[RU]

Согласно настоящему изобретению предложен химерный рецептор антигена (CAR) или T-клеточный рецептор (TCR), который содержит внеклеточный домен, раскрытый в настоящем описании. Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к полинуклеотиду, кодирующему химерный рецептор антигена (CAR) или T-клеточный рецептор (TCR), которые содержат внеклеточный домен, раскрытый в настоящем описании. Другие аспекты настоящего изобретения относятся к клеткам, содержащим CAR или TCR, и их применению в T-клеточной терапии.

(57) Реферат / Формула:

Согласно настоящему изобретению предложен химерный рецептор антигена (CAR) или T-клеточный рецептор (TCR), который содержит внеклеточный домен, раскрытый в настоящем описании. Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к полинуклеотиду, кодирующему химерный рецептор антигена (CAR) или T-клеточный рецептор (TCR), которые содержат внеклеточный домен, раскрытый в настоящем описании. Другие аспекты настоящего изобретения относятся к клеткам, содержащим CAR или TCR, и их применению в T-клеточной терапии.

---

Евразийское (2D 201891965 (13) А1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки (51) Int. Cl. A61K48/00 (2006.01)
2019.04.30 C07K14/705 (2006.01)
(22) Дата подачи заявки 2017.03.31
(54) ХИМЕРНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ АНТИГЕНОВ И Т-КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
(31) (32)
62/317,258 2016.04.01
(33) US
(86) PCT/US2017/025351
(87) WO 2017/173256 2017.10.05
(71) Заявитель:
КАЙТ ФАРМА, ИНК. (US)
(72) Изобретатель: Вилтзиус Джед (US)
(74) Представитель:
Нилова М.И. (RU) (57) Согласно настоящему изобретению предложен химерный рецептор антигена (CAR) или T-клеточный рецептор (TCR), который содержит внеклеточный домен, раскрытый в настоящем описании. Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к полинуклеотиду, кодирующему химерный рецептор антигена (CAR) или T-клеточный рецептор (TCR), которые содержат внеклеточный домен, раскрытый в настоящем описании. Другие аспекты настоящего изобретения относятся к клеткам, содержащим CAR или TCR, и их применению в T-клеточной терапии.
ХИМЕРНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ АНТИГЕНОВ И Т-КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ
И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании предварительной
5 заявки на патент США № 62/317,258, поданной 1 апреля 2016 года, полное содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки.
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
[0002] Настоящая заявка содержит перечень последовательностей, который был
подан в электронном виде в формате ASCII, и его полное содержание включено в 10 настоящее описание посредством ссылки. Указанная копия ASCII, созданная 30 марта 2017 года, названа K-1031_02_SL.txt и имеет размер 414963 байта.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] Злокачественные новообразования по своей природе состоят из
нормальных клеток, которые претерпели генетическую или эпигенетическую конверсию с превращением в аномальные раковые клетки. При этом раковые клетки начинают экспрессировать белки и другие антигены, отличные от экспрессируемых нормальными клетками. Эти аберрантные опухолевые антигены могут использоваться врожденной иммунной системой организма для специфичного нацеливания на раковые клетки и их уничтожения. Однако раковые клетки задействуют различные механизмы для предотвращения успешного нацеливания иммунных клеток, таких как Т- и В-лимфоциты, на раковые клетки.
[0004] Современная Т-клеточная терапия основана на применении обогащенных
или модифицированных Т-клеток человека для нацеливания на раковые клетки и их
уничтожения в организме пациента. С целью улучшения способности Т-клеток к
нацеливанию на конкретную раковую клетку и ее уничтожению были разработаны
способы конструирования Т-клеток для экспрессии конструкций, которые нацеливают
Т-клетки на конкретную раковую клетку-мишень. Химерные рецепторы антигенов
(CAR) и конструированные Т-клеточные рецепторы (TCR), которые содержат
связывающие домены, способные взаимодействовать с конкретным опухолевым
антигеном, обеспечивают нацеливание Т-клеток на раковые клетки, которые
экспрессируют конкретный опухолевый антиген, и их уничтожение.
[0005] Существует потребность в улучшенных CAR и TCR для нацеливания на
5 раковые клетки и их уничтожения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0006] Настоящее изобретение удовлетворяет указанную потребность путем
обеспечения композиций и способов, включающих генетически сконструированные иммунные клетки, которые экспрессируют рецепторы антигенов (CAR) или Т-10 клеточные рецепторы (TCR), которые специфично нацеливаются на раковые клетки и уничтожают их.
[0007] CAR может содержать, например, (i) антигенспецифичный компонент
("антигенсвязывающую молекулу"), (ii) по меньшей мере один костимулирующий домен (включая шарнирный домен) и (iii) по меньшей мере один домен активации. 15 Каждый домен может быть гетерогенным, то есть состоящим из последовательностей, полученных из разных белковых цепей. Экспрессирующие CAR иммунные клетки (такие как Т-клетки) можно применять в различных видах терапии, включая терапию рака.
[0008] Как более подробно описано ниже, включая раздел Примеры, CAR,
20 содержащие костимулирующий домен, который содержит укороченный шарнирный домен ("THD"), неожиданно обеспечивают лучшие свойства по сравнению с CAR, содержащим костимулирующий домен, который содержит полноразмерный шарнирный домен ("CHD"). Полинуклеотиды, кодирующие такие CAR, могут быть трансдуцированы в Т-клетки, и CAR экспрессируются в Т-клетках, например, в 25 собственных Т-клетках пациента. Когда трансдуцированные Т-клетки трансплантируют обратно пациенту, CAR направляют Т-клетки на распознавание и связывание эпитопа, присутствующего на поверхности раковых клеток, обеспечивая таким образом связывание преимущественно раковых клеток по сравнению с нераковыми клетками. Это связывание приводит к активации цитолитических механизмов в Т-клетке, которые 30 специфично уничтожают связанные раковые клетки. До создания настоящего изобретения не было известно, что CAR, содержащие THD, превосходят CAR,
содержащий CHD. Таким образом, настоящее изобретение удовлетворяет существующую неудовлетворенную потребность в новых и улучшенных видах терапии для лечения рака.
[0009] Один аспект настоящего изобретения относится к выделенному
5 полинуклеотиду, кодирующему химерный рецептор антигена (CAR) или Т-клеточный рецептор (TCR), который содержит (i) антигенсвязывающую молекулу, (ii) костимулирующий домен и (iii) домен активации. Костимулирующий домен может содержать внеклеточный домен, трансмембранный домен и внутриклеточный домен, причем указанный внеклеточный домен содержит укороченный шарнирный домен,
10 состоящий по существу из или состоящий из (i) аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно
15 100% идентична аминокислотам 123-152 из SEQ Ш NO: 1, и, необязательно, (ii) от одной до шести аминокислот.
[00010] В некоторых вариантах реализации указанные от одной до -шести
аминокислот представляют собой гетерологичные аминокислоты.
[00011] В некоторых вариантах реализации укороченный шарнирный домен
20 состоит по существу из или состоит из аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% 25 идентична аминокислотам 123-152 из SEQ Ш NO: 1.
[00012] В некоторых вариантах реализации аминокислотная последовательность
кодируется нуклеотидной последовательностью, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере 30 приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ ID NO: 2.
[00013] В некоторых вариантах реализации трансмембранный домен представляет
собой трансмембранный домен 4-1BB/CD137, альфа-цепи Т-клеточного рецептора, бета-цепи Т-клеточного рецептора, CD3 эпсилон, CD4, CD5, CD8 альфа, CD9, CD 16, CD19, CD22, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154 или дзета-5 цепи Т-клеточного рецептора или любую их комбинацию.
[00014] В некоторых вариантах реализации трансмембранный домен содержит
аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей
10 мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере
приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 5.
[00015] В некоторых вариантах реализации трансмембранный домен кодируется
нуклеотидной последовательностью, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по
15 меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей
мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере
приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 4.
[00016] В некоторых вариантах реализации внутриклеточный домен содержит
сигнальный участок 4-1BB/CD137, активирующих рецепторов NK-клеток, В7-НЗ,
20 BAFFR, BLAME (SLAMF8), В TLA, CD100 (SEMA4D), CD103, CD160 (BY55), CD18, CD 19, CD 19а, CD2, CD247, CD27, CD276 (В7-НЗ), CD29, CD3 дельта, CD3 эпсилон, CD3 гамма, CD30, CD4, CD40, CD49a, CD49D, CD49f, CD69, CD7, CD84, CD8 альфа, CD8 бета, CD96 (Tactile), CD1 la, CD1 lb, CD1 lc, CD1 Id, CDS, CEACAM1, CRT AM, рецепторов цитокинов, DAP-10, DNAM1 (CD226), Fc-рецептора гамма, GADS, GITR, HVEM
25 (LIGHTR), IA4,1С AM-1,1С AM-1, Ig альфа (CD79a), IL2R бета, IL2R гамма, IL7R альфа, иммуноглобулиноподобных белков, индуцибельного костимулятора Т-клеток (ICOS), интегринов, ITGA4, ITGA4, ITGA6, ITGAD, ITGAE, ITGAL, ITGAM, ITGAX, ITGB2, ITGB7, ITGB1, KIRDS2, LAT, LFA-1, LFA-1, лиганда, специфично связывающегося с CD83, LIGHT, LIGHT (члена 14 суперсемейства фактора некроза опухолей; TNFSF14),
30 LTBR, Ly9 (CD229), ассоциированного с функцией лимфоцитов антигена 1 (LFA-1 (CD1 la/CD 18), молекулы главного комплекса гистосовместимости (МНС) класса I, NKG2C, NKG2D, NKp30, NKp44, NKp46, NKp80 (KLRF1), OX-40, PAG/Cbp, белка 1 программируемой смерти (PD-1), PSGL1, SELPLG (CD162), сигнальных молекул
активации лимфоцитов (белков SLAM), SLAM (SLAMF1; CD 150; ГРО-3), SLAMF4 (CD244; 2B4), SLAMF6 (NTB-A; Lyl08), SLAMF7, SLP-76, белков-рецепторов ФНО, TNFR2, рецептора Toll лиганда (Toll ligand receptor), TRANCE/RANKL, VLA1 или VLA-6 или их комбинацию.
5 [00017] В некоторых вариантах реализации внутриклеточный домен содержит
сигнальный участок 4-1BB/CD137.
[00018] В некоторых вариантах реализации внутриклеточный домен содержит
аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по
10 меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей
мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере
приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 7.
[00019] В некоторых вариантах реализации внутриклеточный домен содержит
аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной
15 последовательностью, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 6.
20 [00020] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула
содержит вариабельный участок тяжелой цепи (VH) и вариабельный участок легкой цепи (VL), причем указанный VH содержит 3 участка, определяющих комплементарность (CDR), и указанный VL содержит 3 CDR.
[00021] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула
25 специфично связывает антиген, выбранный из группы, состоящей из 5Т4, альфа-фетопротеина, антигена созревания В-клеток (ВСМА), СА-125, карциноэмбрионального антигена, CD19, CD20, CD22, CD23, CD30, CD33, CD56, CD123, CD138, c-Met, CSPG4, лектиноподобной молекулы 1 С-типа (CLL-1), EGFRvIII, эпителиального опухолевого антигена, ERBB2, FLT3, фолатсвязывающего белка, GD2, GD3, HER1-HER2 в 30 комбинации, HER2-HER3 в комбинации, HER2/Neu, HERV-K, гликопротеина gp41 оболочки ВИЧ-1, гликопротеина gpl20 оболочки ВИЧ-1, IL-11R альфа, каппа-цепи, лямбда-цепи, ассоциированного с меланомой антигена, мезотелина, MUC-1, мутантного
р53, мутантного ras, простатспецифического антигена, ROR1 или VEGFR2 или их комбинации.
[00022] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула
специфично связывает ВСМА, CLL-1 илиБЫЗ.
5 [00023] В некоторых вариантах реализации домен активации содержит
аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере 10 приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 9 или SEQ Ш NO: 251.
[00024] В некоторых вариантах реализации домен активации кодируется
нуклеотидной последовательностью, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по
15 меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей
мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере
приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 8.
[00025] В некоторых вариантах реализации CAR или TCR дополнительно
содержит лидерный пептид.
20 [00026] В некоторых вариантах реализации лидерный пептид содержит
аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере
25 приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 11.
[00027] В некоторых вариантах реализации лидерный пептид кодируется
нуклеотидной последовательностью, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей
30 мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 10.
[00028] Другой аспект настоящего изобретения относится к вектору,
содержащему полинуклеотид согласно описанному выше аспекту или варианту реализации.
[00029] В некоторых вариантах реализации вектор представляет собой
5 аденовирусный вектор, аденоассоциированный вектор, ДНК-вектор, лентивирусный
вектор, плазмиду, ретровирусный вектор или РНК-вектор или любую их комбинацию.
[00030] Еще один аспект настоящего изобретения относится к полипептиду,
кодируемому полинуклеотидом согласно описанному выше аспекту или варианту реализации или вектором согласно описанному выше аспекту или варианту реализации.
10 [00031] Другой аспект настоящего изобретения относится к клетке, содержащей
полинуклеотид согласно описанному выше аспекту или варианту реализации, вектор
согласно описанному выше аспекту или варианту реализации или полипептид согласно
описанному выше аспекту или варианту реализации или любую их комбинацию.
[00032] В некоторых вариантах реализации клетка представляет собой Т-клетку.
15 [00033] В некоторых вариантах реализации Т-клетка представляет собой
аллогенную Т-клетку, аутологичную Т-клетку, конструированную аутологичную Т-клетку (еАСТ(tm)) или инфильтрующий опухоль лимфоцит (TIL).
[00034] В некоторых вариантах реализации Т-клетка представляет собой Т-клетку
CD4+.
20 [00035] В некоторых вариантах реализации Т-клетка представляет собой Т-клетку
CD8+.
[00036] В некоторых вариантах реализации Т-клетка представляет собой клетку,
полученную in vitro.
[00037] В некоторых вариантах реализации Т-клетка представляет собой
25 аутологичную Т-клетку.
[00038] Один аспект настоящего изобретения относится к композиции,
содержащей полинуклеотид согласно описанному выше аспекту или варианту реализации, содержащей вектор согласно описанному выше аспекту или варианту реализации, содержащей полипептид согласно описанному выше аспекту или варианту
30 реализации или содержащей клетку согласно описанному выше аспекту или варианту реализации.
[00039] В некоторых вариантах реализации композиция приготовлена для
доставки субъекту и, необязательно, содержит по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
[00040] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу получения
5 клетки, экспрессирующей CAR или TCR, включающему трансдукцию клетки полинуклеотидом согласно описанному выше аспекту или варианту реализации в подходящих условиях.
[00041] В некоторых вариантах реализации указанный способ дополнительно
включает выделение клетки.
10 [00042] Еще один аспект настоящего изобретения относится к способу индукции
иммунного ответа против опухоли, включающему введение субъекту эффективного количества клеток, содержащих полинуклеотид согласно описанному выше аспекту или варианту реализации, содержащих вектор согласно описанному выше аспекту или варианту реализации или полипептид согласно описанному выше аспекту или варианту
15 реализации или любую их комбинацию.
[00043] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения рака
у нуждающегося в этом субъекта, включающему введение указанному субъекту полинуклеотида согласно описанному выше аспекту или варианту реализации, вектора согласно описанному выше аспекту или варианту реализации, полипептида согласно
20 описанному выше аспекту или варианту реализации, клетки согласно описанному выше аспекту или варианту реализации или композиции согласно описанному выше аспекту или варианту реализации.
[00044] В некоторых вариантах реализации рак представляет собой рак
кроветворной системы.
25 [00045] В некоторых вариантах реализации рак представляет собой рак,
происходящий из лейкоцитов.
[00046] В некоторых вариантах реализации рак представляет собой рак,
происходящий из плазматических клеток.
[00047] В некоторых вариантах реализации рак представляет собой лейкоз,
30 лимфому или миелому.
[00048] В некоторых вариантах реализации рак представляет собой острый
лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) (включая не-Т-клеточный ОЛЛ), острый миелоидный
лейкоз, В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, В-клеточный острый лимфоидный
лейкоз ("BALL"), бластическое плазмоцитоидное дендритное клеточное новообразование, лимфому Беркитта, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ), хронический миелогенный лейкоз (ХМЛ), хронический миелоидный лейкоз, хронический или острый лейкоз, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому 5 (ДКВЛ), фолликулярную лимфому (ФЛ), лейкоз ворсистых клеток, болезнь Ходжкина, злокачественные лимфопролиферативные состояния, лимфому MALT-типа, мантийноклеточную лимфому, лимфому маргинальной зоны, моноклональную гаммапатию неустановленной этиологии (МГНЭ), множественную миелому, миелодисплазию и миелодиспластический синдром, неходжкинскую лимфому (НХЛ),
10 пролиферативное заболевание плазматических клеток (включая бессимптомную миелому (тлеющую множественную миелому или индолентную миелому), плазмобластную лимфому, плазмоцитоидное дендритное клеточное новообразование, плазмоцитомы (включая дискразию плазматических клеток; солитарную миелому; солитарную плазмоцитому; экстрамедуллярную плазмоцитому и множественную
15 плазмоцитому), POEMS-синдром (также известный как синдром Кроу-Фукаса; болезнь Такацуки и РЕР-синдром), первичную медиастинальную крупноклеточную В-клеточную лимфому (ПМБКЛ), мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, лимфому маргинальной зоны селезенки (ЛМЗС), системный амилоидоз легкой цепи, Т-клеточный острый лимфоидный лейкоз ("TALL"), Т-клеточную
20 лимфому, трансформированную фолликулярную лимфому или макроглобулинемию Вальденстрема или их комбинацию.
[00049] Настоящее изобретение в общем относится к терапии с применением
аутологичных конструированных клеток, сокращенно называемой "еАСТ(tm)", также известной как адоптивный перенос клеток. еАСТ(tm) представляет собой процесс,
25 посредством которого собственные Т-клетки пациента собирают и далее генетически конструируют для распознавания и нацеливания на один или более антигенов, экспрессируемых на клеточной поверхности одной или более конкретных раковых клеток. Т-клетки можно конструировать таким образом, чтобы обеспечить экспрессию, например, CAR или TCR. CAR-положительные (CAR+) Т-клетки конструируют для
30 экспрессии CAR. CAR могут содержать, например, внеклеточный одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv) со специфичностью к конкретному опухолевому антигену, который прямо или опосредованно связан с внутриклеточным сигнальным участком, содержащим по меньшей мере один костимулирующий домен, который прямо
или опосредованно связан с по меньшей мере одним доменом активации; указанные компоненты могут быть расположены в любом порядке. Костимулирующий домен может быть получен из костимулирующего белка, известного в данной области техники, например, соответствующего SEQ Ш NO: 1, а домен активации может быть получен из, 5 например, любой формы CD3 дзета. В некоторых вариантах реализации создают CAR, содержащий два, три, четыре или более костимулирующих доменов. В некоторых вариантах реализации CAR конструируют таким образом, что костимулирующий домен экспрессируется как отдельная полипептидная цепь. Примеры терапии и конструкций на основе экспрессирующих CAR Т-клеток описаны в патентных публикациях США 10 №№ 2013/0287748, 2014/0227237, 2014/0099309 и 2014/0050708; международных патентных публикациях WO2012033885, WO2012079000, WO2014127261, WO2014186469, WO2015080981, WO2015142675, WO2016044745 и WO2016090369; и Sadelain etal, Cancer Discovery, 3: 388-398 (2013), полное содержание каждой из которых включено в настоящее описание посредством ссылки.
15 [00050] Любой аспект или вариант реализации согласно настоящему описанию
могут быть объединены с любым другим аспектом или вариантом реализации, раскрытыми в настоящем описании. Несмотря на то, что настоящее изобретение было описано в привязке к его подробному описанию, приведенное выше описание предназначено для иллюстрации и не ограничивает объем настоящего изобретения,
20 который определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты,
преимущества и модификации находятся в рамках последующей формулы изобретения.
[00051] Патентная и научная литература, упомянутая в настоящем описании,
относится к сведениям, которые доступны специалистам в данной области техники. Все патенты США и опубликованные или неопубликованные заявки на патент США,
25 упомянутые в настоящем описании, включены в него посредством ссылки. Все опубликованные зарубежные патенты и заявки на патент, упомянутые в настоящем описании, включены в него посредством ссылки. Все другие опубликованные ссылки, словари, документы, рукописи и научная литература, упомянутые в настоящем описании, включены в него посредством ссылки.
30 [00052] Другие признаки и преимущества настоящего изобретения будут понятны
из чертежей и последующего подробного описания, включая примеры, и формулы изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
[00053] Описанные выше и дополнительные признаки настоящего изобретения будут более понятны из последующего подробного описания, взятого в сочетании с прилагаемыми чертежами. Однако чертежи предназначены только для иллюстрации 5 и не являются ограничивающими.
[00054] На ФИГ. 1А показан костимулирующий белок, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш NO: 1. Отмечены шарнирный домен костимулирующего белка (подчеркнут сплошной линией), трансмембранный домен (подчеркнут точечной пунктирной линией) и сигнальный домен (подчеркнут
10 штриховой пунктирной линией). Жирным шрифтом выделен новый укороченный шарнирный домен ("THD"). ФИГ. 1В и 1С представляют собой ленточные диаграммы внеклеточного домена костимулирующего белка, содержащего аминокислотную последовательность SEQ Ш NO: 1. На ФИГ. 1В показан пример участка внутри аминокислотной последовательности SEQ Ш NO: 1, используемого для получения
15 одного варианта реализации шарнирного участка в контексте последовательности CAR, то есть участка, содержащего аминокислоты 114-152 из SEQ Ш NO: 1 (в настоящем описании назван как полноразмерный шарнирный домен или "CHD"; он обозначен черным и темно-серым цветом). На ФИГ. 1С показан THD, который содержит аминокислоты 123-152 из SEQ Ш NO: 1 (отмечен черным цветом). На ФИГ.
20 1В часть шарнирного участка, исключенная из ФИГ. 1С, отмечена темно-серым цветом и обведена.
[00055] На ФИГ. 2А-2Н показаны множественные выравнивания последовательностей CLUTSTAL W (2.83) для восьми типовых связывающих молекул, раскрытых в настоящем описании. На ФИГ. 2А показано выравнивание
25 последовательностей типовых связывающих молекул против CLL-1, содержащих домен VH. Показаны CDR и каркасные участки (FR) в соответствии с нумерацией по Чотиа (ФИГ. 2А). ФИГ. 2В представляет собой таблицу, в которой представлены SEQ Ш NO для каждого VH и CDR, показанного на ФИГ. 2А. На ФИГ. 2С показано выравнивание последовательностей типовых связывающих молекул против CLL-1,
30 содержащих домен VL. Показаны CDR и FR в соответствии с нумерацией по Чотиа (ФИГ. 2С). ФИГ. 2D представляет собой таблицу, в которой представлены SEQ Ш NO для каждой последовательности VH и CDR, показанной на ФИГ. 2С. На ФИГ. 2Е
показано выравнивание последовательностей типовых связывающих молекул против ВСМА, содержащих домен VH. Показаны участки, определяющие комплементарность (CDR), и каркасные участки (FR) в соответствии с нумерацией по Чотиа (ФИГ. 2Е). ФИГ. 2F представляет собой таблицу, в которой представлены SEQ 5 Ш N0 для каждого VH и CDR, показанного на ФИГ. 2Е. На ФИГ. 2G показано выравнивание последовательностей типовых связывающих молекул против ВСМА, содержащих домен VL. Показаны CDR и FR в соответствии с нумерацией по Чотиа (ФИГ. 2G). ФИГ. 2Н представляет собой таблицу, в которой представлены SEQ Ш N0 для каждой последовательности VH и CDR, показанной на ФИГ. 2G.
10 [00056] На ФИГ. 3 представлена экспрессия CAR в первичных Т-клетках человека, подвергнутых электропорации мРНК, кодирующей различные CAR. Показаны данные, полученные для CAR, содержащего полноразмерный шарнирный домен ("CHD"), и показаны данные, полученные для CAR, содержащего укороченный шарнирный домен ("THD").
15 [00057] На ФИГ. 4А-4Х показана выработка ИФНу, ИЛ-2 и ФНОа в подвергнутых электропорации Т-клетках, экспрессирующих CAR против FLT3, после совместного культивирования в течение 16 часов с указанными линиями клеток-мишеней. На ФИГ. 4А-4В, 4G-4H, 4M-4N и 4S-4T показана выработка ИФНу после совместного культивирования с клетками-мишенями Namalwa, EoL-1, HL60 и MV4;11,
20 соответственно. На ФИГ. 4C-4D, 4I-4J, 40-4Р и 4U-4V показана выработка ИЛ-2 после совместного культивирования с клетками-мишенями Namalwa, EoL-1, HL60 и MV4;11, соответственно. На ФИГ. 4E-4F, 4K-4L, 4Q-4R и 4W-4X показана выработка ФНОа после совместного культивирования с клетками-мишенями Namalwa, EoL-1, HL60 и MV4;11, соответственно.
25 [00058] На ФИГ. 5А-5Н показана цитолитическая активность подвергнутых электропорации Т-клеток, экспрессирующих CAR против FLT3, против линий клеток-мишеней Namalwa (ФИГ. 5А-5В), EoLl (ФИГ. 5C-5D), HL60 (ФИГ. 5E-5F) и MV4;11 (ФИГ. 5G-5H) после совместного культивирования в течение 16 часов. [00059] На ФИГ. 6А-6В представлена экспрессия CAR в трансдуцированных с
30 применением лентивируса первичных Т-клетках человека, полученных от двух здоровых доноров.
[00060] На ФИГ. 7A-7F показана выработка ИФНу (ФИГ. 7А-7В), ФНОа (ФИГ.
7C-7D) и ИЛ-2 (ФИГ. 7E-7F) в трансдуцированных с применением лентивируса
экспрессирующих CAR Т-клетках, полученных от двух здоровых доноров, после совместного культивирования в течение 16 часов с указанными линиями клеток-мишеней.
[00061] На ФИГ. 8A-8D показана средняя цитолитическая активность с течением 5 времени для Т-клеток, экспрессирующих конструкции CAR против FLT3, полученных от двух здоровых доноров, которые совместно культивировали с линиями клеток-мишеней Namalwa (ФИГ. 8А), ЕоЫ (ФИГ. 8В), MV4;11 (ФИГ. 8С) и HL60 (ФИГ. 8D), для 16, 40, 64, 88 или 112 часов.
[00062] На ФИГ. 9А-9В показана пролиферация трансдуцированных с 10 применением лентивируса экспрессирующих CAR Т-клеток, меченных CFSE, полученных от двух здоровых доноров, после совместного культивирования в течение 5 дней с частицами, содержащими CD3-CD28, или указанными линиями клеток-мишеней.
[00063] На ФИГ. 10A-10D представлена экспрессия CAR в трансдуцированных с 15 применением лентивируса первичных Т-клетках человека, используемых для исследований in vivo. На ФИГ. 10E-10F показаны графические изображения результатов измерений методом биолюминесцентной визуализации, выполненных в двух повторностях, для меченых клеток острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) после внутривенной инъекции либо контрольных (не экспрессирующих CAR, mock) Т-20 клеток, либо Т-клеток, экспрессирующих CAR против FLT3 (10E3-CHD, 10E3-THD или 8B5-THD) в ксеногенной модели. На ФИГ. 10G представлены значения р для соответствующих точек данных на ФИГ. 10Е. На ФИГ. 10Н-10К показаны кривые выживаемости для мышей, которых подвергали инъекции не экспрессирующими CAR Т-клетками или экспрессирующими CAR Т-клетками 10E3-CHD (ФИГ. ЮН), не 25 экспрессирующими CAR Т-клетками или экспрессирующими CAR Т-клетками 10ЕЗ-THD (ФИГ. 101), не экспрессирующими CAR Т-клетками или экспрессирующими CAR Т-клетками 8B5-THD (ФИГ. 10J) или экспрессирующими CAR Т-клетками 10E3-THD или 8B5-THD (ФИГ. 10К).
[00064] На ФИГ. 11 А- 11В показана экспрессия CAR против CLL-1, определяемая
30 по белку L, через 6 часов после электропорации мРНК.
[00065] На ФИГ. 12А-12С показаны результаты анализа высвобождения
цитокинов из различных конструированных Т-клеток, экспрессирующих CAR против
CLL-1, через 24 часа после электропорации мРНК. Уровни выработки ИЛ-2 (ФИГ.
12А), ИФНу (ФИГ. 12В) и ФНОа (ФИГ. 12С) показаны для контролей (клеток-мишеней отдельно, не экспрессирующих CAR Т-клеток, экспрессирующих GFP Т-клеток и экспрессирующих CD 19 CAR Т-клеток) и Т-клеток, экспрессирующих CAR против CLL-1 (24C1HL-THD, 24C1HL CHD, 24C8 HL-CHD и 24C8 HL THD), 5 которые, как указано, совместно культивировали с клетками Namalwa, MV4; 11, U937, HL60HEOL-1.
[00066] На ФИГ. 13А-13Е показана цитолитическая активность различных конструированных Т-клеток, экспрессирующих CAR против CLL-1, через 24 часа после электропорации мРНК. Т-клетки, подвергнутые электропорации контрольными
10 конструкциями (не содержащими CAR, GFP и CD 19 CAR) или конструкциями CAR против CLL-1 (24C8 HL-CHD и 24C8 HL THD), совместно культивировали с клетками-мишенями Namalwa (ФИГ. 13A), MV4;11 (ФИГ. 13В), EoL-1 (ФИГ. 13С), HL-60 (ФИГ. 13D) и U937, и определяли процент специфичного лизиса для каждой линии клеток-мишеней.
15 [00067] На ФИГ. 14А-14С показаны результаты анализа высвобождения цитокинов из различных трансдуцированных Т-клеток, экспрессирующих CAR против CLL-1, после совместного культивирования в течение 16 часов с различными линиями клеток. Уровни выработки ИФНу (ФИГ. 14А), ИЛ-2 (ФИГ. 14В) и ФНОа (ФИГ. 14С) показаны для контролей (клеток-мишеней отдельно и не
20 экспрессирующих CAR Т-клеток) и трансдуцированных Т-клеток, экспрессирующих CAR против CLL-1 (10E3 THD и 24C1LH THD), которые, как указано, совместно культивировали с клетками-мишенями Namalwa, HL-60 или MV4; 11. [00068] На ФИГ. 15А-15С показана цитолитическая активность Т-клеток, экспрессирующих CAR против CLL-1 (C124C1LHTHD), после совместного
25 культивирования в течение 16 часов и 40 часов с клетками-мишенями Namalwa (ФИГ. 15A), MV4;11 (ФИГ. 15В) mniHL-60 (ФИГ. 15С).
[00069] На ФИГ. 16A-16F показана выработка ИФНу, ФНОа и ИЛ-2 в трансдуцированных с применением лентивируса экспрессирующих CAR Т-клетках, полученных от двух здоровых доноров, после совместного культивирования в 30 течении 16 часов с линиями клеток-мишеней EoL-1 (черный цвет), NCI-H929 (светлосерый цвет) или MM1S (серый цвет). На ФИГ. 16А и 16В показана выработка ИФНу (пг/мл, ось у) в трансдуцированных с применением лентивируса экспрессирующих
CAR Т-клетках, полученных от первого донора (ФИГ. 16А) и второго донора (ФИГ.
16В). На ФИГ. 16С и 16D показана выработка ФНОа (пг/мл, ось у) в трансдуцированных с применением лентивируса экспрессирующих CAR Т-клетках, полученных от первого донора (ФИГ. 16С) и второго донора (ФИГ. 16D). На ФИГ. 16Е и 16F показана выработка ИЛ-2 (пг/мл, ось у) в трансдуцированных с 5 применением лентивируса экспрессирующих CAR Т-клетках, полученных от первого донора (ФИГ. 16Е) и второго донора (ФИГ. 16F).
[00070] На ФИГ. 17A-17F показана средняя цитолитическая активность (выраженная в виде процента оставшихся жизнеспособных клеток-мишеней; ось у) с течением времени для Т-клеток, экспрессирующих указанные CAR, полученных от
10 двух здоровых доноров, которые совместно культивировали с клетками-мишенями EoLl (ФИГ. 17А и 17В), NCI-H929 (ФИГ. 17С и 17D) или MM1S (ФИГ. 17Е и 17F), для 16 часов, 40 часов, 64 часов, 88 часов или 112 часов. На ФИГ. 17А и 17В показана средняя цитолитическая активность трансдуцированных экспрессирующих CAR Т-клеток, полученных от первого донора (ФИГ. 17А) и второго донора (ФИГ. 17В),
15 которые совместно культивировали с клетками-мишенями EoLl, для 16 часов, 40 часов, 64 часов, 88 часов или 112 часов. На ФИГ. 17С и 17D показана средняя цитолитическая активность трансдуцированных экспрессирующих CAR Т-клеток, полученных от первого донора (ФИГ. 17С) и второго донора (ФИГ. 17D), которые совместно культивировали с клетками-мишенями NCI-H929, для 16 часов, 40 часов,
20 64 часов, 88 часов или 112 часов. На ФИГ. 17Е и 17F показана средняя цитолитическая активность трансдуцированных экспрессирующих CAR Т-клеток, полученных от первого донора (ФИГ. 17Е) и второго донора (ФИГ. 17F), которые совместно культивировали с клетками-мишенями MM1S, для 16 часов, 40 часов, 64 часов, 88 часов или 112 часов.
25 [00071] На ФИГ. 18А и 18В показана пролиферация трансдуцированных с применением лентивируса экспрессирующих CAR Т-клеток, меченных CFSE, полученных от первого здорового донора (ФИГ. 18А) и второго здорового донора (ФИГ. 18В), после совместного культивирования в течение 6 дней с частицами, содержащими CD3-CD28 (верхний ряд), линиями клеток-мишеней EoL-1 (второй
30 ряд), NCI-H929 (третий ряд) или ММ1S (нижнй ряд).
[00072] ФИГ. 19А и ФИГ. 19В представляют собой графики, показывающие
термостабильность химерных рецепторов антигенов (CAR) согласно настоящему
изобретению. ФИГ. 19А: в растворе фосфатно-солевого буфера (ФСБ) CAR,
содержащий внеклеточный домен с укороченным шарнирным доменом ("THD"), имеет более высокую температуру плавления по сравнению с CAR, содержащим внеклеточный домен с полноразмерным шарнирным доменом ("CHD"). ФИГ. 19В: в присутствии 50 MMNaCl CAR, содержащий внеклеточный домен с THD, имеет более 5 высокую температуру плавления по сравнению с CAR, содержащим внеклеточный домен с CHD.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[00073] Настоящее изобретение относится к новым полипептидам, содержащим
новый укороченный шарнирный домен ("THD"), и полинуклеотидам, кодирующим
10 указанные полипептиды. Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к полинуклеотиду, кодирующему химерный рецептор антигена (CAR) или Т-клеточный рецептор (TCR), содержащий THD, раскрытый в настоящем описании. Согласно настоящему изобретению также предложены векторы (например, вирусные векторы), содержащие такие полинуклеотиды, и композиции, содержащие такие векторы.
15 Согласно настоящему изобретению также предложены полинуклеотиды, кодирующие такие CAR или TCR, и композиции, содержащие такие полинуклеотиды. Согласно настоящему изобретению дополнительно предложены конструированные клетки (например, Т-клетки), содержащие такие полинуклеотиды и/или трансдуцированные такими вирусными векторами, и композиции, содержащие такие конструированные
20 клетки. Согласно настоящему изобретению предложены композиции (например, фармацевтические композиции), содержащие множество конструированных Т-клеток. Согласно настоящему изобретению предложены способы получения таких конструированных Т-клеток и композиций и способы применения (например, для лечения меланомы) таких конструированных Т-клеток и композиций. Согласно
25 настоящему изобретению также предложен способ индукции иммунного ответа против опухоли, включающий введение субъекту эффективного количества клеток, содержащих полинуклеотид, вектор или полипептид согласно настоящему изобретению. Другие аспекты настоящего изобретения относятся к клеткам, содержащим CAR или TCR, и их применению в Т-клеточной терапии, например,
30 аутологичной клеточной терапии (еАСТ(tm)) для лечения пациента, страдающего от рака.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
[00074] С целью лучшего понимания настоящего изобретения ниже в первую
очередь приведены определения некоторых терминов. Дополнительные определения
для следующих терминов и других терминов приведены в тексте настоящего описания.
5 [00075] В настоящем описании и прилагаемой формуле изобретения
неопределенная и определенная формы единственного числа включают определяемые
объекты во множественном числе, если контекст явно не предписывает иное.
[00076] Если не указано конкретно или не очевидно из контекста, в настоящем
описании термин "или" следует понимать как включающий и охватывающий как "или", 10 так и "и".
[00077] Термин "и/или" в настоящем описании следует рассматривать как
конкретное раскрытие каждого из двух указанных признаков или компонентов совместно с другим или без другого. Таким образом, термин "и/или" в такой фразе как "А и/или В" в настоящем описании включает А и В; А или В; А (отдельно) и В 15 (отдельно). Аналогично, термин "и/или" в такой фразе как "А, В и/или С" включает каждый из следующих аспектов: А, В и С; А, В или С; А или С; А или В; В или С; А и С; А и В; В и С; А (отдельно); В (отдельно) и С (отдельно).
[00078] Термины "например" и "т. е." в настоящем описании используются
просто в качестве примера, не являются ограничивающими и не должны толковаться как 20 ссылающиеся исключительно на те элементы, которые явно перечислены в настоящем описании.
[00079] Термины "или более", "по меньшей мере", "более чем" и т. п., например,
"по меньшей мере один" включают, но не ограничиваются перечисленными, по меньшей мере 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24,
25 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, ПО, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137,
30 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149 или 150, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000 или более, чем указанное значение. Указанные
термины также включают любое большее число или дробное число в промежуточном диапазоне.
[00080] Наоборот, термин "не более чем" включает каждое значение, которое меньше указанного значения. Например, "не более 100 нуклеотидов" включает 100, 99, 5 98, 97, 96, 95, 94, 93, 92, 91, 90, 89, 88, 87, 86, 85, 84, 83, 82, 81, 80, 79, 78, 77, 76, 75, 74, 73, 72, 71, 70, 69, 68, 67, 66, 65, 64, 63, 62, 61, 60, 59, 58, 57, 56, 55, 54, 53, 52, 51, 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 и 0 нуклеотидов. Указанный термин также включает любое меньшее число или дробное число в
10 промежуточном диапазоне.
[00081] Термины "множество", "по меньшей мере два", "два или более", "по
меньшей мере второй" и т. д. включают, но не ограничиваются перечисленными, по меньшей мере 2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20,21,22, 23,24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50,
15 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, ПО, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149 или 150, 200, 300, 400, 500, 600, 700,
20 800, 900, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000 или более. Указанные термины также включают
любое большее число или дробное число в промежуточном диапазоне.
[00082] В тексте настоящего описания слово "содержащий" или его варианты,
такие как "включает" или "включающий", подразумевает включение указанного элемента, целочисленной переменной или этапа или группы элементов, целочисленных
25 переменных или этапов, но не исключение любого другого элемента, целочисленной переменной или этапа или группы элементов, целочисленных переменных или этапов. Следует понимать, что в настоящем описании во всех случаях описания аспектов с использованием терминологии "содержащий" также предложены аналогичные аспекты, описанные иначе в терминах "состоящий из" и/или "состоящий по существу из".
30 [00083] Если не указано конкретно или не очевидно из контекста, в настоящем
описании термин "примерно" относится к значению или составу, которые находятся в
пределах допустимого диапазона погрешностей для конкретного значения или состава,
определяемого специалистом в данной области техники, и данный диапазон отчасти
будет зависеть от способа измерения или определения значения или состава, т. е. от ограничений измерительной системы. Например, "примерно" или "состоящий по существу из" на практике в данной области техники может означать в пределах одного или более одного стандартных отклонений. "Примерно" или "состоящий по существу 5 из" может означать диапазон до 10% (т. е. ± 10%). Таким образом, "примерно" можно понимать как составляющий на 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1%, 0,05% 0,01% или 0,001% больше или меньше, чем указанное значение. Например, приблизительно 5 мг может включать любое количество от 4,5 до 5,5 мг. Кроме того, в частности, в отношении биологических систем или процессов, указанные термины
10 могут иметь значение до порядка величины или до 5-кратного значения величины. В случаях, когда в настоящем раскрытии предложены конкретные значения или составы, если не указано иное, следует считать, что "примерно" или "состоящий по существу из" означают нахождение в пределах допустимого диапазона погрешностей для этого конкретного значения или состава.
15 [00084] Следует понимать, что в настоящем описании любой диапазон
концентраций, процентный диапазон, диапазон соотношений или диапазон целочисленных значений включает значение любого целого числа в пределах указанного диапазона и, при необходимости, его дробные доли (такие как одна десятая и одна сотая целого числа), если не указано иное.
20 [00085] Единицы, префиксы и символы в настоящем описании приведены в их
форме, принятой согласно Международной системе единиц (СИ). Числовые диапазоны включают числа, определяющие диапазон.
[00086] Если не указано иное, все технические и научные термины в настоящем
описании имеют то же самое значение, которое обычно понятно специалисту в данной
25 области техники, к которой относится настоящее раскрытие. Например, в публикациях Juo, "The Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology", 2nd ed., (2001), CRC Press; "The Dictionary of Cell & Molecular Biology", 5th ed., (2013), Academic Press и "The Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology", Cammack et al. eds., 2nd ed, (2006), Oxford University Press для специалистов в данной области техники предложен
30 общий словарь для многих терминов, используемых в настоящем раскрытии.
[00087] "Введение" относится к физическому введению агента в организм
субъекта с применением любого из различных способов и систем доставки, известных
специалистам в данной области техники. Типичные пути введения составов, раскрытых в настоящем описании, включают внутривенный, внутримышечный, подкожный, внутрибрюшинный, спинальный или другие парентеральные пути введения, например, введение посредством инъекции или инфузии. Фраза "парентеральное введение" в 5 настоящем описании означает способы введения, отличные от энтерального и местного введения, обычно введение посредством инъекции, и включает, но не ограничивается перечисленными, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, интратекальную, внутрилимфатическую, внутриочаговую, внутрикапсулярную, внутриглазничную, внутрисердечную, внутрикожную, внутрибрюшинную,
10 транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, внутрисуставную, субкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную, эпидуральную и интрастернальную инъекцию и инфузию, а также электропорацию in vivo. В некоторых вариантах реализации состав вводят посредством непарентерального пути, например, перорально. Другие непарентеральные пути включают местный, эпидермальный пути введения или
15 введение через слизистые, например, интраназальное, вагинальное, ректальное,
подъязычное или местное введение. Введение также может выполняться, например,
однократно, несколько раз и/или в течение одного или более длительных периодов.
[00088] Термин "антитело" (АЬ) включает, но не ограничивается
перечисленными, гликопротеин иммуноглобулин, который специфично связывается с
20 антигеном. В общем, антитело может содержать по меньшей мере две тяжелые (Н) цепи и две легкие (L) цепи, соединенные между собой дисульфидными связями, или их антигенсвязывающую молекулу. Каждая Н-цепь содержит вариабельный участок тяжелой цепи (сокращенно обозначенный в настоящем описании как VH) и константный участок тяжелой цепи. Константный участок тяжелой цепи содержит три константных
25 домена, CHI, СН2 и СНЗ. Каждая легкая цепь содержит вариабельный участок легкой цепи (сокращенно обозначенный в настоящем описании как VL) и константный участок легкой цепи. Константный участок легкой цепи содержит один константный домен, CL. Участки VH и VL можно далее подразделить на участки гипервариабельности, называемые участками, определяющими комплементарность (CDR), которые
30 чередуются с более консервативными участками, называемыми каркасными участками
(FR). Каждый VH и VL содержит три CDR и четыре FR, расположенных в следующем
порядке от N-конца до С-конца: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4.
Вариабельные участки тяжелой и легкой цепей содержат связывающий домен, который
взаимодействует с антигеном. Константные участки АЬ могут опосредовать связывание
иммуноглобулина с тканями или факторами организма-хозяина, включая различные
клетки иммунной системы (например, эффекторные клетки) и первый компонент (Clq)
классической системы комплемента.
5 [00089] Антитела могут включать, например, моноклональные антитела,
рекомбинантные антитела, моноспецифичные антитела, мультиспецифичные антитела (включая биспецифичные антитела), антитела человека, конструированные антитела, гуманизированные антитела, химерные антитела, иммуноглобулины, синтетические антитела, тетрамерные антитела, содержащие две молекулы тяжелой цепи и две
10 молекулы легкой цепи, мономер легкой цепи антитела, мономер тяжелой цепи антитела, димер легкой цепи антитела, димер тяжелой цепи антитела, пару легкая цепь антитела-тяжелая цепь антитела, интратела, слитые антитела (иногда упоминаемые в настоящем описании как "конъюгаты антител"), антитела, представляющие собой гетероконъюгаты, однодоменные антитела, моновалентные антитела, одноцепочечные
15 антитела или одноцепочечные Fv (scFv), камелизированные антитела, аффитела, фрагменты Fab, фрагменты F(ab')2, Fv, соединенные дисульфидными связями (sdFv), антиидиотипические (анти-Id) антитела (включая, например, анти-анти-Id антитела), миниантитела, доменные антитела, синтетические антитела (иногда упоминаемые в настоящем описании как "миметики антител") и антигенсвязывающие фрагменты
20 любого из вышеупомянутых антител. В некоторых вариантах реализации антитела
согласно настоящему описанию относятся к популяциям поликлональных антител.
[00090] Иммуноглобулин может быть получен из любого из широко известных
изотипов, включающих, но не ограничивающихся перечисленными, IgA, секреторный IgA, IgG, IgE и IgM. Подклассы IgG также хорошо известны специалистам в данной
25 области техники и включают, но не ограничиваются перечисленными, IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4 человека. "Изотип" относится к классу или подклассу АЬ (например, IgM или IgGl), который кодируется генами константного участка тяжелой цепи. Термин "антитело" включает, в качестве примера, как природные, так и неприродные АЬ; моноклональные и поликлональные АЬ; химерные и гуманизированные АЬ; АЬ человека
30 или АЬ вида, отличного от человека; полностью синтетические АЬ и одноцепочечные АЬ. АЬ вида, отличного от человека, может быть гуманизировано рекомбинантными способами для снижения его иммуногенности для человека. Если не указано конкретно и если контекст не указывает иное, термин "антитело" также включает
антигенсвязывающий фрагмент или антигенсвязывающий участок любого из вышеупомянутых иммуноглобулинов и включает моновалентный и бивалентный фрагмент или участок и одноцепочечное АЬ.
[00091] "Антигенсвязывающая молекула", "антигенсвязывающий участок" или
5 "фрагмент антитела" относится к любой молекуле, содержащей антигенсвязывающие участки (например, CDR) антитела, из которого получена указанная молекула. Антигенсвязывающая молекула может содержать антигенные участки, определяющие комплементарность (CDR). Примеры фрагментов антител включают, но не ограничиваются перечисленными, Fab, Fab', F(ab')2 и Fv-фрагменты, dAb, линейные
10 антитела, scFv-антитела и мультиспецифичные антитела, образованные из антигенсвязывающих молекул. Пептитела (т. е. слитые с Fc молекулы, содержащие пептидсвязывающие домены) представляют собой еще один пример подходящих антигенсвязывающих молекул. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула связывается с антигеном на опухолевой клетке. В
15 некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула связывается с антигеном на клетке, участвующей в гиперпролиферативном заболевании, или с вирусным или бактериальным антигеном. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула связывается с ВСМА, CLL-1 или FLT3. В других вариантах реализации антигенсвязывающая молекула представляет собой фрагмент
20 антитела, который специфично связывается с антигеном, содержащий один или более участков, определяющих комплементарность (CDR), этого антитела. В других вариантах реализации антигенсвязывающая молекула представляет собой одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv). В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула содержит или состоит из авимеров.
25 [00092] В настоящем описании термины "вариабельный участок" или
"вариабельный домен" используются взаимозаменяемо, и они являются общепринятыми в данной области техники. Вариабельный участок обычно относится к участку антитела, как правило, к участку легкой или тяжелой цепи, обычно к приблизительно 110-120 аминокислотам из N-концевой последовательности в зрелой
30 тяжелой цепи и приблизительно 90-115 аминокислотам в зрелой легкой цепи,
последовательности которых значительно различаются среди антител и используются
для обеспечения связывания и специфичности конкретного антитела для его
конкретного антигена. Вариабельность последовательности сосредоточена в участках,
называемых участками, определяющими комплементарность (CDR), тогда как более высококонсервативные участки в вариабельном домене называются каркасными участками (FR). Без привязки к какому-либо конкретному механизму или теории, считается, что CDR легкой и тяжелой цепей в первую очередь ответственны за 5 взаимодействие и специфичность антитела к антигену. В некоторых вариантах реализации вариабельный участок представляет собой вариабельный участок человека. В некоторых вариантах реализации вариабельный участок содержит CDR грызуна или мыши и каркасные участки человека (FR). В конкретных вариантах реализации вариабельный участок представляет собой вариабельный участок примата (например, 10 примата, отличного от человека). В некоторых вариантах реализации вариабельный участок содержит CDR грызуна или мыши и каркасные участки (FR) примата (например, примата, отличного от человека).
[00093] Термины "VL" и "домен VL" используются взаимозаменяемо для
обозначения вариабельного участка легкой цепи антитела или его антигенсвязывающей 15 молекулы.
[00094] Термины "VH" и "домен VH" используются взаимозаменяемо для
обозначения вариабельного участка тяжелой цепи антитела или его антигенсвязывающей молекулы.
[00095] Ряд определений CDR является общепринятым: нумерация по Кабату,
20 нумерация по Чотиа, нумерация АЬМ или контактная нумерация. Определение АЬМ
представляет собой компромисс между первыми двумя и используется программным
обеспечением для моделирования антител АЬМ от Oxford Molecular. Контактное
определение основано на анализе имеющихся комплексных кристаллических структур.
[00096] Таблица 1. Нумерация CDR
Петля
Кабат
АЬМ
Чотиа
Контактная
L24-L34
L24-L34
L24-L34
L30-L36
L50-L56
L50-L56
L50-L56
L46-L55
L89-L97
L89-L97
L89-L97
L89-L96
H31--H35B
(Нумерация по Кабату)
Н26-Н35В
Н26--Н32..34
Н30--Н35В
Н31--Н35
(Нумерация по Чотиа)
Н26-Н35
Н26--Н32
Н30--Н35
Н50--Н65
Н50-Н58
Н52--Н56
Н47--Н58
Н95--Н102
Н95-Н102
Н95--Н102
Н93--Н101
[00097] Термин "нумерация по Кабату" и похожие термины являются
признанными в данной области техники и относятся к системе нумерации аминокислотных остатков в вариабельных участках тяжелой и легкой цепей антитела 5 или его антигенсвязывающей молекуле. В некоторых аспектах CDR антитела могут быть определены в соответствии с системой нумерации по Кабату (см., например, Kabat ЕА & Wu ТТ (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391 и Kabat EA et al, (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242). Согласно системе нумерации по Кабату, CDR
10 внутри молекулы тяжелой цепи антитела обычно расположены в позициях аминокислот 31-35, которые, необязательно, могут включать одну или две дополнительные аминокислоты после 35 (называемые в схеме нумерации по Кабату как 35А и 35В), (CDR1), позициях аминокислот 50-65 (CDR2) и позициях аминокислот 95-102 (CDR3). Согласно системе нумерации по Кабату, CDR внутри молекулы легкой цепи антитела
15 обычно расположены в позициях аминокислот 24-34 (CDR1), позициях аминокислот 5056 (CDR2) и позициях аминокислот 89-97 (CDR3). В конкретном варианте реализации CDR антител согласно настоящему описанию были определены в соответствии со схемой нумерации по Кабату.
[00098] В некоторых аспектах CDR антитела могут быть определены в
20 соответствии со схемой нумерации по Чотиа, которая относится к расположению структурных петель иммуноглобулинов (см., например, Chothia С & Lesk AM, (1987), J Mol Biol 196: 901-917; Al-Lazikani В et al, (1997) J Mol Biol 273: 927-948; Chothia С et al, (1992) J Mol Biol 227: 799-817; Tramontano A et al, (1990) J Mol Biol 215(1): 175-82 и патент США № 7709226). Как правило, при использовании системы нумерации по
Кабату петля CDR-H1 согласно нумерации по Чотиа расположена в позициях аминокислот 26-32, 33 или 34 тяжелой цепи, петля CDR-H2 согласно нумерации по Чотиа расположена в позициях аминокислот 52-56 тяжелой цепи и петля CDR-H3 согласно нумерации по Чотиа расположена в позициях аминокислот 95-102 тяжелой 5 цепи, тогда как петля CDR-L1 согласно нумерации по Чотиа расположена в позициях аминокислот 24-34 легкой цепи, петля CDR-L2 согласно нумерации по Чотиа расположена в позициях аминокислот 50-56 легкой цепи и петля CDR-L3 согласно нумерации по Чотиа расположена в позициях аминокислот 89-97 легкой цепи. Конец петли CDR-HI согласно нумерации по Чотиа при нумерации с использованием системы
10 нумерации по Кабату варьирует между Н32 и Н34 в зависимости от длины петли (это объясняется тем, что схема нумерации по Кабату предполагает размещение вставок в позициях Н35А и Н35В; если и 35 А, и 35В отсутствуют, петля заканчивается в позиции 32; если присутствует только 35А, петля заканчивается в позиции 33; если присутствуют и 35А, и 35В, петля заканчивается в позиции 34). В конкретном варианте реализации
15 CDR антител согласно настоящему описанию были определены в соответствии со схемой нумерации по Чотиа.
[00099] В настоящем описании термины "константный участок" и "константный
домен" являются взаимозаменяемыми и имеют значение, общепринятое в данной области техники. Константный участок представляет собой участок антитела, например,
20 С-концевой участок легкой и/или тяжелой цепи, который непосредственно не участвует в связывании антитела с антигеном, но который может выполнять различные эффекторные функции, такие как взаимодействие с Fc-рецептором. Константный участок молекулы иммуноглобулина обычно содержит более консервативную аминокислотную последовательность по сравнению с вариабельным доменом
25 иммуноглобулина.
[000100] В настоящем описании термин "тяжелая цепь", используемый в отношении антитела, может относиться к любому отдельному типу, например, альфа (а), дельта (8), эпсилон (s), гамма (у) и мю (ц), основанному на аминокислотной последовательности константного домена, что обусловливает наличие классов антител
30 IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, соответственно, включая подклассы IgG, например, IgGi, IgG2, IgG3 и IgG4.
[000101] В настоящем описании термин "легкая цепь", используемый в отношении
антитела, может относиться к любому отдельному типу, например, каппа (к) или лямбда
(к), основанному на аминокислотной последовательности константных доменов. Аминокислотные последовательности легкой цепи хорошо известны в данной области техники. В конкретных вариантах реализации легкая цепь представляет собой легкую цепь человека.
5 [000102] "Аффинность связывания" в общем относится к силе совокупных нековалентных взаимодействий между отдельным сайтом связывания молекулы (например, антитела) и ее партнером по связыванию (например, антигеном). Если не указано иное, в настоящем описании "аффинность связывания" относится к истинной аффинности связывания, которая отражает взаимодействие 1:1 между членами пары
10 связывания (например, антителом и антигеном). Аффинность молекулы X для ее партнера Y может в общем быть представлена с помощью константы диссоциации (KD). Аффинность может быть измерена и/или выражена рядом способов, известных в данной области техники, включающих, но не ограничивающихся перечисленными, равновесную константу диссоциации (KD) И равновесную константу ассоциации (КА).
15 KD рассчитывают из отношения k0ff/k0n, тогда как КА рассчитывают из отношения k0n/k0ff. k0n относится к константе скорости ассоциации, например, антитела и антигена, a k0ff относится к диссоциации, например, антитела и антигена. kon и k0ff могут быть определены с помощью способов, известных специалисту в данной области техники, таких как анализы BIACORE(r) или KinExA.
20 [000103] В настоящем описании "консервативная замена аминокислоты" представляет собой замену, при которой аминокислотный остаток заменен на аминокислотный остаток, содержащий сходную боковую цепь. В данной области техники были определены семейства аминокислотных остатков, содержащих боковые цепи. Эти семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями
25 (например, лизин, аргинин, гистидин), кислыми боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серии, треонин, тирозин, цистеин, триптофан), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин), бета-разветвленными боковыми цепями
30 (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин). В некоторых вариантах реализации один или несколько аминокислотных остатков внутри одного или более CDR или внутри
одного или более каркасного участка антитела или его антигенсвязывающей молекулы могут быть заменены на аминокислотный остаток со сходной боковой цепью. [000104] В настоящем описании термин "гетерологичный" означает полученный из любого источника, отличного от источника природных последовательностей. Например, 5 гетерологичная последовательность, включенная в виде части костимулирующего белка, содержащего аминокислотную последовательность SEQ Ш NO: 1, например, соответствующего костимулирующего белка человека, представляет собой аминокислоты, которые в природе не встречаются в виде костимулирующего белка человека дикого типа, т. е. не выравниваются с этим белком. Например, гетерологичная 10 нуклеотидная последовательность относится к нуклеотидной последовательности, отличной от последовательности, кодирующей костимулирующий белок человека дикого типа.
[000105] В настоящем описании "эпитоп" представляет собой термин, используемый в данной области техники, и относится к локализованному участку
15 антигена, с которым антитело может специфично связываться. Эпитоп может представлять собой, например, смежные аминокислоты полипептида (линейный или смежный эпитоп), или эпитоп может, например, быть образован двумя или более несмежными участками полипептида или полипептидов (конформационный, нелинейный, прерывистый или несмежный эпитоп). В некоторых вариантах реализации
20 эпитоп, с которым связывается антитело, может быть определен посредством, например, ЯМР-спектроскопии, кристаллографических исследований методом дифракции рентгеновских лучей, анализов ELISA, обмена водорода/дейтерия в сочетании с масс-спектрометрией (например, жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией с ионизацией электрораспылением), сканирующих анализов олигопептидов, основанных
25 на использовании массива данных, и/или картирования с применением мутагенеза (например, картирования с применением сайт-направленного мутагенеза). Для кристаллографии методом дифракции рентгеновских лучей кристаллизация может быть выполнена с применением любого способа, известного в данной области техники (например, Giege R et al, (1994) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50(Pt 4): 339-350;
30 McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23; Chayen NE (1997) Structure 5: 1269-1274;
McPherson A (1976) J Biol Chem 251: 6300-6303). Кристаллы антитело:антиген могут
быть исследованы с применением хорошо известных методов дифракции рентгеновских
лучей, и структуры могут быть уточнены с использованием компьютерного
программного обеспечения, такого как X-PLOR (Yale University, 1992, компания-поставщик Molecular Simulations, Inc.; см., например, Meth Enzymol (1985) volumes 114 & 115, eds Wyckoff HW et al.,; U.S. 2004/0014194) и BUSTER (Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49(Pt 1): 37-60; Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A: 3615 423, ed Carter CW; Roversi P et al, (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10): 1316-1323). Исследования в области картирования с применением мутагенеза могут быть выполнены любым способом, известным специалисту в данной области техники. См., например, Champe М et al, (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394 и Cunningham ВС & Wells JA (1989) Science 244: 1081-1085 для описания методов мутагенеза, включая
10 методы аланин-сканирующего мутагенеза.
[000106] В настоящем описании антигенсвязывающая молекула, антитело или его антигенсвязывающая молекула "перекрестно конкурирует" с эталонным антителом или его антигенсвязывающей молекулой, если взаимодействие между антигеном и первой связывающей молекулой, антителом или его антигенсвязывающей молекулой
15 блокирует, ограничивает, ингибирует или иным образом снижает способность эталонной связывающей молекулы, эталонного антитела или его антигенсвязывающей молекулы взаимодействовать с антигеном. Перекрестная конкуренция может быть полной, например, связывание связывающей молекулы с антигеном полностью блокирует способность эталонной связывающей молекулы связывать антиген, или она
20 может быть частичной, например, связывание связывающей молекулы с антигеном снижает способность эталонной связывающей молекулы связывать антиген. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула, которая перекрестно конкурирует с эталонной антигенсвязывающей молекулой, связывает тот же самый или перекрывающийся эпитоп, что и эталонная антигенсвязывающая молекула. В других
25 вариантах реализации антигенсвязывающая молекула, которая перекрестно конкурирует с эталонной антигенсвязывающей молекулой, связывает другой эпитоп по сравнению с эталонной антигенсвязывающей молекулой. Многочисленные типы конкурентных анализов связывания могут применяться для определения того, конкурирует ли одна антигенсвязывающая молекула с другой, например: твердофазный
30 прямой или непрямой радиоиммуноанализ (RIA); твердофазный прямой или непрямой
иммуноферментный анализ (EIA); конкурентный сэндвич-анализ (Stahli et al., 1983,
Methods in Enzymology 9:242-253); твердофазный прямой EIA с образованием авидин-
биотинового комплекса (Kirkland et al., 1986, J. Immunol. 137:3614-3619); твердофазный
прямой анализ с применением метки, твердофазный прямой сэндвич-анализ с применением метки (Harlow and Lane, 1988, Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press); твердофазный прямой RIA с применением 1-125 в качестве метки (Morel et al., 1988, Molec. Immunol. 25:7-15); твердофазный прямой EIA с образованием авидин-5 биотинового комплекса (Cheung, et al., 1990, Virology 176:546-552) и прямой RIA с применением метки (Moldenhauer et al., 1990, Scand. J. Immunol. 32:77-82). [000107] В настоящем описании термины "иммуноспецифично связывает", "иммуноспецифично распознает", "специфично связывает" и "специфично распознает" являются аналогичными терминами в контексте описания антител и относятся к
10 молекулам, которые связываются с антигеном (например, эпитопом или иммунным комплексом), в той мере как такое связывание понимается специалистом в данной области техники. Например, молекула, которая специфично связывается с антигеном, может связываться с другими пептидами или полипептидами, как правило, с более низкой аффинностью, как определено посредством, например, иммуноанализов
15 BIACORE(r) на приборе KinExA 3000 (Sapidyne Instruments, Boise, Ш) или других анализов, известных в данной области техники. В конкретном варианте реализации молекулы, специфично связывающиеся с антигеном, связываются с антигеном с КА, которая составляет по меньшей мере 2 log, 2,5 log, 3 log, 4 log или больше, чем КА, соответствующая связыванию молекул с другим антигеном.
20 [000108] В другом варианте реализации молекулы, специфично связывающиеся с антигеном, связываются с константой диссоциации (Kd), составляющей приблизительно 1 х 10"7 М. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула специфично связывает антиген с "высокой аффинностью", когда Kd составляет от приблизительно 1 х 10"9 М до приблизительно 5 х 10"9 М. В некоторых вариантах
25 реализации антигенсвязывающая молекула специфично связывает антиген с "очень высокой аффинностью", когда Kd составляет от 1 х 10"10 М до приблизительно 5 х Ю"10 М. В одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула характеризуется Kd 10" 9 М. В одном варианте реализации скорость диссоциации составляет менее приблизительно 1 х Ю"5. В других вариантах реализации антигенсвязывающая молекула
30 связывает ВСМА человека с Kd, составляющей от приблизительно 1 х Ю"7 М до приблизительно 1 х Ю"13 М. В еще одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула связывает ВСМА человека с Kd, составляющей от приблизительно 1 х 10"10 М до 5 х 10"10M.
[000109] В конкретном варианте реализации настоящего изобретения предложены антитело или его антигенсвязывающая молекула, которые связываются с антигеном-мишенью человека, например, ВСМА человека или CLL-1 человека, с более высокой аффинностью по сравнению с антигенами-мишенями других видов, например, ВСМА 5 вида, отличного от человека, или CLL-1 вида, отличного от человека. В некоторых вариантах реализации настоящего изобретения предложены антитело или его антигенсвязывающая молекула, которые связываются с антигеном-мишенью человека, например, ВСМА человека или CLL-1 человека, с аффинностью, составляющей 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70% или больше по
10 сравнению с антигенами-мишенями других видов, как измерено посредством, например, радиоиммуноанализа, поверхностного плазмонного резонанса или кинетического эксклюзионного анализа. В конкретном варианте реализации антитело или его антигенсвязывающая молекула согласно настоящему описанию, которые связываются с антигеном-мишенью человека, будут связываться с антигеном-мишенью другого вида
15 со степенью связывания, составляющей менее чем 10%, 15% или 20% от связывания антитела или его антигенсвязывающей молекулы с антигеном человека, как измерено посредством, например, радиоиммуноанализа, поверхностного плазмонного резонанса или кинетического эксклюзионного анализа.
[000110] "Антиген" относится к любой молекуле, которая провоцирует иммунный 20 ответ или способна быть связанной антителом или антигенсвязывающей молекулой. Иммунный ответ может включать либо выработку антител, либо активацию специфичных иммунокомпетентных клеток, либо и то, и другое. Специалисту в данной области техники с легкостью будет понятно, что любая макромолекула, включая практически все белки или пептиды, может служить в качестве антигена. Антиген может 25 экспрессироваться эндогенно, т. е. экспрессироваться геномной ДНК, или может экспрессироваться рекомбинантно. Антиген может быть специфичным для конкретной ткани, такой как раковая клетка, или он может экспрессироваться неспецифично. Кроме того, фрагменты более крупных молекул могут выступать в качестве антигенов. В одном варианте реализации антигены представляют собой опухолевые антигены. В одном 30 конкретном варианте реализации антиген представляет собой целую молекулу или фрагмент ВСМА, FLT3 или CLL-1.
[000111] Термин "нейтрализация" относится к антигенсвязывающей молекуле,
scFv, антителу или его фрагменту, которые связываются с лигандом и предотвращают
или снижают биологический эффект этого лиганда. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула, scFv, антитело или его фрагмент непосредственно блокируют сайт связывания на лиганде или иным образом изменяют способность лиганда к связыванию посредством косвенных путей (таких как структурные или 5 энергетические изменения в лиганде). В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула, scFv, антитело или его фрагмент предотвращают выполнение биологической функции белка, с которым они связываются. [000112] В настоящем описании термин "ВСМА" относится к антигену созревания В-клеток, который может включать, но не ограничивается перечисленными, природный
10 ВСМА, изоформу ВСМА или межвидовой ВСМА-гомолог ВСМА. ВСМА (также известный как TNFRSF17, CD269 и TNFRSF13A) является членом суперсемейства рецептора фактора некроза опухолей (ФНО). ВСМА экспрессируется на поверхности клеток множественной миеломы, в то время как его экспрессия сильно ограничивается плазматическими клетками и субпопуляцией зрелых В-клеток в здоровой ткани.
15 Аминокислотная последовательность ВСМА человека (hBCMA) представлена в базе данных NCBI под номером доступа Q02223.2 (GL313104029). В настоящем описании ВСМА включает ВСМА человека и гомологи ВСМА видов, отличных от человека, а также его варианты, фрагменты или посттрансляционно модифицированные формы, включающие, но не ограничивающиеся перечисленными, N- и О-связанные
20 гликозилированные формы ВСМА. Белки ВСМА могут дополнительно включать фрагменты, содержащие весь внеклеточный домен ВСМА или его часть (например, все из аминокислот 1-54 hBCMA или их часть).
[000113] В настоящем описании термин "С1Х-1" относится к лектиноподобной молекуле 1 С-типа, которая может включать, но не ограничивается перечисленными,
25 природный CLL-1, изоформу CLL-1 или межвидовой CLL-1-гомолог CLL-1. CLL-1 (также известный как член А семейства 12 лектиновых доменов С-типа, CLEC12A, лектин 2, ассоциированный с дендритными клетками, DCAL-2, миелоидный ингибиторный лектиноподобный рецептор С-типа и MICL) представляет собой рецептор клеточной поверхности, который модулирует сигнальные каскады и
30 опосредует фосфорилирование тирозина целевых МАР-киназ. Экспрессия CLL-1 обнаружена, например, в клетках острого миелоидного лейкоза (ОМЛ). Аминокислотная последовательность CLL-1 человека (hCLL-1) представлена в базе данных UniProtKB/Swiss-Prot под номером доступа Q5QGZ9.3 (GL308153619). В
настоящем описании CLL-1 включает CLL-1 человека и гомологи CLL-1 видов, отличных от человека, а также его варианты, фрагменты или посттрансляционно модифицированные формы, включающие, но не ограничивающиеся перечисленными, N- и О-связанные гликозилированные формы CLL-1. 5 [000114] В настоящем описании термин "FLT3" относится к Fms-подобной тирозинкиназе 3 (FLT-3), которая может включать, но не ограничивается перечисленными, природный FLT3, изоформу FLT3 или межвидовой FLT3-гомолог FLT3. FLT3 (также известный как антиген 135 кластера дифференцировки (CD 135), тирозиновая протеинкиназа рецепторного типа FLT3, связанная с FMS тирозинкиназа 3,
10 тирозинкиназа 1 стволовых клеток, рецептор цитокинов FL, тирозинкиназа типа III рецептора фактора роста, STK1, или фетальная печеночная киназа 2 (Flk2)) представляет собой рецептор цитокинов, который относится к классу III рецепторных тирозинкиназ. CD135 представляет собой рецептор лиганда цитокина Flt3 (FLT3L). FLT3 экспрессируется на поверхности различных гемопоэтических клеток-предшественников
15 и на поверхности клеток острого миелоидного лейкоза (ОМЛ). Аминокислотная последовательность FLT3 человека (hFLT3) представлена в базе данных UniProtKB/Swiss-Prot под номером доступа Р36888 (GI: 156630887). В настоящем описании FLT3 включает FLT3 человека и гомологи FLT3 видов, отличных от человека, а также его варианты, фрагменты или посттрансляционно модифицированные формы,
20 включающие, но не ограничивающиеся перечисленными, N- и О-связанные гликозилированные формы FLT3.
[000115] Термин "аутологичный" относится к любому материалу, полученному от того же самого индивидуума, которому он впоследствии будет введен повторно. Например, способ терапии с применением аутологичных конструированных клеток 25 (еАСТ(tm)) согласно настоящему описанию включает забор у пациента лимфоцитов, которые затем конструируют для экспрессии, например, конструкции CAR и далее вводят обратно тому же самому пациенту.
[000116] Термин "аллогенный" относится к любому материалу, полученному от одного индивидуума, который затем вводят другому индивидууму того же вида, 30 например, аллогенная трансплантации Т-клеток.
[000117] Термины "трансдукция" и "трансдуцированный" относятся к способу, посредством которого чужеродную ДНК вводят в клетку с помощью вирусного вектора (см. Jones et al., "Genetics: principles and analysis," Boston: Jones & Bartlett Publ. (1998)).
В некоторых вариантах реализации вектор представляет собой ретровирусный вектор, ДНК-вектор, РНК-вектор, аденовирусный вектор, бакуловирусный вектор, вектор на основе вируса Эпштейна-Барр, паповавирусный вектор, вектор на основе вируса осповакцины, вектор на основе вируса простого герпеса, аденоассоциированный вектор, 5 лентивирусный вектор или любую их комбинацию.
[000118] В настоящем описании термин "укороченный" относится к чему-либо, имеющему меньший размер, чем целое. Например, аминокислотная последовательность укороченного шарнирного домена (в качестве альтернативы именуемого в настоящем описании как "THD") может включать любую более короткую аминокислотную
10 последовательность, чем последовательность полного или полноразмерного шарнирного домена ("CHD"). В некоторых вариантах реализации THD состоит по существу из или состоит из аминокислот 118-152, 119-152, 120-152, 121-152, 122-152, 123-152, 124-152, 125-152, 126-152, 127-152, 128-152, 129-152 или 130-152 из SEQ ГО NO: 1. В одном варианте реализации THD состоит по существу из или состоит из
15 аминокислотной последовательности SEQ ГО NO: 3, которая состоит из аминокислот 123-152 из SEQ ГО NO: 1.
[000119] "Рак" относится к широкой группе различных заболеваний, характеризующихся неконтролируемым ростом аномальных клеток в организме. Нерегулируемое деление и рост клеток приводят к образованию злокачественных
20 опухолей, которые прорастают в соседние ткани и могут также метастазировать в отдаленные части организма через лимфатическую систему или кровоток. "Рак" или "раковая ткань" может включать опухоль. Примеры раковых заболеваний, которые можно лечить с помощью способов согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются перечисленными, раковые заболевания иммунной системы, включая
25 лимфому, лейкоз, миелому и другие лейкоцитарные злокачественные новообразования. В некоторых вариантах реализации способы согласно настоящему изобретению могут применяться для уменьшения размера опухоли для опухоли, имеющей природу, например, рака кости, рака поджелудочной железы, рака кожи, рака головы или шеи, кожной или внутриглазной злокачественной меланомы, рака матки, рака яичника, рака
30 прямой кишки, рака анальной области, рака желудка, рака яичка, рака матки, карциномы
фаллопиевых труб, карциномы эндометрия, карциномы шейки матки, карциномы
влагалища, карциномы вульвы, множественной миеломы, болезни Ходжкина,
неходжкинской лимфомы (НХЛ), первичной медиастинальной крупноклеточной В-
клеточной лимфомы (ПМБКЛ), диффузной крупноклеточной В-клеточной лимфомы (ДКВЛ), фолликулярной лимфомы (ФЛ), трансформированной фолликулярной лимфомы, лимфомы маргинальной зоны селезенки (ЛМЗС), рака пищевода, рака тонкого кишечника, рака эндокринной системы, рака щитовидной железы, рака 5 паращитовидной железы, рака надпочечника, саркомы мягких тканей, рака уретры, рака пениса, хронического или острого лейкоза, острого миелоидного лейкоза, хронического миелоидного лейкоза, острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) (включая не Т-клеточный ОЛЛ), хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ), солидных опухолей детского возраста, лимфоцитарной лимфомы, рака мочевого пузыря, рака почки или
10 мочеточника, карциномы почечной лоханки, новообразования центральной нервной системы (ЦНС), первичной лимфомы ЦНС, ангиогенеза опухоли, опухоли оси позвоночника, глиомы ствола головного мозга, аденомы гипофиза, саркомы Капоши, эпидермоидного рака, плоскоклеточного рака, Т-клеточной лимфомы, раковых заболеваний, вызванных воздействием окружающей среды, включая заболевания,
15 вызванные асбестом, других злокачественных новообразований В-клеток и комбинаций указанных видов рака. В одном конкретном варианте реализации рак представляет собой множественную миелому. Конкретный рак может быть восприимчивым к химиотерапии или лучевой терапии или рак может быть рефрактерным. Рефрактерный рак относится к раку, который не поддается хирургическому вмешательству, и этот рак либо изначально
20 не является восприимчивым к химиотерапии или лучевой терапии, либо рак становится невосприимчивым с течением времени.
[000120] "Противоопухолевый эффект" в настоящем описании относится к биологическому эффекту, который может проявляться в виде уменьшения объема опухоли, уменьшения числа опухолевых клеток, уменьшения пролиферации
25 опухолевых клеток, уменьшения числа метастазов, увеличения общей выживаемости или выживаемости без прогрессирования, увеличения продолжительности жизни или облегчения различных физиологических симптомов, связанных с опухолью. Противоопухолевый эффект может также относиться к предотвращению возникновения опухоли, например, для вакцины.
30 [000121] В настоящем описании "цитокин" относится к белку, не являющемуся
антителом, который высвобождается одной клеткой в ответ на контакт с конкретным
антигеном, при этом цитокин взаимодействует со второй клеткой, опосредуя ответ во
второй клетке. Цитокин может экспрессироваться клеткой эндогенно или вводиться
субъекту. Цитокины могут высвобождаться иммунными клетками, включая макрофаги, В-клетки, Т-клетки и тучные клетки, с передачей иммунного ответа. Цитокины могут вызывать различные виды ответа в клетке-реципиенте. Цитокины могут включать гомеостатические цитокины, хемокины, провоспалительные цитокины, эффекторы и 5 белки острой фазы. Например, гомеостатические цитокины, включая интерлейкин (ИЛ) 7 и ИЛ-15, способствуют выживанию и пролиферации иммунных клеток, а провоспалительные цитокины могут способствовать воспалительному ответу. Примеры гомеостатических цитокинов включают, но не ограничиваются перечисленными, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-7, ИЛ-10, ИЛ-12р40, ИЛ-12р70, ИЛ-15 и интерферон (ИФН) гамма.
10 Примеры провоспалительных цитокинов включают, но не ограничиваются перечисленными, ИЛ-1а, ИЛ-lb, ИЛ-6, ИЛ-13, ИЛ-17а, фактор некроза опухолей (ФНО) альфа, ФНО бета, фактор роста фибробластов (ФРФ) 2, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ), растворимую молекулу межклеточной адгезии 1 (sICAM-1), растворимую молекулу сосудистой адгезии 1
15 (sVCAM-1), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), VEGF-C, VEGF-D и плацентарный фактор роста (PLGF). Примеры эффекторов включают, но не ограничиваются перечисленными, гранзим А, гранзим В, растворимый Fas-лиганд (sFasL) и перфорин. Примеры белков острой фазы включают, но не ограничиваются перечисленными, С-реактивный белок (CRP) и сывороточный амилоид A (SAA).
20 [000122] "Хемокины" представляют собой тип цитокина, который опосредует клеточный хемотаксис, или направленное движение. Примеры хемокинов включают, но не ограничиваются перечисленными, ИЛ-8, ИЛ-16, эотаксин, эотаксин-3, макрофагальный хемокин (MDC или CCL22), моноцитарный хемотаксический белок 1 (МСР-1 или CCL2), МСР-4, макрофагальный воспалительный белок 1а (МГР-1а, МГР-
25 la), МГР-ip (МГР-lb), белок 10, индуцируемый интерфероном гамма (IP-10), и хемокин, регулируемый тимусом и активацией (TARC или CCL17).
