[RU]

Ассоциация 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3H-[1,3]оксазино[6,5-g][1,2,3]бензо-триазин-4,9-диона формулы (I)

или его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, и ингибитора ацетилхолинэстеразы. Лекарственные средства.

(57) Реферат / Формула:

Ассоциация 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3H-[1,3]оксазино[6,5-g][1,2,3]бензо-триазин-4,9-диона формулы (I)

или его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, и ингибитора ацетилхолинэстеразы. Лекарственные средства.

---

Евразийское (21) 201692006 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2017.02.28
(22) Дата подачи заявки 2015.04.03
(51) Int. Cl.
A61K 45/06 (2006.01) A61K31/445 (2006.01) A61K31/5365 (2006.01) A61P25/28 (2006.01) A61K 9/00 (2006.01) A61K31/27 (2006.01) A61K31/55 (2006.01)
(54) НОВАЯ АССОЦИАЦИЯ 8-ЦИКЛОПРОПИЛ-3-[2-(3-ФТОРФЕНИЛ)ЭТИЛ]-7,8-ДИГИДРО-3Н-[1,3]ОКСАЗИНО[6,5^][1,2,3]БЕНЗОТРИАЗИН-4,9-ДИОНА И ИНГИБИТОРА АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ, А ТАКЖЕ СОДЕРЖАЩИЕ ЕЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ
(31) 1453046
(32) 2014.04.07
(33) FR
(86) PCT/FR2015/050879
(87) WO 2015/155451 2015.10.15
(71) Заявитель:
ЛЕ ЛАБОРАТУАР СЕРВЬЕ (FR)
(72) Изобретатель:
Бретен Сильви, Пюио Мария (FR)
(74) Представитель:
Веселицкая И.А., Кузенкова Н.В., Веселицкий М.Б., Белоусов Ю.В., Каксис Р.А., Куликов А.В., Кузнецова Е.В., Соколов Р.А., Кузнецова Т.В.
(RU)
(57) Ассоциация 8-циклопропил-3-[2-(3-
фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3Н-
[1,3]оксазино[6,5^]
[1,2,3]бензо-триазин-4,9-диона формулы (I)
или его соли присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, и ингибитора ацетилхолинэстеразы. Лекарственные средства.
127254
15 Заявка № 201692006
Заявитель ЛЕ ЛАБОРАТУАР СЕРВЬЕ, FR
НОВАЯ АССОЦИАЦИЯ 8-ЦИКЛОПРОПИЛ-3-[2-(3-ФТОРФЕНИЛ)ЭТИЛ]-7,8-20 ДИГИДРО-ЗЯ-[1,3]ОКСАЗИНО[6,5-^][1,2,3]БЕНЗОТРИАЗИН-4,9-ДИОНАИ ИНГИБИТОРА АЦЕТИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ, А ТАКЖЕ СОДЕРЖАЩИЕ ЕЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ
Настоящее изобретение относится к новой ассоциации между 825 циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-_§¦][!,2,3]бензотриазин-4,9-дионом формулы (I):
или его солью присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, и ингибитором ацетилхолинэстеразы для получения
фармацевтических композиций с целью применения в лечении когнитивных расстройств, связанных со старением мозга и нейродегенеративными болезнями.
8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^][1,2,3]-бензотриазин-4,9-дион является позитивным аллостерическим 5 модулятором АМРА-рецептора глутамата, описанным в патентной заявке WO 2008/085506. Более конкретно, соединение формулы (I) обладает прокогнитивными свойствами, улучшает синаптическую пластичность и проявляет нейропротекторные свойства, что обуславливает интерес к его активности в лечении расстройств центральной нервной системы и особенно в
10 лечении когнитивных недостаточностей, связанных со старением мозга и нейродегенеративными болезнями.
Настоящее изобретение касается ассоциации между 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-дионом формулы (I), или его солью присоединения с фармацевтически
15 приемлемой кислотой или основанием, и ингибитором ацетилхолинэстеразы, а также ее свойств, представляющих интерес для лечения когнитивных расстройств, связанных со старением мозга и нейродегенеративными болезнями.
