|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Композиция, отбеливающая кожу, которая содержит: a) экстракт Desmodium gangeticum, содержащий более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов; и b) косметически приемлемую основу, выбираемую из группы, состоящей из крема, лосьона, геля и эмульсии. 2. Композиция по п.1, в которой указанный экстракт характеризуется растворимостью в воде от 1 до 80% (мас./мас.) при 25°С. 3. Композиция по п.2, в которой растворимость экстракта составляет от 1 до 60% (мас./мас.) при 25°С. 4. Композиция по п.3, в которой растворимость экстракта составляет от 1 до 40% (мас./мас.) при 25°С. 5. Способ получения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, включающий стадии: (a) нагревание Desmodium gangeticum в воде при температуре в интервале от 30 до 100°С; (b) отделение нерастворимого материала для получения водной фракции; (c) фракционирование в основном нерастворимых в воде компонентов водной фракции следующими методами: (i) разделение с помощью геля на основе полистирола; (ii) разделение путем осаждения с помощью умеренно полярных растворителей, выбираемых из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, диэтилового эфира, бутилового спирта, изобутилметилкетона и их смесей; или (iii) разделение химическим путем, включающим кислотный гидролиз для отделения нерастворимых в воде компонентов. 6. Способ по п.5, в котором после стадии разделения с помощью геля на основе полистирола следует стадия солюбилизации в основном нерастворимых в воде компонентов в умеренно полярном растворителе, выбираемом из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, диэтилового эфира, бутилового спирта, изобутилметилкетона и их смесей, с последующим отделением растворителя. 7. Способ по п.5 или 6, в котором умеренно полярным растворителем является этилацетат. 8. Способ по любому из пп.5-7, в котором водную фракцию высушивают в порошок, после чего осуществляют остальные стадии способа. 9. Композиция для отбеливания кожи, содержащая: a) экстракт Desmodium gangeticum, полученный способом по любому из пп.5-8; и b) косметически приемлемую основу. 10. Экстракт Desmodium gangeticum, применяемый в качестве агента, отбеливающего кожу, который содержит более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов. 11. Применение экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, для производства медикамента для отбеливания кожи. 12. Косметический способ отбеливания кожи, включающий стадию местного нанесения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Композиция, отбеливающая кожу, которая содержит: a) экстракт Desmodium gangeticum, содержащий более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов; и b) косметически приемлемую основу, выбираемую из группы, состоящей из крема, лосьона, геля и эмульсии. 2. Композиция по п.1, в которой указанный экстракт характеризуется растворимостью в воде от 1 до 80% (мас./мас.) при 25°С. 3. Композиция по п.2, в которой растворимость экстракта составляет от 1 до 60% (мас./мас.) при 25°С. 4. Композиция по п.3, в которой растворимость экстракта составляет от 1 до 40% (мас./мас.) при 25°С. 5. Способ получения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, включающий стадии: (a) нагревание Desmodium gangeticum в воде при температуре в интервале от 30 до 100°С; (b) отделение нерастворимого материала для получения водной фракции; (c) фракционирование в основном нерастворимых в воде компонентов водной фракции следующими методами: (i) разделение с помощью геля на основе полистирола; (ii) разделение путем осаждения с помощью умеренно полярных растворителей, выбираемых из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, диэтилового эфира, бутилового спирта, изобутилметилкетона и их смесей; или (iii) разделение химическим путем, включающим кислотный гидролиз для отделения нерастворимых в воде компонентов. 6. Способ по п.5, в котором после стадии разделения с помощью геля на основе полистирола следует стадия солюбилизации в основном нерастворимых в воде компонентов в умеренно полярном растворителе, выбираемом из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, диэтилового эфира, бутилового спирта, изобутилметилкетона и их смесей, с последующим отделением растворителя. 7. Способ по п.5 или 6, в котором умеренно полярным растворителем является этилацетат. 8. Способ по любому из пп.5-7, в котором водную фракцию высушивают в порошок, после чего осуществляют остальные стадии способа. 9. Композиция для отбеливания кожи, содержащая: a) экстракт Desmodium gangeticum, полученный способом по любому из пп.5-8; и b) косметически приемлемую основу. 10. Экстракт Desmodium gangeticum, применяемый в качестве агента, отбеливающего кожу, который содержит более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов. 11. Применение экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, для производства медикамента для отбеливания кожи. 12. Косметический способ отбеливания кожи, включающий стадию местного нанесения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов.
Евразийское
патентное
ведомство
023896
(13) B1
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2016.07.29
(21) Номер заявки 201201563
(22) Дата подачи заявки
2011.05.13
(51) Int. Cl.
A61K 8/97 (2006.01) A61Q19/02 (2006.01)
(54)
КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ОТБЕЛИВАНИЯ КОЖИ, СОДЕРЖАЩАЯ ЭКСТРАКТ DESMODIUM GANGETICUM
(31) 1559/MUM/2010
(32) 2010.05.18
(33) IN
(43) 2013.04.30
(86) PCT/EP2011/057790
(87) WO 2011/144536 2011.11.24
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
ЮНИЛЕВЕР Н.В. (NL)
(72) Изобретатель:
Бандиопадхуай Пунам, Бансал Виши, Гаджил Виджай Рамчандра, Шариф Резван, Шукла Рави Кант (IN)
(74) Представитель:
Саломатина И.С. (RU) (56) JP-A-7082133
KURIAN GINO A. ET AL.: "Antioxidant effects of ethyl acetate extract of Desmodium gangeticum root on myocardial ischemia reperfusion injury in rat hearts", CHINESE MEDICINE, BIOMED CENTRAL LTD, LO, vol. 5, no. 1, 22 January 2010 (2010-01-22), page 3, XP021069616, ISSN: 1749-8546 the whole document
JP-A-7157420
JP-A-7061918
GOVINDARAJAN R. ET AL.: "Antiinflammatory and antioxidant activities of Desmodium gangeticum fractions in carrageenan-induced inflamed rats", PHYTOTHERAPY RESEARCH, JOHN WILEY & SONS LTD. CHICHESTER, GB, vol. 21, no. 10, 1 October 2007
(2007-10-01), pages 975-979, XP009144012, ISSN:
0951-418X, DOI: 10.1002/PTR.2199 [retrieved on 2007-06-29] the whole document
(57) Изобретение относится к композиции для отбеливания кожи, включающей экстракт Desmodium gangeticum, содержащий более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов и косметически приемлемую основу, выбираемую из группы, состоящей из крема, лосьона, геля и эмульсии, способу получения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./ мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов и применеию предложенного экстракта Desmodium gangeticum для отбеливания кожи.
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области местно применяемых композиций для личной гигиены, содержащих выборочные фракции природных материалов, используемых для отбеливания кожи.
