюс 0,1%-ная муравьиная кислота и смесью вода плюс 0,1%-ная муравьиная кислота в соотношении от 3:97 до 60:40 с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла 35%, 120 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.30 (3Н, t), 3.16 (2Н, q), 6.94 (1H, t), 7.04-7.89 (2Н, m), 8.19 (1H, s). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 2,56 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 53. трет-Бутил-(4-хлор-3-йодфенокси)диметилсилан.
К раствору 4-хлор-3-йодфенола (2 г, 7,86 ммоль) в безводном 2-метилтетрагидрофуране (10 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (1,25 г, 8,28 ммоль), затем имидазол (642 мг, 68,1 ммоль) Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли EtOAc (10 мл) и смесь промывали водным раствором гидроксида натрия (2М, 3x 10 мл), водой (10 мл) и рассолом (10 мл), сушили над Na2SO4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на си-ликагеле, элюируя смесью гептан: EtOAc в соотношении 90:10 с получением указанного в заголовке со- 43
единения в виде бесцветного масла с 30%-ным выходом, 870 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 0.00 (s, 6H), 0.78 (s, 9H), 6.57 (dd, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.17 (d, 1H). ЖХ-МС (система 11) Rt равно 3,55 мин без ионизации.
Подготовительный пример 54. 6-Хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ол.
Раствор трет-бутил-(4-хлор-3-йодфенокси)диметилсилана (подготовительный пример 53, 102 мг, 0,28 ммоль), 2-(4-(этилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 21) (90 мг, 0,28 ммоль) и водного раствора карбоната цезия (1М, 0,55 мл, 0,55 ммоль) в диоксане (4 мл) дегазировали с азотом в течение 10 мин, с последующим добавлением дихлорида 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(11) (11,0 мг, 0,014 ммоль). Полученную смесь нагревали при 100°С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь распределяли между водой (15 мл) и EtOAc (15 мл), водный слой затем экстрагировали EtOAc (2x 15 мл). Органические слои объединяли и промывали рассолом (25 мл), сушили над MgSO4 и затем концентрировали в вакууме. К остатку добавляли 4М HCl в диоксане (4 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 ч. После концентрирования в вакууме к остатку добавляли раствор NH3 (7M в МеОН, 2 мл) и смесь снова концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью циклогексан/EtOAc в соотношении 70:30 с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой смолы с 72%-ным выходом, 65 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.35 (t, 3H), 3.19 (q, 2H), 3.85 (s, 3Н), 5.23 (br s, 1H), 6.75 (d, 1H), 6.82 (dd, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.54 (dd, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,30 мин; МС m/z 325 [М-Н]-.
Подготовительный пример 55. 6-Хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил-трифтор-метансульфонат.
К охлажденному раствору 6-хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ола (подготовительный пример 54, 100 мг, 0,31 ммоль) и 2,6-лутидина (42,0 мкл, 0,37 ммоль) в CH2Cl2 добавляли триф-торметансульфоновый ангидрид (62,0 мкл, 0,37 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли дополнительное количество 2,6-лутидина (21,0 мкл, 0,19 ммоль) и трифторметансульфонового ангидрида (31,0 мкл, 0,19 ммоль) и смесь перемешивали в течение еще 1 ч. После концентрирования в вакууме остаток очищали колоночной хроматографией на силикаге-ле, элюируя смесью циклогексан/EtOAc в соотношении 70:30 с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла с 96%-ным выходом, 135 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.36 (t, 3Н), 3.19 (q, 2H), 3.87 (s, 3H), 7.22 (d, 1H), 7.25-7.28 (m, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.57 (m, 2Н). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 5 -72.7 (s) м.д.
ЖХ-МС (система 12): Rt равно 3,28 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 56. 2-(6-Хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
Раствор 6-хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил-трифторметансульфоната (подготовительный пример 55, 130 мг, 0,28 ммоль), бис(пинаколато)дибора (86,0 мг, 0,34 ммоль) и ацетата калия (97,0 мг, 3,50 ммоль) в безводном диоксане (5 мл) дегазировали с азотом в течение 10 мин с последующим добавлением дихлорида 1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(П) (23,0 мг, 0,028 ммоль). Полученную смесь нагревали при 80°С в течение 1 ч. Добавляли дополнительное количество дихлорида 1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(П) (23,0 мг, 0,028 ммоль) и смесь нагревали в течение еще 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры и концентрирования в вакууме остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя CH2Cl2 с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого масла с 40%-ным выходом, 50 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.33 (m, 15H), 3.17 (q, 2H), 3.85 (s, 3H), 7.38 (d, 1H), 7.44 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.54 (dd, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.75 (dd, 1H).
Подготовительный пример 57. 4-Бром-2-йод-1-метоксибензол.
Подметан (103 мкл, 1,65 ммоль) добавляли к раствору 4-бром-2-йодфенола (450 мг, 1,51 ммоль) и карбоната калия (271 мг, 1,96 ммоль) в ацетоне (10 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. После концентрирования в вакууме смесь распределяли между водой (20 мл) и EtOAc (20 мл) и водный слой экстрагировали EtOAc (2x 15 мл). Органические слои объединяли и промывали рассолом (20 мл), сушили над MgSO4 (s) и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения в виде оранжевого масла с 93%-ным выходом, 439 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 3.86 (s, 3Н), 6.68 (d, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.88 (d, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,73 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 58. 5'-Бром-4-(этилсульфонил)-2,2'-диметокси-1,1'-бифенил.
Раствор 4-бром-2-йод-1-метоксибензола (подготовительный пример 57, 350 мг, 1,12 ммоль), 2-(4-(этилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 21, 365 мг, 1,12 ммоль) и водный раствор карбоната цезия (1М, 2,23 мл, 2,23 ммоль) в диоксане (18 мл) дегазировали с азотом в течение 10 мин с последующим добавлением дихлорида 1,1-бис(дифенилфос-фино)ферроцен-палладия(П) (46,0 мг, 0,0056 ммоль). Полученную смесь нагревали при 80°С в течение 16
ч. После охлаждения до комнатной температуры и концентрирования в вакууме неочищенный остаток распределяли между водой (30 мл) и EtOAc (30 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2x20 мл).
Органические слои объединяли и промывали рассолом (25 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гепта-ны/EtOAc (70:30) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 45%-ным выходом, 150 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.35 (t, 3H), 3.16 (q, 2Н), 3.75 (s, 3Н), 3.87 (s, 3Н), 6.86 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.52 (dd, 1H). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,58 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 59. 2-(4'-(Этилсульфонил)-2',6-диметокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
Раствор 5'-бром-4-(этилсульфонил)-2,2'-диметокси-1,1'-бифенила (подготовительный пример 58, 150 мг, 0,39 ммоль), бис(пинаколато)дибора (119 мг, 0,47 ммоль) и ацетата калия (134 мг, 1,36 ммоль) в безводном диоксане (8 мл) дегазировали с азотом в течение 10 мин с последующим добавлением дихло-рида 1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(П) (32 мг, 0,039 ммоль). Полученную смесь нагревали при 90°С в течение 9 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь распределяли между водой (30 мл) и EtOAc (20 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (3x20 мл). Органические слои объединяли и промывали рассолом (30 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2/гептаны/EtOAc в соотношении 55:40:5 с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 62%-ным выходом, 105 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.32 (m, 15H), 3.16 (q, 2H), 3.80 (s, 3Н), 3.83 (s, 3Н), 6.98 (d, 1H), 7.41 (m, 2Н), 7.51 (dd, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.84 (dd, 1H). ЖХ-МС (Система 11): Rt равно 2,82 мин; МС m/z
433 [М+Н]+.
Подготовительный пример 60. 2-(3-Бромфенил)-2,3-дигидро-Ш-1,3-диаза-2-борафенален.
