|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Соединение формулы  где атомы, обозначенные 1 и 2, соединены или двойной связью, или эпоксидированной двойной связью; n равно 1 или 2; m равно 0 или 1; X представляет собой -CN, -CF 3 или -C(O)R a , где R a представляет собой -ОН, алкокси (С ≤ 6) , алкиламино (С ≤ 6) , диалкиламино (С ≤ 6) или -NHS(О) 2 -алкил (С1-4) ; каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 2) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (C ≤ 12) , или замещенный алкандиил (С ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -OCH 2 CH 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 3 отсутствует или представляет собой водород; или алкил (С ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 3 соединен вместе с R 4 , как показано ниже; при условии, что R 3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 4 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген, циано или оксо; или алкил (С ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (С ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (С ≤ 12) , ариламино (С ≤ 12) , аралкиламино (C ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 4 соединен вместе или с R 3 , или с R 5 , как показано ниже; R 5 отсутствует или представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 5 соединен вместе с R 4 , как показано ниже; при условии, что R 5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген, циано или оксо; или алкил (С ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (C ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, если R 3 и R 4 соединены вместе, соединение определено формулой (Ia)  в которой R 7 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (C ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , алкокси (C ≤ 12) , арилокси (C ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (C ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (С ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (C ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или при условии, если R 4 и R 5 соединены вместе, соединение определено формулой (Ib)  в которой R 8 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (C ≤ 12) , арилокси (C ≤ 12) , аралкокси (С ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (C ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (С ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (C ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; в котором по меньшей мере один атом кольца групп гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) и гетероариламино (С ≤ 12) представляет собой N, О или S; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 2. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой  в которой n равно 1 или 2; X представляет собой -CN, -CF 3 или -C(O)R a , где R a представляет собой -ОН, алкокси (С ≤ 6) , алкиламино (C ≤ 6) , диалкиламино (С ≤ 6) или -NHS(О) 2 -алкил (С1-4) ; каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(О)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (С ≤ 12) или замещенный алкандиил (С ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 3 отсутствует или представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, что R 3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 5 отсутствует или представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, что R 5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (С ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 3. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой  в которой каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (С ≤ 12) или замещенный алкандиил (С ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 3 отсутствует или представляет собой водород; алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, что R 3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 5 отсутствует или представляет собой водород; алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, что R 5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (C ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 4. Соединение по п.3, дополнительно определенное формулой  в которой каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 3 представляет собой водород или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (C ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -СО 2 СН 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -OCH 2 CH 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; и R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , алкокси (C ≤ 12) , арилокси (C ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (С ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (С ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или его таутомер. 5. Соединение по п.3, дополнительно определенное формулой  в которой каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (С ≤ 12) или замещенный алкандиил (C ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 5 представляет собой водород; алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (С ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (С ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (C ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 6. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой  в которой каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH; R 4 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (C ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) алкокси (C ≤ 12) , арилокси (C ≤ 12) , аралкокси (С ≤ 12) , гетероарилокси (С ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (С ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (C ≤ 12) , амидо (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Сl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -СО 2 СН 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (С ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (C ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 7. Соединение по п.1, в котором атомы, обозначенные 1 и 2, соединены двойной связью. 8. Соединение по п.1, в котором атомы, обозначенные 1 и 2, соединены эпоксидированной двойной связью. 9. Соединение по одному из пп.1, 2, 7 и 8, в котором n равно 1. 10. Соединение по одному из пп.1, 2, 7 и 8, в котором n равно 2. 11. Соединение по одному из пп.1 и 7-10, в котором m равно 0. 12. Соединение по одному из пп.1 и 7-10, в котором m равно 1. 13. Соединение по одному из пп.1, 2 и 7-12, в котором X представляет собой -CN. 14. Соединение по одному из пп.1-13, в котором каждый R 1 и R 2 представляет собой метил. 15. Соединение по одному из пп.1-13, в котором R 1 представляет собой метил и R 2 представляет собой водород. 16. Соединение по одному из пп.1-3, 5 и 7-13, в котором R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (C ≤ 8) . 17. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-16, в котором R 3 отсутствует. 18. Соединение по одному из пп.14 и 7-16, в котором R 3 представляет собой водород. 19. Соединение по одному из пп.1-4 и 7-16, в котором R 3 представляет собой алкил (C ≤ 8) , арил (C ≤ 8) или ацил (C ≤ 8) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 . 20. Соединение по п.19, в котором R 3 представляет собой метил. 21. Соединение по п.19, в котором R 3 представляет собой фенил. 22. Соединение по одному из пп.1 и 6-21, в котором R 4 представляет собой водород. 23. Соединение по одному из пп.1 и 7-21, в котором R 4 представляет собой оксо. 24. Соединение по одному из пп.1 и 6-21, в котором R 4 представляет собой алкил (С ≤ 8) , арил (C ≤ 8) , ацил (C ≤ 8) , алкокси (C ≤ 8) , где один или более атомов водорода любой из последних четырех групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 . 25. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой метил, изопропил, трет-бутил или циклопропил. 26. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой галогеналкил (C ≤ 6) . 27. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой метокси или этокси. 28. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой фенил, хлорфенил, метилфенил или метоксифенил. 29. Соединение по любому из пп.1 и 6-21, в котором R 4 представляет собой гетероарил (C ≤ 8) , в котором по меньшей мере один атом кольца представляет собой N, О или S. 30. Соединение по п.29, в котором R 4 представляет собой пиридинил или пиримидинил. 31. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой этоксикарбонил. 32. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-31, в котором R 5 отсутствует. 33. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-31, в котором R 5 представляет собой водород. 34. Соединение по одному из пп.1-5 и 7-31, в котором R 5 представляет собой алкил (С ≤ 8) , арил (C ≤ 8) , ацил (C ≤ 8) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -OCH 2 CH 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 . 35. Соединение по п.34, в котором R 5 представляет собой метил, циклогексил или трет-бутил. 36. Соединение по п.34, в котором R 5 представляет собой 2-гидроксиэтил или 2,2,2-трифторэтил. 37. Соединение по п.34, в котором R 5 представляет собой фенил. 38. Соединение по п.34, в котором R 5 представляет собой ацетил, метоксикарбонил, этоксикарбонил или фенилкарбонил. 39. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой водород. 40. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой циано. 41. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой галоген. 42. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой алкил (С ≤ 6) . 43. Соединение по п.42, в котором R 6 представляет собой метил, изопропил или циклогексил. 44. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой арил (C ≤ 8) или гетероарил (C ≤ 8) , в котором по меньшей мере один атом кольца представляет собой N, О или S, где один или более атомов водорода любой из групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 . 45. Соединение по любому из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой фенил, метилфенил или нафтил. 46. Соединение по п.44, в котором R 6 представляет собой хлорфенил, фторфенил или метоксифенил. 47. Соединение по п.44, в котором R 6 представляет собой пиридинил, пиримидинил, метилпиразолил, диметилизоксазолил, метилтриазолил или метилтетразолил. 48. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой аралкил (С ≤ 12) или замещенный аралкил (С ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 . 49. Соединение по п.48, в котором R 6 представляет собой бензил. 50. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой амидо (C ≤ 8) . 51. Соединение по п.50, в котором R 6 представляет собой фенилкарбониламино. 52. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой алкинил (C ≤ 8) . 53. Соединение по п.52, в котором R 6 представляет собой этинил. 54. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой ацил (С ≤ 8) . 55. Соединение по любому из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой аминокарбонил или диметиламинокарбонил. 56. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой алкокси (C ≤ 8) . 57. Соединение по п.56, в котором R 6 представляет собой метокси. 58. Соединение по одному из пп.1, 7-16 и 39-57, в котором R 7 или R 8 представляет собой водород. 59. Соединение по одному из пп.1, 7-12 и 39-57, в котором R 7 или R 8 представляет собой галоген. 60. Соединение по одному из пп.1, 7-16 и 39-57, в котором R 7 или R 8 представляет собой арил (С ≤ 8) . 61. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 10 имеет R-конфигурацию. 62. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 10 имеет S-конфигурацию. 63. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 5 имеет R-конфигурацию. 64. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 5 имеет S-конфигурацию. 65. Соединение по п.1, выбранное из      66. Соединение по п.1, выбранное из    67. Соединение, выбранное из  68. Соединение, выбранное из  69. Фармацевтическая композиция для лечения или предотвращения воспаления или заболеваний, связанных с воспалением, содержащая: a) соединение по любому из пп.1-68 в терапевтически эффективном количестве и b) фармацевтически приемлемый носитель.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Соединение формулы где атомы, обозначенные 1 и 2, соединены или двойной связью, или эпоксидированной двойной связью; n равно 1 или 2; m равно 0 или 1; X представляет собой -CN, -CF 3 или -C(O)R a , где R a представляет собой -ОН, алкокси (С ≤ 6) , алкиламино (С ≤ 6) , диалкиламино (С ≤ 6) или -NHS(О) 2 -алкил (С1-4) ; каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 2) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (C ≤ 12) , или замещенный алкандиил (С ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -OCH 2 CH 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 3 отсутствует или представляет собой водород; или алкил (С ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 3 соединен вместе с R 4 , как показано ниже; при условии, что R 3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 4 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген, циано или оксо; или алкил (С ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (С ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (С ≤ 12) , ариламино (С ≤ 12) , аралкиламино (C ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 4 соединен вместе или с R 3 , или с R 5 , как показано ниже; R 5 отсутствует или представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 5 соединен вместе с R 4 , как показано ниже; при условии, что R 5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген, циано или оксо; или алкил (С ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (C ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, если R 3 и R 4 соединены вместе, соединение определено формулой (Ia) в которой R 7 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (C ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , алкокси (C ≤ 12) , арилокси (C ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (C ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (С ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (C ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или при условии, если R 4 и R 5 соединены вместе, соединение определено формулой (Ib) в которой R 8 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (C ≤ 12) , арилокси (C ≤ 12) , аралкокси (С ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (C ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (С ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (C ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; в котором по меньшей мере один атом кольца групп гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) и гетероариламино (С ≤ 12) представляет собой N, О или S; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 2. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой в которой n равно 1 или 2; X представляет собой -CN, -CF 3 или -C(O)R a , где R a представляет собой -ОН, алкокси (С ≤ 6) , алкиламино (C ≤ 6) , диалкиламино (С ≤ 6) или -NHS(О) 2 -алкил (С1-4) ; каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(О)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (С ≤ 12) или замещенный алкандиил (С ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 3 отсутствует или представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, что R 3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 5 отсутствует или представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, что R 5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (С ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 3. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой в которой каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (С ≤ 12) или замещенный алкандиил (С ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 3 отсутствует или представляет собой водород; алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, что R 3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 5 отсутствует или представляет собой водород; алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; при условии, что R 5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (C ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (C ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 4. Соединение по п.3, дополнительно определенное формулой в которой каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 3 представляет собой водород или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (C ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -СО 2 СН 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -OCH 2 CH 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; и R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , алкокси (C ≤ 12) , арилокси (C ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (С ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (С ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (С ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или его таутомер. 5. Соединение по п.3, дополнительно определенное формулой в которой каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (С ≤ 12) или замещенный алкандиил (C ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 5 представляет собой водород; алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (C ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (С ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (С ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (C ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 6. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой в которой каждый R 1 и R 2 независимо представляет собой водород или алкил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH; R 4 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (С ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (C ≤ 12) , аралкил (C ≤ 12) , гетероарил (С ≤ 12) , гетероциклоалкил (С ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) алкокси (C ≤ 12) , арилокси (C ≤ 12) , аралкокси (С ≤ 12) , гетероарилокси (С ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (С ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (С ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (C ≤ 12) , амидо (C ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Сl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -СО 2 СН 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; R 6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил (C ≤ 12) , алкенил (C ≤ 12) , алкинил (С ≤ 12) , арил (С ≤ 12) , аралкил (С ≤ 12) , гетероарил (C ≤ 12) , гетероциклоалкил (C ≤ 12) , ацил (С ≤ 12) , алкокси (С ≤ 12) , арилокси (С ≤ 12) , аралкокси (C ≤ 12) , гетероарилокси (С ≤ 12) , ацилокси (С ≤ 12) , алкиламино (C ≤ 12) , диалкиламино (C ≤ 12) , ариламино (C ≤ 12) , аралкиламино (С ≤ 12) , гетероариламино (C ≤ 12) , амидо (С ≤ 12) , где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 ; или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер. 7. Соединение по п.1, в котором атомы, обозначенные 1 и 2, соединены двойной связью. 8. Соединение по п.1, в котором атомы, обозначенные 1 и 2, соединены эпоксидированной двойной связью. 9. Соединение по одному из пп.1, 2, 7 и 8, в котором n равно 1. 10. Соединение по одному из пп.1, 2, 7 и 8, в котором n равно 2. 11. Соединение по одному из пп.1 и 7-10, в котором m равно 0. 12. Соединение по одному из пп.1 и 7-10, в котором m равно 1. 13. Соединение по одному из пп.1, 2 и 7-12, в котором X представляет собой -CN. 14. Соединение по одному из пп.1-13, в котором каждый R 1 и R 2 представляет собой метил. 15. Соединение по одному из пп.1-13, в котором R 1 представляет собой метил и R 2 представляет собой водород. 16. Соединение по одному из пп.1-3, 5 и 7-13, в котором R 1 и R 2 соединены вместе и представляют собой алкандиил (C ≤ 8) . 17. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-16, в котором R 3 отсутствует. 18. Соединение по одному из пп.14 и 7-16, в котором R 3 представляет собой водород. 19. Соединение по одному из пп.1-4 и 7-16, в котором R 3 представляет собой алкил (C ≤ 8) , арил (C ≤ 8) или ацил (C ≤ 8) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -C(O)CH 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 . 20. Соединение по п.19, в котором R 3 представляет собой метил. 21. Соединение по п.19, в котором R 3 представляет собой фенил. 22. Соединение по одному из пп.1 и 6-21, в котором R 4 представляет собой водород. 23. Соединение по одному из пп.1 и 7-21, в котором R 4 представляет собой оксо. 24. Соединение по одному из пп.1 и 6-21, в котором R 4 представляет собой алкил (С ≤ 8) , арил (C ≤ 8) , ацил (C ≤ 8) , алкокси (C ≤ 8) , где один или более атомов водорода любой из последних четырех групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 . 25. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой метил, изопропил, трет-бутил или циклопропил. 26. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой галогеналкил (C ≤ 6) . 27. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой метокси или этокси. 28. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой фенил, хлорфенил, метилфенил или метоксифенил. 29. Соединение по любому из пп.1 и 6-21, в котором R 4 представляет собой гетероарил (C ≤ 8) , в котором по меньшей мере один атом кольца представляет собой N, О или S. 30. Соединение по п.29, в котором R 4 представляет собой пиридинил или пиримидинил. 31. Соединение по п.24, в котором R 4 представляет собой этоксикарбонил. 32. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-31, в котором R 5 отсутствует. 33. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-31, в котором R 5 представляет собой водород. 34. Соединение по одному из пп.1-5 и 7-31, в котором R 5 представляет собой алкил (С ≤ 8) , арил (C ≤ 8) , ацил (C ≤ 8) , где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -OCH 2 CH 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 . 35. Соединение по п.34, в котором R 5 представляет собой метил, циклогексил или трет-бутил. 36. Соединение по п.34, в котором R 5 представляет собой 2-гидроксиэтил или 2,2,2-трифторэтил. 37. Соединение по п.34, в котором R 5 представляет собой фенил. 38. Соединение по п.34, в котором R 5 представляет собой ацетил, метоксикарбонил, этоксикарбонил или фенилкарбонил. 39. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой водород. 40. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой циано. 41. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой галоген. 42. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой алкил (С ≤ 6) . 43. Соединение по п.42, в котором R 6 представляет собой метил, изопропил или циклогексил. 44. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой арил (C ≤ 8) или гетероарил (C ≤ 8) , в котором по меньшей мере один атом кольца представляет собой N, О или S, где один или более атомов водорода любой из групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -OCH 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -ОС(O)СН 3 или -S(O) 2 NH 2 . 45. Соединение по любому из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой фенил, метилфенил или нафтил. 46. Соединение по п.44, в котором R 6 представляет собой хлорфенил, фторфенил или метоксифенил. 47. Соединение по п.44, в котором R 6 представляет собой пиридинил, пиримидинил, метилпиразолил, диметилизоксазолил, метилтриазолил или метилтетразолил. 48. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой аралкил (С ≤ 12) или замещенный аралкил (С ≤ 12) , в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH 2 , -NO 2 , -CO 2 H, -CO 2 CH 3 , -CN, -SH, -ОСН 3 , -ОСН 2 СН 3 , -С(O)СН 3 , -N(CH 3 ) 2 , -C(O)NH 2 , -OC(O)CH 3 или -S(O) 2 NH 2 . 49. Соединение по п.48, в котором R 6 представляет собой бензил. 50. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой амидо (C ≤ 8) . 51. Соединение по п.50, в котором R 6 представляет собой фенилкарбониламино. 52. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой алкинил (C ≤ 8) . 53. Соединение по п.52, в котором R 6 представляет собой этинил. 54. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой ацил (С ≤ 8) . 55. Соединение по любому из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой аминокарбонил или диметиламинокарбонил. 56. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R 6 представляет собой алкокси (C ≤ 8) . 57. Соединение по п.56, в котором R 6 представляет собой метокси. 58. Соединение по одному из пп.1, 7-16 и 39-57, в котором R 7 или R 8 представляет собой водород. 59. Соединение по одному из пп.1, 7-12 и 39-57, в котором R 7 или R 8 представляет собой галоген. 60. Соединение по одному из пп.1, 7-16 и 39-57, в котором R 7 или R 8 представляет собой арил (С ≤ 8) . 61. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 10 имеет R-конфигурацию. 62. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 10 имеет S-конфигурацию. 63. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 5 имеет R-конфигурацию. 64. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 5 имеет S-конфигурацию. 65. Соединение по п.1, выбранное из 66. Соединение по п.1, выбранное из 67. Соединение, выбранное из 68. Соединение, выбранное из 69. Фармацевтическая композиция для лечения или предотвращения воспаления или заболеваний, связанных с воспалением, содержащая: a) соединение по любому из пп.1-68 в терапевтически эффективном количестве и b) фармацевтически приемлемый носитель.
Евразийское 025568 (13) B1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2017.01.30
(21) Номер заявки 201390894
(22) Дата подачи заявки
2011.12.19
(51) Int. Cl.
C07D 231/54 (2006.01) C07D 239/70 (2006.01) C07D 401/04 (2006.01) C07D 403/04 (2006.01) C07D 413/04 (2006.01) C07D 417/04 (2006.01) C07D 487/04 (2006.01) A61K31/416 (2006.01) A61K31/517 (2006.01) A61P29/00 (2006.01)
(54)
ПИРАЗОЛИЛЬНЫЕ И ПИРИМИДИНИЛЬНЫЕ ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЕНОНЫ В КАЧЕСТВЕ АНТИОКСИДАНТНЫХ МОДУЛЯТОРОВ ВОСПАЛЕНИЯ
(31) 61/424,601
(32) 2010.12.17
(33) US
(43) 2013.12.30
(86) PCT/US2011/065897
(87) WO 2012/083306 2012.06.21
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
РИТА ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНК.
(US)
(72) Изобретатель:
Андерсон Эрик, Болтон Гари Л., Капрат Брэдли, Цзян Синь, Ли Читасэ, Рорк Уилльям Х., Висник
Мелеэн (US)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU) (56) WO-A2-2009146216
HONDA T. ET AL.: "New enone derivatives of oleanolic acid and ursolic acid as inhibitors of nitric oxide production in mouse macrophages", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, PERGAMON, ELSEVIER SCIENCE, GB, vol. 7, no. 13, 8 July 1997 (1997-07-08), pages 1623-1628, XP004136268, ISSN: 0960-894X, DOI: 10.1016/S0960-894X(97)00279-5, cited in the application, compounds 1-17
(57) Изобретение относится к новым антиоксидантным модуляторам воспаления, включая соединения формулы
в которой переменные определены в изобретении. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, наборам и изделиям, содержащим данные соединения. Изобретение также относится к способам и промежуточным соединениям, пригодным для получения соединений, и способам применения соединений и их композиций.
Уровень техники настоящего изобретения
По настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной патентной заявки США № 61/424601, поданной 17 декабря 2010 г., содержание которой включено в настоящее изобретение с помощью ссылки.
I. Область техники, к которой относится настоящее изобретение.
Настоящее изобретение относится в общем к областям биологии и медицины. Более конкретно, оно относится к соединениям, композициям и способам лечения и предотвращения заболеваний, таких как заболевания, связанные с окислительным стрессом и воспалением.
II. Описание предшествующего уровня техники.
Противовоспалительная и антипролиферативная активность встречающегося в природе тритерпе-ноида, олеанолевой кислоты, улучшены химическими модификациями. Например, разработаны 2-циано-3,12-диоксоолеана-1,9(11)-диен-28-овая кислота (CDDO) и родственные соединения (Honda et al., 1997; Honda et al., 1998; Honda et al., 1999; Honda et al., 2000a; Honda et al., 2000b; Honda, et al., 2002; Sun et al. 1998; Sun et al., 1999; Place et al., 2003; Liby et al., 2005). Сложный метиловый эфир, бардоксолон-метил (CDDO-Me), в настоящее время оценивают в клинических испытаниях II фазы для лечения диабетической нейропатии и хронического заболевания почек.
Было показано, что синтетические тритерпеноидные аналоги олеанолевой кислоты являются ингибиторами процессов клеточного воспаления, таких как индукция IFN-y индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS) и СОХ-2 в мышиных макрофагах; смотрите Honda et al. (2000а); Honda et al. (2000b) и Honda et al. (2002), все из которых включены в настоящее изобретение с помощью ссылки. Также показано, что синтетические производные другого тритерпеноида, бетулиновой кислоты, ингибируют процессы клеточного воспаления, хотя данные соединения менее широко охарактеризованы (Honda et al., 2006). Фармакология данных синтетических тритерпеноидных молекул является сложной. Показано, что соединения, являющиеся производными олеанолевой кислоты, влияют на функционирование многочисленных белковых мишеней, и посредством этого модулируют активность нескольких важных клеточных сигнальных путей, связанных с окислительным стрессом, контролированием клеточного цикла и воспалением (например, Dinkova-Kostova et al., 2005; Ahmad et al., 2006; Ahmad et al., 2008; Liby et al., 2007a). Производные бетулиновой кислоты, хотя они показали сравнимые противовоспалительные свойства, также, по-видимому, имеют значительные отличия в их фармакологии по сравнению с соединениями, являющимися производными ОА (Liby et al., 2007b). В общем, неизвестно, обладают ли тритерпеноид-ные исходные соединения, применяемые в настоящее время, оптимальными свойствами для всех применений по сравнению с другими возможными исходными соединениями. Кроме того, часто необходимо получить производные из исходных соединений, являющихся природными продуктами. Получение три-терпеноидных исходных соединений высокой чистоты может быть дорогим, и растительные материалы, которые являются основным источником данных соединений, могут иметь различную доступность, в том числе из-за неблагоприятных погодных условий, заболевания и других факторов окружающей среды. Принимая во внимание то, что профили биологической активности известных тритерпеноидных производных варьируются и ввиду широкого разнообразия заболеваний, которые можно лечить или предотвращать соединениями, обладающими мощными антиоксидантными и противовоспалительными эффектами, и высокую степень нереализованной потребности медицины, представленной в данном наборе заболеваний, желательно получить новые соединения с разнотипной структурой, которые могут обладать улучшенными профилями биологической активности для лечения одного или более заболеваний. Следовательно, разработка мощных селективных антиоксидантных/противовоспалительных соединений, которые можно легко получить из простых исходных соединений, является требуемой целью.
Сущность настоящего изобретения
Настоящее изобретение относится к новым соединениям, включая пиразолильные и пиримиди-нильные трициклические еноны с противовоспалительными и/или антиоксидантными свойствами, их фармацевтическим композициям, способам их получения и способам их применения.
где атомы, обозначенные 1 и 2, соединены или двойной связью, или эпоксидированной двойной связью;
n равно 1 или 2; m равно 0 или 1;
В одном аспекте настоящего изобретения обеспечивают соединениями формулы
X представляет собой -CN, -CF3 или -C(O)Ra, где Ra представляет собой -ОН, алкокси(С <6), алкила-мино(С <6), диалкиламино(С <6) или -NHS(О)2-алкиЛ(C1-4);
каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород; или алкил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), или замещенный вариант любой из последних трех групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2; или
R1 и R2 соединены вместе и представляют собой алкандиил(С <12), или замещенный алкандиил(С <12), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2,
-CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2;
R3 отсутствует или представляет собой водород или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СН.,, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; или R3 соединен вместе с R4, как показано ниже; при условии, что R3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R4 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген, циано или оксо; или алкил^п), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), в котором по меньшей мере один атом кольца представляет собой N, О или S, ацил(С <12), алкокси(С <12), арилокси(С <12), аралкокси(С <12), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино(С <12), диалкиламино(С <12), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СН или -S(O)2NH2; или R4 соединен вместе или с R3, или с R5, как показано ниже;
R5 отсутствует или представляет собой водород или алкил^п), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ащщр^) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -OCH2CH3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; или R5 соединен вместе с R4, как показано ниже; при условии, что R5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; и
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген, циано или оксо; или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), ал-кокси(С <12), арилокси(С <12), аралкокси(С <12), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино(С <12), диалкила-мино(С <12), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН,
-F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -СО2СН3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2;
при условии, если R3 и R4 соединены вместе, соединение дополнительно определено формулой 1а
в которой R7 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано или алкил(С <12), алке-нил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), алкок-си(С <12), арилокси(С <12), аралкокси(С <12), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино(С <12), диалкилами-но(С <12), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН,
-F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2,
-ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; или
в которой R8 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил(С <12), ал-кенил(С <12), алкинил(С <12), арил^п) аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил^щ алкок-си(С <12), арилокси(С <12^ аралкокси(С <12), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино(С <12), диалкилами-но(С <12), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH.)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O^NH2;
в котором по меньшей мере один атом кольца групп гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), гете-роарилокси(С <12) и гетероариламино(С <12) представляет собой N, О или S;
или их фармацевтически приемлемой сольи или таутомером.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определяют формулой
в которой n равно 1 или 2;
X представляет собой -CN, -CF3 или -C(O)Ra, где Ra представляет собой -ОН, алкокси(С <6), алкила-мино(С <6), диалкиламино(С <6) или -№К(О)2-алкил(с:1-4);
каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород; алкил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), или замещенный вариант любой из последних трех групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3,
-С(O)СНз, -N(CH.)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2; или
R1 и R2 соединен^1 вместе и представляют собой алкандиил(С <12) или замещенный алкандиил(С <12), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН., -ОСН2СН3, -С^СНз, -N(CH.)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O^NH2;
R3 отсутствует или представляет собой водород или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH.)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; при условии, что R3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R5 отсутствует или представляет собой водород; или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СНз, -N(CH.)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; при условии, что R5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; и
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), алкокси(С <12), арилокси(С <12), аралкокси(С <12), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино(С <12), диалкиламино(С <12), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH.)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2;
или их фармацевтически приемлемой солью или таутомером.
в которой каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород, алкил(С <12), арил(С <12), арал-кил(С <12), или замещенный вариант любой из последних трех групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2; или
R1 и R2 соединены вместе и представляют собой алкандиил(С <12) или замещенный алкандишлр^), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2;
R3 отсутствует или представляет собой водород; алкиЛ(С <12), алкениЛ(С <12), алкиниЛ(С <12), ариЛ(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3b -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2; при условии, что R3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R5 отсутствует или представляет собой водород; алкиЛ(С <12), алкениЛ(С <12), алкиниЛ(С <12), арил^^ аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СНз или -S(O)2NH2; при условии, что R5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи; и
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), алкокси(С <12), арилокси(С <12), аралкокси(С <12), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино(С <12), диалкиламино(С <12), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2;
или их фармацевтически приемлемой солью или таутомером.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определяют формулой
в которой каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород; алкил(С <12), арил(С <12), арал-кил(С <12) или замещенный вариант любой из последних трех групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3,
-ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2;
R3 представляет собой водород или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; и
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил(С <12), алкенил^^, алкиниЛ(C <12), арил(С <12), аралкиЛ(C <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), алкоксир^), арилокси(C <12), аралкокси(С <12), гетероарилокси(С <12), ацилокси(C <12), алкиламино^^), диалкиламино(С <12), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из
данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -С^СЩ -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2;
или их фармацевтически приемлемой солью или таутомером.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определяют формулой
в которой каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород; алкил(С <12), арил^^, арал-кил(С <12), или замещенный вариант любой из последних трех групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; или
R1 и R2 соединены вместе и представляют собой алкандишлр^) или замещенный алкандиил(С <12), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2;
R5 представляет собой водород; алкил(С <12), алкенил^^), алкинил^з, арил^щ аралкил(С <12), гете-роаршлр^), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; и
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^^, алкенил^^, алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), алкоксир^) ари-локси(С <12), аралкоксир^х гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино(С <12), диалкиламино(С <12), ари-ламино^^, аралкиламино^^), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СН.,, -N(CH3)2, -C(O)NH2,
-OC(O)CH3 или -S(O)2NH2;
или их фармацевтически приемлемой солью или таутомером.
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определяют формулой
в которой каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород; алкиЛ(С <12), арил^^, арал-кшлр^) или замещенный вариант любой из последних трех групп;
R4 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкиЛ(С <12), алкеншлр^), алкиниЛ(С <12), ариЛ(С <12), аралкиЛ(С <12), гетероариЛ(С <12), гетероциклоалкиЛ(С <12), ацил^^, алкокси(С <12), ари-локси(С <12), аралкокси(С <12), гетероарилокси(С <12), ацилоксир^), алкиламино(С <12), диалкиламино^^), ари-ламино(С <12), аралкиламино^^), гетероариламино(С <12), амидо^п) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2;
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^^, алкенил^^, алкинил^з, ариЛ(С <12), аралкиЛ(С <12), гетероариЛ(С <12), гетероциклоалкиЛ(С <12), ациЛ(С <12), алкокси(С <12), арилокси(С <12), аралкоксир^), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламинр^^диалкиламино^^), ариламино^^), аралкиламино^^), гетероариламино(С <12), амидо(С <12) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СЩ -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2;
или их фармацевтически приемлемой солью или таутомером.
В некоторых вариантах осуществления атомы, обозначенные 1 и 2, соединены двойной связью. В некоторых вариантах осуществления атомы, обозначенные 1 и 2, соединены эпоксидированной двойной связью. В некоторых вариантах осуществления n равно 1. В некоторых вариантах осуществления n равно 2. В некоторых вариантах осуществления m равно 0. В некоторых вариантах осуществления m равно 1. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой -CN.
В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой алкил(С <8) или замещенный алкшлр^). В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой алкил^). В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой метил. В некоторых вариантах осуществления каждый R1 и R2 представляет собой метил. В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой метил, и R2 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой этил. В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой этил и R2 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления каждый R1 и R2 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R1 и R2 соединены вместе и представляют собой алкандииЛ(С <8). В некоторых вариантах осуществления R1 и R2 соединены вместе и представляют собой 1,4-бутандиил. В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой ариЛ(С <8). В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой фенил. В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой фенил и R2 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой арал-кшлр^). В некоторых вариантах осуществления R1 или R2 представляет собой бензил. В некоторых вариантах осуществления R1 представляет собой бензил и R2 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления каждый R1 и R2 представляет собой бензил.
В некоторых вариантах осуществления R3 отсутствует. В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой алкил^), арил(С <8), ацил(С <8), алкокси(С <8) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СН;,, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СН или -S(O)2NH2. В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой алкил(С <4) или замещенный алкил(С <4). В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой алкил(С <4). В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой метил. В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой арил(С <8) или замещенный арил(С <8). В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой арил(С <8). В некоторых вариантах осуществления R3 представляет собой фенил.
В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой оксо. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой алкил(С <8), арил(С <8), ацил(С <8), алкокси(С <8)или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO^H;,, -CN, -SH, -ОСН.,, -ОСН2СНЪ -С^СН,, N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой алкил(С <6) или замещенный алкил^^). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой алкил(С <6). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой метил, изопропил, трет-бутил или циклопропил. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой галогеналкил(С <6). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой трифторметил. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой алкокси(С <6). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой метокси или этокси. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой арил^) или замещенный арил(С <8). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой фенил, хлорфенил, метилфенил или метоксифенил. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой гетероариЛ(С <8). В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой пиридинил или пиримидинил. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой ацшлр^) или замещенный ацил^ф. В некоторых вариантах осуществления R4 представляет собой этоксикарбонил.
В некоторых вариантах осуществления R5 отсутствует. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой алкил^), аршлр^), ацшлр^), алкокси(С <8) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH,, -CN, -SH, -ОСЩ -ОСН2СЩ -С^СЩ -N(CHз)2, -C(O)NH2, -ОС^СН или -S(O)2NH2. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой алкил^^) или замещенный алкил^^). В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой алкил^^). В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой метил, циклогексил или трет-бутил. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой замещенный алкиЛ(С <4). В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой 2-гидроксиэтил или 2,2,2-трифторэтил. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой аршлр^) или замещенный арил^^). В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой
аршлр^). В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой фенил. В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой ациЛ(С <8) или замещенный ациЛ(С <8). В некоторых вариантах осуществления R5 представляет собой ацетил, метоксикарбонил, этоксикарбонил или фенилкарбонил.
В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой циано. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой галоген. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой хлор или бром. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой алкшлр^). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой метил, изопропил или циклогексил. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой арил^), гетероаршлр^) или замещенный вариант любой из данных групп, в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -OOCH;,, -CN, -SH, -OCH;,, -OCH2CH;,, -C(O)CH;,, -N(CH;,)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой арил(С <10). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой фенил, метилфенил или нафтил. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой замещенный арил^). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой хлорфенил, фторфенил или метоксифенил. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой гетероарил(С <8). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой пиридинил, пиримидинил, метилпиразолил, диметилизоксазолил, метилтриазолил или метилтетразолил. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой аралкил(С <12) или замещенный аралкил(С <12), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH,, -CN, -SH, -ОСН;, -ОСН2СН;, -C(O)CH;, -N(CH;)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой бензил. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой амидо^^). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой фенилкарбони-ламино. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой алкиншлр^). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой этинил. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой ациЛ(С <8). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой аминокарбонил или ди-метиламинокарбонил. В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой алкокси(С <8). В некоторых вариантах осуществления R6 представляет собой метокси. В некоторых вариантах осуществления атом углерода 10 имеет R-конфигурацию. В некоторых вариантах осуществления атом углерода 10 имеет S-конфигурацию. В некоторых вариантах осуществления атом углерода 5 имеет R-конфигурацию. В некоторых вариантах осуществления атом углерода 5 имеет S-конфигурацию.
В некоторых вариантах осуществления R7 или R8 представляет собой водород. В некоторых вариантах осуществления R7 или R8 представляет собой галоген. В некоторых вариантах осуществления R7 или R8 представляет собой бром. В некоторых вариантах осуществления R7 или R8 представляет собой аршлр^). В некоторых вариантах осуществления R7 или R8 представляет собой фенил.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, для лечения или предотвращения воспаления или заболеваний, связанных с воспалением, содержащим соединение согласно любой из формул, описанных в настоящем изобретении, и вспомогательное вещество.
Другие цели, особенности и преимущества настоящего изобретения станут понятными из следующего подробного описания. Однако ясно, что подробное описание и конкретные примеры, определяя конкретные варианты осуществления настоящего изобретения, приведены только с целью иллюстрации, поскольку различные изменения и модификации в пределах объема и сущности настоящего изобретения будут очевидны специалисту в данной области техники из подробного описания. Обратите внимание на то, что, если конкретное соединение приписано только к одной конкретной общей формуле, это не значит, что оно не может принадлежать к другой общей формуле.
Описание иллюстративных вариантов осуществления
Описанными в настоящем изобретении являются новые соединения и композиции с антиоксидант-ными и/или противовоспалительными свойствами, способы их получения и способы их применения, включая лечение и/или предотвращение заболевания.
I. Определения.
При применении в контексте химической группы, "водород" обозначает -Н; "гидрокси"' обозначает -ОН; "оксо" обозначает =O; "галоген" обозначает независимо -F, -Cl, -Br или -I; "амино" обозначает -NH2; "гидроксиамино" обозначает -NHOH; "нитро" обозначает -NO2; "имино" обозначает =NH; "циано" обозначает -CN; "изоцианат" обозначает -N=C=O; "азидо" обозначает -N^ в моновалентном контексте "'фосфат" обозначает -OP(O)(OH)2 или его депротонированную форму; в двухвалентном контексте "фосфат" обозначает -OP(O)(OH)O- или его депротонированную форму; "меркапто" обозначает -SH; "тио" обозначает =S; "сульфонил" обозначает -S(O)2-; и "сульфинил" обозначает ^(О)-.
В контексте химических формул символ "-" обозначает единичную связь, "=" обозначает двойную связь; и "=" обозначает тройную связь. "Эпоксидированная двойная связь" представляет собой группу Я.
Символ " " представляет собой необязательную связь, которая, если она присутствует, является единичной или двойной. Символ "=" представляет собой единичную связь или двойную связь. Таким
образом, например, структура ^ оригинала включает структуры
О, о, о.
0.0.
Как ясно специалисту в данной области техники, не один данный кольцевой атом не образует часть
более чем одной двойной связи. Символ " ,ЛЛА " / когда он нарисован перпендикулярно через связь, оп-
ределяет место присоединения группы. Следует отметить, что место присоединения обычно определяют
таким способом для больших групп для того, чтобы помочь читателю быстро и однозначно определить
место присоединения. Символ обозначает единичную связь, когда группа, присоединенная к тол-
стому концу клина, находится "снаружи плоскости страницы". Символ - обозначает единичную
связь, когда группа, присоединенная к толстому концу клина, находится "за плоскостью страницы". Символ ""ллл" обозначает единичную связь, когда конфигурация (например, или R, или S) или геометрия является неопределенной (например, или Е, или Z). Любая неопределенная валентность атома структуры, показанной в данном описании, имплицитно представляет собой атом водорода, соединенный с атомом. Когда группа "R" показана в виде "плавающей группы" в кольцевой системе, например, в формуле
то R может замещать любой атом водорода, соединенный с любым из кольцевых атомов, включая изображенный, подразумеваемый или явно определенный водород, при условии, что образуется стабильная структура. Когда группа "R" показана в виде "плавающей группы" в конденсированной кольцевой системе, как, например, в формуле
то R может замещать любой водород, соединенный с любым из кольцевых атомов любого из конденсированных колец, если не указано иначе. Замещаемые водороды включают показанные водороды (например, водород, соединенный с азотом в формуле выше), подразумеваемые водороды (например, водород формулы выше, который не показан, но ясно, что он присутствует), явно показанные водороды и необязательные водороды, чье присутствие зависит от особенностей кольцевого атома (например, водород, соединенный с группой X, где X представляет собой -СН-), при условии, что образуется стабиль
ная структура. В показанном примере, R может находиться в любом из 5-членного или 6-членного кольца конденсированной кольцевой системы. В формуле выше, подстрочная буква "у", следующая непосредственно после группы "R", взятой в скобки, представляет собой числовую переменную. Если не указано иначе, данная переменная может быть равной 0, 1, 2 или любому целому, большему чем 2, ограниченному только максимальным числом замещаемых атомов водорода кольца или кольцевой системы.
Что касается групп и классов ниже, следующие вставные подписи дополнительно определяют группу/класс следующим образом: "(Cn)" определяет точное количество (n) атомом углерода в группе/классе. "(С <П)" определяет максимальное количество (n) атомов углерода, которые могут быть в группе/классе, с минимальным количеством в пределах возможного для указанной группы, например, ясно, что минимальное количество атомов углерода в группе "алкенил(С <8)" или классе "алкецр^)" составляет два. Например, "алкокси(С <10)" обозначает те группы, которые содержат 1-10 атомов углерода (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10, или любой получаемый из него диапазон (например, 3-10 атомов углерода). (Cn-n') определяет и минимальное (п) и максимальное количество (п') атомов углерода в группе. Аналогично, "алкил(С2-10)" обозначает те алкильные группы, которые содержат 2-10 атомов углерода (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10, или любой получаемый из него диапазон (например, 3-10 атомов углерода)).
Термин "насыщенный", как применяют в настоящем изобретении, обозначает соединение или группу, модифицированную таким образом, что она. не содержит углерод-углерод двойных связей и углерод-углерод тройных связей, за исключением отмеченных ниже случаев. Термин не исключает множественных связей углерод-гетероатом, например двойную связь углерод-кислород или двойную связь углерод-азот. Более того, он не исключает двойную связь углерод-углерод, которая может возникать как часть кето-енольной таутомерии или имин/енаминовой таутомерии.
Термин "алифатический" при применении без модификатора "замещенный" обозначает, что таким образом модифицированное соединение/группа представляет собой ациклическое или циклическое, но не ароматическое углеводородное соединение или группу. В алифатических соединениях/группах атомы углерода могут быть соединены вместе, образуя нормальные цепи, разветвленные цепи или неароматические кольца (алициклические). Алифатические соединения/группы могут быть насыщенными, которые соединены единичной связью (алканы/алкил), или ненасыщенными, с одной или более двойными связями (алкены/алкенил) или с одной или более тройными связями (алкины/алкинил). При применении термина "алифатический" без модификатора "замещенный" присутствуют только атомы углерода и водорода. Когда термин применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода можно
независимо замещать -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3,
-С^СЩ -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СН или -S(O)2NH2.
Термин "алкил" при применении без модификатора "замещенный" относится к моновалентной насыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве места присоединения, линейной или разветвленной, цикло, циклической или ациклической структуре, и без атомов, отличных от углерода и водорода. Таким образом, как применяют в настоящем изобретении, циклоалкил представляет собой подгруппу алкила. Группы -СН3 (Me), -CH2CH3 (Et), -СН2СН2СН3 (н-Pr), -СН(СН3)2 (изо-Pr), -СН(СН2)2 (цик-лопропил), -СН2СН2СН2СН3 (н-Bu), -СН (СН3) СН2СН3 (втор-бутил), -СН2СН(СН3)2 (изобутил), -С(СН3)3 (трет-бутил), -СН2С(СН3)3 (неопентил), циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогексил-метил являются неограничивающими примерами алкильных групп. Термин "алкандиил" при применении без модификатора "замещенный" обозначает двухвалентную насыщенную алифатическую группу, с одним или двумя насыщенными атомами углерода в качестве места присоединения, линейную или разветвленную, цикло, циклическую или ациклическую структуру, без углерод-углеродных двойных или тройных связей, и без атомов, отличных от углерода и водорода. Группы -СН2-(метилен), -СН2СН2-,
СН2С(СН3)2СН2-, -СН2СН2СН2- и являются неограничивающими примерами алкандиильных
групп. Термин "алкилиден" при применении без модификатора "замещенный" относится к двухвалентной группе =CRR', в которой R и R' независимо представляют собой водород, алкил, или R и R' соединены вместе, получая алкандиил, содержащий по меньшей мере два атома углерода. Неограничивающие примеры алкилиденовых групп включают =СН2, =СН(СН2СН3) и =С(СН3)2. Когда любой из данных терминов применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2,
-C(O)NH2, -ОС^^Н или -S(O)2NH2. Следующие группы являются неограничивающими примерами замещенных алкильных групп: -СН2ОН, -CH2Cl, -CF3, -CH2CN, СН^^ОН, -С^С^ОСН^ -CH2C(O)NH2, -С^С^СЩ -СН2ОСН3, С^ОС^С^, -CH2NH2, -CHN(CH3)2 и -CH2CH2CI. Термин "галогеналкил" представляет собой поднабор замещенного алкила, в котором один или более атомов водорода замещены галогеновой группой, и другие атомы, помимо углерода, водорода и галогена, отсутствуют. Группа -CH2Cl представляет собой неограничивающий пример галогеналкила. "Алкан" относится к соединению H-R, в котором R представляет собой алкил. Термин "фторалкил" представляет собой под-набор замещенного алкила, в котором один или более атомов водорода замещены фтор-группой, и другие атомы, помимо углерода, водорода и фтора, отсутствуют. Группы -CH2F, -CF3 и -CH2CF3 являются
неограничивающими примерами фторалкильных групп. "Алкан" относится к соединению H-R, в котором R представляет собой алкил.
Термин "алкенил" при применении без модификатора "замещенный" относится к моновалентной ненасыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве места присоединения, линейной или разветвленной, цикло, циклической или ациклической структуры по меньшей мере с одной неароматической углерод-углеродной двойной связью, без углерод-углеродных тройных связей и без других атомов, помимо углерода и водорода. Неограничивающие примеры алкенильных групп включают -СН=СН2 (винил), -СН=СНСН3, -СН=СНСН2СН3, -СН2СН=СН2 (аллил), -СН2СН=СНСН3 и -СН=СН-С6Н5. Термин "алкендиил" при применении без модификатора "замещенный" относится к двухвалентной ненасыщенной алифатической группе с двумя атомами углерода в качестве мест присоединения, линейной или разветвленной, цикло, циклической или ациклической структуры по меньшей мере с одной неароматической углерод-углеродной двойной связью, без углерод-углеродных тройных связей и без атомов, отличных от углерода и водорода. Группы -СН=СН-, СН=С(СН3)СН2-, -СН=СНСН2- и т-""^ являются неограничивающими примерами алкендиильных групп. Когда данные термины применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2. Группы -CH=CHF, -CH=CHCl и -СН=CHBr являются неограничивающими примерами замещенных ал-кениловых групп. "Алкен" относится к соединению H-R, в котором R представляет собой алкенил.
Термин "алкинил" при применении без модификатора "замещенный" относится к моновалентной ненасыщенной алифатической группе с атомом углерода в качестве места присоединения, линейной или разветвленной, цикло, циклической или ациклической структуры, пс меньшей мере, с одной углерод-углеродной тройной связью и без атомов, отличных от углерода и водорода. Как применяют в настоящем изобретении, термин алкинил не исключает наличия одной или более неароматических углерод-углеродных двойных связей. Группы -С^СН, -С=ССН3 и -СН2С=ССН3 являются неограничивающими примерами алкинильных групп. Когда алкинил применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СЩ -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СН или -S(O)2NH2. "Алкилен" относится к соединению H-R, в котором R представляет собой алкинил.
Термин "аралкил" при применении без модификатора "замещенный" относится к моновалентной группе -алкандииларил, в которой каждый из терминов алкандиил и арил применяют способом, согласующимся с определениями, приведенными в настоящем изобретении. Неограничивающие примеры аралкилов представляют собой фенилметил (бензил, Bn) и 2-фенилэтил. Когда термин применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода алкандиила и/или арила независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2. Неограничивающие примеры замещенных аралкилов представляют собой (3-хлорфенил)метил и 2-хлор-2-фенилэт-1-ил.
Термин "гетероарил" при применении без модификатора "замещенный" относится к моновалентной ароматической группе с ароматическим атомом углерода или атомом азота в качестве места присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или более ароматических кольцевых систем, в которых по меньшей мере один из кольцевых атомов представляет собой азот, кислород или серу, и в которых гетероарильная группа не состоит из атомов, отличных от углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы. Как применяют в настоящем изобретении, термин не исключает присутствия одной или более алкильных, арильных и/или арал-кильных групп (число атомов углерода, разрешенных ограничением), соединенных с ароматическим кольцом или ароматической кольцевой системой. Если присутствует более одного кольца, кольца могут быть конденсированными или неконденсированными. Неограничивающие примеры гетероарильных групп включают фуранил, имидазолил, индолил, индазолил (Im), изоксазолил, метилпиридинил, оксазо-лил, фенилпиридинил, пиридинил, пирролил, пиримидинил, пиразинил, хинолил, хиназолил, хиноксали-нил, триазинил, тетразолил, тиазолил, тиенил и триазолил. Термин "гетероарендиил" при применении без модификатора "замещенный" относится к двухвалентной ароматической группе, с двумя ароматическими атомами углерода, двумя ароматическими атомами азота или одним ароматическим атомом углерода и одним ароматическим атомом азота в качестве двух мест присоединения, причем указанные атомы образуют часть одной или более ароматических кольцевых систем, в которых по меньшей мере один из кольцевых атомов представляет собой азот, кислород или серу, и в которых двухвалентная группа не состоит из атомов, отличных от углерода, водорода, ароматического азота, ароматического кислорода и ароматической серы. Как применяют в настоящем изобретении, термин не исключает присутствия одной или более алкильных, арильных и/или аралкильных групп (число атомов углерода, разрешенных ограничением), соединенных с ароматическим кольцом или ароматической кольцевой системой. Если присутствует более одного кольца, кольца могут быть конденсированными или неконденсированными. Неограничивающие примеры гетероарендиильных групп включают
Когда данные термины применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3,
-ОСН2СН3, -С^СЩ -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2.
Термин "гетероциклоалкил" при применении без модификатора "замещенный" относится к. моновалентной неароматической группе с атомом углерода или атомом азота в качестве места присоединения, причем указанный атом углерода или атом азота образует часть одной или более неароматических кольцевых структур, в которых по меньшей мере один из кольцевых атомов представляет собой азот, кислород или серу, и в которых гетероциклоалкильная группа не состоит из атомов, отличных от углерода, водорода, азота, кислорода и серы. Как применяют в настоящем изобретении, термин не исключает присутствия одной или более алкильных групп (число атомов углерода, разрешенных ограничением), соединенных с кольцом или кольцевой системой. Если присутствует более одного кольца, кольца могут быть конденсированными или неконденсированными. Неограничивающие примеры гетероциклоалкильных групп включают азиридинил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофуранил, тетрагидропиранил и пиранил. Когда термин "гетероциклоалкил" применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2,
-C(O)NH2, -ОС^СН или -S(O)2NH2.
Термин "ацил" при применении без модификатора "замещенный" относится к группе -C(O)R, в которой R представляет собой водород, алкил, арил, аралкил или гетероарил, как данные термины определены выше. Группы -СНО, -С^СН, (ацетил, Ас), -С^СН^Н^ -С^СН^Н^Н^ -С^СЩСН^, -С^СЩСН^, С(O)С6Н5, -С(O)С6Н4СН3, -С^СН-СН -С(O) (имидазолил) представляют собой неограничивающие примеры ацильных групп. "Тиоацил" определяют аналогичным способом, за исключением того, что атом кислорода группы -C(O)R заменен на атом серы, -C(S)R. Когда любой из данных терминов применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода (включая атом водорода, непосредственно соединенный с карбонильной или тиокарбо-нильной группой) независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СЩ -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2. Группы -C(O)CH2CF3, -CO2H (карбоксил), -CO2CH3 (метилкарбоксил), CO2CH2CH3, -C(O)NH2 (карбамоил) и -CON(CH3)2 представляют собой неограничивающие примеры замещенных ацильных групп.
Термин "алкокси" при применении без модификатора "замещенный" относится к группе -OR, в которой R представляет собой алкил, как данный термин определяют выше.
Неограничивающие примеры алкоксигрупп включают -OCH3, -ОСН2СН3, -ОСН2СН2СН3, -ОСН(СН3)2, -ОСН(СН2)2, -О-циклопентил и -O-циклогексил. Термины "алкенилокси", "алкинилокси", "арилокси", "аралкокси", "гетероарилокси" и "ацилокси" при применении без модификатора "замещенный" относятся к группам, определенным как -OR, в которых R представляет собой алкенил, алкинил, арил, аралкил, гетероарил и ацил соответственно. Термин "алкоксидиил" относится к двухвалентной группе -О-алкандиил-, -О-алкандиил-O- или -алкандиил-О-алкандиил-. Термин "алкилтио" при применении без модификатора "замещенный" относится к группе -SR, в которой R представляет собой алкил, как данный термин определяют выше. Когда любой из данных терминов применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2. Термин "спирт" относится к алкану, как определено выше, в котором по меньшей мере один из атомов водорода замещен на гидроксигруппу.
Термин "алкиламино" при применении без модификатора "замещенный" относится к группе -NHR, в которой R представляет собой алкил, как данный термин определяют выше. Неограничивающие примеры алкиламиногрупп включают -NHCH3 и -NHCH2CH3. Термин "диалкиламино" при применении без модификатора "замещенный" относится к группе -NRR', в которой R и R' могут представлять собой одинаковые или различные алкильные группы, или R и R' можно брать вместе, получая алкандиил. Неограничивающие примеры диалкиламино групп включают -N(CH3)2, -N(CH3) (CH2CH3) и N-пирролидинил. Термины "алкоксиамино", "алкениламино", "алкиниламино", "ариламино", "аралкиламино", "гетероари-ламино" и "алкилсульфониламино" при применении без модификатора "замещенный" относятся к группам, определенным как -NHR, в которых R представляет собой алкокси, алкенил, алкинил, арил, аралкил, гетероарил и алкилсульфонил соответственно. Неограничивающий пример ариламиногруппы представляет собой NHC6H5. Термин "амидо" (ациламино) при применении без модификатора "замещенный" относится к группе -NHR, в которой R представляет собой ацил, как данный термин определяют выше. Неограничивающий пример амидогруппы представляет собой NHC(O)CH3. Термин "алкилимино" при применении без модификатора "замещенный" относится к двухвалентной группе =NR, в которой R представляет собой алкил, как данный термин определяют выше. Термин "алкиламинодиил" относится к
двухвалентной группе -NH-алкандиил-, -NH-алкандиил-NH- или -алкандиил-№г1-алкандиил-. Когда любой из данных терминов применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода
независимо замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3,
-C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2. Группы -NHC(O)OCH3 и -NHC(O)NHCH3 представляют собой неограничивающие примеры замещенных амидогрупп.
Термины "алкилсульфонил" и "алкилсульфинил" при применении без модификатора "замещенный" относятся к группам -S(O)2R и -S(O)R соответственно, в которых R представляет собой алкил, как данный термин определяют выше. Термины "алкенилсульфонил", "алкинилсульфонил", "арилсульфонил", "аралкилсульфонил" и "гетероарилсульфонил" определяют аналогичным способом. Когда любой из данных терминов применяют с модификатором "замещенный", один или более атомов водорода независимо
замещены -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3,
-N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СН или -S(O)2NH2.
Как применяют в настоящем изобретении, "хиральное вспомогательное соединение" относится к удаляемой хиральной группе, которая способна влиять на стереоселективность реакции. Специалист в данной области техники знаком с данными соединениями, и многие из них имеются в продаже.
Применение слов в единственном числе, при применении в сочетании с термином "включая" в формуле изобретения и/или описании, может обозначать "один", но оно также соответствует значению "один или более", "по меньшей мере один" и "один или более чем один".
Во всей заявке термин "приблизительно" применяют для указания, что величина включает погрешность, присущую устройству, способу, применяемому для определения величины, или погрешность, которая имеется между объектами исследования.
Термины "включает" и "содержит" являются неисчерпывающими глаголами связки. Любые формы или время одного или более из данных глаголов, такие как "включает", "включая", "содержит" и "содержащий", также являются неисчерпывающими. Например, любой способ, который "включает" одну или более стадий, не ограничен обладанием только данными одной или более стадиями и также включает другие неперечисленные стадии.
Термин "эффективный", как данный термин применяют в описании и/или формуле изобретения, обозначает достаточный для получения требуемого, ожидаемого или предполагаемого результата.
Термин "гидрат" при применении в качестве модификатора для соединения обозначает то, что соединение содержит менее одной (например, гемигидрат), одну (например, моногидрат) или более одной (например, дигидрат) молекулы воды, связанных с каждой молекулой соединения, такой как в твердых формах соединения.
Как применяют в настоящем изобретении, термин "IC50" относится к ингибирующей дозе, которая составляет 50% получаемого максимального ответа. Данная количественная мера показывает, какое количество конкретного лекарственного средства или других веществ (ингибитора) требуется для ингиби-рования указанного биологического, биохимического или химического процесса (или компонента процесса, например фермента, клетки, клеточного рецептора или микроорганизма) наполовину.
"Изомер" исходного соединения представляет собой отдельное соединение, в котором каждая молекула содержит те же образующие его атомы, как исходное соединение, но когда конфигурации данных атомов отличаются в трехмерном пространстве.
Как применяют в настоящем изобретении, термин "пациент" или "субъект" относится к живому организму млекопитающего, такому как человек, обезьяна, корова, овца, коза, собака, кошка, мышь, крыса, морская свинка или к их трансгенным видам. В конкретных вариантах осуществления пациент или субъект представляет собой примата. Неограничивающие примеры человеческих субъектов включают взрослых, подростков, младенцев и эмбрионы.
Как в общем применяют в настоящем изобретении, "фармацевтически приемлемый" относится к тем соединениям, материалам, композициям и/или лекарственным формам, которые разрешены с медицинской точки зрения, подходят для применения в контакте с тканями, органами и/или жидкостями тела человеческих существ и животных без избыточной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений с соразмерным соотношением риск/польза.
"Фармацевтически приемлемые соли" обозначает соли соединений настоящего изобретения, которые являются фармацевтически приемлемыми, как определено выше, и которые обладают требуемой фармакологической активностью. Данные соли включают соли присоединения кислоты, образованные неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и подобными, или органическими кислотами, такими как 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, 4,4'-метиленбис-(3-гидрокси-2-ен-1-карбоновая кислота), 4-метилбицикло[2,2,2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, уксусная кислота, алифатические моно- и дикарбо-новые кислоты, алифатические производные серной кислоты, ароматические производные серной кислоты, бензолсульфоновая кислота, бензойная кислота, камфорсульфоновая кислота, угольная кислота, коричная кислота, лимонная кислота, циклопентанпропионовая кислота, этансульфоновая кислота, фума-ровая кислота, глюкогептоновая кислота, глюконовая кислота, глютаминовая кислота, гликолевая кисло
та, гептановая кислота, гексановая кислота, гидроксинафтойная кислота, молочная кислота, лаурилсер-ная кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, миндальная кислота, метан-сульфоновая кислота, муконовая кислота, о-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, щавелевая кислота, п-хлорбензолсульфоновая кислота, фенил-замещенные алкановые кислоты, пропионовая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, пировиноградная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, янтарная кислота, винная кислота, трет-бутилуксусная кислота, триметилуксусная кислота и подобными. Фармацевтически приемлемые соли также включают соли присоединения оснований, которые можно получить, когда присутствующие кислые протоны способны взаимодействовать с неорганическими или органическими основаниями. Приемлемые неорганические основания включают гидроксид натрия, карбонат натрия, гидроксид калия, гидроксид алюминия и гидроксид кальция. Приемлемые органические основания включают этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглюкамин и подобные. Ясно, что конкретный анион или катион, образующие часть любой соли настоящего изобретения, не является критическим, при условии, что соль, как целое, является фармацевтически приемлемой. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых солей и способы их получения и применение представлены в Handbook of Pharmaceutical Salts Properties, and Use (P. H. Stahl and CG. Wermuth eds., Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002).
"Предотвращение" включает (1) ингибирование возникновения заболевания у субъекта или пациента, который может быть подвержен риску и/или предрасположен к заболеванию, но еще не страдает или проявляет любую или все из патологии или симптоматики заболевания, и/или (2) замедление возникновения патологии или симптоматики заболевания у субъекта или пациента, который подвержен риску и/или предрасположен к заболеванию, но еще не страдает или проявляет любую или все из патологии или симптоматики заболевания.
"Пролекарство" обозначает соединение, которое может превращаться in vivo метаболически в ингибитор согласно настоящему изобретению. Само пролекарство может также обладать или не обладать активностью относительно указанного белка-мишени. Например, соединение, содержащее гидрокси-группу, можно вводить в виде сложного эфира, который превращается гидролизом in vivo в гидрокси-соединение. Подходящие эфиры, которые могут превращаться in vivo в гидроксисоединения, включают ацетаты, цитраты, лактаты, фосфаты, тартраты, малонаты, оксалаты, салицилаты, пропионаты, сукцина-ты, фумараты, малеаты, метиленбис-р-гидроксинафтоат, гентизаты, изетионаты, ди-п-толуоилтартраты, метансульфонаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, п-толуолсульфонаты, циклогексилсульфаматы, хинаты, сложные эфиры аминокислот и подобные. Аналогично, соединение, содержащее аминогруппу, можно вводить в виде амида, который превращается гидролизом in vivo в аминовое соединение.
Термин "насыщенный" при ссылке на атом обозначает то, что атом соединен с другими атомами только посредством одинарных связей.
"Стереоизомер" или ''оптический изомер" представляет собой изомер указанного соединения, в котором те же атомы соединены с такими же другими атомами, но где конфигурации данных атомов отличаются в трехмерном пространстве. "Энантиомеры" представляют собой стереоизомеры указанного соединения, которые являются зеркальными изображениями друг друга, подобно левой и правой рукам. "Диастереомеры" представляют собой стереоизомеры указанного соединения, которые не являются энантиомерами. Хиральные молекулы содержат хиральный центр, также называемый стереоцентром или стереогенным центром, который представляет собой любое место, даже необязательно атом, в молекуле, содержащей группы, такие, что перестановка местами любых двух групп приводит к стереоизомеру. В органических соединениях хиральным центром обычно является атом углерода, фосфора или серы, хотя также возможно, чтобы другие атомы представляли собой стереоцентры в органических и неорганических соединениях. Молекула может содержать несколько стереоцентров, давая большое количество сте-реоизомеров. В соединениях, чья стереоизомерия является результатом тетраэдрических стереогенных центров (например, тетраэдрический углерод), суммарное количество гипотетически возможных стерео-изомеров не будет превышать 2n, где n представляет собой количество тетраэдрических стереоцентров. Молекулы с симметрией часто имеют меньшее, чем максимально возможное количество стереоизомеров. 50:50 смесь энантиомеров называют рацемической смесью. Альтернативно, смесь энантиомеров может быть энантиомерно обогащенной так, что один энантиомер присутствует в количестве, большем чем 50%. Обычно энантиомеры и/или диастереомеры можно разделить или выделить, применяя способы, известные в данной области техники. Предполагается, что для любого стереоцентра или оси хирально-сти, для которых не определена стереохимия, данный стереоцентр или ось хиральности может присутствовать в их R-форме, S-форме или в виде смеси R- и S-форм, включая рацемические и нерацемические смеси. Как применяют в настоящем изобретении, фраза "по существу, не содержит других стереоизоме-ров" обозначает то, что композиция содержит <15%, более предпочтительно <10%, даже более предпочтительно <5% или самое предпочтительное <1% другого стереоизомера (стереоизомеров).
"Эффективное количество", "терапевтически эффективное количество" или "фармацевтически эффективное количество" обозначает то, что количество, которое при введении субъекту или пациенту для лечения заболевания, является достаточным для осуществления данного лечения заболевания.
"Лечение" включает (1) ингибирование заболевания у субъекта или пациента, страдающего или проявляющего патологию или симптоматику данного заболевания (например, остановку дальнейшего развития патологии и/или симптоматики), (2) облегчение заболевания у субъекта или пациента, который страдает или проявляет патологию или симптоматику данного заболевания (например, обращение патологии и/или симптоматики) и/или (3) осуществление любого измеримого ослабления заболевания у субъекта или пациента, который страдает или проявляет патологию или симптоматику заболевания.
Другие сокращения, применяемые в настоящем изобретении, являются следующими: ДМСО, диме-тилсульфоксид; NO, оксид азота; iNOS, индуцибельная синтаза оксида азота; СОХ-2, циклооксигеназа-2; FBS, фетальная бычья сыворотка; IFNy или IFN-у, интерферон-у; TNFa или TNF-a, фактор некроза опу-холей-a; IL-1P, интерлейкин-1Р; НО-1, индуцибельная гемоксигеназа.