Уровень техники
Привлекательный вид и здоровое состояние кожи - один из наиболее желаемых потребителем результатов применения продуктов для личной гигиены. В тропических странах, у жителей которых обычно кожа темная, многие хотят иметь более светлую кожу. А те представители белой расы, которые живут не в жарких странах, стремятся обладать ровно загорелой кожей. Однако приобретаемый на солнце загар зачастую оказывается неравномерным: на коже образуются более темные пятна, называемые веснушками, а бывает и гиперпигментация отдельных участков поверхности тела. Чаще всего после загорания на солнце, заживления ран или лечения угревой сыпи на коже остаются пятна или иные изменения пигментации. В таких случаях люди стремятся купировать дефекты кожи при помощи косметических средств.
Таким образом, потребители композиций для личной гигиены ожидают от этих продуктов обеспечения мягкости, гладкости, чистоты и равномерного цвета кожи. Для удовлетворения этого спроса производители такого рода продуктов прибегают к различным подходам. Так, один из часто реализуемых подходов состоит в том, что в косметические продукты включают солнцезащитные (фотозащитные) компоненты, которые отражают излучение либо поглощают его. Такие вещества могут быть органическими или неорганическими химическими соединениями. Они по большей части обеспечивают лишь сохранение основного цвета кожи, предотвращая ее дальнейшее потемнение под действием излучения.
Другой подход к регуляции цвета, тона и внешнего вида кожи состоит в так называемом отбеливании: в композиции для личной гигиены добавляют химические вещества, влияющие на образование меланина в коже путем биохимических превращений в роговом слое кожи, в результате чего изменяется ее цвет и внешний вид. Этот подход позволяет осветлить кожу по сравнению с ее основным цветом. Хотя такой подход успешно использовался во многих косметических продуктах, продолжаются исследования с целью увеличить эффективность отбеливающих агентов.
Одним из недостатков большинства применявшихся до сих пор отбеливающих кожу агентов заключается в том, что они обычно представляют собой химические соединения, получаемые синтетическим путем. А потребители, как правило, негативно относятся к продуктам, содержащим синтетические химические вещества. Многие потребители все больше предпочитают, чтобы активные ингредиенты таких косметических продуктов происходили или были выделены из природных источников.
Для того, чтобы найти возможности справиться с перечисленными выше недостатками средств для ухода за кожей, авторы настоящего изобретения на протяжении ряда лет работали над получением активных начал из природных источников для различных аспектов личной гигиены. Ими было обнаружено, что определенные фракции травянистого растения Desmodium gangeticum (десмодиум гангский, или шалипарни, из семейства бобовых), которое богато полифенолами, включая флавоноиды, содержащиеся в этом материале в сравнительно высоких концентрациях, проявляют повышенную активность в отношении ингибирования тирозиназы, а этот биохимический механизм показателен для улучшенного отбеливания кожи.
В патенте Японии 7061918 (Tsuneo, 1995) описывается косметическое средство, содержащее по меньшей мере один растительный экстракт, выбираемый из группы экстрактов Vetiveria zizanoides, Hem-idesmus indicus, Cymbopogon nardus, Piper longum, Piper chaba, Herpestris monnies, Cardiospermum halica-cabum, Tinospora cordifolia, Desmodium gangeticum, Michelia champaka и Melaleuca leucadendron. Описываемые в этой патентной публикации преимущества связаны с антиоксидантными свойствами, позволяющими избежать растрескивания кожи и сохранить ее блеск и упругость.
В патенте Японии 7082133 (Tsuneo, 1995) описываются косметические средства, обладающие хорошим отбеливающим действием, включая косметическое средство, содержащее по меньшей мере один экстракт, выбираемый из группы, состоящей из экстрактов Cymbopogon nardus, Cardiospermum halica-cabum, Desmodium gangeticum, Muraya koenigii и Smilax zeylanica.
В этих двух упомянутых выше патентных публикациях фигурируют в качестве примера экстракты Desmodium gangeticum, полученные с такими растворителями, как вода, этиловый спирт и смесь вода/этиловый спирт (50%). Авторы настоящего изобретения тоже получили эти экстракты и обнаружили, что они не содержат полифенолы и флавоноиды в приведенных в формуле изобретения количествах и поэтому не могут обеспечить желаемый эффект отбеливания кожи.
Таким образом, задачей настоящего изобретения является создание композиции для личной гигиены, включающей фракции, полученные из природных источников, которые обеспечивают усиленное отбеливание кожи по сравнению с известными фракциями из природных источников.
Раскрытие изобретения
Первым объектом настоящего изобретения предлагается композиция для отбеливания кожи, содержащая
(a) экстракт Desmodium gangeticum, в котором содержится более 50% (масса/масса) полифенолов и более 40% (масса/масса) флавоноидов; и
(b) косметически приемлемая основа.
(a)
Вторым объектом настоящего изобретения предлагается способ получения экстракта Desmodium gangeticum, в котором содержится более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавонои-дов, причем этот способ включает стадии:
(a) нагревания Desmodium gangeticum в воде при температуре в интервале от 30 до 100°С.
(b) отделения нерастворимого материала для получения водной фракции;
(c) фракционирование водной фракции для выделения в основном нерастворимых в воде компонентов любым из следующих методов:
(i) разделение с помощью геля на основе полистирола, например геля MCI;
(ii) разделение путем осаждения с помощью умеренно полярных растворителей, выбираемых из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, ди-этилового эфира, бутанола, изобутилметилкетона и их смесей, или
(iii) разделение путем химической реакции, включающей кислотный гидролиз, для отделения нерастворимых в воде компонентов.
Третьим объектом настоящего изобретения предлагается композиция для отбеливания кожи, содержащая экстракт Desmodium gangeticum, в котором присутствует более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, полученный способом, предлагаемым вторым объектом изобретения, а также косметически приемлемую основу.
Четвертым объектом настоящего изобретения предлагается экстракт Desmodium gangeticum, в котором содержится более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, для применения в качестве агента, отбеливающего кожу.
Пятым объектом настоящего изобретения предлагается экстракт Desmodium gangeticum, содержащий более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, для производства медикамента для отбеливания кожи.
Шестым объектом настоящего изобретения предлагается косметический способ отбеливания кожи, включающий стадию местного нанесения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов.
Осуществление изобретения
Эти и другие объекты, признаки и преимущества настоящего изобретения должны быть ясны специалистам в данной области техники из нижеследующего описания и прилагаемой формулы изобретения. Во избежание разночтений любой признак одного объекта настоящего изобретения может быть использован в любом другом его объекте Слово "содержащий" означает здесь "включающий", а не "состоящий из". Иными словами, перечисленные в настоящем документе стадии или возможности не являются исчерпывающими. Следует отметить, что приводимые в нижеследующем описании примеры предназначены для разъяснения данного изобретения и не ограничивают его объем. Все приводимые в настоящем документе значения процентного содержания представляют собой выраженное в процентах отношение масса/масса, если не указано иного. За исключением рабочих и сравнительных примеров и тех случаев, когда оговаривается особо, все численные значения в настоящем описании, указывающие количество вещества или условия реакции, и физические свойства веществ следует понимать как приблизительные (сопровождаемые словом "около"). Численные интервалы, указываемые выражением "от х до у" следует понимать как включающие х и у. Когда в отношении какого-либо конкретного признака дается множество предпочтительных интервалов, указываемых выражением "от х до у", следует считать, что рассматриваются все интервалы, содержащие различные конечные точки.
