(57) Реферат / Формула:
Настоящее изобретение отчасти относится к способам обнаружения мишеней для иммунотерапии in vivo, к терапевтическим композициям (например, мшРНК, иммунореактивные клетки, экспрессирующие мшРНК и/или химерные рецепторы антигенов (CAR)) и к способам их применения.
2420-530101ЕА/061 СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ СНИЖЕНИЯ ИММУНОСУПРЕССИИ ОПУХОЛЕВЫМИ
КЛЕТКАМИ
РОДСТВЕННЫЕ ЗАВКИ
По этой заявке испрашивается приоритет временных заявок USSN 61/929821, поданной 21 января 2014, USSN 61/921303, поданной 27 декабря 2013, и USSN 61/833298, поданной 10 июня 2013, содержание которых включено в настоящее описание в виде ссылки в полном объеме.
ГОСУДАРСТВЕННАЯ ПОДДЕРЖКА
Настоящее изобретение осуществлено при поддержке правительства по грантам № 1R01CA173750-01 и Т32 AI07386, предоставленным Национальными институтами здоровья, и по гранту № Р30-СА14051 Национального института рака. Правительство имеет определенные права на изобретение.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к способам обнаружения мишеней для иммунотерапии in vivo, к терапевтическим композициям, которые модулируют мишени иммунотерапии (например, мшРНК, иммунореактивные клетки, экспрессирующие мшРНК, и в некоторых случаях рецептор, мишенью которого является злокачественная клетка, например, химерные рецепторы антигенов (CAR)), и связанным с ними способам применения.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Цитотоксические Т-клетки играют центральную роль в опосредованном иммунной системой контроле злокачественных опухолей1-3, и моноклональные антитела, мишенью которых являются ингибирующие рецепторы на Т-клетках, могут обеспечивать значимую клиническую пользу в случае пациентов, имеющих заболевание на поздней стадии4-6. Для обеспечения жизнеспособности в опухолях развиты многочисленные иммуносупрессорные механизмы для обеспечения их собственного роста и успешного ускользания от иммунной системы хозяина, эффективного блокирования активности Т-клеток в микроокружении опухоли. Вышесказанное является центральной проблемой в онкологии, поскольку сильная инфильтрация Т-клетками CD8, которые обладают цитотоксической
функцией против опухолевых клеток, ассоциирована с благоприятным прогнозом в случае множества типов злокачественной опухоли у человека1'3'8. Указанный природный защитный механизм сильно ослабевает у большинства пациентов под действием многочисленных ингибирующих сигналов, исходящих от опухоли, ее стромы, регуляторных Т-клеток и популяций миелоидных клеток.9-11 были идентифицированы различные молекулярные и клеточные иммуносупрессорные механизмы, ответственные за ускользание опухоли. Мишенью некоторых из таких механизмов являются иммунные противоопухолевые эффекторные клетки. Однако многие регуляторные механизмы, которые приводят к утрате функции Т-клеток в иммуносупрессорных опухолях, остаются неизвестными. Для улучшения ситуации, связанной с ограниченным успехом иммунотерапии злокачественных опухолей, требуются новые способы ингибирования путей иммуносупрессии, инициируемых опухолевыми клетками для того, чтобы ускользнуть от иммунной системы хозяина.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к мишеням для ингибирования путей иммуносупрессии, используемых опухолевыми клетками для инактивации и/или супрессии иммунных клеток.
В изобретение также предлагаются композиции и способы, связанные с мшРНК с терапевтическим потенциалом.
Раскрытие также относится к иммунореактивным клеткам, включая Т-клетки (например, клетки, нацеленные на опухолевый антиген), экспрессирующим по меньшей мере одну мшРНК или другую молекулу нуклеиновой кислоты, способную вызывать сайленсинг генов, которые ингибируют функцию Т-клеток.
Раскрытие также относится к иммунореактивным клеткам, включая Т-клетки, несущим по меньшей мере один вектор, экспрессирующий мшРНК и по меньшей мере один химерный рецептор антигена, направленный на опухолевый антиген.
В некоторых вариантах изобретение относится к иммунореактивным клеткам, обладающих специфичностью по отношению к опухоли, содержащим вектор, кодирующий мшРНК, способную вызывать сайленсинг генов, которые ингибируют функцию Т-клеток.
В некоторых аспектах последовательность мшРНК снижает экспрессию гена, выбранного из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 или РррЗсс. В другом аспекте мшРНК содержит 15 непрерывно следующих друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID N0: 604-620 и 653-677. В некоторых аспектах иммунореактивная клетка дополнительно содержит вектор, кодирующий специфичный для опухоли Т-клеточный рецептор. В некоторых аспектах иммунореактивная клетка выбрана из группы, состоящей из инфильтрующего опухоль лимфоцита (TIL), Т-клетки природного киллера (NKT), цитотоксического Т-лимфоцита (CTL) и Т-клетки CD4.
В некоторых вариантах иммунореактивная клетка содержит вектор, кодирующий CAR, при этом CAR содержит антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и стимулирующий домен. В некоторых аспектах антигенсвязывающий домен связывает опухолевый антиген или патогенный антиген. Примеры опухолевых антигенов включают, например, специфичный для простаты мембранный антиген (PSMA) , раково-эмбриональный антиген (СЕА), CD19, CD20, CD22, ROR1, мезотелин, CD333/IL3Ra, с-Met, гликолипид F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ESO-1 TCR, ERBB2, BIRC5, СЕACAM5, WDR4 6, BAGE, CSAG2, DCT, MAGED4, GAGE1, GAGE 2, GAGE 3, GAGE 4, GAGE 5, GAGE 6, GAGE 7, GAGE 8, IL13RA2, MAGEA1, MAGEA2, MAGEA3, MAGEA4, MAGEA6, MAGEA9, MAGEA10, MAGEA12, MAGEB1, MAGEB2, MAGEC2, TP53, TYR, TYRP1, SAGE1, SYCP1, SSX2, SSX4, KRAS, PRAME, NRAS, ACTN4, CTNNB1, CAS P 8, CDC27, CDK4, EEF2, FN1, HSPA1B, LPGAT1, ME1, HHAT, TRAPPC1, MUM3, MY01B, PAPOLG, OS9, PTPRK, ТРИ, ADFP, AFP, AIM2, ANXA2, ART4, CLCA2, CPSF1, PPIB, EPHA2, EPHA3, FGF5, CA9, TERT, MGAT5, CEL, F4.2, CAN, ETV6, ВIRC7, CSF1, OGT, MUC1, MUC2, MUM1, CTAG1A, CTAG2, СTAG, MRPL28, FOLH1, RAGE, SFMBT1, KAAG1, SART1, TSPYL1, SART3, SOX10, TRG, WT1, TACSTD1, SILV, SCGB2A2, MC1R, MLANA, GPR143, OCA2, KLK3, SUPT7L, ARTC1, BRAF, CAS P 5, CDKN2A,
UBXD5, EFTUD2, GPNMB, NFYC, PRDX5, ZUBR1, SIRT2, SNRPD1, HERV-K-MEL, CXorf61, CCDC110, VENTXP1, SPA17, KLK4, ANKRD3 OA, RAB38, CCND1, CYP1B1, MDM2, MMP2, ZNF395, RNF43, SCRN1, STEAP1, 707-AP, TGFBR2, PXDNL, AKAP13, PRTN3, PSCA, RHAMM, ACPP, ACRBP, LCK, RCVRN, RPS2, RPLIOA, SLC45A3, BCL2L1, DKK1, ENAH, CSPG4, RGS5, BCR, BCR-ABL, ABL-BCR, DEK, DEK-CAN, ETV6-AML1, LDLR-FUT, NPM1-ALK1, PML-RARA, SYT-SSX1, SYT-SSX2, FLT3, ABL1, AML1, LDLR, FUT1, NPM1, ALK, PML1, RARA, SYT, SSX1, MSLN, UBE2V1, HNRPL, WHSC2, EIF4EBP1, WNK2, OAS3, BCL-2, MCL1, CTSH, ABCC3, BST2, MFGE8, TPBG, FMOD, XAGE1, RPSA, COTL1, CALR3, PA2G4, EZH2, FMNL1, HPSE, APC, UBE2A, BCAP31, TOP2A, TOP2B, ITGB8, RPA1, ABI2, CCNI, CDC2, SEPT2, S TAT1, LRP1, ADAM17, JUP, DDR1, ITPR2, HMOX1, TPM4, BAAT, DNAJC8, TAPBP, LGALS3BP, PAGE 4, РАК2, CDKN1A, PTHLH, SOX2, SOX11, TRPM8, TYMS, ATIC, PGK1, SOX4, TOR3A, TRGC2, BTBD2, SLBP, EGFR, IER3, TTK, LY6K, IGF2BP3, GPC3, SLC35A4, HSMD, H3F3A, ALDH1A1, MFI2, MMP14, SDCBP, PARP12, MET, CCNB1, PAX3-FKHR, PAX3, FOXOl, XBP1, SYND1, ETV5, HSPA1A, HMHA1, TRIM68 и любое их сочетание. В некоторых аспектах антигенсвязывающим доменом является антигенсвязывающий фрагмент антитела (например, Fab или scFv). Внутриклеточные домены таких CAR содержат цитоплазматические домены передачи сигнала, полученные из Т-клеточного рецептора и костимулирующих молекул.
В некоторых вариантах вектор представляет собой плазмиду, ретровирусный вектор или лентивирусный вектор.
В некоторых вариантах изобретение относится к выделенным молекулам нуклеиновых кислоты, кодирующим последовательность мшРНК. В другом варианте изобретение относится к выделенным молекулам нуклеиновых кислот, кодирующим CAR. В еще одном варианте изобретение относится к выделенным молекулам нуклеиновых кислот, кодирующим CAR и последовательность мшРНК. В некоторых аспектах выделенная нуклеиновая кислота кодирует последовательность мшРНК, снижает экспрессию гена, выбранного из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, или Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b,
Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 или РррЗсс. В другом аспекте выделенная нуклеиновая кислота кодирует мшРНК, содержащую 15 непрерывно следующих друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID N0: 604-620 и 653-677.
В некоторых вариантах выделенная нуклеиновая кислота
кодирует CAR, содержащий антигенсвязывающий домен,
трансмембранный домен, стимулирующий домен и костимулирующий домен. В некоторых вариантах антигенсвязывающий домен представляет собой антигенсвязывающий фрагмент антитела (например, Fab или scFv). В некоторых вариантах антигенсвязывающий домен представляет собой цитоплазматический домен передачи сигнала, полученный из Т-клеточного рецептора и костимулирующих молекул.
В некоторых вариантах антигенсвязывающий домен связывает
опухолевый антиген (например, опухолевый антиген,
ассоциированный с солидной опухолью, лимфоидной опухолью, меланомой, карциномой, саркомами, аденокарциномой, лимфомой, лейкозом, раком почки, молочной железы, легкого, мочевого пузыря, ободочной кишки, яичника, простаты, поджелудочной железы, желудка, головного мозга, головы и шеи, кожи, матки, семенников, глиомой, раком пищевода и печени).
В некоторых вариантах изобретение относится к векторам,
содержащим выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую
последовательность мшРНК, выделенную нуклеиновую кислоту,
кодирующую CAR, или выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую
CAR и последовательность мшРНК. В некоторых аспектах вектор
представляет собой плазмиду, лентивирусный вектор, ретровирусный
вектор, аденовирусный вектор, вектор на основе
аденоассоциированного вируса. мшРНК может быть оперативно связана с промотором РНК-полимеразы II или промотором РНК-полимеразы III.
В других вариантах изобретение относится к композициям, содержащим иммунореактивные клетки согласно изобретению и фармацевтически приемлемый носитель.
В некоторых вариантах изобретение относится к иммунореактивным клеткам, трансфицированным первым вектором, кодирующим CAR, и вторым вектором, кодирующим последовательность мшРНК. В некоторых аспектах последовательность мшРНК снижает экспрессию гена, выбранного из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, МарЗкЗ, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 или РррЗсс. В другом аспекте мшРНК содержит 15 непрерывно следующих друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID N0: 604-620 и 653-677. В некоторых аспектах иммунореактивная клетка дополнительно содержит вектор, кодирующий специфичный для опухоли Т-клеточный рецептор. В некоторых аспектах иммунореактивная клетка выбрана из группы, состоящей из инфильтрующего опухоль лимфоцита (TIL), Т-клетки природного киллера (NKT), цитотоксического Т-лимфоцита (CTL) и Т-клетки CD4 .
В некоторых вариантах изобретение относится к способам
лечения злокачественной опухоли у пациента, при этом способ
включаетвведение пациенту аутологичной Т-клетки,
модифицированной для экспрессии специфичного для опухоли Т-клеточного рецептора или CAR и мшРНК, при этом последовательность мшРНК снижает экспрессию гена, выбранного из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, МарЗкЗ, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 или РррЗсс. В некоторых аспектах последовательность мшРНК содержит 15 непрерывно следующих друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 и 653-677; и при этом CAR содержит антигенсвязывающий
домен, трансмембранный домен, стимулирующий домен и костимулирующий домен. В некоторых аспектах CAR содержит антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен, стимулирующий домен и костимулирующий домен.
В некоторых вариантах изобретение относится к способам
лечения злокачественной опухоли у пациента, при этом способ
включаетвведение пациенту аутологичной Т-клетки,
модифицированной для экспрессии специфичного для опухоли Т-клеточного рецептора или CAR и мшРНК согласно изобретению. В еще одном варианте изобретение относится к способам лечения злокачественной опухоли у пациента путем сайленсинга генов, которые ингибируют функцию Т-клеток, включающим введение пациенту иммунореактивной клетки, содержащей вектор, при этом вектор кодирует специфичный для опухоли Т-клеточный рецептор или CAR и последовательность мшРНК согласно изобретению.
В некоторых вариантах изобретение относится к способам
идентификации гена, который ингибирует функцию иммунореактивной
Т-клетки, при этом способ включает получение популяции
иммунореактивных Т-клеток, несущих векторы, экспрессирующие
мшРНК, осуществление контакта популяции иммунореактивных Т-
клеток с иммуносупрессирующей опухолью, определение того,
восстанавливает ли мшРНК Т-клеточную функцию в
иммуносупрессирующей опухоли, и идентификацию гена,
ассоциированного с мшРНК, который восстанавливает Т-клеточную функцию в опухоли, в качестве гена, который ингибирует функцию инфильтрующих опухоль Т-клеток.
В некоторых вариантах изобретение относится к способам повышения иммунного ответа у пациента, при этом способ включает введение терапевтического средства, которое модулирует активность гена, выбранного из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс.
В некоторых случаях последовательность, кодирующая мшРНК,
содержит первую последовательность, содержащую 15-25 (15, 16,
17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 25) нуклеотидов,
комплементарных любой из последовательностей SEQ ID NO: 604-62 0
или SEQ ID NO: 653-677, и вторую последовательность, которая
является обратным комплементом первой последовательности с одним
несовпадением или без несовпадений (т.е., точно комплементарную
первой последовательности), и третью последовательность из 5-9
нуклеотидов, расположенную между первой и второй
последовательностями.
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем описании, имеют такое же значение, которое обычно подразумевает специалист в области, к которой относится изобретение. Способы и материалы для применения в настоящем изобретении, описаны в настоящей публикации; также могут быть использованы другие подходящие способы и материалы, известные в данной области. Материалы, способы и примеры являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения. Все публикации, заявки на выдачу патентов, патенты, последовательности, объекты в базах данных и другие ссылки, упоминаемые в настоящем описании, включены в виде ссылки в полном объеме. В случае противоречия настоящее описание, включая определение, будет проверено.
Другие признаки и преимущества изобретения будут понятны на основании следующего подробного описания и фигур и формулы изобретения.
ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Файл патента или заявки содержит по меньшей мере один чертеж, выполненный в цвете. Копии такой публикации патента или заявки на выдачу патента с цветным чертежом(чертежами) будут предоставлены Ведомством после установления и оплаты необходимой пошлины.
Фиг. 1 представляет собой схематичную диаграмму, демонстрирующую пример способа выявления in vivo мшРНК, которые усиливают инфильтрацию и накопление Т-клеток в микроокружении опухоли.
Фиг. 2 представляет собой набор графиков, показывающих
типичные графические изображения данных проточной цитометрии Т-клеток CD8+ от трансгенных мышей Ragl-/-/OT-I TCR после инфекции вектором мшРНК. Эффективность трансдукции определяли на основе экспрессии репортера Thyl.l, кодируемого лентивирусным вектором. Затем культивируемые с цитокинами Т-клетки, экспрессирующие контрольную мшРНК LacZ, красили с использованием панели маркеров активации (черные линии; контроль изотипа, заштрихованы). Большинство инфицированных Т-клеток имели фенотип центральных клеток памяти (CD62L+CD44 + ) .
фиг. 3 представляет собой набор графиков, показывающих типичные графические изображения данных проточной цитометрии Т-клеток OT-I, отсортированных из опухолей и вторичных лимфоидных органов для анализа с использованием глубокого секвенирования (dLN, дренирующий опухоль лимфатический узел; irLN, нерелевантный лимфатический узел) . Клетки CD8+Va2+V|35+Thyl. 1 + отсортировывали и экстрагировали геномную ДНК для ПНР-амплификации кассеты мшРНК.
Фиг. 4 представляет собой набор графиков, показывающих данные глубокого секвенирования, полученные при скрининге пула мшРНК in vivo. Верхний ряд, риды последовательностей для всех генов в пуле в опухоли, нерелевантном (irLN) и дренирующем лимфатическом узле (dLN); нижний ряд, три отдельных гена (LacZ, отрицательный контроль) для опухоли, нерелевантных лимфатических узлов (irLN) и дренирующих опухоли лимфатических узлов (dLN) представлены на графике в сравнении с селезенкой. На графике представлены риды последовательностей для таких тканей по сравнению с селезенкой. Пунктирные линии показывают отклонение 1од2 от диагонали.
Фиг. 5 представляет собой набор графиков, показывающих данные глубокого секвенирования, полученные при скрининге дисфункции Т-клеток. Риды секвенирования мшРНК для генов, позитивных при втором скрининге, представлены на графике в сравнении с селезенкой для опухолей (красный), нерелевантных лимфатических узлов (irLN, синий) и дренирующих опухоль лимфатических узлов (dLN, зеленый), при этом пунктирные линии
показывают отклонение 1од2 от диагонали. Данные показывают обогащение конкретными мшРНК, представляющими такие гены в опухолях, по сравнению с селезенкой или лимфатическими узлами.
Фиг. б является графиком, показывающим основанную на
проточной цитометрии количественную оценку обогащения опухолей
Т-клетками OT-I CD8+ по сравнению с селезенкой. Процентное
содержание Т-клеток OT-I, экспрессирующих мшРНК, определяли,
используя проточную цитометрию, в опухолях/селезенке посредством
пропускания по репортерным белкам в Т-клетках CD8+Va2+V|35+.
Статистическую значимость определяли для каждой
экспериментальной мшРНК по сравнению с мшРНК LacZ (кратное обогащение опухоль/селезенка) (п=3; * р <0,05, ** р <0,01, Т-критерий Стьюдента).
Фиг. 7 представляет собой набор графиков, показывающих типичные графические изображения данных проточной цитометрии об обогащении опухоли клетками, трансдуцированными векторами мшРНК (LacZ, Akap8I, Smad2, Rbks, Dgkz). Процентное содержание T-клеток OT-I, экспрессирующих мшРНК, определяли с использованием проточной цитометрии в опухолях/селезенках посредством пропускания по репортерным белкам в Т-клетках CD8+Va2+V|35+.
Фиг. 8 представляет собой набор графиков, показывающих основанную на проточной цитометрии количественную оценку обогащения опухолей Т-клетками CD4+ и CD8+. Т-клетки, экспрессирующие мшРНК, идентифицировали в опухолях и селезенке, используя репортер Thyl.1 (% Т-клеток Thyl.1+ CD8 или Т-клеток CD4+, верхняя и нижняя панели). Общее количество Т-клеток, экспрессирующих мшРНК LacZ или Ppp2r2d, определяли в опухолях и селезенках через 7 дней после переноса 2х106 клеток, экспрессирующих мшРНК (правые панели). Показано кратное обогащение Т-клетками, экспрессирующими мшРНК Ppp2r2d, по сравнению с Т-клетками, экспрессирующими мшРНК LacZ, в опухолях.
Фиг. 9 представляет собой график, описывающий отмену опосредованной мшРНК Ppp2r2d экспансии Т-клеток в опухолях под действием кДНК Ppp2r2d с мутантным сайтом связывания мшРНК, но с сохраненной последовательностью белка. Идентифицировали три
популяции клеток на основании коэкспрессированных репортеров; кратное обогащение вычисляли на основании процентного содержания позитивных по репортеру клеток в опухолях по сравнению с селезенками.
Фиг. 10а описывает создание мутантной кДНК Ppp2r2d с сохраненной последовательностью белка, но нарушенным сайтом связывания мшРНК. Клетки EL4 трансдуцировали мутантной кДНК Ppp2r2d или кДНК Ppp2r2d дикого типа в векторе, также содержащем GFP. GFP-позитивные клетки сортировали для гомогенности и трансдуцировали векторами мшРНК LacZ или Ppp2r2d, экспрессирующими репортер Thyl.1. мшРНК-трансдуцированные (Thyl.l+) клетки анализировали, используя проточную цитометрию, в отношении экспрессии GFP. Ppp2r2d-MinPHK снижала уровни GFP в случае экспрессии Ppp2r2d дикого типа, но не в случае мутантного Ppp2r2d.
Фиг. 10Ь демонстрирует, что экспрессия мутантной кДНК Ppp2r2d предотвращает возникновение фенотипа, индуцируемого мшРНК Ppp2r2d. Т-клетки OT-I трансдуцировали вектором, кодирующим мшРНК LacZ, мшРНК Ppp2r2d или мшРНК Ppp2r2d, плюс мутантную кДНК Ppp2r2d. разные популяции клеток нормализовали в отношении эффективности трансдукции и инъецировали совместно мышам, несущим опухоли B16-Ova. Процентное содержание каждой популяции Т-клеток в опухолях и селезенках количественно оценивали, пропуская Т-клетки CD8+Va2+V|35+; трансдуцированные клетки выявляли на основе экспрессии флуоресцирующих репортеров Thyl.1 или аметрин/GFP (типичные данных, полученные в 2 независимых экспериментах, п=3 мыши на эксперимент).
Фиг. 10с является графиком, демонстрирующим анализ на основе ПЦР в реальном времени в отношении экспрессии Ppp2r2d в Т-клетках OT-I, трансдуцированных мшРНК LacZ, мшРНК Ppp2r2d и мшРНК Ppp2r2d плюс мутантной кДНК Ppp2r2d. Данные представляют биологические повторы (п=3), каждое значение представляет собой среднее +/- s.d.
Фиг. 11 представляет собой график, демонстрирующий анализ кПЦР в реальном времени уровней мРНК Ppp2r2d в Т-клетках OT-I,
трансдуцированным мшРНК LacZ мшРНК или одной из трех мшРНК Ppp2r2d, идентифицированных при скрининге.
На фиг. 12а представлена таблица, демонстрирующая обогащение конкретными мшРНК опухоли по сравнению с селезенкой, которое вычисляли на основании результатов глубокого секвенирования после второго скрининга.
Фиг. 12Ь демонстрирует кластеризацию средних уровней экспрессии мРНК, которые, как было обнаружено, значимо регулируются Т-клетками в опухолях, экспрессирующих контрольную мшРНК LacZ или одну из пяти экспериментальных мшРНК. Определяли значимые различия в экспрессии, соответствующие р-значению в Anova <0,01, между Т-клетками, экспрессирующими контрольную мшРНК LacZ или одну из пяти экспериментальных мшРНК (Alk, Arhgap5, Egr2, Ptpn2 или Ppp2r2d) (JMP-Genomics 6.0, SAS Institute Inc.). мРНК, подвергаемые значимой регуляции в одной или нескольких группах обработки, показаны после кластеризации (Fast Ward).
Фиг. 12с представляет собой диаграмму Венна, показывающую перекрывания между профилями экспрессии инфильтрующими опухоль Т-клетками, трансдуцированными одной из пяти экспериментальных мшРНК (профили определяли, учитывая Anova р <0,01, как описано выше). Указаны идентификационные перекрывающихся зондов для любого сочетания 5 профилей, которые представлены перекрывающимися овалами. Значимость перекрываний по сравнению с ожидаемыми при случайном событии (точный критерий Фишера) показана в сопровождающей таблице.
Фиг. 13а представляет собой набор графиков, показывающих типичные графические изображения данных проточной цитометрии, демонстрирующие частоту трансдуцированных мшРНК Ppp2r2d или LacZ Т-клеток CD8 в опухолях в 1 день.
На фиг. 13Ь показаны два графика, демонстрирующих степень пролиферации (на основании разведения CFSE) трансдуцированных мшРНК Ppp2r2d Т-клеток CD8 по сравнению с трансдуцированными мшРНК LacZ Т-клетками в опухолях в 1, 3, 5 и 7 дни.
Фиг. 13с представляет собой набор графиков, демонстрирующих, что Ppp2r2d-caraieHCHHr ингибирует апоптоз Т-клеток при встрече с
опухолевыми клетками. CFSE-меченые Т-клетки OT-I культивировали совместно с опухолевыми клетками B16-0va в течение 72 часов. Клетки красили, используя CD8 и аннексии V.
FIG. 13d представляет собой набор графиков, демонстрирующих внутриклеточное окрашивание в отношении противоапоптозных белков. Т-клетки OT-I, экспрессирующие мшРНК LacZ или Ppp2r2d, культивировали совместно с опухолевыми клетками B16-0va в течение 4 8 часов и затем красили антителом контрольного изотипа (серый) и фосфо-АКТ- (Ser473), фосфо-Bad- (Serll2) или Bcl-2-антителами.
Фиг. 13е представляет собой график, демонстрирующий повышенную секрецию IFN-y Т-клетками с сайленсингом Ppp2r2d. Т-клетки OT-I, выделенные из организма мышей, несущих опухоли В16-Ova, анализировали в отношении экспрессии IFN-y, используя внутриклеточное окрашивание.
Фиг. 13f представляет собой набор графиков, демонстрирующих, что Т-клетки с сайленсингом Ppp2r2d распространяются в опухолях даже без презентации опухолевых антигенов профессиональными антигенпрезентирующими клетками. Т-клетки OT-I, экспрессирующие мшРНК LacZ или Ppp2r2d, переносили мышам C57BL/6 или Ь2т- /'-, несущим 14-дневные опухоли B16-0va. мшРНК-экспрессирующие Т-клетки идентифицировали на основе экспрессии бирюзового флуоресцирующего белка (TFP) или Thyl.1 (кратное обогащение в опухолях по сравнению с селезенками).
Фиг. 13д представляет собой график, демонстрирующий, что сайленсинг Ppp2r2d ингибирует апоптоз Т-клеток после встречи с опухолевыми клетками. CFSE-меченые Т-клетки OT-I культивировали совместно с опухолевыми клетками B16-0va в течение 72 часов (активированная каспаза-3).
Фиг. 14 представляет собой набор графиков, демонстрирующих Т-клетки OT-I, экспрессирующие мшРНК LacZ или Ppp2r2d, меченые CFSE и стимулированные СБЗ-антителом в течение 72 часов. Затем клетки красили, используя CD8 и аннексии V, и анализировали проточной цитометрией.
FIG. 15 представляет собой набор графиков, демонстрирующих
накопление Т-клеток, экспрессирующих мшРНК Ppp2r2d, в опухолях и в дренирующих опухоли лимфатических узлах, но не в других вторичных лимфоидных органах. Т-клетки OT-I, экспрессирующие мшРНК Ppp2r2d или LacZ, метили CFSE и инъецировали мышам, несущим опухоли B16-0va. Т-клетки выделяли из указанных органов в 1, 3, 5 и 7 дни, чтобы исследовать степень накопления Т-клеток на основе разбавления красителя CSFE.
Фиг. 1ба-с представляют собой набор графиков,
демонстрирующих, что сайленсинг Ppp2r2d усиливает
противоопухолевую активность Т-клеток CD4 и CD8. Т-клетки активировали анти-СВЗ/СБ28-шариками, инфицировали лентивирусами, осуществляющими экспрессию мшРНК LacZ или Ppp2r2d, и инъецировали мышам, несущим опухоли B16-0va (a,b) или В16 (с). Размер опухолей измеряли каждый три дня после переноса Т-клеток с использованием штангенциркулей по двум наиболее длинным осям. а,Ь) Т-клетки TRP-1 CD4+ и/или OT-I CD8+ (2х106) переносили (12 и 17 дни) мышам, несущим 12-дневные опухоли B16-0va. Оценивали опухолевую нагрузку (а) и выживаемость (Ь) . с) Т-клетки TRP-1 CD4+ и pmel-1 CD8+ (ЗхЮ6 TRP-1 CD4+ плюс ЗхЮ6 pmel-1 CD8 + ) переносили (10 и 15 дни) мышам с 10-дневными опухолями В1б. Логарифмический ранговый критерий (Мантеля-Кокса) применяли, используя GraphPad Prism, версию б, сравнивая выживаемость мышей, обработанных Т-клетками, экспрессирующими мшРНК LacZ, по сравнению с Т-клетками, экспрессирующими мшРНК Ppp2r2d.
Фиг. 17 представляет собой набор графиков, демонстрирующих FACS-анализ обогащения Т-клеток в опухолях по сравнению с селезенкой в отношении клеток, экспрессирующих панель мшРНК Ppp2r2d или Cblb (верхние панели). Уровни мРНК Ppp2r2d и Cblb измеряли в кПЦР перед переносом Т-клеток (нижние панели). Данные представляют биологические повторы (п=3), каждое значение представляет собой среднее +/- s.d.
Фиг. 18 представляет собой набор графиков, демонстрирующих количественную оценку белка Ppp2r2d посредством масс-спектрометрии с использованием меченых синтетических пептидов (AQUA, отношение эндогенных пептидов к пептидам AQUA). Типичные
данные из двух независимых экспериментов (a-d); Двусторонний t-критерий Стьюдента, * Р <0,05, ** Р <0,01; mean +/- s.d.
Фиг. 19 является графиком, демонстрирующим кПЦР-анализ мРНК Ppp2r2d в инфильтрующих опухоль Т-клетках OT-I (7 день).
На фиг. 20а представлены графики, показывающие типичные графические изображения данных проточной цитометрии, демонстрирующие пролиферацию Т-клеток, экспрессирующих мшРНК Ppp2r2d, в опухолях и дренирующих опухоли лимфатических узлах. Т-клетки OTI, экспрессирующие мшРНК Ppp2r2d или LacZ, метили CFSE и инъецировали мышам, несущим опухоли B16-Ova. Т-клетки выделяли из указанных органов в 1, 3, 5 и 7 дни, чтобы исследовать степень пролиферации Т-клеток на основе разбавления CFSE. Количественно оценивали клетки, которые не имели разбавленного CFSE (не делящиеся клетки) (справа).
Фиг. 20Ь представляет собой графики, показывающие типичные графические изображения данных проточной цитометрии, демонстрирующие выживаемость инфильтрующих опухоли Т-клеток. Т-клетки OT-I, экспрессирующие мшРНК Pp2r2d или LacZ, инъецировали мышам, несущим опухоли B16-Ova. Т-клетки выделяли на 7 день и оценивали апоптоз посредством внутриклеточного окрашивания с использованием антитела, специфичного для активированной каспазы-3 (гибель некоторых Т-клеток могла быть вызвана процедурой выделения из опухолей).
Фиг. 2 0с представляет собой графики, показывающие типичные графические изображения данных проточной цитометрии, демонстрирующие внутриклеточное окрашивание цитокина IFNy в случае Т-клеток, экспрессирующих мшРНК LacZ и Ppp2r2d, собранных из опухолей B16-Ova; Т-клетки метили CFSE перед инъекцией. Данные для всех экспериментов являются типичными для двух независимых испытаний. Статистический анализ выполняли для биологических повторов (п=3); * Р <0,05, ** Р <0,01, двусторонний t-критерий Стьюдента. Каждое значение представляет собой среднее +/- s.d.
Фиг. 21а-с представляют собой серию графиков, демонстрирующих анализ ex vivo продукции цитокинов
инфильтрующими опухоль Т-клетками OT-I на уровне одной клетки с использованием устройства с нанолунками (84 672 лунок с пиколитровым объемом). А) Типичные отдельные клетки в нанолунках и соответствующие картины секреции цитокинов. В) Процентное содержание Т-клеток, секретирующих указанные цитокины. с) Скорости секреции цитокинов, вычисленные на основании стандартных кривых (среднее +/- s.d., критерий Манна-Уитни, * Р <0,05).
Фиг. 22а представляет собой набор графиков, показывающих типичные графические изображения данных проточной цитометрии, демонстрирующие, что большинство адоптивно перенесенных клеток OT-I имели фенотип клеток памяти в лимфатических узлах, но имели эффекторный фенотип в опухолях. Предварительно обработанные цитокинами клетки, экспрессирующие мшРНК Ppp2r2d или LacZ, инъецировали мышам, несущим 14-дневные опухоли B16-Ova. На 7 день после переноса Т-клетки собирали из указанных органов и красили CD62L- и С044-антителами. FACS-анализ клеток OT-I, экспрессирующих мшРНК, осуществляли, пропуская дважды позитивные по CD8/Thyl.l клетки.
Фиг. 22Ь представляет собой набор графиков, показывающих типичные графические изображения данных проточной цитометрии, демонстрирующие анализ маркеров истощения. Клетки OT-I собирали из дренирующих лимфатических узлов и опухолей мышей и красили антителами, специфичными для TIM-3, LAG-3, PD-1 и CD25. Для всех экспериментов (п=3 биологическим повторам; * Р <0,05, ** Р <0,01, двусторонний t-критерий Стьюдента); каждое значение представляет собой среднее +/- s.d.
Фиг. 23а представляет собой набор графиков, демонстрирующих внутриклеточное окрашивание в отношении гранзима В в Т-клетках OT-I в дренирующих опухоли лимфатических узлах и опухолях.
На фиг. 23Ь представлены парные изображения и график, демонстрирующие инфильтрацию опухолей мшРНК-экспрессирующими Т-клетками. Т-клетки OT-I трансдуцировали векторами мшРНК LacZ или Ppp2r2d, кодирующими репортер GFP, и инъецировали мышам, несущим опухоли B16-0va. Через 7 дней опухоли вырезали и замороженные срезы красили анти-GFP и DAPI, чтобы подсчитать мшРНК
экспрессирующие Т-клетки OT-I в опухолях.
На фиг. 23с представлены парные изображения и график, демонстрирующие иммуногистохимию TUNEL, проведенную на срезах тканей, и осуществляли количественную оценку апоптозных клеток.
Фиг. 2 3d представляет собой набор графиков, демонстрирующих экспрессию МНС класса I опухолевыми клетками. Опухоли расщепляли коллагеназой и красили CD45.2- и Н-2КЬ-антителами. FACS-анализ в отношении экспрессии Н-2КЬ осуществляли, пропуская CD45.2-негативные клетки меланомы. Данные представляют биологические повторы (п=3), каждое значение представляет собой среднее +/-s.d.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Настоящее изобретение основано, отчасти, на наблюдении того, что регуляторные механизмы, которые приводят к утрате Т-клеточной функции в иммуносупрессирующих опухолях, можно систематически выявлять in vivo, используя способ скрининга объединенных в пулы малых шпилечных РНК (мшРНК), направленный на идентификацию генов, которые блокируют функцию инфильтрующих опухоль Т-клеток. Как описано в разделе "Уровень техники" выше, ассоциированные с опухолью иммуносупрессирующие механизмы активно блокируют активность Т-клеток в микроокружении опухолей. Способы, описанные в настоящей публикации, позволяют идентифицировать мшРНК, которые обеспечивают возможность устойчивой инфильтрации и накопления Т-клеток в опухолях, несмотря на множественные ингибирующие сигналы. Как описано ниже, способы позволяют идентифицировать мшРНК, которые вызывают сайленсинг экспрессии генов, ответственных за иммуносупрессию опухолями, обеспечивая возможность усиленной инфильтрации и накопления Т-клеток в опухолях и резистентность к апоптозу.
В некоторых случаях изобретение относится к способам специфичной идентификации регуляторных механизмов, которые приводят к утрате Т-клеточной функции в микроокружении опухоли. Такие способы могут включать в себя: получение популяции Т-клеток, несущих векторы, экспрессирующие мшРНК; осуществление контакта популяции Т-клеток с иммуносупрессирующей опухолью; определение того, восстанавливает ли мшРНК функцию Т-клеток
(например, восстанавливает способность Т-клетки к инфильтрации и пролиферации в микроокружении опухоли) в иммуносупрессирующей опухоли; идентификацию гена, ассоциированного с мшРНК, которая восстанавливает функцию Т-клеток в опухоли, в качестве гена, который ингибирует функцию Т-клеток в микроокружении опухоли.
Изобретение относится к генам-мишеням для снижения
иммуносупрессирующего действия опухолей. Экспрессия генов-
мишеней может быть снижена в иммунных клетках, например, Т-
клетках, которые узнают ассоциированные с опухолью антигены, и
снижение экспрессии генов-мишеней может повышать способность
клеток уклоняться от ассоциированных с опухолью
иммуносупрессирующих механизмов.
Изобретение относится к мшРНК, которые снижают (например,
вызывают сайленсинг, элиминируют, осуществляют нокдаун, нокаут
или снижают) экспрессию генов, которые нарушают функцию
инфильтрующих опухоль Т-клеток. Такие мшРНК были
идентифицированы в результате переноса трансдуцированных мшРНК Т-клеток в опухоли с последующим глубоким секвенированием, чтобы количественно оценить представительство всех мшРНК в опухоли и лимфоидных опухолях. Репрезентивные мшРНК, предлагаемые в настоящем изобретении, включают мшРНК, которые снижают активность генов, включая, например, Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс.
В некоторых случаях изобретение относится к терапевтическим композициям (например, содержащим выделенные молекулы нуклеиновых кислот, векторы, экспрессирующие молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие мшРНК), связанным с мшРНК, которые вызывают сайленсинг экспрессии генов, которые блокируют функцию инфильтрующих опухоль Т-клеток. В других аспектах изобретение относится к модифицированным иммунореактивным клеткам (например, Т-клеткам, включая Т-клетки природные киллеры (NKT), цитотоксические Т-лимфоциты (CTL) и регуляторные Т
клетки), которые несут векторы, способные экспрессировать мшРНК,
описанные в настоящей публикации. В другом аспекте
модифицированные иммунореактивные клетки дополнительно несут
вектор, способный экспрессировать CAR, имеющий
антигенсвязывающий домен, мишенью которого является специфичный для опухоли антиген.
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ РНК
Одним из наиболее важных недавних открытий в биомедицинских
исследованиях является путь интерференции РНК (РНК-и), который
используется клетками для регуляции активности многих генов.
Принципы РНК-и открыли множество новых возможностей для
идентификации терапевтических мишеней. Интерференция РНК (РНК-и)
является эффективным средством для высокопроизводительного
анализа генной функции в масштабе всего генома. Термин
"интерференция РНК" (РНК-и), также называемая
просттранскрипционным сайленсингом генов (PTGS), относится к биологическому процессу, в котором молекулы РНК ингибируют экспрессию генов. "Агент интерференции РНК" в используемом в настоящем описании смысле определяют как агент, который мешает или ингибирует экспрессию гена-мишени, например, гена-мишени согласно изобретению, посредством интерференции РНК (РНК-и). Такие агенты интерференции РНК включают, но без ограничения, молекулы нуклеиновых кислоты, включая молекулы РНК, которые являются гомологичными гену-мишени, например, гену-мишени согласно изобретению или его фрагменту, малые интерферирующие РНК (миРНК), малые шпилечные (мшРНК) и малые молекулы, которые мешают или ингибируют экспрессию гена-мишени посредством интерференции РНК (РНК-и).
"Интерференция РНК (РНК-и)" представляет собой процесс, при котором экспрессия или введение РНК с последовательностью, которая идентична или очень сходна с геном-мишенью, приводит к специфичному для последовательности распаду или PTGS матричной РНК (мРНК), транскрибируемой с являющегося мишенью гена, и таким образом к ингибированию экспрессии гена-мишени. Указанный процесс был описан в клетках растений, беспозвоночных и млекопитающих. РНК-и также может быть инициирована введением
молекул нуклеиновых кислот, например, синтетических миРНК или агентов интерференции РНК, для ингибирования или сайленсинга экспрессии генов-мишеней. В используемом в настоящем описании смысле термин "ингибирование экспрессии гена-мишени" или "ингибирование экспрессии маркерного гена" включает любое снижение экспрессии или активности белка или уровня гена-мишени (например, маркерного гена согласно изобретению) или белка, кодируемого геном-мишенью, например, маркерного белка согласно изобретению. Снижение может составлять по меньшей мере 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% или 99% или больше по сравнению с экспрессией гена-мишени или активностью или уровнем белка, кодируемого геном-мишенью, который не был подвергнут целенаправленному воздействию агента интерференции РНК.
"Короткие интерферирующие РНК", также называемые в настоящем описании "малые интерферирующие РНК" (миРНК) определяют как агент, который функционирует, ингибируя экспрессию гена-мишени. Такие РНК представляют собой эффекторные молекулы для индукции РНК-и, приводящие к посттранскрипционному сайленсингу гена с помощью РНК-индуцируемого комплекса сайленсинга (RISC). Кроме миРНК, которые могут быть химически синтезированы, доступны различные другие системы в форме потенциальных эффекторных молекул для посттранскрипционного сайленсинга генов, включая малые шпилечные РНК (мшРНК), длинные днРНК, короткие временные РНК и микро-РНК (микроРНК). Такие эффекторные молекулы либо процессируются в миРНК, например, как в случае мшРНК, либо непосредственно способствуют сайленсингу гена, как в случае микроРНК. Таким образом, настоящее изобретение охватывает применение мшРНК, а также любой другой подходящей формы РНК, чтобы повлиять на посттранскрипционный сайленсинг генов под действием РНК-и. Применение мшРНК имеет преимущество по сравнению с применением химически синтезированной миРНК, поскольку супрессия гена-мишени обычно является долговременной и стабильной. миРНК может быть химически синтезирована, может быть получена in vitro в результате транскрипции или может быть получена в клетке-хозяине из экспрессированной мшРНК.
В одном варианте миРНК представляет собой малую имеющую
структуру шпильки (также называемую структурой "ствол-петля") РНК (мшРНК). Такие мшРНК состоят из короткой (например, 19-25 нуклеотидов) антисмысловой нити, за которой следует состоящая из 5-9 нуклеотидов петля и комплементарная смысловая нить. Альтернативно, смысловая нить может предшествовать структуре нуклеотидной петли, и антисмысловая нить может следовать далее. Такие мшРНК могут находиться в плазмидах, ретровирусах и лентивирусах.
В используемом в настоящем описании смысле "сайленсинг генов", индуцированный интерференцией РНК, относится к снижению уровня мРНК в клетке гена-мишени по меньшей мере примерно на 5%, примерно на 10%, примерно на 2 0%, примерно на 3 0%, примерно на 4 0%, примерно на 50%, примерно на 60%, примерно на 7 0%, примерно на 8 0%, примерно на 90%, примерно на 95%, примерно на 99%, примерно на 100% от уровня мРНК, выявляемого в клетке без введения интерференции РНК. В одном предпочтительном варианте уровни мРНК снижаются по меньшей мере примерно на 7 0%, примерно на 8 0%, примерно на 90%, примерно на 95%, примерно на 99%, примерно на 10 0%.
Термин "пониженный" или "снижение" в используемом в настоящем описании смысле обычно означает снижение по меньшей мере на 10% по сравнению с эталонным уровнем, например, снижение по меньшей мере примерно на 2 0% или по меньшей мере примерно на 3 0%, или по меньшей мере примерно на 4 0%, или по меньшей мере примерно на 50%, или по меньшей мере примерно на 60%, или по меньшей мере примерно на 7 0%, или по меньшей мере примерно на 8 0%, или по меньшей мере примерно на 90%, или вплоть до и включая снижение на 10 0%, или любое снижение в виде целого числа от 10 до 100% по сравнению с эталонным уровнем.
Термин "повышенный" или "повышение" в используемом в настоящем описании смысле обычно означает повышение по меньшей мере на 10% по сравнению с эталонным уровнем, например, повышение по меньшей мере примерно на 2 0%, или по меньшей мере примерно на 3 0%, или по меньшей мере примерно на 4 0%, или по меньшей мере примерно на 50%, или по меньшей мере примерно на 60%, или по меньшей мере примерно на 7 0%, или по меньшей мере
примерно на 8 0%, или по меньшей мере примерно на 90%, или вплоть до и включая повышение на 10 0% или любое повышение в виде целого числа от 10 до 10 0% по сравнению с эталонным уровнем, или примерно 2-кратное или примерно 3-кратное, или примерно 4-кратное, или примерно 5-кратное или примерно 10-кратное повышение или любое повышение от 2-кратного до 10-кратного или больше по сравнению с эталонным уровнем. ИММУНОРЕАКТИВНЫЕ КЛЕТКИ
В некоторых вариантах изобретение относится к иммунореактивным клеткам, включая Т-клетки, цитотоксические Т-клетки, инфильтрующие опухоль лимфоциты (TIL), регуляторные (CD4) Т-клетки и клетки природные киллеры (NKT), экспрессирующие по меньшей мере один антиген-распознающий рецептор. В любом аспекте иммунореактивные клетки экспрессируют по меньшей мере один специфичный для опухоли антиген-распознающий рецептор. В некоторых аспектах используют специфичные для антигена опухолевой клетки Т-клетки, NKT-клетки, TIL, CTL-клетки или другие иммунореактивные клетки. Не ограничивающие примеры иммунореактивных клеток включают Т-клетки, такие как, например, Т-клетки a|3-TCR+ (например, Т-клетки CD8+ или Т-клетки CD4+), Т-клетки y8-TCR+, инфильтрующие опухоль лимфоциты (TIL), Т-клетки природные киллеры (NKT), цитотоксические Т-лимфоциты (CTL) и Т-клетки CD4.
КОМПОЗИЦИИ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ
В некоторых вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, содержащие последовательность длиной по меньшей мере 12, 15, 20 или 2 5 непрерывно следующих друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 и 653-677. мшРНК также содержат обратный комплемент последовательности непрерывно следующих друг за другом нуклеотидов и короткую последовательность, расположенную между двумя последовательностями, так что две последовательности образуют структуру мшРНК "ствол-петля", которая может быть
процессирована в клетке с образованием миРНК, которая ингибирует экспрессию белка, кодируемого одной из последовательностей SEQ ID N0: 604-620 и 653-677, и их композиции.
В таблице 1 представлен список генов, которые идентифицированы в настоящем изобретении как вовлеченные в иммуносупрессию Т-клеток опухолью.
gggtcccaatattgaagcccatggatcttatggtagaagcgagtccacg gcgaatttttgcaaatgctcacacatatcatataaattccatttcagta aatagtgatcatgaaacatatctttctgcagatgacctgagaattaatt tatggcacttagaaatcacagatagaagctttaacatcgtggacatcaa gcctgctaacatggaggagctgaccgaagtcatcactgcagccgagttc cacccgcaccagtgcaacgtgttcgtctacagcagtagcaaagggacca tccgcctgtgtgacatgcgctcctcggccctgtgcgacagacactccaa gttttttgaagagcctgaagatcccagcagtaggtccttcttctcagaa ataatttcatccatatccgatgtaaaattcagtcatagtgggcggtaca tgatgaccagagactacctgtcggtgaaggtgtgggacctcaacatgga gagcaggccggtggagacccaccaggtccacgagtacctgcgcagcaag ctctgctctctctatgagaacgactgcatctttgacaagtttgagtgtt gctggaacggttcggatagcgccatcatgaccgggtcctataacaactt cttcaggatgtttgatagagacacgcggagggatgtgaccctggaggcc tcgagagagagcagcaaaccgcgcgccagcctcaaaccccggaaggtgt gtacggggggtaagcggaggaaagacgagatcagtgtggacagtctgga cttcaacaagaagatcctgcacacagcctggcaccccgtggacaatgtc attgccgtggctgccaccaataacttgtacatattccaggacaaaatca actagagacgcgaacgtgaggaccaagtcttgtcttgcatagttaagcc ggacatttttctgtcagagaaaaggcatcattgtccgctccattaagaa cagtgacgcacctgctacttcccttcacagacacaggagaaagccgcct ccgctggaggcccggtgtggttccgcctcggcgaggcgcgagacaggcg ctgctgctcacgtggagacgctctcgaagcagagttgacggacactgct cccaaaaggtcattactcagaataaatgtatttatttcagtccgagcct
tcctttccaatttatagaccaaaaaattaacatccaagagaaaagttat tgtcagataccgctctttctccaactttccctctttctctgccatcaca cttgggccttcactgcagcgtggtgtggccaccgtccgtgtcctctcgg ccttcctccgagtccaggtggactctgtggatgtgtggatgtggcccga gcaggctcaggcggccccactcacccacagcatccgccgccaccccttc gggtgtgagcgctcaataaaaacaacacactataaagtgtttttaaatc caaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 604)
Eif2ak3
ggaaagtccaccttccccaacaaggccagcctgggaacatggagtggca gcggccgcagccaatgagagagcaaacgcgcggaaagtttgctcaatgg gcgatgtccgagataggctgtcactcaggtggcagcggcagaggccggg ctgagacgtggccaggggaacacggctggctgtccaggccgtcggggcg gcagtagggtccctagcacgtccttgccttcttgggagctccaagcggc gggagaggcaggcgtcagtggctgcgcctccatgcctgcgcgcggggcg ggacgctgatggagcgcgccatcagcccggggctgctggtacgggcgct gctgctgctgctgctgctgctggggctcgcggcaaggacggtggccgcg gggcgcgcccgtggcctcccagcgccgacggcggaggcggcgttcggcc tcggggcggccgctgctcccacctcagcgacgcgagtaccggcggcggg cgccgtggctgcggccgaggtgactgtggaggacgctgaggcgctgccg gcagccgcgggagagcaggagcctcggggtccggaaccagacgatgaga cagagttgcgaccgcgcggcaggtcattagtaattatcagcactttaga tgggagaattgctgccttggatcctgaaaatcatggtaaaaagcagtgg gatttggatgtgggatccggttccttggtgtcatccagccttagcaaac cagaggtatttgggaataagatgatcattccttccctggatggagccct cttccagtgggaccaagaccgtgaaagcatggaaacagttcctttcaca
NM 004836.5
NM 010121.2
gttgaatcacttcttgaatcttcttataaatttggagatgatgttgttt tggttggaggaaaatctctgactacatatggactcagtgcatatagtgg aaaggtgaggtatatctgttcagctctgggttgtcgccaatgggatagt gacgaaatggaacaagaggaagacatcctgcttctacagcgtacccaaa aaactgttagagctgtcggacctcgcagtggcaatgagaagtggaattt cagtgttggccactttgaacttcggtatattccagacatggaaacgaga gccggatttattgaaagcacctttaagcccaatgagaacacagaagagt ctaaaattatttcagatgtggaagaacaggaagctgccataatggacat agtgataaaggtttcggttgctgactggaaagttatggcattcagtaag aagggaggacatctggaatgggagtaccagttttgtactccaattgcat ctgcctggttacttaaggatgggaaagtcattcccatcagtctttttga tgatacaagttatacatctaatgatgatgttttagaagatgaagaagac attgtagaagctgccagaggagccacagaaaacagtgtttacttgggaa tgtatagaggccagctgtatctgcagtcatcagtcagaatttcagaaaa gtttccttcaagtcccaaggctttggaatctgtcactaatgaaaacgca attattcctttaccaacaatcaaatggaaacccttaattcattctcctt ccagaactcctgtcttggtaggatctgatgaatttgacaaatgtctcag taatgataagttttctcatgaagaatatagtaatggtgcactttcaatc ttgcagtatccatatgataatggttattatctaccatactacaagaggg agaggaacaaacgaagcacacagattacagtcagattcctcgacaaccc acattacaacaagaatatccgcaaaaaggatcctgttcttcttttacac tggtggaaagaaatagttgcaacgattttgttttgtatcatagcaacaa cgtttattgtgcgcaggcttttccatcctcatcctcacaggcaaaggaa ggagtctgaaactcagtgtcaaactgaaaataaatatgattctgtaagt
ggtgaagccaatgacagtagctggaatgacataaaaaactctggatata tatcacgatatctaactgattttgagccaattcaatgcctgggacgtgg tggctttggagttgtttttgaagctaaaaacaaagtagatgactgcaat tatgctatcaagaggatccgtctccccaatagggaattggctcgggaaa aggtaatgcgagaagttaaagccttagccaagcttgaacacccgggcat tgttagatatttcaatgcctggctcgaagcaccaccagagaagtggcaa gaaaagatggatgaaatttggctgaaagatgaaagcacagactggccac tcagctctcctagcccaatggatgcaccatcagttaaaatacgcagaat ggatcctttcgctacaaaagaacatattgaaatcatagctccttcaeca caaagaagcaggtctttttcagtagggatttcctgtgaccagacaagtt catctgagagccagttctcaccactggaattctcaggaatggaccatga ggacatcagtgagtcagtggatgcagcatacaacctccaggacagttgc cttacagactgtgatgtggaagatgggactatggatggcaatgatgagg ggcactcctttgaactttgtccttctgaagcttctccttatgtaaggtc aagggagagaacctcctcttcaatagtatttgaagattctggctgtgat aatgcttccagtaaagaagagccgaaaactaatcgattgcatattggca accattgtgctaataaactaactgctttcaagcccaccagtagcaaatc ttcttctgaagctacattgtctatttctcctccaagaccaaccacttta agtttagatctcactaaaaacaccacagaaaaactccagcccagttcac caaaggtgtatctttacattcaaatgcagctgtgcagaaaagaaaacct caaagactggatgaatggacgatgtaccatagaggagagagagaggagc gtgtgtctgcacatcttcctgcagatcgcagaggcagtggagtttcttc acagtaaaggactgatgcacagggacctcaagccatccaacatattctt tacaatggatgatgtggtcaaggttggagactttgggttagtgactgca
atggaccaggatgaggaagagcagacggttctgaccccaatgccagctt atgccagacacacaggacaagtagggaccaaactgtatatgagcccaga gcagattcatggaaacagctattctcataaagtggacatcttttcttta ggcctgattctatttgaattgctgtatccattcagcactcagatggaga gagtcaggaccttaactgatgtaagaaatctcaaatttccaccattatt tactcagaaatatccttgtgagtacgtgatggttcaagacatgctctct ccatcccccatggaacgacctgaagctataaacatcattgaaaatgctg tatttgaggacttggactttccaggaaaaacagtgctcagacagaggtc tcgctccttgagttcatcgggaacaaaacattcaagacagtccaacaac tcccatagccctttgccaagcaattagccttaagttgtgctagcaaccc taataggtgatgcagataatagcctacttcttagaatatgcctgtccaa aattgcagacttgaaaagtttgttcttcgctcaatttttttgtggacta ctttttttatatcaaatttaagctggatttgggggcataacctaatttg agccaactcctgagttttgctatacttaaggaaagggctatctttgttc tttgttagtctcttgaaactggctgctggccaagctttatagccctcac catttgcctaaggaggtagcagcaatccctaatatatatatatagtgag aactaaaatggatatatttttataatgcagaagaaggaaagtccccctg tgtggtaactgtattgttctagaaatatgctttctagagatatgatgat tttgaaactgatttctagaaaaagctgactccatttttgtccctggcgg gtaaattaggaatctgcactattttggaggacaagtagcacaaactgta taacggtttatgtccgtagttttatagtcctatttgtagcattcaatag ctttattccttagatggttctagggtgggtttacagctttttgtacttt tacctccaataaagggaaaatgaagctttttatgtaaattggttgaaag gtctagttttgggaggaaaaaagccgtagtaagaaatggatcatatata