[000123] "Терапевтически эффективное количество", "эффективная доза",
"эффективное количество" или "терапевтически эффективная доза" терапевтического
агента, например, конструированных экспрессирующих CAR Т-клеток, представляет
30 собой любое количество, которое при применении отдельно или в комбинации с другим
терапевтическим агентом защищает субъекта от начала заболевания или способствует
регрессии заболевания, о чем свидетельствует снижение тяжести симптомов
заболевания, увеличение частоты и продолжительности бессимптомных периодов
заболевания или предотвращение нарушений или инвалидности вследствие вызванных заболеванием поражений. Способность терапевтического агента стимулировать регрессию заболевания можно оценивать с применением различных способов, известных практикующему специалисту в данной области техники, таких как 5 оценивание на людях в процессе клинических испытаний, на животных в модельных системах, прогнозирующих эффективность у людей, или оценивание активности агента в анализах in vitro.
[000124] Термин "лимфоцит" в настоящем описании включает натуральные киллеры (NK), Т-клетки или В-клетки. NK-клетки представляют собой тип
10 цитотоксических (клеточно-токсических) лимфоцитов, который представляет основной компонент врожденной иммунной системы. NK-клетки отторгают опухоли и инфицированные вирусами клетки. Они функционируют посредством процесса апоптоза, или запрограммированной гибели клеток. Они названы "натуральными киллерами", поскольку они не требуют активации для уничтожения клеток. Т-клетки
15 играют важную роль в функционировании клеточного иммунитета (без участия антител). Их Т-клеточные рецепторы (TCR) дифференцируют сами клетки от лимфоцитов других типов. Тимус, специализированный орган иммунной системы, в первую очередь отвечает за созревание Т-клеток. Существует шесть типов Т-клеток, а именно: Т-хелперы (например, клетки CD4+), цитотоксические Т-клетки (также
20 известные как ТС, цитотоксические Т-лимфоциты, CTL, Т-киллеры, цитолитические Т-клетки, Т-клетки CD8+ или киллерные Т-клетки), Т-клетки памяти ((i) стволовые клетки памяти TSCM, такие как интактные клетки, представляют собой CD45RO-, CCR7+, CD45RA+, CD62L+ (L-селектин), CD27+, CD28+ и IL-7Ra+, но они также экспрессируют большие количества CD95, IL-2RP, CXCR3 и LFA-1 и демонстрируют
25 многочисленные функциональные признаки, характерные для клеток памяти); (ii) центральные клетки памяти Тем экспрессируют L-селектин и CCR7, они секретируют ИЛ-2, но не ИФНу или ИЛ-4 и (ш) эффекторные клетки памяти ТЕМ, однако, не экспрессируют L-селектин или CCR7, но вырабатывают эффекторные цитокины, такие как ИФНу и ИЛ-4), регуляторные Т-клетки (Tregs, супрессорные Т-клетки или
30 регуляторные Т-клетки CD4+CD25+), Т-клетки-натуральные киллеры (NKT) и Т-клетки
гамма-дельта. С другой стороны, В-клетки играют главную роль в функционировании
гуморального иммунитета (с участием антител). Они вырабатывают антитела и
антигены и выполняют роль антигенпрезентирующих клеток (АПК) и превращаются в
В-клетки памяти после активации посредством взаимодействия с антигеном. У млекопитающих незрелые В-клетки образуются в костном мозге, от которого происходит их название.
[000125] Термин "генно-инженерный" или "конструированный" относится к 5 способу модификации генома клетки, включающему, но не ограничивающемуся перечисленными, удаление кодирующей или некодирующей области или ее части или вставку кодирующей области или ее части. В некоторых вариантах реализации модифицируемая клетка представляет собой лимфоцит, например, Т-клетку, который может быть получен либо от пациента, либо от донора. Клетка может быть 10 модифицирована для экспрессии экзогенной конструкции, такой как, например, химерный рецептор антигена (CAR) или Т-клеточный рецептор (TCR), которую внедряют в геном клетки.
[000126] "Иммунный ответ" относится к действию клеток иммунной системы (например, Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, натуральных киллеров (NK), макрофагов,
15 эозинофилов, тучных клеток, дендритных клеток и нейтрофилов) и растворимых макромолекул, вырабатываемых любой из этих клеток или печенью (включая АЬ, цитокины и комплемент), которое приводит к избирательному нацеливанию, связыванию, повреждению, разрушению и/или выведению из организма позвоночного инвазивных патогенов, клеток или тканей, инфицированных патогенами, раковых или
20 других аномальных клеток, или, в случае аутоиммунного процесса или патологического воспаления, нормальных клеток или тканей человека.
[000127] Термин "иммунотерапия" относится к лечению субъекта, пораженного заболеванием или подверженного риску заражения заболеванием или страдающего рецидивом заболевания, с применением способа, включающего индукцию, усиление,
25 подавление или иную модификацию иммунного ответа. Примеры иммунотерапии включают, но не ограничиваются перечисленными, виды Т-клеточной терапии. Т-клеточная терапия может включать адоптивную Т-клеточную терапию, иммунотерапию с применением лимфоцитов, инфильтрующих опухоль (TIL), аутологичную клеточную терапию, терапию с применением аутологичных конструированных клеток (еАСТ(tm)) и
30 аллогенную трансплантацию Т-клеток. Однако специалист в данной области техники
должен признать, что способы модификации, раскрытые в настоящем описании,
повышают эффективность любой терапии с применением трансплантируемых Т-клеток.
Примеры Т-клеточной терапии описаны в патентных публикациях США №№
2014/0154228 и 2002/0006409, патенте США № 5728388 и международной публикации № WO 2008/081035.
[000128] Т-клетки, применяемые для иммунотерапии, могут быть получены из любого источника, известного в данной области техники. Например, Т-клетки могут 5 быть получены путем дифференцировки in vitro из популяции гемопоэтических стволовых клеток, или Т-клетки могут быть получены от субъекта. Т-клетки могут быть получены, например, из мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК), костного мозга, ткани лимфатических узлов, пуповинной крови, ткани тимуса, ткани из очага инфекции, асцита, плеврального экссудата, ткани селезенки и опухолей. Помимо
10 этого, Т-клетки могут быть получены из одной или более линий Т-клеток, доступных в данной области техники. Т-клетки также могут быть получены из единицы крови, собранной у субъекта, с применением любого количества методик, известных специалисту в данной области техники, таких как разделение с помощью фиколла (FICOLL(tm)) и/или аферез. Дополнительные способы выделения Т-клеток для Т-
15 клеточной терапии раскрыты в патентной публикации США № 2013/0287748, полное содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки. [000129] Термин "терапия с применением аутологичных конструированных клеток", который может быть сокращен как "еАСТ(tm)", также известный как адоптивный перенос клеток, представляет собой способ, посредством которого
20 собственные Т-клетки пациента собирают и впоследствии генетически изменяют для распознавания и нацеливания на один или более антигенов, экспрессируемых на поверхности клеток одной или более конкретных опухолевых клеток или злокачественных новообразований. Т-клетки могут быть сконструированы для экспрессии, например, химерных рецепторов антигенов (CAR) или Т-клеточного
25 рецептора (TCR). CAR-положительные (+) Т-клетки сконструированы для экспрессии внеклеточного одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv), имеющего специфичность к конкретному опухолевому антигену, связанного с внутриклеточным сигнальным участком, содержащим по меньшей мере один костимулирующий домен и по меньшей мере один домен активации. Костимулирующий домен может быть получен
30 из природного костимулирующего домена, например, содержащего аминокислотную
последовательность SEQ Ш NO: 1, или его варианта, например, варианта, содержащего
укороченный шарнирный домен ("THD"), а домен активации может быть получен,
например, из CD3-дзета. В некоторых вариантах реализации CAR сконструирован таким
образом, что он содержит два, три, четыре или более костимулирующих доменов. scFv CAR может быть сконструирован для нацеливания, например, на CD 19, который представляет собой трансмембранный белок, экспрессируемый клетками в линии В-клеток, включая все нормальные В-клетки и злокачественные В-клетки, включающие, 5 но не ограничивающиеся перечисленными, клетки НХЛ, ХЛЛ и не Т-клеточного ОЛЛ. В некоторых вариантах реализации CAR сконструирован таким образом, что костимулирующий домен экспрессируется в виде отдельной полипептидной цепи. Примеры терапии и конструкций на основе экспрессирующих CAR Т-клеток описаны в патентных публикациях США №№ 2013/0287748, 2014/0227237, 2014/0099309 и 10 2014/0050708, полное содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки.
[000130] В настоящем описании "пациент" включает любого человека, страдающего от рака (например, лимфомы или лейкоза). В настоящем описании термины "субъект" и "пациент" используются взаимозаменяемо.
15 [000131] В настоящем описании термин "клетка in vitro" относится к любой клетке, которую культивируют ex vivo. В частности, клетка in vitro может включать Т-клетку. [000132] Термины "пептид", "полипептид" и "белок" используются взаимозаменяемо и относятся к соединению, состоящему из аминокислотных остатков, ковалентно связанных пептидными связями. Белок или пептид содержит по меньшей
20 мере две аминокислоты, и максимальное количество аминокислот, которое может содержать последовательность белка или пептида, не ограничено. Полипептиды включают любой пептид или белок, содержащий две или более аминокислот, соединенных друг с другом пептидными связями. В настоящем описании указанный термин относится как к коротким цепям, которые также обычно упоминаются в данной
25 области техники как пептиды, олигопептиды и олигомеры, например, и к более длинным цепям, которые обычно упоминаются в данной области техники как белки, которые подразделяют на множество типов. "Полипептиды" включают, например, биологически активные фрагменты, по существу гомологичные полипептиды, олигопептиды, гомодимеры, гетеродимеры, варианты полипептидов, модифицированные
30 полипептиды, производные, аналоги, слитые белки и другие. Полипептиды включают природные пептиды, рекомбинантные пептиды, синтетические пептиды или их комбинацию.
[000133] "Стимуляция" в настоящем описании относится к первичному ответу, индуцированному путем связывания стимулирующей молекулы с ее когнатным лигандом, при этом связывание опосредует событие передачи сигнала. "Стимулирующая молекула" представляет собой молекулу на Т-клетке, например, 5 комплекс Т-клеточного рецептора (TCR)/CD3, который специфично связывается с когнатным стимулирующим лигандом, присутствующим на антигенпрезентирующей клетке. "Стимулирующий лиганд" представляет собой лиганд, который, когда он присутствует на антигенпрезентирующей клетке (например, АПК, дендритной клетке, В-клетке и т. п.), может специфично связываться со стимулирующей молекулой на Т-
10 клетке, тем самым опосредуя первичный ответ в Т-клетке, включающий, но не ограничивающийся перечисленными, активацию, инициирование иммунного ответа, пролиферацию и т. п. Стимулирующие лиганды включают, но не ограничиваются перечисленными, антитело против CD3 (такое как ОКТЗ), молекулу МНС класса I, нагруженную пептидом, антитело-суперагонист против CD2 и антитело-суперагонист
15 против CD28.
[000134] "Костимулирующий сигнал" в настоящем описании относится к сигналу, который в сочетании с первичным сигналом, таким как связывание TCR/CD3, приводит к Т-клеточному ответу, такому как, но не ограничивающемуся перечисленными, пролиферацию и/или повышающую регуляцию или понижающую регуляцию ключевых 20 молекул.
[000135] "Костимулирующий лиганд" в настоящем описании включает молекулу на антигенпрезентирующей клетке, которая специфично связывает когнатную костимулирующую молекулу на Т-клетке. Связывание костимулирующего лиганда обеспечивает сигнал, который опосредует Т-клеточный ответ, включающий, но не
25 ограничивающийся перечисленными, пролиферацию, активацию, дифференцировку и т. п. Костимулирующий лиганд индуцирует сигнал, который является дополнением к первичному сигналу, обеспечиваемому стимулирующей молекулой, например, путем связывания комплекса Т-клеточного рецептора (TCR)/CD3 с молекулой главного комплекса гистосовместимости (МНС), нагруженной пептидом. Костимулирующий
30 лиганд может включать, но не ограничивается перечисленными, 3/TR6, лиганд 4-1ВВ,
агонист или антитело, которое связывает рецептор Toll лиганда, В7-1 (CD80), В7-2
(CD86), лиганд CD30, CD40, CD7, CD70, CD83, медиатор вируса герпеса (HVEM),
лейкоцитарный антиген G человека (HLA-G), ILT4, иммуноглобулиноподобный
транскрипт (TLT) 3, индуцибельный костимулирующий лиганд (ICOS-L), молекулу межклеточной адгезии (1СAM), лиганд, который специфично связывается с В7-НЗ, рецептор лимфотоксина бета, белок А, связанный с цепью МНС класса I (MICA), белок В, связанный с цепью МНС класса I (MICB), лиганд ОХ40, PD-L2 или белок 5 программируемой смерти (PD) L1. Костимулирующий лиганд включает, но не ограничивается перечисленными, антитело, которое специфично связывается с костимулирующей молекулой, присутствующей на Т-клетке, такой как, но не ограничивающейся перечисленными, 4-1ВВ, В7-НЗ, CD2, CD27, CD28, CD30, CD40, CD7, ICOS, лиганд, который специфично связывается с CD83, антиген-1, 10 ассоциированный с функцией лимфоцитов (LFA-1), рецептор С натуральных киллеров (NKG2C), ОХ40, PD-1 или член 14 суперсемейства фактора некроза опухолей (TNFSF14 или LIGHT).
[000136] "Костимулирующая молекула" представляет собой когнатный партнер по связыванию на Т-клетке, который специфично связывается с костимулирующим
15 лигандом, опосредуя таким образом костимулирующий ответ в Т-клетке, такой как, но не ограничивающийся перечисленным, пролиферация. Костимулирующие молекулы включают, но не ограничиваются перечисленными, "Костимулирующая молекула" представляет собой когнатный партнер по связыванию на Т-клетке, который специфично связывается с костимулирующим лигандом, опосредуя таким образом
20 костимулирующий ответ в Т-клетке, такой как, но не ограничивающийся перечисленным, пролиферация. Костимулирующие молекулы включают, но не ограничиваются перечисленными, 4-1BB/CD137, В7-НЗ, BAFFR, BLAME (SLAMF8), В TLA, CD 33, CD 45, CD100 (SEMA4D), CD103, CD134, CD137, CD154, CD16, CD160 (BY55), CD18, CD19, CD19a, CD2, CD22, CD247, CD27, CD276 (B7-H3), CD28, CD29,
25 CD3 (альфа; бета; дельта; эпсилон; гамма; дзета), CD30, CD37, CD4, CD4, CD40, CD49a, CD49D, CD49f, CD5, CD64, CD69, CD7, CD80, лиганд CD83, CD84, CD86, CD8 альфа, CD8 бета, CD9, CD96 (Tactile), CDl-la, CDl-lb, CDl-lc, CDl-ld, CDS, CEACAM1, CRT AM, DAP-10, DNAM1 (CD226), Fc-рецептор гамма, GADS, GITR, HVEM (LIGHTR), IA4, ICAM-1, ICAM-1, ICOS, Ig альфа (CD79a), IL2R бета, IL2R гамма, IL7R альфа, интегрин,
30 ITGA4, ITGA4, ITGA6, ITGAD, ITGAE, ITGAL, ITGAM, ITGAX, ITGB2, ITGB7, ITGB1, KIRDS2, LAT, LFA-1, LFA-1, LIGHT, LIGHT (член 14 суперсемейства фактора некроза опухолей, TNFSF14), LTBR, Ly9 (CD229), антиген-1, ассоциированный с функцией лимфоцитов (LFA-1 (CD1 la/CD 18), молекулу МНС класса I, NKG2C, NKG2D, NKp30,
NKp44, NKp46, NKp80 (KLRF1), OX40, PAG/Cbp, PD-1, PSGL1, SELPLG (CD162), сигнальную молекулу активации лимфоцитов, SLAM (SLAMF1; CD 150; ГРО-3), SLAMF4 (CD244; 2B4), SLAMF6 (NTB-A; Lyl08), SLAMF7, SLP-76, ФНО, ФНОг, TNFR2, рецептор Toll лиганда, TRANCE/RANKL, VLA1 или VLA-6 или их фрагменты, 5 укороченные варианты или комбинации.
[000137] В настоящем описании термины "снижение" и "уменьшение" используются взаимозаменяемо и указывают на любое изменение, которое меньше, чем оригинал. "Снижение" и "уменьшение" представляют собой относительные термины, требующие сравнения между предыдущими и последующими измерениями.
10 "Снижение" и "уменьшение" включают полные истощения.
[000138] "Терапия" или "лечение" субъекта относится к любому типу вмешательства или процессу, которому подвергается субъект, или введение активного агента субъекту с целью регрессии, облегчения, ослабления, подавления, замедления или предотвращения начала, прогрессирования, развития, тяжести или рецидива
15 симптома, осложнения или состояния или биохимических признаков, связанных с заболеванием. В одном варианте реализации "терапия" или "лечение" включает частичную ремиссию. В другом варианте реализации "терапия" или "лечение" включает полную ремиссию.
[000139] Для расчета процента идентичности сравниваемые последовательности 20 обычно выравнивают способом, который дает наибольшее совпадение между последовательностями. Один пример компьютерной программы, которая может использоваться для определения процента идентичности, представляет собой пакет программ GCG, который включает GAP (Devereux et al., 1984, Nucl. Acid Res. 12:387; Genetics Computer Group, University of Wisconsin, Madison, Wis.). Компьютерный 25 алгоритм GAP используется для выравнивания двух полипептидов или полинуклеотидов, для которых необходимо определить процент идентичности последовательностей. Последовательности выравнивают для оптимального совпадения их соответствующей аминокислоты или нуклеотида ("длина совпадения", определяемая алгоритмом). В некоторых вариантах реализации стандартная матрица сравнения (см. 30 Dayhoff et al., 1978, Atlas of Protein Sequence and Structure 5:345-352 для матрицы сравнения РАМ 250; Henikoff et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci USA 89:10915-10919 для матрицы сравнения BLOSUM 62) также используется алгоритмом.
[000140] Различные аспекты изобретения более подробно описаны в следующих подразделах.
I. Химерные рецепторы антигенов и Т-клеточные рецепторы
[000141] Химерные рецепторы антигенов (CAR или CAR-T) и Т-клеточные 5 рецепторы (TCR) представляют собой рецепторы, созданные методами генетической инженерии. Эти конструированные рецепторы могут легко быть введены в иммунные клетки и экспрессироваться иммунными клетками, включая Т-клетки, с применением способов, известных в данной области техники. С помощью CAR один и тот же рецептор может быть запрограммирован как на распознавание конкретного антигена, так и, при 10 связывании с этим антигеном, на активацию иммунной клетки для атаки и разрушения несущей этот антиген клетки. В случае, когда эти антигены присутствуют на опухолевых клетках, иммунная клетка, экспрессирующая CAR, может нацеливаться на опухолевую клетку и уничтожать ее.
[000142] Один аспект настоящего изобретения относится к полинуклеотидам,
15 кодирующим химерные рецепторы антигенов (CAR) или Т-клеточные рецепторы (TCR), содержащие костимулирующий домен, который содержит новый внеклеточный домен, содержащий укороченный шарнирный домен ("THD"), и конструированным Т-клеткам, которые содержат костимулирующий домен, содержащий новый THD. Костимулирующий домен может дополнительно содержать трансмембранный домен
20 и/или внутриклеточный домен. В некоторых вариантах реализации CAR или TCR, кодируемый полинуклеотидом согласно настоящему изобретению, дополнительно содержит антигенсвязывающую молекулу, которая специфично связывается с антигеном-мишенью. В некоторых вариантах реализации CAR или TCR, кодируемый полинуклеотидом, дополнительно содержит домен активации. В одном конкретном
25 варианте реализации CAR или TCR, кодируемый полинуклеотидом, содержит (i) антигенсвязывающую молекулу, которая специфично связывается с антигеном-мишенью, (ii) костимулирующий домен, содержащий внеклеточный домен, трансмембранный домен и внутриклеточный домен, и (ш) домен активации, при этом внеклеточный домен содержит, состоит по существу из или состоит из THD согласно
30 настоящему описанию, например, SEQ Ш NO: 3.
[000143] В некоторых вариантах реализации ориентация CAR согласно настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий домен (такой как scFv) в
тандеме с костимулирующим доменом и доменом активации. Костимулирующий домен может содержать один или более внеклеточных участков, трансмембранный участок и внутриклеточный участок. В других вариантах реализации в тандеме могут применяться несколько костимулирующих доменов.
5 I.A. Костимулирующий домен.
[000144] Химерные рецепторы антигенов содержат костимулирующие (сигнальные) домены для увеличения их активности. См. патенты США №№ 7741465 и 6319494, а также Krause et al. и Finney et al. (см. выше), Song et al, Blood 119:696-706 (2012); Kalos etal, Sci Transl. Med. 3:95 (2011); Porter etal, N. Engl. J. Med. 365:725-33
10 (2011) и Gross etal, Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 56:59-83 (2016). Костимулирующий белок, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш NO: 1, представляет собой природный костимулирующий белок, обнаруженный на Т-клетках. Полная природная аминокислотная последовательность этого костимулирующего белка описана как эталонная последовательность NP_006130.1 в базе данных NCBI. См.
15 фигуру 1А. Полная природная нуклеотидная последовательность этого костимулирующего белка описана как эталонная последовательность NM_006139.1 в базе данных NCBI.
[000145] Новый внеклеточный домен. В настоящем раскрытии показано, что новый внеклеточный домен костимулирующего белка, содержащий укороченный
20 шарнирный домен ("THD"), может улучшить одно или более свойств CAR или TCR. В некоторых вариантах реализации домен THD представляет собой укороченную версию полноразмерного шарнирного домена ("CHD"). В некоторых вариантах реализации выделенный полинуклеотид, кодирующий THD, содержит (i) аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей
25 мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам 123-152 из SEQ Ш NO: 1, при этом домен THD не содержит аминокислоты 1-122 из SEQ Ш NO: 1.
30 [000146] В других вариантах реализации THD состоит по существу из или состоит из аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по
меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам 123-152 из SEQ Ш NO: 1. В других вариантах реализации THD состоит по существу из или состоит 5 из аминокислотной последовательности, кодируемой нуклеотидной последовательностью, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере
10 приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 3. [000147] В некоторых вариантах реализации выделенный полинуклеотид, кодирующий THD, состоит по существу из или состоит из (i) аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей
15 мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам 123-152 из SEQ Ш NO: 1, и, необязательно, (ii) ± одной аминокислоты, ± двух аминокислот, ± 3
20 аминокислот, ± 4 аминокислот, ± 5 аминокислот или ± 6 аминокислот. В некоторых вариантах реализации выделенный полинуклеотид, кодирующий THD, состоит по существу из или состоит из (i) аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере
25 приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам 123-152 из SEQ Ш NO: 1, и, необязательно, (ii) одной или двух аминокислот, одной-трех аминокислот, одной-четырех аминокислот, одной-пяти аминокислот или одной-шести аминокислот. Указанные одна-шесть аминокислот,
30 которые могут быть добавлены или удалены из аминокислотной последовательности THD, могут располагаться либо на N-конце, либо на С-конце, либо и на N-конце, и на С-конце.
[000148] В некоторых вариантах реализации выделенный полинуклеотид, кодирующий THD, состоит по существу из или состоит из (i) аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере 5 приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам 123-152 из SEQ Ш NO: 1, и (ii) одной дополнительной N-концевой аминокислоты, двух дополнительных N-концевых аминокислот, трех дополнительных N-концевых 10 аминокислот, четырех дополнительных N-концевых аминокислот, пяти дополнительных N-концевых аминокислот или шести дополнительных N-концевых аминокислот.
[000149] В некоторых вариантах реализации дополнительные аминокислоты могут представлять собой N-концевые аминокислоты. В некоторых вариантах реализации 15 дополнительные аминокислоты могут быть гетерологичными. В других вариантах реализации дополнительные аминокислоты являются частью природной последовательности костимулирующего белка.
[000150] В некоторых вариантах реализации THD состоит по существу из или состоит из аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере
20 приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам 123-152 из SEQ Ш NO: 1, аминокислотам 122-152 из SEQ Ш
25 NO: 1, аминокислотам 121-152 из SEQ ID NO: 1, аминокислотам 120-152 из SEQ ГО NO: 1, аминокислотам 119-152 из SEQ ГО NO: 1, аминокислотам 118-152 из SEQ ГО NO: 1 или аминокислотам 117-152 из SEQ ГО NO: 1.
[000151] В других вариантах реализации THD состоит по существу или состоит из
аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно
30 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по
меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей
мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере
приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам 124-152 из
SEQ Ш NO: 1, аминокислотам 125-152 из SEQ Ш NO: 1, аминокислотам 126-152 из SEQ Ш NO: 1, аминокислотам 127-152 из SEQ ID NO: 1, аминокислотам 128-152 из SEQ ГО NO: 1, аминокислотам 129-152 из SEQ ГО NO: 1 или аминокислотам 130-152 из SEQ ГО NO: 1.
5 [000152] В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-116 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-117 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-118 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-119 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации
10 THD не содержит аминокислоты 1-120 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-121 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-122 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-123 из SEQ ГО N0: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-124 из SEQ ГО
15 NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-125 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-126 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1127 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не содержит аминокислоты 1-128 из SEQ ГО NO: 1. В некоторых вариантах реализации THD не
20 содержит аминокислоты 1-129 из SEQ ГО NO: 1.
[000153] Соответствующая аминокислотная последовательность THD
представляет собой SEQ ГО N0. 3 LDNEKSNGTI IHVKGKHLCP SPLFPGPSKP.
Нуклеотидная последовательность, кодирующая внеклеточный участок THD,
представляет собой SEQ ГО N0. 2
25 CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTC TGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCA.
[000154] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид, кодирующий
костимулирующий домен в CAR или TCR, содержит нуклеотидную
последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей
30 мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере
приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере
приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере
приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере
приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш N0: 3, при этом указанная нуклеотидная последовательность кодирует THD и при этом CAR или TCR не содержат аминокислоты 1-122 из SEQ Ш NO: 1.
[000155] В одном конкретном варианте реализации THD состоит по существу из 5 или состоит из аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере
10 приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ Ш NO: 3. В конкретном варианте реализации полинуклеотид, кодирующий THD, состоит по существу из или состоит из нуклеотидной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 65%, по меньшей мере приблизительно 70%, по
15 меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной
20 последовательности SEQ Ш NO : 2.
[000156] В некоторых вариантах реализации THD дополнительно содержит все или некоторые из членов семейства иммуноглобулинов, такие как IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgD, IgE, IgM, или их фрагмент.
[000157] В некоторых вариантах реализации THD получен из полноразмерного
25 шарнирного домена ("CHD") человека, например, из костимулирующего белка,
содержащего аминокислотную последовательность SEQ Ш NO: 1. В других вариантах
реализации THD получен из CHD костимулирующего белка грызуна, мыши или примата
(например, примата, отличного от человека). В некоторых вариантах реализации THD
получен из химерного CHD костимулирующего белка.
30 [000158] Трансмембранный домен: Костимулирующий домен для CAR или TCR
согласно настоящему изобретению может дополнительно содержать трансмембранный
домен и/или внутриклеточный сигнальный домен. Трансмембранный домен может быть
сконструирован таким образом, чтобы быть слитым с внеклеточным доменом CAR.
Аналогично, он может быть слитым с внутриклеточным доменом CAR. В одном варианте реализации применяют трансмембранный домен, который естественным образом связан с одним из доменов CAR. В некоторых случаях трансмембранный домен может быть выбран или модифицирован путем замены аминокислоты во избежание 5 связывания таких доменов с трансмембранными доменами тех же самых или других поверхностных мембранных белков для минимизации взаимодействия с другими членами рецепторного комплекса. Трансмембранный домен может быть получен либо из природного, либо из синтетического источника. В случае природного источника этот домен может быть получен из любого связанного с мембраной или трансмембранного
10 белка. Трансмембранные участки, применяемые, в частности, в соответствии с настоящим изобретением, могут быть получены из (т. е. содержат) 4-1BB/CD137, активирующих рецепторов NK-клеток, белка иммуноглобулина, В7-НЗ, BAFFR, BLAME (SLAMF8), В TLA, CD 100 (SEMA4D), CD 103, CD 160 (BY55), CD 18, CD 19, CD 19a, CD2, CD247, CD27, CD276 (B7-H3), CD28, CD29, CD3 дельта, CD3 эпсилон, CD3
15 гамма, CD30, CD4, CD40, CD49a, CD49D, CD49f, CD69, CD7, CD84, CD8 альфа, CD8 бета, CD96 (Tactile), CD1 la, CD1 lb, CD1 lc, CD1 Id, CDS, CEACAM1, CRT AM, рецептора цитокина, DAP-10, DNAM1 (CD226), Fc-рецептора гамма, GADS, GITR, HVEM (LIGHTR), IA4, ICAM-1, ICAM-1, Ig альфа (CD79a), IL-2R бета, IL-2R гамма, IL-7R альфа, индуцибельного костимулятора Т-клеток (ICOS), интегринов, ITGA4, ITGA4,
20 ITGA6, ITGAD, ITGAE, ITGAL, ITGAM, ITGAX, ITGB2, ITGB7, ITGB1, KIRDS2, LAT, LFA-1, LFA-1, лиганда, специфично связывающегося с CD83, LIGHT, LIGHT, LTBR, Ly9 (CD229), ассоциированного с функцией лимфоцитов антигена 1 (LFA-1; CD1-la/CD18), молекулы МНС класса I, NKG2C, NKG2D, NKp30, NKp44, NKp46, NKp80 (KLRF1), OX-40, PAG/Cbp, белка 1 программируемой смерти (PD-1), PSGL1, SELPLG
25 (CD 162), сигнальных молекул активации лимфоцитов (белков SLAM), SLAM (SLAMF1; CD 150; IPO-3), SLAMF4 (CD244; 2B4), SLAMF6 (NTB-A; Lyl08), SLAMF7, SLP-76, белков-рецепторов ФНО, TNFR2, TNFSF14, рецептор Toll лиганда, TRANCE/RANKL, VLA1 или VLA-6 или их фрагмента, укороченного варианта или комбинации. [000159] Необязательно, короткие линкеры могут образовывать связи между
30 любыми или некоторыми из внеклеточных, трансмембранных и внутриклеточных доменов CAR.
[000160] В одном конкретном варианте реализации нуклеотидная
последовательность трансмембранного домена костимулирующего белка представляет
собой SEQ Ш NO. 4:
TTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCAC CGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGTT.
[000161] В одном варианте реализации полинуклеотид, кодирующий 5 трансмембранный домен внутри костимулирующего домена, содержит нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 65%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере 10 приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной последовательности SEQ Ш NO: 4.
[000162] Аминокислотная последовательность трансмембранного домена 15 костимулирующего белка представляет собой SEQ Ш NO. 5: FWVLVVVGGV LACYSLLVTV AFIIFWV.
[000163] В одном конкретном варианте реализации транс мембранный домен внутри костимулирующего домена содержит аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно
20 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ Ш NO: 5. [000164] В другом варианте реализации трансмембранный домен получен из (т. е.
25 содержит) CD8. В одном варианте реализации нуклеотидная последовательность внеклеточного домена и трансмембранного домена CD8 представляет собой SEQ Ш NO: 238
GCTGCAGCATTGAGCAACTCAATAATGTATTTTAGTCACTTTGTACCAGTGTTCTT GCCGGCTAAGCCTACTACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTCCTACC 30 ATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGGGG GCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACC CCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGT AATCACAGGAAC.
[000165] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид, кодирующий трансмембранный домен внутри костимулирующего домена, содержит нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 65%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере 5 приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной 10 последовательности трансмембранного домена CD8.
[000166] Аминокислотная последовательность внеклеточного домена и трансмембранного домена CD 8 представляет собой SEQ Ш NO. 239 AAALSNSMYFSHFVPVFLPAKPTTTPAPRPPTPAPTIASQPLSLRPEACRPAAGGAVH TRGLDFACDIYIWAPLAGTCGVLLLSLVITLYCNHRN. 15 [000167] В одном конкретном варианте реализации транс мембранный домен внутри костимулирующего домена содержит аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей 20 мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотной последовательности трансмембранного домена CD8. [000168] Внутриклеточный (сигнальный) домен: Внутриклеточный (сигнальный) домен конструированных Т-клеток согласно настоящему изобретению может обеспечивать передачу сигнала к домену активации, который затем активирует 25 по меньшей мере одну из нормальных эффекторных функций иммунной клетки. Эффекторная функция Т-клетки, например, может представлять собой цитолитическую активность или хелперную активность, включая секрецию цитокинов. [000169] В некоторых вариантах реализации подходящий внутриклеточный сигнальный домен включает (т. е. содержит), но не ограничивается перечисленными, 430 1BB/CD137, активирующие рецепторы NK-клеток, белок иммуноглобулин, В7-НЗ, BAFFR, BLAME (SLAMF8), В TLA, CD100 (SEMA4D), CD103, CD160 (BY55), CD18, CD 19, CD 19а, CD2, CD247, CD27, CD276 (В7-НЗ), CD28, CD29, CD3 дельта, CD3 эпсилон, CD3 гамма, CD30, CD4, CD40, CD49a, CD49D, CD49f, CD69, CD7, CD84, CD8
альфа, CD8 бета, CD96 (Tactile), CD1 la, CD1 lb, CD1 lc, CD1 Id, CDS, CEACAM1, CRT AM, рецептор цитокина, DAP-10, DNAM1 (CD226), Fc-рецептор гамма, GADS, GITR, HVEM (LIGHTR), IA4, ICAM-1, ICAM-1, Ig альфа (CD79a), IL-2R бета, IL-2R гамма, IL-7R альфа, индуцибельный костимулятор Т-клеток (ICOS), интегрины, ITGA4, ITGA4, 5 ITGA6, ITGAD, ITGAE, ITGAL, ITGAM, ITGAX, ITGB2, ITGB7, ITGB1, KIRDS2, LAT, LFA-1, LFA-1, лиганд, специфично связывающийся с CD83, LIGHT, LIGHT, LTBR, Ly9 (CD229), Lyl08), ассоциированный с функцией лимфоцитов антиген 1 (LFA-1, CD1-la/CD18), молекулу МНС класса I, NKG2C, NKG2D, NKp30, NKp44, NKp46, NKp80 (KLRF1), OX-40, PAG/Cbp, белок 1 программируемой смерти (PD-1), PSGL1, SELPLG 10 (CD 162), сигнальные молекулы активации лимфоцитов (белки SLAM), SLAM (SLAMF1; CD 150; IPO-3), SLAMF4 (CD244; 2B4), SLAMF6 (NTB-A, SLAMF7, SLP-76, белки-рецепторы ФНО, TNFR2, TNFSF14, рецептор Toll лиганда, TRANCE/RANKL, VLA1 или VLA-6 или их фрагмент, укороченный вариант или комбинацию.
[000170] Пример нуклеотидной последовательности, кодирующей 15 внутриклеточный сигнальный домен, представляет собой SEQ Ш NO. 6: AGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCCACGC CGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCG CTGCCTATCGGAGC.
[000171] В одном варианте реализации полинуклеотид, кодирующий 20 внутриклеточный сигнальный домен внутри костимулирующего домена, содержит нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 65%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере 25 приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной последовательности SEQ Ш NO: 6.
[000172] Пример внутриклеточного сигнального домена представляет собой SEQ
30 Ш NO. 7: RSKRSRLLHSDYMNMTPRRPGPTRKHYQPYAPPRDFAAYRS.
[000173] В одном конкретном варианте реализации внутриклеточный сигнальный
домен внутри костимулирующего домена содержит аминокислотную
последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей
мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотной 5 последовательности SEQ Ш N0: 7.
[000174] В некоторых вариантах реализации костимулирующий домен содержит, состоит по существу из или состоит из внеклеточного THD и трансмембранного и внутриклеточного доменов костимулирующих белков. Например, нуклеотидная последовательность, кодирующая костимулирующий домен, представляет собой SEQ
10 ID NO. 240:
CTTGATAATGAAAAGTCAAACGGAACAATCATTCACGTGAAGGGCAAGCACCTC TGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGT GGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCT GGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAATATGACTCC
15 ACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACCTAGAGA TTTCGCTGCCTATCGGAGC.
[000175] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид, кодирующий костимулирующий домен, состоит по существу из или состоит из нуклеотидной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей
20 мере приблизительно 65%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере
25 приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной последовательности SEQ Ш NO: 240, при этом костимулирующий домен не содержит аминокислоты 1-122 из SEQ Ш NO: 1, аминокислоты 1-121 из SEQ Ш NO: 1, аминокислоты 1-120 из SEQ Ш NO: 1, аминокислоты 1-119 из SEQ Ш NO: 1, аминокислоты 1-118 из SEQ Ш NO: 1 или аминокислоты 1-118 из SEQ Ш NO: 1.
30 [000176] Соответствующая аминокислотная последовательность
костимулирующего домена представляет собой SEQ Ш NO. 241:
LDNEKSNGTIfflVKGKHLCPSPLFPGPSKPFWVLVVVGGVLACYSLLVTVAFIIFWVR SKRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKH YQP YAPPRDF AAYRS.
[000177] В некоторых вариантах реализации костимулирующий домен содержит, состоит по существу из или состоит из нуклеотидной последовательности, которая на по 5 меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% 10 идентична аминокислотной последовательности SEQ Ш NO: 241, при этом костимулирующий домен не содержит аминокислоты 1-122 из SEQ Ш NO: 1, аминокислоты 1-121 из SEQ Ш NO: 1, аминокислоты 1-120 из SEQ Ш NO: 1, аминокислоты 1-119 из SEQ Ш NO: 1, аминокислоты 1-118 из SEQ Ш NO: 1 или аминокислоты 1-118 из SEQ Ш NO: 1.
15 LB. Домен активации
[000178] CD3 представляет собой элемент Т-клеточного рецептора на природных Т-клетках, и было показано, что он является важным внутриклеточным активирующим элементом в CAR. В одном варианте реализации CD3 представляет собой CD3 дзета, нуклеотидная последовательность которого представляет собой SEQ Ш NO. 8:
20 AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAAC CAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGAC AAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCC CCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTC TGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGT
25 ACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAG CCCTGCCACCTAGG.
[000179] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид, кодирующий домен активации, содержит нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 65%, по меньшей мере 30 приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере
приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной последовательности SEQ Ш N0: 8.
[000180] Соответствующая аминокислотная последовательность
5 внутриклеточного CD3 дзета представляет собой SEQ Ш NO. 9: RVKFSRSADAPAYQQGQNQLYNELNLGRJ^EYDVLDKimGRJ3PEMGGKPR^NPQ EGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALP PR.
[000181] В некоторых вариантах реализации домен активации содержит 10 нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере 15 приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотной последовательности SEQ Ш NO: 9.
[000182] В некоторых вариантах реализации домен активации содержит аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по 20 меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотной последовательности:
25 RVKFSRSADAPAYKQGQNQLYNELNLGRREEYDVLDKRRGRDPEMGGKPRRKNPQ EGLYNELQKDKMAEAYSEIGMKGERRRGKGHDGLYQGLSTATKDTYDALHMQALP PR (SEQ Ш NO: 251).
I. С. Антигенсвязывающие молекулы [000183] CAR могут быть сконструированы для связывания с антигеном (таким как 30 антиген клеточной поверхности) путем включения в них антигенсвязывающей молекулы, которая взаимодействует с этим антигеном-мишенью. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула представляет собой фрагмент
специфичного к этому антигену антитела, например, один или более одноцепочечных фрагментов антитела (scFv). ScFv представляет собой одноцепочечный фрагмент антитела, содержащий соединенные друг с другом вариабельные участки тяжелой и легкой цепей антитела. См. патенты США №№ 7741465 и 6319494, а также Eshhar et al, 5 Cancer Immunol Immunotherapy (1997) 45: 131-136. ScFv сохраняет способность исходного антитела к специфичному взаимодействию с антигеном-мишенью. scFv подходят для химерных рецепторов антигенов, поскольку они могут быть сконструированы для экспрессии в виде части единственной цепи вместе с другими компонентами CAR. Там же. См. также Krause et al, J. Exp. Med., Volume 188, No. 4,
10 1998 (619-626); Finney et al, Journal of Immunology, 1998, 161: 2791-2797. Следует понимать, что антигенсвязывающая молекула обычно содержится внутри внеклеточного участка CAR, так что она способна распознавать и связывать целевой антиген. Биспецифичные и мультиспецифичные CAR, имеющие специфичность более чем к одной целевой мишени, находятся в рамках настоящего изобретения.
15 [000184] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид кодирует CAR или TCR, содержащий THD согласно настоящему изобретению и антигенсвязывающую молекулу, которая специфично связывается с антигеном-мишенью. В некоторых вариантах реализации антиген-мишень представляет собой опухолевый антиген. В некоторых вариантах реализации антиген выбран из ассоциированного с опухолью
20 поверхностного антигена, такого как 5Т4, альфа-фетопротеин (АФП), В7-1 (CD80), В7-2 (CD86), ВСМА, бета-хорионический гонадотропин человека, СА-125, карциноэмбриональный антиген (СЕА), карциноэмбриональный антиген (СЕA), CD 123, CD133, CD138, CD19, CD20, CD22, CD23, CD24, CD25, CD30, CD33, CD34, CD4, CD40, CD44, CD56, CD8, CLL-1, c-Met, ЦМВ-специфичный антиген, CSPG4, CTLA-4,
25 дисиалоганглиозид GD2, дуктально-эпителиальный муцин, EBV-специфичный антиген, вариант III EGFR (EGFRvIII), ELF2M, эндоглин, эфрин В2, рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), молекула адгезии эпителиальных клеток (ЕрСАМ), эпителиальный опухолевый антиген, ErbB2 (HER2/neu), белок, связанный с фибробластами (tap), FLT3, фолатсвязывающий белок, GD2, GD3, антиген,
30 ассоциированный с глиомой, гликосфинголипиды, gp36, ВГВ-специфичный антиген,
ВГС-специфичный антиген, HER1-HER2, HER2-HER3 в комбинации, HERV-K,
высокомолекулярный ассоциированный с меланомой антиген (HMW-MAA),
гликопротеин gp41 оболочки ВИЧ-1, ВПЧ-специфичный антиген, обратная
транскриптаза теломеразы человека, рецептор ИФР1, ИФР-П, IL-11R альфа, IL-13R-a2, специфичный антиген вируса гриппа; CD38, инсулиноподобный фактор роста-1 (ИФР1), кишечная карбоксиэстераза, каппа-цепь, LAGA-la, лямбда-цепь, специфичный антиген вируса Ласса, лектин-реактивный АФП, специфичный для линии или 5 тканеспецифичный антиген, такой как CD3, MAGE, MAGE-A1, молекула главного комплекса гистосовместимости (МНС), молекула главного комплекса гистосовместимости (МНС), презентирующая опухолеспецифичный пептидный эпитоп, M-CSF, ассоциированный с меланомой антиген, мезотелин, мезотелин, MN-CA IX, MUC-1, mut hsp70-2, мутантный р53, мутантный р53, мутантный ras, эластаза
10 нейтрофилов, NKG2D, Nkp30, NY-ESO-1, р53, РАР, простаза, простатспецифический антиген (ПСА), опухолевый антиген-1 карциномы простаты (РСТА-1), простатспецифический антиген, простеин, PSMA, RAGE-1, ROR1, RU1, RU2 (AS), молекула поверхностной адгезии, сурвивин и теломеразы , TAG-72, дополнительный домен A (EDA) и дополнительный домен В (EDB) фибронектина и домен А1 тенасцина-
15 С (TnC А1), тиреоглобулин, стромальные опухолевые антигены, рецептор-2 фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR2), вирус-специфичный поверхностный антиген, такой как ВИЧ-специфичный антиген (такой как gpl20 ВИЧ), а также любое производное или вариант этих поверхностных маркеров. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула специфично связывается с ВСМА. В других вариантах
20 реализации антигенсвязывающая молекула специфично связывается с CLL-1. В других вариантах реализации антигенсвязывающая молекула специфично связывается с FLT3. [000185] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула специфично связывает ВСМА. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность,
25 выбранную из SEQ Ш NO: 13-20; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш NO: 21-28; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш NO: 29-36; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш NO: 37-44; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш
30 NO: 45-52; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 53-60.
[000186] В одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит
(a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 13; (b) VH
CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 21; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 29; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 37; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 45; и/или (f) VL CDR3, 5 содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 53.
[000187] В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 14; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 22; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 30; (d) VL CDR1,
10 содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 38; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 46; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 54. [000188] В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 15; (b) VH
15 CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 23; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 31; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 39; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 47; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 55.
20 [000189] В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 16; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 24; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 32; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 40; (е) VL CDR2,
25 содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 48; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 56. [000190] В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 17; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 25; (с) VH CDR3,
30 содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 33; (d) VL CDR1,
содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 41; (е) VL CDR2,
содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 49; и/или (f) VL CDR3,
содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО N0: 57.
[000191] В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 18; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 26; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 34; (d) VL CDR1, 5 содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 42; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 50; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 58. [000192] В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 19; (b) VH
10 CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 27; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 35; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 43; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 51; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 59.
15 [000193] В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 20; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 28; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 36; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 44; (е) VL CDR2,
20 содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 52; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 60. [000194] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ Ш N0: 77-84, и VL, содержащий аминокислотную
25 последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ Ш N0: 85-92. В одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 77, и VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 85. В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную
30 последовательность SEQ Ш N0: 78, и VL, содержащий аминокислотную
последовательность SEQ Ш N0: 86. В другом варианте реализации
антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную
последовательность SEQ Ш N0: 79, и VL, содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 87.
другом варианте реализации
антигенсвязывающая
молекула
содержит
VH,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 80, и
VL,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 88.
другом варианте реализации
антигенсвязывающая
молекула
содержит
VH,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 81, и
VL,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 89.
другом варианте реализации
антигенсвязывающая
молекула
содержит
VH,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 82, и
VL,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 90.
другом варианте реализации
антигенсвязывающая
молекула
содержит
VH,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 83, и
VL,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 91.
другом варианте реализации
антигенсвязывающая
молекула
содержит
VH,
содержащий аминокислотную
последовательность
SEQ ID
NO: 84, и
VL,
содержащий аминокислотную
последовательность SEQ Ш N0: 92.
[000195] В одном конкретном варианте реализации полинуклеотид согласно настоящему изобретению содержит нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей
20 мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ
25 Ш NO: 61-68. В другом варианте реализации полинуклеотид согласно настоящему изобретению содержит нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере
30 приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 69-76.
[000196] Другие известные антитела против ВСМА или их антигенсвязывающие молекулы могут применяться в качестве антигенсвязывающих молекул для CAR или TCR, содержащих THD согласно настоящему изобретению. Неограничивающие примеры таких антител против ВСМА или их антигенсвязывающих молекул включают 5 антитела или антигенсвязывающие молекулы, описанные в WO2015158671А1, опубликованной 22 октября 2015 года, и WO2016014565A2, опубликованной 28 января 2016 года.
[000197] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула специфично связывает CLL-1. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая
10 молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш NO: 93-96; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш NO: 97-100; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш NO: 101-104; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш NO: 105-108;
15 (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ Ш NO: 109-112; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 113-116.
[000198] В одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 93; (b) VH
20 CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 97; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 101; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 105; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 109; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 113.
25 [000199] В одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 94; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 98; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 102; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 106; (е) VL CDR2,
30 содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 110; и/или (f) VL CDR3,
содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 114.
[000200] В одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит
(a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 95; (b) VH
CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 99; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 103; (d) VL CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 107; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш NO: 111; и/или (f) VL CDR3, 5 содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 115.
[000201] В одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит (a) VH CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 96; (b) VH CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 100; (с) VH CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 104; (d) VL
10 CDR1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 108; (е) VL CDR2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш NO: 112; и/или (f) VL CDR3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ IDNO: 116. [000202] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из
15 группы, состоящей из SEQ Ш N0: 125-128, и VL, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ IDNO: 129-132. В одном варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 125, и VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 129. В другом варианте реализации
20 антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 126, и VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 130. В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 127, и VL, содержащий аминокислотную
25 последовательность SEQ Ш N0: 131. В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 128, и VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ Ш N0: 132.
[000203] В одном конкретном варианте реализации полинуклеотид согласно
30 настоящему изобретению содержит нуклеотидную последовательность, которая на по
меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей
мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере
приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере
приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ Ш N0: 117-120. В другом варианте реализации полинуклеотид согласно настоящему 5 изобретению содержит нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере 10 приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична нуклеотидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ IDNO: 121-124.
[000204] Другие примеры антител против CLL-1 или их антигенсвязывающих молекул включают антитела или антигенсвязывающие молекулы, описанные в 15 WO2016014535, опубликованной 28 января 2016 года, и US 2016/0051651 Al, опубликованной 25 февраля 2016 года.
[000205] Антигенсвязывающая молекула, кодируемая полинуклеотидом согласно настоящему изобретению, может быть одноцепочечной или двухцепочечной. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула является 20 одноцепочечной. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула выбрана из группы, состоящей из scFv, Fab, Fab', Fv, F(ab')2, dAb и любой их комбинации. В одном конкретном варианте реализации антигенсвязывающая молекула содержит scFv.
[000206] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула
25 содержит единственную цепь, в которой вариабельный участок тяжелой цепи и
вариабельный участок легкой цепи соединены с помощью линкера. В некоторых
вариантах реализации VH расположен на N-конце линкера, a VL расположен на С-конце
линкера. В других вариантах реализации VL расположен на N-конце линкера, a VH
расположен на С-конце линкера. В некоторых вариантах реализации линкер содержит
30 по меньшей мере приблизительно 5, по меньшей мере приблизительно 8, по меньшей
мере приблизительно 10, по меньшей мере приблизительно 13, по меньшей мере
приблизительно 15, по меньшей мере приблизительно 18, по меньшей мере
приблизительно 20, по меньшей мере приблизительно 25, по меньшей мере
приблизительно 30, по меньшей мере приблизительно 35, по меньшей мере приблизительно 40, по меньшей мере приблизительно 45, по меньшей мере приблизительно 50, по меньшей мере приблизительно 60, по меньшей мере приблизительно 70, по меньшей мере приблизительно 80, по меньшей мере 5 приблизительно 90 или по меньшей мере приблизительно 100 аминокислот. В некоторых вариантах реализации линкер содержит по меньшей мере приблизительно 18 аминокислот. В некоторых вариантах реализации линкер содержит аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере
10 приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности GSTSGSGKPGSGEGSTKG (SEQ Ш NO: 12) или аминокислотной последовательности GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 237). В
15 одном варианте реализации линкер представляет собой линкер Уитлоу (Whitlow). В некоторых вариантах реализации связывающая молекула содержит единственную цепь, в которой вариабельный участок тяжелой цепи и вариабельный участок легкой цепи соединены с помощью линкера, содержащего аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 12.
20 [000207] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула связывает антиген-мишень (например, ВСМА человека, FLT3 человека или CLL-1 человека) с KD, составляющей менее чем 1 х 10"6 М, менее чем 1 х 10"7 М, менее чем 1 х 10"8 М или менее чем 1 х Ю"9 М. В одном конкретном варианте реализации антигенсвязывающая молекула связывает антиген-мишень (например, ВСМА человека,
25 FLT3 человека или CLL-1 человека) с KD, составляющей менее чем 1 х Ю"7 М. В другом варианте реализации антигенсвязывающая молекула связывает антиген-мишень (например, ВСМА человека, FLT3 человека или CLL-1 человека) с KD, составляющей менее чем 1 х 10"8 М. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула связывает антиген-мишень (например, ВСМА человека, FLT3 человека или CLL-1
30 человека) с KD, составляющей приблизительно 1 Х 10"' М, приблизительно 2 х Ю"7 М,
приблизительно 3 х Ю"7 М, приблизительно 4 х Ю"7 М, приблизительно 5 х Ю"7 М,
приблизительно 6 х Ю"7 М, приблизительно 7 х Ю"7 М, приблизительно 8 х Ю"7 М,
приблизительно 9 х 10"7 М, приблизительно 1 Х ю-8 М, приблизительно 2 х Ю"8 М,
приблизительно 3 х 10 М, приблизительно 4 х 10 М, приблизительно 5 х Ю"8 М, приблизительно 6 х Ю"8 М, приблизительно 7 х Ю"8 М, приблизительно 8 х Ю"8 М, приблизительно 9 х 10"8 М, приблизительно 1 х Ю"9 М, приблизительно 2 х Ю"9 М, приблизительно 3 х Ю"9 М, приблизительно 4 х Ю"9 М, приблизительно 5 х Ю"9 М, 5 приблизительно 6 х Ю"9 М, приблизительно 7 х Ю"9 М, приблизительно 8 х Ю"9 М, приблизительно 9 х Ю"9 М, приблизительно 1 х Ю"10 М или приблизительно 5 х Ю"10 М. В некоторых вариантах реализации KD рассчитывают как отношение koff/k0n, и kon и k0ff определяют с применением моновалентного антитела, такого как фрагмент Fab, как измерено, например, посредством поверхностного плазмонного резонанса с 10 использованием технологии BIAcore(r). В других вариантах реализации KD рассчитывают как отношение k0ff/k0n, и kon и k0ff определяют с применением бивалентного антитела, такого как фрагмент Fab, как измерено, например, посредством поверхностного плазмонного резонанса с использованием технологии BIAcore(r).
[000208] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула
15 связывает антиген-мишень (например, ВСМА человека, FLT3 человека или CLL-1 человека) с константой скорости ассоциации (kon), составляющей менее чем 1 * 10"4 М"1 с"1, менее чем 2 х Ю"4 М"1 с"1, менее чем 3 х Ю"4 М"1 с"1, менее чем 4 х Ю"4 М"1 с"1, менее чем 5 х Ю"4 М"1 с"1, менее чем 6 х Ю"4 М"1 с"1, менее чем 7 х Ю"4 М"1 с"1, менее чем 8 х Ю" 4 М"1 с"1, менее чем 9 х Ю"4 М"1 с"1, менее чем 1 х ю-5 М"1 с"1, менее чем 2 х Ю"5 М"1 с"1,
20 менее чем 3 х Ю"5 М"1 с"1, менее чем 4 х Ю"5 М"1 с"1, менее чем 5 х Ю"5 М"1 с"1, менее чем 6 х Ю"5 М"1 с"1, менее чем 7 х 10"5 М"1 с"1, менее чем 8 х Ю"5 М"1 с"1, менее чем 9 х Ю"5 М" 1 с"1, менее чем 1 х Ю"6 М"1 с"1, менее чем 2 х Ю"6 М"1 с"1, менее чем 3 х Ю"6 М"1 с"1, менее чем 4 х ю-6 М"1 с"1, менее чем 5 х 10"6 М"1 с"1, менее чем 6 х Ю"6 М"1 с"1, менее чем 7 х Ю" 6 М"1 с"1, менее чем 8 х Ю"6 М"1 с"1, менее чем 9 х Ю"6 М"1 с"1 или менее чем 1 х ю-7 М"1
25 с"1. В некоторых вариантах реализации kon определяют с применением моновалентного антитела, такого как фрагмент Fab, как измерено, например, посредством поверхностного плазмонного резонанса с использованием технологии BIAcore(r). В других вариантах реализации kon определяют с применением бивалентного антитела, как измерено, например, посредством поверхностного плазмонного резонанса с
30 использованием технологии BIAcore(r).
[000209] В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула
связывает антиген-мишень (например, ВСМА человека, FLT3 человека или CLL-1
человека) с константой скорости диссоциации (k0ff), составляющей менее чем 1 х 10"2 с"
1, менее чем 2 х 10"2 с"1, менее чем 3 х 10'2 с"1, менее чем 4 х 10"2 с"1, менее чем 5 х Ю"2 с" 1, менее чем 6 х Ю"2 с"1, менее чем 7 х Ю"2 с"1, менее чем 8 х Ю"2 с"1, менее чем 9 х Ю"2 с" 1, менее чем 1 х ю-3 с"1, менее чем 2 х Ю"3 с"1, менее чем 3 х Ю"3 с"1, менее чем 4 х Ю"3 с" 1, менее чем 5 х Ю"3 с"1, менее чем 6 х Ю"3 с"1, менее чем 7 х Ю"3 с"1, менее чем 8 х Ю"3 с" 5 1, менее чем 9 х Ю"3 с"1, менее чем 1 х ю-4 с"1, менее чем 2 х 10"4 с"1, менее чем 3 х Ю"4 с" 1, менее чем 4 х Ю"4 с"1, менее чем 5 х Ю"4 с"1, менее чем 6 х Ю"4 с"1, менее чем 7 х Ю"4 с" 1, менее чем 8 х Ю"4 с"1, менее чем 9 х Ю"4 с"1, менее чем 1 х Ю"4 с"1 или менее чем 5x10" 4 с"1. В некоторых вариантах реализации k0ff определяют с применением моновалентного антитела, такого как фрагмент Fab, как измерено, например, посредством 10 поверхностного плазмонного резонанса с использованием технологии BIAcore(r). В других вариантах реализации k0ff определяют с применением бивалентного антитела, как измерено, например, посредством поверхностного плазмонного резонанса с использованием технологии BIAcore(r).
[000210] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид кодирует TCR, 15 который дополнительно содержит четвертый участок, определяющий комплементарность (CDR4). В некоторых вариантах реализации полинуклеотид кодирует TCR, который дополнительно содержит константный участок. В некоторых вариантах реализации константный участок выбран из константного участка IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgD, IgE и IgM.
20 I.D. Домен-переключатель
[000211] Следует понимать, что неблагоприятные побочные эффекты могут быть минимизированы путем трансдукции иммунных клеток (содержащих один или более CAR или TCR) суицидальным геном. Также может требоваться введение в иммунные клетки индуцибельного "включающего" или "ускоряющего" переключателя.
25 Подходящие способы включают применение индуцибельной каспазы-9 (заявка на патент США № 2011/0286980) или тимидинкиназы перед, после или одновременно с трансдукцией клеток конструкцией CAR согласно настоящему изобретению. Дополнительные способы введения суицидальных генов и/или "включающих" переключателей включают технологию TALENS, цинковые пальцы, интерферирующую
30 РНК (RNAi), малую интерферирующую РНК (siRNA), малую шпилечную РНК (shRNA), антисмысловую технологию и другие способы, известные в данной области техники.
[000212] В соответствии с настоящим изобретением дополнительные способы контроля с помощью переключателя, относящегося к типу "включатель-выключатель" или к другим типам, могут быть включены в настоящее описание. Эти способы могут включать применение доменов димеризации и факультативных активаторов таких 5 доменов димеризации. Эти способы включают, например, способы, включающие применение системы димеризации FKBP/Rapalog в некоторых клетках, описанные в публикации Wu et al., Science 2014 350 (6258), полное содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки. Дополнительная технология димеризации описана, например, BFegan et al. Chem. Rev. 2010, 110, 3315-3336, а также патентах США
10 №№ 5830462; 5834266; 5869337 и 6165787, полное содержание которых также включено в настоящее описание посредством ссылки. Дополнительные пары димеризации могут включать циклоспорин-А/циклофилин, рецептор, эстроген/рецептор эстрогена (необязательно, с применением тамоксифена), глюкокортикоиды/рецептор глюкокортикоидов, тетрациклин/рецептор тетрациклина, витамин D/рецептор витамина
15 D. Другие примеры технологии димеризации можно найти, например, в WO 2014/127261, WO 2015/090229, US 2014/0286987, US 2015/0266973, US 2016/0046700, патенте США № 8486693, US 2014/0171649 и US 2012/0130076, полное содержание которых также включено в настоящее описание посредством ссылки.
I.E. Лидерный пептид
20 [000213] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид согласно настоящему изобретению кодирует CAR или TCR, который может дополнительно содержать лидерный пептид (также упоминаемый в настоящем описании как "сигнальный пептид"). В некоторых вариантах реализации лидерный пептид содержит аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно
25 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности MALPVTALLLPLALLLHAARP (SEQ ID NO: 11).
30 В некоторых вариантах реализации лидерный пептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ГО NO: 11.
[000214] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид согласно настоящему изобретению кодирует CAR или TCR, содержащий лидерный пептид (Р), антигенсвязывающую молекулу (В), внеклеточный домен (Е) костимулирующего белка, трансмембранный домен (Т), костимулирующий участок (С) и домен активации (А), при 5 этом CAR имеет следующую конфигурацию: Р-В-Е-Т-С-А. В некоторых вариантах реализации антигенсвязывающая молекула содержит VH и VL, при этом CAR имеет следующую конфигурацию: P-VH-VL-E-T-C-A или P-VL-VH-E-T-C-A. В некоторых вариантах реализации VH и VL соединены с помощью линкера (L), при этом CAR имеет следующую конфигурацию, от N-конца к С-концу: P-VH-L-VL-E-T-C-A или P-VH-L-10 VL-E-T-C-A.
[000215] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид согласно настоящему изобретению кодирует CAR, содержащий аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по
15 меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из таблицы 2. В некоторых вариантах реализации полинуклеотид согласно настоящему изобретению кодирует CAR, содержащий аминокислотную
20 последовательность, выбранную из таблицы 2.
