(57) Реферат / Формула:
Описаны молекулы антител, которые специфически связываются с PD-L1. Также описаны комбинированные способы терапии, включающие молекулы антител против PD-L1. Молекулы антител против PD-L1 можно использовать для лечения, предупреждения и/или диагностики злокачественных или инфекционных состояний и нарушений.
Евразийское (21) 201790834 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2018.01.31
(22) Дата подачи заявки 2015.10.13
(51) Int. Cl.
A61K39/395 (2006.01) C07K16/28 (2006.01) C07K16/46 (2006.01)
(54) МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ К PD-L1 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
(31) 62/063,852; 62/094,847; 62/198,545; 62/213,076
(32) 2014.10.14; 2014.12.19; 2015.07.29;
2015.09.01
(33) US
(86) PCT/US2015/055390
(87) WO 2016/061142 2016.04.21
(71) Заявитель:
НОВАРТИС АГ (CH); ДАНА-ФАРБЕР КЭНСЕР ИНСТИТЬЮТ, ИНК.; ПРЕЗИДЕНТ ЭНД ФЕЛЛОУЗ ОФ ГАРВАРД КОЛЛЕДЖ (US)
(72) Изобретатель:
Фриман Гордон Джеймс, Шарп Эрлин Хелен, Фрэй Герхард Йоханн, Чан Хваи Вэнь, Матараза Дженнифер Мари, Дранофф Гленн (US)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
антител, которые спе-PD-L1. Также описаны
(57) Описаны молекулы цифически связываются с комбинированные способы терапии, включающие молекулы антител против PD-L1. Молекулы антител против PD-L1 можно использовать для лечения, предупреждения и/или диагностики злокачественных или инфекционных состояний и нарушений.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
2420-541650ЕА/032 МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ К PD-L1 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
По настоящей заявке испрашивается приоритет временной заявки США № 62/063852, поданной 14 октября 2014 года, временной заявки США № 62/094847, поданной 19 декабря 2014 года, временной заявки США № 62/198545, поданной 29 июля 2015 года, и временной заявки США № 62/213076, поданной 1 сентября 2015 года, содержание вышеупомянутых заявок включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
Настоящая заявка содержит список последовательностей, который предоставлен в электронной форме в формате ASCII и включен в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме. Указанная копия ASCII, созданная 13 октября 2015 года, названа C2160-7003WO_SL.txt и имеет размер 310216 байт.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Способность Т-клеток опосредовать иммунный ответ против
антигена требует двух различных сигнальных взаимодействий
(Viglietta, V. et al. (2007) Neurotherapeutics 4:666-675;
Korman, A. J. et al. (2007) Adv. Immunol. 90:297-339) . Во-
первых, антиген, который экспонирован на поверхности
антигенпрезентирующих клеток (АРС), презентируется
антигенспецифической наивной CD4+ Т-клетке. Такое презентирование доставляет сигнал через Т-клеточный рецептор (TCR), который предписывает Т-клетке инициировать иммунный ответ, специфичный к презентируемому антигену. Во-вторых, различные костимулирующие и ингибиторные сигналы, опосредуемые взаимодействиями между АРС и определенными молекулами Т-клеточной поверхности, запускают активацию и пролиферацию Т-клеток и, в конечном итоге, их ингибирование.
Иммунная система строго контролируется сетью
костимулирующих и коингибиторных лигандов и рецепторов. Эти молекулы предоставляют второй сигнал для активации Т-клеток и
обеспечивают сбалансированную сеть положительных и отрицательных
сигналов для максимизации иммунных ответов против инфекции,
одновременно ограничивая иммунитет к собственным компонентам
(Wang, L. et al. (Epub Mar. 7, 2011) J. Exp. Med. 208 (3) :577-92;
Lepenies, B. et al. (2008) Endocrine, Metabolic & Immune
Disorders-Drug Targets Targets 8:279-288). Примеры
костимулирующих сигналов включают связывание между лигандами В7.1 (CD80) и В7.2 (CD86) на АРС и рецепторами CD28 и CTLA-4 на CD4+ Т-лимфоцитах (Sharpe, А. Н. et al. (2002) Nature Rev. Immunol. 2:116-126; Lindley, P. S. et al. (2009) Immunol. Rev. 229:307-321). Связывание B7.1 или B7.2 с CD28 стимулирует активацию Т-клеток, в то время как связывание В7.1 или В7.2 с CTLA-4 ингибирует такую активацию (Dong, С. et al. (2003) Immunolog. Res. 28(l):39-48; Greenwald, R. J. et al. (2005) Алл. Rev. Immunol. 23:515-548). CD28 конститутивно экспрессируется на поверхности Т-клеток (Gross, J., et al. (1992) J. Immunol. 149:380-388), в то время как экспрессия CTLA-4 быстро повышается после активации Т-клеток (Linsley, P. et al. (1996) Immunity 4:535-543) .
Другие лиганды рецептора CD2 8 включают группу родственных молекул В7, также известную как "суперсемейство В7" (Coyle, А. J. et al. (2001) Nature Immunol. 2(3) :203-209; Sharpe, A. H. et al. (2002) Nature Rev. Immunol. 2:116-126; Collins, M. et al.
(2005) Genome Biol. 6:223.1-223.7; Korman, A. J. et al. (2007) Adv. Immunol. 90:297-339) . Известно несколько представителей семейства В7, в том числе В7.1 (CD80), В7.2 (CD86), лиганд индуцибельного костимулятора (ICOS-L), лиганд 1 белка запрограммированной смерти (PD-L1; В7-Н1), лиганд 2 белка запрограммированной смерти (PD-L2; B7-DC), В7-НЗ, В7-Н4 и В7-Н6
(Collins, М. et al. (2005) Genome Biol. 6:223.1-223.7).
Белок запрограммированной смерти 1 (PD-1) является ингибиторным представителем расширенного семейства CD2 8/CTLA-4 регуляторов Т-клеток (Okazaki et al. (2002) Curr Opin Immunol 14: 391779-82; Bennett et al. (2003) J. Immunol. 170:711-8). Другие представители семейства CD2 8 включают CD2 8, CTLA-4, ICOS и BTLA. Было идентифицировано два гликопротеиновых лиганда PD-1
на клеточной поверхности: лиганд 1 белка запрограммированной смерти (PD-L1) и лиганд 2 белка запрограммированной клеточной смерти 2 (PD-L2). Было показано, что при связывании с PD-1 PD-L1 и PD-L2 подавляют активацию Т-клеток и секрецию цитокинов
(Freeman et al. (2000) J Exp Med 192:1027-34; Latchman et al.
(2001) Nat Immunol 2:261-8; Carter et al. (2002) Eur J Immunol 32:634-43; Ohigashi et al. (2005) Clin Cancer Res 11:2947-53).
PD-L1 (также известный как белок кластера дифференцировки 274 (CD274) или гомолог 1 В7 (В7-Н1)) представляет собой трансмембранный белок 1 типа размером 4 0 кДа. PD-L1 связывается с его рецептором, PD-1, находящемся на активированных Т-клетках, В-клетках и миелоидных клетках, модулируя активацию или ингибирование. Как PD-L1, так и PD-L2, являются гомологами В7, которые связываются с PD-1, но не связываются с CD28 или CTLA-4
(Blank et al. (2005) Cancer Immunol Immunother. 54:307-14) . Связывание PD-L1 с его рецептором PD-1 на Т-клетках доставляет сигнал, который ингибирует опосредуемую TCR активацию продукции IL-2 и пролиферацию Т-клеток. Механизм вовлекает ингибирование фосфорилирования ZAP7 0 и его связывания с CD3C, (Sheppard et al.
(2004) FEBS Lett. 574:37-41). Передача сигнала PD-1 ослабляет фосфорилирование активирующей петли РКС-9 в результате передачи сигнала TCR, необходимое для активации факторов транскрипции NF-кВ и АР-1 и для продукции IL-2. PD-L1 также связывается с костимулирующей молекулой CD80 (В7-1), но не CD86 (В7-2) (Butte et al. (2008) Mol Immunol. 45:3567-72).
Было показано, что экспрессия PD-L1 на клеточной поверхности активируется посредством стимуляции IFN-y. Экспрессия PD-L1 была обнаружена при многих злокачественных опухолях, включая карциному легкого, яичника и толстого кишечника, и различные миеломы человека, и она часто ассоциируется с плохим прогнозом (Iwai et al. (2002) PNAS 99:12293-7; Ohigashi et al.
(2005) Clin Cancer Res 11:2947-53; Okazaki et al. (2007) Intern. Immun. 19:813-24; Thompson et al. (2006) Cancer Res. 66:3381-5). Было предположено, что PD-L1 играет роль в опухолевом иммунитете путем повышения апоптоза клонов антигенспецифических Т-клеток
(2005)
(Dong et al. (2002) Nat Med 8:793-80 0) . Также было предположено, что PD-L1 может быть вовлечен в воспаление слизистой оболочки кишечника, и ингибирование PD-L1 подавляет истощающее заболевание, ассоциированное с колитом (Kanai et al. (2003) J Immunol 171:4156-63).
Учитывая важность иммунных каскадов контроля в регуляции иммунного ответа, существует потребность в разработке новых средств, которые модулируют активность иммуноингибиторных белков, таких как PD-L1, таким образом, обеспечивая активацию иммунной системы. Такие средства можно использовать, например, для иммунотерапии злокачественной опухоли и для лечения других состояний, таких как хроническая инфекция.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем описании описаны молекулы антител ('например, гуманизированные молекулы антител), которые связываются с лигандом белка запрограммированной смерти 1 (PD-L1) с высокой аффинностью и специфичностью. В одном варианте осуществления молекулы антител против PD-L1 содержат новую комбинацию каркасных областей (например, FW1, FW2, FW3 и/или FW4), например, новые комбинации каркасных областей тяжелой цепи и/или каркасных областей легкой цепи. Также предусматриваются молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие молекулы антител, экспрессирующие векторы, клетки-хозяева и способы получения молекул антител. Также предусматриваются иммуноконъюгаты, полиспецифические или биспецифические молекулы антител и фармацевтические композиции, содержащие молекулы антител. Молекулы антител против PD-L1, описанные в настоящем описании, можно использовать (отдельно или в комбинации с другими средствами и способами терапии) для лечения, предупреждения и/или диагностики нарушений, таких как злокачественные нарушения (например, солидные опухоли и опухоли мягких тканей), а также инфекционные заболевания (например, хронические инфекционные нарушения или сепсис). Кроме того, в настоящем описании описаны способы и композиции, содержащие комбинацию двух, трех или более лекарственных средств, выбранных из одной, двух или всех из следующих категорий (i)-(iii) : (i) средство, которое усиливает презентацию антигена (например,
презентацию опухолевого антигена); (ii) средство, которое усиливает ответ эффекторных клеток (например, активацию и/или мобилизацию В-клеток и/или Т-клеток); или (iii) средство, которое уменьшает иммуносупрессию опухоли. В некоторых вариантах осуществления комбинация включает ингибитор PD-L1 (например, молекула антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании). Таким образом, в настоящем описании описаны композиции и способы для обнаружения PD-L1, а также способы лечения различных нарушений, включая злокачественную опухоль и/или инфекционные заболевания, с использованием молекул антител против PD-L1 и их комбинаций.
Таким образом, в одном аспекте изобретение относится к молекуле антитела (например, выделенная или рекомбинантная молекула антитела), имеющей одно или несколько из следующих свойств:
(i) связывается с PD-L1, например, PD-L1 человека, с высокой аффинностью, например, с константой аффинности по меньшей мере приблизительно 107 М-1, как правило, приблизительно 108 М-1, и, более конкретно, приблизительно от 109 М-1 до 1010 М-1 или прочнее;
(ii) по существу не связывается с CD2 8, CTLA-4, ICOS или
BTLA;
(iii) ингибирует или снижает связывание PD-L1 с рецептором, например, PD-1 или CD80 (В7-1), или с обоими из них;
(iv) специфически связывается с эпитопом на PD-L1,
например, с тем же или сходным эпитопом, что и эпитоп,
распознаваемый моноклональным антителом мыши ВАР058 или химерным
антителом ВАР058, например, BAP058-chi;
(v) демонстрирует такую же или сходную аффинность или
специфичность связывания, или и аффинность, и специфичность
связывания, что и любое из BAP058-hum01, BAP058-hum02, ВАР058-
hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07,
BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-
huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6,
BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M,
BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O;
(vi) демонстрирует такую же или сходную аффинность или специфичность связывания, или и аффинность, и специфичность связывания, что и молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи и вариабельная область легкой цепи), описанная в таблице 1;
(vii) демонстрирует такую же или сходную аффинность или специфичность связывания, или и аффинность, и специфичность связывания, что и молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи и вариабельная область легкой цепи), имеющая аминокислотную последовательность, представленную в таблице 1;
(viii) демонстрирует такую же или сходную аффинность или специфичность связывания, или и аффинность, и специфичность связывания, что и молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи и вариабельная область легкой цепи), кодируемая нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1;
(ix) ингибирует, например, конкурентно ингибирует, связывание второй молекулы антитела с PD-L1, где вторая молекула антитела представляет собой молекулу антитела, описанную в настоящем описании, например, молекулу антитела, выбранную, например, из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O;
(x) связывает такой же или перекрывающийся эпитоп со второй
молекулой антитела к PD-L1, где вторая молекула антитела
представляет собой молекулу антитела, описанную в настоящем
описании, например, молекулу антитела, выбранную, например, из
любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, ВАР058-
hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08,
BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-
huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7,
BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N
или BAP058-Clone-O;
(xi) конкурирует за связывание и/или связывает тот же
эпитоп, что и вторая молекула антитела к PD-L1, где вторая
молекула антитела представляет собой молекулу антитела,
описанную в настоящем описании, например, молекулу антитела,
выбранную из, например, любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02,
BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-
hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml 0, BAP058-huml1,
BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-
huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-
Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O;
(xii) обладает одним или несколькими биологическими свойствами молекулы антитела, описанной в настоящем описании, например, молекулы антитела, выбранной из, например, любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0;
(xiii) имеет одно или несколько фармакокинетических свойств молекулы антитела, описанной в настоящем описании, например, молекулы антитела, выбранной из, например, любого из ВАР058-humOl, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0;
(xiv) ингибирует один или несколько видов активности PD-L1, например, приводит к одному или нескольким из: увеличения уровня инфильтрирующих опухоль лимфоцитов, увеличения опосредуемой Т-клеточным рецептором пролиферации или снижения иммунного ускользания злокачественных клеток; или
(xv) связывает PD-L1 человека и перекрестно реагирует с PD-L1 яванского макака.
(xiv)
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела связывается с PD-L1 с высокой аффинностью, например, с KD, которая является приблизительно такой же или является по меньшей мере приблизительно на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% или 90% более высокой или более низкой, чем KD молекулы антитела против PD-L1 мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1, например, молекулы антитела против PD-L1 мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1, описанной в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления KD молекулы антитела против PD-L1 мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1 составляет менее чем приблизительно 0,4, 0,3, 0,2, 0,1 или 0,05 нМ, например, при измерении способом Biacore. В некоторых вариантах осуществления KD молекулы антитела против PD-L1 мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1 составляет менее чем приблизительно 0,2 нМ, например, приблизительно 0,171 нМ. В других вариантах осуществления KD молекулы антитела против PD-L1 мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1 составляет менее чем приблизительно 10, 5, 3, 2 или 1 нМ, например, при измерении по связыванию с клетками, экспрессирующими PD-L1 (например, клетками 300.19). В некоторых вариантах осуществления KD молекулы антитела против PD-L1 мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1 составляет менее чем приблизительно 1 нМ, например, приблизительно 0,285 нМ.
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 связывается с PD-L1 с Kd медленнее чем 1х10~4, 5х10~5 или 1х10~5 с-1, например, приблизительно б,33х10~5 с-1. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 связывается с PD-L1 с Ка быстрее чем lxlO4, 5х104, 1х105 или 5х105
М 1с 1, например, приблизительно 3,07х105 М 1с-1.
В некоторых вариантах осуществления уровень экспрессии молекулы антитела является более высоким, например, по меньшей мере приблизительно в 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, б, 7, 8, 9 или 10 раз более высоким, чем уровень экспрессии молекулы антитела мыши или химерной молекулы антитела, например, молекулы антитела мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1, описанной в настоящем
описании. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела экспрессируется в клетках СНО.
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 снижает один или несколько видов активности, ассоциированных с PD-L1, с IC50 (концентрация при ингибировании 50%), которая является приблизительно такой же или более низкой, например, по меньшей мере приблизительно на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% или 90% более низкой, чем IC50 молекулы антитела мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1, например, молекулы антитела мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1, описанной в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления IC50 молекулы антитела мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1 составляет менее чем приблизительно б, 5, 4, 3, 2 или 1 нМ, например, при измерении по связыванию с клетками, экспрессирующими PD-L1 (например, клетками 300.19) . В некоторых вариантах осуществления IC50 молекулы антитела мыши или химерной молекулы антитела против PD-L1 составляет менее чем приблизительно 4 нМ, например, приблизительно 3,40 нМ (или приблизительно 0,51 мкг/мл). В некоторых вариантах осуществления снижаемая активность, ассоциированная с PD-L1, представляет собой связывание PD-L1 и/или PD-L2 с PD-1. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 связывается с мононуклеарными клетками периферической крови (РВМС), активируемыми стафилококковым энтеротоксином В (SEB). В других вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 увеличивает экспрессию IL-2 в цельной крови, активированной SEB. Например, антитело против PD-L1 увеличивает экспрессию IL-2 по меньшей мере приблизительно в 2, 3, 4 или 5 раз по сравнению с экспрессией IL-2, когда используют изотипический контроль (например, IgG4).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 имеет увеличенную стабильность, например, является по меньшей мере приблизительно в 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, б, 7, 8, 9 или 10 раз более стабильной in vivo или in vitro, чем молекула антитела мыши или химерная молекула антитела против PD-L1, например, молекула антитела мыши или химерная молекула антитела
против PD-L1, описанная в настоящем описании.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 представляет собой гуманизированную молекулу антитела, и она имеет показатель риска на основе анализа Т-клеточных эпитопов, составляющий 300-700, 400-650, 450-600, или показатель риска, как описано в настоящем описании.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит по меньшей мере одну антигенсвязывающую область, например, вариабельную область или ее антигенсвязывающий фрагмент, из антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит по меньшей мере одну, две, три или четыре вариабельных области из антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из ВАР058-humOl, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против
PD-L1 содержит по меньшей мере одну или две вариабельных области тяжелой цепи из антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N, или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит по меньшей мере одну или две вариабельных области легкой цепи из антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N, или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает константную область тяжелой цепи для IgG4, например, IgG4 человека. В одном варианте осуществления IgG4 человека включает замену в положении 22 8 (например, замену Ser на Pro). В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает константную область тяжелой цепи для IgGl, например, IgGl человека. В одном варианте осуществления IgGl человека включает замену в положении 2 97 (например, замену Asn на Ala) . В одном варианте осуществления IgGl человека включает
замену в положении 2 65, замену в положении 32 9, или обе из них (например, замену Asp на Ala в положении 2 65 и/или замену Pro на Ala в положении 329). В одном варианте осуществления IgGl человека включает замену в положении 2 34, замену в положении 235, или обе из них (например, замену Leu на Ala в положении 234 и/или замену Leu на Ala в положении 235) . В одном варианте осуществления константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, указанную в таблице 3, или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичную) ей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает константную область легкой цепи каппа, например, константную область легкой цепи каппа человека. В одном варианте осуществления константная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, указанную в таблице 3, или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичную) ей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает константную область тяжелой цепи IgG4, например, IgG4 человека, и константную область легкой цепи каппа, например, константную область легкой цепи каппа человека, например, константную область тяжелой и легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, указанную в таблице 3, или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичную) ей. В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает константную область тяжелой цепи IgGl, например, IgGl человека, и константную область легкой цепи каппа, например, константную область легкой цепи каппа человека, например, константную область тяжелой и легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, указанную в таблице 3 или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичную) ей. В одном варианте осуществления IgGl человека
включает замену в положении 297 (например, замена Asn на Ala). В одном варианте осуществления IgGl человека включает замену в положении 265, замену в положении 329, или обе из них (например, замена Asp на Ala в положении 2 65 и/или замена Pro на Ala в положении 329) . В одном варианте осуществления IgGl человека включает замену в положении 2 34, замену в положении 2 35, или обе из них (например, замена Leu на Ala в положении 234 и/или замена Leu на Ala в положении 235).
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает вариабельный домен и константную область тяжелой цепи, вариабельный домен и константную область легкой цепи, или и те, и другие, содержащие аминокислотную последовательность BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или ВАР058-С1опе-О; или как описано в таблице 1, или кодируемые нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей. Молекула антитела против PD-1 необязательно содержит лидерную последовательность из тяжелой цепи, легкой цепи, или из обеих из них.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три определяющих комплементарность области (CDR) из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N, или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в таблице 1 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в таблице 1 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В
определенных вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 включает замену в CDR легкой цепи, например, одну или несколько замен в CDR1, CDR2 и/или CDR3 легкой цепи.
В другом варианте осуществления молекула антитела против
PD-L1 включает по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или
шесть CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области
тяжелой и легкой цепи, содержащей аминокислотную
последовательность, представленную в таблице 1 или кодируемую нуклеотидно последовательностью, представленной в таблице 1. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает все шесть CDR из антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из ВАР058-humOl, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N, или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1, или в высокой степени сходные CDR, например, CDR, которые являются идентичными или которые имеют по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен). В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 может включать любые CDR, описанные в настоящем описании. В определенных вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 включает замену в CDR легкой цепи, например, одну или несколько замен в CDR1, CDR2 и/или CDR3 легкой цепи. В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR
согласно Rabat et al. (например, по меньшей мере одну, две или три CDR согласно определению Rabat, как указано в таблице 1) из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-R, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей; или имеющего по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно одной, двух или трех CDR согласно Rabat et al., показанных в таблице 1.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR согласно Rabat et al. (например, по меньшей мере одну, две или три CDR согласно определению Rabat, как указано в таблице 1) из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-R, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей; или имеющего по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не
более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно одной, двух или трех CDR согласно Rabat et al., показанных в таблице 1.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR согласно Rabat et al. (например, по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR согласно определению Rabat, как указано в таблице 1) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-R, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей; или имеющего по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно одной, двух, трех, четырех, пяти или шести CDR согласно Rabat et al., показанных в таблице 1.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает все шесть CDR согласно Rabat et al. (например, все шесть CDR согласно определению Rabat, как указано в таблице 1) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, ВАР058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-R, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N
или ВАР058-С1опе-О; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1 ; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичного) любой из вышеупомянутых последовательностей; или имеющего по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно всех шести CDR согласно Rabat et al., показанных в таблице 1. В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 может включать любую CDR, описанную в настоящем описании.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три гипервариабельных петли согласно Chothia (например, по меньшей мере одну, две или три гипервариабельных петли согласно определению Chothia, как показано в таблице 1) из вариабельной области антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-R, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые контактируют с PD-L1; или которое имеет по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно одной, двух или трех гипервариабельных петель согласно Chothia et al., представленных в таблице 1.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три гипервариабельных петли согласно Chothia (например, по меньшей мере одну, две или три гипервариабельных петли согласно определению Chothia, как указано в таблице 1) вариабельной
области легкой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые контактируют с PD-L1; или которое имеет по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно одной, двух или трех гипервариабельных петель согласно Chothia et al., представленных в таблице 1.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть гипервариабельных петель (например, по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть гипервариабельных петель согласно определению Chothia, как указано в таблице 1) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, ВАР058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N, или BAP058-Clone-O; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые контактируют с PD-L1; или которое имеет по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно одной, двух, трех, четырех, пяти или шести гипервариабельных петель
согласно Chothia et al., показанных в таблице 1.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает все шесть гипервариабельных петель (например, все шесть гипервариабельных петель согласно определению Chothia, как указано в таблице 1) антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O, или в высокой степени сходные гипервариабельные петли, например, гипервариабельные петли, которые являются идентичными или которые имеют по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен); или которые имеют по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно всех шести гипервариабельных петель согласно Chothia et al., показанных в таблице 1. В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 может включать любую гипервариабельную петлю, описанную в настоящем описании.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три гипервариабельных петли, которые имеют те же канонические структуры, что и соответствующая гипервариабельная петля антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, ВАР058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O, например, те же канонические структуры, что и по меньшей мере петля 1 и/или петля 2 вариабельных доменов тяжелой и/или легкой цепей антитела,
описанного в настоящем описании. См., например, Chothia et al. , (1992) J. Mol. Biol. 227:799-817; Tomlinson et al. , (1992) J. Mol. Biol. 227:776-798 для описания канонических структур гипервариабельных петель. Эти структуры можно определить путем изучения таблиц, представленных в этих ссылках.
В определенных вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 включает комбинацию CDR или гипервариабельных петель, определяемых согласно Rabat et al. и Chothia et al.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельных петли из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, ВАР058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N, или BAP058-Clone-O, согласно определению Kabat и Chothia (например, по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельных петли согласно определению Kabat и Chothia, как указано в таблице 1); или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичную) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которые имеют по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен) относительно одной, двух или трех CDR или гипервариабельных петель согласно Kabat и/или Chothia, показанных в таблице 1.
Например, молекула антитела против PD-L1 может включать CDR1 VH согласно Kabat et al. или гипервариабельную петлю 1 VH согласно Chothia et al., или их комбинацию, например, как показано в таблице 1. В одном варианте осуществления комбинация CDR согласно Kabat и Chothia для CDR1 VH включает аминокислотную последовательность GYTFTSYWMY (SEQ ID NO: 195) или
аминокислотную последовательность, по существу идентичную ей (например, имеющую по меньшей мере одно аминокислотное изменение, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или инсерций, например, консервативных замен)). Кроме того, молекула антитела против PD-L1 может включать, например, CDR 2-3 VH согласно Kabat et al. и CDR 1-3 VL согласно Kabat et al. , например, как представлено в таблице 1. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления каркасные области определяют на основе комбинации CDR, определяемых согласно Kabat et al. , и гипервариабельных петель, определяемых согласно Chothia et al. Например, молекула антитела против PD-L1 может включать FR1 VH, определяемую на основе гипервариабельной петли 1 VH согласно Chothia et al. , и FR2 VH, определяемую на основе CDR 1-2 VH согласно Kabat et al. , например, как показано в таблице 1. Кроме того, молекула антитела против PD-L1 может включать, например, FR 3-4 VH, определяемые на основе CDR 2-3 VH согласно Kabat et al. и FR 1-4 VL, определяемые на основе CDR 13 VL согласно Kabat et al.
Молекула антитела против PD-L1 может содержать любую комбинацию CDR или гипервариабельных петель согласно определениям Kabat и Chothia. В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, ВАР058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O, согласно определению Kabat и Chothia (например, по меньшей мере одну, две или три CDR согласно определению Kabat и Chothia, как указано в таблице 1).
В одном варианте осуществления, например, варианте осуществления, включающем вариабельную область, CDR (например, CDR согласно Chothia или CDR согласно Kabat) или другую последовательность, упоминаемую в настоящем описании, например,
в таблице 1, молекула антитела представляет собой
моноспецифическую молекулу антитела, биспецифическую молекулу
антитела или представляет собой молекулу антитела, которая
содержит антигенсвязывающий фрагмент антитела, например,
половинное антитело или антигенсвязывающий фрагмент половинного
антитела. В вариантах осуществления молекула антитела
представляет собой биспецифическую молекулу антитела, обладающую
первой специфичностью связывания в отношении PD-L1 и второй
специфичностью связывания в отношении TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ
(например, СЕАСАМ-1 и/или СЕАСАМ-5), PD-1 или PD-L2. В некоторых
вариантах осуществления вторая специфичность связывания в
отношении TIM-3, LAG-3 и/или PD-1 включает аминокислотную
последовательность или кодируется нуклеотидной
последовательностью, как описано в настоящем описании (например, как описано в разделе под названием "Ингибиторы молекул иммунной точки контроля", начинающемся на стр.218 настоящего описания ниже (включая все публикации, упомянутые в нем).
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), включающую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID N0: 1, SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 195; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), включающую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID N0: 9, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID N0: 10 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID N0: 11.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), включающую
аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID
N0: 1, SEQ ID N0: 4 или SEQ ID NO: 195; аминокислотную
последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 5 и аминокислотную
последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), включающую
аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 12, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 13 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 14.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID N0: 1. В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID N0: 4. В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID N0: 195.
В одном варианте осуществления вариабельная каркасная область легкой или тяжелой цепи (например, область, охватывающая по меньшей мере FR1, FR2, FR3 и необязательно FR4) молекулы антитела против PD-L1 может быть выбрана из: (а) вариабельной каркасной области легкой или тяжелой цепи, включающей по меньшей мере 80%, 85%, 87% 90%, 92%, 93%, 95%, 97%, 98% или предпочтительно 100% аминокислотных остатков из вариабельной каркасной области легкой или тяжелой цепи человека, например, остатка вариабельной каркасной области легкой или тяжелой цепи зрелого антитела человека, последовательности эмбрионального типа человека или консенсусной последовательности человека; (Ь) вариабельной каркасной области легкой или тяжелой цепи, включающей от 20% до 80%, от 40% до 60%, от 60% до 90% или от 7 0% до 95% аминокислотных остатков из вариабельной каркасной области легкой или тяжелой цепи человека, например, остатка вариабельной каркасной области легкой или тяжелой цепи зрелого антитела человека, последовательности эмбрионального типа человека или консенсусной последовательности человека; (с) не являющейся человеческой каркасной области (например, каркасной области грызуна); или (d) не являющейся человеческой каркасной области, которая была модифицирована, например, для удаления антигенных или цитотоксических детерминант, например, деиммунизирована или частично гуманизирована. В одном варианте осуществления вариабельная каркасная область легкой или тяжелой цепи (в частности, FR1, FR2 и/или FR3) включает последовательность вариабельной каркасной области легкой или
тяжелой цепи, по меньшей мере на 70, 75, 80, 85, 87, 88, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98, 99% идентичную, или идентичную, каркасным областям сегмента VL или VH гена эмбрионального типа человека.
В определенных вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит вариабельный домен тяжелой цепи, имеющий по меньшей мере одно, два, три, четыре, пять, шесть, семь, десять, пятнадцать или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций в аминокислотной последовательности ВАР058-chi-HC, например, аминокислотную последовательность области FR из целой вариабельной области, например, показанной на фиг.8А-8В, или SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит вариабельный домен тяжелой цепи, имеющий одно или несколько: Q в положении 1, I в положении 2, Т в положении 3, V или К в положении 5, Р в положении 9, Т в положении 10, V в положении 11, К в положении 12, Т в положении 15, Е или Q в положении 16, Т в положении 17, LB положении 18, R или Т в положении 19, I или V в положении 20, Т в положении 21, Т в положении 23, G, V или F в положении 24, I в положении 37, R в положении 38, А, или Р, или S в положении 40, Т или R в положении 41, S в положении 42, Q или К в положении 43, М, или L, или V в положении 48, R в положении 67, F, или V, или L в положении 68, I в положении 70, S в положении 71, А, К или R в положении 72, D, или Т, или N в положении 74, Т или К в положении 7 6, N в положении 77, Q в положении 78, F, или V, или L в положении 7 9, S или V в положении 80, L в положении 81, Е, или К, или Т в положении 82, М в положении 83, Т или N в положении 84, N в положении 85, V или М в положении 8 6, К, или R, или D в положении 87, Т, или А, или Р в положении 88, А или V в положении 8 9, Т в положении 91, или Т в положении 93, аминокислотной последовательности BAP058-chi-HC, например, аминокислотной последовательности FR из целой вариабельной области, например, показанной на фиг.8А-8В, или SEQ ID NO: 16.
Альтернативно или в комбинации с заменами в тяжелой цепи BAP058-chi-HC, описанными в настоящем описании, молекула антитела против PD-L1 содержит вариабельный домен легкой цепи, имеющий по меньшей мере одно, два, три, четыре, пять, шесть,
семь, десять, пятнадцать, двадцать или более аминокислотных
изменений, например, аминокислотных замен или делеций, в
аминокислотной последовательности BAP058-chi-LC, например,
аминокислотной последовательности, представленной на фиг.9А-9В,
или SEQ ID N0: 17. В одном варианте осуществления молекула
антитела против PD-L1 содержит вариабельный домен тяжелой цепи,
имеющий одно или несколько из: Е или А в положении 1, V в
положении 2, V или Q в положении 3, LB положении 4, Т в
положении 7, Р в положении 8, D или L или S или А в положении 9,
S или Т в положении 10, Q или L в положении 11, Р в положении
12, V или L или А в положении 13, Т в положении 14, Р или L в
положении 15, К в положении 16, Q или Е в положении 17, К или Р
в положении 18, А в положении 19, Т в положении 20, L в
положении 21, S в положении 22, LB положении 37, А в положении
43, R или Q в положении 45, I в положении 58, А или S или Р в
положении 60, S в положении 63, Y в положении 67, Е в положении
70, F в положении 73, К в положении 74, N в положении 7 6, S или
R в положении 77, I или L в положении 78, Е в положении 7 9, Р
или А в положении 80, D в положении 81, F, или I, или V, или А в
положении 83, G в положении 84, Т, или V, или Y в положении 85,
или Y в положении 87 аминокислотной последовательности ВАР058-
chi-LC, например, аминокислотной последовательности,
представленной на фиг.1 OA-10В или SEQ ID NO: 2 4 или 26.
В других вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 включает одну, две, три или четыре каркасных области тяжелой цепи (например, аминокислотная последовательность VHFW, представленная в таблице 2 или кодируемая нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 2), или последовательность, по существу идентичную им.
В других вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 включает одну, две, три или четыре каркасных области легкой цепи (например, аминокислотная последовательность VLFW, представленная в таблице 2 или кодируемая нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 2), или последовательность, по существу идентичную им.
В других вариантах осуществления молекула антитела против
PD-L1 включает одну, две, три или четыре каркасных области
тяжелой цепи (например, аминокислотная последовательность VHFW,
представленная в таблице 2 или кодируемая нуклеотидной
последовательностью, представленной в таблице 2), или
последовательность, по существу идентичную им; и одну, две, три
или четыре каркасных области легкой цепи (например,
аминокислотная последовательность VLFW, представленная в таблице
2 или кодируемую нуклеотидной последовательностью,
представленной в таблице 2), или последовательность, по существу идентичную им.
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область 1 тяжелой цепи (VHFW1) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum07, BAP058-huml4 или BAP058-huml6 (например, SEQ ID NO: 124) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 1 тяжелой цепи (VHFW1) из BAP058-hum04, BAP058-hum06, ВАР058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml2, BAP058-huml5, BAP058-huml7, BAP058-Clone-L или BAP058-Clone-M (например, SEQ ID NO: 126) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 1 тяжелой цепи (VHFW1) из BAP058-hum03, BAP058-hum05, BAP058-huml1, BAP058-huml3, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O (например, SEQ ID NO: 128) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 1 тяжелой цепи (VHFW1) из BAP058-humlO (например, SEQ ID N0: 130).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область 2 тяжелой цепи (VHFW2) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-huml1, BAP058-huml4, BAP058-Clone-K или BAP058-Clone-N (например, SEQ ID NO: 132) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 2 тяжелой цепи (VHFW2) из BAP058-hum04, BAP058-huml2 или BAP058-Clone-L (например, SEQ ID NO: 134) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 2 тяжелой цепи (VHFW2) из ВАР058-hum06, BAP058-hum09, BAP058-huml5, или ВАР058-С1опе-М (например, SEQ ID NO: 136) . В некоторых вариантах осуществления молекула
антитела содержит каркасную область 2 тяжелой цепи (VHFW2) из BAP058-hum05, BAP058-hum07 или BAP058-huml6 (например, SEQ ID NO: 138) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 2 тяжелой цепи (VHFW2) из ВАР058-hum08, BAP058-huml3, BAP058-huml7 или ВАР058-С1опе-О (например, SEQ ID NO: 140). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 2 тяжелой цепи из ВАР058-humlO (например, SEQ ID NO: 142).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область 3 тяжелой цепи (VHFW3) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum07, BAP058-huml4 или BAP058-humlб, (например, SEQ ID NO: 144) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 тяжелой цепи (VHFW3) из BAP058-hum03, BAP058-hum06, ВАР058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml5, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-M или BAP058-Clone-N (например, SEQ ID NO: 146) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 тяжелой цепи (VHFW3) из BAP058-hum04, BAP058-huml2 или BAP058-Clone-L (например, SEQ ID NO: 148) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 тяжелой цепи (VHFW3) из BAP058-hum05, BAP058-hum08 или BAP058-huml7 (например, SEQ ID NO: 150) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 тяжелой цепи (VHFW3) из BAP058-huml3 или ВАР058-С1опе-О (например, SEQ ID NO: 152) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область 4 тяжелой цепи (VHFW4) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O (например, SEQ ID NO: 154) .
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область 1 легкой цепи (VLFW1) из BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058
huml4, BAP058-huml5, BAP058-humlб, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L или BAP058-Clone-M (например, SEQ ID NO: 156) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 1 легкой цепи (VLFW1) из BAP058-BAPhum0 8, BAP058-humlO, BAP058-humll или BAP058-Clone-N (например, SEQ ID NO: 158) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 1 легкой цепи (VLFW1) из BAP058-hum01 или BAP058-hum09 (например, SEQ ID N0: 160) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 1 легкой цепи (VLFW1) из BAP058-hum02 или BAP058-huml2
(например, SEQ ID N0: 162). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 1 легкой цепи
(VLFW1) из BAP058-hum07 (например, SEQ ID N0: 164) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 1 легкой цепи (VLFW1) из BAP058-huml3 или ВАР058-С1опе-О
(например, SEQ ID N0: 166).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область 2 легкой цепи (VLFW2) из BAP058-hum08, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, ВАР058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7 или BAP058-Clone-N (например, SEQ ID N0: 168). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 2 легкой цепи (VLFW2) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum09, BAP058-huml3, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M или BAP058-Clone-O (например, SEQ ID N0: 170).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область 3 легкой цепи (VLFW3) из BAP058-hum08, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml4, ВАР058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7 или BAP058-Clone-N (например, SEQ ID N0: 172) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 легкой цепи (VLFW3) из BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-huml2, BAP058-Clone-L или BAP058-Clone-M (например, SEQ ID N0: 174). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 легкой цепи (VLFW3) из BAP058-hum01 или
BAP058-hum09 (например, SEQ ID NO: 176) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 легкой цепи (VLFW3) из BAP058-hum02 (например, SEQ ID NO: 178) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 легкой цепи (VLFW3) из BAP058-hum03 или ВАР058-С1опе-К (например, SEQ ID NO: 180) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 легкой цепи (VLFW3) из BAP058-hum07 (например, SEQ ID NO: 182) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область 3 легкой цепи (VLFW3) из BAP058-huml3 или ВАР058-С1опе-О (например, SEQ ID NO: 184).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область 4 легкой цепи (VLFW4) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0 (например, SEQ ID NO: 18 6).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum01, BAP058-hum02 или BAP058-huml4 (например, SEQ ID NO: 124 (VHFW1), SEQ ID NO: 132 (VHFW2) и SEQ ID NO: 144
(VHFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum07 или BAP058-huml6 (например, SEQ ID NO: 124 (VHFW1), SEQ ID NO: 138
(VHFW2) и SEQ ID NO: 144 (VHFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum04, BAP058-huml2 или BAP058-Clone-L
(например, SEQ ID NO: 126 (VHFW1), SEQ ID NO: 134 (VHFW2), и SEQ ID NO: 148 (VHFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum06, BAP058-hum09, BAP058-huml5 или BAP058-Clone-M
(например, SEQ ID NO: 126 (VHFW1), SEQ ID NO: 136 (VHFW2), и SEQ ID NO: 146 (VHFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из
BAP058-hum08 или BAP058-huml7 (например, SEQ ID NO: 126 (VHFW1), SEQ ID NO: 140 (VHFW2) и SEQ ID NO: 150 (VHFW3) ) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum03, BAP058-huml1, ВАР058-Clone-K или BAP058-Clone-N (например, SEQ ID NO: 128 (VHFW1), SEQ ID NO: 132 (VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3) ) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-huml3 или ВАР058-С1опе-О
(например, SEQ ID NO: 128 (VHFW1), SEQ ID NO: 140 (VHFW2) и SEQ ID NO: 152 (VHFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum05 (например, SEQ ID NO: 128 (VHFW1), SEQ ID NO: 138
(VHFW2), и SEQ ID NO: 150 (VHFW3) ) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-humlO (например, SEQ ID NO: 130 (VHFW1), SEQ ID NO: 142 (VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3) ) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела, кроме того, содержит каркасную область 4 тяжелой цепи (VHFW4) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O (например, SEQ ID NO: 154).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum01 или BAP058-hum09 (например, SEQ ID NO: 160 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 176 (VLFW3) ) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml4, BAP058-huml5, ВАР058-пит16или BAP058-huml7 (например, SEQ ID NO: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, ВАР058-Clone-L или BAP058-Clone-M (например, SEQ ID NO: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 174 (VLFW3) ) . В некоторых
вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum08, BAP058-humlO или BAP058-humll (например, SEQ ID NO: 158 (VLFW1), SEQ ID NO: 168
(VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml3 или ВАР058-С1опе-О (например, SEQ ID N0: 166 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 184
(VLFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum02
(например, SEQ ID N0: 162 (VLFW1), SEQ ID N0: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 178 (VLFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum03 (например, SEQ ID N0: 156 (VLFW1), SEQ ID N0: 170
(VLFW2) и SEQ ID NO: 180 (VLFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum07 (например, SEQ ID N0: 164 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 182 (VLFW3) ) . В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml2 (например, SEQ ID N0: 162 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 174 (VLFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из ВАР058-С1опе-К (например, SEQ ID N0: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 180
(VLFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-Clone-N
(например, SEQ ID N0: 158 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела, кроме того, содержит каркасную область 4 легкой цепи (VLFW4) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O (например, SEQ ID NO: 186).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из
BAP058-hum01 (например, SEQ ID NO: 124(VHFW1), SEQ ID NO: 132
(VHFW2) и SEQ ID NO: 144 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum01 (например, SEQ ID NO: 160 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 176 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum02 (например, SEQ ID NO: 124 (VHFW1), SEQ ID NO: 132
(VHFW2) и SEQ ID NO: 144 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum02 (например, SEQ ID NO: 162 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 178 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum03 (например, SEQ ID NO: 128 (VHFW1), SEQ ID NO: 132
(VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum03 (например, SEQ ID NO: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 180 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum04 или BAP058-Clone-L (например, SEQ ID NO: 126
(VHFW1), SEQ ID NO: 134 (VHFW2) и SEQ ID NO: 148(VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum04 или ВАР058-Clone-L (например, SEQ ID NO: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 170
(VLFW2) и SEQ ID NO: 174 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum05 (например, SEQ ID NO: 128 (VHFW1), SEQ ID NO: 138
(VHFW2) и SEQ ID NO: 150 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum05 (например, SEQ ID NO: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 174 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum06 или ВАР058-С1опе-М (например, SEQ ID NO: 126
(VHFW1), SEQ ID NO: 136 (VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3) ) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum0 6 или ВАР058-Clone-М (например, SEQ ID NO: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 170
(VLFW2) и SEQ ID NO: 174 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum07 (например, SEQ ID N0: 124 (VHFW1), SEQ ID NO: 138
(VHFW2) и SEQ ID NO: 144 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum07 (например, SEQ ID N0: 164 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 182 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum08 (например, SEQ ID N0: 126 (VHFW1), SEQ ID NO: 140
(VHFW2) и SEQ ID NO: 150 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum08 (например, SEQ ID N0: 158 (VLFW1), SEQ ID NO: 168(VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-hum09 (например, SEQ ID N0: 126 (VHFW1), SEQ ID NO: 136
(VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-hum09 (например, SEQ ID N0: 160 (VLFW1), SEQ ID NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 176 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-humlO (например, SEQ ID N0: 130 (VHFW1), SEQ ID NO: 142
(VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-humlO (например, SEQ ID N0: 158 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-humll (например, SEQ ID N0: 128 (VHFW1), SEQ ID NO: 132
(VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-humll (например, SEQ ID N0: 158 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-huml2 (например, SEQ ID N0: 126 (VHFW1), SEQ ID NO: 134
(VHFW2) и SEQ ID NO: 148 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml2 (например, SEQ ID N0: 162 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 174 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-huml3 или ВАР058-С1опе-О (например, SEQ ID N0: 128
(VHFW1), SEQ ID NO: 140 (VHFW2) и SEQ ID NO: 152 (VHFW3) ) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml3 или ВАР058-Clone-О (например, SEQ ID N0: 166 (VLFW1), SEQ ID NO: 170
(VLFW2) и SEQ ID NO: 184 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-huml4 (например, SEQ ID N0: 124 (VHFW1), SEQ ID NO: 132
(VHFW2) и SEQ ID NO: 144 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml4 (например, SEQ ID N0: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-huml5 (например, SEQ ID N0: 126 (VHFW1), SEQ ID NO: 136
(VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml5 (например, SEQ ID N0: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-huml6 (например, SEQ ID N0: 124 (VHFW1), SEQ ID NO: 138
(VHFW2) и SEQ ID NO: 144 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml6 (например, SEQ ID N0: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-huml7 (например, SEQ ID N0: 126 (VHFW1), SEQ ID NO: 140
(VHFW2) и SEQ ID NO: 150 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-huml7 (например, SEQ ID N0: 156 (VLFW1), SEQ ID NO: 168 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасные области 1-3 тяжелой цепи из BAP058-Clone-N (например, SEQ ID N0: 128 (VHFW1), SEQ ID NO: 132
(VHFW2) и SEQ ID NO: 146 (VHFW3)) и каркасные области 1-3 легкой цепи из BAP058-Clone-N (например, SEQ ID N0: 158 (VLFW1), SEQ ID
NO: 170 (VLFW2) и SEQ ID NO: 172 (VLFW3)).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1, кроме того, содержит каркасную область 4 тяжелой цепи (VHFW4) из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O (например, SEQ ID NO: 154) и каркасную область 4 легкой цепи (VLFW4) из BAP058-hum01, ВАР058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-huml0, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-O (например, SEQ ID NO: 186).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит каркасную область тяжелой цепи, имеющую комбинацию каркасных областей FW1, FW2 и FW3, как показано на фиг. 4 или 6. В другом варианте осуществления молекула антитела содержит каркасную область легкой цепи, имеющую комбинацию каркасных областей FW1, FW2 и FW3, как показано на фиг. 4 или 6. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит каркасную область тяжелой цепи, имеющую комбинацию каркасных областей FW1, FW2 и FW3, как показано на фиг.4 или б, и каркасную область легкой цепи, имеющую комбинацию каркасных областей FW1, FW2 и FW3, как показано на фиг.4 или 6.
В одном варианте осуществления вариабельный домен тяжелой
или легкой цепи, или как тяжелой, так и легкой цепи, молекулы
антитела против PD-L1 включает аминокислотную
последовательность, которая по существу идентична аминокислотной последовательности, описанной в настоящем описании, например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентична вариабельной области антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из ВАР058-humOl, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05,
BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или которое отличается по меньшей мере на 1 или 5 остатков, но менее чем 40, 30, 20 или 10 остатков, от вариабельной области антитела, описанного в настоящем описании.
В одном варианте осуществления вариабельная область тяжелой
или легкой цепи, или как тяжелой, так и легкой цепи, молекулы
антитела против PD-L1 включает аминокислотную
последовательность, кодируемую последовательностью нуклеиновой кислоты, описанной в настоящем описании, или нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется с последовательностью нуклеиновой кислоты, описанной в настоящем описании (например, последовательности нуклеиновой кислоты, представленные в таблицах 1 и 2), или комплементарной ей последовательностью, например, в условиях низкой жесткости, средней жесткости или высокой жесткости, или в других условиях гибридизации, описанных в настоящем описании.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит по меньшей мере одну, две, три или четыре антигенсвязывающих области, например, вариабельных области, имеющих аминокислотную последовательность, как указано в таблице 1, или последовательность, по существу идентичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей или которая отличается не более чем на 1, 2, 5, 10 или 15 аминокислотных остатков от последовательностей, представленных в таблице 1). В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 включает домен VH и/или VL, кодируемый нуклеиновой кислотой, имеющей нуклеотидную последовательность, как указано в таблице 1, или последовательность, по существу идентичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей или которая отличается не более
чем на 3, б, 15, 30 или 45 нуклеотидов от последовательностей, представленных в таблице 1).
В другом варианте осуществления молекула антитела против
PD-L1 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR из
вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную
последовательность, как указано в таблице 1, или
последовательность, по существу гомологичную ей (например,
последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%,
95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одну, две, три
или более замен, инсерций или делеций, например, консервативных
замен). В другом варианте осуществления молекула антитела против
PD-L1 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR из
вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную
последовательность, как указано в таблице 1, или
последовательность, по существу гомологичную ей (например,
последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%,
95%, 99% или более идентичную ей и/или обладающую одной, двумя,
тремя или более заменами, инсерциями или делециями, например,
консервативными заменами). В другом варианте осуществления
молекула антитела против PD-L1 содержит по меньшей мере одну,
две, три, четыре, пять или шесть CDR из вариабельных областей
тяжелой и легкой цепей, имеющих аминокислотную
последовательность, как указано в таблице 1), или а последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одну, две, три или более замен, инсерций или делеций, например, консервативных замен).
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR и/или гипервариабельных петли из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058
huml4, BAP058-huml5, BAP058-humlб, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0, как обобщенно представлено в таблице 1, или последовательность, по существу идентичную им (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную им, и/или имеющую одну, две, три или более замен, инсерций или делеций, например, консервативных замен). В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR и/или гипервариабельных петли из вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0, как обобщенно представлено в таблице 1, или последовательность, по существу идентичную им (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную им, и/или имеющую одну, две, три или более замен, инсерций или делеций, например, консервативных изменений). В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит все шесть CDR и/или гипервариабельных петель, описанных в настоящем описании, например, описанных в таблице 1.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 имеет вариабельную область, которая имеет идентичную последовательность, или которая отличается на 1, 2, 3 или 4 аминокислоты от вариабельной области, описанной в настоящем описании (например, области FR, описанной в настоящем описании).
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 представляет собой полноразмерное антитело или его фрагмент (например, Fab, F(ab')2, Fv или одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv)). В определенных вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 представляет собой моноклональное антитело
или антитело с одной специфичностью. Молекула антитела против PD-L1 также может представлять собой гуманизированную, химерную молекулу антитела, молекулу антитела животного семейства верблюжьих, молекулу антитела акулы или полученную in vitro молекулу антитела. В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 представляет собой гуманизированную молекулу антитела. Тяжелые и легкие цепи молекулы антитела против PD-L1 могут быть полноразмерными (например, антитело может включать по меньшей мере одну, и предпочтительно две полных тяжелых цепи, и по меньшей мере одну, и предпочтительно две полных тяжелых цепи) или могут включать антигенсвязывающий фрагмент (например, Fab, F(ab')2, Fv, одноцепочечный Fv-фрагмент, однодоменое антитело, диантитело (dAb), двухвалентное антитело или биспецифическое антитело, или их фрагмент, их однодоменный вариант или антитело животного семейства верблюжьих).
В определенных вариантах осуществления молекула антитела
против PD-L1 имеет форму биспецифической или мультиспецифической
молекулы антитела. В одном варианте осуществления
биспецифическая молекула антитела имеет первую специфичность
связывания в отношении PD-L1 и вторую специфичность связывания в
отношении TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3
и/или СЕАСАМ-5), PD-1 или PD-L2. В одном варианте осуществления
биспецифическая молекула антитела связывается с PD-L1 и TIM-3. В
другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела
связывается с PD-L1 и LAG-3. В другом варианте осуществления
биспецифическая молекула антитела связывается с PD-L1 и СЕАСАМ
(например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5). В другом варианте
осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с
PD-L1 и СЕАСАМ-1. В другом варианте осуществления
биспецифическая молекула антитела связывается с PD-L1 и СЕАСАМ-
5. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула
антитела связывается с PD-L1 и PD-1. В другом варианте
осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с
PD-L1 и PD-L2. Любую комбинацию вышеупомянутых молекул можно
получать в виде мультиспецифической молекулы антитела, например,
триспецифического антитела, которое включает первую
специфичность связывания в отношении PD-L1 и вторую и третью специфичность связывания в отношении одного или нескольких из: TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5), PD-1 или PD-L2. В некоторых вариантах осуществления вторая и/или третья специфичность связывания в отношении TIM-3, LAG-3 и/или PD-1 вовлекает аминокислотную последовательность или кодируется нуклеотидной последовательностью, как описано в настоящем описании (например, как описано в разделе под названием "Ингибиторы молекул иммунной точки контроля", начинающемся на стр.218 настоящего описания ниже (включая все публикации, упомянутые в нем).
В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с биспецифической молекулой, содержащей одно или несколько из: TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ
(например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5), PD-1 или PD-L2. В одном варианте осуществления биспецифическая молекула антитела, используемая в комбинации, связывается с СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5) и LAG-3. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела, используемая в комбинации, связывается с СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5) и TIM-3. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела, используемая в комбинации, связывается с LAG-3 и TIM-3.
В других вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 имеет константную область тяжелой цепи (Fc), выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgAl, IgA2, IgD и IgE; в частности, выбранную, например, из константных областей IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4, более конкретно, константной области тяжелой цепи IgGl или IgG2
(например, IgGl, IgG2 или IgG4 человека). В одном варианте осуществления константная область тяжелой цепи представляет собой IgGl человека. В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 имеет константную область легкой цепи, выбранную, например, из константных областей легкой цепи каппа или лямбда, предпочтительно каппа (например, каппа человека). В одном варианте осуществления константная область является
измененной, например, мутантной, для модификации свойств молекулы антитела против PD-L1 (например, для повышения или снижения одного или нескольких из: связывания Fc-рецептора, гликозилирования антитела, количества остатков цистеина, функции эффекторных клеток или функции комплемента). Например, константная область является мутантной в положениях 296 (с М на Y) , 298 (с S на Т) , 300 (с Т на Е), 477 (с Н на К) и 478 (с N на F) для изменения связывания Fc-рецептора (например, мутантные положения соответствуют положениям 132 (с М на Y) , 134 (с S на Т) , 136 (с Т на Е) , 313 (с Н на К) и 314 (с N на F) SEQ ID NO: 212 или 214; или положениям 135 (с М на Y), 137 (с S на Т), 139
(с Т на Е), 316 (с Н на К) и 317 (с N на F) SEQ ID NO: 215, 216, 217 или 218). В другом варианте осуществления константная область тяжелой цепи IgG4, например, IgG4 человека, является мутантной в положении 22 8 (например, с S на Р) , например, как показано в таблице 3. В определенных вариантах осуществления молекулы антител против PD-L1 содержат IgG4 человека, являющийся мутантным в положении 22 8 (например, с S на Р) , например, как показано в таблице 3; и константную область легкой цепи каппа, например, как показано в таблице 3. В другом варианте осуществления константная область тяжелой цепи IgGl, например, IgGl человека, является мутантной в одном или нескольких из положения 297 (например, с N на А), положения 265 (например, с D на А), положения 329 (например, с Р на А), положения 234
(например, с L на А) или положения 2 35 (например, с L на А) , например, как показано в таблице 3. В определенных вариантах осуществления молекулы антител против PD-L1 содержат IgGl человека, являющийся мутантным в одном или нескольких из вышеупомянутых положений, например, как показано в таблице 3; и константную область легкой цепи каппа, например, как показано в таблице 3.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 является выделенной или рекомбинантной.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 представляет собой гуманизированную молекулу антитела.
Также изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты,
которая содержит одну или обе нуклеотидных последовательности,
которые кодируют вариабельные области, CDR, гипервариабельные
петли, каркасные области молекул антител против PD-L1 тяжелой и
легкой цепей, как описано в настоящем описании. В определенных
вариантах осуществления нуклеотидная последовательность, которая
кодирует молекулу антитела против PD-L1, является кодон-
оптимизированной. Например, изобретение относится к первой и
второй нуклеиновой кислоте, кодирующим вариабельные области
тяжелой и легкой цепей, соответственно, молекулы антитела против
PD-L1, выбранной из одного или нескольких, например, любого из
BAP058-hum01, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-
hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09,
BAP058-humlO, BAP058-huml1, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-
huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K,
BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-
0, как обобщенно представлено в таблице 1, или
последовательность по существу, идентичную им. Например,
нуклеиновая кислота может включать нуклеотидную
последовательность, как указано в таблицах 1 и 2, или последовательность, по существу идентичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей или которая отличается не более чем на 3, б, 15, 30 или 45 нуклеотидов от последовательностей, представленных в таблицах 1 и 2).
В других вариантах осуществления молекула нуклеиновой
кислоты содержит нуклеотидную последовательность, которая
кодирует вариабельный домен тяжелой цепи и/или константную
область тяжелой цепи, содержащие аминокислотную
последовательность BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, ВАР058-С1опе-М, BAP058-Clone-N или ВАР058-С1опе-О; или как описано в таблице 1; или нуклеотидную последовательность, представленную в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В других вариантах осуществления молекула нуклеиновой
кислоты содержит нуклеотидную последовательность, которая
кодирует вариабельный домен легкой цепи и/или константную
область легкой цепи, содержащие аминокислотную
последовательность BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, ВАР058-С1опе-М, BAP058-Clone-N или ВАР058-С1опе-О; или как описано в таблице 1; или нуклеотидную последовательность, представленную в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную) любой из вышеуказанных последовательностей.
Вышеупомянутые нуклеотидные последовательности, кодирующие вариабельный домен тяжелой и легкой цепей антитела против PD-L1 и константные области, может присутствовать в отдельной молекуле нуклеиновой кислоты или в той же самой молекуле нуклеиновой кислоты. В определенных вариантах осуществления молекулы нуклеиновых кислот содержат нуклеотидную последовательность, кодирующую лидерную последовательность.
В определенных вариантах осуществления молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельных петли из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, как указано в таблице 1, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей, и/или имеющую одну, две, три или более замен, инсерций или делеций, например, консервативных замен).
В другом варианте осуществления молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельных петли из вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, как указано в таблице 1, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одну, две, три или более замен, инсерций или делеций, например, консервативных
замен) .
В другом варианте осуществления молекула нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR или гипервариабельных петель из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, имеющих аминокислотную последовательность, как указано в таблице 1, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одну, две, три или более замен, инсерций или делеций, например, консервативных замен).
В другом варианте осуществления молекула нуклеиновой кислоты включает одну или несколько каркасных областей тяжелой цепи (например, любую из VHFW1 (тип а) , VHFW1 (тип b) , VHFW1 (тип с) , VHFW1 (тип d) , VHFW2 (тип а) , VHFW2 (тип а') , VHFW2 (тип b) , VHFW2 (тип с), VHFW2 (тип d) , VHFW2 (тип e),VHFW3 (тип а), VHFW3 (тип b) , VHFW3 (тип с) , VHFW3 (тип d) , VHFW3 (тип е) или VHFW4, или любую их комбинацию, например, комбинацию каркасных областей, как описано в настоящем описании) любого из ВАР058-humOl, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N или BAP058-Clone-0, как обобщенно представлено в таблице 1 и 2, или последовательность, по существу идентичную им. Например, молекула нуклеиновой кислоты может содержать нуклеотидную последовательность, как указано в таблицах 1 и 2, или последовательность, по существу идентичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей или которая отличается не более чем на 3, б, 15, 30 или 45 нуклеотидов от последовательностей, представленных в таблицах 1 и 2).
В другом варианте осуществления молекула нуклеиновой кислоты включает одну или несколько каркасных областей легкой
цепи (например, любую из VLFW1 (тип а) , VLFW1 (тип b) , VLFW1 (тип с), VLFW1 (тип d), VLFW1 (тип е), VLFW1 (тип f), VLFW2 (тип а) , VLFW2 (тип с) , VLFW3 (тип а) , VLFW3 (тип b) , VLFW3 (тип с) , VLFW3 (тип d) , VLFW3 (тип е) , VLFW3 (тип f) , VLFW3 (тип д) или VLFW4, или любую их комбинацию, например, комбинацию каркасных областей, как описано в настоящем описании) любого из ВАР058-humOl, BAP058-hum02, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum05, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-hum08, BAP058-hum09, BAP058-humlO, BAP058-humll, BAP058-huml2, BAP058-huml3, BAP058-huml4, BAP058-huml5, BAP058-huml6, BAP058-huml7, BAP058-Clone-K, BAP058-Clone-L, BAP058-Clone-M, BAP058-Clone-N, или BAP058-Clone-O, как обобщенно представлено в таблице 1 и 2, или последовательность по существу, идентичную им. Например, молекула нуклеиновой кислоты может содержать нуклеотидную последовательность, как указано в таблицах 1 и 2, или последовательность, по существу идентичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей или которая отличается не более чем на 3, б, 15, 30 или 45 нуклеотидов от последовательностей, представленных в таблицах 1 и 2).
В другом варианте осуществления молекула нуклеиновой кислоты включает одну или несколько каркасных областей тяжелой цепи и одну или несколько каркасных областей легкой цепи, как описано в настоящем описании. Каркасные области тяжелой и легкой цепей могут присутствовать в одном и том же векторе или в различных векторах.
В другом аспекте заявка относится к клеткам-хозяевам и векторам, содержащим нуклеиновые кислоты, описанные в настоящем описании. Нуклеиновые кислоты могут находиться в одном векторе или в различных векторах, находящихся в одной клетке-хозяине или в отдельных клетках-хозяевах. Клетка-хозяин может представлять собой эукариотическую клетку, например, клетку млекопитающих, клетку насекомых, клетку дрожжей или прокариотическую клетку, например, Е. coli. Например, клетка млекопитающих может представлять собой культивируемую клетку или клеточную линию. Иллюстративные клетки млекопитающих включают лимфоцитарные
клеточные линии (например, NSO), клетки яичника китайского хомячка (СНО), клетки COS, ооциты и клетки трансгенного животного, например, эпителиальную клетку молочной железы.
В одном аспекте изобретение относится к способу предоставления молекулы антитела, описанной в настоящем описании. Способ включает предоставление антигена PD-L1 (например, антиген, содержащий по меньшей мере часть эпитопа PD-L1); получение молекулы антитела, которая специфически связывается с полипептидом PD-L1; и оценку того, связывается ли молекула антитела специфически с полипептидом PD-L1, или оценку эффективности молекулы антитела в отношении модулирования, например ингибирования, активности PD-L1. Кроме того, способ может включать введение молекулы антитела индивидууму, например, человеку или не являющемуся человеком животному.
В другом аспекте изобретение относится к композициям,
например фармацевтическим композициям, которые включают
фармацевтически приемлемый носитель, эксципиент или
стабилизатор, и по меньшей мере одну из молекул антител против PD-L1, описанных в настоящем описании. В одном варианте осуществления композиция, например, фармацевтическая композиция, включает комбинацию молекулы антитела и одного или нескольких средств, например, лекарственного средства или другой молекулы антитела, как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления молекула антитела конъюгирована с меткой или лекарственным средством.
Молекулы антител против PD-L1, описанные в настоящем описании, могут ингибировать, снижать или нейтрализовывать один или несколько видов активности PD-L1, что приводит к блокаде или уменьшению активности иммунной точки контроля. В одном варианте осуществления молекула антитела приводит к одному или нескольким из: увеличение уровня инфильтрирующих опухоль лимфоцитов, увеличение опосредуемой Т-клеточным рецептором пролиферации, снижение иммунного ускользания злокачественных клеток, восстановление функции эффекторных клеток (например, одной или нескольких из пролиферации Т-клеток, секреции IFN-y или
цитолитической функции), ингибирование функции регуляторных Т-клеток или эффекта на активность множества типов клеток, таких как регуляторные Т-клетки, эффекторные Т-клетки и NK-клетки). Таким образом, такие молекулы антител можно использовать для лечения или предупреждения нарушений, при которых является желательным усиление иммунного ответа у индивидуума. Применение молекул антител против PD-L1
Таким образом, в другом аспекте предусматривается способ модулирования иммунного ответа у индивидуума. Способ включает введение индивидууму молекулы антитела против PD-L1, описанной в настоящем описании (например, терапевтически эффективного количества молекулы антитела против PD-L1), отдельно или в комбинации с одним или несколькими средствами или процедурами, так чтобы происходило модулирование иммунного ответа у индивидуума. В одном варианте осуществления молекула антитела усиливает, стимулирует или увеличивает иммунный ответ у индивидуума. Индивидуумом может быть млекопитающее, например, примат, предпочтительно высший примат, например, человек (например, пациент, имеющий или обладающий риском наличия нарушения, описанного в настоящем описании). В одном варианте осуществления индивидуум нуждается в усилении иммунного ответа. В одном варианте осуществления индивидуум имеет или имеет риск наличия нарушения, описанного в настоящем описании, например, злокачественной опухоли или инфекционного нарушения, как описано в настоящем описании. В определенных вариантах осуществления индивидуум представляет собой индивидуума с иммунодефицитом или имеет риск наличия иммунодефицита. Например, индивидуум подвергается или подвергался химиотерапевтическому лечению и/или лучевой терапии. Альтернативно или в комбинации, индивидуум имеет иммунодефицит в результате инфекции или имеет риск его наличия.
В одном аспекте предусматривается способ лечения (например, один или несколько из снижения, ингибирования или замедления прогрессирования) злокачественной опухоли или новообразования у индивидуума. Способ включает введение индивидууму молекулы антитела против PD-L1, описанной в настоящем описании, например,
терапевтически эффективного количества молекулы антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с одним или несколькими средствами или методиками. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с модулятором костимулирующей молекулы (например, агонистом костимулирующей молекулы) или модулятором ингибиторной молекулы (например, ингибитором ингибитора иммунной точки контроля), например, как описано в настоящем описании.
В определенных вариантах осуществления злокачественная
опухоль, которую лечат молекулой антитела против PD-L1,
включает, но не ограничивается ими, солидную опухоль,
гематологическую злокачественную опухоль (например, лейкоз,
лимфома, миелома, например множественная миелома) и
метастатический очаг. В одном варианте осуществления
злокачественная опухоль представляет собой солидную опухоль.
Примеры солидных опухолей включают злокачественные
новообразования, например, саркомы и карциномы, например
аденокарциномы и карциномы различных систем органов, такие как
аденокарциномы и карциномы легкого, молочной железы, яичника,
лимфоидной системы, желудочно-кишечного тракта (например,
толстого кишечника), анальной области, гениталий и мочеполовых
путей (например, почки, уротелия, клеток мочевого пузыря,
предстательной железы), глотки, ЦНС (например, головного мозга,
нейронных или глиальных клеток), головы и шеи, кожи (например,
меланома), рак носоглотки, например, дифференцированную или
недифференцированную метастазирующую или локально рецидивирующую
карциному носоглотки), и поджелудочной железы, а также
аденокарциномы, которые включают злокачественные
новообразования, такие как рак толстого кишечника, рак прямой кишки, почечно-клеточная карцинома, рак печени, немелкоклеточный рак легкого, рак тонкого кишечника и рак пищевода. Злокачественная опухоль может представлять собой злокачественную опухоль на ранней, промежуточной или поздней стадии, или метастазирующую злокачественную опухоль.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль выбрана из рака легкого (например, немелкоклеточного рака
легкого (NSCLC) (например, NSCLC с плоскоклеточной и/или неплоскоклеточной гистологией, или аденокарцинома NSCLC)), меланомы (например, распространенной меланомы), рака почки (например, почечноклеточного рака), рака печени, миеломы (например, множественной миеломы), рака предстательной железы, рака молочной железы (например, рака молочной железы, который не экспрессирует один, два или все из рецептора эстрогена, рецептора прогестерона или Her2/neu, например, тройного отрицательного рака молочной железы) , рака ободочной и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака головы и шеи (например, плоскоклеточной карциномы головы и шеи (HNSCC)), рака анального канала, рака желудка и пищевода, рака щитовидной железы, рака шейки матки, лимфопролиферативного заболевания (например, посттрансплантационного лимфопролиферативного заболевания) или гематологической злокачественной опухоли, Т-клеточной лимфомы, В-клеточной лимфомы, неходжкинской лимфомы или лейкоза (например, миелоидного лейкоза или лимфоидного лейкоза).
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль выбрана из карциномы (например, распространенной или метастазирующей карциномы) , меланомы или карциномы легкого, например, немелкоклеточной карциномы легкого.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой лимфому, например, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжскинскую лимфому.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак молочной железы, например, метастазирующий рак молочной железы.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой лейкоз, например, хронический миелогенный лейкоз.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак головы и шеи, например, плоскоклеточную карциному головы и шеи (HNSCC).
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой миелодиспластический синдром.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль
представляет собой рак мочевого пузыря (например, карциному переходных клеток).
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак толстого кишечника.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак легкого, например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), например, NSCLC стадии IV или рецидивирующую NSCLC, аденокарциному NSCLC или плоскоклеточную карциному NSCLC или мелкоклеточный рак легкого.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак кожи, например, меланому (например, меланому стадии III или IV) или карциному из клеток Меркеля. В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой меланому, например, распространенную меланому. В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой распространенную или нерезектабельную меланому, которая не отвечает на другие способы терапии. В других вариантах осуществления злокачественная опухоль представляет собой меланому с мутацией BRAF (например, с мутацией V600 BRAF). В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят после лечения антителом против CTLA-4 (например, ипилимумабом) с ингибитором BRAF (например, вемурафенибом или дабрафенибом) или без него.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой гепатокарциному, например распространенную гепатокарциному, с вирусной инфекцией, например хроническим вирусным гепатитом, или без нее.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак предстательной железы, например, распространенный рак предстательной железы.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой миелому, например множественную миелому.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак почки, например, почечноклеточный рак (RCC) (например, метастазирующий RCC или светлоклеточный почечноклеточный рак (CCRCC), например, распространенный или
метастазирующий светлоклеточный почечноклеточный рак).
В одном варианте осуществления микроокружение
злокачественной опухоли имеет повышенный уровень экспрессии PD-L1. Альтернативно или в комбинации, микроокружение злокачественной опухоли может иметь увеличенную экспрессию IFNy и/или CD8. В одном варианте осуществления, альтернативно или в комбинации, индивидуум имеет повышенный уровень экспрессии Bim (например, в PD-1+ CD8+ Т-клетках по сравнению с PD-1- CD8+ Т-клетками).
В некоторых вариантах осуществления индивидуум имеет или идентифицирован как имеющий опухоль, которая имеет один или несколько из высокого уровня или экспрессии PD-L1, или как являющийся положительным по инфильтрирующим опухоль лимфоцитам (TIL+) (например, как имеющий увеличенное количество TIL), или имеющий оба из этих признаков. В определенных вариантах осуществления индивидуум имеет или идентифицирован как имеющий опухоль, которая имеет высокий уровень или экспрессию PD-L1 и которая является TIL+. В некоторых вариантах осуществления способы, описанные в настоящем описании, кроме того, включают идентификацию индивидуума на основе наличия опухоли, которая имеет один или несколько из высокого уровня или экспрессии PD-L1 или является TIL+, или имеет оба из этих признаков. В определенных вариантах осуществления способы, описанные в настоящем описании, кроме того. включают идентификацию индивидуума на основе наличия опухоли, которая имеет высокий уровень или экспрессию PD-L1 и является TIL+. В некоторых вариантах осуществления опухоли, которые являются TIL+, являются положительными по CD8 и IFNy. В некоторых вариантах осуществления индивидуум имеет или идентифицирован как имеющий высокий процент клеток, которые являются положительными в отношении одного, двух или более из PD-L1, CD8, и/или IFNy. В определенных вариантах осуществления индивидуум имеет или идентифицирован как имеющий высокий процент клеток, которые являются положительными по всем из PD-L1, CD8 и IFNy. Индивидуум может быть идентифицирован до, в процессе или после проведения терапии, например, терапии
молекулой антитела против PD-L1 и/или другой терапии, как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления индивидуума идентифицируют до проведения терапии, например терапии, как описано в настоящем описании (например, перед началом терапии или в период между лечениями).
В некоторых вариантах осуществления способы, описанные в настоящем описании, кроме того, включают идентификацию индивидуума на основе наличия высокого процента клеток, которые являются положительными по одному, двум или более из PD-L1, CD8 и/или IFNy. В определенных вариантах осуществления способы, описанные в настоящем описании, кроме того, включают идентификацию индивидуума на основе наличия высокого процента клеток, которые являются положительными в отношении всех из PD-Ll, CD8 и IFNy. В некоторых вариантах осуществления индивидуум имеет или идентифицирован как имеющий один, два или несколько из PD-L1, CD8 и/или IFNy, и один или несколько из рака легкого, например, плоскоклеточного рака легкого или аденокарциномы легкого; рака головы и шеи; плоскоклеточного рака шейки матки; рака желудка; рака пищевода; рака щитовидной железы; меланомы и/или рака носоглотки (NPC). В определенных вариантах осуществления способы, описанные в настоящем описании кроме того, включают идентификацию индивидуума на основе наличия одного, двух или нескольких из PD-L1, CD8 и/или IFNy, и одного или нескольких из рака легкого, например, плоскоклеточного рака легкого или аденокарциномы легкого; рака головы и шеи; плоскоклеточного рака шейки матки; рака желудка; рака пищевода; рака щитовидной железы; меланомы и/или рака носоглотки. Индивидуум может быть идентифицирован до, в процессе или после проведения терапии, например, терапии молекулой антитела против PD-L1 и/или другой терапии, как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления индивидуума идентифицируют до проведения терапии, например, терапии, как описано в настоящем описании (например, перед началом терапии или в период между лечениями).
Способы и композиции, описанные в настоящем описании,
являются пригодными для лечения метастазирующих очагов, ассоциированных с вышеупомянутыми злокачественными опухолями.
В следующем аспекте изобретение относится к способу лечения инфекционного заболевания у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества молекулы антитела против PD-L1, описанной в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими средствами, или методиками. В одном варианте осуществления инфекционное заболевание выбрано из гепатита (например, инфекции гепатитом С) или сепсиса.
Кроме того, изобретение относится к способу усиления иммунного ответа на антиген у индивидуума, включающему введение индивидууму: (i) антигена; и (ii) молекулы антитела против PD-L1, так чтобы происходило усиление иммунного ответа на антиген у индивидуума. Антиген может представлять собой, например, опухолевый антиген, вирусный антиген, бактериальный антиген или антиген из патогена.
Молекулу антитела против PD-L1 можно вводить индивидууму
системно (например, перорально, парентерально, подкожно,
внутривенно, ректально, внутримышечно, внутрибрюшинно,
интраназально, трансдермально или путем ингаляции или внутриполостного вливания), местным путем или путем нанесения на слизистые оболочки, такие как слизистые оболочки носа, горла и бронхиальных трубок.
Дозировки и терапевтические режимы для молекулы антитела против PD-L1 могут быть определены квалифицированным специалистом. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят путем инъекции (например, подкожно или внутривенно) в дозе приблизительно от 1 до 3 0 мг/кг, например, приблизительно от 5 до 25 мг/кг, приблизительно от 10 до 20 мг/кг, приблизительно от 1 до 5 мг/кг или приблизительно 3 мг/кг. Схема дозирования может варьироваться от, например, одного раза в неделю до одного раза в 2, 3 или 4 недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в дозе приблизительно от 10 до 2 0 мг/кг раз в две недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят,
отдельно или в комбинации (например, в комбинации с молекулой антитела против LAG-3), в дозе менее чем или приблизительно 5 мг/кг; менее чем или приблизительно 4 мг/кг; менее чем или приблизительно 3 мг/кг; менее чем или приблизительно 2 мг/кг; менее чем или приблизительно 1 мг/кг раз в две недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в дозе от 1 до 5 мг/кг раз в две недели; от 1 до 4 мг/кг раз в две недели, от 1 до 3 мг/кг раз в две недели или от 1 до 2 мг/кг раз в две недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела против LAG-3 вводят, отдельно или в комбинации (например, в комбинации с молекулой антитела против PD-L1) в дозе от 1 до 5 мг/кг раз в две недели; от 1 до 4 мг/кг раз в две недели, от 1 до 3 мг/кг раз в две недели или от 1 до 2 мг/кг раз в две недели.
Молекулы антител, описанные в настоящем описании, можно использовать в способах, описанных в настоящем описании, хотя можно использовать другие антитела против PD-L1 вместо или в комбинации с молекулой антитела против PD-L1 по изобретению.
Комбинированная терапия
Способы и композиции, описанные в настоящем описании, можно использовать в комбинации с другими средствами или способами терапии. В одном варианте осуществления способы, описанные в настоящем описании, включают введение индивидууму молекулы антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, в комбинации со средством, или терапевтической процедурой, или способом терапии, в количестве, эффективном для лечения или предупреждения нарушения. Введение молекулы антитела против PD-L1 и введение терапевтических средств или проведение терапевтических процедур или способов терапии можно осуществлять одновременно или последовательно в любом порядке. Можно использовать любую комбинацию и последовательность молекул антител против PD-L1 и других средств, процедур или способов лечения (например, как описано в настоящем описании). Введение молекулы антитела против PD-L1 и/или введение других терапевтических средств или проведение терапевтических процедур или способов терапии можно осуществлять в периоды активного
нарушения или в период ремиссии или менее активного заболевания. Молекулу антитела против PD-L1 можно вводить до другого лечения, одновременно с лечением, после лечения или в ходе ремиссии нарушения.
В определенных вариантах осуществления способы и композиции, описанные в настоящем описании, вводят в комбинации с одним или несколькими другими молекулами антитела, химиотерапией, другим средством против злокачественной опухоли
(например, направленная терапия против злокачественной опухоли, генная терапия, вирусная терапия, РНК-терапия, трансплантация костного мозга, нанотерапия или онколитические лекарственные средства), цитотоксическими средствами, иммунной терапией
(например, цитокины или клеточная иммунная терапия), хирургическими процедурами (например, лампэктомия или мастэктомия) или радиационными процедурами, или комбинацией любых из вышеуказанных. Дополнительная терапия может быть в форме адъювантной или неоадъювантной терапии. В некоторых вариантах осуществления дополнительная терапия представляет собой ферментативный ингибитор (например, низкомолекулярный ферментативный ингибитор) или метастатический ингибитор. Иллюстративные цитотоксические средства, которые можно вводить в комбинации, включают антимикротубулиновые средства, ингибиторы топоизомераз, антиметаболиты, ингибиторы митоза, алкилирующие средства, антрациклины, алкалоиды барвинка, интеркалирующие средства, средства, способные препятствовать каскаду передачи сигнала, средства, которые стимулируют апоптоз, ингибиторы протеасом и лучевую терапию (например, локальное облучение или облучение всего организма (например, облучение гамма-излучением) ) . В других вариантах осуществления дополнительная терапия представляет собой хирургическую операцию или лучевую терапию, или их комбинацию. В других вариантах осуществления дополнительная терапия представляет собой терапию, нацеленную на один или несколько из каскадов PI3K/AKT/mT0R, ингибитор HSP90 или ингибитор тубулина.
Альтернативно или в комбинации с вышеуказанными комбинациями, проведение способов и введение композиций,
описанных в настоящем описании, можно осуществлять в комбинации с одним или несколькими из: иммуномодуляторов (например, активатор костимулирующей молекулы или ингибитор ингибиторной молекулы, например, молекулы контрольной точки иммунного ответа); вакцины, например, терапевтической вакцины против злокачественной опухоли; или других форм клеточной иммунотерапии.
Иллюстративные неограничивающие комбинации и применения молекул антител против PD-L1 включают следующие.
В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с модулятором костимулирующей молекулы или ингибиторной молекулы, например, коингибирующего лиганда или рецептора.
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с модулятором, например агонистом, костимулирующей молекулы. В одном варианте осуществления агонист костимулирующей молекулы выбран из агониста (например, антитело-агонист или его антигенсвязывающий фрагмент, или растворимая слитая конструкция) 0X4 О, CD2, CD2 7, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CDlla/CD18), ICOS (CD278), 4-1ВВ (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или лиганда CD83.
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с ингибитором ингибиторной молекулы (или ингибитором контрольной точки иммунного ответа), выбранной из PD-1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2В4 и/или TGFR-бета. Ингибирование ингибиторной молекулы может быть осуществлено посредством ингибирования на уровне ДНК, РНК или белка. В вариантах осуществления ингибиторную нуклеиновую кислоту (например, дцРНК, миРНК или кшРНК) можно использовать для ингибирования экспрессии ингибиторной молекулы. В других вариантах осуществления ингибитор ингибиторного сигнала представляет собой полипептид, например, растворимый лиганд, или антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые связываются с ингибиторной молекулой. В одном варианте
осуществления ингибитор представляет собой растворимый лиганд (например, CTLA-4-Ig), или антитело или фрагмент антитела, которые связываются с PD-1, PD-L2 или CTLA-4. Например, молекулу антитела против PD-L1 можно вводить в комбинации с антителом против CTLA-4, например, ипилимумабом, например, для лечения злокачественной опухоли (например, злокачественная опухоль, выбранная из: меланомы, например, метастазирующей меланомы; рака легкого, например, немелкоклеточной карциномы легких; или рака предстательной железы). В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-1 вводят после лечения антителом против CTLA-4 (например, ипилимумабом) с ингибитором BRAF (например, вемурафениб или дабрафениб) или без него.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с антителом против LAG-3 или его антигенсвязывающим фрагментом.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с антителом против TIM-3 или его антигенсвязывающим фрагментом.
В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с антителом против LAG-3 и антителом против TIM-3 (или его антигенсвязывающими фрагментами).
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5), например, молекулой антитела против СЕАСАМ. В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ-1, например, молекулой антитела против СЕАСАМ-1. В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ-5, например, молекулой антитела против СЕАСАМ-5.
Комбинацию антител, описанных в настоящем описании, можно вводить отдельно, например, в качестве отдельных антител или их антигенсвязывающих фрагментов, или в связанном состоянии, например, в качестве биспецифической или триспецифической молекулы антитела. В одном варианте осуществления вводят биспецифическое антитело, которое включает молекулу антитела
против PD-L1 и антитело против TIM-3, против СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5) или против LAG-3, или его антигенсвязывающий фрагмент. В определенных вариантах осуществления комбинацию антител, описанных в настоящем описании, используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, солидная опухоль или гематологическая злокачественная опухоль).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела
(например, моно-, би- или триспецифическое антитело) для TIM-3,
LAG-3 и/или PD-1, используемая в любом из способов и композиций,
описанных в настоящем описании, включает аминокислотную
последовательность, или она кодируется нуклеотидной
последовательностью, как описано в настоящем описании (например, как описано в разделе под названием "Ингибиторы молекул иммунной точки контроля", начинающемся на стр.218 настоящего описания ниже (включая все публикации, упоминаемые в нем).
В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с цитокином. Цитокин можно вводить в качестве слитой конструкции с молекулой антитела против PD-L1 или в качестве отдельных композиций. В одном варианте осуществления антитело против PD-L1 вводят в комбинации с одним, двумя, тремя или более цитокинами, например, в качестве слитой молекулы или в качестве отдельных композиций. В одном варианте осуществления цитокин представляет собой интерлейкин (IL), выбранный из одного, двух, трех или более из IL-1, IL-2, IL-15 или IL-21. В определенных вариантах осуществления комбинацию молекулы антитела против PD-L1 и цитокина, описанного в настоящем описании, используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, солидная опухоль).
В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с антителом, специфичным к HLA С, например, антителом, специфичным к иммуноглобулин-подобным рецепторам киллерных клеток (также обозначаемым как "антитело против KIR"). В определенных вариантах осуществления комбинацию
молекулы антитела против PD-L1 и антитела против KIR используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, солидная опухоль, например, распространенная солидная опухоль).
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с клеточной иммунотерапией (например,
Provenge(r) (например, Sipuleucel-T)) и необязательно в комбинации с циклофосфамидом. В определенных вариантах осуществления комбинацию молекулы антитела против PD-L1, Provenge(r) и/или циклофосфамида используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, рак предстательной железы, например, распространенной рак предстательной железы).
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с вакциной, например, вакциной против злокачественной опухоли (например, вакцина на основе дендритных клеток против карциномы почки (DC-RCC)). В одном варианте осуществления вакцина является основанной на пептиде, основанной на ДНК, основанной на РНК или основанной на антигене, или их комбинацией. В вариантах осуществления вакцина содержит один или несколько пептидов, нуклеиновых кислот (например, ДНК или РНК) , антигенов или их комбинацию. В определенных вариантах осуществления комбинацию молекулы антитела против PD-L1 и вакцины DC-RCC используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, карцинома почки, например, метастазирующий почечноклеточный рак (RCC) или светлоклеточный почечноклеточный рак (CCRCC)).
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с адъювантом.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с химиотерапией и/или иммунотерапией. Например, молекулу антитела против PD-L1 можно использовать для лечения миеломы, отдельно или в комбинации с одним или несколькими из: химиотерапевтических или других средств против
злокачественной опухоли (например, аналоги талидомида, например,
леналидомид), антитела против TIM-3, обработанных опухолевым
антигеном дендритных клеток, слитых (например, посредством
электрослияния) опухолевых клеток и дендритных клеток, или
вакцинации идиотипом иммуноглобулина, продуцируемым
злокачественными плазмацитами. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с антителом против TIM-3 для лечения миеломы, например, множественной миеломы.
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с химиотерапией для лечения рака легкого, например, немелкоклеточного рака легкого. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют со стандартной химиотерапией против рака легкого, например, NSCLC, например, терапией платиновыми дублетами, для лечения рака легкого. В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с ингибитором индоламин-пиррол-2,3-диоксигеназы (IDO) (например, (4Е)-4-[ (З-хлор-4-фторанилино)нитрозометилиден]-1,2,5-оксадиазол-З-амин (также известный как INCB24360), индоксимод (1-метил-Б-триптофан), ос-циклогексил-5Н-имидазо[5,1-а]изоиндол-5-этанол (также известный как NLG919), и т.д.)) у индивидуума с распространенной или метастазирующей злокачественной опухолью (например, пациент с метастазирующей и рецидивирующей злокачественной опухолью NSCL).
В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с одним или несколькими из: стратегии на иммунной основе (например, интерлейкин-2 или интерферон-а), нацеливающего средства (например, ингибитор VEGF, такой как моноклональное антитело к VEGF); ингибитора тирозинкиназы VEGF, такого как сунитиниб, сорафениб, акситиниб и пазопаниб; ингибитора PHK-i; или ингибитора нижерасположенного медиатора передачи сигнала VEGF, например, ингибитора мишени рапамицина (mTOR) у млекопитающих, например, эверолимуса и темсиролимуса. Любую из таких комбинаций можно использовать для лечения рака почки, например, почечноклеточного рака (RCC)
(например, светлоклеточного почечноклеточного рака (CCRCC)) или метастазирующего RCC.
В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, описанную в настоящем описании, используют в комбинации с ингибитором МЕК (например, ингибитор МЕК, как описано в настоящем описании). В некоторых вариантах осуществления комбинацию антитела против PD-L1 и ингибитора МЕК используют для лечения злокачественной опухоли (например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании). В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль, которую лечат комбинацией, выбрана из меланомы, рака ободочной и прямой кишки, немелкоклеточного рака легкого, рака яичника, рака молочной железы, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы, гематологической злокачественной опухоли или почечноклеточного рака. В определенных вариантах осуществления злокачественная опухоль включает мутацию BRAF (например, мутация V600E BRAF), BRAF дикого типа, KRAS дикого типа или активирующую мутацию KRAS. Злокачественная опухоль может представлять собой злокачественную опухоль на ранней, промежуточной или поздней стадии.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с одним, двумя или всеми из оксалиплатина, лейковорина или 5-FU (например, сопутствующее лечение FOLFOX). Альтернативно или в комбинации, комбинация дополнительно включает ингибитор VEGF (например, ингибитор VEGF, как описано в настоящем описании). В некоторых вариантах осуществления комбинацию антитела против PD-L1, сопутствующего лечения FOLFOX и ингибитора VEGF используют для лечения злокачественной опухоли (например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании). В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль, которую лечат комбинацией, выбрана из меланомы, рака ободочной и прямой кишки, немелкоклеточного рака легкого, рака яичника, рака молочной железы, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы, гематологической злокачественной опухоли или почечноклеточного
рака. Злокачественная опухоль может представлять собой злокачественную опухоль на ранней, промежуточной или поздней стадии.
В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят с ингибитором тирозинкиназы (например, акситиниб) для лечения почечноклеточного рака и других солидных опухолей.
В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят с агентом, нацеленным на рецептор 4-1ВВ (например, антитело, которое стимулирует передачу сигнала через 4-1ВВ (CD-137), например, PF-2566). В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с ингибитором тирозинкиназы (например, акситиниб) и средством, нацеленным на рецептор 4-1ВВ.
Молекула антитела против PD-L1 может быть связана с веществом, например, цитотоксическим средством или частью (например, терапевтическое лекарственное средство; соединение, испускающее радиационное излучение; молекулы растительного, грибного или бактериального происхождения; или биологический белок (например, белковый токсин) или частица (например, рекомбинантная вирусная частица, например, через белок вирусной оболочки)). Например, антитело может быть связано с радиоактивным изотопом, таким как а-, (3- или у-излучатель или |3-и у-излучатель.
Можно использовать любую комбинацию и последовательность молекул антител против PD-L1 и других лекарственных средств, методик или способов лечения (например, как описано в настоящем описании). Введение молекулы антитела и/или других лекарственных средств, проведение методик или способов терапии можно осуществлять в периоды активного нарушения или в период ремиссии или менее активного заболевания. Молекулу антитела можно вводить до другого способа лечения, одновременно с лечением, после лечения или во время ремиссии нарушения.
Дополнительные комбинированные способы терапии Способы и композиции, описанные в настоящем описании (например, антитела против PD-L1 и способы с их использованием)
можно использовать в комбинации с другими средствами или терапевтическими режимами, например, вторым лекарственным средством, выбранным из одного или нескольких средств, приведенных в таблице 6. В одном варианте осуществления способы, описанные в настоящем описании, включают введение индивидууму молекулы антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании
(необязательно в комбинации с одним или несколькими ингибиторами PD-1, PD-L2, LAG-3, TIM-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5), или CTLA-4), кроме того, включают введение второго лекарственного средства, выбранного из одного или нескольких средств, приведенных в таблице б, в количестве, эффективном для лечения или предупреждения нарушения, например, нарушения, как описано в настоящем описании, например, злокачественной опухоли. При введении в комбинации молекулу антитела против PD-L1, дополнительное средство (например, второе или третье средство), или все из них, можно вводить в количестве или дозе, которая превышает, является более низкой или является такой же, как и количество или дозировка каждого средства по отдельности, например, в качестве монотерапии. В определенных вариантах осуществления введенное количество или дозировка антитела против PD-L1, дополнительного средства (например, второе или третье средство) , или всех из них, являются более низкими (например, по меньшей мере на 2 0%, по меньшей мере на 3 0%, по меньшей мере на 4 0% или по меньшей мере на 50%), чем количество или дозировка каждого средства, используемого отдельно, например, в качестве монотерапии. В других вариантах осуществления количество или дозировка антитела против PD-L1, дополнительного средства (например, второе или третье средство) или всех из них, которые приводят к желаемому эффекту (например, лечение злокачественной опухоли) являются более низкими
(например, по меньшей мере на 2 0%, по меньшей мере на 3 0%, по меньшей мере на 4 0% или по меньшей мере на 50% более низкими).
В других вариантах осуществления второе лекарственное средство выбрано из одного или нескольких средств, приведенных в таблице б. В одном варианте осуществления злокачественная опухоль выбрана из рака легкого (например, немелкоклеточный рак
легкого (NSCLC) (например, NSCLC с плоскоклеточной и/или неплоскоклеточной гистологией или аденокарцинома NSCLC)) или описана в публикации, приведенной в таблице 6. В некоторых вариантах осуществления второе лекарственное средство выбрано из одного или нескольких из: 1) ингибитора протеинкиназы С (РКС); 2) ингибитора белка теплового шока 90 (HSP90); 3) ингибитора фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) и/или мишени рапамицина (mTOR); 4) ингибитора цитохрома Р450 (например, ингибитор CYP17 или ингибитор 17-альфа-гидроксилазы/С17-20-лиазы); 5) хелатирующего железо агента; 6) ингибитора ароматазы; 7) ингибитора р53, например, ингибитора взаимодействия p53/Mdm2; 8) индуктора апоптоза; 9) ингибитора ангиогенеза; 10) ингибитора альдостеронсинтазы; 11) ингибитора рецептора smoothened (SMO); 12) ингибитора рецептора пролактина (PRLR); 13) ингибитора передачи сигнала Wnt; 14) ингибитора CDK4/6; 15) ингибитора фибробластного фактора роста рецептор 2 (FGFR2)/фибробластного фактора роста рецептор 4 (FGFR4); 16) ингибитора макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF); 17) ингибитора одного или нескольких из с-KIT, высвобождения гистамина, Flt3 (например, FLK2/STK1) или РКС; 18) ингибитора одного или нескольких из VEGFR-2 (например, FLK-1/KDR), PDGFR-бета, c-KIT или Raf-киназы С; 19) агониста соматостатина и/или ингибитора высвобождения гормона роста; 20) ингибитора киназы анапластической лимфомы (ALK) ; 21) ингибитора рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 (IGF-1R); 22) ингибитора Р-гликопротеина 1; 23) ингибитора рецептора сосудисто-эндотелиального фактора роста (VEGFR); 24) ингибитора киназы BCR-ABL; 25) ингибитора FGFR; 2 6) ингибитора CYP11B2; 27) ингибитора HDM2, например, ингибитора взаимодействия HDM2-p53; 28) ингибитора тирозинкиназы; 29) ингибитора с-МЕТ; 30) ингибитора JAK; 31) ингибитора DAC; 32) ингибитора 1ip-гидроксилазы; 33) ингибитора IAP; 34) ингибитора РШ-киназы; 35) ингибитора поркупина; 36) ингибитора BRAF, например, V60 0E BRAF или BRAF дикого типа; 37) ингибитора HER3; 38) ингибитора МЕК; или 39) ингибитора киназы липидов, например, как описано в настоящем описании и в таблице 6.
В одном варианте осуществления второе лекарственное средство выбрано из одного или нескольких из: соединение А8, соединение А17, соединение А2 3, соединение А2 4, соединение А2 7, соединение А29, соединение АЗЗ и соединение А13.
В других вариантах осуществления второе лекарственное средство выбрано из одного или нескольких из: соединение А5, соединение А8, соединение А17, соединение А2 3, соединение А2 4, соединение А2 9 и соединение А4 0.
В других вариантах осуществления второе лекарственное средство выбрано из одного или нескольких из: соединение А9, соединение А1б, соединение А17, соединение А21, соединение А22, соединение А2 5, соединение А2 8, соединение А4 8 и соединение 49.
В некоторых вариантах осуществления второе лекарственное средство вводят в терапевтической дозе или в дозе ниже терапевтической дозы. В определенных вариантах осуществления концентрация второго лекарственного средства, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, когда второе лекарственное средство вводят в комбинации с молекулой антитела против PD-L1, чем когда второе лекарственное средство вводят индивидуально. В определенных вариантах осуществления концентрация молекулы антитела против PD-L1, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, когда молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с вторым лекарственным средством, чем когда молекулу антитела против PD-L1 вводят индивидуально. В определенных вариантах осуществления при комбинированной терапии, концентрация второго лекарственного средства, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, чем терапевтическая доза второго лекарственного средства в качестве монотерапии, например, на 10-20%, 20-30%, 30-40%, 4050%, 50-60%, 60-70%, 70-80% или 80-90% более низкой. В определенных вариантах осуществления при комбинированной терапии концентрация молекулы антитела против PD-L1, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, чем терапевтическая доза молекулы
Дополнительные признаки и варианты осуществления
Альтернативно или в комбинации со способами, описанными в
настоящем описании, изобретение относится к способу лечения
(например, ингибирования, уменьшения, смягчения или
предупреждения) нарушения, например, гиперпролиферативного состояния или нарушения (например, злокачественной опухоли) у индивидуума. Способ включает введение индивидууму комбинации двух, трех или более лекарственных средств, выбранных из одной, двух или всех из следующих категорий (i)-(iii) : (i) средство, которое усиливает презентацию антигена (например, опухолевого антигена); (ii) средство, которое усиливает ответ эффекторных клеток (например, активация и/или мобилизация В-клеток и/или Т-клеток); или (iii) средство, которое уменьшает иммуносупрессию опухоли, тем самым осуществляя лечение нарушения, например, гиперпролиферативного состояния или нарушения (например, злокачественной опухоли). В некоторых вариантах осуществления комбинация включает ингибитор PD-L1 (например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании). Подвергаемая лечению злокачественная опухоль может представлять собой, например, злокачественную опухоль, описанную в настоящем описании, такую как рак легкого (плоскоклеточный), рак легкого (аденокарцинома), рак головы и шеи, рак шейки матки (плоскоклеточный), рак желудка, рак щитовидной железы, меланома, рак ротоглотки или рак молочной железы.
В другом аспекте изобретение относится к способу снижения активности (например, роста, выживаемости или жизнеспособности, или всех из них), гиперпролиферативной (например, злокачественной) клетки. Способ включает приведение в контакт клетки с комбинацией двух, трех или более лекарственных средств, выбранных из одной, двух или всех из следующих категорий (i)-(iii): (i) средство, которое усиливает презентацию антигена (например, опухолевого антигена); (ii) средство, которое усиливает ответ эффекторных клеток (например, активация и/или
антитела против PD-L1 в качестве монотерапии, например, на 1020%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% или 80-90% более низкой.
мобилизация В-клеток и/или Т-клеток); или (iii) средство, которое уменьшает иммуносупрессию опухоли, тем самым, снижая активность гиперпролиферативной клетки. В некоторых вариантах осуществления комбинация включает ингибитор PD-L1 (например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании). Способ можно выполнять у индивидуума, например, в качестве части терапевтического протокола. Злокачественная клетка может представлять собой, например, клетку злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, такой как рак легкого (плоскоклеточный) , рак легкого (аденокарцинома) , рак головы и шеи, рак шейки матки (плоскоклеточный) , рак желудка, рак щитовидной железы, меланома, рак носоглотки или рак молочной железы.
В определенных вариантах осуществления способов, описанных в настоящем описании, способ, кроме того, включает определение уровня и/или распределения инфильтрата иммунных клеток
(например, Т-клеток) (например, уровня и/или распределения инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL)) у индивидуума. В одном варианте осуществления уровень и/или распределение инфильтрата иммунных клеток определяют in vivo, например, неинвазивным способом (например, путем обнаружения антитела к Т-клеточному маркеру, меченному поддающейся обнаружению меткой, с использованием подходящего способа визуализации, например, сканирования с помощью позитронной эмиссионной томографии
(ПЭТ)). В других вариантах осуществления уровень инфильтрата иммунных клеток определяют в образце (например, биоптате опухоли), полученном от индивидуума (например, с использованием иммуногистохимических способов). В некоторых вариантах осуществления повышенный уровень и/или более широкое распространение TIL в злокачественной опухоли, например, новообразовании (например, относительно эталона или контроля) указывает на лучший прогноз для индивидуума, например, более положительный терапевтический исход. В некоторых вариантах осуществления сниженный уровень и/или менее широкое распространение TIL в злокачественной опухоли, например, новообразовании (например, относительно эталона или контроля)
указывает на худший прогноз у индивидуума, например, более отрицательный терапевтический исход. В некоторых вариантах осуществления эталоном является индивидуум в другой период времени, например, до терапии или на более ранней стадии терапии). В вариантах осуществления, соответствующих низкому уровню или не поддающемуся обнаружению инфильтрату опухоли у индивидуума, вводят одно или несколько средств категорий (i) или
(ii) , или как (i), так и (ii). В других вариантах осуществления,
соответствующих поддающемуся обнаружению уровню или повышенному
уровню инфильтрата опухоли у индивидуума, вводят одно или
несколько средств категории (iii) . Стадии обнаружения также
можно использовать, например, для мониторинга эффективности
лекарственного средства, описанного в настоящем описании.
Например, стадию обнаружения можно использовать для мониторинга
эффективности лекарственных средств категорий (i), (ii) и/или
(iii) •
В другом аспекте изобретение относится к композиции
(например, одной или нескольким композициям или дозированным формам), которая включает комбинацию двух, трех или более лекарственных средств, выбранных из одной, двух или всех из следующих категорий (i)-(iii): (i) средство, которое усиливает презентацию антигена (например, опухолевого антигена); (ii) средство, которое усиливает ответ эффекторных клеток (например, активация и/или мобилизация В-клеток и/или Т-клеток); или (iii) средство, которое уменьшает иммуносупрессию опухоли. В некоторых вариантах осуществления комбинация включает ингибитор PD-L1
(например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании).
В другом аспекте, изобретение относится к композиции
(например, к одной или нескольким композициям или дозированным формам, как описано в настоящем описании), для применения для лечения нарушения, например, злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления композиция для применения включает комбинацию двух, трех или более лекарственных средств, выбранных из одной, двух или всех из следующих категорий (i)-
(iii): (i) средство, которое усиливает презентацию антигена
(например, опухолевого антигена); (ii) средство, которое усиливает ответ эффекторных клеток (например, активация и/или мобилизация В-клеток и/или Т-клеток); или (iii) средство, которое уменьшает иммуносупрессию опухоли. В некоторых вариантах осуществления используемая комбинация включает ингибитор PD-L1 (например, молекулу антитела против PD-L1 как описано в настоящем описании). Злокачественная опухоль может представлять собой, например, злокачественную опухоль, описанную в настоящем описании, такую как рак легкого (плоскоклеточный), рак легкого (аденокарцинома), рак головы и шеи, рак шейки матки (плоскоклеточный), рак желудка, рак щитовидной железы, меланома, рак носоглотки или рак молочной железы.
Также предусматриваются составы, например дозированные составы, и наборы, например терапевтические наборы, которые включают комбинацию двух, трех или более лекарственных средств, выбранных из одной, двух или всех из следующих категорий (i)-(iii): (i) средство, которое усиливает презентацию антигена (например, опухолевого антигена); (ii) средство, которое усиливает ответ эффекторных клеток (например, активация и/или мобилизация В-клеток и/или Т-клеток); или (iii) средство, которое уменьшает иммуносупрессию опухоли, тем самым, снижая ее активность в клетке, и (необязательно) инструкции по применению. В некоторых вариантах осуществления комбинация включает ингибитор PD-L1 (например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании).
Комбинации лекарственных средств, описанных в настоящем описании, включают два или более лекарственных средств, описанных в настоящем описании. Лекарственные средства в комбинации могут принадлежать к одной и той же категории, например, два или более лекарственных средств категории (i), или могут включать по меньшей мере одно средство из двух или более категорий (например, лекарственное средство категории (i) в комбинации с лекарственным средством категории (ii)), как описано ниже. Определенные лекарственные средства могут принадлежать к двум или более категориям из категорий (i)-(iii) . Например, лекарственное средство (например, агонист GITR,
антагонист IDO, ингибитор TGF-b, среди прочих) может выступать в качестве лекарственного средства в нескольких категориях.
В определенных вариантах осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает одно, два, три или более лекарственных средств, которые усиливают презентацию антигена (например, опухолевого антигена) (обозначаемая в настоящем описании как "антигенпрезентирующая комбинация"). В определенных вариантах осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает одно или несколько из: средства, которое усиливает презентацию антигена (например, вакцина, например, вакцина на клеточной или антигенной основе); средства, которое усиливает лизис опухолевых клеток (например, онколитический вирус); средства, которое стимулирует (например, дезингибирует) фагоцит, например, активатор интерферона типа I (IFN) (например, агонист TLR, агонист RIG-I-подобного рецептора (RLR)), и/или средства, которое активирует и/или привлекает дендритную клетку или макрофаг (например, макрофаг I), например, биспецифическое или триспецифическое связывающее клетки средство.
В некоторых вариантах осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает одно, два, три, четыре, пять или более лекарственных средств, выбранных из: (i) агониста стимулятора генов интерферона (агонист STING), (ii) агониста Toll-подобного рецептора (TLR) (например, агонист TLR-3, -4, -5, -7, -8 или -9), (iii) модулятора TIM-3 (например, молекула антитела против TIM-3), (iv) ингибитора рецептора сосудисто-эндотелиального фактора роста (VEGFR), (v) ингибитора с-Met, (vi) ингибитора TGFb (например, антитело против TGFb), (vii) ингибитора IDO/TDO, (viii) антагониста A2AR, (ix) онколитического вируса, (х) вакцины (например, каркасной вакцины), или (xi) биспецифического или триспецифического связывающего клетки средства. В комбинации для презентации антигена можно использовать любые из вышеупомянутых средств (i)-(xi). В одном иллюстративном варианте осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает агонист STING. В другом иллюстративном варианте осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает агонист TLR (например, агонист TLR7). В другом иллюстративном варианте осуществления
антигенпрезентирующая комбинация включает агонист STING и
агонист TLR (например, агонист TLR7). В некоторых вариантах
осуществления антигенпрезентирующая комбинация выбрана из
агониста STING, агониста TLR, антагониста A2AR или
онколитического вируса или их комбинации и, необязательно,
одного или нескольких из (iii)-(vii) или (x)-(xi). В некоторых
вариантах осуществления антигенпрезентирующая комбинация выбрана
из агониста STING или агониста TLR, или комбинации обоих из них
и, необязательно, одного или нескольких из (iii)-(xi). В другом
варианте осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает
агонист STING, агонист TLR (например, агонист TLR7) и модулятор
TIM-3 (например, ингибитор TIM-3). В другом варианте
осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает агонист
STING, агонист TLR (например, агонист TLR7) и ингибитор VEGFR. В
другом варианте осуществления антигенпрезентирующая комбинация
включает агонист STING, агонист TLR (например, агонист TLR7) и
ингибитор с-МЕТ. В других вариантах осуществления
антигенпрезентирующая комбинация включает онколитический вирус.
В других вариантах осуществления антигенпрезентирующая
комбинация включает онколитический вирус и цитокин, например,
онколитический вирус, экспрессирующий один или несколько из GM-
CSF или CSF (например, CSF1 или CSF2) . В некоторых вариантах
осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает
биспецифическое или триспецифическое связывающее клетки
средство, например, биспецифическую или триспецифическую
молекулу антитела к CD4 7 и CD19, с Fc-доменом или без него. В
некоторых вариантах осуществления антигенпрезентирующая
комбинация включает ингибитор TGFb (например, антитело против
TGFb) . В других вариантах осуществления антигенпрезентирующая
комбинация включает ингибитор IDO/TDO. В других вариантах
осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает
антагонист A2AR. В других вариантах осуществления
антигенпрезентирующая комбинация включает вакцину (например, IL-2 в комбинации с MUC1 или вакцина на основе дендритных клеток (например, Provenge(r)) ) . В других вариантах осуществления
антигенпрезентирующая комбинация включает вакцину и агонист TLR (например, агонист TLR, как описано в настоящем описании). В определенном варианте осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает вакцину и агонист STING. В определенном варианте осуществления антигенпрезентирующая комбинация включает вакцину, агонист STING и агонист TLR.
В определенных вариантах осуществления комбинация включает одно, два, три, четыре, пять или более лекарственных средств, которые усиливают ответ эффекторных клеток (обозначаемая в настоящем описании как "комбинация, направленная на эффекторные клетки"). В некоторых вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает активатор лимфоцитов, например, активатор NK-клеток и/или активатор Т-клеток. В некоторых вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, активирует (например, дезингибирует) инфильтрирующие опухоль лимфоциты (TIL), например, NK-клетки или Т-клетки. В некоторых вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает модулятор NK-клеток, выбранный из модулятора (например, молекулы антитела) рецептора NK (например, модулятор одного или нескольких из NKG2A, KIR3DL, NKp46, MICA или СЕACAMI); интерлейкина или варианта интерлейкина (например, цитокин IL-2, IL-15, IL-21, IL-13R или IL-12 или его вариант, или их комбинация); биспецифического или триспецифического связывающего клетки средства (например, биспецифическая молекула антитела против NKG2A и CD138, или биспецифическая молекула антитела против CD3 и TCR) ; терапии NK-клетками; или вакцины, которая включает NK-клетки и антиген/иммуностимулятор. В некоторых вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает иммуномодулятор (например, один или несколько из: активатора костимулирующей молекулы или ингибитора молекулы иммунной точки контроля, как описано в настоящем описании). В некоторых вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает модулятор Т-клеток, выбранный из ингибитора ингибитора точки контроля (например, ингибитор одного
или нескольких из: PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG-3, VISTA, DKG-a, В7-НЗ, В7-Н4, TIGIT, CTLA-4, BTLA, CD160, TIM1, IDO, LAIR1, IL-12 или их комбинации, например, ингибитор PD-1 и TIM-3, или ингибитор PD-1 и LAG-3). В одном варианте осуществления ингибитор ингибитора точки контроля представляет собой молекулу антитела (например, моноспецифическое или биспецифическое антитело или его фрагмент, как описано в настоящем описании). Например, ингибитор ингибитора точки контроля представляет собой молекулу антитела против PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG-3, VISTA, В7-Н4, CTLA-4 или TIGIT, или любую их комбинацию (например, комбинация, как описано в настоящем описании). В некоторых вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает модулятор Т-клеток, выбранный из агониста или активатора костимулирующей молекулы. В одном варианте осуществления агонист костимулирующей молекулы выбран из агониста (например, агонистическое антитело или его антигенсвязывающий, или растворимая слитая конструкция) GITR, ОХ40, ICOS, SLAM (например, SLAMF7), HVEM, LIGHT, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD1la/CDl8), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, CD7, NKG2C, NKp80, CD160, B7-H3 или лиганда CD83. В других вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает биспецифическое связывающее Т-клетки средство (например, биспецифическая молекула антитела, которая связывается с CD3 и опухолевым антигеном (например, EGFR, PSCA, PSMA, ЕрСАМ, HER2, среди прочих).
