|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] Настоящее изобретение относится к комбинации гемцитабин[фенилбензокси-L-аланинил)]фосфата (химическое наименование: 2'-деокси-2',2'-дифтор-D-цитидин-5'-O-[фенил(бензокси-L-аланинил)]фосфат) (NUC-1031) и противоракового средства на основе платины, выбранного из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина. Комбинации применяются для лечения рака, в частности, желчного пути и рака мочевого пузыря.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
Настоящее изобретение относится к комбинации гемцитабин[фенилбензокси-L-аланинил)]фосфата (химическое наименование: 2'-деокси-2',2'-дифтор-D-цитидин-5'-O-[фенил(бензокси-L-аланинил)]фосфат) (NUC-1031) и противоракового средства на основе платины, выбранного из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина. Комбинации применяются для лечения рака, в частности, желчного пути и рака мочевого пузыря.
Евразийское (21) 201891473 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2019.01.31
(22) Дата подачи заявки 2016.12.21
(51) Int. Cl.
A61K31/7068 (2006.01) A61P35/00 (2006.01)
A61K 33/00 (2006.01)
(54) КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ
(31) PCT/GB2015/054158; 1609770.1
(32) 2015.12.23; 2016.06.03
(33) GB
(86) PCT/GB2016/054018
(87) WO 2017/109486 2017.06.29
(71) Заявитель:
НУКАНА ПиЭлСи (GB)
(72) Изобретатель: Гриффит Хью (GB)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
(57) Настоящее изобретение относится к комбинации гемцитабин[фенилбензокси-Ь-аланинил)]фосфата (химическое наименование: 2'-деокси-2',2'-дифтор-В-цитидин-5'-0-[фенил(бензокси-Ь-аланинил)]фосфат) (NUC-1031) и противоракового средства на основе платины, выбранного из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина. Комбинации применяются для лечения рака, в частности, желчного пути и рака мочевого пузыря.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
2420-550957ЕА/071
КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ
[0001] Настоящее изобретение относится к комбинации гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата (химическое название : 2'-дезокси-2', 2'-дифтор-0-цитидин-5'-0- [фенил (бензокси-L-аланинил)]фосфат) (NUC-1031) и противоракового средства на основе платины, выбранного из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина.
Уровень техники
NUC-1031
[0002] Гемцитабин (1; продаваемый на рынке как Гемзар(r)) представляет собой эффективный аналог нуклеозида, который в настоящее время разрешен к применению в лечении рака молочной железы, немелкоклеточного рака легкого, рака яичника и рака поджелудочной железы, и широко применяется для лечения ряда других видов рака, включающих рак мочевого пузыря, рак желчного пузыря, колоректальный рак и лимфому.
[0003] Клиническое применение гемцитабина ограничено наличием ряда механизмов врожденной и приобретенной устойчивости. На клеточном уровне устойчивость зависит от трех параметров: i) понижающей регуляции дезоксицитидинкиназы, необходимой для превращения в активный фосфорилированный фрагмент; (ii) пониженной экспрессии транспортеров нуклеозида, в частности, hENTl, необходимого для потребления раковыми клетками; и (iii) повышающей регуляции каталитических ферментов, особенно цитидиндезаминазы, которая деградирует гемцитабин.
[0004] Международная публикация W02005/012327 описывает
серию нуклеотидных производных гемцитабина и родственных молекул
нуклеозидов лекарственного средства. Среди них
гемцитабин[фенилбензокси-Ъ-аланинил)]фосфат (NUC-1031; 2)
идентифицирован как наиболее эффективное соединение. Оказалось, что эти соединения не подвергаются действию многих механизмов врожденной и приобретенной резистентности, которые ограничивают применимость гемцитабина {"Application of ProTide Technology to Gemcitabine: A Successful Approach to Overcome the Key Cancer Resistance Mechanisms Leads to a New Agent (NUC-1031) in Clinical Development"; Slusarczyk et all; J. Med. Chem. ; 2014, 57, 1531-1542) .
ОН F
[0005] NUC-1031 2 обычно получают в форме смеси двух диастереоизомеров, эпимерных при фосфатном центре (S-эпимер 3 и R-эпимер 4), которые могут быть разделены и введение осуществляют в виде одного эпимера.
HN N N
Ph.
OH F 4
[0006] ProGeml было первым исследованием на людях(FTIH),
фаза I, открытым, двухэтапным исследованием для оценки
безопасности, переносимости, клинической эффективности,
фармакокинетики (РК) и фармакодинамики (PD) NUC-1031 в двух параллельных схемах введения у субъектов с запущенными солидными злокачественными опухолями (Номер EudraCT: 2011-005232-26). У субъектов были следующие типы опухолей при входе в исследование: колоректальный рак (7 субъектов), неизвестный первичный (3), рак яичников (12), рак молочной железы (4), рак поджелудочной железы (9), холангиокарцинома (7), рак эндометрия (3), рак шейки матки (2), рак легких (7), мезотелиома (3), рак пищевода (3), рак фаллопиевой трубы (1), трофобласт (1), рак почки (1), рак желудка (1), анальный рак (1), рак тимуса (1) и остеосаркома (1) . Исследование подтвердило противоопухолевую активность NUC-1031 у пациентов с запущенными прогрессирующими типами раков, когда были исчерпаны все стандартные терапевтические варианты, многие из которых были устойчивы или резистентными к предшествующей нуклеозидной аналоговой терапии, включая использование гемцитабина. Особо следует отметить, что фармакокинетические данные показали, что NUC-1031, в качестве единственного агента, генерирует приблизительно более чем 10-кратный пик внутриклеточной концентрации (Стах) активного трифосфатного фрагмента (dFdCTP), чем единственный агент гемцитабин в эквимолярной дозе. Более того, внутриклеточная экспозиция во времени или область под кривой (AUC) по dFdCTP была в 27 раз больше для NUC-1031, по сравнению с ранее известными данными для гемцитабина из ряда опубликованных исследований. Наконец, анализ показал, что NUC-1031 высвобождает
менее половины количества потенциально токсичного метаболита 2',2'-дифтор-2'-дезоксиуридина (dFdU), по сравнению с обычным количеством, продуцируемым гемцитабином. Рак желчных путей
Рак желчных путей (ВТС) связан с высокой смертностью (приблизительно 23 на миллион населения с частотой 0,7% злокачественных опухолей у взрослых, то есть примерно 12 0 0 новых случаев, зарегистрированных в Англии и Уэльсе в год. Рак желчных путей подразделяется в отношении места происхождения:
- Рак желчного пузыря
- Дистальный желчный проток
- Ампулярные опухоли
- Внутрипеченочная холангиокарцинома
Внутрипротоковая холангиокарцинома (холангиокарцинома Клатскина)
[0007] Эти раковые заболевания более распространены у пациентов в возрасте от 50 до 70 лет, с более высокой заболеваемостью у мужчин, в случае холангиокарциномы и ампуллярной карциномы, а у женщин - при раке желчного пузыря. Хотя более 90% ВТС являются аденокарциномами, можно найти другие гистологические подтипы, такие как плоскоклеточные опухоли, нейроэндокринные опухоли, лимфомы или саркомы. Основными этиологическими факторами ВТС являются желчные камни, врожденные аномалии желчных протоков, первичный склерозирующий холангит, хронические заболевания печени и наследственные синдромы полипоза.
[0008] Хирургия дает единственный шанс на выздоровление;
однако, из-за агрессивного характера ВТС, большая часть
пациентов (> 65%) диагностируются на более поздних стадиях,
когда операция невозможна, и когда единственной доступной
терапией является паллиативная химиотерапия. Прогноз пациентов с
диагнозом распространенного (метастатического или
неоперабельного локально-распространенного заболевания) рака желчных путей является плохим. Пятилетняя общая выживаемость для III и IV стадий рака составляет 10% и 0% соответственно. Тем не менее, первая линия дублетной химиотерапии показала улучшение
общей выживаемости и качества жизни по сравнению с терапией одним агентом.
[0009] Наиболее активными химиотерапевтическими составами для лечения ВТС являются гемцитабин, фторпиримидины и платиновые агенты. В исследовании UK NCRN ABC-02 было установлено, что цисплатин и гемцитабин являются эталонным режимом лечения первой линии у пациентов с ВТС. Результаты этого рандомизированного исследования III фазы, включающего 410 пациентов, для сравнения химиотерапии цисплатином/гемцитабином с дублетной терапией с монотерапией гемцитабином, продемонстрировали преимущество в общей выживаемости (медиана 11,7 месяцев, против 8,1 месяцев, р <0,001) и выживаемость без прогрессиирования (медиана 8 месяцев, против 5 месяцев, р <0,001) . Очень похожие результаты были получены в японском рандомизированном исследовании фазы II с использованием тех же схем лечения (исследование ВТ-22), где медиана выживаемости 11,2 месяца была зарегистрирована при лечении с цисплатином/гемцитабином. Надежность исследования АВС-02 с учетом его размеров и наблюдаемого показателей выживания позволила установить комбинацию цисплатина и гемцитабина в качестве стандарта, и с тех пор она широко применяется в Великобритании и на международном уровне (например, см. Руководство NCCN в США).
[0010] Цель настоящего изобретения заключается в создании комбинированной терапии для лечения рака. Цель некоторых конкретный вариантов осуществления настоящего изобретения заключается в создании терапии, которая более эффективна, чем лечение, известное из уровня техники.
[ООН] Некоторые конкретные варианты осуществления настоящего изобретения реализуют некоторые или все вышеуказанные цели.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0012] В соответствии с настоящим изобретением предлагается
гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат или его
фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения при лечении рака в комбинации с противораковым средством на основе платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и
триплатина.
[0013] Изобретение также обеспечивает гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат или фармацевтически приемлемую соль или его сольват в комбинации с противораковым средством на основе платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина. Комбинация обычно используется при лечении рака.
[0014] Изобретение также обеспечивает противораковое средство на основе платины, выбранное из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина, для применения при лечении рака в комбинации с гемцитабин-[фенил-бензокси-L-аланинил)]-фосфатом или фармацевтически приемлемой солью или его сольватом.
[0015] Изобретение также обеспечивает способ лечения рака, где способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата или фармацевтически приемлемой соли или его сольвата, в комбинации с противораковым средством на основе платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина.
[0016] Изобретение также обеспечивает гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат или фармацевтически приемлемую соль или его сольват, в комбинации с противораковым средством на основе платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина, для применения в производстве лекарственного средства для лечения рака.
[0017] Изобретение также обеспечивает гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат или фармацевтически приемлемую соль или его сольват, для применения в производстве лекарственного средства для лечения рака в комбинации с противораковым средством на основе платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина.
[0018] Изобретение также обеспечивает противораковое средство на основе платины, выбранное из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина, для применения в производстве лекарственного средства для лечения рака в
комбинации с гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфатом или фармацевтически приемлемой соли или его сольватом.
[0019] Изобретение также обеспечивает фармацевтический состав, содержащий гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат или фармацевтически приемлемую соль или его сольват, вместе с противораковым средством на основе платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина, и по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым эксципиентом.
[0020] Состав может содержать дозированную форму гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат и дозированную форму противоракового средства на основе платины. Дозированные формы могут быть одинаковыми, но обычно они бывают различными.
[0021] Изобретение также обеспечивает два отдельных состава, которые будут использоваться вместе, при этом составы могут представлять собой:
первый состав, содержащий гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат или фармацевтически приемлемую соль или его сольват, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент; и
второй состав, содержащий противораковое средство на основе платины, выбранное из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
[0022] Составы могут быть представлены в форме набора. Составы (то есть набор, содержащий указанные составы) обычно предназначены для лечения рака.
[0023] Лечение по изобретению основано на том факте, что комбинация этих двух средств (то есть гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил ) ]-фосфата и противоракового средства на основе платины), показывает большую эффективность при введении в комбинации, по сравнению с тем, когда каждый из них вводится по-отдельности. Термин 'в комбинации' или 'вместе' в контексте настоящего изобретения относится к тому, что эти два средства вводят одному пациенту во время лечения. Введение может быть осуществлено по-отдельности, в том смысле, что выполняется в отдельных дозированных формах, или оно может быть в виде
введения одной дозированной формы. Введение может осуществляться одновременно или последовательно или сразу же один за другим или с некоторым временным интервалом между введениями этих двух средств. Термин 'только один' в контексте настоящего описания означает введение только одного активного агента и без введения другого средства во время лечения, даже спустя некоторый временной интервал.
