|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] 1. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; железо - 0.027-24.5. 2. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; железо - 0.027-24.5; цинк - 0.065-72.8. 3. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; цинк - 0.065-72.8. 4. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; цинк- 0.065-72.8, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13 С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе. 5. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; железо - 0.027-24.5; цинк - 0.065-72.8, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13 С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе. 6. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; железо - 0.027-24.5, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13 С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе. 7. Фармацевтический состав для инъекций по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что значение рН составляет величину от 4 до 7.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
1. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; железо - 0.027-24.5. 2. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; железо - 0.027-24.5; цинк - 0.065-72.8. 3. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; цинк - 0.065-72.8. 4. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; цинк- 0.065-72.8, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13 С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе. 5. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; железо - 0.027-24.5; цинк - 0.065-72.8, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13 С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе. 6. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 ∙10 3 -300 ∙10 3 ; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; железо - 0.027-24.5, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13 С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе. 7. Фармацевтический состав для инъекций по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что значение рН составляет величину от 4 до 7.
Евразийское 023752 (13) B1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОМУ ПАТЕНТУ
(45) Дата публикации и выдачи патента 2016.07.29
(21) Номер заявки 201101254
(22) Дата подачи заявки 2011.10.03
(51) Int. Cl.
A61K31/4412 (2006.01) A61K 51/04 (2006.01) A61K101/00 (2006.01) A61P 9/10 (2006.01)
(54) ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ СОСТАВ ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ, ОБЛАДАЮЩИЙ
НЕЙРОПРОТЕКТОРНОЙ, АНТИАМНЕСТИЧЕСКОЙ, АНТИОКСИДАНТНОЙ, ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКОЙ, ПРОТИВОИШЕМИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ (ВАРИАНТЫ)
(43) 2013.08.30
(96) 2011000131 (RU) 2011.10.03
(71) (73) Заявитель и патентовладелец:
ООО "Эн.Си.ФАРМ" (RU)
(72) Изобретатель:
Челяева Анастасия Геннадьевна, Лобко Владимир Павлович (RU)
(74) Представитель:
Баландина Л.А. (RU)
(56) RU-C1-2156087 BY-C1-13304 EA-B1-008591 RU-C1-2309751
МАШКОВСКИЙ М.Д., Лекарственные средства. Пособие для врачей, М., ООО "Новая Волна", 2001, т. 2, с. 186-187
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области фармацевтической промышленности и медицине и может быть использовано при создании и применении фармацевтических составов обладающих нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью.
Уровень техники
Важной проблемой современной медицины является создание новых средств, способных эффективно защищать, а также лечить заболевания мозга. Для лечения острых нарушений мозгового кровообращения, дисциркуляторной энцефалопатии, вегетососудистой дистонии, атеросклеротических нарушений функций мозга, невротических и неврозоподобных расстройств с проявлением тревоги, для купирования абстинентного синдрома при алкоголизме, для лечения острой интоксикации нейролептиками и ряда других заболеваний используют современные российские средства на основе препарата 6-метил-2-этил-3-гидроксипиридина сукцината, в частности, мексидол (Инструкция по применению препарата мексидол. Регистрационный номер Р № 002161/01).
Мексидол обладает механизмом действия, принципиальным отличием которого от механизма действия традиционных нейропсихотропных препаратов является отсутствие у него специфического связывания с известными рецепторами (НИИ Фармакологии РАМН, Т.А. Воронина. Мексидол. Основные эффекты, механизм действия, применение (http://www.voed.ru/mexidol.htm). Мексидол является ингибитором свободно-радикальных процессов, перекисного окисления липидов, он активирует супероксиддис-мутазу, оказывает влияние на физико-химические свойства мембраны, повышает содержание полярных фракций липидов (фосфотидилсерина и фосфотидилинозита и др.) в мембране, уменьшает отношение холестерол/фосфолипиды, уменьшает вязкость липидного слоя и увеличивает текучесть мембраны, активирует энергосинтезирующие функции митохондрий и улучшает энергетический обмен в клетке и, таким образом, защищает аппарат клеток и структуру их мембран.
Вызываемое мексидолом изменение функциональной активности биологической мембраны приводит к конформационным изменениям белковых макромолекул синаптических мембран, вследствие чего мексидол оказывает модулирующее влияние на активность мембраносвязанных ферментов, ионных каналов и рецепторных комплексов, в частност, бензодиазепиновый, ГАМК, ацетилхолиновый, усиливая их способность к связыванию с лигандами, повышая активность нейромедиаторов и активацию синапти-ческих процессов. Наряду с этим, мексидол обладает выраженным гиполипидемическим действием, уменьшает уровень общего холестерина и липопротеидов низкой плотности и увеличивает липопротеи-ды высокой плотности.
Таким образом, механизм действия мексидола определяет, прежде всего, его антиоксидантные свойства, способность стабилизировать биомембраны клеток, активировать энергосинтезирующие функции митохондрий, модулировать работу рецепторных комплексов и прохождение ионных токов, усиливать связывание эндогенных веществ, улучшать синаптическую передачу и взаимосвязь структур мозга. Благодаря этому механизму действия мексидол оказывает влияние на ключевые базисные звенья патогенеза различных заболеваний, имеет большой спектр эффектов, чрезвычайно малые побочные проявления и низкую токсичность, обладает способностью потенцировать действие других центрально действующих веществ, в особенности тех, которые реализуют свое действие как прямые агонисты рецепторов.
В изобретении заявлены три варианта фармацевтического состава.
Аналогом трех вариантов фармацевтического состава является фармацевтическая композиция, обладающая нейротропной, антиамнестической активностью, содержащая мексидол и семакс (заявка на изобретение РФ 2006146529, опубл. 27.12.2006).
Недостатком аналога является малая стабильность фармацевтической композиции в течение срока годности (в частности, в течение 3 лет).
Другим аналогом трех вариантов фармацевтического состава является средство, содержащее мек-сидол и вспомогательные вещества: крахмал картофельный, поливинилпирролидон, магний стеариново-кислый, микрокристаллическая целлюлоза, сахар молочный (патент РФ 2145855, опубл. 26.05.1999). Лекарственное средство предназначено для лечения нарушений функций мозга, в частности острых и хронических нарушений мозгового кровообращения.
Недостатком аналога является малая стабильность фармацевтического средства в течение срока годности.
Также аналогом трех вариантов фармацевтического состава является стабильный фармацевтический состав для инъекций, содержащий мексидол, янтарную кислоту, трилон Б и воду для инъекций (патент РФ 2205640, опубл. 09.04.2002). Препарат назначают внутривенно и внутримышечно.
Недостатком аналога является малая стабильность фармацевтического состава в течение срока годности.
Прототипом трех вариантов является фармацевтический состав для инъекций (Инструкция по применению препарата Мексидол. Регистрационный номер Р № 002161/01), содержащий препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 50 г/л, натрия метабисульфат - 1 г/л.
Препарат применяют при острой и хронической недостаточности мозгового кровообращения и связанных с ней заболеваниях, в том числе при инсульте и его последствиях. Исследования показали, что
Связь 1Ч+-Н - это ковалентная связь.
Вышеуказанный препарат содержит катион 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина (2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиний) и фармацевтически приемлемый анион, а именно C4H6O4. Ионная связь между катионом и анионом - это связь между отрицательно и положительно заряженными частицами в препарате.