В некоторых вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает одно, два, три, четыре, пять или более лекарственных средств, выбранных из: (i) модулятора GITR (например, агонист GITR), (ii) ингибитора PD-L1
(например, молекула антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании), (iii) ингибитора PD-1, (iv) ингибитора IAP
(ингибитор апоптотического белка), (v) ингибитора EGFR (рецептор эпидермального фактора роста), (vi) ингибитора мишени рапамицина
(mTOR), (vii) IL-15 или его варианта, (viii) ингибитора CTLA-4,
(ix) биспецифического связывающего Т-клетки средства (например, биспецифическая молекула антитела, которая связывается с CD3 и опухолевым антигеном (например, EGFR, PSCA, PSMA, ЕрСАМ, HER2, среди прочих), (х) агониста CD40 (например, молекула антитела против CD40), (xi) агониста ОХ40 (например, молекула антитела против ОХ40) или (xii) агониста CD27 (например, молекула антитела против CD27). В комбинации, направленной на эффекторные клетки, можно использовать любую комбинацию вышеупомянутых средств. В одном иллюстративном варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист GITR. В другом варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает ингибитор PD-L1 (например, молекула антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании). В другом варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает ингибитор PD-1. В других вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист GITR и ингибитор PD-L1
(например, молекула антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании). В других вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист GITR и ингибитор PD-1. В других вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист GITR, ингибитор PD-L1 (например, молекула антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании) и ингибитор PD-1. В других вариантах осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает ингибитор PD-L1 (например, молекула антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании) и ингибитор PD-1. В одном варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист GITR и ингибитор IAP. В другом варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист GITR и ингибитор ингибитора EGFR. В другом варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист GITR и ингибитор ингибитора mTOR. В одном варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает IL-15 или его вариант. В одном варианте осуществления комбинация, направленная
на эффекторные клетки, включает ингибитор CTLA-4. В одном варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает биспецифическое связывающее Т-клетки средство
(например, биспецифическая молекула антитела, которая связывается с CD3 и опухолевым антигеном (например, EGFR, PSCA, PSMA, ЕрСАМ, HER2, среди прочих). В одном варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист CD4 0 (например, молекула антитела против CD4 0). В одном варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист 0X40 (например, молекула антитела против 0X40). В одном варианте осуществления комбинация, направленная на эффекторные клетки, включает агонист CD27 (например, молекула антитела против CD27).
В определенных вариантах осуществления комбинация включает одно, два, три, четыре, пять или более лекарственных средств, которые уменьшают опухолевую иммуносупрессию (обозначаемая в настоящем описании как "комбинация против опухолевой иммуносупреесии"). В некоторых вариантах осуществления комбинация модулирует активность или уровень одного или нескольких из Treg, макрофага 2 или MDSC. В некоторых вариантах осуществления комбинация повышает одно или несколько из поляризации М2, истощения Treg или привлечения Т-клеток. В некоторых вариантах осуществления комбинация против опухолевой иммуносупреесии включает одно, два, три, четыре, пять или более лекарственных средств, выбранных из: (i) иммуномодулятора
(например, один или несколько из активатора костимулирующей молекулы (например, агонист GITR) или ингибитора молекулы иммунной точки контроля (например, один или несколько из PD-L1, PD-1, LAG-3, TIM-3 или CTLA-4), как описано в настоящем описании), (ii) ингибитора CSF-1/1R (например, ингибитор макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF)), (iii) ингибитора IL-17, (iv) ингибитора IL-1-бета, (v) ингибитора CXCR2, (vi) ингибитора фосфоинозитид-3-киназы (PI3K, например, Р13К-дельта или Р13К-гамма), (vii) ингибитора BAFF-R, (viii) ингибитора MALT-1/BTK, (ix) ингибитора JAK, (х) ингибитора CRTH2, (xi) ингибитора VEGFR, (xiii) IL-15 или его варианта,
(xiv) ингибитора CTLA-4, (xv) ингибитора IDO/TDO, (xvi) антагониста A2AR, (xvii) ингибитора TGFb или (xviii) ингибитора PFKFB3. В определенных вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор молекулы иммунной точки контроля
(например, ингибитор PD-L1, PD-1, LAG-3, TIM-3, СЕАСАМ
(например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), или CTLA-4, или любая их комбинация) . В комбинации против опухолевой иммуносупрее сии можно использовать любую комбинацию вышеупомянутых средств. Водном иллюстративном варианте осуществления комбинация против опухолевой иммуносупреесии включает одно, два, три, четыре, пять или более лекарственных средств, выбранных из ингибитора PD-L1
(например, молекула антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании), ингибитора PD-1, ингибитора LAG-3, модулятора TIM-3 (например, ингибитор TIM-3), агониста GITR, ингибитора CSF-1/1R (например, ингибитор M-CSF), ингибитора IL-17, ингибитора IL-1-бета или ингибитора CXCR2. В одном варианте осуществления комбинация против опухолевой иммуносупреесии включает один, два или все из ингибитора CSF-1/1R (например, ингибитор M-CSF), ингибитора IL-17, ингибитора IL-1-бета. В одном варианте осуществления комбинация против опухолевой иммуносупреесии включает ингибитор IL-17, ингибитор CXCR2, ингибитор CRTH2, антагонист A2AR или ингибитор PFKFB3, или их комбинацию.
В некоторых вариантах осуществления комбинация включает
одно или несколько лекарственных средств антигенпрезентирующей
комбинации. В других вариантах осуществления комбинация включает
одно или несколько лекарственных средств комбинации,
направленной на эффекторные клетки. В других вариантах
осуществления комбинация включает одно или несколько
лекарственных средств комбинации против опухолевой
иммуносупреесии. В других вариантах осуществления комбинация включает одно или несколько лекарственных средств антигенпрезентирующей комбинации и одно или несколько лекарственных средств комбинации, направленной на эффекторные клетки. В других вариантах осуществления комбинация включает одно или несколько лекарственных средств антигенпрезентирующей
комбинации и одно или несколько лекарственных средств комбинации против опухолевой иммуносупреесии. В других вариантах осуществления комбинация включает одно или несколько лекарственных средств антигенпрезентирующей комбинации, одно или несколько лекарственных средств комбинации, направленной на эффекторные клетки, и одно или несколько лекарственных средств комбинации против опухолевой иммуносупреесии. В других вариантах осуществления комбинация включает одно или несколько лекарственных средств антигенпрезентирующей комбинации, одно или несколько лекарственных средств комбинации, направленной на эффекторные клетки, и одно или несколько лекарственных средств комбинации против опухолевой иммуносупреесии.
В определенных вариантах осуществления комбинация включает:
(i) одно или несколько лекарственных средств
антигенпрезентирующей комбинации, выбранных из одно, двух или
всех из агониста STING, агониста TLR (например, агонист TLR7)
или модулятора TIM-3 (например, ингибитор TIM-3);
(ii) одно или несколько лекарственных средств комбинации, направленной на эффекторные клетки, выбранных из одного, двух или всех из модулятора GITR (например, агонист GITR), ингибитора PD-L1 (например, молекула антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании) или ингибитора PD-1;
(iii) одно или несколько лекарственных средств комбинации против опухолевой иммуносупреесии, выбранных из одного, двух или всех из ингибитора CSF-1/1R (например, ингибитор M-CSF), ингибитора IL-17 или ингибитора IL-1-бета:
(iv) комбинацию (i) и (ii);
(v) комбинацию (i) и (iii);
(vi) комбинацию (ii) и (iii); или
(vii) комбинацию (i), (ii) и (iii).
Комбинацию можно использовать для лечения злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании, такой как рак легкого (плоскоклеточный) , рак легкого (аденокарцинома), рак головы и шеи, рак шейки матки (плоскоклеточный), рак желудка, рак щитовидной железы, меланома (например, распространенная меланома), рак носоглотки или рак молочной железы.
В других вариантах осуществления комбинация включает лекарственное средство из антигенпрезентирующей комбинации (например, один или несколько из агониста STING, агониста TLR, вакцины или онколитического вируса) в комбинации с терапевтическим средством из комбинации, направленной на эффекторные клетки, и/или комбинации против опухолевой иммуносупреесии (например, ингибитор ингибитора точки контроля, например, ингибитор PD-L1, PD-1, LAG-3, TIM-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), или CTLA-4, или любая их комбинация). В одном варианте осуществления один или несколько из агониста STING, агониста TLR, вакцины или онколитического вируса вводят в комбинации с молекулой антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления агонист STING и/или вакцину вводят в комбинации с молекулой антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления онколитический вирус вводят в комбинации с молекулой антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. Комбинацию можно использовать для лечения злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании, такой как рак легкого (плоскоклеточный) , рак легкого (аденокарцинома) , рак головы и шеи, рак шейки матки (плоскоклеточный) , рак желудка, рак щитовидной железы, меланома (например, распространенная меланома), рак носоглотки или рак молочной железы.
В определенных вариантах осуществления комбинация включает комбинацию лекарственных средств, как описано в разделе под названием "Иллюстративные комбинации антигенпрезентирующих комбинаций, комбинаций, направленных на эффекторные клетки, и комбинаций против опухолевой иммуносупреесии", приведенном в подробном описании.
Комбинации, описанные в настоящем описании, можно вводить вместе в одной композиции или можно вводить по отдельности в двух или более различных композициях, например, композициях или дозированных формах, как описано в настоящем описании. Введение лекарственных средств можно проводить в любом порядке. Первое средство и дополнительные средства (например, второе, третье
средства) можно вводить одним и тем же путем введения или различными путями введения. Например, первое лекарственное средство можно вводить одновременно, до или после дополнительного средства. В определенных вариантах осуществления первое средство вводят местным путем, например, лекарственное средство любой из категорий (i)-(iii) может быть связано с нацеливающим на опухоль средством, например, нацеливающим на опухоль антителом (например, для формирования конъюгата антитело-лекарственное средство), или любым другим средством для доставки (например, состав, такой как направленный состав), так что введение первого средства локализуется в желаемой области, например, в области опухоли (например, области, обогащенной дендритными клетками). В одном варианте осуществления лекарственное средство представляет собой антиген (например, вакцина, например, вакцина против злокачественной опухоли in situ), который нацелен на опухолевое окружение, таким образом, вызывая активацию дендритных клеток. Лекарственное средство также можно вводить локально, например инъецировать, в область опухоли (например, внутриопухолевое или околоопухолевое введение). Локализованная доставка или введение лекарственного средства могут снизить один или несколько побочных эффектов или токсичность, которые в ином случае ассоциированы с системным введением лекарственного средства. В одном иллюстративном варианте осуществления лекарственное средство (например, STING или TLR) можно конъюгировать со связывающим опухоль антителом (например, антитело, которое связывается с HER2), тем самым доставляя лекарственное средство в экспрессирующую HER-2 клетку. Обнаружение/Терагностика
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способам обнаружения присутствия PD-L1 в образце, например, in vitro или in vivo (например, в биологическом образце, например, в сыворотке, сперме или моче, или в биоптате ткани, например, из гиперпролиферативного или злокачественного очага). Способ по изобретению можно использовать для оценки (например, мониторинга лечения или прогрессирования, диагностики и/или определения стадии нарушения, описанного в настоящем описании, например,
гиперпролиферативного или злокачественного нарушения у индивидуума). Способ включает: (i) приведение в контакт образца
(и необязательно эталонного, например, контрольного образца), или введение индивидууму, с молекулой антитела, как описано в настоящем описании, в условиях, которые позволяют взаимодействие, и (ii) обнаружение образования комплекса между молекулой антитела и образцом (и, необязательно, эталонным, например, контрольным образцом). Образование комплекса указывает на присутствие PD-L1 и может указывать на пригодность или необходимость лечения, описанного в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления PD-L1 обнаруживают до лечения, например, до первоначального лечения, или до лечения после интервала между лечениями. Обнаружение может вовлекать иммуногистохимию, иммуноцитохимию, FACS, молекулу антитела в комплексе с магнитными гранулами, анализы ELISA, способы ПЦР
(например, ОТ-ПЦР) или способ визуализации in vivo. Как правило, молекула антитела, используемая в способах обнаружения in vivo и in vitro, является прямо или непрямо меченной поддающимся обнаружению веществом для облегчения обнаружения связанного или несвязанного связывающегося соединения. Подходящие поддающиеся обнаружению вещества включают различные биологически активные ферменты, простетические группы, флуоресцентные материалы, люминесцентные материалы, парамагнитные (например, активные в отношении ядерного магнитного резонанса) материалы и радиоактивные материалы. В других вариантах осуществления молекулу антитела обнаруживают in vivo, например, с использованием способа визуализации in vivo, как описано в настоящем описании (например, визуализация с помощью ПЭТ)
Дополнительные варианты осуществления относятся к способу лечения злокачественной опухоли, включающему: идентификацию у индивидуума, например, в образце (например, образце от индивидуума, содержащем злокачественные клетки и необязательно иммунные клетки, такие как TIL) присутствия одного, двух или
всех из PD-L1, CD8 или IFN-y, тем самым, предоставляя величину
для одного, двух или всех из PD-L1, CD8 и IFN-y. Кроме того,
способ может включать сравнение величин для PD-L1, CD8 и/или IFN-y с эталонной величиной, например, контрольной величиной. Если величины для PD-L1, CD8 и/или IFN-y превышают эталонную величину, например, контрольные величины, проводят введение терапевтически эффективного количества антитела против PD-L1
(например, антитело против PD-L1, описанное в настоящем описании) индивидууму, необязательно в комбинации с одним или несколькими другими средствами, тем самым осуществляя лечение злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления индивидуума идентифицируют до лечения, например, до первоначального лечения или до лечения после интервала между лечениями. Злокачественная опухоль может представлять собой, например, злокачественную опухоль, описанную в настоящем описании, такую как рак легкого (плоскоклеточный), рак легкого
(аденокарцинома), рак головы и шеи, рак шейки матки
(плоскоклеточный), рак желудка, рак щитовидной железы, меланома, рак носоглотки или рак молочной железы, например, рак молочной железы TN, например, рак молочной железы IM-TN. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль представляет собой ER+ рак молочной железы или рак поджелудочной железы.
Также предусматривается способ лечения злокачественной опухоли, включающий: исследование индивидуума, например, образца
(например, образца индивидуума, содержащего злокачественные
клетки) в отношении присутствия PD-L1, тем самым идентифицируя
величину для PD-L1, сравнение величины для PD-L1 с контрольной
величиной и, если величина для PD-L1 превышает контрольную
величину, введение терапевтически эффективного количества
антитела против PD-L1 (например, антитело против PD-L1,
описанное в настоящем описании) индивидууму, необязательно в
комбинации с одним или несколькими другими средствами, тем самым
осуществляя лечение злокачественной опухоли. Злокачественная
опухоль может представлять собой, например, злокачественную
опухоль, как описано в настоящем описании, такую как
немелкоклеточная аденокарцинома легкого (NSCLC) (АСА),
плоскоклеточная карцинома NSCLC (SCC) или печеночно-клеточная
карцинома (НСС).
Без связи с теорией, полагают, что индивидуум, который демонстрирует предсуществующий иммунный ответ на злокачественную опухоль, например, иммунную реакцию на терапию иммуномодулятором
(например, терапия ингибитором молекулы точки контроля), может иметь пролонгированный и/или более устойчивый ответ на терапию по сравнению с индивидуумом, который не имеет такого же иммунного ответа. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления оценка статуса активации иммунных клеток
(например, Т-клеток) у индивидуума перед терапией иммуномодулятором может служить в качестве средства оценки и/или мониторинга способности индивидуума отвечать на терапию иммуномодулятором. В вариантах осуществления такую оценку можно использовать для идентификации, отбора и/или стратификации индивидуумов (например, пациента или совокупности пациентов) в качестве более или менее вероятно отвечающих на терапию иммуномодулятором.
Таким образом, альтернативно или в комбинации со способами, описанными в настоящем описании, предусматривается способ оценки статуса активации иммунных клеток (например, Т-клеток) индивидуума (например, оценка вероятности ответа индивидуума на терапию иммуномодулятором). Способ включает определение уровня и/или распределения активации Т-клеток у индивидуума. В одном варианте осуществления уровень и/или распределение активации Т-клеток включает показатель уровня и/или распределения одного или нескольких из: CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля
(например, одного или нескольких из PD-1, LAG-3, TIM-3, СЕАСАМ
(например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) или CTLA-4), или любой их комбинации. Например, уровень и/или распределение CD8-экспрессирующих клеток можно оценивать в качестве маркера активированных Т-клеток. В других вариантах осуществления можно оценивать уровень и/или распределение клеток, экспрессирующих PD-L1 или другой ингибитор точки контроля. Индивидуума можно оценивать до, в процессе или после проведения терапии иммуномодулятором. В одном варианте осуществления индивидуума оценивают до терапии иммуномодулятором (например, терапия
ингибитором молекулы точки контроля), например, до первоначального лечения или до лечения после интервала между лечениями. В одном варианте осуществления повышенный уровень одного или нескольких из CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля у индивидуума (например, относительно эталона, например, контроля) указывает на увеличенную способность индивидуума отвечать на терапию (также называемую в настоящем описании "положительным статусом иммунной активации"). В другом варианте осуществления сниженный уровень одного или нескольких из CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля у индивидуума (например, относительно эталона, например, контроля) указывает на сниженную способность индивидуума отвечать на терапию (также называемую в настоящем описании "отрицательным статусом иммунной активации"). Необязательно способ может включать проведение терапии иммуномодулятором, как описано в настоящем описании (например, ингибитором молекул точки контроля, как описано в настоящем описании), если у индивидуума определяют наличие положительного статуса иммунной активации.
В одном варианте осуществления терапия иммуномодулятором включает активатор костимулирующей молекулы, например, один или несколько активаторов, как описано в настоящем описании (например, агонист молекулы GITR, как описано в настоящем описании). В других вариантах осуществления терапия иммуномодулятором включает ингибитор молекулы иммунной точки контроля, например, один или несколько ингибиторов ингибитора точки контроля, как описано в настоящем описании (например, ингибитор одного или нескольких из PD-L1, PD-1, TIM-3 или CTLA-4, как описано в настоящем описании). В одном варианте осуществления терапия иммуномодулятором включает молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. В других вариантах осуществления терапия иммуномодулятором включает комбинацию активатора костимулирующей молекулы и ингибитора точки контроля.
В некоторых вариантах осуществления уровень и/или распределение CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля определяют in vivo, например, неинвазивным путем (например,
путем обнаружения антитела к Т-клеточному маркеру, меченному подающейся обнаружению меткой, с использованием подходящего способа визуализации, например, сканирования с помощью позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ). Например, ПЭТ с антителом-мишенью или иммунный ПЭТ (например, ПЭТ с антителом против CD8 или ПЭТ с антителом против PD-L1) можно использовать для обнаружения уровня и/или распределения (например, локализации опухоли) экспрессирующих CD8 или PD-L1 клеток in vivo. Способы визуализации антител (например, визуализации ПЭТ с антителами) известны в данной области, например, как описано Lamberts, L. Е. et al. (2015) J. Clin. Oncol. 33 (DOI: 10, 1200/JCO. 2014, 57, 8278) ; Tavare, R. et al. (2014) PNAS 111(3):1108-1113; и Boerman and Oyen (2011) The Journal of Nuclear Medicine 52 (8):1171-72, включенной в настоящее описание в качестве ссылки. В других вариантах осуществления уровень CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля определяют в образце (например, биоптате опухоли), полученном от индивидуума (например, с использованием иммуногистохимических способов).
В качестве иллюстративного варианта осуществления
увеличенное количество или изменение положения экспрессирующих
CD8 клеток с краев опухоли внутрь опухоли может указывать на
улучшение исхода, например, увеличенную способность к ответу
индивидуума на терапию иммуномодулятором. В определенных
вариантах осуществления положительный статус иммунной активации
(например, увеличение уровня активированных Т-клеток) появляется
в ответ на предшествующее лечение злокачественной опухоли,
например, в ответ на одно или несколько из лучевой терапии,
химиотерапии, онколитического вируса, биспецифического
связывающего Т-клетки средства, биологической или направленной терапии (например, терапии против злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании). В некоторых вариантах осуществления индивидуум, который демонстрирует положительный статус иммунной активации в ответ на предшествующее лечение, становится лучшим кандидатом для терапии иммуномодулятором. В одном варианте осуществления индивидуума, который имеет мутацию B-Raf (например, мутацию B-Raf, как описано в настоящем
описании) лечат ингибитором B-Raf (например, ингибитором B-Raf, как описано в настоящем описании). Индивидуум может иметь увеличение уровня экспрессирующих CD8 Т-клеток после лечения ингибитором B-Raf, и, таким образом, он может стать лучшим кандидатом для терапии иммуномодулятором.
В другом иллюстративном варианте осуществления экспрессию
PD-L1 или других ингибиторов точки контроля (например,
относительно эталона) можно использовать для определения или
анализа способности индивидуума отвечать на терапию
злокачественной опухоли. В одном варианте осуществления средство
для визуализации с помощью ПЭТ может продемонстрировать, что
индивидуум имеет предсуществующую экспрессию PD-L1 или других
молекул точки контроля. Экспрессия этих молекул на опухоли может
помочь стратифицировать пациентов для целей дополнительной
диагностики. Если индивидуум не имел поддающегося обнаружению
предсуществующего иммунного ответа на терапию иммуномодулятором
и не имел поддающейся обнаружению экспрессии молекулы точки
контроля, то такой индивидуум, вероятно, будет плохим кандидатом
для терапии. Визуализация с помощью ПЭТ также может
продемонстрировать гетерогенность экспрессии и
продемонстрировать те опухоли (положительные в ПЭТ), которые являются фактическими опухолями/очагами повреждения, наиболее пригодными для ответа. Это было бы полезным, поскольку взятие образцов небольшого количества заданных очагов повреждения может вводить в заблуждение; например, для определения того, является ли индивидуум отвечающим или не возникла ли ошибка при взятии образца способом биопсии или вследствие низкого количества образцов. С использованием визуализации с помощью ПЭТ является возможным обнаружение большинства опухолей и, таким образом, проведение более точного определения эффективности опухолевой нагрузки и лучшее понимание того, как терапия действует.
В другом аспекте изобретение относится к диагностическим или терапевтическим наборам, которые включают молекулы антител, описанные в настоящем описании, и инструкции по применению.
Все публикации, патентные заявки, патенты и другие ссылки, упомянутые в настоящем описании, включены в настоящее описание в
качестве ссылок в полном объеме.
Другие признаки, задачи и преимущества изобретения станут понятными из описания и чертежей и из формулы изобретения.
Другие признаки, задачи и преимущества изобретения станут очевидными из описания и чертежей, и из формулы изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фиг.1 представлены аминокислотные последовательности вариабельных областей легкой (SEQ ID N0: 8) и тяжелой (SEQ ID N0: б) цепей mAb мыши против PD-L1 ВАР058. Последовательности CDR легкой и тяжелой цепей на основе нумерации Kabat подчеркнуты. Последовательности CDR тяжелой цепи на основе нумерации Chothia показаны полужирным шрифтом и курсивом.
На фиг.2 представлены аминокислотные последовательности вариабельных областей легкой (SEQ ID N0: 8 и 249, соответственно, в порядке представления) и тяжелой (SEQ ID N0: б и 248, соответственно, в порядке представления) цепей mAb мыши против PD-L1 ВАР058, выровненные с последовательностями эмбрионального типа. Верхняя и нижняя последовательности представляют собой последовательности эмбрионального типа (GL) и ВАР058 (Mu mAb), соответственно. Последовательности CDR легкой и тяжелой цепей на основе нумерации Kabat подчеркнуты. Последовательности CDR легкой и тяжелой цепей на основе нумерации Chothia показаны полужирным шрифтом и курсивом. "-" означает идентичный аминокислотный остаток.
На фиг.З представлена столбиковая диаграмма,
демонстрирующая результаты анализа связывания FACS для семнадцати гуманизированных клонов ВАР058 (с BAP058-hum01 по BAP058-huml7). Концентрации антител составляют 200, 100, 50, 25 и 12,5 нг/мл от самого левого столбика к самому правому столбику для каждого исследованного mAb.
На фиг.4 представлен структурный анализ гуманизированных клонов ВАР0058 (а, Ь, с, d, е, f и g соответствуют различным типам последовательностей каркасной области). Также представлены концентрации mAb в образцах.
На фиг.5 представлена аффинность связывания и специфичность гуманизированного mAb ВАР058, измеренная в конкурентном анализе
связывания с использованием постоянной концентрации меченного Alexa 488 mAb мыши ВАР058, серийных разведений исследуемых антител и экспрессирующих PD-Ll-клеток 300.19.
На фиг.6 представлено ранжирование гуманизированных клонов ВАР058 на основе данных FACS, конкурентного связывания и структурного анализа. Также показаны концентрации mAb в образцах.
На фиг.7 представлено блокирование связывания лиганда с PD-1 выбранными гуманизированными клонами ВАР058. Представлено блокирование связывания PD-1-Ig с экспрессирующими PD-L1 клетками. Оценивали BAP058-hum01, BAP058-hum03, BAP058-hum04, BAP058-hum06, BAP058-hum07, BAP058-humll и BAP058-huml3. В анализ также были включены mAb мыши ВАР058 и химерное mAb.
На фиг.8А-8В представлено выравнивание последовательностей вариабельных доменов тяжелой цепи для семнадцати гуманизированных клонов ВАР058 и BAP058-chi. На фиг.8А, представлены все последовательности. На фиг.8А показаны SEQ ID NO: 250, 251, 251, 251, 252, 252, 252, 253, 253, 254, 254, 255, 255, 256, 256, 257, 258, 259, соответственно, в порядке представления. На фиг.8В, показаны только аминокислотные последовательности, которые отличаются от последовательности мыши. На фиг.8В показаны SEQ ID NO: 250, 251, 251, 251, 252, 252, 252, 253, 253, 254, 254, 255, 255, 256, 256, 257, 258, 259, соответственно, в порядке представления.
На фиг.9А-9В представлено выравнивание последовательностей вариабельных доменов легкой цепи для семнадцати клонов ВАР058 и BAP058-chi. На фиг.9А представлены все последовательности. На фиг.9А показаны SEQ ID NO: 17, 86, 86, 86, 86, 42, 42, 42, 66, 66, 66, 22, 22, 26, 34, 58, 82, 74, соответственно, в порядке представления. На фиг.9В показаны только аминокислотные последовательности, которые отличаются от последовательности мыши. На фиг.9В показаны SEQ ID NO: 17, 86, 86, 86, 86, 42, 42, 42, 66, 66, 66, 22, 22, 26, 34, 58, 82, 74, соответственно, в порядке появления.
На фиг.10 показаны иллюстративные злокачественные опухоли, при которых относительно высокие доли пациентов являются
тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y.
На фиг.11 представлены иллюстративные ER+ рак молочной железы и рак поджелудочной железы, при которых относительно низкие доли пациентов являются тройными положительными по PD-Ll/CD8/IFN-y.
На фиг.12 представлена доля иллюстративных пациентов с раком молочной железы, которые являются тройными положительными по PD-Ll/CD8/IFN-y.
На фиг.13 представлена доля иллюстративных пациентов с раком толстого кишечника пациенты, которые являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y.
На фиг.14 показано графическое представление проточной цитометрии для поверхностной экспрессии PD-L1 в клетках ЕВС-1 in vitro с обработкой соединение А17 или без него. Клетки ЕВС-1 представляют собой клетки немелкоклеточного рака легкого с амплификацией сМЕТ.
На фиг.15 показано графическое представление экспрессии мРНК PD-L1 в клетках HS.74 6.T в модели с ксенотрансплантатом опухоли с обработкой соединением А17 или без нее. Клетки Hs.7 4 6.T представляют собой клетки рака желудка с амплификацией с-МЕТ и мутацией с-МЕТ.
На фиг.16 показано графическое представление экспрессии мРНК PD-L1 в клетках Н3122 in vitro с соединением А23 или без него. Клетки Н3122 представляют собой клетки немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) с транслокацией ALK.
На фиг.17 показано графическое представление экспрессии мРНК PD-L1 в клетках L0XIMV1 (мутантные по BRAF клетки меланомы) в модели с ксенотрансплантатом опухоли с обработкой соединением А2 9 или без нее.
На фиг.18 показано графическое представление экспрессии мРНК PD-L1 в клетках HEYA8 (клетки рака яичника с мутантным KRAS) в модели с ксенотрансплантатом опухоли с обработкой соединением А34 или без нее.
На фиг.19 показано графическое представление экспрессии мРНК PD-L1 в клетках UKE-1 (клетки миелопролиферативного
новообразования с мутацией V617F JAK2) в модели с ксенотрансплантатом опухоли с обработкой соединением А18 или без нее.
На фиг.20 представлена схематическая диаграмма, на которой показан процессинг и представление антигена, ответы эффекторных клеток и каскады иммуносупреесии, на которые направлены комбинированные способы терапии, описанные в настоящем описании.
На фиг.21 представлен эффект иллюстративных антител против
PD-L1 на стимуляцию высвобождения IFN-y из совместных культур дендритных клеток и CD4+ Т-клеток.
На фиг.22 представлен эффект иллюстративных антител против PD-L1 на индуцируемую SEB секрецию IL-2 Т-клетками.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ТАБЛИЦ
Таблица 1 представляет собой обобщенное представление
аминокислотных и нуклеотидных последовательностей молекул
антител против PD-L1 мыши, химерных и гуманизированных молекул
антител против PD-L1. Молекулы антител включают mAb мыши ВАР058,
химерное mAb BAP058-chi и гуманизированные mAb с BAP058-hum01 по
BAP058-huml7 и с ВАР058-С1опе-К по ВАР058-С1опе-О. В этой
таблице представлены аминокислотные и нуклеотидные
последовательности CDR тяжелой и легкой цепей, аминокислотные и нуклеотидные последовательности вариабельных областей тяжелой и легкой цепей и аминокислотные и нуклеотидные последовательности тяжелой и легкой цепей.
В таблице 2 представлены аминокислотные и нуклеотидные последовательности каркасных областей тяжелых и легких цепей гуманизированных mAb с BAP058-hum01 по BAP058-huml7 и с ВАР058-Clone-К по ВАР058-С1опе-О.
В таблице 3 представлены аминокислотные последовательности константных областей тяжелых цепей IgG человека и легкой цепи каппа человека.
Таблица 4 представляет собой обобщенное представление выхода, титра, содержания мономеров и уровней эндотоксинов для выбранных гуманизированных mAb ВАР058, экспрессированных в клетках СНО.
В таблице 5 представлены зарядовые изоформы, выявленные с помощью анализа Novex IEF, для отдельных гуманизированных mAb ВАР058, экспрессируемых в клетках СНО.
Таблица 6 представляет собой обобщенное представление отдельных лекарственных средств, которые можно вводить в комбинации с молекулами антител против PD-1 и другими иммуномодуляторами (например, одним или несколькими из: активатора костимулирующей молекулы и/или ингибитора молекулы иммунной точки контроля), описанными в настоящем описании. В таблице 6 слева направо представлено следующее: обозначение соединения для второго лекарственного средства, структура соединения и патентная публикация(и), описывающая соединение.
В таблице 7 представлен иллюстративный перечень лекарственных средств из антигенпрезентирующих комбинаций (категория А) , комбинаций, направленных на эффекторные клетки, (категория В) и комбинаций против опухолевой иммуносупреесии (категория С).
В таблице 8 показано перекрестно-видовое связывание иллюстративных антител PD-L1 при оценке способом Biacore. ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Иммунная система обладает способностью распознавать и уничтожать опухолевые клетки; однако опухоли могут использовать множество стратегий для ускользания от иммунитета. Блокада иммунных точек контроля является одним из подходов для активации или реактивации терапевтического противоопухолевого иммунитета. Лиганд 1 белка запрограммированной смерти (PD-L1) описан в качестве лиганда иммуноингибиторного рецепторного белка запрограммированной смерти 1 (PD-1). Связывание PD-L1 с PD-1 приводит к ингибированию к опосредуемой Т-клеточным рецептором пролиферации лимфоцитов и секреции цитокинов (Freeman et al.
(2000) J Exp Med 192:1027-34). Таким образом, блокирование PD-L1 может приводить к усилению противоопухолевого иммунитета.
Несколько типов клеток экспрессируют PD-L1. Например, PD-L1 экспрессируется на активированных Т-клетках, дендритных клетках
(DC), натуральных киллерах (NK), макрофагах, В-клетках, моноцитах и клетках сосудистого эндотелия. PD-L1 экспрессируется
во многих злокачественных опухолях, включая карциному легкого, яичника и толстого кишечника человека и различные миеломы (Iwai et al. (2002) PNAS 99:12293-7; Ohigashi et al. (2005) Clin Cancer Res 11:2947-53; Okazaki et al. (2007) Intern. Immun. 19:813-24; Thompson et al. (2006) Cancer Res. 66:3381-5). Экспрессия PD-L1 строго коррелирует с неблагоприятным прогнозом при различных типах злокачественной опухоли, включая рак почки, яичника, мочевого пузыря, молочной железы, желудка и поджелудочной железы.
Многие инфильтрирующие опухоль Т-лимфоциты имеют преобладающую экспрессию PD-1 по сравнению с Т-лимфоцитами в нормальных тканях и Т-лимфоцитами периферической крови. Это указывает на то, что активация PD-1 на реактивных в отношении опухоли Т-клетках может приводить к нарушению противоопухолевого иммунного ответа (Ahmadzadeh et al. (2009) Blood 114:1537-44) . Таким образом, передача сигнала PD-L1, опосредуемая экспрессирующими PD-L1 опухолевыми клетками, взаимодействующими с экспрессирующими PD-1 Т-клетками, может приводить к ослаблению активации Т-клеток и ускользанию от иммунного надзора (Sharpe et al. (2 002) Nat Rev Immunol. 2:116-2 6; Keir et al. (2 008) Annu Rev Immunol. 26:677-704) . Блокада PD-1 может ингибировать гематогенное распространение низкоиммуногенных опухолевых клеток посредством усиленного привлечения эффекторных Т-клеток (Iwai et al. (2005) Int. Immunol. 17:133-144).
Антитело против PD-L1 может усиливать Т-клеточный иммунитет, например, посредством блокирования его ингибиторных взаимодействий как с PD-1, так и с В7-1. Антитело против PD-1 может обеспечить иммунную регуляцию через PD-L2/PD-1. Как PD-1, так и В7-1, экспрессируются на Т-клетках, В-клетках, DC и макрофагах, что обеспечивает потенциал для двунаправленных взаимодействий между В7-1 и PD-L1 на этих типах клеток. PD-L1 на некроветворных клетках может взаимодействовать с В7-1, а также с PD-1, на Т-клетках.
Таким образом, настоящее изобретение относится, по меньшей мере частично, к молекулам антител (например, гуманизированным молекулам антител), которые связываются с лигандом 1 белка
запрограммированной смерти (PD-L1) с высокой аффинностью и специфичностью. В одном варианте осуществления предусматриваются гуманизированные антитела против PD-L1, которые демонстрируют неожиданно низкую иммуногенность. Например, гуманизированные антитела против PD-L1 могут иметь показатель риска менее 650, 600, 550 или менее 500, согласно анализу Т-клеточных эпитопов. В других вариантах осуществления было показано, что отдельные комбинации каркасных областей, например, как показано на фиг.5 и 7, имеют определенную эффективность продукции и свойства связывания.
Дополнительные аспекты изобретения включают молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие молекулы антител, экспрессирующие векторы, клетки-хозяева и способы получения молекул антител. Также предусматриваются иммуноконъюгаты, мультиспецифические или биспецифические молекулы и фармацевтические композиции, содержащие молекулы антител. Молекулы антител против PD-L1, описанные в настоящем описании, можно использовать для лечения, предупреждения и/или диагностики злокачественных или неопластических нарушений (например, солидные опухоли и опухоли мягких тканей; меланома, например, распространенная меланома; печеночно-клеточная карцинома; рак поджелудочной железы; почечноклеточный рак (RCC), например, метастазирующий RCC или светлоклеточный RCC; глиомы или глиобластомы; множественная миелома; рак ободочной и прямой кишки и рак легкого, например, немелкоклеточная карцинома), а также инфекционных заболеваний (например, инфекционных нарушений, таких как гепатит, например гепатит С (например, хронический вирусный гепатит); сепсис). Таким образом, в настоящем описании описаны способы обнаружения PD-L1, а также способы лечения различных нарушений, включая злокачественную опухоль и инфекционные заболевания, с использованием молекул антител против PD-L1.
Кроме того в настоящем описании описаны способы и композиции, включающие комбинацию двух, трех или более лекарственных средств, выбранных из одной, двух или всех из следующих категорий (i)-(iii): (i) средство, которое усиливает презентацию антигена (например, презентацию опухолевого
антигена) (например, путем усиления одного или нескольких из активности или созревания дендритных клеток, захвата антигена или процессинга антигена); (ii) средство, которое усиливает ответ эффекторных клеток (например, ответ иммунных эффекторных клеток, например, активацию и/или мобилизацию В-клеток и/или Т-клеток, например, в лимфатическом узле); или (iii) средство, которое уменьшает иммуносупреесию опухоли (например, увеличивая инфильтрацию Т-клеток и уничтожение опухолевых клеток). В некоторых вариантах осуществления комбинация включает ингибитор PD-L1 (например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании). Без связи с теорией, полагают, что терапевтические подходы, которые усиливают противоопухолевый иммунитет, действуют более эффективно, когда иммунный ответ оптимизируют через множество мишеней на различных стадиях иммунного ответа. Каждая из этих стадий представлена в схематичной форме на фиг.20. Например, подходы, которые приводят к активации дендритных клеток, в комбинации с подходами, которые усиливают клеточный гуморальный иммунитет, могут приводить к более эффективному и/или длительному терапевтическому ответу.
Термины "лиганд 1 белка запрограммированной смерти" или "PD-L1" включают изоформы PD-L1, млекопитающих, например, человека, видовые гомологи PD-1 человека и аналоги, содержащие по меньшей мере один общий эпитоп с PD-L1. Аминокислотная последовательность PD-L1, например, PD-1 человека, известна в данной области, например, Dong et al. (1999) Nat Med. 5(12) : 1365-9; Freeman et al. (2000) J Exp Med. 192 (7) :1027-34) .
Дополнительные термины определены ниже и на протяжении заявки.
Как используют в рамках изобретения, форма единственного числа относится к одному или более чем к одному (например, по меньшей мере к одному) грамматическому объекту в форме единственного числа.
Термин "или" используют в настоящем описании для обозначения, и используют взаимозаменяемо с, термина "и/или", если контекст явно не указывает на иное.
"Приблизительно" и "приближенно", как правило, означает
приемлемую степень ошибки для измеренного количества, учитывая природу или точность измерений. Иллюстративные степени ошибки находятся в пределах 20 процентов (%), как правило, в пределах 10%, и, более конкретно, в пределах 5% от данной величины или диапазона величин.
Под "комбинацией" или "в комбинации с" не подразумевают, что терапия или лекарственные средства должны быть введены одновременно и/или составлены для доставки совместно, хотя эти способы доставки входят в объем, описанный в настоящем описании. Лекарственные средства в комбинации можно вводить одновременно, до или после одного или нескольких дополнительных способов терапии или лекарственных средств. Введение лекарственных средств или терапевтические протоколы можно осуществлять в любом порядке. Как правило, каждое средство вводят в дозе и/или по расписанию, определенным для этого средства. Кроме того, будет понятно, что дополнительное лекарственное средство, используемое в этой комбинации, можно вводить вместе в единой композиции или можно вводить по отдельности в различных композициях. Как правило, ожидается, что дополнительные лекарственные средства, используемые в комбинации, будут использоваться на уровнях, которые не превышают уровни, при которых их используют по отдельности. В некоторых вариантах осуществления уровни, используемые в комбинации, будут более низкими, чем уровни, используемые по отдельности.
В вариантах осуществления дополнительное лекарственное средство вводят в терапевтической дозе или в дозе ниже терапевтической дозы. В определенных вариантах осуществления концентрация второго лекарственного средства, которая требуется для обеспечения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, когда второе лекарственное средство вводят в комбинации с первым лекарственным средством, например, молекулой антитела против PD-L1, чем когда второе лекарственное средство вводят отдельно. В определенных вариантах осуществления концентрация первого лекарственного средства, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, когда первое лекарственное средство
вводят в комбинации со вторым лекарственным средством, чем когда первое лекарственное средство вводят отдельно. В определенных вариантах осуществления в комбинированной терапии концентрация второго лекарственного средства, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, чем терапевтическая доза второго лекарственного средства в качестве монотерапии, например, на 1020%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80%, или 80-90% более низкой. В определенных вариантах осуществления при комбинированной терапии концентрация первого лекарственного средства, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, чем терапевтическая доза первого лекарственного средства в качестве монотерапии, например, на 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 5060%, 60-70%, 70-80% или 80-90% более низкой.
Термин "ингибирование", "ингибитор" или "антагонист" включает снижение определенного параметра, например активности, данной молекулы, например, ингибитора иммунной точки контроля. Например, этот термин включает ингибирование активности, например, активности PD-1 или PD-L1, по меньшей мере на 5%, 10%, 20%, 30%, 40% или более. Таким образом, ингибирование не должно составлять 100%.
Термин "активация", "активатор" или "агонист" включает увеличение определенного параметра, например активности, данной молекулы, например, костимулирующей молекулы. Например, этот термин включает увеличение активности, например костимулирующей активности, по меньшей мере на 5%, 10%, 25%, 50%, 75% или более.
Термин "эффект против злокачественной опухоли" относится к биологическому эффекту, который может проявляться различными путями, включая, но не ограничиваясь ими, например, снижение объема опухоли, уменьшение количества злокачественных клеток, уменьшение количества метастазов, увеличение продолжительности жизни, уменьшение пролиферации злокачественных клеток, уменьшение выживаемости злокачественных клеток или смягчение различных физиологических симптомов, ассоциированных со злокачественным состоянием. "Эффект против злокачественной
опухоли" также может проявляться способностью пептидов, полинуклеотидов, клеток и антитела к изначальному предупреждению возникновения рецидива злокачественной опухоли.
Термин "противоопухолевый эффект" относится к
биологическому эффекту, который может проявляться различными путями, включая, но не ограничиваясь ими, например, уменьшение объема опухоли, уменьшение количества опухолевых клеток, снижение пролиферации опухолевых клеток или снижение выживаемости опухолевых клеток.
Термин "злокачественная опухоль" относится к заболеванию, характеризующемуся быстрым и неконтролируемым ростом аберрантных клеток. Злокачественные клетки могут распространяться локально или через кровоток и лимфатическую систему в другие части организма. Примеры различных злокачественных опухолей описаны в настоящем описании и включают, но не ограничиваются ими, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак яичника, рак шейки матки, рак кожи, рак поджелудочной железы, рак ободочной и прямой кишки, рак почки, рак печени, рак головного мозга, лимфому, лейкоз, рак легкого и т.п. Термины "новообразование" и "злокачественная опухоль" используют в настоящем описании взаимозаменяемо, например, оба термина охватывают солидные и жидкостные, например, диффузные или циркулирующие, опухоли. Как используют в рамках изобретения, термин "злокачественная опухоль" или "опухоль" включает предзлокачественные, а также злокачественные новообразования и опухоли.
Термин "антигенпрезентирующая клетка" или "АРС" относится к клетке иммунной системы, такой как вспомогательная клетка (например, В-клетка, дендритная клетка и т.п.), которая экспонирует чужеродный антиген в комплексе с основным комплексом гистосовместимости (МНС) на ее поверхности. Т-клетки могут распознавать эти комплексы с использованием их Т-клеточных рецепторов (TCR). АРС процессируют антигены и презентируют их Т-клеткам.
Термин "костимулирующая молекула" относится к
распознаваемому связывающему партнеру на Т-клетке, который специфически связывается с костимулирующим лигандом, тем самым,
опосредуя костимулирующий ответ Т-клеткой, такой как, но не ограничиваясь ими, пролиферацию. Костимулирующие молекулы представляют собой молекулы клеточной поверхности, отличные от рецепторов антигенов или их лигандов, которые требуются для эффективного иммунного ответа. Костимулирующие молекулы включают, но не ограничиваются ими, молекулу МНС класса I, белки-рецепторы TNF, иммуноглобулин-подобные белки, рецепторы цитокинов, интегрины, сигнальные молекулы активации лимфоцитов
(белки SLAM), активирующие рецепторы NK-клеток, BTLA, рецептор Toll-лиганда, ОХ40, CD2, CD7, CD27, CD28, CD30, CD40, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CDlla/CD18), 4-1ВВ (CD137), В7-НЗ, CDS, ICAM-1, ICOS
(CD278), GITR, BAFFR, LIGHT, HVEM (LIGHTR), KIRDS2, SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD19, CD4, С08-альфа, CD8-бета, IL2R-6eTa, IL2R-raMMa, IL7R-aльфa, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CDlld, ITGAE, CD103, ITGAL, CDlla, LFA-1, ITGAM, CDllb, ITGAX, CDllc, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, NKG2D, NKG2C, TNFR2, TRANCE/RANKL, ДНКМ1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96
(Tactile), СЕАСАМ1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Lyl08), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, CD19a, и лиганд, который специфически связывается с CD83.
"Иммунная эффекторная клетка", как этот термин используют в настоящем описании, относится к клетке, которая вовлечена в иммунный ответ, например, в стимуляцию ответа иммунных эффекторных клеток. Примеры иммунных эффекторных клеток включают Т-клетки, например, альфа/бета Т-клетки и гамма/дельта Т-клетки, В-клетки, натуральные киллеры (NK), натуральные киллерные Т-клетки (NKT) , тучные клетки и фагоциты миелоидного происхождения.
"Иммунная эффекторная" или "эффекторная" "функция" или "ответ", как эти термины используют в настоящем описании, относится к функции или ответу, например, иммунной эффекторной клетки, которые усиливают или стимулируют иммунную атаку на клетку-мишень. Например, иммунная эффекторная функция или ответ
относятся к свойству Т-клеток или NK-клеток, которое стимулирует уничтожение или ингибирование роста или пролиферации клетки-мишени. В случае Т-клетки, первичная стимуляция и костимуляция являются примерами иммунной эффекторной функции или ответа.
Термин "эффекторная функция" относится к специализированной функции клетки. Эффекторная функция Т-клетки, например, может представлять собой цитолитическую активность или хелперную активность, включая секрецию цитокинов.
Термин "статус иммунной активации" относится к вероятности того, что индивидуум будет отвечать на терапию, например, терапию иммуномодулятором. В некоторых вариантах осуществления статус иммунной активации может представлять собой положительный статус или отрицательный статус. В вариантах осуществления положительный статус иммунной активации означает, что существует более чем 50% вероятность (например, более чем 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или более вероятность), что индивидуум будет отвечать на терапию, например, терапию иммуномодулятором. В вариантах осуществления отрицательный статус иммунной активации означает, что существует более чем 50% вероятность (например, более чем 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или более вероятность), что индивидуум не будет отвечать на терапию, например, терапию иммуномодулятором.
Как используют в рамках изобретения, термины "лечить", "лечение" и "проведение лечения" относятся к снижению или смягчению прогрессирования, тяжести и/или длительности нарушения, например, пролиферативного нарушения, или к смягчению одного или нескольких симптомов (предпочтительно, одного или нескольких заметных симптомов) нарушения вследствие проведения одного или нескольких способов терапии. В конкретных вариантах осуществления термины "лечить", "лечение" и "проведение лечения" относятся к смягчению по меньшей мере одного поддающегося измерению физического параметра пролиферативного нарушения, такого как рост опухоли, не обязательно заметный для пациента. В других вариантах осуществления термины "лечить", "лечение" и "проведение лечения" относятся к ингибированию прогрессирования пролиферативного нарушения, либо физически, например,
посредством стабилизации заметного симптома, либо
физиологически, например, посредством стабилизации физического параметра, либо обоими из этих путей. В других вариантах осуществления термины "лечить", "лечение" и "проведение лечения" относятся к снижению или стабилизации размера опухоли или количества злокачественных клеток.
Композиции и способы по настоящему изобретению охватывают
полипептиды и нуклеиновые кислоты, имеющие указанные
последовательности, или последовательности, по существу
идентичные или сходные с ними, например, последовательности по
меньшей мере на 85%, 90%, 95% или выше идентичные указанной
последовательности. В контексте аминокислотной
последовательности термин "по существу идентичный" используют в настоящем описании для обозначения первой аминокислоты, которая содержит достаточное или минимальное количество аминокислотных остатков, которые i) являются идентичными или ii) являются консервативными заменами выровненных аминокислотных остатков во второй аминокислотной последовательности, так что первая и вторая аминокислотные последовательности могут иметь общий структурный домен и/или общую функциональную активность. Примерами являются аминокислотные последовательности, которые содержат общий структурный домен, обладающий по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с эталонной последовательностью, например, последовательностью, описанной в настоящем описании.
В контексте нуклеотидной последовательности термин "по существу идентичный" используют в настоящем описании для обозначения первой последовательности нуклеиновой кислоты, которая содержит достаточное или минимальное количество нуклеотидов, которые являются идентичными выровненным нуклеотидам во второй последовательности нуклеиновой кислоты, так что первая и вторая нуклеотидные последовательности кодируют полипептиды, обладающие общей функциональной активностью, или кодируют общий структурный полипептидный домен или общую функциональную активность полипептида. Примерами являются нуклеотидные последовательности, обладающие по меньшей мере
приблизительно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с эталонной последовательностью, например, последовательностью, описанной в настоящем описании.
Термин "функциональный вариант" относится к полипептидам,
которые обладают по существу идентичной аминокислотной
последовательностью со встречающейся в природе
последовательностью или кодируются по существу идентичной нуклеотидной последовательностью, и способны иметь один или несколько видов активности встречающейся в природе последовательности.
Вычисление гомологии или идентичности последовательностей (эти термины используют в настоящем описании взаимозаменяемо) проводят следующим образом.
Для определения процентной идентичности двух аминокислотных последовательностей или двух последовательностей нуклеиновой кислоты, последовательности выравнивают для целей оптимального сравнения (например, можно вносить пропуски в одну или обе из первой и второй аминокислотной последовательности или последовательности нуклеиновой кислоты для оптимального выравнивания, и негомологичными последовательностями можно пренебрегать для целей сравнения). В предпочтительном варианте осуществления длина эталонной последовательности, выровненной для цели сравнения, составляет по меньшей мере 30%, предпочтительно по меньшей мере 4 0%, более предпочтительно по меньшей мере 50%, 60%, и еще более предпочтительно по меньшей мере 70%, 80%, 90%, 100% от длины эталонной последовательности. Затем сравнивают аминокислотные остатки или нуклеотиды в соответствующих положениях аминокислот или положениях нуклеотидов. Когда положение в первой последовательности занято тем же аминокислотным остатком или нуклеотидом, что и соответствующее положение во второй последовательности, тогда молекулы являются идентичными в этом положении (как используют в настоящем описании, "идентичность" аминокислот или нуклеиновых кислот эквивалентна "гомологии" аминокислот или нуклеиновых кислот).
Процентная идентичность между двумя последовательностями
является функцией количества идентичных положений между последовательностями с учетом количества пропусков и длины каждого пропуска, который необходимо вносить для оптимального выравнивания двух последовательностей.
Сравнение последовательностей и определение процентной идентичности между двумя последовательностями можно проводить с использованием математического алгоритма. В предпочтительном варианте осуществления процентную идентичность между двумя аминокислотными последовательностями определяют с использованием алгоритма Needleman и Wunsch ((1970) J. Mol. Biol. 48:444-453), который был включен в программу GAP пакета программ GCG
(доступный на http://www.gcg.com), с использованием либо матрицы Blossum 62, либо матрицы РАМ250, и веса пропуска 16, 14, 12, 10, 8, б или 4 и веса продолжения пропуска 1, 2, 3, 4, 5, или б. В другом предпочтительном варианте осуществления процентную идентичность между двумя нуклеотидными последовательностями определяют с использованием программы GAP в пакете программ GCG
(доступный на http://www.gcg.com) с использованием матрицы NWSgapdna. CMP и веса пропуска 40, 50, 60, 7 0 или 8 0 и веса продолжения пропуска 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Особенно предпочтительным набором параметров (и набор параметров, который следует использовать, если нет иных указаний) является оценочная матрица Blossum 62 со штрафом за пропуск 12, штрафом за продолжение пропуска 4 и штраф за пропуск со сдвигом рамки считывания 5.
Процентную идентичность между двумя аминокислотными или нуклеотидными последовательностями можно определять с использованием алгоритма Е. Meyers и W. Miller ((1989) CABI0S, 4:11-17), который включен в программу ALIGN (версия 2.0), с использованием таблицы веса остатков РАМ120, штрафа за продолжение пропуска 12 и штрафа за пропуск 4.
Последовательности нуклеиновой кислоты и белка, описанные в настоящем описании, можно использовать в качестве "последовательности запроса" для проведения поиска против общедоступных баз данных, например, для идентификации других представителей семейства или родственных последовательностей.
Такой поиск можно проводить с использованием программ NBLAST и XBLAST (версия 2.0) от Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10. Нуклеотидный поиск BLAST можно проводить с использованием программы NBLAST, вес=100, длина слова=12, для получения нуклеотидных последовательностей, гомологичных молекулам нуклеиновых кислот по изобретению. Поиск белков в BLAST можно проводить с использованием программы XBLAST, вес=50, длина слова=3, для получения аминокислотных последовательностей, гомологичных молекулам белка по изобретению. Для проведения выравниваний с пропусками для целей сравнения можно использовать Gapped BLAST, как описано в Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-3402. При использовании программ BLAST и Gapped BLAST, можно использовать параметры по умолчанию соответствующих программ (например, XBLAST и NBLAST). См. http://www.ncbi.nlm.nih.gov.
Как используют в рамках изобретения, термин "гибридизуются в условиях низкой жесткости, умеренной жесткости, высокой жесткости или очень высокой жесткости" описывает условия для гибридизации и промывания. Руководство по проведению реакций гибридизации может быть найдено в Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6, которая включена в качестве ссылки. В этой ссылке описаны водные и неводные способы, и можно использовать любой их них. Конкретные условия гибридизации, упоминаемые в настоящем описании, являются следующими: 1) условия гибридизации низкой жесткости в 6Х хлориде натрия/цитрате натрия (SSC) при приблизительно 45°С, после чего следует два промывания в 0,2Х SSC, 0,1% SDS по меньшей мере при 50°С (температура промываний может быть увеличена до 55°С для условий низкой жесткости); 2) условия гибридизации умеренной жесткости в 6Х SSC при приблизительно 45°С, после чего следует одно или несколько промываний в 0,2Х SSC, 0,1% SDS при 60°С; 3) условия гибридизации высокой жесткости в 6Х SSC при приблизительно 45°С, после чего следует одно или несколько промываний в 0,2Х SSC, 0,1% SDS при 65°С; и предпочтительно 4) условия гибридизации очень высокой жесткости
представляют собой 0,5 М фосфат натрия, 7% SDS при 65°С, а затем
одно или несколько промываний в 0,2Х SSC, 1% SDS при 65°С. Условия очень высокой жесткости (4) являются предпочтительными условиями и условиями, которые следует использовать, если нет иных указаний.
Понятно, что молекулы по настоящему изобретению могут иметь дополнительные консервативные аминокислотные замены или замены неосновных аминокислот, которые не имеют существенного эффекта на их функции.
Термин "аминокислота" охватывает все молекулы, как природные, так и синтетические, которые включают как функциональную аминогруппу, так и функциональную кислотную группу, и способны к включению в полимер из встречающихся в природе аминокислот. Иллюстративные аминокислоты включают встречающиеся в природе аминокислоты; аналоги, производные и их конгенеры; аминокислотные аналоги, имеющие вариантные боковые цепи; и все стереоизомеры любого из вышеуказанного. Как используют в рамках изобретения термин "аминокислота" включает как D-, так и L-оптические изомеры и пептидомиметики.
"Консервативная аминокислотная замена" представляет собой замену, в которой аминокислотный остаток заменен аминокислотным остатком, имеющим сходную боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющих сходные боковые цепи, определены в данной области. Эти семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислотными боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серии, треонин, тирозин, цистеин), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).
Термины "полипептид", "пептид" и "белок" (если он является одноцепочечным) используют в настоящем описании взаимозаменяемо
для обозначения полимеров аминокислот любой длины. Полимер может
быть линейным или разветвленным, он может содержать
модифицированные аминокислоты, и он может прерываться не
аминокислотами. Также термины охватывают полимер аминокислот,
который модифицирован; например, посредством образования
дисульфидной связи, гликозилирования, липидизации,
ацетилирования, фосфорилирования или любого другого
манипулирования, такого как конъюгация с компонентом для
мечения. Полипептид можно выделять из природных источников,
можно продуцировать рекомбинантными способами из
эукариотического или прокариотического хозяина, или он может быть продуктом методик синтеза.
Термины "нуклеиновая кислота", "последовательность нуклеиновой кислоты", "нуклеотидная последовательность" или "полинуклеотидная последовательность" и "полинуклеотид" используют взаимозаменяемо. Они относятся к полимерной форме любой длины из нуклеотидов, либо дезоксирибонуклеотидов, либо рибонуклеотидов, или их аналогов. Полинуклеотид может быть либо одноцепочечным, либо двухцепочечным, и, если он является одноцепочечным, он может представлять собой кодирующую цепь или некодирующую (антисмысловую) цепь. Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и аналоги нуклеотидов. Последовательность нуклеотидов может прерываться ненуклеотидными компонентами. Полинуклеотид, кроме того, можно модифицировать после полимеризации, например, посредством конъюгации с компонентом для мечения. Нуклеиновая кислота может представлять собой рекомбинантный полинуклеотид или полинуклеотид, происходящий из геномной ДНК, кДНК, полусинтетический или синтетический, который либо не встречается в природе, либо связан с другим полинуклеотидом в неприродной компоновке.
Термин "выделенный", как используют в рамках изобретения, относится к материалу, который извлечен из его исходной или естественной среды (например, природная среда, если он является встречающимся в природе). Например, встречающийся в природе полинуклеотид или полипептид, присутствующий в живом животном,
не является выделенным, однако тот же полинуклеотид или полипептид, отделенный посредством вмешательства человека от некоторых или всех сосуществующих с ним материалов в природной системе, является выделенным. Такие полинуклеотиды могут быть частью вектора и/или такие полинуклеотиды или полипептиды могут быть частью композиции, и все еще быть выделенными, поскольку такой вектор или композиция не являются частью среды, в которой они встречаются в природе.
Различные аспекты изобретения более подробно описаны ниже. На протяжении описания предоставлены дополнительные определения.
Молекулы антител
В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с PD-L1 млекопитающего, например, человека. Например, молекула антитела связывается специфически с эпитопом, например, линейным или конформационным эпитопом (например, эпитоп, как описано в настоящем описании) на PD-L1.
Как используют в рамках изобретения, термин "молекула
антитела" относится к белку, например, цепи иммуноглобулина или
ее фрагменту, содержащему по меньшей мере одну
последовательность вариабельного домена иммуноглобулина. Термин
"молекула антитела" включает, например, моноклональное антитело
(включая полноразмерное антитело, которое обладает Fc-областью
иммуноглобулина). В одном варианте осуществления молекула
антитела включает полноразмерное антитело или полноразмерную
цепь иммуноглобулина. В одном варианте осуществления молекула
антитела содержит антигенсвязывающий или функциональный фрагмент
полноразмерного антитела или полноразмерной цепи
иммуноглобулина.
В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой моноспецифическую молекулу антитела и связывает один эпитоп. Примером является моноспецифическая молекула антитела, имеющая множество последовательностей вариабельного домена иммуноглобулина, каждая из которых связывает один и тот же эпитоп.
В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой мультиспецифическую молекулу антитела,
например, она содержит множество последовательностей
вариабельных доменов иммуноглобулинов, где первая
последовательность вариабельного домена иммуноглобулина из множества обладает специфичностью связывания в отношении первого эпитопа и вторая последовательность вариабельного домена иммуноглобулина из множества обладает специфичностью связывания в отношении второго эпитопа. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на одном антигене, например, на одном и том же белке (или субъединице мультимерного белка). В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы перекрываются. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы не перекрываются. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на различных антигенах, например, на различных белках (или различных субъединицах мультимерного белка). В одном варианте осуществления мультиспецифическая молекула антитела содержит третий, четвертый или пятый вариабельный домен иммуноглобулина. В одном варианте осуществления мультиспецифическая молекула антитела представляет собой биспецифическую молекулу антитела, триспецифическую молекулу антитела или тетраспецифическую молекулу антитела.
В одном варианте осуществления мультиспецифическая молекула
антитела представляет собой биспецифическую молекулу антитела.
Биспецифическая молекула антитела обладает специфичностью в
отношении не более чем двух антигенов. Биспецифическая молекула
антитела характеризуется первой последовательностью
вариабельного домена иммуноглобулина, которая обладает специфичностью связывания в отношении первого эпитопа, и второй последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая обладает специфичностью связывания в отношении второго эпитопа. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на одном и том же антигене, например, на одном и том же белке (или субъединице мультимерного белка). В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы перекрываются. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы не перекрываются. В одном варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на различных антигенах, например, различных белках (или
различных субъединицах мультимерного белка). В одном варианте осуществления биспецифическая молекула антитела содержит последовательность вариабельного домена легкой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые обладают специфичностью связывания в отношении первого эпитопа, и последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые обладают специфичностью связывания в отношении второго эпитопа. В одном варианте осуществления биспецифическая молекула антитела содержит половинное антитело, обладающее специфичностью связывания в отношении первого эпитопа, и половинное антитело, обладающее специфичностью связывания в отношении второго эпитопа. В одном варианте осуществления биспецифическая молекула антитела содержит половинное антитело или его фрагмент, обладающие специфичностью связывания отношении первого эпитопа, и половинное антитело или его фрагмент, обладающие специфичностью связывания в отношении второго эпитопа. В одном варианте осуществления биспецифическая молекула антитела содержит scFv или его фрагмент, которые обладают специфичностью связывания в отношении первого эпитопа, и scFv или его фрагмент, которые обладают специфичностью связывания в отношении второго эпитопа. В одном варианте осуществления первый эпитоп расположен на PD-L1 и второй эпитоп расположен на TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ
(например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5), PD-L1 или PD-L2.
В одном варианте осуществления молекула антитела включает диантитело, одноцепочечную молекулу, а также антигенсвязывающий фрагмент антитела (например, Fab, F(ab')2 и Fv). Например, молекула антитела может включать последовательность вариабельного домена тяжелой (Н) цепи (сокращенно обозначаемая в настоящем описании как VH), и последовательность вариабельного домена легкой (L) цепи (сокращенно обозначаемая в настоящем описании как VL). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит или состоит из тяжелой цепи или легкой цепи
(сокращенно обозначаемая в настоящем описании как половинное антитело). В другом примере молекула антитела включает две последовательности вариабельного домена тяжелой (Н) цепи и две
последовательности вариабельного домена легкой (L) цепи, тем самым формируя два антигенсвязывающих центра, как например, Fab, Fab', F(ab')2, Fc, Fd, Fd', Fv, одноцепочечные антитела (например, scFv), антитела с одним вариабельным доменом, диантитела (Dab)
(двухвалентные и биспецифические) и химерные (например, гуманизированные) антитела, которые можно получать путем модификации целых антител или антител, синтезированных de novo с использованием технологий рекомбинантных ДНК. Эти функциональные фрагменты антител сохраняют способность селективно связываться с их соответствующим антигеном или рецептором. Антитела и фрагменты антител могут происходить из любого класса антител, включая, но не ограничиваясь ими, IgG, IgA, IgM, IgD и IgE, и из любого подкласса (например, IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4) антител. Препарат молекул антител может быть моноклональным или поликлональным. Молекула антитела также может представлять собой антитело человека, гуманизированное антитело, антитело с пересаженными CDR или полученное in vitro антитело. Антитело может иметь константную область тяжелой цепи, выбранную, например, из IgGl, IgG2, IgG3 или IgG4. Антитело может иметь легкую цепь, выбранную, например, из каппа или лямбда. Термин "иммуноглобулин" (Ig) используют в настоящем описании взаимозаменяемо с термином "антитело".
Примеры антигенсвязывающих фрагментов молекулы антитела включают: (i) Fab-фрагмент, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CHI; (ii) F (ab' ) 2-фрагмент, двухвалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и CHI; (iv) Fv-фрагмент, состоящий из доменов VL и VH одного плеча антитела, (v) фрагмент диантитела (dAb), который состоит из VH-домена; (vi) вариабельный домен животного семейства верблюжьих или камелизованный вариабельный домен;
(vii) одноцепочечный Fv (scFv), см., например, Bird et al.
(1988) Science 242:423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883); (viii) однодоменное антитело. Эти фрагменты антител получают с использованием общепринятых
способов, известных специалистам в данной области, и фрагменты подвергают скринингу в отношении применимости также, как и интактные антитела.
Термин "антитело" включает интактные молекулы, а также их функциональные фрагменты. Константные области антитела могут быть изменены, например, посредством мутации, для модификации свойств антитела (например, для увеличения или снижения одного или нескольких из: связывание Fc-рецептора, гликозилирование антитела, количество остатков цистеина, эффекторная функция клеток или функция комплемента).
Молекулы антител также могут представлять собой однодоменные антитела. Однодоменные антитела могут включать антитела, определяющие комплементарность области которых являются частью однодоменного полипептида. Примеры включают, но не ограничиваются ими, антитела с тяжелой цепью, антитела, естественным образом лишенные легких цепей, однодоменные антитела, происходящие из общепринятых антител с 4 цепями, модифицированные способами инженерии антитела и однодоменные каркасы, отличные от каркасов, происходящих из антител. Однодоменные антитела могут представлять собой любое однодоменное антитело уровня техники или любое однодоменное антитело, которое появится в будущем. Однодоменные антитела могут происходить из любого вида, включая, но не ограничиваясь ими, мышь, человека, верблюд, ламу, рыбу, козу, кролика и жвачные животные. Согласно другому аспекту изобретения, однодоменное антитело представляет собой встречающееся в природе однодоменное антитело, известное как антитело с тяжелой цепью, лишенное легких цепей. Такие однодоменные антитела описаны, например, в WO 9404678. Для ясности, этот вариабельный домен, происходящий из антитела с тяжелой цепью, естественным образом лишенный легкой цепи, известен в настоящем описании как VHH или наноантитело, чтобы отличить его от общепринятой VH иммуноглобулинов с тяжелой цепью. Такая молекула VHH может происходить из антител, индуцированных в видах Camelidae, например, в верблюде, ламе, дромедаре, алпаке и гуанако. Другие виды, помимо Camelidae, могут продуцировать антитела с тяжелой
цепью, естественным образом лишенные легкой цепи; такие VHH входят в объем настоящего изобретения.
Области VH и VL могут быть подразделены на области гипервариабельности, называемые "определяющими комплементарность областями" (CDR), расположенные между областями, которые являются более консервативными областями, называемыми "каркасными областями" (FR или FW).
Протяженность каркасной области и CDR была точно определена рядом способов (см., Kabat, Е. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 913242; Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917; и определение AbM, используемое программным обеспечением для модулирования антитела АЬМ от Oxford Molecular. См., главным образом, например, Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. Antibody Engineering Lab Manual (Ed.: Duebel, S. and Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg).
Термины "определяющая комплементарность область" и "CDR", как используют в рамках изобретения относятся к последовательностям аминокислот в вариабельных областях антитела, которые сообщают ему специфичность к антигену и аффинность связывания. Как правило, существует три CDR в каждой вариабельной области тяжелой цепи (HCDR1, HCDR2, HCDR3) и три CDR в каждой вариабельной области легкой цепи (LCDR1, LCDR2, LCDR3).
Точные границы аминокислотной последовательности данной CDR можно определять с использованием любой из ряда хорошо известных схем, включая схемы, описанные Kabat et al. (1991), "Sequences of Proteins of Immunological Interest", 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (схема нумерации "Kabat"), Al-Lazikani et al. , (1997) JMB 273, 927-948 (схема нумерации "Chothia"). Как используют в рамках изобретения, CDR, определяемые согласно схеме нумерации "Chothia", также иногда называют "гипервариабельными петлями".
Например, согласно Kabat, аминокислотные остатки CDR вариабельного домена тяжелой цепи (VH) нумеруются как 31-35
(HCDR1), 50-66 (HCDR2) и 99-109 (HCDR3); и аминокислотные остатки CDR в вариабельном домене легкой цепи (VL) нумеруются как 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) и 89-97 (LCDR3). Согласно Chothia, аминокислоты CDR в VH нумеруются как 26-32 (HCDR1), 5257 (HCDR2) и 99-109 (HCDR3); и аминокислотные остатки в VL нумеруются как 26-32 (LCDR1), 50-52 (LCDR2) и 91-96 (LCDR3). При комбинировании определений CDR как по Kabat, так и по Chothia, CDR состоят из аминокислотных остатков 26-35 (HCDR1), 50-66
(HCDR2) и 99-109 (HCDR3) в VH человека и аминокислотных остатков 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) и 89-97 (LCDR3) в VL человека.
Как правило, если нет конкретных указаний, молекулы антител PD-L1 могут включать любую комбинацию одной или нескольких CDR по Kabat и/или гипервариабельных петель по Chothia, например, описанных в таблице 1. В одном варианте осуществления для молекул антител против PD-L1, описанных в таблице 1, используют следующие определения: HCDR1 согласно комбинированным определениям CDR как Kabat, так и Chothia, и HCCDR 2-3 и LCCDR 1-3 согласно определению CDR по Kabat. В соответствии со всеми определениями, каждая VH и VL, как правило, включает три CDR и четыре FR, расположенных от N-конца к С-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
Как используют в рамках изобретения, "последовательность
вариабельного домена иммуноглобулина" относится к аминокислотной
последовательности, которая может формировать структуру
вариабельного домена иммуноглобулина. Например,
последовательность может включать всю или часть аминокислотной последовательности встречающегося в природе вариабельного домена. Например, последовательность может включать или может не включать одну, две или более N- или С-концевых аминокислот, или может включать другие изменения, которые совместимы с образованием белковой структуры.
Термин "антигенсвязывающий центр" относится к части молекулы антитела, которая содержит детерминанты, которые формируют поверхность контакта, которая связывается с полипептидом PD-L1 или его эпитопом. Что касается белков (или миметиков белков), антигенсвязывающий центр, как правило,
включает одну или несколько петель (по меньшей мере из четырех аминокислот или миметиков аминокислот), которые формируют поверхность контакта, которая связывается с полипептидом PD-L1. Как правило, антигенсвязывающий центр молекулы антитела включает по меньшей мере одну или две CDR и/или гипервариабельных петли, или, более конкретно, по меньшей мере три, четыре, пять или шесть CDR и/или гипервариабельных петель.
Термины "моноклональные антитело" или "композиция моноклонального антитела", как используют в рамках изобретения, относятся к препарату молекул антител с единой молекулярной композицией. Композиция моноклональных антител проявляет одну специфичность связывания и аффинность в отношении конкретного эпитопа. Моноклональное антитело можно получать посредством технологии гибридом или способами, в которых не используется технология гибридом (например, рекомбинантные способы).
"Эффективный белок человека" представляет собой белок, который не индуцирует ответ нейтрализующих антител, например, ответ человека против антител мыши (НАМА). КАМА может быть проблемой в ряде случаев, например, если молекулу антитела вводят многократно, например, при лечении хронического или рецидивирующего заболевания. Ответ НАМА может приводить к тому, что многократное введение антител становится неэффективным вследствие увеличенного выведения антител из сыворотки (см., например, Saleh et al. , Cancer Immunol. Immunother., 32:180-190 (1990)) и также вследствие потенциальных аллергических реакций (см., например, LoBuglio et al., Hybridoma, 5:5117-5123 (1986)).
Молекула антитела может представлять собой поликлональное или моноклональное антитело. В других вариантах осуществления антитело может быть рекомбинантно продуцированным, например, продуцированным способами фагового дисплея или комбинаторными способами.
Способы фагового дисплея и комбинаторные способы получения антител известны в данной области (как описано, например, в Ladner et al., патент США № 5223409; Kang et al. , международная публикация № WO 92/18619; Dower et al., международная публикация № WO 91/17271; Winter et al., международная публикация WO
92/20791; Markland et al. , международная публикация № WO 92/15679; Breitling et al. , международная публикация WO 93/01288; McCafferty et al., международная публикация № WO 92/01047; Garrard et al. , международная публикация № WO 92/09690; Ladner et al., международная публикация № WO 90/02809; Fuchs et al. (1991) Bio/Technology 9:1370-1372; Hay et al.
(1992) Hum Antibod Hybridomas 3:81-85; Huse et al. (1989) Science 24 6:1275-12 81; Griffths et al. (1993) EMBO J 12:725-734; Hawkins et al. (1992) J Mol Biol 226:889-896; Clackson et al.
(1991) Nature 352:624-628; Gram et al. (1992) PNAS 8 9:357 6-358 0; Garrad et al. (1991) Bio/Technology 9:1373-1377; Hoogenboom et al. (1991) Nuc Acid Res 19:4133-4137; и Barbas et al. (1991) PNAS 8 8:7978-7982, содержание всех из которых включено в настоящее описание в качестве ссылки).
В одном варианте осуществления антитело представляет собой
полностью человеческое антитело (например, антитело,
продуцированное мышью, которая была генетически модифицирована для продукции антител с последовательностями иммуноглобулинов человека), или не являющееся человеческим антитело, например, антитело грызуна (мыши или крысы), козы, примата (например, обезьяна), верблюда. Предпочтительно, не являющееся человеческим антитело представляет собой антитело грызуна (антитело мыши или крысы). Способы получения антител грызунов известны в данной области.
Моноклональные антитела человека можно получать с
использованием трансгенных мышей, содержащих гены
иммуноглобулинов человека вместо системы мыши. Спленоциты из этих трансгненых мышей, иммунизированных представляющим интерес антигеном, используют для получения гибридом, которые секретируют mAb человека со специфической аффинностью в отношении эпитопов из белка человека (см., например, Wood et al., международная заявка WO 91/00906, Kucherlapati et al., публикация PCT WO 91/10741; Lonberg et al. , международная заявка WO 92/03918; Kay et al., международная заявка 92/03917; Lonberg, N. et al. 1994 Nature 368:856-859; Green, L.L. et al. 1994 Nature Genet. 7:13-21; Morrison, S.L. et al. 1994 Proc. Natl.
Acad. Sci. USA 81:6851-6855; Bruggeman et al. 1993 Year Immunol 7:33-40; Tuaillon et al. 1993 PNAS 90:3720-3724; Bruggeman et al. 1991 Eur J Immunol 21:1323-1326).
Антитело может представлять собой антитело, в котором вариабельная область или ее часть, например CDR, продуцированы в организме не человека, например, крысы или мыши. В объем изобретения входят химерные антитела, антитела с пересаженными CDR и гуманизированные антитела. В объем изобретения входят антитела, продуцированные в организме не человека, например, крысы или мыши, а затем модифицированные, например, в вариабельной каркасной области или константной области, для снижения антигенности у человека.
Химерные антитела можно продуцировать способами рекомбинантных ДНК. В данной области известно несколько таких способов (см. Robinson et al., международная публикация патента PCT/US86/02269; Akira, et al. , патентная заявка Европы 184187; Taniguchi, М., патентная заявка Европы 171496; Morrison et al. , патентная заявка Европы 173494; Neuberger et al. , международная заявка WO 86/01533; Cabilly et al. , патент США № 4816567; Cabilly et al. , патентная заявка Европы 125023; Better et al. (1988 Science 240:1041-1043); Liu et al. (1987) PNAS 84:34393443; Liu et al. , 1987, J. Immunol. 139:3521-3526; Sun et al. (1987) PNAS 84:214-218; Nishimura et al., 1987, Cane. Res. 47:999-1005; Wood et al. (1985) Nature 314:446-449; и Shaw et al., 1988, J. Natl Cancer Inst. 80:1553-1559).
В гуманизированном антителе или антителе с пересаженными CDR по меньшей мере одна или две, но, как правило, все три реципиентных CDR (тяжелой и/или легкой цепей иммуноглобулинов), заменены донорной CDR. В антителе могут быть заменена по меньшей мере часть не являющейся человеческой CDR, или только некоторые из CDR могут быть заменены не являющимися человеческими CDR. Является необходимой только замена ряда CDR, требуемых для связывания гуманизированного антитела с PD-L1. Предпочтительно донором является антитело грызуна, например, антитело крысы или мыши, и реципиентом является каркасная область человека или консенсусная каркасная область человека. Как правило,
иммуноглобулин, предоставляющий CDR, называют "донором" и иммуноглобулин, предоставляющий каркасную область, называют "акцептором". В одном варианте осуществления донорный иммуноглобулин не является человеческим (например, грызуна). Акцепторная каркасная область представляет собой встречающуюся в природе (например, человеческую) каркасную область или консенсусную каркасную область, или последовательность, приблизительно на 85% или более, предпочтительно на 90%, 95%, 99% или более, идентичную им.
Как используют в рамках изобретения, термин "консенсусная последовательность" относится к последовательности, образованной из наиболее часто встречающихся аминокислот (или нуклеотидов) в семействе родственных последовательностей (см., например, Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany 1987). В семействе белков каждое положение в консенсусной последовательности занято аминокислотной, наиболее часто встречающейся в этом положении в семействе. Если две аминокислоты встречаются с равной частотой, в консенсусную последовательность может быть включена любая из них. "Консенсусная каркасная область" относится к каркасной области в консенсусной последовательности иммуноглобулина.
Антитело можно гуманизировать способами, известными в данной области (см., например, Morrison, S. L., 1985, Science 229:1202-1207, by Oi et al. , 1986, BioTechniques 4:214, и Queen et al. US 5585089, US 5693761 и US 5693762, содержание всех из которых включено в настоящее описание в качестве ссылки).
Гуманизированные антитела или антитела с пересаженными CDR можно получать посредством пересадки CDR или замены CDR, где одна, две или все CDR цепи иммуноглобулина могут быть заменены. См., например, патент США 5225539; Jones et al. 1986 Nature 321:552-525; Verhoeyan et al. 1988 Science 239:1534; Beidler et al. 1988 J. Immunol. 141:4053-4060; Winter US 5225539, содержание каждого из которых прямо включено в настоящее описание в качестве ссылки. В Winter описан способ пересадки CDR, который можно использовать для получения гуманизированных антител по настоящему изобретению (патентная заявка
Великобритании GB 2188638А, поданная 26 марта 1987 года; Winter, US 5225539, содержание каждой из которых прямо включено в настоящее описание в качестве ссылки).
Также в объем изобретения входят гуманизированные антитела, в которых конкретные аминокислоты замещены, удалены или вставлены. Критерии выбора аминокислот донора описаны в 558508 9, например, в колонках 12-16 US 5585089, например, в колонках 1216 US 5585089, содержание которого включено в настоящее описание в качестве ссылки. Другие способы гуманизации антител описаны в Padlan et al. ЕР 519596 Al, опубликованной 23 декабря 1992 года.
Молекула антитела может представлять собой одноцепочечное антитело. Одноцепочечное антитело (scFV) может быть сконструировано способами инженерии (см., например, Colcher, D. et al. (1999) Алл N Y Acad Sci 880:263-80; и Reiter, Y. (1996) Clin Cancer Res 2:245-52) . Одноцепочечное антитело может быть димеризованным или мультимеризованным для получения поливалентных антител, обладающих специфичностью в отношении различных эпитопов на одном и том же белке-мишени.
В других вариантах осуществления молекула антитела имеет константную область тяжелой цепи, выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgAl, IgA2, IgD и IgE; в частности, выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи (например, человека) IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4. В другом варианте осуществления молекула антитела имеет константную область легкой цепи, выбранную, например, из константных областей легкой цепи каппа и лямбда (например, человека). Константную область можно изменять, например, посредством мутации, для модификации свойств антитела (например, для повышения или снижения одного или нескольких из: связывания Fc-рецептора, гликозилирования антитела, количества остатков цистеина, функции эффекторных клеток и/или функции комплемента). В одном варианте осуществления антитело имеет эффекторную функцию и может фиксировать комплемент. В других вариантах осуществления антитело не привлекает эффекторные клетки или не фиксирует комплемент. В другом варианте осуществления антитело имеет сниженную способность или не имеет
способности связывать Fc-рецептор. Например, оно представляет собой изотип или подтип, фрагмент или другой мутант, который не поддерживает связывание с Fc-рецептором, например, оно имеет мутантную или удаленную область связывания Fc-рецептора.
Способы изменения константной области антитела известны в данной области. Антитела с измененной функцией, например, измененной аффинностью в отношении эффекторного лиганда, такого как FcR на клетке, или компонент С1 комплемента, можно получать путем замены по меньшей мере одного аминокислотного остатка в константной части антитела другим остатком (см., например, ЕР 388151 А1, патент США № 5624821 и патент США № 5648260, содержание всех из которых включено в настоящее описание в качестве ссылки). Может быть описан сходный тип изменений, который при применении для иммуноглобулина мыши или другого вида снизит или устранит эти функции.
Молекула антитела может быть дериватизирована или связана с
другой функциональной молекулой (например, другой пептид или
белок). Как используют в рамках изобретения,
"дериватизированная" молекула антитела представляет собой молекулу, которая модифицирована. Способы дериватизации включают, но не ограничиваются ими, присоединение флуоресцентной части, радионуклеотида, токсина, фермента или аффинного лиганда, такого как биотин. Таким образом, подразумевается, что молекулы антитела по изобретению включают дериватизированные или иным образом модифицированные формы антител, описанных в настоящем описании, включая молекулы иммуноадгезии. Например, молекула антитела может быть функционально связана (посредством химического связывания, генетического слияния, нековалентной ассоциации или иным образом) с одной или несколькими другими молекулярными структурами, такими как другое антитело (например, биспецифическое антитело или диантитело), поддающийся обнаружению агент, цитотоксический агент, фармацевтическое средство и/или белок или пептид, которые могут опосредовать ассоциацию антитела или части антител с другой молекулой (такой как центральная область стрептавидина или полигистидиновая метка).
Один тип дериватизированной молекулы антитела получают
путем сшивания двух или более антител (одного типа или различных
типов, например, с получением биспецифических антител).
Подходящие сшиватели включают сшиватели, которые являются
гетеробифункциональными, имеющими две отдельных
реакционноспособных группы, разделенных соответствующим
спейсером (например, м-малеимидобензоил-Ы-гидроксисукцинимидный
эфир) или гомобифункциональными (например,
дисукцинимидилсуберат). Такие линкеры доступны от Pierce Chemical Company, Rockford, 111.
Подходящие подающиеся обнаружению средства, посредством
которых может быть дериватизирована (или мечена) молекула
антитела по изобретению, включают флуоресцентные соединения,
различные ферменты, простетические группы, люминесцентные
материалы, биолюминесцентные материалы, испускающие
флуоресценцию атомы металлов, например, европий (Ей) и другие лантаноиды, и радиоактивные материалы (описанные ниже). Иллюстративные флуоресцентные поддающиеся обнаружению средства включают флуоресцеин, флуоресцеин изотиоцианат, родамин, 5-диметиламин-1-нафталинсульфонилхлорид, фикоэритрин и т.п. Антитело также может быть дериватизировано поддающимися обнаружению ферментами, такими как щелочная фосфатаза,
пероксидаза хрена, р-галактозидаза, ацетилхолинэстераза, глюкозооксидаза и т.п. Когда антитело дериватизировано поддающимся обнаружению ферментом, его выявляют добавлением дополнительных реагентов, которые фермент использует для продукции поддающегося обнаружению продукта реакции. Например, когда присутствует поддающееся обнаружению средство пероксидаза хрена, добавление пероксида водорода и диаминобензидина приводит к окрашенному продукту реакции, который поддается обнаружению. Молекула антитела также может быть дериватизирована простетической группой (например, стрептавидин/биотин и авидин/биотин). Например, антитело может быть дериватизировано биотином и может быть обнаружено посредством непрямого измерения связывания авидина или стрептавидина. Примеры подходящих
флуоресценных материалов включают умбеллиферон, флуоресцеин,
флуоресцеин изотиоцианат, родамин, дихлортриазиниламин
флуоресцеин, дансилхлорид или фикоэритрин; пример
люминесцентного материала включает люминол; и примеры биолюминесцентных материалов включают люциферазу, люциферин и экворин.
Меченную молекулу антитела можно использовать, например, в
диагностических целях и/или экспериментально в ряде контекстов,
в том числе (i) для выделения заданного антигена стандартными
способами, такими как аффинная хроматография или
иммунопреципитация; (ii) для обнаружения заданного антигена
(например, в клеточном лизате или супернатанте клеток) для оценки величины и профиля экспрессии белка; (iii) для мониторинга уровней белка в ткани в качестве части процедуры клинического тестирования, например, для определения эффективности данного режима лечения.
Молекулы антител могут быть конъюгированы с другой молекулярной структурой, как правило, меткой или терапевтическим
(например, цитотоксическим или цитостатическим) средством или частью. В диагностических или терапевтических применениях можно использовать радиоактивные изотопы. Радиоактивные изотопы, которые могут быть связаны с антителами против PSMA, включают, но не ограничиваются ими а-, |3- или у-излучатели, или р- и у-излучатели. Такие радиоактивные изотопы включают, но не ограничиваются ими, йод (1311 или 1251), иттрий (90Y) , лютеций
(177Lu) , актиний (225Ас) , празеодимий, астат (211At) , рений (186Re) , висмут (212Bi или 213Bi), индий (1111п) , технеций (99тТс) , фосфор
(32Р) , родий (188Rh) , серу (35S), углерод (14С) , тритий (3Н) , хром
(51Сг) , хлор (36С1), кобальт (57Со или 58Со) , железо (59Fe) , селен
(75Se) или галлий (67Ga) . Радиоизотопы, пригодные в качестве лекарственных средств, включают иттрий (90Y) , лютеций (177 Lu) , актиний (225Ас) , празеодимий, астат (211At) , рений (186Re) , висмут
(212Bi или 213Bi) и родий (188Rh) . Радиоизотопы, пригодные в качестве меток, например, для применения в диагностике, включают йод (1311 или 1251), индий (1111п) , технеций (99тТс) , фосфор (32Р) ,
углерод (14С) и тритий (3Н) , или один или несколько терапевтических изотопов, приведенных выше.
Изобретение относится к радиоактивно меченным молекулам антител и к способам их мечения. В одном варианте осуществления раскрывается способ мечения молекулы антитела. Способ включает приведение в контакт молекулы антитела с хелатирующим агентом, тем самым получая конъюгированное антитело. Конъюгированное антитело подвергают радиоактивному мечению радиоизотопом, например, 111индием, 90иттрием и 177лютецием, тем самым получая меченную молекулу антитела.
Как рассмотрено выше, молекула антитела может быть конъюгирована с лекарственным средством. Терапевтически активные радиоизотопы уже упоминались. Примеры других лекарственных средств включают таксол, цитохалазин В, грамицидин D, бромид этидия, эметин, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, дигидрокси антрацин дион, митоксантрон, митрамицин, актиномицин D, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, татракаин, лидокаин, пропранолол, пуромицин, майтанзиноиды, например майтанзинол (см., патент США № 5208020), СС-1065 (см. патент США № 5475092, 5585499, 5846545) и их аналоги или гомологи. Лекарственные средства включают, но не ограничиваются ими, антиметаболиты (например, метотрексат, б-меркаптопурин, 6-тиогуанин, цитарабин, 5-фторурацил декарбазин), алкилирующие средства (например, мехлорэтамин, тиотепа, хлорамбуцил, СС-1065, мелфалан, кармустин (BSNU) и ломустин (CCNU), циклофосфамид, бусульфан, дибромманнит, стрептозотоцин, митомицин С и цис-дихлордиаминплатина (II) ( (DDP) цисплатин), антрациклины (например, даунорубицин (прежде дауномицин) и доксорубицин), антибиотики (например, дактиномицин (прежде актиномицин), блеомицин, митрамицин и антрамицин (АМС)) и антимитотические средства (например, винкристин, винбластин, таксол и майтанзиноиды).
В одном аспекте изобретение относится к способу предоставления связывающей мишень молекулы, которая специфически связывается с рецептором PD-L1. Например, связывающая мишень
молекула представляет собой молекулу антитела. Способ включает: предоставление белка-мишени, который содержит по меньшей мере часть не являющегося человеческим белка, причем часть является гомологичной (по меньшей мере на 70, 75, 80, 85, 87, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98% идентична) соответствующему белку-мишени человека, но отличается по меньшей мере на одну аминокислоту (например, по меньшей мере на одну, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь или девять аминокислот); получение молекулы антитела, которая специфически связывается с антигеном; и оценку эффективности связывающего соединения в отношении модулирования активности белка-мишени. Кроме того, способ может включать введение связывающегося соединения (например, молекулы антитела) или производного (например, гуманизированная молекула антитела) человеку.
В определенных вариантах осуществления молекула антитела
представляет собой мультиспецифическую (например,
биспецифическую или триспецифическую) молекулу антитела. Протоколы получения биспецифических или гетеродимерных молекул антител известны в данной области; включая, но не ограничиваясь ими, например, подход "выступ в полости", описанный, например, в US 5731168; образование пар Fc посредством электростатического направленного взаимодействия, как описано, например, в WO 09/089004, WO 06/106905 и WO 2010/129304; образование гетеродимеров сконструированных доменов с обменом цепями (SEED), как описано, например, в WO 07/110205; обмен Fab-плечами, как описано, например, в WO 08/119353, WO 2011/131746 и WO 2013/060867; двойной конъюгат антитела, например, посредством сшивания с получением биспецифической структуры с использованием гетеробифункционального реагента, имеющего амин-реактивную группу и сульфгидрил-реактивную группу, как описано, например, в US 4433059; биспецифические детерминанты антител, полученные посредством рекомбинации половинных антител (пары тяжелая-легкая цепь или Fab) из различных антител посредством цикла восстановления и окисления дисульфидных связей между двумя тяжелыми цепями, как описано, например, в US 4444878; трифункциональные антитела, например, три Fab'-фрагмента, сшитые
через сульфгидрильные реакционноспособные группы, как описано,
например, в US5273743; биосинтетические связывающие белки,
например, пару scFv, сшитых через С-концевые хвостовые части,
предпочтительно через дисульфид- или амин-реактивное химическое
сшивание, как описано, например, в US5534254; бифункциональные
антитела, например, Fab-фрагменты с различной специфичностью
связывания, димеризованные через лейциновые молнии (например, с-
fos и c-jun), которые имеют замененный константный домен, как
описано, например, в US5582996; биспецифические и
олигоспецифические моно- и олиговалентные рецепторы, например, области VH-CH1 двух антител (двух Fab-фрагментов), связанные через полипептидный спейсер между областью СН1 одного антитела и областью VH другого антитела, как правило, со связанными с ними легкими цепями, как описано, например, в US5591828; биспецифические конъюгаты ДНК-антитело, например, сшивание антител или Fab-фрагментов через двухцепочечный фрагмент ДНК, как описано, например, в US5635602; биспецифические слитые белки, например, экспрессирующая конструкция, содержащая две scFv с гидрофильным спиралевидным пептидным линкером между ними и полной константной областью, как описано, например, в US5637481; мультивалентные или мультиспецифические связывающие белки, например, димер полипептидов, имеющих первый домен со связывающей областью вариабельной области тяжелой цепи Ig и второй домен со связывающей областью вариабельной области легкой цепи Ig, обычно называемый диантителами (также предусматриваются структуры более высокого порядка, создающие биспецифические, триспецифические или тетраспецифические молекулы, как описано, например, в US5837242; конструкции миниантител со сшитыми цепями VL и VH, дополнительно связанными через пептидные спейсеры с шарнирной областью и областью СНЗ антитела, которые могут димеризоваться с образованием биспецифических/поливалентных молекул, как описано, например, в US5837821; VH- и VL-домены, связанные коротким пептидным линкером (например, 5 или 10 аминокислот) или совсем без линкера в любой ориентации, которые могут образовывать димеры с образованием биспецифических диантител; тримеры и тетрамеры, как описано, например, в
US5844094; нить VH-доменов (или VL-доменов в представителях
семейств), связанных пептидными связями с поддающимися сшиванию
группами на С-конце, далее связанных с VL-доменами с
образованием серии FV (или scFv), как описано, например, в
US5864019; и одноцепочечные связывающие полипептиды как с VH-,
так и с VL-доменом, связанными через пептидный линкер, которые
комбинируют в поливалентные структуры через нековалентное или
химическое сшивание с образованием, например, гомобивалентных,
гетеробивалентных, тривалентных и тетравалентных структур с
использованием формата как scFV, так и диантител, как описано,
например, в US58 69 62 0. Дополнительные иллюстративные
мультиспецифические и биспецифические молекулы и способы их
получения представлены, например, в US5910573, US5932448,
US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353,
US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896,
US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056,
US7527787, US7534866, US7612181, US2002004587А1, US2002076406A1,
US2002103345A1, US2003207346А1, US2003211078А1, US200421964ЗА1,
US2004220388A1, US2004242847А1, US2005003403А1, US2005004352А1,
US2005069552A1, US2005079170А1, US200510054ЗА1, US2005136049А1,
US2005136051A1, US2005163782А1, US2005266425А1, US2006083747А1,
US2006120960A1, US2006204493А1, US2006263367А1, US2007004909А1,
US2007087381A1, US2007128150А1, US2007141049А1, US2007154901А1,
US2007274985A1, US2008050370А1, US2008069820А1, US2008152645А1,
US2008171855A1, US2008241884А1, US2008254512А1, US2008260738А1,
US2009130106A1, US2009148905A1, US2009155275А1, US2009162359А1,
US2009162360A1, US2009175851А1, US2009175867А1, US2009232811А1,
US2009234105A1, US2009263392А1, US2009274649А1, ЕР346087А2,
WO0006605A2, WO02072635A2, WO04081051А1, WO06020258А2 ,
WO2007044887A2, W02007095338А2 , W02007137760А2 , W02008119353А1, WO2009021754A2, W02009068630А1, WO9103493A1, W09323537A1, WO9409131A1, W09412625A2, WO9509917A1, W09637621A2, WO9964460A1. Содержание приведенных выше заявок включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
В других вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 (например, моноспецифическая, биспецифическая или
мультиспецифическая молекула антитела) ковалентно связана, например слита, с другим партнером, например, белком, например, одним, двумя или более цитокинами, например, в качестве слитой молекулы, например, слитого белка. В других вариантах осуществления слитая молекула содержит один или несколько белков, например, один, два или более цитокинов. В одном варианте осуществления цитокин представляет собой интерлейкин (IL), выбранный из одного, двух, трех или более из IL-1, IL-2, IL-12, IL-15 или IL-21. В одном варианте осуществления биспецифическая молекула антитела имеет первую специфичность связывания с первой мишенью (например, с PD-L1), вторую специфичность связывания со второй мишенью (например, LAG-3 или TIM-3) и необязательно связана с доменом интерлейкина (например, IL-12), например, полноразмерным IL-12 или его частью.
"Слитый белок" и "слитый полипептид" относятся к полипептиду, имеющему по меньшей мере две части, ковалентно связанных вместе, где каждая из частей представляет собой полипептид, имеющий отличающееся свойство. Свойство может представлять собой биологическое свойство, такое как активность in vitro или in vivo. Свойство также может представлять собой простое химическое или физическое свойство, такое как связывание с молекулой-мишенью, катализ реакции и т.д. Две части могут быть связаны прямо одной пептидной связью или через пептидный линкер, однако находятся в одной рамке считывания друг с другом.
Настоящее изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей описанную выше молекулу антитела, ее векторам и клеткам-хозяевам. Молекула нуклеиновой кислоты включает, но не ограничивается ими, РНК, геномную ДНК и кДНК.
Иллюстративные молекулы антител против PD-L1
В определенных вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID N0: 1, SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 195; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 2 и аминокислотную
последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID N0: 9, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID N0: 10 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID N0: 11.
В других вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 содержит:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID N0: 1, SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 195; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 5 и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID N0: 12, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID N0: 13 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID N0: 14.
В вариантах осуществления вышеупомянутых молекул антител VHCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 1. В других вариантах осуществления VHCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 4. В других вариантах осуществления VHCDR1 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 195.
В вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител имеют вариабельную область тяжелой цепи, содержащую по меньшей мере одну каркасную область (FW), содержащую любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID N0: 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152 или 154, или аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную им, или имеющую не более двух аминокислотных замен, инсерций или делеций по сравнению с любой из аминокислотных последовательностей SEQ ID N0: 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152 или 154 .
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител имеют вариабельную область тяжелой цепи, содержащую по меньшей мере одну каркасную область, содержащую любую из
аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152 или 154 .
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител имеют вариабельную область тяжелой цепи, содержащую по меньшей мере две, три или четыре каркасных области, содержащих любые из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 124, 12 6, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152 или 154.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат аминокислотную последовательность VHFW1 SEQ ID NO: 124, 126, 128 или 130, аминокислотную последовательность VHFW2 SEQ ID NO: 132, 134, 136, 138, 140 или 142, и аминокислотную последовательность VHFW3 SEQ ID NO: 144, 14 6, 148, 150 или 152, и, необязательно, дополнительно содержат аминокислотную последовательность VHFW4 SEQ ID NO: 154.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител имеют вариабельную область легкой цепи, содержащую по меньшей мере одну каркасную область, содержащую любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184 или 18 6, или аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную им, или имеющую не более двух аминокислотных замен, инсерций или делеций по сравнению с любой из аминокислотных последовательностей 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184 или 186.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител имеют вариабельную область легкой цепи, содержащую по меньшей мере одну каркасную область, содержащую любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184 или 186.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител имеют вариабельную область легкой цепи, содержащую по меньшей мере две, три или четыре каркасных области, содержащих любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 156, 158,
160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184 или 18 6.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат аминокислотную последовательность VLFW1 SEQ ID NO: 156, 158, 160, 162, 164 или 166, аминокислотную последовательность VLFW2 SEQ ID NO: 168 или 170 и аминокислотную последовательность VLFW3 SEQ ID NO: 172, 174, 176, 178, 180, 182 или 184, и, необязательно, дополнительно содержат аминокислотную последовательность VLFW4 SEQ ID NO: 186.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85% идентичную любой из SEQ ID NO: 18, 30, 38, 46, 50, 54, 62, 70 или 7 8.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, 30, 38, 46, 50, 54, 62, 7 0 или 78.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85% идентичную любой из SEQ ID NO: 22, 26, 34, 42, 58, 66, 74, 82 или 8 б.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, 2 6, 34, 42, 58, 66, 74, 82 или 86.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 20.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 32.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 96.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 197.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 38.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 40.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 91.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 46.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 48.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 50.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 52.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 54.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 56.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 70.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 78.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 80.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 247.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 260.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22. В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 34.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 36.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 42.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 44.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 58.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела
содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 60.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 66.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 68.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 74.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 76
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 82.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 84.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 86.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 88.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 18, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 22.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 18, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 26.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 18, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 86.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 30, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 34.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 30, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 66.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 38, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 42.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 38, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 74 .
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 4 6, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 42.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 50, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 42.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 50, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 22.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 50, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 86.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 54, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 58.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 54, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 86.
антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 62, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 66.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 62, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 86.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 70, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 66.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 78, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 82.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 20, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 24.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 20, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 28.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 20, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 88.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 36.
антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 32, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 68.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 40, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 44.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 40, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 76.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 48, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 44.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 52, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 44.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 52, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 24.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела
содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 52, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 88.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 2 60, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 44.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 56, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 60.
антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 56, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 88.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 64, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 68.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 64, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 88.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 72, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 68.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 80, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 84.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 247, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 84.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 197, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 36.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 91, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 44.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела
содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 96, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 68.
антител выбраны из Fab, F(ab')2, Fv или одноцепочечного Fv-фрагмента (scFv).
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область тяжелой цепи, выбранную из IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область легкой цепи, выбранную из константных областей легкой цепи каппа или лямбда.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область тяжелой цепи IgG4 человека с мутацией в положении 22 8 SEQ ID N0: 188 или 190 и константную область легкой цепи каппа.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область тяжелой цепи IgG4 человека с мутацией серина на пролин в положении 22 8 SEQ ID N0: 188 или 190 и константную область легкой цепи каппа.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область тяжелой цепи IgGl человека с мутацией аспарагина на аланин в положении 2 97 SEQ ID N0: 192 и константную область легкой цепи каппа.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область тяжелой цепи IgGl человека с мутацией аспартата на аланин в положении 2 65, и мутацией пролина на аланин в положении 32 9 SEQ ID N0: 193 и константную область легкой цепи каппа.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область тяжелой цепи IgGl человека с мутацией лейцина на аланин в положении 2 34 и мутацией лейцина на аланин в положении 235 SEQ ID N0: 194 и константную область легкой цепи каппа.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител способны связываться с PD-L1 человека с константой диссоциации (KD) менее чем приблизительно 0,2 нМ.
В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связываются с PD-L1 человека с KD менее чем приблизительно 2,5 нМ, 2 нМ, 1,5 нМ, 1 нМ, 0,5нМ, 0,2 нМ, 0,15
нМ, 0,1 нМ, 0,05 нМ или 0,02 нМ, например, приблизительно от 0,2 нМ до 0,1 нМ, например, приблизительно от 0,166 нМ до 0,176 нМ, например, приблизительно 0,171 нМ, или, например, приблизительно от 0,1 нМ до 1,5 нМ, например, приблизительно от 0,2 5 до 0,4 6 нМ, например, приблизительно 0,137 нМ, 0,931 нМ или 2,14 нМ, например, при измерении способом Biacore.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связываются с PD-L1 яванского макака с KD менее чем приблизительно 1 нМ, 0,8 нМ, 0,6 нМ, 0,4 нМ, 0,2 нМ, 0,15 нМ, 0,1 нМ, 0,05 нМ или 0,02 нМ, например, приблизительно от 0,1 нМ до 1 нМ, например, приблизительно от 0,2 нМ до 0,8 нМ, например, приблизительно от 0,13 нМ до 0,11 нМ, например, приблизительно 0,124 нМ, 0,369 нМ, 0,431 нМ, 0,735 нМ, например, при измерении способом Biacore.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связываются с PD-L1 мыши с KD менее чем приблизительно 100 нМ, 60 нМ, 10 нМ, 1 нМ, 0,5 нМ, 0,2 нМ, 0,15 нМ, 0,1 нМ, 0,05 нМ или 0,02 нМ, например, приблизительно от 0,13 нМ до 0,11 нМ, например, приблизительно 0,124 нМ, 0,04 нМ, 0,075 нМ или 77,4 нМ, например, при измерении способом Biacore.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связываются с PD-L1 крысы с KD менее чем приблизительно 15 нМ, 10 нМ, 5 нМ, 1 нМ, 0,5 нМ, 0,2 нМ, 0,15 нМ, 0,1 нМ, 0,05 нМ, или 0,02 нМ, например, приблизительно от 0,1 нМ до 3,5 нМ, например, приблизительно от 0,13 нМ до 0,11 нМ, например, приблизительно 0,124 нМ, 0,04 нМ, 0, 075 нМ, 0,431 нМ, 1,36 нМ, 6,14 нМ или 77,4 нМ, например, при измерении способом Biacore. В определенных вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связываются как с PD-L1 человека, так и с PD-L1 яванского макака, со сходной KD, например, в нМ-диапазоне, например, при измерении способом Biacore.
В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связываются с клетками 300.19, которые экспрессируют PD-L1 человека (например, клетки 300.19, трансфицированные PD-L1 человека) с KD менее чем приблизительно 0,5 нМ, 0,4 нМ, 0,3 нМ, 0,2 нМ, 0,1 нМ, 0, 075 нМ, 0,05 нМ, 0, 025 нМ или 0,01 нМ,
например, приблизительно 0,285 нМ, например, при измерении с помощью FACS-анализа.
В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связываются с клетками, которые экспрессируют PD-L1 яванского макака (например, клетки, трансфицированные PD-L1 яванского макака) с KD менее чем приблизительно 1 нМ, 0,7 5 нМ, 0,5 нМ, 0,25 нМ или 0,01 нМ, например, приблизительно 0,129 нМ, например, при измерении с помощью FACS-анализа.
В определенных вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител не являются перекрестно реагирующими с PD-L1 мыши или крысы. В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела являются перекрестно реагирующими с PD-L1 макака резус. Например, перекрестную реактивность можно измерять способом Biacore или с помощью анализа связывания с использованием клеток, которые экспрессируют PD-L1 (например, клетки 300.19, экспрессирующие PD-L1 человека). В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связывают внеклеточный Ig-подобный домен PD-L1.
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител способны снижать связывание PD-1 или В7-1 с PD-L1 или клеткой, которая экспрессирует PD-L1. В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител снижают (например, блокируют) связывание PD-L1 с клеткой, которая экспрессирует PD-L1 (например, клетки 300.19, экспрессирующие PD-L1 человека) с IC50 менее чем приблизительно 1,5 нМ, 1 нМ, 0,8 нМ, 0,6 нМ, 0,4 нМ, 0,2 нМ или 0,1 нМ, например, от приблизительно 0,2 нМ до приблизительно 0,1 нМ, например, приблизительно 0,15 нМ или менее, например, приблизительно 0,145 нМ. В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые антитела снижают (например, блокируют) связывание В7-1 с клеткой, которая экспрессирует PD-L1 (например, клетки 300.19, экспрессирующие PD-L1 человека) с IC50 менее чем приблизительно 2 нМ, 1,5 нМ, 1 нМ, 0,5 нМ или 0,2 нМ, например, от приблизительно 0,5 нМ до приблизительно 0,01 нМ, или приблизительно 0,2 нМ или менее, например, приблизительно 0,1 нМ.
антител способны усиливать ответ антигенспецифических Т-клеток.
В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител повышают экспрессию IL-2 из клеток, активированных стафилококковым энтеротоксином В (SEB) (например, в концентрации 25 мкг/мл) по меньшей мере приблизительно в 2, 3, 4, 5, б, 7 или 8 раз, например, приблизительно в 2-3 раза, например, приблизительно в 2-2,6 раза, например, приблизительно в 2,39 раза, или, например, приблизительно от 2,4 до 6,4 раза, по сравнению с экспрессией IL-2, когда используют изотипический контроль (например, IgG4), например, при измерении в анализе активации Т-клеток SEB, например, с использованием мононуклеарных клеток периферической крови (РМВС) или анализа с цельной кровью человека ex vivo.
В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител повышают экспрессию IFN-y из Т-клеток, активированных SEB
(например, в концентрации 3 пг/мл) по меньшей мере приблизительно в 2, 3, 4, 5, б, 7 или 8 раз, например, приблизительно в 0,5-4,5 раза, например, приблизительно в 2,72 раза, или, например, приблизительно в 4-7 раз по сравнению с экспрессией IFN-y, когда используют изотипический контроль
(например, IgG4), например, при измерении в анализе активности IFN-y.
В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связывают PD-L1 с Kd медленнее чем 5х10~4, 1х10~4, 5х10~5
или 1х10~5 с-1, например, приблизительно б,33х10~5 с-1, например, при измерении способом Biacore. В некоторых вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител связывают с PD-L1 с Ка быстрее чем lxlO4, 5х104, 1х105 или 5х105 М 1с 1, например, приблизительно 3,07х104 М 1с~1, например, при измерении способом Biacore.
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 представляет собой моноспецифическую молекулу антитела или биспецифическую молекулу антитела. В вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 имеет первую специфичность связывания с PD-L1 и вторую специфичность
связывания с TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5), PD-1 или PD-L2. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит антигенсвязывающий фрагмент антитела, например, половинное антитело или антигенсвязывающий фрагмент половинного антитела.
В другом аспекте изобретение относится к выделенной молекуле нуклеиновой кислоты, кодирующей любую из вышеупомянутых молекул антител, к ее векторам и клеткам-хозяевам.
Предусматривается выделенная нуклеиновая кислота,
кодирующая вариабельную область тяжелой цепи или вариабельную область легкой цепи, или обе из них, из любой из вышеупомянутых молекул антител.
В одном варианте осуществления предусматривается выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая CDR 1-3 тяжелой цепи, где указанная нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID N0: 104-108, 113-117 или 205-208.
В другом варианте осуществления предусматривается выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая CDR 1-3 легкой цепи, где указанная нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 109-112, 118-123, 209-214 и 245246.
В других вариантах осуществления вышеупомянутая нуклеиновая кислота, кроме того, содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельный домен тяжелой цепи, где указанная нуклеотидная последовательность по меньшей мере на 85% идентична любой из SEQ ID NO: 19, 31, 39, 47, 51, 55, 63, 71, 79, 90, 95, 10 0, 196 или 201.
В других вариантах осуществления вышеупомянутая нуклеиновая кислота, кроме того, содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельный домен тяжелой цепи, где указанная нуклеотидная последовательность содержит любую из SEQ ID NO: 19, 31, 39, 47, 51, 55, 63, 71, 79, 90, 95, 100, 196 или 201.
В других вариантах осуществления вышеупомянутая нуклеиновая кислота, кроме того, содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую тяжелую цепь, где указанная нуклеотидная последовательность по меньшей мере на 85% идентична любой из SEQ
ID NO: 21, 33, 41, 49, 53, 57, 65, 73, 81, 92, 97, 101, 198 или 202 .
В других вариантах осуществления вышеупомянутая нуклеиновая кислота, кроме того, содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую тяжелую цепь, где указанная нуклеотидная последовательность содержит любую из SEQ ID NO: 21, 33, 41, 49, 53, 57, 65, 73, 81, 92, 97, 101, 198 или 202.