Раствор 3-бромбензолбороновой кислоты (20 г, 0,1 моль) и нафталин-1,8-диамина (17,3 г, 0,11 моль) в безводном толуоле (600 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир: EtOAc в соотношении 5:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде серого твердого вещества с 54%-ным выходом, 23 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 5.91 (s, 2H), 6.35 (d, 2H), 7.00 (d, 2H), 7.06-7.09 (m, 2H), 7.24-7.26 (m, 1H), 7.47-7.55 (m, 2H), 7.69 (s, 1H).
Подготовительный пример 61. 2-[3-(4,4,5,5-Тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]-2,3-дигидро-Ш-1, 3 -диаза-2 -борафенален.
К раствору 2-(3-бромфенил)-2,3-дигидро-Ш-1,3-диаза-2-борафеналена (Подготовительный пример 60, 23 г, 0,071 моль), бис(пинаколато)дибора (22 г, 0,086 моль) и трициклогексилфосфина (1 г, 3,6 ммоль) в безводном диоксане (400 мл) при комнатной температуре добавляли ацетат калия (28 г, 0,284 моль). Полученный раствор дегазировали. Затем одной порцией добавляли бис(дибензилиденацетон)дипалла-дий (2 г, 36 ммоль) и реакционную смесь трижды продували азотом, а затем перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью петролейный эфир: EtOAc в соотношении 5:1с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 61%-ным выходом, 16 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.37 (s, 12H), 6.12 (d, 1H), 6.43 (d, 2H), 7.04-7.16 (m, 4Н), 7.41-7.42 (m, 1Н), 7.72-7.77 (m, 1H), 7.89-7.90 (m, 1H), 8.09 (s, 1H).
Подготовительный пример 62. 2-[3-(7-Этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)фенил]-2,3-дигидро-1H- 1,3-диаза-2-борафенален.
Раствор комнатной температуры 2-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]-2,3-дигидро-Ш-1,3-диаза-2-борафеналена (подготовительный пример 61, 7,8 г, 21,1 ммоль), 4-хлор-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 8, 2,6 г, 14,1 ммоль) и карбоната цезия (13,8 г, 42,3 ммоль) в диоксане (160 мл) и воде (13 мл) дегазировали. Затем одной порцией добавляли дихлорид 1,1'-бис(ди-трет-бутилфосфино)ферроценпалладия (0,91 г, 1,4 ммоль) и реакционную смесь снова трижды продували азотом. Полученный раствор затем перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2:MeOH в соотношении 50:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества с 83,6%-ным выходом.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.69 (t, 3H), 4.58 (q, 2H), 6.23 (s, 2H), 6.44 (d, 2Н), 7.06 (d, 2H), 7.12-7.16 (m, 2H), 7.61-7.65 (m, 1H), 7.76 (d, 1H), 8.21 (d, 1H) 8.28 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 9.39 (s, 1H).
Подготовительный пример 63. 3-(7-Этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)бензолбороновая кислота.
К раствору 2-[3-(7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин-4-ил)-фенил]-2,3-дигидро-1H-1,3-диаза-2-борафеналена (подготовительный пример 62, 10,5 г, 26,9 ммоль) в THF (400 мл) при комнатной температуре добавляли 5 н. водный раствор хлористого водорода (110 мл, 0,55 моль) и полученную реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали и фильтрат нейтрализовали карбонатом калия до рН 6. Полученный осадок отфильтровывали и осадок на фильтре промывали небольшим количеством EtOAc. Собранное твердое вещество сушили под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 62,4%-ным выходом, 4,5 г. Переносили непосредственно на следующую стадию.
Подготовительный пример 64. 2-(4'-Этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-2,3-дигидро-Ш-1,3-диаза-2-борафенален.
К раствору 4-(этилсульфонил)бензолбороновой кислоты (0,90 г, 4,22 ммоль) в безводном DMF (20 мл) при комнатной температуре добавляли 2-(3-хлор-4-фторфенил)-2,3-дигидро-Ш-1,3-диаза-2-борафе-нален (Подготовительный пример 81, 1,00 г, 3,37 ммоль) и фосфит калия (2,87 г, 13,5 ммоль) и реакционную смесь дегазировали с аргоном в течение 30 мин. К ней добавляли 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенил (276,7 мг, 0,67 ммоль) с последующим добавлением трис(дибензилиденацетон)пал-ладия(0) (154 мг, 0,168 ммоль) и полученный раствор нагревали до 100°С при перемешивании в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали, затем фильтровали через набивку целита. Набивку тщательно промывали EtOAc (100 мл) и фильтрат промывали водой (2x 50 мл), затем насыщенным солевым раствором и сушили над безводным MgSO4 (s), фильтровали и упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде желтого масла. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью Ог^О^МеОН в соотношении 98:2 с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла с 42%-ным выходом, 600 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.31 (t, 3H), 3.18 (q, 2H), 5.99 (s, 1H), 6.42 (d, 2Н), 7.07 (d, 2H), 7.14 (t, 2H), 7.68-7.70 (m, 2H), 7.78 (d, 2H), 8.00 (d, 2H).
Подготовительный пример 65. (4'-Этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)бороновая кислота.
Этот продукт получали способом, аналогичным описанному выше для Подготовительного примера 63, с использованием 2-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-2,3-Дигидро-1H-1,3-диаза-2-борафена-лена (подготовительный пример 64) с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла с 88%-ным выходом, 378 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.39 (t, 3H), 3.35 (q, 2H), 7.33 (dd, 1H), 7.83-7.88 (m, 3Н), 7.988.03 (m, 3Н), 8.23 (s, 2H). ЖХ-МС (система 9): Rt равно 3,04 мин; МС m/z 309 [М+Н]+.
Подготовительный пример 66. 5-Хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-2-карбонитрил.
К раствору 2-(4-(этилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 21, 542 мг, 1,66 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (2 мл) добавляли 2-бром-4-хлорбензонитрил (300 мг, 1,38 ммоль) и карбонат натрия (441 мг, 4,16 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и затем добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (160 мг, 0,14 ммоль) и реакционную смесь дегазировали еще раз. Реакционную смесь помещали на предварительно нагретую плитку (110°С) на 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит и растворитель удаляли в вакууме. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:циклогексан в соотношении 1:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде темного твердого вещества с 62%-ным выходом, 0,345 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.35 (t, 3Н), 3.16 (q, 2Н), 3.92 (s, 3Н), 7.40-7.53 (m, 4H), 7.59-7.62 (dd, 1H) 7.70 (d, 1H). ЖХ-МС (система 11): Rt равно 2,62 минут; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 67. (6-Циано-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)бороно-вая кислота.
К раствору 5-хлор-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-2-карбонитрила (подготовительный пример 66, 330 мг, 0,985 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли дихлорид бис(дифенилфосфино)фер-роцен-палладия(П) (30 мг, 0,12 ммоль), ацетат калия (290 мг, 2,95 ммоль) и бис(пинаколато)дибор (3,75 мг, 1,48 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и затем помещали на предварительно нагретую плитку (100°С) на 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и растворитель удаляли в вакууме. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией с обращенной фазой, элюируя смесью MeCN/H2O для гидролиза боронового сложного эфира с получением указанного в заголовке соединения с 25%-ным выходом, 85 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.36 (t, 3H), 1.38 (q, 2H), 3.87 (s, 3H), 7.39-7.59 (гп,4Н), 7.81-8.06 (гп,2Н). ЖХ-МС (система 11): Rt равно 2,20 минут; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 68. 5'-Хлор-4-(этилсульфонил)-2-фтор-2'-метокси-1,1'-бифенил.