ttacaactaacttcttcaactatggactttttaagcctaatgaaatctt aagtgtcttatatgtaatcctgtaggttggtacttcccccaaactgatt ataggtaacagtttaatcatctcacttgctaacatgtttttatttttca ctgtaaatatgtttatgttttatttataaaaattctgaaatcaatccat ttgggttggtggtgtacagaacacacttaagtgtgttaacttgtgactt ctttcaagtctaaatgatttaataaaactttttttaaattaaaaaaaaa aaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 605)
Arhgap5
ctcggtgagcgcgccgaggaagagaggcgagcggagagtggaggaggag gcggcggcggcgggagcggtccccaggaatgtcgctgccgccgccaccg ccggggccgctgccgttgaggaggagacggaggagaccgacgttgttag gaagatgatccctatgatcttgaagatgtttctgcacagaaatgaggga aatacaaagaaccaaatacagttctgaaatttgggatctgtattttgag atgattttattttcagaatgagaagcatatctggttacctttatgaatg tagagacatgagaagagagttatgatggcaaaaaacaaagagcctcgtc ccccatcctataccatcagtatagttggactctctgggactgaaaaaga caaaggtaactgtggagttggaaagtcttgtttgtgcaatagatttgta cgctcaaaagcagatgaatattatccagagcatacttctgtgcttagca ccattgactttggaggacgagtagtaaacaatgatcactttttgtactg gggtgacataatacaaaatagtgaagatggagtagaatgcaaaattcat gtcattgaacaaacagagttcattgatgaccagactttcttgcctcatc ggagtacgaatttgcaaccatatataaaacgtgcagctgcatctaaatt gcagtcagcagaaaaactaatgtacatttgcactgatcagctaggctta gaacaagactttgaacagaagcaaatgcctgaagggaagctcaacgtag atggatttttattatgcattgatgtaagtcaaggatgcaataggaagtt
NM 001030055.1
NM 009706.2
tgatgatcaacttaaatttgtgaataacctttttgtccagttatcaaaa tcaaaaaaacctgtaataatagcagcaactaaatgtgatgaatgcgtgg atcattatcttagagaagttcaggcatttgcttcaaataaaaagaacct tcttgtagtggaaacatcagcacgatttaatgtcaacattgaaacatgt tttactgcactggtacaaatgttggataaaactcgtagcaagcctaaaa ttattccctatttggatgcttataaaacacagagacaacttgttgtcac agcaacagataagtttgaaaaacttgtgcagactgtgagagattatcat gcaacttggaaaactgttagtaataaattaaaaaatcatcctgattatg aagaatacatcaacttagagggaacaagaaaggccagaaatacattctc aaaacatatagaacaacttaaacaggaacatataagaaaaaggagagaa gagtatataaatactttaccaagagcttttaacactcttttgccaaatc tagaagagattgaacatttgaattggtcagaagctttgaagttaatgga aaagagagcagatttccagttatgttttgtggtgctagaaaaaactcct tgggatgaaactgaccatatagacaaaattaatgataggcggattccat ttgacctcctgagcactttagaagctgaaaaagtctatcagaaccatgt acagcatctgatatccgagaagaggagggtggaaatgaaggaaaaattc aaaaagactttggaaaaaattcaattcatttcaccagggcagccatggg aggaagttatgtgctttgttatggaggatgaagcctacaaatatatcac tgaggctgatagcaaagaggtatatggtaggcatcagcgagaaatagtt gaaaaagccaaagaagagtttcaagaaatgctttttgagcattctgaac ttttttatgatttagatcttaatgcaacacctagttcagataaaatgag tgaaattcatacagttctgagtgaagaacctagatataaagctttacag aaacttgcacctgatagggaatcccttctacttaagcatataggatttg tttatcatcccactaaagaaacatgtcttagtggccaaaattgtacaga
cattaaagtggagcagttacttgctagtagtcttttacagttggatcat ggccgcttaagattatatcacgatagtaccaatatagataaagttaacc tttttattttagggaaggatggccttgcccaagaactagcaaatgagat aaggacacaatccactgatgatgagtatgccttagatggaaaaatttat gaacttgatcttcggccggttgatgccaaatcgccttactttttgagtc agttatggactgccgcctttaaaccacatgggtgcttctgtgtatttaa ttccattgagtcattgagttttattggggaatttattgggaaaataaga actgaagcttctcagatcagaaaagataaatacatggctaatcttccat ttacattaattctggctaatcagagagattccattagtaagaatctacc aattctcaggcaccaagggcagcagttggcaaacaagttgcaatgtcct tttgtagatgtacctgctggtacatatcctcgtaaatttaatgaaaccc aaataaagcaagctctcagaggagtattggaatcagttaaacacaattt ggatgtggtgagcccaattcctgccaataaggacttatcagaagctgac ttgagaattgtcatgtgcgccatgtgtggagatccatttagtgtggatc ttattctttcacccttccttgattctcattcttgcagtgctgctcaagc tggacagaataattccctaatgcttgataaaatcattggtgaaaaaagg aggcgaatacagatcacaatattatcataccactcttcaattggagtaa gaaaagatgaactagttcatgggtatatattagtttactctgcaaaacg gaaagcttcgatgggaatgcttcgagcatttctatcagaagttcaagac accattcctgtacagctggtggcagttactgacagccaagcagattttt ttgaaaatgaggctatcaaagagttaatgactgaaggagaacacattgc aactgagatcactgctaaatttacagcactgtattctttatctcagtat catcggcaaactgaggtctttactctgttttttagtgatgttctagaga aaaaaaatatgatagaaaattcttatttgtctgataatacaagggaatc
aacccatcaaagtgaagatgtttttctaccatctcccagagactgtttt ccctataataactaccctgattcagatgatgacacagaagcaccacctc cttatagtccaattggggatgatgtacagttgcttccaacacctagtga ccgttccagatatagattagatttggaaggaaatgagtatcctattcat agtaccccaaactgtcatgaccatgaacgcaaccataaagtgcctccac ctattaaacctaaaccagttgtacctaagacaaatgtgaaaaaactcga tccaaaccttttaaaaacaattgaagctggtattggtaaaaatccaaga aagcagacttcccgggtgcctttggcacatcctgaagatatggatcctt cagataactatgcggaacccattgatacaattttcaaacagaagggcta ttctgatgagatttatgttgtcccagatgatagtcaaaatcgtattaaa attcgaaactcatttgtaaataacacccaaggagatgaagaaaatgggt tttctgatagaacctcaaaaagtcatggggaacggaggccttcaaaata caaatataaatctaaaaccttgtttagtaaagccaagtcatactataga agaacacattcagatgccagtgatgatgaggctttcaccacttctaaaa caaaaagaaaaggaagacatcgtggaagtgaagaagatccacttctttc tcctgttgaaacttggaaaggtggtattgataatcctgcaatcacttct gaccaggagttagatgataagaagatgaagaagaaaacccacaaagtga aagaagataaaaagcagaaaaagaaaactaagaacttcaatccaccaac acgtagaaattgggaaagtaattactttgggatgcccctccaggatctg gttacagctgagaagcccataccactatttgttgagaaatgtgtggaat ttattgaagatacagggttatgtaccgaaggactctaccgtgtcagcgg gaataaaactgaccaagacaatattcaaaagcagtttgatcaagatcat aatatcaatctagtgtcaatggaagtaacagtaaatgctgtagctggag cccttaaagctttctttgcagatctgccagatcctttaattccatattc
tcttcatccagaactattggaagcagcaaaaatcccggataaaacagaa cgtcttcatgccttgaaagaaattgttaagaaatttcatcctgtaaact atgatgtattcagatacgtgataacacatctaaacagggttagtcagca acataaaatcaacctaatgacagcagacaacttatccatctgtttttgg ccaaccttgatgagacctgattttgaaaatcgagagtttctgtctacta ctaagattcatcaatctgttgttgaaacattcattcagcagtgtcagtt tttcttttacaatggagaaattgtagaaacgacaaacattgtggctcct ccaccaccttcaaacccaggacagttggtggaaccaatggtgccacttc agttgccgccaccattgcaacctcagctgatacaaccacaattacaaac ggatcctcttggtattatatgagtaggaagtgattgcaaacaggctgga tttggacaaaaagcaaatctagacatgcatgtttcagggttcagtagta tacttcatgtttcatacagataattcacattcaaaattacattttctct ttgaactagatggtattccttattcacttacattacaaatctaagacca tgtgataagcatgactggagaggtttaatttttataaacaaaaatagct ataaagtacaaagctgctgctgcatgcaaccttattgcaatcagtatat cattcctgtggcaatttctgtcaccttatattgtgaataaaatttttct atagaaattaaatgatttaaaaactcacctatatgaaacatttaatgct tttcagcctgctttctggctgattttgttatttgatgtgctaatttggg caacttaatttacattctggcagtcggtgtagataactaaaagcccagt taagtattttataatttcaggctactgaggccatgcttgggatgttgtt tgaaagaaagaaaaaatacacttgacatatttcacatttctgtaccttc atctttacttccaagtaaacccgtggatgatttgatgagggataaatga acctatttcttttacacacataccaaggacatgcttgtggctaaagtga gttgataatgttgtgcaaaggatagttgtcaccaactcatttctttatg
gtccataatgaaataaaaattttgtatactgttaattctgtaaacagat gcatgttcaaaagatctatgatggtcttgtaatcttaatctaatatatt ttagatattttaattttttccctcttggggaacacatttagtatagtgt agaaaatacttccatgacattttcatataaggttatataacttttcata cataaacatgaaatttgttgtagaaaattctttaaaccaaacatttaaa tctaggacttcaatttaatttgttccttgaatctatttttatgtggccc ttaaaaaatatccaaaaaacccattgctaatatagcaataaaaatactt tgggtactgacagactctttggagtgtttatattacaaatttgtattca tattcttttctgtgatgtgttgtactaaaatccaaaatggcttttgcac catttttaagccaattttttcctttgatgttggtaccagaattactata agtgactgctgcttttgggggtaaacattttgttagtgaagataaaacc agaacactaaattatggataaaattttcagaataggtggcacaggtaaa tttcactaggttatattttgtgtagtaaagaaaaaaattatttggtcaa tgttatcttaattcatactacaatttaagattatcttatgtgtattata gtaaatagatgattttcagattcaaggctcctaagagtttgatttgctc tgttttttcctaaaataaatattgtctctcccaactgttaagttctagg tattgtacttccaattttaacttcagaaccaagatgttggcatgaacca ggctgctgttgaagtacatgtatattataaattatcttatttgtgttat actcttacatgttatcttttctaagaaaacaaagtccctattattccta ttgcaaagcacacaggaattaagaaagtacagtaatttttaaaaaaaaa tccggtaaatgtagtattcttaacctgttctatattacttatacctatt gtctatatagctttaatttatagttgtcagtttaactattggcatgtct ggcaaagaaaattaaactttaagagttttataaactgtttctaggttgc taaagaatttatttttctactatatatggtatagacaaagcatcaaact
atgtacaggaaaaaagcctgactatttctatttggaagtaggctgaaaa gagaattttcaaaactgttcgtgtcttcagttcattctgtcataacttt gctattgtaatatgtgaataccagtttatttaagctgttctcttttata ctgtattaatttaatgttcatctgcgtttagtaccatttttgttattaa aactggcatttaccgtttttcacattaacccaccttgcaccttccccca aacttatctccacttttctatgcattctatcattgatttgacacacttc atagtgagtcatttaaatactctacgtttggttcaattaaccagtaggt tacagttattgaaaattaaagtacagtttaaagctcagtctgttacact gaattgattgtgtttgtttttgccaagggtttagatatgcttttaaata ttagaaacatctaagaacagaataacataattaaacttttttctggtaa gttactggaaggtttcactgtttagggacctatcatatgagacttctta aaggattaaaagaataggatagtctcataattgtgagtaaacatcaagg cattatattttacaatactgaataaaatttcatctacacacatgttgcc attgtttcatttaaggttcagtgcttatagttaactacaatattggacc taacaggatctagattagcaatataaagaagcatagtggtactctgttt cacactttcagtagatttattagaagtcaaattctattcaacagacact tattaggatatacaactaatttaagaataaaattccaggcacaatatat tttttttaaatggtatttgttagtagtgcttcttccccttaacatttac agtgtaaatactgcaggtaaccgcaatctaagttagccaaaaagcagct ttttttcccatactgtatgtaaataatgtagacctgggtttttttgttt atttgggtttgtttttttttttgaggtactggaatctaattaatatctc ttaggtatcaacaaaagggaacaattggaatgagaatttaggccttagc ttccatggtgatttttagttttttatacagtaataattgtgatgctatt tgtcaactggatataaatacacatataattttaaaaagtcaaaagtgct
tttgtttctttgtttaatgtaatttttgtgcttcacctacaggatgctg cagtaaattaaatatcagtgaagcttctgatgtataaagaatgctatga ataaaacattaagaagctgtgtaattttaagttatagttgcctctattt ttaccatttcattggtaaaaattagctaatttttttcaagtgaaatgaa aaataaaaatataaatttatcaatatgatggaaatcttattaaggagat gtattattgaattttcactgtacctgaaaaggagattcaaaattttttc tggggatgtatataggtgaaaatttgattttttaaattatcaggaaaac aagataatgcacagatttctaagactaagatcttacctggatgtgattt ttgagctgtggctagacattctttagagccactggaaatattttgaaaa ctattctagttatagcagagctgctaatattaacgaatatatttgtgtc ttcatggtttgtgactattaggccaaattttgtggtatatgttgtcagt ctggatctggtgaggtctgttcaacatgaatctttgtgttatcttgaat ttagtagtttcaaggtacttaaattcttaacagtttctaatttgtttca atacatatgggacatggttgatttttttactgtattagaactcttggaa gttcttagccttttcaggttatgaaatacctgaaagtaaaattttctaa gatttaataagggaagatactattcaaatcattttcttaggatagcatc tttacatacaatgagaggattgtacaagcattaatctcatattccaaca tccagttacttgatgtgatccaagtaccctggtctttttgaagcagtta aaatctaattaattaactttgggagtcttcactattcaattgatcctca tcattgtcctatttgcatgactccattttttcctccactatatgagttt tctttgtcagggggagaggagtgggaagagtcacagaatctcatattca catcttaattaaattgtgtgaaattagtcttttgtggaaattctgtagg cagtatgattttgaaaagctaaccaatgataattagcattttagttaat actaaatgcataaaattataacccttgaaattaatttggtgctggcagt
tctggtttagtcatttttaccagtagttagtagtattaagacctgcagt atatgcactttttgagtagctgtcaaataattgtagttgagaaacaact tgtttattctcacaattcagattttctattcagttttgtctcaaatagt aagttattgtgaacaatttaataacggccctcctgttctagtttgccta atattttagttaagatttagtgttttaacctatttttttaagtttattt tttgtattagattttatttgaataagttatgtgggtttagtaattgacc tatttattcattgcttcactaattcatccagattagttttaagtgtgta tatgtatttgctcaccagatcattttcttgggaccttgaactgtgaatg ttttgtcctaaccatttaatattttctaggtacttgctgcaagttcttg aactattttaccagctttaactttggggctcttagtttcttttctccag attcttgttattttattttatccaaataaatatttaggtgttctaagaa (SEQ ID NO: 606)
Smad2
cggccgggaggcggggcgggccgtaggcaaagggaggtggggaggcggt ggccggcgactccccgcgccccgctcgccccccggcccttcccgcggtg ctcggcctcgttcctttcctcctccgctccctccgtcttccatacccgc cccgcgcggctttcggccggcgtgcctcgcgccctaacgggcggctgga ggcgccaatcagcgggcggcagggtgccagccccggggctgcgccggcg aatcggcggggcccgcggcccagggtggcaggcgggtctacccgcgcgg ccgcggcggcggagaagcagctcgccagccagcagcccgccagccgccg ggaggttcgatacaagaggctgttttcctagcgtggcttgctgcctttg gtaagaacatgtcgtccatcttgccattcacgccgccagttgtgaagag actgctgggatggaagaagtcagctggtgggtctggaggagcaggcgga ggagagcagaatgggcaggaagaaaagtggtgtgagaaagcagtgaaaa gtctggtgaagaagctaaagaaaacaggacgattagatgagcttgagaa
NM 001003652
NM 001252481
agccatcaccactcaaaactgtaatactaaatgtgttaccataccaagc acttgctctgaaatttggggactgagtacaccaaatacgatagatcagt gggatacaacaggcctttacagcttctctgaacaaaccaggtctcttga tggtcgtctccaggtatcccatcgaaaaggattgccacatgttatatat tgccgattatggcgctggcctgatcttcacagtcatcatgaactcaagg caattgaaaactgcgaatatgcttttaatcttaaaaaggatgaagtatg tgtaaacccttaccactatcagagagttgagacaccagttttgcctcca gtattagtgccccgacacaccgagatcctaacagaacttccgcctctgg atgactatactcactccattccagaaaacactaacttcccagcaggaat tgagccacagagtaattatattccagaaacgccacctcctggatatatc agtgaagatggagaaacaagtgaccaacagttgaatcaaagtatggaca caggctctccagcagaactatctcctactactctttcccctgttaatca tagcttggatttacagccagttacttactcagaacctgcattttggtgt tcgatagcatattatgaattaaatcagagggttggagaaaccttccatg catcacagccctcactcactgtagatggctttacagacccatcaaattc agagaggttctgcttaggtttactctccaatgttaaccgaaatgccacg gtagaaatgacaagaaggcatataggaagaggagtgcgcttatactaca taggtggggaagtttttgctgagtgcctaagtgatagtgcaatctttgt gcagagccccaattgtaatcagagatatggctggcaccctgcaacagtg tgtaaaattccaccaggctgtaatctgaagatcttcaacaaccaggaat ttgctgctcttctggctcagtctgttaatcagggttttgaagccgtcta tcagctaactagaatgtgcaccataagaatgagttttgtgaaagggtgg ggagcagaataccgaaggcagacggtaacaagtactccttgctggattg aacttcatctgaatggacctctacagtggttggacaaagtattaactca
gatgggatccccttcagtgcgttgctcaagcatgtcataaagcttcacc aatcaagtcccatgaaaagacttaatgtaacaactcttctgtcatagca ttgtgtgtggtccctatggactgtttactatccaaaagttcaagagaga aaacagcacttgaggtctcatcaattaaagcaccttgtggaatctgttt cctatatttgaatattagatgggaaaattagtgtctagaaatactctcc cattaaagaggaagagaagattttaaagacttaatgatgtcttattggg cataaaactgagtgtcccaaaggtttattaataacagtagtagttatgt gtacaggtaatgtatcatgatccagtatcacagtattgtgctgtttata tacatttttagtttgcatagatgaggtgtgtgtgtgcgctgcttcttga tctaggcaaacctttataaagttgcagtacctaatctgttattcccact tctctgttatttttgtgtgtcttttttaatatataatatatatcaagat tttcaaattatttagaagcagattttcctgtagaaaaactaatttttct gccttttaccaaaaataaactcttgggggaagaaaagtggattaacttt tgaaatccttgaccttaatgtgttcagtggggcttaaacagtcattctt tttgtggttttttgtttttttttgtttttttttttaactgctaaatctt attataaggaaaccatactgaaaacctttccaagcctcttttttccatt cccatttttgtcctcataatcaaaacagcataacatgacatcatcacca gtaatagttgcattgatactgctggcaccagttaattctgggatacagt aagaattcatatggagaaagtccctttgtcttatgcccaaatttcaaca ggaataattggcttgtataatctagcagtctgttgatttatccttccac ctcataaaaaatgcataggtggcagtataattattttcagggatatgct agaattacttccacatatttatccctttttaaaaaagctaatctataaa taccgtttttccaaaggtattttacaatatttcaacagcagaccttctg ctcttcgagtagtttgatttggtttagtaaccagattgcattatgaaat
gggccttttgtaaatgtaattgtttctgcaaaatacctagaaaagtgat gctgaggtaggatcagcagatatgggccatctgtttttaaagtatgttg tattcagtttataaattgattgttattctacacataattatgaattcag aattttaaaaattgggggaaaagccatttatttagcaagttttttagct tataagttacctgcagtctgagctgttcttaactgatcctggttttgtg attgacaatatttcatgctctgtagtgagaggagatttccgaaactctg ttgctagttcattctgcagcaaataattattatgtctgatgttgactca ttgcagtttaaacatttcttcttgtttgcatcttagtagaaatggaaaa taaccactcctggtcgtcttttcataaattttcatatttttgaagctgt ctttggtacttgttctttgaaatcatatccacctgtctctataggtatc attttcaatactttcaacatttggtggttttctattgggtactccccat tttcctatatttgtgtgtatatgtatgtgttcatgtaaatttggtatag taattttttattcattcaacaaatatttattgttcacctgtttgtacca ggaacttttcttagtctttgggtaaaggtgaacaagacaactacagttc ctgcctttgctgagacagcagttacactaacccttaattatcttacttg tctatgaaggagataaacagggtactgtactggagaataacagatggga tgcttcaggtaggacatcaaggaaagcctctaaggaaaggatgcatgag ctaacacctgacattaaagaagcaagccaagtgaggagccaggggagat aagcattcctggcaaagagaatagcatcaaatgcaaaaaggttcacact aaaggaaactcctgattaggtattaatgctttatacagaaacctctata caaatccaaacttgaagatcagaatggttctacagttcataacattttg aaggtggccttattttgtgatagtctgcttcatgtgattctcactaaca tatctccttcctcaacctttgctgtaaaaatttcatttgcaccacatca gtactacttaatttaacaagcttttgttgtgtaagctctcactgtttta
gtgccctgctgcttgcttccagactttgtgctgtccagtaattatgtct tccactacccatcttgtgagcagagtaaatgtcctaggtaataccacta tcaggcctgtaggagatactcagtggagcctctgcccttctttttctta cttgagaacttgtaatggtgttagggaacagttgtaggggcagaaaaca actctgaaagtggtagaaggtcctgatcttggtggttactcttgcatta ctgtgttaggtcaagcagtgcctactatgctgtttcagtagtggagcgc atctctacagttctgatgcgatttttctgtacagtatgaaattgggact caactctttgaaaacacctattgagcagttatacctgttgagcagttta cttcctggttgtaattacatttgtgtgaatgtgtttgatgctttttaac gagatgatgttttttgtattttatctactgtggcctgattttttttttg ttttctgcccctccccccatttataggtgtggttttcatttttctaagt gatagaatcccctctttgttgaatttttgtctttatttaaattagcaac attacttaggatttattcttcacaatactgttaattttctaggaatgat gacctgagaaccgaatggccatgctttctatcacatttctaagatgagt aatattttttccagtaggttccacagagacaccttgggggctggcttag gggaggctgttggagttctcactgacttagtggcatatttattctgtac tgaagaactgcatggggtttcttttggaaagagtttcattgctttaaaa agaagctcagaaagtctttataaccactggtcaacgattagaaaaatat aactggatttaggcctaccttctggaataccgctgattgtgctcttttt atcctactttaaagaagctttcatgattagatttgagctatatcagtta taccgattataccttataatacacattcagttagtaaacatttattgat gcctgttgtttgcccagccactgtgatggatattgaataataaaaagat gactaggacggggccctgacccttgagctgtgcttggtcttgtagaggt tgtgttttttttcctcaggacctgtcactttggcagaaggaaatctgcc
taatttttcttgaaagctaaattttctttgtaagtttttacaaattgtt taatacctagttgtattttttaccttaagccacattgagttttgcttga tttgtctgtcttttaaacactgtcaaatgctttcccttttgttaaaatt attttaatttcactttttttgtgcccttgtcaatttaagactaagactt tgaaggtaaaacaaacaaacaaacatcagtcttagtctcttgctagttg aaatcaaataaaagaaaatatatacccagttggtttctctacctcttaa aagcttcccatatatacctttaagatccttctcttttttctttaactac taaataggttcagcatttattcagtgttagataccctcttcgtctgagg gtggcgtaggtttatgttgggatataaagtaacacaagacaatcttcac tgtacataaaatatgtcttcatgtacagtctttactttaaaagctgaac attccaatttgcgccttccctcccaagcccctgcccaccaagtatctct ttagatatctagtctgtggacatgaacaatgaatacttttttcttactc tgatcgaaggcattgatacttagacatatcaaacatttcttcctttcat atgctttactttgctaaatctattatattcattgcctgaattttattct tcctttctacctgacaacacacatccaggtggtacttgctggttatcct ctttcttgttagccttgttttttgttttttttttttttttttgagaggg agtctcgctctgttgcccaacctggagtgcagtggtgcgatcttggttc actgcaagctccgcctcccgggttcacgccatgcttctgcctcagcctc ccaagtagctgggactacaggcgcccaccaccacactcggctaattttt tgtatttttagtagagacggggtttcaccgtgttggccaggatggtctc gatctcctgacctcgtgatctgtccacctcggcttcccaaagtgctggg attacaggcatgagccaccgcgcccagcctagccatatttttatctgca tatatcagaatgtttctctcctttgaacttattaacaaaaaaggaacat gcttttcatacctagagtcctaatttcttcatcatgaaggttgctattc
aaattgatcaatcattttaattttacaaatggctcaaaaattctgttca gtaaatgtctttgtgactggcaaatggcataaattatgtttaagattat gaacttttctgacagttgcagccaatgttttccctacgataccagattt ccatcttggggcatattggattgttgtatttaagacagtcagaataatg atagtgtgtggtctccagaggtagtcagaatcctgctattgagttcttt ttatatcttccttttcaattttttattaccattttgtttgtttagacta cactttgtagggattgaggggcaaattatctcttggagtggaattcctg tgttttgagccttacaaccaggaaatatgagctatactagatagcctca tgatagcatttacgataagaacttatctcgtgtgttcatgtaatttttt gagtaggaactgttttatcttgaatattgtagctaactatatatagcag aactgcctcagtctttttaagaaggaaataaataatatatgtgtatgaa tttatatatacatatacactcatagacaaacttaacagttggggtcatt ctaacagttaaaacaattgttccattgtttaaatctcagatcctggtaa aatgttcttaatttgtctgtgtacattttcctttcatggacagaccatt ggagtacattaattttcttaatctgccatttggcagttcatttaatata ccattttttggcaacttggtaactaagaatcacagccaaaatttgttaa catcaaagaaagctctgccatataccccgttactaaattattatacatc cagcagattctgggatgtactaacttagggttaactttgttgttgttga taatactagattgctccctctttaattcttcttctggtgcaaggttgct gcttaagttaccctgggaaatactactacaaggtcaaattttctagtat cttacagcctgattgaaggtgattcagatctttgctcaatataaatgga ttttccaagattctctgggccatccttgacccacaggtgatctcgctgg agtatattaacttaacttcagtgccagttggtttggtgccatgagatcc ataatgaatccagaacttcaccattgcttagatataagagtcccttgga
agaataatgccactgatgatgggggtcagaaggtgtattaactcaacat agagggcttttagatttttcttcaaaaaaatttcgagaaaagtattctt ttaccctccaaacagttaacagctcttagtttctccaaatatgctcttt gatttacttatttttaattaaagatggtaatttattgaacaatgaaatc cgtaatatattgatttaaggacaaaagtgaagttttagaattataaaag tacttaaatattatatattttccatttcataattgttttcctttctctg tggctttaaagtttttgactattttacaatgttaatcactaggtaactt gccatatttctggttctatattaagttctatcctttataatgctgttat tataaagctggtttttagcatttgtctgtagcaatagaaattttactaa gtctctgttctcccagtaagttttttcttttctcagtaagtccctaaga aaacatttgtttgccactcttactattcccaatcttggattgttcgagc tgaaaaaaaatttgatgagaaacaggaggatccttttctggtgaatata ggttcctgctttaagaatgtggaaatccattgctttatataactaatat acacacagattaattaaaattgtgagaaataattcacacatgacaagta ggtaacatgcatgagttttgaatttttttaaaaacccaactgtttgaca aaatatagaacccaaattggtactttcttagaccagtgtaacctcacac ctcagttttgcttttccaaccctgacttgaaaggcatatttgtatcttt ttattagtgatagtgaagctgtgacactaaccttttatacaaaagagta aagaaagaaaaactacagcgattaagatgagaacagttctgcagttgtt gaactagatcacagcattgtaggcagaataaaaaatgttcatatctgag aatattcctttcgccatcttttcccaaggccagacctcctggtggagca cagttaaaagtaacattctgggcctttgtaatcggagggctgtgtctcc agctggcagcctttgttttaatatataatgcaggactgtggaaaacagt tggcatagaatattttcacctaaaaaagaaagaaaagacatacaaaact
ggattaattgcaaaaagagaatacagtaaaataccatataactggacaa agctagaagaacctttagaagatttgtctgaaaacagatttcaagagtg agcttttatacactgctcactaatttgcttgattactaccaactcttct taaagttaacacgtttaaggtatttctggacttcctagccttttagcaa gcttagaggaactagccattagctagtgatgtaaaaatattttggggac tgatgcccttaaaggttatgcccttgaaagttcttaccttttctctagt gatattaaggaacgagtgggtagtgttctcagggtgaccagctgcccta aagtgcctgggattgagggtttccctggatgcgggactttccctggata caaaacttttagcagagttttgtatatatgtggatttttctgataagta gcacatcagaggccttaaccactgcccaaaagcgattctccattgagag tacatatcttgaacttaagaaattcatttgctctgatttttaatcttgt aaagtttttgctaaactcaaaacaagtcccaggcacaccagaaggagct gaccaccttaggtgttcttgtgatttatccttacttccctatgttgtca tagttgcttctaaactcagctgcactatggctgtcaacatttctgatac ttattgggatatgtgccatccagtcatttagtactttgaatggaacatg agatttataacacaggtaatagctgaaggtaccagtatggtggtgagac tcacacttagtgatccagctaaggtaactgatgttataatggaacagag aagaggccaactagatagctaagttcttctgaacctatgtgtatatgta agtacaaatcatgcgtccttatggggttaaacttaatctgaaatttaca tttttcatagtaaaaggaaaccaattgttgcagatttcttttcttgtga ggaaatacatggcctttgatgctctggcgtctactgcatttcccagtct gttctgctcgagaagccagaatgtgttgttaacatttttccgtgaatgt tgtgttaaaatgattaaatgcatcagccaatggcaagtgaaggaattgg gtgtcctgatgcagactgagcagtttctctcaattgtagcctcatactc
ataaggtgcttaccagctagaacattgagcacgtgaggtgagatttttt ttctctgatggcattaactttgtaatgcaatatgatggatgcagaccct gttcttgtttccctctggaagtccttagtggctgcatccttggtgcact gtgatggagatattaaatgtgttctttgtgagctttcgttctatgattg tcaaaagtacgatgtggttccttttttatttttattaaacaatgagctg aggctttattacagctggttttcaagttaaaattgttgaatactgatgt ctttctcccacctacaccaaatattttagtctatttaaagtacaaaaaa agttctgcttaagaaaacattgcttacatgtcctgtgatttctggtcaa tttttatatatatttgtgtgcatcatctgtatgtgctttcactttttac cttgtttgctcttacctgtgttaacagccctgtcaccgttgaaaggtgg acagttttcctagcattaaaagaaagccatttgagttgtttaccatgtt aaaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 607)
Акар81
gtgtgtggaggggaccctgtggttagcagcagctatcgcagcgtcggat gttcagagcagcagaagccggcgtcgtcggatgttgtgttgcccgccac catgagctacacaggctttgtccagggatctgaaaccactttgcagtcg acatactcggataccagcgctcagcccacctgtgattatggatatggaa cttggaactctgggacaaatagaggctacgagggctatggctatggcta tggctatggccaggataacaccaccaactatgggtatggtatggccact tcacactcttgggaaatgcctagctctgacacaaatgcaaacactagtg cctcgggtagcgccagtgccgattccgttttatccagaattaaccagcg cttagatatggtgccgcatttggagacagacatgatgcaaggaggcgtg tacggctcaggtggagaaaggtatgactcttatgagtcctgcgactcga gggccgtcctgagtgagcgcgacctgtaccggtcaggctatgactacag cgagcttgaccctgagatggaaatggcctatgagggccaatacgatgcc
NM 014371
NM 017476
taccgcgaccagttccgcatgcgtggcaacgacaccttcggtcccaggg cacagggctgggcccgggatgcccggagcggccggccaatggcctcagg ctatgggcgcatgtgggaagaccccatgggggcccggggccagtgcatg tctggtgcctctcggctgccctccctcttctcccagaacatcatccccg agtacggcatgttccagggcatgcgaggtgggggcgccttcccgggcgg ctcccgctttggtttcgggtttggcaatggcatgaagcagatgaggcgg acctggaagacctggaccacagccgacttccgaaccaagaagaagaaga gaaagcagggcggcagtcctgatgagccagatagcaaagccacccgcac ggactgctcggacaacagcgactcagacaatgatgagggcaccgagggg gaagccacagagggccttgaaggcaccgaggctgtggagaagggctcca gagtggacggagaggatgaggagggaaaagaggatgggagagaagaagg caaagaggatccagagaagggggccctaaccacccaggatgaaaatggc cagaccaagcgcaagttgcaggcaggcaagaagagtcaggacaagcaga aaaagcggcagcgagaccgcatggtggaaaggatccagtttgtgtgttc tctgtgcaaataccggaccttctatgaggacgagatggccagccatctt gacagcaagttccacaaggaacactttaagtacgtaggcaccaagctcc ctaagcagacggctgactttctgcaggagtacgtcactaacaagaccaa gaagacagaggagctccgaaaaaccgtggaggaccttgatggcctcatc caccaaatctacagagaccaggatctgacccaggaaattgccatggagc attttgtgaagaaggtggaggcagcccattgtgcagcctgcgacctctt cattcccatgcagtttgggatcatccagaagcatctgaagaccatggat cacaaccggaaccgcaggctcatgatggagcagtccaagaagtcctccc tcatggtggcccgcagtattctcaacaacaagctcatcagcaagaagct ggagcgctacctgaagggcgagaaccctttcaccgacagccccgaggag
gagaaggagcaggaggaggctgagggcggtgccctggacgagggggcgc agggcgaagcggcagggatctcggagggcgcagagggcgtgccggcgca gcctcccgtgcccccagagccagcccccggggccgtgtcgccgccaccg ccgccgcccccagaggaggaggaggagggcgccgtgcccttgctgggag gggcgctgcaacgccagatccgcggcatcccgggcctcgacgtggagga cgacgaggagggcggcgggggcgccccgtgacccgagctcggggcgggc ggagcccgcgtggccgaagctggaaaccaaacctaataaagttttccca tcccaccaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 608)
Rbks
acctttgagcgatggcggcgtctggggaaccccagaggcagtggcaaga ggaggtggcggcggtggtagtggtgggctcctgcatgaccgacctggtc agtcttacttctcgtttgccaaaaactggagaaaccatccatggacata agttttttattggctttggagggaaaggtgccaaccagtgtgtccaagc tgctcggcttggagcaatgacgtccatggtgtgtaaggttggcaaagat tcttttggcaatgattatatagaaaacttaaaacagaatgatatttcta cagaatttacatatcagactaaagatgctgctacaggaactgcttctat aattgtcaataatgaaggccagaatatcattgtcatagtggctggagca aatttacttttgaatacggaggatctgagggcagcagccaatgtcatta gcagagccaaagtcatggtctgccagctcgaaataactccagcaacttc tttggaagccctaacaatggcccgcaggagtggagtgaaaaccttgttc aatccagcccctgccattgctgacctggatccccagttctacaccctct cagatgtgttctgctgcaatgaaagtgaggctgagattttaactggcct cacggtgggcagcgctgcagatgctggggaggctgcattagtgctcttg aaaaggggctgccaggtggtaatcattaccttaggggctgaaggatgtg tggtgctgtcacagacagaacctgagccaaagcacattcccacagagaa
NM 022128
NM 153196
agtcaaggctgtggataccacgggtgctggtgacagctttgtgggagct ctggccttctacctggcttactatccaaatctgtccttggaagacatgc tcaacagatccaatttcattgcagcagtcagtgtccaggctgcaggaac acagtcatcttacccttacaaaaaagaccttccgcttactctgttttga ttgctattagtcccaaaataaatatacctgggaataaaatgtacttggg ggtggctgctcctggctaatgcttattagaaaatgtcctcgtccccttt ctttgcaaatattagttcttttacgaagtcatcctcaagcttcaattta tttataacgatgattcttttgctttccatgcatttgcacaaaacaacca gaattaaagattccacaacc (SEQ ID NO: 609)
Egr2
aactgagcgaggagcaattgattaatagctcggcgaggggactcactga ctgttataataacactacaccagcaactcctggcttcccagcagccgga acacagacaggagagagtcagtggcaaatagacatttttcttatttctt aaaaaacagcaacttgtttgctacttttatttctgttgatttttttttc ttggtgtgtgtggtggttgtttttaagtgtggagggcaaaaggagatac catcccaggctcagtccaacccctctccaaaacggcttttctgacactc caggtagcgagggagttgggtctccaggttgtgcgaggagcaaatgatg accgccaaggccgtagacaaaatcccagtaactctcagtggttttgtgc accagctgtctgacaacatctacccggtggaggacctcgccgccacgtc ggtgaccatctttcccaatgccgaactgggaggcccctttgaccagatg aacggagtggccggagatggcatgatcaacattgacatgactggagaga agaggtcgttggatctcccatatcccagcagctttgctcccgtctctgc acctagaaaccagaccttcacttacatgggcaagttctccattgaccct cagtaccctggtgccagctgctacccagaaggcataatcaatattgtga gtgcaggcatcttgcaaggggtcacttccccagcttcaaccacagcctc
NM 000399
NM 010118
atccagcgtcacctctgcctcccccaacccactggccacaggacccctg ggtgtgtgcaccatgtcccagacccagcctgacctggaccacctgtact ctccgccaccgcctcctcctccttattctggctgtgcaggagacctcta ccaggacccttctgcgttcctgtcagcagccaccacctccacctcttcc tctctggcctacccaccacctccttcctatccatcccccaagccagcca cggacccaggtctcttcccaatgatcccagactatcctggattctttcc atctcagtgccagagagacctacatggtacagctggcccagaccgtaag ccctttccctgcccactggacaccctgcgggtgccccctccactcactc cactctctacaatccgtaactttaccctggggggccccagtgctggggt gaccggaccaggggccagtggaggcagcgagggaccccggctgcctggt agcagctcagcagcagcagcagccgccgccgccgccgcctataacccac accacctgccactgcggcccattctgaggcctcgcaagtaccccaacag acccagcaagacgccggtgcacgagaggccctacccgtgcccagcagaa ggctgcgaccggcggttctcccgctctgacgagctgacacggcacatcc gaatccacactgggcataagcccttccagtgtcggatctgcatgcgcaa cttcagccgcagtgaccacctcaccacccatatccgcacccacaccggt gagaagcccttcgcctgtgactactgtggccgaaagtttgcccggagtg atgagaggaagcgccacaccaagatccacctgagacagaaagagcggaa aagcagtgccccctctgcatcggtgccagccccctctacagcctcctgc tctgggggcgtgcagcctgggggtaccctgtgcagcagtaacagcagca gtcttggcggagggccgctcgccccttgctcctctcggacccggacacc ttgagatgagactcaggctgatacaccagctcccaaaggtcccggaggc cctttgtccactggagctgcacaacaaacactaccaccctttcctgtcc ctctctccctttgttgggcaaagggctttggtggagctagcactgcccc
ctttccacctagaagcaggttcttcctaaaacttagcccattctagtct ctcttaggtgagttgactatcaacccaaggcaaaggggaggctcagaag gaggtggtgtggggacccctggccaagagggctgaggtctgaccctgct ttaaagggttgtttgactaggttttgctaccccacttccccttattttg acccatcacaggtttttgaccctggatgtcagagttgatctaagacgtt ttctacaataggttgggagatgctgatcccttcaagtggggacagcaaa aagacaagcaaaactgatgtgcactttatggcttgggactgatttgggg gacattgtacagtgagtgaagtatagcctttatgccacactctgtggcc ctaaaatggtgaatcagagcatatctagttgtctcaacccttgaagcaa tatgtattataaactcagagaacagaagtgcaatgtgatgggaggaaca tagcaatatctgctccttttcgagttgtttgagaaatgtaggctatttt ttcagtgtatatccactcagattttgtgtatttttgatgtacactgttc tctaaattctgaatctttgggaaaaaatgtaaagcatttatgatctcag aggttaacttatttaagggggatgtacatatattctctgaaactaggat gcatgcaattgtgttggaagtgtccttggtgccttgtgtgatgtagaca atgttacaaggtctgcatgtaaatgggttgccttattatggagaaaaaa atcactccctgagtttagtatggctgtatatttctgcctattaatattt ggaattttttttagaaagtatatttttgtatgctttgttttgtgactta aaagtgttacctttgtagtcaaatttcagataagaatgtacataatgtt accggagctgatttgtttggtcattagctcttaatagttgtgaaaaaat aaatctattctaacgcaaaaccactaactgaagttcagataatggatgg tttgtgactatagtgtaaataaatacttttcaacaataaaaaaaaaaaa aaa (SEQ ID NO: 610)
Dgka
agttcctgccagtgagtccctaggcctccatctctctcccttgctgtac
NM 001345
NM 016811
caccttcaccaccatccatgcgaccccaagagccttaatgactctagaa gagactccaggcaggggaagctgaaaggacctttcactccctacttttg gccagggccttctgtgccacctgccaagaccagcaggcctaccctctga agaggtccaagcaacggaagtactactacgaagctgcctttctggccat ccttgagaaaaatagacagatggccaaggagaggggcctaataagcccc agtgattttgcccagctgcaaaaatacatggaatactccaccaaaaagg tcagtgatgtcctaaagctcttcgaggatggcgagatggctaaatatgt ccaaggagatgccattgggtacgagggattccagcaattcctgaaaatc tatctcgaagtggataatgttcccagacacctaagcctggcactgtttc aatcctttgagactggtcactgcttaaatgagacaaatgtgacaaaaga tgtggtgtgtctcaatgatgtttcctgctacttttcccttctggagggt ggtcggccagaagacaagttagaattcaccttcaagctgtacgacacgg acagaaatgggatcctggacagctcagaagtggacaaaattatcctaca gatgatgcgagtggctgaatacctggattgggatgtgtctgagctgagg ccgattcttcaggagatgatgaaagagattgactatgatggcagtggct ctgtctctcaagctgagtgggtccgggctggggccaccaccgtgccact gctagtgctgctgggtctggagatgactctgaaggacgacggacagcac atgtggaggcccaagaggttccccagaccagtctactgcaatctgtgcg agtcaagcattggtcttggcaaacagggactgagctgtaacctctgtaa gtacactgttcacgaccagtgtgccatgaaagccctgccttgtgaagtc agcacctatgccaagtctcggaaggacattggtgtccaatcacatgtgt gggtgcgaggaggctgtgagtccgggcgctgcgaccgctgtcagaaaaa gatccggatctaccacagtctgaccgggctgcattgtgtatggtgccac ctagagatccacgatgactgcctgcaagcggtgggccatgagtgtgact
gtgggctgctccgggatcacatcctgcctccatcttccatctatcccag tgtcctggcctctggaccggatcgtaaaaatagcaaaacaagccagaag accatggatgatttaaatttgagcacctctgaggctctgcggattgacc ctgttcctaacacccacccacttctcgtctttgtcaatcctaagagtgg cgggaagcaggggcaaagggtgctctggaagttccagtatatattaaac cctcgacaggtgttcaacctcctaaaggatggtcctgagatagggctec gattattcaaggatgttcctgatagccggattttggtgtgtggtggaga cggcacagtaggctggattctagagaccattgacaaagctaacttgcca gttttgcctcctgttgctgtgttgcccctgggtactggaaatgatctgg ctcgatgcctaagatggggaggaggttatgaaggacagaatctggcaaa gatcctcaaggatttagagatgagtaaagtggtacatatggatcgatgg tctgtggaggtgatacctcaacaaactgaagaaaaaagtgacccagtcc cctttcaaatcatcaataactacttctctattggcgtggatgcctctat tgctcatcgattccacatcatgcgagagaaatatccggagaagttcaac agcagaatgaagaacaagctatggtacttcgaatttgccacatctgaat ccatcttctcaacatgcaaaaagctggaggagtctttgacagttgagat ctgtgggaaaccgctggatctgagcaacctgtccctagaaggcatcgca gtgctaaacatccctagcatgcatggtggctccaacctctggggtgata ccaggagaccccatggggatatctatgggatcaaccaggccttaggtgc tacagctaaagtcatcaccgaccctgatatcctgaaaacctgtgtacca gacctaagtgacaagagactggaagtggttgggctggagggtgcaattg agatgggccaaatctataccaagctcaagaatgctggacgtcggctggc caagtgctctgagatcaccttccacaccacaaaaacccttcccatgcaa attgacggagaaccctggatgcagacgccctgtacaatcaagatcaccc
acaagaaccagatgcccatgctcatgggcccacccccccgctccaccaa tttctttggcttcttgagctaagggggacacccttggcctccaagccag ccttgaacccacctccctgtccctggactctactcccgaggctctgtac attgctgccacatactcctgccagcttgggggagtgttccttcaccctc acagtatttattatcctgcaccacctcactgttccccatgcgcacacac atacacacaccccaaaacacatacattgaaagtgcctcatctgaataaa atgacttgtgtttcccctttgggatctgctaaaaaaaaaaaaaaaaaaa aaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 611)
Cblb
ctgggtcctgtgtgtgccacaggggtggggtgtccagcgagcggtctcc tcctcctgctagtgctgctgcggcgtcccgcggcctccccgagtcgggc gggaggggagagcgggtgtggatttgtcttgacggtaattgttgcgttt ccacgtctcggaggcctgcgcgctgggttgctccttcttcgggagcgag ctgttctcagcgatcccactcccagccggggctccccacacacactggg ctgcgtgcgtgtggagtgggacccgcgcacacgcgtgtctctggacagc tacggcgccgaaagaactaaaattccagatggcaaactcaatgaatggc agaaaccctggtggtcgaggaggaaatccccgaaaaggtcgaattttgg gtattattgatgctattcaggatgcagttggaccccctaagcaagctgc cgcagatcgcaggaccgtggagaagacttggaagctcatggacaaagtg gtaagactgtgccaaaatcccaaacttcagttgaaaaatagcccaccat atatacttgatattttgcctgatacatatcagcatttacgacttatatt gagtaaatatgatgacaaccagaaacttgcccaactcagtgagaatgag tactttaaaatctacattgatagccttatgaaaaagtcaaaacgggcaa taagactctttaaagaaggcaaggagagaatgtatgaagaacagtcaca ggacagacgaaatctcacaaaactgtcccttatcttcagtcacatgctg
NM 170662
NM 001033238
gcagaaatcaaagcaatctttcccaatggtcaattccagggagataact ttcgtatcacaaaagcagatgctgctgaattctggagaaagttttttgg agacaaaactatcgtaccatggaaagtattcagacagtgccttcatgag gtccaccagattagctctggcctggaagcaatggctctaaaatcaacaa ttgatttaacttgcaatgattacatttcagtttttgaatttgatatttt taccaggctgtttcagccttggggctctattttgcggaattggaatttc ttagctgtgacacatccaggttacatggcatttctcacatatgatgaag ttaaagcacgactacagaaatatagcaccaaacccggaagctatatttt ccggttaagttgcactcgattgggacagtgggccattggctatgtgact ggggatgggaatatcttacagaccatacctcataacaagcccttatttc aagccctgattgatggcagcagggaaggattttatctttatcctgatgg gaggagttataatcctgatttaactggattatgtgaacctacacctcat gaccatataaaagttacacaggaacaatatgaattatattgtgaaatgg gctccacttttcagctctgtaagatttgtgcagagaatgacaaagatgt caagattgagccttgtgggcatttgatgtgcacctcttgccttacggca tggcaggagtcggatggtcagggctgccctttctgtcgttgtgaaataa aaggaactgagcccataatcgtggacccctttgatccaagagatgaagg ctccaggtgttgcagcatcattgacccctttggcatgccgatgctagac ttggacgacgatgatgatcgtgaggagtccttgatgatgaatcggttgg caaacgtccgaaagtgcactgacaggcagaactcaccagtcacatcacc aggatcctctccccttgcccagagaagaaagccacagcctgacccactc cagatcccacatctaagcctgccacccgtgcctcctcgcctggatctaa ttcagaaaggcatagttagatctccctgtggcagcccaacgggttcacc aaagtcttctccttgcatggtgagaaaacaagataaaccactcccagca
ccacctcctcccttaagagatcctcctccaccgccacctgaaagacctc caccaatcccaccagacaatagactgagtagacacatccatcatgtgga aagcgtgccttccagagacccgccaatgcctcttgaagcatggtgccct cgggatgtgtttgggactaatcagcttgtgggatgtcgactcctagggg agggctctccaaaacctggaatcacagcgagttcaaatgtcaatggaag gcacagtagagtgggctctgacccagtgcttatgcggaaacacagacgc catgatttgcctttagaaggagctaaggtcttttccaatggtcaccttg gaagtgaagaatatgatgttcctccccggctttctcctcctcctccagt taccaccctcctccctagcataaagtgtactggtccgttagcaaattct ctttcagagaaaacaagagacccagtagaggaagatgatgatgaataca agattccttcatcccaccctgtttccctgaattcacaaccatctcattg tcataatgtaaaacctcctgttcggtcttgtgataatggtcactgtatg ctgaatggaacacatggtccatcttcagagaagaaatcaaacatccctg acttaagcatatatttaaagggagatgtttttgattcagcctctgatcc cgtgccattaccacctgccaggcctccaactcgggacaatccaaagcat ggttcttcactcaacaggacgccctctgattatgatcttctcatccctc cattaggtgaagatgcttttgatgccctccctccatctctcccacctcc cccacctcctgcaaggcatagtctcattgaacattcaaaacctcctggc tccagtagccggccatcctcaggacaggatctttttcttcttccttcag atccctttgttgatctagcaagtggccaagttcctttgcctcctgctag aaggttaccaggtgaaaatgtcaaaactaacagaacatcacaggactat gatcagettccttcatgttcagatggttcacaggcaccagccagacccc ctaaaccacgaccgcgcaggactgcaccagaaattcaccacagaaaacc ccatgggcctgaggcggcattggaaaatgtcgatgcaaaaattgcaaaa
ctcatgggagagggttatgcctttgaagaggtgaagagagccttagaga tagcccagaataatgtcgaagttgcccggagcatcctccgagaatttgc cttccctcctccagtatccccacgtctaaatctatagcagccagaactg tagacaccaaaatggaaagcaatcgatgtattccaagagtgtggaaata aagagaactgagatggaattcaagagagaagtgtctcctcctcgtgtag cagcttgagaagaggcttgggagtgcagcttctcaaaggagaccgatgc ttgctcaggatgtcgacagctgtggcttccttgtttttgctagccatat ttttaaatcagggttgaactgacaaaaataatttaaagacgtttacttc ccttgaactttgaacctgtgaaatgctttaccttgtttacagtttggca aagttgcagtttgttcttgtttttagtttagttttgttttggtgttttg atacctgtactgtgttcttcacagaccctttgtagcgtggtcaggtctg ctgtaacatttcccaccaactctcttgctgtccacatcaacagctaaat catttattcatatggatctctaccatccccatgccttgcccaggtccag ttccatttctctcattcacaagatgctttgaaggttctgattttcaact gatcaaactaatgcaaaaaaaaaaaagtatgtattcttcactactgagt ttcttctttggaaaccatcactattgagagatgggaaaaacctgaatgt ataaagcatttatttgtcaataaactgccttttgtaaggggttttcaca taacata (SEQ ID NO: 612)
Mdfic
cccaggccggctctggcctcctgacccagacagcgcagggcgcgaggga tcgcgcggccgagcccgggtcgcgccgctcccagcatcggggccgctag ccaagagttcgaggccttcccgatccggatgtgatgaaaaagagcaaca gagggagaagtgtttcaggattgtaggagtggaagaggggaaagagagg cagagagggggaaggccccctcgcaggggagccggctggagtgagctgg ctggaaagagggggcggagtgcgcggagtcagagccgccaccgctgccg
NM 001166345
NM 175088
cagttgccgccactgcggcgtctgggctgagccggagggaggcgggagg acgcgcaggggcggccgccgccgtcgtcaggccaccggggcgaaaatgc ggccgctgccggaggctcgctaactttccggggcggaagaggaggagga ggaggaggaaggggcttggagcgactacggggggatgcggagaagcagt cagttccctgcacccagcacctcacagcccttcctccgtgcgccctgcc gggcggcgagctaggcggcagcggcgcggcgcgggctcggcggagcggc ccatgtccggcgcgggcgaagccctcgctcccgggcccgtggggccgca gcgcgtggccgaggcgggcggcggccagctgggctccacagcccaggga aaatgtgataaagacaatactgagaaagatataactcaagctaccaata gccacttcacacatggagagatgcaagaccagtccatttggggaaatcc ttcggatggtgaactcattagaacccaacctcagcgcttgcctcagctt cagacttcagcccaggtgccaagtggtgaggaaataggcaagataaaga acggccacacaggtctgagcaatggaaatggaattcaccacggggccaa acacggatccgcagataatcgcaaactttcagcacctgtttctcaaaaa atgcatagaaaaattcagtccagcttgtctgtaaacagcgatatcagta agaagagcaaagtaaatgctgtcttttcccaaaagacaggctcttcacc tgaagattgttgtgtccactgtatcctggcttgcttgttctgcgaattc ctgaccctttgcaacattgtcctgggacaagcgtcatgtggcatctgca cctcagaagcctgctgctgttgctgtggtgacgagatgggggatgattg taactgcccttgtgatatggactgtggcatcatggatgcctgttgtgaa tcatcagactgcttggaaatctgtatggaatgctgtggaatttgttttc cttcataaatatttatcttttgtttgtgttaaaactggagagtgtttaa aaatttccttttggggggaagaaaagcacattgtaagattctcatgaaa caacatggaatttgcactgttaactcattattgtaagtaatctctgaaa
gcctttttactttaaccaaatctacatggtttaatatgtgaaattttaa ctactttaactagttttataaatttcttaatatgttacaataacttagg gacattttgacaccccccttcccaaatgttaaatgccttctccttttta ccgatatttctgtttcttttaaccgttctcaggagcactttgctccaaa tatattatttttcagtgtgtatttaaacgaggcagtttattttgatatg tatctattcatgattgaaaggaagcagtcttggccaggcacggtggctt acacctgtaaccctggcattttgggaggccaaggtgggcagattgcctg agctcaggagttcgagaccagccagggcaacatggtgaaaccccatctc tactaaaatacaaaaagttagctgggcttggcggtgtgcgcctgtagtc ccagctactcaggaggctgaggcaggagaattgcttgaacccgagaggc ggaagttgcagtgagccgagattgtgccactgaactccaacctgcactc cagcctgggcaacagagcgagactccatctctaaataaataaataaata aataaataaataaataaataaataaacaaaccagtctttattttaaaag aaactttaggaaacaaacccacataatagttgggaaccagtgttgatct ctctcccttaccttctccacttgttcaacagactctgaatgccgactgt gtggactctcttcctcagactgtggggacagatacaattccactcctgt ccacaggaacatgagatttagcagactaaggagatctgtaaagaatgaa ccataccacaaggcatactgaagtgaggattataagagaaataaactca aaatgctgttggaatatgcagagaattgctaccagaatattcagtaagg tttcagggagaatgtggcatttgaggactctcttagaatgagtgattca cctgctatttaaatgaattatttagatttttgacaaagatttaggtgga caccctaaactgtgtgtgcctttaaccagttaaaagaacagtgccttca gcatacttttttattagttgtaggaatacagctttttgaaaaagctata aagtttaaattaactaaaaatatgcattttcttacacataatttaaatg
ttatcatacttttttgatgaaaacataatgccttagtaaaatagctcta tttaataaagaagattgagtactctgacacatttcatttaaattaggaa atttttaatattaaaatcccagtgttctgagttattgaaaggctttctt ttattttgagagctttaggtctttttgggatgagaacattttagttgtt tagtttgtttcttaagcagtgctattttttgtaaacacagataaatgga aaccattcttttcaatgcagaagaaatctagatatcccctactgtgacc aaatttctgtattacgattttatgttaaattaaactaatatggcaggtt ataatgatccttaagtgtaaagaaatcagtcaattacaagagtaattgt atagttattgagacctatagtgtgtggcttagatgaaagggagagtaaa ttttcataccatgctctctcctactcagtttgatctctctaaaattgta gtttggtttgatttaatataattcttagtagaaattttgaaagtatgct ttgggattaataattatttttaatttttctggctgaatatcaaattgat agtaacaacagaagcataattttaggaaggctttcgcaaacctagcctt ttaagagaggtttttaacctgaagcatgagaatatatcacctgtggttt ttcctttgagatgaaacgtagtttctagttatatcattacttaaagggc ttaaaaagaaaaaacttagcaaacttttgaatctttcttttattgctat ttacacatacatacacacatacaaaacctttaaattttgggatctgaat ataattctggtaaacagctgtcttcatttttctcctctaaagaacttaa ttcatttgttacataaaatataaggaaatctttatactattttacagta accacaatctaaatatttacatatacccaaaattaacttatgctcatat attaggatgtgagaatatcatctgtttatggacacatgaaacctcctaa tgacctggaattgttagaatatttgactttttatatgcaaagtttttca accaagtggtttgtctaatatttaaacatgtactggcacaatttgtgat gaaaatattagcacatttgcaataatgtttctccataacagagaatgtt
aatggataccagaattttatttttgtatttatgttcatagtacttttcc tcttgtctactccagacagttattccataaagcatttgtataattaaaa ggaaaacagaaaaaggaaaagtaggcaaatgtgaaaatagtttcaatat atcttatgatttcttaatgtaaaatgttttgttgaagtatatggctatc atgactaagtgctagaatttatagttacaggcggtgtccttttaaatgt ggaaaggcttttaaaatattttaaaactggacctgtattatcctgaata cactattttgaaaatttttaaaaatgacttctttattttgctttaccgt atgtttatatctaattgacatattgactaatgtttgaaagaattcaacc ataagttaaaatctgaaggttatctttatcatgtttcatccctgtctga agatttcctagtcttcttatgtaaatcacatgactcatgtccgtaaatg aactatgaaagatatcgatcagtttatgatcattgacatgtgatttcaa aacacagtgttcttttaaaaatctataatatgtcaaaatacaagttttt tttttttacatcgttttagtaagttaatttcatttatttactttggagc tatatttccacttagaaaaactaaggtaattttacaatatatgctgaga ttaaaaaccaaggtaaaaatgatcaaacatatatgaaattgagtcttag atttaatgaatttcactcgaaaataaatgatcagaagaattttcatcta aggcatagagtggcgaaatttttgtaaatgctcgcagttagcatctaac taaaacaatacagtatgactttatttaggagaaggctttttatttagaa aattattttttcatttttacagtgtatcaactgtatccattttcctcac ctggatagtcaatgttatctgagcagttcaaggagtaaccaaggcaacc ttatgtaataactttccattctttatccatacaaactctttcagtgccc tagattctaatgttataaacgtcaaacatcactgcccaacataaataag actcgagacttattaacataaataagtatcttgccttcttgaatgctag ttaaatgcttagatttacctaactgcctaatgaatcaggttatttgtta
ataagattatttttcaaattatttaagacctttatgccccttccaatta cttgtgatttgtaggcctgtaggattgttgcatctaatctgactggcaa cagaaaatgtcatcaaatactataatatccattttgttttcttttgcac taatacaacagaacatatcatttttgttttaaacaatggttaatatatt aatagggtttgttccacacttactatttatagtttttataatcaagcat tgggtattaaaagagaatcctttcaacccttcatcttcgtatgcttata caataaattgcagtgagtgt (SEQ ID NO: 613)
Entpdl
agggaagaagggagaaagagagagagatttgaatatacattgcttcaag gatgcaaaaaattacaacctggaaaaggcttcgagtaactttaggaaaa tgagctgctggactcctcagtcaatctgtcctttctagtcaatgaaaaa gacagggtttgaggttccttccgaaacggggccggctaatttagcccct cccacgagcccaagggtctgttatatctctgtttccttgaggacctctc tcacggagacggaccacagcaagcagaggctgggggggggaaagacgag gaaagaggaggaaaacaaaagctgctacttatggaagatacaaaggagt ctaacgtgaagacattttgctccaagaatatcctagccatccttggctt ctcctctatcatagctgtgatagctttgcttgctgtggggttgacccag aacaaagcattgccagaaaacgttaagtatgggattgtgctggatgcgg gttcttctcacacaagtttatacatctataagtggccagcagaaaagga gaatgacacaggcgtggtgcatcaagtagaagaatgcagggttaaaggt cctggaatctcaaaatttgttcagaaagtaaatgaaataggcatttacc tgactgattgcatggaaagagctagggaagtgattccaaggtcccagca ccaagagacacccgtttacctgggagccacggcaggcatgcggttgctc aggatggaaagtgaagagttggcagacagggttctggatgtggtggaga ggagcctcagcaactacccctttgacttccagggtgccaggatcattac
NM 001776
NM 009848
tggccaagaggaaggtgcctatggctggattactatcaactatctgctg ggcaaattcagtcagaaaacaaggtggttcagcatagtcccatatgaaa ccaataatcaggaaacctttggagctttggaccttgggggagcctctac acaagtcacttttgtaccccaaaaccagactatcgagtccccagataat gctctgcaatttcgcctctatggcaaggactacaatgtctacacacata gcttcttgtgctatgggaaggatcaggcactctggcagaaactggccaa ggacattcaggttgcaagtaatgaaattctcagggacccatgettteat cctggatataagaaggtagtgaacgtaagtgacctttacaagaccccct gcaccaagagatttgagatgactcttccattccagcagtttgaaatcca gggtattggaaactatcaacaatgccatcaaagcatcctggagctcttc aacaccagttactgcccttactcccagtgtgccttcaatgggattttct tgccaccactccagggggattttggggcattttcagctttttactttgt gatgaagtttttaaacttgacatcgagaaagtctctcaggaaaaggtga ctgagatgatgaaaaagttctgtgctcagccttgggaggagataaaaac atcttacgctggagtaaaggagaagtacctgagtgaatactgcttttct ggtacctacattctctccctccttctgcaaggctatcatttcacagctg attcctgggagcacatccatttcattggcaagatccagggcagcgacgc cggctggactttgggctacatgctgaacctgaccaacatgatcccagct gagcaaccattgtccacacctctctcccactccacctatgtcttcctca tggttctattctccctggtccttttcacagtggccatcataggcttgct tatctttcacaagccttcatatttctggaaagatatggtatagcaaaag cagctgaaatatgctggctggagtgaggaaaaaaatcgtccagggagca ttttcctccatcgcagtgttcaaggccatccttccctgtctgccagggc cagtcttgacgagtgtgaagcttccttggcttttactgaagcctttctt
ttggaggtattcaatatcctttgcctcaaggacttcggcagatactgtc tctttcatgagtttttcccagctacacctttctcctttgtactttgtgc ttgtataggttttaaagacctgacacctttcataatctttgctttataa aagaacaatattgactttgtctagaagaactgagagtcttgagtcctgt gataggaggctgagctggctgaaagaagaatctcaggaactggttcagt tgtactctttaagaacccctttctctctcctgtttgccatccattaaga aagccatatgatgcctttggagaaggcagacacacattccattcccagc ctgctctgtgggtaggagaattttctacagtaggcaaatatgtgctaaa gccaaagagttttataaggaaatatatgtgctcatgcagtcaatacagt tctcaatcccacccaaagcaggtatgtcaataaatcacatattcctagg tgatacccaaatgctacagagtggaacactcagacctgagatttgcaaa aagcagatgtaaatatatgcattcaaacatcagggcttactatgaggta ggtggtatatacatgtcacaaataaaaatacagttacaactcagggtca caaaaaatgcatcttccaatgcatatttttattatggtaaaatatacat aaatataattcaccattttaacatttaattcatattaaatacgtacaaa tcagtgacatttagtacattcacagtgttgtgccaccatcaccactatt tagttccagaacatttgcatcatcaatacattgtctagagacaagacta tcctgggtaggcagaaaccatagatcttttgtgtttacagctatggaaa ccaactgtaccataaagatagttcactgagttttaaagccaagccacat cttatttttccaaggtttaatttagtgagagggcagcattagtgtggag tggcatgcttttgccctatcgtggaatttacacatcagaatgtgcagga tccaagtctgaaagtgttgccacccgtcacacaacatgggctttgtttg cttattccatgaagcagcagctatagaccttaccatggaaacatgaaga gaccctgcacccctttccttaaggattgctgcaagagttacctgttgag
caggattgactggtgatgtttcattctgaccttgtcccaagctctccat ctctagatctggggactgactgttgagctgatggggaaagaaaagctct cacacaaaccggaagccaaatgtcccctatctcttgaatgatcaagtca cttttgacaacatccaggtgaatataaaaacttaataaagctgtggaaa ggaactcttaatcttcttttctgctacttaggttaaattcactagatct tgattaggaatcaaaattcgaattgggacatgttcaaattctttcttgt ggtagttgcctatactgtcatcgctgctgttggttgagcatttgtggtg taccacgctgtgtgctcaagggtattacattcatcttctcatttaatcc tcacaacaatctgaagaaggtaggtattacaattcccacttcatagaaa cagaaactgaggttcagagaggttaagtcatttgcccaaatggctgage caaagcctaccatgtacctaacctttattttctttcccgaacataccag gctgtctcctcataacttccaagcatgcacttaaaactccacatgaata caaggttcatgggacttggtattcatagaaagggaggcagaaagctggt ctgttcctgataggcttgtaatttaatatcattctgttcatgtgctttg gatggaagcacatctggcatatgatgctaatcagtggttcccatacccc tggcttcctaattttaatgtttgctcacagcatagtagattgacatcaa atagtggccgatgatgatgaaaataaaggtcaaataagttgagccaata acagccgcttttttccttctgtctgcgtatacaaagcactgtcatgcac acaatctattctgaccctcacaacaacccataagggtgtaaatagtatt tccattttacaaatgaggatcacacaaactactacatggcagagcagat actccaactcatgtcttctggttgaagcctattgctttttcttttctaa acactttccctcagcaagttggaattagacttcacaagtctccttcaga gaacacaaatcttttcttattccattcctgtttggttgcctacgtccaa tctccccctccccagagatgccaaaaaaaaaatcctttaaggtatttgg
gagccaaactcaacttgttaaaatctcaaattatggagacaatcagcag acacaacctaaccccaattattttggcaggaaggttggtttagaggcag atccagcaatctgctttgggccactctgggtggggtaggtgaaataaga ttggtcactgttaactaattttaatattggattggccattggttatcac tgattaccattctcccctggattttcacccaggactcaaaacttggttc tgctaaccctgttcctttatgaggaaccttttaaagattcctttataag gtgggagttttttttctatgaacctataggggagaaaaaagatcagcag aagtcattacttttttttttttttttttttttttttgagagagagtctc actccattgcccaggctggagtgcagtggtgctatctcggctcactgca acctccgcctcctgggttcaagcaattctcctgcctcagcctcccgagt agctgggattgcaggtgcccaccaccacacccggctaatttttgtattt ttagtaaagacagggtttcaccatgttggccaggctggtctccaactcc caatctcaggtgatcctattgcctcgggctcccaaagtgctgggattac aggagtgagccaccatgcctggccagaagtggttacttctgtagacaaa agaataatgctacttaatcaggctttctgtgtgacaagaaagagaaaga aaataaagaagtttcaattcatccaattcttaataagaaatatgtaaat aaaattttttaaaattacacttcattttaatgttgtatcagtcaaggtc cctgcaagagatggatggtatggtacactcaaactgggtaacacaggag agttttcagaaagcaactaaatccaaaatactatcaaggaatcaatata aaaattgttaatatttttctcatactaaattttcaaaatattttgtgtc tattacatttacagcacatcttaattaggactagctgtgtgttcacctc acatgtggcttgtagctaccatactggacagcacatgtccaaaaaaata cacgtaaagttaaagtttaaaagacacaggaactaagccctcattgtct ttcccttgggaggtagtttaaagagctatagatgctgtaacattcttgc
tattatttattatatatgacattattcctaaaaaagcttttgagatcct aggttgtattcctcaggttttgttgccttcccatgaagatgtgaaggca gggatgcctgttattcagtccaagatgcatgacaagagaccttgggaaa gtttcatctggatttaaagattaattcttgatgcttacattccatactc aaaatgtaaatttgaatattaaaataaagatgattttttttttggagct agtcttgctctgttgcccaggctggaatgcagtggcatgatcatggctc actgcagcctcgacctcccaagctcaagcaaggctacaggtgtgcacct aagtagctaggactacaggtgtgcaccaccatgtctagctatttttttt tctgtagagacagggttttcctatgttgtccaggctggtctcgaactcc tgccctcaagcaatcctcctgccttggcctcccaaagtgttgagattac aggcgtaagccactgcacctggccaagatgaatattttaatagctcaca gaacaaagtttgccacataatgataaaattactatgaaaatatattccc tttattgtcagtttaaaagatgaactgagtttcacccaaactggtctgg cccctctctgattcaaataccaatagttgctctgattcaaattccaact gttagaacatgacagctgctcataactagctttgcttactaaccatgtt tctttccatttgtattaggtcctttactttttataacagcctcaaagtt tcatgaattgctgcagtaaacattgattttcatgtttgtgagtctgcaa gccagctgggcagctctacttcaggtggtaagggtggatcagacctatt ccatatacctcttgttctccttgtccagtggtttctagggatatgttct catgatgaaccccgcagaggctcgtgaaagtgagaggaaactaggatgc ctcttaaggtcttggtcaggatggggtctcctgtcacttctgtcacagg ctattgtaagtcatatgagcaagctcaataaaatataaacaagtcagat aaacagtgggaggaatggcaaagtcatatggccaaggccatgagtgatt aattttaacacaggaaaaaagtaaagcattaaatgcgattatttaatat
acaatgtcttattaactgaaatataaaatgtgtttactgtaaaatataa tctgtttatctcaccaaagaaatattatctttaaaaaatgtcattactt ctaagacatcatcagtctgcaacttctttccatagccttaatcaggatg ctgtggcagctcccacattagcctcgcattctaaactggtagatgtcct aggaaaccatacatctatgtatttttcttattttatacgtttaggacaa tgtatagctaattacccaactttttatttgcatacaaatctaatacaac tgaacacaatcagttttatcacaggtataatggatttttcaatagtgag gaggtgcctccatgagccttctctttagaaaagtggcattcaagactct tcatttgaagtgaagattgctatgtcttttgcattgctctattttacat aaattaagttataaattgacactataatcaactgacaccatgatcagtg atgatgatcaccctcatcagcactagagttgacttgtttttataacccc tttgcatgtatgttgaatagcaaagttcatcagagaacatgtattagtc aatggtaagtaagatactctcatctaagaaataacatcacctcttctaa tgaagttctaagaagagagggaagaaaaagtcttgggagctagtcaggg aatagtgtgtatttgcaattacctaaactgaactctaccattactccta acccagttcctcctcctgtgttttacatgattaatgccacccctgcctc aatgaaccaagatcagctccatcactgggacctccccattctgcctgtg caatatttttcttttttatttctccttctaatattactgttattgctcc agtaaagagctgtaatatattttacctggactgataccaggaatggtgg tgttgcttccaatctgttgctgctagattaatctttgcaaagcacaggc ttaatttcattgctgctcaactaaaaccactggtggctttccattgcct acaaaataaagtcaacctccccatcagacattcaaggctttcaatgatc catggccgccagctctctccaggctcatatcccactccactcctctgat gtttcctacactacactacactatactacactacagccaggtagaatga
ctgttcacccaacaccactcaggttgtcttctcaacttggaatactctt gcaccttcaaagctcatttcaaatgccccttcatttgtgaagccttctc caaatttccaagtcagaatgtctcttccttgtgctaccacaacccttta actgagcctccattagtgcactgagaccattctgttcagtgtctgggtg aagcttcctggtgaaaaatatgttacctatttctttctgaaaagttgga ttcagggatattatcacggacctaaggtaatagttctagccaacctccc tgtccactgccaggccgactacaaacccttctgttgctggcgagctggt ccgcaccactagttctgcttcactctatttatctcttgatgtaaccatc ttctttctccaggttttaagaaccagcccaactcctggttccctgatga agcttttattcccctagccacatggaacttttcctttttggaacatgcc tttagtttctgtgtagtttgccatgcagcacttcattgtacacattatt aaaacagaattttaaggattagaatgaaccttaaaagatcatgcatctc aaaatttaatgtacatacaaattacccagggattttgttgaaataaaaa ttatttaattttaattaatataaataattcagtaggtctggggtgaggc ctgaggttttacatttccaacaagctgccaggtaaagccaatacatctg tccaggaatcacactttgcgtatcaaaggtctagatgacattatcattc caaagagtttcttttacaggctctcagatcagtgttcatccactacctg actactgtcattcacaggcattctgttccacagcaggccagctaacgtg gtatttacaaagctcactcctcttatacaacaatccaagtgtttctttt gtcagttgtctgtgccccaggagatccctctctgccttgccttgccctc tgcctttggagaccagcacctcatactcagtgaaggcctggagtgctta agagggatttcttccagctctcttgccctggtcttcagtgtattagatg tattacctccatgctctcagtagaggcccataggaaagagtaggtaggt tatgccagctcacacgcatcctttaaaaatggtttagaagtttagctgg