[0024] Комбинированная терапия по изобретению включает совместное введение или последовательное введение двух активных агентов способом, который улучшает общий терапевтический результат по сравнению с введением только одного из активных агентов в течение всего периода лечения. Фармацевтический состав(ы), используемый для этой цели, может быть индивидуальным, то есть в форме отдельных лекарственных формах, или представлен в одной лекарственной форме. Каждый или любой состав может быть представлен в жидкой форме, либо уже разбавленной, либо готовой для разбавления, либо может находиться в твердой форме. Твердые формы могут быть представлены в форме, подходящей для растворения в среде соответствующего растворителя. Твердые формы также могут быть представлены в виде концентрированной стандартной лекарственной формы в виде таблеток, капсул для рассасывания и т.п.
[0025] В частности, авторы настоящего изобретения установили, что цисплатин сенсибилизирует некоторые конкретные линии раковых клеток, например, клеточную линию рака мочевого пузыря НТ137 6, вместе с NUC-1031 показывая устойчивый синергических эффект. Дополнительно, авторы изобретения установили, что комбинация NUC-1031 и цисплатина в условиях in vivo приводит к увеличению внутриклеточного ti/2 dFdCTP, что демонстрирует, что комбинация может быть эффективна для лечения злокачественных новообразований желчных путей.
[0026] Синергия, наблюдаемая для гемцитабина и соединений платины, объясняется увеличением в 1,5 раза уровня dFdCTP (гемцитабинтрифосфата) активного метаболита как гемцитабина, так и NUC-1031 (van Moorsel et al., British Journal of Cancer, 1999, 80(7), 981-990), который был описан как результат улучшения
активности дезоксицитидинкиназы (dCK). Для комбинации
гемцитабина и средства на основе платины были предложены два
механизма увеличения dCK-опосредованных уровней dFdCTP. Первый
клеточный механизм включает ингибирование
рибонуклеотидредуктазы, фермента, ответственного за синтез
дезоксицитидинтрифосфата (dCTP), который, как известно,
ингибирует dCK (Bajetta et al. , Annals of Oncology, 2003, 14,
242-247). Согласно второму молекулярному механизму,
индуцированное платиной ДНК-повреждение активирует процессы восстановления нуклеотидного удаления, которые требуют дезоксирибонуклеотидов (dNTP). В свою очередь, несколько ферментов, участвующих в синтезе dNTP, регулируются, включая dCK (van Moorsel et al. , 1999) . NUC-1031 синтезируется как нуклеотидный аналог в монофосфатной форме, который обходит dCK-зависимое образование dFdCTP, и, следовательно, синергия, наблюдаемая при объединении NUC-1031 и цисплатина, по-видимому, происходит из другого и еще неизвестного пути.
[0027] В некоторых конкретных предпочтительных вариантах осуществления противораковое средство на основе платины представляет собой цисплатин.
[0028] Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат может представлять собой смесь фосфатных диастереоизомеров, или она может представлять собой (Б)-эпимер или (R)-эпимер, по существу в форме диастереомерно чистой формы, 'по существу диастереомерно чистый' определяются для целей настоящего изобретения как диастереомерная чистота более чем примерно 90%. Если присутствует в виде по существу в диастереоизомерно чистой форме гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат может иметь диастереоизомерную чистоту более 95%, 98%, 99% или даже 99,5%.
[0029] Рак может представлять собой солидный рак. Рак может представлять собой рак, выбранный из: рака поджелудочной железы, рака молочной железы, рака яичников, рака мочевого пузыря, колоректального рака, рака легкого, рака желчных путей (например, рака, выбранного из рака желчного пузыря, рака дистального желчного протока, ампулярного рака, внутрипротоковой
холангиокарциномы и внутрипеченочной холангиокарциномы), рака простаты, рака почки, лимфомы, лейкемии, рака шейки матки, тимусного рака, рака неизвестного первичного происхождения, эзофагеального рака, мезотелиомы, надпочечного рака, рака матки, рака фаллопиевых труб, эндометриального рака, относящегося к раку яичка, рака головы и шеи, рака центральной нервной системы и опухоли половых клеток.
[0030] В некоторых конкретных предпочтительных вариантах осуществления, рак выбран из рака мочевого пузыря, рака яичников, немелкоклеточного рака легкого и рака желчных путей
(например, рака, выбранного из рака желчного пузыря, рака дистального желчного протока, ампулярного рака, внутрипротоковой холангиокарциномы и внутрипеченочной холангиокарциномы). В некоторых конкретных предпочтительных вариантах осуществления, рак выбран из рака мочевого пузыря, рака яичников и рака желчных путей (например, рака, выбранного из рака желчного пузыря, рака дистального желчного протока, ампулярного рака, внутрипротоковой холангиокарциномы и внутрипеченочной холангиокарциномы). В некоторых конкретных предпочтительных вариантах осуществления, рак представляет собой рак желчных путей. В других предпочтительных вариантах осуществления, рак представляет собой рак мочевого пузыря. Комбинации, в которых противораковое средство на основе платины представляет собой цисплатин, в частности, предпочтительны для лечения этих конкретных злокачественных новообразований. В некоторых конкретных предпочтительных вариантах осуществления рак выбран из рака яичников, немелкоклеточного рака легкого и рака желчных путей
(например, рака, выбранного из рака желчного пузыря, рака дистального желчного протока, ампулярного рака, внутрипротоковой холангиокарциномы и внутрипеченочной холангиокарциномы), и противораковое средство на основе платины является цисплатином. В некоторых конкретных предпочтительных вариантах осуществления, рак выбран из рака яичников и желчных путей (например, рака, выбранного из рака желчного пузыря, рака дистального желчного протока, ампулярного рака, внутрипротоковой холангиокарциномы и внутрипеченочной холангиокарциномы), и противораковое средство
на основе платины является цисплатином. Таким образом, предпочтительно, чтобы рак представлял собой рак желчных путей, и противораковое средство на основе платины представляло цисплатин. Аналогично, может предпочтительно, чтобы рак представлял собой рак мочевого пузыря, и противораковое средство на основе платины представляло собой цисплатин.
[0031] Рак может представлять собой рак, который предварительно не лечили химиотерапией. В качестве альтернативы, рак (например, рак желчных путей или рак мочевого пузыря) может быть рецидивирующим. Таким образом, рак может повторяться или прогрессировать после одного или нескольких предшествующих курсов химиотерапии (который может включать или не включать лечение агентом, выбранным из цисплатина, гемцитабина или гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата. Рак (например, рак желчных путей или рак мочевого пузыря) может представлять собой рефрактерный, резистентный или частично резистентный к противораковому средству на основе платины (например, цисплатин) рак. Альтернативно, рак (например, рак желчных путей или рак мочевого пузыря) может быть чувствительным к противораковому средству на основе платины (например, цисплатин). Рак (например, рак желчных путей или рак мочевого пузыря) может быть метастатическим.
[0032] Сольват обычно представляет собой гидрат. Таким образом, гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат может быть представлен в форме соли или гидрата или сольвата (например, гидрата) соли. Также возможно, что гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил ) ]-фосфат может быть представлен не в форме соли и не в форме сольвата или гидрата. Предпочтительно, гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат представлен в форме свободного основания.
[0033] Возможно, введение комбинации обеспечивает ti/2 внутриклеточного dFdCTP более 10 часов. Возможно, что введение комбинации обеспечивает ti/2 внутриклеточного dFdCTP более 15 часов. Возможно, что введение комбинации обеспечивает ti/2 внутриклеточного dFdCTP более 18 часов. Возможно, что введение комбинации обеспечивает ti/2 внутриклеточного dFdCTP более 2 0
часов.
[0034] Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат и противораковое средство на основе платины можно вводить одновременно или последовательно. В случае, если их вводят одновременно, их можно вводить в одной лекарственной форме или их можно вводить в отдельных лекарственных формах. Если их вводят последовательно, их можно вводить в один день, или их можно вводить в разные дни во время лечения. Возможно, что в определенные дни во время лечения, гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат и противораковое средство на основе платины вводят одновременно или в один день, а в некоторые конкретные другие дни в соответствии с программой лечения вводится только одно из средств.
Составы NUC-1031
[0035] Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат можно вводить парентерально, например, внутривенно, подкожно или внутримышечно. Предпочтительно, гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат вводят внутривенно.
[0036] Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат можно вводить парентерально в форме водного состава, который не обязательно также содержит полярный органический растворитель, например, ДМА. В случае парентерального (например, внутривенного) введения, состав предпочтительно также содержит полярный апротонный органический растворитель, например, ДМА.
[0037] Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат может содержаться в составе. Состав может представлять собой форму для разбавления определенным заранее количеством перед введением, то есть до 48 часов (например, до 24, 12 или 2 часов) до введения.
[0038] Состав может также содержать одно или более фармацевтически приемлемых солюбилизирующих средств, например, фармацевтически приемлемых неионных солюбилизирующих средств. Солюбилизирующие средства могут быть названы поверхностно-активными веществами. Иллюстративные солюбилизирующие средства включают полиэтоксилированные жирные кислоты и сложные эфиры жирных кислот и их смеси. Подходящие солюбилизирующие средства включают полиэтоксилированное касторовое масло (например, такое,
которое продается под торговым названием Коллифор(r) ELP) ; полиэтоксилированную стеариновую кислоту (например, такую, которая продается под торговыми названиями Solutol(r) или Коллифор(r) HS15); или полиэтоксилированный (например, полиоксиэтилен (20)) сорбитанмоноолеат (например, такой, который продается под торговым названием Твин(r) 80) .
[0039] В некоторых предпочтительных вариантах осуществления изобретения, состав включает более чем одно фармацевтически приемлемое солюбилизирующее средство.
[0040] Состав также может включать водный носитель. Состав согласно изобретению может быть готов для введения, в таком случае он обычно включает водный носитель.
[0041] В случае, когда гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-
аланинил) ]-фосфат предпочтительно представлен в форме для
парентерального введения, например, для внутривенного,
подкожного или внутримышечного введения, в некоторых конкретных
вариантах осуществления изобретения, его можно вводить
перорально. Предпочтительно, состав предназначен для
внутривенного введения. Введение может быть осуществлено посредством центрального венозного устройства введения (CVAD) или он может быть введен через периферическую вену.
[0042] Суммарная доза гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат в составе для введения обычно составляет от 2 50 мг до 3 г, например, от 1 г до 2 г, например, приблизительно 1,5 г.
Составы исходного раствора
[0043] Возможно, что полярный апротонный растворитель (например, ДМА) составляет 30% или более по объему состава. Таким образом, может быть, что полярный апротонный растворитель (например, ДМА) составляет 50% или более, например, 60% или более по объему состава. Полярный апротонный растворитель (например, ДМА) может составлять 95% или менее по объему состава, например, 90% или менее. Состав может также содержать водный носитель (например, солевой раствор). Водный носитель может присутствовать в количестве 50% или менее по объему
состава, например, 30% или менее по объему состава. Обычно водный носитель (например, солевой раствор) будет составлять 5% или более, например, 10% или более, по объему состава.
[0044] Возможно, что концентрация гемцитабин[фенилбензокси-L-аланинил)]фосфата в растворителе(растворителях) в составе составляет 500 мг или менее на мл. Возможно, что концентрация составляет 100 мг или более на мл. Предпочтительно, концентрация составляет от 200 мг до 300 мг, например, от 225 мг до 275 мг, например, приблизительно 250 мг на мл..
[0045] Некоторые предпочтительные составы содержат:
от 30% до 95% по объему ДМА;
от 5% до 50% по объему водного носителя; и
от 100 мг до 4 00 мг (например, от 100 мг до 300 мг) на мл гемцитабин[фенилбензокси-Ъ-аланинил)]фосфата.
[0046] Более предпочтительные составы содержат: от 7 0% до 90% по объему ДМА;
от 10% до 30% по объему водного носителя (например, солевой раствор); и
от 2 00 мг до 300 мг на мл
гемцитабин[фенилбензокси-Ъ-аланинил)]фосфата.
[0047] Составы, описанные в предыдущих четырех абзацах, в которых полярный апротонный растворитель (например, ДМА) , присутствует как основной компонент, могут быть, например, использованы для введения (например, инфузией или инъекцией) состава без его предварительного разбавления перед указанным введением. Они могут, например, быть введены посредством CVAD. В случае, когда введение осуществляется посредством CVAD, состав обычно не разбавляют.
