Раскрывается комбинированное применение витамина D (холекальциферола) и 25-ОН D3 (кальцифедиола) для поддержания костной ткани и/или предупреждения или лечения остеопороза, рахита и остеопении. Названные препараты вводят по отдельности или вместе один раз в сутки, или 1 раз в неделю, или один раз в месяц. Изобретение предусматривает дополнительное введение одного или нескольких дополнительных лекарственных средств против остеопороза.

[0001] Способ поддержания здоровья костной ткани и/или предупреждения или лечения остеопороза, рахита и остеопении, включающий введение человеку витамина D и 25-гидроксивитамина D3 (25-OH D3).

[0002] Способ по п.1, в котором витамин D и 25-OH D3 вводят по отдельности.

[0003] Способ по п.1, в котором витамин D и 25-OH D3 вводят вместе.

[0004] Способ по любому из пп.1-3, в котором витамин D и 25-OH D3 вводят один раз в сутки.

[0005] Способ по любому из пп.1-3, в котором витамин D и 25-OH D3 вводят один раз в неделю.

[0006] Способ по любому из пп.1-3, в котором витамин D и 25-OH D3 вводят один раз в месяц.

[0007] Способ по любому из предшествующих пунктов, дополнительно включающий введение человеку одного или нескольких дополнительных лекарственных средств против остеопороза.

[0008] Применение 25-OH D3 и витамина D для изготовления комбинированного лекарственного средства для поддержания здоровья костной ткани и/или предупреждения или лечения остеопороза, рахита и остеопении.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к применеию витамина D3 (холекальциферола) и 25-гидроксивитамина D3 (25-OH D3) для лечения и/или предупреждения остеопороза и для снижения тяжести уменьшения плотности костной ткани.

Предшествующий уровень техники

Витамин D (например, эргокальциферол и холекальциферол) представляет собой группу жирорастворимых соединений, определяемую их биологической активностью. Недостаток витамина D вызывает рахит у детей и остеомаляцию у взрослых. Но после более чем 100-кратного приема рекомендованной ежесуточной разрешенной дозы (т.е. 5-15 мг или 200-600 ME витамина D) в течение нескольких месяцев может иметь место токсичность. Для витамина D порогом токсичности является 500-600 мг/кг массы тела в сутки. Как правило, "взрослым не следует принимать более трех RDA в течение продолжителного периода времени" (Garrison & Somer, The Nutrition Desk Reference, Third Ed., McGraw-Hill, pg. 82, 1997). Гиперкальциемия может иметь место при концентрации в крови 25-гидроксивитамина D3 свыше 375 ммоль/л. Позднее безопасный верхний уровень витамина D3 идентифицирован как составляющий по меньшей мере 250 мкг/сутки (10000 ME) (Hathcock et al., Am. J. Clin. Nutr., 85: 6-18, 2007). Показано, что прием внутрь такого количества в виде пищевой добавки приводит к концентрации 25-гидроксивитамина D3 в крови примерно 200 нмоль/л.

Витамин D является прогормоном, который гидроксилируется в печени с образованием 25-гидроксивитамина D (кальцифедикола; 25-ОН витамина D; 25-OH D), который затем претерпевает другое гидроксилирование в почках и других тканях с образованием 1,25-дигидроксивитамина D - активной гормональной формы витамина D. 1,25-Дигидроксивитамин D секретируется в кровь, связывается с белком, связывающим витамин D (DBP), и переносится к тканям-мишеням. Связывание между 1,25-дигидроксивитамином D и рецептором витамина D создает комплекс, действующий как фактор транскрипции в клеточных ядрах.

Недостаток витамина D может промотировать резорбцию костей. Он также может модулировать функцию сердечно-сосудистой, иммунной и мышечной систем.

Эпидемиологические исследования обнаруживают связи между поглощением витамина D и его действием на кровяное давление или метаболизм глюкозы. Активность витамина D находится под отрицательным контролем паратиреоидного гормона по принципу обратной связи.

Как витамин D, так и 25-OH D3 в прошлом назначали как фармацевтические средства. Витамин D, конечно, широко доступен; 25-OH D3 ранее продавался в США Organon USA под названием "CALDEROL", но в настоящее время находится в списке отмененных FDA лекарственных средств. Он представлял собой желатиновую капсулу, содержащую кукурузное масло и 25-OH D3.

В настоящее время жидкая форма 25-OH D3 продается в Испании FAES Farma под названием "HIDROFEROL" в масляном растворе.

Комбинацию витамина D и 25-OH D3 используют в корме для животных. 25-OH D3 для использования в кормах коммерчески доступен от DSM под названием "ROVIMIX HY-D".

Tritsch et al. (US 2003/0170324) раскрывают композицию кормового премикса, по меньшей мере, с 25-OH D3, в количестве от 5 до 50% (мас./мас.), растворенного в масле, и антиоксидантом, средством, инкасулирующим капельки 25-OH D3 и масла, и пищевой добавкой (например, витамином D3). Премикс может быть добавлен в корм для домашней птицы, свиней или кошек. Такая композиция стабилизирует 25-OH D3 против окисления.

Simoes-Nunes et al. (US 2005/0064018) раскрывают добавление в корм для животных комбинации 25-ОН витамина D3 и витамина D3. В частности, в корм для свиней добавляют от примерно 10 до примерно 100 мкг/кг 25-ОН витамина D3 и от примерно 200 до примерно 4000 МЕ/кг витамина D3. Такая добавка улучшает прочность костей у свиней.