tttcttattactcctgtctatggatgtttccttctgtcactctactagg gatgaaacagctaatcatgttcaatagttacatttagattggtttttaa aaactatgattgtattagttcgtttccatgctgctgataaagacatatc tgagactggaaacaaaaagggtttaattggacttacagttccacatggc tggggaggcctcaaaatcaggtgggaggcaaaaggtacttcttacgtgg tggcatcaagagcaaaatgaggaagaagcaaaagcagaaactcttcata aacccaccagatcttgtgggacttattatcacgagaatagcacagaaaa gactggcctccatgattcaattacctcccactgcgtccctcccacaaca tgtgggaattctgggagatacaattcaagttgagatttgggtggggaca cagccaaaccatatcattcctccctgggctcctccaaatttcataatcc tcacatttcaaaaccaatcattccttcccaacagttccccaaagtctta actcatttcagcattaacccaaaagtccacagtccaaagtctcatctga gacaaggcaagtcccttccacttacaagcctgtaaaagcaagctagtta cctcctagatacaatggggggtacaggtattgggtaaatacagctgttc caaatgagagaaattggccaaaacaaaggggttacagggtccatgcaag tctgaaatccagtggggcagtcaaattttaaagctccataatgatctcc tttgactccatgtctcacattcaggtcatgctgatgcaagagataggtt cccatggtcttgtgcagctccgcccctgtggctttgcagagtacagcct ccctcctggctgctttctcaggctgatgttgagtgtctgtagcttttcc aggcacaagatgcaagttggtggttgatctaccattctggggtctacca ttctggggtctaccgttctgggactgtggccttcttctcacagctccac taggcagtgccccaacagggactctgtgtgggggctctgccccacattt cccttccacactgccctaggagaggttccccatgagggctctgcccctg cagcaaacttttgcctggacatccaggtgtttccatatatattctgaaa
tctaggcagaggttcccaaatctcaattcttgacatctctgcacccaca ggctcaacatcacatggaagctgccaatgcttggggcctctaccctctg aagccacagcccaagctctatgttggctcctttcagccatggctggagc agctgggacacagggcaccaagtccctaggctgcacacagcacagagac cctgggcccagcccacaaaaccactttttcctcctgggcctctgggcct gtgatgggaggggctgccatgaaggtctctgacatgacctggagacatt ttccccatggtcttggggattaacattaggctccttgctgcttatgcaa atttctgcagccagcttgaatttctccttaaaaaaaatgggtttttctt ttctactgcatcatcaggctgcagattttccacatttatgctcttgttt cccttttaaaacagaatgtttttaacagcacccaagtcaccttttgaat gctttgctgcttagaaatttattccaccagataccctaagtcatctctc tcaagctctaagttccacaaatctctagggcaagggtgaaatgctgcca gtctccttgctaaaacataacaagggtcacctttacttcagttcccaac aaggtcttcatctccatctgagaccacctcagcctggaccttattgttc atatcactatcagtatttttgtcaatgccattcacagtctctaggaggt tccaaactttcctacattttcctatcttcttctgagccctccagattat ttcaacacccagttccaaagttgcttccacattttcgggtatcttttca gcaatgccccactctactggtactattagtccattttcatgctgctgat aaagacatacctgagactgggaacaaaaagaggtttaattggacttata gttccacctggctggggaggcctcagaatcatggcaggaggtgaaaggc atttcttacacggcagcagcaagagaaaaatgaagaagcagcaaaagca gaaacccctgataaaaccatcagatctcgtgagacttattcactatcac aagaatagcatgggaaagaccagcccccttgattcaattacctccccct gggtcctgtgggaattctggaaggtacaattcaagttgagatttgggtg
gggacacagccaaaccatatcaatgattttgtactttaaccagctgaat ggaagtacaatctcttgctatatgacacaataattatttgcaaaatgag taaacatatcataaggaaattatttttacaaggtttgaaacctgaaatg cagtctattatcatacataactaaaaatagagcctcaataaacagattc ccagttttgaaaatgcaacatttgtactccacattgtcagttttcttag gtatatttataaatactcctataaaaatgtaaagaaacacataatgtag attgctaattttataataacacaagttgattttgacatccaacttatta attatgaaatgacttttggcctagtaacaatgaaaatgggggcaaatac agataaatggtaattcttagaatgaactactcagcaccaattctaagtt tttcttgatggtaaatcataatgttccctttctcctcggttctgcaatc tataggcataccataattgtaatcaatagcttaaaaatatgtctctctg tcctattctgtatctgtatctcttggatttttacctttgcaatagtcaa ctgaaccatcttcttggagtactcatgaagatggaagtctacatggaga atacaggatgaatccactctgtctcctgcagtgaagtctgtttgaagga tgtatttggctgtcttctggacaggccattctaataacagaaacaaaca agttattttaaaacttattggaatattcaaatattaaccaaagtagaaa aatataatacacatccatgtgcccatcacagaacttcactgattatcat catttagccagtcttgaagaagcaagtgctaattacaatcacaaatgaa acaagattcagacttcatgaagagcactgcgctataataaaagaagaaa tgagcacatacattcttttactgacagtcaaatggtgaaggtgggcaga atcattatgtgatgcaacatggcaaaagtatacagacagtgcatccaga ggaaggcaccttgctgaatgactagaatggaagtaggagacattttgca ggcccccttcatcctgcagggagaaccagaaccacagcagctctatttg cctattcctctttaaattacaaagttaaaatttgggagtagtagaaaat
caattggttatcttatagagtctcctagaatatttcattggcattgaga aggtggaaaatgcaaattatatactttaaaatgtaatttttgcttttca catatgcttaaagcctaaaacctcttaataaacttcttctgaaatata (SEQ ID NO: 614)
Dgkz
ggagagtgtctctaaggtgacactcgggtgcgcggcagcagcggcggtt gcaggagctcgctctccgcccgggctccggctccgctccagccgtccgg ggggcgccgcggcgcgcagagcgcagcaccccgactccagccaggagcc cccgcccccccggagcgcaggaggaccccggcccgcctctcccaggcgc agcgcccagcatctcgctgctcctgtcgtctaagcgtcggcgtcgctag ggacctgcggaacccggcgctcccctccctccccgcctcgcgtccccgg cccgggcggactggagactcgaacttgagcgggtgcccgaaaggccgca ggagccgcgggcggaaggcggccgcacgatggccgaggggcagggcggc ggagggcagcgctgggactgggctggcggcggccgggcagccgaggagg aggtggtgcggcggcgatgccggcgcggggaggaggcccaggtcgcgca gccctggcccgagggttcccggggcacggccgctgggcccccggtggag gagcgtttccgccagctgcacctacgaaagcaggtgtcttacaggaaag ccatcaccaagtcgggcctccagcacctggccccccctccgcccacccc tggggccccgtgcagcgagtcagagcggcagatccggagtacagtggac tggagcgagtcagcgacatatggggagcacatctggttcgagaccaacg tgtccggggacttctgctacgttggggagcagtactgtgtagccaggat gctgaagtcagtgtctcgaagaaagtgcgcagcctgcaagattgtggtg cacacgccctgcatcgagcagctggagaagataaatttccgctgtaagc cgtccttccgtgaatcaggctccaggaatgtccgcgagccaacctttgt acggcaccactgggtacacagacgacgccaggacggcaagtgtcggcac
NM 201532
NM 138306
tgtgggaagggattccagcagaagttcaccttccacagcaaggagattg tggccatcagctgctcgtggtgcaagcaggcataccacagcaaggtgtc ctgcttcatgctgcagcagatcgaggagccgtgctcgctgggggtccac gcagccgtggtcatcccgcccacctggatcctccgcgcccggaggcccc agaatactctgaaagcaagcaagaagaagaagagggcatccttcaagag gaagtccagcaagaaagggcctgaggagggccgctggagacccttcatc atcaggcccaccccctccccgctcatgaagcccctgctggtgtttgtga accccaagagtgggggcaaccagggtgcaaagatcatccagtctttcct ctggtatctcaatccccgacaagtcttcgacctgagccagggagggccc aaggaggcgctggagatgtaccgcaaagtgcacaacctgcggatcctgg cgtgcgggggcgacggcacggtgggctggatcctctccaccctggacca gctacgcctgaagccgccaccccctgttgccatcctgcccctgggtact ggcaacgacttggcccgaaccctcaactggggtgggggctacacagatg agcctgtgtccaagatcctctcccacgtggaggaggggaacgtggtaca gctggaccgctgggacctccacgctgagcccaaccccgaggcagggcct gaggaccgagatgaaggcgccaccgaccggttgcccctggatgtcttca acaactacttcagcctgggctttgacgcccacgtcaccctggagttcca cgagtctcgagaggccaacccagagaaattcaacagccgctttcggaat aagatgttctacgccgggacagctttctctgacttcctgatgggcagct ccaaggacctggccaagcacatccgagtggtgtgtgatggaatggactt gactcccaagatccaggacctgaaaccccagtgtgttgttttcctgaac atccccaggtactgtgcgggcaccatgccctggggccaccctggggagc accacgactttgagccccagcggcatgacgacggctacctcgaggtcat tggcttcaecatgacgtegttggccgcgctgcaggtgggcggacacggc
gagcggctgacgcagtgtcgcgaggtggtgctcaccacatccaaggcca tcccggtgcaggtggatggcgagccctgcaagcttgcagcctcacgcat ccgcatcgccctgcgcaaccaggccaccatggtgcagaaggccaagcgg cggagcgccgcccccctgcacagcgaccagcagccggtgccagagcagt tgcgcatccaggtgagtcgcgtcagcatgcacgactatgaggccctgca ctacgacaaggagcagctcaaggaggcctctgtgccgctgggcactgtg gtggtcccaggagacagtgacctagagctctgccgtgcccacattgaga gactccagcaggagcccgatggtgctggagccaagtccccgacatgcca gaaactgtcccccaagtggtgcttcctggacgccaccactgccagccgc ttctacaggatcgaccgagcccaggagcacctcaactatgtgactgaga tcgcacaggatgagatttatatcctggaccctgagctgctgggggcatc ggcccggcctgacctcccaacccccacttcccctctccccacctcaccc tgctcacccacgccccggtcactgcaaggggatgctgcaccccctcaag gtgaagagctgattgaggctgccaagaggaacgacttctgtaagctcca ggagctgcaccgagctgggggcgacctcatgcaccgagacgagcagagt cgcacgctcctgcaccacgcagtcagcactggcagcaaggatgtggtcc gctacctgctggaccacgcccccccagagatccttgatgcggtggagga aaacggggagacctgtttgcaccaagcagcggccctgggccagcgcacc atctgccactacatcgtggaggccggggcctcgctcatgaagacagacc agcagggcgacactccccggcagcgggctgagaaggctcaggacaccga gctggccgcctacctggagaaccggcagcactaccagatgatccagcgg gaggaccaggagacggctgtgtagcgggccgcccacgggcagcaggagg gacaatgcggccaggggacgagcgccttccttgcccacctcactgccac attccagtgggacggccacggggggacctaggccccagggaaagagccc
catgccgccccctaaggagccgcccagacctagggctggactcaggagc tgggggggcctcacctgttcccctgaggaccccgccggacccggaggct cacagggaacaagacacggctgggttggatatgcctttgccggggttct ggggcagggcgctccctggccgcagcagatgccctcccaggagtggagg ggctggagagggggaggccttcgggaagaggcttcctgggccccctggt cttcggccgggtccccagcccccgctcctgccccaccccacctcctccg ggcttcctcccggaaactcagcgcctgctgcacttgcctgccctgcctt gcttggcacccgctccggcgaccctccccgctcccctgtcatttcatcg cggactgtgcggcctgggggtggggggcgggactctcacggtgacatgt ttacagctgggtgtgactcagtaaagtggatttttttttctttaaaaaa aa (SEQ ID NO: 615)
Vamp 7
attggaggagcgctcccactcccaagaggccacgcgtagacggggcgct tcatgcggaagtcagcggcgtccggtcccagcctcctctgggagcgggc agttggcgaccctgcactgacccgcgtccctccgtcccgagcccgcgcg ccctcagagggtgcccggacagactgaagccatggcgattctttttgct gttgttgccagggggaccactatccttgccaaacatgcttggtgtggag gaaacttcctggaggtgacagagcagattctggctaagataccttctga aaataacaaactaacgtactcacatggcaattatttgtttcattacatc tgccaagacaggattgtatatctttgtatcactgatgatgattttgaac gttcccgagcctttaattttctgaatgagataaagaagaggttccagac tacttacggttcaagagcacagacagcacttccatatgccatgaatagc gagttctcaagtgtcttagctgcacagctgaagcatcactctgagaata agggcctagacaaagtgatggagactcaagcccaagtggatgaactgaa aggaatcatggtcagaaacatagatctggtagctcagcgaggagaaaga
NM 005638
NM 011515
ttggaattattgattgacaaaacagaaaatcttgtggattcttctgtca ccttcaaaactaccagcagaaatcttgctcgagccatgtgtatgaagaa cctcaagctcactattatcatcatcatcgtatcaattgtgttcatctat atcattgtttcacctctctgtggtggatttacatggccaagctgtgtga agaaataggaaagaagaagttaccattaaccaaggatatgagagaacaa ggagttaaaagcaatccatgtgactcaagcctttcacatactgacagat ggtatctgccagtctcttcaaccctcttctcactttttaaaatcttgtt ccatgcctccaggtttatctttgtcttatctaccagtttattcctgtga acttcagattgaaccattcattgcagcagtagccttaaaaaggcttttg tttatttctttggtttgttaactagtgtcatctatttagagaaacattt ttgtttttaattgctcaaagctgtcgccgctagtcttatgagctatcta ctaaaactatggagaaactttgtatgtgcacacaaaagtattcaagaga cagtattgctaacatctcatcttaatgtcttttgttattgagaagtttt aggtgcttcaaaacaatataaatggataatagttgttatttggggaatt gtaatgatgttggtgctgcttccttctaagagctcagacaagtaaagta tgaaacattcttatttcagttagatggggaacattttgctagcccatta gaagcacacagaattatccttgtcctcctaatattgactttcaggaata aagttcagtgtgctgatcattcacaatacagtggatagcttgatatctt ctgttttcccattgcagttgatttgagaagatgaaggtttaaatattgt tgaaagttgcagttttttaaatgtgttcctttttcttctgtgaatattt agggcaatcgtgtcgctaatagaatatgtagtagagggggtggggaggt aaattcctctgacttgccaaagaaaaagaagggaaccacagtggatatg ctagcattttagctgtgcaaagggaggtagtgtgggaaaagtgtttcca ttctgggaaaagcccaaaccgaatacggtcagcagtcaactccagggtt
tgggcttgattcctgttgaataatagttttgagcattctttgtggttaa ataaattcttaaatctgcctagttttgatgaattcttttgtgaaacttg aaagagaatagacagtatgacatatagaattaatacaaaacagtttaac aaccatttaactgcagtgtaagaaaattggactgtaatcatatcgctac tggcatctgttatctagtatgcatttctggtgtgtatctgaaaggaaga cattttctaccctagatccaattgcatttatttatcaataagtgccatt aaattgaaattatattacattttacactttctcaatgaatgaacaaatt agtctgtagaatctagccacctgtttagcctagtcatgtgccttgaaca tatatgtgtcccataatctggctcatggtacctgttcttctatccaaac ctttcaattcatgctacctgattcatttatttgacatagatcttaggcc cacttgaactcttttcttgtttatctagcatagcacaaacgtttttcca gtcttctttatcaacactaatgcctcttaattgcatcagtatttcctat tggaaaatacatctgttccagaaaaacatttggcattcctgaataattt ccaaatgtttttaatccaaagaaaaaggtttaaagcttatttccctttc ttatacacacctgaataaaattgatgtgcatgttttagggatcaattac ctaactgttccttggtctatttatgtataagaatgctttttaaagcaca tgtctcattttaaatgacgcacaaactgaagatgttaataaaatttaag agtaatacaatgaaaaaa (SEQ ID NO: 616)
Hipkl
gcagagtctgcagtgcggagggggcgggaagtccaggccccgcactcga tccacgctggctccctacggaggcccacctactcgaggcccaccgactc ctactgcaatcagtactatgcgatcgtcctagagagtccattcagctgc acttccgcctcagtatggcatcacagctgcaagtgttttcgcccccatc agtgtcgtcgagtgccttctgcagtgcgaagaaactgaaaatagagccc tctggctgggatgtttcaggacagagtagcaacgacaaatattataccc
NM 198268
NM 010432
acagcaaaaccctcccagccacacaagggcaagccaactcctctcaeca ggtagcaaatttcaacatccctgcttacgaccagggcctcctcctccca gctcctgcagtggagcatattgttgtaacagccgctgatagctcgggca gtgctgctacatcaaccttccaaagcagccagaccctgactcacagaag caacgtttctttgcttgagccatatcaaaaatgtggattgaaacgaaaa agtgaggaagttgacagcaacggtagtgtgcagatcatagaagaacatc cccctctcatgctgcaaaacaggactgtggtgggtgctgctgccacaac caccactgtgaccacaaagagtagcagttccagcggagaaggggattac cagctggtccagcatgagatcctttgctctatgaccaatagctatgaag tcttggagttcctaggccgggggacatttggacaggtggctaagtgctg gaagaggagcaccaaggaaattgtggctattaaaatcttgaagaaccac ccctcctatgccagacaaggacagattgaagtgagcatcctttcccgcc taagcagtgaaaatgctgatgagtataattttgtccgttcatacgagtg ctttcagcataagaatcacacctgccttgtttttgaaatgttggagcag aacttatatgattttctaaagcaaaacaaatttagcccactgccactca agtacatcagaccaatcttgcagcaggtggccacagccttgatgaagct caagagtcttggtctgatccacgctgaccttaagcctgaaaacatcatg ctggttgatccagttcgccagccctaccgagtgaaggtcattgactttg gttctgctagtcacgtttccaaagctgtgtgctcaacctacttacagtc acgttactacagagctcctgaaattattcttgggttaccattttgtgaa gctattgatatgtggtcactgggctgtgtgatagctgagctgttcctgg gatggcctctttatcctggtgcttcagaatatgatcagattcgttatat ttcacaaacacaaggcttgccagctgaatatcttctcagtgccggaaca aaaacaaccaggtttttcaacagagatcctaatttggggtacccactgt
ggaggcttaagacacctgaagaacatgaactggagactggaataaaatc aaaagaagctcggaagtacatttttaattgcttagatgacatggctcag gtgaatatgtctacagacctggagggaacagacatgttggcagagaagg cagaccgaagagaatacattgatctgttaaagaaaatgctcacaattga tgcagataagagaattacccctctaaaaactcttaaccatcagtttgtg acaatgactcaccttttggattttccacatagcaatcatgttaagtctt gttttcagaacatggagatctgcaagcggagggttcacatgtatgatac agtgagtcagatcaagagtcccttcactacacatgttgccccaaataca agcacaaatctaaccatgagcttcagcaatcagctcaatacagtgcaca atcaggccagtgttctagcttccagttctactgcagcagctgctactct ttctctggctaattcagatgtctcactactaaactaccagtcagctttg tacccatcatctgctgcaccagttcctggagttgcccagcagggtgttt ccttgcagcctggaaccacccagatttgcactcagacagatccattcca acagacatttatagtatgtccacctgcgtttcaaactggactacaagca acaacaaagcattctggattccctgtgaggatggataatgctgtaccga ttgtaccccaggcaccagctgctcagccactacagattcagtcaggagt tctcacgcagggaagctgtacaccactaatggtagcaactctccaccct caagtagccaccatcacaccgcagtatgcggtgccctttactctgagct gcgcagccggccggccggcgctggttgaacagactgccgctgtactgca ggcgtggcctggagggactcagcaaattctcctgccttcaacttggcaa cagttgcctggggtagctctacacaactctgtccagcccacagcaatga ttccagaggccatggggagtggacagcagctagctgactggaggaatgc ccactctcatggcaaccagtacagcactatcatgcagcagccatccttg ctgactaaccatgtgacattggccactgctcagcctctgaatgttggtg
ttgcccatgttgtcagacaacaacaatccagttccctcccttcgaagaa gaataagcagtcagctccagtctcttccaagtcctctctagatgttctg ccttcccaagtctattctctggttgggagcagtcccctccgcaccacat cttcttataattccttggtccctgtccaagatcagcatcagcccatcat cattccagatactcccagccctcctgtgagtgtcatcactatccgaagt gacactgatgaggaagaggacaacaaatacaagcccagtagctctggac tgaagccaaggtctaatgtcatcagttatgtcactgtcaatgattctcc agactctgactcttctttgagcagcccttattccactgataccctgagt gctctccgaggcaatagtggatccgttttggaggggcctggcagagttg tggcagatggcactggcacccgcactatcattgtgcctccactgaaaac tcagcttggtgactgcactgtagcaacccaggcctcaggtctcctgagc aataagactaagccagtcgcttcagtgagtgggcagtcatctggatgct gtatcacccccacagggtatcgagctcaacgcggggggaccagtgcagc acaaccactcaatcttagccagaaccagcagtcatcggcggctccaacc tcacaggagagaagcagcaacccagccccccgcaggcagcaggcgtttg tggcccctctctcccaagccccctacaccttccagcatggcagcccgct acactcgacagggcacccacaccttgccccggcccctgctcacctgcca agccaggctcatctgtatacgtatgctgccccgacttctgctgctgcac tgggctcaaccagctccattgctcatcttttctccccacagggttcctc aaggcatgctgcagcctataccactcaccctagcactttggtgcaccag gtccctgtcagtgttgggcccagcctcctcacttctgccagcgtggccc ctgctcagtaccaacaccagtttgccacccaatcctacattgggtcttc ccgaggctcaacaatttacactggatacccgctgagtcctaccaagatc agccagtattcctacttatagttggtgagcatgagggaggaggaatcat
ggctaccttctcctggccctgcgttcttaatattgggctatggagagat cctcctttaccctcttgaaatttcttagccagcaacttgttctgcaggg gcccactgaagcagaaggtttttctctgggggaacctgtctcagtgttg actgcattgttgtagtcttcccaaagtttgccctatttttaaattcatt atttttgtgacagtaattttggtacttggaagagttcagatgcccatct tctgcagttaccaaggaagagagattgttctgaagttaccctctgaaaa atattttgtctctctgacttgatttctataaatgcttttaaaaacaagt gaagcccctctttatttcattttgtgttattgtgattgctggtcaggaa aaatgctgatagaaggagttgaaatctgatgacaaaaaaagaaaaatta ctttttgtttgtttataaactcagacttgcctattttattttaaaagcg gcttacacaatctcccttttgtttattggacatttaaacttacagagtt tcagttttgttttaatgtcatattatacttaatgggcaattgttatttt tgcaaaactggttacgtattactctgtgttactattgagattctctcaa ttgctcctgtgtttgttataaagtagtgtttaaaaggcagctcaccatt tgctggtaacttaatgtgagagaatccatatctgcgtgaaaacaccaag tattctttttaaatgaagcaccatgaattcttttttaaattatttttta aaagtctttctctctctgattcagcttaaatttttttatcgaaaaagcc attaaggtggttattattacatggtggtggtggttttattatatgcaaa atctctgtctattatgagatactggcattgatgagctttgcctaaagat tagtatgaattttcagtaatacacctctgttttgctcatctctcccttc tgttttatgtgatttgtttggggagaaagctaaaaaaacctgaaaccag ataagaacatttcttgtgtatagcttttatacttcaaagtagcttcctt tgtatgccagcagcaaattgaatgctctcttattaagacttatataata agtgcatgtaggaattgcaaaaaatattttaaaaatttattactgaatt
taaaaatattttagaagttttgtaatggtggtgttttaatattttacat aattaaatatgtacatattgattagaaaaatataacaagcaatttttcc tgctaacccaaaatgttatttgtaatcaaatgtgtagtgattacacttg aattgtgtacttagtgtgtatgtgatcctccagtgttatcccggagatg gattgatgtctccattgtatttaaaccaaaatgaactgatacttgttgg aatgtatgtgaactaattgcaattatattagagcatattactgtagtgc tgaatgagcaggggcattgcctgcaaggagaggagacccttggaattgt tttgcacaggtgtgtctggtgaggagtttttcagtgtgtgtctcttcct tccctttcttcctccttcccttattgtagtgccttatatgataatgtag tggttaatagagtttacagtgagcttgccttaggatggaccagcaagcc cccgtggaccctaagttgttcaccgggatttatcagaacaggattagta gctgtattgtgtaatgcattgttctcagtttccctgccaacattgaaaa ataaaaacagcagcttttctcctttaccaccacctctacccctttccat tttggattctcggctgagttctcacagaagcattttccccatgtggctc tctcactgtgcgttgctaccttgcttctgtgagaattcaggaagcaggt gagaggagtcaagccaatattaaatatgcattcttttaaagtatgtgca atcacttttagaatgaatttttttttccttttcccatgtggcagtcctt cctgcacatagttgacattcctagtaaaatatttgcttgttgaaaaaaa catgttaacagatgtgtttataccaaagagcctgttgtattgcttacca tgtccccatactatgaggagaagttttgtggtgccgctggtgacaagga actcacagaaaggtttcttagctggtgaagaatatagagaaggaaccaa agcctgttgagtcattgaggcttttgaggtttcttttttaacagcttgt atagtcttggggcccttcaagctgtgaaattgtccttgtactctcagct cctgcatggatctgggtcaagtagaaggtactggggatggggacattcc
tgcccataaaggatttggggaaagaagattaatcctaaaatacaggtgt gttccatctgaattgaaaatgatatatttgagatataattttaggactg gttctgtgtagatagagatggtgtcaaggaggtgcaggatggagatggg agatttcatggagcctggtcagccagctctgtaccaggttgaacaccga ggagctgtcaaagtatttggagtttcttcattgtaaggagtaagggctt ccaagatggggcaggtagtccgtacagcctaccaggaacatgttgtgtt ttctttattttttaaaatcattatattgagttgtgttttcagcactata ttggtcaagatagccaagcagtttgtataatttctgtcactagtgtcat acagttttctggtcaacatgtgtgatctttgtgtctcctttttgccaag cacattctgattttcttgttggaacacaggtctagtttctaaaggacaa attttttgttccttgtcttttttctgtaagggacaagatttgttgtttt tgtaagaaatgagatgcaggaaagaaaaccaaatcccattcctgcaccc cagtccaataagcagataccacttaagataggagtctaaactccacaga aaaggataataccaagagcttgtattgttaccttagtcacttgcctagc agtgtgtggctttaaaaactagagatttttcagtcttagtctgcaaact ggcatttccgattttccagcataaaaatccacctgtgtctgctgaatgt gtatgtatgtgctcactgtggctttagattctgtccctggggttagccc tgttggccctgacaggaagggaggaagcctggtgaatttagtgagcagc tggcctgggtcacagtgacctgacctcaaaccagcttaaggctttaagt cctctctcagaacttggcatttccaacttcttcctttccgggtgagaga agaagcggagaagggttcagtgtagccactctgggctcatagggacact tggtcactccagagtttttaatagctcccaggaggtgatattattttca gtgctcagctgaaataccaaccccaggaataagaactccatttcaaaca gttctggccattctgagcctgcttttgtgattgctcatccattgtcctc
cactagaggggctaagcttgactgcccttagccaggcaagcacagtaat gtgtgttttgttcagcattattatgcaaaaattcactagttgagatggt ttgttttaggataggaaatgaaattgcctctcagtgacaggagtggccc gagcctgcttcctattttgattttttttttttttaactgatagatggtg cagcatgtctacatggttgtttgttgctaaactttatataatgtgtggt ttcaattcagcttgaaaaataatctcactacatgtagcagtacattata tgtacattatatgtaatgttagtatttctgctttgaatccttgatattg caatggaattcctactttattaaatgtatttgatatgctagttattgtg tgcgatttaaactttttttgctttctccctttttttggttgtgcgcttt cttttacaacaagcctctagaaacagatagtttctgagaattactgagc tatgtttgtaatgcagatgtacttagggagtatgtaaaataatcatttt aacaaaagaaatagatatttaaaatttaatactaactatgggaaaaggg tccattgtgtaaaacatagtttatctttggattcaatgtttgtctttgg ttttacaaagtagcttgtattttcagtattttctacataatatggtaaa atgtagagcaattgcaatgcatcaataaaatgggtaaattttctgactt atgtggctgtttttgacttctgttataggatataaaggggatcaataaa tgacatctttgaaagtgaaaa (SEQ ID NO: 617)
Nuak2
gtgetttactgcgcgctctggtactgetgtggctccccgtcctggtgcg ggacctgtgccccgcgcttcagccctccccgcacagcctactgattccc ctgccgcccttgctcacctcctgctcgccatggagtcgctggttttcgc gcggcgctccggccccactccctcggccgcagagctagcccggccgctg gcggaagggctgatcaagtcgcccaagcccctaatgaagaagcaggcgg tgaagcggcaccaccacaagcacaacctgcggcaccgctacgagttcct ggagaccctgggcaaaggcacctacgggaaggtgaagaaggcgcgggag
NM 030952
NM 001195025
agctcggggcgcctggtggccatcaagtcaatccggaaggacaaaatca aagatgagcaagatctgatgcacatacggagggagattgagatcatgtc atcactcaaccaccctcacatcattgccatccatgaagtgtttgagaac agcagcaagatcgtgatcgtcatggagtatgccagccggggcgaccttt atgactacatcagcgagcggcagcagctcagtgagcgcgaagctaggca tttcttccggcagatcgtctctgccgtgcactattgccatcagaacaga gttgtccaccgagatctcaagctggagaacatcctcttggatgccaatg ggaatatcaagattgctgacttcggcctctccaacctctaccatcaagg caagttcctgcagacattctgtgggagccccctctatgcctcgccagag attgtcaatgggaagccctacacaggcccagaggtggacagctggtccc tgggtgttctcctctacatcctggtgcatggcaccatgccctttgatgg gcatgaccataagatcctagtgaaacagatcagcaacggggcctaccgg gagccacctaaaccctctgatgcctgtggcctgatccggtggctgttga tggtgaaccccacccgccgggccaccctggaggatgtggccagtcactg gtgggtcaactggggctacgccacccgagtgggagagcaggaggctccg catgagggtgggcaccctggcagtgactctgcccgcgcctccatggctg actggctccggcgttcctcccgccccctcctggagaatggggccaaggt gtgcagcttcttcaagcagcatgcacctggtgggggaagcaccacccct ggcctggagcgccagcattcgctcaagaagtcccgcaaggagaatgaca tggcccagtctctccacagtgacacggctgatgacactgcccatcgccc tggcaagagcaacctcaagctgccaaagggcattctcaagaagaaggtg tcagcctctgcagaaggggtacaggaggaccctccggagctcagcccaa tccctgcgagcccagggcaggctgccccgctgctccccaagaagggcat tctcaagaagccccgacagcgcgagtctggctactactcctctcccgag
cccagtgaatctggggagctcttggacgcaggcgacgtgtttgtgagtg gggatcccaaggagcagaagcctccgcaagcttcagggctgctcctcca tcgcaaaggcatcctcaaactcaatggcaagttctcccagacagccttg gagctcgcggcccccaccaccttcggctccctggatgaactcgccccac ctcgccccctggcccgggccagccgaccctcaggggctgtgagcgagga cagcatcctgtcctctgagtcctttgaccagctggacttgcctgaacgg ctcccagagcccccactgcggggctgtgtgtctgtggacaacctcacgg ggcttgaggagcccccctcagagggccctggaagctgcctgaggcgctg gcggcaggatcctttgggggacagctgcttttccctgacagactgccag gaggtgacagcgacctaccgacaggcactgagggtctgctcaaagctca cctgagtggagtaggcattgccccagcccggtcaggctctcagatgcag ctggttgcaccccgaggggagatgccttctcccccacctcccaggacct gcatcccagctcagaaggctgagagggtttgcagtggagccctgagcag ggctggatatgggaagtaggcaaatgaaatgcgccaagggttcagtgtc tgtcttcagccctgctgaacgaagaggatactaaagagaggggaacggg aatgcccgcgacagagtccacattgcctgtttcttgtgtacatgggggg gccacagagacctggaaagagaactctcccagggcccatctcctgcatc ccatgaatactctgtacacatggtgccttctaaggacagctccttccct actcattccctgcccaagtggggccagacctctttacacacacattccc gttcctaccaaccaccagaactggatggtggcacccctaatgtgcatga ggcatcctgggaatggtctggagtaacgcttcgttatttttatttttat ttttatttatttatttatttttttgagacggagtttcgctcttggtgcc caggctagagtgcaatggcgcgatctcagctcacctcaacctccgcctc ccgggttcaagcgattctcctgcctcagcctccctagtagctgggatta
caggcgcccgccaccatgcccggctaattttgtatttttagtagagaca gggtttctccatgttggtcaggctggtctcaaactcccgacctcaggtg atccacccacctcggcctcccaaagtgctgggattacaggcgtgagcca ccgcgccccacctaacccttccttatttagcctaggagtaagagaacac aatctctgtttcttcaatggttctcttcccttttccatcctccaaacct ggcctgagcctcctgaagttgctgctgtgaatctgaaagacttgaaaag cctccgcctgctgtgtggacttcatctcaaggggcccagcctcctctgg actccaccttggacctcagtgactcagaacttctgcctctaagctgctc taaagtccagactatggatgtgttctctaggccttcaggactctagaat gtccatatttatttttatgttcttggctttgtgttttaggaaaagtgaa tcttgctgttttcaataatgtgaatgctatgttctgggaaaatccacta tgacatctaagttttgtgtacagagagatatttttgcaactatttccac ctcctcccacaaccccccacactccactccacactcttgagtctcttta cctaatggtctctacctaatggacctccgtggccaaaaagtaccattaa aaccagaaaggtgattggaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa aaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 618)
Alk
agctgcaagtggcgggcgcccaggcagatgcgatccagcggctctgggg gcggcagcggtggtagcagctggtacctcccgccgcctctgttcggagg gtcgcggggcaccgaggtgctttccggccgccctctggtcggccaccca aagccgcgggcgctgatgatgggtgaggagggggcggcaagatttcggg cgcccctgccctgaacgccctcagctgctgccgccggggccgctccagt gcctgcgaactctgaggagccgaggcgccggtgagagcaaggacgctgc aaacttgcgcagcgcgggggctgggattcacgcccagaagttcagcagg cagacagtccgaagccttcccgcagcggagagatagcttgagggtgcgc
NM 004304
NM 007439
aagacggcagcctccgccctcggttcccgcccagaccgggcagaagagc ttggaggagccaaaaggaacgcaaaaggcggccaggacagcgtgcagca gctgggagccgccgttctcagccttaaaagttgcagagattggaggctg ccccgagaggggacagaccccagctccgactgcggggggcaggagagga cggtacccaactgccacctcccttcaaccatagtagttcctctgtaccg agcgcagcgagctacagacgggggcgcggcactcggcgcggagagcggg aggctcaaggtcccagccagtgagcccagtgtgcttgagtgtctctgga ctcgcccctgagcttccaggtctgtttcatttagactcctgctcgcctc cgtgcagttgggggaaagcaagagacttgcgcgcacgcacagtcctctg gagatcaggtggaaggagccgctgggtaccaaggactgttcagagcctc ttcccatctcggggagagcgaagggtgaggctgggcccggagagcagtg taaacggcctcctccggcgggatgggagccatcgggctcctgtggctcc tgccgctgctgctttccacggcagctgtgggctccgggatggggaccgg ccagcgcgcgggctccccagctgcggggccgccgctgcagccccgggag ccactcagctactcgcgcctgcagaggaagagtctggcagttgacttcg tggtgccctcgctcttccgtgtctacgcccgggacctactgctgccacc atcctcctcggagctgaaggctggcaggcccgaggcccgcggctcgcta gctctggactgcgccccgctgctcaggttgctggggccggcgccggggg tctcctggaccgccggttcaccagccccggcagaggcccggacgctgtc cagggtgctgaagggcggctccgtgcgcaagctccggcgtgccaagcag ttggtgctggagctgggcgaggaggcgatcttggagggttgcgtcgggc cccccggggaggcggctgtggggctgctccagttcaatctcagcgagct gttcagttggtggattcgccaaggcgaagggcgactgaggatccgcctg atgcccgagaagaaggcgtcggaagtgggcagagagggaaggctgtccg
cggcaattcgcgcctcccagccccgccttctcttccagatcttcgggac tggtcatagctccttggaatcaccaacaaacatgccttctccttctcct gattattttacatggaatctcacctggataatgaaagactccttccctt tcctgtctcatcgcagccgatatggtctggagtgcagctttgacttccc ctgtgagctggagtattcccctccactgcatgacctcaggaaccagagc tggtcctggcgccgcatcccctccgaggaggcctcccagatggacttgc tggatgggcctggggcagagcgttctaaggagatgcccagaggctcctt tctccttctcaacacctcagctgactccaagcacaccatcctgagtccg tggatgaggagcagcagtgagcactgcacactggccgtctcggtgcaca ggcacctgcagccctctggaaggtacattgcccagctgctgccccacaa cgaggctgcaagagagatcctcctgatgcccactccagggaagcatggt tggacagtgctccagggaagaatcgggcgtccagacaacccatttcgag tggccctggaatacatctccagtggaaaccgcagcttgtctgcagtgga cttctttgccctgaagaactgcagtgaaggaacatccccaggctccaag atggccctgcagagctccttcacttgttggaatgggacagtcctccagc ttgggcaggcctgtgacttccaccaggactgtgcccagggagaagatga gagccagatgtgccggaaactgcctgtgggtttttactgcaactttgaa gatggcttctgtggctggacccaaggcacactgtcaccccacactcctc aatggcaggtcaggaccctaaaggatgcccggttccaggaccaccaaga ccatgctctattgctcagtaccactgatgtccccgcttctgaaagtgct acagtgaccagtgctacgtttcctgcaccgatcaagagctctccatgtg agctccgaatgtcctggctcattcgtggagtcttgaggggaaacgtgtc cttggtgctagtggagaacaaaaccgggaaggagcaaggcaggatggtc tggcatgtcgccgcctatgaaggcttgagcctgtggcagtggatggtgt
tgcctctcctcgatgtgtctgacaggttctggctgcagatggtcgcatg gtggggacaaggatccagagccatcgtggcttttgacaatatctccatc agcctggactgetасеtcaecattagcggagaggacaagatcctgcaga atacagcacccaaatcaagaaacctgtttgagagaaacccaaacaagga gctgaaacccggggaaaattcaccaagacagacccccatctttgaccct acagttcattggctgttcaccacatgtggggccagcgggccccatggcc ccacccaggcacagtgcaacaacgcctaccagaactccaacctgagcgt ggaggtggggagcgagggccccctgaaaggcatccagatctggaaggtg ccagccaccgacacctacagcatctcgggctacggagctgctggcggga aaggcgggaagaacaccatgatgcggtcccacggcgtgtctgtgctggg catcttcaacctggagaaggatgacatgctgtacatcctggttgggcag cagggagaggacgcctgccccagtacaaaccagttaatccagaaagtct gcattggagagaacaatgtgatagaagaagaaatccgtgtgaacagaag cgtgcatgagtgggcaggaggcggaggaggagggggtggagccacctac gtatttaagatgaaggatggagtgccggtgcccctgatcattgcagccg gaggtggtggcagggcctacggggccaagacagacacgttccacccaga gagactggagaataactcctcggttctagggctaaacggcaattccgga gccgcaggtggtggaggtggctggaatgataacacttccttgctctggg ccggaaaatctttgcaggagggtgccaccggaggacattcctgccccca ggccatgaagaagtgggggtgggagacaagagggggtttcggagggggt ggaggggggtgctcctcaggtggaggaggcggaggatatataggcggca atgcagcctcaaacaatgaccccgaaatggatggggaagatggggtttc cttcatcagtccactgggcatcctgtacaccccagctttaaaagtgatg gaaggccacggggaagtgaatattaagcattatctaaactgcagtcact
gtgaggtagacgaatgtcacatggaccctgaaagccacaaggtcatctg cttctgtgaccacgggacggtgctggctgaggatggcgtctcctgcatt gtgtcacccaccccggagccacacctgccactctcgctgatcctctctg tggtgacctctgccctcgtggccgccctggtcctggctttctccggcat catgattgtgtaccgccggaagcaccaggagctgcaagccatgcagatg gagetgcagagccctgagtacaagctgagcaagctccgcacctcgacca tcatgaccgactacaaccccaactactgctttgctggcaagacctcctc catcagtgacctgaaggaggtgccgcggaaaaacatcaccctcattcgg ggtctgggccatggcgcctttggggaggtgtatgaaggccaggtgtccg gaatgcccaacgacccaagccccctgcaagtggctgtgaagacgctgcc tgaagtgtgctctgaacaggacgaactggatttcctcatggaagccctg atcatcagcaaattcaaccaccagaacattgttcgctgcattggggtga gcctgcaatccctgccccggttcatcctgctggagctcatggcgggggg agacctcaagtccttcctccgagagacccgccctcgcccgagccagccc tcctccctggccatgctggaccttctgcacgtggctcgggacattgcct gtggctgtcagtatttggaggaaaaccacttcatccaccgagacattgc tgccagaaactgcctcttgacctgtccaggccctggaagagtggccaag attggagacttcgggatggcccgagacatctacagggcgagctactata gaaagggaggctgtgccatgctgccagttaagtggatgcccccagaggc cttcatggaaggaatattcacttctaaaacagacacatggtcctttgga gtgctgctatgggaaatcttttctcttggatatatgccataccccagca aaagcaaccaggaagttctggagtttgtcaccagtggaggccggatgga cccacccaagaactgccctgggcctgtataccggataatgactcagtgc tggcaacatcagcctgaagacaggcccaactttgccatcattttggaga
ggattgaatactgcacccaggacccggatgtaatcaacaccgctttgcc gatagaatatggtccacttgtggaagaggaagagaaagtgcctgtgagg cccaaggaccctgagggggttcctcctctcctggtctctcaacaggcaa aacgggaggaggagcgcagcccagctgccccaccacctctgcctaccac ctcctctggcaaggctgcaaagaaacccacagctgcagagatctctgtt cgagtccctagagggccggccgtggaagggggacacgtgaatatggcat tctctcagtccaaccctccttcggagttgcacaaggtccacggatccag aaacaagcccaccagcttgtggaacccaacgtacggctcctggtttaca gagaaacccaccaaaaagaataatcctatagcaaagaaggagccacacg acaggggtaacctggggctggagggaagctgtactgtcccacctaacgt tgcaactgggagacttccgggggcctcactgctcctagagccctcttcg ctgactgccaatatgaaggaggtacctctgttcaggctacgtcacttcc cttgtgggaatgtcaattacggctaccagcaacagggcttgcccttaga agccgctactgcccctggagctggtcattacgaggataccattctgaaa agcaagaatagcatgaaccagcctgggccctgagctcggtcgcacactc acttctcttccttgggatccctaagaccgtggaggagagagaggcaatg gctccttcacaaaccagagaccaaatgtcacgttttgttttgtgccaac ctattttgaagtaccaccaaaaaagctgtattttgaaaatgctttagaa aggttttgagcatgggttcatcctattctttcgaaagaagaaaatatca taaaaatgagtgataaatacaaggcccagatgtggttgcataaggtttt tatgcatgtttgttgtatacttccttatgcttctttcaaattgtgtgtg ctctgcttcaatgtagtcagaattagctgcttctatgtttcatagttgg ggtcatagatgtttccttgccttgttgatgtggacatgagccatttgag gggagagggaacggaaataaaggagttatttgtaatgactaaaa (SEQ
ID NO: 619)
Pdzklipl
gcccgtcttcgtgtctcctccctccctcgccttcctccttcctagctcc tctcctccagggccagactgagcccaggttgatttcaggcggacaccaa tagactccacagcagctccaggagcccagacaccggcggccagaagcaa ggctaggagctgctgcagccatgtcggccctcagcctcctcattctggg cctgctcacggcagtgccacctgccagctgtcagcaaggcctggggaac cttcagccctggatgcagggccttatcgcggtggccgtgttcctggtcc tcgttgcaatcgcctttgcagtcaaccacttctggtgccaggaggagcc ggagcctgcacacatgatcctgaccgtcggaaacaaggcagatggagtc ctggtgggaacagatggaaggtactcttcgatggcggccagtttcaggt ccagtgagcatgagaatgcctatgagaatgtgcccgaggaggaaggcaa ggtccgcagcaccccgatgtaaccttctctgtggctccaaccccaagac tcccaggcacatgggatggatgtccagtgctaccacccaagccccctcc ttctttgtgtggaatctgcaatagtgggctgactccctccagccccatg ccggccctacccgcccttgaagtatagccagccaaggttggagctcaga ccgtgtctaggttggggctcggctgtggccctggggtctcctgctcagc tcagaagagccttctggagaggacagtcagctgagcacctcccatcctg ctcacacgtccttccccataactatggaaatggccctaatttctgtgaa ataaagactttttgtatttctggggctgaggctcagcaacagcccctca ggcttccagtga (SEQ ID NO: 620)
NM 005764
NM 001164557
Inpp5b
aaatgtagtcactgtcccggaacctggggcagcggagtcccgtgcgccc tgtggtgacagctcaggagggtgtgtgcgctcagcaggggccagcatgg accagtctgtggcaatccaggagacgctggctgagggggaatactgcgt catcgcggtgcaaggtgtgctgtgtgagggggacagccggcagagccgc
NM 005540
NM 008385
ctcctgggactcgtgcgctaccgcctggagcacggcggccaggaacacg ctctcttcctctatacgcaccggaggatggccattaccggggacgatgt ctctctggaccagatagtgccagtctcgcgggattttacgctggaagaa gtgtccccagatggtgaactctacatccttggctcagatgtgaccgtcc agctggacacagcagagcttagcctcgtattccaactgccctttggttc acaaaccaggatgttcctccacgaagttgccagggcctgtccaggcttc gattctgcgacccgggatcctgaattcctgtggctgtctcggtataggt gcgcagagctggagctggagatgccaacgccgcgcggttgtaactcggc cctagttacctggccagggtacgcgacaattggcggaggtggttctaac tttgatggtttgagaccaaatgggaagggagtgcctatggaccaaagct ccaggggtcaagataaaccagaaagcttgcaaccaagacagaataaatc caagtccgaaattactgacatggttcgctcctccactatcacagtgtcg gacaaggctcatattttatccatgcagaagtttggactgcgagatacaa ttgtgaaatcacatctactacagaaagaagaggattacacctatatcca gaacttcaggttttttgcgggaacatacaatgtaaatgggcagtccccc aaagaatgcctccggctgtggctgagcaatggtatccaggccccagatg tctattgtgtagggttccaggagcttgatctgagtaaggaagctttttt ctttcacgataccccaaaggaggaagagtggttcaaagctgtgtcagag ggtcttcatccagatgccaaatatgcaaaggtgaagcttatccgactgg ttgggattatgctgctgttatatgtcaaacaggagcatgcagcttatat ctcagaagtggaagccgagactgtggggacaggaatcatggggaggatg ggcaacaagggaggcgtggcgatcaggttccagttccacaacaccagca tctgcgttgtgaattctcacttggcagcccacattgaagagtatgagag gaggaaccaggactataaggacatttgttctcgaatgcagttttgtcag
cctgacccaagccttccccctctcaccatcagcaaccatgatgtgatct tgtggctgggggacctcaactacaggatagaagagctggatgtggaaaa agtgaaaaagctcatcgaagagaaggactttcaaatgctgtatgcatat gatcagctgaaaattcaggtggccgcaaagactgtctttgaaggcttca cagagggtgagctcacattccagcctacttacaagtatgatacgggctc tgacgactgggataccagtgagaagtgccgtgctcctgcctggtgtgat cggattctctggaaagggaagaacatcactcagctgagttaccagagcc асаtggccctgaagaccagtgaccacaagcctgtcagetcagtgtttga catcggggtgagggtcgtaaatgacgagctttaccggaagacactggag gaaattgttcgctccctggataagatggaaaatgccaacattccttctg tgtccctgtccaagcgagagttctgttttcagaatgtgaagtacatgca attgaaagtagaatcctttacaattcataatggacaagtaccctgtcat tttgaattcatcaacaagcctgatgaagagtcttactgtaagcagtggc tgaatgccaaccccagcagaggcttcctcctgccagattctgatgttga gattgacttggagctcttcgtaaataagatgacagctacaaagctcaac tcgggtgaagacaaaattgaggacattctggttctgcacttggacaggg gaaaggattactttttgtctgtgtctgggaactacctgcccagctgttt tgggtctcccattcatacactgtgttacatgagagagccaatcttggac ctaccacttgaaaccattagtgagctgactctgatgccagtatggactg gagatgatgggagccagttggatagccccatggaaatccccaaagagct ctggatgatggttgattacctgtaccgaaatgctgtccagcaggaagat ctgtttcagcaaccaggcctgaggtcagaatttgaacatatcagggact gcttggatactggaatgattgataacctctctgccagcaatcattctgt agccgaagccctgctgcttttcctggagagccttccagagcctgtcatc
tgttacagcacctaccataactgcttggagtgttctggcaactacacag caagcaaacaggtcatttctactctccccatattccacaaaaatgtctt ccactacttgatggcgtttttgcgagaactgctgaaaaattcagcaaaa aatcatttggatgagaatattctagctagcatatttggcagcttattgc ttcgaaacccagctggtcaccaaaagcttgatatgacagagaagaagaa ggctcaagaatttattcaccagttcctctgcaacccactctgagcctct ctctcctcctattttacttgaggctgccaattaccagccccacctgttt cagctcaagagatgccttaagataattatgtgaggccacttggtagcaa gaatggcagctatttcctgagcctagtaccccaattaagcccaccattg gttagcacactcagcgctgtgagtcgtgaagacacgggagaaaatccac cataataaaactgacattcaattttcaactttagttatttaacacagat ttttttattttttatttttttttattttgagacggagttttgctctgtc gcgcagggtggagtgcggtggcacgatctcggctcactgcaacctctgc ctcctgggtgcaagcaattatcctgcctcagcctcccgagtagctggga ctgcaggcacacactgccacgcccagctaattttttgcattttagtaga gacggggtttcaccgtgttgcccaggctgttctaaaactcctgaactca ggtaatctgcctgcctcggcctccccaagtgctaggattacagatgtga gccaccacgcccggccttttttttttttttttcttttttgagatggagt ttcactcttgttgcccaggctggagtgcgttggcgtggtcttggctcac tgcaacctctgcctccttggttcaagcaattctcctgcctcagcctctc gagtagctgggattataggcgtccgccaccatgcctggctaattttttt gtgtgtttttagtatagacacggtttcaccatgttggccaggctggtct cgaatgcctggcctcaggtgatccacctgccttggcctcccaaagtgct gggattacaggcatgaaccaccacgcctggcctaaaatgtttttaaata
actgtacttgtactcactcaccctacctccagggcatagtcagtctggg ctgagatccccatgatcagatatttgatggaaagtcctgaaaggccaat gagttggatggcaagaatgcaggcagaagctgctggataaaataggcta cagccacctcagatgctttcagtgctctgtctgaggatgtgtatatgca tatgcaaactcgacccccgttcctgcccagataatggctcaataactct gaggctggttgctcagcctctgagggcaatacaggcatttaaaaaatta aaatgaccaggcacagtggctcacgcctgtaatctcggcactttgggag actgaggtgggagcatcacttgagaccaggagtttgggaccaggctggg caacacagggagaccccctctctacaaaaacatttttaaaaaattagct gggtgtggtgatgcatgcctgtggtcccagttacttgggaggctgacgt gggtggctcacttgagcacaggagtttgaggctgcagtgacctatgacc acatcactgtacgccagcccgggtgagagagggagaccccgtctctaaa aataaaatgtaaaatcactgaaaaaatgagtgttcggtgaaacaagtgg gattttctgggccagcaagtcttccaaactgtatatgatgcatcctgtc tccatgtgtaatatattttaatgataaatgtatttttaacagtgaaaaa aaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 653)
Socsl
ggcagctgcacggctcctggccccggagcatgcgcgagagccgccccgg agcgccccggagccccccgccgtcccgcccgcggcgtcccgcgccccgc cgccagcgcacccccggacgctatggcccacccctccggctggcccctt ctgtaggatggtagcacacaaccaggtggcagccgacaatgcagtctcc acagcagcagagccccgacggcggccagaaccttcctcctcttcctcct cctcgcccgcggcccccgcgcgcccgcggccgtgccccgcggtcccggc cccggcccccggcgacacgcacttccgcacattccgttcgcacgccgat taccggcgcatcacgcgcgccagcgcgctcctggacgcctgcggattct
NM 003745
NM 001271603
actgggggcccctgagcgtgcacggggcgcacgagcggctgcgcgccga
gcccgtgggcaccttcctggtgcgcgacagccgccagcggaactgcttt
ttcgcccttagcgtgaagatggcctcgggacccacgagcatccgcgtgc
actttcaggccggccgctttcacctggatggcagccgcgagagcttcga
ctgcctcttcgagctgctggagcactacgtggcggcgccgcgccgcatg
ctgggggccccgctgcgccagcgccgcgtgcggccgctgcaggagctgt
gccgccagcgcatcgtggccaccgtgggccgcgagaacctggctcgcat
ccccctcaaccccgtcctccgcgactacctgagctccttccccttccag
atttgaccggcagcgcccgccgtgcacgcagcattaactgggatgccgt
gttattttgttattacttgcctggaaccatgtgggtaccctccccggcc
tgggttggagggagcggatgggtgtaggggcgaggcgcctcccgccctc
ggctggagacgaggccgcagaccccttctcacctcttgagggggtcctc
cccctcctggtgctccctctgggtccccctggttgttgtagcagcttaa
ctgtatctggagccaggacctgaactcgcacctcctacctcttcatgtt
tacatatacccagtatctttgcacaaaccaggggttgggggagggtctc
tggctttatttttctgctgtgcagaatcctattttatattttttaaagt
cagtttaggtaataaactttattatgaaagtttttttttt (SEQ ID
NO: 654)
Jun
gacatcatgggctatttttaggggttgactggtagcagataagtgttga gctcgggctggataagggctcagagttgcactgagtgtggctgaagcag cgaggcgggagtggaggtgcgcggagtcaggcagacagacagacacagc cagccagccaggtcggcagtatagtccgaactgcaaatcttattttctt ttcaccttctctctaactgcccagagctagcgcctgtggctcccgggct ggtgtttcgggagtgtccagagagcctggtctccagccgcccccgggag
NM 002228
NM 010591
gagagccctgctgcccaggcgctgttgacagcggcggaaagcagcggta cccacgcgcccgccgggggaagtcggcgagcggctgcagcagcaaagaa ctttcccggctgggaggaccggagacaagtggcagagtcccggagcgaa cttttgcaagcctttcctgcgtcttaggcttctccacggcggtaaagac cagaaggcggcggagagccacgcaagagaagaaggacgtgcgctcagct tcgctcgcaccggttgttgaacttgggcgagcgcgagccgcggctgccg ggcgccccctccccctagcagcggaggaggggacaagtcgtcggagtcc gggcggccaagacccgccgccggccggccactgcagggtccgcactgat ccgctccgcggggagagccgctgctctgggaagtgagttcgcctgcgga ctccgaggaaccgctgcgcccgaagagcgctcagtgagtgaccgcgact tttcaaagccgggtagcgcgcgcgagtcgacaagtaagagtgcgggagg catcttaattaaccctgcgctccctggagcgagctggtgaggagggcgc agcggggacgacagccagcgggtgcgtgcgctcttagagaaactttccc tgtcaaaggctccggggggcgcgggtgtcccccgcttgccagagccctg ttgcggccccgaaacttgtgcgcgcagcccaaactaacctcacgtgaag tgacggactgttctatgactgcaaagatggaaacgaccttctatgacga tgccctcaacgcctcgttcctcccgtccgagagcggaccttatggctac agtaaccccaagatcctgaaacagagcatgaccctgaacctggccgacc cagtgggagcctgaagccgcacctccgcgccaagaactcggacctcctc acctcgcccgacgtggggctgctcaagctggcgtcgcccgagctggagc gcctgataatccagtccagcaacgggcacatcaccaccacgccgacccc cacccagttcctgtgccccaagaacgtgacagatgagcaggagggcttc gccgagggcttcgtgcgcgccctggccgaactgcacagccagaacacgc tgcccagcgtcacgtcggcggcgcagccggtcaacggggcaggcatggt
ggctcccgcggtagcctcggtggcagggggcagcggcagcggcggcttc agcgccagcctgcacagcgagccgccggtctacgcaaacctcagcaact tcaacccaggcgcgctgagcagcggcggcggggcgccctcctacggcgc ggccggcctggcctttcccgcgcaaccccagcagcagcagcagccgccg caccacctgccccagcagatgcccgtgcagcacccgcggctgcaggccc tgaaggaggagcctcagacagtgcccgagatgcccggcgagacaccgcc cctgtcccccatcgacatggagtcccaggagcggatcaaggcggagagg aagcgcatgaggaaccgcatcgctgcctccaagtgccgaaaaaggaagc tggagagaatcgcccggctggaggaaaaagtgaaaaccttgaaagctca gaactcggagctggcgtccacggccaacatgctcagggaacaggtggca cagettaaacagaaagtcatgaaccacgttaacagtgggtgccaactea tgctaacgcagcagttgcaaacattttgaagagagaccgtcgggggctg aggggcaacgaagaaaaaaaataacacagagagacagacttgagaactt gacaagttgcgacggagagaaaaaagaagtgtccgagaactaaagccaa gggtatccaagttggactgggttgcgtcctgacggcgcccccagtgtgc acgagtgggaaggacttggcgcgccctcccttggcgtggagccagggag cggccgcctgcgggctgccccgctttgcggacgggctgtccccgcgcga acggaacgttggacttttcgttaacattgaccaagaactgcatggacct aacattcgatctcattcagtattaaaggggggagggggagggggttaca aactgcaatagagactgtagattgcttctgtagtactccttaagaacac aaagcggggggagggttggggaggggcggcaggagggaggtttgtgaga gcgaggctgagcctacagatgaactctttctggcctgccttcgttaact gtgtatgtacatatatatattttttaatttgatgaaagctgattactgt caataaacagcttcatgcctttgtaagttatttcttgtttgtttgtttg
ggtatcctgcccagtgttgtttgtaaataagagatttggagcactctga gtttaccatttgtaataaagtatataatttttttatgttttgtttctga aaattccagaaaggatatttaagaaaatacaataaactattggaaagta ctcccctaacctcttttctgcatcatctgtagatactagctatctaggt ggagttgaaagagttaagaatgtcgattaaaatcactctcagtgcttct tactattaagcagtaaaaactgttctctattagactttagaaataaatg tacctgatgtacctgatgctatggtcaggttatactcctcctcccccag ctatctatatggaattgcttaccaaaggatagtgcgatgtttcaggagg ctggaggaaggggggttgcagtggagagggacagcccactgagaagtca aacatttcaaagtttggattgtatcaagtggcatgtgctgtgaccattt ataatgttagtagaaattttacaataggtgcttattctcaaagcaggaa ttggtggcagattttacaaaagatgtatccttccaatttggaatcttct ctttgacaattcctagataaaaagatggcctttgcttatgaatatttat aacagcattcttgtcacaataaatgtattcaaataccaaaaaaaaaaaa aaaaa (SEQ ID NO: 655)
Nptxr
cggccgcggcgacagctccagctccggctccggctccggctccggctcc ggctcccgcgcctgccccgctcggcccagcgcgcccgggctccgcgccc cgaccccgccgccgcgcctgccgggggcctcgggcgcccccgccgcccg cctcacgctgaagttcctggccgtgctgctggccgcgggcatgctggcg ttcctcggtgccgtcatctgcatcatcgccagcgtgcccctggcggcca gcccggcgcgggcgctgcccggcggcgccgacaatgcttcggtcgcctc gggcgccgccgcgtccccgggcccgcagcggagcctgagcgcgctgcac ggcgcgggcggttcagccgggccccccgcgctgcccggggcacccgcgg ccagcgcgcacccgctgccgcccgggcccctgttcagccgcttcctgtg
NM 014293
NM 030689
cacgccgctggctgctgcctgcccgtcgggggcccagcagggggacgcg gcgggcgctgcgccgggcgagcgcgaagagctgctgctgctgcagagca cggccgagcagctgcgccagacggcgctgcagcaggaggcgcgcatccg cgccgaccaggacaccatccgtgagctcaccggcaagctgggccgctgc gagagcggcctgccgcgcggcctccagggcgccgggccccgccgcgaca ccatggccgacgggccctgggactcgcctgcgctcattctggagctgga ggacgccgtgcgcgccctgcgggaccgcatcgaccgcctggagcaggag cttccagcccgtgtgaacctctcagctgccccagccccagtctctgctg tgcccaccggcctacactccaagatggaccagctggaggggcagctgct ggcccaggtgctggcactggagaaggagcgtgtggccctcagccacagc agccgccggcagaggcaggaagtggaaaaggagttggacgtcctgcagg gtcgtgtggctgagctggagcacgggtcctcagcctacagtcctccaga tgccttcaagatcagcatccccatccgtaacaactacatgtacgcccgc gtgcggaaggctctgcccgagctctacgcattcaccgcctgcatgtggc tgcggtccaggtccagcggcaccggccagggcacccccttctcctactc agtgcccgggcaggccaacgagattgtactgctagaggcgggccatgag cccatggagctgctgatcaacgacaaggtggcccagctgcccctgagcc tgaaggacaatggctggcaccacatctgcatcgcctggaccacaaggga tggcctatggtctgcctaccaggacggggagctgcagggctccggtgag aacctggctgcctggcaccccatcaagcctcatgggatccttatcttgg gccaggagcaggataccctgggtggccggtttgatgccacccaggcctt tgtcggtgacattgcccagtttaacctgtgggaccacgccctgacacca gcccaggtcctgggcattgccaactgcactgcgccactgctgggcaacg tccttccctgggaagacaagttggtggaggcctttgggggtgcaacaaa
ggctgccttcgatgtctgcaaggggagggccaaggcatgaggggccacc tcatccagggcccctcccttgcctgccactttggggacttgaggggggt catattccctcctcagcctgcccacgcactggccttccctcctgcccca ctcctggctgtgcctcccatttcccctcacctgtacccacacctccaga atgccctgccctgcgagtgtgtcccctgtccccacctgagtggggagga gcgtctcaagtgaacagtgggagcctgcccacctggcactgcactggag ttgtctcttaccccaccctccctgcccatcaactgtatctgatttcact aattttgacagcacccccagtagggtaggattgtgtatgagggggaccc cactatctcagtggtgggggtggccgcccgcccccttgtcccccatgca acaggcccagtggcttccccttcagggccacaacaggctgtagaagggg atgacgaggacatcagaggttagacttaccctcctccctctttccacca gctgccagtcaagggcagtgggatctcgatggagcctcccccccccccc acccatgcctccctcttcctcctctttcctcctctctttgtgtgtagcg gtttgaatgttggttccatgcctggcccagccccacctcagtctccagg acattcctttcccagctccagcctggagggaaggggacaaagaccccag gaggccaaagggctgcagtcaccccttgtgctcacccatagtgatggcc actggtatagtcatcgctctccctccatgccaaggacaggacttggacc gcttcagcctgggctgggagcagccctaaggtagaggcctcatggccca ggagaccccacctctggcagagccacattacctaccctgtgcatggtcc tggggcagcaaggaagaagctcagagggtggggagaagcatgaagcagt gagcagagcactgggtgagagggagaagaccttggttcctagccagccc tgctaatgtgctgtgtggccttctgtaagtccctgccctctctgggcct ggccttcctcattcgtgagctgaggccctcgctttggtcatttgctctc cagattgggtgtgagcttctctgtgattccaggtggatatgtggggaaa
gctctggtgaccctgggcttcgcaggggtagatcccaggactcggcagt ggatgggatgcagccagtcatgggttagggtcagcagagactcagagtc cagggcaaggttcaaggcagactaacctcatgcatggattgtaaaaaac cagctccctttggatcaacccagcctggcacccttgcctgtctgagagt gtctcaaagggctgatggcttcctggtccccttgagtcatcaccagctt ccccaagagagtgtcagaatcttaagagctgagaggccgggcacggtgg ctcacgcctgtaatcccagcactttgggaggctgagacaggcagatcac ttgaggtcaggagttcgaagtcagcctggccaacgtggtgaaaccccat cttcactaaaaatacaaaacttagctggttaggtggtgcatgcctgtag tcccagctactcgggaggccgaggcagaagaatctcttgaactgaggag gtggaggttgcagtgagccgagatcacgccattgcactccagcctgggc aacagagcaagactccatctcaaaaaaataataataatcttaaagatga gaaaagccaccccatctggcaccacagctgcatcttgcttgtgagaaat ggggaagagttcagggaggacacgtgacctgcacaggatcacagagcat ggggcagagccaggactagagctcagggcatctgactccctcttcagtg ttcttccccctccatgttgcctgcccctgaagacctttgagttcagtct acacctaagcaggtagacatccgcgaggtcagatgctttccaacatgac acctgaacatcttcctttatgcaacacccaaacatcttggcatccccac cccaggaagtgcggggaggaggttatgatccctgggcgcttcggcagaa tggagagctgaggtgtccctcccctgctagtcacctaccaggtgtctga gcagctgcatgctccctggctcaagtgggcactgtaccttttgcctgcc tttttgttccctatctccactccctgaggccacttagcctgagacatga tgcaagagctgcaggccggggggctcagtgccatggaagctactccaag ttgcattgcctcccgcgcccagatcctgctttccatttcgagaacataa
atagattgcccagcccctccagtacaatcccactggaagaaaaggcaat ggcgggcttcagccagacctgctgagacctaggttgccacggtaacagc caaagacatcaacccaagtgctgggtcaagtgtctcatcatactggcac tgttgctggggtgacggcagaattcagaacttcaatttcagtgacgcca agcttgatgtgtttctgttattgttttgaagaaggtagctcttgtggag gacttgggagaaggatggggtcttaggaaggaggtgacagcacttgcat ggtcacttgagcccacacacacgctcaaccccaagtcctttatgctttg tcacagtgaagatgagacctctgacgtccaagccttgttcctgtgctgc atcacccactcagccttccaaagggaacaggaacaaatttccccagcac cactgtttgggtcccgcttttcctatcttctgctgcccctgagcacatc caagcagacagggaaagaggagtcagacatggcccagtcacatcctgag ctgctcctggctgataaccacgatggagcccgtgtttgtcctgccatct ggcactgcactgagtgtggcacaggcaccgtcctgttgatctcacaaca cagttctaagttaggacgttcttggctccgttagacaggtgaggaaact ggggcacagagaggtgatgtcatctgcctggtgtcaatcagctagcaag tgatggagcccagatttcaaaccaaagggggttacgtccaggggctgag ttcccactcacctgtgtagagtgccatctgggcaccattgctccagacg tgttccgacccctttcccagcccacagggcttgaagtgaaggaacagag gcagggggtgggccagccccagggccagggtccccttggtgaagccgtg ccagggggctcagctgcttcagggaatgtgtccctcccaccatgggcca gagcttcagcccttctttagctcagctagagttcacaggagagccaaaa aagaaaaggaagctgagcatctcccgagtcctgggcagggaaggggagg gaaattgctgcttctccaactcttgcttggggccaagccctgcaccagt tgcttcccagctgttatctgccagatcttcccatcttgtggcatgtggt
gcccccaccaacatcccaaggggaccaatccccttgccaccactttgca tcacctgggaccacagatttggacaggaagggctctgagaagaggccaa agccctcattttacagatgaggaagctgaagcccggggaggggagcgac cctcaaggccacccagctggacacgggagacttgagcccagccttctga ctgcattcagccctctctaggacgcagcagcctctccccagcactgagt cccccctcctttgtgtgtcccagcacccttggcctgagtaaacttggaa aggggctccctcccagagaagggactactctcttcacccctttattcca gctgcctgccaccccagacccccacctcccaccctgacccccgacccct gggtggggaaggggctcacatgggcccaggctgagtgtgagtgagcatg tcaagttgtctgacactgtgacattagtgcaccctactgacaacccctc cccagccttgcccctttctcctctccctgttttgtacataaattgacat gagctgcaacatgtgtgcgtgtgtgtgcgtgtgtgtgtgtgtgtatgtg tgtgtgatctgtgtcatggttttgttacctttttgtttttgtaaacttg aatgttcaaaataaacatgctgtttactctgagaaaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 656)
Socs3
gcggctccgacttggactccctgctccgctgctgccgcttcggccccgc acgcagccagccgccagccgcccgcccggcccagctcccgccgcggccc cttgccgcggtccctctcctggtcccctcccggttggtccgggggtgcg cagggggcagggcgggcgcccaggggaagctcgagggacgcgcgcgcga aggctcctttgtggacttcacggccgccaacatctgggcgcagcgcggg ccaccgctggccgtctcgccgccgcgtcgccttggggacccgagggggc tcagccccaaggacggagacttcgattcgggaccagccccccgggatgc ggtagcggccgctgtgcggaggccgcgaagcagctgcagccgccgccgc gcagatccacgctggctccgtgcgccatggtcacccacagcaagtttcc
NM 003955
NM 007707
cgccgccgggatgagccgccccctggacaccagcctgcgcctcaagacc ttcagctccaagagcgagtaccagctggtggtgaacgcagtgcgcaagc tgcaggagagcggcttctactggagcgcagtgaccggcggcgaggcgaa cctgctgctcagtgccgagcccgccggcacctttctgatccgcgacagc tcggaccagcgccacttcttcacgctcagcgtcaagacccagtctggga ccaagaacctgcgcatccagtgtgaggggggcagcttctctctgcagag cgatccccggagcacgcagcccgtgccccgcttcgactgcgtgctcaag ctggtgcaccactacatgccgccccctggagccccctccttcccctcgc cacctactgaaccctcctccgaggtgcccgagcagccgtctgcccagcc actccctgggagtccccccagaagagcctattacatctactccgggggc gagaagatccccctggtgttgagccggcccctctcctccaacgtggcca ctcttcagcatctctgtcggaagaccgtcaacggccacctggactccta tgagaaagtcacccagctgccggggcccattcgggagttcctggaccag tacgatgccccgctttaaggggtaaagggcgcaaagggcatgggtcggg agaggggacgcaggcccctctcctccgtggcacatggcacaagcacaag aagccaaccaggagagagtcctgtagctctggggggaaagagggcggac aggcccctccctctgccctctccctgcagaatgtggcaggcggacctgg aatgtgttggagggaagggggagtaccacctgagtctccagcttctccg gaggagccagctgtcctggtgggacgatagcaaccacaagtggattctc cttcaattcctcagcttcccctctgcctccaaacaggggacacttcggg aatgctgaactaatgagaactgccagggaatcttcaaactttccaacgg aacttgtttgctctttgatttggtttaaacctgagctggttgtggagcc tgggaaaggtggaagagagagaggtcctgagggccccagggctgcgggc tggcgaaggaaatggtcacaccccccgcccaccccaggcgaggatcctg
gtgacatgctcctctccctggctccggggagaagggcttggggtgacct
gaagggaaccatcctggtaccccacatcctctcctccgggacagtcacc
gaaaacacaggttccaaagtctacctggtgcctgagagcccagggccct
tcctccgttttaagggggaagcaacatttggaggggatggatgggctgg
tcagctggtctccttttcctactcatactataccttcctgtacctgggt
ggatggagcgggaggatggaggagacgggacatctttcacctcaggctc
ctggtagagaagacaggggattctactctgtgcctcctgactatgtctg
gctaagagattcgccttaaatgctccctgtcccatggagagggacccag
cataggaaagccacatactcagcctggatgggtggagaggctgagggac
tcactggagggcaccaagccagcccacagccagggaagtggggaggggg
ggcggaaacccatgcctcccagctgagcactgggaatgtcagcccagta
agtattggccagtcaggcgcctcgtggtcagagcagagccaccaggtcc
cactgccccgagccctgcacagccctccctcctgcctgggtgggggagg
ctggaggtcattggagaggctggactgctgccaccccgggtgctcccgc
tctgccatagcactgatcagtgacaatttacaggaatgtagcagcgatg
gaattacctggaacagttttttgtttttgtttttgtttttgtttttgtg
ggggggggcaactaaacaaacacaaagtattctgtgtcaggtattgggc
tggacagggcagttgtgtgttggggtggtttttttctctatttttttgt
ttgtttcttgttttttaataatgtttacaatctgcctcaatcactctgt
cttttataaagattccacctccagtcctctctcctcccccctactcagg
cccttgaggctattaggagatgcttgaagaactcaacaaaatcccaatc
caagtcaaactttgcacatatttatatttatattcagaaaagaaacatt
tcagtaatttataataaagagcactattttttaatgaaaaac (SEQ
ID NO: 657)
Fl lr gaggcagctcctgtggggaaaggcgccagtgcgccgaggcggggagtgg cggcggggtaacacctggccgaggtgactcgttctgaagagcagcggtt ccttacaccaatcggaacgtgcaggggtggggagctggccaatcaggcg cggagggcggggccgggcggggttccacctggcggctggctctcagtcc cctcgctgtagtcgcggagctgtgtctgttcccaggagtccttcggcgg ctgttgtgtcgggagcctgatcgcgatggggacaaaggcgcaagtcgag aggaaactgttgtgcctcttcatattggcgatcctgttgtgctccctgg cattgggcagtgttacagtgcactcttctgaacctgaagtcagaattcc tgagaataatcctgtgaagttgtcctgtgcctactcgggcttttcttct ccccgtgtggagtggaagtttgaccaaggagacaccaccagactcgttt gctataataacaagatcacagcttcctatgaggaccgggtgaccttctt gccaactggtatcaccttcaagtccgtgacacgggaagacactgggaca tacacttgtatggtctctgaggaaggcggcaacagctatggggaggtca aggtcaagctcatcgtgcttgtgcctccatccaagcctacagttaacat cccctcctctgccaccattgggaaccgggcagtgctgacatgctcagaa caagatggttccccaccttctgaatacacctggttcaaagatgggatag tgatgcctacgaatcccaaaagcacccgtgccttcagcaactcttccta tgtcctgaatcccacaacaggagagctggtctttgatcccctgtcagcc tctgatactggagaatacagctgtgaggcacggaatgggtatgggacac ccatgacttcaaatgctgtgcgcatggaagctgtggagcggaatgtggg ggtcatcgtggcagccgtccttgtaaccctgattctcctgggaatcttg gtttttggcatctggtttgcctatagccgaggccactttgacagaacaa agaaagggacttcgagtaagaaggtgatttacagccagcctagtgcccg aagtgaaggagaattcaaacagacctcgtcattcctggtgtgagcctgg
NM 016946
NM 172647
