[RU]

Объектом технического решения по данному техническому решению являются фармацевтические композиции (варианты) на основе стабилизированного раствора двух активных веществ, стабилизированный раствор двух активных веществ содержит как первое активное вещество низкомолекулярную гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль, причем молекулярная масса такой кислоты или соли может быть от 100 до 400 кДа или как вариант от 400 кДа до 2,5 млн Да, как второе активное вещество декаметоксин или его растворимую в воде соль, стабилизатор, фармацевтически приемлемую соль, способную к растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков, или смесь таких солей, при этом стабилизатор имеет способность образовывать одновременно с гиалуроновой кислотой и/или ее фармацевтически приемлемой солью и с декаметоксином или его растворимой в воде солью растворимые в воде соединения, а также содержит по крайней мере одну фармацевтически приемлемую добавку.

(57) Реферат / Формула:

Объектом технического решения по данному техническому решению являются фармацевтические композиции (варианты) на основе стабилизированного раствора двух активных веществ, стабилизированный раствор двух активных веществ содержит как первое активное вещество низкомолекулярную гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль, причем молекулярная масса такой кислоты или соли может быть от 100 до 400 кДа или как вариант от 400 кДа до 2,5 млн Да, как второе активное вещество декаметоксин или его растворимую в воде соль, стабилизатор, фармацевтически приемлемую соль, способную к растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков, или смесь таких солей, при этом стабилизатор имеет способность образовывать одновременно с гиалуроновой кислотой и/или ее фармацевтически приемлемой солью и с декаметоксином или его растворимой в воде солью растворимые в воде соединения, а также содержит по крайней мере одну фармацевтически приемлемую добавку.

---

(12) МЕЖДУНАРОДНАЯ ЗАЯВКА , ОПУБЛИКОВАННАЯ
В СООТВЕТСТВИИ
ДОГОВОРОМ О ПАТЕНТНОЙ КООПЕРАЦИИ (РСТ)
(19) Всемирная Организация Интеллектуальной Собственности
Международное бюро
(43) Дата международной публикации 03 декабря 2015 (03.12.2015)
W 1P O I РСТ
(10) Номер международной публикации
WO 2015/183230 А1
(51) Международная патентная классификация :
А 61К 9/08 (2006.01) А 61К 31/14 (2006.01)
А 61К31/728 (2006.01) А 61К 47/02 (2006.01)
(21) Номер международной заявки : PCT/UA2015/000047
(22) Дата международной
подачи :
02 июня 2015 (02.06.2015)
Русский
(25) Язык подачи :
(26) Язык публикации :
(30)
Данные о приоритете :
а 2014 05946 30 мая 2014 (30.05.2014)
и 2014 06108 03 июня 2014 (03.06.2014)
а 2015 05330 29 мая 2015 (29.05.2015)
(72) (71)
а 2015 05327 29 мая 2015 (29.05.2015)
Изобретатель ;и
Заявитель : ДЕРКАЧ , Наталия Мыколаивна (DER-КАСН , Nataliia Mykolaivna) [UA/UA]; ул. Клинична , 23-25-173, Киев, 03 110, Kiev (UA).
(74)
Агент : ЯКОБЧУК , Олена Мыколаивна (IAKOBCHUK, Olena Mykolaivna); ул. Курска , 12-613, Киев, 03049, Kiev (UA).
(81)
Указанные государства (если не указано иначе, для каждого вида национальной охраны) : А Е, AG, AL, AM,
АО, AT, AU, AZ, ВA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
Указанные государства (если не указано иначе, для каждого вида региональной охраны): ARIPO (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW), евразийский (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM), европейский патент (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR), OAPI (BF,BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Опубликована :
- с отчётом о международном поиске (статья 21.3)
- до истечения срока для изменения формулы изобретения и с повторной публикацией в случае получения изменений (правило 48.2(h))
"?)
(54) Title: COMPOSITION BASED ON A STABILIZED SOLUTION OF ACTIVE INGREDIENTS
(54) Название изобретения : КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ СТАБИЛИЗИРОВАННОГО РАСТВОРА АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
(57) Abstract: This invention relates to pharmaceutical compositions (variants) based on a stabilized solution of two active ingredients, said stabilized solution of two active ingredients comprising, as first active ingredient, low-molecular weight hyaluronic acid and/or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein the molecular mass of said acid or salt is from 100 kDa to 400 kDa or, in a variant, from 400 kDato 2.5 MDa, and, as second active ingredient, Decametoxin or a water-soluble salt thereof, and a stabilizer in the form of a pharmaceutically acceptable salt that is capable of dissolving in water and dissociating in aqueous solutions into metal cations and acid residue anions, or a mixture of such salts, wherein the stabilizer is capable of forming water-soluble compounds with hyaluronic acid and/or a pharmaceutic -ally acceptable salt thereof and Decametoxin or a water-soluble salt thereof, simultaneously. The stabilized solution further contains at least one pharmaceutically acceptable additive.
(57) Реферат: Объектом технического решения поданному техническому решению являются фармацевтические композиции (варианты ) на основе стабилизированного раствора двух активных веществ , стабилизированный раствор двух активных веществ содержит , как первое активное вещество , низкомолекулярную гиалуроновую кислоту и / или ее фармацевтически приемлемую соль, причем молекулярная масса такой кислоты или соли может быть от 100 кДа до 400 кДа или как вариант с молдекулярною массой от 400кд до 2,5 млнДа ,, как второе активное вещество декаметоксин или его растворимую в воде соль , стабилизатор , фармацевтически приемлемой солью , способной к растворения в воде и диссоциации в водных растворах н а катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью таких солей , при этом стабилизатор имеет способность образовывать
одновременно с гиалуроновой кислотой и / или ее фармацевтически приемлемой солью и с декаметоксином или
его растворимой воде солью растворимые в воде соединения , а также содержит по крайней мере одну
фармацевтически приемлемую добавку .
КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ СТАБИЛИЗИРОВАННОГО РАСТВОРА АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ
Область техники
Техническое решение относится к области медицины , в частности к композициям , которые обладают противовоспалительным , антисептическим , регенерирующим и увлажняющим действием и могут быть использованы для лечения поражений кожи и органов , и в частности , имеют терапевтическую активность в отношении подавления спаечного процесса .
Уровень техники
Спайки является патологическим сращиванием тканей и образованные фрагментами рубцовой ткани , появляются в нетипичных местах из-за повреждения , нанесенных хирургической травмой , инфекцией , ишемией или действием посторонних материалов . Спайки могут иметь форму тонких полосок ткани , похожих на полиэтиленовую пленку , или форму толстых волокнистых полос . Процесс образования спаек называется спаечным процессом .
Спайки образуются в результате воспалительного процесса , который может возникать при заболеваниях внутренних органов , после хирургических операций , при инфекциях и травмах . Хотя спайки могут возникать между различными органами , чаще всего это происходит между петлями кишечника , маточными трубами , яичниками , маткой , мочевым пузырем и сердцем .
Спайки в брюшной полости - распространенное осложнение после хирургической операции , которое наблюдается у 93% людей , перенесших операцию на органах таза или брюшной полости . Брюшные спайки также встречаются в 10,4% людей , которые никогда не оказывались на хирургическом столе .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 В большинстве случаев спайки безболезненны и не вызывают осложнений .
Тем не менее , спайки являются причиной 60-70% случаев непроходимости
тонкого кишечника взрослых и способствует развитию хронической боли в
области таза .
Спайки обычно начинают формироваться в течение первых нескольких дней после операции , но они могут не вызывать никаких симптомов в течение нескольких месяцев или даже лет. По мере того , как рубцовая ткань начинает ограничивать движение по тонкому кишечнику , все больше усложняется передвижения пищи по пищеварительной системе , повышается вероятность возникновения непроходимости кишечнике .
В крайних случаях , спайки могут образовывать фиброзные полосы вокруг
сегментов кишки . Это ограничивает приток крови и приводит к отмиранию тканей .
Рубцовая ткань может образоваться внутри соединительнотканной сумки , окружающей сердце (перикард ), мешая тем самым его нормальной работе .
Различные инфекции , такие как ревматизм , приводят к образованию спаек на
клапанах сердца и снижение эффективности его функций .
Спайки в малом тазу могут образовываться в органах малого таза , таких как матка , яичники , маточные трубы или мочевой пузырь . Как правило , они возникают после операции . Воспалительные заболевания органов таза и осложнения после
инфекций (например , венерических заболеваний ) часто приводит к образованию
спаек в маточных трубах , по которым яйцеклетки поступают в матку для оплодотворения . Спайки маточных труб могут привести к бесплодию и повышают
риск внематочной беременности .
Очень часто спаечный процесс после гинекологических операций вообще не имеет клинических проявлений , однако учитывать наличие спаек необходимо , так как возможны ранние или отсроченные осложнения , включая бесплодие , тазовую боль и кишечную непроходимость , сопровождающиеся снижением качества жизни . Это часто требует повторной госпитализации и дополнительного более сложного хирургического вмешательства , что значительно увеличивает расходы на лечение .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
Склонность к образованию спаек является индивидуальной особенностью каждого человека . Различные факторы , такие как питание , хронические заболевания , сахарный диабет и хронические инфекционные процессы ослабляют функции лейкоцитов и фибринолитическую активность , потенциально усиливают формирование спаек . Доказано также , что частота развития послеоперационных спаек увеличивается с возрастом пациента , числом предыдущих операций и объемом хирургического вмешательства . Любая операция в брюшной полости может привести к формированию сращений даже
при минимальной травме серозной оболочки , что приводит к склеиванию почти
всех структур . Установлено , что спайки формируются у 60-90% женщин , которые претерпели радикальные гинекологических операций . Некоторые исследования показывают , что женщины , которым была проведена хотя б ы одна операция , подвергаются повторной операции с 5% вероятностью . Такие женщины имеют большую вероятность быть госпитализированными через спаечную болезнь в последующие 10 лет . Таким образом , спайки являются причиной госпитализации 20% пациенток .
Потребность в уменьшении развития послеоперационных спаек очевидна . Например , ежегодно в США выполняются более 440000 операций абдоминального и тазового адгезиолиза , что создают дополнительные риски для пациентов .
В поиске эффективных методов профилактики спаек предложено много клинических техник и противоспайковых препаратов , которые должны предотвращать образование первичных и вторичных послеоперационных спаек . Основным подходом к профилактике спаек включают соответствующую хирургическую технику с ограничением травмы внутрибрюшных структур и
применения противоспайковых препаратов , уменьшающих спайкообразование .
Противоспайковые препараты могут быть направлены против различных
факторов воспалительного процесса (например , инфекции , эндотоксинов ,
экссудата ) и / или спайкообразования (например , гемокоагуляции , отложения фибрина , фибробластной активности и пролиферации ). Любой противоспайковый
препарат должен действовать специфически против факторов процесса
образования спаек , но не против процесса нормального заживления ран .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
В литературе описаны исследования по воздействию на процесс
спайкообразования противоспайковых препаратов следующих классов :
нестероидных противовоспалительных препаратов , глюкокортикоидных и
антигистаминных препаратов , прогестерон / эстрогенных препаратов ,
антикоагулянтов , фибринолитических препаратов , антибиотиков . Данные
клинических испытаний и исследований на животных показывают , что упомянутые
противоспайковые препараты не решают проблему образования
послеоперационных спаек - их использование ограничивает их недостаточная эффективность , а также в некоторых случаях их недостаточная безопасность (наличие нежелательных побочных эффектов ), присутствие воспалительных процессов , возможно появление инфекций , что приводит к побочным еффектам и замедлению заживления ран .
Поэтому авторами были предложены стабилизированный раствор и фармацевтические композиции на его основе , который может проявлять
противоспайковое действие , а также вещества фармацевтической композиции ,
которые оказывают и ранозаживляющее и противовоспалительное , дезинфицирующее действие . Как вещество , которое имеет противоспайковое
действие выбрана гиалуроновая кислота и / или ее фармацевтически
приемлемые соли .
Гиалуроновая кислота (Г К) представляет собой природный гликозаминогликан - основной компонент внеклеточного вещества
соединительной ткани . ГК является биосовместимым , неиммуногенным ,
нетоксичным и естественно биоабсорбуемым веществом . Она имеет отрицательный заряд при физиологических значениях рН и легко растворима в воде , естественная ГК имеет молекулярную массу от 5 тыс до 20 млн Да. Средняя
молекулярная масса ГК, содержащейся в синовиальной жидкости у человека
составляет примерно 3 млн Да. ГК в тканях серозной оболочки и обеспечивает определенную защиту от высыхания и других типов повреждения серозной оболочки . ГК содержится также в коже , где участвует в процессе регенерации
ткани . При чрезмерном воздействии на кожу ультрафиолета , происходит ее
воспаление ("солнечный ожог"), при этом в клетках дермы прекращается синтез ГК и увеличивается скорость ее распада .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
Известен препарат для профилактики спайкообразования под названием Separacoat (производитель Genzyme, США), который представляет собой раствор 0,04% ГК в сочетании с фосфатным буфером (статья Н .Л .Матвеев , Д .Ю .Арутюнян внутрибрюшные спайки - недооцениваемая проблема .Я-Эндоскопическая хирургия .-2007.-Ns 5.-С.60-69.). Он применялся интраоперационно , к диссекции , для защиты брюшных поверхностей от непрямой хирургической травмы , а не послеоперационно , для разделения поверхностей после их травматизации . Исследования показали неэффективность этого препарата . По результатам клинических испытаний он не был одобрен Управлением по контролю за качеством пищевых продуктов и лекарственных препаратов США (FDA) и был снят с производства .
Известный препарат Интергель для предотвращения спаек (Intergel solution - производитель Lifecore Biomedical, Inc. Chaska, MN), который содержит раствор 5% гиалуроната железа . В предыдущих исследованиях было показано , что он уменьшает количество , тяжесть и распространенность спаек в хирургии брюшной полости , однако , использование этого препарата при хирургических операциях , во время которых проводилось вскрытие просвета кишечника , привело к неприемлемо высокой частоте послеоперационных осложнений . В 2003 году препарат был выведен из клинического применения в связи со случаями позднего
послеоперационной боли у больных .
Из описания к патенту RU 2233164 (опубликованного 27.07.2004) известен способ профилактики развития послеоперационных спаек брюшной полости при абдоминальных операциях , заключается в нанесении на операционную рану
пленки на основе химически модифицированной гиалуроновой кислоты , а именно гиалуроновой кислоты , химически связанной с 5 -аминосалициловои кислотой .
Однако , при применении препаратов на основе гиалуроновой кислоты
возникает потребность в противовоспалительном , антимикробном и
ранозаживляющем действии , что значительно расширит их применения и
удобство их применения при широком спектре воспалений и ран , особенно при
операциях , вагинальных инфекциях и родовой деятельности , и тому подобное . Для этого использовали вместе с препаратом на основе гиалроновой кислоты препараты , которые осуществляют противовоспалительное ранозаживляющее
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 действие . Попытки создать один препарат на основе гиалуроновой кислоты ,
который будет проявлять и противовоспалительное , ранозаживляющее действие ,
привели к созданию патентов , описаны ниже .
Среди потивовоспалительных препаратов , содержащих гиалуроновую кислоту является RU 2438697 (опубликовано 10.01 .2012) известен комплексный противовирусный препарат для наружного применения при лечении герпесвирусной инфекции , содержащий рекомбинантный интерферон , гиалуроновую кислоту , хитозана сукцинат , экстракт корня солодки , оксид цинка , лидокаин или дикаин , полиэтиленоксид , ланолин безводный , вазелин , глицерин , воду дистиллированную . Препарат обеспечивает пролонгированное противовоспалительное , анестезирующее , ранозаживляющее действие на герпетические поражения слизистых оболочек и кожи , в том числе генитального герпеса , офтальмогерпеса и лишая .
Из заявки на изобретение RU 2003101 393 (опубликовано 27.06.2004) известна фармацевтическая композиция для лечения воспаления слизистой оболочки , стоматита и синдрома Бехчета , содержащий в качестве активных ингредиентов эффективные дозы гиалуроновой кислоты , глицирретиновои кислоты и поливинилпирролидона в смеси с эксципиентами и адъювантами , пригодными для местного применения и дополнительно содержит
антибактериальные агенты / дезинфицирующие средства и применение такой
композиции для изготовления лекарств для местного лечения воспалительных состояний слизистой оболочки полости рта и выстилки ротоглотки и пищевода , в
частности , воспаление слизистой оболочки и стоматита , а также слизистой оболочки влагалища и прямой кишки (включающих , но не ограничиваются , вестибулит и синдром Бехчета ) .
Из описания к патенту RU 2195262 (опубликовано 27.12.2002) известен
фармакологическое средство на основе гиалуроновой кислоты , обладает
антимикробным , ранозаживляющим и противовоспалительным действием . Средство содержит гиалуроновую кислоту , тримекаин и полиэтиленоксид ,
представляет собой бесцветную однородную гелеобразную массу , легко
растворимый в физиологическом растворе и в воде . Фармакологическое средство
используют для лечения инфекционно -воспалительных заболеваний , в том числе
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 местных и общих гнойно - воспалительных процессов , термических и химических
ожогов , трофических язв при хронической венозной недостаточности , лучевых
поражений кожи , трещин , ссадин , а также для лечения ран различной этиологии .
Из описания к патенту RU 2501 566 (опубликовано 20.12.201 3) известна
фармацевтическая композиция для профилактики образования
послеоперационных шрамов , спаек и келоидов в связи с хирургическим вмешательством , включая биологически активный пептид , содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56 и гиалуроновую кислоту с
высокой молекулярной массой или его фармацевтически приемлемую соль .