Выражение "композиция для личной гигиены" здесь включает композиции для местного применения на коже млекопитающих, в частности человека. Такие композиции можно, как правило, классифицировать как оставляемые на коже или же смываемые; они включают любой продукт, наносимый на тело человека для улучшения внешнего вида, очищения, регуляции запаха или из эстетических соображений. Композиция по данному изобретению может быть в форме жидкости, лосьона, крема, пены, скраба, геля, кускового мыла или тоника, или же она наносится с помощью какого-либо приспособления или же посредством маски на лице, тампона или повязки/пластыря. Примеры композиций для личной гигиены, не ограничивающие объем данного изобретения, включают оставляемые (не смываемые) на коже лосьоны и кремы, шампуни, кондиционеры, гели для душа, кусковое туалетное мыло, антиперспиранты, дезодоранты, средства для эпиляции, губную помаду, основу для макияжа, тушь для ресниц, средства для искусственного загара и солнцезащитные лосьоны. Термин "кожа" в настоящем документе включает кожу лица и тела (например, шеи, груди, спины, рук, подмышечной области, кистей рук, ног, ягодиц и волосистой части головы).
Настоящим изобретением предлагается композиция для отбеливания кожи, включающая экстракт Desmodium gangeticum. содержащий более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флаво-ноидов, и косметически приемлемую основу.
Растение Desmodium gangeticum (L.) D С, называемое обычно шалпарни (на санскрите) или сариван (на хинди), представляет собой мелкий кустарник с очень коротким деревянистым стеблем; оно встречается в Индии в основном в тропических районах. Это растение хорошо известно как компонент лечебных средств, издавна применяемых в традиционной индийской медицине.
Сообщалось, что Desmodium gangeticum содержит птерокарпан гангетин, который обладает противовоспалительным и обезболивающим действием. Это растение содержит также алкалоиды, птерокарпа-ны, флавоновые и изофлавоноидные гликозиды.
По настоящему изобретению экстракт из растительного материала Desmodium gangeticum предпочтительно содержит более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов. Обычные полифенолы и флавоноиды, которые предпочтительно присутствуют в растительном материале для использования в композиции по данному изобретению, включают соединения, структура которых приводится ниже.
(1) триптамин
(2) хлорогеновая кислота
Экстракт по данному изобретению характеризуется растворимостью в воде предпочтительно от 1 до 80%, более предпочтительно от 1 до 60%, еще более предпочтительно от 1 до 40% (мас./мас.) при 25°С. Иными словами, экстракт Desmodium gangeticum является гидрофобным и соответственно обладает низкой растворимостью в воде. Было обнаружено, что та его фракция, которая обладает наименьшей растворимостью в воде, содержит соединения типа полифенолов и флавоноидов в количествах, указанных в формуле данного изобретения, обеспечивает лучшее отбеливание кожи, на что указывают более высокие значения величин, характеризующих ингибирование тирозиназы.
Экстракт по данному изобретению включается в композицию по данному изобретению в количестве предпочтительно от 0,001 до 20%, более предпочтительно от 0,01 до 10%, еще более предпочтительно от 0,1 до 5% (мас./мас.).
Композиция для личной гигиены по данному изобретению содержит косметически приемлемую основу. Косметически приемлемой основой является предпочтительно крем, лосьон, гель или эмульсия.
Композиции для личной гигиены можно получать, используя различные косметически приемлемые эмульгирующие и не эмульгирующие системы и основы. Очень хорошей основой является крем. Особенно предпочтительны быстро впитывающиеся кремы. Быстро впитывающиеся кремовые основы обычно содержат от 5 до 25% (мас./мас.) жирных кислот и от 0,1 до 10% (мас./мас.) мыла. Быстро впитывающаяся кремовая основа обеспечивает матирование кожи, что весьма ценно с точки зрения потребителя. В быстро впитывающихся кремовых основах особенно предпочтительны жирные кислоты С12-С20, еще более предпочтительны жирные кислоты C14-C18. Наиболее предпочтительной жирной кислотой является стеариновая кислота. Жирная кислота присутствует в композиции по данному изобретению в количестве предпочтительно от 5 до 20% (мас./мас.). Мыла в быстро впитывающейся кремовой основе включают жирнокислотные соли щелочных металлов, например калия или натрия; наиболее предпочтителен из них стеарат калия. Мыло в быстро впитывающейся кремовой основе, как правило, присутствует в количестве предпочтительно от 0,1 до 10%, более предпочтительно от 0,1 до 3% (мас./мас.). Обычно быстро впитывающуюся кремовую основу косметических композиций получают путем смешивания цельного жирового материала с гидроксидом калия, взятых в желаемых количествах. При этом мыло, как правило, образуется прямо в реакционной смеси в процессе смешивания. Композиция для личной гигиены по данному изобретению на основе быстро впитывающегося крема предпочтительно содержит воду в количестве от 60 до 85%, более предпочтительно от 65 до 80% (мас./мас.).
Композиция по данному изобретению может дополнительно содержать еще один отбеливающий кожу агент, отличный от экстракта по данному изобретению. Этот дополнительный отбеливающий кожу агент предпочтительно выбирают из соединений, объединяемых термином "витамин В3", или их производных: никотиновой кислоты (называемой также ниацином), никотинамида (ниацинамида) и др., а также иных известных в данной области техники отбеливающих агентов, например экстракта алоэ, молочнокислого аммония, арбутина, азелаиновой кислоты, койевой кислоты, бутилгидроксианизола, бутил-гидрокситолуола, эфиров лимонной кислоты, производных 3-дифенилпропана, 2,5-дигидроксибензойной
кислоты и ее производных, эллаговой кислоты, экстракта фенхеля, глюкопиранозил-1-аскорбата, глюко-новой кислоты, гликолевой кислоты, экстракта зеленого чая, гидрохинона, 4-гидроксианизола и его производных, производных 4-гидроксибензойной кислоты, гидроксикаприловой кислоты, экстракта лимона, линолевой кислоты, аскорбилфосфата магния, экстракта шелковицы, производных 2,4-резорцинола, производных 3,5-резорцинола, салициловой кислоты, витаминов (витамина В6, витамина В12, витамина С, витамина А), дикарбоновых кислот, производных резорцинола, гидроксикарбоновых кислот (например, молочной кислоты и ее солей, например лактата натрия) и их смесей. Наиболее предпочтительными отбеливающими кожу агентами в контексте настоящего изобретения являются соединения группы витамина B3 или их производные, например никотиновая кислота (называемая также ниацином) и никотинамид (ниацинамид); наиболее предпочтителен никотинамид. Если используется никотинамид, то он присутствует в количестве предпочтительно от 0,1 до 10%, более предпочтительно от 0,2 до 5% (мас./мас.) от общей массы композиции.
Композиция для личной гигиены по данному изобретению предпочтительно содержит дополнительно агенты, поглощающие ультрафиолетовое излучение. Эти агенты могут быть органическими либо неорганическими соединениями.