Нейродегенеративные болезни, связанные со старением мозга, такие как болезнь Альцгеймера, характеризуются расстройствами памяти и нарушениями
20 когнитивных функций. Когнитивные расстройства в целом обусловлены снижением способности нейронов синтезировать и выделять определенные нейромедиаторы, такие как, например, глутамат и ацетилхолин (Robbins et al., Trends in Pharmacol. Sci. 2006(3), 27, 141-148). Кроме этого, наблюдаются прогрессирующая утрата синаптической пластичности и нейронных процессов, и
25 определенных специальных отделах мозга эта нейронная потеря ускорена. Патофизиологические исследования ясно продемонстрировали, что недостаток глутаматергической нейромедиации тесно связан с развитием болезни Альцгеймера (Advokat et al., Neuroscience & Biobehav. Rev. 1992, 16, 13-24; Francis et al., Progress in Neurobiology 1992, 39(5), 517-545).
30 В глутаматергической системе AMPA (("а-амино-3-гидрокси-5-метил-4-
изоксазолпропионовая кислота")-рецептор, по-видимому, является рецептором, наиболее вовлеченным в явления физиологической возбудимости нейронов и особенно в явления, участвующие в процессе запоминания. Например, показано,
что обучение связано с повышенным связыванием АМРА с ее рецептором в гиппокампе, одном из ключевых для когнитивных процессов отделов мозга.
Параллельно во время болезни Альцгеймера наблюдается прогрессирующая дегенерация холинергических нейронов. Ингибиторы ацетилхолинэстеразы, 5 такие как донепезил, в настоящее время используются в симптоматическом лечении болезни Альцгеймера с целью ограничить снижение уровня ацетилхолина в мозге путем блокирования активности ацетилхолинэстеразы. Было показано, что ингибиторы ацетилхолинэстеразы, такие как позитивные аллостерические модуляторы АМРА-рецептора, делают возможным улучшение
10 когнитивных свойств в различных животных моделях эпизодической памяти и кратковременной памяти (Black, Psychopharmacol. 2005, 179, 154-163; O'Neill et al, IDrugs 2007, 10(3), 185-192; Yuede et al, Behav. Pharmacol, 2007, 18(5-6), 347-363). Таким образом, существует два типа стратегии улучшения когнитивных функций, целью которых являются либо АМРА-рецепторы или
15 глутамат, либо ацетилхолин.
Настоящее изобретение неожиданно показало, что эффект ингибиторов ацетилхолинэстеразы усиливается эффектом 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона или его солей присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой
20 или основанием. Соответственно, совместное введение этих соединений способно сделать возможным улучшение когнитивной деятельности пациентов по сравнению с введением только ингибитора ацетилхолинэстеразы, но при этом не вызывая или не усиливая связанные с лечением неблагоприятные эффекты (в частности, желудочно-кишечные расстройства, такие как тошнота или диарея,
25 головные боли, утомляемость). Другими словами, вследствие этого становится мыслимым лечение с использованием более низких доз ингибитора ацетилхолинэстеразы, нежели традиционно используемые при моновведении, с такой же или лучшей когнитивной деятельностью и меньшим количеством неблагоприятных эффектов.
30 Еще удивительнее то, что ассоциация 8-циклопропил-3-[2-(3-
фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона или его соли присоединения введенного в слабоактивной дозе и ингибитора ацетилхолинэстеразы также введенного в слабоактивной дозе
приводит к синергическому эффекту с хорошим влиянием на познавательные способности.
Эти ^предусматриваемые эффекты делают возможным рассмотрение использования ассоциации между 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-5 дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-дионом или его соли присоединения и ингибитором ацетилхолинэстеразы в лечении когнитивных расстройств, связанных со старением мозга и нейродегенеративными болезнями. В особенности целевыми являются когнитивные расстройства, связанные с болезнью Альцгеймера. Более конкретно, целевыми являются когнитивные 10 расстройства, связанные с болезнью Альцгеймера у пациентов с симптомами депрессии.
Предпочтительно в контексте изобретения 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-дион используют в виде основания.
15 Ингибиторы ацетилхолинэстеразы, согласно изобретению, выбирают из
физостигмина, ривастигмина, галантамина, донепезила, такрина и гиперзина А. Согласно предпочтительному варианту осуществления, ингибитор ацетилхолинэстеразы выбран из донепезила, ривастигмина и галантамина. Донепезил предпочтительно используют в форме гидрохлорида, ривастигмин - в
20 форме гидротартрата и галантамин - в форме гидробромида. Преимущественно ингибитором ацетилхолинэстеразы является донепезил.
