[RU]

Настоящее изобретение относится к производным макроциклических пуринов, способам их получения, фармацевтическим композициям и их применению при лечении вирусных инфекций.

(57) Реферат / Формула:

Настоящее изобретение относится к производным макроциклических пуринов, способам их получения, фармацевтическим композициям и их применению при лечении вирусных инфекций.

---

2420-521002ЕА/072 МАКРОЦИКЛИЧЕСКИЕ ПУРИНЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Описание
Настоящее изобретение относится к производным
макроциклических пуринов, способам их получения,
фармацевтическим композициям и их применению при лечении вирусных инфекций.
Настоящее изобретение относится к применению производных макроциклических пуринов в лечении вирусных инфекций, иммунных или воспалительных нарушений, в которое вовлечены модуляция или агонизм толл-подобных рецепторов (TLR). Толл-подобные рецепторы представляют собой первичные трансмембранные белки, характеризующиеся внеклеточным лейцин-богатым доменом и цитоплазматическим расширением, которое содержит консервативную область. Врожденная иммунная система может распознавать патоген-ассоциированные молекулярные паттерны посредством данных TLR, экспрессируемых на клеточной поверхности определенных типов иммунных клеток. При распознавании чужеродных патогенов активируется образование цитокинов и повышение уровня регуляции ко-стимулирующих молекул на фагоцитах. Это приводит к модуляции поведения Т-клеток.
Установлено, что большинство видов млекопитающих имеют от десяти до пятнадцати типов толл-подобных рецепторов. В общей сложности у человека и мышей выявили тринадцать TLR (под названием TLR1-TLR13), а у других видов млекопитающих обнаружили эквивалентные формы многих из них. Однако эквиваленты определенных TLR, обнаруженных у человека, присутствуют не у всех млекопитающих. Например, ген, кодирующий белок, аналогичный TLR10 у людей, присутствует у мышей, но, оказывается, в определенный момент в прошлом был поврежден ретровирусом. С другой стороны, у мышей экспрессируются TLR 11, 12 и 13, ни один из которых не представлен у человека. У других млекопитающих могут экспрессироваться TLR, которые не обнаружены у человека. Другие виды, не являющиеся млекопитающими, могут иметь TLR, отличные от таковых у млекопитающих, доказательством этому служит TLR14, который
обнаружен у рыбы фугу. Это может осложнить способ применения экспериментальных животных в качестве моделей врожденного иммунитета человека.
Для детального обзора толл-подобных рецепторов см. следующие журнальные статьи. Hoffmann, J.A., Nature, 426, рЗЗ-38, 2003; Akira, S., Takeda, К., and Kaisho, Т., Annual Rev. Immunology, 21, p335-376, 2003; Ulevitch, R. J., Nature Reviews: Immunology, 4, p512-520, 2004.
Ранее были описаны соединения, проявляющие активность в отношении толл-подобных рецепторов, такие как производные пурина в WO 2006/117670, производные аденина в WO 98/01448 и WO 99/28321 и пиримидины в WO 2009/067081.
Тем не менее, существует острая потребность в новых
модуляторах толл-подобных рецепторов, обладающих
предпочтительной селективностью, более высокой эффективностью, более высокой метаболической стабильностью, а также улучшенным профилем безопасности по сравнению с соединениями из известного уровня техники.
При лечении определенных вирусных инфекций могут регулярно вводиться инъекции интерферона (IFN-альфа), как в случае с вирусом гепатита С (HCV). Больше информации в ссылке Fried et. al. Peginterferon-alfa plus ribavirin for chronic hepatitis С virus infection, N Engl J Med 2002; 347: 975-82. Доступные для перорального применения низкомолекулярные индукторы IFN предоставляют потенциальные преимущества в виде пониженной иммуногенности и удобства введения. Таким образом, новые индукторы IFN представляют собой потенциально эффективный новый класс лекарственных средств для лечения вирусных инфекций. В качестве литературного примера низкомолекулярного индуктора IFN, обладающего противовирусным эффектом, см. De Clercq, Е.; Descamps, J.; De Somer, P. Science 1978, 200, 563-565.
IFN-альфа также вводится в комбинации с другими лекарственными средствами при лечении определенных типов рака (ссылаясь на Eur. J. Cancer 46, 2849-57, и Cancer Res. 1992, 52, 1056, в качестве примеров). Агонисты TLR 7/8 также представляют интерес как вакцинные адъюванты благодаря своей
способности индуцировать ярко выраженную ТЫ реакцию (ссылаясь на Vaccines 2010, б, 1-14, и Hum. Vaccines 2009, 5, 381-394, в качестве примеров).
В соответствии с настоящим изобретением представлено соединение формулы (I):
(I)
Y представляет собой ароматическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее по меньшей мере азот, необязательно замещенное одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из Ci-балкила, С^алкокси, трифторметила или галогена,
Z представляет собой насыщенный или ненасыщенный Ci-юалкил, необязательно замещенный алкилом или алкилгидроксилом;
или Z представляет собой Ci-балкил-Ш-С (О) -Ci-балкил- или CV 6алкил-Ш-С (О) -С1-6алкил-0-;
или Z представляет собой Ci-юалкил-О-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом,
или Z представляет собой С1-6алкил-0-С1-6алкил-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом,
или Z представляет собой С1-6алкил-0-С1-6алкил-0-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом,
Часть настоящего изобретения также составляют те соединения формулы (I), где
X представляет собой О, Ы-С^алкил, NH, S или
Y представляет собой ароматическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее по меньшей мере азот, необязательно замещенное одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из Ci-балкила, С^алкокси, трифторметила, галогена, С (О) NH-Ci-балкила, NH (СО) -С^алкила, CN, Ш-С^алкила, N- (Ci-балкила) 2, С (О)-С^алкила или ОН,
Z представляет собой насыщенный или ненасыщенный Ci_ юалкил, необязательно замещенный алкилом, или алкилгидроксилом, или ОН;
или Z представляет собой С1-6алкил-Ш-С (О) -Ci-балкил- или Ci_ 6алкил-Ш-С (О) -С1-6алкил-0-;
или Z представляет собой С1-6алкил-ЫСН3-С (О)-С^алкил- или С1-6алкил-ЫСН3-С (О) -Ci-балкил-О-;
или Z представляет собой Ci-балкил-С (О) -NH-Ci-балкил- или Ci-6алкил-С (О) -NH-Ci-балкил-О-;
или Z представляет собой Ci-балкил-С (О) -ЫСН3-С1-балкил- или Ci-балкил-С (О) -ЫСН3-С1-балкил-0-;
или Z представляет собой Ci-юалкил-О-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом, или алкилгидроксилом, или ОН,
или Z представляет собой С1-юалкил-ЫН-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом, или ОН,
или Z представляет собой С1-балкил-0-С1-балкил-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом, или ОН,
или Z представляет собой С1-6алкил-0-С1-6алкил-0-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом, или ОН,
Предпочтительные соединения, характеризующиеся одной из
следующих формул, в соответствии с настоящим изобретением выбраны из группы
Другими предпочтительными соединениями в соответствии с настоящим изобретением являются соединения, имеющие следующие номера (приведенные в таблицах 1 и 2, соответственно): 32, 45, 60, 64, 65, 68, 75, 87, 90, 91 и 92.
Частью настоящего изобретения также является
фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват или полиморф вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами, разбавителями или носителями.
Кроме того, настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, сольвату или полиморфу или приведенной выше фармацевтической композиции для применения в качестве лекарственного препарата.
Настоящее изобретение также относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, сольвату или полиморфу или вышеуказанной фармацевтической композиции для применения при лечении нарушения, в которое вовлечена модуляция TLR7 .
Термин "алкил" относится к наиболее насыщенному (но в определенных соединениях в соответствии с настоящим изобретением являющемуся ненасыщенным) алифатическому углеводороду с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащему определенное количество атомов углерода.
Термин "галоген" относится к фтору, хлору, брому или йоду.
Термин "алкокси" относится к алкильной группе (цепи углерода и водорода), связанной одинарной связью с кислородом, как например, метоксигруппа или этоксигруппа.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) включают их соли присоединения кислоты и основные соли. Подходящие соли присоединения кислоты образуются из кислот, которые образуют нетоксичные соли. Подходящие основные соли образуются из оснований, которые образуют нетоксичные соли.
Соединения по настоящему изобретению также могут существовать в несольватированной и сольватированной формах. Термин "сольват" применяется в данном описании для описания молекулярного комплекса, включающего соединение по настоящему изобретению и одну или несколько молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например, этанола.
Термин "полиморф" относится к способности соединения по настоящему изобретению существовать в более чем одной форме или
кристаллической структуре.
Соединения по настоящему изобретению могут присутствовать в так называемой форме "таутомера(ов)", которая относится к изомерам органических соединений, которые легко подвергаются взаимопревращению путем химической реакции, называемой таутомеризацией. Результатом данной реакции является симметричная миграция атома водорода или протона, сопровождаемая сдвигом одинарной связи и смежной двойной связи.
Соединения по настоящему изобретению могут вводиться в виде кристаллических или аморфных продуктов. Они могут быть получены, например, в виде твердой прессованной массы, порошков или пленок посредством таких способов, как осаждение, кристаллизация, лиофильная сушка, распылительная сушка или сушка выпариванием. Их можно вводить отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими соединениями по настоящему изобретению или в комбинации с одним или несколькими другими лекарственными средствами. В основном, они будут вводиться в виде состава в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами. Термин "эксципиент" применяется в данном описании для описания любого ингредиента, отличного от соединения(й) по настоящему изобретению. Выбор эксципиента в большей степени зависит от таких факторов, как конкретный способ введения, влияние эксципиента на растворимость и стабильность и природа лекарственной формы.
Соединения по настоящему изобретению или любая их подгруппа могут быть составлены в различные фармацевтические формы для целей введения. В качестве подходящих композиций могут быть приведены все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме соли присоединения, в качестве активного ингредиента объединяется в однородную смесь с фармацевтически приемлемым носителем, при этом носитель может принимать широкое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, требуемого для введения. Данные фармацевтические композиции желательно
находятся в единичной лекарственной форме, подходящей, например, для перорального, ректального или чрескожного введения. Например, при получении композиций в пероральной лекарственной форме может использоваться любая из общепринятых фармацевтических сред, такая как, например, вода, гликоли, масла, спирты и т.п. в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердых носителей, таких как крахмалы, сахара, каолин, разбавители, смазочные средства, связующие, средства для улучшения распадаемости таблеток и т.п. в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Благодаря своей простоте введения таблетки и капсулы представляют собой наиболее предпочтительные пероральные формы единицы дозирования, в случае которых очевидно применяют твердые фармацевтические носители. Также включены препараты в твердой форме, которые незадолго до применения могут быть преобразованы в препараты в жидкой форме. В композициях, подходящих для чрескожного введения, носитель необязательно включает вещество, способствующее проникновению, и/или подходящее смачивающее средство, необязательно в комбинации с подходящими добавками любой природы в минимальных пропорциях, при этом добавки не оказывают значительного вредного воздействия на кожу. Указанные добавки могут облегчать введение в кожу и/или могут быть полезными для получения необходимых композиций. Данные композиции можно вводить различными путями, например, в форме трансдермального пластыря, в форме точечного нанесения, в форме мази. Соединения согласно настоящему изобретения можно также вводить посредством ингаляции или инсуффляции с помощью способов и составов, используемых в данной области для введения таким путем. Таким образом, в основном соединения по настоящему изобретению могут вводиться в легкие в форме раствора, суспензии или сухого порошка.
Особенно предпочтительно составление вышеуказанных фармацевтических композиций в единичной лекарственной форме для простоты введения и равномерности дозирования. Единичная лекарственная форма, применяемая в данном описании, относится к
физически отдельным единицам, подходящим в качестве единичных доз, при этом каждая единица содержит предварительно установленное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных лекарственных форм являются таблетки (включая делимые таблетки или таблетки, покрытые оболочкой), капсулы, пилюли, пакетики с порошком, пластинки, суппозитории, инъецируемые растворы или суспензии и т.п., а также их отдельные множества.
Специалисты в области лечения инфекционных заболеваний смогут определить эффективное количество исходя из результатов тестов, представленных далее в данном описании. В общем, предполагается, что эффективное суточное количество составляет от 0,01 мг/кг до 50 мг/кг массы тела, более предпочтительно от 0,1 мг/кг до 10 мг/кг массы тела. Может быть целесообразным введение необходимой дозы в виде двух, трех, четырех или более частей дозы при подходящих интервалах в течение дня. Указанные части дозы могут быть составлены в виде единичных лекарственных форм, например, содержащих от 1 до 1000 мг и, в частности, от 5 до 2 00 мг активного ингредиента на единичную лекарственную форму.
Точная дозировка и частота введения зависят от конкретного
применяемого соединения формулы (I), конкретного состояния,
которое лечится, тяжести состояния, лечение которого
осуществляют, возраста, веса и общего физического состояния
конкретного пациента, а также другой лекарственной терапии,
которую может получать индивидуум, что хорошо известно
специалистам в данной области техники. Более того, очевидно,
что эффективное количество может быть снижено или увеличено в
зависимости от реакции подвергаемого лечению субъекта и/или в
зависимости от оценки врача, назначающего соединения по
настоящему изобретению. Таким образом, приведенные выше
диапазоны эффективного количества являются только
рекомендациями и не предназначены ограничивать в той или иной мере объем или применение настоящего изобретения.
Синтез промежуточного соединения D1
При 10°С 3-бромбензиламин (11,9 г, 63,96 ммоль) каплями добавляли к смеси А1 (10 г, 60,91 ммоль) и С1 (125 мг, 0,97 ммоль) в EtOH (100 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение ночи. Каплями добавляли 12 0 мл 1н NaOH и смесь перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Осадок отфильтровывали, промывали минимумом холодного EtOH и сушили, с получением 12,74 г (75% выход) промежуточного соединения D1.
Синтез промежуточного соединения Е1
N-Бромсукцинимид (7,56 г, 42,47 ммоль) порциями добавляли в суспензию D1 (10,7 г, 38,61 ммоль) в THF (100 мл), поддерживая температуру 15°С, затем реакционную смесь перемешивали при 15°С в течение 10 минут. Смесь выливали в водный раствор ЫаНСОз и EtOAc. Слои декантировали и разделяли. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенное соединение помещали в CH3CN, осадок
отфильтровывали и сушили, с получением 7,5 г (55% выход) части промежуточного соединения Е1. Фильтрат выпаривали и очищали хроматографией на силикагеле (SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм; подвижная фаза (99% CH2CI2, 1% СН3ОН) . Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 2,8 г (20% выход) второй партии промежуточного соединения Е1.
Синтез промежуточного соединения F1
Смесь Е1 (8,3 г, 23,31 ммоль) в мочевине (14 г, 2 33,1 ммоль) нагревали при 160°С в течение 4 часов. Снова добавляли мочевину (14 г, 233,1 ммоль) и смесь перемешивали при 160°С в течение 2 часов. Смесь охлаждали до к. т. и добавляли воду. Осадок растирали и отфильтровывали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С, с получением 9,25 г (99% выход) промежуточного соединения F1.
Синтез промежуточного соединения G1
Смесь F1 (3 г, 7,52 ммоль), 4-бром-1-бутена (2,29 мл, 22, 55 ммоль), К2СО3 (3,11 г, 22,55 ммоль) в сухом DMF (40 мл) перемешивали при 50°С в течение 12 часов. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в EtOAc. Органический слой промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 50 г, CH2CI2/CH3OH: 98-2). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 1,95 г (57% выход) промежуточного соединения G1.
Синтез промежуточного соединения HI
При к. т. каплями добавляли метоксид натрия (30% масс, раствор в СН3ОН) (8,4 мл, 45,24 ммоль) к смеси G1 (4,1 г, 9,05 ммоль) в СНзОН (100 мл) . Смесь перемешивали при 60°С в течение б часов. Смесь выливали в воду. Водный слой экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 3,8 г (100% выход) промежуточного соединения HI. Неочищенное соединение использовали непосредственно на следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения II Реакцию выполняли в двух повторах.
Смесь HI (2*1,75 г, 8,бб ммоль), аллил-три-Ы-бутилолова (2*1,32 мл, 8,бб ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (2*500 мг, 0,8 7 ммоль) в диоксане (2*17,5 мл) перемешивали при 14 0°С в течение 1 часа. Смесь охлаждали до к. т. и выливали в водный раствор KF (1 г/100 мл) . Смесь перемешивали в течение 10 минут при к. т. Добавляли EtOAc и смесь фильтровали через слой целита(r). Целит(r) промывали EtOAc. Слои декантировали. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 120 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 98,5/1,5/0,1). Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 1,76 г (56% выход) промежуточного соединения II.
Синтез промежуточного соединения Л
II (950 мг, 2,6 ммоль) добавляли к сверхсухому СН2С1г (760 мл) и полученную в результате смесь дегазировали барботированием N2 через раствор в течение 30 минут. Добавляли катализатор Граббса 2ого поколения (222 мг, 0,26 ммоль) одной порцией и смесь перемешивали в токе N2 в течение 2 4 часов. Растворитель выпаривали, и неочищенное соединение немедленно очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 10 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 98,5/1,5/0,1). Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 280 мг промежуточного соединения II и 2 00 мг (2 3% выход) промежуточного соединения Л (в виде смеси двух изомеров Е и Z) .
Синтез конечного соединения 1
Смесь Л (200 мг, 0,59 ммоль) в бн НС1 (2 мл) и диоксана (5 мл) перемешивали при к.т. в течение 16 часов. Смесь промывали EtOAc (15 мл), затем смесь ощелачивали при 0°С с помощью К2СОз (появлялся осадок) и экстрагировали несколько раз EtOAc и СН3ОН. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток повторно кристаллизовали из CH3CN, осадок отфильтровывали и сушили, с получением 108 мг (56% выход) соединения 1 (смесь изомеров E/Z 55/45).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 2
Синтез промежуточного соединения К1
Смесь Л (130 мг, 0,39 ммоль), Pd/C (10%) (20 мг, 0,02 ммоль) в СНзОН (30 мл) гидрогенизировали при атмосферном давлении Н2 в течение 4 часов. Катализатор удаляли фильтрованием через целит(r). Целит(r) промывали СНзОН. Фильтрат выпаривали, с получением 12 6 мг (96% выход) промежуточного соединения К1, используемого как таковое в следующей стадии.
Синтез конечного соединения 2
При к.т. смесь К1 (110 мг, 0,32 ммоль) в бн НС1 (1 мл) и диоксана (2 мл) перемешивали в течение б часов. Смесь выливали на лед и нейтрализовали Зн NaOH. Осадок отфильтровывали, промывали водой, EtOH, затем диэтиловым эфиром и сушили, с получением 79 мг (75% выход) соединения 2.
Общая схема получения конечных продуктов: способ 3
Синтез промежуточного соединения Ml
L1 (3,0 г, 32, 23 ммоль), 5-бром-1-пентен (4,8 г, 32,23 ммоль) и К2СО3 (5,34 г, 38, 67 ммоль) в DMF (75 мл) перемешивали при 60°С в течение 12 часов. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток помещали в EtOAc. Органический слой промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 4,6 г (89% выход) промежуточного соединения Ml, используемого как таковое в следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения N1
В токе N2 натрий (1,42 г, 62,03 ммоль) растворяли в EtOH (80 мл) при к.т. Каплями добавляли Ml (2,0 г, 12,41 ммоль), Е1 (4,42 г, 12,41 ммоль) в EtOH (20 мл) и полученную в результате смесь перемешивали при 90°С в течение 5 часов в токе N2. Растворитель выпаривали. Добавляли EtOAc и воду. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (SiOH с зернами неправильной формы 2 0-4 5 мкм; подвижная фаза (0,5% NH4OH, 94% СН2С12, 6% СН3ОН) . Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 3,15 г (53% выход) промежуточного соединения N1.
Синтез промежуточного соединения 01
Смесь N1 (0,50 г, 1,04 ммоль), аллил-три-Ы-бутилолова (0,32 мл, 1,04 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (120 мг, 0,10 ммоль) в диоксане (4 мл) перемешивали при 140°С в
течение 1 часа. Смесь охлаждали до к.т. и выливали в водный раствор KF (5 г/100 мл) . Смесь перемешивали в течение 10 минут при к. т. EtOAc добавляли и слои декантировали. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (SiOH с зернами неправильной формы 15-45 мкм; подвижная фаза (0,5% NH4OH, 95% CH2CI2, 5% СН3ОН) . Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 300 мг (65% выход) промежуточного соединения 01.
Синтез промежуточного соединения Р1
01 (1,80 г, 4,06 ммоль) добавляли к сверхсухому СН2С1г (1080 мл), и полученную в результате смесь дегазировали барботированием N2 через раствор в течение 30 минут. Добавляли катализатор Граббса 2ого поколения (346 мг, 0,41 ммоль) одной порцией, и смесь перемешивали при к. т. в токе N2 в течение 2 4 часов. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 120 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 96/4/0,5). Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 1,4 7 г неочищенного продукта. Остаток очищали хроматографией с обращенной фазой (X-Bridge-Cl8 5 мкм 30*150 мм), подвижная фаза (градиент от 80% NH4HCO3 0,5% буфера, рН 10, 20% CH3CN до 0% NH4HCO3 0,5% буфера, рН 10, 100% CH3CN) . Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 8 3 мг (5% выход) промежуточного соединения Р1 (в виде смеси двух изомеров Е и Z) и 8 00 мг промежуточного соединения 01.