К раствору (5-хлор-2-метоксифенил)бороновой кислоты (714 мг, 1,68 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (1 мл) добавляли 1-бром-4-(этилсульфонил)-2-фторбензол (подготовительный пример 19, 450 мг, 1,68 ммоль) и карбонат натрия (534 мг, 5,04 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и затем добавляли
тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (194 мг, 0,17 ммоль) и реакционную смесь еще раз дегазировали. Реакционную смесь помещали на предварительно нагретую плитку (110°С) на 16 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит и растворитель удаляли в вакууме. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:циклогексан в соотношении 40:60 с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого масла с 90%-ным выходом, 500 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.35 (t, 3H), 3.18 (q, 2H), 3.80 (s, 3H), 6.94 (d, 1H), 7.25 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.53-7.56 (m, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.74 (d, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 5 -109.69 м.д. ЖХ-МС (система 13): Rt равно 2,60 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 69. 2-(4'-Ртилсульфонил)-2'-фтор-6-метокси-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
К раствору 5'-хлор-4-(этилсульфонил)-2-фтор-2'-метокси-1,1'-бифенила (Подготовительный пример 68, 500 мг, 1,52 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (7 мл) добавляли ацетат калия (448 мг, 4,56 ммоль), бис(пинаколато)дибор (425 мг, 1,68 ммоль), трициклогексилфосфин (46,2 мг, 0,18 ммоль) и трис (дибен-зилиденацетон)дипалладий(0) (69,6 мг, 0,076 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и затем кипятили с обратным холодильником при 85°С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через набивку целита. Фильтрат разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали водой (50 мл), затем сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. Неочищенный материал очищали хроматографией с обращенной фазой (MeCN/вода, 0,1%-ная муравьиная кислота, градиент) и флэш-хроматографией (смесь EtOAc:гептаны в соотношении 40:60) с получением указанного в заголовке продукта в виде белой пены с 15%-ным выходом, 85 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 1.31- 1.35 (m, 15H), 3.17 (q, 2H), 3.84 (s, 3H), 7.00 (d, 1H), 7.55-7.59 (m, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.69-7.72 (m, 2H), 7.88 (d, 1H) м.д. 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 5 -109.53 м.д.
Подготовительный пример 70. 2-Бром-1-фтор-4-((4-метоксибензил)окси)бензол.
К раствору 3-бром-4-фторфенола (2,18 г, 11,4 ммоль) в DMF (15 мл) порциями при комнатной температуре добавляли карбонат калия (3,15 г, 22,8 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, затем по каплям добавляли 4-метоксибензилхлорид (1,55 мл, 11,4 ммоль). По завершении добавления реакционную смесь нагревали при 60°С под азотом в течение 15 ч. Охлажденную реакционную смесь гасили водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3x50 мл). Объединенные экстракты промывали 1М водным раствором NaOH (50 мл) и рассолом (50 мл), затем сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с количественным выходом, 3,62 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 3.82 (s, 3H), 4.93 (s, 2H), 6.83-6.87 (m, 1H), 6.91 (dt, 2Н), 7.02 (dd, 1H), 7.14 (dd, 1H), 7.34 (m, 2Н). LC (система 11): Rt равно 2,99 мин.
Подготовительный пример 71. 2-(2-Фтор-5-((4-метоксибензил)окси)фенил)-4,4,5,5-тетраметил-
I, 3,2-диоксаборолан.
К раствору 2-бром-1-фтор-4-((4-метоксибензил)окси)бензола (подготовительный пример 70, 3,55 г,
II, 4 ммоль) в диметоксиэтане (15 мл) добавляли бис(пинаколато)дибор (3,19 г, 12,6 ммоль) и ацетат ка-
лия (1,68 г, 17,1 ммоль) при комнатной температуре. Смесь дегазировали и трижды продували газооб-
разным азотом, затем добавляли трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (313 мг, 0,34 ммоль) и трицик-
логексилфосфин (384 мг, 1,37 ммоль). Смесь дегазировали и продували газообразным азотом, затем ки-
пятили с обратным холодильником в течение 15 ч. Охлажденную реакционную смесь разбавляли EtOAc
(50 мл) и фильтровали через арбоцель для удаления следов катализатора, промывая свежеприготовлен-
ным EtOAc (2x 25 мл). Фильтрат промывали водой (20 мл) и рассолом (20 мл), затем сушили над безвод-
ным MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта. Очистка
колоночной хроматографией с элюированием смесью гептаны:EtOAc в соотношении от 95:5 до 90:10
дала указанное в заголовке соединение в виде желтого рыхлого твердого вещества с 65%-ным выходом,
2,65 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.36 (s, 12H) 3.82 (s, 3Н), 4.96 (s, 2H), 6.89-6.93 (m, 3Н), 6.95 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.33-7.36 (m, 1H). LC (система 13): Rt равно 2,90 мин. Подготовительный пример 72. 2-Бром-5-(хлорсульфонил)бензойная кислота.
К хлорсульфоновой кислоте (100 мл), охлажденной до 0°С, порциями в течение 10 мин добавляли 2-бромбензойную кислоту (20,0 г, 99,5 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и затем осторожно нагревали до дефлегмации в течение 30 мин с приращениями на 10°С, с последующим кипячением с обратным холодильником в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры раствор гасили 1-мл порциями смеси лед-вода (2 л). Дополнительное количество льда добавляли при необходимости поддержания температуры ниже 5°С. Полученный осадок отфильтровывали под вакуумом и сушили в вакуумной печи в течение 4 ч с получением указанного в заголовке соединения в виде желто-коричневого твердого вещества с 95%-ным выходом, 28,6 г.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 8.00 (s, 2H), 8.60 (s, 1H). ЖХ-МС (Система 13): Rt равно 2,07 мин.
Подготовительный пример 73. 2-Бром-5-(этилсульфонил)бензойная кислота.
К 2-бром-5-(хлорсульфонил)бензойной кислоте (Подготовительный пример 72, 10,1 г, 33,8 ммоль), растворенной в THF (100 мл), осторожно при 0°С под азотом добавляли моногидрат гидразина (3,32 мл, 67,6 ммоль). Образовался мелкозернистый осадок, реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение 126 ч, затем фильтровали. Твердое вещество промывали гептанами, сушили при пониженном давлении и растворяли в промышленном метилированном спирте (100 мл). К этому раствору добавляли ацетат натрия (16,6 г, 203 ммоль) и этилйодид (13,5 мл, 169 ммоль) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 20 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток распределяли между EtOAc (500 мл) и раствором гидроксида натрия (1М, 500 мл). Слои разделяли и органический слой отбрасывали. Водный слой подкисляли до рН 1 с помощью HCl (1М, 500 мл) и экстрагировали EtOAc (5x500 мл). Объединенные органические слои сушили над MgSO4 и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде желто-коричневого твердого вещества с 48%-ным выходом, 4,82 г.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.20 (t, 3H), 3.10 (q, 2H), 7.80 (d, 1H), 7.85 (d, 1H), 8.40 (s, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 1,90 мин; МС m/z 293 [M81Br-H]-.
Подготовительный пример 74. 2-Бром-5-(этилсульфонил)бензамид.
К 2-бром-5-(этилсульфонил)бензойной кислоте (подготовительный пример 73, 8,10 г, 27,6 ммоль), растворенной в THF (200 мл), добавляли карбонилдиимидазол (8,72 г, 41,4 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 5 мин под азотом, а затем через раствор барботировали аммиак. Через 10 мин наблюдалось повышение температуры от 22 до 41°С. Температура затем начала снижаться, достигнув 35°С через 5 мин, по истечении которых подачу аммиака останавливали. Реакционную смесь оставляли стоять в виде насыщенного аммиаком раствора в течение 30 мин, а затем осуществляли удаление растворителя при пониженном давлении. Остаток распределяли между EtOAc (500 мл) и водой (500 мл) и слои разделяли. Органический слой сушили над MgSO4 и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. Растирание с CH2Cl2 дало указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества с 28%-ным выходом, 2,23 г. Еще одну порцию указанного в заголовке соединения выделили при сушке фильтрата и дополнительном растирании с получением дополнительных 8%, 650 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.10 (t, 3Н), 3.40 (q, 2Н), 7.75-7.85 (m, 3Н), 8.00 (d,1H), 8.10 (s,lH). ЖХ-МС (Система 11): Rt равно 1,80 мин; МС m/z 292 [M79Br+H]+.
