|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Соединение формулы (I)  где m обозначает 1 или 2; R1 обозначает атом водорода, атом галогена, NR10R11 или неразветвленный или разветвленный (C 1 -C 8 )алкил, где R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный гетероциклил, который необязательно содержит один дополнительный гетероатом или гетероатомную группу, выбранную из S, О, N и NH; X обозначает-СН или N; R2 обозначает атом водорода или NR17R18, где R17 и R18 каждый обозначает атом водорода; R3, R4, R5 и R6, каждый независимо один от другого, обозначает атом водорода, атом галогена или неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил; R7 обозначает фенил, необязательно замещенный одним или более галогеном; R8 обозначает COR27 или CHR28OCOR29, где R27 обозначает неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил или группу OR30, где(C 1 -C 8 )алкил необязательно замещен ди(С 1 -С 3 )алкиламиногруппой: R30 обозначает неразветвленный или разветвленный (C 1 -C 8 )алкил; R28 обозначает атом водорода; R29 обозначает неразветвленный или разветвленный (C 1 -С 8 )алкил, группу NR31R32 или фенил, где (С 1 -С 8 )алкил необязательно замещен ди(С 1 -С 3 )алкиламиногруппой: R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает неразветвленный или разветвленный (C 1 -С 8 )алкил, необязательно замещенный (С 1 -С 3 )алкоксикарбонилом; или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный гетероциклил; R27 обозначает неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил или группу OR30, где(С 1 -С 8 )алкил необязательно замещен диметиламиногруппой; R29 обозначает неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил, группу NR31R32 или фенил, где (С 1 -С 8 )алкил необязательно замещен диметиламиногруппой; R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил, необязательно замещенный CO2Et. 3. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3, R4, R5 и R6, каждый независимо один от другого, обозначает атом водорода, атом галогена или метил, где значения R9, R12, R13, R15 и R16 определены в п.1. 4. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 обозначает атом водорода или атом галогена; R4 обозначает атом водорода; R5 обозначает атом водорода и R6 обозначает атом водорода, атом галогена или неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил. 5. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 обозначает водород или фтор. 6. Соединение по любому из пп.1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 обозначает водород или фтор; R4 обозначает атом водорода; R5 обозначает атом водорода и R6 обозначает атом водорода, фтор или СН3; R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют пиперидинил; R7 обозначает фенил, необязательно замещенный одним или более фтором; R27 обозначает метил, необязательно замещенный-NMe2; или OR30; R29 обозначает метил, необязательно замещенный -NMe2; NR31R32; или фенил; R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает метил, необязательно замещенный CO2Et. 7. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из метил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, пропан-2-ил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, N-[(2,5-дифторфенил)сульфонил]-N-{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}ацетамид, ([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}амино)метилацетат, этил N-{[([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}амино)метокси]карбонил}-N-метилглицинат, этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-метил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, N-{3-[4-(2-аминопиридин-4-ил)-1-этил-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}-N-[(2,5-дифторфенил)сульфонил]ацетамид, этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2-метилфенил}карбамат, пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2-метилфенил}карбамат, 8. Способ лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF, который включает введение нуждающемуся в лечении млекопитающему эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1. 9. Способ по п.8, где заболевание выбрано из группы, включающей рак и расстройства пролиферации клеток. 10. Способ по п.9, где заболевание представляет собой меланому. 11. In vitro способ ингибирования В-RAF, который включает контактирование указанного рецептора с эффективным количеством соединения формулы (I) по п.1. 12. Фармацевтическая композиция для лечения расстройства пролиферации клеток, включающая терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый инертный наполнитель, носитель или разбавитель. 13. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 в качестве лекарственного средства для лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF. 14. Применение соединения формулы (I) по п.1 в качестве пролекарства, высвобождающего соединение формулы (II)  где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, X и m определены в п.1. 15. Применение соединения формулы (I) по п.14, где пролекарство предназначено для лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF. 16. Применение соединения формулы (I) по п.15, где пролекарство предназначено для лечения рака и расстройств пролиферации клеток.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Соединение формулы (I) где m обозначает 1 или 2; R1 обозначает атом водорода, атом галогена, NR10R11 или неразветвленный или разветвленный (C 1 -C 8 )алкил, где R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный гетероциклил, который необязательно содержит один дополнительный гетероатом или гетероатомную группу, выбранную из S, О, N и NH; X обозначает-СН или N; R2 обозначает атом водорода или NR17R18, где R17 и R18 каждый обозначает атом водорода; R3, R4, R5 и R6, каждый независимо один от другого, обозначает атом водорода, атом галогена или неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил; R7 обозначает фенил, необязательно замещенный одним или более галогеном; R8 обозначает COR27 или CHR28OCOR29, где R27 обозначает неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил или группу OR30, где(C 1 -C 8 )алкил необязательно замещен ди(С 1 -С 3 )алкиламиногруппой: R30 обозначает неразветвленный или разветвленный (C 1 -C 8 )алкил; R28 обозначает атом водорода; R29 обозначает неразветвленный или разветвленный (C 1 -С 8 )алкил, группу NR31R32 или фенил, где (С 1 -С 8 )алкил необязательно замещен ди(С 1 -С 3 )алкиламиногруппой: R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает неразветвленный или разветвленный (C 1 -С 8 )алкил, необязательно замещенный (С 1 -С 3 )алкоксикарбонилом; или его фармацевтически приемлемая соль. 2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный гетероциклил; R27 обозначает неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил или группу OR30, где(С 1 -С 8 )алкил необязательно замещен диметиламиногруппой; R29 обозначает неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил, группу NR31R32 или фенил, где (С 1 -С 8 )алкил необязательно замещен диметиламиногруппой; R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил, необязательно замещенный CO2Et. 3. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3, R4, R5 и R6, каждый независимо один от другого, обозначает атом водорода, атом галогена или метил, где значения R9, R12, R13, R15 и R16 определены в п.1. 4. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 обозначает атом водорода или атом галогена; R4 обозначает атом водорода; R5 обозначает атом водорода и R6 обозначает атом водорода, атом галогена или неразветвленный или разветвленный (С 1 -С 8 )алкил. 5. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 обозначает водород или фтор. 6. Соединение по любому из пп.1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 обозначает водород или фтор; R4 обозначает атом водорода; R5 обозначает атом водорода и R6 обозначает атом водорода, фтор или СН3; R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют пиперидинил; R7 обозначает фенил, необязательно замещенный одним или более фтором; R27 обозначает метил, необязательно замещенный-NMe2; или OR30; R29 обозначает метил, необязательно замещенный -NMe2; NR31R32; или фенил; R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает метил, необязательно замещенный CO2Et. 7. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из метил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, пропан-2-ил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, N-[(2,5-дифторфенил)сульфонил]-N-{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}ацетамид, ([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}амино)метилацетат, этил N-{[([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}амино)метокси]карбонил}-N-метилглицинат, этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-метил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат, N-{3-[4-(2-аминопиридин-4-ил)-1-этил-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}-N-[(2,5-дифторфенил)сульфонил]ацетамид, этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2-метилфенил}карбамат, пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2-метилфенил}карбамат, 8. Способ лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF, который включает введение нуждающемуся в лечении млекопитающему эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1. 9. Способ по п.8, где заболевание выбрано из группы, включающей рак и расстройства пролиферации клеток. 10. Способ по п.9, где заболевание представляет собой меланому. 11. In vitro способ ингибирования В-RAF, который включает контактирование указанного рецептора с эффективным количеством соединения формулы (I) по п.1. 12. Фармацевтическая композиция для лечения расстройства пролиферации клеток, включающая терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый инертный наполнитель, носитель или разбавитель. 13. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 в качестве лекарственного средства для лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF. 14. Применение соединения формулы (I) по п.1 в качестве пролекарства, высвобождающего соединение формулы (II) где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, X и m определены в п.1. 15. Применение соединения формулы (I) по п.14, где пролекарство предназначено для лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF. 16. Применение соединения формулы (I) по п.15, где пролекарство предназначено для лечения рака и расстройств пролиферации клеток.
Евразийское 023942 (13) B1
патентное
ведомство
(12)
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2016.07.29
(21) Номер заявки 201290694
(22) Дата подачи заявки
2011.01.19
(51) Int. Cl.
C07D 401/04 (2006.01) A61K 31/4439 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01)
(54) СУЛЬФОНАМИДНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ 3,4-ДИАРИЛПИРАЗОЛОВ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ
(31) 10151805.8
(32) 2010.01.27
(33) EP
(43) 2013.01.30
(86) PCT/EP2011/050654
(87) WO 2011/092088 2011.08.04
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
НЕРВИАНО МЕДИКАЛ САЙЕНСИЗ С.р.л. (IT)
(72) Изобретатель:
Пуличи Маурицио, Маркионни Кьяра, Тракванди Габриелла (IT)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
(56) WO-A2-2007024843 WO-A2-2007105058 WO-A1-03055860
RAJU U. ET AL.: "Inhibition of DNA repair as a mechanism of enhanced radioresponse of head and neck carcinoma cells by a selective cyclooxygenase-2 inhibitor, celecoxib", INTERNATIONAL JOURNAL OF RADIATION: ONCOLOGY BIOLOGY PHYSICS, PERGAMON PRESS, USA, vol. 63, no. 2, 1 October 2005 (2005-10-01), pages 520-528, XP025262543, ISSN: 0360-3016, DOI: DOI:10.1016/J.IJR0BP.2005.06.007 [retrieved on 2005-10-01] Introduction: cf. Celecoxib
WO-A1-2010010154
(57) В изобретении раскрываются соединения, которые являются сульфонамидными производными соединениями 3,4-диарилпиразола, или их фармацевтически приемлемые соли, способ их получения и содержащие их фармацевтические композиции, предназначенные для лечения расстройства пролиферации клеток; указанные соединения пригодны для лечения заболеваний, вызываемых и/или связанных с измененной активностью протеинкиназы, таких как рак, а также для лечения расстройств пролиферации клеток; раскрывается также применение указанных соединений в качестве лекарственного средства для лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF. Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I) в качестве пролекарства, высвобождающего соединение формулы (II), которое предназначено для лечения рака и расстройств пролиферации клеток
Настоящая заявка представляет параграф 371, подана на основании международной заявки РСТ/ЕР 2011/050654, поданной 19 января 2011 г., которая заявляет преимущество перед предварительной европейской патентной заявкой серийный номер 10151805, поданной 27 января 2010 г. Все содержание этих заявок включено в описание ссылкой.