Для применения в сочетании с основными ингредиентами композиции по данному изобретению подходят разнообразные органические фотозащитные агенты, поглощающие ультрафиолетовое излучение. Пригодные по данному изобретению фотозащитные агенты, эффективно поглощающие ультрафиолетовое излучение А и В, включают 2-гидрокси-4-метоксибензофенон, октилдиметил-пара-аминобензойную кислоту, дигаллоилтриолеат, 2,2-дигидрокси-4-метоксибензофенон, этил-4-(бис(гидроксипропил))аминобензоат, 2-этилгексил-2-циано-3,3-дифенилакрилат, 2-этилгексилсалицилат, глицерил-пара-аминобензоат, 3,3,5-триметилциклогексилсалицилат, метилантранилат, пара-диметил-аминобензойная кислота или аминобензоат, 2-этилгексил-пара-диметиламинобензоат, 2-фенилбензи-мидазол-5-сульфоновая кислота, 2-(пара-диметиламинофенил)бензоксазол-5-сульфокислота кислота, 2-этилгексил-пара-метоксициннамат, бутилметоксидибензоилметан, 2-гидрокси-4-метоксибензофенон, оксилдиметил-пара-аминобензойная кислота и их смеси. Наиболее пригодными по данному изобретению фотозащитными агентами, поглощающими ультрафиолетовое излучение, являются 2-этилгексил-пара-метоксициннамат и бутилметоксидибензоилметан.
В композициях по данному изобретению используется эффективное и безопасное количество фотозащитного агента, поглощающего ультрафиолетовое излучение. Композиция по данному изобретению содержит предпочтительно от около 0,1% до около 10%, более предпочтительно от около 0,1% до около 5% (мас./мас.) такого фотозащитного агента. По данному изобретению предпочтительно также использовать эффективные неорганические фотозащитные агенты, отражающие ультрафиолетовое излучение. Они включают, например, оксид цинка, оксид железа, коллоидную двуокись кремния, диоксид титана.
По данному изобретению особенно подходит высокодисперсный диоксид титана в любой из двух его форм, а именно диспергируемого в воде диоксида титана и диспергируемого в масле диоксида титана. Диспергируемый в воде диоксид титана представляет собой ультрамелкие частицы, которые могут быть покрыты (или не покрыты) материалом, придающим частицам свойство гидрофильной поверхности. Примеры таких материалов включают оксид алюминия и силикат алюминия.
Диспергируемый в масле диоксид титана представляет собой ультрамелкие частицы, которые обладают свойством гидрофобной поверхности и которые для этой цели могут быть покрыты металлсодержащим мылом (например, стеаратом алюминия, лауратом алюминия или стеаратом цинка) или кремний-органическими соединениями.
Термин "ультрамелкий диоксидтитана" означает, что частицы диоксида титана имеют размеры (диаметр) менее 100 нм, предпочтительно 70 нм или менее, более предпочтительно от 10 до 40 нм, наиболее предпочтительно от 15 до 25 нм.
При местном применении (нанесении на кожу) смеси, содержащей как диспергируемый в воде ультрамелкий диоксид титана, так и диспергируемый в масле ультрамелкий диоксид титана, достигается синергически усиленная защита кожи от вредного воздействия ультрафиолетового излучения в длинноволновом (А) и средневолновом (В) диапазонах.
В контексте данного изобретения предпочтительным неорганическим фотозащитным агентом, отражающим ультрафиолетовое излучение, является ультрамелкий диоксид титана. Суммарное количество фотозащитных агентов, отражающих ультрафиолетовое излучение, включенных в композицию по данному изобретению, составляет предпочтительно от 0,1 до 5% (мас./мас.).
Композиция по данному изобретению может также содержать другие разбавители. Эти разбавители действуют как диспергирующие агенты или носители для других материалов, присутствующих в композиции, для ускорения их распределения при нанесении композиции на кожу.
Разбавители (помимо воды) могут включать жидкие или твердые смягчающие вещества, растворители, влагоудерживающие агенты, загустители и порошки. Примерами каждой из этих категорий средств, которые можно использовать по отдельности или в виде смесей одного или более таких агентов, служат следующие вещества:
смягчающие агенты - стеариловый спирт, глицерилмонорицинолеат, норковое масло, цетиловый
спирт, изопропилизостеарат, стеариновая кислота, изобутилпальмитат, изоцетилстеарат, олеиловый спирт, изопропиллаурат, гексиллаурат, децилолеат, октадекан-2-ол, изоцетиловый спирт, эйкозаниловый спирт, бегениловый спирт, цетилпальмитат, силиконовые масла (например, диметилполисилоксан), ди-н-бутилсебакат, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, изопропилстеарат, бутилстеарат, полиэтиленг-ликоль, триэтиленгликоль, ланолин, масло какао, кукурузное масло, хлопковое масло, оливковое масло, пальмоядровое масло, рапсовое масло, сафлоровое масло, энотеровое масло, соевое масло, подсолнечное масло, масло авокадо, кунжутное масло, кокосовое масло, арахисовое масло, касторовое масло, ацетили-рованные ланолиновые спирты, вазелиновое масло, минеральное масло, бутилмиристат, изостеариновая кислота, пальмитиновая кислота, изопропиллинолеат, лауриллактат, миристиллактат, децилолеат и ми-ристилмиристат;
растворители - этиловый спирт, изопропанол, ацетон, моноэтиловый эфир этиленгликоля, монобутиловый эфир диэтиленгликоля и моноэтиловый эфир диэтиленгликоля; и
порошки - мел, тальк, фуллерова земля, каолин, крахмал, камеди, коллоидный диоксид кремния, полиакрилат натрия, смектиты тетраалкил- и/или триалкиламмония, химически модифицированный силикат магния-алюминия, органически модифицированная монтмориллонитовая глина, гидратированный силикат алюминия, коллоидный диоксид кремния, карбоксивиниловый полимер, карбокисметилцеллю-лоза натрия и моностеарат этиленгликоля.
Косметически приемлемая основа составляет обычно от 10 до 99,9%, предпочтительно от 50 до 99% (мас./мас.) композиции и может - в отсутствие других вспомогательных косметических агентов - обеспечивать равновесность композиции. Композиция по данному изобретению может содержать воду.
Композиция по данному изобретению может содержать стандартную дезодорирующую основу в качестве косметически приемлемого носителя. Под дезодорирующим агентом подразумевается продукт в карандашной, шариковой или спреевой форме, который используется как индивидуальное средство для маскирования дурного запаха тела, например путем нанесения на кожу в подмышечной области, содержащее или не содержащее антиперспирантов.
Дезодорирующая композиция может быть, как правило, в форме плотного твердого материала, пластичного твердого материала, геля, крема и жидкости; ее наносят на кожу с помощью аппликаторов, соответствующих физическим свойствам данной композиции.
Дезодорирующие композиции, которые наносят на кожу шариковым способом, обычно содержат жидкий носитель. Такой жидкий носитель может быть гидрофобным или содержать смесь как гидрофильных, так и гидрофобных жидкостей. Они могут быть в форме эмульсии или микроэмульсии. Жидкий носитель или смесь носителей зачастую составляет от 30 до 95% (мас./мас.), а во многих случаях от 40 до 80% (мас./мас.) композиции.