Как вещество , обладающее противовоспалительным , антимикробным ,
бактерицидным действием выбран декаметоксин .
Декаметоксин - [ 1,10-декаметилен -бис(Ы,N-диметилметоксикарбонил -
метил )амония дихлорид ] обладает бактерицидной активностью в отношении
грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов . Соединение
проявляет четкое бактерицидное действие на стафилококки , стрептококки , синегнойную палочку , капсульные бактерии и фунгицидное действие на дрожжи ,
дрожжеподобные грибы , аспергиллы , плесневые грибы . Также декаметоксин
повышает чувствительность бактерий к антибиотикам .
Известно применение декаметоксина в виде раствора местно и
эндобронхиально при гнойных и грибковых поражениях кожи (абсцессы , гнойные
раны , кандидоз и др.), при проктите , гнойных конъюнктивитах , гингивитах , периодонтитах , тонзиллитах , отитах и других гнойных процессах . Эндобронхиально его назначают при заболеваниях легких .
Кроме того , декаметоксин используют как антисептическое средство для обработки рук медицинского персонала и операционного поля , а также для обеззараживания шовного и хирургических материалов , резиновых перчаток , медицинских инструментов , приборов и оборудования и з металла , стекла , пластмассы , резины , химической стерилизации и консервации костно -сухожильных трансплантатов .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 Декаметоксин - это поверхностно -активное вещество (ПАВ), действие
которого обусловлено нарушением целостности клеточной стенки . Клеточная
стенка микроорганизмов состоит из коротких липидных цепочек , которые быстро
разрушаются под действием декаметоксина . Клеточная стенка человеческой
клетки состоит и з длинных липидных цепочек , на которые молекула
декаметоксина не действует .
Ранее , до представленного нами технического ршення , было невозможно использование препаратов с содержанием гиалуроновой кислоты с декаметоксином , потому что декаметоксин является катионной ПАВ , поэтому о н не совместим с мылом и другими анионными соединениями , в частности , в растворе с гиалуроновой кислотой - так декаметоксин , за счет четвертичных аминогрупп имеет положительный заряд , а гиалуроновая кислота , за счет
карбоксильных групп , заряжена отрицательно , то при их взаимодействии в
растворе образуется нерастворимый в воде осадок . Это было основной проблемой , почему не применяли вместе в одном препарате эти 2 вещества , которые в сочетании могут давать эффективное лечение спаечных процессов , вагинальных инфекций и осуществлять эффективное ранозаживляющее и противовоспалительное действие .
Даже в инструкции к препаратам , которые содержат гиалуроновую кислоту часто пишут о невозможности их совместного применения с четвертичными аминами , к которым относится декаметоксин . И поэтому в литературе отсутствует информация по применению терапевтических средств , содержащих в растворе одновременно декаметоксин и гиалуроновую кислоту .
Суть технического решения
Задачей представленного технического решения является создание стабилизированного раствора , содержащего гиалуроновую кислоту и / или ее фармацевтически приемлемые соли и декаметоксин и / или его растворимые в воде соли (далее декаметоксин ) и является стабильным со временем и может быть использован для приготовления препаратов широкого спектра действия в
жидкой или мягкой форме . И способ получения такого стабилизированного
раствора .
Задачей технического решения является создание нового препарата
фармацевтической композиции широкого спектра действия , которая содержит
стабилизированный раствор гиалуроновой кислоты сдекаметоксином .
Еще одной задачей представленного технического решения является создание новой фармацевтической композиции , которая сочетает возможность ее использования в качестве лекарственного средства с терапевтической активностью , которая также имеет противовоспалительное , антисептическое , регенерирующее и увлажняющее действие .
Дополнительной задачей представленного технического решения является повышение эффективности профилактики и терапии спаечной болезни и ее последствий , повышения качества жизни после переноса операций , угнетение спаечного процесса , избегание обезвоживания органов с одновременным противовоспалительным и ранозаживляющим действием . В результате раны заживают быстрее без спаечных процессов и без обострений воспалительных процессов .
Еще одной задачей было повышение эффективности лечения вагинальных
инфекций , для уничтожения патогенной флоры в гинекологии , стоматологии , урологии , проктологии , офтальмологии , дерматовенерологии , при этом противовоспалительное действие является пролонгированным , дополнительным действием является защита слизистых оболочек от пересыхания , увлажнение их, стимуляция и х регенерации , снижение количества случаев травматизма мягких тканей в частности половых путей рожениц , уменьшение продолжительности родов и снижение частоты оперативных родов , а также при операциях на шее ,
когда есть высокий риск формирования рубца через все слои шеи .
Также задачей является повышение эффективности процесса
ранозаживления с одновременным бактерицидным , антимикробным действием .
Другой задачей является увеличение ассортимента композиций в фармацевтически приемлемой лекарственной форме на основе указанного стабилизированного раствора .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 Одна из поставленных задач достигается созданием стабилизированного
раствора на основе гиалуроновой кислоты и / или е е фармацевтически
приемлемых солей (далее ГК) и декаметоксина путем подбора концентраций и
стабилизаторов и создание специальных условий способа получения стабилизированного раствора и фармацевтических композиций на его основе в жидкой или в мягкой , либо форме без образования осадка в длительной
стабильной форме . Причем раствор содержит одновременно ГК и декаметоксин в
жидкой форме и является стабильным с течением временем .
В результате исследований неожиданно было обнаружено , что раствор на
основе декаметоксина и Г К может быть создан посредством введения
стабилизатора .
Стабилизатором является фармацевтически приемлемая соль , которая
способна к растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков .
Механизмом стабилизации вероятно является экранирование катионов и
анионов стабилизатора карбоксильных групп гиалуроновой кислоты и аминогрупп
декаметоксина соответственно .
Эффективными стабилизаторами , в частности , является нетоксичные и
малотоксичные соли неорганических кислот , соли органических моно - и
дикарбоновых кислот и тому подобное .
В частности , стабилизаторами является хлорид натрия , натрия сукцинат , лактат натрия , хлорид цинка , сульфат цинка .
Таким образом , объектом изобретения является стабилизированный раствор на основе двух активных веществ , имеет терапевтическую активность , которая отличается тем , что дополнительно содержит стабилизатор , как первое активное вещество используют гиалуроновую кислоту и / или ее фармацевтически приемлемую соль , как второе активное вещество используют декаметоксин и / или
его растворимую в воде соль , причем стабилизатор является фармацевтически
приемлемой солью , которая способна к растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
таких солей , при этом стабилизатор имеет способность образовывать одновременно с гиалуроновой кислотой и / или ее фармацевтически приемлемой
солью и с декаметоксином или его растворимой в воде солью растворимые в воде соединения .
Преимущественно , стабилизатор является нетоксичной или малотоксичной солью неорганических кислот , органических моно - и дикарбоновых кислот или смесью таких солей , в частности стабилизатором может быть хлорид натрия , сукцинат натрия , лактат натрия , хлорид цинка , сульфат цинка или любая их смесь .
Необязательно , стабилизированный раствор может дополнительно
содержать другие фармацевтически приемлемые добавки , в частности для поддержания рН раствора на постоянном уровне , например органические моно -или дикарбоновые кислоты , неорганические кислоты , щелочи , в частности может содержать органическую кислоту , соль которой входит в его состав в качестве стабилизатора , в частности для корректировки р Н может быть использовано вещество и з ряда соляная кислота , серная кислота , азотная кислота , фосфорная кислота , уксусная кислота , пропионовая кислота , гидроксиуксусная кислота , молочная кислота , пировиноградная кислота , щавелевая кислота , малоновая кислота , янтарная кислота , малеиновая кислота , фумаровая кислота , винная
кислота , лимонная кислота , аскорбиновая кислота , уксуснокислый аммоний ,
раствор аммиака , гидроксид щелочноземельного металла , гидроксид щелочного
металла , натрия карбонат , натрия гидрокарбонат , натрия фосфат .
приемлемую добавку с содержанием от 1 до 60 мг / мл .
Преимущественно содержание компонентов может быть представлено табличкой ниже мг / мл
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
Преимущественно , стабилизированный раствор содержит сукцинат натрия ,
в качестве стабилизатора , и дополнительно янтарную кислоту .
Преимущественно , стабилизированный раствор содержит лактат натрия , в
качестве стабилизатора , и дополнительно молочную кислоту .
Также стабилизированный раствор может иметь такой состав мг / мл:
гиалуроновая кислота и / или ее фармацевтически
приемлемая соль с молекуляною массой 400 кДадо 2,5 млн .Да 5
сукцинат натрия 16
янтарная кислота 0,05
натрия хлорид 1,2
декаметоксин и / или его растворимая в воде соль 0,2.
вода
остальное до 1 мл
Другим объектом изобретения является способ получения стабилизированного раствора , в котором в воде растворяют одно из активных веществ и стабилизатор , и затем в образованном растворе при перемешивании растворяют второе активное вещество до ее полного растворения , причем как активные вещества используют гиалуроновую кислоту и / или ее фармацевтически приемлемую соль и декаметоксин и / или его растворимую в
воде соль , а стабилизатор является фармацевтически приемлемой солью ,
которая способна к растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью таких солей , при этом стабилизатор имеет способность образовывать одновременно с
гиалуроновой кислотой и / или ее фармацевтически приемлемой солью и с
декаметоксином или его растворимой в воде солью растворимые в воде соединения .
Исходя из того , что при взаимодействии в растворе нестабилизированных
декаметоксина и гиалуроновой кислоты образуется нерастворимый в воде осадок ,
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
то стабилизатор должен прилагаться к смеси раньше , чем такой осадок сможет образоваться .
Итак, объектом изобретения является способ получения стабилизированного раствора на основе декаметоксина и гиалуроновой кислоты , в котором к предварительно образованному раствору декаметоксина со стабилизатором в воде добавляют Г К или с предварительно образованного раствора ГК со стабилизатором добавляют декаметоксин , причем стабилизатор выбран из ряда фармацевтически приемлемых солей , которые не образуют нерастворимый в воде осадок , а только растворимые в воде соединения .
Преимущественно , способ получения стабилизированного раствора на основе декаметоксина и гиалуроновой кислоты заключается в том , что в растворе стабилизатора растворяют декаметоксин , после чего в образованном растворе растворяют гиалуроновую кислоту или ее соль , или наоборот , в растворе декаметоксина растворяют стабилизатор , после чего в образованном растворе растворяют гиалуроновую кислоту или ее соль .
Преимущественно , способ получения стабилизированного раствора на
основе декаметоксина и гиалуроновой кислоты заключается в том , что в растворе стабилизатора растворяют гиалуроновую кислоту или ее соль , после чего в образованном растворе растворяют декаметоксин , или наоборот , в растворе гиалуроновой кислоты или ее соли растворяют стабилизатор , после чего в образованном растворе растворяют декаметоксин .
Преимущественно , в способе получения стабилизированного раствора на
основе декаметоксина и гиалуроновой кислоты рН стабилизированного раствора декаметоксина и гиалуроновой кислоты дополнительно доводят до желаемой величины путем добавления кислоты или основания .
Преимущественно , в способе получения стабилизированного раствора на
основе декаметоксина и гиалуроновой кислоты указанный раствор дополнительно стерилизуют автоклавированием .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
Способ получения стабилизированного раствора на основе декаметоксина
и гиалуроновой кислоты проверено для широких пределов соотношений
компонентов , в частности (на 100 мл раствора ):
гиалуроновая кислота - от 1 м г до 50 г,
декаметоксин - от 0,01 мгдо 10 г,
стабилизатор - от 1 мкг д о 60 г.
Декаметоксин может быть применен в виде основания или хлорида .
На основе стабилизированного раствора на основе декаметоксина и ГК могут быть получены лекарственные препараты путем добавления к стабилизированному раствору применяемых в медицинской практике вспомогательных фармацевтических веществ для перевода его в желаемую лекарственную форму от жидкой до мягкой .
Желаемые лекарственные формы , в частности , включают раствор , аэрозоль , суспензию , сироп , капли , раствор для инъекций , аппликацию , крем , гель , мазь , пасту , линимент , свечу , но не ограничиваются ими .
Сам стабилизированный раствор также может выступать фармацевтической композицией .
Стабилизированный раствор и фармацевтические композиции могут
применяться при любых операциях , где есть риск возникновения послеоперационного спаечного процесса , в частности :
• брюшная полость ;
• оболочки сухожилий ;
• суставы ;
• плевральная полость ;
• полость перикарда ;
• оболочки спинного и головного мозга ;
• полость среднего уха ;
• оболочки яичка
• нервные стволы .
Кроме того , можно использовать при операциях , где есть риск спаивания мягких тканей . Например , при операциях на шее , когда есть высокий риск формирования рубца через все слои шеи .
Стабилизированный раствор и фармацевтические композиции на его основе предотвращают образование спаек между органами , таким образом предотвращают развитие спаечного процесса после операций , снимают воспаление , регенерируют поврежденные слизистые оболочки и предотвращают развитие постоперационных инфекций .
С противовоспалительной целью стабилизированный раствор и фармацевтические композиции настоящего изобретения могут использоваться
для уничтожения патогенной флоры в гинекологии , стоматологии , урологии ,
проктологии , офтальмологии , дерматовенерологии , при этом
противовоспалительное действие является пролонгированным , дополнительной действием является защита слизистых оболочек от пересыхания , увлажнение их, стимуляция их регенерации .
Другими объектами изобретения является фармацевтические композиции на основе стабилизированного раствора , которые решают другие проставлены задачи .
Было замечено , что из -за того , что ГК может иметь достаточно широкий
спектр значений молекулярной массы , она проявляет различные свойства . Нами
было разграничено 2 вида ГК: 1. - это ГК с молекулярной массой до 400 кДа и 2. -ГК от 401 кДа до 2500000 Да. Первая категория при проведенных исследованиях , приведеных ниже вместе с декаметоксином предопределяла проникните вещества к клеткам ткани , и проведения эффективного ранозаживляющего
действия с одновременным уничтожением патогенной флоры , дезинфицирующим действием .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 Поэтому еще одним объектом , который решает поставленную выше задачу ,
а именно : повышение эффективности лечения вагинальных инфекций , для
уничтожения патогенной флоры в гинекологии , стоматологии , урологии ,
проктологии , офтальмологии , дерматовенерологии , с обеспечением
пролонгированного противовоспалительного действия по обеспечению такого дополнительного действия как защиту слизистых оболочек от пересыхания , увлажнение их, стимуляция их регенерации , снижение количества случаев травматизма мягких тканей в частности половых путей родильниц , уменьшение продолжительности родов и снижение частоты оперативных родов , а также при операциях на шее , когда есть высокий риск формирования рубца через все слои шеи ; повышение эффективности процесса ранозаживления с одновременным
бактерицидным , антимикробным действием ,
является
фармацевтическая композиция на основе стабилизированного раствора
двух активных веществ , которая отличается тем , что содержит , как первое активное вещество , высокомолекулярное гиалуроновую кислоту и / или ее фармацевтически приемлемую соль (ВГК ), причем молекулярная масса такой кислоты или соли может быть от 400 кДа до 2,5 млн .Да, как второе активное вещество , содержит декаметоксин и / или его растворимую в воде соль ,
стабилизатор , являющийся фармацевтически приемлемой солью , которая
способна к растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью таких солей , при этом
стабилизатор имеет способность образовывать одновременно с гиалуроновой кислотой и / или ее фармацевтически приемлемой солью и с декаметоксином или
его растворимой в воде солью растворимые в воде соединения а также содержит
по крайней мере одну фармацевтически приемлемую добавку .
Преимущественно фармацевтическая композиция содержит вещества в
таком соотношении
декаметоксин и / или его растворимая в воде соль
0,01-10
стабилизатор
1-60
фармацевтически приемлемая добавка
1-60
вода
Остальное до мл
Техническим решением является также композиция , содержащая высокомолекулярную гиалуроновую кислоту с молекулярной массой от 400 кДа до 2500000 Да, декаметоксин , сукцинат натрия , янтарную кислоту , натрия хлорид и воду , с последующим содержанием компонентов , в м г / мл :
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5млн Да 2-8
сукцинат натрия янтарная кислота хлорид натрия декаметоксин вода
11-22 0,02-0,08 0,8-2 0,05-0,5 остальное до 1 мл
Кроме того , по техническому решению преимущественно , стабилизированный раствор содержит высокомолекулярную гиалуроновую кислоту с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5 млн Да, декаметоксин , сукцинат натрия , янтарную кислоту , натрия хлорид и воду , с последующим содержанием компонентов , в мг/ мл:
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5 млн Да 5
сукцинат натрия янтарная кислота хлорид натрия декаметоксин
0,05 1,2 0,2
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
вода остальное до 1 мл
Кроме того , по техническому решению преимущественно , стабилизированный раствор применяют для подавления спаечного процесса .
Кроме того , по техническому решению преимущественно ,
стабилизированный раствор применяют для защиты органов от образования
спаек и избегания обезвоживания органов .
Также как фармацевтически приемлемую добавку содержит по крайней мере один используемый вспомогательный фармацевтический компонент для
перевода ее в лекарственную форму от мягкой до жидкой , какой может быть
аэрозоль , суспензия , сироп , капли , раствор для инъекций , крем , гель , мазь , паста , линимент , раствор для наружного применения , раствор для приема внутрь .