Недостатками прототипа являются относительно малая скорость наступления лечебного эффекта, недостаточно большой лечебный эффект фармацевтического средства, низкая стабильность фармацевтического состава в течение срока годности.
Сущность изобретения
Дадим определения терминам.
Инъекция - введение лекарственного раствора (состава) непосредственно под кожу, в мышцу, в вену. Срок годности - период, в течение которого фармацевтический состав сохраняет свои свойства в мере, обеспечивающей его использование по назначению.
Минеральные вещества подразделяют на макро- и микроэлементы.
Задачей настоящего изобретения является создание эффективного фармацевтического состава, обладающего нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противо-ишемической активностью.
Задача решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропро-текторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, от прототипа отличается тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л:
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1-103-300-103;
калий - 0.020-27.7;
магний - 0.065-70.3;
железо - 0.027-24.5.
Задача также решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций, обладающий ней-ропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, от прототипа отличается тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л:
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1-10 3-300-10 3;
калий - 0.020-27.7; железо - 0.027-24.5; цинк - 0.065-72.8.
Задача также решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций, обладающий ней-ропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3 -гидроксипиридина сукцинат, от прототипа отличается тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л:
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат- 1-103-300-103;
калий - 0.020-27.7;
магний - 0.065-70.3;
цинк - 0.065-72.8.
Задача также решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций, обладающий ней-ропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, от прототипа отличается тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л:
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1-103-300-103;
калий - 0.020-27.7;
магний - 0.065-70.3;
цинк - 0.065-72.8,
и фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
Задача также решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций, обладающий ней-ропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, от прототипа отличается тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л:
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 -103-300-10 3;
калий - 0.020-27.7; железо - 0.027-24.5; цинк - 0.065-72.8,
и фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
Задача также решается за счет того, что фармацевтический состав для инъекций, обладающий ней-ропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, от прототипа отличается тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л:
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1-103-300-103;
калий - 0.020-27.7;
магний - 0.065-70.3; железо - 0.027-24.5,
и фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
Дополнительно, каждый вышеописанный фармацевтический состав для инъекций может быть выполнен таким образом, что значение рН составляет величину от 4 до 7.
В заявленных составах используют фармацевтически приемлемый растворитель, в частности воду для инъекций или другой растворитель.
Технические результаты изобретения:
увеличение скорости наступления лечебного эффекта (уменьшение времени наступления лечебного эффекта) при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического средства;
увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации фармацевтического средства; повышение стабильности фармацевтического состава в течение срока годности. В настоящее время увеличение скорости наступления лечебного эффекта при введении лекарственных средств в организм с помощью инъекций обеспечивают дозировкой средства и временем его воздействия;
введением в раствор для инъекций вспомогательного ингредиента -ускорителя скорости воздействия (частный случай регулятора скорости воздействия).
Известен инъекционный раствор (заявка РФ № 94015245, опубл. 27.12.1995), в котором в качестве регулятора скорости воздействия используют 5-10% раствор гиалуроновой кислоты.
Известен кардиостимулирующий препарат (патент РФ № 2068697, опубл. 10.11.1996), содержащий яд зеленой жабы, хлорбутанодигидрат, хлористый натрий и воду. Для повышения скорости наступления кардиостимулирующего эффекта (при сохранении продолжительности действия), обеспечиваемого указанным ядом, в препарат вводят до 95% этилового спирта. Спирт за счет осмотических явлений вызывает болевые ощущения и местную негативную реакцию, что и ускоряет действие препарата.
Известны биологически активные добавки, которые при их введении совместно с действующим началом повышают фармакологическую активность лечебных препаратов за счет оптимизации скорости усвоения действующего начала. Так, в противоопухолевое средство (а.с. СССР № 1683190, опубл. 20.04.1995) дополнительно вводят поливинилпирролидон и сорбиновую кислоту. Эти компоненты повышают противоопухолевую активность действующего начала.
В изобретении достигается увеличение скорости наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического средства, за счет введение в состав средства минеральных веществ. Описание действия заявленных фармацевтических составов будет приведено ниже.
Ниже приведем общие сведения о минеральных веществах.
Минеральные вещества подразделяют на макро- и микроэлементы.
К макроэлементам относятся кальций, фосфор, магний, калий, натрий, хлор и сера.
Микроэлементы: железо, медь, марганец, цинк, кобальт, йод, фтор, хром, молибден, ванадий, никель, стронций, кремний, селен признаны необходимыми для жизнедеятельности человека и животных.
Макроэлементы регулируют водно-солевой обмен, поддерживают осмотическое давление в клетках и межклеточных жидкостях, что необходимо для передвижения между ними питательных и лекарственных веществ. Процессы кроветворения происходят с участием железа, меди, марганца, кальция и других минеральных веществ (элементов). Минеральные вещества (микроэлементы) активируют действие ферментов, гормонов, участвуют во всех видах обмена веществ.
Минеральные вещества (Fe, Cu, Zn и др.) в растворе (в частности, в фармацевтическом составе для инъекций) находятся в составе фармацевтически приемлемых солей, например сукцинатов, хлоридов, карбонатов или сульфатов, а также в составе различных фармацевтически приемлемых комплексных соединений.
Минеральные вещества, соли металлов оказывают противомикробный эффект, инактивируя ферменты, необходимые для жизнедеятельности микроорганизмов. Инактивация ферментов происходит путем взаимодействия ионов металлов с сульфгидрильными группами ферментов.
На слизистые оболочки металлы оказывают выраженное местное действие. При рассматриваемых в патенте концентрациях минеральных веществ местное действие этих веществ может быть вяжущим или раздражающим.
Механизм местного действия металлов обусловлен их способностью реагировать с белками тканей. В результате такого взаимодействия белки свертываются и образуют с ионами металлов альбуминаты. При этом, если происходит частичное свертывание белков только в самых поверхностных слоях тканей, наблюдается вяжущий или раздражающий эффект, имеющий обратимый характер.
Проведенные исследования показали, что минеральные вещества, входящие в состав препарата, усиливают их лечебный эффект. Обеспечивается это в основном за счет явно выраженного раздражающего эффекта на ткани организма, а также путем воздействия на ферментативную систему организма.
Перечень чертежей
На фиг. 1 представлен УФ-спектр заявленного фармацевтического состава для инъекций и мекси-
дола.
На фиг. 2 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава. На фиг. 3-6 представлены хроматограммы образца заявленного фармацевтического состава для инъекций.
На фиг. 7-9 представлены хроматограммы образца заявленного фармацевтического состава для инъекций на хиральной колонке.
На фиг. 10 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций.
На фиг. 11 представлен MSMS иона 438.7. На фиг. 12 представлен MSMS иона 138.
На фиг. 13 представлено определение массовой доли компонентов образца заявленного фармацевтического состава.
На фиг. 14 представлен 1Н-ЯМР-спектр образца заявленного фармацевтического состава в D2O.
На фиг. 15 представлен 1Н-ЯМР-спектр образца заявленного фармацевтического состава в DMSO.
На фиг. 16-18 представлены 13С-ЯМР-спектры образца заявленного фармацевтического состава с подавлением и без подавления.
На фиг. 19 представлен 1Н-ЯМР-спектр образца заявленного фармацевтического состава.
На фиг. 20, 21 представлены масс-спектры высокого разрешения смеси производных заявленного фармацевтического состава.
На фиг. 22 представлена схема кавитационного реактора для изотопного обогащения различных смесей.