В других вариантах осуществления вышеупомянутая нуклеиновая кислота, кроме того, содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельный домен легкой цепи, где указанная нуклеотидная последовательность по меньшей мере на 85% идентична любой из SEQ ID NO: 23, 27, 35, 43, 59, 67, 75, 83, 87, 93, 98, 102, 199 или 203.
В других вариантах осуществления вышеупомянутая нуклеиновая кислота, кроме того, содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельный домен легкой цепи, где указанная нуклеотидная последовательность содержит любую из SEQ ID NO: 23, 27, 35, 43, 59, 67, 75, 83, 87, 93, 98, 102, 199 или 203.
В других вариантах осуществления вышеупомянутая нуклеиновая кислота, кроме того, содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь, где указанная нуклеотидная последовательность по меньшей мере на 85% идентична любой из SEQ ID NO: 25, 29, 37, 45, 61, 69, 77, 85, 89, 94, 99, 103, 200 или 204 .
В других вариантах осуществления вышеупомянутая нуклеиновая кислота, кроме того, содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь, где указанная нуклеотидная последовательность содержит любую из SEQ ID NO: 25, 29, 37, 45, 61, 69, 77, 85, 89, 94, 99, 103, 200 или 204.
В определенных вариантах осуществления предусматриваются один или несколько экспрессирующих векторов и клеток-хозяев, содержащих вышеупомянутые нуклеиновые кислоты.
Также предусматривается способ получения молекулы антитела или ее фрагмента, включающий культивирование клетки-хозяина, как описано в настоящем описании, в условиях, подходящих для экспрессии генов.
Фармацевтические композиции и наборы
В другом аспекте настоящее изобретение относится к
композициям, например, фармацевтически приемлемым композициям,
которые включают молекулу антитела, описанную в настоящем
описании, вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Как
используют в рамках изобретения, "фармацевтически приемлемый
носитель" включает любые и все растворители, дисперсионные
среды, обеспечивающие изотоничность и замедляющие всасывание
средства, и т.п., которые являются физиологически совместимыми.
Носитель может быть пригодным для внутривенного,
внутримышечного, подкожного, парентерального,
внутриспинномозгового или эпидермального введения (например, посредством инъекции или инфузии).
Композиции по настоящему изобретению могут иметь различные формы. Они включают, например, жидкие, полутвердые и твердые дозированные формы, такие как жидкие растворы (например, инъецируемые и инфузируемые растворы), дисперсии или суспензии, липосомы и суппозитории. Предпочтительная форма зависит от предполагаемого пути введения и терапевтического применения. Типичные предпочтительные композиции имеют форму инъецируемых или инфузируемых растворов. Предпочтительным путем введения является парентеральное (например, внутривенное, подкожное, внутрибрюшинное, внутримышечное) введение. В предпочтительном варианте осуществления антитело вводят посредством внутривенной инфузии или инъекции. В другом предпочтительном варианте осуществления антитело вводят посредством внутримышечной или подкожной инъекции.
Выражения "парентеральное введение" и "введенный
парентерально", как используют в рамках изобретения, означают
пути введения, отличные от энтерального и местного введения,
обычно посредством инъекции, и включают, но не ограничиваются
ими, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную,
интратекальную, интракапсулярную, внутриглазничную,
внутрисердечную, внутрикожную, внутрибрюшинную,
транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, внутрисуставную,
подкапсулярную, субарахноидальную, внутрипозвоночную,
эпидуральную и внутригрудинную инъекцию и инфузию.
Терапевтические композиции, как правило, должны быть стерильными и стабильными в условиях изготовления и хранения. Композиция может быть изготовлена в качестве раствора, микроэмульсии, дисперсии, липосомы или другой упорядоченной структуры, подходящей для высокой концентрации антитела. Стерильные инъецируемые растворы можно получать путем включения активного соединения (т.е. антитела или части антитела) в требуемом количестве в соответствующий растворитель с одним или комбинацией ингредиентов, перечисленных выше, при необходимости, с последующей стерилизацией фильтрованием. Как правило, дисперсии получают включением активного соединения в стерильный носитель, который содержит основную дисперсионную среду и другие требуемые ингредиенты из перечисленных выше ингредиентов. В случае стерильных порошков для получения стерильных инъецируемых растворов, предпочтительными способами изготовления являются вакуумная сушка и сублимационная сушка, которые обеспечивают порошок активного ингредиента с любым дополнительным требуемым ингредиентом из ранее стерилизованного фильтрацией его раствора. Надлежащую текучесть раствора можно поддерживать, например, с использованием материалов покрытий, таких как лецитин, посредством поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсий, и с использованием поверхностно-активных веществ. Пролонгированного всасывания инъецируемой композиции можно достигать путем включения в композицию средства, которое замедляет всасывание, например, моностеаратов и желатина.
Молекулы антител можно вводить различными способами, известными в данной области, хотя для многих терапевтических применений предпочтительным путем/способом введения является внутривенная инъекция или инфузия. Например, молекулы антител можно вводить посредством внутривенной инфузии при скорости более 20 мг/мин, например, 20-40 мг/мин, и, как правило, больше или равно 4 0 мг/мин для достижения дозы приблизительно от 35 до 44 0 мг/м2, как правило, приблизительно от 7 0 до 310 мг/м2, и более часто приблизительно от 110 до 130 мг/м2. Например, молекулы антител можно вводить посредством внутривенной инфузии
со скоростью менее 10 мг/мин; как правило, меньше или равно 5
мг/мин для достижения дозы приблизительно от 1 до 100 мг/м2, как
правило, приблизительно от 5 до 50 мг/м2, приблизительно от 7 до
25 мг/м2 и более часто приблизительно 10 мг/м2. Как будет понятно
специалисту в данной области, путь и/или способ введения будет
варьироваться в зависимости от желаемых результатов. В
определенных вариантах осуществления активное соединение можно
составлять с носителем, который защищает соединение от быстрого
высвобождения, таким как состав с контролируемым высвобождением,
включая имплантаты, трансдермальные пластыри и
микроинкапсулированные системы доставки. Можно использовать
биодеградируемые биосовместимые полимеры, такие как
этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, сложные полиортоэфиры и полимолочная кислота. Множество способов получения таких составов запатентовано или общеизвестно специалистам в данной области. См., например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.
В определенных вариантах осуществления молекулу антитела можно вводить перорально, например, с инертным разбавителем или усвояемым пищевым носителем. Соединение (и другие ингредиенты, если желательно) также может быть заключено в твердую или мягкую желатиновую капсулу, спрессовано в таблетки или включено непосредственно в рацион индивидуума. Для перорального терапевтического введения соединение может быть включено с эксципиентами и использовано в форме проглатываемых таблеток, буккальных таблеток, лепешек, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, вафель и т.п. Для введения соединения по изобретению путем, отличным от парентерального введения, может быть необходимым покрытие соединения или совместное введение соединения с материалом для предупреждения его инактивации. Терапевтические композиции также можно вводить с использованием медицинских устройств, известных в данной области.
Режимы дозирования корректируют для обеспечения оптимального желаемого ответа (например, терапевтического ответа). Например, можно вводить однократный болюс, можно
вводить несколько разделенных доз в течение времени или дозу
можно пропорционально снижать или повышать, если это необходимо
для терапевтического случая. Особенно преимущественным является
составление парентеральных композиций в единичной дозированной
форме для простоты введения и единообразия дозировки. Единичная
дозированная форма, как используют в рамках настоящего
изобретения, относится к физически дискретным единицам,
подходящим в качестве однократных дозировок для индивидуумов,
подлежащих лечению; причем каждая единица содержит заданное
количество активного соединения, вычисленное для достижения
требуемого терапевтического эффекта, вместе с требуемым
фармацевтическим носителем. Характеристики единичных
дозированных форм по настоящему изобретению определяются и прямо зависят от (а) уникальных характеристик активного соединения и конкретного терапевтического эффекта, подлежащего достижению, и (Ь) ограничений, свойственных данной области, в отношении составления активного соединения для лечения чувствительности индивидуумов.
Иллюстративный неограничивающий диапазон для терапевтически или профилактически эффективного количества молекулы антитела составляет 0,1-30 мг/кг, более предпочтительно 1-25 мг/кг. Дозировки и терапевтические режимы молекулы антитела против PD-L1 могут быть определены квалифицированным специалистом. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят посредством инъекции (например, подкожно или внутривенно) в дозе приблизительно от 1 до 40 мг/кг, например, от 1 до 30 мг/кг, например, приблизительно от 5 до 25 мг/кг, приблизительно от 10 до 20 мг/кг, приблизительно от 1 до 5 мг/кг, от 1 до 10 мг/кг, от 5 до 15 мг/кг, от 10 до 20 мг/кг, от 15 до 25 мг/кг или приблизительно 3 мг/кг. Схема дозирования может варьироваться, например, от одного раза в неделю до одного раза в 2, 3 или 4 недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в дозе приблизительно от 10 до 2 0 мг/кг раз в две недели. Молекулу антитела можно вводить посредством внутривенной инфузии со скоростью более 2 0 мг/мин, например, 20-40 мг/мин, и, как правило, больше или равно 40
мг/мин для достижения дозы приблизительно от 35 до 440 мг/м2, как правило, приблизительно от 70 до 310 мг/м2, и более часто приблизительно от 110 до 130 мг/м2. В вариантах осуществления скорость инфузии приблизительно от 110 до 130 мг/м2 обеспечивает уровень приблизительно 3 мг/кг. В других вариантах осуществления молекулу антитела можно вводить посредством внутривенной инфузии со скоростью менее 10 мг/мин, например, меньше или равно 5 мг/мин, для достижения дозы приблизительно от 1 до 100 мг/м2, например, приблизительно от 5 до 50 мг/м2, приблизительно от 7 до 2 5 мг/м2 или приблизительно 10 мг/м2. В некоторых вариантах осуществления антитело инфузируют на протяжении периода приблизительно 3 0 мин. Молекулу антитела можно вводить посредством внутривенной инфузии со скоростью менее 10 мг/мин, предпочтительно, меньше или равно 5 мг/мин, для достижения дозы приблизительно от 1 до 100 мг/м2, предпочтительно приблизительно от 5 до 50 мг/м2, приблизительно от 7 до 25 мг/м2, или более предпочтительно приблизительно 10 мг/м2. Следует отметить, что величины дозировок могут варьироваться в зависимости от типа и тяжести состояния, подлежащего смягчению. Кроме того, следует понимать, что для любого конкретного индивидуума конкретные режимы дозирования следует корректировать с течением времени в соответствии с потребностями индивидуума и профессиональным мнением лица, осуществляющего введение или контролирующего введение композиций, и что диапазоны дозировок, описанные в настоящем описании, являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения объема или практики заявленной композиции.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению включают "терапевтически эффективное количество" или "профилактически эффективное количество" антитела или части антитела по изобретению. "Терапевтически эффективное количество" относится к количеству, эффективному, в необходимых дозировках и в течение необходимых периодов времени, для достижения желаемого терапевтического результата. Терапевтически эффективное количество модифицированного антитела или фрагмента антитела может варьироваться в зависимости от таких факторов, как
заболевание, возраст, пол и масса тела индивидуума, и
способность антитела или части антитела индуцировать желаемый
ответ у индивидуума. Терапевтически эффективное количество также
представляет собой количество, в котором любые токсические или
вредоносные эффекты модифицированного антитела или фрагмента
антитела перевешиваются терапевтически благоприятными эффектами.
"Терапевтически эффективная дозировка" предпочтительно
ингибирует поддающийся измерению параметр по меньшей мере
приблизительно на 2 0%, более предпочтительно по меньшей мере
приблизительно на 4 0%, еще более предпочтительно по меньшей мере
приблизительно на 60%, и еще более предпочтительно по меньшей
мере приблизительно на 8 0% относительно не подвергнутых лечению
индивидуумов. Способность соединения ингибировать поддающийся
измерению параметр, например, злокачественную опухоль, можно
оценивать в модельной системе на животных, прогнозирующей
эффективность при опухолях у человека. Альтернативно это
свойство композиции можно оценивать путем исследования
способности соединения к ингибированию, такому как ингибирование
in vitro, с использованием анализов, известных
квалифицированному специалисту.
"Профилактические эффективное количество" относится к количеству, эффективному, в необходимых дозировках и в течение необходимых периодов времени, для достижения желаемого профилактического результата. Как правило, поскольку профилактическую дозу используют у индивидуумов до или на ранней стадии заболевания, профилактически эффективное количество является меньшим, чем терапевтически эффективное количество.
Также в объем настоящего изобретения входит набор, содержащий молекулу антитела, описанную в настоящем описании. Набор может включать один или несколько элементов, включающих: инструкции по применению; другие реагенты, например, метку, лекарственное средство или средство, пригодное для хелатирования или связывания иным образом антитела с меткой, или лекарственным средством, или радиопротекторной композицией; устройства или другие материалы для подготовки антитела для введения; фармацевтически приемлемые носители; и устройства или другие
материалы для введения индивидууму.
Применение молекул антител против PD-L1
Молекулы антител против PD-L1, описанные в настоящем описании применимы для диагностики in vitro и in vivo, а также для терапии и профилактики. Например, эти молекулы можно вводить в клетки в культуре, in vitro или ex vivo, или индивидууму, например, человеку, для лечения, предупреждения и/или диагностики различных нарушений, таких как злокачественные опухоли и инфекционные нарушения.
Таким образом, в одном аспекте изобретение относится к способу модификации иммунного ответа у индивидуума, включающему введение индивидууму молекулы антитела, описанной в настоящем описании, чтобы происходила модификация иммунного ответа у индивидуума. В одном варианте осуществления иммунный ответ усиливается, стимулируется или активируется. В одном варианте осуществления молекулы антител усиливают иммунный ответ у индивидуума посредством блокады PD-L1.
Как используют в рамках изобретения, термин "индивидуум" включает человека и не являющихся человеком животных. В одном варианте осуществления индивидуум представляет собой человека, например, пациента-человека, имеющего нарушение или состояние, характеризующееся аномальным функционированием PD-L1. Термин "не являющиеся человеком животные" включает млекопитающих и немлекопитающих, таких как не являющиеся человеком приматы. В одном варианте осуществления индивидуумом является человек. В одном варианте осуществления индивидуумом является пациент-человек, нуждающийся в усилении иммунного ответа. В одном варианте осуществления индивидуум имеет иммунодефицит, например, индивидуум подвергается или подвергался химиотерапевтической или лучевой терапии. Альтернативно или в комбинации, индивидуум имеет иммунодефицит или имеет риск наличия иммунодефицита в результате инфекции. Способы и композиции, описанные в настоящем описании, являются пригодными для лечения пациентов-людей, имеющих нарушение, которое можно лечить путем усиления опосредуемого Т-клетками иммунного ответа. Например, способы и композиции, описанные в настоящем описании, могут усиливать ряд
иммунных видов активности. В одном варианте осуществления индивидуум имеет увеличенное количество или активность инфильтрирующих опухоль Т-лимфоцитов (TIL) . В другом варианте осуществления индивидуум имеет увеличенную экспрессию или активность интерферона-гамма (IFN-y) . В другом варианте осуществления индивидуум имеет сниженную экспрессию или активность PD-L1.
Терапевтические применения
Блокада PD-L1 посредством антител может усилить иммунный ответ на злокачественные клетки у пациента. PD-L1, как правило, не экспрессируется в нормальных клетках человека, но распространен в различных злокачественных опухолях человека (Dong et al. (2002) Nat Med 8:787-9) . Взаимодействие между PD-1 и PD-L1 приводит к снижению уровня инфильтрирующих опухоль лимфоцитов, снижению опосредуемой Т-клеточным рецептором пролиферации и иммунному ускользанию злокачественных клеток (Dong et al. (2003) J Mol Med 81:281-7; Blank et al. (2005) Cancer Immunol Immunother. 54:307-14); Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100) . Иммунная супрессия может быть обращена вспять путем ингибирования локального взаимодействия PD-L1 с PD-1, и этот эффект является аддитивным, когда также блокируется взаимодействие PD-L2 с PD-1 (Iwai et al. (2002) PNAS 99:12293-7; Brown et al. (2003) J. Immunol. 170:1257-66). Антитело против PD-L1 можно использовать отдельно для ингибирования роста злокачественных опухолей. Альтернативно антитело против PD-L1 можно использовать совместно с другими иммуногенными средствами, стандартными способами лечения злокачественной опухоли или другими антителами, как описано в настоящем описании. Таким образом, ингибирование PD-L1 может усиливать иммунный ответ.
В одном аспекте настоящее изобретение относится к лечению индивидуума in vivo с использованием молекулы антитела против PD-L1, так чтобы происходило ингибирование или снижение роста злокачественных опухолей. Антитело против PD-L1 можно использовать отдельно для ингибирования роста злокачественных
опухолей. Альтернативно антитело против PD-L1 можно использовать в комбинации с одним или несколькими из: стандартного способа лечения злокачественной опухоли (например, для злокачественных или инфекционных нарушений), другого антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, иммуномодулятора (например, активатор костимулирующей молекулы или ингибитор ингибиторной молекулы); вакцины, например, терапевтической вакцины против злокачественной опухоли; или других форм клеточной иммунотерапии, как описано ниже.
Таким образом, в одном варианте осуществления изобретение относится к способу ингибирования роста опухолевых клеток у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества молекулы антитела против PD-L1, описанной в настоящем описании.
В одном варианте осуществления способы пригодны для лечения
злокачественной опухоли in vivo. Для достижения
антигенспецифического усиления иммунитета молекулу антитела против PD-L1 можно вводить вместе с представляющим интерес антигеном. Когда антитела к PD-L1 вводят в комбинации с одним или несколькими средствами, комбинацию можно вводить в любом порядке или одновременно.
Типы злокачественной опухоли; терагностические способы
В другом аспекте предусматривается способ лечения у
индивидуума, например, снижения или смягчения,
гиперпролиферативного состояния или нарушения (например, злокачественной опухоли), например, солидной опухоли, опухоли мягких тканей или метастатического очага, у индивидуума. Способ включает введение индивидууму одной или нескольких молекул антител против PD-L1, описанных в настоящем описании, отдельно или в комбинации с другими средствами или терапевтическими частями.
Как используют в рамках изобретения, термин "злокачественная опухоль" подразумевает включение всех типов злокачественного роста или онкогенных процессов, метастатических тканей или злокачественно трансформированных клеток, тканей или органов безотносительно гистопатологического типа или степени
инвазивности. Примеры злокачественных нарушений включают, но не ограничиваются ими, солидные опухоли, гематологические злокачественные опухоли, опухоли мягких тканей и метастатические очаги.
Примеры солидных опухолей включают злокачественные опухоли, например, саркомы и карциномы (включая аденокарциномы и плоскоклеточный рак) различных систем органов, такие как опухоли, поражающие печень, легкое, молочную железу, лимфоидные органы, желудочно-кишечный тракт (например, толстый кишечник), мочеполовые пути (например, почки, клетки уротелия), предстательную железу и глотку. Аденокарциномы включают злокачественные опухоли, такие как большинство типов рака толстого кишечника, рак прямой кишки, почечно-клеточную карциному, рак печени, немелкоклеточная карцинома легкого, злокачественная опухоль тонкого кишечника и злокачественная опухоль пищевода. Плоскоклеточный рак включает злокачественные опухоли, например, в легком, пищеводе, коже, области головы и шеи, полости рта, анальном канале и шейке матки. В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой меланому, например, меланому распространенной стадии. Метастатические очаги повреждения вышеупомянутых злокачественных опухолей также можно лечить или предупреждать с использованием способов и композиций по настоящему изобретению.
Иллюстративные злокачественные опухоли, рост которых может ингибироваться с использованием молекул антител, описанных в настоящем описании, включают злокачественные опухоли, обычно отвечающие на иммунотерапию. Неограничивающие примеры предпочтительных злокачественных опухолей для лечения включают лимфому (например, диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома, лимфома Ходжкина, неходжскинская лимфома), рак молочной железы (например, метастазирующий рак молочной железы), рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), например, немелкоклеточный рак легкого стадии IV или рецидивирующий немелкоклеточный рак легкого, аденокарциному NSCLC или плоскоклеточную карциному NSCLC), миелому (например, множественную миелому), лейкоз (например, хронический
миелогенный лейкоз), рак кожи (например, меланому (например, меланому стадии III или IV) или карциному из клеток Меркеля), рак головы и шеи (например, плоскоклеточную карциному головы и шеи (HNSCC)), миелодиспластический синдром, рак мочевого пузыря
(например, карциному переходных клеток), рак почки (например,
почечно-клеточный рак, например, светлоклеточный
почечноклеточный рак, например, распространенный или метастазирующий светлоклеточный почечноклеточный рак) и рак толстого кишечника. Кроме того, с использованием молекул антител, описанных в настоящем описании, можно лечить рефрактерные или рецидивирующие злокачественные опухоли.
Примеры других злокачественных опухолей, которые можно лечить, включают рак кости, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы или шеи, кожную или внутриглазную злокачественную меланому, рак тела матки, рак яичника, рак прямой кишки, рак анального канала, рак желудка и пищевода, рак желудка, рак яичка, рак тела матки, карциному фаллопиевых труб, карциному эндометрия, карциному шейки матки, карциному вагины, карциному вульвы, рак из клеток Меркеля, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, рак пищевода, рак тонкого кишечника, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечника, саркому мягких тканей, рак уретры, рак полового члена, хронический или острый лейкоз, в том числе острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, солидные опухоли детского возраста, лимфоцитарную лимфому, рак мочевого пузыря, множественную миелому, миелодиспластические синдромы, рак почки или уретры, карциному почечной лоханки, новообразование центральная нервной системы (ЦНС), первичную лимфому ЦНС, ангиогенез опухоли, опухоль позвоночника, глиому ствола головного мозга, аденому гипофиза, саркому Капоши, эпидермоидный рак, плоскоклеточный рак, Т-клеточную лимфому, индуцируемые факторами внешней среды злокачественные опухоли, включая злокачественные опухоли, индуцируемые асбестом
(например, мезотелиома), и комбинации указанных злокачественных опухолей.
С использованием молекул антител, описанных в настоящем описании можно осуществлять лечение метастазирующих опухолей, например, метастазирующих опухолей, которые экспрессируют PD-L1 (Iwai et al. (2005) Int. Immunol. 17:133-144) . В одном варианте осуществления злокачественная опухоль экспрессирует повышенный уровень PD-L1, IFNy и/или CD8.
Передача сигнала PD-L1 может обеспечивать повышенную экспрессию Bim в CD8+ Т-клетках. Лечение злокачественных опухолей, например, распространенных меланом, у пациентов, у которых экспрессируется высокий уровень Bim (например, повышенные уровни Bim в PD-1+CD8+ Т-клетках по сравнению с PD-1-CD8+ Т-клетками) можно осуществлять с использованием молекул антител, описанных в настоящем описании.
Модели на животных, которые можно использовать для исследования эффективности антитела против PD-L1 в монотерапии или комбинированной терапии злокачественной опухоли, включают, например, модель карциномы толстого кишечника СТ2 6 (Sakuishi et al. (2010) J Exp Med. 207(10): 2187-2194) и модель миеломы 5T33 (Manning et al. (1992) Br J Cancer. 66(6): 1088-1093).
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль экспрессирует повышенный уровень PD-L1, IFNy и /или CD8.
Без связи с теорией, в некоторых вариантах осуществления пациент более вероятно будет отвечать на лечение иммуномодулятором (необязательно в комбинации с одним или несколькими средствами, как описано в настоящем описании), если пациент имеет злокачественную опухоль, которая на высоком уровне экспрессирует PD-L1, и/или если злокачественная опухоль инфильтрирована противоопухолевыми иммунными клетками, например TIL. Противоопухолевые иммунные клетки могут быть положительными по CD8, PD-L1 и/или IFN-y; таким образом, уровни CD8, PD-L1 и/или IFN-y могут служить в качестве показателя уровней TIL в микроокружении. В определенных вариантах осуществления микроокружение злокачественной опухоли называют тройным положительным по PD-L1/CD8/IFN-y.
Таким образом, в некоторых аспектах настоящая заявка
относится к способам определения того, является ли образец опухоли положительным по одному или нескольким из PD-L1, CD8 и IFN-y, и, если образец опухоли является положительным по одному или нескольким, например, двум или всем трем, из маркеров, тогда введение пациенту терапевтически эффективного количества молекулы антитела против PD-1, необязательно в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами или средствами против злокачественной опухоли.
При следующих показаниях большая доля пациентов являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y: рак легкого
(плоскоклеточный); рак легкого (аденокарцинома); рак головы и шеи; рак желудка; NSCLC; HNSCC; рак желудка (например, MSIhi и/или EBV+); CRC (например, MSIhi); рак носоглотки (NPC); рак шейки матки (например, плоскоклеточный); рак щитовидной железы, например, папиллярный рак щитовидной железы; меланома; рак молочной железы TN; и DLBCL (диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома). При раке молочной железы в общем и при раке толстого кишечника в общем умеренная часть пациентов являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y. При следующих показаниях небольшая часть пациентов являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y: ER+ рак молочной железы и рак поджелудочной железы. Эти данные рассмотрены далее в примере 4. Независимо от того, большая или маленькая доля пациентов являются тройными положительными по этим маркерам, скрининг пациентов в отношении этих маркеров позволяет идентифицировать долю пациентов, которые имеют особенно высокую вероятность благоприятного ответа на терапию антителом против PD-L1
(например, блокирующее антитело против PD-L1), необязательно в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами
(например, молекула антитела против TIM-3, молекула антитела против LAG-3 или молекула антитела против PD-L1) и/или средствами против злокачественной опухоли, например, средствами, приведенными в таблице б и описанными в публикациях, приведенных в таблице б.
В некоторых вариантах осуществления образец классифицируют
как тройной положительный по PD-Ll/CD8/IFN-y. Этот показатель можно приближенно свести к двум пороговым значениям: классифицируют ли индивидуальную клетку как положительную и классифицируют ли образец в целом как положительный. Во-первых, можно измерять в индивидуальной клетке уровень PD-L1, CD8 и/или IFN-y. В некоторых вариантах осуществления клетка, которая является положительной по одному или нескольким из этих маркеров, представляет собой клетку, которая имеет более высокий уровень маркера по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной. Например, в некоторых вариантах осуществления высокий уровень PD-L1 в данной клетке представляет собой уровень, превышающий уровень PD-L1 в соответствующей незлокачественной ткани у пациента. В качестве другого примера, в некоторых вариантах осуществления высокий уровень CD8 или IFN-y в данной клетке представляет собой уровень этого белка, обычно наблюдаемый в TIL. Во-вторых, также можно измерять процент клеток в образце, которые являются положительными по PD-L1, CD8, и/или IFN-y (не является необходимым, чтобы одна клетка экспрессировала все три маркера). В некоторых вариантах осуществления тройной положительный образец представляет собой образец, который имеет высокий процент клеток, которые являются положительными по этим маркерам, например, выше эталонной величины или выше, чем в контрольном образце.
В других вариантах осуществления можно измерять уровни PD-Ll, CD8 и/или IFN-y в целом в образце. В этом случае высокий уровень CD8 или IFN-y в образце может представлять собой уровень этого белка, обычно наблюдаемый в опухоли, инфильтрированной TIL. Аналогично, высокий уровень PD-L1 может представлять собой уровень этого белка, обычно наблюдаемый в образце опухоли, например, в микроокружении опухоли.
Идентификация подгрупп пациентов, которые являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y, как показано в примере 4 настоящего описания, выявила определенные субпопуляции пациентов, которые, вероятно, будут особенно хорошо отвечать на терапию антителом против PD-1. Например, многие пациенты с раком
молочной железы IM-TN (иммуномодулирующий, тройной
отрицательный) являются тройными положительными по PD-Ll/CD8/IFN-y. Рак молочной железы IM-TN описан, например, в Brian D. Lehmann et al. , "Identification of human triple-negative breast cancer subtypes and preclinical models for selection of targeted therapies", J Clin Invest. Jul 1, 2011; 121(7): 27502767. Тройной отрицательный рак молочной железы представляет собой рак молочной железы, который не экспрессирует рецептора эстрогена (ER), рецептора прогестерона (PR) и Her2/neu. Эти злокачественные опухоли трудно лечить, поскольку они обычно не отвечают на средства, которые нацелены на ER, PR и Her2/neu. Тройной отрицательный рак молочной железы может быть далее подразделен на различные классы, один из который является иммуномодулирующим. Как описано в Lehmann et al. , рак молочной железы IM-TN обогащен факторами, вовлеченным в процессы иммунных клеток, например, один или несколько из передачи сигнала иммунными клетками (например, каскад ТН1/ТН2, каскад NK-клеток, каскад передачи сигнала В-клеточным рецептором, каскад DC и передача сигнала Т-клеточным рецептором), передачи сигнала цитокинами (например, каскад цитокинов, каскад IL-12 и каскад IL-7), процессинга и представления антигена, передачи сигнала через центральные иммунные каскады передачи сигнала (например, передача сигнала NFKB, TNF и JAK/STAT), генов, вовлеченных в Т-клеточную функцию, иммунной транскрипции, ответа интерферона (IFN) и процессинга антигенов. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль, подлежащая лечению, представляет собой злокачественную опухоль, которая является или для которой определено, что она является положительной по одному или нескольким маркерам рака молочной железы IM-TN, например, фактору, который стимулирует одно или несколько из передачи сигнала иммунными клетками (например, каскад ТН1/ТН2, каскад NK-клеток, каскад передачи сигнала В-клеточным рецептором, каскад DC и передача сигнала Т-клеточным рецептором), передачи сигнала цитокинами (например, каскад цитокинов, каскад IL-12 и каскад IL-7), процессинга и
представления антигена, передачи сигнала через центральные иммунные каскады передачи сигнала (например, передача сигнала через NFKB, TNF и JAK/STAT), генов, вовлеченных в Т-клеточную функцию, иммунной транскрипции, ответа интерферона (IFN) и процессинга антигена.
В качестве другого примера, в рамках настоящего изобретения показано, что подгруппа пациентов с раком толстого кишечника, имеющих высокую MSI (микросателлитная нестабильность) также является тройной положительной по PD-Ll/CD8/IFN-y. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления антитело против PD-L1, например, антитело против PD-L1, описанное в настоящем описании
(необязательно в комбинации с одним или несколькими иммуномодуляторами, такими как антитело против LAG-3, антитело против TIM-3 или антитело против PD-1, и одно или несколько средств против злокачественной опухоли, например, средство против злокачественной опухоли, описанное в таблице б или в публикации в таблице б) вводят пациенту, который имеет или который идентифицирован как имеющий рак толстого кишечника с высокой MSI, тем самым осуществляя лечение злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления клетка с высокой MSI представляет собой клетку, имеющую MSI на уровне, превышающем эталонную величину или величину в контрольной клетке, например, незлокачественной клетке того же типа ткани, что и злокачественная опухоль.
В качестве другого примера, в рамках настоящего изобретения показано, что подгруппа пациентов с раком желудка, имеющих высокую MSI, и/или которые являются EBV+, также являются тройными положительными по PD-Ll/CD8/IFN-y. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления антитело против PD-L1, например, антитело против PD-L1, описанное в настоящем описании
(необязательно в комбинации с одним или несколькими иммуномодуляторами, такими как антитело против LAG-3, антитело против TIM-3 или антитело против PD-1, и одно или несколько средств против злокачественной опухоли, например, средство против злокачественной опухоли, описанное в таблице б или в
публикации в таблице б) вводят пациенту, который имеет или который идентифицирован как имеющий рак желудка с высокой MSI и/или EBV+, тем самым осуществляя лечение злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления клетка с высокой MSI представляет собой клетку, имеющую MSI на уровне, превышающем эталонную величину или величину в контрольной клетке, например, незлокачественной клетке того же типа ткани, что и злокачественная опухоль.
Кроме того, в настоящем описании описаны способы анализа злокачественной опухоли в отношении PD-L1, а затем лечения злокачественной опухоли антителом против PD-L1. Как описано в примере 5 настоящего описания, образец злокачественной опухоли можно анализировать в отношении уровней белка или уровней мРНК PD-L1. Образец, имеющий уровни PD-L1 (белок или мРНК), превышающие эталонную величину или величину в контрольной клетке
(например, незлокачественная клетка), можно классифицировать как положительный по PD-L1. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления антитело против PD-L1, например, антитело против PD-L1, описанное в настоящем описании (необязательно в комбинации с одним или несколькими средствами против злокачественной опухоли) вводят пациенту, который имеет или который идентифицирован как имеющий злокачественную опухоль, которая является положительной по PD-L1. Злокачественная опухоль может представлять собой, например, немелкоклеточную аденокарциному легкого (NSCLC) (АСА), плоскоклеточную карциному NSCLC (SCC) или печеночно-клеточную карциному (НСС).
В некоторых вариантах осуществления способы, описанные в настоящем описании, вовлекают использование антитела против PD-L1, например, антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, например в качестве монотерапии, для лечения злокачественной опухоли, которая является (или идентифицирована как являющаяся) положительной по PD-L1. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак ободочной и прямой кишки (например, с высокой MSI), рак желудка
(например, с высокой MSI и/или EBV+), NPC, рак шейки матки, рак молочной железы (например, рак молочной железы TN) и рак
яичника. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль представляет собой NSCLC, меланому или HNSCC. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-L1 вводят в дозе, например, 1, 3, 10 или 20 мг/кг.
Исходя из, например, примера 4 настоящего описания, было обнаружено, что определенные типы рака желудка, которые являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y, также являются положительными по PIK3CA. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления злокачественную опухоль можно лечить молекулой антитела против PD-1 (необязательно в комбинации с одним или несколькими иммуномодуляторами, например, молекулой антитела против LAG-3, молекулой антитела против TIM-3 или молекулой антитела против PD-1) и средством, которое ингибирует PIK3CA. Иллюстративные средства в этой категории описаны в Stein RC (September 2001). "Prospects for phosphoinositide 3-kinase inhibition as a cancer treatment". Endocrine-related Cancer 8 (3) : 237-48, и Marone R, Cmiljanovic V, Giese B, Wymann MP (January 2008), "Targeting phosphoinositide 3-kinase: moving towards therapy", Biochimica et Biophysica Acta 1784 (1) : 15985.
Исходя из, например, примера 4 настоящего описания, CRC, например, пациента, который имеет (или идентифицирован как имеющий) CRC с высокой MSI, можно лечить антителом против PD-L1, необязательно в комбинации с терапевтическим средством, которое нацелено на одно или несколько из LAG-3, RNF43 и BRAF. Например, эти злокачественные опухоли можно лечить антителом против PD-L1, необязательно в комбинации с одним или несколькими терапевтическими средствами, которые нацелены на одно или несколько из LAG-3, PD-1, RNF43 и BRAF. В вариантах осуществления одно или несколько терапевтических средств включают иммуномодуляторы, такие как молекула антитела против LAG-3 и средство против злокачественной опухоли, описанное в таблице б или в публикации, приведенной в таблице б. Ингибиторы LAG-3, например, антитела, описаны в настоящем описании. RNF4 3 можно ингибировать, например, антителом, низкомолекулярным
соединением (например, 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид (соединение А28)), миРНК
или лигандом Rspo или его производным. Ингибиторы BRAF (например, вемурафениб или дабрафениб) описаны в настоящем
описании.
Исходя из, например, примера 4 настоящего описания,
пациента, который имеет (или идентифицирован как имеющий)
плоскоклеточный рак легкого можно лечить молекулой антитела
против PD-L1 в комбинации с терапевтическим средством, которое
нацелено на LAG-3, например, молекулой антитела против LAG-3, и
необязательно одним или несколькими средствами против
злокачественной опухоли, например, средством против
злокачественной опухоли, описанным в таблице б или в публикации, приведенной в таблице б.
В некоторых вариантах осуществления индивидуума, который имеет (или идентифицирован как имеющий) плоскоклеточный рак легкого, можно лечить антителом против PD-1 необязательно в комбинации с терапевтическим средством, которое нацелено на TIM-3, например, антителом против TIM-3. Ингибиторы TIM-3, например, антитела, описаны в настоящем описании.
Исходя из, например, примера 4 настоящего описания, пациента, который имеет (или идентифицирован как имеющий) рак щитовидной железы, можно лечить молекулой антитела против PD-1, необязательно в комбинации с терапевтическим средством, которое нацелено на BRAF, и необязательно в комбинации с одним или несколькими иммуномодуляторами, например, молекулой антитела против LAG-3, молекулой антитела против TIM-3 и молекулой антитела против PD-L1. Ингибиторы BRAF (например, вемурафениб или дабрафениб) описаны в настоящем описании, например, в таблице бив публикациях, приведенных в таблице б.
В некоторых вариантах осуществления способы терапии, описанные в настоящем описании, можно использовать для лечения пациента, который имеет (или идентифицирован как имеющий) злокачественную опухоль, ассоциированную с инфекцией, например, вирусной или бактериальной инфекцией. Иллюстративные злокачественные опухоли включают рак шейки матки, рак анального
канала, ассоциированный с HPV плоскоклеточный рак головы и шеи, ассоциированные с HPV папилломы пищевода, ассоциированные с HHV6 лимфомы, ассоциированные с EBV лимфомы (включая лимфому Беркитта), желудочную MALT-лимфому, другие ассоциированные с инфекцией MALT-лимфомы, НСС, саркому Капоши.
В других вариантах осуществления злокачественная опухоль представляет собой гематологическую злокачественную опухоль или злокачественную опухоль, включающую, но не ограничивающуюся ими, лейкоз или лимфому. Например, молекулу антитела против PD-L1 можно использовать для лечения злокачественных опухолей и новообразований, включая, но не ограничиваясь ими, например, острые лейкозы, включая, но не ограничиваясь ими, например, В-клеточный острый лимофидный лейкоз ("BALL"), Т-клеточный острый лимфоидный лейкоз ("TALL"), острый лимфоидный лейкоз (ALL); один или несколько из хронических лейкозов, включая, но не ограничиваясь ими, например, хронический миелогенный лейкоз (CML), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL); дополнительные гематологические злокачественные опухоли или гематологические состояния, включающие, но не ограничивающиеся ими, например, В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, бластное плазмацитоидное новообразование из дендритных клеток, лимфому Беркитта, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому, фолликулярную лимфому, волосатоклеточный лейкоз, мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, злокачественные лимфопролиферативные состояния, лимфому MALT, лимфому из клеток мантийной зоны, лимфому из клеток маргинальной зоны, множественную миелому, миелодисплазию и миелодиспластический синдром, неходжскинскую лимфому, плазмобластную лимфому, плазмацитоидное новообразование из дендритных клеток, макроглобулинемию Вальденстрема и "прелейкоз", который является многообразным набором гематологических состояний, объединенных неэффективной продукцией (или дисплазией) миелоидных клеток крови и т.п.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак молочной железы, например, метастазирующий рак молочной железы, например, рак молочной
железы, который не экспрессирует один, два или все из рецептора эстрогена, рецептора прогестерона или Her2/neu, например, тройной отрицательный рак молочной железы.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль
представляет собой рак легкого, например, немелкоклеточный рак
легкого (например, плоскоклеточный немелкоклеточный рак
легкого), например, локально распространенный или
метастазирующий немелкоклеточный рак легкого, например, немелкоклеточный рак легкого стадии IV или рецидивирующий немелкоклеточный рак легкого.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак кожи, например, карциному из клеток Меркеля (МСС), например, метастазирующую карциному из клеток Меркеля.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль
выбрана из рака легкого (например, немелкоклеточного рака
легкого (NSCLC) (например, NSCLC с плоскоклеточной и/или
неплоскоклеточной гистологией, аденокарциномы NSCLC или
плоскоклеточной карциномы NSCLC)), меланомы (например,
распространенной меланомы), рака почки (например,
почечноклеточного рака, например, светлоклеточного
почечноклеточного рака), рака печени, миеломы (например, множественной миеломы), рака предстательной железы, рака молочной железы (например, рака молочной железы, который не экспрессирует один, два или все из рецептора эстрогена, рецептора прогестерона или Her2/neu, например, тройного отрицательного рака молочной железы) , рака ободочной и прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака головы и шеи (например, плоскоклеточной карциномы головы и шеи (HNSCC), рака анального канала, рака желудка и пищевода, рака щитовидной железы, рака шейки матки, лимфопролиферативного заболевания (например, посттрансплантационного лимфопролиферативного заболевания) или гематологической злокачественной опухоли, Т-клеточной лимфомы, неходжкинской лимфомы или лейкоза (например, миелоидного лейкоза).
выбрана из карциномы (например, распространенной или метастазирующей карциномы), меланомы или карциномы легкого, например, немелкоклеточной карциномы легкого.
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак легкого, например, немелкоклеточный рак легкого.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой гепатокарциному, например, распространенную гепатокарциному, с вирусной инфекцией, например, хроническим вирусным гепатитом, или без нее.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак предстательной железы, например, распространенной рак предстательной железы.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой миелому, например, множественную миелому.
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой рак почки, например, почечноклеточный рак (RCC) (например, метастазирующий RCC или светлоклеточный почечноклеточный рак).
В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой меланому, например, распространенную меланому. В одном варианте осуществления злокачественная опухоль представляет собой распространенную или нерезектабельную меланому, которая не отвечает на другие способы терапии. В других вариантах осуществления злокачественная опухоль представляет собой меланому с мутацией BRAF (например, мутацией V600 BRAF). В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят после лечения антителом против CTLA-4 (например, ипилимумабом) с ингибитором BRAF (например, вемурафенибом или дабрафенибом) или без него.
Способы и композиции, описанные в настоящем описании, являются пригодными для лечения метастатических очагов, ассоциированных с вышеупомянутыми злокачественными опухолями.
Комбинирование антител против PD-L1 с вакцинами против злокачественной опухоли
Молекулы антител к PD-L1 можно комбинировать с иммуногенным
средством, таким как злокачественные клетки, очищенные опухолевые антигены (включая рекомбинантные белки, пептиды и молекулы углеводов) , клетки, и клетки, трансфицированные генами, кодирующими иммуностимулирующие цитокины (Не et al (2 004) J. Immunol. 173:4919-28). Неограничивающие примеры вакцин против опухоли, которые можно использовать, включают пептиды антигенов меланомы, такие как пептиды gplOO, антигены MAGE, Trp-2, MART1 и/или тирозиназы, или опухолевые клетки, трансфицированные для экспрессии цитокина GM-CSF, вакцины на основе ДНК, вакцины на основе РНК и вакцины на основе вирусной трансдукции. Вакцина против злокачественной опухоли может быть профилактической или терапевтической.
Блокаду PD-L1 можно комбинировать с протоколом вакцинации. Было разработано множество экспериментальных стратегий для вакцинации против опухолей (см. Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C, 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D. 2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; см. also Restifo, N. и Sznol, M., Cancer Vaccines, Ch. 61, pp. 3023-3043 in DeVita, V. et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles и Practice of Oncology. Fifth Edition). В одной из этих стратегий вакцину получают с использованием аутологичных или аллогенных опухолевых клеток. Было показано, что эти клеточные вакцины являются наиболее эффективными, когда опухолевые клетки трансдуцируют для экспрессии GM-CSF. Было показано, что GM-CSF является мощным активатором представления антигенов для вакцинации против опухоли (Dranoff et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 3539-43).
Блокаду PD-L1 можно использовать вместе с коллекцией рекомбинантных белков и/или пептидов, экспрессируемых в опухоли, для индукции иммунного ответа на эти белки. Эти белки обычно рассматриваются иммунной системой как собственные антигены и, таким образом, она толерантна к ним. Опухолевый антиген также может включать белок теломеразу, которая требуется для синтеза теломер хромосом и которая экспрессируется в более чем 85%
злокачественных опухолей и только в ограниченном количестве
соматических тканей (Kim, N et al. (1994) Science 266: 2011-
2 013) (эти соматические ткани могут быть защищены от иммунной
атаки различными способами). Опухолевый антиген также может
представлять собой "неоантигены", экспрессируемые в
злокачественных клетках вследствие соматических мутаций, которые изменяют белковую последовательность или образуют слитые белки между двумя неродственными последовательностями (т.е. Ьсг-аЫ в филадельфийской хромосоме), или идиотип в случае В-клеточных опухолей.
Другие вакцины против опухоли могут включать белки из вирусов, вовлеченных в злокачественные опухоли человека, таких как вирусы папилломы человека (HPV), вирусы гепатита (HBV и HCV) и герпес-вирус саркомы Капоши (KHSV) и вирус Эпштейна-Барра
(EBV) . Другой формой специфического опухолевого антигена, которую можно использовать вместе с блокадой PD-1, являются очищенные белки теплового шока (HSP), выделенные непосредственно из опухолевой ткани. Эти белки теплового шока содержат фрагменты белков из опухолевых клеток, и эти HSP являются высокоэффективными в отношении доставки в антигенпрезентирующие клетки для индукции опухолевого иммунитета (Suot, R & Srivastava, Р (1995) Science 2 69:1585-158 8; Tamura, Y. et al.
(1997) Science 278:117-120) .
Дендритные клетки (DC) представляют собой эффективные антигенпрезентирующие клетки, которые можно использовать для индукции антигенспецифических ответов. DC можно продуцировать ех vivo и нагружать различными белковыми и пептидными антигенами, а также экстрактами опухолевых клеток (Nestle, F. et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332) . DC также можно трансдуцировать генетическими способами для экспрессии этих опухолевых антигенов. DC были подвергнуты слиянию непосредственно с опухолевыми клетками для целей иммунизации (Kugler, A. et al.
(2000) Nature Medicine 6:332-336). В качестве способа вакцинации, иммунизацию посредством DC можно эффективно комбинировать с блокадой PD-1 для активации более мощных противоопухолевых ответов.
В другом варианте осуществления комбинация, кроме того, включает ингибитор или активатор модулятора иммунной точки контроля (например, ингибитор LAG-3 (например, молекула антитела против LAG-3), ингибитор PD-1 (например, молекула антитела против PD-1), модулятор TIM-3 (например, активатор или ингибитор TIM-3, например, молекула антитела против TIM-3) или ингибитор CTLA-4 (например, антитело против CTLA-4) или любую их комбинацию.
Блокаду PD-L1 также можно комбинировать со стандартным способом лечения злокачественной опухоли. Блокаду PD-L1 можно эффективно комбинировать с химиотерапевтическими режимами. В этих случаях может быть возможным снижение дозы вводимого химиотерапевтического реагента (Mokyr, М. et al. (1998) Cancer Research 58: 5301-5304) . В определенных вариантах осуществления проведение способов и введение композиций, описанных в настоящем описании, осуществляют в комбинации с одной или несколькими другими молекулами антител, химиотерапией, другой терапией злокачественной опухоли (например, направленная терапия злокачественной опухоли или онколитические лекарственные средства), цитотоксическими средствами, способами иммунной терапии (например, цитокины), хирургическими и/или лучевыми процедурами. Иллюстративные цитотоксические средства, которые можно вводить в комбинации, включают антимикротубулиновые средства, ингибиторы топоизомеразы, антиметаболиты, ингибиторы митоза, алкилирующие средства, антрациклины, алкалоиды барвинка, интеркалирующие средства, средства, способные препятствовать каскаду передачи сигнала, средства, которые стимулируют апоптоз, ингибиторы протеасом и лучевую терапию (например, локальное облучение или облучение всего организма).
Альтернативно или в комбинации с вышеупомянутыми комбинациями, проведение способов и введение композиций, описанных в настоящем описании, можно осуществлять в комбинации с одним или несколькими из: иммуномодулятора (например, активатор костимулирующей молекулы или ингибитор ингибиторной молекулы); вакцины, например, терапевтической вакцины против злокачественной опухоли; или других форм клеточной
иммунотерапии.
Иллюстративные неограничивающие комбинации и применения молекул антител против PD-L1 включают следующие комбинации.
В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с модулятором костимулирующей молекулы или ингибиторной молекулы, например, коингибиторного лиганда или рецептора.
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с модулятором, например, агонистом, костимулирующей молекулы. В одном варианте осуществления агонист костимулирующей молекулы выбран из агониста (например, антитело-агонист или его антигенсвязывающий фрагмент или растворимая слитая конструкция) 0X4О, CD2, CD2 7, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CDlla/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или лиганда CD83.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с костимулирующей молекулой, например, агонистом, ассоциированным с положительным сигналом, который включает костимулирующий домен CD28, CD27, ICOS и GITR.
Иллюстративные агонисты GITR включают, например, слитые белки GITR и антитела против GITR (например, двухвалентные антитела против GITR), такие как слитый белок GITR, описанный в патенте США № 6111090, патенте Европы № 090505В1, патенте США № 8586023, публикациях РСТ № WO 2010/003118 и 2011/090754, или антитело против GITR, описанное, например, в патенте США № 7025962, патенте Европы № 1947183В1, патенте США № 7812135, патенте США № 8388967, патенте США № 8591886, патенте Европы № ЕР 1866339, публикации РСТ № WO 2011/028683, публикации РСТ № WO 2013/039954, публикации РСТ № WO2005/007190, публикации РСТ № WO 2007/133822, публикации РСТ № WO2005/055808, публикации РСТ № WO 99/40196, публикации РСТ № WO 2001/03720, публикации РСТ № WO99/20758, публикации РСТ № WO2006/083289, публикации РСТ № WO 2005/115451, патенте США № 7618632 и публикации РСТ № WO 2011/051726. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с ингибитором молекулы,
ингибирующей молекулу иммунной точки контроля. Специалисту в данной области будет понятно, что термин "иммунные точки контроля" означает группу молекул на поверхности CD4 и CD8 Т-клеток. Эти молекулы могут эффективно служить в качестве "тормозов" для подавления или ингибирования противоопухолевого иммунного ответа. Молекулы иммунной точки контроля включают, но не ограничиваются ими, белок запрограммированной смерти 1 (PD-1), цитотоксический Т-лимфоцитарный антиген 4 (CTLA-4), В7Н1, В7Н4, ОХ-40, CD137, CD40 и LAG-3, которые прямо ингибируют иммунные клетки. Иммунотерапевтические средства, которые могут действовать в качестве ингибиторов иммунной точки контроля, пригодные в способах по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, ингибиторы PD-1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2В4, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5) и/или TGFR-бета. Ингибирование ингибиторной молекулы можно проводить посредством ингибирования на уровне ДНК, РНК или белка. В вариантах осуществления для ингибирования экспрессии ингибиторной молекулы можно использовать ингибиторную нуклеиновую кислоту (например, дцРНК, миРНК или кшРНК). В других вариантах осуществления ингибитор ингибиторного сигнала представляет собой полипептид, например, растворимый лиганд, или антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые связываются с ингибиторной молекулой.
В одном варианте осуществления ингибитор представляет собой растворимый лиганд (например, CTLA-4-Ig или TIM-3-Ig), или антитело или фрагмент антитела, которые связываются с PD-1, PD-L2 или CTLA-4. Например, молекулу антитела против PD-L1 можно вводить в комбинации с антителом против CTLA-4, например, ипилимумабом, например, для лечения злокачественной опухоли (например, злокачественной опухоли, выбранной из: меланомы, например, метастазирующей меланомы; рака легкого, например, немелкоклеточной карциномы легких; или рака предстательной железы). Иллюстративные антитела против CTLA-4 включают тремелимумаб (моноклональное 1д62-антитело, доступное от Pfizer, прежде известное как тицилимумаб, СР-675.206); и ипилимумаб
(антитело против CTLA-4, также известное как MDX-010, CAS № 477202-00-9). В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят после лечения, например, после лечения меланомы, антителом против CTLA-4 (например, ипилимумабом), с ингибитором BRAF (например, вемурафениб или дабрафениб) или без него. Иллюстративные дозы, которые можно использовать, включают дозу антитела против PD-L1 приблизительно от 1 до 10 мг/кг, например, 3 мг/кг, и дозу антитела против CTLA-4, например ипилимумаба, приблизительно 3 мг/кг.
Иммунные ингибиторные молекулы, например, PD-L1 и LAG-3, могут регулировать, например, синергично регулировать, функцию Т-клеток для обеспечения иммунного ускользания опухоли. В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с антителом против LAG-3 или его антигенсвязывающим фрагментом. В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с антителом против TIM-3 или его антигенсвязывающим фрагментом. В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с антителом против LAG-3 и антителом против TIM-3, или их антигенсвязывающими фрагментами. Комбинацию антител, описанных в настоящем описании, можно вводить по отдельности, например, в качестве отдельных антител, или в связанной форме, например, в качестве биспецифической или триспецифической молекулы антитела.
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела
(например, моноспецифическое, биспецифическое или
триспецифическое антитело) для TIM-3, LAG-3 и/или PD-1, используемая в любом из способов, описанных в настоящем описании, включает аминокислотную последовательность или кодируется нуклеотидной последовательностью, как описано в настоящем описании (например, как описано в разделе под названием "Ингибиторы молекул иммунной точки контроля", начинающемся на стр.218 настоящего описания ниже (включая все публикации, упоминаемые в нем).
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ (например, ингибитор СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-3 и/или СЕАСАМ-5), например, с
молекулой антитела против СЕАСАМ. В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ-1, например, молекулой антитела против СЕАСАМ-1. В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 водят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ-5, например, молекулой антитела против СЕАСАМ-5. В одном варианте осуществления вводят биспецифическое антитело, которое включает молекулу антитела против PD-L1 и антитело против TIM-3 или против LAG-3, или их антигенсвязывающий фрагмент. В определенных вариантах осуществления комбинацию антител, описанных в настоящем описании, используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, солидной опухоли). Эффективность вышеупомянутых комбинаций можно исследовать в моделях на животных, известных в данной области.
В одном варианте осуществления ингибитор СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1 и/или СЕАСАМ-5) представляет собой молекулу антитела против СЕАСАМ. Без связи с теорией СЕАСАМ-1 описана в качестве лиганда и партнера TIM-3 (см., например, W0 2014/022332) . Синергичный эффект in vivo комбинации антител против TIM-3 и против СЕАСАМ-1 был обнаружен в моделях с ксенотрансплантатами злокачественных опухолей (см., например, WO 2014/022332). Полагают, что опухоли используют СЕАСАМ-1 или СЕАСАМ-5 для ингибирования иммунной системы, как описано, например, в Markel et al. J Immunol. 2002 Mar 15; 168 (6) : 2803-10; Markel et al. J Immunol. 2006 Nov 1; 177 (9) :6062-71; Markel et al. Immunology. 2009 Feb;126(2):186-200; Markel et al. Cancer Immunol Immunother. 2010 Feb;59(2):215-30; Ortenberg et al. Mol Cancer Ther. 2012 Jun; 11 (6) : 1300-10; Stern et al. J Immunol. 2005 Jun 1; 174 (11) :6692-701; Zheng et al. PIoS One. 2010 Sep 2;5(9). pii: el2529. Таким образом, ингибиторы СЕАСАМ можно использовать с другими иммуномодуляторами, описанными в настоящем описании (например, ингибиторы PD-1 или TIM-3) для усиления иммунного ответа против злокачественной опухоли, например, меланомы, рака легкого (например, NSCLC), рака мочевого пузыря, рака толстого кишечника или рака яичника, или других злокачественных опухолей,
как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор СЕАСАМ представляет собой антитело против СЕАСАМ-1, как описано в W0 2010/125571, WO 2013/82366 и WO 2014/022332, например, моноклональное антитело 34В1, 2 6Н7 и 5F4 или его рекомбинантную форму, как описано, например, в US 2004/0047858, US 7132255 и WO 99/52552. В других вариантах осуществления антитело против СЕАСАМ представляет собой молекулу антитела против СЕАСАМ-1 и/или против СЕАСАМ-5, как описано, например, в WO 2010/125571, WO 2013/054331 и US 2 014/0271618.
В некоторых вариантах осуществления иммунные ингибиторные молекулы против PD-L1 и LAG-3 (например, молекулы антител) вводят в комбинации друг с другом, например, для лечения злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления пациент представляет собой пациента, который имеет прогрессирование (например, имеет рост опухоли) в ходе терапии ингибитором PD-1 (например, молекулой антитела, как описано в настоящем описании) и/или ингибитором PD-L1 (например, молекулой антитела). В некоторых вариантах осуществления терапию молекулой антитела против PD-L1 и/или молекулой антитела против PD-L1 продолжают, и к терапии добавляют иммунную ингибиторную молекулу против LAG-3 (например, антитело).
В некоторых вариантах осуществления иммунные ингибиторные молекулы против PD-L1 и TIM-3 (например, молекулы антител) вводят в комбинации друг с другом, например, для лечения злокачественной опухоли. В некоторых вариантах осуществления пациент представляет собой пациента, который имеет прогрессирование (например, имеет рост опухоли) в ходе терапии ингибитором PD-L1 (например, молекула антитела, как описано в настоящем описании) и/или ингибитором PD-L1 (например, молекула антитела). В некоторых вариантах осуществления терапию молекулой антитела против PD-1 и/или молекулой антитела против PD-L1 продолжают, и к терапии добавляют иммунную ингибиторную молекулу против TIM-3 (например, антитело).
В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с цитокином, например, интерлейкином-2, -15, -12 или -21. В определенных вариантах осуществления
комбинацию молекулы антитела против PD-L1 и цитокина, описанную в настоящем описании, используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, солидной опухоли или меланомы).
Иллюстративные иммуномодуляторы, которые можно использовать в комбинации с молекулами антител против PD-L1, включают, но не ограничиваются ими, например, афутузумаб (доступный от Roche(r)) ; пегфилграстим (Neulasta(r)) ; леналидомид (СС-5013, Revlimid(r)) ; талидомид (Thalomid(r)) , актимид (СС4047); и цитокины, например, IL-21 или IRX-2 (смесь цитокинов человека, включая интерлейкин 1, интерлейкин 2 и интерферон у, CAS 951209-71-5, доступная от IRX Therapeutics).
В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с ингибитором индоламин-пиррол-2,3-диоксигеназы (IDO) (например, INCB24360) у индивидуума с распространенной или метастазирующей злокачественной опухолью (например, у пациента с метастазирующей или рецидивирующей злокачественной опухолью NSCL).
В других вариантах осуществления молекулы антител против PD-L1 вводят индивидууму совместно с (например, до, одновременно или после) одним или несколькими из: трансплантации костного мозга, истощающей Т-клетки терапии с использованием химиотерапевтических средств, таких как флударабин, лучевой терапии внешним пучком (XRT), циклофосфамида и/или антител, таких как ОКТЗ или САМРАТН. В одном варианте осуществления молекулы антител против PD-L1 вводят после истощающей В-клетки терапии, такой как средства, которые реагируют с CD2 0, например, ритуксан. Например, в одном варианте осуществления индивидуумы могут подвергаться стандартному лечению химиотерапией в высокой дозе с последующей трансплантацией стволовых клеток периферической крови. В определенных вариантах осуществления после трансплантации индивидуумам вводят молекулы антител против PD-L1. В дополнительном варианте осуществления молекулы антител против PD-L1 вводят до или после хирургической операции.
Другим примером комбинации является антитело против PD-L1 в
комбинации с декарбазином для лечения меланомы. Без связи с
теорией, полагают, что комбинированному применению блокады PD-L1
и химиотерапии способствует клеточная гибель, которая является
следствием цитотоксического действия большинства
химиотерапевтических соединений, которое может приводить к увеличенным уровням опухолевого антигена в каскаде представления антигена. Другими способами комбинированной терапии, которые могут приводить к синергии с блокадой PD-L1 через клеточную смерть, являются лучевая терапия, хирургическая операция и дефицит гормонов. Каждый из этих протоколов создает источник опухолевого антигена в хозяине. Также с блокадой PD-L1 можно комбинировать ингибиторы ангиогенеза. Ингибирование ангиогенеза приводит к гибели опухолевых клеток, которые могут предоставлять опухолевый антиген в каскады представления антигена хозяина.
Блокирующие PD-L1 антитела также можно использовать в
комбинации с биспецифическими антителами. Биспецифические
антитела можно использовать для нацеливания на два отдельных
антигена. Например, биспецифические антитела против Fc-
рецептора/против опухолевого антигена (например, Her-2/neu)
используют для нацеливания макрофагов в область опухоли. Это
нацеливание может более эффективно активировать
опухолеспецифические ответы. Т-клеточное звено этих ответов может быть усилено с использованием блокады PD-L1. Альтернативно антиген можно доставлять прямо в DC с использованием биспецифических антител, которые связываются с опухолевым антигеном и специфическим маркером клеточной поверхности дендритных клеток.
Опухоли ускользают от иммунного надзора хозяина посредством
большого разнообразия механизмов. Многие из этих механизмов
могут быть преодолены посредством инактивации белков, которые
экспрессируются опухолями и которые являются
иммунодепрессивными. Они включают, среди прочих, TGF-бета (Kehrl, J. et al. (1986) J. Exp. Med. 163: 1037-1050), IL-10 (Howard, M. & O'Garra, A. (1992) Immunology Today 13: 198-200), и Fas-лиганд (Hahne, M. et al. (1996) Science 274: 1363-1365). Антитела или их антигенсвязывающие фрагменты к каждой из этих
структур можно использовать в комбинации с антителом против PD-L1 для противодействия эффектам иммунодепрессивного средства и способствования иммунным ответам хозяина.
Другие антитела, которые можно использовать для активации способности хозяина к иммунному ответу, можно использовать в комбинации с антителом против PD-L1. Они включают молекулы на поверхности дендритных клеток, которые активируют функцию DC и представление антигена. Антитела против CD4 0 способны эффективно замещать хелперную активность Т-клеток (Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478), и их можно использовать совместно с антителами против PD-1 (Ito, N. et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 52 7-40). Антитела к Т-клеточным костимулирующим молекулам, таким как CTLA-4 (например, патент США № 5811097), ОХ-40 (Weinberg, A. et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169), 4-1ВВ (Melero, I. et al. (1997) Nature Medicine 3: 682-685 (1997) и ICOS (Hutloff, A. et al. (1999) Nature 397: 262-266) также могут обеспечить увеличенные уровни активации Т-клеток.
Дополнительные иллюстративные стандартные способы лечения описаны в разделе под названием "комбинированные способы лечения" ниже.
Во всех из способов, описанных в настоящем описании, блокаду PD-L1 можно комбинировать с другими формами иммунотерапии, такими как лечение цитокинами (например, интерфероны, GM-CSF, G-CSF, IL-2, IL-21) или терапия биспецифическими антителами, которые обеспечивают усиленное представление опухолевых антигенов (см., например, Holliger (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448; Poljak (1994) Structure 2:1121-1123).
Способы введения молекул антител известны в данной области
и описаны ниже. Подходящие используемые дозировки молекул
зависят от возраста и массы тела индивидуума и конкретного
используемого лекарственного средства. Дозировки и
терапевтические режимы молекулы антитела против PD-L1 могут быть определены квалифицированным специалистом. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят путем инъекции (например, подкожно или внутривенно) в дозе
приблизительно от 1 до 30 мг/кг, например, приблизительно от 5 до 25 мг/кг, приблизительно от 10 до 20 мг/кг, приблизительно от 1 до 5 мг/кг или приблизительно 3 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в дозе приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг или 10 мг/кг, приблизительно 2 0 мг/кг, приблизительно 3 0 мг/кг или приблизительно 4 0 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в дозе приблизительно 1-3 мг/кг или приблизительно 3-10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в дозе приблизительно 0,5-2, 2-4, 2-5, 5-15 или 5-20 мг/кг. Схема дозирования может варьироваться, например, от одного раза в неделю до одного раза в 2, 3 или 4 недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в дозе приблизительно от 10 до 2 0 мг/кг раз в две недели.
Молекулы антител можно использовать неконъюгированными или в конъюгированной форме со вторым средством, например, цитотоксическим лекарственным средством, радиоактивным изотопом или белком, например, белковым токсином или вирусным белком. Этот способ включает: введение молекулы антитела, отдельно или конъюгированной с цитотоксическим лекарственным средством, индивидууму, которому требуется такое лечение. Молекулы антител можно использовать для доставки различных лекарственных средств, например, цитотоксической части, например, терапевтического лекарственного средства, радиоактивного изотопа, молекул растительного, грибного или бактериального происхождения или биологических белков (например, белковых токсинов) или частиц (например, рекомбинантные вирусные частицы, например; через белок вирусной оболочки) или их смесей.
Иммуносупрессия
Иммуносупрессия вовлекает действие, которое снижает активацию или эффективность иммунной системы. Некоторые части иммунной системы сами по себе обладают иммунодепрессивными эффектами в отношении других частей иммунной системы, и иммуносупрессия может происходить в качестве неблагоприятной реакции на лечение других состояний.
Преднамеренно индуцированную иммуносупреесию (например, посредством иммунодепрессанта (например, иммунодепрессивного лекарственного средства или токсина внешней среды), хирургической операции (спленэктомии), плазмафереза или облучения) можно проводить для предупреждения отторжения организмом трансплантата органа, лечения реакции "трансплантат против хозяина" после трансплантации костного мозга или лечения аутоиммунных заболеваний, таких как ревматоидный артрит или болезнь Крона.
Непреднамеренная иммуносупрессия может возникать, например,
при нарушении питания, старении, многих типах злокачественной
опухоли (например, лейкоз, лимфома, множественная миелома) и
определенных хронических инфекциях, например, вирусом
иммунодефицита человека (ВИЧ). Нежелательным эффектом
непреднамеренной иммуносупреесии является иммунодефицит, который
приводит к увеличенной чувствительности к патогенам, например,
бактериям и вирусам. Иммунодефицит может быть потенциальным
неблагоприятным эффектом определенных иммунодепрессивных
лекарственных средств. Как используют в рамках изобретения, в
некоторых вариантах осуществления термины "имеющий
иммуносупреесию", "имеющий иммунодефицит" или "имеющий иммунную недостаточность" могут быть использованы взаимозаменяемо.
Иммуносупрессия является одной из ведущих причин смерти у пациентов с сепсисом. Нейтрофилы являются классическими компонентами врожденного иммунитета, однако нейтрофилы могут демонстрировать функцию презентации антигена и ингибировать пролиферацию посредством экспрессии PD-L1.
Таким образом, в одном варианте осуществления изобретение относится к способу ингибирования иммуносупреесии у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества молекулы антитела против PD-L1, описанной в настоящем описании. В одном варианте осуществления способы пригодны для лечения сепсиса.
В одном аспекте предусматривается способ лечения, например, снижения или смягчения, иммуносупреесии у индивидуума. В одном варианте осуществления индивидуум страдает сепсисом или имеет
риск развития сепсиса. В другом варианте осуществления Индивидуум имеет хроническую инфекцию (например, ВИЧ) или злокачественную опухоль или имеет риск ее развития. В другом варианте осуществления индивидууму проводят или проводили терапию против злокачественной опухоли, например, химиотерапию или лучевую терапию. Способ включает введение индивидууму одной или нескольких молекул антител против PD-L1, описанных в настоящем описании, отдельно или в комбинации с другими средствами или способами терапии.
Дополнительные способы комбинированной терапии Молекулу антитела против PD-L1 можно использовать в комбинации с другими способами терапии. Например, комбинированная терапия может включать композицию по настоящему изобретению, составленную совместно и/или введенную совместно с одним или несколькими дополнительными лекарственными средствами, например, одним или несколькими средствами против злокачественной опухоли, цитотоксическими или цитостатическими средствами, гормональным лечением, вакцинами и/или другими способами иммунотерапии. В других вариантах осуществления молекулы антител вводят в комбинации с другими способами терапевтического лечения, включая хирургическую операцию, лучевую терапию, криохирургию и/или термотерапию. В таких комбинированных способах терапии можно преимущественно использовать более низкие дозировки вводимых лекарственных средств, таким образом, избегая возможной токсичности или осложнений, ассоциированных с различными способами монотерапии.
Под термином "в комбинации с" подразумевают, что проведение терапии или введение лекарственных средств необходимо осуществлять в одно и то же время и/или составлять для доставки вместе, хотя эти способы доставки входят в объем, описанный в настоящем описании. Молекулы антител против PD-L1 можно вводить одновременно, перед или после одного или нескольких других дополнительных способов терапии или лекарственных средств. Введение молекулы антитела против PD-L1 и другого средства или проведение терапевтического протокола можно осуществлять в любом порядке. Как правило, каждое средство вводят в дозе и/или по
расписанию, определенным для данного средства. Кроме того, будет понятно, что дополнительное лекарственное средство, используемое в этой комбинации, можно вводить совместно в одной композиции или вводить по отдельности в различных композициях. Как правило, ожидается, что дополнительные лекарственные средства, используемые в комбинации, можно использовать на уровнях, которые не превышают уровни, при которых их используют по отдельности. В некоторых вариантах осуществления уровни, используемые в комбинации, будут более низкими, чем уровни, используемые по отдельности. Иммунотодуляторы
В определенных вариантах осуществления иммуномодулятор, используемый в комбинации с молекулой антитела против PD-L1 или в комбинациях, описанных в настоящем описании (например, в комбинации с лекарственным средством, выбранным из антигенпрезентирующей комбинации) представляет собой ингибитор молекулы иммунной точки контроля. В одном варианте осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-1, PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2В4 и/или TGFR-бета. В одном варианте осуществления ингибитор молекулы иммунной точки контроля ингибирует PD-1, PD-L1, LAG-3, TIM-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), CTLA-4 или любую их комбинацию.
Ингибирование ингибиторной молекулы можно проводить на уровне ДНК, РНК или белка. В некоторых вариантах осуществления для ингибирования экспрессии ингибиторной молекулы можно использовать ингибиторную нуклеиновую кислоту (например, дцРНК, миРНК или кшРНК). В других вариантах осуществления ингибитор ингибиторного сигнала представляет собой полипептид, например, растворимый лиганд (например, PD-1-Ig или CTLA-4 Ig), или антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые связываются с ингибиторной молекулой; например, антитело или его фрагмент (также обозначаемые в настоящем описании как "молекула антитела"), которые связываются с PD-1, PD-L1, PD-L2, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), CTLA-4, TIM-3, LAG-3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGFR-бета, или их
комбинацией.
В определенных вариантах осуществления молекула антитела имеет форму биспецифической или мультиспецифической молекулы антитела. В одном варианте осуществления биспецифическая молекула антитела имеет первую специфичность связывания с PD-1 или PD-L1 и вторую специфичность связывания, например, вторую специфичность связывания с TIM-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), LAG-3 или PD-L2. В одном варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с PD-1 или PD-L1 и TIM-3. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с PD-1 или PD-L1 и LAG-3. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с PD-1 или PD-L1 и СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) . В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с PD-1 или PD-L1 и СЕАСАМ-1. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с PD-1 или PD-L1 и СЕАСАМ-3. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с PD-1 или PD-L1 и СЕАСАМ-5. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с PD-1 или PD-L1. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с PD-1 и PD-L2. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с TIM-3 и LAG-3. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) и LAG-3. В другом варианте осуществления биспецифическая молекула антитела связывается с СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) и TIM-3. Любую комбинацию вышеупомянутых молекул можно получать в виде мультиспецифической молекулы антитела, например, триспецифического антитела, которое имеет первую специфичность связывания с PD-1 или PD-1, и вторую и третью специфичность связывания с двумя или более из: TIM-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), LAG-3 или PD-L2.
В определенных вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-1, например, PD-1 человека (например, молекулу антитела, как описано в настоящем описании).
В другом варианте осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор PD-L1, например, PD-L1 человека. В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1 представляет собой молекулу антитела к PD-1 или PD-L1. Ингибитор PD-1 или PD-L1 можно вводить отдельно или в комбинации с другими иммуномодуляторами, например, в комбинации с ингибитором LAG-3, TIM-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) или CTLA-4. В иллюстративном варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекулу антитела против PD-1 или PD-L1, вводят в комбинации с ингибитором LAG-3, например, молекулой антитела против LAG-3. В другом варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекулу антитела против PD-1 или PD-L1, вводят в комбинации с ингибитором TIM-3, например, молекулой антитела против TIM-3. В другом варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекулу антитела против PD-1 или PD-L1, вводят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ (например, ингибитор СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) , например, молекулой антитела против СЕАСАМ. В другом варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекулу антитела против PD-1 или PD-L1, вводят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ-1, например, молекулой антитела против СЕАСАМ-1. В другом варианте осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекулу антитела против PD-1 или PD-L1, вводят в комбинации с ингибитором СЕАСАМ-5, например, молекулой антитела против СЕАСАМ-5. В других вариантах осуществления ингибитор PD-1 или PD-L1, например, молекулу антитела против PD-1, вводят в комбинации с ингибитором LAG-3, например, молекулой антитела против LAG-3, и ингибитором TIM-3, например, молекулой антитела против TIM-3. Также в объем изобретения входят комбинации иммуномодуляторов с ингибитором PD-1 (например, одним или несколькими из PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 и/или TGFR). В вышеупомянутых комбинациях ингибиторов молекул точки контроля можно использовать любые из молекул антител, известных в данной области или описанных в настоящем описании.
представляет собой ингибитор СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), например, СЕАСАМ человека (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) . В одном варианте осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор СЕАСАМ-1, например, СЕАСАМ-1 человека. В другом варианте осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор СЕАСАМ-3, например, СЕАСАМ-3 человека. В другом варианте осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор СЕАСАМ-5, например, СЕАСАМ-5 человека. В одном варианте осуществления ингибитор СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) представляет собой молекулу антитела к СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) . Ингибитор СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) можно вводить отдельно или в комбинации с другими иммуномодуляторами, например, в комбинации с ингибитором LAG-3, TIM-3, PD-1, PD-L1 или CTLA-4.
В других вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор LAG-3, например, LAG-3 человека. В одном варианте осуществления ингибитор LAG-3 представляет собой молекулу антитела к LAG-3. Ингибитор LAG-3 можно вводить отдельно или в комбинации с другими иммуномодуляторами, например, в комбинации с ингибитором СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), TIM-3, PD-1, PD-L1 или CTLA-4.
В других вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой ингибитор TIM-3, например, TIM-3 человека. В одном варианте осуществления ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела к TIM-3. Ингибитор TIM-3 можно вводить отдельно или в комбинации с другими иммуномодуляторами, например, в комбинации с ингибитором СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), LAG-3, PD-1, PD-L1 или CTLA-4.
В определенных вариантах осуществления иммуномодулятор, используемый в комбинациях, описанных в настоящем описании (например, в комбинации с лекарственным средством, выбранным из антигенпрезентирующей комбинации), представляет собой активатор или агонист костимулирующей молекулы. В одном варианте осуществления агонист костимулирующей молекулы выбран из агониста (например, агонистическое антитело или его антигенсвязывающий фрагмент или растворимая слитая конструкция)
ОХ40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CDlla/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или лиганда CD83.
В других вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой агонист GITR. В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой молекулу антитела к GITR. Агонист GITR можно вводить отдельно или в комбинации с другими иммуномодуляторами, например, в комбинации с ингибитором PD-1, PD-L1, CTLA-4, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), TIM-3 или LAG-3. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против GITR представляет собой биспецифическое антитело, которое связывается с GITR и PD-1, PD-L1, CTLA-4, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), TIM-3 или LAG-3. В одном иллюстративном варианте осуществления молекулу антитела вводят в комбинации с молекулой антитела против PD-1 (например, молекула антитела против PD-1, как описано в настоящем описании). Молекула антитела к GITR и молекула антитела против PD-1 могут быть в форме отдельных композиций антител или в форме биспецифической молекулы антитела. В других вариантах осуществления агонист GITR можно вводить в комбинации с другой костимулирующей молекулой, например, агонистом ОХ40, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CDlla/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp8 0, CD160, B7-H3 или лиганда CD83 .
В других вариантах осуществления иммуномодулятор представляет собой активатор костимулирующей молекулы (например, агонист 0X40) . В одном варианте осуществления агонист 0X4 О представляет собой молекулу антитела к 0X40. Агонист 0X4 0 можно вводить отдельно или в комбинации с другими иммуномодуляторами, например, в комбинации с ингибитором PD-1, PD-L1, CTLA-4, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), TIM-3 или LAG-3. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела против 0X4 О представляет собой биспецифическое антитело, которое связывается с GITR и PD-1, PD-L1, CTLA-4, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5), TIM-3 или LAG-3. В одном иллюстративном варианте осуществления молекулу антитела к 0X40 вводят в комбинации с
молекулой антитела против PD-1 (например, молекула антитела против PD-1, как описано в настоящем описании). Молекула антитела к 0X40 и молекула антитела против PD-1 могут быть в форме отдельных композиций антител или в форме биспецифической молекулы антитела. В других вариантах осуществления агонист 0X4О можно вводить в комбинации с другой костимулирующей молекулой, например, агонистом GITR, CD2, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CDlla/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp8 0, CD160, B7-H3 или лиганда CD83 .
Следует отметить, что в настоящем описании описаны только иллюстративные комбинации ингибиторов точки контроля или агонистов костимулирующих молекул. Дополнительные комбинации этих средств входят в объем настоящего изобретения.
В определенных вариантах осуществления молекулы антител
против PD-L1, описанные в настоящем описании, вводят в
комбинации с одним или несколькими другими ингибиторами PD-1,
PD-L1 и/или PD-L2, известными в данной области. Антагонист может
представлять собой антитело, его антигенсвязывающий фрагмент,
иммуноадгезин, слитый белок или олигопептид. В некоторых
вариантах осуществления другое антитело против PD-1 выбрано из
MDX-1106, Merck 3475 или СТ-011. В некоторых вариантах
осуществления ингибитор PD-1 представляет собой иммуноадгезин
(например, иммуноадгезин, содержащий внеклеточную или
связывающую PD-1 часть PD-L1 или PD-L2, слитую с константной
областью (например, Fc-область последовательности
иммуноглобулина) . В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой АМР-224. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой антитело против PD-L1. В некоторых вариантах осуществления связывающий PD-L1 антагонист выбран из YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718С или MDX-1105. MDX-1105, также известный как BMS-936559, представляет собой антитело против PD-L1, описанное в WO2007/005874. Антитело YW243.55.S70 (последовательности вариабельной области тяжелой и легкой цепей, показанные в SEQ ID N0: 20 и 21, соответственно) представляет собой антитело против
PD-L1, описанное в WO 2010/077634.
MDX-1106, также известный как MDX-1106-04, ONO-4538 или BMS-936558, представляет собой антитело против PD-1, описанное в WO2006/121168. Merck 3745, также известное как МК-3475 или SCH-900475, представляет собой антитело против PD-1, описанное в WO2009/114335. Пидилизумаб (СТ-011; Cure Tech) представляет собой гуманизированное моноклональное IgGlk-антитело, которое связывается с PD-1. Пидилизумаб и другие гуманизированные моноклональные антитела против PD-1 описаны в WO2009/101611. В других вариантах осуществления антитело против PD-1 представляет собой пембролизумаб. Пембролизумаб (торговое название Keytruda, прежде ламбролизумаб, также известный как МК-3475), описанный, например, в Hamid, О. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44. AMP-224 (B7-DCIg; Amplimmune; например, описанный в WO2010/027827 и WO2011/066342) представляет собой слитую конструкцию растворимого рецептора PD-L2 с Fc, которая блокирует взаимодействие между PD-1 и В7-Н1. Другие антитела против PD-1 включают AMP 514 (Amplimmune), среди прочих, например, антитела против PD-1, описанные в US 8609089, US 2010028330 и/или US 20120114649.
В некоторых вариантах осуществления другое антитело против PD-1 представляет собой MDX-1106. Альтернативные названия для MDX-1106 включают MDX-1106-04, ONO-4538, BMS-936558 или ниволумаб. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 представляет собой ниволумаб (регистрационный номер CAS: 946414-94-4). Ниволумаб (также обозначаемый как BMS-936558 или MDX1106; Bristol-Myers Squibb) представляет собой полностью человеческое моноклональное 1дС4-антитело, которое специфически блокирует PD-1. Ниволумаб (клон 5С4) и другие моноклональные антитела человека, которые специфически связываются с PD-1, описаны в US 8008449 и W020 06/121168. Пембролизумаб или лабролизумаб (также известный как МК-3475; Merck) представляет собой гуманизированное моноклональное 1дС4-антитело, которое связывается с PD-1. Пембролизумаб и другие гуманизированные антитела против PD-1 описаны в US 8354509 и WO09/114335. MDPL3280A (Genentech/Roche) представляет собой оптимизированное
посредством Fc человека моноклональное IgGl-антитело, которое связывается с PD-L1. MDPL3280A и другие моноклональные антитела человека к PD-L1 описаны в патенте США № 7943743 и публикации США № 20120039906. Другие связывающие PD-L1 соединения связующие вещества включают YW243.55.S70 (вариабельные области тяжелой и легкой цепей показаны в SEQ ID NO: 20 и 21 в W02010/077634) и MDX-1105 (также обозначаемый как BMS-936559, и, например, связывающие PD-L1 соединения, описанные в WO2007/005874).
В некоторых вариантах осуществления молекула антитела (например, моно-, би- или триспецифическое антитело) против TIM-3, LAG-3 и/или PD-1, используемая в любом из способов и комбинаций, описанных в настоящем описании, включает аминокислотную последовательность или кодируется нуклеотидной последовательностью, как описано в настоящем описании (например, как описано в разделе под названием "Ингибиторы молекул иммунной точки контроля", начинающемся на стр.218 настоящего описания ниже (включая все публикации, упоминаемые в нем). Способы терапии злокачественной опухоли
Иллюстративные комбинации молекул антител против PD-L1 (отдельно или в комбинации с другими стимулирующими средствами) и стандарт лечения злокачественной опухоли, включают по меньшей мере следующие.
В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, описанную в настоящем описании, используют в комбинации со стандартным способом лечения злокачественной опухоли, представляющим собой химиотерапевтическое средство, включая, но не ограничиваясь ими, анастрозол (Arimidex(r)) , бикалутамид (Casodex(r)) , блеомицина сульфат (Blenoxane(r)) , бусульфан (Myleran(r)) , бусульфан инъекционный (Busulfex(r)) , капецитабин (Xeloda(r)) , ^-пентоксикарбонил-5-дезокси-5-фторцитидин, карбоплатин (Paraplatin(r)) , кармустин (BiCNU(r)) , хлорамбуцил (Leukeran(r)) , цисплатин (Platinol(r)) , кладрибин (Leustatin(r)) , циклофосфамид (Cytoxan(r) или Neosar(r)) , цитарабин, цитозин арабинозид (Cytosar-U(r)) , липосомальную инъекцию цитарабина
(DepoCyt(r)) , дакарбазин (DTIC-Dome(r)) , дактиномицин (актиномицин D, космеган), даунорубицина гидрохлорид (Cerubidine(r)) , липосомальную инъекцию даунорубицина цитрата (DaunoXome(r)) , дексаметазон, доцетаксел (Таксотер(r)) , доксорубицина гидрохлорид
(Adriamycin(r), Rubex(r)) , этопозид (Vepesid(r)) , флударабина фосфат
(Fludara(r)), 5-фторурацил (Adrucil(r), Efudex(r)) , флутамид
(Eulexin(r)) , тезацитибин, гемцитабин (дифтордезоксицитидин), гидроксимочевину (Hydrea(r)) , идарубицин (Idamycin(r)), ифосфамид
(IFEX(r)), иринотекан (Камптосар(r)) , L-аспарагиназу (ELSPAR(r)) , лейковорин кальций, мелфалан (Alkeran(r)) , б-меркаптопурин
(Purinthol(r)) , метотрексат (Folex(r)), митоксантрон (Novantrone(r)) , милотарг, паклитаксел (Taxol(r)) , феникс (иттрий 90/MX-DTPA), пентостатин, имплант полифепросана 20 с кармустином (Gliadel(r)) , тамоксифена цитрат (Nolvadex(r)) , тенипозид (Vumon(r)) , б-тиогуанин, тиотепу, тирапазамин (Tirazone(r)) , топотекана гидрохлорид для инъекций (Hycamptin(r)) , винбластин (Velban(r)) , винкристин
(Oncovin(r)) и винорелбин (Navelbine(r)), ибрутиниб, иделалисиб и брентуксимаб ведотин.
Иллюстративные алкилирующие средства включают, но не ограничиваются ими, азотистые иприты, производные этиленимина, алкилсульфонаты, нитрозомочевина и триазены: урацил мустард
(Aminouracil Mustard(r), Chlorethaminacil(r), Demethyldopan(r),
Desmethyldopan(r), Haemanthamine(r), Nordopan(r), Uracil nitrogen
mustard(r), Uracillost(r), Uracilmostaza(r), Uramustin(r),
Uramustine(r)) , хлорметин (Mustargen(r)) , циклофосфамид (Cytoxan(r), Neosar(r), Clafen(r), Endoxan(r), Procytox(r), Revimmune(tm)) , ифосфамид
(Mitoxana(r)) , мелфалан (Alkeran(r)) , хлорамбуцил (Leukeran(r)) , пипоброман (Amedel(r), Vercyte(r)) , триэтиленмеламин (Hemel(r), Hexalen(r), Hexastat(r)) , триэтилентиофосфорамин, темозоломид
(Temodar(r)) , тиотепу (Thioplex(r)) , бусульфан (Busilvex(r), Myleran(r)) , кармустин (BiCNU(r)) , ломустин (CeeNU(r)) , стрептозоцин
(Zanosar(r)) и дакарбазин (DTIC-Dome(r)) . Дополнительные
иллюстративные алкилирующие средства включают, но не ограничиваются ими, оксалиплатин (Eloxatin(r)) ; темозоломид
(Temodar(r) и Temodal(r)) ; дактиномицин (также известный как актиномицин D, Cosmegen(r)) ; мелфалан (также известный как L-PAM, L-сарколизин и фенилаланин мустард, Alkeran(r)) ; алтретамин (также известный как гексаметилмеламин (НММ), Hexalen(r)) ; кармустин
(BiCNU(r)) ; бендамустин (Treanda(r)); бусульфан (Busulfex(r) и
Myleran(r)) ; карбоплатин (Paraplatin(r)) ; ломустин (также известный
как CCNU, CeeNU(r)) ; цисплатин (также известный как CDDP,
Platinol(r) и Platinol(r)-AQ) ; хлорамбуцил (Leukeran(r)) ;
циклофосфамид (Cytoxan(r) и Neosar(r)) ; дакарбазин (также известный как DTIC, DIC и имидазол карбоксамид, DTIC-Dome(r)) ; алтретамин
(также известный как гексаметилмеламин (НММ), Hexalen(r)) ; Ifosfamide (Ifex(r)); преднумустин; прокарбазин (Matulane(r)) ; мехлорэтамин (также известный как нитроген мустард, мустин и мехлорэтамин гидрохлорид, Mustargen(r)) ; стрептазоцин (Zanosar(r)); тиотепу (также известую как тиофосфоамид, TESPA и TSPA, Thioplex(r)) ; циклофосфамид (Endoxan(r), Cytoxan(r), Neosar(r),
Procytox(r), Revimmune(r)) ; и бендамустин HC1 (Treanda(r)) .
Иллюстративные антрациклины включают, например,
доксорубицин (Adriamycin(r) и Rubex(r)) ; блеомицин (lenoxane(r)) ; даунорубицин (даунорубицин гидрохлорид, дауномицин и рубидомицин гидрохлорид, Cerubidine(r)) ; даунорубицин липосомальный (липосомы даунорубицина цитрата, DaunoXome(r)) ; митоксантрон (DHAD, Novantrone(r)) ; эпирубицин (Ellence(tm)) ; идарубицин (Idamycin(r), Idamycin PFS(r)) ; митомицин С (Mutamycin(r)) ; гелданамицин; гербимицин; равидомицин и дезацетилравидомицин.
Иллюстративные алкалоиды барвинка, которые можно использовать в комбинации с молекулами антител против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-L1 или против PD-1) включают, но не ограничиваются ими, винорелбина тартрат (Navelbine(r)) , винкристин (Oncovin(r)) и виндезин (Eldisine(r)) ) ;
винбластин (также известный как винбластина сульфат, винкалейкобластин и VLB, Alkaban-AQ(r) и Velban(r)) ; и винорелбин (Navelbine(r)) .
Иллюстративные ингибиторы протеасом, которые можно использовать в комбинации с молекулами антител против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-L1 или против TIM-3) включают, но не ограничиваются ими, бортезомиб (Velcade(r)) ; карфилзомиб (РХ-171-007, (S) -4-метил-Л/- ( (S) -1- ( ( (S) -4-метил-1-((Я)-2-метилоксиран-2-ил)-1-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксо-З-фенилпропан-2-ил)-2-((S)-2-(2-морфолиноацетамидо)-4-фенилбутанамидо)пентанамид); маризомиб (NPI-0052); иксазомиба цитрат (MLN-9708); деланзомиб (СЕР-18770) ; и О-метил-N- [ (2-метил-5-тиазолил) карбонил] -L-серил-О-метил-Л/- [ (1S) -2- [ (2R) -2-метил-2-оксиранил]-2-оксо-1-(фенилметил)этил]-L-серинамид (ONX-0912) .
В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, описанную в настоящем описании, используют, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) в комбинации с ингибитором тирозинкиназы (например, ингибитор рецепторной тирозинкиназы (RTK)). Иллюстративный ингибитор тирозинкиназы включает, но не ограничивается ими, ингибитор каскада эпидермального фактора роста (EGF) (например, ингибитор рецептора эпидермального фактора роста (EGFR)), ингибитор каскада сосудисто-эндотелиального фактора роста (VEGF) (например, ингибитор рецептора сосудисто-эндотелиального фактора роста (VEGFR) (например, ингибитор VEGFR-1, ингибитор VEGFR-2, ингибитор VEGFR-3)), ингибитор каскада тромбоцитарного фактора роста (PDGF) (например, ингибитор рецептора тромбоцитарного фактора роста (PDGFR) (например, ингибитор PDGFR-B)), ингибитор RAF-1, ингибитор KIT и ингибитор RET. В некоторых вариантах осуществления средство против злокачественной опухоли, используемое в комбинации с ингибитором hedgehog, выбрано из
группы, состоящей из: акситиниба (AG013736) , босутиниба (SKI-606), цедираниба (RECENTIN(tm), AZD2171), дасатиниба (SPRYCEL(r), BMS-354825) , эрлотиниба (TARCEVA(r)) , гефитиниба (IRESSA(r)), иматиниба (Gleevec(r), CGP57148B, STI-571), лапатиниба (TYKERB(r), TYVERB(r)) , лестауртиниба (СЕР-701), нератиниба (HKI-272), нилотиниба (TASIGNA(r)) , семаксаниба (семаксиниб, SU5416), сунитиниба (SUTENT(r), SU11248), тоцераниба (PALLADIA(r)), вандетаниба (ZACTIMA(r), ZD6474), ваталаниба (РТК787, PTK/ZK), трастузумаба (HERCEPTIN(r)) , бевацизумаба (AVASTIN(r)) , ритуксимаба (RITUXAN(r)) , цетуксимаба (ERBITUX(r)) , панитумумаба (VECTIBIX(r)) , ранибизумаба (Lucentis(r)) , нилотиниба (TASIGNA(r)) , сорафениба (NEXAVAR(r)) , алемтузумаба (САМРАТН(r)) , гемтузумаба озагомицина (MYLOTARG(r)) , ENMD-2076, PCI-32765, АС220, довитиниба лактата (TKI258, CHIR-258), BIBW 2992 (TOVOK(tm)) , SGX523, PF-04217903, PF-02341066, PF-299804, BMS-777607, АВТ-869, МР470, BIBF 1120 (VARGATEF(r)) , АР24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, СЕР-11981, тивозаниба (AV-951), OSI-930, ММ-121, XL-184, XL-647, XL228, АЕЕ788, AG-490, AST-б, BMS-599626, CUDC-101, PD153035, пелитиниба (ЕКВ-569), вандетаниба (зактима), WZ3146, WZ4002, WZ8040, АВТ-869 (линифаниб), АЕЕ788, АР24534 (понатиниб), AV-951 (тивозаниб), акситиниба, BAY 73-4506 (регорафениб), биваниба аланината (BMS-582664), бриваниба (BMS-540215), цедираниба (AZD2171), CHIR-258 (довитиниба), CP 673451, CYC116, Е7080, Ki8751, маситиниба (АВ1010), MGCD-265, мотесаниба дифосфата (AMG-706), МР-470, OSI-930, пазопаниба гидрохлорида, PD173074, сорафениба тозилата (Bay 43-9006), SU 5402, TSU-68 (SU6668), ваталаниба, XL880 (GSK1363089, EXEL-2880). Отдельные ингибиторы тирозинкиназы выбраны из сунитиниба, эрлотиниба, гефитиниба или сорафениба.
В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, описанную в настоящем описании, используют, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), в
комбинации с ингибиторами рецептора сосудисто-эндотелиального фактора роста (VEGF). Иллюстративные ингибиторы VEGF/VEGFR описаны в настоящем описании ниже, например, в разделе под названием "Иллюстративные средства, используемые в комбинациях".
В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, описанную в настоящем описании используют, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), в комбинации с ингибитором PI3K. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K представляет собой ингибитор дельта- и гамма-изоформ PI3K. Иллюстративные ингибиторы PI3K, которые можно использовать в комбинации, описаны в настоящем описании ниже, например, в разделе под названием "Иллюстративные средства, используемые в комбинациях".
В некоторых вариантах осуществления молекулы антител против PD-L1, описанные в настоящем описании, используют, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), в комбинации с ингибитором mTOR, например, одним или несколькими ингибиторами mTOR, описанными в настоящем описании ниже, например, в разделе под названием "Иллюстративные средства, используемые в комбинациях".
В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, описанную в настоящем описании, используют, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), в комбинации с ингибитором BRAF, например, GSK211843 6, RG72 04, PLX4032, GDC-0879, PLX4720 и сорафениба тозилатом (Bay 43-9006) . В некоторых вариантах осуществления комбинация включает ингибитор RAF, например, дебрафиниб или N-{3-[5-(2-аминопиримидин-4-ил)-2-трет-бутил-1,З-тиазол-4-ил]-2-фторфенил}-2,б-дифторбензолсульфонамид.
В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1,
описанную в настоящем описании, используют, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), в комбинации с ингибитором МЕК. В некоторых вариантах осуществления комбинацию антитела против PD-L1 и ингибитора МЕК используют для лечения злокачественной опухоли (например, злокачественная опухоль, описанная в настоящем описании). В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль, которую лечат комбинацией, выбрана из меланомы, рака ободочной и прямой кишки, немелкоклеточного рака легкого, рака яичника, рака молочной железы, рака предстательной железы, рака поджелудочной железы, гематологической злокачественной опухоли или почечноклеточного рака. В определенных вариантах осуществления злокачественная опухоль включает мутацию BRAF (например, мутация V600E BRAF), BRAF дикого типа, KRAS дикого типа или активирующую мутацию KRAS. Злокачественная опухоль может быть на ранней, промежуточной или поздней стадии.
Любой ингибитор МЕК можно использовать в комбинации, включая, но не ограничиваясь ими, ARRY-142886, G02442104 (также известный как GSK1120212), RDEA436, RDEA119/BAY 869766, AS703026, G00039805 (также известный как AZD-6244 или селуметиниб) , BIX 02188, BIX 02189, CI-1040 (PD-184352), PD0325901, PD98059, U0126, GDC-0973 (метанон, [3,4-дифтор-2-[ (2-фтор-4-йодфенил)амино]фенил][З-гидрокси-3-(25)-2-пиперидинил-1-азетидинил]-), G-38963, G02443714 (также известный как AS703206) или их фармацевтически приемлемую соль или сольват. Дополнительные примеры ингибиторов МЕК описаны в WO 2013/019906, WO 03/077914, WO 2005/121142, WO 2007/04415, WO 2008/024725 и WO 2009/085983, содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылки. В некоторых вариантах осуществления ингибитор МЕК представляет собой траметиниб или N-(3-{З-циклопропил-5-[(2-фтор-4-йодофенил)амино]-6,8-диметил-2,4,7-триоксо-З,4,6,7-тетрагидропиридо[4,З-d]пиримидин-1(2Н)-ил}фенил)ацетамид.
В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, описанную в настоящем описании, используют отдельно или в
комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), в комбинации с ингибитором JAK2, например, СЕР-701, INCB18424, СР-690550 (тасоцитиниб).
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию, описанную в настоящем описании, используют, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-L1 или против TIM-3), в комбинации с паклитакселом или средством на основе паклитаксела, например, TAXOL(r), связанным с белком паклитакселом (например,
ABRAXANE(r)) . Иллюстративные средства на основе паклитаксела включают, но не ограничиваются ими, связанный с альбумином паклитаксел в форме наночастиц (ABRAXANE, выпускаемый в продажу Abraxis Bioscience), связанный с докозагексаеновой кислотой паклитаксел (DHA-паклитаксел, таксопрексин, выпускаемый в продажу Protarga), связанный с полиглутаматом паклитаксел (PG-паклитаксел, паклитаксел полиглумекс, СТ-2103, XYOTAX, выпускаемый в продажу Cell Therapeutic), активируемое опухолью пролекарство (ТАР), ANG105 (Angiopep-2, свяазнный с тремя молекулами паклитаксела, выпускаемый в продажу ImmunoGen), паклитаксел-ЕС-1 (паклитаксел, связанный с распознающим егЬВ2 пептидом ЕС-1; см. Li et al. , Biopolymers (2007) 87:225-230), и конъюгированный с глюкозой паклитаксел (например, 2'-паклитаксел метил-2-глюкопиранозилсукцинат, см. Liu et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters (2007) 17:617-620).
Лучевую терапию можно проводить посредством одного из нескольких способов или комбинации способов, включая, но не ограничиваясь ими, терапию внешним пучком, внутреннюю лучевую терапию, облучение посредством имплантата, стереотактическую радиохирургическую операцию, системную лучевую терапию, лучевую терапию и постоянную или временную интерстициальную брахитерапию. Термин "брахитерапия" относится к лучевой терапии, доставляемой пространственно ограниченным радиоактивным материалом, помещенным в организм или вблизи опухоли или другой области пролиферативного заболевания ткани. Подразумевают, что
термин включает, но не ограничивается ими, воздействие радиоактивных изотопов (например, At-211, 1-131, 1-125, Y-90, Re-186, Re-188, Sm-153, Bi-212, P-32 и радиоактивные изотопы Lu) . Подходящие источники радиации для применения в качестве средства для обработки клеток по настоящему изобретению включают как твердые вещества, так и жидкости. В качестве неограничивающего примера, источником радиационного излучения может быть радионуклид, такой как 1-125, 1-131, Yb-169, Ir-192 в качестве твердого источника, 1-125 в качестве твердого источника, или другие радионуклиды, которые испускают фотоны, бета-частицы, гамма-излучение и другие терапевтические лучи. Радиоактивный материал также может представлять собой жидкость, изготовленную из любого раствора радионуклида(ов), например, раствор 1-12 5 или 1-131, или радиоактивную жидкость можно получать с использованием взвеси подходящей жидкости, содержащей мелкие частицы твердых радионуклидов, таких как Au-198, Y-90. Более того, радионуклид (ы) может быть выполнен в виде геля или радиоактивных микросфер.
Молекулы антител против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), можно вводить в комбинации с одним или несколькими из существующих способов лечения злокачественной опухоли, включая, но не ограничиваясь ими: хирургическую операцию; лучевую терапию (например, терапия внешним пучком, которая вовлекает трехмерную конформную лучевую терапию, где поле облучения представляет собой рассчитанное локальное облучение (например, облучение, направленное на заранее выбранную мишень или орган) или сфокусированное облучение). Сфокусированное облучение может быть выбрано из группы, состоящей из стереотактической радиохирургии, фракционированной стереотактической радиохирургии и лучевой терапии с модулируемой интенсивностью. Сфокусированное облучение может иметь источник излучения, выбранный из группы, состоящей из пучка частиц (протонный), кобальта-60 (фотонный) и линейного ускорителя (рентгеновский) , например, как описано в W0 2012/177624.
В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), вводят в комбинации с антителом против иммуноглобулин-подобных рецепторов киллерных клеток
(также обозначаемое в настоящем описании как "антитело против KIR"), общим антителом против KIR или антителом против NKG2D, и/или антителом против MICA. В определенных вариантах осуществления комбинацию молекулы антитела против PD-L1 и антитела против KIR, общего антитела против KIR или антитела против NKG2D, описанного в настоящем описании, используют для лечения злокачественной опухоли, например, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании
(например, солидная опухоль, например, распространенная солидная опухоль).
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором
(например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), вводят в комбинации с клеточной иммунотерапией
(например, провендж (например, сипулейцел)), и необязательно в комбинации с циклофосфамидом. В определенных вариантах осуществления комбинацию молекулы антитела против PD-L1, провенджа и/или циклофосфамида используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, рак предстательной железы, например, распространенный рак предстательной железы).
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором
(например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), вводят в комбинации с вакциной, например, вакциной против карциномы печени на основе дендритных клеток
(DC-RCC). В определенных вариантах осуществления комбинацию молекулы антитела против PD-L1 и вакцины DC-RCC используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, как описано в настоящем описании (например, карцинома печени, например, метастазирующий почечноклеточный рак (RCC) или
светлоклеточный почечноклеточный рак (CCRCC)).
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором
(например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или
против TIM-3), вводят в комбинации с химиотерапией и/или
иммунотерапией. Например, молекулу антитела против PD-L1 можно
использовать для лечения миеломы, отдельно или в комбинации с
одним или несколькими из: химиотерапии или других средств против
злокачественной опухоли (например, аналоги талидомида, например,
леналидомид), антитела против TIM-3, обработанных опухолевым
антигеном дендритных клеток, слитых (например, посредством
электрослияния) опухолевых клеток и дендритных клеток или
вакцинации идиотипом иммуноглобулина, продуцированным
злокачественными плазмацитами. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с антителом против TIM-3 для лечения миеломы, например, множественной миеломы.
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором
(например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), используют в комбинации с химиотерапией для лечения рака легкого, например, немелкоклеточного рака легкого. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют с терапией платиновыми дублетами для лечения рака легкого.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), используют для лечения рака почки, например, почечноклеточного рака (RCC) (например, светлоклеточного почечноклеточного рака (CCRCC) или метастазирующего RCC. Молекулу антитела против PD-L1 можно вводить в комбинации с одним или несколькими из: стратегии на иммунной основе
(например, интерлейкин-2 или интерферон-а), направленного средства (например, ингибитор VEGF, такой как моноклональное
антитело к VEGF; ингибитора тирозинкиназы VEGF, такого как сунитиниб, сорафениб, акситиниб и пазопаниб; ингибитор на основе PHK-i) или ингибитор нижеследующего медиатора передачи сигнала VEGF, например, ингибитор мишени рапамицина (mTOR) у млекопитающих, например, эверолимус и темсиролимус).
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1, описанными в настоящем описании, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), для лечения рака поджелудочной железы включает, но не ограничивается ими, химиотерапевтическое средство, например, паклитаксел или средство на основе паклитаксела (например, состав паклитаксела, такой как TAXOL, стабилизированный альбумином состав паклитаксела в форме наночастиц (например, ABRAXANE) или липосомальный состав паклитаксела); гемцитабин (например, гемцитабин отдельно или в комбинации с АХР107-11); другие химиотерапевтические средства, такие как оксалиплатин, 5-фторурацил, капецитабин, рубитекан, эпирубицина гидрохлорид, NC-6004, цисплатин, доцетаксел
(например, TAXOTERE), митомицин С, ифосфамид; интерферон; ингибитор тирозинкиназы (например, ингибитор EGFR (например, эрлотиниб, панитумумаб, цетуксимаб, нимотузумаб); ингибитор рецептора HER2/neu (например, трастузумаб); двойной ингибитор киназ (например, босутиниб, саракатиниб, лапатиниб, вандетаниб); мультикиназный ингибитор (например, сорафениб, сунитиниб, XL184, пазопаниб); ингибитор VEGF (например, бевацизумаб, AV-951, бриваниб); радиоиммунотерапию (например, XR303); вакцину против злокачественной опухоли (например, GVAX, пептид сурвивин); ингибитор СОХ-2 (например, целекоксиб); ингибитор рецептора IGF-1 (например, AMG 479, МК-0646); ингибитор mTOR (например, эверолимус, темсиролимус); ингибитор IL-6 (например, CNTO 328); ингибитор циклин-зависимой киназы (например, Р276-00, UCN-01); направленное на измененный метаболизм энергии (AEMD) соединение
(например, CPI-613); ингибитор HDAC (например, вориностат); агонист рецептора 2 TRAIL (TR-2) (например, конатумумаб); ингибитор МЕК (например, AS703026, селуметиниб, GSK1120212);
двойной ингибитор киназ Raf/MEK (например, R05126766); ингибитор
передачи сигнала Notch (например, МК0752); слитый белок
моноклональное антитело-антитело (например, L19IL2); куркумин;
ингибитор HSP90 (например, танеспимицин, STA-9090); rIL-2;,
денилейкин дифтитокс; ингибитор топоизомеразы 1 (например,
иринотекан, РЕР02); статин (например, симвастатин); ингибитор
фактора Vila (например, PCI-27483); ингибитор АКТ (например, RX-
0201); активируемое гипоксией пролекарство (например, ТН-302);
метформина гидрохлорид, ингибитор гамма-секретазы (например,
RO4929097); ингибитор рибонуклеотидредуктазы (например, 3-АР);
иммунотоксин (например, HuC242-DM4); ингибитор PARP (например,
KU-0059436, велипариб); ингибитор CTLA-4 (например, СР-б75,20б,
ипилимумаб); терапию AdV-tk; ингибитор протеасом (например,
бортезомиб (велкейд), NPI-0052); тиазолидиндион (например,
пиоглитазон); NPC-1C; ингибитор Aurora-киназы (например,
R763/AS703569), ингибитор CTGF (например, FG-3019); siG12D
LODER; и лучевую терапию (например, томотерапия,
сетеротактическое облучение, протонная терапия), хирургическую операцию и их комбинацию. В определенных вариантах осуществления комбинацию паклитаксела или средства на основе паклитаксела и гемцитабина можно использовать с молекулами антител против PD-L1, описанными в настоящем описании.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения мелкоклеточного рака легкого включает, но не ограничивается ими, химиотерапевтическое средство, например, этопозид, карбоплатин, цисплатин, оксалиплатин, иринотекан, топотекан, гемцитабин, липосомальный SN-38, бендамустин, темозоломид, белотекан, NK012, FR901228, флавопиридол); ингибитор тирозинкиназы (например, ингибитор EGFR (например, эрлотиниб, гефитиниб, цетуксимаб, панитумумаб); мультикиназный ингибитор (например, сорафениб, сунитиниб); ингибитор VEGF (например, бевацизумаб, вандетаниб); вакцину против злокачественной опухоли (например, GVAX); ингибитор Вс1-2 (например, облимерсен натрий, АВТ-263);
ингибитор протеасом (например, бортезомиб (велкейд), NPI-0052), паклитаксел или средство на основе паклитаксела; доцетаксел; ингибитор рецептора IGF-1 (например, AMG 479) ; ингибитор HGF/SF (например, AMG 102, МК-0646); хлороквин; ингибитор Aurora-киназы (например, MLN8237); радиоиммунотерапию (например, TF2); ингибитор HSP90 (например, танеспимицин, STA-9090); ингибитор mTOR (например, эверолимус); биспецифическое антитело против Ер-CAM/CD3 (например, МТ110); ингибитор СК-2 (например, СХ-4 94 5); ингибитор HDAC (например, белиностат); антагонист SMO (например, BMS 833923); пептидную вакцину против злокачественной опухоли и лучевую терапию (например, лучевая терапия с модулируемой интенсивностью (IMRT), гипофракционированная лучевая терапия, направляемая гипоксией лучевая терапия), хирургическую операцию и их комбинации.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), для лечения немелкоклеточного рака легкого включает, но не ограничивается ими, химиотерапевтическое средство, например, винорелбин, цисплатин, доцетаксел, пеметрексед динатрий, этопозид, гемцитабин, карбоплатин, липосомальный SN-38, TLK286, темозоломид, топотекан, пеметрексед динатрий, азацитидин, иринотекан, тегафур-гимерацил-отерацил калий, сапацитабин); ингибитор тирозинкиназы (например, ингибитор EGFR (например, эрлотиниб, гефитиниб, цетуксимаб, панитумумаб, нецитумумаб, PF-00299804, нимотузумаб, RO5083945), ингибитор МЕТ (например, PF-02341066, ARQ 197), ингибитор Р13К-киназы (например, XL147, GDC-0941), двойной ингибитор киназ Raf/MEK (например, R05126766), двойной ингибитор киназ PI3K/mTOR (например, XL765), ингибитор SRC (например, дасатиниб), двойной ингибитор (например, BIBW 2992, GSK1363089, ZD6474, AZD0530, AG-013736, лапатиниб, MEHD7 94 5A, линифаниб), мультикиназный ингибитор (например, сорафениб, сунитиниб, пазопаниб, AMG 706, XL184, MGCD265, BMS-690514, R935788), ингибитор VEGF (например, эндостар, эндостатин, бевацизумаб, цедираниб, BIBF 1120, акситиниб,
тивозаниб, AZD2171), вакцину против злокачественной опухоли
(например, липосомальная вакцина BLP2 5, GVAX, рекомбинантная ДНК
и аденовирус, экспрессирующие белок L523S), ингибитор Вс1-2
(например, облимерсен натрий), ингибитор протеасом (например,
бортезомиб, карцилзомиб, NPI-0052, MLN9708), паклитаксел или
средство на основе паклитаксела, доцетаксел, ингибитор рецептора
IGF-1 (например, циксутумумаб, МК-0646, OSI 906, СР-751,871,
BIIB022), гидроксихлороквин, ингибитор HSP90 (например,
танеспимицин, STA-9090, AUY922, XL888), ингибитор mTOR
(например, эверолимус, темсиролимус, ридафоролимус),
биспецифическое антитело против Ep-CAM-/CD3 (например, МТ110), ингибитор СК-2 (например, СХ-4945), ингибитор HDAC (например, MS 275, LBH589, вориностат, вальпроевая кислота, FR901228), ингибитор DHFR (например, пралатрексат), ретиноид (например, бексаротен, третиноин), конъюгат антитело-лекарственное средство (например, SGN-15), бисфосфонат (например, золедроновая кислота), вакцину против злокачественной опухоли (например, белагенпуматуцел-L), низкомолекулярный гепарин (LMWH) (например, тинзапарин, эноксапарин), GSK1572932A, мелатонин, талактоферрин, димесну, ингибитор топоизомеразы (например, амрубицин, этопозид, каренитецин), нельфинавир, циленгитид, ингибитор ЕгЬВЗ (например, ММ-121, U3-1287), ингибитор сурвивина (например, YM155, LY2181308), эрибулина мезилат, ингибитор СОХ-2 (например, целекоксиб), пегфилграстим, ингибитор Polo-подобной киназы 1 (например, BI 6121), агонист рецептора 2 TRAIL (TR-2) (например, CS-1008), конъюгат пептид CNGRC (SEQ ID NO: 225)-TNF-альфа, дихлорацетат (DCA), ингибитор HGF (например, SCH 900105), SAR240550, агонист PPAR-гамма (например, CS-7017), ингибитор гамма-секретазы (например, RO4929097), эпигенетическую терапию (например, 5-азацитидин), нитроглицерин, ингибитор МЕК (например, AZD6244), ингибитор циклин-зависимой киназы (например, UCN-01), холестерин-Fusl, антитубулиновое средство (например, Е7389), ингибитор фарнезил-ОН-трансферазы (например, лонафарниб), иммунотоксин (например, ВВ-10901, SSI (dsFv) РЕ38), фондапаринукс, средство, разрушающее сосуды (например, AVE8062), ингибитор PD-L1 (например, MDX-1105, MDX-1106), бета-глюкан,
NGR-hTNF, EMD 521873, ингибитор МЕК (например, GSK1120212), аналог эпотилона (например, иксабепилон), ингибитор кинезинового веретена (например, 4SC-2 05), нацеленное на теломеры средство
(например, KML-001), ингибитор каскада Р70 (например, LY2584702), ингибитор АКТ (например, МК-2206), ингибитор ангиогенеза (например, леналидомид), ингибитор передачи сигнала Notch (например, ОМР-21М18), лучевую терапию, хирургическую операцию и их комбинации.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекула антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), для лечения рака яичника включает, но не ограничивается ими, химиотерапевтическое средство (например, паклитаксел или средство на основе паклитаксела; доцетаксел; карбоплатин; гемцитабин; доксорубицин; топотекан; цисплатин; иринотекан, TLK286, ифосфамид, олапариб, оксалиплатин, мелфалан, пеметрексед динатрий, SJG-136, циклофосфамид, этопозид, децитабин); антагонист грелина (например, AEZS-130), иммунотерапию
(например, АРС8024, ореговомаб, ОРТ-821), ингибитор
тирозинкиназы (например, ингибитор EGFR (например, эрлотиниб), двойной ингибитор (например, Е7080), мультикиназный ингибитор
(например, AZD0530, JI-101, сорафениб, сунитиниб, пазопаниб), ON 01910.Na), ингибитор VEGF (например, бевацизумаб, BIBF 1120, цедираниб, AZD2171), ингибитор PDGFR (например, IMC-3G3), паклитаксел, ингибитор топоизомеразы (например, каренитецин, иринотекан), ингибитор HDAC (например, вальпроат, вориностат), ингибитор рецептора фолатов (например, фарлетузумаб), ингибитор ангиопоэтина (например, AMG 386), аналог эпотилона (например, иксабепилон), ингибитор протеасом (например, карфилзомиб), ингибитор рецептора IGF-1 (например, OSI 906, AMG 479) , ингибитор PARP (например, велипариб, AGO14699, инипариб, МК-4827), ингибитор Aurora-киназы (например, MLN8237, ENMD-2076), ингибитор ангиогенеза (например, леналидомид), ингибитор DHFR
(например, пралатрексат), радиоиммунотерапевтическое средство
(например, Hu3S193), статин (например, ловастатин), ингибитор
топоизомеразы 1 (например, NKTR-102), вакцину против злокачественной опухоли (например, вакцина на основе синтетических длинных пептидов р53, вакцина на основе аутологичных ОС-DC), ингибитор mTOR (например, темсиролимус, эверолимус), ингибитор BCR/ABL (например, иматиниб), антагонист рецептора ЕТ-А (например, ZD4054), агонист рецептора 2 TRAIL
(TR-2) (например, CS-1008), ингибитор HGF/SF (например, AMG 102), EGEN-001, ингибитор Polo-подобной киназы 1 (например, BI 6727), ингибитор гамма-секретазы (например, RO4929097), ингибитор Wee-1 (например, МК-1775), антитубулиновое средство
(например, винорелбин, Е7389), иммунотоксин (например, денилейкин дифтитокс), SB-485232, средство, разрушающее сосуды
(например, AVE8062), ингибитор интегрина (например, EMD 525797), ингибитор кинезинового веретена (например, 4SC-205), ревлимид, ингибитор HER2 (например, MGAH22), ингибитор ЕггВЗ (например, ММ-121), лучевую терапию; и их комбинации.