Также как фармацевтически приемлемую добавку содержит по крайней мере один вспомогательный фармацевтический компонент из ряда регулятор
вязкости , консервант , антиоксидант , причем как регулятор вязкости содержит
вещество из ряда производное алкилцелюлозы , производное
гидроксиалкилцелюлозы , метилцеллюлоза , гидроксипропилметилцеллюлоза ,
гидроксибутилцелюлоза , карбоксиметилцеллюлоза , крахмал , ксантановая камедь
, гуаровая камедь , полиакриловые кислоты и и х соли , сополимеры метакрилата , полиэтиленоксид , полипропиленоксид , производные хитина , крахмал , пектин , альгиновая кислота , циклодекстрин , агар -агар , каррагинан ; как консервант содержит вещество с ряда хлорид лауралкония , хлорид бензалкония , хлорид
бензододецинию , хлорид цетилперидина , цетримид , домифен бромид , бензиловый спирт , хлорбутанол , о крезол , хлорокрезол , фенол , этилфениловый
спирт , бензойная кислота , натрия бензоат , сорбиновая кислота , калиевая соль
сорбиновой кислоты , парааминобензойная кислота , метилпарагидроксибензоат , пропилпарагидроксибензоат , как антиоксидант содержит вещество с ряда натрий метабисульфит , натрия бисульфит , натрия сульфит , натрий тиосульфат , аскорбиновая кислота .
Кроме того , по техническому решению преимущественно ,
фармацевтическая композиция имеет такую лекарственную форму как гель , как
активный компонент содержит стабилизированный раствор , содержащий
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
высокомолекулярную гиалуроновую кислоту с молекулярной массой от 400 кДа до
2,5 млн Да, декаметоксин , лактат натрия , молочную кислоту и воду, как
вспомогательный фармацевтический компонент содержит глицерин и
гидроксипропилметилцеллюлозу , с последующим содержанием компонентов , в мг
/ мл:
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5 млн Да 2-8
лактат натрия 0,5-3
молочная кислота 0,1-1
декаметоксин 0,05-0,5
глицерин 20-50
гидроксипропилметилцеллюлоза 15-50
вода остальное до 1 мл
Кроме того , по техническому решению преимущественно ,
фармацевтическая композиция имеет такую лекарственную форму как гель , как
активный компонент содержит стабилизированный раствор , содержащий
гиалуроновую кислоту с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5 млн Да ,
декаметоксин , лактат натрия , молочную кислоту и воду как вспомогательный
фармацевтический компонент содержит глицерин и
гидроксипропилметилцеллюлозу , с последующим содержанием компонентов , в м г / мл :
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5 млн Да 5
лактат натрия 1,42
молочная кислота 0,36
декаметоксин 0,2
глицерин 30
гидроксипропилметилцеллюлоза
PCT7UA2015/000047 30
вода
остальное до 1 мл
Кроме
того
техническому
решению
преимущественно
фармацевтическую композицию применяют для подавления спаечного процесса .
Четвертым объектом технического решения по данному техническому решению является фармацевтически отличается и композиция на основе стабилизированного раствора двух активных веществ , которая им, что стабилизированный раствор двух активных веществ , которая содержит как первое активное вещество низкомолекулярную гиалуроновую кислоту и / или ее фармацевтически приемлемую соль , причем молекулярная масса такой кислоты или соли может быть от 100 "Да до 400 кДа, как второй активное вещество
декаметоксин или его растворимую в воде соль , стабилизатор , фармацевтически
приемлемой солью , которая способна к растворению в воде и диссоциации в водных растворах н а катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью таких солей , при этом стабилизатор имеет способность образовывать
одновременно с гиалуроновой кислотой и / или его фармацевтически приемлемой
солью и с декаметоксином или его растворимой в воде солью растворимые в воде соединения а также содержит по крайней мере одну фармацевтически приемлемую добавку . Содержащий компоненты в следующем соотношении :
гиалуроновая кислота и / или его фармацевтически приемлемая соль с молекулярной массой от 100 кДа до 400 кДа 1-50
декаметоксин и / или его растворимый вводе соль 0,01-10
стабилизатор 1-60
фармацевтически приемлемая добавка
вода Остальное до 1 мл
При этом стабилизатор является нетоксичной солью или малотоксичен
солью неорганической кислоты , органической монокарбоновой или дикарбоновой
кислоты , или любой смесью таких солей и может быть хлоридом натрия ,
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 сукцинатом натрия , лактатом натрия , хлоридом цинка , сульфатом цинка , или
любой смесью этих солей .
А фармацевтически приемлемой солью низкомолекулярной гиалуроновой кислоты может быть гиалуронат натрия .
Причем , как фармацевтически приемлемую добавку содержит агент для корректировки рН или буфер , в частности фосфатный буфер или цитратный
буфер или ацетатный буфер или сукцинатний буфер или трис гидрохлорид буфер
или малеатний буфер , а как агент для корректировки рН содержит вещество с ряда соляная кислота , серная кислота , азотная кислота , фосфорная кислота , уксусная кислота , пропионовая кислота , гидроксиуксусная кислота , молочная кислота , пировиноградная кислота , щавелевая кислота , малоновая кислота , янтарная кислота , малеиновая кислота , фумаровая кислота , винная кислота ,
лимонная кислота , аскорбиновая кислота , уксуснокислый аммоний , раствор
аммиака , гидроксид щелочноземельного металла , гидроксид щелочного металла ,
натрия карбонат , натрия гидрокарбонат , натрия фосфат .
Одним из воплощений является фармацевтическая композиция , которая как стабилизатор содержит сукцинат натрия , а как агент для корректировки р Н содержит янтарную кислоту .
Еще одним воплощением является фармацевтическая композиция , как стабилизатор содержит лактат натрия , а как агент для корректировки р Н раствора содержит молочную кислоту .
Такую композицию могут использовать для подавления спаечного процесса , для защиты органов от образования спаек и заживление ран с одновременной противовоспалительным действием .
Причем как фармацевтически приемлемую добавку может содержать по крайней мере один используемый вспомогательный фармацевтический компонент для перевода ее в лекарственную форму от мягкой до жидкой , а ее лекарственной
формой может быть аэрозоль , суспензия , сироп , капли , раствор для инъекций , крем , гель , мазь , паста , линимент , раствор для наружного применения , раствор для приема внутрь .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
Представленная фармацевтическая композиция может как
фармацевтически приемлемую добавку содержать по крайней мере один
вспомогательный фармацевтический компонент по ряду регулятор вязкости ,
консервант , антиоксидант , причем как регулятор вязкости содержит вещество из
ряда производное алкилцелюлозы , производное гидроксиалкилцелюлозы
метилцеллюлоза , гидроксипропилметилцеллюлоза , гидроксибутилцелюлоза
карбоксиметилцеллюлоза , крахмал , ксантановая камедь , гуаровая камедь
полиакриловые кислоты и их соли , сополимеры метакрилата , полиэтиленоксид
полипропиленоксид , производные хитина , крахмал , пектин , альгиновая кислота
циклодекстрин , агар -агар , каррагинан ; как консервант содержит вещество с ряда
хлорид лауралкония , хлорид бензалкония , хлорид бензододецинию , хлорид
цетилперидина , цетримид , домифен бромид , бензиловый спирт , хлорбутанол , о
крезол , хлорокрезол , фенол , этилфениловый спирт , бензойная кислота , натрия
бензоат , сорбиновая кислота , калиевая соль сорбиновой кислоты ,
парааминобензойная кислота , метилпарагидроксибензоат ,
пропилпарагидроксибензоат ; как антиоксидант содержит вещество с ряда натрий
метабисульфит , натрия бисульфит , натрия сульфит , натрий тиосульфат , аскорбиновая кислота .
Одним из воплощений является фармацевтическая композиция , ее
лекарственной формой является гель , содержащий низкомолекулярную
гиалуроновую кислоту и / или ее фармацевтически приемлемую соль с
молекулярной массой от 100 кДа до 400 кДа , декаметоксин или его растворимую в
воде соль , лактат натрия , молочную кислоту и воду , как вспомогательные
фармацевтические компоненты содержит глицерин и
гидроксипропилметилцеллюлозу , при таком соотношении компонентов , в мг / мл:
низкомолекулярная гиалуроновая кислота и / или его фармацевтически приемлемая соль с молекулярной массой от 100 кДа до 400 кДа 2-8
лактат натрия 0,5-3
молочная кислота 0,1-1
декаметоксин или его растворимый в воде соль 0,05-0,5
WO 2015/183230 глицерин
гидроксипропилметилцеллюлоза вода
PCT/UA2015/000047
20-50 15-50
остальное до 1 мл
Еще одним воплощением композиции является композиция с таким составом м г / мл :
низкомолекулярная гиалуроновая кислота и / или ее фармацевтически приемлемая соль с молекулярной массой от 100 кДа до 400 кДа 7
лактат натрия
молочная кислота
1, 1
декаметоксин или его растворимый в воде соль
глицерин
гидроксипропилметилцеллюлоза
вода
остальное до 1 мл
Также фармацевтическая композиция в виде геля может иметь такой состав :, в м г / мл :
низкомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массой от 100
кДа до 400 кДа 5
лактат натрия 1,42
молочная кислота 0,36
декаметоксин 0,2
глицерин 30
гидроксипропилметилцеллюлоза 30
вода остальное до 1 мл
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
Кроме того , по техническому решению преимущественно ,
фармацевтическую композицию применяют для подавления спаечного процесса .
Кроме того , по техническому решению преимущественно , фармацевтическую композицию применяют для ускорения заживления ран .
Описание технического решения
Раньше уже отмечалось , что декаметоксин , за счет четвертичных аминогрупп имеет положительный заряд , а гиалуроновая кислота , за счет карбоксильных групп , заряжена отрицательно - поэтому при их взаимодействии в растворе образуется нерастворимый в воде осадок . В результате исследований неожиданно было обнаружено , что раствор на основе следующих двух действующих веществ как декаметоксин и гиалуроновая кислота или ее фармацевтически приемлемая соль , может быть создан с помощью введения в
раствор стабилизатора . Введение стабилизатора в раствор , содержащий
декаметоксин и гиалуроновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль , предотвращает образование осадка в растворе .
Стабилизатором фармацевтически приемлемая соль , которая способна к растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков , или смесь указанных фармацевтически приемлемых солей . Фармацевтически приемлемыми солями являются нетоксичные соли или малотоксичные соли . В частности , это могут быть соли таких кислот как неорганические кислоты (например , соляная кислота , серная кислота , азотная кислота ), органические моно - и дикарбоновые кислоты (например , янтарная кислота , уксусная кислота , молочная кислота ). Механизмом стабилизации вероятно является экранирование катионов и анионов стабилизатора в растворе
соответственно карбоксильных групп гиалуроновой кислоты и аминогрупп
декаметоксину .
Эффективными стабилизаторами , в частности , есть такие нетоксичные соли и малотоксичные соли неорганических кислот , соли органических моно - и дикарбоновых кислот , как , например , хлорид натрия , натрия сукцинат , лактат натрия , хлорид цинка , сульфат цинка . Указанные соли могут быть использованы при получении по техническому решению стабилизированного раствора на основе
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 гиалуроновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли (далее по
тексту для сокращения будет называться стабилизированный раствор ) в любом
виде - как в кристаллическом виде , так и в виде водного раствора .
По техническому решению в стабилизированном растворе могут быть использованы гиалуроновая кислота и / или ее фармацевтически приемлемая соль . Как соль гиалуроновой кислоты могут быть использованы такие соли , как гиалуронат натрия , гиалуронат калия , гиалуронат цинка - по техническому
решению преимущественно , фармацевтически приемлемой солью гиалуроновой
кислоты является гиалуронат натрия . Соли гиауроновои кислоты , как и гиалуроновая кислота , имеют свойство стимулировать регенеративные процессы в тканях , а также проявляют некоторые антимикробные свойства (особенно это свойство проявляет гиалуронат цинка , который показал определенную активность
против штаммов стафилококка , стрептококка , кишечной палочки ) . Свойство
гиалуроновой кислоты и солей гиаулуроновои кислоты стимулировать регенеративные процессы в тканях имеет несколько различных механизмов воздействия этих веществ на процесс заживления ран - они стимулируют
фагоцитоз , активируют гранулоциты и макрофаги , способствует очищению раны
от некротических элементов , формирующих локальное повышение концентрации гиалуроновой кислоты , создает основу для клеток , которые участвуют в процессе заживления ран , индуцируют пролиферацию таких клеток как эпителиоциты и фибробласты , усиливают миграцию фибробластов и эндотелиальных клеток в пораженную область тканей , в свою очередь создает оптимальные условия для процессов тканевой регенерации .
Согласно данного технического решения , стабилизированный раствор
может дополнительно содержать по крайней мере одну фармацевтически
приемлемую добавку . Как фармацевтически приемлемую добавку , в основном ,
применяют агент для корректировки рН или буфер . Агент для корректировки рН
или буфер применяют для получения стабилизированного раствора с требуемым
значением показателя р Н .
Агент для корректировки р Н - это вещество или смесь веществ , которые
добавляют в стабилизированный раствор с целью получения требуемого
значения показателя рН. В качестве агента для корректировки рН применяют
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 вещества с ряда соляная кислота , серная кислота , азотная кислота , фосфорная
кислота , уксусная кислота , пропионовая кислота , гидроксиуксусная кислота ,
молочная кислота , пировиноградная кислота , щавелевая кислота , малоновая
кислота , янтарная кислота , малеиновая кислота , фумаровая кислота , винная
кислота , лимонная кислота , аскорбиновая кислота , уксуснокислый аммоний ,
раствор аммиака , гидроксид щелочноземельного металла , гидроксид щелочного металла , натрия карбонат , натрия гидрокарбонат , натрия фосфат . Этот приведен перечень веществ не ограничивает вещества , которые могут быть применены по данному техническому решению как агент для корректировки рН.
Буфер - это вещество или смесь веществ , поддерживает (стабилизирует ) показатель р Н раствора у определенного значения р Н при изменении каких -то параметров этого раствора (концентрация компонентов , температура и т.д .). Как буфер может быть применено любые описанные в литературе и известны
специалистам буфера , в частности , такие буферы как фосфатный буфер , цитратный буфер , ацетатный буфер , сукцинатний буфер , трис гидрохлорид
буфер , малеатний буфер . Этот приведен перечень веществ не ограничивает вещества , которые могут быть применены по данному техническому решению как
буфер .
Согласно данного технического решения , на основе стабилизированного раствора могут быть получены фармацевтические композиции (препараты ) путем добавления к стабилизированного раствора обычных в медицинской практике
вспомогательных фармацевтических компонентов для получения
фармацевтических композиций в желаемой лекарственной форме .
Желаемые лекарственные формы , в частности , включают раствор , аэрозоль , суспензию , сироп , капли , раствор для инъекций , крем , гель , мазь , пасту , линимент , раствор для наружного применения , раствор для приема внутрь , но не ограничиваются ими .
Лекарственные формы - это удобные для применения состояния , предоставляемых лекарственным препаратам (например , агрегатное состояние , геометрическая форма ) .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
По агрегатному состоянию лекарственные формы делят на газообразные , жидкие , мягкие и твердые .
К газообразных лекарственных форм относят газы или смесь газов , аэрозоли .
Аэрозоль - это лекарственная форма , является дисперсной системой с газообразной дисперсионной средой и твердой или жидкой дисперсионной фазой . Аэрозоли , содержащие жидкую дисперсионную фазу , называются еще спреями . Важнейшее свойство аэрозолей это способность твердых или жидких частиц после распыления находиться во взвешенном состоянии в дисперсионной среде .
К жидких лекарственных форм относят растворы , настои , отвары , настойки , экстракты , эмульсии , суспензии , микстуры , сатурации , сиропы , капли .
Растворы - это жидкая лекарственная форма , которую получают путем полного растворения твердой лекарственного вещества в растворителе или смешение между собой жидкостей . Как правило , растворы не должны содержать взвешенных частиц и осадка . Растворы делятся на растворы для наружного применения , растворы внутреннего применения и на растворы для инъекций .
Настои и отвары представляют собой водные выдержками из лекарственного растительного сырья . Они быстро теряют свои свойства , и
поэтому их готовят непосредственно перед выдачей больному и в небольшом
количестве (в объеме на 3-4 дня применения ).
Настойки - это жидкие , прозрачные , более или менее окрашенные спиртовые , спирто -водные или спирто -эфирные извлечения лекарственных веществ из растительного сырья .
Экстракты - это концентрированные вытяжки из растительного сырья , полученные с помощью растворителей , отличаются от настоек более высокой концентрацией лекарственных веществ .
Эмульсии - это дисперсные системы , состоящие из двух взаимно нерастворимых жидкостей , одна из которых распределена в другой в виде
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 капелек . Эмульсии получают путем диспергирования одной жидкости в другой ,
например , масла в воде .
Суспензии - это дисперсные системы , состоящие мельчайших частиц твердых веществ в жидкостях . Суспензии получают путем диспергирования твердых веществ в жидкости .
Микстуры получаются при смешивании в воде , спирте и других растворителях нескольких лекарственных веществ . Они могут быть прозрачными , мутными и даже с осадком , перед употреблением их следует взбалтывать .
Сатурации - это насыщенные газом жидкости .
Сиропы - это лекарственная форма , которая является концентрированным водным раствором сахарозы , содержащий лекарственные вещества .
Капли - это жидкая лекарственная форма , предназначенная для внутреннего или наружного применения , и дозируется каплями . Как капли могут быть использованы растворы , суспензии , эмульсии .
К мягких лекарственных форм относят мази , пасты , линименты , суппозитории , кремы , гели .