На фиг. 23 представлено поперечное сечение кавитационного реактора. На фиг. 24 представлена схема установки по изотопному обогащению.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения На фиг. 1-10 представлены хроматограммы образцов заявленного фармацевтического состава для инъекций.
Параметры разделения
Состав подвижной фазы.
А - вода с добавлением на 1 л 113 мкл трифторуксусной кислоты;
В - ацетонитрил с добавлением на 1 л 113 мкл трифторуксусной кислоты.
Стандартный градиент от 5 до 100%В за 20 мин.
Колонка размером 250x4,6 мм сорбент Reprosil-Pur ODS.
Детекция УФ 220 нм.
Хроматографическая система Agilent 1200 series. Масс-детектор Agilent 6310 Ion Trap LCMS.
На фиг. 1 представлен УФ-спектр (верхняя кривая) заявленного фармацевтического состава для инъекций, содержащего препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральные вещества: калий, магний, железо. Нижняя кривая на графике - мексидол.
По оси абсцисс - длина волны, по оси ординат - оптическая плотность.
На фиг. 2 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций. Регистрация при длине волны 220 нм.
По оси абсцисс - время, по оси ординат - поглощение при длине волны 220 нм.
На фиг. 3 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций с масс-селективной детекцией 1-го пика.
На верхнем графике по оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 4 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций с масс-селективной детекцией 2-го пика.
На верхнем графике по оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 5 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций с масс-селективной детекцией 3-го пика.
На верхнем графике по оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 6 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций с масс-селективной детекцией 4-го пика.
На верхнем графике по оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 7 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций на хиральной колонке, регистрация при длине волны 220 нм.
По оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность поглощения на длине волны 220 нм.
На фиг. 8 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций на хиральной колонке (YMC CHIRAL NEA (R) 250x4,6 мм, S - 5 мкм, 30 нм) с масс-селективной детекцией.
На верхнем графике по оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 9 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций на хиральной колонке (YMC CHIRAL NEA (R) 250x4,6 мм, S - 5 мкм, 30 нм) с масс-селективной детекцией.
На верхнем графике по оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 10 представлена хроматограмма образца заявленного фармацевтического состава для инъекций. Регистрация при длине волны 220 нм.
По оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность. На фиг. 11 представлен MSMS иона 438.7.
На верхнем графике по оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 12 представлен MSMS иона 138.
На верхнем графике по оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На нижнем графике по оси абсцисс - значение m/z, где m - масса иона; z - заряд иона, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 13 представлено определение массовой доли компонентов образца заявленного фармацевтического состава для инъекций методом ELSD (оборудование ELSD - Sedex 75 температура 40°C). По оси абсцисс - время, по оси ординат - интенсивность.
На фиг. 14- представлен 1Н-ЯМР-спектр образца заявленного фармацевтического состава в D2O. На фиг. 15 представлен 1Н-ЯМР-спектр образца заявленного фармацевтического состава в DMSO. На фиг. 16 представлен 13С-ЯМР-спектр образца заявленного фармацевтического состава с подавлением.
На фиг. 17 представлен 13С-ЯМР-спектры образца заявленного фармацевтического состава без подавления.
На фиг. 18 представлен 13С-ЯМР-спектры образца заявленного фармацевтического состава без подавления.
На фиг. 19 представлен 1Н-ЯМР-спектр образца заявленного фармацевтического состава. По совокупности ЯМР-спектров определена структура катиона 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина(2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния).
Изобретение иллюстрируется следующими ниже примерами. Пример 1. Способ введения минеральных веществ в воду для инъекций. Пример 2. Способ получения фармацевтических составов. Пример 3. Испытания на общую токсичность.
Примеры 4-8 иллюстрируют эффективность заявленных фармацевтических составов с нейропро-текторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью. Исследования проведены с использованием материалов, опубликованных в источниках [1-5].
Пример 1.
Введение минеральных веществ в раствор (в воду для инъекций) осуществляли по методике [6]. Существуют и другие способы введения минеральных веществ в раствор. Растворы готовили из чистых металлов при использовании фармацевтически приемлемых растворителей, обеспечивающих устойчивость растворов при хранении.
Для проведения исследований концентрации металлов в растворах обеспечивались в следующих диапазонах, мг/л:
калий - 0.010-30.000;
магний - 0.030-80.000;
железо - 0.010-30.000;
цинк - 0.050-80.000.
Контроль концентраций металлов в растворах осуществляли атомно-абсорбционным методом определения содержания натрия, калия, кальция, магния, железа, марганца, меди, цинка, свинца, кадмия, кобальта, никеля, хрома. П.1.3.2.1 источника [6].
Пример 2. Получение фармацевтического состава с калием, магнием и железом.
В реактор с мешалкой наливают 8 л воды для инъекций. После чего в реактор загружают препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 10 г, заливают раствор с калием (общее содержание калия 0.1 мг), заливают раствор с магнием (общее содержание магния 0.3 мг), заливают раствор с железом (общее содержание железа 0.1 мг) при постоянном перемешивании. Затем доводят рН раствора до значения 4,5. Полученный раствор доводят до объема 10 л водой для инъекций и пропускают через фильтр.
При контроле найдено:
1Н-ЯМР-спектр в DMSO: 1Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d6): 12,1-9,9 (м, 2.75Н); 7,020 (д, JAB=8,4 Гц, 1Н); 6,840 (д, JAB=8,4 Гц, 1Н); 2.671 (к, J=9,6 Гц, 2,05Н); 2,502 (с, 0,25Н); 2,429 (с, 4,12Н); 2,303 (с, 3,08Н); 1,130 (т, J=7,5 Гц, 3,07Н).
13С-ЯМР-спектр: 1Н ЯМР (400.4 МГц, D2O): 7,720 (д, JAB=8,8 Гц, 0,92Н); 7,402 (д, JAB=8,8 Гц, 0,92Н); 4,090 (с, 58,4Н); 2,894 (к, J=7,6 Гц, 2Н); 2,547 (с, 2,98Н); 2,492 (с, 3,97Н); 1,450 (т, J=9 Гц, 3,03Н).
1Н-ЯМР-спектр в D2O: 1Н ЯМР (400.4 МГц, D2O): 7,720 (д, JAB=8,8 Гц, 0,92Н); 7,402 (д, JAB=8,8 Гц, 0,92Н); 4,090 (с, 58,4Н); 2,894 (к, J=7,6 Гц, 2Н); 2,547 (с, 2,98Н); 2,492 (с, 3,97Н); 1,450 (т, J=9 Гц, 3,03Н).
13С -ЯМР-спектры: 13С ЯМР (600 МГц, DMSO-d6): 174,18 (м); 149,90 (м); 149,15 (м); 147,02 (м); 122,72 (дд, J1=6 Гц, J2=636 Гц); 121,48 (дк, J1=18 Гц, J2=636 Гц); 29,38 (тт, J1=20,4 Гц, J2=510 Гц); 25,33 (тк, J1=18 Гц, J2=510 Гц); 23,13 (кд, J1=9 Гц, J2=504 Гц); 12,98 (кт, J1=21 Гц, J2=504 Гц).
Контроль показал качественное выполнение фармацевтического состава.
Аналогичным образом были получены и проконтролированы другие заявленные фармацевтические составы с минеральными веществами и препаратом 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
Проведены лабораторные исследования заявленных фармацевтических составов. На фиг. 1-19 проиллюстрированы исследования только одного фармацевтического состава, мг/л:
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1-103-300-103;
калий - 0.220;
магний - 0.70;
железо - 0.245.