[000216] Таблица 2. Примеры последовательностей CAR
Конструкция CAR
Нуклеотидная последовательность
SEQ
NO:
Аминокислотная последователь-ность
SEQ
NO:
10ЕЗ CHD
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGACCCTCAAAGAGTCTGGA CCCGTGCTCGTAAAACCTACGGAGACCCT GACACTCACCTGCACAGTCTCCGGCTTCA GCCTCATCAATGCCAGGATGGGAGTTTCC TGGATCAGGCAACCGCCCGGAAAGGCCCT G GAAT G G С Т С G СACATAT Т Т Т СAGTААС G СТGAAAAAAGCTATCGGACTTСТСТGAAA AGTCGGCT СAC GAT ТAGTAAG GACACAT С СAAGAG С СAAGT GGTGCTTAC GAT GAC ТА ACAT G GAC С С Т GT G GATAC T G СААС С TAT TACTGTGCTCGAATCCCTGGTTATGGCGG АААТ G G G GAC TAC СAC TAC TAC G GTAT G G ATGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTTACT GTTTCAAGCGGAGGGGGAGGGAGTGGGGG TGGCGGATCTGGCGGAGGAGGCAGCGATA
242
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVTLKESGPVL VKPTETLTLTCTVSGF SLINARMGVSWIRQPP GKALEWLAHIFSNAEK SYRTSLKSRLTISKDT S KS QWLTMTNMD PVD TATYYCARIPGYGGNG DYHYYGMDVWGQGTTV TVSSGGGGSGGGGSGG GGSDIQMTQSPSSLSA SLGDRVTITCRASQGI RNDLGWYQQKPGKAPK RLIYASSTLQSGVPSR FSGSGSGTEFTLTISS LQPEDFATYYCLQHNN FPWTFGQGTKVEIKRA
243
TCCAGATGACGCAGTCCCCTAGTTCACTT TCCGCATCCCTGGGGGATCGGGTTACCAT TACATGCCGCGCGTCACAGGGTATCCGGA AT GAT С T G G GAT G GTAC СAG СAGAAG С С G GGAAAGGCTCCTAAGCGCCTCATCTACGC CAGCTCCACCCTGCAGAGTGGAGTGCCCT CCCGGTTTTCAGGCAGTGGCTCCGGTACG GAGT T TAC T С T TACAAT TAG СAG С С T G СA GCCAGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTT TGCAGCATAATAATTTCCCCTGGACCTTT GGTCAGGGCACCAAGGTGGAGATCAAAAG AGCAGCCGCCATCGAAGTAATGTATCCCC С С С С GTАС СТ Т GACAAT GAGAAGT CAAAT G GAAC CAT TAT С CAT GT TAAG G G СAAACA CCTCTGCCCTTCTCCACTGTTCCCTGGCC CTAGTAAGCCGTTTTGGGTGCTGGTGGTA GTCGGTGGGGTGCTGGCTTGTTACTCTCT TCTCGTGACCGTCGCCTTTATAATCTTTT GGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTC СATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С СAC G CCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACC AGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCT GCCTATCGGAGCCGAGTGAAATTTTCTAG ATCAGCTGATGCTCCCGCCTATCAGCAGG GACAGAAT СААС T T TACAATGAGCT GAAC CTGGGTCGCAGAGAAGAGTACGACGTTTT GGACAAACGCCGGGGCCGAGATCCTGAGA TGGGGGGGAAGCCGAGAAGGAAGAATCCT СAAGAAG G С С T GTACААС GAG С T T СAAAA AGACAAAAT G G С T GAG GCGTACTCT GAGA TCGGCATGAAGGGCGAGCGGAGACGAGGC AAGGGTCACGATGGCTTGTATCAGGGCCT GAGTACAG С СACAAAG GACAC С TAT GAC G CCCTCCACATGCAGGCACTGCCCCCACGC TAG
AAIEVMYPPPYLDNEK SNGTIIHVKGKHLCPS PLFPGPSKPFWVLVW GGVLACYSLLVTVAFI IFWVRS KRSRLLHSDY MNMTPRRPGPTRKHYQ PYAPPRDFAAYRSRVK FSRSADAPAYQQGQNQ LYNELNLGRREEYDVL DKRRGRDPEMGGKPRR KNPQEGLYNELQKDKM AEAYSEIGMKGERRRG KGHDGLYQGLSTATKD TYDALHMQALPPR
10E3 THD
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAAGTTACTTTGAAGGAGTCTGGA CCTGTACTGGT GAAG С СААС С GAGACAC T GACACT CAC GT GTACAGTGAGT GGTTTTT CCTTGATCAACGCAAGGATGGGCGTCAGC TGGATCAGGCAACCCCCTGGCAAGGCTCT GGAATGGCTCGCTCACATATTCAGCAATG CCGAAAAAAGCTACCGGACAAGCCTGAAA TCCCGCCTGACTATTTCCAAGGACACTTC TAAGTCTCAGGTGGTGCTGACCATGACCA ACATGGACCCGGTGGACACCGCCACCTAT TACTGCGCAAGAATCCCTGGGTATGGTGG GAATGGTGACTACCATTATTATGGGATGG ATGTGTGGGGGCAAGGCACAACCGTAACG GTCTCAAGCGGTGGGGGAGGCTCAGGGGG CGGAGGCTCCGGAGGTGGCGGCTCCGACA TTCAGATGACCCAAAGCCCGTCCAGCCTG T С С G С СAG С С T G G GAGATAGAGT GACAAT CAC GT GTAGAG С T T С С СAAG G GATAAGAA ATGATCTCGGGTGGTATCAGCAGAAGCCC GGCAAAGCCCCCAAAAGGCTTATATATGC TAGTAGTACACT GCAGT CT GGAGTT CCTT CCCGATTTTCAGGTAGCGGCTCCGGTACA
244
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVTLKESGPVL VKPTETLTLTCTVSGF SLINARMGVSWIRQPP GKALEWLAHIFSNAEK SYRTSLKSRLTISKDT S KS QWLTMTNMD PVD TATYYCARIPGYGGNG DYHYYGMDVWGQGTTV TVSSGGGGSGGGGSGG GGSDIQMTQSPSSLSA SLGDRVTITCRASQGI RNDLGWYQQKPGKAPK RLIYASSTLQSGVPSR FSGSGSGTEFTLTISS LQPEDFATYYCLQHNN FPWTFGQGTKVEIKRA AALDNEKSNGTIIHVK GKHLCPSPLFPGPSKP FWVLVWGGVLACYS L LVTVAFIIFWVRSKRS RLLHSDYMNMTPRRPG PTRKHYQPYAPPRDFA AYRSRVKFSRSADAPA
GAGT T CAC CCT CAC GATAAG С T CAC T С СA GCCTGAGGATTTCGCAACGTACTACTGCC TCCAGCACAACAATTTTCCCTGGACTTTC G G С СAG G G CAC СAAG GT G GAGAT СAAGAG GGCCGCTGCCCTTGATAATGAAAAGTCAA AC G GAACAAT CAT T CAC GT GAAG G G СAAG CACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGG TCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCG TAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCT CTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTT CTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGC T С СATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С СA CGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTA С СAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT T T С G CTGCCTATCGGAGCCGAGTGAAATTTTCT AGATCAGCTGATGCTCCCGCCTATCAGCA GGGACAGAAT СААС T T TACAATGAGCTGA ACCTGGGTCGCAGAGAAGAGTACGACGTT TTGGACAAACGCCGGGGCCGAGATCCTGA GAT G G G G G G GAAG С С GAGAAG GAAGAAT С CTCAAGAAGGCCTGTACAACGAGCTTCAA AAAGACAAAATGGCTGAGGCGTACTCTGA GAT С G G CAT GAAG G G С GAG С G GAGAC GAG GCAAGGGTCACGATGGCTTGTATCAGGGC С T GAGTACAG С СACAAAG GACAC С TAT GA CGCCCTCCACATGCAGGCACTGCCCCCAC GCTAG
YQQGQNQLYNELNLGR REEYDVLDKRRGRDPE MGGKPRRKNPQEGLYN ELQKDKMAEAYSEIGM KGERRRGKGHDGLYQG L S TAT К D T Y DAL HMQA LPPR
SB5 CHD ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGATCCAGTTGGTGGAATCAGGG GGCGGTGTGGTGCAGCCGGGTAGGAGCCT GAGACTGTCATGCGTGGCGTCTGGCTTCA CAT T СAAGAAC TAC G G CAT G CAC T G G GT G CGACAGGCCCCCGGAAAGGGTTTGGAGTG GGTCGCCGTGATCTGGTACGACGGATCTA AT GAGTAT TAC G GAGAT С С T GT GAAG G GA AG GT T CAC CAT С T С С С G С GACAATAG СAA AAATATGCTCTACCTGCAAATGAACTCAC TCAGGGCGGATGATACGGCGGTCTACTAT TGCGCTCGCTCAGGGATTGCTGTGGCCGG CGCATTCGATTACTGGGGACAGGGTACCC TGGTGACAGTATCAAGCGGAGGCGGCGGC TCTGGCGGCGGCGGATCTGGCGGGGGGGG AAGT GAGAT T GT GT T GACACAGT СТ С С С G ATACCCTGTCACTGTCACCCGGCGAGAAG G СAAC GCT GAGT T G СAGAG СAAG С СAGT С AGTCTCCTCTTCTTTTCTGGCCTGGTATC AGCAAAAACCAGGTCAGGCACCATСТСТС CTGATTTACGTTGCCAGCAGACGGGCGGC TGGCATTCCCGACAGGTTCTCTGGAAGCG GATCTGGGACCGATTTTACCCTGACAATT AGCCGCTTGGAGCCCGAAGACTTTGGTAT GTTTTACTGC СAG CAC TAC G GAAG GACAC CTTTCACATTTGGCCCGGGCACGAAAGTC GATATAAAAC G С G СAG С С G С CAT T GAAGT AAT GTAC С CAC CAC С T TAT T T GGACAAT G AAAAGT С СAAT GGTACCATTATT CACGT С AAGGGAAAGCATCTCTGTCCAAGCCCTCT GTTCCCCGGCCCCTCCAAACCATTCTGGG
246
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQIQLVESGGGV VQPGRSLRLSCVASGF TFKNYGMHWVRQAPGK GLEWVAVIWYDGSNEY YGDPVKGRFTISRDNS KNMLYLQMNSLRADDT AVYYCARS GIAVAGAF DYWGQGTLVTVSSGGG GSGGGGSGGGGSEIVL TQSPDTLSLSPGEKAT LSCRASQSVSSSFLAW YQQKPGQAPSLLIYVA SRRAAGIPDRFSGSGS GTDFTLTISRLEPEDF GMFYCQHYGRT P FT FG P GT KVDIKRAAAIEVM YPPPYLDNEKSNGTII HVKGKHLCPSPLFPGP S KP FWVLVWGGVLAC YSLLVTVAFIIFWVRS KRSRLLHSDYMNMTPR RPGPTRKHYQPYAPPR DFAAYRSRVKFSRSAD APAYQQGQNQLYNELN LGRREEYDVLDKRRGR DPEMGGKPRRKNPQEG LYNELQKDKMAEAYSE IGMKGERRRGKGHDGL YQGLSTATKDTYDALH MQALPPR
TGCTGGTGGTCGTCGGCGGAGTTCTGGCC TGCTATTCTCTGCTCGTGACTGTTGCATT СATСATTTTСTGGGTGAGATССAAAAGAA GCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAAT ATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAG GAAACAC TAC СAG С С T TAC G CAC CAC СТА GAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCCGAGTG AAATTTTCTAGATCAGCTGATGCTCCCGC С TAT СAG СAG G GACAGAAT СААС T T TACA AT GAG С T GAAC CTGGGTCG СAGAGAAGAG TACGACGTTTTGGACAAACGCCGGGGCCG AGATCCTGAGATGGGGGGGAAGCCGAGAA G GAAGAAT С С T СAAGAAG G С С T GTACААС GAGCTTCAAAAAGACAAAATGGCTGAGGC GTACTCTGAGATCGGCATGAAGGGCGAGC GGAGACGAGGCAAGGGTCACGATGGCTTG TAT СAG G G С С T GAGTACAG С СACAAAG GA CAC С TAT GAC G С С С T С СACAT G СAG G CAC TGCCCCCACGCTAG
SB5 THD ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGATTCAGCTCGTGGAGTCAGGT GGTGGCGTGGTTCAGCCCGGACGGTCCCT GCGACTCTCTTGTGTGGCAAGCGGATTTA CCTTTAAGAACTATGGCATGCACTGGGTG AGGCAGGCCCCTGGAAAAGGACTGGAGTG GGTTGCTGTGATCTGGTACGACGGGTCCA ACGAATATTATGGCGATCCTGTGAAGGGA С G GT T TACAAT С T CAC G С GATААС T СAAA GAACATGCTGTACCTGCAAATGAACTСТС TGCGCGCTGATGACACTGCCGTGTATTAT TGCGCTCGGAGTGGTATCGCCGTCGCAGG AGCATTTGATTATTGGGGGCAAGGGACCC TCGTGACAGTGAGTTCCGGAGGGGGAGGT TCTGGTGGAGGCGGCTCTGGTGGGGGAGG CAGCGAGATCGTTCTGACCCAGTCTCCTG ACACACTGTCACTGTCCCCTGGTGAAAAG GCCACACTGTCTTGTAGAGCGTCCCAGAG CGTTTCCAGTTCCTTCCTTGCATGGTATC AACAAAAACCCGGGCAGGCTCCAAGCTTG CTGATCTACGTGGCCAGCCGCCGGGCCGC AGGCATCCCTGATAGGTTTAGCGGTTCTG GGAGCGGGACGGACTTCACCTTGACAATA TCACGGCTGGAACCCGAAGACTTCGGAAT GTTTTATTGCCAGCACTACGGAAGAACTC CATTCACCTTTGGCCCGGGAACGAAGGTA GACAT СAAGAGAG СAG СAG С С С T С GACAA С GAGAAAT С СAAT G GAAC CAT TAT С CAT G TGAAGGGGAAACATCTCTGCCCTTCACCA TTGTTCCCTGGACCCAGCAAGCCTTTTTG GGTTCTGGTCGTGGTGGGGGGCGTCCTGG CTTGTTACTCCCTCCTCGTTACAGTCGCC TTСATAATСTTTTGGGTTAGATССAAAAG AAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGA ATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACA AG GAAACAC TAC СAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCCGAG TGAAATTTTCTAGATCAGCTGATGCTCCC G С С TAT СAG СAG G GACAGAAT СААС T T TA
24f
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQIQLVESGGGV VQPGRSLRLSCVASGF TFKNYGMHWVRQAPGK GLEWVAVIWYDGSNEY YGDPVKGRFTISRDNS KNMLYLQMNSLRADDT AVYYCARS GIAVAGAF DYWGQGTLVTVSSGGG GSGGGGSGGGGSEIVL TQSPDTLSLSPGEKAT LSCRASQSVSSSFLAW YQQKPGQAPSLLIYVA SRRAAGIPDRFSGSGS GTDFTLTISRLEPEDF GMFYCQHYGRT P FT FG PGTKVDIKRAAALDNE KSNGTIIHVKGKHLCP SPLFPGPSKPFWVLW VGGVLACYSLLVTVAF 11FWVRS KRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
С AAT GAG С T GAAC CTGGGTCG СAGAGAAG AGTACGACGTTTTGGACAAACGCCGGGGC CGAGATCCTGAGATGGGGGGGAAGCCGAG AAG GAAGAAT С С T СAAGAAG G С С T GTACA AC GAG С T T СAAAAAGACAAAAT G G С T GAG GCGTACTCTGAGATCGGCATGAAGGGCGA GCGGAGACGAGGCAAGGGTCACGATGGCT T GTAT СAG G G С С T GAGTACAG С СACAAAG GACAC С TAT GAC G С С С T С СACAT G СAG G С ACTGCCCCCACGCTAG
HxL CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT FS-214 95 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGG GGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCT GAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCA CCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTC CGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTG GGT CT CAGCTATTAGT GGTAGT GGT GGTA G СACATAC TAC G СAGAC T С С GT GAAG G G С С G GT T СAC CAT С T С СAGAGACAAT T С СAA GAACAC GCT GTAT С T G СAAAT GAACAG С С T GAGAG С С GAG GACAC GGCGGTGTACTAC TGCGCAAGAGCCGAGATGGGAGCCGTATT С GACATAT GGGGT СAGGGTACAAT GGT СA CCGTCTCCTCAGGGTCTACATCCGGCTCC GGGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTAC AAAGGGGGAAATTGTGTTGACACAGTСТС CAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAA AGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCA GAGTGTTAGCAGGTACTTAGCCTGGTACC AACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTC CT CAT CTAT GAT G CAT С СААСAG G G С CAC TGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTG GGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATC AG СAG С С TAGAG С С T GAAGAT Т Т Т G СAGT TTATTACTGTCAGCAGAGAATCTCCTGGC CTTTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTT GAGATCAAACGGGCCGCTGCCCTTGATAA Т GAAAAGT САААСGGAACAATCATТ СACG TGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCC TTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTG GGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCG CTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCT TTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAG AAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGA ATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACA AG GAAACAC TAC СAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGG TGAAGTTTTССAGATСTGСAGATGСACСA G С GTAT СAG СAG G G С СAGAAC СААС T GTA TAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAG AGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GA CGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAG ACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATA AT GAG С T G СAGAAG GATAAGAT G G С T GAA G С С TAT T С T GAAATAG G CAT GAAAG GAGA GCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTT T GTAC СAG G GAC T СAG CAC T G С TAC GAAG
133
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEVQLLESGGGL VQPGGSLRLSCAASGF TFSSYAMSWVRQAPGK GLEWVSAISGSGGSTY YADSVKGRFTISRDNS KNTLYLQMNSLRAEDT AVYYCARAEMGAVFDI WGQGTMVTVSSGSTSG SGKPGSGEGSTKGEIV LTQSPATLSLSPGERA TLSCRASQSVSRYLAW YQQKPGQAPRLLIYDA SNRATGIPARFSGSGS GTDFTLTISSLEPEDF AVYYCQQRISWPFTFG GGTKVEIKRAAALDNE KSNGTIIHVKGKHLCP SPLFPGPSKPFWVLW VGGVLACYSLLVTVAF 11FWVRS KRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
GATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGC CCTGCCACCTAGGTAA
LxH CAR FS-21495
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGAAATTGTGTTGACACAGTCTCCA GCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAG AGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGA GTGTTAGCAGGTACTTAGCCTGGTACCAA CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCT CAT CTAT GAT GCAT CCAACAGGGCCACT G GCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGG TCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAG CAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTT ATTACTGTCAGCAGAGAATCTCCTGGCCT TTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGA GATCAAACGGGGGTCTACATCCGGCTCCG GGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACA AAGGGGGAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGG GGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTC ACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGT CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGT GGGT CT CAGCTATTAGT GGTAGT GGT GGT AGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGG CCGGTTCAC CAT С T С СAGAGACAAT T С СA AGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGC CTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTA CTGCGCAAGAGCCGAGATGGGAGCCGTAT TCGACATATGGGGTCAGGGTACAATGGTC ACCGTCTCCTCAGCCGCTGCCCTTGATAA T GAAAAGT СAAAC GGAACAAT CAT T СAC G TGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCC TTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTG GGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCG CTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCT TTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAAAAG AAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGA ATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACA AGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACC TAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGG TGAAGTTTTССAGATСTGСAGATGСACСA GCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTA TAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAG AGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGA CGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAG ACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATA AT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGCT GAA GCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGA GCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTT TGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAG GATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGC CCTGCCACCTAGGTAA
135
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEIVLTQSPATL SLSPGERATLSCRASQ SVSRYLAWYQQKPGQA PRLLIYDASNRATGIP ARFSGSGSGTDFTLTI SSLEPEDFAVYYCQQR ISWPFTFGGGTKVEIK RGSTSGSGKPGSGEGS TKGEVQLLESGGGLVQ PGGSLRLSCAASGFTF SSYAMSWVRQAPGKGL EWVSAISGSGGSTYYA DSVKGRFTISRDNSKN TLYLQMNSLRAEDTAV YYCARAEMGAVFDIWG QGTMVTVS SAAALDNE KSNGTIIHVKGKHLCP SPLFPGPSKPFWVLW VGGVLACYSLLVTVAF 11FWVRS KRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
136
HxL CAR PC-21497
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGG GGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCT GAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCA CCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTC CGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTG
137
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVESGGGV VQPGRSLRLSCAASGF T FS S YGMHWVRQAP GK GLEWVAVISYDGSNKY YADSVKGRFTISRDNS KNTLYLQMNSLRAEDT
138
GGTGGCAGTTATATCGTATGATGGAAGTA ATAAATАСТАТGCAGACTCCGTGAAGGGC С GAT T СAC CAT С T С СAGAGACAAT T С СAA GAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCC T GAGAG С С GAG GACAC GGCGGTGTACTAC TGCGCCAGAGACGGTACTTATCTAGGTGG TCTCTGGTACTTCGACTTATGGGGGAGAG GTACCTTGGTCACCGTCTCCTCAGGGTCT ACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAGTGG CGAAGGTAGTACAAAGGGGGATATTGTGA TGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCGTC ACCCCTGGAGAGCCGGCCTCCATCTCCTG СAG GT С TAGT СAGAG С С T С С T G СATAGTA AT G GATACAAC TAT T T G GAT TGGTACCTG СAGAAG С СAG G G СAGT С T С СACAG С T С С T GATCTATTTGGGTTCTAATCGGGCCTCCG GGGTCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGA T СAG G СACAGAT T T TACAC T GAAAAT СAG CAGAGTGGAGGCTGAGGATGTTGGGGTTT ATTACTGCATGCAGGGACTCGGCCTCCCT CTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGA GATCAAACGGGCCGCTGCCCTTGATAATG AAAAGT СAAAC G GAACAATCATT CACGT G AAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTT GTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGG TGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCT TGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTT TATAAT CTTCTGGGT TAGAT С СAAAAGAA GCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAAT ATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAG GAAACAC TAC СAG С С T TAC G CAC CAC СТА GAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTG AAGT T T T С СAGAT С T G СAGAT G CAC СAG С GTAT СAG СAG G G С СAGAAC СААС T GTATA AC GAG С T СААС С T G G GAC G СAG G GAAGAG TAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC С С T GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAAT GAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGC CTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGC GGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTG TAC СAG G GAC T СAG CAC T G С TAC GAAG GA TACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCC TGCCACCTAGGTAA
AVYYCARDGTYLGGLW YFDLWGRGTLVTVSSG STSGSGKPGSGEGSTK GDIVMTQSPLSLPVTP GEPASISCRSSQSLLH SNGYNYLDWYLQKPGQ SPQLLIYLGSNRASGV PDRFSGSGSGTDFTLK IS RVEAEDVGVYYCMQ GLGLPLTFGGGTKVEI KRAAALDNEKSNGTII HVKGKHLCPSPLFPGP S KP FWVLVWGGVLAC YSLLVTVAFIIFWVRS KRSRLLHSDYMNMTPR RPGPTRKHYQPYAPPR DFAAYRSRVKFSRSAD APAYQQGQNQLYNELN LGRREEYDVLDKRRGR DPEMGGKPRRKNPQEG LYNELQKDKMAEAYSE IGMKGERRRGKGHDGL YQGLSTATKDTYDALH MQALPPR
HxL CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT PC-214 97 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGATATTGTGATGACTCAGTCTCCA CTCTCCCTGCCCGTCACCCCTGGAGAGCC GGCCTCCATCTCCTGCAGGTCTAGTCAGA GCCTCCTG СATAGTAAT G GATACAAC TAT TTGGATTGGTACCTGCAGAAGCCAGGGCA GTCTCCACAGCTCCTGATCTATTTGGGTT CTAATCGGGCCTCCGGGGTCCCTGACAGG T T СAGT GGСAGT GGAT СAGGСACAGAT T T TACACTGAAAATCAGCAGAGTGGAGGCTG AGGATGTTGGGGTTTATTACTGCATGCAG GGACTCGGCCTCCCTCTCACTTTTGGCGG AGGGACCAAGGTTGAGATCAAACGGGGGT CTACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAGT
139
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPDIVMTQSPLSL PVTPGEPASISCRSSQ SLLHSNGYNYLDWYLQ KPGQSPQLLIYLGSNR ASGVPDRFSGSGSGTD FT L КIS RVEAEDVGVY YCMQGLGLPLTFGGGT KVEIKRGSTSGSGKPG SGEGSTKGQVQLVESG GGWQPGRSLRLSCAA SGFTFSSY GMHWVRQA PGKGLEWVAVISYDGS NKYYAD SVKGRFTIS R DNSKNTLYLQMNSLRA
GGCGAAGGTAGTACAAAGGGGCAGGTGCA GCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCC AGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGT GCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTAGCTA TGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAG GCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATA TСGTATGAT GGAAGTAATAAATАСТАТ GC AGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCT С СAGAGACAAT T С СAAGAACAC G С T GTAT С T G СAAAT GAACAG С С T GAGAG С С GAG GA CACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGACG GTACTTATCTAGGTGGTCTCTGGTACTTC GACTTATGGGGGAGAGGTACCTTGGTCAC CGTCTCCTCAGCCGCTGCCCTTGATAATG AAAAGT СAAAC G GAACAATCATT CACGT G AAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCACCCTT GTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATTCTGGG TGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCT TGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTGGCTTT TATAAT CTTCTGGGT TAGAT С СAAAAGAA GCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAAT ATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAG GAAACAC TAC СAG С С T TAC G CAC CAC СТА GAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTG AAGT T T T С СAGAT С T G СAGAT G CAC СAG С GTAT СAG СAG G G С СAGAAC СAAC T GTATA AC GAG С T СAAC С T G G GAC G СAG G GAAGAG TAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC С С T GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAAT GAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGC CTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGC GGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTG TAC СAG G GAC T СAG CAC T G С TAC GAAG GA TACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCC TGCCACCTAGGTAA
EDTAVYYCARDGTYLG GLWYFDLWGRGTLVTV SSAAALDNEKSNGTII HVKGKHLCPSPLFPGP S KP FWVLVWGGVLAC YSLLVTVAFIIFWVRS KRSRLLHSDYMNMTPR RPGPTRKHYQPYAPPR DFAAYRSRVKFSRSAD APAYQQGQNQLYNELN LGRREEYDVLDKRRGR DPEMGGKPRRKNPQEG LYNELQKDKMAEAYSE IGMKGERRRGKGHDGL YQGLSTATKDTYDALH MQALPPR
HxL CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT AJ-215 0 8 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGG GCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGT GAAGGTTTCCTGCAAGGCATCTGGATACA С С T T CAC СAG С TAC TATAT G CAC T G G GT G CGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTG GATGGGAATAATCAACCCTGGTGGTGGTA G СACAAG С TAC G СACAGAAGT T С СAG G G С AGAGT СAC CAT GAC СAG G GACAC GT С СAC GAG СACAGT С TACAT G GAG С T GAG СAG С С T GAGAT С T GAG GACAC GGCGGTGTACTAC TGCGCCAGAGAGAGTTGGCCAATGGACGT ATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCT CCTCAGGGTCTACATCCGGCTCCGGGAAG CCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACAAAGGG G GAAATAGT GAT GAC G СAGT С T С СAG С СA CCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAGAGCC ACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGT TAG СAG СAAC TTAGCCTGGTAC СAG СAGA AACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATC TAT G GT G CAT С CAC СAG G G С CAC T G GTAT CCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTG
141
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVQSGAEV KKPGASVKVSCKASGY T FT S YYMHWVRQAP GQ GLEWMGIINPGGGSTS YAQKFQGRVTMTRDTS TSTVYMELSSLRSEDT AVYYCARESWPMDVWG QGTTVTVSSGSTSGSG KPGSGEGSTKGEIVMT QSPATLSVSPGERATL SCRASQSVSSNLAWYQ QKPGQAPRLLIYGAST RATGIPARFSGSGSGT EFTLTISSLQSEDFAV YYCQQYAAYPTFGGGT KVEIKRAAALDNEKSN GTIIHVKGKHLCPSPL F P G P S К P FW VL VWG G VLACYSLLVTVAFIIF WVRS KRSRLLHSDYMN MTPRRPGPTRKHYQPY APPRDFAAYRSRVKFS
GGACAGAGTT CACT CT CACCATCAGCAGC CTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTTATTA CTGTCAGCAGTACGCCGCCTACCCTACTT TTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA CGGGCCGCTGCCCTTGATAATGAAAAGTC AAAC G GAACAAT CAT T CAC GT GAAG G G СA AGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCT GGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGT CGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACT CTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATC TTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCT G С T С СATAG С GAT TACATGAATAT GACTC CACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACAC TAC СAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT T T CGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTT С СAGAT С T G СAGAT G CAC СAG С GTATCAG СAG G G С СAGAAC СAAC T GTATAAC GAG С T СAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC G TTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCT GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GAAAAAA CCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGC AGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCT GAAATAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG GGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGG GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACC TAGGTAA
RSADAPAYQQGQNQLY NELNLGRREEYDVLDK RRGRDPEMGGKPRRKN PQEGLYNELQKDKMAE AYSEIGMKGERRRGKG HDGLYQGLSTATKDTY DALHMQALPPR
LxH CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT AJ-215 0 8 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGAAATAGTGATGACGCAGTCTCCA GCCACCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAG AGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGA GT GT TAG CAG СAAC TTAGCCTGGTAC CAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCT CAT С TAT G GT G CAT С CAC CAG G G С CAC T G GTATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGG T С T G G GACAGAGT T CAC T С T CAC CAT CAG CAGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTT ATTACTGTCAGCAGTACGCCGCCTACCCT ACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGAT CAAACGGGGGTCTACATCCGGCTCCGGGA AGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACAAAG GGGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGC TGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGA AGGTTTCCTGCAAGGCATCTGGATACACC T T CAC CAG С TAC TATAT G CAC TGGGTGCG ACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGA TGGGAATAATCAACCCTGGTGGTGGTAGC ACAAG С TAC G СACAGAAGT T С CAG G G CAG AGT СAC CAT GAC CAG G GACAC GT С CAC GA G СACAGT С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T G AGAT С T GAG GACAC GGCGGTGTACTACTG С G С СAGAGAGAGT T G G С СAAT G GAC GTAT GGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTCTCC TCAGCCGCTGCCCTTGATAATGAAAAGTC AAAC G GAACAAT CAT T CAC GT GAAG G G СA AGCACCTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCT GGTCCATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGT CGTAGTGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACT
143
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEIVMTQSPATL SVSPGERATLSCRASQ SVSSNLAWYQQKPGQA PRLLIYGASTRATGIP ARFSGSGSGTEFTLTI SSLQSEDFAVYYCQQY AAYPTFGGGTKVEIKR GSTSGSGKPGSGEGST К GQ VQ L VQ S GAE VK К P GASVKVSCKASGYTFT S YYMHWVRQAP GQ GL E WMGIINPGGGSTSYAQ KFQGRVTMTRDTSTST VYMELSSLRSEDTAVY YCARESWPMDVWGQGT TVTVS SAAALDNEKSN GTIIHVKGKHLCPSPL F P G P S К P FW VL VWG G VLACYSLLVTVAFIIF WVRS KRSRLLHSDYMN MTPRRPGPTRKHYQPY APPRDFAAYRSRVKFS RSADAPAYQQGQNQLY NELNLGRREEYDVLDK RRGRDPEMGGKPRRKN PQEGLYNELQKDKMAE AYSEIGMKGERRRGKG HDGLYQGLSTATKDTY DALHMQALPPR
CTCTGCTCGTCACCGTGGCTTTTATAATC TTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCT G С T С СATAG С GAT TACATGAATAT GACTC CACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT T T CGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTT С СAGAT С T G СAGAT G CAC CAG С GTATCAG CAG G G С СAGAAC СAAC T GTATAAC GAG С T СAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC G TTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCT GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GAAAAAA CCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGC AGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCT GAAATAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG GGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGG GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACC TAGGTAA
HxL CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT NM-21517 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGCTGCAGCTGCAGGAGTCGGGC CCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCT GTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCT С CAT CAG СAGTAGTAGT TACTACTGGGGC TGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCT GGAGTGGATTGGGAGTATCTCCTATAGTG G GAG CAC С TAC TACAAC CCGTCCCT СAAG AGT С GAGT CAC CATAT С С GTAGACAC GT С CAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGTT CTGTGACCGCCGCAGACACGGCGGTGTAC TACTGCGC СAGAG G CAG G G GATAT G СAAC CAGCTTAGCCTTCGATATCTGGGGTCAGG GTACAATGGTCACCGTCTCCTCAGGGTCT ACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAGTGG CGAAGGTAGTACAAAGGGGGAAATTGTGT TGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTTTG TCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTG CAG G G С СAGT СAGAGT GT TAG CAG С TAC T TAGCCTGGTAC СAACAGAAAC С T G G С CAG GCTCCCAGGCTCCTCATCTATGATGCATC СAACAG G G С CAC T G G CAT С С CAG С СAG GT TCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTC AC T С T CAC CAT CAG CAG С С TAGAG С С T GA AGAT Т Т Т G СAGT Т ТAT ТAC Т GT CAG СAGA GACACGTCTGGCCTCCTACTTTTGGCGGA GGGACCAAGGTTGAGATCAAACGGGCCGC TGСССTTGATAATGAAAAGTСAAACGGAA СAAT CAT T CAC GT GAAG G G СAAG CAC С T С TGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATC CAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGG GTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTC GTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGT TAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATA G С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С С G С CCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCC TTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCT ATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCT G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С СA GAAC СAAC T GTATAAC GAG С T СAAC С T G G
145
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQLQLQESGPGL VKPSETLSLTCTVSGG SISSSSYYWGWIRQPP GKGLEWIGSISYSGST YYNPSLKSRVTISVDT SKNQFSLKLSSVTAAD TAVYYCARGRGYAT S L AFDIWGQGTMVTVSSG STSGSGKPGSGEGSTK GEIVLTQSPATLSLSP GERATLSCRASQSVSS YLAWYQQKPGQAPRLL IYDASNRATGIPARFS GSGSGTDFTLTISSLE PEDFAVYYCQQRHVWP PTFGGGTKVEIKRAAA LDNEKSNGTIIHVKGK HLCPSPLFPGPSKPFW VL VWG G VL AC Y S L L V TVAFIIFWVRS KRSRL LHSDYMNMTPRRPGPT RKHYQPYAPPRDFAAY RSRVKFSRSADAPAYQ QGQNQLYNELNLGRRE EYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNEL QKDKMAEAYSEIGMKG ERRRGKGHDGLYQGLS TAT К D T Y DAL HMQAL P PR
GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GAC AAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGG TGGСAAACСAAGACGAAAAAACССССAGG AGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGAT AAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG GGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGC ACTGCTAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG С С С T G С CAC С TAG GTAA
LxH CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT NM-21517 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGAAATTGTGTTGACACAGTCTCCA GCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAG AGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGA GT GT TAG CAG CTACTTAGCCTGGTAC СAA CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCT CAT CTAT GAT GCAT CCAACAGGGCCACT G GCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGG TCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAG CAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTT AT TAC T GT CAG СAGAGACAC GTCTGGCCT CCTACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGA GATCAAACGGGGGTCTACATCCGGCTCCG GGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACA AAGGGGCAGCTGCAGCTGCAGGAGTCGGG CCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCC TGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGC T С CAT CAG СAGTAGTAGT TACTACTGGGG CTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGC TGGAGTGGATTGGGAGTATCTCCTATAGT GGGAGCACCTACTACAACCCGTCCCTCAA GAGT С GAGT CAC CATAT С С GTAGACAC GT CCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGT TCTGTGACCGCCGCAGACACGGCGGTGTA CTACTGCGCCAGAGGCAGGGGATATGCAA CCAGCTTAGCCTTCGATATCTGGGGTCAG GGTACAATGGTCACCGTCTCCTCAGCCGC TGСССTТGATAATGAAAAGTСAAACGGAA СAAT CAT T CAC GT GAAG G G СAAG CAC С T С TGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATC CAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGG GTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTC GTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGT TAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATA G С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С С G С CCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCC TTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCT ATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCT G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С СA GAAC СAAC T GTATAAC GAG С T СAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GAC AAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGG TGGСAAACСAAGACGAAAAAACСССCAGG AGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGAT AAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG GGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGC ACTGCTAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG С С С T G С CAC С TAG GTAA
147
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEIVLTQSPATL SLSPGERATLSCRASQ SVSSYLAWYQQKPGQA PRLLIYDASNRATGIP ARFSGSGSGTDFTLTI SSLEPEDFAVYYCQQR HVWPPTFGGGTKVEIK RGSTSGSGKPGSGEGS TKGQLQLQESGPGLVK PSETLSLTCTVSGGSI SSSSYYWGWIRQPPGK GLEWIGSISYSGSTYY NPSLKSRVTISVDTSK NQFSLKLSSVTAADTA VYYCARGRGYAT S LAF DIWGQGTMVTVSSAAA LDNEKSNGTIIHVKGK HLCPSPLFPGPSKPFW VL VWG G VL AC Y S L L V TVAFIIFWVRS KRSRL LHSDYMNMTPRRPGPT RKHYQPYAPPRDFAAY RSRVKFSRSADAPAYQ QGQNQLYNELNLGRRE EYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNEL QKDKMAEAYSEIGMKG ERRRGKGHDGLYQGLS TAT К D T Y DAL HMQAL P PR
HxL CAR TS-21522
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGG GGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCT GAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCA С С T T СAGTAG С TATAG CAT GAAC T G G GT С CGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTG GGT T T CAAC CAT TAGTAGTAGTAGTAGTA С СATATAC TAC G СAGAC T С T GT GAAG G G С С GAT T СAC CAT С T С СAGAGACAAT G С СAA GAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCC T GAGAG С T GAG GACAC GGCGGTGTACTAC TGCGCCAGAGGTTCTCAGGAGCACCTGAT TTTCGATTATTGGGGACAGGGTACATTGG TCACCGTCTCCTCAGGGTCTACATCCGGC TCCGGGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAG TACAAAGGGGGAAATTGTGTTGACACAGT CTCCAGCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGG GAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAG TCAGAGTGTTAGCAGGTACTTAGCCTGGT ACCAACAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGG CTCCTCATCTATGATGCATCCAACAGGGC CACTGGCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCA GTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACC ATCAGCAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGC AGT T TAT TAC T GT CAG СAGAGAT T С TAC T ACCCTTGGACTTTTGGCGGAGGGACCAAG GTTGAGATCAAACGGGCCGCTGCCCTTGA TAAT GAAAAGT СAAAC GGAACAAT CAT T С ACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCA CCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATT CTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCC TCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTG GCTTTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAA AAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACA TGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCC ACAAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC С ACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCA GGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCA С CAG С GTAT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGG AAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGA GGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACC AAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCT ATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCT GAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGG AGAG С G GAGAAG G G GAAAAG G G CAC GAC G GTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC G AAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СA AGCCCTGCCACCTAGGTAA
149
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEVQLVESGGGL VQPGGSLRLSCAASGF TFSSYSMNWVRQAPGK GLEWVSTISSSSSTIY YAD SVKGRFTIS RDNA KNSLYLQMNSLRAEDT AVYYCARGSQEHLIFD YWGQ GT LVTVS S G S T S GSGKPGSGEGSTKGEI VLTQSPATLSLSPGER ATLSCRASQSVSRYLA WYQQKPGQAPRLLIYD ASNRATGIPARFSGSG SGTDFTLTISSLEPED FAVYYCQQRFYYPWTF GGGTKVEIKRAAALDN EKSNGTIIHVKGKHLC PSPLFPGPSKPFWVLV WGGVLACYS LLVTVA FIIFWVRSKRSRLLHS DYMNMTPRRPGPTRKH YQPYAPPRDFAAYRSR VKFSRSADAPAYQQGQ NQLYNELNLGRREEYD VLDKRRGRDPEMGGKP RRKNPQEGLYNELQKD KMAEAYSEIGMKGERR RGKGHDGLYQGLSTAT KDTYDALHMQALPPR
LxH CAR TS-21522
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGAAATTGTGTTGACACAGTCTCCA GCCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAG AGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGA GTGTTAGCAGGTACTTAGCCTGGTACCAA CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCT CAT CTAT GAT GCAT CCAACAGGGCCACT G GCATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGG
151
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEIVLTQSPATL SLSPGERATLSCRASQ SVSRYLAWYQQKPGQA PRLLIYDASNRATGIP ARFSGSGSGTDFTLTI SSLEPEDFAVYYCQQR FYYPWTFGGGTKVEIK RGSTSGSGKPGSGEGS
TCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAG CAGCCTAGAGCCTGAAGATTTTGCAGTTT AT TAC T GT CAG СAGAGAT TCTACTACCCT TGGACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGA GATCAAACGGGGGTCTACATCCGGCTCCG GGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACA AAGGGGGAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGG GGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTC AC С T T СAGTAG С TATAG CAT GAAC T G G GT CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGT GGGT T T CAAC CAT TAGTAGTAGTAGTAGT AC СATATAC TAC G СAGAC T С T GT GAAG G G С С GAT T СAC CAT С T С СAGAGACAAT G С СA AGAACTCACTGTATCTGCAAATGAACAGC С T GAGAG С T GAG GACAC GGCGGTGTACTA CTGCGCCAGAGGTTCTCAGGAGCACCTGA TTTTCGATTATTGGGGACAGGGTACATTG GTCACCGTCTCCTCAGCCGCTGCCCTTGA TAAT GAAAAGT СAAAC GGAACAAT CAT T С ACGTGAAGGGCAAGCACCTCTGTCCGTCA CCCTTGTTCCCTGGTCCATCCAAGCCATT CTGGGTGTTGGTCGTAGTGGGTGGAGTCC TCGCTTGTTACTCTCTGCTCGTCACCGTG GCTTTTATAATCTTCTGGGTTAGATCCAA AAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACA TGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCC ACAAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC С ACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCA GGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCA С CAG С GTAT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGG AAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGA GGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACC AAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCT ATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCT GAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGG AGAG С G GAGAAG G G GAAAAG G G CAC GAC G GTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC G AAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СA AGCCCTGCCACCTAGGTAA
TKGEVQLVESGGGLVQ PGGSLRLSCAASGFTF SSYSMNWVRQAPGKGL EWVSTISSSSSTIYYA D SVKGRFTIS RDNAKN SLYLQMNSLRAEDTAV YYCARGSQEHLIFDYW GQGTLVTVSSAAALDN EKSNGTIIHVKGKHLC PSPLFPGPSKPFWVLV WGGVLACYS LLVTVA FIIFWVRSKRSRLLHS DYMNMTPRRPGPTRKH YQPYAPPRDFAAYRSR VKFSRSADAPAYQQGQ NQLYNELNLGRREEYD VLDKRRGRDPEMGGKP RRKNPQEGLYNELQKD KMAEAYSEIGMKGERR RGKGHDGLYQGLSTAT KDTYDALHMQALPPR
HxL CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT RY-2152 7 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGG GGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCT GAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCA CCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTC CGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTG GGTGGCAGTTATATCGTATGATGGAAGTA ATAAATAC TAT G СAGAC T С С GT GAAG G G С С GAT T СAC CAT С T С СAGAGACAAT T С СAA GAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCC T GAGAG С С GAG GACAC GGCGGTGTACTAC TGCGCCAGAACTGACTTCTGGAGCGGATC CCCTCCAGGCTTAGATTACTGGGGACAGG GTACATTGGTCACCGTCTCCTCAGGGTCT ACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAGTGG CGAAGGTAGTACAAAGGGGGACATCCAGT TGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCA
153
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVESGGGV VQPGRSLRLSCAASGF T FS S YGMHWVRQAP GK GLEWVAVISYDGSNKY YADSVKGRFTISRDNS KNTLYLQMNSLRAEDT AVYY СART D FW S G S P P GLDYWGQGTLVTVSSG STSGSGKPGSGEGSTK GDIQLTQSPSSVSASV GDRVTITCRASQGISS WLAWYQQKPGKAPKLL IYGASSLQSGVPSRFS GSGSGTDFTLTISSLQ PEDFATYYCQQIYTFP FTFGGGTKVEIKRAAA LDNEKSNGTIIHVKGK
T CT GTAGGAGACAGAGT CACCAT CACTTG TCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGT TAG С С T G GTAT CAG СAGAAAC CAG G GAAA GCCCCTAAGCTCCTGATCTATGGTGCATC CAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGT TCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTC ACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGA AGAT T T T G CAAC T TAT TAC T GT CAG СAGA TATACACCTTCCCTTTCACTTTTGGCGGA GGGACCAAGGTTGAGATCAAACGGGCCGC TGСССTТGATAATGAAAAGTСAAACGGAA СAAT CAT T CAC GT GAAG G G СAAG CAC С T С TGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATC CAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGG GTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTC GTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGT TAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATA G С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С С G С CCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCC TTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCT ATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCT G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С СA GAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GAC AAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGG TGGСAAACСAAGACGAAAAAACСССCAGG AGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGAT AAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG GGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGC ACTGCTAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG С С С T G С CAC С TAG GTAA
HLCPSPLFPGPSKPFW VL VWG G VL AC Y S L L V TVAFIIFWVRS KRSRL LHSDYMNMTPRRPGPT RKHYQPYAPPRDFAAY RSRVKFSRSADAPAYQ QGQNQLYNELNLGRRE EYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNEL QKDKMAEAYSEIGMKG ERRRGKGHDGLYQGLS TAT К D T Y DAL HMQAL P PR
LxH CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT RY-2152 7 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGACATCCAGTTGACCCAGTCTCCA TCTTCCGTGTCTGCATCTGTAGGAGACAG AGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGG GTAT TAG CAG CTGGTTAGCCT G GTAT CAG CAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCT GATCTATGGTGCATCCAGTTTGCAAAGTG GGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGA T CT GGGACAGATTT CACT CT CACCAT CAG CAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTT AT TAC T GT CAG СAGATATACAC С T T С С С T TTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGA GATCAAACGGGGGTCTACATCCGGCTCCG GGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACA AAGGGGCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGG GGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTC ACCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGT CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGT GGGTGGCAGTTATATCGTATGATGGAAGT AATAAATАСТАТGCAGACTCCGTGAAGGG С С GAT T СAC CAT С T С СAGAGACAAT T С СA AGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGC CTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTA CTGCGCCAGAACTGACTTCTGGAGCGGAT CCCCTCCAGGCTTAGATTACTGGGGACAG
155
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPDIQLTQSPSSV SASVGDRVTITCRASQ GISSWLAWYQQKPGKA PKLLIYGASSLQSGVP SRFSGSGSGTDFTLTI SSLQPEDFATYYCQQI YTFPFTFGGGTKVEIK RGSTSGSGKPGSGEGS TKGQVQLVESGGGWQ PGRSLRLSCAASGFTF SSYGMHWVRQAPGKGL EWVAVISYDGSNKYYA DSVKGRFTISRDNSKN TLYLQMNSLRAEDTAV YYCARTDFWSGSPPGL DYWGQGTLVTVSSAAA LDNEKSNGTIIHVKGK HLCPSPLFPGPSKPFW VL VWG G VL AC Y S L L V TVAFIIFWVRS KRSRL LHSDYMNMTPRRPGPT RKHYQPYAPPRDFAAY RSRVKFSRSADAPAYQ QGQNQLYNELNLGRRE EYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNEL
GGTACATTGGTCACCGTCTCCTCAGCCGC TGСССTTGATAATGAAAAGTСAAACGGAA СAAT CAT T CAC GT GAAG G G СAAG CAC С T С TGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCATC CAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTGG GTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCTC GTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGGT TAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATA G С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С С G С CCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCC TTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCT ATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCT G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С СA GAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GAC AAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGG TGGСAAACСAAGACGAAAAAACСССCAGG AGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGAT AAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG GGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGC ACTGCTAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG С С С T G С CAC С TAG GTAA
QKDKMAEAYSEIGMKG ERRRGKGHDGLYQGLS TAT К D T Y DAL HMQAL P PR
HxL CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT PP-2152 8 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGG GCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGTCCTCGGT GAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGAGGCA CCTTCAGCAGCTATGCTATCAGCTGGGTG CGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTG GATGGGAGGGATCATCCCTATCTTTGGTA CAG СAAAC TAC G СACAGAAGT T С CAG G G С AGAGT СAC GAT TACCGCGGAC GAAT С СAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GAGAT С T GAG GACAC GGCGGTGTACTAC TGCGCCAGAACTCCTGAATACTCCTCCAG С AT AT G G CAC TAT TACTACGG CAT G GAC G TATGGGGCCAGGGAACAACTGTCACCGTC TCCTCAGGGTCTACATCCGGCTCCGGGAA GCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACAAAGG G G GACAT С GT GAT GAC С СAGT С T С СAGAC TCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGC CAC CAT CAAC T G СAAGT С CAG С СAGAGT G TTTTATACAGСTССAACAATAAGAACTAC TTAGCTTGGTAC CAG СAGAAAC CAG GACA GCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGGCAT CTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGA TTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTT CACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTG AAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAG TTCGCCCACACTCCTTTCACTTTTGGCGG AGGGACCAAGGTTGAGATCAAACGGGCCG CTGCCCTTGATAATGAAAAGTCAAACGGA ACAAT CAT T CAC GT GAAG G G СAAG CAC С T CTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCAT CCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTG GGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCT CGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGG TTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCAT
157
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVQSGAEV KKPGSSVKVSCKASGG T F S S YAISWVRQAP GQ GLEWMGGIIPIFGTAN YAQKFQGRVTITADES TSTAYMELSSLRSEDT AVYYCART PEYS S SIW HYYYGMDVWGQGTTVT VSSGSTSGSGKPGSGE GSTKGDIVMTQSPDSL AVSLGERATINCKSSQ SVLYS SNNKNYLAWYQ QKPGQPPKLLIYWAST RESGVPDRFSGSGSGT D FT LTIS S LQAEDVAV YYCQQFAHTPFTFGGG TKVEIKRAAALDNEKS NGTIIHVKGKHLCPSP LFPGPSKPFWVLVWG GVLACYSLLVTVAFII FWVRS KRSRLLHSDYM NMTPRRPGPTRKHYQP YAPPRDFAAYRSRVKF SRSADAPAYQQGQNQL YNELNLGRREEYDVLD KRRGRDPEMGGKPRRK NPQEGLYNELQKDKMA EAYSEIGMKGERRRGK GHDGLYQGLSTATKDT Y DAL HMQAL P P R
AG С GAT TACAT GAATAT GACTCCACGCCG CCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGC CTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCC TATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATC T G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С С AGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GA СAAG С G СAGAG GAC G G GAC С С T GAGAT G G GTGGСAAACСAAGACGAAAAAACССССAG GAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGA TAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAA GGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG С С С T G С CAC С TAG GTAA
LxH CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT PP-2152 8 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGACATCGTGATGACCCAGTCTCCA GACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAG G G С CAC CAT CAAC T G СAAGT С CAG С СAGA GTGTTTTATACAGCTC СAACAATAAGAAC TACTTAGCTTGGTAC CAG СAGAAAC CAG G ACAGCCTCCTAAGCTGCTCATTTACTGGG CATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGAC CGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGA TTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGG CTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAG CAGTTCGCCCACACTCCTTTCACTTTTGG С G GAG G GAC СAAG GT T GAGAT СAAAC G G G GGTCTACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGA AGTGGCGAAGGTAGTACAAAGGGGCAGGT GCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGA AGAAGCCTGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCC TGCAAGGCTTCTGGAGGCACCTTCAGCAG CTATGCTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCC CTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGG AT CAT С С С TAT С T T T G GTACAG СAAAC ТА С G СACAGAAGT Т С СAG G G СAGAGT CAC GA TTACCGCG GAC GAAT С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GAGAT С T GA GGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAA CTCCTGAATACTCCTCCAGCATATGGCAC TAT TACTACGG CAT G GAC GTAT G G G G С СA GGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCAGCCG CTGCCCTTGATAATGAAAAGTCAAACGGA ACAAT CAT T CAC GT GAAG G G СAAG CAC С T CTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCCAT CCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAGTG GGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTGCT CGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTGGG TTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCAT AG С GAT TACAT GAATAT GACTCCACGCCG CCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGC CTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCC TATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATC T G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С С AGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GA СAAG С G СAGAG GAC G G GAC С С T GAGAT G G
159
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPDIVMTQSPDSL AVSLGERATINCKSSQ SVLYS SNNKNYLAWYQ QKPGQPPKLLIYWAST RESGVPDRFSGSGSGT D FT LTIS S LQAEDVAV YYCQQFAHTPFTFGGG TKVEIKRGSTSGSGKP GSGEGSTKGQVQLVQS GAEVKKPGSSVKVSCK AS GGT FS S YAISWVRQ APGQGLEWMGGIIPIF GTANYAQKFQGRVTIT ADESTSTAYMELSSLR SEDTAVYYCARTPEYS S SIWHYYYGMDVWGQG TTVTVS SAAALDNEKS NGTIIHVKGKHLCPSP LFPGPSKPFWVLVWG GVLACYSLLVTVAFII FWVRS KRSRLLHSDYM NMTPRRPGPTRKHYQP YAPPRDFAAYRSRVKF SRSADAPAYQQGQNQL YNELNLGRREEYDVLD KRRGRDPEMGGKPRRK NPQEGLYNELQKDKMA EAYSEIGMKGERRRGK GHDGLYQGLSTATKDT Y DAL HMQAL P P R
GTGGСAAACСAAGACGAAAAAACССССAG GAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGA TAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAA GGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG С С С T G С CAC С TAG GTAA
HxL CAR ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT RD-2153 0 GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGG GGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCT GAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCA CCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGTC CGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTG GGTGGCAGTTATATCGTATGATGGAAGTA ATAAATАСТАТGCAGACTCCGTGAAGGGC С GAT T СAC CAT С T С СAGAGACAAT T С СAA GAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCC T GAGAG С С GAG GACAC GGCGGTGTACTAC TGCGTCAAGGGGCCGTTGCAGGAGCCGCC ATAC GAT TAT G GAAT G GAC GTAT G G G G С С AGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCAGGG TCTACATCCGGCTCCGGGAAGCCCGGAAG T G G С GAAG GTAGTACAAAG G G G GAAATAG TGATGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCT GTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTC С T G CAG G G С СAGT СAGAGT GT TAG CAG СA ACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGC CAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATAGCGC AT С CAC CAG G G С CAC T G GTAT С С CAG С СA GGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAG T T CAC T С T CAC CAT CAG CAG С С T G СAGT С TGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGC AGCACCACGTCTGGCCTCTCACTTTTGGC G GAG G GAC СAAG GT T GAGAT СAAAC G G G С CGCTGCCCTTGATAATGAAAAGTCAAACG GAACAAT CATT CACGT GAAG G G СAAG CAC CTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCC ATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAG TGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTG CTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTG GGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCC ATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С CGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCA GCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTG CCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGA T С T G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G ССAGAACCAACTGTATAACGAGСTСAACС TGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTG GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC С С T GAGAT GGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCC AGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAG GATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAAT AGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAA AAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTC AG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC G С TCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGT AA
161
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVESGGGV VQPGRSLRLSCAASGF T FS S YGMHWVRQAP GK GLEWVAVISYDGSNKY YADSVKGRFTISRDNS KNTLYLQMNSLRAEDT AVYYCVKGPLQEPPYD YGMDVWGQGTTVTVS S GSTSGSGKPGSGEGST KGEIVMTQSPATLSVS PGERATLSCRASQSVS SNLAWYQQKPGQAPRL LIYSASTRATGIPARF SGSGSGTEFTLTISSL QSEDFAVYYCQQHHVW PLTFGGGTKVEIKRAA ALDNEKSNGTIIHVKG KHLCPSPLFPGPSKPF W VL VWG G VL AC Y S L L VTVAFIIFWVRS KRSR LLHSDYMNMTPRRPGP TRKHYQPYAPPRDFAA YRSRVKFSRSADAPAY QQGQNQLYNELNLGRR EEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNE LQKDKMAEAYSEIGMK GERRRGKGHDGLYQGL S TAT К D T Y DAL HMQ AL PPR
LxH CAR RD-21530
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGAAATAGTGATGACGCAGTCTCCA GCCACCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAG AGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGA GT GT TAG CAG CAAC TTAGCCTGGTAC CAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCT CAT С TATAG С G CAT С CAC CAG G G С CAC T G GTATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGG T С T G G GACAGAGT T CAC T С T CAC CAT CAG CAGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTT ATTACTGTCAGCAGCACCACGTCTGGCCT CTCACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGA GATCAAACGGGGGTCTACATCCGGCTCCG GGAAGCCCGGAAGTGGCGAAGGTAGTACA AAGGGGCAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGG GGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCC TGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTC ACCTTCAGTAGCTATGGCATGCACTGGGT CCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGT GGGTGGCAGTTATATCGTATGATGGAAGT AATAAATАСТАТGCAGACTCCGTGAAGGG С С GAT T СAC CAT С T С СAGAGACAAT T С СA AGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGC CTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTA CTGCGTCAAGGGGCCGTTGCAGGAGCCGC СATAC GAT TAT G GAAT G GAC GTAT G G G G С CAGGGAACAACTGTCACCGTCTCCTCAGC CGCTGCCCTTGATAATGAAAAGTCAAACG GAACAAT CATT CACGT GAAG G G СAAG CAC CTCTGTCCGTCACCCTTGTTCCCTGGTCC ATCCAAGCCATTCTGGGTGTTGGTCGTAG TGGGTGGAGTCCTCGCTTGTTACTCTCTG CTCGTCACCGTGGCTTTTATAATCTTCTG GGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCC ATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С CGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCA GCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTG CCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGA T С T G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G ССAGAACCAACTGTATAACGAGСTСAACС TGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTG GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC С С T GAGAT GGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCC AGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAG GATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAAT AGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAA AAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTC AG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC G С TCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGT AA
163
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEIVMTQSPATL SVSPGERATLSCRASQ SVSSNLAWYQQKPGQA PRLLIYSASTRATGIP ARFSGSGSGTEFTLTI SSLQSEDFAVYYCQQH HVWPLTFGGGTKVEIK RGSTSGSGKPGSGEGS TKGQVQLVESGGGWQ PGRSLRLSCAASGFTF SSYGMHWVRQAPGKGL EWVAVISYDGSNKYYA DSVKGRFTISRDNSKN TLYLQMNSLRAEDTAV YYCVKGPLQEPPYDYG MDVWGQGTTVTVSSAA ALDNEKSNGTIIHVKG KHLCPSPLFPGPSKPF W VL VWG G VL AC Y S L L VTVAFIIFWVRS KRSR LLHSDYMNMTPRRPGP TRKHYQPYAPPRDFAA YRSRVKFSRSADAPAY QQGQNQLYNELNLGRR EEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNE LQKDKMAEAYSEIGMK GERRRGKGHDGLYQGL S TAT К D T Y DAL HMQ AL PPR
ДНК HxL THD CAR для клона 24C1
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTCCAACTGCAAGAAAGCGGA CCCGGACTGGTGAAGCCTTCTGAGACACT TAGTCTGACGTGCACGGTCAGTGGCGGCT CCATCTCCTCCTATTATTGGTCATGGATA CGACAACCCCCAGGTAAGGGCCTGGAATG GAT T G G С TATAT С TAC TAT T CAG GAAG СA
165
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLQESGPGL VKPSETLSLTCTVSGG SISSYYWSWIRQPPGK GLEWIGYIYYSGSTNY NPSLKSRVTISVDTSK NQFSLKLSSVTAADTA VYYCVSLVYCGGDCYS
СGAACTACAATСССAGССTGAAGTСССGA GT GACAAT Т Т CAGTAGATACCAGTААААА CCAGTTCAGTCTTAAACTGTCAAGCGTGA CAGCTGCCGACACCGCTGTGTATTACTGC GTCTCACTGGTGTATTGTGGAGGGGATTG TTATAGCGGGTTCGATTATTGGGGACAGG GAACCCTGGTGACTGTATCTTCCGGCGGC GGCGGCTCAGGGGGTGGCGGTAGTGGCGG TGGGGGTTCCGATATTCAACTGACACAAT CCCCCAGCTCACTCAGCGCCAGCGTGGGG GACAGGGTTAGCTTTACCTGTCAAGCCTC T CAG GATATAAATAAC T T T С T GAAC T G GT ATCAACAGAAGCCTGGGAAGGCGCCCAAA CTCCTGATCTATGATGCGTCCAACCTGGA AACTGGCGTGCCTTCACGCTTTAGCGGCT С T G G CAGT G GTACAGAC T T CAC T T T TAC С ATCTCTTCACTTCAGCCGGAGGACATCGC СACATAT TACT GT СAACAGTAC GGAAACT TGCCCTTTACTTTTGGAGGCGGCACCAAA GTTGAAATCAAAAGGGCCGCTGCCCTGGA TAAC GAAAAGAG СAAT G G GAC TATAATAC ATGTTAAAGGAAAACACCTGTGTCCATCT CCCCTGTTCCCTGGACCGTCAAAGCCATT TTGGGTGCTCGTGGTTGTCGGTGGCGTTC TCGCCTGTTATAGCTTGCTGGTGACAGTA GCCTTCATTATCTTTTGGGTGAGATCCAA AAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACA TGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCC ACAAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC С ACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCA GGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCA С CAG С GTAT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGG AAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGA GGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACC AAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCT ATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCT GAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGG AGAG С G GAGAAG G G GAAAAG G G CAC GAC G GTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC G AAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СA AGCCCTGCCACCTAGGTAA
GFDYWGQGTLVTVSSG GGGSGGGGSGGGGSDI QLTQSPSSLSASVGDR VSFTCQASQDINNFLN WYQQKPGKAPKLLIYD ASNLETGVPSRFSGSG SGTDFTFTISSLQPED IATYYCQQYGNLPFTF GGGTKVEIKRAAALDN EKSNGTIIHVKGKHLC PSPLFPGPSKPFWVLV WGGVLACYS LLVTVA FIIFWVRSKRSRLLHS DYMNMTPRRPGPTRKH YQPYAPPRDFAAYRSR VKFSRSADAPAYQQGQ NQLYNELNLGRREEYD VLDKRRGRDPEMGGKP RRKNPQEGLYNELQKD KMAEAYSEIGMKGERR RGKGHDGLYQGLSTAT KDTYDALHMQALPPR
(CAR1.1) ДНК HxL THD CAR для клона 24C1
CAGGTCCAACTGCAAGAAAGCGGACCCGG ACTGGTGAAGCCTTCTGAGACACTTAGTC TGACGTGCACGGTCAGTGGCGGCTCCATC T С С T С С TAT TAT T G GT CAT G GATAC GACA ACCCCCAGGTAAGGGCCTGGAATGGATTG G С TATAT С TAC TAT T CAG GAAG CAC GAAC TACAAT С С СAG С С ТGAAGT СССGAGT GAC AAT Т Т CAGTAGATAC CAGTAAAAAC CAGT TCAGTCTTAAACTGTCAAGCGTGACAGCT GCCGACACCGCTGTGTATTACTGCGTCTC ACTGGTGTATTGTGGAGGGGATTGTTATA GCGGGTTCGATTATTGGGGACAGGGAACC CTGGTGACTGTATCTTCCGGCGGCGGCGG CTCAGGGGGTGGCGGTAGTGGCGGTGGGG GTTССGATATTCAACTGACACAATССССС AGCTCACTCAGCGCCAGCGTGGGGGACAG GGTTAGCTTTACCTGTCAAGCCTCTCAGG
167
QVQLQESGPGLVKPSE TLSLTCTVSGGSISSY YWSWIRQPPGKGLEWI GYIYYSGSTNYNPSLK SRVTISVDTSKNQFSL KLSSVTAADTAVYYCV SLVYCGGDCYSGFDYW GQGTLVTVSSGGGGSG GGGSGGGGSDIQLTQS PSSLSASVGDRVSFTC QASQDINNFLNWYQQK PGKAPKLLIYDASNLE TGVPSRFSGSGSGTDF TFTISSLQPEDIATYY CQQYGNLPFTFGGGTK VEIKRAAALDNEKSNG TIIHVKGKHLCPSPLF
ATATAAATААСT T T СT GAACT GGTAT СAA CAGAAGCCTGGGAAGGCGCCCAAACTCCT GATCTATGATGCGTCCAACCTGGAAACTG GCGTGCCTTCACGCTTTAGCGGCTCTGGC AGT G GTACAGAC T T CAC T T T TAC CAT С T С T T CAC T T CAG С С G GAG GACAT С G С СACAT AT TAC T GT СAACAGTAC G GAAAC T T G С С С TTTACTTTTGGAGGCGGCACCAAAGTTGA AATCAAAAGGGCCGCTGCCCTGGATAACG AAAAGAG СAAT G G GAC TATAATACATGTT AAAGGAAAACACCTGTGTCCATCTCCCCT GTTCCCTGGACCGTCAAAGCCATTTTGGG TGCTCGTGGTTGTCGGTGGCGTTCTCGCC TGTTATAGCTTGCTGGTGACAGTAGCCTT СATTATСTTTTGGGTGAGATССAAAAGAA GCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAAT ATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC СТА GAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTG AAGT T T T С СAGAT С T G СAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATA AC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAG TAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC С С T GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAAT GAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGC CTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGC GGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTG TAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GA TACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCC TGCCACCTAGG
P G P S К P FW VL VWG G V LACYSLLVTVAFIIFW VRSKRSRLLHS DYMNM TPRRPGPTRKHYQPYA PPRDFAAYRSRVKFSR SADAPAYQQGQNQLYN ELNLGRREEYDVLDKR RGRDPEMGGKPRRKNP QEGLYNELQKDKMAEA YSEIGMKGERRRGKGH DGLYQGLSTATKDTYD ALHMQALPPR
(CAR1.2) ДНК HxL CHD CAR для клона 24C1
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGCAGCTGCAGGAATCCGGA CCGGGGCTGGTGAAGCCCAGCGAGACTCT GAGTCTCACGTGTACAGTTTCTGGAGGTA G CAT TAGCTCCTAC TAT T G GT CAT G GATA AGGCAGCCCCCCGGGAAGGGATTGGAATG GAT С G G С TATAT T TAC TACAGT G G GAG СA ССAATTACAACСССTCACТGAAGTСТAGA GT ТACAAT СAG С GT T GACAC С T СAAAGAA TCAGTTCAGTTTGAAATTGTCTAGCGTCA CAG CAG С T GATACAG С С GT С TAT TAT T GT GTTTCTCTGGTCTATTGCGGTGGGGATTG TTACAGTGGCTTTGACTATTGGGGGCAGG GTACTCTGGTTACAGTTTCTTCCGGGGGG GGAGGCTCTGGGGGCGGAGGCTCAGGTGG T G GAG G CAG С GACAT С CAGT T GACACAGA GCCCGAGTTCCTTGTCCGCCTCCGTCGGG GATAGAGTGTCATTTACCTGTCAGGCCTC T CAG GATAT TAATAAC T T T С T GAAT T G GT AT CAG СAAAAG С С С G GAAAG G CAC С СAAG CTGTTGATTTACGACGCCAGTAACCTGGA GACAGGCGTGCCCTCCCGGTTTAGTGGTA GCGGAAGCGGTACGGATTTTACCTTTACT ATCAGCTCTCTCCAACCCGAAGACATTGC AAC С TAC TAT T GT СAACAATAT G GAAAC С TGCCTTTTACATTTGGCGGCGGCACCAAG GTGGAGATTAAGCGGGCGGCAGCTATTGA
169
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLQESGPGL VKPSETLSLTCTVSGG SISSYYWSWIRQPPGK GLEWIGYIYYSGSTNY NPSLKSRVTISVDTSK NQFSLKLSSVTAADTA VYYCVSLVYCGGDCYS GFDYWGQGTLVTVSSG GGGSGGGGSGGGGSDI QLTQSPSSLSASVGDR VSFTCQASQDINNFLN WYQQKPGKAPKLLIYD ASNLETGVPSRFSGSG SGTDFTFTISSLQPED IATYYCQQYGNLPFTF GGGTKVEIKRAAAIEV MYPPPYLDNEKSNGTI IHVKGKHLCPSPLFPG P S К P FW VL VWG G VL A CYSLLVTVAFIIFWVR SKRSRLLHS DYMNMTP RRPGPTRKHYQPYAPP RDFAAYRSRVKFSRSA DAPAYQQGQNQLYNEL NLGRREEYDVLDKRRG RDPEMGGKPRRKNPQE GLYNELQKDKMAEAYS
GGTGATGTATCCACCGCCTTACCTGGATA AC GAAAAGAGTAAC GGTAC CAT CAT T CAC GTGAAAGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCC CCTCTTCCCCGGGCCATCAAAGCCCTTCT GGGTTCTTGTGGTCGTGGGAGGCGTGCTT GCTTGTTATTCTCTGCTCGTTACCGTGGC GTTTATCATTTTTTGGGTTAGATCCAAAA GAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATG AATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCAC AAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC CTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGG GTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACC AG С GTAT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GT ATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAA GAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG G ACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAA GACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTAT AAT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGCT GA AGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAG AGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGT T T GTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAA G GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG CCCTGCCACCTAGGTAA
EIGMKGERRRGKGHDG LYQGLSTATKDTYDAL HMQALPPR
(CAR1.2) ДНК HxL CHD CAR для клона 24C1
CAGGTGCAGCTGCAGGAATCCGGACCGGG GCTGGTGAAGCCCAGCGAGACTCTGAGTC TCACGTGTACAGTTTCTGGAGGTAGCATT AGCTCCTACTATTGGTCATGGATAAGGCA GCCCCCCGGGAAGGGATTGGAATGGATCG G С TATAT T TAC TACAGT G G GAG CAC СAAT TACAAC С С С T CAC T GAAGT С TAGAGT TAC AAT СAG С GT T GACAC С T СAAAGAAT CAGT TCAGTTTGAAATTGTCTAGCGTCACAGCA GCTGATACAGCCGTCTATTATTGTGTTTC TCTGGTCTATTGCGGTGGGGATTGTTACA GTGGCTTTGACTATTGGGGGCAGGGTACT CTGGTTACAGTTTCTTCCGGGGGGGGAGG CTCTGGGGGCGGAGGCTCAGGTGGTGGAG G СAG С GACAT С CAGT T GACACAGAG С С С G AGTTCCTTGTCCGCCTCCGTCGGGGATAG AGTGTCATTTACCTGTCAGGCCTCTCAGG ATATTAATAACTTTСTGAATTGGTATСAG CAAAAGCCCGGAAAGGCACCCAAGCTGTT GAT T TAC GAC G С СAGTAAC С T G GAGACAG GCGTGCCCTCCCGGTTTAGTGGTAGCGGA AGCGGTACGGATTTTACCTTTACTATCAG CTCTCTCCAACCCGAAGACATTGCAACCT ACTATTGTCAACAATATGGAAACCTGCCT TTTACATTTGGCGGCGGCACCAAGGTGGA GATTAAGCGGGCGGCAGCTATTGAGGTGA TGTATCCACCGCCTTACCTGGATAACGAA AAGAGTAAC GGTAC CAT CAT T CAC GT GAA AGGTAAACACCTGTGTCCTTCTCCCCTCT TCCCCGGGCCATCAAAGCCCTTCTGGGTT CTTGTGGTCGTGGGAGGCGTGCTTGCTTG TTATTCTCTGCTCGTTACCGTGGCGTTTA TСATTTTTTGGGTTAGATССAAAAGAAGС CGCCTGCTC СATAG С GAT TACAT GAATAT GACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGA AACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGA
171
QVQLQESGPGLVKPSE TLSLTCTVSGGSISSY YWSWIRQPPGKGLEWI GYIYYSGSTNYNPSLK SRVTISVDTSKNQFSL KLSSVTAADTAVYYCV SLVYCGGDCYSGFDYW GQGTLVTVSSGGGGSG GGGSGGGGSDIQLTQS PSSLSASVGDRVSFTC QASQDINNFLNWYQQK PGKAPKLLIYDASNLE TGVPSRFSGSGSGTDF TFTISSLQPEDIATYY CQQYGNLPFTFGGGTK VEIKRAAAIEVMYPPP YLDNEKSNGTIIHVKG KHLCPSPLFPGPSKPF W VL VWG G VL AC Y S L L VTVAFIIFWVRS KRSR LLHSDYMNMTPRRPGP TRKHYQPYAPPRDFAA YRSRVKFSRSADAPAY QQGQNQLYNELNLGRR EEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNE LQKDKMAEAYSEIGMK GERRRGKGHDGLYQGL S TAT К D T Y DAL HMQ AL PPR
GATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAA GTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGT AT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTA TGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGG AC С С T GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GA AAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGA GCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCT ATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGG AGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTA С CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATA CTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTG СCACСTAGG
(CAR1.3) ДНК HxL CD8 CAR для клона 24C1
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGCAATTGCAAGAGTCCGGC CCCGGACTCGTTAAACCCAGTGAGACGCT TAGCCTGACCTGTACCGTCTCAGGGGGCA GCATCTCCTCTTATTACTGGAGCTGGATC AGGCAGCCTCCAGGAAAAGGCCTTGAATG GATTGGGTACATCTACTACTCTGGCTCAA СAAATTATAATССATСССТGAAGTСССGС GT GAC ТAT С Т С Т GT G GACAC CAG СAAGAA Т CAGT Т Т Т CACT GAAGT Т GT СТAGT GT ТА CCGCGGCCGACACCGCCGTATACTACTGT GTGTCTCTTGTGTACTGTGGCGGCGACTG CTATTCCGGGTTCGACTACTGGGGCCAAG GGACTCTGGTAACCGTGTCCTCAGGCGGC GGCGGGTCAGGAGGAGGCGGCAGTGGAGG TGGCGGCTCCGACATCCAGCTGACACAAT CACCATCTTCCCTTTCAGCTTCAGTCGGG GACAGAGT GT С С Т Т СACAT G С СAG G С СAG С СAG GATAT СAATААС Т Т С С Т GAAC Т G GT АС СААСAGAAAC С С G GAAAG G С Т С СAAAG CTCCTGATCTATGATGCTTCCAACCTGGA GACCGGCGTGCCCTCCAGGTTCAGTGGTT СAG GAT CAG G CAC T GAC TTTACGTT CAC С AT AT ССAGTСTTСAGСССGAAGACATТGС ААС С ТAT ТAC Т G С СААСAATAC G G GAAC С TTCCCTTTACATTCGGAGGCGGCACCAAG GTGGAAATCAAAAGGGCTGCAGCATTGAG CAACТ СAATAAT GTAT Т Т ТAGT CACT Т Т G TACCAGTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACT ACCACACCCGCTCCACGGCCACCTACCCC AGCTCCTACCATCGCTTCACAGCCTCTGT CCCTGCGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCC GCAGGGGGCGCTGTTCATACCAGAGGACT GGATTTCGCCTGCGATATCTATATCTGGG CACCCCTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTC CTGCTGTCCCTGGTCATCACGCTCTATTG ТААТ СACAG GAACAGAT С СAAAAGAAG С С GCCTGCTC СATAG С GAT ТACAT GAATAT G ACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAA ACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAG ATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAG T T T T С СAGAT С T G СAGAT G CAC CAG С GTA T CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATAAC G AG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GA
173
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLQESGPGL VKPSETLSLTCTVSGG SISSYYWSWIRQPPGK GLEWIGYIYYSGSTNY NPSLKSRVTISVDTSK NQFSLKLSSVTAADTA VYYCVSLVYCGGDCYS GFDYWGQGTLVTVSSG GGGSGGGGSGGGGSDI QLTQSPSSLSASVGDR VSFTCQASQDINNFLN WYQQKPGKAPKLLIYD ASNLETGVPSRFSGSG SGTDFTFTISSLQPED IATYYCQQYGNLPFTF GGGTKVEIKRAAALSN SIMYFS H FVPVFLPAK PTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAA GGAVHTRGLDFACDIY IWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCNHRNRSKRSR LLHSDYMNMTPRRPGP TRKHYQPYAPPRDFAA YRSRVKFSRSADAPAY QQGQNQLYNELNLGRR EEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNE LQKDKMAEAYSEIGMK GERRRGKGHDGLYQGL S TAT К D T Y DAL HMQ AL PPR
CCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAA AAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAG CTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTA TTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGСGGA GAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC TTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGC CACCTAGGTAA
(CAR1.3) ДНК HxL CD8 CAR для клона 24C1
CAGGTGCAATTGCAAGAGTCCGGCCCCGG ACTCGTTAAACCCAGTGAGACGCTTAGCC TGACCTGTACCGTCTCAGGGGGCAGCATC TCCTCTTATTACTGGAGCTGGATCAGGCA GCCTCCAGGAAAAGGCCTTGAATGGATTG G GTACAT CTACTACTCTGGCT СAACAAAT TATAATCCATCCCTGAAGTCCCGCGTGAC TAT CT CT GT GGACACCAGCAAGAAT CAGT TTTCACTGAAGTTGTCTAGTGTTACCGCG GCCGACACCGCCGTATACTACTGTGTGTC TCTTGTGTACTGTGGCGGCGACTGCTATT CCGGGTTCGACTACTGGGGCCAAGGGACT CTGGTAACCGTGTCCTCAGGCGGCGGCGG GTCAGGAGGAGGCGGCAGTGGAGGTGGCG G С T С С GACAT С CAG С T GACACAAT CAC СA TCTTCCCTTTCAGCTTCAGTCGGGGACAG AGTGTCCTTCACATGCCAGGCCAGCCAGG ATAT СAATAAC T T С С T GAAC T G GTAC СAA CAGAAACCCGGAAAGGCTCCAAAGCTCCT GATCTATGATGCTTCCAACCTGGAGACCG GCGTGCCCTCCAGGTTCAGTGGTTCAGGA T CAG G CAC T GAC TTTACGTT CAC СATAT С CAGTCTTCAGCCCGAAGACATTGCAACCT ATTACTGCCAACAATACGGGAACCTTCCC TTTACATTCGGAGGCGGCACCAAGGTGGA AATCAAAAGGGCTGCAGCATTGAGCAACT СAATAATGTATTTTAGT CACTTT GTACCA GTGTTCTTGCCGGCTAAGCCTACTACCAC ACCCGCTCCACGGCCACCTACCCCAGCTC CTACCATCGCTTCACAGCCTCTGTCCCTG CGCCCAGAGGCTTGCCGACCGGCCGCAGG GGGCGCTGTTCATACCAGAGGACTGGATT TCGCCTGCGATATCTATATCTGGGCACCC CTGGCCGGAACCTGCGGCGTACTCCTGCT GTCCCTGGTCATCACGCTCTATTGTAATC ACAG GAACAGAT С СAAAAGAAG С С G С С T G С T С СATAG С GAT ТACAT GAATAT GAC T С С ACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACT AC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT T T С GCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTC СAGAT С T G СAGAT G CAC CAG С GTATCAGC AG G G С СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T С AAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT TTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTG AGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GAAAAAAC CCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCA GAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTG AAATAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G GGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGG ACT CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT G
175
QVQLQESGPGLVKPSE TLSLTCTVSGGSISSY YWSWIRQPPGKGLEWI GYIYYSGSTNYNPSLK SRVTISVDTSKNQFSL KLSSVTAADTAVYYCV SLVYCGGDCYSGFDYW GQGTLVTVSSGGGGSG GGGSGGGGSDIQLTQS PSSLSASVGDRVSFTC QASQDINNFLNWYQQK PGKAPKLLIYDASNLE TGVPSRFSGSGSGTDF TFTISSLQPEDIATYY CQQYGNLPFTFGGGTK VEIKRAAALSNSIMYF SHFVPVFLPAKPTTTP APRPPTPAPTIASQPL S L R P EAC R PAAG GAVH TRGLDFACDIYIWAPL AGTCGVLLLSLVITLY CNHRNRSKRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
ACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCT AGG
(CARl.4) ДНК LxH THD CAR для клона 24C1
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGATATCCAGCTCACGCAATCCCCC TCAAGCTTGAGTGCCTCCGTGGGCGACCG GGTGTCCTTCACATGTCAGGCAAGCCAAG ACATAAATAAT T T С С T GAAT T G GTAC СAA CAAAAACCCGGCAAGGCTCCCAAACTCCT GATTTATGATGCCTCCAATCTGGAGACCG GGGTCCCTTCTAGATTCAGCGGAAGTGGC AGCGGCACAGACTTTACATTTACTATCTC TTCTCTGCAACCAGAGGACATCGCCACAT ACTATTGCCAGCAATACGGCAATCTGCCC TTCACCTTCGGAGGCGGAACCAAGGTAGA AATTAAAAGGGGCGGTGGAGGCTCCGGAG GGGGGGGCTCTGGCGGAGGGGGCTCCCAA GTACAATTGCAGGAGTCAGGGCCTGGACT CGTGAAGCCTTCAGAAACTTTGTCACTGA CATGTACAGTGTCCGGCGGAAGCATTTCC AGTTACTATTGGTCCTGGATTAGACAGCC ACCCGGCAAAGGACTGGAATGGATTGGAT ATATCTACTACTCTGGATCTACAAACTAT AATCCCAGCCTCAAATCCAGGGTCACTAT TAGT GT GGATACAT CAAAGAAT CAGTT CT CCTTGAAGCTGAGCTCAGTCACTGCTGCC GACACCGCAGTGTACTATTGTGTGAGCCT GGTCTACTGCGGCGGAGATTGCTACAGCG GTTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCCTG GTTACCGTTAGTTCCGCGGCTGCTCTTGA TAAC GAGAAGT С CAAC GGTAC GAT TAT С С ACGTTAAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGC CCGCTGTTCCCAGGCCCCAGTAAGCCCTT TTGGGTCCTCGTTGTGGTAGGTGGGGTAC TCGCCTGCTACTCCCTGCTCGTCACTGTC GCATT CAT CAT CTT CT GGGT CAGAT CCAA AAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACA TGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCC ACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCACC ACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCA GGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCA CCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACT GTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGG AAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGA GGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACC AAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCT ATAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCT GAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGG AGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACG GTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACG AAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGCA AGCCCTGCCACCTAGGTAA