В одном иллюстративном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) используют для лечения миеломы, отдельно или в комбинации с одним или несколькими из: химиотерапии или других средств против злокачественной опухоли
(например, аналоги талидомида, например, леналидомид), HSCT
(Cook, R. (2008) J Мапад Care Pharm. 14(7 Suppl):19-25), антитела против TIM-3 (Hallett, WHD et al. (2011) J of American Society for Blood and Marrow Transplantation 17(8) : 1133-145), обработанных опухолевым антигеном дендритных клеток, слитых
(например, посредством электрослияния) опухолевых клеток и дендритных клеток или вакцинации идиотипом иммуноглобулина, продуцируемым злокачественными плазмацитами (рассмотрено в Yi, Q. (2009) Cancer J. 15 ( 6) :502-10) .
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором
(например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) используют для лечения рака почки, например, почечноклеточного рака (RCC) или метастазирующего RCC. Молекулу
антитела против PD-L1 можно вводить в комбинации с одним или несколькими из: стратегии на иммунной основе (например, интерлейкин-2 или интерферон-а), направленного средства (например, ингибитор VEGF, такой как моноклональное антитело к VEGF, например, бевацизумаб (Rini, B.I. et al. (2010) J. Clin. Oncol. 28 (13) :2137-2143) ) ; ингибитора тирозинкиназы VEGF, такого как сунитиниб, сорафениб, акситиниб и пазопаниб (рассмотрено в Pal. S.K. et al. (2 014) Clin. Advances in Hematology & Oncology 12(2):90-99)); ингибитор PHK-i) или ингибитора нижеследующего медиатора передачи сигнала VEGF, например, ингибитора мишени рапамицина (mTOR) у млекопитающих, например, эверолимус и темсиролимус (Hudes, G. et al. (2007) N. Engl. J. Med. 356 (22) : 2271-2281, Motzer, R.J. et al. (2008) Lancet 372: 449456) .
Пример подходящих терапевтических средств для применения в
комбинации с молекулами антител против PD-L1, описанными в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с другим
иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3,
против PD-1 или против TIM-3), для лечения хронического
миелогенного лейкоза (AML) согласно изобретению включает, но не
ограничивается ими, химиотерапевтическое средство (например,
цитарабин, гидроксимочевина, клофарабин, мелфалан, тиотепа,
флударабин, бусульфан, этопозид, кордицепин, пентостатин,
капецитабин, азацитидин, циклофосфамид, кладрибин, топотекан),
ингибитор тирозинкиназы (например, ингибитор BCR/ABL (например,
иматиниб, нилотиниб), ON 01910.Na, двойной ингибитор (например,
дасатиниб, босутиниб), мультикиназный ингибитор (например, DCC-
2036, понатиниб, сорафениб, сунитиниб, RGB-286638)), интерферон-
альфа, стероиды, апоптотическое средство (например, омацетаксин
мепесукцинат), иммунотерапию (например, аллогенные CD4+ Thl-
подобные Т-клетки памяти/связанное с микрочастицами антитело
против CD3/против CD2 8, аутологичные индуцируемые цитокинами
киллерные клетки (CIK), AHN-12), нацеленное на CD52 средство
(например, алемтузумаб), ингибитор HSP90 (например,
танеспимицин, STA-9090, AUY922, XL888), ингибитор mTOR
(например, эверолимус), антагонист SMO (например, BMS 833923), ингибитор рибонуклеотидредуктазы (например, 3-АР), ингибитор JAK-2 (например, INCB018424), гидроксихлороквин, ретиноид
(например, фенретинид), ингибитор циклин-зависимой киназы
(например, UCN-01), ингибитор HDAC (например, белиностат, вориностат, JNJ-26481585), ингибитор PARP (например, велипариб), антагонист MDM2 (например, RO5045337), ингибитор киназы Aurora В
(например, ТАК-901), радиоиммунотерапию (например, меченное актинием 225 антитело против CD33 НиМ195), ингибитор Hedgehog
(например, PF-04449913) , ингибитор STAT3 (например, ОРВ-31121), КВ004, вакцину против злокачественной опухоли (например, AG858), трансплантацию костного мозга, трансплантацию стволовых клеток, лучевую терапию и их комбинации.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в
комбинации с молекулами антител против PD-L1, отдельно или в
комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой
антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), для
лечения хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL) включает, но
не ограничивается ими, химиотерапевтическое средство (например,
флударабин, циклофосфамид, доксорубицин, винкристин,
хлорамбуцил, бендамустин, хлорамбуцил, бусульфан, гемцитабин, мелфалан, пентостатин, митоксантрон, 5-азацитидин, пеметрексед динатрий), ингибитор тирозинкиназы (например, ингибитор EGFR
(например, эрлотиниб), ингибитор ВТК (например, PCI-32765), мультикиназный ингибитор (например, MGCD265, RGB-286638), нацеленное на CD-2 0 средство (например, ритуксимаб, офатумумаб, RO5072759, LFB-R603), нацеленное на CD52 средство (например, алемтузумаб), преднизолон, дарбэпоэтин-альфа, леналидомид, ингибитор Вс1-2 (например, АВТ-263), иммунотерапию (например, аллогенные CD4+ Thl-подобные Т-клетки памяти/связанное с микрочастицами антитело против СОЗ/против CD2 8, аутологичные индуцируемые цитокинами киллерные клетки (CIK)), ингибитор HDAC
(например, вориностат, вальпроевая кислота, LBH589, JNJ-26481585, AR-42), ингибитор XIАР (например, AEG35156) , нацеленное на CD-74 средство (например, милатузумаб), ингибитор mTOR (например, эверолимус), АТ-101, иммунотоксин (например,
САТ-8015, анти-Тас(Fv)-РЕ38 (LMB-2)), нацеленное на CD37 средство (например, TRU-016), радиоиммунотерапию (например, 131-тозитумомаб), гидроксихлороквин, перифозин, ингибитор SRC
(например, дасатиниб), талидомид, ингибитор Р13К-дельта
(например, CAL-101), ретиноид (например, фенретинид), антагонист MDM2 (например, RO5045337), плериксафор, ингибитор Aurora-киназы
(например, MLN8237, ТАК-901), ингибитор протеасом (например, бортезомиб), нацеленное на CD-19 средство (например, MEDI-551, MOR208), ингибитор МЕК (например, АВТ-348), ингибитор JAK-2
(например, INCB018424), активируемое гипоксией пролекарство
(например, ТН-302), паклитаксел или средство на основе паклитаксела, ингибитор HSP90, ингибитор АКТ (например, МК2206), ингибитор HMG-CoA (например, симвастатин), GNKG186, лучевую терапию, трансплантацию костного мозга, трансплантацию стволовых клеток и их комбинацию.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в
комбинации с молекулами антител против PD-L1, описанными в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с другим
иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3,
против PD-1 или против TIM-3) для лечения острого лимфоцитарного
лейкоза (ALL) включает, но не ограничивается ими,
химиотерапевтическое средство (например, преднизолон,
дексаметазон, винкристин, аспарагиназа, даунорубицин,
циклофосфамид, цитарабин, этопозид, тиогуанин, меркаптопурин, клофарабин, липосомальный аннамицин, бусульфан, этопозид, капецитабин, децитабин, азацитидин, топотекан, темозоломид), ингибитор тирозинкиназы (например, ингибитор BCR/ABL (например, иматиниб, нилотиниб), ON 01910.Na, мультикиназный ингибитор
(например, сорафениб)) , нацеленное на CD-20 средство (например, ритуксимаб), нацеленное на CD52 средство (например, алемтузумаб), ингибитор HSP90 (например, STA-9090), ингибитор mTOR (например, эверолимус, рапамицин), ингибитор JAK-2
(например, INCB018424), ингибитор рецептора HER2/neu (например, трастузумаб), ингибитор протеасом (например, бортезомиб), метотрексат, аспарагиназу, нацеленное на CD-22 средство
(например, эпратузумаб, инотузумаб), иммунотерапию (например,
аутологичные индуцируемые цитокином киллерные клетки (CIK), AHN-12), биланатумомаб, ингибитор циклин-зависимой киназы (например, UCN-01), нацеленное на CD45 средство (например, ВС8), антагонист MDM2 (например, RO5045337), иммунотоксин (например, САТ-8015, DT2219ARL), ингибитор HDAC (например, JNJ-26481585), JVRS-100, паклитаксел или средство на основе паклитаксела, ингибитор STAT3 (например, ОРВ-31121), ингибитор PARP (например, велипариб), EZN-2285, лучевую терапию, стероид, трансплантацию костного мозга, трансплантацию стволовых клеток или их комбинацию.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в
комбинации с молекулами антител против PD-L1, описанными в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с другим
иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3,
против PD-1 или против TIM-3), для лечения острого миелоидного
лейкоза (AML) включает, но не ограничивается ими,
химиотерапевтическое средство (например, цитарабин,
даунорубицин, идарубицин, клофарабин, децитабин, восароксин, азацитидин, клофарабин, рибавирин, СРХ-351, треосульфан, элацитарабин, азацитидин), ингибитор тирозинкиназы (например, ингибитор BCR/ABL (например, иматиниб, нилотиниб), ON 01910.Na, мультикиназный ингибитор (например, мидостаурин, SU 11248, квизартиниб, сорафиниб)), иммунотоксин (например, гемтузумаб озагомицин), слитый белок DT388IL3, ингибитор HDAC (например, вориностат, LBH589), плериксафор, ингибитор mTOR (например, эверолимус) , ингибитор SRC (например, дасатиниб), ингибитор HSP90 (например, STA-9090), ретиноид (например, бексаротен, ингибитор Aurora-киназы (например, BI 811283), ингибитор JAK-2 (например, INCB018424), ингибитор Polo-подобной киназы (например, BI 6121), ценерсен, нацеленное на CD45 средство (например, ВС8), ингибитор циклин-зависимой киназы (например, UCN-01), антагонист MDM2 (например, RO5045337), ингибитор mTOR (например, эверолимус), ЪУ57363б-натрий, ZRx-101, MLN4924, леналидомид, иммунотерапию (например, AHN-12), гистамина дигидрохлорид, лучевую терапию, трансплантацию костного мозга, трансплантацию стволовых клеток и их комбинацию.
комбинации с молекулами антител против PD-L1, описанными в настоящем описании, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), для лечения множественной миеломы
(ММ) включает, но не ограничивается ими, химиотерапевтическое средство (например, мелфалан, амифостин, циклофосфамид, доксорубицин, клофарабин, бендамустин, флударабин, адриамицин, SyB L-0501), талидомид, леналидомид, дексаметазон, преднизон, помалидомид, ингибитор протеасом (например, бортезомиб, карфилзомиб, MLN9708), вакцину против злокачественной опухоли
(например, GVAX), нацеленное на CD-4 0 средство (например, SGN-40, CHIR-12.12), перифозин, золедроновую кислоту, иммунотерапию
(например, MAGE-A3, NY-ESO-1, HuMax-CD38), ингибитор HDAC
(например, вориностат, LBH589, AR-42), аплидин, ингибитор циклин-зависимой киназы (например, PD-0332991, динациклиб), триоксид мышьяка, СВ3304, ингибитор HSP90 (например, KW-2478), ингибитор тирозинкиназы (например, ингибитор EGFR (например, цетуксимаб), мультикиназный ингибитор (например, АТ9283)), ингибитор VEGF (например, бевацизумаб), плериксафор, ингибитор МЕК (например, AZD6244), IPH2101, аторвастатин, иммунотоксин
(например, ВВ-10901), NPI-0052, радиоиммунотерапевтическое средство (например, иттрий Y 90 ибритутомаб тиуксетан), ингибитор STAT3 (например, ОРВ-31121), MLN4924, ингибитор Aurora-киназы (например, ENMD-2076), IMGN901, АСЕ-041, ингибитор СК-2 (например, СХ-4945), лучевую терапию, трансплантацию костного мозга, трансплантацию стволовых клеток и их комбинацию.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1, отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3), для лечения рака предстательной железы включает, но не ограничивается ими, химиотерапевтическое средство (например, доцетаксел, карбоплатин, флударабин), абиратерон, гормональную т(например, флутамид, бикалутамид, нилутамид, ципротерон ацетат, кетоконазол, аминоглутетимид, абареликс, дегареликс, леупролид, гозерелин, трипторелин, бузерелин), ингибитор тирозинкиназы
(например, двойной ингибитор киназ (например, лапатаниб),
мультикиназный ингибитор (например, сорафениб, сунитиниб)) , VEGF
ингибитор (например, бевацизумаб), ТАК-7 00, вакцину против
злокачественной опухоли (например, ВРХ-101, РЕР223),
леналидомид, ТОК-001, ингибитор рецептора IGF-1 (например, циксутумумаб), TRC105, ингибитор киназы Aurora А (например, MLN8237), ингибитор протеасом (например, бортезомиб), OGX-011, радиоиммунотерапию (например, HuJ591-GS), ингибитор HDAC
(например, вальпроевая кислота, SB939, LBH589),
гидроксихлороквин, ингибитор mTOR (например, эверолимус), довининиба лактат, дииндолилметан, эфавиренц, OGX-427, генистеин, IMC-3G3, бафетиниб, СР-675.206, лучевую терапию, хирургическую операцию или их комбинацию.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения HNSCC включает, но не ограничивается ими, одно или оба из соединения А8, как описано в настоящем описании (или соединения, описанного в публикации РСТ № WO2010/029082) и цетуксимаба
(например, эрбитукс, выпускаемый в продажу BMS) . В некоторых вариантах осуществления терапевтическое средство (например, соединение А8 или соединение, родственное А8) представляет собой модулятор PI3K, например, ингибитор PI3K. В некоторых вариантах осуществления терапевтическое средство (например, цетуксимаб) модулирует, например, ингибирует, EGFR. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая повышенные уровни или активность PI3K или EGFR по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения рака желудка, например, рака желудка с высокой MSI и/или EBV+, включает, но не ограничивается ими, соединение А8, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в публикации РСТ №
WO2010/029082). В некоторых вариантах осуществления
терапевтическое средство (например, соединение А8 или соединение, родственное А8) представляет собой модулятор PI3K, например, ингибитор PI3K. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая повышенные уровни или активность PI3K по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения рака желудка, например, рака желудка с высокой MSI и/или инактивированным RNF4 3, включает, но не ограничивается ими, соединение А2 8, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в публикации РСТ № W02010/101849). В некоторых вариантах осуществления терапевтическое средство
(например, соединение А28 или соединение, родственное А28) представляет собой модулятор, например, ингибитор, поркупина. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая повышенные уровни или активность поркупина по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения стромальной опухоли GI (GIST) включает, но не ограничивается ими, соединение А1б, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в публикации РСТ № WO1999/003854) . В некоторых вариантах осуществления терапевтическое средство
(например, соединение А1б или соединение, родственное А1б)
представляет собой модулятор, например, ингибитор,
тирозинкиназы. В некоторых вариантах осуществления
злокачественная опухоль имеет или определено, что она имеет, повышенные уровни или активность тирозинкиназы по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения NSCLC, например, плоскоклеточной карциномы или аденокарциномы, включает, но не ограничивается ими, одно или оба из соединения А17, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в патенте США № 7767675 и 8420645) и соединения А23, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в публикации РСТ № WO2003/077914). В некоторых вариантах осуществления соединение
(например, соединение А17 или соединение, родственное А17) модулирует, например, ингибирует, с-МЕТ. В некоторых вариантах осуществления соединение (например, соединение А23 или соединение, родственное А23) модулирует, например, ингибирует, Alk. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет, или определено, что она имеет, повышенные уровни или активность одного или обоих из с-МЕТ или Alk по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая мутацию в EGFR.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения меланомы (например, меланома NRAS) включает, но не ограничивается ими, одно или оба из соединения А24, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в патентах США № 8415355 и 8685980) и соединения А34, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в публикации РСТ № WO2003/077914). В некоторых вариантах осуществления соединение
(например, соединение А24 или соединение, родственное А24) модулирует, например, ингибирует, одно или несколько из JAK и CDK4/6. В некоторых вариантах осуществления соединение
(например, соединение А34 или соединение, родственное А34) модулирует, например, ингибирует, МЕК. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована
как имеющая повышенные уровни или активность одного или нескольких из JAK, CDK4/6 и МЕК по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения меланомы (например, меланома NRAS) включает, но не ограничивается ими, одно или оба из соединения А29, как описано в настоящем описании (или соединения, описанного в публикации РСТ № WO2011/025927) и соединения А34, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в публикации РСТ № WO2003/077914). В некоторых вариантах осуществления соединение (например, соединение А29 или соединение, родственное А29) модулирует, например, ингибирует, BRAF. В некоторых вариантах осуществления соединение (например, соединение А34 или соединение, родственное А34) модулирует, например, ингибирует, МЕК. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая, повышенные уровни или активность одного или обоих из BRAF и МЕК по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения плоскоклеточного NSCLC включает, но не ограничивается ими, соединение А5, как описано в настоящем описании (или соединение, описанное в патенте США № 8552002). В некоторых вариантах осуществления соединение (например, соединение А5 или соединение, родственное А5) модулирует, например, ингибирует, FGFR. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая повышенные уровни или активность FGFR по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной.
Пример подходящих терапевтических средств для применения в комбинации с молекулами антител против PD-L1 отдельно или в
комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) для лечения рака ободочной и прямой кишки включает, но не ограничивается ими, одно или оба из соединения А2 9, как описано в настоящем описании (или соединение согласно публикации РСТ № WO2011/025927) и цетуксимаба (например, эрбитукс, выпускаемый в продажу BMS) . В некоторых вариантах осуществления терапевтическое средство (например, соединение А29 или соединение, родственное А29) модулирует, например, ингибирует, BRAF. В некоторых вариантах осуществления терапевтическое средство (например, цетуксимаб) модулирует, например, ингибирует EGFR. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая повышенные уровни или активность BRAF или EGFR по сравнению с контрольной клеткой или эталонной величиной.
Настоящее изобретение также относится к способу лечения злокачественной опухоли соединением А8, цетуксимабом и молекулой антитела против PD-L1 (необязательно в комбинации с молекулой антитела против PD-1 или молекулой антитела против TIM-3). В некоторых вариантах осуществления пациента сначала лечат соединением А8 и цетуксимабом. Это лечение продолжается в течение некоторого количества времени, например, в течение заданного количества времени, например, в течение приблизительно 1, 2, 4, б, 8, 10 или 12 месяцев. Затем вводят молекулу антитела против PD-L1 (необязательно в комбинации с молекулой антитела против TIM-3 или молекулой антитела против LAG-3). Антитело против PD-L1 необязательно можно вводить в комбинации с цетуксимабом.
В некоторых вариантах осуществления пациента сначала лечат всеми тремя из соединения А8, цетуксимаба и молекулы антитела против PD-L1 (необязательно в комбинации с молекулой антитела против TIM-3 или молекулой антитела против LAG-3). Это лечение продолжают в течение количества времени, например, заданного количества времени, например, приблизительно б, 8, 10 или 12 месяцев. Далее, соединение А8 и/или цетуксимаб можно отменять, так чтобы поддерживающая фаза вовлекала лечение молекулой
антитела против PD-L1 (например, в качестве монотерапии или в комбинации с молекулой антитела против TIM-3 или молекулой антитела против LAG-3), но не соединением А8 или цетуксимабом.
В других вариантах осуществления три соединения (соединение А8, цетуксимаб и молекула антитела против PD-L1, необязательно в комбинации с молекулой антитела против TIM-3 или молекулой антитела против LAG-3) вводят последовательно в начале лечения. Например, сначала можно вводить соединение А8 и цетуксимаб, как описано выше. Затем к режиму добавляют молекулу антитела против PD-L1 (необязательно в комбинации с молекулой антитела против TIM-3 или молекулой антитела против LAG-3). Далее соединение А8 и/или цетуксимаб можно отменять, как описано выше.
Иллюстративные дозы режимов с тремя (или более) средствами являются следующими. Молекулу антитела против PD-L1 можно вводить, например, в дозе приблизительно от 1 до 40 мг/кг, например, от 1 до 30 мг/кг, например, приблизительно от 5 до 25 мг/кг, приблизительно от 10 до 20 мг/кг, приблизительно от 1 до 5 мг/кг или приблизительно 3 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления соединение А8 вводят в дозе приблизительно 200300, 300-400 или 200-400 мг. В некоторых вариантах осуществления цетуксимаб вводят в первоначальной дозе 400 мг/м2 в качестве внутривенной инфузии в течение 120 минут, а затем посредством инфузии 250 мг/м2 каждую неделю в течение 60 минут. В вариантах осуществления одно или несколько из соединений А8, цетуксимаба и молекулы антитела против PD-L1 вводят в дозе, которая является более низкой, чем доза, в которой это средство обычно вводят в качестве монотерапии, например, приблизительно на 0-10%, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% или 80-90% ниже, чем доза, в которой средство обычно вводят в качестве монотерапии. В вариантах осуществления одно или несколько из соединения А8, цетуксимаба и молекулы антитела против PD-L1 вводят в дозе, которая является более низкой, чем доза этого средства, указанная в данном абзаце, например, приблизительно на 0-10%, 10-20%, 20-30%, 30-40%, 40-50%, 50-60%, 60-70%, 70-80% или 80-90% ниже, чем доза этого средства, указанная в данном абзаце. В определенных вариантах осуществления концентрация
соединения А8, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, когда соединение А8 вводят в комбинации с одним или обоими из цетуксимаба и молекулы антитела против PD-L1, чем когда соединение А8 вводят отдельно. В определенных вариантах осуществления концентрация цетуксимаба, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, когда цетуксимаб вводят в комбинации с одним или обоими из соединения А8 и молекулы антитела против PD-L1, чем когда цетуксимаб вводят индивидуально. В определенных вариантах осуществления концентрация молекулы антитела против PD-L1, которая требуется для достижения ингибирования, например, ингибирования роста, является более низкой, когда молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с одним или обоими из цетуксимаба и соединения А8, чем когда молекулу антитела против PD-L1 вводят индивидуально.
Кроме того, в рамках настоящего изобретения описан способ лечения злокачественной опухоли молекулами антител против PD-L1 отдельно или в комбинации с другим иммуномодулятором (например, молекулой антитела против LAG-3, против PD-1 или против TIM-3) и направленным средством против злокачественной опухоли, например, средством, которое нацелено на один или несколько белков. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 (и необязательно другой иммуномодулятор(ы)) вводят сначала, а затем вводят направленное средство против злокачественной опухоли. Продолжительность периода между введением молекулы антитела против PD-L1 и направленного средства против злокачественной опухоли может составлять, например, 10, 2 0 или 3 0 минут, 1, 2, 4, б или 12 часов или 1, 2, 3, 4, 5, б или 7 суток или любой период времени в этом диапазоне. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят многократно в течение периода времени (например, 1, 2, 3, 4, 5 или б суток или 1, 2, 4, 8, 12, 16 или 2 0 недель или любой период времени в этом диапазоне) до введения направленного средства против злокачественной опухоли. В других вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 и направленное
средство против злокачественной опухоли вводят по существу одновременно.
Инфекционные заболевания
Другие способы по изобретению используют для лечения пациентов, которые подверглись воздействию конкретных токсинов или патогенов. Таким образом, другой аспект изобретения относится к способу лечения инфекционного заболевания у индивидуума, включающему введение индивидууму молекулы антитела против PD-L1, чтобы происходило лечение индивидуума от инфекционного заболевания.
При лечении инфекции (например, острой и/или хронической) введение молекул антител против PD-L1 можно комбинировать с общепринятыми способами лечения в дополнение к или вместо стимуляции природной иммунной защиты хозяина от инфекции. Природная иммунная защита хозяина от инфекции включает, но не ограничивается ими, воспаление, лихорадку, опосредуемую антителами защиту хозяина, опосредуемую Т-лимфоцитами защиту хозяина, включая секрецию лимфокинов и цитотоксические Т-клетки (особенно в ходе вирусной инфекции), опосредуемый комплементом лизис и опсонизацию (облегчаемые фагоцитозом) и фагоцитоз. Способность молекул антител против PD-L1 реактивировать дисфункциональные Т-клетки может быть пригодной для лечения хронических инфекций, в частности, инфекций, при которых клеточно-опосредуемый иммунитет является важным для полного выздоровления.
Аналогично применению против опухолей, как описано выше, опосредуемую антителом блокаду PD-L1 можно использовать отдельно или в качестве адъюванта, в комбинации с вакцинами, для стимуляции иммунного ответа на патогены, токсины или собственные антигены. Примеры патогенов, для которых этот терапевтический подход может быть особенно пригодным, включают патогены, для которых в настоящее время не существует эффективной вакцины, или патогены, для которых общепринятые вакцины являются менее чем полностью эффективными. Они включают, но не ограничиваются ими ВИЧ, гепатит (А, В и С) , вирус гриппа, вирус герпеса, лямблии, возбудитель малярии, лейшмании, Staphylococcus aureus,
Pseudomonas Aeruginosa. Блокада PD-L1 является особенно пригодной против распространенных инфекций агентами, такими как ВИЧ, которые презентируют измененные антигены в ходе инфекций. Эти новые эпитопы распознаются в качестве чужеродных в момент введения антитела против PD-L1, таким образом, вызывая выраженный Т-клеточный ответ, который не тормозится негативными сигналами через PD-L1. Вирусы
Для инфекций, являющихся результатом вирусов, молекулы антител против PD-L1 можно комбинировать посредством применения одновременно, перед или после применения стандартных способов терапии для лечения вирусных инфекций. Такие стандартные способы терапии варьируются в зависимости от типа вируса, хотя практически во всех случаях может быть эффективным введение сыворотки человека, содержащей антитела (например, IgA, IgG) , специфичные к вирусу.
Некоторые примеры патогенных вирусов, вызывающих инфекции, поддающиеся лечению способами, включают ВИЧ, гепатит (А, В или С), вирус герпеса (например, VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II и CMV, вирус Эпштейна-Барра), аденовирус, вирус гриппа, флавивирусы, эховирус, риновирус, вирус Коксаки, короновирус, респираторно-синцитиальный вирус, вирус свинки, ротавирус, вирус кори, вирус краснухи, парвовирус, вирус коровьей оспы, вирус HTLV, вирус денге, папилломавирус, вирус моллюска, полиовирус, вирус бешенства, вирус JC и вирус арбовирусного энцефалита.
В одном варианте осуществления инфекция представляет собой
инфекцию вирусом гриппа. Инфекция вирусом гриппа может вызывать
лихорадку, кашель, миалгию, головную боль и недомогание, которые
часто возникают при сезонных эпидемиях. Вирус гриппа также
ассоциирован с рядом постинфекционных нарушений, таких как
энцефалит, миоперикардит, синдром Гудпасчера и синдром Рейе.
Инфекция вирусом гриппа также подавляет нормальную
антибактериальную защиту легких, так что пациент,
выздоравливающий от гриппа, имеет увеличенный риск развития
бактериальной пневмонии. Поверхностные белки вируса
демонстрируют выраженное антигенное варьирование, являющееся
результатом мутации и рекомбинации. Таким образом, цитолитические Т-лимфоциты являются основным средством хозяина для устранения вируса после инфицирования. Грипп классифицируют на три основных типа: А, В и С. Вирус гриппа типа А является уникальным, поскольку он инфицирует как человека, так и многих других животных (например, свиней, лошадей, птиц и тюленей) и является основной причиной пандемического гриппа. Также, когда клетка инфицируется двумя различными штаммами вируса гриппа А, сегментированные РНК-геномы двух типов родительских вирусов смешиваются в процессе репликации с образованием гибридного репликанта, что приводит к новым эпидемическим штаммам. Вирус гриппа В не реплицируется у животных и, таким образом, имеет меньшее генетическое варьирование и вирус гриппа С имеет только один серотип.
Большинство общепринятых способов терапии являются паллиативными средствами против симптомов в результате инфекции, в то время как в действительности заболевание устраняется иммунным ответом хозяина. Однако определенные штаммы (например, вирус гриппа А) могут вызывать более тяжелое заболевание и смерть. Вирус гриппа А можно лечить как клинически, так и профилактически, посредством введения ингибиторов циклических аминов амантадина и римантидина, которые ингибируют репликацию вируса. Однако клиническая применимость этих лекарственных средств ограничена вследствие относительно высокой встречаемости неблагоприятных реакций, которые сужают противовирусный спектр (только вирус гриппа А) и тенденции вируса к устойчивости. Введение сывороточного IgG-антител к основным поверхностным белкам вируса гриппа: гемагглютинину и нейраминидазе, может препятствовать легочной инфекции, в то время как для предупреждения инфицирования верхних дыхательных путей и трахеи требуется мукозальный IgA. Наиболее эффективным современным способом лечения гриппа является вакцинация посредством введения вируса, инактивированного формалином или р-пропиолактоном.
В другом варианте осуществления инфекция представляет собой инфекцию гепатита, например, инфекцию гепатита В или С.
Вирус гепатита В (HB-V) является наиболее инфекционным передаваемым через кровь патогеном. Он является основной причиной острого и хронического гепатита и карциномы печени, а также пожизненной хронической инфекции. После инфекции вирус реплицируется в гепатоцитах, с которых также затем отделяется поверхностный антиген HBsAg. Обнаружение избыточных уровней HBsAg в сыворотке используют в качестве стандартного способа диагностики инфекции гепатита В. Острая инфекция может разрешаться или может развиваться в хроническую персистирующую инфекцию. Современные способы лечения хронического HBV включают а-интерферон, который повышает экспрессию лейкоцитарного антигена человека класса I (HLA) на поверхности гепатоцитов, тем самым облегчая их распознавание цитотоксическими Т лимфоцитами. Кроме того, нуклеозидные аналоги ганцикловир, фамицикловир и ламивудин также продемонстрировали некоторую эффективность в отношении лечения инфекции HBV в клинических испытаниях. Дополнительные способы лечения HBV включают пегилированный ос-интерферон, аденфовир, энтекавир и телбувидин. Хотя пассивный иммунитет может быть сообщен посредством парентерального введения сывороточных антител против HBsAg, вакцинация инактивированным или рекомбинантным HBsAg также сообщает устойчивость к инфекции. Молекулы антител против PD-L1 можно комбинировать с общепринятыми способами лечения инфекций гепатита В для получения терапевтического преимущества.
Инфекция вирусом гепатита С (HC-V) может приводить к хронической форме гепатита, вызывающей цирроз. Хотя симптомы являются сходными с симптомами инфекции, вызываемой вирусом гепатита В, в отличие от HB-V, инфицированные хозяева могут быть бессимптомными в течение 10-2 0 лет. Молекулу антитела против PD-L1 можно вводить в качестве монотерапии или в комбинации со стандартным способом лечения инфекции гепатита С. Например, молекулу антитела против PD-L1 можно вводить с одним или несколькими из Совальди (софосбувир), Олизио (симепревир), вместе с рибавирином или пегилированным интерфероном. Хотя также одобрены режимы, которые включают Инцивек (телапревир) или
Виктрелис (боцепревир) плюс рибавирин и пегилированный интерферон, они ассоциированы с увеличенными побочными эффектами и большей длительностью лечения, и, таким образом, они не считаются предпочтительными режимами.
Общепринятый способ лечения инфекции HC-V включает введение комбинации а-интерферона и рибавирина. Перспективной потенциальной терапией инфекции HC-V является ингибитор протеаз телапревир (VX-960). Дополнительные способы лечения включают: антитело против PD-1 (MDX-110 6, Медарекс), бавитуксимаб (антитело, которое связывается с анионным фосфолипидом фосфатидилсерином зависимым от В2-гликопротеина I образом, Peregrine Pharmaceuticals), антитело (а) против белка Е2 вирусной оболочки HPV (например, ATL 6865-АЬ68+АЬб5, XTL Pharmaceuticals) и Civacir(r) (поликлональный иммуноглобулин человека против HCV) . Антитела против PD-L1 по изобретению можно комбинировать с одним или несколькими из этих способов лечения инфекций гепатита С для получения терапевтического преимущества. Ингибиторы протеазы, полимеразы и NS5A, которые можно использовать в комбинации с молекулами антител против PD-L1 для специфического лечения инфекции гепатита С, включают средства, описанные в US 2013/0045202, включенной в настоящее описание в качестве ссылки.
В другом варианте осуществления инфекция представляет собой
инфекцию вирусом кори. После инкубации в течение 9-11 суток у
хозяев, инфицированных вирусом кори, развивается лихорадка,
кашель, ринит и конъюнктивит. В течение 1-2 суток развивается
эритематозная макопопулезная сыпь, которая быстро
распространяется по всему телу. Поскольку инфекция также подавляет клеточный иммунитет, хозяин имеет более высокий риск развития бактериальных суперинфекций, включая отит среднего уха, пневмонию и постинфекционный энцефаломиелит. Острая инфекция ассоциирована со значительной заболеваемостью и смертностью, особенно у имеющих неполноценное питание подростков.
Лечение кори включает пассивное введение объединенного IgG человека, которое может препятствовать инфекции у неиммунных индивидуумов, даже при введении вплоть до одной недели после
воздействия. Однако предшествующая иммунизация живым ослабленным вирусом является наиболее эффективным способом лечения и предотвращает заболевание более чем у 95% иммунизированных индивидуумов. Поскольку существует один серотип вируса, одна иммунизация или инфекция, как правило, приводит к пожизненной защите от последующей инфекции.
У небольшой части инфицированных хозяев корь может развиваться в SSPE, который представляет собой хроническое прогрессирующее неврологическое нарушение в результате персистирующей инфекции центральной нервной системы. SSPE вызывается клональными вариантами вируса кори с дефектами, которые препятствуют сборке и почкованию вируса. Для этих пациентов может быть желательной реактивация Т-клеток молекулами антител против PD-L1, чтобы способствовать выведению вируса.
В другом варианте осуществления инфекция представляет собой ВИЧ. ВИЧ атакует СБ4+-клетки, включая Т-лимфоциты, моноциты-макрофаги, фолликулярные дендритные клетки и клетки Лангерганса, и происходит истощение CD4+ хелперных/индуцирующих клеток. В результате хозяин приобретает тяжелый дефект клеточно-опосредуемого иммунитета. Инфекция ВИЧ приводит к СПИД по меньшей мере у 50% индивидуумов и передается через половой контакт, введение инфицированной крови или продуктов крови, искусственное оплодотворение инфицированной спермой, воздействие содержащих кровь игл или шприцов и от инфицированной матери к младенцу в процессе родов.
Хозяин, инфицированный ВИЧ, может быть бессимптомным, или у него может развиваться острое заболевание, которое напоминает мононуклеоз - лихорадка, головная боль, боль в горле, недомогание и сыпь. Симптомы могут прогрессировать в прогрессирующую иммунную дисфункцию, включая персистирующую лихорадку, ночную потливость, снижение массы тела, необъяснимую диарею, экзему, псориаз, себорейный дерматит, опоясывающий герпес, кандидоз полости рта и волосистую лейкоплакию полости рта. У пациентов, у которых инфекции развиваются в СПИД, являются частыми оппортунистические инфекции хозяина паразитами.
аналоги нуклеозидов, зидовудин (AST), либо отдельно, либо в комбинации с диданозином или зальцитабином, дидезоксиинозин, дидезоксицитидин, ламивудин, ставудин; ингибиторы обратной транскриптазы, такие как делавирдин, невирапин, ловирид, и ингибиторы протеаз, такие как саквинавир, ритонавир, индинавир и нельфинавир. Молекулы антител против PD-L1 можно комбинировать с общепринятыми способами лечения ВИЧ-инфекций для получения терапевтического преимущества.
В другом варианте осуществления инфекция представляет собой инфекцию цитомегаловирусом (CMV). Инфекция CMV часто ассоциирована с персистирующей, латентной и рецидивирующей инфекцией. CMV инфицирует моноциты и клетки-предшественники гранулоцитов-моноцитов и остается латентным в них. Клинические симптомы CMV включают мононуклеоз-подобные симптомы (т.е. лихорадка, увеличенные гланды, недомогание) и тенденцию к развитию аллергической кожной сыпи на антибиотики. Вирус распространяется посредством прямого контакта. Вирус выделяется в мочу, слюну, сперму и в меньшей степени в другие жидкости организма. Передача также может происходить от инфицированной матери к ее плоду или новорожденному ребенку и посредством переливания крови и трансплантации органов. Инфекция CMV, как правило, приводит к снижению клеточного иммунитета, характеризующемуся сниженными бластогенными ответами на неспецифические митогены и специфические антигены CMV, снижению цитотоксической способности и повышению количества CD8-лимцоцитов или СБ4+-лимфоцитов.
Лечение инфекции CMV включает противовирусные средства
ганцикловир, фоскарнет и сидовир, однако эти лекарственные
средства, как правило, назначают только пациентам с
иммунодефицитом. Молекулы антител против PD-L1 можно
комбинировать с общепринятыми способами лечения
цитомегаловирусных инфекций для получения терапевтического преимущества.
В другом варианте осуществления инфекция представляет собой инфекцию вирусом Эпштейна-Барра (EBV). EBV может вызывать персистирующие и латентные инфекции и в основном атакует В
клетки. Инфекция EBV приводит к клиническому состоянию инфекционного мононуклеоза, которое включает лихорадку, боль в горле часто с экссудатом, генерализованную лимфаденопатию и спленомегалию. Также присутствует гепатит, в результате которого может развиваться желтуха.
Хотя типичными способами лечения инфекций EBV является паллиативное лечение симптомов, EBV ассоциирован с развитием определенных злокачественных опухолей, таких как лимфома Беркитта и рак носоглотки. Таким образом, выведение вирусной инфекции до возникновения этих осложнений имело бы значительную пользу. Молекулы антител против PD-L1 можно комбинировать с общепринятыми способами лечения инфекций вирусом Эпштейна-Барра для получения терапевтического преимущества.
В другом варианте осуществления инфекция представляет собой инфекцию вирусом простого герпеса (HSV). HSV передается посредством прямого контакта с инфицированным хозяином. Прямая инфекция может быть бессимптомной, однако, как правило, приводит к буллезным пузырям, содержащим инфекционные частицы. Заболевание проявляется в качестве циклов активных периодов заболевания, при которых появляются очаги повреждения и исчезают по мере того, как вирус латентно инфицирует нервный ганглий для последующих обострений. Очаги повреждения могут быть на лице, половых органах, глазах и/или руках. В некоторых случаях инфекция также может вызывать энцефалит.
Способы лечения инфекций вирусом герпеса в основном направлены на разрешение симптоматических обострений и включают системные противовирусные лекарственные средства, такие как: ацикловир (например, Zovirax(r)) , валацикловир, фамицикловир, пенцикловир и местные лекарственные средства, такие как доказанол (Abreva(r)), тромантидин и зилактин. Выведение латентных инфекций вирусом герпеса имело бы значительную клиническую пользу. Молекулы антител против PD-L1 можно комбинировать с общепринятыми способами лечения инфекций вирусом герпеса для получения терапевтического преимущества.
В другом варианте осуществления инфекция представляет собой
инфекцию Т-лимфотропным вирусом человека (HTLV-1, HTLV-2). HTLV
передается посредством полового контакта, грудного вскармливания
или воздействия зараженной крови. Вирус активирует подгруппу Тн-
клеток, называемых Thl-клетками, что приводит к
сверхпролиферации и сверхпродукции Thl-цитокинов (например, IFN-y и TNF-a). Это в свою очередь приводит к подавлению Тп2-лимфоцитов и снижению продукции Тп2-цитокинов (например, IL-4, IL-5, IL-10 и IL-13), вызывающим снижение способности инфицированного хозяина индуцировать адекватный иммунный ответ на вторгающиеся организмы, для выведения которых требуется Независимый ответ (например, паразитарные инфекции, продукция мукозальных и гуморальных антител).
Инфекции HTLV приводят к оппортунистическим инфекциям, вызывающим бронхоэктазы, дерматит и суперинфекции Staphylococcus spp. и Strongyloides spp., что приводит гибели от полимикробного сепсиса. Инфекция HTLV также может приводить непосредственно к взрослому Т-клеточному лейкозу/лимфоме и прогрессирующей демиелинизирующей болезни верхнего двигательного нейрона, известной как HAM/TSP. Выведение латентных инфекций HTLV может иметь значительную клиническую пользу. Молекулы антител против PD-L1 можно комбинировать с общепринятыми способами лечения инфекций HTLV для получения терапевтического преимущества.
В другом варианте осуществления инфекция представляет собой инфекцию вирусом папилломы человека (HPV). HPV в основном поражает кератиноциты и возникает в двух формах: кожной и генитальной. Полагают, что передача происходит посредством прямого контакта и/или половой активности. Как кожная, так и генитальная, инфекция HPV могут приводить к бородавкам и латентным инфекциям, и, иногда, рецидивирующим инфекциям, которые контролируется иммунитетом хозяина, который контролирует симптомы и блокирует появление бородавок, но оставляет хозяина способным передавать инфекцию другим людям.
Инфекция HPV также может приводить к определенным злокачественным опухолям, таким рак шейки матки, анального канала, женских наружных половых органов, полового члена и
ротоглотки. В настоящее время отсутствуют известные способы лечения инфекции HPV, однако текущим способом лечения является местное применение имиквимода, который стимулирует атаку иммунной системой пораженной области. Выведение латентных инфекций HPV может иметь значительную клиническую пользу. Антитела против PD-L1 по изобретению можно комбинировать с общепринятыми способами лечения инфекций HPV для получения терапевтического преимущества. Бактериальные инфекции
Некоторые примеры патогенных бактерий, вызывающих инфекции,
поддающиеся лечению способами по изобретению, включают
возбудителей сифилиса, хламидии, рикеттсиозные бактерии,
микобактерии, стафилококки, стрептококки, пневмококки,
менингококки и гонококки, клебсиеллы, протеи, серратии, псевдомонады, легионеллы, возбудители дифтерии, сальмонеллы, бациллы, возбудители холеры, возбудители столбняка, возбудители ботулизма, возбудители сибирской язвы, возбудители чумы, возбудители лептоспироза и возбудители болезни Лайма. Молекулы антител против PD-L1 можно использовать в комбинации с существующими способами лечения вышеупомянутых инфекций. Например, способы лечения сифилиса включают пенициллин (например, пенициллин G), тетрациклин, доксицилин, цефтриаксон и азитромицин.
Болезнь Лайма, вызываемая Borrelia burgdorferi, передается человеку через укусы клещей. Заболевание первоначально проявляется в виде локализованной сыпи, за которой следуют гриппоподобные симптомы, включая недомогание, лихорадку, головную боль, скованность мышц шеи и боль в суставах. Более поздние проявления могут включать мигрирующий и полиартикулярный артрит, вовлечение нервной системы и сердца с параличом черепных нервов и радикулопатией, миокардитом и аритмиями. Некоторые случаи болезни Лайма становятся персистирующими, вызывая необратимое повреждение, аналогичное третичному сифилису. Современные способы терапии болезни Лайма включают в основном введение антибиотиков. Устойчивые к антибиотикам штаммы можно лечить гидроксихлороквином или метотрексатом. Рефрактерных к
антибиотикам пациентов с нейропатической болью можно лечить габапентином. Миноциклин может быть полезным при поздней/хронической болезни Лайма с неврологическими или другими воспалительными проявлениями.
Другие формы боррелиоза, такие как формы, возникающие в результате инфекции В. recurentis, В. hermsii, В. turicatae, В. parikeri. , В. hispanica, В. duttonii и В. persica, а также лептоспироз (например, L. interrogans) , как правило, разрешаются самопроизвольно, если титры в крови не достигают концентрации, вызывающей внутрипеченочную обструкцию.
Грибы и паразиты
Некоторые примеры патогенных грибов, вызывающих инфекции, поддающиеся лечению способами по изобретению, включают Candida {albicans, krusei, glabrata, tropicalis, и т.д.), Cryptococcus neoformans, Aspergillus {fumigatus, niger, и т.д.), род Mucorales {mucor, absidia, rhizophus), Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis и Histoplasma capsulatum.
Некоторые примеры патогенных паразитов, вызывающих
инфекции, поддающиеся лечению способами, описанными в настоящем
описании, включают Entamoeba histolytica, Balantidium coli,
Naegleriafowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambia,
Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondi и Nippostrongylus brasiliensis.
Дополнительные комбинированные способы терапии
В рамках настоящего изобретения предусматриваются комбинации молекул антител против PD-L1 с одним или несколькими вторыми терапевтическими средствами. Многие из комбинаций в этом разделе являются пригодными для лечения злокачественной опухоли, однако также описаны другие показания. Данный раздел сфокусирован на комбинациях молекул антител против PD-L1, необязательно с одним или несколькими иммуномодуляторами (например, молекула антитела против TIM-3, молекула антитела против LAG-3 или молекула антитела против PD-L1), с одним или
несколькими средствами, описанными в таблице 6. В комбинациях, описанных ниже, в одном варианте осуществления молекула антитела против PD-1 содержит (i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID N0: 1, SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 195; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 5; и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 3; и (ii) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID N0: 9 или SEQ ID N0: 12, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID N0: 10 или SEQ ID N0: 13 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID N0: 11 или SEQ ID N0: 14.
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором РКС сотрастаурином (соединение А1) или соединением, описанным в публикации РСТ № W0 2005/039549, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор РКС представляет собой сотрастаурин (соединение А1) или соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2005/039549. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с сотрастаурином (соединение А1) или соединением, как описано в публикации РСТ № W0 2005/039549, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, меланома, неходжкинская лимфома, воспалительное заболевание кишечника, отторжение трансплантата, офтальмологическое нарушение или псориаз.
В определенных вариантах осуществления сотрастаурин (соединение А1) вводят в дозе приблизительно от 20 до 600 мг, например, от приблизительно 200 до приблизительно 600 мг, от приблизительно 50 мг до приблизительно 450 мг, приблизительно от 100 мг до 4 00 мг, приблизительно от 150 мг до 350 мг или приблизительно от 2 00 мг до 300 мг, например, приблизительно 50 мг, 10 0 мг, 150 мг, 2 0 0 мг, 3 0 0 мг, 4 0 0 мг, 50 0 мг или 60 0 мг.
Схема дозирования может варьироваться, например, от введения раз в двое суток до введения каждые сутки, два раза или три раза в сутки.
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором BCR-ABL TASIGNA (соединение А2 или соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2004/005281), для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор BCR-ABL представляет собой TASIGNA или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2004/005281. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с TASIGNA (соединение А2) или соединением, как описано в публикации РСТ № WO 2004/0052 81, для лечения нарушения, такого как лимфоцитарный лейкоз, болезнь Паркинсона, неврологическая злокачественная опухоль, меланома, рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, рак ободочной и прямой кишки, миелоидный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз (CML), рак головы и шеи или легочная гипертензия.
В одном варианте осуществления ингибитор BCR-ABL или TASIGNA вводят в дозе приблизительно 300 мг (например, два раза в сутки, например, для вновь диагностированного Ph+ CML-CP) или приблизительно 4 00 мг, например, два раза в сутки, например, для резистентного или нетолерантного Ph+ CML-CP и CML-AP). Ингибитор BCR-ABL или соединение А2 вводят в дозе приблизительно 300-400 мг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором HSP90, таким как 5-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-Ы-этил-4-(4-(морфолинометил)фенил)изоксазол-3-карбоксамид (соединение A3) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2010/060937 или WO 2004/072051, для лечения
нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании.
В одном варианте осуществления ингибитор HSP90 представляет
собой 5-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-Ы-этил-4-(4-
(морфолинометил)фенил)изоксазол-3-карбоксамид (соединение A3) или соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2010/060937 или WO 2004/072051. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с 5-(2,4-дигидрокси-5-изопропилфенил)-Ы-этил-4-(4-(морфолинометил)фенил)изоксазол-3-карбоксамидом (соединение A3) или соединением, как описано в публикации РСТ № WO 2010/060937 или WO 2004/072051, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, множественная миелома, немелкоклеточный рак легкого, лимфома, рак желудка, рак молочной железы, рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, рак поджелудочной железы, рак ободочной и прямой кишки, солидная опухоль или гемопоэтическое нарушение.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором PI3K и/или mTOR дактолисибом (соединение А4) или 8- ( б-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметилфенил)-1,3-дигидроимидазо[4,5-с]хинолин-2-оном
(соединение А41) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2006/122806, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K и/или mTOR представляет собой дактолисиб
(соединение А4 ) , 8-(б-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-
пиперазин-1-ил-З-трифторметилфенил)-1,3-дигидроимидазо[4,5-с]хинолин-2-он (соединение А41) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2006/122806. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с дактолисибом (соединение А4 ), 8-(б-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметилфенил)-1,3-дигидроимидазо [ 4 , 5-с] хинолин-2-оном (соединение А41) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2006/122806, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, рак
предстательной железы, лейкоз (например, лимфоцитарный лейкоз), рак молочной железы, злокачественная опухоль головного мозга, рак мочевого пузыря, рак поджелудочной железы, рак почки, солидная опухоль, рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак или рак печени.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором FGFR 3-(2,б-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-(б-((4-(4-этилпиперазин-1-ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1-метилмочевиной (соединение А5) или соединением, описанным в патенте США 8552002, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор FGFR представляет собой 3-(2,б-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-(б-((4-(4-этилпиперазин-1-
ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1-метилмочевину (соединение А5) или соединение, описанное в патенте США 8552002. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с соединением А5 или соединением, как описано в US 8552002, для лечения нарушения, такого как рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, гематологическая злокачественная опухоль или солидная опухоль.
В одном варианте осуществления ингибитор FGFR или 3-(2,б-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-(б-((4-(4-этилпиперазин-1-ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1-метилмочевину (соединение А5) вводят в дозе приблизительно 100-125 мг (например, в сутки), например, приблизительно 100 мг или приблизительно 12 5 мг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором PI3K бупарлисибом (соединение Аб) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/084786, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K представляет собой
бупарлисиб (соединение Аб) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/084786. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с бупарлисибом (соединение Аб) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/084786, для лечения нарушения, такого как рак предстательной железы, рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC)), рак предстательной железы, рак желудка, рак поджелудочной железы, эндокринная злокачественная опухоль, лейкоз, рак яичника, меланома, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак женской репродуктивной системы, рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, рак ободочной и прямой кишки, мультиформная глиобластома (GBM), солидная опухоль, лейкоз, неходжкинская лимфома, гемопоэтическое нарушение или рак головы и шеи.
В одном варианте осуществления ингибитор PI3K или бупарлисиб (соединение Аб) вводят в дозе приблизительно 100 мг
(например, в сутки).
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором FGFR 8-(2, б-дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-
((диметиламино)метил)-1Н-имидазол-2-ил)хиноксалин-5-
карбоксамидом (соединение А7) или соединением, описанным в
публикации РСТ № WO 2009/141386, для лечения нарушения,
например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном
варианте осуществления ингибитор FGFR представляет собой 8-(2,6-
дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-((диметиламино)метил)-1Н-
имидазол-2-ил)хиноксалин-5-карбоксамид (соединение А7) или
соединение, описанное в публикации РСТ № WO 200 9/141386. В одном
варианте осуществления ингибитор FGFR представляет собой 8-(2,6-
дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-((диметиламино)метил)-1Н-
имидазол-2-ил)хиноксалин-5-карбоксамид (соединение А7) . В одном
варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют
в комбинации с 8-(2,б-дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-
((диметиламино)метил)-1Н-имидазол-2-ил)хиноксалин-5
карбоксамидом (соединение А7) или соединением, описанным в публикации РСТ № W0 2009/141386, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, характеризующегося ангиогенезом, злокачественная опухоль рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак или гематологическая злокачественная опухоль.
В одном варианте осуществления ингибитор FGFR или 8-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-((диметиламино)метил)-1Н-имидазол-2-ил)хиноксалин-5-карбоксамид (соединение А7) вводят в дозе например, от приблизительно 3 мг до приблизительно 5 г, более предпочтительно от приблизительно 10 мг до приблизительно 1,5 г на индивидуума в сутки, необязательно разделенной на 1-3 отдельных дозы, которые могут иметь, например, одинаковый размер.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором PI3K (S)-N1-(4-метил-5-(2-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)пиридин-4-ил)тиазол-2-ил)пирролидин-1,2-дикарбоксамидом (соединение А8) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/029082, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K представляет собой (S)-Nl-
(4-метил-5-(2-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)пиридин-4-
ил)тиазол-2-ил)пирролидин-1,2-дикарбоксамид (соединение А8 ) или
соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2010/029082. В одном
варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют
в комбинации с (S)-N1-(4-метил-5-(2-(1,1,1-трифтор-2-
метилпропан-2-ил)пиридин-4-ил)тиазол-2-ил)пирролидин-1,2-дикарбоксамидом (соединение А8) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/029082, для лечения нарушения, такого как рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого
(NSCLC)), рак предстательной железы, эндокринная злокачественная опухоль, рак яичника, меланома, рак мочевого пузыря, рак женской половой системы, рак ободочной и прямой кишки, мультиформная глиобластома (GBM), рак желудка, рак молочной железы, рак
поджелудочной железы, рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, солидная опухоль, лейкоз, неходжкинская лимфома; или нарушение гемопоэза, и рак головы и шеи.
В одном варианте осуществления ингибитор PI3K или (S)-Nl-(4-метил-5-(2-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)пиридин-4-ил)тиазол-2-ил)пирролидин-1,2-дикарбоксамид (Соединение А8) вводят в дозе приблизительно 150-300, 200-300, 200-400 или 3004 00 мг (например, в сутки), например, приблизительно 2 00, 300 или 4 0 0 мг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором цитохрома Р450 (например, ингибитор CYP17) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/149755, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор цитохрома Р450 (например, ингибитор CYP17) представляет собой соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2010/149755. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/149755, для лечения рака предстательной железы.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором HDM2 (S)-1-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-б-метокси-2-(4-(метил(((lr,4S)-4-(4-метил-3-оксопиперазин-1-ил)циклогексил)метил)амино)фенил)-1,2-дигидроизохинолин-З(4Н)-оном (соединение А10) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2011/076786, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор HDM2 представляет собой (S)-l-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-б-метокси-2-(4-(метил(((lr,4S)-4-(4-метил-З-оксопиперазин-1-ил)циклогексил)метил)амино)фенил)-1,2-дигидроизохинолин-3(4Н)-он (соединение А10) или соединение,
описанное в публикации РСТ № WO 2011/076786. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с (S)-1-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-б-метокси-2-(4-(метил(((lr,4S)-4-(4-метил-3-оксопиперазин-1-
ил)циклогексил)метил)амино)фенил)-1,2-дигидроизохинолин-З(4Н)-оном (соединение А10) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2011/076786, для лечения нарушения, такого как солидная опухоль.
В одном варианте осуществления ингибитор HDM2 или (S)-l-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-б-метокси-2-(4-(метил(((lr,4S)-4-(4-метил-З-оксопиперазин-1-ил)циклогексил)метил)амино)фенил)-1,2-дигидроизохинолин-3(4Н)-он (соединение А10) вводят в дозе приблизительно от 400 до 700 мг, например, вводят три раза в неделю, две 2 недели с введением и одну неделю без введения. В некоторых вариантах осуществления доза составляет приблизительно 400, 500, 600 или 700 мг; приблизительно 400-500, 500-600 или 600-700 мг, например, с введением три раза в неделю.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с хелатирующим железо агентом деферасироксом (также известным как EXJADE; соединение All) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 1997/049395, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления хелатирующий железо агент представляет собой деферасирокс или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 1997/049395. В одном варианте осуществления хелатирующий железо агент представляет собой деферасирокс (соединение All). В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с деферасироксом (соединение All) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 1997/049395, для лечения перегрузки железом, гемохроматоза или миелодисплазии.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или
несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором ароматазы лектрозолом (также известным как FEMARA; соединение А12) или соединением, описанным в US 4 97 8 672, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор ароматазы представляет собой лектрозол (соединение А12) или соединение, описанное в патенте США 4978672. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с лектрозолом (соединение А12) или соединением, описанным в патенте США 4978672, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, лейомиосаркома, рак эндометрия, рак молочной железы, рак женской репродуктивной системы или гормональный дефицит.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором PI3K, например, общим ингибитором PI3K (4S,5R)-3-
(2'-амино-2-морфолино-4'-(трифторметил)-[4,5'-бипиримидин]- 6-
ил)-4-(гидроксиметил)-5-метилоксазолидин-2-оном (соединение А13)
или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2013/124826, для
лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем
описании. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K
представляет собой (4S,5R)-3-(2'-амино-2-морфолино-4'-
(трифторметил)-[4,5'-бипиримидин]-б-ил)-4-(гидроксиметил)-5-метилоксазолидин-2-он (соединение А13) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO2013/124826. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с
(4S,5R)-3-(2'-амино-2-морфолино-4'-(трифторметил)-[4,5'-бипиримидин]-б-ил)-4-(гидроксиметил)-5-метилоксазолидин-2-оном
(соединение А13) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2013/124826, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль или распространенная солидная опухоль.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или
несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором р53 и/или взаимодействия p53/Mdm2 (S)-5-(5-хлор-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-З-ил)-б-(4-хлорфенил)-2-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1-изопропил-5,б-дигидропирроло[3,4-d]имидазол-4(1Н)-оном (соединение А14) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2013/111105 для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор р53 и/или взаимодействия p53/Mdm2 представляет собой (S)-5-(5-хлор-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-З-ил)-б-(4-хлорфенил)-2-(2, 4-диметоксипиримидин-5-ил)-1-изопропил-5,б-дигидропирроло[3,4-d]имидазол-4(1Н)-он (соединение А14) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO2013/111105. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с (S)-5-(5-хлор-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-З-ил)-б-(4-хлорфенил)-2-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1-изопропил-5,б-
дигидропирроло[3,4-d]имидазол-4(1Н)-оном (соединение А14) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2013/111105, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль или саркома мягких тканей.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против
PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или
несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации
с ингибитором тирозинкиназы CSF-1R 4-((2-(((1R,2R)-2-
гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-б-ил)окси)-N-
метилпиколинамидом (соединение А15) или соединением, описанным в
публикации РСТ № WO 2005/073224, для лечения нарушения,
например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном
варианте осуществления ингибитор тирозинкиназы CSF-1R
представляет собой 4-((2-(((1R,2R)-2-
гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-б-ил)окси)-N-метилпиколинамид (соединение А15) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2005/073224. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с 4- ( (2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-б-ил)окси)-
N-метилпиколинамидом (соединение А15) или соединением, описанным в публикации РСТ № W0 2005/073224, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против
PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или
несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации
с индуктором апоптоза и/или ингибитором ангиогенеза, таким как
иматиниба мезилат (также известный как GLEEVEC; соединение А16),
или соединением, описанным в публикации РСТ № WO1999/003854, для
лечения нарушения, например, описанного нарушения. В одном
варианте осуществления индуктор апоптоза и/или ингибитор
ангиогенеза представляет собой иматиниба мезилат (соединение
А16) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO1999/003854.
В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1
используют в комбинации с иматиниба мезилатом (соединение А16)
или соединением, описанным в публикации РСТ № WO1999/003854, для
лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль,
множественная миелома, рак предстательной железы,
немелкоклеточный рак легкого, лимфома, рак желудка, меланома, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, рак ободочной и прямой кишки, мультиформная глиобластома, рак печени, рак головы и шеи, астма, рассеянный склероз, аллергия, деменция альцгеймеровского типа, боковой амиотрофический склероз или ревматоидный артрит.
В определенных вариантах осуществления иматиниба мезилат (соединение А16) вводят в дозе приблизительно от 100 до 1000 мг, например, приблизительно от 200 мг до 800 мг, приблизительно от 300 мг до 7 00 мг или приблизительно от 4 00 мг до 60 0 мг, например, приблизительно 2 00 мг, 300 мг, 4 00 мг, 50 0 мг, 60 0 мг или 700 мг. Схема дозирования может варьироваться от, например, раза в двое суток до раза в сутки, двух или трех раз в сутки. В одном варианте осуществления иматиниба мезилат вводят в пероральной дозе приблизительно от 100 мг до 600 мг каждые сутки, например, приблизительно 100 мг, 200 мг, 260 мг, 300 мг,
4 00 мг или 60 0 мг каждые сутки.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против
PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, антитело как
описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним
или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в
комбинации с ингибитором JAK 2-фтор-Ы-метил-4-(7-(хинолин-6-
илметил)имидазо[1,2-b][1,2,4]триазин-2-ил)бензамидом (соединение
А17) или его дигидрохлоридом или с соединением, описанным в
публикации РСТ № WO 2007/070514, для лечения нарушения,
например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном
варианте осуществления ингибитор JAK представляет собой 2-фтор-
Ы-метил-4-(7-(хинолин-б-илметил)имидазо[1,2-Ь][1,2,4]триазин-2-
ил)бензамид (соединение А17) или его дигидрохлорид, или
соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/070514. В одном
варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют
в комбинации с 2-фтор-Ы-метил-4-(7-(хинолин-б-
илметил)имидазо[1,2-b][1,2,4]триазин-2-ил)бензамидом (соединение
А17) или его дигидрохлоридом, или соединением, описанным в
публикации РСТ № WO 2007/070514, для лечения нарушения, такого
как солидная опухоль, например, рак легкого (например,
немелкоклеточный рак легкого (NSCLC))), мультифорная
глиобластома (GBM), рак почки, рак печени, рак желудка, рак ободочной и прямой кишки, миелоидный лейкоз, гематологическая злокачественная опухоль, аутоиммунное заболевание, неходжкинская лимфома или тромбоцитемия. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая мутацию с-МЕТ (например, мутацию с-МЕТ или амплификацию с-МЕТ).
В определенных вариантах осуществления соединение А17 вводят в пероральной дозе приблизительно от 100 до 1000 мг, например, приблизительно от 200 мг до 900 мг, приблизительно от 300 мг до 8 00 мг или приблизительно от 4 00 мг до 7 00 мг, например, приблизительно 4 00 мг, 50 0 мг или 60 0 мг. Схема дозирования может варьироваться от, например, от раза в двое суток до раза в сутки, два или три раза в сутки. В одном варианте осуществления соединение А17 вводят в пероральной дозе приблизительно от 400 до 600 мг два раза в сутки.
В одном варианте осуществления ингибитор JAK или 2-фтор-Ы-метил-4-(7-(хинолин-б-илметил)имидазо[1,2-Ь][1,2,4]триазин-2-ил)бензамид (соединение А17) или его дигидрохлорид вводят в дозе приблизительно 400-600 мг (например, в сутки), например, приблизительно 400, 500 или 600 мг или приблизительно 400-500 или 500-600 мг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором JAK руксолитиниба фосфатом (также известным как JAKAFI; соединение А18) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/070514, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор JAK представляет собой руксолитиниба фосфат (соединение А18) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/070514. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с руксолитиниба фосфатом (соединение А18) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/070514, для лечения нарушения, такого как рак предстательной железы, лимфоцитарный лейкоз, множественная миелома, лимфома (например, неходжкинская лимфома), рак легкого, лейкоз (например, миелоидный лейкоз, лимфоцитарный лейкоз), кахексия, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, ревматоидный артрит, псориаз, рак ободочной и прямой кишки, миелоидный лейкоз, гематологическая злокачественная опухоль, аутоиммунное заболевание, неходжкинская лимфома или тромбоцитемия. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая мутацию JAK. В некоторых вариантах осуществления мутация JAK представляет собой мутацию V617F JAK2.
В одном варианте осуществления ингибитор JAK или руксолитиниба фосфат (соединение А18) вводят в дозе приблизительно 15-25 мг, например, два раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления доза составляет приблизительно 15, 20 или 2 5 мг или приблизительно 15-20 или 20-25 мг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против
PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или
несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации
с ингибитором деацетилазы (DAC) панобиностатом (соединение А19)
или соединением, описанным в публикации РСТ № W0 2014/072493,
для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в
настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор DAC
ингибитор представляет собой панобиностат (соединение А19) или
соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2014/072493. В одном
варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют
в комбинации с панобиностатом (соединение А19), соединением,
описанным в публикации РСТ № WO 2014/072493, для лечения
нарушения, такого как мелкоклеточный рак легкого, рак
дыхательных путей/рак грудной полости, рак предстательной
железы, множественная миелома, миелодиспластический синдром, рак
кости, немелкоклеточный рак легкого, эндокринная злокачественная
опухоль, лимфома, неврологическая злокачественная опухоль,
лейкоз, ВИЧ/СПИД, иммунное нарушение, отторжение трансплантата,
рак желудка, меланома, рак молочной железы, рак поджелудочной
железы, рак ободочной и прямой кишки, мультиформная
глиобластома, миелоидный лейкоз, гематологическая
злокачественная опухоль, рак почки, неходжкинская лимфома, рак головы и шеи, множественная миелома, миелодиспластический синдром, лимфома (например, неходжкинская лимфома) или лейкоз (например, миелоидный лейкоз), нарушения гемопоэза или рак печени.
В одном варианте осуществления ингибитор DAC или панобиностат (соединение А19) вводят в дозе приблизительно 2 0 мг (например, в сутки).
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором одного или нескольких из цитохрома Р450 (например, 11В2), альдостерона или ангиогенеза, осилодростатом (соединение
А2 0) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2007/024945, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор одного или нескольких из цитохрома Р450 (например, 11В2), альдостерона или ангиогенеза, представляет собой осилодростат (соединение А2 0) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO2007/024945. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с осилодростатом (соединение А2 0) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2007/024945, для лечения нарушения, такого как синдром Кушинга, гипертензия, или для терапии сердечной недостаточности.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором IAP, (S)-N-( (S)-1-циклогексил-2-( (S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-
(метиламино)пропанамидом (соединение А21) или соединением,
описанным в US 8552003, для лечения нарушения, например,
нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте
осуществления ингибитор IAP представляет собой (S)-N-( (S)-1-
циклогексил-2-((S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-
ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамид (соединение А21) или
соединение, описанное в патенте США 8552003. В одном варианте
осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в
комбинации с (S)-N-( (S)-1-циклогексил-2-( (S)-2-(4-(4-
фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-
(метиламино)пропанамидом (соединение А21) или соединением, описанным в патенте США 8552003, для лечения нарушения, такого как множественная миелома, рак молочной железы, рак яичника, рак поджелудочной железы или гемопоэтическое нарушение.
В одном варианте осуществления ингибитор IAP или (S)-N-
((S)-1-циклогексил-2-((S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамид
(соединение А21) или соединение, описанное в US 8552003, вводят
в дозе приблизительно 1800 мг, например, один раз в неделю. В одном варианте осуществления соединение А21 вводят в дозе (например, пероральной дозе) приблизительно 10-3000 мг, например, приблизительно 20-2400 мг, приблизительно 50-1800 мг, приблизительно 100-1500 мг, приблизительно 200-1200 мг, приблизительно 300-900 мг, например, приблизительно 600 мг, приблизительно 900 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 150 0 мг, приблизительно 18 00 мг, приблизительно 2100 мг или приблизительно 24 00 мг. В одном варианте осуществления соединение А21 вводят один раз в неделю или один раз в две недели.
В одном варианте осуществления при комбинированной терапии соединение А21 вводят перорально. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, вводят, например, внутривенно, по меньшей мере через одни, двое, трое, четверо, пятеро, шестеро или семеро суток, например, через трое суток после введения соединения А21, например, перорально. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, вводят, например, внутривенно, по меньшей мере за одни, двое, трое, четверо, пятеро, шестеро или семеро суток, например, за трое суток, до введения соединения А21, например, перорально. В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, вводят, например, внутривенно, в течение тех же суток, что и соединение А21, например, вводимое перорально.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против
PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или
несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации
с ингибитором Smoothened (SMO), сонидегиба фосфатом (соединение
А22), (R)-2-(5-(4-(б-бензил-4,5-диметилпиридазин-З-ил)-2-
метилпиперазин-1-ил)пиразин-2-ил)пропан-2-олом (соединение А25) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/131201 или
WO 2010/007120 для лечения нарушения, например, нарушения,
описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления
ингибитор SMO представляет собой сонидегиба фосфат (соединение
А22), (R)-2-(5-(4-(б-бензил-4,5-диметилпиридазин-З-ил)-2-
метилпиперазин-1-ил)пиразин-2-ил)пропан-2-ол (соединение А25) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/131201 или WO 2010/007120. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с сонидегиба фосфатом
(соединение А22), (R)-2-(5-(4-(б-бензил-4,5-диметилпиридазин-З-ил) -2-метилпиперазин-1-ил)пиразин-2-ил)пропан-2-олом (соединение А2 5) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/131201 или WO 2010/007120, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, медуллобластома, мелкоклеточный рак легкого, рак предстательной железы, базально-клеточная карцинома, рак поджелудочной железы или воспаление.
В определенных вариантах осуществления сонидегиба фосфат
(соединение А22) вводят в дозе приблизительно от 20 до 500 мг, например, приблизительно от 40 мг до 400 мг, приблизительно от 50 мг до 300 мг или приблизительно от 100 мг до 200 мг, например, приблизительно 50 мг, 100 мг, 150 мг, 2 00 мг, 2 50 мг или 300 мг. Схема дозирования может варьироваться от, например, от раза в двое суток до раза в сутки, двух или трех раз в сутки.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против TIM-3, например, молекулу антитела против TIM-3, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитром Alk церитинибом (также известный как ZYKADIA; соединение А2 3) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/131201 для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор Alk представляет собой церитиниб (соединение А23) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/131201. В одном варианте осуществления молекулу антитела против TIM-3 используют в комбинации с церитинибом (соединение А2 3) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/131201, для лечения нарушения, такого как немелкоклеточный рак легкого или солидные
опухоли, например, рак легкого (например, немелкоклеточный рак
легкого (NSCLC)) , лимфома (например, анапластическая
крупноклеточная лимфома или неходжкинская лимфома) , воспалительная миофибробластная опухоль (IMT) или нейробластома. В некоторых вариантах осуществления NSCLC представляет собой NSCLC стадии II IB или IV, или рецидивирующую локально распространенную или метастазирующую NSCLC. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль (например, рак легкого, лимфома, воспалительная миофибробластная опухоль или нейробластома) имеет или идентифицирована как имеющая перестройку или транслокацию ALK, например, слияние ALK. В одном варианте осуществления слияние ALK представляет собой слияние EML4-ALK, например, слияние EML4-ALK, описанное в настоящем описании. В другом варианте осуществления слияние ALK представляет собой слияние ALK-R0S1. В определенных вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет прогрессирование на или является резистентной или толерантной к ингибитору R0S1 или ингибитору ALK, например, ингибитору ALK, отличному от соединения А2 3. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет прогрессирование на или является резистентной или толерантной к кризотинибу. В одном варианте осуществления индивидуум является ALK-наивным пациентом, например, пациентом-человеком. В другом варианте осуществления индивидуум представляет собой пациента, например, пациента-человека, которого ранее лечили ингибитором ALK. В другом варианте осуществления индивидуум представляет собой пациента, например, пациента-человека, которого ранее лечили соединением А2 3 .
В одном варианте осуществления соединение А2 3 и молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, вводят ALK-наивному пациенту. В другом варианте осуществления соединение А2 3 и молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, вводят пациенту, которого ранее лечили ингибитором ALK. В другом варианте осуществления соединение А23 и молекулу антитела против PD-L1, например,
молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, вводят пациенту, которого ранее лечили соединением А2 3 .
В одном варианте осуществления ингибитор Alk или церитиниб (соединение А23) вводят в дозе приблизительно 750 мг, например, один раз в сутки.
В определенных вариантах осуществления соединение А2 3 вводят в пероральной дозе приблизительно от 100 до 1000 мг, например, приблизительно от 150 мг до 900 мг, приблизительно от 2 00 мг до 8 00 мг, приблизительно от 300 мг до 7 00 мг, или приблизительно от 400 мг до 600 мг, например, приблизительно 150 мг, 300 мг, 4 50 мг, 60 0 мг или 750 мг. В определенном варианте осуществления соединение А23 вводят в пероральной дозе приблизительно 7 50 мг или менее, например, приблизительно 60 0 мг или менее, например, приблизительно 450 мг или менее. В определенных вариантах осуществления соединение А2 3 вводят с приемом пищи. В других вариантах осуществления дозу вводят натощак. Схема дозирования может варьироваться, например, от раза в двое суток до раза в сутки, двух или трех раз в сутки. В одном варианте осуществления соединение А2 3 вводят каждые сутки. В одном варианте осуществления соединение А23 вводят в пероральной дозе приблизительно от 150 мг до 750 мг в сутки, либо с приемом пищи, либо натощак. В одном варианте осуществления соединение А23 вводят в пероральной дозе приблизительно 7 50 мг в сутки в состоянии натощак. В одном варианте осуществления соединение А23 вводят в пероральной дозе приблизительно 750 мг в сутки посредством капсулы или таблетки. В другом варианте осуществления соединение А23 вводят в пероральной дозе приблизительно 600 мг в сутки посредством капсулы или таблетки. В одном варианте осуществления соединение А23 вводят в пероральной дозе приблизительно 450 мг с сутки посредством капсулы или таблетки.
В одном варианте осуществления соединение А23 вводят в дозе приблизительно 450 мг и ниволумаб вводят в дозе приблизительно 3 мг/кг. В другом варианте осуществления доза соединения А23 составляет 600 мг и доза ниволумаба составляет 3 мг/кг. В одном
варианте осуществления соединение А2 3 вводят с маложирной пищей.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором JAK и/или CDK4/6 7-циклопентил-Ы,Ы-диметил-2-((5-
(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7Н-пирроло[2,З-d]пиримидин-б-карбоксамидом (соединение А2 4) или соединением, описанным в патенте США 8415355 или патенте США 8685980 для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор JAK и/или CDK4/6 представляет собой 7-циклопентил-Ы,Ы-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7Н-пирроло[2,З-d]пиримидин-б-карбоксамид
(соединение А24) или соединение, описанное в патенте США 8415355 или патенте США 8685980. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с 7-циклопентил-N,N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7Н-пирроло[2,З-d]пиримидин-б-карбоксамидом (соединение А2 4) или соединением, описанным в US 8415355 или US 8685980, для лечения нарушения, такого как лимфома, неврологическая злокачественная опухоль, меланома, рак молочной железы или солидная опухоль, например, рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого
(NSCLC)).
В одном варианте осуществления ингибитор JAK и/или CDK4/6 или 7-циклопентил-Ы,Ы-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7Н-пирроло[2,З-d]пиримидин-б-карбоксамид (соединение А24) вводят в дозе приблизительно 200-600 мг, например, в сутки. В одном варианте осуществления соединение вводят в дозе приблизительно 200, 300, 400, 500 или 60 0 мг или приблизительно 200-300, 300-400, 400-500 или 500-600 мг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором рецептора пролактина (PRLR), молекулой моноклонального антитела человека (соединение А2 6), как описано
в патенте США 7867493, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор PRLR представляет собой моноклональное антитело человека (соединение А26), описанное в US № 7867493. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с молекулой моноклонального антитела человека (соединение А26), описанной в патенте США 7867493, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, рак предстательной железы или рак молочной железы. Иллюстративные антитела против PRLR, описанные в US 7 8 67493, включают chXHA.06.642, chXHA.06.275, he.06,642-1, he.06,642-2, he.06,2751, he.06,275-2, he.06,275-3, he.06,275-4, XPA.06,128, XPA.06,129, XPA.06,130, XPA.06,131, XPA.06,141, XPA.06,147, XPA.06,148, XPA.06,158, XPA.06,159, XPA.06,163, XPA.06,167, XPA.06,171, XPA.06,178, XPA.06,181, XPA.06,192, XPA.06,202, XPA.06,203, XPA.06,206, XPA.06,207, XPA.06,210, XPA.06,212, XPA.06,217, XPA.06,219, XPA.06,229, XPA.06,233, XPA.06,235, XPA.06,239, XPA.06,145, XHA.06.567, XHA.06.642, XHA.06.983, XHA.06.275, XHA.06.189 или ХНА.06.907.
В некоторых вариантах осуществления соединение А2 6 представляет собой выделенное антитело, которое связывает внеклеточный домен PRLR и содержит (а) определяющие комплементарность области (CDR), расположенные в положениях 2438, положениях 54-60 и положениях 93-101 аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 88, как описано в US 7867493; и (b) CDR, расположенные в положениях 31-35, положениях 50-66 и 99-113 SEQ ID NO: 90, как описано в US 7867493.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против
PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или
несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации
с ингибитором PIM-киназы N-(4-( (1R, 3S,5S)-З-амино-5-
метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,б-дифторфенил)-5-фторпиколинамидом (соединение А2 7) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/026124, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном
варианте осуществления ингибитор PIM-киназы представляет собой N-(4-((lR,3S,5S)-З-амино-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-б-
(2,б-дифторфенил)-5-фторпиколинамид (соединение А27) или
соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2010/026124. В одном
варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют
в комбинации с N-(4-((1R,3S,5S)-З-амино-5-
метилциклогексил)пиридин-3-ил)-б-(2,б-дифторфенил)-5-фторпиколинамидом (соединение А2 7) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/026124, для лечения нарушения, такого как множественная миелома, миелодиспластический синдром, миелоидный лейкоз или неходжкинская лимфома.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором передачи сигнала Wnt 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамидом
(соединение А2 8) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/101849, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор передачи сигнала Wnt представляет собой 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид (соединение А28) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2010/101849. В одном варианте осуществления ингибитор передачи сигнала Wnt представляет собой 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид (соединение А28) . В одном варианте осуществления а PD-L1 молекулу антитела используют в комбинации с 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамидом (соединение А28) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/101849, для лечения нарушения, такого как солидная опухоль (например, рак головы и шеи, плоскоклеточная карцинома, рак молочной железы, рак поджелудочной железы или рак толстого кишечника).
В определенных вариантах осуществления 2-(2',3-диметил-
[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид
(соединение А28) вводят в дозе приблизительно от 1 до 50 мг, например, приблизительно от 2 мг до 45 мг, приблизительно от 3 мг до 40 мг, приблизительно от 5 мг до 35 мг, от 5 мг до 10 мг или приблизительно от 10 мг до 30 мг, например, приблизительно 2 мг, 5 мг, 10 мг, 2 0 мг, 3 0 мг или 4 0 мг. Схема дозирования может варьироваться от, например, от раза в двое суток до раза в сутки, двух или трех раз в сутки.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором BRAF энкорафенибом (соединение А2 9) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2011/025927, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор BRAF представляет собой энкорафениб (соединение А29) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2011/025927. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с энкорафенибом (соединение А2 9) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2011/025927, для лечения нарушения, такого как рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC)), меланома (например, распространенная меланома), рак щитовидной железы (например, папиллярный рак щитовидной железы) или рак ободочной и прямой кишки.
В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая мутацию BRAF (например, мутацию V600E BRAF), BRAF дикого типа, KRAS дикого типа или активирующую мутацию KRAS. Злокачественная опухоль может находиться на ранней, промежуточной или поздней стадии.
В одном варианте осуществления ингибитор BRAF или энкорафениб (соединение А29) вводят в дозе приблизительно 200300, 200-400 или 300-400 мг, например, в сутки. В одном варианте осуществления соединение вводят в дозе приблизительно 200, приблизительно 300 или приблизительно 4 00 мг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором CDK4/6 7-циклопентил-Ы,Ы-диметил-2-((5-((1R,6S)-9-метил-4-оксо-З,9-диазабицикло[4,2,1]нонан-3-ил)пиридин-2-ил)амино)-7Н-пирроло[2,З-d]пиримидин-б-карбоксамидом (соединение АЗО) или соединением, описанным в публикации РСТ № W0 2011/101409, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор CDK4/6 представляет собой 7-циклопентил-Ы,Ы-диметил-2-
((5-((1R,6S)-9-метил-4-оксо-3,9-диазабицикло[4,2,1]нонан-3-ил)пиридин-2-ил)амино)-7Н-пирроло[2,З-d]пиримидин-б-карбоксамид
(соединение АЗО) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2011/101409. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с 7-циклопентил-Ы,N-диметил-2-((5-((1R,6S)-9-метил-4-оксо-3,9-диазабицикло[4,2,1]нонан-3-ил)пиридин-2-ил)амино)-7Н-пирроло[2,З-d]пиримидин-б-карбоксамидом (соединение АЗО) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2011/101409, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, лимфома из клеток мантийной зоны, липосаркома, немелкоклеточный рак легкого, меланома, плоскоклеточный рак пищевода или рак молочной железы.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором HER3, соединением А31 или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2012/022814, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор HER3 представляет собой соединение А31 или соединение, описанное в публикации РСТ WO 2012/022814. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с соединением А31 или соединением, описанным в публикации РСТ WO 2012/022814, для лечения нарушения, такого как рак желудка, рак пищевода, рак головы и шеи, плоскоклеточная карцинома, рак желудка, рак
молочной железы (например, метастазирующий рак молочной железы) или рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак.
В некоторых вариантах осуществления соединение А31 представляет собой молекулу моноклонального антитела человека. В некоторых вариантах осуществления соединение А31 представляет собой моноклональное антитело против HER3 или его антигенсвязывающий фрагмент, который содержит 1, 2, 3, 4, 5 или б CDR согласно Kabat или Chothia, VH и/или VL, любого из антител, представленных в таблице 1 U.S. 8735551. В одном варианте осуществления моноклональное антитело против HER3 или его антигенсвязывающий фрагмент содержат VH SEQ ID NO: 141 и VL SEQ ID NO: 140, как описано в U.S. 8735551.
В одном варианте осуществления ингибитор HER3 или соединение А31 вводят в дозе приблизительно 3, 10, 20 или 40 мг/кг, например, один раз в неделю (QW). В одном варианте осуществления соединение вводят в дозе приблизительно 3-10, 102 0 или 2 0-40 мг/кг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором FGFR2 и/или FGFR4, соединением А32 или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2014/160160 (например, конъюгат молекула антитела-лекарственное средство против FGFR2 и/или FGFR4, например, mAb 12425), для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор FGFR2 и/или FGFR4 представляет собой соединение А32 или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2014/160160. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с соединением А32 или соединением, как описано в таблице б, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, рак желудка, рак молочной железы, рабдомиосаркома, рак печени, рак надпочечника, рак легкого, рак пищевода, рак толстого кишечника или рак эндометрия.
В некоторых вариантах осуществления соединение А32
представляет собой конъюгат молекула антитела-лекарственное средство, направленный против FGFR2 и/или FGFR4, например, mAb 12425. В некоторых вариантах осуществления соединение А32 представляет собой конъюгат молекула антитела-лекарственное средство, направленный против FGFR2 и/или FGFR4, который содержит 1, 2, 3, 4, 5 или б CDR согласно Kabat или Chothia, VH и/или VL любого из антител, представленных в таблице 1 W0 2014/160160. В некоторых вариантах осуществления соединение А32 представляет собой конъюгат молекула антитела-лекарственное средство против FGFR2 и/или FGFR4, который содержит линкер из N-сукцинимидил-4-(малеимидометил)циклогексанкарбоксилата (SMCC) и груз в виде Ы2'-деацетил-Ы2' - (З-меркапто-1-оксопропил) майтанзина (DM1) . В некоторых вариантах осуществления соединение А32 представляет собой конъюгат молекула антитела-лекарственное средство, имеющий следующую формулу:
где АЬ представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие CDR1 тяжелой цепи SEQ ID NO: 1, 21, 41, 61, 81 или 101, CDR2 тяжелой цепи SEQ ID N0: 2, 22, 42, 62, 82 или 102, CDR3 тяжелой цепи SEQ ID N0: 3, 23, 43, 63, 83 или 103, и CDR1 легкой цепи SEQ ID N0: 11, 31, 51, 71, 91 или 111, CDR2 легкой цепи SEQ ID N0: 12, 32, 52, 72, 92 или 112, CDR3 легкой цепи SEQ ID N0: 13, 33, 53, 73, 93 или 113, где CDR
определяют в соответствии с определением Kabat; и п равен 1-10, например, как описано в пункте 2 9 формулы изобретения WO 2014/160160.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором M-CSF, соединением АЗЗ или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2004/045532 (например, молекула антитела или Fab-фрагмент против M-CSF), для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор M-CSF представляет собой соединение АЗЗ или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2004/045532. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с соединением АЗЗ или соединением, как описано в публикации РСТ № WO 2004/045532, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, рак предстательной железы, рак молочной железы или пигментный виллезонодулярный синовит (PVNS).
В некоторых вариантах осуществления соединение АЗЗ представляет собой молекулу моноклонального антитела против М-CSF или ее фрагмент (например, Fab-фрагмент). В некоторых вариантах осуществления соединение АЗЗ представляет собой моноклональное антитело или Fab-фрагмент, которые связываются с тем же эпитопом, что и моноклональное антитело 5Н4 (номер доступа АТСС № НВ10027), например, как описано в WO 2004/045532. В других вариантах осуществления соединение АЗЗ представляет собой моноклональное антитело или его Fab-фрагмент, которые конкурируют с моноклональным антителом 5Н4 (номер доступа АТСС № НВ10027) за связывание с M-CSF, например, как описано в WO 2004/045532. В некоторых вариантах осуществления соединение АЗЗ представляет собой моноклональное антитело или Fab-фрагмент, которые содержат 1, 2, 3, 4, 5 или б CDR моноклонального антитела 5Н4 (номер доступа АТСС № НВ10027), например, как описано в W0 2004/045532. В некоторых вариантах осуществления ингибитор M-CSF или соединение АЗЗ вводят в средней дозе
приблизительно 10 мг/кг.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором МЕК, биниметинибом (соединение A34) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2003/077914, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор МЕК представляет собой бинеметиниб (соединение А34) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2003/077914. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с бинеметинибом (соединение A34) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2003/077914, для лечения нарушения, такого как немелкоклеточный рак легкого, полисистемное генетическое нарушение, меланома, рак яичника, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак поджелудочной железы, гематологическая злокачественная опухоль или почечно-клеточная карцинома, мультисистемное генетическое расстройство, рак желудка, рак ободочной и прямой кишки, рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, ревматоидный артрит или рак ободочной и прямой кишки. В некоторых вариантах осуществления злокачественная опухоль имеет или идентифицирована как имеющая мутацию KRAS.
В одном варианте осуществления ингибитор МЕК или биниметиниб (соединение А34) вводят в дозе приблизительно 45 мг, например, два раза в сутки.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором одного или нескольких из c-KIT, высвобождения гистамина, Flt3 (например, FLK2/STK1) или РКС мидостаурином (соединение A35) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2003/037347, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления
ингибитор представляет собой мидостаурин (соединение А35) или соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2003/037347. В одном варианте осуществления ингибитор одного или нескольких из с-К1Т, высвобождения гистамина, Flt3 (например, FLK2/STK1) или РКС представляет собой мидостаурин. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с мидостаурином (соединение A35) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2003/037347, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, рак ободочной и прямой кишки, миелоидный лейкоз, миелодиспластический синдром, связанная со старением дегенерация желтого пятна, диабетическое осложнение или дерматологическое нарушение.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором TOR (например, ингибитор mTOR) эверолимусом (также известным как AFINITOR; соединение A3 б) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2014/08 5318, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор TOR представляет собой эверолимус (соединение A3 б) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2014/085318. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с эверолимусом (соединение A3 б) для лечения нарушения, такого как интерстициальное заболевание легких, мелкоклеточный рак легкого, рак дыхательных путей/рак грудной полости, рак предстательной железы, множественная миелома, саркома, связанная со старением дегенерация желтого пятна, рак кости, туберозный склероз, рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC с плоскоклеточной и/или неплоскоклеточной гистологией)), меланома (например, распространенная меланома), рак пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, рак предстательной железы, гематологическая злокачественная опухоль, например, лимфома или лейкоз, эндокринная злокачественная опухоль, лимфома, неврологические нарушения, астроцитома, рак шейки матки,
неврологическая злокачественная опухоль, лейкоз, иммунные нарушения, отторжение трансплантата, рак желудка, меланома, эпилепсия, рак молочной железы или рак мочевого пузыря.
В одном варианте осуществления ингибитор TOR или эверолимус
(соединение АЗб) вводят в дозе приблизительно 2,5-20 мг/сутки. В одном варианте осуществления соединение вводят в дозе приблизительно 2,5, 5, 10 или 20 мг/сутки, например, приблизительно 2,5-5, 5-10 или 10-20 мг/сутки.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором одного или нескольких из VEGFR-2, PDGFR-бета, KIT или Raf-киназы С 1-метил-5-((2-(5-(трифторметил)-1Н-имидазол-2-ил)пиридин-4-ил)окси)-N-(4-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-амином (соединение А37) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/030377, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор одного или нескольких из VEGFR-2, PDGFR-бета, KIT или Raf-киназы С представляет собой 1-метил-5-((2-(5-(трифторметил)-1Н-имидазол-2-ил)пиридин-4-ил)окси)-N-(4-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-амин
(соединение A37) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/030377. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с 1-метил-5-((2-(5-
(трифторметил)-1Н-имидазол-2-ил)пиридин-4-ил)окси)-N-(4-
(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-амином (соединение А37) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2007/030377, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, меланома или солидная опухоль.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с агонистом соматостатина и/или ингибитором высвобождения гормона роста, пасиреотида диаспартатом (также известным как
SIGNIFOR; соединение A3 8) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2002/010192 или патенте США № 7473761 для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления агонист соматостатина и/или ингибитор высвобождения гормона роста представляет собой пасиреотида диаспартат (соединение A38) или соединение, описанное в публикации РСТ № W02002/010192 или патенте США № 7473761. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с пасиреотида диаспартатом (соединение A38) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2002/010192 или патенте США № 7473761, для лечения нарушения, такого как рак предстательной железы, эндокринная злокачественная опухоль, неврологическая злокачественная опухоль, рак кожи (например, меланома), рак поджелудочной железы, рак печени, синдром Кушинга, желудочно-кишечное нарушение, акромегалия, нарушение печени и желчных путей или цирроз печени.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против
PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в
настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или
несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации
с модулятором передачи сигнала и/или ингибитором ангиогенеза,
довитинибом (соединение A3 9) или соединением, описанным в
публикации РСТ № WO 2009/115562, для лечения нарушения,
например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном
варианте осуществления модулятор передачи сигнала и/или
ингибитор ангиогенеза представляет собой довитиниб (соединение
A3 9) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO
2009/115562. В одном варианте осуществления молекулу антитела
против PD-L1 используют в комбинации с довитинибом (соединение
A39) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO
2009/115562, для лечения нарушения, такого как злокачественная
опухоль, злокачественная опухоль дыхательных
путей/злокачественная опухоль грудной полости, множественная миелома, рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, эндокринная злокачественная опухоль или неврологическое
генетическое нарушение.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором EGFR (R,Е)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-
метилизоникотинамидом (соединение А4 0) или соединением, описанным в публикации РСТ № W0 2013/184757, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор EGFR представляет собой
(R,Е)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-
1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамид (соединение А40)
или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2013/184757. В
одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1
используют в комбинации с (R,Е)-N-(7-хлор-1-(1-(4-
(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамидом (соединение А40) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2013/184757, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, например, солидная опухоль, например, рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC)).
В одном варианте осуществления ингибитор EGFR или (R,E)-N-
(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамид (соединение А40) вводят в дозе 150-250 мг, например, в сутки. В одном варианте осуществления соединение вводят в дозе приблизительно 150, 200 или 250 мг или приблизительно 150-200 или 200-250 мг. В определенных вариантах осуществления соединение А4 0 вводят в пероральной дозе приблизительно 50-500 мг, например, приблизительно от 100 мг до 400 мг, приблизительно от 150 мг до 350 мг или приблизительно от 2 00 мг до 300 мг, например, приблизительно 100 мг, 150 мг или 2 00 мг. Схема дозирования может варьироваться, например, от раза в двое суток до раза в сутки, двух раз или трех раз в сутки. В одном варианте осуществления соединение А4 0 вводят в пероральной дозе
приблизительно от 100 до 200 мг, например, приблизительно 150 мг, один раз в сутки.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором ALK N6-(2-изопропокси-5-метил-4-(1-метилпиперидин-4-ил) фенил) -N4- (2- (изопропилсульфонил) фенил) -1Н-пиразоло [3, 4-d]пиримидин-4,б-диамином (соединение А42) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2008/073687, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор ALK представляет собой N6-(2-изопропокси-5-метил-4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил)-N4- (2-
(изопропилсульфонил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4,6-диамин (соединение А42) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2008/073687. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с N6- (2-изопропокси-5-метил-4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил)-N4- (2-
(изопропилсульфонил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4,6-диамином (соединение А42) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2008/073687, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль, анапластическая крупноклеточная лимфома (ALCL), немелкоклеточная карцинома легких (NSCLC) или нейробластома.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором IGF-1R 3-(4-(4-( (5-хлор-4-( (5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино)пиримидин-2-ил)амино)-5-фтор-2-метилфенил)пиперидин-1-ил)тиэтана 1, 1-диоксидом (соединение А43), 5-хлор-№-(2-фтор-5-метил-4-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)пиперидин-4-ил)фенил)-N4- (5-метил-1Н-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамином (соединение А44) или 5-XAop-N2-(4-(1-этилпиперидин-4-ил)-2-фтор-5-метилфенил)-N4-(5-метил-1Н-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамином (соединение А45) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/002655,
для лечения нарушения, например, описанного нарушения. В одном варианте осуществления ингибитор IGF-1R представляет собой 3-(4-
(4-((5-хлор-4-((5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино)пиримидин-2-ил)амино)-5-фтор-2-метилфенил)пиперидин-1-ил)тиэтана 1,1-диоксид
(соединение А43), 5-хлор-Ы2-(2-фтор-5-метил-4-(1-(тетрагидро-2Н-
пиран-4-ил)пиперидин-4-ил)фенил)-N4-(5-метил-1Н-пиразол-3-
ил)пиримидин-2,4-диамин (соединение А44), 5-хлор-Ы2-(4-(1-
этилпиперидин-4-ил) -2-фтор-5-метилфенил) -N4- (5-метил-1Н-пиразол-
3-ил)пиримидин-2,4-диамин (соединение А45) или соединение,
описанное в публикации РСТ № W0 2010/002655. В одном варианте
осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в
комбинации с 3-(4-(4-( (5-хлор-4-( (5-метил-1Н-пиразол-3-
ил)амино)пиримидин-2-ил)амино)-5-фтор-2-метилфенил)пиперидин-1-ил)тиэтана 1, 1-диоксидом (соединение А43), 5-хлор-Ы2-(2-фтор-5-метил-4-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)пиперидин-4-ил)фенил)-N4- (5-метил-1Н-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамином (соединение А44), 5-хлор-Ы2-(4-(1-этилпиперидин-4-ил)-2-фтор-5-метилфенил)-N4- (5-метил-1Н-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамином (соединение А45) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO 2010/002655, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль или саркома.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором Р-гликопротеина 1 вальсподаром (также известным как AMDRAY; соединение А4 6) или соединением, описанным в ЕР 2 9 6122, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор Р-гликопротеина 1 представляет собой вальсподар (соединение А4 6) или соединение, описанное в ЕР 296122. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с вальсподаром (соединение А4 6) или соединением, описанным в ЕР 296122, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль или устойчивая к лекарственным средствам опухоль.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с одним или несколькими из ингибитора VEGFR, ваталаниба сукцината (соединение А47) или соединения, описанного в ЕР 2 9 6122, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор VEGFR представляет собой ваталаниба сукцинат (соединение А47) или соединение, описанное в ЕР 296122. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с ваталаниба сукцинатом (соединение А4 7) или соединением, описанным в ЕР 296122, для лечения злокачественной опухоли.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором IDH или соединением, описанным в WO2014/141104, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор IDH представляет собой соединение А48 или соединение, описанное в публикации РСТ № WO2014/141104. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с соединением А4 8 или соединением, описанным в W02014/141104, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором BCL-ABL, (R) -N- (4-(хлордифторметокси)фенил)- б-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н- пиразол-5-ил)никотинамидом (соединение А49), или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2013/171639, WO2013/171640, W02013/171641 или W02013/171642, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор
BCL-ABL представляет собой соединение, описанное в публикации РСТ № WO2013/171639, W02013/171640, W02013/171641 или WO2013/171642. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с (R)-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(З-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Я-пиразол-5-ил)никотинамидом (соединение А49) или соединением, описанным в публикации РСТ № WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 или WO2013/171642, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль.
В другом варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с ингибитором c-RAF или соединением, описанным в публикации РСТ № W02014/15161 б, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления ингибитор c-RAF представляет собой соединение А50 или соединение, описанное в публикации РСТ № W02014/15161 б. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с соединением А50 или соединением, описанным в публикации РСТ № W02014/15161 б, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль.
В другом варианте осуществления молекулу антитела PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании, отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими иммуномодуляторами, используют в комбинации с конкурентным ингибитором ERK1/2 АТР или соединением, описанным в международной патентной заявке № PCT/US2014/062913, для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в настоящем описании. В одном варианте осуществления конкурентный ингибитор ERK1/2 АТР представляет собой соединение А51 или соединение, описанное в международной патентной заявке № PCT/US2014/062913 или в публикации РСТ № WO2015/066188. В одном варианте осуществления молекулу антитела против PD-L1 используют в комбинации с соединением А51 или соединением, описанным в международной патентной заявке № PCT/US2014/062913 или в
публикации РСТ № WO2015/066188, для лечения нарушения, такого как злокачественная опухоль.
В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации с одним или несколькими средствами, выбранными из соединения А8, соединения А17, соединения А2 3, соединения А2 4, соединения А2 7, соединения А2 9 и соединения АЗЗ.
В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела против PD-L1 вводят в комбинации со средством против злокачественной опухоли, имеющим известную активность в анализе с иммунными клетками, например, в одном или нескольких из анализа huMLR, анализа пролиферации Т-клеток и анализа пролиферации В-клеток. Иллюстративные способы анализа описаны ниже. Исходя из этого анализа, для каждого исследуемого средства можно вычислять IC50. В вариантах осуществления средство против злокачественной опухоли имеет IC50, например, 0-1 мкМ, 1-4 мкМ или более 4 мкМ, например, 4-10 мкМ или 4-20 мкМ. В вариантах осуществления второе лекарственное средство выбрано из одного или нескольких из: соединения А9, соединения А16, соединения А17, соединения А21, соединения А22, соединения А25, соединения А2 8, соединения А4 8 и соединения 49.
В некоторых вариантах осуществления соединение А2 8 (или соединение, родственное соединению А28) вводят в дозе приблизительно 5-10 или 10-30 мг. В некоторых вариантах осуществления соединение А22 (или соединение, родственное соединению А22) вводят в дозе приблизительно 200 мг. В некоторых вариантах осуществления соединение А17 (или соединение, родственное соединению А17) вводят в дозе приблизительно 400-600 мг. В некоторых вариантах осуществления соединение А16 (или соединение, родственное соединению А16) вводят в дозе приблизительно 400-600 мг п/о в сутки. В некоторых вариантах осуществления соединение А29 (или соединение, родственное соединению А29) вводят в дозе приблизительно 200-400 или 300-400 мг. В некоторых вариантах осуществления соединение А24 (или соединение, родственное соединению А24) вводят в дозе приблизительно 200-600 мг. В некоторых вариантах осуществления
соединение А23 (церитиниб) (или соединение, родственное церитинибу) вводят в дозе приблизительно 750 мг один раз в сутки. В некоторых вариантах осуществления соединение А8 (или соединение, родственное соединению А8) вводят в дозе приблизительно 200-400 или 300-400 мг. В некоторых вариантах осуществления соединение А5 (или соединение, родственное соединению А5) вводят в дозе приблизительно 100-125 мг. В некоторых вариантах осуществления соединение Аб (или соединение, родственное соединению Аб) вводят в дозе приблизительно 100 мг. В некоторых вариантах осуществления соединение А1 (или соединение, родственное соединению А1) вводят в дозе приблизительно 200-300 или 200-600 мг. В некоторых вариантах осуществления соединение А40 (или соединение, родственное соединению А40) вводят в дозе приблизительно 150-250 мг. В вариантах осуществления соединение А10 (или соединение, родственное соединению А10) вводят в дозе приблизительно от 400 до 700 мг, например, вводят три раза в неделю, с введением в течение 2 недель и одной неделей без введения. В вариантах осуществления ингибитор BCR-ABL ингибитор вводят в дозе приблизительно 20 мг bid-80 мг bid.
Ниже приведен иллюстративный анализ huMLR и анализ пролиферации В- или Т-клеток.
Реакция смешанных лимфоцитов человека
Реакция смешанных лимфоцитов (MLR) представляет собой функциональный анализ, который измеряет пролиферативный ответ лимфоцитов одного индивидуума (респондер) на лимфоциты другого индивидуума (стимулятор). Для проведения аллогенной MLR, мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) от трех доноров выделяли из лейкоцитарных пленок неизвестного типа HLA (Kantonspital Blutspendezentrum из Берна и Аарау, Швейцария). Клетки приготавливали в количестве 2105 в 0,2 мл культуральной среды, содержавшей RPMI 164 0 GlutaMAX(tm) с 10% эмбриональной телячьей сывороткой (FCS), 100 Е пенициллина/100 мкг стрептомицина, 50 мкг 2-меркаптоэтанола. Индивидуальные 2-направленные реакции проводили путем смешения РВМС от двух различных доноров в соотношении 1:1 и сокультивирование
проводили в трех экземплярах в 9б-луночных планшетах для культивирования тканей с плоским дном в течение б суток при 37°С, 5% СОг, в присутствии или в отсутствие диапазона концентраций исследуемых соединений из 8 точек. Клетки обрабатывали 3H-TdR (1 мКи/0,2 мл) в течение последних 16 ч культивирования и включенную в них радиоактивность использовали в качестве меры пролиферации клеток. Для каждого соединения вычисляли концентрацию, которая ингибировала 50% максимального ответа huMLR (IC50) • В качестве положительного контроля ингибирования huMLR использовали циклоспорин.
Анализ пролиферации В-клеток человека
РВМС выделяли непосредственно перед анализом с использованием градиента плотности Ficoll-Paque из крови человека и подвергали негативному выделению В-клеток. В-клетки ресуспендировали в культуральной среде (RPMI 1640, HEPES, 10% FCS, 50 мкг/мл гентамицина, 50 мкМ 2-меркаптоэтанол, lx ITS (инсулин, трансферрин и селенит натрия), 1х неосновные аминокислоты) в концентрации 9,104 на лунку в 9б-луночном культуральном планшете с плоским дном. Стимуляцию В-клеток проводили посредством молекулы антитела человека против IgM (30 мкг/мл) и IL-4 (75 нг/мл) или посредством лиганда CD40 (3 мкг/мл) и IL-4 (75 нг/мл) в присутствии или в отсутствие диапазона исследуемых концентраций из 7 точек. После культивирования в течение 72 ч при 37°С, 10% СОг, клетки обрабатывали 3H-TdR (1 мкКи/лунка) в течение последних б ч культивирования. Затем В-клетки собирали и измеряли включение тимидина с использованием сцинтилляционного счетчика. Для каждой дублированной обработки вычисляли среднее значение, и эти данные на носили на график в XLfit 4 для определения соответствующих величин IC50.
Анализ пролиферации Т-клеток человека
РВМС выделяли непосредственно перед анализом с использованием градиента плотности Ficoll-Paque из крови человека и подвергали негативному выделению Т-клеток. Т-клетки приготавливали в культуральной среде (RPMI 1640, HEPES, 10% FCS,
50 мкг/мл гентамицина, 50 мкМ 2-меркаптоэтанол, lx ITS (инсулин, трансферрин и селенит натрия), 1х неосновные аминокислоты) в концентрации 8,104 на лунку в 9б-луночном культуральном планшете с плоским дном. Стимуляцию Т-клеток проводили посредством молекулы антитела человека против CD3 (10 мкг/мл) или посредством молекулы антитела против CD3 человека (5 мкг/мл) и молекулы антитела против CD2 8 (1 мкг/мл) в присутствии или в отсутствие диапазона исследуемых концентраций из 7 точек. После культивирования в течение 72 ч при 37°С, 10% СОг, клетки обрабатывали 3H-TdR (1 мкКи/лунка) в течение последних б ч культивирования. Клеточную пролиферацию измеряли по включению тимидина, позволяющему определение IC50 для каждого исследуемого соединения.
Иллюстративные комбинации для антигенпрезентирующих комбинаций, комбинаций, направленных на эффекторные клетки, и комбинаций против опухолевой иммуносупрее сии
Иллюстративные комбинации лекарственных средств из двух или более из антигенпрезентирующей категории (А), категории эффекторных клеток (В) и категории противоопухолевой иммуносупреесии (С) предоставлены в данном разделе.