Остальные заявленные и описанные фармацевтические составы также подвергались лабораторным исследованиям.
На фиг. 1 представлен УФ-спектр фармацевтического состава. Концентрация препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат 0.054 г/мл определена УФ-спектрофотометрией. По НД N002161/01-140308 1 мл препарата должен содержать от 0.045 до 0.055 г. Нижняя кривая на графике -стандартный образец 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат (препарат мексидол), верхняя - заявленный фармацевтический состав.
Кинематическая вязкость фармацевтического состава 1.180 мм2/с (из диапазона 1.01-1.23 мм2/с). Определено с помощью капиллярного вязкозиметра.
Проведенные исследования стабильности (срока хранения) показали, что полученное таким образом фармацевтические составы стабильны и сохраняют исходные показатели в течение 3.5 лет. Проводилась УФ-спектрофотометрия и другие вышеуказанные исследования каждые полгода в течение 3.5 лет. Установлено повышение стабильности заявленных фармацевтических составов в течение 3.5 лет по сравнению с мексидолом. Мексидол проявлял стабильные свойства в течение 3 лет. В мексидоле стабильность обеспечивает стабилизатор метабисульфит натрия.
Также установлено, что введение в фармацевтические составы заявленных минеральных веществ обеспечивает изотоничность фармацевтических составов. Результаты этих исследований будут раскрыты в следующей заявке на изобретение.
Пример 3.
Испытания на общую токсичность проводили путем внутрибрюшинного введения фармацевтических составов на базе 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ крысам. Для проведения исследований концентрации минеральных веществ в растворах выбраны, мг/л:
калий - 30.000;
магний - 80.000;
железо - 30.000; цинк - 80.000.
LD50 составляет величину от 950 до 1000 мг/кг при внутрибрюшинном введении.
При внутримышечном введении LD50 составляет величину до 3000 мг/кг, что позволяет отнести заявляемые составы к нетоксичным веществам.
При длительном применении фармацевтических составов на базе 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ у крыс не выявило изменений со стороны органов и тканей организма (были несущественные).
Пример 4.
Антиоксидантную активность фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ сравнивали с антиоксидантной активностью препарата мексидол хемилюминесцентным методом [7].
Сравнивали мексидол, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 50 г/л, натрия метабисульфат - 1 г/л, с фармацевтическими составами на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ (порядковые номера фармацевтических составов
49-72).
Установлено, что по антиоксидантной активности (АОА) фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ в основном превосходили мексидол на 10-20%.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 49, 57 и 65 не превосходили мексидол.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 55 и 56 по АОА практически не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 54.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 63 и 64 по АОА не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 62.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 71 и 72 по АОА не превосходили фармацевтический состав с порядковым номером 70.
Следовательно, фармацевтические составы с порядковыми номерами 55 и 56, 63 и 64, 71 и 72 применять в качестве антиоксидантного средства экономически нецелесообразно (затратно).
Исследования на антиоксидантную активность фармацевтических составов также проведены по методике [8]. Результаты в основном аналогичны вышеприведенным.
Пример 5.
Противогипоксическую активность фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ сравнивали с противогипоксической активностью препарата мексидол.
Сравнения выполнены на белых нелинейных мышах (самцы) массой 22-26 г по острой гипоксии [9,
10].
Острую гипоксию (нормобарическую гипоксическую гипоксию) моделировали путем помещения мышей в термокамеру объемом 250 см3.
В опытах регистрировали продолжительность жизни животных после прекращения доступа воздуха в термокамеру. Животные помещались в термокамеру поодиночке.
Мексидол вводили однократно внутрибрюшинно за 30, 60 и 90 мин до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в термокамеру.
Время от момента введения препарата до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в таблицах обозначено Тв в минутах.
Каждый из фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сук-цинат и минеральных веществ вводили однократно внутрибрюшинно также за 30, 60 и 90 мин до помещения мышей в термокамеру и прекращения доступа воздуха в термокамеру.
После помещения мышей в термокамеру по мере потребления кислорода концентрация его в воздухе и в организме мышей снижалась, а количество углекислого газа возрастало. В результате у животных развивалась острая гипоксическая гипоксия. Продолжительность жизни (до остановки дыхания) регистрировали с помощью секундомера и по ее увеличению судили об эффективности испытанных препаратов.
Результаты сравнения противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ с противогипоксической активностью препарата мексидол приведены в табл. 13-16.
На модели острой нормобарической гипоксической гипоксии (в термокамере) установлено, что большая часть фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сук-цинат и минеральных веществ (особенно с использованием железа) увеличивала продолжительность жизни мышей в среднем на 10-13% (в некоторых экспериментах - до 20%) по сравнению с мексидолом.
Установлено увеличение скорости наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического средства. Это хорошо видно в табл. 16. Заявленные препараты увеличивают скорость наступления лечебного эффекта, что сближает значения продолжительности жизни при Тв=30 мин и Тв=60 и 90 мин.
Достигнуто увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации и количества препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
Сравнения также проведены на моделях: острой гипобарической гипоксии в вытяжной барокамере с имитацией подъема животных со скоростью 50 м/с до высоты 11000 м; острой гемической гипоксии и острой гистотоксической гипоксии.
Результаты этих сравнений аналогичны результатам, полученным на модели острой нормобариче-ской гипоксической гипоксии.
Пример 6.
Нейропротекторное действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ сравнивали с нейропротекторным действием препарата мексидол.
Сравнительные исследования выполнены на белых нелинейных крысах-самцах массой 220-250 г, у которых моделировали ишемический инсульт и геморрагический инсульт.
Ишемический инсульт у крыс воспроизводили двусторонней перевязкой общих сонных артерий. Подопытным животным вводили внутрибрюшинно мексидол и заявленные фармацевтические составы с порядковыми номерами 25-48. Характеристики этих фармацевтических составов приведены в табл. 4-6.
Животных после операции наблюдали в течение 2 недель с учетом выживаемости крыс. Неврологический дефицит у животных определяли каждый час в течение 24 ч, а затем 1 раз в сутки. Тяжесть состояния определяли по сумме соответствующих баллов.
Результаты исследования нейропротекторного действия препаратов представлены в табл. 17. Анализ результатов, приведенных в таблице, показал, что у крыс, получивших внутрибрюшинно мексидол, неврологический дефицит был максимально выражен (5.4±0,1 балла) через 3 и 4 сутки после двусторонней перевязки общих сонных артерий. Количество крыс в опыте - 28. Из них погибло 14% животных.
В опытах было установлено, что составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ в дозах 20 мг в сутки на крысу оказывает выраженное нейропротек-торное действие, в целом превосходя по выраженности действия в отношении неврологического дефицита мексидол.
Было проведено 24 опыта с крысами, получившими внутрибрюшинно фармацевтический состав на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ. Количество крыс в каждом опыте - 28. В опытах погибало 8-14% животных.
Фармацевтические составы с порядковыми номерами 25, 33 и 41 по нейропротекторному действию практически не превосходят мексидол. Нейропротекторные действия остальных составов превосходят нейропротекторное действие мексидола.
Наиболее выраженое нейропротекторное действие у фармацевтических составов с порядковыми
номерами 26-32, 34-40, 42-48.