tcggctcaccgcctatcatctgcatttgccttactcaggtgctaccgga ctctggcccctgatgtctgtagtttcacaggatgccttatttgtcttct acaccccacagggccccctacttcttcggatgtgtttttaataatgtca gctatgtgccccatcctccttcatgccctccctccctttcctaccactg ctgagtggcctggaacttgtttaaagtgtttattccccatttctttgag ggatcaggaaggaatcctgggtatgccattgacttcccttctaagtaga cagcaaaaatggcgggggtcgcaggaatctgcactcaactgcccacctg gctggcagggatctttgaataggtatcttgagcttggttctgggctctt tccttgtgtactgacgaccagggccagctgttctagagcgggaattaga ggctagagcggctgaaatggttgtttggtgatgacactggggtccttcc atctctggggcccactctcttctgtcttcccatgggaagtgccactggg atccctctgccctgtcctcctgaatacaagctgactgacattgactgtg tctgtggaaaatgggagctcttgttgtggagagcatagtaaattttcag agaacttgaagccaaaaggatttaaaaccgctgctctaaagaaaagaaa actggaggctgggcgcagtggctcacgcctataatcccagaggctgagg caggcggatcacctgaggtcaggagttcaagatcagcctgaccaacatg gagaaaccctactaaaaatacaaagttagccaggcatagtggtgcatgc ctgtaatcccagctgctcaggagcctggcaacaagagcaaaactccagc tcaaaaaaaaaaagaaagaaaagaaagctggagctggtggcttaggcca tcacccttcccttggctggaactactggacagacccttttgagatgtgc ctgtggtgctgtggagatgtgtgtagtggtcttagctctttgttgagct tgtgtgtgtgttgtgtagtcttagctgtatgctgaaattgggcgtgtgt tggagggcttcttagctctttggtgagattgtatttctatgtgtttgta tcagctgaatgttgctggaaataaaaccttggtttgtcaaggctctttt
ttgtgggaagtaagtaggggaaaaggtctttgagggttcctaggctcct ttgtacaacaggaaaatgcctcaaagccttgcttcccagcaacctgggg ctggttcccagtgcctggtcctgccccttcctggttcttatctcaaggc agagcttctgaatttcaggccttcattccagagccctcttgtggccagg ccttcctttgctggaggaaggtacacagggtgaagctgatgctgtactt gggggatctccttggcctgttccaccaagtgagagaaggtacttactct tgtacctcctgttcagccaggtgcattaacagacctccctacagctgta ggaactactgtcccagagctgaggcaaggggatttctcaggtcatttgg agaacaagtgctttagtagtagtttaaagtagtaactgctactgtattt agtggggtggaattcagaagaaatttgaagaccagatcatgggtggtct gcatgtgaatgaacaggaatgagccggacagcctggctgtcattgcttt cttcctccccatttggacccttctctgcccttacatttttgtttctcca tctaccaccatccaccagtctatttattaacttagcaagaggacaagta aagggccctcttggcttgattttgcttctttctttctgtggaggatata ctaagtgcgactttgccctatcctatttggaaatccctaacagaattga gttttctattaaggatccaaaaagaaaaacaaaatgctaatgaagccat cagtcaagggtcacatgccaataaacaataaattttccagaagaaatga aatccaactagacaaataaagtagagcttatgaaatggttcagtaaaga tgagtttgttgttttttgttttgttttgttttgtttttttaaagacgga gtctcgctctgtcacccaggctggagtgcagtggtatgatcttggctca ctgtaacctccgcctcccgggttcaagccattctcctgcctcagtctcc tgagtagctgggattacgggtgcgtgccaccatgcctggctaatttttg tgtttttagtagagacagggtttcaccatgttggtcgggctggtctcaa actcctgacctcttgatccgcctgccttggcctcccaaagtgatgggat
tacagatgtgagccaccgtgcctagccaaggatgagatttttaaagtat gtttcagttctgtgtcatggttggaagacagagtaggaaggatatggaa aaggtcatggggaagcagaggtgattcatggctctgtgaatttgaggtg aatggttccttattgtctaggccacttgtgaagaatatgagtcagttat tgccagccttggaatttacttctctagcttacaatggaccttttgaact ggaaaacaccttgtctgcattcactttaaaatgtcaaaactaattttta taataaatgtttattttcacattgagtttgtttaaatcctgaagttctt accttaagagaattgggactcctagagtgattggacattcaaaatattc ctgatagtcttgttaattaagagattaggatatctttccattaccttga taattacgttttaatttagcttttttcattggcctgtgtttaaatgcaa ataaccccacaatggacatttcctatgttaaagtgacatttaggggata aaaaatgagagcagttccatggattttggtgtttcccctgagacatgaa ctcagcataatctgggataaaatgattgagtgttaaggatgtgtttgtt gttcctgtcgtttttttattttcttcaaagtatacaacatggtttgata tgcacatacatttgtgtaatgattgccatggtcaattaacacatcaeca tttttgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgtgagggagtcttgctccgttg ccaggctggagtgcaatggtacaaccttggctcactgcaacctccacct cctgggttcaagcaattctcttgcctcagcctcctaagtagctgggact ataggcgtgtgccaccatgcccagctaatttttgtatttttagtagaga cggggtttcaccatgttggccaggatgatctcgatcccttgacctcatg atccgcccacctcggcctcccaaagtgctgggattacaggcgtgagtca ctgcacccggccacatcacctcccatgttctatcttacgtattcagaac ttgttcatcttgtaactgaaagcgtgtaccctttgaccaacactgtttt tcctgtcttaacaggatctacagatcaaggacaggggaggggatagtgg
aggaaaacggagttagtctgtttctaaatgaggggacagtatgtttctt ggggcctgaggacagcttaataaagtagacaaatgaagaaaaacaacaa tttgcattaaaaaatatccaattcttta (SEQ ID NO: 658)
Fyn
agagcatcagcaagagtagcagcgagcagccgcgctggtggcggcggcg cgtcgttgcagttgcgccatctgtcaggagcggagccggcgaggagggg gctgccgcgggcgaggaggaggggtcgccgcgagccgaaggccttcgag acccgcccgccgcccggcggcgagagtagaggcgaggttgttgtgcgag cggcgcgtcctctcccgcccgggcgcgccgcgcttctcccagcgcaccg aggaccgcccgggcgcacacaaagccgccgcccgcgccgcaccgcccgg cggccgccgcccgcgccagggagggattcggccgccgggccggggacac cccggcgccgccccctcggtgctctcggaaggcccaccggctcccgggc ccgccggggaccccccggagccgcctcggccgcgccggaggagggcggg gagaggaccatgtgagtgggctccggagcctcagcgccgcgcagttttt ttgaagaagcaggatgctgatctaaacgtggaaaaagaccagtcctgcc tctgttgtagaagacatgtggtgtatataaagtttgtgatcgttggcgg acattttggaatttagataatgggctgtgtgcaatgtaaggataaagaa gcaacaaaactgacggaggagagggacggcagcctgaaccagagctctg ggtaccgctatggcacagaccccacccctcagcactaccccagcttcgg tgtgacctccatccccaactacaacaacttccacgcagccgggggccaa ggactcaccgtctttggaggtgtgaactcttcgtctcatacggggacct tgcgtacgagaggaggaacaggagtgacactctttgtggccctttatga ctatgaagcacggacagaagatgacctgagttttcacaaaggagaaaaa tttcaaatattgaacagctcggaaggagattggtgggaagcccgctcct tgacaactggagagacaggttacattcccagcaattatgtggctccagt
NM 002037
NM 001122892
tgactctatccaggcagaagagtggtactttggaaaacttggccgaaaa gatgctgagcgacagctattgtcctttggaaacccaagaggtacctttc ttatccgcgagagtgaaaccaccaaaggtgcctattcactttctatccg tgattgggatgatatgaaaggagaccatgtcaaacattataaaattcgc aaacttgacaatggtggatactасаttaccacccgggcccagtttgaaa cacttcagcagcttgtacaacattactcagagagagctgcaggtctctg ctgccgcctagtagttccctgtcacaaagggatgccaaggcttaccgat ctgtctgtcaaaaccaaagatgtctgggaaatccctcgagaatccctgc agttgatcaagagactgggaaatgggcagtttggggaagtatggatggg tacctggaatggaaacacaaaagtagccataaagactcttaaaccaggc acaatgtcccccgaatcattccttgaggaagcgcagatcatgaagaagc tgaagcacgacaagctggtccagctctatgcagtggtgtctgaggagcc catctacatcgtcaccgagtatatgaacaaaggaagtttactggatttc ttaaaagatggagaaggaagagctctgaaattaccaaatcttgtggaca tggcagcacaggtggctgcaggaatggcttacatcgagcgcatgaatta tatccatagagatctgcgatcagcaaacattctagtggggaatggactc atatgcaagattgctgacttcggattggcccgattgatagaagacaatg agtacacagcaagacaaggtgcaaagttccccatcaagtggacggcccc cgaggcagccctgtacgggaggttcacaatcaagtctgacgtgtggtct tttggaatcttactcacagagctggtcaccaaaggaagagtgccatacc caggcatgaacaaccgggaggtgctggagcaggtggagcgaggctacag gatgccctgcccgcaggactgccccatctctctgcatgagctcatgatc cactgctggaaaaaggaccctgaagaacgccccacttttgagtacttgc agagcttcctggaagactactttaccgcgacagagccccagtaccaacc
tggtgaaaacctgtaaggcccgggtctgcggagagaggccttgtcccag aggctgccccacccctccccattagctttcaattccgtagccagctgct ccccagcagcggaaccgcccaggatcagattgcatgtgactctgaagct gacgaacttccatggccctcattaatgacacttgtccccaaatccgaac ctcctctgtgaagcattcgagacagaaccttgttatttctcagactttg gaaaatgcattgtatcgatgttatgtaaaaggccaaacctctgttcagt gtaaatagttactccagtgccaacaatcctagtgctttccttttttaaa aatgcaaatcctatgtgattttaactctgtcttcacctgattcaactaa aaaaaaaaaagtattattttccaaaagtggcctctttgtctaaaacaat aaaattttttttcatgttttaacaaaaaccaatcaggacaggtgtttgt ttttgttttcttttttataaatatgaatatatataatatatatgtccct gtacatatacaatgtgggtgctaatgtggagactgtggccggcctgagc caccaagctgcgggacccagagggaggattttactgcaagtcagcatca aagcaccggtgttattctgaaaacaccagtggcctcatttttggctttt gcaaagcatgaattttttcatttggattgcactttcctggttcatgact gtacctgtaggtggttgttactttgactcttttcaggaaccacccccca agctgaatttacaagttctgttagcactatttgcttcaacttactgcga tttgttctcaaaacttaaaaataagcaagcaaatggctgatactaccaa gagaactggaagatggataccacacaaacttcttgtataaaaatatgaa tgctgaaatgtttcagacatttttaatttaataaacctgtaaccacatt taagtgatctaaaacccatagcattgtagtcatggcaacccgctaaact ttctcatgcaactaaaatttctgggggaaatgagggtgggggttgtaca tttcccattgtaaaataagtgttttaaatgtcctgtactgctaacgaat gactttctatatgtccaggagttctccagtggaataactatgcactact
ttacatttcatggggatgcacaaaaacaaaaaagtattacatttttagt tgctgtttgtaccaaccttaaattacatatgtttaacaacaacaaatca aaaatcctatttctattgagtttttaatactgactagcaactctgaagt cttaattccttttttgttatgatttatttgtgagtttacatttttaaat tgtttaactttcttaatttagtaattaaaaagagagcattttacatttg aa (SEQ ID NO: 659)
Ypel2
gccgcggcggtggcggagactgtggctttaagagcgtgccgggagcccg agccccagccgggccgcgcttcgccgctgcgcaccccagcggagccaag ccccacgctggccggacagggccgcctgtcgccgggctgctgagaacta gccctagacctctgcgtgagggttcttctgccgaagacatcaccagtgt gtggagcctgccacacccacccgctgccaaaccacggcctttacctgtg tcttccggtgtttcccgtgcgacccatcctgtgggagtgcctcgtgggc tgccccagagttcaccccacactcagcagcaccaatggtgaagatgaca agatcgaagactttccaggcatatctgccctcctgccaccggacctaca gctgcattcactgcagagctcacttggccaatcatgatgaactaatttc caagtcattccaaggaagtcaaggacgagcatacctctttaactcagta gttaatgtgggctgtgggcctgcagaagagcgagtgttgctaacaggac tgcatgcagtcgcagacatttactgtgaaaactgcaaaaccactctggg ctggaaatacgaacatgcttttgaaagcagccagaaatataaagaaggc aaatacatcattgaactagcacacatgatcaaggacaatggctgggact gattggacagcatctacccaacccagtgtccacgtgaacgccattcaac cgaacattcttcccaagcgtgagagagtgactgacacttggttccatcc atttaggggccttgccatccggggcatcctcccaccctgacgccatctt tctggtgaccggcctctaaatcgctgtctctctgtctctttgctttgta
NM 001005404
NM 001005341
tctgtttgtgagttgatcctggcttctctctctgttctagttttggctg aaaacaaaacaacaaaaggaacagatccttgaccgcatggcggcagccc accttggtaagggccccagggcccatgcgagagctgcctgatggcctct tgtcaggagagcagtggcacgggggcgtgaggaagagggaaaggggaaa ctctaagggtcctggcgcggggaaggggtggaagggtggaggtaggaac aaaattgcgccgctcctggagacctgataacttaggcttgaaataattg acttgtctaaaaggacaaagagaaaaaaaaaatacctcatgactgcatt ctctctgactagaagcttctgttcctgacaccaaatgtgccaggttagc aaatgagcacaagatgtggccctgattctagttggtggggcaagggcct ggttctcctgggctgagtgggggagtgtcctggcagcagcgagtgacct gggcagtggccaggtgggtgcgatgactctgatgcctcactcagtctct gggcaatcatcatctttgcctctagccaccgtagataaggtgtgaaggg actgctgtttgcaatgggcttaccatccaaatatcccaaaggctttgac cagcaaccaagtaaaatcagtaattgaggagagcagggcacaaaggggc tgcagtttgggagctcctgaagaaatggctcagatattgagtcagagaa ataaaaagtaggatcagttagcaattctaactgcccttccttctgaccc ctcataagaggagtgtggtgagggaggggactgggtaggggtcatccca ggaggaggggtttacattggaaccagttcaggttcggtgcatctttcct cttcggttttacagtggcttccgtgggatcgtcaatttcttgttcttag agtttcgggtgtttttctccagtcttgttactgtagactgtagaaagca cgggccccaggctctgagcttagtaataacctggctggtagattcctca tgcccctaattgtcccacttaggcctgaatgtcttgcatggagagaaat ctcctgtcagtgtggtccagcagcagggaggagttctgcccaaattccg atatcaccccttcccccatccaagcatccttcgattagggaagtggaga
gcacatccctgtaaggcccataagagaaagaggagtttgttacatttaa tcaacactgtgaagtctgttctacagcaattcagccattacacagtata tgactgaaactcatttaactgggttaatttcatttcttagactgaatat attattgttaagatacgtgtgcgtgttaggtaattctcagcatctcctc caagtaggccgaccttctcggaaaattcaccctaaaagtctcacaaaag aatgagttcatggggagattctgtaaagtgatgaactgagatgaaagca gccaacagcccaggagcttttcagaatagcgtctgcagcagaaccagtt tccattcagagcgcgtccttggtggaaatgcttttttgtgtgtctccac gcgctgatggtggaatgggagccccaagacgtgtgggcttagaaatcaa cttttgttccccaaggcttcttgtccagatctttccagtgctttcatag ccctgggagatcaagttgttctccccactttactgcaaggtagactgaa gttcagaagaaatactgaatttctgctcccagaagaatagtttctctgg ctcacaggcccaagttctcaatgaaatcgttttttaactttcacattcc taagctggcttcccggcacagaagccatggatttcccctctctcccttc cccctcctcaaggaaatagtcttcctttatggattttcattggactctt tcctcagcgattgtcctggctgtttattgatagtccttcccataagaaa atggggttaaacatggggtaggtattttgtctttcaaactacaaatgga atgtggtgacataaactagacatggggtgccctcaagtttccaagggga ccaatgtgccactgttcttccttggggatgaggcctttgactgttggat ggatcagagcaggctccagtcagaccctggttctgaatgtttttttttt cggtgactatccagtgagccttcagtgggtgcaaggcgccatacttgct gtgagagagctgagtagagtgttggtttttccataactacagggggaaa aaaagtcattaggctttccctttgtgtcagtgaaaccaaaagtgcttct tacaacgttcgctctgttcatgggttgtctatctaacattgagcagcat
tggagaggccacagctgagctatggagatgctaaattaactcatggcct cagtcagttcattctttaatttcctcaccaaattattgacttagagcat aaccaaagacctcattcattcaccccaggtgggttggggtaattggagt ttgttggtgaagtttgggggcggggtgttgggagtagagacagggtaag gggacgtgagaaaggaaaaggcatgaagttctatacctcagccagcagc tgccttcgtttggaactgaagtccagccagcagactctctagctccatc tcccctgtgccaccctaggtcatatgaccttggccaccttggagtagac ccagacccctcgggacccgggacattagtctcaggctgctgatggattg atttgacatgaaccaaacacagccaaactcgatacccacaagctgtcag ctgaacctgactgagtgttcttcctgagttcacgaggataggctagagt gcatttttactggtggatcagtgtgtgcgaaagagatgaccctttataa agagattttcaagtggatatatataaaagaaacagttgcttgtaaaata tacttttgtaaataatatttaattttttaaataatatatttggtgctgt tttctcagatcccctgagagcactttttattttccttttaaattctatg gtttcctttgcatttcttgaagtatattttaagggaaacagtgatcacc aatacatgttttcagttttttttttttttaaggtctctatcactttaat ctggatcaaggctttgaagcaatgcctctctgcattttttccccagtgg aacagactctgcagtacattaatcaggttgagaattgaaatattttctt gcatcagtattggctagaaaagaaaataaataaaaccaagttaatttag tagtaacaacttacagtgattcttcctgttggaagaatttccaacaaat cagaatcacgtttttagttgtgcgtgtgcgcgcacacgtgtgtaaaaag cactttcgattgtgcctcctgttttctcgagtggggacactttaactac agtttacacctcgggcgcataaagtttttcttctctttctctctggttg tttctgtttctgagtggaccaacagcagaacccacgaggatttgttttg
agtatggagctgttgcgggtttgctcctttttcttgctttgcgtgctca gtttttacagactgtaaaggagatgtgttgtttgtgaagatggagcaga gtcaaatctgtgcttctaactgagatgagagtgtattaatcacgtatcg cagggctccagctgttttagaagccacatcatgttaaacattaactggt ttggattaaaagaacattaatattataatacacatatcttagtggtaaa cagctttttttttttaaggtcagattgcctcaggtttagaaagaggctg agaaatcaaatcttgaacacaatcaacttacatattttaaaggaatctg cctcaaatgagaaaatatgctagttatctagatagaggaaagagatatt tacttttttaaaaattaaaatagttatgaaatctggcagaaaaggtaaa gcctagaagaaactatgaaagctattctcatgttaccaaattctatctg cgcatatgtttttgtataacatttcggtgacagtgggagtcggttccct ttcccaacctgcagagactatcttccaatacagaatctgtctatttatg cttgtgtttacaaactgtatttgttgggtttgggtttttgttttctttg gtggcatttttcaggtcactttgcttctataacaaaggtaattgttttc aaataatttgtcttcaccttttcctgtatttgtacatagtgattcagta ttagagaaaagtgcattgtttctgtcatatttccaatctgtgttggtgc tcatttgagaaaataaaagttttcaaatattaactcttaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 660)
Pkdl
ccctcccctcccgatcctcatccccttgccctcccccagcccagggact tttccggaaagtttttattttccgtctgggctctcggagaaagaagctc ctggctcagcggctgcaaaactttcctgctgccgcgccgccagcccccg ccctccgctgcccggccctgcgccccgccgagcgatgagcgcccctccg gtcctgcggccgcccagtccgctgctgcccgtggcggcggcagctgccg cagcggccgccgcactggtcccagggtccgggcccgggcccgcgccgtt
NM 002742
NM 008858
cttggctcctgtcgcggccccggtcgggggcatctcgttccatctgcag atcggcctgagccgtgagccggtgctgctgctgcaggactcgtccgggg actacagcctggcgcacgtccgcgagatggcttgctccattgtcgacca gaagttccctgaatgtggtttctacggaatgtatgataagatcctgctt tttcgccatgaccctacctctgaaaacatccttcagctggtgaaagcgg ccagtgatatccaggaaggcgatcttattgaagtggtcttgtcagcttc cgccacctttgaagactttcagattcgtccccacgctctctttgttcat tcatacagagctccagctttctgtgatcactgtggagaaatgctgtggg ggctggtacgtcaaggtcttaaatgtgaagggtgtggtctgaattacca taagagatgtgcatttaaaatacccaacaattgcagcggtgtgaggcgg agaaggctctcaaacgtttccctcactggggtcagcaccatccgcacat catctgctgaactctctacaagtgcccctgatgagccccttctgcaaaa atcaccatcagagtcgtttattggtcgagagaagaggtcaaattctcaa tcatacattggacgaccaattcaccttgacaagattttgatgtctaaag ttaaagtgccgcacacatttgtcatccactcctacacccggcccacagt gtgccagtactgcaagaagcttctgaaggggcttttcaggcagggcttg cagtgcaaagattgcagattcaactgccataaacgttgtgcaccgaaag taccaaacaactgccttggcgaagtgaccattaatggagatttgcttag ccctggggcagagtctgatgtggtcatggaagaagggagtgatgacaat gatagtgaaaggaacagtgggctcatggatgatatggaagaagcaatgg tccaagatgcagagatggcaatggcagagtgccagaacgacagtggcga gatgcaagatccagacccagaccacgaggacgccaacagaaccatcagt ccatcaacaagcaacaatatcccactcatgagggtagtgcagtctgtca aacacacgaagaggaaaagcagcacagtcatgaaagaaggatggatggt
ccactacaccagcaaggacacgctgcggaaacggcactattggagattg gatagcaaatgtattaccctctttcagaatgacacaggaagcaggtact acaaggaaattcctttatctgaaattttgtctctggaaccagtaaaaac ttcagctttaattcctaatggggccaatcctcattgtttcgaaatcact acggcaaatgtagtgtattatgtgggagaaaatgtggtcaatccttcca gcccatcaccaaataacagtgttctcaccagtggcgttggtgcagatgt ggccaggatgtgggagatagccatccagcatgcccttatgcccgtcatt cccaagggctcctccgtgggtacaggaaccaacttgcacagagatatct ctgtgagtatttcagtatcaaattgccagattcaagaaaatgtggacat cagcacagtatatcagatttttcctgatgaagtactgggttctggacag tttggaattgtttatggaggaaaacatcgtaaaacaggaagagatgtag ctattaaaatcattgacaaattacgatttccaacaaaacaagaaagcca gcttcgtaatgaggttgcaattctacagaaccttcatcaccctggtgtt gtaaatttggagtgtatgtttgagacgcctgaaagagtgtttgttgtta tggaaaaactccatggagacatgctggaaatgatcttgtcaagtgaaaa gggcaggttgccagagcacataacgaagtttttaattactcagatactc gtggctttgcggcaccttcattttaaaaatatcgttcactgtgacctca aaccagaaaatgtgttgctagcctcagctgatccttttcctcaggtgaa actttgtgattttggttttgcccggatcattggagagaagtctttccgg aggtcagtggtgggtacccccgcttacctggctcctgaggtcctaagga acaagggctacaatcgctctctagacatgtggtctgttggggtcatcat ctatgtaagcctaagcggcacattcccatttaatgaagatgaagacata cacgaccaaattcagaatgcagctttcatgtatccaccaaatccctgga aggaaatatctcatgaagccattgatcttatcaacaatttgctgcaagt
aaaaatgagaaagcgctacagtgtggataagaccttgagccacccttgg ctacaggactatcagacctggttagatttgcgagagctggaatgcaaaa tcggggagcgctacatcacccatgaaagtgatgacctgaggtgggagaa gtatgcaggcgagcaggggctgcagtaccccacacacctgatcaatcca agtgctagccacagtgacactcctgagactgaagaaacagaaatgaaag ccctcggtgagcgtgtcagcatcctctgagttccatctcctataatctg tcaaaacactgtggaactaataaatacatacggtcaggtttaacatttg ccttgcagaactgccattattttctgtcagatgagaacaaagctgttaa actgttagcactgttgatgtatctgagttgccaagacaaatcaacagaa gcatttgtattttgtgtgaccaactgtgttgtattaacaaaagttccct gaaacacgaaacttgttattgtgaatgattcatgttatatttaatgcat taaacctgtctccactgtgcctttgcaaatcagtgtttttcttactgga gcttcattttggtaagagacagaatgtatctgtgaagtagttctgtttg gtgtgtcccattggtgttgtcattgtaaacaaactcttgaagagtcgat tatttccagtgttctatgaacaactccaaaacccatgtgggaaaaaaat gaatgaggagggtagggaataaaatcctaagacacaaatgcatgaacaa gttttaatgtatagttttgaatcctttgcctgcctggtgtgcctcagta tatttaaactcaagacaatgcacctagctgtgcaagacctagtgctctt aagcctaaatgccttagaaatgtaaactgccatatataacagatacatt tccctctttcttataatactctgttgtactatggaaaatcagctgctca gcaacctttcacctttgtgtatttttcaataataaaaaatattcttgtc aaaa (SEQ ID NO: 661)
Ptpn2
gctcgggcgccgagtctgcgcgctgacgtccgacgctccaggtactttc cccacggccgacagggcttggcgtgggggcggggcgcggcgcgcagcgc
NM 002828
NM 008977
gcatgcgccgcagcgccagcgctctccccggatcgtgcggggcctgagc ctctccgccggcgcaggctctgctcgcgccagctcgctcccgcagccat gcccaccaccatcgagcgggagttcgaagagttggatactcagcgtcgc tggcagccgctgtacttggaaattcgaaatgagtcccatgactatcctc atagagtggccaagtttccagaaaacagaaatcgaaacagatacagaga tgtaagcccatatgatcacagtcgtgttaaactgcaaaatgctgagaat gattatattaatgccagtttagttgacatagaagaggcacaaaggagtt acatcttaacacagggtccacttcctaacacatgctgccatttctggct tatggtttggcagcagaagaccaaagcagttgtcatgctgaaccgcatt gtggagaaagaatcggttaaatgtgcacagtactggccaacagatgacc aagagatgctgtttaaagaaacaggattcagtgtgaagctcttgtcaga agatgtgaagtcgtattatacagtacatctactacaattagaaaatatc aatagtggtgaaaccagaacaatatctcactttcattatactacctggc cagattttggagtccctgaatcaccagcttcatttctcaatttcttgtt taaagtgagagaatctggctccttgaaccctgaccatgggcctgcggtg atccactgtagtgcaggcattgggcgctctggcaccttctctctggtag acacttgtcttgttttgatggaaaaaggagatgatattaacataaaaca agtgttactgaacatgagaaaataccgaatgggtcttattcagacccca gatcaactgagattctcatacatggctataatagaaggagcaaaatgta taaagggagattctagtatacagaaacgatggaaagaactttctaagga agacttatctcctgcctttgatcattcaccaaacaaaataatgactgaa aaatacaatgggaacagaataggtctagaagaagaaaaactgacaggtg accgatgtacaggactttcctctaaaatgcaagatacaatggaggagaa cagtgagagtgctctacggaaacgtattcgagaggacagaaaggccacc
acagctcagaaggtgcagcagatgaaacagaggctaaatgagaatgaac gaaaaagaaaaaggtggttatattggcaacctattctcactaagatggg gtttatgtcagtcattttggttggcgcttttgttggctggacactgttt tttcagcaaaatgccctataaacaattaattttgcccagcaagcttctg cactagtaactgacagtgctacattaatcataggggtttgtctgcagca aacgcctcatatcccaaaaacggtgcagtagaatagacatcaaccagat aagtgatatttacagtcacaagcccaacatctcaggactcttgactgca ggttcctctgaaccccaaactgtaaatggctgtctaaaataaagacatt catgtttgttaaaaactggtaaattttgcaactgtattcatacatgtca aacacagtatttcacctgaccaacattgagatatcctttatcacaggat ttgtttttggaggctatctggattttaacctgcacttgatataagcaat aaatattgtggttttatctacgttattggaaagaaaatgacatttaaat aatgtgtgtaatgtataatgtactattgacatgggcatcaacactttta ttcttaagcatttcagggtaaatatattttataagtatctatttaatct tttgtagttaactgtactttttaagagctcaatttgaaaaatctgttac taaaaaaataaattgtatgtcgattgaattgtactggatacattttcca tttttctaaagagaagtttgatatgagcagttagaagttggaataagca atttctactatatattgcatttcttttatgttttacagttttccccatt ttaaaaagaaaagcaaacaaagaaacaaaagtttttcctaaaaatatct ttgaaggaaaattctccttactgggatagtcaggtaaacagttggtcaa gactttgtaaagaaattggtttctgtaaatcccattattgatatgttta tttttcatgaaaatttcaatgtagttggggtagattatgatttaggaag caaaagtaagaagcagcattttatgattcataatttcagtttactagac tgaagttttgaagtaaacacttttcagtttctttctacttcaataaata
gtatgattatatgcaaaccttacattgtcattttaacttaatgaatatt
ttttaaagcaaactgtttaatgaatttaactgctcatttgaatgctagc
tttcctcagatttcaacattccattcagtgtttaatttgtcttacttaa
acttgaaattgttgttacaaatttaattgctaggaggcatggatagcat
acattattatggatagcataccttatttcagtggttttcaaactatgct
cattggatgtccaggtgggtcaagaggttactttcaaccacagcatctc
tgccttgtctctttatatgccacataagatttctgcataaggcttaagt
attttaaagggggcagttatcatttaaaaacagtttggtcgggcgcggt
ggctcatgcctgtaatcccagcactttgggaggctgaagtgggcagatc
acctgaggtcaggagttcaagaccagcctggccaacgtggtgaaacacc
atctctactaaaaatgcaaaaattagctgggcatggtggagggcacctg
taatctcagctactcaggaggctgaggtaggagaattgcttgaacccag
gagatggaggttgcagtgagetgagatcacgtcactgcactccagccag
ggcgacagagcgagactccatctcaaaagaaacaaacaaaaaaaacagt
ttgggccgggtgtggtggctcacgcttgtaatcccagcacttcggaagg
ccaaggcgggcggatcacgaggtcaagagatggagactgtcctggccaa
catggtgaaatcccttctttactaaaaatacaaaaattatctgggcgtg
gtggtgcatgcctgtagtcccagctccttgggaggctaaggcaggagaa
tcacttgaacccgggaggcagaggttgcagtgagccgagattgcaccac
tgcactccagcctggcaacagagcaagacttcgtctc (SEQ ID NO:
662)
Grk6
cggctggctgcggcggccggggaggccggggaggccgcggcgcggtcac tgcgagccgagccgagccgcgccgagccgcgccgatcgccatccggcct cggcactcgcgcgcgatcccggccggcggcgcggcccggcgggccaggc
NM 001004106
NM 001038018
ggcgccacagcccatggagctcgagaacatcgtagcgaacacggtgcta ctcaaggcccgggaaggtggcggtggaaatcgcaaaggcaaaagcaaga aatggcggcagatgctccagttccctcacatcagccagtgcgaagagct gcggctcagcctcgagcgtgactatcacagcctgtgcgagcggcagccc attgggcgcctgctgttccgagagttctgtgccacgaggccggagctga gccgctgcgtcgccttcctggatggggtggccgagtatgaagtgacccc ggatgacaagcggaaggcatgtgggcggcagctaacgcagaattttctg agccacacgggtcctgacctcatccctgaggtcccccggcagctggtga cgaactgcacccagcggctggagcagggtccctgcaaagaccttttcca ggaactcacccggctgacccacgagtacctgagcgtggccccttttgcc gactacctcgacagcatctacttcaaccgtttcctgcagtggaagtggc tggaaaggcagccagtgaccaaaaacaccttcaggcaataccgagtcct gggcaaaggtggctttggggaggtgtgcgcctgccaggtgcgggccaca ggtaagatgtatgcctgcaagaagctagagaaaaagcggatcaagaagc ggaaaggggaggccatggcgctgaacgagaagcagatcctggagaaagt gaacagtaggtttgtagtgagcttggcctacgcctatgagaccaaggac gcgctgtgcctggtgctgacactgatgaacgggggcgacctcaagttcc acatctaccacatgggccaggctggcttccccgaagcgcgggccgtctt ctacgccgccgagatctgctgtggcctggaggacctgcaccgggagcgc atcgtgtacagggacctgaagcccgagaacatcttgctggatgaccacg gccacatccgcatctctgacctgggactagctgtgcatgtgcccgaggg ccagaccatcaaagggcgtgtgggcaccgtgggttacatggctccggag gtggtgaagaatgaacggtacacgttcagccctgactggtgggcgctcg gctgcctcctgtacgagatgatcgcaggccagtcgcccttccagcagag
gaagaagaagatcaagcgggaggaggtggagcggctggtgaaggaggtc cccgaggagtattccgagcgcttttccccgcaggcccgctcactttgct cacagctcctctgcaaggaccctgccgaacgcctggggtgtcgtggggg cagtgcccgcgaggtgaaggagcaccccctctttaagaagctgaacttc aagcggctgggagctggcatgctggagccgccgttcaagcctgaccccc aggccatttactgcaaggatgttctggacattgaacagttctctacggt caagggcgtggagctggagcctaccgaccaggacttctaccagaagttt gccacaggcagtgtgcccatcccctggcagaacgagatggtggagaccg agtgcttccaagagctgaatgtctttgggctggatggctcagttccccc agacctggactggaagggccagccacctgcacctcctaaaaagggactg ctgcagagactcttcagtcgccaagattgctgtggaaactgcagcgaca gcgaggaagagctccccacccgcctctagcccccagcccgaggccccca ccagcagttggcggtagcagctactccgagcgccgtttacagttttgca cagtgatcttccccattgtccactcaagtcgtggcctggggaacacaga cggagctgtccccagtgtcctccgtccctcagcccctggcctggctgag tttggcagggcctgggccatccctgggacaaaggtgcgtcccttcagct cttctccgtggagctcggggctttctgtatttatgtatttgtacgaatg tatatagcgaccagagcattcttaattcccgccgcagacctggcgcccc cgccttggctcctgggggcagccagccctggctgggagagcgggagctg gcagaggagccactgccaaactcaaggctcctctggcccagcttggatg gctgagggtggtcacacccctgagccttcagcactgtgctggccacccc ggcctctgagtaagactcgtgcctccccctgctgccctgggctcaggct gctaccctctggggcccaaagctgtcccttctcagtgcttgtcagcgct gggtctggggcctctgtatgccctaggcctgtgccaaagtggccagaga
ttgggctgcctgtgatacccatcagcccactgccccggccggcccagat aggtctgcctctgccttccagctcccacagcctggtccctgatactggg ctctgtcctgcagacacctctttcagaaacgcccaagcccagcccctag gagggggtggggcatccctggtcaaccctcaaacattccggactcccct cataacaatagacacatgtgcccagcaataatccgccccttcctgtgtg cgcctgtggggtgcgtgcgcgcgcgtgtgtacctgtgtgggtgaagggg atagggcgaggctgtgcctgtgccccaggtcccagccctggcccttccc agactgtgatggccatcctggtcccagtgttagggtagcatgggattac agggccctgttttttccatatttaaagccaatttttattactcgttttg tccaacgtaa (SEQ ID NO: 663)
Cdkn2a
cgagggctgcttccggctggtgcccccgggggagacccaacctggggcg acttcaggggtgccacattcgctaagtgctcggagttaatagcacctcc tccgagcactcgctcacggcgtccccttgcctggaaagataccgcggtc cctccagaggatttgagggacagggtcggagggggctcttccgccagca ccggaggaagaaagaggaggggctggctggtcaccagagggtggggcgg accgcgtgcgctcggcggctgcggagagggggagagcaggcagcgggcg gcggggagcagcatggagccggcggcggggagcagcatggagccttcgg ctgactggctggccacggccgcggcccggggtcgggtagaggaggtgcg ggcgctgctggaggcgggggcgctgcccaacgcaccgaatagttacggt cggaggccgatccaggtcatgatgatgggcagcgcccgagtggcggagc tgctgctgctccacggcgcggagcccaactgcgccgaccccgccactct cacccgacccgtgcacgacgctgcccgggagggcttcctggacacgctg gtggtgctgcaccgggccggggcgcggctggacgtgcgcgatgcctggg gccgtctgcccgtggacctggctgaggagctgggccatcgcgatgtcgc
NM 000077
NM 001040654
acggtacctgcgcgcggctgcggggggcaccagaggcagtaaccatgcc
cgcatagatgccgcggaaggtccctcagacatccccgattgaaagaacc
agagaggctctgagaaacctcgggaaacttagatcatcagtcaccgaag
gtcctacagggccacaactgcccccgccacaacccaccccgctttcgta
gttttcatttagaaaatagagcttttaaaaatgtcctgccttttaacgt
agatatatgccttcccccactaccgtaaatgtccatttatatcattttt
tatatattcttataaaaatgtaaaaaagaaaaacaccgcttctgccttt
tcactgtgttggagttttctggagtgagcactcacgccctaagcgcaca
ttcatgtgggcatttcttgcgagcctcgcagcctccggaagctgtcgac
ttcatgacaagcattttgtgaactagggaagctcaggggggttactggc
ttctcttgagtcacactgctagcaaatggcagaaccaaagctcaaataa
aaataaaataattttcattcattcactcaaaaaaaaaaaaaa (SEQ
ID NO: 664)
Sbfl
gggcgggccggctggctgggaagatggcggcgggaacctgggccgccgc cgccgccgccgccgccgccgcggagcgaaccaggggtgtccggggtgcg cggtccagggccggggccgggccatgagcgcgccgtcctcgagtccccg agccgcggagcccgcccgcgcccctcgggccgccccgcgtccctcgcca tggcgcggctcgcggactacttcgtgctggtggcgttcgggccgcaccc gcgcgggagtggggaaggccagggccagattctgcagcgcttcccagag aaggactgggaggacaacccattcccccagggcatcgagctgttttgcc agcccagcgggtggcagctgtgtcccgagaggaatccaccgaccttctt tgttgctgtcctcaccgacatcaactccgagcgccactactgcgcctgc ttgaccttctgggagccagcggagccttcacaggaaacgacgcgcgtgg aggatgccacagagagggaggaagagggggatgagggaggccagaccca
NM 002972
NM 001170561
cctgtctcccacagcacctgccccatctgcccagctgtttgcaccgaag acgctggtactggtgtcgcgactcgaccacacggaggtgttcaggaaca gccttggcctcatctatgccatccacgtggagggcctgaatgtgtgcct ggagaacgtgattgggaacctgctgacgtgcactgtgcccctggctggg ggctcgcagaggacgatctctttgggggctggtgaccggcaggtcatcc agactccactggccgactcgctgcccgtcagccgctgcagcgtggccct gctcttccgccagctaggcatcaccaacgtgctgtctttgttctgtgcc gccctcacggagcacaaggttctcttcctgtcccggagctaccagcggc tcgccgatgcctgtaggggcctcctggcactgctgtttcctctcagata cagcttcacctatgtgcccatcctgccggctcagctgctggaggtcctc agcacacccacgcccttcatcattggggtcaacgcggccttccaggcag agacccaggagctgctcgatgtgattgttgctgatctggatggagggac ggtcaecattcctgagtgtgtgcacattccacccttgccagagccactg cagagtcagacgcacagtgtgctgagcatggtcctggacccggagctgg agttggctgacctcgccttccctccgcccacgacatccacctcctccct gaagatgcaggacaaggagctgcgcgcggtcttcctgcggctgttcgct cagctgctgcagggctatcgctggtgcctgcacgtcgtgcgcatccacc cggagcctgtcatccgcttccataaggcagccttcctgggccagcgtgg gctggtagaggacgatttcctgatgaaggtgctggagggcatggccttt gctggctttgtgtcagagcgtggggtcccataccgccctacggacctgt tcgatgagctggtggcccacgaggtggcaaggatgcgggcggatgagaa ccacccccagcgtgtcctgcgtcacgtccaggaactggcagagcagctc tacaagaacgagaacccgtacccagccgtggcgatgcacaaggtacaga ggcccggtgagagcagccacctgcgacgggtgccccgacccttcccccg
gctggatgagggcaccgtgcagtggatcgtggaccaggctgcagccaag atgcagggtgcacccccagctgtgaaggccgagaggaggaccaccgtgc cctcagggccccccatgactgccatactggagcggtgcagtgggctgca tgtcaacagcgcccggcggctggaggttgtgcgcaactgcatctcctac gtgtttgaggggaaaatgcttgaggccaagaagctgctcccagccgtgt tgagggccctgaaggggcgagctgcccgccgctgcctcgcccaggagct gcacctgcatgtgcagcagaaccgtgcggtcctggaccaccagcagttt gactttgtcgtccgtatgatgaactgctgcctgcaggactgcacttctc tggacgagcatggcattgcggcggctctgctgcctctggtcacagcctt ctgccggaagctgagcccgggggtgacgcagtttgcatacagctgtgtg caggagcacgtggtgtggagcacgccacagttctgggaggccatgttct atggggatgtgcagactcacatccgggccctctacctggagcccacgga ggacctggcccccgcccaggaggttggggaggcaccttcccaggaggac gagcgctctgccctagacgtggcttctgagcagcggcgcttgtggccaa ctctgagtcgtgagaagcagcaggagctggtgcagaaggaggagagcac ggtgttcagccaggccatccactatgccaaccgcatgagctacctcctc ctgcccctggacagcagcaagagccgcctacttcgggagcgtgccgggc tgggcgacctggagagcgccagcaacagcctggtcaccaacagcatggc tggcagtgtggccgagagctatgacacggagagcggcttcgaggatgca gagacctgcgacgtagctggggctgtggtccgcttcatcaaccgctttg tggacaaggtctgcacggagagtggggtcaccagcgaccacctcaaggg gctgcatgtcatggtgccagacattgtccagatgcacatcgagaccctg gaggccgtgcagcgggagagccggaggctgccgcccatccagaagccca agctgctgcggccgcgcctgctgccgggtgaggagtgtgtgctggacgg
cctgcgcgtctacctgctgccggatgggcgtgaggagggcgcggggggc agtgctgggggaccagcattgctcccagctgagggcgccgtcttcctca ccacgtaccgggtcatcttcacggggatgcccacggaccccctggttgg ggagcaggtggtggtccgctccttcccggtggctgcgctgaccaaggag aagcgcatcagcgtccagacccctgtggaccagctcctgcaggacgggc tccagctgcgctcctgcacattccagctgctgaaaatggcctttgacga ggaggtggggtctgacagcgccgagctcttccgtaagcagctgcataag ctgcggtacccgccggacatcagggccacctttgcgttcaccttgggct ctgcccacacacctggccggccaccgcgagtcaccaaggacaagggtcc ttccctcagaaccctgtcccggaacctggtcaagaacgccaagaagacc atcgggcggcagcatgtcactcgcaagaagtacaacccccccagctggg agcaccggggccagccgccccctgaggaccaggaggacgagatctcagt gtcggaggagctggagcccagcacgctgaccccgtcctcagccctgaag ccctccgaccgcatgaccatgagcagcctggtggaaagggcttgctgtc gcgactaccagcgcctcggtctgggcaccctgagcagcagcctgagccg ggccaagtctgagcccttccgcatttctccggtcaaccgcatgtatgcc atctgccgcagctacccagggctgctgatcgtgccccagagtgtccagg acaacgccctgcagcgcgtgtcccgctgctaccgccagaaccgcttccc cgtggtctgctggcgcagcgggcggtccaaggcggtgctgctgcgctct ggaggcctgcatggcaaaggtgtcgtcggcctcttcaaggcccagaacg caccttctccaggccagtcccaggcggactcgagtagcctggagcagga gaagtacctgcaggctgtggtcagetccatgccccgctacgccgacgcg tcgggacgcaacacgcttagcggcttctcctcagcccacatgggcagtc acgttcccagccccagagccagggtcaccacgctgtccaaccccatggc
ggcctcggcctccagacggaccgcaccccgaggtaagtggggcagtgtc cggaccagtggacgcagcagtggccttggcaccgatgtgggctcccggc tagctggcagagacgcgctggccccaccccaggccaacgggggccctcc cgacccgggcttcctgcgtccgcagcgagcagccctctatatccttggg gacaaagcccagctcaagggtgtgcggtcagaccccctgcagcagtggg agctggtgcccattgaggtattcgaggcacggcaggtgaaggctagctt caagaagctgctgaaagcatgtgtcccaggctgccccgctgctgagccc agcccagcctccttcctgcgctcactggaggactcagagtggctgatcc agatccacaagctgctgcaggtgtctgtgctggtggtggagctcctgga ttcaggctcctccgtgctggtgggcctggaggatggctgggacatcacc acccaggtggtatccttggtgcagctgctctcagaccccttctaccgca cgctggagggctttcgcctgctggtggagaaggagtggctgtccttcgg ccatcgcttcagccaccgtggagctcacaccctggccgggcagagcagc ggcttcacacccgtcttcctgcagttcctggactgcgtacaccaggtcc acctgcagttccccatggagtttgagttcagccagttctacctcaagtt cctcggctaccaccatgtgtcccgccgtttccggaccttcctgctcgac tctgactatgagcgcattgagctggggctgctgtatgaggagaaggggg aacgcaggggccaggtgccgtgcaggtctgtgtgggagtatgtggaccg gctgagcaagaggacgcctgtgttccacaattacatgtatgcgcccgag gacgcagaggtcctgcggccctacagcaacgtgtccaacctgaaggtgt gggacttctacactgaggagacgctggccgagggccctccctatgactg ggaactggcccaggggccccctgaacccccagaggaagaacggtctgat ggaggcgctccccagagcaggcgccgcgtggtgtggccctgttacgaca gctgcccgcgggcccagcctgacgccatctcacgcctgctggaggagct
gcagaggctggagacagagttgggccaacccgctgagcgctggaaggac acctgggaccgggtgaaggctgcacagcgcctcgagggccggccagacg gccgtggcacccctagctccctccttgtgtccaccgcaccccaccaccg tcgctcgctgggtgtgtacctgcaggaggggcccgtgggctccaccctg agcctcagcctggacagcgaccagagtagtggctcaaccacatccggct cccgtcaggctgcccgccgcagcaccagcaccctgtacagccagttcca gacagcagagagtgagaacaggtcctacgagggcactctgtacaagaag ggggccttcatgaagccttggaaggcccgctggttcgtgctggacaaga ccaagcaccagctgcgctactacgaccaccgtgtggacacagagtgcaa gggtgtcatcgacttggcggaggtggaggctgtggcacctggcacgccc actatgggtgcccctaagactgtggacgagaaggccttctttgacgtga agacaacgcgtcgcgtttacaacttctgtgcccaggacgtgccctcggc ccagcagtgggtggaccggatccagagctgcctgtcggacgcctgagcc tcccagccctgcccggctgctctgcttccggtcgttaccgaccactagg ggtgggcagggccgccccggccatgtttacagccccggccctcgacagt attgaggccccgagcccccagcacttgtgtgtacagcccccgtccccgc cccgccccgcccggccggccctaacttattttggcgtcacagctgagca ccgtgccgggaggtggccaaggtacagcccgcaatgggcctgtaaatag tccggccccgtcagcgtgtgctggtccagccagcggctgcaggcgagtt tctagaaccagagtctatataaagagagaactaacgccacgctcctgtg cctgccttccccactccccggctgcctgctctcggcctacccagagggt cccatctgcccctatccaggcccacctggcgggaggttggcatctttct cgtgagcctctcctggtgcctgggtccacccagctcggcctgcatgtcc ctgggagtgactttgctctgggggcggatcgagcaggaggcttcactgg
ggacttgcttgattccctccacgcctcagggctggtctaggggccggca cggctggagaggaagcccccatccctacccaggggatgcagaagctgac ctcacagaggcttgggggtgaaagggtgggtggtcatttgaccccagaa ggctgttgcaggtccagaggacacttgaggtggacgtcagtttctggct agacccgagctgaagggatggaggccggaggcgggggggggggggggac agtgggctcccaggggaatgcaggttgaccacatctggctcctgccagg caacgagcagcatctggcagagtaaggggccaacgcccatgggggatgg accctctcagttcttgggaattctgccccaaaagtcctttccctggggt ctcagagggcccccgtccttcccttcttggtgtcactgtggcccctcac tgctcttttcctattcaaacctgagtcccaccaggcccagggcttcacc tgetgagetgttgtgtccttgcctgtgacgaggcctggccaggggtgca ggagcagaaggtggggagggttatagacgctgcaaaggccaagagaaca tctgagagtggcagctggtgacctggccagaggggctggtgaggggcag agaacctggctagaggctgggtccctcaggtggtcctctcaggtgggag gcgagcagcaggtgtgggtgaggggaaggttctgatgacagctgcagag gcagggcccagtgctggcaggtggggggccaagaccctcccctggtggg acgttgaagccaaggatggccttggaccctgtcaggcccagcatggtcc cgccacctcccccaccccacaggtggtgttgggacacctgggcgagatg tgagggtgggctcacttgagccactgaaaccagccaggtcttccctcag gccggacagatggcgcctgaccgaagttcctggcacctggaaaacccac aggtcagagtaaggggagaaaggaccctgccctccctgttccacgtctg tggggggagaggacaaatgccaggcacagggtaggcggcgagaacaagg cactcaatgtgtagctggggcagagactcggcctctggggagctgagcg ggttccctccacccccaaccgtggtggaaagacaagctcgctggggcgg
ggtgggggtctggtctccacctgcccctcccactcagccactgaggaca aggtggggcccaggcttctgggagggggagctggcacaaaaggaagtcc tggggttgatgtgtttgagcgttaggcgaagtggttccccccatccccc aaacggaaaaatgtcagtatttgctaagctgtagagacctgatgccgtg atgtggcctgttccgcctccacccattacacggggataacgctgggggg tggcgggcccacaaaagaggtgctggaggagactctcccacccctggcc gggccggggctttggggccggaaggttcacagtacgcggtttgtccgaa cgtcacggcttttattgggagttgggggtttggggtgccctgtcaggtg atcagaacattaaaaatggactcaacgtaaaaaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 665)
Lpmk
gccgtcagggccccagggagcgcggggcgccgctgctgctgttcttcgg ctcggttctgtctaccgggcagcgccggggccggcggctgcggcggcag aggaacaggagccgggagccgcgttccgccgagagttgggcagaggagc gcccgcgccccggcggcgtcatgggccccctccccgcgcttcagagggc accagccgcgggaacccccgggcctcctcgcgcccgagcctgagcgacc ctcgggttctccggcgccccctccctcgccctattttttttcctactct cgctgccgttaccgcttctgctctccgttatggcaacagagccaccatc ccccctccgggtcgaggcgccgggccccccagaaatgcggacctcaccg gcgatcgagtccacccctgagggcaccccgcagccggcgggcggcagac tccgcttcctcaacggctgcgtgcccctctcgcatcaggtggccgggca catgtacgggaaggacaaagtgggtatactgcaacatccagatggcaca gttttgaaacagttacaaccacctccaaggggcccaagagagctggaat tctataatatggtttatgctgctgactgttttgatggtgttcttctaga gctacgaaaatatttgccaaaatattatggcatctggtcacctcccact
NM 152230
NM 027184
gcaccaaacgatttatacctaaaactggaagatgtgacccataaattta ataagccctgtataatggatgtaaagatagggcaaaaaagctatgatcc ttttgcctcatctgagaagattcagcaacaggtcagcaagtacccatta atggaagagattgggttcttggtgcttggcatgagggtttatcatgttc attccgatagctatgagacagaaaaccagcattacggaagaagcttaac aaaagaaactataaaggatggagtctccagattttttcataatgggtac tgcttaagaaaagatgctgttgctgccagtattcagaagattgagaaaa ttctgcagtggtttgaaaaccagaagcagcttaatttttacgcaagttc attactctttgtttatgaaggttcatctcagccaaccactacaaaattg aatgacagaactttggcagaaaagtttttgtccaaaggacaactgtcag acacagaagtactagagtacaataataactttcatgtgttaagttccac agctaatggaaaaatagagtcttcagtgggcaaaagcttgtccaagatg tatgcgcgtcacaggaaaatatatacaaaaaagcatcacagtcagactt cattgaaagttgaaaatctggagcaagacaatgggtggaaaagcatgtc acaggaacatttaaatggaaatgtactttcccaactggaaaaagttttc taccatcttcccactggttgccaagagattgctgaagtagaagtgcgaa tgatagattttgctcatgtgttccctagcaacacaatagatgagggata tgtttatgggctaaagcatttaatttctgtacttcgaagtattttagac aattgaatcctctgttgcagtctttttaaggggtgggccaatcataatg aagaggggcagtcaatatctgcacctttaatgctatgtaaaaaatttgt attatgagtcgacattttatttgtctttatacttttggaagaatggtta acttttttataatcttactcaggaaaactaactatttgttcattagaaa actatgaagaataaagaaacttaggaatgttaagcagggaatgtggtgg tacatggcttaaacatcttttttggctcaagcaaaatgcaaaccattat
tcagtcattaagagtttagttagctttctgtagccaattcatgaaatct ctgtccacccagccttgacaatgagccatatctaaaatattacattatt agaacacctaccaaaatctcgaaagcacaggttgatgtccttagtattg ctatgtatgaagttactaaaactggagaaaattctacttcagaaataag tactgtttaggttttatattaaaagttcagaccagcatatcaaagggtg ctccttagtgaaatgatttagaattgttgcattccaaaagcaggttttc tctttaatttttacatctctctctcaaaatattatacttcatgaaaaag acaattgatgtggatgacaacaacaaagtcttgaaattaagggcacact aattgtccttactggggttaggggaagagagatattattttcaaggaac aaaatattttcctttacaatctttcattcatgagaaaattggaatataa atttattacattgtgaaagtatcataaaccatatacctttgtatctaaa tgcagcttcaaaaaagtaaataattgaagttttatttctcctctaaata acttgaatttttttctttaaaaatttatgtatttatatgtccccattta gttaagtggtagtgtaaatgtatgttgttaaaaacagtttctcagaatt atagtaagcaatgaaagacaatatctaattaggttgttatcaaaaatac tgtgtgtaaattagtccgtaatatagggtttggtgcgtatctatattca tgcttctatttcactcttcctcaaaacagttttatattatgttgaccag tgaaattgtaacttaatttcatggggacaggggcagtgctacagttcct ggaaaaattagatttgtattatctttgtttcacacccaccaccttaaaa aaaaatcaactagttatttgtcatttaaaacatttaaaactttgagtct tcaaatacatttgatgttaatgctgccattacttgcacttccattcact aataacatttctaggtagttatcagttttgtcatattcctggaaaatat tttggggttgtaaattctttctcctctttttcttctggagttacaaatt gaatttttaaatccgagcacctttattgtggtgtggagaaaattatcac
aattttatgtttattttaccttctcagccttctctgagggcactttgca aatacctgagtccaaacagaagtaccaactaaatgctctatgaactcta tccttagtaaatctattaaacctgaataatttaaaagatcatgttcatt ttgtaatagcaaaatttgattttaattttttatttagaattggtgtatt tatcatagggacttccaatttttcttcactttttgaatggatattggct atagttttatgttttaacgggaatgaatttcaagtcataataatcagaa tttttagttttacttttttcttttacaatatggattttgttgttatttg gatagtggttcaataaatcttaagctcagataattaaacactattttga atcttaacaagatactgaggctttttttgtatgggatgatatcaaccta tgtacaatgaatttaataaacttaagtattgtcagattttttgcacatt ttagctcaataaaatcttaatgttcaagatttttttatctgcatttgga aatacaattttgtaaaatcaatgtcttacctttttgatacaatagatca tgttttgtttttaataaagcaagaagcccttttatctgttgtttttcag ggaagggattaacatttaattctgtttgtttacatttgttatcattgtt atccaatgctcattttatgttgctttataagtaggcttaggtataacag aataagtatctgtttatctaatctacatgtgactatcttagtctctctc ggtcacttaatattatgctgaaatttaccactgtggggatgaatgatcg ctattcaccaagtatatttgaacatgtaaatgcttaagaaataagcata atgcggatatagtttgggttaataggattctcatagttttttttcccct atgaaacataagtaatgattttagtgtatttcttatggaatacactcat ttaaaaaggactttaagaaattgtggatgtgaataatacctttctctaa taaaaatttaaattgtataatagttttataatatttacattaattgata ttttaatatggatagacattgcatagattcaaataaattaaaatcaatg ataaatgctaaatattttatctaaatagtttttcaagaaacagttatgg
aaatgtgtatattaaatggctctaatgtggagcttgtggtatttcaact cagtattcattattagttgtgtgtctggaaagattgtacttacttttcc tctttacactacagtttgctcttatggggctctaaactgtttaactgaa gaaccttcgtctgtattttgattgagcataatttagtattttatgattt ccaagatgatgttcttatgtctatcaagtctatgtatcaaatttataac atcatttaagaaaaaggaatttccacagatacttcagttgcaatttttt gtttcatgctactgaaaatacatttgtttctaggggttggaatattata gaagatgtaggatgaaagaaaacgatagaacaacgaaagaattctgttt atgaaattacaggaattgtgtccactatggtaaagcattgtcattttag tacattttctcttagtagtttggcattttatactttaaaacttgttttg ctttaaaaattgtttataatgcttaccttctttctccagtgcctttagt cttgatttgatatgtttgtaccctcagttaccctttctattacatgttt ttgatgttttcatagcctaggaaacatcgattcctttttaataattgtc aatctgattatttaaagaggtaacaattatctgttaatgctttggaaaa acaagtagggttgcctttggaggccaggcttcttagttcattcaaaaat attccttggatttatgccatgtattaagcatttttagcccccagtatta caactgtgaaccaaacggataaggccctaaccattttcagcattctctt tggatggggtgggattggggacttaattaaaatagagatatagaaaaat aggcatctaaataagataataagtgtggggttgaaatgaagcatctaac aatagttgaagttagaagtaatattttacagtattgtaacctctattta agtttgggtattagttacagatagcataaaaaagccttaatttttcact ttccttgctggcaaaggtacatttatttagactgtccatttaaagtaat gtttaacataaacattactgtgaaaaacattccattacatattcccaag caaatgagctgcatcttctttactgtattttacaatttagtacaacagt
tttaggcctcaatcttaacatcactggtattttaaatttggcaatgaat atgaaattacttttgacttacagattgattatattattactttgaaaat gcattaatttcttagaaaagtttggagcctctatctttttttgagttaa tacttaaattctcattacttatattaatagcctgtactaagtgaaaata ttatttatgcaagtaaacaagtcactataggcttttaagacttttcttt aattttagattttgtcatcaaagtttaaattttttacctactgtccact taaatataatttaacagtttgtaaagtgaaatagttttaagtatgatgt atgatgcacctgcatataaatgaaaatggcgtgcacaaagacactttac tatgggaactgtactggaagatttatgaaagcatgtgaaattgcaccta aaattgtgttattagtgactataagcagcaatgctaaatttattgtact tgatgaatgaatgtatttagtcacagttactttggtttaaatgtataaa tgtctttagggtttttttttaaatgtgtttgtaatttgtactattgtgg gggtatacttggactgcaggggttattgtcaatgtgtgatttgtgtttt tattttatagaatcatctaatgtgatataccaatttttataagtgatat ttacataattctaataactgtatatttgacaacctattaaaatgttttg cattggaa (SEQ ID NO: 666)
Rockl
gctggttccccttccgagcgtccgcgccccgcatgcgcagtctgccccg gcggtctccgtttgtttgaacaggaaggcggacatattagtccctctca gcccccctcgccccaccccccaggcattcgccgccgcgactcgcccttt ccccggctgggaccgcagcccctcccagaagctcccccatcagcagccg ccgggacccaactatcgtcttcctcttcgcccgctctccagcctttcct ctgctaagtctccatcgggcatcgacctcgccctgccccaccggacacc gtagcagcagccccagcagcgacgggacaaaatgggagagtgaggctgt cctgcgtggaccagctcgtggccgagactgatcggtgcgtcgggccggg
NM 005406
NM 009071
ccgagtagagccggggacgcggggctagaccgtctacagcgcctctgag cggagcgggcccggcccgtggcccgagcggcggccgcagctggcacagc tcctcacccgccctttgctttcgcctttcctcttctccctcccttgttg cccggagggagtctccaccctgcttctctttctctacccgctcctgccc atctcgggacggggacccctccatggcgacggcggccggggcccgctag actgaagcacctcgccggagcgacgaggctggtggcgacggcgctgtcg gctgtcgtgaggggctgccgggtgggatgcgactttgggcgtccgagcg gctgtgggtcgctgttgcccccggcccggggtctggagagcggaggtcc cctcagtgaggggaagacgggggaaccgggcgcacctggtgaccctgag gttccggctcctccgccccgcggctgcgaacccaccgcggaggaagttg gttgaaattgctttccgctgctggtgctggtaagagggcattgtcacag cagcagcaacatgtcgactggggacagttttgagactcgatttgaaaaa atggacaacctgctgcgggatcccaaatcggaagtgaattcggattgtt tgctggatggattggatgctttggtatatgatttggattttcctgcctt aagaaaaaacaaaaatattgacaactttttaagcagatataaagacaca ataaataaaatcagagatttacgaatgaaagctgaagattatgaagtag tgaaggtgattggtagaggtgcatttggagaagttcaattggtaaggca taaatccaccaggaaggtatatgctatgaagcttctcagcaaatttgaa atgataaagagatctgattctgcttttttctgggaagaaagggacatca tggcttttgccaacagtccttgggttgttcagcttttttatgcattcca agatgatcgttatctctacatggtgatggaatacatgcctggtggagat cttgtaaacttaatgagcaactatgatgtgcctgaaaaatgggcacgat tctatactgcagaagtagttcttgcattggatgcaatccattccatggg ttttattcacagagatgtgaagcctgataacatgctgctggataaatct
ggacatttgaagttagcagattttggtacttgtatgaagatgaataagg aaggcatggtacgatgtgatacagcggttggaacacctgattatatttc ccctgaagtattaaaatcccaaggtggtgatggttattatggaagagaa tgtgactggtggtcggttggggtatttttatacgaaatgcttgtaggtg atacacctttttatgcagattctttggttggaacttacagtaaaattat gaaccataaaaattcacttacctttcctgatgataatgacatatcaaaa gaagcaaaaaaccttatttgtgccttccttactgacagggaagtgaggt tagggcgaaatggtgtagaagaaatcaaacgacatctcttcttcaaaaa tgaccagtgggcttgggaaacgctccgagacactgtagcaccagttgta cccgatttaagtagtgacattgatactagtaattttgatgacttggaag aagataaaggagaggaagaaacattccctattcctaaagctttcgttgg caatcaactaccttttgtaggatttacatattatagcaatcgtagatac ttatcttcagcaaatcctaatgataacagaactagctccaatgcagata aaagcttgcaggaaagtttgcaaaaaacaatctataagctggaagaaca gctgcataatgaaatgcagttaaaagatgaaatggagcagaagtgcaga acctcaaacataaaactagacaagataatgaaagaattggatgaagagg gaaatcaaagaagaaatctagaatctacagtgtctcagattgagaagga gaaaatgttgctacagcatagaattaatgagtaccaaagaaaagctgaa caggaaaatgagaagagaagaaatgtagaaaatgaagtttctacattaa aggatcagttggaagacttaaagaaagtcagtcagaattcacagcttgc taatgagaagctgtcccagttacaaaagcagctagaagaagccaatgac ttacttaggacagaatcggacacagctgtaagattgaggaagagtcaca cagagatgagcaagtcaattagtcagttagagtccctgaacagagagtt gcaagagagaaatcgaattttagagaattctaagtcacaaacagacaaa
gattattaccagctgcaagctatattagaagctgaacgaagagacagag gtcatgattctgagatgattggagaccttcaagctcgaattacatcttt acaagaggaggtgaagcatctcaaacataatctcgaaaaagtggaagga gaaagaaaagaggctcaagacatgcttaatcactcagaaaaggaaaaga ataatttagagatagatttaaactacaaacttaaatcattacaacaacg gttagaacaagaggtaaatgaacacaaagtaaccaaagctcgtttaact gacaaacatcaatctattgaagaggcaaagtctgtggcaatgtgtgaga tggaaaaaaagctgaaagaagaaagagaagctcgagagaaggctgaaaa tcgggttgttcagattgagaaacagtgttccatgctagacgttgatctg aagcaatctcagcagaaactagaacatttgactggaaataaagaaagga tggaggatgaagttaagaatctaaccctgcaactggagcaggaatcaaa taagcggctgttgttacaaaatgaattgaagactcaagcatttgaggca gacaatttaaaaggtttagaaaagcagatgaaacaggaaataaatactt tattggaagcaaagagattattagaatttgagttagctcagcttacgaa acagtatagaggaaatgaaggacagatgcgggagctacaagatcagctt gaagctgagcaatatttctcgacactttataaaacccaggtaaaggaac ttaaagaagaaattgaagaaaaaaacagagaaaatttaaagaaaataca ggaactacaaaatgaaaaagaaactcttgctactcagttggatctagca gaaacaaaagctgagtctgagcagttggcgcgaggccttctggaagaac agtattttgaattgacgcaagaaagcaagaaagctgcttcaagaaatag acaagagattacagataaagatcacactgttagtcggcttgaagaagca aacagcatgctaaccaaagatattgaaatattaagaagagagaatgaag agctaacagagaaaatgaagaaggcagaggaagaatataaactggagaa ggaggaggagatcagtaatcttaaggctgcctttgaaaagaatatcaac
actgaacgaacccttaaaacacaggctgttaacaaattggcagaaataa tgaatcgaaaagattttaaaattgatagaaagaaagctaatacacaaga tttgagaaagaaagaaaaggaaaatcgaaagctgcaactggaactcaac caagaaagagagaaattcaaccagatggtagtgaaacatcagaaggaac tgaatgacatgcaagcgcaattggtagaagaatgtgcacataggaatga gcttcagatgcagttggccagcaaagagagtgatattgagcaattgcgt gctaaacttttggacctctcggattctacaagtgttgctagttttccta gtgctgatgaaactgatggtaacctcccagagtcaagaattgaaggttg gctttcagtaccaaatagaggaaatatcaaacgatatggctggaagaaa cagtatgttgtggtaagcagcaaaaaaattttgttctataatgacgaac aagataaggagcaatccaatccatctatggtattggacatagataaact gtttcacgttagacctgtaacccaaggagatgtgtatagagctgaaact gaagaaattcctaaaatattccagatactatatgcaaatgaaggtgaat gtagaaaagatgtagagatggaaccagtacaacaagctgaaaaaactaa tttccaaaatcacaaaggccatgagtttattcctacactctaccacttt cctgccaattgtgatgcctgtgccaaacctctctggcatgtttttaagc caccccctgccctagagtgtcgaagatgccatgttaagtgccacagaga tcacttagataagaaagaggacttaatttgtccatgtaaagtaagttat gatgtaacatcagcaagagatatgctgctgttagcatgttctcaggatg aacaaaaaaaatgggtaactcatttagtaaagaaaatccctaagaatcc accatctggttttgttcgtgcttcccctcgaacgctttctacaagatcc actgcaaatcagtctttccggaaagtggtcaaaaatacatctggaaaaa ctagttaaccatgtgactgagtgccctgtggaatcgtgtgggatgctac ctgataaaccaggcttctttaaccatgcagagcagacaggctgtttctt
tgacacaaatatcacaggcttcagggttaagattgctgtttttctgtcc ttgctttggcacaacacactgagggttttttttattgcgggtttgccta caggtagattagattaattattactatgtaatgcaagtacagttggggg aaagcttaggtagatatattttttttaaaaggtgctgcctttttggatt tataagaaaatgcctgtcagtcgtgatagaacagagttttcctcatatg agtaagaggaagggactttcactttcaagtggaacagccatcactatca agatcagctcatggaaggagtaaagaaaatatctcaaaatgagacaaac tgaagttttgttttttttttaatgacttaagtttttgtgctcttgcaag actatacaaaactattttaagaaagcagtgatatcacttgaacttcagt gccctcactgtagaatttaaaagccttactgttgattgcccatgttgga cttgatggagaaattaaatatctttcattatgctttacaaaatactgta tatgtttcagcaagtttggggaatgggagaggacaaaaaaaagttacat ttaatctatgcatttttgccaagccatattgagttattttactactaga gacattaggaaactaactgtacaaaagaaccaagtttaaaagcattttg tggggtacatcatttctataattgtataatgtatttctttgtggtttta aatgataaagacattaagttaacaaacatataagaaatgtatgcactgt ttgaaatgtaaattattcttagaacactttcaatgggggttgcattgtc cttttagtgccttaatttgagataattattttactgccatgagtaagta tagaaatttcaaaaaatgtattttcaaaaaattatgtgtgtcagtgagt ttttcattgataattggtttaatttaaaatatttagaggtttgttggac tttcataaattgagtacaatctttgcatcaaactacctgctacaataat gactttataaaactgcaaaaaatgtagaaggttgcaccaacataaaaag gaaatatggcaatacatccatgatgttttccagttaacataggaattac cagataaatactgttaaactcttgtccagtaacaagagttgattcatat
ggacagtatgatttattgtttatttttttaaccaaatacctcctcagta
atttataatggctttgcagtaatgtgtatcagataagaagcactggaaa
accgatcgtctctaggatgatatgcatgtttcaagtggtattgaaagcc
gcactgatggatatgtaataataaacatatctgttattaatatactaat
gactctgtgctcatttaatgagaaataaaagtaatttatggatgggtat
ctttaatttttactgcaatgtgttttctcatggctgaaatgaatggaaa
acatacttcaaattagtctctgattgtatataaatgtttgtgaaattcc
atggttagattaaagtgtatttttaaaagataaaa (SEQ ID NO:
667)
Stkl7b
gaacggcgatgccccagacgcggctgcagttttcaaaccgcgactgcaa gcttcggtagtcctctccgctgctgtcgccaggagtcacttcacgagaa gccaggtcacaaccgtcggcccttgtctggaaaagtaaaagtggatcct gccacgttcggagctccctggcgcctcgcccggctggagctagagaact cgtcctgtggcggcccccggcgtggggcgggacagcggccccctggagg gggcagtcccgggagaacctgcggcggccggagcggtaaaaataagtga ctaaagaagcagacctgggaatcacctaacatgtcgaggaggagatttg attgccgaagtatttcaggcctactaactacaactcctcaaattccaat aaaaatggaaaactttaataatttctatatacttacatctaaagagcta gggagaggaaaatttgctgtggttagacaatgtatatcaaaatctactg gccaagaatatgctgcaaaatttctaaaaaagagaagaagaggacagga ttgtcgagcagaaattttacacgagattgctgtgcttgaattggcaaag tcttgtccccgtgttattaatcttcatgaggtctatgaaaatacaagtg aaatcattttgatattggaatatgctgcaggtggagaaattttcagcct gtgtttacctgagttggctgaaatggtttctgaaaatgatgttatcaga
NM 004226
NM 133810
ctcattaaacaaatacttgaaggagtttattatctacatcagaataaca ttgtacaccttgatttaaagccacagaatatattactgagcagcatata ccctctcggggacattaaaatagtagattttggaatgtctcgaaaaata gggcatgcgtgtgaacttcgggaaatcatgggaacaccagaatatttag ctccagaaatcctgaactatgatcccattaccacagcaacagatatgtg gaatattggtataatagcatatatgttgttaactcacacatcaccattt gtgggagaagataatcaagaaacatacctcaatatttctcaagttaatg tagattattcggaagaaactttttcatcagtttcacagctggccacaga ctttattcagagccttttagtaaaaaatccagagaaaagaccaacagca gagatatgcctttctcattcttggctacagcagtgggactttgaaaact tgtttcaccctgaagaaacttccagttcctctcaaactcaggatcattc tgtaaggtcctctgaagacaagacttctaaatcctcctgtaatggaacc tgtggtgatagagaagacaaagagaatatcccagaggatagcagcatgg tttccaaaagatttcgtttcgatgactcattacccaatccccatgaact tgtttcagatttgctctgttagcacttttttctttgactcatttggact gaatttgaaattttatatccactccagtgagattatgatttgtagettc atatatgacatgtttatattgtaaatgcacttttccatggaataattta gggaagtgttttaatgttaaattactagttgctagcatgttatgatttc atatcctgagatagctctgcagataagaaaatatttaaatatatgacaa aaagtaaaattgtacatgtgagtttacatgttaatgaaataattcaact tcaaatgaacttaccagaatgttttgcatatcaacaaaaaaagtggctt gagttttattatagttggtgtaaactgaacacagtgaagacattggaat ttaataggttctctctctaaggtgactcttataccatgcctctatcaac ataatttgtttaggaaagcagtatgaagtttaagccaaaataatttcta
ctttatagatgctcaagagacattttacaattgaaaatgtctttcaatt acaaatattttgaaacttcgtaagattttcattctctgtggtctgttat atgagagagatcctttaactagagcaaagagggagttagaaacctgatc agggatattctttacaagttggagcagaggaaagagtagcatgccttcg tattttaacgcaaatgtctttttcctcctcccaacctacttgagatctg ataaggtctggaagatggagatatttggtatgcaagtgtagagtttttt aatcctccagaatttctagagtagaagatacttaggtatagttaaatat tctgtatttttagtcaaacatatttattaattgaatatagaagaaaatg ttgacacactcagacagcttactgaattttagatgtcttctgcatctta gaatacaagccagtcattcagagttctaaaagtatgcataaaaaattac agcaccggtaggtctattaacacagtgcccgagtcagcggtagcaagac tgatgtgatcataaaacatgacatcaggctcgtctgaagttcttgtgtg aaattcctagtgagtgaggaggctcagcttaaagccatctgcagagtgg cccctcattgtggtcttttgctgggaccaatgcaagagactagggagag caaaatgtttgcttatggctagagactatatccagccctaatgatgggg aaagttagtccttttcgggtaatcttttatgaattttcacctgatgacc gttatattggtctgttatcatgttacgataactgtgatctcatgaccat gttgctgtatcagaagaaatagtttgacaaatggtaacaacaacctgat gttccccctttagacctttaacttctcaaaattttggtaagtttccaaa ttctttaataataacttaaaactttttgaataactatcaggtcacttta tttgaccacatggtgaattcctttaatgtcttcagcatttgttaaggaa aagttttctctacttgtgtgtgtatgtgtgcacatgtgtgtatgtacag gtgtatgtatatatctatagatagatacaatacattctttagacacttt tcaagattctttgctgtggtatattgtgctcaactcaggtgccaaagga