Гидрофобные жидкие носители обычно содержат одно или более веществ, выбираемых из химических соединений следующих классов: силоксаны, углеводороды, разветвленные алифатические спирты, простые и сложные эфиры, характеризующиеся точкой плавления не выше 25°С и точкой кипения по меньшей мере 100°С.
Гидрофильные жидкие носители, которые можно использовать в композициях по данному изобретению, обычно содержат воду и/или одноатомные или многоатомные спирты либо смешивающиеся с водой гомологичные соединения. Одноатомные спирты часто короткоцепочечные, т.е. содержат до шести атомов углерода; на практике это чаще всего этиловый спирт или иногда изопропанол. Многоатомные спирты обычно включают этиленгликоль или пропиленгликоль, или может использоваться гомологичное соединение, например диэтиленгликоль.
Композиции по данному изобретению, которые сохраняют жидкую форму, можно наносить на кожу с помощью таких обычных для этой цели способов, как шариковый или пульверизаторный/аэрозоль-ный. Такие композиции можно сделать более густьми, например используя один или более загущающих агентов из числа описанных здесь.
Плотные твердые композиции, которые обычно получают с использованием гелеобразующих или структурирующих агентов, можно наносить на кожу с помощью палочки-аппликатора; пластичные твердые композиции, гели и кремы можно наносить на кожу с помощью аппликатора с диспенсерной головкой, имеющей по меньшей мере одно отверстие, через которое выдавливается под небольшим давлением мягкий твердый материал, гель или крем.
В подходящих для этой цели загустителях и гелеобразующих агентах используются растворимые или диспергируемые в воде вещества с высокой вязкостью, включая различные эмульгирующие агенты, и/или загущенные или желированные с использованием растворимых или диспергируемых в воде полимеров, включая полиакрилаты, и растворимых или диспергируемых в воде природных полимеров, как, например, водорастворимых полисахаридов или производных крахмала (альгинатов, карагеннанов, ага-розы), и диспергируемых в воде полимеров, включая производные целлюлозы.
Концентрация таких полимеров в не смешивающихся с водой жидкостях часто выбирают в пределах от 1 до 20% (мас./мас.) в зависимости от требующейся степени загущения или структурирования и эффективности выбранного полимера в жидкости/смеси.
Один из классов структурирующих агентов, которые желательны благодаря их давно доказанной
способности создавать плотные твердые материалы и, как недавно выяснилось, пластичные твердые материалы, включает воск. В настоящем документе термин "воск" включает не только вещества природного происхождения, которые находятся в твердом состоянии, на ощупь "восковые", нерастворимы в воде при 30-40°С и плавятся при более высокой температуре (как правило, в интервале от 50 до 95°С (например, пчелиный, канделилльский и карнаубский воск), но также вещества, обладающие сходными свойствами. Эти последние включают углеводородные воски, например парафин, минеральный воск и микрокристаллический воск; синтетические воски, например полиэтилен с молекулярной массой от 2000 до 10000 Да; восковые производные или восковые компоненты природных восков.
В пределах каждого класса гелеобразующих/структурирующих агентов можно использовать смеси веществ.
Когда дезодорирующая композиция по данному изобретению содержит аэрозольную композицию, в ее состав помимо описанной выше основной композиции входит пропеллент, обычно в весовом соотношении от 95:5 до 40:60, а во многих составах весовое соотношение берется от 90:10 до 50:50.
Пропеллент, используемый по данному изобретению, обычно представляет собой вещество с низкой точкой кипения - как правило, ниже -5°С; это может быть, например, такой алкан, как пропан, бутан или изобутан, который может содержать некоторое количество пентана или изопентана, или фторуглево-дород или фторуглерод со сходным содержанием углерода. В ходе наполнения емкости для аэрозоля газ-пропеллент сжижают путем создания повышенного давления.
Композиции по данному изобретению при необходимости могут содержать и различные другие компоненты. Во втором издании руководства по косметическим ингредиентам Ассоциации по парфюмерно-косметическим товарам и душистым веществам (1992), которое целиком включается в настоящий документ путем отсылки, описывается большое разнообразие (не ограничивая объема изобретения) косметических и фармацевтических ингредиентов, обычно используемых в производстве средств для ухода за кожей, которые подходят для применения в композициях по данному изобретению. Их примеры включают: антиоксиданты, связующие агенты, биологические добавки, забуферивающие агенты, красители, загустители, полимеры, вяжущие агенты, отдушки, увлажнители, опалесцирующие вещества, кондиционеры, отшелушивающие агенты, регуляторы рН, консерванты, природные экстракты, эфирные масла, агенты, вызывающие определенные кожные ощущения (охлаждающие, освежающие и проч.), мягчительные агенты, заживляющие агенты.
Композиция по данному изобретению может быть составлена в любой известной форме, более предпочтительно - в форме крема или лосьона.
Способ
Настоящим изобретение также предлагается способ получения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (масса/масса) полифенолов и более 40% (масса/масса) флавоноидов. Этот способ включает стадии (а) нагревания Desmodium gangeticum в воде при температуре в интервале от 30°С до 100°С, (b) отделения нерастворимого материала для получения водной фракции, (с) разделения в основном нерастворимых в воде составляющих водной фракции любым из следующих методов для получения желаемого экстракта:
(i) разделение с помощью геля на основе полистирола, например геля MCI,
(ii) разделение путем осаждения с помощью умеренно полярных растворителей, выбираемых из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, ди-этилового эфира, бутанола, изобутилметилкетона и их смесей, или
(iii) разделение химическим путем, включающим кислотный гидролиз, для отделения нерастворимых в воде компонентов.
В предпочтительном аспекте данного изобретения после стадии разделения с помощью геля на основе полистирола, например геля MCI, осуществляют стадию солюбилизации указанных в основном нерастворимых компонентов в умеренно полярном растворителе, выбираемом из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, диэтилового эфира, бута-нола, изобутилметилкетона и их смесей, с последующим отделением растворителя.
На вышеуказанной стадии наиболее предпочтительным умеренно полярным растворителем является этилацетат.
В другом предпочтительном варианте данного способа предлагается высушивание водорастворимой фракции для получения порошка, после чего осуществляются остальные стадии этого способа.
Таким образом, предпочтительный способ по настоящему изобретению включает получение экстракта, который относительно нерастворим в воде, например, этот экстракт содержит относительно гидрофобные вещества.
В наиболее предпочтительном способе получения предпочтительного экстракта для включения в состав композиции по данному изобретению имеются следующие стадии.
(i) Экстракция. Desmodium gangeticum вначале нагревают в воде при температуре в интервале от 30 до 100°С, более предпочтительно - в интервале от 50 до 95°С. Для экстракции берут различные органы растения, включая листья, корень или стебель, предпочтительно надземную часть или корень, более предпочтительно надземную часть. Экстракцию проводят в течение предпочтительно от 2 до 8 ч, более
предпочтительно от 4 до 6 ч.