Настоящее изобретение относится к определенным сульфонамидным производным 3,4-диарилпиразола, которые модулируют активность протеинкиназ. Таким образом, соединения по настоящему изобретению пригодны при лечении заболеваний, вызванных нарушением регуляции активности протеинкиназ. В настоящем изобретении раскрываются также способы получения указанных соединений, способы приготовления фармацевтических композиций, содержащих указанные соединения, и способы лечения заболеваний с использованием фармацевтических композиций, содержащих указанные соединения.
Аномальное функционирование протеинкиназ (РК) является отличительным признаком многих заболеваний.
Большая часть онкогенов и протоонкогенов, вовлекаемых в развитие рака у человека, кодируют РК. Повышенные активности РК влекут за собой многочисленные не злокачественные заболевания, такие как доброкачественная гиперплазия предстательной железы, семейный аденоматоз, полипоз, нейрофиб-роматоз, псориаз, вызванная атеросклерозом пролиферация гладких клеток сосудов, легочный фиброз, артрит, гломерулонефрит и послеоперационный стеноз и рестеноз.
РК также вовлекаются в воспалительные состояния и в размножение вирусов и паразитов. РК может также играть важную роль в патогенезе и развитии нейродегенеративных расстройств.
В качестве общей ссылки, касающейся аномального функционирования или дисрегуляции РК, см. например, Current Opinion in Chemical Biology 1999, 3, 459-465 and Carcinogenesis 2008, 29, 1087-191.
Среди нескольких известных протеинкиназ классический метаболический путь Ras, Raf, MEK (ми-тогенактивированная протеинкиназа/регулируемая внеклеточными сигналами киназа киназы), ERK (ки-наза, регулируемая внеклеточными сигналами) играет центральную роль в регулировании множества функций клеток, зависящих от клеточного контекста, включая пролиферацию, дифференциацию, выживание, иммортализацию клеток и ангиогенез (обзор приведен в Peyssonnaux and Eychene, Biology of the Cell, 2001, 93, 3-62). В указанном метаболическом пути члены семейства Raf рекрутируются в цитоплаз-матическую мембрану за счет соединения с GTP-связывающим Ras, что приводит к фосфорилированию и активации белков Raf. Активированные Raf затем фосфорилируют и активируют MEK, которые, в свою очередь, фосфорилируют и активируют ERK. После активации ERK перемещаются из цитоплазмы в ядро, что приводит к фосфорилированию и регулированию активности факторов транскрипции, таких как Elk-I и Мус. Сообщалось, что метаболический путь Ras/Raf/MEK/ERK способствует онкогенному фенотипу, вызывая иммортализацию, рост, независимый от фактора роста, нечувствительность к подавляющим рост сигналам, способность распространяться и метастазировать путем стимулирования ангио-генеза и ингибирования апоптоза (обзор приведен в Kolch et al., Exp. Rev. Mol. Med., 2002, 4, 1-18). Фактически фосфорилирование ERK возрастает приблизительно в 30% всех опухолей человека (Hoshino et al., Oncogene, 1999, 18, 813-822). Указанное может быть результатом сверхэкспрессии и/или мутации главных членов метаболического пути.
Сообщается о трех изоформах серин/треонин протеинкиназы Raf-1/c-Raf, B-Raf и A-Raf (обзор приведен в Mercer and Pritchard, Biochim. Biophys. Acta, 2003, 1653, 25-40), гены которых, как полагают, возникают в результате дупликации гена. Все три гена Raf экспрессируются в большинстве тканей, но по-разному: c-Raf повсеместно экспрессируется с высокими уровнями, в то время как высокие уровни экспрессии B-Raf обнаружены в нейронных тканях, a A-Raf - в урогенитальных тканях. В большой степени гомологичные члены семейства Raf обладают перекрывающимися, но различными биохимическими активностями и биологическими функциями (Hagemann and Rapp, Expt. Cell Res. 1999, 253, 34-46). Экспрессия всех трех генов Raf требуется для нормального развития у мышей, однако для завершения созревания необходимы как c-Raf, так и B-Raf. B-Raf -/- мыши умирают при Е12.5 вследствие кровотечения в сосудах, вызванного повышенным апоптозом клеток эндотелия (Wojnowski et al., Nature Genet., 1997, 16, 293-297). По сообщениям, B-Raf является основной изоформой, которая вовлекается в пролиферацию клеток и является основной мишенью онкогенного Ras. Активирование 5 соматических миссенс-мутаций идентифицировано исключительно для B-Raf и с частотой 66% встречается в злокачественных мелано-мах кожи (Davies et al., Nature, 2002, 417, 949-954), а также присутствует в разнообразных видах рака человека, включая, однако этим не ограничиваясь, папиллярные опухоли щитовидной железы (Cohen et al., J. Natl. Cancer Inst., 2003, 95, 625-627), холангиокарциномы (Tannapfel et al., Gut, 2003, 52, 706-712), рак толстого кишечника и яичников (Davies et al., Nature, 10 2002, 417, 949-954). Наиболее частой мутацией в B-Raf (80%) является замена валина глутаминовой кислотой в позиции 600. Указанные мутации увеличивают базовую активность киназы B-Raf и, как полагают, блокируют передачу сигналов Raf/MEK/ERK от стимулов пролиферации в обратном направлении, включая активацию Ras и рецептора фактора роста, что приводит к конститутивной активации ERK. Мутированные белки B-Raf трансформируются в клетки NIH3T3 (Davies et al., Nature, 2002, 15 417, 949-954) и меланоциты (Wellbrock et al., Cancer Res., 2004, 64, 2338-2342), а также было показано, что они важны для жизнеспособности и пре
вращения клеток меланомы (Hingorani et al., Cancer Res., 2003, 63, 5198-5202). В качестве ключевого стимула для сигнального каскада Raf/MEK/ERK, B-Raf представляет собой подходящую точку вмешательства в опухолях, зависящих от данного метаболического пути.
Замещенные производные пиразола для лечения опосредованных цитокинами заболеваний, таких как воспаление и артрит, раскрываются в заявках WO 98/52940 и WO 00/31063, поданных компанией G.D. Searle & Со.
Производные гидроксиарилпиразола для лечения рака раскрываются в заявке WO 03/055860, поданной организацией Cancer Research Institute, и в заявке WO 07/105058, поданной компанией Pfizer Inc.
Производные пиримидинилпиразола для лечения гиперпролиферативных расстройств, таких как рак, раскрываются в заявке WO 07/24843, поданной компанией SmithKline Beecham Corporation. Несмотря на указанные разработки, все еще сохраняется потребность в эффективных средствах для лечения указанных заболеваний.
Краткое описание чертежей
Настоящее изобретение поясняется также ссылкой на прилагаемые чертежи, которые приведены ниже.
Фиг. 1 относится к изучению стабильности в буферном растворе и показывает устойчивость соединения № 2, взятого в качестве представителя соединения формулы (I) по настоящему изобретению, в забуференном фосфатом физиологическом растворе (PBS) с рН 7,4.
Фиг. 2 относится к изучению стабильности в плазме и показывает превращение в свежей плазме мыши соединения № 2, взятого в качестве представителя соединения формулы (I) по настоящему изобретению, в родительское соединение соединения № 2.
Авторы настоящего изобретения установили, что соединения формулы (I), приведенные ниже, являются ингибиторами киназы и, таким образом, пригодны для использования в терапии в качестве противоопухолевых средств.
Таким образом, первым объектом настоящего изобретения является сульфонамидное производное 3,4-диарилпиразола, представленное формулой (I)
где m обозначает 1 или 2;
R1 обозначает атом водорода, атом галогена, NR10R11 или неразветвленный или разветвленный (Q-Q^CCM, где
R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный гетероциклил, который необязательно содержит один дополнительный гетероатом или гетероатомную группу, выбранную из S, О, N и NH;
X обозначает -СН или N;
R2 обозначает атом водорода или NR17R18, где R17 и R18 каждый обозначает атом водорода;
R3, R4, R5 и R6 каждый независимо один от другого обозначает атом водорода, атом галогена или неразветвленный или разветвленный (C1 -^алюш;
R7 обозначает фенил, необязательно замещенный одним или более галогеном;
R8 обозначает COR27 или CHR28OCOR29, где
R27 обозначает неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил или группу OR30, где^-^алсшл необязательно замещен ди^-О^алкиламино группой:
R30 обозначает неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил; R28 обозначает атом водорода;
R29 обозначает неразветвленный или разветвленный (^-С^алкил, группу NR31R32 или фенил, где (Q-Q^COUI необязательно замещен ди(С1-С3)алкиламино группой:
R31 и R32 каждый независимо один от другого обозначает неразветвленный или разветвленный (Q-Q^CCM, необязательно замещенный (Q-С^алкоксикарбонилом;
и его фармацевтически приемлемые соли.