Синтез конечного соединения 3
PI (40 мг, 0,10 ммоль) в бн НС1 (2 мл) и диоксане (2 мл) перемешивали при к.т. в течение 18 часов. При 0°С смесь ощелачивали с помощью К2СО3 и экстрагировали EtOAc и СНзОН. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 12 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 90/10/0,5). Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 23 мг. Соединение помещали в диэтиловый эфир, осадок отфильтровывали и сушили, с получением 15 мг (40% выход) соединения 3 (в виде смеси двух изомеров E/Z 70/30).
Синтез промежуточного соединения Q1
Смесь Р1 (70 мг, 0,17 ммоль), Pd/C 10% (18 мг, 0,02 ммоль) в СН3ОН (5 мл) гидрогенизировали при атмосферном давлении Н2 в течение 4 часов. Катализатор удаляли фильтрованием через слой целита(r). Целит(r) промывали СНзОН и фильтрат выпаривали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 10 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 96/4/0,5). Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 50 мг (71% выход) промежуточного соединения Q1.
Синтез конечного соединения 4
Q1 (50 мг, 0,12 ммоль) в бн НС1 (1 мл) и диоксане (1 мл) перемешивали при к.т. в течение 18 часов. Осадок отфильтровывали, промывали диоксаном и сушили, с получением 38 мг (71% выход) соединения 4 (1НС1, 1Н20).
Синтез промежуточного соединения S1
При 10°С R1 (7,70 г, 34, 79 ммоль) в EtOH (30 мл) каплями добавляли к смеси А1 (5,44 г, 33,14 ммоль), С1 (68 мг, 0,53 ммоль) в EtOH (25 мл) . Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Каплями добавляли 60 мл 1н NaOH и смесь перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Смесь экстрагировали СН2С1г (3 раза). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм; подвижная фаза (0,1% NH4OH, 98% СН2С12, 2% СНзОН) . Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 5,1 г (49% выход) промежуточного соединения S1.
Синтез промежуточного соединения Tl
При 10°С в токе N2 N-бромсукцинимид (2,90 г, 16,33 ммоль) порциями добавляли к смеси S1 (5,1 г, 16,33 ммоль) в THF (100 мл) . Смесь перемешивали в течение 10 минут при 10°С. Смесь выливали в раствор ЫаНСОз 10% в воде и EtOAc. Слои декантировали. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, CH2CI2/CH3OH 991) . Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 3,75 г (59% выход) промежуточного соединения Т1.
Синтез промежуточного соединения U1
Бензоилизоцианат (7,05 г, 47,92 ммоль) добавляли к смеси Т1 (3,75 г, 9,58 ммоль) в CH3CN (80 мл) при перемешивании при к. т. Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Растворитель выпаривали, остаток растворяли в смеси 2-пропанол/25% водный NH3 1:1 (200 мл), и полученный в результате раствор перемешивали при к. т. в течение 72 часов. Растворитель выпаривали, и полученную в результате смесь выливали в воду, нейтрализовали разбавленной НС1 и экстрагировали EtOAc. Слои фильтровали через слой целита(r), целит(r) промывали EtOAc. Фильтрат декантировали. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенное соединение очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 98/2/0,1). Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 1,7 0 г (33% выход) промежуточного соединения U1.
Синтез промежуточного соединения VI
Смесь U1 (1,6 г, 2,97 ммоль) в NH4OH 25% (160 мл) и iPrOH (160 мл) перемешивали при к.т. в течение 72 часов. iPrOH выпаривали и добавляли воду. Смесь экстрагировали EtOAc. Осадок появлялся между 2 фазами. Осадок отфильтровывали и сушили, с получением 880 мг (68% выход) промежуточного соединения VI. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 680 мг промежуточного соединения U1.
Синтез промежуточного соединения W1
Синтез промежуточного соединения XI
Смесь W1 (0,60 г, 1,01 ммоль), бензилтриэтиламмония
Смесь VI (520 мг, 1,20 ммоль), трет-бутил-N-(3-бромпропил)карбамата (570 мг, 2,40 ммоль) и К2СО3 (496 мг, 3,59 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при 8 0°С в течение 5 часов. После охлаждения до к.т. смесь выливали в воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали водой, насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 800 мг (> 100% выход) промежуточного соединения W1. Неочищенное соединение использовали непосредственно на следующей стадии.
хлорида (11,5 мг, 0,05 ммоль) в NaOH 30% (15 мл) и EtOH (15 мл) перемешивали при 60°С в течение 4 часов. Смесь концентрировали наполовину. Доводили рН до 5 с помощью Зн НС1. Смесь экстрагировали EtOAc (дважды). Объединенные органические слои сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 500 мг (98% выход) промежуточного соединения XI.
Синтез промежуточного соединения Y1
При 0°С 4н НС1 в диоксане (1,25 мл, 4,99 ммоль) каплями добавляли к смеси XI (0,50 г, 1 ммоль) в диоксане (2,5 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 12 часов. Смесь выпаривали досуха, с получением 4 50 мг (> 10 0% выход) промежуточного соединения Y1. Неочищенное соединение использовали без какой-либо дополнительной очистки на следующей стадии.
Синтез конечного соединения 5
Гидрохлорид 1-(З-Диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида
(520 мг, 2,72 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (367 мг, 2,72 ммоль) медленно добавляли к смеси Y1 (370 мг, 0,91 ммоль), диизопропилэтиламина (0,78 мл, 4,53 ммоль) в DMF (270 мл) . Смесь перемешивали при к.т. в течение 24 часов. Растворитель выпаривали досуха. Остаток помещали в CH2CI2-CH3OH (90-10) и промывали водой. Осадок появлялся в воронке для декантации. Осадок отфильтровывали, с получением 103 мг. Этот осадок помещали в горячий EtOH, перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 часа, охлаждали до к.т. и
отфильтровывали. Неочищенный продукт очищали обращенной фазой (X-Bridge-C18 5 мкм 30*150 мм), подвижная фаза (градиент от 75% NH4HCO3 0,5% буфера, рН 10, 25% СН3ОН до 0% NH4HCO3 0,5% буфера, рН 10, 10 0% СН3ОН). Очищенные фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 8 мг (чистого продукта) и 50 мг (неочищенного продукта). Неочищенный продукт очищали обращенной фазой (X-Bridge-Cl8 5 мкм 30*150 мм) , подвижная фаза (градиент от 90% трифторуксусной кислоты 0,05%, 10% СНзОН до 0% трифторуксусной кислоты 0,05%, 100% СН3ОН). Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 2 0 мг. 2 фракции (8 мг и 2 0 мг) объединяли, помещали в диоксан и CH3CN и добавляли 0,50 мл 4н НС1 в диоксане. Смесь перемешивали при к. т. в течение 2 часов. Осадок отфильтровывали и сушили, с получением 28 мг (7% выход) соединения 5 (соль НС1).
он i
+ "\ *¦ "Of"*
о о
Z1 А2 В2
Синтез промежуточного соединения В2
Раствор этилгликолята (10,0 г, 96,06 ммоль) в диметиламине (40% раствор в воде) (100 мл) перемешивали при к.т. в течение 16 часов и концентрировали в вакууме. Остаток помещали в EtOH и снова концентрировали. Цикл выполняли 3 раза, с получением 9,7 5 г (98% выход) промежуточного соединения В2.
NaH
DMF /=\ \
+ N 'Г ". N= (ч /)-О N-
-от- * V -- ^-гц
о Т х-
В2 С2 D2
Синтез промежуточного соединения D2
При 0°С в токе N2 добавляли NaH (2,16 г, 54,13 ммоль) к раствору В2 (4,09 г, 39,69 ммоль) в DMF (36 мл) при к.т. Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 0 минут и добавляли 6-хлорниконитрил С2 (5,0 г, 36,09 ммоль) (с выделением тепла) и смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Добавляли 10% водный раствор NaHC03 (150 мл), затем добавляли насыщенный раствор соли. Водный слой экстрагировали EtOAc (дважды). Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 7,0 г (95% выход) промежуточного соединения D2.
Pd/C 10%
МеОН Mt\ /^^\ \
N -
Синтез промежуточного соединения Е2
Добавляли Pd/C 10% (2,0 г) к раствору D2 (7,0 г, 34,11 ммоль) в МеОН (14 0 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при к. т. в атмосфере Нг (1 атм. ) . Добавляли Pd/C 10% (1,5 г, 0,04 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при тех же условиях в течение 4 часов. Катализатор фильтровали через слой целита(r). Целит(r) промывали СН3ОН и фильтрат
концентрировали в вакууме. Перед очисткой эту фракцию объединяли с другой партией.
Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 120 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 92/8/0,5). Чистые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении, с получением 2,2 г (27% выход) промежуточного соединения Е2.
NH2.HCI
Е2 F2 G2 О
Синтез промежуточного соединения G2
Е2 (2,2 г, 10,51 ммоль) в EtOH (10 мл) каплями добавляли к раствору F2 (1,64 г, 10,01 ммоль) и гидрохлорида анилина (20 мг, 0,16 ммоль) в EtOH (10 мл) при 10°С. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 0 часов. Водный 1М раствор NaOH (25 мл) каплями добавляли к раствору при 10°С и полученную в результате смесь перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Осадок отфильтровывали, промывали минимумом холодного EtOH и сушили в вакууме, с получением 2,25 г (75% выход) промежуточного соединения G2. G2 использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
' ^ * \ \_ THF U M \ / \ ^ \
о о
G2 H2
Синтез промежуточного соединения Н2
Раствор N-бромсукцинимида (1,47 г, 8,24 ммоль) в THF (50 мл) каплями добавляли за 25 минут к раствору G2 (2,25 г, 7,49 ммоль) в THF (80 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 3 0 минут, и затем при к. т. в течение 4 5 минут. Смесь помещали в СН2С1г, промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз, затем насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Неочищенное соединение кристаллизовали из CH3CN, осадок отфильтровывали и сушили, с получением 0,79 г (27% выход) промежуточного соединения Н2. Фильтрат выпаривали и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм,
50 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 97/3/0,1). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 0,71 г (выход 25%) промежуточного соединения Н2.
О H2N
N^ ^N Л L J"
H2N \ / \-о \|-
HO N v-(\ /> -°, ,N~
Синтез промежуточного соединения 12
Смесь Н2 (1,4 г, 3,69 ммоль) в мочевине (13,3 г, 221,51 ммоль) нагревали при 160°С в течение б часов. Смесь охлаждали до к. т. и добавляли воду. Осадок растирали и отфильтровывали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С, с получением 1,05 г (67% выход) промежуточного соединения 12.
Синтез промежуточного соединения К2
Смесь 12 (1,23 г, 2,91 ммоль), трет-бутил-N-(3-бромпропил) карбамата J2 (1,04 г, 4,37 ммоль), К2СОз (604 мг, 4,37 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при 50°С в течение 12 часов. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в EtOAc. Органический слой промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 95/5/0,5). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 0,97 г (выход 57%) промежуточного соединения К2.
НгЫ H2N
V J Na \ N /
N ^ V" И.ОН " BocHN ^ - ^ ' " ^ "
-N ^ ^ BocHN ^ \-N ^-^
К2 ° L2 °
Синтез промежуточного соединения L2
При к.т. натрий (44 6 мг, 19,42 ммоль) добавляли к МеОН (30 мл) . Смесь перемешивали до растворения натрия (с выделением тепла). Добавляли К2 (7 50 мг, 1,2 9 ммоль) и смесь перемешивали
при 50°С в течение 16 часов в токе N2. Добавляли воду и рН регулировали до 5-6. Водный слой экстрагировали EtOAc. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 0,54 г (83% выход) промежуточного соединения L2.
Синтез промежуточного соединения М2
При 0°С 4М НС1 в диоксане (2,68 мл, 10,73 ммоль) каплями добавляли к смеси L2 (0,54 г, 1,07 ммоль) в диоксане (20 мл). Смесь перемешивали при к. т. в течение 12 часов. Смесь выпаривали досуха, с получением 0,74 г (> 100% выход). Неочищенное соединение использовали без какой-либо дополнительной очистки на следующей стадии.
Синтез конечного соединения б
1-(З-Диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (675 мг, 3,52 ммоль) и гидроксибензотриазол (476 мг, 3,52 ммоль) медленно добавляли к смеси М2 (500 мг, 1,17 ммоль), диизопропилэтиламина (1,01 мл, 5,87 ммоль) в DMF (360 мл) . Смесь перемешивали при к.т. в течение 24 часов. Растворитель выпаривали досуха. Остаток помещали в воду. Осадок отфильтровывали, промывали водой и сушили. Остаток очищали хроматографией с обращенной фазой (X-Bridge-Cl8 5 мкм 30*150 мм) , подвижная фаза (градиент от 90% трифторуксусной кислоты 0,05%, 10% МеОН до 0% трифторуксусной кислоты 0,05%, 100% МеОН). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 75 мг соединения б и 100 мг (неочищенного осадка) . Чистую
фракцию (75 мг) помещали в диоксан и CH3CN и добавляли 1 мл 4н НС1 в диоксане. Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Осадок отфильтровывали и сушили, с получением 57 мг (12% выход) соединения б (соль НС1).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 7
Синтез промежуточного соединения 02
Добавляли 4-бром-1-бутен (8,6 мл, 84,17 ммоль) к смеси N2 (15 г, 5 6,11 ммоль), К2СО3 (23,3 г, 168,33 ммоль), тетрабутиламмонийбромида (1,81 г, 5,61 ммоль) в CH3CN (75 мл) . Полученную в результате смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 18 часов. Смесь охлаждали до к. т. Растворитель выпаривали. Добавляли воду и EtOAc. Слои
декантировали. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 120 г, гептан/EtOAc: 93-7). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 14,8 г (82% выход) промежуточного соединения 02.
Синтез промежуточного соединения Р2
При 0°С каплями добавляли 1н НС1 (120 мл, 119,47 ммоль) к смеси 02 (19,2 г, 59, 74 ммоль) в Et20 (250 мл) . Смесь перемешивали при 0°С в течение 3 0 минут, затем энергично перемешивали при к. т. в течение 12 часов. Полученные в результате слои декантировали. Водный слой ощелачивали до рН 8 с помощью К2СО3 (порошок), затем экстрагировали Et20 (3 раза). Водный слой насыщали К2СО3, затем снова экстрагировали CH2CI2 (2 раза) . Органические слои объединяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 7,9 г (84% выход) промежуточного соединения Р2.
Синтез промежуточного соединения Q2
В токе N2 LiAlH4 (4,4 г, 114,50 ммоль) суспендировали в THF (150 мл) при 10°С. Каплями добавляли Р2 (9 г, 57,25 ммоль) в THF (150 мл). Обеспечивали нагревание реакционной смеси до к.т. и перемешивали при к. т. в течение 3 0 минут. Реакционную смесь охлаждали до -10°С и гасили добавлением воды (5 мл), Зн NaOH (5 мл) и снова воды (14 мл) . Суспензию фильтровали через слой целита(r). Целит(r) промывали THF и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток помещали в EtOAc, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 5,3 г (80% выход) промежуточного соединения Q2.
Синтез промежуточного соединения R2
При 0°С трет-бутилдиметилсилилхлорид (1,31 г, 8,68 ммоль) добавляли к смеси Q2 (1,0 г, 8,68 ммоль), EtsN (1,33 мл, 9,55 ммоль), 4-диметиламинопиридина (106 мг, 0,87 ммоль) в CH2CI2 (30 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 24 часов. Добавляли воду и слои декантировали. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 1,70 г (85% выход) промежуточного соединения R2.
Синтез промежуточного соединения S2
Раствор 4,б-дигидрокси-2-метилтиопиримидина (50 г, 316,09 ммоль) в трифторуксусной кислоте (210 мл) перемешивали при к.т. в течение 30 минут. Смесь охлаждали до 5°С, затем каплями добавляли дымящуюся HNO3 (19,5 мл, 426, 73 ммоль) при 5°С. При добавлении температуру поддерживали на уровне 10-15°С. Удаляли ледяную баню, и после чего при достижении температуры 2 0°С проходило бурное выделение тепла (от 2 0°С до 4 5°С за 5 секунд). Смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Смесь выливали в смесь воды и льда. Осадок отфильтровывали и промывали водой. Осадок сушили в вакууме при 50°С, с получением 42 г (выход 65%) промежуточного соединения S2. Данное промежуточное соединение использовали непосредственно на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.
Синтез промежуточного соединения Т2
N,N-диметиланилин (76,7 мл, 0,61 моля) каплями добавляли к РОС13 (93,7 мл, 1,01 моля) при 0°С. S2 (41 г, 201, 79 ммоль) добавляли порциями при 0°С, и затем смесь нагревали до 100°С в течение 2 часов. Раствор концентрировали в вакууме и удаляли остаточный РОС1з азеотропным выпариванием с толуолом (3 раза). Полученное в результате масло помещали в раствор СЩС^-гептана
(70-30) и фильтровали через стеклянный фильтр, содержащий Si02-Фильтрат концентрировали, и остаток очищали препаративной ЖХ
(SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм, 1000 г DAVISIL), подвижная фаза (8 0% гептан, 2 0% CH2CI2) . Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 37,8 г (78% выход) промежуточного соединения Т2.
Синтез промежуточного соединения U2
Синтез промежуточного соединения V2
Этилхлорформиат (13,5 мл, 138,90 ммоль) добавляли к раствору U2 (39,8 г, 126,27 ммоль) и Et3N (26,5 мл, 189,40
2М Раствор NH3 в iPrOH (115 мл, 229,31 ммоль) каплями добавляли к раствору Т2 (36,7 г, 152,87 ммоль) и Et3N (23,4 мл, 168,16 ммоль) в THF (360 мл) (при добавлении температуру поддерживали на уровне к. т. с помощью бани с ледяной водой) . Реакционную смесь перемешивали при к. т. в течение 5 часов. Смесь выпаривали досуха. Воду и EtOAc добавляли к остатку. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали EtOAc (дважды). Объединенные органические слои сушили над MgS04, фильтровали и удаляли растворитель при пониженном давлении, с получением 34,5 г (выход 100%) промежуточного соединения U2.
ммоль) в THF (1300 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение б часов и растворитель частично выпаривали при пониженном давлении. Остаток поглощали СН2С1г и водой. Слои разделяли, водный слой экстрагировали CH2CI2 (дважды). Объединенные органические слои сушили над MgS04, фильтровали и удаляли растворитель при пониженном давлении. Остаток очищали ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм, 1000 г DAVISIL), подвижная фаза (градиент от 85% гептана, 15% AcOEt до 80% гептана, 2 0% AcOEt). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 35 г (95% выход) промежуточного соединения V2.
Синтез промежуточного соединения Х2
Смесь V2 (5,0 г, 17,08 ммоль), W2 (2,85 г, 17,08 ммоль), К2СОз (3,54 г, 25,6 ммоль) и Nal (2,56 г, 17,08 ммоль) в ацетоне (200 мл) перемешивали при к.т. в течение 48 часов. Смесь отфильтровывали, и фильтрат выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 220 г, СН2С1г/гептан 50-50). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 7,4 г (100% выход) промежуточного соединения Х2.
Синтез промежуточного соединения Y2
Раствор Х2 (7,20 г, 17,03 ммоль) и NH3 30% в воде (100 мл) в THF (100 мл) перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток суспендировали в воде и экстрагировали CH2CI2. Органический слой промывали водой и сушили над MgS04, фильтровали и растворитель
выпаривали в вакууме, с получением 7,1 г (100% выход) промежуточного соединения Y2 (желтого масла). Данное промежуточное соединение использовали непосредственно на следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения Z2
З-Хлорпероксибензойную кислоту (2,44 г, 9,91 ммоль) в CH2CI2 (20 мл) каплями добавляли к раствору Y2 (2,0 г, 4,96 ммоль) в CH2CI2 (100 мл) при к. т. Смесь перемешивали при к. т. в течение 2 0 часов. К смеси добавляли водный раствор ЫагЭгОз (5 экв.). Слои разделяли, и водный слой экстрагировали CH2CI2 (дважды). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, с получением 2,70 г (> 100% выход) промежуточного соединения Z2. Промежуточное соединение использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
Синтез промежуточного соединения A3
Смесь Z2 (2,16 г, 4,96 ммоль), R2 (1,70 г, 7,44 ммоль) и EtsN (1,04 мл, 7,44 ммоль) в CH3CN (70 мл) перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Добавляли воду и смесь экстрагировали EtOAc (дважды). Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, CH2CI2/CH3OH 99,5-0,5) . Чистые фракции собирали и
Синтез промежуточного соединения ВЗ
A3 (1,05 г, 1,80 ммоль) добавляли к сверхсухому СН2С12 (230 мл) и полученную в результате смесь дегазировали барботированием N2 через раствор в течение 30 минут. Катализатор Граббса 2ого поколения (153 мг, 0,18 ммоль) добавляли одной порцией, и смесь перемешивали при к. т. в токе N2 в течение 2 4 часов. Смесь концентрировали. Остаток очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм 300 г, MERCK), подвижная фаза (80% гептан, 20% AcOEt). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 0,70 г (70% выход) промежуточного соединения ВЗ.
Синтез конечного соединения 7
Fe (385 мг, 6,90 ммоль) добавляли к смеси ВЗ (640 мг, 1,15 ммоль) в АсОН (6,8 мл) и воде (1,36 мл) . Смесь нагревали при 100°С с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator) с выходом мощности, варьирующим от 0 до 400 Вт, в течение 40 минут. Смесь фильтровали через слой целита(r) и промывали АсОН. Фильтрат концентрировали в вакууме и досуха выпаривали совместно с толуолом (дважды). Остаток помещали в CH2Cl2/MeOH/NH4OH 90-10-0,5. Осадок отфильтровывали (осадок (1,0 г) содержал ожидаемое соединение) и фильтрат выпаривали для очистки хроматографией.
Остаток (фильтрата) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, CH2Cl2/CH3OH/NH4OH: 90-10-0,5).