gctttttttttttttttttttttttgagatggagttttgctctgtctct caggctggagtgcagtggcatgatctcagctcacggcaacctctgcctc ccgggttcaagcaattctcctgtctcagcctcctgagtagttgggatta caggcgcatgccaccgtgcccagctaatttttgtatttttagtagagac ggggtttcaecatgttggccaggctggtcacaaactcctgacttcaagt gatccacccgcctcggcctcccaaagtgctgggattacaggcgtgagcc actgcgcccccgcccaggagctcttttcttatgacatataaattatgac atttatattctttatatgactttatgttctcttcttatgacatttaaat tctttaagtagtttgttggtccaataaactagacgttgtataatctaaa ttgagcccttgtatatctaaaactgatgagttgtttctaaattgttgat tgtccatttacttgcctttggtattaagataatgcaagtaaagtttagt aagtcattggataatgaaatgattatgtttctgaagaccatattatatt tttaatttttagaggaatcatgccatcccccaaaaaatcaagaaatatt tgaattttaaattataagttcatttgttaaaagacatttttacaaatgt ctgaaaatcttaaaatactttacatctacctttaagtagtagaatacag agctgtaaatttccatgccttttttcctgatattaagttttatagtaaa aaagcaactagtgattgcacaaagaatataaaaatccactctttttaca aaggtgtgaatttaaataacgttattgattggaatatgaaaatagacca atcatttaagagctttttagcaaatgattcaattcttactctttttctc ccaagattgaaaagcataatgtatttctctaaagtaggaatctagagag cccctgtgagtggacaaatgtcagtaacacttgaacacatgagaagata agtgttatgttgtgataatttaaagttaaatttgctttttgggtaggat ccctaaatagatgggatttttaaatagatgatatatagatgacaattgc aattgtcattttaattattttccctacagtaaagaacctagctctgagc
agtgaaattgtaatggcactttaaaggaagtaagccgttaactgttctc tagtggagcgatctccaactgttttggcactagggacgggttttgtgga agaaaatttttccacaggactgggggtttagggggatggtttcaggatg attcaagtacattacatttatcattagattctcataaggagcatgcaac ctagatctcttgcacgtgtggttcacagcaggattcgagctcctttgag aatctaatgccatggctgatctaacaggaaactgagctcaggcagtaat gcttggcaccgccccccaccttctatgcagcccggtcgtggcctgggga ctggggacccctgctctagtcagtaataaggtacttgtgccagaatata aatcaacacattgcttcctttatcaaagaagtcttgttatttaaaaaaa gtcaactgagccagtatgattagtgatgtaattgattttcattctggca caagcctctttcattctggacagctcacaaatagttaatggaccatgct ttgaatagccttcctctaagcaacatttataaatactgatattttagaa ctgtttacatttcttctgtttatttttgaattttcagtttgatatcttg tccttattcattgttgtataaacaactgtactttaatttcaagtagtat taaaagtatttcacttcagtttggggggattattatcaatttataattt tataaaagtattttaaagaataattgtaaattttccataaattacaact tcctgccatattttattaaataataatcttgcttaaggcatatagacag acattattatgagtattccagtaaaaaaaatctacatcaacttgaccat tctggctaaaaattaaaaagcacttttttatatctgtggttgtcatttg tttcaaagcatttctaaatttattgttcttaaaagtatgtctgcatgtt ctagcctttgacctaggtcatctatgaaccctctttgtgtctaataaac atatctgtaaaggcaaaaaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 668)
Mast2
taggcaggcggctgagccggcggcgggtggcctgcccaacgtgtgctgg gtgggagaaggcgaggcgtcagcgatgctgtctcttccgtgaggagcgc
NM 015112
NM 001042743
agaggaggtcgcggcgccggaggccccagaaggctcgaaggcgccgcgg gctggggtcggtggcttagggagcccgtccggccatggtggccgcgggt ggtggttggcgcggctgcgctgcggcccggggcagtgcggagccgggac agtcgcggcgctgacgcccgcgggccccagctgcagatatgaagcggag ccgctgccgcgaccgaccgcagccgccgccgcccgaccgccgggaggat ggagttcagcgggcagcggagctgtctcagtctttgccgccgcgccggc gagcgccgcccgggaggcagcggctggaggagcggacgggccccgcggg gcccgagggcaaggagcaggatgtagtaactggagttagtcccctgctc ttcaggaaactcagtaatcctgacatattttcatccactggaaaagtta aacttcagcgacaactgagtcaggatgattgtaagttatggagaggaaa cctggccagctctctatcgggtaagcagctgctccctttgtccagcagt gtacatagcagtgtgggacaggtgacttggcagtcgtcaggagaagcat caaacctggttcgaatgagaaaccagtcccttggacagtctgcaccttc tcttactgetggcctgaaggagttgagccttccaagaagaggcagcttt tgtcggacaagtaaccgcaagagcttgattgtgacctctagcacatcac ctacactaccacggccacactcaccactccatggccacacaggtaacag tcctttggacagcccccggaatttctctccaaatgcacctgctcacttt tcttttgttcctgcccgtaggactgatgggcggcgctggtctttggcct ctttgccctcttcaggatatggaactaacactcctagctccactgtctc atcatcatgctcctcacaggaaaagctgcatcagttgcctttccagcct acagctgatgagctgcactttttgacgaagcatttcagcacagagagcg taccagatgaggaaggacggcagtccccagccatgcggcctcgctcccg gagcctcagtcccggacgatccccagtatcctttgacagtgaaataata atgatgaatcatgtttacaaagaaagattcccaaaggccaccgcacaaa
tggaagagcgactagcagagtttatttcctccaacactccagacagcgt getgcccttggcagatggagccctgagctttatteatcatcaggtgatt gagatggcccgagactgcctggataaatctcggagtggcctcattacat cacaatacttctacgaacttcaagataatttggagaaacttttacaaga tgctcatgagcgctcagagagctcagaagtggcttttgtgatgcagctg gtgaaaaagctgatgattatcattgcccgcccagcacgtctcctggaat gcctggagtttgaccctgaagagttctaccaccttttagaagcagctga gggccacgccaaagagggacaagggattaaatgtgacattccccgctac atcgttagccagctgggcctcacccgggatcccctagaagaaatggccc agttgagcagctgtgacagtcctgacactccagagacagatgattctat tgagggccatggggcatctctgccatctaaaaagacaccctctgaagag gacttcgagaccattaagctcatcagcaatggcgcctatggggctgtat ttctggtgcggcacaagtccacccggcagcgctttgccatgaagaagat caacaagcagaacctgatcctacggaaccagatccagcaggccttcgtg gagcgtgacatactgactttcgctgagaacccctttgtggtcagcatgt tctgctcctttgataccaagcgccacttgtgcatggtgatggagtacgt tgaagggggagactgtgccactctgctgaagaatattggggccctgcct gtggacatggtgcgtctatactttgcggaaactgtgctggccctggagt acttacacaactatggcatcgtgcaccgtgacctcaagcctgacaacct cctaattacatccatggggcacatcaagctcacggactttggactgtcc aaaattggcctcatgagtctgacaacgaacttgtatgagggtcatattg aaaaggatgcccgggaattcctggacaagcaggtatgcgggaccccaga atacattgcgcctgaggtgatcctgcgccagggctatgggaagccagtg gactggtgggccatgggcattatcctgtatgagttcctggtgggctgcg
tccctttttttggagatactccggaggagctctttgggcaggtgatcag tgatgagattgtgtggcctgagggtgatgaggcactgcccccagacgcc caggacctcacctccaaactgctccaccagaaccctctggagagacttg gcacaggcagtgcctatgaggtgaagcagcacccattctttactggtct ggactggacaggacttctccgccagaaggctgaatttattcctcagttg gagtcagaggatgatactagctattttgacacccgctcagagcgatacc accacatggactcggaggatgaggaagaagtgagtgaggatggctgcct tgagatccgccagttctcttcctgctctccaaggttcaacaaggtgtac agcagcatggagcggctctcactgctcgaggagcgccggacaccacccc cgaccaagcgcagcctgagtgaggagaaggaggaccattcagatggcct ggcagggctcaaaggccgagaccggagctgggtgattggctcccctgag atattacggaagcggctgtcggtgtctgagtcatcccacacagagagtg actcaagccctccaatgacagtgcgacgccgctgctcaggcctcctgga tgcgcctcggttcccggagggccctgaggaggccagcagcaccctcagg aggcaaccacaggagggtatatgggtcctgacacccccatctggagagg gggtatctgggcctgtcactgaacactcaggggagcagcggccaaagct ggatgaggaagctgttggccggagcagtggttccagtccagctatggag acccgaggccgtgggacctcacagctggctgagggagccacagccaagg ccatcagtgacctggctgtgcgtagggcccgccaccggctgctctctgg ggactcaacagagaagcgcactgctcgccctgtcaacaaagtgatcaag tccgcctcagccacagccctctcactcctcattccttcggaacaccaca cctgctccccgttggccagccccatgtccccacattctcagtcgtccaa cccatcatcccgggactcttctccaagcagggacttcttgccagccctt ggcagcatgaggcctcccatcatcatccaccgagctggcaagaagtatg
gcttcaccctgcgggccattcgcgtctacatgggtgactccgatgtcta caccgtgcaccatatggtgtggcacgtggaggatggaggtccggccagt gaggcagggcttcgtcaaggtgacctcatcacccatgtcaatggggaac ctgtgcatggcctggtgcacacggaggtggtagagctgatcctgaagag tggaaacaaggtggccatttcaacaactcccctggagaacacatccatt aaagtggggccagctcggaagggcagctacaaggccaagatggcccgaa ggagcaagaggagccgcggcaaggatgggcaagaaagcagaaaaaggag ctccctgttccgcaagatcaccaagcaagcatccctgctccacaccagc cgcagcctttcttcccttaaccgctccttgtcatcaggggagagtgggc caggctctcccacacacagccacagcctttccccccgatctcccactca aggctaccgggtgacccccgatgctgtgcattcagtgggagggaattca tcacagagcagctcccccagctccagcgtgcccagttccccagccggct ctgggcacacacggcccagctccctccacggtctggcacccaagctcca acgccagtaccgctctccacggcgcaagtcagcaggcagcatcccactg tcaccactggcccacaccccttctcccccacccccaacagcttcacctc agcggtccccatcgcccctgtctggccatgtagcccaggcctttcccac aaagcttcacttgtcacctcccctgggcaggcaactctcacggcccaag agtgcggagccaccccgttcaccactactcaagagggtgcagtcggctg agaaactggcagcagcacttgccgcctctgagaagaagctagccacttc tcgcaagcacagccttgacctgccccactctgaactaaagaaggaactg ccgcccagggaagtgagccctctggaggtagttggagccaggagtgtgc tgtctggcaagggggccctgccagggaagggggtgctgcagcctgctcc ctcacgggccctaggcaccctccggcaggaccgagccgaacgacgggag tcgctgcagaagcaagaagccattcgtgaggtggactcctcagaggacg
acaccgaggaagggcctgagaacagccagggtgcacaggagctgagctt ggcacctcacccagaagtgagccagagtgtggcccctaaaggagcagga gagagtggggaagaggatcctttcccgtccagagaccctaggagcctgg gcccaatggtcccaagcctattgacagggatcacactggggcctcccag aatggaaagtcccagtggtccccacaggaggctcgggagcccacaagcc attgaggaggctgccagctcctcctcagcaggccccaacctaggtcagt ctggagccacagaccccatccctcctgaaggttgctggaaggcccagca cctccacacccaggcactaacagcactttctcccagcacttcgggactc acccccaccagcagttgctctcctcccagctccacctctgggaagctga gcatgtggtcctggaaatcccttattgagggcccagacagggcatcccc aagcagaaaggcaaccatggcaggtgggctagccaacctccaggatttg gaaaacacaactccagcccagcctaagaacctgtctcccagggagcagg ggaagacacagccacctagtgcccccagactggcccatccatcttatga ggatcccagccagggctggctatgggagtctgagtgtgcacaagcagtg aaagaggatccagccctgagcatcacccaagtgcctgatgcctcaggtg acagaaggcaggacgttccatgccgaggctgccccctcacccagaagtc tgagcccagcctcaggaggggccaagaaccagggggccatcaaaagcat cgggatttggcattggttccagatgagcttttaaagcaaacatagcagt tgtttgccatttcttgcactcagacctgtgtaatatatgctcctggaaa ccatcaaaaaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 669)
Pdpl
agagtgggcaggccgggggtgagggctcgcgctccgggagctgcacggg gctgcgtggaaagagcgccgagcggtggcgtcgttgtcgccccctcctc gtcgggaagaatcgtttggtctcctgccgtgcccggttcgtattcccta ctccctgccacgagccgccccgtccgggatcctccacccgtccaaagtt
NM 001161779
NM 001098231
gtgagggggcgccgggcgtgctcgcggatcggcggccgcgggcgtgcgg agggctggacgagccctggagcgccaggagaatgtgtgtgtgtcccggg cccagacgaattggaatcccagtcagaagttccagcctgccactgttct ctgatgccatgccagcaccaactcaactgttttttcctctcatccgtaa ctgtgaactgagcaggatctatggcactgcatgttactgccaccacaaa catctctgttgttcctcatcgtacattcctcagagtcgactgagataca cacctcatccagcatatgctaccttttgcaggccaaaggagaactggtg gcagtacacccaaggaaggagatatgcttccacaccacagaaattttac ctcacacctccacaagtcaatagcatccttaaagctaatgaatacagtt tcaaagtgccagaatttgacggcaaaaatgtcagttctatccttggatt tgacagcaatcagctgcctgcaaatgcacccattgaggaccggagaagt gcagcaacctgcttgcagaccagagggatgcttttgggggtttttgatg gccatgcaggttgtgcttgttcccaggcagtcagtgaaagactctttta ttatattgctgtctctttgttaccccatgagactttgctagagattgaa aatgcagtggagagcggccgggcactgctacccattctccagtggcaca agcaccccaatgattactttagtaaggaggcatccaaattgtactttaa cagcttgaggacttactggcaagagcttatagacctcaacactggtgag tcgactgatattgatgttaaggaggctctaattaatgccttcaagaggc ttgataatgacatctccttggaggcgcaagttggtgatcctaattcttt tctcaactacctggtgcttcgagtggcattttctggagccactgcttgt gtggcccatgtggatggtgttgaccttcatgtggccaatactggcgata gcagagccatgctgggtgtgcaggaagaggacggcteatggtcagcagt cacgctgtctaatgaccacaatgctcaaaatgaaagagaactagaacgg ctgaaattggaacatccaaagagtgaggccaagagtgtcgtgaaacagg
atcggctgcttggcttgctgatgccatttagggcatttggagatgtaaa gttcaaatggagcattgaccttcaaaagagagtgatagaatctggccca gaccagttgaatgacaatgaatataccaagtttattcctcctaattatc acacacctccttatctcactgctgagccagaggtaacttaccaccgatt aaggccacaggataagtttctggtgttggctactgatgggttgtgggag actatgcataggcaggatgtggttaggattgtgggtgagtacctaactg gcatgcatcaccaacagccaatagctgttggtggctacaaggtgactct gggacagatgcatggccttttaacagaaaggagaaccaaaatgtcctcg gtatttgaggatcagaacgcagcaacccatctcattcgccacgctgtgg gcaacaacgagtttgggactgttgatcatgagcgcctctctaaaatgct tagtcttcctgaagagcttgctcgaatgtacagagatgacattacaatc attgtagttcagttcaattctcatgttgtaggggcgtatcaaaaccaag aatagtgagtggctctttcactggcaattctcaaatgatatacatttaa agggcagattttttaaaaagatactactataataaacatttccagttgg tcattctaagcatttacccttttgatactctagctagtcaggtactcca aattgactttgcagcagggtggcagggtcaggagagtctggtcctgcct agctcagatttcatggcacctgcacttgaagcaagtcacttctttatca caggtgtcttgaaacattagcttcttttaccaacctgagaaaattagga tgacctggcaaataagatcttgaataggccaaaagcaagtatcttgctg tgtgtagtctcttggttaaagtgaagaaacagtactgttcacacctttc ttcactgagattccagtgtacatgagaacatatatttattgcatgattt tctagatacacagtctatgcattattcatatacatttattttagcctaa agtggttttcaaatccagttcttcaagccataaatgaccaagatccaag caatctgaatttgtttttgtgattatttgactggaatgcttcttaagtg
gaataactatactccgttatccacccgatttcctaatgtaattgaaaga ttttctattttgccacacacttggagacaataagggtttttagttttat ctactcttctattgaagttaaagaaagaaaaaaagatttttttatttgt attaatgaaaagctttagtttaaaataaggagatccagaataaaaagaa gagactgatctcttcaattattgtcatctgtagccaccagcacatcact cttatgtaatccccaaaggcttggcatgccgtaagtgtgtggtgggtag actgctgccggggaatcgtacttcttatttagtaatgataagacttttc attatttttggaattttaaagatgacataaataagtttaaatatcaatt tggggagtaaggtttaatattgccatcgggtattgagacaggaggaagt ttctgtttttctccatttagacataggtcaattaaaatatttgggttta aaatgactaaatgctttaaacatattgtagcttaagatatatgtgttaa gatatatacatgagaaactttaaaaggtaactactgtgcatgcctgatg cttaatagaatacttagtggcatcaaatgtttgcagcagtctccataat tatattcagtcccttctaatactgtatcaatgtaaatgaaataaatata ttcaaattggctttttgatatgcatcaagtggcattttgttcctgtgtt taatagtgatctgtatacagctgtgcacatattgtcatcacttattcta gcatcactgttaaggctgtgattatgtttgatattcacctggattttaa tacaagccaatatcagcttcccattgtgtaataacttgggtgtttagga gtcttttcacattttttggggatatgaactagatgttcaagaactcctt ctggactgtggatactgaatcagtgtactattggctgcagaatttgttt caattgaaaatagactcaggaagattgctgctcagaatatcatataatg tttattttttgaggtgtttttgtttttatttgtgtgttttttttttttt aagtcagcttggaacttttttcctgggtagtatttgggagagggaaagg ctgtactatatatttatttctaaatgttttgactgggcatttttctttt
aatgaaatatgtggactgctctagcaaaccctattttcagctactattt gaatattcttgaacaccaccactgaagagtttcatatacaccaaataat gtctcatctctatagtacagggaatataaaattggtttcctgtggtcat gatcaagatagtagtattattacacaagaaacttggtctgcagtctgga agcttgtctgctctatagaaatgaaaatgcagcatgaagttgacattgt ggaaatgaaagtaattgggtattagaaatctgaaagtactgtcatctaa aagcaattgtgattttattgtaattggttgtcactgttgtacggtgtct agaattaaagaatacatgtaaactttcatggtatttagcctttcttaaa tttttttaaaatttaaactttctaacctatgtattcaacttctgtattt atatttaatcagtggttcatgttatataatacacccttaactagttaaa tggaatgttggtatggtacagagtaccatattgctaagaaaactgtctt ataaaagatgtatatgtgtgaagacatgaaagtttaatgtacagaatgg ttggagaaatgcctatggtgaattaaagcttcatatctgctttctgaaa aaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 670)
Yesl
ggaggaggtggagagtgaggccgaggcgtggggagcccgggaactccct cctcctgaagtaacgcgtcccgggccggctctgccgtcgttgctgccgc cgggcgccccgggacgaggaggtggaggagggagagggcccgcgggcct cgcctccgccctccgccacctcgagctgcggtagcagcgacteatgaga gcgcggccggaggacagatttgataatgggctgcattaaaagtaaagaa aacaaaagtccagccattaaatacagacctgaaaatactccagagcctg tcagtacaagtgtgagccattatggagcagaacccactacagtgtcacc atgtccgtcatcttcagcaaagggaacagcagttaatttcagcagtctt tccatgacaccatttggaggatcctcaggggtaacgccttttggaggtg catcttcctcattttcagtggtgccaagttcatatcctgctggtttaac
NM 005433
NM 009535
aggtggtgttactatatttgtggccttatatgattatgaagctagaact acagaagacctttcatttaagaagggtgaaagatttcaaataattaaca atacggaaggagattggtgggaagcaagatcaatcgctacaggaaagaa tggttatatcccgagcaattatgtagcgcctgcagattccattcaggca gaagaatggtattttggcaaaatggggagaaaagatgctgaaagattac ttttgaatcctggaaatcaacgaggtattttcttagtaagagagagtga aacaactaaaggtgcttattccctttctattcgtgattgggatgagata aggggtgacaatgtgaaacactacaaaattaggaaacttgacaatggtg gatactatatcacaaccagagcacaatttgatactctgcagaaattggt gaaacactacacagaacatgctgatggtttatgccacaagttgacaact gtgtgtccaactgtgaaacctcagactcaaggtctagcaaaagatgctt gggaaatccctcgagaatctttgcgactagaggttaaactaggacaagg atgtttcggcgaagtgtggatgggaacatggaatggaaccacgaaagta gcaatcaaaacactaaaaccaggtacaatgatgccagaagctttccttc aagaagctcagataatgaaaaaattaagacatgataaacttgttccact atatgctgttgtttctgaagaaccaatttacattgtcactgaatttatg tcaaaaggaagcttattagatttccttaaggaaggagatggaaagtatt tgaagcttccacagctggttgatatggctgctcagattgctgatggtat ggcatatattgaaagaatgaactatattcaccgagatcttcgggctgct aatattcttgtaggagaaaatcttgtgtgcaaaatagcagactttggtt tagcaaggttaattgaagacaatgaatacacagcaagacaaggtgcaaa atttccaatcaaatggacagctcctgaagctgcactgtatggtcggttt acaataaagtctgatgtctggtcatttggaattctgcaaacagaactag taacaaagggccgagtgccatatccaggtatggtgaaccgtgaagtact
agaacaagtggagcgaggatacaggatgccgtgccctcagggctgtcca gaatccctccatgaattgatgaatctgtgttggaagaaggaccctgatg aaagaccaacatttgaatatattcagtccttcttggaagactacttcac tgctacagagccacagtaccagccaggagaaaatttataattcaagtag cctattttatatgcacaaatctgccaaaatataaagaacttgtgtagat tttctacaggaatcaaaagaagaaaatcttctttactctgcatgttttt aatggtaaactggaatcccagatatggttgcacaaaaccactttttttt ccccaagtattaaactctaatgtaccaatgatgaatttatcagcgtatt tcagggtccaaacaaaatagagctaagatactgatgacagtgtgggtga cagcatggtaatgaaggacagtgaggctcctgcttatttataaatcatt tcctttctttttttccccaaagtcagaattgctcaaagaaaattattta ttgttacagataaaacttgagagataaaaagctataccataataaaatc taaaattaaggaatatcatgggaccaaataattccattccagtttttta aagtttcttgcatttattattctcaaaagttttttctaagttaaacagt cagtatgcaatcttaatatatgctttcttttgcatggacatgggccagg tttttcaaaaggaatataaacaggatctcaaacttgattaaatgttaga ccacagaagtggaatttgaaagtataatgcagtacattaatattcatgt tcatggaactgaaagaataagaactttttcacttcagtccttttctgaa gagtttgacttagaataatgaaggtaactagaaagtgagttaatcttgt atgaggttgcattgattttttaaggcaatatataattgaaactactgtc caatcaaaggggaaatgttttgatctttagatagcatgcaaagtaagac ccagcattttaaaagccctttttaaaaactagacttcgtactgtgagta ttgcttatatgtccttatggggatgggtgccacaaatagaaaatatgac cagatcagggacttgaatgcacttttgctcatggtgaatatagatgaac
agagaggaaaatgtatttaaaagaaatacgagaaaagaaagtgaaagtt ttacaagttagagggatggaaggtaatgtttaatgttgatgtcatggag tgacagaatggctttgctggcactcagagctcctcacttagctatattc tgagactttgaagagttataaagtataactataaaactaatttttctta cacactaaatgggtatttgttcaaaataatgaagttatggcttcacatt cattgcagtgggatatggtttttatgtaaaacatttttagaactccagt tttcaaatcatgtttgaatctacattcacttttttttgttttctttttt gagacggagtctcgctctgtcgcccaggctggagtgcagtggcgcgatc tcggctcactgcaagctctgcctcccaggttcacaccattctcctgcct cagcctcccgagtagctgggactacaggtgcccaccaccacgcctggct agttttttgtatttttagtagagacgcagtttcaccgtgttagccagga tggtctcgatctcctgaccttgtgatctgcccgcctcggcctcccaaag tgctgggattacaggcgtgagccaccgcgcccagcctacattcacttct aaagtctatgtaatggtggtcattttttcccttttagaatacattaaat ggttgatttggggaggaaaacttattctgaatattaacggtggtgaaaa ggggacagtttttaccctaaagtgcaaaagtgaaacatacaaaataaga ctaatttttaagagtaactcagtaatttcaaaatacagatttgaatagc agcattagtggtttgagtgtctagcaaaggaaaaattgatgaataaaat gaaggtctggtgtatatgttttaaaatactctcatatagtcacacttta aattaagccttatattaggcccctctattttcaggatataattcttaac tatcattatttacctgattttaatcatcagattcgaaattctgtgccat ggcatatatgttcaaattcaaaccatttttaaaatgtgaagatggactt catgcaagttggcagtggttctggtactaaaaattgtggttgttttttc tgtttacgtaacctgcttagtattgacactctctaccaagagggtcttc
ctaagaagagtgctgtcattatttcctcttatcaacaacttgtgacatg agattttttaagggctttatgtgaactatgatattgtaatttttctaag catattcaaaagggtgacaaaattacgtttatgtactaaatctaatcag gaaagtaaggcaggaaaagttgatggtattcattaggttttaactgaat ggagcagttccttatataataacaattgtatagtagggataaaacacta acttaatgtgtattcattttaaattgttctgtatttttaaattgccaag aaaaacaactttgtaaatttggagatattttccaacagcttttcgtctt cagtgtcttaatgtggaagttaacccttaccaaaaaaggaagttggcaa aaacagccttctagcacacttttttaaatgaataatggtagcctaaact taatatttttataaagtattgtaatattgttttgtggataattgaaata aaaagttctcattgaatgcacctattaatcgttttagttgctattcata ttctcattcgttttttaaaaactgatatattctgaatttattcttccat tgagaaaaaaatgttcagttacttgtaactactgagcagaatttaatca atcctttattaaattcagaacattattgaa (SEQ ID NO: 671)
Met
gccctcgccgcccgcggcgccccgagcgctttgtgagcagatgcggagc cgagtggagggcgcgagccagatgcggggcgacagctgacttgetgaga ggaggcggggaggcgcggagcgcgcgtgtggtccttgcgccgctgactt ctccactggttcctgggcaccgaaagataaacctctcataatgaaggcc cccgctgtgcttgcacctggcatcctcgtgctcctgtttaccttggtgc agaggagcaatggggagtgtaaagaggcactagcaaagtccgagatgaa tgtgaatatgaagtatcagcttcccaacttcaccgcggaaacacccatc cagaatgtcattctacatgagcatcacattttccttggtgccactaact acatttatgttttaaatgaggaagaccttcagaaggttgctgagtacaa gactgggcctgtgctggaacacccagattgtttcccatgtcaggactgc
NM 001127500
NM 008591
agcagcaaagccaatttatcaggaggtgtttggaaagataacatcaaca tggctctagttgtcgacacctactatgatgatcaactcattagctgtgg cagcgtcaacagagggacctgccagcgacatgtctttccccacaatcat actgctgacatacagtcggaggttcactgcatattctccccacagatag aagagcccagccagtgtcctgactgtgtggtgagcgccctgggagccaa agtcctttcatctgtaaaggaccggttcatcaacttctttgtaggcaat accataaattcttcttatttcccagatcatccattgcattcgatatcag tgagaaggctaaaggaaacgaaagatggttttatgtttttgacggacca gtcctacattgatgttttacctgagttcagagattcttaccccattaag tatgtccatgcctttgaaagcaacaattttatttacttcttgacggtcc aaagggaaactctagatgctcagacttttcacacaagaataatcaggtt ctgttccataaactctggattgcattcctacatggaaatgcctctggag tgtattctcacagaaaagagaaaaaagagatccacaaagaaggaagtgt ttaatatacttcaggctgcgtatgtcagcaagcctggggcccagcttgc tagacaaataggagccagcctgaatgatgacattcttttcggggtgttc gcacaaagcaagccagattctgccgaaccaatggatcgatctgccatgt gtgcattccctatcaaatatgtcaacgacttcttcaacaagatcgtcaa caaaaacaatgtgagatgtctccagcatttttacggacccaatcatgag cactgctttaataggacacttctgagaaattcatcaggctgtgaagcgc gccgtgatgaatatcgaacagagtttaccacagctttgcagcgcgttga cttattcatgggtcaattcagcgaagtcctcttaacatctatatccacc ttcattaaaggagacctcaccatagctaatcttgggacatcagagggtc gcttcatgcaggttgtggtttctcgatcaggaccatcaacccctcatgt gaattttctcctggactcccatccagtgtctccagaagtgattgtggag
catacattaaaccaaaatggctacacactggttatcactgggaagaaga tcacgaagatcccattgaatggcttgggctgcagacatttccagtcctg cagtcaatgcctctctgccccaccctttgttcagtgtggctggtgccac gacaaatgtgtgcgatcggaggaatgcctgagcgggacatggactcaac agatctgtctgcctgcaatctacaaggttttcccaaatagtgcacccct tgaaggagggacaaggctgaccatatgtggctgggactttggatttcgg aggaataataaatttgatttaaagaaaactagagttctccttggaaatg agagctgcaccttgactttaagtgagagcacgatgaatacattgaaatg cacagttggtcctgccatgaataagcatttcaatatgtccataattatt tcaaatggccacgggacaacacaatacagtacattctcctatgtggatc ctgtaataacaagtatttcgccgaaatacggtcctatggctggtggcac tttacttactttaactggaaattacctaaacagtgggaattctagacac atttcaattggtggaaaaacatgtactttaaaaagtgtgtcaaacagta ttcttgaatgttataccccagcccaaaccatttcaactgagtttgctgt taaattgaaaattgacttagccaaccgagagacaagcatcttcagttac cgtgaagatcccattgtctatgaaattcatccaaccaaatcttttatta gtacttggtggaaagaacctctcaacattgtcagttttctattttgctt tgccagtggtgggagcacaataacaggtgttgggaaaaacctgaattca gttagtgtcccgagaatggtcataaatgtgcatgaagcaggaaggaact ttacagtggcatgtcaacatcgctctaattcagagataatctgttgtac cactccttccctgcaacagctgaatctgcaactccccctgaaaaccaaa gcctttttcatgttagatgggatcctttccaaatactttgatctcattt atgtacataatcctgtgtttaagccttttgaaaagccagtgatgatctc aatgggcaatgaaaatgtactggaaattaagggaaatgatattgaccct
gaagcagttaaaggtgaagtgttaaaagttggaaataagagctgtgaga atatacacttacattctgaagccgttttatgcacggtccccaatgacct gctgaaattgaacagcgagctaaatatagagtggaagcaagcaatttct tcaaccgtccttggaaaagtaatagttcaaccagatcagaatttcacag gattgattgctggtgttgtctcaatatcaacagcactgttattactact tgggtttttcctgtggctgaaaaagagaaagcaaattaaagatctgggc agtgaattagttcgctacgatgcaagagtacacactcctcatttggata ggcttgtaagtgcccgaagtgtaagcccaactacagaaatggtttcaaa tgaatctgtagactaccgagctacttttccagaagatcagtttcctaat tcatctcagaacggttcatgccgacaagtgcagtatcctctgacagaca tgtcccccatcctaactagtggggactctgatatatccagtccattact gcaaaatactgtccacattgacctcagtgctctaaatccagagctggtc caggcagtgcagcatgtagtgattgggcccagtagcctgattgtgcatt tcaatgaagtcataggaagagggcattttggttgtgtatatcatgggac tttgttggacaatgatggcaagaaaattcactgtgctgtgaaatccttg aacagaatcactgacataggagaagtttcccaatttctgaccgagggaa tcatcatgaaagattttagtcatcccaatgtcctctcgctcctgggaat ctgcctgcgaagtgaagggtctccgctggtggtcctaccatacatgaaa catggagatcttcgaaatttcattcgaaatgagactcataatccaactg taaaagatcttattggctttggtcttcaagtagccaaaggcatgaaata tcttgcaagcaaaaagtttgtccacagagacttggctgcaagaaactgt atgctggatgaaaaattcacagtcaaggttgctgattttggtcttgcca gagacatgtatgataaagaatactatagtgtacacaacaaaacaggtgc aaagctgccagtgaagtggatggctttggaaagtctgcaaactcaaaag
tttaccaccaagtcagatgtgtggtcctttggcgtgctcctctgggagc tgatgacaagaggagccccaccttatcctgacgtaaacacctttgatat aactgtttacttgttgcaagggagaagactcctacaacccgaatactgc ccagaccccttatatgaagtaatgctaaaatgctggcaccctaaagccg aaatgcgcccatccttttctgaactggtgtcccggatatcagcgatctt ctctactttcattggggagcactatgtccatgtgaacgctacttatgtg aacgtaaaatgtgtcgctccgtatccttctctgttgtcatcagaagata acgctgatgatgaggtggacacacgaccagcctccttctgggagacatc atagtgctagtactatgtcaaagcaacagtccacactttgtccaatggt tttttcactgcctgacctttaaaaggccatcgatattctttgctcttgc caaaattgcactattataggacttgtattgttatttaaattactggatt ctaaggaatttcttatctgacagagcatcagaaccagaggcttggtccc acaggccacggaccaatggcctgcagccgtgacaacactcctgtcatat tggagtccaaaacttgaattctgggttgaattttttaaaaatcaggtac cacttgatttcatatgggaaattgaagcaggaaatattgagggcttctt gatcacagaaaactcagaagagatagtaatgctcaggacaggagcggca gccccagaacaggccactcatttagaattctagtgtttcaaaacacttt tgtgtgttgtatggtcaataacatttttcattactgatggtgtcattca cccattaggtaaacattcccttttaaatgtttgtttgttttttgagaca ggatctcactctgttgccagggctgtagtgcagtggtgtgatcatagct cactgcaacctccacctcccaggctcaagcctcccgaatagctgggact acaggcgcacaccaccatccccggctaatttttgtattttttgtagaga cggggttttgccatgttgccaaggctggtttcaaactcctggactcaag aaatccacccacctcagcctcccaaagtgctaggattacaggcatgagc
cactgcgcccagcccttataaatttttgtatagacattcctttggttgg aagaatatttataggcaatacagtcaaagtttcaaaatagcatcacaca aaacatgtttataaatgaacaggatgtaatgtacatagatgacattaag aaaatttgtatgaaataatttagtcatcatgaaatatttagttgtcata taaaaacccactgtttgagaatgatgctactctgatctaatgaatgtga acatgtagatgttttgtgtgtatttttttaaatgaaaactcaaaataag acaagtaatttgttgataaatatttttaaagataactcagcatgtttgt aaagcaggatacattttactaaaaggttcattggttccaatcacagctc ataggtagagcaaagaaagggtggatggattgaaaagattagcctctgt ctcggtggcaggttcccacctcgcaagcaattggaaacaaaacttttgg ggagttttattttgcattagggtgtgttttatgttaagcaaaacatact ttagaaacaaatgaaaaaggcaattgaaaatcccagctatttcacctag atggaatagccaccctgagcagaactttgtgatgcttcattctgtggaa ttttgtgcttgctactgtatagtgcatgtggtgtaggttactctaactg gttttgtcgacgtaaacatttaaagtgttatattttttataaaaatgtt tatttttaatgatatgagaaaaattttgttaggccacaaaaacactgca ctgtgaacattttagaaaaggtatgtcagactgggattaatgacagcat gattttcaatgactgtaaattgcgataaggaaatgtactgattgccaat acaccccaccctcattacatcatcaggacttgaagccaagggttaaccc agcaagctacaaagagggtgtgtcacactgaaactcaatagttgagttt ggctgttgttgcaggaaaatgattataactaaaagctctctgatagtgc agagacttaccagaagacacaaggaattgtactgaagagctattacaat ccaaatattgccgtttcataaatgtaataagtaatactaattcacagag tattgtaaatggtggatgacaaaagaaaatctgctctgtggaaagaaag
aactgtctctaccagggtcaagagcatgaacgcatcaatagaaagaact cggggaaacatcccatcaacaggactacacacttgtatatacattcttg agaacactgcaatgtgaaaatcacgtttgctatttataaacttgtcctt agattaatgtgtctggacagattgtgggagtaagtgattcttctaagaa ttagatacttgtcactgcctatacctgcagctgaactgaatggtacttc gtatgttaatagttgttctgataaatcatgcaattaaagtaaagtgatg caacatcttgtaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 672)
Ppmlg
agttgctaaggaaatgactgcccgcagcgcctggccccgccgcgcaggc cgggcggggtctggagcggcgccgtttccgcttccgctccctcacagct cccgtcccgttaccgcctcctggccggcctcgcgcctttcaccggcacc ttgcgtcggtcgcgccgcggggcctgctcctgccgcgcgcacccccggg gcttcggctccggcacgggtcgcgcccagctttcctgcacctgaggccg ccggccagccgccgccatgggtgcctacctctcccagcccaacacggtg aagtgctccggggacggggtcggcgccccgcgcctgccgctgccctacg gcttctccgccatgcaaggctggcgcgtctccatggaggatgctcacaa ctgtattcctgagctggacagtgagacagccatgttttctgtctacgat ggacatggaggggaggaagttgccttgtactgtgccaaatatcttcctg atatcatcaaagatcagaaggcctacaaggaaggcaagctacagaaggc tttagaagatgccttcttggctattgacgccaaattgaccactgaagaa gtcattaaagagctggcacagattgcagggcgacccactgaggatgaag atgaaaaagaaaaagtagctgatgaagatgatgtggacaatgaggaggc tgcactgctgcatgaagaggctaccatgactattgaagagctgctgaca cgctacgggcagaactgtcacaagggccctccccacagcaaatctggag gtgggacaggcgaggaaccagggtcccagggcctcaatggggaggcagg
NM 177983
NM 008014
acctgaggactcaactagggaaactccttcacaagaaaatggccccaca gccaaggcctacacaggcttttcctccaactcggaacgtgggactgagg caggccaagttggtgagcctggcattcccactggtgaggctgggccttc ctgctcttcagcctctgacaagctgcctcgagttgctaagtccaagttc tttgaggacagtgaggatgagtcagatgaggcggaggaagaagaggaag acagtgaggaatgcagcgaggaagaggatggctacagcagtgaggaggc agagaatgaggaagatgaggatgacaccgaggaggctgaagaggacgat gaagaagaagaagaagagatgatggtgccagggatggaaggcaaagagg agcctggctctgacagtggtacaacagcggtggtggccctgatacgagg gaagcagttgattgtagccaacgcaggagactctcgctgtgtggtatct gaggctggcaaagctttagacatgtcctatgatcacaaaccagaggatg aagtagaactagcacgcatcaagaatgctggtggcaaggtcaecatgga tgggcgagtcaacgggggcctcaacctctccagagccattggggaccac ttctataagagaaacaagaacctgccacctgaggaacagatgatttcag cccttcctgacatcaaggtgetgactctcactgacgaccatgaatteat ggtcattgcctgtgatggcatctggaatgtgatgagcagccaggaagtt gtagatttcattcaatcaaagatcagccagcgtgatgaaaatggggagc ttcggttattgtcatccattgtggaagagctgctggatcagtgcctggc accagacacttctggggatggtacagggtgtgacaacatgacctgcatc atcatttgcttcaagccccgaaacacagcagagctccagccagagagtg gcaagcgaaaactagaggaggtgctctctactgagggggctgaagaaaa tggcaacagcgacaagaagaagaaggccaagcgagactagcagtcatcc agacccctgcccacctagactgttttctgagccctccggacctgagact gagttttgtctttttcctttagccttagcagtgggtatgaggtgtgcag
ggggagctgggtggcttcactccgcccattccaaagagggctctccctc cacactgcagccgggagcctctgctgtccttcccagccgcctctgctcc tcgggctcatcaccggttctgtgcctgtgctctgttgtgttggagggaa ggactggcggttctggtttttactctgtgaactttatttaaggacattc ttttttattggcggctccatggccctcggccgcttgcacccgctctctg ttgtacactttcaatcaacactttttcagactaaaggccaaaacctaa (SEQ ID NO: 672)
Blvrb
Ggcgtggcccttcgagccagctccgccccgttgttcctggcttgagtag ggcagagagcaccgcccagcagccagtgggttcccgcgcgtgccgagac tctgaggccttgcacccccacgatcccgtacgatggccgtcaagaagat cgcgatcttcggcgccactggccagaccgggctcaccaccctggcgcag gcggtgcaagcaggttacgaagtgacagtgctggtgcgggactcctcca ggctgccatcagaggggccccggccggcccacgtggtagtgggagatgt tctgcaggcagccgatgtggacaagaccgtggctgggcaggacgctgtc atcgtgctgctgggcacccgcaatgacctcagtcccacgacagtgatgt ccgagggcgcccggaacattgtggcagccatgaaggcteatggtgtgga caaggtcgtggcctgcacctcggctttcctgctctgggaccctaccaag gtgcccccacgactgcaggctgtgactgatgaccacatccggatgcaca aggtgctgcgggaatcaggcctgaagtacgtggctgtgatgccgccaca cataggagaccagccactaactggggcgtacacagtgaccctggatgga cgagggccctcaagggtcatctccaaacatgacctgggccatttcatgc tgcgctgcctcaccaccgatgagtacgacggacacagcacctacccctc ccaccagtaccagtagcactctgtccccatctgggagggtggcattctg ggacatgaggagcaaaggaagggggcaataaatgttgagccaagagctt
NM 000713
NM 144923
caaattactctagagaaaccgacaaaaaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO: 673)
Tnkl
ggaactcggggtgcggccctcgccggccccgggccagcggccaggtccc cgccctccgcgggatttactcctgtcccgcctcctcggatttagcccag gcagcctgggaggttccgcagtcgccgcttccgccttgaccaggtggag ctggagacctggtctctctagggcctaccctgagctcaccatctgaagg agagtgccatcatccttaggaactccttctccagacatgcttcctgagg ctggctccctgtggctactgaagctgctccgggacatccagttggccca gttttactggcccatccttgaggagcttaatgtcactcggccagagcac ttcgactttgtaaagcctgaggacctggacggcattggcatgggccggc ctgcccagcgcagactgtccgaagctctgaaaaggctacgttctgggcc taagtctaagaactgggtctacaagatccttggaggttttgcccctgag cacaaggagcccaccctgccctcggacagcccacggcacctccctgagc cagaggggggcctcaagtgtctgatcccagagggtgctgtttgcagagg ggagctgctgggttcaggctgcttcggtgtggtgcaccgagggctgtgg acgctgcccagtggcaagagtgtcccagtggctgtcaagtccctccggg taggtcccgaaggcccgatgggcacagaactgggggacttcctgcgaga ggtatcggtcatgatgaacttggagcacccacacgtgctgcgtctgcac ggccttgtactgggccagcctctgcagatggtgatggagctggcgccac tgggctccctgcacgcgcgcctaacggccccggccccgacacccccgct gctcgtggccctgctctgcctcttcctgcggcagctggcgggagccatg gcgtacctgggggcccgcgggctggtgcaccgagacctcgctacgcgca acctactgctggcgtcgccgcgcaccatcaaggtggctgacttcgggct ggtgcggcctctgggcggtgcccggggccgctacgtcatgggcgggccc
NM 001251902
NM 031880
cgccctatcccctacgcctggtgtgccccagagagcctgcgccacggag ccttctcgtctgcctcggacgtgtggatgtttggggtgacgctgtggga gatgttctccgggggcgaggaaccctgggccggggtcccaccgtacctc atcctgcagcggctggaggacagagcccggctgcctaggcctcccctct gctccagggccctctactccctcgccttgcgctgctgggccccccaccc tgccgaccggcctagcttttcccacctggaggggctgctgcaagaggcc gggccttcggaagcatgttgtgtgagggatgtcacagaaccaggcgccc tgaggatggagactggtgaccccatcacagtcatcgagggcagctcctc tttccacagccccgactccacaatctggaagggccagaatggtcgcacc ttcaaagtgggcagcttcccagcctcggcagtgacgctggcagatgcgg ggggcttgccagccacccgtccagtccacagaggcacccctgcccgggg agatcaacacccaggaagcatagatggagacagaaagaaggcaaatctt tgggatgcgcccccagcacggggccagaggaggaacatgcccctggaga ggatgaaaggcatttccaggagtctggagtcagttctgtccctcggtcc tcgtcccacagggggtggttcaagcccccctgaaattcgacaagccaga gctgtgccccagggacctccaggcctgcctccacgcccacctttatcct ctagctctcctcagcccagccagccctctagggagaggcttccctggcc caaaagaaaacccccacacaatcaccccatgggaatgcctggagcccgt aaagccgctgccctctctggaggcctcttgtccgatcctgagttgcaga ggaagattatggaggtggagctgagtgtgcatggggtcacccaccagga gtgccagacagcactaggagccactgggggagatgtggtttctgccatc cggaacctcaaggtagatcagctcttccacctgagtagccggtccagag ctgactgctggcgcatcctggagcattaccagtgggacctctcagctgc cagccgctatgtcctggccaggccctgagctcagcttctgcgggcacag
acaccagcatgaaaagcctaggcccctgagggcctggccacatgggacc
aagcggaaccagaacaaggtcccgacaggggtagacgttccacctgggg
agatcccacctgccgtaggcacatggaggaggagcccagagttgggcac
tggcaaatgtctcctccctcccatgctccttggcttctgaaggctgaag
ctcctttggctgggccaagaaggatctagtctgcccactacattctcaa
acaagaggacttggaggaaaagagctgctatacatcatatgcagaggaa
gcttctacgcgctagagaggatcaaggggccacactggaccatgtgaac
agccatcctgaactgccatcagctaccacactggactctgcagggcagc
catcctggatgatggaagccaccatattgacttggggtataggcccaaa
ctgccttcgtttggtccagggccatcgtgggtgatgacgattgctctct
tgcactcaaggacatttgatgctggtagtatggattatgagatggacta
gcccctgccccagcccagctctcacattcccctttgttttttcccatac
caactgcttctaccctcccctattacatacatctttcaatgtccaaaaa
gttacaaagtttatatgaatgtaacatataaaaaaa (SEQ ID NO:
674)
Prkab2
actgggcggactccgcgccgccggccttgtagccattttaggaggaatc gctggtcgccagcgaggggtgcggcttcaatttcaataactttattggt ggcctgatctgcagaacagccatcacatcagtggcccttggaggaggga gcgcatcgcccgaggtggtccccgacgagctgcagccatgggaaacacc accagcgaccgggtgtccggggagcgccacggcgccaaggctgcacgct ccgagggcgcaggcggccatgccccggggaaggagcacaagateatggt ggggagtacggacgaccccagcgtgttcagcctccctgactccaagctc cctggggacaaagagtttgtatcatggcagcaggatttggaggactccg taaagcccacacagcaggcccggcccactgttatccgctggtctgaagg
NM 005399
NM 182997
aggcaaggaggtcttcatctctgggtccttcaacaattggagcaccaag attccactgattaagagccataatgactttgttgccatcctggacctcc ctgagggagagcaccaatacaagttctttgtggatggacagtgggttca tgatccatcagagcctgtggttaccagtcagettggcacaattaacaat ttgatccatgtcaagaaatctgattttgaggtgttcgatgctttaaagt tagattctatggaaagttctgagacatcttgtagagacctttccagctc acccccagggccttatggtcaagaaatgtatgcgtttcgatctgaggaa agattcaaatccccacccatccttcctcctcatctacttcaagttattc ttaacaaagacactaatatttcttgtgacccagccttactccctgagcc caaccatgttatgctgaaccatctctatgcattgtccattaaggacagt gtgatggtccttagcgcaacccatcgctacaagaagaagtatgttacta ctctgctatacaagcccatttgaagggatcccttcttgcctctaaggat tcaggagaagcatctcccttgcatttctggactgaaccagtcttacctg agactggaaggctgatttgctttgaggctgatatgtgtgtttcagagcc tctgagtaggatgctctgcttttgcatttgattgcagatgagagcttta tgagttcacggaatttattttaagaaaaaaaaatatacatatgagaaga aggtaaatggaagcctcctagccccagctagaagtattgtttctgcctg tgggttttcaccaagacctgtttgggggcgctgcaggaataactatata ggaagatttttcctaaaatgaaagaacagcaaactcttaggatccttgt tgggtggagattctatcactgctaccttggctctccaaggaatgggctt gtgctagaccgctgccctacttaacagctgcctcattgcaagggcagtt tttcttgcatgggttctctatattcccagagtatgtggcacaatctgtg ttgtttatatgataccagatgccccacaagaacccttattcctctcatt tcacattcttcctttaatagcctccttcagatcccatacctgacccctc
tctaacacaaaacttattgggtaagtgactttgaaaagttttgtggcac ctgacccaccccagacactagggctatcagaaggtctcctttttagccc agcacaggcccaggccactttgtcgtgtttgttttaacttctaaagaaa atatgtttcagcattataagaaaggcagaatgcagaacacctacatttt tgttttagtttggtgccaaggctcaggctgtattggcaaattcccgaaa gttttcccactttgcctggccctgcttctgtcttttctttctcagtaaa cagttctgaaggcaggagtggaacccgggagtattttcatgtctttcat ccttgaaagatttttatgtgcctgcattttttttttaattaaaaaatgc cttttcattggtcttaagagaccgcattggagaatttcaggcttttgat aaatgcttcttcaaagagattttcttctctagtctagccttccacattc ttagattaatatggccaaccctgtacacatcactacactaaacactgct ctagataaactgctcaagttcatttaactcatttgatgcacctaaaggg gttcctcattttaaagatttgttaggccaagaagcaagagagtattcct agtattcccaaccatgaaaagtatcattctttgcaccaaatgttaacaa aatcattttgttctcctgcctcttctttttaaaggtgtttgatgattaa gtggggtcactgaattccatttgtggactgaaaagtattcaatccactt ttggggttcagagataaaacattttttcccaagtagctggggctcttcc attttgcagataagtcaaataatcaacactaaaggaggctaaactgttg atgaatgagagactccctgactgctcagatgaccctagccacactgaaa gggcacctacaggtcagtttagctacctcctgtctttcccatgcaaagc tgataacacagttgtctttggacttgtagacctcttggattccaggtgt gatggagtaaagtgtgggattgttgttttgctgggatgcaaataactaa atgctttggtggttaattgctaagagtaaatactactttagccatccaa ggccaccttctgcagcaaaaggcttttgtggagaaccttttatgttccc
aaccactttttgaatggtgtgccatttaaaaatccaggccagatcctat tataaccaactctcaggatttacagccttcagttgtactagaattttgt ttttatccaatactcattaaataagtgggccacttaggaagattcaaaa tcttggttattacatgaagtttgttatatttcttgtcaacagtattgaa atgtaatatgtatgtgttcatgtatgaaaatttttactccacacaggtg tttcagtagagtggggcaggaaaagagatctcttcgatttctttcaggc ctgaggcttttgtgaaatgcgtcagccccctgtgacagtaggttttgat gctagtgatcttcagatctttctctctggaaatgtgcagagagtgtcag tttcccaagttctgaggtaactctcagcccagatgtgaaatgggagcct accagctggtatagaagggaatgggtaggaggcactgggtgctgactca ttcagcactgtcccttttctatactgctgatacatcccatggttctgag aagccttatctcagtctatttggaagagagggaggaagagaaggaagta acccaaagtactactcatttatcattgtatattgattagttaaagggat aattaatttaatgctgaggagagtttgacagattttgaaaatgagtaaa ggcaaaaaaaatttttttagcctttattttgcttttgggaattttacag agtcaaagtaggcagaataagaaaatagttcttcaggagggccgacctt taaagaacttcaacatagtttcggaattgtggggaagagaagagtgact gagetgagaagtaataatagaataaagggttgagtaacttacaactgaa aatgatctcttttaaaaagaaattaaatcagacaccacatggtggtgtc cttggatctcactgtacagaattagcagtgtataaccatcttctctttt catcttgttccaattctctcctctttcctttccattctgctttaagctc atgtgtcaggcagactttaccagagtgtcagacattacctaaaacacat acgttagccatgctgctggtatggagaaattccacaccatgattattag cctcctttaagctgaatgggatttaaccattctaggcaacacccctgaa
gggcatacctaacctcaatagtgttggcttttaaaacgtatgtttgtat ggtagagaaactttgtaaaagaagaatccaagagaagtttgtgaggatc ctacaaacccaggcccactcactttgctctaattctttctagtatcttg tagatctaatgggtctgggataaaaactttgaaaagtgtcaatattcca tgtatgctgctgaaatgaagttaagtttggaaagaagtgatacctctag actgggtttatattaatctgggatataaatgaagaagacatactaatag aactccttgcttttaattggggaaatagggctttaataattttgacctc aactaaaaatgatatgcaatagtctctgtgtgtgtttgaaatacattgt gttctcagagatttctacattctcacgttctagtgatttggggcatggg cttaatagcagatgtacagtgtattcctgcattattgtgattcccctta aagcccagttcttgctgtcttctaccaggggctgctgactccagttacc catggaatgcaggacctgggaggggtagccattagggtctttcaaaact ctttggatctaagcatttgtctctccttaagtgccaatcacaattggat atggaaggactgtgatttctgcaatgaacccaaacttttagagtaaaaa gccaaatttaaattataagaaagaagggaaaaaagagaaaaactcaagt ctattacttgtagagtccaattcttagcaatggaatcgctctaggattc tagtttgggctttgtctggatttgcttttctcagttgtgctttgaagtg aataagctttgttacaaattaattttttattagttccaatattagttgg agttaacttgaattgattgtatgtagcacagcacttttgcagtaagatt ggtgtgaaatactaaacactatggattttgtaggtgtcaggttaaatgg tcaagggatacctacattaagtcatatattaggtattgatgatcttact tcttttctgttcccctgtacaaaacacttacctaacccagcttgtggtt ttaggacagccaaagctcactgttgttggttagtcctaatcactacacg ggtctcataaatgagacttgtttgaattttggtacattggagcatgttg
gttggtattacacggcagcatttcgaatgagtgcagctctgtgtctgtc
agaaaggagagataagactactttgaagggaattaaatatgtgagtcct
ctttttaatggtgctttttgtaacctttaatgctgaggtacagagctgc
ttttcaatatttcataaaggagtggcagacaagagtggattttaaagct
gttcttcaaacgtaatttgtcactggactctgacacacctggaaattat
atgatatgatacatacagaaatgttgtgggttttttccataaaacttta
ataaaagtattatacagcaataaaaaaaaaaaaaaa (SEQ ID NO:
675)
Trpm7
gcgccgctcacgtggtccgtccccagccccgtcgccggcggaggcgggc gcgggcgcgtccctgtggccagtcacccggaggagttggtcgcacaatt atgaaagactcggcttctgctgctagcgccggagctgagttagttctga gaaggtttccctgggcgttccttgtccggcggcctctgctgccgcctcc ggagacgcttcccgatagatggctacaggccgcggaggaggaggaggtg gagttgctgcccttccggagtccgccccgtgaggagaatgtcccagaaa tcctggatagaaagcactttgaccaagagggaatgtgtatatattatac caagttccaaggaccctcacagatgccttccaggatgtcaaatttgtca gcaactcgtcaggtgtttttgtggtcgcttggtcaagcaacatgcttgt tttactgcaagtcttgccatgaaatactcagatgtgaaattgggtgacc attttaatcaggcaatagaagaatggtctgtggaaaagcatacagaaca gagcccaacggatgcttatggagtcataaattttcaagggggttctcat tcctacagagctaagtatgtgaggctatcatatgacaccaaacctgaag tcattctgcaacttctgcttaaagaatggcaaatggagttacccaaact tgttatctctgtacatgggggcatgcagaaatttgagcttcacccacga atcaagcagttgcttggaaaaggtcttattaaagctgcagttacaactg
NM 017672
NM 021450
gagcctggattttaactggaggagtaaacacaggtgtggcaaaacatgt tggagatgccctcaaagaacatgcttccagatcatctcgaaagatttgc actatcggaatagctccatggggagtgattgaaaacagaaatgatcttg ttgggagagatgtggttgctccttatcaaaccttattgaaccccctgag caaattgaatgttttgaataatctgcattcccatttcatattggtggat gatggcactgttggaaagtatggggcggaagtcagactgagaagagaac ttgaaaaaactattaatcagcaaagaattcatgctaggattggccaggg tgtccctgtggtggcacttatatttgagggtgggccaaatgttatcctc acagttcttgaataccttcaggaaagcccccctgttccagtagttgtgt gtgaaggaacaggcagagctgcagatctgctagcgtatattcataaaca aacagaagaaggagggaatcttcctgatgcagcagagcccgatattatt tccactatcaaaaaaacatttaactttggccagaatgaagcacttcatt tatttcaaacactgatggagtgcatgaaaagaaaggagcttatcactgt tttccatattgggtcagatgaacatcaagatatagatgtagcaatactt actgcactgctaaaaggtactaatgcatctgcatttgaccagcttatcc ttacattggcatgggatagagttgacattgccaaaaatcatgtatttgt ttatggacagcagtggctggttggatccttggaacaagctatgcttgat gctcttgtaatggatagagttgcatttgtaaaacttcttattgaaaatg gagtaagcatgcataaattccttaccattccgagactggaagaacttta caacactaaacaaggtccaactaatccaatgctgtttcatcttgttcga gacgtcaaacagggaaatcttcctccaggatataagatcactctgattg atataggacttgttattgaatatctcatgggaggaacctacagatgcac ctatactaggaaacgttttcgattaatatataatagtcttggtggaaat aatcggaggtctggccgaaatacctccagcagcactcctcagttgcgaa
agagtcatgaatcttttggcaatagggcagataaaaaggaaaaaatgag gcataaccatttcattaagacagcacagccctaccgaccaaagattgat acagttatggaagaaggaaagaagaaaagaaccaaagatgaaattgtag acattgatgatccagaaaccaagcgctttccttatccacttaatgaact tttaatttgggcttgccttatgaagaggcaggtcatggcccgtttttta tggcaacatggtgaagaatcaatggctaaagcattagttgcctgtaaga tctatcgttcaatggcatatgaagcaaagcagagtgacctggtagatga tacttcagaagaactaaaacagtattccaatgattttggtcagttggcc gttgaattattagaacagtccttcagacaagatgaaaccatggctatga aattgctcacttatgaactgaagaactggagtaattcaacctgccttaa gttagcagtttcttcaagacttagaccttttgtagctcacacctgtaca caaatgttgttatctgatatgtggatgggaaggctgaatatgaggaaaa attcctggtacaaggtcatactaagcattttagttccacctgccatatt gctgttagagtataaaactaaggctgaaatgtcccatatcccacaatct caagatgctcatcagatgacaatggatgacagcgaaaacaactttcaga acataacagaagagatccccatggaagtgtttaaagaagtacggatttt ggatagtaatgaaggaaagaatgagatggagatacaaatgaaatcaaaa aagcttccaattacgcgaaagttttatgccttttatcatgcaccaattg taaaattctggtttaacacgttggcatatttaggatttctgatgcttta tacatttgtggttcttgtacaaatggaacagttaccttcagttcaagaa tggattgttattgcttatatttttacttatgccattgagaaagtccgtg agatctttatgtctgaagctgggaaagtaaaccagaagattaaagtatg gtttagtgattacttcaacatcagtgatacaattgccataatttctttc ttcattggatttggactaagatttggagcaaaatggaactttgcaaatg
catatgataatcatgtttttgtggctggaagattaatttactgtcttaa cataatattttggtatgtgcgtttgctagattttctagctgtaaatcaa caggcaggaccttatgtaatgatgattggaaaaatggtggccaatatgt tctacattgtagtgattatggctcttgtattacttagttttggtgttcc cagaaaggcaatactttatcctcatgaagcaccatcttggactcttgct aaagatatagtttttcacccatactggatgatttttggtgaagtttatg catacgaaattgatgtgtgtgcaaatgattctgttatccctcaaatctg tggtcctgggacgtggttgactccatttcttcaagcagtctacctcttt gtacagtatatcattatggttaatcttcttattgcatttttcaacaatg tgtatttacaagtgaaggcaatttccaatattgtatggaagtaccagcg ttatcattttattatggcttatcatgagaaaccagttctgcctcctcca cttatcattcttagccatatagtttctctgttttgctgcatatgtaaga gaagaaagaaagataagacttccgatggaccaaaacttttcttaacaga agaagatcaaaagaaacttcatgattttgaagagcagtgtgttgaaatg tatttcaatgaaaaagatgacaaatttcattctgggagtgaagagagaa ttcgtgtcacttttgaaagagtggaacagatgtgcattcagattaaaga agttggagatcgtgtcaactacataaaaagatcattacaatcattagat tctcaaattggccatttgcaagatctttcagccctgacggtagatacat taaaaacactcactgcccagaaagcgtcggaagctagcaaagttcataa tgaaatcacacgagaactgagcatttccaaacacttggctcaaaacctt attgatgatggtcctgtaagaccttctgtatggaaaaagcatggtgttg taaatacacttagctcctctcttcctcaaggtgatcttgaaagtaataa tccttttcattgtaatattttaatgaaagatgacaaagatccccagtgt aatatatttggtcaagacttacctgcagtaccccagagaaaagaattta
attttccagaggctggttcctcttctggtgccttattcccaagtgctgt ttcccctccagaactgcgacagagactacatggggtagaactcttaaaa atatttaataaaaatcaaaaattaggcagttcatctactagcataccac atctgtcatccccaccaaccaaattttttgttagtacaccatctcagcc aagttgcaaaagccacttggaaactggaaccaaagatcaagaaactgtt tgctctaaagctacagaaggagataatacagaatttggagcatttgtag gacacagagatagcatggatttacagaggtttaaagaaacatcaaacaa gataaaaatactatccaataacaatacttctgaaaacactttgaaacga gtgagttctcttgctggatttactgactgtcacagaacttccattcctg ttcattcaaaacaagcagaaaaaatcagtagaaggccatctaccgaaga cactcatgaagtagattccaaagcagctttaataccggattggttacaa gatagaccatcaaacagagaaatgccatctgaagaaggaacattaaatg gtctcacttctccatttaagccagctatggatacaaattactattattc agctgtggaaagaaataacttgatgaggttatcacagagcattccattt acacctgtgcctccaagaggggagcctgtcacagtgtatcgtttggaag agagttcacccaacatactaaataacagcatgtcttcttggtcacaact aggcctctgtgccaaaatagagtttttaagcaaagaggagatgggagga ggtttacgaagagctgtcaaagtacagtgtacctggtcagaacatgata tcctcaaatcagggcatctttatattatcaaatcttttcttccagaggt ggttaatacatggtcaagtatttacaaagaagatacagttctgcatctc tgtctgagagaaattcaacaacagagagcagcacaaaagcttacgtttg cctttaatcaaatgaaacccaaatccataccatattctccaaggttcct tgaagttttcctgctgtattgccattcagcaggacagtggtttgctgtg gaagaatgtatgactggagaatttagaaaatacaacaataataatggag
atgagattattccaactaatactctggaagagatcatgctagcctttag ccactggacttacgaatatacaagaggggagttactggtacttgatttg caaggtgttggtgaaaatttgactgacccatctgtgataaaagcagaag aaaagagatcctgtgatatggtttttggcccagcaaatctaggagaaga tgcaattaaaaacttcagagcaaaacatcactgtaattcttgctgtaga aagcttaaacttccagatctgaagaggaatgattatacgcctgataaaa ttatatttcctcaggatgagccttcagatttgaatcttcagcctggaaa ttccaccaaagaatcagaatcaactaattctgttcgtctgatgttataa tattaatattactgaatcattggttttgcctgcacctcacagaaatgtt actgtgtcacttttccctcgggaggaaattgtttggtaatatagaaagg tgtatgcaagttgaatttgctgactccagcacagttaaaaggtcaatat tcttttgacctgattaatcagtcagaaagtccctataggatagagctgg cagctgagaaattttaaaggtaattgataattagtatttataacttttt aaagggctctttgtatagcagaggatctcatttgactttgttttgatga gggtgatgctctctcttatgtggtacaataccattaaccaaaggtaggt gtccatgcagattttattggcagctgttttattgccattcaactaggga aatgaagaaatcacgcagccttttggttaaatggcagtcaaaattttcc tcagtgtatttagtgtgttcagtgatgatatcactggttcccaactaga tgcttgttggccacgggaagggaaatgacttgttctaattctaggttca cagaggtatgagaagcctgaactgaagaccattttcaagagggacggta tttatgaatcagggttaggctccatatttaaagatagagccagtttttt tttttaaatagaacccaaattgtgtaaaaatgttaattgggttttttaa acattgttttatcaagtcactgttaagtagaagaaagccatggtaaact gatacataacctaaattataaaagcagaaacctaactcactcgtcaagg
gaagttaccttttgaggaaagttaaagtacttttttccctatctgtatc tatagcaacaacccagaacttacaaacttctccaaagattttattgatt gttatatcaaatcagaatgtaaacatgaactcttgcatatatttaaaat tgtgttggaacatttgaacatgaatgctgtttgtggtacttaagaaatt aattcagttggattatcattatgtgatactggcagattgcagtgcaacc ttatgccaataaaatgtaatttaacagccccagatattgttgaatattc aacaataacaagaaaagcttttcatctaagttttatgctttaatttttt ttctttttttttctttttcttttgtttccttggtactaattttaatttt tatttggaagggagcagtataaagcttatttgtatttagtagtgtatct catagatacagacaaggcaagagatgataagctgtttaaatagtgttta atattgattgggggtggggagaaagaaaaagtgtattacttaaagatac tatatacgttttgtatatcattaaatctttaaaagaaatgaaataaatt tattgtttacagatgtttagtgagtttaatcattctgaaaaattatctg acattttcagggtgtcaatttgagtatcagtttttttaaatgaaccatt tgtatacctgtgcttttgatctcctgtcctgtacaatgtttaaattaat actgatttcttactgtcttcttagaaatctgttttttgttaggccaaaa aagggcaatatgggctgtctgttgatttttaattttatattgattattt tcacaggattataatagtagctatacttttttttttttttttttttttg agacggagtctcgctctgttgcttgggctggagtgcagtggtgcgatct cagctcaccacaaccgccgccttccgggtttaagtgattctcctgcctc agcctcccgagtagctgggactacaggcacacgccaccatgcccagcta atttttatatttttagtagagacagggtttcactatgttggccagtgtg gtcacaaactcctgaccttgtgagccaccgcacctggctgctaacactt atttagtgcctactgtgtaccagacattactctaagtatttcacatata
ttaacctacttaatccttataacaatgttataaagaaataggtgttatt atcctgttttgcagatttgaaagtcaaggtgctagagaggtaaagtaac gtccataagattcttacgtttatttaataataagtagcaacggtaggat ttgaacccaggctggctgcctttcatctatactgtttttgttttgtttt gttttgttttgttttgttttgtttgtcttggtggggcatggtggctcat gcctgtaatcccagcacttcgggaggccaaggcaggtggatcacttggg ctcaggagtttgagaccagcctgggcaacatggcaaaatcctatctctg ctaaaaaaaaaaatacaaaaattaggccaggtgcagtggctcatgcctg taatcccagcactttgggaggccaaggtgggcggatcacaaggtcagga gttcgagaccagcctgaccaacatagtgaaaccccgtctctactaaaaa tacaaaaaattagctgggcatggcggtgagtgcctgtaatcccagctac tcaggagtctgaggcaggagaattgcttgaacctgggaggtggaggttg cagtgagetgagategtgccattgcgctccagcctgggcaacagtgcga gactccgtcaaaaaaaaaaaaataactggatgtgatggtgtgcacctgt agttccagctacttgggagactgaggtgggaggatcacttgagcctggg agactgaggcagcagtgagctgagatcatgccactgctttccaacctgg gcaacagagtgagatcctgtctcagaaagaaaaaaaaaaaaaagacaac ctcttgctctgttgcccaggctggagtgtagtagcgtgatcatagctca ctgcagccgtaaactcctgggctcaagcaatcctcctgccactgcctct tgattaggtggaaccacaggcatgcaccaccacacgtacctaattttat atatatatttttttatttttcatttttatttatttttgtttttttgagt tgaagtctcactctgttgcccaggccggagtacagtggcacaatcttgg ctcactgcaacctctgcctcccaagatcaagcaattctcgtgcttcagc ctccaaagtagctgagattacaggtacccaccataatgcctggctgatt
tttgtatttttcgtagagacaaggtttcaccttgttggccaggctgatc tcaaactcctgacctcaagtgatccacctcccccggctacccaaagtac tgggattataggtgtgagccaccatgcctgggtaacacccaactaattt taaatatatattttgtagagatggggtctagccttgttgcccacgctgg tctcaaattcctgggctcaagtgatcctctcgcctgagcttcccaaagt ggtagaattgcaggcatgaattgctgcacccagcctcatctgtgctgtg aattatgtgctgtattgactctcaagcatgatgaccattggtggtttct gtaccatttcctgttactttactgaaacacacctactccattaacttct tgggttaagtctagaaagtaacagtttacttgtaaaccacatttcttat ccccaataagtatttttttaagattattaaagttcattattactaccct atgatgtgaaagtgtcatttgcttaatctttttaattttttattctcaa cctcatcttactgaagagaataaaactcttttaccatattcttaaaatg tggaattctcggccaggtgcagtggctcacgcctgtaattccatcactt tgggaggccaaggtgggtggatcatctgaggtcaggagttcaagaccag cctggccaacatggtgaaaccccgtctctactaaaaatacaaaaattat ctgggtgtggtggcgcgtgcctgtaggcccagctactcaggaggctgag gcaggagaattgcttgaacccaagaggtggaggttgcagtgagcctaga ttgctgccactgcactccagcctgggtgacagcagaactctgtctcaaa aaaaagatgtggaattcttttctgcaaatgttctctaatagtatacctt cttcagtctgtcgatatatgtatgctattattttacaagtaatacatgt tgattgtattggaaattatagaaaagattatattggattgtttagaaaa tatttttaaatgtgaagaaaaatataaaaattactcccttgttccactt tccccactctcaagtcagactatgttgttttcatagttagtagctagca gtctaccccactagattatatgcttcacagagggaagggaccctcaaga
cttcactggattgagtagcacccaataccttgcttgctgcctggtttgt gatgggcatactgtaagaaaaaaaaatctgaatgacaaaatgtttttcc ataataccagacttcctcttgaagagatgggtcgtaatgttgtagtctt acatgcttacgtagacaatcaaagcaagaatactcaataaatggctatt taccacttgaaagaaa (SEQ ID NO: 676)
РррЗсс
aaggcggaagggtggggagggcggcgctcggggcgggaggcccggccgg gtccgctaggacagcggggccgctgggaagttgtgagagcggcgctcgg gggcgcgcttgcgtgcacgagggcccgggccgcgagcagccgcggccgt cccggtcgccacccttagcagcggtcgcggtcggtgccgaagcggtgtt ccccgccttagccgctggcgcctcccaagagagcggccggtgggccctc gtcctgtcagtggcgtcggaggccggcgctgcggtggccgcgcccttct ggtgctcggacaccgctgaggagccggggccgggcacggctggctgacg gctccgggcagctaaggctgcccgaggagaaggcggcggccgcggcgta ggcgcacgtccggcgggctcctggagcctggaggaggccgaggggacca tgtccgggaggcgcttccacctctccaccaccgaccgcgtcatcaaagc tgtcccctttcctccaacccaacggcttactttcaaggaagtatttgag aatgggaaacctaaagttgatgttttaaaaaaccatttggtaaaggaag gacgactggaagaggaagtagccttaaagataatcaatgatggggctgc catcctgaggcaagagaagactatgatagaagtagatgctccaatcaca gtatgtggtgatattcatggacaattctttgacctaatgaagttatttg aagttggaggatcacctagtaacacacgctacctctttctgggtgacta tgtggacagaggctatttcagtatagagtgtgtgctgtatttatggagt ttaaagattaatcatcccaaaacattgtttctgcttcggggaaatcatg aatgcaggcatcttacagactatttcaccttcaaacaggaatgtcgaat
NM 001243974
NM 008915
caaatattcggaacaggtgtatgatgcctgtatggagacatttgactgt cttcctcttgctgccctcttaaaccagcagtttctctgtgtacatggag gaatgtcacctgaaattacttctttagatgacattaggaaattagacag gtttacggaacctcccgcctttggacctgtgtgtgacctgctttggtct gatccctcagaggattatggcaatgagaagaccttggagcactataccc acaacactgtccgagggtgctcttatttctacagttaccctgcagtttg tgaatttttgcagaacaataatttactatcaattatcagagcccatgaa gcccaagatgctgggtatcgaatgtacaggaagagccaagccacaggct ttccatcacttattacaattttctctgcccccaattacctagatgtcta taacaataaagctgctgtgttgaaatatgaaaacaatgtcatgaatatc aggcagtttaactgttctccacacccctactggcttccaaactttatgg atgttttcacatggtctttgccttttgttggggaaaaagtcacagagat gctggtaaatgtgctcaacatatgctctgatgacgaactgatttctgat gatgaagcagaagatcactacattccaagctatcagaaaggaagcacta cagttcgtaaggagatcatcaggaataagatcagagccattgggaagat ggcacgggtcttttcaattcttcggcaagaaagtgagagtgtgctgact ctcaagggcctgactcccacaggcacactccctctgggcgtcctctcag gaggcaagcagactatcgagacagccacagtagaagcggtagaggcccg ggaagccatcagagggttctcgcttcagcacaagatccggagttttgaa gaagcgcgaggtctggaccgaattaatgagcgaatgccaccccgaaagg atagcatacacgctggtgggccaatgaaatctgtaacctcagcacactc acatgctgcgcacaggagcgaccaagggaagaaagcccattcatgactt agagtcctgccgtggctcaggtggatctaaaactcaagaacaaattcta tttatttattattggaaaatgaaaagcaactcaaaacaacttcaacgtg
gaggtgcatttataattcagtctgcatttattctgtaaaaaggtggctg ttttataaattcttttaatttatgttcaatatatataaaaagtgcatct gttttgtttttcccttttttctccataattttaagaaatgaatctgatt gttgtcaacacatttgtgaagtcttgtgctataaaggggaacttcccct aataaaagggccttggaaacctcaaacctgggtttctgacttgaaaaaa aaaaaaaaa (SEQ ID NO: 677)
В некоторых аспектах нуклеиновые кислоты в композициях
кодируют последовательности мшРНК, мишенями которых являются
последовательности, представленные в таблице 2. Такблица2,
кроме того, демонстрирует обогащение в опухоли по сравнению с
селезенкой выбранными мшРНК га основании анализа с
использованием глубокого секвенирования ("кратность
обогащения").