Приведенные выше определения заменяют любое противоречащее определение в любой из ссылок, которые введены в настоящее изобретение с помощью ссылки. Тот факт, что определяют конкретные термины, однако, не следует считать как указывающий, что любой термин, который не определен, является неопределенным. Скорее, считают, что все применяемые термины описывают настоящее изобретение в терминах так, что специалисту в данной области техники ясен объем и практическое осуществление настоящего изобретения.
II. Соединения и способы получения.
Соединения, относящиеся к настоящему изобретению, показаны выше в разделе, относящемся к сущности настоящего изобретения, и в формуле изобретения ниже. Их можно получить, применяя способы, приведенные в разделе примеров. Данные способы можно дополнительно модифицировать и оптимизировать, применяя принципы и способы органической химии, как применимо специалистом в данной области техники. Данные принципы и способы описывают, например, в March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure (2007), которая включена в настоящее изобретение с помощью ссылки.
Соединения, применяемые в способах настоящего изобретения, могут содержать один или более асимметрично-замещенных атомов углерода или азота и могут быть выделены в оптически активной или рацемической форме. Таким образом, предполагаются все хиральные, диастереомерные, рацемические формы, эпимерные формы и все геометрические изомерные формы структуры, если специально не указана конкретная стереохимия или изомерная форма. Соединения могут находиться в виде рацематов и рацемических смесей, отдельных энантиомеров, диастереомерных смесей и отдельных диастереомеров. В некоторых вариантах осуществления получают отдельный диастереомер. Хиральные центры соединений настоящего изобретения могут иметь S- или R-конфигурацию, как определено рекомендациями ИЮПАК 1974. Например, смеси стереоизомеров можно разделить способами, описанными в разделе примеров ниже, а также их модификациями.
Предполагается, что атомы, образующие соединения настоящего изобретения, включают все изотопные формы данных атомов. Соединения настоящего изобретения включают соединения с одним или более атомами, которые являются изотопно модифицированными или обогащенными, в частности соединения с фармацевтически приемлемыми изотопами или соединения, пригодные для фармацевтических исследований. Изотопы, как применяют в настоящем изобретении, включают атомы, имеющие то же атомное число, но отличное массовое число. В качестве общего примера и без ограничения, изотопы водорода включают дейтерий и тритий, и изотопы углерода включают 13С и 14С. Аналогично, предполагается, что один или более атомов углерода соединения настоящего изобретения можно заменить атомом (атомами) кремния. Кроме того, предполагается, что один или более атомов кислорода соединения настоящего изобретения можно заменить атомом (атомами) серы или селена.
Соединения настоящего изобретения могут также быть в пролекарственной форме. Поскольку известно, что пролекарства улучшают многие желаемые качества фармацевтических средств (например, биодоступность, получение и т.д.), соединения, применяемые в некоторых способах настоящего изобретения, можно, при желании, доставлять в пролекарственной форме. Таким образом, настоящее изобретение предполагает пролекарства соединений настоящего изобретения, а также способы доставки проле-карств. Пролекарства соединений, применяемых в настоящем изобретении, можно получить модификацией функциональных групп, присутствующих в соединении таким образом, чтобы данный модификации расщеплялись, или общепринятыми манипуляциями или in vivo, до исходного соединения. Соответственно пролекарства включают, например, соединения, описанные в настоящем изобретении, в которых гидрокси-, амино- или карбоксигруппа соединена с любой группой, которая, при введении пролекарства субъекту, отщепляется, образуя гидрокси-, амино- или карбоновую кислоту соответственно.
Ясно, что конкретный анион или катион, образующий часть любой соли настоящего изобретения, не является критическим, при условии, что соль, в целом, является фармакологически приемлемой. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых солей и способов их получения и применения представлены в Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use (2002), которая включена в настоящее изобретение с помощью ссылки.
Ясно, что соединения настоящего изобретения включают соединения, которые модифицированы
так, что они содержат заместители, которые превращаются в водород in vivo. Они включают группы, которые могут превращаться в атом водорода ферментативными или химическими способами, включая, но не ограничиваясь, гидролиз и гидрогенолиз. Примеры включают гидролизуемые группы, такие как ацильные группы, группы, содержащие оксикарбонильную группу, аминокислотные остатки, пептидные остатки, о-нитрофенилсульфенил, триметилсилил, тетрагидропиранил, дифенилфосфинил и подобные. Примеры ацильных групп включают формил, ацетил, трифторацетил и подобные. Примеры групп, содержащих оксикарбонильную группу, включают этоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил (-С(О)ОС(СН3)3), бензил оксикарбонил, п-метоксибензилоксикарбонил, винилоксикарбонил, Р-(п-толуолсульфонил)этоксикарбонил и подобные. Подходящие аминокислотные остатки включают, но не ограничиваются, остатки Gly (глицин), Ala (аланин), Arg (аргинин), Asn (аспарагин), Asp (аспарагиновая кислота), Cys (цистеин), Glu (глютаминовая кислота), His (гистидин), Ile (изолейцин), Leu (лейцин), Lys (лизин), Met (метионин), Phe (фенилаланин), Pro (пролин), Ser (серин), Thr (треонин), Trp (триптофан), Tyr (тирозин), Val (валин), Nva (норвалин), Hse (гомосерин), 4-Нур (4-гидроксипролин), 5-Hyl (5-гидроксилизин), Orn (орнитин) и p-Ala. Примеры подходящих аминокислотных остатков также включают аминокислотные остатки, которые защищены защитной группой. Примеры подходящих защитных групп включают группы, обычно применяемые в пептидном синтезе, включая ацильные группы (такие как формил и ацетил), арилметоксикарбонильные группы (такие как бензилоксикарбонил и п-нитробензилоксикарбонил), трет-бутоксикарбонильные группы (-С(О)ОС(СН3)3) и подобные. Подходящие пептидные остатки включают пептидные остатки, содержащие два-пять аминокислотных остатков. Остатки данных аминокислот или пептидов могут присутствовать в стереохимических конфигурациях D-формы, L-формы или их смесях. Кроме того, аминокислотный или пептидный остаток может содержать асимметрический атом углерода. Примеры подходящих аминокислотных остатков, содержащих асимметрический атом углерода, включают остатки Ala, Leu, Phe, Trp, Nva, Val, Met, Ser, Lys, Thr и Tyr. Пептидные остатки, содержащие асимметрический атом углерода, включают пептидные остатки, содержащие один или более образующих их аминокислотных остатков, содержащих асимметрический атом углерода. Примеры подходящих защитных групп аминокислот включают защитные группы, обычно применяемые в пептидном синтезе, включая ацильные группы (такие как формил и ацетил), арилметок-сикарбонильные группы (такие как бензилоксикарбонил и п-нитробензилоксикарбонил), трет-бутоксикарбонильные группы (-С(О)ОС(СН3)3) и подобные. Другие примеры заместителей, "превращаемых в водород in vivo", включают восстановительно элиминируемые гидрогенолизуемые группы. Примеры подходящих восстановительно элиминируемых гидрогенолизуемых групп включают, но не ограничиваются, арилсульфонильные группы (такие как о-толуолсульфонил); метильные группы, замещенные фенилом или бензилокси (такие как бензил, тритил и бензилоксиметил); арилметоксикарбонильные группы (такие как бензилоксикарбонил и о-метоксибензилоксикарбонил); и галогенэтоксикарбонильные группы (такие как р,р,р-трихлорэтоксикарбонил и р-йодэтоксикарбонил).
Соединения настоящего изобретения могут также обладать преимуществом, заключающимся в том, что они могут быть более эффективными, менее токсичными, более долго действующими, более активными, оказывающими меньшие побочные эффекты, более легко поглощаемыми и/или обладающими лучшими фармакокинетическими профилями (например, лучшей пероральной биодоступностью и/или меньшим клиренсом), и/или обладающими другими пригодными фармакологическими, физическими или химическими свойствами по сравнению с соединениями, известными на предыдущем уровне техники, для применения для показаний, предусмотренных в настоящем изобретении, или других.
III. Биологическая активность.
Результаты анализов по подавлению IFNy-индуцированного NO продуцирования показаны для нескольких из соединений настоящего изобретения в табл. 1 ниже. В правой колонке данной таблицы под заголовком RAW264.7, результаты сравнивают с результатами для бардоксолонметила (RTA 402). Результаты анализа NQ01-ARE по гену-репортеру люциферазы показаны в последней колонке. Подробности, относящиеся к обоим анализам, приводятся в разделе примеров ниже. За исключением формул, помеченных "хиральное", каждое соединение, показанное в табл. 1, является рацемическим. Что касается рацемических соединений, показанная молекулярная структура является формулой одного из двух энан-тиомеров. Что касается формул, обозначенных "хиральное", молекулярная формула показывает преобладающий присутствующий стереоизомер.
Подавление IFNy-индуцированного NO продуцирования
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQ01-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63341
N-N
хиральное
269,34
1,7
ТХ63342
/\^ хиральное
269,34
180
ТХ63363
хиральное
233,31
> 200
ТХ63364
277,36
> 200
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQ01-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63432
N-N'
269,34
166
ТХ63436
' ^ хиральное
255,31
> 200
ТХ63444
337,46
140
108
ТХ63445
N-N'
NC^^lXJ^Br
348,24
37,9
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQ01-ARE
NO 1С50 <нМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
TX6345Q
311,42
148
ТХ63451
325,40
137
ТХ63454
^CF3
N-N
NC_-^LA^
337,30
134
ТХ63455
N-N
331,40
109
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная
N0 1С5о
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63456
345,40
> 200
ТХ63462
N-N
313,35
147
ТХ634 63
297,35
205
108
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-AKE
NO 1С50 (нМ)
Относительная
NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63464
N-N
299,37
> 200
ТХ63465
345,44
18,3
4,8
ТХ63466
N-NH
NC^> 4LA^N^^\ NC
508,61
10, 4
4,5
ТХ63467
HN-N
255,31
> 200
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ N(J01-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63468
NC^^jJI^
281,35
33,7
2,0
ТХ63435
N-N7
379,88
24, 3
ТХ63486
Ncrfj^cl
379,88
34, 3
ТХ63487
295,38
60, 7
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264 .7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С so (нМ)
Относительная NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63491
N-N7 с,
379,90
15,2
гп\?с '503
NV
J 1 J N
346,43
7 4
5, 5
ТХ63504
371,47
8,9
ТХ63505
346,43
6,9
6,8
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С50 (вМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63506
346,43
15, 6
3,2
ТХ63507
N-N7
346,43
24,4
ТХ63508
N-N7
O^XPH
359,48
20,6
ТХ63509
N-N
375,47
23, 8
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO IC50 (нМ)
Относительная
N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63512
N-N7
о"лг ^
359,47
20, 8
1/4
ТХ63513
N-N7
0 /'CH^^ OMe
375,47
20,8
2, 9
ТХ63514
N-N7
o^XrH
359,47
30, 8
ТХ63515
N-N7
375,47
29,2
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная
N0 1С5о
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63519
363,43
2,5
ТХ63524
331,41
48,6
ТХ63528
N^N
297,36
56,7
ТХ63529
N^N
357,45
30,7
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная
NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63531
N-N7
NC^rvJ^L^-NH
0XJJ o> ~o
388,47
> 200
1,1
ТХ63533
241,29
> 200
ТХ63534
NC^^jL^^il
309,41
23, 3
ТХ63540
N-N7
317,39
66,8
45,0
1,6
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAH264.7
Анализ NQ01-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная
NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63 541
N-N7
331,41
3,7
4,4
ТХ63542
N^N NC^^j^J^J1
267,33
36,7
ТХ63544
N-N
407,51
ТХ63547
N-N7
311,43
3,1
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO IC50 (нМ)
Относительная
NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63550
359,47
20,
1,8
TX6355I
N-N
255,32
18,1
ТХ63552
N^N NC^^j^^J
343,43
8,9
1,9
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO IC50 (нМ)
Относительная NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63553
HN^N NC^vj^^i1
283,33
> 200
ТХ63554
N^N
267,33
15,6
1,9
ТХ63559
255,31
> 200
ТХ63561
NC^xj^^J
323,44
15,7
2,4
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO IC50 (нМ)
Относительная
NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63567
N^N NC^^j^^JJ
335,33
18, 9
ТХ63568
332,41
> 200
1,3
ТХ63569
N^N
329,40
9,8
4,3
2,0
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С5о
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63570
N-N7
> 200
ТХ63578
N-N'
> 200
ТХ63579
HN-N
NCWj0
10, 8
ТХ63582
N^N NC^xj^^i
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63583
NC^^J^j'
357,46
ТХ63584
311.-39
> 200
3,1
ТХ63586
N^N
344,42
2,9
Соединение Hi
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63587
N-N7
437,53
ТХ63568
N-N
349,43
5,2
ТХ63589
N-N7
269,35
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
ЫО 1С50 (нМ)
Относительная NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63590
ОМе
373,46
12, 5
ТХ63591
351,49
ТХ63594
384,47
> 200
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (НМ)
Относительная NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63595
311,39
8,0
ТХ63598
N^N
343,43
4,8
1,9
ТХ63599
345,45
5,8
3,2
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQ01-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63600
395,50
ТХ63601
497,63
150
ТХ63603
395,50
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63604
NC^\LA <^CI
303,79
3,4
ТХ63605
^"^N-N
407,51
14, 8
2,8
ТХ63606
N-N7
334,22
4,6
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная
NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63607
N-N7
407,51
> 200
1,0
ТХ63611
N-N^~
373,45
ТХ63612
N^N NC^^J^jJ
377,88
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NOOl-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63613
N-N7
NC^^lA^^CN
294,35
101
ТХ63615
NC^^J^J^JJ
385,26
ТХ63617
NC^^A^
385,26
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная
N0 1С5о
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63619
Т Т J NH2
312,37
> 200
ТХ63625
N-N \
364,44
ТХ63626
N N NC^^J^^
382,46
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NOOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная
N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63627
306,36
ТХ63628
NXI
NC^NJ^^J
364,47
ТХ63629
393,48
137
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO IC50 (нМ)
Относительная NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63630
341, 40
ТХ63631
Nc^sXA/^f TIT он
313,35
> 200
ТХ63636
NC^^^J^jJ
344,42
ТХ63637
N-N7
283,37
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO IC50 (НМ)
Относительная NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63665
N4 N TIT N^N
351,41
7 , 0
ТХ63666
359,42
12, 5
ТХ63667
, "Ч />
373,45
155
ТХ63676
HN-N NC^^j^^/^O
285,34
> 200
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63690
N-N7
335,41
6,5
ТХ93691
N-N7
299 37
36 5
ТХ63692
N-N7 NC^JX> =0
299,37
> 200
ТХ63714
350,42
> 200
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная
N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63718
N^N
ур^
313,35
4,3
ТХ63719
337,38
5, 9
3,9
ТХ63720
:xfh-
1 н
332,40
4, 9
3 ,1
ТХ63721
° 1 н
349,40
7, 8
4,9
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С so (нМ)
Отно сительная NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63722
° i н
332,40
8,3
5,2
ТХ63 723
351,40
23, 3
ТХ63 724
360,41
3,1
2,1
4,9
ТХ63725
/ N-N
0 = M
280,32
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63727
N^N
389,45
11,5
4,6
ТХ63728
NXJ
360,41
6,7
2,7
ТХ63729
N'N\ N
427,50
11, 5
Соединение *
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная
NO IC5o
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63730
N^N
355,39
6,4
ТХ63731
N^N
373,45
12,9
ТХ63734
T T T N^=N
379,46
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63735
ill N"N
351,40
15, 6
ТХ63736
N^N
341,40
9,8
5,3
ТХ63748
N-l/
333,39
16, 5
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63757
N^N
361,40
4,3
3,4
ТХ63758
N^N
352,44
ТХ63760
351,40
6,2
4,8
Соединение №
Молекулярная структура
Моле кулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63761
323,39
8,9
7,2
ТХ63769
359,42
9,4
7,6
ТХ63773
N^N
311,38
4,9
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO ICso (нМ)
Относительная NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63774
310,40
26, 7
21,5
TXG3776
/ 0
381,43
> 200
ТХ63791
NCxijt>
Н хиральное
331,41
2,3
1,4
ТХ63 792
¦ H хиральное
331,41
147
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная
NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63793
N^N
= хиральное
313,35
2,5
2,0
ТХ63794
• хиральное
313,35
88, 5
ТХ63803
N-N7
388,43
ТХ63804
N-N7
334,41
> 200
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная NO IC50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63827
338,45
ТХ6382Э
N-N7
374,40
ТХ63834
N-N7
NCkffYiy
361,44
10S
ТХ63836
N-NH
317,39
6,1
4,8
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
EAW264 .7
Анализ NQOl-ARE
N0 1С50 (нМ)
Относительная N0 1С5о
Кратная индукция при 62, 5 нМ
ТХ63848
347,41
9,5
5,7
ТХ63849
3S1,41
> 2 0 0
ТХ63850
359,42
8,9
5,3
ТХ63851
332,40
5,1
3,0
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQ01 -ARE
NO 1С50 (нМ)
Относительная
NO 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63852
29S,37
TX638S3
339,44
18, 6
ТХ63857
J T J N-N
337,38
6,3
5,1
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NQOl-ARE
N0 ICso (нМ)
Относительная NO 1С!0
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63871
N-N
389,45
7,5
4,5
ТХ63872
337,38
4, 6
2,8
ТХ63874
283,33
5, 5
4,8
ТХ63900
yp^
353,47
Соединение №
Молекулярная структура
Молекулярная масса
RAW264.7
Анализ NOpl-ARE
NO ICS0 (нМ)
Относительная
N0 1С50
Кратная индукция при 62,5 нМ
ТХ63905
378,47
129
IV. Заболевания, вязанные с воспалением и/или окислительным стрессом.
Воспаление представляет собой биологический процесс, который обеспечивает устойчивость к инфекционным или паразитическим организмам и восстанавливает поврежденные ткани. Воспаление обычно характеризуется локализованным расширением кровеносных сосудов, покраснением, опуханием и болью, миграцией лейкоцитов к месту инфекции или повреждения, продуцированием воспалительных цитокинов, таких как TNF-a и IL-1, и продуцированием реакционноспособных содержащих кислород или азот молекул, таких как пероксид водорода, супероксид и пероксинитрит. На поздних стадиях воспаления ремолдинг тканей, ангиогенез и образование рубцов (фиброз) могут осуществляться как часть процесса заживления раны. В нормальных условиях воспалительный ответ является регулируемым и временным и разрешается организованным способом после адекватного решения проблем, связанных с инфекцией или повреждением. Однако острое воспаление может стать избыточным и угрожающим жизни, если нарушены регуляторные механизмы. Альтернативно, воспаление может стать хроническим и вызывать общее повреждение тканей или системные осложнения. На основе, по меньшей мере, данных, представленных выше, соединения настоящего изобретения можно применять для лечения или предотвращения воспаления или заболеваний, связанных с воспалением.
Многие серьезные и неустранимые человеческие заболевания включают дисрегуляцию воспалительных процессов, включая заболевания, такие как рак, атеросклероз и диабет, которые традиционно не рассматриваются как воспалительные заболевания. В случае рака воспалительные процессы связаны с образованием, ростом, метастазами опухоли и устойчивостью к терапии. В настоящее время известно, что атеросклероз, долгое время рассматриваемый как расстройство липидного метаболизма, является в первую очередь воспалительным заболеванием, причем активированные макрофаги играют важную роль в образовании и последующем разрыве атеросклеротических бляшек. Также показано, что активация воспалительных сигнальных путей играет роль в развитии устойчивости к инсулину, а также в повреждении периферических тканей, связанном с диабетической гипергликемией. Избыточное продуцирование реакционноспособных содержащих кислород молекул и реакционноспособных содержащих азот молекул, таких как супероксид, пероксид водорода, оксид азота и пероксинитрит, представляет собой признак воспалительных заболеваний. Данные о нарушенном продуцировании пероксинитрита приводятся для широко диапазона заболеваний (Szabo et al., 2007; Schulz et al., 2008; Forstermann, 2006; Pall, 2007).
Аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит, волчанка, псориаз и множественный склероз, сопровождаются неприемлемой и хронической активацией воспалительных процессов в поврежденных тканях, возникающих в результате нарушений узнавания по отношению к неузнаванию и ответных механизмов в иммунной системе. При нейродегенеративных заболеваниях, таких как болезнь Альцгеймера и Паркинсона, нейрональное повреждение связано с активацией микроглии и повышенными концентрациями противовоспалительных белков, таких как. индуцибельная синтаза оксида азота (iNOS). Хроническая недостаточность органа, такая как почечная недостаточность, сердечная недостаточность, печеночная недостаточность и хроническое обструктивное заболевание легких, тесно связана с присутствием хронического окислительного стресса и воспаления, приводящих к развитию фиброза и последующей потере функционирования органа. Окислительный стресс в сосудистых эндотелиальных клетках, которые выстилают большие и малые кровеносные сосуды, может приводить к эндотелиальной дисфункции, и считают, что он является важным способствующим фактором развития системного сердечно-сосудистого заболевания, осложнений диабета, хронического заболевания почек и других форм недостаточности органов и ряда других связанных со старением заболеваний, включая дегенеративные заболевания центральной нервной системы и сетчатки.
Многие другие заболевания сопровождаются окислительным стрессом и воспалением в поврежденной ткани, включая воспалительное заболевание кишечника; воспалительные заболевания кожи; муко-зит, связанный с радиационной терапией и химиотерапией; заболевания глаз, такие как увеит, глаукома, дегенерация желтого пятна и различные формы ретинопатии; недостаточность и отторжение трансплантата; ишемически-реперфузионное повреждение; хроническую боль; дегенеративные заболевания костей и суставов, включая остеоартрит и остеопороз; астму и кистозный фиброз; эпилепсию; и психоневрологические заболевания, включая шизофрению, депрессию, биполярное расстройство, посттравматическое стрессовое расстройство, синдром дефицита внимания, заболевание аутического спектра и расстройства питания, такие как нервная анорексия. Считают, что нарушение воспалительных сигнальных путей является основным фактором патологии мышечной атрофии, включая мышечную дистрофию и различные формы кахексии.
Ряд угрожающих жизни острых заболеваний также сопровождается нарушением воспалительного сигнального пути, включая острую недостаточность органа, включая недостаточность поджелудочной железы, почек, печени или легких, инфаркт миокарда или острый коронарный синдром, инсульт, септический шок, травму, тяжелые ожоги и анафилаксию.
Многие осложнения инфекционных заболеваний также сопровождаются нарушениями воспалительной реакции. Хотя воспалительная реакция может уничтожать инвазивные патогены, избыточный воспалительный ответ может также быть достаточно разрушительным и в некоторых случаях может
быть первоисточником повреждения в инфицированных тканях. Кроме того, избыточный воспалительный ответ может также приводить к системным осложнениям в результате чрезмерного продуцирования воспалительных цитокинов, таких как TNF-a и IL-1. Считают, что это является фактором смертности, возникающим в результате сильного гриппа, тяжелого острого респираторного синдрома и сепсиса.
Нарушенная или избыточная экспрессия или iNOS или циклооксигеназы-2 (СОХ-2) непосредственно связана с патогенезом многих болезненных процессов. Например, ясно, что NO представляет собой мощный мутаген (Tamir and Tannebaum, 1996), и что оксид азота может также активировать СОХ-2 (Salvemini et al., 1994). Кроме того, имеется заметное повышение iNOS в опухолях толстой кишки крыс, вызванных канцерогеном, азоксиметаном (Takahashi et al., 1997). Показано, что серия синтетических три-терпеноидных аналогов олеанолевой кислоты являются мощными ингибиторами процессов клеточного воспаления, таких как активация IFN-у индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS) и СОХ-2 в мышиных макрофагах; смотрите Honda et al. (2000а); Honda et al. (2000b) и Honda et al. (2002), все из которых включены в настоящее изобретение с помощью ссылки.
В одном аспекте соединения, описанные в настоящем изобретении, характеризуются их способностью ингибировать синтез оксида азота в клетках RAW 264.7 из макрофагов, вызванный воздействием у-интерферона. Они дополнительно характеризуются способностью индуцировать экспрессию антиокси-дантных белков, таких как NQO1, и снижать экспрессию провоспалительных белков, таких как СОХ-2 и индуцибельная синтаза оксида азота (iNOS). Данные свойства являются подходящими для лечения широкого спектра заболеваний и расстройств, сопровождающихся окислительным стрессом и нарушением воспалительных процессов, включая рак, осложнения в результате локализованного воздействия или воздействия на все тело ионизирующим излучением, мукозит в результате радиационной терапии или химиотерапии, аутоиммунные заболевания, сердечно-сосудистые заболевания, включая атеросклероз, ишемически-реперфузионное повреждение, острую и хроническую недостаточность органа, включая почечную недостаточность и сердечную недостаточность, респираторные заболевания, диабет и осложнения диабета, сильную аллергию, отторжение трансплантата, реакцию "трансплантат против хозяина", нейродегенеративные заболевания, заболевания глаз и сетчатки, острую и хроническую боль, дегенеративные заболевания костей, включая остеоартрит и остеопороз, воспалительное заболевание кишечника, дерматит и другие кожные заболевания, сепсис, ожоги, эпилепсию и психоневрологические заболевания.
Не будучи связанными теорией считают, что активация антиоксидантного/противовоспалительного пути Keap1/Nrf2/ARE связана и с противовоспалительными и противораковыми свойствами соединений, описанных в настоящем изобретении.
В другом аспекте, соединения, описанные в настоящем изобретении, можно применять для лечения субъекта, страдающего от заболевания, вызванного повышенным уровнем окислительного стресса в одной или более тканях. Окислительный стресс является результатом аномально высокой или долго сохраняющейся концентрации реакционноспособных содержащих кислород молекул, таких как супероксид, пероксид водорода, оксид азота и пероксинитрит (образованный реакцией оксида азота и супероксида). Окислительный стресс может сопровождаться острым или хроническим воспалением. Окислительный стресс может быть вызван митохондриальной дисфункцией, активацией иммунных клеток, таких как макрофаги и нейтрофилы, сильным воздействием внешним агентом, таким как ионизирующее излучение или цитотоксический химиотерапевтический агент (например, доксорубицин), травмой или другими сильными повреждениями тканей, ишемией/реперфузией, плохой циркуляцией или анемией, локализованной или общей гипоксией или гипероксией, повышенной концентрацией воспалительных цитокинов и других связанных с воспалением белков и/или другими нарушенными физиологическим состояниями, такими как гипергликемия или гипогликемия.
На моделях животных многих данных заболеваний показано, что стимулирование экспрессии ин-дуцибельной гемооксигеназы (HO-1), гена-мишени пути Nrf2, обладает значительным терапевтическим эффектом, включая модели инфаркта миокарда, почечной недостаточности, недостаточности и отторжения трансплантата, инсульта, сердечно-сосудистого заболевания и аутоиммунного заболевания (например, Sacerdoti et al., 2005; Abraham and Kappas, 2005; Bach, 2006; Araujo et al., 2003; Liu et al., 2006; Ishi-kawa et al., 2001; Kruger et al., 2006; Satoh et al., 2006; Zhou et al., 2005; Morse and Choi, 2005; Morse and Choi, 2002). Данный фермент разрушает гем до железа, монооксида углерода (СО) и биливердина (который впоследствии превращается в мощную антиоксидантную молекулу, билирубин).
В другом аспекте, соединения настоящего изобретения можно применять для предотвращения или лечения повреждения ткани или недостаточности органа, острой и хронической, являющихся результатом окислительного стресса, усиленного воспалением. Примеры заболеваний, которые попадают в данную категорию, включают сердечную недостаточность, печеночную недостаточность, недостаточность и отторжение трансплантата, почечную недостаточность, панкреатит, фиброзные заболевания легких (кис-тозный фиброз, ХОБЛ и другие), сахарный диабет (включая осложнения), атеросклероз, ишемически-реперфузионное повреждение, глаукому, инсульт, аутоиммунное заболевание, аутизм, дегенерацию желтого пятна и мышечную дистрофию. Например, в случае аутизма, исследования показывают, что повышенный окислительный стресс в центральной нервной системе может способствовать развитию заболе
вания (Chauhan and Chauhan, 2006).
Данные также связывают окислительный стресс и воспаление с развитием и патологией многих других заболеваний центральной нервной системы, включая психические расстройства, такие как психоз, большая депрессия и биполярное расстройство; судорожные расстройства, такие как эпилепсия; боль и сенсорные синдромы, такие как мигрень, нейропатическая боль или звон в ушах; и поведенческие синдромы, такие как синдром дефицита внимания; смотрите, например, Dickerson et al., 2007; Hanson et al., 2005; Kendall-Tackett, 2007; Lencz et al., 2007; Dudhgaonkar et al., 2006; Lee et al., 2007; Morris et al., 2002; Ruster et al., 2005; McIver et al., 2005; Sarchielli et al., 2006; Kawakami et al., 2006; Ross et al., 2003, все из которых включены в настоящее изобретение с помощью ссылки. Например, повышенная концентрация воспалительных цитокинов, включая TNF, интерферон-у и IL-6, связана с основными психическим заболеваниями (Dickerson et al., 2007). Микроглиальная активация также связана с основными психическими заболеваниями. Следовательно, снижение количества воспалительных цитокинов и ингиби-рование избыточной активации микроглии могут быть полезными для пациентов с шизофренией, большой депрессией, биполярным расстройством, заболеваниями аутического спектра и другими психоневрологическими заболеваниями.
Соответственно при патологиях, сопровождающихся только окислительным стрессом или окислительным стрессом, усиленным воспалением, лечение может включать введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения настоящего изобретения, такого как соединения, описанные выше или в другом месте в настоящем описании. Лечение можно осуществлять превентивно, перед прогнозируемым состоянием окислительного стресса (например, трансплантация органа или осуществление радиационной терапии на пациенте с раком), или его можно осуществлять терапевтически в ситуациях, сопровождающихся установленным окислительным стрессом и воспалением.
Соединения, описанные в настоящем изобретении, можно обычно применять для лечения воспалительных заболеваний, таких как сепсис, дерматит, аутоиммунное заболевание и остеоартрит. В одном аспекте соединения настоящего изобретение можно применять для лечения воспалительной боли и/или нейропатической боли, например, активацией Nrf2 и/или ингибированием NF-KB.
В некоторых вариантах осуществления соединения, описанные в настоящем изобретении, можно применять для лечения и предотвращения заболеваний, таких как рак, воспаление, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, аутизм, боковой амиотрофический склероз, болезнь Хантингтона, аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит, волчанка, болезнь Крона и псориаз, воспалительное заболевание кишечника, все другие заболевания, для которых считают, что их патогенез связан с избыточной продукцией или оксида азота или простагландинов, и патологии, сопровождающиеся только окислительным стрессом или окислительным стрессом, усиленным воспалением.
Другой аспект воспаления заключается в продуцировании воспалительных простагландинов, таких как простагландин Е. Данные молекулы вызывают расширение кровеносных сосудов, экстравазацию плазмы, локализованную боль, повышенную температуру и другие симптомы воспаления. Индуцибель-ная форма фермента СОХ-2 связана с их продуцированием, и высокие концентрации СОХ-2 обнаруживаются в воспаленных тканях. Следовательно, ингибирование СОХ-2 может облегчать многие симптомы воспаления и ряд важных противовоспалительных лекарственных средств (например, ибупрофен и целе-оксиб) действуют ингибированием СОХ-2 активности. Недавнее исследование, однако, продемонстрировало, что класс циклопентеноновых простагландинов (cyPG) (например, 15-дезоксипростагландин J2, также известный как PGJ2) участвует в стимулировании контролируемой регрессии воспаления (например, Rajakariar et al., 2007). СОХ-2 также связана с продуцированием циклопентеноновых простагланди-нов. Следовательно, ингибирование СОХ-2 может препятствовать полной регрессии воспаления, потенциально способствуя устойчивости активированных иммунных клеток в тканях и приводя к хроническому "вялотекущему" воспалению. Данный эффект может быть ответственным за повышенную частоту возникновения сердечно-сосудистого заболевания у пациентов, применяющих селективные СОХ-2 ингибиторы в течение длительного периода времени.
В одном аспекте соединения, описанные в настоящем изобретении, можно применять для контролирования продуцирования провоспалительных цитокинов в клетке селективной активацией регулятор-ных цистеиновых остатков (RCR) в белках, которые регулируют активность редокс-чувствительных факторов транскрипции. Показано, что активация RCR cyPG запускает программу нормализации, в которой эффективно индуцируется активность антиоксиданта и цитопротекторного фактора транскрипции Nrf2 и подавляются активности прооксидантных и провоспалительных факторов транскрипции NF-кВ и STAT. В некоторых вариантах осуществления это увеличивает продуцирование антиоксидантных и восстанавливающих молекул (NQO1, НО-1, SOD1, у-GCS) и снижает окислительный стресс и продуцирование прооксидантных и провоспалительных молекул (iNOS, СОХ-2, TNF-a). В некоторых вариантах осуществления соединения настоящего изобретение могут вызывать возвращение клеток, в которых протекает воспалительный процесс, в невоспаленное состояние, способствуя нормализации воспаления и ограничивая избыточное повреждение ткани хозяина.
V. Фармацевтические составы и пути введения.
Соединения настоящего изобретения можно вводить различными способами, например перорально или инъекцией (например, подкожно, внутривенно, интраперитонеально и т.д.). В зависимости от пути введения, активные соединения можно покрывать материалом для защиты соединения от действия кислот и других естественных условий, которые могут дезактивировать соединение. Их можно также вводить непрерывной перфузией/вливанием в место заболевания или раны.
Для введения терапевтического соединения отличным от парентерального введения способом может быть необходимым наносить покрытие на соединение, или вводить соединение совместно с материалом, предотвращающим его дезактивацию. Например, терапевтическое соединение можно вводить пациенту в подходящем носителе, например липосомах или разбавителе. Фармацевтически приемлемые разбавители включают солевой раствор и водные буферные растворы. Липосомы включают вода-в-масле-в воде CGF эмульсии, а также общепринятые липосомы (Strejan et al., 1984).
Терапевтическое соединение можно также вводить парентерально, интраперитонеально, интраспи-нально или интрацеребрально. Дисперсии можно получить в глицерине, жидких полиэтиленгликолях, и их смесях и в маслах. При стандартных условиях хранения и применения, данные препараты могут содержать консервант, предотвращающий рост микроорганизмов.
Фармацевтические композиции, подходящие для инъекционного применения, включают стерильные водные растворы (при растворимости в воде) или дисперсии и стерильные порошки для получения стерильных инъецируемых растворов или дисперсии для немедленного приема; смотрите, например, патентную заявку США J. Zhang, озаглавленную "Amorphous Solid Dispersions of CDDO-Me for Delayed Release Oral Dosage Compositions", опубликованную 13 февраля 2009 г., которая включена в настоящее изобретение с помощью ссылки. Во всех случаях состав должен быть стерильным и должен быть жидким в такой степени, чтобы его можно было вводить шприцом. Он должен быть стабильным в условиях получения и хранения и должен быть предохранен от оказывающего пагубное влияние действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибки. Носитель может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (такой как глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль, и подобные), их подходящие смеси и растительные масла. Можно поддерживать надлежащую текучесть, например, применением покрытия, такого как лецитин, поддержанием требуемого размера частиц в случае дисперсии и применением поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов можно достигать различными антибактериальными и противогрибковыми агентами, например парабенами, хлорбутанолом, фенолом, аскорбиновой кислотой, тимеро-салом и подобными. Во многих случаях предпочтительно включать изотонические агенты, например сахара, хлорид натрия или полиспирты, такие как маннитол и сорбитол, в композицию. Продленное поглощение инъецируемых композиций можно достигать включением в композицию агента, который замедляет поглощение, например моностеарата алюминия или желатина.
Стерильные инъецируемые растворы можно получить введением терапевтического соединения в требуемом количестве в подходящий растворитель с одним или комбинацией ингредиентов, перечисленных выше, при необходимости, с последующей стерилизацией фильтрованием. В общем, дисперсии можно получить введением терапевтического соединения в стерильный носитель, который содержит основную дисперсную среду и требуемые другие ингредиенты из ингредиентов, перечисленных выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных инъецируемых растворов, предпочтительными способами получения являются вакуумная сушка и лиофилизация, которые дают порошок активного ингредиента (т.е. терапевтического соединения) плюс любой дополнительный требуемый ингредиент из его предварительно очищенный микрофильтрацией раствор.
Терапевтическое соединение можно вводить перорально, например, с инертным разбавителем или усваиваемым и пригодным в пищу носителем. Терапевтическое соединение и другие ингредиенты можно также заключать в твердые или мягкие желатиновые капсулы, прессовать в таблетки или включать непосредственно в рацион субъекта. Что касается перорального терапевтического введения, терапевтическое соединение можно вводить с вспомогательными веществами и применять в виде таблеток для проглатывания, буккальных таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, капсул-имплантат и подобных. Процентное содержание терапевтического соединения в композициях и препаратах может, конечно, варьироваться. Количество терапевтического соединения в данных терапевтически пригодных композициях является таким, чтобы получить подходящее дозирование.
Особенно предпочтительно формулировать парентеральные композиции в виде стандартных лекарственных форм для легкости введения и равномерности дозирования. Стандартная лекарственная форма, как применяют в настоящем изобретении, относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве однократных доз для субъектов, подвергаемых лечению; причем каждая единичная форма содержит предварительно определенное количество терапевтического соединения, рассчитанное для оказания требуемого терапевтического эффекта, в сочетании с требуемым фармацевтическим носителем. Спецификация для стандартных лекарственных форм настоящего изобретения определяется и непосредственно зависит от (а) уникальных характеристик терапевтического соединения и конкретного терапевтического эффекта, которые требуется достичь, и (b) ограничений, характерных для области техники
смешения терапевтического соединения для лечения определенного заболевания у пациента.
Терапевтическое соединение можно также вводить местно на кожу, глаза или слизистую оболочку. Альтернативно, если требуется местное введение в легкие, терапевтическое соединение можно вводить ингаляцией в виде сухого порошка или аэрозоля.
Активные соединения вводят при терапевтически эффективной дозе, достаточной для лечения состояния, связанного с заболевание пациента. Например, эффективность соединения можно оценить в животной модельной системе, которая может предсказывать эффективность лечения заболевания у людей, такой как модельные системы, показанные в примерах и на чертежах.
Действительная величина дозы соединения настоящего изобретения или композиции, содержащая соединение настоящего изобретения, вводимое субъекту, может определяться физическими и физиологическими факторами, такими как возраст, пол, вес тела, тяжесть заболевания, тип заболевания, которое подвергают лечению, предшествующего или текущего терапевтического вмешательства, идиопатии субъекта и пути введения. Данные факторы может определить специалист в данной области техники. Практик, ответственный за введение, будет обычно определять концентрацию активного ингредиента (ингредиентов) в композиции и подходящую дозу (дозы) для конкретного субъекта. Дозу может регулировать лечащий врач в случае любого осложнения.
Эффективное количество обычно будет изменяться от приблизительно 0,001 до приблизительно 1000, от приблизительно 0,01 до приблизительно 750 мг/кг, от приблизительно 100 до приблизительно 500 мг/кг, от приблизительно 1,0 до приблизительно 250 мг/кг, от приблизительно 10,0 до приблизительно 150 мг/кг в виде одного или более введения доз в день, в течение одного или нескольких дней (в зависимости от курса, пути введения и факторов, обсуждавшихся выше). Другие подходящие диапазоны доз включают от 1 до 10000 мг в день, от 100 до 10000 мг в день, от 500 до 10000 мг в день и от 500 до 1000 мг в день. В некоторых конкретных вариантах осуществления количество является меньшим, чем 10000 мг в день с диапазоном от 750 до 9000 мг в день.
Эффективное количество может быть меньшим чем 1, меньшим чем 500, меньшим чем 250, меньшим чем 100, меньшим чем 50, меньшим чем 25 или меньшим чем 10 мг/кг/день. Альтернативно, оно может быть в диапазоне от 1 до 200 мг/кг/день. Например, что касается лечения пациентов с диабетом, единичная доза может составлять количество, которое снижает содержание глюкозы в крови по меньшей мере до 40% по сравнению с субъектом, неподвергаемым лечению. В другом варианте осуществления единичная доза представляет собой количество, которое снижает содержание глюкозы в крови до уровня, который составляет ±10% содержания глюкозы в крови субъекта, не страдающего от диабета.
В других неограничивающих примерах доза может также содержать от приблизительно 1, от приблизительно 5, от приблизительно 10, от приблизительно 50, от приблизительно 100, от приблизительно 200, от приблизительно 350, от приблизительно 500, от приблизительно 1, от приблизительно 5, от приблизительно 10, от приблизительно 50, от приблизительно 100, от приблизительно 200, от приблизительно 350, от приблизительно 500 до приблизительно 1000 мг/кг/вес тела или более на одно введение, и любой получаемый из них диапазон. В неограничивающих примерах диапазона, полученного из величин, приведенных в настоящем изобретении, диапазон от приблизительно 5 до приблизительно 100 мг/кг/вес тела, от приблизительно 5 до приблизительно 500 мг/кг/вес тела и т.д., можно вводить на основе величин, описанных выше.
В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция настоящего изобретения может содержать, например, по меньшей мере приблизительно 0,1% соединения настоящего изобретения. В других вариантах осуществления соединение настоящего изобретения может составлять от приблизительно 2 до приблизительно 75% веса единичной формы или от приблизительно 25 до приблизительно 60%, например, и любой полученный из них диапазон.
Предполагаются единичные или многократные дозы агентов. Требуемые интервалы времени для доставки многократных доз может определить специалист в данной области техники, применяя только стандартные эксперименты. В качестве примера, субъектам можно вводить две дозы в день с приблизительно 12-часовыми интервалами. В некоторых вариантах осуществления агент вводят один раз в день.
Агент (агенты) можно вводить согласно регулярному режиму. Как применяют в настоящем изобретении, регулярный режим относится к предварительно определенным назначенным периодам времени. Регулярный режим может включать периоды времени, которые являются одинаковыми или которые отличаются по продолжительности, при условии, что режим определен предварительно. Например, регулярный режим может включать введение дважды в день, каждый день, на каждый второй день, на каждый третий день, на каждый четвертый день, на каждый пятый день, на каждый шестой день, раз в неделю, раз в месяц или любое число дней или недель в данных диапазонах. Альтернативно, предварительно определенный регулярный режим может включать введение дважды в день на первой неделе, с последующим введением раз в день в течение нескольких месяцев, и т.д. В других вариантах осуществления настоящее изобретение обеспечивает то, что агент (агенты) можно принимать перорально и что время приема зависит или не зависит от приема пищи. Таким образом, например, агент можно принимать каждое утро и/или каждый вечер, вне зависимости от того, когда субъект принимал или будет принимать пищу.
VI. Комбинационная терапия.
В добавление к применению в виде монотерапии, соединения настоящего изобретения можно также применять в комбинационной терапии. Эффективную комбинационную терапию можно осуществлять в виде единичной композиции или фармакологического состава, который содержит оба агента, или в виде двух различных композиций или составов, вводимых одновременно, где одна композиция содержит соединение настоящего изобретения и другая содержит второй агент (агенты). Альтернативно, терапия может предшествовать или следовать за лечением другим агентом с интервалами в диапазоне от минут до месяцев.
Неограничивающие примеры данной комбинационной терапии включают комбинацию одного или более соединений настоящего изобретения с другим противовоспалительным агентом, химиотерапевти-ческим агентом, радиационной терапией, антидепрессантом, антипсихотическим агентом, противосудо-рожным агентом, стабилизатором настроения, антибактериальным агентом, антигипертензивным агентом, снижающим уровень холестерина агентом или другим модулятором липидов в крови, агентом, способствующим потере веса, антитромботическим агентом, агентом для лечения или профилактики сердечно-сосудистых проблем, таких как инфаркт миокарда или инсульт, антидиабетическим агентом, агентом, ослабляющим отторжение трансплантата или реакцию трансплантат-против-хозяина, антиартритным агентом, болеутоляющим агентом, противоастматическим агентом или другими агентами для лечения заболеваний дыхательных путей или агентом для лечения или предотвращения кожных заболеваний. Соединения настоящего изобретения можно комбинировать с агентами, разработанными для усиления иммунного ответа пациента на рак, включая (но не ограничиваясь) противораковую вакцину, смотрите Lu et al. (2011), которая включена в настоящее изобретение с помощью ссылки.
VII. Примеры.
Следующие примеры включены для иллюстрации предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения. Специалисту в данной области техники ясно, что способы, описанные в примерах, которые следуют далее, представляют собой способы, разработанные заявителями настоящего изобретения, хорошо функционирующие при практическом осуществлении настоящего изобретения, и таким образом их можно рассматривать как образующие предпочтительные варианты для осуществления на практике настоящего изобретения. Однако специалисту должно быть ясно, в свете настоящего изобретения, что многие изменения можно вводить в конкретные варианты осуществления, которые описаны, и, тем не менее, получать подобный или аналогичный результат, не выходя за пределы сущности и объема настоящего изобретения.
Способы и материалы.
Продуцирование оксида азота и жизнеспособность клеток.
Мышиные макрофаги RAW264.7 помещали в 96-луночные планшеты при 30000 клеток на лунку в трех экземплярах в RPMI1640+0,5% FBS и выдерживали при 37°С с 5% CO2. На следующий день клетки предварительно обрабатывали ДМСО или лекарственным средством (диапазон доз 0-200 нМ) в течение 2 ч и затем обрабатывали рекомбинантным мышиным IFNy (R &D Systems) в течение 24 ч. Концентрацию оксида азота в среде определяли, применяя систему реагентов Грисса (Promega). Жизнеспособность клеток определяли, применяя реагент WST-1 (Roche). Величины IC50 определяли на основе подавления IFNy, вызванного продуцированием оксида азота, нормированного по отношению к жизнеспособности клеток.
Анализ NQQ1-ARE по гену-репортеру люциферазы.
Данный анализ позволяет количественно оценить эндогенную активность фактора транскрипции Nrf2 в культивируемых клетках млекопитающих. Экспрессию люциферазы светлячка из NQO1-ARE лю-циферазной репортерной плазмиды контролировали связыванием Nrf2 со специфической последовательностью усилителя, соответствующего антиоксидантному чувствительному элементу (ARE), который обнаруживается в промоторном участке человеческого гена NADPH:хиноноксидоредуктаза 1 (NQO1) (Xie et al., 1995). Плазмиду получали вставкой последовательности
5'-CAGTCACAGTGACTCAGCAGAATCTG-3' (SEQ ID NO:1),
включающей человеческий NQO1-ARE в вектор pLuc-MCS, применяя сайты встраивания Hin-dIII/XhoI (GenScript Corp., Piscataway, N.J.). Анализ проводили в клетках HuH7, выдерживаемых в DMEM (Invitrogen), снабженной 10% FBS и 100 ед/мл (каждый) пенициллина и стрептомицина. Что касается анализа, клетки помещали в 96-луночные планшеты при концентрации 17000 клеток на лунку. Через 24 ч клетки трансфецировали совместно с 50 нг каждой из репортерной плазмиды QO1-ARE и плазмиды pRL-TK, применяя агент для трансфекции, липофектамин 2000 (Invitrogen). Плазмида pRL-TK постоянно экспрессировала люциферазу Renilla, и ее применяли в качестве внутреннего контроля для нормализации степени трансфекции. Через 30 ч после трансфекции клетки обрабатывали соединениями (при концентрациях в диапазоне от 0 до 1 мкМ) в течение 18 ч. Люциферазную активность светлячка и Renilla оценивали люциферазным анализом Dual-Glo (Promega Corp., Madison, Wis.), сигнал люминесценции измеряли на люминометре L-Max II (Molecular Devices). Люциферазную активность светлячка нормализовали относительно активности Renilla, и рассчитывали кратную индукцию по сравнению с
контролем растворителем (ДМСО) нормализованной активности светлячка. Кратную индукцию при концентрации 62,5 нМ применяли для сравнения относительных эффективностей соединений по индуцированию транскрипционной активности Nrf2, смотрите Xie T., Belinsky M., Xu Y., Jaiswal А-K. ARE-and TRE-mediated regulation of gene expression. Response to xenobiotics and antioxidants. J Biol. Chem. (1995) 270(12):6894-6900, которая включена в настоящее изобретение с помощью ссылки. Получение определенных синтетических соединений AIM настоящего изобретения.
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 1(a) и 1(b): (а) этилвинилкетон, Et3N, ТГФ, 81%; (b) (S)-фенилаланин. CSA, ДМФА, от комнатной температуры до 70°С, 5 дней, 45%; (с) NaBH4, EtOH, 0°C, 1 ч, 90%; (d) MOMCl, изо-Pr2NEt, CH2Cl2, 3 дня, 90%; (е): (i) Li, трет-BuOH, NH3, ТГФ, кипячение с обратным холодильником, 2 ч; (ii) MeI, ТГФ, -78°С, 2 ч, 28%; (f) этиленгликоль, 10-CSA, циклогексан, -H2O, 66%; (g) PDC, 95%; (h) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 90%; (i) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 2 ч, количественный; (j) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 3 ч, 59%; (k): (i) LDA, ТГФ, -78°С, 45 мин; (ii) TsCN, -78°C, 45 мин, 77%; (l): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 12 ч, 23% ТХ63342; 9% ТХ63341.
Схема 2
О ОН 0^0''
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 2: (a) NaBH4, EtOH, 0°C, 92%; (b) MOM-Cl, изо-Pr2NEt, комнатная температура, 78%; (с) KO-трет-Bu, трет-BuOH, MeI, 43%; (d) этиленгликоль, п-TsOH-^O, толуол -H2O, 99%; (e) H2 10% Pd/C EtOH 99%; (f) MOM-Cl изо-Pr2NEt комнатная температура. 12 ч, количественный; (g): (i) LDA, ТГФ, -78°C, 30 мин; (ii) TsCN, -78°C, 30 мин, 66%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 3 ч, 0°С; (ii) пиридин, 60°С, 4 ч; 86%; (i) 3н. HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура, 2 дня, 68%.
TX6344S
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 3: (a) PDC, выход 93%; (b) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, количественный; (с) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 2 ч, 97%; (d) 3н. HCl (водн.), Ме-
ОН, комнатная температура, 3 ч, 86%; (е): (i) LDA, ТГФ, -78°С, 45 мин; (ii) TsCN, -78°C, 45 мин, 44%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, 0°С; (ii) пиридин, 55°С, ТХ63432: 29%, ТХ63445: 4%.
Схема 4
32 ТХ63444
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 4: (а) циклогексилгидразин-HCl, Et3N, EtOH, 15 мин, 36%; (b) 3н. HCl (волн.), МеОН, комнатная температура, 3 ч, выход 98%; (с) LDA, TsCN, ТГФ, -78°С, 1,5 ч, выход 46%; (d): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 16 ч, выход
59%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 5: (а) трет-BuNHNH2-HCl, Et3N, EtOH, кипячение с обратным холодильником, 5 ч; комнатная температура, 12 ч, 35% соединения 36; 36% соединения 37; (b) 1н. HCl (водн.), MeOH, комнатная температура, 12 ч, количественный; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 90%; (d) NH2OH-HO, 50°С, 12 ч, количественный; (е) NaOMe, 55°C, 5,5 ч; комнатная температура, 12 ч, 59%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, время; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 56%.
Схема 6
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 6: (а) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, 86%; (b) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 83%; (с) NH2OH-HO, 50°C, 12 ч, количественный; (d) NaOMe, 55°C, 5,5 ч; комнатная температура, 12 ч, 80%; (е) (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, время; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 67%.
Схема 7
47 ТХ63454
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 7: (а) (2,2,2-трифторэтил)гидразин, EtOH, 60°C, 2 ч, 70%; (b) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, количественный; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 96%; (d) IN^OH-HCl, 50°C, 12 ч, 93%; (с) NaOMe, 50°C, 6 ч, 52%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 54%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 8: (а) фенилгидразин-HCl, NaOAc-3H2O, EtOH, 70°C, 12 ч, 35% соединения 51; 51% соединения 52; (b) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, 92%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 97%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, 91%; (е) NaOMe, 55°С, 5,5 ч; комнатная температура, 12 ч, 80%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, время; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 3%.
Схема 9
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 9: (а) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, 92%; (b) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 95%; (с) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, 76%; (d) NaOMe, 55°C, 5,5 ч; комнатная температура, 12 ч, 79%; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, время; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 24%.
Схема 10
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 10: (а) гидразин, EtOH, комнатная температура, 1 ч; 60°С, 1 ч, 82%; (b) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, количественный; (с) HCO2Et, NaOMe,
комнатная температура, 12 ч, 99%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, 97%; (е) NaOMe, 55°С, 5,5 ч; комнатная
температура, 12 ч, 83%; (f): (i) DDQ, бензол, кипячение с обратным холодильником, 4,5 ч, 43%.
ТХ63467
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 12: (a) AcCl, NaHCO3 (водн.), ТГФ, 0°С, 1 ч, 24%.
Схема 13
ТХ63464
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 13: (а) 2-гидразинилэтанол, EtOH, 60°C, 2 ч, 93% (b) 3н. HCl (волн.). МеОН, комнатная температура, 12 ч, 62%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 91%; (d) NH2OH-HO, 50°C, 12 ч, количественный; (е) NaOMe, 50°C, 6 ч, количественный; (f): (i) бромид пербромид пиридиния, диоксан, комнатная температура, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 5%.
Схема 14
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 14: (а) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, CH2O2, комнатная температура, 3 ч, 54% (b) фенилбороновая кислота, Pd(OAc)2, Pt^P, K3PO4, DME, 85°С, 9 ч, 53%; (с) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, количественный; (d) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 92%; (е) NH2OH-HO, 50°С, 12 ч, 96%; (f) NaOMe, 50°C, 6 ч, 75%; (f): (i) 1,3-дибром-
ТХ63466
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 15 (a): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 6%.
Схема 16
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 16: (а) арилбороновая кислота, Pd(OAc)2, Ph3P, K3PO4, DME, 85°С, 9 ч, выходы; (b) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, выходы; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, выходы; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, выходы; (е) NaOMe, 50°С, 6 ч, выходы; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, выходы.
Схема 17
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 17: (а) 3- или 4-пиридинилбороновая кислота, Pd(OAc)2,
Ph3P, K3PO4, DME, 85°C, 9 ч, 83а: 26%, 83b: 49%; (b) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12
ч, 84а: 97%, 84b: количественный; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 85а: количественный, 85b: количественный; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, 86а: количественный, 86b: количественный; (е) NaOMe, 50°C, 6 ч, 87а: количественный, 87b: количественный; (f): (i) Br2, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, ТХ63503: 31%, TX63505: 27%.
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 18(a) и (b): (а) KO-трет-Bu, трет-BuOH, 1,4-дибромбутан, 45°С, 78%; (b) Н2, 20% Pd(OH)2, EtOH, 31%; (с) этиленгликоль, п-TsOH-^O, толуол, -H2O, количественный; (d) PDC, 45°С, 73%; (е) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 99%; (f) MeN-HNH2, EtOH, от комнатной температуры до 60°С, 75%; (g) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, количественный; (h) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, количественный; (i) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, 96%; (j) NaOMe, 50°C, 6 ч, количественный; (k): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 38%.
Схема 19
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 19: (а) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, CH2Cl2, комнатная температура, 2 ч, 62%; (b) фенилбороновая кислота, Pd(OAc)2, Ph3P, K3PO4, DME, 85°C, 12 ч, 73%; (с) 1н. HCl (волн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, количественный; (d) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 47%; (е) NH2OH-HCl, 50°С, 12 ч, количественный; (f) NaOMe, 50°C, 6 ч, количественный; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 37%.
104 TX63S24
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 20: (a): (i) фенилгидразин, толуол, 75°С; (ii) TsOH-H2O, толуол, 80°С, 3 дня; (b) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, 50: 17%, 101: 52%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, количественный; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, 89%; (е) NaOMe, 55°С, 6 ч, комнатная температура, 12 ч, 89%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 30 мин; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 28%.
111 ТХ63531
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 21(a) и (b): (a): (i) NH2OH-HC1, TEA, EtOH, H2O, комнатная температура, 16 ч; (ii) NaOMe, МеОН, ТГФ, комнатная температура; (b) MeNHNH2, EtOH, кипя
чение с обратным холодильником, 16 ч; (с) PhCOCl, TEA, EtOAc; (d) 3н. HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура; (е) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч; (f) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч; (g) NaOMe, 50°С, 6 ч, (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч.
Схема 22(a)
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 22(a) и (b): (a) Li, NH3, -78°C, 45 мин, 23%; (b) этиленгликоль, п-TsOH-^O, бензол, H2O, 75%; (с) PDC, MgSO4, CH2Cl2, 2 дня, комнатная температура, 90%; (d) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 96%; (e) MeNHNH2, EtOH, 60°С, 2 ч, 85%; (f) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, CH2Cl2, комнатная температура, 3 ч, 64%; (g) фенилбороновая кислота, PPh4, Pd(OAc)2, K3PO4, DME, 85°С, 16 ч, 53%; (h) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, 91%; (i) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 96%; (j) NH2OH-HCl, 50°С, 12 ч, количественный; (k) NaOMe, 50°C, 6 ч, количественный; (l): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 28%.
Схема 23(a)
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 23(a) и (b): (a): (i) этилвинилкетон, Et3N, MeCN, комнатная температура, 12 ч; (ii) пирролидон, бензол, -H2O, 48 ч, 41%; (b) NaBH4, EtOH, 0°C, 45 мин, 56%; (с) Li, NH3, -78°C, 45 мин, 28%; (d) этиленгликоль, п-TsOH-HA бензол, -H2O, 62%; (е) PDC, MgSO4, CH2Cl2, 2 дня, комнатная температура, 92%; (f) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, количественный; (g) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 2 ч, 79%; (h) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, CH2Cl2, комнатная температура, 3 ч, 74%; (i) фенилбороновая кислота, PPh4, Pd(OAc)2, K3PO4, DME, 85°С, 16 ч, 63%; (j) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, количественный; (k) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 95%; (l) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, количественный; (m) NaOMe, 50°C, 6 ч, количественный; (n): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 33%.
Схема 24
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 24: (а) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, CH2Cl2, комнатная температура, 3 ч; (b): (i) фенилбороновая кислота, Pd(OAc)2, Ph3P, K3PO4, DME, 85°C, 9 ч; (ii) HCl (водн.), МеОН; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, количественный; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, 94%; (e) NaOMe, 50°C, 6 ч, 94%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 52%.
Схема 25
146а-Ь
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 25: (а) изопропенилпинаколборонат, Pd(II), 16 ч, 141а: 41%, 141b: 40%; (b) Н2, 10% Pd/C, 142а: 93%, 141b: 93%; (с) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная темпера
тура, 12 ч, 142а: 99%, 141b: 93%; (d) HCO2E1, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 144а: количественный, 144b: количественный; (е) NH2OH-HO, 50°C, 12 ч, 145а: количественный, 145b: 87%; (f) NaOMe, 50°C, 6 ч, 146a: 99% 141b: 97%; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, ТХ63547: 15% TX63591: 13%.
Схема 26
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 26: (а) пинаколовый эфир бензилбороновой кислоты, Pd(dppf)Cl2, K2CO3, диоксан, 100°С, 16 ч, 47%; (b) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч, 90%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, количественный; (d) NH2OH-HO, 50°С, 12 ч, 97%; (е) NaOMe, 50°C, 6 ч, 32%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 36%.
Схема 27
/ / /
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 27: (а) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, количественный; (b) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 99%; (с) NH2OH-HCl, 50°С, 12 ч, 98%; (d) NaOMe, 50°C, 6 ч, количественный; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 38%.
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 28(a) и (b): (а) акриламид, Et3N, 85°C, 16 ч, 96%; (b) АсОН, 160°С (микроволновое облучение), 1 ч, 73%; (с) NaH, MeI, ДМФА, ТГФ, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч, 68%; (d) Н2, PtO2, АсОН, H2O, комнатная температура, 16 ч; (e) TPAP, NMO, 4А молекулярные сита, CH2Cl2, комнатная температура, 1 ч, 79% за 2 стадии; (f) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 3 ч; (g) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 3 ч, 93% за 2 стадии; (h) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, CH2Cl2, комнатная температура, 5 ч 49%; (i) фенилбороновая кислота, Pd(OAc)2, Ph3P, K3PO4, DME, 110°С (микроволновое облучение), 2,5 ч, 95%; (j): (i) LDA, ТГФ, -78°C, 30 мин; (ii) PhSeCl, -78°C, 1 ч, 45%; (k) H2O2, EtOAc, ТГФ, комнатная температура, 30 мин, 90%; (l) I2, пиридин, CCl4,- от комнатной температуры до 65°С, 41 ч, 60%; (m) Zn(CN)2, Pd(Ph3P)4, ДМФА, 80°С, 20 мин, 89%.
Схема 29
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 30: (a) PhCOCl, iPr2Net, MgBr2, CH2Cl2, комнатная температура, 16 ч; (b) NH2NH2, EtOH, 63°C, 1 ч, 38% за 2 стадии; (с) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч, количественный; (d) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, 84%; (е) NH2OH-HCl, 50°C, 12 ч, 84%; (f) NaOMe, 50°C, 6 ч, количественный; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 28%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 31: (а) замещенный амидин, пиперидин, iPrOH, 85°C, герметично закрытая колба, 2 дня; (b) 3н. HCl (водн.); (b) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч; (с) NH2OH-HCl, 50°С, 16 ч; (d) NaOMe, 50°C, 6 ч; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч.
Схема 32(a)
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 32: (а) (МеО)2СО, NaH, ТТФ, кипячение с обратным холодильником, 3 ч, 87%; (b) ацетамидин-HCl, пиперидин, изо-PrOH, кипячение с обратным холодильником, 2 дня, 62%; (с) Tf2O, Et3N, CHCl3, 0°C, 2 ч, 83%; (d) фенилбороновая кислота, PPh4, Pd(OAc)2, K3PO4, DME, 85°C, 16 ч, 83%; (е) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, количественный; (f) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 12 ч, количественный; (g) NH2OH-HCl, 50°С, 12 ч, количественный; (h) NaOMe, 50°C, 6 ч, количественный; (i): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 67%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 33: (a): (i) мочевина, диоксан, кипячение с обратным холодильником, 3 дня; (ii) MeOH, NaOMe, кипячение с обратным холодильником, 3 дня; (b) 1н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 12 ч, 71% за 2 стадии; (с) HCO2E1, NaOMe, от комнатной температуры до 50°С, 49%; (с) NH2OH-HO, 50°С, 12 ч; (d) NaOMe, 50°С, 6 ч, 15% за 2 стадии; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 12 ч, 31%.
Схема 34
197 ТХ63554
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 35: (а) ацетамидин-HCl, пиперидин, изо-PrOH, кипячение с обратным холодильником, 2 дня, 48%; (b) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч, 94%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, 90%; (d) NH2OH-HO, 50°С, 16 ч, 98%; (е) NaOMe, комнатная температура, 48 ч, 80%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 51%.
202 ТХ63569
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 35: (а) ацетамидин-HCl, пиперидин, изо-PrOH, 85°С, 4 дня, 60%; (b) 3н. HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч, 95%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, 91%; (d) NH2OH-HCl, 50°C, 16 ч, 89%; (е) NaOMe, комнатная температура, 16 ч, количественный; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 36%.
Схема 36
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 36: (a): (i) BzCl, MgBr2-Et2O, DIPEA, DCM, 16 ч; (ii) PhNHNH2, EtOH, 80°C, 16 ч; (b) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч; (с) NH2OH-HCl, 50°С, 16 ч; (d) NaOMe, МеОН, ТГФ, комнатная температура, 16 ч; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 36%.