Более конкретно, ассоциация 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона и ингибитора ацетилхолинэстеразы, выбранного из донепезила, ривастигмина и галантамина,
25 применяется в лечении когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера, и более конкретно - когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера у пациентов с симптомами депрессии.
Изобретение также относится к применению ассоциации между 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-
30 ^][1,2,3]бензотриазин-4,9-дионом или его солями присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием и ингибитором ацетилхолинэстеразы для получения фармацевтических композиций для лечения когнитивных расстройств, связанных со старением мозга и нейродегенеративными болезнями.
Более конкретно, изобретение относится к использованию ассоциации между 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^][1,2,3]бензотриазин-4,9-дионом или его солями присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, и 5 ингибитором ацетилхолинэстеразы, выбранным из донепезила, ривастигмина и галантамина, для получения фармацевтических композиций для лечения когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера, и более конкретно - когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера у пациентов с симптомами депрессии.
10 Изобретение также относится к фармацевтическим композициям,
содержащим ассоциацию между 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона или его солями присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием и ингибитором ацетилхолинэстеразы, в комбинации с одним или более
15 фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.
Преимущественно изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим ассоциацию между 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-дионом или его солями присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой
20 или основанием, и ингибитором ацетилхолинэстеразы, выбранным из донепезила, ривастигмина и галантамина, в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ.
В фармацевтических композициях согласно изобретению массовая доля активных ингредиентов (отношение массы активных ингредиентов к общей
25 массе композиции) составляет от 5 до 50%.
Из числа фармацевтических композиций согласно изобретению более конкретно могут быть упомянуты подходящие для введения пероральным, парэнтеральным и в особенности внутривенным, чрес- или подкожным, назальным, ректальным, сублингвальным, глазным или дыхательным путем,
30 более конкретно таблетки, драже, сублингвальные таблетки, желатиновые капсулы, таблетки для медленного растворения под языком, капсулы, леденцы, инъекционные препараты, аэрозоли, глазные или назальные капли, суппозитории, кремы, мази, дермальные гели, трансдермальные пластыри и т.п.
В дополнение к 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^][1,2,3]бензотриазин-4,9-диону и соединению-ингибитору ацетилхолинэстеразы, фармацевтические композиции согласно изобретению содержат одно или более вспомогательное вещество или носитель, выбранное из 5 разбавителей, смазывающих веществ, связывающих веществ, разрыхлителей, стабилизаторов, консервантов, абсорбентов, красителей, подсластителей, вкусоароматических добавок и т.п.
Могут быть упомянуты следующие, никоим образом не ограничительные, примеры:
10 -для разбавителей: лактоза, декстроза, сахароза, маннитол, сорбитол,
целлюлоза, глицерин;
-для смазывающих веществ: диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота и ее магниевые и кальциевые соли, полиэтиленгликоль;
-для связывающих веществ: силикаты алюминия и магния, крахмал, 15 желатин, трагакант, метилцеллюлоза, натрия карбоксиметилцеллюлоза и поливинилпиролидон;
- для разрыхлителей: агар, альгиновая кислота и ее натриевая соль, шипучие смеси.
Входящие в ассоциацию соединения могут быть введены одновременно или 20 последовательно. Предпочтительным путем введения является пероральный. Другим преимущественным путем введения является трансдермальный пластырь. Соответствующие фармацевтические композиции могут позволять немедленное или отсроченное высвобождение активных ингредиентов. Кроме того, входящие в ассоциацию соединения могут быть введены в виде двух 25 отдельных фармацевтических композиций, каждая из которых содержит один из активных ингредиентов, или альтернативно в виде одной фармацевтической композиции, в которой активные ингредиенты смешаны.
Предпочтительными фармацевтическими композициями являются таблетки. Используемая дозировка различается в зависимости от пола, возраста и 30 веса пациентов, пути введения, природы расстройства и любых связанных курсов лечения, и находится в диапазоне от 1 до 200 мг эквивалентов свободного основания 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона в 24 часа, и более предпочтительно от 5 до 50 мг в день. Доза ингибитора ацетилхолинэстеразы
равна или меньше той, которая используется при введении ингибитора самого по себе. В случае донепезила дозировка составляет от 0,5 до 30 мг в день, предпочтительные дневные дозы - от 5 до 10 мг. В случае ривастигмина дозировка составляет от 0,5 до 20 мг в день, предпочтительные дневные дозы -5 от 1,5 до 14 мг. В случае галантамина дозировка составляет от 1 до 30 мг в день, предпочтительные дневные дозы - от 8 до 24 мг.