Arhgap5
11855
TRCN0000360421
GATCATGAACGTAACCATAAA
1,2
ARHGAP5
394
Arhgap5
11855
TRCN0000360349
TGATAATAGCAGCAACTAAAT
1,3
ARHGAP5
394
Arhgap5
11855
TRCN0000321112
AGCATGACTGGAGAGGTTTAA
1,4
ARHGAP5
394
Arhgap5
11855
TRCN0000321110
TGATAGTCAGAATCGAATTAT
1,4
ARHGAP5
394
Arhgap5
11855
TRCN0000321109
GAACTGGTTCATGGGTATATA
1,5
ARHGAP5
394
Arhgap5
11855
TRCN0000012706
GCAAGCTCTAAGAGGAGTATT
3,6
ARHGAP5
394
Arhgap5
11855
TRCN0000012707
CCTGATCCTTTGATTCCATAT
6,0
ARHGAP5
394
Arhgap5
11855
TRCN0000321181
ACAGATCCTCTTGGTATTATA
8,3
ARHGAP5
394
Arhgap5
11855
TRCN0000012703
GCACGATTTAATGTCAACATT
15,7
ARHGAP5
394
Blvrb
233016
ND000310
CTCAGTCCCACTACAGTAATG
0,8
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000308
TGACCACATCCGGATGCATAA
1,0
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000306
GCCTCACCACCAATGAGTATG
1,2
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000309
TGAGAAATGACACAAATAGAG
1,2
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000303
TGCAAGAGTCAGGGCTGAAAT
1,3
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000301
GGAAGCTGTCATCGTGCTACT
1,5
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000304
GCATAAGATTCTGCAAGAGTC
1,9
BLVRB
645
Blvrb
233016
TRCN0000042385
CCTCAGTCCCACTACAGTAAT
2,2
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000302
TCGAGGGTCATATCCAAGCAT
2,4
BLVRB
645
Blvrb
233016
TRCN0000324726
GAACATCGTGACAGCCATGAA
3,0
BLVRB
645
Blvrb
233016
TRCN0000042384
CCAATGAGTATGACGGACACA
3,1
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000307
GAGGGTCATGCATCCTGAGAA
3,1
BLVRB
645
Blvrb
233016
ND000305
TAGGAGACCAACCACTAACTG
5,3
BLVRB
645
Blvrb
233016
TRCN0000324662
GCTGAAATACGTGGCAGTGAT
5,3
BLVRB
645
Blvrb
233016
TRCN0000042386
CGGATGCATAAGATTCTGCAA
8,0
BLVRB
645
Cblb
208650
ND000027
TCTACATCGATAGTCTCATGA
0,7
CBLB
868
Cblb
208650
TRCN0000244603
CTACACCTCACGATCATATAA
0,9
CBLB
868
Cblb
208650
TRCN0000244605
TGAGCGAGAATGAGTACTTTA
0,9
CBLB
868
Cblb
208650
ND000026
ATCGAACATCCCAGATTTAGG
1,0
CBLB
868
Cblb
208650
ND000029
TAAAGTGTACTGGTCCATTAG
1,4
CBLB
868
Cblb
208650
TRCN0000244607
CTTGTACTCCAGTACCATAAT
1,5
CBLB
868
Cblb
208650
ND000028
GTATGAGACAGAAGGACTGAG
1,5
CBLB
868
Cblb
208650
TRCN0000244604
CCAGATTTAGGCATCTATTTG
1,6
CBLB
868
Cblb
208650
ND000031
TCAGCACTTGAGACTTATATT
1,7
CBLB
868
Cblb
208650
ND000024
TACACCTCACGATCATATAAA
2,1
CBLB
868
Cblb
208650
ND000033
AACACAGACGCCATGATTTGC
5,1
CBLB
868
Cblb
208650
ND000032
AAGATGTCAAGATTGAGCCTT
5,3
CBLB
868
Cblb
208650
TRCN0000244606
CCCTGATTTAACCGGATTATG
6,1
CBLB
868
Cblb
208650
ND000030
AGCCAGGTCCAATTCCATTTC
10,0
CBLB
868
Cblb
208650
ND000025
CGAGCGATCCGGCTCTTTAAA
10,8
CBLB
868
Cdkn2a
12578
ND000317
CTTGGTGAAGTTCGTGCGATC
0,6
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000257162
CGCTCTGGCTTTCGTGAACAT
0,8
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000362594
GATGATGATGGGCAACGTTCA
0,9
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000231228
TCCCAAGAGCAGAGCTAAATC
0,9
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000362666
TCTTGGTGAAGTTCGTGCGAT
1,0
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000362596
ACGGGCATAGCTTCAGCTCAA
1,1
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000222730
GCTCGGCTGGATGTGCGCGAT
1,1
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000231225
TTGAGGCTAGAGAGGATCTTG
1,2
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000222731
CATCAAGACATCGTGCGATAT
2,1
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000077815
GTGAACATGTTGTTGAGGCTA
2,3
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000077816
GTCTTTGTGTACCGCTGGGAA
3,3
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000362595
CTAGCGATGCTAGCGTGTCTA
4,1
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000222729
GTGATGATGATGGGCAACGTT
5,6
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000231226
GCTCAACTACGGTGCAGATTC
6,9
CDKN2A
1029
Cdkn2a
12578
TRCN0000231227
TCAAGACATCGTGCGATATTT
7,2
CDKN2A
1029
Dgka
13139
TRCN0000024825
GAGCTAAGTAAGGTGGTATAT
0,7
DGKA
1606
Dgka
13139
TRCN0000368765
GCGATGTACTGAAGGTCTTTG
0,7
DGKA
1606
Dgka
13139
ND000059
TCAGTGATGTGTACTGCTACT
0,8
DGKA
1606
Dgka
13139
ND000054
GTATATCTCGACCGATGGTTC
1,0
DGKA
1606
Dgka
13139
TRCN0000378505
TGATGCGAGTGGCCGAATATC
1,1
DGKA
1606
Dgka
13139
TRCN0000024828
CCTAGGATTTGAACAATTCAT
1,2
DGKA
1606
Dgka
13139
ND000058
AAAGATTCTCAAGGATATAGA
1,6
DGKA
1606
Dgka
13139
ND000056
GAGGGATGTTCCATCACCTTC
1,9
DGKA
1606
Dgka
13139
ND000053
TACAGACATCCTTACACAACC
2,0
DGKA
1606
Dgka
13139
TRCN0000024824
GCCGAATATCTAGACTGGGAT
3,4
DGKA
1606
Dgka
13139
TRCN0000024827
CGGCTGGAAGTGGTAGGAATA
3,5
DGKA
1606
Dgka
13139
ND000055
GTTCCTCAGTTCCGGATATTG
5,0
DGKA
1606
Dgka
13139
TRCN0000024826
CCTGAGCTGTAACTTCTGTAA
100
6,8
DGKA
1606
Dgka
13139
ND000057
TGCGAACAGAGCATTAGCCTT
101
7,8
DGKA
1606
Dgka
13139
TRCN0000361167
TGTTCCTCAGTTCCGGATATT
102
10,2
DGKA
1606
Dgkz
104418
ND000063
CACCTTCCACAGCAAGGAGAT
103
0,4
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000061
ATCGTGGTGCATACCCAATGC
104
0,4
DGKZ
8525
Dgkz
104418
TRCN0000278613
CCTGGATGTCTTTAACAACTA
105
0,7
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000060
CGAGTAGTGTGTGACGGAATG
106
0,9
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000065
CACATCTGGTTTGAGACCAAC
107
1,4
DGKZ
8525
Dgkz
104418
TRCN0000278690
GAGAAGTTCAACAGCCGCTTT
108
1,6
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000069
ACTGTGCAGGCACCATGCCCT
109
2,0
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000068
AGAAGCTGTTCAGATCTAGGG
110
2,8
DGKZ
8525
Dgkz
104418
TRCN0000297512
GTGGACTTCAAAGAATTCATT
111
3,6
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000064
ACTACGAGGCTCTACATTATG
112
5,2
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000067
AGTACATAATTTGAGGATTCT
113
5,5
DGKZ
8525
Dgkz
104418
TRCN0000278682
CGAGGCTCTACATTATGACAA
114
6,0
DGKZ
8525
Dgkz
104418
TRCN0000278614
CCTGTAAGATCGTGGTGCATA
115
6,4
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000062
GAAACCGCAGTGCATCGTCTT
116
7,7
DGKZ
8525
Dgkz
104418
ND000066
CAGCATCACGGATTCGAATTG
117
14,0
DGKZ
8525
Egr2
13654
TRCN0000218224
AGGATCCTTCAGCATTCTTAT
118
0,4
EGR2
1959
Egr2
13654
ND000075
AGCTCTGGCTGACACACCAG
119
0,6
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000081682
CCAGGATCCTTCAGCATTCTT
120
0,6
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000081678
GCTGTATATTTCTGCCTATTA
121
1,3
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000235777
ACTATTGTGGCCGCAAGTTTG
122
1,3
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000235775
AGCGGGTACTACCGTTTATTT
123
1,6
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000235778
CTGTATATTTCTGCCTATTAA
124
2,4
EGR2
1959
Egr2
13654
ND000073
GTGACCACCTTACTACTCACA
125
3,2
EGR2
1959
Egr2
13654
ND000074
GTTTGCCAGGAGTGACGAAAG
126
3,9
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000081681
CCTTCACCTACATGGGCAAAT
127
4,0
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000081680
CCAGAAGGTATCATCAATATT
128
5,1
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000081679
CCACTCTCTACCATCCGTAAT
129
5,2
EGR2
1959
Egr2
13654
ND000072
CCGTGCCAGAGAGATCCACAC
130
5,6
EGR2
1959
Egr2
13654
ND000071
CAATAGGTTGGGAGTTGCTGA
131
8,6
EGR2
1959
Egr2
13654
TRCN0000235776
ACTCTCTACCATCCGTAATTT
132
10,2
EGR2
1959
Eif2ak3
13666
TRCN0000321872
CCATGAGTTCATCTGGAACAA
133
0,4
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000328
CATAGCTCCTTCTCCTGAAAG
134
0,9
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000332
GATGACTGCAATTACGCTATC
135
1,1
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000325
GTCGCCATTTATGTCGGTAGT
136
1,1
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000326
TGGAAACAACTACTCCCATAA
137
1,1
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
TRCN0000321873
GTGACCCATCTGCACTAATTT
138
1,3
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000329
GCATGATGGCAACCATTATGT
139
1,3
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000330
ATCCCGATATCTAACAGATTT
140
1,6
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000333
TGTCGCCGATGGGATAGTGAT
141
1,9
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
TRCN0000321805
GCCACTTTGAACTTCGGTATA
142
2,0
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
TRCN0000028759
CCATACGATAACGGTT АСТАТ
143
4,8
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
TRCN0000321806
CCTCTACTGTTCACTCAGAAA
144
5,8
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000327
CATACGATAACGGTTACTATC
145
5,9
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
ND000331
CGTGACCCATCTGCACTAATT
146
7,3
EIF2AK3
9451
Eif2ak3
13666
TRCN0000028799
GCCTGTTTGATGATACAAGTT
147
13,4
EIF2AK3
9451
Entpdl
12495
ND000082
GAATGTAAGTGAGCTCTATGG
148
0,3
ENTPD1
953
Entpdl
12495
TRCN0000222348
CCGAACTGATACCAACATCCA
149
0,4
ENTPD1
953
Entpdl
12495
TRCN0000222346
CCCATGCTTTAACCCAGGATA
150
0,4
ENTPD1
953
Entpdl
12495
TRCN0000222345
CCTTGGTTTCACCTCTATCTT
151
0,8
ENTPD1
953
Entpdl
12495
TRCN0000222344
CCAAGGACATTCAGGTTTCAA
152
0,9
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000085
CAGGAACAGAGTTGGCTAAGC
153
1,0
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000078
TTAACCCAGGATACGAGAAGG
154
1,1
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000081
ACTATCTCAGCCATGGCTTTG
155
1,2
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000077
TTCAAGTGGTGGCGTCCTTAA
156
1,3
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000076
GACTTTGGGCTACATGCTGAA
157
1,4
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000080
GGCATGCGCTTGCTTAGAATG
158
1,9
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000084
GCACTGGAGACTACGAACAGT
159
1,9
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000083
GTGGATTACTATTAACTATCT
160
6,5
ENTPD1
953
Entpdl
12495
TRCN0000222347
GCTCCTGGGAACAGATTCATT
161
7,3
ENTPD1
953
Entpdl
12495
ND000079
ACCATTTGATCAGTTTCGAAT
162
13,3
ENTPD1
953
Fllr
16456
TRCN0000284518
GCTGATTCCCAGGACTATATT
163
0,6
FUR
50848
Fllr
16456
TRCN0000124868
GTATCGCTGTATAACTATGTA
164
0,6
FUR
50848
Fllr
16456
ND000093
ATTGACCTGCACCTACTCT
165
0,6
FUR
50848
Fllr
16456
ND000094
GCCGGGAGGAAACTGTTGT
166
0,6
FUR
50848
Fllr
16456
TRCN0000271840
CCTGGTTCAAGGACGGGATAT
167
0,7
FUR
50848
Fllr
16456
TRCN0000271841
TTCGGTGTACACTGCTCAATC
168
0,7
FUR
50848
Fllr
16456
TRCN0000271792
CACCGGGTAAGAAGGTCATTT
169
0,9
FUR
50848
Fllr
16456
ND000088
ACTTGCATGGTCTCCGAGGAA
170
0,9
FUR
50848
Fllr
16456
ND000086
GTAACACTGATTCTCCTTGGA
171
1,0
FUR
50848
Fllr
16456
ND000090
GTTATAACAGCCAGATCACAG
172
1,1
FUR
50848
Fllr
16456
ND000092
TAGCTGCACAGGATGCCTTCA
173
1,3
FUR
50848
Fllr
16456
ND000087
GGTTTGCCTATAGCCGTGGAT
174
1,9
FUR
50848
Fllr
16456
TRCN0000271794
CCTATAGCCGTGGATACTTTG
175
4,3
FUR
50848
Fllr
16456
ND000091
CTCCGTTGTCCATTTGCCTTA
176
4,6
FUR
50848
Fllr
16456
ND000089
CCACCCTCTGAATATTCCTGG
177
6,8
FUR
50849
Fyn
14360
TRCN0000023383
CATCCCGAACTACAACAACTT
178
0,7
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000023381
CCTTTGGAAACCCAAGAGGTA
179
0,9
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000361148
TCTGAGACAGAAGCGTGTTAT
180
1,4
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000023379
GCTCGGTTGATTGAAGACAAT
181
1,4
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000361213
TTGACAATGGTGGATACTATA
182
1,9
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000361149
TCTTCACCTGATTCAACTAAA
183
1,9
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000023382
GCTCTGAAGTTGCCAAACCTT
184
2,0
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000361212
CACTGTTTGTGGCGCTTTATG
185
2,3
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000361152
CATCGAGCGCATGAATTATAT
186
2,9
FYN
2534
Fyn
14360
TRCN0000023380
CCTGTATGGAAGGTTCACAAT
187
6,5
FYN
2534
Fyn
14360
ND000111
TCGATGTTATGTCAAAGGCC
188
0,5
FYN
2534
Fyn
14360
ND000112
ACCACACAAACTTCCTGTAT
189
0,7
FYN
2534
Fyn
14360
ND000115
ACAGCTCCTGTCCTTTGGAAA
190
1,0
FYN
2534
Fyn
14360
ND000113
GCAGCGAAACTGACAGAGGAG
191
4,1
FYN
2534
Fyn
14360
ND000114
ACACTGTTTGTGGCGCTTTAT
192
4,4
FYN
2534
Grk6
26385
ND000356
TGACTACCACAGCCTATGTGA
193
0,5
GRK6
2870
Grk6
26385
TRCN0000022851
CGAGAAACAGATCTTGGAGAA
194
0,6
GRK6
2870
Grk6
26385
ND000355
CTAACCTTGCTTAGCAACTGT
195
0,6
GRK6
2870
Grk6
26385
ND000359
AGGAATGAGCGCTACACGTTC
196
1,0
GRK6
2870
Grk6
26385
TRCN0000022853
TCTTGGAGAAAGTGAACAGTA
197
1,1
GRK6
2870
Grk6
26385
TRCN0000022850
GCGCCTGTTATTTCGTGAGTT
198
1,1
GRK6
2870
Grk6
26385
TRCN0000361581
GAACAGTTCTCTACAGTTAAA
199
1,1
GRK6
2870
Grk6
26385
ND000354
CAGGCTATTTATTGCAAGGAT
200
1,2
GRK6
2870
Grk6
26385
ND000357
GAGCTTAGCCTACGCCTATGA
201
1,3
GRK6
2870
Grk6
26385
TRCN0000022852
GCAAAGGCAAGAGCAAGAAAT
202
1,3
GRK6
2870
Grk6
26385
TRCN0000361580
CCATGGCTCTCAACGAGAAAC
203
2,7
GRK6
2870
Grk6
26385
ND000358
TCTATGCTGCTGAGATCTGCT
204
4,2
GRK6
2870
Grk6
26385
TRCN0000361508
GCCGACTAATGCAGAACTTTC
205
4,5
GRK6
2870
Grk6
26385
ND000360
CGCCTGTTATTTCGTGAGTTC
206
5,8
GRK6
2870
Grk6
26385
TRCN0000022849
CGCCGACTAATGCAGAACTTT
207
11,0
GRK6
2870
Hipkl
15257
ND000371
CTACCTGCAATCACGCTACTA
208
0,3
HIPK1
204851
Hipkl
15257
ND000374
AGCGGAGGGTTCACATGTATG
209
0,4
HIPK1
204851
Hipkl
15257
TRCN0000361231
CAACCAGTACAGCACTATTAT
210
0,4
HIPK1
204851
Hipkl
15257
TRCN0000361237
TACCCTTTCTCTGGCTAATTC
211
0,7
HIPK1
204851
Hipkl
15257
TRCN0000368011
AGCCTGAAGGCGAGGTCTAAT
212
1,1
HIPK1
204851
Hipkl
15257
ND000376
CATTGGCACCCGTACTATCAT
213
1,1
HIPK1
204851
Hipkl
15257
TRCN0000023157
GCTTCAGAATACGATCAGATT
214
1,2
HIPK1
204851
Hipkl
15257
ND000375
GAAGACTCTTAACCACCAATT
215
1,8
HIPK1
204851
Hipkl
15257
TRCN0000361233
ATACGATCAGATTCGCTATAT
216
1,9
HIPK1
204851
Hipkl
15257
ND000372
CTGTCATACATTTGGTCTCTT
217
2,7
HIPK1
204851
Hipkl
15257
ND000377
GCTACTAGCCCTGAGTTCTTA
218
3,4
HIPK1
204851
Hipkl
15257
TRCN0000361232
TATAACTTTGTCCGTTCTTAT
219
4,5
HIPK1
204851
Hipkl
15257
ND000373
CTCGCTGCTAAACTACCAATC
220
6,3
HIPK1
204851
Hipkl
15257
ND000378
GCCAATCATCATTCCAGATAC
221
6,7
HIPK1
204851
Hipkl
15257
TRCN0000023154
CGCTCCAAATACAAGCACAAA
222
12,3
HIPK1
204851
Inpp5b
16330
TRCN0000080903
GCTTAGAGGTTCCTGGATAAA
223
0,5
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
TRCN0000080906
CCTTTGGTTCACACACCAGAA
224
0,7
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
ND000130
CTGTTAGTGACCTGACGTTGA
225
0,8
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
TRCN0000305895
ATATTCTAGCTAGCATATTTG
226
0,8
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
TRCN0000311434
GGCCAGAGTTTGACCATATAA
227
1,4
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
ND000131
GAGTCCTTCACGATTCATAAT
228
1,4
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
TRCN0000080905
CGGATCTCCTATCCATACATT
229
1,5
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
ND000128
GTATCGGACAAGGCTCACATT
230
1,6
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
ND000129
TTCGAGACACAATCGTGAGAT
231
1,9
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
ND000127
CTGTCCAAGCCGCAAACATGT
232
3,1
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
ND000133
CTCAAGCTTGTATTCCAACTT
233
4,3
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
ND000132
ATATAAGGGACTGTCTAGATA
234
4,6
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
TRCN0000080904
CGAGTCCTTCACGATTCATAA
235
6,2
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
TRCN0000080907
CCGAGTCCTTCACGATTCATA
236
8,1
INPP5B
3633
Inpp5b
16330
ND000134
CGTCCGACTGGTTGGGATTAT
237
9,5
INPP5B
3633
Ipmk
69718
TRCN0000024840
CCCAGATGGTACAGTTCTGAA
238
0,5
IPMK
253430
Ipmk
69718
ND000384
CGAGGCTCTGTGGGTTCTATA
239
0,5
IPMK
253430
Ipmk
69718
TRCN0000360733
TTGCCGTGCTTCGGAGTATTT
240
0,6
IPMK
253430
Ipmk
69718
TRCN0000360808
GATGCGATTGCCGCCAGTATT
241
0,7
IPMK
253430
Ipmk
69718
TRCN0000024839
CCTAACGAAAGAGACCCTGAA
242
0,8
IPMK
253430
Ipmk
69718
ND000383
ATTGCCGTGCTTCGGAGTATT
243
1,1
IPMK
253430
Ipmk
69718
ND000380
AGCGGAAGTACGGATGATAGA
244
1,3
IPMK
253430
Ipmk
69718
TRCN0000360807
GAGGCTCTGTGGGTTCTATAT
245
1,4
IPMK
253430
Ipmk
69718
ND000379
TGCCCAAATACTACGGCGTCT
246
1,7
IPMK
253430
Ipmk
69718
TRCN0000024843
CGGCAAGGACAAAGTGGGCAT
247
2,9
IPMK
253430
Ipmk
69718
ND000381
CTAGCAACACAGTCGATGAGG
248
3,2
IPMK
253430
Ipmk
69718
TRCN0000360732
ACCAAACGATGTGTACCTAAA
249
4,0
IPMK
253430
Ipmk
69718
TRCN0000024841
ACCCTGTATAATGGACGTGAA
250
4,1
IPMK
253430
Ipmk
69718
ND000382
CCTGTATAATGGACGTGAAGA
251
4,7
IPMK
253430
Ipmk
69718
TRCN0000024842
CACCAAACGATGTGTACCTAA
252
6,9
IPMK
253430
Jun
16476
TRCN0000229526
GAACAGGTGGCACAGCTTAAG
253
0,5
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000042693
CGGCTACAGTAACCCTAAGAT
254
0,5
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000055205
CTACGCCAACCTCAGCAACTT
255
0,7
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000055206
CGGTGCCTACGGCTACAGTAA
256
0,8
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000042695
GCTTAAGCAGAAAGTCATGAA
257
0,9
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000360499
AGCGCATGAGGAACCGCATTG
258
0,9
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000360498
CCTATCGACATGGAGTCTCAG
259
0,9
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000042697
GAAGCGCATGAGGAACCGCAT
260
1,0
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000360511
ATTCGATCTCATTCAGTATTA
261
1,1
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000360572
GGATCGCTCGGCTAGAGGAAA
262
1,2
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000055207
GCGGATCAAGGCAGAGAGGAA
263
3,1
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000229528
GGCATGTGCTGTGATCATTTA
264
3,2
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000042694
ACGCAGCAGTTGCAAACGTTT
265
3,3
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000055203
GCGGGCTAACTGCAATAAGAT
266
5,2
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000229525
CAGTAACCCTAAGATCCTAAA
267
5,5
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000229527
GCTAACGCAGCAGTTGCAAAC
268
5,8
JUN
3725
Jun
16476
TRCN0000218856
GAAAGTCATGAACCACGTTAA
269
6,4
JUN
3725
Mast2
17776
TRCN0000225743
AGCAACAACAGGAAGGTATAT
270
0,4
MAST2
23139
Mast2
17776
TRCN0000022896
GCATCCACGAACAAGACCATA
271
0,7
MAST2
23139
Mast2
17776
TRCN0000225741
TTGAGACCAAGCGTCACTTAT
272
1,0
MAST2
23139
Mast2
17776
ND000396
CCGCAAGAGCTTGATTGTAAC
273
1,2
MAST2
23139
Mast2
17776
TRCN0000022898
GCTGGTTCTGAAGAGTGGAAA
274
1,2
MAST2
23139
Mast2
17776
ND000392
GATATTACGGAAGCGGTTATC
275
1,3
MAST2
23139
Mast2
17776
ND000393
ACGAATACCACGGTCCCAAAT
276
1,4
MAST2
23139
Mast2
17776
TRCN0000218393
GTGGAAACAAGGTATCAATTT
277
1,5
MAST2
23139
Mast2
17776
ND000397
GAAGTGTGCTATCCGGGAAAG
278
1,6
MAST2
23139
Mast2
17776
ND000395
GCCTCATTACGTCACACTATT
279
1,6
MAST2
23139
Mast2
17776
TRCN0000022895
CCTCATTACGTCACACTATTT
280
1,9
MAST2
23139
Mast2
17776
TRCN0000225742
ACTTGTATGAGGGTCATATTG
281
4,1
MAST2
23139
Mast2
17776
TRCN0000022897
CGAATGAGAAACCAATCCCTT
282
4,2
MAST2
23139
Mast2
17776
ND000394
GCATCAAACCTGGTTCGAATG
283
4,3
MAST2
23139
Mast2
17776
TRCN0000022894
CCCTGTCAACAAAGTAATCAA
284
5,1
MAST2
23139
Mdfic
16543
TRCN0000237997
GGAGGAAACAGGCAAGATAAA
285
0,2
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000237994
TGATGCGGGACCAGTCCATTT
286
0,4
MDFIC
29969
Mdfic
16543
ND000148
TGTAATGAGGACAATACGGAG
287
0,4
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000362432
TCCTGACCCTCTGCAACATTG
288
0,6
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000237996
TGACATGGACTGCGGCATCAT
289
0,8
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000095981
CGAAGCATGTAATGAGGACAA
290
1,0
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000095982
GACATCAGTAAGAAGAGTAAA
291
1,1
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000237998
TGCCAAGTGACAGGTTATAAA
292
1,1
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000095983
TGCAACATTGTCCTGGGACAA
293
1,5
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000237995
ATCGTCAGACTGTCTAGAAAT
294
1,6
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000095980
CCGTGGAGAATCACAAGATAT
295
2,6
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000362509
GTTTATCTATTGGAGGTTAAA
296
4,4
MDFIC
29969
Mdfic
16543
ND000147
GAAGAGTAAAGTAAATGCTGT
297
5,1
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000095979
CGCCGGATGTATGTGGTTTAA
298
7,2
MDFIC
29969
Mdfic
16543
TRCN0000362431
GCCGGATGTATGTGGTTTAAT
299
10,0
MDFIC
29969
Nptxr
73340
TRCN0000219475
CTTGGTCTCTCCCATCATATA
300
0,5
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000150
ACAGCAACTGGCACCATATCT
301
0,8
NPTXR
23467
Nptxr
73340
TRCN0000219474
GATACCTTGGGAGGCCGATTT
302
0,8
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000155
GGCCAATGAGATCGTGCTTCT
303
1,0
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000154
GTAGCCTTTGACCCTCAAATC
304
1,0
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000152
CAATGGAGCTGCTGATCAACG
305
1,0
NPTXR
23467
Nptxr
73340
TRCN0000219472
GACAGCAACTGGCACCATATC
306
1,1
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000158
TTGGTCTCTCCCATCATATAC
307
1,3
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000159
ATACCTTGGGAGGCCGATTTG
308
1,3
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000153
CCTGTCAGTTTCAGGACTTTG
309
2,0
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000156
TCCGCAACAACTACATGTACG
310
2,1
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000157
ATAAGCTGGTAGAGGCCTTTG
311
3,9
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000149
CGGTGCCGTCATCTGCATCAT
312
6,6
NPTXR
23467
Nptxr
73340
TRCN0000219473
CAAGCCACACGGCATCCTTAT
313
7,0
NPTXR
23467
Nptxr
73340
ND000151
TCAAGCCACACGGCATCCTTA
314
7,2
NPTXR
23467
Nuak2
74137
ND000434
TTGGACTTGCCTGAACGTCTT
315
0,2
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000361872
TTTGACGGGCAGGATCATAAA
316
0,4
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000024271
GCCAATGGAAACATCAAGATT
317
0,7
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000361873
GTGTAGTGACTGCCATTATTT
318
0,7
NUAK2
81788
Nuak2
74137
ND000436
CCAAGGTGTGCAGCTTCTTCA
319
1,6
NUAK2
81788
Nuak2
74137
ND000431
CCTGATCCGGTGGCTGTTAAT
320
1,7
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000378457
GGGCTCATCAAGTCGCCTAAA
321
1,8
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000024270
CCGAAAGGCATTCTCAAGAAA
322
2,1
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000024273
GTCGCCTAAACCTCTGATGAA
323
2,1
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000024272
CCGAGGCGATCTGTATGATTA
324
2,1
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000378409
GAAGTCTCGACAGCGTGAATC
325
2,8
NUAK2
81788
Nuak2
74137
ND000435
TCGGACCGCTGTTTGACTTCA
326
2,8
NUAK2
81788
Nuak2
74137
ND000433
TAGCAGCAAGATTGTGATTGT
327
4,5
NUAK2
81788
Nuak2
74137
ND000432
AGTCTCGACAGCGTGAATCTG
328
5,4
NUAK2
81788
Nuak2
74137
TRCN0000024269
CCCAAGGAAAGGCATCCTTAA
329
13,1
NUAK2
81788
Pdzklipl
67182
TRCN0000244507
GATGGCAGATACTCCTCAATG
330
0,4
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
ND000172
GGGAATGGATGGCAGATACTC
331
0,5
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
ND000176
CTCCCTCACCTCTCTAGAATC
332
0,6
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
ND000170
TGCAATCGTCTTCGCCGTCAA
333
0,8
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
ND000173
CATTGCTGTCGCTGTGTTCTT
334
1,2
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
TRCN0000244505
ACAAGAATGCCTACGAGAATG
335
1,7
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
ND000174
TTCTTGGTCCTTGTTGCAATC
336
2,0
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
TRCN0000244509
GGAGCACAGTGATGATCATTG
337
2,5
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
ND000171
ACTGCTCTACAGGAATCTACT
338
2,5
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
ND000175
CTGTCAACAAGGTCTAGGAAA
339
4,8
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
TRCN0000244508
CCTCATTGCTGTCGCTGTGTT
340
6,3
PDZK1IP1
10158
Pdzklipl
67182
TRCN0000244506
TCTACAGGAATCTACTGAAAC
341
12,9
PDZK1IP1
10158
Pkdl
18763
ND000445
CAAGTCCTATGACCCTAATTT
342
0,5
PKD1
5310
Pkdl
18763
TRCN0000304664
GGTGGACACCACTCAGTATTA
343
0,8
PKD1
5310
Pkdl
18763
TRCN0000072086
CCAACTCAACATCACCGTAAA
344
0,8
PKD1
5310
Pkdl
18763
TRCN0000304612
ACACAATACCACGCATATTTA
345
0,9
PKD1
5310
Pkdl
18763
ND000447
GGCCGCTTCAAATATGAAATA
346
1,2
PKD1
5310
Pkdl
18763
ND000444
TTCACTAGGAGTGGCATATTC
347
1,3
PKD1
5310
Pkdl
18763
ND000442
CATCTATAAGGGTAGTCTTTC
348
1,4
PKD1
5310
Pkdl
18763
ND000441
GTTATTACCTCTCTTGTTTCT
349
1,8
PKD1
5310
Pkdl
18763
ND000446
GTAGTCTACCCTGTCTATTTG
350
2,9
PKD1
5310
Pkdl
18763
TRCN0000072084
GCCCTGTACCTTTCAACCAAT
351
4,9
PKD1
5310
Pkdl
18763
ND000443
CATGTCATCGAGTACTCTTTA
352
6,2
PKD1
5310
Pkdl
18763
TRCN0000304611
CAACTGATGGTGTCCTATATA
353
7,7
PKD1
5310
Pkdl
18763
TRCN0000072085
CCATCATTGAAGGTGGCTCAT
354
8,9
PKD1
5310
Pkdl
18763
TRCN0000072087
GCTTCACTACTCTTCCTGCTT
355
9,9
PKD1
5310
Pkdl
18763
TRCN0000331808
CGCTCGCACTTTCAGCAATAA
356
47,6
PKD1
5310
Ppmlg
14208
TRCN0000326875
GAGGATGATAAAGACAAAGTA
357
0,3
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
TRCN0000326874
GCTTTCCTCAGCCCATTACAA
358
0,5
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
ND000458
GAGATGATGGTCCCTGGAATG
359
0,8
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
TRCN0000375841
TGACCACAGAGGAAGTCATTA
360
1,1
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
TRCN0000081212
GATGCCTTCTTGGCTATTGAT
361
1,1
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
TRCN0000306418
CCATGGATGGACGAGTCAATG
362
1,2
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
ND000460
TGACGCGATATGGGCAGAACT
363
1,2
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
ND000464
GCTACCATGACTATTGAAGAG
364
1,3
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
ND000462
TGGCAAAGCTTTAGATATGTC
365
2,1
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
ND000465
CATGGATGGACGAGTCAATGG
366
2,9
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
TRCN0000081210
CTTCGGTTATTGTCATCCATT
367
3,0
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
ND000459
TGCCTGTGCTCTGTTGTGTTG
368
3,6
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
ND000461
CAAATTAGTGAGCCCGGTACT
369
6,2
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
TRCN0000081209
GCCTTGTACTGTGCCAAATAT
370
7,1
PPM1G
5496
Ppmlg
14208
ND000463
CATGACGTGCATCATCATTTG
371
8,5
PPM1G
5496
Ppp2r2d
52432
ND000490
ACTTCGAGACCCATTTAGAAT
372
0,7
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
ND000488
CAGAAGATCCCAGCAGTAGAT
373
0,9
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
TRCN0000080899
GCCACCAATAACTTGTATATA
374
1,0
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
TRCN0000430828
ATAGTGATCATGAAACATATC
375
1,3
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
ND000487
ATATGTACGCCGGTCAATTAG
376
1,4
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
TRCN0000425449
ATGCTCATACATATCACATAA
377
1,5
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
TRCN0000427220
TCATCTCCACCGTTGAGTTTA
378
1,6
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
ND000491
GATCTGAGAATTAACCTATGG
379
1,7
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
TRCN0000080901
CCATTTAGAATTACGGCACTA
380
1,9
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
TRCN0000080902
CGGTTCAGACAGTGCCATTAT
381
2,0
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
ND000489
CACCGTTGAGTTTAACTACTC
382
4,0
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
ND000486
GCTCAATAAAGGCCATTACTC
383
4,9
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
TRCN0000431278
GAGAATTAACCTATGGCATTT
384
8,3
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
ND000492
CCACAGTGGTCGATACATGAT
385
16,3
PPP2R2D
55844
Ppp2r2d
52432
TRCN0000080900
CCCACATCAGTGCAATGTATT
386
17,2
PPP2R2D
55844
РррЗсс
19057
ND000512
CCCGAGGTCTAGACCGAATTA
387
0,1
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000510
TCACAGTGTGTGGTGATGTTC
388
0,4
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
TRCN0000012695
GCTGTATCTATGGAGCTTAAA
389
0,4
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
TRCN0000012693
CCTATGAGCAAATCACATTTA
390
0,4
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000511
AGGAATGTCGGATCAAGTATT
391
0,7
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
TRCN0000012694
CGGCTAACTTTGAAGGAAGTT
392
0,9
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
TRCN0000012696
CGGATGAAGAAATGAACGTAA
393
1,2
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000508
ACCTAGTAATACTCGCTACCT
394
1,4
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000513
CTGTATCTATGGAGCTTAAAG
395
1,6
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000515
AGAAATGAACGTAACCGATGA
396
1,8
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000514
CAAACAACTTAAACTTGGAGG
397
2,4
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000507
TGTAATTCAGTCGCATTTATT
398
2,6
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000506
GGACAATTCTTTGACCTGATG
399
4,2
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
TRCN0000012697
CGAGGTCTAGACCGAATTAAT
400
4,3
РРРЗСС
5533
РррЗсс
19057
ND000509
TTCCGTCACTTATTACGATTT
401
4,4
РРРЗСС
5533
Prkab2
108097
ND000529
CTGTGGTTACCAGTCAGCTTG
402
0,2
PRKAB2
5565
Prkab2
108097
TRCN0000025112
GTATGTCACCACGCTGCTGTA
403
0,4
PRKAB2
5565
Prkab2
108097
ND000527
CCCTCACCTACTCCAAGTTAT
404
0,7
PRKAB2
5565
РгкаЬ2
108097
TRCN0000361908
TATGAGTTCACGGAGTTTATT
405
0,7
PRKAB2
5565
РгкаЬ2
108097
TRCN0000025111
CGCAACCCATCGCTACAAGAA
406
0,8
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
TRCN0000025109
CATCGCTACAAGAAGAAGTAT
407
0,9
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
ND000528
CAATTGGAGCACCAAGATCCC
408
1,1
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
ND000530
AGTGGGTTCATGATCCGTCAG
409
1,1
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
ND000526
ACCGTTATCCGCTGGTCTGAA
410
1,8
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
TRCN0000361952
GATCTGAGGAGAGATTCAAAT
411
2,0
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
TRCN0000361953
CTTAACAAGGACACGAATATT
412
2,3
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
TRCN0000361910
CTCTGATAAAGAGTCATAATG
413
2,6
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
TRCN0000025110
CGCTGCTGTATAAGCCCATCT
414
4,1
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
ND000525
CTTACGGTCAAGAAATGTATG
415
4,8
PRKAB2
5565
РгкаЫ
108097
TRCN0000025113
CATTAAGGACAGTGTGATGGT
416
7,0
PRKAB2
5565
Ptpn2
19255
ND000532
TCCGAACACATGCTGCCATTT
417
0,5
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000029891
GCCAAGATTGACAGACACCTA
418
1,0
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000279253
AGACTATTCTGCAGCTATAAA
419
1,0
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000029893
CCGTTATACTTGGAAATTCGA
420
1,0
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000279254
AGTATCGAATGGGACTTATTC
421
1,2
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
ND000534
TTATATTAATGCCAGCTTAGT
422
1,4
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
ND000531
ATGTTCATGACTTGAGACTAT
423
1,7
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000279329
ATATGATCACAGTCGTGTTAA
424
2,2
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000279252
CGGTGGAAAGAACTTTCTAAA
425
2,2
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
ND000533
CCATATCTCACTTCCATTATA
426
4,7
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000279330
TCTCCTACATGGCCATAATAG
427
5,0
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000029890
CGGTGGAAAGAACTTTCTAAA
428
5,1
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
ND000535
TATCGAATGGGACTTATTCAG
429
5,5
PTPN2
5771
Ptpn2
19255
TRCN0000029892
CCTGTCTTGTTCTGATGGAAA
430
7,4
PTPN2
5771
Rbks
71336
ND000536
TCGCTGCAGTCAGTGTACAGG
431
0,4
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000543
GGCCTTCTACCTGGCTTACTA
432
0,6
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000537
CTGCAATGATTCTCCTAGAAC
433
0,9
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000544
AGTGGTGGGTTCCTGCATGAC
434
0,9
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000539
ATATGCCAGCTAGAAATAAGC
435
1,1
RBKS
611132
Rbks
71336
TRCN0000078936
GTGATGATATGCCAGCTAGAA
436
1,2
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000538
CATATTTCTACAGAGTTTACA
437
1,7
RBKS
611132
Rbks
71336
TRCN0000078934
TCAATAATGAAGGCCAGAATA
438
1,9
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000545
GCTGCCAGGTTGTGGTCATCA
439
2,7
RBKS
611132
Rbks
71336
TRCN0000078937
TGATGATATGCCAGCTAGAAA
440
4,0
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000541
CAAGGTTGGCAACGATTCTTT
441
4,1
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000542
GAGCCTGTTCCAAAGCACATT
442
5,0
RBKS
611132
Rbks
71336
TRCN0000078935
CCAAAGCACATTCCCACTGAA
443
5,7
RBKS
611132
Rbks
71336
ND000540
CATTAGCCGAGCCAAAGTGAT
444
12,8
RBKS
611132
Rbks
71336
TRCN0000078933
GCCTCCATAATTGTCAATAAT
445
13,9
RBKS
611132
Rockl
19877
ND000568
CATACTGTTAGTCGGCTTGAA
446
0,6
ROCK1
6093
Rockl
19877
ND000567
ATGACATGCAAGCGCAATTGG
447
0,7
ROCK1
6093
Rockl
19877
ND000565
GCCTACAGGTAGATTAGATTA
448
0,9
ROCK1
6093
Rockl
19877
ND000569
AGTTCAATTGGTGAGGCATAA
449
1,0
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000361452
CTAGCAAAGAGAGTGATATTG
450
1,2
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000022901
CCTGGTTTATGATTTGGATTT
451
1,6
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000022900
CGGGAGTTACAAGATCAACTT
452
1,7
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000022902
CCGTGCAAAGTAAGTTACGAT
453
1,8
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000022899
GCAGAAATAATGAATCGCAAA
454
2,0
ROCK1
6093
Rockl
19877
ND000566
ATCAAGATCAGATCGTGGAAG
455
2,2
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000361453
TTCAATTGGTGAGGCATAAAT
456
2,3
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000022903
GCAGTGTCTCAAATTGAGAAA
457
4,1
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000361455
TGTGGGATGCTACCTGATAAA
458
4,4
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000361522
CTACAGGTAGATTAGATTAAT
459
5,6
ROCK1
6093
Rockl
19877
TRCN0000361521
CAACTTTCTAAGCAGATATAA
460
6,5
ROCK1
6093
Sbfl
77980
ND000571
CAGTATGTTACTCGTAAGAAG
461
0,2
SBF1
6305
Sbfl
77980
TRCN0000081099
GCAGTATGTTACTCGTAAGAA
462
0,4
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000575
TGCTAAGTTGTTTCTAGAACC
463
0,8
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000570
CGATACTATGACCACCGAATG
464
0,8
SBF1
6305
Sbfl
77980
TRCN0000081101
CGAGAGGAATCCACCAACTTT
465
0,9
SBF1
6305
Sbfl
77980
TRCN0000081102
GCGATACTATGACCACCGAAT
466
1,5
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000578
CTAACTTATTGTGGTGTCATG
467
1,5
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000574
TCTTGCTGGACTCTGATTATG
468
1,6
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000572
GGCTAGATGAGGGCACAATTC
469
2,2
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000573
GAAGACAACACGTCGCGTTTA
470
3,1
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000577
TACGGAATTGCATCTCCTATG
471
3,2
SBF1
6305
Sbfl
77980
TRCN0000081098
CACGCGGACATCTATGACAAA
472
4,8
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000579
TTACCACATACCGCGTCATCT
473
5,6
SBF1
6305
Sbfl
77980
TRCN0000081100
CCCTACAGCAATGTGTCCAAT
474
6,0
SBF1
6305
Sbfl
77980
ND000576
GACTTTGTCGTCCGCATGATG
475
6,9
SBF1
6305
Smad2
17126
ND000208
AGATCAGTGGGACACAACAGG
476
0,4
SMAD2
4087
Smad2
17126
TRCN0000089336
TGGTGTTCAATCGCATACTAT
477
1,0
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000205
GTAATTACATCCCAGAAACAC
478
1,1
SMAD2
4087
Smad2
17126
TRCN0000089334
CGGTTAGATGAGCTTGAGAAA
479
1,2
SMAD2
4087
Smad2
17126
TRCN0000089333
CCAGTAGTAGTGCCTGAAGTA
480
1,2
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000207
TAACCCGAATGTGCACCATAA
481
1,2
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000199
CCCAACTGTAACCAGAGATAC
482
1,4
SMAD2
4087
Smad2
17126
TRCN0000089335
CCACTGTAGAAATGACAAGAA
483
1,5
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000200
CCTCCGTCGTAGTATTCATGT
484
1,9
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000201
GCCAGTGGTGAAGAGACTTCT
485
1,9
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000203
CTCGGCACACGGAGATTCTAA
486
6,7
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000204
GACAGTATCCCAAAGGTTATT
487
7,1
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000202
GAGTGCGCTTGTATTACATAG
488
7,1
SMAD2
4087
Smad2
17126
TRCN0000089337
CTAAGTGATAGTGCAATCTTT
489
19,3
SMAD2
4087
Smad2
17126
ND000206
TGCCTAAGTGATAGTGCAATC
490
30,3
SMAD2
4087
Socsl
12703
ND000214
TTTCGAGCTGCTGGAGCACTA
491
0,6
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000219
TCGAGCTGCTGGAGCACTACG
492
1,2
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000231240
TCGCCAACGGAACTGCTTCTT
493
1,4
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000218
ACTTCTGGCTGGAGACCTCAT
494
1,5
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000067420
GCGAGACCTTCGACTGCCTTT
495
1,7
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000067418
CGACACTCACTTCCGCACCTT
496
1,8
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000220
CTACCTGAGTTCCTTCCCCTT
497
1,8
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000231238
TTCCGCTCCCACTCCGATTAC
498
1,8
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000231241
TAACCCGGTACTCCGTGACTA
499
1,9
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000216
TACTCCGTGACTACCTGAGTT
500
2,4
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000211
CTTCCGCTCCCACTCCGATTA
501
2,6
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000067422
GCGCGACAGTCGCCAACGGAA
502
2,7
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000231239
TGGACGCCTGCGGCTTCTATT
503
2,9
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000067419
CGCATCCCTCTTAACCCGGTA
504
3,4
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000212
TACATATTCCCAGTATCTTTG
505
3,6
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000231242
GCGCCTTATTATTTCTTATTA
506
4,1
SOCS1
8651
Socsl
12703
TRCN0000067421
CCGTGACTACCTGAGTTCCTT
507
5,8
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000215
GGAGGGTCTCTGGCTTCATTT
508
7,8
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000213
TTCGCGCTCAGCGTGAAGATG
509
8,4
SOCS1
8651
Socsl
12703
ND000217
ATCCCTCTTAACCCGGTACTC
510
8,5
SOCS1
8651
Socs3
12702
ND000222
CGAGAAGATTCCGCTGGTACT
511
0,3
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000067472
GCTGCAGGAGAGCGGATTCTA
512
0,4
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000231180
GGCTAGGAGACTCGCCTTAAA
513
0,7
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000067468
GCTAGGAGACTCGCCTTAAAT
514
0,8
SOCS3
9021
Socs3
12702
ND000227
GAGAGCTTACTACATCTATTC
515
0,9
SOCS3
9021
Socs3
12702
ND000221
GGGAGTTCCTGGATCAGTATG
516
1,0
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000067470
CAAGAGAGCTTACTACATCTA
517
1,1
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000231179
CAGTATGATGCTCCACTTTAA
518
1,2
SOCS3
9021
Socs3
12702
ND000223
CAAGCTGGTGCACCACTACAT
519
1,3
SOCS3
9021
Socs3
12702
ND000224
ACCTGGACTCCTATGAGAAAG
520
1,4
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000067471
CTTCTTCACGTTGAGCGTCAA
521
1,6
SOCS3
9021
Socs3
12702
ND000228
TCGGGAGTTCCTGGATCAGTA
522
1,7
SOCS3
9021
Socs3
12702
ND000226
TGCAGGAGAGCGGATTCTACT
523
1,9
SOCS3
9021
Socs3
12702
ND000225
CCTGGTGGGACAATACCTTTG
524
3,3
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000067469
GATCAGTATGATGCTCCACTT
525
4,6
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000231176
TCTTCACGTTGAGCGTCAAGA
526
4,7
SOCS3
9021
Socs3
12702
TRCN0000231177
CGCTTCGACTGTGTACTCAAG
527
4,9
SOCS3
9021
Socs3
12702
ND000229
GGAGCAAAAGGGTCAGAGGGG
528
5,3
SOCS3
9021
Stkl7b
98267
ND000590
AGTGGGACTTTGGAAGCTTGT
529
0,3
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000597
CATCTGGACTGACTCGGAAAT
530
0,5
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000596
ATGCTGCGGGTGGAGAAATTT
531
0,6
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000588
TATCTGAATATTTCTCAAGTG
532
0,6
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000593
TTTACCTGAGTTAGCCGAAAT
533
0,7
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000589
GTTAACTCATACATCACCATT
534
1,1
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000594
CCTATACCATAACTCTATTAC
535
1,3
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000592
CTCAACTATGATCCCATTACC
536
1,3
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000591
AGACCTCCAAGTCCTCCTGTA
537
1,4
STK17B
9262
Stkl7b
98267
TRCN0000024255
GCTGTGGTTAGACAATGTATA
538
1,6
STK17B
9262
Stkl7b
98267
ND000595
TATTGGCATAATAGCGTATAT
539
3,6
STK17B
9262
Stkl7b
98267
TRCN0000024256
GCTTGTTTCATCCTGAGGAAA
540
4,0
STK17B
9262
Stkl7b
98267
TRCN0000024258
TCCTCAACTATGATCCCATTA
541
4,2
STK17B
9262
Stkl7b
98267
TRCN0000024254
GCAGAAGCTAAGGACGAATTT
542
4,4
STK17B
9262
Stkl7b
98267
TRCN0000024257
CAGAATAACATTGTTCACCTT
543
6,4
STK17B
9262
Tnkl
83813
ND000599
TGCCCAGCGCAGACTTAATGA
544
0,3
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000023704
CGTGACACTCTGGGAAATGTT
545
0,6
TNK1
8711
Tnkl
83813
ND000602
GTGTCCCACCATATCTCATCC
546
0,7
TNK1
8711
Tnkl
83813
ND000600
AGTAGCAATACCGGATCACTG
547
0,7
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000023706
GCGGGAAGTATCTGTCATGAT
548
0,8
TNK1
8711
Tnkl
83813
ND000603
AGAGGATGCGAGGCATTTCCA
549
1,1
TNK1
8711
Tnkl
83813
ND000601
GGACAGAGAGAAGGCAACGTT
550
1,1
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000361891
AGAATTGGGTGTACAAGATAC
551
1,3
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000023707
CCACCTATTATCTGCAACTCT
552
1,6
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000023705
GCCTCTGATGTGTGGATGTTT
553
1,7
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000361890
TGCAGAGGATGCGAGGCATTT
554
1,8
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000361889
TGGCGTGACACTCTGGGAAAT
555
2,0
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000023708
CAGACTTAATGAAGCCCTGAA
556
5,2
TNK1
8711
Tnkl
83813
TRCN0000361892
GTGTTGTACATCGAGGGTTAT
557
5,2
TNK1
8711
Tnkl
83813
ND000598
CCAGAACTTCGGCGTACAAGA
558
7,6
TNK1
8711
Trpm7
58800
ND000607
GAAGTATCAGCGGTATCATTT
559
0,4
TRPM7
54822
Trpm7
58800
TRCN0000274774
ATGGATTGTTATCGCTTATAT
560
0,7
TRPM7
54822
Trpm7
58800
ND000606
GCTTGGAAAGGGTCTTATTAA
561
0,9
TRPM7
54822
Trpm7
58800
ND000608
ATTGAATCCCTTGAGCAAATT
562
0,9
TRPM7
54822
Trpm7
58800
TRCN0000274712
CCTTATCAAACCCTATTGAAT
563
1,1
TRPM7
54822
Trpm7
58800
TRCN0000274773
CCAAAGATCAAGAACCCATTT
564
1,2
TRPM7
54822
Trpm7
58800
ND000604
TAGAGGTAATGTTCTCATTGA
565
1,2
TRPM7
54822
Trpm7
58800
ND000610
ACCGGATTGGTTACGAGATAG
566
1,5
TRPM7
54822
Trpm7
58800
TRCN0000274772
ACCTGGTGCAGGACCATTAAC
567
1,7
TRPM7
54822
Trpm7
58800
ND000605
TAGACTTTCTAGCCGTAAATC
568
2,9
TRPM7
54822
Trpm7
58800
TRCN0000274711
CTAGACTTTCTAGCCGTAAAT
569
3,1
TRPM7
54822
Trpm7
58800
TRCN0000023957
CCTCAGGATGAGTCATCAGAT
570
3,5
TRPM7
54822
Trpm7
58800
TRCN0000023956
CCTGGTATAAGGTCATATTAA
571
4,9
TRPM7
54822
Trpm7
58800
TRCN0000023955
GCTCAGAATCTTATTGATGAT
572
5,3
TRPM7
54822
Trpm7
58800
ND000609
GCCCTAACAGTAGATACATTG
573
5,9
TRPM7
54822
Vamp7
20955
TRCN0000115068
CTTACTCACATGGCAATTATT
574
0,6
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCN0000380436
GCACAACTGAAGCATCACTCT
575
0,8
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCN0000336075
GCACAAGTGGATGAACTGAAA
576
0,9
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCN0000336077
TTACGGTTCAAGAGCACAAAC
577
1,0
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCN0000380733
TAAGAGCCTAGACAAAGTGAT
578
1,0
VAMP7
6845
Vamp7
20955
ND000255
AGCCATGTGTATGAAGAATAT
579
1,2
VAMP7
6845
Vamp7
20955
ND000258
TCCAGGAGCCCATACAAGTAA
580
1,4
VAMP7
6845
Vamp7
20955
ND000256
ATAAACTAACTTACTCACATG
581
1,5
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCN0000336014
GCCGCCACATTTCGTTGTAAA
582
1,8
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCN0000353419
GCACTTCCTTATGCTATGAAT
583
1,9
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCNOOOO115066
GCCTTAAGATATGCAATGTTA
584
2,2
VAMP7
6845
Vamp7
20955
ND000257
CTGAAAGGAATAATGGTCAGA
585
4,0
VAMP7
6845
Vamp7
20955
ND000259
CTCCTTGTAAATGATACACAA
586
9,8
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCN0000353291
CTTTGCCTGTCATATAGTTTG
587
10,5
VAMP7
6845
Vamp7
20955
TRCNOOOO 115069
TCGAGCCATGTGTATGAAGAA
588
11,3
VAMP7
6845
Yesl
22612
ND000617
ATCCCTAGCAATTACGTAGTG
589
0,5
YES1
7525
Yesl
22612
TRCN0000339152
TGGTTATATCCCTAGCAATTA
590
0,5
YES1
7525
Yesl
22612
ND000614
TATGCTTCACTCGGCATGTTT
591
0,6
YES1
7525
Yesl
22612
ND000616
ATTCCAGATACGGTTACTCAA
592
0,6
YES1
7525
Yesl
22612
ND000613
TTTAAGAAGGGTGAACGATTT
593
0,7
YES1
7525
Yesl
22612
ND000612
CACGACCAGAGCTCAGTTTGA
594
0,8
YES1
7525
Yesl
22612
ND000615
CAGGTATGGTAAACCGTGAAG
595
0,8
YES1
7525
Yesl
22612
ND000611
GGAGTGGAACATGCTACAGTT
596
1,0
YES1
7525
Yesl
22612
ND000618
CCTCATTCTCAGTGGTGTCAA
597
2,6
YES1
7525
Yesl
22612
ND000619
TCGAGAATCATTGCGACTAGA
598
2,8
YES1
7525
Yesl
22612
TRCN0000339083
CCAGGTACAATGATGCCAGAA
599
2,8
YES1
7525
Yesl
22612
TRCN0000339150
GCGGAAAGATTACTTCTGAAT
600
3,9
YES1
7525
Yesl
22612
TRCN0000023616
GCTGCTCTGTATGGTCGATTT
601
4,1
YES1
7525
Yesl
22612
TRCN0000023618
CCTTGTATGATTATGAAGCTA
602
5,4
YES1
7525
Yesl
22612
TRCN0000023617
GCCAGTCATTATGGAGTGGAA
603
9,7
YES1
7525
мшРНК, в случае которых показано по меньшей мере ^3-кратное обогащение мшРНК в опухоли по сравнению с селезенкой, показывают более активную область последовательности-мишени.
В некоторых аспектах нуклеиновые кислоты в композициях кодируют последовательности мшРНК, мишенью которых являются последовательности Ppp2r2d и Cblb человека, представленные в таблице 2а.