[0048] Альтернативно, эти составы могут быть исходными растворами, которые должны быть разбавлены до применения, чтобы получить состав пригодный для введения, например, через периферическую вену.
Составы раствора с поверхностно-активным веществом
[004 9] Возможно, что полярный апротонный растворитель (например, ДМА) составляет 10% или более, например, 2 0% или более по объему состава. Таким образом, может быть, что полярный
апротонный растворитель (например, ДМА) составляет 8 0% или менее, например, 7 0% или менее по объему состава. Полярный апротонный растворитель (например, ДМА), может составлять 55% или менее по объему состава. Состав может также содержать один или несколько солюбилизирующих средств (например, одну или более полиэтоксилированных жирных кислот). Одно или более солюбилизирующих средств могут составлять 7 0% или менее по объему состава, например, 60% или менее по объему состава. Обычно одно или более солюбилизирующих средств составляют 2 0% или больше, например, 35%, по объему состава. Состав может также содержать водный носитель, например, в количестве от 1% до 15% по объему или от 5% до 12% по объему.
[0050] Возможно, что концентрация гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфата в растворителе(ях) состава составляет 200 мг или менее на мл, например, 150 мг или менее или 130 мг или менее. Возможно, что концентрация составляет 4 0 мг или больше на мл, например, 60 мг или больше. Предпочтительно, концентрация составляет от 70 мг до 120 мг на мл, например, приблизительно 100 мг на мл.
[0051] Некоторые предпочтительные составы содержат:
от 2 0% до 7 0% по объему ДМА;
от 2 0% до 7 0% по объему солюбилизирующего средства или солюбилизирующих средств; и
от 50 мг до 150 мг гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата на мл. Состав может также содержать водный носитель, например, в количестве от 1% до 15% по объему.
[0052] Некоторые конкретные предпочтительные составы содержат:
от 3 0% до 60% по объему ДМА;
от 10% до 35% по объему первого солюбилизирующего средства; от 10% до 35% по объему второго солюбилизирующего средства; от 2% до 15% по объему водного носителя; и
от 50 мг до 150 мг на мл гемцитабин- [фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат на мл. Первым солюбилизирующим средством может быть полиэтоксилированное касторовое масло (например, такое,
которое продается под торговым названием Коллифор(r) ELP) . Второе
солюбилизирующее средство может представлять собой
полиэтоксилированный сорбитанмоноолеат (например, такой, который продается под торговым названием Твин(r) 80) .
[0053] Состав может содержать:
от 35% до 50% по объему ДМА;
от 15% до 30% по объему первого солюбилизирующего средства; от 15% до 30% по объему второго солюбилизирующего средства; от 5% до 12% по объему водного носитела; и
от 50 мг до 150 мг гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата на мл.
[0054] Составы растворов с поверхностно-активными веществами, описанные в предыдущих пяти абзацах, в которых полярный апротонный растворитель (например, ДМА) , присутствует в качестве основного компонента, обычно разбавляют водным носителем перед введением. Их обычно готовят из исходного раствора, указанного выше, и дополнительно разбавляют перед введением. После разбавления они могут быть введены через периферическую вену.
[0055] Эти составы могут быть получены из состава исходного
раствора, который не содержит каких-либо солюбилизирующих
средств, разбавлением раствором, который содержит
солюбилизирующие средства.
Составы инфузионных растворов
[0056] Возможно, полярный апротонный растворитель (например, ДМА), составляет 0,1% или больше, например, 0,5% или больше или 1% или более по объему состава. Таким образом, возможно, что ДМА составляет 12% или менее, например, 10% или менее или 8% или менее по объему состава. Состав может также содержать водный носитель (например, солевой раствор или WFI) . Водный носитель может составлять 99,5% или менее по объему состава, например, 99% или 98% или менее по объему состава. Обычно водный носитель составляет 80% или больше, например, 95% или больше, по объему состава. Состав может также содержать один или несколько солюбилизирующих средств (например, одну или более
полиэтоксилированных жирных кислот). Одно или несколько солюбилизирующих средств могут составлять 12% или менее по объему состава, например, 10% или менее или 8% или менее по объему состава. Обычно один или несколько солюбилизирующих средств составляют 0,1% или больше, например, 0,5% или больше или 1% или больше по объему состава.
[0057] Возможно, что концентрация гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфата в растворителе(ях) состава составляет 15,0 мг или менее на мл или 12,0 мг или менее на мл, например, 10,0 мг или менее или 8 мг или менее на мл. Возможно, что концентрация составляет 1,0 мг или больше на мл, например, 2,0 мг или больше. Предпочтительно, концентрация составляет от 2,5 мг до 12 мг на мл, например, от 3 мг до 11 мг на мл.
[0058] Некоторые предпочтительные составы содержат:
от 0,1% до 10% по объему ДМА;
от 0,1% до 10% по объему солюбилизирующего средства или солюбилизирующих средств;
от 85% до 99% по объему водного носителя; и
от 2,0 мг до 12,0 мг гемцитабин-фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата на мл.
[0059] Некоторые конкретные предпочтительные составы содержат:
от 1% до 8% по объему ДМА;
от 0,5% до 4% по объему первый солюбилизирующего средства; от 0,5% до 4% по объему второй солюбилизирующего средства; от 85% до 99% по объему водного носителя; и
от 2,0 мг до 12,0 мг гемцитабин- [фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат на мл. Первое солюбилизирующее средство может представлять собой полиэтоксилированное касторовое масло
(например, такое, которое продается под торговым названием Коллифор(r) ЕЪР) . Второе солюбилизирующее средство может представлять собой полиэтоксилированный сорбитанмоноолеат
(например, такой, который продается под торговым названием Твин(r) 80) . .
[0060] Составы инфузионного раствора, описанные в
предыдущих четырех абзацах, в которых полярный апротонный растворитель (например, ДМА), присутствует как минорной компонент, обычно получают, разбавляя концентрированный раствор гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата водным носителем за 4 8 часов до введения. Указанный концентрированный раствор может быть любым раствором гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ] -фосфата в полярном апротонном растворителе (см. раздел 'составы исходного раствора' выше), раствором гемцитабин-
[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата в смеси полярного
апротонного растворителя и солюбилизирующего средства (см. раздел 'составы раствора с поверхностно-активным веществом' выше). Эти составы, в которых полярный апротонный растворитель
(например, ДМА) присутствует в качестве минорного компонента, можно вводить через периферическую вену. Низкие концентрации полярного апротонного растворителя (например, ДМА) в указанном составе оказывают менее болезненного действие при периферическом введении.
Наборы
[0061] Изобретение обеспечивает набор для лечения рака, где набор содержит:
первый состав, содержащий гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат или его фармацевтически приемлемую соль или сольват, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент; и
второй состав, содержащий противораковое средство на основе платины и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
[0062] В некоторых конкретных вариантах осуществления, набор может содержать:
первый состав, содержащий:
от 30% до 95% по объему ДМА;
от 5% до 50% по объему водного носителя; и
от 100 мг до 4 00 мг (например, от 100 мг до 300 мг) гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата на мл;
второй состав, содержащий противораковое средство на основе
платины и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент; и
третий состав, содержащий:
от 30% до 95% по объему ДМА;
от 5% до 50% по объему водного носителя.
[0063] Третий состав обычно не содержит активное вещество. Таким образом, он не содержит ни гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ] -фосфат, ни противораковое средство на основе платины. Третий состав может быть представлен в двух отдельных емкостях или в одной емкости.
[0064] Набор, указанный в предыдущих двух абзацах, применяется, если гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат вводится внутривенно через CVAD. CVAD промывается третьим составом до введения первого состава. Это уменьшает риск осаждения гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата внутри или вначале устройства для внутривенного введения, то есть CVAD, позволяя исключить прямой контакт активного состава с водными средами (например, солевого промывного раствора). CVAD может также быть промыт третьим составом после введения первого состава. Это также дополнительно предотвращает осаждение.
[0065] В некоторых конкретных вариантах осуществления, набор может содержать:
первый состав, содержащий:
от 30% до 95% по объему ДМА;
от 5% до 50% по объему водного носителя; и
от 100 мг до 4 00 мг (например, от 100 мг до 300 мг) гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата на мл;
второй состав, содержащий противораковое средство на основе платины и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент; и
третий состав, содержащий:
от 10% до 50% по объему ДМА;
от 2 0% до 60% по объему первый солюбилизирующего средства; от 2 0% до 60% по объему второй солюбилизирующего средства. [0066] Обычно третий состав не содержит активное вещество. Таким образом, он не будет содержать ни гемцитабин-[фенил
бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата, ни противоракового средства на основе платины.
[0067] Набор, указанный в предыдущих двух абзацах, используется, когда гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат вводится внутривенно через периферическую вену. Первый состав разбавляется третьим составом за 48 часов, например, за 24 часа перед введением, с получением четвертого состава. Четвертый состав дополнительно разбавляют водным носителем перед введением до желаемой концентрации, с получением состава, который используется для введения в форме инфузиии или инъекцией пациенту. С целью получения составов для периферического введения, которые устойчивы в отношении осаждения гемцитабин-
[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата, обычно желательно
добавлять солюбилизирующие средства. Однако, гемцитабин-[фенил-
бензокси-Ъ-аланинил ) ]-фосфат может подвергаться разложению в
присутствии таких солюбилизирующих средств. Таким образом,
двухступенчатый метод разведения, в некоторых конкретных
вариантах осуществления по изобретению, является
предпочтительным средством для получения составов гемцитабин-
[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата для периферического
введения.
Иллюстративная методика введения гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата
[0068] Иллюстративная методика для введения гемцитабин-
[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата может быть следующей:
Раствор 250 мг/мл гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата (S-эпимер, R-эпимер или их смесь) готовили в смеси 80:20
(по объему) DMA и 0,9% солевого раствора. Этот состав исходного раствора обычно достаточно стабилен при длительных сроках хранении и транспортировке. Этот состав исходного раствора может вводиться пациентам внутривенно посредством CVAD (например, линии Хикмана, линии PICC, Portacath), например, со скоростью 2 0 мл/час. Устройство для внутривенного введения обычно промывают смесью DMA и 0,9% солевого раствора (см. Пример 4 ниже) 80:20
(по объему) как до, так и после введения композиции, содержащей гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат. Это помогает
снизить риск возможного осаждения гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфата в устройстве для внутривенного введения при контакте с промывным солевым раствором. Альтернативно, когда внутривенное введение в периферическую вену является предпочтительным способом введения, состав исходного раствора затем разбавляют до 100 мг/мл раствором разбавителя, который составляет 20%: 40%: 40% смесь DMA: Tween(r) 80: Kolliphor (r) ЕЪР (например, 6,7 мл 250 мг/мл гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфата в 80:20 DMA:0,9% солевой раствор разбавляют до 10 мл раствором DMA: Tween(r) 80: Kolliphor(r) разбавленный раствор ЕЪР) . Полученный (раствор с поверхностно-активным веществом) состав обычно стабилен в течение 5 дней. Состав инфузионного раствора затем получают разбавлением этого состава раствора с поверхностно-активным веществом до желаемой концентрации 0,9% солевым раствором.
[0069] Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат,
который вводят в АВС-08 исследовании, описанном в примерах, выполняли по приведенной методике введения, используя S-эпимер гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата, вводимый посредством CVAD.
Составы противоракового средства на основе платины
[0070] Противораковое средство на основе платины можно
вводить парентерально, например, внутривенно,
интраперитонеально, подкожно или внутримышечно. Предпочтительно, противораковое средство на основе платины вводится внутривенно.
[0071] Противораковое средство на основе платины обычно вводят в форме водного раствора, например, в виде стерильного 1 мг/мл водного раствора. Водный раствор обычно представляет собой солевой раствор (например, 0,9% солевой раствор). Водный раствор может также содержать маннит (например, 10 мг/мл).
[0072] В случае, если противораковое средство на основе платины (например, цисплатин) вводится в дозе менее 50 мг/мл, его обычно вводят в форме инфузии в объеме 100-250 мл в течение 15-60 минут. В случае, если противораковое средство на основе платины (например, цисплатин) средство вводится в дозе,
превышающей или равной 50 мг/мл, его обычно вводят в форме инфузии в объеме 250-500 мл в течение с 15-60 минут.
[0073] Дополнительная информация о введении цисплатина доступна, например, на одобренной США FDA этикетке для Platinol(r).