Stark et al. (US 5695794) раскрывают добавление комбинации 25-ОН витамина D3 и витамина D3 в корм для домашней птицы для облегчения влияний тибиальной дисхондроплазии.

Borenstein et al., US 5043170, раскрывают комбинацию витамина D3 и или 1- α-гидроксихолекальциферола или 1- α,25-дигидроксихолекальциферола для улучшения прочности яиц и крепости ног у кур-несушек и других кур.

Chung et al., WO 2007/059960, раскрывают, что свиноматки, которых кормят кормом, содержащим как витамин D3, так и 25-гидроксивитамин D3, имеют улучшенные общее состояние здоровья, телосложение, количество и здоровье приплода и другие параметры продуктивности. Также раскрывается пищевая добавка 25-OH D3 для людей, но ее дозировочный интервал - 5-15 мкг на 1 кг массы тела, что равнозначно крайне высокой суточной дозировке 300-900 мкг на человека - является очень высоким.

Бисфосфонаты, которые являются метаболически стабилизированными аналогами пирофосфатов, одобрены как эффективные для лечения остеопороза посредством предотвращения ухудшения состояния костей (т.е. как антирезорптивные средства). Бисфосфонаты в кости адсорбируются к гидроксиапатиту, который является кристаллической формой кальция и фосфата. Таким образом, бисфосфонаты предотвращают резорбцию костной ткани посредством ингибирования мобилизации кальция.

Francis (US 4230700 и US 4330537) раскрывает ингибирование резорбции костной ткани с помощью комбинации этидроната и от примерно 100 до примерно 50000 ME соединения, подобного витамину D.

Fleshner-Barak (WO 03/007916) раскрывает введение бисфосфоната и природного производного витамина D, такого как 1,25-дигидроксивитамин D3, или 24,25-дигидроксивитамин D3, или 25-ОН витамина D3.

Daifotis et al. (WO 03/086415) раскрывают ингибирование резорбции костной ткани с помощью комбинации по меньшей мере одного бисфосфоната и от примерно 100 до примерно 60000 ME неактивированного метаболита витамина D2 и/или витамина D3.

В вышеуказанных документах не делается предположения, что применение комбинации витамина D3 и 25-OH D3 может являться неожиданно благоприятным для лечения и/или предупреждения остеопороза у людей. Формы и дозировки композиции предполагают желательное действие на костный метаболизм. Другие преимущества и улучшения описываются ниже или будут очевидны из раскрытия данного изобретения.

Подробное описание изобретения

Обнаружено, что комбинация витамина D3 (холекальциферола) и 25-OH D3 (кальцифедиола) для применения в качестве лекарственного средства, нутрицевтика или пищи для здоровья костной ткани у человека имеет преимущества перед введением или одного витамина D3, или одного 25-гидроксивитамина D3. Человек может быть любого возраста, включая детей и подростков, начиная с рождения и до состояния зрелости, и в возрасте от 18 до 80 лет или старше 80 лет.

В первом аспекте одна или несколько фармацевтических, нутрицевтических или пищевых композиций, подходящих для использования человеком, предлагаются для введения как витамина D3, так и 25-OH D3 и фармацевтически приемлемого носителя и поддержания посредством этого здоровья костной ткани и/или лечения и/или предупреждения остеопороза.

Данное изобретение также относится к фармацевтической композиции для человека для лечения болезней костной ткани и/или поддержания здоровья костной ткани, в которой активные ингредиенты состоят, по существу, из комбинации витамина D3 и 25-OH D3.

В другом аспекте изобретение относится к набору, который включает несколько отдельных дозировок композиции витамина D3 и 25-OH D3. Они могут быть заключены в контейнер, например пузырек, блистер или флаконы на подставке. Необязательно в контейнер могут быть заключены одно или несколько других лекарственных средств против остеопороза, таких как бисфосфонаты. Кроме того, в наборе даются инструкции по введению композиции в виде дозировки для людей.

В другом аспекте изобретение относится к способу введения человеку, по меньшей мере, витамина D3 и 25-гидроксивитамина D3 для лечения и/или предупреждения остеопороза. Их можно вводить один раз в сутки, один раз в неделю или один раз в месяц.

Витамин D3 и 25-OH D3 можно вводить совместно с другими лекарственными средствами против остеопороза или без них, в комбинированных или отдельных препаратах и необязательно одновременно. Термин "другие лекарственные средства против остеопороза", используемый в данном описании, относится к другим соединениям, которые можно вводить для ослабления, уменьшения интенсивности, предупреждения, отсрочки начала или подобного воздействия на остеопороз. Примеры включают бисфосфонаты, моноклональные антитела, кальцийсодержащие формы, эстрогены, фитоэстрогены и подобные препараты.

Другой аспект данного изобретения относится к пище, промотирующей здоровье костной ткани, функциональной пище, пищевой добавке или нутрицевтику, подходящим для потребления человеком, содержащим 25-OH D3, и предпочтительно комбинацию витамина D3 и 25-OH D3. В другом воплощении 25-OH D3, один или в комбинации с витамином D3, представляет собой активный ингредиент, промотирующий здоровье костной ткани, в пище, функциональной пище, пищевой добавке или нутрицевтике, подходящих для потребления человеком. Дозировки 25-OH D3 и/или D3 могут быть такими же, какие имеются в фармацевтическом продукте, но предпочтительно будут иметь тенденцию к более низким интервалам. Пищевые добавки и нутрицевтики могут находиться в форме таблеток, капсул или других обычных лекарственных формах. Пища может представлять собой напиток или еду и, если желательно, также может содержать другие питательно эффективные соединения, такие как витамины, минералы и т.п..