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPDIQLTQSPSSL SASVGDRVSFTCQASQ DINNFLNWYQQKPGKA PKLLIYDASNLETGVP SRFSGSGSGTDFTFTI SSLQPEDIATYYCQQY GNLPFTFGGGTKVEIK RGGGGSGGGGSGGGGS QVQLQESGPGLVKPSE TLSLTCTVSGGSISSY YWSWIRQPPGKGLEWI GYIYYSGSTNYNPSLK SRVTISVDTSKNQFSL KLSSVTAADTAVYYCV SLVYCGGDCYSGFDYW GQGTLVTVSSAAALDN EKSNGTIIHVKGKHLC PSPLFPGPSKPFWVLV WGGVLACYS LLVTVA FIIFWVRSKRSRLLHS DYMNMTPRRPGPTRKH YQPYAPPRDFAAYRSR VKFSRSADAPAYQQGQ NQLYNELNLGRREEYD VLDKRRGRDPEMGGKP RRKNPQEGLYNELQKD KMAEAYSEIGMKGERR RGKGHDGLYQGLSTAT KDTYDALHMQALPPR
178
(CARl.4) ДНК LxH THD CAR для клона 24C1
GATAT С CAG С T CAC G СAAT С С С С С T СAAG CTTGAGTGCCTCCGTGGGCGACCGGGTGT С С Т Т СACAT GT CAG G СAAG С СAAGACATA AATAATTTССTGAATTGGTACСAACAAAA ACCCGGCAAGGCTCCCAAACTCCTGATTT ATGATGCCTCCAATCTGGAGACCGGGGTC CCTTCTAGATTCAGCGGAAGTGGCAGCGG
DIQLTQSPSSLSASVG DRVSFTCQASQDINNF LNWYQQKPGKAPKLLI YDASNLETGVPSRFSG SGSGTDFTFTISSLQP EDIATYYCQQYGNLPF TFGGGTKVEIKRGGGG
180
СACAGAC T T ТACAT Т ТAC TAT СТСТТСТС Т G CAAC СAGAG GACAT С G С СACATAC TAT TGCCAGCAATACGGCAATCTGCCCTTCAC CTTCGGAGGCGGAACCAAGGTAGAAATTA AAAGGGGCGGTGGAGGCTCCGGAGGGGGG GGCTCTGGCGGAGGGGGCTCCCAAGTACA ATTGCAGGAGTCAGGGCCTGGACTCGTGA AGCCTTCAGAAACTTTGTCACTGACATGT ACAGTGTCCGGCGGAAGCATTTCCAGTTA CTATTGGTCCTGGATTAGACAGCCACCCG G СAAAG GAC T G GAAT G GAT T G GATATATС TACTACTCTG GAT С TACAAAC TATAAT С С CAG CCT СAAAT С CAG GGT CAC TAT TAGT G TGGATACATCAAAGAATCAGTTCTСCTTG AAGCTGAGCTCAGTCACTGCTGCCGACAC CGCAGTGTACTATTGTGTGAGCCTGGTCT ACTGCGGCGGAGATTGCTACAGCGGTTTC GATTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTTAC CGTTAGTTCCGCGGCTGCTCTTGATAACG AGAAGT С CAAC GGTAC GAT TAT С CAC GT T AAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCGCT GTTCCCAGGCCCCAGTAAGCCCTTTTGGG TCCTCGTTGTGGTAGGTGGGGTACTCGCC TGCTACTCCCTGCTCGTCACTGTCGCATT CAT CAT CTT CT GGGT CAGAT CCAAAAGAA GCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAAT ATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC СТА GAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTG AAGT T T T С CAGAT С T G CAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATA AC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAG TAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC CCT GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAAT GAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGC CTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGC GGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTG TAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GA TACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCC TGCCACCTAGG
SGGGGSGGGGSQVQLQ ESGPGLVKPSETLSLT CTVS GGSIS SYYWSWI RQPPGKGLEWIGYIYY SGSTNYNPSLKSRVTI SVDTSKNQFSLKLSSV TAADTAVYYCVS LVYC GGDCYSGFDYWGQGTL VTVS SAAALDNEKSNG TIIHVKGKHLCPSPLF P G P S К P FW VL VWG G V LACYSLLVTVAFIIFW VRSKRSRLLHS DYMNM TPRRPGPTRKHYQPYA PPRDFAAYRSRVKFSR SADAPAYQQGQNQLYN ELNLGRREEYDVLDKR RGRDPEMGGKPRRKNP QEGLYNELQKDKMAEA YSEIGMKGERRRGKGH DGLYQGLSTATKDTYD ALHMQALPPR
(CARl.5) ДНК LxH CHD CAR для клона 24C1
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGATATCCAGCTGACCCAGTCTCCA TCCTCTTTGAGTGCCTCCGTGGGTGACCG CGTCTCTTTCACTTGCCAAGCCAGCCAAG ACATСAACAACTTTСTGAATTGGTACСAG СAGAAAC CAG G СAAAG CAC СAAAG С T С С T CATCTACGACGCCTCCAACCTGGAAACCG GGGTGCCCAGCAGGTTTAGCGGGAGCGGT TCTGGCACGGATTTTACGTTCACCATCTC CTCTCTGCAGCCCGAGGATATAGCTACTT AT TAC T GT CAG СAGTAC G G GAAT С T G С СA TTTACTTTTGGGGGTGGAACTAAGGTGGA AATCAAAAGGGGCGGCGGGGGAAGCGGGG GCGGGGGCTCAGGTGGCGGAGGGAGCCAG GTGCAACTCCAGGAAAGTGGCCCAGGATT GGTGAAGCCCAGCGAGACCCTTTCCCTTA CTTGTACTGTTAGCG GAG G CAG СATAAG С
181
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPDIQLTQSPSSL SASVGDRVSFTCQASQ DINNFLNWYQQKPGKA PKLLIYDASNLETGVP SRFSGSGSGTDFTFTI SSLQPEDIATYYCQQY GNLPFTFGGGTKVEIK RGGGGSGGGGSGGGGS QVQLQESGPGLVKPSE TLSLTCTVSGGSISSY YWSWIRQPPGKGLEWI GYIYYSGSTNYNPSLK SRVTISVDTSKNQFSL KLSSVTAADTAVYYCV SLVYCGGDCYSGFDYW GQGTLVTVSSAAAIEV MYPPPYLDNEKSNGTI
AG С TAC TAT TGGTCCTG GAT СAGACAG С С ACCAGGGAAAGGGCTTGAATGGATTGGCT ACAT T TAC TAT TCCGGGTC CAC CAAC TAC AACCCATCCCTCAAGTCCCGCGTGACAAT T T С С GT С GACACAAG СAAGAAC СAGT T С T CCCTGAAACTTAGTAGCGTCACTGCTGCA GATACAGCAGT GTACTATT GTGT CAGCCT TGTCTACTGTGGCGGCGACTGCTACAGTG GCTTTGATTACTGGGGACAGGGCACGCTC GTGACAGTGTCCAGCGCTGCGGCTATCGA GGTAATGTATCCGCCACCGTATCTGGACA ACGAGAAGT CTAAT GGGACAAT CATT CAC GTGAAGGGGAAGCACCTGTGTCCATCCCC CCTGTTTCCGGGTCCCAGTAAACCCTTCT GGGTGCTTGTTGTCGTTGGCGGGGTGCTG GCCTGCTATTCCCTGCTGGTGACCGTCGC GTTTATTATTTTCTGGGTTAGATCCAAAA GAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATG AATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCAC AAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC CTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGG GTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACC AG С GTAT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GT ATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAA GAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG G ACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAA GACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTAT AAT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGCT GA AGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAG AGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGT T T GTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAA G GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG CCCTGCCACCTAGGTAA
IHVKGKHLCPSPLFPG P S К P FW VL VWG G VL A CYSLLVTVAFIIFWVR SKRSRLLHS DYMNMTP RRPGPTRKHYQPYAPP RDFAAYRSRVKFSRSA DAPAYQQGQNQLYNEL NLGRREEYDVLDKRRG RDPEMGGKPRRKNPQE GLYNELQKDKMAEAYS EIGMKGERRRGKGHDG LYQGLSTATKDTYDAL HMQALPPR
(CARl.5) ДНК LxH CHD CAR для клона 24C1
GATATCCAGCTGACCCAGTCTCCATCCTC TTTGAGTGCCTCCGTGGGTGACCGCGTCT С T T T CAC T T G С СAAG С CAG С СAAGACAT С AACAAC T T T С T GAAT T G GTAC CAG СAGAA AC CAG G СAAAG CAC СAAAG С T С С T CAT С T ACGACGCCTCCAACCTGGAAACCGGGGTG CCCAGCAGGTTTAGCGGGAGCGGTTCTGG CACGGATTTTACGTTCACCATCTCCTCTC T G CAG С С С GAG GATATAG С TAC T TAT TAC T GT CAG СAGTAC G G GAAT С T G С CAT T TAC TTTTGGGGGTGGAACTAAGGTGGAAATCA AAAGGGGCGGCGGGGGAAGCGGGGGCGGG GGCTCAGGTGGCGGAGGGAGCCAGGTGCA ACTCCAGGAAAGTGGCCCAGGATTGGTGA AGCCCAGCGAGACCCTTTCCCTTACTTGT ACTGTTAGCG GAG G CAG СATAAG CAG СТА С TAT TGGTCCTG GAT СAGACAG С CAC CAG GGAAAGGGCTTGAATGGATTGGCTACATT TAC TAT TCCGGGTC CAC CAAC TACAAC С С ATCCCTCAAGTCCCGCGTGACAATTTCCG TСGACACAAGСAAGAACCAGTTСTСССTG AAAC TTAGTAGCGT CAC T G С T G СAGATAC AGCAGT GTACTATT GT GT CAGCCTT GT CT ACTGTGGCGGCGACTGCTACAGTGGCTTT GATTACTGGGGACAGGGCACGCTCGTGAC AGTGTCCAGCGCTGCGGCTATCGAGGTAA
183
DIQLTQSPSSLSASVG DRVSFTCQASQDINNF LNWYQQKPGKAPKLLI YDASNLETGVPSRFSG SGSGTDFTFTISSLQP EDIATYYCQQYGNLPF TFGGGTKVEIKRGGGG SGGGGSGGGGSQVQLQ ESGPGLVKPSETLSLT CTVS GGSIS SYYWSWI RQPPGKGLEWIGYIYY SGSTNYNPSLKSRVTI SVDTSKNQFSLKLSSV TAADTAVYYCVS LVYC GGDCYSGFDYWGQGTL VTVS SAAAIEVMYP P P YLDNEKSNGTIIHVKG KHLCPSPLFPGPSKPF W VL VWG G VL AC Y S L L VTVAFIIFWVRS KRSR LLHSDYMNMTPRRPGP TRKHYQPYAPPRDFAA YRSRVKFSRSADAPAY QQGQNQLYNELNLGRR EEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNE
TGTATCCGCCACCGTATCTGGACAACGAG AAGT CTAAT GGGACAAT CATT CACGT GAA GGGGAAGCACCTGTGTCCATCCCCCCTGT TTCCGGGTCCCAGTAAACCCTTCTGGGTG CTTGTTGTCGTTGGCGGGGTGCTGGCCTG CTATTCCCTGCTGGTGACCGTCGCGTTTA TTATTTTCTGGGTTAGATCCAAAAGAAGC CGCCTGCTC СATAG С GAT TACAT GAATAT GACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGA AACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGA GATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAA GTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGT AT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTA TGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGG AC С С T GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GA AAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGA GCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCT ATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGG AGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTA С CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATA CTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTG СCACСTAGG
LQKDKMAEAYSEIGMK GERRRGKGHDGLYQGL S TAT К D T Y DAL HMQ AL PPR
(CARl.6) ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT ДНК LxH GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC CD8 CAR GCCCGGACATTCAATTGACCCAGTCCCCT для клона AG CAGT С T С T CAG СAAGT GT G G GAGATAG 2 4C1 GGTGTCATTCACCTGTCAGGCTTCACAGG ACATCAACAACTTСCTCAATTGGTATCAG СAGAAG С CAG G GAAG G CAC СAAAG С T G С T СATATATGACGСTTСAAACСTTGAAACСG GAGTACCTAGCCGCTTCAGCGGAAGCGGA TCAGGGACTGACTTCACTTTTACCATCTC T T CAC T G CAG С С С GAAGACAT С G С СACAT ACTACTGCCAGCAGTACGGAAACTTGCCT TTTACATTTGGGGGCGGCACCAAAGTGGA GATTAAGCGAGGGGGAGGCGGCTCAGGAG GCGGTGGCTCCGGAGGCGGGGGTTCCCAG GTCCAGCTCCAGGAATCCGGCCCAGGTCT GGTTAAGCCCAGTGAAACTTTGTCCCTCA CGTGTACTGTGAGCGGTGGTTCAATCTCC T СATAC TAT TGGTCTTG GATAC G G CAAC С TCCTGGAAAGGGCCTCGAGTGGATCGGCT ATAT С TAC TATAGT G G С T С CAC TAAT TAC AACССTTСССTСAAGTССAGAGTСACСAT Т Т С С GT G GACACAT С TAAGAAC СAGT T СA GTCTGAAGTTGTCCAGCGTTACAGCCGCA GACACAGCCGTTTATTACTGTGTGTCTCT TGTTTACTGCGGGGGAGACTGTTATAGCG GCTTCGATTACTGGGGCCAGGGCACCTTG GTCACAGTCTCTTCCGCGGCCGCCCTCTC TAACAGTATTATGTACTTTTCT CAT T T T G TACCCGTGTTCCTTCCCGCTAAGCCAACT ACTACCCCGGCCCCACGGCCGCCTACCCC T G CAC С СACAATAG С CAGT CAG С С T T T GA GCCTGAGACCTGAGGCTTGTCGGCCGGCT GCTGGGGGTGCAGTGCACACACGAGGTCT TGATTTTGCTTGCGACATATACATCTGGG CCCCTCTGGCCGGGACCTGTGGGGTGCTG
185
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPDIQLTQSPSSL SASVGDRVSFTCQASQ DINNFLNWYQQKPGKA PKLLIYDASNLETGVP SRFSGSGSGTDFTFTI SSLQPEDIATYYCQQY GNLPFTFGGGTKVEIK RGGGGSGGGGSGGGGS QVQLQESGPGLVKPSE TLSLTCTVSGGSISSY YWSWIRQPPGKGLEWI GYIYYSGSTNYNPSLK SRVTISVDTSKNQFSL KLSSVTAADTAVYYCV SLVYCGGDCYSGFDYW GQ GT LVTVS SAAALSN SIMYFS H FVPVFLPAK PTTTPAPRPPTPAPTI ASQPLSLRPEACRPAA GGAVHTRGLDFACDIY IWAPLAGTCGVLLLSL VITLYCNHRNRSKRSR LLHSDYMNMTPRRPGP TRKHYQPYAPPRDFAA YRSRVKFSRSADAPAY QQGQNQLYNELNLGRR EEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNE LQKDKMAEAYSEIGMK GERRRGKGHDGLYQGL S TAT К D T Y DAL HMQ AL PPR
CTTCTGAGCTTGGTCATCACGCTCTATTG CAAC CAT С G СAACAGAT С СAAAAGAAG С С GCCTGCTC СATAG С GAT TACAT GAATAT G ACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAA ACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAG ATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAG T T T T С CAGAT С T G CAGAT G CAC CAG С GTA T CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATAAC G AG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GA CCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAA AAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAG CTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTA TTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGСGGA GAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC TTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGC CACCTAGGTAA
(CARl.6) ДНК LxH CD8 CAR для клона 24C1
GACAT T СAAT TGACCCAGTCCCCTAGCAG TCTCTCAGCAAGTGTGGGAGATAGGGTGT CATT CACCT GT CAGGCTT CACAGGACAT С AACAACTTCCTCAATTGGTATCAGCAGAA G С CAG G GAAG G CAC СAAAG С T G С T СATAT ATGACGCTTCAAACCTTGAAACCGGAGTA CCTAGCCGCTTCAGCGGAAGCGGATCAGG GACTGACTTCACTTTTACCATCTCTTCAC T G CAG С С С GAAGACAT С G С СACATAC TAC TGCCAGCAGTACGGAAACTTGCCTTTTAC ATTTGGGGGCGGCACCAAAGTGGAGATTA AGCGAGGGGGAGGCGGCTCAGGAGGCGGT GGCTCCGGAGGCGGGGGTTCCCAGGTCCA GCTCCAGGAATCCGGCCCAGGTCTGGTTA AGCCCAGTGAAACTTTGTCCCTCACGTGT ACTGTGAGCGGTGGTTCAATCTCCTCATA CTATTGGTCTTGGATACGGCAACCTCCTG GAAAGGGCCTCGAGTGGATCGGCTATATC TAC TATAGT G G С T С CAC TAAT TACAAC С С TTCCCTCAAGTCCAGAGTCACCATTTCCG T GGACACAT CTAAGAACCAGTT CAGT CT G AAGTTGTCCAGCGTTACAGCCGCAGACAC AGCCGTTTATTACTGTGTGTCTCTTGTTT ACTGCGGGGGAGACTGTTATAGCGGCTTC GATTACTGGGGCCAGGGCACCTTGGTCAC AGTCTCTTCCGCGGCCGCCCTCTCTAACA GTATTATGTACTTTTCTCATTTTGTACCC GTGTTCCTTCCCGCTAAGCCAACTACTAC CCCGGCCCCACGGCCGCCTACCCCTGCAC С СACAATAG С CAGT CAG С С T T T GAG С С T G AGACCTGAGGCTTGTCGGCCGGCTGCTGG GGGTGCAGTGCACACACGAGGTCTTGATT TTGCTTGCGACATATACATCTGGGCCCCT CTGGCCGGGACCTGTGGGGTGCTGCTTCT GAGCTTGGTCATCACGCTCTATTGCAACC ATCGCAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTG С T С СATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С С ACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACT AC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT T T С GCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTC CAGAT CT GCAGAT GCACCAGCGTAT CAGC
187
DIQLTQSPSSLSASVG DRVSFTCQASQDINNF LNWYQQKPGKAPKLLI YDASNLETGVPSRFSG SGSGTDFTFTISSLQP EDIATYYCQQYGNLPF TFGGGTKVEIKRGGGG SGGGGSGGGGSQVQLQ ESGPGLVKPSETLSLT CTVS GGSIS SYYWSWI RQPPGKGLEWIGYIYY SGSTNYNPSLKSRVTI SVDTSKNQFSLKLSSV TAADTAVYYCVS LVYC GGDCYSGFDYWGQGTL VTVSSAAALSNSIMYF SHFVPVFLPAKPTTTP APRPPTPAPTIASQPL S L R P EAC R PAAG GAVH TRGLDFACDIYIWAPL AGTCGVLLLSLVITLY CNHRNRSKRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
AG G G С СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T С AAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT TTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCCTG AGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GAAAAAAC CCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCA GAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTG AAATAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G GGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGG ACT CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT G ACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCT AGG
(CAR2.1) ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT ДНК HxL GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC THD CAR GCCCGCAGGTACAGCTGCAGGAATCTGGG для клона С С С G GAC Т Т GT СAAG С СAAGT СAGACАС Т 2 4С8 TTCTCTTACATGTACCGTGAGCGGCGGAA GTATAAGCAGTGGAGGCTTTTACTGGTCT TGGATACGGCAGCACCCAGGCAAAGGCTT GGAGTGGATТ GGATACATТ CAT CATТ CAG GAT С ТACACAC TATAAT С CAT С С С T TAAG TCCCGGGTCAC CAT TAG CAT T GATAC GT С TAAGAATCTGTTCAGTCTCAGGCTGTCCT CCGTCACTGCTGCCGACACAGCCGTGTAC TACTGCGCCTCCTTGGTTTACTGCGGAGG CGACTGTTATAGCGGCTTTGATTATTGGG GGCAGGGGACCCTCGTAACCGTGAGCTCT GGAGGGGGTGGGAGCGGGGGAGGAGGTTC AGGGGGGGGCGGCTCCGATATCCAGCTCA CTCAAAGCCCCTCTAGTCTCTCTGCCTCA GTGGGGGATCGGGTCAGTTTTACTTGTCA AG С T T СACAG GATAT СAACAAC T T С С T TA AT T G GTAT CAG СAGAAG С CAG GAAAAG СA CCCAAGCTGCTCATCTATGATGCCTCAAA TTTGGAGACGGGTGTTCCCAGTCGATTCT CTGGGTCAGGGTCCGGGACCGACTTTACG TTTACGATCTCCTCTCTGCAGCCCGAAGA CAT С G С СACATAC TAT T GT СAACAGTAC G GCAACTTGCCTTTCACATTTGGGGGCGGG ACTAAGGTTGAAATCAAGAGGGCCGCTGC AC T G GACAAT GAGAAGT С CAAC G G CAC СA TCATCCACGTGAAGGGCAAGCACCTGTGC CCTAGTCCTCTGTTCCCAGGCCCATCCAA ACCTTTTTGGGTTCTTGTTGTGGTCGGGG GGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGCTGGTC ACGGTGGCCTTCATAATTTTCTGGGTTAG ATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCG AT TACAT GAATAT GAC T С CAC GCCGCCCT G G С С С СACAAG GAAACAC TAC CAG С С T TA CGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATC GGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCA GAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С СAGAA С CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG CGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGG СAAAC СAAGAC GAAAAAAC С С С СAG GAG G GTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAG ATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG G G С AC GAC GGTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T
189
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLQESGPGL VKPSQTLSLTCTVSGG SISSGGFYWSWIRQHP GKGLEWIGYIHHSGST HYNPSLKSRVTISIDT SKNLFSLRLSSVTAAD TAVYYCASLVYCGGDC YSGFDYWGQGTLVTVS SGGGGSGGGGSGGGGS DIQLTQSPSSLSASVG DRVSFTCQASQDINNF LNWYQQKPGKAPKLLI YDASNLETGVPSRFSG SGSGTDFTFTISSLQP EDIATYYCQQYGNLPF TFGGGTKVEIKRAAAL DNEKSNGTIIHVKGKH LCPSPLFPGPSKPFWV L VWG G VL AC Y S L L VT VAFIIFWVRSKRSRLL HSDYMNMTPRRPGPTR KHYQPYAPPRDFAAYR SRVKFSRSADAPAYQQ GQNQLYNELNLGRREE YDVLDKRRGRDPEMGG KPRRKNPQEGLYNELQ KDKMAEAYSEIGMKGE RRRGKGHDGLYQGLST AT К D T Y DAL HMQAL P P R
GCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCA CATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA
(CAR2.1) ДНК HxL THD CAR для клона 24C8
CAGGTACAGCTGCAGGAATCTGGGCCCGG ACTTGTCAAGCCAAGTCAGACACTTTCTC TTACATGTACCGTGAGCGGCGGAAGTATA AGCAGTGGAGGCTTTTACTGGTCTTGGAT ACGGCAGCACCCAGGCAAAGGCTTGGAGT GGATT GGATACATT CAT CATT CAGGAT CT ACACAC TATAAT С CAT CCCTTAAGTCCCG GGTCACCATTAGCATTGATACGTCTAAGA ATCTGTTCAGTCTCAGGCTGTCCTCCGTC ACTGCTGCCGACACAGCCGTGTACTACTG CGCCTCCTTGGTTTACTGCGGAGGCGACT GTTATAGCGGCTTTGATTATTGGGGGCAG GGGACCCTCGTAACCGTGAGCTCTGGAGG GGGTGGGAGCGGGGGAGGAGGTTCAGGGG GGGGCGGCTCCGATATCCAGCTCACTCAA AGCCCCTCTAGTCTCTCTGCCTCAGTGGG GGATCGGGTCAGTTTTACTTGTCAAGCTT CACAGGATATCAACAACTTCCTTAATTGG TATCAGCAGAAGCCAGGAAAAGCACCCAA GCTGCTCATCTATGATGCCTCAAATTTGG AGACGGGTGTTCCCAGTCGATTCTCTGGG TCAGGGTCCGGGACCGACTTTACGTTTAC GATCTCCTCTCTGCAGCCCGAAGACATCG CCACATACTATTGTCAACAGTACGGCAAC TTGCCTTTCACATTTGGGGGCGGGACTAA GGTTGAAATCAAGAGGGCCGCTGCACTGG ACAAT GAGAAGT С CAAC G G СAC CAT CAT С CACGTGAAGGGCAAGCACCTGTGCCCTAG TCCTCTGTTCCCAGGCCCATCCAAACCTT TTTGGGTTCTTGTTGTGGTCGGGGGGGTG CTGGCCTGCTATTCTCTGCTGGTCACGGT GGCCTTCATAATTTTCTGGGTTAGATCCA AAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTAC ATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCC CACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCAC CACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGC ACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAAC TGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGG GAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAG AGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAAC CAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTC TATAAT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGC TGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAG GAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGAC GGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTAC GAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGC AAGCCCTGCCACCTAGG
191
QVQLQESGPGLVKPSQ TLSLTCTVSGGSISSG GFYWSWIRQHPGKGLE WIGYIHHSGSTHYNPS LKSRVTISIDTSKNLF SLRLSSVTAADTAVYY CASLVYCGGDCYSGFD YWGQGTLVTVSSGGGG SGGGGSGGGGSDIQLT QSPSSLSASVGDRVSF TCQASQDINNFLNWYQ QKPGKAPKLLIYDASN LETGVPSRFSGSGSGT DFTFTISSLQPEDIAT YYCQQYGNLPFTFGGG TKVEIKRAAALDNEKS NGTIIHVKGKHLCPSP LFPGPSKPFWVLVWG GVLACYSLLVTVAFII FWVRS KRSRLLHSDYM NMTPRRPGPTRKHYQP YAPPRDFAAYRSRVKF SRSADAPAYQQGQNQL YNELNLGRREEYDVLD KRRGRDPEMGGKPRRK NPQEGLYNELQKDKMA EAYSEIGMKGERRRGK GHDGLYQGLSTATKDT YDALHMQALPPR
192
(CAR2.2) ДНК HxL CHD CAR для клона 24C8
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTGCAGCTGCAGGAAAGCGGT CCGGGACTTGTCAAGCCGTCCCAAACGCT GAGTCTGACGTGTACTGTCTCTGGTGGCT CTATTTCTTCCGGGGGCTTTTATTGGTCT TGGATCAGACAACACCCTGGCAAAGGGCT G GAGT G GATAG G GTATAT T CAC CAC T С T G GGTССACTСACTACAACССATСATTGAAA
193
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLQESGPGL VKPSQTLSLTCTVSGG SISSGGFYWSWIRQHP GKGLEWIGYIHHSGST HYNPSLKSRVTISIDT SKNLFSLRLSSVTAAD TAVYYCASLVYCGGDC YSGFDYWGQGTLVTVS
194
Т С CAGAGT GACTAT СТ СААТ С GACACAT С CAAGAACCTTTTCAGCCTGAGGTTGTCAT CAGTTACCGCCGCTGACACCGCGGTGTAT TATTGCGCCTCTCTCGTGTACTGCGGTGG CGATTGTTATAGTGGCTTTGACTACTGGG GGCAGGGGACATTGGTTACCGTTTCAAGT GGAGGCGGTGGGTCTGGCGGGGGCGGTAG CGGAGGTGGGGGGAGCGACATACAGCTTA CGCAGAGCCCCTCCAGCCTTTCAGCCTCC GTGGGGGATAGGGTGTCCTTTACCTGCCA GGCTTCCCAGGACATAAACAACTTCCTCA ATTGGTATCAGCAAAAGCCCGGGAAAGCA CCAAAGCTGCTCATCTACGATGCCAGCAA CCTGGAAACCGGAGTGCCGTCTCGCTTCT CTGGAAGTGGCAGTGGGACCGATTTCACT ТТТАСААТСТСAAGTТТGСAGССAGAAGA CAT Т G СААСATAC ТAC Т GTCAACAGTACG GCAATCTCCCCTTTACATTTGGGGGGGGA ACTAAAGTGGAGATTAAGCGCGCTGCAGC CATTGAAGTTATGTATCCGCCCCCGTATC Т G GATААС GAGAAAT С ТAAT G GTАС СATА ATACATGTGAAGGGGAAGCACCTCTGTCC ATCACCGCTGTTCCCCGGCCCTTCAAAAC CTTTCTGGGTACTCGTTGTCGTGGGTGGA GTTCTGGCCTGCTATAGTCTGCTGGTGAC CGTGGCGTTTATCATCTTCTGGGTAAGAT CCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGAT TACATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGG С С С СACAAG GAAACАС ТАС СAG С С Т ТAC G CACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGG AGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGA Т G САС СAG С GTAT CAG CAG GGC СAGAAC С AACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGC AGG GAAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G CAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCA AACСAAGACGAAAAAACССССAGGAGGGT CT CTATAAT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGA AAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG G G CAC GACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGC TAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACA TGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA
SGGGGSGGGGSGGGGS DIQLTQSPSSLSASVG DRVSFTCQASQDINNF LNWYQQKPGKAPKLLI YDASNLETGVPSRFSG SGSGTDFTFTISSLQP EDIATYYCQQYGNLPF TFGGGTKVEIKRAAAI EVMYPPPYLDNEKSNG TIIHVKGKHLCPSPLF P G P S К P FW VL VWG G V LACYSLLVTVAFIIFW VRSKRSRLLHS DYMNM TPRRPGPTRKHYQPYA PPRDFAAYRSRVKFSR SADAPAYQQGQNQLYN ELNLGRREEYDVLDKR RGRDPEMGGKPRRKNP QEGLYNELQKDKMAEA YSEIGMKGERRRGKGH DGLYQGLSTATKDTYD ALHMQALPPR
(CAR2.2) CAGGTGCAGCTGCAGGAAAGCGGTCCGGG
ДНК HxL ACTTGTCAAGCCGTCCCAAACGCTGAGTC
CHD CAR TGACGTGTACTGTCTCTGGTGGCTCTATT
для клона TCTTCCGGGGGCTTTTATTGGTCTTGGAT
24C8 СAGACAACAC С С T G G СAAAG G G С T G GAGT
G GATAG G GTATAT T CAC CAC TCTGGGTCC AC T СAC TACAAC С CAT CAT T GAAAT С СAG AGT GACTAT CT СААТ С GACACAT С CAAGA ACCTTTTCAGCCTGAGGTTGTCATCAGTT ACCGCCGCTGACACCGCGGTGTATTATTG CGCCTCTCTCGTGTACTGCGGTGGCGATT GTTATAGTGGCTTTGACTACTGGGGGCAG GGGACATTGGTTACCGTTTCAAGTGGAGG CGGTGGGTCTGGCGGGGGCGGTAGCGGAG GT G G G G G GAG С GACATACAG С T TAC G CAG AGCCCCTCCAGCCTTTCAGCCTCCGTGGG GGATAGGGTGTCCTTTACCTGCCAGGCTT
195
QVQLQESGPGLVKPSQ TLSLTCTVSGGSISSG GFYWSWIRQHPGKGLE WIGYIHHSGSTHYNPS LKSRVTISIDTSKNLF SLRLSSVTAADTAVYY CASLVYCGGDCYSGFD YWGQGTLVTVSSGGGG SGGGGSGGGGSDIQLT QSPSSLSASVGDRVSF TCQASQDINNFLNWYQ QKPGKAPKLLIYDASN LETGVPSRFSGSGSGT DFTFTISSLQPEDIAT YYCQQYGNLPFTFGGG TKVEIKRAAAIEVMYP PPYLDNEKSNGTIIHV
С С CAG GACATAAACААС T T С С T СААТ Т G G ТAT CAG СAAAAG С С С G G GAAAG CAC СAAA GCTGCTCATCTACGATGCCAGCAACCTGG AAACCGGAGTGCCGTCTCGCTTCTCTGGA AGTGGCAGTGGGACCGATTTCACTTTTAC AATСTСAAGTTTGСAGССAGAAGACATTG CAACATACTACTGTCAACAGTACGGCAAT CTCCCCTTTACATTTGGGGGGGGAACTAA AGTGGAGATTAAGCGCGCTGCAGCCATTG AAGTTATGTATCCGCCCCCGTATCTGGAT AAC GAGAAAT С TAAT G GTAC СATAATACA TGTGAAGGGGAAGCACCTCTGTCCATCAC CGCTGTTCCCCGGCCCTTCAAAACCTTTC TGGGTACTCGTTGTCGTGGGTGGAGTTCT GGCCTGCTATAGTCTGCTGGTGACCGTGG CGTTTATCATCTTCTGGGTAAGATCCAAA AGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACAT GAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCA СAAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC СA CCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAG GGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCAC CAG С GTAT CAG CAG GGC СAGAAC CAAC T G TATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GA AGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCA AGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTA TAATGAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTG AAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGA GAG С G GAGAAG G G GAAAAG G G CAC GAC G G T T T GTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GA AG GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAA GCCCTGCCACCTAGG
KGKHLCPSPLFPGPSK P FWVLVWGGVLACYS LLVTVAFIIFWVRSKR SRLLHSDYMNMTPRRP GPTRKHYQPYAPPRDF AAYRSRVKFSRSADAP AYQQGQNQLYNELNLG RREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLY NELQKDKMAEAYSEIG MKGERRRGKGHDGLYQ GLSTATKDTYDALHMQ ALPPR
(CAR2.3) ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT ДНК HxL GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC CD8 CAR GCCCGCAGGTGCAGTTGCAGGAAAGCGGG для клона CCTGGCCTTGTGAAACCAAGCCAGACACT 2 4C8 GAGCCTGACATGCACTGTGTCCGGCGGGT CCATATCTTCCGGGGGTTTTTATTGGTCC TGGATACGCCAGCATCCCGGGAAAGGACT T GAAT G GAT T G GATATAT С СAC CAT T С С G GAAG CAC С CAC TACAAT С СAAG CCT TAAA TCCCGGGTGACAATCTCCATCGACACCTC AAAGAATCTTTTTTCCCTGCGGTTGTCTT CAGTAACTGCCGCCGATACCGCTGTGTAC TACTGTGCCAGCCTCGTCTATTGCGGCGG AGATTGTTATTCTGGGTTCGATTATTGGG GT СAAG G СACAC T G GTAAC T GT CAG CAG С GGAGGCGGCGGTTCCGGGGGCGGGGGCAG TGGAGGGGGCGGATCTGACATTCAGCTTA CGCAGTCCCCATCTTCACTTAGCGCCAGC GTTGGCGATCGGGTCAGCTTCACGTGTCA AG СAAGT CAG GATAT СAACAAC T T T С T TA ACTGGTAC CAG СAGAAG С CAG G СAAG G СA CCCAAGTTGCTGATTTACGATGCTTCTAA CCTCGAGACGGGAGTGCCTAGCCGCTTCT CCGGGAGCGGCAGCGGCACAGACTTTACC TTTACGATTTCCAGTCTGCAGCCAGAGGA TATAGCAACTTATTACT GT CAGCAGTAT G GCAACCTCCCTTTTACCTTCGGTGGTGGC
197
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLQESGPGL VKPSQTLSLTCTVSGG SISSGGFYWSWIRQHP GKGLEWIGYIHHSGST HYNPSLKSRVTISIDT SKNLFSLRLSSVTAAD TAVYYCASLVYCGGDC YSGFDYWGQGTLVTVS SGGGGSGGGGSGGGGS DIQLTQSPSSLSASVG DRVSFTCQASQDINNF LNWYQQKPGKAPKLLI YDASNLETGVPSRFSG SGSGTDFTFTISSLQP EDIATYYCQQYGNLPF TFGGGTKVEIKRAAAL SNSIMYFSHFVPVFLP AKPTTTPAPRPPTPAP TIASQPLSLRPEACRP AAGGAVHTRGLDFACD IYIWAPLAGTCGVLLL SLVITLYCNHRNRSKR SRLLHSDYMNMTPRRP GPTRKHYQPYAPPRDF AAYRSRVKFSRSADAP AYQQGQNQLYNELNLG
ACAAAG GT С GAGAT TAAAAGAG С С G CAG С GTTGTCCAACTCCATAATGTATTTTTCTC ATTTTGTGCCCGTCTTTCTGCCTGCCAAA CCTACCACCACCCCCGCCCCACGACCACC TACTCCAGCCCCCACCATCGCCTCCCAGC CCCTCAGCCTGAGGCCAGAGGCTTGTCGC CCTGCTGCGGGGGGCGCTGTCCATACCAG AGGACTCGACTTCGCCTGCGATATTTATA TATGGGCCCCCCTCGCCGGCACCTGCGGA GTCTTGCTCCTGAGCCTTGTGATCACGCT TTATTGTAAC CAT С G GAATAGAT С СAAAA GAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATG AATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCAC AAG GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC CTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGG GTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGCACC AG С GTAT CAG CAG GGC СAGAAC CAAC T GT ATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAA GAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG G ACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAA GACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTAT AAT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGCT GA AGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAG AGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGT T T GTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAA G GATAC T TAT GAC G С T С T С СACAT G СAAG CCCTGCCACCTAGGTAA
RREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLY NELQKDKMAEAYSEIG MKGERRRGKGHDGLYQ GLSTATKDTYDALHMQ ALPPR
(CAR2.3) CAGGTGCAGTTGCAGGAAAGCGGGCCTGG
ДНК HxL С С T T GT GAAAC СAAG С СAGACAC T GAG С С
CD8 CAR TGACATGCACTGTGTCCGGCGGGTCCATA для клона TCTTCCGGGGGTTTTTATTGGTCCTGGAT 24C8 ACGCCAGCATCCCGGGAAAGGACTTGAAT G GAT T G GATATAT С CAC CAT T С С G GAAG С ACСCACTACAATССAAGССTТAAATСССG GGTGACAATСТСCATСGACACСТCAAAGA ATCTTTTTTCCCTGCGGTTGTCTTCAGTA ACTGCCGCCGATACCGCTGTGTACTACTG TGCCAGCCTCGTCTATTGCGGCGGAGATT GTTATTCTGGGTTCGATTATTGGGGTCAA GGCACACTGGTAACTGTCAGCAGCGGAGG CGGCGGTTCCGGGGGCGGGGGCAGTGGAG GGGGCGGATCTGACATTCAGCTTACGCAG TCCCCATCTTCACTTAGCGCCAGCGTTGG CGATCGGGTCAGCTTCACGTGTCAAGCAA GTCAGGATATCAACAACTTTCTTAACTGG TAC CAG СAGAAG С CAG G СAAG G CAC С СAA GTTGCTGATTTACGATGCTTCTAACCTCG AGACGGGAGTGCCTAGCCGCTTCTCCGGG AGCGGCAGCGGCACAGACTTTACCTTTAC GAT T T С CAGT С T G CAG С СAGAG GATATAG CAAC T TAT TAC T GT CAG СAGTAT G G CAAC CTCCCTTTTACCTTCGGTGGTGGCACAAA GGTCGAGATTAAAAGAGCCGCAGCGTTGT CCAACTCCATAATGTATTTTTCTCATTTT GTGCCCGTCTTTCTGCCTGCCAAACCTAC CACCACCCCCGCCCCACGACCACCTACTC CAGCCCCCACCATCGCCTCCCAGCCCCTC AGCCTGAGGCCAGAGGCTTGTCGCCCTGC TGCGGGGGGCGCTGTCCATACCAGAGGAC
199
QVQLQESGPGLVKPSQ TLSLTCTVSGGSISSG GFYWSWIRQHPGKGLE WIGYIHHSGSTHYNPS LKSRVTISIDTSKNLF SLRLSSVTAADTAVYY CASLVYCGGDCYSGFD YWGQGTLVTVSSGGGG SGGGGSGGGGSDIQLT QSPSSLSASVGDRVSF TCQASQDINNFLNWYQ QKPGKAPKLLIYDASN LETGVPSRFSGSGSGT DFTFTISSLQPEDIAT YYCQQYGNLPFTFGGG TKVEIKRAAALSNSIM YFSHFVPVFLPAKPTT TPAPRPPTPAPTIASQ PLSLRPEACRPAAGGA VHTRGLDFACDIYIWA PLAGTCGVLLLSLVIT LYCNHRNRSKRSRLLH SDYMNMTPRRPGPTRK HYQPYAPPRDFAAYRS RVKFSRSADAPAYQQG QNQLYNELNLGRREEY DVLDKRRGRDPEMGGK PRRKNPQEGLYNELQK DKMAEAYSEIGMKGER RRGKGHDGLYQGLSTA TKDTYDALHMQALPPR
TCGACTTCGCCTGCGATATTTATATATGG GCCCCCCTCGCCGGCACCTGCGGAGTCTT GCTCCTGAGCCTTGTGATCACGCTTTATT GTAAC CAT С G GAATAGAT С СAAAAGAAG С CGCCTGCTC СATAG С GAT TACAT GAATAT GACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGA AACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGA GATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAA GTTTTCCAGATCTGCAGATGCACCAGCGT AT CAG CAG GGC СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTA TGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGG AC С С T GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC GA AAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGA GCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCT ATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGCGG AGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTA С CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATA CTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTG СCACСTAGG
(CAR3.1) ДНК HxL THD CAR для клона 20C5.1
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGCAGGTCCAACTGGTGCAGTCCGGA GCCGAAGTCAAGAAACCAGGTGCCTCCGT TAAAGTGAGTTGCAAAGTCTCTGGATACA CTCTGACCGAGCTCTCTATGCACTGGGTC CGGCAGGCCCCCGGCAAGGGATTGGAATG GATGGGCGGGTTCGATCCTGAGGACGGAG AGAC TAT С TAC G С T СAAAAAT T С CAG G GA С GAGT GACT GT GAC С GAAGACACTAGTAC CGACACTGCCTACATGGAACTTTCCTCTC T G С GAT СAGAAGATAC С G CAGT GTAC TAC TGTGCTACTGAATCTAGGGGCATTGGATG GCCCTACTTCGATTACTGGGGTCAGGGAA CTCTGGTGACTGTCTCCAGCGGTGGAGGT GGCAGCGGTGGTGGCGGAAGCGGGGGGGG CGGCTCTGATATTCAGATGACTСААТCTС CTTCTTCTCTGTCCGCTTCCGTGGGCGAT AGAGTGACCATTACTTGTAGGGCGTCCCA GTСААТCTСCAGTTATTTGAATTGGTATС AGCAGAAGCCCGGGAAAGCACCTAAGCTG TTGATCAGCGGGGCTTCTAGCCTGAAGAG TGGGGTACCTTCACGGTTCAGCGGAAGCG GAAGCGGAACCGATTTCACCCTGACTATC AGCAGCCTGCCACCTGAGGACTTTGCAAC TTACTACTGC СAACAGT СATACAG CAC T С CGATCACTTTCGGCCAGGGCACCCGGCTC GAAATCAAGCGCGCTGCTGCTTTGGACAA T GAGAAGT СAAAC GGCACCAT CATACAT G TTAAAGGTAAACATCTGTGTCCCTCCCCG CTGTTCCCCGGCCCTTCCAAACCGTTCTG GGTTCTGGTGGTGGTCGGAGGCGTACTCG CTTGCTATAGTCTGCTGGTAACTGTCGCC TTСATСATСTTTTGGGTGAGATССAAAAG AAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGA ATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACA AGGAAACACTACCAGCCTTACGCACCACC TAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGG TGAAGTTTTССAGATСTGСAGATGСACСA
201
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVQSGAEV KKPGASVKVSCKVSGY TLTELSMHWVRQAPGK GLEWMGGFDPEDGETI YAQKFQGRVTVTEDTS TDTAYMELSSLRSEDT AVYYCATESRGIGWPY FDYWGQGTLVTVSSGG GGSGGGGSGGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRV TITCRASQSISSYLNW YQQKPGKAPKLLISGA SSLKSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLPPEDF ATYYCQQSYSTPITFG QGTRLEIKRAAALDNE KSNGTIIHVKGKHLCP SPLFPGPSKPFWVLW VGGVLACYSLLVTVAF 11FWVRS KRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
GCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAACTGTA TAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGGGAAG AGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAGAGGA CGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAG ACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATA AT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGCT GAA GCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGA GCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTT TGTACCAGGGACTCAGCACTGCTACGAAG GATACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGC CCTGCCACCTAGGTAA
(CAR3.1) CAGGTCCAACTGGTGCAGTCCGGAGCCGA ДНК HxL AGTCAAGAAACCAGGTGCCTCCGTTAAAG THD CAR TGAGTTGCAAAGTCTCTGGATACACTCTG для клона ACCGAGCTCTCTATGCACTGGGTCCGGCA 2 0C5 . 1 GGCCCCCGGCAAGGGATTGGAATGGATGG GCGGGTTCGATCCTGAGGACGGAGAGACT ATCTACGCTCAAAAATTCCAGGGACGAGT GAC T GT GAC С GAAGACAC TAGTACCGACA CTGCCTACATGGAACTTTCCTCTCTGCGA T CAGAAGATACCGCAGT GTACTACT GT GC TACTGAATCTAGGGGCATTGGATGGCCCT ACTTCGATTACTGGGGTCAGGGAACTCTG GTGACTGTCTCCAGCGGTGGAGGTGGCAG CGGTGGTGGCGGAAGCGGGGGGGGCGGCT CTGATATTCAGATGACTCAATCTCCTTCT TCTCTGTCCGCTTCCGTGGGCGATAGAGT GACCATTACTTGTAGGGCGTCCCAGTCAA T С T С CAGT TAT T T GAAT T G GTAT CAG CAG AAGCCCGGGAAAGCACCTAAGCTGTTGAT CAGCGGGGCTTCTAGCCTGAAGAGTGGGG TACCTTCACGGTTCAGCGGAAGCGGAAGC G GAAC С GAT T T CAC CCT GAC TAT CAG CAG CCTGCCACCTGAGGACTTTGCAACTTACT ACT GCCAACAGT CATACAGCACT CCGAT С ACTTTCGGCCAGGGCACCCGGCTCGAAAT CAAGCGCGCTGCTGCTTTGGACAATGAGA AGT СAAAC G G СAC CAT СATACAT GT TAAA GGTAAACATCTGTGTCCCTCCCCGCTGTT CCCCGGCCCTTCCAAACCGTTCTGGGTTC TGGTGGTGGTCGGAGGCGTACTCGCTTGC TATAGTCTGCTGGTAACTGTCGCCTTCAT CATCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCC GCCTGCTC СATAG С GAT TACAT GAATAT G ACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAA ACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAG ATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAG T T T T С CAGAT С T G CAGAT G CAC CAG С GTA T CAG CAG GGC СAGAAC CAAC T GTATAAC G AG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GA CCCTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAA AAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAG CTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTA TTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGСGGA GAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC TTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGC CACCTAGG
203
Q VQ L VQ S GAE VK К P GA SVKVSCKVSGYTLTEL SMHWVRQAPGKGLEWM GGFDPEDGETIYAQKF QGRVTVTEDTSTDTAY MELSSLRSEDTAVYYC ATESRGIGWPYFDYWG QGTLVTVSSGGGGSGG GGSGGGGSDIQMTQSP SSLSASVGDRVTITCR ASQSISSYLNWYQQKP GKAPKLLISGASSLKS GVPSRFSGSGSGTDFT LTISSLPPEDFATYYC QQSYSTPITFGQGTRL EIKRAAALDNEKSNGT IIHVKGKHLCPSPLFP GP S KP FWVLVWGGVL ACYSLLVTVAFIIFWV RSKRSRLLHS DYMNMT PRRPGPTRKHYQPYAP PRDFAAYRSRVKFSRS ADAPAYQQGQNQLYNE LNLGRREEYDVLDKRR GRDPEMGGKPRRKNPQ EGLYNELQKDKMAEAY SEIGMKGERRRGKGHD GLYQGLSTATKDTYDA LHMQALPPR
(CAR3.2)
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT
205
MAL PVTAL LLP LAL L L
206
ДНК HxL
GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC
HAARPQVQLVQSGAEV
CHD CAR
GCCCGCAGGTGCAGCTTGTGCAGAGCGGG
KKPGASVKVSCKVSGY
для клона
GCCGAGGTGAAGAAGCCCGGGGCCAGCGT
TLTELSMHWVRQAPGK
20C5.1
CAAAGTGTCCTGTAAGGTCAGCGGTTACA
GLEWMGGFDPEDGETI
CCCTCACCGAGCTGAGCATGCACTGGGTA
YAQKFQGRVTVTEDTS
CGGCAGGCTCCCGGCAAAGGTCTTGAGTG
TDTAYMELSSLRSEDT
GATGGGTGGATTTGATCCAGAAGATGGAG
AVYYCATESRGIGWPY
AGAC TAT С TAC G С С СAGAAGT T С CAG GGC
FDYWGQGTLVTVSSGG
С G G GT CAC С GTAACAGAAGACAC С T CAAC
GGSGGGGSGGGGSDIQ
T GACAC С G С T TACAT G GAG С T GAGT T CAC
MTQSPSSLSASVGDRV
TGCGGTCCGAGGACACGGCCGTGTATTAT
TITCRASQSISSYLNW
TGTGCCACCGAGAGCCGCGGAATCGGATG
YQQKPGKAPKLLISGA
GCCTTACTTCGACTACTGGGGACAGGGTA
SSLKSGVPSRFSGSGS
CACTTGTTACAGTATCATCCGGGGGTGGC
GTDFTLTISSLPPEDF
GGCTCTGGTGGGGGCGGCTCCGGAGGGGG
ATYYCQQSYSTPITFG
TGGATCAGATAT CCAAAT GACT CAAAGT С
QGTRLEIKRAAAIEVM
CAAGTTCCCTGTCTGCCTCAGTCGGAGAT
YPPPYLDNEKSNGTII
AGAGTCACCATAACCTGCAGGGCAAGTCA
HVKGKHLCPSPLFPGP
GTCCATCTCCTCCTATCTGAACTGGTACC
S KP FWVLVWGGVLAC
AACAGAAACCTGGAAAGGCGCCTAAGCTC
YSLLVTVAFIIFWVRS
CTGATCTCCGGAGCCTCATCTTTGAAATC
KRSRLLHSDYMNMTPR
CGGTGTCCCATCTCGCTTCAGTGGCTCTG
RPGPTRKHYQPYAPPR
GAAG С G GTACAGAT TTTACTTTGAC CAT T
DFAAYRSRVKFSRSAD
AGCAGCCTCCCACCGGAAGACTTTGCTAC
APAYQQGQNQLYNELN
ATAT TAC T G С CAG CAGT С T TAC T CAAC С С
LGRREEYDVLDKRRGR
СААТ CAC С T T С G G G СAAG G CAC СAGAC T С
DPEMGGKPRRKNPQEG
GAAATAAAAAGAG CAG С T G С TAT С GAG GT
LYNELQKDKMAEAYSE
TAT GTAC С CAC CGCCGTACTTG GATAAC G
IGMKGERRRGKGHDGL
AAAAAAG СAAT G G GAC CATCATT CAT GT G
YQGLSTATKDTYDALH
AAGGGTAAGCACCTTTGCCCTAGCCCACT
MQALPPR
GTTTCCTGGCCCGAGTAAACCCTTTTGGG
TACTTGTGGTCGTCGGCGGCGTGCTGGCC
TGCTACTCACTCCTGGTTACCGTCGCATT
СATСATСTTTTGGGTGAGATССAAAAGAA
GCCGCCTGCTCCATAGCGATTACATGAAT
ATGACTCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAG
GAAACAC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC СТА
GAGATTTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTG
AAGT T T T С CAGAT С T G CAGAT G CAC CAG С
GTAT CAG CAG GGC СAGAAC CAAC T GTATA
AC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAG
TAT GAC GT T T T G GACAAG С G СAGAG GAC G
G GAC CCT GAGAT G G GT G G СAAAC СAAGAC
GAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTCTATAAT
GAGCTGCAGAAGGATAAGATGGCTGAAGC
CTATTCTGAAATAGGCATGAAAGGAGAGC
GGAGAAGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTG
TAC CAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GA
TACTTATGACGCTCTCCACATGCAAGCCC
TGCCACCTAGGTAA
(CAR3.2)
CAGGTGCAGCTTGTGCAGAGCGGGGCCGA
207
Q VQ L VQ S GAE VK К P GA
208
ДНК HxL
GGTGAAGAAGCCCGGGGCCAGCGTCAAAG
SVKVSCKVSGYTLTEL
CHD CAR
TGTCCTGTAAGGTCAGCGGTTACACCCTC
SMHWVRQAPGKGLEWM
для клона
ACCGAGCTGAGCATGCACTGGGTACGGCA
GGFDPEDGETIYAQKF
20C5.1
GGCTCCCGGCAAAGGTCTTGAGTGGATGG
QGRVTVTEDTSTDTAY
GTGGATTTGATСCAGAAGATGGAGAGACT
MELSSLRSEDTAVYYC
ATCTACGCCCAGAAGTTCCAGGGCCGGGT
ATESRGIGWPYFDYWG
СAC С GTAACAGAAGACAC С T CAAC T GACA
QGTLVTVSSGGGGSGG
CCGCTTACATGGAGCTGAGTTCACTGCGG TCCGAGGACACGGCCGTGTATTATTGTGC CACCGAGAGCCGCGGAATCGGATGGCCTT AC T T С GAC TAC T G G G GACAG G GTACAC T T GTTACAGTATCATCCGGGGGTGGCGGCTC TGGTGGGGGCGGCTCCGGAGGGGGTGGAT CAGATAT С СAAATGACT CAAAGT ССAAGT TCCCTGTCTGCCTCAGTCGGAGATAGAGT CAC СATAAC С T G CAG G G СAAGT CAGT С СA TCTCCTCCTATCTGAACTGGTACCAACAG AAACCTGGAAAGGCGCCTAAGCTCCTGAT CTCCGGAGCCTCATCTTTGAAATCCGGTG TCCCATCTCGCTTCAGTGGCTCTGGAAGC G GTACAGAT TTTACTTTGAC CAT TAG СAG CCTCCCACCGGAAGACTTTGCTACATATT AC T G С CAG CAGT С T TAC T CAAC С С СААТ С ACCTTCGGGCAAGGCACCAGACTCGAAAT AAAAAGAG CAG С T G С TAT С GAG GT TAT GT ACССACСGССGTACTTGGATAACGAAAAA AG СAAT G G GAC CATCATT CAT GT GAAGGG TAAGCACCTTTGCCCTAGCCCACTGTTTC CTGGCCCGAGTAAACCCTTTTGGGTACTT GTGGTCGTCGGCGGCGTGCTGGCCTGCTA CTCACTCCTGGTTACCGTCGCATTCATCA TCTTTTGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGC CT GCT CCATAGCGATTACAT GAATAT GAC TCCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAAC AC TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT TTCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTT T T С CAGAT С T G CAGAT G CAC CAG С GTAT С AG CAG GGC СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GA CGTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACC CTGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAA AACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCT G СAGAAG GATAAGAT GGCT GAAG С С TAT T CT GAAATAGGCAT GAAAGGAGAGСGGAGA AGGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCA G G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T T ATGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCA CCTAGG
GGSGGGGSDIQMTQSP SSLSASVGDRVTITCR ASQSISSYLNWYQQKP GKAPKLLISGASSLKS GVPSRFSGSGSGTDFT LTISSLPPEDFATYYC QQSYSTPITFGQGTRL EIКRAAAIEVMYPPPY LDNEKSNGTIIHVKGK HLCPSPLFPGPSKPFW VL VWG G VL AC Y S L L V TVAFIIFWVRS KRSRL LHSDYMNMTPRRPGPT RKHYQPYAPPRDFAAY RSRVKFSRSADAPAYQ QGQNQLYNELNLGRRE EYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNEL QKDKMAEAYSEIGMKG ERRRGKGHDGLYQGLS TAT К D T Y DAL HMQAL P PR
(CAR3.3) ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT ДНК HxL GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC CD8 CAR GCCCGCAGGTGCAGTTGGTGCAAAGCGGC для клона GCAGAAGTTAAGAAACCTGGGGCGTCAGT 2 0C5 . 1 TAAGGTGTCTTGCAAAGTATCTGGCTATA CCCTCACTGAGCTGTCCATGCATTGGGTA AGGCAGGCTCCTGGAAAGGGGCTCGAATG GAT G G GAG GAT T T GAC CCT GAAGAC G GAG AGAC CAT С TAC G С С СAGAAAT T С CAG GGT AGAGTAACAGT GACT GAGGACACTAGCAC T GACACAG С GTACAT G GAG С T GAGT T С T С T GAGAAGT GAG GACACAG CCGTTTACTAC TGCGCTACCGAGTCCAGAGGTATTGGCTG GCCATACTTCGACTATTGGGGTCAGGGCA CCCTGGTTACAGTGAGTTCAGGAGGCGGG GGCTCTGGGGGGGGCGGTTCCGGAGGGGG GGGCT CAGATATACAGATGACGCAGAGT С CATCAAGTCTCTCAGCCAGCGTGGGAGAT
209
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVQSGAEV KKPGASVKVSCKVSGY TLTELSMHWVRQAPGK GLEWMGGFDPEDGETI YAQKFQGRVTVTEDTS TDTAYMELSSLRSEDT AVYYCATESRGIGWPY FDYWGQGTLVTVSSGG GGSGGGGSGGGGSDIQ MTQSPSSLSASVGDRV TITCRASQSISSYLNW YQQKPGKAPKLLISGA SSLKSGVPSRFSGSGS GTDFTLTISSLPPEDF ATYYCQQSYSTPITFG QGTRLEIKRAAALSNS IMYFSHFVPVFLPAKP
CGCGTGACTATTACTTGCCGCGCCAGCCA GAGTATTAGCTCCTATCTGAATTGGTACC AGCAAAAGCCCGGGAAGGCCCCTAAGCTT CTGATTTCTGGCGCCTCCTCTTTGAAGTC AGGTGTGCCAAGCAGATTTAGCGGGTCTG GAAGT G G CAC T GAC T T TACAC T TAC TAT С TCCAGCCTGCCCCCAGAGGATTTTGCCAC ATAT TAC T GT CAG СAAAG CTACTCTACTC СAAT CAC T T T С G G С CAG G G СACAAGAT T G GAGATTAAGAGGGCTGCCGCACTTTCAAA TTCCATCATGTATTTCAGCCATTTTGTGC CTGTTTTTCTTCCGGCCAAACCTACAACC ACTCCCGCCCCACGCCCACCTACTCCCGC CCCTACCATTGCCTCCCAGCCTCTGTCTC TTAGACCTGAGGCTTGTAGACCTGCTGCC GGCGGAGCCGTGCACACTCGCGGTCTGGA CTTCGCCTGCGACATCTATATCTGGGCCC CTCTGGCCGGCACCTGCGGCGTTCTCCTT CTCTCACTCGTAATCACACTCTATTGCAA TСACAGGAACAGATССAAAAGAAGССGСС Т GCT CCATAGCGATTACAT GAATAT GACT CCACGCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACA С TAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT T TCGCTGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTT T С CAGAT С T G CAGAT G CAC CAG С GTATCA G CAG GGC СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GTTTTGGACAAGCGCAGAGGACGGGACCC TGAGATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAA ACCCCCAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTG CAGAAGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTС T GAAATAGGCAT GAAAGGAGAGСGGAGAA GGGGAAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAG G GAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TA TGACGCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCAC CTAGGTAA
TTTPAPRPPTPAPTIA SQPLSLRPEACRPAAG GAVHTRGLDFACDIYI WAP LAGT С GVL L L S LV ITLYCNHRNRSKRSRL LHSDYMNMTPRRPGPT RKHYQPYAPPRDFAAY RSRVKFSRSADAPAYQ QGQNQLYNELNLGRRE EYDVLDKRRGRDPEMG GKPRRKNPQEGLYNEL QKDKMAEAYSEIGMKG ERRRGKGHDGLYQGLS TAT К D T Y DAL HMQAL P PR
(CAR3.3) CAGGTGCAGTTGGTGCAAAGCGGCGCAGA ДНК HxL AGTTAAGAAACCTGGGGCGTCAGTTAAGG CD8 CAR TGTCTTGCAAAGTATCTGGCTATACCCTC для клона ACTGAGCTGTCCATGCATTGGGTAAGGCA 2 0C5.1 GGCTCCTGGAAAGGGGCTCGAATGGATGG GAG GAT T T GAC С С T GAAGAC G GAGAGAC С AT С TAC G С С СAGAAAT T С CAG G GTAGAGT AACAGT GACT GAGGACACTAGCACT GACA CAG С GTACAT G GAG С T GAGT T С T С T GAGA AGT GAG GACACAG CCGTTTACTACTGCGC TACCGAGTCCAGAGGTATTGGCTGGCCAT ACTTCGACTATTGGGGTCAGGGCACCCTG GTTACAGTGAGTTCAGGAGGCGGGGGCTC TGGGGGGGGCGGTTCCGGAGGGGGGGGCT СAGATATACAGAT GAC GСAGAGT СCAT СA AGTCTCTCAGCCAGCGTGGGAGATCGCGT GACTATTACTTGCCGCGCCAGCCAGAGTA TTAGCTCCTATCTGAATTGGTACCAGCAA AAGCCCGGGAAGGCCCCTAAGCTTCTGAT TTCTGGCGCCTCCTCTTTGAAGTCAGGTG TGCCAAGCAGATTTAGCGGGTCTGGAAGT G G CAC T GAC T T TACAC T TAC TAT С T С CAG CCTGCCCCCAGAGGATTTTGCCACATATT
211
Q VQ L VQ S GAE VK К P GA SVKVSCKVSGYTLTEL SMHWVRQAPGKGLEWM GGFDPEDGETIYAQKF QGRVTVTEDTSTDTAY MELSSLRSEDTAVYYC ATESRGIGWPYFDYWG QGTLVTVSSGGGGSGG GGSGGGGSDIQMTQSP SSLSASVGDRVTITCR ASQSISSYLNWYQQKP GKAPKLLISGASSLKS GVPSRFSGSGSGTDFT LTISSLPPEDFATYYC QQSYSTPITFGQGTRL EIKRAAALSNSIMYFS H FVPVFLPAKPTTT PA PRPPTPAPTIASQPLS L R P EAC R PAAG GAVH T RGLDFACDIYIWAPLA GTCGVLLLSLVITLYC NHRNRSKRSRLLHSDY MNMTPRRPGPTRKHYQ
ACTGTCAGCAAAGCTACTCTACTCCAATC ACTTTCGGCCAGGGCACAAGATTGGAGAT TAAGAGGGCTGCCGCACTTTCAAATTCCA TCATGTATTTCAGCCATTTTGTGCCTGTT TTTCTTCCGGCCAAACCTACAACCACTCC CGCCCCACGCCCACCTACTCCCGCCCCTA CCATTGCCTCCCAGCCTCTGTCTCTTAGA CCTGAGGCTTGTAGACCTGCTGCCGGCGG AGCCGTGCACACTCGCGGTCTGGACTTCG CCTGCGACATCTATATCTGGGCCCCTCTG GCCGGCACCTGCGGCGTTCTCCTTCTCTC ACT CGTAAT СACAC T С TAT T G СAATCACA GGAACAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTC СATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G CCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACC AGCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCT GCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAG AT С T G CAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G С СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC CTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTT G GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC CCT GAGA TGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCC CAGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAA GGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAA TAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GA AAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACT CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC G CTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG
PYAPPRDFAAYRSRVK FSRSADAPAYQQGQNQ LYNELNLGRREEYDVL DKRRGRDPEMGGKPRR KNPQEGLYNELQKDKM AEAYSEIGMKGERRRG KGHDGLYQGLSTATKD T Y DAL HMQAL PPR
(CAR4.1) ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT ДНК HxL GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC THD CAR GCCCGCAGGTCCAGTTGGTCGAAAGTGGC для клона GGTGGTGTAGTGCAGCCGGGCCGCAGTTT 2 0C5.2 GAGGCTTTCCTGTGCGGCTTCAGGCTTTA CTTTTTCCAGCTATGGAATGCACTGGGTG CGGCAGGCCCCCGGCAAAGGACTTGAGTG GGTGGCCGTCATTTCTTATGACGGATCAG ATAAGTACTACGTGGACAGCGTCAAGGGC AGATT CACCAT CT CTAGGGACAACAGTAA AAATAGAC TCTACCTC CAGAT GAATAG С С T СAGAG С Т GAAGACAC GGCCGTCTAC TAT TGTGCTCGGGAGCGGTATAGTGGCAGAGA CTACTGGGGGCAGGGCACACTCGTTACAG TGAGTAGCGGCGGAGGAGGGAGTGGGGGC GGTGGCTCCGGTGGAGGAGGTTCTGAGAT TGTTATGACCCAGAGTCCTGCGACCCTCT CAGTCAGCCCCGGGGAGCGCGCAACTTTG TCTTGCAGAGCTAGTCAGTCCGTGTCCTC TCTTCTGACATGGTACCAGCAAAAGCCCG GGCAGGCTCCGCGCCTTTTGATCTTTGGG GCTTCAACAAGAGCCACTGGGATTCCCGC ACGATTCTCTGGCTCCGGGAGCGGTACTG GTTTCACCCTGACGATTAGCAGTCTCCAG AGCGAGGACTTCGCCGTATACTACTGCCA G СAGTAC GATAC GT G G С CAT T CAC T T T T G GAC CAG G GAC TAAAGT G GAT T T TAAG С G С GCCGCCGCTCTCGATAACGAAAAGTCAAA T G G CAC СATAAT С CAC GT СAAAG G СAAG С ACCTGTGCCCTTCCCCGCTCTTCCCCGGA CCCAGTAAACCATTTTGGGTGCTGGTTGT
213
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVESGGGV VQPGRSLRLSCAASGF T FS S YGMHWVRQAP GK GLEWVAVISYDGSDKY YVDSVKGRFTISRDNS KNRLYLQMNSLRAEDT AVYYCARERYSGRDYW GQGTLVTVSSGGGGSG GGGSGGGGSEIVMTQS PATLSVSPGERATLSC RASQSVSSLLTWYQQK P GQAP RL LIFGAS T RA TGIPARFSGSGSGTGF TLTISSLQSEDFAVYY CQQYDTWPFTFGPGTK VDFKRAAALDNEKSNG TIIHVKGKHLCPSPLF P G P S К P FW VL VWG G V LACYSLLVTVAFIIFW VRSKRSRLLHS DYMNM TPRRPGPTRKHYQPYA PPRDFAAYRSRVKFSR SADAPAYQQGQNQLYN ELNLGRREEYDVLDKR RGRDPEMGGKPRRKNP QEGLYNELQKDKMAEA YSEIGMKGERRRGKGH DGLYQGLSTATKDTYD ALHMQALPPR
TGTGGGGGGCGTGCTGGCCTGCTATAGCC TTTTGGTCACTGTAGCCTTCATTATTTTT TGGGTCAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCT С СATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С СAC GCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT T T С G С TGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCA GAT С T G CAGAT G CAC CAG С GTATCAGCAG GGC СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T СAA CCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTT T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC CCT GAG ATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCC С CAG GAG G GT С T С TATAAT GAG С T G СAGA AGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAA ATAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G G AAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC GCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAG GTAA
(CAR4.1) ДНК HxL THD CAR для клона 20C5.2
CAGGTCCAGTTGGTCGAAAGTGGCGGTGG TGTAGTGCAGCCGGGCCGCAGTTTGAGGC TTTCCTGTGCGGCTTCAGGCTTTACTTTT TCCAGCTATGGAATGCACTGGGTGCGGCA GGCCCCCGGCAAAGGACTTGAGTGGGTGG CCGT CAT TTCTTATGACG GAT СAGATAAG TACTACGTG GACAG С GT СAAG G G CAGAT T CAC CAT С T С TAG G GACAACAGTAAAAATA GACTCTACCTCCAGATGAATAGCCTCAGA GCTGAAGACACGGCCGTCTACTATTGTGC T С G G GAG С G GTATAGT G G СAGAGAC TACT GGGGGCAGGGCACACTCGTTACAGTGAGT AGCGGCGGAGGAGGGAGTGGGGGCGGTGG CTCCGGTGGAGGAGGTTCTGAGATTGTTA TGACCCAGAGTCCTGCGACCCTCTCAGTC AGCCCCGGGGAGCGCGCAACTTTGTCTTG CAGAGCTAGTCAGTCCGTGTCCTCTCTTC T GACAT G GTAC CAG СAAAAG С С С G G G CAG GCTCCGCGCCTTTTGATCTTTGGGGCTTC AACAAGAG С CAC T G G GAT T С С С G CAC GAT TCTCTGGCTCCGGGAGCGGTACTGGTTTC AC С С T GAC GAT TAG CAGT С T С СAGAG С GA GGACTTCGCCGTATACTACTGCCAGCAGT ACGATACGTGGCCATTCACTTTTGGACCA GGGACTAAAGTGGATTTTAAGCGCGCCGC CGCTCTCGATAACGAAAAGTCAAATGGCA С СATAAT С CAC GT СAAAG G СAAG CAC С T G TGCCCTTCCCCGCTCTTCCCCGGACCCAG TAAACCATTTTGGGTGCTGGTTGTTGTGG GGGGCGTGCTGGCCTGCTATAGCCTTTTG GTCACTGTAGCCTTCATTATTTTTTGGGT CAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATA G С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С С G С CCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCC TTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCT ATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCT G CAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG GGC СA GAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GAC AAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGG
215
QVQLVESGGGWQPGR SLRLSCAASGFTFSSY GMHWVRQAP GKGL EWV AVISYDGSDKYYVDSV KGRFTIS RDN SKNRLY LQMNSLRAEDTAVYYC ARERYSGRDYWGQGTL VTVSSGGGGSGGGGSG GGGSEIVMTQSPATLS VSPGERATLSCRASQS VSSLLTWYQQKPGQAP RLLIFGASTRATGIPA RFSGSGSGTGFTLTIS SLQSEDFAVYYCQQYD TWPFTFGPGTKVDFKR AAALDNEKSNGTIIHV KGKHLCPSPLFPGPSK P FWVLVWGGVLACYS LLVTVAFIIFWVRSKR SRLLHSDYMNMTPRRP GPTRKHYQPYAPPRDF AAYRSRVKFSRSADAP AYQQGQNQLYNELNLG RREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLY NELQKDKMAEAYSEIG MKGERRRGKGHDGLYQ GLSTATKDTYDALHMQ ALPPR
TGGСAAACСAAGACGAAAAAACСССCAGG AGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGAT AAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG GGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGC ACTGCTAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T CCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG
(CAR4.2) ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT ДНК HxL GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC CHD CAR GCCCGCAGGTGCAGCTCGTGGAGTCTGGC для клона GGCGGCGTGGTCCAGCCCGGCCGGTCCCT 2 0C5.2 GCGCCTGTCCTGCGCCGCCAGCGGGTTTA CTTTTTCCTCCTACGGCATGCACTGGGTG CGCCAGGCTCCCGGCAAGGGCCTCGAGTG GGTCGCCGTGATCTCATACGATGGGTCAG ACAAATAC TAT GT С GAT T С T GT TAAAG G G СGGTTTACСATTTСAAGAGATAACTСTAA GAATAG GCT GTAT T T G CAGAT GAACAG С С T GAG GGCT GAAGATAC С G CAGT GTAC TAT TGCGCTAGGGAGCGGTATAGTGGCCGCGA TTACTGGGGACAGGGTACACTGGTGACCG TGAGCTCTGGGGGTGGCGGAAGCGGGGGT GGCGGAAGCGGCGGAGGGGGTAGTGAAAT TGTGATGACCCAGTCTCCGGCTACACTTT CAGTCTCCCCTGGGGAGAGAGCTACACTG TCATGCAGAGCGTCCCAGTCCGTCTCTTC TCTCCTTACCTGGTATCAGCAGAAGCCCG GCCAGGCTCCTCGACTGCTGATCTTCGGT GCCTCCACAAGGGCGACCGGGATTCCAGC CCGCTTCTCAGGTTCTGGGAGCGGAACTG GT T T CACT T T GACAAT CAGT T CACT GCAG TCAGAGGATTTCGCCGTGTACTACTGCCA G СAATAC GACACAT GGC CAT T CAC T T T С G GAC С С GGTAC CAAAGT С GAT T T CAAGAGA GCCGCGGCCATCGAGGTTATGTACCCACC ACCATAT CT GGACAATGAAAAAAGСAATG GAAC CAT TAT С CAT GT GAAG G GTAAACAC CTCTGCCCTAGCCCACTTTTCCCTGGCCC ATCAAAGCCCTTCTGGGTCTTGGTGGTCG TGGGGGGTGTGCTGGCCTGTTACAGCCTT CTGGTGACGGTTGCTTTCATTATCTTCTG GGTTAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCC ATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С CGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCA GCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTG CCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGA T С T G CAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G ССAGAACCAACTGTATAACGAGСTСAACС TGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTG GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC CCT GAGAT GGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCC AGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAG GATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAAT AGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAA AAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTC AG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC G С TCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGT AA
217
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPQVQLVESGGGV VQPGRSLRLSCAASGF T FS S YGMHWVRQAP GK GLEWVAVISYDGSDKY YVDSVKGRFTISRDNS KNRLYLQMNSLRAEDT AVYYCARERYSGRDYW GQGTLVTVSSGGGGSG GGGSGGGGSEIVMTQS PATLSVSPGERATLSC RASQSVSSLLTWYQQK P GQAP RL LIFGAS T RA TGIPARFSGSGSGTGF TLTISSLQSEDFAVYY CQQYDTWPFTFGPGTK VDFKRAAAIEVMYPPP YLDNEKSNGTIIHVKG KHLCPSPLFPGPSKPF W VL VWG G VL AC Y S L L VTVAFIIFWVRS KRSR LLHSDYMNMTPRRPGP TRKHYQPYAPPRDFAA YRSRVKFSRSADAPAY QQGQNQLYNELNLGRR EEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNE LQKDKMAEAYSEIGMK GERRRGKGHDGLYQGL S TAT К D T Y DAL HMQ AL PPR
(CAR4.2)
CAGGTGCAGCTCGTGGAGTCTGGCGGCGG
219
QVQLVESGGGWQPGR
220
ДНК HxL
CGTGGTCCAGCCCGGCCGGTCCCTGCGCC
SLRLSCAASGFTFSSY
CHD CAR
TGTCCTGCGCCGCCAGCGGGTTTACTTTT
GMHWVRQAP GKGL EWV
для клона
TCCTCCTACGGCATGCACTGGGTGCGCCA
AVISYDGSDKYYVDSV
20C5.2
GGCTCCCGGCAAGGGCCTCGAGTGGGTCG
KGRFTISRDN SKNRLY
CCGT GAT С T СATAC GAT GGGT СAGACAAA
LQMNSLRAEDTAVYYC
TACTATGTCGATTCTGTTAAAGGGCGGTT
ARERYSGRDYWGQGTL
TAC CAT T T СAAGAGATAAC T С TAAGAATA
VTVSSGGGGSGGGGSG
GGCTGTATTTGCAGATGAACAGCCTGAGG
GGGSEIVMTQSPATLS
GCTGAAGATACCGCAGTGTACTATTGCGC
VSPGERATLSCRASQS
TAGGGAGCGGTATAGTGGCCGCGATTACT
VSSLLTWYQQKPGQAP
GGGGACAGGGTACACTGGTGACCGTGAGC
RLLIFGASTRATGIPA
TCTGGGGGTGGCGGAAGCGGGGGTGGCGG
RFSGSGSGTGFTLTIS
AAGCGGCGGAGGGGGTAGTGAAATTGTGA
SLQSEDFAVYYCQQYD
TGACCCAGTCTCCGGCTACACTTTCAGTC
TWPFTFGPGTKVDFKR
TCCCCTGGGGAGAGAGCTACACTGTCATG
AAAIEVMYPPPYLDNE
CAGAGCGTCCCAGTCCGTCTCTTCTCTCC
KSNGTIIHVKGKHLCP
TTACCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAG
SPLFPGPSKPFWVLW
GCTCCTCGACTGCTGATCTTCGGTGCCTC
VGGVLACYSLLVTVAF
CACAAGGGCGACCGGGATTCCAGCCCGCT
11FWVRS KRSRLLHSD
TCTCAGGTTCTGGGAGCGGAACTGGTTTC
YMNMTPRRPGPTRKHY
ACT T T GACAAT CAGT T CACT GCAGT СAGA
QPYAPPRDFAAYRSRV
GGATTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAAT
KFSRSADAPAYQQGQN
ACGACACATGGCCATTCACTTTCGGACCC
QLYNELNLGRREEYDV
G GTAC СAAAGT С GAT T T СAAGAGAG С С G С
LDKRRGRDPEMGGKPR
GGC CAT С GAGGT TAT GTAC С CAC CACCAT
RKNPQEGLYNELQKDK
AT CT GGACAAT GAAAAAAGСAAT GGAAC С
MAEAYSEIGMKGERRR
AT TAT С CAT GT GAAG G GTAAACAC С T С T G
GKGHDGLYQGLSTATK
CCCTAGCCCACTTTTCCCTGGCCCATCAA
DTYDALHMQALPPR
AGCCCTTCTGGGTCTTGGTGGTCGTGGGG
GGTGTGCTGGCCTGTTACAGCCTTCTGGT
GACGGTTGCTTTCATTATCTTCTGGGTTA
GATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGC
GAT TACAT GAATAT GACTCCACGCCGCCC
TGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTT
ACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTAT
CGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGC
AGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG GGC СAGA
AC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GA
С G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GACAA
GCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTG
G СAAAC СAAGAC GAAAAAAC С С С СAG GAG
GGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAA
GATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCA
T GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG G G
CAC GAC GGTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC
TGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCC
ACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG
(CAR4.3)
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT
221
MAL PVTAL LLP LAL L L
222
ДНК HxL
GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC
HAARPQVQLVESGGGV
CD8 CAR
GCCCGCAGGTGCAGTTGGTTGAATCAGGA
VQPGRSLRLSCAASGF
для клона
GGGGGTGTGGTGCAACCCGGTCGGTCACT
T FS S YGMHWVRQAP GK
20C5.2
GCGCCTCAGTTGTGCTGCTTCCGGGTTTA
GLEWVAVISYDGSDKY
CTTTCAGCTCATATGGGATGCACTGGGTA
YVDSVKGRFTISRDNS
CGGCAGGCTCCAGGTAAAGGCTTGGAATG
KNRLYLQMNSLRAEDT
GGTGGCGGTGATCAGCTATGACGGCTCTG
AVYYCARERYSGRDYW
ACAAATAT TAT GT G GAC T С С GT GAAAG G С
GQGTLVTVSSGGGGSG
AGAT T СAC CAT СAGT С GAGACAAC T СAAA
GGGSGGGGSEIVMTQS
GAATAGAC TCTACTTG CAGATGAATAGCC
PATLSVSPGERATLSC
TCCGGGCCGAAGATACTGCAGTCTATTAT TGCGCCCGGGAGCGCTACAGTGGAAGAGA CTATTGGGGGCAAGGAACTCTTGTCACAG TCTCATCTGGCGGCGGCGGCAGCGGTGGG GGCGGATCTGGCGGGGGCGGCAGCGAAAT С GT TAT GAC T СAGAGT С С T G С СACAC T GA GCGTTAGCCCTGGTGAGAGAGCAACACTT AGCTGCAGAGCTAGTCAGAGTGTTTCCAG TСTTTTGACATGGTACСAACAGAAGСССG GTCAAGCTCCACGACTGCTCATCTTCGGT GCATCCACCCGCGCAACCGGGATACCCGC CCGGTTTTCCGGTTCTGGAAGTGGCACAG GATTCACGCTCACCATTTCTTCTCTGCAG TCTGAAGACTTTGCCGTGTATTACTGCCA GCAGTACGATACCTGGCCCTTTACCTTTG GCCCAGGTACTAAAGTGGATTTTAAACGA G С T G С T G CAC T T T С СAATAGTAT TAT GTA CTTTTCACATTTTGTGCCCGTGTTCCTGC CTGCGAAGCCTACGACAACCCCAGCCCCT AGGCCGCCCACACCGGCCCCAACTATTGC CTCCCAGCCATTGTCTCTGAGACCCGAAG CTTGCAGACCTGCTGCTGGAGGCGCCGTT CACACCCGAGGATTGGATTTCGCATGTGA CATTTACATCTGGGCCCCTTTGGCCGGAA CCTGCGGTGTGCTGCTGCTGTCACTCGTG AT TACAC T T TAC T GCAAC СAC С GAAACAG ATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCG AT TACAT GAATAT GAC T С CAC GCCGCCCT G G С С С СACAAG GAAACAC TAC CAG С С T TA CGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATC GGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCA GAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG GGC СAGAA С CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG CGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGG СAAAC СAAGAC GAAAAAAC С С С СAG GAG G GTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAG ATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG GGC AC GAC GGTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T GCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCA CATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA
RASQSVSSLLTWYQQK P GQAP RL LIFGAS T RA TGIPARFSGSGSGTGF TLTISSLQSEDFAVYY CQQYDTWPFTFGPGTK VDFKRAAALSNSIMYF SHFVPVFLPAKPTTTP APRPPTPAPTIASQPL S L R P EAC R PAAG GAVH TRGLDFACDIYIWAPL AGTCGVLLLSLVITLY CNHRNRSKRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
(CAR4.3) CAGGTGCAGTTGGTTGAATCAGGAGGGGG ДНК HxL TGTGGTGCAACCCGGTCGGTCACTGCGCC CD8 CAR TCAGTTGTGCTGCTTCCGGGTTTACTTTC для клона AGCTCATATGGGATGCACTGGGTACGGCA 2 0C5.2 GGCTCCAGGTAAAGGCTTGGAATGGGTGG CGGTGATCAGCTATGACGGCTCTGACAAA TAT TAT GT G GAC T С С GT GAAAG G CAGAT T CAC CAT СAGT С GAGACAAC T CAAAGAATA GACTCTACTTGCAGATGAATAGCCTCCGG GCCGAAGATACTGCAGTCTATTATTGCGC С С G G GAG С G С TACAGT G GAAGAGAC TAT T GGGGGCAAGGAACTCTTGTCACAGTCTCA TCTGGCGGCGGCGGCAGCGGTGGGGGCGG ATCTGGCGGGGGCGGCAGCGAAATCGTTA TGACTCAGAGTCCTGCCACACTGAGCGTT AGCCCTGGT GAGAGAG СAACAC T TAG С T G CAGAGCTAGTCAGAGTGTTTCCAGTCTTT
223
QVQLVESGGGWQPGR SLRLSCAASGFTFSSY GMHWVRQAP GKGL EWV AVISYDGSDKYYVDSV KGRFTISRDN SKNRLY LQMNSLRAEDTAVYYC ARERYSGRDYWGQGTL VTVSSGGGGSGGGGSG GGGSEIVMTQSPATLS VSPGERATLSCRASQS VSSLLTWYQQKPGQAP RLLIFGASTRATGIPA RFSGSGSGTGFTLTIS SLQSEDFAVYYCQQYD TWPFTFGPGTKVDFKR AAALSNSIMYFSHFVP VFLPAKPTTTPAPRPP
T GACAT G GTAC СAACAGAAG С С С G GT СAA GCTCCACGACTGCTCATCTTCGGTGCATC CACCCGCGCAACCGGGATACCCGCCCGGT TTTCCGGTTCTGGAAGTGGCACAGGATTC ACGCTCACCATTTCTTCTCTGCAGTCTGA AGACTTTGCCGTGTATTACTGCCAGCAGT ACGATACCTGGCCCTTTACCTTTGGCCCA GGTACTAAAGTGGATTTTAAACGAGCTGC TGCACTTTC СAATAGTAT TATGTACTTTT CACATTTTGTGCCCGTGTTCCTGCCTGCG AAGCCTACGACAACCCCAGCCCCTAGGCC GCCCACACCGGCCCCAACTATTGCCTCCC AGCCATTGTCTCTGAGACCCGAAGCTTGC AGACCTGCTGCTGGAGGCGCCGTTCACAC CCGAGGATTGGATTTCGCATGTGACATTT ACATCTGGGCCCCTTTGGCCGGAACCTGC GGTGTGCTGCTGCTGTCACTCGTGATTAC ACTTTACTGСAACСACСGAAACAGATССA AAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTAC ATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCC CACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCAC CACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGC ACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAAC TGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGG GAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAG AGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAAC CAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTC TATAAT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGC TGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAG GAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGAC GGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTAC GAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGC AAGCCCTGCCACCTAGG
TPAPTIASQPLSLRPE ACRPAAGGAVHTRGLD FAC DIYIWAPLAGTСG VLLLSLVITLYCNHRN RSKRSRLLHS DYMNMT PRRPGPTRKHYQPYAP PRDFAAYRSRVKFSRS ADAPAYQQGQNQLYNE LNLGRREEYDVLDKRR GRDPEMGGKPRRKNPQ EGLYNELQKDKMAEAY SEIGMKGERRRGKGHD GLYQGLSTATKDTYDA LHMQALPPR
(CAR4.4) ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT ДНК LxH GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC THD CAR GCCCGGAGATTGTGATGACCCAGTCCCCT для клона GCTACCCTGTCCGTCAGTCCGGGCGAGAG 2 0C5.2 AGCCACCTTGTCATGCCGGGCCAGCCAGT CCGTCAGCAGTCTCCTGACTTGGTATCAG CAAAAACCAGGGCAGGCACCGCGGCTTTT GATTTTTGGTGCAAGCACACGCGCCACTG GCATTCCAGCTAGGTTTTCTGGAAGTGGA TCTGGGACAGGCTTCACTCTGACAATCAG TAGCCTGCAGAGTGAGGACTTTGCTGTTT ACTACTGT СAACAGTAC GACAC С T G G С СA TTCACATTCGGGCCCGGCACCAAGGTCGA CTTCAAGAGGGGCGGTGGAGGTTCAGGTG GTGGCGGGTCAGGCGGCGGTGGGTCTCAG GTTCAACTGGTGGAATCAGGTGGCGGCGT TGTCCAACCGGGGCGATCACTTCGACTTT CCTGTGCTGCCTCAGGCTTTACTTTTTCA TCCTATGGGATGCACTGGGTTCGGCAGGC TCCCGGAAAAGGACTCGAGTGGGTTGCAG TGATCTCTTACGATGGCTCAGACAAGTAT TATGTGGACTCAGTCAAGGGGAGATTCAC AATAAG С С GAGACAAC T С СAAAAAC С G G С T T TAT С T С CAGAT GAACAG CCT TAGAG С G GAAGATACCGCGGTATACTACTGTGCCCG
225
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEIVMTQSPATL SVSPGERATLSCRASQ SVSSLLTWYQQKPGQA PRLLIFGASTRATGIP ARFSGSGSGTGFTLTI SSLQSEDFAVYYCQQY DTWPFTFGPGTKVDFK RGGGGSGGGGSGGGGS QVQLVESGGGWQPGR SLRLSCAASGFTFSSY GMHWVRQAP GKGL EWV AVISYDGSDKYYVDSV KGRFTISRDN SKNRLY LQMNSLRAEDTAVYYC ARERYSGRDYWGQGTL VTVS SAAALDNEKSNG TIIHVKGKHLCPSPLF PGPSKPFWVLVWGGV LACYSLLVTVAFIIFW VRSKRSRLLHS DYMNM TPRRPGPTRKHYQPYA PPRDFAAYRSRVKFSR SADAPAYQQGQNQLYN ELNLGRREEYDVLDKR
С GAGAG GTAT T С С G G СAGAGAC ТAC Т G G G GACAGGGCACACTGGTCACCGTGAGTTCT GCCGCAGCGCTCGATAACGAAAAGAGCAA С G GAAC CAT TAT С CAC GT TAAG G G СAAG С ACCTGTGCCCCAGTCCCCTCTTCCCAGGA CCATCTAAACCCTTCTGGGTTCTGGTAGT AGTTGGAGGGGTCCTTGCATGTTACTCCC TTTTGGTCACCGTCGCCTTCATTATTTTC TGGGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCT С СATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С СAC GCCGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTAC CAG С С T TAC G CAC CAC С TAGAGAT T T С G С TGCCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCA GAT С T G CAGAT G CAC CAG С GTATCAGCAG GGC СAGAAC CAAC T GTATAAC GAG С T СAA CCTGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTT T G GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC CCT GAG ATGGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCC С CAG GAG G GT С T С TATAAT GAG С T G СAGA AGGATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAA ATAG G CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G G AAAAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGAC T CAG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC GCTCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAG GTAA
RGRDPEMGGKPRRKNP QEGLYNELQKDKMAEA YSEIGMKGERRRGKGH DGLYQGLSTATKDTYD ALHMQALPPR
(CAR4.4) GAGATTGTGATGACCCAGTCCCCTGCTAC ДНК LxH CCTGTCCGTCAGTCCGGGCGAGAGAGCCA THD CAR CCTTGTCATGCCGGGCCAGCCAGTCCGTC для клона AGCAGTCTCCTGACTTGGTATCAGCAAAA 2 0C5.2 ACCAGGGCAGGCACCGCGGCTTTTGATTT TTGGTGCAAGCACACGCGCCACTGGCATT CCAGCTAGGTTTTCTGGAAGTGGATCTGG GACAG G С T T CAC TCT GACAAT СAGTAG С С T G СAGAGT GAG GAC TTTGCTGTTTACTAC T GT СAACAGTAC GACAC С T G G С CAT T CAC ATTCGGGCCCGGCACCAAGGTCGACTTCA AGAGGGGCGGTGGAGGTTCAGGTGGTGGC GGGTCAGGCGGCGGTGGGTCTCAGGTTCA ACTGGTGGAATCAGGTGGCGGCGTTGTCC AACCGGGGCGATCACTTCGACTTTCCTGT GCTGCCTCAGGCTTTACTTTTTCATCCTA TGGGATGCACTGGGTTCGGCAGGCTCCCG GAAAAGGACTCGAGTGGGTTGCAGTGATС T С T TAC GAT GGCT CAGACAAGTAT TAT GT GGACT CAGT CAAGGGGAGATT СACAATAA GCCGAGACAACTCCAAAAACCGGCTTTAT С T С CAGAT GAACAG CCT TAGAG С G GAAGA TACCGCGGTATACTACTGTGCCCGCGAGA G GTAT T С С G G СAGAGAC TAC T G G G GACAG GGCACACTGGTCACCGTGAGTTCTGCCGC AG С G С T С GATAAC GAAAAGAG CAAC G GAA С CAT TAT С CAC GT TAAG G G СAAG CAC С T G TGCCCCAGTCCCCTCTTCCCAGGACCATC TAAACCCTTCTGGGTTCTGGTAGTAGTTG GAGGGGTCCTTGCATGTTACTCCCTTTTG GTCACCGTCGCCTTCATTATTTTCTGGGT GAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATA G С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С С G С CCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCC
227
EIVMTQSPATLSVSPG ERATLSCRASQSVSSL LTWYQQKPGQAPRLLI FGASTRATGIPARFSG SGSGTGFTLTISSLQS EDFAVYYCQQYDTWPF TFGPGTKVDFKRGGGG SGGGGSGGGGSQVQLV ESGGGWQPGRSLRLS CAASGFTFSSYGMHWV RQAPGKGLEWVAVISY DGSDKYYVDSVKGRFT ISRDNSKNRLYLQMNS LRAEDTAVYYCARERY SGRDYWGQGTLVTVSS AAALDNEKSNGTIIHV KGKHLCPSPLFPGPSK P FWVLVWGGVLACYS LLVTVAFIIFWVRSKR SRLLHSDYMNMTPRRP GPTRKHYQPYAPPRDF AAYRSRVKFSRSADAP AYQQGQNQLYNELNLG RREEYDVLDKRRGRDP EMGGKPRRKNPQEGLY NELQKDKMAEAYSEIG MKGERRRGKGHDGLYQ GLSTATKDTYDALHMQ ALPPR
TTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCT ATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCT G CAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG GGC СA GAAC CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GAC AAGCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGG TGGСAAACСAAGACGAAAAAACСССCAGG AGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGAT AAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG GGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGC ACTGCTAC GAAG GATAC T TAT GAC G С T С T CCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG
(CAR4.5) ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT
ДНК LxH GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC
CHD CAR G С С С G GAGAT С GT CAT GACACAGAGT С СA
для клона GCTACCCTGAGCGTGTCCCCTGGAGAGAG 2 0C5.2 AGCCACCCTGTCCTGTAGGGCTAGTCAGA GTGTGTCCAGCCTCCTCACCTGGTATCAA CAGAAGCCTGGTCAAGCTCCCCGGCTGCT TATCTTCGGGGCCAGCACGCGAGCCACAG GCATCCCGGCCAGATTCTCTGGCTCTGGC AGTGGCACCGGGTTCACTCTCACGATCTC ATCCCTGCAGTCAGAGGATTTCGCTGTGT AT TAC T GT CAG СAGTAC GATACAT G G С С С TTCACCTTCGGCCCGGGCACAAAAGTAGA TTTCAAGCGCGGCGGCGGGGGTAGTGGGG GCGGGGGATCAGGAGGAGGGGGCTCCCAA GTACAGCTGGTTGAGAGCGGCGGCGGGGT GGTTCAGCCCGGGCGCAGCCTCAGGCTGA GT T G С G CAG CAT CAG GAT T СACAT T CAGT TCTTATGGAATGCATTGGGTCAGACAGGC TCCCGGGAAGGGCCTTGAATGGGTGGCAG T CAT TAG С TAC GAC G GAAG С GATAAGTAC TAT GT GGACT CAGT TAAAGGGAGAT T TAC TAT СAG С С G С GACAAT T С СAAAAACAGAT TGTATTTGCAGATGAACTCCCTCAGGGCG GAG GACAC T G С T GTATAT TAC T G С G CAC G AGAGAGATAC T С С G G С С GAGAC TAT T G G G GCCAAGGAACATTGGTAACTGTGAGCTCC GCCGCAGCTATTGAGGTCATGTACCCCCC ACCTTATCTC GATAAT GAGAAGAGTAAT G G GAC TATAAT T CAC GTAAAG G G СAAACAC CTGTGCCCTTCCCCGCTGTTTCCAGGTCC AAGTAAGCCGTTCTGGGTCCTGGTTGTGG TGGGAGGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTG TTGGTTACCGTGGCCTTTATCATTTTCTG GGTGAGATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCC ATAG С GAT TACAT GAATAT GAC T С CAC G С CGCCCTGGCCCCACAAGGAAACACTACCA GCCTTACGCACCACCTAGAGATTTCGCTG CCTATCGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGA T С T G CAGAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG G G ССAGAACCAACTGTATAACGAGСTСAACС TGGGACGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTG GACAAG С G СAGAG GAC G G GAC CCT GAGAT GGGTGGCAAACCAAGACGAAAAAACCCCC AGGAGGGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAG GATAAGATGGCTGAAGCCTATTCTGAAAT
229
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEIVMTQSPATL SVSPGERATLSCRASQ SVSSLLTWYQQKPGQA PRLLIFGASTRATGIP ARFSGSGSGTGFTLTI SSLQSEDFAVYYCQQY DTWPFTFGPGTKVDFK RGGGGSGGGGSGGGGS QVQLVESGGGWQPGR SLRLSCAASGFTFSSY GMHWVRQAP GKGL EWV AVISYDGSDKYYVDSV KGRFTISRDN SKNRLY LQMNSLRAEDTAVYYC ARERYSGRDYWGQGTL VTVS SAAAIEVMYP P P YLDNEKSNGTIIHVKG KHLCPSPLFPGPSKPF W VL VWG G VL AC Y S L L VTVAFIIFWVRS KRSR LLHSDYMNMTPRRPGP TRKHYQPYAPPRDFAA YRSRVKFSRSADAPAY QQGQNQLYNELNLGRR EEYDVLDKRRGRDPEM GGKPRRKNPQEGLYNE LQKDKMAEAYSEIGMK GERRRGKGHDGLYQGL S TAT К D T Y DAL HMQ AL PPR
AGG CAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAA AAGGGCACGACGGTTTGTACCAGGGACTC AG CAC T G С TAC GAAG GATAC T TAT GAC G С TCTCCACATGCAAGCCCTGCCACCTAGGT AA
(CAR4.5) ДНК LxH CHD CAR для клона 20C5.2
GAGAT С GT CAT GACACAGAGT С CAGCTAC CCTGAGCGTGTCCCCTGGAGAGAGAGCCA CCCT GT CCT GTAGGGCTAGT CAGAGT GT G TCCAGCCTCCTCACCTGGTATCAACAGAA GCCTGGTCAAGCTCCCCGGCTGCTTATCT TCGGGGCCAGCACGCGAGCCACAGGCATC CCGGCCAGATTCTCTGGCTCTGGCAGTGG CACCGGGTTCACTCTCACGATCTCATCCC TGCAGTCAGAGGATTTCGCTGTGTATTAC TGTCAGCAGTACGATACATGGCCCTTCAC CTTCGGCCCGGGCACAAAAGTAGATTTCA AGCGCGGCGGCGGGGGTAGTGGGGGCGGG GGATCAGGAGGAGGGGGCTCCCAAGTACA GCTGGTTGAGAGCGGCGGCGGGGTGGTTC AGCCCGGGCGCAGCCTCAGGCTGAGTTGC GCAGCATCAGGATTCACATTCAGTTCTTA TGGAATGCATTGGGTCAGACAGGCTCCCG GGAAGGGCCTTGAATGGGTGGCAGTCATT AGCTACGACGGAAGCGATAAGTACTATGT GGACTCAGTTAAAGGGAGATTTACTATCA G С С G С GACAAT T С СAAAAACAGAT T GTAT TTGCAGATGAACTCCCTCAGGGCGGAGGA CACTGCTGTATATTACTGCGCACGAGAGA GATACTCCGGCCGAGACTATTGGGGCCAA GGAACATTGGTAACTGTGAGCTCCGCCGC AGCTATTGAGGTCATGTACCCCCCACCTT AT CT CGATAAT GAGAAGAGTAAT GGGACT ATAATTCACGTAAAGGGCAAACACCTGTG CCCTTCCCCGCTGTTTCCAGGTCCAAGTA AGCCGTTCTGGGTCCTGGTTGTGGTGGGA GGGGTGCTGGCCTGCTATTCTCTGTTGGT TACCGTGGCCTTTATCATTTTCTGGGTGA GATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGC GAT TACAT GAATAT GACTCCACGCCGCCC TGGCCCCACAAGGAAACACTACCAGCCTT ACGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTAT CGGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGC AGATGCACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGA ACCAACTGTATAACGAGCTCAACCTGGGA CGCAGGGAAGAGTATGACGTTTTGGACAA GCGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTG G СAAAC СAAGAC GAAAAAAC С С С СAG GAG GGTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAA GATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCA TGAAAGGAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGG CACGACGGTTTGTACCAGGGACTCAGCAC TGCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCC ACATGCAAGCCCTGCCACCTAGG
231
EIVMTQSPATLSVSPG ERATLSCRASQSVSSL LTWYQQKPGQAPRLLI FGASTRATGIPARFSG SGSGTGFTLTISSLQS EDFAVYYCQQYDTWPF TFGPGTKVDFKRGGGG SGGGGSGGGGSQVQLV ESGGGWQPGRSLRLS CAASGFTFSSYGMHWV RQAPGKGLEWVAVISY DGSDKYYVDSVKGRFT ISRDNSKNRLYLQMNS LRAEDTAVYYCARERY SGRDYWGQGTLVTVSS AAAIEVMYPPPYLDNE KSNGTIIHVKGKHLCP SPLFPGPSKPFWVLW VGGVLACYSLLVTVAF 11FWVRS KRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
232
(CAR4.6) ДНК LxH CD8 CAR для клона 20C5.2
ATGGCACTCCCCGTAACTGCTCTGCTGCT GCCGTTGGCATTGCTCCTGCACGCCGCAC GCCCGGAAATAGTGATGACTCAGTCCCCG GCCACCCTCAGCGTGTCCCCCGGGGAGCG AGCGACCCTGTCATGCAGGGCTTCCCAGA GTGTCAGCTCCCTGCTCACTTGGTATCAG
233
MAL PVTAL LLP LAL L L HAARPEIVMTQSPATL SVSPGERATLSCRASQ SVSSLLTWYQQKPGQA PRLLIFGASTRATGIP ARFSGSGSGTGFTLTI
234
CAAAAGCCGGGGCAGGCTCCCCGCCTCCT CATCTTCGGGGCATCAACTAGGGCCACCG GCATTCCTGCAAGATTTTCCGGGTCTGGC AGCGGCACCGGCTTCACCCTTACCATTAG CTCTCTGCAGTCTGAGGACTTCGCCGTTT AC TAT T GT CAG СAGTAT GATAC T T G G С С С TTTACCTTCGGTCCCGGAACTAAGGTGGA CTTCAAGCGCGGGGGGGGTGGATCTGGAG GTGGTGGCTCCGGGGGCGGTGGAAGCCAG GTCCAGTTGGTTGAGAGCGGCGGCGGAGT GGTGCAGCCCGGGAGGTCCTTGCGGCTGA GCTGTGCAGCCTCCGGTTTTACTTTTTCT AG С TAT G GAAT G CAT T G G GTAAGACAG G С TCCCGGAAAAGGCCTCGAGTGGGTGGCGG T CATTAGCTAT GAT GGAT СT GATAAATAC TATGTGGACTCAGTTAAGGGGCGCTTCAC AAT CT CAAGAGACAATAGCAAAAATAGAC TGTACCTGCAGATGAATAGTCTGCGCGCC GAGGACACTGCCGTGTACTACTGCGCCCG С GAGAGATACAG С G GAC G G GAT TAC T G G G GCCAGGGTACCCTCGTAACGGTGTCCTCC GCTGCCGCCCTTAGCAACAGCATTATGTA CTTTTCTCATTTCGTGCCAGTCTTTCTCC CAGCAAAGCCCACCACTACCCCGGCCCCC AGGCCGCCTACTCCTGCCCCCACTATCGC GTCTCAGCCTCTCTCCTTGCGGCCCGAGG CCTGCCGGCCAGCCGCAGGGGGCGCCGTA CATACTCGGGGTTTGGATTTCGCTTGCGA CATATATATTTGGGCCCCCCTCGCCGGCA CATGTGGAGTGCTGCTCCTGAGTCTCGTT ATAACССTСTATTGСAACСATAGAAACAG ATCCAAAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCG AT TACAT GAATAT GAC T С CAC GCCGCCCT G G С С С СACAAG GAAACAC TAC CAG С С T TA CGCACCACCTAGAGATTTCGCTGCCTATC GGAGCAGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCA GAT G CAC CAG С GTAT CAG CAG GGC СAGAA С CAAC T GTATAAC GAG С T CAAC С T G G GAC G CAG G GAAGAGTAT GAC GT T T T G GACAAG CGCAGAGGACGGGACCCTGAGATGGGTGG СAAAC СAAGAC GAAAAAAC С С С СAG GAG G GTCTCTATAATGAGCTGCAGAAGGATAAG ATGGCTGAAGCCTATTCTGAAATAGGCAT GAAAG GAGAG С G GAGAAG G G GAAAAG GGC AC GAC GGTTTGTAC CAG G GAC T CAG CAC T GCTACGAAGGATACTTATGACGCTCTCCA CATGCAAGCCCTGCCACCTAGGTAA
SSLQSEDFAVYYCQQY DTWPFTFGPGTKVDFK RGGGGSGGGGSGGGGS QVQLVESGGGWQPGR SLRLSCAASGFTFSSY GMHWVRQAP GKGL EWV AVISYDGSDKYYVDSV KGRFTISRDN SKNRLY LQMNSLRAEDTAVYYC ARERYSGRDYWGQGTL VTVSSAAALSNSIMYF SHFVPVFLPAKPTTTP APRPPTPAPTIASQPL S L R P EAC R PAAG GAVH TRGLDFACDIYIWAPL AGTCGVLLLSLVITLY CNHRNRSKRSRLLHSD YMNMTPRRPGPTRKHY QPYAPPRDFAAYRSRV KFSRSADAPAYQQGQN QLYNELNLGRREEYDV LDKRRGRDPEMGGKPR RKNPQEGLYNELQKDK MAEAYSEIGMKGERRR GKGHDGLYQGLSTATK DTYDALHMQALPPR
(CAR4.6) GAAATAGT GAT GACT CAGT ССССGGСCAC
ДНК LxH CCTCAGCGTGTCCCCCGGGGAGCGAGCGA CD8 CAR CCCTGTCATGCAGGGCTTCCCAGAGTGTC для клона AGCTCCCTGCTCACTTGGTATCAGCAAAA 2 0C5.2 GCCGGGGCAGGCTCCCCGCCTCCTCATCT TCGGGGCATCAACTAGGGCCACCGGCATT CCTGCAAGATTTTCCGGGTCTGGCAGCGG CACCGGCTTCACCCTTACCATTAGCTCTC TGCAGTCTGAGGACTTCGCCGTTTACTAT T GT CAG СAGTAT GATAC TTGGCCCTTTAC CTTCGGTCCCGGAACTAAGGTGGACTTCA AGCGCGGGGGGGGTGGATCTGGAGGTGGT
235
EIVMTQSPATLSVSPG ERATLSCRASQSVSSL LTWYQQKPGQAPRLLI FGASTRATGIPARFSG SGSGTGFTLTISSLQS EDFAVYYCQQYDTWPF TFGPGTKVDFKRGGGG SGGGGSGGGGSQVQLV ESGGGWQPGRSLRLS CAASGFTFSSYGMHWV RQAPGKGLEWVAVISY DGSDKYYVDSVKGRFT
GGCTCCGGGGGCGGTGGAAGCCAGGTCCA GTTGGTTGAGAGCGGCGGCGGAGTGGTGC AGCCCGGGAGGTCCTTGCGGCTGAGCTGT GCAGCCTCCGGTTTTACTTTTTCTAGCTA TGGAATGCATTGGGTAAGACAGGCTCCCG GAAAAGGCCTCGAGTGGGTGGCGGTCATT AGСTATGAT GGAT CT GATAAATАСТАТ GT GGACTCAGTTAAGGGGCGCTTCACAATCT CAAGAGACAATAGCAAAAATAGACT GTAC CTGCAGATGAATAGTCTGCGCGCCGAGGA CACTGCCGTGTACTACTGCGCCCGCGAGA GATACAG С G GAC G G GAT TACTGGGGC CAG GGTACCCTCGTAACGGTGTCCTCCGCTGC CGCCCTTAGCAACAGCATTATGTACTTTT CTCATTTCGTGCCAGTCTTTCTCCCAGCA AAGCCCACCACTACCCCGGCCCCCAGGCC GCCTACTCCTGCCCCCACTATCGCGTCTC AGCCTCTCTCCTTGCGGCCCGAGGCCTGC CGGCCAGCCGCAGGGGGCGCCGTACATAC TCGGGGTTTGGATTTCGCTTGCGACATAT ATATTTGGGCCCCCCTCGCCGGCACATGT GGAGTGCTGCTCCTGAGTCTCGTTATAAC ССTСTATТGСААССATAGAAACAGATССА AAAGAAGCCGCCTGCTCCATAGCGATTAC ATGAATATGACTCCACGCCGCCCTGGCCC CACAAGGAAACACTACCAGCCTTACGCAC CACCTAGAGATTTCGCTGCCTATCGGAGC AGGGTGAAGTTTTCCAGATCTGCAGATGC ACCAGCGTATCAGCAGGGCCAGAACCAAC TGTATAACGAGCTCAACCTGGGACGCAGG GAAGAGTATGACGTTTTGGACAAGCGCAG AGGACGGGACCCTGAGATGGGTGGCAAAC CAAGACGAAAAAACCCCCAGGAGGGTCTC TATAAT GAGCT GCAGAAGGATAAGAT GGC TGAAGCCTATTCTGAAATAGGCATGAAAG GAGAGCGGAGAAGGGGAAAAGGGCACGAC GGTTTGTACCAGGGACTCAGCACTGCTAC GAAGGATACTTATGACGCTCTCCACATGC AAGCCCTGCCACCTAGG
ISRDNSKNRLYLQMNS LRAEDTAVYYCARERY SGRDYWGQGTLVTVSS AAALSNSIMYFSHFVP VFLPAKPTTTPAPRPP TPAPTIASQPLSLRPE ACRPAAGGAVHTRGLD FACDIYIWAPLAGTCG VLLLSLVITLYCNHRN RSKRSRLLHS DYMNMT PRRPGPTRKHYQPYAP PRDFAAYRSRVKFSRS ADAPAYQQGQNQLYNE LNLGRREEYDVLDKRR GRDPEMGGKPRRKNPQ EGLYNELQKDKMAEAY SEIGMKGERRRGKGHD GLYQGLSTATKDTYDA LHMQALPPR
[000217] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид согласно настоящему изобретению кодирует CAR, содержащий аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 5 85%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 10 150, 152, 154, 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 178, 180, 190, 192, 202, 204, 214, 216, 226 и 228. В некоторых вариантах реализации CAR содержит аминокислотную
последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ Ш N0: 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 178, 180, 190, 192, 202, 204, 214, 216, 226 и 228.