Мази - это лекарственные формы , имеют мягкую консистенцию , предназначенные для наружного применения . Мази получают путем смешивания различных лекарственных средств с формообразующими веществами , называют мазевые основы . В качестве мазевых основ используют продукты переработки нефти (вазелин , парафин ит .п.), животные жиры и растительные масла .
Пасты - это разновидность мазей с содержанием порошкообразных веществ не менее 25% (близкая по консистенции к тесту), благодаря чему они
имеют хорошие адсорбирующие и подсушивающим свойствами .
Линименты (еще называют жидкие мази) - это однородные смеси в виде густых жидкостей или студенистой массы , что плавятся при температуре тела . В качестве основы линиментов используют растительные масла и животные жиры .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 Суппозитории - это дозированная мягкая лекарственная форма . При
комнатной температуре они имеют твердую консистенцию , при температуре тела
расплавляются . Различают суппозитории ректальные (свечи ), вагинальные и
палочки . Наиболее подходящей основой для суппозиториев является масло
какао .
Кремы - это мягкая лекарственная форма для местного применения (иногда их еще называют - мази мягкой консистенции ), которые являются двух - или многофазными дисперсными системами , часто п о сути это очень густые эмульсии типа масло в воде или вода в масле . Кремы , в отличие от мазей , имеют менее вязкую консистенцию , хотя так же , как и мази , содержащие в своем составе лекарственные вещества , масла , жиры и другие компоненты .
Гели - это мягкая лекарственная форма для местного применения , является
одно -, двух - или многофазными дисперсными системами с жидкой дисперсионной средой и особой дисперсной фазой - Гелеобразователи (веществом , создает
пространственную структуру в виде трехмерной сетки ) . Гели является особым видом мазей , которые обычно готовят на основе полимерных носителей , и они вязкую консистенцию , способны сохранять форму , имеют упругость и пластичность .
Как вспомогательные фармацевтические компоненты для получения
фармацевтических композиций в желаемой лекарственной форме могут быть
использованы любые известные специалистам вещества . По данным техническим решением , в основном , фармацевтические композиции могут содержать по
крайней мере один вспомогательный фармацевтический компонент по ряду
регулятор вязкости , консервант , антиоксидант . Назначение этих вспомогательных
фармацевтических компонентов в фармацевтических композициях описаны в
литературе и известно специалистам .
Как регулятор вязкости может быть использована вещество с ряда таких веществ как производное алкилцелюлозы , производное гидроксиалкилцелюлозы , метил целлюлоза , гидроксипропил метил целлюлоза , гидроксибутилцелюлоза , карбоксиметилцеллюлоза , крахмал , ксантановая камедь , гуаровая камедь , полиакриловые кислоты и и х соли , сополимеры метакрилата , полиэтиленоксид ,
полипропиленоксид , производные хитина , крахмал , пектин , альгиновая кислота , циклодекстрин , агар -агар , каррагинан . Этот приведен перечень веществ не ограничивает вещества , которые могут быть применены по данному техническим нарушением как регулятор вязкости .
В качестве консерванта может быть использована вещество с ряда таких веществ как хлорид лауралкония , хлорид бензалкония , хлорид бензододецинию , хлорид цетилперидина , цетримид , домифен бромид , бензиловый спирт , хлорбутанол , о -крезол , хлорокрезол , фенол , этилфениловый спирт , бензойная кислота , натрия бензоат , сорбиновая кислота , калиевая соль сорбиновой кислоты , ПАБК, метилпарабен , пропилпарагидроксибензоат . Этот приведен перечень веществ не ограничивает вещества , которые могут быть применены по данному техническому решению в качестве консерванта .
Как антиоксидант может быть использована вещество с ряда таких веществ
как натрий метабисульфит , натрия бисульфит , натрия сульфит , натрий тиосульфат , аскорбиновая кислота . Этот приведен перечень веществ не
ограничивает вещества , которые могут быть применены по данному техническим нарушением как антиоксидант .
Сам стабилизированный раствор также может использоваться , как лекарственное средство .
Одной из форм воплощением первого технического решения является стабилизированный водный раствор с последующим содержанием компонентов , мг/ мл:
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота (ВГК) с молекулярной массой
от 400 кДа до 2,5 млнДа 5
сукцинат натрия 16
янтарная кислота 0,05
натрия хлорид 1,2
декаметоксин 0,2
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
вода остальное до 1 мл
Другой формой воплощения третьего технического решения является фармацевтическая композиция в форме водного геля с последующим содержанием компонентов , мг / мл геля :
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5 млнДа 5
натрия лактат 1,42
молочная кислота 0,36
декаметоксин 0,2
глицерин 30
гидроксипропилметилцеллюлоза 30
вода остальное до 1 мл
Одной из форм воплощения фармацевтической композиции 4 объектом технического решения является стабилизированный водный раствор с последующим содержанием компонентов , м г / мл :
низкомолекулярная гиалуроновая кислота (НГК) с молекулярной массой от 100 кДа до 400 кДа 5
сукцинат натрия 16
янтарная кислота 0,05
натрия хлорид 1,2
декаметоксин 0,2
вода остальное до 1 мл
Другой преобладающей формой воплощения четвертого технического
решения является фармацевтическая композиция в форме водного геля с последующим содержанием компонентов , м г / мл геля :
3 1
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
низкомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массой от 1 Uu кДа до 400 кДа 5
натрия лактат 1,42
молочная кислота 0,36
декаметоксин 0,2
глицерин 30
гидроксипропилметилцеллюлоза 30
вода остальное до 1 мл
Стабилизированный раствор и фармацевтические композиции на его основе могут применяться при любых операциях на органах , где есть риск возникновения послеоперационного спаечного процесса , в частности , таких органах или частях органов как:
- Брюшная полость ;
- Оболочки сухожилий ;
- Суставы ;
- Плевральная полость ;
- Полость перикарда ;
- Оболочки спинного и головного мозга ;
- Полость среднего уха ;
- Оболочка яичка
- Нервный стволы ;
- Маточные трубы ;
- Яичники ;
- Матка ;
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 - Мочевой пузырь .
Кроме того , их можно использовать при операциях на других органах , где есть риск спаивания мягких тканей . Например , при операциях на шее , когда есть высокий риск формирования рубца через все слои шеи .
Стабилизированный раствор и фармацевтические композиции на его основе предотвращают образование спаек между органами , таким образом предотвращают развитие спаечного процесса после операций , снимают воспаление , регенерируют поврежденные слизистые оболочки и предотвращают развитие постоперационных инфекций .
С противовоспалительной целью стабилизированный раствор и
фармацевтические композиции приведенным нарушением могут использоваться
для уничтожения патогенной флоры в гинекологии , стоматологии , урологии ,
проктологии , офтальмологии , дерматовенерологии , при этом
противовоспалительное действие является пролонгированным , дополнительной действием является защита слизистых оболочек от пересыхания , увлажнение их, стимуляция и х регенерации .
Примеры выполнения технического решения :
Способ получения стабилизированного раствора на основе декаметоксину и высокомолекулярного гиалуроновой кислоты проверено для широких пределов соотношений компонентов , в частности (на 100 мл раствора ):
высокомолекулярное гиалуроновая кислота или е е фармацевтически приемлемая соль - от 1 м г до 50 г,
декаметоксин - от 0,01 мгдо 10 г,
стабилизатор - от 1 мкг до 60 г,
вода - остальное до объема 100 мл .
Исходя из того , что при взаимодействии в растворе декаметоксину и
высокомолекулярного гиалуроновой кислоты образуется нерастворимый в воде
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
осадок , очевидно , что стабилизатор должен прилагаться к воде раньше , чем один из компонентов - декаметоксин или гиалуроновая кислота
Гиалуроновая кислота с молекулярной массой от 400 кд до 2,5 млнДа , благодаря своей большой молекулярной массе не способна проникать клетку , однако , было замечено , что она окутывает органы пленкой и предотвращает образование спаек и избежания обезвоживания органов . Благодаря добавлению декаметоксину и / или его соли достигается и одновременно противовоспалительное и ранозаживляющее действие . В результате раны заживают быстрее без спаечных процессов и без обострений воспалительных процессов . что будет дальше показано на примерах . Такое сочетание активных веществ позволяет создать на поверхности органов пленку , которая и будет одновременно проявлять весь спектр указанной выше действия .
Гиалуроновая кислота с молекулярной массой от ЮОкДа к 400 кд, может проникать саму клетку , поэтому ее действие более направлена на процессы регенерации клитин и ранозаживлению , а вместе с декаметоксином также добавляются еще и бактерицидные , противовоспалительные свойства . И хотя молекулярная масса не является большой , такая низкомолекулярная гиалуроновая кислота также способна образовывать пленку н а органах и тем не менее н а спаечный процесс будет влиять меньше , что будет показано на примерах ниже , при том предоставлять другой спектр действий .
Примеры конкретного выполнения
Ниже приведены примеры конкретной реализации технического решения . Пример 1.
Получение стабилизированного раствора и фармацевтической композиции на его основе
В колбу наливают 800 мл очищенной дистиллированной воды . В колбу
последовательно добавляют : 16 гсукцината натрия ,50 мг янтарной кислоты ,1,2 г
натрия хлорида и перемешивают 5-10 мин . на магнитной мешалке (600 rpm) до
полного растворения компонентов . Далее при непрерывном перемешивании к
раствору добавляют 200 м г декаметоксина до полного растворения . Добавляют 5
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 г высокомолекулярного гиалуроновой кислоты (от 400 кДа до 2,5 млн Да) и
перемешивают на магнитной мешалке в полной гидратации (растворение )
высокомолекулярной гиалуроновой кислоты .
Затем полученный стабилизированный раствор при необходимости рН раствора доводят до 7,3 янтарной кислотой , после чего объем полученного раствора доводят очищенной водой до 1000 мл.
Пример 2.
Получение стабилизированного раствора .
Повторяют процедуру , описанную в примере 1, за исключением того , что
вместо высокомолекулярной гиалуроновой кислоты применяют гиалуронат
натрия .
Пример 3.
Получение фармацевтической композиции на основе стабилизированного раствора в виде геля .
В колбу наливают 800 мл очищенной дистиллированной воды . В колбу последовательно добавляют 200 мг декаметоксина , 1,42 г лактата натрия , 360 мг молочной кислоты , 30 г глицерина и перемешивают 5-1 0 мин . на магнитной мешалке (600 rpm) д о полного растворения компонентов . Далее при непрерывном перемешивании к раствору добавляют 5 г высокомолекулярного гиалуроновой кислоты (от 400 кДа до 2,5 млн Да) и перемешивают на магнитной мешалке в полной гидратации (растворение ) гиалуроновой кислоты . К раствору добавляют 30 г гидроксипропилметилцеллюлозы , после чего объем смеси при перемешивании доводят очищенной водой до 1000 мл. При необходимости рН раствора доводят д о значения 3,1 5 добавлением молочной кислоты или натрия лактата .
Способ получения стабилизированного раствора на основе декаметоксина
и низкомолекулярной гиалуроновой кислоты проверено для широких пределов
соотношений компонентов , в частности (на 100 мл раствора ):
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
Высокомолекулярная гиалуроновая кислота или ее фармацевтически
приемлемая соль - от 1 мгдо 50 г,
декаметоксин - от 0,01 мгдо 10 г, стабилизатор - от 1 мкг до 60 г, вода - остальное до объема 100 мл.
Исходя из того , что при взаимодействии в растворе декаметоксину и низкомолекулярной гиалуроновой кислоты образуется нерастворимый в воде осадок , очевидно , что стабилизатор должен прилагаться к воде раньше , чем один из компонентов - декаметоксин или гиалуроновая кислота .
Пример 4.
Получение фармацевтической композиции на основе стабилизированного раствора
В колбу наливают 800 мл очищенной дистиллированной воды . В колбу последовательно добавляют : 16 г сукцината натрия ,50 мг янтарной кислоты , 1,2 г натрия хлорида и перемешивают 5-10 мин . на магнитной мешалке (600 rpm) до полного растворения компонентов . Далее при непрерывном перемешивании к раствору добавляют 200 мг декаметоксину до полного растворения . Добавляют 5 г низкомолекулярной гиалуроновой кислоты (от 100 ""Да до 400 кДа) и
перемешивают на магнитной мешалке в полной гидратации (растворение )
гиалуроновой кислоты . При необходимости рН раствора доводят до 7,3 янтарной
кислотой , после чего объем полученного раствора доводят очищенной водой до 1000 мл .
Пример 5.
Получение фармацевтической композиции на основе стабилизированного
раствора .
Повторяют процедуру , описанную в примере 1, за исключением того , что
вместо низкомолекулярной гиалуроновой кислоты применяют гиалуронат натрия .
Пример 6.
WO 2015/183230
Получение фармацевтической раствора в виде геля .
композиции на основе стабилизированного
В колбу наливают 800 мл очищенной дистиллированной воды . В колбу последовательно добавляют 200 мг декаметоксину , 1,42 г лактата натрия , 360 мг молочной кислоты , 30 г глицерина и перемешивают 5-1 0 мин . на магнитной мешалке (600 rpm) до полного растворения компонентов . Далее при непрерывном
перемешивании к раствору добавляют 5 г низкомолекулярной гиалуроновой
кислоты (от 100 кДа до 400 кДа) и перемешивают на магнитной мешалке в полной гидратации (растворение ) гиалуроновой кислоты . К раствору добавляют 30 г гидроксипропилметилцеллюлозы , после чего объем смеси при перемешивании доводят очищенной водой до 1000 мл. При необходимости рН раствора доводят д о значения 3,1 5 добавлением молочной кислоты или натрия лактата .
Пример 7 получения стабилизированного раствора .
В колбу наливают 800 мл очищенной дистиллированной воды , 200 м г
декаметоксину , 1,42 г лактата натрия при постиномй перемешивания в течение 510 минут на магнитной мешалке (600 rpm) до полного растворения компонентов .
Далее при постоянном перемешивании добавляют 5 г низкомолекулярной гиалуроновой кислоты (от 100 Да до 400 кДа ) и перемешивают на магнитной мешалке в полной гидратации (растворение ) гиалуроновой кислоты .
Для приготовления фармацевтической композиции добавляют
последовательно 360 м г молочной кислоты , 30 г глицерина и перемешивают 5-10 мин . на магнитной мешалке (600 rpm) до полного растворения компонентов . К раствору добавляют 30 г гидроксипропилметилцеллюлозы , после чего объем смеси при перемешивании доводят очищенной водой до 1000 мл .
Для определения таких свойств полученных по техническому решению
стабилизированных растворов и фармацевтических композиций как стабильность
стабилизированных растворов , антибактериальная активность
стабилизированных растворов и фармацевтических композиций на их основе , влияние фармацевтических композиций на развитие спаек , действие
фармацевтических композиции на заживление ран, было проведено исследование , результаты которых описаны далее .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
Для исследования стабилизированные растворы , полученные в примерах 2,4., хранили при постоянной комнатной температуре в течение 2-х лет , и через определенный интервал времени проверяли присутствие /отсутствие осадка в стабилизированных растворах , содержание гиалуроната натрия в
стабилизированных растворах , значение показателя рН стабилизированных
растворов . Результаты испытания отражены в табл . 1
не меняют своих свойств в течение двух лет хранения при комнатной температуре .
Исследование антибактериальной активности стабилизированных
растворов , полученных в примерах 2,4 осуществлялось стандартным методом бумажных дисков . Результаты исследований представлены в таблице 2.
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 повреждения (прошивка брыжейки лигатурой и скарификация серозного слоя
кишки ) и химического повреждения (нанесение порошка таблеток Альтабора и
нанесения раствора йода серозных оболочек кишечника с целью активации
спаечного процесса .
В эксперименте использовали 66 белых беспородных крыс массой 180-200 г, которые были рандомизированы по следующим экспериментальными группами , имеющими следующие названия :
- Контрольная патология 1;
- Лигатура + Фармацевтическая композиция (ВГК , НГК);
- Контрольная патология 2 ;
- Скарификация + Фармацевтическая композиция (ВГК , НГК);
- Контрольная патология 3;
- Порошок таблеток Альтабора + Фармацевтическая композиция (ВГК, НГК);
- Контрольная патология 4;
- Раствор йода + Фармацевтическая композиция (ВГК , НГК ).
Для четырех экспериментальных групп животных повреждающим фактором является механический фактор - для двух экспериментальных групп повреждения
осуществляли путем лигатуры (прошивка брыжейки 12-перстной кишки шелковой
нитью ), для двух экспериментальных групп животных повреждения осуществляли
путем скарификации (нанесения 10 продольных царапин кончиком хирургической
иглы до "кровавой росы " на серозном слое червеобразного отростка слепой кишки ).
Для четырех экспериментальных групп животных повреждающим фактором является химический фактор - для двух экспериментальных групп повреждения осуществляли путем нанесения порошка таблеток Альтабора (30 м г) на висцеральную поверхность селезенки , для двух экспериментальных групп повреждения осуществляли путем нанесения спиртового раствора йода на
червеобразный отросток слепой кишки .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
В таблице 3 указано названия экспериментальных групп животных ,
факторы , которые влияли на процесс образования спаек в каждой
4 1
экспериментально группе , повреждающий фактор , количество животных в каждой
экспериментально группе .