Сульфонамидные производные 3,4-диарилпиразола, представленные формулой (I), могут быть получены по реакциям, включающим стандартные синтетические превращения.
В настоящем изобретении предлагаются также способы лечения заболеваний, вызываемых и/или связанных с нарушенным регулированием активности протеинкиназ, в частности семейства RAF, который включает введение нуждающемуся в лечении млекопитающему эффективного количества замещенных 3,4-диарилпиразольных соединений, представленных формулой (I), как определено выше.
Предпочтительный способ осуществления настоящего изобретения заключается в лечении заболевания, вызванного и/или связанного с нарушенным регулированием активности протеинкиназ, которое выбрано из группы, включающей рак или расстройства пролиферации клеток.
Другой предпочтительный способ осуществления настоящего изобретения заключается в лечении конкретных типов рака, в частности меланомы.
Кроме того, способ по настоящему изобретению может быть пригоден для ингибирования ангиоге-неза и метастазов опухолей, а также лечения отторжения трансплантатов органов и подавления реакции "трансплантат-против-хозяина".
Также дополнительно может назначатся нуждающемуся в лечении млекопитающему радиотерапии или химиотерапии в сочетании с по меньшей мере одним цитостатическим или цитотоксическим средством.
Кроме того, в настоящем изобретении предлагается in vitro способ ингибирования активности семейства белков RAF, который включает контактирование указанного белка с эффективным количеством соединения формулы (I).
В настоящем изобретении предлагается также фармацевтическая композиция, включающая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый инертный наполнитель, носитель или разбавитель.
Такая фармацевтическая композиция может использоваться в комбинации с известными методами лечения рака, такими как радиотерапия или химиотерапия в сочетании с цитостатическими или цитоток-сическими средствами, антибиотиками, алкилирующими агентами, антиметаболитическими средствами, гормональными средствами, иммунологическими средствами, средствами интерферонового типа, ингибиторами циклооксигеназы (например, ингибиторами СОХ-2), ингибиторами матричной металлопротеа-зы, ингибиторами теломеразы, ингибиторами тирозинкиназы, средствами против рецептора фактора роста, агентами против HER, агентами против EGFR, средствами против ангиогенеза (например, ингибиторами ангиогенеза), ингибиторами фарнезилтрансферазы, ингибиторами пути передачи сигнала ras-raf, ингибиторами клеточного цикла, другими ингибиторами cdks, агентами, связывающими тубулин, ингибиторами топоизомеразы I, ингибиторами топоизомеразы II и т.п.
Соединения настоящего изобретения могут использоваться в лекарственном препарате или наборе, включающим соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, или его фармацевтические композиции и одно или несколько химиотерапевтических средств в виде комбинированного препарата, предназначенного для одновременного, раздельного или последовательного использования при терапии против рака.
В соответствии с еще одним аспектом в настоящем изобретении предлагается применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, в качестве лекарственного средства, обладающего противораковой активностью, для использования в способе лечения рака.
Настоящее изобретение относиться к применению соединения формулы (I) в качестве пролекарст-ва, высвобождающего соединение формулы (II), предназначенное для лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF, частности для лечения рака и расстройств пролиферации клеток.
Если указано иное, то при ссылке на соединения формулы (I) как таковые, а также на любую их фармацевтическую композицию или на любые включающие их терапевтические способы лечения, соединения настоящего изобретения может находиться в виде изомеров, таутомеров, гидратов, сольватов, комплексных соединений, метаболитов, носителей, N-оксидов и фармацевтически приемлемых солей.
Метаболитом соединения формулы (I) является любое соединение, в которое конкретное соединение формулы (I) преобразуется в условиях in vivo, например, при введении нуждающемуся в этом млекопитающему. Как правило, при введении соединения формулы (I) это же самое производное может быть преобразовано во множество соединений, например в более растворимые производные, такие как гидроксилированные производные, которые легко выводятся из организма. Таким образом, в зависимости от реализующего метаболического пути любые из указанных гидроксилированных производных можно рассматривать как метаболиты соединений формулы (I).
N-оксиды представляют собой соединения формулы (I), в которых атом азота и атом кислорода соединены посредством семиполярной связи.
Если в соединении по настоящему изобретению имеется хиральный центр или другая форма изомерного центра, то предполагается, что все формы подобного изомера или изомеров, в том числе энан-тиомеры и диастереомеры, включены в настоящее изобретение. Соединения, содержащие хиральный центр, могут использоваться в виде рацемической смеси, энантиомерно обогащенной смеси или же рацемическая смесь может быть разделена с помощью хорошо известных методов, и индивидуальный энантиомер может использоваться отдельно. В тех случаях, когда соединения содержат ненасыщенные углерод-углеродные двойные связи, в объем настоящего изобретения входят как цис (Z), так и транс (Е) изомеры.
В тех случаях, когда соединения могут существовать в таутомерных формах, предполагается, что каждая форма включена в объем настоящего изобретения независимо от того, существует оно в равновесии или преимущественно в одной форме.
Таким образом, если не указано иное, в том случае, когда в соединении формулы (I) m принимает
В тех случаях, когда соединения могут существовать в таутомерных формах, предполагается, что каждая форма включена в объем настоящего изобретения независимо от того, существует оно в равновесии или преимущественно в одной форме.
В тех случаях, когда соединения могут существовать в других таутомерных формах, таких как кето-енольные таутомеры, предполагается, что каждая таутомерная форма включена в объем настоящего изобретения независимо от того, существует оно в равновесии или преимущественно в одной форме.
Под термином "неразветвленный или разветвленный С1-С8алкил" авторы настоящего изобретения подразумевают любую из групп, таких как, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобу-тил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил, н-гексил, н-гептил, н-октил и т.п.
Под термином "неразветвленный или разветвленный С1-С6алкил" авторы настоящего изобретения подразумевают любую из групп, таких как, например, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобу-тил, трет-бутил, втор-бутил, н-пентил, н-гексил и т.п.
Под термином "неразветвленный или разветвленный С1-С3алкил" авторы настоящего изобретения подразумевают любую из групп, таких как, например, метил, этил, н-пропил, изопропил.
Под термином "гетероциклил" авторы настоящего изобретения подразумевают 3-8-членный насыщенный или частично ненасыщенный карбоцикл, в котором один или несколько атомов углерода замещены гетероатомами, такими как атомы азота, кислорода и сера. Не ограничивающими настоящее изобретение примерами гетероциклильных групп являются, например, пиран, пирролидин, пирролин, ими-дазолин, имидазолидин, пиразолидин, пиразолин, тиазолин, тиазолидин, дигидрофуран, тетрагидрофу-ран, 1,3-диоксолан, пиперидин, пиперазин, морфолин и т.п.
Под термином "атом галогена" авторы настоящего изобретения подразумевают атом фтора, хлора, брома или йода.
Из всего вышесказанного специалисту должно быть понятно, что любую группу, имеющую сложное название, такое как, например, алкиламино, следует рассматривать как составленную обычным образом из образующих ее частей, например из аминогруппы, которая дополнительно замещена алкилом, где значение алкила определено выше.
Аналогично, любой из терминов таких как, например, "диалкиламино", "алкоксикарбонил" и т.п., включает группы, где значение для таких фрагментов как алкил, алкокси определены выше.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) включают кислотно-аддитивные соли с неорганическими или органическими кислотами, в частности с азотной, хлористо-водородной, броми-сто-водородной, серной, хлорной, фосфорной, уксусной, трифторуксусной, пропионовой, гликолевой, молочной, щавелевой, фумаровой, малоновой, яблочной, малеиновой, винной, лимонной, бензойной, коричной, миндальной, метансульфоновой, изетиновой и салициловой кислотой.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) включают также соли с неорганическими или органическими основаниями, например соли с щелочными или щелочно-земельными металлами, в частности с гидроксидами, карбонатами или бикарбонатами натрия, калия, кальция, аммония или магния, алициклическими или циклическими аминами, предпочтительно с метиламином, этиламином, диэтиламином, триэтиламином, пиперидином и т.п.
Предпочтительным классом соединений формулы (I) являются соединения, в которых
R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный гетероциклил;
R27 обозначает неразветвленный или разветвленный (^-С^алкил или группу OR30, где^-C8)алкил необязательно замещен диметиламино группой;
R29 обозначает неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил, группу NR31R32 или фенил, где (C1-C8)алкил необязательно замещен диметиламино группой;
R31 и R32 каждый независимо один от другого обозначает неразветвленный или разветвленный (Q-Q^CCM, необязательно замещенный CO2Et.
Еще одним предпочтительным классом соединений формулы (I) являются соединения, в которых
R3, R4, R5 и R6 каждый независимо один от другого обозначает атом водорода, атом галогена или метил, где значения R9, R12, R13, R15 и R16 определены в п.1.
4. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где
R3 обозначает атом водорода или атом галогена;
R4 обозначает атом водорода;
R5 обозначает атом водорода и
R6 обозначает атом водорода, атом галогена или неразветвленный или разветвленный (C1 -C8)алкил. Еще одним предпочтительным классом соединений формулы (I) являются соединения, в которых R1 обозначает водород или фтор.