(ii) Отделение нерастворимых компонентов. Всякий нерастворимый материал, образовавшийся в результате экстракции, затем удаляют из смеси. Раствор, содержащий водный экстракт, является водной фракцией. Перед осуществлением следующих стадий эту фракцию предпочтительно высушивают в порошок, удаляя воду предпочтительно путем испарения.
(iii) Фракционирование. Водную фракцию затем подвергают дальнейшему фракционированию для получения фракции, содержащей относительно не растворимые в воде компоненты, например вещества, характеризующиеся растворимостью от 5 до 50% (мас./мас.), более предпочтительно от 10 до 40% (мас./мас.) при 25°С. Способы, которые можно применить для получения относительно не растворимой в воде (относительно гидрофобной) фракции, кратко описаны ниже.
Разделение с помощью геля MCI.
Разделение осуществляют путем пропускания смеси сквозь полимерную смолу на основе полистирола (гель MCI), например производства компании Supelco. Типичная процедура состоит в следующем. Раствор водного экстракта наносят на стеклянную колонку, заполненную гелем MCI (предварительно промытым этиловым или метиловым спиртом и набухавшим в воде в течение 2-4 ч). Гель MCI представляет собой гидрофобный гель, способный адсорбировать и удерживать гидрофобные фракции, которые затем элюируют растворителями с различной полярностью. Разделение проводят, как правило, при температуре около комнатной, например, в интервале от 20 до 30°С. Мобильной фазой служит предпочтительно метиловый спирт. Предпочтительно, чтобы фракцию, адсорбированную гелем MCI, которую отделили с помощью геля MCI, как описано выше, затем фракционировали с помощью умеренно полярных растворителей. Предпочтительными умеренно полярными растворителями являются этилацетат, ацетон, хлороформ, дихлорметан, гексаны, толуол, ксилол, диэтиловый эфир, бутанол, изобутилметилкетон и их смеси. Наиболее предпочтительным умеренно полярным растворителем является этилацетат.
Разделение с помощью умеренно полярных растворителей.
Получить желаемую фракцию можно также способом, включающим процедуру осаждения, в которую входит стадия смешивания порошковой формы водной фракции с растворителем (с полярностью от сильной до умеренной) при температуре около комнатной, а именно при 20-30°С. Соотношение водорастворимой фракции и растворителя составляет предпочтительно от 1:1 до 1:5 (мас./мас.). Предпочтительные полярные и умеренно полярные растворители включают метиловый спирт, этиловый спирт, пропа-нол, бутанол и ацетон. Получаемую растворимую фракцию можно подвергнуть дальнейшему фракционированию с помощью умеренно полярных растворителей, как, например, этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, диэтилового эфира, бутанола и изобутилметилкетона. Наиболее предпочтительным умеренно полярным растворителем является этилацетат. Желаемую фракцию получают путем выпаривания растворимой фазы (растворителя).
Разделение путем кислотного гидролиза.
Еще один предпочтительный способ получения желаемой фракции включает стадию кислотного гидролиза порошковой формы водной фракции. Водный раствор экстракта закисляют с помощью разбавленной неорганической кислоты (например, соляной или серной), чтобы рН был от 2 до 5. Предпочтителен рН в интервале от 3 до 4. Кислотный гидролиз проводят предпочтительно при комнатной температуре, а именно при 20-30°С, в течение 1-5 ч. Осадок, получаемый после кислотного гидролиза, промывают водой. Этот осадок предпочтительно высушивают в вакууме для получения желаемой фракции.
В еще одном варианте настоящего изобретения предлагается применение экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, в качестве агента, отбеливающего кожу. Это применение предпочтительно не является лечебным.
Далее настоящее изобретение раскрывается с помощью нижеследующих примеров, не ограничивающих его объем.
Примеры
Пример 1. Водный экстракт Desmodium gangeticum.
Истолченную надземную часть растения Desmodium gangeticum (от компании Arya Vastu Bhandar, Дехрадун, шт. Утаранчал, Индия) в количестве 50 г помещали в круглодонную колбу вместе с 500 мл дистиллированной воды и нагревали с обратным холодильником в течение 5-8 ч. Затем содержимое колбы фильтровали через муслин. Фильтрат выпаривали при 45°С при пониженном давлении и в результате получали порошок.
Пример 2. Полученная с помощью геля MCI растворимая в метиловом спирте фракция Desmodium sangeticum.
Водный экстракт, полученный, как описано в примере 1, в количестве около 10 г растворяли в примерно 200 мл дистиллированной воды, так что образовывался прозрачный раствор. Этот раствор наносили на колонку, заполненную гелем MCI (~50 г). В данном случае использовали гель MCI, представляющий собой полистиролдивинилбензоловую смолу, приобретенную в компании Supelco (North Harrison Road, Беллефонте, шт. Пенсильвания, 168230048, США). Нанесенный на колонку материал элюировали водой (500 мл) и метиловым спиртом (500 мл). Обе фракции высушивали при 45°С при пониженном давлении.
Пример 3. Растворимая в этиловом спирте фракция водного экстракта Desmodium ganseticum.
Водный экстракт, полученный, как описано в примере 1, в количестве около 10 г, помещали в круг-лодонную колбу вместе с 100 мл этилового спирта и нагревали с обратным холодильником в течение примерно 1 ч. Затем содержимое колбы фильтровали через ватмановскую фильтровальную бумагу. Фильтрат выпаривали с помощью ротационного испарителя при 45°С при пониженном давлении и в результате получали в форме порошка растворимую в этиловом спирте фракцию водного экстракта Des-modium gangeticum.
Пример 4. Растворимая в этилацетате субфракция растворимой в метиловом спирте фракции Des-modium ganseticum.
Растворимую в метиловом спирте фракцию, полученную с помощью геля MCI, как описано в примере 2, в количестве 1 г помещали в круглодонную колбу вместе с 50 мл этилацетата и нагревали с обратным холодильником в течение примерно 1 ч. Затем содержимое колбы фильтровали и выпаривали при 45°С при пониженном давлении; в результате получали в форме порошка растворимую в этилацета-те субфракцию растворимой в метиловом спирте фракции.
Пример 5. Растворимая в этилацетате субфракция растворимой в ацетоне фракции Desmodium gan-geticum.
Водный экстракт, полученный, как описано в примере 1, в количестве около 10 г, помещали в круг-лодонную колбу вместе с 100 мл ацетона и нагревали с обратным холодильником в течение примерно 1 часа. Затем содержимое колбы фильтровали и выпаривали при 45°С при пониженном давлении; в результате получали в форме порошка так называемую ацетоновую фракцию водного экстракта. Один грамм этой фракции помещали в 100-милилитровую круглодонную колбу с 50 мл этилацетата и нагревали с обратным холодильником. Растворившийся в этилацетате материал фильтровали и выпаривали при 45°С при пониженном давлении; в результате получали в форме порошка растворимую в этилацетате фракцию ацетоновой фракции водного экстракта.
Пример 6. Полученная с помощью геля MCI растворимая в этилацетате фракция Desmodium ganget-
icum.