Схема 37
213 214 ТХ63436
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 37(a) и (b): (а) KO-трет-Bu, трет-BuOH, MeI, 55%; (b) Н2, 10% Pd/C, EtOAc, 12 ч, 99%; (с): (i) этиленгликоль, п-TsOH•H2O, толуол, -H2O; (ii) PDC, CH2Cl2, комнатная температура, 22 ч, 7 3%; (d) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 1 ч, количественный; (е) MeNHNH2, EtOH, 65°C, 4 ч, 27%; (f) 1н. HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура, 24 ч, 90%; (g): (i) LDA, ТГФ, -78°С, 30 мин; (ii) TsCN, -78°C, 30 мин, 80%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 12 ч, 46%.
222 223 224 TX63533
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 38: (a): (i) Н2, 10% Pd/C, ТГФ, от 0°С до комнатной температуры, 4 дня; (ii) NaOMe, MeOH, комнатная температура, 12 ч, 42%; (b) этиленгликоль, п-TsOH^O, толуол, H2O, 100%; (с) TBAF-H2O, ТГФ, комнатная температура, 3 дня, 94%; (d) PDC, CH2Cl2, комнатная температура, 12 ч, 100%; (е) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч, 100%; (f): (i) MeN-HNH2, EtOH, 65°C, 12 ч, 83%; (ii) 1н. HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура, 3 дня, 83%; (g) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч, 100%; (h) NH2OH-HCl, 60°C, 12 ч, 100%; (i) NaOMe, 50°C, 6 ч, 100%; (j): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч;
(ii) пиридин, 60°С, 2 ч, 20%.
235 ТХ63559
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 39(a) и (b): (а): (i) гексаметилдисилазан, NaI, TMSCl, MeCN, комнатная температура, 12 ч; (ii) Pd(OAc)2, MeCN, комнатная температура, 12 ч, 79%; (b): (i) KHMDS, ТГФ, 0°С, 30 мин; (ii) MeI, 0°C, 30 мин, 81%; (с) Н2, 10% Pd/C, ТГФ, комнатная температура, 3 ч, 99%; (d) метилэтилдиоксолан, этиленгликоль, п-TsOH, CH2Cl2, комнатная температура, 2 дня, 99%; (е) TBAF, ТГФ, комнатная температура, 4 дня, 89%; (f) PDC, CH2Cl2, комнатная температура, 12 ч, 90%; (g) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч, количественный; (h): (i) MeNHNH2, EtOH, 65°C, 12 ч; (ii) 1н. HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура, 2 дня, 76%; (i) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч, 96%; (j) NH2OH-HCl, 60°С, 12 ч, 91%; (k) NaOMe, 50°С, 6 ч, 71%; (l): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 5 ч,
71%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 40: (а) TMS-ацетилен, CuI, TEA, диоксан, 80°С, 16 ч, 3%; (b) HCl (водн.), ТГФ, 3 дня, 98%; (с) HCO2Et, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч, количественный; (d) NH2OH-HO, 60°C, 12 ч, количественный; (е) NaOMe, 50°С, 6 ч, 50%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 5 ч, 55%.
Схема 41
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 41: (a) Zn(CN)2, dppf, NaCO3, Pb(OAc)2, DMAc, 120°C, 16 ч, 80%; (b) HCl (водн.), МеОН, 16 ч, 9б%; (с) HCO2E1, NaOMe, от 0°С до комнатной температуры, 16 ч, количественный; (d) NH2OH-HCl, 50°С, 16 ч, количественный; (е) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 6 ч, 100% в виде смеси; (f): 100% в виде смеси; (f); (i) 1,3 дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°C до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, ТХ63613: 39%, TX63619: 8%.
Схема 42
ТХ63630
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 42: (а) HCl, МеОН, 60°С, 16 ч, количественный; (b) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, количественный; (с) NH2OH-HCl, EtOH, 50°С, 16 ч, количественный; (d) NaOEt, ТГФ, МеОН, 50°С, 6 ч, 100% в виде смеси; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-
диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, ТХ63630: 37%, ТХ63631: 13%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 43: (a) TMSN3, Bu2SnO, толуол, 110°С; (b) RX, K2CO3, ДМФА; (с) HCl, ТГФ; (d) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч; (e) NH2OH-HO, EtOH, ТГФ, H2O, 50°С; (f) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 16 ч.
Схема 44
263 ТХ63723
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 44: (a) NH2OH, EtOH, 50°С, 16 ч; (b) диметилацеталь ди-метилацетамида, диоксан, 60°С, 2 ч, 96%; (с) HCl, ТГФ, 2 дня, количественный; (d) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, количественный; (е) NH2OH-HO, EtOH, ТГФ, H2O, 50°С, 16 ч, 77%; (f) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 3 ч, 98%; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 4 ч, 78%.
Схема 45
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 45: (а) Ac2O, пиридин, 110°С, 3 ч; (b) HCl (водн.), ТГФ, 2
дня, 34%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, 99%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, ТГФ, H2O,
50°С, 16 ч, 28%; (е) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 3 ч, 100%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 4 ч, 60%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 46: (а) диметилацеталь диметилформамида, 80°С, 16 ч; (b) MeNHNH2, АсОН, диоксан, 80°С, 2 ч; (с) HCl (водн.), ТГФ, количественный; (d) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 97%; (е) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, от 50°С до комнатной температуры, 16 ч, 79%; (f) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 3 ч, 77%; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 4 ч; 84%.
Схема 47
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 47: (а) KOH, EtOH, H2O, 3 дня, количественный; (b) диме-тилацеталь диметилацетамида, диоксан, 80°С, 2 ч; (с) NH2OH-HCl, TEA, AcOH, диоксан, 80°С, 3 ч, 58%; (d) HCl (водн.), ТГФ, количественный; (е) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 97%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, ТГФ, H2O, 50°С, 16 ч, 94%; (g) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 3 ч, 79%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 6 ч,
71%.
16 ч.
286 ТХ63667
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 49: (a) PhMgBr, ТГФ, от 0°С до комнатной температуры, 16 ч; (b) HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура, 16 ч, затем 60°С, 4 ч; 93%; (с) HCO2E1, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, 97%; (d) NH2OH-HO, TEA, AcOH, диоксан, 50°С, 4 ч; 98%; (е) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 16 ч, 83%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 90%.
Схема 50
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 50: (a) NCS, DCM, комнатная температура, 4 дня; (b) HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура, 3 ч, 76%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, 91%; (d) NH2OH-HO, EtOH, H2O, 50°С, 16 ч, 50%; (е) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 16 ч; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 60%.
Схема 51
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 51: (а) HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура, 3 ч; (b) (Boc)2O, DMAP, TEA, диоксан, H2O, комнатная температура, 16 ч, (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч; (d) NH2OH-HO, TEA, EtOH, H2O, Py-Ts, 50°C, 4 ч; (e) NaOMe, ТГФ, MeOH, 50°C, 16 ч, 78%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 12,5%.
ТХ63467 ТХ63642
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 52: (a) BzCl, NaHCO3 (водн.), ТГФ, 0°С, 47%.
Схема 53
ТХ63579 ТХ63611
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 53: (a) BzCl, NaHCO3 (водн.), ТГФ, 0°С, 47%.
Схема 54
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 54: (а) (МеО)2СО, NaH, ТГФ, кипячение с обратным холодильником, 3 ч, 87%; (b) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 16 ч, (с) HCl (водн.), МеОН, 16 ч, 100%; (d) HCO2E1, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, 100%; (e) IN^OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч, 100%; (f) NaOMe, МеОН, 50°С, 9 ч, 99%; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 9%.
ТХ63691 ТХ63692
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 55(a) и (b): (a) MeI, K2CO3, ДМФА, 16 ч, 64%; (b) HCl (водн.), МеОН, 16 ч, 100%; (с) HCO2Et, NaOMe, комнатная температура, 16 ч, 100%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч, 100%; (е) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С, 6 ч, 100%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 15%.
Схема 56
70 308 ТХ63804
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 56: (a) IBX, ДМФА, 65°С, 6 ч, 308: 60%, ТХ63804: 3%.
Схема 57
308 309 ТХ63803
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 57: (а) I2, ТГФ, пиридин, 60°С, 16 ч, 100%; (b) FSO2CF2CO2Me, CuI, НМРА, ДМФА, 70°С, 6 ч, 63%.
Схема 58(a)
ТХ63615 ТХ63626
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 58(a) и (b): (а) 3-аминопиразол, (TsO^O, толуол, кипячение с обратным холодильником,- 16 ч, 310а: 49%, 310b: 6,7%; (b) HCl (волн.), МеОН, 311а: 100%, 311b: 90%; (с) HCO2E1, NaOMe, комнатная температура; (d) IN^OH-HCl, EtOH, 50°C; (e) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч ТХ63617: 33%, и ТХ63627: 17%, ТХ63615: 24%; (g) PhB(OH)2, Pd(PPh3)4, DME, K3PO4, 90°С, 16 ч, 26%.
319а 319а ТХ63606 ТХ63649
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 59: (а) HCl (водн.), МеОН; (b) HCO2E1, NaOMe, комнатная температура; (с) NH2OH-HCl, EtOH, 50°С; (d) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-
диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч ТХ63606: 69%, ТХ63649: 2%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 60: (а) R-B^^, K3PO4, Pd(PPh3)4, DME, 80°C, 16 ч.
Схема 60
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 61: (a) R-B(OH)2, K3PO4, PPh3, Pd(OAc)2 или Pd(PPh3)4, DME, 80°С, 16 ч; (b) HCl (водн.), МеОН; (с) HCO2E1, NaOMe, комнатная температура; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C; (e) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч.
Схема 62
326 ТХ63829
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 62: (a) IBX, ДМСО, 65°С, 7 ч, 43%; (b) I2, пиридин, ТТФ, 60°С, 30 ч, 100%; (с) FSO2CF2CO2Me, CuI, НМРА, ДМФА, 70°С, 6 ч, 42%.
Схема 63
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 63: (a) Zn(CN)2, dppf, Na2CO3, Pd(OAc)2 DMA, 120°C, 16 ч, 90%; (b) HCl (водн.), ТГФ, MeOH, 3 дня, 99%; (с) HCO2E1, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч; (d) NH2OH-HO, EtOH, ТГФ, H2O, 50°C, 16 ч, 100%; (e) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С, 4 ч; 72%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 74%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 64: (a) TMSN3, Bu2SnO, толуол, 130°С, 16 ч, 43%; (b) HCl (водн.), ТГФ, 16 ч, 97%; (с) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 100%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, ТГФ, 50°С, 16 ч, 90%; (е) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С, 4 ч; 86%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 70%.
Схема 65
341 ТХ63857
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 65: (а) Ac2O, пиридин, 110°С, 3 ч; (b) HCl (водн.), ТГФ, 3 дня, 20%; (с) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 100%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°С, 4 ч; затем TsOH, бензол, кипячение с обратным холодильником, 7 ч, 47%; (е) NaOMe, ТГФ/EtOH, 50°С, 4 ч; 100%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii)
пиридин, 55°С, 5 ч 46%.
347 348 ТХ63872
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 66: (а) KOH, EtOH, H2O, 4 дня, 100%; (b) диметилацеталь диметилацетамида, 80°С, 3 ч; (с) NH2OH-HCl, TEA, АсОН, 80°С, 2 ч, 69%; (d) HCl (водн.), ТГФ, 4 дня, 97%; (е) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 100%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 4 ч; затем TsOH, бензол, кипячение с обратным холодильником, 7 ч, 100%; (g) NaOMe, ТГФ/EtOH, 50°С, 4 ч; 77%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 79%.
Реагенты и условия, относящиеся к схема 67: (а) диэтилоксалат, NaH, ТГФ, кипячение с обратным холодильником, 16 ч, 100%; (b) MeNHNH2, EtOH, 60°C, 16 ч, 19%; (с) HCl (водн.), ТГФ, 16 ч, 73%; (d) HCO2E1, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 100%; (e) NH2OH-HO, EtOH, 50°C, 16 ч, 100%; (f) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С, 6 ч, 100%; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 55°С, 5 ч 80%; (h) (COCl)2, ТГФ, комнатная температура, 3 ч, 35%.
Схема 68
Ph Ph^
360 ТХ63607
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 68: (а) н-BuLi, DIPA, BnBr, ТГФ, от -78°С до комнатной температуры, 45%; (b) H2, Pd/C, ТГФ, 48 ч; (с) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 98%, (d) NH2OH-HO, EtOH, 50°С, 16 ч, 100%; (e) NaOMe, ТГФ/MeOH, 50°С, 9 ч, 100%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 39%.
Схема 69
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 69: (a) KHMDS, ТГФ, BnBr, от -60°С до комнатной температуры, 15%; (b) H2, Pd/C, ТГФ, 48 ч; (с) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 95%; (d) NH2OH-HO, EtOH, 50°C, 16 ч, 100%; (е) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С, 9 ч, 98%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 28%.
ТХ63629
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 70: (a) DIPA, н-BuLi, ТГФ, Ph2ICl, от -78°С до комнатной температуры, 31%; (b) H2, Pd/C, ТГФ, 48 ч; (с) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч; (е) NaOMe, ТГФ/МеОН, 50°С, 9 ч, 91%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 4 ч; 79%.
Схема 71
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 71: (а) диметилкарбонат, NaH, ТГФ, кипячение с обратным холодильником, 16 ч; (b) гидрохлорид ацетимидамида, пиперидин, iPrOH, кипячение с обратным холодильником, 48 ч, 42%; (с) Р0С13, ДМФА, 140°С, 3 ч, 100%; (d) NaOMe, MeOH, 50°C, 3 ч, 44%; (е) HCO2Et, NaOMe, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 100%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч, 100%; (g) NaOMe, ТГФ/MeOH, 50°С, 9 ч, 100%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 30%.
Схема 72
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 72: (а) гидрохлорид циклопропанкарбоксимидамида, пиперидин, iPrOH, 90°C, 72 ч, 77%; (b) HCl (водн.), МеОН, iPrOH, комнатная температура, 16 ч, 94%; (с) POCl, DIPEA, бензол, 80°С, 16 ч, 94%; (d) NaOMe, МеОН, 50°С, 2 ч, 100%; (е) HCO2Et, NaOMe, ТГФ,
комнатная температура, 16 ч, 100%; (f) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 2 ч, затем комнатная температура, 16 ч, 90%; (g) NaOMe, MeOH, комнатная температура, 16 ч, 41%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 3 ч, 23%.
Схема 73
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 73: (а) гидрохлорид 2,2-диметилпропионамидина, пиперидин, н-BuOH, 100°С, 72 ч, 60%; (b) POCl, DIPEA, бензол, 90°С, 2 ч, затем комнатная температура, 16 ч, 93%; (с) NaOMe, MeOH, 50°С, 2 ч, 100%; (d) HCl (водн.), МеОН, iPrOH, комнатная температура, 16 ч, 92%; (е) HCO2Et, NaOMe, MeOH, комнатная температура, 16 ч, 97%; (f) N^OH-HCl, EtOH, 50°C, 2 ч, затем комнатная температура, 16 ч, 100%; (g) NaOMe, MeOH, комнатная температура, 16 ч, 50%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 2 ч, 38%.
Схема 74
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 74: (а) тиомочевина, EtOH, кипячение с об-
ратным холодильником, 16 ч, 87%; (b) MeI, K2CO3, ДМФА, комнатная температура, 2 ч, 100%; (с) PhB(ОН)2, Pd. (PPh3)4, Cu(I) тиофен-2-карбоксилат, ТГФ, кипячение с обратным холодильником, 16 ч, 40%; (d) HCl (водн.), МеОН, iPrOH, комнатная температура, 16 ч, 100%; (е) HCO2Et, NaOMe, MeOH, комнатная температура, 16 ч, 100%; (f) N^OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч, 98%; (g) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 16 ч, 50%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 62%.
Схема 75(a)
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 75(a) и (b): (а) ClCH2COOH, HCl, H2O, 100°С, 6 ч, 93%; (b) POCL,, DIPEA, 90°С, 16 ч, 90%; (с) NaOMe, МеОН, 50°С, 1 ч, 401а: 65%, 401b: 5,5%; (d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч, 100%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч, 100%; (f) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 6 ч, 100%; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 40%.
Схема 76
411 412 ТХ63730
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 77: (a) Zn(CN)2, dppf, Na2CO3, DMAc, 120°С, 16 ч, 40%; (b) HCO2Et, NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч; (с) N^OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч, 30%; (d) TEA, MeCN, 85°C, 16 ч; (e): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 41%.
d: ТХ53852 R = Н, R' = Me
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 78: (а) POQ3, DIPEA, бензол, 90°С, 4 ч; (b) RR'NH, DIPEA, iPrOH, 90°C, 48 ч; (с) HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч; (d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч; (е) N^OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч, 30%; (f) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 16 ч; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч.
Схема 79
422 ТХ63736
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 79: (a) Na, EtOH, 50°С, 3 ч, 35%; (b) HCO2Et, Na, EtOH,
комнатная температура, 16 ч, 92%; (с) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 16 ч, 30%; (d) NaOMe, ТГФ, МеОН,
50°С, 16 ч; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 12%.
Схема 80
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 80: (a) PhB(OH)2, PPhh,, K3PO4, Pd(OAc)2, ДМФА, DME,
90°С, 16 ч, 67%; (b) HCO2Et, NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч; (с) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C,
16 ч; (d) NaOMe, ТГФ, МеОН, 50°С, 16 ч; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 69%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 81: (a) EtONa, EtOH, комнатная температура, 16 ч; (b) HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч, 84%; (с) HCO2Et, NaOEt, EtOH, бензол, комнатная температура, 16 ч, 96%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, 50°C, 2 ч, затем комнатная температура, 16 ч; (е) NaOEt, EtOH, МеОН, комнатная температура, 16 ч; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 2 ч, 48%.
Схема 82
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 82: (a) MgBr2-Et2O, DIPEA, DCM, затем BzCl, комнатная температура, 16 ч, 27%; (b) NHNH2-H2O, EtOH, 65°C, 1 ч, затем комнатная температура, 5 дней; (с) HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч; (d) HCO2Et, NaOMe, MeOH, комнатная температура, 16 ч; (е) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, комнатная температура, 16 ч, 34%; (f) NaOMe, МеОН, ТГФ, комнатная температура, 16 ч; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч;
(ii) пиридин, 60°С, 3 ч, 43%.
ТХ63850
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 83: (a) Ac2O, NaOAc, комнатная температура, 3 дня, 31%.
Схема 84
ТХ63836
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 84: (а) этилхлорформиат, NaHCO3, комнатная температура, 16 ч, 76%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 85: (a) MgBr2-Et2O, DIPEA, DCM, затем хлорид гидрохлорид 2-пиридинкарбоновой кислоты, комнатная температура, 16 ч; (b) NHNH2-H2O, EtOH, комнатная температура, 16 ч, затем 70°С, 1 ч; (с) HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч, 94%; (d) HCO2Et, NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч, 96%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, комнатная температура, 16 ч, 85%; (f) NaOMe, МеОН, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 99%; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 60°С, 3 ч, 16%.
Схема 86
ТХ63690 ТХ63349
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 86: (a) Accufluor, MeCN, 80°С, 2 ч, затем комнатная температура, 3 дня, 14%.
Схема 87
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 87: (a) MeOTf, TEA, DCM, комнатная температура, 16 ч, 444: 33%, 445: 10%; (b) HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч, 93%; (с) HCO2Et, NaOMe, Ме-ОН, комнатная температура, 16 ч, 72%; (d) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 2 ч, затем комнатная температура, 16 ч; (е) NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 31%.
Схема 88
16 ч, 85%; (d) NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч, 96%; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 39%.
Схема 89(a)
Реагенты и условия, относящиеся к схемам 89(a) и (b): (а) 2-метил-1,3-циклогександион, 1-гексен-3-он, Et3N, MeCN, комнатная температура 16 ч; (b) ^)-фенилаланин, CSA, MeCN, от комнатной температуры до 70°С, 48 ч, 70%; (с) NaBH4, EtOH, 0°C, 15 мин, затем АсОН, комнатная температура, 1 ч, 96%; (d) 3,4-дигидро-2Н-пиран, TsOH, CH2Cl2, от 0°С до комнатной температуры, 16 ч, 46%; (е) Li, NH3, -78°C, 45 мин, 68%; (f) п-толуолсульфонат пиридиния, EtOH, 70°C, 6 ч, затем комнатная температура, 16 ч; (g) этиленгликоль, TsOH, бензол, кипячение с обратным холодильником, 16 ч; (h) PDC, MgSO4, DCM, комнатная температура, 24 ч, 67%; (i) HCO2Et, бензол, затем NaOMe, МеОН, от 0°С до комнатной температуры, 16 ч, 97%; (j) MeNHNH2, EtOH, 50°C, 16 ч, 78%; (k) HCl (водн.), МеОН, комнатная температура, 16 ч; (l) HCO2Et, NaOMe, MeOH, комнатная температура, 16 ч, 98%; (m) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 16 ч, 93%; (n) NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч, 83%; (о): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 30%.
Схема 90
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 90: (а) бензамидингидрохлорид, пиперидин, iPrOH, 85°С, 96 ч; (b) HCl (водн.), МеОН, ТГФ, комнатная температура, 16 ч; (с) HCO2Et, бензол, затем NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч; (d) M^OH-HCl, EtOH, H2O, 50°C, 16 ч; (е) NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч, 52%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16
ч, 79%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 91: (а) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, DCM, комнатная температура, 30 мин, 58%; (b) фенилбороновая кислота, Pd(PPh3)4, K3PO4, DME, 80°С, 16 ч, 41%; (с) HCl (водн.), МеОН, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 92%; (d) HCO2Et, бензол, затем NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч; (е) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°С, 16 ч; (f) NaOMe, MeOH, комнатная температура, 16 ч; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 16 ч, 30%.
Схема 92
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 92: (a) N2H4-HCl, TEA, АсОН, диоксан, затем 276, 70°С, 3 ч, 96%; (b) NaH, ДМФА, затем iPrI, 16 ч, 79%; (с) HCl (водн.), ТГФ, комнатная температура, 48 ч, 97%;
(d) HCO2Et, ТТФ, затем NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч, 98%; (e) NH2OH-HCl, EtOH, H2O,
50°С, 3 ч, 100%; (f) NaOMe, МеОН, ТГФ, 50°С, 3 ч, 72%; (g): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1,5 ч; (ii) пиридин, 60°С, 4 ч; 69%.
Схема 93
vH /\н
ТХ63465 ТХ63834
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 93: (а) H2O2 (водн.), CH3CN, комнатная температура, 16 ч,
85%.
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 95: (а) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, DCM, 0°С, 0,5 ч, 485: 55%, 486: 14%; (b) HCO2Et, бензол, затем NaOMe, MeOH, комнатная температура, 16 ч, 78%; (с) NH2OH-HCl, EtOH, H2O, 50°С, 2 ч, затем комнатная температура, 16 ч; (d) NaOMe, MeOH, ТГФ, комнатная температура, 16 ч, 81%; (е): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, 0°С, 1,0 ч; (ii) пиридин,
50°С, 2 ч, 27%.
Схема 96
4S4 ТХ63900
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 96: (a) NaOEt, EtOH, 80°C, 48 ч, 92%; (b) HCl (водн.), EtOH, комнатная температура, 16 ч, 99%; (с) HCO2Et, бензол, затем NaOEt, EtOH, комнатная температура, 16 ч; (d) NH2OH-HCI, EtOH, 50°C, 2 ч, затем комнатная температура, 16 ч, 88%; (е) NaOEt, EtOH, комнатная температура, 72 ч, 96%; (f): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 1 ч; (ii) пиридин, 50°С, 2 ч, 31%.
Схема 97
Реагенты и условия, относящиеся к схеме 97: (а): (i) диметилкарбонат, NaH, ТГФ, 80°С, 16 ч; (ii) формамидинацетат, пиперидин, iPrOH, 80°С, 48 ч, 16%; (b) POCI3, ДМФА, DIPEA, 90°С, 2 ч, 86%; (с) NaOMe, MeOH, 60°С, 16 ч, 88%; (d) HCl, МеОН, комнатная температура, 16 ч, 99%; (е) HCO2Et, NaOMe, бензол, МеОН, комнатная температура, 48 ч, 82%; (f) NH2OH-HO, EtOH, 50°С, 16 ч,- 95%; (g) NaOMe, МеОН, комнатная температура, 16 ч, 88%; (h): (i) 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, ДМФА, от 0°С до комнатной температуры, 2 ч; (ii) пиридин, 50°С, 2 ч, 30%.
Получение и охарактеризация синтетических производных AIM. Соединение 2.
Этилвинилкетон (8,0 г, 95 ммоль) растворяли в ТГФ (75 мл) и добавляли соединение 1 (10 г, 79 ммоль) и триэтиламин (8,37 г, 82 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10-20% EtOAc в гексане), получая соединение 2 (13,5 г, 81%) в виде масла, m/z: 211 [М+Н]+.
Соединение 3.
Соединение 2 (13,5 г, 64,2 ммоль) растворяли в ДМФА (600 мл), добавляли ^)-фенилаланин (10,63 г, 64 ммоль) и D-камфорсульфокислоту (735 г, 32 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней, затем выдерживали при 70°С в течение 1 дня. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали эфиром, затем сушили над Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 3 (5,51 г, 45%) в виде масла, m/z: 193 [М+Н]+.
Соединение 4.
Раствор NaBH4 (0,296 г, 7,8 ммоль) в этаноле (40 мл) добавляли к 0°С раствору соединения 3 (5,51 г, 28,6 ммоль) в этаноле (100 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили уксусной кислотой (2,9 мл). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 5 мин, затем концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (си-ликагель, 20% EtOAc в гексане), получая соединение 4 (5,0 г, 90%) в виде масла, m/z: 195 [М+Н]+.
Соединение 5.
Соединение 4 (3,05 г, 15,6 ммоль) растворяли в CH2Cl2, затем добавляли изо-P^EtN и MOMCl. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли EtOAc, промывали 0,1н. HCl и солевым раствором, затем сушили над Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 5 (3,35 г, 90%) в виде бледно-желтой жидкости, m/z: 29 [М+Н]+.
Соединение 6.
Раствор соединения 5 (3,0 г, 12,6 ммоль) и трет-BuOH (965 мг, 13 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли к -78°С раствору литиевой проволоки (0,44 г, 64 ммоль) в жидком NH3 (50 мл). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч и охлаждали до -78°С. Добавляли раствор метилйо-дида (9,5 г, 67 ммоль) в ТГФ (25 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и гасили водой (2 мл), затем медленно нагревали до комнатной температуры. Смесь экстрагировали эфиром, затем промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-15% EtOAc в гексане), получая соединение 6 (0,90
г, 28%) в виде масла, m/z: 255 [М+Н]+.
Соединение 7.
Смесь соединения 6 (0,90 г, 3,5 ммоль), этиленгликоля и камфорсульфокислоты в циклогексане кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч с азеотропным удалением воды. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, промывали насыщенным раствором NaHCO3 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 20% EtOAc в гексане), получая соединение 7 (С, 59 г, 66%) в виде масла, m/z: 255 [М+Н]+.
Соединение 8.
Соединение 7 (190 мг, 0,75 ммоль) растворяли в CH2Cl2 и добавляли дихромат пиридиния и MgSO4. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали через целит, элюировали EtOAc/CH2Cl2 (1/3) и концентрировали, получая соединение 8 (180 мг, 95%) в виде твердого остатка, m/z: 253 [М+Н]+.
Соединение 9.
Соединение 8 (120 мг, 0,48 ммоль) растворяли в этилформиате и охлаждали до 0°С, затем добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, разбавляли трет-BuOMe и 1н. HCl и экстрагировали EtOAc, затем промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 9 (120 мг, 90%) в виде твердого остатка, m/z: 281 [М+Н]+.
Соединения 10 и 11.
Смесь соединения 9 (120 мг, 0,43 ммоль) и метилгидразина (35 мг, 0,7 ммоль) в этаноле (15 мл) выдерживали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток фильтровали через тонкий слой силикагеля (элюировали EtOAc) и концентрировали, получая соединения 10 и 11 (125 мг, количественный) в виде масла, m/z: 291 [М+Н]+.
Соединения 12 и 13.
Смесь соединений 10 и 11 (0,40 г, 1,4 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NaHCO3 и экстрагировали эфиром, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищен
ный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 15% EtOAc в гексане), получая соединения 12 и 13 (0,20 г, 59%) в виде твердого остатка, m/z: 247 [М+Н]+. Соединения 14 и 15.
Раствор соединений 12 и 13 (0,20 г, 0,81 ммоль) в ТГФ добавляли к -78°С раствору LDA (2,0 экв.) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 45 мин, затем добавляли раствор TsCN (1,5 экв.) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительных 45 мин, затем гасили 1н. HCl (водн.) и нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь экстрагировали эфиром, затем промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-25% EtOAc в гексане), получая соединения 14 и 15 (170 мг, 77%) в виде твердого остатка, m/z: 272 [М+Н]+.
Соединения ТХ63341 и ТХ63342.
Смесь соединений 14 и 15 (170 мг, 0,63 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и раствор охлаждали до 0°С. Добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли трет-BuOMe и промывали водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63342 (39 мг, 23%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, d6-ДМСО) 5 8,44 (с, 1Н), 7,39 (с, 1Н), 3,78 (с, 3Н), 2,69 (дд, 1Н, J=5,6, 15,7 Гц), 2,46 (ддд, 1Н, J=6,9, 11,6, 15,9 Гц), 2,16 (д, 1Н, J=11,6 Гц), 1,82 (м, 2Н), 1,40 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,13 (с, 3Н); m/z: 270 [М+Н]+ и ТХ63341 (15 мг, 9%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,30 (с, 1Н), 7,31 (с, 1Н), 4,06 (с, 3Н), 2,75 (дд, 1Н, J=4,8, 15,7 Гц), 2,53 (ддд, 1H, J=6,0, 12,3, 15,6 Гц), 2,27 (д, 1Н, J=11,9 Гц), 1,95 (дд, 1H, J=5,6, 13,3 Гц), 1,77 (м, 1Н), 1,53 (с, 3Н), 1,31 (с, 6Н); m/z: 270 [М+Н]+.
Соединение 17.
Соединение 16 (10 г, 56 ммоль) растворяли в этаноле, охлаждали до 0°С и добавляли раствор NaBH4 в этаноле. Смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и гасили уксусной кислотой. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток фильтровали через тонкий слой силикагеля (элюировали 30% EtOAc в гексане) и концентрировали, получая соединение 17 (9,3 г, 92%) в виде вязкой жидкости.
Соединение 18.
Соединение 17 (9,3 г, 52 ммоль) растворяли в CH2Cl2, затем добавляли изо-P^EtN и MOMCl. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли EtOAc, промывали 0,1н. HCl и солевым раствором, затем сушили над Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 30% EtOAc в гек-сане), получая соединение 18 (9,0 г, 78%) в виде бледно-желтой жидкости, m/z: 225 [М+Н]+.
Соединение 19.
Соединение 18 (3,5 г, 16 ммоль) растворяли в трет-BuOH и добавляли раствор Ю-трет-Bu в ТГФ. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, охлаждали до 10°С и добавляли йодметан. Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 30 мин и гасили водой. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над Na2SO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10% EtOAc в гексане), получая соединение 19 (1,7 г, 43%) в виде бледно-желтой жидкости, m/z: 253 [М+Н]+.
Соединение 20.
Смесь соединения 19 (4,31 г, 17,1 ммоль), этиленгликоля и гидрата п-толуолсульфокислоты в толуоле кипятили с обратным холодильником в течение ночи с азеотропным удалением воды. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc, промывали насыщенным раствором NaHCO3 и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 20 (4,26 г, 99%) в виде твердого остатка, m/z: 253 [М+Н]+.
Соединение 21.
Соединение 20 (4,65 г, 18,4 ммоль) растворяли в EtOH в атмосфере N2 и добавляли 10% Pd/C. Колбу тщательно продували Н2 и перемешивали в течение 4 дней при комнатной температуре, добавляя через 3 дня дополнительную порцию 10% Pd/C. Реакционную смесь фильтровали через целит, элюировали метанолом и концентрировали, получая соединение 21 (4,63 г, 99%) в виде твердого остатка, m/z: 255 [М+Н]+.
Соединение 22.
Соединение 21 (58 мг, 0,28 ммоль) растворяли в CH2Cl2, затем добавляли изо-P^EtN и MOMCl. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали насыщенным раствором NaHCO3 и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 22 (72 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 255 [М+Н]+.
Соединение 23.
Раствор соединения 22 (70 мг, 0,28 ммоль) в ТГФ добавляли к -78°С раствору LDA (3,5 экв.) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем добавляли раствор TsCN (1,3 экв.) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительных 30 мин, затем гасили насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 1.5% EtOAc в гексане), получая соединение 23 (51 мг, 66%) в виде белого твердого остатка, m/z: 280 [М+Н]+.
Соединение ТХ63364.
Соединение 23 (48 мг, 0,17 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,6 экв.) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 3 ч, добавляя через 2 ч дополнительную порцию 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (0,1 экв.). Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 4 ч, затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли EtOAc, промывали 1н. HCl (водн.), насыщенным раствором NaHCO3 и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 15% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63364 (41 мг, 86%) в виде белого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 7,94 (с, 1Н), 4,78 (д, 1Н, J=6,8 Гц), 4,65 (д, 1Н, J=6,8 Гц), 3,44 (с, 3Н), 3,28 (дд, 1Н, J=4,3, 11,4 Гц), 2,00 (м, 1Н), 1,92 (м, 1Н), 1,59 (м, 3Н), 1,49 (м, 1Н), 1,36 (м, 1Н), 1,24 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,13 (с, 3Н); m/z: 278 [М+Н]+.
Соединение ТХ63363.
Соединение ТХ63364 (28 мг, 0,10 ммоль) растворяли в ТГФ и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре и гасили насыщенным раствором NaHCO3. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток. очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гекса-не), получая соединение ТХ63363 (16 мг, 68%) в виде белого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,06 (с, 1Н), 8,52 (с, 1Н), 3,45 (дд, 1Н, J=4,3, 11,6 Гц), 1,92 (м, 1Н), 1,86 (м, 1Н), 1,61 (м, 3Н), 1,44 (м, 2Н), 1,23 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н); m/z: 234 [М+Н]+.
Соединение 25.
Соединение 21 (2,56 г, 10,1 ммоль) растворяли в CH2Cl2 и добавляли в течение 10 мин дихромат пи-ридиния. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем выдерживали при 45°С до исчезновения исходных веществ, как определено тонкослойной хроматографией. Реакционную смесь фильтровали через целит, элюировали CH2Cl2 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 25 (2,36 г, 93%) в виде твердого остатка, m/z: 253 [М+Н]+.
Соединение 26.
Соединение 25 (2,9 5 г, 11,7 ммоль) растворяли в этилформиате и охлаждали до 0°С, затем добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли водой, и рН доводили до 7 уксусной кислотой. Смесь экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 26 (3,27 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 281 [М+Н]+.
Соединение 27.
Смесь 26 (1,50 г, 5,35 ммоль) и метилгидразина (0,37 г, 8,03 ммоль) в этаноле (100 мл) выдерживали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, EtOAc), получая соединение 27 (1,50 г, 97%) в виде масла, m/z: 291
[М+Н]+.
Соединение 28.
Соединение 27 (1,50 г, 5,17 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NaHCO3 и экстрагировали эфиром, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 28 (1,10 г, 86%) в виде твердого остатка, m/z: 247 [М+Н]+.
Соединение 29.
Раствор соединения 28 (1,10 г, 4,47 ммоль) в ТГФ добавляли к -78°С раствору LDA (1,6 экв.) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 45 мин, затем добавляли раствор TsCN (1,2 экв.) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительных 45 мин, затем гасили 1н. HCl (водн.) и нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь экстрагировали эфиром, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силика-гель, 5-35% EtOAc в гексане), получая соединение 29 (0,53 г, 44%) в виде твердого остатка, m/z: 272
[М+Н]+.
Соединения ТХ63432 и ТХ63445.
Соединение 29 (530 мг, 1,95 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 1 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли водой, экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-30% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63432 (155 мг, 29%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, d6-ДМСО) 5 8,44 (с, 1Н), 7,39 (с, 1Н), 3,78 (с, 3Н), 2,69 (дд, 1Н, J=5, 6, 15,7 Гц), 2,46 (ддд, 1Н, J=6,9, 11,6, 15,9 Гц), 2,16 (д, 1Н, J=11,6 Гц), 1,82 (м, 2Н), 1,40 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,13 (с, 3Н); m/z: 270 [М+Н]+ и ТХ63445 (28 мг, 4%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,43 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 2,65 (д, 1Н, J=6,2, 16,1 Гц), 2,44 (ддд, 1Н, J=7,0, 11,8, 16,3 Гц), 2,15 (дд, 1Н, J=1,6, 12,1 Гц), 1,98 (дд, 1Н, J=7,1, 13,5 Гц), 1,87 (кв.д, 1H, J=6,2, 12,0 Гц), 1,49 (с, 3Н), 1,30 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); m/z: 348, 350 (1:1) [М+Н]+.
Соединение 30.
Раствор гидрохлорида циклогексилгидразина (0,245 г, 1,5 экв.) и триэтиламина (165 мг, 1,5 экв.) в EtOH (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Медленно добавляли раствор соединения 26 (0,3 г, 1,07 ммоль) в EtOH (5 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем реакционную смесь выдерживали при 60°С в течение 16 ч и затем концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (5-35% EtOAc в гексане), получая соединение 30 (0,14 г, 36%) в виде липкого твердого остатка; m/z: 359 [М+Н]+.
Соединение 31.
Раствор соединения 30 (0,14 г, 0,39 ммоль) в МеОН обрабатывали 3н. HCl (водн.) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь гасили эфиром и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.). Органический слой отделяли и сушили над MgSO4, затем фильтровали через короткую колонку (силикагель, 15% EtOAc в гексане), получая соединение 31 (0,12 г, 98%) в виде твердого остатка, m/z: 315 [М+Н]+.
Соединение 32.
Раствор диизопропиламида лития (LDA) получали добавлением H-BuLi (1,6 М в гексане) к диизо-пропиламину в ТГФ при 0°С, перемешиванием в течение 30 мин и затем охлаждением реакции до -78°С. Добавляли по каплям раствор соединения 31 (0,12 г, 0,39 ммоль) в ТГФ к раствору LDA. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 45 мин и затем добавляли раствор п-толуолсульфонилцианида в ТГФ. После перемешивания в течение 45 мин добавляли 1н. HCl (водн.). Реакционную смесь экстрагировали эфиром, и объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO4, фильтровали и упаривали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силика-гель, 5-25% EtOAc в гексане), получая соединение 32 (60 мг, 46%) в виде твердого остатка; m/z: 340
[М+Н]+.
Соединение ТХ63444.
1,3-Дибром-5,5-диметилгидантоин добавляли к раствору соединения 32 (60 мг, 0,17 ммоль) в ДМФА при 0°С. После перемешивания в течение 2 ч добавляли пиридин и реакционную смесь выдерживали при 55°С в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли МТВЕ, и смесь промывали водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63444 (35 мг, 59%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,53 (с, 1Н), 7,13 (с, 1Н), 4,04 (тт, 1Н, J=3,6, 11,7 Гц), 2,79 (дд, 1Н, J=5,2, 16,2 Гц), 2,56 (ддд, 1Н, J=6,9, 11,8, 15,9 Гц), 2,21 (дд, 1Н, J=2,4, 11,5 Гц), 2,15 (м, 2Н), 1,88 (м, 4Н), 1,76 (м, 1Н), 1,66 (м, 2Н), 1,50 (с, 3Н), 1,44 (м, 2Н), 1,29 (с, 3Н), 1,28 (м, 1Н), 1,24 (с, 3Н); m/z: 338 [М+Н]+.
Соединения 33 и 34.
трет-Бутилгидразингидрохлорид (0,125 г, 1,0 ммоль) растворяли в этаноле (25 мл). Добавляли три-этиламин (0,18 мл, 1,3 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение приблизительно 30 мин. Добавляли соединение 26 (0,203 г, 0,72 ммоль) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч и затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом (50 мл) и промывали водой (20 мл) и солевым раствором (10 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая два продукта: соединение 33 (81 мг, 35%, менее полярное) и соединение 34 (91 мг, 36%, более полярное) в виде твердых веществ. Соединение 33: m/z: 333 [М+Н]+. Соединение 34: m/z: 347 [М+Н]+.
Соединение 35.
Соединение 33 (81 мг, 0,24 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 35 (70 мг, количественный) в виде твердого
остатка, m/z: 289 [М+Н]+.
Соединение 36.
Соединение 35 (70 мг, 0,24 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 36 (69 мг, 90%) в виде твердого остатка, m/z: 317 [М+Н]+.
Соединение 37.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 36 (69 мг, 0,218 ммоль). Добавляли 9/1 смесь этанол/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в эти-лацетате, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 37 (70 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 314 [М+Н]+.
Соединение 38.
Соединение 37 (70 мг, 0,224 ммоль) растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4 (водн.) и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 38 (41 мг, 59%) в виде твердого остатка, m/z: 314 [М+Н]+.
Соединение ТХ63450.
Соединение 38 (41 мг, 0,13 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор дибромдиметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63450 (23 мг, 56%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,58 (с, 1Н), 7,21 (с, 1Н), 2,79 (дд, 1Н, J=5,7, 15,7 Гц), 2,56 (ддд, 1Н, J=7,3, 11,5, 15,8 Гц), 2,21 (дд, 1Н, J=2,6, 11,4 Гц), 1,87 (м, 2Н), 1,56 (с, 9Н), 1,49 (с, 3Н), 1,29 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); m/z: 312 [М+Н]+.
Соединение 39.
Соединение 34 (91 мг, 0,26 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 39 (68 мг, 86%) в виде твердого остатка, m/z: 303 [М+Н]+.
Соединение 40.
Соединение 39 (68 мг, 0,22 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 40 (62 мг, 83%) в виде твердого остатка, m/z: 331 [М+Н]+.
Соединение 41.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 40 (62 мг, 0,19 ммоль). Добавляли смесь 9/1 этанол/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в эти-лацетате, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 41 (66 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 328 [М+Н]+.
Соединение 42.
Соединение 41 растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4, и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 42 (49 мг, 80%) в виде твердого
остатка, m/z: 328 [М+Н]+.
Соединение ТХ63451.
Соединение 42 растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63451 (33 мг, 68%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,39 (с, 1Н), 7,89 (с, 1Н), 3,28 (дд, 1Н, J=3,8, 16,6 Гц), 3,06 (дд, 1Н, J=12,2, 16,5 Гц), 2,58 (дд, 1Н, J=3,7, 12,1 Гц), 1,71 (с, 9Н), 1,44 (с, 3Н), 1,36 (с, 3Н), 1,32 (с, 3Н); m/z: 326
[М+Н]+.
Соединение 43.
Смесь 26 (300 мг, 1,07 ммоль) и (2,2,2-трифторэтил)гидразина (70% чистота, 270 мг, 2,4 ммоль) в этаноле (25 мл) выдерживали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-45% EtOAc в гексане), получая соединение 43 (270 мг, 70%) в виде твердого остатка, m/z: 359 [М+Н]+.
Соединение 44.
Соединение 43 (0,27 г, 0,75 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (2x25 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 44 (0,24 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 315 [М+Н]+.
Соединение 45.
Соединение 44 (0,24 г, 0,75 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 45 (0,25 г, 96%) в виде твердого остатка, m/z: 343 [М+Н]+.
Соединение 46.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 45 (0,25 г, 0,73 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 46 (0,23 г, 93%) в виде твердого остатка, m/z: 340 [М+Н]+.
Соединение 47.
Соединение 46 (0,23 г, 0,68 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТГФ и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного KH2PO4. Смесь экстрагировали этил-ацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 47 (0,12 г, 52%) в виде твердого остатка, m/z: 340 [М+Н]+.
Соединение ТХ63454.
Соединение 47 (0,12 г, 0,35 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-30% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63454 (65 мг, 54%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,47 (с, 1Н), 7,22 (с, 1Н), 4,65 (м, 2Н), 2,84 (дд, 1Н, J=5,7, 16,2 Гц), 2,59 (ддд, 1Н, J=7,0, 11,9, 16,1 Гц), 2,21 (дд, 1Н, J=2,1, 11,9 Гц), 1,90 (м, 2Н), 1,51 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,25 (с,
3Н); m/z: 338 [М+Н]+.
Соединения 48 и 49.
Этанол добавляли к смеси соединения 26 (204 мг, 0,73 ммоль), фенилгидразингидрохлорида (132 мг, 0,92 ммоль) и тригидрата ацетата натрия (140 мг, 1,08 ммоль) и постепенно нагревали до 65°С. Затем реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 48 (91 мг, 35%, менее полярное) и соединение 49 (135 мг, 51%, более полярное) в виде твердых веществ.
Соединение 48: 1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,62 (д, 2Н, J=8,5 Гц), 7,53 (с, 1Н), 7,41 (т, 2Н, J=7,6 Гц), 7,22 (т, 1Н, J=7,5 Гц), 3,98 (м, 4Н), 2,80 (дд, 1Н, J=5,7, 15,9 Гц), 2,59 (ддд, 1Н, J=6,5, 11,6, 15,8 Гц), 2,36 (м, 1Н), 1,99 (м, 2Н), 1,77 (м, 4Н), 1,37 (с, 3Н), 1,09 (3Н), С,98 (с, 3Н); m/z: 353 [М+Н]+.
Соединение 49: ^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,06 (с, 1Н), 7,56 (м, 4Н), 7,46 (м, 1Н), 3,93 (м, 4Н), 2,98 (дд, 1Н, J=12,2, 16,7 Гц), 2,86 (дд, 1Н, J=4,0, 16,7 Гц), 2,32 (дд, 1Н, J=4,0, 12,2 Гц), 2,01 (м, 1Н), 1,91 (м, 2Н), 1,68 (м, 1Н), 1,28 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 0,90 (с, 3Н); m/z: 367 [М+Н]+.
Соединение 50.
Соединение 48 (86 мг, 0,24 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 50 (69 мг, 92%) в виде твердого остатка, m/z: 309 [М+Н]+.
Соединение 51.
Соединение 50 (69 мг, 0,22 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 51 (73 мг, 97%) в виде твердого остатка, m/z: 337 [М+Н]+.
Соединение 52.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 51 (73 мг, 0,22 ммоль).
Добавляли смесь 9/1 этанол/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 52 (66 мг, 91%) в виде твердого остатка, m/z: 334 [М+Н]+.
Соединение 53.
Соединение 52 (66 мг, 0,20 ммоль) растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4, и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 53 (53 мг, 80%) в виде твердого остатка, m/z: 334 [М+Н]+.
Соединение ТХ63455.
Соединение 53 (53 мг, 0,16 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали повторяющейся колоночной хроматографией (силика-гель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63455 (1,8 мг, 3%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,63 (с, 1Н), 7,66 (м, 3Н), 7,48 (м, 3Н), 2,92 (дд, 1Н, J=4,8, 15,8 Гц), 2,67 (ддд, 1Н, J=6,5, 11,8, 15,8 Гц), 2,26 (дд, 1Н, J=2,4, 11,4 Гц), 1,97 (м, 2Н), 1,58 (с, 3Н), 1,33 (с, 3Н), 1,28 (с,
3Н); m/z: 332 [М+Н]+.
Соединение 54.
Соединение 49 (0,120 г, 0,33 ммоль) растворяли в метаноле (20 мл) и добавляли 1н. HCl (водн., 2 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн., 15 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 54 (97,3 мг, 92%) в виде твердого остатка.
Соединение 55.
Соединение 54 (0,0973 г, 0,30 ммоль) растворяли в этилформиате (5 мл) и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН, 0,4 мл, 7,1 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 55 (100,7 мг, 95%) в виде твердого остатка,
m/z: 351 [М+Н]+.
Соединение 56.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн., 3,2 мл, 0,32 мл) добавляли к соединению 55 (100,7 мг, 0,29 ммоль). Добавляли смесь 9/1 этанол/вода (2 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 56 (75,4 мг, 76%) в виде твердого остатка, m/z: 348 [М+Н]+.
Соединение 57.
Соединение 56 (75,4 мг, 0,22 ммоль) растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ (6 мл) и добавляли меток-сид натрия (30 вес.% раствор в МеОН, 0,24 мл, 4,3 мл) и реакционную смесь перемешивали при 55°С в
течение приблизительно 5,5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4 и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом (50 мл) и промывали солевым раствором (10 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 57 (59,5 мг, 79%) в виде твердого остатка, m/z: 348 [М+Н]+. Соединение ТХ63456.
Соединение 57 (59,5 мг, 0,17 ммоль) растворяли в сухом ДМФА (1 мл) и добавляли охлажденный до 0°С раствор дибромдиметилгидантоина (31 мг, 0,109 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ, как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин (0,13 мл, 1,6 ммоль) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (60 мл) и промывали солевым раствором (10 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая твердое вещество (29,9 мг). Очищенный остаток очищали снова колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане) до твердого остатка. Твердый остаток растирали с Et2O/EtOAc, получая соединение ТХ63456 (14,3 мг, 24%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,44 (с, 1Н), 8,15 (с, 1Н), 7,48-7,68 (м, 5Н), 3,18 (дд, 1Н, J=8,0, 16,0 Гц), 3,02 (дд, 1Н, J=4,0, 16,0 Гц), 2,62 (дд, 1Н, J=4,0, 12,0 Гц), 1,56 (с, 3Н), 1,34 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н); m/z: 346
[М+Н]+.
Соединение 58.
Соединение 26 (1,200 г, 4,28 ммоль) растворяли в этаноле (100 мл). Добавляли безводный гидразин (0,36 мл, 11,5 ммоль) в этаноле (5 мл), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растирали со смесью эфир/этилацетат, получая соединение 58 (0,965 г, 82%) в виде твердого остатка, m/z: 277 [М+Н]+.
Соединение 59.
Соединение 58 (280 мг, 1,01 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом и промывали, насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 59 (245,2 мг, количественный) в виде твердого
остатка, m/z: 233 [М+Н]+.
Соединение 60.
Соединение 59 (239 мг, 1,03 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 63 (264 мг, 99%): m/z: 261 [М+Н]+.
Соединение 61.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 60 (260 мг, 1,00 ммоль). Добавляли смесь 9/1 этанол/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в эти-лацетате, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая, соединение 61 (248,9 мг, 97%): m/z: 253
[М+Н]+.
Соединение 62.
Соединение 61 (245 мг, 0,95 ммоль) растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4, и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 62 (204 мг, 83%) в виде твердого остатка, m/z: 258 [М+Н]+.
Соединение ТХ63467.
Смесь соединения 62 (51 мг, 0,198 ммоль) и DDQ (59 мг, 0,26 ммоль) растворяли в бензоле (11 мл). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 4,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией три раза (силикагель, 1,5% МеОН в CH2Cl2, 2% МеОН в CH2Cl2 и EtOAc соответственно), получая твердый остаток. Очищенный остаток растворяли в этилацетате (40 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение TX63467 (22 мг, 43%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 12,59 (с, 1Н), 8,51 (с, 1Н), 7,44 (с, 1Н), 2,68-2,77 (м, 1Н), 2,45-2,58 (м, 1Н), 2,15-2,22 (м, 1Н), 1,78-1,92 (м, 2Н), 1,41 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,13 (с, 3Н); m/z: 256 [М+Н]+.
Соединение ТХ63462.
Соединение ТХ63467 (12 мг, 0,047 ммоль) растворяли в смеси насыщенного NaHCO3 (водн., 0,5 мл) и ТГФ (1,5 мл), и смесь охлаждали до 0°С. Добавляли метилхлорформиат (1 капля, избыток) и реакционную смесь перемешивали в течение 40 мин при 0°С, затем добавляли дополнительный метилхлорформи-ат (2 капли, избыток) и реакционную смесь перемешивали в течение 20 мин. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (40 мл) и промывали NaCl (водн., 10 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63462 (2,3 мг, 16%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,57 (с, 1Н), 7,89 (с, 1Н), 4,10 (с, 3Н), 2,90 (дд, 1Н, J=8,0, 16,0 Гц), 2,582,68 (м, 1Н), 2,19 (дд, 1Н, J=4,0, 12,0 Гц), 1,85-2,02 (м, 2Н), 1,56 (с, 3Н), 1,32 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 314
[М+Н]+.
Соединение ТХ63463.
Соединение ТХ63467 (12 мг, 0,047 ммоль) растворяли в смеси насыщенного NaHCO3 (водн., 0,5 мл) и ТГФ (1,5 мл), и смесь охлаждали до 0°С. Добавляли ацетилхлорид (1 капля, избыток) и реакционную смесь перемешивали в течение 40 мин при 0°С. Затем добавляли дополнительный ацетилхлорид (2 капли, избыток) и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 20 мин. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (40 мл) и промывали NaCl (водн., 10 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63463 (3,3 мг, 24%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,49 (с, 1Н), 7,97 (с, 1Н), 2,90 (дд, 1Н, J=4,0, 12,0 Гц), 2,69 (с, 3Н), 2,572,68 (м, 1Н), 2,19 (дд, 1Н, J=4,0, 12,0 Гц), 1,85-2,02 (м, 2Н), 1,54 (с, 3Н), 1,32 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 298
[М+Н]+.
Соединение 63.
Смесь соединения 26 (300 мг, 1,07 ммоль) и 2-гидразинилэтанола (130 мг, 1,7 ммоль) в этаноле (5 мл) выдерживали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 1% МеОН в EtOAc), получая соединение 63 (320 мг,
93%) в виде масла, m/z: 321 [М+Н]+.
Соединение 64.
Соединение 63 (0,32 г, 1,0 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (2x 25 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 64 (0,17 г, 62%) в виде твердого остатка, m/z: 277 [М+Н]+.
Соединение 65.
Соединение 64 (0,17 г, 0,62 ммоль) растворяли в этилформиате, и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли KH2PO4 (водн.), экстрагировали этилацетатом (2x25 мл) и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 65 (0,17 г, 91%) в виде твердого остатка, m/z: 305 [М+Н]+.
Соединение 66.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединение 65 (0,17 г, 0,56 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой, экстрагировали этилацетатом (2x 25 мл) и промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 66 (0,18 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 302 [М+Н]+.
Соединение 67.
Соединение 66 (0,18 г, 0,56 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного KH2PO4. Смесь экстрагировали этил-ацетатом (2x 25 мл) и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 67 (0,18 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 302 [М+Н]+.
Соединение ТХ63464.
Соединение 67 (0,18 г, 0,56 ммоль) растворяли в диоксане. Добавляли бромидпербромид пириди-ния, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли пиридин и затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 0 до 2% МеОН в EtOAc), получая соединение ТХ63464 (10 мг, 5%) в виде грязно-белого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,45 (с, 1Н), 7,17 (с, 1Н), 4,21 (м, 2Н), 4,01 (д, 1Н, J=5,1 Гц), 4,00 (д, 1Н, J=4,6 Гц), 2,81 (дд, 1Н, J=5,5, 16,1 Гц), 2,57 (ддд, 1Н, J=7,0, 11,8, 16,0 Гц), 2,21 (дд, 1Н, J=2,1, 11,7 Гц), 1,91 (м, 2Н), 1,51 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); m/z: 300 [М+Н]+.
Соединение 68.
Соединение 27 (2,6 г, 9,0 ммоль) растворяли в CH2Cl2 и добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (1,7 г, 5,9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь промывали 1н. Na2CO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 35% EtOAc в гексане), получая соединение 68 (1,8 г, 54%) в виде липкого твердого остатка, m/z: 369, 371 (1:1) [М+Н]+.
Соединение 69.
Смесь соединения 68 (1,3 г, 3,5 ммоль), фенилбороновой кислоты (645 мг, 5,3 ммоль), Ph3P (190 мг, 0,73 ммоль), K3PO4 (2,24 г, 10,6 ммоль) и DME (15 мл) барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (80 мг, 0,35 ммоль), и барботирование N2 продолжали в течение 10 мин. Реакционную смесь выдерживали при 85°С в течение 9 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 30% EtOAc в гексане), получая соединение 69 (0,69 г, 53%) в виде грязно-белого твердого остатка, m/z: 367 [М+Н]+.
Соединение 70.
Соединение 69 (0,69 г, 1,9 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (2x25 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 70 (0,64 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 323 [М+Н]+.
Соединение 71.
Соединение 70 (0,64 г, 1,9 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли KH2PO4 (водн.), экстрагировали этилацетатом (2x 25 мл) и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 71 (0,61 г, 92%) в виде твердого остатка, m/z: 351 [М+Н]+.
Соединение 72.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 71 (0,61 г, 1,7 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 72 (0,58 г, 96%) в виде твердого остатка, m/z: 348 [М+Н]+.
Соединение 73.
Соединение 72 (0,58 г, 1,7 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного KH2PO4. Смесь экстрагировали этил-ацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 73 (435 мг, 75%) в виде твердого остатка, m/z: 348 [М+Н]+.
Соединение ТХ63465.
Соединение 73 (435 мг, 1,25 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-30% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63465 (0,3 г, 69%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, d6-ДМСО) 5 8,51 (с, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,44 (с, 3Н), 3,76 (с, 3Н), 2,55 (м 2Н), 2,23 (д, 1Н, J=11,9 Гц), 1,89 (дд, 1Н, J=5,0, 12,6 Гц), 1,82 (м, 1Н), 1,46 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н); m/z: 346
[М+Н]+.
Общий способ А.
Соединение 68 (1,0 экв.) растворяли в DME (смотрите табл. 2 относительно количества). Добавляли PhB(OH)2 (смотрите табл. 2 относительно количества), Ph3P (0,2 экв.) и K3PO4 (3,0 экв.) и смесь барботи-ровали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (смотрите табл. 2 относительно количества), и смесь барботировали N2 в течение 10 мин. Затем смесь перемешивали при 85°С в течение 9 ч. Реакционную смесь фильтровали, концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией, получая соответствующие производные:
соединение 74а: 0,23 г, 78%: m/z: 401, 403 (3:1) [М+Н]+,
соединение 74b: 0,2 г, 68%: m/z: 401, 403 (3:1) [М+Н]+,
соединение 74с: 0,23 г, 78%: m/z: 401, 403 (3:1) [М+Н]+,
соединение 74d: 0,1051 г, 74%: m/z: 385 [М+Н]+, соединение 74е: 0,0992 г, 70%: m/z: 385 [М+Н]+,
соединение 74f: 0,13 г, 64%: m/z: 381 [М+Н]+, соединение 74q: 0,2 г, 69%: m/z: 397 [М+Н]+,
соединение 74h: 0,097 г, 67%: m/z: 381 [М+Н]+,
соединение 74i: 0,0872 г, 58%: m/z: 3 97 [М+Н]+, соединение 74j: 0,13 г, 70%: m/z: 381 [М+Н]+, соединение 74k: 0,14 г, 48%: m/z: 397 [М+Н]+, соединение 74l: 0,17 г, 71%: m/z: 385 [М+Н]+.
Общий способ В.
Соединение 74 (смотрите табл. 3 относительно количества) растворяли в метаноле (смотрите табл. 3 относительно количества) и добавляли HCl (водн., смотрите табл. 3 относительно количества). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соответствующие производные:
соединение 75а: 210 мг, количественный: m/z: 357, 359 (3:1) [М+Н]+,
соединение 75b: 180 мг, количественный: m/z: 357, 35 9 (3:1) [М+Н]+,
соединение 75с: 180 мг, количественный: m/z: 357, 359 (3:1) [М+Н]+,
соединение 75d: 80,3 мг, 87%: m/z: 341 [М+Н]+, соединение 75е: 79,7 мг, 83%: m/z: 341 [М+Н]+,
соединение 75f: 120 мг, количественный: m/z: 337 [М+Н]+, соединение 75g: 180 мг, количественный: m/z: 353 [М+Н]+, соединение 75h: 82,4 мг, 96%: m/z: 337 [М+Н]+, соединение 75i: 71,5 мг, 92%: m/z: 353 [М+Н]+, соединение 75j: 120 мг, количественный: m/z: 337 [М+Н]+, соединение 75k: 120 мг, 97%: m/z: 353 [М+Н]+, соединение 75l: 150 мг, количественный: m/z: 341 [М+Н]+.
Общий способ С.
Соединение 75 (смотрите табл. 4 относительно количества) растворяли в этилформиате (смотрите табл. 4 относительно количества) и добавляли 30% NaOMe в метаноле (смотрите табл. 4 относительно количества). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соответствующие производные:
соединение 76а: 220 мг, 97%: m/z: 385, 387 (3:1) [М+Н]+,
соединение 76b: 180 мг, 94%: m/z: 385, 387 (3:1) [М+Н]+,
соединение 76с: 180 мг, 94%: m/z: 385, 387 (3:1) [М+Н]+,
соединение 76d: 93 мг, количественный: m/z: 3 69 [М+Н]+,
соединение 76е: 77,8 мг, 91%: m/z: 369 [М+Н]+,
соединение 76f: 125 мг, 96%: m/z: 365 [М+Н]+, соединение 76g: 180 мг, 93%: m/z: 381 [М+Н]+,
соединение 76h: 90,2 мг, количественный: m/z: 365 [М+Н]+,
соединение 76i: 75,8 мг, 99,6%: m/z: 381 [М+Н]+, соединение 76j: 120 мг, 92%: m/z: 365 [М+Н]+, соединение 76k: 125 мг, 97%: m/z: 381 [М+Н]+, соединение 76l: 150 мг, 92%: m/z: 369 [М+Н]+.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн., смотрите табл. 5 относительно количества) добавляли к соединению 76 (смотрите табл. 5 относительно количества). Добавляли смесь 9/1 этанол/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной темпера
туры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соответствующие производные:
соединение 77а: 220 мг, количественный: m/z: 382, 384 (3:1) [М+Н]+,
соединение 77b: 180 мг, количественный: m/z: 382, 3 84 (3:1) [М+Н]+,
соединение 77с: 180 мг, количественный: m/z: 382, 384 (3:1) [М+Н]+,
соединение 77d: 84 мг, 92%: m/z: 366 [М+Н]+,
соединение 77е: 72,1 мг, 94%: m/z: 366 [М+Н]+,
соединение 77f: 125 мг, количественный: m/z: 362 [М+Н]+,
соединение 77g: 170 мг, 95%: m/z: 378 [М+Н]+,
соединение 77h: 84,0 мг, 94%: m/z: 362 [М+Н]+,
соединение 77i: 66,0 мг, 87%: m/z: 378 [М+Н]+,
соединение 77j: 125 мг, количественный: m/z: 362 [М+Н]+,
соединение 77k: 130 мг, количественный: m/z: 378 [М+Н]+,
соединение 77l: 150 мг, количественный: m/z: 366 [М+Н]+.
Общий способ Е.
Соединение 77 (смотрите табл. 6 относительно количества) растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (смотрите табл. 6 относительно количества), реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4, и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соответствующие производные:
соединение 78а: 220 мг, количественный: m/z: 382, 384 (3:1) [М+Н]+,
соединение 78b: 170 мг, 95%: m/z: 382, 384 (3:1) [М+Н]+,
соединение 78с: 180 мг, количественный: m/z: 382, 384 (3:1) [М+Н]+,
соединение 78d: 88 мг, количественный: m/z: 366 [М+Н]+,
соединение 78е: 93,4 мг, количественный: m/z: 366 [М+Н]+,
соединение 78f: 120 мг, 96%: m/z: 362 [М+Н]+,
соединение 78g: 170 мг, количественный: m/z: 378 [М+Н]+,
соединение 78h: 71,5 мг, 86%: m/z: 362 [М+Н]+,
соединение 78i: 72,0 мг, количественный: m/z: 378 [М+Н]+,
соединение 78j: 110 мг, 88%: m/z: 362 [М+Н]+,
соединение 78k: 130 мг, количественный: m/z: 378 [М+Н]+,
соединение 781: 150 мг, количественный: m/z: 366 [М+Н]+.
Общий способ F.