6. Соединение по любому из пп.1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, где
R3 обозначает водород или фтор;
R4 обозначает атом водорода;
R5 обозначает атом водорода и
R6 обозначает атом водорода, фтор или СН3;
R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют пиперидинил;
R7 обозначает фенил, необязательно замещенный одним или более фтором;
R27 обозначает метил, необязательно замещенный -NMe2; или OR30;
R29 обозначает метил, необязательно замещенный -NMe2; NR31R32; или фенил;
R31 и R32 каждый независимо один от другого обозначает метил, необязательно замещенный
CO2Et.
Предпочтительными соединениями формулы (I) или его фармацевтически приемлемыми солями являются соединения, выбранные из группы, состоящей из
метил[(2,5-дифторфенил)сульфонил] {3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил] -2,4-дифтор-фенил}карбамат,
этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил] {3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил] -2,4-дифтор-фенил}карбамат,
пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифтор-фенил}карбамат,
пропан-2-ил[(2,5-дифторфенил)сульфонил] {3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил] -2,4-дифторфенил}карбамат,
N-[(2,5-дифторфенил)сульфонил] -N-{ 3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил] -2,4-дифтор-фенил}ацетамид,
([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}-амино)метилацетат,
этил N-{[([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифтор-фенил}-амино)метокси]карбонил}-N-метилглицинат,
этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-метил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифтор-фенил}карбамат,
N-{3-[4-(2-аминопиридин-4-ил)-1-этил-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}-N-[(2,5-дифтор-фенил)сульфонил]ацетамид,
этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил] {3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил] -2-метил-фенил}карбамат,
пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил] {3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил] -2-метил-фенил}карбамат.
Соединения настоящего изобретения могут быть получены с использованием путей реакций и схем синтеза, которые описаны ниже, с помощью методик, известных из области техники и легко доступных исходных веществ. Воплощение определенных вариантов настоящего изобретения описано в приведенных ниже примерах, однако обычным специалистам в данной области техники должно быть понятно, что описанные способы получения можно легко адаптировать с тем, чтобы получить другие варианты воплощения настоящего изобретения. Например, синтез не приведенных в примерах соединений по настоящему изобретению можно осуществить с помощью модификаций, которые очевидны специалистам, например путем защиты мешающих групп, путем замены на другие подходящие реагенты, известные из области техники, или путем обычных модификаций условий проведения реакций. Иначе, следует понимать, что другие реакции, упомянутые в данном описании или известные из области техники, можно адаптировать с тем, чтобы получить другие соединения по настоящему изобретению.
Таким образом, соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть получены в соответствии со способом, который включает
где значения R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, X и m указаны выше, с любым агентом, подходящим для присоединения требуемой группы R8 к атому азота сульфонамидной группы, где значение R8 указано выше, согласно любой из альтернативных стадий:
а) взаимодействие необязательно защищенного сульфонамидного производного 3,4-диарилпиразола формулы (II)
a1) с ацильным соединением формулы (III)
R27'COW (III)
где W обозначает подходящую уходящую группу, такую как гидрокси, атом галогена или группа OCOR27', где R27' обозначает атом водорода или необязательно замещенную группу, выбранную из не-разветвленного или разветвленного (C1-C8)алкила, (С2-С8)алкенила, (С2-С8)алкинила, (С3-С8)циклоалкила, (C3-С8)циклоалкенила, гетероциклила, арила и гетероарила, с образованием соединения формулы (I), где R8 обозначает COR27, где R27 обозначает R27', а значение R27' указано выше;
или
а2) с галогенформиатом формулы (IV)
R3 0oco-Hal (iv) где Hal обозначает атом галогена, а значение R30 указано выше, с образованием соединения формулы (I), где R8 обозначает COR27, где R27 обозначает OR30, а значение R30 указано выше; или
а3) с альфа-галогеналкильным соединением формулы (V)
Hal-CHR280COR29 (V)
где значения Hal, R28 и R29 указаны выше, с образованием соединения формулы (I), где R8 обозначает CHR28OCOR29, где значения R28 и R29 определены выше, с последующим необязательным удалением защитной группы, если она присутствует;
Ь) если необходимо, превращение полученного соединения формулы (I)
где значения R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, X и m определены выше, в другое соединение формулы (I), в котором один или несколько R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, X и m различны, с помощью известных реакций; и/или разделение полученного соединения формулы (I) на отдельные изомеры; и/или превращение соединения формулы (I), как определено выше, в фармацевтически приемлемую соль или превращение его соли в свободное соединение формулы (I), как определено выше.
Ссылку на любое конкретное соединение формулы (I) по настоящему изобретению, необязательно в форме фармацевтически приемлемой соли, можно найти в экспериментальной части данного описания.
Следует отметить, что когда в соединении формулы (II) m принимает значение, равное 0, a R1 обозначает атом водорода и приведена лишь одна из следующих таутомерных форм формулы (IIa) или (IIb), то следует, тем не менее, понимать, что оставшаяся форма также входит в объем настоящего изобретения
Приведенные выше способы являются аналогичными способами, которые можно осуществить в соответствии с методиками, известными из области техники.
Как указано выше, специалисту должно быть понятно, что если соединение формулы (I), полученное в соответствии с приведенным выше способом, образуется в виде смеси изомеров, то их разделение на отдельные изомеры соединения формулы (I), которое проводят согласно обычным методикам, также входит в объем настоящего изобретения.
В соответствии со стадией (а) способа сульфонамидное производное 3,4-диарилпиразола (II) взаимодействует согласно хорошо известным методикам с реагентом, необходимым для введения требуемой группы R8.
Согласно стадии a1) получают соединение формулы (I), где R8 обозначает ацильную группу. В этом случае превращение соединения формулы (II) в соединение формулы (I) осуществляют по реакции соединения формулы (II) с ацильным соединением формулы R27'COW, где W обозначает подходящую уходящую группу, такую как гидрокси, атом галогена или ацилоксигруппа. Специалисту должно быть понятно, что указанную реакцию можно осуществить различными путями и в различных условиях проведения процесса, что хорошо известно из области получения карбоксамидов. Например, в том случае, когда W обозначает атом галогена, такой как атом хлора, реакцию проводят в соответствующем растворителе, таком как, например, дихлорметан, хлороформ, тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, 1,4-диоксан, ацетонитрил, толуол или ^^диметилформамид и т.п., при температуре в пределах от приблизительно минус 10°С до температуры кипения с обратным холодильником и в течение соответствующего времени, например от приблизительно 30 мин до приблизительно 96 ч. Реакцию проводят в присутствии подходящего поглотителя ионов водорода, такого как триэтиламин, ^^диизопропилэтиламин или пиридин. В том случае, когда W обозначает гидроксильную группу, реакцию проводят в присутствии конденси
рующего агента, такого как, например, тетраборат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония (TBTU), 1,3-дициклогексилкарбодиимида, 1,3-диизопропилкарбодиимида, 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида, N-циклогексил-карбодиимид-N'-пропилоксиметилполистирола или N-циклогексил-карбодиимид-N'-метилполистирола, в подходящем растворителе, таком как, например, дихлорметан, хлороформ, тетрагидрофуран, диэтиловый эфир, 1,4-диоксан, ацетонитрил, толуол или N,N-диметилформамид, при температуре в диапазоне от приблизительно минус 10°С до температуры кипения с обратным холодильником и в течение соответствующего времени, например от приблизительно 30 мин до приблизительно 96 ч Указанную реакцию необязательно проводят в присутствии подходящего катализатора, например 4-диметиламинопиридина, или в присутствии еще одного конденсирующего реагента, такого как N-гидроксибензотриазол. В качестве альтернативы, эту же самую реакцию, например, проводят также по способу смешанного ангидрида с использованием алкилхлороформиата, такого как этил-, изобутил- или изопропилхлороформиата, в присутствии третичного основания, такого как триэтиламин, ^^диизопропилэтиламин или пиридин, в подходящем растворителе, таком как, например, толуол, ди-хлорметан, хлороформ, тетрагидрофуран, ацетонитрил, диэтиловый эфир, 1,4-диоксан или N,N-диметилформамид, при температуре в диапазоне от приблизительно -30°С до комнатной температуры. В том случае, когда W обозначает ацилоксигруппу формулы OCOR27', реакцию проводят в присутствии третичного основания, такого как триэтиламин, ^^диизопропилэтиламин или пиридин, который может использоваться и как растворитель, или в подходящем растворителе, таком как, например, толуол, ди-хлорметан, хлороформ, тетрагидрофуран, ацетонитрил, диэтиловый эфир, 1,4-диоксан или N,N-диметилформамид, при температуре в диапазоне от приблизительно -30°С до комнатной температуры.
Согласно стадии а2) получают соединение формулы (I), где R8 обозначает алкоксикарбонильную группу. В этом случае превращение соединения формулы (II) в соединение формулы (I) осуществляют по реакции соединения формулы (II) с подходящим галогенформиатом, который также называют гало-генкарбонатным соединением, формулы R30OCOHal, где Hal обозначает атом галогена, преимущественно атом хлора. Например, реакцию осуществляют в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофу-ран, 1,4-диоксан, дихлорметан, хлороформ, ацетонитрил, толуол или их смеси, при температуре в диапазоне от приблизительно -5°С до приблизительно 35°С и в течение времени, которое меняется от приблизительно 30 мин до приблизительно до 72 ч, в присутствии подходящих поглотителей ионов водорода, таких как триэтиламин или диизопропилэтиламин.