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
ПРИМЕР А: Эксперимент на модели эпизодической памяти, контекст-
10 зависимый серийный тест на различение
Эффекты 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона и донепезила (последний использован в форме гидрохлорида), вводимых отдельно или в комбинации, изучали с применением контекст-зависимого серийного теста на различение на
15 мышах C57BL/6 среднего возраста 14-15 месяцев (п = 12 на группу) (Celerier et al, Learn Mem. 2004, 11(2), 196-204; Tronche et al, Behav. Brain Res. 2010, 215(2), 255-260). В этой модели мыши среднего возраста проявляют специфическую дисфункцию контекст-зависимой памяти по сравнению с молодыми мышами, без каких бы то ни было дефектов пространственной
20 памяти. Эта модель важна для оценки влияния продуктов при болезни Альцгеймера, поскольку пациенты с такой деменцией также проявляют, на очень ранних стадиях, расстройства контекст-зависимой эпизодической памяти (Gold et al, Expert Rev. Neurother. 2008, 8(12), 1879-1891).
Мышей, помещенных в коробку с высокими стенками, обучают двум типам
25 последовательных пространственных различий (D1: белое дно, затем D2: черное дно) на дне с четырьмя отверстиями, из которых только одно содержит приманку, при этом в D1 и D2 приманку содержат противоположные отверстия. Каждое различие выполняют на конкретном дне (белом или черном), что создает внутренний контекст, индивидуальный для каждого различия. Через двадцать
30 четыре часа после обучения мышей возвращают на белое контекстное дно и измеряют следующие параметры:
- долю правильных ответов (т.е., % опусканий головы в отверстие, где была приманка во время приобретающего упражнения на белом дне),
- долю перекрывающихся ответов (т.е., % опусканий головы в отверстие, где была приманка во время приобретающего упражнения на черном дне, в последнем показанном мышам контексте),
- и долю ошибок (т.е., % опусканий головы в два отверстия, где не было приманок во время упражнений, как на белом, так и на черном дне) (см. Фигуру
1).
Результаты демонстрируют, что у мышей среднего возраста, получавших носитель, доля правильных ответов в этом тесте на планшетах с 4-мя отверстиями близка к уровню случайности (" 25 %). После длительного лечения на протяжении 9 дней донепезила гидрохлоридом (0,1 мг/кг основания per os) наблюдается легкое незначительное повышение доли правильных ответов по сравнению с носителем (35,5 % против 26,4 %, см. Фигуру 2). Однако количество правильных ответов значительно возрастает более чем на 40 % по сравнению с носителем после длительного лечения на протяжении 9 дней 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^][1,2,3]бензотриазин-4,9-дионом в дозах 0,1 и 0,3 мт/ктрег os (43,7 % правильных ответов при 0,1 мг/кг и 48 % правильных ответов при 0,3 мг/кг) (на Фигуре 2 соединение обозначено как S). И наконец, введение ассоциации 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона (0,1 мг/кг основания per os) и донепезила (0,1 мг/кг основания per os) приводит к значительному увеличению количества правильных ответов, более чем на 100 % по отношению к носителю (61,1 % правильных ответов при использовании ассоциации против 26,4 % при использовании только носителя). Эти результаты показывают четкое усиление эффекта донепезила в присутствии 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона.
К тому же наблюдается очень четкая корреляция между увеличением количества правильных ответов и уменьшением количества перекрывающихся ответов, что подтверждает особое влияние каждого из соединений и их ассоциации на контекст-зависимую память. Соответственно, введение ассоциации 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона (0,1 мг/кг основания per os) и донепезила (0,1 мг/кг основания per os) значительно улучшает контекст-зависимую память (правильные ответы - перекрывающиеся ответы) по
сравнению с той, которая наблюдается при введении отдельных соединений. Это
наблюдаемое для ассоциации повышение не может быть объяснено простым
сложением эффектов отдельных соединений и демонстрирует синергию
действия двух соединений при совместном введении (см. Фигуру 3).