В данном описании и формуле изобретения используются определения, которые приводятся далее.

"Здоровье костной ткани" является широким термином. Поддержание здоровья костной ткани означает включение предупреждения остеопороза/остеопении, рахита/остеомалязии, поддержание нормальных резорбции/образования костной ткани и событий регенерации, поддержание нормального метаболизма Ca+ и предупреждение анормальной мобилизации и увеличение максимальной костной массы.

Термин "витамин D" обозначает или витамин D3 (холекальциферол) и/или витамин D2 (эргокальциферол). Люди неспособны вырабатывать витамин D2 (эргокальциферол), но способны использовать его в качестве источника витамина D. Витамин D2 может быть синтезирован различными растениями и часто используется в витамине D в добавках как эквивалент витамина D.

Термин "метаболит витамина D" обозначает любой метаболит витамина D иной, чем 25-гидроксивитамин D3.

Термин "25-OH D3" относится конкретно к 25-гидроксивитамину D3.

Термин "25-OH D" относится к 25-гидроксилированному метаболиту или витамина D2, или витамина D3, который является основной формой в кровотоке, обнаруженной в плазме.

Термин "предупреждение" включает облегчение заболевания, уменьшение тяжести симптомов, раннее вмешательство и увеличение длительности начала заболевания и не предназначен для ограничения ситуации, когда пациент более неспособен противостоять заболеванию или переживать какие-либо симптомы.

"Биофосфонаты" включают алендронат, клодронат, этидронат, ибандронат, олпадронат, минодронат, памидронат, ризедронат, тилудронат и золедронат.

Термин "другие лекарственные средства против остеопороза", используемый в данном описании, относится к другим соединениям, которые можно вводить для облегчения, уменьшения интенсивности, предупреждения, отсрочки начала или подобного воздействия на остеопороз. Примеры включают бисфософнаты, моноклональные антитела, кальцийсодержащие формы, эстрогены, фитоэстрогены и подобные препараты.

Недостаток витамина D является ведущим фактором, вносящим вклад в проблемы здоровья костной ткани. Недостаток/Недостаточность витамина D является особенно преобладающим состоянием в популяции стареющих людей и тех, кто страдает хронической неподвижностью независимо от возраста. Кроме того, младенцы, дети, начинающие ходить, дети, подростки и молодые взрослые люди могут страдать от скрытого недостатка витамина D. Это может происходить из-за общей нехватки воздействия солнечного излучения, пониженной способности организма вырабатывать витамин D или эффективно его метаболизировать или ряда других причин, таких как использование всякий раз вне дома средств против загара. Таким образом, одним из аспектов данного изобретения является применение комбинации витамина D и 25-OH D3 для промотирования здоровья костной ткани у престарелых людей. Используемый в данном описании термин "престарелые" предназначен для включения таких индивидуумов, возраст которых свыше 65 лет, предпочтительно свыше 70 лет и даже свыше 80.

В другом воплощении данная комбинация 25-OH D3 и витамина D подходит для поддержания здоровья костной ткани у людей, которые находятся в опасности развития состояний, характеризующихся недостатком или недостаточностью витамина D. К таким людям могут относится, в частности, все взрослые, включая женщин в период после менопаузы (т.е. в возрасте примерно 45 лет и старше) и мужчин, которые находятся в возрасте примерно 45 лет и старше. Она особенно подходит для поддержания здоровья костной ткани у индивидуумов, которые не получают большую часть природного солнечного света, таких как люди, которые традиционно носят длинную одежду, не выходят регулярно за двери или которые используют солнцезащитные кремы, когда на них воздействует солнечный свет, или живут в географических зонах, значительно севернее или южнее экватора, где солнечный свет менее интенсивен.

В другом воплощении комбинация 25-OH D3 и витамина D подходит для улучшения здоровья костной ткани у детей и молодежи, которые находятся в фазе моделирования построения костей. Это относится, в особенности, к тем, кто находится в опасности недостатка или недостаточности витамина D до достижения максимума костной массы. Она особенно подходит для улучшения здоровья костной ткани до достижения максимума костной массы у индивидуумов, которые не получают большую часть природного солнечного света, таких как люди, которые традиционно носят длинную одежду, не выходят регулярно за двери, кто использует солнцезащитные кремы, когда на них воздействует солнечный свет, или живет в географических зонах, значительно севернее или южнее экватора, где солнечный свет менее интенсивен. Таким образом, другой аспект данного изобретения относится к применению комбинации 25-OH D3 и витамина D для повышения максимума костной массы у индивидуумов, которые находятся в фазе моделирования построения костей.

Другой аспект данного изобретения относится к способу поддержания здоровья костной ткани у людей с синдромом мальабсорбции (например, пораженных глютеновой болезнью, спру или синдромом укороченной тонкой кишки) путем введения комбинации витамина D и 25-OH D3.