хирургическому вмешательству под наркозом , вызванным внутрибрюшинно введением тиопентала натрия в дозе 50 мг/кг. После срединной лапаратомии
согласно рандомизации у животных экспериментальных групп вызвали повреждения органов брюшной полости одним и з нижеперечисленных способов :
1) прошивали шелковой нитью участок брыжейки 12-перстной кишки ;
2) скарифицировали серозную оболочку червеобразного отростка слепой
кишки (10 продольных царапин кончиком хирургической иглы д о "кровавой росы ");
3) присыпали порошком таблеток Альтабора (30 м г) висцеральную поверхность селезенки ;
4) смазывали 5% спиртовым раствором йода серозную оболочку
червеобразного отростка слепой кишки .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
После повреждения соответствующих органов животных
экспериментальных групп в брюшную полость вводили фармацевтические
композиции в количестве 5 мл. Затем брюшную полость животных
экспериментальных групп ушивали . За животными наблюдали в течение 14 дней .
Состояние животных оценивали с помощью определения выживаемости , оценки
внешнего вида , динамики массы тела . На 14-й день животных выводили из
эксперимента передозировкой наркоза , вскрывали брюшную полость , проводили
макроскопический обзор , определяли наличие спаек и осуществляли балльную оценку состояния органов и тканей в местах манипуляций . Затем фрагменты
комплекса спаянных органов секли в пределах сращений , взвешивали и с целью
проведения морфологических исследований фиксировали в 10% растворе
формалина . Далее образцы спаечных тканей обезвоживали в спиртах , заливали в целлоидин -парафин . Срезы окрашивали гематоксилином и эозином , пикрофуксином по Ван -Гизону . Микроскопическое изучение микропрепаратов проводили под микроскопом Granum. Микрофотосъемки изображений выполняли цифровой видеокамерой Granum ДСМ 310. Фотографии обрабатывали на компьютере с помощью программы Toup View.
Для балльной оценки состояния органов и тканей в местах манипуляций
использовали следующую шкалу :
Участок брыжейки 12-перстной кишки :
0 - изменений нет;
0,5 балла - белесые уплотнения у нитей ;
1 балл - белесые уплотнения у нитей + точечные шнуровидные (в виде
тяжей ) сращение с прилегающей петлей толстой кишки ;
2 балла - белесые уплотнения у нитей + плоскостные (широкое столкновения ) сращение с прилегающей петлей толстой кишки ;
3 балла - белесые уплотнения у нитей + плоскостные сращения с прилегающей петлей толстой кишки + сращения с хвостовой долей печени и / или расположенной в области желудочно -селезеночной связки поджелудочной железой .
Серозная оболочка червеобразного отростка слепой кишки :
0 - изменений нет ;
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
1 балл - небольшие белесые наслоения на поверхности верхушки отростка ;
2 балла - умеренные белесые наслоения на поверхности верхушки отростка + точечные шнуровидные сращения между телом отростка и прилегающей петлей тонкой кишки ;
3 балла - выраженные белесые наслоения н а поверхности отростка + плоскостные сращения между телом отростка и прилегающей петлей тонкой кишки .
Капсула селезенки
0 - изменений нет;
1 балл - мелкие единичные белесые наслоения на диафрагмальной поверхности органа ;
2 балла - белесые наслоения , распространяющиеся на диафрагмальной
поверхности органа ;
3 балла - белесые наслоения , распространяющиеся на диафрагмальной
поверхности органа ;
4 балла - белесые наслоения , распространяющиеся на и более диафрагмальной поверхности органа + сращения висцеральной поверхности
органа (желудочной части ее ) с прилегающей хвостовой частью поджелудочной
железы .
Статистическую обработку проводили с использованием параметрических и непараметрических методов одинфакторного дисперсионного анализа - критериев Крускала -Уолиса , Мана -Уитни , и углового преобразования Фишера .
Изучение влияния фармацевтических композиций на развитие спаек в брюшной полости крыс после механического повреждения участка брыжейки 12 -перстной кишки , вызванного прошивкой шелковой нитью , показало следующие результаты .
После механического повреждения участка брыжейка 12-перстной кишки ,
вызванной прошивкой шелковой нитью , у животных контрольной и опытной групп не наблюдалось значимых нарушений трофических процессов и общего
состояния организма , на что указывает динамика массы тела крыс , которая представлена в таблице 4 .
Таблица 4
Время експеримента
Маса тела крыс ,
Експериментальная группа -
Експериментальная
группа - Лигатура +
Експериментальная группа - Лигатура +
Контрольная
Фармацевтическая
Фармацевтическая
патология 1
композиция ВГК
композиция НГК
Начальное
194,1 7±12,38
185,0011 0,82
194,1 7+12,38
состояние
3 суток
190,00±1 0,29
180,8311 0,53
197,00+10,29
7 суток
201 ,67±1 0,67
186,67+1 0,67
201 ,67+10,67
14 суток
205,83±1 0,83
177,50+12,81
205,8311 0,83
По результатам макроскопического исследования развития спаечного процесса в брюшной полости крыс установлено , что после механического повреждения участка брыжейки 12-перстной кишки , вызванной прошивкой шелковой нитью , у животных группы Контрольная патология 1 наблюдается развитие спаечного процесса у 100% животных (6 из 6). В экспериментальной группе Лигатура + Фармацевтическая композиция , фармацевтическая композиция
ВГК способствует достоверному по сравнению с группой Контрольная патология
1, снижению количества животных с спайками н а 83,3% (1 и з 6), а фармацевтическая композиция НГК - на 50% - это видно из данных таблицы 5.
Из представленных данных видно , что фармацевтическая НГК тоже
способствует снижению спайкообразованияя , но не в такой убедительной
степени , как фармацевтическая композиция с ВГК. Однако влияние
фармацевтической композиции ВГК на спайкообразования очевидно .
Предоставленная в таблице 6 балльная оценка выраженности спаечного процесса показывает значимую противоспаечную активность фармацевтических композиций ВГК и НГК, на что указывает достоверное , относительно группы Контрольная патология 1, снижение количества баллов спаечного процесса в 4,2
раза под действием фармацевтической композиции ВГК , и в 1,8 раза под действием фармацевтической композиции НГК .
Определение массы комплекса спаянных органов у крыс после прошивки шелковыми нитями брыжейки 12-перстной кишки (таблица 7) также показало , что
фармацевтические композиции способствуют достоверному по сравнению с
4 6
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 группой Контрольная патология 1, снижению массы комплекса спаянных органов в 1,6 раза - фармацевтическая композиция ВГК ив 1,2 раза - фармацевтическая композиция НГК , что также указывает на выраженное противоспаечное действие
фармацевтическая композиция . ВГК
Изучение макропрепаратов комплекса спаянных органов в месте прошивки брыжейки 12-перстной кишки показало , что в группе Контрольная патология 1 у 66,7% крыс хорошо заметны белесые уплотнения у нитей и плоскостные спайки с прилегающей петлей толстой кишки , а у 33,3% животных есть еще и спайки с хвостовой долей печени .
В группе Лигатура + Фармацевтическая композиция под влиянием
фармацевтическая композиция ВГК в 83,3% животных наблюдали минимальные изменения в зоне прошивки , которые характеризовались только белесыми уплотнениями у нитей . Только у одной крысы (16,7% или на 1 из 6) эти уплотнения сочетались с единичным точечным шнуровидным сращиванием с прилегающей
петлей толстой кишки .
У животных группы Контрольная патология 1 в зоне прошивки рябь вокруг остатков нитей определяются различные по размеру сформированые очаги фиброзной ткани , в которой видно гигантские клетки инородного тела
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
(макрофаги ). Как правило , воспалительная реакция в прилегающих участках брыжейки ни проявлялась . В этой же зоне часто определяется целый спаечный комплекс , включающий петли , которые срослись , тонкой и толстой кишки , а в некоторых случаях и долю печени , мелкие участки сращения печени и поджелудочной железы . Спайки характеризовались как уже четко ориентированные , выражено фуксинофильными пучками коллагеновых волокон ,
так и более рыхлой структурой гранулярного типа с коллагеновыми фибриллами с нечеткой продольной ориентацией . В ткани спаек непосредственно у серозной
оболочки стенок кишок местами видны гигантские клетки инородного тела . В мышечной оболочке кишок выявлены патологические изменения в виде дистрофии и дезорганизации мышечных волокон , проникновение коллагеновых волокон в мышечную ткань . В 66,7% животных массы фибрина откладываются в местах травмирования , между сальником и прилегающей петлей толстой кишки развиваются шнурообразные и плоскостные спайки (2 балла ). В 33,3% животных отмечены также и сращения с капсулой хвостовой доли печени (3 балла ) .
У животных с экспериментальной группы Лигатура + Фармацевтическая композиция ВГК в зоне вмешательства определяли значительно меньше по
размеру по сравнению с экспериментальной группой Контрольная патология 1,
инкапсулированные гранулемы чужеродных тел , фрагменты нитей , не рассосались , с небольшими участками фиброзной ткани вокруг окружала достаточно тонкая зрелая соединительнотканная капсула . Спаек петель кишечника в зоне прошивки у подавляющего большинства крыс не обнаружено ,
местами отмечено лишь "огрубление " слоев рыхлой волокнистой соединительной ткани , разделяющей дольки жировой ткани сальника . Только у одной крысы
отмечена небольшая спайка между петлями кишечника .
Изучение влияния фармацевтических композиций на развитие спаек в брюшной полости крыс после механического повреждения серозной оболочки
червеобразного отростка слепой кишки , вызванного скарификацией , показало
следующие результаты .
После механического повреждения серозной оболочки червеобразного
отростка слепой кишки , вызванного скарификацией , у животных
экспериментальных групп не наблюдалось значимых нарушений трофических
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
процессов и общего функционального состояния организма , на что указывает динамика массы тела крыс - это видно из данных , предоставленных в таблице 8.
повреждения серозной оболочки червеобразного отростка слепой кишки , вызванного скарификацией , у животных группы Контрольная патология 2 наблюдается развитие спаечного процесса в 100% случаев (6 из 6). В экспериментальной группе Скарификация + Фармацевтическая композиция , фармацевтическая композиция ВГК способствует достоверному по сравнению с группой Контрольная патология 2 , снижению количества животных со спайками до 16,7% (1 из 6), и 50% (3 из 6) под действием фармацевтической композиции НГК -это видно из данных таблицы 9.
Манна -Уитни , достоверно относительно группы Контрольная патология 2, р <0,05.
Предоставленная в таблице 10 бальная оценка выраженности спаечного процесса свидетельствует о значительном противоспаечном действии фармацевтической композиции ВГК, на что указывает достоверное , по сравнению с группой Контрольная патология 2, снижение количества баллов в 3,2 раза , и противоспаечное действие фармацевтической композиции НГК в 1,67 раза по сравнению с контрольной группой 2.
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
Определение массы посеченного комплекса спаянных органов у крыс после механического повреждения участка серозной оболочки червеобразного отростка слепой кишки , вызванного скарификацией (смотреть таблицу 1 1), также показало , что фармацевтическая композиция ВГК способствует достоверному по сравнению с группой Контрольная патология 2, снижению массы комплекса спаянных органов в 1,5 раза , а фармацевтическая композиция НГК - в 1,2 раза , что также указывает на выраженное противоспаечное действие фармацевтической композиции ВГК.
<0,05.
Изучение макропрепаратов комплекса спаянных органов в месте
повреждения участка серозной оболочки червеобразного отростка слепой кишки , вызванного скарификацией , показало , что в группе Контрольная патология 2 у 100% крыс (у б из 6) констатировали умеренные белесые наслоения на поверхности верхушки отростка и единичные точечные шнурообразные спайки
между телом отростка и надлежащей петлей тонкой кишки .
В группе Скарификация + Фармацевтическая композиция ВГК у 50% крыс никаких заметных изменений тканей в месте вмешательства не обнаружено . У 33,3% животных видны небольшие белесые наслоения на поверхности верхушки отростка , а у одного животного (16,7%) - кроме них еще и единичная точечная
шнурообразная спайка с прилегающей петлей тонкой кишки .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
Морфологические исследования развития спаечного процесса в брюшной
полости крыс после механического повреждения участка серозной оболочки
червеобразного отростка слепой кишки , вызванного скарификацией , показывают , что в группе Контрольная патология 2 на поверхности серозной оболочки верхушки червеобразного отростка видно умеренно большие массы фибрина ,
которые разрушают ее, не только тесно соприкасаясь с мышечной оболочкой , но и частично замещая мышечные волокна . Фибриновые отложения имеют в основном
рыхлый волокнистый , фуксинофильний характер , вариабельное клеточное
наполнение . В области тела отростка , очевидно , на непосредственном участке механического воздействия , сохранены следы травмы и воспаления , которые
затрагивающих подслизистый слой и мышечную оболочку . Н а одних участках к
серозной оболочке тела отростка тесно прилегает неизмененного вида сальник , местами он "проникает " в мышечные волокна , а на отдельных участках трансформируется в зрелого вида спайку , которая распространяется и на
прилегающую петлю тонкой кишки . Таким образом , после скарификации
поверхности червеобразного отростка слепой кишки развивается менее
выраженный спаечный процесс - 2 балла . У всех крыс кроме отложений фибриновых масс на поверхности отростка обнаружены точечные шнурообразные спайки с соответствующей петлей тонкой кишки .
В группе Скарификация + Фармацевтическая композиция ВГК у 50% крыс
отсутствовали фибриновый наслоения на поверхности верхушки червеобразного отростка слепой кишки . Сальник не изменен , свободно прилегал к телу отростка .
У 33,3% животных на серозной оболочке верхушки отростка наблюдали умеренные фибриновые наслоения . Соединительнотканные слои сальника местами огрубевали , но образование спаек с петлей тонкой кишки не отмечено . И только в 16,7% (в 1 из 6) крыс обнаружены единичные точечные сращения с петлей тонкой кишки . Коллагеновые волокна спаек менее зрелые , чем у животных
из группы Контрольная патология 2 , нарушений целостности мышечной оболочки
кишки не отмечено .
Таким образом , интраабдоминальное введение фармацевтической композиции ВГК после скарификации поверхности червеобразного отростка
слепой кишки предотвращает развитие спаек у 50% животных и снижает процесс
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
развитие спаек - у 33,3% крыс . Фармацевтическая композиция морфологически
способствует снижению объема фибриновых масс , откладываемых в местах
вмешательства , а также уменьшает объем и распространение сращений ,
препятствует ускоренному созреванию ткани спаек .
Изучение влияния фармацевтических композиций на развитие спаек в брюшной полости крыс после повреждения висцеральной поверхности и капсулы селезенки , вызванного порошком таблеток Альтабора , показало следующие результаты .
После химического повреждения висцеральной поверхности и капсулы селезенки , вызванного порошком таблеток Альтабора , у животных экспериментальных групп не наблюдалось значимых нарушений трофических процессов и общего функционального состояния организма , на что указывает динамика массы тела крыс - это видно из данных , предоставленных в таблице 12.
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
Порошок таблеток Альтабора + Фармацевтическая композиция ,
фармацевтическая композиция ВГК способствует достоверному по сравнению с группой Контрольная патология 3, снижению количества животных со спайками на 83,3% (в 1 из 6), а фармацевтическая композиция НГК - на 50% - это видно из данных таблицы 13 .
патология 3, р <0,05.
Предоставленная в таблице 14 бальная оценка выраженности спаечного
процесса свидетельствует о значительной протиспайковой активности
фармацевтической композиции ВГК , на что указывает достоверное , относительно группы Контрольная патология 3 , снижение количества баллов в 2,3 раза , а противоспаечная активность фармацевтической композиции НГК - в 1,5 раза
Таблица 14
Экспериментальная группа
Количество животных в экспериментальной группе
Выраженность
спаечного процесса
баллы
Определение массы посеченного комплекса спаянных органов у крыс после химического повреждения висцеральной поверхности и капсулы селезенки , вызванного порошком таблеток Альтабора (смотреть таблицу 15), также показало , что фармацевтическая композиция ВГК способствует достоверному по сравнению с группой Контрольная патология 3, снижению массы комплекса спаянных органов в 1,7 раза , а фармацевтическая композиция НГК в 1,26 раза , что также указывает на более выраженное противоспаечное действие фармацевтической композиции
ВГК.
Изучение макропрепаратов комплекса спаянных органов в месте повреждения висцеральной поверхности и капсулы селезенки , вызванного
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 порошком таблеток Альтабора , показало , что в группе Контрольная патология 3 у
100% крыс (у 6 из 6) изменения характеризовались белесыми напластовываниями
на диафрагмальной поверхности , которые распространяются на большую
поверхность органа . Эти изменения сочетались с плоскостными спайками
висцеральной поверхности селезенки (желудочной части ее) с прилегающей
хвостовой частью поджелудочной железы .
В группе Порошок таблеток Альтабора + Фармацевтическая композиция ВГК в 33,3% крыс не было видимых изменений поверхности органа . В 16,7% крыс белесые наслоения распространялись на диафрагмальной поверхности органа , а в 33,3%о крыс - на диафрагмальной поверхности органа . Только у 16,7% крыс распространены белесые наслоения на диафрагмальной поверхности селезенки
сочетались с небольшими спайками желудочной части висцеральной поверхности с прилегающей хвостовой частью поджелудочной железы .