Подготовительный пример 75. 2-Бром-5-(этилсульфонил)бензонитрил.
К 2-бром-5-(этилсульфонил)бензамиду (подготовительный пример 74, 2,20 г, 7,53 ммоль) в THF (50 мл) с триэтиламином (1,57 мл, 11,3 ммоль) добавляли по каплям под азотом трифторуксусный ангидрид (1,26 мг, 9,04 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 16 ч, а затем разбавляли EtOAc (100 мл) и промывали раствором бикарбоната натрия (насыщенный 100 мл), HCl (1М, 100 мл) и рассолом (100 мл). Органическую фазу сушили над MgSO4 и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного твердого вещества с 80%-ным выходом, 1,64 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 1.30 (t, 3Н), 3.15 (q, 2H), 7.90-8.00 (m, 2H), 8.20 (s, 1Н) м.д. ЖХ-МС (система 11): Rt равно 2,29 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 76. 4-(Этилсульфонил)-2'-фтор-5'-((4-метоксибензил)окси)-[1,1'-бифе-нил]-2-карбонитрил.
К 2-бром-5-(этилсульфонил)бензонитрилу (подготовительный пример 75, 1,09 г, 3,96 ммоль) в смеси диоксан/вода (5:1 об./об., 66 мл) добавляли 2-(2-фтор-5-((4-метоксибензил)окси)фенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (подготовительный пример 71, 1,56 г, 4,35 ммоль) и карбонат натрия (1,26 г, 11,9 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и добавляли тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (462 мг, 0,40 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 110°С под азотом в течение 12 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли силикагель и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюи-руя смесью EtOAc/циклогексан в соотношении 1:3, с последующей колоночной хроматографией с обращенной фазой, элюируя смесью MeCN/вода с 0,1%-ным NH3 от 0 до 100% с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества с 51%-ным выходом, 851 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.40 (t, 3H), 3.20 (q, 2H), 3.80 (s, 3Н), 5.00 (s, 2Н), 6.50 (d, 2Н), 7.00 (m, 1H), 7.10 (m, 1H), 7.20 (t, 1Н), 7.35-7.40 (m, 2Н), 7.70 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.30 (s, 1H). LC (система 12): Rt равно 3,08 мин.
Подготовительный пример 77. 4-(Этилсульфонил)-2'-фтор-5'-гидрокси-[1,1'-бифенил]-2-карбонит-
рил.
К 4-(этилсульфонил)-2'-фтор-5'-((4-метоксибензил)окси)- [1,1'-бифенил]-2-карбонитрилу (подготовительный пример 76, 850 мг, 1,99 ммоль), растворенному в CH2Cl2 (6 мл) при 0°С под азотом, добавляли по каплям трифторуксусную кислоту (2 мл). По завершении добавления реакционная смесь приобретала пурпурный цвет. После перемешивания в течение 20 мин при 0°С растворитель удаляли при пониженном
давлении с получением коричневого твердого вещества. Растирание с CH2Cl2 дало указанное в заголовке соединение в виде бесцветного твердого вещества с 53%-ным выходом, 325 мг. Сушка фильтрата при пониженном давлении с последующим дополнительным растиранием дала вторую партию материала с 46%-ным выходом, 279 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CD3OD): 5 м.д. 1.30 (t, 3H), 3.30 (q, 2H), 6.60 (m, 1H), 6.95 (m, 1H), 7.10 (t, 1H), 7.80 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.40 (s, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 2,39 минут; МС m/z 304 [М-Н]-
Подготовительный пример 78. 2'-Циано-4'-(этилсульфонил)-6-фтор-[1,1'-бифенил]-3-ил-трифтор-метансульфонат.
К 4-(этилсульфонил)-2'-фтор-5'-гидрокси-[1,1'-бифенил]-2-карбонитрилу (подготовительный пример 77, 600 мг, 1,96 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл), охлажденному при 0°С под азотом, добавляли по каплям трифторметансульфоновый ангидрид (496 мкл, 2,95 ммоль). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры в течение 1 ч и затем перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре, а затем разбавляли CH2Cl2 (80 мл) и промывали раствором бикарбоната натрия (насыщенный, 50 мл) и раствором NH4Cl (насыщенный, 50 мл). Органическую фазу сушили над MgSO4 и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:циклогексан в соотношении от 1:4 до 2:3 с получением указанного в заголовке соединения с 82%-ным выходом, 707 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.40 (t, 3H), 3.20 (q, 2H), 7.35-7.40 (m, 2H), 7.40 (m, 1H), 7.80 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.40 (s, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 3,06 мин; Ms m/z без ионизации.
Подготовительный пример 79. 4-(Этилсульфонил)-2'-фтор-5'-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборо-лан-2-ил)-[1, 1'-бифенил] -2-карбонитрил.
К 2'-циано-4'-(этилсульфонил)-6-фтор-[1, 1'-бифенил] -3 -ил-трифторметансульфонату (подготовительный пример 78, 350 мг, 0,80 ммоль) в диоксане (7 мл) добавляли ацетат калия (236 мг, 2,4 ммоль) и бис(пинаколато)дибор (224 мг, 0,88 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и добавляли ацетоновый аддукт дихлор[1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(П) (65 мг, 0,08 ммоль), а затем нагревали до 110°С под азотом в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали через целит и очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью E^OAc^^^ в соотношении от 1:4 до 1:1 с получением смеси исходного материала с продуктом в соотношении 3:1. Неочищенный материал растворяли в диоксане (7 мл) и добавляли ацетат калия (236 мг, 2,4 ммоль) с последующим добавлением бис(пинаколато)дибора (224 мг, 0,88 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и добавляли ацетоновый аддукт дихлор[1Д'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия(П) (65 мг, 0,08 ммоль), а затем нагревали до 110°С под азотом в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали через целит и очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:гептаны в соотношении от 7:93 до 60:40 с получением указанного в заголовке соединения с 77%-ным выходом, 257 мг.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.20 (s, 12H), 1.30 (t, 3Н), 3.20 (q, 2H), 7.20 (t, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.95 (d, 1H), 8.15 (d, 1H), 8.30 (s, 1H). ЖХ-МС (Система 12): Rt равно 3,29 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 80. 4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид.
К раствору 4-бромбензолсульфонамида (2,00 г, 9,32 ммоль) и бис(пинаколато)дибора (2,40 г, 9,32 ммоль) в DMSO (20 мл) добавляли ацетат калия (2,5 г, 24,4 ммоль) и смесь дегазировали в течение 45 мин. Затем добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(11) (220 мг, 0,26 ммоль) и смесь нагревали до 90°С в течение 16 ч. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc (30 мл), промывали водой (3x30 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали под вакуумом. Остаток растирали с Et2O (50 мл) и HCl (1М, 50 мл), образованное твердое вещество растворяли в CH2Cl2 (30 мл) и фильтровали через набивку диоксида кремния, промывая Et2O, затем концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 13%-ным выходом, 550 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.36 (s, 12H), 4.87 (s, 2H), 7.89-7.95 (m, 4H). ЖХ-МС (система 11):
Rt равно 2,30 мин; МС m/z 282 [М-Н]-.
Подготовительный пример 81. 2-(3-Хлор-4-фторфенил)-2,3-дигидро-Ш-1,3-диаза-2-борафенален.
Раствор 3-хлор-4-фторбензолбороновой кислоты (4 г, 22,8 ммоль) и нафталин-1,8-диамина (3,62 г, 22,9 моль) в безводном толуоле (80 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали в вакууме. Остаток растирали с гексаном с получением указанного в заголовке соединения в виде серого твердого вещества с 88%-ным выходом, 6 г.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 5.93 (s, 2H), 6.41 (d, 2H), 7.06 (d, 2H), 7.11-7.16 (m, 2H), 7.19 (t, 1H), 7.47-7.51 (m, 1H), 7.64-7.66 (m, 1H).