5 Результаты ясно показывают, что введение 8-циклопропил-3-[2-(3-
фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона и донепезила в ассоциации делает возможным получение значительного и совершенно неожиданного синергетического эффекта. Кроме того, фармакокинетические анализы показали, что между двумя лекарственными
10 средствами не было взаимодействий фармакокинетического типа, могущих
объяснить или вмешаться в вышеописанный синергетический эффект.
ПРИМЕР В: Первичный наблюдательный тест Ирвина
В плане безопасности эффекты 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3#-[1,3]оксазино[6,5-?-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона и донепезила
15 (последний в форме гидрохлорида), вводимых отдельно или в ассоциации, изучали с использованием первичного наблюдательного теста Ирвина на мышах C57BL/6 (п = 4 особи на группу).
Записывали поведенческие изменения, физиологические и нейротоксические симптомы, ректальную температуру и диаметр зрачков,
20 используя стандартизированную сетку наблюдений, производную от сети Ирвина.
Наблюдалось, что 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-дион (от 3 до 100 мг/кг основания per os) и донепезил (в 0,3 и 1 мг/кг основания per os), вводимые
25 однократно по отдельности или в совмесно, не вызывают никаких изменений в мышах согласно стандартизированной сетке наблюдений. В более высокой дозе (3 и 10 мг/кг основания per os) отдельно введенный донепезил вызывает покачивание, седативный эффект от легкого до умеренного, потерю мышечного тонуса и снижение реакции на прикосновение. При совместном введении
30 донепезила с 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-дионом (от 3 до 100 мг/кг основания per os) не наблюдалось никакого усиления эффектов, наблюдаемых при введении донепезила в дозе 3 и 10 мг/кг. Дополнительно в этом исследовании фармакокинетические анализы показали, что между двумя лекарственными
средствами не было взаимодействий фармакокинетического типа, могущих объяснить или вмешаться в вышеописанные наблюдения.
Подводя итоги, вышепредставленные результаты демонстрируют синергию действия 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-5 [1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона и донепезила в плане когнитивной деятельности, с хорошими показателями безопасности и без фармакокинетического взаимодействия.
ПРИМЕР С: Изучение возбуждающих постсинаптических потенциалов
(ВПСП), вызванных электростимуляцией у находящихся в
10 сознании мышей
8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-
^][1,2,3]бензотриазин-4,9-дион и ривастигмин оценивали
электрофизиологически на мышах, находящихся в сознании, после перорального введения по отдельности и в совмесно в слабоактивных дозах обоих соединений
15 с целью изучить синергический потенциал между этими двумя соединениями в гиппокампе. Исследование ВПСП, вызванных электростимуляцией у находящихся в сознании мышей, делает возможным физиологическое изучение явлений электрофизиологии, которые являются основой нейронной деятельности и связаны с процессами запоминания и обучения. Обучение и память фактически
20 требуют изменений в нейронных цепях. Следовательно, содействие синаптическим ответам посредством продукта или ассоциации продуктов путем воздействия на возбуждающие постсинаптические потенциалы должно позволить облегчить обучение или противостоять возрастным дефектам памяти или дефектам памяти, возникающим при нейродегенеративных болезнях, таких
25 как болезнь Альцгеймера (Shapiro, Arch. Neurol. 2001, 58, 874-881). Исследования проводили следующим образом:
Трехмесячные мыши C57BL/6 были анестезированы 0,8-3 % галотаном, доставляемым через маску. После анестезии в перфорирующий путь и зубчатую извилину гиппокампа животных вводили соответственно стимулирующий и 30 записывающий электроды. После имплантации электродов мышей содержали в клетках от 5 до 7 дней со свободным доступом к пище и воде для полного восстановления. Каждое животное с имплантом содержали в одиночной клетке до завершения эксперимента.