Соединение 78 (смотрите табл. 7 относительно количества) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С растзор дибромдиметилгидантоина (смотрите табл. 7 относительно количества) и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин (смотрите табл. 7 относительно количества) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соответствующие производные:
ТХ63485: 125 мг, 57%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, CDO3) 5 8,53 (с, 1Н), 7,20-7,48 (м, 4Н), 3,81 (с, 3Н), 2,68 (дд, 1Н, J=12,0, 4,0 Гц), 2,51-2,61 (м, 1Н), 2,24 (д, 1Н, J=8,0 Гц), 1,82-1,99 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 380, 382 (3:1) [М+Н]+;
ТХ63486: 89 мг, 53%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 8,53 (с, 1Н), 7,48 (д, 2Н, J=8,0 Гц), 7,28 (д, 2Н, J=8,0 Гц), 3,80 (с, 3Н), 2,66 (дд, 1Н, J=12,0, 4,0 Гц), 2,50-2,60 (м, 1Н), 2,24 (дд, 1Н, J=12,0, 2,0 Гц), 1,821,99 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н); m/z: 380, 382 (3:1) [М+Н]+;
ТХ63491: 120 мг, 67%: 1Н-ЯМР (500 МГц, CDCI3) 5 8,56 (с, 1Н), 7,55 (м, 1Н), 7,45 (м, 1Н), 7,45-7,25 (м, 2Н), 3,67 (с, 3Н), 2,60-2,39 (м, 2Н), 2,29-2,20 (м, 1Н), 1,91-1,85 (м, 2Н), 1,60 (с, 3Н), 1,35 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н); m/z: 380, 382 (3:1) [М+Н]+;
ТХ63506: 22,5 мг, 26%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 8,54 (с, 1Н), 7,45-7,52 (м, 1Н), 7,10-7,18 (м, 2Н), 7,04-7,08 (м, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 2,69 (дд, 1Н, J=12,0, 4,0 Гц), 2,52-2,62 (м, 1Н), 2,24 (д, 1Н, J= 8,0 Гц), 1,831,98 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,31 (С, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 364 [М+Н]+;
ТХ63507: 26,9 мг, 37%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 8,54 (с, 1Н), 7,16-7,28 (м, 2Ы), 7,28-7,30 (м, 2Н), 3,79 (с, 3Н), 2,66 (дд, 1Н, J=12,0, 4,0 Гц), 2,49-2,58 (м, 1Н), 2,24 (дд, 1Н, J=8,0, 2,0 Гц), 1,82-1,97 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 364 [М+Н]+;
ТХ63508: 40 мг, 34%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,52 (с, 1Н), 7,16-7,45 (м, 4Н), 7,06 (д, 2Н, J=8,0 Гц), 3,82 (с, 3Н), 3,74 (с, 3Н), 2,45-2,60 (м, 2Н), 2,22 (д, 1Н, J=8,0 Гц), 1,75-1,93 (м, 2Н), 1,45 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н); m/z: 360 [М+Н]+;
ТХ63509: 35 мг, 21%: 1Ы-ЯМР (500 МГц, CDCI3) 5 8,57 (с, 1Н), 7,45 (м, 1Н), 7,23-7,18 (м, 1Н), 7,087,03 (м, 2Н), 3,85 (шир.с, 3Н), 3,69 (с, 3Н), 2,58-2,52 (м, 1Н), 2,27 (м, 1Н), 1,89 (м, 2Н), 1,57 (с, 3Н), 1,30 (с,
3Н), 1,25 (с, 3Н); m/z: 376 [М+Н]+;
ТХ63512: 22,2 мг, 31%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 8,55 (с, 1Н), 7,38 (т, 1Н, J=4,0 Гц), 7,10-7,31 (м, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 2,68 (дд, 1Н, J=12,0, 4,0 Гц), 2,53-2,62 (м, 1Н), 2,44 (с, 3Н), 2,25 (дд, 1Н, J=8,0, 2,0 Гц), 1,82-1,96 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 360 [М+Н]+;
ТХ63513: 17,1 мг, 24%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 8,55 (с, 1Н), 7,43 (т, 1Н, J=12,0 Гц), 6,85-7,01 (м, 3Н), 3,87 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 2,70 (дд, 1Н, J=12,0, 4,0 Гц), 2,52-2,62 (м, 1Н), 2,25 (дд, 1Н, J=12,0, 2,0 Гц), 1,82-1,98 (м, 2Н), 1,56 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 376 [М+Н]+;
ТХ63514: 60 мг, 55%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,50 (с, 1Н), 7,29-7,38 (м, 4Н), 3,75 (с, 3Н), 2,472,62 (м, 2Н), 2,37 (с, 3Н), 2,23 (д, 1Н, J=12,0 Гц), 1,76-1,93 (м, 2Н), 1,45 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н); m/z: 381 [М+Н]+;
ТХ63515: 50 мг, 39%: 1Ы-ЯМР (400 МГц, ДМСО) 5 8,50 (с, 1Н), 7,38 (д, 2Н, J=8,0 Гц), 7,06 (д, 2Н, J=8,0 Гц), 3,82 (с, 3Н), 3,74 (с, 3Н), 2,45-2,60 (м, 2Н), 2,22 (д, 1Н, J=8,0 Гц), 1,75-1,93 (м, 2Н), 1,45 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н); m/z: 376 [М+Н]+;
ТХ63519: 75 мг, 50%: 1Ы-ЯМР (500 МГц, с^-ДМСО) 5 8,51 (с, 1Н), 7,56 (м, 1Н), 7,49 (м, 1Н), 7,437,34 (м, 2Н), 3,68 (с, 3Н), 2,45 (м, 1Н), 2,23 (м, 1Н), 1,84 (м, 2Н), 1,47 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н); m/z: 364 [М+Н]+.
Соединение 79а.
Смесь соединения 68 (270 мг, 0,73 ммоль), 3-пиридинилбороновой кислоты (1,5 экв.), Ph3P (0,2 экв.), K3PO4 (3,0 экв.) и DME барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (0,1 экв.), и барбо-тирование N2 продолжали в течение 10 мин. Реакционную смесь выдерживали при 85°С в течение 9 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-30% EtOAc в гексане), получая соединение 79а (70 мг, 26%) в виде твердого остатка, m/z: 368 [М+Н]+.
Соединение 79b.
Соединение 68 (290 мг, 0,79 ммоль) подвергали взаимодействию с 4-пиридинилбороновой кислотой, применяя тот же способ, что и для получения соединения 79а, получая соединение 79b (140 мг, 49%) в виде твердого остатка, m/z: 368 [М+Н]+.
Соединение 80а.
Соединение 79а (70 мг, 0,19 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. ЫО (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (2x25 мл) и промывали насыщенным раствором Na-EICO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 80а (60 мг, 97%) в виде твердого остатка, m/z: 324 [М+Н]+.
Соединение 80b.
Соединение 79b (140 мг, 0,38 ммоль) подвергали тому же способу, который применяли для получения соединения 80а, получая соединение 80b (130 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 324 [М+Н]+.
Соединение 81а.
Соединение 80а (60 мг, 0,19 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли KH2PO4 (водн.), экстрагировали этилацетатом (2x25 мл) и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 81а (70 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 352 [М+Н]+.
Соединение 81b.
Соединение 80b (130 мг, 0,38 ммоль) подвергали тому же способу, который применяли для получения соединения 81а, получая соединение 81b (135 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 352 [М+Н]+.
Соединение 82а.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 81а (70 мг, 0,19 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 82а (70 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 349 [М+Н]+.
Соединение 82b.
Соединение 81b (135 мг, 0,38 ммоль) подвергали тому же способу, который применяли для получения соединения 82а, получая соединение 82b (135 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 349 [М+Н]+.
Соединение 83а.
Соединение 82а (70 мг, 0,19 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% меток-сид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного Kt[2PO4. Смесь экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 83а (70 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 349 [М+Н]+.
Соединение 83b.
Соединение 82b (135 мг, 0,38 ммоль) подвергали тому же способу, который применяли для получения соединения 83а, получая соединение 83b (135 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 349 [М+Н]+.
Соединение ТХ63503.
Соединение 83а (65 мг, 0,19 ммоль) растворяли в сухом ДМФА, добавляли охлажденный до 0°С раствор Br2 и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-35% EtOAc в гексане с 0,5% Et3N), получая соединение ТХ63503 (20 мг, 31%) в виде грязно-белого твердого остатка.
1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,69 (дд, 1Н, J=1,5, 4,8 Гц), 8,64 (д, 1Н, J=1,4 Гц), 8,53 (с, 1Н), 7,69 (тд, 1Н, J=1,8, 7,9 Гц), 7,46 (дд, 1Н, J=4,9, 7,3 Гц), 3,83 (с, 3Н), 2,70 (дд, 1Н, J=4,8, 16,0 Гц), 2,58 (ддд, 1Н, J=6,8, 11,6, 15,9 Гц), 2,25 (дд, 1Н, J=1,9, 11,9 Гц), 1,92 (м, 2Н), 1,56 (с, 3Н), 1,31 (с 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z:
347 [М+Н]+.
Соединение ТХ63505.
Соединение 83b (135 мг, 0,38 ммоль) подвергали тому же способу, который применяли для получения соединения ТХ63503, получая соединение ТХ63505 (35 мг, 27%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, d^/ДМСО) 5 8,71 (д, 2Н, J=4,6 Гц), 8,51 (с, 1Н), 7,51 (д, 2Н, J=4,5 Гц), 3,85 (с, 3Н), 2,63 (м, 2Н), 2,24 (д, J=12,0 Гц, 1Н), 1,86 (м, 2Н), 1,46 (с, 3Н), 1,23 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н); m/z: 347 [М+Н]+.
Соединение 84.
Соединение 18 (1,04 г, 4,64 ммоль) растворяли в трет-ВЫЗЫ и добавляли к раствору KO-трет-Ви в трет-BuOEL Реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин при комнатной температуре и добавляли 1,4-дибромбутан. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 80 мин, затем нагревали до 45°С до исчезновения исходных веществ, как определено тонкослойной хроматографией. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10% EtOAc в гексане), получая соединение 84 (1,006 г, 78%) в виде масла, m/z: 279 [М+Н]+.
Соединение 85.
Соединение 84 (1,561 г, 5,61 ммоль) растворяли в EtOEI в атмосфере N2 и добавляли 20% Pd(OEI)2. Колбу Parr для встряхивания тщательно продували Н2 и доводили до 54 psi (до 31 кПа). Колбу встряхивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель от 6 до 50% EtOAc в гексане), получая соединение 85 (0,493 г, 31%) в виде масла.
1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 4,72 (д, 1Н, J=6,8 Гц), 4,59 (д, 1Н, J=6,8 Гц), 3,38 (с, 3Н), 3,11 (дд, 1Н, J=4,2, 11,6 Гц), 2,76 (дт, 1Н, J=5,9, 15,0 Гц), 2,44 (тд, 1Н, J=7,5, 13,0 Гц), 2,32 (тд, 1Н, J=3,4, 15,0 Гц), 2,22 (ддд, 1Н, J=2,9, 5,8, 13,8 Гц), 1,87 (м, 2Н), 1,79 (м, 1Н), 1,69 (м, 1Н), 1,50 (м, 8Н), 1,30 (м, 3Н), 1,12 (с, 3Н).
Соединение 86.
Смесь соединения 85 (460 мг, 1,64 ммоль), этиленгликоля и гидрата п-толуолсульфокислоты в толуоле кипятили с обратным холодильником в течение ночи с азеотропным удалением воды. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc, промывали насыщенным раствором NaE[CO3 и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 86 (4 97 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 263 (M-E[2O+1).
Соединение 87.
Соединение 86 (497 мг, 1,64 ммоль) растворяли в CE[2Cl2 и добавляли дихромат пиридиния в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем выдерживали при 45°С до исчезновения исходных веществ, как определено тонкослойной хроматографией. Реакционную смесь фильтровали через целит, элюировали CEI2Cl2 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 87 (359 мг, 73%) в виде твердого остатка, m/z: 279 [М+Н]+.
Соединение 88.
Соединение 87 (352 мг, 1,26 ммоль) растворяли в этилформиате и охлаждали до 0°С, затем добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли водой, и рН доводили до 7 уксусной кислотой. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 88 (384 мг, 99%) в виде твердого остатка, m/z: 307 [М+Н]+.
Соединение 89.
Смесь соединения 88 (227 мг, 0,74 ммоль) и метилгидразина (2,7 экв.) в этаноле (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем выдерживали при 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток растирали с эфиром/EtOAc, получая соединение 89 (176 мг, 75%) в виде твердого остатка, m/z: 317 [М+Н]+.
Соединение 90.
Соединение 89 (93 мг, 0,29 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 1н. ЫО (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc и промывали насыщенным раствором NaE[CO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 90 (83 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 273 [М+Н]+.
Соединение 91.
Соединение 90 (80 мг, 0,29 ммоль) растворяли в этилформиате и охлаждали до 0°С, затем добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли KH2PO4 (водн.), экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 91 (89 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 301 [М+Н]+.
Соединение 92.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 91 (87 мг, 0,29 ммоль). Добавляли смесь 9/1 этансл/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 92 (83 мг, 96%) в виде твердого остатка, m/z: 298 [М+Н]+.
Соединение 93.
Соединение 92 (77 мг, 0,26 ммоль) растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН), реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KT-[2PO4 (водн.) и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали.
Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 93 (81 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 298 [М+Н]+.
Соединение ТХ63487.
Соединение 93 (81 мг, 0,26 ммоль) растворяли в сухом ДМФА, добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ, как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым, раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63487 (29 мг, 38%) в виде твердого остатка.
1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,45 (с, 1Н), 7,07 (с, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 2,78 (дд, 1Н, J=4,8, 14,9 Гц), 2,55 (ддд, 1Н, J=7,5, 11,6, 15,3 Гц), 2,33 (дд, 1Н, J=2,8, 10,9 Гц), 2,27 (м, 1Н), 1,83 (м, 5Н), 1,63 (м, 3Н), 1,44 (с, 3Н), 1,27 (м, 1Н); m/z: 296 [М+Н]+.
Соединение 94.
Соединение 89 (159 мг, 0,50 ммоль) растворяли в Qr[2Cl2 и добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин. Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли EtOAc, промывали насыщенным раствором Na]r[CO3 (водн.) и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 94 (123 мг, 62%) в виде твердого остатка, m/z: 395, 397 (1:1) [М+Н]+.
Соединение 95.
Смесь соединения 94 (121 мг, 0,31 ммоль), фенилбороновой кислоты (56 мг, 0,46 ммоль), Ph3P (18 мг, 0,07 ммоль), K3PO4 (210 мг, 0,99 ммоль) и ОМЕ (10 мл) барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (16 мг, 0,07 ммоль), и барботирование N2 продолжали в течение 10 мин. Реакционную смесь выдерживали при 85°С в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтровали через MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 95 (88 мг, 73%) в виде белого твердого остатка, m/z: 393 [М+Н]+.
Соединение 96.
Соединение 95 (84 мг, 0,21 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 1н. ЫО (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали насыщенным раствором Na]r[CO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 96 (79 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 349 [М+Н]+.
Соединение 97.
Соединение 96 (75 мг, 0,21 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 97 (38 мг, 47%) в виде твердого остатка, m/z: 377 [М+Н]+.
Соединение 98.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 97 (38 мг, 0,10 ммоль). Добавляли смесь 9/1 этанол/вода и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в эти-лацетате, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 98 (38 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 374 [М+Н]+.
Соединение 99.
Соединение 98 (38 мг, 0,10 ммоль) растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН), реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного Kr-[2PO4, и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали этилацетатом и
промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 99 (40 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 374 [М+Н]+. Соединение ТХ63504.
Соединение 99 (40 мг, 0,10 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ, как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63504 (14 мг, 37%) в виде твердого остатка.
1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,52 (с, 1Н), 7,50 (т, 2Н, J=7,0 Гц), 7,44 (т, 1Н, J=6,7 Гц), 7,34 (д, 2Н, J=7,0 Гц), 3,82 (с, 3Н), 2,67 (д, 1Н, J=6,2 Гц), 2,56 (м, 1Н), 2,40 (д, 1Н, J=10,4 Гц), 2,28 (м, 1Н), 1,84 (м, 5Н), 1,65 (м, 3Н), 1,50 (с, 3Н), 1,28 (м, 1Н); m/z: 372 [М+Н]+.
Соединения 48 и 100.
Соединение 26 (100 мг, 0,36 ммоль) растворяли в толуоле (10 мл), барботировали N2 в течение 5 мин и добавляли фенилгидразин (38 мкл, 0,38 ммоль). Пробирку герметично закрывали, и реакционную смесь перемешивали при 75°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в толуоле (10 мл) и добавляли гидрат п-толуолсульфокислоты (12 мг, 0,06 ммоль), затем смесь барботировали N2 в течение 3 мин. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи, затем при комнатной температуре в течение 3 дней. Реакционную смесь концентрировали, получая смесь соединений 48 и 100: m/z: 353 [М+Н]+.
Соединения 50 и 101.
Смесь соединений 48 и 100 растворяли в метаноле и добавляли 1н. ЫО (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным раствором NafICO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10-25% EtOAc в гексане), получая соединение 50 (19 мг, 17%) и соединение 101 (57,1 мг, 52%) в виде твердых веществ: m/z: 309 [М+Н]+.
Соединение 102.
Соединение 101 (50,4 мг, 0,16 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 102 (61,4 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 337 [М+Н]+.
Соединение 103.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 102 (61,4 мг, 0,16 ммоль). Добавляли смесь 9/1 этанол/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 103 (48,5 мг, 89%) в виде твердого остатка, m/z: 334 [М+Н]+.
Соединение 104.
Соединение 103 (47,5 мг, 0,14 ммоль) растворяли в смеси 3/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% меток-сид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4 и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 104 (42,5 мг, 89%) в виде твердого остатка, m/z: 334 [М+Н]+.
Соединение ТХ63524.
Соединение 104 (42,5 мг, 0,13 ммоль) растворяли в сухом ДМФА, добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63524 (11,8 мг, 28%) в виде твердого остатка.
1Ы-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 7,60 (м, 3Н), 7,57 (с, 1Н), 7,46 (с, 1Н), 7,45 (м, 2Н), 2,86 (ддд, 1Н, J=1,1, 5,7, 15,9 Гц), 2,65 (ддд, 1Н, J=6,7, 12,0, 16,1 Гц), 2,32 (дд, 1Н, J=1,9, 11,9 Гц), 1,95 (м, 2Н), 1,60 (с, 3Н), 1,30 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); m/z: 332 [М+Н]+.
Соединение 105.
Соединение 26 (0,282 г, 1,0 ммоль) растворяли в 0,1 М гидроксиламингидрохлориде в 9:1 EtOЫ/Ы2O (11 мл, 1,1 ммоль) и добавляли триэтиламин (0,15 мл, 1,1 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Реакционную смесь быстро нагревали до 45°С и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь быстро нагревали до 60°С для обеспечения циклизации и затем, концентрировали, разбавляли EtOAc, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до стеклообразного остатка m/z: [М+Н]+ 278,1.
К раствору полученного выше промежуточного соединения (305 мг, 1,1 ммоль) в ТГФ и МеОН (2:1) добавляли 30% NaOMe (8 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с KH2PO4 (насыщенный) и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 105 (0,297 г), m/z: [М+Н]+ 273,1. Данное вещество применяли непосредственно на следующей стадии.
Соединение 106.
Соединение 105 (0,297 г, 1,1 ммоль) растворяли в EtOJH (20 мл) и добавляли метилгидразин (0,15 г, 3,26 ммоль) в виде раствора в EtOJH (1 мл) по каплям при комнатной температуре. Реакционную смесь выдерживали в течение ночи и шесть дополнительных часов при кипячении с обратным холодильником. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 18 г), применяя 3:1, затем 1:1 гексан/EtOAc в качестве элюента. Соединение 106 (62 мг, 18%) получали в виде стеклообразного остатка, m/z: [M+I-[]+ 306,2.
Соединение 107.
Соединение 106 (0,062 г, 0,20 ммоль) растворяли в EtOAc (7 мл). Добавляли триэтиламин (0,06 мл, 0,4 ммоль), с последующим добавлением бензоилхлорида (0,069 г, 0,49 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл), промывали насыщенным раствором NaЫCO3 (водн.) (10 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до черного масла, получая соединение 107 (0,1145 г), которое применяли без дополнительной очистки, m/z: [M+H]+ 410,3.
Соединение 108.
Раствор соединения 107 (114,5 мг, 0,28 ммоль) в МеОН (5 мл) обрабатывали 3н. ЫО (всдн.) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и насыщенным раствором NaЫCO3 (водн.). Органический слой сушили над MgSO4, концентрировали, получая соединение 108 (57 мг, 57%), m/z: [M+Ы]+ 366,2.
Соединение 109.
К раствору соединения 108 (57 мг, 0,16 ммоль) в 2 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 109 (63 мг), которое применяли без дополнительной очистки, m/z: [M+Ы]+ 394,2.
Соединение 110.
К раствору соединения 109 (0,063 г, 0,16 ммоль) в 2 мл EtOJH добавляли NЫ2OЫ•ЫCl соль (2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 110 (0,0613 г), которое применяли без дополнительной очистки, m/z: [M+Ы]+ 391,2.
Соединение 111.
К раствору соединения 110 (0,0613 г, 0,16 ммоль) в ТГФ и МеОН (2:1) добавляли 30% NaOMe (8 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с Kr-[2PO4 (насыщенный) и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 111 (0,0493 г), которое применяли без дополнительной очистки, m/z: [M+Ы]+ 391,2.
Соединение ТХ63531.
К раствору соединения 111 (0,0493 г, 0,13 ммоль) в 1 мл ДМФА при 0°С добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (30 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя 2:1 DCM/EtOAc, получая соединение ТХ63531 (5,8 мг, 11%).
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 3,44 (с, 1Н), 7,88 (д, 2Н, J=4,3 Гц), 7,60 (т, 1Н, J=5,6 Гц), 7,54 (шир.с, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 3,73 (с, 3Н), 2,60 (м, 1Н), 2,44 (м, 1Н), 2,14 (д, 1Н, J=8,8 Гц), 1,79-1,66 (м, 2Н), 1,49 (с, 3Н), 1,36 (с, 3Н), 1,07 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 389,2.
Соединение ТХ63524.
Соединение 104 (42,5 мг, 0,13 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63524 (11,8 мг, 28%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 7,60 (м, 3Н), 7,57 (с, 1Н), 7,46 (с, 1Н), 7,45 (м, 2Н), 2,86 (ддд, 1Н, J=1,1, 5,7, 15,9 Гц), 2,65 (ддд, 1Н, J=6,7, 12,0, 16,1 Гц), 2,32 (дд, 1Н, J=1,9, 11,9 Гц), 1,95 (м, 2Н), 1,60 (с, 3Н), 1,30 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н);
m/z: 332 [М+Н]+.
Соединение 112.
Раствор соединения 17 (6,4 г, 36 ммоль) в ТГФ (25 мл) добавляли к -78°С раствору лития (2 экв.) в жидком №Ы3 (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 45 мин, гасили Nr-[4Cl (10 г) и нагревали до комнатной температуры. Смесь разбавляли водой, экстрагировали EtOAc и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 112 (1,5 г, 23%) в виде масла, m/z: 183 [М+Н]+.
Соединение 113.
Смесь соединения 112 (1,5 г, 8,2 ммоль), этиленгликоля и гидрата п-толуолсульфокислоты в бензоле кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч с азеотропным удалением воды. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, промывали водой и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 113 (1,4 г, 75%) в виде масла, m/z: 227 [М+Н]+.
Соединение 114.
Соединение 113 (1,4 г, 6,2 ммоль) растворяли в ОИ^Ь (100 мл), затем добавляли MgSO4 (150 мг) и PDC (2 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. Реакционную смесь фильтровали через слой силикагеля (элюировали CH^Cy и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 114 (1,25 г, 90%) в виде белого твердого остатка, m/z: 225 [М+Н]+.
Соединение 115.
Соединение 114 (1,25 г, 5,57 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили KH^POzi (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 115 (1,35 г, 96%) в виде твердого остатка, m/z: 253 [М+Н]+.
Соединение 116.
Смесь соединения 115 (1,35 г, 5,35 ммоль) и метилгидразина (1,6 экв.) в этаноле выдерживали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, EtOAc), получая соединение 116 (1,2 г, 85%) в виде твердого остатка, m/z: 263 [М+Н]+.
Соединение 117.
Соединение 116 (1,2 г, 4,6 ммоль) растворяли в QH^C^ и добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,55 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь промывали 1н. раствором Na2CO3 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10-30% EtOAc в гексане), получая соединение 117 (1,0 г, 64%) в виде твердого остатка, m/z: 341, 343 (1:1) [М+Н]+.
Соединение 118.
Смесь соединения 117 (1,0 г, 2,9 ммоль), фенилбороновой кислоты (1,25 экв.), Ph3P (0,3 экв.), K3PO4 (3 экв.) и DME барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (0,15 экв.) и барботирование N2 продолжали в течение 10 мин. Реакционную смесь выдерживали при 85°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10-30% EtOAc в гексане), получая соединение 118 (0,53 г, 53%) в виде масла, m/z: 339 [М+Н]+.
Соединение 119.
Соединение 118 (0,53 г, 1,6 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HICl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaHIC^ и экстрагировали EtOAc (2x25 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 119 (0,42 г, 91%) в виде твердого остатка, m/z: 295 [М+Н]+.
Соединение 120.
Соединение 119 (0,42 г, 1,4 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили KЫ2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 120 (0,44 г, 96%) в виде твердого остатка, m/z: 323 [М+Н]+.
Соединение 121.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 120 (0,44 г, 1,4 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 121 (445 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 320 [М+Н]+.
Соединение 122.
Соединение 121 (445 мг, 1,4 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% меток-сид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного Kr-[2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 122 (440 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 320 [М+Н]+.
Соединение ТХ63540.
Соединение 122 (440 мг, 1,4 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 15-35% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63540 (120 мг, 28%) в виде твердого остатка.
1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,55 (с, 1Н), 7,50 (т, 2Н, J=8,1 Гц), 7,45 (м, 1Н), 7,35 (д, 2Н, J=8,0 Гц), 3,83 (с, 3Н), 2,64 (м, 4Н), 2,51 (ддт, 1Н, J=1,7, 5,7, 12,3 Гц), 1,89 (м, 1Н), 1,77 (м, 1Н), 1,48 (с, 3Н); m/z: 318 [М+Н]+.
Соединение 123.
Соединение 1 (30,0 г, 238 ммоль) суспендировали в ацетонитриле, и смесь охлаждали до 0°С. Добавляли этилвинилкетон (25 г, 297 ммоль) и триэтиламин (53 мл, 380 ммоль) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали KЫ2PO4 (водн.) и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток. растворяли в бензоле (250 мл), добавляли пирролидон (5,0 мл, 60 ммоль) и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч с азеотропным удалением воды. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, промывали насыщенным раствором NablC^ и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 20% EtOAc в гексане), получая желтое масло. Масло кристаллизовали из холодного трет-BuOMe (50 мл), получая соединение 123 (18,59 г, 41%) в виде белого твердого остатка.
Соединение 124.
Раствор NaBU^ (0,64 г, 17 ммоль) в этаноле (100 мл) добавляли к 0°С раствору соединения 123 (12,97 г, 67,5 ммоль) в этаноле (100 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 45 и гасили уксусной кислотой (7,7 мл, 135 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч, затем концентрировали. Остаток разбавляли 10% МЫ^Ы (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 124 (7,28 г, 56%) в виде светло-желтого твердого остатка, m/z: 195 [М+Н]+.
Соединение 125.
Раствор соединения 124 (6,1 г, 31 ммоль) в ТГФ (25 мл) добавляли к -78°С раствору лития (2 экв.) в жидком Nr-[3 (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 45 мин, гасили Nr-[4Cl (10 г), и нагревали до комнатной температуры. Смесь разбавляли водой, экстрагировали EtOAc и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 125 (1,7 г, 28%) в виде масла, m/z: 197 [М+Н]+.
Соединение 126.
Смесь соединения 125 (1,7 г, 8,7 ммоль), этиленгликоля и гидрата п-толуолсульфокислоты в бензоле кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч с азеотропным удалением воды. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, промывали водой и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 126 (1,3 г, 62%) в виде масла, m/z: 241 [М+Н]+.
Соединение 127.
Соединение 126 (1,3 г, 6,2 ммоль) растворяли в CbkCb (100 мл), затем добавляли MgSO4 (150 мг) и PDC (2 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. Реакционную смесь фильтровали через слой силикагеля (элюировали CЫ2Cl2) и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение 127 (1,18 г, 92%) в виде белого твердого остатка, m/z: 239 [М+Н]+.
Соединение 128.
Соединение 127 (0,67 г, 2,8 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили KH^POzi (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 128 (0,75 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 267 [М+Н]+.
Соединение 129.
Смесь соединения 128 (0,75 г, 2,8 ммоль) и метилгидразина (1,6 экв.) в этаноле выдерживали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, EtOAc), получая соединение 129 (613 мг, 79%) в виде твердого остатка, m/z: 277 [М+Н]+.
Соединение 130.
Соединение 129 (0,61 г, 2,2 ммоль) растворяли в CЫ2Cl2 и добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,55 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь промывали 1н. Na2CO3 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10-30% EtOAc в гексане), получая соединение 130 (580 мг, 74%) в виде твердого остатка, m/z: 355, 357 (1:1) [М+Н]+.
Соединение 131.
Смесь соединения 130 (0,58 г, 1,6 ммоль), фенилбороновой кислоты (1,25 экв.), Ph3P (0,3 экв.), K3PO4 (3 экв.) и DME барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (0,15 экв.), и барботиро-вание N2 продолжали в течение 10 мин. Реакционную смесь выдерживали при 85°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10-30% EtOAc в гексане), получая соединение 131 (360 мг, 63%) в виде грязно-белого твердого остатка, m/z: 353 [М+Н]+.
Соединение 132.
Соединение 131 (0,33 г, 0,94 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. ЫЮ (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaЫCO3 и экстрагировали EtOAc (2x25 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 132 (300 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 309 [М+Н]+.
Соединение 133.
Соединение 132 (0,30 г, 0,94 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили Kr-[2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 133 (300 мг, 95%) в виде твердого остатка, m/z: 337 [М+Н]+.
Соединение 134.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 133 (0,30 г, 0,89 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 134 (300 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 334 [М+Н]+.
Соединение 135.
Соединение 134 (0,30 г, 0,89 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного Kr-[2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 135 (300 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 334 [М+Н]+.
Соединение ТХ63541.
Соединение 135 (0,30 г, 0,89 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 15-35% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63541 (97 мг, 33%) в виде твердого остатка.
1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,53 (с, 1Н), 7,51 (м, 2Н), 7,45 (тт, 1Н, J=2,1, 7,3 Гц), 7,35 (м, 2Н), 3,83 (с, 3Н), 2,61 (м, 3Н), 2,15 (дт, 1Н, J=2,1, 12,7 Гц), 2,04 (м, 1Н), 1,75 (кв.д, 1Ы, J=6,6, 12,7 Гц), 1,50 (с, 3Н), 1,33 (с, 3Н); m/z: 332 [М+Н]+.
Соединения ТХ63791 и ТХ63792.
Энантиомеры соединения ТХ63541 (488,9 мг) разделяли, применяя хиральную ВЭЖХ (CЫIRAL-PAK IA, 5 мкм, 30x250 мм, 2:50:50 EtOЫ/EtOAc/гексан), получая два хорошо разрешающихся пика. Один при 3,98 мин, который давал соединение ТХ63791 (206,2 мг, чистота 99,6%).
1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,50 (с, 1Н), 7,48 (м, 2Н), 7,42 (м, 1Н), 7,32 (м, 2Н), 3,80 (с, 3Н), 2,59 (м, 3Н), 2,12 (т, 1Н, J=12,6 Гц), 2,01 (м, 1Н), 1,73 (м, 1Н), 1,47 (с, 3Н), 1,30 (д, 3Н, J=6,0 Гц) и другой при 5,04 мин, который давал соединение ТХ63792 (220,7 мг, чистота 99,8%).
1Ы-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,50 (с, 1Н), 7,48 (м, 2Н), 7,42 (м, 1Н), 7,32 (м, 2Н), 3,80 (с, 3Н), 2,59 (м, 3Н), 2,12 (т, 1Н, J=12,6 Гц), 2,01 (м, 1Н), 1,73 (м, 1Н), 1,47 (с, 3Н), 1,30 (д, 3Н, J=6,0 Гц).
Соединение 136а-Ь.
Соединение 48 (0,360 г, 1,02 ммоль) растворяли в DCM (30 мл) при комнатной температуре. Добавляли N,N'-дибромдиметилгидантоин (0,169 г, 0,59 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали досуха и остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 24 г), применяя 10% EtOAc/гексан, получая соединение 136b (0,1057 г), m/z: 433,0, [М+Н]+ и соединение 136а (0,1141 г), m/z: 389,0, [М+Н]+.
Соединение 137.
Смесь соединения 136а (105,7 мг) и соединения 136b (114,1 мг) растворяли в DME. Добавляли PhB(OЫ)2 (1,5 экв.), Ph3P (0,2 экв.) и K3PO4 (3,0 экв.) и смесь барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (0,1 экв.), и смесь барботировали N2 в течение 10 мин. Затем смесь перемешивали при 85°С в течение 9 ч. Реакционную смесь фильтровали, концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией, получая соответствующие продукты кросс-сочетания в виде смеси (а: 81,6 мг, b: 37,4 мг), которую растворяли в МеОН и добавляли ЫCl (водн., 3 н.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали насыщенным раствором NaЫCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 137 (108,9 мг), m/z: [М+Н]+ 385,1.
Соединение 138.
Соединение 137 (0,116 г, 0,30 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли Kr-[2PO4 (водн.), экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 138 (134,2 мг, 100%), m/z: [М+Н]+ 413,1.
Соединение 139.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 117 (0,134 г, 0,33 ммоль) в EtO]! перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 139 (124,9 мг, 94%), m/z:
[М+Н]+ 410,2.
Соединение 140.
Соединение 139 (0,1249 г, 0,31 ммоль) растворяли в смеси 1/1 МеОН/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного Kr-[2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 140 (119,5 мг, 94%), m/z: [М+Н]+ 410,2.
Соединение ТХ63544.
Соединение 140 (0,1195 г, 0,29 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 30% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63544 (60,9 мг, 52%).
1Ы-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,60 (с, 1Н), 7,31-7,28 (м, 5Н), 7,26-7,21 (м, 3Н), 7,15-7,13 (м, 2Н), 2,80 (дд, 1Н, J=5,1, 16,4 Гц), 2,67-2,60 (м, 1Н), 2,28 (дд, 1Н, J=2,1, 11,6 Гц), 1,98-1,86 (м, 2Н), 1,60 (с, 3Н), 1,29 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); m/z: [М+Н]+ 408,2.
Соединение 141а.
Смесь соединения 68 (0,23 г, 0,62 ммоль), изопропенилпинаколбороната (1,25 экв.), Ph3P (0,3 экв.), K3PO4 (3 экв.) и DME барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (0,15 экв.), и барботиро-вание N2 продолжали в течение 10 мин. Реакционную смесь выдерживали при 85°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 10 до 30% EtOAc в гексане), получая соединение 141а (85 мг, 41%) в виде твердого остатка, m/z: 331 [М+Н]+.
Соединение 142а.
Соединение 141а (85 мг, 0,26 ммоль) растворяли в ТГФ в атмосфере N2 и добавляли 10% Pd/C. Колбу тщательно продували Н2 и перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали, получая соединение 142а (85 мг, 99%) в виде твердого остатка, m/z: 333 [М+Н]+.
Соединение 143а.
Соединение 142а (85 мг, 0,26 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. ЫCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaЫCO3 и экстрагировали EtOAc (2x25 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 143а (70 мг, 95%) в виде твердого остатка, m/z: 289 [М+Н]+.
Соединение 144а.
Соединение 143а (70 мг, 0,24 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили Kr-[2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 144а (80 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 317 [М+Н]+.
Соединение 145а.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 144а (80 мг, 0,24 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 145а (80 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 314 [М+Н]+.
Соединение 146а.
Соединение 145а (80 мг, 0,24 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метансл/ТГФ и добавляли 30% меток-сид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного Kr-[2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 146а (75 мг, 99%) в виде твердого остатка, m/z: 314 [М+Н]+.
Соединение ТХ63547.
Соединение 146а (75 мг, 0,24 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 15 до 35% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63547 (11 мг, 15%) в виде твердого остатка.
1Ы-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,50 (с, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 3,05 (септет, 1Н, J=7, 0 Гц), 2,84 (ддд, 1Н, J=7,0, 11,7, 15,7 Гц), 2,58 (ддд, 1Н, J=7,0, 11,7, 15,7 Гц), 2,16 (дд, 1Н, J=2,1, 11,9 Гц), 1,88 (м, 2Н), 1,50 (с, 3Н), 1,32 (д, 3Н, J=7,1 Гц), 1,29 (с, 3Н), 1,29 (д, 3Н, J=7,1 Гц), 1,24 (с, 3Н); m/z: 312 [М+Н]+.
Соединение 141b.
Соединение 68 (0,371 г, 1,00 ммоль), K2CO3 (0,417 г, 3,02 ммоль), пинаколовый эфир 1-циклогексенилбороновой кислоты (0,269 г, 0,23 ммоль) и диоксан (15 мл) смешивали, и реакционную смесь барботировали N2 в течение 2-3 мин. Добавляли Pd(dppf)Cl2 (0,079 г, 0,097 ммоль) и реакционную смесь барботировали N2 в течение приблизительно 5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 100°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным раствором NaЫCO3 (водн.) (30 мл), слои разделяли, и органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до масла. Масло хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 19 г), применяя 20% EtOAc/гексан, получая соединение 141b (151 мг, 40%) в виде стеклообразного остатка/белого твердого остатка, m/z: [M+H]+ 371,2.
Соединение 142b.
Соединение 141b (0,147 г, 0,40 ммоль) растворяли в EtOm (20 мл) и колбу продували газообразным азотом. Добавляли 10% Pd/C (0,035 г) и колбу разряжали и продували Н2 три раза и перемешивали в те
чение ночи плюс 6 ч в атмосфере Н2 при комнатной температуре. Катализатор отфильтровывали, и фильтрат концентрировали, получая соединение 142b (139 мг; 93%) в виде прозрачной пены/стеклообразного остатка, m/z: [M+H]+ 373,1. Соединение 143b.
Соединение 142b (0,139 г, 0,37 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 37а, получая соединение 143b (110,6 мг, 92%) в виде стеклообразного остатка/твердого остатка, m/z: 329,1. Соединение 144b.
Соединение 143b (0,1106 г, 0,34 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 143а, получая соединение 144а (128 мг, количественный), m/z: [M+Ы]+ 357,1. Соединение 145b.
Соединение 144b (0,128 г, 0,36 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 144а, получая соединение 145а (111,4 мг, 89%) в виде пены, m/z: [M+H]+ 354,1. Соединение 146b.
Соединение 145b (0,1114 г, 0,32 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 145а, получая соединение 146а (111,7 мг, 97%) в виде грязно-белой пены, m/z: [M+Ы]+ 354,0. Соединение ТХ63591.
Соединение 146b (0,111 г, 0,31 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 146а, получая соединение ТХ63547, и хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 12 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc и хроматографировали второй раз на силикагеле (230-400 меш, 8 г), применяя 5% метил-трет-бутиловый эфир в DCM, получая соединение ТХ63591 (14 мг, 12%).
1Ы-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,45 (с, 1Н), 3,75 (с, 3Н), 2,82 (дд, 1Н, J=15,5 Гц), 2,51-2,62 (м, 2Н), 2,12 (дд, 1Н, J=10, 2,5 Гц), 1,74-1,89 (м, 7Н), 1,50-1,58 (м, 3Н), 1,46 (с, 3Н), 1,29-1,37 (м, 2Н), 1,25 (с, 3Н), 1,23 (с, 3Н).
Соединение 147.
Соединение 68 (0,151 г, 0,41 ммоль), K2CO3 (0,176 г, 1,29 ммоль), пинаколовый эфир бензилбороно-вой кислоты (0,176 г, 0,8 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (0,038 г, 0,0046 ммоль) и диоксан (8 мл) взаимодействовали в атмосфере азота при 90°С в течение 1,5 ч и затем в течение ночи при 100°С. Добавляли дополнительное количество Pd(dppf)Cl2 (0,041 г, 0,005 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 120°С в течение ночи и очищали хроматографией на силикагеле (230-400 меш, 9,9 г), элюируя смесью 5:1 гексан/EtOAc, затем смесью 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение 147 в виде смеси с дегалогенированным исходным бромпиразолом в виде масла, (0,0736 г), m/z: [M+Ы]+ 381,1.
Соединение 148.
Соединение 147 (73,6 мг, 0,19 ммоль) растворяли в МеОН и добавляли 3н. ЫО (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO^ затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 148 (58,8 мг) в виде твердого остатка, m/z: 337,1 [М+Н]+.
Соединение 149.
Соединение 148 (58,8 мг, 0,18 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли Kr-[2PO4 (водн.), экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 149 (74 мг) в виде твердого остатка. Соединение применяли непосредственно на следующей стадии.
Соединение 150.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 149 (74 мг, 0,2 ммоль) в EMO!! перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 150 (71 мг) в виде твердого остатка, m/z: 362,1 [М+Н]+.
Соединение 151.
Соединение 150 (71 мг, 0,2 ммоль) растворяли в смеси 1/1 МеОН/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного Kr-[2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 11 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc, получая соединение 151 (23 мг) в виде твердого остатка, m/z: 362,1.
Соединение ТХ63550.
Соединение 151 (23 мг, 0,063 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор Br2, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хромато
графией (230-400 меш, 7 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63550 (8,3 мг).
1Ы-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,45 (с, 1Н), 7,28 (дд, 2Н, J=7,3, 7,5 Гц), 7,21 (т, 1Н, J=7,3 Гц), 7,04 (д, 2Н, J=7,4 Гц), 3,90 (с, 2Н), 3,65 (с, 3Н), 2,57 (дд, 1Н, J=5,9, 15,8 Гц), 2,35 (м, 1Н), 2,14 (дд, 1Н, J=1,9, 11,8 Гц), 1,90-1,77 (м, 2Н), 1,47 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н); m/z: [M+rn]+ 360,1.
Соединение 152.
Соединение 130 (355 мг, 1,28 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. ШО (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaЫCO3 и экстрагировали EtOAc (2x25 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 152 (305 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 233 [М+Н]+.
Соединение 153.
Соединение 152 (305 мг, 1,28 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили Kr-[2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 153 (330 мг, 99%) в виде твердого остатка, m/z: 261 [М+Н]+.
Соединение 154.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 153 (330 мг, 1,27 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 154 (320 мг, 98%) в виде твердого остатка, m/z: 258 [М+Н]+.
Соединение 155.
Соединение 154 (320 мг, 1,24 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТТФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного Kr-[2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 155 (320 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 258 [М+Н]+.
Соединение ТХ63551.
Соединение 155 (320 мг, 1,24 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 15 до 35% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63551 (120 мг, 38%) в виде твердого остатка.
1Ы-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,46 (с, 1Н), 7,08 (с, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 2,75 (дд, 1Н, J=6,3, 16,0 Гц), 2,57 (м, 2Н), 2,09 (дт, 1Н, J=1,8, 12,4 Гц), 2,02 (дд, 1Н, J=7,1, 13,7 Гц), 1,74 (м, 1Н), 1,44 (с, 3Н), 1,31 (д, 3Н, J=6,7 Гц); m/z: 256 [М+Н]+.
Соединение 156.
Раствор соединения 1 (2,50 г, 19,8 ммоль) и акриламида (2,15 г, 30,2 ммоль) в Et3N (50 мл) выдерживали при 85°С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и коричневый твердый остаток выделяли фильтрованием. Неочищенный твердый остаток растирали с EtOAc, получая соединение 156 (3,77 г, 96%) в виде светло-коричневого твердого остатка, m/z: 198 [М+Н]+.
Соединение 157.
Соединение 156 (3,75 г, 19,0 ммоль) растворяли в НОАс (37,5 мл), разделяли на 3 равные порции и герметично закрывали в пробирках СВЧ. Каждую пробирку выдерживали при 160°С в течение 1 ч в СВЧ-печи. Реакционные смеси объединяли, разбавляли EtOHI (20 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 20 мин, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь фильтровали, и фильтрат промывали EtOAc, получая соединение 157 (2,48 г, 73%) в виде светло-коричневого твердого остатка, m/z: 180 [М+Н]+.
Соединение 158.
Natl (1,0 экв.) добавляли к 0°С раствору соединения 157 (1,5 г, 8,4 ммоль) в ДМФА/ТГФ (2,3/1, 30 мл), смесь перемешивали в течение 45 мин. Добавляли MeI (1,5 экв.) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Через 1,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь гасили насыщенным раствором Nr-[4Cl и экстрагировали CHl^Cl^ затем промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 0-100% EtOAc в гексане), получая соединение 158 (1,1 г, 68%) в виде светло-желтого твердого остатка, m/z: 194 [М+Н]+.
Соединение 159.
Соединение 158 (600 мг, 3,1 ммоль) растворяли в АсОН/вода (19/1, 12 мл) в атмосфере N2 и добавляли PtO2 (120 мг). Колбу тщательно продували Н2 и перемешивали в течение 16 ч при комнатной темпе
ратуре. Реакционную смесь фильтровали через целит, элюировали EtOAc и концентрировали. Неочищенный остаток растворяли в CH2Cl2, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 159 (864 мг, количественный) в виде вязкого масла, m/z: 198 [М+Н]+. Соединение 160.
ТРАР (107 мг, 0,30 ммоль) добавляли при комнатной температуре к смеси соединения 159 (864 мг, 3,1 ммоль), NMO (770 мг, 6,6 ммоль) и 4А молекулярных сит (2 г) в CH2Cl2 (40 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь фильтровали через слой силикагеля, элюировали ацетон/CЫ2Cl2 (1/1, 100 мл) и концентрировали. Остаток растворяли в CЫ2Cl2, промывали 1н. HCl (водн.) и водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 0 до 50% ацетон в гексане), получая соединение 160 (480 мг, 79%) в виде белого твердого остатка, m/z: 196 [М+Н]+.
Соединение 161.
Соединение 160 (120 мг, 0,61 ммоль) растворяли в этилформиате, охлаждали до 0°С и добавляли 25% метоксид натрия (25 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°С, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили 12н. HCl (0,55 мл) и экстрагировали CH2Cl2, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая неочищенное соединение 161, m/z: 224 [М+Н]+.
Соединение 162.
Смесь неочищенного соединения 161 и метилгидразина (52 л, 0,98 ммоль) в этаноле (6,1 мл) выдерживали при 60°С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 0-10% МеОН в CH2Cl2), получая соединение 162 (134 мг, 93%) в виде масла, m/z: 234 [М+Н]+.
Соединение 163.
Раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина (107 мг, 0,37 ммоль) в CH2Cl2 (3 мл) добавляли при комнатной температуре к раствору соединения 162 (134 мг, 0,57 ммоль) в CH2Cl2 (3 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь непосредственно очищали последующей колоночной хроматографией, вначале непосредственно наносили (силикагель, от
0 до 70% ацетон в гексане), затем (силикагель, от 0 до 5% МеОН в CH2Cl2), получая соединение 163 (87 мг, 49%) в виде масла, m/z: 312, 314 (1:1), [М+Н]+.
Соединение 164.
Смесь соединения 163 (87 мг, 0,28 ммоль), 3-фенилбороновой кислоты (1,5 экв.), Ph3P (0,2 экв.), K3PO4 (3,0 экв.) и DME барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (0,1 экв.), и барботиро-вание N2 продолжали в течение 10 мин. Реакционную пробирку герметично закрывали и выдерживали при 110°С в течение 2,5 ч в СВЧ-печи. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 0 до 65% ацетон в гексане), получая соединение 164 (82 мг, 95%) в виде белого твердого остатка, m/z: 310 [М+Н]+.
Соединение 165.
Раствор LDA (2,0 экв.) в ТГФ добавляли к -78°С раствору соединения 164 (40 мг, 0,13 ммоль) в ТГФ (1,3 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем добавляли раствор PhSeCl (3 экв.) в ТГФ (0,4 мл). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительного
1 ч, затем гасили насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc, затем промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 0 до 100% EtOAc в гекса-не), получая соединение 165 (27 мг, 45%) в виде желтого твердого остатка, m/z: 466 [М+Н]+.
Соединение 166.
Соединение 165 (27 мг, 0,058 ммоль) растворяли в EtOAc/ТГФ (3/1, 1,2 мл) и добавляли H2O2 (30%, 5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали насыщенным раствором Na2SO3 (водн.) и водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 0 до 100% EtOAc в гексане), получая соединение 166 (16 мг, 90%) в виде белого твердого остатка, m/z: 308 [М+Н]+.
Соединение 167.
Добавляли йод (2 экв.) при комнатной температуре к раствору соединения 166 (14,2 мг, 0,046 ммоль) в пиридин/CCLi (1/2, 0,69 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре, затем в течение 16 ч при 50°С, и, наконец, в течение 20 ч при 65°С. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли EtOAc. Смесь промывали насыщенным раствором Na2SO3 (водн.), водой и солевым; раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 0 до 100% EtOAc в гексане), получая соединение 167 (12 мг, 60%) в виде желтого твердого остатка, m/z: 434 [М+Н]+.
Соединение ТХ63568.
Соединение 167 (11 мг, 0,036 ммоль), Zn(CN)2 (3 экв.) и Pd(PPh3)4 (0,2 экв.) растворяли в дегазированном ДМФА (0,5 мл). Пробирку продували N2, герметично закрывали и реакционную смесь переме
шивали в течение 20 мин при 80°С. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и промывали водой, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 0 до 5 0% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63568 (7,5 мг, 89%) в виде светло-желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,08 (с, 1Н), 7,49 (т, 2Н, J=7,0 Гц), 7,43 (т, 1Н, J=7,2 Гц), 7,32 (д, 2Н, J=6,9 Гц), 3,88 (дд, 1Н, J=2,8, 13,2 Гц), 3,80 (с, 3Н), 3,12 (с, 3Н), 2,72 (ддд, 1Н, J=1,3, 6,6, 16,4 Гц), 2,63 (ддд, 1Н, J=6,6, 11,4, 16,3 Гц), 2,30 (м, 1Н), 2,00 (м, 1Н), 1,35 (с, 3Н); m/z: 333 [М+Н]+.
Соединение 169.
Соединение 25 (0,294 г, 1,17 ммоль) растворяли в DCM (50 мл). Добавляли последовательно MgBr-Et2O (0,777 г, 3,0 ммоль) и iPr2EtN (0,4 мл, 2,3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение приблизительно 15 мин, смесь постепенно становилась оранжевой. Добавляли по каплям бензоилхлорид (0,342 г, 2,43 ммоль) в DCM (2 мл) и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водного NaHCO3 раствора, слои разделяли и органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до масла, получая неочищенное соединение 168. Остаток растворяли в EtOH (25 мл), обрабатывали моногидратом гидразина (0,63 г, 12,6 ммоль) в EtOH, смесь выдерживали при 63°С в течение приблизительно 1 ч и затем концентрировали до желтого масла. Масло хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 15 г), применяя смесь 50% EtOAc/гексан, получая соединение 169 (158 мг, 38%) в виде практически прозрачного масла, m/z: [M+H]+ 353,1.
Соединение 170.
Соединение 169 (0,158 г, 0,45 ммоль) растворяли в МеОН и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 170 (174 мг, количественный) в виде масла, m/z: [M+H]+ 309,0.
Соединение 171.
Соединение 170 (0,169 г, 0,5 5 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 171 (154,8 мг, 84%), m/z: [М+Н]+ 337,0.
Соединение 172.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 171 (0,1548 г, 0,46 ммоль). Добавляли смесь 9:1 EtOH/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 172 (128 мг, 83%) в виде светло-желтого твердого остатка, m/z: [M+H]+ 334,0.
Соединение 173.
Соединение 172 (0,128 г, 0,38 ммоль) растворяли в смеси 3:1 МеОН/ТГФ и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4, и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение 173 (129 мг, количественный) в виде желтого стеклообразного/твердого остатка, m/z: [M+H]+ 334,0.
Соединение ТХ63579.
Смесь соединения 173 (0,129 г, 0,39 ммоль) и DDQ (1,3 экв.) растворяли в бензоле. Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 4,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 11 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63579 (35,47 мг, 27%).
1Ы-ЯМР (500 МГц, d6-ДМСО) 5 13,05 (с, 1Н), 8,55 (с, 1Н), 7,61 (д, 2Н), 7,47 (дд, 2Н, J=7,4, 7,5 Гц), 7,35 (т, 1Н, J=7,4 Гц), 2,87 (дд, 1Н, J=5,5, 15,8 Гц), 2,76-2,69 (м, 1Н), 2,26 (д, 1Н), 1,98-1,86 (м, 2Н), 1,45 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 332,0.
Соединение 174.
Раствор гидрохлорида ацетамида (0,68 г, 7,2 ммоль) и пиперидина (0,60 г, 7,0 ммоль) в изо-PrOH (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин, затем добавляли соединение 26 (0,20 г, 0,71 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 дней, затем концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 25% EtOAc в гексане), получая соединение 174 (3,12 г, 56%) в виде твердого остатка, m/z: 303 [М+Н]+.
Соединение 175а.
Гемисульфат О-метилизомочевины (0,946 г, 7,7 ммоль) и пиперидин (0,58 г, 6,8 ммоль) растворяли в iPrOH (15 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение приблизительно 15 мин. Добавляли соединение 174 (0,212 г, 0,76 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем кипятили с обратным холодильником в течение 4 дней. iPrOH заменяли на н-BuOH и добавляли дополнительное количество гемисульфата 0-метилизомочевины (0,432 г, 3,5 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc (80 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (15 мл) и солевым раствором (15 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 20% EtOAc/гексан), получая смесь трех компонентов (364 мг), m/z: 319,2 [М+Н]+.
Общий способ F.
Соединение 174 (смотрите табл. 8 относительно количества), замещенный амидин (смотрите табл. 8 относительно количества) и пиперидин (смотрите табл. 8 относительно количества) растворяли в изо-PrOH (10 мл), и смесь перемешивали при 85°С в течение 48 ч в герметично закрытой колбе. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали CHCl3 и промывали раствором NH4Cl (водн., 10%), солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, EtOAc/гексан или МеОН/CHCy, получая соответствующие производные:
соединение 175b: 0,12 г, 56%: m/z: 303 [М+Н]+,
соединение 175с: 0,2282 г, 63%: m/z: 331 [М+Н]+,
соединение 175d: 0,233 г, 75%: m/z: 289 [М+Н]+,
соединение 175е: 0,307 г, 75%: m/z: 365 [М+Н]+,
соединение 175f: 0,190 г, 52%: m/z: 345 [М+Н]+,
соединение 175g: 0,337 г, 88%: m/z: 357 [М+Н]+,
соединение 175h: 0,2 г, 40%: m/z: 399, 401 (3:1) [М+Н]+,
соединение 175i: 1,38 г, больше 100%: m/z: 399/401 (39/14%) [М+Н]+, 155/157 (100/36%), соединение 175j: 0,164 г, 39%: m/z: 379 [М+Н]+, соединение 175k: 0,161 г, 32%: m/z: 395 [М+Н]+,
соединение 175l: 0,92 г, больше 100%: m/z: 386 (93%) [М+Н]+, 143 (64%) и 126 (100%),
соединение 175m: 0,172 г, 44%: m/z: 366 [М+Н]+,
соединение 175n: 1,05 г, больше 100%: m/z: 366 (83%) [М+Н]+ и 190 (100%), соединение 175о: 0,38 г, 95%: m/z: 366 (100%) [М+Н]+. Соединение 176а.
Соединение 175а (0,364 г) растворяли в МеОН и добавляли HCl (водн., 1н.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая смесь (0,336 г), m/z: 275 [М+Н]+.
Общий способ G.
Соединение 175Ь-о (смотрите табл. 9 относительно количества) растворяли в растворителе (смотрите табл. 9 относительно количества) и добавляли HCl (водн.) (смотрите табл. 9 относительно количества). Смесь перемешивали в атмосфере N2 при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток подщелачивали NH4OH (водн., 10%) до рН приблизительно 9-10, экстрагировали CHO3 и промывали насыщенным раствором NaCl (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соответствующие производные:
соединение 176b: 0,14 г, количественный: m/z: 259 [М+Н]+,
соединение 176с: 0,176 г, 89%: m/z: 287 [М+Н]+,
соединение 176d: 0,134 г, 93%: m/z: 245 [М+Н]+,
соединение 176е: 0,287 г, количественный: m/z: 321 [М+Н]+,
соединение 176f: 0,139 г, 84%: m/z: 301 [М+Н]+,
соединение 176g: 0,191 г, 65%: m/z: 313 [М+Н]+,
соединение 176h: 0,155 г, 87%: m/z: 355, 357 (3:1) [М+Н]+,
соединение 176i: 0,32 г, 73%: m/z: 355/357 (100/74%) [М+Н]+,
соединение 176j: 0,139 г, 96%: m/z: 335 [М+Н]+,
соединение 17 6k: 0,127 г, 88%: m/z: 351 [М+Н]+,
соединение 176l: 0,37 г, 92%: m/z: 342 (100%), [М+Н]+, соединение 176m: 0,174 г, 100%: m/z: 322 [М+Н]+,
соединение 176n: 0,27 г, 66%: m/z: 322 (100%), [М+Н]+,
соединение 176о: 0,24 г, 72%: m/z: 322 (100%), [М+Н]+.
Соединение 177а.
Соединение 176а (0,33 6 г, 1,2 ммоль) растворяли в этилформиате (20 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,56 мл, 28,4 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 177а (0,152 г, 66% за 3 стадии), m/z: 303 [М+Н]+.
Общий способ Н.
Соединение 176Ь-о (смотрите табл. 10 относительно количества) и этилформиат (смотрите табл. 10 относительно количества) растворяли в бензоле (смотрите табл. 10 относительно количества) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (смотрите табл. 10 относительно количества). Смесь перемешивали в атмосфере N2 при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали насыщенным раствором KH2PO4 (водн.), насыщенным раствором NaCl (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соответствующие производные:
соединение 177b: 0,13 г, 92%: m/z: 287 [М+Н]+,
соединение 177с: 0,206 г, количественный: m/z: 315 [М+Н]+,
соединение 177d: 0,194 г, 95%: m/z: 273 [М+Н]+,
соединение 177е: 0,248 г, 84%: m/z: 349 [М+Н]+,
соединение; 177f: 0,162 г, количественный: m/z: 329 [М+Н]+,
соединение 177g: 0,228 г, количественный: m/z: 329 [М+Н]+,
соединение 177h: 0,166 г, 99%: m/z: 397, 399 (3:1) [М+Н]+,
соединение 177i: 0,32 г, 91%: m/z: 383/385 (100/42%), [М+Н]+,
соединение 177j: 0,134 г, 89%: m/z: 363 [М+Н]+,
соединение 177k: 0,156 г, количественный: m/z: 379 [М+Н]+,
соединение 177l: 0,33 г, 94%: m/z: 392 (13%) [M+Na]+ и 370 (100%) [М+Н]+, соединение 177m: 0,137 г, 83%: m/z: 350 [М+Н]+,
соединение 177n: 0,35 г, больше 100%: m/z: 350 (100%) [М+Н]+,
соединение 177о: 0,22 г, 82%: m/z: 350 (100%) [М+Н]+.
Соединение 178а.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (5,5 мл, 0,55 ммоль) добавляли к соединению 177а (0,152 г, 0,5 ммоль). Добавляли смесь 9/1 этанол/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc/гексан), получая соединение 178а (18 мг, 12%),
m/z: 300 [М+Н]+.
Общий способ I.
Соединение 177Ь-О (смотрите табл. 11 относительно количества) растворяли в EtOH (смотрите табл. 11 относительно количества) и добавляли гидроксиламингидрохлорид (смотрите табл. 11 относительно количества). Смесь перемешивали в течение ночи при 50°С в атмосфере N2. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), насыщенным раствором NaCl (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соответствующие производные:
соединение 178b: 0,13 г, количественный: m/z: 284 [М+Н]+,
соединение 178с: 0,183 г, 96%: m/z: 312 [М+Н]+,
соединение 178d: 0,168 г, 88%: m/z: 270 [М+Н]+,
соединение 178е: 0,247 г, количественный: m/z: 346 [М+Н]+,
соединение 178f: 0,167 г, количественный: m/z: 326 [М+Н]+,
соединение 178g: 0,175 г, 85%: m/z: 338 [М+Н]+,
соединение 178h: 0,149 г, 90%: m/z: 380, 382 (3:1) [М+Н]+,
соединение 178i: 0,31 г, приблизительно 100%: m/z: 380/382 (100/63%) [М+Н]+,
соединение 178j: 0,152 г, количественный: m/z: 360 [М+Н]+,
соединение 178k: 0,146 г, количественный: m/z: 376 [М+Н]+, соединение 178l: 0,37 г, приблизительно 100%: m/z: 367 (100%), [М+Н]+, соединение 178m: 0,111 г, 82%: m/z: 347 [М+Н]+, соединение 178n: 0,24 г, 83%: m/z: 347 (100%), [М+Н]+, соединение 178о: 0,097 г, 45%: m/z: 347 (100%), [М+Н]+. Соединение 179а.
Соединение 178а (18 мг, 0,06 ммоль) растворяли в смеси 3:1 МеОН/ТГФ (1,6 мл) и добавляли 30% метоксид натрия (0,066 мл, 1,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 5,5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4 и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 179а (13,3
мг, 74%).
Общий способ J.
Соединение 178Ъ-о (смотрите табл. 12 относительно количества) растворяли в МеОН (смотрите табл. 12 относительно количества) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (смотрите табл. 12 относительно количества). Смесь перемешивали в атмосфере N2 при 50°С в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), насыщенным раствором NaCl (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соответствующие производные:
соединение 179b: 0,13 г, количественный: m/z: 284 [М+Н]+,
соединение 179с: 0,141 г, 77%: m/z: 312 [М+Н]+,
соединение 179d: 0,128 г, 76%: m/z: 270 [М+Н]+,
соединение 179е: 0,225 г, 92%: m/z: 346 [М+Н]+,
соединение 179f: 0,123 г, 81%: m/z: 326 [М+Н]+, соединение 179g: 0,140 г, 80%: m/z: 338 [М+Н]+, соединение 179h: 0,137 г, 92%: m/z: 380, 382 (3:1) [М+Н]+, соединение 179i: 0,21 г, 68%: m/z: 380/382 (100/52%) [М+Н]+, соединение 179j: 0,119 г, 90%: m/z: 360 [М+Н]+, соединение 179k: 0,123 г, 91%: m/z: 376 [М+Н]+, соединение 179l: 0,31 г, 82%: m/z: 367 (100%) [М+Н]+,
соединение 179m: 0,080 г, 72%: m/z: 347 [М+Н]+,
соединение 179n: 0,25 г, больше 100%: m/z: 347 (100%) [М+Н]+, соединение 179о: 0,063 г, 65%: m/z: 347 (100%) [М+Н]+. Соединение ТХ63528.
Соединение 179а (13,3 мг, 0,044 ммоль) растворяли в сухом ДМФА (0,26 мл), добавляли охлажденный до 0°С раствор дибромдиметилгидантоина (8,0 мг, 0,028 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ, как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин (0,034 мл, 0,416 ммоль) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63528 (6,5 мг, 50%), m/z: 298 [М+Н]+.
Общий способ K.