Подготовительный пример 82. 5'-Хлор-4-(этилсульфонил)-2,2'-дифтор-1,1'-бифенил.
Раствор 2-(4-(этилсульфонил)-2-фторфенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (подготовительный пример 45, 1,77 г, 5,64 ммоль), 4-хлор-1-фтор-2-йодбензола (1,28 г, 5,00 ммоль) и карбоната на
трия (1,59 г, 15,00 ммоль) в диоксане (40 мл) и воде (10 мл) дегазировали. Добавляли тетра-кис(трифенилфосфин)палладий(0) (577 мг, 0,50 ммоль), смесь дегазировали еще два раза и реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли EtOAc (50 мл) и водой (50 мл), слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (2x30 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом (30 мл), сушили над MgSO4 и растворитель удаляли в вакууме. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc :гептан в соотношении от 1:19 до 1:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла с 28%-ным выходом, 443 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.34 (t, 3H), 3.18 (q, 2H), 7.16 (m, 1H), 7.38 (m, 2Н), 7.60 (m, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.78 (m, 1H). 19F ЯМР (376 МГц, CDCl3): 5 -110.2 (m, 1F), -116.9 (m, 1F). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 3,17 минут; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 83. 2-(4'-(Этилсульфонил)-2',6-дифтор-[1,1'-бифенил]-3-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан.
Раствор 5'-хлор-4-(этилсульфонил)-2,2'-дифтор-1,1'-бифенила (подготовительный пример 82, 100 мг, 0,32 ммоль), бис(пинаколато)дибора (241 мг, 0,949 ммоль), ацетата палладия(П) (2,0 мг, 0,01 ммоль), 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенила (9,0 мг, 0,190 ммоль) и ацетата калия (93 мг, 0,95 ммоль) в диоксане (4 мл) нагревали до 110°С в герметично закрытой пробирке. Через 2 ч в реакционную смесь загружали дополнительное количество ацетата палладия(П) (10 мг, 0,044 ммоль) и 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенила (20 мг, 0,042 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч при 110°С. Реакционную смесь охлаждали, фильтровали через набивку целита, промывая EtOAc (20 мл). Летучие вещества удаляли в вакууме. Неочищенный материал использовали без дополнительной очистки, подразумевая 100%-ное превращение (128 мг). ЖХ-МС (система 13): Rt равно 3,54 мин; МС m/z без ионизации.
Подготовительный пример 84. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-7-циклопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пири-дазин.
Это вещество получали способом, аналогичным описанному выше для подготовительного примера 87 с использованием 7-циклопропил-4-(4-фторфенил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 93, 450 мг, 1,77 ммоль) и 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (253,3 мг, 0,885 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 25%-ным выходом, 500 мг.
^-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6):5 м.д. 1.18-1.24 (m, 4H), 3.77-3.78 (m, 1H), 7.63 (t, 1H), 8.45-8.51 (m, 1H), 8.82-8.85 (m, 2Н), 9.58 (s, 1H). ЖХ-МС (система 7): Rt равно 3,10 мин; МС m/z 333 [М+Н]+
Подготовительный пример 85. 1-Бром-4-(этилтио)-2-хлорбензол.
К раствору 1-бром-4-фтор-2-хлорбензола (1,9 г, 0,97 ммоль) в DMSO (10 мл) комнатной температуры добавляли этантиолат натрия (0,84 г, 1 ммоль) и полученную реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 18 ч. Реакционную смесь распределяли между водой (20 мл) и EtOAc (50 мл). Органический слой отделяли и водный слой дополнительно экстрагировали EtOAc (3x50 мл). Органические слои объединяли и промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), затем сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный материал очищали колоночной хроматографией на силикаге-ле, элюируя гептаном с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветной жидкости с 70%-ным выходом, 1,6 г.
1H ЯМР (400МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.31 (s, 3H), 2.95 (q, 2H), 7.04 (d, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.50 (d, 1H). LC (Система 1): Rt равно 3,65 мин..
Подготовительный пример 86. 4-(4-Фторфенил)-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Суспензию 4-хлор-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 6, 575 мг, 2,92 ммоль), (4-фторфенил)бороновой кислоты (534 мг, 3,81 ммоль), карбоната цезия (1,66 г, 5,08 ммоль) в воде (2 мл) и диоксане (10 мл) дегазировали с азотом в течение 30 мин. Добавляли тетракис (трифе-нилфосфин)палладий(0) (293 мг, 0,254 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 100°С и перемешивали в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через целит и промывали EtOAc (5 мл). Фильтрат распределяли с водой (20 мл) и продукт экстрагировали EtOAc (2x 10 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Очистка колоночной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью EtOAc/гептаны в соотношении 7/3 дала указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого масла с 100%-ным выходом, 751 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.79 (d, 6H), 5.21 (m, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.55 (m, 1H), 8.22 (m, 2Н), 8.39 (s, 1H), 9.39 (s, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 2,27 мин; МС m/z 257 [М+Н]+.
Подготовительный пример 87. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
К раствору 4-(4-фторфенил)-7-изопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина (Подготовительный пример 86, 770 мг, 3,00 ммоль) в концентрированной серной кислоте (7,00 мл) при 0°С добавляли порциями в течение 1,5 ч 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (687 мг, 2,40 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Реакционную смесь добавляли по каплям к насыщенному водному раствору тиосульфата натрия (20 мл) при 0°С. По завершении добавления реакционную смесь подщелачивали до рН 9 с помощью твердого карбоната калия. Реакционную смесь фильтровали через целит, промывали
CH2Cl2 (20 мл) и экстрагировали CH2Cl2 (3x40 мл), сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением бледно-желтого твердого вещества. Очистка колоночной хроматографией на силикагеле с элюированием смесью EtOAc:CH2Cl2 в соотношении 1:1 дала указанное в заголовке соединение в виде бледно-желтого твердого вещества (558 мг, 55%).
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.79 (d, 6H), 5.22 (m, 1H), 7.38 (t, 1H), 8.20 (m, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.56 (d, 1H), 9.39 (s, 1H). ЖХ-МС (система 12): Rt равно 2,65 минут; МС m/z 337 [M81Br+H]+.
Подготовительный пример 88. 5-Бром-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-2-ол.
К перемешиваемому раствору 2-(4-(этилсульфонил)-2-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-дио-ксаборолана (подготовительный пример 21, 600 мг, 1,84 ммоль) в диоксане (30 мл) и воде (10 мл) добавляли 4-бром-2-йодфенол (604 мг, 2,02 ммоль), карбонат натрия (488 мг, 4,6 ммоль) и тетракис (трифе-нилфосфин)палладий(0) (106 мг, 0,092 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 18 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться и затем фильтровали через целит. Фильтрат упаривали досуха и затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью циклогексан:EtOAc в соотношении 1:1, с последующей вторичной колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2:МеОН в соотношении 98:2, с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества с 44%-ным выходом, 301 мг.
1H ЯМР (400 МГц CDCl3): 5 м.д. 1.33 (t, 3H), 3.18 (q, 2Н), 3.99 (s, 3Н), 5.82 (s, 1H), 6.91 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.64 (dd, 1H). ЖХ-МС: (Система 11): Rt равно 2,55 мин; МС m/z 371 [M79Br+H]+.
Подготовительный пример 89. 4'-(Этилсульфонил)-2'-метокси-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диокса-боролан-2-ил)-[1,1'-бифенил]-2-ол.