Каркасные вакцины
Агонист CD4 0
Ингибитор Р13К-у, -8
Биспецифические связывающие Т-клетки средства
Агонист 0X40
Ингибитор BAFF-R
Агонист CD2 7
Ингибитор MALT-1/ВТК
Ингибитор JAK
Ингибитор CRTH2
Ингибитор VEGFR
Агонист IL-15
Ингибитор TGFb
Ингибитор IDO/TDO
Антагонист A2AR
Ингибитор CTLA-4
Ингибитор PFKFB3
В некоторых вариантах осуществления комбинации по настоящему изобретению включают одно или несколько из следующих: А1В1, А1В2, А1ВЗ, А1В4, А1В5, А1В6, А1В7, А1В8, А1В9, А1В10, А1В11, А1В12, А2В1, А2В2, А2ВЗ, А2В4, А2В5, А2В6, А2В7, А2В8, А2В9, А2В10, А2В11, А2В12, АЗВ1, АЗВ2, АЗВЗ, АЗВ4, АЗВ5, АЗВ6, АЗВ7, АЗВ8, АЗВ9, АЗВ10, АЗВ11, АЗВ12, А4В1, А4В2, А4ВЗ, А4В4, А4В5, А4В6, А4В7, А4В8, А4В9, А4В10, А4В11, А4В12, А5В1, А5В2, А5ВЗ, А5В4, А5В5, А5В6, А5В7, А5В8, А5В9, А5В10, А5В11, А5В12, А6В1, А6В2, А6ВЗ, А6В4, А6В5, А6В6, А6В7, А6В8, А6В9, А6В10, А6В11, А6В12, А7В1, А7В2, А7ВЗ, А7В4, А7В5, А7В6, А7В7, А7В8, А7В9, А7В10, А7В11, А7В12, А8В1, А8В2, А8ВЗ, А8В4, А8В5, А8В6, А8В7, А8В8, А8В9, А8В10, А8В11, А8В12, А9В1, А9В2, А9ВЗ, А9В4, А9В5, А9В6, А9В7, А9В8, А9В9, А9В10, А9В11, А9В12, А10В1, А10В2, А10ВЗ, А10В4, А10В5, А10В6, А10В7, А10В8, А10В9, А10В10, А10В11, А10В12, А11В1, А11В2, А11ВЗ, А11В4, А11В5, А11В6, А11В7, А11В8, А11В9, А11В10, А11В11, А11В12, А1С1, А1С2, А1СЗ, А1С4, А1С5, А1С6, А1С7, А1С8, А1С9, А1С10, А1С11, А1С12, А1С13, А1С14, А1С15, А1С16, А1С17, А1С18, А1С19, А1С20, А1С21, А2С1, А2С2, А2СЗ, А2С4, А2С5, А2С6, А2С7, А2С8, А2С9, А2С10, А2С11, А2С12, А2С13, А2С14, А2С15, А2С16, А2С17, А2С18, А2С19, А2С20, А2С21,
АЗС1, АЗС2, АЗСЗ, АЗС4, АЗС5, АЗС6, АЗС7, АЗС8, АЗС9, АЗС10 АЗС11, АЗС12, АЗС13, АЗС14, АЗС15, АЗС16, АЗС17, АЗС18, АЗС19 АЗС20, АЗС21, А4С1, А4С2, А4СЗ, А4С4, А4С5, А4С6, А4С7, А4С8 А4С9, А4С10, А4С11, А4С12, А4С13, А4С14, А4С15, А4С16, А4С17 А4С18, А4С19, А4С20, А4С21, А5С1, А5С2, А5СЗ, А5С4, А5С5, А5С6 А5С7, А5С8, А5С9, А5С10, А5С11, А5С12, А5С13, А5С14, А5С15 А5С16, А5С17, А5С18, А5С19, А5С20, А5С21, А6С1, А6С2, А6СЗ А6С4, А6С5, А6С6, А6С7, А6С8, А6С9, А6С10, А6С11, А6С12, А6С13 А6С14, А6С15, А6С16, А6С17, А6С18, А6С19, А6С20, А6С21, А7С1 А7С2, А7СЗ, А7С4, А7С5, А7С6, А7С7, А7С8, А7С9, А7С10, А7С11 А7С12, А7С13, А7С14, А7С15, А7С16, А7С17, А7С18, А7С19, А7С20 А7С21, А8С1, А8С2, А8СЗ, А8С4, А8С5, А8С6, А8С7, А8С8, А8С9 А8С10, А8С11, А8С12, А8С13, А8С14, А8С15, А8С16, А8С17, А8С18 А8С19, А8С20, А8С21, А9С1, А9С2, А9СЗ, А9С4, А9С5, А9С6, А9С7 А9С8, А9С9, А9С10, А9С11, А9С12, А9С13, А9С14, А9С15, А9С16 А9С17, А9С18, А9С19, А9С20, А9С21, А10С1, А10С2, А10СЗ, А10С4 А10С5, А10С6, А10С7, А10С8, А10С9, А10С10, A10C11, A10C12 A10C13, A10C14, A10C15, A10C16, A10C17, A10C18, A10C19, A10C20 A10C21, A11C1, A11C2, A11C3, A11C4, A11C5, A11C6, A11C7, A11C8 A11C9, A11C10, A11C11, A11C12, A11C13, A11C14, A11C15, A11C16 A11C17, A11C18, A11C19, A11C20, A11C21, B1C1, B1C2, B1C3, B1C4 B1C5, B1C6, B1C7, B1C8, B1C9, B1C10, B1C11, B1C12, B1C13, B1C14 B1C15, B1C16, B1C17, B1C18, B1C19, B1C20, B1C21, B2C1, B2C2 B2C3, B2C4, B2C5, B2C6, B2C7, B2C8, B2C9, B2C10, B2C11, B2C12 B2C13, B2C14, B2C15, B2C16, B2C17, B2C18, B2C19, B2C20, B2C21 B3C1, B3C2, ВЗСЗ, B3C4, B3C5, B3C6, B3C7, B3C8, B3C9, B3C10 B3C11, B3C12, B3C13, B3C14, B3C15, B3C16, B3C17, B3C18, B3C19 B3C20, B3C21, B4C1, B4C2, B4C3, B4C4, B4C5, B4C6, B4C7, B4C8 B4C9, B4C10, B4C11, B4C12, B4C13, B4C14, B4C15, B4C16, B4C17 B4C18, B4C19, B4C20, B4C21, B5C1, B5C2, B5C3, B5C4, B5C5, B5C6 B5C7, B5C8, B5C9, B5C10, B5C11, B5C12, B5C13, B5C14, B5C15 B5C16, B5C17, B5C18, B5C19, B5C20, B5C21, B6C1, B6C2, B6C3 B6C4, B6C5, B6C6, B6C7, B6C8, B6C9, B6C10, B6C11, B6C12, B6C13 B6C14, B6C15, B6C16, B6C17, B6C18, B6C19, B6C20, B6C21, B7C1 B7C2, B7C3, B7C4, B7C5, B7C6, B7C7, B7C8, B7C9, B7C10, B7C11 B7C12, B7C13, B7C14, B7C15, B7C16, B7C17, B7C18, B7C19, B7C20
В7С21, В8С1, В8С2, В8СЗ, В8С4, В8С5, В8С6, В8С7, В8С8, В8С9 В8С10, В8С11, В8С12, В8С13, В8С14, В8С15, В8С16, В8С17, В8С18 В8С19, В8С20, В8С21, В9С1, В9С2, В9СЗ, В9С4, В9С5, В9С6, В9С7 В9С8, В9С9, В9С10, В9С11, В9С12, В9С13, В9С14, В9С15, В9С16 В9С17, В9С18, В9С19, В9С20, В9С21, В10С1, B10C2, B10C3, B10C4 B10C5, B10C6, B10C7, B10C8, B10C9, BIOCIO, B10C11, B10C12 B10C13, B10C14, B10C15, B10C16, B10C17, B10C18, B10C19, B10C20 B10C21, B11C1, B11C2, B11C3, B11C4, B11C5, B11C6, B11C7, B11C8 B11C9, B11C10, B11C11, B11C12, B11C13, B11C14, B11C15, B11C16 B11C17, B11C18, B11C19, B11C20, B11C21, B12C1, B12C2, B12C3 B12C4, B12C5, B12C6, B12C7, B12C8, B12C9, B12C10, B12C11 B12C12, B12C13, B12C14, B12C15, B12C16, B12C17, B12C18, B12C19 B12C20, B12C21, A1B1C1, A1B1C2, A1B1C3, A1B1C4, A1B1C5, A1B1C6 A1B1C7, A1B1C8, A1B1C9, A1B1C10, A1B1C11, A1B1C12, A1B1C13 A1B1C14, A1B1C15, A1B1C16, A1B1C17, A1B1C18, A1B1C19, A1B1C20 A1B1C21, A1B2C1, A1B2C2, A1B2C3, A1B2C4, A1B2C5, A1B2C6, A1B2C7 A1B2C8, A1B2C9, A1B2C10, A1B2C11, A1B2C12, A1B2C13, A1B2C14 A1B2C15, A1B2C16, A1B2C17, A1B2C18, A1B2C19, A1B2C20, A1B2C21 A1B3C1, A1B3C2, A1B3C3, A1B3C4, A1B3C5, A1B3C6, A1B3C7, A1B3C8 A1B3C9, A1B3C10, A1B3C11, A1B3C12, A1B3C13, A1B3C14, A1B3C15 A1B3C16, A1B3C17, A1B3C18, A1B3C19, A1B3C20, A1B3C21, A1B4C1 A1B4C2, A1B4C3, A1B4C4, A1B4C5, A1B4C6, A1B4C7, A1B4C8, A1B4C9 A1B4C10, A1B4C11, A1B4C12, A1B4C13, A1B4C14, A1B4C15, A1B4C16 A1B4C17, A1B4C18, A1B4C19, A1B4C20, A1B4C21, A1B5C1, A1B5C2 A1B5C3, A1B5C4, A1B5C5, A1B5C6, A1B5C7, A1B5C8, A1B5C9, A1B5C10
A1B5C11,
A1B5C12,
A1B5C13,
A1B5C14,
A1B5C15,
A1B5C16,
A1B5C17
A1B5C18,
A1B5C19,
A1B5C20,
A1B5C21,
A1B6C1,
A1B6C2,
A1B6C3
A1B6C4,
A1B6C5,
A1B6C6,
A1B6C7,
A1B6C8,
A1B6C9,
A1B6C10
A1B6C11,
A1B6C12,
A1B6C13,
A1B6C14,
A1B6C15,
A1B6C16,
A1B6C17
A1B6C18,
A1B6C19,
A1B6C20,
A1B6C21,
A1B7C1,
A1B7C2,
A1B7C3
A1B7C4,
A1B7C5,
A1B7C6,
A1B7C7,
A1B7C8,
A1B7C9,
A1B7C10
A1B7C11,
A1B7C12,
A1B7C13,
A1B7C14,
A1B7C15,
A1B7C16,
A1B7C17
A1B7C18,
A1B7C19,
A1B7C20,
A1B7C21,
A1B8C1,
A1B8C2,
A1B8C3
A1B8C4,
A1B8C5,
A1B8C6,
A1B8C7,
A1B8C8,
A1B8C9,
A1B8C10
A1B8C11,
A1B8C12,
A1B8C13,
A1B8C14,
A1B8C15,
A1B8C16,
A1B8C17
A1B8C18,
A1B8C19,
A1B8C20,
A1B8C21,
A1B9C1,
A1B9C2,
A1B9C3
А1В9С4, А1В9С5, А1В9С6, А1В9С7, А1В9С8, А1В9С9, А1В9С10 А1В9С11, А1В9С12, А1В9С13, А1В9С14, А1В9С15, А1В9С16, А1В9С17 А1В9С18, А1В9С19, А1В9С20, А1В9С21, А1В10С1, A1B10C2, A1B10C3 A1B10C4, A1B10C5, A1B10C6, A1B10C7, A1B10C8, A1B10C9, A1B10C10 A1B10C11, A1B10C12, A1B10C13, A1B10C14, A1B10C15, A1B10C16 A1B10C17, A1B10C18, A1B10C19, A1B10C20, A1B10C21, A1B11C1 A1B11C2, A1B11C3, A1B11C4, A1B11C5, A1B11C6, A1B11C7, A1B11C8 A1B11C9, A1B11C10, A1B11C11, A1B11C12, A1B11C13, A1B11C14 A1B11C15, A1B11C16, A1B11C17, A1B11C18, A1B11C19, A1B11C20 A1B11C21, A1B12C1, A1B12C2, A1B12C3, A1B12C4, A1B12C5, A1B12C6 A1B12C7, A1B12C8, A1B12C9, A1B12C10, A1B12C11, A1B12C12 A1B12C13, A1B12C14, A1B12C15, A1B12C16, A1B12C17, A1B12C18 A1B12C19, A1B12C20, A1B12C21, A2B1C1, A2B1C2, A2B1C3, A2B1C4 A2B1C5, A2B1C6, A2B1C7, A2B1C8, A2B1C9, A2B1C10, A2B1C11 A2B1C12, A2B1C13, A2B1C14, A2B1C15, A2B1C16, A2B1C17, A2B1C18 A2B1C19, A2B1C20, A2B1C21, A2B2C1, A2B2C2, A2B2C3, A2B2C4 A2B2C5, A2B2C6, A2B2C7, A2B2C8, A2B2C9, A2B2C10, A2B2C11 A2B2C12, A2B2C13, A2B2C14, A2B2C15, A2B2C16, A2B2C17, A2B2C18 A2B2C19, A2B2C20, A2B2C21, A2B3C1, A2B3C2, A2B3C3, A2B3C4 A2B3C5, A2B3C6, A2B3C7, A2B3C8, A2B3C9, A2B3C10, A2B3C11 A2B3C12, A2B3C13, A2B3C14, A2B3C15, A2B3C16, A2B3C17, A2B3C18 A2B3C19, A2B3C20, A2B3C21, A2B4C1, A2B4C2, A2B4C3, A2B4C4 A2B4C5, A2B4C6, A2B4C7, A2B4C8, A2B4C9, A2B4C10, A2B4C11 A2B4C12, A2B4C13, A2B4C14, A2B4C15, A2B4C16, A2B4C17, A2B4C18 A2B4C19, A2B4C20, A2B4C21, A2B5C1, A2B5C2, A2B5C3, A2B5C4 A2B5C5, A2B5C6, A2B5C7, A2B5C8, A2B5C9, A2B5C10, A2B5C11 A2B5C12, A2B5C13, A2B5C14, A2B5C15, A2B5C16, A2B5C17, A2B5C18 A2B5C19, A2B5C20, A2B5C21, A2B6C1, A2B6C2, A2B6C3, A2B6C4 A2B6C5, A2B6C6, A2B6C7, A2B6C8, A2B6C9, A2B6C10, A2B6C11 A2B6C12, A2B6C13, A2B6C14, A2B6C15, A2B6C16, A2B6C17, A2B6C18 A2B6C19, A2B6C20, A2B6C21, A2B7C1, A2B7C2, A2B7C3, A2B7C4 A2B7C5, A2B7C6, A2B7C7, A2B7C8, A2B7C9, A2B7C10, A2B7C11 A2B7C12, A2B7C13, A2B7C14, A2B7C15, A2B7C16, A2B7C17, A2B7C18 A2B7C19, A2B7C20, A2B7C21, A2B8C1, A2B8C2, A2B8C3, A2B8C4 A2B8C5, A2B8C6, A2B8C7, A2B8C8, A2B8C9, A2B8C10, A2B8C11 A2B8C12, A2B8C13, A2B8C14, A2B8C15, A2B8C16, A2B8C17, A2B8C18
А2В8С19, А2В8С20, А2В8С21, А2В9С1, А2В9С2, А2В9СЗ, А2В9С4 А2В9С5, А2В9С6, А2В9С7, А2В9С8, А2В9С9, А2В9С10, А2В9С11 А2В9С12, А2В9С13, А2В9С14, А2В9С15, А2В9С16, А2В9С17, А2В9С18 А2В9С19, А2В9С20, А2В9С21, А2В10С1, А2В10С2, А2В10СЗ, А2В10С4 А2В10С5, А2В10С6, А2В10С7, А2В10С8, А2В10С9, А2В10С10, А2В10С11 А2В10С12, А2В10С13, А2В10С14, А2В10С15, А2В10С16, А2В10С17 А2В10С18, А2В10С19, А2В10С20, А2В10С21, А2В11С1, А2В11С2 А2В11СЗ, А2В11С4, А2В11С5, А2В11С6, А2В11С7, А2В11С8, А2В11С9 А2В11С10, А2В11С11, А2В11С12, А2В11С13, А2В11С14, А2В11С15 А2В11С16, А2В11С17, А2В11С18, А2В11С19, А2В11С20, А2В11С21 А2В12С1, А2В12С2, А2В12СЗ, А2В12С4, А2В12С5, А2В12С6, А2В12С7 А2В12С8, А2В12С9, А2В12С10, А2В12С11, А2В12С12, А2В12С13 А2В12С14, А2В12С15, А2В12С16, А2В12С17, А2В12С18, А2В12С19 А2В12С20, А2В12С21, АЗВ1С1, АЗВ1С2, АЗВ1СЗ, АЗВ1С4, АЗВ1С5 АЗВ1С6, АЗВ1С7, АЗВ1С8, АЗВ1С9, АЗВ1С10, АЗВ1С11, АЗВ1С12 АЗВ1С13, АЗВ1С14, АЗВ1С15, АЗВ1С16, АЗВ1С17, АЗВ1С18, АЗВ1С19 АЗВ1С20, АЗВ1С21, АЗВ2С1, АЗВ2С2, АЗВ2СЗ, АЗВ2С4, АЗВ2С5 АЗВ2С6, АЗВ2С7, АЗВ2С8, АЗВ2С9, АЗВ2С10, АЗВ2С11, АЗВ2С12 АЗВ2С13, АЗВ2С14, АЗВ2С15, АЗВ2С16, АЗВ2С17, АЗВ2С18, АЗВ2С19 АЗВ2С20, АЗВ2С21, АЗВЗС1, АЗВЗС2, АЗВЗСЗ, АЗВЗС4, АЗВЗС5 АЗВЗСб, АЗВЗС7, АЗВЗС8, АЗВЗС9, АЗВЗС10, АЗВЗС11, АЗВЗС12 АЗВЗС13, АЗВЗС14, АЗВЗС15, АЗВЗС16, АЗВЗС17, АЗВЗС18, АЗВЗС19 АЗВЗС20, АЗВЗС21, АЗВ4С1, АЗВ4С2, АЗВ4СЗ, АЗВ4С4, АЗВ4С5 АЗВ4С6, АЗВ4С7, АЗВ4С8, АЗВ4С9, АЗВ4С10, АЗВ4С11, АЗВ4С12 АЗВ4С13, АЗВ4С14, АЗВ4С15, АЗВ4С16, АЗВ4С17, АЗВ4С18, АЗВ4С19 АЗВ4С20, АЗВ4С21, АЗВ5С1, АЗВ5С2, АЗВ5СЗ, АЗВ5С4, АЗВ5С5 АЗВ5С6, АЗВ5С7, АЗВ5С8, АЗВ5С9, АЗВ5С10, АЗВ5С11, АЗВ5С12 АЗВ5С13, АЗВ5С14, АЗВ5С15, АЗВ5С16, АЗВ5С17, АЗВ5С18, АЗВ5С19 АЗВ5С20, АЗВ5С21, АЗВ6С1, АЗВ6С2, АЗВбСЗ, АЗВ6С4, АЗВ6С5 АЗВбСб, АЗВ6С7, АЗВ6С8, АЗВ6С9, АЗВ6С10, АЗВ6С11, АЗВ6С12 АЗВ6С13, АЗВ6С14, АЗВ6С15, АЗВ6С16, АЗВ6С17, АЗВ6С18, АЗВ6С19 АЗВ6С20, АЗВ6С21, АЗВ7С1, АЗВ7С2, АЗВ7СЗ, АЗВ7С4, АЗВ7С5 АЗВ7С6, АЗВ7С7, АЗВ7С8, АЗВ7С9, АЗВ7С10, АЗВ7С11, АЗВ7С12 АЗВ7С13, АЗВ7С14, АЗВ7С15, АЗВ7С16, АЗВ7С17, АЗВ7С18, АЗВ7С19 АЗВ7С20, АЗВ7С21, АЗВ8С1, АЗВ8С2, АЗВ8СЗ, АЗВ8С4, АЗВ8С5 АЗВ8С6, АЗВ8С7, АЗВ8С8, АЗВ8С9, АЗВ8С10, АЗВ8С11, АЗВ8С12
АЗВ8С13, АЗВ8С14, АЗВ8С15, АЗВ8С16, АЗВ8С17, АЗВ8С18, АЗВ8С19 АЗВ8С20, АЗВ8С21, АЗВ9С1, АЗВ9С2, АЗВ9СЗ, АЗВ9С4, АЗВ9С5 АЗВ9С6, АЗВ9С7, АЗВ9С8, АЗВ9С9, АЗВ9С10, АЗВ9С11, АЗВ9С12 АЗВ9С13, АЗВ9С14, АЗВ9С15, АЗВ9С16, АЗВ9С17, АЗВ9С18, АЗВ9С19 АЗВ9С20, АЗВ9С21, АЗВ10С1, АЗВ10С2, АЗВ10СЗ, АЗВ10С4, АЗВ10С5 АЗВ10С6, АЗВ10С7, АЗВ10С8, АЗВ10С9, АЗВ10С10, АЗВ10С11 АЗВ10С12, АЗВ10С13, АЗВ10С14, АЗВ10С15, АЗВ10С16, АЗВ10С17 АЗВ10С18, АЗВ10С19, АЗВ10С20, АЗВ10С21, АЗВ11С1, АЗВ11С2 АЗВ11СЗ, АЗВ11С4, АЗВ11С5, АЗВ11С6, АЗВ11С7, АЗВ11С8, АЗВ11С9 АЗВ11С10, АЗВ11С11, АЗВ11С12, АЗВ11С13, АЗВ11С14, АЗВ11С15 АЗВ11С16, АЗВ11С17, АЗВ11С18, АЗВ11С19, АЗВ11С20, АЗВ11С21 АЗВ12С1, АЗВ12С2, АЗВ12СЗ, АЗВ12С4, АЗВ12С5, АЗВ12С6, АЗВ12С7 АЗВ12С8, АЗВ12С9, АЗВ12С10, АЗВ12С11, АЗВ12С12, АЗВ12С13 АЗВ12С14, АЗВ12С15, АЗВ12С16, АЗВ12С17, АЗВ12С18, АЗВ12С19 АЗВ12С20, АЗВ12С21, А4В1С1, А4В1С2, А4В1СЗ, А4В1С4, А4В1С5
А4В1С6,
А4В1С7,
А4В1С8,
А4В1С9,
А4В1С10,
А4В1С11,
А4В1С12
А4В1С13,
А4В1С14,
А4В1С15,
А4В1С16,
А4В1С17,
А4В1С18,
А4В1С19
А4В1С20,
А4В1С21,
А4В2С1,
А4В2С2,
А4В2СЗ,
А4В2С4,
А4В2С5
А4В2С6,
А4В2С7,
А4В2С8,
А4В2С9,
А4В2С10,
А4В2С11,
А4В2С12
А4В2С13,
А4В2С14,
А4В2С15,
А4В2С16,
А4В2С17,
А4В2С18,
А4В2С19
А4В2С20,
А4В2С21,
А4ВЗС1,
А4ВЗС2,
А4ВЗСЗ,
А4ВЗС4,
А4ВЗС5
А4ВЗС6,
А4ВЗС7,
А4ВЗС8,
А4ВЗС9,
А4ВЗС10,
А4ВЗС11,
А4ВЗС12
А4ВЗС13,
А4ВЗС14,
А4ВЗС15,
А4ВЗС16,
А4ВЗС17,
А4ВЗС18,
А4ВЗС19
А4ВЗС20,
А4ВЗС21,
А4В4С1,
А4В4С2,
А4В4СЗ,
А4В4С4,
А4В4С5
А4В4С6,
А4В4С7,
А4В4С8,
А4В4С9,
А4В4С10,
А4В4С11,
А4В4С12
А4В4С13,
А4В4С14,
А4В4С15,
А4В4С16,
А4В4С17,
А4В4С18,
А4В4С19
А4В4С20,
А4В4С21,
А4В5С1,
А4В5С2,
А4В5СЗ,
А4В5С4,
А4В5С5
А4В5С6,
А4В5С7,
А4В5С8,
А4В5С9,
А4В5С10,
А4В5С11,
А4В5С12
А4В5С13,
А4В5С14,
А4В5С15,
А4В5С16,
А4В5С17,
А4В5С18,
А4В5С19
А4В5С20,
А4В5С21,
А4В6С1,
А4В6С2,
А4В6СЗ,
А4В6С4,
А4В6С5
А4В6С6,
А4В6С7,
А4В6С8,
А4В6С9,
А4В6С10,
А4В6С11,
А4В6С12
А4В6С13,
А4В6С14,
А4В6С15,
А4В6С16,
А4В6С17,
А4В6С18,
А4В6С19
А4В6С20,
А4В6С21,
А4В7С1,
А4В7С2,
А4В7СЗ,
А4В7С4,
А4В7С5
А4В7С6,
А4В7С7,
А4В7С8,
А4В7С9,
А4В7С10,
А4В7С11,
А4В7С12
А4В7С13,
А4В7С14,
А4В7С15,
А4В7С16,
А4В7С17,
А4В7С18,
А4В7С19
А4В7С20,
А4В7С21,
А4В8С1,
А4В8С2,
А4В8СЗ,
А4В8С4,
А4В8С5
А4В8С6, А4В8С7, А4В8С8, А4В8С9, А4В8С10, А4В8С11, А4В8С12 А4В8С13, А4В8С14, А4В8С15, А4В8С16, А4В8С17, А4В8С18, А4В8С19 А4В8С20, А4В8С21, А4В9С1, А4В9С2, А4В9СЗ, А4В9С4, А4В9С5 А4В9С6, А4В9С7, А4В9С8, А4В9С9, А4В9С10, А4В9С11, А4В9С12 А4В9С13, А4В9С14, А4В9С15, А4В9С16, А4В9С17, А4В9С18, А4В9С19 А4В9С20, А4В9С21, А4В10С1, А4В10С2, А4В10СЗ, А4В10С4, А4В10С5 А4В10С6, А4В10С7, А4В10С8, А4В10С9, А4В10С10, А4В10С11 А4В10С12, А4В10С13, А4В10С14, А4В10С15, А4В10С16, А4В10С17 А4В10С18, А4В10С19, А4В10С20, А4В10С21, А4В11С1, А4В11С2 А4В11СЗ, А4В11С4, А4В11С5, А4В11С6, А4В11С7, А4В11С8, А4В11С9 А4В11С10, А4В11С11, А4В11С12, А4В11С13, А4В11С14, А4В11С15 А4В11С16, А4В11С17, А4В11С18, А4В11С19, А4В11С20, А4В11С21 А4В12С1, А4В12С2, А4В12СЗ, А4В12С4, А4В12С5, А4В12С6, А4В12С7 А4В12С8, А4В12С9, А4В12С10, А4В12С11, А4В12С12, А4В12С13 А4В12С14, А4В12С15, А4В12С16, А4В12С17, А4В12С18, А4В12С19 А4В12С20, А4В12С21, А5В1С1, А5В1С2, А5В1СЗ, А5В1С4, А5В1С5 А5В1С6, А5В1С7, А5В1С8, А5В1С9, А5В1С10, А5В1С11, А5В1С12 А5В1С13, А5В1С14, А5В1С15, А5В1С16, А5В1С17, А5В1С18, А5В1С19 А5В1С20, А5В1С21, А5В2С1, А5В2С2, А5В2СЗ, А5В2С4, А5В2С5 А5В2С6, А5В2С7, А5В2С8, А5В2С9, А5В2С10, А5В2С11, А5В2С12 А5В2С13, А5В2С14, А5В2С15, А5В2С16, А5В2С17, А5В2С18, А5В2С19 А5В2С20, А5В2С21, А5ВЗС1, А5ВЗС2, А5ВЗСЗ, А5ВЗС4, А5ВЗС5 А5ВЗС6, А5ВЗС7, А5ВЗС8, А5ВЗС9, А5ВЗС10, А5ВЗС11, А5ВЗС12 А5ВЗС13, А5ВЗС14, А5ВЗС15, А5ВЗС16, А5ВЗС17, А5ВЗС18, А5ВЗС19 А5ВЗС20, А5ВЗС21, А5В4С1, А5В4С2, А5В4СЗ, А5В4С4, А5В4С5 А5В4С6, А5В4С7, А5В4С8, А5В4С9, А5В4С10, А5В4С11, А5В4С12 А5В4С13, А5В4С14, А5В4С15, А5В4С16, А5В4С17, А5В4С18, А5В4С19 А5В4С20, А5В4С21, А5В5С1, А5В5С2, А5В5СЗ, А5В5С4, А5В5С5 А5В5С6, А5В5С7, А5В5С8, А5В5С9, А5В5С10, А5В5С11, А5В5С12 А5В5С13, А5В5С14, А5В5С15, А5В5С16, А5В5С17, А5В5С18, А5В5С19 А5В5С20, А5В5С21, А5В6С1, А5В6С2, А5В6СЗ, А5В6С4, А5В6С5 А5В6С6, А5В6С7, А5В6С8, А5В6С9, А5В6С10, А5В6С11, А5В6С12 А5В6С13, А5В6С14, А5В6С15, А5В6С16, А5В6С17, А5В6С18, А5В6С19 А5В6С20, А5В6С21, А5В7С1, А5В7С2, А5В7СЗ, А5В7С4, А5В7С5 А5В7С6, А5В7С7, А5В7С8, А5В7С9, А5В7С10, А5В7С11, А5В7С12 А5В7С13, А5В7С14, А5В7С15, А5В7С16, А5В7С17, А5В7С18, А5В7С19
А5В7С20,
А5В7С21,
А5В8С1, А5В8С2, А5В8СЗ,
А5В8С4,
А5В8С5
А5В8С6,
А5В8С7,
А5В8С8, А5В8С9, А5В8С10,
А5В8С11,
А5В8С12
А5В8С13,
А5В8С14,
А5В8С15, А5В8С16, А5В8С17,
А5В8С18,
А5В8С19
А5В8С20,
А5В8С21,
А5В9С1, А5В9С2, А5В9СЗ,
А5В9С4,
А5В9С5
А5В9С6,
А5В9С7,
А5В9С8, А5В9С9, А5В9С10,
А5В9С11,
А5В9С12
А5В9С13,
А5В9С14,
А5В9С15, А5В9С16, А5В9С17,
А5В9С18,
А5В9С19
А5В9С20,
А5В9С21,
А5В10С1, А5В10С2, А5В10СЗ,
А5В10С4,
А5В10С5
А5В10С6,
А5В10С7
, А5В10С8, А5В10С9, А5В10С10,
А5В10С11
А5В10С12,
А5В10С13, А5В10С14, А5В10С15, А5В10С16,
А5В10С17
А5В10С18,
А5В10С19, А5В10С20, А5В10С21,
А5В11С1,
А5В11С2
А5В11СЗ,
А5В11С4,
А5В11С5, А5В11С6, А5В11С7,
А5В11С8,
А5В11С9
А5В11С10,
А5В11С11, А5В11С12, А5В11С13, А5В11С14,
А5В11С15
А5В11С16,
А5В11С17, А5В11С18, А5В11С19, А5В11С20,
А5В11С21
А5В12С1,
А5В12С2,
А5В12СЗ, А5В12С4, А5В12С5,
А5В12С6,
А5В12С7
А5В12С8,
А5В12С9,
А5В12С10, А5В12С11, А5В12С12,
А5В12С13
А5В12С14,
А5В12С15, А5В12С16, А5В12С17, А5В12С18,
А5В12С19
А5В12С20,
А5В12С21, А6В1С1, А6В1С2, А6В1СЗ
, А6В1С4,
А6В1С5
А6В1С6,
А6В1С7,
А6В1С8, А6В1С9, А6В1С10,
А6В1С11,
А6В1С12
А6В1С13,
А6В1С14,
А6В1С15, А6В1С16, А6В1С17,
А6В1С18,
А6В1С19
А6В1С20,
А6В1С21,
А6В2С1, А6В2С2, А6В2СЗ,
А6В2С4,
А6В2С5
А6В2С6,
А6В2С7,
А6В2С8, А6В2С9, А6В2С10,
А6В2С11,
А6В2С12
А6В2С13,
А6В2С14,
А6В2С15, А6В2С16, А6В2С17,
А6В2С18,
А6В2С19
А6В2С20,
А6В2С21,
А6ВЗС1, А6ВЗС2, АбВЗСЗ,
А6ВЗС4,
А6ВЗС5
АбВЗСб,
А6ВЗС7,
А6ВЗС8, А6ВЗС9, А6ВЗС10,
А6ВЗС11,
А6ВЗС12
А6ВЗС13,
А6ВЗС14,
А6ВЗС15, А6ВЗС16, А6ВЗС17,
А6ВЗС18,
А6ВЗС19
А6ВЗС20,
А6ВЗС21,
А6В4С1, А6В4С2, А6В4СЗ,
А6В4С4,
А6В4С5
А6В4С6,
А6В4С7,
А6В4С8, А6В4С9, А6В4С10,
А6В4С11,
А6В4С12
А6В4С13,
А6В4С14,
А6В4С15, А6В4С16, А6В4С17,
А6В4С18,
А6В4С19
А6В4С20,
А6В4С21,
А6В5С1, А6В5С2, А6В5СЗ,
А6В5С4,
А6В5С5
А6В5С6,
А6В5С7,
А6В5С8, А6В5С9, А6В5С10,
А6В5С11,
А6В5С12
А6В5С13,
А6В5С14,
А6В5С15, А6В5С16, А6В5С17,
А6В5С18,
А6В5С19
А6В5С20,
А6В5С21,
А6В6С1, А6В6С2, АбВбСЗ,
А6В6С4,
А6В6С5
АбВбСб,
А6В6С7,
А6В6С8, А6В6С9, А6В6С10,
А6В6С11,
А6В6С12
А6В6С13,
А6В6С14,
А6В6С15, А6В6С16, А6В6С17,
А6В6С18,
А6В6С19
А6В6С20,
А6В6С21,
А6В7С1, А6В7С2, А6В7СЗ,
А6В7С4,
А6В7С5
А6В7С6,
А6В7С7,
А6В7С8, А6В7С9, А6В7С10,
А6В7С11,
А6В7С12
А6В7С13, А6В7С14, А6В7С15, А6В7С16, А6В7С17, А6В7С18, А6В7С19 А6В7С20, А6В7С21, А6В8С1, А6В8С2, А6В8СЗ, А6В8С4, А6В8С5 А6В8С6, А6В8С7, А6В8С8, А6В8С9, А6В8С10, А6В8С11, А6В8С12 А6В8С13, А6В8С14, А6В8С15, А6В8С16, А6В8С17, А6В8С18, А6В8С19 А6В8С20, А6В8С21, А6В9С1, А6В9С2, А6В9СЗ, А6В9С4, А6В9С5 А6В9С6, А6В9С7, А6В9С8, А6В9С9, А6В9С10, А6В9С11, А6В9С12 А6В9С13, А6В9С14, А6В9С15, А6В9С16, А6В9С17, А6В9С18, А6В9С19 А6В9С20, А6В9С21, А6В10С1, А6В10С2, А6В10СЗ, А6В10С4, А6В10С5 А6В10С6, А6В10С7, А6В10С8, А6В10С9, А6В10С10, А6В10С11 А6В10С12, А6В10С13, А6В10С14, А6В10С15, А6В10С16, А6В10С17 А6В10С18, А6В10С19, А6В10С20, А6В10С21, А6В11С1, А6В11С2 А6В11СЗ, А6В11С4, А6В11С5, А6В11С6, А6В11С7, А6В11С8, А6В11С9 А6В11С10, А6В11С11, А6В11С12, А6В11С13, А6В11С14, А6В11С15 А6В11С16, А6В11С17, А6В11С18, А6В11С19, А6В11С20, А6В11С21 А6В12С1, А6В12С2, А6В12СЗ, А6В12С4, А6В12С5, А6В12С6, А6В12С7 А6В12С8, А6В12С9, А6В12С10, А6В12С11, А6В12С12, А6В12С13 А6В12С14, А6В12С15, А6В12С16, А6В12С17, А6В12С18, А6В12С19 А6В12С20, А6В12С21, А7В1С1, А7В1С2, А7В1СЗ, А7В1С4, А7В1С5 А7В1С6, А7В1С7, А7В1С8, А7В1С9, А7В1С10, А7В1С11, А7В1С12 А7В1С13, А7В1С14, А7В1С15, А7В1С16, А7В1С17, А7В1С18, А7В1С19 А7В1С20, А7В1С21, А7В2С1, А7В2С2, А7В2СЗ, А7В2С4, А7В2С5 А7В2С6, А7В2С7, А7В2С8, А7В2С9, А7В2С10, А7В2С11, А7В2С12 А7В2С13, А7В2С14, А7В2С15, А7В2С16, А7В2С17, А7В2С18, А7В2С19 А7В2С20, А7В2С21, А7ВЗС1, А7ВЗС2, А7ВЗСЗ, А7ВЗС4, А7ВЗС5 А7ВЗС6, А7ВЗС7, А7ВЗС8, А7ВЗС9, А7ВЗС10, А7ВЗС11, А7ВЗС12 А7ВЗС13, А7ВЗС14, А7ВЗС15, А7ВЗС16, А7ВЗС17, А7ВЗС18, А7ВЗС19 А7ВЗС20, А7ВЗС21, А7В4С1, А7В4С2, А7В4СЗ, А7В4С4, А7В4С5 А7В4С6, А7В4С7, А7В4С8, А7В4С9, А7В4С10, А7В4С11, А7В4С12 А7В4С13, А7В4С14, А7В4С15, А7В4С16, А7В4С17, А7В4С18, А7В4С19 А7В4С20, А7В4С21, А7В5С1, А7В5С2, А7В5СЗ, А7В5С4, А7В5С5 А7В5С6, А7В5С7, А7В5С8, А7В5С9, А7В5С10, А7В5С11, А7В5С12 А7В5С13, А7В5С14, А7В5С15, А7В5С16, А7В5С17, А7В5С18, А7В5С19 А7В5С20, А7В5С21, А7В6С1, А7В6С2, А7В6СЗ, А7В6С4, А7В6С5 А7В6С6, А7В6С7, А7В6С8, А7В6С9, А7В6С10, А7В6С11, А7В6С12 А7В6С13, А7В6С14, А7В6С15, А7В6С16, А7В6С17, А7В6С18, А7В6С19 А7В6С20, А7В6С21, А7В7С1, А7В7С2, А7В7СЗ, А7В7С4, А7В7С5
А7В7С6, А7В7С7, А7В7С8, А7В7С9, А7В7С10, А7В7С11, А7В7С12 А7В7С13, А7В7С14, А7В7С15, А7В7С16, А7В7С17, А7В7С18, А7В7С19 А7В7С20, А7В7С21, А7В8С1, А7В8С2, А7В8СЗ, А7В8С4, А7В8С5 А7В8С6, А7В8С7, А7В8С8, А7В8С9, А7В8С10, А7В8С11, А7В8С12 А7В8С13, А7В8С14, А7В8С15, А7В8С16, А7В8С17, А7В8С18, А7В8С19 А7В8С20, А7В8С21, А7В9С1, А7В9С2, А7В9СЗ, А7В9С4, А7В9С5 А7В9С6, А7В9С7, А7В9С8, А7В9С9, А7В9С10, А7В9С11, А7В9С12 А7В9С13, А7В9С14, А7В9С15, А7В9С16, А7В9С17, А7В9С18, А7В9С19 А7В9С20, А7В9С21, А7В10С1, А7В10С2, А7В10СЗ, А7В10С4, А7В10С5 А7В10С6, А7В10С7, А7В10С8, А7В10С9, А7В10С10, А7В10С11 А7В10С12, А7В10С13, А7В10С14, А7В10С15, А7В10С16, А7В10С17 А7В10С18, А7В10С19, А7В10С20, А7В10С21, А7В11С1, А7В11С2 А7В11СЗ, А7В11С4, А7В11С5, А7В11С6, А7В11С7, А7В11С8, А7В11С9 А7В11С10, А7В11С11, А7В11С12, А7В11С13, А7В11С14, А7В11С15 А7В11С16, А7В11С17, А7В11С18, А7В11С19, А7В11С20, А7В11С21 А7В12С1, А7В12С2, А7В12СЗ, А7В12С4, А7В12С5, А7В12С6, А7В12С7 А7В12С8, А7В12С9, А7В12С10, А7В12С11, А7В12С12, А7В12С13 А7В12С14, А7В12С15, А7В12С16, А7В12С17, А7В12С18, А7В12С19 А7В12С20, А7В12С21, А8В1С1, А8В1С2, А8В1СЗ, А8В1С4, А8В1С5 А8В1С6, А8В1С7, А8В1С8, А8В1С9, А8В1С10, А8В1С11, А8В1С12 А8В1С13, А8В1С14, А8В1С15, А8В1С16, А8В1С17, А8В1С18, А8В1С19 А8В1С20, А8В1С21, А8В2С1, А8В2С2, А8В2СЗ, А8В2С4, А8В2С5 А8В2С6, А8В2С7, А8В2С8, А8В2С9, А8В2С10, А8В2С11, А8В2С12 А8В2С13, А8В2С14, А8В2С15, А8В2С16, А8В2С17, А8В2С18, А8В2С19 А8В2С20, А8В2С21, А8ВЗС1, А8ВЗС2, А8ВЗСЗ, А8ВЗС4, А8ВЗС5 А8ВЗС6, А8ВЗС7, А8ВЗС8, А8ВЗС9, А8ВЗС10, А8ВЗС11, А8ВЗС12 А8ВЗС13, А8ВЗС14, А8ВЗС15, А8ВЗС16, А8ВЗС17, А8ВЗС18, А8ВЗС19 А8ВЗС20, А8ВЗС21, А8В4С1, А8В4С2, А8В4СЗ, А8В4С4, А8В4С5 А8В4С6, А8В4С7, А8В4С8, А8В4С9, А8В4С10, А8В4С11, А8В4С12 А8В4С13, А8В4С14, А8В4С15, А8В4С16, А8В4С17, А8В4С18, А8В4С19 А8В4С20, А8В4С21, А8В5С1, А8В5С2, А8В5СЗ, А8В5С4, А8В5С5 А8В5С6, А8В5С7, А8В5С8, А8В5С9, А8В5С10, А8В5С11, А8В5С12 А8В5С13, А8В5С14, А8В5С15, А8В5С16, А8В5С17, А8В5С18, А8В5С19 А8В5С20, А8В5С21, А8В6С1, А8В6С2, А8В6СЗ, А8В6С4, А8В6С5 А8В6С6, А8В6С7, А8В6С8, А8В6С9, А8В6С10, А8В6С11, А8В6С12 А8В6С13, А8В6С14, А8В6С15, А8В6С16, А8В6С17, А8В6С18, А8В6С19
А8В6С20, А8В6С21, А8В7С1, А8В7С2, А8В7СЗ, А8В7С4, А8В7С5 А8В7С6, А8В7С7, А8В7С8, А8В7С9, А8В7С10, А8В7С11, А8В7С12 А8В7С13, А8В7С14, А8В7С15, А8В7С16, А8В7С17, А8В7С18, А8В7С19 А8В7С20, А8В7С21, А8В8С1, А8В8С2, А8В8СЗ, А8В8С4, А8В8С5 А8В8С6, А8В8С7, А8В8С8, А8В8С9, А8В8С10, А8В8С11, А8В8С12 А8В8С13, А8В8С14, А8В8С15, А8В8С16, А8В8С17, А8В8С18, А8В8С19 А8В8С20, А8В8С21, А8В9С1, А8В9С2, А8В9СЗ, А8В9С4, А8В9С5 А8В9С6, А8В9С7, А8В9С8, А8В9С9, А8В9С10, А8В9С11, А8В9С12 А8В9С13, А8В9С14, А8В9С15, А8В9С16, А8В9С17, А8В9С18, А8В9С19 А8В9С20, А8В9С21, А8В10С1, А8В10С2, А8В10СЗ, А8В10С4, А8В10С5 А8В10С6, А8В10С7, А8В10С8, А8В10С9, А8В10С10, А8В10С11 А8В10С12, А8В10С13, А8В10С14, А8В10С15, А8В10С16, А8В10С17 А8В10С18, А8В10С19, А8В10С20, А8В10С21, А8В11С1, А8В11С2 А8В11СЗ, А8В11С4, А8В11С5, А8В11С6, А8В11С7, А8В11С8, А8В11С9 А8В11С10, А8В11С11, А8В11С12, А8В11С13, А8В11С14, А8В11С15 А8В11С16, А8В11С17, А8В11С18, А8В11С19, А8В11С20, А8В11С21 А8В12С1, А8В12С2, А8В12СЗ, А8В12С4, А8В12С5, А8В12С6, А8В12С7 А8В12С8, А8В12С9, А8В12С10, А8В12С11, А8В12С12, А8В12С13 А8В12С14, А8В12С15, А8В12С16, А8В12С17, А8В12С18, А8В12С19 А8В12С20, А8В12С21, А9В1С1, А9В1С2, А9В1СЗ, А9В1С4, А9В1С5 А9В1С6, А9В1С7, А9В1С8, А9В1С9, А9В1С10, А9В1С11, А9В1С12 А9В1С13, А9В1С14, А9В1С15, А9В1С16, А9В1С17, А9В1С18, А9В1С19 А9В1С20, А9В1С21, А9В2С1, А9В2С2, А9В2СЗ, А9В2С4, А9В2С5 А9В2С6, А9В2С7, А9В2С8, А9В2С9, А9В2С10, А9В2С11, А9В2С12 А9В2С13, А9В2С14, А9В2С15, А9В2С16, А9В2С17, А9В2С18, А9В2С19 А9В2С20, А9В2С21, А9ВЗС1, А9ВЗС2, А9ВЗСЗ, А9ВЗС4, А9ВЗС5 А9ВЗС6, А9ВЗС7, А9ВЗС8, А9ВЗС9, А9ВЗС10, А9ВЗС11, А9ВЗС12 А9ВЗС13, А9ВЗС14, А9ВЗС15, А9ВЗС16, А9ВЗС17, А9ВЗС18, А9ВЗС19 А9ВЗС20, А9ВЗС21, А9В4С1, А9В4С2, А9В4СЗ, А9В4С4, А9В4С5 А9В4С6, А9В4С7, А9В4С8, А9В4С9, А9В4С10, А9В4С11, А9В4С12 А9В4С13, А9В4С14, А9В4С15, А9В4С16, А9В4С17, А9В4С18, А9В4С19 А9В4С20, А9В4С21, А9В5С1, А9В5С2, А9В5СЗ, А9В5С4, А9В5С5 А9В5С6, А9В5С7, А9В5С8, А9В5С9, А9В5С10, А9В5С11, А9В5С12 А9В5С13, А9В5С14, А9В5С15, А9В5С16, А9В5С17, А9В5С18, А9В5С19 А9В5С20, А9В5С21, А9В6С1, А9В6С2, А9В6СЗ, А9В6С4, А9В6С5 А9В6С6, А9В6С7, А9В6С8, А9В6С9, А9В6С10, А9В6С11, А9В6С12
А9В6С13, А9В6С14, А9В6С15, А9В6С16, А9В6С17, А9В6С18, А9В6С19 А9В6С20, А9В6С21, А9В7С1, А9В7С2, А9В7СЗ, А9В7С4, А9В7С5 А9В7С6, А9В7С7, А9В7С8, А9В7С9, А9В7С10, А9В7С11, А9В7С12 А9В7С13, А9В7С14, А9В7С15, А9В7С16, А9В7С17, А9В7С18, А9В7С19 А9В7С20, А9В7С21, А9В8С1, А9В8С2, А9В8СЗ, А9В8С4, А9В8С5 А9В8С6, А9В8С7, А9В8С8, А9В8С9, А9В8С10, А9В8С11, А9В8С12 А9В8С13, А9В8С14, А9В8С15, А9В8С16, А9В8С17, А9В8С18, А9В8С19 А9В8С20, А9В8С21, А9В9С1, А9В9С2, А9В9СЗ, А9В9С4, А9В9С5 А9В9С6, А9В9С7, А9В9С8, А9В9С9, А9В9С10, А9В9С11, А9В9С12 А9В9С13, А9В9С14, А9В9С15, А9В9С16, А9В9С17, А9В9С18, А9В9С19 А9В9С20, А9В9С21, А9В10С1, А9В10С2, А9В10СЗ, А9В10С4, А9В10С5 А9В10С6, А9В10С7, А9В10С8, А9В10С9, А9В10С10, А9В10С11 А9В10С12, А9В10С13, А9В10С14, А9В10С15, А9В10С16, А9В10С17 А9В10С18, А9В10С19, А9В10С20, А9В10С21, А9В11С1, А9В11С2 А9В11СЗ, А9В11С4, А9В11С5, А9В11С6, А9В11С7, А9В11С8, А9В11С9 А9В11С10, А9В11С11, А9В11С12, А9В11С13, А9В11С14, А9В11С15 А9В11С16, А9В11С17, А9В11С18, А9В11С19, А9В11С20, А9В11С21 А9В12С1, А9В12С2, А9В12СЗ, А9В12С4, А9В12С5, А9В12С6, А9В12С7 А9В12С8, А9В12С9, А9В12С10, А9В12С11, А9В12С12, А9В12С13 А9В12С14, А9В12С15, А9В12С16, А9В12С17, А9В12С18, А9В12С19 А9В12С20, А9В12С21, А10В1С1, A10B1C2, A10B1C3, A10B1C4, A10B1C5 A10B1C6, A10B1C7, A10B1C8, A10B1C9, A10B1C10, A10B1C11 A10B1C12, A10B1C13, A10B1C14, A10B1C15, A10B1C16, A10B1C17 A10B1C18, A10B1C19, A10B1C20, A10B1C21, A10B2C1, A10B2C2 A10B2C3, A10B2C4, A10B2C5, A10B2C6, A10B2C7, A10B2C8, A10B2C9 A10B2C10, A10B2C11, A10B2C12, A10B2C13, A10B2C14, A10B2C15 A10B2C16, A10B2C17, A10B2C18, A10B2C19, A10B2C20, A10B2C21 A10B3C1, A10B3C2, A10B3C3, A10B3C4, A10B3C5, A10B3C6, A10B3C7 A10B3C8, A10B3C9, A10B3C10, A10B3C11, A10B3C12, A10B3C13 A10B3C14, A10B3C15, A10B3C16, A10B3C17, A10B3C18, A10B3C19 A10B3C20, A10B3C21, A10B4C1, A10B4C2, A10B4C3, A10B4C4, A10B4C5 A10B4C6, A10B4C7, A10B4C8, A10B4C9, A10B4C10, A10B4C11 A10B4C12, A10B4C13, A10B4C14, A10B4C15, A10B4C16, A10B4C17 A10B4C18, A10B4C19, A10B4C20, A10B4C21, A10B5C1, A10B5C2 A10B5C3, A10B5C4, A10B5C5, A10B5C6, A10B5C7, A10B5C8, A10B5C9 A10B5C10, A10B5C11, A10B5C12, A10B5C13, A10B5C14, A10B5C15
А10В5С16, А10В5С17, А10В5С18, А10В5С19, А10В5С20, А10В5С21 А10В6С1, А10В6С2, А10В6СЗ, А10В6С4, А10В6С5, А10В6С6, А10В6С7 А10В6С8, А10В6С9, А10В6С10, А10В6С11, А10В6С12, А10В6С13 А10В6С14, А10В6С15, А10В6С16, А10В6С17, А10В6С18, А10В6С19 А10В6С20, А10В6С21, А10В7С1, А10В7С2, А10В7СЗ, А10В7С4, А10В7С5 А10В7С6, А10В7С7, А10В7С8, А10В7С9, А10В7С10, А10В7С11 А10В7С12, А10В7С13, А10В7С14, А10В7С15, А10В7С16, А10В7С17 А10В7С18, А10В7С19, А10В7С20, А10В7С21, А10В8С1, А10В8С2 А10В8СЗ, А10В8С4, А10В8С5, А10В8С6, А10В8С7, А10В8С8, А10В8С9 А10В8С10, А10В8С11, А10В8С12, А10В8С13, А10В8С14, А10В8С15 А10В8С16, А10В8С17, А10В8С18, А10В8С19, А10В8С20, А10В8С21 А10В9С1, А10В9С2, А10В9СЗ, А10В9С4, А10В9С5, А10В9С6, А10В9С7 А10В9С8, А10В9С9, А10В9С10, А10В9С11, А10В9С12, А10В9С13 А10В9С14, А10В9С15, А10В9С16, А10В9С17, А10В9С18, А10В9С19 А10В9С20, А10В9С21, А10В10С1, A10B10C2, A10B10C3, A10B10C4 A10B10C5, A10B10C6, A10B10C7, A10B10C8, A10B10C9, A10B10C10 A10B10C11, A10B10C12, A10B10C13, A10B10C14, A10B10C15 A10B10C16, A10B10C17, A10B10C18, A10B10C19, A10B10C20 A10B10C21, A10B11C1, A10B11C2, A10B11C3, A10B11C4, A10B11C5 A10B11C6, A10B11C7, A10B11C8, A10B11C9, A10B11C10, A10B11C11 A10B11C12, A10B11C13, A10B11C14, A10B11C15, A10B11C16 A10B11C17, A10B11C18, A10B11C19, A10B11C20, A10B11C21, A10B12C1 A10B12C2, A10B12C3, A10B12C4, A10B12C5, A10B12C6, A10B12C7 A10B12C8, A10B12C9, A10B12C10, A10B12C11, A10B12C12, A10B12C13 A10B12C14, A10B12C15, A10B12C16, A10B12C17, A10B12C18 A10B12C19, A10B12C20, A10B12C21, A11B1C1, A11B1C2, A11B1C3 A11B1C4, A11B1C5, A11B1C6, A11B1C7, A11B1C8, A11B1C9, A11B1C10 A11B1C11, A11B1C12, A11B1C13, A11B1C14, A11B1C15, A11B1C16 A11B1C17, A11B1C18, A11B1C19, A11B1C20, A11B1C21, A11B2C1 A11B2C2, A11B2C3, A11B2C4, A11B2C5, A11B2C6, A11B2C7, A11B2C8 A11B2C9, A11B2C10, A11B2C11, A11B2C12, A11B2C13, A11B2C14 A11B2C15, A11B2C16, A11B2C17, A11B2C18, A11B2C19, A11B2C20 A11B2C21, A11B3C1, A11B3C2, A11B3C3, A11B3C4, A11B3C5, A11B3C6 A11B3C7, A11B3C8, A11B3C9, A11B3C10, A11B3C11, A11B3C12 A11B3C13, A11B3C14, A11B3C15, A11B3C16, A11B3C17, A11B3C18 A11B3C19, A11B3C20, A11B3C21, A11B4C1, A11B4C2, A11B4C3
А11В4С4, А11В4С5, А11В4С6, А11В4С7, А11В4С8, А11В4С9, А11В4С10 А11В4С11, А11В4С12, А11В4С13, А11В4С14, А11В4С15, А11В4С16 А11В4С17, А11В4С18, А11В4С19, А11В4С20, А11В4С21, А11В5С1 А11В5С2, А11В5СЗ, А11В5С4, А11В5С5, А11В5С6, А11В5С7, А11В5С8 А11В5С9, А11В5С10, А11В5С11, А11В5С12, А11В5С13, А11В5С14 А11В5С15, А11В5С16, А11В5С17, А11В5С18, А11В5С19, А11В5С20 А11В5С21, А11В6С1, А11В6С2, А11В6СЗ, А11В6С4, А11В6С5, А11В6С6 А11В6С7, А11В6С8, А11В6С9, А11В6С10, А11В6С11, А11В6С12 А11В6С13, А11В6С14, А11В6С15, А11В6С16, А11В6С17, А11В6С18 А11В6С19, А11В6С20, А11В6С21, А11В7С1, А11В7С2, А11В7СЗ А11В7С4, А11В7С5, А11В7С6, А11В7С7, А11В7С8, А11В7С9, А11В7С10 А11В7С11, А11В7С12, А11В7С13, А11В7С14, А11В7С15, А11В7С16 А11В7С17, А11В7С18, А11В7С19, А11В7С20, А11В7С21, А11В8С1 А11В8С2, А11В8СЗ, А11В8С4, А11В8С5, А11В8С6, А11В8С7, А11В8С8 А11В8С9, А11В8С10, А11В8С11, А11В8С12, А11В8С13, А11В8С14 А11В8С15, А11В8С16, А11В8С17, А11В8С18, А11В8С19, А11В8С20 А11В8С21, А11В9С1, А11В9С2, А11В9СЗ, А11В9С4, А11В9С5, А11В9С6 А11В9С7, А11В9С8, А11В9С9, А11В9С10, А11В9С11, А11В9С12 А11В9С13, А11В9С14, А11В9С15, А11В9С16, А11В9С17, А11В9С18 А11В9С19, А11В9С20, А11В9С21, А11В10С1, A11B10C2, A11B10C3 A11B10C4, A11B10C5, A11B10C6, A11B10C7, A11B10C8, A11B10C9 A11B10C10, A11B10C11, A11B10C12, A11B10C13, A11B10C14 A11B10C15, A11B10C16, A11B10C17, A11B10C18, A11B10C19 A11B10C20, A11B10C21, A11B11C1, A11B11C2, A11B11C3, A11B11C4 A11B11C5, A11B11C6, A11B11C7, A11B11C8, A11B11C9, A11B11C10 A11B11C11, A11B11C12, A11B11C13, A11B11C14, A11B11C15 A11B11C16, A11B11C17, A11B11C18, A11B11C19, A11B11C20 A11B11C21, A11B12C1, A11B12C2, A11B12C3, A11B12C4, A11B12C5 A11B12C6, A11B12C7, A11B12C8, A11B12C9, A11B12C10, A11B12C11 A11B12C12, A11B12C13, A11B12C14, A11B12C15, A11B12C16 A11B12C17, A11B12C18, A11B12C19, A11B12C20 или Al1B12C21 . Иллюстративные средства, используемые в комбинациях В настоящем описании описаны способы и композиции, которые включают комбинацию одного, двух или более из: (i) средства, которое усиливает презентацию антигена (например, опухолевого антигена); (ii) средства, которое усиливает ответ эффекторных
клеток (например, активацию и/или мобилизацию В-клеток и/или Т-клеток); или (iii) средства, которое уменьшает иммуносупреесию опухоли, тем самым, осуществляя лечение нарушения, например, гиперпролиферативного состояния или нарушения (например, злокачественной опухоли).
В некоторых вариантах осуществления одно или несколько средств из (i), (ii) и/или (iii), описанных в настоящем описании, можно использовать в комбинации с ингибитором PD-L1 (например, молекулой антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании).
Иллюстративные средства, которые можно использовать в этих комбинациях, представлены в настоящем описании.
Иллюстративные агонисты STING
В одном варианте осуществления комбинация включает агонист STING. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, рак молочной железы, плоскоклеточная карцинома, меланома, рак яичника, карцинома фаллопиевых труб, карцинома брюшины, саркома мягких тканей, меланома, рак молочной железы, рак пищевода, рак головы и шеи, рак эндометрия, рак шейки матки или базально-клеточная карцинома), например, гематологической злокачественной опухоли (например, лейкоз (например, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL) или лимфома (например, В-клеточная лимфома из клеток маргинальной зоны, мелколимфоцитарная лимфома, фолликулярная лимфома, лимфома Ходжкина, неходжкинская лимфома)).
В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой циклический динуклеотид, например, циклический динуклеотид, содержащий пуриновые или пиримидиновые нуклеиновые основания (например, нуклеиновые основания аденозин, гуанин, урацил, тимин или цитозин). В некоторых вариантах осуществления нуклеиновые основания циклического динуклеотида содержат одно и то же нуклеиновое основание или различные нуклеиновые основания.
В некоторых вариантах осуществления агонист STING включает
нуклеиновое основание аденозин или гуанозин. В некоторых вариантах осуществления агонист STING включает одно нуклеиновое основание аденозин и одно нуклеиновое основание гуанозин. В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит два нуклеиновых основания аденозина или два нуклеиновых основания гуанозина.
В некоторых вариантах осуществления агонист STING включает модифицированный циклический динуклеотид, например, содержащий модифицированное нуклеиновое основание, модифицированную рибозу или модифицированную фосфатную связь. В некоторых вариантах осуществления модифицированный циклический динуклеотид содержит модифицированную фосфатную связь, например, тиофосфат.
В некоторых вариантах осуществления агонист STING включает циклический динуклеотид (например, модифицированный циклический динуклеотид) с 2', 5'- или 3', 5'-фосфатными связями. В некоторых вариантах осуществления агонист STING включает циклический динуклеотид (например, модифицированный циклический динуклеотид) со стереохимией Rp или Sp вокруг фосфатных связей.
В некоторых вариантах осуществления агонист STING
представляет собой Rp, Rp-flHTno-2', З'с-ди-АМР (например, Rp,Rp-
дитио-с-[А(2',5')рА(3',5')р]), или его циклический
динуклеотидный аналог. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой соединение, представленное в публикации патента США № US2015/0056224 (например, соединение на фиг.2с, например, соединение 21 или соединение 22). В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой с-[G(2',5')рд(3',5')р], его О-замещенное дитиорибозой производное, или соединение, представленное на фиг.4 публикаций РСТ № W0 2014/189805 и WO 2014/189806. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой с-[А(2',5')рА(3',5')р] или его О-замещенное дитиорибозой производное, или представляет собой соединение, представленное на фиг.5 публикаций РСТ № WO 2014/189805 и WO 2014/189806. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой с-[G(2',5')рА(3',5')р] или его О-замещенное дитиоребозой
производное, или представляет собой соединение, представленное на фиг.5 публикаций РСТ № W0 2014/189805 и WO 2014/189806. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой 2'-О-пропаргил-циклический-[А(2',5')рА(3 ' , 5 ' ) Р ] (2'-0-пропаргил-ML-CDA) или соединение, представленное на фиг.7 публикации РСТ № WO 2014/189806.
Другие иллюстративные агонисты STING описаны, например, в публикациях РСТ № WO 2014/189805 и WO 2014/189806, и в публикации США № 2015/0056225.
Иллюстративные агонисты TLR
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает агонист Toll-подобного рецептора (TLR) . В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, рак молочной железы, плоскоклеточная карцинома, меланома, рак яичника, карцинома фаллопиевых труб, карцинома брюшины, саркома мягких тканей, меланома, рак молочной железы, рак пищевода, рак головы и шеи, рак эндометрия, рак шейки матки или базально-клеточная карцинома), например, гематологической злокачественной опухоли (например, лейкоз (например, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), или лимфома (например, В-клеточная лимфома из клеток маргинальной зоны, мелколимфоцитарная лимфома, фолликулярная лимфома, лимфома Ходжкина, неходжкинская лимфома)).
TLR представляют собой семейство паттерн-распознающих рецепторов, которые первоначально были идентифицированы в качестве сенсоров врожденной иммунной системы, которые распознают микробные патогены. У человека TLR включают TLR-1, TLR-2, TLR-3, TLR-4, TLR-5, TLR-6, TLR-7, TLR-8, TLR-9, и TLR-10. TLR-1, -2, -4, -5 и -6 экспрессируются на поверхности клеток и TLR-3, -7/8 и -9 экспрессируются в компартменте ER. Подгруппы дендритных клеток человека можно идентифицировать на основе различных паттернов экспрессии TLR. Миелоидная или "традиционная" подгруппа дендритных клеток человека экспрессирует TLR 1-8 и плазмацитоидная подгруппа дендритных
клеток экспрессирует только TLR-7 и TLR-9. Связывание лиганда с TLR активизирует каскад внутриклеточных каскадов передачи сигнала, которые индуцируют продукцию факторов, вовлеченных в воспаление и иммунитет. При стимуляции миелоидная подгруппа и плазмацитоидная подгруппа дендритных клеток человека приводит к примированию антигенспецифических CD4+ и CD8+ Т-клеток и активации NK-клеток и Т-клеток, соответственно.
В некоторых вариантах осуществления агонист TLR выбран из одного или нескольких из агониста TLR-1, агониста TLR-2, агониста TLR-3, агониста TLR-4, агониста TLR-5, агониста TLR-6, агониста TLR-7, агониста TLR-8, агониста TLR-9, агониста TLR-10, агониста TLR-1/2, агониста TLR-2/6 или агониста TLR-7/8. В одном варианте осуществления агонист TLR представляет собой агонист TLR7 .
В некоторых вариантах осуществления агонист TLR
представляет собой имиквимод или 3-(2-метилпропил)-3,5,8-
триазатрицикло[7.4.0.02.6]тридека-1(9),2(6),4,7,10,12-гексаен-7-
амин. Имиквимод или 3-(2-метилпропил)-3, 5, 8-
триазатрицикло[7.4.0.02.6]тридека-1(9),2(6),4,7,10,12-гексаен-7-амин может связывать и активировать TLR-7 и/или TLR-8.
В некоторых вариантах осуществления агонист TLR представляет собой 852А. 852А описан, например, в Inglefield et al. J Interferon Cytokine Res. 2008;28 (4) :253-63 . 852A может связывать и активировать TLR-7 и/или TLR-8.
В некоторых вариантах осуществления агонист TLR представляет собой бациллу Кальмета-Герена (BCG). BCG может связывать и активировать TLR-9.
В некоторых вариантах осуществления агонист TLR представляет собой EMD 120108. EMD 120108 представляет собой синтетический олигонуклеотид, содержащий фосфоротиоатный олигодезоксинуклеотид. EMD 12 01081 может связывать и активировать TLR-9, например, в моноцитах/макрофагах, плазмацитоидных дендритных клетках (DC) и В-клетках, инициируя иммунные каскады передачи сигнала, активируя В-клетки и индуцируя продукцию цитокинов Т-хелперными клетками.
В некоторых вариантах осуществления агонист TLR
представляет собой IMO-2055. IMO-2055 представляет собой синтетический олигонуклеотид, содержащий неметилированные CpG-динуклеотиды. Имитируя неметелированные последовательности CpG в бактериальной ДНК, IMO-2 055 может связывать и активировать TLR-9, например, в моноцитах/макрофагах, плазмацитоидных дендритных клетках (DC) и В-клетках, что приводит к инициации иммунных каскадов передачи сигнала, и активации В-клеток и DC, и индукции продукции цитокинов Т-хелперными клетками.
Другие иллюстративные агонисты TLR, которые можно
использовать в комбинации, включают, например, агонисты TLR-1/2
(например, Pam3Cys), агонисты TLR-2 (например, CFA, MALP2,
Pam2Cys, FSL-1 или Hib-OMPC), агонисты TLR-3 (например,
полирибозиновая:полирибоцитидиловая кислота (поли 1:С),
полиаденозин-полиуридиновая кислота (поли AU) , полиинозиновая-полицитидиловая кислота, стабилизированная поли-Ъ-лизином и карбоксиметилцеллюлозой (Hiltonol(r)) ) , агонисты TLR-4 (например, монофосфориллипид A (MPL), LPS, сиалил-Tn (STn)), агонисты TLR-5 (например, бактериальный флагеллин), агонисты TLR-7 (например, имиквимод) , агонисты TLR-7/8 (например, резиквимод или локсорибин) и агонисты TLR-9 (например, неметилированный CpG-динуклеотид (CpG-ODN)).
В другом варианте осуществления агонист TLR используют в комбинации с агонистом GITR, например, как описано в W02004060319 и международной публикации № W02014012479.
Иллюстративные ингибиторы VEGFR
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор рецептора сосудисто-эндотелиального фактора роста (VEGF) (например, ингибитор одного или нескольких из VEGFR (например, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3) или VEGF). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, меланома, рак молочной железы, рак толстого кишечника, рак пищевода, желудочно-кишечная стромальная опухоль (GIST), рак почки (например, почечно
клеточный рак), рак печени, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), рак яичника, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы или рак желудка), например, гематологической злокачественной опухоли (например, лимфома).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор VEGFR представляет собой ваталаниба сукцинат (соединение А47) или соединение, описанное в ЕР 296122.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор VEGFR представляет собой ингибитор одного или нескольких из VEGFR-2, PDGFR-бета, KIT или Raf-киназы С, 1-метил-5-( (2-(5-(трифторметил)-1Н-имидазол-2-ил)пиридин-4-ил)окси)-N-(4-(трифторметил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-амин (соединение А37) или соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2007/030377.
Другие иллюстративные ингибиторы каскада VEGFR, которые
можно использовать в комбинациях, описанных в настоящем
описании, включают, например, бевацизумаб (AVASTIN(r)) , акситиниб
(INLYTA(r)) ; бриваниба аланинат (BMS-582664, (S)-( (R)-1-(4-(4-
фтор-2-метил-1Н-индол-5-илокси)-5-метилпирроло[2,1-
f] [1,2,4]триазин-б-илокси)пропан-2-ил)2-аминопропаноат) ;
сорафениб (NEXAVAR(r)) ; пазопаниб (VOTRIENT(r)) ; сунитиниба малат
(SUTENT(r)) ; седираниб (AZD2171, CAS 2 8 8 3 8 3-20-1); варгатеф
(BIBF1120, CAS 928326-83-4); форетиниб (GSK1363089); телатиниб
(BAY57-9352, CAS 332012-40-5); апатиниб (YN968D1, CAS 811803-05-
1); иматиниб (GLEEVEC(r)) ; понатиниб (АР24534, CAS 943319-70-8);
тивозаниб (AV951, CAS 475108-18-0); регорафениб (BAY73-4506, CAS
755037-03-7); ваталаниба дигидрохлорид (РТК787, CAS 212141-51-
0); бриваниб (BMS-540215, CAS 649735-46-6); вандетаниб
(CAPRELSA(r) или AZD6474); мотесаниба дифосфат (AMG706, CAS
857876-30-3, N-(2,З-дигидро-3,3-диметил-1Н-индол-б-ил)-2-[(4-
пиридинилметил)амино]-3-пиридинкарбоксамид, описанный в
публикации РСТ № WO 02/066470); довитиниб димолочную кислоту
(TKI258, CAS 852433-84-2); линфаниб (АВТ869, CAS 7 9 69 67-16-3);
кабозантиниб (XL184, CAS 849217-68-1); лестауртиниб (CAS 111358-
88-4); N-[5-[[[5-(l,1-диметилэтил)-2-оксазолил]метил]тио]-2-
тиазолил]-4-пиперидинкарбоксамид (BMS38703, CAS 345627-80-7);
(3R,4R)-4-амино-1-((4-((3-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-
f][1,2,4]триазин-5-ил)метил)пиперидин-3-ол (BMS690514); N-(3,4-
дихлор-2-фторфенил) -б-метокси-7- [ [ (Заа, 5(3, баа) -октагидро-2-
метилциклопента[с]пиррол-5-ил]метокси]-4-хиназолинамин (XL647,
CAS 7 81613-23-8); 4-метил-З-[[1-метил-б-(3-пиридинил)-1Н-
пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-ил]амино]-N-[3-
(трифторметил)фенил]бензамид (BHG712, CAS 940310-85-0);
афлиберцепт (EYLEA(r)) и эндостатин (ENDOSTAR(r)) .
Иллюстративные антитела против VEGF включают, но не ограничиваются ими, моноклональное антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и моноклональное антитело против VEGF А4.6.1, продуцируемое гибридомой АТСС НВ 107 09; рекомбинантное гуманизированное моноклональное антитело против VEGF, полученное согласно Presta et al. (1997) Cancer Res. 57:4593-4599. В одном варианте осуществления антитело против VEGF представляет собой бевацизумаб (BV), также известный как rhuMAb VEGF или AVASTIN(r). Оно содержит мутантные каркасные области IgGl человека и антигенсвязывающие определяющие комплементарность области из моноклонального антитела мыши против hVEGF А.4.6.1, которое блокирует связывание VEGF человека с его рецепторами. Бевацизумаб и другие гуманизированные антитела против VEGF, кроме того, описаны в патенте США № 6884879, выданном 2 6 февраля 2005 года. Дополнительные антитела включают антитела серии G6 или В20 (например, G6-31, В20-4.1), как описано в публикации РСТ № WO2005/012359, публикации РСТ № WO2005/044853, содержание этих патентных заявок включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме. Для дополнительных антител см. патенты США № 7060269, 6582959, 6703020, 6054297, W098/45332, WO 96/30046, WO94/10202, ЕР 0666868В1, публикации патентных заявок США № 2006009360, 20050186208, 20030206899, 20030190317, 20030203409 и 20050112126; и Popkov et al, Journal of Immunological Methods 288: 149-164 (2004). Другие антитела включают антитела, которые связываются с функциональным эпитопом на VEGF человека, содержащим остатки F17, М18, D19, Y21, Y25, Q89, 191, К101, Е103 и С104 или альтернативно содержащим остатки F17, Y21, Q22, Y25,
D63, 183 и Q89.
Иллюстративные ингибиторы с-МЕТ
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор с-МЕТ. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, немелкоклеточный рак легкого, рак поджелудочной железы, рак печени, рак щитовидной железы, опухоль головного мозга (например, глиобластома), рак почки (например, почечноклеточный рак), рак головы и шеи (например, плоскоклеточная карцинома головы шеи)).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-МЕТ представляет собой соединение А17 или соединение, описанное в патенте США № 7767675 и 8420645). с-МЕТ - рецепторная тирозинкиназа, сверхэкспрессируемая или мутантная во многих типах опухолевых клеток, играет ключевую роль в пролиферации опухолевых клеток, выживании, инвазии, метастазировании и ангиогенезе опухоли. Ингибирование с-МЕТ может индуцировать клеточную смерть в опухолевых клетках, сверхэкспрессирующих белок с-МЕТ или экспрессирующих конститутивно активированный белок с-МЕТ.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-МЕТ представляет собой JNJ-38877605. JNJ-38877605 представляет собой перорально доступный низкомолекулярный ингибитор с-Met. JNJ-38877605 селективно связывается с с-МЕТ, тем самым, ингибируя фосфорилирование с-МЕТ и нарушая каскады передачи сигнала с-Met.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-Met представляет собой AMG 208. AMG 208 представляет собой селективный низкомолекулярный ингибитор с-МЕТ. AMG 208 ингибирует лиганд-зависимую и лиганд-независимую активацию сМЕТ, ингибируя его тирозинкиназную активность, что может приводить к ингибированию роста клеток в опухолях, которые сверхэкспрессируют с-Met.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-Met представляет собой AMG 337. AMG 337 представляет собой
перорально биодоступный ингибитор с-Met. AMG 337 селективно связывается с с-МЕТ, тем самым, нарушая каскады передачи сигнала с-МЕТ.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-Met представляет собой LY2801653. LY2801653 представляет собой перорально доступный низкомолекулярный ингибитор с-Met. LY2801653 селективно связывается с с-МЕТ, тем самым ингибируя фосфорилирование с-МЕТ и нарушая каскады передачи сигнала с-Met.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-Met представляет собой MSC2156119J. MSC2156119J представляет собой перорально биодоступный ингибитор с-Met. MSC2156119J селективно связывается с с-МЕТ, ингибирует фосфорилирование с-МЕТ и нарушает опосредуемые с-Met каскады передачи сигнала.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-МЕТ
представляет собой капматиниб. Капматиниб также известен как
INCB028060. Капматиниб представляет собой перорально
биодоступный ингибитор с-МЕТ. Капматиниб селективно связывается с с-Met, тем самым ингибируя фосфорилирование с-Met и нарушая каскады передачи сигнала с-Met.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-МЕТ представляет собой кризотиниб. Кризотиниб также известен как PF-02341066. Кризотиниб представляет собой перорально доступный ингибитор на основе аминопиридина рецепторной тирозинкиназы -киназы анапластической лимфомы (ALK) и c-Met/рецептора фактора роста гепатоцитов (HGFR). Кризотиниб конкурирующим с АТР образом связывается с и ингибирует ALK-киназу и слитые белки ALK. Кроме того, кризотиниб ингибирует киназу с-Met и нарушает каскад передачи сигнала с-Met. В целом, это средство ингибирует рост опухолевых клеток.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-МЕТ представляет собой голватиниб. Голватиниб представляет собой перорально биодоступниый двойной ингибитор киназ с-МЕТ и VEGFR-2 с потенциальной антинеопластической активностью. Голватиниб связывает и ингибирует активность как с-МЕТ, так и VEGFR-2, что может ингибировать рост опухолевых клеток и выживаемость опухолевых клеток, которые сверхэкспрессируют эти рецепторные
тирозинкиназы.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор с-МЕТ представляет собой тивантиниб. Тивантиниб также известен как ARQ 197. Тивантиниб представляет собой перорально биодоступный низкомолекулярный ингибитор с-МЕТ. Тивантиниб связывается с белком с-МЕТ и нарушает каскады передачи сигнала с-Met, что может индуцировать клеточную гибель в опухолевых клетках, сверхэкспрессирующих белок с-МЕТ или экспрессирующих конститутивно активированный белок с-Met.
Иллюстративные ингибиторы TGFb
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в
настоящем описании, включает ингибитор трансформирующего фактора
роста-бета (TGF-|3) . В некоторых вариантах осуществления
комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли,
например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем
описании, например, солидной опухоли (например, злокачественная
опухоль головного мозга (например, глиома), меланома, рак почки
(например, почечноклеточный рак), плевральная злокачественная
мезотелиома (например, рецидивирующая плевральная
злокачественная мезотелиома) или рак молочной железы (например, метастазирующий рак молочной железы)).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор TGF-|3 представляет собой фресолимумаб (регистрационный номер CAS: 948564-73-6). Фресолимумаб также известен как GC1008. Фресолимумаб представляет собой моноклональное антитело человека, которое связывает и ингибирует изоформы 1, 2 и 3 TGF-бета.
Тяжелая цепь фресолимумаба имеет аминокислотную
последовательность (SEQ ID N0: 300) :
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSNVISWVRQAPGQGLEWMGGVIPIVDIANYAQRF KGRVTITADESTSTTYMELSSLRSEDTAVYYCASTLGLVLDAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSV FPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVP SSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRT PEVTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYK CKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESN
GQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK.
Легкая цепь фресолимумаба имеет аминокислотную
последовательность (SEQ ID NO: 301) :
ETVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSLGSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRAPGIPDRFS GSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYADSPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKS GTASWCLLNNFYPREAKVQWKVflHKLQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKV YACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC.
Фресолимумаб описан, например, в WO 2006/086469, US 8383780 и US 8591901.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор TGF-|3 представляет собой ХОМА 089. ХОМА 089 также известен как ХРА.42.089. ХОМА 089 представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело, которое специфически связывает и нейтрализует лиганды TGF-бета 1 и 2.
Вариабельная область тяжелой цепи ХОМА 089 имеет
аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 302):
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKF
QGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGLWEVRALPSVYWGQGTLVTVSS
(описана в качестве SEQ ID NO: б в WO 2012/167143). Вариабельная
область легкой цепи ХОМА 08 9 имеет аминокислотную
последовательность (SEQ ID NO: 303):
SYELTQPPSVSVAPGQTARITCGANDIGSKSVHWYQQKAGQAPVLWSEDIIRPSGIPERISGS
NSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDRDSDQYVFGTGTKVTVLG (описана в
качестве SEQ ID NO: 8 в WO 2012/167143).
Иллюстративные ингибиторы IDO/TDO
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) и/или триптофан-2,3-диоксигеназы (TDO). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, меланома, немелкоклеточный рак легкого, рак толстого кишечника, плоскоклеточный рак головы и шеи, рак яичника, рак брюшины, рак фаллопиевых труб, рак молочной железы (например, метастазирующий или HER2-отрицательный рак молочной
железы)), например, гематологической злокачественной опухоли (например, лимфома, например, неходжкинская лимфома или лимфома Ходжкина (например, диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома (DLBCL))).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO
выбран из (4Е)-4-[ (З-хлор-4-фторанилино)нитрозометилиден]-1,2,5-
оксадиазол-3-амина (также известен как INCB24360), индоксимода
(1-метил-0-триптофан) или а-циклогексил-5Н-имидазо[5, 1-
а]изоиндол-5-этанола (также известен как NLG919).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой эпакадостат (регистрационный номер CAS: 12 04 669-58-8). Эпакадостат также известен как INCB24360 или INCB024360 (Incyte). Эпакадостат является мощным и селективным ингибитором индоламин-2,3-диоксигеназы (ID01) с IC50 10 нМ, высокоселективным с точки зрения других родственных ферментов, таких как ID02 или триптофан-2,3-диоксигеназа (TDO).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой индоксимод (New Link Genetics). Индоксимод, D-изомер 1-метил-триптофана, представляет собой перорально вводимый низкомолекулярный ингибитор каскада индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO), который нарушает механизмы, посредством которых опухоли ускользают от иммуноопосредуемого разрушения.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой NLG919 (New Link Genetics). NLG919 представляет собой мощный ингибитор каскада IDO (индоламин-(2,3)-диоксигеназа) с Ki/EC50 7 нМ/75 нМ в бесклеточных анализах.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой F001287 (Flexus/BMS). F001287 представляет собой низкомолекулярный ингибитор индоламин-2,3-диоксигеназы 1 (ID01) .
Иллюстративные антагонисты A2AR
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает антагонист рецептора аденозина А2а (A2aR) (например, ингибитор каскада A2aR, например, ингибитор
аденозина, например, ингибитор A2aR или CD-7 3). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой истрадефиллин (регистрационный номер CAS: 155270-99-8). Истрадефиллин также известен как KW-6002 или 8-[(Е)-2-(3,4-диметоксифенил)винил]-1,З-диэтил-7-метил-З,7-дигидро-1Н-пурин-2,б-дион. Истрадефиллин описан, например, в LeWitt et al. (2008) Annals of Neurology 63 (3) : 295-302) .
В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой тозаденант (Biotie). Тозаденант также известен как SYN115 или 4-гидрокси-Ы-(4-метокси-7-морфолин-4-ил-1,З-бензотиазол-2-ил)-4-метилпиперидин-1-карбоксамид. Тозаденант блокирует эффект эндогенного аденозина в отношении рецепторов А2а, что приводит к усилению эффекта дофамина на рецептор D2 и ингибированию эффекта глутамата на рецептор mGluR5. Например, в некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой преладенант (регистрационный номер CAS: 377727-87-2) . Преладенант также известен как SCH 420814 или 2-(2-фуранил)-7-[2- [4- [4-(2-метоксиэтокси)фенил]-1-пиперазинил]этил]7Н-пиразоло[4,3-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-5-амин. Преладенант был разработан в качестве лекарственного средства, которое действует в качестве мощного и селективного антагониста рецептора аденозина А2А.
В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой випаденан. Випаденан также известен как BIIB014, V2006 или 3-[(4-амино-З-метилфенил)метил]-7-(фуран-2-ил)триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин. Например, в некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой PBF-509 (Palobiofarma). Например, в некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR, например PBF-509, вводят в суточной дозе приблизительно 80 мг, 160 мг или 240 мг.
Другие иллюстративные антагонисты A2aR включают, например, ATL-444, MSX-3, SCH-58261, SCH-412,348, SCH-442,416, VER-6623, VER-6947, VER-7835, CGS-15943 или ZM-241.385.
В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой антагонист каскада A2aR (например, ингибитор CD-73, например, антитело против CD73) MEDI9447. MEDI9447 представляет собой моноклональное антитело, специфичное к CD73. Нацеливание на внеклеточную продукцию аденозина посредством CD7 3 может снизить иммуносупрессивные эффекты аденозина. Сообщалось, что MEDI9447 обладает рядом видов активности, например, ингибированием активности эктонуклеотидазы CD7 3, смягчением опосредуемого AMP подавления лимфоцитов и ингибированием роста сингенной опухоли. MEDI94 4 7 может запускать изменения как в миелоидных, так и лимфоидных инфильтрирующих лейкоцитарных популяциях в микроокружении опухоли. Эти изменения включают, например, увеличение уровня СБ8-эффекторных клеток и активированных макрофагов, а также снижение пропорций супрессорных клеток миелоидного происхождения (MDSC) и регуляторных Т-лимфоцитов.
Иллюстративные онколитические вирусы
В некоторых вариантах осуществления комбинация, как описано в настоящем описании, включает онколитический вирус. В некоторых вариантах осуществления онколитические вирусы способны селективно реплицироваться в злокачественных клетках и запускать их смерть или замедление роста. В некоторых случаях онколитические вирусы не имеют эффекта или имеют минимальный эффект на незлокачественные клетки. Онколитический вирус включает, но не ограничивается ими, онколитический аденовирус, онколитические вирусы простого герпеса, онколитический ретровирус, онколитический парвовирус, онколитический вирус коровьей оспы, онколитический вирус Синбис, онколитический вирус гриппа или онколитический РНК-вирус (например, онколитический реовирус, онколитический вирус болезни Ньюкасла (NDV), онколитический вирус кори или онколитический вирус везикулярного стоматита (VSV)).
В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус
представляет собой вирус, например, рекомбинантный
онколитический вирус, описанный в US2010/0178684 А1, который включен в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
В некоторых вариантах осуществления рекомбинантный
онколитический вирус содержит последовательность нуклеиновой кислоты (например, гетерологичную последовательность нуклеиновой кислоты), кодирующую ингибитор иммунного или воспалительного ответа, например, как описано в US2010/0178684 А1, включенном в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме. В некоторых вариантах осуществления рекомбинантный онколитический вирус, например, онколитический NDV, содержит проапоптотический белок (например, апоптин), цитокин (например, GM-CSF, CSF, интерферон-гамма, интерлейкин-2 (IL-2), фактор некроза опухоли-альфа), иммуноглобулин (например, антитело против фибронектина ED-B), ассоциированный с опухолью антиген, биспецифический адаптерный белок (например, биспецифическое антитело или фрагмент антитела, направленные против белка HN NDV и Т-клеточного костимулирующего рецептора, такого как CD3 или CD2 8; или слитый белок между IL-2 человека и одноцепочечным антителом, направленным против белка HN NDV). См., например, Zamarin et al. Future Microbiol. 7,3(2012):347-67, включенную в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме. В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус представляет собой химерный онколитический NDV, описанный в US 8 591881 В2, US 2012/0122185 Al или US 2014/0271677 Al, каждый из которых включен в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус
включает кондиционально репликативный аденовирус (CRAd), который
сконструирован для репликации исключительно в злокачественных
клетках. См., например, Alemany et al. Nature Biotechnol.
18 (2000) : 723-27. В некоторых вариантах осуществления
онколитический аденовирус включает вирус, описанный в таблице 1 на стр.725 Alemany et al., включенной в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
Иллюстративные онколитические вирусы включают, но не ограничиваются ими, следующие:
Онколитический аденовирус группы В (ColoAdl) (PsiOxus Therapeutics Ltd.) (см., например, идентификационный номер клинических испытаний: NCT02053220);
ONCOS-102 (ранее называемый CGTG-102), который представляет собой аденовирус, содержащий гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF) (Oncos Therapeutics) (см., например, идентификатор клинических испытаний: NCT01598129);
VCN-01, который представляет собой генетически
модифицированный онколитический аденовирус человека, кодирующий гиалуронидазу РН20 человека (VCN Biosciences, S.L.) (см., например, идентификаторы клинических испытаний: NCT02045602 и NCT02045589);
кондиционально репликативный аденовирус IC0VIR-5, который представляет собой вирус, происходящий из аденовируса серотипа 5 человека дикого типа (Had5), модифицированный для селективной репликации в злокачественных клетках с нарушенной регуляцией каскада ретинобластомы/Е2Г (Institut Catala d'Oncologia) (см., например, идентификатор клинических испытаний: NCT01864759);
целивир, который содержит происходящие из костного мозга аутологичные мезенхимные стволовые клетки (MSC), инфицированные IC0VIR5, онколитическим аденовирусом (Hospital Infantil Universitario Nino Jesus, Madrid, Spain/ Ramon Alemany) (см., например, идентификатор клинических испытаний: NCT01844661);
CG0070, который представляет собой кондиционально реплицирующийся онколитический аденовирус серотипа 5 (Ad5), в котором промотор E2F-1 человека контролирует экспрессию необходимых вирусных генов Е1а, тем самым, ограничивая репликацию вируса и цитотоксичность в отношении опухолевых клеток с дефектом каскада Rb (Cold Genesys, Inc.) (см., например, идентификатор клинических испытаний: NCT02143804); или
DNX-2401 (ранее называемый Delta-24-RGD), который представляет собой аденовирус, сконструированный для селективной репликации в клетках с дефектом каскада ретинобластомы (Rb) и для инфицирования клеток, которые более эффективно экспрессируют определенные RGD-связывающие интегрины (Clinica Universidad de Navarra, Universidad de Navarra/ DNAtrix, Inc.) (см., например, идентификатор клинических испытаний: NCT01956734).
В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус, описанный в настоящем описании, вводят посредством инъекции,
например, подкожной, внутриартериальной, внутривенной,
внутримышечной, интратекальной или внутрибрюшинной инъекции. В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус, описанный в настоящем описании, вводят внутрь опухоли, трансдермально, трансмукозально, перорально, интраназально или посредством легочного введения.
Иллюстративные вакцины, например, каркасные вакцины
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает вакцину, например, каркасную вакцину. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании.
Вакцины против злокачественной опухоли описаны, например, в
публикациях РСТ № W0 2007/070660 и WO 2012/167230, ЕР 1960009
В1, патентах США № US 8067237 и US 8932583, и публикации США №
US 2011/0020216. Компоненты, которые можно использовать в
вакцинах против злокачественной опухоли (например,
имплантируемые каркасные материалы) описаны, например, в публикациях РСТ № WO 2009/102465 и WO 2013/106852. Способы, которые можно использовать для введения вакцин против злокачественной опухоли, описаны, например, в публикациях РСТ № WO 2013/158673, WO 2012/048165 и WO 2012/149358.
В некоторых вариантах осуществления вакцина против злокачественной опухоли включает макропористый каркас, содержащий (i) клетки или композицию для привлечения клеток, и (ii) сигнал рассредоточения, способный индуцировать или ускорять миграцию клеток, и (iii) биоактивную композицию, нанесенную или посеянную на/в каркас, которая вызывает модификацию клеток, привлеченных к каркасу. Миграцию модифицированных клеток можно ускорять посредством открытых взаимосвязанных макропор и сигнала рассредоточения.
В некоторых вариантах осуществления вакцина против злокачественной опухоли индуцирует эндогенный иммунный ответ на злокачественную мишень посредством введения пористого каркаса, содержащего композицию для привлечения и композицию антигена-мишени, где эндогенные антигенпрезентирующие клетки привлекаются
к каркасу для взаимодействия с антигеном, и где указанные клетки остаются до тех пор, пока сигнал рассредоточения не индуцирует выход в ткань лимфатического узла снаружи каркаса, тем самым, стимулируя эндогенный иммунный ответ на указанную злокачественную мишень.
В некоторых вариантах осуществления вакцину против злокачественной опухоли используют для удаления клеток-мишеней из млекопитающего с использованием каркасной композиции.
В некоторых вариантах осуществления вакцину против злокачественной опухоли in situ получают путем привлечения злокачественных клеток к имплантированному каркасу и уничтожения клеток с использованием цитотоксического средства.
В некоторых вариантах осуществления в качестве компонента каркаса используют цитозин-гуанозиновый олигонуклеотид (CpG-ODN) , который может эффективно перепрограммировать и рассредоточивать дендритные клетки, привлеченные к каркасу, и индуцировать эффективный противоопухолевый ответ.
В некоторых вариантах осуществления используют полиинозин-полицитидиловую кислоту (поли 1:С) и/или CpG ODN для проявления синергичного эффекта на ингибирование опухоли.
В некоторых вариантах осуществления используют пористые стержни, содержащие соединение для привлечения иммунных клеток (например, GM-CSF) и соединение для активации иммунных клеток (например, CpG ODN), и необязательно содержащие антиген, такой как лизат опухоли, например, для индукции иммунного ответа на вакцинный антиген. В некоторых вариантах осуществления поры, которые способствуют привлечению или высвобождению клеток, формируются in situ в гидрогелях после инъекции гидрогеля. В некоторых вариантах осуществления для ведения используют инъекционный запоминающий форму пористый полимер гидрогеля.
В других вариантах осуществления комбинации, описанные в настоящем описании, включают вакцину против злокачественной опухоли или новообразования. Неограничивающие примеры вакцин против новообразований, которые можно использовать, включают пептиды антигенов меланомы, таких как пептиды gplOO, антигены MAGE, Trp-2, MART1 и/или тирозиназа, опухолевые клетки,
трансфицированные для экспрессии цитокина GM-CSF, вакцины на основе ДНК, вакцины на основе РНК и вакцины на основе трансдукции вируса. Вакцина против злокачественной опухоли может быть профилактической или терапевтической.
Были разработаны многие экспериментальные стратегии для вакцинации против опухолей (см. Rosenberg, S., 2000, Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62; Logothetis, C, 2000, ASCO Educational Book Spring: 300-302; Khayat, D. 2000, ASCO Educational Book Spring: 414-428; Foon, K. 2000, ASCO Educational Book Spring: 730-738; также см. Restifo, N. and Sznol, M., Cancer Vaccines, Ch. 61, pp. 3023-3043 in DeVita, V. et al. (eds.), 1997, Cancer: Principles and Practice of Oncology. Fifth Edition). В одной из этих стратегий вакцину получают с использованием аутологичных или аллогенных опухолевых клеток. Было показано, что эти клеточные вакцины являются наиболее эффективными, когда опухолевые клетки трансдуцируют для экспрессии GM-CSF. Было показано, что GM-CSF является мощным активатором представления антигена для вакцинации против опухолей (Dranoff et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 3539-43) .
Комбинации, описанные в настоящем описании, например,
блокаду PD-1, можно использовать совместно с коллекцией
рекомбинантных белков и/или пептидов, экспрессируемых в опухоли,
для достижения иммунного ответа на эти белки. Эти белки обычно
рассматриваются иммунной системой как собственные антигены и,
таким образом, она толерантна к ним. Опухолевый антиген также
может включать белок теломеразу, который требуется для синтеза
теломер хромосом и который экспрессируется более чем в 8 5%
злокачественных опухолей и только в ограниченном количестве
соматических тканей (Kim, N et al. (1994) Science 266: 2011-
2 013) (эти соматические ткани можно защитить от иммунной атаки
различными способами). Опухолевый антиген также может
представлять собой "неоантигены", экспрессируемые в
злокачественных клетках вследствие соматических мутаций, которые изменяют белковую последовательность или создают слитые белки между двумя неродственными последовательностями (т.е. bcr-abl в
филадельфийской хромосоме), или идиотип в случае В-клеточных опухолей.
Другие вакцины против опухоли могут включать белки из вирусов, вовлеченных в злокачественные опухоли человека, таких как вирусы папилломы человека (HPV), вирусы гепатита (HBV и HCV) и герпес-вирус саркомы Капоши (KHSV) и вирус Эпштейна-Барра
(EBV) . Другой формой специфического опухолевого антигена, которую можно использовать вместе с блокадой PD-1 являются очищенные белки теплового шока (HSP), выделенные непосредственно из опухолевой ткани. Эти белки теплового шока содержат фрагменты белков из опухолевых клеток, и эти HSP являются высокоэффективными в отношении доставки в антигенпрезентирующие клетки для индукции опухолевого иммунитета (Suot, R & Srivastava, Р (1995) Science 2 69:1585-158 8; Tamura, Y. et al.
(1997) Science 278 : 117-120) .
Дендритные клетки (DC) представляют собой эффективные антигенпрезентирующие клетки, которые можно использовать для индукции антигенспецифических ответов. DC можно продуцировать ех vivo и нагружать различными белковыми и пептидными антигенами, а также экстрактами опухолевых клеток (Nestle, F. et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). DC также можно трансдуцировать генетическими способами для экспрессии этих опухолевых антигенов. DC были подвергнуты слиянию непосредственно с опухолевыми клетками для целей иммунизации (Kugler, A. et al.
(2000) Nature Medicine 6:332-336). В качестве способа вакцинации, иммунизацию посредством DC можно эффективно комбинировать с другим средством, например, блокадой PD-1, для активации более мощных противоопухолевых ответов.
Иллюстративные биспецифические связывающие Т-клетки средства
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, желудочно
кишечный рак, меланома или рак легкого) или гематологической злокачественной опухоли (например, лимфома (например, неходжскинская лимфома) или лейкоз (например, острый лимфобластный лейкоз)).
Биспецифические связывающиеся с Т-клетками средства (BiTE(r)) представляют собой класс искусственных биспецифических моноклональных антител, которые могут нацеливать иммунную систему хозяина, например, цитотоксическую активность Т-клеток, против злокачественных клеток. Биспецифические связывающиеся с Т-клетками средства могут образовывать связь между Т-клетками и опухолевыми клетками, которая обеспечивает проявление Т-клетками цитотоксической активности в отношении опухолевых клеток путем продукции белков, таких как перфорин и гранзимы, независимо от присутствия МНС I или костимулирующих молекул. Эти белки входят в опухолевые клетки и инициируют апоптоз клеток. Это действие имитирует физиологические процессы, наблюдаемые в ходе атак Т-клеток против опухолевых клеток.
В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство представляет собой слитый белок, содержащий два одноцепочечных вариабельных фрагмента (scFv) из различных антител. В некоторых вариантах осуществления один из scFv связывается с Т-клетками, например, через рецептор CD3, а другой - с опухолевыми клетками, например, через опухолеспецифическую молекулу.
В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство представляет собой биспецифическую молекулу антитела против NKG2A и CD138, или биспецифическую молекулу антитела против CD3 и TCR. В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство представляет собой биспецифическую молекулу антитела, которая связывается с CD3 и опухолевым антигеном (например, EGFR, PSCA, PSMA, ЕрСАМ, HER2, среди прочих).
В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство представляет собой блинатумомаб (регистрационный номер CAS: 85342 6-35-4) .
Блинатумомаб также известен как МТ103. Блинатумомаб специфически нацелен на участок CD3 для Т-клеток и участок CD19 для В-клеток.
В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство представляет собой МТ110. МТ110 представляет собой одноцепочечное антитело, которое нацелено на ЕрСАМ и CD3. МТ110 описано, например, в Amann et al. J Immunother. 2009;32 (5) :452-64.
В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство нацелено на ассоциированный с меланомой хондроитинсульфат протеогликан (MCSP). В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство нацелено на CD33. В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство включает трастузумаб (нацеленный на HER2/neu), цетуксимаб или панитумумаб (оба из которых нацелены на рецептор EGF), и их функциональный фрагмент. В некоторых вариантах осуществления биспецифическое связывающееся с Т-клетками средство нацелено на CD66e и ЕрпА2.
Иллюстративный агонист GITR
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает агонист GITR. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли или гематологической злокачественной опухоли.
Иллюстративные агонисты GITR включают, например, слитые белки GITR и антитела против GITR (например, двухвалентные антитела против GITR), такие как слитый белок GITR, описанный в патенте США № 6111090, патенте Европы № 0920505В1, патенте США № 8586023, публикациях РСТ № WO 2010/003118 и 2011/090754, или антитело против GITR, описанное, например, в патенте США № 7025962, патенте Европы № 1947183В1, патенте США № 7812135, патенте США № 8388967, патенте США № 8591886, патенте Европы № ЕР 1866339, публикации РСТ № WO 2011/028683, патенте США № 87 09424, публикации РСТ № WO 2013/039954, международной публикации № WO2013/039954, публикации США № US2014/0072566,
международной публикации № W02015/02 б684, публикации РСТ № WO2005/007190, публикации РСТ № WO 2007/133822, публикации РСТ № W02005/055808, публикации РСТ № WO 99/40196, публикации РСТ № WO 2001/03720, публикации РСТ № WO99/20758, патенте США № 6689607, публикации РСТ № WO2006/083289, публикации РСТ № WO 2005/115451, патенте США № 7618632, публикации РСТ № WO 2011/051726, международной публикации № W020 040 60319 и международной публикации № W02014012479.
В одном варианте осуществления агонист GITR используют в комбинации с ингибитором PD-1, например, как описано в WO2015/026684.
В другом варианте осуществления агонист GITR используют в комбинации с агонистом TLR, например, как описано в WO2004060319 и международной публикации № W02014012479.
Ингибиторы молекул иммунной точки контроля
В одном варианте осуществления комбинации, описанные в настоящем описании, включают ингибитор PD-1, например, антитело против PD-1, как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления комбинация ингибитора PD-1 включает ингибитор PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. В вариантах осуществления комбинация антитела против PD-1 и антитела против PD-L1 присутствует в качестве отдельных антител. В других вариантах осуществления антитело против PD-1 и антитело против PD-L1 присутствуют в одной и той же молекуле антитела, например, в виде биспецифической или мультиспецифической молекулы антитела.
В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела против PD-1, описанную в US 2015/0210769, опубликованной 30 июля 2015 года, под названием "Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof", включенной в качестве ссылки в полном объеме. В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-1 включает по меньшей мере один или два вариабельных домена тяжелой цепи (необязательно, включающих константную область), по меньшей мере один или два вариабельных домена легкой цепи (необязательно, включающих константную область), или оба из них, содержащих аминокислотную
последовательность ВАР049-Clone-A, ВАР049-Clone-B, BAP049-Clone-
C, BAP049-Clone-D или BAP049-Clone-E; или как описано в таблице
1 US 2015/0210769, или кодируемых нуклеотидной
последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательностью, по существу идентичной (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичной) любой из вышеупомянутых последовательностей. Молекула антитела против PD-1 необязательно содержит лидерную последовательность из тяжелой цепи, легкой цепи или обеих из них, как показано в таблице 4 US 2015/0210769; или последовательность, по существу идентичную ей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-включает по меньшей мере одну, две или три определяющих комплементарность области (CDR) из вариабельной области тяжелой цепи и/или вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из BAP049-hum01, ВАР049-hum02, ВАР049-hum03, ВАР049-hum04, BAP049-hum05, BAP049-hum06, BAP049-hum07, BAP049-humO8, BAP049-hum09, BAP049-humlO, BAP049-huml1, BAP049-huml2, BAP049-huml3, BAP049-huml4, BAP049-huml5, BAP049-huml6, BAP049-Clone-A, BAP049-Clone-B, BAP049-Clone-C, BAP049-Clone-D, или BAP049-Clone-E; или как описано в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательности, по существу идентичной (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичной) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 1 US 2015/0210769, или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В одном варианте осуществления одна или несколько из CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в
таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1.
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-1 включает по меньшей мере одну, две или три CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в таблице 1 US 2015/0210769 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В определенных вариантах осуществления молекула антитела против PD-1 включает замену в CDR легкой цепи, например, одну или несколько замен в CDR1, CDR2 и/или CDR3 легкой цепи. В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-1 включает замену в CDR3 легкой цепи в положении 102 вариабельной области легкой цепи, например, замену остатка цистеина на тирозин, или замену остатка цистеина на серии, в положении 102 вариабельной области легкой цепи согласно таблице 1 (например, SEQ ID NO: 16 или 24 для последовательности мыши или химерной последовательности, немодифицированной; или любая из SEQ ID NO: 34, 42, 46, 54, 58, 62, 66, 70, 74 или 78 для модифицированной последовательности).
В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-1 включает по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, содержащих аминокислотную последовательность, представленную в таблице 1 US 2015/0210769 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В одном варианте осуществления одна или несколько из CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблице 1 или кодируемой
нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-
1 включает:
(a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 GYTFTTY (SEQ ID NO: 261) (SEQ ID NO: 4, представленная в таблице 1 US 2015/0210769), аминокислотную последовательность VHCDR2 YPGTGG (SEQ ID NO: 2 62)
(SEQ ID NO: 5, представленная в таблице 1 US 2015/0210769), и аминокислотную последовательность VHCDR3 WTTGTGAY (SEQ ID NO: 263) (SEQ ID NO: 3, представленная в таблице 1 US 2015/0210769); и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SQSLLDSGNQKNF (SEQ ID NO: 264) (SEQ ID NO: 13, описанная в таблице 1 US 2015/0210769), аминокислотную последовательность VLCDR2 WAS (SEQ ID NO: 2 65)
(SEQ ID NO: 14, описанная в таблице 1 US 2015/0210769) и аминокислотную последовательность VLCDR3 DYSYPY (SEQ ID NO: 266)
(SEQ ID NO: 33, описанная в таблице 1 US 2015/0210769);
(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность
VHCDR1, выбранную из TYWMH (SEQ ID NO: 2 67) (SEQ ID NO: 1,
описанная в таблице 1 US 2015/0210769); аминокислотную
последовательность VHCDR2 NIYPGTGGSNFDEKFKN (SEQ ID NO: 2 68)
(SEQ ID NO: 2, описанная в таблице 1 US 2015/0210769); и
аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 2 63; и VL,
содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1
KSSQSLLDSGNQKNFLT (SEQ ID NO: 269) (SEQ ID NO: 10, описанная в
таблице 1 US 2015/0210769), аминокислотную последовательность
VLCDR2 WASTRES (SEQ ID NO: 270) (SEQ ID NO: 11, описанная в
таблице 1 US 2015/0210769), и аминокислотную последовательность
VLCDR3 QNDYSYPYT (SEQ ID NO: 271) (SEQ ID NO: 32, описанная в
таблице 1 US 2015/0210769);
(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 GYT FT TYWMH (SEQ ID NO: 272) (SEQ ID NO: 224, описанная в US 2015/0210769), аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 2 62, и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO:
2 63; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 2 64, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID
NO:
265 и
аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ
ID NO:
2 6 6;
или
(d) VH
, содержащую аминокислотную последовательность
VHCDR1
SEQ
ID NO:
272; аминокислотную последовательность VHCDR2
SEQ ID
NO:
2 68; и
аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ
ID NO:
2 63;
и VL,
содержащую аминокислотную последовательность
VLCDR1
SEQ
ID NO:
269, аминокислотную последовательность VLCDR2
SEQ ID
NO:
270 и
аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ
ID NO:
271 .
В комбинациях, описанных в настоящем описании ниже, в другом варианте осуществления молекула антитела против PD-1 содержит (i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID NO: 2 67, SEQ ID NO: 2 61 или SEQ ID NO: 272; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 2 68 или SEQ ID NO: 2 62; и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 2 63; и (ii) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 2 69 или SEQ ID NO: 2 64, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 270 или SEQ ID NO: 2 65, и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 271 или SEQ ID NO: 2 66.
В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-
1 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID NO:
2 67. В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-1 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID NO: 2 61. В другом варианте осуществления молекула антитела против PD-1 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID NO: 272.
В других вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой антитело против PD-1, выбранное из ниволумаба, пембролизумаба или пидилизумаба.
В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 представляет собой ниволумаб. Альтернативные названия ниволумаба включают MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538 или BMS-936558. В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 представляет собой ниволумаб (регистрационный номер CAS: 946414
94-4) . Ниволумаб представляет собой полностью человеческое моноклональное 1д64-антитело, которое специфически блокирует PD-1. Ниволумаб (клон 5С4) и другие моноклональные антитела человека, которые специфически связываются с PD-1, описаны в US 8008449 и WO2006/121168. В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой ниволумаб, имеющий последовательность, описанную в настоящем описании (или последовательность, по существу идентичную или сходную, например, с последовательностью, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или выше идентичной с указанной последовательностью).
Аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепей ниволумаба являются следующими:
Тяжелая цепь (SEQ ID N0: 3 04)
QVQLVESGGGWQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSKRY YADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFP LAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSS SLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPE VTCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCK VSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQ PENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
Легкая цепь (SEQ ID N0: 3 05)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIP ARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDE QLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYE KHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 представляет собой пембролизумаб. Пембролизумаб (также называемый ламбролизумабом, МК-3475, МК03475, SCH-900475 или KEYTRUDA(r); Merck) представляет собой гуманизированное моноклональные 1д64-антитело, которое связывается с PD-1. Пембролизумаб и другие гуманизированные антитела против PD-1 описаны в Hamid, О. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2) : 134-44, US 8354509 и WO2009/114335. Аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепей пембролизумаба являются следующими:
Тяжелая цепь (SEQ ID NO: 30 6)
QVQLVQSGVE VKKPGASVKV SCKASGYTFT NYYMYWVRQA PGQGLEWMGG
INPSNGGTNF NEKFKNRVTL TTDSSTTTAY MELKSLQFDD TAVYYCARRD
100
YRFDMGFDYW GQGTTVTVSS ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK
150
DYFPEPVTVS WNSGALTSGV HTFPAVLQSS GLYSLSSWT VPSSSLGTKT
200
YTCNVDHKPS NTKVDKRVES KYGPPCPPCP APEFLGGPSV FLFPPKPKDT
250
LMISRTPEVT CWVDVSQED PEVQFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQFNSTY
300
RWSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKGLPS SIEKTISKAK GQPREPQVYT
350
LPPSQEEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS
400
DGSFFLYSRL TVDKSRWQEG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSLGK
447
Легкая цепь (SEQ ID NO: 3 07) EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVS TSGYSYLHWYQQKPGQAPRL 50 LIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTIS SLEPEDFAVYYCQHSRDLPL 100 TFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKV 150 QWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLS STLTLSKADYEKHKVYACEV 2 00 THQGLSSPVTKSFNRGEC 218
В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой пембролизумаб, описанный, например, в US 8354509 и WO 2009/114335 и имеющий последовательность, описанную в настоящем описании (или последовательность, по существу идентичную или сходную с ней, например, последовательность, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или выше идентичную указанной последовательности).
В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-1 представляет собой пидилизумаб. Пидилизумаб (СТ-011; Cure Tech) представляет собой гуманизированное моноклональное антитело IgGlk, которое связывается с PD-1. Пидилизумаб и другие гуманизированные моноклональные антитела против PD-1 описаны в WO2009/101611.