Согласно стадии а3) получают соединение формулы (I), где R8 обозначает альфа-галогеналкильную группу. В этом случае превращение соединения формулы (II) в соединение формулы (I) осуществляют по реакции соединения формулы (II) с подходящим альфа-галогеналкильным соединением формулы Hal-CHR28OCOR29, где Hal обозначает атом галогена, преимущественно атом йода или брома. Например, реакцию осуществляют в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран, дихлорметан, хлороформ, ацетонитрил, толуол или их смеси, при температуре в диапазоне от приблизительно -5°С до приблизительно 65°С и в течение времени, которое меняется от приблизительно 30 мин до приблизительно 72 ч, в присутствии подходящих поглотителей ионов водорода, таких как триэтиламин или диизопропи-лэтиламин.
Исходное соединение формулы (II) может быть получено, как описано в ожидающей решения экспертизы заявке на изобретение WO 2010/010154.
Другие исходные соединения способа получения соединений настоящего изобретения, т.е. соединения формул (III), (IV) и (V) в любых возможных вариантах, а также любые используемые в способе реагенты являются известными соединениями, и если они сами по себе не являются коммерчески доступными, то они могут быть получены, как указано в экспериментальной части данного описания.
Всем специалистам в данной области техники должно быть понятно, что любые превращения, осуществляемые в соответствии с указанными способами, могут потребовать проведения стандартных модификаций, таких как, например, замена на другие подходящие реагенты, известные из области техники, или осуществления рутинных модификаций условий проведения реакций.
Специалистам также известно, что превращение химических групп в другие может требовать, чтобы один или несколько реакционноспособных центров в соединении, содержащем указанную группу, были защищены с тем, чтобы избежать протекания нежелательных побочных реакций. Защиту подобных реакционных центров и последующее удаление защиты по окончании синтетических превращений можно осуществить согласно стандартным методикам, которые описаны, например, в Green, Theodora W. and Wuts, Peter G.M. - Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, John Wiley & Sons Inc., New York (NY), 1999.
В тех случаях, когда соединение формулы (I) содержит один или несколько асимметрических центров, указанное соединение может быть разделено на отдельные изомеры по известным специалистам методикам. Подобные методики включают стандартные хроматографические методы, в том числе хроматографию с использованием хиральной стационарной фазы, или кристаллизацию. Общие методы разделения соединений, содержащих один или несколько асимметрических центров, описаны, например, в Jacques, Jean; Collet, Andre; Wilen, Samuel H. - Enantiomers, Racemates, and Resolutions, John Wiley & Sons Inc., New York (NY), 1981.
Фармакология
Методы испытаний.
In vitro исследование пролиферации клеток.
Экспоненциально растущие клетки меланомы человека А375 (с мутацией B-RAF) и клетки мелано-мы человека Mewo (с B-Raf дикого типа) высевают и инкубируют при 37°С во влажной атмосфере, содержащей 5% CO2. Через 24 ч в среду добавляют ступенчато возрастающие дозы соединения и инкубируют в течение 72 ч. По окончании обработки клетки промывают и проводят подсчет. Количество клеток определяют с помощью системы контроля с использованием клеточного аденозинтрифосфата. Пролиферацию клеток сравнивают с контрольными клетками и рассчитывают концентрацию, которая на 50% ингибирует рост клеток.
Анализ по методу р-МАРК (T202/Y204) ArrayScan.
Клетки A375 меланомы человека, имеющие мутированный B-RAF, высевают на 384-луночные планшеты, покрытые полилизином (Matrix) с плотностью 1000 клеток на лунку в подходящей среде, дополненной 10%-й FCS, и инкубируют в течение 16-24 ч. Клетки обрабатывают в течение 1,5 или 2 ч возрастающими дозами соединений (начиная с дозы 10 мкМ, фактор разбавления 2,5). По окончании обработки клетки осаждают 3,7%-ным п-формальдегидом в течение 15-30 мин и пермеабилизируют раствором, содержащим D-PBS, промывают дважды с помощью D-PBS (80 0,1% Triton X-100 и 1% бычьего сывороточного альбумина (Sigma-Aldrich)) в течение 15 мин при комнатной температуре (окрашивающий раствор). Добавляют моноклональное антитело E10 против фосфо-МАРК (T202/Y204) (Cell Signaling, номер по каталогу 9106), разбавленное в соотношении 1:100 окрашивающим раствором, и инкубируют в течение 1 ч при 37°С. После удаления раствора первичного антитела добавляют Су(tm)2-сопряженное вторичное антитело против мыши (Amersham), разбавленное в соотношении 1:500 окрашивающим раствором, содержащим 2 мкг/мл DAPI. Планшет инкубируют в течение 1 ч при 37°С, дважды промывают, а затем считывают с помощью ArrayScan VTI компании Cellomics (4 поля на лунку, алгоритм CytoNucTrans).
В качестве конечного результата приводится параметр "MEAN_ RingAvglntenCh2", который определяет среднюю интенсивность флуоресценции цитоплазмы, связанную с р-МАРК окрашиванием.
Мутации B-RAF, которые конститутивно активируют киназу, идентифицированы в большинстве меланом и в большой фракции рака ободочной и прямой кишки и папиллярного рака щитовидной железы. Рост клеток с активированным B-RAF прямо зависит от активности B-RAF.
Приведенные выше испытания показывают, что соединения формулы (I) действительно обладают заметной активностью при ингибировании пролиферации клеток, при этом значения IC50 составляют меньше чем 10 мкМ для клеточной линии с мутацией В-Raf (A375), и обладают менее действенной активностью при ингибировании пролиферации клеток в клеточной линии с мутацией B-Raf дикого типа (Mewo), как указано в приведенной ниже табл. 1.
В той же таблице приведены данные, полученные для соединений формулы (I) при проведении испытаний с использованием плашет-ридера ArrayScan, и они демонстрируют способность соединений формулы (I) подавлять передачу сигнала по сигнальному пути, который управляется активацией B-RAF в клеточной линии А375 с мутацией B-RAF. Значения IC50 во всех случаях составляют меньше чем 10 мкМ, что согласуется со значениями IC50, полученными при исследовании пролиферации в той же самой клеточной линии, подтверждая тем самым, что антипролиферативная активность соединений определяется ингибированием активности B-RAF.
Из вышесказанного следует, что новые соединения формулы (I) по настоящему изобретению действительно обладают преимуществами при лечении заболеваний, таких как рак, вызываемых прекращением регулирования активности протеинкиназы, в частности активности киназ семейства Raf. Кроме того, соединения формулы (I) по настоящему изобретению могут использоваться в качестве пролекарств, высвобождающих в условиях in vivo родительское лекарственное средство формулы (II)
где значения R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, X и m указаны выше.
Высвобождаемые соединения формулы (II) активны в качестве ингибиторов протенкиназы, в частности ингибиторов киназ семейства Raf. Они могут использоваться в терапии при лечении заболеваний, вызываемых прекращением регулирования активности протеинкиназы, таких как рак.
Как правило, группа R8, значение которой указано выше, представляет собой модифицирующую группу пролекарства, и в данном описании ее обозначают также как предшественник функциональной группы.
Указанная модифицирующая группа пролекарства полностью или частично расщепляется деструктивными ферментами. Различные деструктивные ферменты могут химически изменять модифицирующую группу пролекарства с образованием родительского ингибитора киназы. Примеры подобных фер
ментов включают, однако этим не ограничиваясь, протеазы, пептидазы, амидазы, эстеразы, глюкорони-дазы, гидролитические ферменты и другие.
In vitro превращение пролекарства формулы (I) в родительское соединение формулы (II).
Соединение формулы (I) по настоящему изобретению, растворенное в ДМСО, инкубируют при 37°С в PBS с рН 7,4 или в свежей плазме мыши. Через интервалы времени 0, 5, 15, 60 и 120 мин берут аликвоты и анализируют их методом ВЭЖХ/МС. УФ-сигнал в диапазоне 210-400 нм используют для идентификации хроматографических пиков либо соединения формулы (I), либо родительского соединения формулы (II).
На фиг. 1 показана устойчивость соединения № 2, взятого в качестве представителя соединения формулы (I) по настоящему изобретению, в буферном растворе PBS, которая демонстрирует, что соединение № 2 устойчиво в буферном растворе и не превращается в соответствующее родительское соединение.
Фиг. 2 показывает превращение в свежей плазме мыши соединения № 2, взятого в качестве представителя соединения формулы (I) по настоящему изобретению, в родительское соединение соединения № 2, и демонстрирует, что соединение № 2 быстро превращается в соответствующее родительское соединение при инкубировании в плазме.
Исследование биодоступности.
В дополнение к in vitro методам для ряда животных можно провести in vivo исследования, такие как фармакокинетические исследования. Соединение формулы (I) по настоящему изобретению можно вводить животным, например мыши или крысе, с различными дозировками и проводить введение различными путями, предпочтительно внутрь. Можно отобрать пробы крови в последовательных временных точках и полученные образцы исследовать на присутствие родительского соединения формулы II.
Соединение формулы (I) по настоящему изобретению вместе с 0,5% Methocel(r) вводят мышам пе-рорально (от 10 до 100 мг/кг) в процессе проведения фармакокинетических исследований, а за превращением соединений формулы (I) в соответствующее родительское соединение (II), как указано выше, следят, анализируя методом ВЭЖХ/МС образцы крови, взятые через 15 и 30 мин, через 1, 6 и 24 ч после введения дозы. Образцы крови берут из подкожной вены конечности.