Однако следует учесть следующее. Фармацевтические составы 31, 32 по своему нейропротектор-ному действию не превосходят состав 30. Поэтому эти составы использовать нецелесообразно. Фармацевтические составы 39, 40 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 38. Поэтому эти составы использовать нецелесообразно. Фармацевтические составы 47, 48 по своему нейропротек-торному действию не превосходят состав 46. Поэтому эти составы использовать нецелесообразно.
Геморрагический инсульт (ГИ) у крыс воспроизводили моделированием локального кровоизлияния в головном мозге (создание ГИ с ишемией мозга) по методике [11]. В соответствии с методикой проводили трепанацию черепа крысы и деструкцию мозговой ткани в области внутренней капсулы с последующим введением в место повреждения крови этой же крысы (0,03 мл крови). Таким образом, достигали инсульт в области внутренней капсулы практически без повреждений соседних тканей мозга.
Фармацевтический состав 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ вводили животным внутрибрюшинно в дозе 20 мг в сутки на крысу. Мексидол вводили животным внут-рибрюшинно в дозе 20 мг в сутки на крысу. Схема введения была следующей: первую инъекцию осуществляли через 2 ч после операции, потом 3 инъекции через 4 ч. Затем фармацевтический состав 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, а также мексидол вводили ежедневно один раз в сутки в течение 14 суток.
В течение 14 суток после операции оценивали координацию движений на вращающемся стержне в течение 2 мин и способность препаратов повышать выживаемость животных.
Установлено, что фармацевтические составы с порядковыми номерами 25, 33 и 41 по координации движения на вращающемся стержне практически не превосходят мексидол. Нейропротекторные действия остальных составов превосходят нейропротекторное действие мексидола.
Координация движения крыс заметно повышается при применении составов с порядковыми номерами 26-32 (см. характеристики составов в табл. 4), 34-40 (см. характеристики составов в табл. 5), 42-48 (см. характеристики составов в табл. 6). Однако следует учесть следующее.
Фармацевтические составы 31, 32 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 30. Одинаковость значений отмечена значками "-//-". Поэтому эти составы использовать на практике нецелесообразно.
Фармацевтические составы 39, 40 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 38. Одинаковость значений отмечена значками "-//-". Поэтому эти составы использовать на практике нецелесообразно.
Фармацевтические составы 47, 48 по своему нейропротекторному действию не превосходят состав 46. Одинаковость значений отмечена значками "-//-". Поэтому эти составы использовать на практике нецелесообразно.
Фармацевтические составы на базе 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ повышают выживаемость крыс после операций. Пример 7.
Антиамнестическое действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ сравнивали с антиамнистическим действием препарата мексидол.
Сравнения выполнены на белых нелинейных мышах (самцы) массой 22-26 г.
Влияние фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукци-нат и минеральных веществ и препарата мексидол на амнезию (процессы обучения и памяти) у мышей исследовали, используя условную реакцию пассивного избегания электрокожного раздражения. Мышей подвергали воздействию электросудорожного шока (ток 30 мА в течение 0.3-0.5 с к ушным раковинам) сразу после обучения условной реакции пассивного избегания (модель амнезии, вызванной электросудорожным шоком) [10, 12].
Влияние фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукци-нат и минеральных веществ, и препарата мексидол на амнезию также оценивали на модели скополами-новой амнезии после обучения условной реакции пассивного избегания [10].
Препараты вводили однократно внутрибрюшинно за 30, 60 и 90 мин до обучения мышей. Сохранность условной реакции пассивного избегания проверяли через 24 ч после амнезирующего воздействия.
На модели амнезии, вызванной электросудорожным шоком, было обнаружено, что у мышей фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, и препарат мексидол активно предупреждают развитие амнезии условной реакции пассивного избегания (см. табл. 19). Число мышей, обучившихся условной реакции пассивного избегания, составляло от 91 до 95%. Причем верхние значения диапазона обеспечивают практически все фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ. Нижнее значение диапазона обеспечивает мексидол.
Анализ табл. 19 показывает, что фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ увеличивают скорость наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического средства. Также наблюдается увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации фармацевтического средства.
Вышеперечисленные эффекты могут быть достигнуты и за счет применения мексидола путем увеличения дозы мексидола. В опытах (см. табл. 19) количество мексидола было увеличено с 20 до 40 мг на мышь.
На модели скополаминовой амнезии было обнаружено, что у мышей фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ и препарат мекси-дол также предупреждают развитие амнезии условной реакции пассивного избегания (см. табл. 20).
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ увеличивают скорость наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического средства. Также наблюдается увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации фармацевтического средства.
Увеличение скорости наступления лечебного эффекта и увеличение лечебного эффекта за счет использования мексидола может быть достигнуто путем увеличения его количества в инъекции.
Пример 8.
Противоишемическое действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ сравнивали с противоишемическим действием препарата мексидол. Результаты сравнения представлены в табл. 21.
Исследования проведены на белых нелинейных мышах (самцы) массой 35-37 г.
Ишемию головного мозга воспроизводили путем перевязки обеих общих сонных артерий. Животных после операции наблюдали в течение 7 дней. Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ и препарат мексидол вводили внутрибрю-шинно в течение 7 дней. В первый день препараты вводились дважды: сразу после операции и через 3 ч после операции. Во второй, третий и т.д. до седьмого дня препараты вводились один раз в сутки.
После двусторонней перевязки общих сонных артерий (и неиспользовании вышеуказанных препаратов) более 90% мышей погибали в течение наблюдаемых дней.
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, а также препарат мексидол существенно увеличивали выживаемость мышей в период наблюдения.
Из табл. 21 видно, что выживаемость мышей при использовании большинства фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ выше, чем выживаемость мышей при использовании мексидола.
Фармацевтические составы № 1, 9 и 17 по действию аналогичны действию мексидола. С увеличением количества минеральных веществ в составах их действие усиливается.
Фармацевтические составы № 7, 8 по своему действию не превосходят действие состава № 6. Фармацевтические составы № 15, 16 по своему действию не превосходят действие состава № 14. Фармацевтические составы № 23 и 24 по своему действию не превосходят действие состава № 22. Поэтому производить и применять их нецелесообразно.
Таким образом, описано применение и подтверждены технические результаты заявленных составов для инъекций.
Состав минеральных веществ в вышеописанных фармацевтических составах для инъекций был ограничен перечнем минеральных веществ (макроэлементов и микроэлементов) в "Руководстве по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. - 240 с". В Руководстве описан метод введения минеральных веществ в раствор, а также методы точного контроля количества минеральных веществ в растворах.
В вышеперечисленных вариантах составов приведены диапазоны весовых значений (в мг/л) компонентов составов, которые по сравнению с прототипом (мексидолом) дают эффект (по техническим результатам) более чем на 5%.
В настоящее время в мире изотопы углерода 13С широко применяются в биохимии и медицине для диагностики. В изобретении представлены результаты собственных исследований по влиянию изотопов углерода 13С на стабильность и эффективность действия лекарственных составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат.
Установлено, что повышение стабильности заявленного фармацевтического состава в течение срока годности может быть достигнуто за счет замены (от 0.5 до 75%) изотопов углерода 12С на изотопы углерода 13С. Изотопы углерода 13С в молекулах препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат замедляют происходящие в молекулах химические реакции, формируют более прочные ковалентные связи, чем изотопы углерода 12С.
Изотопы углерода 13С повышают сопротивляемость молекул к окислительному воздействию радикалов.
Изотопы углерода 13С не токсичны. Проведенные эксперименты показывают, что кормление мышей и крыс пищей, обогащенной на 75% углеродом 13С, не приводит к побочным эффектам и ухудшению их здоровья.