Другие антитела против PD-1 включают AMP 514 (Amplimmune), среди прочих, например, антитела против PD-1, описанные в US 8609089, US 2010028330 и/или US 20120114649.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой иммуноадгезин (например, иммуноадгезин, содержащий внеклеточную или связывающую PD-1 часть PD-L1 или PD-L2, слитую с константной областью (например, Fc-область последовательности иммуноглобулина). В некоторых вариантах
осуществления ингибитор PD-1 представляет собой АМР-224 (В7-DCIg; Amplimmune; например, описанный в WO2010/027827 и WO2011/066342), представляет собой слитую конструкцию PD-L2-растворимый Fc-рецептор, которая блокирует взаимодействие между PD-1 и В7-Н1.
Иллюстративные ингибиторы PD-L1 или PD-L2
В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления молекула антитела против PD-L1 выбрана из молекулы антитела, приведенной в разделе "Сущность изобретения" и в разделе под названием "Иллюстративные молекулы антител против PD-L1", описанном в настоящем описании.
В других вариантах осуществления ингибитор PD-L1 выбран из YW243.55.S70, MPDL3280A, MEDI-4736, MSB-0010718C или MDX-1105.
В некоторых вариантах осуществления антитело против PD-L1
представляет собой MSB0010718C. MSB0010718C (также обозначаемое
как А09-246-2; Merck Serono) представляет собой моноклональное
антитело, которое связывается с PD-L1. Пембролизумаб и другие
гуманизированные антитела против PD-L1 описаны в WO2013/079174 и
имеют последовательность, описанную в ней (или
последовательность, по существу идентичную или сходную с ней,
например, последовательность, по меньшей мере на 85%, 90%, 95%
или выше идентичную указанной последовательности) .
Аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепей MSB0010718C включают по меньшей мере следующие:
Тяжелая цепь (SEQ ID N0: 308) (SEQ ID NO: 24, как описано в WO2013/079174)
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITF YADKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSS
Легкая цепь (SEQ ID N0: 309) (SEQ ID NO: 25, как описано в WO2013/079174)
QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSN RPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVL
В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой YW243.55.S70. Антитело YW243.55.S70 представляет собой
антитело против PD-L1, описанное в WO 2010/077634
(последовательности вариабельных областей тяжелой и легкой
цепей, представленные в SEQ ID NO: 20 и 21, соответственно) и
имеющее последовательность, описанную в ней (или
последовательность, по существу идентичную или сходную ей, например, последовательность, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или выше идентичную указанной последовательности).
В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой MDX-1105. MDX-1105, также известный как BMS-936559, представляет собой антитело против PD-L1, описанное в WO2007/005874 и имеющее последовательность, описанную в ней (или последовательность, по существу идентичную или сходную с ней, например, последовательность, по меньшей мере на 85%, 90%, 95% или выше идентичную указанной последовательности).
В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой MDPL3280A (Genentech/Roche) . MDPL328OA представляет собой моноклональное IgGl-антитело человека с оптимизированной областью Fc, которое связывается с PD-L1. MDPL3280A и другие моноклональные антитела человека к PD-L1 описаны в патенте США № 7943743 и в публикации США № 20120039906.
В других вариантах осуществления ингибитор PD-L2 представляет собой АМР-224. АМР-224 представляет собой слитую конструкцию РО-Ъ2-растворимый рецептор Fc, которая блокирует взаимодействие между PD-1 и В7-Н1 (B7-DCIg; Amplimmune; например, описанный в WO2010/027827 и WO2011/066342).
Иллюстративные ингибиторы LAG-3
В одном варианте осуществления комбинации, описанные в настоящем описании, включают ингибитор LAG-3, например, антитело против LAG-3, как описано в настоящем описании. В одном варианте осуществления комбинация ингибитора LAG-3 включает ингибитор PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 и антитело против PD-L1 в комбинации присутствуют в качестве отдельных антител. В других вариантах осуществления антитело против LAG-3 и антитело против PD-L1 находятся в одной молекуле антитела, например, в качестве биспецифической или
мультиспецифической молекулы антитела.
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор LAG-3. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли или гематологической злокачественной опухоли.
В одном варианте осуществления антитело против LAG-3
представляет собой молекулу антитела против LAG-3, описанную в
US 2015/0259420, поданной 13 марта 2015 года, под названием
"Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof", включенной в
качестве ссылки в полном объеме. В одном варианте осуществления
молекула антитела против LAG-3 включает по меньшей мере один или
два вариабельных домена тяжелой цепи (необязательно включающих
константную область), по меньшей мере один или два вариабельных
домена легкой цепи (необязательно включающих константную
область), или оба из них, содержащих аминокислотную
последовательность любого из BAP050-hum01, BAP050-hum02, ВАР050-
hum03, BAP050-hum04, BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07,
BAP050-hum08, BAP050-hum09, BAP050-huml0, BAP050-huml1, BAP050-
huml2, BAP050-huml3, BAP050-huml4, BAP050-huml5, BAP050-huml6,
BAP050-huml7, BAP050-huml8, BAP050-huml9, BAP050-hum20,
huBAP050(Ser) (например, BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-hum06-Ser, BAP050-hum07-Ser, BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-humlO-Ser, BAP050-huml1-Ser, BAP050-huml2-Ser, BAP050-huml3-Ser, BAP050-huml4-Ser, BAP050-huml5-Ser, BAP050-huml8-Ser, BAP050-huml9-Ser, или BAP050-hum20-Ser) , BAP050-Clone-F, BAP050-Clone-G, BAP050-Clone-H, BAP050-Clone-I или BAP050-Clone-J; или как описано в таблице 1 US 2015/0259420, или кодируемых нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичную) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против LAG-3 включает по меньшей мере одну, две или три определяющих
комплементарность области (CDR) из вариабельной области тяжелой
цепи и/или вариабельной области легкой цепи антитела, описанного
в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого
из BAP050-hum01, BAP050-hum02, BAP050-hum03, BAP050-hum04,
BAP050-hum05, BAP050-hum06, BAP050-hum07, BAP050-hum08, BAP050-
hum09, BAP050-humlO, BAP050-huml1, BAP050-huml2, BAP050-huml3,
BAP050-huml4, BAP050-huml5, BAP050-huml6, BAP050-huml7, BAP050-
huml8, BAP050-huml9, BAP050-hum20, huBAP050(Ser) (например,
BAP050-hum01-Ser, BAP050-hum02-Ser, BAP050-hum03-Ser, BAP050-
hum04-Ser, BAP050-hum05-Ser, BAP050-humOб-Ser, BAP050-hum07-Ser,
BAP050-hum08-Ser, BAP050-hum09-Ser, BAP050-humlO-Ser, BAP050-
humll-Ser, BAP050-huml2-Ser, BAP050-huml3-Ser, BAP050-huml4-Ser,
BAP050-huml5-Ser, BAP050-huml8-Ser, BAP050-huml9-Ser, или
BAP050-hum20-Ser) , BAP050-Clone-F, BAP050-Clone-G, BAP050-Clone-
H, BAP050-Clone-I, или BAP050-Clone-J; или как описано в таблице
1 US 2015/0259420, или кодируемого нуклеотидной
последовательностью, представленной в таблице 1; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичную) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против LAG-3 включает по меньшей мере одну, две или три CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в таблице 1 US 2015/0259420 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1.
В другом варианте осуществления молекула антитела против LAG-3 включает по меньшей мере одну, две или три CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в
таблице 1 US 2015/0259420 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1. В определенных вариантах осуществления молекула антитела против PD-L1 включает замену CDR легкой цепи, например, одну или несколько замен в CDR1, CDR2 и/или CDR3 легкой цепи.
В другом варианте осуществления молекула антитела против LAG-3 включает по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в таблице 1 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1 US 2015/0259420. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблице 1 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1.
В одном варианте осуществления молекула антитела против LAG-3 содержит:
(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 GFTLTNY (SEQ ID NO: 274) (SEQ ID NO: 4, описанная в таблице 1 US 2015/0259420), аминокислотную последовательность VHCDR2 NTDTGE (SEQ ID NO: 281) (SEQ ID NO: 5, описанная в таблице 1 US 2015/0259420) и аминокислотную последовательность VHCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY (SEQ ID NO: 277) (SEQ ID NO: 3, описанная в таблице 1 US 2015/0259420); и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SQDISNY (SEQ ID NO: 282) (SEQ ID NO: 13, описанная в таблице 1 US 2015/0259420), аминокислотную последовательность VLCDR2 YTS (SEQ
ID NO: 283) (SEQ ID NO: 14, описанная в таблице 1 US 2015/0259420), и аминокислотную последовательность VLCDR3 YYNLPW (SEQ ID NO: 284) (SEQ ID NO: 15, описанная в таблице 1 US 2015/0259420);
(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1
NYGMN (SEQ ID NO: 273) (SEQ ID NO: 1, описанная в таблице 1 US
2015/0259420); аминокислотную последовательность VHCDR2
WINTDTGEPTYADDFKG (SEQ ID NO: 276) (SEQ ID NO: 2, описанная в
таблице 1 US 2015/0259420); и аминокислотную последовательность
VHCDR3 SEQ ID NO: 277; и VL, содержащую аминокислотную
последовательность VLCDR1 SSSQDISNYLN (SEQ ID NO: 278) (SEQ ID
NO: 10, описанная в таблице 1 US 2015/0259420), аминокислотную
последовательность VLCDR2 YTSTLHL (SEQ ID NO: 279) (SEQ ID NO:
11, описанная в таблице 1 US 2015/0259420), и аминокислотную
последовательность VLCDR3 QQYYNLPWT (SEQ ID NO: 2 80) (SEQ ID NO:
12, описанная в таблице 1 US 2015/0259420);
(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 275) (SEQ ID NO: 286, описанная в US 2015/0259420), аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 281 и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 277; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 282, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 283, и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 2 8 4; или
(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID NO: 275; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 27 6; и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 277; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 27 8, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 279, и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 280 .
В другом варианте осуществления в комбинациях, описанных в настоящем описании ниже, молекула антитела против LAG-3 содержит:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), включающую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID
NO: 273, SEQ ID NO: 274 или SEQ ID NO: 2 7 5; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 27 6; и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 277; и
(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), включающую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 278, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 279 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 280.
В другом варианте осуществления в комбинациях, представленных в настоящем описании ниже, молекула антитела против LAG-3 включает:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), включающую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID NO: 273, SEQ ID NO: 274 или SEQ ID NO: 275; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 281 и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 277; и
(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), включающую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 2 82, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 283 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 284.
В одном варианте осуществления молекула антитела против LAG-3 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID NO: 273. В другом варианте осуществления молекула антитела против LAG-3 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID NO: 274. В другом варианте осуществления молекула антитела против LAG-3 содержит аминокислотную последовательность VHCDR1 SEQ ID NO: 275.
В некоторых вариантах осуществления антитело против LAG-3 представляет собой BMS-986016. BMS-986016 (также обозначаемое как BMS986016; Bristol-Myers Squibb) представляет собой моноклональное антитело, которое связывается с LAG-3. BMS-98 6016 и другие гуманизированные антитела против LAG-3 описаны в US 2011/0150892, WO2010/019570 и WO2014/008218.
Иллюстративные ингибиторы TIM-3
В одном варианте осуществления комбинации, описанные в настоящем описании, включают ингибитор TIM-3, например, антитело против TIM-3, как описано в настоящем описании. В одном варианте
осуществления комбинация ингибитора TIM-3 включает ингибитор PD-L1, например, молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления антитело против TIM-3 и антитело против PD-L1 в комбинации присутствуют в качестве отдельных антител. В других вариантах осуществления антитело против TIM-3 и антитело против PD-L1 присутствуют в одной и той же молекуле антитела, например, в качестве биспецифической или мультиспецифической молекулы антитела.
В одном варианте осуществления ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела против TIM-3, описанную в US 2015/0218274, опубликованной б августа 2015 года, под названием "Antibody Molecules to TIM-3 and Uses Thereof", включенной в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
В одном варианте осуществления молекула антитела против TIM-3 включает по меньшей мере один или два вариабельных домена тяжелой цепи (необязательно включающих константную область), по меньшей мере один или два вариабельных домена легкой цепи (необязательно включающих константную область), или оба из них, содержащих аминокислотную последовательность ABTIM3, ABTIM3-humOl, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-humlO, ABTIM3-humll, ABTIM3-huml2, ABTIM3-huml3, ABTIM3-huml4, ABTIM3-huml5, ABTIM3-huml6, ABTIM3-huml7, ABTIM3-huml8, ABTIM3-huml9, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum2 3; или как описано в таблицах 1-4 US 2015/0218274; или кодируемых нуклеотидной последовательностью, представленной в таблице 1-4; или последовательность, по существу идентичную (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичную) любой из вышеупомянутых последовательностей. Молекула антитела против TIM-3 необязательно содержит лидерную последовательность из тяжелой цепи, легкой цепи, или обеих из них, как показано в US 2015/0218274; или последовательность, по существу идентичную ей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против TIM-3 включает по меньшей мере одну, две или три определяющих комплементарность области (CDR) из вариабельной области тяжелой
цепи и/или вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в настоящем описании, например, антитела, выбранного из любого из ABTIM3, АВТШЗ-humOl, ABTIM3-hum02, ABTIM3-hum03, ABTIM3-hum04, ABTIM3-hum05, ABTIM3-hum06, ABTIM3-hum07, ABTIM3-hum08, ABTIM3-hum09, ABTIM3-huml0, ABTIM3-huml1, ABTIM3-huml2, ABTIM3-huml3, ABTIM3-huml4, ABTIM3-huml5, ABTIM3-huml6, ABTIM3-huml7, ABTIM3-huml8, ABTIM3-huml9, ABTIM3-hum20, ABTIM3-hum21, ABTIM3-hum22, ABTIM3-hum2 3; или как описано в таблицах 1-4 US 2015/0218274; или кодируемого нуклеотидной последовательностью, представленной в таблицах 1-4; или последовательностью, по существу идентичной (например, по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, 99% или более идентичной) любой из вышеупомянутых последовательностей.
В другом варианте осуществления молекула антитела против TIM-3 включает по меньшей мере одну, две или три CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в таблицах 1-4 US 2015/0218274 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблицах 1-4. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблицах 1-4 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблицах 1-4.
В другом варианте осуществления молекула антитела против TIM-3 включает по меньшей мере одну, две или три CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в таблицах 1-4 US 2015/0218274 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблицах 1-4. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблицах 1-4 или кодируемой нуклеотидной последовательностью,
представленной в таблицах 1-4. В определенных вариантах осуществления молекула антитела против TIM-3 включает замену в CDR легкой цепи, например, одну или несколько замен в CDR1, CDR2 и/или CDR3 легкой цепи.
В другом варианте осуществления молекула антитела против TIM-3 включает по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR (или, в совокупности, все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в таблицах 1-4 US 2015/0218274 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной в таблицах 1-4. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или, в совокупности, все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен или делеций, относительно аминокислотной последовательности, представленной в таблицах 1-4 или кодируемой нуклеотидной последовательностью, представленной в таблицах 1-4 .
В одном варианте осуществления молекула антитела против TIM-3 включает:
(a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из GYTFTSY
(SEQ ID NO: 285) (SEQ ID NO: 9, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); аминокислотную последовательность VHCDR2 YPGNGD
(SEQ ID NO: 286) (SEQ ID NO: 10, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); и аминокислотную последовательность VHCDR3 VGGAFPMDY (SEQ ID NO: 2 87) (SEQ ID NO: 5, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); и вариабельную область легкой цепи (VL) , содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SESVEYYGTSL
(SEQ ID NO: 288) (SEQ ID NO: 12, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274), аминокислотную последовательность VLCDR2 AAS (SEQ ID NO: 289) (SEQ ID NO: 13, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274), и аминокислотную последовательность VLCDR3 SRKDPS
(SEQ ID NO: 290) (SEQ ID NO: 14, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274);
(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SYNMH (SEQ ID NO: 2 91) (SEQ ID NO: 3,
(b)
описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); аминокислотную
последовательность VHCDR2 DIYPGNGDTSYNQKFKG (SEQ ID NO: 2 92)
(SEQ ID NO: 4, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); и
аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 287; и VL,
содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1
RASESVEYYGTSLMQ (SEQ ID NO: 293) (SEQ ID NO: 6, описанная в
таблицах 1-4 US 2015/0218274), аминокислотную последовательность
VLCDR2 AASNVES (SEQ ID NO: 2 94) (SEQ ID NO: 7, описанная в
таблицах 1-4 US 2015/0218274), и аминокислотную
последовательность VLCDR3 QQSRKDPST (SEQ ID NO: 295) (SEQ ID NO: 8, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274);
(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID NO: 2 85; аминокислотную последовательность VHCDR2 YPGSGD (SEQ ID NO: 296) (SEQ ID NO: 25, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 287; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 288, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 289 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 2 90;
(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID NO: 2 91; аминокислотную последовательность VHCDR2 DIYPGSGDTSYNQKFKG (SEQ ID NO: 297) (SEQ ID NO: 24, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 287; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 2 93, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 2 94 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 2 95;
(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID NO: 2 85; аминокислотную последовательность VHCDR2 YPGQGD (SEQ ID NO: 298) (SEQ ID NO: 31, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 287; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 288, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 289 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 2 90; или
(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность
VHCDR1, выбранную из SEQ ID NO: 2 91; аминокислотную последовательность VHCDR2 DIYPGQGDTSYNQKFKG (SEQ ID NO: 2 99) (SEQ ID NO: 30, описанная в таблицах 1-4 US 2015/0218274); и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 287; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID NO: 2 93, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID NO: 2 94 и аминокислотную последовательность VLCDR3 SEQ ID NO: 2 95.
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор TIM-3. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли или гематологической злокачественной опухоли.
Иллюстративные антитела против TIM-3 описаны в патенте США № 8552156, WO 2011/155607, ЕР 2581113 и публикации США № 2014/044728.
Иллюстративные ингибиторы CTLA-4
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор CTLA-4. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли или гематологической злокачественной опухоли.
Иллюстративные антитела против CTLA-4 включают тремелимумаб (моноклональные 1д62-антитело, доступное от Pfizer, ранее известное как тицилимумаб, СР-675,206) и ипилимумаб (антитело CTLA-4, также известное как MDX-010, CAS № 477202-00-9).
В одном варианте осуществления комбинация включает молекулу антитела против PD-1, например, как описано в настоящем описании, и антитело против CTLA-4, например, ипилимумаб. Иллюстративные дозы, которые можно использовать, включают дозу молекулы антитела против PD-1 приблизительно от 1 до 10 мг/кг, например 3 мг/кг, и дозу антитела против CTLA-4, например ипилимумаба, приблизительно 3 мг/кг.
Другие иллюстративные антитела против CTLA-4 описаны, например, в патенте США № 5811097.
Иллюстративные ингибиторы IAP
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в
настоящем описании, включает ингибитор ингибитора белка апоптоза
(IAP) . В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют
для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной
опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной
опухоли (например, рак молочной железы, рак яичника или рак
поджелудочной железы), например, гематологической
злокачественной опухоли (например, множественная миелома).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IAP представляет собой (S)-N-( (S)-1-циклогексил-2-( (S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамид (соединение А21) или соединение, описанное в патенте США № 8552003.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IAP,
например, (S)-N-((S)-1-циклогексил-2-((S)-2-(4-(4-
фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамид (соединение А21) или соединение, описанное в патенте США № 8552003, вводят в дозе приблизительно 18 00 мг, например, один раз в неделю.
Иллюстративные ингибиторы EGFR
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор рецептора эпидермального фактора роста (EGFR). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого), рак поджелудочной железы, рак молочной железы или рак толстого кишечника).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор EGFR представляет собой (R,Е)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-
метилизоникотинамид (соединение А4 0) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2013/184757.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор EGFR,
например, (R,Е)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-
еноил)азепан-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-
метилизоникотинамид (соединение А4 0) или соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2013/184757, вводят в дозе 150-250 мг, например, в сутки. В некоторых вариантах осуществления ингибитор EGFR, например, (R,Е)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-
метилизоникотинамид (соединение А4 0) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2013/184757, вводят в дозе приблизительно 150, 2 00 или 2 50 мг, или приблизительно 150-200 или 200-250 мг.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор EGFR выбран из одного или нескольких из эрлотиниба, гефитиниба, цетуксимаба, панитумумаба, нецитумумаба, PF-00299804, нимотузумаба или RO5083945.
Иллюстративные ингибиторы mTOR
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в
настоящем описании, включает ингибитор мишени рапамицина (mTOR).
В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для
лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной
опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной
опухоли (например, рак предстательной железы, рак молочной
железы, злокачественная опухоль головного мозга, рак мочевого
пузыря, рак поджелудочной железы, рак почки или рак печени, рак
легкого (например, мелкоклеточный рак легкого или
немелкоклеточный рак легкого), рак респираторной
системы/торакальный рак, саркома, рак кости, немелкоклеточный рак легкого, эндокринный рак, астроцитома, рак шейки матки, неврологический рак, рак желудка или меланома), например, гематологической злокачественной опухоли (например, лейкоз (например, лимфоцитарный лейкоз), например, лимфома, или например, множественная миелома).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR представляет собой дактолисиб (соединение А4) или 8-(б-метокси-пиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметил-фенил)-1,3-дигидро-имидазо[4,5 - с]хинолин-2 - он (соединение А41), или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2006/122806.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR
представляет собой эверолимус (также известный как AFINITOR(r); соединение A3 б) или соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2014/085318.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR, например, эверолимус (соединение A3 б) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2014/08 5318, вводят в дозе приблизительно 2,5-20 мг/сутки. В одном варианте осуществления ингибитор TOR, например, эверолимус (соединение A3 б) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2014/08 5318, вводят в дозе приблизительно 2,5, 5, 10 или 20 мг/сутки, например, приблизительно 2,5-5, 5-10 или 10-2 0 мг/сутки.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR выбран из одного или нескольких из рапамицина, темсиролимуса
(TORISEL(r)) , AZD8055, BEZ235, BGT226, XL765, PF-4691502, GDC0980, SF1126, OSI-027, GSK1059615, KU-0063794, WYE-354, паломида 529
(Р529), PF-04691502 или PKI-587, ридафоролимуса (ранее
известного как деферолимус, (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2
[ (1R, 9S, 12S, 15R, 16Е,18R,19R,21R, 23S, 24Е,26Е,28Z,3OS,32S,35R)-
1,18-дигидрокси-19,30-диметокси-15,17,21,23, 29,35-гексаметил-2,3,10,14, 2 0-пентаоксо-11,Зб-диокса-4-
азатрицикло[30.3.1.04.9]гексатриаконта-1б,24,26,28-тетраен-12-ил]пропил]-2-метоксициклогексилдиметилфосфинат, также известный как АР2 357 3 и МК8 6 69 и описанный в публикации РСТ № WO 03/064383); эверолимус (AFINITOR(r) или RAD001); рапамицин
(AY22989, SIROLIMUS(r)) ; симапимод (регистрационный номер CAS: 164301-51-3); (5-{2,4-бис[(3S)-З-метилморфолин-4-ил]пиридо[2,3-d]пиримидин-7-ил}-2-метоксифенил)метанол (AZD8055); 2-амино-8-
[транс-4-(2-гидроксиэтокси)циклогексил]- б-(б-метокси-3-пиридинил)-4-метил-пиридо[2,З-d]пиримидин-7(8Н)-он (PF04691502, регистрационный номер CAS : 1013101-3 6-4); N2-[1,4-диоксо-4-[[4-
(4-оксо-8-фенил-4Н-1-бензопиран-2-ил)морфолиний-4-ил]метокси]бутил]-Ъ-аргинилглицил-Ъ-а-аспартил-Ъ-серин, внутренняя соль (SF1126, регистрационный номер CAS: 936487-67-1) или XL7 65 (SAR2454 09).
Другие иллюстративные ингибиторы mTOR включают, но не
ограничиваются ими, темсиролимус; ридафоролимус (1Я,2Я,4S)-4-
[ (2R) -2 [ (1Я, 9S, 12 S, 15Я, 16?, 18Я, 19Я, 21Я,
23S,2 4?,2 6?,28Z,30S,32S,35Я)-1,18-дигидрокси-19,3О-диметокси-
15,17,21,23, 29, 35-гексаметил-2,3,10,14,2 0-пентаоксо-11, 3 6-
диокса-4-азатрицикло [30, 3, 1, О4'9] гексатриаконта-1 б, 24, 26, 28-
тетраен-12-ил]пропил]-2-метоксициклогексилдиметилфосфинат, также
известный как АР23573 и МК8669; эверолимус (RAD001); рапамицин
(AY22989); симапимод; (5-{2,4-бис[(3S)-З-метилморфолин-4-
ил]пиридо[2,З-d]пиримидин-7-ил}-2-метоксифенил)метанол
(AZD8055); 2-амино-8-[транс-4-(2-гидроксиэтокси)циклогексил]-6-
(б-метокси-3-пиридинил)-4-метил-пиридо[2,З-d]пиримидин-7(8Я)-он
(PF04691502) ; и N2-[1,4-диоксо-4-[[4-(4-оксо-8-фенил-4Я-1-
бензопиран-2-ил)морфолиний-4-ил]метокси]бутил]-L-аргинилглицил-L-a-аспартил-Ъ-серин (SEQ ID NO: 360), внутренняя соль (SF1126); и XL765.
Иллюстративные агонисты IL-15
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает агонист интерлейкина-15 (IL-15). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, рефрактерная солидная опухоль), (например, меланома (например, метастазирующая или распространенная меланома), рак почки (например, почечно-клеточный рак), немелкоклеточный рак легкого, плоскоклеточный рак головы и шеи или рак мочевого пузыря (например, немышечный инвазивный рак мочевого пузыря)), например, гематологической злокачественной опухоли (например, лейкоз, например, острый миелогенный лейкоз
(например, рефрактерный или рецидивирующий острый миелогенный лейкоз), например, лимфома, например, неходжкинская лимфома
(например, рецидивирующая/рефрактерная вялотекущая В-клеточная неходжкинская лимфома), или, например, множественная миелома
(например, рецидивирующая или рефрактерная множественная миелома)).
IL-15, секретируемый мононуклеарными фагоцитами (и
некоторыми другими типами клеток) после вирусной инфекции, регулирует активацию и пролиферацию Т-клеток и натуральных киллеров. Этот цитокин индуцирует активацию активаторов транскрипции STAT3, STAT5 и STAT б через каскады передачи сигнала JAK-киназы в тучных клетках, Т-клетках и дендритных эпидермальных Т-клетках. IL-15 и интерлейкин-2 (IL-2) являются структурно сходными и обладают многими видами биологической активности; оба из них могут связываться с общими субъединицами рецептора гематопоэтина, подавляя активность друг друга. Количество CD8+ Т-клеток памяти может регулироваться через баланс между IL-15 и IL-2.
В некоторых вариантах осуществления агонист IL-15 представляет собой рекомбинантный IL-15 человека (rhIL-15), например, CYP0150 (Cytune). CYP0150 представляет собой рекомбинантный белок, состоящий из IL-15 человека, связанного с доменом Sushi+ рецептора альфа-цепи человека (транспрезентация) .
CYP0150 описан, например, в публикации РСТ № W0 2007/046006. CYP0150 имеет аминокислотную последовательность: MAPRRARGCRTLGLPALLLLLLLRPPATRGDYKDDDDKIEGRITCPPPMSVEHADIWVKSYSLY SRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPPSGGSGGGGS GGGSGGGGSLQNWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLE SGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS (SEQ ID NO: 310) (описанная в качестве SEQ ID NO: 60 в WO 2007/046006) или MDSKGSSQKAGSRLLLLLWSNLLLCQGWSTTRDYKDDDDKIEGRNWVNVISDLKKIEDLIQS МНIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTE SGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTSSGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGSLQITCPPP MSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALV HQRPAPP (SEQ ID NO: 311) (описанная в качестве SEQ ID NO: 62 в WO 2007/046006).
В некоторых вариантах осуществления агонист IL-15 представляет собой ALT-803 (Altor Bioscience). ALT-803 представляет собой растворимый комплекс IL-15N72D: IL-15Ra.Su/Fc, продуцируемый из рекомбинантной клеточной линии млекопитающих с
высоким выходом, которая совместно экспрессирует IL-15N72D и слитый белок IL-15Ra.Su/Fc. Мутант IL-15 (N72D) имеет усиленную биологическую активность IL-15 (Zhu et al. 2009, J Immunol. 183:3598). Мутант IL-15N72D и растворимый домен IL-15Ra могут образовывать стабильные гетеродимерные комплексы в растворе, и этот комплекс демонстрирует увеличенную биологическую активность (приблизительно в 25 раз более активен) по сравнению с не находящемся в комплексе IL-15. ALT-803 описан, например, в публикации РСТ № WO 2012/040323 и патенте США № 8507222.
В некоторых вариантах осуществления агонист IL-15 представляет собой hetIL-15 (Admune). HetIL-15 представляет собой гетеродимерный IL-15 человека (IL-15/sIL-15Ra). HetIL-15 описан, например, в публикации РСТ № WO 2009/002562 и WO 2014/066527.
Иллюстративные агонисты CD4 0
В одном варианте осуществления комбинация включает агонист
CD40. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют
для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной
опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной
опухоли (например, рак легкого, карцинома пищевода, меланома или
почечноклеточный рак), например, гематологической
злокачественной опухоли (например, лейкоз (например, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL)), например, лимфома (например, неходжскинская лимфома), или, например, множественная миелома).
В одном варианте осуществления агонист CD4 0 представляет собой ADC-1013 (Alligator/Biolnvent). ADC-1013 представляет собой полностью человеческое моноклональное IgG-антитело-агонист против CD4 0 человека. CD4 0, интегральный мембранный белок, встречающийся на поверхности В-лимфоцитов, является представителем суперсемейства рецептора фактора некроза опухоли и на высоком уровне экспрессируется в ряде злокачественных опухолей, таких как В-клеточные злокачественные опухоли. Агонисты CD4 0, например, антитела против CD4 0, способны эффективно замещать хелперную активность Т-клеток (Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474-478).
ADC-1013 описано, например, в публикации РСТ № W0 2015/091853. Клоны ADC-1013 включают, например, 1136/1137, 1132/1133, 1148/1149, 1140/1135, 1134/1135, 1107/1108, 1142/1135, 1146/1147 и 1150/1151.
Вариабельная область тяжелой цепи 1132/1133 имеет
аминокислотную последовательность:
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSGIGSYGGGTYYADSV KGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARYVNFGMDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 312) (описанная в качестве SEQ ID NO: 65 в WO 2015/091853) . Вариабельная область легкой цепи 1132/1133 имеет аминокислотную последовательность:
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSG SGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYGRNPPTFGQGTKLEIK (SEQ ID NO: 313)
(описанная в качестве SEQ ID NO: 66 в WO 2015/091853) . CDR1 тяжелой цепи 1132/1133 имеет аминокислотную последовательность: GFTFSSYA (SEQ ID NO: 314) (описанная в качестве SEQ ID NO: 13 в WO 2015/091853) . CDR2 тяжелой цепи 1132/1133 имеет аминокислотную последовательность: IGSYGGGT (SEQ ID NO: 315)
(описанная в качестве SEQ ID NO: 14 в WO 2015/091853) . CDR3 тяжелой цепи 1132/1133 имеет аминокислотную последовательность: ARYVNFGMDY (SEQ ID N0: 316) (описанная в качестве SEQ ID N0: 15 в WO 2015/091853) . CDR1 легкой цепи 1132/1133 имеет аминокислотную последовательность: QSISSY (SEQ ID NO: 317)
(описанная в качестве SEQ ID NO: 16 в WO 2015/091853) . CDR2 легкой цепи 1132/1133 имеет аминокислотную последовательность: AAS (SEQ ID NO: 289) (описанная в качестве SEQ ID NO: 17 в WO 2015/091853). CDR3 легкой цепи 1132/1133 имеет аминокислотную последовательность: QQYGRNPPT (SEQ ID NO: 318) (описанная в качестве SEQ ID NO: 18 в WO 2015/091853).
Вариабельная область тяжелой цепи 1107/1108 имеет
аминокислотную последовательность:
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSV
KGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARRVWGFDYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO:
319) (описанная в качестве SEQ ID NO: 79 в WO 2015/091853) .
Вариабельная область легкой цепи 1107/1108 имеет аминокислотную
последовательность (SEQ ID NO: 320) :
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSG
SGSGT DFTLTISSLQPEDFATYYCQQYGVYPFTFGQGTKLEIK (описанная в
качестве SEQ ID NO: 80 в WO 2015/091853) . CDR1 тяжелой цепи
1107/1108 имеет аминокислотную последовательность: GFTFSSYA (SEQ
ID NO: 314) (описанная в качестве SEQ ID NO: 55 в WO
2015/091853). CDR2 тяжелой цепи 1107/1108 имеет аминокислотную
последовательность: ISGSGGST (SEQ ID NO: 321) (описанная в
качестве SEQ ID NO: 56 в WO 2015/091853) . CDR3 тяжелой цепи
1107/1108 имеет аминокислотную последовательность: ARRVWGFDY
(SEQ ID NO: 322) (описанная в качестве SEQ ID NO: 57 в WO
2015/091853). CDR1 легкой цепи 1107/1108 имеет аминокислотную
последовательность: QSISSY (SEQ ID NO: 317) (описанная в
качестве SEQ ID NO: 58 в WO 2015/091853) . CDR2 легкой цепи
1107/1108 имеет аминокислотную последовательность: AAS (SEQ ID
NO: 289) (описанная в качестве SEQ ID NO: 59 в WO 2015/091853) .
CDR3 легкой цепи 1107/1108 имеет аминокислотную
последовательность: QQYGVYPFT (SEQ ID NO: 323) (описанная в качестве SEQ ID NO: 60 в WO 2015/091853).
В некоторых вариантах осуществления агонист CD4 0 представляет собой ISF35. ISF35 представляет собой химерный CD154. ISF описан в публикациях РСТ № WO 2003/099340 и WO 2008/070743.
В некоторых вариантах осуществления агонист CD4 0 представляет собой дацетузумаб. Дацетузумаб также известен как SGN-40 или huS2C6. Дацетузумаб представляет собой гуманизированное моноклональное антитело, которое нацелено на CD40. Дацетузумаб описан, например, в Advani et al. J Clin Oncol. 2009; 27(26) :4371-7; и Khubchandani et al. Curr Opin Investig Drugs. 2009; 10 ( 6) :579-87 .
В некоторых вариантах осуществления агонист CD4 0 представляет собой лукатумумаб (регистрационный номер CAS: 903512-50-5) . Лукатумумаб также известен как CHIR-12.12 или HCD-122. Лукатумумаб связывает и ингибирует CD40, тем самым, ингибируя индуцируемую лигандом CD4 0 клеточную пролиферацию и запуская клеточный лизис через антителозависимую клеточную цитотоксичность (ADCC) в клетках, сверхэкспрессирующих CD40.
Лукатумумаб описан, например, в Tai et al. Cancer Res. 2005; 65 (13) :5898-906.
Антитела против CD4 0 способны эффективно замещать хелперную активность Т-клеток (Ridge, J. et al. (1998) Nature 393: 474478), и их можно использовать совместно с антителами против PD-1 (Ito, N. et al. (2000) Immunobiology 201 (5) 527-40) .
Иллюстративные агонисты 0X4О
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в
настоящем описании, включает агонист ОХ40. В некоторых вариантах
осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной
опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в
настоящем описании, например, солидной опухоли (например, рак
молочной железы, меланома, рак головы и шеи или рак
предстательной железы), например, гематологической
злокачественной опухоли (например, лимфома (например, В-клеточная лимфома)).
ОХ40, также известный как CD134, представляет собой гликопротеин клеточной поверхности и является представителем суперсемейства рецепторов фактора некроза опухоли (TNF), экспрессируется на Т-лимфоцитах и обеспечивает костимулирующий сигнал для пролиферации и выживания активированных Т-клеток. Активация 0X40 может индуцировать пролиферацию эффекторных Т-лимфоцитов, которая стимулирует иммунный ответ против опухолевых клеток, которые экспрессируют опухолеассоциированные антигены (ТАА) .
В некоторых вариантах осуществления агонист 0X4 0 выбран из mAb 106-222, гуманизированного 106-222 (НиЮб), mAb 119-122 ИЛИ гуманизированного 119-122 (Ни119).
MAb 106-222, гуманизированное 106-222 (НиЮб) , mAb 119-122 и гуманизированное 119-122 (Hull9) описаны, например, в публикации РСТ № WO 2012/027328 и патенте США № 9006399. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи mAb 106-222 описана в качестве SEQ ID NO: 4 в WO 2012/027328. Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи mAb 106-222 описана в качестве SEQ ID NO: 10 в WO 2012/027328. Аминокислотная последовательность вариабельной
области тяжелой цепи гуманизированного 10 6-222 (НиЮб) описана в качестве SEQ ID NO: 5 в WO 2012/027328. Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи гуманизированного 106-222 (НиЮб) описана в качестве SEQ ID NO: 11 в WO 2012/027328. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи mAb 119-122 описана в качестве SEQ ID NO: 16 в WO 2012/027328. Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи mAb 119-122 описана в качестве SEQ ID NO: 22 в WO 2012/027328. Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи гуманизированного 119-122 (Ни119) описана в качестве SEQ ID NO: 17 в WO 2012/027328. Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи гуманизированного 119-122 (Ни119) описана в качестве SEQ ID NO: 23 в WO 2012/027328.
В некоторых вариантах осуществления агонист 0X4 0 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело, описанное в патенте США № 7959925 и публикации РСТ № WO 2006/121810.
В некоторых вариантах осуществления агонист 0X4 0 выбран из MEDI6469, MEDI0562 или MEDI6383. MEDI6469 представляет собой моноклональное антитело мыши против ОХ40. MEDI0562 представляет собой гуманизированное моноклональное антитело против 0X40. MEDI6383 представляет собой моноклональное антитело против ОХ40.
В некоторых вариантах осуществления агонист 0X40, например MEDI6469, вводят внутривенно в дозе приблизительно 0,4 мг/кг, например, раз в двое суток.
Другие иллюстративные антитела против ОХ-4 0 описаны, например, в Weinberg, A. et al. (2000) Immunol 164: 2160-2169).
Иллюстративные агонисты CD27
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает агонист CD27. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, меланома, почечноклеточный рак, рефрактерная к гормонам аденокарцинома предстательной железы, рак яичника, рак молочной
железы, аденокарцинома ободочной и прямой кишки или немелкоклеточный рак легкого), например, гематологической злокачественной опухоли (например, лимфома (например, лимфома Ходжкина, лимфома Беркитта, лимфома из клеток мантийной зоны, первичная лимфома центральной нервной системы или В-клеточная лимфома маргинальной зоны), или лейкоз (например, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL)).
В одном варианте осуществления агонист CD27 представляет собой варлилумаб (регистрационный номер CAS: 1393344-72-3) . Варлилумаб также известен как CDX-1127 (Celldex) или 1F5. Варлилумаб представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело (mAb), которое нацелено на CD27, молекулу каскада активации лимфоцитов. CDX-1127 представляет собой mAb-агонист CD27, которое может активировать Т-клетки человека в контексте стимуляции Т-клеточного рецептора, и, таким образом, опосредовать противоопухолевые эффекты. CDX-1127 также могут обеспечить прямые терапевтические эффекты против опухолей с экспрессией CD27.
Варлилумаб описан, например, в Vitale et al. , Clin Cancer Res. 2012;18(14):3812-21, WO 2008/051424 и US 8481029.
В одном варианте осуществления агонист CD27 представляет собой BION-1402 (BioNovion). BION-1402 также известен как hCD27.15. BION-1402 представляет собой моноклональное антитело против CD2 7 человека. BION-14 02 может стимулировать пролиферацию и/или выживаемость CD27+ клеток. BION-1402 может активировать CD27 человека более эффективно, чем его лиганд CD70, что приводит к значительно увеличенному эффекту на пролиферацию CD8+ и CD4+ Т-клеток.
BION-1402 описано, например, в качестве hCD27.15 в WO
2012/004367. Это антитело продуцируется гибридомой hCD27.15,
которая была депонирована в АТСС 2 июня 2 010 года под номером
РТА-11008. Вариабельная область тяжелой цепи hCD27.15 имеет
аминокислотную последовательность:
EVRLQQSGADLVKPGASVKLSCASGFIIKATYMHWVRQRPEQGLEWIGRIDPANGE KY DPKFQVKAITADTSSSTAYLQLNSLTSDDTAVYYCARYAWYFDVWGAGTTVTVSSAKTTPPXVY PXXPGS (SEQ ID NO: 324) (описанная в качестве SEQ ID NO: 3 в WO
2012/004367). Вариабельная область легкой цепи hCD27.15 имеет
аминокислотную последовательность:
DIQMTQSPASLSASVGDTVTITCRASENIYSFLAWYHQKQGRSPQLLVYHAKTLAEGVPSRFSG SGSGTQFSLKINSLQAEDFGSYYCQHYYGSPLTFGAGTKLEVKRADAAPTVSIFPPSSEELSL
(SEQ ID NO: 325) (описанная в качестве SEQ ID NO: 4 в WO
2012/004367). CDR1 тяжелой цепи hCD27.15 имеет аминокислотную
последовательность: GFIIKATYMH (SEQ ID NO: 326) (описанная в
качестве SEQ ID NO: 5 в WO 2012/004367) . CDR2 тяжелой цепи
hCD27.15 имеет аминокислотную последовательность:
RIDPANGETKYDPKFQV (SEQ ID NO: 327) (описанная в качестве SEQ ID NO: 6 в WO 2012/004367). CDR3 тяжелой цепи hCD27.15 имеет аминокислотную последовательность: YAWYFDV (SEQ ID NO: 32 8)
(описанная в качестве SEQ ID NO: 7 в WO 2012/004367) . CDR1 легкой цепи hCD27.15 имеет аминокислотную последовательность: RASENIYSFLA (SEQ ID NO: 329) (описанная в качестве SEQ ID NO: 8 в WO 2012/004367). CDR2 легкой цепи hCD27.15 имеет аминокислотную последовательность: HAKTLAE (SEQ ID NO: 330)
(описанная в качестве SEQ ID NO: 9 в WO 2012/004367) . CDR3 легкой цепи hCD27.15 имеет аминокислотную последовательность: QHYYGSPLT (SEQ ID NO: 331) (описанная в качестве SEQ ID NO: 10 в WO 2012/004367).
Иллюстративные связывающие CSF-1/1R средства
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает связывающее CSF-1/1R средство. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, рак предстательной железы, рак молочной железы или пигментированный виллонодулярный синовит (PVNS)).
В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство представляет собой ингибитор макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF).
В другом варианте осуществления связывающее CSF-1/1R средство представляет собой ингибитор тирозинкиназы CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-б-ил) окси) -N-метилпиколинамид (соединение А15) или соединение,
описанное в публикации РСТ № WO 2005/073224.
В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство представляет собой ингибитор M-CSF, соединение АЗЗ или связывающее CSF-1 средство, описанное в публикации РСТ № WO 2004/045532 или публикации РСТ № WO 2005/068503, включая RX1 или 5Н4 (например, молекула антитела или Fab-фрагмент против M-CSF).
В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство, например, ингибитор M-CSF, соединение АЗЗ или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2004/045532 (например, молекула антитела или Fab-фрагмент против M-CSF), вводят в средней дозе приблизительно 10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство представляет собой ингибитор CSF1R или 4-(2-((lR, 2R)-2-гидроксициклогексиламино)бензотиазол-б-илокси)-N-
метилпиколинамид. 4-(2-((lR, 2R)-2-
гидроксициклогексиламино)бензотиазол-б-илокси)-N-
метилпиколинамид описан в качестве примера 157 на стр.117 публикации РСТ № WO 2007/121484.
В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство представляет собой пексидартиниб (регистрационный номер CAS 1029044-16-3). Пексидартиниб также известен как PLX3397 или 5- ( (5-хлор-1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-3-ил)метил)-N-( (6-
(трифторметил)пиридин-3-ил)метил)пиридин-2-амин. Пексидартиниб представляет собой низкомолекулярный ингибитор рецепторной тирозинкиназы (RTK) KIT, CSF1R и FLT3. FLT3, CSF1R и FLT3 сверхэкспрессируются или являются мутантными во многих типах злокачественных клеток и играют значительную роль в пролиферации и метастазировании опухолевых клеток. PLX3397 может связывать и ингибировать фосфорилирование рецептора фактора стволовых клеток
(KIT), рецептора колониестимулирующего фактора 1 (CSF1R) и FMS-подобной тирозинкиназы 3 (FLT3), что может приводить к ингибированию пролиферации опухолевых клеток и подавлению макрофагов, остеокластов и тучных клеток, вовлеченных в остеолитическое метастазирующее заболевание. В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство, например, пексидартиниб, используют в комбинации с ингибитором PD-1,
например, молекулой антитела против PD-1, описанной в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство представляет собой эмактузумаб. Эмактузумаб также известен как RG7155 или RO5509554. Эмактузумаб представляет собой гуманизированное IgGl-mAb, нацеленное на CSF1R. В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство, например, пексидартиниб, используют в комбинации с ингибитором PD-L1, например, молекулой антитела против PD-L1, описанной в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство представляет собой FPA008. FPA008 представляет собой гуманизированное mAb, которое ингибирует CSF1R. В некоторых вариантах осуществления связывающее CSF-1/1R средство, например FPA008, используют в комбинации с ингибитором PD-1, например, молекулой антитела против PD-1, описанной в настоящем описании.
Иллюстративные ингибиторы IL-17
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор интерлейкина 17 (IL-17). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли, например, рака молочной железы, рака легкого или рака толстого кишечника.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IL-17 представляет собой секукинумаб (регистрационные номера CAS: 875356-43-7 (тяжелая цепь) и 875356-44-8 (легкая цепь)).
Секукинумаб также известен как AIN4 57 и COSENTYX(r). Секукинумаб
представляет собой рекомбинантное моноклональное антитело IgGl/к человека, которое специфически связывается с IL-17A. Оно экспрессируется в рекомбинантной клеточной линии яичника китайского хомячка (СНО).
Секукинумаб описан, например, в W0 2006/013107, US 7807155,
US 8119131, US 8617552 и ЕР 1776142. Вариабельная область
тяжелой цепи секукинумаба имеет аминокислотную
последовательность (SEQ ID NO: 332) :
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMNWVRQAPGKGLEWVAAINQDGSEKYYVGSV KGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRVEDTAVYYCVRDYYDILTDYYIHYWYFDLWGRGTLVTVSS
(описанная в качестве SEQ ID NO: 8 в WO 2006/013107) . Вариабельная область легкой цепи секукинумаба имеет аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 333) : EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYWMNWVRQAPGKGLEWVAAINQDGSEKYYVGSV KGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRVEDTAVYYCVRDYYDILTDYYIHYWYFDLWGRGTLVTVSS
(описанная в качестве SEQ ID NO: 10 в WO 2006/013107) . CDR1
тяжелой цепи секукинумаба имеет аминокислотную
последовательность NYWMN (SEQ ID NO: 334) (описанная в качестве SEQ ID NO: 1 в WO 2006/013107) . CDR2 тяжелой цепи секукинумаба имеет аминокислотную последовательность AINQDGSEKYYVGSVKG (SEQ ID NO: 335) (описанная в качестве SEQ ID NO: 2 в WO 2006/013107) . CDR3 тяжелой цепи секукинумаба имеет аминокислотную последовательность DYYDILTDYYIHYWYFDL (SEQ ID NO: 336) (описанная в качестве SEQ ID NO: 3 в WO 2006/013107). CDR1 легкой цепи секукинумаба имеет аминокислотную последовательность RASQSVSSSYLA (SEQ ID NO: 337) (описанная в качестве SEQ ID NO: 4 в WO 2006/013107). CDR2 легкой цепи секукинумаба имеет аминокислотную последовательность GASSRAT (SEQ ID NO: 338)
(описанная в качестве SEQ ID NO: 5 в WO 2006/013107) . CDR3 легкой цепи секукинумаба имеет аминокислотную последовательность QQYGSSPCT (SEQ ID NO: 361) (описанная в качестве SEQ ID NO: 6 в WO 2006/013107).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IL-17 представляет собой CJM112. CJM112 также известен как ХАВ4. CJM112 представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело человека, которое нацелено на IL-17A.
CJM112 описано, например, в WO 2014/122613. Тяжелая цепь CJM112 имеет аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 339): EVQLVESGGDLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKQDGSEKYYVDSV KGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDRGSLYYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLA PSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSSL GTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTP EVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKC
KVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNG QPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (описанная в качестве SEQ ID NO: 14 в WO 2014/122613) . Легкая цепь CJM112 имеет аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 340) :
AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRPSQGINWELAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLEQGVPSRFSG SGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSG TASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVY ACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (описанная в качестве SEQ ID NO: 44 в WO 2014/122613).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IL-17 представляет собой иксекизумаб (регистрационный номер CAS: 1143503-69-8). Иксекизумаб также известен как LY2439821. Иксекизумаб представляет собой гуманизированное моноклональное 1д64-антитело, которое нацелено на IL-17A.
Иксекизумаб описан, например, в WO 2007/070750, US 7838638 и US 8110191. Вариабельная область тяжелой цепи иксекизумаба имеет аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 341) : QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYSFTDYHIHWVRQAPGQGLEWMGVINPMYGTTDYNQRF KGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARYDYFTGTGVYWGQGTLVTVSS (описанная в качестве SEQ ID NO: 118 в WO 2007/070750). Вариабельная область легкой цепи иксекизумаба имеет аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 342): DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSRSLVHSRGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFIGVP DRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHLPFTFGQGTKLEIK (описанная в качестве SEQ ID NO: 241 в WO 2007/070750).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IL-17 представляет собой бродалумаб (регистрационный номер CAS: 1174395-19-7). Бродалумаб также известен как AMG 827 или АМ-14. Бродалумаб связывается с рецептором А интерлейкина-17 (IL-17RA) и препятствует активации рецептора посредством IL-17.
Бродалумаб описан, например, в WO 2008/054603, US 7767206, US 7786284, US 7833527, US 7939070, US 8435518, US 8545842, US 8790648 и US 9073999. CDR1 тяжелой цепи бродалумаба имеет аминокислотную последовательность RYGIS (SEQ ID NO: 343) (как описано в качестве SEQ ID NO: 146 в WO 2008/054603) . CDR2
тяжелой цепи бродалумаба имеет аминокислотную последовательность WISTYSGNTNYAQKLQG (SEQ ID N0: 344) (как описано в качестве SEQ ID N0: 147 в W0 2008/054603). CDR3 тяжелой цепи бродалумаб имеет аминокислотную последовательность RQLYFDY (SEQ ID N0: 345) (как описано в качестве SEQ ID N0: 148 в W0 2008/054603) . CDR1 легкой цепи бродалумаба имеет аминокислотную последовательность RASQSVSSNLA (SEQ ID N0: 346) (как описано в качестве SEQ ID N0: 224 в W0 2008/054 603) . CDR2 тяжелой цепи бродалумаба имеет аминокислотную последовательность DASTRAT (SEQ ID N0: 347) (как описано в качестве SEQ ID N0: 225 в W0 2008/054603) . CDR3 тяжелой цепи бродалумаба имеет аминокислотную последовательность QQYDNWPLT (SEQ ID N0: 348) (как описано в качестве SEQ ID N0: 226 в W0 2008/054603).
Иллюстративные ингибиторы IL-10
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор интерлейкина 1-бета (IL-1(3) . В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, гематологической злокачественной опухоли (например, лимфома (например, лимфома Ходжкина), лейкоз (например, острый или хронический лейкоз) или множественная миелома).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор IL-1|3 представляет собой канакинумаб. Канакинумаб также известен как ACZ885 или ILARIS(r). Канакинумаб представляет собой моноклональное антитело IgGl/к человека, которое нейтрализует биологическую активность IЪ- 1 (3 человека.
Канакинумаб описан, например, в W0 2002/16436, US 7446175 и ЕР 13137 69. Вариабельная область тяжелой цепи канакинумаба имеет аминокислотную последовательность (SEQ ID N0: 349): MEFGLSWVFLVALLRGVQCQVQLVESGGGWQPGRSLRLSCAASGFTFSVYGMNWVRQAPGKGL EWVAIIWYDGDNQYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNGLRAEDTAVYYCARDLRTGPFDYWG QGTLVTVSS (описанная в качестве SEQ ID N0: 1 в US 7446175) . Вариабельная область легкой цепи канакинумаба имеет аминокислотную последовательность (SEQ ID N0: 350) :
MLPSQLIGFLLLWVPASRGEIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCRASQSIGSSLHWYQQKPDQSPK LLIKYASQSFSGVPSRFSGSGSGTDFTLTINSLEAEDAAAYYCHQSSSLPFTFGPGTKVDIK (описанная в качестве SEQ ID NO: 2 в US 7446175). Иллюстративные ингибиторы CXCR2
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в
настоящем описании, включает ингибитор ингибитора рецептора 2
(CXCR2) хемокинов (мотив С-Х-С). В некоторых вариантах
осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной
опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в
настоящем описании, например, солидной опухоли, например, рака
молочной железы, метастазирующей саркомы, рака поджелудочной
железы, меланомы, почечноклеточного рака (RCC),
немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) или педиатрической опухоли (например, рабдомиосаркома).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 представляет собой данириксин (регистрационный номер CAS: 954126-98-8). Данириксин также известен как GSK1325756 или 1-(4-хлор-2-гидрокси-З-пиперидин-З-илсульфонилфенил)-3-(З-фтор-2-метилфенил)мочевина. Данириксин описан, например, в Miller et al. Eur J Drug Metab Pharmacokinet (2014) 39:173-181; и Miller et al. BMC Pharmacology and Toxicology (2015), 16:18.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 представляет собой репариксин (регистрационный номер CAS: 266359-83-5) . Репариксин также известен как репертаксин или (2R)-2-[4-(2-метилпропил)фенил]-N-метилсульфонилпропанамид. Репариксин представляет собой неконкурентный аллостерический ингибитор CXCR1/2. Репариксин описан, например, в Zarbock et al. British Journal of Pharmacology (2008), 1-8.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор CXCR2 представляет собой навариксин. Навариксин также известен как МК-7123, SCH 527123, PS291822 или г-гидрокси-N,N-диметил-З-[[2-[[(1R)-1-(5-метилфуран-2-ил)пропил]амино]-3,4-диоксоциклобутен-1-ил]амино]бензамид. Навариксин описан, например, в Ning et al. Mol Cancer Ther. 2012; 11 ( 6) :1353-64.
Иллюстративные ингибиторы PI3K-y, -8
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат-3-киназы (PI3K), например, фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат-3-киназы гамма и/или дельта (Р13К-у,8) . В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли
(например, рак предстательной железы, рак молочной железы,
злокачественная опухоль головного мозга, рак мочевого пузыря,
рак поджелудочной железы, рак почки, солидная опухоль, рак
печени, немелкоклеточный рак легкого, эндокринный рак, рак
яичника, меланома, рак женской репродуктивной системы, рак
пищеварительного тракта/желудочно-кишечный рак, мультиформная
глиобластома, рак головы и шеи или рак толстого кишечника),
например, гематологической злокачественной опухоли (например,
лейкоз (например, лимфоцитарный лейкоз, например, хронический
лимфоцитарный лейкоз (CLL) (например, рецидивирующий
CLL)),например, лимфома (например, неходжкинская лимфома
(например, рецидивирующая фолликулярная В-клеточная
неходжкинская лимфома (FL) или рецидивирующая мелколимфоцитарная лимфома (SLL) ) или, например, множественная миелома) .
В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K представляет собой ингибитор изоформ дельта и гамма PI3K. Иллюстративные ингибиторы PI3K GSK 2126458, GDC-0980, GDC-0941, Sanofi XL147, XL756, XL147, PF-46915032, ВКМ 120, CAL-101, CAL 263, SF1126, РХ-886 и двойной ингибитор PI3K (например, Novartis BEZ235), которые можно использовать в комбинации, описаны, например, в WO 2010/036380, WO 2010/006086, WO 09/114870, WO 05/113556.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор Р13К-у,8
представляет собой иделалисиб (регистрационный номер CAS:
870281-82-6) . Иделалисиб также известен как ZYDELIG(r), GS-1101,
CAL-101 или 5-фтор-3-фенил-2-[(IS)-1-(7Н-пурин-6-
иламино)пропил]-4(ЗН)-хиназолинон. Иделалисиб блокирует Р1108, дельта-изоформу PI3K. Иделалисиб описан, например, в Wu et al.
Journal of Hematology & Oncology (2 013) 6: 36.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K-y,-8 представляет собой дактолисиб (соединение А4) или 8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметилфенил)-1,3-дигидр-имидазо[4,5-с]хинолин-2-он (соединение А41) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2006/122806.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор Р13К-у,-8 представляет собой бупарлисиб (соединение Аб) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/084786.
В одном варианте осуществления ингибитор PI3K-y,S, например бупарлисиб (соединение Аб) , или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/084786, вводят в дозе приблизительно 100 мг (например, в сутки).
Другие иллюстративные ингибиторы Р13К-у,-8, которые можно использовать в комбинации, включают, например, пиктилисиб (GDC-0941), LY294002, пиларалисиб (XL147), PI-3065, PI-103, VS-5584 (SB2343), CZC24832, дувелисиб (IPI-145, INK1197), TG100-115, CAY10505, GSK1059615, PF-04691502, AS-605240, воксталисиб (SAR245409, XL765), IC-87114, омипалисиб (GSK2126458, GSK458), TG100713, гедатолисиб (PF-05212384, PKI-587), PKI-402, аналог XL147, PIK-90, PIK-293, PIK-294, 3-метиладенин (3-МА), AS-252424, AS-604850 или апитолисиб (GDC-0980, RG7422).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K представляет собой соединение А8 или соединение, описанное в публикации РСТ № WO2010/029082.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K представляет собой общий ингибитор PI3K (4S,5R)-3-(2'-амино-2-морфолино-4'-(трифторметил)-[4,5'-бипиримидин]-б-ил)-4-(гидроксиметил)-5-метилоксазолидин-2-он (соединение А13) или соединение, описанное в публикации РСТ № W02013/12482б.
Иллюстративные ингибиторы Р13К-у,-8 включают, но не ограничиваются ими, дувелисиб и иделалисиб. Иделалисиб (также называемый GS-1101 или CAL-101; Gilead) представляет собой низкомолекулярное соединение, которое блокирует дельта-изоформу
PI3K. Структура иделалисиба (5-фтор-3-фенил-2-[(IS)-1-(7Я-пурин-б-иламино)пропил]-4(ЗЯ)-хиназолинон) представлена ниже.
Дувелисиб (также называемый IPI-145; Infinity
Pharmaceuticals и Abbvie) представляет собой низкомолекулярное соединение, которое блокирует Р13К-8,у. Структура дувелисиба (8-хлор-2-фенил-З-[(IS)-1-(9Н-пурин-б-иламино)этил]-1(2Н)-изохинолинон) представлена ниже.
В одном варианте осуществления ингибитор представляет собой
двойной ингибитор фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) и mTOR,
выбранный из 2-амино-8-[транс-4-(2-гидроксиэтокси)циклогексил]-
б-(б-метокси-3-пиридинил)-4-метил-пиридо[2,З-d]пиримидин-7(8Я)-
она (PF-04691502); N-[4-[[4-(диметиламино)-1-
пиперидинил]карбонил]фенил]-N1 -[4-(4,б-ди-4-морфолинил-1,3,5
триазин-2-ил)фенил]мочевины (PF-05212384, PKI-587); 2-метил-2-
{4-[3-метил-2-оксо-8-(хинолин-3-ил)-2,3-дигидро-1Я-имидазо[4,5-
с]хинолин-1-ил]фенил}пропаннитрила (BEZ-235); апитолисиба (GDC-
0 980, RG7422) ; 2,4-дифтор-Ы-{2-(метилокси)-5-[4-(4-пиридазинил)-
б-хинолинил]-3-пиридинил}бензолсульфонамида (GSK2126458); 8-(б-
метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-(пиперазин-1-ил)-3-
(трифторметил)фенил)-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-2(ЗН)-он
малеиновой кислоты (NVP-BGT226); 3-[4-(4-
Морфолинилпиридо[3',2':4,5]фуро[3,2-d]пиримидин-2-ил]фенола (PI-
103); 5-(9-изопропил-8-метил-2-морфолино-9Н-пурин-б-
ил)пиримидин-2-амина (VS-5584, SB2343); или N-[2-[(3,5-диметоксифенил)амино]хиноксалин-3-ил]-4-[(4-метил-З-метоксифенил)карбонил]аминофенилсульфонамида (XL765). Иллюстративные ингибиторы BAFF-R
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор рецептора фактора активации В-клеток (BAFF-R). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, гематологической злокачественной опухоли, например, лейкоза (например, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), например, рецидивирующий или рефрактерный хронический лимфоцитарный лейкоз).
В одном варианте осуществления ингибитор BAFF-R представляет собой VAY736. VAY736 представляет собой происходящее из полностью человеческой комбинаторной библиотеки антител (HuCAL) моноклональное антитело, нацеленное на BAFF-R. BAFF-R, также известный как представитель 13С суперсемейства рецептора фактора некроза опухоли, сверхэкспрессируется в определенных типах опухолевых клеток и при аутоиммунных заболеваниях. VAY736 обладает как противовоспалительной, так и антинеопластической активностью. В злокачественных клетках BAFF-R играет ключевую роль в пролиферации и выживании В-клеток. VAY7 3 6 нацелен на и связывает BAFF-R, что ингибирует как взаимодействие BAFF/BAFF-R, так и опосредуемую BAFF-R передачу сигнала. Это может снизить рост опухолевых клеток,
экспрессирующих BAFF-R.
VAY736 описано, например, в US 8106163. CDR1 тяжелой цепи VAY7 3 6 имеет аминокислотную последовательность GDSVSSNSAAWG (SEQ ID NO: 351) (описанная в качестве SEQ ID NO: 3 в US 8106163) . CDR2 тяжелой цепи VAY7 3 6 имеет аминокислотную последовательность RIYYRSKWYNSYAVSVKS (SEQ ID NO: 352) (описанная в качестве SEQ ID NO: 10 в US 8106163) . CDR3 тяжелой цепи VAY736 имеет аминокислотную последовательность YDWVPKIGVFDS (SEQ ID NO: 3 62)
(описанная в качестве SEQ ID NO: 17 в US 8106163) . CDR1 легкой цепи VAY736 имеет аминокислотную последовательность RASQFISSSYLS
(SEQ ID NO: 353) (описанная в качестве SEQ ID NO: 24 в US
8106163). CDR2 легкой цепи VAY736 имеет аминокислотную
последовательность LLIYGSSSRAT (SEQ ID NO: 354) (описанная в
качестве SEQ ID NO: 31 в US 8106163) . CDR3 легкой цепи VAY736
имеет аминокислотную последовательность QQLYSSPM (SEQ ID NO:
355) (описанная в качестве SEQ ID NO: 38 в US 8106163) .
Вариабельная область тяжелой цепи VAY7 3 6 имеет аминокислотную
последовательность (SEQ ID NO: 356) :
QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWGWIRQSPGRGLEWLGRIYYRSKWYNSYA VSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARYDWVPKIGVFDSWGQGTLVTVSS
(описанная в качестве SEQ ID NO: 52 в US 8106163) . Вариабельная
область легкой цепи VAY7 3 6 имеет аминокислотную
последовательность (SEQ ID NO: 357):
DIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQFISSSYLSWYQQKPGQAPRLLIYGSSSRATGVPARFS
GSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLYSSPMTFGQGTKVEIKRT (описанная в
качестве SEQ ID NO: 45 в US 8106163) . Тяжелая цепь VAY736 имеет аминокислотную последовательность (SEQ ID NO: 358): QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWGWIRQSPGRGLEWLGRIYYRSKWYNSYA VSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVYYCARYDWVPKIGVFDSWGQGTLVTVSSASTK GPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSV VTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKD TLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDW LNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDI AVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSL SLSPGK (описанная в качестве SEQ ID NO: 75 в US 8106163) . Вариабельная область легкой цепи VAY7 3 6 имеет аминокислотную
последовательность (SEQ ID NO: 359) :
DIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQFISSSYLSWYQQKPGQAPRLLIYGSSSRATGVPARFS GSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLYSSPMTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKS GTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKV YACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (описанная в качестве SEQ ID NO: 71 в US 8106163).
Иллюстративные ингибиторы MALT-1/ВТК
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор MALT-1 и/или ВТК. В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании.
Иллюстративные ингибиторы MALT-1/ВТК включают, но не
ограничиваются ими, (S)-1-(б-(2Н-1,2,З-триазол-2-ил)-5-
(трифторметил)пиридин-3-ил)-3-(2-хлор-7-(1-
метоксиэтил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-б-ил)мочевину, (S)-1- (2-
хлор-7-(1-метоксиэтил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-б-ил)-3-(2-
(трифторметил)пиридин-4-ил)мочевину, (S)-1-(2-хлор-7-(1-
метоксиэтил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-б-ил)-3-(1-метил-2-оксо-5-
(трифторметил)-1,2-дигидропиридин-З-ил)мочевину, (R)-1-(б-(2Н-
1,2,З-триазол-2-ил)-5-(трифторметил)пиридин-3-ил)-3-(2-хлор-7-
(1-метокси-2-метилпропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-б-ил)мочевину,
(R)-1-(5-хлор-б-(2Н-1,2,З-триазол-2-ил)пиридин-3-ил)-3-(2-хлор-
7-(1-метокси-2-метилпропил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-б-
ил)мочевину, (S)-1-(7-(1-метоксиэтил)-2-метилпиразоло[1,5-
а]пиримидин-б-ил)-3-(2-(трифторметил)пиридин-4-ил)мочевину, (S)-1-(2-фтор-7-(1-метоксиэтил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-б-ил)-3-(2-
(трифторметил)пиридин-4-ил)мочевину, (S)-1-(2-хлор-7-(1-
метоксиэтил)пиразоло[1,5-а]пиримидин-б-ил)-3-(5-цианопиридин-З-ил)мочевину.
Иллюстративные ингибиторы ВТК включают, но не ограничиваются ими, ибрутиниб (PCI-32765); GDC-0834; RN-486; CGI-560; CGI-1764; НМ-71224; СС-292; ONO-4059; CNX-774 или LFM-А13. В одном варианте осуществления ингибитор ВТК не снижает или не ингибирует киназную активность индуцируемой интерлейкином-2 киназы (ITK), например, он выбран из GDC-0834; RN-486; CGI-560;
CGI-1764; HM-71224; CC-292; ONO-4059; CNX-774 или LFM-A13.
В одном варианте осуществления ингибитор киназы
представляет собой ингибитор ВТК, например, ибрутиниб (PCI-
32765). Структура ибрутиниба (1-[(3R)-3-[4-амино-З-(4-
феноксифенил)-1Я-пиразоло[3,4-d]пиримидин-1-ил]пиперидин-1-ил]проп-2-ен-1-он) представлена ниже.
В других вариантах осуществления ингибитор ВТК представляет собой ингибитор ВТК, описанный в международной заявке WO/2015/079417, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме. Например, в некоторых вариантах осуществления ингибитор ВТК представляет собой соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль;
где
R1 представляет собой водород, С1-С6 алкил, необязательно замещенный гидрокси;
R2 представляет собой водород или галоген; R3 представляет собой водород или галоген; R4 представляет собой водород; R5 представляет собой водород или галоген;
или R4 и R5 связаны друг с другом и обозначают связь, -СН2-, -СН2-СН2-, -СН=СН-, -СН=СН-СН2-; -СН2-СН=СН- или -СН2-СН2-СН2-
R6 и R7 обозначают независимо друг от друга Н, С1-С6 алкил, необязательно замещенный гидроксилом, СЗ-Сб циклоалкил, необязательно замещенный галогеном или гидрокси, или галоген;
R8, R9, R, R', R10 и R11 независимо друг от друга обозначают Н, или С1-С6 алкил, необязательно замещенный С1-С6 алкокси; или любые два из R8, R9, R, R', R10 и R11 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, могут образовывать 3-б-членное насыщенное карбоциклическое кольцо;
R12 представляет собой водород или С1-С6 алкил, необязательно замещенный галогеном или С1-С6 алкокси;
или R12 и любой из R8, R9, R, R', R10 или R11 вместе с атомами, с которыми они связаны, могут образовывать 4, 5, б или 7-членное азациклическое кольцо, которое может быть необязательно замещено галогеном, циано, гидроксилом, С1-С6 алкилом или С1-С6 алкокси;
п равен 0 или 1; и
R13 представляет собой С2-С6 алкенил, необязательно замещенный С1-С6 алкилом, С1-С6 алкокси или Ы,Ы-ди-С1-Сб алкиламино; С2-С6 алкинил, необязательно замещенный С1-С6 алкилом или С1-С6 алкокси; или С2-С6 алкиленилоксид, необязательно замещенный С1-С6 алкилом.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор ВТК формулы I
выбран из: N-(3-(5-((1-акрилоилазетидин-З-ил)окси)-б-
аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида; (Е)-N-(3-(б-амино-5-((1-(бут-2-еноил)азетидин-3-
ил)окси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида; N-(3-(б-амино-5-((1-пропиолоилазетидин-З-
ил)окси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида; N-(3-(б-амино-5-((1-(бут-2-иноил)азетидин-3-
ил)окси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида; N-(3-(5-((1-акрилоилпиперидин-4-ил)окси)-б-
аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида; N- (3- (б-амино-5- (2- (За-
метил акрил амид о) этокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; (Е)-N-(3-(б-амино-5-(2-(N-метилбут-
3АМЕНЯЮЩ7АЯ СТРАНИЦА
2-енамидо)этокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-
циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(б-амино-5-(2-(N-
метилпропиоламидо)этокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; (Е)-N-(3-(б-амино-5-(2-(4-метокси Ы-метилбут-2-енамидо)этокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(б-амино-5-(2
(Ы-метилбут-2-инамидо)этокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(2-((4-амино-б-(3
(4-циклопропил-2-фторбензамидо)-5-фтор-2-метилфенил)пиримидин-5-ил)окси)этил)-Ы-метилоксиран-2-карбоксамида; N-(2-((4-амино-б
(3-(б-циклопропил-8-фтор-1-оксоизохинолин-2(1Н)-
ил)фенил)пиримидин-5-ил)окси)этил)-N-метилакриламида; N-(3-(5
(2-акриламидоэтокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-
метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(б-амино-5-(2
(N-этилакриламидо)этокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-
циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(б-амино-5-(2-(N-(2
фторэтил)акриламидо)этокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-
4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(5-((1
акриламидоциклопропил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-
метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; (S)-N-(3-(5-(2
акриламидопропокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-
4-циклопропил-2-фторбензамида; (S)-N-(3-(б-амино-5-(2-(бут-2
инамидо)пропокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-
циклопропил-2-фторбензамида; (S)-N-(3-(б-амино-5-(2-(N-
метилакриламидо)пропокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-
циклопропил-2-фторбензамида; (S)-N-(3-(б-амино-5-(2-(N-метилбут
2-инамидо)пропокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-
циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(б-амино-5-(3-(N-
метилакриламидо)пропокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-
циклопропил-2-фторбензамида; (S)-N-(3-(5-((1-акрилоилпирролидин
2-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-
циклопропил-2-фторбензамида; (S)-N-(3-(б-амино-5-((1-(бут-2
иноил)пирролидин-2-ил)метокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-
метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; (S)-2- (3- (5- ( (1
акрилоилпирролидин-2-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-б-циклопропил-3,4-дигидроизохинолин
1(2Н)-она; N-(2-((4-амино-б-(3-(б-циклопропил-1-оксо-З,4
дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)пиримидин-5-ил)окси)этил)-N-
метилакриламида; N-(3-(5-(((2S,4R)-1-акрилоил-4
метоксипирролидин-2-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-
метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(б-амино-5
(((2S,4R)-1-(бут-2-иноил)-4-метоксипирролидин-2-
ил)метокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; 2- (3- (5- ( ( (2S,4R)-1-акрилоил-4-метоксипирролидин 2-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-
(гидроксиметил)фенил)-б-циклопропил-3,4-дигидроизохинолин-1(2Н)-
она; N-(3-(5-(((2S,4S)-1-акрилоил-4-метоксипирролидин-2
ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-
циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(б-амино-5-(((2S,4S)-1-(бут-2
иноил)-4-метоксипирролидин-2-ил)метокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-
2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(5-(((2S,4R)
1-акрилоил-4-фторпирролидин-2-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-
ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(б
амино-5-(((2S,4R)-1-(бут-2-иноил)-4-фторпирролидин-2-
ил)метокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида; (S)-N-(3-(5-((1-акрилоилазетидин-2-ил)метокси)- б
аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида; (S)-N-(3-(б-амино-5-((1-пропиолоилазетидин-2
ил)метокси)пиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида; (S)-2-(3-(5-((1-акрилоилазетидин-2-ил)метокси)- б
аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-б-
циклопропил-3,4-дигидроизохинолин-1(2Н)-она; (R)-N-(3-(5-((1
акрилоилазетидин-2-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-
метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; (R)-N-(3-(5-((1
акрилоилпиперидин-3-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(5-(((2R,3S)-1 акрилоил-З-метоксипирролидин-2-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида; N-(3-(5
(((2S,4R)-1-акрилоил-4-цианопирролидин-2-ил)метокси)-б-
аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-
фторбензамида или N-(3-(5-(((2S,4S)-1-акрилоил-4
цианопирролидин-2-ил)метокси)-б-аминопиримидин-4-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4-циклопропил-2-фторбензамида.
Если нет иных указаний, химические термины, используемые выше при описании ингибитора ВТК формулы I, используют в соответствии с их значениями, указанными в международной заявке WO/2015/079417, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
Иллюстративные ингибиторы JAK
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор Janus-киназы (JAK). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли (например, рак толстого кишечника, рак предстательной железы, рак легкого, рак молочной железы или рак поджелудочной железы), например, гематологической злокачественной опухоли (например, лейкоз (например, миелоидный лейкоз или лимфоцитарный лейкоз), например, лимфома (например, неходжкинская лимфома), или, например, множественная миелома.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор JAK
представляет собой 2-фтор-Ы-метил-4-(7-(хинолин-б-
илметил)имидазо[1,2-b][1,2,4]триазин-2-ил)бензамид (соединение А17) или его дигидрохлорид, или соединение, описанное в публикации РСТ № W0 2007/070514.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор JAK,
например, 2-фтор-Ы-метил-4-(7-(хинолин-б-илметил)имидазо[1,2-
b][1,2,4]триазин-2-ил)бензамид (соединение А17), или его дигидрохлорид, или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/070514, вводят в дозе приблизительно 400-600 мг (например, в сутки) , например, приблизительно 4 00, 50 0 или 60 0 мг, или приблизительно 400-500 или 500-600 мг.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор JAK представляет собой руксолитиниба фосфат (также известный как JAKAFI; соединение А18) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/070514.
В одном варианте осуществления ингибитор JAK, например,
руксолитиниба фосфат (также известный как JAKAFI; соединение А18) или соединение, описанное в публикации РСТ № WO 2007/070514, вводят в дозе приблизительно 15-25 мг, например, два раза в сутки. В некоторых вариантах осуществления доза составляет приблизительно 15, 2 0 или 2 5 мг, или приблизительно 15-20 или 20-25 мг.
Иллюстративные ингибиторы CRTH2
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в
настоящем описании, включает ингибитор рецептора
хемоаттрактанта, гомологичного молекуле, экспрессируемой на Т-хелпере 2 (CRTH2). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор CRTH2 представляет собой QAV680 (регистрационный номер CAS: 872365-167) . QAV680 также известен как февипипрант и 2-[2-метил-1-[ (4-метилсульфонилфенил)метил]пирроло[2,3-Ь]пиридин-3-ил]уксусная кислота. QAV680 описан, например, в Sandham et al. Bioorg Med Chem. 2013;21(21) :6582-91. QAW039 также известен как [l-(4-метансульфонил-2-трифторметил-бензил)-2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил]уксусная кислота. QAW039 описан, например, в Sykes et al. European Respiratory Journal September 1, 2014 vol. 44 no. Suppl 58 P4074.
В некоторых вариантах осуществления ингибитор CRTH2 представляет собой QAW039 (номер CAS: 872365-14-5).
Другие ингибиторы CRTH2, которые можно использовать в комбинации, включают, например, AZD1981, ARRY-502, сетипипрант (АСТ-453859) иАСТ-129968.
Иллюстративные ингибиторы PFKFB3
В одном варианте осуществления комбинация, описанная в настоящем описании, включает ингибитор б-фосфофрукто-2-киназы/фруктоза-2,б-бифосфатазы 3 (PFKFB3). В некоторых вариантах осуществления комбинацию используют для лечения злокачественной опухоли, например, злокачественной опухоли, описанной в настоящем описании, например, солидной опухоли
(например, распространенная солидная опухоль).
В некоторых вариантах осуществления ингибитор PFKFB3
представляет собой PFK-158. PFK-158 также известен как ACT-PFK-
158 или (Е)-1-(пиридин-4-ил)-3-(7-(трифторметил)хинолин-2-
ил)проп-2-ен-1-он. PFK-158 представляет собой производное 3-(3-пиридинил)-1-[4-пиридинил]-2-пропен-1-она (ЗРО). PFKFB3, который катализирует конвертирование фруктоза-б-фосфата во фруктоза-2,б-бисфосфат, на высоком уровне экспрессируется и является активным в злокачественных клетках человека и играет ключевую роль в повышении как гликолитического потока в злокачественных клетках, так и пролиферации злокачественных клеток. Ингибиторы PFKFB3, например, PFK-158, могут связывать и ингибировать активность PFKFB3, что приводит к ингибированию как гликолитического пути в злокачественных клетках, так и захвата глюкозы злокачественными клетками. Это препятствует продукции макромолекул и выработке энергии, которые вызывают усиленную пролиферацию злокачественных клеток по сравнению с нормальными здоровыми клетками. Лишение злокачественных клеток питательных веществ и энергии приводит к ингибированию роста злокачественных клеток.
PFK158 описан, например, на стр.5 W0 2013/148228.
Средства, подавляющие иммунную систему
В альтернативном варианте осуществления молекулы антител против TIM-3, описанные в настоящем описании, используют для получения антиидиотипических пептидов или антител (Wallmann, J. et al. (2010) "Anti-Ids in Allergy: Timeliness of a Classic Concept," World Allergy Organiz. J. 3 (6) :195-201; Nardi, M. et
В некоторых вариантах осуществления ингибитор PFKFB3 имеет следующую структуру:
al. (2000) "Antiidiotype Antibody Against Platelet Anti-Gpiiia Contributes To The Regulation Of Thrombocytopenia In HIV-1-ITP Patients," J. Exp. Med. 191(12):2093-2100) or mimetics (Zang, Y. C. et al. (2003) "Human Anti-Idiotypic T Cells Induced By TCR Peptides Corresponding To A Common CDR3Sequence Motif In Myelin Basic Protein-Reactive T Cells," Int. Immunol. 15(9):1073-1080; Loiarro, M. et al. (Epub 2010 Apr. 8) "Targeting TLR/IL-1R Signalling In Human Diseases," Mediators Inflamm. 2010:674363) против B7-H1 или PD-1.
Подавление иммунной системы является желательным при
лечении воспалительных и аутоиммунных заболеваний, и реакции
"трансплантат против хозяина" (GvHD). Примеры аутоиммунных
нарушений, которые можно лечить посредством введения антител по
настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими,
очаговую алопецию, анкилозирующий спондилит, антифосфолипидный
синдром, аутоиммунную болезнь Аддисона, аутоиммунные заболевания
надпочечника, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунный
гепатит, аутоиммунный оофорит и орхит, аутоиммунную
тромбоцитопению, болезнь Бехчета, буллезный пемфигоид,
кардиомиопатию, брюшные афты-дерматит, синдром хронической
усталости и иммунной дисфункции (CFIDS), хроническую
воспалительную демиелинизирующую полиневропатию, синдром Черджа-
Стросс, рубцовый пемфигоид, синдром CREST, болезнь холодового
агглютинина, болезнь Крона, дискоидную волчанку, эссенциальную
смешанную криоглобулинемию, фибромиалгию-фибромиозит,
гломерулонефрит, болезнь Грэйвса, синдром Гийена-Барре,
тиреоидит Хашимото, идиопатический фиброз легких, идиопатическую
тромбоцитопеническую пурпуру (ITP), IgA-невропатию, ювенильный
артрит, красный плоский лишай, обыкновенную волчанку, болезнь
Меньера, смешанное заболевание соединительной ткани, рассеянный
склероз, оптический Нейромиелит (NMO), сахарный диабет 1 типа
или иммуноопосредуемый сахарный диабет, миастению, пемфигус
обыкновенный, пернициозную анемию, узелковый полиартериит,
полихондрит, полигландулярные синдромы, ревматическую
полимиалгию, полимиозит и дерматомиозит, первичную
агаммаглобулинемию, первичный билиарный цирроз, псориаз,
псориатический артрит, феномен Рейно, синдром Рейтера,
ревматоидный артрит, саркоидоз, склеродермию, синдром Шегрена,
синдром мышечной скованности, системную красную волчанку,
обыкновенную волчанку, артериит Такаясу, височный
артериит/гигантоклеточный артериит, поперечный миелит, язвенный колит, увеит, васкулит, такой как герпетиформный дерматит васкулит, витилиго и гранулематоз Вегенера.
Примеры воспалительных нарушений, которые можно предупреждать, лечить или контролировать способами по изобретению, включают, но не ограничиваются ими, астму, энцефалит, воспалительное заболевание кишечника, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD), аллергические нарушения, септический шок, фиброз легких, недифференцированную спондилоартропатию, недифференцированную артропатию, артрит, воспалительный остеолиз и хроническое воспаление вследствие хронических вирусных или бактериальных инфекций.
Таким образом, антитела и антигенсвязывающие фрагменты по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения воспалительных и аутоиммунных заболеваний.
Диагностическое применение
В одном аспекте настоящее изобретение относится к диагностическому способу для обнаружения присутствия белка PD-L1 in vitro (например, в биологическом образце, таком как биоптат ткани, например, из злокачественной ткани) или in vivo (например, визуализация у индивидуума in vivo) . Способ включает: (i) приведение в контакт образца с молекулой антитела, описанной в настоящем описании, или введение индивидууму молекулы антитела; (необязательно), (ii) приведение в контакт с ним эталонного образца, например, контрольного образца (например, контрольный биологический образец, такой как плазма, ткань, биоптат) или контрольного индивидуума; и (iii) обнаружение образования комплекса между молекулой антитела и образцом или индивидуумом или контрольным образцом или индивидуумом, где изменение, например, статистически значимое изменение, образования комплекса в образце или у индивидуума относительно контрольного образца или индивидуума указывает на присутствие
PD-L1 в образце. Молекулу антитела можно прямо или непрямо метить поддающимся обнаружению веществом для облегчения обнаружения связанного или несвязанного антитела. Подходящие поддающиеся обнаружению вещества включают различные ферменты, простетические группы, флуоресцентные материалы, люминесцентные материалы и радиоактивные материалы, как описано выше и как более подробно описано ниже.
Термин "образец", как используют для образцов, используемых для обнаружения полипептидов, включает, но не ограничивается ими, клетки, клеточные лизаты, экстракты белков или мембран клеток, жидкости организма или образцы тканей.
Образование комплекса между молекулой антитела и PD-L1 можно обнаружить путем измерения или визуализации либо связывающей молекулы, связанной с антигеном PD-L1, либо несвязанной связывающей молекулы. Можно использовать общепринятые способы анализа для обнаружения, например, твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), радиоиммунный анализ (RIA) или иммуногистохимию тканей. Альтернативно мечению молекулы антитела присутствие PD-L1 в образце можно анализировать посредством конкурентного иммуноанализа с использованием стандартов, меченных поддающимся обнаружению веществом, и немеченой молекулы антитела. В том анализе биологический образец, меченые стандарты и молекулу антитела объединяют и определяют количество меченого стандарта, связанного с немеченой связывающей молекулой. Количество PD-L1 в образце обратно пропорционально количеству меченого стандарта, связанного с молекулой антитела.
Альтернативно или в комбинации со способами, описанными в настоящем описании, описан способ оценки статуса активации иммунных клеток (например, Т-клеток) индивидуума (например, оценка вероятность ответа индивидуума на терапию иммуномодулятором). Способ включает определение уровня и/или распределения активации Т-клеток у индивидуума. В одном варианте осуществления уровень и/или распределение активации Т-клеток включает показатель уровня и/или распределения одного или нескольких из: CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля
(например, одного или нескольких из PD-1, LAG-3, TIM-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1, -3 и/или -5) или CTLA-4), или любой их комбинации. Например, уровень и/или распределение CD8-экспрессирующих клеток можно оценивать в качестве маркера активированных Т-клеток. В других вариантах осуществления можно оценивать уровень и/или распределение клеток, экспрессирующих PD-L1 или другой ингибитор точки контроля. Индивидуума можно оценивать до, в процессе или после проведения терапии иммуномодулятором. В одном варианте осуществления индивидуума оценивают до терапии иммуномодулятором (например, терапия ингибитором молекулы точки контроля), например, до первоначального лечения или до лечения после интервала между лечениями. В одном варианте осуществления повышенный уровень одного или нескольких из CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля у индивидуума (например, относительно эталона, например, контроля) указывает на увеличенную способность индивидуума отвечать на терапию (также называемую в настоящем описании "положительным статусом иммунной активации"). В другом варианте осуществления сниженный уровень одного или нескольких из CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля у индивидуума (например, относительно эталона, например, контроля) указывает на сниженную способность индивидуума отвечать на терапию (также называемую в настоящем описании "отрицательным статусом иммунной активации"). Необязательно способ может включать проведение терапии иммуномодулятором, как описано в настоящем описании (например, ингибитором молекул точки контроля, как описано в настоящем описании), если у индивидуума определяют наличие положительного статуса иммунной активации.
В одном варианте осуществления терапия иммуномодулятором включает активатор костимулирующей молекулы, например, один или несколько активаторов, как описано в настоящем описании (например, агонист молекулы GITR, как описано в настоящем описании). В других вариантах осуществления терапия иммуномодулятором включает ингибитор молекулы иммунной точки контроля, например, один или несколько ингибиторов ингибитора точки контроля, как описано в настоящем описании (например,
ингибитор одного или нескольких из PD-L1, PD-1, TIM-3 или CTLA-4, как описано в настоящем описании). В одном варианте осуществления терапия иммуномодулятором включает молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. В других вариантах осуществления терапия иммуномодулятором включает комбинацию активатора костимулирующей молекулы и ингибитора ингибитора точки контроля.
В некоторых вариантах осуществления уровень и/или распределение CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля определяют in vivo, например, неинвазивным путем (например, путем обнаружения антитела к Т-клеточному маркеру, меченному подающейся обнаружению меткой, с использованием подходящего способа визуализации, например, сканирования с помощью позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ). Например, ПЭТ с антителом-мишенью или иммунный ПЭТ (например, ПЭТ с антителом против CD8 или ПЭТ с антителом против PD-L1) можно использовать для обнаружения уровня и/или распределения (например, локализации опухоли) экспрессирующих CD8 или PD-L1 клеток in vivo. Способы визуализации антител (например, визуализации ПЭТ с антителами) известны в данной области, например, как описано Lamberts, L. Е. et al. (2015) J. Clin. Oncol. 33 (DOI: 10, 1200/JCO. 2014, 57, 8278) ; Tavare, R. et al. (2014) PNAS 111 (3) : 1108-1113; Pampaloni et al. , J Clin Oncol 32:5s, 2014 (suppl; abstr 3084); и Boerman and Oyen (2011) The Journal of Nuclear Medicine 52 (8):1171-72; в патентах США № US 5192525, US 5219548, US 5399338, US 6096874, US 7338651, US 7410943, US 7747308, US 7754884, US 7848557, US 7894649, US 8090175, US 8188116, US 8287471, US 8323621, US 8372868, US 8532739, US 8 67 94 83, US 8771966 и US 884132 0; публикациях патентных заявок США № US 2002/122806, US 2003/129579, US 2004/096915, US 2004/096915, US 2005/215883, US 2006/193773, US 2007/258888, US 2008/004521, US 2008/031823, US 2008/119718, US 2008/130825, US 2008/146914, US 2008/200806, US 2008/230703, US 2008/241074, US 2008/241873, US 2010/034735, US 2010/092384, US 2010/258138, US 2010/278739, US 2010/324130, US 2011/014120, US 2011/064652, US 2011/116703, US 2012/052010, US 2013/136688, US 2013/157289, US
2013/177502, US 2015/185204, US 2015/190534 и US 2015/217006; публикациях международных патентных заявок № WO 92/19213, WO 9640616, WO 2002/035232, WO 2002/047537, WO 2003/020701, WO 2003/034068, WO 2005/012335, WO 2005/046733, WO 2005/077263, WO 2006/074129, WO 2006/100562, WO 2006/147379, WO 2007/092115, WO 2008/023251, WO 2008/057166, WO 2008/115854, WO 2008/143706, WO 2009/121631, WO 2010/127054, WO 2011/153346, WO 2015/085179, WO 2015/100498, WO 2015/103039 и WO 92/06068; и патентах Европы № ЕР 0551434 BI, ЕР 1330652 В1 и ЕР 1861713 В1; все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок.
В одном варианте осуществления уровень и/или распределение CD8 определяют in vivo, например, путем обнаружения антитела против CD8, меченного поддающимся обнаружению реагентом ПЭТ, например, конъюгированного с S-2-(4-изотиоцианатбензил)-1,4,7-триазациклононан-1,4,7-триуксусной кислотой для радиоактивного мечения 64Си, например, как описано в Tavare, R. et al. (2014) PNAS 111(3):1108-1113. В другом варианте осуществления уровень и/или распределение PD-1 или PD-L1 определяют in vivo, например, путем обнаружения антитела против PD-1 или антитела против PD-L1, меченного поддающимся обнаружению реагентом ПЭТ, например, 18Е-фтордезоксиглюкозой (FDG), например, как описано в Pampaloni et al. , J Clin Oncol 32:5s, 2014 (suppl; abstr 3084) . В другом варианте осуществления уровень и/или распределение CTLA-4 определяют in vivo, например, путем обнаружения антитела против CTLA-4, меченного поддающимся обнаружению реагентом ПЭТ, например, как описано в WO 2009/121631.
В других вариантах осуществления уровень CD8, PD-L1 или другого ингибитора точки контроля определяют в образце (например, биоптате опухоли), полученном от индивидуума (например, с использованием иммуногистохимических способов).
Также в объем изобретения входят реагенты для обнаружения. Примером являются реагенты иммуно-ПЭТ, которые включают молекулу антитела против PD-L1, как описано в настоящем описании. Иллюстративные реагенты для мечения включают, но не ограничиваются ими, бром-7б (76Вг) , кальций-47 (47Са) , углерод-11 (НС), углерод-14 (14С) , хром-51 (51Сг) , кобальт-57 (57Со) ,
кобальт-58 (58Со) , медь-64 (64Си) , эрбий-169 (169Ег) , фтор-18 (18F) , фтордезоксиглюкозу (18F-FDG), галлий-67 (67Ga) , галлий-68 (68Ga) , водород-3 (3Н) , индий-Ill (ш1п), йод-123 (1231), йод-124 (1241), йод-125 (1251), йод-131 (1311), железо-59 (59Fe) , криптон-81т (81тКг) , лютеций-177 (177Lu) , азот-13 (13N) , кислород-15 (150) , фосфор-32 (32Р) , самарий-153 (153Sm) , селен-75 (75Se), стронций-89 (89Sr) , таллий-201 (201Т1), натрий-22 (22Na) , натрий-24 (24Na) , технеций-99т (99тТс) , ксенон-133 (133Хе) , иттрий-8б (86Y) , иттрий-88 (88Y) , иттрий-90 (90Y) и цирконий-89 (89Zr) . Дополнительные иллюстративные реагенты для мечения и их применения в иммунном ПЭТ описаны, например, в Lamberts, L. Е. et al. (2015) J. Clin. Oncol. 33 (DOI: 10,1200/JCO.2014,57,8278) и Boerman and Oyen (2011) The Journal of Nuclear Medicine 52 (8):1171-72. Нуклеиновые кислоты
Настоящее изобретение также относится к нуклеиновым кислотам, содержащим нуклеотидные последовательности, которые кодируют вариабельные области тяжелой и легкой цепей и CDR или гипервариабельные петли молекул антител против PD-L1, как описано в настоящем описании. Например, настоящее изобретение относится к первой и второй нуклеиновой кислоте, кодирующей вариабельные области тяжелой и легкой цепей, соответственно, молекулы антитела против PD-L1, выбранной из одной или несколько из молекул антител, описанных в настоящем описании. Нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, как указано в таблицах настоящего описания, или последовательность, по существу идентичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичная ей или отличающаяся не более чем на 3, б, 15, 3 0 или 45 нуклеотидов от последовательностей, показанных в таблицах настоящего описания).
В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельных петли из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, как указано в таблицах, представленных в настоящем описании, или последовательность, по существу
гомологичную ей (например, последовательность по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одну или несколько замен, например, консервативных замен). В других вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельных петли из вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, как указано в таблицах, представленных в настоящем описании, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одну или несколько замен, например, консервативных замен). В других вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR или гипервариабельных петель из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, имеющих аминокислотную последовательность, как указано в таблицах, представленных в настоящем описании, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или имеющую одну или несколько замен, например, консервативных замен).
В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельных петли из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей нуклеотидную последовательность, как указано в таблицах, представленных в настоящем описании, последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или способную гибридизоваться в условиях жесткости, описанных в настоящем описании). В другом варианте осуществления нуклеиновая кислота может содержать последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельных петли из вариабельной области легкой цепи, имеющей нуклеотидную последовательность, как указано в таблицах,
представленных в настоящем описании, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или способную гибридизоваться в условиях жесткости, описанных в настоящем описании). В другом варианте осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR или гипервариабельных петель из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, имеющих нуклеотидную последовательность, как указано в таблицах, представленных в настоящем описании, или последовательность, по существу гомологичную ей (например, последовательность, по меньшей мере приблизительно на 85%, 90%, 95%, 99% или более идентичную ей и/или способную гибридизоваться в условиях жесткости, описанных в настоящем описании).
В другом аспекте заявка относится к клеткам-хозяевам и векторам, содержащим нуклеиновые кислоты, описанные в настоящем описании. Нуклеиновые кислоты могут присутствовать в одном векторе или в отдельных векторах, находящихся в той же клетке-хозяине или в отдельной клетке-хозяине, как более подробно описано ниже.
Векторы
Кроме того, в рамках настоящего изобретения
предусматриваются векторы, содержащие нуклеотидные
последовательности, кодирующие молекулу антитела, описанную в настоящем описании. В одном варианте осуществления векторы содержат нуклеотиды, кодирующие молекулу антитела, описанную в настоящем описании. В одном варианте осуществления векторы содержат нуклеотидные последовательности, описанные в настоящем описании. Векторы включают, но не ограничиваются ими, вирус, плазмиду, космиду, фаг лямбда или искусственную хромосому дрожжей (YAC).
Можно использовать многочисленные векторные системы. Например, в одном классе векторов используются ДНК-элементы, которые происходят из вирусов животных, например, таких как вирус папилломы крупного рогатого скота, вирус полиомы,
аденовирус, вирус коровьей оспы, вакуловирус, ретровирусы (вирус саркомы Рауса, MMTV или MOMLV) или вирус SV40. В другом классе векторов используются РНК-элементы, происходящие из РНК-вирусов, таких как вирус леса Семлики, вирус восточного энцефалита лошадей и флавивирусы.
Кроме того, селекцию клеток, которые имеют стабильно встроенную ДНК в их хромосомы, можно проводить путем внесения одного или нескольких маркеров, которые позволяют проведение селекции трансфицированных клеток-хозяев. Маркер может обеспечивать, например, прототропию ауксотрофному хозяину, устойчивость к биоцидам (например, антибиотикам) или резистентность к тяжелым металлам, таким как медь или сходные с ней. Ген селективного маркера может быть либо прямо связан с последовательностями ДНК, подлежащими экспрессии, либо он может быть введен в ту же клетку посредством совместной трансформации. Для оптимального синтеза мРНК могут потребоваться дополнительные элементы. Эти элементы могут включать сигналы сплайсинга, а также промоторы транскрипции, энхансеры и сигналы терминации.
После получения экспрессирующего вектора или
последовательности ДНК, содержащей конструкции, для экспрессии, экспрессирующие векторы можно трансфицировать или вводить в соответствующую клетку-хозяина. Для достижения этого можно использовать различные способы, например, такие как слияние протопластов, осаждение с фосфатом кальция, электропорация, ретровирусная трансдукция, вирусная трансфекция, генная пушка, трансфекция на липидной основе или другие общепринятые способы. В случае слияния протопластов клетки выращивают в среде и подвергают скринингу в отношении соответствующей активности.
Способы и условия клуьтивирования полученных
трансфицированных клеток и выделения продуцированной молекулы антитела известны специалистам в данной области, и их можно варьировать или оптимизировать, в зависимости от конкретного используемого экспрессирующего вектора и клетки-хозяина млекопитающих, исходя из настоящего писания.
Клетки
Настоящее изобретение также относится к клеткам-хозяевам,
содержащим нуклеиновую кислоту, кодирующую молекулу антитела, как описано в настоящем описании.
В одном варианте осуществления клетки-хозяева генетически модифицированы так, чтобы они содержали нуклеиновые кислоты, кодирующие молекулу антитела.
В одном варианте осуществления клетки-хозяева модифицируют способами генной инженерии с использованием экспрессирующей кассеты. Выражение "экспрессирующая кассета" относится к нуклеотидным последовательностям, которые способны влиять на экспрессию гена у хозяев, совместимых с такими последовательностями. Такие кассеты могут включать промотор, открытую рамку считывания с интронами или без них, и сигнал терминации. Также можно использовать дополнительные факторы, необходимые или полезные для достижения экспрессии, например, такие как индуцибельный промотор.
Также изобретение относится к клеткам-хозяевам, содержащим векторы, описанные в настоящем описании.
Клетка может представлять собой, но не ограничивается ими, эукариотическую клетку, бактериальную клетку, клетку насекомых или клетку человека. Подходящие эукариотические клетки включают, но не ограничиваются ими, клетки Vero, клетки HeLa, клетки COS, клетки СНО, клетки НЕК2 93, клетки ВНК и клетки MDCKII. Подходящие клетки насекомых включают, но не ограничиваются ими, клетки Sf9.
Таблица 1. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности молекул антител мыши, химерных и гуманизированных молекул антител. Молекулы антител включают mAb мыши ВАР058, химерное mAb BAP058-chi и гуманизированные mAb с BAP058-hum01 по BAP058-huml7 и с ВАР058-С1опе-К по ВАР058-С1опе-О. Показаны аминокислотные и нуклеотидные последовательности CDR тяжелых и легких цепей, вариабельных областей тяжелых и легких цепей, и тяжелых и легких цепей.