[000218] В некоторых вариантах реализации полинуклеотид согласно настоящему 5 изобретению содержит нуклеотидную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 50%, по меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 65%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере
10 приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 159, 161, 163, 165, 167, 177, 179, 189, 191, 201, 203, 213, 215, 225
15 и 227. В некоторых вариантах реализации полинуклеотид содержит нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ГО NO: 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 159, 161, 163, 165, 167, 177, 179, 189, 191, 201, 203, 213, 215, 225 и 227.
II. Векторы, клетки и фармацевтические композиции
20 [000219] В некоторых аспектах настоящего описания предложены векторы, содержащие полинуклеотид согласно настоящему изобретению. В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к вектору или набору векторов, содержащих полинуклеотид, кодирующий CAR или TCR, содержащие укороченный шарнирный домен ("THD"), описанный выше.
25 [000220] Любой вектор, известный в данной области техники, может подходить для настоящего изобретения. В некоторых вариантах реализации вектор представляет собой вирусный вектор. В некоторых вариантах реализации вектор представляет собой ретровирусный вектор, ДНК-вектор, вектор на основе вируса лейкоза мышей, SFG-вектор, плазмиду, РНК-вектор, аденовирусный вектор, бакуловирусный вектор, вектор
30 на основе вируса Эпштейна-Барр, паповавирусный вектор, вектор на основе вируса осповакцины, вектор на основе вируса простого герпеса, аденоассоциированный вирусный вектор (AAV), лентивирусный вектор или любую их комбинацию.
117
[000221]
В одном варианте реализации вектор, который может применяться в
контексте настоящего изобретения, представляет собой pGAR и имеет кодирующую последовательность:
CTGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCA 5 GCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCT TCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCC TTTAGGGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTAG GGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGA CGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACT
10 CAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCT ATTGGTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAAT ATTAACGCTTACAATTTGCCATTCGCCATTCAGGCTGCGCAACTGTTGGGAAGGG CGATCGGTGCGGGCCTCTTCGCTATTACGCCAGCTGGCGAAAGGGGGATGTGCTG CAAGGCGATTAAGTTGGGTAACGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGACGTTGTAAAAC
15 GACGGCCAGTGAATTGTAATACGACTCACTATAGGGCGACCCGGGGATGGCGCG CCAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTT ACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCAT TGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTG ACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTG
20 TATCATATGCCAAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCT GGCATTATGCCCAGTACATGACCTTATGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTA CGTATTAGTCATCGCTATTACCATGCTGATGCGGTTTTGGCAGTACATCAATGGG CGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCA ATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAA
25 CTCCGCCCCATTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATAT AAGCAGAGCTGGTTTAGTGAACCGGGGTCTCTCTGGTTAGACCAGATCTGAGCCT GGGAGCTCTCTGGCTAACTAGGGAACCCACTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCC TTGAGTGCTTCAAGTAGTGTGTGCCCGTCTGTTGTGTGACTCTGGTAACTAGAGA TCCCTCAGACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCAGTGGCGCCCGAACAG
30 GGACTTGAAAGCGAAAGGGAAACCAGAGGAGCTCTCTCGACGCAGGACTCGGCT TGCTGAAGCGCGCACGGCAAGAGGCGAGGGGCGGCGACTGGTGAGTACGCCAA AAATTTTGACTAGCGGAGGCTAGAAGGAGAGAGATGGGTGCGAGAGCGTCAGTA TTAAGCGGGGGAGAATTAGATCGCGATGGGAAAAAATTCGGTTAAGGCCAGGGG GAAAGAAAAAATATAAATTAAAACATATAGTATGGGCAAGCAGGGAGCTAGAA
35 CGATTCGCAGTTAATCCTGGCCTGTTAGAAACATCAGAAGGCTGTAGACAAATAC TGGGACAGCTACAACCATCCCTTCAGACAGGATCAGAAGAACTTAGATCATTAT ATAATACAGTAGCAACCCTCTATTGTGTGCATCAAAGGATAGAGATAAAAGACA CCAAGGAAGCTTTAGACAAGATAGAGGAAGAGCAAAACAAAAGTAAGACCACC GCACAGCAAGCCGCCGCTGATCTTCAGACCTGGAGGAGGAGATATGAGGGACAA
40 TTGGAGAAGTGAATTATATAAATATAAAGTAGTAAAAATTGAACCATTAGGAGT AGCACCCACCAAGGCAAAGAGAAGAGTGGTGCAGAGAGAAAAAAGAGCAGTGG GAATAGGAGCTTTGTTCCTTGGGTTCTTGGGAGCAGCAGGAAGCACTATGGGCGC AGCGTCAATGACGCTGACGGTACAGGCCAGACAATTATTGTCTGGTATAGTGCA GCAGCAGAACAATTTGCTGAGGGCTATTGAGGCGCAACAGCATCTGTTGCAACT
45 CACAGTCTGGGGCATCAAGCAGCTCCAGGCAAGAATCCTGGCTGTGGAAAGATA CCTAAAGGATCAACAGCTCCTGGGGATTTGGGGTTGCTCTGGAAAACTCATTTGC ACCACTGCTGTGCCTTGGAATGCTAGTTGGAGTAATAAATCTCTGGAACAGATTT
GGAATCACACGACCTGGATGGAGTGGGACAGAGAAATTAACAATTACACAAGCT TAATACACTCCTTAATTGAAGAATCGCAAAACCAGCAAGAAAAGAATGAACAAG AATTATTGGAATTAGATAAATGGGCAAGTTTGTGGAATTGGTTTAACATAACAAA TTGGCTGTGGTATATAAAATTATTCATAATGATAGTAGGAGGCTTGGTAGGTTTA 5 AGAAT AGTTTTTGCTGTACTTTCTATAGTGAATAGAGTTAGGCAGGGATATTC AC CATTATCGTTTCAGACCCACCTCCCAACCCCGAGGGGACCCGACAGGCCCGAAG GAATAGAAGAAGAAGGTGGAGAGAGAGACAGAGACAGATCCATTCGATTAGTG AACGGATCTCGACGGTATCGGTTAACTTTTAAAAGAAAAGGGGGGATTGGGGGG TACAGTGCAGGGGAAAGAATAGTAGACATAATAGCAACAGACATACAAACTAA
10 AGAATTACAAAAACAAATTACAAAATTCAAAATTTTATCGCGATCGCGGAATGA AAGACCCCACCTGTAGGTTTGGCAAGCTAGCTTAAGTAACGCCATTTTGCAAGGC ATGGAAAATACATAACTGAGAATAGAGAAGTTCAGATCAAGGTTAGGAACAGAG AGACAGC AGAAT ATGGGCCAAACAGGATATCTGTGGTAAGCAGTTCCTGCCCCG GCTCAGGGCCAAGAACAGATGGTCCCCAGATGCGGTCCCGCCCTCAGCAGTTTCT
15 AGAGAACCATCAGATGTTTCCAGGGTGCCCCAAGGACCTGAAAATGACCCTGTG CCTTATTTGAACTAACCAATCAGTTCGCTTCTCGCTTCTGTTCGCGCGCTTCTGCT CCCCGAGCTCAATAAAAGAGCCCACAACCCCTCACTCGGCGCGCCAGTCCTTCGA AGTAGATCTTTGTCGATCCTACCATCCACTCGACACACCCGCCAGCGGCCGCTGC CAAGCTTCCGAGCTCTCGAATTAATTCACGGTACCCACCATGGCCTAGGGAGACT
20 AGTCGAATCGATATCAACCTCTGGATTACAAAATTTGTGAAAGATTGACTGGTAT TCTTAACTATGTTGCTCCTTTTACGCTATGTGGATACGCTGCTTTAATGCCTTTGT ATCATGCTATTGCTTCCCGTATGGCTTTCATTTTCTCCTCCTTGTATAAATCCTGGT TGCTGTCTCTTTATGAGGAGTTGTGGCCCGTTGTCAGGCAACGTGGCGTGGTGTG CACTGTGTTTGCTGACGCAACCCCCACTGGTTGGGGCATTGCCACCACCTGTCAG
25 CTCCTTTCCGGGACTTTCGCTTTCCCCCTCCCTATTGCCACGGCGGAACTCATCGC CGCCTGCCTTGCCCGCTGCTGGACAGGGGCTCGGCTGTTGGGCACTGACAATTCC GTGGTGTTGTCGGGGAAGCTGACGTCCTTTTCATGGCTGCTCGCCTGTGTTGCCA CCTGGATTCTGCGCGGGACGTCCTTCTGCTACGTCCCTTCGGCCCTCAATCCAGC GGACCTTCCTTCCCGCGGCCTGCTGCCGGCTCTGCGGCCTCTTCCGCGTCTTCGCC
30 TTCGCCCTCAGACGAGTCGGATCTCCCTTTGGGCCGCCTCCCCGCCTGGTTAATTA AAGTACCTTTAAGACCAATGACTTACAAGGCAGCTGTAGATCTTAGCCACTTTTT AAAAGAAAAGGGGGGACTGGAAGGGCGAATTCACTCCCAACGAAGACAAGATC TGCTTTTTGCTTGTACTGGGTCTCTCTGGTTAGACCAGATCTGAGCCTGGGAGCTC TCTGGCTAACTAGGGAACCCACTGCTTAAGCCTCAATAAAGCTTGCCTTGAGTGC
35 TTCAAGTAGTGTGTGCCCGTCTGTTGTGTGACTCTGGTAACTAGAGATCCCTCAG ACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCAGGCATGCCAGACATGATAAGATA CATTGATGAGTTTGGACAAACCACAACTAGAATGCAGTGAAAAAAATGCTTTATT TGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAACCATTATAAGCTGCAATAAACA AGTTAACAACAACAATTGCATTCATTTTATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGG
40 GAGGTTTTTTGGCGCGCCATCGTCGAGGTTCCCTTTAGTGAGGGTTAATTGCGAG CTTGGCGTAATCATGGTCATAGCTGTTTCCTGTGTGAAATTGTTATCCGCTCACAA TTCCACACAACATACGAGCCGGAAGCATAAAGTGTAAAGCCTGGGGTGCCTAAT GAGTGAGCTAACTCACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGG AAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGG
45 TTTGCGTATTGGGCGCTCTTCCGCTTCCTCGCTCACTGACTCGCTGCGCTCGGTCG TTCGGCTGCGGCGAGCGGTATCAGCTCACTCAAAGGCGGTAATACGGTTATCCAC AGAATCAGGGGATAACGCAGGAAAGAACATGTGAGCAAAAGGCCAGCAAAAGG CCAGGAACCGTAAAAAGGCCGCGTTGCTGGCGTTTTTCCATAGGCTCCGCCCCCC TGACGAGCATCACAAAAATCGACGCTCAAGTCAGAGGTGGCGAAACCCGACAGG
АСТАТ AAAGATACCAGGCGTTTCCCCCTGGAAGCTCCCTCGTGCGCTCTCCTGTT CCGACCCTGCCGCTTACCGGATACCTGTCCGCCTTTCTCCCTTCGGGAAGCGTGG CGCTTTCTCATAGCTCACGCTGTAGGTATCTCAGTTCGGTGTAGGTCGTTCGCTCC AAGCTGGGCTGTGTGCACGAACCCCCCGTTCAGCCCGACCGCTGCGCCTTATCCG 5 GTAACTATCGTCTTGAGTCCAACCCGGT AAGAC ACGACTTATCGCCACTGGCAGC AGCCACTGGTAACAGGATTAGCAGAGCGAGGTATGTAGGCGGTGCTACAGAGTT CTTGAAGTGGTGGCCTAACTACGGCTACACTAGAAGAACAGTATTTGGTATCTGC GCTCTGCTGAAGCCAGTTACCTTCGGAAAAAGAGTTGGTAGCTCTTGATCCGGCA AACAAACCACCGCTGGTAGCGGTGGTTTTTTTGTTTGCAAGCAGCAGATTACGCG
10 CAGAAAAAAAGGATCTCAAGAAGATCCTTTGATCTTTTCTACGGGGTCTGACGCT CAGTGGAACGAAAACTCACGTTAAGGGATTTTGGTCATGAGATTATCAAAAAGG ATCTTCACCTAGATCCTTTTAAATTAAAAATGAAGTTTTAAATCAATCTAAAGTA TATATGAGTAAACTTGGTCTGACAGTTACCAATGCTTAATCAGTGAGGCACCTAT CTCAGCGATCTGTCTATTTCGTTCATCCATAGTTGCCTGACTCCCCGTCGTGTAGA
15 TAACTACGATACGGGAGGGCTTACCATCTGGCCCCAGTGCTGCAATGATACCGCG AGACCCACGCTCACCGGCTCCAGATTTATCAGCAATAAACCAGCCAGCCGGAAG GGCCGAGCGCAGAAGTGGTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCATCCAGTCTATTAAT TGTTGCCGGGAAGCTAGAGTAAGTAGTTCGCCAGTTAATAGTTTGCGCAACGTTG TTGCCATTGCTACAGGCATCGTGGTGTCACGCTCGTCGTTTGGTATGGCTTCATTC
20 AGCTCCGGTTCCCAACGATCAAGGCGAGTTACATGATCCCCCATGTTGTGCAAAA AAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCCGATCGTTGTCAGAAGTAAGTTGGCCGCAGT GTTATCACTCATGGTTATGGCAGCACTGCATAATTCTCTTACTGTCATGCCATCCG TAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAATAGTG TATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCA
25 CATAGCAGAACTTTAAAAGTGCTCATCATTGGAAAACGTTCTTCGGGGCGAAAA CTCTCAAGGATCTTACCGCTGTTGAGATCCAGTTCGATGTAACCCACTCGTGCAC CCAACTGATCTTCAGCATCTTTTACTTTCACCAGCGTTTCTGGGTGAGC AAAAAC AGGAAGGCAAAATGCCGCAAAAAAGGGAATAAGGGCGACACGGAAATGTTGAA TACTCATACTCTTCCTTTTTCAATATTATTGAAGCATTTATCAGGGTTATTGTCTC
30 ATGAGCGGATACATATTTGAATGTATTTAGAAAAAT AAAC AAAT AGGGGTTCCG CGCACATTTCCCCGAAAAGTGCCAC. [000222] Карта вектора pGAR представлена ниже:
Подходящие дополнительные типовые векторы включают, например, pBABE-puro, pBABE-neo largeTcDNA, pBABE-hygro-hTERT, pMKO.l GFP, MSCV-IRES-GFP, pMSCV PIG (пустая плазмида Puro IRES GFP), pMSCV-loxp-dsRed-loxp-eGFP-Puro-5 WPRE, MSCV IRES Luciferase, pMIG, MDH1-PGK-GFP 2.0, TtRMPVIR, pMSCV-IRES-mCherry FP, pRetroX GFP T2A Cre, pRXTN, pLncEXP и pLXIN-Luc. [000223] В других аспектах настоящего описания предложены клетки, содержащие полинуклеотид или вектор согласно настоящему изобретению. В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение относится к клеткам, например, клеткам in vitro,
10 содержащим полинуклеотид, кодирующий CAR или TCR, содержащие TCD, описанный в настоящем описании. В других вариантах реализации настоящее изобретение относится к клеткам, например, клеткам in vitro, содержащим полипептид, кодируемый CAR или TCR, содержащими TCD согласно настоящему описанию. [000224] В качестве клетки-хозяина для полинуклеотидов, векторов или
15 полипептидов согласно настоящему изобретению может быть применена любая клетка. В некоторых вариантах реализации клетка может представлять собой прокариотическую клетку, клетку гриба, дрожжевую клетку или высшие эукариотические клетки, такие как клетка млекопитающего. Подходящие прокариотические клетки включают, но не ограничиваются перечисленными,
20 эубактерии, такие как грамотрицательные или грамположительные организмы, например, Enterobactehaceae, такие как Escherichia, например, Е. coli; Enterobacter;
Erwinia; Klebsiella; Proteus; Salmonella, например, Salmonella typhimurium; Serratia, например, Serratia marcescans, и Shigella; Bacilli, такие как В. subtilis и В. licheniformis; Pseudomonas, такие как P. aeruginosa; uStreptomyces. В некоторых вариантах реализации клетка представляет собой клетку человека. В некоторых вариантах реализации клетка 5 представляет собой иммунную клетку. В некоторых вариантах реализации иммунная клетка выбрана из группы, состоящей из Т-клетки, В-клетки, лимфоцита, инфильтрующего опухоль (TIL), экспрессирующей TCR клетки, натурального киллера (NK), дендритной клетки, гранулоцита, врожденной лимфоидной клетки, мегакариоцита, моноцита, макрофага, тромбоцита, тимоцита и миелоидной клетки. В
10 одном из вариантов реализации иммунная клетка представляет собой Т-клетку. В другом варианте реализации иммунная клетка представляет собой NK-клетку. В некоторых вариантах реализации Т-клетка представляет собой инфильтрующий опухоль лимфоцит (TIL), аутологичную Т-клетку, конструированную аутологичную Т-клетку (еАСТ(tm)), аллогенную Т-клетку, гетерологичную Т-клетку или любую их
15 комбинацию.
[000225] Клетка согласно настоящему изобретению может быть получена из любого источника, известного в данной области техники. Например, Т-клетки могут быть получены путем дифференцировки in vitro из популяции гемопоэтических стволовых клеток, или Т-клетки могут быть получены от субъекта. Т-клетки могут быть
20 получены, например, из мононуклеарных клеток периферической крови, костного мозга, ткани лимфатических узлов, пуповинной крови, ткани тимуса, ткани из очага инфекции, асцита, плеврального экссудата, ткани селезенки и опухолей. Помимо этого, Т-клетки могут быть получены из одной или более линий Т-клеток, доступных в данной области техники. Т-клетки также могут быть получены из единицы крови, собранной у субъекта,
25 с применением любого количества методик, известных специалисту в данной области техники, таких как разделение с помощью фиколла (FICOLL(tm)) и/или аферез. В некоторых вариантах реализации клетки, собранные путем афереза, промывают для удаления фракции плазмы и помещают в подходящий буфер или среду для последующей обработки. В некоторых вариантах реализации клетки промывают ФСБ.
30 Следует иметь в виду, что может быть использована стадия промывки, как то с
использованием полуавтоматической проточной центрифуги, например, Cobe(tm) 2991
cell processor, Baxter CytoMate(tm), или тому подобного. В некоторых вариантах
реализации промытые клетки ресуспендируют в одном или более биосовместимых
122
буферах или другом солевом растворе с буфером или без него. В некоторых вариантах реализации нежелательные компоненты образца, полученного путем афереза, удаляют. Дополнительные способы выделения Т-клеток для Т-клеточной терапии раскрыты в патентной публикации США № 2013/0287748, полное содержание которой включено в 5 настоящее описание посредством ссылки.
[000226] В некоторых вариантах реализации Т-клетки выделяют из МКПК путем лизиса красных клеток крови и обеднения моноцитов, например, с помощью центрифугирования в градиенте перколла (PERCOLL(tm)). В некоторых вариантах реализации конкретную субпопуляцию Т-клеток, такую как Т-клетки CD4+, CD8+,
10 CD28+, CD45RA+ и CD45RO+, дополнительно выделяют с применением методик положительного или отрицательного отбора, известных в данной области техники. Например, обогащение популяции Т-клеток путем отрицательного отбора может быть выполнено с помощью комбинации антител, нацеленных на поверхностные маркеры, уникальные для отбираемых с помощью отрицательного отбора клеток. В некоторых
15 вариантах реализации может быть использована сортировка и/или отбор клеток с помощью отрицательной магнитной иммунной адгезии или проточной цитометрии с применением коктейля моноклональных антител, нацеленных на маркеры клеточной поверхности, присутствующие на отбираемых с помощью отрицательного отбора клетках. Например, для обогащения клетками CD4+ с помощью отрицательного отбора
20 коктейль моноклональных антител как правило содержит антитела против CD8, CD1 lb, CD 14, CD 16, CD20 и HLA-DR. В некоторых вариантах реализации проточную цитометрию и сортировку клеток используют для выделения популяций целевых клеток для применения согласно настоящему изобретению.
[000227] В некоторых вариантах реализации МКПК используют непосредственно
25 для генетической модификации иммунных клеток (такой как CAR или TCR) с
применением способов согласно настоящему описанию. В некоторых вариантах
реализации после выделения МКПК дополнительно выделяют Т-лимфоциты, и как
цитотоксические Т-лимфоциты, так и Т-лимфоциты-хелперы сортируют с получением
субпопуляций интактных Т-клеток, Т-клеток памяти и эффекторных Т-клеток либо до,
30 либо после генетической модификации и/или экспансии.
[000228] В некоторых вариантах реализации клетки CD8+ дополнительно
сортируют с получением интактных клеток, центральных клеток памяти и эффекторных
клеток путем выявления антигенов клеточной поверхности, которые связаны с каждым
123
из этих типов клеток CD8+. В некоторых вариантах реализации экспрессия фенотипических маркеров центральных Т-клеток памяти включает CCR7, CD3, CD28, CD45RO, CD62L и CD 127, и указанные клетки являются отрицательными в отношении гранзима В. В некоторых вариантах реализации центральные Т-клетки памяти 5 представляют собой Т-клетки CD8+, CD45RO+ и CD62L+. В некоторых вариантах реализации эффекторные Т-клетки являются отрицательными в отношении CCR7, CD28, CD62L и CD 127 и положительными в отношении гранзима В и перфорина. В некоторых вариантах реализации Т-клетки CD4+ дополнительно сортируют с получением их субпопуляций. Например, Т-клетки-хелперы CD4+ могут быть 10 рассортированы с получением интактных клеток, центральных клеток памяти и эффекторных клеток путем выявления популяций клеток, содержащих антигены клеточной поверхности.
[000229] В некоторых вариантах реализации иммунные клетки, например, Т-клетки, после выделения подвергают генетической модификации с применением
15 известных способов, или осуществляют активацию и экспансию указанных иммунных клеток (или дифференцировку в случае клеток-предшественников) in vitro, а затем подвергают их генетической модификации. В другом варианте реализации иммунные клетки, например, Т-клетки, подвергают генетической модификации химерными рецепторами антигенов согласно настоящему описанию (например, трансдукции с
20 применением вирусного вектора, содержащего одну или более нуклеотидных последовательностей, кодирующих CAR) и затем активации и/или экспансии in vitro. Способы осуществления активации и экспансии Т-клеток известны в данной области техники и описаны, например, в патентах США №№ 6905874; 6867041 и 6797514 и публикации РСТ № WO 2012/079000, полное содержание которых включено в
25 настоящее описание посредством ссылки. В целом, такие способы включают приведение МКПК или выделенных Т-клеток в контакт со стимулирующим агентом и костимулирующим агентом, такими как антитела против CD3 и против CD28, как правило присоединенные к частице или другой поверхности, в культуральной среде с подходящими цитокинами, такими как ИЛ-2. Антитела против CD3 и против CD28,
30 присоединенные к одной и той же частице, выступают в качестве "суррогатной"
антигенпрезентирующей клетки (АПК). Одним из примеров является система
Dynabeads(r), система активатора/стимулятора CD3/CD28 для физиологической
активации Т-клеток человека. В других вариантах реализации Т-клетки активируют и
124
стимулируют их пролиферацию с помощью питающих клеток и подходящих антител и цитокинов с применением таких способов, как способы, описанные в патентах США №№ 6040177 и 5827642 и публикации РСТ № WO 2012/129514, полное содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки. 5 [000230] В некоторых вариантах реализации Т-клетки получают от субъекта-донора. В некоторых вариантах реализации субъект-донор представляет собой пациента - человека, страдающего от рака или опухоли. В других вариантах реализации субъект-донор представляет собой пациента - человека, не страдающего от рака или опухоли. [000231] Другие аспекты настоящего изобретения относятся к композициям,
10 содержащим полинуклеотид согласно настоящему описанию, вектор согласно настоящему описанию, полипептид согласно настоящему описанию или клетку in vitro согласно настоящему описанию. В некоторых вариантах реализации композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, солюбилизатор, эмульгатор, консервант и/или адъювант. В некоторых вариантах реализации
15 композиция содержит вспомогательное вещество. В одном из вариантов реализации композиция содержит полинуклеотид, кодирующий CAR или TCR, содержащие укороченный шарнирный домен ("THD") согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации композиция содержит CAR или TCR, содержащие TCD, кодируемый полинуклеотидом согласно настоящему изобретению. В другом варианте
20 реализации композиция содержит Т-клетку, содержащую CAR или TCR, содержащие TCD согласно настоящему описанию.
[000232] В других вариантах реализации композиция выбрана для парентеральной доставки, для ингаляции или для доставки через пищеварительный тракт, как то перорально. Получение таких фармацевтически приемлемых композиций находится в
25 пределах возможностей специалиста в данной области техники. В некоторых вариантах реализации используют буферы для поддержания композиции при физиологическом рН или при несколько более низком рН, как правило в диапазоне рН от приблизительно 5 до приблизительно 8. В некоторых вариантах реализации, в случае если предусмотрено парентеральное введение, композиция находится в форме апирогенного, приемлемого
30 для парентерального введения водного раствора, содержащего композицию согласно
настоящему описанию, совместно с дополнительными терапевтическими агентами или
без них, в фармацевтически приемлемом носителе. В некоторых вариантах реализации
носитель для парентеральной инъекции представляет собой стерильную
125
дистиллированную воду, в которой композицию согласно настоящему описанию, совместно с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим агентом или без него, готовят в виде стерильного изотонического раствора, содержащего подходящие консерванты. В некоторых вариантах реализации препарат содержит состав желаемой 5 молекулы с полимерными соединениями (такими как полимолочная кислота или полигликолевая кислота), частицами или липосомами, обеспечивающими контролируемое или замедленное высвобождение продукта, который затем доставляют посредством инъекции веществ замедленного всасывания. В некоторых вариантах реализации для введения желаемой молекулы используют имплантируемые устройства 10 для доставки лекарственных средств.
///. Способы согласно настоящему изобретению
[000233] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу получения клетки, экспрессирующей CAR или TCR, включающему трансдукцию клетки полинуклеотидом, раскрытым в настоящем описании, в подходящих условиях. В
15 некоторых вариантах реализации способ включает трансдукцию клетки полинуклеотидом, кодирующим CAR или TCR, раскрытые в настоящем описании. В некоторых вариантах реализации способ включает трансдукцию клетки с применением вектора, содержащего полинуклеотид, кодирующий CAR или TCR. [000234] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу индукции
20 иммунитета к опухоли, включающему введение субъекту эффективного количества клеток, содержащих полинуклеотид согласно настоящему описанию, вектор согласно настоящему описанию или CAR или TCR согласно настоящему описанию. В одном варианте реализации способ включает введение субъекту эффективного количества клеток, содержащих полинуклеотид, кодирующий CAR или TCR, раскрытые в
25 настоящем описании. В другом варианте реализации способ включает введение субъекту эффективного количества клеток, содержащих вектор, содержащий полинуклеотид, кодирующий CAR или TCR, раскрытые в настоящем описании. В другом варианте реализации способ включает введение субъекту эффективного количества клеток, содержащих CAR или TCR, кодируемые полинуклеотидом,
30 раскрытым в настоящем описании.
[000235] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу индукции иммунного ответа у субъекта, включающему введение эффективного количества
126
конструированных иммунных клеток согласно настоящей заявке. В некоторых вариантах реализации иммунный ответ представляет собой опосредованный Т-клетками иммунный ответ. В некоторых вариантах реализации опосредованный Т-клетками иммунный ответ направлен на одну или более клеток-мишеней. В некоторых вариантах 5 реализации конструированная иммунная клетка содержит CAR или TCR содержащие THD согласно настоящему описанию. В некоторых вариантах реализации клетка-мишень представляет собой опухолевую клетку.
[000236] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения или предотвращения злокачественного новообразования, включающему введение
10 нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества по меньшей мере одной иммунной клетки, где указанная иммунная клетка содержит по меньшей мере один CAR или TCR, и где указанные CAR или TCR содержат THD согласно настоящему описанию. [000237] Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения рака у нуждающегося в этом субъекта, включающему введение субъекту полинуклеотида,
15 вектора, CAR или TCR, клетки или композиции, раскрытых в настоящем описании. В одном варианте реализации способ включает введение полинуклеотида, кодирующего CAR или TCR. В другом варианте реализации способ включает введение вектора, содержащего полинуклеотид, кодирующий CAR или TCR. В другом варианте реализации способ включает введение CAR или TCR, кодируемых полинуклеотидом,
20 раскрытым в настоящем описании. В другом варианте реализации способ включает введение клетки, содержащей полинуклеотид, или вектора, содержащего полинуклеотид, кодирующий CAR или TCR.
[000238] В некоторых вариантах реализации способы лечения рака у нуждающегося в этом субъекта включают Т-клеточную терапию. В одном варианте
25 реализации Т-клеточная терапия согласно настоящему изобретению представляет собой терапию с применением аутологичных конструированных клеток (еАСТ(tm)). В соответствии с этим вариантом реализации способ может включать получение клеток крови от пациента. Выделенные клетки крови (например, Т-клетки) затем могут быть подвергнуты конструированию таким образом, чтобы обеспечить экспрессию CAR или
30 TCR согласно настоящему изобретению. В конкретном варианте реализации Т-клетки,
экспрессирующие CAR, или Т-клетки, экспрессирующие TCR, вводят пациенту. В
некоторых вариантах реализации Т-клетки, экспрессирующие CAR, или Т-клетки,
экспрессирующие TCR, применяют для лечения опухоли или рака у пациента. В одном
127
варианте реализации применение Т-клеток, экспрессирующих CAR, или Т-клеток, экспрессирующих TCR, обеспечивает уменьшение размера опухоли или злокачественного новообразования.
[000239] В некоторых вариантах реализации донорские Т-клетки для применения 5 для Т-клеточной терапии получают от пациента (например, для терапии с применением аутологичных Т-клеток). В других вариантах реализации донорские Т-клетки для применения для Т-клеточной терапии получают от субъекта, который не является пациентом.
[000240] Т-клетки могут быть введены в терапевтически эффективном количестве.
10 Например, терапевтически эффективное количество Т-клеток может составлять по меньшей мере приблизительно 104 клеток, по меньшей мере приблизительно 105 клеток, по меньшей мере приблизительно 106 клеток, по меньшей мере приблизительно 107 клеток, по меньшей мере приблизительно 108 клеток, по меньшей мере приблизительно 109 или по меньшей мере приблизительно 1010. В другом варианте реализации
15 терапевтически эффективное количество Т-клеток составляет приблизительно 104 клеток, приблизительно 105 клеток, приблизительно 106 клеток, приблизительно 107 клеток или приблизительно 108 клеток. В одном конкретном варианте реализации терапевтически эффективное количество Т-клеток, экспрессирующих CAR, или Т-клеток, экспрессирующих TCR, составляет приблизительно 2 X 106 клеток/кг,
20 приблизительно 3 X 106 клеток/кг, приблизительно 4 X 106 клеток/кг, приблизительно 5 X 106 клеток/кг, приблизительно 6 X 106 клеток/кг, приблизительно 7 X 106 клеток/кг, приблизительно 8 X 106 клеток/кг, приблизительно 9 X 106 клеток/кг, приблизительно 1 X 107 клеток/кг, приблизительно 2 X 107 клеток/кг, приблизительно 3 X 107 клеток/кг, приблизительно 4 X 107 клеток/кг, приблизительно 5 X 107 клеток/кг, приблизительно 6
25 X 107 клеток/кг, приблизительно 7 X 107 клеток/кг, приблизительно 8 X 107 клеток/кг или приблизительно 9 X 107 клеток/кг.
IV. Лечение рака
[000241] Способы согласно настоящему изобретению могут применяться для лечения рака у субъекта, уменьшения размера опухоли, уничтожения опухолевых 30 клеток, предотвращения пролиферации опухолевых клеток, предотвращения роста опухоли, устранения опухоли у пациента, предотвращения рецидива опухоли, предотвращения метастазирования опухоли, обеспечения ремиссии у пациента или
любой их комбинации. В некоторых вариантах реализации указанные способы вызывают полный ответ. В других вариантах реализации указанные способы вызывают частичный ответ.
[000242] Раковые заболевания, которые могут поддаваться лечению, включают 5 неваскуляризированные, еще по существу не васкуляризированные или васкуляризированные опухоли. Рак также может включать солидные или несолидные опухоли. В некоторых вариантах реализации рак представляет собой рак кроветворной системы. В некоторых вариантах реализации рак представляет собой рак, происходящий из лейкоцитов. В других вариантах реализации рак представляет собой рак
10 плазматических клеток. В некоторых вариантах реализации рак представляет собой лейкоз, лимфому или миелому. В некоторых вариантах реализации рак представляет собой острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) (включая не Т-клеточный ОЛЛ), острый лимфоидный лейкоз (ОЛЛ) и гемофагоцитарный лимфогистиоцитоз (ГЛГ), В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, В-клеточный острый лимфоидный лейкоз
15 ("BALL"), бластическое плазмоцитоидное дендритное клеточное новообразование, лимфому Беркитта, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ), хронический миелогенный лейкоз (ХМЛ), хронический миелоидный лейкоз (ХМЛ), хроническую или острую гранулематозную болезнь, хронический или острый лейкоз, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, диффузную крупноклеточную В-клеточную
20 лимфому (ДКВЛ), фолликулярную лимфому, фолликулярную лимфому (ФЛ), лейкоз ворсистых клеток, гемофагоцитарный синдром (синдром активации макрофагов (САМ), болезнь Ходжкина, крупноклеточную гранулему, дефицит адгезии лейкоцитов, злокачественные лимфопролиферативные состояния, лимфому MALT-типа, мантийноклеточную лимфому, лимфому маргинальной зоны, моноклональную
25 гаммапатию неустановленной этиологии (МГНЭ), множественную миелому, миелодисплазию и миелодиспластический синдром (МДС), миелоидные заболевания, включая, но не ограничиваясь ими, острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), неходжкинскую лимфому (НХЛ), пролиферативные заболевания плазматических клеток (например, бессимптомную миелому (тлеющую множественную миелому или индолентную
30 миелому), плазмобластную лимфому, плазмоцитоидное дендритное клеточное
новообразование, плазмоцитомы (например, дискразию плазматических клеток;
солитарную миелому; солитарную плазмоцитому; экстрамедуллярную плазмоцитому и
множественную плазмоцитому), POEMS-синдром (синдром Кроу-Фукаса; болезнь
129
Такацуки; РЕР-синдром), первичную медиастинальную крупноклеточную В-клеточную лимфому (ПМБКЛ), мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, лимфому маргинальной зоны селезенки (ЛМЗС), системный амилоидоз легкой цепи, Т-клеточный острый лимфоидный лейкоз ("TALL"), Т-клеточную лимфому, 5 трансформированную фолликулярную лимфому, макроглобулинемию Вальденстрема или их комбинацию.
[000243] В одном варианте реализации рак представляет собой миелому. В одном конкретном варианте реализации рак представляет собой множественную миелому. В другом варианте реализации рак представляет собой лейкоз. В одном варианте
10 реализации рак представляет собой острый миелоидный лейкоз.
[000244] В некоторых вариантах реализации способы дополнительно включают введение химиотерапевтического агента. В некоторых вариантах реализации выбранный химиотерапевтический агент представляет собой антилимфоцитарный (прекондиционирующий) химиотерапевтический агент. Предпочтительные схемы
15 лечения с целью прекондиционирования, как и соответствующие предпочтительные биомаркеры, описаны в предварительных заявках на патент США 62/262143 и 62/167750, полное содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки. В них описаны, например, способы кондиционирования пациента, нуждающегося в Т-клеточной терапии, включающие введение пациенту
20 предпочтительных установленных доз циклофосфамида (от 200 мг/м2/сутки до 2000 мг/м2/сутки) и установленных доз флударабина (от 20 мг/м2/сутки до 900 мг/м2/сутки). Одна такая схема введения включает лечение пациента, включающее ежедневное введение пациенту приблизительно 500 мг/м2/сутки циклофосфамида и приблизительно 60 мг/м2/сутки флударабина в течение трех дней с последующим введением пациенту
25 терапевтически эффективного количества конструированных Т-клеток.
[000245] В других вариантах реализации каждое из антигенсвязывающих молекулы, трансдуцированных (или иным образом конструированных) клеток (такие как CAR или TCR) и химиотерапевтического агента вводят в количестве, эффективном для лечения заболевания или состояния у субъекта.
30 [000246] В некоторых вариантах реализации композиции, содержащие
экспрессирующие CAR и/или TCR иммунные эффекторные клетки, раскрытые в
настоящем описании, могут быть введены совместно с любым количеством
химиотерапевтических агентов. Примеры химиотерапевтических агентов включают
130
алкилирующие агенты, такие как тиотепа и циклофосфамид (ЦИТОКСАН (CYTOXAN(tm))); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтилентиофосфорамид, 5 триэтилентиофосфорамид и триметилолмеламиновая смола; производные азотистого иприта, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, мехлорэтамина оксида гидрохлорид, мелфалан, новэмбихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урацил мустард; производные нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин,
10 нимустин, ранимустин; антибиотики, такие как аклациномицины, актиномицин, антрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, калихеамицин, карабицин, карминомицин, карцинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-Ь-норлейцин, доксорубицин, эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, микофеноловая кислота, ногаламицин,
15 оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, циностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-ФУ); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги
20 пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин, 5-ФУ; андрогены, такие как калустерон, дромостанолона пропионат, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; средства, угнетающие функции надпочечников, такие как аминоглутетимид, митотан, трилостан; средства для восполнения дефицита фолиевой кислоты, такие как фолиновая
25 кислота; ацеглатон; альдофосфамида гликозид; аминолевулиновую кислоту; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатрексат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; эльформитин; эллиптина ацетат; этоглюцид; галлия нитрат; гидроксимочевину; лентинан; лонидамин; митогуазон; митоксантрон; мопидамол; нитракрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; подофиллиновую кислоту; 2-этилгидразид; прокарбазин; PSK(r); разоксан;
30 сизофиран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2"-
трихлортриэтиламин; уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол;
митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-С"); циклофосфамид; тиотепу;
таксоиды, например, паклитаксел (Таксол (TAXOL(tm)), Bristol-Myers Squibb) и
131
доцетаксел (Таксотер (TAXOTERE ), Rhone-Poulenc Rorer); хлорамбуцил; гемцитабин; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; соединения платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; платину; этопозид (VP-16); ифосфамид; митомицин С; митоксантрон; винкристин; винорелбин; навельбин; новантрон; тенипозид; 5 дауномицин; аминоптерин; кселоду; ибандронат; СРТ-11; ингибитор топоизомеразы RFS2000; дифторметилорнитин (ДМФО); производные ретиноевой кислоты, такие как Таргретин (Targretin(tm)) (бексаротен), Панретин (Panretin(tm)) (алитретиноин); Онтак (ONTAK(tm)) (денилейкин дифтитокс); эсперамицины; капецитабин и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше. В некоторых 10 вариантах реализации композиции, содержащие экспрессирующие CAR и/или TCR иммунные эффекторные клетки, раскрытые в настоящем описании, могут быть введены совместно с антигормональным агентом, действие которого направлено на регуляцию или подавление действия гормонов на опухоли, таким как антиэстрогены, включая, например, тамоксифен, ралоксифен, ингибирующие ароматазу 4(5)-имидазолы, 415 гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY117018, онапристон и торемифен (Фарестон (Fareston)); и антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпорид и гозерелин; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше. Также в случае необходимости вводят комбинации химиотерапевтических агентов, включающие, но не ограничивающиеся 20 перечисленными, комбинацию CHOP, то есть циклофосфамид (Цитоксан (Cytoxan(r))), доксорубицин (гидроксидоксорубицин), винкристин (Онковин (Oncovin(r))) и преднизон. [000247] В некоторых вариантах реализации химиотерапевтический агент вводят одновременно с введением или в течение одной недели после введения конструированной клетки или нуклеиновой кислоты. В других вариантах реализации 25 химиотерапевтический агент вводят в период времени от 1 до 4 недель или от 1 недели до 1 месяца, от 1 недели до 2 месяцев, от 1 недели до 3 месяцев, от 1 недели до 6 месяцев, от 1 недели до 9 месяцев или от 1 недели до 12 месяцев после введения конструированной клетки или нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации химиотерапевтический агент вводят по меньшей мере за 1 месяц до введения 30 клетки или нуклеиновой кислоты. В некоторых вариантах реализации способы дополнительно включают введение двух или более химиотерапевтических агентов. [000248] Совместно с композициями согласно настоящему описанию могут
применяться различные дополнительные терапевтические агенты. Например,
132
потенциально подходящие дополнительные терапевтические агенты включают ингибиторы PD-1, такие как ниволумаб (Опдиво (OPDIVO(r))), пембролизумаб (Кейтруда (KEYTRUDA(r))), пембролизумаб, пидилизумаб (CureTech) и атезолизумаб (Roche). [000249] Дополнительные терапевтические агенты, подходящие для применения в 5 комбинации с настоящим изобретением, включают, но не ограничиваются перечисленными, ибрутиниб (Имбрувика (IMBRUVICA(r))), офатумумаб (Арзерра (ARZERRA(r))), ритуксимаб (Ритуксан (RITUXAN(r))), бевацизумаб (Авастин (AVASTIN(r))), трастузумаб (Герцептин (HERCEPTIN(r))), трастузумаб эмтанзин (Кадсила (KADCYLA(r))), иматиниб (Гливек (GLEEVEC(r))), цетуксимаб (Эрбитукс
10 (ERBITUX(r))), панитумумаб (Вектибикс (VECTffilX(r))), катумаксомаб, ибритумомаб, офатумумаб, тозитумомаб, брентуксимаб, алемтузумаб, гемтузумаб, эрлотиниб, гефинитиб, вандетаниб, афатиниб, лапатиниб, нератиниб, акситиниб, маситиниб, пазопаниб, сунитиниб, сорафениб, тоцераниб, лестауртиниб, акситиниб, цедираниб, ленватиниб, нинтеданиб, пазопаниб, регорафениб, семаксаниб, сорафениб, сунитиниб,
15 тивозаниб, тоцераниб, вандетаниб, энтректиниб, кабозантиниб, иматиниб, дазатиниб, нилотиниб, понатиниб, радотиниб, бозутиниб, лестауртиниб, руксолитиниб, пакритиниб, кобиметиниб, селуметиниб, траметиниб, биниметиниб, алектиниб, церитиниб, кризотиниб, афлиберцепт, адипотид, денилейкин дифтитокс, ингибиторы mTOR, такие как эверолимус и темсиролимус, ингибиторы сигнального пути Hedgehog,
20 такие как сонидегиб и висмодегиб, ингибиторы CDK, такие как ингибитор CDK (палбоциклиб).
[000250] В дополнительных вариантах реализации композицию, содержащую иммунные клетки, содержащие CAR и/или TCR, вводят совместно с противовоспалительным агентом. Противовоспалительные агенты или лекарственные
25 средства могут включать, но не ограничиваются перечисленными, стероиды и глюкокортикоиды (включая бетаметазон, будесонид, дексаметазон, гидрокортизона ацетат, гидрокортизон, гидрокортизон, метилпреднизолон, преднизолон, преднизон, триамцинолон), нестероидные противовоспалительные средства (Н11ВС), включая аспирин, ибупрофен, напроксен, метотрексат, сульфасалазин, лефлуномид,
30 лекарственные средства, подавляющие ФНО, циклофосфамид и микофенолат. Типовые
Н11ВС включают ибупрофен, напроксен, напроксена натрий, ингибиторы Сох-2 и
сиалилаты. Типовые анальгетики включают ацетаминофен, оксикодон, трамадол или
пропоксифена гидрохлорид. Типовые глюкокортикоиды включают кортизон,
133
дексаметазон, гидрокортизон, метилпреднизолон, преднизолон или преднизон. Типовые модификаторы биологического ответа включают молекулы, направленные против маркеров клеточной поверхности (например, CD4, CD5 и т.д.), ингибиторы цитокинов, такие как антагонисты ФНО (например, этанерцепт (Энбрел (ENBREL(r))), адалимумаб 5 (Хумира (HUMIRA(r))) и инфликсимаб (Ремикейд (REMICADE(r))), ингибиторы хемокинов и ингибиторы молекул адгезии. Модификаторы биологического ответа включают моноклональные антитела, а также рекомбинантные формы молекул. Типовые БМАРП включают азатиоприн, циклофосфамид, циклоспорин, метотрексат, пеницилламин, лефлуномид, сульфасалазин, гидроксихлорохин, соединения золота (для
10 перорального (ауранофин) и внутримышечного введения) и миноциклин.
[000251] В некоторых вариантах реализации композиции согласно настоящему описанию вводят совместно с цитокином. Термин "цитокин" в настоящем описании относится к белкам, высвобождаемым одной клеточной популяцией, которые действуют на другую клетку в качестве медиаторов межклеточных взаимодействий. Примерами
15 цитокинов являются лимфокины, монокины и традиционные полипептидные гормоны. В число цитокинов входят гормоны роста, такие как гормон роста человека, N-метионилированный гормон роста человека и бычий гормон роста; паратиреоидный гормон; тироксин; инсулин; проинсулин; релаксин; прорелаксин; гликопротеиновые гормоны, такие как фолликулостимулирующий гормон (ФСГ), тиреостимулирующий
20 гормон (ТСГ) и лютеинизирующий гормон (ЛГ); фактор роста гепатоцитов (ФРГ); фактор роста фибробластов (ФРФ); пролактин; плацентарный лактоген; ингибирующее вещество Мюллера; гонадотропин-ассоциированный пептид мыши; ингибин; активин; фактор роста эндотелия сосудов; интегрин; тромбопоэтин (ТПО); факторы роста нервной ткани (NGF), такие как NGF-бета; фактор роста тромбоцитов;
25 трансформирующие факторы роста (ТФР), такие как ТФР-альфа и ТФР-бета; инсулиноподобный фактор роста-I и -II; эритропоэтин (ЭПО); остеоиндуктивные факторы; интерфероны, такие как интерферон-альфа, -бета и -гамма; колониестимулирующие факторы (КСФ), такие как макрофагальный колониестимулирующий фактор (М-КСФ); гранулоцитарно-макрофагальный КСФ (ГМ-
30 КСФ) и гранулоцитарный КСФ (Г-КСФ); интерлейкины (ИЛ), такие как ИЛ-1, ИЛ-1-
альфа, ИЛ-2, ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-7, ИЛ-8, ИЛ-9, ИЛ-10, ИЛ-11, ИЛ-12; ИЛ-15,
фактор некроза опухоли, такой как ФНО-альфа или ФНО-бета; и другие полипептидные
факторы, включая ЛИФ и лиганд Kit (KL). В настоящем описании термин "цитокин"
134
включает белки, полученные из природных источников или из культуры рекомбинантных клеток, и биологически активные эквиваленты цитокинов с природной последовательностью.
[000252] Все публикации, патенты и патентные заявки, упомянутые в настоящем 5 описании, включены в настоящее описание посредством ссылки в той же степени, как если бы для каждой отдельной публикации, патента или патентной заявки была специально и независимо указано, что они включены посредством ссылки. Однако указание источника в настоящем описании не должно быть истолковано в качестве подтверждения того, что такой источник является частью предшествующего уровня
10 техники по отношению к настоящему изобретению. В тех случаях, когда любое из определений или терминов, представленных в источниках, включенных посредством ссылки, отличается от терминов и обсуждений, представленных в настоящем описании, представленные в настоящем описании термины и определения имеют преимущество. [000253] Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано следующими
15 примерами, которые не должны быть истолкованы как дополнительно ограничивающие. Содержание всех источников, цитируемых в этой заявке, явным образом включено в настоящее описание посредством ссылки.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1
20 [000254] Плазмиды, кодирующие промотор Т7, конструкцию CAR и стабилизирующую последовательность бета-глобина, линеаризировали путем расщепления 10 мкг ДНК с помощью EcoRI и BamHI (NEB) в течение ночи. Затем ДНК подвергали расщеплению под действием протеиназы К (Thermo Fisher, 600 ед./мл) в течение 2 часов при 50 °С, очищали с помощью смеси фенол/хлороформ и осаждали
25 путем добавления ацетата натрия и двух объемов этанола. Затем осадки сушили, ресуспендировали в воде, не содержащей ДНКаз/РНКаз, и количественно определяли с помощью NanoDrop. Затем один мкг линейной ДНК использовали для проведения транскрипции in vitro с помощью mMESSAGE mMACHINE Т7 Ultra (Thermo Fisher) в соответствии с инструкциями производителя. РНК дополнительно очищали с помощью
30 набора MEGAClear (Thermo Fisher) в соответствии с инструкциями производителя и количественно определяли с помощью NanoDrop. Целостность мРНК оценивали на
основании подвижности в агарозном геле. МКПК выделяли из лейкопаков (leukopaks) (Hemacare) здоровых доноров путем центрифугирования в градиенте плотности фиколл-пака (Ficoll-Paque) в соответствии с инструкциями производителя. МКПК стимулировали с помощью ОКТЗ (50 нг/мл, Miltenyi Biotec) в среде R10 + ИЛ-2 (300 5 МЕ/мл, Proleukin(r), Prometheus(r) Therapeutics and Diagnostics). Через семь дней после стимуляции Т-клетки дважды промывали в среде Opti-MEM (Thermo Fisher Scientific) и ресуспендировали в конечной концентрации 2,5х107 клеток/мл в среде Opti-MEM. Для электропорации использовали десять мкг мРНК. Электропорацию клеток проводили с помощью системы Gemini Х2 (Harvard Apparatus ВТХ) для подачи одного импульса 400
10 В в течение 0,5 мс в кюветах с зазором 2 мм (Harvard Apparatus ВТХ). Клетки сразу переносили в среду R10 + ИЛ-2 и оставляли для восстановления в течение 6 часов. Для оценки экспрессии CAR Т-клетки окрашивали с помощью FLT-=3-HIS (Sino Biological Inc.) или биотинилированного белка L (Thermo Scientific) в буфере для окрашивания (BD Pharmingen) в течение 30 минут при 4 °С. Затем клетки промывали и окрашивали с
15 помощью антитела anti-HIS-PE (Miltenyi Biotec) или реагента РЕ Streptavidin (BD Pharmingen) в буфере для окрашивания в течение 30 минут при 4 °С. Затем клетки промывали и ресуспендировали в буфере для окрашивания с пропидия иодидом (BD Pharmingen), после чего проводили сбор данных. Экспрессия CAR FLT3 в Т-клетках, подвергнутых электропорации, показана на ФИГ. 3.
20 [000255] Т-клетки подвергали электропорации с применением плазмид, кодирующих CAR против FLT3, содержащий связывающую молекулу 10ЕЗ, 2Е7, 8В5, 4Е9 или 11F11 против FLT3 и шарнирный участок, выбранный из полного шарнирного домена (полноразмерный шарнирный домен, или "CHD") или укороченного шарнирного домена ("THD"). Затем подвергнутые электропорации Т-клетки,
25 экспрессирующие CAR против FLT3, культивировали совместно с клетками-мишенями Namalwa (FLT3-отрицательными), EoLl (FLT3-положительными), HL60 (FLT3-положительными) или MV4; 11 (FLT3-положительными) при отношении Э:М 1:1 в среде R10. После совместного культивирования в течение шестнадцати часов супернатанты от Namalwa (ФИГ. 4A-4F), EoLl (ФИГ. 4G-4L), HL60 (ФИГ. 4M-4R) и MV4;11 (4S-4X)
30 анализировали с помощью Luminex (EMD Millipore) в отношении выработки ИФНу (ФИГ. 4А, 4В, 4G, 4Н, 4М, 4N, 4S и 4Т), ИЛ-2 (ФИГ. 4С, 4D, 41, 4J, 40, 4Р, 4U и 4V) и ФНОа (ФИГ. 4Е, 4F, 4К, 4L, 4Q, 4R, 4W и 4Х).
[000256] Жизнеспособность клеток-мишеней оценивали с помощью проточного цитометрического анализа захвата пропидия иодида (ПИ) CD3-отрицательными клетками. Подвергнутые электропорации Т-клетки, экспрессирующие CAR против FLT3, культивировали совместно с клетками-мишенями Namalwa (ФИГ. 5А-5В), EoLl 5 (ФИГ. 5C-5D), HL60 (ФИГ. 5E-5F) и MV4;11 (5G-5H) через 16 часов после начала совместного культивирования.
ПРИМЕР 2
[000257] Для получения лентивирусных супернатантов использовали лентивирусный вектор переноса третьего поколения, содержащий различные
10 конструкции CAR, в сочетании со смесью ViraPower Lentiviral Packaging Mix (Life Technologies). Кратко, смесь для трансфекции получали путем смешивания 15 мкг ДНК и 22,5 мкл полиэтиленимина (Polysciences, 1 мг/мл) в 600 мкл среды OptiMEM. Полученную смесь инкубировали в течение 5 минут при комнатной температуре. Одновременно клетки 293 Т (АТСС) подвергали трипсинолизу, подсчитывали, и клетки
15 общим количеством 10x106 высевали во флакон Т75 на смесь для трансфекции. Через три дня после трансфекции супернатанты собирали и фильтровали через фильтр с диаметром пор 0,45 мкм и хранили при -80°С до использования. МКПК выделяли из лейкопаков (Hemacare) здоровых доноров путем центрифугирования в градиенте плотности фиколл-пака в соответствии с инструкциями производителя. МКПК
20 стимулировали с помощью ОКТЗ (50 нг/мл, Miltenyi Biotec) в среде R10 + ИЛ-2 (300 МЕ/мл, PROLEUKIN(r), PROMETHEUS(r) Therapeutics and Diagnostics). Через сорок восемь часов после стимуляции клетки подвергали трансдукции с помощью лентивируса при множественности заражения (MOI) = 10. Концентрацию клеток поддерживали в диапазоне 0,5-2,0 х 106 клеток/мл, затем их использовали для
25 определения активности. Для оценки экспрессии CAR Т-клетки окрашивали с помощью FLT-3-HIS (Sino Biological Inc.) или биотинилированного белка L (Thermo Scientific) в буфере для окрашивания (BD Pharmingen) в течение 30 минут при 4 °С. Затем клетки промывали и окрашивали с помощью антитела anti-HIS-PE (Miltenyi Biotec) или реагента РЕ Streptavidin (BD Pharmingen) в буфере для окрашивания в течение 30 минут
30 при 4 °С. Затем клетки промывали и ресуспендировали в буфере для окрашивания с пропидия иодидом (BD Pharmingen), после чего проводили сбор данных. Экспрессия
CAR FLT3 в Т-клетках, полученных от двух здоровых доноров, показана на ФИГ. 6А-6В.
[000258] Т-клетки, полученные от двух здоровых доноров, подвергали трансдукции с применением лентивирусных векторов, кодирующих Т-клетки с CAR против FLT3, 5 содержащий связывающую молекулу 10ЕЗ, 8В5 или 11F11 и шарнирный участок, выбранный из полноразмерного шарнирного домена ("CHD"), укороченного шарнирного домена ("THD") и шарнирного участка CD8. Трансдуцированные Т-клетки культивировали совместно с клетками-мишенями при отношении Э:М 1:1 в среде R10. После совместного культивирования в течение шестнадцати часов супернатанты 10 анализировали с помощью Luminex (EMD Millipore) в отношении выработки ИФНу (ФИГ. 7А-7В), ФНОа (ФИГ. 7C-7D) и ИЛ-2 (ФИГ. 7E-7F).
[000259] Жизнеспособность клеток-мишеней оценивали с помощью проточного цитометрического анализа захвата пропидия иодида (ПИ) CD3-отрицательными клетками. Определяли среднюю цитолитическую активность трансдуцированных с 15 применением лентивируса экспрессирующих CAR Т-клеток (полученных от двух здоровых доноров), культивируемых совместно с клетками-мишенями Namalwa (ФИГ. 8А), EoLl (ФИГ. 8В), MV4;11 (ФИГ. 8С) и HL60 (ФИГ. 8D).
[000260] Для оценки пролиферации экспрессирующих CAR Т-клеток в ответ на экспрессирующие FLT3 клетки-мишени Т-клетки были помечены CFSE, затем 20 проводили совместное культивирование с клетками-мишенями при отношении Э:М 1:1 в среде R10. Через пять дней оценивали пролиферацию Т-клеток с помощью проточного цитометрического анализа снижения концентрации CFSE. Пролиферация Т-клеток, экспрессирующих CARFLT3, показана на ФИГ. 9А-9В.
ПРИМЕР 3
25 [000261] Для оценки антилейкозной активности in vivo были получены Т-клетки, экспрессирующие CAR FLT3, для применения в ксеногенной модели ОМЛ человека. Экспрессия CAR различных линий эффекторов, используемых в ксеногенной модели ОМЛ человека, показана на ФИГ. 10A-10D. Меченые люциферазой клетки MV4;11 (2 х 106 клеток/животное) вводили путем внутривенной инъекции самкам мышей NSG в
30 возрасте от 5 до 6 недель. Через 6 дней путем внутривенной инъекции вводили 6 х 106 Т-клеток (-50% CAR+) в 200 мкл ФСБ и еженедельно определяли опухолевую нагрузку у животных методом биолюминесцентной визуализации (ФИГ. 10E-10G). Анализ
выживаемости проводили путем инъекции контрольных (не экспрессирующих CAR, mock) Т-клеток или экспрессирующих CAR Т-клеток 10E3-CHD (ФИГ. ЮН), 10E3-THD (ФИГ. 101) или 8B5-THD (ФИГ. 10J).
ПРИМЕР 4
5 [000262] Т-клетки подвергали электропорации с применением плазмид, кодирующих конструкции CAR против CLL-1 24C8 HL-CHD CAR (содержащую полноразмерный шарнирный домен костимулирующего белка) и 24C8 HL-THD CAR (содержащую укороченный шарнирный домен костимулирующего белка). Экспрессия CAR против CLL-1 Т-клетками, подвергнутыми электропорации, показана на ФИГ. 11А-
10 11D. Затем Т-клетки, экспрессирующие CAR против CLL-1, культивировали с клетками-мишенями Namalwa (АТСС; CLL-1-отрицательными), U937 (АТСС; CLL-1-положительными), HL-60 (АТСС; CLL-1-положительными), EoL-1 (Sigma; CLL-1-положительными), KGla (АТСС; CLL-1-положительными) и MV4;11 (АТСС; CLL-1-положительными) при отношении Э:М 1:1 в среде R10 через 6 часов после
15 электропорации мРНК. После совместного культивирования в течение шестнадцати часов супернатанты анализировали с помощью Luminex (EMD Millipore), в соответствии с инструкциями производителя, в отношении выработки ИЛ-2 (ФИГ. 12А), ИФНу (ФИГ. 12В) и ФНОа (ФИГ. 12С).