Соединение 179Ь-о (смотрите табл. 13 относительно количества) растворяли в сухом ДМФА (10 мл) и раствор охлаждали до 0°С в атмосфере N2. Добавляли дибромдиметилгидантоин (DBDMH) (смотрите табл. 13 относительно количества) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Добавляли пиридин (смотрите табл. 13 относительно количества) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), насыщенным раствором KH2PO4 (водн.), насыщенным раствором NaCl (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соответствующие производные:
соединение ТХ63468: 65 мг, 51%: ^-ЯМР (400 МГц, CDCb) 5 8,88 (с, 1Н), 8,44 (с, 1Н), 3,00 (дд, 1Н, J=6,3, 17,2 Гц), 2,85 (ддд, 1Н, J=7, 6, 11,4, 17,2 Гц), 2,73 (с, 3Н), 2,21 (дд, 1Н, J=2,2, 12,5 Гц), 2,06 (м, 1Н), 1,96 (м, 1Н), 1,48 (с, 3Н), 1,33 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н); m/z: 282 [М+Н]+;
соединение ТХ63534: 53 мг, 38%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCb) 5 8,88 (с, 1Н), 8,48 (с, 1Н), 3,18-3,27 (м, 1Н), 3,00 (дд, 1Н, J=15,0, 10,0 Гц), 2,81-2,91 (м, 1Н), 2,24 (дд, 1Н, J=10,0, 5,0 Гц), 2,03-2,09 (м, 1Н), 1,902,01 (м, 1Н), 1,48 (с, 3Н), 1,38 (с, 3Н), 1,37 (с, 3Н), 1,33 (с, 3Н), 1,28 (с, 3Н); m/z: 310 [М+Н]+;
соединение ТХ63542: 56,8 мг, 54%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCLj) 5 9,04 (шир.с, 1Н), 8,79 (с, 1Н), 8,55 (шир.с, 1Н), 3,02 (дд, 1Н, J=6,1, 17,5 Гц), 2,92-2,84 (м, 1Н), 2,20 (дд, 1Н, J=1,8, 12,6 Гц), 2,06-2,02 (м, 1Н), 1,93 (дддд, 1Н, J=6,5, 12,0, 12,3, 12,6 Гц), 1,45 (с, 3Н), 1,29 (с, 3Н), 1,23 (с, 3Н); m/z: 268 [М+Н]+;
соединение ТХ63552: 114 мг, 51%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCy 5 8,95 (с, 1Н), 8,57 (с, 1Н), 8,43 (м, 2Н), 7,50 (м, 3Н), 3,03 (дд, 1Н, J=6,1, 17,5 Гц), 2,92-2,85 (м, 1Н), 2,25 (д, 1Н, J=12,4 Гц), 2,08-2,01 (м, 1Н), 1,99-1,92 (м, 1Н), 1,51 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н); m/z: 344 [М+Н]+;
соединение ТХ63561: 54 мг, 44%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCLj) 5 8,81 (с, 1Н), 8,44 (с, 1Н), 2,95 (дд, 1Н, J=6,0, 17,3 Гц), 2,80 (дддд, 1Н, J=7,3, 8,8, 8,9, 11,4 Гц), 2,20 (дд, 1Н, J=1,9, 12,5 Гц), 2,03-1,99 (м, 1Н), 1,91 (дддд, 1Н, J=6,4, 12,3, 12,5, 12,6 Гц), 1,43 (с, 3Н), 1,39 (с, 9Н), 1,28 (с, 3Н), 1,23 (с, 3Н); m/z: 324 [М+Н]+;
соединение ТХ63567: 52 мг, 38%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCLj) 5 8,70 (с, 1Н), 8,67 (с, 1Н), 3,12 (дд, 1Н, J=6,1, 18,1 Гц), 2,96 (дддд, 1Н, J=7,5, 9,1, 9,3, 10,9 Гц), 2,23 (дд, 1Н, J=2,1, 12,8 Гц), 2,12-2,08 (м, 1Н), 1,98 (дддд, 1Н, J=6,6, 12,6, 13,0, 13,3 Гц), 1,49 (с, 3Н), 1,30 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н); m/z: 336 [М+Н]+;
соединение ТХ63582: 47 мг, 35%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCI3) 5 8,90 (с, 1Н), 8,57 (с, 1Н), 8,39 (д, 2Н, J=8,5 Гц), 7,46 (д, 2Н, J=8,5 Гц), 3,04 (дд, 1Н, J=5,8, 17,4 Гц), 2,92-2,85 (м, 1Н), 2,24 (дд, 1Н, J=1,8, 12,5 Гц), 2,08-2,04 (м, 1Н), 2,01-1,93 (м, 1Н), 1,51 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н); m/z: 378, 380 (100/38%) [М+Н]+;
соединение ТХ63612: 140 мг, 67%: 1Н-ЯМР (500 МГц, CDCLj) 5 8,88 (с, 1Н), 8,66 (с, 1Н), 7,79-7,81 (м, 1Н), 7,51-7,54 (м, 1Н), 7,39-7,42 (м, 2Н), 3,08 (дд, 1Н, J=20, 5 Гц), 2,90-2,97 (м, 1Н), 2,28 (дд, 1Н, J=15, 2,5 Гц), 1,95-2,11 (м, 2Н), 1,53 (с, 3Н), 1,32 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 378/380 (100/39%) [М+Н]+;
соединение ТХ63583: 30 мг, 35%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCI3) 5 8,95 (с, 1Н), 8,56 (с, 1Н), 8,23 (шир.с, 2Н), 7,44-7,30 (м, 2Н), 3,04-3,01 (м, 1Н), 2,91-2,84 (м, 1Н), 2,47 (с, 3Н), 2,25 (д, 1Н, J=12,1 Гц), 2,07-1,95 (м, 2Н), 1,51 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н); m/z: 358 [М+Н]+;
соединение ТХ63590: 47 мг, 38%: ^-ЯМР (400 МГц, CDCy 5 8,98 (с, 1Н), 8,55 (с, 1Н), 8,43 (д, 2Н, J=10,0 Гц), 7,05 (д, 2Н, J=5,0 Гц), 3,92 (с, 3Н), 3,05 (дд, 1Н, J=20,0, 5,0 Гц), 2,85-2,95 (м, 1Н), 2,28 (дд, 1Н, J=10,0, 5,0 Гц), 1,94-2,13 (м, 2Н), 1,54 (с, 3Н), 1,35 (с, 3Н), 1,29 (с, 3Н); m/z: 374 [М+Н]+;
соединение ТХ63628: 70 мг, 23%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCLj) 5 8,93 (с, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 8,22 (с, 1Н), 3,09 (дд, 1Н, J=6,2, 6,1 Гц), 2,93 (м, 1Н), 2,86 (с, 3Н), 2,28 (дд, 1Н, J=1,8, 1,8 Гц), 2,03 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,35 (с, 3Н), 1,29 (с, 3Н); m/z: 365 (100%) [M+H]+;
соединение ТХ63586: 21 мг, 26%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCy 5 9,69 (с, 1Н), 8,91 (дт, 1Н, J=1,5, 8,0
Гц), 8,86 (с, 1Н), 8,75 (дд, 1Н, J=1,0, 4,8 Гц), 8,63 (с, 1Н), 7,62 (дд, 1Н, J=5,0, 7,9 Гц), 3,08 (дд, 1Н, J=6,0, 17,9 Гц), 2,93 (дддд, 1Н, J=7,3, 9,0, 9,0, 11,0 Гц), 2,25 (дд, 1Н, J=2,3, 12,6 Гц), 2,11-2,06 (м, 1Н), 2,02-1,94 (дддд, 1Н, J=6,5, 12,5, 12,9, 13,5 Гц), 1,52 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: 345 [М+Н]+;
соединение ТХ63636: 120 мг, 51%: 1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,94 (с, 1Н), 8,83 (д, 2Н, J=5,14), 8,68 (с, 1Н), 8,32 (д, 2Н, J=5,45), 3,12 (дд, 1Н, J=6,17, 11,64, 6,04 Гц), 3,02-2,92 (м, 1Н), 2,30 (дд, 1Н, J=1,93, 10,6, 2,03), 2,17-1,97 (м, 2Н), 1,57 (с, 3Н), 1,37 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н); m/z: 345 (100%) [М+Н]+;
соединение ТХ63641: 15 мг, 25%: ^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,98 (с, 1Н), 8,87 (с, 1Н), 8,76 (с, 1Н), 8,55 (д, 1Н, J=7,7), 7,92 (т, 1Н, 7,2, 7,2), 7,49 (т, 1Н, J=5,25, 5,7), 3,14 (дд, 1Н, J=5,99, 12,01, 5,25 Гц), 3,042,91 (м, 1Н), 2,31 (д, 1Н, J=11,88), 2,18-1,94 (м, 2Н), 1,57 (с, 3Н), 1,35 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н); m/z: 345 (100%), [М+Н]+.
Соединение 180.
Раствор соединения 25 (1,4 г, 5,5 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли к кипящей смеси диметилкарбо-ната (6 экв.) и NaH (избыток) в ТГФ (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили раствором KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 180 (1,5 г, 87%) в виде твердого остатка, m/z: 311 [М+Н]+.
Соединение 181.
Раствор гидрохлорида ацетамид (5,3 г, 55 ммоль) и пиперидина (2,4 г, 28 ммоль) в изо-PrOH (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин, затем добавляли соединение 184 (1,5 г, 4,8 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 дней, затем концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 15-65% EtOAc в гексане), получая соединение 181 (0,95 г, 62%) в виде твердого остатка, m/z: 319 [М+Н]+.
Соединение 182.
Соединение 185 (468 мг, 1,47 ммоль) растворяли в CHCl3 (15 мл) и добавляли охлажденный до 0°С раствор триэтиламина (1,5 экв.) и Tf2O (1,1 экз.) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-15% EtOAc в гексане), получая соединение 182 (548 мг, 83%) в виде твердого остатка, m/z: 451 [М+Н]+.
Соединение 183.
Смесь соединения 182 (548 мг, 1,22 ммоль), фенилбороновой кислоты (1,2 экв.), Ph3P (0,36 экв.), K3PO4 (3 зкв.) и DME барботировали N2 в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (0,18 экв.), и барботиро-вание N2 продолжали в течение 10 мин. Реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 35% EtOAc в гексане), получая соединение 183 (380 мг, 83%) в виде грязно-белого твердого остатка: m/z: 379 [М+Н]+.
Соединение 184.
Соединение 183 (0,38 г, 1,0 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 и экстрагировали EtOAc (2x25 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 184 (0,36 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 335 [М+Н]+.
Соединение 185.
Соединение 184 (0,36 г, 1,0 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили раствором KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 184 (0,37 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 363 [М+Н]+.
Соединение 186.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 185 (0,37 г, 1,0 ммоль) в этаноле перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 186 (0,37 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 360 [М+Н]+.
Соединение 187.
Соединение 186 (0,37 г, 1,0 ммоль) растворяли в смеси 2/1 ТГФ/метанол и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч. Реакционную смесь концентрировали и гасили добавлением насыщенного раствора KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 187 (0,37 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 360 [М+Н]+.
Соединение ТХ63529.
Соединение 187 (0,37 г, 1,0 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 2 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63529 (0,24 г, 67%) в виде белого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,86 (с, 1Н), 7,55 (м, 2Н), 7,50 (с, 3Н), 2,88 (м, 1Н), 2,76 (дд, 1Н, J=5,8, 17,0 Гц, 1Н), 2,67 (с, 3Н), 2,36 (дд, 1H, J=2,0, 12,4 Гц), 1,92 (м, 1Н), 1,83 (м, 1Н), 1,47 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,14 (с, 3Н); m/z: 358 [М+Н]+.
Соединение 188.
Смесь соединения 26 (148 мг, 0,53 ммоль) и мочевину (2 экв.) в диоксане перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 дней. Реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в МеОН и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 дней, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли уксусной кислотой (0,2 мл) и водой (2 мл) и концентрировали. Остаток разбавляли 1н. HCl (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 188 в виде коричневого масла, m/z: 305 [М+Н]+.
Соединение 189.
Сединение 188 растворяли в МеОН и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 189 (98 мг, 71%) в виде твердого остатка, m/z: 261 [М+Н]+.
Соединение 190.
Соединение 189 (98 мг, 0,38 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем добавляли дополнительное количество этилформиата (5 мл) и реакционную смесь выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали раствором KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 25 до 100% EtOAc/гексан), получая соединение 190 (52,7 мг, 49%) в виде твердого остатка, m/z: 289 [М+Н]+.
Соединение 191.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 190 (52,7 мг, 0,18 ммоль). Добавляли смесь 9:1 этанол/вода, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 191 в виде твердого остатка, m/z: 286 [М+Н]+.
Соединение 192.
Соединение 191 растворяли в смеси 3:1 МеОН/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН), реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением НОАс и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10% MeOH/CH2Cl2), получая соединение 192 (7,8 мг, 15%) в виде твердого остатка, m/z: 286 [М+Н]+.
Соединение ТХ63553.
Соединение 192 (7,8 мг, 0,027 ммоль) растворяли в сухом ДМФА, добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоика и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 8% МеОН/QH^Cy, затем препаративной тонкослойной хроматографией (силикагель, EtOAc), получая соединение ТХ63553 (2,4 мг, 31%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,74 (с, 1Н), 7,63 (с, 1Н), 7,23 (шир.с, 1Н), 2,84 (дд, 1Н, J=6,5, 16,6 Гц), 2,71-2,64 (м, 1Н), 2,14 (дд, 1Н, J=2,0, 12,5 Гц), 1,94-1,85 (м, 2Н), 1,47 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н), 1,19 (с, 3Н); m/z: 284 [М+Н]+.
Соединение 193.
Раствор соединения 129 (898 мг, 3,37 ммоль), гидрохлорида ацетамида (3,2 г, 34 ммоль) и пиперидина (2,0 мл, 20 ммоль) в изо-PrOH (15 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 2 дней, затем концентрировали. Остаток растворяли в CHCl3, промывали 10% раствором NH4OH (водн.) и солевым
раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 193 (464 мг, 48%) в виде твердого остатка, m/z: 289 [М+Н]+. Соединение 194.
Соединение 193 (464 мг, 1,61 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли 10% раствором NH4OH (водн.) и экстрагировали CHCl3, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 193 (371 мг, 94%) в виде твердого остатка, m/z: 245 [М+Н]+.
Соединение 195.
Соединение 194 (371 мг, 1,52 ммоль) растворяли в бензоле (20 мл), затем добавляли этилформиат (1,25 мл) и 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре, затем концентрировали. Смесь разбавляли раствором KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 194 (371 мг, 90%) в виде твердого остатка, m/z: 273 [М+Н]+.
Соединение 196.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 195 (371 мг, 1,36 ммоль) в этаноле перемешивали в течение 16 ч при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 196 (361 мг, 98%) в виде твердого остатка, m/z: 270 [М+Н]+.
Соединение 197.
Соединение 196 (361 мг, 1,34 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч. Реакционную смесь концентрировали и разбавляли EtOAc, затем промывали насыщенным раствором KH2PO4 и солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 197 (287 мг, 80%) в виде твердого остатка, m/z: 270 [М+Н]+.
Соединение ТХ63554.
Соединение 197 (287 мг, 0,80 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 1 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали и разбавляли EtOAc, затем промывали насыщенным раствором KH2PO4 и солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63554 (145 мг, 51%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,89 (с, 1Н), 8,44 (с, 1Н), 2,96 (дд, 1Н, J=6,8, 17,5 Гц), 2,86 (ддд, 1Н, J=7,0, 10,9, 17,1 Гц), 2,74 (с, 3Н), 2,60 (кв.д, 1Н, J=6,7, 13,1 Гц), 2,15 (м, 2Н), 1,82 (м, 1Н), 1,43 (с, 3Н), 1,33 (д, 3Н, J=6,7 Гц); m/z: 268 [М+Н]+.
Соединение 198.
Раствор соединения 129 (330 мг, 1,24 ммоль), гидрохлорида ацетамид (1,94 г, 12,4 ммоль) и пиперидина (0,74 мл, 7,5 ммоль) в изо-PrOH (10 мл) выдерживали при 85°С в течение 4 дней, затем концентрировали. Остаток растворяли в CHCl3, промывали 10% раствором NH4OH (водн.) и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 20% EtOAc в гексане), получая соединение 198 (260 мг, 60%) в виде твердого остатка, m/z: 351 [М+Н]+.
Соединение 199.
Соединение 198 (260 мг, 0,74 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 3н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, разбавляли 10% NH4OH (водн.) и экстрагировали CHCl3, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 199 (217 мг, 95%) в виде белого твердого остатка, m/z: 307 [М+Н]+.
Соединение 200.
Соединение 199 (217 мг, 0,71 ммоль) растворяли в бензоле (20 мл), затем добавляли этилформиат (1,25 мл) и 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре, затем концентрировали. Смесь разбавляли KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 200 (216 мг, 91%) в виде твердого остатка, m/z: 335 [М+Н]+.
Соединение 201.
Смесь гидроксиламингидрохлорида и соединения 200 (216 мг, 0,65 ммоль) в этаноле перемешивали в течение 4 ч при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли EtOAc, промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и солевым раство
ром, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 200 (190 мг, 89%) в виде твердого остатка, m/z: 332 [М+Н]+. Соединение 202.
Соединение 201 (190 мг, 0,57 ммоль) растворяли в метаноле и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали и разбавляли EtOAc, затем промывали насыщенным раствором KH2PO4 и солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 201 (228 мг, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 332 [М+Н]+.
Соединение ТХ63569.
Соединение 202 (228 мг, 0,57 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 1 ч), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали и разбавляли EtOAc, затем промывали насыщенным раствором KH2PO4 и солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63569 (68 мг, 36%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 9,01 (с, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 8,49 (м, 2Н), 7,55 (м, 3Н), 3,04 (дд, 1Н, J=6,5, 17,8 Гц), 2,94 (ддд, 1Н, J=7,3, 11,3, 17,8 Гц), 2,64 (кв.д, 1Н, J=6,7, 12,7 Гц), 2,22 (м, 2Н), 1,88 (м, 1Н), 1,51 (с, 3Н), 1,37 (д, 3Н, J=6,7 Гц); m/z: 330 [М+Н]+.
Соединение 203.
Соединение 25 (0,297 г, 1,18 ммоль) растворяли в DCM (50 мл) и добавляли MgBr-Et2O (0,776 г, 3,0 ммоль), с последующим добавлением изо-Pr^NEt (0,42 мл, 2,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение приблизительно 40 мин, в течение которых реакционная смесь постепенно становилась оранжевой. Добавляли по каплям бензоилхлорид (0,347 г, 2,44 ммоль) в DCM (3 мл), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором NaHCO3 (10 мл), слои разделяли, и органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до красноватого масла. Продукт исследовали масс-спектрометрическим анализом, МС: m/z: [M+H]+ 357,0. Данный неочищенный материал применяли непосредственно на следующей стадии. Остаток растворяли в EtOH (16 мл), и газообразный азот барботировали через раствор в течение 5 мин. Добавляли шприцом фенилгидразин (0,5 мл, 5,08 ммоль) и плотно закрытую пробирку выдерживали в течение ночи при 80°С и перемешивании. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали досуха, растворяли в EtOAc (80 мл), промывали насыщенным водным раствором KH2PO4 (15 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (15 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до красного масла. Продукт исследовали масс-спектрометрическим анализом, МС: m/z: [M+H]+ 429,1. Данное вещество применяли непосредственно на следующей стадии. Неочищенную кетальную смесь растворяли в МеОН (20 мл) и добавляли 1н. HCl (4 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем концентрировали, и остаток распределяли между EtOAc и насыщенным водным раствором NaHCO3 (20 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до красного масла/твердого остатка. Масло/твердый остаток хроматографировали последовательно 3 раза на силикагеле (230-400 меш, 26 г), применяя смесь 20% гексан/EtOAc, получая более полярный изомер (203, 94,4 мг) с небольшим количеством менее полярной примеси. МС: m/z: [M+H]+ 385,1.
Соединение 204.
Соединение 203 (91 мг, 0,237 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли раствором KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 204 (90 мг), m/z: [M+H]+ 413,1.
Соединение 205.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 203 (90 мг, 0,22 ммоль). Добавляли смесь 9:1 EtOH/H2O, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток хроматографировали на силикагеле (230400 меш, 10 г), применяя смесь 20% гексан/EtOAc в виде бледно-желтого стеклообразного остатка, получая соединение 205 (22,8 мг), m/z: [М+Н]+ 410,1.
Соединение 206.
Соединение 205 (22,8 мг, 0,054 ммоль) растворяли в смеси 3:1 МеОН/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного раствора KH2PO4 и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение 206 (22 мг) в
виде грязно-белой пены. Данное вещество применяли непосредственно на следующей стадии. Соединение ТХ63605.
Соединение 206 (22 мг, 0,038 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток хроматографировали дважды на силикагеле, применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, затем очищали препаративной тонкослойной хроматографией, применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63605 (4,5 мг) в виде стеклообразного остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 7,73-7,76 (м, 2Н), 7,36-7,60 (м, 9Н), 3,00-3,08 (м, 1Н), 2,85-2,95 (м, 1Н), 2,41-2,44 (м, 1Н), 1,92-2,10 (м, 2Н), 1,62 (с, 3Н), 1,33 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 408,1.
Соединение 208.
Соединение 207 (4,0 г, 19 ммоль) растворяли в трет-BuOH и добавляли раствор KO-трет-Bu в трет-BuOH. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин и добавляли йодметан. Реакционную смесь перемешивали в течение 45 мин при комнатной температуре, гасили насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и концентрировали. Смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10% EtOAc в гексане), получая соединение 208 (2,5 г, 55%) в виде бледно-желтой жидкости, m/z: 177 (М-СН3ОСН2ОН).
Соединение 209.
Соединение 208 (2,5 г, 10 ммоль) растворяли в EtOAc в атмосфере N2 и добавляли 10% Pd/C. Колбу тщательно продували Н2 и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали, получая соединение 209 (2,5 г, 99%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 4,70 (д, 1Н, J=7 Гц), 4,61 (д, 1Н, J=7 Гц), 3,65 (т, 1Н, J=6 Гц), 3,38 (с, 3Н), 2,58 (тд, 1Н, J=7,17 Гц), 2,25 (тд, 1Н, J=7,17 Гц), 1,91 (м, 3Н), 1,77 (м, 2Н), 1,53 (м, 1Н), 1,23 (с, 6Н), 1,10 (м, 1Н), 1,01 (с, 3Н).
Соединение 210.
Смесь соединения 209 (2,5 г, 10 ммоль), этиленгликоля и гидрата п-толуолсульфокислоты в толуоле кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч с азеотропным удалением воды. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток растворяли в CH2Cl2 и добавляли PDC (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 22 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит (элюировали CH2Cl2) и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10% EtOAc в гексане), получая соединение 210 (1,8 г, 73%) в виде бесцветного масла.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 3,90 (м, 4Н), 2,33 (м, 1Н), 2,10 (м, 2Н), 1,94 (м, 1Н), 1,85 (м, 1Н), 1,72 (м, 2Н), 1,49 (м, 1Н), 1,26 (м, 1Н), 1,25 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н), 0,88 (с, 3Н).
Соединение 211.
Соединение 210 (0,81 г, 3,4 ммоль) растворяли в этилформиате (8,2 мл), охлаждали до 0°С и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН, 9,6 мл). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли трет-BuOMe, охлаждали до 0°С и гасили концентрированной HCl (4,25 мл). Смесь разбавляли водой и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 211 (0,92 г, количественный) в виде вязкого масла, m/z: 267 [М+Н]+.
Соединение 212.
Смесь 211 (0,90 г, 3,4 ммоль) и метилгидразина (0,20 г, 4,4 ммоль) в этаноле (20 мл) выдерживали при 65°С в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 50 до 75% EtOAc в гексане), получая соединение 212 (0,25 г, 27%) в виде вязкого масла, m/z: 277 [М+Н]+.
Соединение 213.
Соединение 212 (0,25 г, 0,91 ммоль) растворяли в ТГФ и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение 24 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 213 (0,19 г, 90%) в виде твердого остатка, m/z: 233 [М+Н]+.
Соединение 214.
Раствор соединения 213 (0,27 г, 1,2 ммоль) в ТГФ добавляли к -78°С раствору LDA (2,5 экв.) в ТГФ. Реакционную смесь перемеривали при -78°С в течение 30 мин, затем добавляли раствор TsCN (1,3 экв.) в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительных 30 мин, затем гасили насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь разбав
ляли водой и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 214 (0,24 г, 80%) в виде твердого остатка, m/z: 258 [М+Н]+. Соединение ТХ63436.
Соединение 214 (90 мг, 0,35 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Затем добавляли пиридин, и реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и промывали 1н. HCl (водн.), насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток перекристаллизовывали из EtOAc, получая соединение ТХ63436 (41 мг, 46%) в виде кристаллического твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 7,24 (с, 1Н), 7,15 (с, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 2,95 (шир.т, 1Н, J=10 Гц), 2,82 (дд, 1Н, J=8, 15 Гц), 2,18 (дд, 1Н, J=10, 15 Гц), 1,81 (с, 3Н), 1,39 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); m/z: 256 [М+Н]+.
Соединение 216.
Соединение 215 (2,8 г, 9,5 ммоль) растворяли в ТГФ (75 мл) в атмосфере N2 и добавляли 10% Pd/C (0,25 г). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и колбу тщательно продували Н2. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 8 ч, затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Колбу снова охлаждали до 0°С и добавляли дополнительную порцию 10% Pd/C (0,20 г). Колбу тщательно продували Н2 и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 8 ч, затем перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в МеОН (50 мл) и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН, 0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрировали. Смесь разбавляли насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 3 до 5% EtOAc в гексане), получая соединение 216 (1,18 г, 42%) в виде масла, m/z: 297 [М+Н]+.
Соединение 217.
Смесь соединения 216 (0,95 г, 3,2 ммоль), этиленгликоля и гидрата п-толуолсульфокислоты в толуоле кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч с азеотропным удалением воды. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 217 (1,09 г, количественный) в виде масла, m/z: 342 [М+Н]+.
Соединение 218.
Соединение 217 (1,33 г, 3,91 ммоль) растворяли в ТГФ и добавляли гидрат TBAF (1,1 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней, причем добавляли дополнительные порции гидрата TBAF (0,55 экв.) через 8 и 24 ч. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 40% EtOAc в гексане), получая соединение 218 (0,83 г, 94%) в виде твердого остатка, m/z: 227 [М+Н]+.
Соединение 219.
Соединение 218 (0,83 г, 3,67 ммоль) растворяли в CH2Cl2 и добавляли PDC (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит (элюировали CH2Cl2) и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10% EtOAc в гексане), получая соединение 219 (0,82 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 225 [М+Н]+.
Соединение 220.
Соединение 219 (0,80 г, 3,6 ммоль) растворяли в этилформиате, охлаждали до 0°С и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 220 (0,90 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 253 [М+Н]+.
Соединение 221.
Смесь соединения 220 (0,70 г, 2,8 ммоль) и метилгидразина (0,32 г, 6,9 ммоль) в этаноле (13 мл) выдерживали при 65°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 80 до 100% EtOAc в гексане), получая грязно-белый твердый остаток. Остаток растворяли в ТГФ и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 221 (0,50 г, 83%) в виде твердого остатка, m/z: 219 [М+Н]+.
Соединение 222.
Соединение 221 (225 мг, 1,03 ммоль) растворяли в этилформиате, охлаждали до 0°С и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь нагревали до комнатной температуры и пере
мешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 222 (0,28 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 247 [М+Н]+. Соединение 223.
Соединение 222 (0,28 г, 1,03 ммоль) растворяли в смеси 9/1 этанол/вода и добавляли гидроксила-мингидрохлорид. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 60°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 223 (0,26 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 244 [М+Н]+.
Соединение 224.
Соединение 223 (0,25 г, 1,03 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТГФ, добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН), реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного раствора KH2PO4 и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым, раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 224 (0,15 г, 60%) в виде твердого остатка, m/z: 244 [М+Н]+.
Соединение ТХ63533.
Соединение 224 (150 мг, 0,62 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Затем добавляли пиридин и затем реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли EtOAc и промывали 1н. HCl (водн.), насыщенным раствором Na-HCO3 (водн.) и солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Объединенные водные фракции экстрагировали CHCl3, который сушили над MgSO4 и концентрировали. Объединенный неочищенный продукт очищали последовательной колоночной хроматографией, вначале (силикагель, 50%
EtOAc в CH2Cl2), затем (силикагель, 2% МеОН в CH2Cl2), получая соединение ТХ63533 (30 мг, 20%) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,28 (с, 1Н), 7,24 (с, 1Н), 3,97 (с, 3Н), 2,95 (ддд, 1Н, J=6,2, 10,8, 13,9 Гц), 2,86 (кв.д, 1Н, J=6,5, 13,7 Гц), 2,73 (дд, 1Н, J=6,1, 13,9 Гц), 2,46 (дд, 1Н, J=10,8, 13,9 Гц), 1,36 (с, 3Н), 1,33 (д, 3Н, J=6,6 Гц); m/z: 242 [М+Н]+.
Соединение 225.
Соединение 216 (0,61 г, 2,1 ммоль) растворяли в MeCN, затем добавляли гексаметилдисилазан (10 экв.) и NaI (5 экв.), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Добавляли хлор-триметилсилан (5 экв.) и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, фильтровали через короткий слой силикагеля (элюировали EtOAc) и концентрировали. Остаток растворяли в MeCN, добавляли Pd(OAc)2 (2 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через короткий слой силикагеля (элюировали EtOAc), промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10% EtOAc в гексане), получая соединение 225 (0,48 г, 79%) в виде белого твердого остатка, m/z: 295 [М+Н]+.
Соединение 226.
Раствор соединения 225 (0,47 г, 1,6 ммоль) в ТГФ добавляли к 0°С раствору KHMDS (2 экв.) в ТТФ. Раствор перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем добавляли метилйодид (4 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, гасили насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 10% EtOAc в гексане), получая соединение 226 (0,40 г, 81%) в виде белого твердого остатка, m/z: 309 [М+Н]+.
Соединение 227.
Соединение 226 (0,39 г, 1,3 ммоль) растворяли в ТГФ в атмосфере N2 и добавляли 10% Pd/C. Колбу тщательно продували Н2 и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали, получая соединение 227 (0,39 г, 99%) в виде масла, m/z: 311 [М+Н]+.
Соединение 228.
Соединение 227 (0,39 г, 1,3 ммоль) растворяли в CH2Cl2 (2 мл), затем добавляли метилэтилдиоксо-лан (3 мл), этиленгликоль (1 капля) и п-толуолсульфокислоту (кат.). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней, гасили насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 228 (0,44 г, 99%) в виде масла, m/z: 355 [М+Н]+.
Соединение 229.
Соединение 228 (0,44 г, 1,3 ммоль) растворяли в ТТФ и добавляли раствор TBAF в ТГФ (1,0 М, 2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней, причем порции
TBAF гидрата (0,65 экв.) добавляли через 24 и 48 ч. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 40% EtOAc в гексане), получая соединение 229 (0,27 г, 89%) в виде твердого остатка, m/z: 241 [М+Н]+. Соединение 230.
Соединение 229 (0,27 г, 1,1 ммоль) растворяли в CH2Cl2 и добавляли PDC (1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит (элюировали CH2Cl2) и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 20% EtOAc в гексане), получая соединение 230 (0,24 г, 90%) в виде твердого остатка, m/z: 239 [М+Н]+.
Соединение 231.
Соединение 230 (0,23 г, 0,97 ммоль) растворяли в этилформиате, охлаждали до 0°С и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 231 (0,29 г, количественный) в виде твердого остатка, m/z: 267 [М+Н]+.
Соединение 232.
Смесь соединения 231 (0,29 г, 0,97 ммоль) и метилгидразина (90 мг, 2,0 ммоль) в этаноле (0,5 мл) выдерживали при 65°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 75% EtOAc в гексане), получая белый твердый остаток. Остаток растворяли в ТГФ и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 232 (0,17 г, 7 6%) в виде твердого остатка, m/z: 233 [М+Н]+.
Соединение 233.
Соединение 232 (0,17 г, 0,73 ммоль) растворяли в этилформиате, охлаждали до 0°С и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 233 (0,19 г, 96%) в виде твердого остатка, m/z: 261 [М+Н]+.
Соединение 234.
Соединение 233 (0,19 г, 0,73 ммоль) растворяли в смеси 8/1 этакол/вода и добавляли гидроксила-мингидрохлорид. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 60°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 234 (0,17 г, 91%) в виде бледно-желтого твердого остатка, m/z: 258 [М+Н]+.
Соединение 235.
Соединение 234 (0,17 г, 0,66 ммоль) растворяли в смеси 1/1 метанол/ТГФ, добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН), реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4 и экстрагировали EtOAc, затем промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение 235 (0,12 г, 71%) в виде белого твердого остатка, m/z: 258 [М+Н]+.
Соединение ТХ63559.
Соединение 235 (0,12 г, 0,47 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Затем добавляли пиридин и затем реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc в CH2Cl2), получая соединение ТХ63559 (85 мг, 71%) в виде твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,29 (с, 1Н), 7,25 (с, 1Н), 3,95 (с, 3Н), 3,11 (дд, 1Н, J=6,3, 11,3 Гц), 2,67 (дд, 1Н, J=6,3, 13,8 Гц), 2,60 (дд, 1Н, J=11,4, 13,6 Гц), 1,40 (с, 6Н), 1,32 (с, 3H); m/z: 256 [М+Н]+. Соединение 236.
К раствору соединения 68 (260 мг, 0,70 ммоль) в диоксане (4 мл) добавляли Et3N (0,5 мл) и CuI (6,7 мг, 0,035 ммоль). Азот барботировали через смесь в течение 15 мин. Добавляли TMS-ацетилен (207 мг, 2,11 ммоль) и (Ph3P)2PdCl2 (14,8 мг, 0,021 ммоль) и смесь выдерживали в герметично закрытой колбе при 80°С в течение ночи. Смесь охлаждали и концентрировали. Флэш-хроматография (20% EtOAc/DCM) давала 9 мг (3%) соединения 236 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 387,1 [М+Н]+.
Соединение 237.
Соединение 236 (30 мг, 0,077 ммоль) растворяли в ТГФ (3 мл) и добавляли 1 М HCl (0,5 мл). Раствор перемешивали в течение 3 дней, затем разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 26 мг (98%) соединения 237 в виде масла. МС (APCI): m/z: 343 [М+Н]+.
Соединение 238.
Раствор соединения 237 (26 мг, 0,076 ммоль) в этилформиате (3 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,2 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 26 мг (больше 100%) соединения 238 в виде масла. МС (APCI): m/z: 299 [М+Н]+.
Соединение 239.
Соединение 238 (0,076 ммоль) растворяли в EtOH (3 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламин-гидрохлорид (5,8 мг, 0,084 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 60°С в течение ночи. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (10 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 27 мг (больше 100%) соединения 239 в виде коричневого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 296 [М+Н]+.
Соединение 240.
Соединение 239 (0,076 ммоль) растворяли в ТГФ (3 мл) и МеОН (1 мл) и добавляли NaOMe (0,1 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (10 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Флэш-хроматография (1:4 EtOAc/DCM) давала 11 мг (50%) соединения 240 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 296 [М+Н]+.
Соединение ТХ63651.
Соединение 240 (11 мг, 0,0,037 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (6,4 мг, 0,022 ммоль) и раствор перемешивали в течение 3 ч при 0°С. Добавляли пиридин (0,05 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение ночи. После охлаждения раствор концентрировали в вакууме до коричневого масла. Флэш-хроматография (25% EtOAc/гексан) давала 6 мг (55%) соединения ТХ63651 в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,45 (с, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 3,63 (с, 1Н), 2,85-2,78 (дд, 1Н, J=5,9, 11,5, 5,6 Гц), 2,61-2,52 (м, 1Н), 2,18-2,13 (дд, 1Н, J=1,9, 10,26, 1,9), 1,99-1,93 (м, 1Н), 1,92-180 (м, 1Н), 1,48 (с, 3Н), 1,30 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: 294 [М+Н]+.
Соединение 241.
Соединение 68 (305 мг, 0,826 ммоль) растворяли в DMAc (5 мл). К данному раствору добавляли Zn(CN)2 (65 мг, 0,56 ммоль), dppf (95 мг, 0,17 ммоль) и Na2CO3 (90 мг, 0,83 ммоль). Азот барботировали через смесь в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (20 мг, 0,09 ммоль), и азот барботировали в течение 10 мин. Суспензию выдерживали при 120°С в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили 25 мл воды и экстрагировали эфиром (2x50 мл). Органические экстракты концентрировали, очищали на колонке с сили-кагелем, элюировали от 5 до 20% EtOAc/гексан, получая соединение 241 в виде грязно-белого твердого остатка (0,21 г, выход 80%). МС (APCI): [М+Н]+ 316.
Соединение 242.
Раствор соединения 241 (145 мг, 0,46 ммоль) в МеОН (5 мл) обрабатывали 3н. HCl (водн.) (1,5 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (15 мл). Органический слой сушили над MgSO4, концентрировали, получая соединение 241 в виде пены (120 мг, 96%). МС (APCI): [М+Н]+ 272.
Соединение 243.
К раствору соединения 242 (120 мг, 0,44 ммоль) в 5 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (0,5 г, 6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4 (водн.). Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 243 (130 мг, выход 100%). МС (APCI): [М+Н]+ 300.
Соединение 244.
К раствору соединения 243 (130 мг, 0,44 ммоль) в 5 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (62 мг, 2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 244 (130 мг,
100%). МС (APCI): [M+H]+ 297. Соединения 245 и 246.
К раствору соединения 244 (130 мг, 0,44 ммоль) в 2 мл ТГФ и 1 мл МеОН добавляли 30% NaOMe (0,66 г, 8 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с раствором KH2PO4 (насыщенный, 15 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая смесь соединений 245 и 246 (130 мг, выход 100%). МС (APCI): 297 [М+Н]+ и 315.
Соединения ТХ63613 и ТХ63619.
К смеси соединений 245 и 246 (130 мг, 0,44 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли DBDMH (72 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г, 30 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с си-ликагелем, элюировали 10-100% EtOAc/гексан, собирая первый менее полярный дикарбонитрил ТХ63613 в виде грязно-белого твердого остатка (50 мг, выход 39%).
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,36 (с, 1Н), 3,98 (с, 3Н), 2,90 (дд, 1Н, J=15, 5 Гц), 2,64 (ддд, 1Н, J=15, 10, 5 Гц), 2,12 (д, 1Н, J=10 Гц), 1,98 (дд, 1Н, J=15, 5 Гц), 1,86 (ддд, 1Н, J=25, 15, 5 Гц), 1,45 (с, 3Н), 1,28 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н); МС (APCI): [М+Н]+ 295; с последующим вторым более полярным карбоксамидом ТХ63619 в виде грязно-белого твердого остатка (10 мг, выход 8%).
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,46 (с, 1Н), 7,45 (с, 1Н), 7,26 (с, 1Н), 3,93 (с, 3Н), 2,85 (дд, 1Н, J=15, 5 Гц), 2,62-2,66 (м, 1Н), 2,15 (д, 1Н, J=10 Гц), 1,89-1,92 (м, 1Н), 1,71-1,84 (м, 1Н), 1,41 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,10 (с, 3Н); МС (APCI): [М+Н]+ 313.
Соединение 247.
Соединение 241 (110 мг, 0,34 ммоль) добавляли к 10 мл МеОН, насыщенного HCl, и смесь выдерживали при 60°С в течение 16 ч в герметично закрытой емкости. Реакционную смесь концентрировали и гасили K2CO3 (конц., 25 мл), и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Экстракты сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 247 в виде белого твердого остатка (105 мг, выход 100%). МС (APCI): m/z: [М+Н]+ 305.
Соединение 248.
К раствору соединения 247 (105 мг, 0,36 ммоль) в 5 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (0,2 г, 3 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4 (водн.). Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 247 (110 мг, выход 88%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 347.
Соединение 249.
К раствору соединения 248 (110 мг, 0,32 ммоль) в 5 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (50 мг, 2 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 249 (110 мг, 100%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 344.
Соединения 250 и 251.
К раствору соединения 248 (110 мг, 0,32 ммоль) в 2 мл ТГФ и 1 мл МеОН добавляли NaOEt (40 мг металлического Na в 1 мл EtOH, 5 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с KH2PO4 (насыщенный, 15 мл) и экстрагировали EtOAc (2x 25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая смесь соединений 250 и 251 (110 мг, выход 100%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 316 и 344.
Соединения ТХ63630 и ТХ63631.
К смеси соединений 250 и 251 (110 мг, 0,32 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли DBDMH (51 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г, 40 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с си-ликагелем, элюировали от 10 до 100% EtOAc/гексан, получая менее полярный этиловый эфир ТХ63630 в виде грязно-белого твердого остатка (40 мг, выход 37%).
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,48 (с, 1Н), 4,40-4,34 (кв., 2Н, J=7,1, 7,2, 7,1 Гц), 4,15 (с, 3Н), 3,10-3,00 (дд, 1Н, J=5,3, 12,32, 5,3 Гц), 2,75-2,63 (м, 1Н), 2,18-2,12 (дд, 1Н, J=1,7, 10,49, 1,8), 2,01-1,93 (дд, 1Н, J=6,91, 6,44, 1,93), 1,92-1,81 (м, 1Н), 1,48 (с, 3Н), 1,44-1,37 (т, 3Н, J=7,13, 7,08), 1,31 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: [M+H]+ 342, и более полярную кислоту ТХ63631 выделяли в виде грязно-белого твердого остатка (13 мг, выход 13%).
1Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО) 5 13,40 (с, 1Н), 8,47 (с, 1Н), 4,05 (с, 3Н), 2,92 (дд, 1Н, J=5,6, 11,8, 5,6 Гц), 2,63-2,54 (м, 1Н), 2,19-2,13 (м, 1Н), 1,95-1,88 (м, 1Н), 1,88-1,75 (м, 1Н), 1,42 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,13 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: [M+H]+ 314.
Соединение 252.
К раствору соединения 241 (160 мг, 0,51 ммоль) в толуоле (5 мл) добавляли триметилсилилазид (0,13 мл, 1,01 ммоль), с последующим добавлением оксида дибутилолова (13 мг, 0,051 ммоль). Смесь выдерживали в течение ночи в масляной бане при 110°С. Раствор охлаждали и переносили в толстостенную колбу. Добавляли дополнительные порции триметилсилилазида (0,13 мл) и оксида дибутилолова (13 мг) и раствор выдерживали в течение ночи в масляной бане при 130°С. После охлаждения добавляли МеОН (5 мл) и раствор концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,26 г неочищенного соединения 252 в виде оранжевого твердого остатка, МС (APCI): m/z: 359,1 [М+Н]+.
Соединение 253а.
Соединение 252 растворяли в ДМФА (5 мл), добавляли карбонат калия (0,35 г, 2,55 ммоль) с последующим добавлением метилйодида (0,16 мл, 2,55 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, добавляли воду (20 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме. Флэш-хроматография (50% EtOAc/гексан) давала 112 мг (59%) соединения 253а в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 373,1 [М+Н]+.
Соединение 254а.
Соединение 253а (108 мг, 0,29 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли 1 М HCl (1 мл). Раствор перемешивали в течение 3 дней, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 95 мг (100%) соединения 254а в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 329,0 [М+Н]+.
Соединение 255а.
Раствор соединения 254а (95 мг, 0,29 ммоль) в этилформиате (4 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,5 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 100 мг (97%) соединения 254а в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 357,0 [М+Н]+.
Соединение 256а.
Соединение 255а (100 мг, 0,28 ммоль) растворяли в EtOH (2 мл), ТГФ (2 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламингидрохлорид (21 мг, 0,31 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем выдерживали при 50°С в течение ночи. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 97 мг (98%) соединения 256а в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 354,0 [М+Н]+.
Соединение 257а.
Соединение 256а (97 мг, 0,27 ммоль) растворяли в ТГФ (3 мл) и МеОН (1 мл) и добавляли NaOMe (0,5 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (20 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Флэш-хроматография (1:3 EtOAc/DCM) давала 86 мг (89%) соединения 257а в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 354,0 [М+Н]+.
Соединение ТХ63665.
Соединение 256а (86 мг, 0,24 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (42 мг, 0,15 ммоль) и раствор перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Добавляли пиридин (0,3 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 5 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (15% EtOAc/DCM) давала 64 мг (74%) соединения ТХ63665 в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 3,53 (с, 1Н), 4,46 (с, 3Н), 4,24 (с, 3Н), 3,15 (дд, 1Н, J=6,1, 17,1 Гц), 2,78 (м, 1Н), 2,24 (м, 1Н), 1,87-2,05 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,32 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: 352,0 [М+Н]+.
Соединение 253b.
Соединение 252 (0,41 ммоль) растворяли в ДМФА (3 мл) и добавляли K2CO3 (0,28 г, 2,06 ммоль) с последующим добавлением бензилбромида (0,1 мл, 0,82 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, добавляли воду (20 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме. Флэш-хроматография (от 30 до 50% EtOAc/гексан) давала 47 мг (26%) соединения 253b в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 449,3 [М+Н]+.
Соединение 254b.
Соединение 253b (44 мг, 0,098 ммоль) растворяли в ТГФ (3 мл) и добавляли 1 М HCl (0,5 мл). Раствор перемешивали в течение 2 дней, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 40 мг (100%) соединения 254b в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 405,3 [М+Н]+.
Соединение 255b.
Раствор соединения 254b (95 мг, 0,23 ммоль) в ТГФ (3 мл) и этилформиате (1 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,4 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане и гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 105 мг (больше 100%) соединения 255b в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 433,1 [М+Н]+.
Соединение 256b.
Соединение 255b (0,23 ммоль) растворяли в EtOH (1 мл), ТГФ (3 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламингидрохлорид (19 мг, 0,28 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 100 мг (100%) соединения 256b в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 430,2 [М+Н]+.
Соединение 257b.
Соединение 256b (100 мг, 0,23 ммоль) суспендировали в 3:1 ТГФ/МеОН (4 мл) и добавляли NaOMe (0,4 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (20 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 70 мг (70%) соединения 257b в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 430,2 [М+Н]+.
Соединение ТХ63729.
Соединение 257b (70 мг, 0,16 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (28 мг, 0,098 ммоль) и раствор перемешивали 90 мин при 0°С. Добавляли пиридин (0,3 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 3 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (5% EtOAc/DCM) давала 55 мг (79%) соединения ТХ63729 в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,47 (с, 1Н), 7,38 (м, 5Н), 5,81 (с, 2Н), 4,18 (с, 3Н), 3,08 (ддд, 1Н, J=1,6, 6,0, 17,1 Гц), 2,73 (ддд, 1Н, J=7,1, 11,7, 18,7, Гц), 2,18 (дд, 1Н, J=2,1, 12,1 Гц), 1,81-1,99 (м, 2Н), 1,48 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: 428,2 [М+Н]+.
Соединение 253с.
Неочищенное соединение 252 (0,41 ммоль) растворяли в ДМФА (3 мл) и добавляли K2CO3 (0,28 г, 2,05 ммоль), с последующим добавлением изопропилйодида (0,2 мл, 2,05 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, добавляли воду (20 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,18 г сырого соединения 253с в виде коричневого масла. МС (APCI): m/z: 401,2 [М+Н]+.
Соединение 254с.
Неочищенное соединение 253с (0,18 г) растворяли в ТГФ (3 мл) и добавляли 1 М HCl (0,5 мл). Раствор перемешивали в течение 5 дней, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 0,15 г неочищенного масла. Флэш-хроматография (30% EtOAc/гексан) давала 111 мг (76%) соединения 254с в виде бесцветного масла. МС (APCI): m/z: 357,2 [М+Н]+.
Соединение 255с.
Раствор соединения 254с (0,11 г, 0,31 ммоль) в ТГФ (3 мл) и этилформиате (1 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,5 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане и гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 113 мг (95%) соединения 255с в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 385,1 [М+Н]+.
Соединение 256с.
Соединение 255с (113 мг, 0,29 ммоль) растворяли в EtOH (1 мл), ТГФ (2 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламингидрохлорид (25 мг, 0,35 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 50°С в течение 3 ч, затем охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали
солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 111 мг (99%) соединения 256с в виде белого твердого остатка. МС (APCI): 382,2 [М+Н]+. Соединение 257с.
Соединение 256с (111 мг, 0,29 ммоль) суспендировали в ТГФ:МеОН (4 мл) и добавляли NaOMe (0,5 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (20 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 112 мг (100%) соединения 257с в виде светло-желтой пены. МС (APCI): m/z: 382,2 [М+Н]+.
Соединение ТХ63734.
Соединение 257с (111 мг, 0,29 ммоль) растворяли в ДМФА (3 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (50 мг, 0,17 ммоль) и раствор перемешивали в течение 90 мин при 0°С. Добавляли пиридин (0,5 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,18 г светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (5% EtOAc/DCM) давала 75 мг (68%) соединения ТХ63734 в виде светло-желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,50 (с, 1Н), 5,16 (септет, 1Н, J=6,7 Гц), 4,22 (с, 3Н), 3,13 (ддд, 1Н, J=1,3, 6,0, 17,1 Гц), 2,77 (ддд, 1Н, J=7,1, 11,7, 17,1 Гц), 2,22 (дд, 1Н, J=2,2, 12,1 Гц), 1,94 (м, 2Н), 1,71 (д, 6Н, J=6,7 Гц), 1,52 (с, 3Н), 1,30 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: 380,2 [М+Н]+.
Соединение 258.
Соединение 241 (115 мг, 0,36 ммоль) суспендировали в EtOH (2 мл) и добавляли гидроксиламин (70 мг, 50% раствор в воде). Грели при 50°С в течение ночи, затем охлаждали и концентрировали до белого твердого остатка, получая соединение 258. МС (APCI): m/z: 349,1 [М+Н]+.
Соединение 259.
Соединение 258 (0,36 ммоль) суспендировали в диоксане (1 мл) и добавляли раствор диметилацета-ля диметилацетамида (146 мг, 1,09 ммоль) в диоксане (1 мл). Смесь выдерживали при 60°С в течение 2 ч. Смесь охлаждали и концентрировали до желтого твердого остатка. Флэш-хроматография (20% EtOAc/DCM) давала 130 мг (96%) соединения 259 в виде белого твердого остатка. МС (APCI) 373,1 [М+Н]+.
Соединение 260.
Соединение 259 (125 мг, 0,34 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли 1 М HCl (1 мл). Раствор перемешивали в течение 2 дней, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 110 мг (100%) соединения 260 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 329,1 [М+Н]+.
Соединение 261.
Раствор соединения 260 (110 мг, 0,33 ммоль) в ТГФ (2 мл) и этилформиате (2 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,6 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане и гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 120 мг (100%) соединения 261 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 357,1 [М+Н]+.
Соединение 262.
Соединение 261 (119 мг, 0,33 ммоль) суспендировали в EtOH (2 мл), ТГФ (2 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламингидрохлорид (28 мг, 0,40 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем выдерживали при 50°С в течение ночи. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали. Флэш-хроматография (15% EtOAc/DCM) давала 90 мг (77%) соединения 262 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 354,1 [М+Н]+.
Соединение 263.
Соединение 262 (90 мг, 0,25 ммоль) суспендировали в ТГФ (3 мл) и МеОН (1 мл) и добавляли Na-OMe (0,5 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 3 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (20 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 88 мг (98%) соединения 263 в виде светло-желтого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 354,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63723.
Соединение 263 (88 мг, 0,25 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (43 мг, 0,15 ммоль) и раствор перемешивали в течение 90 мин при 0°С. Добавляли пиридин (0,4 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения рас
твор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (5% EtOAc/DCM) давала 68 мг (78%) соединения ТХ63723 в виде светло-желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,41 (с, 1Н), 4,10 (с, 3H), 3,02 (ддд, 1Н, J=1,3, 6,0, 17,3 Гц), 2,64 (м, 1Н), 2,59 (с, 3Н), 2,12 (дд, 1Н, J=2,1, 12,1 Гц), 1,75-1,94 (м, 2Н), 1,43 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,16 (с, 3Н); МС (APCI) m/z: 352,1 [М+Н]+.
Соединение 264.
Неочищенное соединение 252 (0,41 ммоль) растворяли в пиридине (3 мл) и добавляли уксусный ангидрид (0,42 мл, 4,44 ммоль). Раствор выдерживали при 110°С в течение 3 ч, затем охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,35 г темно-коричневого масла. Флэш-хроматография (1:1 EtOAc/гексан) давала 225 мг сырого соединения 264 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 373,1 [М+Н]+.
Соединение 265.
Сырое соединение 264 (0,22 г, 0,5 9 ммоль) растворяли в ТГФ (3 мл) и добавляли 1 М HCl (0,5 мл). Раствор перемешивали в течение 2 дней, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 0,20 г неочищенной пены. Флэш-хроматография (1:1 EtOAc/гексан) давала 66 мг (34%) соединения 264 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 329,1 [М+Н]+.
Соединение 266.
Раствор соединения 265 (66 мг, 0,20 ммоль) в ТГФ (2 мл) и этилформиате (2 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,36 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане, гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 71 мг (99%) соединения 266 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 357,2 [М+Н]+.
Соединение 267.
Соединение 266 (71 мг, 0,20 ммоль) растворяли в EtOH (1 мл), ТГФ (2 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламингидрохлорид (17 мг, 0,24 ммоль) и реакционную смесь выдерживали в течение ночи при 50°С, затем охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме. Флэш-хроматография (1:1 EtOAc/DCM) давала 20 мг (28%) соединения 267 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 354,2 [М+Н]+.
Соединение 268.
Соединение 267 (20 мг, 0,057 ммоль) растворяли в 1:1 ТГФ/МеОН (2 мл) и добавляли NaOMe (0,1 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч, затем охлаждали и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (10 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 20 мг (100%) соединения 268 в виде бежевой пены. МС (APCI): m/z: 354,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63735.
Соединение 268 (20 мг, 0,057 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (9,7 мг, 0,034 ммоль) и раствор перемешивали в течение 90 мин при 0°С. Добавляли пиридин (0,1 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме. Флэш-хроматография (10% EtOAc/DCM) давала 12 мг (60%) соединения ТХ63735 в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,46 (с, 1Н), 4,23 (с, 3Н), 3,06 (ддд, 1Н, J=1,0, 6,0, 11,2 Гц), 2,75 (ддд, 1Н, J=7,2, 11,7, 17,1 Гц), 2,62 (с, 3Н), 2,19 (дд, 1Н, J=2,0, 12,1 Гц), 1,95 (м, 2Н), 1,50 (с, 3Н), 1,30 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: 352,1 [М+Н]+.
Соединение 269.
К раствору соединения 241 (0,47 г, 1,49 ммоль) в EtOH (6 мл) добавляли воду (3 мл), с последующим добавлением KOH (0,42 г, 7,45 ммоль). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Добавляли насыщенный раствор KH2PO4, и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,50 г (100%) соединения 269 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 334,2 [М+Н]+.
Соединение 270.
DMA-диметилацеталь (2 мл) добавляли к соединению 269 (135 мг, 0,40 ммоль) и смесь выдерживали при 80°С в течение 2 ч. Раствор охлаждали и концентрировали, получая соединение 270 в виде белого
твердого остатка. МС (APCI): m/z: 403,3 [М+Н]+. Соединение 271.
Гидроксиламингидрохлорид (36 мг, 0,52 ммоль) суспендировали в диоксане (1 мл) и добавляли Et3N (0,073 мл, 0,52 ммоль). Смесь обрабатывали ультразвуком в течение нескольких минут. Добавляли раствор соединения 270 (0,40 ммоль) в диоксане (2 мл), с последующим добавлением уксусной кислоты (50 мг, 0,83 ммоль). Смесь выдерживали при 80°С в течение 1 ч и затем добавляли дополнительный гид-роксиламингидрохлорид (5 мг), с последующим добавлением уксусной кислоты (100 мг). Смесь выдерживали при 80°С в течение 3 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 150 мг липкой белой пены. Флэш-хроматография (25% EtOAc/гексан) давала 86 мг (58%) соединения 271 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 373,2 [М+Н]+.
Соединение 272.
Соединение 271 (83 мг, 0,22 ммоль) растворяли в ТГФ (2 мл) и добавляли 1 М HCl (0,5 мл). Раствор перемешивали в течение 2 дней, затем разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 75 мг (100%) соединения 272 в виде белой пены. MC (APCI): m/z: 329,1 [M+H]+.
Соединение 273.
Соединение 272 (73 мг, 0,22 ммоль) растворяли в ТГФ (2 мл) и этилформиате (1 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,4 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане, гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 85 мг (больше 100%) соединения 273 в виде светло-желтого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 357,1 [М+Н]+.
Соединение 274.
Соединение 273 (0,22 ммоль) растворяли в ТГФ (2 мл), EtOH (1 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гид-роксиламингидрохлорид (23 мг, 0,33 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 50°С в течение 3 ч. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (10 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 80 мг (больше 100%) соединения 274 в виде светло-желтой пены МС (APCI): m/z: 354,1 [М+Н]+.
Соединение 275.
Соединение 274 (стадия 5) (0,22 ммоль) растворяли в смеси 2:1 ТГФ/МеОН (3 мл) и добавляли NaOMe (0,4 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 3 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (10 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 78 мг светло-желтой пены. Флэш-хроматография (25% EtOAc/гексан) давала 60 мг (77%) соединения 275 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 354,2 [М+Н]+.
Соединение ТХ63760.
Соединение 275 (59 мг, 0,17 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (29 мг, 0,10 ммоль) и раствор перемешивали 90 мин при 0°С. Добавляли пиридин (0,3 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (5% EtOAc/DCM) давала 49 мг (84%) соединения ТХ63760 в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 3,46 (с, 1Н), 4,24 (с, 3Н), 3,16 (дд, 1Н, J=5,8, 17,7Гц), 2,80 (ддд, 1Н, J=7,1, 11,6, 17,5 Гц), 2,48 (с, 3Н), 2,19 (дд, 1Н, J=1,7, 12,1 Гц), 1,95 (м, 2Н), 1,50 (с, 3Н), 1,30 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: 352,2 [М+Н]+.
Соединение 276.
Соединение 269 (29 мг, 0,087 ммоль) суспендировали в ДМФА-DMA (2 мл) и выдерживали при 80°С в течение ночи. Раствор охлаждали и концентрировали, получая соединение 276 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 389,1 [М+Н]+.
Соединение 277.
Соединение 276 (0,087 ммоль) растворяли в диоксане (1 мл) и добавляли НОАс (4 капли), с последующим добавлением метилгидразина (1 капля). Раствор выдерживали при 80°С в течение 2 ч, затем охлаждали и концентрировали, получая заявленное в заголовке соединение 277 в виде грязно-белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 372,1 [М+Н]+.
Соединение 278.
Соединение 277 (0,087 ммоль) растворяли в ТГФ (3 мл) и добавляли 1 М HCl (0,5 мл). Раствор перемешивали в течение ночи, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (10 мл) и экстрагировали
EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 28 мг (100%) соединения 278 в виде светло-желтого масла. МС (APCI): m/z: 328,1 [М+Н]+. Соединение 279.
Соединение 278 (28 мг, 0,087 ммоль) в этилформиате (2 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,15 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 30 мг (97%) соединения 279 в виде масла. МС (APCI): m/z: 356,0 [М+Н]+.
Соединение 280.
Соединение 279 (30 мг, 0,084 ммоль) растворяли в EtOH (3 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидро-ксиламингидрохлорид (9 мг, 0,13 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 60°С в течение ночи. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (10 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 28 мг (94%) соединения 280 в виде коричневой пены. МС (APCI): m/z: 353,0 [М+Н]+.
Соединение 281.
Соединение 280 (28 мг, 0,079 ммоль) растворяли в смеси 4:1 ТГФ/МеОН (2 мл) и добавляли NaOMe (0,15 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (10 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Флэш-хроматография (2-5% MeOH/CHCl3) давала 22 мг (79%) соединения 280 в виде прозрачного стеклообразного остатка. МС (APCI): m/z: 353,0 [М+Н]+.
Соединение ТХ63714.
Соединение 281 (21 мг, 0,060 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (10,2 мг, 0,15 ммоль) и раствор перемешивали Б течение 2 ч при 0°С. Добавляли пиридин (0,1 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 6 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (100% EtOAc) давала 15 мг (71%) соединения ТХ63714 в виде липкой белой пены.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,45 (с, 1Н), 8,04 (с, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 3,80 (с, 3Н), 2,60 (м, 1Н), 2,48 (ддд, 1Н, J=6,6, 11,4, 16,1 Гц), 2,21 (дд, 1Н, J=2,0, 12,0 Гц), 1,78-1,97 (м, 2Н), 1,49 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: 351,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63587.
Соединение ТХ63445 (0,052 г, 0,14 ммоль), K3PO4 (0,086 г, 0,40 ммоль), 4-феноксифенилбороновую кислоту (0,047 г, 0,22 ммоль) и диметоксиэтан (6 мл) смешивали, и смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,014 г, 0,012 ммоль) и реакционную смесь барботировали в течение следующих 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 8 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63587 (25,3 мг) в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,58 (с, 1Н), 7,38 (дд, 2Н, J=7,6, 8,1 Гц), 7,25 (м, 2Н), 7,17 (т, 1Н, J=7,5 Гц), 7,07 (д, 4Н, J=7,5 Гц), 3,83 (с, 3Н), 2,65 (дд, 1Н, J=6,0, 16,1 Гц), 2,52 (м, 1Н), 2,21 (д, 1Н, J=11,9 Гц), 1,92 (дд, 1Н, J=6,6, 13,4 Гц), 1,83 (дддд, 1Н, J=6,0, 12,5, 12,8, 12,8 Гц), 1,55 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 438,0.
Соединение ТХ63588.
Соединение ТХ63445 (0,054 г, 0,146 ммоль), K3PO4 (0,090 г, 0,42 ммоль), пинаколовый эфир 1-метил-1Н-пиразол-4-бороновой кислоты (0,048 г, 0,23 ммоль) и диметоксиэтан (6 мл) смешивали, и смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,016 г, 0,014 ммоль) и реакционную смесь барботировали в течение следующих 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 10 г), применяя смесь от 50 до 100% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63588 (11,6 мг) в виде белого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,47 (с, 1Н), 7,57 (с, 1Н), 7,45 (с, 1Н), 3,97 (с, 3Н), 3,83 (с, 3Н), 2,68 (ддд, 1Н, J=1,l, 6,0, 15,8 Гц), 2,52 (дддд, 1Н, J=6,9, 7,9, 8,0, 11,6 Гц), 2,17 (дд, 1Н, J=1,9, 12,0 Гц), 1,92 (дд, 1Н, J=6,6, 13,5 Гц), 1,86 (м, 1Н), 1,49 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 350,0.
Соединение ТХ63600.
Соединение ТХ63445 (0,049 г, 0,141 ммоль), K3PO4 (0,091 г, 0,43 ммоль), нафталин-2-бороновую кислоту (0,042 г, 0,28 ммоль) и диметоксиэтан (7 мл) смешивали, и смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,014 г, 0,012 ммоль) и реакционную смесь барботировали в течение следующих 3-5 мин. Затем пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение ночи при
перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 10 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63600 (23,2 мг) в виде грязно-белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,54 (с, 1Н), 7,94 (д, 1Н, J=5 Гц), 7,86-7,90 (м, 2Н), 7,78 (шир.с, 1Н), 7,54-7,56 (м, 1Н), 7,42 (шир.д, 1Н, J=10 Гц), 7,25 (с, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 2,70 (дд, 1Н, J=12,5, 5 Гц), 2,56-2,63 (м, 1Н), 2,25 (дд, 1Н, J=12,5, 2,5 Гц), 1,85-1,95 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,29 (с, 3Н), 1,23 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 396,1.
Соединение ТХ63603.