После восстановления индуцировали стабильный базовый уровень вызываемых ответов с помощью парных импульсов (длительность импульса 100 мкс, негативный-позитивный), применяемых по 3 импульса/минута на стимулирующий электрод, расположенный в перфорирующем пути. Интервалы 5 между импульсами фиксированы по 40 мс (Gruart et al., J. Neurosci. 2006, 24, 1077-1087). Полевые ВПСП контролировали до получения стабильного базового уровня (на протяжении 30 минут) Затем вводили продукты или носитель и записывали вызванные полевые потенциалы. Соединения вводили per os по отдельности или в совмесно в следующих дозах: ривастигмин (0,03 мг/кг, п.о.);
10 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-
g-][1,2,3] бензотриазин-4,9-дион (на Фигуре 4 соединение обозначено как S; 3 мг/кг, п.о.); носитель (1 % (масс./об.) гидроксиэтилцеллюлозы и 1 % (об./об.) полисорбата 80 в дистиллированной воде). По причинам кинетики, связанной с tmax каждого из продуктов, введение соединений осуществляли следующим
15 образом: 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^][1,2,3]бензотриазин-4,9-дион и ривастигмин вводили через зонд, за 45 и 30 минут соответственно до индукции спаренных импульсов, как описано выше. В целях гомогенности групп животных те из них, которые получали только один из двух продуктов, во время второго введения получали
20 носитель. Вызванные потенциалы затем записывали на протяжении приблизительно 2,5 часов с момента последнего введения соединения или носителя.
Результаты показывают, что на базовом уровне все группы идентичны (незначимые различия) (см. Фигуру 4, "базовый уровень"). После введения
25 различных соединений результаты являются статистически отличающимися (двухфакторный дисперсионный анализ между курсами лечения и сеансами; р < 0,001). Анализы post hoc показывают, что:
- при введении по отдельности в однократной дозе 3 мг/кг п.о., 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-
30 ^][1,2,3]бензотриазин-4,9-дион не вызывает значительного изменения амплитуды полевых ВПСП по сравнению с группой носителя, за исключением 3 отдельных случаев (на 45, 115 и 120 минуте после индукции спаренных импульсов), что указывает на слабоактивность дозы (см. Фигуру 4, кривая с треугольниками и Таблицу 1);
- при введении по отдельности в однократной дозе 0,03 мг/кг ривастигмин не вызывает значительного изменения амплитуды полевых ВПСП по сравнению с группой носителя, за исключением 3 отдельных случаев (на 45, 65 и 115 минуте после индукции спаренных импульсов), что указывает на
5 слабоактивность дозы (см. Фигуру 4, кривая с квадратами и Таблицу 1);
- ассоциации двух соединений, 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3#-[1,3]оксазино[6,5-?-][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона в однократной дозе 3 мг/кг п.о. и ривастигмина в однократной дозе 0,03 мг/кг п.о., вызывает значительное изменение амплитуд полевых ВПСП по сравнению с группой
10 носителя почти на всем протяжении периода записи (особенно от 25 до 80 минуты, затем от 90 до 95 минуты, затем от 105 до 130 минуты и от 140 до 150 минуты после введения ривастигмина; р < 0,05) (см. Фигуру 4, кривая с крестиками и Таблицу 1).
Время
НОСИТЕЛЬ
0,03 мг/кг
3,0 мг/кг
0,03 мг/кг ривастигмина
ривастигмина
Соединения S
+ 3,0 мг/кг Соединения S
85 минут
0,972
0,980
0,156
90 минут
0,356
0,596
0,014
95 минут
0,526
0,197
0,043
100 минут
0,971
0,592
0,161
105 минут
0,558
0,688
0,011
110 минут
0,632
0,601
0,056
115 минут
0,007
0,002
< 0,001
120 минут
0,163
0,007
< 0,001
125 минут
0,251
0,243
0,006
130 минут
0,311
0,521
0,016
135 минут
0,536
0,979
0,103
140 минут
0,323
0,337
0,001
145 минут
0,810
0,810
0,007
150 минут
0,413
0,362
< 0,001
Результаты ясно демонстрируют, что введение 8-циклопропил-3-[2-(3-
фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-
диона и ривастигмина в ассоциации делает возможным получение значительного
5 и полностью неожиданного синергетического эффекта.
ПРИМЕР D: Фармацевтическая композиция
Состав препарата на 1000 таблеток, содержащих дозу в 5 мг 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-^][1,2,3]бензотриазин-4,9-диона и 10 мг ингибитора ацетилхолинэстеразы, 10 выбранного из донепезила, ривастигмина и галантамина:
8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-
^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-дион 5 г
Ингибитор ацетилхолинэстеразы Юг
Кукурузный крахмал 20 г
15 Мальтодекстрин 7,5 г
Коллоидная двуокись кремния 0,2 г
Натриевая соль карбоксиметилкрахмала 3 г
Магния стеарат 1 г
Лактоза 55 г
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Ассоциация между 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3#-[1,3]оксазино[6,5-?-][1,2,3]бензотриазин-4,9-дионом формулы (I):
или его солью присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием, и ингибитором ацетилхолинэстеразы.