Чистые фракции собирали и выпаривали, с получением 52 мг фракции 1.
Предварительно полученный осадок очищали хроматографией (соединение и S1O2 смешивали перед элюированием). Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 25 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 90-10-0,5). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 8 0 мг фракции 2.
Фракцию 1 и фракцию 2 объединяли, и затем отверждали из CH3CN, с получением 95 мг (23% выход) соединения 7 (Е-изомер с 3,5% Z-изомера).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 8
цЛ^"02 ^ n-'V'"02 | Nrfe30% вводе H-"^NOz !
S N N Н
i-^. ^ " I П1~ \ ,
N N > f S N N ТГ
V2 CK О ^ C3j> О
Синтез промежуточного соединения СЗ
V2 (1,7 г, 5,8 ммоль), 3-метоксибензилхлорид (0,93 мл, 6,4
ммоль), К2СОз (2 г, 14,5 ммоль) и йодид натрия (0,87 г, 5,8
ммоль) в ацетоне (60 мл) перемешивали при к. т. в течение 16
часов. Раствор фильтровали, и фильтрат выпаривали при
пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали препаративной
ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 80 г, Merck,
подвижная фаза гептан/СН2С1.2 70/30) . Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 1,4 г (58% выход) промежуточного соединения СЗ.
Синтез промежуточного соединения D3
СЗ (1,4 г, 3,4 ммоль) перемешивали в NH3 3 0% в воде (30 мл) и THF (30 мл) при к.т. в течение 16 часов. Смесь концентрировали, и остаток сушили азеотропным выпариванием с EtOH (дважды), с получением 1,3 г (97% выход) . Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки на следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения ЕЗ
Синтез промежуточного соединения F3
З-Хлорпероксибензойную кислоту (2,04 г, 8,3 ммоль) добавляли к раствору D3 (1,3 г, 3,3 ммоль) в СН2С1г (80 мл) при к. т. Смесь перемешивали при к. т. в течение 2 0 часов. К смеси добавляли водный раствор ЫагЭгОз (2,61 г, 16,52 ммоль). Слои разделяли и водный слой экстрагировали CH2CI2 (дважды). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 1,4 г (100% выход) промежуточного соединения ЕЗ.
Смесь ЕЗ (1,4 г, 3,3 ммоль), 4-амино-1-бутанола (0,45 мл, 3 ммоль) и К2С03 (414 мг, 4,9 ммоль) в CH3CN (65 мл) перемешивали при 8 0°С в течение 1 часа 3 0 минут. Соли фильтровали и к фильтрату добавляли воду. Смесь экстрагировали CH2CI2 (дважды). Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и выпаривали растворитель. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 80 г, Merck, подвижная фаза CH2Cl2/MeOH/NH4OH 98/2/0,1). Чистые фракции собирали и концентрировали, с получением 1,2 г (84% выход) промежуточного соединения F3.
NH,
Синтез промежуточного соединения G3
Fe (1,54 г, 27,6 ммоль) добавляли к смеси F3 (1,2 г, 2,7 6 ммоль) в АсОН (24 мл) и воде (8,6 мл). Смесь энергично перемешивали при к. т. в течение 2 4 часов. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, и остаток разбавляли EtOAc и водой. Смесь фильтровали через слой целита(r) и промывали EtOAc. Слои разделяли, и органический слой промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз (дважды), затем насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (15-40 мкм, 40 г) в CH2Cl2/MeOH/NH4OH (90/10/0,5). Чистые фракции собирали и концентрировали. Эту фракцию отверждали из смеси СНзСЫ/диизопропиловый эфир, с получением 0,70 г (71% выход) промежуточного соединения G3.
BBr3
СНЬС12
Синтез промежуточного соединения НЗ
При -60°С в токе N2 ВВг3 (5,6 мл, 5,6 ммоль) каплями добавляли к смеси G3 (400 мг, 1,1 ммоль) в CH2CI2 (40 мл) . Смесь перемешивали при -60°С в течение 1 часа, и затем при к. т. в течение 12 часов в токе N2. Каплями добавляли 1 мл СН3ОН при 0°С. Затем смесь выливали в насыщенный раствор К2СО3 в воде. Смесь экстрагировали раствором СНгС^/МеОН. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенное соединение очищали хроматографией на колонке с силикагелем (15-40 мкм, 40 г) в CH2Cl2/MeOH/NH4OH (90/10/0,5). Чистые фракции собирали и концентрировали. Остаток отверждали из смеси СНзСЫ/диизопропиловый эфир, с получением 2 65 мг (69% выход) промежуточного соединения НЗ.
Синтез конечного соединения 8
При к. т. в токе N2 медленно каплями добавляли раствор диизопропилазодикарбоксилата (0,27 мл, 1,36 ммоль) в THF (5 мл) к смеси НЗ (2 35 мг, 0,68 ммоль), РРпз (358 мг, 1,3 6 ммоль) в THF (50 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение б часов. Реакционную смесь выливали в воду со льдом и добавляли EtOAc. Смесь ощелачивали водным раствором ЫаНСОз 10% в воде, затем органический слой разделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворители выпаривали досуха. Неочищенное соединение очищали хроматографией на колонке с силикагелем (15-40 мкм, 40 г) в
CH2Cl2/MeOH/NH4OH (95/5/0,1). Чистые фракции собирали и выпаривали. Остаток отверждали из смеси СНзСЫ/диизопропиловый эфир, с получением 75 мг (34% выход) соединения 8.
Синтез промежуточного соединения J3
При 0°С в токе N2 добавляли NaH (3,28 г, 82 ммоль) к раствору В2 (7,32 г, 71 ммоль) в DMF (80 мл) . Смесь перемешивали при к.т. в течение 30 минут и добавляли 13 (10 г, 54,6 ммоль) (с выделением тепла) и смесь перемешивали при к.т. в течение 4 часов. Добавляли 10% водный раствор ЫаНСОз (150
мл), и затем насыщенный раствор соли (150 мл) . Полученную в результате смесь экстрагировали EtOAc (дважды). Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток помещали в минимум AcOEt, осадок отфильтровывали и сушили, с получением промежуточного соединения J3 (9,04 г, 81% выход).
Синтез промежуточного соединения КЗ
При 0°С в токе N2 каплями добавляли BH3/THF (110 мл, 39 ммоль) к раствору J3 (9,0 г, 43,9 ммоль) в THF (60 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 часов, затем гасили с помощью 2М НС1 и перемешивали при к.т. в течение 12 часов. Реакционную смесь выпаривали досуха. Остаток помещали в CH2CI2-CH3OH-NH4OH 90-10-1. Осадок отфильтровывали (минеральные вещества), а фильтрат концентрировали. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 330 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 96/4/0,590/10/0,5) . Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением промежуточного соединения КЗ (6,2 г, 73% выход).
Синтез промежуточного соединения L3
КЗ (6,2 г, 29,5 ммоль) в EtOH (30 мл) каплями добавляли к раствору F2 (4,6 г, 2 8 ммоль) и анилина гидрохлорида (56 мг, 0,4 3 ммоль) в EtOH (25 мл) при 10°С. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 0 часов. Водный раствор 1М NaOH (25 мл) каплями добавляли к раствору при 10°С и полученную в результате смесь перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Осадок отфильтровывали, промывали минимумом холодного EtOH и сушили в вакууме. Маточные слои концентрировали, получали
второй осадок в СН2С1г, фильтровали и сушили в вакууме. Две партии объединяли, с получением промежуточного соединения L3 (2,44 г, 29% выход).
Синтез промежуточного соединения МЗ
Раствор NBS (0, 326 г, 1,83 ммоль) в THF (15 мл) каплями добавляли за 25 минут к раствору L3 (0,5 г, 1,67 ммоль) в THF (15 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 3 0 минут, и затем при к. т. в течение 4 5 минут. Смесь помещали в CH2CI2, промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз, сушили над MgS04, фильтровали и выпаривали в вакууме. Это неочищенное соединение отверждали из CH3CN. Осадок отфильтровывали и сушили, с получением промежуточного соединения МЗ (216 мг, 34% выход).
Синтез промежуточного соединения N3
Смесь МЗ (1,04 г, 2,74 ммоль) в мочевине (4,9 г, 82,28 ммоль) нагревали при 160°С в течение 4 часов. Снова добавляли мочевину (3 г, 2,64 ммоль) и смесь перемешивали при 160°С в течение 12 часов. Смесь охлаждали до к.т. и добавляли воду. Осадок растирали и отфильтровывали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С, с получением промежуточного соединения N3. Неочищенное соединение использовали непосредственно на следующей стадии.
какой-либо дополнительной очистки.
гидрохлорид ;224 мг, 1,66 (неочищенное),
Синтез конечного соединения 9 1-(З-Диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (318 мг, 1,6 6 ммоль) и гидроксибензотриазол ммоль) медленно добавляли к смеси Q3 диизопропилэтиламина (0,476 мл, 2,76 ммоль) в DMF (170 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 24 часов. Растворитель выпаривали досуха. Остаток помещали в воду. Осадок отфильтровывали, промывали водой и сушили. Неочищенное соединение очищали обращенной фазой (X-Bridge-Cl8 5 мкм 30*150 мм), подвижная фаза (градиент от 90% NH4HCO3 0,5%, 10% CH3CN до 0% NH4HCO3 0,5%, 100% CH3CN) , с получением конечного соединения 9 (37 мг, 18% выход).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 10
Синтез конечного соединения 10
Смесь соединения 7 (100 мг, 0,27 ммоль), Pd/C (10%) (14,5 мг, 0,014 ммоль) в CH3OH/THF 50/50 (10 мл) гидрогенизировали при атмосферном давлении Щ в течение 4 часов. Катализатор удаляли фильтрованием через фильтр (Chromafil Xtra 0,45 мкм). Фильтрат концентрировали. Эту фракцию отверждали из CH3CN, осадок отфильтровывали и сушили, с получением конечного соединения 10 (81 мг, 81% выход).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 11
Синтез промежуточного соединения R3
При 0°С в токе N2 добавляли NaH (705 мг, 17,6 ммоль) к раствору 1, 4-бутандиола (3,2 г, 35, 26 ммоль) в DMF (30 мл) . Смесь перемешивали в течение 3 0 минут при к.т., затем добавляли ЕЗ (2,5 г, 5,8 7 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли лед и смесь экстрагировали EtOAc. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 97/3/0,1). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением промежуточного соединения R3 (1,78 г, 70% выход).
Синтез промежуточного соединения S3
Порошок железа (2,27 г, 40,65 ммоль) добавляли к смеси R3
(1,77 г, 4,07 ммоль) в АсОН (35 мл) и воде (11 мл) . Смесь перемешивали при 50°С в течение 8 часов. Реакционную смесь разбавляли водой и ощелачивали с помощью К2СО3 10% в воде. Добавляли EtOAc и СН3ОН и полученную в результате смесь фильтровали через слой целита(r). Целит(r) промывали CH2CI2/CH3OH
(80/20) . Фильтрат декантировали. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Фракцию помещали в CH3CN, осадок отфильтровывали и сушили, с получением промежуточного соединения S3 (1,2 г, 82% выход).
Синтез промежуточного соединения ТЗ
При -60°С в токе N2 ВВгз (13,6 мл, 13,6 ммоль) каплями добавляли к смеси S3 (980 мг, 2, 727 ммоль) в CH2CI2 (40 мл) . Смесь перемешивали при -60°С в течение 1 часа в токе N2. Смесь перемешивали 5 часов при 0°С. Каплями добавляли 5 мл СН3ОН при -
60°С. Затем смесь выливали в насыщенный раствор К2СО3. Смесь экстрагировали CH2CI2/CH3OH. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением промежуточного соединения ТЗ (0,55 г, 49% выход), который использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
Синтез конечного соединения 11
Смесь ТЗ (537 мг, 1,32 ммоль), К2СО3 (182 мг, 1,32 ммоль) в DMF (71 мл) перемешивали при 8 0°С в течение 12 часов.
Неочищенную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток помещали в минимум DMF и добавляли 5 г S1O2 35-70 мкм. Полученную в результате суспензию выпаривали досуха и помещали в верхнюю часть 50 г хроматографической колонки и элюировали с градиентом CH2CI2-CH3OH-NH4OH от 95-5-0,5 до 90-10-0,5. Фракции, содержащие ожидаемые соединения, объединяли и концентрировали при пониженном давлении. Твердое вещество кристаллизовали из CH3CN, осадок отфильтровывали и сушили, с получением конечного соединения 11 (33 мг, 8% выход).
iNO, _
W3 гу^о
Общая схема получения конечных продуктов: способ 12
N Н7
Г С|ТТ I
NHj 30% в воде
THF
NX/N02 из мЛ^мрг
OTBDMS
S N NH V2 О" "О
mCPBA
СНгС12 ~ JL X ^ ^OTBDMS NaH, THF
X3 *он NA> °* Z3 o-^o
OTBDMS TBAF
п n 2
0 J
NO-
Fe, AcOH
вода
OTBDMS
S' N-^ NH V2 O'' ~0
КгСОз Nal
ацетон
S^N^N-^V^V"'
"ли
Синтез промежуточного соединения V3
V2 (1,4 г, 4,8 ммоль), U3 (1,44 г, 4,8 ммоль), K2C03 (1,65 г, 12 ммоль) и Nal (0,72 г, 4,8 ммоль) в ацетоне (60 мл) перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Раствор фильтровали, и фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной
формы 15-40 мкм, 80 г, Merck, подвижная фаза гептан/СН2С12 85/15), с получением промежуточного соединения V3 (2,3 г, 94% выход).
Л /v^UIBUMS THF \ ^Ч. ^л. X
CI NH2
щЛ^-14^ Nit 30% вводе Мх-Ц> -Ы02
VeAMAM^^W°(tm)(tm)S THF Ч..А"Дч"- ^^OTBDMS
Синтез промежуточного соединения W3
V3 (2,3 г, 4,5 ммоль) перемешивали в NH3 (3 0% в воде) (40 мл) и THF (40 мл) при к.т. в течение 16 часов. Смесь концентрировали в вакууме и остаток сушили азеотропным выпариванием EtOH (дважды). Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 40 г, Merck, подвижная фаза гептан/AcOEt 85/15), с получением промежуточного соединения W3 (1,25 г, 56% выход).
NH2 N Н2
N02
OTBDMS
NA^-N02 mCPBA nA_I
-А. /-\ ,OTBDMS CHzCI, ! \ JL Л Л
Синтез промежуточного соединения ХЗ
Добавляли 3-хлорпероксибензойную кислоту (2,04 г, 8,2 ммоль) к раствору W3 (1,3 г, 3,3 ммоль) в СН2С1г (70 мл) при к. т. Смесь перемешивали при к. т. в течение 2 0 часов. К смеси добавляли водный раствор ЫагЭгОз (5 экв.). Два слоя разделяли, и водный слой экстрагировали CH2CI2 (дважды). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором ИаНСОз, сушили над MgS04, фильтровали и удаляли растворитель при пониженном давлении. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без какой-либо дополнительной очистки.
|Hj С> A^N°2
I ЫГ. НО^ ^~-^ОН N
N^V уз т II Т
|_| Г^Г
OTBDMS
Синтез промежуточного соединения Z3
При 0°С в токе N2 добавляли NaH (4 57 мг, 11,4 ммоль) к раствору Y3 (2,1 мл, 22,8 ммоль) в THF (100 мл). Смесь перемешивали в течение 3 0 минут при к.т., затем добавляли ХЗ (2 г, 3,8 ммоль) к раствору в 2 0 мл THF при 0°С. Смесь перемешивали при 5°С в течение 15 минут. Добавляли лед и смесь экстрагировали EtOAc. Неочищенное соединение очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г) в СНгС^/МеОН/ИЩОН (98/2/0,1), с получением промежуточного соединения Z3 (1 г, 4 8% выход).
Синтез промежуточного соединения А4
Тетрабутиламмонийфторид (0,653 мл, 0,65 ммоль) каплями добавляли к раствору Z3 (0,3 г, 0,544 ммоль) в THF (10 мл) при к.т. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 3 часов. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и выливали в воду. Органический слой разделяли, промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением промежуточного соединения А4 (22 0 мг, 92% выход).
Синтез промежуточного соединения В4
При к. т. в токе N2 раствор ди-трет-бутилазодикарбоксилата (0,72 мл, 3,2 ммоль) в THF (10 мл) медленно каплями добавляли к смеси А4 (0,7 г, 1,6 ммоль) и PPh3 (0,84 г, 3,2 ммоль) в THF (12 0 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 12 часов. Реакционную смесь выливали в воду со льдом и добавляли EtOAc.
Смесь ощелачивали водным 10% раствором ЫаНСОз, затем органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворители выпаривали досуха, с получением промежуточного соединения В4 (60 мг, 9% выход).
Синтез конечного соединения 12
Порошок железа (80 г, 1,43 ммоль) добавляли к смеси В4 (60 мг, 0,143 ммоль) в АсОН (1,3 мл) и воде (0,5 мл) . Смесь энергично перемешивали при к. т. в течение б часов. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, и остаток разбавляли СН2С12/МеОН 90/10 и водой. Водный слой насыщали К2СОз и экстрагировали СН2С12/МеОН 90/10. Органические слои сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 40 г) в CH2Cl2/MeOH/NH4OH (90/10/0,5). Кристаллизация из смеси СНзСЫ/диизопропиловый эфир давала конечное соединение 12 (14 мг, 2 9% выход).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 13
Синтез промежуточного соединения С4
Раствор Z2 (2,12 г, 4,87 ммоль) и NEt3 (677 мкл, 4,87 ммоль) в 4-пентен-1-оле (75 мл) перемешивали при к.т. в течение 4 8 часов. Растворитель удаляли в вакууме. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 90 г, Merck, подвижная фаза, градиент: гептан/СНгС12 от 50/50 до 0/100), с получением промежуточного соединения С4 (1,6 г, 66% выход) в виде желтого масла.
Синтез промежуточного соединения D4
Катализатор Граббса 2ого поколения (41 мг, 4 8,47 ммоль) добавляли к дегазированному раствору С4 (208 мг, 0,47 ммоль) в CH2CI2 (150 мл) при к.т. Раствор перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Добавляли DMT SiliaBond(r) (поглотитель Ru от Silicycle(r))
(298 мг, 0,388 ммоль), смесь перемешивали при к.т. в течение б часов и раствор фильтровали через целит(r). Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 90 г Merck, подвижная фаза, градиент: гептан/AcOEt от 100/0 до 70/30) . Фракции, содержащие ожидаемый продукт собирали и частично выпаривали и осадок отфильтровывали, с получением 736 мг промежуточного соединения D4 (73% выход, содержащий 6% Z-изомера). 2 97 мг этой партии очищали препаративной ЖХ
(стабильный оксид кремния 5 мкм 150x30,0 мм, подвижная фаза, градиент: гептан/AcOEt от 85/15 до 0/100), с получением 195 мг промежуточного соединения D4 в виде белого твердого вещества
(чистый Е-изомер). Чистоту Е-изомера проверяли аналитической хроматографией с обращенной фазой (Column Nucleodur Sphinx 150x4,6 мм, подвижная фаза: градиент от 70% МеОН, 30% НСООН 0,1% до 100% МеОН). Эту партию чистого Е-изомера использовали на следующей стадии.
Синтез конечного соединения 16
Порошок железа (158 г, 2,83 ммоль) добавляли к раствору D4 (195 мг, 0,47 ммоль) в АсОН (8 мл) и воде (741 мл) . Смесь нагревали при 100°С с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходом мощности, варьирующим от 0 до 4 00 Вт, в течение 1 часа. Смесь фильтровали через слой целита(r) и промывали DMF (2 50 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме, и остаток растирали в СН2С1г/МеОН (80:20) . Осадок отфильтровывали, промывали СН2С1г/МеОН (80:20) . Полученное в результате желтое твердое вещество растворяли в DMF и фильтровали через слой целита(r). Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток растирали в СН2С12/МеОН (90:10) . Осадок отфильтровывали, с получением конечного соединения 16 в виде белого твердого вещества (17 мг, 10% выход).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 14
Синтез промежуточного соединения Е4
Раствор Z2 (3,8 г, 5,06 ммоль) и NEt3 (844 мкл, 6,07 ммоль) в З-бутен-1-оле (68 мл) перемешивали при к. т. в течение 20 часов, затем перемешивали при 30°С в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме, с получением 5 г желтого масла. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 120 г Grace, подвижная фаза, градиент: гептан/СН2С12 от 50/50 до 10/90). Фракции, содержащие ожидаемый продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 2,2 г промежуточного соединения Е4 в виде желтого масла.
Синтез промежуточных соединений F4 и G4
Е4 (1,34 г, 3,14 ммоль) добавляли в сухой CH2CI2 (1 л) и полученную в результате смесь дегазировали барботированием N2 через раствор в течение 30 минут. Добавляли катализатор Граббса 2ого поколения (134 мг, 0,157 ммоль) одной порцией и смесь перемешивали при к. т. в атмосфере N2 в течение 16 часов. Добавляли DMT SiliaBond(r) (0,965 г, 1,25 ммоль), и смесь перемешивали при к.т. в течение 16 часов, и раствор фильтровали через целит(r). Фильтрат выпаривали в вакууме, с получением 1,89 г коричневого твердого вещества. Неочищенный продукт очищали
препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 50 г Merck, подвижная фаза, градиент: гептан/AcOEt от 100/0 до 80/20) . Фракции, содержащие ожидаемый продукт, частично выпаривали (AcOEt), продукт осаждали и отфильтровывали, с получением 162 мг промежуточного соединения F4 (13% выход, Е-изомер) в виде желтого твердого вещества. Другие фракции, содержащие ожидаемые продукты объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 244 мг белого твердого вещества (смесь F4 (Е-изомер) и G4 (Z-изомер)).