Соединение ТХ63445 (0,051 г, 0,146 ммоль), K3PO4 (0,093 г, 0,44 ммоль), нафталин-1-бороновую кислоту (0,053 г, 0,35 ммоль) и диметоксиэтан (7 мл) смешивали, смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,018 г, 0,016 ммоль) и реакционную смесь барботировали в течение следующих 3-5 мин. Затем пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течением ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 10 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63603 (17 мг) в виде смеси взаимопревращающихся атропизомеров в виде желтого стеклообразного остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,58 (с, 1Н), 7,93-7,96 (м, 2Н), 7,35-7,56 (м, 5Н), 3,59 (с, 1,5Н), 3,58 (с, 1,5Н), 2,25-2,48 (м, 3Н), 1,85-1,88 (м, 2Н), 1,61 (с, 1,5Н), 1,58 (с, 1,5Н), 1,28 (с, 1,5Н), 1,27 (с, 1,5Н), 1,23 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 396,1.
Соединение ТХ63625.
Соединение ТХ63445 (0,053 г, 0,152 ммоль), K3PO4 (0,088 г, 0,42 ммоль), 3,5-диметилизоксазол-4-бороновую кислоту (0,042 г, 0,30 ммоль) и диметоксиэтан (6 мл) смешивали и газообразный азот барбо-тировали через перемешиваемую смесь в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,014 г, 0,013 ммоль), и газообразный азот барботировали через перемешиваемую смесь в течение 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 8 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, с последующей препаративной тонкослойной хроматографией, применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63625 (6,6 мг) в виде твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,51 (с, 1Н), 3,63 (с, 3Н), 2,49 (м, 1Н), 2,43 (м, 1Н), 2,36, 2,31 (с, с [1,5, 1,5] 3Н), 2,25 (м, 1Н), 2,20, 2,15 (с, с [1,5, 1,5] 3Н), 2,1 (м, 2Н), 1,58 (с, 3Н), 1,31 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 365,0.
Соединение ТХ63637.
Соединение ТХ63445 (0,049 г, 0,141 ммоль), K2CO3 (0,061 г, 0,44 ммоль), метилбороновую кислоту (0,037 г, 0,64 ммоль) и диоксан (8 мл) смешивали, и смесь барботировали N2 в течение 1-2 мин. Добавляли Pd(dppf)Cl2 (0,0167 г, 0,023 ммоль) и реакционную смесь барботировали в течение следующих 1-2 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 90°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 9 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc и повторно хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 4 г), применяя смесь дихлорметан/метил-трет-бутиловый эфир/МеОН, 200/20/1, получая соединение ТХ63637 (20 мг) в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 3,48 (с, 1Н), 3,76 (с, 3Н), 2,65 (дд, 1Н, J=5,9, 15,6 Гц), 2,44 (м, 1Н), 2,16 (с, 3Н), 2,15 (м, 1Н), 1,82-1,97 (м, 2Н), 1,49 (с, 3Н), 1,29 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 384,0.
Соединение 282.
Раствор соединения 241 (175 мг, 0,55 ммоль) в ТГФ (5 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли PhMgBr (1,1 мл, 1,0 М в ТГФ, 1,1 ммоль) и раствор перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Добавляли дополнительное количество PhMgBr (1,1 мл) и через 6 ч добавляли следующую порцию PhMgBr (3,3 мл). После перемешивания в течение ночи добавляли дополнительную порцию PhMgBr (3,3 мл). После перемешивания в течение ночи, раствор охлаждали в ледяной бане и гасили медленным добавлением 1 М HCl (5 мл). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Добавляли 6 М HCl (2 мл) и смесь перемешивали в течение ночи. Добавляли дополнительный ТГФ (5 мл), и смесь перемешивали в течение 3 дней. Смесь концентрировали, нейтрализовали насыщенным раствором NaHCO3 и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,40 г масла. Флэш-хроматография (30% EtOAc/гексан) давала 0,21 г белой пены, которая представляла собой смесь соединений 282 и 283 МС (APCI): m/z: 395, 351 [М+Н]+.
Соединение 283.
Смесь соединений 282 и 283 (0,21 г) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли 1 М HCl (1 мл). Раствор перемешивали в течение ночи и затем выдерживали при 40°С в течение 6 ч. После охлаждения раствор нейтрализовали насыщенным раствором NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и
сушили в вакууме, получая 0,18 г (93%) соединения 283 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 351,0 [М+Н]+.
Соединение 284.
Раствор соединения 283 (0,18 г, 0,51 ммоль) в этилформиате (3 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,9 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане, гасили добавлением насыщенного KH2PO4 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 184 мг (97%) соединения 284 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 379,0 [М+Н]+.
Соединение 285.
Соединение 284 (184 мг, 0,49 ммоль) растворяли в EtOH (2 мл), ТГФ (5 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламингидрохлорид (37 мг, 0,53 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем выдерживали при 50°С в течение 4 ч. Добавляли дополнительное количество гидроксиламингидрохлорида (10 мг) и нагревание продолжали в течение ночи. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 180 мг (98%) соединения 285 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 376,0 [М+Н]+.
Соединение 286.
Соединение 285 (180 мг, 0,48 ммоль) растворяли в смеси 5:1 ТГФ/МеОН (6 мл) и добавляли NaOMe (0,9 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Раствор концентрировали, добавляли насыщенный водный KH2PO4 (25 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 0,18 г светло-желтой пены. Флэш-хроматография (40% EtOAc/гексан) давала 150 мг (83%) соединения 286 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 376,0 [М+Н]+.
Соединение ТХ63667.
Соединение 286 (150 мг, 0,40 ммоль) растворяли в ДМФА (3 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (69 мг, 0,24 ммоль) и раствор перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Добавляли пиридин (0,5 мл) и раствор выдерживали при 55°С в течение 5 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (25% EtOAc/гексан) давала 135 мг (90%) соединения ТХ63667 в виде белой пены.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,52 (с, 1Н), 7,76 (м, 2Н), 7,66 (м, 1Н), 7,54 (м, 2Н), 4,06 (с, 3Н), 2,242,38 (м, 2Н), 2,18 (м, 1Н), 1,69-1,83 (м, 2Н), 1,51 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: 374,1 [М+Н]+.
Соединение 287.
N-Хлорсукцинимид (0,124 г, 0,93 ммоль) добавляли к перемешиваемой смеси соединения 27 (0,235 г, 0,81 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и смесь перемешивали в течение 4 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали досуха, и остаток растворяли в EtOAc (80 мл), раствор промывали водным NaHCO3 раствором (20 мл), органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 287 (347,8 мг) в виде стеклообразного остатка/твердого остатка. Данное вещество применяли непосредственно на следующей стадии, m/z: [М+Н]+ 325,0, 326,9.
Соединение 288.
Соединение 287 (347,8 мг, 1,07 ммоль) растворяли в МеОН и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 288 (198 мг, 76%), m/z: [M+H]+ 280,9, 282,8.
Соединение 289.
Соединение 288 (192 мг, 0,68 ммоль) растворяли в МеОН и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 289 (189,8 мг, 91%), m/z: [М+Н]+ 308,9.
Соединение 290.
Соединение 289 (189,8 мг, 0,61 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали KH2PO4 (водн.), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 12 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение 290 (92,8 мг, 50%) в виде белого твердого остатка, m/z: [М+Н]+ 305,9.
Соединение 291.
Соединение 290 (89 мг, 0,29 ммоль) растворяли в смеси 3/1 МеОН/ТГФ и добавляли метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН) и реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 5 ч и затем пе
ремешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением, насыщенного KH2PO4 (водн.) и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc/гексан), получая соединение 291 (88,6 мг) в виде стеклообразного остатка/пены. Данное вещество применяли непосредственно на следующей стадии.
Соединение ТХ63604.
Соединение 291 (88,6 мг, 0,29 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор дибромдиметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63604 (52,5 мг, 60%) в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,39 (с, 1Н), 3,77 (с, 3Н), 2,65 (дд, 1Н, J=17,5, 7,5 Гц), 2,39-2,46 (м, 1Н), 2,11 (арр д, 1Н, J=10 Гц), 1,94 (дд, 1Н, J=12,5, 7,5 Гц), 1,82 (ддд, 1Н, J=25, 12,5, 5 Гц), 1,45 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н); m/z: [М+Н]+ 303,9.
Соединение 292.
Раствор соединения 106 (173 мг, 0,57 ммоль) в МеОН обрабатывали 3н. HCl раствором, перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (15 мл). Органический слой сушили над MgSO4, концентрировали, получая соединение 292, которое применяли непосредственно на следующей стадии.
Соединение 293.
Соединение 292 (принимают 0,57 ммоль из предыдущей стадии) растворяли в диоксане (10 мл) и воде (6 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли триэтиламин (0,7 мл, 5 ммоль), DMAP (0,013 г, 0,11 ммоль) и Boc2O (0,167 г, 0,78 ммоль) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Через 3 ч добавляли дополнительный Boc2O (0,48 г, 2,2 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали досуха и растворяли в MeCN. Добавляли дополнительные каталитический DMAP и Boc2O (0,21 г, 1,0 ммоль) и смесь нагревали до 50°С. Смесь концентрировали досуха. Добавляли EtOAc и нерастворившиеся вещества удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали и повторно суспендировали в ТГФ (1 мл). Добавляли дополнительный Boc2O (0,71 г, 3,3 ммоль) и смесь выдерживали при 55°С в течение ночи, затем выдерживали при 65°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали досуха и хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 12 г), применяя смесь 50% EtOAc/гексан, получая продукт в виде смеси соединения 293 и продукта бис-Вос, 0,0471 г. МС: m/z: [M+H]+ 362,1, 462,2.
Соединение 294.
К раствору соединения 293 (47,1 мг, приблизительно 0,11 ммоль) в HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4 (водн.). Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 294 (49,8 мг). МС (APCI): [М+Н]+ 390,1.
Соединение 295.
К раствору соединения 294 (0,0498 г, 0,128 ммоль) в EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (нейтрализовали TEA) и раствор пара-толуолсульфоната пиридиния в МеОН, и смесь выдерживали при 50°С в течение 4 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 295 (91 мг) в виде пены (это полностью отражало комбинацию предшествующего эксперимента), m/z: [M+H]+ 387,1.
Соединение 296.
К раствору соединения 295 (0,091 г, 0,23 ммоль) в ТГФ и МеОН добавляли 30% NaOMe (8 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с раствором KH2PO4 (насыщенный, 15 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 296 (71 мг, 78%) в виде грязно-белой пены, m/z: [M+H]+ 387,1.
Соединение ТХ63594.
Соединение 296 (0,071 г, 0,18 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор дибромдиметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакцион
ную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63594 (8,7 мг, 12,5%).
^-ЯМР (500 МГц, d6-/jMra) 5 8,42 (с, 1Н), 5,76 (с, 1Н), 3,58 (с, 3Н), 3,52-3,55 (м, 1Н), 2,31-2,36 (м, 1Н), 2,11-2,13 (м, 1Н), 1,75-1,86 (м, 2Н), 1,45 (с, 9Н), 1,39 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н), 1,12 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 385,1.
Соединение ТХ63642.
Соединение ТХ63467 (0,021 г, 0,082 ммоль) растворяли в смеси насыщенного водного NaHCO3 (0,5 мл) и ТГФ (2,0 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли раствор бензоилхлорида в ТГФ, и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение нескольких минут, после чего добавляли дополнительное количество раствора бензоилхлорида, и реакционную смесь перемешивали в течение нескольких минут. Реакционную смесь распределяли между EtOAc (40 мл) и солевым раствором (2 мл), слои разделяли, органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до масла. Масло хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 8 г), применяя смесь 10:1 гексан/EtOAc. Соединение ТХ63642 (14 мг) получали в виде прозрачного стеклообразного остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,44 (с, 1Н), 8,12-8,15 (м, 3Н), 7,68 (м, 1Н), 7,57 (м, 2Н), 2,96 (дд, 1Н, J=5,9, 16,7 Гц), 2,69 (м, 1Н), 2,24 (дд, 1Н, J=2,0, 12,0 Гц), 1,89-2,03 (м, 2Н), 1,55 (с, 3Н), 1,34 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 360,0, 255,9 (M-PhCO).
Соединение ТХ63611.
Соединение ТХ63579 (17 мг, 0,051 ммоль) растворяли в смеси насыщенного NaHCO3 (водн., 0,5 мл) и ТГФ (1,5 мл) и смесь охлаждали до 0°С. Добавляли ацетилхлорид (1 капля, избыток) и реакционную смесь перемешивали в течение 40 мин при 0°С. Затем добавляли дополнительный ацетилхлорид (2 капли, избыток) и реакционную смесь перемешивали в течение следующих 20 мин. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (40 мл) и промывали NaCl (водн., 10 мл), затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 25% EtOAc в гексане), получая соединение ТХ63611 (2,9 мг, 15%) в виде прозрачного стеклообразного остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,50 (с, 1Н), 7,40-7,46 (м, 3Н), 7,26-7,30 (м, 2Н), 2,82 (с, 3Н), 2,64-2,73 (м, 1Н), 2,46-2,55 (м, 1Н), 2,30-2,34 (м, 1Н), 1,82-1,95 (м, 2Н), 1,56 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,23 (с, 3Н); m/z: 298 [М+Н]+.
Соединение 297.
Раствор соединения 25 (1,4 г, 5,5 ммоль) в ТГФ (10 мл) добавляли к кипящей смеси диметилкарбо-ната (6 экв.) и NaH (избыток) в ТГФ (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили раствором KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 297 (1,5 г, 87%) в виде твердого остатка, m/z: 311 [М+Н]+.
Соединение 298.
Смесь соединения 297 (1 г, 3,17 ммоль), метилгидразина (300 мг, 6,5 ммоль) и EtOH (15 мл) выдерживали при 60°С в течение 16 ч. EtOH удаляли, и неочищенный продукт обрабатывали 20 мл диэтилово-го эфира. Осадок собирали фильтрованием, получая соединение 298 в виде белого твердого остатка (450 мг, выход 46%). МС: m/z: [M+H]+ 307.
Соединение 299.
Раствор соединения 298 (190 мг, 1,2 ммоль) в МеОН (5 мл) обрабатывали 3н. HCl (водн.) (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл). Органический слой сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 299 (165 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 263.
Соединение 300.
К раствору соединения 299 (165 мг, 0,62 ммоль) в 5 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (1,3 г, 10 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 300 (180 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 291.
Соединение 301.
К раствору соединения 300 (180 мг, 0,62 ммоль) в 10 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl (95 мг, 2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 301 в виде твердого остатка (178 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 288.
Соединение 302.
К раствору соединения 301 (178 мг, 0,62 ммоль) в смеси 2:1 ТГФ/МеОН (3 мл) добавляли по каплям 30% NaOMe (1,2 г, 10 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 9 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали, получая соединение 302 в виде грязно-белого твердого продукта (175 мг, выход 99%). МС: m/z: [M+H]+ 288.
Соединение ТХ63676.
К раствору соединения 302 (175 мг, 0,61 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли дибромдиметил-гидантоин (100 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 20 до 55% EtOAc/гексан, собирая смесь исходного цианокетона и цианоенонового продукта (35 мг). Данную смесь (30 мг) смешивали с DDQ (30 мг, 0,13 ммоль) в 1 мл бензола и кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч. Полученную в результате смесь растворяли в 10 мл EtOAc и промывали насыщенный NaHCO3 (2x15 мл). Органический слой концентрировали, и остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 20 до 55% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63676 в виде грязно-белого твердого остатка (15 мг, выход 9%).
^-ЯМР (500 МГц, ДМСО) 5 8,46 (с, 1Н), 6,47 (с, 1Н), 3,19 (с, 3Н), 2,09 (м, 1Н), 1,95 (м, 2Н), 1,66 (м, 1Н), 1,52 (с, 3Н), 1,39 (м, 1Н), 1,18 (с, 3Н), 1,19 (с, 3Н); МС: m/z: [М+Н]+ 286.
Соединение 303а-Ъ.
К смеси соединения 298 (670 мг, 2,18 ммоль) и K2CO3 (910 мг, 6,55 ммоль) в 15 мл ДМФА при комнатной температуре добавляли MeI (625 мг, 4,4 ммоль). Смесь перемешивали в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили 100 мл воды и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 10 до 35% EtOAc/гексан, получая смесь соединений 303а-Ъ (450 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 321.
Соединение 304а-Ъ.
Раствор соединений 303а-Ъ (450 мг, 1,4 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали раствором 3н. HCl (4 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и промывали насыщенным. раствором NaHCO3 (20 мл). Органический слой сушили над MgSO4 и концентрировали, получая смесь соединений 304а-Ъ в виде масла (390 мг, выход 100%). МС: m/z: [М+Н]+ 277.
Соединение 305a-b.
К раствору соединений 304а4) (390 мг, 1,4 ммоль) в 6 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (1,5 г, 6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем выливали в воду и подкисляли KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая смесь соединений 305а4) (425 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 305.
Соединение 306а4).
К раствору соединений 305а4) (425 мг, 1,4 ммоль) в 10 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (195 мг, 2 экв.) и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая смесь соединений 306а4) в виде масла (425 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 302.
Соединение 307а4).
К раствору соединений 306а4) (425 мг, 1,4 ммоль) в смеси 1:1 ТГФ/МеОН (4 мл) добавляли 30% NaOMe (2 г, 8 экв.). Раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали, получая смесь соединений 307а4) в виде масла (425 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 302.
Соединения ТХ63691 и ТХ63692.
К раствору соединений 307а4) (425 мг, 1,4 ммоль) в 3 мл ДМФА при 0°С добавляли дибромдиме-тилгидантоин (222 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 10 до 50% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63691 в виде грязно-белого твердого остатка. Рч=0,5 (гексан/EtOAc 1:3) (25 мг, выход 6%).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,42 (с, 1Н), 3,94 (с, 3Н), 3,58 (с, 3Н), 2,84 (ддд, 1Н, J=1,4, 5,9, 15,2 Гц), 2,59 (м, 1Н), 2,11 (дд, 1Н, J=2,4, 11,7 Гц), 1,75-1,91 (м, 2Н), 1,45 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,19 (с, 3Н); МС: m/z: [M+H]+ 300.
Продолжительное элюирование давало желтую пену, Rf=0,25 (гексан/EtOAc 1:3) (260 мг, выход 62%), МС: m/z: [M+H]+ 302. Данное вещество (260 мг) смешивали с DDQ (200 мг, 0,88 ммоль) в 10 мл
бензола и кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч. Полученную в результате смесь растворяли в 25 мл EtOAc и промывали насыщенным NaHCO3 (2x25 мл). Органический слой концентрировали, и остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 20 до 60% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63692 (60 мг, выход 15%) в виде грязно-белого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,34 (с, 1Н), 3,30 (с, 3Н), 2,09 (м, 1Н), 1,73-1,92 (м, 3Н), 1,48 (с, 3Н), 1,42 (м, 1Н), 1,42 (с, 3Н), 1,21 (с, 6Н); МС: m/z: [M+H]+ 300.
Соединения 308 и ТХ63804.
Смесь соединения 70 (0,48 г, 1,49 ммоль) и IBX (1,67 г, 4 экв.) в ДМФА (8 мл) выдерживали при 65°С в течение 6 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором и сушили над MgSO4. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 35% EtOAc/гексан, получая заявленное в заголовке соединение в виде грязно-белого твердого остатка, соединение 308, Rj=0,45 (гексан/EtOAc 3:2) (286 мг, выход 60%), МС: m/z: [M+H]+ 321. Соединение ТХ63804 также выделяли в виде желтой пены Rj=0,35 (гексан/EtOAc 3:2) (15 мг, выход 3%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,73 (д, 1Н, J=10,4 Гц), 7,39-7,51 (м, 5Н), 5 6,08 (д, 1Н, J=9,2 Гц), 3,75 (с, 3Н), 2,63-2,75 (м, 2Н), 2,54 (кв., 1Н, J=13,2 Гц), 1,53 (с, 3Н), 1,20 (с, 6Н); МС: m/z: [M+H]+ 335.
Соединение 309.
К раствору соединения 308 (286 мг, 0,89 ммоль) в ТГФ (5 мл) и пиридине (0,22 г, 3 экв.) добавляли йод (0,46 г, 2 экв.) и раствор выдерживали при 60°С в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором тиосульфата натрия (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x30 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором и сушили над MgSO4. После концентрирования в вакууме, соединение 309 выделяли в виде светло-окрашенного твердого остатка (395 мг, 100%), МС: m/z: [M+H]+ 447.
Соединение ТХ63803.
Смесь соединения 309 (0,2 г, 0,45 ммоль) и CuI (0,22 г, 2,5 экв.) в ДМФА (5 мл) выдерживали при 70°С. Добавляли последовательно FS02CF2CO2Me (1,3 г, 15 экв.) и НМРА (1,4 г, 17 экв.) и смесь выдерживали при 70°С в течение 6 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором NH4Cl (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором и сушили над MgSO4. После концентрирования в вакууме, хроматография на силикагеле, элюируя смесью от 5 до 35% EtOAc/гексан, давала соединение ТХ63803 в виде белого твердого остатка (110 мг, 63%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,31 (с, 1Н), 7,47 (м, 2Н), 7,41 (м, 1Н), 7,32 (м, 2Н), 3,80 (с, 3Н), 2,66 (дд, 1Н, J=5,9, 16,1 Гц), 2,54 (ддд, 1Н, J=6,6, 11,2, 15,9 Гц), 2,21 (д, 1Н, J=11,7 Гц), 1,86 (м, 2Н), 1,51 (с, 3Н), 1,25 (с, 3Н), 1,24 (с, 3Н); МС: m/z: [M+H]+ 389.
Соединение 310а4).
Соединение 26 (0,72 г, 2,57 ммоль), 3-аминопиразол (0,222 г, 2,67 ммоль), гидрат п-толуолсульфокислоты (0,025 г, 0,12 ммоль) и толуол (70 мл) кипятили с обратным холодильником с удалением воды, применяя ловушку Дина-Старка. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи и охлаждали и концентрировали досуха. Остаток растворяли в EtOAc (80 мл), промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (15 мл) и солевым раствором (15 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до желтого твердого остатка. Твердый остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 16 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc. Выделяли следующий продукт (продукты): соединение 310а (410 мг, 49%) - чистый неполярный изомер в виде белого твердого остатка, m/z: [M+H]+ 328,0. Соединение 310b (56 мг, 6,7%) - чистый полярный изомер в виде желтого стеклообразного остатка, МС: m/z: [M+H]+ 328,0.
Соединение 311а.
Соединение 311а (0,326 г, 1,15 ммоль) растворяли в МеОН и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией, получая соединение 311а (303,5 мг, 100%), m/z: [M+H]+ 283,9.
Соединение 312а.
Соединение 311а (0,326 г, 1,15 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 311а (393 мг), m/z: [M+H]+ 312,0.
Соединение 313а.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 312а (0,393 г, 1,26 ммоль). Добавляли смесь 9:1 EtOH/H2O, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 313а (352 мг) в виде светло-желтого твердого остатка, m/z: [M+H]+ 309,0.
Соединение 314а.
Соединение 313а (0,3518 г, 1,14 ммоль) растворяли в смеси 3:1 МеОН/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4 и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение 313а (351 мг) в виде желтого твердого остатка. Данное вещество применяли непосредственно на следующей стадии.
Соединения ТХ63627 и ТХ63615.
Соединение 314а (0,204 г, 0,66 ммоль) растворяли в сухом ДМФА, добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (230-400 меш, 18 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63627 (34,1 мг, 17%) в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 9,62 (с, 1Н), 8,42 (с, 1Н), 8,15 (с, 1Н), 7,28 (с, 1Н) 3,06 (м, 1Н), 2,99 (м, 1Н), 2,38 (д, 1Н, J=11,4 Гц), 2,12 (дд, 1Н, 6,2, 5,9 Гц), 1,92 (м, 1Н), 1,84 (с, 3Н), 1,37 (с, 3Н), 1,35 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 306,9.
Соединение ТХ63615 (59,6 мг, 24%) также выделяли в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 9,58 (с, 1Н), 8,38 (с, 1Н), 8,11 (с, 1Н), 3,04 (дд, 1Н, J=20, 5 Гц), 2,90-2,97 (м, 1Н), 2,33 (д, 1Н, J=10 Гц), 2,08 (дд, 1Н, J=15, 5 Гц), 1,83-1,92 (м, 1Н), 1,80 (с, 3Н), 1,33 (с, 3Н), 1,32 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 384,9, 386,8.
Соединение ТХ63626.
Соединение ТХ63615 (0,0486 г, 0,126 ммоль), K3PO4 (0,086 г, 0,41 ммоль), фенилбороновую кислоту (0,024 г, 0,20 ммоль) и диметоксиэтан (6 мл) смешивали, и газообразный азот барботировали через перемешиваемую смесь в течение 1-2 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,015 г, 0,012 ммоль), и газообразный азот барботировали через перемешиваемую смесь в течение 1-2 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 90°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 9,7 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc, с последующей второй очисткой на силикагеле, применяя смесь 3: 1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63626 (12,8 мг, 26%) в виде желтоватого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 9,75 (с, 1Н), 8,41 (д, 2Н, J=13,3 ГЦ), 8,03 (д, 2Н, J=7,5 Гц), 7,50 (т, 1Н, J=7,6, 7,6 Гц), 7,33 (т, 1Н, J=7,2, 7,6 Гц), 3,07 (м, 1Н), 2,98 (м, 1Н), 2,30 (д, 1Н, J=12,4 Гц), 2,11 (м, 1Н), 1,95 (м, 1Н), 1,89 (с, 3Н), 1,38 (с, 3Н), 1,37 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 383,0.
Соединение 311b.
Соединение 310b (0,0523 г, 0,16 ммоль) растворяли в МеОН и добавляли 1н. HCl (водн.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем реакционную смесь концентрировали. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc (50 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией, получая соединение 311b (40,7 мг, 90%), m/z: [M+H]+ 283,9.
Соединение 312b.
Соединение 311b (0,0407 г, 0,144 ммоль) растворяли в этилформиате и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли раствором KH2PO4 (водн.) и экстрагировали EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 312b (42,2 мг), m/z: [M+H]+ 312,0.
Соединение 313b.
Раствор 0,1н. гидроксиламингидрохлорида (водн.) добавляли к соединению 312b (0,0422 г, 0,136 ммоль). Добавляли смесь 9:1 EtOH/H2O и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь концентрировали. Остаток растворяли в EtOAc, затем сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 313b (43,7 мг) в виде желтого стеклообразного остатка, m/z: [M+H]+ 309,0.
Соединение 314b.
Соединение 313b (0,0437 г, 0,14 ммоль) растворяли в смеси 3:1 МеОН/ТГФ и добавляли 30% метоксид натрия (30 вес.% раствор в МеОН). Реакционную смесь перемешивали при 55°С в течение 6 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного KH2PO4, и реакционную смесь концентрировали. Остаток экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение 314b (44,5 мг). Данное вещество применяли непосредственно на следующей стадии.
Соединение ТХ63617.
Соединение 314b (0,0445 г, 0,14 ммоль) растворяли в сухом ДМФА и добавляли охлажденный до 0°С раствор 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоина, и реакционную смесь перемешивали при 0°С до исчезновения исходных веществ (приблизительно 30 мин), как определено тонкослойной хроматографией. Затем добавляли пиридин и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Затем реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь экстрагировали EtOAc и промывали солевым раствором, затем сушили над MgSO4 и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией (230-400 меш, 10 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc, с последующей второй очисткой на силикагеле (230-400 меш, 8 г), применяя смесь 1% метил-трет-бутиловый эфир/DCM, получая соединение ТХ63617 (18 мг, 33%) в виде белого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,96 (с, 1Н), 8,46 (с, 1Н), 8,07 (с, 1Н), 3,14 (дд, 1Н, J=16,4, 6,0 Гц), 2,963,03 (м, 1Н), 2,27 (дд, 1Н, J=11,9, 3,4 Гц), 2,00-2,11 (м, 2Н), 1,51 (с, 3Н), 1,32 (с, 3Н), 1,23 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 384,9, 386,9.
Соединение 316а4).
Раствор слегка сырой смеси соединений 130, 315 и примеси X (1,96 г, принимаем 5,21 ммоль, с соединением 130 в качестве основной фракции) и 3н. HCl (20 мл, 60 ммоль) в 20 мл МеОН перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали концентрированным NH4OH до рН приблизительно 10, затем экстрагировали CHCl3. Органический экстракт промывали насыщенный NaCl раствором, сушили над (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 1,47 г (91%) неразделимой смеси соединений 316а4) и примеси X в виде светло-желтого пенообразного остатка, которую применяли без очистки.
Соединения 3 Па-b и X.
К перемешиваемому раствору слегка сырой смеси соединений 316а4) и X (1,47 г, принимаем 4,73 ммоль) и этилформиата (3,8 мл, 47,0 ммоль) в 20 мл бензола добавляли по каплям NaOMe, 30 вес.% раствор в МеОН (4,4 мл, 23,4 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 1,51 г (94%) неразделимой смеси соединений 317а4) и X в виде оранжевого твердого остатка, которую применяли без очистки. МС (APCI): m/z: 387 (78%) [М+Н]+ и 339/341 (91/100%) [М+Н]+.
Соединения 318а4) и X.
Раствор слегка сырой смеси соединений 317а4) и X (1,51 г, принимаем 4,46 ммоль) и гидроксила-мингидрохлорида (0,47 г, 6,76 ммоль) в 20 мл этанола выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец охлаждали, концентрировали и распределяли между EtOAc и насыщенным раствором Na-HCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 1,47 г (98%) неразделимой смеси соединений 318а4) и X в виде темно-коричневого пенообразного остатка, которую применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 384 (79%) [М+Н]+ и 336/338 (90/100%).
Соединения 319а4) и X.
К перемешиваемому раствору слегка сырой смеси соединений 318а4) и X (1,47 г, принимаем 4,37 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 50 мл МеОН добавляли по каплям 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (4,1 мл, 21,8 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Образец хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая 0,81 г (55%) неразделимой смеси соединений 319а4) и X в виде светло-желтого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 336/338 (96/100%) [М+Н]+.
Соединения ТХ63606 и ТХ63649.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору смеси соединений 319а4) и X (0,81 г, 2,40 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,38 г, 1,33 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (1,90 мл, 23,49 ммоль). Баню со льдом удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 16 ч. Образец концентрировали (для удаления большего количества ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Образец хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая 0,56 г (69%) соединения ТХ63606 в виде желтого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,36 (с, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 2,49-2,60 (м, 2Н), 2,38-2,45 (м, 1Н), 2,00-2,06 (м, 2Н), 1,66-1,75 (м, 1Н), 1,39 (с, 3Н), 1,28 (шкр.д, 3Н, J=5 Гц); МС (APCI) m/z: 334/336 (95/100%) [М+Н]+.
Все фракции с примесью в результате хроматографии объединяли, концентрировали и повторно
хроматографировали (силикагель, 25% EtOAc/гексан), получая 0,019 г (2%) соединения ТХ63649 в виде белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 3,21 (с, 1Н), 4,00 (с, 3Н), 2,51-2,63 (м, 2Н), 2,38 (м, 1Н), 2,14 (м, 1Н), 2,05 (м, 1Н), 1,62 (м, 1Н), 1,47 (с, 3Н), 1,32 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС (APCI) m/z: 334/336 (96/100%) [М+Н]+. Соединения ТХ63650 и ТХ63656.
Соединение ТХ63606 (0,102 г, 0,31 ммоль), K3PO4 (0,190 г, 0,90 ммоль), 3-метилфенилбороновую кислоту (0,065 г, 0,48 ммоль) и диметоксиэтан (7 мл) смешивали и раствор барботировали N2 в течение 35 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,022 г, 0,019 ммоль) и раствор барботировали снова в течение 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 10 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63650 (52 мг) в виде светло-желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,48 (с, 1Н), 7,34 (т, 1Н, J=7,6, 7,3 Гц), 7,22 (д, 1Н, 7,7 Гц), 7,11 (д, 2Н, 7,8 Гц), 3,77 (с, 3Н), 2,53 (м, 3Н), 2,39 (с, 3Н), 2,10 (м, 2Н), 1,70 (м, 1Н), 1,45 (с, 3Н), 1,28 (д, 3Н, J=6,8); m/z: [M+H]+ 346,1.
Соединение ТХ63656 (2,9 мг) также выделяли в виде желтого стеклообразного остатка; m/z: [M+H]+ 344,0.
Соединение ТХ63659 и ТХ63663.
Соединение ТХ63606 (0,141 г, 0,42 ммоль), K3PO4 (0,27 г, 1,27 ммоль) 3-фторфенилбороновую кислоту (0,091 г, 0,65 ммоль) и диметоксиэтан (10 мл) смешивали и раствор барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,027 г, 0,023 ммоль) и раствор барботировали снова в течение 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и растворитель декантировали с твердого остатка. Жидкость концентрировали до остатка, который хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 14 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63659 (42 мг) в виде желтой пены/стеклообразного остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 3,51 (с, 1Н), 7,47 (м, 1Н), 7,14 (м, 2Н), 7,06 (м, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 2,58 (м, 3Н), 2,15 (м, 1Н), 2,07 (м, 1Н), 1,75 (м, 1Н), 1,50 (с, 3Н), 1,33 (д, 3Н); m/z: [M+H]+ 350,0; и соединение ТХ63663 (6,4 мг) в виде желтого стеклообразного остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,32 (с, 1Н), 7,48 (дд, 1Н, J=6,3, 7,79, 7,74), 7,15 (т, 1Н, J=8,49, 8,49), 7,12 (д, 1Н, J=7,67), 7,06-7,02 (м, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,16-3,08 (м, 1Н), 2,83-2,75 (м, 1Н), 2,68-2,55 (м, 2Н), 2,08 (с, 3Н), 1,72 (с, 3Н); m/z: [M+H]+ 348,0.
Соединение ТХ63664.
Соединение ТХ63606 (0,1209 г, 0,36 ммоль), K3PO4 (0,227 г, 1,07 ммоль), 3-метоксифенилбороновую кислоту (0,083 г, 0,55 ммоль) и диметоксиэтан (8 мл) смешивали и раствор барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,030 г, 0,026 ммоль) и раствор барботировали снова в течение 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 15 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63664 (34 мг) в виде белого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,52 (с, 1Н), 7,42 (т, 1Н, J=7,83, 8,06), 6,96 (д, 1Н, J=8,38), 6,92 (д, 1Н, J=7,58), 6,87 (с, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,83 (с, 3Н), 2,67 (дд, 1Н, J=6,46, 9,77, 6,59 Гц), 2,62-2,54 (м, 2Н), 2,16 (т, 1Н, J=12,86, 12,75), 2,08-2,00 (м, 1Н), 1,80-1,62 (м, 1Н), 1,50 (с, 3Н), 1,32 (д, 3Н, J=6,74); m/z: [M+H]+ 362,1.
Соединение 320а.
Соединение 130 (0,450 г, 1,27 ммоль), K3PO4 (0,86 г, 4,05 ммоль), пинаколовый эфир 1-метилпиразол-4-бороновой кислоты (0,554 г, 2,65 ммоль) и диметоксиэтан (20 мл) смешивали, и смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,122 г, 0,11 ммоль) и реакционную смесь барботировали снова в течение 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 95°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным раствором NaCl (водн.) (40 мл), и органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Полученное в результате масло хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 18 г), применяя EtOAc в качестве элюента, получая соединение 320а (374,5 мг) в виде желтой пены/стеклообразного остатка, m/z: [М+Н]+ 357,1.
Соединение 321а.
Соединение 320а (0,371 г, 1,04 ммоль) растворяли в МеОН (15 мл) и 1н. HCl (5 мл), и смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя МеОН, и затем распределяли между EtOAc (80 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (15 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до грязно-белого твердого остатка (321а, 285 мг), m/z: [M+H]+ 313,1.
Соединение 322а.
Соединение 321а (0,285 г, 0,91 ммоль) растворяли в этилформиате (30 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,1 мл, 5,9 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (водн.) (20 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до стеклообразного остатка (322а, 323 мг), m/z: [М+Н]+ 341,0.
Соединение 323а.
Раствор гидроксиламингидрохлорида (0,105 г, 1,52 ммоль) добавляли к соединению 322а (0,323 г, 0,95 ммоль) в смеси 10:1 EtOH/H2O (22 мл). Реакционную смесь быстро нагревали до 50°С и затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали досуха, распределяли между EtOAc (100 мл) и солевым раствором (20 мл), и органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до пены/твердого остатка (323а, 289 мг), m/z: [М+Н]+ 338,0.
Соединение 324а.
Соединение 323а (0,289 г, 0,86 ммоль) растворяли в смеси 1:1 МеОН/ТГФ, (20 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,0 мл, 5,4 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (20 мл) и EtOAc (100 мл), слои разделяли, и водный слой экстрагировали обратно EtOAc. Объединенные органические слои сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 324а (275 мг) в виде стеклообразного остатка/пены, m/z: [М+Н]- 338,0.
Соединение ТХ63690.
Соединение 324а (0,275 г, 0,82 ммоль) растворяли в бензоле (30 мл) и добавляли DDQ (0,220 г, 0,969 ммоль) и реакционную смесь быстро нагревали до 45°С и образовался темный остаток. Добавляли DCM (20 мл) и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, затем разбавляли EtOAc (80 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (2x20 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток хромато-графировали два раза на силикагеле (230-400 меш), применяя смесь 50% EtOAc/DCM, получая стеклообразный остаток. Стеклообразный остаток растворяли в этиловом эфире (5 мл), и при стоянии при комнатной температуре образовывался твердый остаток, который собирали фильтрованием, промывали этиловым эфиром (1 мл) и сушили в потоке воздуха, получая соединение ТХ63690 (69 мг) в виде желтого твердого остатка.
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,46 (с, 1Н), 7,58 (с, 1Н), 7,46 (с, 1Н), 3,97 (с, 3Н), 3,85 (с, 3Н), 2,65 (м, 1Н), 2,48-2,58 (м, 2Н), 1,99-2,12 (м, 2Н), 1,72 (м, 1Н), 1,43 (с, 3Н), 1,28 (д, 3Н, J=6,8 Гц); m/z: [M+H]+ 336,0.
Соединение 320b.
Соединение 130 (0,455 г, 1,28 ммоль), K3PO4 (0,877 г, 4,14 ммоль), 2-фторфенилбороновую кислоту (0,343 г, 2,48 ммоль), диметоксиэтан (12 мл) и ДМФА (6 мл) смешивали, и смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,126 г, 0,11 ммоль) и реакционную смесь барботировали снова в течение 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 95°С в течение 2 дней при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и водой (20 мл) и промывали насыщенным раствором NaCl (водн.) (20 мл), слои разделяли, объединенные водные слои промывали EtOAc (50 мл) и объединенные органические слои сушили над MgSO4, фильтровали, концентрировали, и остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 19,7 г), применяя смесь 40% EtOAc/гексан в качестве элюента, получая соединение 320b (134,6 мг) в виде прозрачного стеклообразного остатка, m/z: [М+Н]+ 371,1.
Соединение 321b.
Соединение 320b (0,1346 г, 0,36 ммоль) растворяли в МеОН (20 мл) и 1н. HCl (3 мл) и смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя МеОН, и затем распределяли между EtOAc (50 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 321b (108 мг) в виде пены/стеклообразного остатка, m/z: [M+H]+ 327,1.
Соединение 322b.
Соединение 321b (0,108 г, 0,33 ммоль) растворяли в этилформиате (10 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (0,4 мл, 2,1 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (водн.) (10 мл) и EtOAc (80 мл). Органический слой экстрагировали солевым раствором (10 мл) и сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до стеклообразного остатка (322b, 111 мг), m/z: [M+H]+ 355,1.
Соединение 323b.
Раствор 0,1 М гидроксиламингидрохлорида в смеси 9:1 EtOH/H2O (6 мл) добавляли к соединению 322b (0,111 г, 0,31 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя этанол, распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным раствором NaCl (водн.) (10 мл) и органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до
стеклообразного остатка (323b, 113 мг), m/z: [M+H]+ 352,1. Соединение 324b.
Соединение 323b (0,113 г, 0,32 ммоль) растворяли в смеси 1:1 МеОН/ТГФ (б мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (0,3 мл, 1,6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре, затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (15 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 324b (110,5 мг) в виде пены, m/z: [M+H]+ 352,1.
Соединение ТХ63721.
Соединение 324b (0,1105 г, 0,31 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл), и добавляли охлажденную до 0°С смесь ^№-дибромдиметилгидантоина (0,051 г, 0,18 ммоль) и перемешивали до исчезновения исходных веществ по тонкослойной хроматографии. Добавляли пиридин (0,2 мл, 2,4 ммоль), реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и затем выдерживали при 60°С в течение 2,5 ч. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 16,6 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получая соединение ТХ63721 (45,7 мг) в виде грязно-белой пены.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,48 (с, 1Н), 7,26-7,43 (м, 4Н), 3,72 (с, 3Н), 2,47-2,57 (м, 3Н), 2,14 (м, 1Н), 1,95 (м, 1Н), 1,70 (м, 1Н), 1,45 (с, 3Н), 1,22 (д, 3Н, J=6,7 Гц); m/z: [M+H]+ 350,1. Соединение 320с.
Соединение 130 (0,450 г, 1,27 ммоль), K3PO4 (0,866 г, 4,08 ммоль), 4-пиридинбороновую кислоту (0,310 г, 2,58 ммоль), диметоксиэтан (12 мл) и ДМФА (6 мл) смешивали и смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,120 г, 0,10 ммоль) и реакционную смесь барботировали снова в течение 3-5 мин. Затем пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 95°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и водой (20 мл) и промывали насыщенным раствором NaCl (водн.) (20 мл), слои разделяли, и объединенные водные слои промывали EtOAc (50 мл). Объединенные органические слои сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, и остаток хроматографировали на силикагеле (230400 меш, 20 г), применяя смесь 3% MeOH/EtOAc в качестве элюента, получая соединение 320с (404,4 мг) в виде белой пены/твердого остатка, m/z: [M+H]+ 354,1.
Соединение 321с.
Соединение 320с (0,402 г, 1,14 ммоль) растворяли в МеОН (25 мл) и 1н. HCl (6 мл) и смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя МеОН, и затем распределяли между EtOAc (80 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (15 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до пены/стеклообразного остатка (321с, 342 мг), m/z: [M+H]+ 310,0.
Соединение 322с.
Соединение 321с (0,310 г, 1,0 ммоль) растворяли в этилформиате (30 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,2 мл, 6,5 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (водн.) (40 мл) и EtOAc (100 мл). Водный слой экстрагировали обратно EtOAc (50 мл), и объединенные органические слои сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до стеклообразного остатка (322с, 330 мг), m/z: [М+Н]+ 338,0.
Соединение 323с.
Раствор 0,1 М гидроксиламингидрохлорида в смеси 9:1 EtOH/H2O (17,6 мл) добавляли к соединению 322с (0,330 г, 0,98 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя этанол, распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл), и органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до пены (323с, 321 мг), m/z: [М+Н]+ 335,1.
Соединение 324с.
Соединение 323с (0,321 г, 0,9 6 ммоль) растворяли в смеси 1:1 МеОН/ТГФ (20 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,0 мл, 5,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (20 мл) и EtOAc (150 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 324с (312 мг) в виде пены, m/z: [M+H]+ 335,1.
Соединение ТХ63720.
Соединение 324с (0,312 г, 0,93 ммоль) растворяли в DCM (40 мл). Добавляли DDQ (0,252 г, 1,11 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали досуха, распределяли между EtOAc (150 мл), и органический слой промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (50 мл). Водный слой экстрагировали обратно EtOAc (100 мл), и объединенные органические слои сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток хрома-тографировали на силикагеле (230-400 меш, 20 г), применяя смесь 2% MeOH/DCM в качестве элюента, получая зеленоватое масло. Масло растирали со смесью гексан/E^O, получая соединение TX63720 (38,5 мг) в виде грязно-белого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,73 (шир.с, 2Н), 8,45 (с, 1Н), 7,29 (м, 2Н), 3,85 (с, 3Н), 2,50-2,70 (м, 3Н), 1,98-2,14 (м, 2Н), 1,72 (м, 1Н), 1,44 м.д. (с, 3Н), 1,29 (д, 3Н, J=6,7 Гц); m/z: [M+H]+ 333,1. Соединение 320d.
Соединение 130 (0,450 г, 1,27 ммоль), K3PO4 (0,873 г, 4,12 ммоль), 3-пиридинбороновую кислоту (0,313 г, 2,61 ммоль), диметоксиэтан (12 мл) и ДМФА (6 мл) смешивали, и смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,124 г, 0,11 ммоль) и реакционную смесь барботировали снова в течение 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 95°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и водой (20 мл) и промывали насыщенным раствором NaCl (водн.) (20 мл). Объединенные водные слои промывали EtOAc (50 мл), и объединенные органические слои сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 20 г), применяя смесью 3% MeOH/EtOAc в качестве элюента, получая соединение 320d (416 мг) в виде белой пены/стеклообразного остатка, m/z: [M+H]+ 354,1.
Соединение 321d.
Соединение 320d (0,413 г, 1,17 ммоль) растворяли в МеОН (25 мл) и 1н. HCl (6 мл), и смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя МеОН, и затем распределяли между EtOAc (80 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (15 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до пены/стеклообразного остатка (321d, 338 мг), m/z: [M+H]+ 310,0.
Соединение 322d.
Соединение 321d (0,303 г, 0,98 ммоль) растворяли в этилформиате (30 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,2 мл, 6,5 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (водн.) (40 мл) и EtOAc (100 мл). Водным слой экстрагировали обратно EtOAc (50 мл), и объединенные органические слои сушили над KH2PO4, фильтровали и концентрировали до стеклообразного остатка (322d, 346 мг), m/z: [М+Н]+ 338,0.
Соединение 323d.
Раствор 0,1 М гидроксиламингидрохлорида в смеси 9:1 EtOH/H2O (16 мл, 1,6 ммоль) добавляли к соединению 322d (0,346 г, 1,03 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя этанол, распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл), и органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до пены/твердого остатка (323d, 299 мг), m/z: [M+H]+ 335,1.
Соединение 324d.
Соединение 323d (0,289 г, 0,86 ммоль) растворяли в смеси 1:1 МеОН/ТГФ (20 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,0 мл, 5,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (20 мл) и EtOAc (150 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 324d (307 мг) в виде пены, m/z: [M+H]+ 335,1.
Соединение ТХ63722.
Соединение 324d (0,307 г, 0,92 ммоль) растворяли в DCM (40 мл) и добавляли DDQ (0,228 г, 1,004 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтровали, и органический слой промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (50 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Остаток хроматографировали на силикагеле (230400 меш, 18 г), применяя смесь 1,5% MeOH/DCM в качестве элюента, получая зеленоватое масло. Масло растирали со смесью гексан/E^O, получая соединение ТХ63722 (40,3 мг) в виде грязно-белого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,67 (м, 1Н), 8,61 (шир.с, 1Н), 8,46 (с, 1Н), 7,71 (м, 1Н), 7,49 (м, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 2,50-2,66 (м, 3Н), 1,97-2,14 (м, 2Н), 1,73 (м, 1Н), 1,45 (с, 3Н), 1,28 (д, 3Н, J=6,8 Гц); m/z: [M+H]+ 333,1.
Соединение 320е.
Соединение 130 (0,453 г, 1,28 ммоль), K3PO4 (0,882 г, 4,16 ммоль), пиримидин-5-бороновую кислоту (0,315 г, 2,6 ммоль), диметоксиэтан (12 мл) и ДМФА (6 мл) смешивали и смесь барботировали N2 в течение 3-5 мин. Добавляли Pd(PPh3)4 (0,118 г, 0,10 ммоль) и реакционную смесь барботировали снова в течение 3-5 мин. Пробирку плотно герметично закрывали и выдерживали при 95°С в течение ночи при перемешивании. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и солевым раствором (20 мл). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, и остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 18 г), применяя смесь 3% MeOH/EtOAc в качестве элюента, получая соединение 320е (333 мг) в виде грязно-белого твердого остатка, m/z: [M+H]+ 355,2.
Соединение 321е.
Соединение 320е (0,333 г, 0,94 ммоль) растворяли в МеОН (25 мл) и добавляли 1н. HCl (6 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем концентрировали, удаляя МеОН,
и распределяли между EtOAc (80 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до твердого остатка (321е, 280,9 мг), m/z: [М+Н]+ 311,2.
Соединение 322е.
Соединение 321е (0,2809 г, 0,91 ммоль) растворяли в этилформиате (34 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,05 мл, 5,7 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре, затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (водн.) (20 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой экстрагировали солевым раствором (10 мл), затем сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до стеклообразного остатка (322е, 280 мг), m/z: [M+H]+ 339,1.
Соединение 323е.
Раствор гидроксиламингидрохлорида (0,15 г, 2,2 ммоль) в смеси 10:1 EtOH/H2O (22 мл) добавляли к соединению 322е (0,280 г, 0,83 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали досуха и распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (10 мл). Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до стеклообразного остатка, который затвердевал при стоянии. Твердый остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 11 г), применяя EtOAc в качестве элюента, получая соединение 323е (180 мг), m/z: [M+H]+ 336,1.
Соединение 324е.
Соединение 323е (0,180 г, 0,54 ммоль) растворяли в смеси 1:1 МеОН/ТГФ (10 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (0,6 мл, 3,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (15 мл) и EtOAc (120 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором NaCl (водн.), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 324е (189 мг) в виде пены, m/z: [M+H]+ 336,1.
Соединение ТХ63748.
Соединение 324е (0,189 г, 0,56 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и добавляли охлажденную до 0°С смесь брома (0,092 г, 0,58 ммоль) в ДМФА (0,5 мл) и перемешивали до исчезновения исходных веществ по тонкослойной хроматографии. Добавляли пиридин (0,45 мл, 5,6 ммоль), реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и затем выдерживали при 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали и концентрировали досуха. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (50 мл), слои разделяли, органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до желтого твердого остатка. Твердый остаток растирали с этиловым эфиром, и соединение ТХ63748 (108 мг) собирали фильтрованием в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 9,25 (с, 1Н), 8,74 (с, 2Н), 8,44 (с, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 2,59 (м, 3Н), 2,08 (м, 2Н), 1,75 (м, 1Н), 1,45 (с, 3Н), 1,29 (д, 3Н, J=6,7 Гц); m/z: [М+Н]+ 334,1.
Соединение 325.
Раствор соединения 132 (431 мг, 1,4 ммоль) и IBX (1,6 г, 5,6 ммоль) в ДМСО (7 мл) выдерживали при 65°С в течение 7 ч. Смесь гасили 50 мл воды и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). EtOAc экстракты концентрировали, и очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 25% EtOAc/гексан), получая соединение 325 в виде белого твердого остатка (189 мг, 43%). МС: m/z: [М+Н]+ 307.
Соединение 326.
Смесь соединения 325 (182 мг, 0,59 ммоль), йода (302 мг, 1,2 ммоль) и пиридина (145 мг, 1,8 ммоль) в ТГФ (3 мл) выдерживали при 60°С в течение 30 ч. Реакционную смесь гасили тиосульфатом натрия (25 мл), экстрагировали EtOAc (2x25 мл), промывали водой, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 326 в виде светлоокрашенного твердого остатка (258 мг, 100%). МС: m/z: [М+Н]+ 433.
Соединение ТХ63829.
Смесь соединения 326 (254 мг, 0,58 ммоль) и CuI (0,28 г, 1,4 ммоль) в 5 мл ДМФА выдерживали при 70°С. Добавляли последовательно FSO2CF2CO2Me (1,7 г, 8,8 ммоль) и НМРА (1,8 г, 10 ммоль), затем выдерживали при 70°С в течение 6 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель, 5-25% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63829 в виде светло-желтого твердого остатка (95 мг, 42%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,27 (с, 1Н), 7,35-7,48 (м, 3Н), 7,28-7,32 (м, 2Н), 3,79 (с, 3Н), 2,49-2,65 (м, 3Н), 2,10 (дт, 1Н, J=2,0, 12,8 Гц), 1,95-2,02 (м, 1Н), 1,64-1,77 (м, 1Н), 1,44 (с, 3Н), 1,26 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС: m/z: [М+Н]+ 375.
Соединение 327.
Соединение 130 (0,54 г, 1,52 ммоль) растворяли в DMA (6 мл) и добавляли цианид цинка (120 мг, 1,02 ммоль), dppf (169 мг, 0,30 ммоль) и карбонат натрия (161 мг, 1,52 ммоль). Азот барботировали через смесь в течение 10 мин, затем добавляли Pd(OAc)2 (34 мг, 0,15 ммоль), и барботирование азотом продолжали в течение следующих 10 мин. Затем смесь выдерживали при 120°С в герметично закрытой колбе в течение ночи. После охлаждения добавляли воду (25 мл), и смесь экстрагировали эфиром (3x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая коричневый полутвердый остаток. Флэш-хроматография (10%
EtOAc/DCM) давала 0,41 г (90%) соединения 327 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 302 [М+Н]+.
Соединение 328.
Соединение 327 (108 мг, 0,36 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли 1 М HCl (1 мл). Раствор перемешивали в течение 3 дней, затем разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 91 мг (99%) соединения 328 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 257,9 [М+Н]+.
Соединение 329.
Раствор соединения 328 (90 мг, 0,35 ммоль) в ТГФ (2 мл) и этилформиата (2 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,6 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане и гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 105 мг (больше 100%) соединения 329 в виде светло-желтого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 286 [М+Н]+.
Соединение 330.
Соединение 329 (0,35 ммоль) растворяли в EtOH (2 мл), ТГФ (2 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гид-роксиламингидрохлорид (27 мг, 0,38 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем выдерживали при 50°С в течение ночи. Добавляли дополнительную порцию гидроксиламингидрохлорида (5 мг), и нагревание продолжали в течение дополнительных 4 ч при 50°С. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 100 мг (100%) соединения 330 в виде светло-желтого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 283 [М+Н]+.
Соединение 331.
Соединение 330 (100 мг, 0,35 ммоль) суспендировали в смеси 3:1 ТГФ/МеОН (4 мл) и добавляли NaOMe (0,6 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Раствор концентрировали и добавляли насыщенный водный KH2PO4 (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл), и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Флэш-хроматография (10% EtOAc/DCM) давала 71 мг (72%) соединения 331 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 283,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63725.
Соединение 331 (71 мг, 0,25 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (43 мг, 0,15 ммоль) и раствор перемешивали 90 мин при 0°С. Добавляли пиридин (0,4 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 5 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (от 5 до 10% EtOAc/DCM) давала 52 мг (74%) соединения ТХ63725 в виде белого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,28 (с, 1Н), 3,93 (с, 3Н), 2,81 (ддд, 1Н, J=1,2, 6,4, 17,2 Гц), 2,60 (м, 1Н), 2,48 (м, 1Н), 1,92-2,06 (м, 2Н), 1,67 (м, 1Н), 1,34 (с, 3Н), 1,24 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС (APCI): m/z: 281,1 [М+Н]+.
Соединение 332.
Соединение 327 (0,29 г, 0,96 ммоль) растворяли в толуоле (5 мл) в толстостенной колбе. Добавляли триметилсилилазид (0,25 мл, 1,92 ммоль) с последующим добавлением оксида дибутилолова (24 мг, 0,096 ммоль). Колбу герметично закрывали и выдерживали в течение ночи в 130°С масляной бане. После охлаждения добавляли МеОН (5 мл) и раствор концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,45 г желтого стеклообразного остатка. МС (APCI): m/z: 345 [М+Н]+. Данное вещество растворяли в ДМФА (5 мл) и добавляли K2CO3 (0,66 г, 4,81 ммоль), с последующим добавлением метилйодида (0,30 мл, 4,81 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, добавляли воду (25 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,40 г коричневого масла. Флэш-хроматография (50% EtOAc/гексан) давала 147 мг (43%) соединения 332 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 373,1 [М+Н]+.
Соединение 333.
Соединение 332 (177 мг, 0,49 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли 1 М HCl (1 мл). Раствор перемешивали в течение 3 дней, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 150 мг (97%) соединения 333 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 315 [М+Н]+.
Соединение 334.
Раствор соединения 333 (95 мг, 0,29 ммоль) в ТГФ (2 мл) и этилформиате (2 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,85 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной
температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане и гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 165 мг (100%) соединения 334 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 343,1 [М+Н]+. Соединение 335.
Соединение 334 (163 мг, 0,48 ммоль) суспендировали в EtOH (3 мл), ТГФ (3 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламингидрохлорид (37 мг, 0,53 ммоль), реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем выдерживали при 50°С в течение ночи. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (ВОДН.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 145 мг (90%) соединения 335 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 340,1 [М+Н]+.
Соединение 336.
Соединение 335 (145 мг, 0,43 ммоль) суспендировали в ТГФ (4 мл) и МеОН (1 мл) и добавляли NaOMe (0,8 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (20 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 148 мг коричневой пены. Флэш-хроматография (1:3 EtOAc/DCM) давала 125 мг (86%) соединения 336 в виде грязно-белого твердого остатка. МС (APCI): 340,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63719.
Соединение 336 (125 мг, 0,37 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (63 мг, 0,22 ммоль) и раствор перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Добавляли пиридин (0,5 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 3 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-окричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (10% EtOAc/DCM) давала 87 мг (70%) соединения ТХ63719 в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,46 (с, 1Н), 4,41 (с, 3Н), 4,20 (с, 3Н), 3,06 (дд, 1Н, J=6,3, 17,3 Гц), 2,75 (ддд, 1Н, J=7,2, 11,6, 17,6 Гц), 2,55 (м, 1Н), 2,01-2,13 (м, 2Н), 1,76 (м, 1Н), 1,44 (с, 3Н), 1,30 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС (APCI): 338,1 [М+Н]+.
Соединение 337.
Неочищенное соеэдинение 332 (1,29 ммоль) растворяли в пиридине (5 мл) и добавляли уксусный ангидрид (0,25 мл, 2,64 ммоль). Раствор выдерживали при 110°С в течение 3 ч, затем охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,40 г соединения 337 в виде темно-коричневого масла. МС (APCI): m/z: 359,2 [М+Н]+.
Соединение 338.
Неочищенное соединение 337 (0,40 г, 1,12 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли 1 М HCl (1 мл). Раствор перемешивали в течение 3 дней, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Флэш-хроматография (75% EtOAc/гексан) давала 70 мг (20%) соединения 338 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 315,1 [М+Н]+.
Соединение 339.
Раствор соединения 338 (69 мг, 0,22 ммоль) в ТГФ (2 мл) и этилформиате (1 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,4 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане, гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 75 мг (100%) соединения 33 9 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 343,1 [М+Н]+.
Соединение 340.
Соединение 339 (75 мг, 0,22 ммоль) растворяли в смеси 3:1 ТГФ/EtOH (4 мл). Добавляли гидрокси-ламин (34 мг, 50 вес.% раствор в воде) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Добавляли вторую порцию гидроксиламина (34 мг) и раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч, затем охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и супили в вакууме, получая 70 мг коричневой пены. Данное вещество суспендировали в бензоле (3 мл) и добавляли п-TsOH (1 мг). Смесь выдерживали при 70°С в течение 8 ч. После охлаждения раствор разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентри
ровали и сушили в вакууме, получая 70 мг коричневой пены. Флэш-хроматография (1:2 EtOAc/DCM - 2:1 EtOAc/DCM)) давала 35 мг (47%) соединения 340 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 340,1 [М+Н]+.
Соединение 341.
Соединение 340 (35 мг, 0,10 ммоль) растворяли в ТГФ (2 мл) и МеОН (1 мл) и добавляли NaOMe (0,2 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 5 ч затем охлаждали и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (10 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 35 мг (100%) соединения 341 в виде коричневой пены. МС (APCI): m/z: 340,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63857.
Соединение 341 (35 мг, 0,10 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (17,7 мг, 0,062 ммоль) и раствор перемешивали в течение 1 ч при 0°С. Добавляли пиридин (0,2 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 5 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме. Флэш-хроматография (20% EtOAc/DCM) давала 16 мг (46%) соединения ТХ63857 в виде белого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,43 (с, 1Н), 4,22 (с, 3Н), 3,01 (дд, 1Н, J=6,4, 17,2 Гц), 2,68-2,82 (м, 1Н), 2,61 (с, 3Н), 2,49-2,59 (м, 1Н), 2,00-2,13 (м, 2Н), 1,69-1,84 (м, 1Н), 1,43 (с, 3Н), 1,30 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС (APCI): m/z: 338,0 [М+Н]+.
Соединение 342.
Соединение 327 (0,71 г, 2,36 ммоль) суспендировали в EtOH (10 мл) и добавляли воду (5 мл), с последующим добавлением KOH (0,66 г, 11,8 ммоль). Смесь перемешивали в течение 4 дней и затем выливали в насыщенный KH2PO4 (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,75 г (100%) соединения 342 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 320,1 [M+H]+.
Соединение 343.
Соединение 342 (380 мг, 1,19 ммоль) добавляли к DMAc-DMA (3 мл), и смесь выдерживали при 80°С в течение 3 ч. Раствор охлаждали, концентрировали и сушили в вакууме, получая соединение 343 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 389,1 [М+Н]+.
Соединение 344.
Гидроксиламингидрохлорид (124 мг, 1,78 ммоль) суспендировали в диоксане (4 мл) и добавляли Et3N (0,25 мл, 1,78 ммоль). Смесь обрабатывали ультразвуком в течение нескольких минут. Добавляли раствор соединения 343 (1,19 ммоль) в диоксане (4 мл) с последующим добавлением уксусной кислоты (0,36 г, 5,94 ммоль). Смесь выдерживали при 80°С в течение 2 ч и охлаждали до комнатной температуры. Смесь разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме. Флэш-хроматография (5-20% EtOAc/DCM) давала 295 мг (69%) соединения 344 в виде белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 359,1 [М+Н]+.
Соединение 345.
Соединение 344 (290 мг, 0,81 ммоль) растворяли в ТГФ (12 мл) и добавляли 1 М HCl (3 мл). Раствор перемешивали в течение 4 дней, затем разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 246 мг (97%) соединения 345 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 315,0 [М+Н]+.
Соединение 346.
Соединение 345 (230 мг, 0,73 ммоль) растворяли в ТГФ (6 мл) и этилформиате (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (1,3 г, 30 вес.% в МеОН), раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь охлаждали в ледяной бане, гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (30 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 250 мг (100%) соединения 346 в виде светло-желтого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 343,0 [М+Н]+.
Соединение 347.
Соединение 346 (250 мг, 0,73 ммоль) суспендировали в ТГФ (6 мл), EtOH (3 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламингидрохлсрид (76 мг, 1,10 ммоль) и смесь выдерживали при 50°С в течение 3 ч. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 250 мг (100%) соединения 347 в виде светло-желтой пены. МС (APCI): m/z: 340,1 [М+Н]+.
Соединение 348.
Соединение 347 (0,73 ммоль) растворяли в смеси 3:1 ТГФ/МеОН (8 мл) и добавляли NaOMe (1,3 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 2 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (40 мл) и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (25 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 250 мг светло-желтой пены. Флэш-хроматография (10-15% EtOAc/DCM) давала 190 мг (77%) соединения 348 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 340,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63872.
Соединение 348 (190 мг, 0,56 ммоль) растворяли в ДМФА (5 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (96 мг, 0,34 ммоль) и раствор перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Добавляли пиридин (1 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 3 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (5% EtOAc/DCM) давала 150 мг (79%) соединения ТХ63872 в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,42 (с, 1Н), 4,23 (с, 3Н), 3,10 (дд, 1Н, J=6,0, 17,2 Гц), 2,75-2,86 (м, 1Н), 2,48-2,60 (м, 1Н), 2,46 (с, 3Н), 2,00-2,15 (м, 2Н), 1,69-1,83 (м, 1Н), 1,43 (с, 3Н), 1,30 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС (APCI): m/z: 338,0 [М+Н]+.