[000263] Жизнеспособность клеток-мишеней оценивали с помощью проточного 20 цитометрического анализа захвата пропидия иодида (ПИ). Подвергнутые электропорации Т-клетки, экспрессирующие CAR против CLL-1, культивировали совместно с клетками-мишенями Namalwa (ФИГ. 13А), MV4;11 (ФИГ. 13В), EoL-1 (ФИГ. 13С), HL-60 (ФИГ. 13D) или U937 (ФИГ. 13Е) в течение 16 часов. Как и ожидалось, клетки Namalwa, культивируемые совместно с Т-клетками, 25 экспрессирующими CAR против CLL-1, продемонстрировали небольшое изменение в жизнеспособности клеток-мишеней относительно контролей (ФИГ. 13А). Однако в клетках MV4;11, культивируемых совместно с Т-клетками, экспрессирующими 24C8 HL-CHD и 24C8 HL-THD, наблюдали повышенную цитолитическую активность относительно контролей, причем более высокую цитолитическую активность в 30 отношении клеток-мишеней наблюдали в совместной культуре Т-клеток, экспрессирующих 24C8HL-THD (ФИГ. 13В). Помимо этого, повышенную цитолитическую активность относительно контролей наблюдали в клетках EoL-1,
культивируемых совместно с Т-клетками, экспрессирующими 24C8_HL-CHD и 24C8 HL-THD (ФИГ. 13С). Повышенную цитолитическую активность относительно контролей наблюдали в клетках HL-60, культивируемых совместно с Т-клетками, экспрессирующими 24C8 HL-CHD и 24C8 HL-THD (ФИГ. 13D). Повышенную 5 цитолитическую активность относительно контролей наблюдали в клетках U937, культивируемых совместно с Т-клетками, экспрессирующими 24C8_HL-CHD и 24C8 HL-THD, причем более высокую цитолитическую активность в отношении клеток-мишеней наблюдали в совместной культуре Т-клеток, экспрессирующих 24C8 HL-THD (ФИГ. 13Е).
10 ПРИМЕР 5
[000264] Т-клетки, трансдуцированные с применением лентивирусных векторов, содержащих конструкцию CAR против CLL-1 с укороченным шарнирным доменом ("THD") костимулирующего белка, 10E3 THD или 24C1LH THD, культивировали совместно с клетками-мишенями Namalwa, U937, HL-60, EoL-1, KGla и MV4;11 при
15 отношении Э:М 1:1 в среде R10 через 12 дней после стимуляции Т-клеток. После совместного культивирования в течение шестнадцати часов супернатанты анализировали с помощью Luminex (EMD Millipore), в соответствии с инструкциями производителя, в отношении выработки цитокинов ИФНу (ФИГ. 14А), ИЛ-2 (ФИГ. 14В) и ФНОа (ФИГ. 14С) в совместных культурах эффекторных Т-клеток, экспрессирующих
20 10E3 THD CAR, и Т-клеток, экспрессирующих 24C1LH THD CAR, с клетками-мишенями Namalwa, HL-60 или MVA;11, как указано.
[000265] Жизнеспособность клеток-мишеней оценивали с помощью проточного цитометрического анализа захвата пропидия иодида (ПИ). Трансдуцированные эффекторные Т-клетки, экспрессирующие 24C1LH THD CAR, культивировали
25 совместно с клетками-мишенями Namalwa, U937, HL-60, EoL-1, KGla или MV4;11 в течение 16 часов или 40 часов. Совместное культивирование клеток-мишеней Namalwa с трансдуцированными Т-клетками, экспрессирующими C124C1LH THD CAR, не оказывало действия на процент жизнеспособных клеток-мишеней Namalwa по сравнению с не экспрессирующими CAR контрольными Т-клетками как через 16 часов,
30 так и через 40 часов (ФИГ. 15 А). Однако Т-клетки, экспрессирующие C1_24C1_LH_THD CAR, культивируемые совместно либо с клетками-мишенями MV4;11 (ФИГ. 15В), либо с клетками-мишенями HL-60 (ФИГ. 15С), вызывали
уменьшение процента жизнеспособных клеток-мишеней по сравнению с не экспрессирующими CAR контрольными Т-клетками как через 16 часов, так и через 40 часов.
ПРИМЕР 6
5 [000266] Т-клетки, экспрессирующие CAR, трансдуцированные с применением конструкций CAR против ВСМА, содержащих укороченный шарнирный домен ("THD") костимулирующего белка, культивировали с клетками-мишенями при отношении эффекторная клетка:клетка-мишень (Э:М) 1:1 в среде R10 через 12 дней после стимуляции Т-клеток. Исследуемые линии клеток включали EoL-1 (Sigma;
10 ВСМА-отрицательные), NCI-H929 (Molecular Imaging; ВСМА-положительные) и ММ1S (Molecular Imaging; ВСМА-положительные). После совместного культивирования в течение шестнадцати часов супернатанты анализировали с помощью Luminex (EMD Millipore), в соответствии с инструкциями производителя, в отношении выработки цитокинов ИФНу (ФИГ. 16А-16В), ФНОа (ФИГ. 16C-16D) и ИЛ-2 (ФИГ. 16E-16F).
15 ИФНу (ФИГ. 16А-16В), ФНОа (ФИГ. 16C-16D) и ИЛ-2 (ФИГ. 16E-16F) наблюдали в супернатанте совместных культур клеток-мишеней NCI-H929 и MM1S для каждой исследуемой Т-клетки, экспрессирующей CAR против ВСМА, у обоих доноров (ФИГ. 16А-16В); однако для IR-отрицательных контрольных Т-клеток ИФНу (ФИГ. 16А-16В), ФНОа (ФИГ. 16C-16D) и ИЛ-2 (ФИГ. 16E-16F) выше фона наблюдали только в
20 супер натанте совместных культур клеток-мишеней EoL-1 (ФИГ. 16А).
[000267] Жизнеспособность клеток-мишеней оценивали с помощью проточного цитометрического анализа захвата пропидия иодида (ПИ) CD3-отрицательными клетками. Т-клетки, экспрессирующие CAR против ВСМА, культивировали совместно с клетками-мишенями EoLl (ФИГ. 17А-17В), NCI-H929 (ФИГ. 17C-17D) или MM1S
25 (ФИГ. 17E-17F) в течение 16 часов, 40 часов, 64 часов, 88 часов или 112 часов. В совместных культурах EoL-1 наблюдали незначительную цитолитическую активность для Т-клеток, экспрессирующих CAR против ВСМА, в любой период времени (ФИГ. 17А-17В). Однако совместное культивирование Т-клеток, экспрессирующих CAR против ВСМА, и клеток-мишеней NCI-H929 или MM1S, вызывало уменьшение
30 процента жизнеспособных клеток-мишеней в каждый исследуемый период времени для каждой из Т-клеток, экспрессирующих CAR против ВСМА.
[000268] Для оценки пролиферации Т-клетки, экспрессирующие CAR против ВСМА, были помечены сукцинимидиловым эфиром карбоксифлуоресцеина (CFSE), затем проводили их совместное культивирование с клетками-мишенями EoL-1, NCI-Н929 или MM1S при отношении Э:М 1:1 в среде R10. Через пять дней оценивали 5 пролиферацию Т-клеток с помощью проточного цитометрического анализа снижения концентрации CFSE (ФИГ. 18А-18В).
ПРИМЕР 7
[000269] Повышенная стабильность является желательным свойством белков. Ее часто оценивают путем определения температуры плавления белка в различных 10 условиях. Белки с более высокой температурой плавления как правило стабильны в течение более длительного времени. В случае если CAR более термостабилен, он может быть функционально активен на поверхности клетки в течение более длительных периодов времени.
[000270] Термическую стабильность внеклеточного домена CAR (ECD) с более
15 длинным шарнирным доменом, то есть полноразмерным шарнирным доменом ("CHD"), и термическую стабильность ECD CAR с укороченным шарнирным доменом ("THD") определяли с помощью термоблока Bio-Rad С1000, системы CFx96 Real-Time. Развертывание белков отслеживали с использованием флюоресцентного красителя SYPRO Orange (Invitrogen), который связывается с гидрофобными аминокислотами,
20 которые становятся гидрофильными, когда белок разворачивается. Температурный градиент устанавливали от 25 °С до 95 °С с шагом 1 °С/1 минуту. Каждый образец содержал 10 мкМ рекомбинантного белка ECD CAR и 5-кратный SYPRO Orange (Molecular Probes(tm) SYPRO(tm) Orange Protein Gel Stain (5000-кратный концентрат в ДМСО)). Анализ проводили в ФСБ с 50 мМ NaCl или без него.
25 [000271] Как показано на ФИГ. 19А и ФИГ. 19В, ECD CAR, который содержит THD, демонстрирует повышенную термостабильность по сравнению с ECD CAR, который содержит CHD, например, содержащим мотив IEVMYPPPY (SEQ Ш NO: 250). Этот способ, описанный в данном примере, является подходящим способом оценки стабильности мРНК, кодирующей CAR, и самого CAR, поскольку как только Т-клетка
30 была трансдуцирована мРНК, кодирующей CAR, трансдуцированная Т-клетка будет экспрессировать CAR, и стабильность мРНК или белка отдельно нельзя легко оценить.
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> KITE PHARMA, INC.
<120> ХИМЕРНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ АНТИГЕНОВ И Т-КЛЕТОЧНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
<130> K-1031.02
<150> US 62/317258 <151> 2016-04-01
<160> 251
<170> PatentIn, версия 3.5
<210> 1 <211> 220 <212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 1
Met Leu Arg Leu Leu Leu Ala Leu Asn Leu Phe Pro Ser Ile Gln Val
1 5 10 15
Thr Gly Asn Lys Ile Leu Val Lys Gln Ser Pro Met Leu Val Ala Tyr
20 25 30
Asp Asn Ala Val Asn Leu Ser Cys Lys Tyr Ser Tyr Asn Leu Phe Ser
35 40 45
Arg Glu Phe Arg Ala Ser Leu His Lys Gly Leu Asp Ser Ala Val Glu
50 55 60
Val Cys Val Val Tyr Gly Asn Tyr Ser Gln Gln Leu Gln Val Tyr Ser
65 70 75 80
Lys Thr Gly Phe Asn Cys Asp Gly Lys Leu Gly Asn Glu Ser Val Thr
85 90 95
Phe Tyr Leu Gln Asn Leu Tyr Val Asn Gln Thr Asp Ile Tyr Phe Cys
100 105 110
Lys Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser
115 120 125
Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro
130 135 140
Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly
145 150 155 160
Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile
165
170
175
Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met
180 185 190
Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro
195 200 205
Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
210 215 220
<210> 2
<211> 90
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Шарнирный домен
<400> 2
cttgataatg aaaagtcaaa cggaacaatc attcacgtga agggcaagca cctctgtccg 60 tcacccttgt tccctggtcc atccaagcca 90
<210> 3
<211> 30
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Шарнирный домен
<400> 3
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
1 5 10 15
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro
20 25 30
<210> 4
<211> 81
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Трансмембранный домен
<400> 4
ttctgggtgt tggtcgtagt gggtggagtc ctcgcttgtt actctctgct cgtcaccgtg 60 gcttttataa tcttctgggt t 81
БЕЛОК
<220>
<223> Трансмембранный домен
<400> 5
Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu
1 5 10 15
Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val 20 25
<210> 6
<211> 123
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Сигнальный/костимулирующий домен
<400> 6
agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 60
ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 120
agc 123
<210> 7
<211> 41
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Сигнальный/костимулирующий домен
<400> 7
Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr
1 5 10 15
Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro
20 25 30
Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser 35 40
<210> 8
<211> 336
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Активационный домен CD3 дзета
<400> 8
agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg
tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga 12 0
cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat 180
gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg 240
agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac cagggactca gcactgctac gaaggatact 300
tatgacgctc tccacatgca agccctgcca cctagg 336
<210> 9
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Активационный домен CD3 дзета
<400> 9
Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly
1 5 10 15
Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr
20 25 30
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
35 40 45
Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys
50 55 60
Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg
65 70 75 80
Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala
85 90 95
Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
100 105 110
<210> 10
<211> 63
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Сигнальный (лидерный) пептид
<400> 10
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60 ccg 63
<211> 21
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Сигнальный (лидерный) пептид
<400> 11
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro 20
<210> 12
<211> 18
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Линкер
<400> 12
Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr
1 5 10 15
Lys Gly
<210> 13
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 13
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
<210> 14
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 14
Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 1 5
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 15
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 1 5
<210> 16
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 16
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser Ser Tyr
1 5
<210> 17
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 17
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 1 5
<210> 18
БЕЛОК
<211> 10
<212>
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 18
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His
<210> <211> <212> <213>
19 7
БЕЛОК
Искусственная последовательность
Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr 1 5
<210> 20
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 20
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
<210> 21
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 21
Ser Gly Ser Gly Gly Ser
1 5
<210> 22
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 22
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly
1 5 10 15
<210> 23
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 23
Asn Pro Gly Gly Gly Ser
1 5
24 5
БЕЛОК
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 24
Ser Tyr Ser Gly Ser 1 5
<210> 25
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 25
Ser Ser Ser Ser Ser Thr
<210> 26
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 26
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
<210> 27
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 27
Ile Pro Ile Phe Gly Thr 1 5
<210> 28
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 28
<210> 29
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 29
Ala Glu Met Gly Ala Val Phe Asp Ile 1 5
<210> 30
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 30
Asp Gly Thr Tyr Leu Gly Gly Leu Trp Tyr Phe Asp Leu
1 5 10
<210> 31
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 31
Glu Ser Trp Pro Met Asp Val
<210> 32
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 32
Gly Arg Gly Tyr Ala Thr Ser Leu Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 33
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 33
Gly Ser Gln Glu His Leu Ile Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 34
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 34
Thr Asp Phe Trp Ser Gly Ser Pro Pro Gly Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 35
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 35
Thr Pro Glu Tyr Ser Ser Ser Ile Trp His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp
1 5 10 15
Val
<210> 36
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 36
Gly Pro Leu Gln Glu Pro Pro Tyr Asp Tyr Gly Met Asp Val
<210> <211> <212> <213>
37 11
БЕЛОК
Искусственная последовательность
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 38
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 38
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp
<210> 39
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 39
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala
1 5 10
<210> 40
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 40
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 41
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 41
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala
1 5 10
42 11
БЕЛОК
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 42
Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala
1 5 10
<210> 43
БЕЛОК
<211> 17
<212>
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 43
Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu
1 5 10 15
Ala
<210> 44
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 44
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala
1 5 10
<210> 45
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 45
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr 1 5
<210> 46
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 46
Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser 1 5
<210> 47
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 47
Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr 1 5
<210> 48
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 48
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr
<210> 49
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 49
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr
<210> 50
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 50
Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 51
Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser 1 5
<210> 52
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 52
Ser Ala Ser Thr Arg Ala Thr 1 5
<210> 53
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 53
Gln Gln Arg Ile Ser Trp Pro Phe Thr 1 5
<210> 54
БЕЛОК
<211> 9
<212>
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 54
Met Gln Gly Leu Gly Leu Pro Leu Thr
<210> <211> <212> <213>
БЕЛОК
Искусственная последовательность
Gln Gln Tyr Ala Ala Tyr Pro Thr 1 5
<210> 56
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 56
Gln Gln Arg His Val Trp Pro Pro Thr
<210> 57
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 57
Gln Gln Arg Phe Tyr Tyr Pro Trp Thr 1 5
<210> 58
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 58
Gln Gln Ile Tyr Thr Phe Pro Phe Thr 1 5
<210> 59
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 59
Gln Gln Phe Ala His Thr Pro Phe Thr 1 5
60 9
БЕЛОК
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 60
Gln Gln His His Val Trp Pro Leu Thr 1 5
<210> 61 <211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 61
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtag cacatactac 180
gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggcggtgt actactgcgc aagagccgag 300
atgggagccg tattcgacat atggggtcag ggtacaatgg tcaccgtctc ctca 354
<210> 62
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 62
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cgtctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcgtatg atggaagtaa taaatactat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagacggt 300
acttatctag gtggtctctg gtacttcgac ttatggggga gaggtacctt ggtcaccgtc 360
tcctca 366
<210> 63
<211> 348
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 63
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaaccctg gtggtggtag cacaagctac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagagagagt 300
tggccaatgg acgtatgggg ccagggaaca actgtcaccg tctcctca 348
<210> 64
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 64
cagctgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtgg ctccatcagc agtagtagtt actactgggg ctggatccgc 120
cagcccccag ggaaggggct ggagtggatt gggagtatct cctatagtgg gagcacctac 180
tacaacccgt ccctcaagag tcgagtcacc atatccgtag acacgtccaa gaaccagttc 240
tccctgaagc tgagttctgt gaccgccgca gacacggcgg tgtactactg cgccagaggc 300
aggggatatg caaccagctt agccttcgat atctggggtc agggtacaat ggtcaccgtc 360
tcctca 366
<210> 65
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 65
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatagca tgaactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtttcaacc attagtagta gtagtagtac catatactac 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca atgccaagaa ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaggttct 300
caggagcacc tgattttcga ttattgggga cagggtacat tggtcaccgt ctcctca 357
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 66
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cgtctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcgtatg atggaagtaa taaatactat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaactgac 300
ttctggagcg gatcccctcc aggcttagat tactggggac agggtacatt ggtcaccgtc 360
tcctca 366
<210> 67
<211> 378
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 67
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac agcaaactac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaactcct 300
gaatactcct ccagcatatg gcactattac tacggcatgg acgtatgggg ccagggaaca 360
actgtcaccg tctcctca 378
<210> 68
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 68
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cgtctggatt caccttcagt agctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcgtatg atggaagtaa taaatactat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggcggtgt actactgcgt caaggggccg 300
ttgcaggagc cgccatacga ttatggaatg gacgtatggg gccagggaac aactgtcacc 360 gtctcctca 369
<210> 69
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 69
gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc aggtacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag agaatctcct ggcctttcac ttttggcgga 300
gggaccaagg ttgagatcaa a 321
<210> 70
<211> 336
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 70
gatattgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60
atctcctgca ggtctagtca gagcctcctg catagtaatg gatacaacta tttggattgg 120
tacctgcaga agccagggca gtctccacag ctcctgatct atttgggttc taatcgggcc 180
tccggggtcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc 240
agcagagtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcagggact cggcctccct 300
ctcacttttg gcggagggac caaggttgag atcaaa 336
<210> 71
<211> 318
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 71
gaaatagtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcaacttag cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccacca gggccactgg tatcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240 gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag tacgccgcct accctacttt tggcggaggg 300 accaaggttg agatcaaa 318
<210> 72
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 72
gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agctacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag agacacgtct ggcctcctac ttttggcgga 300
gggaccaagg ttgagatcaa a 321
<210> 73
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 73
gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc aggtacttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag agattctact acccttggac ttttggcgga 300
gggaccaagg ttgagatcaa a 321
<210> 74
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 74
gacatccagt tgacccagtc tccatcttcc gtgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc gggcgagtca gggtattagc agctggttag cctggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatggt gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtcagcag atatacacct tccctttcac ttttggcgga 300
gggaccaagg ttgagatcaa a 321
<210> 75
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 75
gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60
atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acaataagaa ctacttagct 120
tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180
gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240
atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcagtt cgcccacact 300
cctttcactt ttggcggagg gaccaaggtt gagatcaaa 339
<210> 76
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 76
gaaatagtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcaacttag cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatagc gcatccacca gggccactgg tatcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag caccacgtct ggcctctcac ttttggcgga 300
gggaccaagg ttgagatcaa a 321
<210> 77 <211> 118
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок тяжелой цепи
<400> 77
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Glu Met Gly Ala Val Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Met Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 78
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок тяжелой цепи
<400> 78
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gly Thr Tyr Leu Gly Gly Leu Trp Tyr Phe Asp Leu Trp
100 105 110
Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 79
<211> 116
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок тяжелой цепи
<400> 79
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Gly Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Ser Trp Pro Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser 115
<210> 80
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок тяжелой цепи
<400> 80
Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Ser
20 25 30
Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Gly Arg Gly Tyr Ala Thr Ser Leu Ala Phe Asp Ile Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 81
<211> 119
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок тяжелой цепи
<400> 81
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Thr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Gln Glu His Leu Ile Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100
105
110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 82
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок тяжелой цепи
<400> 82
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Thr Asp Phe Trp Ser Gly Ser Pro Pro Gly Leu Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 83
<211> 126
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок тяжелой цепи
<400> 83
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Thr Pro Glu Tyr Ser Ser Ser Ile Trp His Tyr Tyr Tyr Gly
100 105 110
Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 84
<211> 123
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок тяжелой цепи
<400> 84
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Gly Pro Leu Gln Glu Pro Pro Tyr Asp Tyr Gly Met Asp Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 85
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400> 85
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ile Ser Trp Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 86
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400> 86
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly
85 90 95
Leu Gly Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 87
<211> 106
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400> 87
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Ala Tyr Pro Thr
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 88
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg His Val Trp Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 89
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400> 89
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Phe Tyr Tyr Pro Trp
85 90 95
<210> 90
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400> 90
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser Trp
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Tyr Thr Phe Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 91
<211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400> 91
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser
20 25 30
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln
35 40 45
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val
50 55 60
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr
65 70 75 80
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln
85 90 95
Phe Ala His Thr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile
100 105 110
Lys
<210> 92
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400> 92
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His His Val Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 93
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 93
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
1 5
<210> 94
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 94
Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly Gly Phe
1 5
<210> 95
БЕЛОК
<211> 7
<212>
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 95
Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu
<210> 96
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 96
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
<210> 97
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 97
Tyr Tyr Ser Gly Ser 1 5
<211> 5 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность <220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи <400> 98
His His Ser Gly Ser 1 5
<210> 99
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 99
Asp Pro Glu Asp Gly Glu 1 5
<210> 100
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 100
Ser Tyr Asp Gly Ser Asp 1 5
<210> 101
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 101
Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr
<210> <211> <212> <213>
102 14
БЕЛОК
Искусственная последовательность
Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 103
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 103
Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr
<210> 104
<211> 8
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 104
Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr 1 5
<210> 105
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 105
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn
1 5 10
<210> 106
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 106
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn
1 5 10
107
БЕЛОК
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 107
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 108
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400> 108
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr
<210> 109
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 109
Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr
<210> 110
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 110
Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr 1 5
<210> 111
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 111
<210> 112
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<400> 112
Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr 1 5
<210> 113
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 113
Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr 1 5
<210> 114
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 114
Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr
<210> 115
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 115
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr 1 5
<210> 116
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400> 116
Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe Thr 1 5
<210> 117 <211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 117
caggtgcagc tgcaggaatc cggaccgggg ctggtgaagc ccagcgagac tctgagtctc 60
acgtgtacag tttctggagg tagcattagc tcctactatt ggtcatggat aaggcagccc 120
cccgggaagg gattggaatg gatcggctat atttactaca gtgggagcac caattacaac 180
ccctcactga agtctagagt tacaatcagc gttgacacct caaagaatca gttcagtttg 240
aaattgtcta gcgtcacagc agctgataca gccgtctatt attgtgtttc tctggtctat 300
tgcggtgggg attgttacag tggctttgac tattgggggc agggtactct ggttacagtt 360
tcttcc 366
<210> 118
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 118
caggtacagc tgcaggaatc tgggcccgga cttgtcaagc caagtcagac actttctctt 60
acatgtaccg tgagcggcgg aagtataagc agtggaggct tttactggtc ttggatacgg 120
cagcacccag gcaaaggctt ggagtggatt ggatacattc atcattcagg atctacacac 180
tataatccat cccttaagtc ccgggtcacc attagcattg atacgtctaa gaatctgttc 240
agtctcaggc tgtcctccgt cactgctgcc gacacagccg tgtactactg cgcctccttg 300
gtttactgcg gaggcgactg ttatagcggc tttgattatt gggggcaggg gaccctcgta 360
accgtgagct ct 372
<210> 119
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 119
caggtccaac tggtgcagtc cggagccgaa gtcaagaaac caggtgcctc cgttaaagtg 60
agttgcaaag tctctggata cactctgacc gagctctcta tgcactgggt ccggcaggcc 120
cccggcaagg gattggaatg gatgggcggg ttcgatcctg aggacggaga gactatctac 180
gctcaaaaat tccagggacg agtgactgtg accgaagaca ctagtaccga cactgcctac 240
atggaacttt cctctctgcg atcagaagat accgcagtgt actactgtgc tactgaatct 300
aggggcattg gatggcccta cttcgattac tggggtcagg gaactctggt gactgtctcc 360
agc 363
<210> 120
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 120
caggtccagt tggtcgaaag tggcggtggt gtagtgcagc cgggccgcag tttgaggctt 60
tcctgtgcgg cttcaggctt tactttttcc agctatggaa tgcactgggt gcggcaggcc 120
cccggcaaag gacttgagtg ggtggccgtc atttcttatg acggatcaga taagtactac 180
gtggacagcg tcaagggcag attcaccatc tctagggaca acagtaaaaa tagactctac 240
ctccagatga atagcctcag agctgaagac acggccgtct actattgtgc tcgggagcgg 300
tatagtggca gagactactg ggggcagggc acactcgtta cagtgagtag c 351
<210> 121
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 121
gacatccagt tgacacagag cccgagttcc ttgtccgcct ccgtcgggga tagagtgtca 60
tttacctgtc aggcctctca ggatattaat aactttctga attggtatca gcaaaagccc 120
ggaaaggcac ccaagctgtt gatttacgac gccagtaacc tggagacagg cgtgccctcc 180
cggtttagtg gtagcggaag cggtacggat tttaccttta ctatcagctc tctccaaccc 240
gaagacattg caacctacta ttgtcaacaa tatggaaacc tgccttttac atttggcggc 300
ggcaccaagg tggagattaa gcgg 324
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 122
gatatccagc tcactcaaag cccctctagt ctctctgcct cagtggggga tcgggtcagt 60
tttacttgtc aagcttcaca ggatatcaac aacttcctta attggtatca gcagaagcca 120
ggaaaagcac ccaagctgct catctatgat gcctcaaatt tggagacggg tgttcccagt 180
cgattctctg ggtcagggtc cgggaccgac tttacgttta cgatctcctc tctgcagccc 240
gaagacatcg ccacatacta ttgtcaacag tacggcaact tgcctttcac atttgggggc 300
gggactaagg ttgaaatcaa gagg 324
<210> 123
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 123
gatattcaga tgactcaatc tccttcttct ctgtccgctt ccgtgggcga tagagtgacc 60
attacttgta gggcgtccca gtcaatctcc agttatttga attggtatca gcagaagccc 120
gggaaagcac ctaagctgtt gatcagcggg gcttctagcc tgaagagtgg ggtaccttca 180
cggttcagcg gaagcggaag cggaaccgat ttcaccctga ctatcagcag cctgccacct 240
gaggactttg caacttacta ctgccaacag tcatacagca ctccgatcac tttcggccag 300
ggcacccggc tcgaaatcaa gcgc 324
<210> 124
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка легкой цепи
<400> 124
gagattgtta tgacccagag tcctgcgacc ctctcagtca gccccgggga gcgcgcaact 60
ttgtcttgca gagctagtca gtccgtgtcc tctcttctga catggtacca gcaaaagccc 120
gggcaggctc cgcgcctttt gatctttggg gcttcaacaa gagccactgg gattcccgca 180
cgattctctg gctccgggag cggtactggt ttcaccctga cgattagcag tctccagagc 240
gaggacttcg ccgtatacta ctgccagcag tacgatacgt ggccattcac ttttggacca 300
gggactaaag tggattttaa gcgc 324
<211> 122
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> АК последовательность вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 125
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 126
<211> 124
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> АК последовательность вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 126
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe
65 70 75 80
Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 127
<211> 121
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> АК последовательность вариабельного участка тяжелой цепи
<400> 127
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu
20 25 30
Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
128 117 БЕЛОК
<220>
<223> АК последовательность вариабельного участка тяжелой цепи <400> 128
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 129
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> АК последовательность вариабельного участка легкой цепи
<400> 129
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 130
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> АК последовательность вариабельного участка легкой цепи
<400> 130
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 131
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> АК последовательность вариабельного участка легкой цепи
<400> 131
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Ser Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg 100 105
<210> 132
<211> 108
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> АК последовательность вариабельного участка легкой цепи
<400> 132
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu
20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg 100 105
<211> 1437
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК HxL CAR FS-21495 <400> 133
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggaggtgc agctgttgga gtctggggga ggcttggtac agcctggggg gtccctgaga 120
ctctcctgtg cagcctctgg attcaccttt agcagctatg ccatgagctg ggtccgccag 180
gctccaggga aggggctgga gtgggtctca gctattagtg gtagtggtgg tagcacatac 240
tacgcagact ccgtgaaggg ccggttcacc atctccagag acaattccaa gaacacgctg 300
tatctgcaaa tgaacagcct gagagccgag gacacggcgg tgtactactg cgcaagagcc 360
gagatgggag ccgtattcga catatggggt cagggtacaa tggtcaccgt ctcctcaggg 420
tctacatccg gctccgggaa gcccggaagt ggcgaaggta gtacaaaggg ggaaattgtg 480
ttgacacagt ctccagccac cctgtctttg tctccagggg aaagagccac cctctcctgc 540
agggccagtc agagtgttag caggtactta gcctggtacc aacagaaacc tggccaggct 600
cccaggctcc tcatctatga tgcatccaac agggccactg gcatcccagc caggttcagt 660
ggcagtgggt ctgggacaga cttcactctc accatcagca gcctagagcc tgaagatttt 720
gcagtttatt actgtcagca gagaatctcc tggcctttca cttttggcgg agggaccaag 780
gttgagatca aacgggccgc tgcccttgat aatgaaaagt caaacggaac aatcattcac 840
gtgaagggca agcacctctg tccgtcaccc ttgttccctg gtccatccaa gccattctgg 900
gtgttggtcg tagtgggtgg agtcctcgct tgttactctc tgctcgtcac cgtggctttt 960
ataatcttct gggttagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 1020
actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1080
ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag 1140
cagggccaga accaactgta taacgagctc aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt 1200
ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc 1260
caggagggtc tctataatga gctgcagaag gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata 1320
ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc 1380
actgctacga aggatactta tgacgctctc cacatgcaag ccctgccacc taggtaa 1437
<210> 134 <211> 478 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 134
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu
20 25 30
Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr
65 70 75 80
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Glu Met Gly Ala Val Phe Asp Ile
115 120 125
Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Ile Val
145 150 155 160
Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala
165 170 175
Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala Trp
180 185 190
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala
195 200 205
Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
210 215 220
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe
225 230 235 240
Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu
260 265 270
Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro
275 280 285
Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val
290 295 300
Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe
305 310 315 320
Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
325 330 335
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
340 345 350
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
355 360 365
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
370 375 380
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
385 390 395 400
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
405 410 415
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
420 425 430
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
435 440 445
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
450 455 460
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
<210> 135
<211> 1437
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК LxH CAR FS-21495 <400> 135
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggaaattg tgttgacaca gtctccagcc accctgtctt tgtctccagg ggaaagagcc 120
accctctcct gcagggccag tcagagtgtt agcaggtact tagcctggta ccaacagaaa 180
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat gatgcatcca acagggccac tggcatccca 240
gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagcctagag 300
cctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag cagagaatct cctggccttt cacttttggc 360
ggagggacca aggttgagat caaacggggg tctacatccg gctccgggaa gcccggaagt 420
ggcgaaggta gtacaaaggg ggaggtgcag ctgttggagt ctgggggagg cttggtacag 480
cctggggggt ccctgagact ctcctgtgca gcctctggat tcacctttag cagctatgcc 540
atgagctggg tccgccaggc tccagggaag gggctggagt gggtctcagc tattagtggt 600
agtggtggta gcacatacta cgcagactcc gtgaagggcc ggttcaccat ctccagagac 660
aattccaaga acacgctgta tctgcaaatg aacagcctga gagccgagga cacggcggtg 720
tactactgcg caagagccga gatgggagcc gtattcgaca tatggggtca gggtacaatg 780
gtcaccgtct cctcagccgc tgcccttgat aatgaaaagt caaacggaac aatcattcac 840
gtgaagggca agcacctctg tccgtcaccc ttgttccctg gtccatccaa gccattctgg 900
gtgttggtcg tagtgggtgg agtcctcgct tgttactctc tgctcgtcac cgtggctttt 960
ataatcttct gggttagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 1020
actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1080
ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag 1140
cagggccaga accaactgta taacgagctc aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt 1200
ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc 1260
caggagggtc tctataatga gctgcagaag gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata 1320
ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc 1380
actgctacga aggatactta tgacgctctc cacatgcaag ccctgccacc taggtaa 1437
<210> 136 <211> 478 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> LxH CAR FS-21495 <400> 136
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
35 40 45
Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg
100 105 110
Ile Ser Trp Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser
130 135 140
Thr Lys Gly Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
180 185 190
Glu Trp Val Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
210 215 220
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Glu Met Gly Ala Val Phe Asp Ile Trp Gly
245 250 255
Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro
275 280 285
Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val
290 295 300
Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe
305 310 315 320
Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
325 330 335
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
340 345 350
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
355 360 365
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
370 375 380
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
385 390 395 400
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
405 410 415
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
420 425 430
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
435 440 445
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
450 455 460
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
ДНК
т/г ^ т"-
<210> 137 <211> 1464 <212>
<213> Искусственная последовательность
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agctggtgga gtctggggga ggcgtggtcc agcctgggag gtccctgaga 120
ctctcctgtg cagcgtctgg attcaccttc agtagctatg gcatgcactg ggtccgccag 180
gctccaggca aggggctgga gtgggtggca gttatatcgt atgatggaag taataaatac 240
tatgcagact ccgtgaaggg ccgattcacc atctccagag acaattccaa gaacacgctg 300
tatctgcaaa tgaacagcct gagagccgag gacacggcgg tgtactactg cgccagagac 360
ggtacttatc taggtggtct ctggtacttc gacttatggg ggagaggtac cttggtcacc 420
gtctcctcag ggtctacatc cggctccggg aagcccggaa gtggcgaagg tagtacaaag 480
ggggatattg tgatgactca gtctccactc tccctgcccg tcacccctgg agagccggcc 540
tccatctcct gcaggtctag tcagagcctc ctgcatagta atggatacaa ctatttggat 600
tggtacctgc agaagccagg gcagtctcca cagctcctga tctatttggg ttctaatcgg 660
gcctccgggg tccctgacag gttcagtggc agtggatcag gcacagattt tacactgaaa 720
atcagcagag tggaggctga ggatgttggg gtttattact gcatgcaggg actcggcctc 780
cctctcactt ttggcggagg gaccaaggtt gagatcaaac gggccgctgc ccttgataat 840
gaaaagtcaa acggaacaat cattcacgtg aagggcaagc acctctgtcc gtcacccttg 900
ttccctggtc catccaagcc attctgggtg ttggtcgtag tgggtggagt cctcgcttgt 960
tactctctgc tcgtcaccgt ggcttttata atcttctggg ttagatccaa aagaagccgc 1020
ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1080
taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc 1140
agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac 1200
ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg 1260
ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag gagggtctct ataatgagct gcagaaggat 1320
aagatggctg aagcctattc tgaaataggc atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg 1380
cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact gctacgaagg atacttatga cgctctccac 1440
atgcaagccc tgccacctag gtaa 1464
<210> 138 <211> 487
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> HxL CAR PC-21497 <400> 138
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
20 25 30
Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr
65 70 75 80
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Thr Tyr Leu Gly Gly Leu Trp
115 120 125
Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly
130 135 140
Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys
145 150 155 160
Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro
165 170 175
Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His
180 185 190
Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln
195 200 205
Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val
210 215 220
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys
225 230 235 240
Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln
245 250 255
Gly Leu Gly Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile
260 265 270
Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile
275 280 285
His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro
290 295 300
Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys
305 310 315 320
Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser
325 330 335
Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg
340 345 350
Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg
355 360 365
Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp
370 375 380
Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn
385 390 395 400
Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg
405 410 415
Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly
420 425 430
Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu
435 440 445
Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu
450 455 460
Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His
465 470 475 480
Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485
<210> 139
<211> 1464
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 139
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggatattg tgatgactca gtctccactc tccctgcccg tcacccctgg agagccggcc 120
tccatctcct gcaggtctag tcagagcctc ctgcatagta atggatacaa ctatttggat 180
tggtacctgc agaagccagg gcagtctcca cagctcctga tctatttggg ttctaatcgg 240
gcctccgggg tccctgacag gttcagtggc agtggatcag gcacagattt tacactgaaa 300
atcagcagag tggaggctga ggatgttggg gtttattact gcatgcaggg actcggcctc 360
cctctcactt ttggcggagg gaccaaggtt gagatcaaac gggggtctac atccggctcc 420
gggaagcccg gaagtggcga aggtagtaca aaggggcagg tgcagctggt ggagtctggg 480
ggaggcgtgg tccagcctgg gaggtccctg agactctcct gtgcagcgtc tggattcacc 540
ttcagtagct atggcatgca ctgggtccgc caggctccag gcaaggggct ggagtgggtg 600
gcagttatat cgtatgatgg aagtaataaa tactatgcag actccgtgaa gggccgattc 660
accatctcca gagacaattc caagaacacg ctgtatctgc aaatgaacag cctgagagcc 720
gaggacacgg cggtgtacta ctgcgccaga gacggtactt atctaggtgg tctctggtac 780
ttcgacttat gggggagagg taccttggtc accgtctcct cagccgctgc ccttgataat 840
gaaaagtcaa acggaacaat cattcacgtg aagggcaagc acctctgtcc gtcacccttg 900
ttccctggtc catccaagcc attctgggtg ttggtcgtag tgggtggagt cctcgcttgt 960
tactctctgc tcgtcaccgt ggcttttata atcttctggg ttagatccaa aagaagccgc 1020
ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1080
taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc 1140
agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac 1200
ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg 1260
ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag gagggtctct ataatgagct gcagaaggat 1320
aagatggctg aagcctattc tgaaataggc atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg 1380
cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact gctacgaagg atacttatga cgctctccac 1440
atgcaagccc tgccacctag gtaa 1464
<210> 140 <211> 487 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> HxL CAR PC-21497
<400> 140
His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu
20 25 30
Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln
35 40 45
Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln
50 55 60
Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg
65 70 75 80
Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp
85 90 95
Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Met Gln Gly Leu Gly Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr
115 120 125
Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly
130 135 140
Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly
145 150 155 160
Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala
165 170 175
Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala
180 185 190
Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser
195 200 205
Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
210 215 220
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala
225 230 235 240
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gly Thr Tyr Leu Gly
245 250 255
Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile
275 280 285
His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro
290 295 300
Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys
305 310 315 320
Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser
325 330 335
Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg
340 345 350
Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg
355 360 365
Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp
370 375 380
Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn
385 390 395 400
Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg
405 410 415
Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly
420 425 430
Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu
435 440 445
Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu
450 455 460
Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His
465 470 475 480
Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485
<210> 141
<211> 1428
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК HxL CAR AJ-21508 <400> 141
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agctggtgca gtctggggct gaggtgaaga agcctggggc ctcagtgaag 120
gtttcctgca aggcatctgg atacaccttc accagctact atatgcactg ggtgcgacag 180
gcccctggac aagggcttga gtggatggga ataatcaacc ctggtggtgg tagcacaagc 240
tacgcacaga agttccaggg cagagtcacc atgaccaggg acacgtccac gagcacagtc 300
tacatggagc tgagcagcct gagatctgag gacacggcgg tgtactactg cgccagagag 360
agttggccaa tggacgtatg gggccaggga acaactgtca ccgtctcctc agggtctaca 420
tccggctccg ggaagcccgg aagtggcgaa ggtagtacaa agggggaaat agtgatgacg 480
cagtctccag ccaccctgtc tgtgtctcca ggggaaagag ccaccctctc ctgcagggcc 540
agtcagagtg ttagcagcaa cttagcctgg taccagcaga aacctggcca ggctcccagg 600
ctcctcatct atggtgcatc caccagggcc actggtatcc cagccaggtt cagtggcagt 660
gggtctggga cagagttcac tctcaccatc agcagcctgc agtctgaaga ttttgcagtt 720
tattactgtc agcagtacgc cgcctaccct acttttggcg gagggaccaa ggttgagatc 780
aaacgggccg ctgcccttga taatgaaaag tcaaacggaa caatcattca cgtgaagggc 840
aagcacctct gtccgtcacc cttgttccct ggtccatcca agccattctg ggtgttggtc 900
gtagtgggtg gagtcctcgc ttgttactct ctgctcgtca ccgtggcttt tataatcttc 960
tgggttagat ccaaaagaag ccgcctgctc catagcgatt acatgaatat gactccacgc 1020
cgccctggcc ccacaaggaa acactaccag ccttacgcac cacctagaga tttcgctgcc 1080
tatcggagca gggtgaagtt ttccagatct gcagatgcac cagcgtatca gcagggccag 1140
aaccaactgt ataacgagct caacctggga cgcagggaag agtatgacgt tttggacaag 1200
cgcagaggac gggaccctga gatgggtggc aaaccaagac gaaaaaaccc ccaggagggt 1260
ctctataatg agctgcagaa ggataagatg gctgaagcct attctgaaat aggcatgaaa 1320
ggagagcgga gaaggggaaa agggcacgac ggtttgtacc agggactcag cactgctacg 1380
aaggatactt atgacgctct ccacatgcaa gccctgccac ctaggtaa 1428
<210> 142 <211> 475 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> HxL CAR AJ-21508 <400> 142
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val
20 25 30
Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr
35 40 45
Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Gly Gly Gly Ser Thr Ser
65 70 75 80
Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser
85 90 95
Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Ser Trp Pro Met Asp Val Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly
130 135 140
Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Ile Val Met Thr
145 150 155 160
Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu
165 170 175
Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln
180 185 190
Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr
195 200 205
Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
210 215 220
Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Ala Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr
245 250 255
Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu
275 280 285
Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly
290 295 300
Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe
305 310 315 320
Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn
325 330 335
Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr
340 345 350
Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser
355 360 365
Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr
370 375 380
Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys
385 390 395 400
Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn
405 410 415
Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu
420 425 430
Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly
435 440 445
His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr
450 455 460
Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
ДНК
т/г ^ т"-
<210> 143 <211> 1428 <212>
<213> Искусственная последовательность
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggaaatag tgatgacgca gtctccagcc accctgtctg tgtctccagg ggaaagagcc 120
accctctcct gcagggccag tcagagtgtt agcagcaact tagcctggta ccagcagaaa 180
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca ccagggccac tggtatccca 240
gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gagttcactc tcaccatcag cagcctgcag 300
tctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag cagtacgccg cctaccctac ttttggcgga 360
gggaccaagg ttgagatcaa acgggggtct acatccggct ccgggaagcc cggaagtggc 420
gaaggtagta caaaggggca ggtgcagctg gtgcagtctg gggctgaggt gaagaagcct 480
ggggcctcag tgaaggtttc ctgcaaggca tctggataca ccttcaccag ctactatatg 540
cactgggtgc gacaggcccc tggacaaggg cttgagtgga tgggaataat caaccctggt 600
ggtggtagca caagctacgc acagaagttc cagggcagag tcaccatgac cagggacacg 660
tccacgagca cagtctacat ggagctgagc agcctgagat ctgaggacac ggcggtgtac 720
tactgcgcca gagagagttg gccaatggac gtatggggcc agggaacaac tgtcaccgtc 780
tcctcagccg ctgcccttga taatgaaaag tcaaacggaa caatcattca cgtgaagggc 840
aagcacctct gtccgtcacc cttgttccct ggtccatcca agccattctg ggtgttggtc 900
gtagtgggtg gagtcctcgc ttgttactct ctgctcgtca ccgtggcttt tataatcttc 960
tgggttagat ccaaaagaag ccgcctgctc catagcgatt acatgaatat gactccacgc 1020
cgccctggcc ccacaaggaa acactaccag ccttacgcac cacctagaga tttcgctgcc 1080
tatcggagca gggtgaagtt ttccagatct gcagatgcac cagcgtatca gcagggccag 1140
aaccaactgt ataacgagct caacctggga cgcagggaag agtatgacgt tttggacaag 1200
cgcagaggac gggaccctga gatgggtggc aaaccaagac gaaaaaaccc ccaggagggt 1260
ctctataatg agctgcagaa ggataagatg gctgaagcct attctgaaat aggcatgaaa 1320
ggagagcgga gaaggggaaa agggcacgac ggtttgtacc agggactcag cactgctacg 1380
aaggatactt atgacgctct ccacatgcaa gccctgccac ctaggtaa 1428
<210> 144 <211> 475
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> LxH CAR AJ-21508 <400> 144
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
35 40 45
Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
100 105 110
Ala Ala Tyr Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
115 120 125
Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr
130 135 140
Lys Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro
145 150 155 160
Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr
165 170 175
Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu
180 185 190
Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Gly Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln
195 200 205
Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr
210 215 220
Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr
225 230 235 240
Tyr Cys Ala Arg Glu Ser Trp Pro Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr
245 250 255
Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn
260 265 270
Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly
290 295 300
Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe
305 310 315 320
Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn
325 330 335
Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr
340 345 350
Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser
355 360 365
Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr
370 375 380
Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys
385 390 395 400
Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn
405 410 415
Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu
420 425 430
Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly
435 440 445
His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr
450 455 460
Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
<210> 145 <211> 1449 <212>
ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК HxL CAR NM-21517 <400> 145
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcagctgc agctgcagga gtcgggccca ggactggtga agccttcgga gaccctgtcc
120
ctcacctgca ctgtctctgg tggctccatc agcagtagta gttactactg gggctggatc 180
cgccagcccc cagggaaggg gctggagtgg attgggagta tctcctatag tgggagcacc 240
tactacaacc cgtccctcaa gagtcgagtc accatatccg tagacacgtc caagaaccag 300
ttctccctga agctgagttc tgtgaccgcc gcagacacgg cggtgtacta ctgcgccaga 360
ggcaggggat atgcaaccag cttagccttc gatatctggg gtcagggtac aatggtcacc 420
gtctcctcag ggtctacatc cggctccggg aagcccggaa gtggcgaagg tagtacaaag 480
ggggaaattg tgttgacaca gtctccagcc accctgtctt tgtctccagg ggaaagagcc 540
accctctcct gcagggccag tcagagtgtt agcagctact tagcctggta ccaacagaaa 600
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat gatgcatcca acagggccac tggcatccca 660
gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagcctagag 720
cctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag cagagacacg tctggcctcc tacttttggc 780
ggagggacca aggttgagat caaacgggcc gctgcccttg ataatgaaaa gtcaaacgga 840
acaatcattc acgtgaaggg caagcacctc tgtccgtcac ccttgttccc tggtccatcc 900
aagccattct gggtgttggt cgtagtgggt ggagtcctcg cttgttactc tctgctcgtc 960
accgtggctt ttataatctt ctgggttaga tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat 1020
tacatgaata tgactccacg ccgccctggc cccacaagga aacactacca gccttacgca 1080
ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca 1140
ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa 1200
gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga 1260
cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc 1320
tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac 1380
cagggactca gcactgctac gaaggatact tatgacgctc tccacatgca agccctgcca 1440
cctaggtaa 1449
<210> 146 <211> 482 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> HxL CAR NM-21517 <400> 146
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu
20 25 30
Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly
35 40 45
Ser Ile Ser Ser Ser Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro
50 55 60
Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr
65 70 75 80
Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr
85 90 95
Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp
100 105 110
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Gly Tyr Ala Thr Ser Leu
115 120 125
Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Gly
130 135 140
Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys
145 150 155 160
Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro
165 170 175
Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser
180 185 190
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
195 200 205
Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser
210 215 220
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
225 230 235 240
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg His Val Trp Pro
245 250 255
Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala
260 265 270
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
275 280 285
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp
290 295 300
Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val
305 310 315 320
Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
325 330 335
Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr
340 345 350
Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr
355 360 365
Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln
370 375 380
Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu
385 390 395 400
Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly
405 410 415
Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu
420 425 430
Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly
435 440 445
Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser
450 455 460
Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro
465 470 475 480
Pro Arg
<210> 147
<211> 1449
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК LxH CAR NM-21517
<400> 147
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc
ccggaaattg tgttgacaca gtctccagcc accctgtctt tgtctccagg ggaaagagcc 120
accctctcct gcagggccag tcagagtgtt agcagctact tagcctggta ccaacagaaa 180
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat gatgcatcca acagggccac tggcatccca 240
gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagcctagag 300
cctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag cagagacacg tctggcctcc tacttttggc 360
ggagggacca aggttgagat caaacggggg tctacatccg gctccgggaa gcccggaagt 420
ggcgaaggta gtacaaaggg gcagctgcag ctgcaggagt cgggcccagg actggtgaag 480
ccttcggaga ccctgtccct cacctgcact gtctctggtg gctccatcag cagtagtagt 540
tactactggg gctggatccg ccagccccca gggaaggggc tggagtggat tgggagtatc 600
tcctatagtg ggagcaccta ctacaacccg tccctcaaga gtcgagtcac catatccgta 660
gacacgtcca agaaccagtt ctccctgaag ctgagttctg tgaccgccgc agacacggcg 720
gtgtactact gcgccagagg caggggatat gcaaccagct tagccttcga tatctggggt 780
cagggtacaa tggtcaccgt ctcctcagcc gctgcccttg ataatgaaaa gtcaaacgga 840
acaatcattc acgtgaaggg caagcacctc tgtccgtcac ccttgttccc tggtccatcc 900
aagccattct gggtgttggt cgtagtgggt ggagtcctcg cttgttactc tctgctcgtc 960
accgtggctt ttataatctt ctgggttaga tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat 1020
tacatgaata tgactccacg ccgccctggc cccacaagga aacactacca gccttacgca 1080
ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca 1140
ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa 1200
gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga 1260
cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc 1320
tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac 1380
cagggactca gcactgctac gaaggatact tatgacgctc tccacatgca agccctgcca 1440
cctaggtaa 1449
<210> 148 <211> 482 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> LxH CAR NM-21517
<400> 148
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
35 40 45
Ser Val Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg
100 105 110
His Val Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser
130 135 140
Thr Lys Gly Gln Leu Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys
145 150 155 160
Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile
165 170 175
Ser Ser Ser Ser Tyr Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys
180 185 190
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Ser Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr
195 200 205
Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys
210 215 220
Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala
225 230 235 240
Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Gly Tyr Ala Thr Ser Leu Ala Phe
245 250 255
Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala
260 265 270
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp
290 295 300
Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val
305 310 315 320
Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
325 330 335
Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr
340 345 350
Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr
355 360 365
Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln
370 375 380
Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu
385 390 395 400
Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly
405 410 415
Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu
420 425 430
Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly
435 440 445
Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser
450 455 460
Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro
465 470 475 480
Pro Arg
ДНК
т/г ^ т"-
<210> 149 <211> 1440 <212>
<213> Искусственная последовательность
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggaggtgc agctggtgga gtctggggga ggcttggtac agcctggggg gtccctgaga 120
ctctcctgtg cagcctctgg attcaccttc agtagctata gcatgaactg ggtccgccag 180
gctccaggga aggggctgga gtgggtttca accattagta gtagtagtag taccatatac 240
tacgcagact ctgtgaaggg ccgattcacc atctccagag acaatgccaa gaactcactg 300
tatctgcaaa tgaacagcct gagagctgag gacacggcgg tgtactactg cgccagaggt 360
tctcaggagc acctgatttt cgattattgg ggacagggta cattggtcac cgtctcctca 420
gggtctacat ccggctccgg gaagcccgga agtggcgaag gtagtacaaa gggggaaatt 480
gtgttgacac agtctccagc caccctgtct ttgtctccag gggaaagagc caccctctcc 540
tgcagggcca gtcagagtgt tagcaggtac ttagcctggt accaacagaa acctggccag 600
gctcccaggc tcctcatcta tgatgcatcc aacagggcca ctggcatccc agccaggttc 660
agtggcagtg ggtctgggac agacttcact ctcaccatca gcagcctaga gcctgaagat 720
tttgcagttt attactgtca gcagagattc tactaccctt ggacttttgg cggagggacc 780
aaggttgaga tcaaacgggc cgctgccctt gataatgaaa agtcaaacgg aacaatcatt 840
cacgtgaagg gcaagcacct ctgtccgtca cccttgttcc ctggtccatc caagccattc 900
tgggtgttgg tcgtagtggg tggagtcctc gcttgttact ctctgctcgt caccgtggct 960
tttataatct tctgggttag atccaaaaga agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat 1020
atgactccac gccgccctgg ccccacaagg aaacactacc agccttacgc accacctaga 1080
gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat 1140
cagcagggcc agaaccaact gtataacgag ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac 1200
gttttggaca agcgcagagg acgggaccct gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac 1260
ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa 1320
ataggcatga aaggagagcg gagaagggga aaagggcacg acggtttgta ccagggactc 1380
agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct ctccacatgc aagccctgcc acctaggtaa 1440
<210> 150 <211> 479
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> HxL CAR TS-21522 <400> 150
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ser Thr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr
65 70 75 80
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala
85 90 95
Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ser Gln Glu His Leu Ile Phe Asp
115 120 125
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser
130 135 140
Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Glu Ile
145 150 155 160
Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg
165 170 175
Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala
180 185 190
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp
195 200 205
Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp
225 230 235 240
Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Phe Tyr Tyr Pro Trp Thr Phe
245 250 255
Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn
260 265 270
Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val
290 295 300
Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala
305 310 315 320
Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser
325 330 335
Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His
340 345 350
Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg
355 360 365
Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln
370 375 380
Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp
385 390 395 400
Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro
405 410 415
Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp
420 425 430
Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg
435 440 445
Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr
450 455 460
Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
<210> 151 <211> 1440 <212>
ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК LxH CAR TS-21522 <400> 151
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggaaattg tgttgacaca gtctccagcc accctgtctt tgtctccagg ggaaagagcc
120
accctctcct gcagggccag tcagagtgtt agcaggtact tagcctggta ccaacagaaa 180
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat gatgcatcca acagggccac tggcatccca 240
gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagcctagag 300
cctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag cagagattct actacccttg gacttttggc 360
ggagggacca aggttgagat caaacggggg tctacatccg gctccgggaa gcccggaagt 420
ggcgaaggta gtacaaaggg ggaggtgcag ctggtggagt ctgggggagg cttggtacag 480
cctggggggt ccctgagact ctcctgtgca gcctctggat tcaccttcag tagctatagc 540
atgaactggg tccgccaggc tccagggaag gggctggagt gggtttcaac cattagtagt 600
agtagtagta ccatatacta cgcagactct gtgaagggcc gattcaccat ctccagagac 660
aatgccaaga actcactgta tctgcaaatg aacagcctga gagctgagga cacggcggtg 720
tactactgcg ccagaggttc tcaggagcac ctgattttcg attattgggg acagggtaca 780
ttggtcaccg tctcctcagc cgctgccctt gataatgaaa agtcaaacgg aacaatcatt 840
cacgtgaagg gcaagcacct ctgtccgtca cccttgttcc ctggtccatc caagccattc 900
tgggtgttgg tcgtagtggg tggagtcctc gcttgttact ctctgctcgt caccgtggct 960
tttataatct tctgggttag atccaaaaga agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat 1020
atgactccac gccgccctgg ccccacaagg aaacactacc agccttacgc accacctaga 1080
gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat 1140
cagcagggcc agaaccaact gtataacgag ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac 1200
gttttggaca agcgcagagg acgggaccct gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac 1260
ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa 1320
ataggcatga aaggagagcg gagaagggga aaagggcacg acggtttgta ccagggactc 1380
agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct ctccacatgc aagccctgcc acctaggtaa 1440
<210> 152 <211> 479 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> LxH CAR TS-21522 <400> 152
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Val Ser Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg
100 105 110
Phe Tyr Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser
130 135 140
Thr Lys Gly Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Ser Ser Tyr Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
180 185 190
Glu Trp Val Ser Thr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
210 215 220
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ser Gln Glu His Leu Ile Phe Asp Tyr Trp
245 250 255
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn
260 265 270
Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys
275 280 285
Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala
305 310 315 320
Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser
325 330 335
Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His
340 345 350
Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg
355 360 365
Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln
370 375 380
Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp
385 390 395 400
Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro
405 410 415
Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp
420 425 430
Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg
435 440 445
Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr
450 455 460
Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
<210> 153
<211> 1449
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК HxL CAR RY-21527 <400> 153
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60 ccgcaggtgc agctggtgga gtctggggga ggcgtggtcc agcctgggag gtccctgaga 120 ctctcctgtg cagcgtctgg attcaccttc agtagctatg gcatgcactg ggtccgccag 180
gctccaggca aggggctgga gtgggtggca gttatatcgt atgatggaag taataaatac 240
tatgcagact ccgtgaaggg ccgattcacc atctccagag acaattccaa gaacacgctg 300
tatctgcaaa tgaacagcct gagagccgag gacacggcgg tgtactactg cgccagaact 360
gacttctgga gcggatcccc tccaggctta gattactggg gacagggtac attggtcacc 420
gtctcctcag ggtctacatc cggctccggg aagcccggaa gtggcgaagg tagtacaaag 480
ggggacatcc agttgaccca gtctccatct tccgtgtctg catctgtagg agacagagtc 540
accatcactt gtcgggcgag tcagggtatt agcagctggt tagcctggta tcagcagaaa 600
ccagggaaag cccctaagct cctgatctat ggtgcatcca gtttgcaaag tggggtccca 660
tcaaggttca gcggcagtgg atctgggaca gatttcactc tcaccatcag cagcctgcag 720
cctgaagatt ttgcaactta ttactgtcag cagatataca ccttcccttt cacttttggc 780
ggagggacca aggttgagat caaacgggcc gctgcccttg ataatgaaaa gtcaaacgga 840
acaatcattc acgtgaaggg caagcacctc tgtccgtcac ccttgttccc tggtccatcc 900
aagccattct gggtgttggt cgtagtgggt ggagtcctcg cttgttactc tctgctcgtc 960
accgtggctt ttataatctt ctgggttaga tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat 1020
tacatgaata tgactccacg ccgccctggc cccacaagga aacactacca gccttacgca 1080
ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca 1140
ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa 1200
gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga 1260
cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc 1320
tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac 1380
cagggactca gcactgctac gaaggatact tatgacgctc tccacatgca agccctgcca 1440
cctaggtaa 1449
<210> 154 <211> 482 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> HxL CAR RY-21527
<400> 154
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
20 25 30
Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr
65 70 75 80
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Asp Phe Trp Ser Gly Ser Pro Pro
115 120 125
Gly Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly
130 135 140
Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys
145 150 155 160
Gly Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val
165 170 175
Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Ser Ser
180 185 190
Trp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu
195 200 205
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser
210 215 220
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln
225 230 235 240
Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile Tyr Thr Phe Pro
245 250 255
Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala
260 265 270
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
275 280 285
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp
290 295 300
Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val
305 310 315 320
Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
325 330 335
Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr
340 345 350
Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr
355 360 365
Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln
370 375 380
Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu
385 390 395 400
Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly
405 410 415
Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu
420 425 430
Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly
435 440 445
Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser
450 455 460
Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro
465 470 475 480
Pro Arg
<210> 155
<211> 1449
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК LxH CAR RY-21527
<400> 155
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60 ccggacatcc agttgaccca gtctccatct tccgtgtctg catctgtagg agacagagtc 120
accatcactt gtcgggcgag tcagggtatt agcagctggt tagcctggta tcagcagaaa 180
ccagggaaag cccctaagct cctgatctat ggtgcatcca gtttgcaaag tggggtccca 240
tcaaggttca gcggcagtgg atctgggaca gatttcactc tcaccatcag cagcctgcag 300
cctgaagatt ttgcaactta ttactgtcag cagatataca ccttcccttt cacttttggc 360
ggagggacca aggttgagat caaacggggg tctacatccg gctccgggaa gcccggaagt 420
ggcgaaggta gtacaaaggg gcaggtgcag ctggtggagt ctgggggagg cgtggtccag 480
cctgggaggt ccctgagact ctcctgtgca gcgtctggat tcaccttcag tagctatggc 540
atgcactggg tccgccaggc tccaggcaag gggctggagt gggtggcagt tatatcgtat 600
gatggaagta ataaatacta tgcagactcc gtgaagggcc gattcaccat ctccagagac 660
aattccaaga acacgctgta tctgcaaatg aacagcctga gagccgagga cacggcggtg 720
tactactgcg ccagaactga cttctggagc ggatcccctc caggcttaga ttactgggga 780
cagggtacat tggtcaccgt ctcctcagcc gctgcccttg ataatgaaaa gtcaaacgga 840
acaatcattc acgtgaaggg caagcacctc tgtccgtcac ccttgttccc tggtccatcc 900
aagccattct gggtgttggt cgtagtgggt ggagtcctcg cttgttactc tctgctcgtc 960
accgtggctt ttataatctt ctgggttaga tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat 1020
tacatgaata tgactccacg ccgccctggc cccacaagga aacactacca gccttacgca 1080
ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca 1140
ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa 1200
gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga 1260
cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc 1320
tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac 1380
cagggactca gcactgctac gaaggatact tatgacgctc tccacatgca agccctgcca 1440
cctaggtaa 1449
<210> 156 <211> 482
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> LxH CAR RY-21527 <400> 156
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val
20 25 30
Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
50 55 60
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro
65 70 75 80
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ile
100 105 110
Tyr Thr Phe Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser
130 135 140
Thr Lys Gly Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
180 185 190
Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
210 215 220
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Asp Phe Trp Ser Gly Ser Pro Pro Gly Leu
245 250 255
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala
260 265 270
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
275 280 285
Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val
305 310 315 320
Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
325 330 335
Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr
340 345 350
Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr
355 360 365
Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln
370 375 380
Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu
385 390 395 400
Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly
405 410 415
Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu
420 425 430
Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly
435 440 445
Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser
450 455 460
Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro
465 470 475 480
Pro Arg
<210> 157 <211> 1479 <212>
ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК HxL CAR PP-21528
<400> 157
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agctggtgca gtctggggct gaggtgaaga agcctgggtc ctcggtgaag
120
gtctcctgca aggcttctgg aggcaccttc agcagctatg ctatcagctg ggtgcgacag 180
gcccctggac aagggcttga gtggatggga gggatcatcc ctatctttgg tacagcaaac 240
tacgcacaga agttccaggg cagagtcacg attaccgcgg acgaatccac gagcacagcc 300
tacatggagc tgagcagcct gagatctgag gacacggcgg tgtactactg cgccagaact 360
cctgaatact cctccagcat atggcactat tactacggca tggacgtatg gggccaggga 420
acaactgtca ccgtctcctc agggtctaca tccggctccg ggaagcccgg aagtggcgaa 480
ggtagtacaa agggggacat cgtgatgacc cagtctccag actccctggc tgtgtctctg 540
ggcgagaggg ccaccatcaa ctgcaagtcc agccagagtg ttttatacag ctccaacaat 600
aagaactact tagcttggta ccagcagaaa ccaggacagc ctcctaagct gctcatttac 660
tgggcatcta cccgggaatc cggggtccct gaccgattca gtggcagcgg gtctgggaca 720
gatttcactc tcaccatcag cagcctgcag gctgaagatg tggcagttta ttactgtcag 780
cagttcgccc acactccttt cacttttggc ggagggacca aggttgagat caaacgggcc 840
gctgcccttg ataatgaaaa gtcaaacgga acaatcattc acgtgaaggg caagcacctc 900
tgtccgtcac ccttgttccc tggtccatcc aagccattct gggtgttggt cgtagtgggt 960
ggagtcctcg cttgttactc tctgctcgtc accgtggctt ttataatctt ctgggttaga 1020
tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat tacatgaata tgactccacg ccgccctggc 1080
cccacaagga aacactacca gccttacgca ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc 1140
agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg 1200
tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga 1260
cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat 1320
gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg 1380
agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac cagggactca gcactgctac gaaggatact 1440
tatgacgctc tccacatgca agccctgcca cctaggtaa 1479
<210> 158 <211> 492 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> HxL CAR PP-21528 <400> 158
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val
20 25 30
Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn
65 70 75 80
Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser
85 90 95
Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Pro Glu Tyr Ser Ser Ser Ile Trp
115 120 125
His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr
130 135 140
Val Ser Ser Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu
145 150 155 160
Gly Ser Thr Lys Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu
165 170 175
Ala Val Ser Leu Gly Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln
180 185 190
Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln
195 200 205
Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr
210 215 220
Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
225 230 235 240
Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val
245 250 255
Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ala His Thr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly
260 265 270
Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser
275 280 285
Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro
290 295 300
Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly
305 310 315 320
Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile
325 330 335
Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met
340 345 350
Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro
355 360 365
Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe
370 375 380
Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu
385 390 395 400
Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp
405 410 415
Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys
420 425 430
Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala
435 440 445
Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys
450 455 460
Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr
465 470 475 480
Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490
<210> 159
<211> 1479
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК LxH CAR PP-21528
<400> 159
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc
ccggacatcg tgatgaccca gtctccagac tccctggctg tgtctctggg cgagagggcc 120
accatcaact gcaagtccag ccagagtgtt ttatacagct ccaacaataa gaactactta 180
gcttggtacc agcagaaacc aggacagcct cctaagctgc tcatttactg ggcatctacc 240
cgggaatccg gggtccctga ccgattcagt ggcagcgggt ctgggacaga tttcactctc 300
accatcagca gcctgcaggc tgaagatgtg gcagtttatt actgtcagca gttcgcccac 360
actcctttca cttttggcgg agggaccaag gttgagatca aacgggggtc tacatccggc 420
tccgggaagc ccggaagtgg cgaaggtagt acaaaggggc aggtgcagct ggtgcagtct 480
ggggctgagg tgaagaagcc tgggtcctcg gtgaaggtct cctgcaaggc ttctggaggc 540
accttcagca gctatgctat cagctgggtg cgacaggccc ctggacaagg gcttgagtgg 600
atgggaggga tcatccctat ctttggtaca gcaaactacg cacagaagtt ccagggcaga 660
gtcacgatta ccgcggacga atccacgagc acagcctaca tggagctgag cagcctgaga 720
tctgaggaca cggcggtgta ctactgcgcc agaactcctg aatactcctc cagcatatgg 780
cactattact acggcatgga cgtatggggc cagggaacaa ctgtcaccgt ctcctcagcc 840
gctgcccttg ataatgaaaa gtcaaacgga acaatcattc acgtgaaggg caagcacctc 900
tgtccgtcac ccttgttccc tggtccatcc aagccattct gggtgttggt cgtagtgggt 960
ggagtcctcg cttgttactc tctgctcgtc accgtggctt ttataatctt ctgggttaga 1020
tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat tacatgaata tgactccacg ccgccctggc 1080
cccacaagga aacactacca gccttacgca ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc 1140
agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg 1200
tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga 1260
cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat 1320
gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg 1380
agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac cagggactca gcactgctac gaaggatact 1440
tatgacgctc tccacatgca agccctgcca cctaggtaa 1479
<210> 160 <211> 492 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> LxH CAR PP-21528 <400> 160
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
Ala Val Ser Leu Gly Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln
35 40 45
Ser Val Leu Tyr Ser Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln
50 55 60
Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr
65 70 75 80
Arg Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
85 90 95
Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Ala His Thr Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly
115 120 125
Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro
130 135 140
Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser
145 150 155 160
Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys
165 170 175
Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln
180 185 190
Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe
195 200 205
Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr
210 215 220
Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg
225 230 235 240
Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Pro Glu Tyr Ser
245 250 255
Ser Ser Ile Trp His Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly
260 265 270
Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro
290 295 300
Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly
305 310 315 320
Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile
325 330 335
Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met
340 345 350
Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro
355 360 365
Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe
370 375 380
Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu
385 390 395 400
Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp
405 410 415
Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys
420 425 430
Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala
435 440 445
Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys
450 455 460
Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr
465 470 475 480
Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490
<210> 161
<211> 1452
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agctggtgga gtctggggga ggcgtggtcc agcctgggag gtccctgaga 120
ctctcctgtg cagcgtctgg attcaccttc agtagctatg gcatgcactg ggtccgccag 180
gctccaggca aggggctgga gtgggtggca gttatatcgt atgatggaag taataaatac 240
tatgcagact ccgtgaaggg ccgattcacc atctccagag acaattccaa gaacacgctg 300
tatctgcaaa tgaacagcct gagagccgag gacacggcgg tgtactactg cgtcaagggg 360
ccgttgcagg agccgccata cgattatgga atggacgtat ggggccaggg aacaactgtc 420
accgtctcct cagggtctac atccggctcc gggaagcccg gaagtggcga aggtagtaca 480
aagggggaaa tagtgatgac gcagtctcca gccaccctgt ctgtgtctcc aggggaaaga 540
gccaccctct cctgcagggc cagtcagagt gttagcagca acttagcctg gtaccagcag 600
aaacctggcc aggctcccag gctcctcatc tatagcgcat ccaccagggc cactggtatc 660
ccagccaggt tcagtggcag tgggtctggg acagagttca ctctcaccat cagcagcctg 720
cagtctgaag attttgcagt ttattactgt cagcagcacc acgtctggcc tctcactttt 780
ggcggaggga ccaaggttga gatcaaacgg gccgctgccc ttgataatga aaagtcaaac 840
ggaacaatca ttcacgtgaa gggcaagcac ctctgtccgt cacccttgtt ccctggtcca 900
tccaagccat tctgggtgtt ggtcgtagtg ggtggagtcc tcgcttgtta ctctctgctc 960
gtcaccgtgg cttttataat cttctgggtt agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc 1020
gattacatga atatgactcc acgccgccct ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac 1080
gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg agcagggtga agttttccag atctgcagat 1140
gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg 1200
gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca 1260
agacgaaaaa acccccagga gggtctctat aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa 1320
gcctattctg aaataggcat gaaaggagag cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg 1380
taccagggac tcagcactgc tacgaaggat acttatgacg ctctccacat gcaagccctg 1440
ccacctaggt aa 1452
<210> 162 <211> 483
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> HxL CAR RD-21530
<400> 162
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
20 25 30
Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr
65 70 75 80
Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Val Lys Gly Pro Leu Gln Glu Pro Pro Tyr Asp
115 120 125
Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr
145 150 155 160
Lys Gly Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser
165 170 175
Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser
180 185 190
Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu
195 200 205
Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe
210 215 220
Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu
225 230 235 240
Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His His Val Trp
245 250 255
Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala
260 265 270
Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly
275 280 285
Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe
290 295 300
Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu
305 310 315 320
Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg
325 330 335
Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro
340 345 350
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
355 360 365
Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
370 375 380
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
385 390 395 400
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
405 410 415
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
420 425 430
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
435 440 445
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
450 455 460
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
465 470 475 480
Pro Pro Arg
<210> 163
<211> 1452
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 163
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggaaatag tgatgacgca gtctccagcc accctgtctg tgtctccagg ggaaagagcc 120
accctctcct gcagggccag tcagagtgtt agcagcaact tagcctggta ccagcagaaa 180
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat agcgcatcca ccagggccac tggtatccca 240
gccaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gagttcactc tcaccatcag cagcctgcag 300
tctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag cagcaccacg tctggcctct cacttttggc 360
ggagggacca aggttgagat caaacggggg tctacatccg gctccgggaa gcccggaagt 420
ggcgaaggta gtacaaaggg gcaggtgcag ctggtggagt ctgggggagg cgtggtccag 480
cctgggaggt ccctgagact ctcctgtgca gcgtctggat tcaccttcag tagctatggc 540
atgcactggg tccgccaggc tccaggcaag gggctggagt gggtggcagt tatatcgtat 600
gatggaagta ataaatacta tgcagactcc gtgaagggcc gattcaccat ctccagagac 660
aattccaaga acacgctgta tctgcaaatg aacagcctga gagccgagga cacggcggtg 720
tactactgcg tcaaggggcc gttgcaggag ccgccatacg attatggaat ggacgtatgg 780