Параллельно выполняли ту же реакцию, исходя из 895 мг Е4. Из этой реакции выделяли партию 110 мг F4 (13% выход, Е-изомер). Получали вторую партию 184 мг (смесь F4 (Е-изомер) и G4 (Z-изомер)).
Две партии, содержащие смесь Е- и Z-изомеров, объединяли (42 8 мг) и очищали препаративной ЖХ (стабильный оксид кремния 5 мкм 150x30,0 мм, подвижная фаза, градиент: СН2С12/МеОН от 100/0 до 98/2), с получением 175 мг F4 (14% выход, Е-изомер) в виде желтого твердого вещества и 130 мг G4 (10% выход, Z-изомер) в виде белого твердого вещества.
Всего получали 447 мг промежуточного соединения F4 (Е-изомер) и 130 мг промежуточного соединения G4 (Z-изомер).
Синтез конечного соединения 15
Железо (93 мг, 1,67 ммоль) добавляли к раствору F4 (111 мг, 0,27 8 ммоль) в уксусной кислоте (5 мл) и дистиллированной воде (330 мкл) . Смесь нагревали при 100°С с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходом мощности, варьирующим от 0 до 400 Вт, в течение 1 часа. Смесь концентрировали в вакууме и растирали в АсОН/Н20 (50:50). Осадок отфильтровывали, с получением серого твердого вещества, которое растворяли в DMF и фильтровали через слой
целита(r). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, с получением бело-коричневого твердого вещества. Это твердое вещество растирали в АсОН/ЩО (50:50); осадок отфильтровывали, с получением 4 0 мг конечного соединения 15 (4 5% выход) в виде белого твердого вещества.
Синтез конечного соединения 17
Железо (109 мг, 1,95 ммоль) добавляли к раствору G4 (130 мг, 0,325 ммоль) в уксусной кислоте (б мл) и дистиллированной воде (390 мкл) . Смесь нагревали при 100°С с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходом мощности, варьирующим от 0 до 400 Вт, в течение 1 часа 3 0 минут. Смесь концентрировали в вакууме и растирали в растворе АсОН/НгО (50:50). Осадок отфильтровывали, с получением серого твердого вещества, которое растирали в АсОН/ЩО (50:50); осадок отфильтровывали и растворяли в DMF. Смесь фильтровали через слой целита(r) и фильтрат концентрировали в вакууме, с получением белого твердого вещества. Это твердое вещество растирали в холодном растворе АсОН/НгО (50:50); осадок отфильтровывали, с получением 18 мг конечного соединения 17 (17% выход) в виде белого твердого вещества.
Общая схема получения конечных продуктов: способ 15
Синтез промежуточного соединения 14
Смесь ХЗ (4 г, 7,61 ммоль), Н4 (1,1 г, 9,13 ммоль) и К2СОз (1,3 г, 9,13 ммоль) в CH3CN (12 0 мл) перемешивали при 8 0°С в течение 1,5 часа. Добавляли воду и смесь экстрагировали EtOAc (дважды). Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм; 120 г) в CH2Cl2/MeOH/NH4OH 98/2/0,1, с получением 2,7 г (63% выход) промежуточного соединения 14.
Синтез промежуточного соединения J4
Тетрабутиламмонийфторид (5,6 мл, 5,5 6 ммоль) каплями добавляли к раствору 14 (2,6 г, 4,64 ммоль) в THF (125 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь разбавляли с помощью EtOAc и выливали в воду. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 80 г Grace, подвижная фаза: CH2Cl2/MeOH/NH4OH 96/4/0,1), с получением 1,82 г промежуточного соединения J4. Неочищенное соединение использовали на следующей стадии.
Br'
Ce2C03, CHjCN
Синтез промежуточного соединения K4
Смесь J4 (1,82 г, 4,08 ммоль), Cs2C03 (1,47 г, 4,49 ммоль), аллилбромид (0,39 мл, 4,49 ммоль) в CH3CN (60 мл) перемешивали при к. т. в течение 5 часов, и затем при 50°С в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в воду со льдом и добавляли EtOAc. Смесь ощелачивали водным раствором ЫаНСОз 10% в воде. Органический слой разделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворители выпаривали досуха, с получением 1,94 г промежуточного соединения К4. Неочищенное соединение использовали непосредственно на следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения L4
Добавляли катализатор Граббса 2ого поколения (100 мг, 0,117 ммоль) к дегазированному раствору К4 (570 мг, 1,17 ммоль) в CH2CI2 (225 мл) при к.т. Раствор перемешивали при к.т. в течение 36 часов.
DMT SiliaBond(r) (1,8 г) добавляли в реакционную смесь, которую перемешивали при к.т. 18 часов. Смесь фильтровали через слой целита(r). Целит(r) промывали CH2CI2. Фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 40 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH 97,5/2,5/0,1). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха. Сухое твердое вещество снова очищали ахиральной SFC (AMINO б мкм 150x21,2
мм), подвижная фаза (80% СОг, 20% МеОН), с получением 182 мг (34% выход) промежуточного соединения L4 (Е-изомера).
Синтез конечного соединения 18
Железо (200 мг, 3,58 ммоль) добавляли к смеси L4 (182 мг, 0,40 ммоль) в уксусной кислоте (4,3 мл) и дистиллированной воде (0,85 мл) . Смесь перемешивали при к.т. в течение 12 часов. Добавляли 6,5 мл уксусной кислоты и смесь перемешивали при 50°С в течение 3 часов, и затем при 80°С в течение 2 часов.
Неочищенный продукт очищали обращенной фазой (X-Bridge-Cl8 5 мкм 30*150 мм), подвижная фаза (градиент от 90% муравьиной кислоты 0,1%, 10% CH3CN до 0% муравьиной кислоты 0,1%, 100% CH3CN), с получением 44 мг (29% выход) конечного соединения 18.
Общая схема получения конечных продуктов: способ 16
О N N
Fe, АсОН
вода
Синтез промежуточного соединения М4
Раствор ХЗ (1,4 г, 2,66 ммоль) и NEt3 (0,44 мл, 0,46 ммоль) в аллиловом спирте (14 мл) перемешивали при 8 0°С в течение 1 часа. Добавляли СН2С1г и Н20 и смесь декантировали. Органический слой сушили над MgS04 и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 80 г, Merck, подвижная фаза гептан/AcOEt 85/15), с получением 500 мг (37% выход) промежуточного соединения М4.
Синтез промежуточного соединения N4
Тетрабутиламмонийфторид (4,5 мл, 4,5 ммоль) каплями добавляли к 4М раствору (1,9 г, 3,77 ммоль) в THF (90 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь разбавляли с помощью EtOAc и выливали в воду. Органический слой промывали насыщенным раствором соли и сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 40 г, Merck, подвижная фаза гептан/AcOEt 70/30), с получением 900 мг (61% выход) промежуточного соединения N4.
Синтез промежуточного соединения 04
Смесь N4 (2,5 г, 6,42 ммоль), CS2CO3 (3,14 г, 9,63 ммоль),
аллилбромида (0,83 мл, 9,63 ммоль) в CH3CN (100 мл)
перемешивали при 7 0°С в течение 1 часа. Реакционную смесь
выливали в воду со льдом и добавляли EtOAc. Смесь ощелачивали
водным насыщенным раствором ЫаНСОз. Затем органический слой
отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворители
выпаривали досуха. Неочищенное соединение очищали
хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г) в гептане/AcOEt 80/20, с получением 1,47 г (53% выход) промежуточного соединения 04.
Синтез промежуточных соединений Р4 и Q4
Раствор 04 (400 мг, 0,93 моля) и 1М раствор хлорциклогексилборана в гексане (18 6 мкл, 0,19 ммоль) в сухом дихлорэтане (22 0 мл) перемешивали при 8 0°С и в атмосфере N2 в течение 1 часа. Добавляли 0,033 экв. катализатора Граббса-Ховейды 2ого поколения (20 мг, 0,031 ммоль) и смесь перемешивали
в закупоренной пробирке при 12 0°С в течение 1 часа. Затем пробирку открывали, добавляли 0,033 экв. катализатора Граббса-Ховейды 2ого поколения (20 мг, 0,031 ммоль) и смесь перемешивали в закупоренной пробирке при 12 0°С в течение 1 часа. Затем пробирку открывали, добавляли 0,033 экв. катализатора Граббса-Ховейды 2ого поколения (20 мг, 0,031 ммоль) и смесь перемешивали
в закупоренной пробирке при 12 0°С в течение 2 часов. DMT SiliaBond(r) (1,43 г, 0,745 ммоль) добавляли в смесь, которую перемешивали при к.т. в течение 12 часов. Смесь фильтровали через слой целита(r) и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали сначала препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 40 г, Merck, подвижная фаза гептан/AcOEt 80/20), и затем ахиральной SFC (Amino б мкм 150x21,2 мм), подвижная фаза (83% С02, 17% МеОН), с получением 55 мг (15%) промежуточного соединения Р4 (Е-изомер) и 80 мг (21% выход) промежуточного соединения Q4 (Z-изомер).
Синтез конечного соединения 23
Синтез конечного соединения 22
Железо (264 мг, 4,73 ммоль) добавляли к смеси Р4 (190 мг, 0,47 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл) и дистиллированной воде (2 мл) . Смесь энергично перемешивали при 50°С в течение 5 часов. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток разбавляли СН2С12/МеОН 90/10 и водой. Смесь насыщали К2СОз, экстрагировали СН2С12/МеОН 90/10. Органические слои сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 40 г) в CH2Cl2/MeOH/NH4OH (90/10/0,5), с получением 4 0 мг (2 6% выход) конечного соединения 23.
Железо (334 мг, 5,98 ммоль) добавляли к смеси Q4 (240 мг, 0,6 ммоль) в уксусной кислоте (12 мл) и воде (2,5 мл) . Смесь энергично перемешивали при 50°С в течение 5 часов. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, и остаток разбавляли СН2С1г/МеОН 90/10 и водой. Смесь насыщали К2СО3, экстрагировали СН2С1г/МеОН 90/10. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 40 г) в CH2Cl2/MeOH/NH4OH (90/10/0,5), с получением 70 мг (36% выход) конечного соединения 22.
Синтез промежуточного соединения Т4
При 0°С NaH (695 мг, 17,36 ммоль) порциями добавляли к S4 (1,52 г, 8,68 ммоль) в THF (70 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 3 0 минут, и затем каплями добавляли при 0°С к R4 (4,6 г, 17,36 ммоль) в THF (45 мл) . Реакционную смесь перемешивали
при к. т. в течение ночи. Добавляли очень небольшое количество льда и ожидаемое соединение экстрагировали AcOEt. Растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 220 г) в смеси гептан/AcOEt 80/20-60/40, с получением 1,44 г (23% выход) промежуточного соединения Т4.
NjyNC2 ТА NX.NC, о/^ОТНР
V2 О
.Дч /\ аЧетон U4 о-^0 \^
Синтез промежуточного соединения U4
I 1 7Hi
Л ^.NO, J ОТНР
И I NH330% вводе N ^ С
| II Т THF ^s^^rr ^rr
Смесь V2 (1 г, 3,42 ммоль), Т4 (1,35 г, 3,76 ммоль), К2СОз (1,18 г, 8,54 ммоль) и Nal (512 мг, 3,42 ммоль) в ацетоне (25 мл) перемешивали при к. т. в течение ночи. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией на колонке с силикагелем (15-41 мкм; 40 г) в гептане/AcOEt 80/20, с получением 1,4 г (72% выход) промежуточного соединения U4.
V ¦ ¦ NH,
NO, J ОТНР
Синтез промежуточного соединения V4
U4 (1,5 г, 2,63 ммоль) перемешивали в NH3 30% в воде (30 мл) и THF (30 мл) при к. т. в течение 2 часов. Смесь концентрировали в вакууме, и остаток сушили азеотропной дистилляцией с EtOH (дважды). Неочищенный продукт (1,3 г, 89% выход) использовали без дополнительной очистки на следующей стадии.
г О г О
NA^N°2 °ТНР APTS N^YNO= 0^ 0Н
^An'YY1 МеОН,воДа ^АА"^у%|^
V4 <Д0 Синтез промежуточного соединения W4
При к.т. пара-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (81 мг, 0,4 7 ммоль) добавляли к смеси V4 (2,60 г, 4,72 ммоль) в МеОН (26 мл) и воде (2,60 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи, и затем при 60°С в течение 12 часов. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и ощелачивали с помощью К2СО3 10% в воде. Органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении, с получением 2 г (90% выход) промежуточного соединения W4.
AAN^vv1
mCPBA
CHjCfe
Синтез промежуточного соединения X4
Мета-хлорпероксибензойную кислоту (951 мг, 3,86 ммоль) в СН2С1г (40 мл) каплями добавляли к раствору W4 (1,80 г, 3,86 ммоль) в СН2С1г (10 мл) при к. т. Смесь перемешивали при к. т. в течение б часов. К смеси добавляли водный раствор ЫагЭгОз (2 экв.) . Два слоя разделяли, и водный слой экстрагировали СН2С1г (дважды). Объединенные органические слои сушили над MgS04, фильтровали и удаляли растворитель при пониженном давлении. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 8 0 г, CH2CI2/CH3OH: 95/5. Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 1,4 г (75% выход) промежуточного соединения Х4.
-N°2
tBuOK
THF
Синтез промежуточного соединения Y4
При 0°С в токе N2 tBuOK (577 мг, 5,14 ммоль) добавляли к
смеси Х4 (1,24
2,57 ммоль]
в THF
418 мл)
Смесь
перемешивали при 8 0°С в течение ночи. Добавляли воду и смесь экстрагировали EtOAc. Органический слой сушили над MgS04,
фильтровали и растворитель выпаривали. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 50 г, CH2CI2/CH3OH 98/2) . Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 85 мг (7% выход) промежуточного соединения Y4.
NH,
Fe, АсОН
вода
Синтез конечного соединения 24
Железо (68 мг, 1,22 ммоль) добавляли к смеси Y4 (85 мг, 0,21 ммоль) в уксусной кислоте (2,2 мл) и воде (0,24 мл). Смесь перемешивали при 50°С в течение 3 часов. Смесь фильтровали, промывали АсОН, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное соединение помещали в DMF и добавляли 2 г БЮг 63-200 мкм. Полученную в результате суспензию выпаривали досуха и помещали в верхнюю часть 2 5 г картриджа для очистки.
Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 25 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 95/5/0,5). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 31 мг. Соединение отверждали из CH3CN, осадок отфильтровывали и сушили, с получением 22 мг (32% выход) конечного соединения 24.
Общая схема получения конечных продуктов: способ 18
Синтез промежуточного соединения А5
При 0°С диизопропилазодикарбоксилат (20,4 мл; 102,5 ммоль) каплями добавляли к смеси V2 (20 г; 68,33 ммоль), Z4 (12,2 г; 68, 33 ммоль) и РРпз (27 г; 102,5 ммоль) в THF (500 мл) . Смесь перемешивали при к.т. в течение 12 часов. Добавляли EtOAc и воду. Слои декантировали. Органический слой промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенное соединение очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 330 г, СН2С12/гептан 70/30) . Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 12 г (3 9% выход) промежуточного соединения А5.
Синтез промежуточного соединения В5
Смесь А5 (5,4 г; 11,92 ммоль) в NH3 30% в воде (100 мл) и THF (100 мл) перемешивали при к.т. в течение 1,3 часа. Смесь концентрировали. Остаток помещали в толуол и концентрировали (процесс повторяли дважды), с получением 5,15 г промежуточного соединения В5.
Синтез промежуточного соединения С5
Синтез промежуточного соединения D5
При 0°С 3-хлорпербензойную кислоту (2,93 г; 11,86 ммоль) в CH2CI2 (20 мл) добавляли к смеси В5 (5,14 г; 11,86 ммоль) в CH2CI2 (100 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 часов. К смеси добавляли водный раствор ЫагЭгОз (2 экв.). Разделяли 2 слоя и водный слой экстрагировали CH2CI2 (дважды). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором NaHC03, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, с получением 6,7 г промежуточного соединения С5 (содержащего сульфоновый аналог), которое использовали непосредственно на следующей стадии.
Смесь С5 (5,6 г; 12,46 ммоль), NEt3 (2,6 мл; 18,69 ммоль) в аллиловом спирте (47,6 мл) перемешивали при 100°С в течение 3 0 минут. Смесь концентрировали и неочищенное соединение очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 330 г, гептан/AcOEt 8 0/2 0) . Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 3,45 г промежуточного соединения D5 (62% выход).
Синтез промежуточных соединений Е5 и F5 Эксперимент выполняли с 4 партиями по 2 г D5. Добавляли катализатор Граббса 2ого поколения (1,54 г; 1,80 ммоль) 3 раза (3*514 мг) (при t=0, t=12 часов, t=24 часа) к смеси D5 (8 г; 18,04 ммоль) в сверхсухом CH2CI2 (3470 мл) . Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 6 часов. Добавляли DMT SiliaBond(r) (24 г; 14,43 ммоль), затем смесь перемешивали 24 часа при к.т. Твердое вещество отфильтровывали и растворитель выпаривали, с получением 8,2 г. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 330 г, СНгС^/МеОН 99,5/0,5) . Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 4,55 г смеси Е5 и F5 после фильтрации и сушки твердого вещества в смеси СН2С12/диизопропиловый эфир. Два изомера разделяли ахиральной SFC (стационарная фаза: Chiralpak IA 5 мкм 250*20 мм), подвижная фаза: 70% С02, 30% МеОН), с получением 4,07 г промежуточного соединения Е5 (Е-изомера, 54% выход) и 187 мг промежуточного соединения F5 (Z-изомера, 2,5% выход).
Синтез конечного соединения 84
При к. т. T1CI3 (5,5 мл; 6,45 ммоль) каплями добавляли к смеси F5 (134 мг; 0,32 ммоль) в THF (20 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. При 0°С смесь ощелачивали порошком К2СО3. Полученную в результате мутную смесь фильтровали через слой целита(r), и целит(r) промывали раствора AcOEt/СНзОН 8/2. Фильтрат сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 182 мг неочищенного соединения. Добавляли МеОН, появляющееся твердое вещество фильтровали и сушили в вакууме при 90°С до 66 мг конечного соединения 84 (60% выход).
Синтез конечного соединения 32
При к.т. Т1С1з (60 мл; 69,811 ммоль) каплями добавляли к смеси Е5 (1,45 г; 3,49 ммоль) в THF (130 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. При 0°С смесь ощелачивали порошком К2С0з. Полученную в результате мутную смесь фильтровали через слой целита(r) и целит(r) промывали раствора AcOEt/CH3OH 8/2. Фильтрат частично выпаривали, с получением 1,1 г неочищенного соединения после фильтрации белого твердого вещества и сушили в вакууме. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (стационарная фаза: сухая загрузка 220 г+10 г 15-40 мкм Grace), подвижная фаза: 0,5% NH4OH, 97% СН2С12, 3% МеОН-0,5% NH4OH, 90% СН2С1г, 10% МеОН) , с получением 730 мг конечного соединения 32
Синтез промежуточного соединения Н5
Синтезировали промежуточное соединение G5 с использованием методики, описанной для промежуточного соединения Р4.
Смесь G5 (250 мг, 0,60 ммоль), Pt02 (25 мг) в CH3OH/THF (50/50) (20 мл) гидрогенизировали при атмосферном давлении Н2 в течение 30 минут. Катализатор удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (с зернами неправильной формы 15-40 мкм 30 г, Merck), подвижная фаза (80% гептан, 20% AcOEt) . Полученное в результате соединение дополнительно очищали ахиральной SFC (2-этилпиридин б мкм 150x30 мм) , подвижная фаза (70% С02, 30% СН3ОН) , , с получением 113 мг промежуточного соединения Н5 (4 5% выход).
Синтез конечного соединения 38
Железо (147 мг, 2,63 ммоль) добавляли к смеси Н5 (110 мг, 0,2 6 ммоль) в уксусной кислоте (7 мл) и воде (1,5 мл) . Смесь энергично перемешивали при к.т. в течение б часов при 50°С. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, остаток помещали в смесь DMF/THF, фильтровали через слой целита(r) и выпаривали. Неочищенный продукт разбавляли смесью уксусная кислота/вода, осадок отфильтровывали, промывали СНзОН и сушили, с получением 55 мг конечного соединения 38 (61% выход).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 2 0
г NH3 (2 М в (tm)пг
N^^v^""^ изопропаноле) ^-Лч^н0;' тСРВА
СНаСЬ
AANH THF ^SAANH
S N NH
сАо
NH?
VS' "N-" "NH NEb
° NH;
^O'^N'^NH
NO;
он Nal, КгСОз
железо. AcOH
A> °"
добавляли к при к.т. в
Суспензию
Синтез промежуточного соединения 15 Реакцию выполняли в 2 партиях по 15 г V2. Протокол для одной партии 15 г
NH3 (2М в изопропаноле) (51 мл; 102 ммоль) раствору V2 (15 г; 51,2 ммоль) в THF (250 мл течение 2 часов. Смешивали две партии концентрировали досуха. Твердое вещество растворяли в CH2CI2. Органический слой промывали водой (один раз), сушили над MgS04, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, с получением 2 8,5 г промежуточного соединения 15 (100% выход) в виде белого твердого вещества.
Синтез промежуточного соединения J5 Реакцию выполняли в 2 партиях по 14 г 15. Протокол для одной партии 14 г
Раствор мета-хлорпербензойной кислоты (9,58 г; 40,0 ммоль) в CH2CI2 (500 мл) каплями добавляли к раствору 15 (14 г; 33,3 ммоль) в CH2CI2 (2 л) при к. т. Смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Раствор фильтровали, с получением 18 г фракции 1.