Соединение 349.
Диэтилоксалат (5 г, 10 экв.) добавляли к суспензии NaH (0,51 г, 60% в масле) в ТГФ (10 мл). Добавляли раствор соединения 127 (0,8 г, 3,35 ммоль) в ТГФ (10 мл). После кипячения с обратным холодильником в течение 16 ч смесь охлаждали, нейтрализовали насыщенным раствором KH2PO4 и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). EtOAc промывали солевым раствором и сушили над MgSO4, получая соединение 349 (1,1 г, 100%). МС: m/z: [M+H]+ 311.
Соединение 350.
Смесь соединения 349 (1,1 г, 3,35 ммоль), метилгидразина (310 мг, 6,7 ммоль) и EtOH (15 мл) выдерживали при 60°С в течение 16 ч. EtOH удаляли и неочищенный продукт пропускали через короткую колонку с силикагелем, элюировали смесью 50% EtOAc/гексан, получая соединение 350 в виде белого твердого остатка (220 мг, выход 19%). МС: m/z: [М+Н]+ 349.
Соединение 351.
Раствор соединения 350 (0,22 г, 0,63 ммоль) в МеОН (5 мл) обрабатывали 3н. HCl (водн.) (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (25 мл). Органический слой сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 351 в виде твердого остатка. (0,14 г, выход 73%). МС: m/z: [M+H]+ 305.
Соединение 352.
К раствору соединения 351 (0,14 г, 0,46 ммоль) в 5 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (0,4 г, 5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 352 (15 5 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 333.
Соединение 353.
К раствору соединения 352 (155 мг, 0,46 ммоль) в 10 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl (75 мг, 2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 353 (155 мг, 100%). МС: m/z: [M+H]+ 330.
Соединение 354.
К раствору соединения 353 (155 мг, 0,46 ммоль) в смеси 2:1 ТГФ/МеОН (3 мл) добавляли 30% NaOMe в МеОН (0,95 г, 10 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 354 (140 мг, выход 100%). МС: m/z: [М+Н]+ 302.
Соединение 355.
К раствору соединения 354 (140 мг, 0,46 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли DBDMH (92 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (0,4 г, 10 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя смесью от 25 до 100% EtOAc/гексан, получая соединение 355 в виде грязно-белого твердого остатка (110 мг, выход 80%). МС: m/z: [М+Н]+ 300.
Соединение ТХ63655.
К раствору соединения 355 (110 мг, 0,36 ммоль) в 5 мл ТГФ при 0°С добавляли (COCl)2 (350 мг, 6 экв.) и 1 каплю ДМФА и раствор перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. После упаривания растворителя остаток растворяли в пиридине (5 мл), добавляли диметиламингидрохлорид (450 мг, 10 экв.) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. После упаривания пиридина неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя смесью от 15 до 50% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63655 в виде грязно-белого твердого остатка (40 мг, выход 35%).
^-ЯМР (500 МГц, ДМСО) 5 8,39 (с, 1Н), 3,74 (с, 3Н), 2,98 (с, 3Н), 2,93 (с, 3Н), 2,76-2,67 (м, 1Н), 2,46-2,40 (м, 2Н), 2,20-2,05 (т, 1Н, J=2,37, 12,3, 12,5), 1,95-1,85 (м, 1Н), 1,65-1,60 (м, 1Н), 1,38 (с, 3Н), 1,201,12 (д, 3Н, J=6,61); МС: m/z: [М+Н]+ 327.
Соединение 356.
н-BuLi (1,6 М в гексане, 0,6 мл, 0,96 ммоль) добавляли к DIPA (110 мг, 1,1 ммоль) в ТГФ (2 мл) при 0°С, перемешивали в течение 30 мин и затем реакционную смесь охлаждали до -78°С. Добавляли по каплям к LDA раствору соединение ТХ63570 (0,2 г, 0,68 ммоль) в 1 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 2 ч и добавляли бензилбромид (65 мг, 1,1 экв.) в 1 мл ТГФ. После перемешивания в течение 2 ч при 0°С смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли 1н. HCl (2 мл), реакционную смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, от 5 до 30% EtOAc/гексан), получая соединение 356 в виде масла (115 мг, 45%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 383.
Соединение 357.
Соединение 356 (115 мг, 0,3 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл) с 10% Pd/C (65 мг) при комнатной температуре. Реакционную смесь обрабатывали водородом и перемешивали в течение двух дней, фильтровали и концентрировали, получая соединение 357, 105 мг. МС (APCI): m/z: [M+H]+ 385.
Соединение 358.
К раствору соединения 357 (105 мг, 0,27 ммоль) в 5 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (0,5 г, 10 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4 (водн.). Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 358 (110 г, выход 98%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 413.
Соединение 359.
К раствору соединения 358 (105 мг, 0,26 ммоль) в 5 мл EtOH, добавляли NH2OH-HCl соль (85 мг, 2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 359 (110 мг, 100%). MC (APCI): m/z: [M+H]+ 410.
Соединение 360.
К раствору соединения 359 (110 мг, 0,26 ммоль) в смеси 2:1 ТГФ/МеОН (3 мл) добавляли 30% NaOMe (0,5 г, 5 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 9 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с KH2PO4 (насыщенный, 15 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 360 (110 мг, выход 100%). MC (APCI): m/z: [М+Н]+ 410.
Соединение ТХ63607.
К раствору соединения 360 (110 мг, 0,26 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли DBDMH (42 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г, 50 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, злюировали смесью от 5 до 30% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63607 в виде грязно-белого твердого остатка (41 мг, выход 39%).
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,45 (с, 1Н), 7,45-7,48 (м, 2Н), 7,37-7,42 (м, 1Н), 7,23-7,30 (м, 4Н), 7,117,19 (м, 3Н), 3,76 (с, 3Н), 3,58 (шир.д, 1Н, J=15 Гц), 3,07 (дд, 1Н, J=15,5 Гц), 2,84 (шир.д, 1Н, J=10 Гц), 2,53 (дд, 1Н, J=20,5 Гц), 2,37-2,44 (м, 1Н), 2,16-2,20 (м, 2Н), 1,70-1,79 (м, 1Н), 1,46 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: [M+H]+ 408.
Соединение 361.
Раствор KHMDS (658 мг, 3,30 ммоль) в ТГФ (6 мл) охлаждали до -60°С. Добавляли по каплям раствор соединения ТХ63570 (482 мг, 1,65 ммоль) в ТГФ (4 мл). Раствор медленно нагревали до 0°С и перемешивали 30 мин. Раствор повторно охлаждали до -60°С и добавляли бензилбромид (0,30 мл, 2,47 ммоль). Раствор нагревали до комнатной температуры в течение 2 ч. Добавляли насыщенный водный NH4Cl (20 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 0,67 г неочищенной пены.
Флэш-хроматография (10% EtOAc/DCM) давала 120 мг (15%) соединения 361 в виде светло-желтой пены. MC (APCI): m/z: 473,1 [М+Н]+. Соединение 362.
Соединение 361 (120 мг, 0,25 ммоль) растворяли в ТГФ (15 мл) с 10% Pd/C (65 мг) при комнатной температуре. Реакционную смесь обрабатывали водородом и перемешивали в течение двух дней, фильтровали и концентрировали, получая соединение 362, 120 мг. МС (APCI): m/z: [M+H]+ 475.
Соединение 363.
К раствору соединения 362 (120 мг, 0,25 ммоль) в 4 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (0,3 г, 6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4 (водн.). Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 363 (120 мг, выход 95%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 503.
Соединение 364.
К раствору соединения 363 (120 мг, 0,23 ммоль) в 5 мл EtOH, добавляли NH2OH-HCl (85 мг, 2 экв.) и выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 364 (120 мг, 100%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 500.
Соединение 365.
К раствору соединения 364 (120 мг, 0,23 ммоль) в смеси 2:1 ТГФ/МеОН (3 мл) добавляли 30% NaOMe (0,5 г, 5 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение 12 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с KH2PO4 (насыщенный, 15 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над KH2PO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 365 (115 мг, выход 98%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 500.
Соединение ТХ63601.
К раствору соединения 365 (115 мг, 0,23 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли DBDMH (38 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г, 55 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем (от 5 до 30% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63601 в виде грязно-белого твердого остатка (31 мг, выход 28%).
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,35 (с, 1Н), 7,40-7,48 (м, 3Н), 7,25-7,31 (м, 5Н), 7,09-7,18 (м, 5Н), 6,91 (д, 2Н, J=10 Гц), 3,74 (с, 3Н), 3,28 (д, 1Н, 15 Гц), 3,18 (д, 1Н, J=15 Гц), 2,92 (д, 1Н, J=15 Гц), 2,62-2,69 (м, 2Н), 2,36-2,43 (м, 2Н), 2,16 (дд, 1Н, J=15, 5 Гц), 2,02-2,08 (м, 1Н), 1,65 (с, 3Н); МС (APCI): m/z: [M+H]+ 498.
Соединение 366.
Раствор диизопропиламина (0,30 мл, 2,15 ммоль) в ТГФ (2 мл) охлаждали до -78°С и добавляли по каплям BuLi (1,6 М в гексане, 1,35 мл, 2,15 ммоль). Раствор удаляли из охлаждающей бани и перемешивали 15 мин. Раствор повторно охлаждали до -78°С и добавляли по каплям раствор соединения ТХ63570 (0,21 г, 0,72 ммоль) в ТГФ (3 мл). Раствор перемешивали в течение 15 мин, затем переносили в баню со льдом и перемешивали в течение 30 мин. Раствор повторно охлаждали до -78°С и добавляли суспензию хлорида дифенилйодония (0,227 г, 0,72 ммоль) в ДМФА (8 мл). Раствор перемешивали в течение 1 ч при -78°С, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч. Раствор гасили насыщенным раствором NH4Cl (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 0,33 г коричневого масла. Флэш-хроматография (25% EtOAc/DCM) давала 80 мг (31%) соединения 366 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 369 [М+Н]+.
Соединение 367.
Соединение 366 (76 мг, 0,019 ммоль) растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли в атмосфере азота 10% Pd/C (20 мг). Смесь разряжали и продували Н2 (3x) и перемешивали в атмосфере Н2 в течение ночи. Смесь фильтровали через тонкий фритт и фильтрат концентрировали, получая 80 мг (больше 100%) соединения 367 в виде белой пены. МС (APCI): m/z: 371,1 [M+H]+.
Соединение 368.
Раствор соединения 367 (75 мг, 0,20 ммоль) в этилформиате (5 мл) охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,55 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 90 мг (больше 100%) соединения 368 в виде коричневой пены. MC(APCI): m/z: 399 [М+Н]+.
Соединение 369.
Соединение 368 (0,20 ммоль) растворяли в EtOH (3 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидроксиламин-гидрохлорид (15 мг, 0,22 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 60°С в течение 3 ч. Раствор охлаждали и концентрировали. Остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (10 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 90 мг (больше 100%) соединения 369 в виде коричневой пены. МС (APCI): m/z: 396 [М+Н]+.
Соединение 370.
Соединение 369 (0,20 ммоль) растворяли в смеси 2:1 ТГФ:МеОН (3 мл) и добавляли NaOMe (0,3 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 4 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (10 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали. Флэш-хроматография (1:2 EtOAc/DCM) давала 72 мг (91%) соединения 370 в виде грязно-белого твердого остатка. МС (APCI): m/z: 396,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63629.
Соединение 370 (71 мг, 0,18 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (31 мг, 0,11 ммоль) и раствор перемешивали в течение 2 ч при 0°С. Добавляли пиридин (0,2 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения раствор концентрировали в вакууме до коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (20% EtOAc/DCM) давала 56 мг (79%) соединения ТХ63629 в виде бледно-желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,65 (с, 1Н), 7,52-7,26 (м, 8Н), 7,14 (м, 2Н), 3,84 (с, 3Н), 3,68 (д, 1Н, J=13,6), 2,72 (м, 1Н), 2,54-2,39 (м, 2Н), 2,67 (м, 1Н), 1,63 (с, 3Н), 1,46 (м, 1Н); МС (APCI): m/z: 394,1 [M+H]+.
Соединение 371.
Диметилкарбонат (3,1 г, 10 экв.) добавляли к суспензии NaH (0,51 г, 60% в масле) в ТГФ (10 мл). Добавляли раствор соединения 127 (0,8 г, 3,35 ммоль) в ТГФ (10 мл). После кипячения с обратным холодильником в течение 16 ч раствор охлаждали, нейтрализовали KH2PO4 (конц.) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). EtOAc промывали солевым раствором и сушили над MgSO4, получая неочищенное соединение 371 (1 г, 100%). МС: m/z: [М+Н]+ 297.
Соединение 372.
Раствор гидрохлорида ацетимидамида (3,2 г, 10 экв.) и пиперидина (1,45 г, 5 экв.) в 10 мл изо-PrOH перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Медленно добавляли неочищенное соединение 371 (1 г, 3,35 ммоль) в 5 мл 2-пропанола и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение двух дней, затем концентрировали. Реакционную смесь смешивали с эфиром (50 мл). Продукт осаждали, фильтровали и промывали водой, получая соединение 372 в виде грязно-белого твердого остатка (425 мг, выход 42%). МС: m/z: [М+Н]+ 305.
Соединение 373.
К суспензии соединения 372 (0,4 г, 1,3 ммоль) в хлорокиси фосфора (10 мл, 107 ммоль) при комнатной температуре добавляли две капли ДМФА. Полученную в результате смесь перемешивали при 140°С в течение 3 ч. Затем смесь концентрировали досуха, разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали Na-HCO3 (50 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделяли, сушили (MgSO4) и упаривали досуха. Соединение 373 получали в виде сырого желтого масла (385 мг, 100%) и применяли без дополнительной очистки.
Соединение 374.
30% NaOMe (1,2 г, 5 экв.) в МеОН добавляли по каплям к перемешиваемому раствору соединения 373 в сухом. МеОН (10 мл). Раствор выдерживали при 50°С в течение 3 ч. Затем смесь концентрировали досуха, разбавляли EtOAc (35 мл) и промывали насыщенным раствором KH2PO4 (25 мл), с последующей промывкой солевым раствором, сушили (MgSO4) и растворители удаляли. Очистка колоночной хроматографией на силикагеле, применяя (от 5 до 40% EtOAc/гексан градиент) давала соединение 374 в виде масла (155 мг, выход 44%). МС: m/z: [M+H]+ 275.
Соединение 375.
К раствору соединения 374 (155 мг, 0,56 ммоль) в 5 мл HCOOEt добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (1 г, 10 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 375. (170 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 303.
Соединение 376.
К раствору соединения 375 (170 мг, 0,56 ммоль) в 10 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (80 мг, 2 экв.) и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали со
левым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 376 (170 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 300. Соединение 377.
К раствору соединения 376 (170 мг, 0,56 ммоль) в 2 мл ТГФ и 1 мл МеОН добавляли 30% NaOMe (1 г, 10 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 9 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (15 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 377 (170 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 300.
Соединение ТХ63646.
К раствору соединения 377 (170 мг, 0,56 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли DBDMH (90 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 15 до 40% EtOAc/гексан, собирая соединение ТХ63646 в виде грязно-белого твердого остатка (50 мг, выход 30%).
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,92 (с, 1Н), 4,00 (с, 3Н), 2,80 (дд, 1Н, J=6,7, 18,3 Гц), 2,61 (с, 3Н), 2,522,60 (м, 2Н), 2,04-2,16 (м, 2Н), 1,73 (м, 1Н), 1,41 (с, 3Н), 1,32 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 398.
Соединение 378.
В герметично закрываемой пробирке раствор слегка сырого соединения 371 (неочищенное из предыдущей стадии, принимаем 3,36 ммоль) в 20 мл изо-PrOH обрабатывали твердым гидрохлоридом цик-лопропанкарбоксимидамида (4,05 г, 33,59 ммоль), с последующей обработкой пиперидином (1,7 мл, 17,2 ммоль). Образец продували N2, герметично закрывали и выдерживали (нагревательный блок) при 90°С в течение 72 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая 0,85 г (77%) соединения 378 в виде грязно-белого твердого остатка. МС (APCI) m/z: 331 (100%) [М+Н]+.
Соединение 379.
Раствор соединения 378 (0,85 г, 2,58 ммоль) в 10 мл МеОН и 3н. HCl (10 мл, 30 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным раствором NH4OH до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали CHCl3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,70 г (94%) соединения 379 в виде грязно-белого твердого остатка. МС (APCI) m/z: 287 (100%) [М+Н]+.
Соединение 380.
К перемешиваемому раствору соединения 379 (0,70 г, 2,43 ммоль) и ^^диизопропилэтиламина (0,47 мл, 2,70 ммоль) в 24 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) хлорокись фосфора (2,3 мл, 24,6 ммоль). После добавления образец выдерживали при 80°С в атмосфере N2 в течение 16 ч, охлаждали, концентрировали, затем аккуратно распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,69 г (94%) соединения 380 в виде грязно-белого твердого остатка. МС (APCI) m/z: 305/307 (100/47%) [М+Н]+.
Соединение 381.
Раствор соединения 380 при комнатной температуре в атмосфере N2 (0,32 г, 1,07 ммоль) в 10 мл ТГФ:МеОН (1:1) обрабатывали 30 вес.% раствором NaOMe в МеОН (2,0 мл, 10,7 ммоль). Образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч, охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,34 г (больше 100%) слегка сырого соединения 381 в виде желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 382.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 381 (0,34 г, принимаем 1,07 ммоль) и этилформиата (9,0 мл, 111,0 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (2,0 мл, 10,7 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,35 г (больше 100%) слегка сырого соединения 382 в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 383.
Раствор слегка сырого соединения 382 (0,35 г, принимаем 1,07 ммоль) и гидрохлорида гидроксила-мина (0,11 г, 1,58 ммоль) в 25 мл EtOH выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали и распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,31 г (90%) слегка сырого соединения 383 в виде
коричневого пенообразного остатка, который применяли без очистки. МС (ES) m/z: 326 (100%) [М+Н]+. Соединение 384.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 383 (0,31 г, 0,96 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 20 мл МеОН добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (0,90 мл, 4,80 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хромато-графировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая 0,13 г (41%) соединения 384 в виде грязно-белого пенообразного остатка.
Соединение ТХ63761.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору соединения 3 84 (0,13 г, 0,40 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,057 г, 0,20 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,33 мл, 4,08 ммоль). Ледяную баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 3 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая 0,030 г (23%) соединения ТХ63761 в виде грязно-белого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,88 (с, 1Н), 3,94 (с, 3Н), 2,75 (дд, 1Н, J=7,0, 18,2 Гц), 2,52 (м, 2Н), 2,16 (м, 1Н), 2,06 (м, 2Н), 1,68 (дкв., 1Н, J=6,5, 12,8 Гц), 1,38 (с, 3Н), 1,29 (д, 3Н, J=6,8 Гц), 1,10 (м, 2Н), 1,02 (м, 2Н); МС (APCI) m/z: 324 (100%) [М+Н]+.
Соединение 385.
В герметично закрываемой пробирке раствор соединения 371 (неочищенный из предыдущей стадии, принимаем 4,20 ммоль) в 15 мл н-BuOH обрабатывали твердым гидрохлоридом 2,2-диметилпропионамидина (5,0 г, 36,6 ммоль), с последующей обработкой пиперидином (2,1 мл, 21,2 ммоль). Образец продували N2, герметично закрывали и выдерживали (нагревательным блоком) при 100°С в течение 72 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая 0,87 г (60%) соединения 385 в виде коричневого липкого остатка. МС (APCI) m/z: 347 (100%) [М+Н]+.
Соединение 386.
К раствору соединения 385 (0,87 г, 2,50 ммоль) и ^^диизопропилэтиламкна (0,48 мл, 2,76 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) хлорокись фосфора (2,3 мл, 24,7 ммоль). После добавления образец выдерживали при 90°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали, затем аккуратно распределяли между EtOAc и насыщенным раствором. NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,85 г (93%) соединения 386 в виде светло-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 365/367 (100/38%) [М+Н]+.
Соединение 387.
Раствор соединения 386 (0,42 г, 1,16 ммоль) в 10 мл МеОН обрабатывали 30 вес.% раствором NaOMe в МеОН (1,1 мл, 5,9 ммоль). Образец продували N2, герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение 48 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,42 г (приблизительно 100%) соединения 387 в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 388.
Раствор соединения 387 (0,42 г, 1,16 ммоль) и 3н. HCl (10 мл, 30 ммоль) в 10 мл МеОН перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным NH4OH раствором до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,34 г (92%) соединения 388 в виде желтого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 317 (100%) [М+Н]+.
Соединение 389.
К перемешиваемому раствору соединения 388 (0,34 г, 1,07 ммоль) и этилформиата (10 мл, 124 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (1,0 мл, 5,3 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,36 г (97%) соединения 389 в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 345 (100%) [М+Н]+.
Соединение 390.
Раствор соединения 389 (0,36 г, 1,04 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,11 г, 1,58 ммоль) в 10 мл EtOH выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали и распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,59 г (больше 100%) соединения 390 в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 391.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 390 (неочищенный из предыдущей стадии, принимаем 1,04 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 10 мл МеОН:ТГФ (1:1) добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (0,98 мл, 5,22 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 20% EtOAc/гексан), получая 0,18 г (50%) соединения 391 в виде светло-желтого масла. МС (APCI) m/z: 342 (100%) [М+Н]+.
Соединение ТХ63853.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору соединения 391 (0,18 г, 0,52 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,075 г, 0,26 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,42 мл, 5,20 ммоль). Ледяную баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 20% EtOAc/гексан), получая 0,068 г (38%) соединения ТХ63853 в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,60 (с, 1Н), 3,97 (с, 3Н), 2,76 (дд, 1Н, J=6,4, 18,0 Гц), 2,51-2,60 (м, 2Н), 2,00-2,15 (м, 2Н), 1,60-1,75 (м, 1Н), 1,36 (с, 12Н), 1,28 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС (APCI) m/z: 340 (100%) [М+Н]+.
Соединение 392.
Ю-трет-Bu (250 мг, 1 экв.) растворяли в безводном EtOH (20 мл). Добавляли к основному раствору тиомочевину (1,7 г, 10 экв.) и соединение 371 (950 мг, 3,2 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч. Растворитель концентрировали в вакууме практически досуха, и остаток растворяли в воде (10 мл). Раствор нейтрализовали 3н. HCl, осадок собирали, промывали водой и сушили в вакууме, получая соединение 392 (900 мг, выход 87%). МС: m/z: [M+H]+ 323.
Соединение 393.
Соединение 392 (900 мг, 2,79 ммоль) растворяли в ДМФА (10 мл) и добавляли K2CO3 (1,2 г, 3 экв.), и смесь перемешивали в течение 30 мин. Добавляли по каплям MeI (0,8 г, 2 экв.), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (2x50 мл). Органический слой промывали водой и солевым раствором и концентрировали, получая соединение 393 (975 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 351.
Соединение 394.
К перемешиваемой смеси соединения 3 93 (975 мг, 2,79 ммоль) и Pd(PPh3)4 (200 мг, 5 моль. %) в ТГФ (20 мл) в атмосфере азота добавляли фенилбороновую кислоту (1 г, 3 экв.) и CuTC (1,8 г, 3,5 экв.). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюировали смесью от 10 до 35% EtOAc/гексан, получая соединение 394 в виде твердого остатка (415 мг, выход 40%). МС: m/z: [M+H]+ 381.
Соединение 395.
Раствор соединения 394 (455 мг, 1,2 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали 3н. HCl (водн.) (3 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x25 мл) и промывали насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (25 мл). Органический слой сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 395 в виде масла (405 мг, выход 100%). МС: m/z: [М+Н]+ 337.
Соединение 396.
К раствору соединения 395 (405 мг, 1,2 ммоль) в 5 мл HCOOEt добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (1,3 г, 6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем выливали в воду и подкисляли насыщенным раствором KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым, раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 396 (435 мг, выход 100%). МС: m/z: [М+Н]+ 365.
Соединение 397.
К раствору соединения 396 (435 мг, 1,18 ммоль) в 20 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (170 мг, 2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали
солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 397 (430 мг, выход 98%). МС: m/z: [М+Н]+ 362. Соединение 398.
К раствору соединения 397 (430 мг, 1,18 ммоль) в 2 мл ТГФ и 2 мл МеОН добавляли 30% NaOMe (1,7 г, 8 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (25 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO4 и очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 15 до 45% EtOAc/гексан, получая соединение 398 в виде грязно-белого твердого остатка (215 мг, выход 50%). МС: m/z: [M+H]+ 362.
Соединение ТХ63666.
К раствору соединения 398 (210 мг, 0,58 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (95 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 15 до 45% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63666 в виде грязно-белого твердого остатка (130 мг, выход 62%).
^-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,76 (с, 1Н), 7,58 (м, 5Н), 3,50 (с, 3Н), 2,90 (м, 1Н), 2,52-2,61 (м, 2Н), 2,05-2,20 (м, 2Н), 1,72 (м, 1Н), 1,45 (с, 3Н), 1,34 (д, 3Н, J=6,6 Гц); МС: m/z: [М+Н]+ 360.
Соединение 399.
Смесь соединения 392 (2,6 г, 8,06 ммоль) и 8,1 г хлоруксусной кислоты (10 экв.) выдерживали при 100°С в течение 1 ч, затем добавляли 10 мл воды, нагревание продолжали в течение следующих 5 ч. Добавляли концентрированную HCl (0,5 мл) и смесь выдерживали при 100°С в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали и добавляли 50 мл ледяной воды. Осадок собирали фильтрованием и сушили в вакууме, получая соединение 399 в виде грязно-белого твердого остатка (2,1 г, выход 93%). МС: m/z: [М+Н]+ 263.
Соединение 400.
Смесь соединения 399 (2,03 г, 7,73 ммоль) и диизопропилэтиламина (1,01 г, 1 экв.) в 10 мл POCl3 выдерживали при 90°С в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили льдом, и продукт осаждали, фильтровали и сушили в вакууме, получая соединение 400 в виде коричневого твердого остатка (2,1 г, выход 90%). МС: m/z: 299, 301 (3:2) [М+Н]+.
Соединения 401а-Ъ.
Раствор соединения 400 (2,05 г, 6,85 ммоль), NaOMe (1,85 г, 1,5 экв., 30% в МеОН) и 25 мл МеОН выдерживали при 50°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x20 мл), промывали водой и очищали на колонке с силикагелем, элюирую смесью от 10 до 15% EtOAc/гексан. Первым полученным соединением было соединение 401а (1,3 г, выход 65%), МС: m/z: 295, 297 (3:1) [М+Н]+. Вторым полученным соединением было соединение 401b (110 мг, выход 5,5%), МС: m/z: 291 [М+Н]+.
Соединение 402.
К раствору соединения 401а (130 мг, 0,44 ммоль) в 5 мл HCOOEt добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (0,5 г, 6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем выливали в воду и подкисляли KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 402 (140 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 319.
Соединение 403.
К раствору соединения 402 (140 мг, 0,44 ммоль) в 10 мл EtOH добавляли KH2OH-HCl соль (65 мг, 2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 403 (138 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 316.
Соединение 404.
К раствору соединения 403 (138 мг, 0,44 ммоль) в 2 мл ТГФ и 1 мл МеОН добавляли по каплям 30% NaOMe (0,63 г, 8 экз.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (15 мл) и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым, раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 404 (136 мг, выход 100%). МС: m/z: [M+H]+ 316.
Соединение ТХ63718.
К раствору соединения 404 (136 мг, 0,44 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (70 мг, 0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 30% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63718 в виде грязно-белого твердого остатка (55 мг, выход 40%).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,71 (с, 1Н), 3,94 (с, 3Н), 3,92 (с, 3Н), 2,67 (дд, 1Н, J=7,0, 17,5 Гц), 2,372,51 (м, 2Н), 1,95-2,06 (м, 2Н), 1,62 (м, 1Н),1,33 (с, 3Н), 1,22 (д, 3Н, J=6,5 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 314.
Соединения ТХ63793 и ТХ63794.
Энантиомеры соединения ТХ63718 (32,7 мг) разделяли, применяя хиральную ВЭЖХ (CHIRALPAK
IA, 5 мкм, 30x250 мм, 2:50:50 EtOH/EtOAc/гексан), получая два хорошо разрешенных пика. Один на 4,04 мин, который давал соединение ТХ63793 (17,6 мг, чистота больше 99,9%).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,79 (с, 1Н), 4,02 (с, 3Н), 4,00 (с, 3Н), 2,75 (дд, 1Н, J=6,4, 18,0 Гц), 2,52 (м, 2Н), 2,09 (м, 2Н), 1,70 (м, 1Н), 1,41 (с, 3Н), 1,30 (д, 3Н, J=6,7 Гц); и второй на 4,66 мин, который давал соединение ТХ63794 (15,1 мг, чистота 98,8%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,79 (с, 1Н), 4,02 (с, 3Н), 4,00 (с, 3Н), 2,75 (дд, 1Н, J=6,4, 18,0 Гц), 2,52 (м, 2Н), 2,09 (м, 2Н), 1,70 (м, 1Н), 1,41 (с, 3Н), 1,30 (д, 3Н, J=6,7 Гц).
Соединение 405а.
Соединение 401b (0,25 г, 0,84 ммоль) растворяли в DME (6 мл) и ДМФА (3 мл). К данному раствору добавляли пиридин-3-илбороновую кислоту (125 мг, 1 ммоль), Ph3P (85 мг, 0,32 ммоль) и K3PO4 (0,54 г, 2,54 ммоль). Азот барботировали через смесь в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (35 мг, 0,16 ммоль), и азот барботировали в течение следующих 10 мин. Суспензию выдерживали при 90°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 35% EtOAc/гексан, получая соединение 405а в виде твердого остатка (0,28 г, выход 98%). МС: m/z: [M+H]+ 338.
Соединение 405b.
Пиридин-4-илбороновую кислоту (125 мг, 1 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 401b, получая соединение 405b (270 мг, выход 95%). МС: m/z: [M+H]+ 338. Соединение 405с.
2-Метоксифенилбороновую кислоту (155 мг, 1 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 401b, получая соединение 405с (150 мг, выход 49%). МС: m/z: [M+H]+ 367. Соединение 405d.
Фенилбороновую кислоту (155 мг, 1 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 401b, получая соединение 405d (185 мг, выход 65%). МС: m/z: [M+H]+ 337. Соединение 405е.
Пиримидин-5-илбороновую кислоту (140 мг, 1,13 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 401b, получая соединение 405е (185 мг, выход 58%). МС: m/z: [M+H]+ 339. Соединение 406а.
К раствору соединения 405а (280 мг, 0,82 ммоль) в 10 мл HCOOEt добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем выливали в воду и подкисляли KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 40ба (300 мг). МС: m/z: [M+H]+ 366.
Соединение 406b.
Соединение 405b (270 мг, 0,82 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 406а, получая заявленное в заголовке соединение 406b (290 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 366. Соединение 406с.
Соединение 405с (150 мг, 0,4 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 406а, получая заявленное в заголовке соединение 406с (120 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 395. Соединение 406d.
Соединение 405d (185 мг, 0,51 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 406а, получая заявленное в заголовке соединение 406d (185 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 365. Соединение 406е.
Соединение 405е (17 5 мг, 0,51 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 406а, получая заявленное в заголовке соединение 406е (185 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 367. Соединение 407а.
К раствору соединения 406а (300 мг, 0,82 ммоль) в 20 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 407а (280 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 363.
Соединение 407b.
Соединение 406b (290 мг, 0,79 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 407а, получая заявленное в заголовке соединение 407b (290 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 363. Соединение 407с.
Соединение 406c (120 мг, 0,3 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 407а, получая заявленное в заголовке соединение 407с (117 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 392.
Соединение 407d.
Соединение 406d (130 мг, 0,3 4 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 407а, получая заявленное в заголовке соединение 407d (120 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 376. Соединение 407е.
Соединение 406e (185 мг, 0,5 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 407а, получая заявленное в заголовке соединение 407е (180 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 364. Соединение 408а.
К раствору соединения 407а (280 мг, 0,78 ммоль) в 4 мл ТГФ и 2 мл МеОН добавляли по каплям 30% NaOMe (8 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (30 мл) и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 408а (220 мг). МС: m/z: [M+H]+ 363.
Соединение 408b.
Соединение 407b (290 мг, 0,79 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 408а, получая заявленное в заголовке соединение, 408b (280 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 363. Соединение 408с.
Соединение 407с (117 мг, 0,3 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 408а, получая заявленное в заголовке соединение 408с (117 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 392. Соединение 408d.
Соединение 407d (120 мг, 0,32 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 408а, получая заявленное в заголовке соединение 408d (110 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 376. Соединение 408е.
Соединение 407е (180 мг, 0,5 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения 408а, получая заявленное в заголовке соединение 408е (180 мг). МС: m/z: [М+Н]+ 364. Соединение ТХ63724.
Соединение 408а (0,19 г, 0,52 ммоль) растворяли в 2 мл ДМФА при 0°С. Добавляли Br2 (95 мг, 1,1 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (2 мл) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 45% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63724 в виде грязно-белого твердого остатка (45 мг, выход 24%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 9,60 (с, 1Н), 8,86 (с, 1Н), 8,77 (м, 1Н), 8,67 (м, 1Н), 7,48 (дд, 1Н, J=4,9, 7,8 Гц), 4,06 (с, 3Н), 2,82 (ддд, 1Н, J=1,1, 6,8, 18,7 Гц), 2,47-2,64 (м, 2Н), 2,03-2,13 (м, 2Н), 1,69 (м, 1Н), 1,40 (с, 3Н), 1,25 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 361.
Соединение ТХ63728.
Соединение 408b (0,28 г, 0,77 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения ТХ63724, получая соединение ТХ63728 (25 мг, 9%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,59 (с, 1Н), 8,46 (шир.с, 2Н), 8,06 (м, 2Н), 3,80 (с, 3Н), 2,56 (дд, 1Н, J=5,9, 18,9 Гц), 2,22-2,35 (м, 2Н), 1,75-1,87 (м, 2Н), 1,44 (м, 1Н), 1,13 (с, 3Н), 0,99 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 361.
Соединение ТХ63727.
К раствору соединения 408с (0,117 г, 0,3 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 30% EtOAc/гексан, получая соединение 45 (80 мг).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,97 (с, 1Н), 7,81 (дд, 1Н, J=1,8, 7,6 Гц), 7,42 (м, 1Н), 7,04-7,09 (м, 2Н), 4,03 (с, 3Н), 3,89 (с, 3Н), 2,85 (ддд, 1Н, J=1,0, 6,7, 18,5 Гц), 2,51-2,66 (м, 2Н), 2,07-2,17 (м, 2Н), 1,75 (м, 1Н), 1,43 (с, 3Н), 1,30 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 390.
Соединение ТХ63769.
Соединение 408d (110 мг, 0,29 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения ТХ63727, получая соединение ТХ63769 (75 мг, 69%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 9,00 (с, 1Н), 8,46 (м, 2Н), 7,49 (м, 2Н), 4,10 (с, 3Н), 2,86 (ддд, 1Н, J=1,0, 6,8, 18,4 Гц), 2,59 (м, 2Н), 2,13 (м, 2Н), 1,74 (м, 2Н), 1,45 (с, 3Н), 1,31 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 374.
Соединение ТХ63757.
Соединение 408е (180 мг, 0,5 ммоль) обрабатывали согласно способу для соединения ТХ63724, получая соединение ТХ63757 (100 мг).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 9,70 (с, 2Н), 9,33 (с, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 4,13 (с, 3Н), 2,90 (ддд, 1Н, J=0,9, 6,6, 18,8 Гц), 2,63 (м, 2Н), 2,16 (м, 2Н), 1,77 (м, 1Н), 3,49 (с, 3Н), 1,33 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 362.
Соединение 409.
Соединение 401b (515 мг, 1,75 ммоль) растворяли в DMAc (10 мл). К данному раствору добавляли Zn(CN)2 (135 мг, 1,15 ммоль), dppf (200 мг, 0,3 6 ммоль) и Na2CO3 (190 мг, 1,75 ммоль). Азот барботировали через смесь в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (40 мг, 0,018 ммоль), и азот барботировали в течение следующих 10 мин. Суспензию выдерживали при 120°С в течение 16 ч. Реакционную смесь гасили 50 мл воды и экстрагировали эфиром (2x50 мл). Органические экстракты концентрировали и очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 20% EtOAc/гексан, получая соединение 409 в виде грязно-белого твердого остатка (0,2 г, выход 40%). МС (APCI): m/z: [M+H]+ 286.
Соединение 410.
К раствору соединения 409 (0,2 г, 0,7 ммоль) в 10 мл HCOOEt добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем выливали в воду и подкисляли KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 410 (220 мг). МС: m/z: [M+H]+ 361.
Соединение 411.
К раствору соединения 410 (0,22 г, 0,7 ммоль) в 20 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (2 экв.) и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 411 (60 мг, выход 30%). МС: m/z: [M+H]+ 358.
Соединение 412.
Раствор соединения 411 (60 мг, 0,17 ммоль) и 1 мл триэтиламина в 2 мл ацетонитрила выдерживали при 85°С в течение 16 ч. Реакционную смесь сушили в вакууме досуха, получая соединение 412 (60 мг). МС: m/z: [M+H]+ 358.
Соединение ТХ63730.
К раствору соединения 412 (60 мг, 0,17 ммоль) в 1 мл ДМФА при 0°С добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 30% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63730 (25 мг, 41%).
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,83 (с, 1Н), 4,42 (м, 2Н), 4,03 (с, 3Н), 2,82 (м, 1Н), 2,45-2,63 (м, 2Н), 2,10 (м, 1H), 2,02 (дд, 1Н, J=2,7, 12,8 Гц), 1,70 (м, 1Н), 1,39 (т, 3Н, J=7,1 Гц), 1,37 (с, 3Н), 1,25 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 356.
Соединение 413.
К раствору слегка сырого соединения 372 (1,39 г, принимаем 4,20 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (0,80 мл, 4,60 ммоль) в 20 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) хлорок-сись фосфора (4,0 мл, 42,9 ммоль). После добавления образец выдерживали при 90°С в атмосфере N2 в течение 4 ч, охлаждали, концентрировали, затем аккуратно распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрирозали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая 0,75 г (55%) соединения 413 в виде светло-желтого масла. МС (APCI) m/z: 323/325 [M+H]+ (100/91%).
Соединение 414а.
Раствор соединения 413 (0,44 г, 1,36 ммоль), ^^диизопропилэтиламина (1,00 мл, 5,74 ммоль) и морфолина (0,24 мл, 2,75 ммоль) в 10 мл изо-PrOH продували N2, герметично закрывали и выдерживали при 90°С в течение 48 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,50 г (98%) соединения 414а в виде светло-коричневого пенообразного остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI): m/z: 374 [М+Н]+ (100%),
Соединение 415а.
Раствор соединения 414а (0,50 г, 1,34 ммоль) и 3н. HCl (5 мл, 15 ммоль) в 5 мл МеОН перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным NH4OH раствором до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,37 г (84%) соединения 415а в виде коричневого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 330 [М+Н]+ (100%).
Соединение 416а.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 415а (0,37 г, 1,12 ммоль) и этилформиата (9,0 мл, 111,0 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (1,0 мл, 5,3 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический
экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,45 г (больше 100%) слегка сырого соединения 416а в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. Соединение 417а.
Раствор слегка сырого соединения 416а (0,45 г, принимаем 1,12 ммоль) и гидрохлорида гидрокси-ламина (0,12 г, 1,73 ммоль) в 20 мл EtOH выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, охлаждали, концентрировали и распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,47 г (100%) темно-желтого масла, которое по TCX и МС представляло собой смесь требуемого соединения 417а и недегидратированного продукта. ТСХ (силикагель, 50% EtOAc/гексан) 2 компонента; Rf=0,47 и 0,12. МС (ES) m/z: 355 (100%) [М+Н]+. Раствор приведенной выше смеси (все количество) и небольшого количества моногидрата п-толуолсульфокислоты в 50 мл бензола выдерживали при 90°С в атмосфере N2 в течение 2 ч (ТСХ показала отсутствие нижнего компонента). Образец охлаждали и концентрировали, получая 0,77 г (много больше 100%) соединения 417а в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 418а.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 417а (все количество неочищенной смеси из предшествующей стадии, принимаем 1,12 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 10 мл МеОН добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор МаОМе в МеОН (1,1 мл, 5,9 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,37 г (94%) соединения 418а в виде желтого твердого остатка, которое применяли без очистки.
Соединение ТХ63758.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору слегка сырого соединения 418а (0,37 г, 1,05 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,15 г, 0,52 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (1,0 мл, 12 ммоль). Ледяную баню удаляли и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 40% EtOAc/гексан), получая 0,20 г (54%) соединения ТХ63758 в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,84 (с, 1Н), 3,84 (ддд, 2Н, J=2,9, 6,4, 11,3 Гц), 3,75 (ддд, 2Н, J=2,8, 6,6, 11,2 Гц), 3,43 (ддд, 2Н, J=2,4, 6,4, 13,1 Гц), 3,22 (ддд, 2Н, J=2,4, 6,5, 13,1 Гц), 2,68 (м, 2Н), 2,55 (м, 1Н), 2,55 (с, 3Н), 2,11 (м, 2Н), 1,69 (м, 1Н), 1,39 (с, 3Н), 1,29 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС (APCI) m/z: 353 [М+Н]+ (100%).
Соединение 414b.
Смесь соединения 413 (0,38 г, 1,17 ммоль), ^^диизопропилэтиламина (0,72 мл, 4,13 ммоль) и гидрохлорида диметиламина (0,11 г, 1,35 ммоль) в 10 мл н-BuOH продували N2, герметично закрывали и выдерживали при 90°С в течение 16 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая 0,25 г (64%) соединения 414b в виде белого воскообразного остатка. МС (APCI) m/z: 332 [М+Н]+ (100%).
Соединение 415b.
Раствор соединения 414b (0,25 г, 0,75 ммоль) и 3н. HCl (6 мл, 18 ммоль) в 10 мл МеОН перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным NH4OH раствором до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,22 г (больше 100%) слегка сырого соединения 415b в виде светло-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 416b.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 415b (все количество из предшествующей стадии, принимаем 0,75 ммоль) и этилформиата (6,1 мл, 75,5 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (1,42 мл, 7,57 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,25 г (больше 100%) слегка сырого соединения 416b в виде желтого м.асла, которое применяли без очистки.
Соединение 417b.
Раствор слегка сырого соединения 416b (все количество из предшествующей стадии, принимаем 0,75 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,080 г, 1,15 ммоль) в 10 мл EtOH выдерживали при 50°С в
атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали и распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,23 г (98%) желтого масла, которое по ТСХ и МС представляло собой смесь требуемого соединения 417b и недегид-ратированного продукта. ТСХ (силикагель, 40% EtOAc/гексан) 2 компонента; Rf=0,38 и 0,06. МС (APCI) m/z: 331 (М+19, 70%) и 313 (М+1, 100%). Раствор приведенной выше смеси (все количество) и небольшое количество моногидрата п-толуолсульфокислоты в 50 мл бензола выдерживали при 90°С в атмосфере N2 в течение 2 ч (ТСХ показала отсутствие нижнего компонента). Образец охлаждали, концентрировали и распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,20 г (83%) соединения 417b в виде светло-желтого пенообразного остатка, которое применяли без очистки. Соединение 418b.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 417b (0,20 г, 0,63 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 10 мл МеОН добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (1,2 мл, 6,4 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,20 г (99%) слегка сырого соединения 418b в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение ТХ63774.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору слегка сырого соединения 418b (0,20 г, 0,62 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,088 г, 0,31 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,50 мл, 6,18 ммоль). Ледяную баню удаляли и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая 0,046 г (24%) соединения ТХ63774 в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,85 (с, 1Н), 3,00 (с, 6Н), 2,75 (м, 2Н), 2,54 (м, 1Н), 2,52 (с, 3Н), 2,10 (м, 2Н), 1,67 (с, 1Н), 1,39 (с, 3Н), 1,29 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС (APCI) m/z: 311 [М+Н]+ (100%).
Соединение 414с.
Смесь соединения 413 (0,44 г, 1,37 ммоль), ^^диизопропилэтиламина (0,26 мл, 1,49 ммоль) и н-бутиламина (0,70 мл, 7,08 ммоль) в 5 мл н-BuOH продували N2, герметично закрывали и выдерживали при 90°С в течение 48 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,59 г (больше 100%) слегка сырого соединения 414с в виде желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 360 [М+Н]+ (100%).
Соединение 415с.
Раствор слегка сырого соединения 414с (все количество из предшествующей стадии, принимаем 1,37 ммоль) и 3н. HCl (5 мл, 15 ммоль) в 10 мл МеОН перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным NH4OH раствором до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали CHCl3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,42 г (98%) слегка сырого соединения 415с в виде светло-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 316 [М+Н]+ (100%).
Соединение 416с.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 415с (0,42 г, 1,34 ммоль) и зтилформиата (10,8 мл, 133,7 ммоль) в 20 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (1,25 мл, 6,66 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре; в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,60 г (больше 100%) слегка сырого соединения 416с в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 344 [М+Н]+ (100%).
Соединение 417с.
Раствор слегка сырого соединения 416с (все количество из предшествующей стадии, принимаем 1,34 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,24 г, 3,45 ммоль) в 10 мл EtOH выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали и распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,58 г (больше 100%) темно-желтого масла, которое по ТСХ и МС представляло собой смесь требуемого соединения 417с и недегидратированного продукта. ТСХ (силикагель, 50% EtOAc/гексан) 2 компонента; Rf=0,42 и 0,06. МС (APCI) m/z: 359 (М+19, 70%) и 341 (М+1, 100%). Раствор приведенной выше смеси (все количе
ство) и небольшое количество моногидрата п-толуолсульфокислоты в 50 мл бензола выдерживали при 90°С в атмосфере N2 в течение 2 ч (ТСХ показала отсутствие нижнего компонента). Образец охлаждали, концентрировали и распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,46 г (приблизительно 100%) соединения 417с в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. (APCI) m/z: 341 [М+Н]+ (100%). Соединение 418с.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 417с (0,46 г, принимаем 1,34 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 10 мл МеОН добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (1,25 мл, 6,66 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая 0,19 г (41%) соединения 418с в виде желтого масла.
Соединение ТХ63827.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору соединения 4.18с (0,19 г, 0,55 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,078 г, 0,27 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,44 мл, 5,44 ммоль). Ледяную баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая 0,079 г (43%) соединения ТХ63827 в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,91 (с, 1Н), 4,39 (с, шир., 1Н), 3,49 (кв., 1Н, J=7,2 Гц), 2,45-2,54 (м, 1Н), 2,48 (с, 3Н), 2,28-2,44 (м, 2Н), 2,08-2,17 (м, 1Н), 2,01 (дт, 1Н, J=2,4, 12,8 Гц), 1,68-1,81 (м, 1Н), 1,50-1,62 (м, 3Н), 1,31-1,45 (м, 2Н), 1,37 (с, 3Н), 1,26 (д, 3Н, J=6,8 Гц), 0,94 (т, 3Н, J=7,6 Гц); МС (APCI) m/z: 339 (100%) [М+Н]+.
Соединение 414d.
Смесь соединения 413 (0,40 г, 1,24 ммоль) и 2,0 М раствора метиламина в ТГФ (3,1 мл, 12,4 ммоль) в 10 мл изо-PrOH продували N2, герметично закрывали и выдерживали при 90°С в течение 48 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 100% EtOAc), получая 0,34 г (87%) соединения 414d в виде белого твердого остатка. МС (APCI) m/z: 318 [М+Н]+ (100%).
Соединение 415d.
Раствор соединения 414d (0,34 г, 1,08 ммоль) и 3н. HCl (6 мл, 18 ммоль) в 12 мл МеОН:ТГФ (2:1) перемешивали при комнатной темлературе в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным NH4OH раствором до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали CHCl3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,26 г (87%) слегка сырого соединения 415d в виде светло-желтого пенообразного остатка, которое применяли без очистки.
Соединение 416d.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 415d (0,26 г, 0,94 ммоль) и этилформиата (7,6 мл, 94,1 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (0,88 мл, 4,69 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,20 г (70%) слегка сырого соединения 416d в виде светло-желтого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 302 [М+Н]+ (100%).
Соединение 417d.
Раствор слегка сырого соединения 416d (0,20 г, 0,65 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,069 г, 0,99 ммоль) в 10 мл EtOH выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали и распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,24 г (больше 100%) в виде светлого пенообразного остатка, который по ТСХ и МС представлял собой смесь требуемого соединения 417d и недегидратированного продукта. ТСХ (силикагель, 5% MeOH/CHCl3) 2 компонента; Rf=0,44 и 0,13. МС (APCI) m/z: 317 (М+19, 52%) и 299 (М+1, 100%). Раствор приведенной выше смеси (все количество) и небольшой порции моногидрата п-толуолсульфокислоты в 50 мл бензола выдерживали при 90°С в атмосфере N2 в течение 4 ч (ТСХ показала отсутствие нижнего компонента). Образец охлаждали, концентрировали и распределяли между CHCl3 и 10% водным раствором NH4OH. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,20 г (больше 100%) слегка сыро
го соединения 417d в виде желтого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 299 [М+Н]+ (100%). Соединение 418d.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 417d (0,20 г, принимаем 0,65 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 10 мл МеОН добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор NaOMe в МеОН (0,61 мл, 3,25 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,17 г (89%) соединения 418d в виде светло-желтого твердого остатка, которое применяли без очистки.
Соединение ТХ63852.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору соединения 418d (0,17 г, 0,58 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,083 г, 0,29 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,47 мл, 5,81 ммоль). Ледяную баню удаляли и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 75% EtOAc/гексан), получая 0,044 г (25%) соединения ТХ63852 в виде светло-желтого твердого остатка.
^-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,93 (с, 1Н), 4,48 (с, шир., 1Н), 3,05 (д, 3Н, J=4,4 Гц), 2,29-2,57 (м, 3Н), 2,51 (с, 3Н), 2,09-2,13 (м, 1Н), 2,03 (т, 1Н, J=13,2 Гц), 1,68-1,82 (м, 1Н), 1,37 (с, 3Н), 1,28 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС (APCI) m/z: 297 [М+Н]+ (100%).
Соединения 419а4).
Раствор соединения 400 (0,56 г, 1,87 ммоль) и металлического Na (200 мг, 8,7 ммоль) в 15 мл EtOH выдерживали при 50°С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали, экстрагировали EtOAc (2x25 мл), промывали водой и очищали на колонке с силикагелем. Выделяли два соединения, элюирую смесью от 10 до 15% EtOAc/гексан. Первое соединение представляло собой соединение 419а (160 мг, выход 28%), МС: m/z: [М+Н]+ 309, 311 (3:1). Второе соединение представляло собой соединение 419b (210 мг, выход 35%). МС: m/z: [M+H]+ 319.
Соединение 420.
К раствору соединения 419b (210 мг, 0,66 ммоль) в 5 мл HCOOEt при комнатной температуре добавляли по каплям раствор металлического Na (50 мг, 2,17 ммоль) в EtOH (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, выливали в воду и подкисляли KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 420 (210 мг, выход 92%). МС: m/z: [M+H]+ 347.
Соединение 421.
К раствору соединения 420 (0,21 г, 0,6 ммоль) в 13 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (2 экв.) и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc (2x25 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 421 (210 мг). МС: m/z: [M+H]+ 344.
Соединение 422.
К раствору соединения 421 (0,21 г, 0,6 ммоль) в 3 мл ТГФ и 1,5 мл МеОН добавляли по каплям 30% NaOMe (8 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc, Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 422 (200 мг). МС: m/z: [M+H]+ 344.
Соединение ТХ63736.
К раствору соединения 422 (200 мг, 0,58 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 30% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63736 в виде грязно-белого твердого остатка (23 мг, 12%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,78 (с, 1Н), 4,44 (т, 2Н, J=7,1), 4,42 (т, 2Н, J=7,0), 2,74 (ддд, 1Н, J=0,9, 6,7, 17,9 Гц), 2,51 (м, 2Н), 2,08 (м, 2Н), 1,69 (м, 1Н), 1,45 (т, 3Н, J=7,1 Гц), 1,40 (с, 3Н), 1,39 (т, 3Н, J=7,1 Гц), 1,30 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 342.
Соединение 423.
Соединение 419а (0,16 г, 0,51 ммоль) растворяли в DME (6 мл) и ДМФА (3 мл). К данному раствору добавляли фенилбороновую кислоту (80 мг, 0,65 ммоль), Ph3P (85 мг, 0,32 ммоль) и K3PO4 (0,33 г, 1,56 ммоль). Азот барботировали через смесь в течение 10 мин. Добавляли Pd(OAc)2 (35 мг, 0,16 ммоль) и
азот барботировали в течение следующих 10 мин. Суспензию выдерживали при 90°С в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 25% EtOAc/гексан, получая соединение 423 в виде твердого остатка (120 мг, выход 67%). МС: m/z: [M+H]+ 351. Соединение 424.
К раствору соединения 423 (120 мг, 0,34 ммоль) в 2,5 мл HCOOEt добавляли по каплям 30% NaOMe в МеОН (6 экв.). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем выливали в воду и подкисляли KH2PO4. Смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4 и концентрировали в вакууме, получая соединение 424 (130 мг). МС: m/z: [M+H]+ 379.
Соединение 425.
К раствору соединения 424 (130 мг, 0,34 ммоль) в 6,5 мл EtOH добавляли NH2OH-HCl соль (2 экв.), и смесь выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с водой и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 425 (120 мг). МС: m/z: [M+H]+ 376.
Соединение 426.
К раствору соединения 425 (120 мг, 0,32 ммоль) в 1,5 мл ТГФ и 0,75 мл МеОН добавляли по каплям 30% NaOMe (8 экв.) и раствор выдерживали при 50°С в течение 6 ч. После концентрирования в вакууме остаток смешивали с насыщенным раствором KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO4, концентрировали в вакууме, получая соединение 426 (110 мг). МС: m/z: [M+H]+ 376.
Соединение ТХ63731.
К раствору соединения 426 (110 мг, 0,29 ммоль) в 2 мл ДМФА при 0°С добавляли 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,55 экв.) и раствор перемешивали в течение 2 ч. Добавляли пиридин (1 г) и раствор выдерживали при 50°С в течение ночи. После концентрирования в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюировали смесью от 5 до 30% EtOAc/гексан, получая соединение ТХ63731 (75 мг, 69%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 9,02 (с, 1Н), 8,46 (м, 2Н), 7,50 (м, 3Н), 4,60 (кв., 2Н, J=7,1 Гц), 2,87 (ддд, 1Н, J=1,1, 6,8, 18,6), 2,61 (м, 2Н), 2,14 (м, 2Н), 1,76 (м, 1Н), 1,46 (с, 3Н), 1,46 (т, 3Н, J=7,1 Гц), 1,32 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 374.
Соединение 427.
K раствору соединения 413 (0,38 г, 1,17 ммоль) в 20 мл EtOH добавляли (по каплям, шприцом) 21 вес.% раствор этоксида натрия в EtOH (4,4 мл, 11,8 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч (ТСХ, силикагель, 30% EtOAc/гексан, еще показывало наличие непрореагировавшего исходного соединения), затем выдерживали при 70°С в течение 8 ч. Образец концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,52 г (больше 100%) слегка сырого соединения 427 в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 428.
Раствор слегка сырого соединения 427 (0,52 г, принимаем 1,17 ммоль) и 3н. HCl (4 мл, 12 ммоль) в 10 мл МеОН перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным NH4OH раствором до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая 0,28 г (84%) соединения 428 в виде коричневого твердого остатка.
Соединение 429.
К перемешиваемому раствору соединения 428 (0,28 г, 0,98 ммоль) и этилформиата (9,0 мл, 111,0 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 21 вес.% раствор этоксида натрия в EtOH (3,7 мл, 9,9 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,30 г (96%) слегка сырого соединения 429 в виде темно-желтого маслянистого остатка, которое применяли без очистки.
Соединение 430.
Раствор соединения 429 (0,30 г, 0,94 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,10 г, 1,44 ммоль) в 10 мл EtOH выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали и распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,30 г (больше 100%) слегка сырого соединения 430 в виде коричневого пенообразного остатка, которое применяли без очистки.
Соединение 431.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 430 (все количество из предшествующей стадии, принимаем 0,94 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 10 мл МеОН добавляли по каплям (шприцом) 21 вес.% раствор этоксида натрия в EtOH (3,5 мл, 9,4 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 0,28 г (95%) слегка сырого соединения 431 в виде желто-оранжевого твердого остатка, которое применяли без очистки.
Соединение ТХ63773.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору слегка сырого соединения 431 (0,28 г, 0,89 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,13 г, 0,45 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,70 мл, 8,65 ммоль). Ледяную баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая 0,14 г (48%) соединения ТХ63773 в виде светло-желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,87 (с, 1Н), 4,40 (кв., 2Н, J=7,1 Гц), 2,75 (дд, 1Н, J=7,0, 18,5 Гц), 2,54 (с, 3Н), 2,52 (м, 2Н), 2,03 (м, 2Н), 1,65 (м, 1Н), 1,38 (с, 3Н), 1,37 (т, 3Н, J=7,1 Гц), 1,27 (д, 3Н, J=6,7 Гц); МС (APCI) m/z: 312 [М+Н]+ (100%).
Соединение 432.
Соединение 127 (0,964 г, 4,04 ммоль) растворяли в DCM (100 мл) и добавляли MgBr2-Et2O (2,707 г, 10,5 ммоль) и изо-P^NEt (1,39 мл, 8,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение приблизительно 30 мин, в процессе чего реакционная смесь постепенно становилась оранжевой. Затем добавляли по каплям бензоилхлорид (1,17 г, 8,3 ммоль) в DCM (3 мл), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником и оранжевый цвет постепенно исчезал. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного водного раствора бикарбоната натрия (100 мл), затем перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Органический слой отделяли и сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до масла. Масло хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 42 г) 10% EtOAc/гексан в качестве злюента, получая продукт 432 в виде практически прозрачного масла (0,372 г, 27%). МС: m/z: [М+Н]+ 343,1.
Соединение 433.
Соединение 432 (0,372 г, 1,09 ммоль) растворяли в EtOH (40 мл) и добавляли моногидрат гидразина (0,244 г, 3,8 ммоль). Реакционную смесь выдерживали при 65°С в течение 1 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 5 дней. Реакционную смесь концентрировали досуха и оставшиеся летучие компоненты удаляли в вакууме, получая продукт 433 в виде масла/твердого остатка (0,41 г), который применяли непосредственно на следующей стадии. МС: m/z: [M+H]+ 339,1.
Соединение 434.
Соединение 433 (0,41 г, 1,2 ммоль) растворяли в МеОН (35 мл) и 1н. HCl (3 мл) и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя МеОН и затем распределяли между EtOAc (60 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 434 в виде масла/стеклообразного остатка (0,3266 г), m/z: [M+H]+ 295,1.
Соединение 435.
Соединение 434 (0,3266 г, 1,11 ммоль) растворяли в этилформиате (50 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (1,8 мл, 9,7 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем выливали в делительную воронку, содержащую насыщенный водный KH2PO4 (20 мл) и EtOAc (125 мл). Органический слой отделяли и сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до масла/стеклообразного остатка, который содержал большое количество исходного соединения, и его обрабатывали этилформиатом (30 мл) и 30% NaOMe в МеОН (1,2 мл, 6,48 ммоль) в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь обрабатывали, как и ранее, получая продукт 435 в виде желтого стеклообразного остатка (0,247 г, 70% на три стадии). МС: m/z: [M+H]+ 323,1.
Соединение 436.
Раствор 0,1 М гидрохлорида гидроксиламина в смеси 9:1 EtOH/вода (12 мл, 1,2 ммоль) добавляли к 435 (0,247 г, 0,77 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. На следующее утро смесь выдерживали при 50°С на роторном испарителе и концентрировали досуха. Неочищенный остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (15 мл), и органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до стеклообразного остатка. Стеклообразный остаток хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 8 г), применяя смесь 50% EtOAc/гексан в качестве элюента, получая продукт 436 в виде стеклообразного остатка (0,0844 г, 34%). МС: m/z: [M+H]+ 320,1.
Соединение 437.
Изоксазол 436 (0,0844 г, 0,26 ммоль) растворяли в смеси 1:1 МеОН/ТГФ (10 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (0,2 мл, 1,08 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (15 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой отделяли и сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая продукт 437 в виде стеклообразного остатка (0,085 г). МС: m/z: [M+H]+ 320,1.
Соединение ТХ63836.
Цианокетон 437 (0,085 г, 0,26 ммоль) растворяли в ДМФА (2,5 мл) и смесь охлаждали до 0°С. Добавляли дибромдиметилгидантоин (0,048 г, 0,17 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,75 ч. Добавляли безводный пиридин (0,25 мл, 3,1 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 60°С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали досуха и хроматографировали на силикагеле (230400 меш, 6 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc в качестве элюента, получая продукт ТХ63836 в виде грязно-белого твердого остатка (0,0355 г, 43% на две стадии).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,47 (с, 1Н), 7,42-7,50 (м, 5Н), 7,33-7,41 (м, 1Н), 2,91 (дд, 1Н, J=6,4, 16,4 Гц), 2,70-2,82 (м, 1Н), 2,51-2,62 (м, 1Н), 2,05-2,18 (м, 2Н), 1,69-1,85 (м, 1Н), 1,46 (с, 3Н), 1,31 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 318,0.
Соединение ТХ63850.
Соединение ТХ63836 (0,015 г, 0,047 ммоль) смешивали с Ac2O (2 мл) и безводным NaOAc (0,013 г, 0,16 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре, затем концентрировали досуха и фильтровали через силикагель (230-400 меш, 1 г), применяя смесь 4:1 гексан/EtOAc, получая продукт ТХ63850 в виде стеклообразного остатка (0,0052 г, 31%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,42 (с, 1Н), 7,28-7,41 (м, 3Н), 7,15-7,27 (м, 2Н), 2,63 (с, 3Н), 2,38-2,62 (м, 4Н), 1,90-2,10 (м, 2Н), 1,43 (с, 3Н), 1,23 (д, 3Н, J=6,4 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 360,1.
Соединение ТХ63871.
Соединение ТХ63836 (0,015 г, 0,047 ммоль) смешивали с этилхлорформиатом (1 мл) и твердым NaHCO3 (0,056 г, 6,67 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали досуха и хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 4 г), применяя смесь 3:1 гексан/EtOAc, получал продукт ТХ63871 в виде грязно-белого твердого остатка (0,014 г, 76%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,72 (с, 1Н), 7,65-7,70 (м, 2Н), 7,36-7,45 (м, 3Н), 4,57 (кв., 2Н, J=7,2 Гц), 2,69-2,81 (м, 2Н), 2,59-2,68 (м, 1Н), 2,18 (дд, 1Н, J=1,2, 12,4 Гц), 2,02-2,10 (м, 1Н), 1,62-1,74 (м, 1Н), 1,67 (с, 3Н), 1,51 (т, 3Н, J=6,8 Гц), 1,34 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 390,1.
Соединение 438.
Соединение 127 (0,971 г, 4,1 ммоль) растворяли в DCM (50 мл) и добавляли MgBr2-Et2O (2,90 г, 11,2 ммоль) и изо -Pr2NEt (2,4 мл, 13,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение приблизительно 30 мин, в течение которых смесь постепенно становилась оранжевой. Добавляли хлорид гидрохлорид пиридин-2-карбоновой кислоты (1,71 г, 9,6 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили добавлением избытка насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Очень темную реакционную смесь концентрировали, удаляя DCM и EtOAc (250 мл), и добавляли избыток насыщенного KH2PO4. Органический слой отделяли, сушили над MgSO4 и концентрировали, получая соединение 438 в виде темного масла (1,09 г), которое применяли непосредственно на следующей стадии. МС: m/z: [M+H]+ 344,1.