Другой аспект данного изобретения относится к способу поддержания здоровья костной ткани у людей с нарушенной функцией печени, когда человек не может эффективно перерабатывать витамин D в 25-гидроксивитамин D, путем обеспечения человека комбинацией витамина D в 25-гидроксивитамина D3.

Витамин D3 и 25-OH D3 можно получить из любого источника, а их композицию можно получить с использованием обычной технологии. Как правило, кристаллы витамина D3, 25-OH D3 или того и другого (по отдельности или вместе) растворяют в масле при нагревании и перемешивании. Предпочтительно масло переносят в сосуд и нагревают. Затем в сосуд добавляют витамин D3, 25-OH D3 или то и другое, причем в то же время температуру масла поддерживают или повышают со временем. Композицию перемешивают для растворения кристаллов витамина D3, 25-OH D3 или того и другого. Перед добавлением к маслу кристаллы можно уменьшить в размере путем измельчения и/или просеивания для улучшения растворения. Композицию можно перемешивать путем перемешивания, вращения сосуда, смешивания, гомогенизации, рециркуляции или с помощью ультразвука. Предпочтительно масло можно нагреть в сосуде до температуры от примерно 80 до примерно 85 °C, загрузить кристаллы нужного размера в сосуд и перемешивать содержимое для растворения кристаллов в масле.

"Масло" может представлять собой любое съедобное масло, липид или жир, например масло из бразильского ореха бабассу, кокосовое масло, масло пальмы слоновая кость, твердый жир murumyru, масло из пальмовых косточек или масло tucum. Масло может быть натуральным, синтетическим, полусинтетическим или их любым сочетанием. Натуральное масло может быть получено из любого источника (например, животного, растения, грибов, рыбы); синтетическое или полусинтетическое масло может быть получено обычной технологией. Предпочтительно масло представляет собой смесь растительных среднецепных триглицеридов, главным образом, каприловой и каприновой кислот. Композиция может необязательно содержать один или несколько других подходящих ингредиентов, таких как, например, антиоксиданты, консерванты, растворяющие вещества, поверхностно-активные вещества, регуляторы pH или буферы, смачивающие средства, и их любое сочетание. Вышеуказанные вещества являются примерами фармацевтически приемлемых носителей.

Подходящие антиоксиданты включают токоферол, смешанные токоферолы, токоферолы из природных или синтетических источников, бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), бутилированный гидроксианизол (ВНА), природные антиоксиданты, подобные экстракту розмарина, пропилгалат и любые другие, используемые в производстве фармацевтических препаратов для людей. Предпочтительно антиоксидантом является токоферол. Подходящие консерванты включают метилпарабен, пропилпарабен, сорбат калия, бензоат натрия, бензойную кислоту и их любое сочетание. Подходящие растворяющие вещества включают неорганические и органические растворители, например спирты, хлорированные углеводороды и их любое сочетание. Подходящие поверхностно-активные вещества могут являться аниогенными, катионогенными или неионогенными, как, например, аскорбилпальмитат, полисорбаты, полиэтиленгликоли и их любое сочетание. Подходящие регуляторы pH или буферы включают смеси лимонная кислота - цитрат натрия, фосфорная кислота - фосфат натрия, уксусная кислота - ацетат натрия и их любое сочетание. Подходящие смачивающие вещества включают глицерин, сорбит, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль и их любое сочетание.

После получения масляную композицию можно включить в различные другие применимые композиции, некоторые из которых обсуждаются ниже. Например, можно получить эмульсии, которые, необязательно, можно инкапсулировать или высушить распылением. Различные эмульсии можно получить объединением неводных композиций, описанных выше, с водной композицией. Эмульсия может быть любого типа. Подходящие эмульсии включают эмульсии масла в воде, эмульсии воды в масле, безводные эмульсии, твердые эмульсии и микроэмульсии. Эмульсии можно получить по любой обычной технологии. Эмульсия содержит водную композицию и неводную (например, масляную) композицию, где последняя включает витамин D3, 25-OH D3 или то и другое (по отдельности или вместе), растворенные в масле в количестве от примерно 3 до примерно 50 мас.% относительно общей массы композиции. Используемые в данном описании термины "водная композиция" и "водная фаза" используются как взаимозаменяемые. Вообще, эмульсия может содержать от примерно 20 до примерно 95% водной композиции и от примерно 5 до примерно 80% неводной композиции. Однако предпочтительно эмульсия содержит от примерно 85 до примерно 95% (об./об.) водной композиции и от примерно 5 до примерно 15% (об./об.) неводной композиции. Удобно, когда неводная композиция может быть диспергирована в виде капелек в водной композиции. Например, капельки в водной композиции могут иметь средний диаметр менее примерно 500 нм. Удобно, когда капельки имеют средний диаметр от примерно 100 до примерно 200 нм.

В особенно выгодном воплощении эмульсия содержит инкапсулирующий агент, который облегчает инкапсулирование масляной композиции после дополнительной обработки эмульсии (например, путем распылительной сушки). Инкапсулирующий агент может представлять собой любое съедобное вещество, способное инкапсулировать масляную композицию. Предпочтительно инкапсулирующий агент представляет собой преимущественно коллоидный материал. Такие материалы включают крахмалы, белки из животных источников (включая желатины), белки из растительных источников, казеин, пектин, альгинат, агар, мальтодекстрины, сульфонаты лигнина, производные целлюлозы, сахара, сахариды, сорбиты, камеди и их любое сочетание.