К фильтрату добавляли 10% водный раствор ЫагЭгОз и насыщенный водный раствор ЫаНСОз. Слои разделяли, и органический слой сушили над MgSC> 4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме, с получением 14 г промежуточного соединения J5 в виде желтого твердого вещества. Неочищенное соединение использовали непосредственно на следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения К5
Раствор J5 (6 г; 2 0,7 ммоль) и NEt3 (3,2 мл; 22,8 ммоль) в аллиловом спирте (12 0 мл) перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Растворитель удаляли в вакууме, с получением желтого твердого вещества. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 120 г Grace, подвижная фаза, градиент: СН2С12/ЕГ-ОАС от 100/0 до 85/15), с получением 4 г промежуточного соединения К5 в виде бледно-желтого твердого вещества (68% выход).
^N-^\/OH Nal, К2СО3 , HCI ачетон L5 М5
Синтез промежуточного соединения М5
В суспензию L5 (5,2 г; 32,2 ммоль) и К2СО3 (11,1 г; 8 0,5 ммоль) в ацетоне (250 мл) добавляли 4-бром-1-бутен (4,1 мл; 4 0,2 ммоль) и смесь нагревали при 60°С 16 часов. Добавляли 4-бром-1-бутен (4,1 мл; 4 0,2 ммоль) и Nal (0,965 г; 6,43 ммоль) и смесь нагревали при 60°С 5 дней, при этом поочередно добавляли 4-бром-1-бутен (2x4,1 мл; 80,4 ммоль), К2С03 (2x2,22 г; 32,2 ммоль) и Nal (3,86 г; 25,7 ммоль) для достижения полного превращения, наблюдаемого с помощью ТСХ. Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали в вакууме, с получением коричневого масла. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм, 450 г, Matrex), подвижная фаза (0,7% NH4OH, 85% гептан, 15% iPrOH) , с получением 3,6 г промежуточного соединения М5 в виде оранжевого масла (62% выход).
NH2
N" ^^N02 M5
";:5*^^4s"0'^44N'^^N H Di-tBU- азодикарбоксилат
ji ~ PPh3.THF СГ О ^-
Синтез промежуточного соединения N5 Реакцию выполняли в 3 партиях. Типичная методика для одной партии.
В азоте раствор К5 (667 мг; 2,35 ммоль), М5 (633 мг; 3,53 ммоль), PPh3 (92 6 мг; 3,53 ммоль) и ди-трет-бутилазодикарбоксилат (813 мг; 3,53 ммоль) в сухом THF (20 мл) нагревали при 130°С с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходом мощности, варьирующим от 0 до 4 00 Вт, в течение 1 часа.
Объединяли 3 партии и выпаривали в вакууме, с получением 9,8 г коричневого масла. Неочищенное соединение очищали
препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм 450 г, Matrex), подвижная фаза (градиент от 60% гептана, 40% AcOEt до 50% гептана, 50% AcOEt), с получением 1,1 г промежуточного соединения N5 (22% выход) в виде желтого твердого вещества.
Синтез промежуточных соединений 05 и Р5
Раствор N5 (950 мг; 1,35 ммоль) и хлордициклогексилборана (1М в гексане) (27 0 мкл; 27 0 мкмоль) в сухом дихлорэтане (4 52 мл) перемешивали при 8 0°С в течение 1 часа. Добавляли катализатор Граббса-Ховейды 2ого поколения (35 мг; 56,2 мкмоль) и смесь перемешивали при 12 0°С в течение 1 часа, затем снова добавляли катализатор (35 мг; 5 6,2 мкмоль). Смесь перемешивали при 120°С в течение 24 часов. Снова добавляли катализатор Граббса-Ховейды 2ого поколения (57 мг; 90,9 ммоль) и смесь перемешивали при 12 0°С в течение б часов. Добавляли DMT SiliaBond(r) (3,11 г; 1,62 ммоль), и смесь перемешивали при к. т. в течение 24 часов, затем отфильтровывали темное твердое вещество, и фильтрат выпаривали в вакууме. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, Merck, 90 г; подвижная фаза, градиент: гептан/iPrOH от 90/10 до 65/35), с получением 0,12 г промежуточного соединения 05 (13% выход), 0,47 г смеси промежуточных соединений 05 и Р5 (52% выход) и 2 8 мг промежуточного соединения Р5 (3% выход).
Смесь промежуточных соединений 05 и Р5 дополнительно очищали препаративной ЖХ (стабильный оксид кремния 5 мкм 150x30,0 мм, подвижная фаза, градиент: гептан/AcOEt от 85/15 до 0/100), с получением 120 мг промежуточного соединения 05 и 224 мг промежуточного соединения Р5.
Общий выход: 54% (Е-изомера 05: 28%, Z-изомера Р5: 26%).
Синтез конечного соединения 39
вода
вода
Смесь 05 (240 мг; 0, 355 ммоль) и железа (119 мг; 2,13 ммоль) в уксусной кислоте (4,3 мл) и воде (0,4 мл) нагревали при 100°С с использованием однорежимного микроволнового устройства (Biotage Initiator EXP 60) с выходом мощности, варьирующим от 0 до 400 Вт, в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме и остаток помещали в DMF. Смесь фильтровали через целит(r) и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением фракции 1. Имидазол SiliaBond(r) (поглотитель Fe от Silicycle(r)) (3,67 г; 4,25 ммоль) добавляли к фракции 1 в DMF (50 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 16 часов, фильтровали через целит(r) и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением 100 мг фракции 2. Фракцию 2 очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 25 г, Merck, сухая загрузка, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/MeOH/NH3 водн. от 95/5/0,5 до 85/15/1,5), с получением 9 мг конечного соединения 39 в виде белого твердого вещества (7% выход).
NH-
NO,
14 П
4S' N NH II О
О''' ~0'
NEt3
Синтез промежуточного соединения Q5
Реакцию выполняли в 3 партиях по 2 0 г промежуточного соединения J5.
Протокол для одной партии 2 0 г.
Раствор J5 (20 г; 69,1 ммоль) и NEt3 (11,5 мл; 83,0 ммоль) в З-бутен-1-оле 500 мл) перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Растворитель удаляли в вакууме, с получением желтого твердого вещества. Очищали 3 объединенные реакционные смеси препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 750 г Grace, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/EtOAc от 100/0 до 80/20) . Фракции, содержащие продукт, объединяли и растворитель удаляли в вакууме, с получением 3 9 г промежуточного соединения Q5 (63% выход).
-CI
NH,
.А..Х,
N ^NH
сАо'
Синтез промежуточного соединения S5
Q5 (12,8 г; 43,2 ммоль), R5 (16,1 г; 77,8 ммоль), К2С03 (14,9 г; 108 ммоль) и Nal (6,48 г; 43,2 ммоль) в ацетоне (690 мл) перемешивали при к. т. в течение 1 часа, и затем смесь нагревали при 7 5°С в течение 16 часов. Смесь охлаждали до к. т.
и фильтровали через слой целита(r). Фильтрат выпаривали в вакууме, с получением фракции 1. Фракцию 1 объединяли с другой партией (реакция с 67,4 6 ммоль Q5), подлежащей очистке препаративной ЖХ (2 серийная хроматография, SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 220 г, Grace, впрыск жидкости, подвижная фаза, градиент: СЩС^/Ег-ОАс от 100/0 до 50/50), с получением 1,97 г фракции 2 в виде коричневого твердого вещества и 10,7 г фракции 3 в виде коричневого твердого вещества.
Две фракции помещали в CH2CI2 и растворяли в нем. Добавляли гептан и смесь частично выпаривали в вакууме, с получением бледно-коричневого осадка, который отфильтровывали, с получением 11,26 г промежуточного соединения S5 в виде грязно-белого твердого вещества (59% выход).
Синтез промежуточных соединений Т5 и U5
Эту реакцию выполняли в 2 партиях с использованием, соответственно, 2,75 г и 1,51 г промежуточного соединения S5. Типичная методика для 1 партии
Раствор S5 (1,51 г; 3,4 0 ммоль) и хлордициклогексилборана (1М в гексане) (0,679 мл; 0,679 ммоль) в сухом дихлорэтане (908 мл), дегазированном барботированием N2 в течение 15 минут, перемешивали при 8 0°С в атмосфере N2 в течение 1 часа. Добавляли катализатор Граббса-Ховейды 2ого поколения (213 мг; 0,340 ммоль) и смесь перемешивали при 8 0°С в течение 1 часа. DMT SiliaBond(r) (4,45 г; 2,72 ммоль) добавляли и полученную в результате смесь перемешивали при к.т. в течение 2 0 часов. 2 партии объединяли и фильтровали через слой целита(r). Фильтрат выпаривали в вакууме, с получением 4,2 г коричневого твердого вещества. Твердое вещество очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами правильной формы, 30 мкм, 200 г, Interchim, подвижная фаза, градиент:
CH2Cl2/AcOEt от 100/0 до 25/75), с получением 2,5 г фракции 1 и 1,3 г промежуточного соединения Т5 (32%, Е-изомер). Фракцию 1 помещали в CH2CI2, затем добавляли гептан. CH2CI2 частично выпаривали в вакууме, и полученный в результате осадок отфильтровывали и сушили в вакууме, с получением 1,52 г промежуточного соединения U5 (38% выход, Z-изомер).
Синтез конечного соединения 45
Эту реакцию выполняли в 5 партиях с использованием, соответственно, 0,5 г, 3 раза по 1 г и два раза по 1,45 г промежуточного соединения U5.
Приводится методика для 2 партий по 1,4 5 г.
В атмосфере N2 U5 (1,45 г; 3,48 ммоль) порциями добавляли к раствору уксусной кислоты (193 мл) и воды (19 мл), нагретый при 7 0°С. После полного растворения одной порцией добавляли железо (1,17 г; 2 0,9 ммоль) и смесь перемешивали при 7 0°С в течение 4 часов. 2 партии объединяли, фильтровали горячими через слой целита(r), и целит(r) промывали горячей уксусной кислотой. Полученный в результате фильтрат концентрировали, с получением коричневого остатка, который помещали в МеОН, обрабатывали ультразвуком и нагревали, с получением желтого осадка, который отфильтровывали, с получением фракции 1 в виде желтого твердого вещества. Фракцию 1 помещали в уксусную кислоту (30 мл) и обрабатывали ультразвуком до частичного растворения. Добавляли воду (700 мл) и полученную в результате смесь обрабатывали ультразвуком в течение 1 часа, охлаждали до 0°С (ледяная баня), с получением осадка, который отфильтровывали (стеклообразная фритта № 5), с получением грязно-белого твердого вещества. Твердое вещество помещали в МеОН, смешивали с 3 другими партиями (полученными с 0,5 г и 2
раза по 1 г U5) . Полученную в результате смесь обрабатывали ультразвуком, нагревали и охлаждали до 0°С (ледяная баня) и полученное в результате твердое вещество отфильтровывали (стеклообразная фритта № 4), с получением 3,5 г фракции 2 в виде грязно-белого твердого вещества. Фракцию 2 смешивали с последней партией (полученной с 1 г U5) , добавляли ДМСО (280
мл) и смесь нагревали при 100°С до полного растворения. Полученный в результате раствор фильтровали, и фильтрат добавляли в воду (1,7 л). Полученный в результате осадок перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Осадок отфильтровывали, с получением 4,1 г фракции 3 в виде грязно-белого твердого вещества.
Фракцию 3 помещали в EtOH и обрабатывали ультразвуком при
45°С в течение 2 часов. Полученную в результате смесь непосредственно отфильтровывали (стеклообразная фритта № 4), с получением 3, 63 г фракции 4 в виде грязно-белого твердого вещества. Фракцию 4 помещали в МеОН (180 мл) и смесь перемешивали при 60°С в течение 1 часа. Смесь фильтровали горячей, с получением 3,47 г конечного соединения 45 в виде грязно-белого твердого вещества (54% выход).
Синтез промежуточного соединения W5
Эту реакцию выполняли в 3 партиях с использованием,
Общая схема получения конечных продуктов: способ 22
соответственно, 0,2 г, 1,5 г и 4 г промежуточного соединения V5.
Приводится методика для партии 4 г.
V5 (4 г; 15,8 ммоль), NaOH (2,52 г; 63,1 ммоль) и 3-бутен-1-ол (100 мл) перемешивали при 90°С в течение 24 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, с получением фракции 1 в виде коричневого масла. Фракцию 1 объединяли с двумя другими партиями, с получением фракции 2. Фракцию 2 очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 1540 мкм, 80 г, Grace, сухая загрузка, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/MeOH/NH3 водн. от 97/3/0,03 до 80/20/2), с получением 3,8 8 г промежуточного соединения W5 в виде оранжевого твердого вещества (60% выход).
Синтез промежуточного соединения Х5
HCI (1М в воде) (2 мл) добавляли к перемешиваемому раствору W5 (3,88 г; 13,4 ммоль) в МеОН (160 мл) при к.т.
Полученную в результате смесь перемешивали при 60°С в течение 4 часов. Затем добавляли HCI (ЗМ в воде) (2 мл) и смесь перемешивали при 60°С в течение 64 часов. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, полученный в результате остаток помещали в СН2С1г, отфильтровывали и сушили при пониженном давлении, с получением 2,72 г промежуточного соединения Х5 в виде бледно-коричневого твердого вещества (84% выход). Соединение использовали непосредственно на следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения Y5
W2 (2,34 г; 14,0 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору Х5 (2,62 г; 12,8 ммоль) и К2СО3 (3,9 г; 2 8,1 ммоль) в DMF (40 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 1 часа, и затем при 7 0°С в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до к.т., разбавляли с помощью МеОН и фильтровали через слой целита(r). Полученный в результате фильтрат концентрировали в вакууме, с получением фракции 1. Фракцию 1 очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 80 г, Grace, сухая загрузка, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/MeOH/NH3 водн. от 100/0/0 до 80/20/2), с получением 4,6 г оранжевого твердого вещества. Твердое вещество очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 80 г, Grace, сухая загрузка, подвижная фаза, градиент: гептан/СН2С12/МеОН от 100/0/0 до 0/90/10), с получением 3 г промежуточного соединения Y5 в виде бледно-оранжевого твердого вещества. Соединение использовали как таковое на следующей стадии реакции.
Синтез конечного соединения 52
Реакцию выполняли в 2 партиях по 2 50 мг промежуточного соединения Y5.
Приводится методика для одной партии 250 г.
В колбе Шленка Y5 (2 50 мг; 0,745 ммоль) растворяли в сухом дихлорэтане (250 мл) и раствор дегазировали барботированием N2 через раствор в течение 2 0 минут. Добавляли хлордициклогексилборан (1М в гексане) (150 мкл; 150 мкмоль) и
полученный в результате раствор перемешивали при 7 0°С в течение 1 часа. Добавляли катализатор Граббса-Ховейды 2ого поколения (23 мг; 37,3 мкмоль) и смесь перемешивали при 120°С в течение 16 часов. Снова добавляли катализатор (23 мг; 37,3 мкмоль) и смесь
перемешивали при 12 0°С в течение 4 часов. Снова добавляли катализатор (9 мг; 14,9 мкмоль) и смесь перемешивали при 120°С в течение 3 часов. Добавляли DMT SiliaBond(r) (1,19 г; 0,716 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 16 часов. Две партии смешивали и фильтровали через слой целита(r). Полученный в результате фильтрат концентрировали, с получением коричневого остатка. Остаток очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 40 г, Merck, сухая загрузка, подвижная фаза, градиент: СЩС^/МеОН/ЫНз водн. от 100/0/0 до 80/20/0,2), с получением 155 мг конечного соединения 52 в виде грязно-белого твердого вещества (смесь E/Z, 34% выход). Общая схема получения конечных продуктов: способ 2 3
Синтез промежуточного соединения Аб
К5 (3,0 г; 10,6 ммоль), Z5 (2,5 г; 11,7 ммоль), К2С03 (2,93 г; 21,2 ммоль) и Nal (1,6 г; 10,6 ммоль) в ацетоне (150 мл) перемешивали при 75°С в течение 16 часов. Раствор фильтровали, и фильтрат выпаривали при пониженном давлении, с получением фракции 1. Фракцию 1 очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 90 г, Merck, подвижная фаза, градиент: гептан/СН2С12/Ег.ОАс от 100/0/0 до 0/90/10) . Фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 4,4 г промежуточного соединения Аб (90% выход) в виде желтого твердого вещества.
Синтез промежуточных соединений Вб и Сб
Реакцию выполняли в 2 партиях по 1,5 г и одной партии 1,2 г промежуточного соединения Аб.
Приводится методика для одной партии 1,5 г.
Аб (1,5 г; 3,27 ммоль) добавляли в сухой СН2С12 (900 мл) и полученную в результате смесь дегазировали барботированием N2 через раствор в течение 30 минут. Добавляли катализатор Граббса 2ого поколения (92 мг; 108 мкмоль) одной порцией и смесь перемешивали при к. т. в атмосфере N2 в течение 2 часов. Снова добавляли катализатор (92 мг; 108 мкмоль) одной порцией и смесь перемешивали при к.т. в атмосфере N2 в течение 16 часов. Снова
добавляли катализатор (92 мг; 108 мкмоль) одной порцией и смесь перемешивали при к.т. в атмосфере N2 в течение 4 8 часов.
Смешивали 3 партии, добавляли DMT SiliaBond(r) (12 г; 7,31 ммоль) и смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Реакционную смесь фильтровали через слой целита(r) и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением фракции 1 в виде коричневого твердого вещества. Фракцию 1 очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 70 г, Merck, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/EtOAc от 100/0 до 80/20) . Фракции, содержащие продукт, объединяли и растворитель удаляли в вакууме, с получением фракции 2 и фракции 3. Фракцию 2 растворяли в горячем EtOH/ацетоне. Смеси давали охладиться до к. т. Затем осадок отфильтровывали, промывали (3 раза) 20 мл EtOH и сушили в вакууме, с получением 8 00 мг промежуточного соединения Вб (смесь E/Z) в виде желтого твердого вещества.
Фракцию 3 растворяли в горячем EtOH/ацетоне. Смеси давали охладиться до к. т. Затем осадок отфильтровывали, промывали (3 раза) 15 мл EtOH и сушили в вакууме, с получением 300 мг промежуточного соединения Вб (смесь E/Z) в виде желтого твердого вещества.
Часть промежуточного соединения Вб (100 мг) очищали ахиральной SFC (стационарная фаза: AMINO б мкм 150x21,2 мм, подвижная фаза: С02/МеОН; 75/25), с получением 78 мг промежуточного соединения Сб (Е-изомер) в виде желтого твердого вещества.
Синтез конечного соединения 57
Смесь Вб (150 мг; 348 мкмоль) и железа (117 мг; 2,0 9 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл) и воде (1 мл) перемешивали при 8 0°С в течение 2 часов. Смесь фильтровали через слой целита(r) и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением фракции 1.
Фракцию 1 помещали в DMF. Добавляли имидазол SiliaBond(r) (3,6 г; 4,17 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 16 часов. Раствор фильтровали через слой целита(r). Фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток помещали в уксусную кислоту и воду (30:70). Осадок отфильтровывали и сушили в вакууме, с получением фракции 2. Фракцию 2 помещали в МеОН. Осадок отфильтровывали и сушили в вакууме, с получением фракции 3. Фракцию 3 фильтровали через слой силикагеля (подвижная фаза: DMF) , фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением фракции 4. Фракцию 4 помещали в DMF. Добавляли имидазол SiliaBond(r) (3,6 г; 4,17 ммоль) и перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Раствор фильтровали через слой целита(r). Фильтрат выпаривали в вакууме, с получением фракции 5. Фракцию 5 помещали в уксусную кислоту и воду (70:30) . Осадок отфильтровывали и сушили в вакууме, с получением фракции 6. Фракцию б очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 10 г, Merck, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/MeOH/NH3 водн. от 97/3/0,1 до 80/20/3). Фракции, содержащие продукт, объединяли и растворитель удаляли в вакууме, с получением 35 мг фракции 7 в виде белого твердого вещества. Фракцию 7 помещали в воду. Осадок отфильтровывали, промывали (дважды) с помощью EtOH и Et20, сушили в вакууме, с получением 2 6 мг конечного соединения 57 в виде белого твердого вещества (21% выход).
Синтез промежуточного соединения D6
Смесь Вб (300 мг; 695 мкмоль), катализатора Вилкинсона (64 мг; 69,5 мкмоль) в THF/MeOH (50/50) (60 мл) гидрогенизировали под давлением 7 бар при к.т. в течение 2 0 часов. Смесь фильтровали через слой целита(r), и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением коричневого твердого вещества.
Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 25 г, Merck, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/EtOAc от 100/0 до 80/20) . Фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 3 05 мг промежуточного соединения D (количественный выход) в виде желтого твердого вещества.
NH,
N02 О
i^0ANANx
Синтез конечного соединения 56
Смесь D6 (250 мг; 577 мкмоль) и железа (193 мг; 3,4 6 ммоль) в уксусной кислоте (30 мл) и воде (3 мл) перемешивали при 120°С б часов, затем 2 часа при 140°С. Смесь выпаривали в вакууме, с получением фракции 1. Фракцию 1 помещали в DMF и фильтровали через слой целита(r) и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением фракции 2. Фракцию 2 помещали в АсОН и воду (30:70) . Раствор экстрагировали СН2С12/МеОН (9:1) (дважды) . Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, с получением фракции 3. Фракцию 3 очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 12 г, Grace, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/MeOH/NH3 водн. от 97/3/0,1 до 80/20/3). Фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 90 мг конечного соединения 5 6 (44% выход) в виде белого твердого вещества.