Режимы дозировки
[0074] Возможно, что NUC-1031 вводится дважды в 21-дневном цикле. Возможно, что противораковое средство на основе платины (например, цисплатин) вводится дважды в 21-дневном цикле. В предпочтительном режиме дозировки, NUC-1031 вводится на день 1 и день 8 из 21-дневного цикла. Возможно, что противораковое средство на основе платины (например, цисплатин) вводится на день 1 и день 8 из 21-дневного цикла. Возможно, что NUC-1031 и противораковое средство на основе платины (например, цисплатин) вводят одновременно на день 1 и день 8 из 21-дневного цикла.
[0075] Доза NUC-1031, которую вводят при каждом введении, нахожится предпочтительно в интервале от 250 мг/м2 до 1250 мг/м2. Доза NUC-1031, которую вводят при каждом введении, может находится в интервале от 300 мг/м2 до 1000 мг/м2. Доза NUC-1031, которую вводят при каждом введении, может находится в интервале от 4 00 мг/м2 до 90 0 мг/м2, например, от 60 0 мг/м2 до 8 00 мг/м2, или от 300 до 750 мг/м2. Доза NUC-1031, которую вводят при каждом введении, может составлять приблизительно 750 мг/м2.
[0076] Доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин), вводимая при каждом введении может составлять от 10 мг/м2 до 200 мг/м2. Доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин), вводимая при каждом введении может составлять от 20 мг/м2 до 100 мг/м2. Доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин), вводимая при каждом введении может составлять от 2 0 мг/м2 до 60 мг/м2. Доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин), вводимая при каждом введении может составлять от 30 мг/м2 до 90 мг/м2.
[0077] Возможно, что доза NUC-1031 или доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин), или доза обоих
соединений, остается в основном одинаковой в каждом цикле лечения. Например, доза NUC-1031, составляющая приблизительно 750 мг/м2, при введении, и доза цисплатина, составляющая приблизительно 50 мг/м2, могут использоваться в нескольких циклах лечения.
[0078] Альтернативно, возможно, что доза NUC-1031 или доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин), или доза обоих соединений, уменьшается от первого цикла лечения ко второму (или последующему) циклу лечения. Например, доза NUC-1031, которую вводят при каждом введении, может уменьшаться от приблизительно 750 мг/м2, в первом цикле лечения, до приблизительно 625 мг/м2 во втором (или последующем) цикле лечения. Доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин) может уменьшаться от приблизительно 90 мг/м2 в первом цикле лечения, до приблизительно 60 мг/м2, или до приблизительно 50 мг/м2 во втором (или последующем) цикле лечения.
[0079] В соответствующих режимах лечения можно использовать уменьшение (как изложено в предыдущем абзаце) как дозы NUC-1031, так и дозы противоракового средства на основе платины (например, цисплатина), от первого цикла лечения ко второму (или последующему) циклу лечения. Например, доза NUC-1031, которую вводят при каждом введении, может уменьшаться от приблизительно 750 мг/м2 в первом цикле лечения до приблизительно 625 мг/м2 во втором (или последующем) цикле лечения, и доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин) может уменьшаться от приблизительно 90 мг/м2 в первом цикле лечения до приблизительно 60 мг/м2 или до приблизительно 50 мг/м2 во втором
(или последующем) цикле лечения.
[0080] В случае, если доза NUC-1031 уменьшается от первого ко второму, или последующему циклу лечения (такой как от приблизительно 750 мг/м2 за введения до приблизительно 625 мг/м2 за введение), доза противоракового средства на основе платины
(например, цисплатин) может остаться такой же между первым и вторым или последующим циклами лечения (например, приблизительно 50 мг/м2 в каждом цикле).
[0081] В случае, если доза NUC-1031 остается постоянной от первого ко второму или последующему циклу лечения (такой как приблизительно 625 мг/м2 за введение), доза противоракового средства на основе платины (например, цисплатин) может уменьшаться между первым и вторым или последующим циклом лечения (например, от 90 мг/м2 в первом цикле лечения до приблизительно 60 мг/м2 или до приблизительно 50 мг/м2 во втором или последующем цикле лечения).
[0082] Ожидается, что приведенный выше режим дозировки обеспечивает баланс, в котором токсичность каждого из компонентов комбинации находится на приемлемом уровне, при этом сохраняя терапевтический положительный эффект, оказываемый комбинацией.
[0083] Возможно, что приведенный выше режим дозировки обеспечивает улучшенную выживание у пациентов. Возможно, он обеспечивает стабильное заболевание у более чем 50% пациентов. Возможно, он обеспечивает одно или несколько из вышеуказанных преимуществ с приемлемым уровнем побочных эффектов. Возможно, что д дозировка такова, что AUC dFdCTP выше для комбинации, чем для NUC-1031, который вводят как единственное средство. Возможно, что дозировка такова, что соотношение AUC к Cmax dFdCTP выше для комбинации, чем для NUC-1031, который вводят как единственное средство.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР
[0084] Варианты осуществления по изобретению дополнительно описаны со ссылками на фигуры.
На фиг.1 показана хроматография для разделения соединений 3 и 4 с помощью ВЭЖХ с использованием колонны Chiralpak AD и системы градиентных растворителей n-гептан/IPA.
На фиг.2 показан синергетический эффект, достигаемый с использованием метода сдвига кривой для цисплатина/ЖГС-1031 на клеточной линии рака мочевого пузыря НТ137 6.
Раскрытие изобретения
[0085] "Одновременное" означает "по существу
одновременное", например, менее чем за 30 минут. "Последовательное" означает введение более, чем за 30 минут друг
от друга.
[0086] По всему описанию, термин S-эпимер или S-диастереоизомер относится к гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил )]-( S ) -фосфату . Аналогично, по всему описанию, термин R-эпимер или R-диастереоизомер относится к гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил)]-(R)-фосфату.
[0087] Соединения в составах согласно изобретению могут
быть получены, сохранены и/или введены в виде фармацевтически
приемлемой соли. Подходящие фармацевтически приемлемые соли
включают, но не ограничиваются ими, соли фармацевтически
приемлемых неорганических кислот, таких как хлористоводородная,
серная, фосфорная, азотная, угольная, борная, аминосульфоновая и
бромистоводородная кислоты, или соли фармацевтически приемлемых
органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, масляная,
винная, малеиновая, гидроксималеиновая, фумаровая, яблочная,
лимонная, молочная, слизевая, глюконовая, бензойная, янтарная,
щавелевая, фенилуксусная, метансульфоновая, толуолсульфоновая,
бензолсульфоновая, салициловая, сульфаниловая, аспарагиновая,
глутаминовая, этилендиаминтетрауксусная, стеариновая,
пальмитиновая, олеиновая, лауриновая, пантотеновая, таниновая, аскорбиновая и валериановая кислоты. Подходящие соли оснований образуются из оснований, которые образуют нетоксичные соли. Примеры включают соли алюминия, аргинина, бензатина, кальция, холина, диэтиламина, диоламина, глицина, лизина, магния, меглумина, оламина, калия, натрия, трометамина и цинка. Полусоли кислот и оснований могут также быть образованы, например, полусульфатные, полуоксалатные и полукальциевые соли. В некоторых вариантах осуществления изобретения, особенно таких, которые используют S- эпимер, соединение представлено в виде HCl-соли или полуоксалатной соли.
[0088] Соединения по изобретению могут существовать в монокристаллической форме или в смеси кристаллических форм, или они могут быть аморфными. Таким образом, соединения по изобретению, предназначенные для фармацевтического применения, можно вводить как кристаллическими или аморфными. Они могут быть получены, например, в виде твердых частиц, порошков или пленок,
способами, такими как осаждение, кристаллизация, сушка вымораживанием или распылительная сушка, или испарительная сушка. Для этой цели можно использовать микроволновую или радиочастотную сушку.
[0089] Для вышеупомянутых соединений по изобретению вводимая доза будет, разумеется, варьироваться в зависимости от используемого соединения, способа введения, желаемого лечения и указанного расстройства. Например, если соединение по изобретению вводится парентерально, то дозировка соединения по изобретению может находиться в диапазоне от 0,1 до 5 г/м2, например, от 0,5 до 2 г/м2. Размер дозы для терапевтических целей соединений по изобретению будет, естественно, изменяться в зависимости от характера и тяжести условий, возраста и пола животного или пациента и способа введения в соответствии с хорошо известными принципами медицины.
[0090] Ожидается, что уровни дозировки, частота дозы и продолжительность лечения соединений по изобретению будут различаться в зависимости от формы состава и клинического показания, возраста и сопутствующих заболеваний пациента.
[0091] Соединение по изобретению или его фармацевтически приемлемая соль могут быть использованы сами по себе, но обычно его можно вводить в форме фармацевтической композиции, в которой соединения по изобретению или их фармацевтически приемлемые соли ассоциированы с фармацевтически приемлемым адъювантом, разбавителем или носителем. Обычные методики выбора и получения подходящих фармацевтических композиций описаны, например "Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs", M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988.
[0092] В зависимости от способа введения соединений по изобретению, фармацевтическая композиция, которая используется для введения соединений по изобретению, предпочтительно включает от 0,05 до 99 масс.% (процент по массе) соединения по изобретению, более предпочтительно от 0,05 до 80 масс.% соединения по изобретению, еще более предпочтительно от 0,10 до 7 0 масс.% соединения по изобретению, и даже более предпочтительно от 0,10 до 50 масс.% соединения по изобретению,
все массовые концентрации указаны в процентах из расчета по общей массе композиции.
[0093] Для перорального введения соединения по изобретению
могут быть смешаны с адъювантом или носителем, например,
лактозой, сахарозой, сорбитом, маннитом; крахмалом, например,
картофельным крахмалом, кукурузным крахмалом или амилопектином;
производным целлюлозы; связующим веществом, например, желатином
или поливинилпирролидоном; и/или смазывающим веществом,
например, стеаратом магния, стеаратом кальция,
полиэтиленгликолем, воском, парафином и тому подобное, и затем могут быть прессованы в таблетки.. Если требуется получить покрытые оболочкой таблетки, сердцевины, приготовленные как описано выше, могут быть покрыты концентрированным раствором глюкозы, который может включать, например, аравийскую камедь, желатин, тальк и двуокись титана. Альтернативно, таблетка может быть покрыта подходящим полимером, растворенным в легко улетучиваемом органическом растворителе.
[0094] Для получения мягких желатиновых капсул, активное соединение может быть смешано, например, с растительным маслом или полиэтиленгликолем. Твердые желатиновые капсулы могут содержать гранулы соединения с использованием любого из описанных выше эксципиентов для таблеток. Кроме того, жидкие или полутвердые составы, содержащие активные соединения, могут быть заключены в твердые желатиновые капсулы.
[0095] Жидкие препараты для перорального применения могут быть в виде сиропов или суспензий, например, растворов, содержащих соединение согласно изобретению, равновесие в которых устанавливается добавлением сахара и смеси этанола, воды, глицерина и пропиленгликоля. Необязательно такие жидкие препараты могут содержать красители, ароматизаторы, подсластители (такие как сахарин), консерванты и/или карбоксиметилцеллюлозу в качестве загустителя или другие эксципиенты, известные специалистам в данной области техники.
[0096] Для парентерального (например, внутривенного) введения, соединения можно вводить в виде стерильного водного или масляного раствора. Соединения по изобретению являются очень
липофильными. Таким образом, водные составы, как правило, также содержат фармацевтически приемлемый полярный органический растворитель.
[0097] Размер дозы для терапевтических целей соединений по изобретению будет, естественно, изменяться в зависимости от характера и тяжести условий, возраста и пола животного или пациента и способа введения в соответствии с хорошо известными принципами медицины.
[0098] Ожидается, что уровни дозировки, частота дозы и продолжительность лечения соединениями по изобретению будут различаться в зависимости от состава и клинического показания, возраста и сопутствующих заболеваний пациента.
[0099] Настоящее изобретение также включает все фармацевтически приемлемые изотопно-меченые формы соединений 2, 3 или 4, где один или более атомов заменены атомами, имеющими одинаковый атомный номер, но атомная масса или массовое число которых отличаются от атомной массы или массового числа преобладающего изотопа, обычно встречаемого в природе.
[00100] Примеры изотопов, подходящих для включения в соединения согласно изобретению, включают изотопы водорода, такие как 2Н и 3Н, углерода, такие как 11С, 13С и 14С, хлора, такие как 36С1, фтора, такие как 18F, йода, такие как 1231 и 1251, азота, такие как 13N и 15N, кислорода, такие как 150, 170 и 180, фосфора, такие как 32Р, и серы, такие как 35S.