Подходящие крахмалы включают растительные крахмалы (например, CAPSUL ® или HI-САР ® от National Starch & Chemical Corp., New York, NY). Предпочтительно крахмал представляет собой модифицированный растительный крахмал CAPSUL ®. Подходящие белки из животных источников включают желатины (например, говяжьи желатины, свиные желатины (типа А или В) с различными числами Блума, рыбьи желатины), белок сепарированного молока, казеинат и их любое сочетание. Предпочтительно животный белок представляет собой желатин. Подходящие белки из растительных источников включают картофельный белок (например, ALBUREX ® от Roquette Preres Societe Anonyme, Lestrem, Франция), белок гороха, соевый белок и их любое сочетание. Предпочтительно растительный белок представляет собой картофельный белок ALBUREX ®. Подходящие мальтодекстрины с различным декстрозным эквивалентом включают мальтодекстрин 5, мальтодекстрин 10, мальтодекстрин 15, мальтодекстрин 20, мальтодекстрин 25 и их любое сочетание. Предпочтительно мальтодекстрин представляет собой мальтодекстрин 15. Подходящие производные целлюлозы включают этилцеллюлозу, метилэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу и их любое сочетание. Подходящие сахариды включают лактозу, сахарозу или их любое сочетание. Предпочтительно сахарид представляет собой сахарозу. Подходящие камеди включают аравийскую камедь, камедь плодов рожкового дерева, каррагенан и их любое сочетание. Предпочтительно камедь представляет собой аравийскую камедь.

Когда эмульсия содержит инкапсулирующий агент, такой агент может быть диспергирован в воде по любой обычной технологии с образованием водной фазы. Водная фаза может представлять собой раствор или смесь в зависимости от свойств выбранных компонентов. Выбранные компоненты можно диспергировать по любой обычной технологии, включая гомогенизацию, смешивание, эмульгирование, рециркуляцию, статическое смешивание, воздействие ультразвука, перемешивание, нагревание или их любую комбинацию. Затем при необходимости вязкость полученной водной фазы можно отрегулировать добавлением воды. Водная композиция эмульсии может содержать необязательно любой другой подходящий материал, включая материалы, обсуждаемые выше при обращении к неводной композиции, и другие материалы. Предпочтительно водная композиция может включать инкапсулирующий агент, пленкообразователь, пластификатор, консервант, антиоксидант или их любое сочетание. Подходящие консерванты включают метилпарабен, пропилпарабен, сорбиновую кислоту, сорбат калия, бензоат натрия и их любое сочетание. Подходящие антиоксиданты включают аскорбат натрия, аскорбиновую кислоту, лимонную кислоту и их любое сочетание.

Предпочтительно водная фаза содержит модифицированный пищевой крахмал, такой как октенилсукценилкрахмал (CAPSUL ®), мальтодекстрин и аскорбат натрия. Другая предпочтительная водная фаза содержит картофельный белок (ALBUREX ®), мальтодекстрин 20 и аскорбат натрия. Выбранные компоненты можно растворить в воде по любой обычной технологии, предпочтительно перемешиванием. Смесь пердпочтительно гомогенизируют до тех пор, пока она не станет однородной и без комочков. Предпочтительно гомогенизацию осуществляют при температуре от примерно 50 до примерно 75 °C. Затем конечную вязкость полученной водной фазы можно отрегулировать до нужной вязкости, предпочтительно от примерно 250 до примерно 450 сП, предпочтительнее от примерно 300 до примерно 400 сП, даже предпочтительнее до примерно 385 сП.

Эмульсию можно получить эмульгированием неводной композиции и водной фазы любым способом, включая гомогенизацию, роторстаторный сдвиг, сдвиг под высоким давлением и кавитацию, высокоскоростные "cowles" или перемешивание при воздействии сдвига и их любую комбинацию. Объем и вязкость эмульсии можно регулировать предпочтительно добавлением воды после эмульгирования. Предпочтительно неводную и водную композиции эмульгируют гомогенизацией. Предпочтительно эмульсия не должна содержать какой-либо минерал, переходный металл или пероксид.

Как отмечалось выше, эмульсия, может быть включена или использована при получении других полезных композиций, в особенности инкапсулированных масел, например порошков, высушенных распылением. Как правило, инкапсулированное масло включает масляную композицию, содержащую витамин D3, 25-OH D3 или то и другое, растворенные в масле, в количестве от примерно 3 до примерно 50 мас.% от общей массы масляной композиции. Инкапсулированное масло можно получить любым обычным способом, например высушивая эмульсию, описанную выше, любым обычным способом, включая распылительную сушку, сушку вымораживанием, сушку в ожиженном слое, сушку на полке, абсорбцию и их любую комбинацию. Предпочтительно инкапсулированное масло получают распылительной сушкой эмульсии, имеющей водную фазу, описанную выше, содержащую инкапсулирующий агент; параметры распылительной сушки диктуются физическими характеристиками, нужными для конечного инкапсулированного масла. Такие физические параметры включают размер частиц, форму и текучесть порошка и содержание воды. Предпочтительно масло находится в количестве менее примерно 30 мас.%, менее примерно 20 мас.%, менее примерно 10 мас.% или менее примерно 3 мас.% относительно общей массы инкапсулированного масла. Инкапсулированное масло должно иметь хорошую текучесть, и витамин D3 и/или 25-OH D3 должны быть равномерно распределены в композиции. Удобно, когда инкапсулированное масло представляет собой порошок. К инкапсулированному маслу может быть добавлена любая другая подходящая добавка. Одной из таких добавок может быть добавка для повышения текучести, такая как диоксид кремния для повышения текучести инкапсулированного масла.