В процессе экспериментальной проверки заявленного фармацевтического состава, обогащенного изотопами углерода 13С, на стабильность и на токсичность были поведены эксперименты и по его лечебным качествам. Установлено, что фармацевтический состав, обогащенный изотопами углерода 13С, обладает повышенной нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью по сравнению с фармацевтическим составом, в котором отсутствуют изотопы углерода С.
В табл. 22-24 представлены фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С.
В табл. 25 представлены результаты сравнения антиоксидантной активности мексидола, содержащего 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 50 г/л, натрия метабисульфат - 1 г/л с антиокси-дантной активностью фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С.
Установлено, что по антиоксидантной активности фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы угле
рода 13С в основном превосходили мексидол на 3-9%.
В табл. 26 представлены результаты сравнения антиоксидантной активности мексидола, содержащего 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 50 г/л, натрия метабисульфат - 1 г/л с антиокси-дантной активностью фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, с замещенными изотопами углерода 13С на изотопы углерода 13С, и минеральных веществ.
Установлено, что по антиоксидантной активности фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С и минеральных веществ также превосходили мексидол в среднем на 5%.
В табл. 27 представлены результаты проверки противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С. Установлено, что с увеличением концентрации изотопов углерода 13С в фармацевтическом составе продолжительность жизни мышей, после прекращения доступа воздуха, увеличивается.
В табл. 28 представлены результаты проверки противогипоксической активности фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С и минеральных веществ. Как и в предыдущем случае, установлено, что с увеличением концентрации изотопов углерода 13С в фармацевтическом составе продолжительность жизни мышей, после прекращения доступа воздуха, увеличивается.
В табл. 29 представлены результаты проверки нейропротекторного действия (на модели геморрагического инсульта) фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С и минеральных веществ и нейропротекторного действия препарата мексидол.
Установлено, что с увеличением концентрации изотопов углерода 13С в фармацевтическом составе количество крыс, не удержавшихся на вращающемся стержне в течение 2 мин уменьшается, а количество выживших крыс увеличивается. Вклад изотопов углерода 13С в эффект составляет приблизительно 35%. Результат получен с учетом ранее описанных исследований нейропротекторного действия (см. табл.
18).
В табл. 30 представлены результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С и минеральных веществ и мексидола на выживаемость мышей на 7-е сутки после двусторонней перевязки общих сонных артерий. Количество мышей в каждом опыте - 30
По результатам проверки осуществлен анализ влияния степени обогащения фармацевтических составов изотопами углерода 13С на противоишемическое действие фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат. Установлено, что вклад изотопов углерода 13С в эффект составляет до 5%. Результат получен с учетом ранее описанных исследований противоишеми-ческого действия (см. табл. 21).
Способы производства стабильного высокообогащенного нерадиоактивного изотопа углерода-13 широко применяются в российской и мировой промышленности. Хорошо отработаны способы получения изотопа 13C методом газовой диффузии через пористые перегородки, диффузии в потоке пара, термодиффузии, а также методом дистилляции, изотопного обмена, центрифугирования, электролиза, генной инженерии и др. Краткая характеристика этих методов приведена в источнике [13].
В Московской государственной академии тонкой химической технологии им. М.В. Ломоносова отрабатывают современные нанотехнологии получения и включения атомов стабильных изотопов углерода 13С в молекулы различной структуры. В академии получают молекулы изотопно меченых соединений с различными уровнями изотопного обогащения - от долей процентов до 100% изотопов в веществе. Работы ведутся в интересах медицинской диагностики. В источнике [14] приведено 165 ссылок на иностранные источники информации по изотопному обогащению различных веществ.
В свою очередь, авторы активно участвовали в работах по изотопному обогащению углеводородов, а также реагентов для получения различных лекарственных препаратов. Обогащение реагентов изотопом углерода 13С (замещение изотопов углерода 12С на изотопы углерода 13С) осуществляли в кавитационном реакторе конструкции профессора Кормилицына В.И. (Московский энергетический институт - технический университет).
Реактор был изготовлен по методике, приведенной в источнике [15]. Скорость течения в реакторе, по длине канала, изменялась от 10 до 50 м/с.
На фиг. 22 представлена схема кавитационного реактора для изотопного обогащения различных смесей, в частности углеводородных реагентов, для получения препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, обогащенного изотопом углерода 12С. Реактор расположен в установке, которая содержит насос 6НК-6х1, обеспечивающий максимальный расход 90 м3/ч, напор 125 м при мощности электродвигателя 75 кВт, частоте оборотов ротора электродвигателя и колеса насоса 2950 об/мин. Дополнительно установка содержит емкости для реагентов и измерительные приборы.
Схема установка представлена на фиг. 24.
Кавитационный реактор 1 (см. фиг. 22) выполнен в виде плоского сопла Лаваля с телами кавитации 2-9 в канале 10.
На фиг. 23 представлено поперечное сечение кавитационного реактора. Канал реактора в области тел кавитации разделяется на несколько каналов. Например, тела кавитации 5 и 6 разделяют канал на более мелкие каналы 13, 14 и 15. Снаружи канал ограничивают стенки 16 и 17, а также две крышки 11 и
12.
На фиг. 22 стрелками 18 показано направление движения реагента на входе в реактор, стрелкой 19 показано направление движения реагента на выходе из реактора. В стенке 16 выполнены каналы 24 и 25 для подачи в зоны кавитации двуокиси углерода и азота.
Установка работает следующим образом. Углеводородный реагент из емкости 28 с помощью насоса 26 прокачивается через реактор 27 и поступает обратно в емкость 28. Падение давления на реакторе контролируется манометрами 29 и 30. Температура реагента контролируется по термометру 31. Подогрев реагента в емкости осуществляют нагревателем 32.
При работе реактора углеводородный реагент движется по каналу кавитатора в направлении 18. При обтекании тел кавитации поток разделяется на несколько потоков. За телами кавитации возникают области кавитации. В частности, за телами (если смотреть по направлению движения реагента) кавитации 2, 3 и 4 располагаются зоны кавитации 20, 21, 22 и 23. При входе в область кавитации реагент "закипает", возникают кавитационные пузырьки, при выходе из области кавитации кавитационные пузырьки схлопываются. При этом в области (в месте) схлопывания кавитационного пузырька наблюдается повышение давления до нескольких тысяч атмосфер и повышение температуры до 1000°C. Через каналы 24 и 25 в поток подается двуокись углерода таким образом, чтобы газ попал в зоны кавитации.
Парогазовая смесь, полученная в реакторе совместно с жидким реагентом, поступает в емкость 28. Далее парогазовая смесь по трубопроводу 33 поступает в сепаратор с пористой перегородкой, где парогазовые смеси с 13С и 12С разделяются.
В экспериментах реактор работал от нескольких часов до нескольких суток. Установлена прямая зависимость степени обогащения парогазовой смеси и реагента изотопом 13С от времени работы кавита-ционного реактора.
Контроль количества изотопов углерода 13С осуществлялся масс-спектроскопией высокого разрешения.
В результате экспериментов было достигнуто обогащение реагента изотопом углерода 13С до 75%. Значение показателя "С" принимало значения от 0.005 до 0.75. Показатель "С" определяли по формуле
С=13С/(13С + 12С),
где 13С - изотоп углерода с относительной атомной массой 13.0033548378(10); 12С - изотоп углерода с относительной атомной массой 12.0.