ВАР058 НС
SEQ ID N0: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO:
4(Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO:
5(Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 6
QVH L Q Q P GAE LVK P GAS VKL S С KAS GY T F T S YWMYWV KQGPGRGLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNKATLTVDK SSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTSVTVSS
SEQ ID NO: 7
ДНК VH
caggtccacctgcagcagcctggggctgagcttgtga agcctggggcttcagtgaagctgtcctgcaaggcttc tggctacaccttcaccagttactggatgtactgggtg aaacaggggcctggacgaggccttgagtggattggaa ggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatga gaagttcaagaacaaggccacactgactgtagacaaa tcctccagcacagcctacatgcagctcagcagcctga catctgaggactctgcggtctattattgtgcaaggga ctatagaaaggggctctatgctatggactactggggt caaggaacctcagtcaccgtctcctca
BAP058 LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 8
DIVMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQSPKLLIYWASTRHTGVPDRFTGSGSGTDFTLT ISNVQSEDLADYFCQQYNSYPLTFGAGSKLELK
SEQ ID NO: 15
ДНК VL
Gacattgtgatgacccagtctcacaaattcatgtcca catcagtaggagacagggtcagcatcacctgcaaggc cagtcaggatgtgggtactgctgtagcctggtatcaa cagaaaccagggcaatctcctaaactactgatttact gggcatccacccggcacactggagtccctgatcgctt cacaggcagtggatctgggacagatttcactctcacc attagcaatgtgcagtctgaagacttggcagattatt tctgtcagcagtataacagctatcctctcacgttcgg tgctgggtccaagctggagctgaaa
BAP058-chi HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 16
EVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMYWV KQGPGRGLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNKATLTVDK SSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
BAP058-chi LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 17
DIMMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQSPKLLIYWASTRHTGVPDRFTGSGSGTDFTLT ISNVQSEDLADYFCQQYNSYPLT FGQGTKVEIK
BAP058-hum01-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 18
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 19
ДНК VH
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA
G GAT Т GAT С С ТААТAG Т G G GAG ТAC TAAGТACААТ GA GAAG T T СAAGAACAGAT Т САС СAT С Т С СAGAGATGAT ТСAAAGAACACGGСGТATСТGСАААТGAACAGССТGA AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 20
Тяжелая цепь
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVSCKAS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 21
ДНК,
тяжелая цепь
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAT T СAC СAT С T С СAGAGAT GAT TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGAC С T AC AC С T G С AAC G T AGAT С AC AAG С С С AG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG СAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC СAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G СAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC СAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG СAG G С TAAC С G T G GACAAGAG СAG G T G G СAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC СAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum01-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 22
DIVMTQTPLSLPVTPGEPASISCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPARFSGSGSGTEFTLT ISSLQSEDFAVYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 23
ДНК VL
GATATTGTGATGACCCAGACTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCТ CCACAGC Т СС Т GAT С TAT Т GGGCATCCACCCGGCACACTGGGATCCCAGCCAGGTT CAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACC AT СAG СAG С С Т G СAG Т С Т GAAGAT Т Т Т G СAG Т Т ТAT Т ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G Т G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 24
Легкая цепь
DIVMTQTPLSLPVTPGEPASISCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPARFSGSGSGTEFTLT ISSLQSEDFAVYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 25
ДНК,
легкая цепь
GATATTGTGATGACCCAGACTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGATCCCAGCCAGGTT CAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACC AT СAG СAG С С T G СAG T С T GAAGAT T T T G СAG T T TAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG СAG GACAG СAAG GACAG СAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T СAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA
СAG G G GAGAG T G T
BAP058-hum02-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 18
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 19
ДНК VH
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAT T СAC СAT С T С СAGAGAT GAT TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 20
Тяжелая цепь
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV
TCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 21
ДНК,
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA
тяжелая
AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC
цепь
TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG
CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA
GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA
GAAG T T СAAGAACAGAT T СAC СAT С T С СAGAGAT GAT
TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA
AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGСССAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT
GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC
TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC
ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG СAG T T С
AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC
TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G
CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG
AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С
СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC СAG GAG GAGAT
GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G СAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC СAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG СAG G С TAAC С G T G GACAAGAG СAG G T G G СAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC СAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum02-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 26
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTLT ISSLQPEDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 27
ДНК VL
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTG CAT С T G TAG GAGACAGAG T СAC CATCAC T T GCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAT TTCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCT GAAGAT T T T G СAAC T TAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 28
Легкая
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYL
цепь
QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTLT ISSLQPEDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 29
ДНК,
легкая цепь
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTG CAT С T G TAG GAGACAGAG T СAC CATCAC T T GCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAT TTCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCT GAAGAT T T T G СAAC T TAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG СAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-hum03-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3
HCDR3
DYRKGLYAMDY
(Chothia)
SEQ ID NO: 30
ЕVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT SYWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 31
ДНК VH
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCTACAGTGAAAATCTCCTGCAAGGTTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG СAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 32
Тяжелая цепь
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 33
ДНК,
тяжелая цепь
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCTACAGTGAAAATCTCCTGCAAGGTTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG СAG С С T GA
GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGСССAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG СAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC СAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G СAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG СAG G С TAAC С G T G GACAAGAG СAG G T G G СAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum03-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10
LCDR2
WASTRHT
(Kabat)
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 34
ЕIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPDRFSGSGSGTDFTLK ISRVEAEDVGVYYCQQYNSYPLT FGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 35
ДНК VL
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCAGACAGGTT CAGTGGCAGTGGGTCAGGCACT GAT TTCACACT GAAA ATCAGCAGGGTGGAGGCTGAGGATGTTGGAGTTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 36
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPDRFSGSGSGTDFTLK ISRVEAEDVGVYYCQQYNSYPLT FGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 37
ДНК,
легкая цепь
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCAGACAGGTT CAGTGGCAGTGGGTCAGGCACT GAT TTCACACT GAAA ATCAGCAGGGTGGAGGCTGAGGATGTTGGAGTTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG
CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG СAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-hum04-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 38
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQAPGQGLEWMGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTISVDT SKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 39
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC СATAT СAG TAGACAC G TCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGA CCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCAAGGGA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 40
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQAPGQGLEWMGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTISVDT SKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 41
ДНК,
тяжелая цепь
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC СATAT СAG TAGACAC G TCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGA CCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGСССAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG СAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC СAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G СAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG СAG G С TAAC С G T G GACAAGAG СAG G T G G СAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum04-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 42
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 43
ДНК VL
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG
Т GAC Т С СAAAG GAGAAAG Т CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT СAG T G GAAG T G GATС T GGGACAGAT T T TAC T T T CACC AT CAGCAGCC T GCAGCC T GAAGATAT T GCAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 44
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 45
ДНК,
легкая цепь
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT СAG T G GAAG T G GATС T GGGACAGAT T T TAC T T T CACC AT CAGCAGCC T GCAGCC T GAAGATAT T GCAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG СAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-hum05-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 46
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWI RQSPSRGLEWLGRIDPNSGSTKYNEKFKNRLTISKDT SKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 47
ДНК VH
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCTACAGTGAAAATCTCCTGCAAGGTTTC T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС AGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGACT CACСAT С T ССAAGGACACС T С CAAAAACCAGGTGGTCCT TACAAT GACСAACAT GG ACCCTGTG GACACAG CCACGTATTACTGTG СAAG G GA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 48
Тяжелая цепь
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWI RQSPSRGLEWLGRIDPNSGSTKYNEKFKNRLTISKDT SKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 49
ДНК,
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA
тяжелая
AGCCTGGGGCTACAGTGAAAATCTCCTGCAAGGTTTC
цепь
T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС
AGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGTA
GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA
GAAG T T СAAGAACAGACT CACСAT С T ССAAGGACACС
T С CAAAAACCAGGTGGTCCT TACAAT GACСAACAT GG
ACCCTGTG GACACAG CCACGTATTACTGTG СAAG G GA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT
GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC
TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC
ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С
AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC
TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G
CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG
AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С
СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT
GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA
GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA
G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С
TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC
AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum05-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 42
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 43
ДНК VL
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAG T G GAAG T G GATС T GGGACAGAT T T TAC T T T CACC AT CAGCAGCC T GCAGCC T GAAGATAT T GCAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 44
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD
YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 45
ДНК,
легкая цепь
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAG T G GAAG T G GATС T GGGACAGAT T T TAC T T T CACC AT CAGCAGCC T GCAGCC T GAAGATAT T GCAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-hum06-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 50
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWI RQPPGKGLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTITADK
STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 51
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACС Т Т CACCAGТ ТAC TGGATGTAC TGGATС CGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 52
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWI RQPPGKGLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 53
ДНК,
тяжелая цепь
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС CGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum06-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 42
ЕIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 43
ДНК VL
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAG T G GAAG T G GATС T GGGACAGAT T T TAC T T T CACC AT CAGCAGCC T GCAGCC T GAAGATAT T GCAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 44
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 45
ДНК,
легкая цепь
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAG T G GAAG T G GATС T GGGACAGAT T T TAC T T T CACC AT CAGCAGCC T GCAGCC T GAAGATAT T GCAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT
GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-hum07-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 54
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWI RQSPSRGLEWLGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 55
ДНК VH
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС AGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAT T CAC СAT С T С СAGAGAT GAT TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 56
Тяжелая цепь
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWI RQSPSRGLEWLGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 57
ДНК,
тяжелая цепь
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС AGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAT T CAC СAT С T С СAGAGAT GAT TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum07-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 58
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPPRFSGSGYGTDFTLT INNIESEDAAYYFCQQYNSYPLTFGQGTKVEIК
SEQ ID NO: 59
ДНК VL
GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG
СAGAAG CCAGGGCAGTCТ CCACAGC Т СС Т GAT С TAT Т GGGCATCCACCCGGCACACTGGGATCCCACCTCGATT СAG Т G G СAG CGGGTATG GAACAGAT Т Т TAC С С Т САСА AT TAATAACATAGAAT С Т GAG GAT G С Т G СATATTAC T TCTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 60
Легкая цепь
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPPRFSGSGYGTDFTLT INNIESEDAAYYFCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 61
ДНК,
легкая цепь
GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGCCACCCTGTCTT TGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGATCCCACCTCGATT CAG T G G CAG CGGGTATG GAACAGAT T T TAC С С T СACA AT TAATAACATAGAAT С T GAGGAT GC T GCATAT TAC T TCTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-hum08-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
(Kabat)
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 62
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRLTISKDT SKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 63
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCTCGTGGACAACGCCTTGAGTGGATAGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGACT CACСAT С T ССAAGGACACС T С CAAAAACCAGGTGGTCCT TACAAT GACСAACAT GG ACCCTGTG GACACAG CCACGTATTACTGTG СAAG G GA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 64
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRLTISKDT SKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS
LGK
SEQ ID NO: 65
ДНК,
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA
тяжелая
AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC
цепь
TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG
CGACAGGCTCGTGGACAACGCCTTGAGTGGATAGGTA
GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA
GAAG T T СAAGAACAGACT CACСAT С T ССAAGGACACС
T С CAAAAACCAGGTGGTCCT TACAAT GACСAACAT GG
ACCCTGTG GACACAG CCACGTATTACTGTG СAAG G GA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT
GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC
TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC
ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С
AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC
TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G
CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG
AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С
СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT
GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA
GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA
G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С
TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC
AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G
GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum08-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 66
DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 67
ДНК VL
GATGTTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCTTGGACAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 68
Легкая цепь
DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 69
ДНК,
легкая цепь
GATGTTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCTTGGACAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-hum09-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 50
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWI RQPPGKGLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG
QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 51
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACС Т Т CACCAGТ ТAC TGGATGTAC TGGATС CGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 52
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWI RQPPGKGLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 53
ДНК,
тяжелая цепь
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС CGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-hum09-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12
LCDR1
SQDVGTA
(Chothia)
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 22
DIVMTQTPLSLPVTPGEPASISCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPARFSGSGSGTEFTLT ISSLQSEDFAVYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 23
ДНК VL
GATATTGTGATGACCCAGACTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGATCCCAGCCAGGTT CAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACC AT CAG CAG С С T G CAG T С T GAAGAT T T T G CAG T T TAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 24
Легкая цепь
DIVMTQTPLSLPVTPGEPASISCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPARFSGSGSGTEFTLT ISSLQSEDFAVYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 25
ДНК,
легкая цепь
GATATTGTGATGACCCAGACTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGATCCCAGCCAGGTT CAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACC AT CAG CAG С С T G CAG T С T GAAGAT T T T G CAG T T TAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G
AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-humlO-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 70
QITLKESGPTLVKPTQTLTLTCTFSGYTFTSYWMYWV RQAPGKGLEWVSRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 71
ДНК VH
CAGATCACCTTGAAGGAGTCTGGTCCTACGCTGGTGA AAC С СACACAGAC С С T CAC G С T GAC С T G CAC С T T С T С TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTC CGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCAGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 72
Тяжелая
QITLKESGPTLVKPTQTLTLTCTFSGYTFTSYWMYWV
цепь
RQAPGKGLEWVSRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 73
ДНК,
тяжелая цепь
CAGATCACCTTGAAGGAGTCTGGTCCTACGCTGGTGA AAC С СACACAGAC С С T CAC G С T GAC С T G CAC С T T С T С TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTC CGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCAGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-humlO-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 66
DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 67
ДНК VL
GATGTTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCTTGGACAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT
GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С Т G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 68
Легкая цепь
DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 69
ДНК,
легкая цепь
GATGTTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCTTGGACAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-humll-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 30
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 31
ДНК VH
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCTACAGTGAAAATCTCCTGCAAGGTTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 32
Тяжелая цепь
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 33
ДНК,
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA
тяжелая
AGCCTGGGGCTACAGTGAAAATCTCCTGCAAGGTTTC
цепь
TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG
CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA
GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA
GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA
T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA
GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT
GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC
TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC
ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С
AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC
TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G
CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG
AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С
СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT
GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA
GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA
G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С
TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC
AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G
GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT
G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-humll-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 66
DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 67
ДНК VL
GATGTTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCG TCACCCTTGGACAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 68
Легкая цепь
DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 69
ДНК,
GATGTTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCG
легкая цепь
TCACCCTTGGACAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-huml2-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 38
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQAPGQGLEWMGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTISVDT SKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 39
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC СATAT CAG TAGACAC G TCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGA CCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 40
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQAPGQGLEWMGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTISVDT SKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 41
ДНК,
тяжелая цепь
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC СATAT CAG TAGACAC G TCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGA CCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-huml2-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 74
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 75
ДНК VL
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTG CAT С T G TAG GAGACAGAG T CAC CATCAC T T GCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAG T G GAAG T G GATС T GGGACAGAT T T TAC T T T CACC AT CAGCAGCC T GCAGCC T GAAGATAT T GCAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 76
Легкая цепь
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 77
ДНК,
легкая цепь
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTG CAT С T G TAG GAGACAGAG T CAC CATCAC T T GCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAG T G GAAG T G GATС T GGGACAGAT T T TAC T T T CACC AT CAGCAGCC T GCAGCC T GAAGATAT T GCAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG
AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-huml3-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 78
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQARGQRLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRFTISRDN SKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 79
ДНК VH
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCTACAGTGAAAATCTCCTGCAAGGTTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCTCGTGGACAACGCCTTGAGTGGATAGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAT T CAC СAT С T С СAGAGACAAT T С СAAGAACAC GCTGTATCTT CAAATGAACAGСС T GA GAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO:
247
Тяжелая цепь
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQARGQRLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRFTISRDN
SKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG
QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL
VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL
SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY
GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV
TCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF
NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE
KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK
GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS
LGK
SEQ ID NO: 81
ДНК,
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGA
тяжелая
AGCCTGGGGCTACAGTGAAAATCTCCTGCAAGGTTTC
цепь
TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG
CGACAGGCTCGTGGACAACGCCTTGAGTGGATAGGTA
GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA
GAAG T T СAAGAACAGAT T CAC СAT С T С СAGAGACAAT
T С СAAGAACAC GCTGTATCTT CAAATGAACAGСС T GA
GAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT
GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC
TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC
ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С
AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-huml3-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 82
AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 83
ДНК VL
GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTG CAT С T G TAG GAGACAGAG T CAC CATCAC T T GCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCCTCGAGGTT
CAGTGGCAGTG GAT С Т G G GACAGAT TTCACCTTTACC AT CAG TAG С С T G GAAG С T GAAGAT G С T G СAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 84
Легкая цепь
AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 85
ДНК,
легкая цепь
GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTG CAT С T G TAG GAGACAGAG T CAC CATCAC T T GCAAGGC CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCTG СAGAAG CCAGGGCAGTCT CCACAGC T СС T GAT С TAT T GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCCTCGAGGTT CAGTGGCAGTG GAT С T G G GACAGAT TTCACCTTTACC AT CAG TAG С С T G GAAG С T GAAGAT G С T G СAACATAT T ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-huml4-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3
HCDR3
DYRKGLYAMDY
(Kabat)
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 18
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 19
ДНК VH
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAT T CAC СAT С T С СAGAGAT GAT TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 20
Тяжелая цепь
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 21
ДНК,
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA
тяжелая
AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC
цепь
TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG
CGACAGGCCACTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGTA
GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA
GAAG T T СAAGAACAGAT T CAC СAT С T С СAGAGAT GAT
TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA
AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT
GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC
TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC
ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С
AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC
TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G
CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG
AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С
СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT
GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA
GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA
G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С
TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC
AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G
GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT
G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT
CTGGGTAAA
BAP058-huml4-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 86
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 87
ДНК VL
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 88
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 89
ДНК,
легкая
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С
цепь
CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-huml5-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 50
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWI RQPPGKGLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 51
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA
AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACС Т Т CACCAGТ ТAC TGGATGTAC TGGATС CGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 52
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWI RQPPGKGLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 53
ДНК,
тяжелая цепь
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС CGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATTGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAG T CAC GAT TAC С G С G GACAAA T С CAC GAG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T GA GATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-huml5-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13
LCDR2
WAS
(Chothia)
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 86
ЕIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 87
ДНК VL
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 88
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 89
ДНК,
легкая цепь
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА
CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-huml6-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 54
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWI RQSPSRGLEWLGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 55
ДНК VH
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС AGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAT T CAC СAT С T С СAGAGAT GAT TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 56
Тяжелая цепь
QVQLVQS GAEVKKPGASVKVS CKAS GYT FT S YWMYWI RQSPSRGLEWLGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDD SKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG
QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL
VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL
SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY
GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV
TCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF
NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE
KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK
GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS
LGK
SEQ ID NO: 57
ДНК,
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGA
тяжелая
AGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTC
цепь
T GGC TACAC С T T CAC CAG T TAC TGGATGTAC TGGATС
AGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTTGAGTGGCTGGGTA
GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA
GAAG T T СAAGAACAGAT T CAC СAT С T С СAGAGAT GAT
TСAAAGAACACGGСGTATСTGСАААТGAACAGССTGA
AAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCAAGGGA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT
GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC
TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC
ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С
AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC
TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT CTGGGTAAA
BAP058-huml6-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 86
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 87
ДНК VL
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC
ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G Т G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 88
Легкая цепь
ЕIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 89
ДНК,
легкая цепь
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-huml7-HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 62
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRLTISKDT SKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 63
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCTCGTGGACAACGCCTTGAGTGGATAGGTA GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA GAAG T T СAAGAACAGAC T CAC СAT С T С СAAG GACAC С T С CAAAAACCAGGTGGTCCT TACAAT GACСAACAT GG ACCCTGTG GACACAG CCACGTATTACTGTG СAAG G GA CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCC
SEQ ID NO: 64
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRLTISKDT SKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LGK
SEQ ID NO: 65
ДНК,
тяжелая
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAA AGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATCTCCTGTAAGGGTTC
цепь
TGGCTACACCTTCACCAGTTACTGGATGTACTGGGTG
CGACAGGCTCGTGGACAACGCCTTGAGTGGATAGGTA
GGATTGATCCTAATAGTGG GAG TAC TAAG TACAAT GA
GAAG T T СAAGAACAGAC T CAC СAT С T С СAAG GACAC С
T С CAAAAAC CAG GTGGTCCT TACAAT GAC СAACAT G G
ACCCTGTG GACACAG CCACGTATTACTGTG СAAG G GA
CTATAGAAAGGGGCTCTATGCTATGGACTACTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCCGCTTCCACCA
AGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAG
GAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGT
GGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTC
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCA
С GAAGACС TACACС T GСAACGTAGAT СACAAGССCAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAGAG T T GAG T С САААТAT
GGTCCCCCATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAGTTCC
TGGGGGGACCATCAGTCTTCCTGTTCCCCCCAAAACC
CAAGGACACTCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTC
ACGTGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCAGGAAGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGATGGCGTGGAGGT
G СATAAT G С СAAGACAAAG С С G С G G GAG GAG CAG T T С
AACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCC
TGCACCAG GAC T G G С T GAAC G G СAAG GAG TACAAG T G
CAAGGTGTCCAACAAAGGCCTCCCGTCCTCCATCGAG
AAAAC СAT С T С СAAAG С СAAAG GGCAGCCCC GAGAG С
СACAG G T G TACAC CCTGCCCCCATCC CAG GAG GAGAT
GACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAA
GGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA
G СAAT G G G CAG С С G GAGAACAAC TACAAGAC CAC G С С
TCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTAC
AG CAG G С TAAC С G T G GACAAGAG CAG G T G G CAG GAG G
GGAATGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCT
G СACAAC CAC TACACACAGAAGAG CCTCTCCCTGTCT
CTGGGTAAA
BAP058-huml7-LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 86
ЕIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 87
ДНК VL
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG С СAAG G GAC СAAG G T G GAAAT СAAA
SEQ ID NO: 88
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 89
ДНК,
легкая цепь
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTTCAGTCTG T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC CAT CAC С T G СAAG G С CAGTCAGGATGTGGGTACTGCTGTAGCCTGGTACCAG
CAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATT GGGCATCCACCCGGCACACTGGGGTCCCATCAAGGTT CAGCGGCAGTG GAT С T G G GACAGAAT TCACTCTCACC ATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATT ACTGTCAGCAGTATAACAGCTATCCTCTCACGTTCGG CCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGTACGGTGGCT GCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGC AGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCT GAATAAC ТТСТАТСС СAGAGAG G С СAAAG TACAG T G G AAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGG AGAG T G T СACAGAG CAG GACAG СAAG GACAG CAC СТА CAGCCTCAGCAGCACCCT GAC G С T GAG СAAAG СAGAC TAC GAGAAACACAAAG TCTACGCCTGC GAAG T CAC С С ATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAA СAG G G GAGAG T G T
BAP058-Clone К НС
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 30
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID N0:196
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGA AACCCGGCGCTACCGTGAAGATCTCCTGCAAGGTGTC
CGGCTACACCTTCACCAGCTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCTACCGGCCAGGGCCTGGAATGGATGGGCA GAATСGACСССAACТССGGСТССАССAAGТACAACGA GAAG Т Т СAAGAAC С G С G Т GAC CAT CAC С G С С GACAAG TCCACCTCCACCGCCTACATGGAACTGTCCTCCCTGC G GAG С GAG GACAC CGCCGTGTACTACTGCGC СAGAGА CTACCGGAAGGGCCTGTACGCCATGGACTATTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT
SEQ ID NO:197
Тяжелая цепь
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LG
SEQ ID N0:198
ДНК,
тяжелая цепь
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGA AACCCGGCGCTACCGTGAAGATCTCCTGCAAGGTGTC CGGCTACACCTTCACCAGCTACTGGATGTACTGGGTG CGACAGGCTACCGGCCAGGGCCTGGAATGGATGGGCA GAATСGACСССAACTССGGСTССACСAAGTACAACGA GAAG T T СAAGAAC С G С G T GAC CAT CAC С G С С GACAAG TCCACCTCCACCGCCTACATGGAACTGTCCTCCCTGC G GAG С GAG GACAC CGCCGTGTACTACTGCGC СAGAGA CTACCGGAAGGGCCTGTACGCCATGGACTATTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCCACCA AGGGCCCAAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCCAG AAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG GTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCT GGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTG AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCA С СAAGAC С TACAC С T G TAAC G T G GAC СACAAG С С CAG СAACAC СAAG G T G GACAAGAG G G T G GAGAG СAAG TAC GGCCCACCCTGCCCCCCCTGCCCAGCCCCCGAGTTCC TGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCC СAAG GACAC С С T GAT GAT CAG СAGAACССССGAGGТ G ACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCG AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGT G СACAAC G С СAAGAC СAAG С С СAGAGAG GAG СAG T T T AACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGC T G CAC CAG GAC T G G С T GAAC G G СAAAGAG TACAAG T G TAAG G T С T С СAACAAG G G С С T G С СAAG СAG СAT С GAA AAGAC CAT CAG СAAG G С СAAG G G С CAG С С TAGAGAG С С С CAG G Т С TACАС С С Т G С САС С СAG С СAAGAG GAGAT GACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAG GGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA G СAAC GGCСAGСССGAGAACAAC ТACAAGACCACССС CCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTAC AGCAGGCT GАС С G Т G GACAAG Т С СAGAT G G СAG GAG G GCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCT G СACAAC CAC TACAC С СAGAAGAG С С TGAGСС Т GТ СС CTGGGCTGATGAATTC
BAP058-Clone К LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 34
ЕIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPDRFSGSGSGTDFTLK ISRVEAEDVGVYYCQQYNSYPLT FGQGTKVEIK
SEQ ID N0:199
ДНК VL
GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCCGACTTCCAGTCCG T GAC С С С СAAAGAAAAAG Т GAC CAT СACAT G СAAG G С CTCCCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCTTGGTATCTG CAGAAGCCTGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACT GGGCCTCTAC СAGACACAC CGGCGTGCCC GACAGAT T CTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGAAG ATCTCCCGGGTGGAAGCCGAGGATGTGGGCGTGTACT ACTGCCAGCAGTACAACTCCTACCCCCTGACCTTCGG С CAG G G CAC СAAG G T G GAAAT СAAG
SEQ ID N0:36
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPDRFSGSGSGTDFTLK ISRVEAEDVGVYYCQQYNSYPLT FGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID N0:200
ДНК,
легкая цепь
GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCCGACTTCCAGTCCG T GAC С С С СAAAGAAAAAG Т GAC CAT СACAT G СAAG G С CTCCCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCTTGGTATCTG CAGAAGCCTGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACT GGGCCTCTAC СAGACACAC CGGCGTGCCC GACAGAT T CTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTCACCCTGAAG ATCTCCCGGGTGGAAGCCGAGGATGTGGGCGTGTACT ACTGCCAGCAGTACAACTCCTACCCCCTGACCTTCGG CCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCC GCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGC AGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCT GAACAAC TTCTACCCCAGG GAG G С СAAG GTGCAGTGG AAG G T G GACAAC G С С С T G СAGAG С G G СAACAG С СAG G AGAG С G T CAC С GAG CAG GACAG СAAG GAC T С CAC СТА
СAG С С T GAG CAGCACCCT GAC С С T GAG СAAG G С С GAC TAC GAGAAG СACAAG GTGTACGCCTGT GAG G T GAC С С ACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAA CAGGGGCGAGTGCTGATGAATTC
BAP058-Clone L НС
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 38
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQAPGQGLEWMGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTISVDT SKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 90
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGA AGCCCGGCGAGTCACTGAGAATTAGCTGTAAAGGTTC AGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTC CGACAGGCCCCAGGGCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTA GAAT С GAC CCTAATAGCGGCTCTAC TAAG TATAAC GA GAAG T T TAAGAATAGAG T GAC TATTAGCGTG GACAC С TCTAAGAATCAGTTTAGCCTGAAGCTGTCTAGCGTGA CCGCCGCTGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGA CTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGT CAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA
SEQ ID NO: 91
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWV RQAPGQGLEWMGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTISVDT SKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG
QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL
VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL
SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY
GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV
TCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF
NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE
KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK
GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY
SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS
SEQ ID NO: 92
ДНК,
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGA
тяжелая
AGCCCGGCGAGTCACTGAGAATTAGCTGTAAAGGTTC
цепь
AGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTC
CGACAGGCCCCAGGGCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTA
GAAT С GAC CCTAATAGCGGCTCTAC TAAG TATAAC GA
GAAG T T TAAGAATAGAG T GAC TATTAGCGTG GACAC С
TCTAAGAATCAGTTTAGCCTGAAGCTGTCTAGCGTGA
CCGCCGCTGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGA
CTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGT
СAAG G CAC TAC С G T GAC CGTGTCTT CAG С TAG CAC ТА
AGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCG
GAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTG
GTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCT
GGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTT
CCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTG
TCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTA
С СAAGAC С TACAC T T G СAAC G T G GAC СACAAG С С T T С
СAACACTAAGGТGGACAAGСGСGТСGAATСGAAGTAC
GGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCC
TCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCC
CAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTG
ACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGG
AGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGT
G СACAAC G С СAAAAC СAAG С С GAG G GAG GAG СAG T T С
AACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGC
TGCATCAG GAC T G G С T GAAC G G GAAG GAG TACAAG T G СAAAGTGTССAACAAGGGACTTССTAGСTСAATСGAA AAGAC СAT С Т С GAAAG С СAAG G GACAG С С С С G G GAAC С С СAAG TGTATACCCTGC САС С GAG С СAG GAAGAAAT GACТAAGAACСAAGТСТСATТGACТТGССТТGТGAAG GGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGT С СAAC GGCСAGССGGAAAACAACТACAAGACCACССС TCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTAC TCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGG GAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCT GCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCC CTGGGA
BAP058-Clone L LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 42
ЕIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 93
ДНК VL
GAGATCGTCCTGACTCAGTCACCCGACTTTCAGTCAG T GAC С С С TAAAGAGAAAG Т CAC TAT CAC С T G TAAAG С CTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTG CAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACT GGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTT TAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACT
ATCTCTTCACTGCAGCCCGAGGATATCGCTACCTACT ACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGG ТCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG
SEQ ID NO: 44
Легкая цепь
ЕIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 94
ДНК,
легкая цепь
GAGATCGTCCTGACTCAGTCACCCGACTTTCAGTCAG T GAC С С С TAAAGAGAAAG Т CAC TAT CAC С T G TAAAG С CTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTG CAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACT GGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTT TAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACT ATCTCTTCACTGCAGCCCGAGGATATCGCTACCTACT ACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGG TCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCC GCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGC AGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCT GAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGG AAG G T G GACAAC G С С С T G СAGAG С G G СAACAG С СAG G AGAG С G T CAC С GAG CAG GACAG СAAG GAC T С CAC СТА СAG С С T GAG CAGCACCCT GAC С С T GAG СAAG G С С GAC TACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCC ACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAA CAGGGGCGAGTGC
BAP058-Clone M HC
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 50
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWI RQPPGKGLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID N0:201
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGA AGCCTGGCGAGTCCCTGCGGATCTCCTGCAAGGGCTC CGGCTACACCTTCACCAGCTACTGGATGTACTGGATC CGGCAGCCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCA GAATСGACСССAACTССGGСTССACСAAGTACAACGA GAAG T T СAAGAAC С G С G T GAC CAT CAC С G С С GACAAG TCCACCTCCACCGCCTACATGGAACTGTCCTCCCTGA GATCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGA CTACCGGAAGGGCCTGTACGCCATGGACTATTGGGGC CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT
SEQ ID N0:260
Тяжелая цепь
EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWI RQPPGKGLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LG
SEQ ID N0:202
ДНК,
тяжелая
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGA AGCCTGGCGAGTCCCTGCGGATCTCCTGCAAGGGCTC
цепь
CGGCTACACCTTCACCAGCTACTGGATGTACTGGATC
CGGCAGCCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCA
GAATСGACСССAACTССGGСTССACСAAGTACAACGA
GAAG T T СAAGAAC С G С G T GAC CAT CAC С G С С GACAAG
TCCACCTCCACCGCCTACATGGAACTGTCCTCCCTGA
GATCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGA
CTACCGGAAGGGCCTGTACGCCATGGACTATTGGGGC
CAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCA
AGGGCCCAAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCCAG
AAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTG
GTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCT
GGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTT
CCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTG
AGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCA
С СAAGAC С TACAC С T G TAAC G T G GAC СACAAG С С CAG
СAACAC СAAG G T G GACAAGAG G G T G GAGAG СAAG TAC
GGCCCACCCTGCCCCCCCTGCCCAGCCCCCGAGTTCC
TGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCC
СAAG GACAC С С T GAT GAT CAG СAGAACССССGAGGТ G
ACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCG
AGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGT
G СACAAC G С СAAGAC СAAG С С СAGAGAG GAG СAG T T T
AACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGC
T G CAC CAG GAC T G G С T GAAC G G СAAAGAG TACAAG T G
TAAG G T С T С СAACAAG G G С С T G С СAAG СAG СAT С GAA
AAGAC CAT CAG СAAG G С СAAG G G С CAG С С TAGAGAG С
С С CAG G Т С TACАС С С Т G С САС С СAG С СAAGAG GAGAT
GACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAG
GGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGA
G СAAC GGCCAGСССGAGAACAAC ТACAAGACCACССС
CCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTAC
AGCAGGCT GАС С G Т G GACAAG Т С СAGAT G G СAG GAG G
GCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCT
G СACAAC CAC TACAC С СAGAAGAG С С TGAGСС Т GТ СС
CTGGGCTGATGAATTC
BAP058-Clone M LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 42
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID N0:203
ДНК VL
GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCCGACTTCCAGTCCG T GAC С С С СAAAGAAAAAG Т GAC CAT СACAT G СAAG G С CTCCCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCTTGGTATCTG CAGAAGCCTGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACT GGGCCTCTACCAGACACACCGGCGTGCCCTCCAGATT CTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTTACCTTCACC ATCTCCAGCCTGCAGCCCGAGGATATCGCCACCTACT ACTGCCAGCAGTACAACTCCTACCCCCTGACCTTCGG С CAG G G CAC СAAG G T G GAAAT СAAG
SEQ ID N0:44
Легкая цепь
EIVLTQS PDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID N0:204
ДНК,
легкая
GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCCGACTTCCAGTCCG T GAC С С С СAAAGAAAAAG Т GAC CAT СACAT G СAAG G С
цепь
CTCCCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCTTGGTATCTG CAGAAGCCTGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACT GGGCCTCTACCAGACACACCGGCGTGCCCTCCAGATT CTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGACTTTACCTTCACC ATCTCCAGCCTGCAGCCCGAGGATATCGCCACCTACT ACTGCCAGCAGTACAACTCCTACCCCCTGACCTTCGG CCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCC GCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGC AGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCT GAACAAC TTCTACCCCAGG GAG G С СAAG GTGCAGTGG AAG G T G GACAAC G С С С T G СAGAG С G G СAACAG С СAG G AGAG С G T CAC С GAG CAG GACAG СAAG GAC T С CAC СТА СAG С С T GAG CAGCACCCT GAC С С T GAG СAAG G С С GAC TAC GAGAAG СACAAG GTGTACGCCTGT GAG G T GAC С С ACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAA CAGGGGCGAGTGCTGATGAATTC
BAP058-Clone N НС
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 30
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO: 95
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGA AACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTC AGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTC CGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTA GAAT С GAC CCTAATAGCGGCTCTAC TAAG TATAAC GA GAAG T T TAAGAATAGAG T GAC TAT CAC С G С С GATAAG TCTACTAGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTGA GAT С AGAG GAC AC CGCCGTCTACTACTGCGC T AGAGA CTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGT CAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA
SEQ ID NO: 96
Тяжелая цепь
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADK STSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCVWDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LG
SEQ ID NO: 97
ДНК,
тяжелая цепь
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGA AACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTC AGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTC CGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTA GAAT С GAC CCTAATAGCGGCTCTAC TAAG TATAAC GA GAAG T T TAAGAATAGAG T GAC TAT CAC С G С С GATAAG TCTACTAGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTGA GAT С AGAG GAC AC CGCCGTCTACTACTGCGC T AGAGA CTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGT СAAG G CAC TAC С G T GAC CGTGTCTT CAG С TAG CAC ТА AGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCG GAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTG
GTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCT GGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTT CCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTG TCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTA С СAAGAC С TACAC T T G СAAC G T G GAC СACAAG С С T T С СAACACTAAGGТGGACAAGСGСGТСGAATСGAAGTAC GGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCC TCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCC CAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTG ACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGG AGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGT G СACAAC G С СAAAAC СAAG С С GAG G GAG GAG СAG T T С AACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGC TGCATCAG GAC T G G С T GAAC G G GAAG GAG TACAAG T G СAAAGTGTССAACAAGGGACTTССTAGСTСAATСGAA AAGAC СAT С Т С GAAAG С СAAG G GACAG С С С С G G GAAC С С СAAG TGTATACCCTGC САС С GAG С СAG GAAGAAAT GACТAAGAACСAAGТСТСATТGACТТGССТТGТGAAG GGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGT С СAAC GGCСAGССGGAAAACAACТACAAGACCACССС TCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTAC TCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGG GAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCT GCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCC CTGGGA
BAP058-Clone N LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 66
DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO: 98
ДНК VL
GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGCCTGCCCG TGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCTATTAGCTGTAAAGC CTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCAG СAGAAG С СAG G G СAAG С С С С TAGAC T G С T GAT С ТAC Т GGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTT TAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGAGTTCACCCTGACT ATCTCTTCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTACT ACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGG TCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG
SEQ ID NO: 68
Легкая цепь
DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQ QKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLT ISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO: 99
ДНК,
легкая цепь
GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGCCTGCCCG TGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCTATTAGCTGTAAAGC CTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCAG СAGAAG С СAG G G СAAG С С С С TAGAC T G С T GAT С ТAC Т GGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTT TAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGAGTTCACCCTGACT ATCTCTTCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTACT ACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGG TCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCC GCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGC AGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCT GAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGG AAG G T G GACAAC G С С С T G СAGAG С G G СAACAG С СAG G
AGAG С G T CAC С GAG CAG GACAG СAAG GAC T С CAC СТА СAG С С T GAG CAGCACCCT GAC С С T GAG СAAG G С С GAC TACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCC ACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAA CAGGGGCGAGTGC
BAP058-Clone 0 НС
SEQ ID NO: 1 (Kabat)
HCDR1
SYWMY
SEQ ID NO: 2 (Kabat)
HCDR2
RIDPNSGSTKYNEKFKN
SEQ ID NO: 3 (Kabat)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 4 (Chothia)
HCDR1
GYTFTSY
SEQ ID NO: 5 (Chothia)
HCDR2
DPNSGS
SEQ ID NO: 3 (Chothia)
HCDR3
DYRKGLYAMDY
SEQ ID NO: 78
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQARGQRLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRFTISRDN SKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSS
SEQ ID NO:
100
ДНК VH
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGA AACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTC AGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTC С GAC AG G С T AGAG G G С AAAGAC T G GAG T G GAT С G G T A GAAT С GAC CCTAATAGCGGCTCTAC TAAG TATAAC GA GAAG T T TAAGAATAGG T T CAC TAT TAG TAGGGATAAC T С TAAGAACAC CCTGTACCTG СAGAT GAATAG С С T GA GAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGA CTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGT CAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA
SEQ ID NO: 80
Тяжелая цепь
EVQLVQS GAEVKKPGATVKIS CKVS GYT FT S YWMYWV RQARGQRLEWIGRIDPNS GS TKYNEKFKNRFTISRDN
SKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWG QGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCL VKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSWTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKY GPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEV TCWVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQF NSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIE KTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVK GFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLY SRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLS LG
SEQ 101
NO:
ДНК,
тяжелая цепь
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGA AACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTC AGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTC С GAC AG G С T AGAG G G С AAAGAC T G GAG T G GAT С G G T A GAAT С GAC CCTAATAGCGGCTCTAC TAAG TATAAC GA GAAG T T TAAGAATAGG T T CAC TAT TAG TAGGGATAAC T С TAAGAACAC CCTGTACCTG СAGAT GAATAG С С T GA GAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGA CTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGT СAAG G CAC TAC С G T GAC CGTGTCTT CAG С TAG CAC ТА AGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCG GAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTG GTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCT GGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTT CCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTG TCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTA С СAAGAC С TACAC T T G СAAC G T G GAC СACAAG С С T T С СAACACTAAGGТGGACAAGСGСGТСGAATСGAAGTAC GGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCC TCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCC CAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTG ACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGG AGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGT G СACAAC G С СAAAAC СAAG С С GAG G GAG GAG СAG T T С
AACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGC TGCATCAG GAC T G G С T GAAC G G GAAG GAG TACAAG T G СAAAGTGTССAACAAGGGACTTССTAGСTСAATСGAA AAGAC СAT С Т С GAAAG С СAAG G GACAG С С С С G G GAAC С С СAAG TGTATACCCTGC САС С GAG С СAG GAAGAAAT GACТAAGAACСAAGТСТСATТGACТТGССТТGТGAAG GGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGT С СAAC GGCСAGССGGAAAACAACТACAAGACCACССС TCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTAC TCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGG GAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCT GCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCC CTGGGA
BAP058-Clone 0 LC
SEQ ID NO: 9 (Kabat)
LCDR1
KASQDVGTAVA
SEQ ID NO: 10 (Kabat)
LCDR2
WASTRHT
SEQ ID NO:
11(Kabat)
LCDR3
QQYNSYPLT
SEQ ID NO: 12 (Chothia)
LCDR1
SQDVGTA
SEQ ID NO: 13 (Chothia)
LCDR2
WAS
SEQ ID NO: 14 (Chothia)
LCDR3
YNSYPL
SEQ ID NO: 82
AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
SEQ ID NO:
102
ДНК VL
GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCG CTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAAAGC CTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTG CAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACT GGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTT
TAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACT ATCTCTTCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTACT ACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGG ТCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG
SEQ ID NO: 84
Легкая цепь
AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYL QKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFT ISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVA APSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQW KVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKAD YEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NO:
103
ДНК,
легкая цепь
GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCG CTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAAAGC CTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTG CAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACT GGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTT TAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACT ATCTCTTCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTACT ACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGG TCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCC GCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGC AGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCT GAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGG AAG G T G GACAAC G С С С T G СAGAG С G G СAACAG С СAG G AGAG С G T CAC С GAG CAG GACAG СAAG GAC T С CAC СТА СAG С С T GAG CAGCACCCT GAC С С T GAG СAAG G С С GAC TACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCC ACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAA CAGGGGCGAGTGC
BAP058 HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058 LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-chi HC
SEQ ID NO:
(Kabat)
HCDR1
SEQ ID NO:
(Kabat)
HCDR2
SEQ ID NO:
(Kabat)
HCDR3
SEQ ID NO:
(Chothia)
HCDR1
SEQ ID NO:
(Chothia)
HCDR2
SEQ ID NO:
(Chothia)
HCDR3
BAP058-chi LC
SEQ ID NO:
(Kabat)
LCDR1
SEQ ID NO:
(Kabat)
LCDR2
SEQ ID NO:
(Kabat)
LCDR3
SEQ ID NO:
(Chothia)
LCDR1
SEQ ID NO:
(Chothia)
LCDR2
SEQ ID NO:
(Chothia)
LCDR3
BAP058-hum01-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum01-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
LCDR2
tgggcatcc
111 (Chothia)
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-hum02-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum02-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-hum03-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum03-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-hum04-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
108 (Chothia)
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum04-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-hum05-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum05-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-hum06-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum06-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
LCDR2
tgggcatcc
111 (Chothia)
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-hum07-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum07-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-hum08-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum08-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-hum09-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
108 (Chothia)
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-hum09-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-humlO-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-humlO-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-humll-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-humll-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
LCDR2
tgggcatcc
111 (Chothia)
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-huml2-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-huml2-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-huml3-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-huml3-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-huml4-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
108 (Chothia)
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-huml4-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-huml5-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-huml5-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-huml6-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-huml6-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
LCDR2
tgggcatcc
111 (Chothia)
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-huml7-HC
SEQ ID NO:
104 (Kabat)
HCDR1
agttactggatgtac
SEQ ID NO:
105 (Kabat)
HCDR2
aggattgatcctaatagtgggagtactaagtacaatg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
106 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
SEQ ID NO:
107 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagttac
SEQ ID NO:
108 (Chothia)
HCDR2
gatcctaatagtgggagt
SEQ ID NO:
106 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaaggggctctatgctatggactac
BAP058-huml7-LC
SEQ ID NO:
245 (Kabat)
LCDR1
aaggccagtcaggatgtgggtactgctgtagcc
SEQ ID NO:
246 (Kabat)
LCDR2
tgggcatccacccggcacact
SEQ ID NO:
109 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataacagctatcctctcacg
SEQ ID NO:
110(Chothia)
LCDR1
agtcaggatgtgggtactgct
SEQ ID NO:
111 (Chothia)
LCDR2
tgggcatcc
SEQ ID NO:
112 (Chothia)
LCDR3
tataacagctatcctctc
BAP058-Clone К HC
SEQ ID NO:
113 (Kabat)
HCDR1
agctactggatgtac
SEQ ID NO:
205(Kabat)
HCDR2
agaatcgaccccaactccggctccaccaagtacaacg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
206 (Kabat)
HCDR3
gactaccggaagggcctgtacgccatggactat
SEQ ID NO:
207 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagctac
SEQ ID NO:
208 (Chothia)
HCDR2
gaccccaactccggctcc
SEQ ID NO:
206 (Chothia)
HCDR3
gactaccggaagggcctgtacgccatggactat
BAP058-Clone К LC
SEQ ID NO:
209 (Kabat)
LCDR1
aaggcctcccaggacgtgggcaccgccgtggct
SEQ ID NO:
210 (Kabat)
LCDR2
tgggcctctaccagacacacc
SEQ ID NO:
211 (Kabat)
LCDR3
cagcagtacaactcctaccccctgacc
SEQ ID NO:
212 (Chothia)
LCDR1
tcccaggacgtgggcaccgcc
SEQ ID NO:
213 (Chothia)
LCDR2
tgggcctct
SEQ ID NO:
214 (Chothia)
LCDR3
tacaactcctaccccctg
BAP058-Clone L HC
SEQ ID NO:
113 (Kabat)
HCDR1
agctactggatgtac
SEQ ID NO:
114 (Kabat)
HCDR2
agaatcgaccctaatagcggctctactaagtataacg agaagtttaagaat
SEQ ID NO:
115 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaagggcctgtacgctatggactac
SEQ ID NO:
116 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcactagctac
SEQ ID NO:
HCDR2
gaccctaatagcggctct
117 (Chothia)
SEQ ID NO:
115 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaagggcctgtacgctatggactac
BAP058-Clone L LC
SEQ ID NO:
118 (Kabat)
LCDR1
aaagcctctcaggacgtgggcaccgccgtggcc
SEQ ID NO:
119 (Kabat)
LCDR2
tgggcctctactagacacacc
SEQ ID NO:
120 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataatagctaccccctgacc
SEQ ID NO:
121 (Chothia)
LCDR1
tctcaggacgtgggcaccgcc
SEQ ID NO:
122 (Chothia)
LCDR2
tgggcctct
SEQ ID NO:
123 (Chothia)
LCDR3
tataatagctaccccctg
BAP058-Clone M HC
SEQ ID NO:
113 (Kabat)
HCDR1
agctactggatgtac
SEQ ID NO:
205 (Kabat)
HCDR2
agaatcgaccccaactccggctccaccaagtacaacg agaagttcaagaac
SEQ ID NO:
206 (Kabat)
HCDR3
gactaccggaagggcctgtacgccatggactat
SEQ ID NO:
207 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcaccagctac
SEQ ID NO:
208 (Chothia)
HCDR2
gaccccaactccggctcc
SEQ ID NO:
206 (Chothia)
HCDR3
gactaccggaagggcctgtacgccatggactat
BAP058-Clone M LC
SEQ ID NO:
209 (Kabat)
LCDR1
aaggcctcccaggacgtgggcaccgccgtggct
SEQ ID NO:
210 (Kabat)
LCDR2
tgggcctctaccagacacacc
SEQ ID NO:
211 (Kabat)
LCDR3
cagcagtacaactcctaccccctgacc
SEQ ID NO:
212 (Chothia)
LCDR1
tcccaggacgtgggcaccgcc
SEQ ID NO:
213 (Chothia)
LCDR2
tgggcctct
SEQ ID NO:
214 (Chothia)
LCDR3
tacaactcctaccccctg
BAP058-Clone N HC
SEQ ID NO:
113 (Kabat)
HCDR1
agctactggatgtac
SEQ ID NO:
114 (Kabat)
HCDR2
agaatcgaccctaatagcggctctactaagtataacg agaagtttaagaat
SEQ ID NO:
115 (Kabat)
HCDR3
gactatagaaagggcctgtacgctatggactac
SEQ ID NO:
116 (Chothia)
HCDR1
ggctacaccttcactagctac
SEQ ID NO:
117 (Chothia)
HCDR2
gaccctaatagcggctct
SEQ ID NO:
115 (Chothia)
HCDR3
gactatagaaagggcctgtacgctatggactac
BAP058-Clone N LC
SEQ ID NO:
118 (Kabat)
LCDR1
aaagcctctcaggacgtgggcaccgccgtggcc
SEQ ID NO:
119 (Kabat)
LCDR2
tgggcctctactagacacacc
SEQ ID NO:
120 (Kabat)
LCDR3
cagcagtataatagctaccccctgacc
SEQ ID NO:
121 (Chothia)
LCDR1
tctcaggacgtgggcaccgcc
SEQ ID NO:
LCDR2
tgggcctct
Аминокислотная последовательность
Нуклеотидная последовательность
VHFW1
(тип a)
QVQLVQS GAE VKKPGAS VKVS CKAS
(SEQ ID NO: 124)
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAG GTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTC TCCTGCAAGGCTTCT (SEQ ID NO: 125)
VHFW1
(тип b)
EVQLVQSGAEVKKPGESLRIS CKGS
(SEQ ID NO: 126)
GAAG TGCAGCTGGTGCAGTCTG GAG СAGAG GTGAAAAAGCCCGGGGAGTCTCTGAGGATC TCCTGTAAGGGTTCT (SEQ ID NO: 127)
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAA GTGAAGAAGСССGGСGAGTСACTGAGAATT AGCTGTAAAGGTTCA (SEQ ID NO: 215)
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAA GTGAAGAAGCCTGGCGAGTCCCTGCGGATC TCCTGCAAGGGCTCC (SEQ ID NO: 216)
VHFW1
(тип с)
EVQLVQSGAEVKKPGATVKIS CKVS
(SEQ ID NO: 128)
GAGGTCCAGCTGGTACAGTCTGGGGCTGAG GTGAAGAAGCCTGGGGCTACAGTGAAAATС TCCTGCAAGGTTTCT (SEQ ID NO: 129)
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAA GTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATC TCCTGCAAGGTGTCC (SEQ ID NO: 217)
GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAA GTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATT AGCTGTAAAGTCTCA (SEQ ID NO: 218)
VHFW1
(тип d)
QITLKESGPTLVKPTQTLTLT CTFS
(SEQ ID NO: 130)
CAGATCACCTTGAAGGAGTCTGGTCCTACG С T G G T GAAAC С С AC AC AGAC С С T CAC G С T G ACCTGCACCTTCTCT (SEQ ID NO: 131)
VHFW2
WVRQATGQGLEWMG
TGGGTGCGACAGGCCACTGGACAAGGGCTT
(тип а)
(SEQ ID N0: 132)
GAGTGGATGGGT (SEQ ID N0: 133)
TGGGTGCGACAGGCTACCGGCCAGGGCCTG GAATGGATGGGC (SEQ ID N0: 219)
TGGGTCCGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTG GAGTGGATGGGT (SEQ ID N0: 220)
VHFW2
(тип а')
WVRQAPGQGLEWMG (SEQ ID N0: 134)
TGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTT GAGTGGATGGGT (SEQ ID N0: 135)
TGGGTCCGACAGGCCCCAGGGCAAGGCCTG GAGTGGATGGGT (SEQ ID N0: 221)
VHFW2
(тип Ь)
WIRQPPGKGLEWIG (SEQ ID N0: 136)
TGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGGCTG GAGTGGATTGGT (SEQ ID N0: 137)
TGGATCCGGCAGCCCCCTGGCAAGGGCCTG GAATGGATCGGC (SEQ ID N0: 222)
VHFW2
(тип с)
WIRQSPSRGLEWLG (SEQ ID N0: 138)
TGGATCAGGCAGTCCCCATCGAGAGGCCTT GAGTGGCTGGGT (SEQ ID N0: 139)
VHFW2
(тип d)
WVRQARGQRLEWIG (SEQ ID N0: 140)
TGGGTGCGACAGGCTCGTGGACAACGCCTT GAG T G GAT AG G T (SEQ ID N0: 141)
TGGGTCCGACAGGCTAGAGGGCAAAGACTG GAGTGGATCGGT (SEQ ID N0: 223)
VHFW2
(тип е)
WVRQAPGKGLEWVS (SEQ ID N0: 142)
TGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTG GAGTGGGTCAGT (SEQ ID N0: 143)
VHFW3
(тип а)
RFTISRDDSKNTAYLQMNSLK TEDTAVYYCAR (SEQ ID N0: 144)
AGAT T CAC СAT С T С СAGAGAT GAT T СAAAG AACACGGCGTATCTGCAAATGAACAGCCTG AAAACCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGT
GCAAGG
(SEQ ID NO: 145)
VHFW3
(тип b)
RVTITADKSTSTAYMELSSLR SEDTAVYYCAR (SEQ ID NO: 146)
AGAG T CAC GAT TAC С G С G GACАААТСCACG AG СACAG С С TACAT G GAG С T GAG CAG С С T G AGATCTGAGGACACGGCCGTGTATTACTGT GCAAGG
(SEQ ID NO: 147)
CGCGTGACCATCACCGCCGACAAGTCCACC TCCACCGCCTACATGGAACTGTCCTCCCTG CGGAGCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGC GCCAGA
(SEQ ID NO: 224)
CGCGTGACCATCACCGCCGACAAGTCCACC TCCACCGCCTACATGGAACTGTCCTCCCTG AGATCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGC GCCAGA
(SEQ ID NO: 225)
AGAG T GAC TAT CAC С G С С GATAAG T С TAC T AGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTG AGAT СAGAG GACAC CGCCGTCTACTACTGC GCTAGA
(SEQ ID NO: 226)
VHFW3
(тип с)
RVTISVDTSKNQFSLKLSSVT AADTAVYYCAR (SEQ ID NO: 148)
AGAG T CAC СATAT CAG TAGACAC G T С СAAG AACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTG ACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGT GCAAGG
(SEQ ID NO: 149)
AGAG T GAC TATTAGCGTG GACAC С T С TAAG AATCAGTTTAGCCTGAAGCTGTCTAGCGTG ACCGCCGCTGACACCGCCGTCTACTACTGC GCTAGA
(SEQ ID NO: 227)
VHFW3
(тип d)
RLTISKDTSKNQWLTMTNMD PVDTATYYCAR (SEQ ID NO: 150)
AGAC T CAC СAT С T С СAAG GACAC С T С СAAA AAC CAG GTGGTCCT TACAAT GAC СAACAT G GAC С С T G T G GAC AC AG С CAC GTATTACTGT
GCAAGG
(SEQ ID N0: 151)
VHFW3
(тип е)
RFTISRDNSKNTLYLQMNSLR AEDTAVYYCAR (SEQ ID N0: 152)
AGAT T CAC СAT С T С СAGAGACAAT T С СAAG AACACGСTGTATСTTСАААТGAACAGССTG AGAGCCGAGGACACGGCCGTGTATTACTGT GCAAGG
(SEQ ID N0: 153)
AG G T T CAC TAT TAG TAG G GATAAC T С TAAG AACACCCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTG AGAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGC GCTAGA
(SEQ ID N0: 228)
VHFW4
WGQGTTVTVSS (SEQ ID N0: 154)
TGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCC TCC
(SEQ ID N0: 155)
TGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCC TCT
(SEQ ID N0: 229)
TGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCT TCA
(SEQ ID N0: 230)
VLFW1
(тип а)
EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTI TC
(SEQ ID N0: 156)
GAAATTGTGCTGACTCAGTCTCCAGACTTT CAG T С T G T GAC T С СAAAG GAGAAAG T CAC С ATCACCTGC (SEQ ID N0: 157)
GAGATCGTGCTGACCCAGTCCCCCGACTTC СAGTССGTGACССССAAAGAAAAAGТGACС ATCACATGC (SEQ ID N0: 231)
GAGATCGTCCTGACTCAGTCACCCGACTTT CAG T CAG T GAC С С С TAAAGAGAAAG Т CAC Т ATCACCTGT (SEQ ID N0: 232)
VLFW1
(тип Ь)
DWMTQSPLSLPVTLGQPASI SC
GATGTTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCC CTGCCCGTCACCCTTGGACAGCCGGCCTCC
(SEQ ID NO: 158)
ATCTCCTGC (SEQ ID NO: 159)
GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGC CTGCCCGTGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCT ATTAGCTGT (SEQ ID NO: 233)
VLFW1
(тип с)
DIVMTQTPLSLPVTPGEPASI SC
(SEQ ID NO: 160)
GATATTGTGATGACCCAGACTCCACTCTCC CTGCCCGTCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCC ATCTCCTGC (SEQ ID NO: 161)
VLFW1
(тип d)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTI TC
(SEQ ID NO: 162)
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCC CTGTCTGCATCTGTAG GAGACAGAG T CAC С ATCACTTGC (SEQ ID NO: 163)
VLFW1
(тип e)
EIVLTQSPATLSLSPGERATL SC
(SEQ ID NO: 164)
GAAAT T G T G T T GACACAG T С T С СAGC СAC С CTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACC CTCTCCTGC (SEQ ID NO: 165)
VLFW1
(тип f)
AIQLTQSPSSLSASVGDRVTI TC
(SEQ ID NO: 166)
GCCATCCAGTTGACCCAGTCTCCATCCTCC CTGTCTGCATCTGTAG GAGACAGAG T CAC С ATCACTTGC (SEQ ID NO: 167)
GC TAT T CAGCTGAC T CAGT CACС TAGTAGC CTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACT ATCACCTGT (SEQ ID NO: 234)
VLFW2
(тип a)
WYQQKPGQAPRLLIY (SEQ ID NO: 168)
TGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCC AGGCTCCTCATCTAT (SEQ ID NO: 169)
TGGTATCAG СAGAAG С СAG G G СAAG С С С С T AGAC T G С T GAT С TAC (SEQ ID NO: 235)
VLFW2
(тип с)
WYLQKPGQSPQLLIY (SEQ ID NO: 170)
TGGTACCTGCAGAAGCCAGGGCAGTCTCCA CAGCTCCTGATCTAT
(SEQ ID NO: 171)
TGGTATCTGCAGAAGCCTGGCCAGTCCCCT CAGCTGCTGATCTAC (SEQ ID NO: 236)
TGGTATCTGCAGAAGCCTGGTCAATCACCT CAGCTGCTGATCTAC (SEQ ID NO: 237)
VLFW3
(тип а)
GVPSRFSGSGSGTEFTLTISS LQPDDFATYYC (SEQ ID NO: 172)
GGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGA T С T GGGACAGAAT T CAC TCT CACCAT CAGC AGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTAT TACTGT
(SEQ ID NO: 173)
GGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGT AGTGGCACCGAGTTCACCCTGACTATCTCT TCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTAC TACTGT
(SEQ ID NO: 238)
VLFW3
(тип Ь)
GVPSRFSGSGSGTDFTFTISS LQPEDIATYYC (SEQ ID NO: 174)
GGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGAAGTGGA T С T GGGACAGAT T T TAC T T T CACCAT CAGC AG С С T G CAG С С T GAAGATAT T G СAACATAT TACTGT
(SEQ ID NO: 175)
GGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGT AGTGGCACCGACTTCACCTTCACTATCTCT T CAC T G CAG С С С GAG GAT AT С G С TAC С TAC TACTGT
(SEQ ID NO: 239)
GGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTGGC TCTGGCACCGACTTTACCTTCACCATCTCC AGCCTGCAGCCCGAGGATATCGCCACCTAC TACTGC
(SEQ ID NO: 240)
VLFW3
(тип с)
GIPARFSGSGSGTEFTLTISS LQSEDFAVYYC (SEQ ID NO: 176)
GGGATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGG T С T GGGACAGAG T TCAC TCT CACCAT CAGC AGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTTAT
TACTGT
(SEQ ID N0: 177)
VLFW3
(тип d)
GVPSRFSGSGSGTDFTLTISS LQPEDFATYYC (SEQ ID N0: 178)
GGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGA T С T GGGACAGAT T T CAC TCT CACCAT CAGC AGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTAT TACTGT
(SEQ ID N0: 179)
VLFW3
(тип е)
GVPDRFSGSGSGTDFTLKISR VEAEDVGVYYC (SEQ ID N0: 180)
GGGGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGG T CAGGCAC T GAT T T CACAC T GAAAAT CAGC AGGGTGGAGGCTGAGGATGTTGGAGTTTAT TACTGT
(SEQ ID N0: 181)
GGCGTGCCCGACAGATTCTCCGGCTCTGGC TCTGGCACCGACTTCACCCTGAAGATCTCC CGGGTGGAAGCCGAGGATGTGGGCGTGTAC TACTGC
(SEQ ID N0: 241)
VLFW3
(тип f)
GIPPRFSGSGYGTDFTLTINN
IESEDAAYYFC
(SEQ ID N0: 182)
GGGATCCCACCTCGATTCAGTGGCAGCGGG TAT G GAACAGAT T T TAC С С T СACAAT TAAT AACATAGAAT С T GAGGAT GC T GCATAT TAC TTCTGT
(SEQ ID N0: 183)
VLFW3
(тип д)
GVPSRFSGSGSGTDFTFTISS LEAEDAATYYC (SEQ ID N0: 184)
GGGGTCCCCTCGAGGTTCAGTGGCAGTGGA T С T G G GACAGAT T T CAC С T T TAC СAT CAG T AG С С T G GAAG С T GAAGAT G С T G СAACATAT TACTGT
(SEQ ID N0: 185)
GGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGT AGTGGCACCGACTTCACCTTCACTATCTCT TCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTAC TACTGT
(SEQ ID N0: 242)
VLFW4
FGQGTKVEIK
(SEQ ID N0: 186)
TTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA (SEQ ID N0: 187)
TTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAG
(SEQ ID NO: 243)
T T С G G T СAAG G CAC TAAG G T С GAGAT TAAG (SEQ ID NO: 244)
Таблица 6. Отдельные лекарственные средства, которые можно
вводить в комбинации с молекулами антител против PD-L1, например, в качестве единичного средства или в комбинации с другими иммуномодуляторами, описанными в настоящем описании. Каждая публикация, приведенная в этой таблице, включена в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме, включая все структурные формулы, приведенные в ней.
Обоз на-чени е
соед инен ия
Генерическ ое
название Торговое название
Структура соединения
Патенты/ публикации патентных заявок
Сотрастаур ин
ЕР 1682103 US 2007/142401 WO 2005/039549
Нилотиниб НС1
моногидрат TASIGNA(r)
WO 2004/005281 US 7169791
НС1 • Н20
WO 2010/060937 WO 2004/072051 ЕР 1611112 US 8450310
Дактолисиб
rrNi ^°
WO 2006/122806
Q-CHg
0- & \-CI
нас'
CI NH
N-CHa
US 8552002
Бупралисиб
CF3 jj-^N
WO 2007/084786
СНз
aYV4ha
O^NH HN^N
НзС Ън
WO 2009/141386 US 2010/0105667
WO 2010/029082
Ингибитор CYP17
2010/149755US 8263635 B2EP 2445903 BI
А10
WO 2011/076786
сн3
Ck N
All Деферасиро KCEXJADE(r)
WO 1997/049395
A12
Летрозол FEMARA(r)
US 4978672
А13
, о
WO 2013/124826 US 2013/0225574
А14
ci"Y^n'CH3
НзС I о
WO 2013/111105
А17
нас
N N
Дигидрохлорид
ЕР 2099447 US 7767675 US 8420645
А18
Руксолитин иба фосфат JAKAFI(r)
N-N
(tm) н
Н3Р04
WO 2007/070514 ЕР 2474545 US 7598257 WO 2014/018632
А19
Панобиност ат
WO 2014/072493 WO 2002/022577 ЕР 1870399
А2 0
Осилодрост ат
WO 2007/024945
А21
{ У о ны-сна
WO 2008/016893 ЕР 2051990 US 8546336
А22
Сонидегиба фосфат
W0 2007/131201 ЕР 2021328 US 8178563
А2 3
Церитиниб ZYKADIA(tm)
0=5=0 с> ^
л. X
2008/073687US 8039479
А2 4
HN-^N^N N-CH"
ф ь
US 8415355 US 8685980
А2 5
С На Насф0Н
V N
WO 2010/007120
А2 6
Моноклональное антитело человека к PRLR
US 7867493
А2 7
?" гт'
У °
WO 2010/026124
ЕР 2344474
US 2010/0056576
WO2008/106692
А2 8
Н*Н7 он,
WO 2010/101849
А2 9
Энкорафени б
н c'V^n^X
Н3С у - NH О СНа 1 N^N
W0 2011/025927
АЗО
Н3С
нэс/
WO 2011/101409
А31
Моноклональное антитело человека к HER3
WO 2012/022814 ЕР 2606070US 8735551
A3 2
Конъюгат антитело-лекарставенное средство (ADC)
WO 2014/160160 АЬ: 12425 (см. таблицу 1, абзац [00191]) Линкер: SMCC
(см. абзца
[00117]
Груз: DM1 (см. абзац [00111], также см. п. 2 9
формулы
изобретения)
АЗЗ
Моноклональное антитело или Fab к M-CSF
W0 2004/045532
A3 4
Биниметини б
WO 2003/077914
A3 5
Мидостаури
HN-__
H> v!y-^CH3
WO 2003/037347
ЕР 1441737US 2012/252785
A3 7
HN |
WO 2007/030377 US 7482367
A3 8
Пасиреотид а
диаспартат SIGNIFOR(r)
1 } 0
WO2002/010192 US 7473761
A3 9
Довитиниб
0^f
HN \-NH2
iH3
WO 2009/115562 US 8563556
А4 0
WO 2013/184757
А41
WO 2006/122806
А42
сн3
HgCN^N сн3
CGf
W0 2008/073687 US 8372858
А4 3
С. N'VCH3 М ^-NH
WO 2010/002655 US 8519129
А4 4
N-ь
HN-^
H3C^N' H
WO 2010/002655 US 8519129
А4 5
WO 2010/002655
H3C-? F
CI NH
6нэ
Примеры ниже предоставлены для облегчения понимания изобретения, однако они не предназначены для ограничения и их не следует истолковывать как ограничивающие его объем никоим образом. Пример 1: Гуманизация антитела против PD-L1 ВАР058 Проводили гуманизацию моноклонального антитела мыши против
PD-L1 BAP058. Получали последовательности и исследуемые образцы для семнадцати гуманизированных клонов ВАР058 с уникальной вариабельной областью. Эти клоны далее анализировали в отношении их биологических функций (например, связывание антигена и блокирование лиганда), структурных признаков и временной экспрессии в клетках СНО.
Пример 1.1: Технология и процесс гуманизации
Гуманизацию ВАР058 проводили с использованием комбинаторной библиотеки каркасных областей (FW) вариабельной области человека. Технология охватывает перенос CDR мыши в рамке считывания в библиотеку вариабельных областей (VR) человека, сконструированных путем комбинирования случайным образом последовательностей FW1, FW2 и FW3 эмбрионального типа человека. Использовали только одну последовательность FW4, которая представляет собой WGQGTTVTVSS (SEQ ID N0: 154) для тяжелой цепи (НС) (подгруппа I НС человека по Kabat, № 21) и FGQGTKVEIK (SEQ ID N0: 186) для легкой цепи (LC) (подгруппа I к человека по Kabat, № 5) . Библиотеку последовательностей VR подвергали слиянию с последовательностями константной области (CR) НС IgG4(S228P) человека и CR к LC человека, и полученную библиотеку целых IgG-mAb экспрессировали в клетках СНО для скрининга. Скрининг проводили с помощью супернатантов культуры ткани, измеряя авидность связывания на антигенэкспрессирующих клетках в формате ELISA с целыми клетками или FACS.
Процесс гуманизации проводили пошаговым образом, начиная с
конструирования и экспрессии подходящего химерного mAb (VR мыши,
IgG4(S228P), к человека), которое может служить для сравнения при
скрининге гуманизированных клонов. Аминокислотные
последовательности константной области для тяжелой цепи IgG4(S228P) и легкой цепи каппа человека представлены в таблице 3.
Гуманизацию VR LC и НС проводили посредством двух независимых этапов. Библиотеку гуманизированных LC (huLC) объединяли с химерной НС (VR мыши, IgG4(S228P)) и полученные "полугуманизированые" mAb подвергали скринингу в отношении
активности связывания способом ELISA. Отбирали клоны huLC с достаточной активностью связывания (> связывание химерного mAb) . Аналогично, библиотеку гуманизированных НС (huHC) объединяли с химерной LC (VR мыши, к человека) и подвергали скринингу в отношении активности связывания способом ELISA. Отбирали huHC клонов с подходящей активностью связывания (> связывание химерного mAb).
Затем вариабельные области выбранных huLC и huHC секвенировали для идентификации huLC и huHC с уникальными последовательностями (некоторые клоны из первоначального процесса селекции могут иметь одинаковые LC или НС) . Затем уникальные huLC и huHC случайным образом комбинировали для формирования небольшой библиотеки гуманизированных mAb (humAb), которую экспрессировали в клетках СНО и подвергали скринингу на антигенэкспрессирующих клетках в формате ELISA и FACS. Клоны с активностью связывания, равной или лучшей, чем связывание химерного mAb для сравнения, являются конечным продуктом процесса гуманизации.
Пример 1.2: Последовательность mAb мыши ВАР058 Определяли последовательности вариабельных областей LC и НС mAb мыши против PD-L1. Последовательности, полученные в двух независимых анализах, были идентичными, и они представлены на фиг.1.
Проводили анализ последовательностей эмбрионального типа и часть результатов представлена на фиг.2 в качестве выравнивания аминокислотных последовательностей. Для легкой цепи V-ген является на 99,28% идентичным mIGKV6-23*01F (277/279 nts) и J-ген является на 97, 06% идентичным mIGKJ5*01F (33/34 nts) . Для тяжелой цепи V-ген является на 96,88% идентичным mIGHVl-72*01F (279/288 nts), J-ген является на 92,45% идентичным mIGHJ4*01F и D-ген представляет собой mIGHD2-5*01F.
Пример 1.3: Конструирование химерного антитела Химерное антитело получали путем клонирования вариабельных доменов НС и LC в экспрессирующий вектор млекопитающих в рамке считывания либо с сигналом секреции и константной областью каппа
(LC) человека, либо сигналом секреции и константным доменом IgG4 (НС) человека. Полученное антитело встраивали в пустой вектор и трансфицировали в клетки CHO-S. Супернатант клеточной культуры собирали через 4 8 часов после трансфекции и концентрацию рекомбинантных клонов в супернатанте определяли посредством количественного ELISA. IgG в супернатанте клеточной культуры улавливали на планшете с антителом против Fc IgG человека. Связавшийся IgG обнаруживали с помощью антитела против IgG человека, конъюгированного с HRP. Концентрацию IgG вычисляли с использованием коммерчески доступного IgG4 человека в качестве стандарта.
Связывание рекомбинантного клона с PD-L1 человека исследовали с использованием клеточной линии 300.19, экспрессирующей huPD-Ll на клеточной поверхности и FACS-анализа. Результат показал, что химера хорошо связывалась с антигеном.
Аминокислотные последовательности тяжелой и легкой цепей для химерного mAb BAP058-chi представлены в таблице 1. Нуклеотидные последовательности тяжелой и легкой цепей химерного mAb BAP058-chi представлены в таблице 1.
Пример 1.4: Клоны гуманизированных антител
Как показано на фиг.З, процесс гуманизации обеспечил семнадцать клонов с аффинностью связывания, сравнимой с аффинностью связывания химерного антитела. В дополнение к данным о связывании, для каждого клона последовательности VR предоставляли вместе с образцом mAb. Образцы получали посредством временной трансфекции клеток СНО, и они представляли собой концентрированные супернатанты культуры тканей. Концентрации антител в растворах определяли с помощью IgG4-спецфического ELISA.
Как показано на фиг.4, семнадцать уникальных клонов
представляют собой комбинации девяти уникальных
последовательностей НС и девяти уникальных последовательностей LC. Для каждой из областей FW НС и LC, в 17 гуманизированных клонах использовались от четырех до семи различных последовательностей эмбрионального типа. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности вариабельных доменов тяжелой и
легкой цепей для гуманизированных клонов ВАР058 представлены в таблице 1. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности CDR тяжелой и легкой цепей гуманизированных клонов ВАР058 также представлены в таблице 1.
На фиг.4 показано, что в образцах концентрация mAb варьировалась от 0,5 мкг/мл до 47,6 мкг/мл. Эти количества были репрезентативными для нескольких экспериментов с временной экспрессией.
Пример 1.5: Анализ гуманизированных клонов
Пример 1.5.1: Анализ активности связывания и специфичности связывания
Активность и специфичность связывания измеряли в конкурентном анализе связывания с использованием постоянной концентрации меченного Alexa 488 ВАР058 мыши, серийных разведений исследуемых антител и экспрессирующих PD-L1 клеток 3 0 0.19. Инкубацию со смесями mAb, имеющими различные соотношения концентраций исследуемого mAb и меченого mAb, проводили при 4°С в течение 30 мин. Затем проводили количественное определение связавшегося mAb мыши с использованием устройства FACS. Эксперимент проводили два раза. Результаты представлены на фиг.5. Интенсивность флуоресценции определяют путем нанесения на график концентраций исследуемого mAb против меченного ВАР058 мыши. На фиг.6 приведены соотношения величин IC50 для каждого mAb. Соотношение для родительского mAb мыши приближалось к 1 (фактическая величина составляет 1,34), что указывает на то, что меченное mAb мыши ВАР058 не утратило аффинность связывания.
Соотношения для исследуемых mAb находились в диапазоне от
1,3 до 4,64, что указывает на то, что прочность связывания может
варьироваться приблизительно в три раза между различными
клонами. Эти результаты хорошо коррелировали с
полуколичественным ранжированием, проведенным на основе данных FACS, представленных на фиг.3 и 5. Клоны ВАР058 человека с высоким ранговым номером (более слабо связывающиеся соединения) имели высокое соотношение в конкурентном анализе связывания.
Пример 1.5.2: Анализ последовательности
На основе структурных признаков семнадцать гуманизированных mAb разделяли на шесть групп и ранжировали в диапазоне 1-17. Результаты представлены на фиг.б.
Пример 1.5.3: Отбор гуманизированных клонов
На фиг.б обобщенно представлены данные, которые учитывали при отборе гуманизированных клонов. Учитывали данные об экспрессии (2-ой столбец), разнообразие состава вариабельных областей (3-ий столбец), относительную оценку в исследованиях связывания (4-ый и 5-ый столбец) и структурный анализ (б-ой столбец).
Отобранные клоны продуцировали в более высоких количествах (0,5 мг; временная экспрессия в клетках СНО) и очищали аффинной хроматографией с белком А. Было показано, что образцы являются свободными от эндотоксинов.
Пример 1.5.4: Блокирование связывания PD-1-Ig с клетками 300.19, трансфилированными PD-L1
Шесть предпочтительных mAb ВАР058 человека исследовали в отношении их способности блокировать связывание PD-1-Ig с клетками 300.19, экспрессирующими PD-L1. В эксперименте по конкурентному связыванию клетки 300.19, экспрессирующие PD-L1, инкубировали со смесями РЕ-меченного PD-1-Ig в постоянной концентрации (0,7 мкг/мл) и возрастающими концентрациями исследуемых mAb при 4°С в течение 4 часов. Затем измеряли флуоресценцию при связывании с использованием FACS и величины IC50 определяли с использованием программного обеспечения Prism.
Все mAb ВАР058 человека и mAb ВАР058 мыши обеспечивали сходные кривые конкурентного связывания. Величины IC50 варьировали в узком диапазоне от 0,29 нМ до 0,33. Родительское mAb ВАР058 мыши демонстрирует величину IC50 0,30 нм. Результаты представлены на фиг.7.
Обобщение и заключения
Моноклональное антитело мыши против PD-L1 ВАР058 подвергали гуманизации. Технология охватывает клонирование CDR мыши в рамке считывания в упорядоченную библиотеку каркасных областей вариабельной области эмбрионального типа человека, экспрессию
библиотеки клонированных вариабельных областей в качестве гуманизированных mAb с интактным IgG4(S228P) в клетках СНО и селекцию клонов, которые связываются со сравнимой или более высокой аффинностью с мишенью, в качестве родительского mAb. Таким образом, с помощью CDR мыши проводили селекцию надлежащих каркасных последовательностей эмбрионального типа человека, которые сохраняют их конформацию и, таким образом, аффинность и специфичность связывания родительского mAb мыши. Были получены последовательности и исследуемые образцы семнадцати гуманизированных mAb с уникальной вариабельной областью, которые прошли тест связывания с клетками 300.19, трансфицированными PD-L1. Эти клоны далее анализировали в отношении их биологических функций (например, связывание и блокирование взаимодействия с PD-1), структурных признаков и временной экспрессии в клетках СНО.
Пример 2: Экспрессия гуманизированного антитела против PD-Ll ВАР058
Пять гуманизированных клонов, описанных в примере 1, отбирали для оценки экспрессии в клетках яичника китайского хомячка (СНО).
Единичные генные векторы (SGV) конструировали с использованием векторов Lonza's GS Xceed (IgG4proAk для тяжелой цепи и каппа для легкой цепи). SGV амплифицировали и временно котрансфицировали в клетки CHOK1SV GS-KO для экспрессии в объеме 2,8 л.
Экспрессирующие культуры собирали через б суток после трансфекции и очищали посредством центрифугирования и стерилизации фильтрованием. Очищенный супернатант клеточной культуры очищали с использованием одностадийной хроматографии с белком А. Анализ качества продукта в форме эксклюзионной ВЭЖХ, SDS-PAGE, IEF и LAL проводили с использованием очищенного материала в концентрации 1 мг/мл, включающего антитело в качестве контрольного образца.
Пример 2.1: Конструирование вектора
Последовательности областей, кодирующих вариабельный домен
легкой и тяжелой цепей, синтезировали в GeneArt AG. Области, кодирующие вариабельный домен легкой цепи, субклонировали в вектор рХС-Карра, и области, кодирующие вариабельный домен тяжелой цепи, субклонировали в вектор pXC-IgG4proAK, соответственно, с использованием N-концевого участка рестрикции Hind III и С-концевых участков рестрикции BsiWI (легкая цепь) и Apal (тяжелая цепь). 5 мкг лиофилизированных челночных векторов ресуспендировали в 50 мкл свободной от эндотоксинов стерильной воды. 1 мкг ДНК расщепляли соответствующими ферментами рестрикции в общем объеме 50 мкл и образцы инкубировали в течение 2 часов при 37°С. Добавляли 8,3 мкл бх буфера для нанесения ДНК и образцы подвергали электрофорезу при 12 0 В в течение 40 мин на 1% масс./об. агарозном геле, окрашенном бромидом этидия. В качестве эталонного маркера использовали 10 мкл ДНК-маркера Lonza SimplyLoad Tandem DNA ladder.
Соответствующие фрагменты подвергали экстракции из геля с использованием набора для экстракции из геля QIAquick (QIAGEN, 28704) в соответствии с инструкциями изготовителя. Лигирование проводили с использованием набора для быстрого лигирования Roche с соотношением остова вектора и ДНК-вставки 1:12, 1 мкл лигазы Т4 quick, 10 мкл 2х буфера для лигирования Т4 quick, объем реакции доводили до 21 мкл свободной от эндотоксинов стерильной водой, когда это было необходимо, и образцы инкубировали при комнатной температуре в течение 10 минут. Аликвоты реакционных смесей для лигирования объемом 10 мкл использовали для трансформации химически компетентных клеток Escherichia coli One Shot Top 10 (Invitrogen, C404003) с использованием способа теплового шока в соответствии с инструкциями изготовителя. Клетки распределяли на содержащие ампициллин (50 мкг/мл) чашки с агаром Луриа-Бертани (Select APS LB Broth base, BD 292438, и Bactiological Agar, Sigma Aldrich A5306) и инкубировали в течение ночи при 37°С до тех пор, пока бактериальные колонии не становились видимыми.
Единичные бактериальные колонии отбирали в 15 мл среды Луриа-Бертани (LB) (Select APS LB Broth base, BD 292438),
содержавшей 50 мкг/мл ампициллина, и инкубировали при 37°С в
течение б часов при встряхивании. ДНК вектора выделяли из 10 мл
этих культур для роста с использованием минипрепаративной
системы QIAGEN и элюировали в 3 0 мкл буфера ЕВ. Положительные
клоны идентифицировали путем расщепления HindiII и EcoRI и
подтверждали посредством нуклеотидного секвенирования
представляющего интерес гена.
Пример 2.2: Амплификация ДНК
Единичную бактериальную колонию отбирали в 15 мл среды Луриа-Бертани (LB), содержавшую 50 мкг/мл ампициллина, и инкубировали при 37°С в течение ночи при встряхивании при 22 0 об/мин. Полученную стартовую культуру использовали для инокуляции 1 л среды Луриа-Бертани (LB), содержавшей 50 мкг/мл ампициллина, и инкубировали при 37°С в течение ночи при встряхивании при 22 0 об/мин. ДНК вектора выделяли с использованием системы QIAGEN Plasmid Plus Gigaprep system (QIAGEN, 12991). Во всех случаях концентрацию ДНК измеряли с использованием спектрофотометра Nanodrop 1000 (Thermo-Scientific) и доводили до 1 мг/мл буфером ЕВ (10 мМ Tris-Cl, рН 8,5). Качество ДНК для единичных генных векторов оценивали путем измерения соотношения поглощения А2 60/А280, и было обнаружено, что оно составляет от 1,8 8 до 1,90. Концентрацию ДНК доводили до 1 мг/мл буфером ЕВ.
Пример 2.3: Культура клеток CHOK1SV GS-KO
Клетки CHOK1SV GS-KO культивировали в среде CD-CHO (Invitrogen, 10743-029), дополненной б мМ глутамином (Invitrogen, 25030-123) . Клетки инкубировали во вращающем инкубаторе Зб,5°С, 5% СОг, 85% влажность, 140 об/мин. Клетки подвергали стандартному субкультивированию каждые 3-4 суток путем посева 2х105 клеток/мл, и их увеличивали в количестве, чтобы иметь достаточное количество доступных для трансфекции клеток. Клетки выбрасывали к 2 0 пассажу.
Пример 2.4: Временные трансфекции клеток CHOK1SV GS-KO Временные трансфекции проводили с использованием клеток CHOK1SV GS-K0, которые находились в культуре в течение минимум
двух недель. Клетки субкультивировали за 24 ч до трансфекции, и жизнеспособность клеток в момент трансфекции составляла > 99%.
Все трансфекции проводили посредством электропорации с использованием Gene Pulse MXCell (Bio-Rad), системы для электропорации на основе планшетов. Для каждой трансфекции живые клетки ресуспендировали в предварительно нагретой среде до 2,8бх107 клеток/мл. 80 мкг ДНК (соотношение 1:1 для SGV тяжелой и легкой цепей) и 700 мкл суспензии клеток распределяли аликвотами в каждую кювету/лунку. Клетки подвергали электропорации при 300 В, 1300 мФ. Трансфицированные клетки переносили в предварительно нагретую среду в колбах Эрленмейера и кювету/лунки ополаскивали два раза предварительно нагретой средой, которую также переносили в колбы. Трансфицированные клеточные культуры инкубировали во вращающем инкубаторе при Зб,5°С, 5% СОг, 85% влажности, 140 об/мин в течение б суток. Жизнеспособность клеток и концентрации живых клеток измеряли в момент сбора с использованием автоматизированного счетчика клеток Vicell. Было обнаружено, что при сборе клеточной культуры плотность и жизнеспособность клеток (> 7,72х106 клеток/мл; > 92,5% на б сутки) находятся в типичном наблюдаемом диапазоне.
Пример 2.5: Аффинная хроматография с белком А Супернатант клеточной культуры собирали и очищали посредством центрифугирования при 2000 об/мин в течение 10 мин, а затем фильтровали через 0,22-мкм фильтра на основе мембраны PES. Очищенный супернатант очищали с использованием предварительно наполненной 5-мл колонки HiTrap MabSelect SuRE (GE Healthcare, 11-0034-94) на устройстве для очистки АКТА (10 мл/мин). Колонку уравновешивали 5 объемами колонки (CV) 50 мМ фосфата натрия, 125 мМ хлорида натрия, рН 7,0 (буфер для уравновешивания). После загрузки образца колонку промывали 2 CV буфера для уравновешивания, а затем 3 CV 50 мМ фосфата натрия, 1 М хлорида натрия, рН 7,0 и повторного промывания 2 CV буфера для уравновешивания. Затем продукт элюировали 10 мМ формиатом натрия, рН 3,5, в 5-15 CV. Белок, содержавший элюированные фракции, сразу доводили до рН 7,2 и фильтровали через 0,2-мкм
фильтр. После элюирования рН элюированных фракций доводили до рН 7,4. Затем продукт концентрировали с использованием фильтрующего элемента Amicon Ultra-4 Centrifugal Filter Unit (MWCO 30 кДа) (UFC903024) до 5-10 мг/мл.
В ходе фазы элюирования наблюдали единичный содержащий белок пик. Посредством анализа эксклюзионной ВЭЖХ и SDS-PAGE было показано, что этот пик содержит mAb. Выход белка после концентрирования представлен в таблице 4. Клоны имели временную экспрессию в диапазоне от 8,25 до 13,21 мг/л. Варианты антитела ВАР058 демонстрировали медленный профиль элюирования (размытые пики) в стандартных условиях элюирования (10 мМ формиат натрия, рН 3,5, в 5 объемах колонки), что требовало дополнительных 5-10 объемов колони буфера для элюирования для снижения УФ-сигнала до значения ниже 50 mAU.
Дублированные образцы очищенных с помощью белка А антител анализировали посредством SE-ВЭЖХ на системе ВЭЖХ Agilent 1200 series, с использованием колонки Zorbax GF-250, 4 мкм 9,4 мм ID х 250 мм (Agilent) . Аликвоты образца в концентрации 1 мг/мл фильтровали через 0,2-мкм фильтр перед инъекцией. Аликвоты объемом 8 0 мкл инжектировали, соответственно, и прогоняли при 1 мл/мин в течение 15 минут. Уровни растворимых агрегатов анализировали с использованием программного обеспечения Chemstation (Agilent).
Профили хроматографии с временем удержания, демонстрирующим процент общих выявленных площадей пиков, получали для исследуемых антител и контрольного 1дС4-антитела. Продукты демонстрировали единичный пик белка на уровне приблизительно 9,05-9,07 мин, сравнимый с контрольным 1дС4-антителом человека
(приблизительно 9,03 мин), и он соответствовал мономерному антителу. Различные количества (вплоть до 15,4%) более высокомолекулярных примесей, соответствующих растворимым агрегатам, было обнаружено при времени удержания от 8,2 9 до 8,4 5 мин. Все продукты демонстрировали сходный профиль удержания, но с различными уровнями мономера, обнаруживаемыми в диапазоне 84,6-98,0% от общего содержания белка. Клоны К и М продемонстрировали наиболее высокое количество примесей с временем удержания, соответствующим димерным антителам
(растворимые агрегаты), составляющее приблизительно 15%, в то время как клон L продемонстрировал наименьшее их количество
(1,96%) .
Пример 2.7: Анализ SDS-PAGE
Восстановленные и невосстановленные образцы антитела, очищенного с помощью белка А, получали для анализа путем смешения с 4х буфером для образца LDS NuPage (Invitrogen, NP0007) и 10х агентом для восстановления образца NuPage
(Invitrogen, NP0009) , и инкубировали при 70°С, 10 мин. Для невосстановленных образцов восстановитель и инкубацию при нагревании не применяли. Образцы подвергали электрофорезу на 1,5-мм предварительно залитых гелях NuPage 4-12% Bis-Tris Novex
(Invitrogen, NP0335PK2) с подвижным буфером NuPage MES SDS в денатурирующих условиях. В гель включали 10-мкл аликвоты предварительно окрашенного стандарта молекулярной массы SeeBlue Plus 2 (Invitrogen, LC5925) и контрольного 1дС4-антитела в концентрации 1 мг/мл. На гель наносили 1 мкл каждого образца в концентрации 1 мг/мл. После электрофореза гели окрашивали InstantBlue (TripleRed, ISB01L) в течение 30 мин при комнатной температуре. Изображения окрашенных гелей анализировали на системе визуализации BioSpectrum Imaging System (UVP).
Анализ подтверждает присутствие антител. В
невосстанавливающих условиях наблюдают преобладающую белковую
полосу на уровне более 98 кДа, сравнимую с контрольным IgG4-
антителом. Контрольное 1дС4-антитело демонстрирует
дополнительную более слабую полосу, соответствующую половинному антителу, состоящему из тяжелой цепи плюс легкая цепь, на уровне приблизительно 7 0 кДа в невосстанавливающих условиях. Это является ожидаемым для контрольного антитела. Две полосы наблюдали в восстанавливающих условиях, что соответствует размеру тяжелой цепи (вблизи положения маркера размером 4 9 кДа) и легкой цепи (вблизи положения маркера 2 8 кДа), и они были сравнимыми с полосами, обнаруженными для контрольного IgG4-антитела.
Пример 2.8: Анализ посредством изоэлектрического
фокусирования (IEF)
Невосстановленные образцы очищенного с помощью белка А антитела подвергали электрофорезу, как описано ниже.
5 мкг очищенных с помощью белка А образцов подвергали электрофорезу на 1,0-мм градиентном геле рН 3-10 Novex (Invitrogen, ЕС66552ВОХ) с использованием рекомендованных производителем условий разделения. В гель были включены 10-мкл аликвоты маркеров IEF рН 3-10 (Invitrogen, 39212-01). После электрофореза гели фиксировали 10% раствором ТСА в течение 30 мин, а затем окрашивали InstantBlue (TripleRed, ISB01L) в течение ночи при комнатной температуре. Изображения окрашенных гелей анализировали на системе визуализации BioSpectrum Imaging System (UVP).
Как показано в таблице 5, исследуемые клоны продемонстрировали зарядовые изоформы, имеющие более чем рН 7,8. Обнаруженные зарядовые изоформы были несколько более основными, чем теоретически вычисленные изоэлектрические точки (pi) для этих антител, которые были спрогнозированы между 7,72 и 8,21. Этот общий сдвиг к более основным изоформам указывает на присутствие посттрансляционных модификаций, таких как гликозилирование молекул. Клоны К и М, L и N, демонстрируют сравнимые зарядовые изоформы, что соответствует их теоретически
вычисленной pi, которая является одинаковой для обеих пар (7,72 для К и М, 7,87 для L и N). pi для клона О было невозможно точно определить, поскольку он не выходил из лунки, в которую был нанесен. Спрогнозированная изоэлектрическая точка для клона О составляет 8,21, что близко к пределу обнаружения (8,3) в этом анализе. Поскольку общая тенденция состоит в небольшом увеличении измеренной pi по сравнению с прогнозированной pi, это указывает на то, что фактическая pi, вероятно, составляет приблизительно 8,6, что выходит за предел обнаружения. Контрольное антитело IgG4 имело ожидаемое поведение.
Измеряли уровни эндотоксинов очищенных белков (в концентрации 1 мг/мл) с использованием устройства Endosafe-PTS, способа на основе анализа LAL с помощью кассеты (Charles River).
Как показано в таблице 4, было обнаружено, что содержание эндотоксинов находится в диапазоне от 0,05 до 0,191 МЕ/мг.
Заключение
Конструировали экспрессирующие векторы GS для единичного гена для выбранных гуманизированных mAb против PD-L1 и использовали для временной транфекции клеток CHOK1SV GS-KO. От 2,4 до 2,8 литра экспрессирующей культуры инкубировали в стандартных условиях в течение б суток и полученный супернатант
клеточной культуры очищали с использованием хроматографии с белком А. Титры после очистки и концентрирования указаны в таблице 4, и было обнаружено, что они находятся в диапазоне от 8,25 до 13,21 мг/л. Конечный выход находился в диапазоне от 19,8 до 37 мг.
Анализ SDS-PAGE показал высокие уровни чистоты после первоначальной очистки с белком А и замены буфера, в то время как анализ эксклюзионной ВЭЖХ показал присутствие растворимых агрегатов (вплоть до 15,43%) в продуктах, что в основном согласуется с димерным антителом. Клоны М и К продемонстрировали повышенные количества этих высокомолекулярных примесей (15,4% и 13,8%, соответственно).
Изоэлектрическое фокусирование обнаружило ряд зарядовых изоформ всех mAb. Клоны K-N продемонстрировали изоформы, которые обычно были более основными, чем исходя из теоретически вычисленных значений pi для этих молекул, что указывает на некоторый уровень посттрансляционных модификаций, pi для клона О нельзя было точно определить, поскольку измеренная pi превышала диапазон обнаружения геля.
Уровни эндотоксинов во всех образцах измеряли перед приготовлением образцов, и было обнаружено, что они составляют менее 0,191 ЕЭ/мг.
Пример 3: Охарактеризация антител мыши против PD-L1 и гуманизированных антител против PD-L1
Аффинность и специфичность связывания
Связывание иллюстративного гуманизированного антитела против PD-L1 с белком PD-L1 человека измеряли с использованием способа Biacore. Результаты представляют собой: Ка=3,07х105 М_1с~ 1; Kd=4, 55х10-5 cr1; KD=0,171 нМ.
Связывание иллюстративного гуманизированного антитела против PD-L1 с белком PD-L1 яванского макак определяли с использованием способам Biacore. Результаты представляют собой: Ка=9,51х105 М^сг1; Kd=4,55xlQ-5 сг1; KD=0,124 нМ.
Пример 3.1: Охарактеризация гуманизированного антитела против PD-L1
Связывание иллюстративного гуманизированного антитела против PD-L1 с белком PD-L1 мыши измеряли с использованием способа Biacore. Результаты представляют собой: Ка=8,30х106 М_1с~ 1; Kd=l, 67Х10-4 с-1; KD=0, 0202 нМ.
Связывание иллюстративного гуманизированного антитела против PD-L1 с белком PD-L1 измеряли с использованием способа
Biacore. Результаты представляют собой: Ка=9,45х106 М^с-1; Kd=l, 23Х10-4С-1; KD=0,168 НМ.
Связывание того же гуманизированного антитела против PD-L1 с клетками 300.19, экспрессирующими PD-L1 человека, измеряли с использованием FACS-анализа. Результат показывает, что антитело против PD-L1 (IgG4 человека) связывается с PD-L1 человека с KD 0,285 нМ.
Связывание того же гуманизированного антитела против PD-L1 с клетками 300.19, экспрессирующими PD-L1 яванского макака, измеряли с использованием FACS-анализа. Результат показывает, что антитело против PD-L1 (IgG4 человека) связывается с PD-L1 человека с KD 1,2 9 нМ.
Эти результаты показывают, что иллюстративное антитело против PD-L1 связывается с высокой аффинностью с PD-L1 человека, мыши, крысы и яванского макака.
Блокирование взаимодействий между PD-L1 и его лигандами
Исследовали способность иллюстративного гуманизированного антитела против PD-L1 блокировать взаимодействия между PD-L1 и обоими из его известных лигандов: PD-1 и В7-1. Результаты показывают, что антитело против PD-L1 блокирует связывание PD-1 и В7-1 с клетками 300.19, экспрессирующми PD-L1 человека, по сравнению с изотипическим контрольным IgG4 человека и контролем без антитела. Антитело против PD-L1 блокировало связывание PD-1 с клетками 300.19 с 1С50 0,145 нМ. То же антитело блокировало связывание В7-1 с клетками 300.19 с 1С50 0,1 нМ.
Способность иллюстративного гуманизированного антитела против PD-L1 усиливать стимулируемую стафилококковым энтеротоксином В (SEB) экспрессию IL-2 и IFNy исследовали в
Клеточная активность
анализе с цельной кровью человека ex vivo. Разбавленную цельную кровь инкубировали с антителом против PD-L1 в присутствии или в
отсутствие SEB при 37°С в течение 4 8 часов перед определением IFNy и IL-2. Результат показывает, что антитело против PD-L1 увеличивает стимулируемую SEB экспрессию IFNy в 2,72+0,84 раза и увеличивает экспрессию IL-2 в 2,39+0,96 раза по сравнению с изотипическим контрольным IgG4 человека (25 мкг/мл SEB; п=5 доноров).
Пример 4: Отбор пациентов на основе статуса PD-Ll/CD8/IFN-y Для каждого из нескольких типов злокачественной опухоли образцы от множества пациентов исследовали в отношении статуса PD-L1/CD8/IFN-y. Каждый образец классифицировали как: тройной отрицательный по PD-L1/CD8/IFN-y, однократно или двойной положительный по этим маркером или тройной положительный по этим маркерам. На фиг.10 показано, что в этом эксперименте в популяции пациентов следующие типы злокачественной опухоли часто являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y: рак легкого (плоскоклеточный), рак легкого (аденокарцинома), рак головы и шеи, рак шейки матки (плоскоклеточный), рак желудка, рак щитовидной железы, меланома и рак носоглотки. Пациенты, имеющие эти типы злокачественной опухоли, являются хорошими кандидатами для терапии антителами против PD-1 и комбинированных способов терапии, как описано в настоящем описании. Вероятность успешного лечения может быть далее усилена путем определения того, какие пациенты являются тройными положительными по PD-Ll/CD8/IFN-y, и лечения тройных положительных пациентов антителами против PD-L1 и комбинированными способами терапии, как описано в настоящем описании.
На фиг.11 показано, что в популяции пациентов следующие типы злокачественной опухоли редко являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y: ER+ рак молочной железы и рак поджелудочной железы. Примечательно, что даже в злокачественных опухолях, которые обычно не являются положительными PD-Ll/CD8/IFN-y, можно увеличить вероятность успешного лечения
посредством определения того, какие пациенты являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y, и лечения тройных положительных пациентов антителами против PD-L1 и комбинированными способами терапии, как описано в настоящем описании.
На фиг.12 показана доля пациентов с раком молочной железы, которые являются тройными положительными по PD-Ll/CD8/IFN-y. Рассматривая рак молочной железы в целом, доля тройных положительных пациентов является довольно низкой. Однако, если сфокусироваться только на раке молочной железы IM-TN, можно видеть, что значительно больший процент пациентов являются тройными положительными по PDLl/CD8/IFN-y. Рак молочной железы IM-TN особенно трудно лечить общепринятыми способами терапии. Открытие, что рак молочной железы IM-TN часто является тройным положительным по PD-Ll/CD8/IFN-yD обеспечивает новые направления терапии этой злокачественной опухоли антителами против PD-L1 и комбинированными способами терапии, как описано в настоящем описании.
На фиг.13 показана доля пациентов с раком толстого кишечника, которые являются тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y. Рассматривая рак толстого кишечника в целом, доля тройных положительных пациентов является довольно низкой. Однако, если сфокусироваться только на раке молочной железы с высокой MSI (высокая нестабильность микросателлитов), можно видеть, что значительно больший процент пациентов являются тройными положительными по PD-Ll/CD8/IFN-y. Уровни MSI можно анализировать с использованием, например, коммерчески доступных способов на основе ПЦР.
Образцы рака желудка исследовали в отношении уровней PD-Ll/CD8/IFN-y (данные не представлены). Было обнаружено, что при раке желудка с высокой MSI или EBV+ раке желудка, приблизительно 4 9% были положительными по PDL1, и высокая доля положительных по PD-L1 клеток были тройными положительными по PD-L1/CD8/IFN-y. Также было обнаружено, что часть положительных по PD-L1 клеток и
положительных по PD-L1/CD8/IFN-y клеток также были положительными по PIK3CA. Эти данные указывают на то, что эти злокачественные опухоли можно лечить антителом против PD-L1, необязательно в комбинации с терапевтическим средством, направленным на PIK3.
Образцы CRC с высокой MSI исследовали в отношении комбинации маркеров (данные не представлены). Было обнаружено, что в образцах CRC с высокой MSI высокая доля образцов PD-Ll/CD8/IFN-y также была положительной по LAG-3, PD-1 (также называемый PDCD1), RNF43 и BRAF. Эти данные указывают на то, что эти злокачественные опухоли можно лечить антителом против PD-1, необязательно в комбинации с терапевтическим средством, которое нацелено на один или несколько из LAG-3, PDCD1, RNF43 и BRAF.
Плоскоклеточный рак легкого исследовали в отношении комбинации маркеров (данные не представлены). Было обнаружено, что в образцах плоскоклеточного рака легкого высокая доля положительных по PDLl/CD8/IFN-y образцов также является положительной по LAG-3. Эти данные указывают на то, что эти злокачественные опухоли можно лечить антителом против PD-1, необязательно в комбинации с терапевтическим средством, которое нацелено на LAG-3, например, антитело против LAG-3.
Папиллярный рак щитовидной железыэ исследовали в отношении комбинации маркеров, включая мутацию V60 0E BRAF (данные не представлены). Было обнаружено, что высокая доля образцов рака щитовидной железы, которые являются положительными по PD-L1, также является положительной по V600E BRAF. Эти данные указывают на то. Что эти злокачественные опухоли можно лечить антителом против PD-L1, необязательно в комбинации с терапевтическим средством, которое нацелено на BRAF.
Пример 5: Отбор пациентов на основе статуса PD-L1
Чтобы обеспечить обширное исследование онкологических заболеваний в отношении способов терапии на основе PD-1/PD-L1, авторы настоящего изобретения провели оценку экспрессии PD-L1 как на уровне белка, так и на уровне мРНК, в злокачественных опухолях человека, включающих опухоли как легкого, так и печени.
Экспрессию белка PD-L1 оценивали в наборе фиксированных в
формалине залитых парафином опухолей немелкоклеточной
аденокарциномы (АСА) легкого (NSCLC), плоскоклеточной карциномы
(SCC) NSCLC и печеночно-клеточной карциномы (НСС) с
использованием иммуногистохимии (IHC). Экспрессию PD-L1
оценивали полуколичественно с использованием
неавтоматизированной методологии оценки гисто-показателя (Н-показатель), исходя из интенсивности окрашивания и процента положительных опухолевых клеток. В анализе IHC, проведенном авторами настоящего изобретения, положительность по PD-L1 (PD-L1+) определяли как Н-показатель> 20. Параллельно исследовали данные экспрессии мРНК PD-L1 от The Cancer Genome Atlas (TCGA) при этих показаниях (503 NSCLC АСА, 489 NSCLC SCC и 191 НСС) и анализировали их путем сравнения экспрессии в соответствующих нормальных тканях от TCGA.
С использованием анализа RNAseq данные вычисляли в качестве log2 (RPKM+0,1) после нормализации RSEM с использованием системы OmicSoft RNASeq для онкологических заболеваний от TCGA. Экспрессия PD-L1 является повышенной при АСА и SCC NSCLC, относительно НСС. Путем наложения распределений и сравнения уровня экспрессии среди всех показаний от TCGA, авторы настоящего изобретения ранжировали профили сверхэкспрессии для PD-L1 и обнаружили, что группа НСС от TCGA имеет значительно сниженные уровни мРНК PD-L1 со средним уровнем -0,8 по сравнению с 1,3 для АСА и 1,5 для SCC, что соответствует изменению от среднего уровня экспрессии более чем в 2 раза. С использованием RNAseq анализ, проведенный авторами настоящего изобретения, определил 50% случаев аденокарциномы NSCLC, 54% случаев плоскоклеточной карциномы NSCLC и б% случаев НСС в качестве экспрессирующих PD-L1 на высоком уровне.
Экспрессию белка PD-L1 в опухолевых клетках измеряли в 4 5 образцах аденокарциномы (АСА) легкого, 47 образцах плоскоклеточной карциномы (SCC) легкого и 36 образцах печеночно-клеточной карциномы (НСС). 16/45 (35,6%) случаев АСА легкого, 21/47 (44,7%) случаев SCC легкого, были положительными по PD-L1. Напротив, положительность по PD-L1 наблюдали только в 2/36
(5,6%) образцах НСС.
В общем, с использованием анализа IHC и RNAseq в больших и независимых наборах образцов NSCLC и НСС человека авторы настоящего изобретения выявили, что экспрессия PD-L1 в большей степени увеличена при NSCLC, чем при НСС. В случае NSCLC, данные между аденокарциномой и плоскоклеточным раком были сравнимыми. Важно, что среди большого количества образцов (128 для IHC и 1183 для RNAseq) для 3 заболеваний, наблюдается очень высокое соответствие между анализами на основе белка и мРНК. Таким образом, данные, полученные авторами настоящего изобретения, устанавливают основу для крупномасштабного сбора данных на основе мРНК в TCGA для заболеваний и сегментов пациентов, у которых могут быть усилены ответы на иммунную терапию на основе PD-1/PD-L1.
Пример 6: Эффекты направленных средств на модулирование PD-
В этом примере оцениваются эффекты отдельных лекарственных средств (например, ингибитор сМЕТ, ингибитор МЕК, ингибитор bRAF и ингибитор ALK) на модулирование PD-L1 (CD274). Соединение А17 можно получать, как описано в примере 21 патента США № 8420645. Следующие соединения: соединение А18 (руксолитиниба фосфат), соединение А2 3 (церитиниб), соединение A3 4 (биниметиниб) и соединение А29 (энкорафиниб) доступны от Novartis AG, Базель, Швейцария. Выбранные лекарственные средства исследовали способом ПЦР в реальном времени и проточной цитометрией в отношении уровней PD-L1. Наблюдали значительное ингибирование PD-L1 соединением А17, соединением А18, соединением А34, соединением А2 9 и соединением А2 3 на опухолевых клетках.
Подавление посредством соединения All белка PD-L1 в клетках немелкоклеточного рака легкого
Экспрессию PD-L1 (CD274) анализировали в злокачественных
клеточных линиях, обработанных соединением А17. Клетки получали
от АТСС и культивировали in vitro в соответствии с инструкциями
АТСС. Использованные клеточные линии были ранее охарактеризованы
Cancer Cell Line Encyclopedia Project
(http://www.broadinstitute.org/ccle/home).
Клетки, посеянные в планшеты с шестью ячейками, обрабатывали соединением А17 в различных концентрациях (10 нМ, 100 нМ и 1000 нМ) в течение 24, 48 и 72 часов. В качестве контроля использовали равное количество носителя (DMSO). Клетки промывали PBS, а затем собирали с использованием скребка для клеток.
Для каждой реакции 0,5-1х106 клеток окрашивали 20 мкл моноклонального антитела против PD-L1 человека с РЕ, клон М1Н1
(BD), в течение 30-60 минут при 4°С. Клетки промывали два раза и данные получали с использованием Canto II с программным обеспечением FACSDiva (BD Bioscience). Анализ данных проводили с использованием программного обеспечения FlowJo (Tree Star). Среднюю интенсивность флуоресценции (MFI) определяли путем гейтирования единичных клеток. В качестве контроля гейтирования использовали неокрашенные клетки.
Обработка клеток ЕВС-1 (немелкоклеточный рак легкого
(NSCLC) с амплификацией сМЕТ) соединением А17 in vitro приводила к значительному подавлению поверхностной экспрессии PD-L1, как наблюдают посредством проточной цитометрии (фиг.14). Результаты, представленные в настоящем описании, указывают на то, что соединение А17 выполняет функцию ингибитора PD-L1/PD-1.
Соединение All, соединение А34, соединение А18, соединение А29 и соединение А23 подавляют мРНК PD-L1
Были разработаны анализы ОТ-ПЦР TaqMan для обнаружения изменений уровней экспрессии PD-L1 (CD274) в клеточных линиях и ксенотрансплантатов опухолей. мРНК выделяли из замороженных клеточных осадков и фрагментов опухоли с использованием набора Qiagen RNeasy Mini kit. Выделенную РНК замораживали при -8 0°С. Качество РНК проверяли и РНК количественно определяли с использованием устройства 2100 Agilent Bioanalyzer в соответствии с протоколом набора Agilent RNA 6000 Nano Kit. кДНК получали с использованием набора High Capacity RNA-to cDNA Kit
(Applied Biosystems).
Реакции ПЦР в реальном времени проводили в общем объеме 2 0 мкл, включая 10 мкл основной смеси для ПЦР Universal PCR master
mix (Applied Biosystems), 1 мкл набора зондов/праймеров для PD-L1 человека (CD274) (Applied Biosystems) и 8 мкл кДНК. Каждый образец анализировали в трех экземплярах. В каждой реакции ПЦР использовали количество кДНК, продуцированной с 25-50 нг РНК в реакции обратной транскрипции. Вследствие различий в уровнях мРНК между PD-L1 и GAPDH, две реакции ПЦР в реальном времени проводили в отдельных пробирках с использованием одного и того же количества кДНК. Реакцию ПЦР в реальном времени проводили на устройстве С1000 Thermal Cycle (BioRad) со следующей программой цикла: инкубация в течение 10 минут при 95°С, затем 4 0 циклов при
95°С в течение 15 секунд и 60°С в течение 1 минуты. После завершения реакции PD-L1 среднюю величину Ct нормализовывали относительно каждой величины Ct из эталонной реакции с GAPDH. Затем каждую нормализованную логарифмическую величину конвертировали в линейную величину.
Ингибирование экспрессии PD-L1 (мРНК) соединением А17 наблюдали в ксенотрансплантате опухоли Hs.7 4 6.T (клетки рака желудка с амплификацией и мутацией сМЕТ) (фиг.16). Ингибирование мРНК PD-L1 соединением А23 наблюдали в Н3122 (немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) с транслокацией ALK) in vitro (фиг.17). Подавление мРНК PD-L1 соединением А2 9 и соединением А34 наблюдали в моделях с ксенотрансплантатами опухолей, включающих опухоли LOXIMV1 (меланома с мутантным BRAF, фиг.18) и HEYA8 (рак яичника с мутантным KRAF, фиг.19), соответственно. Подавление мРНК PD-L1 соединением А18 наблюдали в моделях с ксенотрансплантатами опухолей, включающих линию UKE-1 (миелопролиферативное новообразование (MPN) с мутацией JAK2V617F, фиг.19).
Результаты, представленные в настоящем описании, демонстрируют роль соединения А17, соединения А34, соединения А18, соединения А2 9 и соединения А2 3 в регуляции молекул иммунной точки контроля в злокачественной опухоли. Наблюдаемое ингибирование экспрессии PD-L1 этими средствами указывает на то, что эти направленные средства могут иметь иммуномодулирующую активность, в дополнение к их эффектам на передачу сигнала в
злокачественной опухоли. Таким образом, результаты,
представленные в данном примере, указывают на то, что введение направленных средств с ингибиторами ингибиторов иммунной точки контроля, таких как PD-1, PD-L1, LAG-3 и/или TIM-3 обеспечивает более эффективное обращение вспять иммунной супрессиии, опосредуемой иммунными точками контроля.
Пример 7: Реакция смешанных лимфоцитов с происходящими из моноцитов дендритными клетками и аллогенными СР4+Т-клетками
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) выделяли из лейкоцитарных пленок с помощью стандартных методик с использованием градиента Ficoll. CD14+ моноцитарную фракцию РВМС выделяли посредством отрицательной селекции с использованием набора для увеличения концентрации моноцитов EasySep от StemCell в соответствии с инструкциями поставщика. Для дифференцировки моноцитов в дендритные клетки (DC) среду дополняли 100 нг/мл GM-CSF человека (ВТР30538, произведенный Novartis или коммерчески доступный от R &D) и 80 нг/мл IL4 человека (ВТР30884, произведенный Novartis) и клетки инкубировали в течение 7 суток при 37°С и 5% СОг. На 7 сутки культивирования происходящих из моноцитов DC получали свежие CD4+ Т-лимфоциты в увеличенной концентрации из РВМС, происходящих из лейкоцитарной пленки, полученной от другого донора (т.е. аллогенные). Фракцию CD4+ Т-клеток выделяли посредством отрицательной селекции с использованием набора для увеличения концентрации CD4+ Т-клеток Easysep от StemCell в соответствии с инструкциями изготовителя. Затем DC и аллогенные CD4+ Т-клетки в увеличенной концентрации высевали в 9б-луночные планшеты с U-образным дном в соотношении 1:10 (104 DC и 105 CD4 Т-клеток/лунка) в присутствии указанных антител и в трех экземплярах. Исследованные антитела включали контрольный huIgG4 против лизоцима курицы (АСЕ14834) . Затем
сокультуры инкубировали в течение 5 суток при 37°С и 5% СОг. На 5 сутки 100 мкл супернатанта собирали и хранили при -2 0°С для последующего анализа цитокинов. Индексы стимуляции (SI) для пролиферации и высвобождения IFNy в каждом эксперименте и для каждой исследованной концентрации антитела вычисляли путем
деления средней величины каждых данных, измеренных для исследуемых антител, на среднюю величину, измеренную для контрольного 1дС4-антитела человека против лизоцима курицы АСЕ14834. IFNy в супернатантах сокультур определяли с помощью стандартного ELISA с использованием коммерчески доступных наборов для ELISA.
Иллюстративные антитела против PD-L1 демонстрировали выраженный эффект на уровни IFNy, поддающиеся обнаружению в супернатантах, собранных на 5 сутки сокультивирования. Как показано на фиг.21, обработка антителом приводило к дозозависимому увеличению высвобождению IFNy, в среднем в ~4-7 раза превышающему уровни, наблюдаемые для изотипического контрольного антитела в дозах в диапазоне от 0,04 мкг/мл и 20 мкг/мл.
РВМС выделяли из лейкоцитарных пленок посредством стандартных методик с использованием градиента Ficoll и ресуспендировали в количестве 2x106 клеток/мл в среде для культивирования Т-клеток. 200000 клеток/лунка добавляли в 96-луночный круглодонный планшет. Затем добавляли SEB (стафилококковый энтеротоксин В) в конечной концентрации 1 нг/мл. Исследуемые антитела или изотипический контрольный IgG4 человека добавляли в конечной концентрации 25 мкг/мл и планшет инкубировали при 37°С, 5% СОг, в течение 4 суток. Супернатанты собирали для измерения цитокина IL-2 посредством MSD в соответствии с протоколом изготовителя. Данные представлены для 5 доноров-людей.
Как показано на фиг.22, иллюстративные антитела против PD-L1 усиливали индуцируемую SEB секрецию IL-2 Т-клетками по сравнению с изотипическим контрольным АЬ у всех доноров, со средней кратностью стимуляции 4,4+2,0 (п=5). В качестве положительного контроля в этом анализе использовали антитела против PD-1, и они продемонстрировали сходный эффект с антителами против PD-L1.
Пример 9: Перекрестно-видовое связывание антител против PD-
Пример 8: Анализ стимуляции Т-клеток суперантигеном
L1 при оценке с использованием Biacore
Специфическое антитело против Fab человека иммобилизовывали на чипе СМ5 (GE, каталожный номер: 28-9583-25). Иммобилизацию проводили при 25°С с использованием скорости потока 10 мкл/мин. IgG разбавляли до 2,5 мкг/мл и улавливали в течение 30 с при скорости поток 10 мкл/мин. Исследуемое антитело улавливали на проточной ячейке FC2, FC3 и FC4. PD-L1 (крысы, человека, мыши или яванского макака) пропускали следующим образом: начальная концентрация PD-L1 представляет собой 100 нМ, 2-кратные разведения: 100, 50, 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56 и 0 нМ. Кинетика/аффинность прохождения Biacore Wizards: время ассоциации 120 с, время диссоциации 600 с (Подвижный буфер HBS-EP+BSA 0,2 5 мг/мл, регенерирующий буфер: 10 мМ глицин НС1, рН 2,1) . Анализ данных проводили с помощью программного обеспечения Biacore Т-100 Evaluation software версии 2 с аппроксимацией 1:1. Результаты представлены в таблице 8.
Таблица 8: Аффинность связывания иллюстративных антител против PD-L1 с PD-L1, измеренная с использованием Biacore
Все публикации, патенты и номера доступа, упомянутые в настоящем описании, включены в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме, как если бы было конкретно или индивидуально указано, что каждая индивидуальная публикация или патент включены в качестве ссылок.
ЭКВИВАЛЕНТЫ
Хотя были рассмотрены конкретные варианты осуществления настоящего изобретения, представленное выше описание является иллюстративным, но не ограничивающим. Многие варианты изобретения станут очевидными специалистам в данной области при изучении этого описания и формулы изобретения, представленной
ниже. Полный объем изобретения должен определяться пунктами формулы определения, их полным объемом эквивалентов и описанием, а также такими вариантами.