Морфологические исследования развития спаечного процесса в брюшной полости крыс после повреждения висцеральной поверхности и капсулы селезенки , вызванного порошком таблеток Альтабора , показывают , что у крыс группы Контрольная патология 3 резко увеличена толщина капсулы диафрагмальной поверхности органа за счет разрастания коллагеновых волокон . Местами видны и утолщение трабекулы , что отходит от капсулы . В ряде случаев в утолщенной капсуле видно достаточно крупные очаги воспаления . Во всех животных наблюдали плоскостные сращения капсулы висцеральной поверхности селезенки с клетчаткой , окружающей поджелудочную железу . В этих спайках основу ткани представляла широкая сеть ориентированных вновь коллагеновых волокон . Местами среди волокон видны отдельные гигантские клетки инородного тела . При окраске пикрофуксином по Ван -Гизону видно , что коллагеновые волокна как в капсуле , так и в спайках достаточно зрелые , выражено фуксинофильные . У
ряда животных обнаружены спайки , которые также формируются - сращение участков сальника с клетчаткой , окружающей доли поджелудочной железы . Это
достаточно большие поля густоклеточной ткани с вкраплениями хаотично расположенных коллагеновых фибрилл . В паренхиме железы обнаружены явления воспаления . Таким образом , видно , что при нанесении инородного тела -порошка таблеток Альтабора н а висцеральную поверхность селезенки ,
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
развивается сильно выраженный спаечный процесс . В 100% случаев происходит наслоение плотных масс фибрина , которые срастаются с капсулой диафрагмальной поверхности и развитие плотных плоскостных спаек между участками сальника и висцеральной поверхностью селезенки , а также клетчаткой
поджелудочной железы и капсулой хвостовой доли печени - 4 балла .
В группе Порошок таблеток Альтабора + Фармацевтическая композиция ВГК в 33,3% крыс капсула диафрагмальной поверхности селезенки не изменена или изменения были очень небольшие - где -то н а поверхности несколько утолщенной капсулы видны нити фибрина , единичные гигантские клетки инородного тела . Висцеральная поверхность органа интактна . У других животных
отмечено умеренно вариабельное утолщение капсулы диафрагмальной
поверхности . Коллагеновые волокна в ней несколько менее плотно упакованы п о
сравнению с крысами из группы Контрольная патология 3 . На висцеральной поверхности видны спайки с клетчаткой , окружающей дольки поджелудочной
железы , но , в отличие от контроля , основу спаек представляла менее зрелая нежная рыхлая волокнистая ткань .
Изучение влияния фармацевтических композиций н а развитие спаек в
брюшной полости крыс после химического повреждения червеобразного отростка слепой кишки , вызванного спиртовым раствором йода , показало следующие результаты .
После химического повреждения червеобразного отростка слепой кишки ,
вызванного 5% спиртовым раствором йода , у животных экспериментальных групп
не наблюдалось значимых нарушений трофических процессов и общего
функционального состояния организма , на что указывает динамика массы тела крыс - это видно из данных , предоставленных в таблице 6.
Таблица 16
Масса тела крыс , в г
В экспериментальной группе Раствор йода + Фармацевтическая композиция , фармацевтическая композиция ВГК способствует достоверному по сравнению с группой Контрольная патология 3, снижению количества животных с спайками на 50% (в 3 из 6), а фармацевтическая композиция НГК на 33% (4 из 6) -это видно из данных таблицы 17.
Предоставленная в таблице 18 балльная оценка выраженности спаечного
процесса свидетельствует о значительной противоспаечной активности
фармацевтической композиции ВГК, на что указывает достоверное , относительно группы Контрольная патология 4, снижение количества баллов в 1,5 раза , а противоспаечная активность фармацевтической композиции НГК - в 1,2 раза
Определение массы посеченного комплекса спаянных органов у крыс после повреждения червеобразного отростка слепой кишки , вызванного спиртовым раствором йода (смотреть таблицу 19), также показало , что фармацевтическая
композиция ВГК способствует достоверному по сравнению с группой Контрольная
патология 4 , снижению массы комплекса спаянных органов в 1,7 раза , а фармацевтическая композиция НГК - в 1,3 раза , что также указывает на более
выраженное противоспаечное действие фармацевтической композиции ВГК .
Изучение макропрепаратов комплекса спаянных органов в месте повреждения червеобразного отростка слепой кишки , вызванного спиртовым раствором йода , показало , что в группе Контрольная патология 4 в 100% крыс (у 6 из 6) отмечены значительные белесые наслоения на верхушке отростка и
плоскостные сращения тела с петлей прилегающей тонкой кишки .
В группе Раствор йода + Фармацевтическая композиция ВГК в 33,3% крыс изменений поверхности не обнаружено , у 16,7% животных имели место умеренные белесые наслоения на верхушке отростка , которые сочетались с
точечными шнурообразными сращениями с прилегающей петлей тонкой кишки . В
50,0% крыс наблюдали выраженные белесые наслоения на верхушке отростка и плоскостные сращения с петлей тонкой кишки .
Морфологические исследования развития спаечного процесса в брюшной полости крыс после повреждения червеобразного отростка слепой кишки , вызванного спиртовым раствором йода , показывают , что у всех крыс группы Контрольная патология 4 на верхушке червеобразного отростка прослежены различные по выраженности фибриновый отложения в виде слабо
фуксинофильной волокнистой или сетчатой массы с достаточно большим
содержанием клеточных элементов . В мышечном слое отростка видны участки дистрофии . В области тела отростка видно "подпаяные " к нему пряди сальника . Эти спайки местами имели хорошо выраженный волокнистый характер
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
Аналогичные спайки сальника обнаружены и с прилегающей к слепой кишке петлей тонкой кишки . В местах срастания определяется выраженная дезинтеграция мышечных волокон , соединительная ткань спайки прорастает мышечные волокна кишки . После химического повреждения поверхности червеобразного отростка слепой кишки спиртовым раствором йода развивается выраженный спаечный процесс - у всех крыс на верхушке отростка откладываются фибриновый наслоения , которые сочетаются с развитием плоскостных спаек между телом отростка и прилегающей петлей тонкой кишки - 3
балла .
В группе Раствор йода + Фармацевтическая композиция ВГК как на верхушке , так и теле червеобразного отростка в 33,3% крыс обнаружены лишь небольшие фибриновый отложения . При этом мышечный слой не поврежден . У 50% животных фибриновый отложения на верхушке отростка были мощные , видно пряди сальника , которые "подпаяны " к телу отростка . Местами они зрелого волокнистого характера , но тем не менее мышечный слой отростка практически
не поврежден . Выявленные спайки и с соответствующей петлей тонкой кишки . В
местах срастания имеет место дезинтеграция мышечных волокон , но соединительная ткань спайки не прорастающая мышечные волокна кишки . Ткань спаек менее зрелая , чем в группе Контрольная патология 4 .
Таким образом , по результатам исследований н а четырех моделях спаечного процесса в брюшной полости (прошивка шелковой нитью брыжейки 2-перстной кишки , скарификация червеобразного отростка слепой кишки ,
нанесенние порошка таблеток Альтабора на висцеральную поверхность селезенки , смазывание 5% спиртовым раствором йода червеобразного отростка слепой кишки ) установлено , что фармацевтическая композиция ВГК проявляет выраженное противоспаечное действие , уменьшая при этом количество спаек , объем фибриновых масс. которые откладываются в местах хирургического вмешательства , объем и распространение сращений , а также препятствует ускоренному созреванию соединительной ткани спаек .
Фармацевтические композиции по техническому решению проявляют
широкую терапевтическую активность , обладают противовоспалительным ,
антисептическим , регенерирующим и увлажняющим действием , и в частности ,
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 могут использоваться как средство для ускорения заживления ран . Для изучения
терапевтической активности фармацевтических композиций по примерам 3,6 было проведено исследование действия фармацевтической композиции на заживление ран на трех моделях ран - рана от химического ожога , рана от термического ожога , и "полнослойная кожная рана ".
Ранозаживляющее действие фармацевтических композиций изучали на модели раны от химического ожога у крыс , вызванного действием 20%-ного раствора КОН . Под действием КОН на месте поражения активно развивалась
гиперемия , а затем участок кожи покрывался некротической корочкой (струпом ),
которая подсыхала , постепенно отторгалась и отпадала . Лечение начинали со следующего дня , нанося каждый день по 0,4 г фармацевтической композиции на всю поверхность раны животных в экспериментальной группе . Контролем служила группа крыс с раной , которая не лечилась . Периодически измеряли площадь ран в каждой группе животных и проводили гистологические исследования участков ткани раневой поверхности . Процесс заживления раны проходил под струпом и состоял в оттягивании краев раны , уменьшении ее размеров и закрытии .
В контрольной группе на 16 день у 50% животных еще оставались небольшие участки ран , которые не зажили . У животных экспериментальной группы , в которых раны лечили , процесс регенерации кожи проходил значительно быстрее и уже к 11-му дню наблюдалось отторжение струпа , а на 17 день отмечено закрытие раны . Средний срок заживления (эпителизации ) раны в контрольной группе составлял 23,5 суток , а в экспериментальных группах - 16,4 суток .
Гистологические исследования ткани раневой поверхности показали , что при химическом ожоге кожи наблюдается картина выраженного воспалительного процесса . В контрольной группе на 5 день сосуды расширены и заполнены эритроцитами , значительные кровоизлияния и отек ткани под струпом ,
выраженная лейкоцитарная инфильтрация . На 13 день опыта воспалительная
реакция была менее выражена . Н а 18 день опыта признаки воспалительной реакции отсутствовали и наблюдалась эпителизация .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
В группе , где раны лечили фармацевтическими композициями ВГК и НГК
большее ранозаживляющее действие проявила композиция на основе НГК, на 5 день опыта воспалительный процесс был менее выражен , чем в контрольной группе животных . Гиперемия прилегающих тканей незначительная , кровоизлияний не отмечено , на месте раневого дефекта появилась грануляционная ткань , по краям которой образовывался эпителиальный слой . Уже на 10-12 день новый эпителиальный слой покрывал участок соединительной ткани , образовавшейся на месте раневого дефекта кожи . Полученные результаты свидетельствуют об
эффективности использования фармацевтической композиции на основе НГК для
лечения ран от химического ожога , и ускорения процесса заживления раны .
Ранозаживляющее действие фармацевтических композиций на основе ВГК и НГК была изучена н а модели раны от термического ожога у крыс , вызванного локальной (площадь поражения примерно 300 мм2) действием высокой температуры 250° С. Лечение , наблюдение за животными проводили также, как в примере 1. Под действием высокой температуры у крыс на коже спины возникал ожог 3-й степени , который протекал с явлениями гнойного воспаления и
демаркации некротической ткани , наблюдалось отслоение всех слоев
эпидермиса . Глубокие слои дермы , которые сохранились были набухшие , отек распространялся на подкожную клетчатку . На границе омертвевших тканей и
жизнеспособных , через сутки образовался струп бурого цвета . Гистологическая
картина ожоговой поверхности характеризовалась признаками воспалительного процесса .
В контрольной группе животных до 15 дня струп подсыхал и отпадал , а к 20 дню признаки воспаления отсутствовали . С эпителиальных придатков кожи и остатков мальпигиевого слоя эпидермиса , которые сохранились , происходило разрастание эпителия по грануляции , за счет чего раны заживали только на 26 день .
В экспериментальной группе фармацевтическая композиция на основе НГК
проявила большую активность по сравнению с ВГК , композиция на основе НГК активизировала процесс заживления раны - до 7 дня струп подсыхал и отторгался , до 16 дня процесс эпителизации полностью заканчивался , и до 22 дня
наблюдалось закрытие раневой поверхности волосяным покровом . Полученные
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
результаты свидетельствуют об эффективности использования
фармацевтической композиции для лечения ран от термического ожога , и
ускорения процесса заживления раны .
Ранозаживляющее действие фармацевтических композиций была изучена на модели "полнослойной кожной раны ", которую получали под общим гексеналовым наркозом , иссечением у крыс в области передней лопатки кожного лоскута площадью примерно 200 мм2. Лечение , наблюдение за животными проводили , как в примере 1. Гистологическая картина раневой поверхности характеризовалась признаками гнойного воспаления .
В контрольной группе животных только на двенадцатый день после начала
эксперимента начиналось образование грануляционной ткани , которая
постепенно заполняла раневой дефект . На 21 сутки наблюдалась плоскостная эпителизация , а окончательное заживление происходило до 27 дня .
В экспериментальной группе при использовании фармацевтических
композиций на основе НГК и ВГК большую активность проявила композиция на
основе НГК, животные на двенадцатый день после начала эксперимента
наблюдалась плоскостная эпителизация . Окончательное заживление раны
происходило до 17 дня . Полученные результаты свидетельствуют об
эффективности использования фармацевтической композиции на основе НГК для
лечения ран от механического воздействия на кожу , и ускорения процесса заживления раны .
Таким образом , по результатам исследований на трех моделях ран установлено , что фармацевтическая композиция на основе НГК проявляет выраженную терапевтическую активность по ускорению процесса заживления ран различного происхождения .
Для изучения влияния фармацевтических композиций на развитие спаек ,
действия фармацевтических композиции на заживление ран , были проведены
исследования на пациентах .
В исследовании приняли участие 85 пациентов . Все включенные в исследование пациенты были разделены на 4 клинические группы . В каждой
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
группе были выделены по 2 подгруппы , для которых использовались фармацевтические композиции ВГК и НГК, соответствующие подгруппы были разделены еще на три подгруппы для исследования действия фармацевтических
композиций с содержанием гиалуроновой кислоты различной молекулярной
массы . Подгруппы были сопоставимы по количественному составу , полу , возрасту и виду выполненных операций .
Контрольная група
1-я группа (п=25)
2-я группа (п=24)
3-я группа (п=24)
Пол
НГК п=36
ВГК п=36
НГК п=13
ВГК п=12
НГК п=12
ВГК п=12
НГК п=12
ВГК п=12
Мужчин ы
52,5±6, 3
54,5±5, 3
53,8±6, 6
56,0±6, 8
53,7±5, 2
58,4±2, 6
Женщин ы
51,6±4, 8
57,5±3, 3
59,9±2, 2
62,5±4, 8
60,6±5, 1
64,1±3, 7
27,4±3, 9
30,4±2, 0
В 1-ю группу вошли 38 пациентов , перенесших плановую лапаротомию и резекцию органов (Таб 22)
Таблица 22. Операции , выполненные в 1-й группе
Операц1я
Контрольная группа
Основная группа
НГК п=12
ВГКп=12
ВГКп=12
ВГК п=12
100 кДа
250 кДа
400 кДа
500 кДа
1 млнДа
2,5 млнДа
Препарат
Препарат
Препарат
Препарат
Препарат
Препарат
Резекция желудка
Га строе кто ми я
Одноетапная резекция сигмовиднойТ кишки
Одноетапная
левостороння
гемиколектом ия
Одноетапная правосторонн яя
гемиколектом ия
Всем пациентам проводили послеоперационную ультразвуковую диагностику спайкообразования .
При сравнении данных таблиц 23.1 и 23.2 видно , что в отличие от контрольной группы , в которой применялись растворы гиалуроновой кислоты
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
различной молекулярной массы , в основной группе , в которой применялись
препараты N2I -6 подпаивание петель тонкой кишки к срединному рубцу
уменьшалось на 20-25 %
Таблица 23.1 Амплитуда скольжения внутренностей у пациентов 1-й группы
(контроль )
н со
н со
н со
н со
н со
\ 1
/-1
1= см
1= со
CZ ю
1= CD
сут
сутк
сутк
сутк
сутк
сутк
сутк
сутк
сутк
сутк
сутк
сутк
Менее
3(6
2(40
2(50
2(50
2(50
2(50
2(25
2(50
1(25
2(50
1(25
1(25
0% )
Более
2(4
3(60
2(50
2(50
2(50
2(50
2(75
2(50
3(75
2(50
3(75
3(75
0% )
Примечание. * - Р <0,01 по сравнению с контрольной группой.
При сравнении действия препаратов 1-3 и 4-6 видно , что препараты 4-6 значительно знижчують возможность образований спаек , а именно на 20-25%.
Однако такая оценка при несомненной преимуществу отсутствии инвазии не позволяет определить распространенность спаечного процесса среди отделов брюшной полости и макроскопический характер спаек .
К второй группе отнесены 48 пациентов , перенесших двухэтапную лапаротомную колоректальную операцию с интервалом более 2 мес (табл 24):
100 кДа
250 кДа
400 кДа
500 кДа
1 млнДа
2,5 млнДа
Препарат
Препарат
Препарат
Препарат
Препарат
Препарат
Левосторонн
ге ми коле кто
мия
Резекция
сигмовидной
кишки
Колоректаль
ная
передняя
резекция
Всем пациентам при повторном вмешательс тве выполнялась интраоперационная диагностика распространения спаечного процесса по анкете в 13-ти областях брюшины .
Схема оценки спаечного процесса при общехирургических операциях
(ответ )
Спайки
Анатомическая область наЛ1ЯИе тяжесть распространенность
, пленчатые , плотные , •> /¦?/
есть нет нет области
умеренные выраженные 5 ¦> •>
Париетальные спайки
Краниальная передняя париетальная брюшина Краниальная париетальная брюшина справа
Краниальная париетальная брюшина слева Каудальная передняя париетальная брюшина
Правая стенка таза Левая стенка таза
Висцеральные спайки
С большим сальником
С он ой кишкой
В подпеченочном пространстве
С правой половиной ободочной кишки С левой половиной ободочной кишки
У ректосигмокда
В а оч н о- прямо кишечной пространстве
Таб 25.1 . Бальная оценка спаечного процесса при общехирургических операциях
в каждой из 13 областей
Охвачено
Спайки
<1/3 области
1/3-2/3 облас-ri
> 2/3 област1
плоскостные
плотные
плоскостные
плотные
плоскостные
плотные
100 кДа
250 кДа
400 "Да
500 кДа
млнДа
7 1
Таб 25.2. Бальная оценка спаечного процесса при общехирургических операциях
в каждой из 13 областей
Из приведенных выше таблиц 25.1 и 25.2 видно , что применение фармацевтических композиций (препарат 1-6) приводит к уменьшению образования спаек на 76%.