Дозировки.

Суточные дозировки.

Композиция по данному изобретению, где два активных ингредиента должны вводиться по отдельности, содержит витамин D3 или 25-OH D3 в количестве от примерно 1 до примерно 50 мкг, предпочтительно от примерно 5 до 25 мкг. С другой стороны, одна суточная дозировка, имеющая как витамин D3, так и 25-OH D3, содержит каждый активный ингредиент в количестве от примерно 1 до примерно 50 мкг, предпочтительно от примерно 5 до 25 мкг.

Дозировочное отношение витамина D3 к 25-OH D3 может составлять от примерно 50:1 до примерно 1:50, предпочтительнее от примерно 25:1 до примерно 1:25 и даже предпочтительнее от примерно 6:1 до примерно 1:6.

Многие отдельные дозировки могут быть упакованы в едином наборе (или контейнере). Например, набор может включать тридцать отдельных суточных дозировок обоих активных ингредиентов по отдельности (т.е. 60 отдельных дозировок) или объединенных (т.е. 30 дозировок, содержащих оба активных ингредиента). В набор могут быть включены инструкции для введения дозировок человеку.

Недельные дозировки.

Одна недельная дозировка содержит витамин D3 или 25-OH D3 в количестве от примерно 7 до примерно 350 мкг и предпочтительно от примерно 35 до 175 мкг. С другой стороны, одна недельная дозировка может содержать как витамин D3, так и 25-OH D3, каждый в количестве от примерно 7 до примерно 350 мкг и предпочтительно от примерно 35 до 175 мкг. Дозировочное отношение витамина D3 к 25-OH D3 может составлять от примерно 50:1 до примерно 1:50, предпочтительнее от примерно 25:1 до примерно 1:25 и даже предпочтительнее от примерно 6:1 до примерно 1:6.

Ежемесячные дозировки.

Одна месячная дозировка содержит витамин D3 или 25-ОН D3 в количестве от примерно 30 до примерно 1500 мкг и предпочтительно от примерно 75 до 500 мкг. С другой стороны, одна месячная дозировка может содержать как витамин D3, так и 25-OH D3, каждый в количестве от примерно 30 до примерно 1500 мкг и предпочтительно от примерно 75 до 500 мкг. Набор может включать одну, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять, одиннадцать или двенадцать недельных или месячных дозировок.

Дозировочные отношения витамина D3 к 25-OH D3 могут колебаться от 50:1 до примерно 1:50, предпочтительнее от примерно 25:1 до примерно 1:25 и даже предпочтительнее от примерно 6:1 до примерно 1:6.

Исследование у людей фармакокинетики введенной перорально высушенной распылением композиции с 25-OH D3, высушенной распылением композиции с витамином D3 или с тем и другим начато для исследования их физиологических взаимодействий. В частности, представляют интерес формы их кривых зависимости реакции от дозы (которые показывают концентрации витамина D3 и 25-OH D3 в кровотоке со временем, не достигается просто средняя или максимальная концентрация) и кинетика в стационарном состоянии. Что касается первого момента, важно исследовать изменение формы кривых зависимости реакции от дозы при воздействи как витамина D3, так и 25-OH D3. Что касается второго момента, также необходимо исследовать их кинетику в стационарном состоянии, когда дозу дают реже, чем ежесуточно, поскольку это является предпочтительным режимом для групп, у которых может быть низкая податливость к ежедневным добавкам (таких как престарелые).

Следующие далее не являющиеся ограничительными примеры представлены для лучшего пояснения изобретения.

Примеры

Пример 1. Клинические испытания.

Композиция.

Высушенную распылением композицию с 25-OH D3 получают в виде порошка. Коротко, 25-OH D3 и DL- α-токоферол растворяют в масле среднецепных триглицеридах и затем эмульгируют в водном растворе модифицированного крахмала, сахарозы и аскорбата натрия. Эмульсию распыляют в распылительной сушилке в присутствии диоксида кремния. Полученный порошок собирают, когда содержание воды (LDO) составляет менее 4%, и просеивают через сито 400 мкм. Порошок упаковывают и герметично закрывают в алюминиевых пакетах и затем хранят в сухой атмосфере при температуре ниже 15 °C и используют в течение 12 месяцев со дня изготовления.

Получают три отдельные партии. Подробнее, получают основу, смешивая в течение 120 мин на производственной установке ERYMIX якорной мешалкой при 70 °C в вакууме входящие в нее

17,30 кг воды (WBI);

13,460 кг модифицированного пищевого крахмала (CAPSUL HS);

3,270 кг сахарозы;

0,730 кг аскорбата натрия.

Масляную фазу получают, смешивая в течение 35 мин в реакторе с двойными стенками пропеллерной мешалкой при 82 °C входящие в нее

0,550 кг масла BERGABEST МСТ 60/40;

0,049 кг кальцифедиола (HY-D, USP);

0,183 кг DL- α-токоферола.