2. Ассоциация по п. 1, отличающаяся тем, что 8-циклопропил-3-[2-(3-
10 фторфенил)этил]-7,8-дигидро-ЗЯ-[1,3]оксазино[6,5-^-][1,2,3]бензотриазин-4,9-
дион использован в форме основания.
3. Ассоциация по п.п. 1 или 2, отличающаяся тем, что ингибитором ацетилхолинэстеразы является донепезил, ривастигмин или галантамин.
4. Ассоциация по п. 3, отличающаяся тем, что донепезил использован в форме гидрохлорида.
5. Ассоциация по любому из п.п. 1-4, отличающаяся тем, что 8-
20 циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-[1,3]оксазино[6,5-
^][1,2,3]бензотриазин-4,9-дион вводят в дневной дозе от 1 до 200 мг эквивалентов свободного основания.
6. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного
25 ингредиента 8-циклопропил-3-[2-(3-фторфенил)этил]-7,8-дигидро-3//-
[1,3]оксазино[6,5-^][1,2,3]бензотриазин-4,9-дион или его соль присоединения с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием в ассоциации с ингибитором ацетилхолинэстеразы по любому из п.п. 1-5, в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами.
7. Фармацевтическая композиция по п. 6 для применения в лечении когнитивных расстройств, связанных со старением мозга и нейродегенеративными болезнями.
8. Фармацевтическая композиция по п. 7 для применения в лечении когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера.
9. Фармацевтическая композиция по п. 8 для применения в лечении когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера у пациентов с симптомами депрессии.
10. Применение ассоциации по любому из п.п. 1-5 в изготовлении лекарственного средства для лечения когнитивных расстройств, связанных со старением мозга и нейродегенеративными болезнями.
11. Применение ассоциации по п. 10 в изготовлении лекарственного средства для лечения когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера.
12. Применение ассоциации по п. 11 в изготовлении лекарственного средства для лечения когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера у пациентов с симптомами депрессии.
13. Ассоциация по любому из п. п. 1-5 для лечения когнитивных расстройств, связанных со старением мозга и нейродегенеративными болезнями.
14. Ассоциация по п. 13 для лечения когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера.
15. Ассоциация по п. 14 для лечения когнитивных расстройств, связанных с болезнью Альцгеймера у пациентов с симптомами депрессии.
7.
а С и 5Й
" Q
а о о
и 5
и С
•-Н о
и "
о и
" ва о о
Я Я
п о
Пиша Пищи нет
Контекст-зависимый серийный тест на различение
последовательных
различия. 2 разных контекста
Лечение
1 час
Комната С
Введение соединений или носи гели
2 мин
6 мин
Комната А Комната В
Отверстие с приманкой
6 мин
Комната А
Отверстие с ггоиманкой
Задержка для запоминания
Отсек животных
24 ч
Лечение
1 час
Комната С
Введение соединений или носителя
Тест
6 мин
Комната А
Правильный ответ
Ошибка Перекрыв, ошет
*. **и *** . р <- Q og- р < о,01 и р < 0,001 соответственно vs. носитель-носитель; + и +++ ; р < 0,05 и р < 0,001 vs. донепезил.
50 -40 " 30 -20 -10 -о - -| ю -
20 -30 -
40 носитель
Донепезил 0,1 м7кг
D1 +
0Q СО
? ==
О н
в) с
со с,
: р < 0,05; р < 0,01 и р < 0,001 соответственно vs. носитель-носитель;
: р < 0,05 и р < 0,001 vs. донепезил.
* : р < 0,05 : ривастигмин + Соединение S против носителя; ф : р < 0,05 ривастигмин против носителя; а : р < 0,05 Соединение S против носителя.
Носитель -¦- 0,03 мг/кг ривастигмина 3 мг/кг соединения S
Комбинация: 3 мг/кг соединения S + 0,03 мг/кг ривастигмина
(19)
(19)
(19)