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
В третьей группе вошло 48 пациентов , перенесших лапароскопические операции на придатках матки по поводу трубно -перитонеального бесплодия с интервалом 2 мес (Таб 26)
Классификация Американского общества фертильности (1979)
обнаруживает 4 степени тяжести заболевания в зависимости от количества и размеров очагов поражения спайками (American Fertility Society. Classification of endometriosis // Fertil. Steril. - 1979, Vol. 32, NQ5-6, 633-634) :
I. наличие 1-5 спаек - относят к легкой степени
II. 6-15 - д о умеренной
III. 15-30 - до тяжелой
IV. более 30 очагов классифицируют как распространен эндометриоз
В 1985 году на основе этой классификации была опубликована система
балльной оценки степени распространения спаечного процесса (таб .27)
Таблица 27
I п пайки ' < ^ запаяно ; 1/3 - 2/3 запаяно I > 2/3 запаяно !
(объем поврежденной ткани)
Нежные
Правый
Плотные
Плотные
Плотные
Плотные
' Полностью запаяный фимбриальный отдел трубы стоит оценивать "> 16"
Таб 28.1 . Бальная оценка спаечного процесса при общехирургических операциях в каждой из 13 областей (группа 3 контроль )
Таб 28.2. Бальная оценка спаечного процесса при общехирургических операциях в каждой из 13 областей (группа 3 основная )
По данным шкалы AFS из таблиц 28.1 и 28.2 видно , что тяжесть распространения спаечного процесса в малом тазу при использовании препаратов 1-6 уменьшилась в среднем соответственно на 76%.
При ТВУЗИ у гинекологических больных не было выявлено : 1) размывания границ яичника , которое определяется как отсутствие четкого контура яичника в течение более 304 его протяженности 2) связи яичника с маткой , которая оставалась при пальпации живота ; 3) увеличение расстояния от яичника к датчику более 11 м м , которое сохранялось при пальпации живота
В исследовании препаратов 1-6 на ранозаживляющее действие приняли участие 24 пациента . Пациенты имели различные поверхностные повреждения (дно ран были представлены мышечной тканью ). Пациенты были разделены на 12 групп по 2 человека , которым в соответствии назначали препараты 1-6 и
гиалуроновую кислоту различной молекулярной массы .
В первые сутки после применения препаратов 1-6 макроскопические края ран были умеренно инфильтрированы , сохранялась отечность и гиперемия кожных покровов вокруг ран , поверхность раневого дефекта была покрыта фибринозной пленкой ; экссудат серозно - гнойного характера был умеренного количества . Н а вторые сутки размер раневого дефекта уменьшается с среднем на 30%, сохраняется инфильтрация краев ран , незначительное количество серозного экссудата ; на дне раны является вялые грануляции . Н а 3-4 сутки воспалительные симптомы купируются , и начинается активное гранулирование .
грануляций
эпителизации
100 "Да
250 кДа
400 кДа
500 кДа
1 млнДа
5,5
2,5 млнДа
Препарат 1
2,5
4,5
9,5
Препарат 2
Препарат 3
5,5
Препарат 4
Препарат 5
Препарат 6
Как видно из таблицы 30 препараты 1-6 способствуют скорейшему заживлению ран благодаря присутствию декаметоксина в составе , что способствует обеззараживанию поверхности раны и дает возможность эпителию с большей скоростью восстанавливаться .
Также было проведено исследование фармацевтических композиций ГК + декаметоксин .
В сравнительном исследовании эффективности и переносимости
фармацевтической композиции ГК с декаметоксином при острой вагинальной
инфекции приняли участие 90 женщин (45 с диагнозом бактериальный вагиноз и
45 - вагинальный кандидоз ). 50 пациентов получали фармацевтическую
композицию ГК с декаметоксином (5 мл 1-2 раза в день ), 25 пациентов - 0,5% фармацевтическую композицию ГК с хлоргексидином (2,5 г / сут), 15 пациентов -
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 2% фармацевтическую композицию ГК с метронидазолом один раз в день .
Продолжительность проведения исследований - 4 недели .
При бактериальном вагинозе клиническое лечение наблюдалось у 90% пациентов , получавших фармацевтическую композицию ГК с декаметоксном , по сравнению с 75% в группе пациентов , получавших фармацевтическую композицию ГК с хлоргексидином ; также в случае с применением фармацевтической композицию ГК с декаметоксином отмечалось значительное снижение рН влагалища до 3 недели исследования (в случае с хлоргекседина до 4 недели ). При вагинальном кандидозе клиническое лечение наблюдалось у 85% пациентов , получавших фармацевтическую композицию ГК с декаметоксином , по сравнению с 80% в группе женщин , получавших фармацевтическую композицию ГК с хлоргексидином .
При проведении исследований фармацевтической композиции ГК с
декаметоксином не было выявлено каких -либо серьезных побочных эффектов . Переносимость фармацевтической композиции была оценена как "очень хорошая " большинством (90%) пациентов .
Таким образом , при бактериальном вагинозе и вагинальном кандидозе фармацевтическая композиция ГК с декаметоксином показала свою
эффективность , и короткий курс терапии данной фармацевтической композицией эквивалентный по эффективности стандартным методикам .
Для изучения биоадгезивного свойства при применении в медицине фармацевтической композиции ГК с декаметокосином были проведены следующие исследования :
Были проанализированы течение родов у 120 женщин . Основную группу (первая группа ) составили 60 пациентов , роды у которых велись с использованием фармацевтической композиции ГК с декаметоксином и
гиалуроновой кислотой . Контрольную группу (вторая группа ) составила 60
пациентов , у которых при проведении родов данный гель не использовался .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
Средний возраст рожениц основной группы составил 28 лет , контрольной
группы - 29 лет . Было обнаружено , что число первенцев в основной группе
составило 30 (50%), в контрольной группе - 32 (53,3%).
Повторные роды имели место в основной группе у 25 (41 ,6%) женщин , у 20 (33,3%) - в контрольной группе .
Третьи и более роды были отмечены у 5 (8,3%) рожениц основной группы и у 8 (13,3%) - контрольной .
Травмы мягких тканей родовых путей в анамнезе имели 20 (33,3%) пациентов основной группы и 15 (25%) - контрольной ; разрывы шейки матки были в анамнезе у 5 (8,3%) женщин основной и у 5 (8,3%) - контрольной группы ; травмы промежности - у 12 (20%) и 10 (16,6%) рожениц соответственно .
Все женщины как основной , так и контрольной групп поступали в родовое отделение в первом периоде родов . В течение всего периода родов осуществлялось мониторного наблюдения за состоянием плода и сократительной активностью матки .
Фармацевтическая композиция ГК с декаметоксином применяли во время родов при каждом вагинальном осмотре , начиная с первого : 5 мл геля равномерно распределяли по вагинальному родовому каналу . Дополнительное нанесение геля осуществляли через 15-30 минут после разрыва плодных оболочек или амниотомии .
Результат :
Анализ травматизма влагалища имели место у 5 (8,3%) женщин основной
группы и у 10 (16,6%) - контрольной группы . Разрывы шейки матки были обнаружены нами в 3 (5%) пациентов 1-й группы и у 15 (25%) - контрольной . В 2 случаях (3,3%) у рожениц основной группы (крупный плод ) и в 3 (5%) случаях в контрольной группе (крупный плод , угрожающий разрыв промежности по старому
рубцу) была проведена эпизиотомия .
Боль как низкая была оценена 35 (58,3%) роженицами основной и 15 (25%) -контрольной групп ; как умеренная - 36 (60%) - основная группа , и 32 (53,3%) -
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047 контрольная . Жалобы на выраженную боль предъявляли 5 (8,3%) пациенток 2-й
группы . В основной группе жалоб на выраженную боль в родах не было .
Таким образом , использование при ведении родов фармацевтической композиции ГК с декаметоксином позволило снизить количество случаев травматизма мягких тканей половых путей , сократить продолжительность родов и снизить частоту оперативного родоразрешения . Кроме того , у всех пациентов
контрольной группы отмечалось снижение болевого синдрома , по субъективным
ощущениям женщин значительно облегчает течение родов . Преимущества фармацевтической композиции :
Фармацевтическая композиция сильные биоадгезивные свойства и высокую способность связывать воду . Данные свойства фармацевтической композиции
обеспечивает гиалуроновая кислота , которая входит в состав фармацевтической
композиции (ГК связывает и удерживает воду. Одна ее молекула связывает до тысячи молекул воды ).
Как результат , данная фармацевтическая композиция образует
слабовязкую биоадгезивную пленку на влагалищном родильном канале , снижая трение между ним и ребенком , которое может приводить к осложнению процесса родов . Данная пленка сохраняет естественную влажность кожи , не нарушая
газообмена .
Также одним из основных преимуществ гиалуроновой кислоты это то, что ГК является естественным компонентом нашего организма , поэтому прекрасно совместима с кожей и не вызывает аллергических реакций и раздражений .
"+" низкая активность ;
"++" хорошая активность ;
"+++" высокая активность
Вывод : по результатам сравнительных исследований Фармацевтическая композиция ГК с декаметоксином проявляет бактерицидное действие по отношению к анаэробным бактериям , и бактериостатическое по отношению к простейшим . Активна в отношении большинства штаммов микроорганизмов , которые вызывают бактериальный вагиноз : Gardnerella vaginalis, Bacteroides spp., Mobiluncus spp., Peptostreptococcus spp.
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
Для исследования фармацевтических композиций были применены многие современные исследований , прот в описании представлены лишь часть исследований , которая должна показать достижения поставленных задач , однако ни в коем случае не ограничивает техническое решение .
Из представленных исследований очевидно , щзо фармацевтические
композиции на основе стабилизированного раствора гиалуроновой кислоты и /
или ее фармацевтически приемлемых солей вместе с декаметоксином и / или его водорастворимых солей оказывают эффективное действие как для предотвращения спайкоутворення и к и для ранозаживляющее , бактерицидного действия . Фармацевтические композиции с ВГК и декаметоксином в большей степени направлены на предотвращение спайкоутворення , чем НГК, однако НГК
больше эффективна с инфекциями в разных частях организма . И поэтому такие
композиции могут быть применены в некоторых случаях отдельно . А в некоторых вместе . Поскольку эффективное сочетание таких композиций может охватить весь спектр действия препарата от вагинальных инфекций , родов , оперативного
лечения и избежания спайкоутворення .
С приведенего выше видно , что техническим результатом является получение стабилизированных раствора , содержащего декаметоксин и гиалуроновую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль , без образования осадка в растворе , и который проявляет противовоспалительное , антисептическое , регенерирующее и увлажняющее действие , в частности , имеет терапевтическую активность в отношении подавления спаечного процесса и
получение фармацевтической композиции в фармацевтически приемлемой лекарственной форме на основе этого стабилизированного раствора , которая
имеет терапевтическую активность , в частности , проявляет выраженное терапевтическое действие в отношении ускорения процесса заживления ран различного происхождения , а также расширение ассортимента лекарственных средств , имеющих терапевтическую активность в отношении подавления спаечного процесса и активность по ускорению процесса заживления ран различного происхождения .
Приведенные примеры осуществления технического решения только иллюстрируют его , но не ограничивают .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ФОРМУЛА
1. Стабилизированный раствор на основе двух активных веществ , который имеет терапевтическую активность , который отличается тем , что дополнительно содержит стабилизатор , как первое активное вещество используют гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль , как второе активное вещество используют декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , причем
стабилизатор является фармацевтически приемлемой солью , которая способна к
растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью таких солей , при этом стабилизатор
имеет способность образовывать одновременно с гиалуроновой кислотой и/или ее фармацевтически приемлемой солью и с декаметоксином и/или его
растворимой в воде солью , растворимые в воде соединения .
2. Стабилизированный раствор по пункту 1, который отличается тем , что
стабилизатор является нетоксичной солью или малотоксичной солью
неорганических кислот , органических моно - и дикарбоновых кислот , или смесью
таких солей .
3. Стабилизированный раствор по пункту 2, который отличается тем , что стабилизатор является хлоридом натрия , сукцинатом натрия , лактатом натрия , хлоридом цинка , сульфатом цинка или любой их смесью .
4. Стабилизированный раствор по пункту 1, который отличается тем , что содержит гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль , декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , стабилизатор и воду , при таком соотношении компонентов , в м г/мл :
гиалуроновая кислота и/или ее фармацевтически приемлемая соль
1-50
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль
0,01-10
стабилизатор
1-60
вода
остальное до 1 мл
5. Стабилизированный раствор по любому из пунктов 1-3, который отличается
тем , что содержит гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 соль , декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , стабилизатор и воду , и
дополнительно содержит по крайней мере одну фармацевтически приемлемую
добавку , при таком соотношении компонентов , в мг/мл:
гиалуроновая кислота и/или ее фармацевтически приемлемая соль
1-50
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль
0,01-10
стабилизатор
1-60
фармацевтически приемлемая добавка
1-60
вода
решта до 1 мл
6. Стабилизированный раствор по пункту 5, который отличается тем , что содержит как фармацевтически приемлемую добавку агент для поддержания рН раствора на постоянном уровне .
7. Стабилизированный раствор по пункту 6, который отличается тем , что содержит сукцинат натрия в качестве стабилизатора и янтарную кислоту в качестве агента для поддержания р Н раствора на постоянном уровне .
8. Стабилизированный раствор по пункту 6, который отличается тем , что содержит лактат натрия в качестве стабилизатора и молочную кислоту в качестве агента для поддержания р Н раствора на постоянном уровне .
9. Стабилизированный раствор по любому из пунктов 5-7, который отличается тем , что является водным раствором , который содержит гиалуроновую кислоту и /или е е фармацевтически приемлемую соль , сукцинат натрия , янтарную кислоту , натрия хлорид , декаметоксин и/или его растворимую в воде соль и воду, при
таком соотношении компонентов , в м г/мл :
гиалуроновая кислота и/или ее фармацевтически
приемлемая соль 5
сукцинат натрия 16
янтарная кислота 0,05
натрия хлорид ,2
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль 0,2.
вода остальное до 1 мл
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
10. Способ получения стабилизированного раствора по пункту 1, который отличается тем , что в воде растворяют одно из активных веществ и стабилизатор , и затем в образованном растворе при перемешивании растворяют второе активное вещество д о его полного растворения , причем как активные вещества используют гиалуроновую кислоту и/ или ее фармацевтически приемлемую соль и декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , а
стабилизатор является фармацевтически приемлемой солью , которая способна к
растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью таких солей , при этом стабилизатор
имеет способность образовывать одновременно с гиалуроновой кислотой и/или ее фармацевтически приемлемой солью и с декаметоксином и/или его
растворимой в воде солью , растворимые в воде соединения .
11. Способ по пункту 10, который отличается тем , что в воде растворяют стабилизатор , затем растворяют декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , после чего в образованном растворе растворяют гиалуроновую кислоту
и/или ее фармацевтически приемлемую соль .
12. Способ по пункту 10, который отличается тем , что в воде растворяют декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , затем растворяют стабилизатор , после чего в образованном растворе растворяют гиалуроновую
кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль .
13. Способ по пункту 10, который отличается тем , что в воде растворяют стабилизатор , затем растворяют гиалуроновую кислоту и/или ее
фармацевтически приемлемую соль , после чего в образованном растворе
растворяют декаметоксин и/или его растворимую в воде соль .
14. Способ по пункту 10, который отличается тем , что в воде растворяют гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль , затем растворяют стабилизатор , после чего в образованном растворе растворяют декаметоксин и/или его растворимую в воде соль .
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
15. Способ по любому из пунктов 10-14, который отличается тем , что рН
стабилизированного раствора дополнительно доводят до желаемой величины
путем добавления кислоты или основания .
16. Способ по любому из пунктов 10-1 5, который отличается тем , что
стабилизированный раствор дополнительно стерилизуют автоклавированием .
17. Способ по п. 10, который отличается тем , что берут компоненты в следующих соотношениях :
гиалуроновая кислота и/или ее фармацевтически приемлемая соль с молекулярной массою от 400 кДа до 2,5 млн.Да
1-50
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль
0,01-10
стабилизатор
1-60
фармацевтически приемлемая добавка
1-60
вода
остальное до 1 мл
18. Фармацевтическая композиция на основе стабилизированного раствора двух
активных веществ , которая отличается тем , что содержит , как первое активное
вещество , высокомолекулярную гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически
приемлемую соль , причем молекулярная масса такой кислоты или соли может
быть от 400 кДа до 2, 5 млн Да, как второе активное вещество , содержит
декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , стабилизатор , который
является фармацевтически приемлемой солью , которая способна к растворению
в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью таких солей , при этом стабилизатор имеет
способность образовывать одновременно с гиалуроновой кислотой и/или ее фармацевтически приемлемой солью и с декаметоксином и/или его растворимой
в воде солью растворимые в воде соединения а также содержит п о крайней мере
одну фармацевтически приемлемую добавку .
19. Фармацевтическая композиция по п .18, которая отличается тем , что
содержит компоненты в следующем соотношении :
гиалуроновая кислота и/или ее фармацевтически
приемлемая соль с молекулярной массою от 400 "Да до 2,5
млн . а
1-50
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль
0,01-10
стабилизатор
1-60
фармацевтически приемлемая добавка
1-60
вода
решта до 1мл
20. Фармацевтическая композиция по пункту 19, которая отличается тем , что
стабилизатор является нетоксичной солью или малотоксичной солью
неорганической кислоты , органической монокарбоновой или дикарбоновой кислоты , или любой смесью таких солей .