Масляную фазу переносят в основу в производственной установке ERYMIX и предварительно эмульгируют ее внутренней коллоидальной мельницей (60 мин, 70 °C). Предэмульсию пропускают через гомогенизатор высокого давления (20 мин). Эмульсию вязкостью 60-90 мП при 70 °C переносят насосом высокого давления в головку распылителя. В качестве ожижающего агента в колонну подают диоксид кремния (SIPERNAT 320 DS). Параметры распыления и сушки приводятся ниже.

В каждой из трех партий 25-OH D3 получают в среднем 8,4 кг высушенного распылением порошка с содержанием 25-OH D3 примерно 0,25%. Другими компонентами композиции являются модифицированный пищевой крахмал - 73,2%, сахароза - 17,6%, аскорбат натрия - 4,0%, среднецепные триглицериды - 3,0%, диоксид кремния - 1,0% и DL- α-токоферол - 1,0%.

Высушенную распылением композицию с витамином D3 получают в виде порошка. Коротко, витамин D3 и DL- α-токоферол растворяют в масле среднецепных триглицеридах и затем эмульгируют в водном растворе модифицированного крахмала, сахарозы и аскорбата натрия. Эмульсию распыляют в распылительной сушилке в присутствии диоксида кремния. Полученный порошок собирают, когда содержание воды (LDO) составляет менее 4%, и просеивают для удаления комков. Порошок хранят в сухой атмосфере при температуре ниже 15 °C и используют в течение 12 месяцев со дня изготовления.

Клинические испытания.

Субъекты.

Набирают здоровых женщин в постклиматорическом периоде (возраст от 50 до 70 лет) с использованием информированного согласия и распределяют с использованием следующих критериев: сывороточный 25-гидроксивитамин D3 от 20 нмоль/л до 50 нмоль/л, индекс массы тела от 18 до 27 кг/м ² , кровяное давление ниже 146/95 мм рт.ст., сывороточный кальций менее 2,6 нмоль/л, глюкоза натощак менее 100 мг/дл, высокоинтенсивные физические нагрузки не более трех раз в неделю, не лечатся от гипертензии, не используют в высоких дозах витамин D или кальцийсодержащую добавку или лекарственное средство, воздействующее на метаболизм костной ткани (например, бифосфонат, кальцитонин, модулятор эстрогеновых рецепторов, гормонозаместительную терапию, паратиреоидный гормон) и не посещают "солнечные" места во время исследования.

Субъектов произвольно распределяют в одну из семи групп лечения (т.е. суточную, недельную, болюса в виде отдельной дозы и в виде комбинированной дозы). В каждую группу включают пять субъектов. За ними наблюдают в течение четырех месяцев в Цюрихе, Швейцария, в зимний период.

Клинические исследования.

Исследуют фармакокинетические характеристики витамина D3 и 25-OH D3. Исследуют эквимолярные количества обоих веществ. Схема приема основана на 20 мкг/сутки (или их эквиваленте в неделю) 25-OH D3. В целях сравнения необходимо вводить эквимолярные количества или витамина D3 или 25-OH D3. Что касается витамина D3, то рассчитывают дозу, достаточную для преодоления изменчивости фона и предоставляют как эффективную дозу для участников испытания.

Один раз в сутки: 120 введений

1. 25-OH D3 - 20 мкг

2. Витамин D3 - 20 мкг (800 ME)

Один раз в неделю: 16 введений

3. 25-OH D3 - 140 мкг

4. Витамин D3 - 140 мкг (5600 ME)

Болюс: отдельное введение

5. 25-OH D3 - 140 мкг

6. Витамин D3 - 140 мкг (5600 ME)

Болюс: комбинированное введение

7. D3 и 25-OH D3 - 140 мкг (5600 ME) + 140 мкг

Твердые желатиновые капсулы, которые упаковывают в пузырьки, содержат или 20 мкг, или 140 мкг на капсулу высушенного распылением или витамина D3 или 25-OH D3. Каждую дозировку принимают перорально за завтраком. Длительность исследования для групп "Один раз в сутки" и "Один раз в неделю" составляет четыре месяца. Субъекты, включенные в группу "Болюс", потребляют перорально одну дозировку при втором посещении.

Концентрации 25-OH D3 в плазме (например, максимальную и стационарную) определяют, получая образцы от субъектов в различное время после приема дозировки. Для целей скрининга и для установки базовых величин получают образец крови перед включением в исследование, и в клинической лаборатории измеряют количество витамина D3, 25-OH D3, кальция, креатинина и глюкозы натощак в сыворотке. В понедельник недели 1 исследования в течение 24 ч оценивают фармакокинетику сывороточных витамина D3, 25-OH D3 и 1,25-дигидроксивитамина D3; сывороточные маркеры (т.е. витамин D3, 25-OH D3, кальций, кретинин, альбумин, РТН, GOT, GPT, ALP, триглицериды, HDL, LDL, общий холестерин, bALP и глюкозу натощак) и уриновые маркеры (т.е. кальций, креатинин и DPD). Ежедневно берут образцы в остальные дни недели 1 и понедельник недели 2 для оценки сывороточных витамина D3 и 25-OH D3, сывороточных маркеров (т.е. кальция, креатинина, альбумина) и уриновых маркеров (т.е. кальция, креатинина). Оценку продолжают в понедельник недель 3, 5, 7, 9, 11, 13 и 15. В понедельник недели 16 берут образцы для оценки фармакокинетики сывороточных витаминов D3, 25-OH D3 и 1,25-дигидроксивитамина D3; сывороточных маркеров (т.е. витамина D3, 25-OH D3, кальция, креатинина, альбумина, РТН, GOT, GPT, ALP, триглицеридов, HDL, LDL, общего холестерина, bALP и глюкозы натощак) и уриновых маркеров (т.е. кальция, креатинина и DPD).