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ:
<110> NOVARTIS AG
DANA-FARBER CANCER INSTITUTE, INC. PRESIDENT AND FELLOWS OF HARVARD COLLEGE
<120> МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ К PD-L1 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
<130> C2160-7003WO
<140> <141>
<150> 62/213,076 <151> 2015-09-01
<150> 62/198,545
<151> 2015-07-29
<150> 62/094,847 <151> 2014-12-19
<150> 62/063,852 <151> 2014-10-14
<160> 362
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1 <211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 1
Ser Tyr Trp Met Tyr 1 5
<210> 2 <211> 17 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 2
Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asn
<210> 3
<211> 11 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 3
Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 4 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 4
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 1 5
<210> 5 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 5
Asp Pro Asn Ser Gly Ser 1 5
<210> 6 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 6
Gln Val His Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Lys Gln Gly Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 7 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<210> 8 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 8
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Ser Lys Leu Glu Leu Lys 100 105
<210> 9 <211> 11 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 9
Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala Val Ala
1 5 10
<210> 10 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 10
Trp Ala Ser Thr Arg His Thr 1 5
<210> 11 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 11
Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu Thr
<210> 12 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 12
Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
1 5
<210> 13 <211> 3 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 13 Trp Ala Ser 1
<210> 14 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 14
Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu 1 5
<210> 15 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 15
gacattgtga tgacccagtc tcacaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 60
atcacctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtatca acagaaacca 120
gggcaatctc ctaaactact gatttactgg gcatccaccc ggcacactgg agtccctgat 180
cgcttcacag gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccattagcaa tgtgcagtct
240
gaagacttgg cagattattt ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggtgct 300 gggtccaagc tggagctgaa a 321
<210> 16
<211> 120
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 16
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Lys Gln Gly Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 17 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 17
Asp Ile Met Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 18 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 18
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 19
<211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 19
caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggcc 120
actggacaag ggcttgagtg gatgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag attcaccatc tccagagatg attcaaagaa cacggcgtat 240
ctgcaaatga acagcctgaa aaccgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
<210> 20 <211> 447 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 20
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 21 <211> 1341 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 21
caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggcc 120
actggacaag ggcttgagtg gatgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag attcaccatc tccagagatg attcaaagaa cacggcgtat 240
ctgcaaatga acagcctgaa aaccgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca tgcaaggtgt gggcagcccc aaccaggtca tgggagagca gacggctcct aatgtcttct ctctccctgt gcgtcctcac ccaacaaagg gagagccaca gcctgacctg atgggcagcc tcttcctcta catgctccgt ctctgggtaa cgtcctgcac cctcccgtcc ggtgtacacc cctggtcaaa ggagaacaac cagcaggcta gatgcatgag
a caggactggc tccatcgaga ctgcccccat ggcttctacc tacaagacca accgtggaca gctctgcaca tgaacggcaa aaaccatctc cccaggagga ccagcgacat cgcctcccgt agagcaggtg accactacac ggagtacaag caaagccaaa gatgaccaag cgccgtggag gctggactcc gcaggagggg acagaagagc
960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1341
<210> 22 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 22
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 23 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 23
gatattgtga tgacccagac tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60
atctcctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg gatcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 24 <211> 214 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 24
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 25
<211> 642 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 25
gatattgtga tgacccagac tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60
atctcctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg gatcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360
tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420
cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480
gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540
ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600
ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gt 642
<210> 26 <211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 26
Asp Ile Gln
Met
Thr Gln Ser Pro 5
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 27 <211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 27
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 28 <211> 214 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 28
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 29 <211> 642 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 29
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360
tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420
cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480
gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540
ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600
ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gt 642
<210> 30 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 30
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 31 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 31
gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggctac agtgaaaatc 60
tcctgcaagg tttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggcc 120
actggacaag ggcttgagtg gatgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
<210> 32 <211> 447 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 32
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 33
<211> 1341 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 33
gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggctac agtgaaaatc 60
tcctgcaagg tttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggcc 120
actggacaag ggcttgagtg gatgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg cgtgtggtca tgcaaggtgt gggcagcccc aaccaggtca tgggagagca gacggctcct aatgtcttct ctctccctgt tgcataatgc gcgtcctcac ccaacaaagg gagagccaca gcctgacctg atgggcagcc tcttcctcta catgctccgt ctctgggtaa caagacaaag cgtcctgcac cctcccgtcc ggtgtacacc cctggtcaaa ggagaacaac cagcaggcta gatgcatgag
a ccgcgggagg caggactggc tccatcgaga ctgcccccat ggcttctacc tacaagacca accgtggaca gctctgcaca agcagttcaa tgaacggcaa aaaccatctc cccaggagga ccagcgacat cgcctcccgt agagcaggtg accactacac cagcacgtac ggagtacaag caaagccaaa gatgaccaag cgccgtggag gctggactcc gcaggagggg acagaagagc
900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1341
<210> 34 <211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 34
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 35 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 35
gaaattgtgc tgactcagtc tccagacttt cagtctgtga ctccaaagga gaaagtcacc 60
atcacctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccagac 180
aggttcagtg gcagtgggtc aggcactgat ttcacactga aaatcagcag ggtggaggct 240
gaggatgttg gagtttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 36 <211> 214 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 36
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala
65 70 75 80
Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 37 <211> 642
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 37
gaaattgtgc tgactcagtc tccagacttt cagtctgtga ctccaaagga gaaagtcacc 60
atcacctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccagac 180
aggttcagtg gcagtgggtc aggcactgat ttcacactga aaatcagcag ggtggaggct 240
gaggatgttg gagtttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360
tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420
cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480
gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540
ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600
ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gt 642
<210> 38 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 38
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser
65 70 75 80
Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 39 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 39
gaagtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaggatc 60
tcctgtaagg gttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag agtcaccata tcagtagaca cgtccaagaa ccagttctcc 240
ctgaagctga gctctgtgac cgccgcggac acggctgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
<210> 40 <211> 447 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 40
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser
65 70 75 80
Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 41
<211> 1341 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 41
gaagtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaggatc 60
tcctgtaagg gttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag agtcaccata tcagtagaca cgtccaagaa ccagttctcc 240
ctgaagctga gctctgtgac cgccgcggac acggctgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 1260
aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 1320
ctctccctgt ctctgggtaa a 1341
<210> 42 <211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 42
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys
1 5 10 15
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 43 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 43
gaaattgtgc tgactcagtc tccagacttt cagtctgtga ctccaaagga gaaagtcacc 60
atcacctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcag cctgcagcct 240
gaagatattg caacatatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 44 <211> 214 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 44
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys
1 5 10 15
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 45 <211> 642
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 45
gaaattgtgc tgactcagtc tccagacttt cagtctgtga ctccaaagga gaaagtcacc 60 atcacctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc aggttcagtg gaagatattg gggaccaagg tctgatgagc cccagagagg gagagtgtca ctgagcaaag ctgagctcgc cacagctcct gaagtggatc caacatatta tggaaatcaa agttgaaatc ccaaagtaca cagagcagga cagactacga ccgtcacaaa gatctattgg tgggacagat ctgtcagcag acgtacggtg tggaactgcc gtggaaggtg cagcaaggac gaaacacaaa gagcttcaac gcatccaccc tttactttca tataacagct gctgcaccat tctgttgtgt gataacgccc agcacctaca gtctacgcct aggggagagt ggcacactgg ccatcagcag atcctctcac ctgtcttcat gcctgctgaa tccaatcggg gcctcagcag gcgaagtcac
gt ggtcccatca cctgcagcct gttcggccaa cttcccgcca taacttctat taactcccag caccctgacg ccatcagggc
180 240 300 360 420 480 540 600 642
<210> 46 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 46
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val
65 70 75 80
Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 47 <211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 47
gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggctac agtgaaaatc 60
tcctgcaagg tttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactggat caggcagtcc 120
ccatcgagag gccttgagtg gctgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag actcaccatc tccaaggaca cctccaaaaa ccaggtggtc 240
cttacaatga ccaacatgga ccctgtggac acagccacgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
<210> 48 <211> 447 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val
65 70 75 80
Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 49
<211> 1341 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 49
gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggctac agtgaaaatc 60
tcctgcaagg tttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactggat caggcagtcc 120
ccatcgagag gccttgagtg gctgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag actcaccatc tccaaggaca cctccaaaaa ccaggtggtc 240
cttacaatga ccaacatgga ccctgtggac acagccacgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag
1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 1260
aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 1320
ctctccctgt ctctgggtaa a 1341
<210> 50 <211> 120
<212> БЕЛОК
<220> <221>
<213> Искусственная последовательность
источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 50
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 51 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 51
gaagtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaggatc 60
tcctgtaagg gttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactggat ccgccagccc 120
ccagggaagg ggctggagtg gattggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
<210> 52 <211> 447 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 52
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 53 <211> 1341
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 53
gaagtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaggatc 60
tcctgtaagg gttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactggat ccgccagccc 120
ccagggaagg ggctggagtg gattggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 1260
aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 1320
ctctccctgt ctctgggtaa a
1341
<210> 54 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 54
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 55 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 55
caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactggat caggcagtcc 120
ccatcgagag gccttgagtg gctgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag attcaccatc tccagagatg attcaaagaa cacggcgtat
240
ctgcaaatga acagcctgaa aaccgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat
300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 3 60
<210> 56 <211> 447
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 56
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 57
<211> 1341 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 57
caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactggat caggcagtcc 120
ccatcgagag gccttgagtg gctgggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag attcaccatc tccagagatg attcaaagaa cacggcgtat 240
ctgcaaatga acagcctgaa aaccgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 1260
aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 1320
ctctccctgt ctctgggtaa a 1341
<210> 58 <211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 58
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Ile Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Ala Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 59 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 59
gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg gatcccacct 180
cgattcagtg gcagcgggta tggaacagat tttaccctca caattaataa catagaatct 240
gaggatgctg catattactt ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 60 <211> 214 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 60
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Asn Ile Glu Ser
65 70 75 80
Glu Asp Ala Ala Tyr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 61 <211> 642 <212> ДНК
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 61
gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg gatcccacct 180
cgattcagtg gcagcgggta tggaacagat tttaccctca caattaataa catagaatct 240
gaggatgctg catattactt ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360
tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420
cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480
gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540
ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600
ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gt 642
<210> 62 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 62
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val
65 70 75 80
Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 63 <211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 63
gaagtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaggatc 60
tcctgtaagg gttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggct 120
cgtggacaac gccttgagtg gataggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag actcaccatc tccaaggaca cctccaaaaa ccaggtggtc 240
cttacaatga ccaacatgga ccctgtggac acagccacgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
<210> 64 <211> 447 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 64
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val
65 70 75 80
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 65 <211> 1341 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 65
gaagtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaggatc 60
tcctgtaagg gttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggct 120
cgtggacaac gccttgagtg gataggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag actcaccatc tccaaggaca cctccaaaaa ccaggtggtc 240
cttacaatga ccaacatgga ccctgtggac acagccacgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc tgcgtggtgg ggcgtggagg cgtgtggtca tgcaaggtgt gggcagcccc aaccaggtca tgggagagca gacggctcct aatgtcttct ctctccctgt ccccaaaacc tggacgtgag tgcataatgc gcgtcctcac ccaacaaagg gagagccaca gcctgacctg atgggcagcc tcttcctcta catgctccgt ctctgggtaa caaggacact ccaggaagac caagacaaag cgtcctgcac cctcccgtcc ggtgtacacc cctggtcaaa ggagaacaac cagcaggcta gatgcatgag
a ctcatgatct cccgaggtcc ccgcgggagg caggactggc tccatcgaga ctgcccccat ggcttctacc tacaagacca accgtggaca gctctgcaca cccggacccc agttcaactg agcagttcaa tgaacggcaa aaaccatctc cccaggagga ccagcgacat cgcctcccgt agagcaggtg accactacac tgaggtcacg gtacgtggat cagcacgtac ggagtacaag caaagccaaa gatgaccaag cgccgtggag gctggactcc gcaggagggg acagaagagc
840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1341
<210> 66
<211> 107
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 66
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 67 <211> 321
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 67
gatgttgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccttggaca gccggcctcc 60
atctcctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gatgattttg caacttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 68 <211> 214 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 68
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 69 <211> 642 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 69
gatgttgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccttggaca gccggcctcc 60
atctcctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gatgattttg caacttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360
tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420
cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480
gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540
ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600
ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gt 642
<210> 70 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 70
Gln Ile Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Thr Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 71 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 71
cagatcacct tgaaggagtc tggtcctacg ctggtgaaac ccacacagac cctcacgctg 60
acctgcacct tctctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtcagtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
<210> 72 <211> 447
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 72
Gln Ile Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Thr Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 73 <211> 1341
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 73
cagatcacct tgaaggagtc tggtcctacg ctggtgaaac ccacacagac cctcacgctg 60
acctgcacct tctctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtcagtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 1260
aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 1320
ctctccctgt ctctgggtaa a 1341
<210> 74 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 74
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 75
<211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 75
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gaagtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcag cctgcagcct 240
gaagatattg caacatatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 76 <211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 76
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 77 <211> 642 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
gacatccaga atcacttgca ggccaggctc aggttcagtg gaagatattg gggaccaagg tctgatgagc cccagagagg gagagtgtca ctgagcaaag ctgagctcgc tgacccagtc aggccagtca ccaggctcct gaagtggatc caacatatta tggaaatcaa agttgaaatc ccaaagtaca cagagcagga cagactacga ccgtcacaaa tccatcctcc ggatgtgggt catctattgg tgggacagat ctgtcagcag acgtacggtg tggaactgcc gtggaaggtg cagcaaggac gaaacacaaa gagcttcaac ctgtctgcat actgctgtag gcatccaccc tttactttca tataacagct gctgcaccat tctgttgtgt gataacgccc agcacctaca gtctacgcct aggggagagt ctgtaggaga cctggtacca ggcacactgg ccatcagcag atcctctcac ctgtcttcat gcctgctgaa tccaatcggg gcctcagcag gcgaagtcac
gt cagagtcacc gcagaaacct ggtcccatca cctgcagcct gttcggccaa cttcccgcca taacttctat taactcccag caccctgacg ccatcagggc
120 180 240 300 360 420 480 540 600 642
<210> 78 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 78
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 79 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<210> 80 <211> 446 <212> БЕЛОК
<220> <221>
<213> Искусственная последовательность
источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 80
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 81 <211> 1341
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 81
gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggctac agtgaaaatc 60
tcctgcaagg tttctggcta caccttcacc agttactgga tgtactgggt gcgacaggct 120
cgtggacaac gccttgagtg gataggtagg attgatccta atagtgggag tactaagtac 180
aatgagaagt tcaagaacag attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240
cttcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc aagggactat 300
agaaaggggc tctatgctat ggactactgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctcc 360
gcttccacca agggcccatc cgtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480
tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540
ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacgaagacc 600
tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagtcc 660
aaatatggtc ccccatgccc accgtgccca gcacctgagt tcctgggggg accatcagtc 720
ttcctgttcc ccccaaaacc caaggacact ctcatgatct cccggacccc tgaggtcacg 780
tgcgtggtgg tggacgtgag ccaggaagac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggat 840
ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagttcaa cagcacgtac 900
cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 960
tgcaaggtgt ccaacaaagg cctcccgtcc tccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa
1020
gggcagcccc gagagccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccaggagga gatgaccaag 1080
aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200
gacggctcct tcttcctcta cagcaggcta accgtggaca agagcaggtg gcaggagggg 1260
aatgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac acagaagagc 1320
ctctccctgt ctctgggtaa a 1341
<210> 82 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 82
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala
65 70 75 80
Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 83 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 83
gccatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc
atcacttgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccctcg 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcaccttta ccatcagtag cctggaagct 240
gaagatgctg caacatatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 84 <211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 84
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala
65 70 75 80
Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 85 <211> 642 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 85
gccatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacct gcagaagcca 120
gggcagtctc cacagctcct gatctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccctcg 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcaccttta ccatcagtag cctggaagct 240
gaagatgctg caacatatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360
tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgctgaa taacttctat 420
cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480
gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540
ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcagggc 600
ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gt 642
<210> 86 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 86
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys
1 5 10 15
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105
<210> 87 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 87
gaaattgtgc tgactcagtc tccagacttt cagtctgtga ctccaaagga gaaagtcacc 60
atcacctgca aggccagtca ggatgtgggt actgctgtag cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctattgg gcatccaccc ggcacactgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240
gatgattttg caacttatta ctgtcagcag tataacagct atcctctcac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 88 <211> 214 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 88
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys
1 5 10 15
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 89 <211> 642 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
gaaattgtgc atcacctgca ggccaggctc aggttcagcg gatgattttg gggaccaagg tctgatgagc cccagagagg gagagtgtca ctgagcaaag ctgagctcgc tgactcagtc aggccagtca ccaggctcct gcagtggatc caacttatta tggaaatcaa agttgaaatc ccaaagtaca cagagcagga cagactacga ccgtcacaaa tccagacttt ggatgtgggt catctattgg tgggacagaa ctgtcagcag acgtacggtg tggaactgcc gtggaaggtg cagcaaggac gaaacacaaa gagcttcaac cagtctgtga actgctgtag gcatccaccc ttcactctca tataacagct gctgcaccat tctgttgtgt gataacgccc agcacctaca gtctacgcct aggggagagt ctccaaagga cctggtacca ggcacactgg ccatcagcag atcctctcac ctgtcttcat gcctgctgaa tccaatcggg gcctcagcag gcgaagtcac
gt gaaagtcacc gcagaaacct ggtcccatca cctgcagcct gttcggccaa cttcccgcca taacttctat taactcccag caccctgacg ccatcagggc
60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 642
<210> 90 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 90
gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaagc ccggcgagtc actgagaatt 60
agctgtaaag gttcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggcc 120
ccagggcaag gcctggagtg gatgggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat 180
aacgagaagt ttaagaatag agtgactatt agcgtggaca cctctaagaa tcagtttagc 240
ctgaagctgt ctagcgtgac cgccgctgac accgccgtct actactgcgc tagagactat 300
agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca 360
<210> 91 <211> 446 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 91
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser
65 70 75 80
Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 92 <211> 1338
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 92
gaagtgcagc agctgtaaag ccagggcaag aacgagaagt ctgaagctgt agaaagggcc tggtgcagtc gttcaggcta gcctggagtg ttaagaatag ctagcgtgac tgtacgctat aggcgccgaa caccttcact gatgggtaga agtgactatt cgccgctgac ggactactgg gtgaagaagc agctactgga atcgacccta agcgtggaca accgccgtct ggtcaaggca ccggcgagtc tgtactgggt atagcggctc cctctaagaa actactgcgc ctaccgtgac actgagaatt ccgacaggcc tactaagtat tcagtttagc tagagactat cgtgtcttca
60 120 180 240 300 360
gctagcacta tccaccgctg tggaacagcg gggctgtact tacacttgca aagtacggcc tttctgttcc tgcgtggtcg ggcgtcgagg cgcgtcgtgt tgcaaagtgt ggacagcccc aaccaagtct tgggagtcca gacggatcct aatgtgttca ctgtccctct agggcccgtc ccctcggctg gagccctgac cgctgtcgtc acgtggacca caccgtgccc caccgaagcc tggacgtgtc tgcacaacgc ccgtgctgac ccaacaaggg gggaacccca cattgacttg acggccagcc tcttcctcta gctgttctgt ccctggga cgtgttcccc cctggtcaag ctccggagtg ggtggtcacg caagccttcc gccttgtccc caaggacact acaggaagat caaaaccaag ggtgctgcat acttcctagc agtgtatacc ccttgtgaag ggaaaacaac ctcgcggctg gatgcatgaa ctggcacctt gattacttcc cacaccttcc gtgccttcat aacactaagg gcgccggagt ttgatgattt ccggaggtgc ccgagggagg caggactggc tcaatcgaaa ctgccaccga ggcttctacc tacaagacca accgtggata gccctgcaca gtagccggag cggagcccgt ccgctgtgct ctagcctggg tggacaagcg tcctcggcgg cccgcacccc agttcaattg agcagttcaa tgaacgggaa agaccatctc gccaggaaga catcggatat cccctccggt agagcagatg accactacac cactagcgaa gaccgtgtcc gcagagctcc taccaagacc cgtcgaatcg tccctcggtc tgaagtgaca gtacgtggat ctccacttac ggagtacaag gaaagccaag aatgactaag cgccgtggaa gctggactca gcaggaggga tcagaagtcc
420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1338
<210> 93
<211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220> <221>
источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 93
gagatcgtcc tgactcagtc acccgacttt cagtcagtga cccctaaaga gaaagtcact 60
atcacctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatct gcagaagcct 120
ggtcaatcac ctcagctgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180
aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgac ttcaccttca ctatctcttc actgcagccc 240
gaggatatcg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300
ggcactaagg tcgagattaa g 321
<210> 94 <211> 642 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 94
gagatcgtcc tgactcagtc acccgacttt cagtcagtga cccctaaaga gaaagtcact 60
atcacctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatct gcagaagcct 120
ggtcaatcac ctcagctgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180
aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgac ttcaccttca ctatctcttc actgcagccc 240
gaggatatcg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300
ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc 360
agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600
ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642
<210> 95 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 95
gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60
agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct 120
accggtcaag gcctggagtg gatgggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat 180
aacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat 240
atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat 300
agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca 360
<210> 96 <211> 446
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 97 <211> 1338 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 97
gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60
agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct 120
accggtcaag aacgagaagt atggaactgt agaaagggcc gctagcacta tccaccgctg tggaacagcg gggctgtact tacacttgca aagtacggcc tttctgttcc tgcgtggtcg ggcgtcgagg cgcgtcgtgt tgcaaagtgt ggacagcccc aaccaagtct tgggagtcca gacggatcct aatgtgttca ctgtccctct gcctggagtg ttaagaatag ctagcctgag tgtacgctat agggcccgtc ccctcggctg gagccctgac cgctgtcgtc acgtggacca caccgtgccc caccgaagcc tggacgtgtc tgcacaacgc ccgtgctgac ccaacaaggg gggaacccca cattgacttg acggccagcc tcttcctcta gctgttctgt ccctggga gatgggtaga agtgactatc atcagaggac ggactactgg cgtgttcccc cctggtcaag ctccggagtg ggtggtcacg caagccttcc gccttgtccc caaggacact acaggaagat caaaaccaag ggtgctgcat acttcctagc agtgtatacc ccttgtgaag ggaaaacaac ctcgcggctg gatgcatgaa atcgacccta accgccgata accgccgtct ggtcaaggca ctggcacctt gattacttcc cacaccttcc gtgccttcat aacactaagg gcgccggagt ttgatgattt ccggaggtgc ccgagggagg caggactggc tcaatcgaaa ctgccaccga ggcttctacc tacaagacca accgtggata gccctgcaca atagcggctc agtctactag actactgcgc ctaccgtgac gtagccggag cggagcccgt ccgctgtgct ctagcctggg tggacaagcg tcctcggcgg cccgcacccc agttcaattg agcagttcaa tgaacgggaa agaccatctc gccaggaaga catcggatat cccctccggt agagcagatg accactacac tactaagtat caccgcctat tagagactat cgtgtcttca cactagcgaa gaccgtgtcc gcagagctcc taccaagacc cgtcgaatcg tccctcggtc tgaagtgaca gtacgtggat ctccacttac ggagtacaag gaaagccaag aatgactaag cgccgtggaa gctggactca gcaggaggga tcagaagtcc
180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1338
<210> 98 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 98
gacgtcgtga tgactcagtc acccctgagc ctgcccgtga ccctggggca gcccgcctct 60
attagctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatca gcagaagcca 120
gggcaagccc ctagactgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180
aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctcttc actgcagccc 240
gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300
ggcactaagg tcgagattaa g
321
<210> 99
<211> 642
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 99
gacgtcgtga tgactcagtc acccctgagc ctgcccgtga ccctggggca gcccgcctct 60
attagctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatca gcagaagcca 120
gggcaagccc ctagactgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180
aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgag ttcaccctga ctatctcttc actgcagccc 240
gacgacttcg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300
ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc 360
agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600
ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642
<210> 100 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 100
gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60
agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct 120
agagggcaaa gactggagtg gatcggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat 180
aacgagaagt ttaagaatag gttcactatt agtagggata actctaagaa caccctgtac 240
ctgcagatga atagcctgag agccgaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat 300
agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca 360
<210> 101 <211> 1338 <212> ДНК
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 101
gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60
agctgtaaag tctcaggcta caccttcact agctactgga tgtactgggt ccgacaggct 120
agagggcaaa gactggagtg gatcggtaga atcgacccta atagcggctc tactaagtat 180
aacgagaagt ttaagaatag gttcactatt agtagggata actctaagaa caccctgtac 240
ctgcagatga atagcctgag agccgaggac accgccgtct actactgcgc tagagactat 300
agaaagggcc tgtacgctat ggactactgg ggtcaaggca ctaccgtgac cgtgtcttca 360
gctagcacta agggcccgtc cgtgttcccc ctggcacctt gtagccggag cactagcgaa 420
tccaccgctg ccctcggctg cctggtcaag gattacttcc cggagcccgt gaccgtgtcc 480
tggaacagcg gagccctgac ctccggagtg cacaccttcc ccgctgtgct gcagagctcc 540
gggctgtact cgctgtcgtc ggtggtcacg gtgccttcat ctagcctggg taccaagacc 600
tacacttgca acgtggacca caagccttcc aacactaagg tggacaagcg cgtcgaatcg 660
aagtacggcc caccgtgccc gccttgtccc gcgccggagt tcctcggcgg tccctcggtc 720
tttctgttcc caccgaagcc caaggacact ttgatgattt cccgcacccc tgaagtgaca 780
tgcgtggtcg tggacgtgtc acaggaagat ccggaggtgc agttcaattg gtacgtggat 840
ggcgtcgagg tgcacaacgc caaaaccaag ccgagggagg agcagttcaa ctccacttac 900
cgcgtcgtgt ccgtgctgac ggtgctgcat caggactggc tgaacgggaa ggagtacaag 960
tgcaaagtgt ccaacaaggg acttcctagc tcaatcgaaa agaccatctc gaaagccaag 1020
ggacagcccc gggaacccca agtgtatacc ctgccaccga gccaggaaga aatgactaag 1080
aaccaagtct cattgacttg ccttgtgaag ggcttctacc catcggatat cgccgtggaa 1140
tgggagtcca acggccagcc ggaaaacaac tacaagacca cccctccggt gctggactca 1200
gacggatcct tcttcctcta ctcgcggctg accgtggata agagcagatg gcaggaggga 1260
aatgtgttca gctgttctgt gatgcatgaa gccctgcaca accactacac tcagaagtcc 1320
ctgtccctct ccctggga 1338
<210> 102 <211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 102
gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60
atcacctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatct gcagaagcct 120
ggtcaatcac ctcagctgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180
aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgac ttcaccttca ctatctcttc actggaagcc 240
gaggacgccg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300
ggcactaagg tcgagattaa g 321
<210> 103 <211> 642 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 103
gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60
atcacctgta aagcctctca ggacgtgggc accgccgtgg cctggtatct gcagaagcct 120
ggtcaatcac ctcagctgct gatctactgg gcctctacta gacacaccgg cgtgccctct 180
aggtttagcg gtagcggtag tggcaccgac ttcaccttca ctatctcttc actggaagcc 240
gaggacgccg ctacctacta ctgtcagcag tataatagct accccctgac cttcggtcaa 300
ggcactaagg tcgagattaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttccccccc 360
agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420
ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcataag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600
ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gc 642
<210> 104 <211> 15 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 104
agttactgga tgtac 15
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 105
aggattgatc ctaatagtgg gagtactaag tacaatgaga agttcaagaa c 51
<210> 106 <211> 33 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 106
gactatagaa aggggctcta tgctatggac tac 33
<210> 107 <211> 21 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 107
ggctacacct tcaccagtta c 21
<210> 108 <211> 18 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 108
gatcctaata gtgggagt 18 <210> 109
<211> 27 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 109
cagcagtata acagctatcc tctcacg
<210> 110 <211> 21 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 110
agtcaggatg tgggtactgc t 21
<210> 111 <211> 9 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 111
tgggcatcc 9
<210> 112 <211> 18 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 112
tataacagct atcctctc 18
<210> 113 <211> 15 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 113
agctactgga tgtac 15
<210> 114 <211> 51 <212> ДНК
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 114
agaatcgacc ctaatagcgg ctctactaag tataacgaga agtttaagaa t 51
<210> 115 <211> 33 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 115
gactatagaa agggcctgta cgctatggac tac 33
<210> 116 <211> 21 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 116
ggctacacct tcactagcta c 21
<210> 117 <211> 18 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 117
gaccctaata gcggctct 18
<210> 118 <211> 33 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
aaagcctctc aggacgtggg caccgccgtg gcc
<210> 119 <211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 119
tgggcctcta ctagacacac c 21
<210> 120
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 120
cagcagtata atagctaccc cctgacc 27
<210> 121 <211> 21 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 121
tctcaggacg tgggcaccgc c 21
<210> 122 <211> 9 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 122
tgggcctct 9
<210> 123
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 123
tataatagct accccctg 18
<210> 124
<211> 25 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 124
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser
20 25
<210> 125 <211> 75 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 125
caggttcagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttct 75
<210> 126 <211> 25 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 126
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser
20 25
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 127
gaagtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaggatc 60 tcctgtaagg gttct 75
<210> 128 <211> 25 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 128
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser 20 25
<210> 129 <211> 75 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 129
gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggctac agtgaaaatc 60 tcctgcaagg tttct 75
<210> 130 <211> 25 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 130
Gln Ile Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Thr Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
<210> 131 <211> 75 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 131
cagatcacct tgaaggagtc tggtcctacg ctggtgaaac ccacacagac cctcacgctg 60 acctgcacct tctct 75
<210> 132 <211> 14 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 132
Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10
<210> 133 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 133
tgggtgcgac aggccactgg acaagggctt gagtggatgg gt 42
<210> 134 <211> 14 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 134
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
1 5 10
<210> 135 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 135
tgggtgcgac aggcccctgg acaagggctt gagtggatgg gt 42
<210> 136 <211> 14 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 136
Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 137 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 137
tggatccgcc agcccccagg gaaggggctg gagtggattg gt 42
<210> 138 <211> 14 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 138
Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly
1 5 10
<210> 139 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 139
tggatcaggc agtccccatc gagaggcctt gagtggctgg gt 42
<210> 140 <211> 14 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 140
Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile Gly
1 5 10
<210> 141 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 141
tgggtgcgac aggctcgtgg acaacgcctt gagtggatag gt 42
<210> 142 <211> 14 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 142
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser
1 5 10
<210> 143 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
tgggtccgcc aggctccagg gaaggggctg gagtgggtca gt
<210> 144 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 144
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Ala Tyr Leu Gln
1 5 10 15
Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg
20 25 30
<210> 145 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 145
agattcacca tctccagaga tgattcaaag aacacggcgt atctgcaaat gaacagcctg 60 aaaaccgagg acacggccgt gtattactgt gcaagg 96
<210> 146 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 146
Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu
1 5 10 15
Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg
20 25 30
<210> 147 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 147
agagtcacga ttaccgcgga caaatccacg agcacagcct acatggagct gagcagcctg 60
agatctgagg acacggccgt gtattactgt gcaagg 9 6
<210> 148
<211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 148
Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys
1 5 10 15
Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg
20 25 30
<210> 149 <211> 96
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 149
agagtcacca tatcagtaga cacgtccaag aaccagttct ccctgaagct gagctctgtg 60 accgccgcgg acacggctgt gtattactgt gcaagg 96
<210> 150 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 150
Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val Leu Thr
1 5 10 15
Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg
20 25 30
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 151
agactcacca tctccaagga cacctccaaa aaccaggtgg tccttacaat gaccaacatg 60 gaccctgtgg acacagccac gtattactgt gcaagg 96
<210> 152 <211> 32
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 152
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln
1 5 10 15
Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg
20 25 30
<210> 153 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 153
agattcacca tctccagaga caattccaag aacacgctgt atcttcaaat gaacagcctg 60 agagccgagg acacggccgt gtattactgt gcaagg 96
<210> 154 <211> 11 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 154
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 155 <211> 33 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 155
tggggccagg gcaccaccgt gaccgtgtcc tcc 33
<210> 156 <211> 23 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 156
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val Thr Pro Lys
1 5 10 15
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys 20
<210> 157 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 157
gaaattgtgc tgactcagtc tccagacttt cagtctgtga ctccaaagga gaaagtcacc 60 atcacctgc 69
<210> 158 <211> 23 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 158
Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
<210> 159 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 159
gatgttgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccttggaca gccggcctcc 60 atctcctgc 69
<210> 160 <211> 23 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 160
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys 20
<210> 161 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 161
gatattgtga tgacccagac tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60 atctcctgc 69
<210> 162 <211> 23 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 162
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys 20
<210> 163 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 163
gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgc 69
<210> 164 <211> 23 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 164
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys 20
<210> 165 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 165
gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgc 69
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 166
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys 20
<210> 167 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 167
gccatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgc 69
<210> 168 <211> 15 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 168
Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr
1 5 10 15
<210> 169 <211> 45 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 169
tggtaccagc agaaacctgg ccaggctccc aggctcctca tctat 45
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 170
Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr
1 5 10 15
<210> 171 <211> 45 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 171
tggtacctgc agaagccagg gcagtctcca cagctcctga tctat 45
<210> 172 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 172
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr
1 5 10 15
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 173 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 173
ggggtcccat caaggttcag cggcagtgga tctgggacag aattcactct caccatcagc 60 agcctgcagc ctgatgattt tgcaacttat tactgt 96
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 174
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
1 5 10 15
Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 175 <211> 96
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 175
ggggtcccat caaggttcag tggaagtgga tctgggacag attttacttt caccatcagc 60 agcctgcagc ctgaagatat tgcaacatat tactgt 96
<210> 176 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 176
Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr
1 5 10 15
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 177 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
gggatcccag ccaggttcag tggcagtggg tctgggacag agttcactct caccatcagc 60
agcctgcagt ctgaagattt tgcagtttat tactgt 9 6
<210> 178 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 178
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
1 5 10 15
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 179 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 179
ggggtcccat caaggttcag cggcagtgga tctgggacag atttcactct caccatcagc 60 agcctgcagc ctgaagattt tgcaacttat tactgt 96
<210> 180 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 180
Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
1 5 10 15
Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 181 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 181
ggggtcccag acaggttcag tggcagtggg tcaggcactg atttcacact gaaaatcagc 60 agggtggagg ctgaggatgt tggagtttat tactgt 96
<210> 182 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 182
Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr
1 5 10 15
Leu Thr Ile Asn Asn Ile Glu Ser Glu Asp Ala Ala Tyr Tyr Phe Cys
20 25 30
<210> 183 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 183
gggatcccac ctcgattcag tggcagcggg tatggaacag attttaccct cacaattaat 60 aacatagaat ctgaggatgc tgcatattac ttctgt 96
<210> 184 <211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 184
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
1 5 10 15
Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys
20 25 30
<210> 185 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 185
ggggtcccct cgaggttcag tggcagtgga tctgggacag atttcacctt taccatcagt 60 agcctggaag ctgaagatgc tgcaacatat tactgt 96
<210> 186 <211> 10 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 186
Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
1 5 10
<210> 187 <211> 30 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 187
ttcggccaag ggaccaaggt ggaaatcaaa 30
<210> 188 <211> 327 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 188
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260 265 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
325
<210> 189 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 189
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105
<210> 190 <211> 326 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 190
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100 105 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180 185 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195 200 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210 215 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245 250 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260
265
270
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305 310 315 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly
325
<210> 191 <211> 330 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 191
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 192 <211> 330
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 192
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 193 <211> 330 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 193
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Ala Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Ala Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 194 <211> 330 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 194
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275
280
285
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 195 <211> 10 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 195
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp Met Tyr
1 5 10
<210> 196 <211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 196
gaagtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatc 60
tcctgcaagg tgtccggcta caccttcacc agctactgga tgtactgggt gcgacaggct 120
accggccagg gcctggaatg gatgggcaga atcgacccca actccggctc caccaagtac 180
aacgagaagt tcaagaaccg cgtgaccatc accgccgaca agtccacctc caccgcctac 240
atggaactgt cctccctgcg gagcgaggac accgccgtgt actactgcgc cagagactac 300
cggaagggcc tgtacgccat ggactattgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctct 360
<210> 197 <211> 446 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435 440 445
<210> 198 <211> 1348 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 198
gaagtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatc 60
tcctgcaagg tgtccggcta caccttcacc agctactgga tgtactgggt gcgacaggct 120
accggccagg aacgagaagt atggaactgt cggaagggcc gcttccacca agcacagccg tggaacagcg ggcctgtaca tacacctgta aagtacggcc ttcctgttcc tgtgtggtgg ggcgtggagg cgggtggtgt tgtaaggtct ggccagccta aaccaggtgt tgggagagca gacggcagct aacgtcttta ctgagcctgt gcctggaatg tcaagaaccg cctccctgcg tgtacgccat agggcccaag ccctgggctg gagccctgac gcctgagcag acgtggacca caccctgccc cccccaagcc tggacgtgtc tgcacaacgc ccgtgctgac ccaacaaggg gagagcccca ccctgacctg acggccagcc tcttcctgta gctgctccgt ccctgggctg gatgggcaga cgtgaccatc gagcgaggac ggactattgg cgtgttcccc cctggtgaag cagcggcgtg cgtggtgacc caagcccagc cccctgccca caaggacacc ccaggaggac caagaccaag cgtgctgcac cctgccaagc ggtctacacc tctggtgaag cgagaacaac cagcaggctg gatgcacgag atgaattc atcgacccca accgccgaca accgccgtgt ggccagggca ctggccccct gactacttcc cacaccttcc gtgcccagca aacaccaagg gcccccgagt ctgatgatca cccgaggtcc cccagagagg caggactggc agcatcgaaa ctgccaccca ggcttctacc tacaagacca accgtggaca gccctgcaca actccggctc agtccacctc actactgcgc ccaccgtgac gctccagaag ccgagcccgt ccgccgtgct gcagcctggg tggacaagag tcctgggcgg gcagaacccc agttcaactg agcagtttaa tgaacggcaa agaccatcag gccaagagga caagcgacat cccccccagt agtccagatg accactacac caccaagtac caccgcctac cagagactac cgtgtcctct caccagcgag gaccgtgtcc gcagagcagc caccaagacc ggtggagagc acccagcgtg cgaggtgacc gtacgtggac cagcacctac agagtacaag caaggccaag gatgaccaag cgccgtggag gctggacagc gcaggagggc ccagaagagc
180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1348
<210> 199 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 199
gagatcgtgc tgacccagtc ccccgacttc cagtccgtga cccccaaaga aaaagtgacc 60
atcacatgca aggcctccca ggacgtgggc accgccgtgg cttggtatct gcagaagcct 120
ggccagtccc ctcagctgct gatctactgg gcctctacca gacacaccgg cgtgcccgac 180
agattctccg gctctggctc tggcaccgac ttcaccctga agatctcccg ggtggaagcc 240
gaggatgtgg gcgtgtacta ctgccagcag tacaactcct accccctgac cttcggccag 300
ggcaccaagg tggaaatcaa g
321
<210> 200 <211> 652 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 200
gagatcgtgc atcacatgca ggccagtccc agattctccg gaggatgtgg ggcaccaagg agcgacgagc cccagggagg gagagcgtca ctgagcaagg ctgtccagcc tgacccagtc aggcctccca ctcagctgct gctctggctc gcgtgtacta tggaaatcaa agctgaagag ccaaggtgca ccgagcagga ccgactacga ccgtgaccaa ccccgacttc ggacgtgggc gatctactgg tggcaccgac ctgccagcag gcgtacggtg cggcaccgcc gtggaaggtg cagcaaggac gaagcacaag gagcttcaac cagtccgtga accgccgtgg gcctctacca ttcaccctga tacaactcct gccgctccca agcgtggtgt gacaacgccc tccacctaca gtgtacgcct aggggcgagt cccccaaaga cttggtatct gacacaccgg agatctcccg accccctgac gcgtgttcat gtctgctgaa tgcagagcgg gcctgagcag gtgaggtgac gctgatgaat aaaagtgacc gcagaagcct cgtgcccgac ggtggaagcc cttcggccag cttcccccca caacttctac caacagccag caccctgacc ccaccagggc
60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 652
<210> 201 <211> 360 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 201
gaagtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaagc ctggcgagtc cctgcggatc 60
tcctgcaagg gctccggcta caccttcacc agctactgga tgtactggat ccggcagccc 120
cctggcaagg gcctggaatg gatcggcaga atcgacccca actccggctc caccaagtac 180
aacgagaagt tcaagaaccg cgtgaccatc accgccgaca agtccacctc caccgcctac 240
atggaactgt cctccctgag atccgaggac accgccgtgt actactgcgc cagagactac 300
cggaagggcc tgtacgccat ggactattgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctct 360
<210> 202 <211> 1348 <212> ДНК
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 202
gaagtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaagc ctggcgagtc cctgcggatc 60
tcctgcaagg gctccggcta caccttcacc agctactgga tgtactggat ccggcagccc 120
cctggcaagg gcctggaatg gatcggcaga atcgacccca actccggctc caccaagtac 180
aacgagaagt tcaagaaccg cgtgaccatc accgccgaca agtccacctc caccgcctac 240
atggaactgt cctccctgag atccgaggac accgccgtgt actactgcgc cagagactac 300
cggaagggcc tgtacgccat ggactattgg ggccagggca ccaccgtgac cgtgtcctct 360
gcttctacca agggcccaag cgtgttcccc ctggccccct gctccagaag caccagcgag 420
agcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgtcc 480
tggaacagcg gagccctgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540
ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg caccaagacc 600
tacacctgta acgtggacca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag ggtggagagc 660
aagtacggcc caccctgccc cccctgccca gcccccgagt tcctgggcgg acccagcgtg 720
ttcctgttcc cccccaagcc caaggacacc ctgatgatca gcagaacccc cgaggtgacc 780
tgtgtggtgg tggacgtgtc ccaggaggac cccgaggtcc agttcaactg gtacgtggac 840
ggcgtggagg tgcacaacgc caagaccaag cccagagagg agcagtttaa cagcacctac 900
cgggtggtgt ccgtgctgac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa agagtacaag 960
tgtaaggtct ccaacaaggg cctgccaagc agcatcgaaa agaccatcag caaggccaag 1020
ggccagccta gagagcccca ggtctacacc ctgccaccca gccaagagga gatgaccaag 1080
aaccaggtgt ccctgacctg tctggtgaag ggcttctacc caagcgacat cgccgtggag 1140
tgggagagca acggccagcc cgagaacaac tacaagacca cccccccagt gctggacagc 1200
gacggcagct tcttcctgta cagcaggctg accgtggaca agtccagatg gcaggagggc 1260
aacgtcttta gctgctccgt gatgcacgag gccctgcaca accactacac ccagaagagc 1320
ctgagcctgt ccctgggctg atgaattc 1348
<210> 203 <211> 321 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 203
gagatcgtgc tgacccagtc ccccgacttc cagtccgtga cccccaaaga aaaagtgacc 60
atcacatgca aggcctccca ggacgtgggc accgccgtgg cttggtatct gcagaagcct 120
ggccagtccc ctcagctgct gatctactgg gcctctacca gacacaccgg cgtgccctcc 180
agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccttca ccatctccag cctgcagccc 240
gaggatatcg ccacctacta ctgccagcag tacaactcct accccctgac cttcggccag 300
ggcaccaagg tggaaatcaa g 321
<210> 204 <211> 652 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полинуклеотид"
<400> 204
gagatcgtgc tgacccagtc ccccgacttc cagtccgtga cccccaaaga aaaagtgacc 60
atcacatgca aggcctccca ggacgtgggc accgccgtgg cttggtatct gcagaagcct 120
ggccagtccc ctcagctgct gatctactgg gcctctacca gacacaccgg cgtgccctcc 180
agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccttca ccatctccag cctgcagccc 240
gaggatatcg ccacctacta ctgccagcag tacaactcct accccctgac cttcggccag 300
ggcaccaagg tggaaatcaa gcgtacggtg gccgctccca gcgtgttcat cttcccccca 360
agcgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gtctgctgaa caacttctac 420
cccagggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480
gagagcgtca ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctgacc 540
ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gtgaggtgac ccaccagggc 600
ctgtccagcc ccgtgaccaa gagcttcaac aggggcgagt gctgatgaat tc 652
<210> 205 <211> 51 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 205
agaatcgacc ccaactccgg ctccaccaag tacaacgaga agttcaagaa c 51
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 206
gactaccgga agggcctgta cgccatggac tat 33
<210> 207 <211> 21 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 207
ggctacacct tcaccagcta c 21
<210> 208 <211> 18 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 208
gaccccaact ccggctcc 18
<210> 209 <211> 33 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 209
aaggcctccc aggacgtggg caccgccgtg gct 33
<210> 210 <211> 21 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<210> 211
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 211
cagcagtaca actcctaccc cctgacc 27
<210> 212 <211> 21 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 212
tcccaggacg tgggcaccgc c 21
<210> 213
<211> 9
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 213
tgggcctct 9
<210> 214
<211> 18
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 214
tacaactcct accccctg 18
<210> 215 <211> 75
<212> ДНК
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 215
gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaagc ccggcgagtc actgagaatt 60 agctgtaaag gttca 75
<210> 216 <211> 75 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 216
gaagtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaagc ctggcgagtc cctgcggatc 60 tcctgcaagg gctcc 75
<210> 217 <211> 75 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 217
gaagtgcagc tggtgcagtc tggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatc 60 tcctgcaagg tgtcc 75
<210> 218 <211> 75 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 218
gaagtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaaac ccggcgctac cgtgaagatt 60 agctgtaaag tctca 75
<210> 219 <211> 42 <212> ДНК
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 219
tgggtgcgac aggctaccgg ccagggcctg gaatggatgg gc 42
<210> 220 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 220
tgggtccgac aggctaccgg tcaaggcctg gagtggatgg gt 42
<210> 221 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 221
tgggtccgac aggccccagg gcaaggcctg gagtggatgg gt 42
<210> 222 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 222
tggatccggc agccccctgg caagggcctg gaatggatcg gc 42
<210> 223 <211> 42 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
tgggtccgac aggctagagg gcaaagactg gagtggatcg gt
<210> 224 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 224
cgcgtgacca tcaccgccga caagtccacc tccaccgcct acatggaact gtcctccctg 60 cggagcgagg acaccgccgt gtactactgc gccaga 96
<210> 225 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 225
cgcgtgacca tcaccgccga caagtccacc tccaccgcct acatggaact gtcctccctg 60 agatccgagg acaccgccgt gtactactgc gccaga 96
<210> 226 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 226
agagtgacta tcaccgccga taagtctact agcaccgcct atatggaact gtctagcctg 60 agatcagagg acaccgccgt ctactactgc gctaga 96
<210> 227 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 227
agagtgacta ttagcgtgga cacctctaag aatcagttta gcctgaagct gtctagcgtg 60
accgccgctg acaccgccgt ctactactgc gctaga
<210> 228 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 228
aggttcacta ttagtaggga taactctaag aacaccctgt acctgcagat gaatagcctg 60 agagccgagg acaccgccgt ctactactgc gctaga 96
<210> 229 <211> 33 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 229
tggggccagg gcaccaccgt gaccgtgtcc tct 33
<210> 230 <211> 33 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 230
tggggtcaag gcactaccgt gaccgtgtct tca 33
<210> 231 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 231
gagatcgtgc tgacccagtc ccccgacttc cagtccgtga cccccaaaga aaaagtgacc 60 atcacatgc 69
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 232
gagatcgtcc tgactcagtc acccgacttt cagtcagtga cccctaaaga gaaagtcact 60 atcacctgt 69
<210> 233 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 233
gacgtcgtga tgactcagtc acccctgagc ctgcccgtga ccctggggca gcccgcctct 60 attagctgt 69
<210> 234 <211> 69 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 234
gctattcagc tgactcagtc acctagtagc ctgagcgcta gtgtgggcga tagagtgact 60 atcacctgt 69
<210> 235 <211> 45 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание =" описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 235
tggtatcagc agaagccagg gcaagcccct agactgctga tctac 45
<210> 236 <211> 45 <212> ДНК
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 236
tggtatctgc agaagcctgg ccagtcccct cagctgctga tctac 45 <210> 237
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 237
tggtatctgc agaagcctgg tcaatcacct cagctgctga tctac 45
<210> 238 <211> 96
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 238
ggcgtgccct ctaggtttag cggtagcggt agtggcaccg agttcaccct gactatctct 60 tcactgcagc ccgacgactt cgctacctac tactgt 96
<210> 239 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 239
ggcgtgccct ctaggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcacctt cactatctct 60 tcactgcagc ccgaggatat cgctacctac tactgt 96
<210> 240 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 240
ggcgtgccct ccagattctc cggctctggc tctggcaccg actttacctt caccatctcc 60 agcctgcagc ccgaggatat cgccacctac tactgc 96
<210> 241 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 241
ggcgtgcccg acagattctc cggctctggc tctggcaccg acttcaccct gaagatctcc 60 cgggtggaag ccgaggatgt gggcgtgtac tactgc 96
<210> 242 <211> 96 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 242
ggcgtgccct ctaggtttag cggtagcggt agtggcaccg acttcacctt cactatctct 60 tcactggaag ccgaggacgc cgctacctac tactgt 96
<210> 243 <211> 30 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 243
ttcggccagg gcaccaaggt ggaaatcaag 30
<210> 244 <211> 30 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<210> 245 <211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 245
aaggccagtc aggatgtggg tactgctgta gcc
<210> 246 <211> 21 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический олигонуклеотид"
<400> 246
tgggcatcca cccggcacac t
<210> 247 <211> 447
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 247
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 248 <211> 98 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 248
Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Pro Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg
<210> 249 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 249
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asn Val Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Ser Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Ser Lys Leu Glu Leu Lys 100 105
<210> 250 <211> 113 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 250
Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Lys Gln Gly Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Lys Asn Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
<210> <211>
251 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 251
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly
<210> 252
<211> 113 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 252
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
<210> 253 <211> 113 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 253
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
<210> <211>
254 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 254
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser
65 70 75 80
Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly
<210> 255 <211> 113
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 255
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
<210> 256 <211> 113 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 256
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val
65 70 75 80
Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
<210> 257 <211> 113 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 257
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val Val
65 70 75 80
Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
<210> 258 <211> 113 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 258
Gln Ile Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Thr Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
<210> 259 <211> 113 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 259
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Arg Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
<210> <211>
260 446
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 260
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
Trp Met Tyr Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115
120
125
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370
375
380
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg 405
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys 420 425
Ser Val Met His Glu Ala Leu 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 435 440
Ser Leu Ser Leu Gly
445
<210> 261
<211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 261
Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 1 5
<210> 262 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 262
Tyr Pro Gly Thr Gly Gly 1 5
<210> 263 <211> 8 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 263
Trp Thr Thr Gly Thr Gly Ala Tyr 1 5
<210> 264 <211> 13 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 264
Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Gly Asn Gln Lys Asn Phe
1 5 10
<210> 265 <211> 3 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 265 Trp Ala Ser 1
<210> 266 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 266
Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr 1 5
<210> 267 <211> 5 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 267
Thr Tyr Trp Met His 1 5
<210> 268 <211> 17 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 268
Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Gly Ser Asn Phe Asp Glu Lys Phe Lys
1 5 10 15
Asn
<210> 269 <211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 269
Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu
1 5 10 15
Thr
<210> 270 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 270
Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser
1 5
<210> 271 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 271
Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr 1 5
<210> 272 <211> 10 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 272
Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Trp Met His
1 5 10
<210> 273 <211> 5 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 273
Asn Tyr Gly Met Asn 1 5
<210> 274 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 274
Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr 1 5
<210> 275 <211> 10 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 275
Gly Phe Thr Leu Thr Asn Tyr Gly Met Asn
1 5 10
<210> 276 <211> 17 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 276
Trp Ile Asn Thr Asp Thr Gly Glu Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 277 <211> 16 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 277
Asn Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Thr Asn Asn Ala Glu Ala Met Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 278 <211> 11 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 278
Ser Ser Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 279 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 279
Tyr Thr Ser Thr Leu His Leu 1 5
<210> 280 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 280
Gln Gln Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp Thr 1 5
<210> 281 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 281
Asn Thr Asp Thr Gly Glu 1 5
<210> 282 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 282
Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr 1 5
<210> 283 <211> 3 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 283 Tyr Thr Ser 1
<210> 284 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 284
Tyr Tyr Asn Leu Pro Trp 1 5
<210> 285 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 285
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 1 5
<210> 286 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 286
Tyr Pro Gly Asn Gly Asp 1 5
<210> 287 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 287
Val Gly Gly Ala Phe Pro Met Asp Tyr 1 5
<210> 288 <211> 11 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr Gly Thr Ser Leu
1 5 10
<210> 289 <211> 3
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 289
Ala Ala Ser 1
<210> 290
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 290
Ser Arg Lys Asp Pro Ser 1 5
<210> 291 <211> 5 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 291
Ser Tyr Asn Met His 1 5
<210> 292
<211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 292
Asp Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
<210> 293 <211> 15 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 293
Arg Ala Ser Glu Ser Val Glu Tyr Tyr Gly Thr Ser Leu Met Gln
1 5 10 15
<210> 294 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 294
Ala Ala Ser Asn Val Glu Ser
1 5
<210> 295 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 295
Gln Gln Ser Arg Lys Asp Pro Ser Thr 1 5
<210> 296 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 296
Tyr Pro Gly Ser Gly Asp 1 5
<210> 297 <211> 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 297
Asp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 298 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 298
Tyr Pro Gly Gln Gly Asp
1 5
<210> 299 <211> 17 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 299
Asp Ile Tyr Pro Gly Gln Gly Asp Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 300 <211> 447 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Ser Asn
20 25 30
Val Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Val Ile Pro Ile Val Asp Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Thr Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Thr Leu Gly Leu Val Leu Asp Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 301 <211> 215 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 301
Glu Thr Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Leu Gly Ser Ser
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Pro Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ala Asp Ser Pro
85 90 95
Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala
100 105 110
Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser
115 120 125
Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu
130 135 140
Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser
145 150 155 160
Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu
165 170 175
Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val
180 185 190
Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215
<210> 302 <211> 121 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 302
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Leu Trp Glu Val Arg Ala Leu Pro Ser Val Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 303 <211> 109 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 303
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Ala Asn Asp Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Ala Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Ser
35 40 45
Glu Asp Ile Ile Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Ile Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Arg Asp Ser Asp Gln
85 90 95
<210> 304 <211> 440
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 304
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Asp Cys Lys Ala Ser Gly Ile Thr Phe Ser Asn Ser
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Lys Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Asn Asp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser
115 120 125
Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp
130 135 140
Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr
145 150 155 160
Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr
165 170 175
Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys
180 185 190
Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp
195 200 205
Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala
210 215 220
Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
225 230 235 240
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
245 250 255
Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val
260 265 270
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
275 280 285
Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
290 295 300
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly
305 310 315 320
Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
325 330 335
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr
340 345 350
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
355 360 365
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
370 375 380
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
385 390 395 400
Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe
405 410 415
Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440
<210> 305 <211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 305
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Trp Pro Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
<210> 306 <211> 447 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 306
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Lys Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 307
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser
20 25 30
Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35 40 45
Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala
50 55 60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65 70 75 80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg
85 90 95
Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
100 105 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115 120 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130 135 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145 150 155 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165 170 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180 185 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195 200 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215
<210> 308 <211> 118 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 308
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ile Met Met Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Tyr Pro Ser Gly Gly Ile Thr Phe Tyr Ala Asp Lys Gly
50 55 60
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln
65 70 75 80
Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg
85 90 95
Ile Lys Leu Gly Thr Val Thr Thr Val Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 309 <211> 110 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 309
Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Arg Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 310 <211> 253 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 310
Met Ala Pro Arg Arg Ala Arg Gly Cys Arg Thr Leu Gly Leu Pro Ala
1 5 10 15
Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Arg Pro Pro Ala Thr Arg Gly Asp Tyr
20 25 30
Lys Asp Asp Asp Asp Lys Ile Glu Gly Arg Ile Thr Cys Pro Pro Pro
35 40 45
Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr
50 55 60
Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly Phe Lys Arg Lys Ala Gly
65 70 75 80
Thr Ser Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn Lys Ala Thr Asn Val Ala
85 90 95
His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile Arg Asp Pro Ala Leu Val
100 105 110
His Gln Arg Pro Ala Pro Pro Ser Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Gln Asn Trp Val Asn Val
130 135 140
Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser Cys Lys Val
165 170 175
Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile Ser Leu Glu
180 185 190
Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu Ile Ile Leu
195 200 205
Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu Ser Gly Cys
210 215 220
Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu Phe Leu Gln
225 230 235 240
Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser 245 250
<210> 311 <211> 263 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 311
Met Asp Ser Lys Gly Ser Ser Gln Lys Ala Gly Ser Arg Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Val Val Ser Asn Leu Leu Leu Cys Gln Gly Val Val Ser Thr
20 25 30
Thr Arg Asp Tyr Lys Asp Asp Asp Asp Lys Ile Glu Gly Arg Asn Trp
35 40 45
Val Asn Val Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser
50 55 60
Met His Ile Asp Ala Thr Leu Tyr Thr Glu Ser Asp Val His Pro Ser
65 70 75 80
Cys Lys Val Thr Ala Met Lys Cys Phe Leu Leu Glu Leu Gln Val Ile
85 90 95
Ile Ile Leu Ala Asn Asn Ser Leu Ser Ser Asn Gly Asn Val Thr Glu
115 120 125
Ser Gly Cys Lys Glu Cys Glu Glu Leu Glu Glu Lys Asn Ile Lys Glu
130 135 140
Phe Leu Gln Ser Phe Val His Ile Val Gln Met Phe Ile Asn Thr Ser
145 150 155 160
Ser Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
165 170 175
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Leu Gln Ile Thr Cys Pro Pro Pro
180 185 190
Met Ser Val Glu His Ala Asp Ile Trp Val Lys Ser Tyr Ser Leu Tyr
195 200 205
Ser Arg Glu Arg Tyr Ile Cys Asn Ser Gly Phe Lys Arg Lys Ala Gly
210 215 220
Thr Ser Ser Leu Thr Glu Cys Val Leu Asn Lys Ala Thr Asn Val Ala
225 230 235 240
His Trp Thr Thr Pro Ser Leu Lys Cys Ile Arg Asp Pro Ala Leu Val
245 250 255
His Gln Arg Pro Ala Pro Pro 260
<210> 312 <211> 117
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 312
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Gly Ser Tyr Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Val Asn Phe Gly Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 313 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 313
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys
35 40 45
Leu Leu Ile
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg
50 55 60
Phe Ser Gly
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser
65 70 75
Leu Gln Pro
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Arg 85 90
Asn Pro Pro
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 314
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala 1 5
<210> 315 <211> 8 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 315
Ile Gly Ser Tyr Gly Gly Gly Thr
1 5
<210> 316 <211> 10 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 316
Ala Arg Tyr Val Asn Phe Gly Met Asp Tyr
1 5 10
<210> 317 <211> 6 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 317
Gln Ser Ile Ser Ser Tyr 1 5
<210> 318 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 318
Gln Gln Tyr Gly Arg Asn Pro Pro Thr 1 5
<210> 319 <211> 116 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 319
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Val Trp Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser 115
<210> 320 <211> 107 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Val Tyr Pro Phe
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105
<210> 321 <211> 8 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 321
Ile Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr
1 5
<210> 322 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 322
Ala Arg Arg Val Trp Gly Phe Asp Tyr 1 5
<210> 323 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 323
Gln Gln Tyr Gly Val Tyr Pro Phe Thr 1 5
<210> 324 <211> 128
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<220>
<221> МОДИФИЦИРОВАННЫЙ ОСТАТОК
<222> (120)..(120)
<223> Любая аминокислота
<220>
<221> МОДИФИЦИРОВАННЫЙ ОСТАТОК <222> (124)..(125)
<223> Любая аминокислота
<400> 324
Glu Val Arg Leu Gln Gln Ser Gly Ala Asp Leu Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Leu Ser Cys Ala Ser Gly Phe Ile Ile Lys Ala Thr Tyr
20 25 30
Met His Trp Val Arg Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile Gly
35 40 45
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Glu Lys Tyr Asp Pro Lys Phe Gln Val
50 55 60
Lys Ala Ile Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Leu
65 70 75 80
Asn Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr
85 90 95
Ala Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Xaa Val Tyr Pro Xaa Xaa Pro Gly Ser
115 120 125
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 325
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Phe
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr His Gln Lys Gln Gly Arg Ser Pro Gln Leu Leu Val
35 40 45
Tyr His Ala Lys Thr Leu Ala Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Ala
65 70 75 80
Glu Asp Phe Gly Ser Tyr Tyr Cys Gln His Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Val Lys Arg Ala Asp Ala Ala
100 105 110
Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Ser Leu
115 120 125
<210> 326 <211> 10 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 326
Gly Phe Ile Ile Lys Ala Thr Tyr Met His
1 5 10
<210> 327 <211> 17 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 327
Arg Ile Asp Pro Ala Asn Gly Glu Thr Lys Tyr Asp Pro Lys Phe Gln
1 5 10 15
Val
<210> 328 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 328
Tyr Ala Trp Tyr Phe Asp Val 1 5
<210> 329 <211> 11 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 329
Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Phe Leu Ala
1 5 10
<210> 330 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 330
His Ala Lys Thr Leu Ala Glu 1 5
<210> 331 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 331
Gln His Tyr Tyr Gly Ser Pro Leu Thr 1 5
<210> 332 <211> 127 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 332
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Gly Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Asp Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Asp Tyr Tyr Ile His Tyr Trp
100 105 110
Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 333 <211> 127 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 333
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Gly Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Arg Asp Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Asp Tyr Tyr Ile His Tyr Trp
100 105 110
Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> <211>
334 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 334
Asn Tyr Trp Met Asn 1 5
<210> <211>
335 17
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 335
Ala Ile Asn Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Gly Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 336 <211> 18 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 336
Asp Tyr Tyr Asp Ile Leu Thr Asp Tyr Tyr Ile His Tyr Trp Tyr Phe
1 5 10 15
Asp Leu
<210> 337 <211> 12 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 337
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 338 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 338
Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr 1 5
<210> 339 <211> 446 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 339
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Asn Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys Tyr Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Gly Ser Leu Tyr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala
115 120 125
Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu
130 135 140
Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly
145 150 155 160
Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser
165 170 175
Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu
180 185 190
Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr
195 200 205
Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr
210 215 220
Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe
225 230 235 240
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
245 250 255
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val
260 265 270
Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
275 280 285
Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val
290 295 300
Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys
305 310 315 320
Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser
325 330 335
Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
340 345 350
Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
355 360 365
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly
370 375 380
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp
385 390 395 400
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp
405 410 415
Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His
420 425 430
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 340 <211> 214
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 340
Ala Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Pro Ser Gln Gly Ile Asn Trp Glu
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Ser Leu Glu Gln Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210
<210> 341 <211> 119 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 341
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Gly Val Ile Asn Pro Met Tyr Gly Thr Thr Asp Tyr Asn Gln Arg Phe
50 55 60
Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Asp Tyr Phe Thr Gly Thr Gly Val Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115
<210> 342 <211> 112 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 342
Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Arg Ser Leu Val His Ser
20 25 30
Arg Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ile Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser
85 90 95
Thr His Leu Pro Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 343 <211> 5 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 343
Arg Tyr Gly Ile Ser 1 5
<210> 344 <211> 17 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 344
Trp Ile Ser Thr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 345 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 345
Arg Gln Leu Tyr Phe Asp Tyr 1 5
<210> 346 <211> 11 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 346
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Asn Leu Ala
1 5 10
<210> 347 <211> 7 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 347
Asp Ala Ser Thr Arg Ala Thr 1 5
<210> 348 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 348
Gln Gln Tyr Asp Asn Trp Pro Leu Thr 1 5
<210> 349 <211> 137 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 349
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly
1 5 10 15
Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln
20 25 30
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
35 40 45
Ser Val Tyr Gly Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Val Ala Ile Ile Trp Tyr Asp Gly Asp Asn Gln Tyr Tyr Ala
65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Leu Arg Thr Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 130 135
<210> 350 <211> 126 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 350
Met Leu Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala
1 5 10 15
Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val
20 25 30
Thr Pro Lys Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile
35 40 45
Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys
50 55 60
Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg
65 70 75 80
Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser
85 90 95
Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Ser
100 105 110
Leu Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
115 120 125
<210> 351 <211> 12 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 351
Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala Trp Gly
1 5 10
<210> 352
<211> 18
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 352
Arg Ile Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Ser Tyr Ala Val Ser Val
1 5 10 15
Lys Ser
<210> 353 <211> 12 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 353
Arg Ala Ser Gln Phe Ile Ser Ser Ser Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 354 <211> 11 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 354
Leu Leu Ile Tyr Gly Ser Ser Ser Arg Ala Thr
1 5 10
<210> 355 <211> 8 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<223> / примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 355
Gln Gln Leu Tyr Ser Ser Pro Met 1 5
<210> 356
<211> 124
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 356
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Ser Ala Ala Trp Gly Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Gly Arg Ile Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Ser Tyr Ala
50 55 60
Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn
65 70 75 80
Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Asp Trp Val Pro Lys Ile Gly Val Phe Asp
100 105 110
Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 357 <211> 110 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 357
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Ser Ser Ser Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Tyr Ser Ser Pro
85 90 95
Met Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr
100 105 110
<210> 358 <211> 454 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 358
Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Ser Ala Ala Trp Gly Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Arg Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Gly Arg Ile Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Ser Tyr Ala
50 55 60
Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn
65 70 75 80
Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Asp Trp Val Pro Lys Ile Gly Val Phe Asp
100 105 110
Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly
130 135 140
Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro
145 150 155 160
Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr
165 170 175
Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val
180 185 190
Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn
195 200 205
Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro
210 215 220
Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu
225 230 235 240
Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp
245 250 255
Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp
260 265 270
Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly
275 280 285
Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn
290 295 300
Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp
305 310 315 320
Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro
325 330 335
Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu
340 345 350
Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn
355 360 365
Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr
385 390 395 400
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
405 410 415
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys
420 425 430
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu
435 440 445
Ser Leu Ser Pro Gly Lys
450
<210> 359 <211> 215 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический полипептид"
<400> 359
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Phe Ile Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Ser Ser Ser Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Tyr Ser Ser Pro
85 90 95
Met Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala
100 105 110
Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser
115 120 125
Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu
130 135 140
Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser
145 150 155 160
Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu
165 170 175
Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val
180 185 190
Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215
<210> 360 <211> 4 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 360
Arg Gly Asp Ser
<210> 361 <211> 9 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 361
Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Cys Thr 1 5
<210> 362 <211> 12 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<223> /примечание ="описание искусственной последовательности: синтетический пептид"
<400> 362
Tyr Asp Trp Val Pro Lys Ile Gly Val Phe Asp Ser
1 5 10
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Выделенная молекула антитела, способная связываться с лигандом 1 белка запрограммированной смерти (PD-L1), содержащая:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), включающую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID N0: 1, SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 195; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), включающую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID N0: 9, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID N0: 10 и
аминокислотную последовательность
VLCDR3
SEQ
ID N0: 11.
2. Молекула антитела
по п.
которая
содержит
аминокислотную последовательность
VHCDR1
SEQ
ID N0: 1.
3. Молекула антитела
по п.
которая
содержит
аминокислотную последовательность
VHCDR1
SEQ
ID N0: 4.
4. Молекула антитела
по п.
которая
содержит
аминокислотную последовательность
VHCDR1
SEQ
ID N0: 195.
5. Выделенная молекула антитела, способная связываться с лигандом 1 белка запрограммированной смерти (PD-L1), содержащая:
(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), включающую аминокислотную последовательность VHCDR1, выбранную из SEQ ID N0: 1, SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 195; аминокислотную последовательность VHCDR2 SEQ ID NO: 5 и аминокислотную последовательность VHCDR3 SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), включающую аминокислотную последовательность VLCDR1 SEQ ID N0: 12, аминокислотную последовательность VLCDR2 SEQ ID N0: 13 и
аминокислотную последовательность
VLCDR3
SEQ
ID N0: 14.
б. Молекула антитела
по п.
которая
содержит
аминокислотную последовательность
VHCDR1
SEQ
ID N0: 1.
7. Молекула антитела
по п.
которая
содержит
аминокислотную последовательность
VHCDR1
SEQ
ID N0: 4.
8. Молекула антитела
по п.
которая
содержит
аминокислотную последовательность
VHCDR1
ID N0: 195.
вариабельную область тяжелой цепи, содержащую по меньшей мере одну каркасную (FW) область, содержащую любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID N0: 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, или 154, или аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную ей или имеющую не более двух аминокислотных замен, инсерций или делеций по сравнению с любой из аминокислотных последовательностей SEQ ID N0: 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152 или 154.
10. Молекула антитела по любому из п.п.1-9, которая имеет вариабельную область тяжелой цепи, содержащую по меньшей мере одну каркасную область, содержащую любую из последовательностей SEQ ID N0: 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152 или 154.
11. Молекула антитела по любому из п.п.1-10, которая имеет вариабельную область тяжелой цепи, содержащую по меньшей мере две, три или четыре каркасных области, содержащих любые из аминокислотных последовательностей SEQ ID N0: 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152 или 154 .
12. Молекула антитела по любому из п.п.1-10, которая содержит аминокислотную последовательность VHFW1 SEQ ID N0: 124, 126, 128 или 130, аминокислотную последовательность VHFW2 SEQ ID N0: 132, 134, 136, 138, 140 или 142 и аминокислотную последовательность VHFW3 SEQ ID N0: 144, 146, 148, 150 или 152, и необязательно дополнительно содержит аминокислотную последовательность VHFW4 SEQ ID N0: 154.
13. Молекула антитела по любому из п.п.1-12, которая имеет вариабельную область легкой цепи, содержащую по меньшей мере одну каркасную область, содержащую любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID N0: 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184 или 186, или аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную ей или имеющую не более двух аминокислотных замен, инсерций или делеций по сравнению с любой из аминокислотных последовательностей 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172,
10.
174, 176, 178, 180, 182, 184 или 186.
14. Молекула антитела по любому из п.п.1-13, которая имеет вариабельную область легкой цепи, содержащую по меньшей мере одну каркасную область, содержащую любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184 или 186.
15. Молекула антитела по любому из п.п.1-14, которая имеет вариабельную область легкой цепи, содержащую по меньшей мере две, три или четыре каркасных области, содержащих любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184 или 186.
16. Молекула антитела по любому из п.п.1-15, которая
содержит аминокислотную последовательность VLFW1 SEQ ID NO: 156,
158, 160, 162, 164 или 166, аминокислотную последовательность
VLFW2 SEQ ID NO: 168 или 170 и аминокислотную последовательность
VLFW3 SEQ ID NO: 172, 174, 176, 178, 180, 182 или 184, и
необязательно дополнительно содержит аминокислотную
последовательность VLFW4 SEQ ID NO: 186.
17. Молекула антитела по любому из п.п.1-16, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85% идентичную любой из SEQ ID NO: 18, 30, 38, 46, 50, 54, 62, 70 или 7 8.
18. Молекула антитела по любому из п.п.1-17, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, 30, 38, 46, 50, 54, 62, 7 0 или 78.
19. Молекула антитела по любому из п.п.1-18, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 85% идентичную любой из SEQ ID NO: 22, 26, 34, 42, 58, 66, 74, 82 или 8 б.
20. Молекула антитела по любому из п.п.1-19, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, 2 6, 34, 42, 58,
14.
66, 74, 82 или 86.
21. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.
22. Молекула антитела по любому из п.п.1-21, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 20.
23. Молекула антитела по любому из п.п.1-20, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30.
24. Молекула антитела по любому из п.п.1-20 и 23, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 96 или SEQ ID NO:
197 .
25. Молекула антитела по любому из п.п.1-20, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38.
26. Молекула антитела по любому из п.п.1-20 и 25, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 40 или SEQ ID NO: 91.
27. Молекула антитела по любому из п.п.1-20, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46.
28. Молекула антитела по любому из п.п.1-20 и 27, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 48.
29. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50.
30. Молекула антитела по любому из п.п.1-20 и 29, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 52.
31. Молекула антитела по любому из п.п.1-20, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54.
21.
последовательность SEQ ID N0: 56.
33. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 62.
34. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0 и 33, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 64.
35. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 70.
36. Молекула антитела по любому из п.п.1-20 и 35, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 72.
37. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 78.
38. Молекула антитела по любому из п.п.1-20 и 37, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 80.
39. Молекула антитела по любому из п.п.1-28, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 22.
40. Молекула антитела по любому из п.п.1-39, которая
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 24.
41. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 8, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 26.
42. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 8 и 41, которая
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 28.
43. Молекула антитела по любому из п.п.1-28, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 34.
33.
последовательность SEQ ID N0: 36.
45. Молекула антитела по любому из п.п.1-28, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 42.
46. Молекула антитела по любому из п.п.1-28 и 45, которая
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 44.
47. Молекула антитела по любому из п.п.1-28, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 58.
48. Молекула антитела по любому из п.п.1-28 и 47, которая
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 60.
49. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 8, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 66.
50. Молекула антитела по любому из п.п.1-28 и 49, которая
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 68.
51. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 8, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 74.
52. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 8 и 51, которая
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 76.
53. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 8, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 82.
54. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 8 и 53, которая
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 84.
55. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 8, которая содержит вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 86.
45.
последовательность SEQ ID NO: 88.
57. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22.
58. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.
59. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 86.
60. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34.
61. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.
62. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42.
63. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность
57.
SEQ ID NO: 74 .
64. Молекула антитела по любому из содержит вариабельный домен тяжелой аминокислотную последовательность SEQ ID N0: домен легкой цепи, содержащий аминокислотную SEQ ID N0: 42.
65. Молекула антитела по любому из содержит вариабельный домен тяжелой аминокислотную последовательность SEQ ID N0: домен легкой цепи, содержащий аминокислотную SEQ ID N0: 42.
66. Молекула антитела по любому из содержит вариабельный домен тяжелой аминокислотную последовательность SEQ ID N0: домен легкой цепи, содержащий аминокислотную SEQ ID N0: 22.
67. Молекула антитела по любому из содержит вариабельный домен тяжелой аминокислотную последовательность SEQ ID N0: домен легкой цепи, содержащий аминокислотную SEQ ID N0: 86.
68. Молекула антитела по любому из содержит вариабельный домен тяжелой аминокислотную последовательность SEQ ID N0: домен легкой цепи, содержащий аминокислотную SEQ ID N0: 58.
69. Молекула антитела по любому из содержит вариабельный домен тяжелой аминокислотную последовательность SEQ ID N0: домен легкой цепи, содержащий аминокислотную SEQ ID N0: 86.
70. Молекула антитела по любому из содержит вариабельный домен тяжелой аминокислотную последовательность SEQ ID N0: домен легкой цепи, содержащий аминокислотную SEQ ID N0: 66.
п.п.1-20, которая цепи, содержащий 4 6, и вариабельный
последовательность
п.п.1-20, которая цепи, содержащий 50, и вариабельный
последовательность
п.п.1-20, которая цепи, содержащий 50, и вариабельный
последовательность
п.п.1-20, которая цепи, содержащий 50, и вариабельный
последовательность
п.п.1-20, которая цепи, содержащий 54, и вариабельный
последовательность
п.п.1-20, которая цепи, содержащий 54, и вариабельный
последовательность
п.п.1-20, которая цепи, содержащий 62, и вариабельный
последовательность
71. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 86.
72. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 70, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.
73. Молекула антитела по любому из п.п.1-20, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 78, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 82.
74. Молекула антитела по любому из п.п.1-20, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 20, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24.
75. Молекула антитела по любому из п.п.1-20, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 20, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28.
76. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 20, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 88.
77. Молекула антитела по любому из п.п.1-20, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 32, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 36.
78. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID NO: 32, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 68.
71.
последовательность SEQ ID N0: аминокислотную последовательность
80. Молекула антитела по
содержит тяжелую цепь,
последовательность SEQ ID N0:
аминокислотную последовательность
81. Молекула антитела по
содержит тяжелую цепь,
последовательность SEQ ID N0:
аминокислотную последовательность
82. Молекула антитела по
содержит тяжелую цепь,
последовательность SEQ ID N0:
аминокислотную последовательность
83. Молекула антитела по
содержит тяжелую цепь,
последовательность SEQ ID N0:
аминокислотную последовательность
84. Молекула антитела по
содержит тяжелую цепь,
последовательность SEQ ID N0:
аминокислотную последовательность
85. Молекула антитела по
содержит тяжелую цепь,
последовательность SEQ ID N0:
аминокислотную последовательность
86. Молекула антитела по
содержит тяжелую цепь,
последовательность SEQ ID N0:
аминокислотную последовательность
87. Молекула антитела по
содержит тяжелую цепь,
последовательность SEQ ID N0:
аминокислотную последовательность
содержащую аминокислотную 40, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 44.
любому из п.п.1-2 0, которая содержащую аминокислотную 40, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 76.
любому из п.п.1-2 0, которая содержащую аминокислотную 48, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 44.
любому из п.п.1-2 0, которая содержащую аминокислотную 52, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 44.
любому из п.п.1-2 0, которая содержащую аминокислотную 52, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 24.
любому из п.п.1-2 0, которая содержащую аминокислотную 52, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 88.
любому из п.п.1-2 0, которая содержащую аминокислотную 56, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 60.
любому из п.п.1-2 0, которая содержащую аминокислотную 56, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 88.
любому из п.п.1-2 0, которая содержащую аминокислотную 64, и легкую цепь, содержащую SEQ ID N0: 68.
последовательность SEQ ID N0: 64, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 88.
89. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 72, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 68.
90. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 80, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 84.
91. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 197, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 36.
92. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 91, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 44.
93. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
последовательность SEQ ID N0: 96, и легкую цепь, содержащую
аминокислотную последовательность SEQ ID N0: 68.
94. Молекула антитела по любому из п.п.1-93, которая представляет собой Fab, F(ab')2, Fv или одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv).
95. Молекула антитела по любому из п.п.1-93, которая содержит константную область тяжелой цепи, выбранную из IgGl, IgG2, IgG3 и IgG4.
96. Молекула антитела по п.95, которая содержит константную область легкой цепи, выбранную из константных областей легкой цепи каппа или лямбда.
97. Антитело по п. 95 или 96, которое содержит константную область тяжелой цепи IgG4 человека с мутацией в положении 22 8 SEQ ID N0: 188 или 190 и константную область легкой цепи каппа.
89.
область тяжелой цепи IgG4 человека с мутацией серина на пролин в положении 22 8 SEQ ID N0: 188 или 190 и константную область легкой цепи каппа.
99. Антитело по п.95 или 96, которое содержит константную область тяжелой цепи IgGl человека с мутацией аспарагина на аланин в положении 2 97 SEQ ID N0: 192 и константную область легкой цепи каппа.
100. Антитело по п. 95 или 96, которое содержит константную область тяжелой цепи IgGl человека с мутацией аспартата на аланин в положении 2 65 и мутацией пролина на аланин в положении 32 9 SEQ ID N0: 193 и константную область легкой цепи каппа.
101. Антитело по п. 95 или 96, которое содержит константную область тяжелой цепи IgGl человека с мутацией лейцина на аланин в положении 2 34 и мутацией лейцина на аланин в положении 2 35 SEQ ID NO: 194 и константную область легкой цепи каппа.
102. Молекула антитела по любому из п.п.1-101, которая способна связываться с PD-L1 человека с константой диссоциации (KD) менее чем приблизительно 0,2 нМ.
103. Молекула антитела по любому из п.п.1-102, которая связывает внеклеточный домен PD-L1.
104. Молекула антитела по любому из п.п.1-103, которая способна уменьшать связывание PD-1 с PD-L1, или оба из них.
105. Молекула антитела по любому из п.п.1-104, которая способна усиливать ответ антигенспецифических Т-клеток.
106. Молекула антитела по любому из п.п.1-105, где указанная молекула антитела представляет собой моноспецифическую молекулу антитела.
107. Молекула антитела по любому из п.п.1-105, где указанная молекула антитела представляет собой биспецифическую молекулу антитела.
108. Молекула антитела по п.107, где указанная молекула антитела имеет первую специфичность связывания с PD-L1 и вторую специфичность связывания с TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ (например, СЕАСАМ-1 и/или СЕАСАМ-5), PD-1 или PD-L2.
109. Молекула антитела по любому из п.п.1-105, где указанная молекула антитела содержит антигенсвязывающий фрагмент
102.
антитела, например, половинное антитело или антигенсвязывающий фрагмент половинного антитела.
110. Фармацевтическая композиция, содержащая выделенную
молекулу антитела по любому из п.п.1-109 и фармацевтически
приемлемый носитель, эксципиент или стабилизатор.
111. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая
вариабельную область тяжелой или легкой цепей молекулы антитела
по любому из п.п.1-110.
112. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая CDR 1-3 тяжелой цепи, где указанная нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 104-108, 113-117 или 205-208.
113. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая CDR 1-3 легкой цепи, где указанная нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 109-112, 118-123, 209-214 и 245-246.
114. Нуклеиновая кислота по п.112, дополнительно содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельный домен тяжелой цепи, где указанная нуклеотидная последовательность по меньшей мере на 8 5% идентична любой из SEQ ID NO: 19, 31, 39, 47, 51, 55, 63, 71, 79, 90, 95, 100, 196 или 201.
115. Нуклеиновая кислота по п.112, дополнительно содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую вариабельный домен тяжелой цепи, где указанная нуклеотидная последовательность содержит любую из SEQ ID NO: 19, 31, 39, 47, 51, 55, 63, 71, 79, 90, 95, 100, 196 или 201.
116. Нуклеиновая кислота по п.114, дополнительно содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую тяжелую цепь, где указанная нуклеотидная последовательность по меньшей мере на 85% идентична любой из SEQ ID NO: 21, 33, 41, 49, 53, 57, 65, 73, 81, 92, 97, 101, 198 или 202.
117. Нуклеиновая кислота по п.115, дополнительно содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую тяжелую цепь, где указанная нуклеотидная последовательность содержит любую из SEQ ID NO: 21, 33, 41, 49, 53, 57, 65, 73, 81, 92, 97, 101, 198 или 202 .
112.
118. Нуклеиновая кислота по п.113, которая дополнительно
содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую
вариабельный домен легкой цепи, где указанная нуклеотидная
последовательность по меньшей мере на 85% идентична любой из SEQ
ID N0: 23, 27, 35, 43, 59, 67, 75, 83, 87, 93, 98, 102, 199 или
203 .
119. Нуклеиновая кислота по п.113, которая дополнительно
содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую
вариабельный домен легкой цепи, где указанная нуклеотидная
последовательность содержит любую из SEQ ID N0: 23, 27, 35, 43,
59, 67, 75, 83, 87, 93, 98, 102, 199 или 203.
12 0. Нуклеиновая кислота по п.118, дополнительно содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь, где указанная нуклеотидная последовательность по меньшей мере на 85% идентична любой из SEQ ID NO: 25, 29, 37, 45, 61, 69, 77, 85, 89, 94, 99, 103, 200 или 204.
121. Нуклеиновая кислота по п.119, дополнительно содержащая
нуклеотидную последовательность, кодирующую легкую цепь, где
указанная нуклеотидная последовательность содержит любую из SEQ
ID NO: 25, 29, 37, 45, 61, 69, 77, 85, 89, 94, 99, 103, 200 или
204 .
122. Экспрессирующий вектор, содержащий нуклеиновую кислота
по любому из п.п.111-121.
123. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по любому из п.п.111-121.
124. Способ получения молекулы антитела или ее фрагмента, включающий культивирование клетки-хозяина по п.123 в условиях, пригодных для экспрессии генов.
125. Способ стимуляции иммунного ответа у индивидуума, включающий введение индивидууму, нуждающемуся в этом, выделенной молекулы антитела по любому из п.п.1-109 в количестве, эффективном для стимуляции иммунного ответа.
12 6. Способ лечения злокачественной опухоли, включающий введение индивидууму, нуждающемуся в этом, выделенной молекулы антитела по любому из п.п.1-109 в количестве, эффективном для лечения злокачественной опухоли.
127. Способ по п.126, где злокачественная опухоль выбрана
из рака легкого, плоскоклеточного рака легкого, меланомы, рака
почки, рака печени, миеломы, рака предстательной железы, рака
молочной железы, ER+ рака молочной железы, рака молочной железы
IM-TN, рака ободочной и прямой кишки, рака ободочной и прямой
кишки с высокой микросателлитной нестабильностью, EBV+ рака
желудка, рака поджелудочной железы, рака щитовидной железы, рака
носоглотки, например, дифференцированной или
недифференцированной метастазирующей или локально рецидивирующей
карциномы носоглотки), гематологической злокачественной опухоли,
неходжкинской лимфомы или лейкоза, или метастатического очага
злокачественной опухоли.
128. Способ по п.126, где злокачественная опухоль выбрана из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), аденокарциномы NSCLC, плоскоклеточной карциномы NSCLC, печеночно-клеточной карциномы, распространенной меланомы, метастазирующего почечноклеточного рака или множественной миеломы.
129. Способ по любому из п.п.125-128, где молекулу антитела вводят в комбинации со вторым лекарственным средством или процедурой.
130. Способ по п.129, где второе лекарственное средство или процедура выбраны из одного или нескольких из химиотерапии, направленной терапии против злокачественной опухоли, онколитического лекарственного средства, цитотоксического средства, терапии на иммунной основе, цитокина, хирургической процедуры, лучевой процедуры, активатора костимулирующей молекулы, ингибитора ингибиторной молекулы, вакцины или клеточной иммунотерапии.
131. Способ по п.129, где молекулу антитела вводят в комбинации с агонистом костимулирующей молекулы, выбранным из одного или нескольких из GITR, ОХ40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CDlla/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 или лиганда CD83.
132. Способ по п.129, где молекулу антитела вводят в комбинации с ингибитором молекулы иммунной точки контроля,
127.
выбранной из одного или нескольких из PD-L1, PD-L2, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-5, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 или TGFR-бета.
133. Способ лечения инфекционного заболевания, включающий введение индивидууму, нуждающемуся в этом, выделенной молекулы антитела по любому из п.п.1-209 в количестве, эффективном для лечения инфекционного заболевания.
134. Способ обнаружения PD-L1 в биологическом образце, включающий (i) приведение в контакт образца или индивидуума (и необязательно, эталонного образца или индивидуума) с выделенной молекулой антитела по любому из п.п.1-109 в условиях, которые позволяют произойти взаимодействию молекулы антитела и полипептида, и (ii) обнаружение образования комплекса между молекулой антитела и образцом или индивидуумом (и необязательно эталонным образцом или индивидуумом).
135. Способ лечения злокачественной опухоли у индивидуума, включающий введение индивидууму комбинации двух, трех или более лекарственных средств, выбранных из двух или всех из следующих категорий (i)-(iii):
(i) средство, которое усиливает презентацию опухолевого
антигена, выбранное из одного или нескольких из: агониста STING,
агониста TLR, антагониста A2AR, онколитического вируса,
модулятора TIM-3, ингибитора рецептора сосудисто-эндотелиального
фактора роста (VEGFR), ингибитора с-Met, ингибитора TGFb,
ингибитора IDO/TDO, вакцины или биспецифического или
триспецифического связывающего клетки средства, или их
комбинации;
(ii) (необязательно) средство, которое усиливает ответ
эффекторных клеток, выбранное из одного или нескольких из:
агониста GITR, ингибитора PD-1, ингибитора PD-L1, ингибитора IAP
(ингибитор апоптотического белка), ингибитора EGFR (рецептор эпидермального фактора роста), ингибитора мишени рапамицина
(mTOR), IL-15 или его варианта, ингибитора CTLA-4, биспецифической молекулы антитела, которая связывается с CD3 и опухолевым антигеном, агониста CD4 0, агониста 0X4 0 или агониста CD2 7, или их комбинации; или
(iii) средство, которое уменьшает иммуносупреесию опухоли, выбранное из молекулы антитела против PD-L1 по любому из п.п.1-109, и, необязательно, одного или нескольких из: агониста GITR, ингибитора молекулы иммунной точки контроля, выбранной из одного или нескольких из PD-1, LAG-3, TIM-3 или CTLA-4, ингибитора CSF-1/1R, ингибитора IL-17, ингибитора IL-ip, ингибитора CXCR2, ингибитора Р13Ку или PI3K8, (vii) ингибитора BAFF-R, ингибитора MALT-1/ВТК, ингибитора JAK, ингибитора CRTH2, ингибитора VEGFR, IL-15 или его варианта, ингибитора CTLA-4, ингибитора IDO/TDO, антагониста A2AR, ингибитора TGFb или ингибитора PFKFB3, или их комбинации,
тем самым осуществляя лечение злокачественной опухоли.
13 6. Применение молекулы антитела по любому из п.п.1-109 или фармацевтической композиции по п.110 для производства лекарственного средства для лечения злокачественной опухоли или инфекционного заболевания у индивидуума.
137. Применение комбинации молекулы антитела по любому из п.п.1-109 или фармацевтической композиции по п.110 и второго лекарственного средства или процедуры для производства лекарственного средства для лечения злокачественной опухоли или инфекционного заболевания у индивидуума.
138. Применение по п.137, где второе лекарственное средство или процедура выбраны из одного или нескольких из химиотерапии, направленной терапии против злокачественной опухоли, онколитического лекарственного средства, цитотоксического средства, терапии на иммунной основе, цитокина, хирургической процедуры, лучевой процедуры, активатора костимулирующей молекулы, ингибитора ингибиторной молекулы, вакцины или клеточной иммунотерапии.
139. Применение по любому из п.п.13 6-138, где
злокачественная опухоль выбрана из рака легкого,
плоскоклеточного рака легкого, меланомы, рака почки, рака
печени, миеломы, рака предстательной железы, рака молочной
железы, ER+ рака молочной железы, рака молочной железы IM-TN,
рака ободочной и прямой кишки, рака ободочной и прямой кишки с
высокой микросателлитной нестабильностью, EBV+ рака желудка,
рака поджелудочной железы, рака щитовидной железы, рака
носоглотки, например, дифференцированной или
недифференцированной метастазирующей или локально рецидивирующей карциномы носоглотки), гематологической злокачественной опухоли, неходжкинской лимфомы или лейкоза, или метастатического очага злокачественной опухоли.
14 0. Применение по любому из п.п.13 6-138, где злокачественная опухоль выбрана из немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), аденокарциномы NSCLC, плоскоклеточной карциномы NSCLC, печеночно-клеточной карциномы, распространенной меланомы, метастазирующего почечноклеточного рака или множественной миеломы.
141. Применение комбинации двух, трех или более лекарственных средств для производства лекарственного средства для лечения злокачественной опухоли у индивидуума, где лекарственные средства выбраны из двух или всех из следующих категорий (i)-(iii):
(i) средство, которое усиливает презентацию опухолевого
антигена, выбранное из одного или нескольких из: агониста STING,
агониста TLR, антагониста A2AR, онколитического вируса,
модулятора TIM-3, ингибитора рецептора сосудисто-эндотелиального
фактора роста (VEGFR), ингибитора с-Met, ингибитора TGFb,
ингибитора IDO/TDO, вакцины или биспецифического или
триспецифического связывающего клетки средства, или их
комбинации;
(ii) (необязательно) средство, которое усиливает ответ
эффекторных клеток, выбранное из одного или нескольких из:
агониста GITR, ингибитора PD-1, ингибитора PD-L1, ингибитора IAP
(ингибитор апоптотического белка), ингибитора EGFR (рецептор эпидермального фактора роста), ингибитора мишени рапамицина
(mTOR), IL-15 или его варианта, ингибитора CTLA-4, биспецифической молекулы антитела, которая связывается с CD3 и опухолевым антигеном, агониста CD4 0, агониста 0X4 0 или агониста CD2 7, или их комбинации; или
выбранное из молекулы антитела против PD-L1 по любому из п.п.1-109, и, необязательно, одного или нескольких из: агониста GITR, ингибитора молекулы иммунной точки контроля, выбранной из одного или нескольких из PD-1, LAG-3, TIM-3 или CTLA-4, ингибитора CSF-1/1R, ингибитора IL-17, ингибитора IL-ip, ингибитора CXCR2, ингибитора Р13Ку или PI3K8, (vii) ингибитора BAFF-R, ингибитора MALT-1/ВТК, ингибитора JAK, ингибитора CRTH2, ингибитора VEGFR, IL-15 или его варианта, ингибитора CTLA-4, ингибитора IDO/TDO, антагониста A2AR, ингибитора TGFb или ингибитора PFKFB3, или их комбинации.
По доверенности
541650
Тяжелая цепь (lgG1 мыши)
FWHl CDRH1 FWH2 CDRH2
QVHLQQPGAE LVKPGASVKL SCKASGYTFT STWMYWVKQG PGRGLEWIGR IDPNSGSTКY
FWH3 CDRH3 FWH4
NEKFKNKATL TVDKSSSTAY MQLSSLTSED SAVYYCAROY RKGL YAMD YW GQGTSVTVSS
Легкая цепь (к мыши)
FWLl CDRL1 FWL2 CDRL2
DIVMTQSHKF MSTSVGDRVS IТСKASQDVG TAVAWYQQKP GQSPKLLIYW ASTRHTGVPD
FWL3 CDRL3 FWL4
RFTGSGSGTD FTLTISNVQS EDLADYFCQQ YNSГРЬТFGA GSKLELK
ФИГ. 1
Тяжелая цепь
GL QVQLQQPGAE LVKPGASVKL SCKASGYTFT SYWMHWVKQR PGRGLEWIGR IDPNSGGTK.Y
Mu mAb ~H Y G s-
GL NEKFKSKATL TVDKPSSTAY MQLSSLTSED SAVYYCAR
Mu mAb N S DY RKGLYAMDYV! GQGTSVTVSS
Легкая цепь
GL DIVMTQSHKF MSTSVGDRVS ITCKASQDVG TAVAWYQQKP GQSPKLLIYW ASTRHTGVPD
Mu mAb -
GL RFTGSGSGTD FTLTISNVQS EDLADYFCQQ rSSITPLTFGA GSKLELK
Mu mAb - -N -
ФИГ. 2
¦ 200 НГ/МЛ
и юо нг/мл
Н 50 НГ/МЛ В 25 НГ/МЛ ? 12.5 НГ/МЛ
100,000.00 90,000.00 80,000.00 70,000.00 60,000.00 50,000.0040,000.00 30,000.00 20,000.00 10,000.00 0.00
¦ 200 НГ/МЛ
и юо нг/мл
Н 50 НГ/МЛ Ш 25 НГ/МЛ ? 12.5 НГ/МЛ
80,000.00 70,000.00 60,000.00 50,000.00 40,000.00 30,000.00 20,000.0010,000.00 0.00
ФИГ
№ клона
Концентрация, мкг/мл
Последе
вательность
FW1 FW2
FW3
FW1
FW2
FW3
9 уь
икальных
9 уник
альных LC
22.0
21.2
16.8
30.5
30.3
31.3
25.2
1.4
30.6
0.5
18.6
21.5
47.6
33.5
20.1
31.7
44.7
ФИГ. 4
со О
lOOOO-i
5000-
00.001
0.01
0.1
•01 -S-11 ¦02 -о-12
^-03
-V--04 -+-14
-х-- 15
-о- 05 -Ф- 06 -0-- 16 ¦ 07 -Ш---17
-д~ 08 -е-Родительское -V-09 --в--Химера
концентрация исследуемого mAb/концен-трация меченного mAb мыши
ФИГ. 5
№ клона
Концентрация, мкг/мл
Последовательность
Ранг
Конкурентное связывание
FW1
FW2
FW3
FW1
FW2
FW3
9 ун
икальных-С
икальных .С
22.0
2.56
21.2
2.14
16.8
1.87
30.5
1.13
30.3
1.71
31.3
1.39
25.2
1.8
1.4
3.38
30.6
1.96
0.5
n.b.
18.6
1.3
21.5
2.27
47.6
2.91
33.5
4.59
20.1
4.64
31.7
2.47
44.7
2.16
ФИГ. 6
0.0001 0.001 0.01 0.1 1 10
концентрация mAb (мкг/мл)
ФИГ. 7
BAP-chi НС
BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 -hum01-HC -hum02-HC -hum14-HC -hum06-HC -hum09-HC -hum15-HC -hum03-HC ¦humll-HC -hum04-HC -hum12-HC -hum07-HC -hum16-HC -hum08-HC -hum17-HC -hum05-HC -hum10-HC -hum13-HC
EVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMYWVKQGPGRGLEWIGRIDPNSGSTKY QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKY QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKY QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWIRQPPGKGLEWIGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWIRQPPGKGLEWIGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWIRQPPGKGLEWIGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWVRQAPGQGLEWMGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWVRQAPGQGLEWMGRIDPNSGSTKY QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMYWIRQSPSRGLEWLGRIDPNSGSTKY QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYWMYWIRQSPSRGLEWLGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWLGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWLGRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWIRQSPSRGLEWIGRIDPNSGSTKY QITLKESGPTLVKPTQTLTLTCTFSGYTFTSYWMYWVRQAPGKGLEWVSRIDPNSGSTKY EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWIRQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKY
100
110
BAP-chi HC
BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 BAP058 -hum01-HC -hum02-HC -hum14-HC -hum06-HC -hum09-HC -hum15-HC -hum03-HC ¦humll-HC ¦hum04-HC ¦hum12-HC -hum07-HC ¦hum16-HC ¦hum08-HC ¦hum17-HC ¦hum05-HC ¦hum10-HC ¦hum13-HC
NEKFKNKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRFTISRDDSKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRFTISRDDSKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRFTISRDDSKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRFTISRDDSKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRFTISRDDSKNTAYLQMNSLKTEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRLTISKDTSKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRLTISKDTSKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRLTISKDTSKNQWLTMTNMDPVDTATYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG NEKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG
ФИГ. 8A
10 20 30 40 50 60
BAP-chi НС .... |.... |.... |.... |.... |.... |....|....|....|....|....|....|
EVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMYWVKQGPGRGLEWIGRIDPNSGSTKY
BAP058-hum01-HC Q. • -V VK V R.AT.Q... .M
BAP058-hum02-HC Q. • -V VK V R.AT.Q... .M
BAP058-hum14-HC Q. • -V VK V R.AT.Q... .M
BAP058-hum06-HC ... .V VK.. .E.LRI.. .G IR.P. .K
BAP058-hum09-HC ... .V VK.. .E.LRI.. .G IR.P. .K
BAP058-hum15-HC ... .V VK.. .E.LRI.. .G IR.P. .K
BAP058-hum03-HC ... .V VK... .Т. Л.. .V R.AT.Q... .M
BAP058-hum11-HC ... .V VK... .Т. Л.. .V R.AT.Q... .M
BAP058-hum04-HC ... .V VK.. .E.LRI.. .G R.A. .Q... .M
BAP058-hum12-HC ... .V VK.. .E.LRI.. .G R.A. .Q... .M
BAP058-hum07-HC Q.. .V VK V IR.S.S L
BAP058-hum16-HC Q.. .V VK V IR.S.S L
BAP058-hum08-HC V VK.. .E.LRI.. .G R.AR.QR
BAP058-hum17-HC V VK.. .E.LRI.. .G R.AR.QR
BAP058-hum05-HC V VK Т. Л.. .V IR.S.S L
BAP058-hum10-HC QIT.KE. .PT TQTLT.T.TF R.A. .K VS
BAP058-hum13-HC V VK Т. Л.. .V R.AR.QR
70 80 90 100 110
BAP-chi HC .... |.... |.... |.... |....|....|....|....|....|....|...
NEKFKNKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQG
BAP058-hum01-HC RF.ISR.D.KN.. .L.MN. .KT. .T
BAP058-hum02-HC RF.ISR.D.KN.. .L.MN. .KT. .T
BAP058-hum14-HC RF.ISR.D.KN.. .L.MN. .KT. .T
, .T..,
.. .E..
. .R.,
, .T
, .T..,
...E..
. .R.,
, .T
, .T..,
.. .E..
. .R.,
, .T
, .T..,
...E..
. .R.,
, .T
RV.
,T.
.A..
, .T..,
.. .E..
. .R..
, .T
BAP058-hum04-HC RV.IS. .T.KNQFSLK.. .V.AA.T...
BAP058-hum12-HC RV.IS. .T.KNQFSLK.. .V.AA.T...
BAP058-hum07-HC RF.ISR.D.KN.. .L.MN. .KT. .T...
BAP058-hum16-HC RF.ISR.D.KN.. .L.MN. .KT. .T...
BAP058-hum08-HC RL.ISK.T.KNQWLTMTNMDPV.T.T.
BAP058-hum 17-HC RL. ISK. T. KNQWLTMTNMDPV. T. T.
BAP058-hum05-HC RL. ISK.T.KNQWLTMTNMDPV.T.T.
BAP058-hum10-HC RV.I.A.. .T E R.. .T...
BAP058-hum13-HC RF.ISR.N.KN.LYL.MN. .RA. .T...
ФИГ. 8B
BAP-chi LC
hum14-LC hum15-LC hum16-LC hum17-LC hum04-LC hum05-LC hum06-LC hum08-LC hum10-LC hum11-LC hum01-LC hum09-LC hum02-LC hum03-LC hum07-LC hum13-LC hum12-LC
DIMMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQSPKLLIYWASTRHTGVPD EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPS EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPS EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPS EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPS EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPS EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPS EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPS DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPS DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPS DWMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPS DIVMTQTPLSLPVTPGEPASISCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPA DIVMTQTPLSLPVTPGEPASISCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPA DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPS EIVLTQSPDFQSVTPKEKVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPD EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGIPP AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPS DIQMTQS P S SL SASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWAS TRHTGVP S
100
BAP-chi LC
hum14-LC hum15-LC hum16-LC hum17-LC hum04-LC hum05-LC hum06-LC hum08-LC hum10-LC hum11-LC hum01-LC hum09-LC hum02-LC hum03-LC hum07-LC hum13-LC hum12-LC
RFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLADYFCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGYGTDFTLTINNIESEDAAYYFCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK RFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
ФИГ. 9A
10 20 30 40 50 60
Drtr-чп DIMMTQSHKFMSTSVGDRVSITCKASQDVGTAVAWYQQKPGQSPKLLIYWASTRHTGVPD
BAP058-hum14-LC E.VL. . .PD.Q.VTPKEK.T A.R S
BAP058-hum15-LC E.VL. . .PD.Q.VTPKEK.T A.R S
BAP058-hum16-LC E.VL. . .PD.Q.VTPKEK.T A.R S
BAP058-hum17-LC E.VL.. .PD.Q.VTPKEK.T A.R S
BAP058-hum04-LC E.VL.. .PD.Q.VTPKEK.T L Q S
BAP058-hum05-LC E.VL.. .PD.Q.VTPKEK.T L Q S
BAP058-hum06-LC E.VL.. .PD.Q.VTPKEK.T L Q S
BAP058-hum08-LC .W PLSLPVTL.QPA. .S A.R S
BAP058-hum10-LC .W PLSLPVTL.QPA. .S A.R S
BAP058-hum11-LC .W PLSLPVTL.QPA. .S A.R S
BAP058-hum01-LC . .V.. .TPLSLPVTP.EPA. .S L Q I.A
BAP058-hum09-LC . .V.. .TPLSLPVTP.EPA. .S L Q I.A
BAP058-hum02-LC . .Q PSSL.A T L Q S
BAP058-hum03-LC E.VL.. .PD.Q.VTPKEK.T L Q
BAP058-hum07-LC E.VL.. .PATL.L.P.E.ATLS L Q I.P
BAP058-hum13-LC A.QL.. .PSSL.A T L Q S
BAP058-hum12-LC . .Q... .PSSL.A T A.R S
70 80 90 100
омг-чп RFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLADYFCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK
BAP058-hum14-LC . .S E SL.PD.F.T.Y
BAP058-hum15-LC . .S E SL.PD.F.T.Y
BAP058-hum16-LC . .S E SL.PD.F.T.Y
BAP058-hum17-LC . .S E SL.PD.F.T.Y
BAP058-hum04-LC . .S F.. .SL.P. .I.T.Y
BAP058-hum05-LC . .S F.. .SL.P. .I.T.Y
BAP058-hum06-LC . .S F.. .SL.P. .I.T.Y
BAP058-hum08-LC . .S E SL.PD.F.T.Y
BAP058-hum10-LC . .S E SL.PD.F.T.Y
BAP058-hum11-LC . .S E SL.PD.F.T.Y
BAP058-hum01-LC ..S E SL F.V.Y
BAP058-hum09-LC ..S E SL F.V.Y
BAP058-hum02-LC ..S SL.P..F.T.Y
BAP058-hum03-LC . .S K. .R.EA. .VGV.Y
BAP058-hum07-LC . .S.. .Y N.IE.. .A.Y
BAP058-hum13-LC . .S F.. .SLEA. .A.T.Y
BAP058-hum12-LC . .S F.. .SL.P. .I.T.Y
ФИГ. 9B
LUAD HNSC
PDL1/CD8/IFNy
?Тройной отрицательный
вОднократно/двойной положительный нТройной положительный
ФИГ. 11
BRCA
Молочной железы IM-TN
PDL1/CD8/IFNy
?Тройной отрицательный
?Однократно/двойной положительный ¦Тройной положительный
ФИГ. 12
COAD
PDL1/CD8/IFNy
?Тройной отрицательный
I ^Однократно/двойной положительный ЕЭТройной положительный
ФИГ. 13
Соединение А17 подавляет экспрессию PDL1
(cMETamP NSCLC, ЕВС-1)
РЕ-А
Экспрессия PDL1 при использовании проточной цито-
метрии
ФИГ. 14
1.2 п
A17 в отношении мРНК CD274 в Hs746.T (мутация сМЕТ/амплификация GC)
о 1 ¦
> ^-I
> ^?? 0.80.6
CD LJ-I- S
о -Q 0.45 " 0.2H
носитель
А17
ФИГ. 15
120.0
см О О
§ 100.0 о
о 80.0-
о _й
60.0-
о о.
Изменение мРНК CD274 в Н3122 при обработке А23
> s 40.0-рЗ 20.0-
о о
0.0-
Носи- 2онМ 1 оонМ Носи- 20НМ 1 оонМ
тель, 4 тель,
часа 24 часа
н Носитель, 4 часа s Носитель, 24 часа
Ш20НМ 120HM
вюонМ пюонМ
тНД20нМ,оонМ
часов ?Носитель, 48 часов
? 20НМ
? юонМ
ФИГ. 16
носитель
А29
ФИГ. 17
1.2 т
А34 в отношении мРНК CD274 в HEYA8 (Мутация Kras)
1 -0.80.60.40.20-
носитель
А34
ФИГ. 18
носитель
А18
ФИГ. 19
l П
Презента-У ~ /лр антигена ЧК...
NK - A
^ ^ -' '';>
STING TLR7
Процес синганти- й гена г
Дендритные клетки
Ответы эффек- / торных Т-клеток/
Цитотоксическая / * te-jf етка/ ssff
TIM-3 ЗахваАЙ^ ческииузел ^ VEGFR _ антигена CStf
^ Опухолевый антиген
с MET Созревание дендритных клетог
GITR PD-1 PD-L1
IAP
EGFR
mTOR
PD-1
PD-L1
LAG-3
TIM-3
GITR
CSF-1/1R
IL-17
IL-1(3
CXCR2
PI3K-Y, -6
BAFF-R
MALT-1/BTK
JAK
CRTH2
VEGFR
> > CD
I- О О ю
^± ш
CD О ^ Ъ 32п 168 4 21 -0.50.25 0.125
о о
ОТ~|1
BAP058-hum04
0 о -95л ?Ф
О о
"- fN
> > CD
32п 168 4
1 -0.5-
2- W
I- о О ю
о о 0.25 CD 00.125
о о
BAP058-hum11
ГМ О
BAP058-hum13
о T
О О u~) *- fN fN
Концентрация антитела [мкг/мл]
Концентрация антитела [мкг/мл]
Концентрация антитела [мкг/мл]
ФИГ. 21
4000 п
E CD з CO -
< ^ Q_ QQ ш '-
ro T-> - P О E CD
< ^ Q_ QQ tO t=
ГО T- *sr
P CD E CD з CQ -
9 =
0= -Q
": : Q_ 0 о < gal
ш QQ jjj I-
m TT - <а-P CD E°"CD
< ^ Q_ QQ tO h
¦ ДОНОР 1 mДОНОР 2 Ш ДОНОР 3 И ДОНОР 4 И ДОНОР 5
ш ^
о о
О ^
nz о О ?2 ш ^ о о
о !=
nz о О ?2
Ab + SEB о о
о !=
zc о О ?2
ш ^ о о
о !=
zc о О ?2
ФИГ. 22
(19)
(19)
(19)
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
3AMEНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
133
133
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
137
137
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
139
138
В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
141
141
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
163
162
В другом варианте осуществления злокачественная опухоль
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
165
165
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
181
180
В других вариантах осуществления иммуномодулятор
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
183
183
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
205
206
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
Пример подходящих терапевтических средств для применения в
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
208
208
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
219
220
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
Лечение ВИЧ включает противовирусную терапию, включающую
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
222
222
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
307
308
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
310
310
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
345
346
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
348
348
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
387
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
390
390
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
472
472
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
473
473
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
474
474
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
478
478
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
479
479
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
493
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
496
496
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
ЗАМЕНЯЮЩАЯ СТРАНИЦА
<220>
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Val Ala Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile
35 40 45
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys
195 200 205
<220>
<220>
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
780
780
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
<400> 77
<400> 77
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Gly Thr Ala
20 25 30
<400> 89
<400> 89
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Trp Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Gly Ala 15
Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro 5 10
Gly Ala 15
Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro 5 10
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<210> 105
<210> 105
<211> 51 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<211> 51 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<400> 118
<400> 118
<210> 127
<210> 127
<211> 75 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<211> 75 <212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser
20 25
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser
20 25
<400> 143
<210> 151
<210> 151
<211> 96
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<211> 96
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys 20
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys 20
<210> 166
<210> 166
<211> 23 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<211> 23 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<210> 170
<210> 170
<211> 15 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<211> 15 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<210> 174
<210> 174
<211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<211> 32 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 177
<400> 177
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290 295 300
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Gly Ala 15
Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro 5 10
Gly Ala 15
Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro 5 10
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu
260 265 270
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<210> 206
<210> 206
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<400> 210
tgggcctcta ccagacacac c
<400> 210
tgggcctcta ccagacacac c
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<400> 223
<400> 223
<210> 232
<210> 232
<211> 69
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<211> 69
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<220>
<221> источник
<400> 244
ttcggtcaag gcactaaggt cgagattaag
<400> 244
ttcggtcaag gcactaaggt cgagattaag
<400> 244
ttcggtcaag gcactaaggt cgagattaag
<400> 244
ttcggtcaag gcactaaggt cgagattaag
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe
50 55 60
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
Ala Arg Asp Tyr Arg Lys Gly Leu Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala
130 135 140
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390
Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 395 400
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 385 390
<400> 288
Gly
Gly
<400> 300
<400> 300
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105
Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly
100 105
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
420 425 430
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
420 425 430
210
210
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro
210 215 220
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 307 <211> 218
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
435 440 445
<210> 307 <211> 218
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile
145 150 155 160
Ile Ser Asp Leu Lys Lys Ile Glu Asp Leu Ile Gln Ser Met His Ile
145 150 155 160
Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu
100 105 110
Ser Leu Glu Ser Gly Asp Ala Ser Ile His Asp Thr Val Glu Asn Leu
100 105 110
<210> 314
<210> 314
<210> 314
<210> 314
<210> 314
<210> 314
<210> 314
<210> 314
<211> 8 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<211> 8 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<400> 320
<400> 320
<220>
<220>
<210> 325
<210> 325
<211> 127 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<211> 127 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> источник
<220>
<221> источник
<220>
<221> источник
<220>
<221> источник
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
His Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Gly Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
<220>
<221> источник
<220>
<221> источник
<220>
<221> источник
<220>
<221> источник
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Phe Ile Ser Ser Ser
20 25 30
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Phe Ile Ser Ser Ser
20 25 30
Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys
115 120 125
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
370 375 380
Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile
370 375 380
<220>
<221> источник
<220>
<221> источник
514
514
9. Молекула антитела по любому из п.п.1-8, которая имеет
9. Молекула антитела по любому из п.п.1-8, которая имеет
515
515
517
517
32. Молекула антитела по любому из п.п.1-20 и 31, которая
32. Молекула антитела по любому из п.п.1-20 и 31, которая
518
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
518
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
44. Молекула антитела по любому из п.п.1-28 и 43, которая
44. Молекула антитела по любому из п.п.1-28 и 43, которая
519
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
519
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
56. Молекула антитела по любому из п.п.1-28 и 55, которая
56. Молекула антитела по любому из п.п.1-28 и 55, которая
520
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
520
содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную
521
521
522
522
79. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
79. Молекула антитела по любому из п.п.1-2 0, которая
523
содержит тяжелую цепь,
523
содержит тяжелую цепь,
88. Молекула антитела по
любому из п.п.1-2 0, которая
88. Молекула антитела по
любому из п.п.1-2 0, которая
524
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
524
содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную
98. Антитело по п.95 или 96, которое содержит константную
98. Антитело по п.95 или 96, которое содержит константную
525
525
530
531
(iii) средство, которое уменьшает иммуносупреесию опухоли,
1/21
1/21
2/21
2/21
2/21
2/21
2/21
2/21
2/21
2/21
3/21
3/21
6/21
6/21
7/21
7/21
7/21
7/21
7/21
7/21
7/21
7/21
7/21
7/21
7/21
7/21
9/21
9/21
9/21
9/21
9/21
9/21
9/21
9/21
9/21
9/21
10/21
10/21
12/21
13/21
13/21
13/21
13/21
13/21
13/21
14/21
14/21
14/21
14/21
14/21
14/21
15/21
15/21
16/21
16/21
16/21
16/21
16/21
16/21
16/21
16/21
16/21
16/21
16/21
16/21
17/21
17/21
17/21
17/21
17/21
17/21
17/21
17/21
17/21
17/21
18/21
18/21
18/21
18/21
21/21
21/21
21/21
21/21
21/21
21/21