Соединение 439.
Неочищеннное соединение 438 (1,09 г, 3,2 ммоль) растворяли в EtOH (100 мл) и добавляли метил-гидразин (1,306 г, 28,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем выдерживали при 70°С, после чего добавляли дополнительное количество EtOH, и нагревание продолжали при 70°С. Реакционную смесь концентрировали досуха, и черное масло хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 40 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc, и затем EtOAc в качестве элюента, получая продукт 439 в виде желтого масла/стеклообразного остатка (0,1453 г, 10% за две стадии). МС: m/z: [M+H]+ 354,2.
Соединение 440.
Соединение 439 (0,1453 г, 0,41 ммоль) растворяли в МеОН (25 мл) и 1н. HCl (4 мл), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрировали, удаляя МеОН, и затем распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 440 в виде масла/стеклообразного остатка (0,1197 г, 94%), m/z: [M+H]+ 310,1.
Соединение 441.
Соединение 440 (0,1197 г, 0,39 ммоль) растворяли в этилформиате (20 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (0,6 мл, 3,24 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре и затем выливали в делительную воронку, содержащую насыщенный водный KH2PO4 (20 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой отделяли и сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соедине-
ние 441 в виде оранжевого стеклообразного остатка (0,1267 г, 96%). МС: m/z: [M+H]+ 338,1. Соединение 442.
Раствор 0,1 М гидроксиламингидрохлорида в смеси 9:1 EtOH/вода (6 мл, 0,6 ммоль) добавляли к соединению 441 (0,1267 г, 0,37 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После завершения смесь концентрировали досуха (Т=50°С) и остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл). Органический раствор сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая соединение 442 в виде желтого стеклообразного остатка (0,1053 г, 85%). МС: m/z: [M+H]+ 335,1.
Соединение 443.
Соединение 442 (0,1053 г, 0,31 ммоль) растворяли в смеси 1:1 МеОН/ТГФ (10 мл) и добавляли 30% NaOMe в МеОН (0,25 мл, 1,35 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем распределяли между насыщенным раствором KH2PO4 (15 мл) и EtOAc (100 мл). Органический слой отделяли, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали, получая продукт 443 в виде стеклообразного остатка (0,1022 г, 99%). МС: m/z: [M+H]+ 335,1.
Соединение ТХ63851.
Соединение 443 (0,1022 г, 0,31 ммоль) растворяли в ДМФА (2,5 мл) и добавляли охлажденную до 0°С смесь Br2 (0,055 г, 0,34 ммоль) в ДМФА (0,3 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,75 ч. Добавляли безводный пиридин (0,25 мл, 3,1 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 60°С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали досуха и распределяли между EtOAc (80 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (10 мл). Органический слой промывали солевым раствором (10 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали до коричневого масла/стеклообразного остатка. Масло хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 8 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc в качестве элюента, и повторно хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 6 г), применяя смесь 50% гексан/EtOAc в качестве элюента, получая продукт ТХ63851 (0,0163 г, 16%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,65 (д, 1Н, J=4,4 Гц), 8,44 (с, 1Н), 7,72 (т, 1Н, J=7,6 Гц), 7,32 (д, 1Н, J=7,6 Гц), 7,17-7,24 (м, 1Н), 3,98 (с, 3Н), 2,55-2,75 (м, 2Н), 2,44-2,55 (м, 1Н), 1,94-2,11 (м, 2Н), 1,62-1,75 (м, 1Н), 1,38 (с, 3Н), 1,24 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС: m/z: [M+H]+ 333,1.
Соединение ТХ63849.
Соединение ТХ63690 (0,034 г, 0,10 ммоль) растворяли в ацетонитриле (1 мл) и добавляли Accufluor (0,042 г, 0,126 ммоль (на основе 3 ммоль/г)). Смесь перемешивали в течение 2 ч при 80°С и затем в течение 3 дней при комнатной температуре. Добавляли дополнительное количество Accufluor (0,046 г, 0,138 ммоль) и смесь выдерживали в течение ночи при 80°С. Реакционную смесь концентрировали и хроматографировали на силикагеле (230-400 меш, 6 г), применяя EtOAc, и затем смесь 5% ТГФ/EtOAc в качестве элюента. Фракции, содержащие продукт, хроматографировали снова на силикагеле (230-400 меш, 2,8 г), применяя смесь 1,2% MeOH/DCM в качестве элюента, получая продукт ТХ63849 (0,005 г, 14%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,29 (с, 1Н), 7,28 (с, 1Н), 7,27 (с, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 3,32 (с, 3Н), 2,72 (д, 1Н, J=14,0 Гц), 2,40-2,51 (м, 1Н), 1,45-1,96 (м, 4Н), 1,22 (д, 3Н, J=6,8 Гц), 1,12 (с, 3Н); МС: m/z: [M+H]+ 352,1.
Соединения 444 и 445.
Раствор соединения 181 (1,663 г, 5,223 ммоль) и Et3N (1,0 мл, 5,94 ммоль) в CHCl3 (50 мл) в атмосфере N2 охлаждали до 0°С и добавляли по каплям метилтрифторметансульфонат (1,0 мл, 8,8 ммоль). Раствор нагревали до комнатной температуры в течение ночи, затем промывали насыщенным раствором NaHCO3 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Хроматография (силикагель, 70% EtOAc/гексан) давала соединение 444 (0,786 г, 33%) в виде грязно-белого твердого остатка; МС (APCI) m/z: 333 (М+1, 100); и соединение 445 (0,247 г, 10%) в виде светло-желтого масла; МС (APCI) m/z: 333 (100) [М+Н]+.
Соединение 446.
Раствор соединения 444 (0,786 г, 2,3 65 ммоль) и 3н. HCl (4 мл, 12 ммоль) в 20 мл МеОН:ТГФ (1:1) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Раствор концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и 10% водным NH4OH. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 446 (0,633 г, 93%) в виде белого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 289 (100%) [М+Н]+.
Соединение 447.
К раствору соединения 446 (1,8 мл, 22,3 ммоль) в бензоле (10 мл) добавляли по каплям (шприцом) NaOMe (30 вес.% в МеОН, 2,0 мл, 10,7 ммоль) в атмосфере N2. Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали и затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 447 (0,502 г, 72%) в виде светло-коричневого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 317 (100%) [М+Н]+.
Соединение 448.
Раствор соединения 447 (0,502 г, принимаем 1,585 ммоль) в этаноле (10 мл) обрабатывали твердым гидрохлоридом гидроксиламина (0,16 г, 2,30 ммоль). Образец выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч и затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 448 (0,658 г, больше 100%) в виде светло-коричневого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 314 (100%) [М+Н]+.
Соединение 449.
Раствор слегка сырого соединения 448 (0,658 г, принимаем 1,585 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали NaOMe (30 вес.% в МеОН, 1,48 мл, 7,89 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 449 (0,578 г, больше 100%) в виде желтого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 314 (100%) [М+Н]+.
Соединение ТХ63584.
Дибромдиметилгидантоин (0,272 г, 0,951 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 449 (0,578 г, принимаем 1,585 ммоль) в ДМФА (10 мл) при 0°С в атмосфере N2. После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (1,3 мл, 16,1 ммоль). Ледяную баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 16 ч. Образец концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина) и затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Очистка хроматографией (силикагель, 2% MeOH/CHCl3) давала соединение ТХ63584 (0,151 г, 31%) в виде светло-желтого пенообразного остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,75 (с, 1Н), 3,51 (с, 3Н), 2,79 (дд, 1Н, J=6,1, 18,5 Гц), 2,57 (с, 3Н), 2,46 (дддд, 1Н, J=7,4, 9,4, 9,4, 11,4 Гц), 2,06 (дд, 1Н, J=2,0, 12,8 Гц), 1,96 (дд, 1Н, J=7,3, 13,3 Гц), 1,76 (м, 1Н), 1,42 (с, 3Н), 1,26 (с, 3Н), 1,20 (с, 3Н); МС (APCI) m/z: 312 (100%) [М+Н]+.
Соединение 450.
Раствор соединения 445 (0,247 г, 0,74 2 ммоль) и 3н. HCl (4 мл, 12 ммоль) в 20 мл МеОН:ТГФ (1:1) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Раствор концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и 10% водным NH4OH. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 450 (0,191 г, 89%) в виде светло-желтого масла. МС (APCI) m/z: 289 (100%) [М+Н]+.
Соединение 451.
К перемешиваемому раствору соединения 450 (0,191 г, 661 ммоль) и этилформиата (0,53 мл, 6,56 ммоль) в бензоле (10 мл) добавляли по каплям (шприцом) NaOMe (30 вес.% в МеОН, 0,62 мл, 3,30 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 451 (0,211 г, больше 100%) в виде желтого масла. МС (APCI) m/z: 317 (100%) [М+Н]+.
Соединение 452.
Раствор слегка сырого соединения 451 (0,211 г, принимаем 0,661 ммоль) в этаноле (10 мл) обрабатывали твердым гидрохлоридом гидроксиламина (0,069 г, 0,99 ммоль). Образец выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 16 ч, охлаждали до комнатной температуры, концентрировали и распределяли между EtCAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 452 (0,176 г, 85%) в виде желтого масла. МС (APCI) m/z: 314 (100%) [М+Н]+.
Соединение 453.
Раствор соединения 452 (0,176 г, 0,561 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали NaOMe (30 вес.% в МеОН, 0,53 мл, 2,82 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали и затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 453 (0,170 г, 96%) в виде желтого липкого остатка. МС (APCI) m/z: 314 (100%) [М+Н]+.
Соединение ТХ63595.
Дибромдиметилгидантоин (0,093 г, 0,325 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору соединения 453 (0,170 г, 0,541 ммоль) в ДМФА (10 мл) при 0°С в атмосфере N2. После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,44 мл, 5,44 ммоль). Ледяную баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 16 ч. Образец концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Очистка хроматографией (силикагель, 30% EtOAc/гексан) давала соединение ТХ63595 (0,066 г, 39%) в виде грязно-белого пенообразного остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, 4-ДМСО) 5 8,86 (с, 1Н), 3,96 (с, 3Н), 2,80 (дд, 1Н, J=17,5, 7,5 Гц), 2,56 (с, 3Н), 2,48-2,54 (м, 1Н), 2,12 (дд, 1Н, J=12,5, 2,5 Гц), 1,98 (арр дд, 1Н, J=12,5, 7,5 Гц), 1,78-1,87 (м, 1Н), 1,43 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,21 (с, 3Н); 13С-ЯМР (125 МГц, CDCl3) 5 197,6, 169,1, 167,9, 165,8, 165,0, 114,8, 114,6, 111,5, 53,9, 46,1, 44,8, 42,8, 27,1, 25,6, 25,4, 21,4, 17,9; МС (ES) m/z: 312 (М+23, 100%) и 312 (67%) [М+Н]+.
Соединение 454.
К перемешиваемой суспензии соединения 1 при 0°С в атмосфере N2 (4,67 г, 37,02 ммоль) в 70 мл ацетонитрила добавляли по каплям 1-гексен-3-он (5 г, 46 ммоль, 90+%, стабилизированный приблизительно 0,6% 4-метоксифенола), с последующим добавлением по каплям триэтиламина (8,25 мл, 59,19 ммоль). Все твердые вещества были в растворе после завершении добавления триэтиламина. Желтый раствор медленно нагрегвали до комнатной температуры в течение ночи. Образец концентрировали, растворяли в EtOAc, промывали насыщенным раствором NaHCO3 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 8,85 г (больше 100%) неочищенного соединения 454 в виде желтой жидкости. МС (APCI) m/z: 225 (17%) [М+Н]+.
Соединение 455.
К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере N2 раствору неочищенного соединения 454 (все количество из предыдущей стадии, принимаем 37,02 ммоль) в 150 мл ацетонитрила добавляли твердый (11^)-фенилаланин (6,11 г, 36,99 ммоль), с последующим добавлением твердой (1R)-(+)-10-камфорсульфокислоты (4,30 г, 18,51 ммоль). Образец выдерживали в атмосфере N2 при 70°С в течение 48 ч, охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали. Твердый остаток промывали свежим ацетонитрилом, объединенный фильтрат концентрировали, затем аккуратно распределяли между насыщенным раствором NaHCO3 и дизтиловым эфиром. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 50% CHCl3-10% EtOAc-40% гексан). Разделение осуществлялось плохо, все фракции, содержащие видимый в УФ компонент (ТСХ, SiO2 [10% EtOAc-40% гексан-50% CHCl3], Rf приблизительно 0,45) объединяли и концентрировали, получая 5,38 г (70%) сырого соединения 455 в виде светло-желтой жидкости. (APCI) m/z: 207 (100%) [М+Н]+.
Соединение 456.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору сырого соединения 455 (6,101 г, 29,575 ммоль) в 100 мл EtOH добавляли по каплям слегка мутный раствор боргидрида натрия (0,31 г, 8,19 ммоль) в 50 мл EtOH. Через приблизительно 15 мин (по ТСХ исходного вещества не оставалось) охлажденный образец гасили добавлением по каплям уксусной кислоты (3,4 мл, 59,4 ммоль), перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем концентрировали. Полученный в результате светло-желтый липкий остаток растворяли в 200 мл EtOAc, содержащего 5 мл воды, сушили над избытком твердого NaHCO3 и фильтровали, получая 5,92 г (96%) сырого соединения 456 в виде светло-желтого масла. МС (APCI) m/z: 209 (100%) [М+Н]+.
Соединение 457.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору слегка сырого соединения 456 (5,92 г, 28,42 ммоль) и 3,4-дигидро-2Н-пирана (3,6 мл, 39,6 ммоль) в 100 мл CH2Cl2 добавляли одной порцией твердый моногидрат п-толуолсульфокислоты (0,50 г, 2,63 ммоль). Образец тут же темнел (из светло-желтого до коричневого) и его медленно нагревали до комнатной температуры в течение ночи. Темный образец концентрировали, затем распределяли между гексаном и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 20% EtOAc в гексане), получая 3,868 г (46%) соединения 457 в виде светло-желтого масла. МС (APCI) m/z: 293 (88%) [М+Н]+ и 191 (100%).
Соединение 458.
Жидкий аммиак (приблизительно 5 мл) конденсировали в двухгорлой колбе при -78°С. Добавляли небольшими порциями литиевую проволоку (0,185 г, 26,66 ммоль, 2 экв.). Через 45 мин литиевая проволока растворялась, затем добавляли по каплям раствор соединения 457 (3,868 г, 13,227 ммоль) в 15 мл ТГФ. Реакционную смесь перемешивали в течение 45 мин при -78°С. Затем добавляли твердый хлорид аммония (5 г, 93 ммоль), и аммиак упаривали. Остаток растворяли в 100 мл воды и экстрагировали EtOAc (2х). Объединенный органический слой концентрировали и хроматографировали (силикагель, 10% EtOAc в гексане), получая 2,649 г (68%) соединения 458 в виде бесцветного масла. МС (APCI) m/z: 175 (100%) [М+Н]+.
Соединение 459.
Раствор соединения 458 (2,649 г, 8,997 ммоль) и п-толуолсульфоната пиридиния (0,23 г, 0,92 ммоль) в 50 мл EtOH выдерживали при 70°С в атмосфере N2 в течение 6 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 2,112 г (больше 100%) слегка сырого соединения 459 в виде желтого масла. МС (APCI) m/z: 211 (24%) [М+Н]+ и 175 (100%).
Соединение 460.
Раствор в атмосфере N2 слегка сырого соединения 459 (2,112 г, принимаем 8,997 ммоль), этилен гликоля (5,0 мл, 89,6 ммоль) и моногидрата п-толуолсульфокислоты (0,171 г, 0,899 ммоль) в 100 мл бензола кипятили с обратным холодильником с ловушкой Дина-Старка в течение 16 ч. Образец концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 2,388 г (больше 100%) неочищенного соединения 460 в виде темно-желтого масла. МС (APCI) m/z: 255 (35%) [М+Н]+ и 175 (100%).
Соединение 461.
К перемешиваемому при комнатной температуре раствору слегка сырого соединения 460 (2,388 г, принимаем 8,997 ммоль) в 100 мл CH2Cl2 добавляли твердый MgSO4 (1,08 г, 8,97 ммоль), с последующим добавлением твердого дихромата пиридиния (6,77 г, 17,99 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, концентрировали, суспендировали в 100 мл диэтилового эфира, перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и фильтровали. Фильтрат концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc в гексане), получая 1,513 г (67%) соединения 461 в виде белого остатка. МС (APCI) m/z: 253 (79%) [М+Н]+ и 173(100%).
Соединение 462.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору соединения 461 (1,513 г, 5,995 ммоль) и этилформиата (5 мл, 62 ммоль) в 10 мл бензола добавляли 30 вес.% раствор метоксида натрия в метаноле (6 мл, 32 ммоль). Образец медленно нагревали до комнатной температуры в течение ночи. Образец растворяли в EtOAc, промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая 1,624 г (97%) соединения 462 в виде желтого липкого остатка. МС (APCI) m/z: 295 (100%) [М+Н]+.
Соединение 463.
Раствор соединения 462 (1,206 г, 4,303 ммоль) в EtOH (20 мл) обрабатывали метилгидразином (0,46 мл, 8,65 ммоль). Образец герметично закрывали, выдерживали при 50°С в течение 16 ч, охлаждали, концентрировали и затем распределяли между CHCl3 и 10% водным NH4OH. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографиро-вали (силикагель, 50% EtOAc в гексане), получая соединение 463 (0,989 г, 78%) в виде липкого белого остатка. МС (APCI) m/z: 291 (100) [М+Н]+.
Соединение 464.
Раствор соединения 463 (0,320 г, 1,102 ммоль) и 3н. HCl (4 мл, 12 ммоль) МеОН/ТГФ (1:1, 20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Раствор концентрировали и затем распределяли между CHCl3 и 10% водным NH4OH. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 464 (0,287 г, больше 100%) в виде светло-желтого масла. МС (APCI) m/z: 247 (100%) [М+Н]+.
Соединение 465.
К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере N2 раствору слегка сырого соединения 464 (0,287 г, принимаем 1,102 ммоль) и этилформиата (0,89 мл, 11,02 ммоль) в бензоле (10 мл) добавляли по каплям (шприцом) NaOMe (30 вес.% в МеОН, 1,0 мл, 5,5 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 465 (0,296 г, 98%) в виде желтого масла. МС (APCI) m/z: 276 (100%) и 275 (90%) [М+Н]+.
Соединение 466.
Раствор соединения 465 (0,296 г, принимаем 1,077 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали твердым гидрохлоридом гидроксиламина (0,12 г, 1,73 ммоль). Образец выдерживали при 50° С в атмосфере N2 в течение 16 ч, охлаждали, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и 10% водным NH4OH. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 466 (0,273 г, 93%) в виде темно-желто-коричневого масла. МС (АРСТ) m/z: 273 (100%) и 272 (86%) [М+Н]+.
Соединение 467.
Раствор соединения 466 (0,273 г, 1,006 ммоль) в МеОН (10 мл) обрабатывали NaOMe (30 вес.% в МеОН, 0,94 мл, 5,01 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 467 (0,226 г, 83%) в виде темно-желтого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 273 (М+2, 100%) и 272 (85%) [М+Н]+.
Соединение ТХ63589.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору соединения 467 (0,226 г, 0,834 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли одной порцией твердый 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,143 г, 0,500 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,68 мл, 8,41 ммоль). Ледяную
баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 16 ч. Образец концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали, затем хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63589 (0,068 г, 30%) в виде грязно-белого пенообразного остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,36 (с, 1Н), 7,06 (с, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 2,74 (дд, 1Н, J=15,0, 5,0 Гц), 2,502,55 (м, 2Н), 2,19-2,31 (м, 2Н), 1,95 (арр дд, 1Н, J=15,0, 5,0 Гц), 1,62-1,71 (м, 2Н), 1,39 (с, 3Н), 0,81 (т, 3Н, J = 7, 5 Гц); МС (APCI) m/z: 270 (100%) [М+Н]+.
Соединение 468.
Смесь соединения 462 (0,412 г, 1,471 ммоль), гидрохлорида бензамидина (2,3 г, 16,68 ммоль) и пиперидина (0,87 мл, 8,80 ммоль) в 2-пропаноле (10 мл) выдерживали в герметично закрытой пробирке при 85°С в течение 96 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и 10% водным NH4OH. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 468 (0,910 г, больше 100%) в виде коричнево-желтого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 365 (100) [М+Н]+.
Соединение 469.
Раствор слегка сырого соединения 468 (0,910 г, принимаем 1,471 ммоль) и 3н. HCl (10 мл, 30 ммоль) в МеОН/ТГФ (1:1, 20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Раствор концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и 10% водным NH4OH раствором. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 469 (0,778 г, больше 100%) в виде темно-желтого липкого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 321 (100%) [М+Н]+.
Соединение 470.
К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере N2 раствору слегка сырого соединения 469 (0,778 г, принимаем 1,471 ммоль) и этилформиата (1,20 мл, 14,80 ммоль) в бензоле (10 мл) добавляли по каплям (шприцом) NaOMe (30 вес.% в МеОН, 1,40 мл, 7,46 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 470 (0,684 г, больше 100%) в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 349 (100%) [М+Н]+.
Соединение 471.
Раствор слегка сырого соединения 470 (0,684 г, принимаем 1,471 ммоль) в EtOH (10 мл) обрабатывали твердым гидрохлоридом гидроксиламина (0,15 г, 2,16 ммоль). Образец выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 16 ч, охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 471 (0,639 г, больше 100%) в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 472.
Раствор слегка сырого соединения 471 (0,639 г, принимаем 1,471 ммоль) в МеОН (20 мл) обрабатывали NaOMe (30 вес.% раствор в МеОН (1,38 мл, 7,36 ммоль)). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая соединение 472 (0,267 г, 52%) в виде грязно-белого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 368 (100%) [M+Na]+ и 346 (45%) [М+Н]+.
Соединение ТХ63598.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору соединения 472 (0,267 г, 0,773 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли одной порцией твердый 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,12 г, 0,42 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,63 мл, 7,79 ммоль). Ледяную баню удаляли и образец выдерживали при 50°С в течение 16 ч. Образец концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63598 (0,209 г, 79%) в виде грязно-белого пенообразного остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,96 (с, 1Н), 8,59 (с, 1Н), 8,44-8,46 (м, 2Н), 7,48-7,53 (м, 3Н), 3,01 (дд, 1Н, J=20,0, 5,0 Гц), 2,87-2,94 (м, 1Н), 2,59 (арр дт, 1Н, J=12,5, 5,0 Гц), 2,41 (тд, 1Н, J=12,5, 3,3 Гц), 2,232,31 (м, 1Н), 2,11-2,16 (м, 1Н), 1,69-1,86 (м, 2Н), 1,46 (с, 3Н), 0,84 (т, 3Н, J=7,5 Гц); МС (ES) m/z: 366 (100%) [М+Н]+ и 344 (37%) [М+Н]+.
Соединение 473.
К перемешиваемому раствору соединения 463 (0,661 г, 2,275 ммоль) в CH2Cl2 (10 л) добавляли одной порцией твердый 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,36 г, 1,26 ммоль). Раствор тут же становился желто-оранжевым и все твердые вещества переходили в раствор. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин (ТСХ показала отсутствие исходного соединения), концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение 473 (0,490 г, 58%) в виде бесцветного масла. МС (APCI) m/z: 369/371 (100/64%) [М+Н]+.
Соединение 474.
К перемешиваемой дегазированной смеси соединения 473 (0,490 г, 1,327 ммоль), фосфата калия (0,85 г, 4,00 ммоль) и фенилбороновой кислоты (0,24 г, 1,97 ммоль) в DME (10 мл) добавляли одной порцией твердый тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,153 г, 0,132 ммоль). Образец дегазировали, выдерживали при 80°С в атмосфере N2 в течение 16 ч, охлаждали и фильтровали через слой целита. Фильтрат концентрировали, растворяли в EtOAc, промывали 1н. NaOH, насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение 474 (0,201 г, 41%) в виде грязно-белого твердого остатка. МС (APCI) m/z: 367 (100%) [М+Н]+.
Соединение 475.
Раствор соединения 474 (0,201 г, 0,548 ммоль) и 3н. HCl (4 мл, 12 ммоль) в МеОН (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в атмосфере М2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, затем аккуратно распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 475 (0,163 г, 92%) в виде грязно-белого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 323 (100%) [М+Н]+.
Соединение 476.
К перемешиваемому раствору соединения 475 (0,163 г, 0,505 ммоль) и этилформиата (4,1 мл, 50,8 ммоль) в бензоле (10 мл) добавляли по каплям (шприцом) NaOMe (30 вес.% раствор в МеОН, 0,47 мл, 2,50 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 476 (0,187 г, больше 100%) в виде желтого липкого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 351 (100%) [М+Н]+.
Соединение 477.
Раствор слегка сырого соединения 476 (0,187 г, принимаем 0,505 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,53 г, 0,76 ммоль) 6 EtOH (20 мл) выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец охлаждали, концентрировали и распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 477 (0,181 г, больше 100%) в виде темно-желтого-коричневого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 348 (100%) [М+Н]+.
Соединение 478.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 477 (0,181 г, принимаем 0,505 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в МеОН (20 мл) добавляли по каплям (шприцом) NaOMe (30 вес.% раствор в МеОН, 0,47 мл, 2,50 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 478 (0,204 г, больше 100%) в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 348 (100%) [М+Н]+.
Соединение ТХ63599.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору слегка сырого соединения 478 (0,204 г, принимаем 0,505 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,072 г, 0,252 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,63 мл, 7,79 ммоль). Ледяную баню удаляли и образец выдерживали при 50°С в течение 16 ч. Образец концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором KH2PO4 и насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 50% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63599 (0,052 г, 30% на 4 стадии) в виде желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (500 МГц, CDCl3) 5 8,48 (с, 1Н), 7,45-7,48 (м, 2Н), 7,39-7,42 (м, 1Н), 7,31-7,33 (м, 2Н), 3,79 (с, 3Н), 2,53-2,65 (м, 3Н), 2,35 (т, 1Н, J=12,5 Гц), 2,22-2,25 (м, 1Н), 1,95-1,99 (м, 1Н), 1,66-1,70 (м, 2Н), 1,45 (с, 3Н), 0,82 (т, 3Н, J=7,5 Гц); МС (APCI) m/z: 346 (100%) [М+Н]+.
Соединение 479.
Гидрохлорид гидразина (86 мг, 1,26 ммоль) суспендировали в диоксане (2 мл) и добавляли триэти-ламин (0,18 мл, 1,26 ммоль) с последующим добавлением уксусной кислоты (0,19 г, 3,15 ммоль). Смесь обрабатывали ультразвуком в течение нескольких минут. Добавляли раствор соединения 276 (0,24 г, 0,63 ммоль) в диоксане (4 мл) и смесь выдерживали при 70°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали, разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2х50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 0,215 г (96%) соединения 479 в виде белого твердого остатка. APCI МС: m/z: 358,1 [М+Н]+.
Соединение 480.
Гидрид натрия (72 мг, 1,80 ммоль) суспендировали в ДМФА (2 мл). Добавляли соединение 479 (215 мг, 0,60 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Добавляли изопропилйодид (0,30 мл, 3,01 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили добавлением насыщенного NH4C1 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2х50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая светло-желтое масло. Флэш-хроматография (EtOAc) давала 190 мг (79%) соединения 480 в виде белой пены. APCI МС: m/z: 400,2 [М+Н]+.
Соединение 481.
Соединение 480 (18 5 мг, 0,46 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и добавляли 1 М HCl (1 мл). Раствор перемешивали в течение 2 дней, затем разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2х50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 160 мг (97%) соединения 481 в виде белой пены. APCI МС: m/z: 356,0 [М+Н]+.
Соединение 482.
Соединение 481 (160 мг, 0,45 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и этилформиате (1 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли по каплям NaOMe (0,8 г, 30 вес.% в МеОН) и раствор нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Смесь гасили добавлением насыщенного водного KH2PO4 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2х50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали, получая 170 мг (98%) соединения 482 в виде белого твердого остатка. APCI МС: m/z: 384,1 [М+Н]+.
Соединение 483.
Соединение 482 (170 мг, 0,44 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл), EtOH (2 мл) и воде (0,5 мл). Добавляли гидрохлорид гидроксиламина (46 мг, 0,66 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при 50°С в течение 3 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. После концентрирования остаток разбавляли насыщенным раствором NaHCO3 (водн.) (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2х50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4, концентрировали и сушили в вакууме, получая 170 мг (100%) соединения 483 в виде грязно-белого твердого остатка. APCI МС: m/z: 381,1 [М+Н]+.
Соединение 484.
Соединение 483 (170 мг, 0,44 ммоль) растворяли в ТГФ (4 мл) и МеОН (2 мл) и добавляли NaOMe (0,8 г, 30 вес.% в МеОН). Раствор выдерживали при 50°С в течение 3 ч, затем охлаждали и концентрировали. Добавляли насыщенный водный KH2PO4 (20 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (2х50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (20 мл), сушили над MgSO4 и концентрировали. Флэш-хроматография (70% EtOAc/DCM) давала 121 мг (72%) соединения 484 в виде белой пены. APCI МС: m/z: 381,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63905.
Соединение 484 (120 мг, 0,32 ммоль) растворяли в ДМФА (3 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли ^№-дибромдиметилгидантоин (54 мг, 0,19 ммоль) и раствор перемешивали 90 мин при 0°С. Добавляли пиридин (0,5 мл) и раствор выдерживали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения раствор концентрировали и сушили в вакууме до светло-коричневого твердого остатка. Флэш-хроматография (3:1 EtOAc/DCM) давала 82 мг (69%) соединения ТХ63905 в виде светло-желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,50 (с, 1Н), 8,10 (с, 1Н), 4,52-4,63 (м, 1Н), 4,17 (с, 3Н), 3,08 (дд, 1Н, J=5,2, 17,2 Гц), 2,66-2,77 (м, 1Н), 2,20 (дд, 1Н, J=2,0, 11,6 Гц), 1,80-1,99 (м, 2Н), 1,58 (д, 6Н, J=6,8 Гц), 1,49 (с, 3Н), 1,27 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н); APCI МС m/z: 379,1 [М+Н]+.
Соединение ТХ63834.
Раствор соединения ТХ63465 (33 мг, 0,1 ммоль) в MeCN (5 мл) обрабатывали 30% H2O2 (0,27 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой (15 мл) и экстрагировали EtOAc (2х15 мл). Органический слой сушили над MgSO4 и очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 25% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63834 в виде белого твердого остатка (30 мг, 85%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,37-7,49 (м, 3Н), 7,28-7,34 (м, 2Н), 4,77 (с, 1Н), 3,79 (с, 3Н), 2,58 (дд,
1Н, J=5,6, 15,6 Гц), 2,36-2,54 (м, 2Н), 1,72-1,80 (м, 1Н), 1,58-1,70 (м, 1Н), 1,32 (с, 3Н), 1,22 (с, 3Н), 1,15 (с, 3Н); МС: m/z: [M+H]+ 362. Соединение ТХ63848.
Раствор соединения ТХ64541 (80 мг, 0,24 ммоль) в MeCN (7 мл) обрабатывали 30% H2O2 (0,63 мл), перемешивали при комна.тной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой (15 мл) и экстрагировали EtOAc (2х15 мл). Органический слой сушили над MgSO4 и очищали колоночной хроматографией (силикагель, от 5 до 35% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63848 в виде светло-желтого твердого остатка (8 мг, 10%).
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 7,26-7,54 (м, 5Н), 4,77 (с, 1Н), 3,79 (с, 3Н), 2,45-2,64 (м, 3Н), 2,10-2,24 (м, 3Н), 1,25-1,35 (м, 3Н), 1,30 (с, 3Н); МС: m/z: [M+H]+ 348.
Соединения 485 и 486.
К перемешиваемому при 0°С раствору соединения 152 (0,37 г, 1,59 ммоль) в 20 мл CH2Cl2 добавляли одной порцией 1, 3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,23 г, 0,80 ммоль). Образец перемешивали в течение 30 мин, при охлаждении гасили насыщенным раствором NaHCO3 (приблизительно 100 мл). Образец нагревали до комнатной температуры, концентрировали, затем экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали. Образец хроматографировали (силикагель, 80% EtOAc/гексан), получая соединение 485 (0,27 г, 55%) в виде белого твердого остатка (МС [APCI] m/z: 311/313 (М+1, 91/100%) и соединение 486 (0,080 г, 14%) в виде белого твердого остатка. МС (APCI) m/z: 359 (100%) [М+Н]+.
Соединение 487.
К перемешиваемому раствору соединения 486 (0,080 г, 0,22 ммоль) и этилформиата (1,8 мл, 22,3 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцем) NaOMe (30 вес.% раствор в метаноле, 0,42 мл, 2,24 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 487 (0,067 г, 78%) в виде коричневого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 387 (100%) [М+Н]+.
Соединение 488.
Раствор слегка сырого соединения 487 (0,067 г, 0,17 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,018 г, 0,26 ммоль) в 10 мл этанола выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали и распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 488 (0,067 г, приблизительно 100%) в виде коричневого твердого остатка, которое применяли без очистки.
Соединение 489.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 488 (0,067 г, принимаем 0,17 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 10 мл метанол:ТГФ (1:1) добавляли по каплям (шприцом) NaOMe (30 вес.% раствор в метаноле, 0,32 мл, 1,71 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 489 (3,054 г, 81%) в виде желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение ТХ63776.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору слегка сырого соединения 489 (0,054 г, 0,14 ммоль) в 5 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,020 г, 0,070 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,12 мл, 1,48 ммоль). Ледяную баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 100% EtOAc), получая соединение ТХ63776 (0,014 г, 27%) в виде желтого масла.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,36 (с, 1Н), [5,70 (с), 5,65 (с), 1Н], [3,63 (с), 3,63 (с), 3Н], 2,41 (м, 3Н), 2,05 (арр, дт, 2,2, 12,8, 1Н), 1,93 (м, 1Н), 1,65 (м, 1Н), [1,53 (с), 1,52 (с), 3Н], [1,50 (с), 1,49 (с), 3Н], 1,37 (с, 3Н), 1,21 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС (APCI) m/z: 382 (100%) [М+Н]+.
Соединение 490.
Раствор соединения 386 (0,42 г, 1,16 ммоль) в 10 мл этанола обрабатывали 21 вес.% раствором этоксида натрия в этаноле (2,2 мл, 5,9 ммоль). Образец продували N2, герметично закрывали и выдерживали при 80°С в течение 48 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtCAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 490 (0,40 г, приблизительно 92%) в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки.
Соединение 491.
Раствор соединения 490 (0,40 г, 1,07 ммоль) и 3н. HCl (10 мл, 30 ммоль) в 10 мл этанола перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным NH4OH раствором до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 491 (0,35 г, 99%) в виде желтого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 331 (100%) [М+Н]+.
Соединение 492.
К перемешиваемому раствору соединения 491 (0,35 г, 1,06 ммоль) и этилформиата (10 мл, 124 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 21 вес.% раствор этоксида натрия в этаноле (2,0 мл, 5,4 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 492 (0,38 г, приблизительно 100%) в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 359 (100%) [М+Н]+.
Соединение 493.
Раствор соединения 492 (0,38 г, 1,06 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (0,11 г, 1,58 ммоль) в 10 мл этанола выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, затем при комнатной температуре в течение ночи. Образец концентрировали и распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 493 (0,33 г, 88%) в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 378 (100%) и 356 (88%) [М+Н]+.
Соединение 494.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 493 (0,33 г, 0,93 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 20 мл этанола добавляли по каплям (шприцом) 21 вес.% раствор этоксида натрия в этаноле (1,75 мл, 4,69 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 72 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали, получая соединение 494 (0,32 г, 96%) в виде темно-желтого пенообразного остатка. МС (APCI) m/z: 356 (100%) [М+Н]+.
Соединение ТХ63900.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору соединения 494 (0,32 г, 0,89 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,125 г, 0,44 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,72 мл, 8,90 ммоль). Ледяную баню удаляли, и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали, хроматографировали (силикагель, 20% EtOAc/гексан), затем кристаллизовали из холодного гекса-на, получая соединение ТХ63900 (0,097 г, 31%) в виде светло-желтого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,85 (с, 1Н), 4,42 (кв., 2Н, J=6,8 Гц), 2,53 (дд, 1Н, J=6,4, 18,4 Гц), 2,452,55 (м, 2Н), 1,98-2,10 (м, 2Н), 1,60-1,73 (м, 1Н), 1,35 (с, 3Н), 1,35 (т, 3Н, J=7,2 Гц), 1,33 (с, 9Н), 1,26 (д, 3Н, J=6,8 Гц); МС (APCI) m/z: 354 (100%) [M+H]+.
Соединение 495.
К перемешиваемому при комнатной температуре в атмосфере N2 раствору соединения 127 (1,00 г, 4,20 ммоль) и диметилкарбоната (7,1 мл, 84,2 ммоль) в 10 мл ТГФ добавляли порциями 60% суспензию гидрида натрия в минеральном масле (0,67 г, 16,75 ммоль). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем 80°С в течение ночи. Образец охлаждали до комнатной температуры, концентрировали, затем распределяли между Et2O и насыщенным раствором KH2PO4 (водн.). Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая промежуточный кетоэфир (1,69 г, больше 100 в виде темно-желтого масла). В герметично закрываемой пробирке раствор промежуточного соединения (принимаем 4,20 ммоль) в 10 мл 2-пропанола обрабатывали твердым формамидинацетатом (4,40 г, 42,26 ммоль) с последующей обработкой пиперидином (2,1 мл, 21,2 ммоль). Образец продували N2, герметично закрывали и выдерживали (нагревательным элементом) при 80°С в течение 7 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали, затем хроматографировали (силикагель, от 30 до 50% EtOAc/гексан), получая соединение 495 (0,189 г, 16%) в виде светло-желтого твердого остатка. МС (APCI) m/z: 291 (100%) [М+Н]+.
Соединение 496.
К раствору соединения 495 (0,189 г, 0,652 ммоль) и ^^диизопропилэтиламина (0,125 мл, 0,718 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) хлорокись фосфора (0,61 мл, 6,54 ммоль). После добавления образец выдерживали при 90°С в атмосфере N2 в течение 2 ч, охлаждали, концентрировали,
затем аккуратно распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенный NaCl раствором, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 496 (0,172 г, 86%) в виде коричневого твердого остатка. МС (APCI) m/z: 309/311 (100/42%) [М+Н]+.
Соединение 497.
Раствор соединения 496 (0,172 г, 0,558 ммоль) в 10 мл метаноле обрабатывали 30 вес.% раствором метоксида натрия в метаноле (0,52 мл, 2,77 ммоль). Образец продували N2, герметично закрывали и выдерживали при 60°С в течение 16 ч. Образец охлаждали, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 497 (0,151 г, 88%) в виде желтого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 305 (100%) [М+Н]+.
Соединение 498.
Раствор соединения 497 (0,151 г, 0,496 ммоль) и 3н. HCl (4 мл, 12 ммоль) в 20 мл метанола перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Образец концентрировали, охлаждали, подщелачивали 10% водным NH4OH раствором до рН приблизительно 9-10 и экстрагировали EtOAc. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 498 (0,128 г, 99%) в виде темно-желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 261 (100%) [М+Н]+.
Соединение 499.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 498 (0,128 г, 0,492 ммоль) и этилформиата (4,0 мл, 50 ммоль) в 10 мл бензола добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор метоксида натрия в метаноле (0,46 мл, 52,45 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 48 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 499 (0,115 г, 82%) в виде светло-желтого твердого остатка, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 289 (100%) [М+Н]+.
Соединение 500.
Раствор слегка сырого соединения 499 (0,115 г, принимаем 0,401 ммоль) и гидрохлорида гидрокси-ламина (0,042 г, 0,604 ммоль) в 10 мл этанола выдерживали при 50°С в атмосфере N2 в течение 16 ч, охлаждали, концентрировали и распределяли между CHCl3 и насыщенным раствором NaHCO3. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 500 (0,109 г, 95%) в виде желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 286 (100%) [М+Н]+.
Соединение 501.
К перемешиваемому раствору слегка сырого соединения 500 (0,109 г, 0,381 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере N2 в 10 мл метанола добавляли по каплям (шприцом) 30 вес.% раствор метоксида натрия в метаноле (0,36 мл, 1,92 ммоль). Образец перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, концентрировали, затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали и концентрировали, получая соединение 501 (0,096 г, 88%) в виде желтого масла, которое применяли без очистки. МС (APCI) m/z: 286 (100%) [М+Н]+.
Соединение ТХ63874.
К перемешиваемому при 0°С в атмосфере N2 раствору слегка сырогс соединения 501 (0,096 г, 0,338 ммоль) в 10 мл ДМФА добавляли одной порцией 1,3-дибром-5,5-диметилгидантоин (0,048 г, 0,168 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 1 ч добавляли пиридин (0,27 мл, 3,34 ммоль). Ледяную баню удаляли и образец выдерживали при 50°С в течение 2 ч. Образец охлаждали, концентрировали (удаляя большую часть ДМФА и пиридина), затем распределяли между EtOAc и насыщенным раствором KH2PO4. Органический экстракт промывали насыщенным раствором NaCl, сушили (MgSO4), фильтровали, концентрировали и хроматографировали (силикагель, 30% EtOAc/гексан), получая соединение ТХ63874 (0,028 г, 30%) в виде коричневого твердого остатка.
1Н-ЯМР (400 МГц, CDCl3) 5 8,81 (с, 1Н), 8,61 (с, 1Н), 3,99 (с, 3Н), 2,81 (дд, 1Н, J=6,4, 18,4 Гц), 2,492,64 (м, 2Н), 2,00-2,15 (м, 2Н), 1,64-1,77 (м, 1Н), 1,39 (с, 3Н), 1,29 (д, 3Н, J=8,8 Гц); МС (APCI) m/z: 284 (100%) [М+Н]+.
Все из способов, описанных и заявленных в настоящем изобретении, можно осуществлять и исполнять без лишнего экспериментирования в свете настоящего изобретения. Тогда как способы настоящего изобретения описаны с точки зрения предпочтительных вариантов осуществления, специалисту в данной области техники ясно, что можно применять варианты способов и стадий или последовательности стадий способа, описанного в настоящем изобретении, не выходя за пределы концепции, сущности и объема настоящего изобретения. Более конкретно, ясно, что определенные агенты, которые являются и химически и физиологически родственными, можно заменять на агенты, описанные в настоящем изобретении, при этом получая аналогичные или такие же результаты. Считается, что все данные аналогичные заместители и модификации, ясные специалисту в данной области техники, включены в объем, сущность и
концепцию настоящего изобретения, как определено прилагаемой формулой изобретения. Ссылки.
Следующие ссылки, поскольку они обеспечивают примерные методики или другие подробности, дополнительные для тех, что изложены в настоящем изобретении, специально введены в настоящее изобретение с помощью ссылки.
Abraham и Kappas, Free Radical Biol. Med., 39:1-25, 2005.
Ahmad et al., Cancer Res., 68:2920-2926, 2008.
Ahmad et al., J. Biol. Chem., 281:35764-9, 2006.
Araujo et al., J. Immunol., 171(3):1572-1580, 2003.
Bach, Hum. Immunol., 57(6):430-432, 2006.
Chauhan and Chauhan, Pathophysiology, 13(3):171-181 2006.
Dickerson et al., Prog Neuropsychopharmacol Biol. Psychiatry, Mar. 6, 2007.
Dinkova-Kostova et al., Proc . Natl. Acad. Sci. USA, 102 (12) =4584-4589, 2005.
Dudhgaonkar et al., Eur. J, Pain, 10(7):573-9, 2006.
Forstermann, Biol. Chem., 387:1521, 2006.
Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, and Use, Stahl and Wernvuth Eds.), Verlag Helvetica Chimica Acta, 2002. Hanson et al., BMC Medical Genetics, 6(7), 2005. Honda et al. Bioorg. Med. Chem. Lett., 12:1027-103 0, 2002. Honda et al., J. Med. Chem., 43:4233-4246, 2000a.
Honda, et al., J. Med, Chem., 43:1866-1877, 2000b.
Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 7:1623-1628, 1997.
Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 9 (24):3429-3434,
1999.
Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 8(19) : 2711-2714,
1998.
Honda et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 16 (24):6306-6309,
2006.
ishikawa et al., Circulation, 104(15):1831-1836, 2001. Kawakami et al. , Brain Dev., 28 (4) : 243-246, 2006. [1042] Kendall-Tackett, Trauma Violence Abuse, 8(2):117-126, 2007.
Kruger et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 319 (3):1144-1152,
2006 .
Lee et al., Glia., 5S {7) :712-22, 2007. Lencz et al., Mol. Psychiatry, 12 (6) :572-80, 2007. Liby et al., Cancer Res., 65(11):4789-4793, 2005. Liby et al., Nat. Rev. Cancer, 7(5):357-356, 2007a. Liby et al., Mol. Cancer. Ther., 6(7):2113-9, 2007b. Liby et al., 2007b.
Liu et al., FASEB J., 20 (2) :207-216, 2006.
Lu et al., J. Clin. Invest., 121(10):4015-29, 2011.
March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 2007,
Mclver et al., Pain, 120(1-2):161-9, 2005.
Morris et al., J. Mol. Med., 80 (2) :96-104, 2002.
Morse and Choi, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 172(6):660-670, 2005.
Morse and Choi, Am. J. Respir. Crit. Care Med., 27{1):8-16, 2002.
Pall, Med. Hypoth., 69:821-825, 2007, Place et al., Clin. Cancer Res., 9(7):2798-806, 2003. Rajakariar et al., Proc. Matl. Acad. Sci. USA, 104(52):20979-84, 2007.
Ross et al., Am. J. Clin. Pathol., 120{Suppl):553-71,
2003 ,
Ross et al., Expert Rev. Mol. Diagn., 3(5):573-585, 2003.
Ruster et al,, Scand. J. Rheumatol., 34(6):460-3, 2005. Sacerdoti et al., Curr Neurovaac Res. 2(2):103-111, 2005. Salvemini et al., J. Clin. Invest., 93{5):1940-1947, 1994. Sarchielli et al,, Cephalalgia, 26 (9) :1071-1079, 2006. Satoh et al. , Proc. Natl. Acad, Sci. USA, 103(3):768-773,
2006.
Schulz et al., Antioxid. Redox. Sig., 10:115, 2008.
Strejan et al., J. Neuroimnmnol., 7:27, 1984.
Suh et al., Cancer Res., 58:717-723, 1998.
Suh et al., Cancer Res., 59(2):336-341, 1999.
Szabo et al., Nature Rev. Drug Disc, 6:662-680, 2007.
Takahashi et al., Cancer Res., 57:1233-1237, 1997.
Tamir and Tannebaum, Biochim. Biophys. Acta, 12 88:F31-F3 6,
1996.
Zhou et al., Am. j, Pathol,, 166(1);27-37, 2005.
Список последовательностей
<110> ANDERSON, ERIC BOLTON, GARY L. CAPRATHE, BRADLEY JIANG, XIN LEE, CHITASE ROARK, WILLIAM H. VISNICK, MELEAN
<120> ПИРАЗОЛИЛЬНЫЕ И ПИРИМИДИНИЛЬНЫЕ ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ЕНОНЫ В КАЧЕСТВЕ АНТИОКСИДАНТНЫХ МОДУЛЯТОРОВ ВОСПАЛЕНИЯ
<130> REAT.P0066WO
<14 0> НЕИЗВЕСТНО <141> 2011-12-19
<150> 61/424601 <151> 2010-12-17
<160> 1
<170> Patentln version 3.5
<210> 1
<211> 26
<212> ДНК
<213> Homo sapiens
<400> 1
cagtcacagt gactcagcag aatctg 26
где атомы, обозначенные 1 и 2, соединены или двойной связью, или эпоксидированной двойной связью;
n равно 1 или 2; m равно 0 или 1;
X представляет собой -CN, -CF3 или -C(O)Ra, где Ra представляет собой -ОН, алкокси(С <6), алкила-мино(С <6), диалкиламино(С <6) или -№К(О)2-алкил(С1-4);
каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород или алкил(С <12), арил^^, аралкил(С <2), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2; или
R1 и R2 соединены вместе и представляют собой алкандишлр^), или замещенный алкандиил(С <12), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2;
R3 отсутствует или представляет собой водород; или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил^^, аршлр^), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкшлр^), ацил(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СН,, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; или R3 соединен вместе с R4, как показано ниже; при условии, что R3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R4 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген, циано или оксо; или алкил(С <12), алкенил^з, алкинил^^), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероаршлр^), гетероциклоалкил(С <12), ацил^п), ал-кокси(С <12), арилокси(С <12), аралкокси(С <12), гетероарилоксир^), ацилокси(С <12), алкиламино^^), диалкила-мино(С <12), ариламино(С <12), аралкиламино^^), гетероариламино(С <12), амидо^^, где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН,
-F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2,
-ОС^^Н или -S(O)2NH2; или R4 соединен вместе или с R3, или с R5, как показано ниже;
R5 отсутствует или представляет собой водород или алкил(С <12), алкенил^з, алкинил(С <12), арил^^, аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил^п), где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СЩ -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2; или R5 соединен вместе с R4, как показано ниже; при условии, что R5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген, циано или оксо; или алкил(С <12), алкенил^з, алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил^^, гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), ал-кокси(С <12), арилокси(С <12), аралкоксир^), гетероарилоксир^), ацилокси^^), алкиламино(С <12), диалкила-мино^^), ариламино^^), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо^з, где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2;
при условии, если R3 и R4 соединены вместе, соединение определено формулой (Ia)
R1 R2 (la)
в которой R7 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^п), ал-кенил(С <12), алкинил(С <12), арил^п), аралкил^п), гетероарил^п), гетероциклоалкиЛ(С <12), ацил^^), ал-кокси^п), арилоксиг^), аралкоксиг^), гетероарилокси^п), ацилоксиг^), алкиламино(С <12), диалкила-мино(С <12), ариламино^^), аралкиламино(С <12), гетероариламино^п), амидо(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH~3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2; или
при условии, если R4 и R5 соединены вместе, соединение определено формулой (lb)
Ri R2 (lb)
в которой R8 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^п), ал-кенил^^), алкиниЛ(С <12), ариЛ(С <12), аралкиЛ(С <12), гетероариЛ(С <12), гетероциклоалкиЛ(c в котором по меньшей мере один атом кольца групп гетероарил^^), гетероциклоалкиЛ(С <12), гете-роарилоксИ(c или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер.
2. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой
в которой n равно 1 или 2;
X представляет собой -CN, -CF3 или -C(O)Ra, где Ra представляет собой -ОН, алкоксИ(С <6), алкила-минO(c <6), диалкиламино(С <6) или -NHS(О)2-алкиЛ(cl-4);
каждый RI и R2 независимо представляет собой водород или алкиЛ(С <12), ариЛ(С <12), аралкиЛ(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(О)Ш3 или -S(O)2NH2; или
Rl и R2 соединены вместе и представляют собой алкандииЛ(С <12) или замещенный алкандииЛ(С <12), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2;
R3 отсутствует или представляет собой водород или алкиЛ(С <12), алкениЛ(С <12), алкиниЛ(С <12), ариЛ(С <12), аралкиЛ(С <12), гетероариЛ(С <12), гетероциклоалкиЛ(С <12), ациЛ(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br,
-I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CHs)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH2; при условии, что R3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R5 отсутствует или представляет собой водород или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил^п), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; при условии, что R5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^з, алкенил^з, алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), алкокси(С <12), арилокси(С <12), аралкоксир^), гетероарилоксир^), ацилокси(С <12), алкиламино^^), диалкиламино^^), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СН,, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3
или -S(O)2NH2;
или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер.
3. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой
в которой каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород или алкил(С <12), арил(С <12), арал-кил(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно
замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2; или
R1 и R2 соединены вместе и представляют собой алкандиил(С <12) или замещенный алкандиил(С <12), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2;
R3 отсутствует или представляет собой водород; алкил^п), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил^п), аралкил(С <12), гетероаршлр^), гетероциклоалкил(С <12), ацил^п), где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; при условии, что R3 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R5 отсутствует или представляет собой водород; алкил^п), алкенил(С <12), алкинил^з, арил^п), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С^СН,, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; при условии, что R5 отсутствует тогда и только тогда, когда атом, с которым он соединен, образует часть двойной связи;
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^^у,, алкениЛ(С <12), алкинил^з, ариЛ(С <12), аралкиЛ(С <12), гетероариЛ(С <12), гетероциклоалкшлр^), ацил^з, алкоксИ(С <12), арилоксИ(С <12), аралкоксир^), гетероарилоксир^), ацилоксИ(С <12), алкиламино^^), диалкиламино^^), ариламино^^), аралкиламино^^), гетероариламино(С <12), амидо(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз
или -S(O)2NH2;
или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер.
4. Соединение по п.3, дополнительно определенное формулой
в которой каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород или алкил(С <12), арил(С <12), арал-киЛ(С <12)_ где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно
замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2;
R3 представляет собой водород или алкил^п), алкенил(С <12), алкинил^п), арил(С <12), аралкил^^), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил^з, где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -СО2СН3, -CN, -SH, -OCH3, -OCH2CH3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2; и
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^з, алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероаршлр^), гетероциклоалкшлр^), ацил^з, алкокси^^), арилоксир^), аралкоксир^), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино^^), диалкиламино^^), ариламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино(С <12), амидо(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3
или -S(O)2NH2;
или его фармацевтически приемлемая соль или его таутомер. 5. Соединение по п.З, дополнительно определенное формулой
в которой каждый R1 и R2 независимо представляет собой водород или алкил(С <12), арил(С <12), арал-кил(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно
замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2; или
R1 и R2 соединены вместе и представляют собой алкандиил(С <12) или замещенный алкандишлр^), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2;
R5 представляет собой водород; алкил^з, алкенил(С <12), алкинил^з, арил(С <12), аралкил(С <12), гете-роарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил^п), где один или более атомов водорода любой из последних восьми групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СН3 или -S(O)2NH2;
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил(С <12), алкенил(С <12), алкинил(С <12), арил(С <12), аралкил(С <12), гетероарил(С <12), гетероциклоалкил(С <12), ацил(С <12), алкокси(С <12), арилокси(С <12), аралкоксир^), гетероарилокси(С <12), ацилокси(С <12), алкиламино(С <12), диалкиламино^^), ариламино^^), аралкиламино(С <12), гетероариламино^^), амидо(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СН3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СН,
или -S(O)2NH2;
или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер.
6. Соединение по п.1, дополнительно определенное формулой
в которой каждый RI и R2 независимо представляет собой водород или алкиЛ(С <12), арил^п), арал-киЛ(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз или -S(O)2NH;
R4 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^п), алкениЛ(С <12), алкиниЛ(С <12), арил^п), аралкил^п), гетероариЛ(С <12), гетероциклоалкиЛ(С <12), ациЛ(С <12) алкокси^п), ари-локси^п), аралкоксИ(С <12), гетероарилоксИ(С <12), ацилоксИ(С <12), алкиламино(С <12), диалкиламино^^), ари-ламино(С <12), аралкиламино(С <12), гетероариламино^п), амидо^п), где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -d, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -СО2СН3, -CN, -SH, -OCH3, -ОСН2СН3, -C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС(O)СНз
или -S(O)2NH2;
R6 представляет собой водород, гидрокси, амино, галоген или циано; или алкил^п), алкенил^ 12), алкиниЛ(С <12), ариЛ(С <12), аралкиЛ(С <12), гетероарил^п), гетероциклоалкил^п), ациЛ(С <12), алкоксИ(С <12), арилоксИ(С <12), аралкокси^п), гетероарилоксИ(С <12), ацилоксИ(С <12), алкиламино^п), диалкиламино^^), ариламино^п), аралкиламино(С <12), гетероариламино^п), амидо(С <12), где один или более атомов водорода любой из последних девятнадцати групп независимо необязательно замещен группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СНз
или -S(O)2NH2;
или его фармацевтически приемлемая соль или таутомер.
7. Соединение по п.1, в котором атомы, обозначенные 1 и 2, соединены двойной связью.
8. Соединение по п.1, в котором атомы, обозначенные 1 и 2, соединены эпоксидированной двойной
связью.
9. Соединение по одному из пп. 1, 2, 7 и 8, в котором n равно 1.
10. Соединение по одному из пп.1, 2, 7 и 8, в котором n равно 2.
11. Соединение по одному из пп.1 и 7-10, в котором m равно 0.
12. Соединение по одному из пп.1 и 7-10, в котором m равно 1.
13. Соединение по одному из пп.1, 2 и 7-12, в котором X представляет собой -CN.
14. Соединение по одному из пп.1-13, в котором каждый RI и R2 представляет собой метил.
15. Соединение по одному из пп.1-13, в котором RI представляет собой метил и R2 представляет собой водород.
16. Соединение по одному из пп.1-3, 5 и 7-13, в котором RI и R2 соединены вместе и представляют собой алкандиил^).
17. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-16, в котором R3 отсутствует.
18. Соединение по одному из пп.14 и 7-16, в котором R3 представляет собой водород.
19. Соединение по одному из пп.1-4 и 7-16, в котором R3 представляет собой алкил^), арил^) или ацил^), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно
замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3,
-C(O)CH3, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СНз или -S(O)2NH2.
20. Соединение по п.19, в котором R3 представляет собой метил.
21. Соединение по п.19, в котором R3 представляет собой фенил.
22. Соединение по одному из пп.1 и 6-21, в котором R4 представляет собой водород.
23. Соединение по одному из пп.1 и 7-21, в котором R4 представляет собой оксо.
24. Соединение по одному из пп.1 и 6-21, в котором R4 представляет собой алкиЛ(С <8), арил^), ацил^), алкокси^), где один или более атомов водорода любой из последних четырех групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3,
-ОСН2СН3, -С^СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СНз или -S(O)2NH2.
25. Соединение по п.24, в котором R4 представляет собой метил, изопропил, трет-бутил или цикло-пропил.
26. Соединение по п.24, в котором R4 представляет собой галогеналкил^).
27. Соединение по п.24, в котором R4 представляет собой метокси или этокси.
28. Соединение по п.24, в котором R4 представляет собой фенил, хлорфенил, метилфенил или ме-токсифенил.
25.
29. Соединение по любому из пп.1 и 6-21, в котором R4 представляет собой гетероариллр^), в котором по меньшей мере один атом кольца представляет собой N, О или S.
30. Соединение по п.29, в котором R4 представляет собой пиридинил или пиримидинил.
31. Соединение по п.24, в котором R4 представляет собой этоксикарбонил.
32. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-31, в котором R5 отсутствует.
33. Соединение по одному из пп.1-3 и 7-31, в котором R5 представляет собой водород.
34. Соединение по одному из пп.1-5 и 7-31, в котором R5 представляет собой алкил(С <8), арил^), ацшлр^), где один или более атомов водорода любой из последних трех групп независимо необязательно
замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -OCH2CH3,
-С^СН,, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2.
35. Соединение по п.34, в котором R5 представляет собой метил, циклогексил или трет-бутил.
36. Соединение по п.34, в котором R5 представляет собой 2-гидроксиэтил или 2,2,2-трифторэтил.
37. Соединение по п.34, в котором R5 представляет собой фенил.
38. Соединение по п.34, в котором R5 представляет собой ацетил, метоксикарбонил, этоксикарбонил или фенилкарбонил.
39. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой водород.
40. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой циано.
41. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой галоген.
42. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой алкил(С <6).
43. Соединение по п.42, в котором R6 представляет собой метил, изопропил или циклогексил.
44. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой арил^) или гетероаршлр^), в котором по меньшей мере один атом кольца представляет собой N, О или S, где один или более атомов водорода любой из групп независимо необязательно замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -OCH3, -ОСН2СН3, -С^СН,, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -ОС^СН, или -S(O)2NH2.
45. Соединение по любому из пп.1-38, в котором R6 представляет собой фенил, метилфенил или нафтил.
46. Соединение по п.44, в котором R6 представляет собой хлорфенил, фторфенил или метоксифе-
нил.
47. Соединение по п.44, в котором R6 представляет собой пиридинил, пиримидинил, метилпиразо-лил, диметилизоксазолил, метилтриазолил или метилтетразолил.
48. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой аралкиЛ(С <12) или замещенный аралкил(С <12), в котором один или более атомов водорода независимо замещены группой -ОН, -F, -Cl, -Br, -I, -NH2, -NO2, -CO2H, -CO2CH3, -CN, -SH, -ОСН3, -ОСН2СН3, -С(O)СНз, -N(CH3)2, -C(O)NH2, -OC(O)CH3 или -S(O)2NH2.
49. Соединение по п.48, в котором R6 представляет собой бензил.
50. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой амидо^^).
51. Соединение по п.50, в котором R6 представляет собой фенилкарбониламино.
52. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой алкиншлр^).
53. Соединение по п.52, в котором R6 представляет собой этинил.
54. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой ацил(С <8).
55. Соединение по любому из пп.1-38, в котором R6 представляет собой аминокарбонил или диме-тиламинокарбонил.
56. Соединение по одному из пп.1-38, в котором R6 представляет собой алкоксир^).
57. Соединение по п.56, в котором R6 представляет собой метокси.
58. Соединение по одному из пп.1, 7-16 и 39-57, в котором R7 или R8 представляет собой водород.
59. Соединение по одному из пп.1, 7-12 и 39-57, в котором R7 или R8 представляет собой галоген.
60. Соединение по одному из пп.1, 7-16 и 39-57, в котором R7 или R8 представляет собой арил(С <8).
61. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 10 имеет R-конфигурацию.
62. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 10 имеет S-конфигурацию.
63. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 5 имеет R-конфигурацию.
64. Соединения по любому из пп.3-6, где атом углерода 5 имеет S-конфигурацию.
65. Соединение по п.1, выбранное из
47.
47.
47.
47.
66. Соединение по п.1, выбранное из
69. Фармацевтическая композиция для лечения или предотвращения воспаления или заболеваний, связанных с воспалением, содержащая:
a) соединение по любому из пп.1-68 в терапевтически эффективном количестве и
b) фармацевтически приемлемый носитель.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
025568
025568
- 1 -
- 1 -
(19)
025568
025568
- 1 -
- 1 -
(19)
025568
025568
- 2 -
- 1 -
(19)
025568
025568
- 4 -
- 3 -
025568
025568
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно определяют формулой
- 3 -
- 4 -
025568
025568
- 6 -
- 6 -
025568
025568
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно выбирают из
- 7 -
- 8 -
025568
025568
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно выбирают из
- 7 -
- 8 -
025568
025568
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно выбирают из
- 9 -
- 8 -
025568
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно выбирают из
025568
- 11 -
- 10 -
025568
В некоторых вариантах осуществления соединения дополнительно выбирают из
025568
- 11 -
- 10 -
025568
025568
- 1, -
- 1, -
025568
025568
- 14 -
- 14 -
025568
Таблица 1
025568
- 21 -
- 20 -
025568
Таблица 1
025568
- 21 -
- 20 -
025568
025568
- 23 -
- 23 -
025568
025568
- 36 -
- 36 -
025568
025568
- 75 -
- 75 -
025568
025568
- 76 -
- 76 -
025568
025568
Таблица 7
- 89 -
- 90 -
025568
025568
- 92 -
- 92 -
025568
025568
Таблица 9
- 105 -
- 106 -
025568
025568
- 108 -
- 108 -
025568
025568
- 171 -
- 171 -
025568
025568
- 172 -
- 172 -
025568
025568
- 173 -
- 173 -
025568
025568
- 179 -
- 179 -
025568
025568
- 182 -
- 182 -
025568
025568
- 183 -
- 183 -
025568
025568
- 184 -
- 184 -
025568
025568
- 185 -
- 185 -
|