[00101] Некоторые конкретные изотопно-меченные соединения, например, такие, которые включают радиоактивный изотоп, являются пригодными в лекарственных средствах и/или в исследованиях распределения субстрата в тканях. Радиоактивный изотоп водорода тритий, т.е., 3Н, и углерода-14, т.е. 14С, являются наиболее пригодными изотопами для этой цели, исходя из легкости их включения и доступных средств определения.
[00102] Замена более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, т.е., 2Н, может привести к определенным терапевтическим преимуществам, возникающим в результате более высокой метаболической устойчивости, например, повышения времени полужизни in vivo или снижения требований к дозировке, и,
следовательно, может быть предпочтительной в некоторых обстоятельствах.
[00103] Замещение изотопами, излучающими позитрон, такими как 11С, 18F, 150 и 13N, может применяться в исследованиях топографии позитронной эмиссии (PET) для изучения активности рецептора субстрата.
[00104] Изотопно-меченые соединения обычно могут быть получены обычными способами, известными специалистам в данной области, или способами, аналогичными описанным с использованием соответствующего меченого изотопами реагента вместо ранее использованного немеченого реагента.
[00105] Способ лечения или соединения для применения в лечении рака может включать, в дополнение к гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил )]-фосфату и противоракового соединения на основе рака, обычные методы хирургии или лучевой терапии или химиотерапии. Такая химиотерапия может включать введение одного или нескольких других активных агентов.
[00106] Таким образом, фармацевтические составы согласно изобретению могут включать другое активное средство.
[00107] Одно или более других активных средств могут представлять собой одно или более из следующих категорий противоопухолевых средств:
(i) антипролиферативные/антинеопластические лекарственные
средства и их комбинации, такие как алкилирующие средства
(например, циклофосфамид, азотистый иприт, бендамустин,
мелфалан, хлорамбуцил, бусульфан, темозоламид и
нитрозомочевины); антиметаболиты (например, гемцитабин и
антифолаты, такие как фторпиримидины, подобные 5-фторурацилу и
тегафуру, ралтитрексид, метотрексат, пеметрексед, цитозина
арабинозид и гидроксимочевина); антимитотические агенты
(например, алкалоиды барвинка, подобные винкристину,
винбластину, виндезину и винорелбину, и таксоиды, подобные
таксолу и таксотеру, и ингибиторы полокиназы); протеасомные
ингибиторы, например, карфилзомиб и бортезомиб; терапия
интерфероном; и ингибиторы топоизомеразы (например,
эпиподофиллотоксины, подобные этопозиду и тенипозиду, амсакрин,
топотекан, митоксантрон и камптотецин);;
(ii) цитостатические средства, такие как антиэстрогены (например, тамоксифен, фулвестрант, торемифен, ралоксифен, дролоксифен и йодоксифен), антиандрогены (например, бикалутамид, флутамид, нилутамид и ципротерона ацетат), антагонисты LHRH или агонисты LHRH (например, гозерелин, лейпрорелин и бусерелин), прогестогены (например, мегестрола ацетат), ингибиторы ароматазы (например, такие как анастрозол, летрозол, воразол и экземестан) и ингибиторы 5а-редуктазы, такие как финастерид;
(iii) средства против инвазии, например, дазатиниб и босутиниб (SKI-606), и ингибиторы металлопротеиназ, ингибиторы функции рецепторов активатора плазминогена урокиназного типа или антитела к гепараназе;
(iv) ингибиторы функции фактора роста: например, такие ингибиторы включают антитела к фактору роста и антитела к рецептору фактора роста, например, анти-егЬВ2 антитело трастузумаб [герцептин(tm)] , анти-EGFR антитело панитумумаб, анти-erbBl антитело цетуксимаб, ингибиторы тирозинкиназы, например, ингибиторы семейства рецепторов эпидермального фактора роста
(например, ингибиторы семейства EGFR с тирозинкиназной активностью, такие как гефинитиб, эрлотиниб и б-акриламидо-N-(3-хлор-4-фторфенил)-7-(3- морфолинопропокси)хиназолин-4-амин (CI 1033), ингибиторы егЬВ2 тирозинкиназы, такие как лапатиниб); ингибиторы семейства факторов роста гепатоцитов; ингибиторы семейства факторов роста инсулина; модуляторы белков-регуляторов клеточного апоптоза (например, ингибиторы Вс1-2); ингибиторы семейства факторов роста тромбоцитов, такие как иматиниб и/или нилотиниб (AMN107); ингибиторы серин/треонин протеинкиназ
(например, ингибиторы сигнального пути по Ras/Raf-каскаду, такие как ингибиторы фарнезилтрансферазы, например, сорафениб, типифарниб и лонафарниб), ингибиторы системы клеточных сигналов через МЕК и/или АКТ киназы, ингибиторы с-kit, ингибиторы аЫ-киназы, ингибиторы Р13-киназы, ингибиторы Р]^3-киназы, ингибиторы CSF-1R киназы, рецептор IGF, ингибиторы киназ; ингибиторы киназы Аврора и ингибиторы циклин-зависимой киназы,
такие как ингибиторы CDK2 и/или CDK4;
(v) антиангиогенные средства, такие как средства, которые ингибируют действие фактора роста эндотелия сосудов, [например, антитело против фактора роста эндотелия сосудов бевацизумаб (авастин(tm)) ; талидомид; леналидомид; и, например, ингибитор рецептора VEGF с тирозинкиназной активностью, такой как вандетаниб, ваталаниб, сунитиниб, акситиниб и пазопаниб;
(vi) методы генной терапии, включающие, например, методы замены аномальных генов, таких как р53 или аномальный ген BRCA1 или BRCA2;
(vii) методы иммунотерапии, включающие, например, терапию
антителами, такими как алемтузумаб, ритуксимаб, ибритумомаб
тиуксетан (зевалин(r)) и офтатумумаб; интерфероны, такие как
интерферон а; интерлейкины, такие как IL-2 (альдеслейкин);
ингибиторы интерлейкина, например, ингибиторы IRAK4;
противораковые вакцины, включающие вакцины для профилактики и
лечения, такие как вакцины против HPV, например, гардасил,
церварикс, онкофаг и сипулейцел-Т (Provenge); и модуляторы толл-
подобного рецептора, например, агонисты TLR-7 или TLR-9; и
(viii) цитотоксические средства, например, флударабин
(флудара), кладрибин, пентостатин (Nipent(tm)) ;
(ix) стероиды, такие как кортикостероиды, включающие
глюкокортикоиды и минералокортикоиды, например, аклометазон,
аклометазона дипропионат, альдостерон, амцинонид, беклометазон,
беклометазона дипропионат, бетаметазон, бетаметазона
дипропионат, бетаметазона натрия фосфат, бетаметазона валерат,
будесонид, клобетазон, клобетазона бутират, клобетазона
пропионат, клопреднол, кортизон, кортизона ацетат, кортивазол,
дезоксикортон, десонид, дезоксиметазон, дексаметазон,
дексаметазона натрия фосфат, дексаметазона изоникотинат,
дифторкортолон, флуклоролон, флуметазон, флунизолид,
флуоцинолон, флуоцинолона ацетонид, флуоцинонид, флуокортина
бутил, флуорокортизон, флуорокортолон, флуорокортолона капроат,
флуорокортолона пивалат, флуорометолон, флупредниден,
флупреднидена ацетат, флурандренолон, флутиказон, флутиказона
пропионат, галцинонид, гидрокортизон, гидрокортизона ацетат, гидрокортизона бутират, гидрокортизона ацепонат, гидрокортизона бутепрат, гидрокортизона валерат, икометазон, икометазона энбутат, мепреднизон, метилпреднизолон, мометазон, параметазон, мометазона фуроата моногидрат, предникарбат, преднизолон, преднизон, тиксокортол, тиксокортола пивалат, триамцинолон, триамцинолона ацетонид, триамцинолоновый спирт и их соответствующие фармацевтически приемлемые производные. Можно использовать комбинацию стероидов, например, комбинацию двух или более стероидов, описанных в этом абзаце;
(х) направленная терапия, например, ингибиторами PI3Kd, например, иделалисибом и перифозином; или соединениями, которые ингибируют PD-1, PD-L1 и CAR Т.
[00108] Одним или несколькими другими активными средствами могут быть также антибиотики (например, антрациклины, такие как адриамицин, блеомицин, доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, митомицин-С, дактиномицин и митрамицин).
[00109] Везде в описании и формуле изобретения слова "включают" и "содержат" и их варианты означают "включая, но не ограничиваясь ими", и они не предназначены (и не) исключают другие фрагменты, добавки, компоненты, целые числа или стадии. Везде в описании и формуле изобретения единственное число охватывает и множественное число, если контекст не требует иного. В частности, где указан неопределенный артикль, должно быть понято, что может подразумеваться и множественная форма, если контекст не требует иначе.
[00110] Признаки, целые числа, характеристики, соединения, химические фрагменты или группы, приведенные в сочетании с конкретным аспектом, вариантом осуществления или примером изобретения, следует понимать применимыми к любому другому аспекту, варианту осуществления или примеру, описанным здесь, если они совместимы с ним. Все признаки, раскрытые в этом описании (включая приложенные формулу изобретения, реферат и фигуры) и/или все стадии любого способа или метода, раскрытого здесь, могут сочетаться в любой комбинации, кроме комбинаций, где по меньшей мере некоторые из таких признаков и/или стадии
взаимно исключают друг друга. Изобретение не ограничивается параметрами вышеприведенных вариантов осуществления. Изобретение распространяется на любое новое изобретение или любую новую комбинацию признаков, раскрытых в этом описании (включая приложенную формулу изобретения, реферат и чертежи), или на любое новое изобретение или любую новую комбинацию стадий любого способа или процесса, раскрытых здесь таким образом.
[00111] Также следует учесть, что все документы и бумаги, которые подаются одновременно с этим описанием или ранее перед в связи с этой заявкой и которые открыты для публичного ознакомления с этим описанием, а содержание всех таких документов и бумаг включено сюда в полном объеме посредством указания ссылки на них.
Пример 1 - Выделение диастереоизомеров NUC-1031
[00112] (R) - и (S)-изомеры разделяли посредством ВЭЖХ в следующих условиях:
Оборудование: хроматографы серии Agilent 1200(tm) с детектором
DAD
Скорость потока: 1,0 мл/мин
Колонка: Chiralpak AD(tm) 250x4,6 мм ID (нормальная фаза) Температура: температура окружающей среды Размер частицы: 2 0 мкм
Подаваемый материал: растворенный в МеОН; 10 г/л Растворитель: н-гептан/ИПС 10-> 50% ИПС
Хроматограмма показана на Фигуре 1. (Б)-эпимер элюируется за 8,6 минут, и (R)-эпимер элюируется за 10,3 минуты.
[00113] Методы и материалы для характеризации: Протонный (1Н) , углеродный (13С) , фосфорный (31Р) и фторный (19F) спектры ЯМР регистрировали на спектрометре Bruker Avance 500 при 25°С. Спектры автоматически калибровали по пику дейтерированного растворителя, и все спектры 13С ЯМР и 31Р ЯМР показали подавление спин-спинового взаимодействия с протонами. Было показано, что чистота конечных соединений составляет > 95%, исходя из анализа ВЭЖХ с использованием Varian Polaris С18-А (10 мкМ) в качестве аналитической колонки с градиентом элюирования Н20/МеОН от 100/0
до 0/100 за 35 минут. Анализ ВЭЖХ проводили с помощью жидкостного хроматографа Varian Prostar (LC Workstation-Varian prostar 335, детектор LC).
2'-ДеЗокси-2',2'-дифтор-В-щ4тидин-5'-0- [фенил (бензилокси-L-аланинил)]-(S)-фосфат 3
(ES+) m/z, найдено: (M+Na+) 603, 14. C25H27F2N408NaP рассчитано: (М+) 580, 47.