Синтез конечного соединения 60
Смесь С б (70 мг; 162 мкмоль) и железа (54 мг; 97 4 мкмоль) в уксусной кислоте (10 мл) и воде (1 мл) перемешивали при 12 0°С
в течение 5 часов. Смесь выпаривали в вакууме, с получением фракции 1. Фракцию 1 помещали в DMF и фильтровали через слой целита(r), и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением фракции 2. Фракцию 2 помещали в АсОН и воду (30:70) . Осадок отфильтровывали, промывали (дважды) EtOH, затем Et20 и сушили в вакууме, с получением 4 6 мг конечного соединения 60 (8 0% выход) в виде белого твердого вещества.
Синтез промежуточного соединения Еб
Синтезировали промежуточное соединение Еб (смесь Е- и Z-изомеров, 90 мг, 17% выход) с использованием методики, описанной для промежуточных соединений Т5 и U5.
Синтез промежуточного соединения F6
Раствор Еб (90 мг; 216 мкмоль) и катализатора Вилкинсона (20 мг; 21,6 мкмоль) в THF (7 мл) и МеОН (7 мл) дегазировали барботированием N2 в течение 10 минут. Смесь гидрогенизировали под давлением 5 бар при к.т. в течение 16 часов. Смесь дегазировали барботированием N2 в течение 10 минут и добавляли катализатор Вилкинсона (40 мг; 4 3,2 мкмоль). Смесь гидрогенизировали под давлением 10 бар при к. т. в течение 16 часов. Смесь дегазировали барботированием N2 в течение 10 минут и добавляли катализатор Вилкинсона (20 мг; 21,6 мкмоль). Смесь гидрогенизировали под давлением 10 бар при к. т. в течение 16 часов. Смесь фильтровали через целит(r), и фильтрат концентрировали в вакууме, с получением 14 0 мг зеленого масла. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 4 г, Grace, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/EtOAc от 100/0 до 80/20) . Фракции, содержащие продукт, объединяли и растворитель удаляли в вакууме, с получением 60 мг промежуточного соединения F6 (66% выход) в виде желтого масла.
Синтез конечного соединения 58
Смесь F6 (76 мг; 0,182 ммоль) и железа (81 мг; 1,4 5 ммоль) в уксусной кислоте (4,2 мл) и воде (0,21 мл) перемешивали при 80°С в течение б часов, затем при 100°С в течение 16 часов. Смесь фильтровали через целит(r), и фильтрат выпаривали в вакууме. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 25 г, Merck, сухая загрузка, подвижная фаза, градиент: СНгС^/МеОН/ЫНз водн. от 97/3/0,3 до 85/15/1,5), с получением 21 мг конечного соединения 58 (34% выход).
К раствору G6 (21,11 г; 95,0 ммоль) в THF (500 мл) при 0°С каплями добавляли лития-алюминия гидрид бис(ТНТ) (1М в толуоле)
(190 ммоль; 190 мл) . Раствор перемешивали в течение 1 часа 30 минут при 0°С, и затем при к. т. в течение 1 часа 30 минут. Смесь охлаждали до 0°С и гасили осторожным добавлением каплями 7,5 мл воды, затем 7,5 мл водного NaOH (5%) и в конце 15 мл воды. Через 3 0 минут дальнейшего перемешивания смесь фильтровали через слой целита(r). Целит(r) промывали EtOAc, фильтрат выпаривали в вакууме, с получением 19,64 г (99% выход) промежуточного соединения Нб в виде прозрачного желтого масла.
SOCI2 (73 мл; 1,01 моля) каплями добавляли к смеси Нб
(19,6 г; 101 ммоль) в СН2С12 (450 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 часов. Растворитель выпаривали, и остаток сушили азеотропной дистилляцией с толуолом (дважды), с получением 23,6 г коричневого масла. Коричневое масло растворяли в СН2С12, промывали 2x100 мл водного NaOH 5%, сушили над MgS04, фильтровали и выпаривали в вакууме, с получением 2 0,5 г коричневого масла. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (стационарная фаза: SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм 450 г, Matrex), подвижная фаза: градиент от 50% гептана, 50% СН2С12 до 0% гептана, 100% СН2С12), с получением промежуточного соединения 16 (4,77 г; 22% выход) в виде желтого масла.
Синтез промежуточного соединения J6
16 (2,7 г; 12,7 ммоль) добавляли к раствору К5 (3 г; 10,6 ммоль), К2СОз (2,93 г; 21,2 ммоль) и Nal (1,59 г; 10,6 ммоль) в ацетоне (180 мл) перемешивали при 7 0°С в течение 16 часов. Реакционную смесь объединяли с другой партией (из 2 00 мг К5). Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали в вакууме, с
получением желтого твердого вещества. Твердое вещество помещали в CH2CI2. Осадок отфильтровывали и фильтрат концентрировали в вакууме, с получением 4,14 г желтого масла. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 1540 мкм, 120 г, Grace, подвижная фаза, градиент: гептан/EtOAc от 100/0/ до 50/50). Фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 3,8 3 г желтого масла, которое повторно очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 80 г, Grace, подвижная фаза, градиент: СН2С12/ЕГ-ОАС от 100/0 до 95/5) . Фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 2,3 г (44% выход) промежуточного соединения J6 в виде желтого масла.
Синтез промежуточных соединений Кб и L6 Реакцию выполняли в 2 партиях. Типичная методика для одной партии.
Раствор J6 (940 мг; 2,05 ммоль) и хлордициклогексилборан (1М в гексане) (409 мкл; 409 мкмоль) в сухом дихлорэтане (564 мл) перемешивали при 8 0°С и в атмосфере N2 в течение 1 часа. Добавляли катализатор Граббса-Ховейды 2ого поколения (85 мг; 13 6 мкмоль) и смесь перемешивали при 12 0°С в течение 1 часа. Добавляли больше катализатора (85 мг; 13 6 мкмоль) и смесь перемешивали при 12 0°С в течение 1 часа. Снова добавляли катализатор (85 мг; 13 6 мкмоль) и смесь перемешивали при 12 0°С в течение 16 часов. 2 партии объединяли, добавляли диамин
SiliaBond(r) (поглотитель Ru от Silicycle(r)) (2,48 г; 3,97 ммоль) и смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали в вакууме, с получением 1,7 5 г черного масла. Партии объединяли друг с другом (масштаб 0,48 ммоль), с получением 2,03 г черного масла. Черное масло очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 1540 мкм, 50 г, Merck, подвижная фаза, градиент: СЩС^/ЕШАс от 100/0 до 98/2) . Фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 7 0 мг фракции 1 (промежуточного соединения Кб, Z-изомер), 160 мг фракции 2 (смесь промежуточных соединений Кб и L6 (75/25)) и 116 мг фракции 3 (смесь промежуточных соединений Кб и L6 (94/6)). Фракцию 2 очищали ахиральной SFC (стационарная фаза: AMINO б мкм 150x21,2 мм, подвижная фаза: 85% СОг, 15% МеОН), с получением 4 5 мг промежуточного соединения L6 (4% выход, Е-изомер) в виде желтого масла и 17 6 мг промежуточного соединения Кб (16% выход, Z-изомер) в виде белого твердого вещества (общий выход: 21%) .
Синтез конечного соединения 65
Железо (182 мг, 3,26 ммоль) добавляли к раствору Кб (176 мг, 0, 4 08 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл) и воде (480 мкл) . Смесь перемешивали при 7 0°С в течение 1 часа, и затем концентрировали в вакууме досуха. Добавляли DMF, смесь нагревали, фильтровали горячей через целит(r), и целит(r) промывали DMF. Имидазол SiliaBond(r) (5,63 г; 26,6 ммоль) добавляли к фильтрату и смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Смесь фильтровали через целит(r), целит(r) промывали DMF, и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток помещали в уксусную кислоту (1 мл), затем добавляли воду и смесь охлаждали до 0°С, с получением осадка. Осадок отфильтровывали, с получением грязно
белого твердого вещества. Твердое вещество помещали в EtOH и нагревали при 8 0°С. Обеспечивали охлаждение смеси до к.т. и осадок отфильтровывали, с получением 50 мг белого твердого вещества. Твердое вещество сушили в вакууме в течение ночи, и затем растворяли в горячем DMF и добавляли имидазол SiliaBond(r) (2 г; 2,32 ммоль) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Смесь фильтровали через целит(r), целит(r) промывали DMF, и фильтрат концентрировали в вакууме, с получением 4 4 мг конечного соединения 65 (30% выход) в виде белого твердого вещества.
Синтез конечного соединения 75
Получали конечное соединение 7 5 (11 мг, 3 0% выход) с использованием методики, описанной для конечного соединения 65, исходя из 45 мг промежуточного соединения L6.
Общая схема получения конечных продуктов: способ 2 6
Синтез промежуточных соединений N6 и Об
R5 (8,7 г; 4 7,6 ммоль) в DMF (50 мл) каплями добавляли в течение 1 часа к смеси Мб (5 г; 2 6,5 ммоль) и К2СОз (14,6 г; 106 ммоль) в DMF (50 мл) при к. т. и в атмосфере N2. Смесь перемешивали при к. т. в течение 72 часов. Смесь выпаривали и добавляли воду/EtOAc. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали EtOAc (дважды). Объединенные органические слои промывали водой (дважды), сушили над MgS04, фильтровали и сушили в вакууме, с получением коричневого твердого вещества. Твердое вещество
Очищали вместе с другой партией (масштаб 1 ммоль) препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 150 г, Merck, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/EtOAC от 100/0 до 90/10). Фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 2,11 г промежуточного соединения N6 (24% выход) в виде оранжевого твердого вещества и 2,64 г второй фракции (смеси N6 и Об (83/17) ) .
Синтез промежуточного соединения Рб Реакцию выполняли в автоклаве.
Раствор N6 (1,9 г; 5,65 ммоль) в NH3 (7М в изопропаноле) (40 мл) перемешивали при 12 0°С в течение 16 часов. Смесь охлаждали до к.т. и осадок отфильтровывали. Осадок промывали Et20 и сушили в вакууме, с получением 1,42 г промежуточного соединения Рб (79% выход) в виде коричневого твердого вещества.
Синтез промежуточного соединения Q6
Раствор Рб (1,42 г; 4,48 ммоль) и NaH (60% в масле) (412 мг; 10,3 ммоль) в З-бутен-1-оле (29 мл) перемешивали при 90°С в течение 16 часов. Растворитель удаляли в вакууме, с получением коричневого твердого вещества. Твердое вещество очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 50 г, Merck, подвижная фаза: СН2С12/МеОН 95/5). Фракции, содержащие продукт, объединяли, и растворитель удаляли в вакууме, с получением 1,2 6 г коричневого твердого вещества. Твердое вещество помещали в Et20, с получением осадка, осадок отфильтровывали и сушили в вакууме, с получением 92 0 мг промежуточного соединения Q6 (58% выход) в виде белого твердого вещества.
Синтез конечных соединений 7 8 и 7 9
Раствор Q6 (460 мг; 1,31 ммоль) и хлордициклогексилборана (1М в гексане) (2 61 мкл; 2 61 мкмоль) в дихлорэтане (430 мл) перемешивали при 8 0°С в атмосфере N2 в течение 1 часа. Добавляли катализатор Граббса-Ховейды 2ого поколения (82 мг; 131 мкмоль) и смесь перемешивали в закупоренной пробирке при 12 0°С в течение 8 часов. Добавляли хлордициклогексилборан (1М в гексане) (261 мкл; 2 61 мкмоль) и смесь перемешивали при 8 0°С в атмосфере N2 в течение 1 часа. Добавляли катализатор Граббса-Ховейды 2ого поколения (82 мг; 131 мкмоль) и смесь перемешивали при 12 0°С в течение 2 часов. Добавляли DMT SiliaBond(r) (3,48 г; 2,08 ммоль) и смесь перемешивали при к.т. в течение 16 часов. Смесь
фильтровали через целит(r) и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением 640 мг черного твердого вещества. Твердое вещество очищали вместе с другой партией (масштаб 1,3 ммоль) препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 40 г, Grace, подвижная фаза, градиент: СН2С12/МеОН от 100/0 до 90/10) . Фракции, содержащие продукт, объединяли и растворитель удаляли в вакууме, с получением 4 63 мг коричневого твердого вещества. Твердое вещество очищали ахиральной SFC (стационарная
фаза: AMINO 6 мкм 150x21,2 мм, подвижная фаза: 82% С02, 18% МеОН (0,3% iPrNH2) ) , с получением 36 мг конечного соединения 78
(Е-изомер, 4% выход) в виде белого твердого вещества и осадка. Этот осадок очищали препаративной ЖХ (стационарная фаза: сферические гранулы оксида кремния без покрытия 5 мкм 150x30,0 мм, подвижная фаза, градиент: гептан/EtOAc/MeOH (10% NH3) от 71/28/1 до 0/80/20), с получением 10 мг конечного соединения 79
(Z-изомер, 1% выход) в виде белого твердого вещества.
Синтез промежуточного соединения Тб
Смесь V2 (7,04 г; 24,04 ммоль), R6 (5,16 г; 24,04 ммоль), К2СОз (4,98 г; 36,06 ммоль) и Nal (3,6 г; 24,04 ммоль) в ацетоне (240 мл) перемешивали при к. т. в течение 24 часов. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном. Фильтрат выпаривали, с получением 18,7 г. Неочищенное соединение растворяли в CH2CI2. Осадок устраняли фильтрованием, и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение очищали препаративной ЖХ (стационарная фаза: SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм 450 г, Matrex), подвижная фаза: 75% гептан, 25% AcOEt) с выходом 7,4 г промежуточного соединения Тб (65% выход).
Синтез промежуточного соединения U6
Смесь Тб (7,25 г, 15,396 ммоль) в водном растворе NH3 (30%) (110 мл) и THF (110 мл) перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Смесь концентрировали. Остаток помещали в толуол и концентрировали (процесс повторяли дважды). Остаток помещали в CH2CI2, сушили над MgS04, фильтровали, и растворитель выпаривали, с получением 7,5 г промежуточного соединения U6. Неочищенное соединение использовали непосредственно на
Синтез промежуточного соединения V6
При 0°С мета-хлорпероксибензойную кислоту (1,36 г, 5,54 ммоль) в CH2CI2 (25 мл) добавляли к смеси U6 (2,5 г, 5,54 ммоль) в CH2CI2 (25 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 часов. К смеси добавляли водный раствор ЫагЭгОз (2 экв.) . 2 слоя разделяли и водный слой экстрагировали CH2CI2 (дважды). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, с получением 4,0 г промежуточного соединения V6 в виде желтого масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения Хб
Смесь V6 (2,58 г, 5,52 ммоль) и NEt3 (1,53 мл, 11,04 ммоль) в W6 (28 мл) перемешивали при 100°С в течение 2,5 часа. Добавляли воду и смесь экстрагировали CH2CI2. Органический слой промывали 0,5н НС1 (б раз), сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (стационарная фаза: SiOH с зернами неправильной формы 20-45 мкм 450 г, Matrex), подвижная фаза: 98% СН2С1г, 2% iPrOH) с выходом 1,3 г промежуточного соединения Хб (41% выход).
Синтез промежуточного соединения Y6
При 0°С TFA (1,72 мл, 22,47 ммоль) каплями добавляли к
смеси Хб (1,30 г, 2,25 ммоль) в CH2CI2 (25 мл) . Смесь
перемешивали при к.т. в течение 12 часов. При 0°С добавляли
воду. Смесь ощелачивали с помощью К2СОз 10% в воде и
экстрагировали CH2CI2. Органический слой сушили над MgS04,
фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 1,1 г
промежуточного соединения Y6, которое использовали
непосредственно на следующей стадии.
Синтез промежуточного соединения Z6
При 0°С добавляли LiOH моногидрат (289 мг, 6,8 9 ммоль) к смеси Y6 (1,1 г, 2,3 ммоль) в смеси THF/вода (50/50) (10 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 12 часов. При 0°С добавляли воду и смесь подкисляли Зн НС1 до рН 2-3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали с выходом 0,8 5 г промежуточного соединения Z6 (8 0% выход).
Синтез промежуточного соединения А7
Медленно
добавляли
гидрохлорид
1-этил-З- [3-
диметиламинопропил]карбодиимида
(941
мг,
4, 91
ммоль)
гидроксибензотриазол (663 мг, 4,91 ммоль) к смеси Z6 (760 мг, 1,64 ммоль), диизопропилэтиламина (1,41 мл, 8,18 ммоль) в DMF (380 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 24 часов. Растворитель выпаривали досуха. Остаток помещали в CH2CI2 и промывали водой, затем насыщенным раствором соли. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 40 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 99/1/0,1). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха с выходом 0,61 г промежуточного соединения А7 (84% выход).
Синтез конечного соединения 8 0
Железо (1,4 г, 25,09 ммоль) добавляли к смеси А7 (560 мг, 1,25 ммоль) в уксусной кислоте (14,4 мл) и воде (1,47 мл) . Смесь перемешивали при 50°С в течение б часов. Смесь фильтровали через целит(r), промывали уксусной кислотой, затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное соединение растворяли в DMF с 4 г БЮг 60-200 мкм, и полученную в результате суспензию выпаривали досуха и помещали в верхнюю часть 2 5 г хроматографической колонки. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 25 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 95/5/0,5). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, и затем помещали в СН3ОН. Полученный в результате осадок отфильтровывали и сушили, с получением 152 мг конечного соединения 80 в виде свободного основания (33% выход) . Получали хлористоводородную соль с 10 экв. 4н НС1 в диоксане, которую добавляли в суспензию соединения в СН3ОН. Осадок перемешивали в течение 1 часа, фильтровали, затем сушили в вакууме с выходом 109 мг конечного соединение 8 0 в виде соли НС1.
Синтез промежуточного соединения С7
Смесь V2 (7,5 г; 2 5,6 ммоль), В7 (7,25 г; 28,2 ммоль), К2СОз (8,85 г; 64 ммоль) и Nal (3,85 г; 25,6 ммоль) в ацетоне (22 0 мл) перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Смесь фильтровали через слой целита(r), и фильтрат выпаривали в вакууме, с получением желтого масла. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 1540 мкм, 120 г Merck, подвижная фаза, градиент: СНгС^/гептан 70/30) . Фракции, содержащие продукт, объединяли и растворитель удаляли в вакууме. Продукт кристаллизовали из диизопропилового эфира, с получением 11,4 г промежуточного соединения С7 (95% выход).
Синтез промежуточного соединения D7
Раствор С7 (11,3 г; 24,1 ммоль) и NH3 (30% в Н20) (170 мл) в THF (170 мл) перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь растворителей удаляли в вакууме, и остаток помещали в СН2С1г, декантировали, сушили над MgSC> 4 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток помещали в диизопропиловый эфир, осадок отфильтровывали и сушили воздухом, с получением 10,5 г промежуточного соединения D7 (97% выход).
NH2
NH2
сАчмАч.
Синтез промежуточного соединения E7
Метахлорпербензойную кислоту (6,33 г; 26 ммоль) порциями добавляли к раствору D7 (10,5 г; 23,3 ммоль) в CH2CI2 (300 мл) при к. т. Смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Добавляли 10% водный раствор ЫагЭгОз (4 экв.) и водный раствор ЫаНСОз. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали CH2CI2 (дважды). Объединенные органические слои сушили над MgS04, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме, с получением 10,8 г промежуточного соединения Е7 (99% выход).
S*^ N II
NH2 1. J. . NH3
Л V 2- tfa'dcm ' Синтез промежуточного соединения G7
E7 (3,5 г; 7,54 ммоль) порциями добавляли к раствору NEt3 1,15 мл; 8,3 ммоль) и F7 (13,2 г; 75,3 ммоль), и полученную в
результате смесь перемешивали при к. т. в течение 16 часов. Добавляли воду и CH2CI2, органический слой декантировали, сушили над MgSC> 4 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 40 г, Merck, (МеОН/СН2С12, 0,5/99,5), с получением промежуточного соединения G7a (3,6 г) .
вода
К раствору G7a (3,6 г; 6,2 ммоль) в CH2CI2 (120 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (9,5 мл; 41,6 ммоль) при к.т. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 12 часов. Реакционную смесь разбавляли CH2CI2 и обрабатывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз. Слои разделяли, и органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 40 г, Grace, сухая загрузка, подвижная фаза, градиент: CH2Cl2/MeOH/NH4OH 98/2/0,1), с получением 1,7 г промежуточного соединения G7 (57% выход).
чо2
N' "^г" Fe, АсОН
мА..
Синтез промежуточного соединения Н7
Железо (2,8 г; 50,3 ммоль) добавляли к смеси G7 (4 г; 8,4 ммоль) в уксусной кислоте (12 мл) и воде (3 мл). Смесь энергично перемешивали при 50°С в течение 5 часов. Реакционную смесь разбавляли с помощью CH2CI2, фильтровали через слой целита(r) и фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение помещали в смесь СНгС^/МеОН (90/10) и осадок отфильтровывали. Фильтрат очищали препаративной ЖХ (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 80 г, Grace, подвижная фаза СН2С1г/МеОН 98/2) . Продукт кристаллизовали из диизопропилового эфира, с получением 2,1 г промежуточного соединения Н7 (62,5% выход).
Синтез промежуточного соединения 17
При 0°С LiOH моногидрат (157 мг, 3,7 5 ммоль) добавляли к смеси Н7 (0,5 г, 1,25 ммоль) в THF/H20 (50/50) (10 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 12 часов. При 0°С добавляли воду, и смесь подкисляли Зн НС1 до рН 2-3. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 4 60 мг промежуточного соединения 17 (99% выход). Неочищенное соединение использовали непосредственно на следующей стадии.