2 1. Фармацевтическая композиция по пункту 20, которая отличается тем , что стабилизатор является хлоридом натрия , сукцинатом натрия , лактатом натрия , хлоридом цинка , сульфатом цинка , или любой смесью этих солей .
22. Фармацевтическая композиция по пункту 2 1, которая фармацевтически приемлемой солью высокомолекулярной
является гиалуронат натрия .
отличается тем , что
гиалуроновой кислоты
23. Фармацевтическая композиция по пункту 19, которая отличается тем , что как фармацевтически приемлемую добавку содержит агент для корректировки рН
или буфер .
24. Фармацевтическая композиция по пункту 23, которая отличается тем , что
буфер содержит фосфатный буфер или цитратный буфер или ацетатный буфер или сукцинатний буфер или трисгидрохлорид буфер или малеатний буфер .
25. Фармацевтическая композиция п о пункту 23, которая отличается
тем , что в
качестве агента хлористоводородная кислота , уксусная молочная кислота
для корректировки рН содержит вещество из ряда кислота , серная кислота , азотная кислота , фосфорная кислота , пропионовая кислота , гидроксиуксусная кислота , пировиноградная кислота , щавелевая кислота , малоновая
кислота , янтарная кислота
малеиновая
кислота
фумаровая
кислота , винная
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 кислота , лимонная кислота , аскорбиновая кислота , уксуснокислый аммоний ,
раствор аммиака , гидроксид щелочноземельного металла , гидроксид щелочного
металла , натрия карбонат , натрия гидрокарбонат , натрия фосфат .
26. Фармацевтическая композиция по пункту 23, которая отличается тем , что в качестве стабилизатора содержит сукцинат натрия , а как агент для корректировки рН содержит янтарную кислоту .
27. Фармацевтическая композиция по пункту 23, которая отличается тем , что в качестве стабилизатора содержит лактат натрия , а как агент для корректировки
р Н раствора содержит молочную кислоту .
28. Фармацевтическая композиция по пункту 19, которая отличается тем , что е е применяют для подавления спаечного процесса .
29. Фармацевтическая композиция п о пункту 19 , которая отличается тем , что ее применяют для защиты органов от образования спаек и избежания обезвоживания органов с одновременным противовоспалительным действием .
30. Фармацевтическая композиция п о пункту 19 , которая отличается тем , что
как фармацевтически приемлемую добавку содержит по крайней мере один используемый вспомогательный фармацевтический компонент для перевода ее в лекарственную форму от мягкой до жидкой .
31. Фармацевтическая композиция п о пункту 30, которая отличается тем , что ее лекарственной формой является аэрозоль , суспензия , сироп , капли , раствор для инъекций , крем , гель , мазь , паста , линимент , раствор для наружного применения , раствор для приема внутрь .
32. Фармацевтическая композиция п о пункту 30, которая отличается тем , что
как фармацевтически приемлемую добавку содержит по крайней мере один вспомогательный фармацевтический компонент из ряда регулятор вязкости ,
консервант , антиоксидант .
33. Фармацевтическая композиция по пункту 32, которая отличается тем , что как регулятор вязкости содержит вещество из ряда : производное алкилцелюлозы ,
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
производное гидроксиалкилцелюлозы , метилцеллюлоза ,
гидроксипропилметилцеллюлоза , гидроксибутилцелюлоза ,
карбоксиметилцеллюлоза , крахмал , ксантановая камедь , гуаровая камедь , полиакриловые кислоты и их соли , сополимеры метакрилата , полиэтиленоксид , полипропиленоксид , производные хитина , крахмал , пектин , альгиновая кислота , циклодекстрин , агар -агар , каррагинан .
34. Фармацевтическая композиция по пункту 32, которая отличается тем , что в качестве консерванта содержит вещество из ряда : хлорид лауралкония , хлорид бензалкония , хлорид бензододециния , хлорид цетилперидина , цетримид , домифен бромид , бензиловый спирт , хлорбутанол , о-крезол , хлорокрезол , фенол , этилфениловый спирт , бензойная кислота , натрия бензоат , сорбиновая кислота ,
калиевая соль сорбиновой кислоты , парааминобензойная кислота , метил парагидроксибензоат , пропил парагидроксибензоат .
35. Фармацевтическая композиция по пункту 32, которая отличается тем , что в качестве антиоксиданта содержит вещество из ряда натрия метабисульфит ,
натрия бисульфит , натрия сульфит , натрия тиосульфат , аскорбиновая кислота .
36. Фармацевтическая композиция по пункту 3 1, которая отличается тем , что ее лекарственной формой является гель , который содержит высокомолекулярную гиалуроновую кислоту и/ или ее фармацевтически приемлемую соль с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5 млн Да, декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , лактат натрия , молочную кислоту и воду , как вспомогательные фармацевтические компоненты содержит глицерин и гидроксипропилметилцеллюлозу , при таком соотношении компонентов , в мг/мл :
36.
гидроксипропилметилцеллюлоза
15-50
вода
остальное до 1 мл
37. Фармацевтическая композиция по пункту 31, которая отличается тем , что ее лекарственной формой является гель , который содержит высокомолекулярную гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль с молекулярной массой от 400 кДа до 2,5млн Да, декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , лактат натрия , молочную кислоту и воду , как вспомогательные фармацевтические компоненты содержит глицерин и гидроксипропилметилцеллюлозу , при таком соотношении компонентов , в мг/мл:
высокомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массою от 400 кДа до 2,5 млн Да
лактат натрия
1,42
молочная кислота
0,36
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль
0,2
глицерин
гидроксипропилметилцеллюлоза
вода
остальное до 1 мл
38. Фармацевтическая композиция на основе стабилизированного раствора двух активных веществ , которая отличается тем , что стабилизированный раствор двух активных веществ содержит как первое активное вещество низкомолекулярную гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль , причем молекулярная масса такой кислоты или соли может быть от 100 кДа до 400 кДа , как второе активное вещество декаметоксин и/или его
растворимую в воде соль , стабилизатор , который является фармацевтически
приемлемой солью , которая способна к растворению в воде и диссоциации в водных растворах на катионы металлов и анионы кислотных остатков или смесью таких солей , при этом стабилизатор обладает способностью образовывать
одновременно с гиалуроновой кислотой и/или ее фармацевтически приемлемой
солью и с декаметоксином и/или его растворимой воде солью , растворимые в воде соединения , а также содержит по крайней мере одну фармацевтически приемлемую добавку .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
39. Фармацевтическая композиция по п. 38, которая отличается тем , что содержит компоненты в следующем соотношении :
гиалуроновая кислота и/или ее фармацевтически приемлемая соль с молекулярной массою от 100 кДа до 400 кДа
1-50
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль
0,01-10
стабилизатор
1-60
фармацевтически приемлемая добавка
1-60
вода
остальное до 1 мл
40. Фармацевтическая композиция по пункту 38, которая отличается тем , что стабилизатор является нетоксичной солью или малотоксичной солью неорганической кислоты , органической монокарбоновой или дикарбоновой кислоты , или любой смесью таких солей .
4 1. Фармацевтическая композиция по пункту 38, которая отличается тем , что стабилизатор является хлоридом натрия , сукцинатом натрия , лактатом натрия , хлоридом цинка , сульфатом цинка , или любой смесью этих солей .
42. Фармацевтическая композиция по пункту 38, которая отличается тем , что
фармацевтически приемлемой солью низкомолекулярной гиалуроновой кислоты
является гиалуронат натрия .
43. Фармацевтическая композиция по пункту 38, которая отличается тем , что как фармацевтически приемлемую добавку содержит агент для корректировки рН
или буфер .
44. Фармацевтическая композиция по пункту 43, которая отличается тем , что
буфер содержит фосфатный буфер или цитратный буфер или ацетатный буфер или сукцинатний буфер или трисгидрохлорид буфер или малеатний буфер .
45. Фармацевтическая композиция по пункту 43, которая отличается тем , что в качестве агента для корректировки р Н содержит вещество из ряда хлористоводородная кислота , серная кислота , азотная кислота , фосфорная кислота , уксусная кислота , пропионовая кислота , гидроксиуксусная кислота ,
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047 молочная кислота , пировиноградная кислота , щавелевая кислота , малоновая кислота , янтарная кислота , малеиновая кислота , фумаровая кислота , винная кислота , лимонная кислота , аскорбиновая кислота , уксуснокислый аммоний , раствор аммиака , гидроксид щелочноземельного металла , гидроксид щелочного
металла , натрия карбонат , натрия гидрокарбонат , натрия фосфат .
46. Фармацевтическая композиция по пункту 43, которая отличается тем , что в качестве стабилизатора содержит сукцинат натрия , а как агент для корректировки рН содержит янтарную кислоту .
47. Фармацевтическая композиция по пункту 43, которая отличается тем , что в качестве стабилизатора содержит лактат натрия , а как агент для корректировки
р Н раствора содержит молочную кислоту .
48. Фармацевтическая композиция по пункту 38, которая отличается тем , что е е применяют для подавления спаечного процесса .
49. Фармацевтическая композиция п о пункту 38, которая отличается тем , что е е применяют для защиты органов от образования спаек и заживления ран с одновременным противовоспалительным действием .
50. Фармацевтическая композиция п о пункту 38, которая отличается тем , что
как фармацевтически приемлемую добавку содержит по крайней мере один используемый вспомогательный фармацевтический компонент для перевода ее в лекарственную форму от мягкой до жидкой .
51 . Фармацевтическая композиция п о пункту 50, которая отличается тем , что ее лекарственной формой является аэрозоль , суспензия , сироп , капли , раствор для инъекций , крем , гель , мазь , паста , линимент , раствор для наружного применения , раствор для приема внутрь .
52. Фармацевтическая композиция п о пункту 50, которая отличается тем , что
как фармацевтически приемлемую добавку содержит по крайней мере один вспомогательный фармацевтический компонент из ряда : регулятор вязкости ,
консервант , антиоксидант .
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
53. Фармацевтическая композиция по пункту 52, которая отличается тем , что
как регулятор вязкости содержит вещество из ряда : производное
алкилцеллюлозы , производное гидроксиалкилцелюлозы , метилцеллюлоза ,
гидрокси пропил метилцеллюлоза , гидроксибутилцелюлоза ,
карбоксиметилцеллюлоза , крахмал , ксантановая камедь , гуаровая камедь , полиакриловые кислоты и их соли , сополимеры метакрилата , полиэтиленоксид , полипропиленоксид , производные хитина , крахмал , пектин , альгиновая кислота , циклодекстрин , агар -агар , каррагинан .
54. Фармацевтическая композиция по пункту 52, которая отличается тем , что в качестве консерванта содержит вещество и з ряда : хлорид лауралкония , хлорид бензалкония , хлорид бензододециния , хлорид цетилперидина , цетримид , домифен бромид , бензиловый спирт , хлорбутанол , о-крезол , хлорокрезол , фенол , этилфениловый спирт , бензойная кислота , натрия бензоат , сорбиновая кислота ,
калиевая соль сорбиновой кислоты , парааминобензойная кислота , метилпарагидроксибензоат , пропилпарагидроксибензоат .
55. Фармацевтическая композиция по пункту 52, которая отличается тем , что в качестве антиоксиданта содержит вещество и з ряда натрия метабисульфит ,
натрия бисульфит , натрия сульфит , натрий тиосульфат , аскорбиновая кислота .
56. Фармацевтическая композиция по пункту 51, которая отличается тем , что
е е лекарственной формой является гель , содержащий низкомолекулярную
гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль с
молекулярной массой от 100 кДа до 400 кДа , декаметоксин и/или его растворимую
в воде соль , лактат натрия , молочную кислоту и воду , как вспомогательные
фармацевтические компоненты содержит глицерин и
гидроксипропилметилцеллюлозу , при таком соотношении компонентов , в мг/мл:
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль
0,05-0,5
глицерин
20-50
гидроксипропил метил целлюлоза
15-50
вода
остальное до 1 мл
57. Фармацевтическая композиция по пункту 51, которая отличается тем , что ее лекарственной формой является гель , содержащий низкомолекулярную гиалуроновую кислоту и/или ее фармацевтически приемлемую соль с молекулярной массой от 100 кДа до 400 "Да, декаметоксин и/или его растворимую в воде соль , лактат натрия , молочную кислоту и воду , как вспомогательные фармацевтические компоненты содержит глицерин и гидроксипропилметилцеллюлозу , при таком соотношении компонентов , в мг / мл:
низкомолекулярная гиалуроновая кислота с молекулярной массою от 100 кДа до 400 кДа
лактат натрия
1,42
молочная кислота
0,36
декаметоксин и/или его растворимая в воде соль
0,2
глщерин
гидроксипропилметилцеллюлоза
вода
остальное до 1 мл
INTERNATIONAL SEARCH REPORT
International application No.
PCT/UA 2015/000047
A. CLASSIFICATION OF SUBJECT MATTER
A61 К 9/08 (2006.01 ); A61 К 31/728 (2006.01 );A61 К 3 1/14 (2006.01 );A61 К 47/02 (2006.01 )
According to International Patent Classification (IPC) or to both national classification and IPC
B . FIELDS SEARCHED
Minimum documentation searched (classification system followed by classification symbols)
A61 K9/08, 31/00, 31/14, 31/728, 47/02
Documentation searched other than minimum documentation to the extent that such documents are included in the fields searched
Electronic data base consulted during the international search (name ofdata base and, where practicable, search terms used)
PatSearch (RUPTO internal), USPTO, PAJ, Esp@cenet, DWPI, EAPATIS, PATENTSCOPE
C . DOCUMENTS CONSIDERED TO BE RELEVANT
Category*
Citation of document, with indication, where appropriate, of the relevant passages
Relevant to claim No.
EA 201000678 A1 (INSTITUTO LUZO FARMAKO D'lTALIIA S.P.A.) 30.12.2010
RU 2280041 C1 (OBSCHESTVO S OGRANICHENNOI OTVETSTVENNOSTIU NAUCHNO-PROIZVODSTVENNOE PREDPRIIATIE "TULSKAIA INDUSTRIIA LTD") 20.07.2006
RU 2448736 C 1 (BOSH END LOMB INKORPOREITID) 27.04.2012
1-57
1-57
1-57
Further documents are listed in the continuation ofBox C.
See patent family annex.
"A" "E" "L"
"O" "P"
Special categories of cited documents:
document defining the general state of the art which is not considered to be of particular relevance
earlier application or patent but published on or after the international filing date
document which may throw doubts on priority claim(s) or which is cited to establish the publication date of another citation or other special reason (as specified)
document referring to an oral disclosure, use, exhibition or other means
"T" later document published after the international filing date or priority date and not in conflict with the application but cited to understand the principle or theory underlying the invention
"X" document of particular relevance; the claimed invention cannot be considered novel or cannot be considered to involve an inventive step when the document is taken alone
"Y" document of particular relevance; the claimed invention cannot be considered to involve an inventive step when the document is combined with one or more other such documents, such combination being obvious to a person skilled in the art
" &" document member of the same patent family
ОТЧЕТ О МЕЖДУНАРОДНОМ
ПОИСКЕ
Номер меяедународной заявки
PCT/UA 2015/000047
КЛАССИФИКАЦИЯ
ПРЕДМЕТА ИЗОБРЕТЕНИЯ
ОБЛАСТЬ ПОИСКА
Проверенный минимум документации (система классификации с индексами классификации )
А 6 1К 9/08, 31/00, 31/14, 31/728, 47/02
Другая проверенная документация в той мере, в какой она включена в поисковые подборки
Электронная база данных , использовавшаяся при поиске (название базы и, если , возможно , используемые поисковые термины ) PatSearch (RUPTO internal), USPTO, PAJ, Esp@cenet, DWPI, EAPATIS, PATENTSCOPE
ДОКУМЕНТЫ , СЧИТАЮЩИЕСЯ РЕЛЕВАНТНЫМИ
Категория
Цитируемые документы с указанием , где это возможно , релевантных частей
Относится к пункту N
ЕА 201000678 А 1 (ИНСТИТУТО ЛУЗО ФАРМАКО Д 'ИТАЛИЯ С .П .А .) 30. 12.2010
RU 2280041 С 1 (ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ
НАУЧНО -ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ПРЕДПРИЯТИЕ "ТУЛЬСКАЯ
ИНДУСТРИЯ ЛТД ") 20.07.2006
RU 2448736 С 1 (БОШ ЭНД ЛОМБ ИНКОРПОРЕЙТИД ) 27.04.2012
1-57
1-57
1-57
последующие документы указаны в продолжении графы С.
данные о патентах -аналогах указаны в приложении
* Особые категории ссылочных документов : "rp'
"А " документ , определяющий общий уровень техники и не считающийся особо релевантным
"Е" более ранняя заявка или патент , но опубликованная на дату "X"
международной подачи или после нее "L" документ , подвергающий сомнению притязание (я) на приоритет , или
который приводится с целью установления даты публикации другого "У"
более поздний документ , опубликованный после даты международной
подачи или приоритета , но приведенный для понимания принципа или теории , на которых основывается изобретение
документ , имеющий наиболее близкое отношение к предмету поиска ; заявленное изобретение не обладает новизной или изобретательским
уровнем , в сравнении с документом , взятым в отдельности
документ , имеющий наиболее близкое отношение к предмету поиска ; заявленное изобретение не обладает изобретательским уровнем , когда
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
WO 2015/183230
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
WO 2015/183230
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
WO 2015/183230
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
WO 2015/183230
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
PCT/UA2015/000047
PCT/UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
WO 2015/183230
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
WO 2015/183230 PCT7UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
WO 2015/183230
PCT/UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
WO 2015/183230 PCT/UA2015/000047
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26)