31Р ЯМР (202 МГц, MeOD) : 5Р 3,66
гЕ ЯМР (500 МГц, MeOD): 5Н 7,58 (д, J=7,5 Гц, 1Н, Я-6), 7, 38-7, 32 (м, 7Н, АгН) , 7, 26-7, 20 (м, ЗН, АгН) , 6,24 (т, J=7,5 Гц, 1Н, Я-1') , 5,84 (д, J=7,5 Гц, 1Н, Я-5), 5,20 (АВ система, Jab=12,0 Гц, 2Н, OCH2Ph) , 4, 46-4, 43 (м, 1Н, Я-5'), 4,36-4,31 (м, 1Н, Я-5'), 4,25-4,19 (м, 1Н, Я-3') , 4, 07-4, 00 (м, 2Н, Я-4', СНСН3) , 1,38 (д, J=7,2 Гц, ЗН, СНСН3) .
i9F ЯМР (470 МГц, MeOD): 5F - 118,0 (д, J=241 Гц, F) , 120,24 (уш.д, J=241 Гц, F) .
13С ЯМР (125 МГц, MeOD): 5С 174,61 (д, 3JC-P= 5,0 Гц, С=0, сложный эфир), 167, 63 (C-NH2), 157, 74 (С=0 основание), 152,10 (д, 2JC-P=7,0 Гц, С-Аг) , 142, 40 (СЯ-основание) , 137, 22 (С-Аг), 130, 90, 129, 63, 129, 39, 129, 32, 126, 32 (СЯ-Аг), 124,51 (д, 1JC_F=257 Гц, CF2) , 121, 47, 121, 43 (СЯ-Аг), 96, 67 (СЯ-основание), 85, 92 (уш. сигнал, С-1') , 80,31 (С-4'), 71,27 (кажущийся т, 2JC_F=23,7 Гц, С-3') , 68, 03 (OCH2Ph) , 65, 73 (д, 2JC_P=5,30 Гц, С-5') , 51,66 (СЯСЯ3), 20, 42 (д, 3JC-P=6,25 Гц, СНСН3) .
ВЭЖХ с обращенной фазой, элюирование Н20/МеОН от 100/0 до 0/100 в течение 35 минут, показан один пик диастереоизомера с tR=22, 53 мин.
2'-ДеЗокси-2',2'-дифтор-Б-цитидин-5'-0- [фенил (бензилокси- L-аланинил)]-(R)-фосфат 4
(ES+) m/z, найдено: (M+Na+) 603, 14. C25H27F2N408NaP рассчитано: (М+) 580, 47.
31Р ЯМР (202 МГц, MeOD): 5Р 3,83
гЯ ЯМР (500 МГц, MeOD): 5Н 7,56 (д, J=7,5 Гц, 1Н, Я-6), 7,38-7,31 (м, 7Н, АгН), 7,23-7,19 (м, ЗН, АгН), 6,26 (т, J=7,5
Гц, 1Н, Я-1') , 5,88 (д, J=7,5 Гц, 1Н, Я-5), 5,20 (с, 2Н, OCH2Ph) , 4, 49-4, 46 (м, 1Н, Я-5'), 4, 38-4, 34 (м, 1Н, Я-5'), 4,23-4,17 (м, 1Н, Я-3') , 4,07-4,01 (м, 2Н, Я-4', СНСН3) , 1,38 (д, J=7,2 Гц, ЗН, СНСНз) .
i9F ЯМР (470 МГц, MeOD): 5F - 118,3 (д, J=241 Гц, F) , -120, 38 (уш.д, J=241 Гц, F) .
13С ЯМР (125 МГц, MeOD): 5С 174, 65 (д, 3JC-P= 5,0 Гц, С=0, сложный эфир), 167, 65 (C-NH2), 157, 75 (С=0 основание), 152,10 (д, 2JC-P=7,0 Гц, С-Аг), 142, 28 (СЯ-основание), 137, 50 (С-Аг), 130, 86, 129, 63, 129, 40, 129, 32, 126, 31 (СЯ-Аг), 124, 50 (д, 1JC_F=257 Гц, CF2) , 121, 44, 121, 40 (СЯ-Аг), 96, 67 (СЯ-основание), 85, 90 (уш. сигнал, С-1') , 80, 27 (С-4'), 71,30 (кажущийся т, 2JC-F= 23,7 Гц, С-3') , 68, 02 (OCH2Ph) , 65, 50 (С-5') , 51,83 (СЯСЯ3), 20, 22 (д, 3JC-Р=7, 5 Гц, СНСНз) .
ВЭЖХ с обращенной фазой, элюирование Н20/МеОН от 100/0 до 0/100 в течение 35 минут, показан один пик диастереоизомера с tR=21,8 7 мин.
Пример 2 - Исследование комбинация NUC-1031 и цисплатина in у± tro.
2.1 Материалы и методы Клеточные культуры и реагенты
А2780, SK-OV-3, OVCAR-3, NCI-H460, NCI-H1975, NCI-H2122, 5637 и НТ1376 культивировали в среде RPMI 1640 (Invitrogen-22400105), добавляли 10% фетальную телячью сыворотку (FBS; Invitrogen-10099141). Все клеточные линии выдерживали в термостате с поддержанием требуемой влажности при 37°С под 5% С02. Клеточные культуральные среды и добавки были приобретены у Invitrogen, а колбы для тканевой культуры были приобретены у Corning, 9б-луночные планшеты и 384-луночные планшеты были приобретены у Greiner. Комплекты для оценки жизнеспособности клеток CellTiter-Glo были приобретены у Promega (Promega-G7573) , счетчик клеток Vi-Cell был приобретен у Beckman, прибор для детектирования Envision был приобретен у PerkinElmer.
Паклитаксел (используемый в качестве эталона) и цисплатин были приобретены у SELLECK, и они имели самую высокую степень
чистоты. Все соединения растворяли в ДМСО и далее разводили в культуральной среде. ДМСО, растворы соединений и культуральные среды нагревали до 37°С для получения раствора и разбавлений. Исследование цитотоксичности
Восемь клеточных линий выдерживали в 9б-луночных планшетах в течение ночи (100 мкл/лунка); для лекарственной терапии смешанные исходные растворы готовили в ДМСО и добавляли в лунки с 3,16-кратными разведениями, по 9 точек на дозу, или в трех повторах, с получения указанных конечных концентраций лекарственного средства, или с контролем по носителю. Конечная концентрация ДМСО составляла 0,5%. Клеточные концентрации АТР оценивали через 72 часа после добавления состава с использованием анализа жизнеспособности клеток CellTiter-Glo в соответствии с инструкциями изготовителя.
Исследование комбинаций
8 клеточных линий выдерживали в 3 8 4-луночных планшетах в течение ночи (60 мкл/лунка) ; для исследования комбинаций, четыре комбинации двух соединений исследовали в двух повторах, сохраняя фиксированную концентрацию одного соединения, одновременно увеличивая концентрацию второго соединения (10-кратное разведение, по 5 точек на дозу), исходные растворы соединения готовили в диметилсульфоксиде и добавляли в лунки с помощью цифрового диспенсера D3 0 0e, получая указанные конечные концентрации лекарственного вещества. Конечная концентрация диметилсульфоксида составляла 0,5%.
Клеточные концентрации АТР оценивали через 72 часа после добавления состава с использованием анализа жизнеспособности клеток CellTiter-Glo в соответствии с инструкциями изготовителя. Таким образом, исследование включало две стадии: Стадия 1: Исследование IC50 для отдельных составов На Стадии 1 определяли 1С50 (используя 5 или более концентраций) каждого индивидуального соединения (цисплатин, гемцитабин и NUC-1031) в релевантных клеточных линиях.
Таблица 1: Таблица 1: Верхняя концентрация отдельных агентов, разведенных в 3,16 раза в 9 точках, и проверенная в
В стадии 2 определяли взаимодействие выбранных комбинаций соединений на рост раковых клеток. Всего исследовали 8 параметров на релевантных клеточных линиях. Это означает, что четыре комбинации двух соединений исследовали в двух повторах, сохраняя фиксированную концентрацию одного соединения с увеличением концентрации второго соединения.
Таблица 2: Комбинированный план лечения, выполненный в
Для характеристики эффекта комбинаций соединений будет использована следующая терминология:
"Синергия" определена как более сильный наблюдаемый эффект от комбинации соединений, чем предсказано по эффектам отдельных соединений.
"Аддитивный" эффект определен, как наблюдаемый эффект
комбинации соединений равен предсказанному от суммы эффектов отдельных соединений.
"Антагонизм" определен как значительно более слабый эффект от комбинации соединений, чем предсказанный эффект от отдельных соединений.
Метод Чоу-Талалая
Метод Чоу-Талалая для комбинации лекарственных веществ основан на уравнении медиана-эффект, получаемого из закона действующих масс, где полученный индекс комбинации (CI) по теории Чоу-Талалая предлагает количественное определение показателя для аддитивного эффекта (С1=1), синергизма (CI <1) в комбинациях лекарственных веществ.
Модель по Влиссу
Метод сравнивает наблюдаемый комбинированный ответ (Y0) с предсказанным комбинированным ответом (YP), который был получен на основании предположения о том, что никакого эффекта от взаимодействия лекарственного средства не происходит.
Считается, что два лекарственных средства А и В ингибируют рост опухоли: лекарственное средство А в дозе а ингибирует рост опухоли на Ya процентов, а лекарственное средство В в дозе b ингибирует рост опухоли на Yb процентов. Если два лекарственных средства действуют независимо, комбинированное ингибирование, выраженное в процентах, Yab, Р можно предсказать, используя полную аддитивность по теории вероятности как Yab, P=Ya +Yb-YaYb.
Анализ по методу сдвига кривой
Считается, что два лекарственных средства действуют
независимо; для лекарственного средства А сохраняют
фиксированную концентрацию и изменяют концентрацию
лекарственного средства В, нормализуя эффект комбинации по фиксированной концентрации А, сравнивают кривые эффекта дозы, полученные от лекарственного средства В: сдвиг влево комбинированных кривых доза-эффект относится к синергии, сдвиг вправо указывается на антагонизм, а перекрывание указывают на аддитивный эффект.
2.3 Результаты
Стадия 1: анализ цитотоксичности отдельных агентов
агентами по отдельности в соответствующих линиях раковых клеток.
На Стадии 1 оценивали цитотоксичность агентов по отдельности; цисплатин, NUC-1031 и гемцитабин исследовали, чтобы получить наиболее приемлемые концентрации для комбинированного действия на Стадии 2.
Обсуждение результатов. Обобщение результатов всех трех
аналитических методов
[00114] Ниже в таблице 4 приведены результаты анализов с использованием трех методов (Чоу-Талалая, по Блиссу и по сдвигу кривой) для характеристики эффекта комбинации соединений NUC-1031 и цисплатина.
[00115] Таблица 4: Результат 3 аналитических методов оценки
эффекта комбинации соединений на рост раковых клеток
Метод
Клеточная линия
Фиксированная концентрация
Чоу-Талалая
По Блиссу
По сдвигу кривой
А2780 (Яичник)
Ацеларин 0,02 5мкМ
Цисплатин 11 мкМ
Аддитивный эффект
Аддитивный эффект
Аддитивный эффект
SK-0V3 (Яичник)
Ацеларин 0,072 мкМ
Цисплатин 4 5,6 мкМ
Неизмеримый
Аддитивный эффект
Аддитивный эффект
OVCAR-3 (Яичник)
Ацеларин 1,9 8 мкМ
Неизмеримый
Аддитивный эффект
Аддитивный эффект
Цисплатин 2 8,3 мкМ
NCI-H460 (Легкое)
Ацеларин 0,04 мкМ
Антагонизм
Антагонизм
Аддитивный эффект
Цисплатин 2,бмкМ
Цисплатин 2,6 мкМ+ Ацеларин 0,0198 мкМ
NCI-H1975 (Легкое)
Ацеларин 1,9 8мкМ
Аддитивный эффект
Аддитивный эффект
Аддитивный эффект
Цисплатин 7 0мкМ
5637 (Мочевой пузырь)
Ацеларин 0,199 мкМ
Синергия
Аддитивный эффект
Антагонизм
Цисплатин 13,7 мкМ
НТ-1376 (Мочевой пузырь)
Ацеларин 1,9 8 мкМ
Синергия
Синергия
Синергия
Цисплатин 20,51 мкМ
[00116] Соответствие результатов по всем трем аналитическим
методам демонстрирует, что синергия наблюдается у двух комбинаций соединений в отношении раковой линии клеток НТ137 6, что показано в таблице 5.