(SEQ ID NO: 640)
Ppp2r2d
CGGTTCGGATAGCGCCATCAT (SEQ ID NO: 641)
Ppp2r2d
TCATTTCCACCGTTGAGTTTA (SEQ ID NO: 642)
Ppp2r2d
AT GC T CACACATAT CATATAA (SEQ ID NO: 643)
Cblb
CGGGCAATAAGACTCTTTAA (SEQ ID NO: 644)
Cblb
TGCCCAGGTCCAGTTCCATTTC (SEQ ID NO: 645)
Cblb
TCCTGATTTAACTGGATTATG (SEQ ID NO: 646)
Cblb
AT СAAACAT С С С TGAC Т TAAG (SEQ ID NO: 647)
Cblb
С TACAC С T СAT GAC CATATAA (SEQ ID NO: 648)
Cblb
TACAC С T СAT GAC СATATAAA (SEQ ID NO: 649)
Cblb
T СAG T GAGAAT GAG TAC T T TA (SEQ ID NO: 650)
Cblb
С С T GAC T TAAGCATATAT T ТА (SEQ ID NO: 651)
Cblb
T С TACAT T GATAGC С T TAT GA (SEQ ID NO: 652)
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Ppp2r2d, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385 или 386.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Pp2r2d
человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385 или 386.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Eif2ak3, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146 или 147.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Eif2ak3 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146 или 147.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Arhgap5, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, или 42.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Arhgap5 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 или 4 2.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Smad2, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489 или 490.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Smad2 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489 или 490.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Акар81, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 1, 2, 3, 4, 5, б, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Акар81 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Rbks, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444 или 445.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Rbks человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444 или 445.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Egr2, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по
меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131 или 132.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Egr2 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131 или 132.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Dgka, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, ИЗ, 114, 115, 116 или 117.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Dgka человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, ИЗ, 114, 115, 116 или 117.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Cblb, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71 или 72.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Cblb человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67,
68, 69, 70, 71 или 72.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Mdfic, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298 или 299.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Mdfic человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298 или 299.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Entpdl, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161 или 162.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Entpdl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161 или 162.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Vamp7, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586 или 587.
последовательность, комплементарную последовательности Vamp7 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586 или 587.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Hipkl, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221 или 222.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Hipkl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221 или 222.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Nuak2, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328 или 329.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Nuak2 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328 или 329.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Alk, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22,
23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 или 31.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Alk человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 или 31.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарных последовательности-мишени Pdzklipl, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338, 339, 340 или 341.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную последовательности Pdzklipl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338, 339, 340 или 341.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Blvrb, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 52, 53, 54, 55, 56 или 57.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Blvrb человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 52, 53, 54, 55, 56 или 57.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Cdkn2a, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом
нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 83, 84, 85, 86 или 87.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Cdkn2a человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 83, 84, 85, 86 или 87.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Fllr, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 175, 17 6 или 177.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Fllr человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 175, 17 6 или 177.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Fyn, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 187, 191 или 192.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Fyn человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 187, 191 или 192.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Grk6, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 204, 205, 206 или 207.
последовательность, комплементарную Grk6 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 204, 205, 206 или 207.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Inpp5b, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 232, 234, 235, 236 или 237.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Inpp5b человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 232, 234, 235, 236 или 237.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Impk, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 248, 249, 250, 251 или 252.
В других вариантах, изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Impk человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 248, 249, 250, 251 или 252.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Jun, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 263, 264, 265, 266, 267, 2 68 или 2 69.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
ID NO: 263, 264, 265, 266, 267, 268 или 269.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Mast2, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 281, 282, 283 или 284.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Mast2 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 281, 282, 283 или 284.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Nptxr, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 311, 312, 313 или 314.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Nptxr человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 311, 312, 313 или 314.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Pkdl, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 351, 352, 353, 354, 355 или 356.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Pkdl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 351, 352, 353, 354, 355 или 356.
нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Ppmlg, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 367, 368, 369, 370 или 371.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Ppmlg человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 367, 368, 369, 370 или 371.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени РррЗсс, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 399, 400 или 401.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную РррЗсс человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 399, 400 или 401.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Prkab2, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 414, 415 или 416.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Prkab2 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 414, 415 или 416.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Ptpn2, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по
меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 426, 427, 428, 429 или 430.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Ptpn2 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 426, 427, 428, 429 или 430.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Rockl,, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 457, 458, 459 или 4 60.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Rockl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 457, 458, 459 или 460.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Sbfl, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 470, 471, 472, 473, 474 или 475.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Sbfl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 470, 471, 472, 473, 474 или 475.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Socsl, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 504, 505, 506, 507, 508,
509 или 510.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Socsl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 504, 505, 506, 507, 508, 509 или 510.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Socs3, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 524, 525, 526, 527 или 528.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Socs3 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 524, 525, 526, 527 или 528.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Stkl7b, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 539, 540, 541, 542 или 543.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Stkl7b человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID NO: 539, 540, 541, 542 или 543.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Tnkl, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID NO: 556, 557 или 558.
последовательность, комплементарную Tnkl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 556, 557 или 558.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Trpm7, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 569, 570, 571, 572 или 573.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Trpm7 человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 569, 570, 571, 572 или 573.
В других вариантах изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, кодирующим последовательности мшРНК, комплементарные последовательности-мишени Yesl, идентичной, по меньшей мере 12, по меньшей мере 15, по меньшей мере 2 0 или по меньшей мере 2 5 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидам, указанным в SEQ ID N0: 600, 601, 602 или 603.
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
последовательность, комплементарную Yesl человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ ID N0: 600, 601, 602 или 603.
В любом варианте последовательность человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, представляет собой последовательность, которая полностью соответствует последовательности гена человека и, например, может не иметь ни одного, иметь 1, 2, 3 или 4 несовпадения нуклеотидов по меньшей мере с 12 по меньшей мере с 15 по меньшей мере с 2 0 или по меньшей мере с 2 5 непрерывно следующими друг за другом нуклеотидами выбранной последовательности-мишени мыши.
Выделенная нуклеиновая кислота может представлять собой, например, молекулу ДНК, при условии, что одна из последовательностей нуклеиновой кислоты, которая, как
обнаружено, в норме непосредственно фланкирует такую молекулу
ДНК со встречающемся в природе геноме, удалена или отсутствует.
Таким образом, выделенная нуклеиновая кислота включает без
ограничения молекулу ДНК, которая существует в виде отдельной
молекулы (например, химически синтезированную нуклеиновую
кислоту, кДНК или фрагмент геномной ДНКУ, полученные в
результате ПЦР или обработки эндонуклеазами рестрикции)
независимо от других последовательностей, а также ДНК, которая
включена в вектор, автономно реплицирующуюся плазмиду, вирус
(например, ретровирус, лентивирус, аденовирус,
аденоассоциированный вирус или вирус герпеса) или в геномную ДНК прокариота или эукариота. Кроме того, выделенная нуклеиновая кислота может включать сконструированную нуклеиновую кислоту, такую как рекомбинантная молекула ДНК, которая является частью гибридной или слитой нуклеиновой кислоты. Нуклеиновая кислота, существующая среди сотен миллионов других нуклеиновых кислот, например, в библиотеках кДНК или геномных библиотеках или пластинках геля, содержащих продукт рестрикционного расщепления геномной ДНК, не следует считать выделенной нуклеиновой кислотой.
При расчете идентичности последовательностей в процентах две последовательности выравнивают и определяют количество идентичных совпадений нуклеотидов или аминокислотных остатков между двумя последовательностями. Количество идентичных совпадений делят на длину выравниваемой области (т.е., количество выравниваемых нуклеотидов или аминокислотных остатков) и умножают на 100, чтобы получить значение идентичности последовательностей в процентах. Будет понятно, что длина выравниваемой области может быть частью одной или обоих последовательностей вплоть до полного размера наиболее короткой последовательности. Также будет понятно, что одну последовательность можно выравнивать с более чем одной другой последовательностью, и поэтому она может иметь разные значения идентичности последовательности в процентах на протяжении каждой выравниваемой области. Следует отметить, что значение идентичности в процентах обычно округляют до ближайшего целого
числа. Например, 78,1%, 78,2%, 78,3% и 78,4% округляют в меньшую сторону до 78%, тогда как 78,5%, 78,6%, 78,7%, 78,8% и 7 8,9% округляют в большую сторону до 7 9%. Также следует отметить, что длина выравниваемой области всегда выражена целым числом.
В используемом в настоящем описании смысле термин
"идентичность последовательностей в процентах" относится к
степени идентичности между любой заданной запрашиваемой
последовательностью и данной исследуемой последовательностью.
Идентичность в процентах для любой запрашиваемой
последовательности нуклеиновой кислоты или аминокислотной
последовательности, например, фактора транскрипции,
относительно другой данной последовательности нуклеиновой кислоты или аминокислотной последовательности может быть определена, как описано ниже.
В используемом в настоящем описании смысле термин
"комплементарная нуклеотидная последовательность", также
известная как "антисмысловая последовательность", относится к
последовательности нуклеиновой кислоты, которая полностью
комплементарна последовательности "смысловой" нуклеиновой
кислоты, кодирующей белок (например, комплементарна кодирующей
нити двунитевой молекулы кДНК или комплементарна
последовательности мРНК). В настоящем изобретении предлагаются
молекулы нуклеиновых кислот, которые содержат
последовательность, комплементарную по меньшей мере примерно 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 или 2 5 нуклеотидам или одной кодирующей нити гена или только ее части.
В используемом в настоящем описании смысле термин "соответствует нуклеотидной последовательности" относится к нуклеотидной последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей идентичную последовательность. В некоторых случаях, когда антисмысловые нуклеотиды (нуклеиновые кислоты) или ми-РНК (малые ингибирующие РНК) гибридизуются с последовательностью мишенью, конкретная антисмысловая последовательность или последовательность малой ингибирующей РНК (ми-РНК) по существу комплементарна последовательности-мишени и поэтому будет
специфично связываться с частью мРНК, кодирующей полипептид.
Соответственно обычно последовательности таких нуклеиновых
кислот будут в высокой степени комплементарны
последовательности-мишени мРНК и будут иметь не более 1, 2, 3, 4, 5, б, 7, 8, 9 или 10 несовпадений оснований на протяжении последовательности. Во многих случаях может быть желательным, чтобы последовательности нуклеиновых кислот точно совпадали, т.е., были полностью комплементарными последовательности, с которой олигонуклеотид специфично связывается, и поэтому имели нулевое несовпадение вдоль комплементарного участка. В высокой степени комплементарные последовательности обычно будут связываться довольно специфично с областью последовательности-мишени мРНК и поэтому будут высоко эффективными в снижении и/или даже ингибировании трансляции последовательности мРНК-мишени в полипептидный продукт.
В используемом в настоящем описании смысле термин "вектор"
относится к любому вирусному или невирусному вектору, а также
любому плазмидному, космидному, фаговому или бинарному вектору
в двунитевой или однонитевой линейной или кольцевой форме,
который может или не может быть самопередающимся или
мобилизируемым и который может трансформировать
прокариотические или эукариотические клетки-хозяева либо посредством интеграции в клеточный геном или который может существовать внехромосомно (например, автономно реплицирующаяся плазмида с началом репликации). Любой вектор, известный в данной области, предполагается для применения при практическом осуществлении настоящего изобретения.
Векторы могут представлять собой вирусные векторы или невирусные векторы. Следует использовать вирусные векторы, при этом предпочтительно вирусные векторы являются дефектными по репликации, что может быть достигнуто, например, в результате удаления всех вирусных нуклеиновых кислот, которые кодируют репликацию. Дефектный по репликации вирусный вектор будет все еще сохранять свои инфекционные свойства и проникать в клетки подобно реплицирующемуся аденовирусному вектору, однако после поступления в клетку дефектный по репликации вирусный вектор не
репродуцируется или не размножается. Векторы также включают липосомы и наночастицы и другие средства для доставки молекулы ДНК в клетку.
Термин "вирусные векторы" относится к применению вирусов или ассоциированных с вирусами векторов в качестве носителей конструкции нуклеиновой кислоты в клетку. Конструкции могут интегрироваться и упаковываться в не реплицирующиеся, дефектные вирусные геномы, подобные аденовирусу, аденоассоциированному вирусу (AAV) или вирусу простого герпеса (HSV) или другим, включая ретровирусный и лентивирусный векторы, для инфекции или трансдукции в клетки. Вектор может включаться или может не включаться в геном клетки.
"Кодирующая" относится к свойству, присущему конкретным последовательностям нуклеотидов в полинуклеотиде, таком как ген, кДНК или мРНК, служить в качестве матриц для синтеза других полимеров и макромолекул в биологических процессах, имеющих либо определенную последовательность нуклеотидов (т.е., рРНК, тРНК и мРНК), либо определенную последовательность аминокислот и в результате этого определенные биологические свойства. Таким образом, ген кодирует белок, если транскрипция и трансляция мРНК, соответствующей такому гену, приводят к продукции белка в клетке или другой биологической системе. И кодирующую нить, нуклеотидная последовательность которой идентична последовательности мРНК и которая обычно приводится в списке последовательностей, и некодирующую нить, используемую в качестве матрицы для транскрипции гена или кДНК, можно называть кодирующими белок или другой продукт данного гена или кДНК.
Термин "экспрессия" в используемом в настоящем описании смысле определяют как транскрипцию и/или трансляцию конкретной нуклеотидной последовательности, управляемую ее промотором.
Векторы, способные осуществлять экспрессию генов, с которым они оперативно связаны, называют в настоящем описании "экспрессирующими векторами". Таким образом, "экспрессирующий вектор" представляет собой специализированный вектор, содержащий рекомбинантный полинуклеотид, включающий в себя последовательности регуляции экспрессии, оперативно связанные с
экспрессируемой нуклеотидной последовательностью.
Экспрессирующий вектор содержит достаточные цис-действующие элементы для экспрессии; другие элементы для экспрессии могут быть предоставлены клеткой-хозяином или в системе экспрессии in vitro. Экспрессирующие векторы включают все векторы, известные в данной области, такие как космиды, плазмиды (например, "голые" или находящиеся в липосомах) и вирусы (например, лентивирусы, ретровирусы, аденовирусы и аденоассоциированные вирусы), которые содержат рекомбинантный полинуклеотид.
В некоторых аспектах изобретение относится к модифицированным клеткам, которые несут векторы, способные экспрессировать мшРНК, описанную в настоящей публикации, и дополнительно модифицированные для экспрессии CAR. В одном аспекте мшРНК и CAR экспрессируются с одного и того же вектора. В другом аспекте мшРНК и CAR экспрессируются с отдельных векторов.
В некоторых вариантах модифицированные клетки, описанные в настоящей публикации, представляют собой иммунореактивные клетки. В некоторых аспектах иммунореактивные клетки экспрессируют по меньшей мере один антиген-распознающий рецептор. В любом аспекте иммунореактивные клетки экспрессируют по меньшей мере один из специфичных для опухоли антиген-распознающий рецептор. В некоторых аспектах используют специфичные для антигена опухолевых клеток Т-клетки, NKT-клетки, TIL, CTL-клетки или другие иммунореактивные клетки. Не ограничивающие примеры иммунореактивных клеток включают Т-клетки, такие как, например, Т-клетки aJ3-TCR+ (например, Т-клетки CD8+ или Т-клетки CD4+), Т-клетки y8-TCR+, инфильтрующие опухоль лимфоциты (TIL), Т-клетки природные киллеры (NKT), цитотоксические Т-лимфоциты (CTL) и Т-клетки CD4.
Композиции, содержащие иммунореактивные клетки согласно изобретению (например, Т-клетки, NKT-клетки, TIL, CTL-клетки или их предшественники), могут быть предоставлены пациенту системно или непосредственно для лечения злокачественной опухоли. В одном варианте клетки согласно изобретению
непосредственно инъецируют в представляющий интерес орган
(например, орган, пораженный злокачественной опухолью).
Альтернативно композиции, содержащие генетически
модифицированные иммунореактивные клетки предоставляют непосредственно в представляющий интерес орган, например, путем введения в систему кровообращения (например, в сосудистую систему опухоли). Могут быть предоставлены средства для размножения и дифференцировки до, во время или после введения клеток, чтобы повысить продукцию Т-клеток, NKT-клеток, TIL, CTL-клеток in vitro или in vivo.
Модифицированные иммунореактивные клетки могут быть введены в любом физиологически приемлемом наполнителе, обычно внутрь сосудов, хотя их также можно вводить в кость или другую обычную область, где клетки могут найти соответствующее место для регенерации и дифференцировки (например, тимус). Обычно можно вводить по меньшей мере 1> <105 клеток, в конце концов достигая 1х1010 или больше. Иммунореактивные клетки согласно изобретению могут содержать очищенную популяцию клеток. Специалисты в данной области легко могут определить процентное содержание генетически модифицированных иммунореактивных клеток в популяции, используя различные хорошо известные способы, такие как активируемая флуоресценцией сортировка клеток (FACS). Предпочтительные диапазоны чистоты в популяциях, содержащих генетически модифицированные иммунореактивные клетки, составляют примерно от 50 до примерно 55%, примерно от 55 до примерно 60% и примерно от 65 до примерно 70%. Более предпочтительно чистота составляет примерно от 7 0 до примерно
7 5%, примерно от 7 5 до примерно 8 0%, примерно от 8 0 до примерно 85%; и еще более предпочтительно чистота составляет примерно от
8 5 до примерно 90%, примерно от 90 до примерно 95% и примерно от 95 до примерно 100%. Дозы легко могут быть скорректированы специалистами в данной области (например, уменьшение чистоты может требовать повышения дозы).
Клетки могут быть введены посредством инъекции, через катетер или тому подобное. При необходимости также могут быть включены факторы, включая без ограничения интерлейкины,
например, IL-2, IL-3, IL-б и IL-11, а также другие интерлейкины, колониестимулирующие факторы, такие как G-, М- и GM-CSF, интерфероны, например, гамма-интерферон и эритропоэтин.
Композиции согласно изобретению включают фармацевтические композиции, содержащие иммунореактивные клетки согласно изобретению или их предшественники и фармацевтически приемлемый носитель. Введение может быть аутологичным или гетерологичным. Например, иммунореактивные клетки или предшественники могут быть получены от одного пациента и введены тому же пациенту или другому совместимому пациенту.
ХИМЕРНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ АНТИГЕНОВ
В некоторых случаях изобретение относится к химерным рецепторам антигенов (CAR), содержащим антигенсвязывающий домен, направленный на антиген опухолевых клеток. CAR является искусственно сконструированным гибридным белком или полипептидом, содержащим внеклеточную часть, которая узнает антиген опухолевых клеток (например, антигенсвязывающие домены антитела (scFv)) и цитоплазматический домен передачи сигнала, полученный из Т-клеточного рецептора, и костимулирующий домен (Kalos М, et al. , Sci Transl Med. 2011 Aug 10;3 (95)). Kalos с соавторами описывают создание CAR-T-клеток, мишенью которых является CD19, и демонстрируют опосредованный CAR-модифицированными Т-клетками мощный противоопухолевый эффект у пациентов с хроническим лимфоцитарным лейкозом. Характеристики CAR включают их способность перенаправлять специфичность и реактивность Т-клеток к выбранной мишени не ограниченным по МНС образом с использованием антигенсвязывающих свойств моноклональных антител. CAR-модифицированные Т-клетки обладают способностью к репликации in vivo, и их длительное присутствие позволяет осуществлять долговременный контроль опухоли и устраняет необходимость в многократных инфузиях антитела (Kalos М, et al., Sci Transl Med. 2011 Aug 10; 3(95)). He ограниченное по МНС узнавание антигена обеспечивает Т-клетки, экспрессирующие CAR, способностью узнавать антиген независимо от процессинга антигена, обходя при этом основной механизм ускользания опухолей. Кроме того, при экспрессии в Т-клетках
CAR преимущественно не димеризуются с альфа- и бета-цепями эндогенного Т-клеточного рецептора (TCR). CAR-модифицированные Т-клетки подробно описаны в WO2012/079000 и WO2012/09999 и в публикации Milone с соавторами (2009, Mol. Ther. 17: 1453).
CAR объединяет сайт связывания молекулы, которая узнает антиген, являющийся мишенью (т.е., "антигенсвязывающий домен") с одним или несколькими доменами обычных иммунных рецепторов, ответственных за инициацию сигнальной трансдукции, которая приводит к активации лимфоцитов (например, "стимулирующим доменом" или "доменом передачи сигнала").
В некоторых вариантах используемую связывающую часть получают из структуры Fab-фрагмента (антигенсвязывающего) моноклонального антитела (мАт), которое обладает высокой аффинностью по отношению к опухолевому антигену, являющемуся мишенью. Поскольку Fab является продуктом двух генов, соответствующие последовательности обычно объединяют через короткий линкерный фрагмент, который позволяет тяжелой цепи накладываться на полученные из легкой цепи пептиды в их нативной конфигурации с образованием одноцепочечного фрагмента вариабельной области (scFv).
Fv- или (scFv) фрагменты антитела содержат домены VH и VL антитела, при этом такие домены присутствуют в одной полипептидной цепи. Обычно Fv-полипептид дополнительно содержит полипептидный линкер между доменами VH и VL, который позволяет scFv образовывать требуемую структуру для связывания антигена.
В некоторых вариантах используемую связывающая часть получают из цитоплазматического домена передачи сигнала, полученного из Т-клеточного рецептора и костимулирующих молекул.
В некоторых вариантах передающая сигнал часть CAR обычно содержит внутриклеточные домены дзета-цепи (?) комплекса TCR/CD3 complex25 или реже гамма-цепи (у) иммуноглобулинового рецептора FcsRI26, 27 или СБЗ-эпсилон-цепи (г)28, при этом трансмембранная область получена из той же самой молекулы.
домен, трансмембранный домен, стимулирующий домен и костимулирующий домен. В дополнительных вариантах осуществления изобретения предлагаются имеющие отношение к CAR нуклеиновые кислоты, рекомбинантные экспрессирующие векторы, клетки-хозяева, популяции клеток, антитела или их антигенсвязывающие части, и фармацевтические композиции, имеющие отношение к CAR согласно изобретению.
В одном аспекте антигенсвязывающий домен связывается с антигеном опухолевой клетки. Термин "антиген опухолевой клетки" или "опухолевый антиген" в используемом в настоящем описании смысле относится к любому полипептиду, экспрессируемому опухолью, который способен индуцировать иммунный ответ. Не ограничивающие примеры опухолевых антигенов включают, например, специфичный для простаты мембранный антиген (PSMA), раково-эмбриональный антиген (СЕА), CD19, CD20, CD22, R0R1, мезотелин, CD333/IL3Ra, с-Met, гликолипид F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ES0-1 TCR, ERBB2, BIRC5, СЕACAM5, WDR4 6, BAGE, CSAG2, DCT, MAGED4, GAGE 1, GAGE 2, GAGE 3, GAGE 4, GAGE 5, GAGE 6, GAGE 7, GAGE 8, IL13RA2, MAGEA1, MAGEA2, MAGEA3, MAGEA4, MAGEАб, MAGEA9, MAGEA10, MAGEA12, MAGEB1, MAGEB2, MAGEC2, TP53, TYR, TYRP1, SAGE1, SYCP1, SSX2, SSX4, KRAS, PRAME, NRAS, ACTN4, CTNNB1, CAS P 8, CDC27, CDK4, EEF2, FN1, HSPA1B, LPGAT1, ME1, HHAT, TRAPPC1, MUM3, MY01B, PAPOLG, 0S9, PTPRK, ТРИ, ADFP, AFP, AIM2, ANXA2, ART4, CLCA2, CPSF1, PPIB, EPHA2, EPHA3, FGF5, CA9, TERT, MGAT5, CEL, F4 .2, CAN, ETV6, В IRC 7, CSF1, OGT, MUC1, MUC2, MUM1, CTAG1A, CTAG2, СTAG, MRPL28, F0LH1, RAGE, SFMBT1, KAAG1, SART1, TSPYL1, SART3, SOX10, TRG, WT1, TACSTD1, SILV, SCGB2A2, MC1R, MLANA, GPR143, 0CA2, KLK3, SUPT7L, ARTC1, BRAF, CAS P 5, CDKN2A, UBXD5, EFTUD2, GPNMB, NFYC, PRDX5, ZUBR1, SIRT2, SNRPD1, HERV-K-MEL, CXorf61, CCDC110, VENTXP1, SPA17, KLK4, ANKRD3 OA, RAB3 8, CCND1, CYP1B1, MDM2, MMP2, ZNF3 95, RNF4 3, SCRN1, STEAP1, 707-AP, TGFBR2, PXDNL, AKAP13, PRTN3, PSCA, RHAMM, ACPP, ACRBP, LCK, RCVRN, RPS2, RPL10A, SLC45A3, BCL2L1, DKK1, ENAH, CSPG4, RGS5, BCR, BCR-ABL, ABL-BCR, DEK, DEK-CAN, ETV6-AML1, LDLR-FUT, NPM1-ALK1, PML-RARA, SYT-SSX1, SYT-SSX2, FLT3, ABL1, AML1, LDLR, FUT1, NPM1, ALK, PML1, RARA, SYT, SSX1,
MSLN, UBE2V1, HNRPL, WHSC2, EIF4EBP1, WNK2, 0AS3, BCL-2, MCL1, CTSH, ABCC3, BST2, MFGE8, TPBG, FMOD, XAGE1, RPSA, COTL1, CALR3, PA2G4, EZH2, FMNL1, HPSE, APC, UBE2A, BCAP31, TOP2A, TOP2B, ITGB8, RPA1, ABI2, CCNI, CDC2, SEPT2, S TAT1, LRP1, ADAM17, JUP, DDR1, ITPR2, HMOX1, TPM4, BAAT, DNAJC8, TAPBP, LGALS3BP, PAGE 4, РАК2, CDKN1A, PTHLH, SOX2, SOX11, TRPM8, TYMS, ATIC, PGK1, SOX4, TOR3A, TRGC2, BTBD2, SLBP, EGFR, IER3, TTK, LY6K, IGF2BP3, GPC3, SLC35A4, HSMD, H3F3A, ALDH1A1, MFI2, MMP14, SDCBP, PARP12, MET, CCNB1, PAX3-FKHR, PAX3, FOXOl, XBP1, SYND1, ETV5, HSPA1A, HMHA1, TRIM68 и любое их сочетание.
Настоящее изобретение, в общем, относится к применению Т-клеток, генетически модифицированных для стабильной экспрессии мшРНК согласно изобретению и требуемого CAR. Т-клетки, экспрессирующие CAR, обычно называют CAR-T-клетками. Т-клетки, экспрессирующие CAR, называют в настоящем описании CAR-T-клетками или CAR-модифицированными Т-клетками. Предпочтительно клетка может быть генетически модифицирована для стабильной экспрессии связывающего домена антитела на своей поверхности, придающего новую антигенную специфичность, которая независима от МНС. В некоторых случаях Т-клетка генетически модифицирована для стабильной экспрессии CAR, который объединяет домен узнавания антигена конкретного антитела с внутриклеточным стимулирующим доменом (например, доменом передачи сигнала). Таким образом, кроме антигенсвязывающего домена CAR может включать в себя внутриклеточные домены дзета-цепи (?) комплекса
TCR/CD3, гамма-цепи (у) иммуноглобулинового рецептора FcsRI2 6,27 или СБЗ-эпсилон-цепи (s). CAR также может содержать трансмембранную область из тех же самых молекул или других трансмембранных белков типа I, таких как CD4, CD8 и CD2 8.
В одном варианте CAR согласно изобретению содержит внеклеточный домен, имеющий домен узнавания антигена, трансмембранный домен и цитоплазматический домен.
В одном варианте используют трансмембранный домен, который в природе ассоциирован с одним из доменов в CAR. В другом варианте цитоплазматический домен может быть сконструирован
так, чтобы ООН содержал стимулирующий домен и костимулирующий домен.
CAR может содержать внутрицитоплазматическую часть костимулирующих молекул, таких как CD28, CD134/OX40, CD137/4-1ВВ, Lck, ICOS или DAP10.
Изобретение также относится к методике адоптивной клеточной терапии (ACT). ACT представляет собой способ, при котором терапевтические лимфоциты вводят пациентам, чтобы лечить злокачественную опухоль. Такой способ предполагает образование ex vivo специфичных для опухоли Т-лимфоцитов и их инфузию пациентам. В дополнение к инфузии лимфоцитов хозяин может быть подвергнут воздействию другими способами, которые способствуют захвату Т-клеток и их иммунному ответу, например, предварительной подготовке хозяина (с использованием излучения или химиотерапии) и введению факторов роста лимфоцитов (таких как IL-2). Один из способов получения таких специфичных для опухоли лимфоцитов заключается в размножении антиген-специфичных Т-клеток.
В одном варианте изобретение относится к созданию Т-клеток, экспрессирующих мшРНК согласно изобретению и требуемый CAR, направленный на опухолевый антиген. Модифицированные Т-клетки могут быть получены введением в клетки вектора (например, плазмиды, лентивирусного вектора, ретровирусного вектора, аденовирусного вектора, вектора на основе аденоассоциированного вируса), кодирующего и 1) мшРНК, способную снижать экспрессию гена-мишени, описанного в настоящей публикации, и 2) требуемый CAR. модифицированные Т-клетки согласно изобретению способны реплицироваться in vivo, что приводит к их длительному существованию, что может приводить к контролированию опухоли.
В одном аспекте изобретение относится к способам лечения злокачественной опухоли, включающим в себя введение композиции, способной вызывать сайленсинг генов, который ингибируют функцию Т-клеток. В одном варианте способы относятся к введению Т-клетки, экспрессирующей мшРНК согласно изобретению и требуемый CAR, направленный на опухолевый антиген. В одном аспекте
вводимая Т-клетка содержит вектор, кодирующий мшРНК согласно изобретению и требуемый CAR, направленный на опухолевый антиген.
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ
В некоторых случаях терапевтические композиции, раскрытые в настоящем описании, могут содержать в дополнение к нацеленным на опухоль Т-клеткам соединения, лекарственные средства и/или агенты, применяемые для лечения злокачественной опухоли. Такие соединения, лекарственные средства и/или агенты могут включать, например, химиотерапевтические лекарственные средства, низкомолекулярные лекарственные средства или антитела, которые стимулируют иммунный ответ на данную злокачественную опухоль. В других случаях терапевтические композиции могут содержать, например, один или несколько низкомолекулярных ингибиторов, которые вызывают сайленсинг, снижают, исключают, вызывают нокдаун, нокаут или снижают экспрессию и/или активность генов, выбранных из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс. Соответственно, в изобретении предлагается один или несколько ингибиторов Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 или РррЗсс.
В одном аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Ppp2r2d.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Eif2ak3.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Arhgap5.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Акар81.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Rbks.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Egr2.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Dgka.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Cblb.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам МарЗкЗ.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам vMdfic.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Entpdl.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Dgkz.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Vamp7.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Nuak2.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Hipkl.
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Alk. В одном варианте ингибитор Alk включает, например, СН5424802 (Hoffmann-La Roche), LDK378 (Novartis), Crizotinib и PF-02341066 (Pfizer) или AP26113 (Ariad Pharmaceuticals).
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Pdzklipl.
В некоторых случаях терапевтические композиции могут содержать, например, цитокины, хемокины и другие молекулы передачи биологических сигналов, специфичные для опухолей вакцины, клеточные противораковые вакцины (например, GM-CSF-трансдуцированные злокачественные клетки), специфичные для
опухоли моноклональные антитела, трансплантируемые аутологичные
и аллогенные стволовые клетки (например, чтобы усилить эффекты
трансплантата против опухоли), другие терапевтические антитела,
средства целенаправленной молекулярной терапии, средства
антиангиогенной терапии, инфекционные агенты для
терапевтических целей (такие как локализуемые в опухоли бактерии) и средства генной терапии.
В некоторых случаях терапевтические композиции, раскрытые в настоящем описании, могут быть приготовлены для применения в виде фармацевтических композиций. Такие композиции могут быть приготовлены или адаптированы для введения пациенту любым путем, например, любым путем, одобренным Управлением по контролю пищевых продуктов и лекарственных средств (FDA). Примеры способов описаны в руководстве FDA - CDER Data Standards Manual, версии номер 004 (которая доступна на сайте fda.give/cder/dsm/DRG/drg0 03 01.htm).
В некоторых случаях фармацевтические композиции могут содержать эффективное количество одного или нескольких пептидов. Термины "эффективное количество" и "эффективное для лечения" в используемом в настоящем описании смысле относятся к количеству или концентрации одного или нескольких пептидов в течение определенного периода времени (включая острое или хроническое введение и периодическое или непрерывное введение), которые являются эффективными в контексте его введения, вызывая предполагаемый эффект или физиологический результат.
Фармацевтические композиции согласно настоящему
изобретению могут содержать любые обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты или наполнители. В некоторых случаях значение рН препарата может быть скорректировано с использованием фармацевтически приемлемых кислот, оснований или буферов, чтобы повысить стабильность приготовленного в виде препарата соединения или его формы доставки.
СПОСОБЫ
заболевание (например, злокачественную опухоль). В некоторых случаях подходящие пациенты включают, например, пациентов, которые имеют или имели состояние или заболевание, но у которых произошло разрешение заболевания или его аспекта, имеют место уменьшенные симптомы заболевания (например, относительно других пациентов (например, большинства пациентов) с таким же состоянием или заболеванием) и/или которые выживают в течение длительных периодов времени при наличии состояния или заболевания (например, относительно других пациентов (например, большинства пациента) с таким же состоянием или заболеванием), например, в бессимптомном состоянии (например, относительно других пациентов (например, большинства пациентов) с таким же состоянием или заболеванием).
Термин "пациент" в используемом в настоящем описании смысле относится к любому животному. В некоторых случаях пациентом является млекопитающее. В некоторых случаях термин "пациент" в используемом в настоящем описании смысле относится к человеку (например, мужчине, женщине или ребенку). Образцы для применения в способах могут включать образцы сыворотки, например, полученные от выбранного пациента.
В некоторых случаях отбор пациента может включать получение образца от пациента (например, пациента-кандидата) и тестирование образца в отношении показателя того, что пациент подходит для отбора. В некоторых случаях может быть подтверждено или может быть идентифицирован пациент, например, медицинским работником, как пациент, имевший или имеющий состояние или заболевание. В некоторых случаях демонстрация позитивного иммунного ответа по отношению к состоянию или заболеванию может быть осуществлена на основании медицинской карты пациента, семейного анамнеза и/или выявления показателя позитивного иммунного ответа. В некоторых случаях в отборе пациентов могут участвовать несколько групп. Например, первая группа может получать образец от пациента-кандидата, а вторая группа может тестировать образец. В некоторых случаях пациенты могут быть выбраны и/или названы практикующим врачом (например, врачом общей практики). В некоторых случаях отбор пациента
может включать получение образца от выбранного пациента и хранение и/или использование образца в способах, раскрытых в настоящем описании. Образцы могут включать, например, клетки или популяции клеток.
СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ
В некоторых вариантах изобретение относится к способам повышения иммунного ответа у пациента, нуждающегося в таком повышении. Изобретение относится к терапии, которая особенно применима для лечения пациентов, имеющих злокачественную опухоль. В некоторых случаях изобретение относится к способам лечения, которые включают в себя введение пациенту композиции, раскрытой в настоящем описании.
В настоящем изобретении предлагаются способы лечения и/или профилактики злокачественной опухоли или симптомов злокачественной опухоли у пациента, включающие в себя введение пациенту терапевтически эффективного количества композиции, способной вызывать сайленсинг генов, которые ингибируют Т-клеточную функцию (например, иммунореактивная Т-клетка, экспрессирующая мшРНК согласно изобретению и требуемый CAR, направленный к опухолевому антигену). В некоторых случаях Т-клетка получена от пациента, подвергаемого лечению, и была модифицирована для экспрессии CAR и мшРНК, которая снижает экспрессию гена-мишени, описанного в настоящей публикации.
В некоторых вариантах злокачественной опухолью является карцинома, саркомы, аденокарцинома, лимфома, лейкоз и т.д., включая солидные и лимфоидные злокачественные опухоли, рак почек, молочной железы, легкого, мочевого пузыря, ободочной кишки, яичника, простаты, поджелудочной железы, желудка, головного мозга, головы и шеи, кожи, матки, семенников, глиому, рак пищевода и печени, включая гепатокарциному, лимфому, включая острую В-лимфобластную лимфому, неходжкинские лимфомы (например, лимфому Беркитта, мелкоклеточную и крупноклеточную лимфомы) и ходжкинские лимфомы, лейкоз (включая AML, ALL и CML) и множественную миелому. В некоторых вариантах злокачественной опухолью является меланома. В некоторых вариантах злокачественная опухоль представляет собой злокачественное
новообразование из плазматических клеток, например, множественную миелому (ММ) или предзлокачественное состояние плазматических клеток. В некоторых вариантах у пациента диагностировано наличие злокачественной опухоли или предрасположенность к образованию злокачественной опухоли.
В используемом в настоящем описании смысле "злокачественная опухоль" относится к злокачественным опухолям и карциномам, саркомам, аденокарциномам, лимфомам, лейкозам и т.д. человека, включая солидные и лимфоидные злокачественные опухоли, рак почки, молочной железы, легкого, мочевого пузыря, ободочной кишки, яичника, простаты, поджелудочной железы, желудка, головного мозга, головы и шеи, кожи, матки, семенников, глиому, рак пищевода и печени, включая гепатокарциному, лимфому, включая острую В-лимфобластную лимфому, неходжкинские лимфомы (например, лимфому Беркитта, мелкоклеточную и крупноклеточную лимфомы) и ходжкинскую лимфому, лейкоз (включая AML, ALL и CML) и множественную миелому.
Термин "противоопухолевый эффект" в используемом в настоящем описании смысле относится к биологическому эффекту, который может проявляться в виде уменьшения объема опухоли, уменьшения количества опухолевых клеток, уменьшения количества метастазов, увеличения продолжительности жизни или ослабления различных физиологических симптомов, ассоциированных со злокачественным состоянием. "Противоопухолевый эффект" также может проявляться в способности пептидов, полинуклеотидов, клеток и антител согласно изобретению предотвращать появление опухоли в первом месте.
Термины "лечить" или "лечение" в используемом в настоящем описании смысле относятся к частичному или полному облегчению, ингибированию, ослаблению и/или устранению заболевания или состояния, от которого страдает пациент. В некоторых случаях лечение может приводить к длительному отсутствию заболевания или состояния, от которого страдает пациент.
заболевание. В некоторых случаях состояние или заболевание пациента можно лечить фармацевтическими композициями, раскрытыми в настоящем описании. Например, в некоторых случаях способы включают в себя отбор пациента со злокачественной опухолью, например, при этом злокачественную опухоль пациента можно лечить за счет увеличения накопления Т-клеток и их инфильтрации в опухоль.
В некоторых случаях способы лечения могут включать в себя однократное введение, несколько введений и многократные введения, которые необходимы для профилактики или лечения заболевания или состояния, от которого страдает пациент. В некоторых случаях способы лечения могут включать в себя оценку уровня заболевания у пациента перед лечением, во время лечения и/или после лечения. В некоторых случаях лечение может продолжаться вплоть до выявления снижения уровня заболевания у пациента.
После введения пациент может быть подвергнут оценке с целью выявления, оценки или определения у него уровня заболевания. В некоторых случаях лечение может продолжаться вплоть до выявления изменения (например, снижения) уровня заболевания у пациента.
После улучшения состояния пациента (например, изменения (например, снижения) уровня заболевания у пациента), можно вводить поддерживающую дозу соединения, композиции или сочетании согласно изобретению, если это необходимо. Затем доза или частота введения, или и то и другое, могут быть снижены в зависимости от симптомов до уровня, при котором сохраняется улучшенное состояние. Однако пациентам может требоваться периодическое лечение на долговременной основе после рецидива каких-либо симптомов заболевания.
Также в объем настоящего изобретения входит сочетание любых способов и любых композиций, раскрытых в настоящем описании, с использованием одного или нескольких терапевтических средств. Терапевтическое средство включает без ограничения малые молекулы, пептиды, антитела, рибозимы, антисмысловые олигонуклеотиды, химиотерапевтические средства и
излучение.
Также в объем настоящего изобретения входит сочетание любых способов и любых композиций, раскрытых в настоящем описании, с обычной терапией злокачественных опухолей и различными лекарственными средствами, чтобы повысить эффективность такой терапии либо за счет снижения доз/токсичности обычной терапии и/либо за счет повышения чувствительности к обычной терапии. Одним из способов обычной терапии является применение лучевой терапии. Другим обычным способом терапии является применение химиотерапевтических лекарственных средств, которые можно разделить на: алкилирующие агенты, антиметаболиты, антрациклины, растительные алкалоиды, ингибиторы топоизомераз и противоопухолевые средства. Все указанные лекарственные средства некоторым образом влияют на клеточное деление или синтез и функционирование ДНК. Другие обычные терапевтические средства против злокачественной опухоли представляют собой средства, которые прямо не затрагивают ДНК. Примеры таких средств, которые сочетаемы с настоящим изобретением, могут включать, например, "низкомолекулярные" лекарственные средства, которые блокируют специфичные ферменты, вовлеченные в рост злокачественной клетки. Моноклональные антитела, противораковые вакцины, ингибиторы ангиогенеза и генная терапия представляют собой целенаправленные средства терапии, которые также можно сочетать с композициями и способами, раскрытыми в настоящем описании, так как они также мешают росту злокачественных клеток.
СПОСОБЫ СКРИНИНГА ТЕСТИРУЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ
В настоящее изобретение включены способы скрининга
тестируемых соединений, например, полипептидов,
полинуклеотидов, неорганических или органических
высокомолекулярных или низкомолекулярных тестируемых
соединений, чтобы идентифицировать средства, применимые для лечения злокачественной опухоли, например, тестируемые соединения, которые вызывают сайленсинг, снижают, исключают, вызывают нокдаун, нокаут, модулируют или снижают экспрессию и/или активность генов, выбранных из группы, состоящей из
Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс.
В используемом в настоящем описании смысле термин "малые молекулы" относится к малым органическим или неорганическим молекулам с молекулярной массой ниже чем примерно 3000 дальтон. В общем, малые молекулы, применимые в изобретении, имеют молекулярную массу менее 3000 дальтон (Д). Малые молекулы могут иметь молекулярную массу, например по меньшей мере примерно от 100 Д до примерно 3000 Д (например, примерно от 100 до примерно 3000 Д, примерно от 100 до примерно 2 50 0 Д, примерно от 100 до примерно 2 000 Д, примерно от 100 до примерно 17 50 Д, примерно от 100 до примерно 1500 Д, примерно от 100 до примерно 1250 Д, примерно от 100 до примерно 1000 Д, примерно от 100 до примерно 7 50 Д, примерно от 100 до примерно 50 0 Д, примерно от 2 00 до примерно 1500, примерно от 500 до примерно 1000, примерно от 300 до примерно 1000 Д или примерно от 100 до примерно 2 50 Д).
Тестируемые соединения могут представлять собой, например, природные продукты или представителей комбинаторной химической библиотеки. Следует использовать набор разных молекул для того, чтобы охватить разнообразие функций, таких как заряд, ароматичность, водородные связи, гибкость, размер, длина боковой цепи, гидрофобность и жесткость. Основанные на комбинировании способы, подходящие для синтеза малых молекул, известны в данной области, например, проиллюстрированы на примерах в публикации Obrecht и Villalgordo (Solid-Supported Combinatorial and Parallel Synthesis of Small-Molecular-Weight Compound Libraries, Pergamon-Elsevier Science Limited (1998)), и включают такие способы, как способы "разделения и объединения" или "параллельного синтеза", способы твердофазного синтеза и синтеза в жидкой фазе и способы, основанные на кодирования (смотри, например, Czarnik, Curr. Opin. Chem. Bio. 1: 60-6 (1997)). Кроме того, коммерчески доступно несколько библиотек малых молекул. Ряд подходящих тестированных
низкомолекулярных соединений перечислены в патенте США № 6503713, включенном в настоящее описание в виде ссылки в полном объеме.
Библиотеки, подвергаемые скринингу с использованием способов согласно настоящему изобретению, могут содержать множество типов тестируемых соединений. Такая библиотека может содержать набор структурно родственных или неродственных тестируемых соединений. В некоторых вариантах тестируемые соединения представляют собой пептидные молекулы или молекулы пептидомиметиков. В некоторых вариантах тестируемыми соединениями являются нуклеиновые кислоты.
В некоторых вариантах тестируемые соединения и их библиотеки могут быть получены в результате систематического изменения структуры первого тестируемого соединения, например, первого тестируемого соединения, которое структурно сходно с известным природным партнером целевого полипептида в связывании, или первой малой молекулы, идентифицированной как молекула, способная связывать целевой полипептид, например, с использованием способов, известных в данной области, или способов, описанных в настоящей публикации, и выявления корреляции такой структуры с получаемой биологической активностью, например, при исследовании взаимосвязи структура-активность . Как будет понятно специалисту в данной области, существует множество стандартных способов создания такой взаимосвязи структура-активность. Таким образом, в некоторых случаях работа может быть в большой степени эмпирической, и в других случаях трехмерная структура эндогенного полипептида или его части может быть использована в качестве исходной точки для рационального конструирования низкомолекулярного соединения или соединений. Например, в одном варианте общую библиотеку малых молекул подвергают скринингу, например, используя способы, описанные в настоящей публикации.
В некоторых вариантах тестируемое соединение применяют в отношении тестируемого образца, например, клетки или живой ткани или органа, например, глаза, и оценивают один или несколько эффектов тестируемого соединения. В культивируемых
или первичных клетках, например, оценивают способность тестируемого соединения вызывать сайленсинг, уменьшать, исключать, подвергать нокдауну, нокауту, модулировать или снижать экспрессию и/или активность генов, выбранных из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс.
В некоторых вариантах тестируемый образец происходит или получен (например, образец взят) из модели in vivo заболевания, которое описано в настоящей публикации. Например, можно использовать животную модель, например, грызуна, такого как крыса.
Способы оценки таких эффектов известны в данной области. Например, способность модулировать экспрессию белка может быть оценена на уровне гена или белка, например, с использованием способов количественной ПЦР или иммуноанализа. В некоторых вариантах высокопроизводительные способы, например, белковые или генные чипы, которые известны в данной области (смотри, например, главу 12, Genomics, Griffiths et al., Eds. Modern genetic Analysis, 1999,W. H. Freeman and Company; Ekins and Chu, Trends in Biotechnology, 1999, 17:217-218; MacBeath and Schreiber, Science 2000, 289(5485): 1760-1763; Simpson, Proteins and Proteomics: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2002; Hardiman, Microarrays Methods and Applications: Nuts and Bolts, DNA Press, 2003), могут быть использованы для выявления влияния на активность Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс или экспрессию генов.
Тестируемое соединение, которые было подвергнуто скринингу способом, описанным в настоящей публикации, и определено как соединение, которое вызывает сайленсинг, уменьшает, исключает,
вызывает нокдаун, нокаут или снижает экспрессию и/или активность генов, выбранных из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс, можно считать соединением-кандидатом. Соединение-кандидат, которое было подвергнуто скринингу, например, в модели in vivo расстройства, например, злокачественной опухоли, и определено как соединение, которое оказывает требуемое влияние на расстройство, например, на один или несколько симптомов расстройства, можно считать кандидатом для терапевтического средства. Кандидаты для терапевтических средств после скрининга в клинических условиях являются терапевтическими средствами. Соединения-кандидаты, кандидаты для терапевтических средств и терапевтические средств могут быть необязательно оптимизированы и/или дериватизованы и приготовлены с физиологически приемлемыми эксципиентами для образования фармацевтических композиций.
Таким образом, тестируемые соединения, идентифицированные как "наилучшие" (например, тестируемые соединения, которые ингибируют иммуносупрессорные пути, используемые опухолевыми клетками для инактивации и/или подавления иммунных клеток) при первом скрининге, могут быть отобраны и подвергнуты систематическому изменению, например, с использованием рационального конструирования, чтобы оптимизировать аффинность, авидность, специфичность связывания или другой параметр. Такая оптимизация также может быть подвергнута скринингу в отношении применения способов, описанных в настоящей публикации. Таким образом, в одном варианте изобретение относится к скринингу первой библиотеки соединений с применением способа, известного в данной области и/или описанного в настоящей публикации, идентификации одного или нескольких наилучших представителей в такой библиотеке, подверганию таких наилучших представителей систематическому структурному изменению для создания второй библиотеки соединений, структурно родственных наилучшему
представителю, и скринингу второй библиотеки с применением способов, описанных в настоящей публикации. ПРИМЕРЫ
Изобретение дополнительно описано в следующих примерах, которые не ограничивают объем изобретения, описанный в формуле изобретения.
Недавняя работа показала, что цитотоксические Т-клетки играют центральную роль в опосредованном иммунной системой контроле злокачественных опухолей1-3, и моноклональные антитела, мишенью которых являются ингибирующие рецепторы на Т-клетках, могут принести значимую клиническую пользу пациентам с заболеванием на поздней стадии4-6. Однако многие регуляторные механизмы, которые приводят к утрате функции Т-клеток в иммуносупрессорных опухолях, остаются неизвестными. В следующих примерах авторы изобретения демонстрируют, что такие регуляторные механизмы можно систематически обнаруживать in vivo в микроокружении опухоли. Авторы изобретения предположили, что мшРНК, нацеленные на ключевые ингибиторы, обеспечат надежную инфильтрацию и накопление Т-клеток в опухолях, несмотря на многочисленные ингибирующие сигналы. С использованием способа скрининга пула мшРНК, направленный на идентификацию генов, которые блокируют функцию инфильтрующих опухоль Т-клеток CD8, были открыты мшРНК-кандидаты для переноса мшРНК-трансдуцированных Т-клеток несущим опухоли мышам, с последующим глубоким секвенированием, чтобы количественно оценить представление всех шпилек в опухолях и лимфоидных органах. Большинство мшРНК индуцировали накопление Т-клеток в опухолях, но не в селезенке, что свидетельствует о возможности обнаружения мшРНК с разным действием в тканях. Одной из мишеней был Ppp2r2d, регуляторная субъединиц фосфатазы РР2А7. Контрольные мшРНК-трансдуцированные Т-клетки подвергались апоптозу при распознавании клеток меланомы, тогда как трансдуцированные Ppp2r2d-MinPHK Т-клетки накапливались в опухолях вследствие повышенной пролиферации и резистентности к апоптозу. Экспрессирующие Ppp2r2d-MinPHK Т-клетки также значимо снижали рост опухолей. Такой способ in vivo имеет широкие
применения для анализа сложных иммунных функций в соответствующем тканевом микроокружении.
Иммунные клетки осуществляют сложные наблюдательные функции в организме и взаимодействуют со многими типами клеток в разном тканевом микроокружении. Терапевтические мишени для модулирования иммунных ответов обычно идентифицируют in vitro и тестируют в животных моделях на поздней стадии процесса. В данном случае авторы изобретения обратились к проблеме того, как можно систематически обнаруживать мишени для иммунной модуляции in vivo. Это является центральной проблемой в онкологии, так как сильная инфильтрация Т-клетками CD8 которые имеют цитотоксическую функцию, направленную против опухолевых клеток - ассоциирована с благоприятным прогнозом при многих типах злокачественных опухолей человека1'3'8. К сожалению, такой природный механизм защиты сильно притупляется у большинства пациентов под влиянием множества ингибирующих сигналов, исходящих от опухоли, ее стромы, регуляторных Т-клеток и популяций миелоидных клеток.9-11
Было показано, что объединенные библиотеки мшРНК являются эффективными средствами обнаружения12-14. Авторы изобретения предположили, что мшРНК, способные восстанавливать функцию Т-клеток CD8, можно систематически обнаруживать in vivo, воспользовавшись высокой пролиферативной способностью Т-клеток после запуска Т-клеточного рецептора ассоциированным с опухолью антигеном. При введении в Т-клетки только небольшая подгруппа мшРНК из пула будет восстанавливать пролиферацию Т-клеток, приводят к их обогащению в опухолях. Сверхпредставительство активных мшРНК в каждом пуле можно количественно оценить глубоким секвенированием кассеты мшРНК из опухолей и вторичных лимфоидных органов (фиг. 1).
Экспериментальные животные. Мышей C57BL/6, мышей TRP-1 (трансгенные мыши, экспрессирующие Т-клеточный рецептор (TCR), специфичный для родственного тирозиназе белка I)23, мышей pmel-1 (трансгенные мыши, экспрессирующие TCR, специфичный для gplOO)18, и мышей Ь2т-/-24 приобретали из The Jackson Laboratory. Мышей Ragl-/- OT-I16 приобретали из Taconic Farms,
Inc. Мышей содержали в виварии Dana-Farber Cancer Institute. Все экспериментальные процедуры были одобрены комитетом по уходу и использованию животных Dana-Farber Cancer.
Линии клеток. Меланомы В1б, агрессивные опухоли, которые трудно лечить, экспрессируют суррогатный опухолевый антиген овальбумин (Ova), который распознается Т-клетками CD8 мышей, трансгенными по рецептору Т-клеток OT-I16'17. Клетки тимомы EL438 и меланомы B16-F1015 поддерживали в RPMI 164 0 с добавлением 10% FBS, 2 мМ L-глутамина, 100 мкг/мл стрептомицина и 100 мкг/мл пенициллина. Экспрессирующие овальбумин опухолевые клетки В16
(B16-Ova) поддерживали в такой же среде с добавлением 600 мкг/мл G418 (Invitrogen).
Векторы и последовательности мшРНК. Отбирали мшРНК для 2 55 генов, сверхэкспрессируемых в Т-клетках с утраченной функцией
(анергичное или истощенное состояние). Вектор pLK0.3G получали
из The RNAi Consortium. Векторы pLKO-Thyl.l, pLKO-Ametrine,
pLKO-RFP, pLKO-TFP получены в результате модификации вектора
pLK0.3G заменой GFP соответствующим репортерным геном. Мышиные
последовательности Ppp2r2d и Cblb, которые являются мишенями 10
отобранных мшРНК, представлены в таблице 3 (перечислены в
порядке активности мшРНК (от наиболее высокой к наиболее
низкой)). Также указана последовательность-мишень LacZ, которая
является мишенью контрольной мшРНК. Все другие
последовательности-мишени можно найти в таблице 2.
клеток красили в PBS, 2% FBS мечеными антителами при 4 °С в течение 2 0 минут, затем два раза промывали охлажденном на льду PBS, 2% FBS. Клетки анализировали/сортировали, используя FACSAria (BD Biosciences) и компьютерную программу FlowJo
(TriStar). Используемые антитела были специфичными для CD4, CD8, Va2, V|35.1/5.2, Thyl.l, CD25, CD44, CD62L, CD69, CD122, CD127, IFNy, TNFa (BioLegend), PD-1, TIM-3, LAG-3, гранзима В и H-2Kb (BioLegend), Va3.2 (eBioscience) , V|3l3, V|3l4 (BD Biosciences), фосфо-Akt (Ser473) и фосфо-Bad (Serll2) (Cell Signaling). Апоптозные клетки выявляли мечением аннексином V
(BioLegend) или антителом к активированной каспазе-3 (Cell Signaling). Шарики с антителами против CD3/CD2 8 мыши приобретали из Invitrogen.
Выделение Т-клеток из опухолей. Меланомы B16-Ova нарезали на небольшие кусочки в чашках Петри, содержащих 5 мл PBS, 2% FBS, и промывали PBS. Опухоли ресуспендировали в 15 мл RPMI с добавлением 2% FBS, 50 ед./мл коллагеназы типа IV (Invitrogen), 20 ед./мл ДНКазы (Roche), образцы инкубировали при 37°С в течение 2 часов и ткань дополнительно диссоциировали, используя диссоциатор gentleMACS (Miltenyi Biotech). Суспензии три раза промывали PBS и пропускали через сито 7 0 мкм. Лимфоциты выделяли центрифугированием в градиенте плотности и затем либо анализировали, либо сортировали проточной цитометрией, используя FACSAria (BD Biosciences).
Апоптоз Т-клеток. Предварительно обработанные цитокином клетки OT-I трансдуцировали мшРНК LacZ или Ppp2r2d и инъецировали мышам, несущим 14-дневные опухоли B16-Ova. Через 7 дней осуществляли внутриклеточное окрашивание, используя антитело против активированной каспазы-3 (Cell Signaling) и дважды позитивные CD8/Thyl.l Т-клетки пропускали в FACS-анализе.
Иммунофлуоресценция и иммуногистохимия. Опухоли B16-Ova от мышей, обработанных Т-клетками OT-I, экспрессирующими мшРНК LacZ или Ppp2r2d (GFP-экспрессирующий вектор), подвергали криоконсервации в соединении с оптимальной температурой резки
(О.С.Т.) (Tissue-Тек). Срезы криоконсервированных опухолей толщиной 10 мкм пермеабилизовали 0,2% тритоном Х-100, фиксировали в 4% параформальдегидом и красили GFP-антителом
(Molecular Probes) в сочетании с DAPI. Для выявления с использованием TUNEL срезы красили TACS 2 TdT Blue Label
(Trevigen), следуя инструкциям производителя. Образцы визуализировали, используя лазерный сканирующий конфокальный микроскоп (Leica SP5X) и анализировали с использованием компьютерной программы ImageJ (NIH).
кОТ-ПЦР-анализ. Суммарную РНК экстрагировали, используя реагент TRIzol (Invitrogen). РНК обратно транскрибировали с использованием набора для высокоэффективной обратной транскрипции кДНК (Applied Biosystems). Количественные ПНР-реакции в реальном времени осуществляли в трех повторах, используя прибор ABI 7900НТ и SYBR green (ABI). Уровни Rpl23 использовали для нормализации. Использовали следующие праймеры: прямой Ppp2r2d G GAAG С С GACAT CAT С Т С СAC (SEQ ID NO: 622), обратный Ppp2r2d GTGAGCGCGGCCTTTATTCT (SEQ ID NO: 623); прямой Cblb GGTCGCATTTTGGGGATTATTGA (SEQ ID NO: 624), обратный Cblb T T T G G С AC AG TCT T AC С AC T T T (SEQ ID NO: 625) ; прямой Rpl23 CTGTGAAGGGAATCAAGGGA (SEQ ID NO: 62 6) и обратный Rpl2 3 TGTCGAATTACCACTGCTGG (SEQ ID NO: 627).
Анализ на микроматрицах. Культивируемые с IL-7/IL-15 Т-клетки OT-I трансдуцировали одной из пяти экспериментальных мшРНК (Ppp2r2d, Arhgap5, Alk, Egr2, Ptpn2) или контрольной мшРНК LacZ. Инфицированные клетки сортировали для очистки, используя GFP, кодируемый вектором, в качестве репортера. Т-клетки (5х106) инъецировали внутривенно мышам, несущим 14-дневные опухоли B16-Ova. Спустя семь дней Т-клетки ON-I, экспрессирующие мшРНК (CD8+GFP+) выделяли из опухолей и селезенок. Клетки сортировали дважды для более высокой очистки и суммарную РНК экстрагировали, используя реагент TRIzol
(Invitrogen), для получения профиля экспрессии генов Affymetrix
(матрицы мышиного генома 430 2.0). Матрицы для каждой мшРНК были в трех повторах (6 мышей на группу).
Нанолучночный анализ продукции цитокинов на уровне отдельных клеток
Материалы. Антитела, используемые для активации Т-клеток, представляли собой антитело против CD3 мыши и антитело против CD2 8 мыши (Biolegend). Антитела, используемые для улавливания секретируемых цитокинов, представляли собой антитело против
IFNy мыши (Biolegend) , антитело против IL-2 мыши (Biolegend), антитело против TNFa мыши (Biolegend) и антитело против GM-CSF мыши (Biolegend). Антитела для выявления представляли собой антитело против IFNy мыши (Biolegend), антитело против IL-2 мыши (Biolegend), антитело против TNFa мыши (Biolegend) и антитело против GM-CSF мыши (Biolegend), и такие антитела флуоресцентно метили подходящими красителями Alexa Fluor
(Invitrogen), следуя инструкциям производителя. Липиды, используемые для получения закрепленных бислоев, представляли собой: 1,2-диолеоил-зп-глицеро-З-фосфохолин (DOPC) и 1,2-диолеоил-зп-глицеро-З-фосфоэтаноламин-^(биотиниловый кэп)
(Biotinyl Сар РЕ) (Avanti Polar Lipids).
Создание PDMS-матриц нанолунок и получение закрепленных
липидных бислоев. Матрицу нанолунок получали, инъецируя
полидиметилсилоксан (PDMS, Dow Corning), приготовленный в смеси
в массовом соотношении 10:1 основа/катализатор, в специально
изготовленную форму, служащую оболочкой для
микроструктурированной силиконовой матрицы. Матрицы нанолунок отверждали при 70°С в течение 4-16 часов. Каждая матрица содержала 72x24 блока, каждый из которых содержал 7x7 (50 мкм х 50 мкм х 50 мкм) субматриц нанолунок (всего 84 672 лунки). PDMS-матрицы непосредственно прилипали к предметному стеклу 3" х 1"
(7,62 см х 2,54 см), образуя слой толщиной 1 мм. Закрепленные липидные слои готовили как описано ранее14. Вислой получали, нанося DOPC-липосомы, содержащие 2 моль% биотин-Сар-РЕ-липидов на PDMS-матрицу нанолунок. Поверхности промывали деионизованной водой, чтобы удалить избыток липосом. Перед применением липидный бислой блокировали БСА в PBS (100 мкг/мл) в течение 45 минут. Затем бислой инкубировали с 1 мкг/мл стрептавидина в
растворе 100 мкг/мл БСА в PBS, затем инкубировали с биотинилированными CD3- и CD2 8- антителами. Устройство тщательно промывали PBS перед добавлением клеток.
Микрогравировка. Улавливающие антитела разбавляли в боратном буфере (50 мМ борат натрия, 8 мМ сахароза и 50 мМ NaCl, рН 9,0) до конечной концентрации 10 мкг/мл и помещали на поверхность эпокси-модифицированных предметных стекол на 1 час при комнатной температуре. Предметные стекла блокировали 3% обезжиренным молоком в PBST (PBS с 0,05% (об./об.) твина 20) в течение 3 0 минут при комнатной температуре и промывали PBS перед приведением их в контакт с PDMS-матрицей нанолунок. Суспензию Т-клеток распределяли на поверхности нанолунок, модифицированных закрепленным липидным бислоем, в среде и давали возможность в лунках. Плотность суспендированных клеток, наносимых на матрицу оптимизировали эмпирически, чтобы максимизировать занятость лунок одиночными клетками (обычно ~3 0% лунок). После инкубации лунок с нагруженными клетками предметное стекло, покрытое улавливающими антителами, помещали на загруженную матрицу для улавливания цитокинов. Микроматрицу и предметное стекло удерживали вместе под давлением в камере для гибридизации (Agilent Technologies, G2534A) и инкубировали в течение 1 часа при 37 °С с 5% СОг. Затем предметное стекло отделяли от матрицы и помещали в PBS.
После микрогравировки предметные стекла инкубировали в течение 30 минут с блокирующим буфером (PBS, 10 мг/мл БСА, 0,05 % (об./об.) твин-20, 2% мышиная сыворотка и 2 мМ азид натрия), промывали PBST (PBS+ 0,05% об./об. твин-20) и затем инкубировали с антителами для выявления флуоресценции в концентрации 1 мкг/мл в течение 4 5 минут при 25°С. Предметные стекла промывали PBST и PBS, в течение короткого периода времени промывали водой и сушили в потоке N2. Эталонные слайды получали в конце каждого эксперимента с использованием таких же антител, которые использовали на подвергнутых печати предметных стеклах. В случае эталонных предметных стекол антитела разбавляли водой, наносили пятнами на контрольные предметные стекла с поли-Ъ-лизином (1 мкл/пятно), и эталонные предметные
стекла сушили в вакууме. Предметные стекла сканировали, используя сканирующее устройство для микроматриц Genepix 4200AL (Molecular Devices). Выделяли медианную интенсивность флуоресценции каждого пятна, используя Genepix Pro.
Цитометрия на основе визуализации на чипе. Перед
визуализацией Т-клетки красили красителем для плазматической
мембраны CellMask(tm) (Invitrogen, Life Technologies) и SYTOX
зеленым (для выявления мертвых клеток, Life Technologies).
Нагруженные клетками матрицы нанолунок устанавливали лицевой
стороной вверх на микроскоп, при этом покровное стекло помещали
сверху матрицы. Изображения получали с использованием
автоматизированного инвертированного эпифлюоресцентного
микроскопа (Carl Zeiss). Проходящий свет и эпифлуоресцентные микрофотографии собирали по блокам (7x7 микролунок на блок). Полученный набор изображений анализировали, используя специализированную программу, чтобы определить количество клеток, присутствующих в каждой лунке, и среднюю интенсивность флуоресценции каждой метки. В анализе рассматривали только живые Т-клетки. Хотя клетки экспрессировали GFP, интенсивность флуоресценции GFP была незначительной в используемых условиях получения данных микроскопического анализа по сравнению с SYTOX зеленым, позволяющим идентифицировать мертвые клетки.
Анализ данных. Данные, извлеченные в результате цитометрии на чипе и анализа цитокинов на печатных матрицах, сопоставляли в Microsoft Excel, используя уникальные идентификаторы, присвоенные каждой лунке на матрице. Набор данных фильтровали так, чтобы он включал лунки, содержащие только одиночные клетки. Чтобы компенсировать проступание сигнала и превратить измеряемую интенсивность флуоресценции для улавливаемых цитокинов из данной клетки в скорость секреции, данные, полученные на основе стандартных калибровочных кривых (для эталонных предметных стекол), полученных с использованием известных количеств антител для выявления, использовали для превращения измеряемых интенсивностей в количество молекул, как описано ранее (Han, Q., et.al., Multidimensional analysis of
the frequencies and rates of cytokine secretion from single cells by quantitative microengraving. Lab Chip 10, 1391-1400, doi: 10.1039/b926849a (2010).
ПРИМЕР 1: Выявление in vivo РНК-и мишеней иммунотерапии Осуществляли два больших первичных скрининга, при этом первый был сфокусирован на генах, сверхэкспрессированных в Т-клетках с нарушенной функцией (анергия или истощение Т-клеток; 255 генов, 1275 мшРНК, разделенных на два пула) , а второй на киназах/фосфатазах (1307 генов, 6535 мшРНК, разделенных на семь пулов) (таблица 4). В указанных первичных скринингах каждый ген был представлен ~5 мшРНК.
мшРНК, мишенью которых являются 2 55 генов,
сверхэкспрессированных в Т-клетках с нарушенной функцией (анергичное или истощенное состояние)31-37, и 1307 генов киназы/фосфатазы (~5 мшРНК на ген), получали из The RNAi Consortium (TRC; Broad Institute, Cambridge, MA, USA) . Создавали девять пулов и мшРНК субклонировали в лентивирусном векторе pLKO-Thyl.1. Каждый пул также содержал 85 мшРНК для негативного контроля (количество мшРНК: GFP, 24; LacZ, 20; люциферазы 25; RFP 16) . Т-клетки OT-I, выделенные в результате негативной селекции (Stemcell Technologies) культивировали с IL-7 (5 нг/мл, Peprotech) и IL-15 (100 нг/мл, Peprotech) в полной среде RPMI (RPMI 1640, 10% FBS, 20 мМ HEPES, 1 мМ
пируват натрия, 0,05 мМ 2-меркаптоэтанол, 2 мМ L-глутамин, 100 мкг/мл стрептомицина и 100 мкг/мл пенициллина). На 2 день Т-клетки OT-I инфицировали лентивирусными пулами при центрифугировании (девять лентивирусных пулов мшРНК и контрольный лентивирусный вектор с контрольной мшРНК LacZ) с добавлением протаминсульфата (5 мкг/мл) в 24-луночных планшетах, покрытых ретронектином (5 мкг/мл) при множественности инфекции (MOI) 15. Обычно инфицировали ~5х106 Т-клеток ОТ-1 для каждого пула.
После инфекции клетки ОТ-1 культивировали с IL-7 (2,5 нг/мл), IL-15 (50 нг/мл) и IL-2 (2 нг/мл) в полной среде RPMI. На 5 день живые мшРНК-трансдуцированные Т-клетки обогащали, используя набор для удаления мертвых клеток (Miltenyi), и инфицированные клетки подвергали позитивной селекции на основе маркера Thyl.1 (Stemcell Technologies) до 50-60% позитивности по Thyl.1. Успешную трансдукцию контролировали по поверхностной экспрессии репортера Thyl.1 (фиг. 2) . Т-клетки (5П106) инъецировали внутривенно мышам C57BL/6, несущим 14-дневные опухоли B16-Ova (15 мышей на пул мшРНК)(количество животных выбрано для обеспечения достаточного количества клеток для выделения Т-клеток и ПЦР) . Геномную ДНК выделяли из 5x106 обогащенных Т-клеток ОТ-1 в качестве исходной популяции для глубокого секвенирования. Спустя семь дней мшРНК-экспрессирующие Т-клетки (CD8+Va2+V|35+Thyl. 1 + ) выделяли с использованием проточной цитометрии из опухолей, селезенок, дренирующих опухоли лимфатических узлов и нерелевантных лимфатических узлов для выделения геномной ДНК с последующей ПЦР-амплификацией кассеты мшРНК (фиг. 3). Выделяли геномную ДНК (Qiagen) и создавали матрицы для глубокого секвенирования с использованием ПЦР кассеты мшРНК. Представительство мшРНК в каждом пуле анализировали глубоким секвенированием, используя анализатор генома Illumina30. Данные нормализовали, используя средние риды контрольных мшРНК в каждом пуле. Гены киназ/фосфатаз отбирали для вторичного скрининга на основе уровней экспрессии в Т-клетках.