К раствору 5-бром-4'-(этилсульфонил)-2'-метокси-[1,1'-бифенил]-2-ола (подготовительный пример 88, 150 мг, 0,40 ммоль) в диоксане (15 мл) добавляли ацетат калия (159 мг, 1,62 ммоль) и бис(пинако-лато)дибор (153 мг, 0,61 ммоль) и суспензию дегазировали под азотом. Добавляли дихлорид 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладия(11) (33 мг, 0,04 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 4 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и затем фильтровали через целит, набивку целита промывали EtOAc и фильтрат упаривали досуха с получением указанного в заголовке соединения, которое использовали без дополнительной очистки (235 мг).
1H ЯМР (400МГц CDCl3): 5 м.д. 1.32-1.34 (m, 15H), 3.17 (q, 2H), 3.97 (s, 3H), 7.03 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.80 (dd, 1H). LC (система 10): Rt равно 2,64 мин.
Подготовительный пример 90. 5-Хлор-^-циклопропилпиридазин-3,4-диамин.
3,5-Дихлор-4-аминопиридазин (5,12 г, 31,2 ммоль) добавляли к циклопропиламину (37,0 г, 650 ммоль) в герметичном контейнере из нержавеющей стали (емкостью 100 мл) с образованием гомогенного раствора. Смесь нагревали в течение 12 ч при 120°С. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем упаривали в вакууме. Остаток растворяли в EtOAc (150 мл) при обработке ультразвуком и перемешивании. EtOAc раствор промывали 10%-ным водным раствором карбоната калия (2x 200 мл), сушили над безводным MgSO4, затем фильтровали и упаривали в вакууме. Смесь снова растворяли в CH2Cl2 и очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя CH2Cl2 (100 мл), затем EtOAc (150 мл) с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-оранжевого твердого вещества с 73%-ным выходом, 4,2 г.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 0.2-0.5 (m, 2Н), 0.38-0.40 (m, 2Н), 2.85-2.95 (m, 1H), 5.75 (b s, 2H), 6.0-6.05 (b s, 1H), 7.80 (s, 1H).
Подготовительный пример 91. 4-Хлор-7-циклопропил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Смесь 5-хлор-Ш-циклопропилпиридазин-3,4- диамина (подготовительный пример 90, 10,0 г, 54 ммоль) и триэтилортоформиата (120 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2:MeOH в соотношении 98:2 с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества с 48%-ным выходом, 5 г.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.05-1.30 (m, 4H), 3.75-3.85 (m, 1H), 8.88 (s, 1H), 9.26 (s, 1H).
ЖХ-МС (система 7): Rt равно 1,69 мин; МС m/z 195 [М+Н]+.
Подготовительный пример 92. 4-(3-Йод-4-фторфенил)-7-циклопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Получали согласно способу, описанному для подготовительного примера 93, с использованием 4-хлор-7-циклопропил-7Н-имидазо[4,5-с]-пиридазина (подготовительный пример 91) и 3-хлор-4-фторбензолбороновой кислоты.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.25-1.36 (m, 4Н), 3.69-3.73 (m, 1Н), 7.34 (t, 1H), 8.08-8.12 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.31-8.34 (m, 1H), 9.33 (s, 1H).
Подготовительный пример 93. 7-Циклопропил-4-(4-фторфенил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин.
К раствору комнатной температуры 4-хлор-7-циклопропил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 91, 1,00 г, 5,1 ммоль) в диоксане (20 мл) добавляли 4-фторбензолбороновую кислоту (1,08 г, 7,71 ммоль) и раствор Na2CO3 (2,72 г, 25,7 ммоль в 12,8 мл воды). Реакционную смесь дегазировали. Затем добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (297 мг, 0,26 ммоль) и смесь кипятили с
обратным холодильником в течение 16 ч. Растворитель удаляли в вакууме и водный слой фильтровали. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя EtOAc с получением указанного в заголовке соединения в виде красного твердого вещества с 73%-ным выходом, 949 мг.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.25-1.37 (m, 4H), 3.69-3.73 (m, 1H), 7.24-7.28 (m, 2Н), 8.19-8.23 (m, 2Н), 8.25 (s, 1H), 9.36 (s, 1H). ЖХ-МС (система 4): Rt равно 1,03 мин; МС m/z 255 [М+Н]+.
Подготовительный пример 94. 4-(3-Йод-4-фторфенил)-7-циклопропил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Получали способом, аналогичным описанному выше для Подготовительного примера 87, с использованием 7-циклопропил-4-(4-фторфенил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 93) и 1,3-дийод-5,5-диметилгидантоина с получением указанного в заголовке соединения с 79%-ным выходом.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.24-1.37 (m, 4H), 3.68-3.74 (m, 1H), 7.23-7.27 (m, 1H), 8.17-8.21 (m, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.62 (dd, 1H), 9.32 (s, 1H). ЖХ-МС (система 3): Rt равно 1,45 мин; МС m/z 381
[М+Н]+.
Подготовительный пример 95. 7-Этил-4-[4-фтор-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил) фенил] -7H-имидазо [4,5-с] пиридазин.
Смесь 4-(3-бром-4-фторфенил)-7-этил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина (подготовительный пример 11, 50 мг, 0,16 ммоль), 4,4,5,5,4',4',5',5'-октаметил-[2,2']би[[1,3,2]диоксабороланила] (59 мг, 0,23 ммоль), дихлорида 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладия (13 мг, 0,016 ммоль) и ацетата калия (46 мг, 0,47 ммоль) в безводном диоксане (2,0 мл) в атмосфере азота нагревали при 100°С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали через целит и фильтрат распределяли между CH2Cl2 (10 мл) и водой (10 мл). Органические слои экстрагировали CH2Cl2 (2x10 мл), сушили над безводным MgSO4 фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:MeOH в соотношении 10:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде смолы с 74%-ным выходом, 42,5 мг.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.38 (s, 12H), 1.68 (t, 3Н), 4.57 (q, 2H), 7.20-7.29 (m, 1H), 8.19-8.24 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.41-8.47 (m, 1H), 9.39 (s, 1H). ЖХ-МС (Система 6): Rt равно 1,50 мин; МС m/z равно 369 [М+Н]+.
Подготовительный пример 96. N-(3,5-Дихлорпиридазин-4-ил)-N'-(1-метилциклопропил)имидофор-мамид.
К охлажденному на льду перемешиваемому раствору соли гидрохлорида 1-метилциклопро-пиламина (2 г, 18,6 ммоль) в безводном THF (15 мл) добавляли гидрид натрия (60 масс.% дисперсия в масле, 1,48 г, 37,2 ммоль) при 0°С, реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Полученную суспензию добавляли при 0°С по каплям к раствору этил-(3,5-дихлорпири-дазин-4-ил)имидоформиата (Подготовительный пример 40, 2 г, 9,3 ммоль) в безводном THF (5 мл) в другой колбе и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили дробленым льдом и экстрагировали EtOAc (2x 20 мл). Органический слой промывали водой (10 мл) и насыщенным солевым раствором (10 мл), затем сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью re^^^OAc в соотношении 60:40 с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с 15%-ным выходом, 340 мг.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 0.73-0.75 (m, 2Н), 0.90-0.93 (m, 2Н), 1.55 (s, 3Н), 5.96 (br s, 1H), 7.43, 7.79 (d, 1H), 8.88 (s, 1H). ЖХ-МС (система 7): Rt равно 2,74 мин; МС m/z 245 [М+Н]+.