ggccagggaa caactgtcac cgtctcctca gccgctgccc ttgataatga aaagtcaaac 840
ggaacaatca ttcacgtgaa gggcaagcac ctctgtccgt cacccttgtt ccctggtcca 900
tccaagccat tctgggtgtt ggtcgtagtg ggtggagtcc tcgcttgtta ctctctgctc 960
gtcaccgtgg cttttataat cttctgggtt agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc 1020
gattacatga atatgactcc acgccgccct ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac 1080
gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg agcagggtga agttttccag atctgcagat 1140
gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg 1200
gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca 1260
agacgaaaaa acccccagga gggtctctat aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa 1320
gcctattctg aaataggcat gaaaggagag cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg 1380
taccagggac tcagcactgc tacgaaggat acttatgacg ctctccacat gcaagccctg 1440
ccacctaggt aa 1452
<210> 164 <211> 483 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> LxH CAR RD-21530 <400> 164
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
35 40 45
Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His
100 105 110
His Val Trp Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
Arg Gly Ser Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser
130 135 140
Thr Lys Gly Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
180 185 190
Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
210 215 220
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Val Lys Gly Pro Leu Gln Glu Pro Pro Tyr Asp Tyr Gly
245 250 255
Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly
275 280 285
Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe
290 295 300
Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu
305 310 315 320
Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg
325 330 335
Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro
340 345 350
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
355 360 365
Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
370 375 380
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
385 390 395 400
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
405 410 415
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
420 425 430
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
435 440 445
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
450 455 460
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
465 470 475 480
Pro Pro Arg
<210> 165
<211> 1440
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 165
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtcc aactgcaaga aagcggaccc ggactggtga agccttctga gacacttagt 120
ctgacgtgca cggtcagtgg cggctccatc tcctcctatt attggtcatg gatacgacaa 180
cccccaggta agggcctgga atggattggc tatatctact attcaggaag cacgaactac 240
aatcccagcc tgaagtcccg agtgacaatt tcagtagata ccagtaaaaa ccagttcagt 300
cttaaactgt caagcgtgac agctgccgac accgctgtgt attactgcgt ctcactggtg 360
tattgtggag gggattgtta tagcgggttc gattattggg gacagggaac cctggtgact 420
gtatcttccg gcggcggcgg ctcagggggt ggcggtagtg gcggtggggg ttccgatatt 480
caactgacac aatcccccag ctcactcagc gccagcgtgg gggacagggt tagctttacc 540
tgtcaagcct ctcaggatat aaataacttt ctgaactggt atcaacagaa gcctgggaag 600
gcgcccaaac tcctgatcta tgatgcgtcc aacctggaaa ctggcgtgcc ttcacgcttt 660
agcggctctg gcagtggtac agacttcact tttaccatct cttcacttca gccggaggac 720
atcgccacat attactgtca acagtacgga aacttgccct ttacttttgg aggcggcacc 780
aaagttgaaa tcaaaagggc cgctgccctg gataacgaaa agagcaatgg gactataata 840
catgttaaag gaaaacacct gtgtccatct cccctgttcc ctggaccgtc aaagccattt 900
tgggtgctcg tggttgtcgg tggcgttctc gcctgttata gcttgctggt gacagtagcc 960
ttcattatct tttgggtgag atccaaaaga agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat 1020
atgactccac gccgccctgg ccccacaagg aaacactacc agccttacgc accacctaga 1080
gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat 1140
cagcagggcc agaaccaact gtataacgag ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac 1200
gttttggaca agcgcagagg acgggaccct gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac 1260
ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa 1320
ataggcatga aaggagagcg gagaagggga aaagggcacg acggtttgta ccagggactc 1380
agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct ctccacatgc aagccctgcc acctaggtaa 1440
<210> 166 <211> 479 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 166
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu
20 25 30
Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly
35 40 45
Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr
65 70 75 80
Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys
85 90 95
Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala
100 105 110
Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser
115 120 125
Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile
145 150 155 160
Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg
165 170 175
Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn
180 185 190
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp
195 200 205
Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp
225 230 235 240
Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe
245 250 255
Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys
275 280 285
Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val
290 295 300
Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala
305 310 315 320
Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser
325 330 335
Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His
340 345 350
Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg
355 360 365
Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln
370 375 380
Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp
385 390 395 400
Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro
405 410 415
Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp
420 425 430
Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg
435 440 445
Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr
450 455 460
Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
ДНК
т/г ^ т"-
<210> 167 <211> 1374 <212>
<213> Искусственная последовательность
caggtccaac tgcaagaaag cggacccgga ctggtgaagc cttctgagac acttagtctg 60
acgtgcacgg tcagtggcgg ctccatctcc tcctattatt ggtcatggat acgacaaccc 120
ccaggtaagg gcctggaatg gattggctat atctactatt caggaagcac gaactacaat 180
cccagcctga agtcccgagt gacaatttca gtagatacca gtaaaaacca gttcagtctt 240
aaactgtcaa gcgtgacagc tgccgacacc gctgtgtatt actgcgtctc actggtgtat 300
tgtggagggg attgttatag cgggttcgat tattggggac agggaaccct ggtgactgta 360
tcttccggcg gcggcggctc agggggtggc ggtagtggcg gtgggggttc cgatattcaa 420
ctgacacaat cccccagctc actcagcgcc agcgtggggg acagggttag ctttacctgt 480
caagcctctc aggatataaa taactttctg aactggtatc aacagaagcc tgggaaggcg 540
cccaaactcc tgatctatga tgcgtccaac ctggaaactg gcgtgccttc acgctttagc 600
ggctctggca gtggtacaga cttcactttt accatctctt cacttcagcc ggaggacatc 660
gccacatatt actgtcaaca gtacggaaac ttgcccttta cttttggagg cggcaccaaa 720
gttgaaatca aaagggccgc tgccctggat aacgaaaaga gcaatgggac tataatacat 780
gttaaaggaa aacacctgtg tccatctccc ctgttccctg gaccgtcaaa gccattttgg 840
gtgctcgtgg ttgtcggtgg cgttctcgcc tgttatagct tgctggtgac agtagccttc 900
attatctttt gggtgagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 9 60
actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1020
ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag 1080
cagggccaga accaactgta taacgagctc aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt 1140
ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc 1200
caggagggtc tctataatga gctgcagaag gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata 1260
ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc 1320
actgctacga aggatactta tgacgctctc cacatgcaag ccctgccacc tagg 1374
<210> 168 <211> 458
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 168
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys
145 150 155 160
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys
165 170 175
Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu
180 185 190
Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
195 200 205
Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr
210 215 220
Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly
245 250 255
Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe
260 265 270
Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val
275 280 285
Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp
290 295 300
Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met
305 310 315 320
Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala
325 330 335
Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg
340 345 350
Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn
355 360 365
Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg
370 375 380
Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro
385 390 395 400
Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala
405 410 415
Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His
420 425 430
Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp
435 440 445
Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455
<210> 169 <211> 1467
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 169
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agctgcagga atccggaccg gggctggtga agcccagcga gactctgagt 120
ctcacgtgta cagtttctgg aggtagcatt agctcctact attggtcatg gataaggcag 180
ccccccggga agggattgga atggatcggc tatatttact acagtgggag caccaattac 240
aacccctcac tgaagtctag agttacaatc agcgttgaca cctcaaagaa tcagttcagt 300
ttgaaattgt ctagcgtcac agcagctgat acagccgtct attattgtgt ttctctggtc 360
tattgcggtg gggattgtta cagtggcttt gactattggg ggcagggtac tctggttaca 420
gtttcttccg gggggggagg ctctgggggc ggaggctcag gtggtggagg cagcgacatc 480
cagttgacac agagcccgag ttccttgtcc gcctccgtcg gggatagagt gtcatttacc 540
tgtcaggcct ctcaggatat taataacttt ctgaattggt atcagcaaaa gcccggaaag 600
gcacccaagc tgttgattta cgacgccagt aacctggaga caggcgtgcc ctcccggttt 660
agtggtagcg gaagcggtac ggattttacc tttactatca gctctctcca acccgaagac 720
attgcaacct actattgtca acaatatgga aacctgcctt ttacatttgg cggcggcacc 780
aaggtggaga ttaagcgggc ggcagctatt gaggtgatgt atccaccgcc ttacctggat 840
aacgaaaaga gtaacggtac catcattcac gtgaaaggta aacacctgtg tccttctccc 900
ctcttccccg ggccatcaaa gcccttctgg gttcttgtgg tcgtgggagg cgtgcttgct 960
tgttattctc tgctcgttac cgtggcgttt atcatttttt gggttagatc caaaagaagc 1020
cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa 1080
cactaccagc cttacgcacc acctagagat ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt 1140
tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag cagggccaga accaactgta taacgagctc 1200
aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag 1260
atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc caggagggtc tctataatga gctgcagaag 1320
gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa 1380
gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc actgctacga aggatactta tgacgctctc 1440
cacatgcaag ccctgccacc taggtaa 1467
<210> 170 <211> 488 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 170
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu
20 25 30
Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly
35 40 45
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr
65 70 75 80
Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys
85 90 95
Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala
100 105 110
Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser
115 120 125
Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile
145 150 155 160
Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg
165 170 175
Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn
180 185 190
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp
195 200 205
Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp
225 230 235 240
Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe
245 250 255
Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val
260 265 270
Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile
275 280 285
Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly
290 295 300
Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg
325 330 335
Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro
340 345 350
Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro
355 360 365
Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala
370 375 380
Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu
385 390 395 400
Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly
405 410 415
Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu
420 425 430
Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser
435 440 445
Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly
450 455 460
Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu
465 470 475 480
His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485
<210> 171
<211> 1401
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 171
caggtgcagc tgcaggaatc cggaccgggg ctggtgaagc ccagcgagac tctgagtctc 60
acgtgtacag tttctggagg tagcattagc tcctactatt ggtcatggat aaggcagccc 120
cccgggaagg gattggaatg gatcggctat atttactaca gtgggagcac caattacaac 180
ccctcactga agtctagagt tacaatcagc gttgacacct caaagaatca gttcagtttg
240
aaattgtcta gcgtcacagc agctgataca gccgtctatt attgtgtttc tctggtctat 300
tgcggtgggg attgttacag tggctttgac tattgggggc agggtactct ggttacagtt 360
tcttccgggg ggggaggctc tgggggcgga ggctcaggtg gtggaggcag cgacatccag 420
ttgacacaga gcccgagttc cttgtccgcc tccgtcgggg atagagtgtc atttacctgt 480
caggcctctc aggatattaa taactttctg aattggtatc agcaaaagcc cggaaaggca 540
cccaagctgt tgatttacga cgccagtaac ctggagacag gcgtgccctc ccggtttagt 600
ggtagcggaa gcggtacgga ttttaccttt actatcagct ctctccaacc cgaagacatt 660
gcaacctact attgtcaaca atatggaaac ctgcctttta catttggcgg cggcaccaag 720
gtggagatta agcgggcggc agctattgag gtgatgtatc caccgcctta cctggataac 780
gaaaagagta acggtaccat cattcacgtg aaaggtaaac acctgtgtcc ttctcccctc 840
ttccccgggc catcaaagcc cttctgggtt cttgtggtcg tgggaggcgt gcttgcttgt 900
tattctctgc tcgttaccgt ggcgtttatc attttttggg ttagatccaa aagaagccgc 960
ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1020
taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc 1080
agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac 1140
ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg 1200
ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag gagggtctct ataatgagct gcagaaggat 1260
aagatggctg aagcctattc tgaaataggc atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg 1320
cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact gctacgaagg atacttatga cgctctccac 1380
atgcaagccc tgccacctag g 1401
<210> 172 <211> 467 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 172
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys
145 150 155 160
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys
165 170 175
Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu
180 185 190
Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
195 200 205
Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr
210 215 220
Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro
245 250 255
Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly
260 265 270
Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe
275 280 285
Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu
290 295 300
Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro
325 330 335
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
340 345 350
Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
355 360 365
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
370 375 380
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
385 390 395 400
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
405 410 415
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
420 425 430
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
435 440 445
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
450 455 460
Pro Pro Arg
465
<210> 173
<211> 1548
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 173
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc aattgcaaga gtccggcccc ggactcgtta aacccagtga gacgcttagc 120
ctgacctgta ccgtctcagg gggcagcatc tcctcttatt actggagctg gatcaggcag 180
cctccaggaa aaggccttga atggattggg tacatctact actctggctc aacaaattat 240
aatccatccc tgaagtcccg cgtgactatc tctgtggaca ccagcaagaa tcagttttca 300
ctgaagttgt ctagtgttac cgcggccgac accgccgtat actactgtgt gtctcttgtg 360
tactgtggcg gcgactgcta ttccgggttc gactactggg gccaagggac tctggtaacc 420
gtgtcctcag gcggcggcgg gtcaggagga ggcggcagtg gaggtggcgg ctccgacatc 480
cagctgacac aatcaccatc ttccctttca gcttcagtcg gggacagagt gtccttcaca 540
tgccaggcca gccaggatat caataacttc ctgaactggt accaacagaa acccggaaag 600
gctccaaagc tcctgatcta tgatgcttcc aacctggaga ccggcgtgcc ctccaggttc 660
agtggttcag gatcaggcac tgactttacg ttcaccatat ccagtcttca gcccgaagac 720
attgcaacct attactgcca acaatacggg aaccttccct ttacattcgg aggcggcacc 780
aaggtggaaa tcaaaagggc tgcagcattg agcaactcaa taatgtattt tagtcacttt 840
gtaccagtgt tcttgccggc taagcctact accacacccg ctccacggcc acctacccca 900
gctcctacca tcgcttcaca gcctctgtcc ctgcgcccag aggcttgccg accggccgca 960
gggggcgctg ttcataccag aggactggat ttcgcctgcg atatctatat ctgggcaccc 1020
ctggccggaa cctgcggcgt actcctgctg tccctggtca tcacgctcta ttgtaatcac 1080
aggaacagat ccaaaagaag ccgcctgctc catagcgatt acatgaatat gactccacgc 1140
cgccctggcc ccacaaggaa acactaccag ccttacgcac cacctagaga tttcgctgcc 1200
tatcggagca gggtgaagtt ttccagatct gcagatgcac cagcgtatca gcagggccag 1260
aaccaactgt ataacgagct caacctggga cgcagggaag agtatgacgt tttggacaag 1320
cgcagaggac gggaccctga gatgggtggc aaaccaagac gaaaaaaccc ccaggagggt 1380
ctctataatg agctgcagaa ggataagatg gctgaagcct attctgaaat aggcatgaaa 1440
ggagagcgga gaaggggaaa agggcacgac ggtttgtacc agggactcag cactgctacg 1500
aaggatactt atgacgctct ccacatgcaa gccctgccac ctaggtaa 1548
<210> 174 <211> 515
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 174
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu
20 25 30
Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly
35 40 45
Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr
65 70 75 80
Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys
85 90 95
Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala
100 105 110
Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser
115 120 125
Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile
145 150 155 160
Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg
165 170 175
Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn
180 185 190
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp
195 200 205
Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp
225 230 235 240
Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe
245 250 255
Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn
260 265 270
Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys
275 280 285
Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile
290 295 300
Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr
325 330 335
Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu
340 345 350
Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg
355 360 365
Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro
370 375 380
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
385 390 395 400
Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
405 410 415
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
420 425 430
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
435 440 445
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
450 455 460
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
465 470 475 480
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
485 490 495
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
500 505 510
Pro Pro Arg
515
ДНК
т/г ^ т"-
<210> 175 <211> 1482 <212>
<213> Искусственная последовательность
caggtgcaat tgcaagagtc cggccccgga ctcgttaaac ccagtgagac gcttagcctg 60
acctgtaccg tctcaggggg cagcatctcc tcttattact ggagctggat caggcagcct 120
ccaggaaaag gccttgaatg gattgggtac atctactact ctggctcaac aaattataat 180
ccatccctga agtcccgcgt gactatctct gtggacacca gcaagaatca gttttcactg 240
aagttgtcta gtgttaccgc ggccgacacc gccgtatact actgtgtgtc tcttgtgtac 300
tgtggcggcg actgctattc cgggttcgac tactggggcc aagggactct ggtaaccgtg 360
tcctcaggcg gcggcgggtc aggaggaggc ggcagtggag gtggcggctc cgacatccag 420
ctgacacaat caccatcttc cctttcagct tcagtcgggg acagagtgtc cttcacatgc 480
caggccagcc aggatatcaa taacttcctg aactggtacc aacagaaacc cggaaaggct 540
ccaaagctcc tgatctatga tgcttccaac ctggagaccg gcgtgccctc caggttcagt 600
ggttcaggat caggcactga ctttacgttc accatatcca gtcttcagcc cgaagacatt 660
gcaacctatt actgccaaca atacgggaac cttcccttta cattcggagg cggcaccaag 720
gtggaaatca aaagggctgc agcattgagc aactcaataa tgtattttag tcactttgta 780
ccagtgttct tgccggctaa gcctactacc acacccgctc cacggccacc taccccagct 840
cctaccatcg cttcacagcc tctgtccctg cgcccagagg cttgccgacc ggccgcaggg 900
ggcgctgttc ataccagagg actggatttc gcctgcgata tctatatctg ggcacccctg 960
gccggaacct gcggcgtact cctgctgtcc ctggtcatca cgctctattg taatcacagg 1020
aacagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1080
cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1140
cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1200
caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1260
agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1320
tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1380
gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1440
gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta gg 1482
<210> 176 <211> 494 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 176
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser
130 135 140
Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys
145 150 155 160
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys
165 170 175
Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu
180 185 190
Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe
195 200 205
Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr
210 215 220
Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys
225 230 235 240
Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe
245 250 255
Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro
260 265 270
Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu
275 280 285
Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His
290 295 300
Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu
305 310 315 320
Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr
325 330 335
Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
340 345 350
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
355 360 365
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
370 375 380
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
385 390 395 400
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
405 410 415
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
420 425 430
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
435 440 445
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
450 455 460
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
465 470 475 480
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490
<210> 177
<211> 1440
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 177
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggatatcc agctcacgca atccccctca agcttgagtg cctccgtggg cgaccgggtg 120
tccttcacat gtcaggcaag ccaagacata aataatttcc tgaattggta ccaacaaaaa 180
cccggcaagg ctcccaaact cctgatttat gatgcctcca atctggagac cggggtccct 240
tctagattca gcggaagtgg cagcggcaca gactttacat ttactatctc ttctctgcaa 300
ccagaggaca tcgccacata ctattgccag caatacggca atctgccctt caccttcgga 360
ggcggaacca aggtagaaat taaaaggggc ggtggaggct ccggaggggg gggctctggc 420
ggagggggct cccaagtaca attgcaggag tcagggcctg gactcgtgaa gccttcagaa 480
actttgtcac tgacatgtac agtgtccggc ggaagcattt ccagttacta ttggtcctgg 540
attagacagc cacccggcaa aggactggaa tggattggat atatctacta ctctggatct 600
acaaactata atcccagcct caaatccagg gtcactatta gtgtggatac atcaaagaat 660
cagttctcct tgaagctgag ctcagtcact gctgccgaca ccgcagtgta ctattgtgtg 720
agcctggtct actgcggcgg agattgctac agcggtttcg attactgggg ccagggcacc 780
ctggttaccg ttagttccgc ggctgctctt gataacgaga agtccaacgg tacgattatc 840
cacgttaagg gtaagcacct ttgccctagc ccgctgttcc caggccccag taagcccttt 900
tgggtcctcg ttgtggtagg tggggtactc gcctgctact ccctgctcgt cactgtcgca 960
ttcatcatct tctgggtcag atccaaaaga agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat 1020
atgactccac gccgccctgg ccccacaagg aaacactacc agccttacgc accacctaga 1080
gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat 1140
cagcagggcc agaaccaact gtataacgag ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac 1200
gttttggaca agcgcagagg acgggaccct gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac 1260
ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa 1320
ataggcatga aaggagagcg gagaagggga aaagggcacg acggtttgta ccagggactc 1380
agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct ctccacatgc aagccctgcc acctaggtaa 1440
<210> 178 <211> 479 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 178
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
20 25 30
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln
35 40 45
Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
50 55 60
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro
65 70 75 80
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
100 105 110
Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
130 135 140
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
145 150 155 160
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
165 170 175
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
180 185 190
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
195 200 205
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
210 215 220
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
225 230 235 240
Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp
245 250 255
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn
260 265 270
Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys
275 280 285
Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val
290 295 300
Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala
305 310 315 320
Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser
325 330 335
Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His
340 345 350
Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg
355 360 365
Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln
370 375 380
Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp
385 390 395 400
Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro
405 410 415
Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp
420 425 430
Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg
435 440 445
Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr
450 455 460
Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
<210> 179
<211> 1374
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 179
gatatccagc tcacgcaatc cccctcaagc ttgagtgcct ccgtgggcga ccgggtgtcc
ttcacatgtc aggcaagcca agacataaat aatttcctga attggtacca acaaaaaccc 120
ggcaaggctc ccaaactcct gatttatgat gcctccaatc tggagaccgg ggtcccttct 180
agattcagcg gaagtggcag cggcacagac tttacattta ctatctcttc tctgcaacca 240
gaggacatcg ccacatacta ttgccagcaa tacggcaatc tgcccttcac cttcggaggc 300
ggaaccaagg tagaaattaa aaggggcggt ggaggctccg gagggggggg ctctggcgga 360
gggggctccc aagtacaatt gcaggagtca gggcctggac tcgtgaagcc ttcagaaact 420
ttgtcactga catgtacagt gtccggcgga agcatttcca gttactattg gtcctggatt 480
agacagccac ccggcaaagg actggaatgg attggatata tctactactc tggatctaca 540
aactataatc ccagcctcaa atccagggtc actattagtg tggatacatc aaagaatcag 600
ttctccttga agctgagctc agtcactgct gccgacaccg cagtgtacta ttgtgtgagc 660
ctggtctact gcggcggaga ttgctacagc ggtttcgatt actggggcca gggcaccctg 720
gttaccgtta gttccgcggc tgctcttgat aacgagaagt ccaacggtac gattatccac 780
gttaagggta agcacctttg ccctagcccg ctgttcccag gccccagtaa gcccttttgg 840
gtcctcgttg tggtaggtgg ggtactcgcc tgctactccc tgctcgtcac tgtcgcattc 900
atcatcttct gggtcagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 960
actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1020
ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag 1080
cagggccaga accaactgta taacgagctc aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt 1140
ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc 1200
caggagggtc tctataatga gctgcagaag gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata 1260
ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc 1320
actgctacga aggatactta tgacgctctc cacatgcaag ccctgccacc tagg 1374
<210> 180 <211> 458
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 180
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly
100 105 110
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln
115 120 125
Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr
130 135 140
Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile
145 150 155 160
Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr
165 170 175
Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile
180 185 190
Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val
195 200 205
Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys
210 215 220
Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
225 230 235 240
Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly
245 250 255
Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe
260 265 270
Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val
275 280 285
Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met
305 310 315 320
Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala
325 330 335
Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg
340 345 350
Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn
355 360 365
Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg
370 375 380
Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro
385 390 395 400
Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala
405 410 415
Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His
420 425 430
Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp
435 440 445
Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455
<210> 181 <211> 1467
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 181
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggatatcc agctgaccca gtctccatcc tctttgagtg cctccgtggg tgaccgcgtc 120
tctttcactt gccaagccag ccaagacatc aacaactttc tgaattggta ccagcagaaa 180
ccaggcaaag caccaaagct cctcatctac gacgcctcca acctggaaac cggggtgccc 240
agcaggttta gcgggagcgg ttctggcacg gattttacgt tcaccatctc ctctctgcag 300
cccgaggata tagctactta ttactgtcag cagtacggga atctgccatt tacttttggg 360
ggtggaacta aggtggaaat caaaaggggc ggcgggggaa gcgggggcgg gggctcaggt 420
ggcggaggga gccaggtgca actccaggaa agtggcccag gattggtgaa gcccagcgag 480
accctttccc ttacttgtac tgttagcgga ggcagcataa gcagctacta ttggtcctgg 540
atcagacagc caccagggaa agggcttgaa tggattggct acatttacta ttccgggtcc 600
accaactaca acccatccct caagtcccgc gtgacaattt ccgtcgacac aagcaagaac 660
cagttctccc tgaaacttag tagcgtcact gctgcagata cagcagtgta ctattgtgtc 720
agccttgtct actgtggcgg cgactgctac agtggctttg attactgggg acagggcacg 780
ctcgtgacag tgtccagcgc tgcggctatc gaggtaatgt atccgccacc gtatctggac 840
aacgagaagt ctaatgggac aatcattcac gtgaagggga agcacctgtg tccatccccc 900
ctgtttccgg gtcccagtaa acccttctgg gtgcttgttg tcgttggcgg ggtgctggcc 960
tgctattccc tgctggtgac cgtcgcgttt attattttct gggttagatc caaaagaagc 1020
cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa 1080
cactaccagc cttacgcacc acctagagat ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt 1140
tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag cagggccaga accaactgta taacgagctc 1200
aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag 1260
atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc caggagggtc tctataatga gctgcagaag 1320
gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa 1380
gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc actgctacga aggatactta tgacgctctc 1440
cacatgcaag ccctgccacc taggtaa 1467
<210> 182 <211> 488 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 182
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
20 25 30
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln
35 40 45
Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
50 55 60
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro
65 70 75 80
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
100 105 110
Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
130 135 140
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
145 150 155 160
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
165 170 175
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
180 185 190
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
195 200 205
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
210 215 220
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
225 230 235 240
Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp
245 250 255
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val
260 265 270
Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile
275 280 285
Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly
290 295 300
Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala
305 310 315 320
Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg
325 330 335
Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro
340 345 350
Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro
355 360 365
Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala
370 375 380
Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu
385 390 395 400
Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly
405 410 415
Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu
420 425 430
Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser
435 440 445
Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly
450 455 460
Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu
465 470 475 480
His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485
ДНК
т/г ^ т"-
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 183
gatatccagc tgacccagtc tccatcctct ttgagtgcct ccgtgggtga ccgcgtctct 60
ttcacttgcc aagccagcca agacatcaac aactttctga attggtacca gcagaaacca 120
ggcaaagcac caaagctcct catctacgac gcctccaacc tggaaaccgg ggtgcccagc 180
aggtttagcg ggagcggttc tggcacggat tttacgttca ccatctcctc tctgcagccc 240
gaggatatag ctacttatta ctgtcagcag tacgggaatc tgccatttac ttttgggggt 300
ggaactaagg tggaaatcaa aaggggcggc gggggaagcg ggggcggggg ctcaggtggc 360
ggagggagcc aggtgcaact ccaggaaagt ggcccaggat tggtgaagcc cagcgagacc 420
ctttccctta cttgtactgt tagcggaggc agcataagca gctactattg gtcctggatc 480
agacagccac cagggaaagg gcttgaatgg attggctaca tttactattc cgggtccacc 540
aactacaacc catccctcaa gtcccgcgtg acaatttccg tcgacacaag caagaaccag 600
ttctccctga aacttagtag cgtcactgct gcagatacag cagtgtacta ttgtgtcagc 660
cttgtctact gtggcggcga ctgctacagt ggctttgatt actggggaca gggcacgctc 720
gtgacagtgt ccagcgctgc ggctatcgag gtaatgtatc cgccaccgta tctggacaac 780
gagaagtcta atgggacaat cattcacgtg aaggggaagc acctgtgtcc atcccccctg 840
tttccgggtc ccagtaaacc cttctgggtg cttgttgtcg ttggcggggt gctggcctgc 900
tattccctgc tggtgaccgt cgcgtttatt attttctggg ttagatccaa aagaagccgc 960
ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1020
taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc 1080
agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac 1140
ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg 1200
ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag gagggtctct ataatgagct gcagaaggat 1260
aagatggctg aagcctattc tgaaataggc atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg 1320
cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact gctacgaagg atacttatga cgctctccac 1380
atgcaagccc tgccacctag g 1401
<210> 184 <211> 467 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 184
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly
100 105 110
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln
115 120 125
Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr
130 135 140
Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile
145 150 155 160
Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr
165 170 175
Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile
180 185 190
Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val
195 200 205
Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys
210 215 220
Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
225 230 235 240
Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro
245 250 255
Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly
260 265 270
Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe
275 280 285
Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu
290 295 300
Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg
305 310 315 320
Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro
325 330 335
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
340 345 350
Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
355 360 365
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
370 375 380
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
385 390 395 400
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
405 410 415
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
420 425 430
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
435 440 445
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
450 455 460
Pro Pro Arg
465
<210> 185 <211> 1548 <212>
ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 185
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggacattc aattgaccca gtcccctagc agtctctcag caagtgtggg agatagggtg 120
tcattcacct gtcaggcttc acaggacatc aacaacttcc tcaattggta tcagcagaag 180
ccagggaagg caccaaagct gctcatatat gacgcttcaa accttgaaac cggagtacct 240
agccgcttca gcggaagcgg atcagggact gacttcactt ttaccatctc ttcactgcag 300
cccgaagaca tcgccacata ctactgccag cagtacggaa acttgccttt tacatttggg 360
ggcggcacca aagtggagat taagcgaggg ggaggcggct caggaggcgg tggctccgga 420
ggcgggggtt cccaggtcca gctccaggaa tccggcccag gtctggttaa gcccagtgaa 480
actttgtccc tcacgtgtac tgtgagcggt ggttcaatct cctcatacta ttggtcttgg 540
atacggcaac ctcctggaaa gggcctcgag tggatcggct atatctacta tagtggctcc 600
actaattaca acccttccct caagtccaga gtcaccattt ccgtggacac atctaagaac 660
cagttcagtc tgaagttgtc cagcgttaca gccgcagaca cagccgttta ttactgtgtg 720
tctcttgttt actgcggggg agactgttat agcggcttcg attactgggg ccagggcacc 780
ttggtcacag tctcttccgc ggccgccctc tctaacagta ttatgtactt ttctcatttt 840
gtacccgtgt tccttcccgc taagccaact actaccccgg ccccacggcc gcctacccct 900
gcacccacaa tagccagtca gcctttgagc ctgagacctg aggcttgtcg gccggctgct 960
gggggtgcag tgcacacacg aggtcttgat tttgcttgcg acatatacat ctgggcccct 1020
ctggccggga cctgtggggt gctgcttctg agcttggtca tcacgctcta ttgcaaccat 1080
cgcaacagat ccaaaagaag ccgcctgctc catagcgatt acatgaatat gactccacgc 1140
cgccctggcc ccacaaggaa acactaccag ccttacgcac cacctagaga tttcgctgcc 1200
tatcggagca gggtgaagtt ttccagatct gcagatgcac cagcgtatca gcagggccag 1260
aaccaactgt ataacgagct caacctggga cgcagggaag agtatgacgt tttggacaag 1320
cgcagaggac gggaccctga gatgggtggc aaaccaagac gaaaaaaccc ccaggagggt 1380
ctctataatg agctgcagaa ggataagatg gctgaagcct attctgaaat aggcatgaaa 1440
ggagagcgga gaaggggaaa agggcacgac ggtttgtacc agggactcag cactgctacg 1500
aaggatactt atgacgctct ccacatgcaa gccctgccac ctaggtaa 1548
<210> 186 <211> 515
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 186
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu
20 25 30
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln
35 40 45
Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala
50 55 60
Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro
65 70 75 80
Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
100 105 110
Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
130 135 140
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
145 150 155 160
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr
165 170 175
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
180 185 190
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
195 200 205
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu
210 215 220
Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
225 230 235 240
Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp
245 250 255
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Ser Asn
260 265 270
Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys
275 280 285
Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile
290 295 300
Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala
305 310 315 320
Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr
325 330 335
Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu
340 345 350
Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg
355 360 365
Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro
370 375 380
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
385 390 395 400
Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
405 410 415
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
420 425 430
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
435 440 445
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
450 455 460
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
465 470 475 480
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
485 490 495
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
500 505 510
Pro Pro Arg
515
<210> 187
<211> 1482
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 187
gacattcaat tgacccagtc ccctagcagt ctctcagcaa gtgtgggaga tagggtgtca
ttcacctgtc aggcttcaca ggacatcaac aacttcctca attggtatca gcagaagcca 120
gggaaggcac caaagctgct catatatgac gcttcaaacc ttgaaaccgg agtacctagc 180
cgcttcagcg gaagcggatc agggactgac ttcactttta ccatctcttc actgcagccc 240
gaagacatcg ccacatacta ctgccagcag tacggaaact tgccttttac atttgggggc 300
ggcaccaaag tggagattaa gcgaggggga ggcggctcag gaggcggtgg ctccggaggc 360
gggggttccc aggtccagct ccaggaatcc ggcccaggtc tggttaagcc cagtgaaact 420
ttgtccctca cgtgtactgt gagcggtggt tcaatctcct catactattg gtcttggata 480
cggcaacctc ctggaaaggg cctcgagtgg atcggctata tctactatag tggctccact 540
aattacaacc cttccctcaa gtccagagtc accatttccg tggacacatc taagaaccag 600
ttcagtctga agttgtccag cgttacagcc gcagacacag ccgtttatta ctgtgtgtct 660
cttgtttact gcgggggaga ctgttatagc ggcttcgatt actggggcca gggcaccttg 720
gtcacagtct cttccgcggc cgccctctct aacagtatta tgtacttttc tcattttgta 780
cccgtgttcc ttcccgctaa gccaactact accccggccc cacggccgcc tacccctgca 840
cccacaatag ccagtcagcc tttgagcctg agacctgagg cttgtcggcc ggctgctggg 900
ggtgcagtgc acacacgagg tcttgatttt gcttgcgaca tatacatctg ggcccctctg 960
gccgggacct gtggggtgct gcttctgagc ttggtcatca cgctctattg caaccatcgc 1020
aacagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1080
cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1140
cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1200
caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1260
agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1320
tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1380
gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1440
gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta gg 1482
<210> 188 <211> 494 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 188
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Gly Gly Gly Gly
100 105 110
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Gln
115 120 125
Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr
130 135 140
Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile
145 150 155 160
Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Tyr Tyr
165 170 175
Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile
180 185 190
Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val
195 200 205
Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Ser Leu Val Tyr Cys
210 215 220
Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
225 230 235 240
Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe
245 250 255
Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro
260 265 270
Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His
290 295 300
Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu
305 310 315 320
Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr
325 330 335
Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
340 345 350
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
355 360 365
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
370 375 380
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
385 390 395 400
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
405 410 415
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
420 425 430
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
435 440 445
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
450 455 460
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
465 470 475 480
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490
ДНК
т/г ^ т"-
<210> 189 <211> 1446 <212>
<213> Искусственная последовательность
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtac agctgcagga atctgggccc ggacttgtca agccaagtca gacactttct 120
cttacatgta ccgtgagcgg cggaagtata agcagtggag gcttttactg gtcttggata 180
cggcagcacc caggcaaagg cttggagtgg attggataca ttcatcattc aggatctaca 240
cactataatc catcccttaa gtcccgggtc accattagca ttgatacgtc taagaatctg 300
ttcagtctca ggctgtcctc cgtcactgct gccgacacag ccgtgtacta ctgcgcctcc 360
ttggtttact gcggaggcga ctgttatagc ggctttgatt attgggggca ggggaccctc 420
gtaaccgtga gctctggagg gggtgggagc gggggaggag gttcaggggg gggcggctcc 480
gatatccagc tcactcaaag cccctctagt ctctctgcct cagtggggga tcgggtcagt 540
tttacttgtc aagcttcaca ggatatcaac aacttcctta attggtatca gcagaagcca 600
ggaaaagcac ccaagctgct catctatgat gcctcaaatt tggagacggg tgttcccagt 660
cgattctctg ggtcagggtc cgggaccgac tttacgttta cgatctcctc tctgcagccc 720
gaagacatcg ccacatacta ttgtcaacag tacggcaact tgcctttcac atttgggggc 780
gggactaagg ttgaaatcaa gagggccgct gcactggaca atgagaagtc caacggcacc 840
atcatccacg tgaagggcaa gcacctgtgc cctagtcctc tgttcccagg cccatccaaa 900
cctttttggg ttcttgttgt ggtcgggggg gtgctggcct gctattctct gctggtcacg 960
gtggccttca taattttctg ggttagatcc aaaagaagcc gcctgctcca tagcgattac 1020
atgaatatga ctccacgccg ccctggcccc acaaggaaac actaccagcc ttacgcacca 1080
cctagagatt tcgctgccta tcggagcagg gtgaagtttt ccagatctgc agatgcacca 1140
gcgtatcagc agggccagaa ccaactgtat aacgagctca acctgggacg cagggaagag 1200
tatgacgttt tggacaagcg cagaggacgg gaccctgaga tgggtggcaa accaagacga 1260
aaaaaccccc aggagggtct ctataatgag ctgcagaagg ataagatggc tgaagcctat 1320
tctgaaatag gcatgaaagg agagcggaga aggggaaaag ggcacgacgg tttgtaccag 1380
ggactcagca ctgctacgaa ggatacttat gacgctctcc acatgcaagc cctgccacct 1440
aggtaa 1446
<210> 190 <211> 481 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 190
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu
20 25 30
Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly
35 40 45
Ser Ile Ser Ser Gly Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro
50 55 60
Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr
65 70 75 80
His Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr
85 90 95
Ser Lys Asn Leu Phe Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp
100 105 110
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys
115 120 125
Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
145 150 155 160
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
165 170 175
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
180 185 190
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
195 200 205
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
225 230 235 240
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe
245 250 255
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu
260 265 270
Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His
275 280 285
Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val
290 295 300
Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr
305 310 315 320
Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu
325 330 335
His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg
340 345 350
Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg
355 360 365
Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln
370 375 380
Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu
385 390 395 400
Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly
405 410 415
Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln
420 425 430
Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu
435 440 445
Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr
450 455 460
Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro
465 470 475 480
Arg
<210> 191
<211> 1380
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 191
caggtacagc tgcaggaatc tgggcccgga cttgtcaagc caagtcagac actttctctt 60
acatgtaccg tgagcggcgg aagtataagc agtggaggct tttactggtc ttggatacgg 120
cagcacccag gcaaaggctt ggagtggatt ggatacattc atcattcagg atctacacac 180
tataatccat cccttaagtc ccgggtcacc attagcattg atacgtctaa gaatctgttc 240
agtctcaggc tgtcctccgt cactgctgcc gacacagccg tgtactactg cgcctccttg 300
gtttactgcg gaggcgactg ttatagcggc tttgattatt gggggcaggg gaccctcgta 360
accgtgagct ctggaggggg tgggagcggg ggaggaggtt cagggggggg cggctccgat 420
atccagctca ctcaaagccc ctctagtctc tctgcctcag tgggggatcg ggtcagtttt 480
acttgtcaag cttcacagga tatcaacaac ttccttaatt ggtatcagca gaagccagga 540
aaagcaccca agctgctcat ctatgatgcc tcaaatttgg agacgggtgt tcccagtcga 600
ttctctgggt cagggtccgg gaccgacttt acgtttacga tctcctctct gcagcccgaa 660
gacatcgcca catactattg tcaacagtac ggcaacttgc ctttcacatt tgggggcggg 720
actaaggttg aaatcaagag ggccgctgca ctggacaatg agaagtccaa cggcaccatc 780
atccacgtga agggcaagca cctgtgccct agtcctctgt tcccaggccc atccaaacct 840
ttttgggttc ttgttgtggt cgggggggtg ctggcctgct attctctgct ggtcacggtg 900
gccttcataa ttttctgggt tagatccaaa agaagccgcc tgctccatag cgattacatg 960
aatatgactc cacgccgccc tggccccaca aggaaacact accagcctta cgcaccacct 1020
agagatttcg ctgcctatcg gagcagggtg aagttttcca gatctgcaga tgcaccagcg 1080
tatcagcagg gccagaacca actgtataac gagctcaacc tgggacgcag ggaagagtat 1140
gacgttttgg acaagcgcag aggacgggac cctgagatgg gtggcaaacc aagacgaaaa 1200
aacccccagg agggtctcta taatgagctg cagaaggata agatggctga agcctattct 1260
gaaataggca tgaaaggaga gcggagaagg ggaaaagggc acgacggttt gtaccaggga 1320
ctcagcactg ctacgaagga tacttatgac gctctccaca tgcaagccct gccacctagg 1380
<210> 192 <211> 460
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 192
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe
65 70 75 80
Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly
115 120 125
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr
130 135 140
Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe
145 150 155 160
Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln
165 170 175
Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn
180 185 190
Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
195 200 205
Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr
210 215 220
Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly
225 230 235 240
Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser
245 250 255
Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro
260 265 270
Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile
290 295 300
Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met
305 310 315 320
Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro
325 330 335
Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe
340 345 350
Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu
355 360 365
Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp
370 375 380
Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys
385 390 395 400
Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala
405 410 415
Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys
420 425 430
Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr
435 440 445
Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
450 455 460
<210> 193 <211> 1473
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 193
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agctgcagga aagcggtccg ggacttgtca agccgtccca aacgctgagt 120
ctgacgtgta ctgtctctgg tggctctatt tcttccgggg gcttttattg gtcttggatc 180
agacaacacc ctggcaaagg gctggagtgg atagggtata ttcaccactc tgggtccact
240
cactacaacc catcattgaa atccagagtg actatctcaa tcgacacatc caagaacctt 300
ttcagcctga ggttgtcatc agttaccgcc gctgacaccg cggtgtatta ttgcgcctct 360
ctcgtgtact gcggtggcga ttgttatagt ggctttgact actgggggca ggggacattg 420
gttaccgttt caagtggagg cggtgggtct ggcgggggcg gtagcggagg tggggggagc 480
gacatacagc ttacgcagag cccctccagc ctttcagcct ccgtggggga tagggtgtcc 540
tttacctgcc aggcttccca ggacataaac aacttcctca attggtatca gcaaaagccc 600
gggaaagcac caaagctgct catctacgat gccagcaacc tggaaaccgg agtgccgtct 660
cgcttctctg gaagtggcag tgggaccgat ttcactttta caatctcaag tttgcagcca 720
gaagacattg caacatacta ctgtcaacag tacggcaatc tcccctttac atttgggggg 780
ggaactaaag tggagattaa gcgcgctgca gccattgaag ttatgtatcc gcccccgtat 840
ctggataacg agaaatctaa tggtaccata atacatgtga aggggaagca cctctgtcca 900
tcaccgctgt tccccggccc ttcaaaacct ttctgggtac tcgttgtcgt gggtggagtt 960
ctggcctgct atagtctgct ggtgaccgtg gcgtttatca tcttctgggt aagatccaaa 1020
agaagccgcc tgctccatag cgattacatg aatatgactc cacgccgccc tggccccaca 1080
aggaaacact accagcctta cgcaccacct agagatttcg ctgcctatcg gagcagggtg 1140
aagttttcca gatctgcaga tgcaccagcg tatcagcagg gccagaacca actgtataac 1200
gagctcaacc tgggacgcag ggaagagtat gacgttttgg acaagcgcag aggacgggac 1260
cctgagatgg gtggcaaacc aagacgaaaa aacccccagg agggtctcta taatgagctg 1320
cagaaggata agatggctga agcctattct gaaataggca tgaaaggaga gcggagaagg 1380
ggaaaagggc acgacggttt gtaccaggga ctcagcactg ctacgaagga tacttatgac 1440
gctctccaca tgcaagccct gccacctagg taa 1473
<210> 194 <211> 490 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 194
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu
20 25 30
Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly
35 40 45
Ser Ile Ser Ser Gly Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro
50 55 60
Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr
65 70 75 80
His Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr
85 90 95
Ser Lys Asn Leu Phe Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp
100 105 110
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys
115 120 125
Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
145 150 155 160
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
165 170 175
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
180 185 190
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
195 200 205
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
225 230 235 240
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe
245 250 255
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile
260 265 270
Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly
275 280 285
Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe
290 295 300
Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val
305 310 315 320
Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp
325 330 335
Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met
340 345 350
Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala
355 360 365
Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg
370 375 380
Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn
385 390 395 400
Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg
405 410 415
Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro
420 425 430
Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala
435 440 445
Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His
450 455 460
Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp
465 470 475 480
Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490
<210> 195
<211> 1407
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 195
caggtgcagc tgcaggaaag cggtccggga cttgtcaagc cgtcccaaac gctgagtctg 60 acgtgtactg tctctggtgg ctctatttct tccgggggct tttattggtc ttggatcaga 120
caacaccctg gcaaagggct ggagtggata gggtatattc accactctgg gtccactcac
180
tacaacccat cattgaaatc cagagtgact atctcaatcg acacatccaa gaaccttttc 240
agcctgaggt tgtcatcagt taccgccgct gacaccgcgg tgtattattg cgcctctctc 300
gtgtactgcg gtggcgattg ttatagtggc tttgactact gggggcaggg gacattggtt 3 60
accgtttcaa gtggaggcgg tgggtctggc gggggcggta gcggaggtgg ggggagcgac 420
atacagctta cgcagagccc ctccagcctt tcagcctccg tgggggatag ggtgtccttt 480
acctgccagg cttcccagga cataaacaac ttcctcaatt ggtatcagca aaagcccggg 540
aaagcaccaa agctgctcat ctacgatgcc agcaacctgg aaaccggagt gccgtctcgc 600
ttctctggaa gtggcagtgg gaccgatttc acttttacaa tctcaagttt gcagccagaa 660
gacattgcaa catactactg tcaacagtac ggcaatctcc cctttacatt tgggggggga 720
actaaagtgg agattaagcg cgctgcagcc attgaagtta tgtatccgcc cccgtatctg 780
gataacgaga aatctaatgg taccataata catgtgaagg ggaagcacct ctgtccatca 840
ccgctgttcc ccggcccttc aaaacctttc tgggtactcg ttgtcgtggg tggagttctg 900
gcctgctata gtctgctggt gaccgtggcg tttatcatct tctgggtaag atccaaaaga 9 60
agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat atgactccac gccgccctgg ccccacaagg 1020
aaacactacc agccttacgc accacctaga gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag 1080
ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat cagcagggcc agaaccaact gtataacgag 1140
ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac gttttggaca agcgcagagg acgggaccct 1200
gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag 1260
aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa ataggcatga aaggagagcg gagaagggga 1320
aaagggcacg acggtttgta ccagggactc agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct 1380
ctccacatgc aagccctgcc acctagg 1407
<210> 196 <211> 469 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 196
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe
65 70 75 80
Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly
115 120 125
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr
130 135 140
Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe
145 150 155 160
Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln
165 170 175
Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn
180 185 190
Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
195 200 205
Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr
210 215 220
Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly
225 230 235 240
Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro
245 250 255
Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val
260 265 270
Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys
275 280 285
Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser
290 295 300
Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg
305 310 315 320
Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro
325 330 335
Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe
340 345 350
Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro
355 360 365
Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly
370 375 380
Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro
385 390 395 400
Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr
405 410 415
Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly
420 425 430
Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln
435 440 445
Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln
450 455 460
Ala Leu Pro Pro Arg
465
ДНК
т/г ^ т"-
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 197
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agttgcagga aagcgggcct ggccttgtga aaccaagcca gacactgagc 120
ctgacatgca ctgtgtccgg cgggtccata tcttccgggg gtttttattg gtcctggata 180
cgccagcatc ccgggaaagg acttgaatgg attggatata tccaccattc cggaagcacc 240
cactacaatc caagccttaa atcccgggtg acaatctcca tcgacacctc aaagaatctt 300
ttttccctgc ggttgtcttc agtaactgcc gccgataccg ctgtgtacta ctgtgccagc 360
ctcgtctatt gcggcggaga ttgttattct gggttcgatt attggggtca aggcacactg 420
gtaactgtca gcagcggagg cggcggttcc gggggcgggg gcagtggagg gggcggatct 480
gacattcagc ttacgcagtc cccatcttca cttagcgcca gcgttggcga tcgggtcagc 540
ttcacgtgtc aagcaagtca ggatatcaac aactttctta actggtacca gcagaagcca 600
ggcaaggcac ccaagttgct gatttacgat gcttctaacc tcgagacggg agtgcctagc 660
cgcttctccg ggagcggcag cggcacagac tttaccttta cgatttccag tctgcagcca 720
gaggatatag caacttatta ctgtcagcag tatggcaacc tcccttttac cttcggtggt 780
ggcacaaagg tcgagattaa aagagccgca gcgttgtcca actccataat gtatttttct 840
cattttgtgc ccgtctttct gcctgccaaa cctaccacca cccccgcccc acgaccacct 900
actccagccc ccaccatcgc ctcccagccc ctcagcctga ggccagaggc ttgtcgccct 960
gctgcggggg gcgctgtcca taccagagga ctcgacttcg cctgcgatat ttatatatgg 1020
gcccccctcg ccggcacctg cggagtcttg ctcctgagcc ttgtgatcac gctttattgt 1080
aaccatcgga atagatccaa aagaagccgc ctgctccata gcgattacat gaatatgact 1140
ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac taccagcctt acgcaccacc tagagatttc 1200
gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag 1260
ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg 1320
gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag 1380
gagggtctct ataatgagct gcagaaggat aagatggctg aagcctattc tgaaataggc 1440
atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact 1500
gctacgaagg atacttatga cgctctccac atgcaagccc tgccacctag gtaa 1554
<210> 198 <211> 517
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 198
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu
20 25 30
Val Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly
35 40 45
Ser Ile Ser Ser Gly Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro
50 55 60
Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr
65 70 75 80
His Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr
85 90 95
Ser Lys Asn Leu Phe Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp
100 105 110
Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys
115 120 125
Tyr Ser Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
145 150 155 160
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
165 170 175
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
180 185 190
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
195 200 205
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
210 215 220
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
225 230 235 240
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe
245 250 255
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu
260 265 270
Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro
275 280 285
Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro
290 295 300
Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro
305 310 315 320
Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp
325 330 335
Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu
340 345 350
Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg
355 360 365
Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro
370 375 380
Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe
385 390 395 400
Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro
405 410 415
Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly
420 425 430
Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro
435 440 445
Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr
450 455 460
Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly
465 470 475 480
Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln
485 490 495
Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln
500 505 510
Ala Leu Pro Pro Arg
515
<210> 199
<211> 1488
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 199
caggtgcagt tgcaggaaag cgggcctggc cttgtgaaac caagccagac actgagcctg 60
acatgcactg tgtccggcgg gtccatatct tccgggggtt tttattggtc ctggatacgc 120
cagcatcccg ggaaaggact tgaatggatt ggatatatcc accattccgg aagcacccac 180
tacaatccaa gccttaaatc ccgggtgaca atctccatcg acacctcaaa gaatcttttt 240
tccctgcggt tgtcttcagt aactgccgcc gataccgctg tgtactactg tgccagcctc 300
gtctattgcg gcggagattg ttattctggg ttcgattatt ggggtcaagg cacactggta 360
actgtcagca gcggaggcgg cggttccggg ggcgggggca gtggaggggg cggatctgac 420
attcagctta cgcagtcccc atcttcactt agcgccagcg ttggcgatcg ggtcagcttc 480
acgtgtcaag caagtcagga tatcaacaac tttcttaact ggtaccagca gaagccaggc 540
aaggcaccca agttgctgat ttacgatgct tctaacctcg agacgggagt gcctagccgc 600
ttctccggga gcggcagcgg cacagacttt acctttacga tttccagtct gcagccagag 660
gatatagcaa cttattactg tcagcagtat ggcaacctcc cttttacctt cggtggtggc 720
acaaaggtcg agattaaaag agccgcagcg ttgtccaact ccataatgta tttttctcat 780
tttgtgcccg tctttctgcc tgccaaacct accaccaccc ccgccccacg accacctact 840
ccagccccca ccatcgcctc ccagcccctc agcctgaggc cagaggcttg tcgccctgct 900
gcggggggcg ctgtccatac cagaggactc gacttcgcct gcgatattta tatatgggcc 960
cccctcgccg gcacctgcgg agtcttgctc ctgagccttg tgatcacgct ttattgtaac 1020
catcggaata gatccaaaag aagccgcctg ctccatagcg attacatgaa tatgactcca 1080
cgccgccctg gccccacaag gaaacactac cagccttacg caccacctag agatttcgct 1140
gcctatcgga gcagggtgaa gttttccaga tctgcagatg caccagcgta tcagcagggc 1200
cagaaccaac tgtataacga gctcaacctg ggacgcaggg aagagtatga cgttttggac 1260
aagcgcagag gacgggaccc tgagatgggt ggcaaaccaa gacgaaaaaa cccccaggag 1320
ggtctctata atgagctgca gaaggataag atggctgaag cctattctga aataggcatg 1380
aaaggagagc ggagaagggg aaaagggcac gacggtttgt accagggact cagcactgct 1440
acgaaggata cttatgacgc tctccacatg caagccctgc cacctagg 1488
<210> 200 <211> 496 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 200
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
20 25 30
Gly Phe Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln His Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile His His Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Asn Leu Phe
65 70 75 80
Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Ser Leu Val Tyr Cys Gly Gly Asp Cys Tyr Ser Gly Phe Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly
115 120 125
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Leu Thr
130 135 140
Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe
145 150 155 160
Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn Trp Tyr Gln
165 170 175
Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn
180 185 190
Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr
195 200 205
Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr
210 215 220
Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Asn Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gly Gly
225 230 235 240
Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met
245 250 255
Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln
275 280 285
Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala
290 295 300
Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala
305 310 315 320
Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr
325 330 335
Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His
340 345 350
Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys
355 360 365
His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
370 375 380
Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly
385 390 395 400
Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr
405 410 415
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
420 425 430
Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys
435 440 445
Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg
450 455 460
Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala
465 470 475 480
Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
485 490 495
<210> 201
<211> 1437
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 201
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtcc aactggtgca gtccggagcc gaagtcaaga aaccaggtgc ctccgttaaa 120
gtgagttgca aagtctctgg atacactctg accgagctct ctatgcactg ggtccggcag 180
gcccccggca agggattgga atggatgggc gggttcgatc ctgaggacgg agagactatc 240
tacgctcaaa aattccaggg acgagtgact gtgaccgaag acactagtac cgacactgcc 300
tacatggaac tttcctctct gcgatcagaa gataccgcag tgtactactg tgctactgaa 360
tctaggggca ttggatggcc ctacttcgat tactggggtc agggaactct ggtgactgtc 420
tccagcggtg gaggtggcag cggtggtggc ggaagcgggg ggggcggctc tgatattcag 480
atgactcaat ctccttcttc tctgtccgct tccgtgggcg atagagtgac cattacttgt 540
agggcgtccc agtcaatctc cagttatttg aattggtatc agcagaagcc cgggaaagca 600
cctaagctgt tgatcagcgg ggcttctagc ctgaagagtg gggtaccttc acggttcagc 660
ggaagcggaa gcggaaccga tttcaccctg actatcagca gcctgccacc tgaggacttt 720
gcaacttact actgccaaca gtcatacagc actccgatca ctttcggcca gggcacccgg 780
ctcgaaatca agcgcgctgc tgctttggac aatgagaagt caaacggcac catcatacat 840
gttaaaggta aacatctgtg tccctccccg ctgttccccg gcccttccaa accgttctgg 900
gttctggtgg tggtcggagg cgtactcgct tgctatagtc tgctggtaac tgtcgccttc 960
atcatctttt gggtgagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 1020
actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1080
ttcgctgcct atcggagcag ggtgaagttt tccagatctg cagatgcacc agcgtatcag 1140
cagggccaga accaactgta taacgagctc aacctgggac gcagggaaga gtatgacgtt 1200
ttggacaagc gcagaggacg ggaccctgag atgggtggca aaccaagacg aaaaaacccc 1260
caggagggtc tctataatga gctgcagaag gataagatgg ctgaagccta ttctgaaata 1320
ggcatgaaag gagagcggag aaggggaaaa gggcacgacg gtttgtacca gggactcagc 1380
actgctacga aggatactta tgacgctctc cacatgcaag ccctgccacc taggtaa 1437
<210> 202 <211> 478 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 202
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val
20 25 30
Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr
35 40 45
Thr Leu Thr Glu Leu Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile
65 70 75 80
Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser
85 90 95
Thr Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr
115 120 125
Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln
145 150 155 160
Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val
165 170 175
Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp
180 185 190
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala
195 200 205
Ser Ser Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
210 215 220
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe
225 230 235 240
Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly
245 250 255
Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro
275 280 285
Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val
290 295 300
Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe
305 310 315 320
Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
325 330 335
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
340 345 350
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
355 360 365
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
370 375 380
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
385 390 395 400
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
405 410 415
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
420 425 430
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
435 440 445
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
450 455 460
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
ДНК
т/г ^ т"-
<210> 203 <211> 1371 <212>
<213> Искусственная последовательность
caggtccaac tggtgcagtc cggagccgaa gtcaagaaac caggtgcctc cgttaaagtg 60
agttgcaaag tctctggata cactctgacc gagctctcta tgcactgggt ccggcaggcc 120
cccggcaagg gattggaatg gatgggcggg ttcgatcctg aggacggaga gactatctac 180
gctcaaaaat tccagggacg agtgactgtg accgaagaca ctagtaccga cactgcctac 240
atggaacttt cctctctgcg atcagaagat accgcagtgt actactgtgc tactgaatct 300
aggggcattg gatggcccta cttcgattac tggggtcagg gaactctggt gactgtctcc 360
agcggtggag gtggcagcgg tggtggcgga agcggggggg gcggctctga tattcagatg 420
actcaatctc cttcttctct gtccgcttcc gtgggcgata gagtgaccat tacttgtagg 480
gcgtcccagt caatctccag ttatttgaat tggtatcagc agaagcccgg gaaagcacct 540
aagctgttga tcagcggggc ttctagcctg aagagtgggg taccttcacg gttcagcgga 600
agcggaagcg gaaccgattt caccctgact atcagcagcc tgccacctga ggactttgca 660
acttactact gccaacagtc atacagcact ccgatcactt tcggccaggg cacccggctc 720
gaaatcaagc gcgctgctgc tttggacaat gagaagtcaa acggcaccat catacatgtt 780
aaaggtaaac atctgtgtcc ctccccgctg ttccccggcc cttccaaacc gttctgggtt 840
ctggtggtgg tcggaggcgt actcgcttgc tatagtctgc tggtaactgt cgccttcatc 900
atcttttggg tgagatccaa aagaagccgc ctgctccata gcgattacat gaatatgact 960
ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac taccagcctt acgcaccacc tagagatttc 1020
gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag 1080
ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg 1140
gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag 1200
gagggtctct ataatgagct gcagaaggat aagatggctg aagcctattc tgaaataggc 1260
atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact 1320
gctacgaagg atacttatga cgctctccac atgcaagccc tgccacctag g 1371
<210> 204 <211> 457
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 204
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu
20 25 30
Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
130 135 140
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg
145 150 155 160
Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
195 200 205
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu
225 230 235 240
Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr
245 250 255
Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro
260 265 270
Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu
275 280 285
Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val
290 295 300
Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr
305 310 315 320
Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro
325 330 335
Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser
340 345 350
Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu
355 360 365
Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg
370 375 380
Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln
385 390 395 400
Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr
405 410 415
Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp
420 425 430
Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala
435 440 445
Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 450 455
<210> 205 <211> 1464
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 205
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agcttgtgca gagcggggcc gaggtgaaga agcccggggc cagcgtcaaa 120
gtgtcctgta aggtcagcgg ttacaccctc accgagctga gcatgcactg ggtacggcag 180
gctcccggca aaggtcttga gtggatgggt ggatttgatc cagaagatgg agagactatc 240
tacgcccaga agttccaggg ccgggtcacc gtaacagaag acacctcaac tgacaccgct
300
tacatggagc tgagttcact gcggtccgag gacacggccg tgtattattg tgccaccgag 360
agccgcggaa tcggatggcc ttacttcgac tactggggac agggtacact tgttacagta 420
tcatccgggg gtggcggctc tggtgggggc ggctccggag ggggtggatc agatatccaa 480
atgactcaaa gtccaagttc cctgtctgcc tcagtcggag atagagtcac cataacctgc 540
agggcaagtc agtccatctc ctcctatctg aactggtacc aacagaaacc tggaaaggcg 600
cctaagctcc tgatctccgg agcctcatct ttgaaatccg gtgtcccatc tcgcttcagt 660
ggctctggaa gcggtacaga ttttactttg accattagca gcctcccacc ggaagacttt 720
gctacatatt actgccagca gtcttactca accccaatca ccttcgggca aggcaccaga 780
ctcgaaataa aaagagcagc tgctatcgag gttatgtacc caccgccgta cttggataac 840
gaaaaaagca atgggaccat cattcatgtg aagggtaagc acctttgccc tagcccactg 900
tttcctggcc cgagtaaacc cttttgggta cttgtggtcg tcggcggcgt gctggcctgc 960
tactcactcc tggttaccgt cgcattcatc atcttttggg tgagatccaa aagaagccgc 1020
ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1080
taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagcagggt gaagttttcc 1140
agatctgcag atgcaccagc gtatcagcag ggccagaacc aactgtataa cgagctcaac 1200
ctgggacgca gggaagagta tgacgttttg gacaagcgca gaggacggga ccctgagatg 1260
ggtggcaaac caagacgaaa aaacccccag gagggtctct ataatgagct gcagaaggat 1320
aagatggctg aagcctattc tgaaataggc atgaaaggag agcggagaag gggaaaaggg 1380
cacgacggtt tgtaccaggg actcagcact gctacgaagg atacttatga cgctctccac 1440
atgcaagccc tgccacctag gtaa 1464
<210> 206 <211> 487 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 206
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val
20 25 30
Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr
35 40 45
Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile
65 70 75 80
Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser
85 90 95
Thr Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr
115 120 125
Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln
145 150 155 160
Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val
165 170 175
Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp
180 185 190
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala
195 200 205
Ser Ser Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
210 215 220
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe
225 230 235 240
Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly
245 250 255
Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met
260 265 270
Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile
275 280 285
His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro
290 295 300
Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser
325 330 335
Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg
340 345 350
Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg
355 360 365
Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp
370 375 380
Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn
385 390 395 400
Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg
405 410 415
Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly
420 425 430
Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu
435 440 445
Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu
450 455 460
Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His
465 470 475 480
Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485
<210> 207
<211> 1398
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 207
caggtgcagc ttgtgcagag cggggccgag gtgaagaagc ccggggccag cgtcaaagtg 60
tcctgtaagg tcagcggtta caccctcacc gagctgagca tgcactgggt acggcaggct 120
cccggcaaag gtcttgagtg gatgggtgga tttgatccag aagatggaga gactatctac 180
gcccagaagt tccagggccg ggtcaccgta acagaagaca cctcaactga caccgcttac
240
atggagctga gttcactgcg gtccgaggac acggccgtgt attattgtgc caccgagagc 300
cgcggaatcg gatggcctta cttcgactac tggggacagg gtacacttgt tacagtatca 360
tccgggggtg gcggctctgg tgggggcggc tccggagggg gtggatcaga tatccaaatg 420
actcaaagtc caagttccct gtctgcctca gtcggagata gagtcaccat aacctgcagg 480
gcaagtcagt ccatctcctc ctatctgaac tggtaccaac agaaacctgg aaaggcgcct 540
aagctcctga tctccggagc ctcatctttg aaatccggtg tcccatctcg cttcagtggc 600
tctggaagcg gtacagattt tactttgacc attagcagcc tcccaccgga agactttgct 660
acatattact gccagcagtc ttactcaacc ccaatcacct tcgggcaagg caccagactc 720
gaaataaaaa gagcagctgc tatcgaggtt atgtacccac cgccgtactt ggataacgaa 780
aaaagcaatg ggaccatcat tcatgtgaag ggtaagcacc tttgccctag cccactgttt 840
cctggcccga gtaaaccctt ttgggtactt gtggtcgtcg gcggcgtgct ggcctgctac 900
tcactcctgg ttaccgtcgc attcatcatc ttttgggtga gatccaaaag aagccgcctg 960
ctccatagcg attacatgaa tatgactcca cgccgccctg gccccacaag gaaacactac 1020
cagccttacg caccacctag agatttcgct gcctatcgga gcagggtgaa gttttccaga 1080
tctgcagatg caccagcgta tcagcagggc cagaaccaac tgtataacga gctcaacctg 1140
ggacgcaggg aagagtatga cgttttggac aagcgcagag gacgggaccc tgagatgggt 1200
ggcaaaccaa gacgaaaaaa cccccaggag ggtctctata atgagctgca gaaggataag 1260
atggctgaag cctattctga aataggcatg aaaggagagc ggagaagggg aaaagggcac 1320
gacggtttgt accagggact cagcactgct acgaaggata cttatgacgc tctccacatg 1380
caagccctgc cacctagg 1398
<210> 208 <211> 466 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 208
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu
20 25 30
Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro
130 135 140
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg
145 150 155 160
Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
165 170 175
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
180 185 190
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
195 200 205
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu
225 230 235 240
Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr
245 250 255
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
260 265 270
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp
275 280 285
Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val
290 295 300
Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr
325 330 335
Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr
340 345 350
Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln
355 360 365
Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu
370 375 380
Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly
385 390 395 400
Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu
405 410 415
Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly
420 425 430
Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser
435 440 445
Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro
450 455 460
Pro Arg
465
<210> 209
<211> 1545
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 209
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agttggtgca aagcggcgca gaagttaaga aacctggggc gtcagttaag 120
gtgtcttgca aagtatctgg ctataccctc actgagctgt ccatgcattg ggtaaggcag 180
gctcctggaa aggggctcga atggatggga ggatttgacc ctgaagacgg agagaccatc 240
tacgcccaga aattccaggg tagagtaaca gtgactgagg acactagcac tgacacagcg 300
tacatggagc tgagttctct gagaagtgag gacacagccg tttactactg cgctaccgag 360
tccagaggta ttggctggcc atacttcgac tattggggtc agggcaccct ggttacagtg 420
agttcaggag gcgggggctc tggggggggc ggttccggag gggggggctc agatatacag 480
atgacgcaga gtccatcaag tctctcagcc agcgtgggag atcgcgtgac tattacttgc 540
cgcgccagcc agagtattag ctcctatctg aattggtacc agcaaaagcc cgggaaggcc 600
cctaagcttc tgatttctgg cgcctcctct ttgaagtcag gtgtgccaag cagatttagc 660
gggtctggaa gtggcactga ctttacactt actatctcca gcctgccccc agaggatttt 720
gccacatatt actgtcagca aagctactct actccaatca ctttcggcca gggcacaaga 780
ttggagatta agagggctgc cgcactttca aattccatca tgtatttcag ccattttgtg 840
cctgtttttc ttccggccaa acctacaacc actcccgccc cacgcccacc tactcccgcc 900
cctaccattg cctcccagcc tctgtctctt agacctgagg cttgtagacc tgctgccggc 960
ggagccgtgc acactcgcgg tctggacttc gcctgcgaca tctatatctg ggcccctctg 1020
gccggcacct gcggcgttct ccttctctca ctcgtaatca cactctattg caatcacagg 1080
aacagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1140
cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1200
cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1260
caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1320
agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1380
tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1440
gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1500
gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta ggtaa 1545
<210> 210 <211> 514
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 210
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val
20 25 30
Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr
35 40 45
Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile
65 70 75 80
Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser
85 90 95
Thr Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly Trp Pro Tyr
115 120 125
Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Gln
145 150 155 160
Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val
165 170 175
Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp
180 185 190
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Ser Gly Ala
195 200 205
Ser Ser Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
210 215 220
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe
225 230 235 240
Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly
245 250 255
Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser
260 265 270
Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro
275 280 285
Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala
290 295 300
Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile
325 330 335
Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val
340 345 350
Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
355 360 365
Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr
370 375 380
Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr
385 390 395 400
Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln
405 410 415
Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu
420 425 430
Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly
435 440 445
Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu
450 455 460
Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly
465 470 475 480
Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser
485 490 495
Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro
500 505 510
Pro Arg
ДНК
т/г ^ т"-
<210> 211 <211> 1479 <212>
<213> Искусственная последовательность
caggtgcagt tggtgcaaag cggcgcagaa gttaagaaac ctggggcgtc agttaaggtg 60
tcttgcaaag tatctggcta taccctcact gagctgtcca tgcattgggt aaggcaggct 120
cctggaaagg ggctcgaatg gatgggagga tttgaccctg aagacggaga gaccatctac 180
gcccagaaat tccagggtag agtaacagtg actgaggaca ctagcactga cacagcgtac 240
atggagctga gttctctgag aagtgaggac acagccgttt actactgcgc taccgagtcc 300
agaggtattg gctggccata cttcgactat tggggtcagg gcaccctggt tacagtgagt 360
tcaggaggcg ggggctctgg ggggggcggt tccggagggg ggggctcaga tatacagatg 420
acgcagagtc catcaagtct ctcagccagc gtgggagatc gcgtgactat tacttgccgc 480
gccagccaga gtattagctc ctatctgaat tggtaccagc aaaagcccgg gaaggcccct 540
aagcttctga tttctggcgc ctcctctttg aagtcaggtg tgccaagcag atttagcggg 600
tctggaagtg gcactgactt tacacttact atctccagcc tgcccccaga ggattttgcc 660
acatattact gtcagcaaag ctactctact ccaatcactt tcggccaggg cacaagattg 720
gagattaaga gggctgccgc actttcaaat tccatcatgt atttcagcca ttttgtgcct 780
gtttttcttc cggccaaacc tacaaccact cccgccccac gcccacctac tcccgcccct 840
accattgcct cccagcctct gtctcttaga cctgaggctt gtagacctgc tgccggcgga 900
gccgtgcaca ctcgcggtct ggacttcgcc tgcgacatct atatctgggc ccctctggcc 960
ggcacctgcg gcgttctcct tctctcactc gtaatcacac tctattgcaa tcacaggaac 1020
agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 1080
ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 1140
agcagggtga agttttccag atctgcagat gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa 1200
ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga 1260
ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca agacgaaaaa acccccagga gggtctctat 1320
aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa gcctattctg aaataggcat gaaaggagag 1380
cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg taccagggac tcagcactgc tacgaaggat 1440
acttatgacg ctctccacat gcaagccctg ccacctagg 1479
<210> 212 <211> 493 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 212
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Leu Thr Glu Leu
20 25 30
Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Val Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Glu Ser Arg Gly Ile Gly 100
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 115 120
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 130 135
Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 165
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
180
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 195 200
Trp Pro Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 105 110
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 125
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro 140
Ile Thr Cys Arg 160
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 170 175
Ser Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
185 190
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 205
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Pro Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
210 215 220
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu
225 230 235 240
Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser
245 250 255
His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala
260 265 270
Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser
275 280 285
Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr
290 295 300
Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala
305 310 315 320
Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys
325 330 335
Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr
340 345 350
Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln
355 360 365
Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys
370 375 380
Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln
385 390 395 400
Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu
405 410 415
Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg
420 425 430
Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met
435 440 445
Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly
450 455 460
Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp
465 470 475 480
Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490
<210> 213
<211> 1425
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 213
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtcc agttggtcga aagtggcggt ggtgtagtgc agccgggccg cagtttgagg 120
ctttcctgtg cggcttcagg ctttactttt tccagctatg gaatgcactg ggtgcggcag 180
gcccccggca aaggacttga gtgggtggcc gtcatttctt atgacggatc agataagtac 240
tacgtggaca gcgtcaaggg cagattcacc atctctaggg acaacagtaa aaatagactc 300
tacctccaga tgaatagcct cagagctgaa gacacggccg tctactattg tgctcgggag 360
cggtatagtg gcagagacta ctgggggcag ggcacactcg ttacagtgag tagcggcgga 420
ggagggagtg ggggcggtgg ctccggtgga ggaggttctg agattgttat gacccagagt 480
cctgcgaccc tctcagtcag ccccggggag cgcgcaactt tgtcttgcag agctagtcag 540
tccgtgtcct ctcttctgac atggtaccag caaaagcccg ggcaggctcc gcgccttttg 600
atctttgggg cttcaacaag agccactggg attcccgcac gattctctgg ctccgggagc 660
ggtactggtt tcaccctgac gattagcagt ctccagagcg aggacttcgc cgtatactac 720
tgccagcagt acgatacgtg gccattcact tttggaccag ggactaaagt ggattttaag 780
cgcgccgccg ctctcgataa cgaaaagtca aatggcacca taatccacgt caaaggcaag 840
cacctgtgcc cttccccgct cttccccgga cccagtaaac cattttgggt gctggttgtt 900
gtggggggcg tgctggcctg ctatagcctt ttggtcactg tagccttcat tattttttgg 960
gtcagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1020
cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1080
cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1140
caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1200
agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1260
tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1320
gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1380
gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta ggtaa 1425
<210> 214 <211> 474 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 214
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
20 25 30
Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr
65 70 75 80
Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp
115 120 125
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser
145 150 155 160
Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
165 170 175
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys
180 185 190
Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala
195 200 205
Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe
210 215 220
Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr
225 230 235 240
Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys
245 250 255
Val Asp Phe Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly
260 265 270
Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe
275 280 285
Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val
290 295 300
Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp
305 310 315 320
Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met
325 330 335
Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala
340 345 350
Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg
355 360 365
Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn
370 375 380
Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg
385 390 395 400
Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro
405 410 415
Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala
420 425 430
Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His
435 440 445
Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp
450 455 460
Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470
<210> 215
<211> 1359
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 215
caggtccagt tggtcgaaag tggcggtggt gtagtgcagc cgggccgcag tttgaggctt
tcctgtgcgg cttcaggctt tactttttcc agctatggaa tgcactgggt gcggcaggcc 120
cccggcaaag gacttgagtg ggtggccgtc atttcttatg acggatcaga taagtactac 180
gtggacagcg tcaagggcag attcaccatc tctagggaca acagtaaaaa tagactctac 240
ctccagatga atagcctcag agctgaagac acggccgtct actattgtgc tcgggagcgg 300
tatagtggca gagactactg ggggcagggc acactcgtta cagtgagtag cggcggagga 360
gggagtgggg gcggtggctc cggtggagga ggttctgaga ttgttatgac ccagagtcct 420
gcgaccctct cagtcagccc cggggagcgc gcaactttgt cttgcagagc tagtcagtcc 480
gtgtcctctc ttctgacatg gtaccagcaa aagcccgggc aggctccgcg ccttttgatc 540
tttggggctt caacaagagc cactgggatt cccgcacgat tctctggctc cgggagcggt 600
actggtttca ccctgacgat tagcagtctc cagagcgagg acttcgccgt atactactgc 660
cagcagtacg atacgtggcc attcactttt ggaccaggga ctaaagtgga ttttaagcgc 720
gccgccgctc tcgataacga aaagtcaaat ggcaccataa tccacgtcaa aggcaagcac 780
ctgtgccctt ccccgctctt ccccggaccc agtaaaccat tttgggtgct ggttgttgtg 840
gggggcgtgc tggcctgcta tagccttttg gtcactgtag ccttcattat tttttgggtc 900
agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 960
ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 1020
agcagggtga agttttccag atctgcagat gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa 1080
ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga 1140
ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca agacgaaaaa acccccagga gggtctctat 1200
aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa gcctattctg aaataggcat gaaaggagag 1260
cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg taccagggac tcagcactgc tacgaaggat 1320
acttatgacg ctctccacat gcaagccctg ccacctagg 1359
<210> 216 <211> 453
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 216
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser
130 135 140
Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser
145 150 155 160
Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
165 170 175
Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
180 185 190
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser
195 200 205
Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp
210 215 220
Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg
225 230 235 240
Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val
245 250 255
Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys
260 265 270
Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser
275 280 285
Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro
305 310 315 320
Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe
325 330 335
Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro
340 345 350
Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly
355 360 365
Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro
370 375 380
Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr
385 390 395 400
Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly
405 410 415
Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln
420 425 430
Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln
435 440 445
Ala Leu Pro Pro Arg
450
<210> 217 <211> 1452
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 217
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agctcgtgga gtctggcggc ggcgtggtcc agcccggccg gtccctgcgc 120
ctgtcctgcg ccgccagcgg gtttactttt tcctcctacg gcatgcactg ggtgcgccag 180
gctcccggca agggcctcga gtgggtcgcc gtgatctcat acgatgggtc agacaaatac 240
tatgtcgatt ctgttaaagg gcggtttacc atttcaagag ataactctaa gaataggctg 300
tatttgcaga tgaacagcct gagggctgaa gataccgcag tgtactattg cgctagggag 360
cggtatagtg gccgcgatta ctggggacag ggtacactgg tgaccgtgag ctctgggggt 420
ggcggaagcg ggggtggcgg aagcggcgga gggggtagtg aaattgtgat gacccagtct 480
ccggctacac tttcagtctc ccctggggag agagctacac tgtcatgcag agcgtcccag 540
tccgtctctt ctctccttac ctggtatcag cagaagcccg gccaggctcc tcgactgctg 600
atcttcggtg cctccacaag ggcgaccggg attccagccc gcttctcagg ttctgggagc 660
ggaactggtt tcactttgac aatcagttca ctgcagtcag aggatttcgc cgtgtactac 720
tgccagcaat acgacacatg gccattcact ttcggacccg gtaccaaagt cgatttcaag 780
agagccgcgg ccatcgaggt tatgtaccca ccaccatatc tggacaatga aaaaagcaat 840
ggaaccatta tccatgtgaa gggtaaacac ctctgcccta gcccactttt ccctggccca 900
tcaaagccct tctgggtctt ggtggtcgtg gggggtgtgc tggcctgtta cagccttctg 960
gtgacggttg ctttcattat cttctgggtt agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc 1020
gattacatga atatgactcc acgccgccct ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac 1080
gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg agcagggtga agttttccag atctgcagat 1140
gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg 1200
gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca 1260
agacgaaaaa acccccagga gggtctctat aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa 1320
gcctattctg aaataggcat gaaaggagag cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg 1380
taccagggac tcagcactgc tacgaaggat acttatgacg ctctccacat gcaagccctg 1440
ccacctaggt aa 1452
<210> 218 <211> 483 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 218
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
20 25 30
Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr
65 70 75 80
Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp
115 120 125
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser
145 150 155 160
Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
165 170 175
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys
180 185 190
Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala
195 200 205
Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe
210 215 220
Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr
225 230 235 240
Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys
245 250 255
Val Asp Phe Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro
260 265 270
Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly
275 280 285
Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe
290 295 300
Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu
305 310 315 320
Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg
325 330 335
Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro
340 345 350
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
355 360 365
Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
370 375 380
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
385 390 395 400
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
405 410 415
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
420 425 430
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
435 440 445
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
450 455 460
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
465 470 475 480
Pro Pro Arg
<210> 219 <211> 1386 <212>
ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 219
caggtgcagc tcgtggagtc tggcggcggc gtggtccagc ccggccggtc cctgcgcctg 60
tcctgcgccg ccagcgggtt tactttttcc tcctacggca tgcactgggt gcgccaggct 120
cccggcaagg gcctcgagtg ggtcgccgtg atctcatacg atgggtcaga caaatactat 180
gtcgattctg ttaaagggcg gtttaccatt tcaagagata actctaagaa taggctgtat 240
ttgcagatga acagcctgag ggctgaagat accgcagtgt actattgcgc tagggagcgg 300
tatagtggcc gcgattactg gggacagggt acactggtga ccgtgagctc tgggggtggc 3 60
ggaagcgggg gtggcggaag cggcggaggg ggtagtgaaa ttgtgatgac ccagtctccg 420
gctacacttt cagtctcccc tggggagaga gctacactgt catgcagagc gtcccagtcc 480
gtctcttctc tccttacctg gtatcagcag aagcccggcc aggctcctcg actgctgatc 540
ttcggtgcct ccacaagggc gaccgggatt ccagcccgct tctcaggttc tgggagcgga 600
actggtttca ctttgacaat cagttcactg cagtcagagg atttcgccgt gtactactgc 660
cagcaatacg acacatggcc attcactttc ggacccggta ccaaagtcga tttcaagaga 720
gccgcggcca tcgaggttat gtacccacca ccatatctgg acaatgaaaa aagcaatgga 780
accattatcc atgtgaaggg taaacacctc tgccctagcc cacttttccc tggcccatca 840
aagcccttct gggtcttggt ggtcgtgggg ggtgtgctgg cctgttacag ccttctggtg 900
acggttgctt tcattatctt ctgggttaga tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat 960
tacatgaata tgactccacg ccgccctggc cccacaagga aacactacca gccttacgca 1020
ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca 1080
ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa 1140
gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga 1200
cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc 1260
tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac 1320
cagggactca gcactgctac gaaggatact tatgacgctc tccacatgca agccctgcca 1380
cctagg 1386
<210> 220 <211> 462 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 220
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser
130 135 140
Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser
145 150 155 160
Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
165 170 175
Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
180 185 190
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser
195 200 205
Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp
210 215 220
Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg
225 230 235 240
Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu
245 250 255
Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro
260 265 270
Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val
275 280 285
Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe
290 295 300
Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
305 310 315 320
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
325 330 335
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
340 345 350
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
355 360 365
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
370 375 380
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
385 390 395 400
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
405 410 415
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
420 425 430
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
435 440 445
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
450 455 460
<210> 221
<211> 1533
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 221
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtgc agttggttga atcaggaggg ggtgtggtgc aacccggtcg gtcactgcgc 120
ctcagttgtg ctgcttccgg gtttactttc agctcatatg ggatgcactg ggtacggcag 180
gctccaggta aaggcttgga atgggtggcg gtgatcagct atgacggctc tgacaaatat 240
tatgtggact ccgtgaaagg cagattcacc atcagtcgag acaactcaaa gaatagactc 300
tacttgcaga tgaatagcct ccgggccgaa gatactgcag tctattattg cgcccgggag 360
cgctacagtg gaagagacta ttgggggcaa ggaactcttg tcacagtctc atctggcggc 420
ggcggcagcg gtgggggcgg atctggcggg ggcggcagcg aaatcgttat gactcagagt 480
cctgccacac tgagcgttag ccctggtgag agagcaacac ttagctgcag agctagtcag 540
agtgtttcca gtcttttgac atggtaccaa cagaagcccg gtcaagctcc acgactgctc 600
atcttcggtg catccacccg cgcaaccggg atacccgccc ggttttccgg ttctggaagt 660
ggcacaggat tcacgctcac catttcttct ctgcagtctg aagactttgc cgtgtattac 720
tgccagcagt acgatacctg gccctttacc tttggcccag gtactaaagt ggattttaaa 780
cgagctgctg cactttccaa tagtattatg tacttttcac attttgtgcc cgtgttcctg 840
cctgcgaagc ctacgacaac cccagcccct aggccgccca caccggcccc aactattgcc 900
tcccagccat tgtctctgag acccgaagct tgcagacctg ctgctggagg cgccgttcac 960
acccgaggat tggatttcgc atgtgacatt tacatctggg cccctttggc cggaacctgc 1020
ggtgtgctgc tgctgtcact cgtgattaca ctttactgca accaccgaaa cagatccaaa 1080
agaagccgcc tgctccatag cgattacatg aatatgactc cacgccgccc tggccccaca 1140
aggaaacact accagcctta cgcaccacct agagatttcg ctgcctatcg gagcagggtg 1200
aagttttcca gatctgcaga tgcaccagcg tatcagcagg gccagaacca actgtataac 1260
gagctcaacc tgggacgcag ggaagagtat gacgttttgg acaagcgcag aggacgggac 1320
cctgagatgg gtggcaaacc aagacgaaaa aacccccagg agggtctcta taatgagctg 1380
cagaaggata agatggctga agcctattct gaaataggca tgaaaggaga gcggagaagg 1440
ggaaaagggc acgacggttt gtaccaggga ctcagcactg ctacgaagga tacttatgac 1500
gctctccaca tgcaagccct gccacctagg taa 1533
<210> 222 <211> 510
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 222
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
20 25 30
Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr
65 70 75 80
Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp
115 120 125
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
130 135 140
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser
145 150 155 160
Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys
165 170 175
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys
180 185 190
Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala
195 200 205
Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe
210 215 220
Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr
225 230 235 240
Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys
245 250 255
Val Asp Phe Lys Arg Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe
260 265 270
Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro
275 280 285
Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu
290 295 300
Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His
305 310 315 320
Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu
325 330 335
Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr
340 345 350
Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
355 360 365
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
370 375 380
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
385 390 395 400
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
405 410 415
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
420 425 430
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
435 440 445
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
450 455 460
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
465 470 475 480
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
485 490 495
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
500 505 510
ДНК
т/г ^ т"-
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 223
caggtgcagt tggttgaatc aggagggggt gtggtgcaac ccggtcggtc actgcgcctc 60
agttgtgctg cttccgggtt tactttcagc tcatatggga tgcactgggt acggcaggct 120
ccaggtaaag gcttggaatg ggtggcggtg atcagctatg acggctctga caaatattat 180
gtggactccg tgaaaggcag attcaccatc agtcgagaca actcaaagaa tagactctac 240
ttgcagatga atagcctccg ggccgaagat actgcagtct attattgcgc ccgggagcgc 300
tacagtggaa gagactattg ggggcaagga actcttgtca cagtctcatc tggcggcggc 3 60
ggcagcggtg ggggcggatc tggcgggggc ggcagcgaaa tcgttatgac tcagagtcct 42 0
gccacactga gcgttagccc tggtgagaga gcaacactta gctgcagagc tagtcagagt 480
gtttccagtc ttttgacatg gtaccaacag aagcccggtc aagctccacg actgctcatc 540
ttcggtgcat ccacccgcgc aaccgggata cccgcccggt tttccggttc tggaagtggc 600
acaggattca cgctcaccat ttcttctctg cagtctgaag actttgccgt gtattactgc 660
cagcagtacg atacctggcc ctttaccttt ggcccaggta ctaaagtgga ttttaaacga 720
gctgctgcac tttccaatag tattatgtac ttttcacatt ttgtgcccgt gttcctgcct 780
gcgaagccta cgacaacccc agcccctagg ccgcccacac cggccccaac tattgcctcc 840
cagccattgt ctctgagacc cgaagcttgc agacctgctg ctggaggcgc cgttcacacc 900
cgaggattgg atttcgcatg tgacatttac atctgggccc ctttggccgg aacctgcggt 9 60
gtgctgctgc tgtcactcgt gattacactt tactgcaacc accgaaacag atccaaaaga 1020
agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat atgactccac gccgccctgg ccccacaagg 1080
aaacactacc agccttacgc accacctaga gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag 1140
ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat cagcagggcc agaaccaact gtataacgag 1200
ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac gttttggaca agcgcagagg acgggaccct 1260
gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag 1320
aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa ataggcatga aaggagagcg gagaagggga 1380
aaagggcacg acggtttgta ccagggactc agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct 1440
ctccacatgc aagccctgcc acctagg 1467
<210> 224 <211> 489 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 224
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser
130 135 140
Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser
145 150 155 160
Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
165 170 175
Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
180 185 190
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser
195 200 205
Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp
210 215 220
Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg
225 230 235 240
Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro
245 250 255
Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro
260 265 270
Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu
275 280 285
Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp
290 295 300
Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn
325 330 335
Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr
340 345 350
Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro
355 360 365
Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser
370 375 380
Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu
385 390 395 400
Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg
405 410 415
Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln
420 425 430
Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr
435 440 445
Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp
450 455 460
Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala
465 470 475 480
Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485
<210> 225
<211> 1425
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 225
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggagattg tgatgaccca gtcccctgct accctgtccg tcagtccggg cgagagagcc 120
accttgtcat gccgggccag ccagtccgtc agcagtctcc tgacttggta tcagcaaaaa 180
ccagggcagg caccgcggct tttgattttt ggtgcaagca cacgcgccac tggcattcca 240
gctaggtttt ctggaagtgg atctgggaca ggcttcactc tgacaatcag tagcctgcag 300
agtgaggact ttgctgttta ctactgtcaa cagtacgaca cctggccatt cacattcggg 360
cccggcacca aggtcgactt caagaggggc ggtggaggtt caggtggtgg cgggtcaggc 420
ggcggtgggt ctcaggttca actggtggaa tcaggtggcg gcgttgtcca accggggcga 480
tcacttcgac tttcctgtgc tgcctcaggc tttacttttt catcctatgg gatgcactgg 540
gttcggcagg ctcccggaaa aggactcgag tgggttgcag tgatctctta cgatggctca 600
gacaagtatt atgtggactc agtcaagggg agattcacaa taagccgaga caactccaaa 660
aaccggcttt atctccagat gaacagcctt agagcggaag ataccgcggt atactactgt 720
gcccgcgaga ggtattccgg cagagactac tggggacagg gcacactggt caccgtgagt 780
tctgccgcag cgctcgataa cgaaaagagc aacggaacca ttatccacgt taagggcaag 840
cacctgtgcc ccagtcccct cttcccagga ccatctaaac ccttctgggt tctggtagta 900
gttggagggg tccttgcatg ttactccctt ttggtcaccg tcgccttcat tattttctgg 960
gtgagatcca aaagaagccg cctgctccat agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc 1020
cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat 1080
cggagcaggg tgaagttttc cagatctgca gatgcaccag cgtatcagca gggccagaac 1140
caactgtata acgagctcaa cctgggacgc agggaagagt atgacgtttt ggacaagcgc 1200
agaggacggg accctgagat gggtggcaaa ccaagacgaa aaaaccccca ggagggtctc 1260
tataatgagc tgcagaagga taagatggct gaagcctatt ctgaaatagg catgaaagga 1320
gagcggagaa ggggaaaagg gcacgacggt ttgtaccagg gactcagcac tgctacgaag 1380
gatacttatg acgctctcca catgcaagcc ctgccaccta ggtaa 1425
<210> 226 <211> 474 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 226
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
35 40 45
Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
100 105 110
Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys
115 120 125
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
130 135 140
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
145 150 155 160
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
165 170 175
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
180 185 190
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
195 200 205
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr
210 215 220
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
225 230 235 240
Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
245 250 255
Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly
260 265 270
Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe
275 280 285
Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val
290 295 300
Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met
325 330 335
Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala
340 345 350
Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg
355 360 365
Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn
370 375 380
Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg
385 390 395 400
Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro
405 410 415
Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala
420 425 430
Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His
435 440 445
Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp
450 455 460
Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 465 470
<210> 227
<211> 1359
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 227
gagattgtga tgacccagtc ccctgctacc ctgtccgtca gtccgggcga gagagccacc 60
ttgtcatgcc gggccagcca gtccgtcagc agtctcctga cttggtatca gcaaaaacca 120
gggcaggcac cgcggctttt gatttttggt gcaagcacac gcgccactgg cattccagct 180
aggttttctg gaagtggatc tgggacaggc ttcactctga caatcagtag cctgcagagt 240
gaggactttg ctgtttacta ctgtcaacag tacgacacct ggccattcac attcgggccc 300
ggcaccaagg tcgacttcaa gaggggcggt ggaggttcag gtggtggcgg gtcaggcggc 360
ggtgggtctc aggttcaact ggtggaatca ggtggcggcg ttgtccaacc ggggcgatca 420
cttcgacttt cctgtgctgc ctcaggcttt actttttcat cctatgggat gcactgggtt 480
cggcaggctc ccggaaaagg actcgagtgg gttgcagtga tctcttacga tggctcagac 540
aagtattatg tggactcagt caaggggaga ttcacaataa gccgagacaa ctccaaaaac 600
cggctttatc tccagatgaa cagccttaga gcggaagata ccgcggtata ctactgtgcc 660
cgcgagaggt attccggcag agactactgg ggacagggca cactggtcac cgtgagttct 720
gccgcagcgc tcgataacga aaagagcaac ggaaccatta tccacgttaa gggcaagcac 780
ctgtgcccca gtcccctctt cccaggacca tctaaaccct tctgggttct ggtagtagtt 840
ggaggggtcc ttgcatgtta ctcccttttg gtcaccgtcg ccttcattat tttctgggtg 900
agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 960
ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 1020
agcagggtga agttttccag atctgcagat gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa 1080
ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga 1140
ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca agacgaaaaa acccccagga gggtctctat 1200
aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa gcctattctg aaataggcat gaaaggagag 1260
cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg taccagggac tcagcactgc tacgaaggat 1320
acttatgacg ctctccacat gcaagccctg ccacctagg 1359
<210> 228 <211> 453
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 228
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu
20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg Gly Gly Gly Gly
100 105 110
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Val
115 120 125
Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser
130 135 140
Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val
145 150 155 160
Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr
165 170 175
Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr
210 215 220
Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
225 230 235 240
Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val
245 250 255
Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys
260 265 270
Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser
275 280 285
Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg
290 295 300
Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro
305 310 315 320
Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe
325 330 335
Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro
340 345 350
Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly
355 360 365
Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro
370 375 380
Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr
385 390 395 400
Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly
405 410 415
Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln
420 425 430
Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln
435 440 445
Ala Leu Pro Pro Arg
450
<210> 229 <211> 1452
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 229
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggagatcg tcatgacaca gagtccagct accctgagcg tgtcccctgg agagagagcc 120
accctgtcct gtagggctag tcagagtgtg tccagcctcc tcacctggta tcaacagaag 180
cctggtcaag ctccccggct gcttatcttc ggggccagca cgcgagccac aggcatcccg 240
gccagattct ctggctctgg cagtggcacc gggttcactc tcacgatctc atccctgcag 300
tcagaggatt tcgctgtgta ttactgtcag cagtacgata catggccctt caccttcggc 360
ccgggcacaa aagtagattt caagcgcggc ggcgggggta gtgggggcgg gggatcagga 420
ggagggggct cccaagtaca gctggttgag agcggcggcg gggtggttca gcccgggcgc 480
agcctcaggc tgagttgcgc agcatcagga ttcacattca gttcttatgg aatgcattgg 540
gtcagacagg ctcccgggaa gggccttgaa tgggtggcag tcattagcta cgacggaagc 600
gataagtact atgtggactc agttaaaggg agatttacta tcagccgcga caattccaaa 660
aacagattgt atttgcagat gaactccctc agggcggagg acactgctgt atattactgc 720
gcacgagaga gatactccgg ccgagactat tggggccaag gaacattggt aactgtgagc 780
tccgccgcag ctattgaggt catgtacccc ccaccttatc tcgataatga gaagagtaat 840
gggactataa ttcacgtaaa gggcaaacac ctgtgccctt ccccgctgtt tccaggtcca 900
agtaagccgt tctgggtcct ggttgtggtg ggaggggtgc tggcctgcta ttctctgttg 960
gttaccgtgg cctttatcat tttctgggtg agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc 1020
gattacatga atatgactcc acgccgccct ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac 1080
gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg agcagggtga agttttccag atctgcagat 1140
gcaccagcgt atcagcaggg ccagaaccaa ctgtataacg agctcaacct gggacgcagg 1200
gaagagtatg acgttttgga caagcgcaga ggacgggacc ctgagatggg tggcaaacca 1260
agacgaaaaa acccccagga gggtctctat aatgagctgc agaaggataa gatggctgaa 1320
gcctattctg aaataggcat gaaaggagag cggagaaggg gaaaagggca cgacggtttg 1380
taccagggac tcagcactgc tacgaaggat acttatgacg ctctccacat gcaagccctg 1440
ccacctaggt aa 1452
<210> 230
<211> 483
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 230
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
35 40 45
Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys
115 120 125
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
130 135 140
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
145 150 155 160
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
165 170 175
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
180 185 190
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
195 200 205
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr
210 215 220
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
225 230 235 240
Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
245 250 255
Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro
260 265 270
Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly
275 280 285
Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe
290 295 300
Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu
305 310 315 320
Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg
325 330 335
Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro
340 345 350
Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr
370 375 380
Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg
385 390 395 400
Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met
405 410 415
Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu
420 425 430
Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys
435 440 445
Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu
450 455 460
Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu
465 470 475 480
Pro Pro Arg
<210> 231
<211> 1386
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 231
gagatcgtca tgacacagag tccagctacc ctgagcgtgt cccctggaga gagagccacc 60
ctgtcctgta gggctagtca gagtgtgtcc agcctcctca cctggtatca acagaagcct 120
ggtcaagctc cccggctgct tatcttcggg gccagcacgc gagccacagg catcccggcc 180
agattctctg gctctggcag tggcaccggg ttcactctca cgatctcatc cctgcagtca 240
gaggatttcg ctgtgtatta ctgtcagcag tacgatacat ggcccttcac cttcggcccg 300
ggcacaaaag tagatttcaa gcgcggcggc gggggtagtg ggggcggggg atcaggagga 360
gggggctccc aagtacagct ggttgagagc ggcggcgggg tggttcagcc cgggcgcagc 420
ctcaggctga gttgcgcagc atcaggattc acattcagtt cttatggaat gcattgggtc 480
agacaggctc ccgggaaggg ccttgaatgg gtggcagtca ttagctacga cggaagcgat 540
aagtactatg tggactcagt taaagggaga tttactatca gccgcgacaa ttccaaaaac 600
agattgtatt tgcagatgaa ctccctcagg gcggaggaca ctgctgtata ttactgcgca 660
cgagagagat actccggccg agactattgg ggccaaggaa cattggtaac tgtgagctcc 720
gccgcagcta ttgaggtcat gtacccccca ccttatctcg ataatgagaa gagtaatggg 780
actataattc acgtaaaggg caaacacctg tgcccttccc cgctgtttcc aggtccaagt 840
aagccgttct gggtcctggt tgtggtggga ggggtgctgg cctgctattc tctgttggtt 900
accgtggcct ttatcatttt ctgggtgaga tccaaaagaa gccgcctgct ccatagcgat 960
tacatgaata tgactccacg ccgccctggc cccacaagga aacactacca gccttacgca 1020
ccacctagag atttcgctgc ctatcggagc agggtgaagt tttccagatc tgcagatgca 1080
ccagcgtatc agcagggcca gaaccaactg tataacgagc tcaacctggg acgcagggaa 1140
gagtatgacg ttttggacaa gcgcagagga cgggaccctg agatgggtgg caaaccaaga 1200
cgaaaaaacc cccaggaggg tctctataat gagctgcaga aggataagat ggctgaagcc 1260
tattctgaaa taggcatgaa aggagagcgg agaaggggaa aagggcacga cggtttgtac 1320
cagggactca gcactgctac gaaggatact tatgacgctc tccacatgca agccctgcca 1380
cctagg 1386
<210> 232
<211> 462
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 232
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu
20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe
85 90 95
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Val
115 120 125
Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser
130 135 140
Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val
145 150 155 160
Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr
165 170 175
Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr
210 215 220
Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
225 230 235 240
Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu
245 250 255
Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro
260 265 270
Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val
275 280 285
Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe
290 295 300
Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
305 310 315 320
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
325 330 335
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
340 345 350
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
370 375 380
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
385 390 395 400
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
405 410 415
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
420 425 430
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
435 440 445
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
450 455 460
<210> 233 <211> 1533 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 233
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccggaaatag tgatgactca gtccccggcc accctcagcg tgtcccccgg ggagcgagcg 120
accctgtcat gcagggcttc ccagagtgtc agctccctgc tcacttggta tcagcaaaag 180
ccggggcagg ctccccgcct cctcatcttc ggggcatcaa ctagggccac cggcattcct 240
gcaagatttt ccgggtctgg cagcggcacc ggcttcaccc ttaccattag ctctctgcag 300
tctgaggact tcgccgttta ctattgtcag cagtatgata cttggccctt taccttcggt 360
cccggaacta aggtggactt caagcgcggg gggggtggat ctggaggtgg tggctccggg 420
ggcggtggaa gccaggtcca gttggttgag agcggcggcg gagtggtgca gcccgggagg 480
tccttgcggc tgagctgtgc agcctccggt tttacttttt ctagctatgg aatgcattgg 540
gtaagacagg ctcccggaaa aggcctcgag tgggtggcgg tcattagcta tgatggatct 600
gataaatact atgtggactc agttaagggg cgcttcacaa tctcaagaga caatagcaaa 660
aatagactgt acctgcagat gaatagtctg cgcgccgagg acactgccgt gtactactgc 720
gcccgcgaga gatacagcgg acgggattac tggggccagg gtaccctcgt aacggtgtcc 780
tccgctgccg cccttagcaa cagcattatg tacttttctc atttcgtgcc agtctttctc 840
ccagcaaagc ccaccactac cccggccccc aggccgccta ctcctgcccc cactatcgcg 900
tctcagcctc tctccttgcg gcccgaggcc tgccggccag ccgcaggggg cgccgtacat 960
actcggggtt tggatttcgc ttgcgacata tatatttggg cccccctcgc cggcacatgt 1020
ggagtgctgc tcctgagtct cgttataacc ctctattgca accatagaaa cagatccaaa 1080
agaagccgcc tgctccatag cgattacatg aatatgactc cacgccgccc tggccccaca 1140
aggaaacact accagcctta cgcaccacct agagatttcg ctgcctatcg gagcagggtg 1200
aagttttcca gatctgcaga tgcaccagcg tatcagcagg gccagaacca actgtataac 1260
gagctcaacc tgggacgcag ggaagagtat gacgttttgg acaagcgcag aggacgggac 1320
cctgagatgg gtggcaaacc aagacgaaaa aacccccagg agggtctcta taatgagctg 1380
cagaaggata agatggctga agcctattct gaaataggca tgaaaggaga gcggagaagg 1440
ggaaaagggc acgacggttt gtaccaggga ctcagcactg ctacgaagga tacttatgac 1500
gctctccaca tgcaagccct gccacctagg taa 1533
<210> 234
<211> 510
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 234
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
20 25 30
Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
35 40 45
Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
Pro Arg Leu Leu Ile Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro
65 70 75 80
Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile
85 90 95
Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
100 105 110
Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
130 135 140
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
145 150 155 160
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
165 170 175
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
180 185 190
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
195 200 205
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr
210 215 220
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
225 230 235 240
Ala Arg Glu Arg Tyr Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
245 250 255
Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe
260 265 270
Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro
275 280 285
Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu
290 295 300
Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His
305 310 315 320
Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu
325 330 335
Ala Gly Thr Cys Gly Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr
340 345 350
Cys Asn His Arg Asn Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
355 360 365
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
385 390 395 400
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
405 410 415
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
420 425 430
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
435 440 445
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
450 455 460
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
465 470 475 480
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
485 490 495
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
500 505 510
<210> 235 <211> 1467
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 235
gaaatagtga tgactcagtc cccggccacc ctcagcgtgt cccccgggga gcgagcgacc 60
ctgtcatgca gggcttccca gagtgtcagc tccctgctca cttggtatca gcaaaagccg 120
gggcaggctc cccgcctcct catcttcggg gcatcaacta gggccaccgg cattcctgca 180
agattttccg ggtctggcag cggcaccggc ttcaccctta ccattagctc tctgcagtct 240
gaggacttcg ccgtttacta ttgtcagcag tatgatactt ggccctttac cttcggtccc 300
ggaactaagg tggacttcaa gcgcgggggg ggtggatctg gaggtggtgg ctccgggggc 360
ggtggaagcc aggtccagtt ggttgagagc ggcggcggag tggtgcagcc cgggaggtcc 420
ttgcggctga gctgtgcagc ctccggtttt actttttcta gctatggaat gcattgggta 480
agacaggctc ccggaaaagg cctcgagtgg gtggcggtca ttagctatga tggatctgat 540
aaatactatg tggactcagt taaggggcgc ttcacaatct caagagacaa tagcaaaaat 600
agactgtacc tgcagatgaa tagtctgcgc gccgaggaca ctgccgtgta ctactgcgcc 660
cgcgagagat acagcggacg ggattactgg ggccagggta ccctcgtaac ggtgtcctcc 720
gctgccgccc ttagcaacag cattatgtac ttttctcatt tcgtgccagt ctttctccca 780
gcaaagccca ccactacccc ggcccccagg ccgcctactc ctgcccccac tatcgcgtct 840
cagcctctct ccttgcggcc cgaggcctgc cggccagccg cagggggcgc cgtacatact 900
cggggtttgg atttcgcttg cgacatatat atttgggccc ccctcgccgg cacatgtgga 960
gtgctgctcc tgagtctcgt tataaccctc tattgcaacc atagaaacag atccaaaaga 1020
agccgcctgc tccatagcga ttacatgaat atgactccac gccgccctgg ccccacaagg 1080
aaacactacc agccttacgc accacctaga gatttcgctg cctatcggag cagggtgaag 1140
ttttccagat ctgcagatgc accagcgtat cagcagggcc agaaccaact gtataacgag 1200
ctcaacctgg gacgcaggga agagtatgac gttttggaca agcgcagagg acgggaccct 1260
gagatgggtg gcaaaccaag acgaaaaaac ccccaggagg gtctctataa tgagctgcag 1320
aaggataaga tggctgaagc ctattctgaa ataggcatga aaggagagcg gagaagggga 1380
aaagggcacg acggtttgta ccagggactc agcactgcta cgaaggatac ttatgacgct 1440
ctccacatgc aagccctgcc acctagg 1467
<210> 236
<211> 489
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 236
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu
20 25 30
Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gly Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Thr Trp Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg Gly Gly Gly Gly
100 105 110
Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gln Val Gln Leu Val
115 120 125
Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser
130 135 140
Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val
145 150 155 160
Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr
165 170 175
Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
180 185 190
Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
195 200 205
Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr
210 215 220
Ser Gly Arg Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
225 230 235 240
Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro
245 250 255
Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro
260 265 270
Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu
275 280 285
Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp
290 295 300
Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly
305 310 315 320
Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn
325 330 335
Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr
340 345 350
Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro
355 360 365
Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser
370 375 380
Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu
385 390 395 400
Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg
405 410 415
Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln
420 425 430
Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr
435 440 445
Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp
450 455 460
Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala
465 470 475 480
Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485
<210> 237
<211> 15
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Линкер G4s scFv
<400> 237
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 238
<211> 288
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Внеклеточный и трансмембранный домен CD8
<400> 238
gctgcagcat tgagcaactc aataatgtat tttagtcact ttgtaccagt gttcttgccg 60
gctaagccta ctaccacacc cgctccacgg ccacctaccc cagctcctac catcgcttca 120
cagcctctgt ccctgcgccc agaggcttgc cgaccggccg cagggggcgc tgttcatacc 180 agaggactgg atttcgcctg cgatatctat atctgggcac ccctggccgg aacctgcggc 240 gtactcctgc tgtccctggt catcacgctc tattgtaatc acaggaac 288
<210> 239
<211> 96
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Внеклеточный и трансмембранный домен CD8
<400> 239
Ala Ala Ala Leu Ser Asn Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro
1 5 10 15
Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro
20 25 30
Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu
35 40 45
Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp
50 55 60
Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly
65 70 75 80
Val Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn
85 90 95
<210> 240
<211> 294
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Внеклеточные и внутриклеточные домены
<400> 240
cttgataatg aaaagtcaaa cggaacaatc attcacgtga agggcaagca cctctgtccg 60
tcacccttgt tccctggtcc atccaagcca ttctgggtgt tggtcgtagt gggtggagtc 120
ctcgcttgtt actctctgct cgtcaccgtg gcttttataa tcttctgggt tagatccaaa 180
agaagccgcc tgctccatag cgattacatg aatatgactc cacgccgccc tggccccaca 240
aggaaacact accagcctta cgcaccacct agagatttcg ctgcctatcg gagc 294
241 98
БЕЛОК
<220>
<223> Внеклеточные и внутриклеточные домены
<400> 241
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
1 5 10 15
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp
20 25 30
Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val
35 40 45
Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
50 55 60
Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr
65 70 75 80
Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr
85 90 95
Arg Ser
<210> 242
<211> 1482
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 10E3_CHD_ДНК
<400> 242
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaggtga ccctcaaaga gtctggaccc gtgctcgtaa aacctacgga gaccctgaca 120
ctcacctgca cagtctccgg cttcagcctc atcaatgcca ggatgggagt ttcctggatc 180
aggcaaccgc ccggaaaggc cctggaatgg ctcgcacata ttttcagtaa cgctgaaaaa 240
agctatcgga cttctctgaa aagtcggctc acgattagta aggacacatc caagagccaa 300
gtggtgctta cgatgactaa catggaccct gtggatactg caacctatta ctgtgctcga 360
atccctggtt atggcggaaa tggggactac cactactacg gtatggatgt ctggggccaa 420
gggaccacgg ttactgtttc aagcggaggg ggagggagtg ggggtggcgg atctggcgga 480
ggaggcagcg atatccagat gacgcagtcc cctagttcac tttccgcatc cctgggggat 540
cgggttacca ttacatgccg cgcgtcacag ggtatccgga atgatctggg atggtaccag 600
cagaagccgg gaaaggctcc taagcgcctc atctacgcca gctccaccct gcagagtgga 660
gtgccctccc ggttttcagg cagtggctcc ggtacggagt ttactcttac aattagcagc 720
ctgcagccag aagattttgc aacttactac tgtttgcagc ataataattt cccctggacc 780
tttggtcagg gcaccaaggt ggagatcaaa agagcagccg ccatcgaagt aatgtatccc 840
cccccgtacc ttgacaatga gaagtcaaat ggaaccatta tccatgttaa gggcaaacac 900
ctctgccctt ctccactgtt ccctggccct agtaagccgt tttgggtgct ggtggtagtc 960
ggtggggtgc tggcttgtta ctctcttctc gtgaccgtcg cctttataat cttttgggtc 1020
agatccaaaa gaagccgcct gctccatagc gattacatga atatgactcc acgccgccct 1080
ggccccacaa ggaaacacta ccagccttac gcaccaccta gagatttcgc tgcctatcgg 1140
agccgagtga aattttctag atcagctgat gctcccgcct atcagcaggg acagaatcaa 1200
ctttacaatg agctgaacct gggtcgcaga gaagagtacg acgttttgga caaacgccgg 1260
ggccgagatc ctgagatggg ggggaagccg agaaggaaga atcctcaaga aggcctgtac 1320
aacgagcttc aaaaagacaa aatggctgag gcgtactctg agatcggcat gaagggcgag 1380
cggagacgag gcaagggtca cgatggcttg tatcagggcc tgagtacagc cacaaaggac 1440
acctatgacg ccctccacat gcaggcactg cccccacgct ag 1482
<210> 243 <211> 493
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 10E3_CHD_АК
<400> 243
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu
20 25 30
Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe
35 40 45
Ser Leu Ile Asn Ala Arg Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro
50 55 60
Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu Ala His Ile Phe Ser Asn Ala Glu Lys
65 70 75 80
Ser Tyr Arg Thr Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr
85 90 95
Ser Lys Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp
100 105 110
Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Ile Pro Gly Tyr Gly Gly Asn Gly
115 120 125
Asp Tyr His Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
130 135 140
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
145 150 155 160
Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala
165 170 175
Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile
180 185 190
Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys
195 200 205
Arg Leu Ile Tyr Ala Ser Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg
210 215 220
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
225 230 235 240
Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Asn
245 250 255
Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala
260 265 270
Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys
275 280 285
Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser
290 295 300
Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val
305 310 315 320
Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile
325 330 335
Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr
340 345 350
Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln
355 360 365
Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys
370 375 380
Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln
385 390 395 400
Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu
405 410 415
Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg
420 425 430
Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met
435 440 445
Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly
450 455 460
Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp
465 470 475 480
Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485 490
<210> 244 <211> 1455
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 10E3_THD_ДНК
<400> 244
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcaagtta ctttgaagga gtctggacct gtactggtga agccaaccga gacactgaca 120
ctcacgtgta cagtgagtgg tttttccttg atcaacgcaa ggatgggcgt cagctggatc 180
aggcaacccc ctggcaaggc tctggaatgg ctcgctcaca tattcagcaa tgccgaaaaa 240
agctaccgga caagcctgaa atcccgcctg actatttcca aggacacttc taagtctcag 300
gtggtgctga ccatgaccaa catggacccg gtggacaccg ccacctatta ctgcgcaaga 360
atccctgggt atggtgggaa tggtgactac cattattatg ggatggatgt gtgggggcaa 420
ggcacaaccg taacggtctc aagcggtggg ggaggctcag ggggcggagg ctccggaggt 480
ggcggctccg acattcagat gacccaaagc ccgtccagcc tgtccgccag cctgggagat 540
agagtgacaa tcacgtgtag agcttcccaa gggataagaa atgatctcgg gtggtatcag 600
cagaagcccg gcaaagcccc caaaaggctt atatatgcta gtagtacact gcagtctgga 660
gttccttccc gattttcagg tagcggctcc ggtacagagt tcaccctcac gataagctca 720
ctccagcctg aggatttcgc aacgtactac tgcctccagc acaacaattt tccctggact 780
ttcggccagg gcaccaaggt ggagatcaag agggccgctg cccttgataa tgaaaagtca 840
aacggaacaa tcattcacgt gaagggcaag cacctctgtc cgtcaccctt gttccctggt 900
ccatccaagc cattctgggt gttggtcgta gtgggtggag tcctcgcttg ttactctctg 960
ctcgtcaccg tggcttttat aatcttctgg gttagatcca aaagaagccg cctgctccat 1020
agcgattaca tgaatatgac tccacgccgc cctggcccca caaggaaaca ctaccagcct 1080
tacgcaccac ctagagattt cgctgcctat cggagccgag tgaaattttc tagatcagct 1140
gatgctcccg cctatcagca gggacagaat caactttaca atgagctgaa cctgggtcgc 1200
agagaagagt acgacgtttt ggacaaacgc cggggccgag atcctgagat gggggggaag 1260
ccgagaagga agaatcctca agaaggcctg tacaacgagc ttcaaaaaga caaaatggct 1320
gaggcgtact ctgagatcgg catgaagggc gagcggagac gaggcaaggg tcacgatggc 1380
ttgtatcagg gcctgagtac agccacaaag gacacctatg acgccctcca catgcaggca 1440
ctgcccccac gctag 1455
<210> 245
<211> 484
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 10E3_THD_АК
<400> 245
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu
20 25 30
Val Lys Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe
35 40 45
Ser Leu Ile Asn Ala Arg Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro
50 55 60
Gly Lys Ala Leu Glu Trp Leu Ala His Ile Phe Ser Asn Ala Glu Lys
65 70 75 80
Ser Lys Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp
100 105 110
Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Ile Pro Gly Tyr Gly Gly Asn Gly
115 120 125
Asp Tyr His Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
130 135 140
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
145 150 155 160
Gly Gly Ser Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala
165 170 175
Ser Leu Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile
180 185 190
Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys
195 200 205
Arg Leu Ile Tyr Ala Ser Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg
210 215 220
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
225 230 235 240
Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Asn
245 250 255
Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala
260 265 270
Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys
275 280 285
Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro
290 295 300
Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu
305 310 315 320
Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser
325 330 335
Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala
355 360 365
Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala
370 375 380
Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg
385 390 395 400
Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu
405 410 415
Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn
420 425 430
Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met
435 440 445
Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly
450 455 460
Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala
465 470 475 480
Leu Pro Pro Arg
<210> 246
<211> 1464
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 8B5_CHD_ДНК
<400> 246
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcagatcc agttggtgga atcagggggc ggtgtggtgc agccgggtag gagcctgaga 120
ctgtcatgcg tggcgtctgg cttcacattc aagaactacg gcatgcactg ggtgcgacag 180
gcccccggaa agggtttgga gtgggtcgcc gtgatctggt acgacggatc taatgagtat 240
tacggagatc ctgtgaaggg aaggttcacc atctcccgcg acaatagcaa aaatatgctc 300
tacctgcaaa tgaactcact cagggcggat gatacggcgg tctactattg cgctcgctca 360
gggattgctg tggccggcgc attcgattac tggggacagg gtaccctggt gacagtatca 420
agcggaggcg gcggctctgg cggcggcgga tctggcgggg ggggaagtga gattgtgttg 480
acacagtctc ccgataccct gtcactgtca cccggcgaga aggcaacgct gagttgcaga 540
gcaagccagt cagtctcctc ttcttttctg gcctggtatc agcaaaaacc aggtcaggca 600
ccatctctcc tgatttacgt tgccagcaga cgggcggctg gcattcccga caggttctct 660
ggaagcggat ctgggaccga ttttaccctg acaattagcc gcttggagcc cgaagacttt 720
ggtatgtttt actgccagca ctacggaagg acacctttca catttggccc gggcacgaaa 780
gtcgatataa aacgcgcagc cgccattgaa gtaatgtacc caccacctta tttggacaat 840
gaaaagtcca atggtaccat tattcacgtc aagggaaagc atctctgtcc aagccctctg 900
ttccccggcc cctccaaacc attctgggtg ctggtggtcg tcggcggagt tctggcctgc 960
tattctctgc tcgtgactgt tgcattcatc attttctggg tgagatccaa aagaagccgc 1020
ctgctccata gcgattacat gaatatgact ccacgccgcc ctggccccac aaggaaacac 1080
taccagcctt acgcaccacc tagagatttc gctgcctatc ggagccgagt gaaattttct 1140
agatcagctg atgctcccgc ctatcagcag ggacagaatc aactttacaa tgagctgaac 1200
ctgggtcgca gagaagagta cgacgttttg gacaaacgcc ggggccgaga tcctgagatg 1260
ggggggaagc cgagaaggaa gaatcctcaa gaaggcctgt acaacgagct tcaaaaagac 1320
aaaatggctg aggcgtactc tgagatcggc atgaagggcg agcggagacg aggcaagggt 1380
cacgatggct tgtatcaggg cctgagtaca gccacaaagg acacctatga cgccctccac 1440
atgcaggcac tgcccccacg ctag 1464
<210> 247
<211> 487
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 8B5_CHD_АК
<400> 247
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Ile Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
20 25 30
Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Lys Asn Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Glu Tyr
65 70 75 80
Tyr Gly Asp Pro Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Met Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gly Ile Ala Val Ala Gly Ala Phe
115 120 125
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly
130 135 140
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu
145 150 155 160
Thr Gln Ser Pro Asp Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Lys Ala Thr
165 170 175
Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Phe Leu Ala Trp
180 185 190
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Ser Leu Leu Ile Tyr Val Ala
195 200 205
Ser Arg Arg Ala Ala Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
210 215 220
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe
225 230 235 240
Gly Met Phe Tyr Cys Gln His Tyr Gly Arg Thr Pro Phe Thr Phe Gly
245 250 255
Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Ala Ala Ala Ile Glu Val Met
260 265 270
Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile
275 280 285
His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro
290 295 300
Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys
305 310 315 320
Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser
325 330 335
Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg
340 345 350
Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg
355 360 365
Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp
370 375 380
Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn
385 390 395 400
Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg
405 410 415
Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly
420 425 430
Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu
435 440 445
Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu
450 455 460
Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His
465 470 475 480
Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg 485
<210> 248
<211> 1437
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 8B5_THD_ДНК
<400> 248
atggcactcc ccgtaactgc tctgctgctg ccgttggcat tgctcctgca cgccgcacgc 60
ccgcagattc agctcgtgga gtcaggtggt ggcgtggttc agcccggacg gtccctgcga 120
ctctcttgtg tggcaagcgg atttaccttt aagaactatg gcatgcactg ggtgaggcag 180
gcccctggaa aaggactgga gtgggttgct gtgatctggt acgacgggtc caacgaatat 240
tatggcgatc ctgtgaaggg acggtttaca atctcacgcg ataactcaaa gaacatgctg 300
tacctgcaaa tgaactctct gcgcgctgat gacactgccg tgtattattg cgctcggagt 360
ggtatcgccg tcgcaggagc atttgattat tgggggcaag ggaccctcgt gacagtgagt 420
tccggagggg gaggttctgg tggaggcggc tctggtgggg gaggcagcga gatcgttctg 480
acccagtctc ctgacacact gtcactgtcc cctggtgaaa aggccacact gtcttgtaga 540
gcgtcccaga gcgtttccag ttccttcctt gcatggtatc aacaaaaacc cgggcaggct 600
ccaagcttgc tgatctacgt ggccagccgc cgggccgcag gcatccctga taggtttagc 660
ggttctggga gcgggacgga cttcaccttg acaatatcac ggctggaacc cgaagacttc 720
ggaatgtttt attgccagca ctacggaaga actccattca cctttggccc gggaacgaag 780
gtagacatca agagagcagc agccctcgac aacgagaaat ccaatggaac cattatccat 840
gtgaagggga aacatctctg cccttcacca ttgttccctg gacccagcaa gcctttttgg 900
gttctggtcg tggtgggggg cgtcctggct tgttactccc tcctcgttac agtcgccttc 960
ataatctttt gggttagatc caaaagaagc cgcctgctcc atagcgatta catgaatatg 1020
actccacgcc gccctggccc cacaaggaaa cactaccagc cttacgcacc acctagagat 1080
ttcgctgcct atcggagccg agtgaaattt tctagatcag ctgatgctcc cgcctatcag 1140
cagggacaga atcaacttta caatgagctg aacctgggtc gcagagaaga gtacgacgtt 1200
ttggacaaac gccggggccg agatcctgag atggggggga agccgagaag gaagaatcct 1260
caagaaggcc tgtacaacga gcttcaaaaa gacaaaatgg ctgaggcgta ctctgagatc 1320
ggcatgaagg gcgagcggag acgaggcaag ggtcacgatg gcttgtatca gggcctgagt 1380
acagccacaa aggacaccta tgacgccctc cacatgcagg cactgccccc acgctag 1437
<210> 249 <211> 478
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 8B5_THD_АК
<400> 249
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
1 5 10 15
His Ala Ala Arg Pro Gln Ile Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val
20 25 30
Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe
35 40 45
Thr Phe Lys Asn Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Glu Tyr
65 70 75 80
Tyr Gly Asp Pro Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser
85 90 95
Lys Asn Met Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr
100 105 110
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gly Ile Ala Val Ala Gly Ala Phe
115 120 125
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly
130 135 140
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Ile Val Leu
145 150 155 160
Thr Gln Ser Pro Asp Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly Glu Lys Ala Thr
165 170 175
Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Phe Leu Ala Trp
180 185 190
Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Ser Leu Leu Ile Tyr Val Ala
195 200 205
Ser Arg Arg Ala Ala Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser
210 215 220
Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe
225 230 235 240
Gly Met Phe Tyr Cys Gln His Tyr Gly Arg Thr Pro Phe Thr Phe Gly
245 250 255
Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu
260 265 270
Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro
275 280 285
Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val
290 295 300
Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe
305 310 315 320
Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp
325 330 335
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
340 345 350
Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser Arg Val
355 360 365
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
370 375 380
Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val
385 390 395 400
Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys Pro Arg
405 410 415
Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys Asp Lys
420 425 430
Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg Arg Arg
435 440 445
Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala Thr Lys
450 455 460
Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
465 470 475
<210> 250
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 250
Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr 1 5
<210> 251
<211> 112
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 251
Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Lys Gln Gly
1 5 10 15
Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr
20 25 30
Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys
50 55 60
Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg
65 70 75 80
Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala
85 90 95
Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
100 105 110
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Выделенный полинуклеотид, кодирующий химерный рецептор антигена
(CAR) или Т-клеточный рецептор (TCR), который содержит (i) антигенсвязывающую
молекулу, (ii) костимулирующий домен и (ш) домен активации, причем указанный
5 костимулирующий домен содержит внеклеточный домен, трансмембранный домен и внутриклеточный домен, где указанный внеклеточный домен содержит укороченный шарнирный домен, состоящий по существу из или состоящий из (i) аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере 10 приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам с 123 по 152 SEQ Ш NO: 1, и, необязательно, (ii) от одной до шести аминокислот.
2. Полинуклеотид по п. 1, где указанные от одной до шести аминокислот
15 представляют собой гетерологичные аминокислоты.
3. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный укороченный шарнирный домен состоит по существу из или состоит из аминокислотной последовательности, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по
20 меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотам с 123 по 152 SEQ Ш NO: 1.
4. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанную аминокислотную последовательность кодирует нуклеотидная последовательность, которая на по
25 меньшей мере приблизительно 60%, по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100%
30 идентична SEQ ID NO: 2.
5. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный трансмембранный домен представляет собой трансмембранный домен 4-1BB/CD137, альфа-цепи Т-клеточного рецептора, бета-цепи Т-клеточного рецептора, CD3 эпсилон, CD4, CD5, CD8 альфа, CD9, CD16, CD19, CD22, CD33, CD37, CD45, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154
5 или дзета-цепи Т-клеточного рецептора или любую их комбинацию.
6. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере
10 приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ ID NO: 5.
7. Полинуклеотид по п. 6, где указанный трансмембранный домен кодируется нуклеотидной последовательностью, которая на по меньшей мере
15 приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ ГО NO: 4.
8. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный внутриклеточный домен содержит сигнальный участок 4-1BB/CD137, активирующих рецепторов NK-клеток, В7-НЗ, BAFFR, BLAME (SLAMF8), В TLA, CD100 (SEMA4D), CD103, CD160 (BY55), CD 18, CD 19, CD 19а, CD2, CD247, CD27, CD276 (B7-H3), CD29, CD3 дельта, CD3 эпсилон, CD3 гамма, CD30, CD4, CD40, CD49a, CD49D, CD49f, CD69, CD7, CD84, CD8 альфа, CD8 бета, CD96 (Tactile), CD1 la, CD1 lb, CD1 lc, CD1 Id, CDS, CEACAM1, CRT AM, рецепторов цитокинов, DAP-10, DNAM1 (CD226), Fc-рецептора гамма, GADS, GITR, HVEM (LIGHTR), IA4, ICAM-1, ICAM-1, Ig альфа (CD79a), IL2R бета, IL2R гамма, IL7R альфа, иммуноглобулиноподобных белков, индуцибельного костимулятора Т-клеток (ICOS), интегринов, ITGA4, ITGA4, ITGA6, ITGAD, ITGAE, ITGAL, ITGAM, ITGAX, ITGB2, ITGB7, ITGB1, KIRDS2, LAT, LFA-1, LFA-1, лиганда, специфично связывающегося с CD83, LIGHT, LIGHT (члена 14 суперсемейства фактора некроза
8.
опухолей; TNFSF14), LTBR, Ly9 (CD229), ассоциированного с функцией лимфоцитов антигена 1 (LFA-1 (CD1 la/CD18), молекулы главного комплекса гистосовместимости (МНС) класса I, NKG2C, NKG2D, NKp30, NKp44, NKp46, NKp80 (KLRF1), OX-40, PAG/Cbp, белка 1 программируемой смерти (PD-1), PSGL1, SELPLG (CD162), 5 сигнальных молекул активации лимфоцитов (белков SLAM), SLAM (SLAMFl; CD 150; ГРО-3), SLAMF4 (CD244; 2B4), SLAMF6 (NTB-A; Lyl08), SLAMF7, SLP-76, белков-рецепторов ФНО, TNFR2, рецептора Toll лиганда, TRANCE/RANKL, VLA1 или VLA-6 или их комбинацию.
9. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный внутриклеточный домен
10 содержит сигнальный участок 4-1BB/CD137.
10. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный внутриклеточный домен содержит аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере
15 приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 7.
11. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный внутриклеточный домен содержит аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной
20 последовательностью, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 6.
25 12. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанная антигенсвязывающая
молекула содержит вариабельный участок тяжелой цепи (VH) и вариабельный участок легкой цепи (VL), причем указанный VH содержит 3 участка, определяющих комплементарность (CDR), и указанный VL содержит 3 CDR.
13. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанная антигенсвязывающая
30 молекула специфично связывает антиген, выбранный из группы, состоящей из 5Т4,
145
альфа-фетопротеина, антигена созревания В-клеток (ВСМА), СА-125, карциноэмбрионального антигена, CD19, CD20, CD22, CD23, CD30, CD33, CD56, CD 123, CD 138, c-Met, CSPG4, лектиноподобной молекулы 1 С-типа (CLL-1), EGFRvIII, эпителиального опухолевого антигена, ERBB2, FLT3, фолатсвязывающего белка, GD2, 5 GD3, HER1-HER2 в комбинации, HER2-HER3 в комбинации, HER2/Neu, HERV-K, гликопротеина gp41 оболочки ВИЧ-1, гликопротеина gpl20 оболочки ВИЧ-1, IL-11R альфа, каппа-цепи, лямбда-цепи, ассоциированного с меланомой антигена, мезотелина, MUC-1, мутантного р53, мутантного ras, простатспецифического антигена, ROR1 или VEGFR2 или их комбинации.
10 14. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанная антигенсвязывающая
молекула специфично связывает ВСМА, CLL-1 или FLT3.
15. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный домен активации содержит
аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно
80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по
15 меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 9 или SEQ Ш NO: 251.
16. Полинуклеотид по п. 1 или п. 2, где указанный домен активации кодирует
20 нуклеотидная последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 80%,
по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 8.
25 17. Полинуклеотид по любому из пп. 1-16, где указанный CAR или TCR
дополнительно содержит лидерный пептид.
18. Полинуклеотид по п. 17, где указанный лидерный пептид содержит
аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно
80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по
30 меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей
146
мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш N0: 11.
19. Полинуклеотид по п. 17, где указанный лидерный пептид кодируется нуклеотидной последовательностью, которая на по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична SEQ Ш NO: 10.
20. Вектор, содержащий полинуклеотид по любому из пп. 1-19.
21. Вектор по п. 20, представляющий собой аденовирусный вектор, аденоассоциированный вектор, ДНК-вектор, лентивирусный вектор, плазмиду, ретровирусный вектор или РНК-вектор или любую их комбинацию.
22. Полипептид, кодируемый полинуклеотидом по любому из пп. 1-19 или вектором по п. 20 или п. 21.
23. Клетка, содержащая полинуклеотид по любому из пп. 1-19, вектор по п. 20 или п. 21, полипептид по п. 22 или любую их комбинацию.
24. Клетка по п. 23, при этом указанная клетка представляет собой Т-клетку.
25. Клетка по п. 24, где указанная Т-клетка представляет собой аллогенную Т-клетку, аутологичную Т-клетку, сконструированную аутологичную Т-клетку (еАСТ) или инфильтрующий опухоль лимфоцит (TIL).
26. Клетка по п. 24 или п. 25, где указанная Т-клетка представляет собой Т-клетку CD4+.
27. Клетка по п. 24 или п. 25, где указанная Т-клетка представляет собой Т-клетку CD8+.
28. Клетка по п. 24 или п. 25, где указанная Т-клетка представляет собой клетку, полученную in vitro.
26.
29. Клетка по п. 24 или п. 25, где указанная Т-клетка представляет собой
аутологичную Т-клетку.
30. Композиция, содержащая полинуклеотид по любому из пп. 1-19, вектор
по п. 20 или п. 21, полипептид по п. 22 или клетку по любому из пп. 23-29.
5 31. Композиция по п. 30, которая приготовлена для доставки субъекту и,
необязательно, содержит по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
32. Способ получения клетки, экспрессирующей CAR или TCR, включающий
трансдукцию клетки полинуклеотидом по любому из пп. 1-19 в подходящих условиях.
10 33. Способ по п. 32, дополнительно включающий выделение указанной
клетки.
34. Способ индукции иммунитета против опухоли, включающий введение
субъекту эффективного количества клеток, содержащих полинуклеотид по любому из пп. 1-19, вектор по п. 20 или п. 21, полипептид по п. 22 или любую их комбинацию.
15 35. Применение полинуклеотида по любому из пп. 1-19, вектора по п. 20 или
п. 21, полипептида по п. 22, клетки по любому из пп. 23-29 или композиции по п. 30 или п. 31 для получения лекарственного средства для лечения рака у нуждающегося в этом субъекта.
36. Применение по п. 35, где указанный рак представляет собой рак
20 кроветворной системы.
37. Применение по п. 35, где указанный рак представляет собой рак, происходящий из лейкоцитов.
38. Применение по п. 35, где указанный рак представляет собой рак, происходящий из плазматических клеток.
25 39. Применение по любому из пп. 35-38, где указанный рак представляет
собой лейкоз, лимфому или миелому.
40. Применение по любому из пп. 35-38, где указанный рак представляет
собой острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ) (включая не-Т-клеточный ОЛЛ), острый миелоидный лейкоз, В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, В-клеточный острый лимфоидный лейкоз ("BALL"), бластическое плазмоцитоидное дендритно-клеточное 5 новообразование, лимфому Беркитта, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ), хронический миелогенный лейкоз (ХМЛ), хронический миелоидный лейкоз, хронический или острый лейкоз, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому (ДКВЛ), фолликулярную лимфому (ФЛ), лейкоз ворсистых клеток, болезнь Ходжкина, злокачественные лимфопролиферативные состояния, лимфому MALT-типа,
10 мантийноклеточную лимфому, лимфому маргинальной зоны, моноклональную гаммапатию неустановленной этиологии (МГНЭ), множественную миелому, миелодисплазию и миелодиспластический синдром, неходжкинскую лимфому (НХЛ), пролиферативное заболевание плазматических клеток (включая бессимптомную миелому (тлеющую множественную миелому или индолентную миелому),
15 плазмобластную лимфому, плазмоцитоидное дендритно-клеточное новообразование, плазмоцитомы (включая дискразию плазматических клеток; солитарную миелому; солитарную плазмоцитому; экстрамедуллярную плазмоцитому и множественную плазмоцитому), POEMS-синдром (также известный как синдром Кроу-Фукаса; болезнь Такацуки и РЕР-синдром), первичную медиастинальную крупноклеточную В-
20 клеточную лимфому (ПМБКЛ), мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, лимфому маргинальной зоны селезенки (ЛМЗС), системный амилоидоз легкой цепи, Т-клеточный острый лимфоидный лейкоз ("TALL"), Т-клеточную лимфому, трансформированную фолликулярную лимфому или макроглобулинемию Вальденстрема или их комбинацию.
ФИГ. 1А- (SEQ ID NO: 1)
MLRLLLALNLFPSIQVTGNKILVKQSPMLVAYDNAVNLSCKYSYNLFSREFRASLH
KGLDSAVEVCWYGNYSQQLQVYSKTGFNCDGKLGNESVTFYLQNLYVNQTDIYFC
КIEVMYPPPYLDNEKSNGT11HVKGKHLCPS PLFPGPSKP FWVLVWGGVLACY SL Шарнирный домен Трансмембранный
LVTVAFIIFWVRSKRSM^LHS^
домен Сигнальный домен
ФИГ. 1В
ФИГ. 1С
ФИГ. 2А - Связывающие молекулы против
CLL-1
4C1_VH '4'I'8_VH 0G5 . 1_VH 0G5 . 2 VH
4C1_VH 4C8_VH J0C5.1_VH 0C5.2 VH
4CI_VH
4G8_VH '0C5 . 1_VH 'DCS . 2 VH
yVvLyES
QVQLVQS QVQLVES
-j 1 1 1_- . 4-
UYHESLI: HYHESLK
YYVDSVK
-I- ,
FR4
VTVSS
VTVSS VTVSS VTVSS
4_ 4, 4, _|_ 4,
FR2
FR1
GEGLVKE SETLSLTCTVS GE GLVKE SO/TLSLTCTVS
GAEVKKE GASVirVSCblVS ' G G GW JEGF.SL PLSCAAS
CDR1
GGSISS--
FR3
FR4
YWS WI Р.Г'Е' E'GKGLEWI GYI: J jS IS S GG EjYWS WIR' ;№ GKGL EWI GY I HHSGS-lT 5YTLT - ELSHHWVPQAPGKGLEWHGGFEiE'EEiGET tFTFSS--Y GL IHWPC'AP GKGL EWVAVI S YE'GS F' К
CDR3
WPYFEYWG^GTL
RDYWGOGTL
SPVTIS VDTS Kl JQ FS LKL S S VTAAFTAVY YGVS LV YCGGEO YS GFDY WGQGTL SP VTISIDTS ЕПILFSLPL S S VTAADTAVY Y'YAS LVYGGGEiC YS GFD YJWGQ GTL GFVTVTEE'T S TE'TAYMEL S S LPS E E'TAVY YGAT ES RGI G-GP FTIS RDEIS Kl JFi YLQL EWSLRAE DTAVY YGAP EPY S '3-
-1 U ^|-I U -4-
ФИГ. 2B
SEQ ID NO:
CDR1
CDR2
CDR3
24C1 VH
125
101
24C8 VH
126
102
20C5.1 VH
127
103
20C5.2 VH
128
100
104
ФИГ. 2С - Связывающие молекулы против
CLL-1
ICIJYL
4G8_"L 0G5 . 1_"L OL'5 .1 "L
FR1
DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTC DIQLTQSPSSLSASVGDRVSFTC DIQMTQSPSSLSASVGDRVTIT EIVMTQSPATLSVSPGERATLSC
CDR2
FR2
DINNFLNpJYQQKPGKAPKLLIY
'к 'к 'к к 'к 'к 'к <
LNWYQQKPGKAPKLLIYDASNLET LNWYQQKPGKAPKLLISGASSLKS LTWYQQKPGQAPRLLI FjGASTRAT
~к к * к 'к к к к
4G1_"L 4C8_VL ОСЪ.1_"L
FR3
RFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYC RFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYC RFSGSGSGTDFTLTISSLPPEDFATYYC RFSGSGSGTGFTLTISSLQSEDFAVYYC
kkkk-kk-k-kk -кк*-к\к-к-к-к ~к -к * -к -к -к ^
CDR3 FR4
QQYGNLР FT FGGGT KVEIKR QQYGNLPFT FGGGTKVEIKR QQSYSTPIT FGQGTRLEIKR FGPGTKVDFKR
к к: ккг****-к-к
ФИГ. 2D
SEQ ID NO:
CDR1
CDR2
CDR3
24С1 VL
125
101
24С8 VL
126
102
20C5.1 VL
127
103
20C5.2 VL
128
100
104
ФИГ. 2Е - Связывающие молекулы против
ВСМА
FS-
21495
PC-
21497
AJ-
21508
NM-
21517
TS-
21522
RY-
21527
PP-
21528
RD-
21530
CDR2 FR3
11AE 'S YL G ]; F TIS F DIIS PI FT L ± L GI IN S L FA E E> T AY YYADS'1 :GY- FTIЯ F DNS I :NTL YLOI INS LPAEETAY S YAM'FOGF* *TI ITF DTS TSTYYFIELS SLF S EE'TAY uNPSLF SF**TI?*.*E'T?I 1'OFSLI LS S" TAAE'TAY i FADS VIGl- FTISF DNAKNSL'i LOI INSLFAEE'TAY YYAE'S'*PGF FTISF E'NS KNTLYLOI INSLFAEE'TAY 11Y А ГЛ " F 0 G ]: * 'TIT A E' E S T S T A YFIE L S S L F S E ETAY 11 PA'S VIJз]; F TIS F DNS РЫT L"± L 01 IN S L FAEE'ТА*.'
FR4
FS-
21495
GTIT'T*
PC-
21497
GTL* *T*
rq о
AJ-
21508
GTTYT;
rq q
NM-
21517
GTIF'T*
rq с
TS-
21522
GTL* *T*
rq с
RY-
21527
GTL* *T*
rq q
PP-
21528
GTTYT*.
rq q
RD-
21530
GTT* *T*
4- 4- 4-4-4-
rq с
4- 4-
CDR3
AF -AEFI
-GAYFE'I
7GG
AFE'GTYLGGL -
-T'Y- FE'L
7GF
AP
EST *E I IE'*.*
7G0
PFGPGiATS
--LAFDI
7G0
L-S .2
-HLIFE'Y
7G0
AFTE'FWSGSP--
-PG-LE'Y
7G0
AFTEEYSSSIFTH
YYYGIIE'Y
7G0
YKGEL;EPP±--
-E'lGEIE'Y
7G0
ФИГ. 2F
SEQ ID NO:
CDR1
CDR2
CDR3
FS-21495 VH
PC-21497 VH
AJ-21508 VH
NM-21517 VH
TS-21522 VH
RY-21527 VH
PP-21528 VH
RD-21530 VH
ФИГ. 2G - Связывающие молекулы против
ВСМА
FR1
CDR1
FR2
CDR2
FS-
21495
*LTC S PATL S LS P GE PAT LSL'
FASCS"SF
1 LP.
IJYX'FPGC'AEFLLI ±
E'ASNF
РС-
21497
*1 IT С SE'LSLE'* 'TE'GEE ~ SIS'-'
PSSCSLLHSNG
-YNYLE
UYL:
PPGC'PECLLIY
LGSNF
AJ-
21508
1ITC SP ALLS* YlpGEFATLSC
NL7A
TJYX
KPGC'AEFLLIY
GASTF
NM-
21517
FLTC SFATLSLSE'GE FAT LSL'
PASOSvSS
1 LP
NiCJPPGC'AE PLLI i
E'ASNF
TS-
21522
ALTC S P ATL S L S PGE FAT L S С
FASСSYSP
YLP
IPYX'KPGCAEPLLIY
E'ASNF
RY-
21527
C'LT'C SPSS* *SAS* *GE'F * "TIT'"'
FG.SCGISS
T.TLA
TJYX
PPGPAENLLIY
'YPSSL
РР-
21528
1 ITC S P E'S LA* *S LYE F ATIl*'"'
[ Y S С S * *L Y S SI IN FN Y L P
bFYX
KPGC'PENLLIY
T'LPSTF
RD-
21530
1 ITC SPATLS* 'SPGEFATLSL'
рдсрсисо
NL^
TMY ;;
LPGCAEFLLIi
SASTP
¦ Ф
t Ф + + ¦ 4- ¦ . . 4-
¦ i 4- 4- ¦
+¦ + +¦
4, 4, 4, + 4-^4-4,4.4.
CDR2
FR3
CDR3
FR4
FS-
21495
PIEAJ" FSGSGSGTEFTLTISS
LEE'EE'FPY *YYC
XFISWPFTF
GGGTIXEIN
РС-
21497
7Л ^
YTEPFSGSGSGTF'FTLPISP
"EAEE'**G**YY'"'
[IO'YLGLPLTF
GGGTr*EIi:
AJ-
21508
AlPAF FSGSGSGTEFTLTISS
LCSEE'FPY'i i'_
j1, ± AA ±
P-TF
GGGTi:*EIK
NM-
21517
AIPAFFSGS GS 'iTF'F TLTISS
LEPEE'FAYYYC
XF.H*.*T*PPTF
GGGTIP*EIi:
TS-
21522
TI P PF F S GS GS GTF'F TLTIS S
LEE'EE'FP* *YY'"'
XFFYY
E'TJTF
'TGI"TTI~*EIK
RY-
21527
П с]
A *E'SF FSGS GSGTDFTLTISS
LCPEE'FP.Ti i'_
XIiTFPFTF
GGGTIXEIF
РР-
21528
A/PEP FSGSGSGTEFTLTISS
LCAEE'*.*PA*YY'I
XFAHTPFTF
GGGTIP*EIK
RD-
21530
AIPAF FSGSGSGTEFTLTISS
LCSEE'FPA'x iC
XHHYT7PLTF
GGGTIP*EIK
+-.4- 4-4-4-4-4-4-4-4-4- * 4-4-4- 4-4-
. . 4-4- 4-4-4-
4- 4-4-
4-4-4-4-4-4-4-4-4-
ФИГ. 2H
SEQ ID NO:
CDR1
CDR2
CDR3
FS-21495 VL
PC-21497 VL
AJ-21508 VL
NM-21517 VL
TS-21522 VL
RY-21527 VL
PP-21528 VL
RD-21530 VL
6/48
GFP CD 19 CAR
CHD
THD
10ЕЗ
2Е7
8В5
4Е9
11F11
1Без CAR
Указанный CAR
Белок L
ФИГ. 4А
ФИГ. 4В
ИФН гамма в клетках Namalwa
ИФН гамма в клетках Namalwa
^40001 с
=.3000 -I
f 2000-
31000 ^ х О
^ of nf <Р f ^
^ ^ ^ ^
ФИГ. 4С
ФИГ. 4D
ИЛ-2 в клетках Namalwa
ИЛ-2 в клетках Namalwa
ФИГ. 4E
ФИГ. 4F
ФНО альфа в клетках Namalwa
ФНО альфа в клетках Namalwa
4 СО
зсо
§203
1 103 ¦з
-г(tm)*-Т
^ of f ^
^ ^ ^ ,
^ ФИГ. 4Н
ИФН гамма в клетках Ео1_1
ИФН гамма в клетках EoL1
-15000п с 5
15000
К 10000-s я <б
О. I-
5000- юоооч к
<б
5000
1 i
¦ -
*cf # "г* < & W°
° г9 к* # 4? #
ФИГ. 41
ФИГ. 4J
^800-
?,600'
К S
га400
§200
О 600 -,
S 400 к
О. Н
200
? # J> J>
9 & к$
($> V $У
^> ^ ^ # С ^ ^ ^ Ч"Ч
ФИГ. 4К
ФИГ. 4L
1500-1
ФНО альфа в клетках EoL1
1500
ФНО альфа в клетках Ео1_1
'1000-
500-
I-х
0) X
о "Г 1000
¦ я (б
511
ФИГ. 4М
ФИГ. 4N
ИФН гамма в клетках HL60
ИФН гамма в клетках HL60
К s я
<в
О. I-
а> я
3000¦
1000
& ^ 4* #
3000
ФИГ. 40
ИП-2 в клетках HL60
ИЛ-2 в клетках HL60
500 п
2 400-
К 300-s я
§.200-
310ОН
"г* &
ФИГ. 40
ФИГ. 4R
ФНО альфа в клетках HL60
250п
"5"
* 200-с
| 150- ! я
г 50-
ФНО альфа в клетках HL60
250 -,
I 200-с
к" 150-
а. 100-
=Г 50-
ФИГ. 4S
150001
ИФН гамма в клетках MV4;11
15000п
ИФН гамма в клетках MV4;11
:locoe-
s' <в
g- 5000-I х
S 10000-
s я л
? 5000 Н а> я I о
* 0
I I
У ГУ <Х'
^ 0 У ^ ^ ^ 4?'
о*" ? f ^
ФИГ. 4U
ФИГ. 4V
ИЛ-2 в клетках MV4;11
ИЛ-2 в клетках MV4;11
600п
600
•=•400-
О. I-
200-
0) 3 -=• 400
О. Н
200
-1 г
(У if i"v ^ \-
ФИГ. 4W
ФИГ. 4X
ФНО альфа в клетках MV4;11
ФНО альфа в клетках MV4;11
1500-1
-=•1000
z 500
1500-,
-В 1000-к s я (б
О. I-
500
0) 3
~ s4> ~ ,of * У * У # # У
"ФИГ. 5С
S1001
V00i
Клетки EoL1
ФИГ. 6А
ФИГ. 6В
Донор 1 Без CAR
Донор 2 Без CAR
10ЕЗ
8::
10ЕЗ
8В5
CHD THD
HFllu
11F11 y|
Белок L
FLT3-HIS
4 4000 "и
w 3000-a
5 2000
" 1000
X о
ФИГ. 7А
Клетки Namalwa (FLTS-вектор) Клетки EoL1 (FLTS+вектор) Клетки HL60 (FLT3+BeKTop) Клетки MV4;11 (FLTS+вектор)
а н =
Я Я
10000-1 800060004000 20000
ФИГ. 7В
| Клетки Namalwa (FLTS-вектор) Клетки EoL1 (FLTS+вектор) Клетки HL60 (FLTS+вектор) Клетки MV4;11 (FLTS+вектор)
<8
•s'
Клетки Namalwa (FLTS-вектор) Клетки EoL1 (FLTS+вектор) Клетки HL60 (FLTS+вектор) Клетки MV4;11 (FLTS+вектор)
3 600Н
Я S Я
400-
200-
<я а н я
я о
ФИГ. 7D
| Клетки Namalwa (FLTS-вектор) Клетки EoL1 (FLTS+вектор) Клетки HL60 (FLTS+вектор) Клетки MV4;11 (FLTS+вектор)
& # # # #
"и Я
2000-1
1500-
ФИГ. 7Е
| Клетки Namalwa (FLTS-вектор) Клетки EoL1 (FLTS+вектор) Клетки HL60 (FLTS+вектор) Клетки MV4;11 (FLTS+вектор)
ее а
<и Я
1000-
500-
<8
<8
я я я
н я
я я о
1500т
1000-
500
ФИГ. 7F
| Клетки Namalwa (FLTS-вектор) Клетки EoL1 (FLTS+вектор) Клетки HL60 (FLTS+вектор) Клетки MV4;11 (FLTS+вектор)
<5>
"*> <5> * к & # # # # ^ $
ФИГ. 8А
Клетки Namalwa
¦ 16ч 40 ч 64 ч ¦ 88 ч 112ч
100
Без CAR
10ЕЗ
8В5
GFP CD19 CHD THD CHD THD CHD
11F11
ФИГ. 8В
В х
о н
Ч 5Й
% Н X
X7 о
а В
" 100
90 80 70 60 50 40 30
Без CAR
jl(
GFP CD19
Клетки Eol_1
¦ 16ч 40 ч к 64 ч
CHD
THD
I...
CHD
88 ч ж 112 ч
CHD THD
Без CAR
10E3
8B5
11F11
ФИГ. 8С
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
Без CAR
GFP CD19
Клетки MV4;11
IMmfJi...
CHD
¦ 16 ч 40 ч к 64 ч ¦ 88 ч 112 ч
CHD THD 8B5
_I" j jmM_
CHD THD 10E3
ФИГ. 8D
Клетки HL60
100 90 80 70 60 50 40 30
10 0
16ч 40 ч с 64 ч ¦ 88 ч 112ч
ill
Без CAR
Без CAR
GFP CD19 CHD
10E3
CHD THD 8B5
CHD
11F11
ФИГ. 9А
Донор 1
Частицы клетки Клетки Клетки Клетки CD3/28 Namalwa EoL1 MV4;11 HL60
Без CAR
CD19 CAR
75.1
88.1
7.3
27.3 5.6
2,2
J.. - - 1
5.4
10ЕЗ
CHD
THD
79.9
189.9
7.6
11.7,
52.S 443 66.9 51.5,
1 м
'\123i
I [
8B5
CHD
THD
1 711 i"J
11F11
CHD
THD
CFSE
J... >
He стимулированные Т-клетки
Т-клетки + указанный стимул
ФИГ. 9В
Донор 2
Без CAR
Частицы клетки Клетки Клетки Клетки CD3/28 Namalwa EoL1 MV4;11 HL60
3,6 I 5.1 U.3 \ 5.1
CD19CAR
i8,0
4,6
10ЕЗ
CHD
THD
69J
5.4 I .49.6
47.3
31.1
31,6
35.8
42.3,
8B5
CHD
AIM
THD
1 ii1
11F11
CHD
-¦ -' 1^
THD
CFSE
стимул
Нестимулированные _ Т-клетки + указанный
Т-клетки
ФИГ. 10А
ФИГ. 10В
ФИГ. ЮС ФИГ. 10D
Без CAR
10E3-CHD
10E3-THD
8B5-THD
S3 8
; с
Белок L
ФИГ. 10F
Медиана (+/- межквартильный
104 1 1 1
О 20 40 60
Дни
ФИГ. 10G
День
Без CAR по
Без CAR по
Без CAR по
10E3-THD по
сравнению с 10E3-CHD
сравнению с 10E3-THD
сравнению с 8B5-THD
сравнению с 8B5-THD
0,756
0, 657
0, 690
0, 959
0, 067
0,0004
0,0002
0, 028
0,777
0,0022
0,0020
0, 639
0, 158
<0,0001
<0,0001
0, 042
0,200
0,0004
0,0001
0, 142
0,376
0,0072
0,0009
0, 054
Без CAR 10E3-THD
р = 0,0012
Дни
ФИГ. 10J
10E3-THD 8B5-THD p = 0,687
-f-
40 -1-
Дни
ФИГ. НА
24С8 HL CHD
¦ ¦¦ ¦ "-~i
ФИГ. 11В
24С8 HL THD
Белок L
ФИГ. 12А
ИЛ-2
I Namalwa MV411 U937 HL60
I EoL-1
ФИГ. 12В
ИФНу
2000 п
'1500-
го 1000-
Namalwa
MV411
U937
HL60
EoL-1
500
¦ I
<$>
,РЧ/ с?Т ^'
ФИГ. 12С
ФНОа
300 и
Q. IX
~ 200 А
100
1 I
¦ж % Ч
Н Namalwa MV411 U937 HL60
к, I EoL-1
.к/
.4/
re 60 о s го s с;
2 40 о
О О)
¦8- ?Q-
ФИГ. 13А
с; о о о
4§4
ФИГ. 13В
g 60
го s c;
О 40
о Ф
f го-
S "_ ФИГ. 13C
^5 0-
/ ° л# 4^ 4^
ФИГ. 13D
S * *
с; о
О 40
о Ф
f ЛЬ
з-ф
/ ° X? jy' jy'
¦§ 10000-
> X
§ 50004
NAMALWA HL 60 JvlV4:11 Т-клетки отдельно
if °
ФИГ. 14В
ИЛ-2
500 400-
¦§ 300-^ 200100-
NAMALWA HL-60 MW;11 Т-клетки отдельно
^ 1000-
500-
NAMALWA
HL60
MV4;11
Т-клетки отдельно
ФИГ. 15А
80 л
ФИГ. 15В
Клетки MV4;11
ФИГ. 15С
ФИГ. 16А
30000
Донор 1
ИФН гамма
EoL-1 NU Н929 MM1S
I 20000
5 5 (б
10000-
& У 4- & 4* / * ^ J ^ ^ J> ^
ИФН гамма
EoL-1 NCI-H929
2S0W
ФИГ. 16В
Донор 2
20000 -
15000-
5 2 (б
10000-
5000-
"dv ^ <2> л^ v" -о'" й.'" Г'1" А*
# ^ ^> / / ^ ^ /
^ л ^ ^ л^ J> Л^" ^
ФИГ. 16С
1500
ФНО альфа
EoL-1 NCI-H929
ММ 1S
-ц 10005
л ¦в-л t; л
В 500
I -~ I
' I -- I
ФИГ. 16D ^
2000-,
ФНО альфа
EoL-1 NCI-H929
ММ 1 S
1 :> о о -
1000-1
О х в
:> оо -
I I I I I I I 1
Л V" V" V" V" V" V" ±?r ..V" ^ ~
/ ^ / ^ ^ ^ ^
ФИГ. 16Е
43/48 ИЛ-2
¦ EoL-1 NCI-H929
ЛИ 13
ч -I f~ 1
Jb' л'** Ч'у A' ~V -Д'"
ФИГ. 16F
5000-,
ИЛ-2
EoL-1 NCI-H929
MM1S
4000-
ФИГ. 17А
Донор 1
Клетки Ео1_1
30 60 40 20 0
5 100
сБ с;
В х
н ч
zr о
ФИГ. 17В*
g РЙ
Ч U
'1 РЙ
16ч 40 ч 64 ч 88 ч 112ч
Донор 2
Клетки Eol_1
CD I CD
сБ с;
zr о
100
80 60 40 20 0
В х
н Ч
о Рй
й и
н W о
16ч 40 ч 64 ч 88 ч 112ч
ФИГ. 17С
Клетки NCI-H929
CD I CD
о н
с; x ш
zr о
100 80 60 40
20 0
5 ^
4 U
В x
H ii 4
2 * ей
о го
во о
С/3
U Рн "Л
16ч
40 ч 64 ч 88 ч 112ч
ФИГ. 17D
Клетки NCI-H929
CD I CD
сБ с;
100 80
I 16ч 40 ч I 64 ч
I 88 ч 112ч
zr о
В х
н а Ч
и W
ФИГ. 17Е
Клетки MM1S
CD I CD
о н
с; x ш
zr о
100
?5 0 и
40 20
i I
¦ 16 ч
40 ч 64 ч
¦ 88 ч
112ч
ФИГ. 17F
Клетки MM1S
CD I CD
сБ с; iЈ
х со
zr о
100
В х
о Я
90 О "Л
90 г, 1Л 1Л
U Рн
_. _ - "к. а ". ".
Рн СЛ
Рн Н
¦ 16ч в 40 ч
¦ 64ч
¦ 88 ч
112ч
83 | 86 t 85 | 91 1 93 | 85 I S6 I 86 | 35 | | 84 j S7 | 88 J
iiliiilllilj
"¦I.;! М
Клетки NCI-H929
Клетки MM1S
9 ! 11
?8 I 89 j S3 i 86 i 8S I 71 1
1 i i i 1 1
t 1 79 i 38 i 83 I 81 I 32 L 75 j
1 1 1 1 1 I 1
35 i 85
25 • SO
1 1
CFSE
Донор 2
Без CAR
51 ! 4?
Частицы CD3/CD28
IR С1 СЗ
I 43 1 65
С25
Клетки EoL1 1
И | •- 5
Клетки NCI-H929
80 i • 81 J ,| SS j .. 31 , 33 i 86 1 77 i . 48 90 1 37 1
Клетки MM1S
CFSE
Нестимулированные Т-клетки
Т-клетки + указанный стимул
ФИГ. 19А
3800 3600
3400 3200
0 3000
2800 2600
2400 2200 2000
ФСБ
100
Температура (С)
Температура (С)
100
100
100
100
103
103
104
104
104
104
105
105
105
105
106
106
106
106
109
109
110
110
110
110
111
111
111
111
112
112
112
112
114
114
115
115
115
115
116
116
119
119
128
135
135
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<210> 11
<210> 11
<210> 15
<210> 15
<210> 15
<210> 15
<210> 15
<210> 15
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
Ser Tyr Asp Gly Ser Asn
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<220>
<223> CDR2 вариабельного участка легкой цепи
<210> 51
<210> 51
<210> 51
<210> 51
<210> 51
<210> 51
<210> 51
<210> 51
<210> 51
<210> 51
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<220>
<223> CDR3 вариабельного участка легкой цепи
<400>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<210> 66 <211> 366 <212> ДНК
<210> 66 <211> 366 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400>
<220>
<223> Вариабельный участок легкой цепи
<400>
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100
105
100
105
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<220>
<223> CDR1 вариабельного участка тяжелой цепи
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<210> 98
<220>
102
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
102
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
102
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<220>
102
<223> CDR3 вариабельного участка тяжелой цепи
<400>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
Gly Ala Ser Ser Leu Lys Ser
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<220>
<223> ДНК вариабельного участка тяжелой цепи
<210> 122 <211> 324 <212> ДНК
<210> 122 <211> 324 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<210> 125
<210> 125
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<210> 133
<210> 133
<220>
<223> HxL CAR FS-21495
<220>
<223> HxL CAR FS-21495
Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ile Ser Trp Pro Phe Thr Phe Gly
Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Ile Ser Trp Pro Phe Thr Phe Gly
245
250
255
245
250
255
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu
Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu
260
270
265
260
270
265
<220>
137
<223> ДНК HxL CAR PC-21497
<400>
<220>
137
<223> ДНК HxL CAR PC-21497
<400>
260
270
265
260
270
265
<220>
137
<223> ДНК HxL CAR PC-21497
<400>
<220>
137
<223> ДНК HxL CAR PC-21497
<400>
<220>
<223> ДНК LxH CAR PC-21497
<220>
<223> ДНК LxH CAR PC-21497
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Gly Leu Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val
Gly Leu Trp Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val
260
270
265
260
270
265
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn
Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn
260
270
265
260
270
265
<220>
143
<223> ДНК LxH CAR AJ-21508
<400>
<220>
143
<223> ДНК LxH CAR AJ-21508
<400>
260
270
265
260
270
265
<220>
143
<223> ДНК LxH CAR AJ-21508
<400>
<220>
143
<223> ДНК LxH CAR AJ-21508
<400>
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu
Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu
275 280 285
275 280 285
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
His Ala Ala Arg Pro Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
275
280
285
275
280
285
<220>
<223> ДНК HxL CAR TS-21522
<400> 149
<220>
<223> ДНК HxL CAR TS-21522
<400> 149
275
280
285
275
280
285
<220>
<223> ДНК HxL CAR TS-21522
<400> 149
<220>
<223> ДНК HxL CAR TS-21522
<400> 149
His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu
His Ala Ala Arg Pro Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu
Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys
Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys
275 280 285
275 280 285
Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
Ser Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln
Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val
Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val
290 295 300
290 295 300
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln
Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp
290 295 300
290 295 300
His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu
His Ala Ala Arg Pro Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu Lys Ser
275
280
285
275
280
285
<220>
<223> ДНК HxL CAR RD-21530
<400> 161
<220>
<223> ДНК HxL CAR RD-21530
<400> 161
<220>
<223> ДНК LxH CAR RD-21530
<220>
<223> ДНК LxH CAR RD-21530
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ala
Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ala
260
270
265
260
270
265
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn
Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn
260
270
265
260
270
265
<220>
167
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
<220>
167
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
260
270
265
260
270
265
<220>
167
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
<220>
167
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys
Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys
50 55 60
50 55 60
Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala
Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala
305
310
320
315
305
310
320
315
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
50 55 60
Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg
Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg
305
310
320
315
305
310
320
315
Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys
Ser Ile Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys
50 55 60
50 55 60
Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala
Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala
305
310
320
315
305
310
320
315
<220>
175
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
<220>
175
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
305
310
320
315
305
310
320
315
<220>
175
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
<220>
175
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp
Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp
290 295 300
290 295 300
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe
Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu
Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu
275
280
285
275
280
285
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 189
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 189
275
280
285
275
280
285
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 189
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 189
Конструкция CAR против CLL-1
Конструкция CAR против CLL-1
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Ser Gly
Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly
Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly
275 280 285
275 280 285
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr
Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala Lys Pro Thr Thr
260
270
265
260
270
265
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu Leu
Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu
Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Ala Ala Ala Leu Asp Asn Glu
260
270
265
260
270
265
<220>
203
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
<220>
203
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
260
270
265
260
270
265
<220>
203
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
<220>
203
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400>
Thr Leu Thr Glu Leu Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
Thr Leu Thr Glu Leu Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
50 55 60
Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys
Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys
305
310
320
315
305
310
320
315
Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe
Gly Gly Phe Asp Pro Glu Asp Gly Glu Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
50 55 60
Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
305
310
320
315
305
310
320
315
Thr Leu Thr Glu Leu Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
Thr Leu Thr Glu Leu Ser Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys
50 55 60
50 55 60
Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly
Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg Pro Ala Ala Gly
305
310
320
315
305
310
320
315
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 211
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 211
305
310
320
315
305
310
320
315
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 211
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<400> 211
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
<220>
<223> Конструкция CAR против CLL-1
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg
Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg
290 295 300
290 295 300
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly
Phe Ala Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly
305
310
320
315
305
310
320
315
Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
Ser Val Ser Ser Leu Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala
50 55 60
50 55 60
Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp
Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp
305
310
320
315
305
310
320
315
Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr
100
110
105
100
110
105
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala
355 360 365
355 360 365
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg Gly Gly Gly Gly
Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys Arg Gly Gly Gly Gly
100
110
105
100
110
105
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly Gln Asn
355 360 365
355 360 365
Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys
Asp Thr Trp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Phe Lys
115
120
125
115
120
125
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr
370 375 380
370 375 380
<210> <211> <212>
<210> <211> <212>
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Ser Tyr Arg Thr Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr
Ser Tyr Arg Thr Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr
85 90 95
85 90 95
Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly
Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly
340
350
345
340
350
345
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
35 40 45
35 40 45
143
143
147
147
1/48
1/48
2/48
2/48
3/48
3/48
3/48
3/48
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
7/48
с5>
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
9/48
15/48
15/48
15/48
15/48
15/48
15/48
15/48
15/48
15/48
19/48
19/48
19/48
19/48
19/48
19/48
19/48
19/48
19/48
19/48
20/48
20/48
20/48
20/48
20/48
20/48
20/48
20/48
20/48
20/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
21/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
22/48
25/48
25/48
26/48
26/48
26/48
26/48
26/48
26/48
26/48
26/48
27/48
27/48
27/48
27/48
29/48
29/48
30/48
30/48
30/48
30/48
30/48
30/48
30/48
30/48
30/48
30/48
30/48
30/48
31/48
31/48
31/48
31/48
31/48
31/48
31/48
31/48
35/48
35/48
36/48
36/48
37/48
37/48
38/48
38/48
40/48
40/48
41/48
41/48
42/48
42/48
42/48
42/48
42/48
42/48
42/48
42/48
42/48
44/48
44/48
44/48
44/48
45/48
45/48
45/48
45/48
45/48
45/48
45/48
45/48
45/48
45/48
46/48
46/48
46/48
46/48
46/48
46/48
46/48
46/48
46/48
46/48
46/48
48/48
48/48
48/48
48/48