Водный экстракт, полученный, как описано в примере 1, в количестве около 10 г растворяли в примерно 200 мл дистиллированной воды, так что образовывался прозрачный раствор. Этот раствор наносили на колонку, заполненную гелем MCI (50 г). В данном случае использовали гель MCI, представляющий собой полистиролдивинилбензоловую смолу, приобретенную в компании Supelco (North Harrison Road, Беллефонте, шт. Пенсильвания, 168230048, США). Нанесенный на колонку материал элюировали сначала водой (~500 мл) и затем метиловым спиртом (500 мл). Метаноловую фракцию (~1 г, высушенный порошок) помещали в круглодонную колбу с этилацетатом (~100 мл) и перемешивали в течение ~1-2 ч при 45-50°С, после чего фильтровали и выпаривали при 45°С при пониженном давлении; в результате получали порошок, названный растворимой в этилацетате фракцией, полученной с помощь геля MCI.
Растворимость экстрактов, полученных в примерах 1-6.
Растворимость различных образцов воде при 25°С определяли следующим образом. Желаемый образец в количестве 10 г помещали в 100-миллилитровую коническую колбу и прибавляли 50 мл дистиллированной воды. Смесь перемешивали на мешалке в течение 15 мин при 25°С, затем фильтровали. Нерастворимый материал, оставшийся на фильтровальной бумаге, высушивали и определяли его процентную долю. Фильтрат высушивали и полученный порошок взвешивали. Вес растворившегося материала использовали для подсчета растворимости (в процентах) в воде при 25°С.
Суммарное содержание полифенолов и флавоноидов в экстрактах примеров 1-6.
Содержание полифенолов и флавоноидов в различных образцах определяли с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (флавоноиды) и колориметрического метода (суммарные полифенолы).
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ).
Хроматографическая система для высокоэффективной жидкостной хроматографии производства компании Shimadzu, снабженная насосом LC-10A и детектором с фотодиодной матрицей SPD-V 10Avp.
Колонка: Phenomenex C18, 250 мм, 5 мкм. Градиент: двойной. Растворитель А: 0,3%-ный водный раствор муравьиной кислоты (подвижная фаза А).
Растворитель В: ацетонитрил (подвижная фаза В). Скорость потока: 0,6 мл/мин.
Время (мин)
(%)В
Конец
Колориметрия.
Использовали реактив Фолина-Чокалтеу и для калибровки галлиевую кислоту.
Реактив Фолина-Чокалтеу: имеющийся в продаже. Для анализа разводили 20 мл готового раствора
до 200 мл.
Приготовление исходного раствора галлиевой кислоты: растворяли 0,110 г моногидрата галлиевой кислоты в воде в 100-миллилитровой мерной колбе с одной меткой.
Приготовление стандартных растворов галлиевой кислоты (А-Е): брали по 1-5 мл исходного раствора, помещали каждое взятое количество в отдельную колбу и разбавляли водой до объема 100 мл. Полученные растворы использовали для построения калибровочного графика.
Приготовление раствора карбоната натрия: брали около 37,50 г безводного карбоната натрия, помещали в 500-миллилитровую мерную колбу с одной меткой и прибавляли теплую воду до половины объема колбы. Взбалтывали, чтобы соль растворилась, охлаждали до комнатной температуры, доливали воду до метки и хорошо перемешивали.
Приготовление образцов: каждый образец (10 мг) растворяли в 10-миллилитровой мерной колбе с одной меткой.
Данные о содержании полифенолов и флавоноидов в различных образцах представлены в табл. 1. Затем оценивали эффективность отбеливания кожи экстрактами из примеров 1-6, используя метод определения ингибирования грибной тирозиназы, описанный ниже. Определение грибной тирозиназы.
Этот анализ включал измерение О-дифенолазной активности грибной тирозиназы с L-диоксифенилаланином в качестве субстрата. Определение проводили спектрофотометрически, измеряя скорость образования дофахрома при 450 нм (молярный коэффициент поглощения 3700 М-1см-1). Инги-бирование оценивали путем определения образования дофахрома в присутствии различных экстрактов растительного материала.
Готовили следующие базовые растворы: 0,1М фосфатный буферный раствор (KH2PO4, рН 6,5); раствор L-диоксифенилаланина (3,5 мМ) в фосфатном буферном растворе; препарат фермента грибной тирозиназы 1 мг/мл (100 кЕ) в фосфатном буферном растворе.
В лунки 96-луночного планшета с плоским дном помещали аликвоты (около 6 мкл) испытываемого экстракта в буферном растворе KH2PO4 (сколько нужно до 200 мкл) и затем 8 мкл препарата грибной тирозиназы. Планшет оставляли при комнатной температуре в темноте на 15 мин для инкубации. Затем в лунки добавляли L-диоксифенилаланин (57 мкл, 10 мМ) и наблюдали образование дофахрома, измеряя поглощение при 450 нм (А450) на спектрофотометре TECAN. Степень ингибирования (в процентах) рассчитывали следующим образом (контроль: без ингибитора):
% ингибирования = [(ЛА450 контроль - ЛА450 опыт)/ЛА450 контроль] х 100
Данные по ингибированию грибной тирозиназы различными экстрактами представлены в табл. 1. Экстракты, указанные в этой таблице, брали в концентрации ~900 частей на миллион.
Данные, приведенные в табл. 1, свидетельствуют, что экстракты по данному изобретению (примеры 2-6) обеспечивают существенно большее ингибирование тирозиназы по сравнению с экстрактом не по данному изобретению (пример 1). Эти данные также показывают, что экстракты по данному изобретению (примеры 2-6), дающие большее ингибирование тирозиназы, содержат более 50% полифенолов и более 40% флавоноидов, тогда как водный экстракт (пример 1) содержит значительно меньше полифено
лов и флавоноидов.
Примеры 7 и 8. Сравнение с положительным контролем.
Определяли ингибирование человеческой тирозиназы экстрактом по примеру 6 в концентрации 300 частей на миллион (пример 7) и оказалось, что его эффективность сравнима с таковой койевой кислоты в концентрации ~ 426 частей на миллион (Ю5о~3мМ) (пример 8). Известно, что койевая кислота является одним из лучших отбеливающих кожу агентов. Данные об ингибировании человеческой тирозиназы приведены в табл. 2.
Первичные меланоциты человека высевали на 96-луночный планшет в количестве 2х104 клеток на лунку и культивировали без всякого вмешательства в течение 24 ч в СО2(5%)-инкубаторе при 37°С. Через 24 ч после посева культуры в двух планшетах одинаково обрабатывали либо активным агентом в разных концентрациях (от 0,01 до 20 частей на миллион), либо растворителем (плацебо) и оставляли на 72 часа. Через 72 ч инкубации в одном планшете определяли количество жизнеспособных клеток с помощью красителя нейтрального красного. В другом планшете определяли тирозиназную активность in situ. В последнем случае культуры промывали дважды фосфатным буферным раствором (PBS) (1х) и обрабатывали детергентом (Triton-X 100; 0,5%; 40 мкл) в течение 1 часа на льду для увеличения проницаемости клеточных мембран. Для визуализации тирозиназной активности in situ добавляли 60 мкл буферного раствора (фосфат натрия, 50 мМ, рН 6,8), содержащего L-диоксифенилаланин (2 мМ) и 3-метил-2-бензотиазолинон гидразон (МВТН) (4 мМ) и инкубировали в течение 1 ч при 37°С. Реакцию останавливали прибавлением 100 мкл ледяного 10%-ного трихлорэтана (ТСА), после чего центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 мин при 4°С. Растворимый супернатант отделяли от осадка и определяли оптическую плотность при помощи планшетного ридера TECAN (фильтр 540 нм). Тирозиназную активность рассчитывали с учетом количества клеток (активность/ NR) и выражали как процент от контроля.