Биодоступность при пероральном введении (Fos) рассчитывают как процентное отношение перо-рального среднего значения площади под кривой (AUC) родительского соединения после пролекарства к среднему внутривенному значению AUC родительского соединения после пролекарства по мере нормализации дозы родительского соединения. В приведенной ниже табл. 2 приводятся данные о биодоступности при пероральном введении (Fos) родительского соединения № 2 и родительского соединения № 45 после введения их соответствующих пролекарств, которые взяты в качестве представителей соединений формулы (I) по настоящему изобретению.
Из сказанного следует, что соединения формулы (I) действительно имеют биологический профиль, рассматриваемый в целом, который неожиданно превосходит биологический профиль, известный из предшествующего уровня техники, и, следовательно, обладают особыми преимуществами при использовании в терапии против пролиферативных расстройств, связанных с измененной активностью киназы, в частности активностью семейства киназ Raf, таких как рак.
Соединения по настоящему изобретению могут назначаться либо как единственные средства, либо, в качестве альтернативы, в комбинации с известными способами лечения рака, такими как радиотерапия или химиотерапевтические схемы лечения в сочетании, например, с антигормональными средствами, такими как антиэстрогены, антиандрогены и ингибиторы ароматазы, ингибиторы топоизомеразы I, ингибиторы топоизомеразы II, агенты, которые нацеливаются на микротрубки, средства на основе платины, алкилирующие агенты, агенты, повреждающие ДНК, или интеркалирующие агенты, противоопухолевые антиметаболиты, другие ингибиторы киназы, другие антиангиогенные средства, ингибиторы кинезинов, терапевтические моноклональные антитела, ингибиторы mTOR, ингибиторы гистондеацетилазы, ингибиторы фарнезилтрансферазы и ингибиторы гипоксической реакции.
Если они составлены в виде фиксированной дозы, в подобных комбинированных лекарственных препаратах применяют соединения по настоящему изобретению в пределах диапазонов доз, которые приведены ниже, и другое фармацевтически активное средство в пределах признанных диапазонов доз.
Если комбинированный состав приготовить невозможно, то соединения формулы (I) могут исполь
зоваться последовательно с известными средствами против рака.
Соединения формулы (I) по настоящему изобретению, пригодные для назначения млекопитающему, например людям, могут вводиться обычным путем и с уровнями доз, которые зависят от возраста, веса и состояния пациента и пути введения.
Например, подходящая доза, пригодная для перорального введения соединения формулы (I), может меняться в диапазоне от приблизительно 10 до приблизительно 1 г на дозу, назначаемую от 1 до 5 раз в день. Соединения по настоящему изобретению могут назначаться в виде различных лекарственных форм, например перорально, в форме таблеток, капсул, таблеток, покрытых сахаром или пленочной оболочкой, жидких растворов или суспензий; ректально в форме суппозиториев; парентерально, например внутримышечно, или путем внутривенной, и/или внутриоболочковой, и/или интраспинальной инъекции или вливания.
Настоящее изобретение включает также фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль в сочетании с фармацевтически приемлемым инертным наполнителем, который может быть носителем или разбавителем.
Фармацевтические композиции, включающие соединение по настоящему изобретению, обычно готовят стандартными способами и вводят их в подходящей фармацевтической форме.
Например, твердые формы для перорального приема могут содержать вместе с активным соединением разбавители, например лактозу, декстрозу, сахарозу, целлюлозу, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; лубриканты, например оксид кремния, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния или кальция и/или полиэтиленгликоли; связующие вещества, например крахмалы, гуммиарабик, жела-тин/метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливинилпирролидон; разрыхлители, например крахмал, альгиновую кислоту, альгинаты или натриевый алкоголят крахмала; шипучие смеси; красители; подсластители; увлажнители, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; и, в общем случае, нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, используемые в фармацевтических составах. Указанные фармацевтические препараты могут быть приготовлены известным способом, например путем смешивания, гранулирования, таблетирования, нанесения оболочки из сахара или нанесения пленочных покрытий.
Жидкими дисперсиями для перорального назначения могут быть, например сиропы, эмульсии или суспензии.
Например, сиропы могут содержать в качестве носителя сахарозу или сахарозу с глицерином и/или маннит и сорбит.
Суспензии и эмульсии могут содержать в качестве примеров носителей природную смолу, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт.
Суспензия или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать вместе с активным соединением фармацевтически приемлемый носитель, например стерильную воду, оливковое масло, эти-лолеат, гликоли, например пропиленгликоль и, если необходимо, подходящее количество гидрохлорида лидокаина.
Растворы для внутривенных инъекций или вливаний могут содержать в качестве носителя стерильную воду или же предпочтительно они могут быть в форме стерильных водных, изотонических, физиологических растворов или они могут в качестве носителя содержать пропиленгликоль.
Суппозитории могут содержать вместе с активным соединением фармацевтически приемлемый носитель, например масло какао, пропиленгликоль, поверхностно-активный сложный эфир жирной кислоты и полиоксиэтиленсорбитана или лецитин.
Экспериментальная часть
Для ссылки на любое конкретное соединение формулы (I) по настоящему изобретению, необязательно в форме фармацевтически приемлемой соли, см. экспериментальную часть и формулу изобретения. Что касается нижеприведенных примеров, то соединения по настоящему изобретению синтезируют, используя приведенные в данном описании способы или другие способы, известные из области техники.
Краткие формы и сокращения, которые используют в данном описании, имеют следующее значение:
г (граммы) мг (миллиграммы)
мл (миллилитры) мМ (миллимолярный)
мкМ (микромолярный) ммоль (миллимоли)
час (часы) Мгц (мега-Герц)
мм (миллиметры) Гц (Герц)
М (молярный) мин (минуты)
моль (моли) ТСХ (тонкослойная
хроматография)
r.t. (комнатная температура) TEA (триэтиламин)
В данном описании все символы и условные обозначения, которые используют в способах, схемах и примерах, находятся в согласии с теми, что используют в научной литературе, например в Journal of the American Chemical Society или Journal of Biological Chemistry.
Если не указано иное, соединения получают из коммерческих источников, они имеют самое высо-
кое качество и их используют без дальнейшей очистки. Безводные растворители, такие как ДМФА, ТГФ, CH2Cl2 и толуол, получают от компании Aldrich Chemical Company. Все реакции, в которых принимают участие соединения, чувствительные к воздуху и влаге, проводят в атмосфере азота или аргона. Общие методы очистки и аналитические методы.
Флэш-хроматографию проводят на силикагеле (по классификации Merck 9395, 60А). ВЭЖХ проводят на колонке Waters X Terra RP 18 (4,6x50 мм, 3,5 мкм) с использованием системы Waters 2790 HPLC, снабженной детектором 996 Waters PDA, и одноквадрупольного масс-анализатора Micromass модели ZQ, снабженного источником ионов с электрораспылением (ESI). В качестве подвижной фазы А используют 5 мМ буфер на основе ацетата аммония (рН 5,5 с отношением уксусная кислота-ацетонитрил 95:5), а в качестве подвижной фазы В используют смесь вода-ацетонитрил (5:95). Градиент от 10 до 90% В в течение 8 мин, выдерживание при 90% В течение 2 мин. УФ-детектирование проводят при 220 и 254 нм. Объемная скорость потока 1 мл/мин. Инжектируемый объем 10 мкл. Сканирование в полном диапазоне масс от 100 до 800 а.е.м. Напряжение в капиллярной игле составляет 2,5 кВ; температура источника 120°C; напряжение на конусном скимере 10 B. Времена удерживания (ВЭЖХ, комнатная температура) приведены в минутах на длине волны 220 или 254 нм. Массы приведены как отношение m/z.
Если необходимо, соединения очищают методом препаративной ВЭЖХ на колонке Waters Symmetry C18 (19x50 мм, 5 мкм) или колонке Waters X Terra RP 18 (30x150 мм, 5 мкм) с использованием препаративного хроматографа Waters HPLC 600, снабженного детектором 996 Waters PDA, и одноквадруполь-ного масс-анализатора Micromass модели ZMD с ионизацией при электрораспылении, в положительном режиме работы. В качестве подвижной фазы А используют смесь вода-0,01% трифторуксусная кислота, а в качестве подвижной фазы В используют ацетонитрил. Градиент от 10 до 90% В в течение 8 мин, выдерживание при 90% В течение 2 мин. Объемная скорость потока 20 мл/мин. В другом варианте в качестве подвижной фазы А используют смесь вода-0,1% NH3, а в качестве подвижной В используют ацетонитрил. Градиент от 10 до 100% В в течение 8 мин, выдерживание при 100% В в течение 2 мин. Объемная скорость потока 20 мл/мин.
Спектры 1Н-ЯМР регистрируют на приборе Mercury VX 400 на частоте 400,45 МГц, снабженном 5 мм зондом для метода двойного резонанса [1Н (15N-31P) ID_PFG Varian].
Приведенные ниже примеры представлены, чтобы пояснить настоящее изобретение, а не ограничить его каким-либо образом. Несмотря на то что настоящее изобретение описывается со ссылкой на конкретные способы и варианты осуществления изобретения, следует понимать, что могут быть внесены различные модификации, которые не выходят за рамки настоящего изобретения.
Пример 1. Метил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат (соединение № 1).