Подготовительный пример 97. 4-Хлор-7-(1-метилциклопропил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Суспензию №(3,5-дихлорпиридазин-4-ил)-№-( 1 -метилциклопропил)имидоформамида (подготовительный пример 96, 340 мг, 1,39 ммоль) и карбоната цезия (908 мг, 2,78 ммоль) в безводном DMF (10 мл) дегазировали с аргоном в течение 10 мин с последующим добавлением 1,10-фенантролина (25 мг, 0,14 ммоль) и бромида меди(1) (10 мг, 0,07 ммоль). Полученную смесь нагревали при 90°С в течение 16 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенный остаток распределяли между CH2Cl2 (20 мл) и водой (5 мл). Органический слой отделяли и промывали водой (5 мл) и насыщенным солевым раствором (5 мл), затем сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикаге-ле, элюируя смесью гексан:EtOAc (60:40) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 21%-ным выходом, 60 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.08-1.11 (m, 2Н), 1.32-1.35 (m, 2Н), 1.67 (s, 3Н), 8.94 (s, 1H), 9.26 (s, 1H). ЖХ-МС (система 7): Rt равно 1,65 мин; МС m/z 209 [М+Н]+.
Подготовительный пример 98. 5-Хлор-^-циклобутилпиридазин-3,4-диамин.
Смесь 3,5-дихлор-4-аминопиридазина (Подготовительный пример 4, 200 мг, 1,22 ммоль), циклобу-тиламина (0,56 мл) и воды (1,12 мл) нагревали в условиях микроволнового излучения при 125°С в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2:MeOH в соотношении 98:2 с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества с 58%-ным выходом, 140 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.68-1.75 (m, 2Н), 1.84-1.92 (m, 2Н), 2.30-2.37 (m, 2Н), 4.40-4.46 (m, 1H), 6.15 (br s, 2H), 6.33 (br s, 1H), 8.10 (s, 1H). ЖХ-МС (система 7): Rt равно 2,17 мин; МС m/z 199
[М+Н]+.
Подготовительный пример 99. 4-Хлор-7-циклобутил-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Смесь 5-хлор^ -циклобутилпиридазин-3,4-диамина (подготовительный пример 98, 140 мг, 0,70 ммоль) и триэтилортоформиата (4 мл) нагревали при 140°С в течение 4 ч. После упаривания в вакууме неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2:MeOH в соотношении 99:1 с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества с 54%-ным выходом, 80 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 1.90-1.98 (m, 2Н), 2.52-2.58 (m, 2Н), 2.73-2.83 (m, 2Н), 5.23-5.31 (m, 1H), 9.04 (s, 1H), 9.25 (s, 1H). ЖХ-МС (система 7): Rt равно 2,29 мин. МС m/z 209 [М+Н]+.
Подготовительный пример 100. 5-Хлор-^-1гоопилпиридазин-3,4-диамин.
Смесь 3,5-дихлор-4-аминопиридазина (подготовительный пример 4, 2 г, 12,3 ммоль) и 70%-ного водного пропиламина (8 мл) нагревали при 125°С в автоклавируемом сосуде в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и упаривали досуха. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2:MeOH в соотношении 98:2 с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества с 35%-ным выходом, 800 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 0.94 (t, 3H), 1.53-1.64 (m, 2H), 3.26-3.34 (m, 2Н), 6.45 (br s, 1H), 6.58 (br s, 2H), 8.23 (s, 1H). ЖХ-МС (система 7): Rt равно 2,05 мин; МС m/z 187 [М+Н]+.
Подготовительный пример 101. 4-Хлор-7-пропил-7H-имидазо[4,5-с]пиридазин.
Смесь 5-хлор-^-1гоопилпиридазин-3,4-диамина (подготовительный пример 100, 800 мг, 4,30 ммоль) и триэтилортоформиата (10 мл) нагревали при 140°С в течение 4 часов. После упаривания в вакууме неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью CH2Cl2:MeOH в соотношении 98:2 с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества с 47%-ным выходом, 400 мг.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 5 м.д. 0.88 (t, 3H), 1.91-2.00 (m, 2H), 4.41 (t, 2H), 8.92 (s, 1H), 9.25 (s, 1H). ЖХ-МС (Система 7): Rt равно 2,12 мин; МС m/z 197 [М+Н]+.
Подготовительный пример 102. 1-Бром-4-(этилсульфонил)-2-хлорбензол.
К раствору 1-бром-4-этилтио-2-хлорбензола (подготовительный пример 85, 1,6 г, 6,4 ммоль) в DCM (30 мл) комнатной температуры добавляли мета-хлорпероксибензойную кислоту (3,13 г, 12,7 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали и промывали 1М водным раствором Na2CO3, сушили и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с использованием колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя 5-15% EtOAc в гептанах с получением указанного в заголовке соединения (1,51 г, 83%). 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): 5 м.д. 1.30 (t, 3 Н), 3.13 (q, 2H), 7.63 (dd, 1H), 7.84 (d, 1 Н), 7.98 (d, 1H). ЖХ-МС: Rt равно 2,85 мин; МС m/z без ионизации.
Методы анализа Конструирование и поддержание клеточной линии
Человеческие эмбриональные клетки почек (НЕК) трансфицировали GABRA2-GABRB2-GABRG2 конструкцией с использованием стандартной методологии. Клетки, стабильно экспрессирующие GABRA2-GABRB2-GABRG2 конструкции, идентифицировали по их устойчивости к генетицину G-418 (320 мкг/мл), гигромицину (160 мкг/мл) и зеоцину (40 мкг/мл). Проводили скрининг клонов в отношении экспрессии с использованием системы визуализации BD Pathway 855 (BD Biosciences, Rockville, MD, США) и автоматизированной электрофизиологической платформы QPatch (Sophion, Копенгаген, Дания).
Клеточная культура
Клетки НЕК, стабильно трансфицированные GABRA2-GABRB2-GABRG2, поддерживали в среде MEM с солями Эрла, 10%-ной фетальной бычьей сывороткой (FBS), 1x L-Glutamax, 1% мМ заменимых аминокислот (MEM) и 1 мМ пируватом натрия, с генетицином G-418 (320 мкг/мл), гигромицином (160 мкг/мл) и зеоцином (40 мкг/мл) в инкубаторе при 37°С с увлажненной атмосферой 5%-ного СО2. Для электрофизиологического тестирования QPatch клетки собирали из колб с помощью ферментативного гидролиза и ресуспендировали в бессывороточной среде. Клетки обычно использовали для электрофизиологических экспериментов в период времени от 24 до 72 часов после расщепления.
Анализ связывания
Аффинность тестируемых соединений определяли путем анализа конкурентного связывания радио-лиганда с использованием известного соединения [3H]Ro-15-1788 (флумазенил) (Perkin Elmer, 85,4 Ки/ммоль) и человеческого рекомбинантного GABA рецептора, содержащего альфа2, бета2 и гаммаЗ субъединицы.
Мембраны получали из клеток НЕК, экспрессирующих hGABA А альфа2бета2-гаммаЗ рецептор, и подтверждали установленную концентрацию белка, экспрессию рецептора и определение константы диссоциации (Kd) флумазенила, а также константы ингибирования (Ki) стандартного набора соединений, перед тем как использовать для тестирования новых соединений.
Анализ осуществляли в 96-луночных планшетах; тестирование соединений проводили с использо
ванием 10-точечного полулогарифмического ряда разведений, начиная с 19 мкМ высшей концентрации. 100 мкл радиолиганда и 100 мкл мембран в 50 мМ трис-HCl и 0,05% F127 с 1 мкл тестируемого соединения инкубировали в течение 2 ч до достижения равновесия реакции и затем собирали на фильтровальные пластины, сушили и подсчитывали на TopCount NXT. Данные анализировали и значения Ki представляли в виде геометрического среднего из по меньшей мере двух параллельных определений.