В случае некоторых генов мшРНК были сверхпредставлены во
всех тестированных тканях по сравнению с исходной популяцией Т-
клеток (например, SHP-1), что свидетельствует об усиленной
пролиферации, независимой от распознавания TCR опухолевого
антигена. В случае других генов имела место избирательная
утрата мшРНК в опухолях (например, ZAP-7 0, важная киназа в пути
активации Т-клеток). Авторы изобретения сфокусировали свой
анализ на генах, в случае которых наблюдали
сверхпредставительство мшРНК в опухоли, но не в селезенке, вторичном лимфоидном органе. Значимое накопление Т-клеток в опухолях наблюдали в случае некоторых мшРНК, несмотря на иммуносупрессорное окружение. Для вторичных скринингов авторы изобретения создавали сфокусированные пулы, в которых каждый ген-кандидат был представлен ~15 мшРНК.
Первичные данные такого анализа для трех генов показаны на фиг. 4: LacZ (негативный контроль), Cblb (ЕЗ убиквитинлигаза, которая индуцирует интернализацию Т-клеточного рецептора) 19 и Ppp2r2d (ранее не исследованный в Т-клетках). В случае Ppp2r2d и Cblb имело место значимое увеличение количества пяти мшРНК в опухолях (красный) по сравнению с селезенкой, тогда как обогащения мшРНК LacZ не наблюдали. В общем, 43 гена удовлетворяли следующим критериям: П4-кратное обогащение для 3 или более мшРНК в опухолях по сравнению с селезенкой (таблица 5, фиг. 4, фиг. 5) . Набор включал генные продукты, ранее идентифицированные как ингибиторы передачи сигнала Т-клеточных рецепторов (включая Cblb, Dgka, Dgkz, Ptpn2), а также другие хорошо известные ингибиторы функции Т-клеток (например, Smad2, Socsl, Socs3, Egr2), что подтверждает подход авторов изобретения (таблица 5, таблица б)20-22. В таблице 5 описана функциональная классификация генов-кандидатов, выявленных при вторичном скрининге.
Таблица 5
Функция
Гены
Ингибирование передачи сигналов TCR
Cbib, Dgka, Dgkz, Fyn, Inpp5b, РррЗсс, Ptpn2, Stkl7b, Tnkl
Метаболизм фосфоинозитола
Dgka, Dgkz, Impk, Inpp5b, Sbfl
Ингибирующие пути передачи сигналов цитокинов
Smad2, Socsl, Socs 3
Передача сигналов AMP, ингибирование mTOR
Entpdl, Prkab2, Nuak
Клеточный цикл
Cdkn2a, Pkdl, Ppp2r2d
Актин и микротрубочки
Arhgap5, Mast2, Rock 1
Потенциальные ядерные функции
Blvrb, Egr2, Impk, Jun, Ppmlg
Роль в злокачественных клетках
Alk, Arhgap5, Eif2ak3, Hipkl, Met, Nuak, Pdzklip, Rockl, Yesl
Вторичные скрининги осуществляли, фокусируя внимание на генах, для мшРНК которых наблюдали сверхпредставительство в опухоли, но не в селезенке, вторичном лимфоидном органе. Значимое накопление Т-клеток в опухолях наблюдали в случае некоторых мшРНК, несмотря на иммуносупрессорное окружение. В случае таких вторичных скринингов синтезировали ~10 дополнительных мшРНК для каждого гена (IDT), всего ~15 мшРНК на ген. Такие сфокусированные пуля содержали 8 5 мшРНК негативного контроля. В случае двух контрольных мшРНК (одна для RFP, одна для люциферазы) наблюдали некоторое обогащение в опухолях по сравнению с селезенкой (4,0 и 5,1-кратное, соответственно). Предел отсечения при вторичном скрининге определяли как > 3 мшРНК с > 4-кратным обогащением в опухоли по сравнению с селезенкой. Результаты скрининга подтверждали на клеточном уровне введением индивидуальных мшРНК в Т-клетки вместе с репортерным белком (флуоресцирующие белки GFP, TFP, RFP или аметрин, Thyl.l). Такой способ позволял одновременно тестировать пять мшРНК у животного (три мыши на группу). Пролиферацию мшРНК-трансдуцированных Т-клеток визуализировали на основании разбавления CFSE через 24 часа, а также через 3, 5 и 7 дней. Кроме того, осуществляли внутриклеточное окрашивание в 3, 5 и 7 дни в отношении IFNy, TNFa и изотипических контролей. Результаты первичного и вторичного скринингов библиотеки пулов мшРНК Т-клеток с нарушенной функцией
представлены в таблице б. Перечислены гены, в случае которых по меньшей мере для 3 мшРНК наблюдали > 4-кратное обогащение в опухолях, вместе с кратким описанием их функции. Результаты вторичного скрининга библиотек мшРНК киназ и фосфатаз показаны в таблице 7.
образом инактивирует DAG
Mdfic
4,4-10,0
Ингибирует экспрессию вирусных генов, взаимодействует с циклином Т1 и Т2
Nptxr
4,0-7,2
Рецептор пентраксина
Fllr
4, 6-6, 8
Миграция клеток
Socs3
4, 6-6, 3
Ингибитор передачи сигналов цитокинов
Pdzklipl
4,8-12,9
Взаимодействующий с Pdzkl белок, экспрессия коррелирует с
прогрессированием опухолей
Fyn
4, 1-6, 5
Ингибирует активацию покоящихся Т-клеток (через Csk)
Ypel2
4,6-5,1
Функция не известна
myb, у нокаутированных мышей развиваются меньше индуцированных канцерогеном опухолей
Grk6
4,2-11
Регулятор отдельных сопряженных с G-белком рецепторов
Cdkn2a
4,1-7,2
Задержка клеточного цикла в G1 и апоптоз в Т-клетках
Sbfl
4, 8-6, 9
Активирует MTMR2, который дефосфорилирует Р1(3)Р и PI(3,5)Р2
Ipmk
4, 0-6, 9
Инозитолполифосфаткиназа, ядерные функции, такие как ремоделирование хроматина
Rockl
4 4, 1-6, 5
Киназа Rho, ингибиторы проявляли активность в мышиных моделях злокачественной опухоли
Stkl7b
4, 0-6, 4
Ингибитор передачи сигналов Т-клеток образует комплекс с протеинкиназой D
Mast2
4,1-5,1
Ассоциированная с микротрубочками сериновая/треониновая киназа
Arhgap5
6,0-15,7
Негативный регулятор GTP-аз Rho, ингибирование может снижать инвазию злокачественных клеток
Alk
9,6-13,5
Киназа анапластической лимфомы (транслокация нуклеофосмина и ALK в ALCL)
Nuak
4,5-13,1
Представитель семейства киназ, родственных АМФ-активируемым протеинкиназам,
онкоген при меланоме
Акар81
4,4-11, 8
Заякоривающий А-киназу белок, привлекает цАМФ=зависимую протеинкиназу (РКА) к хроматину
Pdpl
4,1-9,8
Фосфатаза
пируватдегидрогеназы 1, регулирование метаболизма глюкозы
Yesl
5,4-9,7
Киназа семейства Src, онкоген в случае нескольких опухолей
Met
4,1-8,9
Рецепторная тирозинкиназа, вовлеченная в гепатоклеточную и другие злокачественные опухоли
Ppmlg
6,2-8,2
Дефосфорилирует субстраты сплайсесомы и гистоны Н2А-Н2В
Blvrb
5,3-8,0
Биливердинредуктаза, а также фактор транскрипции, задержка клеточного цикла
Tnkl
5,2-7,6
Осуществляет понижающую регуляцию пути Ras (фосфорилирование Grb2), ингибирование пути NF-kB
Prkab2
4,1-7,0
Субъединица АМФ-киназы, ингибирует синтез жирных кислот и путь mTOR
Trpm7
4,9-5,9
Ионный канал и сериновая-треониновая киназа
РррЗсс
4,2-4,4
Регуляторная субъединица кальциневрина (фосфатаза в передаче сигнала Т-клеточных рецепторов)
ПРИМЕР 2. Управляемая мшРНК экспансия Т-клеток CD4 и CD8 в меланомах В16
Позитивные мшРНК в основанном на глубоком секвенировании анализе клонирования в лентивирусных векторах, кодирующих пять разных репортерных белков (флуоресцирующих белков GFP, TFP, RFP или аметрина, Thyl.l). Предварительно обработанные цитокинами Т-клетки ОТ-1 трансдуцировали лентивирусными векторами, управляющими экспрессией отдельной мшРНК и репортерного белка; 1х106 Т-клеток каждой популяции смешивали и совместно инъецировали внутривенно мышам C57BL/6, несущим 14-дневные опухоли B16-0va. Через семь дней Т-клетки выделяли из опухолей, селезенок и лимфатических узлов и определяли процент позитивных по репортерам Т-клеток CD8+Va2+V|35+, используя проточную цитометрию на основе совместно введенных репортеров. Кратное обогащение в опухолях по сравнению с селезенкой вычисляли на основе процентного содержания Т-клеток ОТ-1 в каждом органе, экспрессирующем конкретный репортер. Когда экспрессировали контрольную мшРНК LacZ в Т-клетках OT-I CD8 ОТ-1, частота мшРНК-экспрессирующих Т-клеток OT-I CD8 была более низкой в опухолях по сравнению с селезенкой (~в 2 раза). Напротив, экспериментальные мшРНК индуцировали накопление Т-клеток ОТ-1 CD8 в опухолях, но не в селезенке (фиг. 6, фиг. 7) . В случае семи таких мшРНК (например, Ppp2r2D, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap8I, Rbks и Egr2) накопление Т-клеток в опухолях было > 10-кратным по сравнению с селезенкой. Наиболее выраженный фенотип наблюдали в случае мшРНК, мишенью которых является Ppp2r2d, регуляторная субъединица фосфатазы7 РР2А.
Т-клетки OT-I CD8+ или TRP-1 CD4+, экспрессирующие мшРНК
Ppp2r2d или LacZ, инъецировали мышам, несущим 14-дневные
опухоли B16-0va. мшРНК-экспрессирующие Т-клетки
идентифицировали в опухолях и селезенках, используя репортер Thyl.l (фиг. 8, % Т-клеток Thyl.1+ CD8, левые панели). Общее количество Т-клеток, экспрессирующих мшРНК LacZ или Ppp2r2d определяли в опухолях и селезенке через 7 дней после переноса 2х106 мшРНК-экспрессирующих клеток (фиг. 8, правые панели). Указано кратное обогащение Т-клеток, экспрессирующих мшРНК Ppp2r2d, по сравнению с Т-клетками, экспрессирующими мшРНК
LacZ. мшРНК Ppp2r2d не только индуцировала накопление Т-клеток OT-I CD8, но также и Т-клеток CD4 (из трансгенных мышей TRP-1 TCR)23, при этом количество Т-клеток в опухолях было значимо выше, когда экспрессировали мшРНК Ppp2r2d, а не мшРНК LacZ (в 36,3 раза в случае Т-клеток CD8; в 16,2 раза в случае Т-клеток CD4) (фиг. 8).
Обогащение Т-клеток в опухолях по сравнению с селезенкой в случае клеток, экспрессирующих панель мшРНК Ppp2r2d или Cblb (фиг. 17, верхние панели). Также измеряли уровни мРНК Ppp2r2d и Cblb, используя кПЦР, перед переносом Т-клеток (фиг. 17, нижние панели). Наиболее сильное обогащение Т-клеток в опухолях наблюдали в случае мшРНК с > 8 0% эффективностью нокдауна на уровне мРНК (мшРНК №1 и 2 для Ppp2r2d и Cblb) . Накопление Т-клеток CD8 коррелировало со степенью нокдауна Ppp2r2d, и две мшРНК Ppp2r2d мшРНК с наиболее высокой активностью in vivo индуцировали саму низкие уровни мРНК Ppp2r2d (фиг. 17).
Нокдаун Ppp2r2d также подтверждали на уровне белка, используя способ количественной масс-спектрометрии (фиг. 18) . Использовали ранее описанный способ абсолютного количественного анализа (AQUA) белков из клеточных лизатов с помощью масс-спектрометрии, чтобы измерить влияние экспрессии мшРНК Ppp2r2d на уровне белка (Gerber, S.A., Rush, J., Stemman, О., Kirschner, M.W. & Gygi, S.P. Absolute quantification of proteins и phosphoproteins from cell lysates by tandem MS. PNAS, 100, 6940-6945 (2003). Такая методика основана на способе "селективного мониторинга реакции", в котором синтетический пептид с включенными стабильными изотопами используют в качестве внутреннего стандарта для масс-спектрометрического анализа. Клетки ОТ-1, экспрессирующие мшРНК LacZ или Ppp2r2d, сортировали для очистки, используя FACS. Клетки (1x106) лизировали в 1 мл реагента для экстракции MPER (Pierce), содержащем смесь ингибиторов протеаз (Sigma), 1 мМ EDTA и 1 мМ PMSF, в течение 15 минут на льду с периодическим встряхиванием. Клеточные обломки удаляли центрифугированием и белковый надосадок фильтровали (0,2 мкм центрифужный фильтр SpinX,
Costar). Концентрацию белка определяли, используя анализ по Брэдфорду (Biorad) и анализ в УФ при 280 нм (Nanodrop instrument); 0,1 мг клеточного белка разделяли в SDS-ПААГ и красили реагентом Кумасси синим (Pierce). Полосы геля, соответствующие диапазону М.м. 45-60 кД, вырезали с последующим расщеплением белков в геле трипсином. Элюированные пептиды импульсно метили, используя 300 фмоль изотопно меченых пептидов Ppp2r2d (FFEEPEDPSS[13C-15N-R]-ОН)(SEQ ID NO: 628) и актина В (GYSFTTTAE[13C-15N-R]-ОН) (SEQ ID NO: 629) (21st Century Biochemicals) для количественной оценки ЖХМС/МС (LTQ XL Orbitrap, Thermo Scientific). Пептид Ppp2r2d выбирали из области белка, которая отличается от других регуляторных субъединиц РР2А. Сначала анализировали данные ЖХ-МС/МС для образца мшРНК LacZ, чтобы локализовать пептиды Ppp2r2d и актина В, которые подвергали мониторингу. Пептиды AQUA для абсолютного количественного анализа элюировали совместно с соответствующими эндогенными пептидами с колонки с обращенной фазой, их более высокая М.М. (10 кД) обеспечивала возможность определения отношения интенсивности пиков для эндогенных пептидов и пептидов AQUA с использованием имеющихся в избытке ионов пептидных фрагментов. Образцы в трех повторах анализировали, используя SDS-ПААГ - ЖХ-МС/МС, и статистическую значимость определяли, используя компьютерную программу Graphpad Prism 6.0 и двусторонний t-критерий Стьюдента (критерий F, * р=0,0062).
Определяли специфичность мшРНК Ppp2r2d. Активность мшРНК Ppp2r2d была специфичной, поскольку фенотип был обратимым, когда вводили мутантную кДНК Ppp2r2d (с последовательностью белка дикого типа, но мутантной последовательностью ДНК в сайте связывания мшРНК) совместно с мшРНК Ppp2r2d (фиг. 9, 10а-с). Кроме того, Т-клетки OT-I CD8 сверхэкспрессировали Ppp2r2d в опухолях по сравнению с селезенкой (в отсутствие какой-либо экспрессии мшРНК), что свидетельствует о том, что он является компонентом, присущим сети передачи сигнала, ингибирующей функцию Т-клеток в опухолях (фиг. 19).
Ppp2r2d. Создавали мутантную кДНК Ppp2r2d с сохраненной последовательностью белка, но нарушенным сайтом связывания мшРНК. кДНК Ppp2r2d дикого типа выделяли в ОТ-ПЦР, используя прямой праймер GGATCCATGGCAGGAGCTGGAGGC (SEQ ID N0: 63 0) и обратный праймер: GC TAGCAT ТААТ Т Т Т GT СС Т GGAATATATACAAGT TAT Т GGT GG
(SEQ ID N0: 631). Последовательность-мишень мшРНК Ppp2r2d,
С С САСАТ CAG Т GCAAT G ТAT Т (SEQ ID N0: 632) подвергали мутации с
получением TCCCCACCAATGTAACGTGTT (SEQ ID N0: 633), используя
ПЦР с перекрыванием (которая сохраняет кодирующую
последовательность белка) с использованием прямого праймера:
Т С CAT С С С САС СААТ G ТААС GTGTTTGTT ТACAG CAG CAG СAAG G (SEQ ID NO: 634)
и обратного праймера:
AAACAAACACGTTACATTGGTGGGGATGGAACTCTGCGGCAGTGA (SEQ ID NO: 635)
(фиг. 10a). И кДНК Ppp2r2d дикого типа и мутантную кДНК Ppp2r2d клонировали в модифицированном векторе pLKO.3 с последовательностью пептида "перескакивания" рибосомы 2A-GFP
(что приводило к стехиометрической экспрессии Ppp2r2d и GFP в
клетках). Конструкции вводили в клетки тимомы EL4. GFP-
экспрессирующие клетки EL4 сортировали для очистки и затем
трансдуцировали лентивирусными векторами для мшРНК LacZ или
Ppp2r2d, осуществляющими экспрессию репортера Thyl.l. мшРНК-
трансдуцированные (Thyl.l+) клетки анализировали с
использованием проточной цитометрии в отношении экспрессии GFP. мшРНК Ppp2r2d снижала уровни GFP в случае Ppp2r2d дикого типа. мшРНК Ppp2r2d была неспособна снижать экспрессию репортера GFP в клетках, экспрессирующих мутантную кДНК Ppp2r2d, что свидетельствует о том, что связывающий мшРНК сайт был успешно подвергнут мутации (фиг. 10а).
Экспрессия мутантной кДНК Ppp2r2d также предотвращала появление фенотипа, индуцируемого мшРНК Ppp2r2d (фиг. 10Ь) . мшРНК Ppp2r2d клонировали в конструкции мутантная кДНК Ppp2r2d-2A-GFP, которая приводила к совместной экспрессии мшРНК Ppp2r2d и мутантной кДНК Ppp2r2d с одного вектора. Т-клетки ОТ-1 отдельно инфицировали лентивирусами, кодирующими мшРНК LacZ
популяции смешивали в одном и том же соотношении и инъецировали мышам, несущим 14-дневные опухоли B16-0va. На 7 день каждую популяцию Т-клеток количественно оценивали в опухолях и селезенках, пропуская Т-клетки OT-I (CD8+Va2+V|35+) , с последующим анализом популяций, для которых характерна экспрессия Thyl.l, аметрина или GFP. Процентное содержание каждой популяции Т-клеток в опухолях и селезенках оценивали, пропуская Т-клетки Va2+V|35+; трансдуцированные клетки выявляли на основе экспрессии флуоресцирующих репортеров Thyl.1 или аметрин/GFP и результаты показаны на фиг. 10Ь (типичные данные из 2 независимых экспериментов, п=3 мыши на эксперимент).
На фиг. 10с представлен ПЦР-анализ в реальном времени экспрессии Ppp2r2d в Т-клетках ОТ-1, трансдуцированных мшРНК LacZ, мшРНК Ppp2r2d и мшРНК Ppp2r2d плюс мутантной кДНК Ppp2r2d. Также мшРНК Ppp2r2d с наиболее высокой активностью in vivo была ассоциирована с наиболее низкими уровнями мРНК Ppp2r2d (фиг. 11).
Анализ на микроматрицах инфильтрующих опухоли Т-клеток, экспрессирующих экспериментальные или контрольные мшРНК, показал, что каждая мшРНК индуцировала индивидуальный набор изменений генной экспрессии с некоторым перекрыванием между конкретными мшРНК (фиг. 12а-с). Два гена (Egr2 и Ptpn2) имели известные функции в Т-клетках. Обогащение в опухоли по сравнению с селезенкой вычисляли на основе результатов глубокого секвенирования, полученных при вторичном скрининге (фиг. 12а). Кластеризация средних уровней экспрессии мРНК показала, что она значимо регулируется Т-клетками к селезенках или опухолях, экспрессирующих контрольную мшРНК LacZ или одну из пяти экспериментальных мшРНК (фиг. 12Ь). Значимые различия в экспрессии были определены в Anova при значении р <0,01 между Т-клетками, экспрессирующими контрольную мшРНК LacZ или одну из пяти экспериментальных мшРНК (Alk, Arhgap5, Egr2, Ptpn2 или Ppp2r2d) (JMP-Genomics 6.0, SAS Institute Inc.). Показаны мРНК, значимо регулируемые в одной или нескольких группах обработки после кластеризации (Fast Ward). Фиг. 12с представляет собой
диаграмму Венна, показывающую перекрывания между профилями экспрессии инфильтрующих опухоли Т-клеток, трансдуцированных одной из пяти экспериментальных мшРНК (профили определены в Anova, р <0,01, как описано выше). Указаны идентификационные номера перекрывающихся зондов для любого сочетания 5 профилей, которые показаны перекрывающимися овалами. Значимость перекрываний по сравнению с перекрываниями, ожидаемыми в результате случайного события (точный критерий Фишера) показана в сопровождающей таблице.
В случае данного примера оценивали клеточные механизмы,
управляющие накоплением Т-клеток под действием мшРНК Ppp2r2d в
опухолях - особенно инфильтрацией, накоплением и апоптозом Т-
клеток. Инфильтрацию Т-клеток в опухолях оценивали посредством
переноса Т-клеток OT-I CD8, меченых цитозольным красителем,
CFSE. Т-клетки ОТ-1, экспрессирующие мшРНК Ppp2r2d или LacZ,
метили CFSE и инъецировали мышам, несущим опухоли B16-0va.
Через двадцать четыре часа трансдуцированные Т-клетки выделяли
из опухолей и селезенок и количественно оценивали, используя
проточную цитометрию. Т-клетки ОТ-1, экспрессирующие мшРНК LacZ
или Ppp2r2d, очищали, используя репортер Thyl.l, и
культивировали в полной среде RPMI без добавления цитокинов в
течение 24 часов. Живые клетки, выделенные центрифугированием в
градиенте плотности Ficoll (Sigma), метили CFSE
(карбоксифлуоресцеиндиацетат, сукциимидиловый эфир,
Invitrogen), и 2> <106 меченых клеток инъецировали мышам, несущим 14-дневные опухоли B16-0va. Разбавление CFSE количественно оценивали проточной цитометрией во временной точке 2 4 часа и через 3, 5 и 7 дней после переноса. Кроме того, осуществляли внутриклеточное окрашивание в 3, 5 и 7 день в отношении IFNy, TNFa и контролей изотипа (BD) . Не выявлено различий в частоте трансдуцированных мшРНК Ppp2r2d или LacZ Т-клеток CD8 в опухолях в 1 день, что свидетельствует против наличия значимого влияния на инфильтрацию Т-клеток (фиг. 13а) . Однако анализ в
ПРИМЕР 3: Изменения функции Т-клеток, индуцированные Ppp2r2d
более поздних временных точках (3 и 5 дни) показал более высокую степень пролиферации (на основании разбавления CFSE) Т-клеток, трансдуцированных мшРНК Ppp2r2d, по сравнению с Т-клетками, трансдуцированными мшРНК LacZ (фиг. 13Ь, фиг. 20а). Т-клетки, трансдуцированные мшРНК Ppp2r2d, также продуцировали более высокие уровни интерферона-П, цитокина, важного для противоопухолевого иммунитета (фиг. 13е). Действие Ppp2r2d было в пути ниже активации Т-клеточных рецепторов, поскольку накопление Т-клеток усиливалось в опухолях и в меньшей степени в дренирующих опухоли лимфатических узлах. Напротив, не наблюдали накопления в нерелевантных лимфатических узлах или селезенке, где соответствующий антиген не презентируется Т-клеткам (фиг. 15) . Значительную степень накопления Т-клеток наблюдали даже в случае Т-клеток, трансдуцированных мшРНК LacZ (полное разбавление красителя CFSE на 7 день), несмотря на присутствие небольших количеств таких клеток в опухолях. Это свидетельствует о том, что Т-клетки, трансдуцированные мшРНК LacZ, утрачиваются в результате апоптоза. Действительно, более высокое процентное содержание инфильтрующих опухоли Т-клеток, было мечено антителом, специфичным для активной каспазы-3, когда была экспрессирована контрольная мшРНК LacZ (а не мшРНК Ppp2r2d) (фиг. 13д, фиг. 20Ь) . Кроме того, совместное культивирование Т-клеток CD8 с клетками опухоли B16-Ova показало, что большинство Т-клеток, экспрессирующих мшРНК LacZ, становятся апоптозными (65,7%), тогда как большинство Т-клеток, трансдуцированных мшРНК Ppp2r2d, были жизнеспособными (89,5%, фиг. 13с).
Т-клетки ОТ-1, экспрессирующие мшРНК LacZ или Ppp2r2d, очищали на основе экспрессии Thyl.l и метили CFSE, как описано выше. Т-клетки ОТ-1, меченые CFSE (1> <105), культивировали совместно с 5хЮ4 клеток B16-Ova на лунку в 9б-луночном планшете в течение 72 часов. Перед анализом на клетки B16-Ova воздействовали 1 нг/мл IFNy в течение 48 часов (чтобы индуцировать МНС класса I, который не экспрессируется in vitro) и промывали три раза. Апоптоз Т-клеток ОТ-1 выявляли, используя
мечение аннексином V клеток CD8+ (фиг. 13с) . Внутриклеточное
окрашивание фосфо-АКТ (Ser473), фосфо-Bad (Ser 112), Bcl-2 и
контроля изотипа осуществляли во временной точке 48 часов,
используя набор для внутриклеточного окрашивания BD. Совместное
культивирование Т-клеток CD8 с опухолевыми клетками B16-Ova
действительно показало, что большинство Т-клеток,
экспрессирующих мшРНК LacZ, были апоптозными (65,7%), тогда как большинство Т-клеток, трансдуцированных мшРНК Ppp2r2d, были живыми (89,5%, фиг. 13с) . Сходный фенотип наблюдали в том случае, когда Т-клетки, экспрессирующие мшРНК Ppp2r2d и LacZ, стимулировали иммобилизованным СБЗ-антителом в отсутствие костимуляции CD28 (фиг. 14). В частности, клетки B16-Ova
(2х105) инъецировали подкожно самкам мышей C57BL/6 (10-недельного возраста). На 12 день мышей, несущих опухоли сходного размера, делили на 7 групп (7-8 мышей/группу). Активированные анти-СВЗ/СБ28-шариками Т-клетки CD4 TRP-1 или/и CD8 ОТ-1, инфицированные векторами для мшРНК Ppp2r2d или LacZ
(2x106 Т-клеток в каждом случае), инъецировали внутривенно на 12 день и 17 день. Для лечения опухолей В16 мышей обрабатывали на 10 день активированными анти-СВЗ/СБ28-шариками Т-клетками CD4 TRP-1 и CD8 pmel-1, экспрессирующими мшРНК Ppp2r2d или LacZ
(ЗхЮ6 Т-клеток в каждом случае). Размер опухолей измеряли каждые три дня после переноса и рассчитывали в виде произведения длины * ширину. Мышей с опухолями > 2 0 мм по наибольшей оси умерщвляли.
Полученные результаты свидетельствовали о возможности того, что Т-клетки CD8, трансдуцированные мшРНК Ppp2r2d, могут быть способны пролиферировать и выживать даже в том случае, когда они распознают свой антиген, непосредственно презентированный опухолевыми клетками B16-Ova. Такую идею проверяли, используя имплантацию опухолевых клеток мышам Ь2т-/-, которые дефицитны по экспрессии белков МНС класса I24. У некоторых мышей только опухолевые клетки, но не профессиональные антигенпрезентирующие клетки хозяина могли презентировать опухолевые антигены Т-клеткам. Действительно, в
случае Т-клеток OT-I CD8, трансдуцированных мшРНК Ppp2r2d, наблюдали массивное накопление в опухолях B16-0va у мышей Ь2т-/- (фиг. 12f), тогда как очень небольшие количества Т-клеток присутствовали в контралатеральных опухолях В1б, в которых отсутствовала экспрессия антигена Ova. Таким образом, Т-клетки, экспрессирующие мшРНК Ppp2r2d, могли эффективно пролиферировать и выживать в ответ на опухолевые клетки, несмотря на отсутствие подходящих костимулирующих сигналов и ингибирующего микроокружения.
Анализ ex vivo инфильтрующих опухоли Т-клеток на уровне одной клетки с использованием устройства с нанолунками также продемонстрировал, что сайленсинг Ppp2r2d повышал продукцию цитокинов Т-клетками (фиг. 21а-с). Т-клетки активировали в течение 3 часов СОЗ/С028-антителами на липидных бислоях с последующим улавливанием цитокинов в течение 1 часа на покрытых антителами предметных стеклах. В случае Т-клеток CD8 наблюдали более высокую скорость секреции IFNy, IL-2 и GM-CSF, и большую долю Т-клетки с более чем одним цитокином (фиг. 21Ь, с) . Присутствие большего числа IFNy-продуцирующих Т-клеток подтверждали с использованием внутриклеточного окрашивания цитокинов (фиг. 21d, фиг. 20).
Фосфатаза РР2А состоит из каталитической и каркасной субъединиц, и ее субстратная специфичность определяется одной из множества регуляторных субъединиц7. Ppp2r2d направляет РР2А к субстратам Cdkl во время интерфазы и анафазы; при этом он ингибирует вход в митоз и индуцирует выход из митоза25. РР2А играет роль охранника для BAD-опосредованного апоптоза. Фосфорилированный BAD секвестрируется в своей неактивной форме в цитозоле посредством 14-3-3, тогда как дефосфорилированный BAD направляется в митохондрии, где он вызывает гибель клетки за счет связывания Bcl-XL и Вс1-226. Также было показано, что фосфатазы РР2А взаимодействуют с цитоплазматическими доменами CD28 и CTLA-4, а также Carmal (выше пути NF-кВ), но не известно, какие регуляторные субъединицы необходимы для таких активностей; в настоящее время нет Ppp2r2d-aнтитeл, подходящих
для требуемых биохимических исследований.
ПРИМЕР 4. Сайленсинг Ppp2r2d усиливает противоопухолевую активность Т-клеток CD4 и CD8.
Оценивали способность мшРНК Ppp2r2d усиливать эффективность адоптивной Т-клеточной терапии. Опухолевые клетки B16-0va (2х105) инъецировали подкожно самкам мышей C57BL/6 (Понедельного возраста). На 12 день мышей, несущих опухоли сходного размера, делили на семь групп (7-8 мышейе/группу), которые либо не получали Т-клеток, либо получали 2x106 мшРНК-трансдуцированных Т-клеток TRP-1 CD4, 2х106 мшРНК-инифицированных Т-клеток OT-I CD8 или и CD4- и CD8- Т-клетки (12 день и 17 день) . В соответствии с группой активированные анти-СБЗ/СБ28-шариками Т-клетки CD4 TRP-1 и/или CD8 ОТ-1, инфицированные мшРНК Ppp2r2d или LacZ (2х106 Т-клеток в каждом случае) инъецировали внутривенно на 12 день и 17 день. Для лечения опухолей В16 мышей обрабатывали на 10 день активированными анти-СВЗ/СБ28-шариками Т-клетками CD4 TRP-1 и CD8 pmel-1, экспрессирующими мшРНК Ppp2r2d или LacZ (ЗхЮ6 Т-клеток в каждом случае). Размер опухолей измеряли каждые три дня после переноса и рассчитывали в виде произведения длины * ширину. Мышей с опухолями > 2 0 мм по наибольшей оси умерщвляли. Ppp2r2d-caraieHCHHr улучшал терапевтическую активность Т-клеток CD4 и CD8, и наблюдали синергетический эффект в том случае, когда совместно вводили трансдуцированные мшРНК Ppp2r2d Т-клетки CD4 и CD8 (фиг. 16а, Ь) . мшРНК Ppp2r2d также усиливала противоопухолевые ответы при введении в Т-клетки, специфичные по отношению к эндогенным опухолевым антигенам (Т-клетки pmel-1 CD8 и Т-клетки TRP-1 CD4) (фиг. 16с).
Т-клетки с сайленсингом Ppp2r2d приобретали эффекторный фенотип в опухолях (фиг. 22а), и > 30% клеток экспрессировали гранзим В (фиг. 23а). В соответствии с сильно повышенными количествами таких эффекторных Т-клеток в опухолях (фиг. 23Ь) TUNEL-окрашивание показало повышенный апоптоз в опухолях, когда присутствовали Т-клетки, экспрессирующие мшРНК Ppp2r2d, а не LacZ (фиг. 2 3с) . Меланомы В16 являются высоко агрессивными
опухолями, отчасти вследствие того, что экспрессия МНС класса I очень низкая. Интересно, что Т-клетки, экспрессирующие мшРНК Ppp2r2d, но не мшРНК LacZ, значимо повышали экспрессию МНС класса I (Н-2КЬ) в опухолевых клетках (фиг. 23d), возможно вследствие наблюдаемого повышения секреции IFNy Т-клетками (фиг. 21а-с, фиг. 13е). мшРНК Ppp2r2d не снижала экспрессию ингибирующих рецепторов PD-1 или LAG-3 инфильтрующими опухоли Т-клетками, демонстрируя, что механизм ее действия отличается от механизмов, известных негативных регуляторов Т-клеточной функции (фиг. 22Ь) . Такой факт свидетельствует о комбинированных подходах, нацеленных на такие внутриклеточные молекулы и молекулы клеточной поверхности.
Полученные результаты доказывают возможность обнаружения in vivo новых мишеней для иммунотерапии в сложном тканевом микроокружении. Авторы изобретения показали, что можно обнаруживать гены с разным действием в тканях, что проиллюстрировано накоплением Т-клеток в опухолях, по сравнению с вторичными лимфоидными органами. В случае генов с избирательным для тканей действием накопление и жизнеспособность Т-клеток вероятно находятся под контролем Т-клеточного рецептора и поэтому не происходит в тканях, в которых отсутствует презентация соответствующего антигена. Может быть предусмотрено множество вариантов способа, представленного в настоящем описании, для исследования регуляции конкретных функций иммунных клеток in vivo. Например, флуоресцирующие репортеры экспрессии цитокинов или цитотоксических молекул (гранзим В, перфорин) могут быть включены в способ, предложенный авторами изобретения, для обнаружения генов, которые контролируют важные эффекторные функции Т-клеток в опухолях.
Целенаправленное воздействие на ключевые регуляторные переключатели может обеспечить новые подходы к модификации активности Т-клеток в злокачественной опухоли и при других патологиях. Эффективность такой основанной на Т-клетках терапии может быть повышена за свет мшРНК-опосредованного сайленсинга
генов, которые ингибируют Т-клеточную функцию в микроокружении опухоли.
ДРУГИЕ ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
Следует понимать, что хотя изобретение представлено вместе с его подробным описанием, приведенное выше описание предназначено для иллюстрации, а не для ограничения объема изобретения, который определен прилагаемой формулой изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации входят в объем следующей далее формулы изобретения.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Galon, J., et al. Type, density, and location of immune cells within human colorectal tumors predict clinical outcome. Science 313, 1960-1964 (2006).
2. Hamanishi, J., et al. Programmed cell death 1 ligand 1 and tumor-infiltrating CD8+ T lymphocytes are prognostic factors of human ovarian cancer. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 104, 33603365 (2007).
3. Mahmoud, S.M., et al. Tumor-Infiltrating CD8 +
Lymphocytes Predict Clinical Outcome in Breast Cancer. J Clin
Oncol 29, 1949-1955 (2011).
4. Topalian, S.L., et al. Safety, activity, and immune correlates of anti-PD-1 antibody in cancer. The New England journal of medicine 366, 2443-2454 (2012).
5. Brahmer, J.R., et al. Safety and activity of anti-PD-Ll antibody in patients with advanced cancer. The New England journal of medicine 366, 2455-2465 (2012) .
6. Hodi, F.S., et al. Improved Survival with Ipilimumab in Patients with Metastatic Меланома. N Engl J Med (2011) .
7. Barr, F.A., Elliott, P.R. and Gruneberg, U. Protein phosphatases and the regulation of mitosis. J Cell Sci 124, 2323-2334 (2011) .
8. Pages, F., et al. In situ cytotoxic and memory T-cells predict outcome in patients with early-stage colorectal cancer. J Clin Oncol 27, 5944-5951 (2009).
4.
L.M. Immune microenvironments in solid tumors: new targets for therapy. Genes Dev 25, 2559-2572 (2011).
10. Gabrilovich, D.I. and Nagaraj, S. Myeloid-derived suppressor cells as regulators of the immune system. Nat Rev Immunol 9, 162-174 (2009).
11. Topalian, S.L., Drake, C.G. & Pardoll, D.M. Targeting the PD-1/B7-H1(PD-L1) pathway to activate anti-tumor immunity. Current opinion in immunology 24, 207-212 (2012) .
12. Westbrook, T.F., et al. A genetic screen for candidate tumor suppressors identifies REST. Cell 121, 837-848 (2005).
13. Luo, В., et al. Highly parallel identification of essential genes in cancer cells. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 105, 2038020385 (2008).
14. Zender, L., et al. An oncogenomics-based in vivo RNAi screen identifies tumor suppressors in liver cancer. Cell 135, 852-864 (2008).
15. Fidler, I.J. Biological behavior of malignant melanoma cells correlated to their survival in vivo. Cancer research 35, 218-224 (1975).
16. Hogquist, K.A., et al. T cell receptor antagonist peptides induce positive selection. Cell 76, 17-27 (1994).
17. Bellone, M., et al. Relevance of the tumor antigen in the validation of three vaccination strategies for melanoma. Journal of immunology 165, 2651-2656 (2000) .
18. Overwijk, W.W., et al. Tumor regression and autoimmunity after reversal of a functionally tolerant state of self-reactive CD8+ T cells. The Journal of experimental medicine 198, 569-580 (2003) .
19. Paolino, M. & Penninger, J.M. СЫ-b in T-cell activation. Semin Immunopathol 32, 137-148 (2010) .
20. Zheng, Y., Zha, Y. & Gajewski, T.F. Molecular regulation of T-cell anergy. EMBO Rep 9, 50-55 (2008) .
21. Doody, K.M., Bourdeau, A. & Tremblay, M.L. T-cell protein tyrosine phosphatase is a key regulator in immune cell signaling: lessons from the knockout mouse model and
10.
implications in human заболевание. Immunological reviews 228, 325-341 (2009).
22. Tamiya, Т., Kashiwagi, I., Takahashi, R., Yasukawa, H. & Yoshimura, A. Suppressors of cytokine signaling (SOCS) proteins and JAK/STAT pathways: regulation of T-cell inflammation by SOCS1 and SOCS3. Arterioscler Thromb Vase Biol 31, 980-985 (2011) .
23. Muranski, P., et al. Tumor-specific Thl7-polarized cells eradicate large established melanoma. Blood 112, 362-373 (2008) .
24. Roller, B.H., Marrack, P., Kappler, J.W. & Smithies, 0. Normal development of mice deficient in beta 2M, MHC class I proteins, и CD8+ T cells. Science 248, 1227-1230 (1990).
25. Mochida, S., Maslen, S.L., Skehel, M. & Hunt, T. Greatwall phosphorylates an inhibitor of protein phosphatase 2A that is essential for mitosis. Science 330, 1670-1673 (2010).
26. Chiang, C.W., et al. Protein phosphatase 2A dephosphorylation of phosphoserine 112 plays the gatekeeper role for BAD-mediated apoptosis. Mol Cell Biol 23, 6350-6362 (2003).
27. Turtle, C.J., Hudecek, M., Jensen, M.C. & Riddell, S.R. Engineered T cells for anti-cancer therapy. Current opinion in immunology 24, 633-639 (2012) .
28. Restifo, N.P., Dudley, M.E. & Rosenberg, S.A. Adoptive immunotherapy for cancer: harnessing the T cell response. Nature reviews. Immunology 12, 269-281 (2012) .
29. Bollard, СМ., Rooney, CM. & Heslop, H.E. T-cell therapy in the treatment of post-transplant lymphoproliferative заболевание. Nat Rev Clin Oncol 9, 510-519 (2012) .
30. Ashton, J.M., et al. Gene sets identified with oncogene cooperativity analysis regulate in vivo growth and survival of leukemia stem cells. Cell Stem Cell 11, 359-372 (2012).
31. Wherry, E.J., et al. Molecular signature of CD8+ T cell exhaustion during chronic viral infection. Immunity 27, 670-684 (2007).
28.
32. Parish, I.A., et al. The molecular signature of CD8+ T
cells undergoing deletional tolerance. Blood 113, 4575-4585
(2009) .
33. Macian, F., et al. Transcriptional mechanisms
underlying lymphocyte tolerance. Cell 109, 719-731 (2002).
34. Zha, Y., et al. T cell anergy is reversed by active Ras and is regulated by diacylglycerol kinase-alpha. Nat Immunol 7, 1166-1173 (2006).
35. Lopes, A.R., et al. Bim-mediated deletion of antigen-specific CD8 T cells in patients unable to control HBV infection. The Journal of clinical investigation 118, 1835-1845 (2008).
36. Kurella, S., et al. Transcriptional modulation of TCR, Notch and Wnt signaling pathways in SEB-anergized CD4+ T cells. Genes Immun 6, 596-608 (2005).
37. Xu, Т., et al. Microarray analysis reveals differences in gene expression of circulating CD8(+) T cells in melanoma patients and healthy donors. Cancer research 64, 3661-3667 (2004) .
38. Gorer, P.A. Studies in antibody response of mice to tumour inoculation. Br J Cancer 4, 372-379 (1950).
34.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Иммунореактивная клетка, обладающая специфичностью по отношению к опухоли, содержащая вектор, содержащий последовательность, кодирующую мшРНК,
при этом мшРНК содержит 15 непрерывно следующих друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID N0: 604-620 и 653-677.
2. Иммунореактивная клетка по п.1, причем иммунореактивная клетка выбрана из группы, состоящей из инфильтрующего опухоль лимфоцита (TIL), Т-клетки природного киллера (NKT), цитотоксического Т-лимфоцита (CTL) и Т-клетки CD4.
3. Иммунореактивная клетка по п.1, причем иммунореактивная клетка экспрессирует специфичный для опухоли Т-клеточный рецептор.
4. Иммунореактивная клетка по п.1, причем иммунореактивная клетка дополнительно содержит вектор, кодирующий химерный рецептор антигена (CAR),
при этом CAR содержит антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и стимулирующий домен.
5. Иммунореактивная клетка по п.1, в которой
последовательность мшРНК снижает экспрессию гена, выбранного из
группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81,
Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl,
Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr,
Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b,
Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 или
РррЗсс.
6. Иммунореактивная клетка по п.1, в которой мшРНК выбрана
из зависимой от расщепления мшРНК или не зависимой от
расщепления мшРНК.
7. Иммунореактивная клетка по п.4, в которой
антигенсвязывающий домен связывает опухолевый антиген или
патогенный антиген.
простаты мембранного антигена (PSMA), раково-эмбрионального антигена (СЕА), CD19, CD20, CD22, R0R1, мезотелина, CD333/IL3Ra, с-Met, гликолипида F77, EGFRvIII, GD-2, NY-ES0-1 TCR, ERBB2, BIRC5, СЕACAM5, WDR4 6, BAGE, CSAG2, DCT, MAGED4, GAGE 1, GAGE 2, GAGE 3, GAGE 4, GAGE 5, GAGE 6, GAGE 7, GAGE 8, IL13RA2, MAGEA1, MAGEA2, MAGEA3, MAGEA4, MAGEАб, MAGEA9, MAGEA10, MAGEA12, MAGEB1, MAGEB2, MAGEC2, TP53, TYR, TYRP1, SAGE1, SYCP1, SSX2, SSX4, KRAS, PRAME, NRAS, ACTN4, CTNNB1, CAS P 8, CDC27, CDK4, EEF2, FN1, HSPA1B, LPGAT1, ME1, HHAT, TRAPPC1, MUM3, MYOIB, PAPOLG, OS9, PTPRK, ТРИ, ADFP, AFP, AIM2, ANXA2, ART4, CLCA2, CPSF1, PPIB, EPHA2, EPHA3, FGF5, CA9, TERT, MGAT5, CEL, F4 .2, CAN, ETV6, В IRC 7, CSF1, OGT, MUC1, MUC2, MUM1, CTAG1A, CTAG2, СTAG, MRPL28, FOLH1, RAGE, SFMBT1, KAAG1, SART1, TSPYL1, SART3, SOX10, TRG, WT1, TACSTD1, SILV, SCGB2A2, MC1R, MLANA, GPR143, OCA2, KLK3, SUPT7L, ARTC1, BRAF, CAS P 5, CDKN2A, UBXD5, EFTUD2, GPNMB, NFYC, PRDX5, ZUBR1, SIRT2, SNRPD1, HERV-K-MEL, CXorf61, CCDC110, VENTXP1, SPA17, KLK4, ANKRD3 OA, RAB3 8, CCND1, CYP1B1, MDM2, MMP2, ZNF3 95, RNF4 3, SCRN1, STEAP1, 707-AP, TGFBR2, PXDNL, AKAP13, PRTN3, PSCA, RHAMM, ACPP, ACRBP, LCK, RCVRN, RPS2, RPL10A, SLC45A3, BCL2L1, DKK1, ENAH, CSPG4, RGS5, BCR, BCR-ABL, ABL-BCR, DEK, DEK-CAN, ETV6-AML1, LDLR-FUT, NPM1-ALK1, PML-RARA, SYT-SSX1, SYT-SSX2, FLT3, ABL1, AML1, LDLR, FUT1, NPM1, ALK, PML1, RARA, SYT, SSX1, MSLN, UBE2V1, HNRPL, WHSC2, EIF4EBP1, WNK2, OAS3, BCL-2, MCL1, CTSH, ABCC3, BST2, MFGE8, TPBG, FMOD, XAGE1, RPSA, COTL1, CALR3, PA2G4, EZH2, FMNL1, HPSE, APC, UBE2A, BCAP31, TOP2A, TOP2B, ITGB8, RPA1, ABI2, CCNI, CDC2, SEPT2, S TAT1, LRP1, ADAM17, JUP, DDR1, ITPR2, HMOX1, TPM4, BAAT, DNAJC8, TAPBP, LGALS3BP, PAGE 4, РАК2, CDKN1A, PTHLH, SOX2, SOX11, TRPM8, TYMS, ATIC, PGK1, SOX4, TOR3A, TRGC2, BTBD2, SLBP, EGFR, IER3, TTK, LY6K, IGF2BP3, GPC3, SLC35A4, HSMD, H3F3A, ALDH1A1, MFI2, MMP14, SDCBP, PARP12, MET, CCNB1, PAX3-FKHR, PAX3, FOXOl, XBP1, SYND1, ETV5, HSPA1A, HMHA1, TRIM68 и любого их сочетания.
9. Иммунореактивная клетка по п.4, в которой антигенсвязывающий домен является антигенсвязывающим фрагментом антитела.
10. Иммунореактивная клетка по п. 9, в которой
антигенсвязывающим фрагментом является Fab или scFv.
11. Иммунореактивная клетка по п.4, в которой CAR дополнительно содержит костимулирующий домен.
12. Иммунореактивная клетка по п.4, в которой вектор представляет собой плазмиду, ретровирусный вектор или лентивирусный вектор.
13. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая химерный рецептор антигена (CAR) и последовательность, кодирующую мшРНК,
причем мшРНК содержит 15 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 и 653-677, и
причем CAR содержит антигенсвязывающий домен,
трансмембранный домен, стимулирующий домен и костимулирующий домен.
14. Выделенная нуклеиновая кислота по п.13, в которой последовательность мшРНК снижает экспрессию гена, выбранного из группы, состоящей из мшРНК Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс.
15. Выделенная нуклеиновая кислота по п. 4, причем антигенсвязывающий домен представляет собой антигенсвязывающий фрагмент антитела.
16. Выделенная нуклеиновая кислота по п.15, причем антигенсвязывающим фрагментом является Fab или scFv.
17. Выделенная нуклеиновая кислота по п.13, причем антигенсвязывающий домен связывает опухолевый антиген.
18. Выделенная нуклеиновая кислота по п.17, причем опухолевый антиген ассоциирован с меланомой, карциномой, саркомами, аденокарциномой, лимфомой, лейкозом, раком почки, молочной железы, легкого, мочевого пузыря, ободочной кишки, яичника, простаты, поджелудочной железы, желудка, головного
14.
мозга, головы и шеи, кожи, матки, семенников, глиомой, раком пищевода и печени.
19. Выделенная нуклеиновая кислота по п.17, причем
опухолевый антиген ассоциирован с солидной опухолью или
лимфоидной опухолью.
20. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.13.
21. Вектор по п.20, представляющий собой плазмиду, лентивирусный вектор, ретровирусный вектор, аденовирусный вектор, вектор на основе аденоассоциированного вируса.
22. Вектор по п.20, в котором последовательность, кодирующая мшРНК, оперативно связана с промотором РНК-полимеразы II или промотором РНК-полимеразы III.
23. Иммунореактивная клетка, содержащая нуклеиновую кислоту по п.13.
24. Иммунореактивная клетка по п.23, причем иммунореактивная клетка является специфичной для опухоли.
25. Иммунореактивная клетка по п.24, причем иммунореактивная клетка выбрана из группы, состоящей из инфильтрующего опухоль лимфоцита (TIL), Т-клетки природного киллера (NKT), цитотоксического Т-лимфоцита (CTL) и Т-клетки CD4 .
26. Композиция, содержащая иммунореактивную клетку по п.1 или п.23, и фармацевтически приемлемый носитель.
27. Композиция по п.2 6, дополнительно содержащая ингибитор Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6, Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 или РррЗсс.
28. Композиция по п.2 6, в которой иммунореактивная Т-клетка является Т-клеткой CD8+ или CD4+.
29. Композиция по п.2 6, в которой иммунореактивная Т-клетка выбрана из группы, состоящей из инфильтрующего опухоль лимфоцита (TIL), Т-клетки природного киллера (NKT), цитотоксического Т-лимфоцита (CTL) и Т-клетки CD4, и в котором антиген является опухолевым антигеном или патогенным антигеном.
26.
30. Иммунореактивная клетка, трансфицированная первым вектором, кодирующим химерный рецептор антигена (CAR), и вторым вектором, содержащим последовательность, кодирующую мшРНК,
причем мшРНК содержит 15 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 и 653-677; и
причем CAR содержит антигенсвязывающий домен,
трансмембранный домен, стимулирующий домен и костимулирующий домен.
31. Т-клетка человека, несущая молекулу нуклеиновой кислоты по п.13.
32. Способ лечения злокачественной опухоли у пациента,
включающий введение пациенту аутологичной Т-клетки,
модифицированной так, чтобы она экспрессировала специфичный для
опухоли Т-клеточный рецептор или химерный рецептор антигена
(CAR) и мшРНК,
причем мшРНК содержит 15 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 и 653-677; и
причем CAR содержит антигенсвязывающий домен,
трансмембранный домен, стимулирующий домен и костимулирующий домен.
33. Способ лечения злокачественной опухоли у пациента на
основе сайленсинга генов, которые ингибируют Т-клеточную
функцию, включающий
введение пациенту иммунореактивной клетки, содержащей вектор, кодирующий специфичный для опухоли Т-клеточный рецептор или химерный рецептор антигена (CAR) и последовательность мшРНК,
причем последовательность мшРНК содержит
последовательность по меньшей мере из 12/15/20/25 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности мРНК, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из
последовательностей SEQ ID NO: 604-620 и 653-677; и
причем CAR содержит антигенсвязывающий домен,
трансмембранный домен, стимулирующий домен и костимулирующий домен.
34. Способ по п.33, в котором вектор представляет собой
плазмиду, лентивирусный вектор, ретровирусный вектор,
аденовирусный вектор, вектор на основе аденоассоциированного
вируса.
35. Иммунореактивная клетка по п.1, в которой
последовательность мшРНК снижает экспрессию гена, выбранного из
группы, состоящей из Cblb, Dgka, Dgkz, Entpdl, Fyn, Ptpn2,
Smad2, Socsl или Socs3.
36. Способ лечения злокачественной опухоли у пациента на основе сайленсинга генов, которые ингибируют Т-клеточную функцию, включающий
введение пациенту иммунореактивной клетки, содержащей вектор, кодирующий специфичный для опухоли Т-клеточный рецептор или химерный рецептор антигена (CAR) и последовательность мшРНК,
причем последовательность мшРНК содержит
последовательность по меньшей мере из 12/15/20/25 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности мРНК, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 и 653-677.
37. Способ идентификации гена, который ингибирует функцию иммунореактивной Т-клетки, включающий
получение популяции иммунореактивных Т-клеток, несущих векторы, экспрессирующие мшРНК;
осуществление контакта популяции иммунореактивных Т-клеток с иммуносупрессирующей опухолью;
определение того, восстанавливает ли мшРНК функцию Т-клеток в иммуносупрессирующей опухоли; и
идентификацию гена, ассоциированного с мшРНК, которая восстанавливает функцию Т-клеток в опухоли, в качестве гена, который ингибирует функцию инфильтрующих опухоль Т-клеток.
38. Способ повышения иммунного ответа у пациента,
включающий введение терапевтического средства, которое
модулирует активность гена, выбранного из группы, состоящей из
Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka,
Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl,
Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6,
Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met,
Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 и РррЗсс.
39. Способ по п.38, в котором терапевтическое средство выбрано из группы, состоящей из малой молекулы, пептида, антитела, рибозима и антисмыслового олигонуклеотида.
40. Способ получения иммунореактивной клетки, обладающей специфичностью по отношению к опухоли и повышенной резистентностью к иммуносупрессии, включающий:
получение иммунореактивной клетки, обладающей
специфичностью по отношению к опухоли; и введение в клетку вектора, содержащего последовательность, кодирующую мшРНК,
причем мшРНК содержит 15 непрерывно следующим друг за другом нуклеотидов, комплементарных последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 и 653-677.
41. Способ по п.40, в котором иммунореактивная клетка выбрана из группы, состоящей из инфильтрующего опухоль лимфоцита (TIL), Т-клетки природного киллера (NKT), цитотоксического Т-лимфоцита (CTL) и Т-клетки CD4.
42. Способ по п.40, в котором иммунореактивная клетка экспрессирует специфичный для опухоли Т-клеточный рецептор.
43. Способ по п.40, в котором иммунореактивная клетка содержит вектор, кодирующий химерный рецептор антигена (CAR),
причем CAR содержит антигенсвязывающий домен,
трансмембранный домен и стимулирующий домен.
44. Способ по п.40, в котором последовательность мшРНК снижает экспрессию гена, выбранного из группы, состоящей из Ppp2r2d, Eif2ak3, Arhgap5, Smad2, Akap81, Rbks, Egr2, Dgka, Cblb, Mdfic, Entpdl, Dgkz, Vamp7, Hipkl, Nuak2, Alk, Pdzklipl, Inpp5b, Socsl, Jun, Nptxr, Socs3, Fllr, Fyn, Ypel2, Pkdl, Grk6,
44.
Cdkn2a, Sbfl, Ipmk, Rockl, Stkl7b, Mast2, Pdpl, Yesl, Met, Ppmlg, Blvrb, Tnkl, Prkab2, Trpm7 или РррЗсс.
45. Способ по п.39, в котором мшРНК выбрана из зависимой от расщепления мшРНК или не зависимой от расщепления мшРНК.
46. Иммунореактивная клетка по п.1 или п.30, в которой
последовательность, кодирующая мшРНК, содержит первую
последовательность, содержащую 15-25 нуклеотидов,
комплементарных любой из последовательностей SEQ ID NO: 604-620
или SEQ ID NO: 653-677, и вторую последовательность, которая
обратно комплементарна первой последовательности с одним
несовпадением или без несовпадений, и третью последовательность
длиной 5-9 нуклеотидов, расположенную между первой и второй
последовательностями.
47. Иммунореактивная клетка по п.4 6, в которой первая последовательность содержит 19-2 5 нуклеотидов, комплементарных любой из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 или SEQ ID NO: 653-677.
48. Иммунореактивная клетка по п.46, в которой вторая
последовательность полностью комплементарна второй
последовательности.
49. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п.13, в
которой последовательность, кодирующая мшРНК, содержит первую
последовательность, содержащую 15-25 нуклеотидов,
комплементарных любой из последовательностей SEQ ID NO: 604-620
или SEQ ID NO: 653-677, и вторую последовательность, которая
обратно комплементарна первой последовательности с одним
несовпадением или без несовпадений, и третью последовательность
длиной 5-9 нуклеотидов, расположенную между первой и второй
последовательностями.
50. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п.4 9, в которой первая последовательность содержит 19-25 нуклеотидов, комплементарных любой из последовательностей SEQ ID NO: 604-620 или SEQ ID NO: 653-677.
51. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты по п.4 9, в которой вторая последовательность полностью комплементарная второй последовательности.
45.
45.
CM О
со О О
О о
ч5 СО
С"5 СйЗ
о о о о о сз ~
О Ш Ю ** N
о о о о о оч~
~1 * 1 "-о
- со <о см
|/|^Ч1
I-O
СТ*
CD СО
-Г"**
-Т"
о <
О4*
о "О
90Л
1-4*41
(г6о~|) aoheedgo mtfMd
(г6о~|) aoheedgo mtfMd
вмнэеэиэо/чиохХио эинэтоню эон±ес1> |
ddO
о о о о о
ddf ^
со а>
о О
<2
см о.
О. ?_
. о
о о
1" 2
N О (О
I. о
1 V т. i
Л. О
О о
см О
"Т-""
О "Г4'
"Т"" "
О о
CD со CD
ФИГ.9
-С*
M о го
<
IE Q_
CM Q.
"O CNI
CNI CL CL
< CM
IE Q_
TD CM
CM CL
+ 5
-п ГО
CM x CL ГО
Q_ > ^
1=1
1,4 Лщ
X CD oo CD
CD О
О О
I""(tm)"
z о <с
О CI> I-
о о о
о о
о о {-
<с "с о
о <с о
о о о
<с
ее го
1=1
тз csi
см о.
ее го "О
см см
CL CL
0_ 1=1
1=1
го го
Ll_
см см
CL CL
ci s -о -о го см
Ll ГО
1 ?
1=1 ^
TD CM
M см м CM
О CL о CL
CO CL CO CL
_l Q_ _l Q_
1=1
ФИИОс
0,14
3.18
ФИГ.11
0.14
3.18
CD 3"
о ю о
I- о о
Csl Г"-" if> сч N lO СО О
f4.
со о.
ее =г
<
CNI
oo со
Q_ Q_
15 oo со
со 1_ о
Ш. о
x щ do
< s m
<
о о CD Q.
о I- CD
о v
CD _Q
5- CD
о о
m о
о 1- CD
со со
CD Q.
CO IT" Q_ CD
_ m
CO Q. CO 2 CD
? in > >
CD Q_
CD IT
ш о ш т со
о. о
со со
со оо со о. о
со о. 1-
о. о
^ со
о ш
"О LO
СМт-^^СЭО ^,°оСч|сЯСч] ' | ' ¦ | ОО^-т-
5 |
5....Я
p^J^dd 8U89jaDJBi тдщ pis ZOB"I 8ua9 p6jei ивэу\| pis gudy 8U89ja8jBi ивэ^ pis 91199 196JBI ивэ^ pis gde6qjv euaola6jei ивэ^ pis > IIV eua9"j96jBi иввщ pis
CB^"^f сосооо-> оог-~.сою
COCOCN^-O КЮООт-О) 0 <ОС\100",Ф От~СМСОСО
OOT- T-CM
5- 3
zoei эиээ I86JBI тэт pis PZ^dd 9U99J86JBI UB9i pis 3udid 91199 ia6jBi ивэ|Д| pis 9U99J96JBI UB91A! pis gdB6i|JV эиээ p6jei ивэ^ pis > IIV 9U99~I96JBI твщ pis
см с о.
СО CO "4f h~
CSi х- СМ о
ш ш ш ш
0i 10 СО
л-" СО СО х--'
4J- СО
ш ш
Ю СЧ!
сл со
т~ о
1 I LLi Ш
со со
CL ТО см см о
см ою <
N О СО
Ш см
со :::
W ::::::;:: :::i
СО СО :
!?М
CO fO
О 03
см о"
о со
ФИМЗа
Опухоль Селезенка
LacZ
Ppp2r2d
со u_
CD8
CFSE
ФИИЗа
Живые клетки
65.7%
LacZ
Ppp2r2d
CFSE
x, 7
6 5
О CD I- О CD T
c; о ъ*1
LacZ Ppp2r2d
ФИИЗс)
Bcl2
(DMM3f
Ь2т-1-
LacZ
5.3%
та*
Ppp2r2d
26.5% #
3.4%
LacZ
4.8%
Ppp2r2d
CD8
CD8
0> CD
X X
CD CD
3 со
о g
CD О
-I- I CD
_o о
CO Q.
14 12
10 8 8 4 2 0
LacZ Ppp2r2d
X X CD CD 3 со
CD О
о со > >
CL 5
^ о 20
18 16 h 14 12 10 h
LacZ Ppp2r2d
ФИГ.13д
Селезенка Дренирующий Опухоль лимфатический узел
ФИГ.14
LacZ
Ppp2r2d
10° 101 102 103 1Q4
10° 101 10' 10:> 104
CFSE
I- CD
о m i- о
CD T
5 4 3
Живые клетки
J=ZL
LacZ Ppp2r2d
Т-клетки, стимулированные анти-СОЗ
(31Л11Л|) ииохАио daiAieed
о о
-4 см ¦
о Im n
'см
о ю о ю о
О N- CM
I" i I
.-Ф
¦ 4 rff '
CM 00
О |.Ю
' CM
о to о ю о
О h~ Ю CM
и1001Л19ваижпа %
июо1Л1эеаижпа %
goooooQ°
Ю О Ю О Ю О "Л
со го см см т- т~
(,ии) ииохАио daiAieed
{ ?
С "
с °°
с <°
С ю
а> оо
со ю -^г со см
о о о о о о
iO СО CM -т-
вянэеэиээ/чиохАио эинэтоню 90HiBd> |
ООО
оз о со
ьиэээсЮэме ьвнчиэхиоонхо
см см
CL CL
| о
С а>
t[ со
с ^
с "
И со
ст>
о to о
о со
о о
см "=~
о о
xf см
о о о о о со ш ^ см
B> IH9e9Lf90/qLf0XAU0
эинэтоню 90HiBd> | ьиооэс1ио> 1е ьвнчиэхиоонхо
VnOV/1Blc1LJAe9cl шчньэноя)
ЭИНЭПЛОН10
ФИГ.19
"О CNI
о g-
ro P-_|Q_
? ?
"О CNI
M CN
о g-
CO P-
_l Q_
0 ?
СШ*^ C*I-^ ^WM^ ^-iuiit"^
N О CO CD СЧ
(%) и"±эи> 1 ь'ээитьггэУэн ^CZ*5 Сн^[!г^ Сл"^
CM О OO CO xj- CM
(%) и> иэи> 1 вээитьггэЬ'эн
if5
' О
X 5"
М О СО о
• о
TD CM
CM Q. Q.
E о
: о
1см О
O О
to см
о о
: о
: о
; о
| О
f о
|_|_
см о. о. ?_
¦о см
см о. о. ?_
о о о о
edsvo
X CD oo CD
3"°
> > S CD О. i- 00 S CO > >
со о
о о со О см О
о О"
Е о iф .wig
CQ ¦_ со
Я)"СЗ" Q.2 Ш S
88.5
•Ж1И:-
"Т-
ОТ : Si
СО 1
СО S
со "О
... i
о см
iqiHehodu
oo Q О
•Ш1
о аз
? о S го >
CL Щ ^1
см о. о. ?_
"О CNJ
о о.
CD CL
__l D_
0 ?
iqiH9hod|j
с; о
см см
e-ovi
оо Q О
e-i/\ii_L
о оз
"О CNJ
CNJ О. О.
(%) a l/\ll/lЈHBdj
azo
3"°
> > S CD Q. i- CO
s го >
эУ01/\1 я Э1яннеаоеии"В1Л1с1он
101
101
103
103
104
104
108
108
109
109
Ill
Ill
112
115
115
116
116
118
118
119
119
122
122
123
123
125
125
126
126
128
128
129
129
131
131
133
133
139
139
140
140
144
144
145
145
150
150
151
151
154
154
155
155
159
159
160
160
163
163
164
164
167
167
168
168
173
173
174
174
175
175
177
177
178
178
179
179
183
183
184
184
192
192
193
193
194
194
212
213
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
215
215
216
216
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
217
217
последовательность, комплементарную Jun человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ
последовательность, комплементарную Jun человека, которая соответствует последовательности-мишени мыши, указанной в SEQ
218
218
В других вариантах изобретение относится к выделенным
В других вариантах изобретение относится к выделенным
219
219
220
221
В других вариантах изобретение относится к выделенным
нуклеиновым кислотам, кодирующим мшРНК, содержащую
223
223
230
229
В некоторых аспектах CAR содержат антигенсвязывающий
232
232
234
233
В другом аспекте изобретение относится к одному или нескольким ингибиторам Smad2.
236
236
В некоторых случаях способы могут включать в себя отбор пациента - человека, который имеет или имел состояние или
В некоторых случаях способы могут включать в себя отбор пациента - человека, который имеет или имел состояние или
237
237
238
239
В общем, способы включают в себя отбор пациента, подвергаемого риску развития или имеющего состояние или
241
241
265
265
Т-клетки ОТ-1 трансдуцировали лентивирусными векторами, осуществляющими экспрессию мшРНК LacZ, мшРНК Ppp2r2d, мшРНК
Т-клетки ОТ-1 трансдуцировали лентивирусными векторами, осуществляющими экспрессию мшРНК LacZ, мшРНК Ppp2r2d, мшРНК
266
266
(Thyl.l), мшРНК Ppp2r2d (аметрин) или мшРНК Ppp2r2d плюс мутантную кДНК Ppp2r2d (GFP) (фиг. 10b) . Затем три указанных
(Thyl.l), мшРНК Ppp2r2d (аметрин) или мшРНК Ppp2r2d плюс мутантную кДНК Ppp2r2d (GFP) (фиг. 10b) . Затем три указанных
267
267
274
273
9. Shiao, S.L., Ganesan, A.P., Rugo, H.S. and Coussens,
276
276
278
277
8. Иммунореактивная клетка по п.7, в которой опухолевый
антиген выбран из группы, состоящей из специфичного для
280
280
285
285
По доверенности
По доверенности
2/38
2/38
2/38
2/38
2/38
2/38
2/38
2/38
3/38
3/38
3/38
3/38
3/38
3/38
4/38
4/38
5/38
5/38
6/38
6/38
7/38
7/38
7/38
7/38
7/38
7/38
8/38
8/38
9/38
9/38
9/38
9/38
9/38
9/38
10/38
10/38
11/38
11/38
11/38
11/38
11/38
11/38
11/38
11/38
11/38
11/38
12/38
12/38
13/38
14/38
0_ <
13/38
14/38
0_ <
13/38
14/38
0_ <
13/38
14/38
0_ <
15/38
14/38
0_ <
15/38
14/38
0_ <
15/38
14/38
0_ <
16/38
16/38
16/38
16/38
16/38
16/38
16/38
16/38
16/38
16/38
16/38
16/38
17/38
17/38
17/38
17/38
17/38
17/38
18/38
18/38
18/38
18/38
18/38
18/38
19/38
19/38
20/38
20/38
20/38
20/38
20/38
20/38
20/38
20/38
20/38
20/38
21/38
21/38
22/38
22/38
23/38
23/38
25/38
24/38
25/38
24/38
25/38
24/38
25/38
24/38
25/38
26/38
27/38
27/38
27/38
27/38
27/38
27/38
27/38
27/38
27/38
27/38
27/38
27/38
28/38
28/38
29/38
29/38
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
30/38
CL ^
31/38
32/38
CL ^
33/38
33/38
33/38
33/38
34/38
34/38
34/38
34/38
34/38
34/38
34/38
34/38
34/38
34/38
34/38
34/38
35/38
35/38
35/38
35/38
35/38
35/38
35/38
35/38
35/38
35/38
35/38
35/38
36/38
36/38
36/38
36/38
36/38
36/38
37/38
37/38
38/38
38/38