Таким образом, были получены фармацевтические составы для инъекций, содержащие препарат 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, с содержанием изотопа углерода 13С от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
Ниже приведен изотопный контроль фармацевтического состава с 8% изотопа углерода 13С.
При контроле количества изотопов углерода 13С регистрировался масс-спектр высокого разрешения смеси производных сукцината этилметилгидроксипиридина с формулами: 12C81H1114N16O-12C41H616O4, 12C713C1Hn14N16O-12C41H616O4 и 12C81Hn15N16O-12C41H616O4. См. фиг. 20, 21.
На фиг. 20 представлен масс-спектр высокого разрешения смеси производных заявленного фармацевтического состава с формулами: 12C81H"14N16O-C4H6O4, 12C713C1H"14N16O-12C41H616O4 и 12C81H"15N16O-12C41H616O4.
На фиг. 21 представлен масс-спектр высокого разрешения смеси производных заявленного фармацевтического состава в области массы вещества 12C713C1H1114N16O.
Измеренные массы:
m/z
Intensity
Relative
Resolution
Charge
138.09091
16468298.0
100.00
227701.00
1.00
138.09184
106803.9
0.65
527604.00
0.00
138.09242
43023.2
0.26
316504.00
0.00
138.09279
19949.1
0.12
149704.00
0.00
138.09300
19399.5
0.12
145104.00
0.00
138.09354
21189.0
0.13
262504.00
0.00
138.09413
14171.1
0.09
309504.00
0.00
138.09442
13261.9
0.08
293804.00
0.00
138.09505
13220.9
0.08
328004.00
0.00
139.01738
471284.1
2.86
225204.00
0.00
139.07477
28821.2
0.18
229104.00
0.00
139.08781
15598.1
0.09
213904,00
0.00
139.09340
146037
0.09
372304.00
0.00
139.09419
1444317.8
8.77
225504.00
1.00
^"c'Hn'W'O Количество 12С в 12C81H1114N16O принято за 100%.
Изотопный состав производных подтвержден по разнице молекулярных масс между пиками в соот-
ветствии с таблицей масс изотопов http://physics.nist.gov/cgi-
bin/Compositions/stand_alone.pl?ele= &ascii=html &isotype=some.
Спектры сделаны на масс-спектрометре OrbiTrap "Орбитальная ловушка". Точность измерения массы моноизотопного пика - 3 ppm.
Таким образом при реализации заявленных фармацевтических составов обеспечивается
увеличение скорости наступления лечебного эффекта при сохранении продолжительности действия без увеличения концентрации фармацевтического средства;
увеличение лечебного эффекта без увеличения концентрации фармацевтического средства;
повышение стабильности фармацевтического состава в течение срока годности.
Минеральные вещества
Порядковый номер фармацевтического состава с 1 граммом препарата 2-этил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в литре
Калий, мг/л
0.01
0.02
0.1
5.0
25.0
27.7
29.0
30.0
Магний, мг/л
0.03
0.065
0.1
30.0
60.0
70.3
75.0
80.0
Железо, мг/л
Цинк, мг/л
0.05
0.065
0.07
30.0
60.0
72.8
73.5
81.0
Минеральные вещества
Порядковый номер фармацевтического состава с 50 граммами препарата 2-зтил-6-метил-3- гидроксипиридина сукцинат в литре
Калий, мг/л
0.01
0.02
0.1
5.0
25.0
27.7
29.0
30.0
Магний, мг/л
0.03
0.065
0.1
30.0
60.0
70.3
75.0
80.0
Железо, мг/л
0.01
0.027
0.03
10.0
21.0
24.5
25.5
30,0
Цинк, мг/л
Результаты проверки противогипоксической
Таблица 16
Результаты проверки противогипоксической активности
фармацевтических составов на базе препарата
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ.
Доза 100 мг. Продолжительность жизни, мин
Результаты проверки нейропротекторного действия (на модели ишемического инсульта) фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ, и нейропротекторного действия препарата мексидол. Измерения в баллах, М+т, где т=0.1
Препарат, порядковый номер фармацевтическ ого состава, доза 20мг в сутки на крысу
Время после операции, час (сутки)
сут.
еут.
сут.
сут.
сут.
10 сут.
12 сут.
сут.
Мексидол
Мексидол, 20 мг 1 5.0
5.1 j 5.3
5.4
5.4
5.3
5.2
5.1
5.0
5.0
Фармацевтические составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-
Результаты проверки нейропротекторного действия (на модели геморрагического инсульта) фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ и нейропротекторного действия препарата мексидол. Количество крыс, не удержавшихся на вращающемся
стержне в течение 2 мин (количество выживших крыс)
2 мин.
**) Количество выживших крыс к моменту контроля. На контроль предоставлялось 10 крыс.
Таблица 19
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и
минеральных веществ и мексидола на амнезию у мышей, вызванную электросудорожным шоком. Число мышей с амнезией
условной реакции пассивного избегания через 24 ч после амнезирующего воздействия, % (значения округлены до целого числа)
Результаты проверки влияния фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ и мексидола на амнезию у мышей, вызванную скополамином. Число мышей с амнезией условной реакции пассивного избегания через 24 ч после амнезирующего
воздействия, % (значения округлены до целого числа)
Фармацевтические составы на базе препарата
2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными
изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С
Минеральные вещества
Порядковый номер фармацевтического состава с изотопом углерода 13С
105
106
107
108
109
111
112
Препарат 2-этил-6-метил-З-гидроксипиридина сукцинат, г/л
Калий, мг/л
Магний, мг/л
Железо, мг/л
Цинк, мг/л
13С/(13С+|2С)
0.005
0.010
0.05
0.10
0.15
0.20
0.50
0.75
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С
Порядковый номер
Антиоксидантная
Антиоксидантная
фармацевтического
активность мексидола,
активность
состава с 50граммами
содержащего 2-этил-6-
фармацевтических
препарата 2-этил-6-метил-
метил-3-
составов на базе
3- гидроксипиридина
гидроксипиридина
препарата 2-этил-6-метил-
сукцинат в литре
сукцинат - 50г/л, натрия
3-гидроксипиридина
метабисульфат - 1г/л,
сукцинат, с замещенными
Усл.ед.
изотопами углерода |2С на изотопы углерода 13С, Усл.ед.
105
3.65
106
3.68
107
3.73
108
3.50
3.77
109
3.81
110
3.83
111
3.85
112
3.86
Результаты сравнения антиоксидантной активности мексидола, содержащего 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 50 г/л, натрия метабисульфат - 1 г/л с антиоксидантной активностью фармацевтических составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С, и минеральных веществ
Таблица 29
Результаты проверки нейропротекторного действия (на модели
геморрагического инсульта) фармацевтических составов
на базе препарата 2-этил-6-метил--гидроксипиридина сукцинат
с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С и
минеральных веществ и нейропротекторного действия препарата мексидол.
Количество крыс, не удержавшихся на вращающемся стержне
в течение 2 мин (количество выживших крыс)
Препарат, порядковый
номер фармацевтического
состава, доза 20мг в сутки на ***)
крысу '
сут.
2 сут.
3 сут.
Время после операции, сутки
10 сут.
сут.