[00117] Таблица 5: Синергетический эффект при лечении комбинациями, подтвержденный всеми тремя методами
Клеточная линия
Фиксированная концентрация
Эффект последовательной дозы
НТ1376 (Мочевой пузырь)
Гемцитабин 1,98 мкМ
Цисплатин
НТ1376 (Мочевой пузырь)
NUC-1031 1,98 мкМ
Цисплатин
Результаты от индивидуальных соединений и средств
Данные, проанализированные с использованием методики Чоу-Талалая
CI < 1, предполагаемая синергия
CI для изменяемой комбинации: GemCis (Цис+Гем)
Доза Цис
Цоза Гем
Эффект
Клеточная линия
198,0
0, 007
0,8952
0,518
А2780
11,0
1,98
0,8525
0, 528
А2780
11,0
0,198
0,7973
0,489
А2780
198,0
0,008
0, 931
0, 341
NQ-H460
19,8
0,008
0,7922
0, 375
NQ-H460
198,0
0,08
0,7688
0,15028
NCI-H1975
19,8
0,08
0,6851
0,17708
NCI-H1975
1,98
0,08
0,6976
0, 149
NCI-H1975
70,0
0,198
0,7231
0,33835
NCI-H1975
70,0
0,0198
0,4228
0,65284
NCI-H1975
19,8
0, 012
0,7909
0,68758
5637
1,98
0, 012
0,7836
0,20073
5637
0,198
0, 012
0,7522
0,19804
5637
0,0198
0, 012
0,7314
0,22947
5637
13, 7
0,198
0,9446
0,31724
5637
13, 7
0,0198
0,8726
0,33306
5637
198,0
1,98
0,7601
0,46232
НТ1376
19,8
1,98
0,6007
0,59809
НТ1376
20,51
1,98
0,6572
0,4459
НТ1376
20,51
0,198
0,5269
0,3652
НТ1376
CI для изменяемой комбинации: AceCis (Цис+Аце)
Доза Цис
Доза Аце
Эффект
Клеточна я линия
198,0
0, 025
0,9004
0, 505
А2780
11,0
0,198
0,6605
0, 642
А2780
2,6
0,198
0,7749
0, 595
NCI-H460
198,0
1,98
0,8097
0,27205
NCI-Н1975
70,0
0,198
0,5335
0,65375
NCI-Н1975
198,0
0,199
0,9794
0,57158
5637
1,98
0,199
0,8218
0,60206
5637
0,198
0,199
0,7971
0,69873
5637
0,0198
0,199
0,8019
0,66363
5637
13, 7
0,198
0,8715
0,56581
5637
19,8
1,98
0,4966
0,27588
НТ1376
20,51
1,98
0,6016
0,22343
НТ1376
20,51
0,198
0,3899
0,36726
НТ1376
20,51
0,0198
0,274
0,49796
НТ1376
20,51
0,00198
0,2662
0,50941
НТ1376
20,51
1,98Е-4
0,3175
0,44121
НТ1376
CI > 1, предлагаемый антагонизм
CI для изменяемой комбинации: GemCis (Цис+Гем)
Доза Цис
Доза Гем
Эффект
Клеточная линия
19,8
0, 007
0,519
18,3616
А2780
1,98
0, 007
0,3904
302,897
А2780
CI для изменяемой комбинации: AceCis (Цис+Аце)
Доза Цис
Доза Аце
Эффект
Клеточная линия
11,0
0,00198
0,3049
2,2242 3
А27 8 0
1,98
0, 04
0,3557
2,266
NCI-H460
0,198
0, 04
0,2166
4,306
NCI-H460
2,6
0,0198
0,1942
6, 145
NCI-H460
2,6
0,00198
0,2357
2, 665
NCI-H460
Данные, проанализированные с использованием метода сдвига кривой
Синергетический эффект, показанный ниже для клеточной линии
Блиссу
Клеточная линия
Фиксированная концентрация
Эффект
последовательной дозы
Синергия
НТ1376
Гемцитабин 1,9 8мкМ
Цисплатин
НТ1376
Цисплатин 2 0,51 мкМ
Гемцитабин
НТ1376
NUC-1031 1,9 8мкМ
Цисплатин
НТ1376
Цисплатин 2 0,51 мкМ
NUC-1031
ПРИМЕР 3 - Дополнительное исследование комбинации NUC-1031 и цисплатина in vitro
Клеточная культура и Реагенты
[00118] Клетки SKOV3 приобретали в Американской коллекции типовых культур (АТСС) . Их культивировали при 37°С и 5% С02 в среде Gibco(tm) RMPI 164 0 + GlutaMAX(tm)-I (Life Technologies; 61870-ОЮ) с 10% Gibco(tm) FBS (Life Technologies; 61870-010) и 1% Gibco(tm) Penicillin-Streptomycin (Life Technologies; 15140122), известной как полная среда, в колбе для культивирования клеток. Цисплатин приобретали у TEVA UK Limited (PL 00289/1146). Флувастатин и
сульфорафан приобретали у компании Merck Millipore Corporation (номера по каталогу 344096 и 574215, соответственно). (S)-NUC-1031 предоставлен компанией NuCana(r) Ltd.
Клеточная культура и применение лекарственных веществ [00119] Клетки SK0V3 высевали в объеме 200 мкл из расчета в среднем 2 50 клеток на лунку в 60 лунок 9б-луночных планшет Costar(r) 3596, с крайними 36 лунками, заполненными 200 мкл PBS каждая. Клетки оставляли расти в полной среде в течение 4 8 часов перед добавлением других лекарственных веществ. Цисплатин, (S)-NUC-1031, флувастатин и сульфорафан по отдельности в полной среде с 10 различными концентрациями добавляли в средние 60 лунок (день 0) . Каждую концентрацию загружали в шести повторах. Клетки подвергали воздействию соединений в течение 24 часов и соединения заменяли чистой полной средой. Эксперимент с флувастатином повторяли с 4-дневным воздействием вместо 24 часов. Планшеты фиксировали 50 мкл 25% раствором ТСА при 4°С в течение 60 минут в день 4 после добавления лекарственных соединений для анализа с сульфородамином В (см. ниже).
[00120] Для комбинации двух агентов различные концентрации цисплатина и флувастатина и две фиксированные концентрации цисплатина, в сочетании с различными концентрациями флувастатина, высевали в 9б-луночный планшет Costar(r) 3596 в трех повторностях в средние 60 лунок. Крайние 3 6 лунок заполняли по 200 мкл PBS в каждую (день 0) . Клетки оставляли на 24 часа для воздействия лекарственных веществ, затем соединения удаляли и заменяли чистой полной средой в день 1. Эксперимент повторяли с цисплатином с сульфорафаном и цисплатином с (S)-NUC-1031, и каждую концентрацию загружали в трех повторах. Планшеты фиксировали 50 мкл 25% раствором ТСА при 4°С в течение 60 минут в день 4 для анализа с сульфородамином В (см. ниже).
Колориметрический анализ с сульфородамином В (SRB) [00121] После добавления раствора ТСА планшеты промывали 10 раз проточной водопроводной водой и оставляли сушиться в сушильном шкафу при 50°С. Затем клетки окрашивали 50 мкл раствора красителя SRB, и краситель вымывали 1% ледяной уксусной кислотой
4 раза в течение 30 минут после добавления SRB. Затем планшеты сушили в печи. Краситель SRB растворяли в 150 мкл 10 мМ буферного раствора Трис в течение 60 минут на качалке. Планшеты считывали на ридере для микропланшет Biohit ВР800 (Biohit Healthcare) и измеряли оптическую плотность при 54 0 нм. Результаты исследований как агентов по отдельности, так и комбинаций, использовали для расчета лекарственных соединений с использованием программного обеспечения Prism Software (GraphPad), где IC50 представляет собой концентрацию лекарственного вещества, которая вызывает 50% ингибирование. Что касается результатов по комбинации двух агентов, их использовали для расчета индекса комбинации (CI) соединений с использованием программного обеспечения CalcuSyn Software (Biosoft). РЕЗУЛЬТАТЫ:
[00122] IC50 для цисплатина и сульфорафана составили 2,436 мкМ и 7, 002 мкМ, соответственно. IC50 для флувастатина и NUC-1031 не смогли вычислить из-за отсутствия ингибирующих эффектов. Значения CI для цисплатина с флувастатином варьировались от 0,355 до 0,557, демонстрируя синергию. Значения CI для цисплатина с сульфорафом варьировались от 0,871 до 1,474, что свидетельствует об антагонизме. Значения CI для цисплатина с NUC-1031 при 0,1-0,5 мкМ и 1-2 мкМ на клетках SKOV3 составлили от 0,871 до 0,957 и от 1,067 до 1,756, соответственно.
Заключение
[00123] Синергическое ингибирование было установлено при низких концентрациях NUC-1031 (0,1-0,5 мкМ) с цисплатином на клетках SKOV3, что делает его более вероятным для клинического применения, поскольку более низкие концентрации лекарств обычно дают более низкую токсичность. Этот результат может служить основой для дальнейшего исследования точной оптимальной комбинированной дозы перед исследованием по эффективности и безопасности на пациентах. Персонализированное лечение путем оценки цитотоксичности и побочных эффектов комбинации у индивидуумов является оптимальным из-за различий в генетическом профиле и реакции на лекарственное средство, так что каждый пациент мог бы принимать лекарства в оптимальных дозах.
ПРИМЕР 4 - Фармакокинетический анализ концентраций dFdCTP из клинического исследования АВС-008 (NUC-1031 в сочетании с
цисплатином) и сравнение с результатами клинического
исследования ProGeml (только NUC-1031).
Первоначальный фармакокинетический анализ проводили на образцах, полученных от первых трех пациентов в клиническом исследовании АВС-008.
Детальные сведения о пациентах:
Пациент 1: 71 год - метастатическая карцинома желчного тракта - начальная доза: 625 мг/м2 (S) -ЖГС-1031 + 2 5мг/м2 цисплатина
Пациент 2: 7 8 лет - метастатическая карцинома желчного тракта - начальная доза: 625мг/м2 (S) -ЖГС-1031 + 2 5мг/м2 цисплатина
Пациент 3: 75 лет - метастатическая карцинома желчного тракта - начальная доза: 625мг/м2 (S) -ЖГС-1031 + 2 5мг/м2 цисплатина
Как NUC-1031, так и цисплатин вводили в дни 1 и 8 в рамках 21-дневного цикла.
Приемлемую дозировку 625мг/м2 NUC-1031 готовили в шприце Luerlock. Такая дозировка была выбрана на основании роста и массы субъекта, используя расчет стандартной площади поверхности тела (BSA). В удлинительную трубку из полиэтилена заливали 1,5 мл промывочного раствора до подключения шприца, содержащего NUC-1031, к удлинительной трубке.
Удлинительную трубку подключали к устройству для венозного введения (CVAD), и NUC-1031 вводили со скоростью 20 мл/час с помощью шприцевого насоса. После завершения инъекции шприц с NUC-1031 отсоединяли от удлинительной трубки, и удлинительную трубку затем промывали дополнительным объемом промывного раствора (3 мл).
Материалы и методы
1. Материалы
Эталонное соединение dFdCTP получали от Biorbyt, Великобритания. Lymphoprep - от STEMCELL Technologies Inc., Великобритания. Перхлорную кислоту (РСА), ацетат аммония (NH4Ac) и аммиак получали от Sigma Aldrich, Великобритания. Воду марки LC-MS, метанол, ацетонитрил и муравьиную кислоту получали от
Fisher Scientific, Великобритания.
2. Методы
A. Подготовка крови и подготовка РВМС: б мл крови собирали с использованием гепаринизированной пробирки для сбора крови. После центрифугирования и отделения плазмы, собирали лейкоцитарную пленку и переносили в новую пробирку, содержащую 3 мл Lymphoprep с градиентом плотности. После центрифугирования, верхнюю поверхность раздела, содержащую слой РВМС, переносили в новую пробирку. После промывки фосфатным буферным раствором (PBS), РВМС ресуспендировали в 100 мкл PBS. Затем добавляли еще 100 мкл 0,8 М РСА и смесь перемешивали на вортексе и центрифугировали, а затем 100 мкл супернатанта переносили в новую пробирку. Экстракты РСА хранили при -8 0°С до проведения анализа.
B. Экстракция образцов (РВМС): Экстракты РСА буферировали в 50 мкл 1М NH4Ac, затем нейтрализовали, используя 2 0 мкл 10% раствора аммиака. Наконец, затем добавляли 5 мкл раствора, содержащего внутренний стандарт 8-хлорАТФ и 5 мкл деионизированной воды. Экстракты переносили в пробирки для LC-MS и 10 мкл вводили в систему UPLC-MS/MS.