Данные электрофизиологического исследования Клеточную суспензию, содержащую клетки НЕК, экспрессирующие GABRA2-GABRB2-GABRG2, помещали на оборудование QPatch в бессывороточной среде в клеточную мешалку данного оборудования. Клетки в аппарате промывали один раз с использованием внеклеточного буфера и затем распределяли их по измерительной пластине QPlate HT в концентрации 3-4е6/мл. Внеклеточный раствор имел следующий состав: 137 мМ NaCI, 1,8 мМ CaCl2, 4 мМ KCI, 1 мМ MgCl2, 10 мМ глюкозу и 10 мМ N-2-гидроксиэтил-пиперазин-^2-этансульфоновую кислоту (HEPES), рН 7,4 с NaOH, 300-310 мОсм/кг. Внутреннюю часть измерительной пластины QPlate заполняли внутриклеточным раствором следующего состава: 90 мМ KCl, 50 мМ KF, 1 мМ MgCl2, 10 мМ HEPES, 11 мМ этиленгликольтетрауксусную кислоту (EGTA) и 2 мМ Mg-ATP, рН 7,35, с КОН, 295-305 мОсм/кг. Все записи фиксировали при комнатной температуре (22-24°С).
GABRA2-GABRB2-GABRG2-опосредованные токи через хлоридные каналы в клетках НЕК измеряли с использованием цельноклеточной конфигурации методики фиксации потенциала (patch-clamp) (Hamill et al., 1981). Записи токов проводили при 1 КГц и обрабатывали при 0,3 КГц с использованием фильтра Бесселя. Корректировку последовательного сопротивления устанавливали на 80% в программном обеспечении QPatch.
Все соединения растворяли в диметилсульфоксиде с получением 30 мМ или 10 мМ исходных растворов, которые затем разбавляли до 1000 раз до требуемой конечной концентрации в диметилсульфок-сиде. Эти растворы разбавляли во внеклеточном растворе до получения требуемых конечных концентраций. Конечная концентрация диметилсульфоксида (менее 0,1% диметилсульфоксида), как было обнаружено, не оказывала существенного влияния на GABRA2-GABRB2-GABRG2-опосредованные токи через хлоридные каналы. Эта концентрация диметилсульфоксида присутствовала во всех примерах.
Токи записывали при -60 мВ с использованием приблизительно ЕС10 концентрации гамма-аминомасляной кислоты (GABA). Эту дозу гамма-аминомасляной кислоты прикладывали в течение 6 секунд и вымывали с использованием внеклеточного буфера в виде незафиксированного применения с использованием системы пипетирования оборудования QPatch. Ту же дозу гамма-аминомасляной кислоты затем прикладывали в течение 9 секунд, затем тестируемое соединение прикладывали совместно с этой дозой гамма-аминомасляной кислоты в течение 15 с и вымывали с использованием внеклеточного раствора, используя систему пипетирования оборудования QPatch.
Эффект соединения (% усиления тока, опосредованного гамма-аминомасляной кислотой) рассчитывали с использованием следующей формулы: [((пиковая амплитуда минус утечка тока, вызванного модулятором) минус (амплитуда минус утечка тока, вызванного GABA))/ (амплитуда минус утечка тока, вызванного GABA)] x 100, где "утечка" представляет собой утечку тока при -60 мВ, "пиковая амплитуда тока, вызванного модулятором" представляет собой ток, вызванный совместным прикладыванием гамма-аминомасляной кислоты и тестируемого соединения, и "амплитуда тока, вызванного GABA" представляет собой ток, вызванный прикладыванием только гамма-аминомасляной кислоты.
Способность соединений формулы (I) модулировать GABA-опосредованные каналы, экспресси-рующие а1 субъединицу (или GABRA1), может быть также измерена с использованием анализа, аналогичного описанному выше, но заменяя GABRA2-GABRB2-GABRG2 генетическую конструкцию на GABRA1-GABRB3-GABRG2 генетическую конструкцию. Все остальные условия остаются теми же самыми, включая те же самые клеточную линию и условия для клеточного роста. Показатели %-ного увеличения, полученные в анализе с использованием GABRA1-GABRB3-GABRG2 конструкции, можно сравнить с результатами, полученными с использованием GABRA2-GABRB2-GABRG2 конструкции для определения селективности данного соединения.
Результаты
При
мер
GABA-a2 Ki
(нМ)
al РАМ
(%)
а2 РАМ (%)
31,1
1,05
124
10,9
-4,67
1,69
5,08
-51,1
27,6
<2,47
18,1
124
108
9,51
9.71
7.45
-55,1
19,4
17,7
-14,6
38,9
61,3
39,2
-0,474
46,7
7,48
3,66
39,1
11,7
40.1
111
35,4
13.3
58,0
18,2
-31,4
39,4
56,0
102
296
31,1
-6,17
84,3
19,0
36,3
43,3
-5,78
31,6
67,8
40,5
37,1
-0,441
55,3
170
-5,82
23,9
147
34,8
74,3
101
69,4
173
120
При
мер
GABA-a2 Ki
(нМ)
al РАМ
(%)
a2 РАМ (%)
23,9
21,3
118
5,82
-29,5
77,2
16,4
-27,0
79,9
34,5
4,99
94,7
38,8
87,4
19,1
8,56
14,6
62,5
14,4
14,0
29,1
14,9
81,3
91,4
112
199
118
678
29,7
20,8
61,1
1750
40,6
18,3
68.7
92,2
-5,53
47.8
21,7
-14,3
83.9
69,5
0,408
50,1
где R1 выбран из (С^С^алкила, (С3-С4)циклоалкила, NH2 и группы МЗ^-СОалкил и R2 представляет собой Н или
R1 и R2 вместе представляют собой -СН2-СН2- или -N(СН3)-СН2-; R3 выбран из Н, F, CHF2, OCH3 и CN; R4 выбран из Н, F, Cl, ОН, ОСН3 и CN;
R5 выбран из (С2-С4)алкила, (С3-С5)циклоалкила и замещенного метилом (С3-С5)циклоалкила, или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, где R1 представляет собой (С2-С4)алкил и R2 представляет собой Н, или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Соединение по п.1 или 2, где R3 выбран из F и ОСН3, или его фармацевтически приемлемая соль.
4. Соединение по любому из пп. 1-3, где R4 выбран из Н и F, или его фармацевтически приемлемая
соль.
5. Соединение по любому из пп.1-4, где R5 представляет собой (С2-С4)алкил, или его фармацевтически приемлемая соль.
6. Соединение по п.1, выбранное из
7-этил-4-(6-фтор-4'-((1-метилэтил)сульфонил)бифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина; 7-этил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метоксибифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина; 7-циклопропил-4-(4'-этилсульфонил-6-фторбифенил-3-ил)-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазина и 4-[4'-(этилсульфонил)-2',6-дифторбифенил-3-ил]-7-(пропан-2-ил)-7H-имидазо[4,5-с]пиридазина.
7. Соединение по п.1, которое представляет собой 7-этил-4-[4'-(этилсульфонил)-6-фтор-2'-метокси-бифенил-3-ил]-7Н-имидазо[4,5-с]пиридазин.
8. Применение соединения по любому из пп.1-7 в качестве лекарственного средства для лечения
боли.
9. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью положительных аллостерических модуляторов GABA(гамма-аминомасляная кислота)д рецепторов, содержащих либо а2, либо а3 субъединицу, содержащая соединение по любому из пп.1-7 и фармацевтически приемлемый эксципиент.
10. Способ лечения боли, включающий введение нуждающемуся в таком лечении субъекту эффективного количества соединения по любому из пп.1-7.
11. Применение соединения по любому из пп.1-7 для изготовления лекарственного средства для лечения боли.
12. Применение соединения по любому из пп.1-7 для лечения боли.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
025635
025635
- 1 -
- 1 -
025635
025635
- 1 -
- 1 -
025635
025635
- 1 -
- 1 -
025635
025635
- 1 -
- 1 -
025635
025635
- 1 -
- 1 -
025635
025635
- 4 -
- 3 -
025635
025635
- 26 -
- 26 -
025635
025635
- 27 -
- 27 -
025635
025635
- 30 -
- 30 -
025635
025635
- 31 -
- 31 -
025635
025635
- 36 -
025635
025635
- 41 -
- 41 -
025635
025635
- 42 -
025635
025635
- 45 -
- 45 -
025635
025635
- 55 -
- 55 -
025635
025635
- 56 -
- 56 -