Синтез конечного соединения 85
З-Диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид (1 г, 1.5.3 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (720 мг, 5,3 ммоль) медленно добавляли к смеси 17 (660 мг, 1,77 ммоль), диизопропилэтиламина (1,5 мл, 8,8 6 ммоль) в DMF (4 00 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 24 часов. Растворитель выпаривали досуха. Остаток помещали в СН2С1г и промывали водой, затем насыщенным раствором соли. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 95/5/0,5). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 4 7 мг конечного соединения 85 (7,5% выход).
Синтез промежуточного соединения J7
При 0°С диизопропилазодикарбоксилат (0,9 мл; 4,541 ммоль) каплями добавляли к смеси Q5 (0,9 г; 3,028 ммоль), Z4 (0,54 г; 3,028 ммоль) и РРп3 (1,19 г; 4,541 ммоль) в THF (45 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 2 часов. Добавляли EtOAc и воду. Слои декантировали. Органический слой промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенное соединение очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 120 г, гептан-EtOAc от 85-15 до 70/30) . Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением промежуточного соединения J7 после кристаллизации из диизопропилового эфира (52 0 мг, 38% выход).
Синтез промежуточного соединения К7
Добавляли катализатор Граббса 2ого поколения (91 мг; 0,107 ммоль) к смеси J7 (0, 488 г; 1, 0 67 ммоль) в CH2CI2 (2 05 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 7 часов. Через 7 часов добавляли DMT SiliaBond(r) (1,42 г; 0,853 ммоль) и смесь перемешивали при к. т. в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через слой целита(r), промывали CH2CI2 и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали вместе с другой партией (масштаб 0,12 ммоль) флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 40 г, СЩС^/МеОН 99, 75/0, 25) . Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением фракции 1; которую затем очищали ахиральной SFC (стационарная фаза: Chiralpak IA 5 мкм 250*20 мм), подвижная фаза: 70% СОг, 30% МеОН), с получением 240 мг промежуточного соединения К7 (Е-изомер, 52% выход).
Синтез конечного соединения 8 6
Железо (0,52 г, 9,315 ммоль) добавляли к смеси К7 (0,2 г, 0, 466 ммоль) в уксусной кислоте (5,4 мл) и воде (550 мкл) . Смесь перемешивали при 50°С в течение 5 часов. Смесь фильтровали через целит(r), промывали АсОН, и затем фильтрат концентрировали. Неочищенное соединение растворяли в DMF с 5 г ЭЮг 60-200 мкм и полученную в результате суспензию выпаривали досуха и помещали в верхнюю часть 2 5 г хроматографической колонки. Выполняли очистку флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 25 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: от 95/5/0,5 до 90/10/0,5). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха. Эту партию кристаллизовали из СНзОН, осадок отфильтровывали, сушили в вакууме при 90°С, с получением конечного соединение 8 6 (68 мг, 41% выход).
Синтез промежуточного соединения М7
Смесь V2 (10,0 г; 34,16 ммоль), L7 (6,85 г; 34,16 ммоль), Nal (5,12 г; 34,16 ммоль) и К2С03 (7, 08 г; 51,24 ммоль) в ацетоне (370 мл) перемешивали при к.т. в течение 24 часов. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное соединение помещали в CH2CI2, осадок (остаточное промежуточное соединение V2) отфильтровывали, промывали минимумом СН2С1г и фильтрат концентрировали, с получением 16,8 г промежуточного соединения
Синтез промежуточного соединения N7
Смесь М7 (16,8 г, 36,77 ммоль) в NH3 в воде (30%) (100 мл) и THF (100 мл) перемешивали при к.т. в течение 1 часа. Смесь разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали насыщенным раствором соли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали, с получением 15,7 г промежуточного соединения N7 (98% выход).
Синтез промежуточного соединения 07
Синтез промежуточного соединения Р7
Смесь 07 (8,0 г, 17,642 ммоль) в аллиловом спирте (90 мл)
При 0°С 3-хлорпероксибензойную кислоту (8,8 г, 35,66 ммоль) в CH2CI2 (100 мл) добавляли к смеси N7 (15,6 г, 35,66 ммоль) в CH2CI2 (100 мл). Смесь перемешивали при к.т. в течение 3 часов. К смеси добавляли водный раствор ЫагЭгОз (2 экв.). Два слоя разделяли и водный слой экстрагировали CH2CI2 (дважды). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, с получением 16 г промежуточного соединения 07 в виде желтого масла (99% выход).
и NEt3 (4,9 мл, 35,285 ммоль) перемешивали при 90°С в течение 1 часа. Смесь выпаривали досуха и очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 120 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 99,5/0,5). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 6,3 г промежуточного соединения Р7 (8 0% выход).
Синтез промежуточных соединений Q7 и R7
Растворитель дегазировали барботированием N2. Реакционную смесь разделяли на 2 равных порции по 750 мг Р7.
Раствор Р7 (750 мг; 1,676 моля) и хлордициклогексилборана (1М в гексане) (335 мкл; 0,335 мкмоль) в сухом дихлорэтане (33 0
мл) перемешивали при 8 0°С и в атмосфере N2 в течение 1 часа. Добавляли 0,033 экв. катализатора Граббса-Ховейды 2ого поколения
(35 мг; 5 6 мкмоль) и смесь перемешивали в закупоренной пробирке при 12 0°С в течение 1 часа. Затем пробирку открывали, снова добавляли 0,033 экв. катализатора (35 мг; 56 мкмоль) и смесь перемешивали в закупоренной пробирке при 12 0°С в течение 1 часа
(последовательность повторяли два раза). Добавляли DMT SiliaBond(r) (1,72 г; 0,8 94 ммоль) к смеси, которую перемешивали при к. т. в течение ночи. Смесь фильтровали через слой целита(r), целит(r) промывали СН2С1г и фильтрат выпаривали. Соединение помещали в СН2С1г, осадок отфильтровывали (0,82 г, фракция 1) . Фильтрат очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 80 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 99,5/0,5/0,5). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха (0,11 г, фракция 2). Фракции 1 и 2 объединяли (0,93 г) и очищали ахиральной SFC (стационарная фаза: AMINO 6 мкм 150x21,2 мм), подвижная фаза: 80% С02, 20% МеОН), с получением 0,25 г промежуточного соединения R7 (18% выход, Е-изомер) и 0,566 г промежуточного соединения Q7 (40% выход, Z-изомер).
Синтез конечного соединения 87
При 0°С Т1С1з (10,2 мл; 11,923 ммоль) каплями добавляли к смеси R7 (2 50 мг; 0,59 6 ммоль) в THF (30 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 4 часов, затем при к. т. в течение ночи. Добавляли воду и смесь ощелачивали с помощью К2СО3. Смесь фильтровали через слой целита(r). Целит(r) промывали EtOAc/CH3OH 70/30. Слои декантировали и органический слой выпаривали досуха. Неочищенное соединение растворяли в DMF, затем добавляли 2 г SiC> 2 и полученную в результате смесь выпаривали досуха. Очистку выполняли флэш-хроматографией на силикагеле (осаждение твердого вещества) (15-40 мкм, 25 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 95/5/0,5). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 2 0 мг конечного соединения 8 7 после кристаллизации из CH3CN (17% выход).
Синтез конечного соединения 8 8
Конечное соединение 8 8 получали из промежуточного соединения Q7 (250 мг, 0,596 ммоль) процедурой, описанной для конечного соединения 87, с выходом 9 мг (4% выход).
Общая схема получения конечных продуктов: способ 31
Синтез промежуточного соединения S7
При 0°С аллиламин (1,46 мл, 19.407 ммоль) каплями добавляли к смеси Q7 (8,0 г, 17, 642 ммоль) и NEt3 (4, 905 мл, 35, 2 85 ммоль) в THF (100 мл) . Смесь перемешивали при к. т. в течение 3 часов. Добавляли воду и EtOAc. Слои декантировали. Смесь экстрагировали EtOAc. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 120 г, CH2CI2/CH3OH/NH4OH: 99,5/0,5). Чистые фракции собирали и выпаривали досуха, с получением 5,8 г промежуточного соединения S7 (74% выход).
NH,
,N02
S7 J .0
NH, U7
Синтез промежуточных соединений Т7 и U7
N Н,
Промежуточные соединения Т7 и U7 синтезировали способом, описанным для промежуточных соединений Q7 и R7.
N Н 2
.NO,
89 90
Синтез конечных соединений 89 и 90
Конечные соединения 8 9 и 90 синтезировали способом, описанным для конечных соединений 8 7 и 88.
Общая схема получения конечных продуктов: способ 32
NH,
-NO,
АЛА
NH-
.NO,
ХАЛА,
Синтез промежуточного соединения V7
Смесь Q7 (2 00 мг, 0,477 ммоль) и катализатора Вилкинсона (88,2 мг, 0,0954 ммоль) в THF/MeOH (50/50) (30 мл) перемешивали при к. т. под давлением Щ 8 бар в течение 2 0 часов. Смесь выпаривали досуха, с получением 0,30 г промежуточного соединения V7, непосредственно используемого на следующей стадии.
Синтез конечного соединения 91
Конечное соединение 91 синтезировали способом, описанным для конечных соединений 8 7 и 88. Способы ЖХМС
Общая методика VDR2 (для методик УЗООхУЗОхх.olp)
ЖХ измерения осуществляли с применением системы UPLC
(сверхэффективной жидкостной хроматографии) Acquity (Waters),
содержащей бинарный насос с дегазатором, автодозатор, диодно-
матричный детектор (DAD) и колонку, как указано в
соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при
температуре 4 0°С. Поток из колонки направляли на МС-детектор.
МС-детектор был оснащен источником ионизации
электрораспылением. Напряжение на капилляре составляло 3 кВ и температуру источника в Quattro (тройном квадрупольном масс-спектрометре от Waters) поддерживали при 130°С. В качестве газа-распылителя применяли азот. Сбор и обработку данных проводили с помощью системы обработки данных MassLynx-Openlynx от Waters-Micromass.
Способ V3014V3001
В дополнение к общей методике VDR2: ВЭЖХ с обращенной фазой выполняли на колонке ТЗ с HSS (высокопрочный диоксид кремния) от Waters (1,8 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,35 мл/мин. Применяли две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) для выполнения условия градиента от 99% А (удерживание в течение 0,5 минуты) до 15% А и 85% В за 4,5 минуты, удерживание в течение 2 мин., с возвращением к начальным условиям через 0,5 мин., удерживание в течение 1,5 минуты. Применяли объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями.
Способ V3018V3001
В дополнение к общей методике VDR2: UPLC с обращенной
фазой проводили на колонке Waters Acquity ВЕН (мостиковый гибрид этилсилоксана/силикагеля) С18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,343 мл/мин. Применяли две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 84,2% А и 15,8% В (удерживание в течение 0,49 минуты) до 10,5% А и 89,5% В за 2,18 минуты, удерживание в течение 1,94 мин., с возвращением к начальным условиям через 0,7 3 мин., удерживание в течение 0,7 3 минуты. Применяли объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями.
387,2
2,47,
V3018V3001
Способ 3
2Н ЯМР (50 0 МГц, ДМСО-о!6) 5 (м.д.) 9,91-10,50 (м, 1Н), 6,91-7,37 (м, 6Н) , 6,576,70 (м, 2Н) , 5,21-5,54 (м, 2Н), 4,82-4,92 (м, 2Н), 4,11-4,30 (м, 2Н), 3,18-3,32 (м, 2Н), 2,032,23 (м, 2Н) , 1,60-1,90 (м, 2Н)
389, 2
390
2,57,
V3018V3001
Способ 4
^ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 (м.д.) 11,25 (с, 1Н), 7,87 (д, J=l, 3 Гц, 1Н) , 7, 72 (с, 1Н), 7,04-7,31 (м, 6Н) , 4,98 (с, 2Н) , 4,414,49 (м, 2Н) , 2,58-2,65
2Н) , 1, 62-1, 72 (м,
2Н) , 1,52-1,61 1,13-1,25 (м, 1,11 (м, 2Н)
2Н) ,
2Н) , 0,99-
354, 1
355
2, 52,
V3014V3001
Способ 5
^ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д.) 10,40-10,67 (м, 1Н), 8,25 (т, J=5,5 Гц, 1Н), 7,74 (с, 1Н), 6,83-7,27
(м, 5Н), 4,79 (с, 2Н), 4,53 (т, J=7,6 Гц, 2Н), 3,36 (с, 2Н), 3,03-3,13
(м, 2Н), 1,66 (с, 2Н)
2,40,
V3014V3001
2,25,
V3018V3001
Способ б
Способ 7
ХЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 (м.д.) 10,42 (уш. с, 1Н), 8,31 (с, 1Н) , 7,59 (т, J=4,80 Гц, 1Н), 7,50 (дд, J=2,02, 8,59 Гц, 1Н), б,83-7,32 (м, 2Н), 6,80 (д, J=8,59 Гц, 1Н) , 4,86 (уш. с, 2Н), 4,67 (уш. с, 2Н), 3,70 (уш. с, 2Н), 3,09 (уш. с, 2Н), 1,721,82 (м, 2Н)
ХН ЯМР (500 МГц, flMCO-d6) 5 (м.д.) 9,53 (с, 1Н), 7,92 (с, 1Н), 7,13-7,22 (м, 2Н), 7,07 (д, J=7,25 Гц, 1Н) , 5,87 (с, 2Н) , 5,68 (д, J=10,09 Гц, 1Н), 5,385,47 (м, 1Н) , 5,20-5,30 (м, 1Н), 4,77 (д, 1Н), 4,66 (д, 1Н), 4,57 (т, 1Н), 4,25-4,36 (м, 1Н),
3.39- 3,47 (м, 1Н) , 3,343,39 (м, 1Н), 3,18-3,30 (м, 2Н), 2,05-2,18 (м, 2Н), 1,70-1,80 (м, 1Н),
1.39- 1,51 (м, 1Н)
1.39-
2,26,
V3018V3001
2,49,
V3014V3001
Способ 8
Способ 9
2Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) (м.д.) 9,64 (уш. с, 1Н), 9,36 (с, 1Н) , 7,08 (т, J=7,70 Гц, 1Н), 6,76 (д, J=7,70 Гц, 1Н), 6,71 (с, 1Н), 6,62 (дд, J=l,73, 7,70 Гц, 1Н), 6,06 (с, 2Н) , 4,71 (с, 2Н) , 3,39 (т, J=6, 46 Гц, 4Н) , 1,761,92 (м, 4Н)
7, 97 7, 68 7, 00 6, 80 6, 39 (м,
LR ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) (м.д.) 10,00 (уш. с, 1Н)
(т, J=5,83 Гц, 1Н),
(т, J=7,72 Гц, 1Н),
(д, J=7, 72 Гц, 1Н) ,
(д, J=7, 72 Гц, 1Н) ,
(с, 2Н) , 4,65-4,94
4Н) ,
4,20 (т, J=7,72 Гц, 2Н), 2,96-3,12 (м, 2Н), 1,50-1,73 (м, 2Н)
2,33,
V3018V3001
2,23,
V3018V3001
Способ 10
Способ 11
гН ЯМР (500 МГц, flMCO-d6) 5 (м.д.) 9,61 (с, 1Н), 7,43 (с, 1Н), 7,15-7,26 (м, 1Н), 7,07-7,14 (м, 1Н), 7,02 (д, J=7,25 Гц, 1Н), 5,92 (с, 2Н) , 5,56 (д, J=10,09 Гц, 1Н), 4,95 (д, J=14,50 Гц, 1Н), 4,47-4,63 (м, 2Н), 4,06-4,23 (м, 1Н), 3,34-3,39 (м, 1Н), 3,22-3,30 (м, 1Н), 2,552,68 (м, 2Н) , 1,67-1,84 (м, 1Н) , 1,46-1,61 (м, 1Н), 1,22-1,45 (м, 5Н), 0,97-1,14 (м, 1Н)
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-de) 5 (м.д.) 9,93 (уш. с, 1Н), 7,92 (с, 1Н), 7,15 (т, J=7,72 Гц, 1Н), 6,81 (д, J=7,72 Гц, 1Н), 6,66-6,77 (м, 1Н) , 6,39 (уш. с, 2Н) , 4,82 (с, 2Н) , 4,57 (т, J=5,99 Гц, 2Н), 4,27 (т, J=6,62 Гц, 2Н), 1,44-1,73 (м, 4Н)
H,N
"ну
° i
343, 1
344
2,12,
V3018V3001
Способ 12
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 (м.д.) 9,93 (уш. с, 1Н), 7,72 (с, 1Н), 7,16 (т, J=7,88 Гц, 1Н), 6,95 (д, J=7,88 Гц, 1Н), 6,78 (дд, J=l,89, 7,88 Гц, 1Н), 6,43 (уш. с, 2Н), 4,82 (с, 2Н), 4,66 (т, J=4,57 Гц, 2Н), 3, 99-4, 07 (м, 2Н) , 3,59 (тд, J=4,57, 12,14 Гц, 4Н)
H,N
342, 1
343
1, 97,
V3018V3001
Способ 8
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 8 (м.д.) 9,75 (уш. с, 1Н), 9,36 (уш. с, 1Н), 7,09 (т, J=7,88 Гц, 1Н), 6,73 (д, J=7,88 Гц, 1Н), 6,68 (с, 1Н), 6,62 (д, J=7,88 Гц, 1Н) , 6,16 (с, 2Н) , 4,73 (с, 2Н), 3,45-3,69 (м, 8Н)
"НУ
340,2
341
2,37,
V3018V3001
Способ 12
2Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 (м.д.) 9,65 (с, 1Н) , 7,48 (с, 1Н), 7,19 (т, J=7,72 Гц, 1Н) , 6,90 (д, J=7,72 Гц, 1Н) , 6,77 (дд, J=l,89, 7,72 Гц, 1Н), 6,10 (т, J=6,31 Гц, 1Н), 5,99 (с, 2Н), 4,75 (с, 2Н), 3,873,99 (м, 2Н), 3,42 (кв, J=6,31 Гц, 2Н) , 1,60-1,78
2Н), 1,39-1,50 (м,
2Н), 1,29-1,39
2Н)
XH ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5
H2N
(м.д.) 9,76-10,25 (м, 1Н),
О /
323, 1
324
2,49,
V3018V3001
Способ 14
8,07 (с, 1Н) , 6,95-7,29 (м, ЗН), 6,44 (с, 2Н), 5,57-5,81 (м, 1Н) , 5,295, 54 (м, 1Н) , 4, 82 (с,
2Н) , 4,66 (уш. с, 2Н) ,
3,20 (д, J=6,31 Гц, 2Н), 2,39 (уш. с, 2Н)
гН ЯМР (500 МГц, flMCO-de) 5
NH2
(м.д.) 9,95 (с, 1Н) , 7,81
(с, 1Н) , 6, 94-7, 39 (м,
337,2
338
2, 65,
V3018V3001
Способ 13
ЗН) , 6,39 (с, 2Н) , 5,145,62 (м, 2Н), 4,78 (с, 2Н), 4,54 (с, 2Н), 1,592,31 (м, 5Н), 1,23 (уш. с, 1Н)
гН ЯМР (500 МГц, flMCO-de) 5
9,92 (уш. с, 1Н), 8,03
NH,
1 L
(уш. с, 1Н), 7,17-7,25 (м,
^ll Vой
r^O-^N^-N
1Н), 7,08-7,16 (м, 2Н),
323, 1
324
2,51,
V3018V3001
Способ 14
6,43 (уш. с, 2Н), 5,685,77 (м, 1Н) , 5,47-5,57 (м, 1Н), 4,81 (с, 2Н), 4,43-4,53 (м, 2Н), 3,283,32 (уш. с, 2Н), 2,342,42 (м, 2Н)
2,13,
V3018V3001
2,19,
V3018V3001
Способ 15
Способ 10
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5
9,62 (с, 1Н), 7,17 (т,
J=8,20 Гц, 1Н), 7,11 (с,
1Н), 6,99 (д, J=8,20 Гц,
1Н), 6,78 (дд, J=l,89,
8,20 Гц, 1Н), 5,91 (с,
2Н) , 5,71 (дт, J=6,50,
15,76 Гц, 1Н), 5,58 (д,
J=9,77 Гц, 1Н), 5,50 (дт,
J=4,89, 15,76 Гц, 1Н),
4,83 (д, J=9,77 Гц, 1Н),
4,48-4,73 (м, 4Н), 4,09-
4,23 (м, 1Н) , 3,38-3,48
(м, 2Н), 1,97-2,08 (м,
2Н) , 1, 62-1, 75 (м, 1Н) ,
1, 29-1, 40 (м, 1Н)
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,64 (с, 1Н) , 7,16-7,23 (м, 1Н), 7,12 (уш. с, 1Н), 7, 01 (д, J=7,25 Гц, 1Н) , 6,80 (дд, J=l,73, 8,04 Гц, 1Н) , 5,95 (с, 2Н) , 5,64 (д, J=9,14 Гц, 1Н), 4,85 (д, J=14,19 Гц, 1Н), 4,524,67 (м, 2Н) , 4,03-4,16 (м, 2Н) , 3,91-4,03 (м, 1Н) , 3, 37-3,50 (м, 2Н) , 1,24-1,68 (м, 8Н)
339, 1
340
2,37,
V3018V3001
Способ 16
гЕ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,99 (уш. с, 1Н) , 7,57 (уш. с, 1Н), 7,21 (т, J=7,70 Гц, 1Н), 6,94 (д, J=7,70 Гц, 1Н), 6,78 (дд, J=l,58, 7,70 Гц, 1Н), 6,49 (уш. с, 2Н), 5,74-5,85 (м, 1Н) , 5, 59-5, 69 (м, 1Н) , 5, 13 (д, J=7,57 Гц, 2Н) , 4,85 (с, 2Н) , 3,90-4,02 (м, 2Н), 2,45-2,50 (м, 2Н)
339, 1
340
2, 32,
V3018V3001
Способ 16
гЕ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,94 (уш. с, 1Н), 7,157,25 (м, 2Н) , 6,92 (д, J=7,57 Гц, 1Н), 6,83 (дд, J=l,73, 7,57 Гц, 1Н), 6,44 (уш. с, 2Н) , 5,76 (дт, J=7,00, 15, 61 Гц, 1Н) , 5,46 (дт, J=5,12, 15,61 Гц, 1Н), 4,76-4,84 (м, 4Н) , 4,05-4,13 (м, 2Н) ,
2,27-2,3!