Результаты.

Табл. 1 показывает маркеры резорбции костей дезоксипиридинолин (DPD) и костноспецифическую щелочную фосфатазу (ВАР) после ежедневного и еженедельного лечения 25-OH D3 (20 мкг в день; 140 мкг в неделю соответственно) и ежедневного и еженедельного лечения витамином D3 (20 мкг в день; 140 мкг в неделю соответственно). Длительность лечения составляет 4 месяца. Величины представляют собой средние значения по методу наименьших квадратов GLM (обобщенная линейная модель), вычисленные для базовых маркеров резорбции костной ткани, возраста и индекса массы тела для 25-OH D3 и витамина D3.

Таблица 1

Табл. 2 показывает относительное изменение маркеров резорбции костной ткани дезоксипиридинолина (DPD) и костноспецифической щелочной фосфатазы (ВАР) после ежедневного и еженедельного лечения 25-OH D3 (20 мкг в день; 140 мкг в неделю соответственно) по сравнению с ежедневным и еженедельным лечением витамином D3 (20 мкг в день; 140 мкг в неделю соответственно). Длительность лечения составляет 4 месяца. Величины представляют собой средние значения по методу наименьших квадратов GLM (обобщенная линейная модель), приведенные в % улучшения, вычисленные для базовых маркеров костной ткани, возраста и индекса массы тела для 25-ОН D3 против витамина D3, приводятся в виде % редукции маркеров резорбции костной ткани после анализа повторных измерений в течение 13 визитов, вычисленных для базовых маркеров резорбции костной ткани, и времени для 25-OH D3 против витамина D3.

Таблица 2

Данные показывают, что лечение один раз в сутки или один раз в неделю 25-OH D3 неожиданно приводит к более заметной редукции маркеров резорбции костной ткани по сравнению с приемом идентичных доз витамина D3. После лечения 25-OH D3 субъекты показывают более явную редукцию маркеров резорбции костной ткани по сравнению с прежним лечением и по сравнению с лечением витамином D3. Редукция дезоксипиридинолина (DPD) и костноспецифической щелочной фосфатазы (ВАР) у субъектов, лечившихся 25-OH D3, при сравнении с лечением витамином D3 составляет 17,0 и 2,4% соответственно, результативная величина, которая клинически релевантна и представляет значимое благоприятное действие во всех возрастных группах.

Редукция маркеров резорбции костной ткани, таких как дезоксипиридинолин (DPD) и костноспецифическая щелочная фосфатаза (ВАР), показывает, что баланс между резорбцией костной ткани и образованием костной ткани сдвигается в сторону образования, которое в конечном счете приводит к приращению костной массы или по меньшей мере к сниженному уменьшению костной массы. Как вывод, лечение 25-OH D3 неожиданно приводит к весьма эффективной редукции маркеров резорбции костной ткани по сравнению с витамином D3, что показывает, что образование костной ткани ячеистой структуры улучшается после лечения 25-OH D3.

Табл. 3 показывает повышение уровней 25-OH D3 в плазме после дозировки 140 мкг 25-OH D3, дозировки 140 мкг витамина D или комбинированной дозировки 140 мкг 25-OH D3 + 140 мкг витамина D. Образцы крови берут согласно указанному времени.

Таблица 3

Как показано выше, имеет место синергичный отклик возрастания 25-OH D в плазме после комбинированного введения 140 мкг 25-OH D3 + 140 мкг витамина D3. Эффект является особенно явным в течение первых 6 ч. Более того, комбинированное введение дает длительное возрастание уровней 25-OH D в плазме по меньшей мере на 30 нмоль/л с 2 и до 206 ч (т.е. до 8,5 дней или в течение 1 недели). После введения 140 мкг 25-OH D3 возрастание уровней 25-OH D в плазме по меньшей мере на 30 нмоль/л наблюдают только в период между 4-49 ч, в то время как возрастания данной величины после введения одних 140 мкг витамина D3 не наблюдают.

Следовательно, комбинированное введение 140 мкг 25-OH D3 + 140 мкг витамина D3 дает два важных преимущества: оно приводит к быстрому и синергичному отклику возрастания 25-OH D3 в плазме, и оно приводит к неожиданно резко выраженному и протяженному плато уровней 25-OH D3 в плазме. Они являются особенно важными целями лечения недостатка витамина D: быстрая коррекция субоптимального статуса витамина D и долговременная и устойчивая концентрация в плазме для уверенности в достаточном снабжении всех тканей, зависимых от витамина D.

Лечение 25-OH D3 редуцирует маркеры резорбции костной ткани более эффективно по сравнению с равной дозировкой витамина D3. Это приводит к более выраженному сдвигу баланса между резорбцией костной ткани и образованием костной ткани в сторону образования и, следовательно, к улучшенному здоровью костной ткани. Из-за синергичного возрастания уровней 25-OH D3 в плазме после комбинированного введения 25-OH D3 и витамина D3 образование костной ткани ускоряется даже в дальнейшем, что приводит к большему благоприятствованию для здоровья костной ткани.