3. Хроматографические методы и исследование образцов Получали 10 мг/мл исходного раствора аналита и аликвоту
замораживали при -8 0°С до применения. Аналит исследовали с использованием ультраэффективной жидкостной хроматографической системы (Accela UPLC, Thermo Scientific, UK) , оснащенной колонкой Biobasic АХ, 5 мкм, 50x2,1 мм (Thermo Electron Corporation, Murrieta, Калифорния, США) и подвижной фазы, состоящей из смеси 10 мМ NH4Ac в ACN/H20 (30:70 об./об.), рН 6,0 (А), и 1 мМ NH4Ac в ACN/H20 (30:70 об./об.), рН 10,5 (В). Использовали градиент подвижной фазы, включая: буфер А=95% при 0-0,5 минут, от 95 до 0% в течение 1,25 минут, сохраняли 0% в течение 1,75 минут, от 0 до 95% в течение 0,1 минуты, заканчивая 95% в течение 2,9 минут, все при объемной скорости потока 500 мл/мин.
4. Масс-спектрометрический анализ
Элюируемые исследуемые соединения детектировали с
использованием трехступенчатой квадрупольной масс-
спектрометрической системы Vantage (Thermo Scientific, UK) , оснащенной источником электрораспыления ионов. Образцы анализировали в режимах контроля множественного реактивного контроля (MRM), контроля положительных (+ve) и отрицательных (-ve) ионов при напряжении распыления 3500 В и 3000 В соответственно. Азот использовался в качестве среды и вспомогательного газа при скорости потока 50 и 2 0 произвольных единиц, соответственно. Аргон использовали в качестве газа для столкновения с давлением 1,5 мТорр.
Результаты
РК параметры в плазме для NUC-1031 показали увеличение AUC
Исходные результаты показаны в Таблицах 9 и 10 Таблица 10: Сравнение средних РК параметров в исследованиях ProGeml и АВС-008
в 2,1 раза и увеличение Cmax в 1,9 раза, по сравнению с ProGeml (фаза I первого исследования NUc-1031 на человеке). РК параметры в плазме для NUC-1031 также показали увеличение периода полужизни в 3,б раза, по сравнению с исследованием, где NUC-1031 был единственным средством.
Внутриклеточные параметры dFdCTP (активная противораковая группа) были схожи с ProGeml, с очевидным исключением более длительного значения tl/2. Это более длительное значение tl/2 может быть объяснено высокими уровнями внутриклеточного dFdCTP через 4 часа после отбора проб для анализа показателей РК. Синергия, наблюдаемая в уровнях dFdCTP после лечения NUC-1031 с цисплатином, имеет значительные потенциальные клинические значения, включая более широкое клиническое применение для лечения рака, в случаях, когда требуются высокие уровни dFdCTP в течение более длительного периода времени для блокирования роста опухоли и для лечения рецидивирующих раковых опухолей после применения одного агента.
Понятно, что увеличенный период полужизни dFdCTP, наблюдаемый при лечении с использованием комбинаций гемцитабин-[фенилбензоксил-Ъ-аланинил] фосфата или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата, с описанными здесь противораковыми агентами на основе платины, обеспечивает преимущества в лечении рака в ряде контекстов. Основным преимуществом является гибкость дозирования, которая дает увеличенный период полужизни. Например, такие медицинские применения позволяют обеспечить эффективные схемы лечения, в которых случаи лечения с использованием активных агентов являются менее частыми, чем те, что используются в настоящее время. Просто в качестве примера, можно привести тот факт, что лечение по изобретению может быть осуществлено у пациента в течение одной суточной дозы лечения, и оно не требует многократного введения в течение дня. Подходящие случаи лечения, например, отдельные случаи лечения, могут потребовать лишь относительно быстрого введения активных агентов, а не длительного введения, например, путем инфузии. Гемцитабин-фенил-бензоксил-Ъ-аланинил]фосфат и противораковое средство на основе платины, с которым он должен использоваться,
могут быть представлены (как в комбинации, так и по отдельности) в качестве лекарственного средства для однократного ежедневного введения пациенту. Медикаменты такого рода для однократного ежедневного введения могут быть полезны при лечении рецидивов рака.
Лечение в соответствии с изобретением с использованием гемцитабин-фенил-бензоксил-Ъ-аланинил]фосфата в комбинации с противораковым агентом на основе платины, независимо от того, в комбинации или последовательно, может использоваться в случаях лечения, осуществляемого каждые два дня, каждые три дня, каждые четыре дня, каждые пять дней, каждые шесть дней или каждую неделю. Кроме того, лечение в соответствии с изобретением может быть использовано в случаях, если лечение разделено одной, двумя или тремя неделями друг от друга.
ПРИМЕР 5 - Сравнение ключевых временных точек,
установленных для выживаемости без прогрессирования, полученные ранее в исследовании ABC-08, и связанные радиологические ответы, с медианными временными точками, установленных для выживаемости без прогрессирования, в исследовании АВС-02 в комбинированной
терапии с применением одного гемцитабина и
гемцитабина/цисплатина.
Описание АВС-02:
В исследовании АВС-02 было установлено, что комбинация гемцитабин/цисплатин является превосходном стандартом лечения по сравнению с одним только гемцитабином в условиях метастатического рака желчного тракта. Установленная медиана для выживаемости без прогрессирования для пациентов, получавших гемцитабин/цисплатин, составляла 8 месяцев. Установленная медиана для выживаемости без прогрессирования для пациентов, получавших гемцитабин в качестве терапии единственным агентом, составляла 5 месяцев. (Valle J, Wasan Н, Palmer DH et al in 2010).
Сравнение с ABC 08:
Временные точки выживаемости без прогрессирования, полученные на сегодняшний день в исследовании АВС-08, превысили установленную медиану для терапии гемцитабином в качестве
единственного агента, так и для терапии комбинацией гемцитабин/цисплатин. Конкретные примеры приведены ниже:
Пациент 02: - имел 60%-ое снижение дозировки NUC-1031 до 375мг/м2 и сопутствующее 25%-ое снижение цисплатина. Однако, как более подробно показано ниже, объем опухоли в течение продолжительного времени продолжал постоянно снижаться.
Этот пациент достиг увеличения временной точки выживания в 9 месяцев, и этот процесс продолжается. Это самое длительное наблюдаемое увеличение временной точки выживания в исследовании АВС-08, и в настоящее время превышает медиану, установленную в исследовании АВС-02.
Этот же пациент показал подтвержденное многократными радиологическими исследованиями продолжающееся снижение объема опухоли:
Контроль через 3 месяца: 17%-ое снижение опухоли, устойчивое заболевание
Контроль через б месяцев: 24%-ое снижение опухоли, устойчивое заболевание
Контроль через 9 месяцев: 41%-ое снижение опухоли, частичный ответ.
Пациент 05-55 лет - Метастатическая карцинома желчных путей - первичная доза: б25мг/м2 (S) -ЖГС-1031 + 2 5мг/м2 цисплатина
Этот пациент достиг увеличения временной точки выживания в 5,5 месяцев, и этот процесс продолжается, превысив медианную временную точку выживания в 5 месяцев, установленную для пациентов, получающих только гемцитабин.
Этот же пациент показал подтвержденное первым радиологическим исследованием значительное снижение объема опухоли:
Контроль через 3 месяца: 54%-ое снижение, частичный ответ.
Хотя эти результаты получены от отдельных пациентов, они представляют собой многообещающие клинические результаты в отношении комбинации по изобретению.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат или его
фармацевтически приемлемая соль или сольват для применения при
лечении рака в комбинации с противораковым средством на основе
платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и
триплатина.
2. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по п.1, где противораковое средство на основе платины представляет собой цисплатин.
3. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по п.1 или п. 2, где гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат представляет собой гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил )]-( S ) -фосфат в по существу диастереомерно чистой форме.
4. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по п.1 или п. 2, где гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат представляет собой смесь фосфатных диастереоизомеров.
5. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по любому из пунктов 1-4, где гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил ) ]-фосфат представлено в форме свободного основания.
6. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по любому из пунктов 1-5, где гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат вводится внутривенно.
7. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по любому из пунктов 1-6, где рак представляет собой солидную опухоль, например, рак, выбранный из рака яичников, рака мочевого пузыря и рака желчных путей.
8. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по п. 7, где рак представляет собой рак желчных путей, например, рак, выбранный из рака желчного пузыря, рака дистального желчного протока, ампулярного рака, внутрипротоковой холангиокарциномы и внутрипеченочной холангиокарциномы.
9. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по любому из пунктов 1-8, где рак является
2.
рецедивирующим.
10. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по любому из пунктов 1-8, где рак является метастатическим.
11. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по любому из пунктов 1-10, где рак рефрактерный, резистентный или частично резистентный к противораковому средству на основе платины.
12. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по любому из пунктов 1-9, где рак чувствителен к противораковому средству на основе платины.
13. Гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат для применения по любому из пунктов 1-12, где доза NUC-1031, которую вводят при каждом введении, составляет между 250 мг/м2 и 1250 мг/м2, и доза противоракового средства на основе платины, которую вводят при каждом введении, составляет между 10 мг/м2 и 200 мг/м2.
14. Способ лечения рака, где способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфата или его фармацевтически приемлемой соли или сольвата в комбинации с противораковым средством на основе платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина.
15. Способ по п.14, где противораковое средство на основе платины представляет собой цисплатин.
16. Способ по п. 14 или п.15, где гемцитабин-[фенил-
бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат представляет собой гемцитабин-
[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-(S)-фосфат в по существу
диастереомерно чистой форме.
17. Способ по п. 14 или п.15, где гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат представляет собой смесь фосфатных диастереоизомеров.
18. Способ по любому из пунктов 14-17, где гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат представлен в форме свободного основания.
19. Способ по любому из пунктов 14-18, где гемцитабин-
[фенил-бензокси-Ъ-аланинил)]-фосфат вводится внутривенно.
20. Способ по любому из пунктов 14-19, где рак представляет собой солидную опухоль, например, рак, выбранный из рака яичников, рака мочевого пузыря и рака желчных путей.
21. Способ по п.20, где рак представляет собой рак желчных путей, например, рак, выбранный из рака желчного пузыря, рака дистального желчного протока, ампулярного рака, внутрипротоковой холангиокарциномы и внутрипеченочной холангиокарциномы.
22. Способ по любому из пунктов 14-21, где рак является рецедивирующим.
23. Способ по любому из пунктов 14-22, где рак является метастатическим.
24. Способ по любому из пунктов 14-23, где рак
рефрактерный, резистентный или частично резистентный к
противораковому средству на основе платины.
25. Способ по любому из пунктов 14-23, где рак чувствителен к противораковому средству на основе платины.
26. Способ по любому из пунктов 14-25, где доза NUC-1031, которую вводят при каждом введении, составляет предпочтительно между 250 мг/м2 и 1250 мг/м2, и доза противоракового средства на основе платины, которую вводят при каждом введении,составляет между 10 мг/м2 и 2 00 мг/м2.
27. Способ по любому из пунктов 14-26, где введение комбинации обеспечивает ti/2 внутриклеточного dFdCTP более чем 10 часов.
28. Способ по любому из пунктов 14-27, где введение комбинации обеспечивает ti/2 внутриклеточного dFdCTP более чем 18 часов.
29. Фармацевтический состав, содержащий гемцитабин-[фенилбензокси-Ъ-аланинил ) ]-фосфат или его фармацевтически приемлемую соль или сольват вместе с противораковым средством на основе платины, выбранным из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
30. Набор, содержащий два отдельных состава, которые будут использоваться вместе, при этом составы представляют собой:
25.
первый состав, содержащий гемцитабин-[фенил-бензокси-Ъ-аланинил) ]-фосфат или его фармацевтически приемлемую соль или сольват и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент; и
второй состав, содержащий противораковое средство на основе платины, выбранное из цисплатина, пикоплатина, липоплатина и триплатина и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
20130521 ХИРАЛЬНЫЙ СКРИНИНГ 1AG-2419 ГЕПТАН ETCH IPAACN #3 РАЦЕМАТ NUC, 2 г/л В ETCH
сл сл о со сл
ФИГ.2
Гемцитабин (1.98 мкМ) + Цисплатин Цисплатин ь Ацералин (1.98 мкМ) + Цисплатин
Цисплатин 2 !^
Log(мкМ)
(19)
(19)
(19)
(19)
(19)
|