Мексидол
Мексидол, 20 мг
5 (9")
4(9)
3(8)
1(7)
0(6)
Фармацевтические составов на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, с замещенными изотопами углерода 12С на изотопы углерода 13С, и минеральных веществ
Фарм. состав №105
4(9)
3(9)
2(8)
1(7)
0(6)
Фарм. состав №106
4(10)
3(9)
2(9)
1(8)
0(8)
Фарм. состав №107
3(10)
3(10)
1(9)
0(8)
0(8)
Фарм. состав №108
3(10)
2(10)
1(9)
0(9)
0(9)
Фарм. состав №109
3(10)
2(10)
1(9)
0(9)
0(9)
Фарм. состав №110
3(10)
К10)
0(9)
0(9)
0(9)
Фарм. состав №111
3(10)
1(10)
0(9)
0(9)
0(9)
Фарм. состав №112
3(10)
1(10)
0(9)
0(9)
0(9)
Фарм, состав №113
3(10)
2(10)
1(9)
0(9)
0(9)
Фарм. состав №114
2(Ю)
0(10)
0(10)
0(9)
0(9)
Фарм. состав №115
3(10)
2(10)
1(9)
0(9)
0(9)
Фарм. состав №116
2(10)
0(10)
0(10)
0(9)
0(9)
Фарм. состав №117
3(10)
2(10)
1(9)
0(9)
0(9)
Фарм. состав № 118
2(10)
1(10)
0(10)
0(9)
0(9)
*) Количество крыс, не удержавшихся на вращающемся стержне в течение 2 мин.
**) Количество выживших крыс к моменту контроля. На контроль предоставлялось 10 крыс.
***) Доза 20 мг в сутки на крысу получена следующим образом: содержание ампулы объемом 2 мл (с концентрацией 50 г действующего вещества на 1 л) делилось на 5 частей.
1. Воронина Т.А., Островская Р.У. Методические указания по изучению ноотропной активности фармакологических веществ //Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. / Под ред. Фисенко В.П. - М., 2000. - С. 153-158.
2. Буреш Я., Бурешова О., Хьюстон П.Д. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения: пер. с англ./ Под. ред. Батуева А.С. - М.: Высш. шк., 1991.-399 с.
3. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Азимбаев Т.К. Оценка антиокислительной и антирадикальной активностей веществ и биологических объектов с помощью железоинициированной хемилюминесцен-ции // Биофизика. - 1992. - Т. 37, вып. 6. - С. 1041-1047.
4. Воронина Т.А. Отечественный препарат нового поколения мексидол: основные эффекты, механизм действия, применение. - М., 2004. - 21 с.
5. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. - М.: Медицина, 2001.
6. Руководство по методам контроля качества и безопасности биологически активных добавок к пище. - М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. - 240 с.
7. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П., Азимбаев Т.К. Оценка антиокислительной и антирадикальной активностей веществ и биологических объектов с помощью железоинициированной хемилюминесцен-ции // Биофизика. - 1992. - Т. 37, вып. 6. - С. 1041-1047.
8. В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов, В.Н. Анисимов. Влияние эпиталамина на свободнорадикальные процессы у человека и животных. Успехи геронтологии, 1999, вып. 3.
9. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для
клинического изучения в качестве антигипоксических средств. Под ред. Л.Д.Лукьяновой. - М., 1990.
10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Р.У. Хабриева. - М.: Минздрав РФ, 2005.
11. McGraw С.Р., Pashayan A.G., Wendel O.T. Cerebral infarction in the Mongolian gerbil exacerbated by phenoxybenzaminetreatment // Stroke. - 1976. - Vol. 7, No. 5. - P. 485-488.
12. Cumin R., Bandle E.F., Gamzu E., Haefely W.E. Effect of the novel compound antiracetam (Ro 135057) upon impared learning and memory in rodents // Psychopharmacol. - 1982. - Vol. 78. - P. 104-111.
13. Разделение изотопов. Физическая энциклопедия. http://dic.academic.ru/dic.nsf/enc
physics/1071/ИЗОТОПОВ.
2 13 15 18
14. Нанотехнология и включение атомов дейтерия Н, углерода С, азота N и кислорода O в молекулы аминокислот и белков.
http://samlib.ru/o/oleg_w_m/cdocumentsandsettingsolegmosinmoidokumentynanotehnologijaiwkliuchenie atomowdeiteriia2hrtf.shtml.
15. Р.Ф. Ганиев, В.И. Кормилицын, Л.И. Украинский. Волновая технология приготовления альтернативных видов топлив и эффективность их сжигания. - М.: Научно-издательский центр "Регулярная и хаотическая динамика", 2008. - 116 с.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 103-300 103; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; железо - 0.027-24.5.
2. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 103-300 103; калий - 0.020-27.7; железо - 0.027-24.5; цинк - 0.065-72.8.
3. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 103-300 103; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; цинк - 0.065-72.8.
4. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 103-300 103; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; цинк- 0.065-72.8, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
5. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - 1 103-300 103; калий - 0.020-27.7; железо - 0.027-24.5; цинк - 0.065-72.8, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
6. Фармацевтический состав для инъекций, обладающий нейропротекторной, антиамнестической, антиоксидантной, противогипоксической, противоишемической активностью, содержащий 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат, отличающийся тем, что содержит минеральные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л: 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат - Ы03-300-103; калий - 0.020-27.7; магний - 0.065-70.3; железо - 0.027-24.5, а также фармацевтический состав содержит изотопы углерода 13С в количестве от 0.5 до 75% от всего углерода в фармацевтическом составе.
7. Фармацевтический состав для инъекций по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что значение рН составляет величину от 4 до 7.
1.
1.
1.
Intens
0.3 0.6
0.0'
2 4 \ Overlaid Д Stacked Д List /
10 12 14 16
Time Irnin]
'lips
Intens.
4000 200015Э0
432.6
+M6 ,5.6-6 f.ir.ir. 14(225-258)
200 400 600 800 1000 Ю0 1400 1600 loOO т/г
Фиг. 9
Фиг. 8
thromatogram
Intens.
a.8-
0-6-
0.4-
0.2-
00-
2 4 6
12 14
Time (mirij
\ Overlaid ^ Shacked \ List /
! 1
Евразийская патентная организация, ЕАПВ Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
023752
023752
- 1 -
- 1 -
(19)
023752
023752
- 1 -
- 1 -
(19)
023752
023752
- 2 -
- 1 -
(19)
023752
023752
- 4 -
- 3 -
023752
Таблица 3
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
023752
Таблица 3
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
- 14 -
- 14 -
023752
Таблица 7
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
023752
Таблица 7
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
- 15 -
- 15 -
023752
Таблица 11
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
023752
Таблица 11
Фармацевтические составы на базе препарата 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и минеральных веществ
- 16 -
- 16 -
023752
023752
- 17 -
- 17 -
023752
Таблица 18
023752
- 19 -
- 18 -
023752
Таблица 18
023752
- 19 -
- 18 -
023752
023752
- 21 -
- 21 -
023752
Таблица 22
023752
Таблица 22
- 22 -
- 22 -
023752
Таблица 24
023752
Таблица 24
- 23 -
- 23 -
023752
Таблица 26
023752
Таблица 26
- 24 -
- 24 -
023752
023752
- 25 -
- 25 -
023752
023752
- 25 -
- 25 -
023752
023752
- 25 -
- 25 -
023752
023752
- 26 -
- 26 -
023752
023752
- 28 -
- 28 -
023752
023752
- 30 -
- 30 -
023752
023752
- 30 -
- 30 -
023752
023752
- 33 -
- 33 -
023752
023752
- 34 -
- 34 -
023752
023752
- 38 -
- 38 -
|