[(I), Rl, R2, R4, R5=H, R3, R6=F, К7=2,5-дифторфенил, R8=COOCH3, X=CH, m=2]
N-{2,4-Дифтор-3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]фенил}-2,5-дифторбензолсульфонамид (80 мг, 0,168 ммоль) суспендируют в 3,5 мл DCM и добавляют TEA (18,7 мг, 25,8 мкл, 0,185 ммоль). К полученному раствору добавляют метилхлорформиат (17,5 мг, 13,0 мкл, 0,185 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, разбавляют с помощью DCM и выливают в воду. Орга
нический слой три раза промывают водой, один раз насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют досуха. Полученное указанным образом твердое вещество переносят в диэтиловый эфир и фильтруют (72 мг, выход 80%).
1Н-ЯМР (401 МГц, ДМСО^6) 5 8,53 (с, 1H), 8,40-8,45 (м, 2Н), 7,74-7,87 (м, 3Н), 7,62 (тд, J=4,1, 9,5 Гц, 1H), 7,41 (тд, J=1,3, 9,0 Гц, 1H), 7,10-7,17 (м, 2H), 4,27 (кв., J=7,3 Гц, 2H), 3,65 (с, 3Н), 1,49 (т, J=7,3 Гц, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C24H18F4N4O4S [М+Н]+ 535,1058, найдено
535,1044.
Действуя аналогичным образом, получают следующие соединения:
Этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифтор-фенил}карбамат (соединение № 2).
[(I), Rl, R2, R4, R5=H, R3, R6=F, R7=2,5-flH <})Top Полученное твердое вещество суспендируют в 1,4-диоксане и добавляют 25%-ный раствор HCl в воде (1,1 экв.). Раствор упаривают досуха и получают требуемое соединение в виде соответствующего гидрохлорида (выход 89%).
^-ЯМР (401 МГц, ДМСО^6) 5 8,88 (с, 1H), 8,61-8,73 (м, 2H), 7,75-7,90 (м, 3Н), 7,59-7,69 (м, 3Н), 7,42-7,54 (м, 1H), 4,33 (кв., J=7,3 Гц, 2H), 4,06-4,16 (кв., J=7,1 Гц, 2Н), 1,51 (т, J=7,3 Гц, 3Н), 1,02 (т, J=7,1 Гц, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C25H20F4N4O4S [М+Н]+ 549,1214, найдено
549,1218.
Пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифтор-фенил}карбамат (соединение № 3).
[(I), Rl, R2, R4, R5=H, R3, R6=F, R7 = 2,5-дифторфенил, R8=COOCH2CH2CH3, Х=СН, m=2]
(Выход 77%)
1H-ЯМР (401 МГц, ДМСО^6) 5 8,53 (с, 1Н), 8,38-8,45 (м, 2Н), 7,80-7,87 (м, 1Н), 7,73-7,80 (м, 2Н), 7,62 (тд, J=4,0, 9,4 Гц, 1Н), 7,41 (тд, J=1,5, 8,9 Гц, 1Н), 7,10-7,16 (м, 2Н), 4,21-4,33 (м, 2Н), 3,98-4,09 (м, 2Н), 1,48 (т, J=7,3 Гц, 3Н), 1,35-1,46 (м, 2Н), 0,65 (т, J=7,4 Гц, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C26H22F4N4O4S [M+H]+ 563,1371, найдено
563,1364.
Пропан-2-ил[(2,5-дифторфенил)сульфонил] {3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил] -2,4-дифторфенил}карбамат (соединение № 4).
[(I), Rl, R2, R4, R5=H, R3, R6=F, R7=2,5-дифтopфeнил, R8=COOCH2(CH3)2, Х=СН, m=2]
(Выход 99%)
1H-ЯМР (401 МГц, ДМСО^6) 5 8,53 (с, 1Н), 8,35-8,44 (м, 2Н), 7,80-7,89 (м, 1Н), 7,72-7,80 (м, 2Н), 7,63 (тд, J=4,l, 9,4 Гц, 1Н), 7,40 (тд, J=l,6, 8,8 Гц, 1Н), 7,06-7,19 (м, 2Н), 4,84 (квин., J=6,2 Гц, 1Н), 4,27 (кв., J=7,3 Гц, 2Н), 1,48 (т, J=7,3 Гц, 3Н), 0,83-1,16 (м, J=6,l Гц, 6Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C26H22F4N4O4S [М+Н]+ 563,1371, найдено
563,1372.
Этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2-метилфенил}-карбамат (соединение № 72).
[(I), Rl, R2, R3, R4, R5=H, R6=MeTmi, R7=2,5-дифтopфeнил, R8=COOCH2CH3, Х=СН, m=2 ]
^-ЯМР (401 МГц, ДМСО^6) 5 8,50 (с, 1Н), 8,29-8,35 (м, 2Н), 7,75-7,90 (м, 2Н), 7,66 (тд, J=4,0, 9,5 Гц, 1Н), 7,35-7,48 (м, 3Н), 7,03-7,07 (м, 2Н), 4,24 (кв., J=7,3 Гц, 2Н), 3,99-4,17 (м, 2Н), 1,95 (с, 3Н), 1,49 (т, J=7,3 Гц, 3Н), 1,00 (т, J=7,1 Гц, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C26H24F2N4O4S [M+H]+ 527,1559, найдено
527,1546.
Пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил]-2-метил-фенил}карбамат (соединение № 73).
[(I), Rl, R2, R3, R4, R5=H, R6=Me-rai, R7=2,5-flH ^-ЯМР (401 МГц, ДМСО-d6) 5 8,49 (с, 1Н), 8,30-8,33 (м, 2Н), 7,75-7,88 (м, 2Н), 7,67 (тд, J=4,0, 9,5 Гц, 1Н), 7,35-7,48 (м, 3Н), 7,04-7,08 (м, 2Н), 4,19-4,28 (м, 2Н), 3,95-4,10 (м, 2Н), 1,98 (с, 3Н), 1,48 (т, J=7,3 Гц, 3Н), 1,33-1,45 (м, 2Н), 0, 66 (т, J=7,4 Гц, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C27H26F2N4O4S [М+Н]+ 541,1716, найдено
541,1691.
Этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-метил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил]-2,4-дифтор-фенил}карбамат (соединение № 74).
[(I), Rl, R2, R4, R5=H, R3, R6=F, R7=2,5-fl^Top ^-ЯМР (401 МГц, ДМСО-d6) 5 8,47 (с, 1Н), 8,39-8,43 (м, 2Н), 7,80-7,87 (м, 1Н), 7,72-7,80 (м, 2Н), 7,62 (тд, J=4,1, 9,4 Гц, 1Н), 7,41 (тд, J=1,6, 8,8 Гц, 1Н), 7,09-7,15 (м, 2Н), 4,06-4,17 (м, 2Н), 3,99 (с, 3Н), 1,00 (т, J=7,1 Гц, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C24H18F4N4O4S [М+Н]+ 535,1058, найдено
535,1052.
Пример 2. N-[(2,5-дифторфенил)сульфонил]-N-{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}ацетамид (соединение № 5).
[(I), Rl, R2, R4, R5=H, R3, R6=F, R7=2,5-flH <ЈTop N-{2,4-дифтор-3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]фенил}-2,5-дифторбензолсульфонамид (80 мг, 0,168 ммоль) суспендируют в 3,5 мл DCM и добавляют TEA (18,7 мг, 25,8 мкл, 0,185 ммоль). К полученному раствору добавляют ацетилхлорид (20,0 мг, 18,0 мкл, 0,252 ммоль) и смесь оставляют на ночь перемешиваться при комнатной температуре, разбавляют с помощью DCM и выливают в воду. Органический слой три раза промывают водой, один раз насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют досуха. Полученное указанным образом твердое вещество переносят в диэтиловый эфир и фильтруют (79 мг, выход 91%).
^-ЯМР (401 МГц, ДМСО^6) 5 8,52 (с, 1H), 8,40-8,43 (м, 2H), 7,83-7,91 (м, 1H), 7,71-7,83 (м, 2H), 7,60 (тд, J=4,0, 9,5 Гц, 1Н), 7,40-7,53 (м, 2Н), 7,12-7,19 (м, 2Н), 4,28 (кв., J=7,3 Гц, 2Н), 1,96 (с, 3Н), 1,49 (т, J=7,3 Гц, 3Н). +
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C24H18F4N4O3S [М+Н]+ 519,1109, найдено 519,1094.
Действуя аналогичным образом, получают следующие соединения:
N-{3-[4-(2-аминопиридин-4-ил)-1-этил-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}-N-[(2,5-дифтор-фенил)сульфонил]ацетамид (соединение № 45).
[(I), Rl, R4, R5=H, R2=NH2, R3, R6=F, R7=2,5-fl^Top Твердое вещество очищают флэш-хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 96:4). Выход 70%. ^-ЯМР (401 МГц, ДМСО^6) 5 8,29 (с, 1Н), 7,74-7,90 (м, 3Н), 7,73-7,75 (м, 1Н), 7,60 (тд, J=4,2, 9,5
Гц, 1Н), 7,42-7,49 (м, 1Н), 6,26 (дд, J=1,6, 5,4 Гц, 1Н), 6,22 (с, 1Н), 5,73 (ушир.с, 2Н), 4,21-4,30 (кв., 2Н), 1,91 (с, 3Н), 1,44-1,50 (м, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C24H19F4N5O3S [М+Н]+ 534,1218, найдено
534,1223.
Пример 3. Этил N-{[([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}амино)метокси]карбонил}^-метилглицинат (соединение № 10).