Данные, представленные в табл. 2, показывают, что образец по данному изобретению (пример 7) обеспечивает существенно большее ингибирование человеческой тирозиназы по сравнению с таким хорошо известным отбеливающим кожу агентом, как койевая кислота (пример 8).
Пример 10. Этаноловый экстракт Desmodium gangeticum.
Истолченную надземную часть растения Desmodium gangeticum (от компании Arya Vastu Bhandar, Дехрадун, шт. Утаранчал, Индия) в количестве 10 г помещали в круглодонную колбу вместе с 300 мл этилового спирта и оставляли на 5 суток, периодически перемешивая. Затем содержимое колбы фильтровали через муслин. Фильтрат выпаривали при 45°С при пониженном давлении и в результате получали порошок этанолового экстракта. Он сходен с материалом, описанным в опубликованном патенте Японии №7061918 и не является продуктом по настоящему изобретению.
Пример 11. Водно-спиртовой (этиловый спирт:вода=50:50) экстракт Desmodium gangeticum.
Истолченную надземную часть растения Desmodium gangeticum (от компании Arya - Vastu Bhandar, Дехрадун, шт. Утаранчал, Индия) в количестве 10 г помещали в круглодонную колбу вместе с 150 мл этилового спирта и 150 мл воды и оставляли на 5 суток, периодически перемешивая. Затем содержимое колбы фильтровали через муслин. Фильтрат выпаривали при 45°С при пониженном давлении и в результате получали порошок водно-спиртового экстракта. Он сходен с материалом, описанным в опубликованном патенте Японии №7 061918 и не является продуктом по настоящему изобретению.
Данные об ингибировании человеческой тирозиназы представлены в табл. 3.
Данные, представленные в табл. 3, показывают, что образец по данному изобретению (пример 12) обеспечивает существенно большее ингибирование тирозиназы в эксперименте с человеческими мела-ноцитами по сравнению с образцом не по данному изобретению (примеры 9-11). Кроме того образец по данному изобретению (пример 12) лучше по этому показателю, чем хорошо известный отбеливающий кожу агент койевая кислота (пример 13).
Пример 14.
Композицию для личной гигиены, предназначенную для отбеливания кожи, в форме быстро впитывающегося крема готовили согласно составу, указанному в таблице 4. Получение этого крема состояло в следующем. Ингредиенты водной фазы (вода, глицерин и гидроксид калия) нагревали до 75°С на водяной бане. В миксере Silverson к водной фазе прибавляли расплавленную стеариновую кислоту и перемешивали при 1500 об/мин до тех пор, пока не получалась эмульсия. Остальные ингредиенты (кроме нико-тинамида и микронизированного диоксида титана) нагревали до 60°С (масляная фаза) и прибавляли к указанной эмульсии при перемешивании (2000 об/мин). Через 10 мин перемешивания полученной смеси давали остыть, продолжая непрерывно перемешивать до тех пор, пока не получался крем. При 50°С добавляли микронизированный диоксид титана и никотинамид, при 40°С добавляли отдушку. Экстракт по примеру 6 добавляли в масляную фазу.
Пример 15.
Композиция для личной гигиены в форме дезодорирующего карандаша для достижения дополнительного эффекта при применении с целью отбеливания кожи в подмышечной области получали согласно составу, приведенному в табл. 5. Получение состояло в следующем. Пропиленгликоль и PEG 200 нагревали до 70-80°С. К этой смеси прибавляли порошок стеарата натрия и перемешивали вплоть до его растворения. Затем прибавляли остальные ингредиенты, включая экстракт по примеру 6, в результате чего получалась конечная расплавленная смесь. Ее разливали в пробирки желаемых размеров, закрывали их крышечками и помещали в холодильник на 1-2 ч. После этого из пробирок извлекали дезодорирующие карандаши.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Композиция, отбеливающая кожу, которая содержит:
a) экстракт Desmodium gangeticum, содержащий более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов; и
b) косметически приемлемую основу, выбираемую из группы, состоящей из крема, лосьона, геля и эмульсии.
2. Композиция по п.1, в которой указанный экстракт характеризуется растворимостью в воде от 1 до 80% (мас./мас.) при 25°С.
3. Композиция по п.2, в которой растворимость экстракта составляет от 1 до 60% (мас./мас.) при
25°С.
4. Композиция по п.3, в которой растворимость экстракта составляет от 1 до 40% (мас./мас.) при
25°С.
5. Способ получения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, включающий стадии:
(a) нагревание Desmodium gangeticum в воде при температуре в интервале от 30 до 100°С;
(b) отделение нерастворимого материала для получения водной фракции;
(c) фракционирование в основном нерастворимых в воде компонентов водной фракции следующими методами:
(i) разделение с помощью геля на основе полистирола;
(ii) разделение путем осаждения с помощью умеренно полярных растворителей, выбираемых из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гексанов, толуола, ксилола, ди-этилового эфира, бутилового спирта, изобутилметилкетона и их смесей; или
(iii) разделение химическим путем, включающим кислотный гидролиз для отделения нерастворимых в воде компонентов.
6. Способ по п.5, в котором после стадии разделения с помощью геля на основе полистирола следует стадия солюбилизации в основном нерастворимых в воде компонентов в умеренно полярном растворителе, выбираемом из группы, состоящей из этилацетата, ацетона, хлороформа, дихлорметана, гекса-нов, толуола, ксилола, диэтилового эфира, бутилового спирта, изобутилметилкетона и их смесей, с последующим отделением растворителя.
7. Способ по п.5 или 6, в котором умеренно полярным растворителем является этилацетат.
8. Способ по любому из пп.5-7, в котором водную фракцию высушивают в порошок, после чего осуществляют остальные стадии способа.
9. Композиция для отбеливания кожи, содержащая:
a) экстракт Desmodium gangeticum, полученный способом по любому из пп.5-8; и
b) косметически приемлемую основу.
10. Экстракт Desmodium gangeticum, применяемый в качестве агента, отбеливающего кожу, который содержит более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов.
11. Применение экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флавоноидов, для производства медикамента для отбеливания кожи.
12. Косметический способ отбеливания кожи, включающий стадию местного нанесения экстракта Desmodium gangeticum, содержащего более 50% (мас./мас.) полифенолов и более 40% (мас./мас.) флаво-ноидов.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
023896
- 1 -
023896
- 1 -
023896
- 1 -
023896
- 1 -
023896
- 4 -
|