[(I), R1, R2, R4, R5=H, R3, R6=F, R7=2,5-дифторфенил, R8=CH2OCON(СН3) СН2СООСН2СН3, Х=СН, ш=2]
Этил N-[(хлорметокси)карбонил] -N-метилглицинат.
Гидрохлорид саркозина (426 мг, 2,772 ммоль) суспендируют в 6,0 мл DCM и добавляют TEA (560 мг, 770 мкл, 5,544 ммоль). Добавляют хлорметилхлороформиат (325 мг, 224 мкл, 2,52 ммоль) и реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Суспензию разбавляют с помощью DCM и выливают в воду. Органический слой один раз промывают водой, один раз насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют досуха. Полученное маслянистое вещество проверяют методом 1Н-ЯМР и используют на следующей стадии.
^-ЯМР (300 МГц, CDCl3) 5 5,79 и 5,76 (2с, 2H, таутомеры), 4,22 (кв., 2H), 4,05 и 3,99 (2с, 2H, тау-томеры), 3,03 и 3,01 (2с, 3Н, таутомеры), 1,28 (т, 3Н).
Этил ^[(иодметокси)карбонил] -N-метилглицинат.
Этил №[(хлорметокси)карбонил]^-метижлицинат, полученный на предыдущей стадии, растворяют в ацетоне (5,0 мл). Добавляют иодид натрия (755 мг, 5,04 ммоль), и реакционную смесь оставляют перемешиваться на ночь при комнатной температуре. Растворитель упаривают досуха, и сырой продукт вновь суспендируют в DCM и выливают в воду. Органический слой один раз промывают водой, один раз насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют досуха. Полученное маслянистое вещество красноватого цвета (303 мг) проверяют методом 1Н-ЯМР и используют на следующей стадии.
^-ЯМР (300 МГц, CDCl3) 5 6,02 и 5,99 (2с, 2Н, таутомеры), 4,22 (кв., 2H), 4,04 и 3,95 (2с, 2H, таутомеры), 3,01 и 2,98 (2с, 3Н, таутомеры), 1,29 (m, 3Н).
N-{2,4-дифтор-3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]фенил}-2,5-дифторбензолсульфонамид (80 мг, 0,168 ммоль) суспендируют в 3,5 мл DCM и добавляют TEA (18,7 мг, 25,8 мкл, 0,185 ммоль). Порциями добавляют этил №[(йодметокси)карбонил]-^метилглицинат, полученный на предыдущей стадии. После перемешивания при комнатной температуре в течение 48 ч реакционную смесь разбавляют с помощью DCM и выливают в воду. Органический слой три раза промывают водой, один раз насыщенным раствором соли, сушат над Na2SO4 и концентрируют досуха. Твердое вещество очищают флэш-хроматографией на силикагеле (DCM/MeOH 97:3). Выход 23%.
^-ЯМР (401 МГц, ДМСО^6) 5 8,95-8,99 (м, 1Н), 8,91 (д, J=7,1 Гц, 2Н), 7,77 (дд, J=1,9, 7,0 Гц, 2Н), 7,38-7,64 (м, 4Н), 7,22-7,32 (м, 1Н), 6,29 и 6,25 (2с, 2Н, таутомеры), 4,30 (кв., J=7,2 Гц, 2Н), 4,13 и 4,02 (2с, 2Н, таутомеры), 4,03-4,12 (м,2Н), 1,48 (т, J=7,3 Гц, 3Н), 1,14 (т, J=7,1 Гц, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C29H27F4N5O6S [М+Н]+ 650,1691, найдено
650,1669.
Действуя аналогичным образом, получают следующие соединения:
([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}-амино)метилацетат (соединение № 7).
[(I), Rl, R2, R4, R5=H, R3, R6=F, R7=2,5-дифтopфeнил, R8=CH2OCOCH3, Х=СН, m=2]
Твердое вещество очищают флэш-хроматографией на силикагеле (гексан/этилацетат 3:7). Выход
72%.
1H-ЯМР (401 МГц, ДМСО-d6) 5 8,49 (с, 1Н), 8,37-8,44 (м, 2Н), 7,61-7,72 (м, 1Н), 7,52-7,61 (м, 2Н), 7,43-7,52 (м, 1Н), 7,26 (тд, J=1,5, 8,8 Гц, 1Н), 7,05-7,10 (м, 2Н), 5,65 (с, 2Н), 4,24 (кв., J=7,2 Гц, 2Н), 1,94 (с, 3Н), 1,43-1,49 (м, 3Н).
Масс-спектр высокого разрешения (ESI): рассчитано для C25H20F4N4O4S [М+Н]+ 549,1214, найдено
549,1207.
где m обозначает 1 или 2;
R1 обозначает атом водорода, атом галогена, NR10R11 или неразветвленный или разветвленный (Q-Q^CCM, где
R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный гетероциклил, который необязательно содержит один дополнительный гетероатом или гетероатомную группу, выбранную из S, О, N и NH;
X обозначает-СН или N;
R2 обозначает атом водорода или NR17R18, где R17 и R18 каждый обозначает атом водорода;
R3, R4, R5 и R6, каждый независимо один от другого, обозначает атом водорода, атом галогена или неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил;
R7 обозначает фенил, необязательно замещенный одним или более галогеном;
R8 обозначает COR27 или CHR28OCOR29, где
R27 обозначает неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил или группу OR30, где^-^алсшл необязательно замещен ди(С1-С3)алкиламиногруппой:
R30 обозначает неразветвленный или разветвленный (C1-C8)алкил; R28 обозначает атом водорода;
R29 обозначает неразветвленный или разветвленный (Q-С^алкил, группу NR31R32 или фенил, где (С1-С8)алкил необязательно замещен ди(С1-С3)алкиламиногруппой:
R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает неразветвленный или разветвленный (Q-С^алкил, необязательно замещенный (С1-С3)алкоксикарбонилом;
или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где
R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют 3-8-членный гетероциклил;
R27 обозначает неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил или группу OR30, где(С1-С8)алкил необязательно замещен диметиламиногруппой;
R29 обозначает неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил, группу NR31R32 или фенил, где (С1-С8)алкил необязательно замещен диметиламиногруппой;
R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил, необязательно замещенный CO2Et.
3. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где
R3, R4, R5 и R6, каждый независимо один от другого, обозначает атом водорода, атом галогена или метил, где значения R9, R12, R13, R15 и R16 определены в п.1.
4. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 обозначает атом водорода или атом галогена;
R4 обозначает атом водорода; R5 обозначает атом водорода и
R6 обозначает атом водорода, атом галогена или неразветвленный или разветвленный (С1-С8)алкил.
5. Соединение по п.2 или его фармацевтически приемлемая соль, где R1 обозначает водород или
фтор.
6. Соединение по любому из пп.1-5 или его фармацевтически приемлемая соль, где R3 обозначает водород или фтор;
R4 обозначает атом водорода;
R5 обозначает атом водорода и
R6 обозначает атом водорода, фтор или СН3;
R10 и R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, образуют пиперидинил;
R7 обозначает фенил, необязательно замещенный одним или более фтором;
R27 обозначает метил, необязательно замещенный-NMe2; или OR30;
R29 обозначает метил, необязательно замещенный -NMe2; NR31R32; или фенил;
R31 и R32, каждый независимо один от другого, обозначает метил, необязательно замещенный
CO2Et.
7. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранные из группы, состоящей из метил[(2,5-дифторфенил)сульфонил] {3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3 -ил] -2,4-
дифторфенил}карбамат,
этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат,
пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат,
пропан-2-ил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат,
N-[(2,5-дифторфенил)сульфонил]-N-{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1H-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}ацетамид,
([(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}амино)метилацетат,
этил N- {[([(2, 5 -дифторфенил)сульфонил] {3-[1 -этил-4-(пиридин-4-ил)-1 Н-пиразол-3-ил] -2,4-
дифторфенил}амино)метокси]карбонил} -N-метилглицинат,
этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-метил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}карбамат,
N-{3-[4-(2-аминопиридин-4-ил)-1-этил-1H-пиразол-3-ил]-2,4-дифторфенил}-N-[(2,5-дифторфенил)сульфонил]ацетамид,
этил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2-метилфенил}карбамат,
пропил[(2,5-дифторфенил)сульфонил]{3-[1-этил-4-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразол-3-ил]-2-метилфенил}карбамат,
8. Способ лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF, который включает введение нуждающемуся в лечении млекопитающему эффективного количества соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1.
9. Способ по п.8, где заболевание выбрано из группы, включающей рак и расстройства пролиферации клеток.
10. Способ по п.9, где заболевание представляет собой меланому.
11. In vitro способ ингибирования В-RAF, который включает контактирование указанного рецептора с эффективным количеством соединения формулы (I) по п.1.
12. Фармацевтическая композиция для лечения расстройства пролиферации клеток, включающая терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый инертный наполнитель, носитель или разбавитель.
13. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 в качестве лекарственного средства для лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF.
14. Применение соединения формулы (I) по п.1 в качестве пролекарства, высвобождающего соединение формулы (II)
(")
где R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, X и m определены в п.1.
15. Применение соединения формулы (I) по п.14, где пролекарство предназначено для лечения заболевания, вызываемого и/или связанного с нарушением регуляции активности киназ семейства RAF.
16. Применение соединения формулы (I) по п.15, где пролекарство предназначено для лечения рака и расстройств пролиферации клеток.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
023942
- 1 -
(19)
023942
- 1 -
(19)
023942
- 2 -
(19)
023942
- 4 -
023942
- 18 -
|