2Н)
325, 1
326
2,19,
V3018V3001
Способ 16
ХЕ ЯШ (500 МГц, ДМСО-о!б) 5 10,25 (уш. с, 1Н) , 7,91 (уш. с, 1Н), 7,18 (т, J=7,25 Гц, 1Н), 6,87 (д, J=7,25 Гц, 1Н), 6,79 (д, J=7,25 Гц, 1Н), 6,54 (уш. с, 2Н) , 5, 30-5, 48 (м, 2Н) , 5,12 (уш. с, 2Н), 4,81 (уш. с, 2Н), 4,76 (уш. с, 2Н)
325, 1
326
2,15,
V3018V3001
Способ 16
^ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,96 (уш. с, 1Н) , 7,55 (с, 1Н), 7,16 (т, J=7,25 Гц, 1Н), 6,88 (д, J=7,25 Гц, 1Н), 6,80 (дд, J=l,73, 7,25 Гц, 1Н), 6,44 (уш. с, 2Н) , 5,61-5,77 (м, 2Н) , 4,78 (с, 4Н), 4,56 (д, J=4,73 Гц, 2Н)
342, 1
343
1,75,
V3018V3001
Способ 17
4Н)
^ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!б) 5 9,98 (уш. с, 1Н) , 7,73 (т, J=7,57 Гц, 1Н), 7,25 (дд, J=7,57, 13, 24 Гц, 2Н) , 6,37 (уш. с, 2Н) , 4,99 (с, 2Н) , 4,41 (с, 2Н) , 4,21 (т, J=7,25 Гц, 2Н), 3,61 (т, J=5,83 Гц, 2Н), 1,38-
1,56
354, 1
355
2,2,
V3018V3001
Способ 16
^ ЯМР (400 МГц, flMCO-de) 5
9,86 (уш. с, 1Н) , 8,19 (д,
J=2,53 Гц, 1Н), 7,50 (дд,
J=2,02, 8,59 Гц, 1Н), 6,64
(д, J=8,59 Гц, 1Н), 6,14
(с, 2Н) , 5,17-5,25 (м,
2Н) , 4,80 (с, 2Н) , 4,67
(уш. с, 2Н), 3,80-3,89 (м,
2Н), 2,25-2,37 (м, 2Н),
1,83-1,91 (м, 2Н)
339, 1
340
2,37,
V3018V3001
Способ 16
гЯ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,84 (уш. с, 1Н), 7,28 (д, J=l,26 Гц, 1Н), 7,16-7,24 (м, 1Н) , 6,96 (д, J=7,25 Гц, 1Н), 6,76-6,82 (м, 1Н) , 6,46 (уш. с, 2Н) , 5,38-5, 50 (м, 2Н) , 4,74 (с, 2Н), 4,68 (д, J=3,78 Гц, 2Н), 4,57 (т, J=7,57 Гц, 2Н), 2,43-2,53 (м, 2Н)
339, 1
340
2,35,
V3018V3001
Способ 16
2Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,97 (уш. с, 1Н) , 7,18 (т, J=7,25 Гц, 1Н), 7,03 (с, 1Н), 6,93 (д, J=7,25 Гц, 1Н), 6,75 (д, J=7,25 Гц, 1Н) , 6,52 (уш. с, 2Н) , 5,43-5,56 (м, 2Н), 4,79 (с, 2Н) , 4, 56-4, 62 (м,
2Н) ,
2Н), 4,42-4,47 (м, 2,32-2,39 (м, 2Н)
336, 2
337
2,59,
V3018V3001
Способ 7
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!б) 9,57 (с, 1Н) , 7,85 (с, 1Н), 7,12-7,24 (м, 2Н), 7, 08 (д, J=7,25 Гц, 1Н) ,
5, 80-5, 99 (м, 5, 52 (м, 1Н) , (м, 1Н), 4,71 3,46-3, 54 (м, 3,40 (м, 2Н) , (м, 2Н), 1,57
322, 2
323
2,45,
V3018V3001
Способ 7
гЕ ЯШ (400 МГц, ДМС0-о!6) 5 9, 54
(уш. с, 1Н) , 8,19 (уш. с, 1Н) , 6,97-7,24 ЗН), 6,27 (уш. с, 1Н), с, 2Н), 5,56-1Н) , 5,44-5,56 4,75 (с, 2Н),
S (м, 2Н) , 3,14-2Н), 2,12-2,24
351,2
352
2,75,
V3018V3001
Способ 14
1Е ЯШ (500 МГц, ДМС0-о!6) 10,09 (уш. с, 1Н), 7,05 (с, 4Н), 6,37 (уш. с, 2Н)
1Н) , 4,83-
4,96 (м, ЗН) , 3,67-3,72 (м, 2Н) , 3, 12-3,17 (м, 2Н) , 1,91 (уш. с, 2Н) , 1,03-1,19 (м, 4Н)
324, 2
325
2, 52,
V3018V3001
Способ 10
6, 95 6, 09 5, 88 2Н) ,
ХЕ ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!6) 5 9,63 (уш. с, 1Н) , 7,63 (с, 1Н), 7,10-7,20 (м, 1Н), 7, 01 (д, J=7, 58 Гц, 1Н) , (д, J=7, 58 Гц, 1Н) ,
(т, J=6,06 Гц, 1Н) (с, 2Н), 4,77 (с, 3,08-3,18 (м, 2Н) ,
(м,
2Н) , 1,69
(уш. с, 2Н), 1,13-1,31
4Н)
2, 15,
V3018V3001
2,46,
V3018V3001
Способ 18
Способ 16
гН ЯМР (500 МГц, ДМСО-с16) 5 9,73 (уш. с, 1Н), 6,856,93 (м, 2Н) , 6,58 (дд, J=l, 58, 8, 20 Гц, 1Н) , 6,37 (д, J=8,20 Гц, 1Н) , 6,26 (уш. с, 2Н) , 5, 66-5, 74 (м, 1Н), 5,55 (уш. д, J=16,39 Гц, 1Н) , 4, 63-4, 69 (м, 4Н), 4,03 (т, J=5,20 Гц, 2Н), 2,97 (т, J=5,20 Гц, 2Н)
2Н)
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,97 (уш. с, 1Н) , 7,087,21 (м, 2Н) , 6,85 (д, J=7,57 Гц, 1Н), 6,78 (дд, J=l, 89, 7, 57 Гц, 1Н) , 6,39 (уш. с, 2Н), 5,75-5,84 (м, 1Н), 5,51 (дт, J=5,24, 15,68 Гц, 1Н), 4,74-4,79 (м, 2Н), 4,67 (д, J=4,73 Гц, 2Н), 4,21-4,27 (м, 2Н), 2,02-2,08 (м, 2Н),
1,55-1,66
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5
NH2
9,94 (уш. с, 1Н) , 7,29 (д,
J=6,94 Гц, 1Н), 7,17-7,25
2, 82,
V3018V3001
(м, 2Н) , 7,10 (д, J=6,94 Гц, 1Н), 6,41 (уш. с, 2Н),
351,2
352
Способ 14
5,42 (уш. с, 2Н), 4,79 (уш. с, 2Н), 4,16-4,24 (м, 2Н), 3,23 (уш. с, 2Н),
2,03 (уш. с, 2Н), 1,77
(уш. с, 2Н), 1,41 (уш. с,
2Н)
1 ^
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5
11,30 (уш. с, 1Н) , 9,64
HN^N^N 0
327, 1
328
1,81,
V3018V3001
Способ 8
(с, 1Н) , 7,33 (дд, J=6,9, 8,8 Гц, 1Н) , 6,24 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 5,96 (уш. с, ЗН) , 4,71 (с, 2Н) , 3,30-3,48 (м, 4Н), 1,701,94 (м, 4Н)
гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5
9,99 (уш. с, 1Н) , 7,13 (д,
N H 2
J=7,6 Гц, 2Н), 7,02 (д,
351,2
352
2,77,
V3018V3001
Способ 14 Способ 26 (реакция метатезиса)
J=7,6 Гц, 2Н), 6,34 (уш. с, 2Н) , 5,92 (дт, J=7,6, 10,1 Гц, 1Н), 5,45 (дт, J=8,0, 10,1 Гц, 1Н), 4,87
4 Cl
(с, 2Н) , 3,82 (т, J=7,6 Гц, 2Н), 3,21-3,29 (м, 2Н), 1,59-1,77 (м, 2Н), 0, 60-0, 92 (м, 4Н)
340, 1
341
2, 03,
V3018V3001
Способ 21
гЕ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 10,21 (уш. с, 1Н), 8,23 (д, J=5,6 Гц, 1Н), 7,33 (д, J=l,9 Гц, 1Н), 6,81 (дд, J=l, 9, 5, 6 Гц, 1Н) , 6,57 (уш. с, 2Н), 5,51 (дт, J=7,6, 10,7 Гц, 1Н), 5,42 (дт, J=5,6, 10,7 Гц, 1Н), 4,88 (с, 2Н), 4,78 (д, J=5,6 Гц, 2Н), 4,51 (т, J=7,6 Гц, 2Н)
гЕ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,94 (с, 1Н), 7,39 (с,
341, 1
342
2,4,
V3018V3001
Способ 19
J=7,7 Гц,
1Н), 7,20
1Н) , 6, 91 (д, J=7,7 Гц, 1Н), 6,81 (д, J=7,7 Гц, 1Н), 6,45 (уш. с, 2Н), 4,82 (с, 2Н), 4,49 (т, J=6,5 Гц, 2Н), 3,98 (т, J=7,3 Гц, 2Н), 1,62-1,76 (м, 2Н), 1,50-1,61 (м, 2Н), 1,32-1,45 (м, 2Н)
340, 1
341
1, 88,
V3018V3001
Способ 20
ХН ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 9,85 (уш. с, 1Н) , 7,96 (д, J=4,6 Гц, 1Н), 7,55 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 7,21 (дд, J=4,6, 8,1 Гц, 1Н), 6,33 (с, 2Н) , 5,45 (дт, J=7,6, 10,6 Гц, 1Н), 5,30 (дт, J=5, 6, 10,6 Гц, 1Н) , 4,88 (с, 2Н), 4,32-4,55 (м, 4Н), 2,42-2,48 (м, 2Н)
1,94,
V3018V3001
2,06,
V3018V3001
Способ 20
Способ 21
J=6, 5
ХЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,77 (уш. с, 1Н), 7,91 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 7,47 (д, J=8,6 Гц, 1Н), 7,18 (дд, J=4,0, 8,6 Гц, 1Н), б,34 (с, 2Н) , 5,70 (дт, J=6,5, 15,4 Гц, 1Н), 5,24 (дт, J=5,5, 15,4 Гц, 1Н), 4,93 (с, 2Н) , 4,56 (д, J=5,5
Гц, 2Н), 4,45
Гц, 2Н), 2,35-2,42 (м, 2Н)
гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,76 (с, 1Н) , 8,33 (д, J=3, 5 Гц, 1Н) , 7,57 (д, J=7,6 Гц, 1Н), 7,20 (дд, J=3,5, 7,6 Гц, 1Н), 6,83 (д, J=ll,б Гц, 1Н), 6,29 (уш. с, 2Н), 5,79-6,00 (м, 1Н) , 4, 93 (д, J=13, 6 Гц, 1Н), 4,81 (д, J=13,6 Гц, 1Н), 4,45-4,67 (м, 1Н), 3,78-3,98 (м, 1Н), 2,182,36 (м, 1Н), 2,01-2,14 (м, 1Н), 1,54-1,83 (м, 2Н)
2,21,
V3018V3001
2, 53,
V3018V3001
Способ 21
Способ 19
1Е ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 9,85 (уш. с, 1Н), 8,32 (дд, J=l,5, 4,6 Гц, 1Н), 7, 57 (д, J=7, б Гц, 1Н) , 7, 25 (дд, J=4,б, 7,б Гц, 1Н), б,86 (д, J=12,1 Гц, 1Н) , 6,32 (с, 2Н) , 5,705,85 (м, 1Н) , 5,00 (д, J=14,7 Гц, 1Н), 4,80 (д, J=14,7 Гц, 1Н), 3,75 (дт, J=4,б, 11,4 Гц, 1Н), 3,54 (дт, J=4,б, 11,4 Гц, 1Н),
ЗН) , 1,24-
1,93-2,47 (м, 1,65 (м, ЗН)
гЕ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 9,94 (уш. с, 1Н) , 7,137,30 (м, 2Н) , 6,98 (д, J=7, 3 Гц, 1Н) , б,80 (д,
J=6, 3 Гц, 2Н) , 1,56 4Н), 1,42 (м, 4Н)
J=7,б Гц, 1Н) с, 2Н) , 4,80 (т, J=6,8 Гц,
1,85,
V3018V3001
1,99,
V3018V3001
Способ 21
Способ 21
гН ЯМР (400 МГц, ДМСО-с16) 5 9,78 (уш. с, 1Н) , 8,04 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 7,43 (д, J=7,б Гц, 1Н), 7,24 (дд, J=4,0, 7,6 Гц, 1Н), 6,30
(с, 2Н) , 6,12 (дт, J=7,0, 15,7 Гц, 1Н), 5,54 (дт, J=5,0, 15,7 Гц, 1Н), 5,01
2Н)
(с, 2Н) , 4,49 (д, J=5,0 Гц, 2Н), 4,18-4,28 (м,
2Н), 2,23-2,36
ХН ЯМР (500 МГц, DMF) 5 10,14 (уш. с, 1Н), 8,29 (д, J=4, 1 Гц, 1Н) , 7, 58 (д, J=7,9 Гц, 1Н), 7,43 (дд, J=4,1, 7,9 Гц, 1Н), 6,66 (уш. с, 2Н) , 6,10 (дт, J=5,7, 10,4 Гц, 1Н), 5,90 (дт, J=8,4, 10,4 Гц, 1Н) , 5,29 (с, 2Н) , 5,13 (д, J=5,7 Гц, 2Н), 3,964,18 (м, 2Н) , 2,58-2,76 (м, 2Н)
2,09,
V3018V3001
2,44,
V3018V3001
Способ 21
Способ 21
lU ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 10,00 (уш. с, 1Н), 7,58 (т, J=7,б Гц, 1Н), 7,11 (д, J=7,б Гц, 1Н), б,99 (д, J=7,б Гц, 1Н), б,39 (уш. с, 2Н), 5,39 (дт, J=7,2, 10,4 Гц, 1Н), 5,16 (дт, J=7,4, 10,4 Гц, 1Н), 4,95 (с, 2Н) , 3,71 (т, J=7, 4 Гц, 2Н) , 2, 63-2, 71
2Н), 2,25-2,34
2Н) , 1, 96-2, 06 (м, 2Н)
(ДД, 6, 47 (ДТ, 5, 18 1Н) , 4,24 (м,
2Н)
гН ЯМР (500 МГц, flMCO-de) 5 10,22 (уш. с, 1Н) , 7,30 (дд, J=l,9, 7,3 Гц, 1Н), 7,12-7,21 (м, 2Н), 7,10 J=2,2, 7,3 Гц, 1Н), (уш . с, 2 Н) , 5,55 J=4,0, 15,7 Гц, 1Н), (дт, J=7,2, 15,7 Гц, 4,89 (с, 2Н), 4,07-(м, 2Н) , 3,37-3,66
2Н), 2,11-2,33
323, 1
324
2, 52,
V3018V3001
Способ 21
ХН ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 10,02 (уш. с, 1Н), 7,30 (д, J=7, б Гц, 1Н) , 7, 037,23 (м, ЗН), 6,43 (уш. с, 2Н) , 6,16 (дт, J=8,0, 9,6 Гц, 1Н), 5,78 (дт, J=8,0, 9,6 Гц, 1Н), 5,03-5,29 (м, 1Н), 4,73-5,01 (м, 2Н), 4,07-4,38 (м, 1Н), 3,654,02 (м, 1Н), 2,13-2,31 (м, 2Н)
354, 1
355
2,43,
V3018V3001
Способ 21
1Е ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 10,00 (уш. с, 1Н) , 7,60 (т, J=7,7 Гц, 1Н), 6,80 (д, J=7,3 Гц, 1Н), 6,65 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 6,41 (уш. с, 2Н), 5,81 (дт, J=7,7, 15,5 Гц, 1Н), 5,58 (дт, J=5,4, 15,5 Гц, 1Н), 4,87 (с, 2Н), 4,84 (д, J=5,4 Гц, 2Н), 4,10 (т, J=7,7 Гц, 2Н), 1,90-2,07 (м, 2Н) , 1, 48-1, 66 (м, 2Н)
342, 1
343
2, 03,
V3018V3001
Способ 19
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,80 (уш. с, 1Н), 8,03 (д, J=4,6 Гц, 1Н), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 7,24 (дд, J=4,6, 8,1 Гц, 1Н), 6,32 (уш. с, 2Н), 4,98 (с, 2Н), 3,99-4,35 (м, 4Н), 1,501,86 (м, 6Н)
гЯ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5
10,05 (уш. с, 1Н), 8,23
(д, J=6,1 Гц, 1Н), 6,85
NH2 1
(д, J=2,0 Гц, 1Н), б,76
1, 97,
V3018V3001
(дд, J=2, 0, 6, 1 Гц, 1Н) ,
340, 1
341
Способ 21
6,51 (с, 2Н) , 5,50 (дт, J=7,0, 15,7 Гц, 1Н), 5,40 (дт, J=5,6, 15,7 Гц, 1Н), 4,90 (с, 2Н) , 4,59 (д, J=5,6 Гц, 2Н), 4,45-4,56 (м, 2Н), 2,19-2,41 (м, 2Н)
^ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5
8,17 (уш. с, 1Н), 8,07 (с,
0,ЗН), 8,02 (с, 0,7Н),
NH2 1
7,29 (д, J=7,6 Гц, 0,ЗН), 7,10-7,25 (м, 4Н), 7,07
ii i s
(д, J=7, 3 Гц, 0, 7Н) , 5, 63-
2,56,
V3018V3001
5,75 (м, 1Н) , 5,55 (тд,
307, 1
308
Способ 22
J=6,6, 10,7 Гц, 0, ЗН) , 5,43 (тд, J=7,5, 15,3 Гц,
0,7Н), 5,22 (с, 1,4Н),
5,21 (с, 0,6Н), 4,64-4,77
(м, 1,4Н), 4,49-4,60 (м, 0, 6Н) , 3, 30 (д, J=7, 9 Гц, 0, бН) , 3, 18 (д, J=7, 9 Гц, 1,4Н), 2,37-2,45 (м, 2Н)
357, 1
358
2,23,
V3018V3001
Способ 23
ХН ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,95 (уш. с, 1Н) , 7,51 (с, 1Н) , 6,38 (с, ЗН) , 6,30 (с, 1Н), 4,77 (с, 2Н), 4,55 (т, J=6,3 Гц, 2Н), 4,24 (т, J=6,3 Гц, 2Н), 3,66 (с, ЗН), 1,40-1,73 (м, 4Н)
339, 1
340
2,25,
V3018V3001
Способ 16
5, 37
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,98 (уш. с, 1Н) , 7,39 (с, 1Н) , 7, 14 (т, J=7, 6 Гц, 1Н) , 6, 86 (д, J=7,6 Гц, 1Н) , 6,79 (дд, J=l,7, 7,6 Гц, 1Н), 6,43 (уш. с, 2Н),
J=5,5 Гц, 1Н),
4,77 (с, 2Н) , 4,65 (д, J=5,5 Гц, 2Н), 4,59 (с, 2Н), 1,57 (с, ЗН)
309, 1
310
2,17,
V3018V3001
Способ 22
1Н) ,
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8,11 (с, 0,5Н), 8,08 (с, 0,5Н), 8,06 (уш. с, 0,5Н), 7,64 (с, 0,5Н), 7,08-7,24 (м, ЗН) , 7,05 (д, J=7,l Гц, 0,5Н), 6,99 (д, J=7,6 Гц, 0,5Н), 6, 73-6, 86 (м, 1Н) , 5, 70-5, 82 (м, 0,5Н), 5,63 (дт, J=3, б, 16,2 Гц,
0,5Н), 5,28-5,50
5,16 (с, ЗН) , 4,69-4,92 (м, 2Н) , 4,54 (д, J=5,6 Гц, 1Н)
357, 1
358
1,99,
V3018V3001
Способ 23
гЯ ЯМР (400 МГц, ДМСО-с16) 5 9,85 (уш. с, 1Н) , 7,88 (с, 1Н) , б, 85 (д, J=7,б Гц, 1Н) , б, 77 (д, J=7,б Гц, 1Н) , 6,35 (уш. с, 2Н) , 4,77 (с, 2Н), 4,45-4,63
2Н), 4,08-4,34 (м,
2Н) , 3,68 (с, ЗН) , 1,441,72 (м, 4Н)
355, 1
356
1,94,
V3018V3001
Способ 23
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 9,91 (уш. с, 1Н) , 7,84 (уш. с, 1Н), 6,65-6,98 (м, 2Н) , 6,42 (уш. с, 2Н) ,
2Н) , 4,95-
5,21 (м, 2Н) , 4,77-4,90 (м, 2Н), 4,71 (уш. с, 2Н), 3,71 (уш. с, ЗН)
342, 1
343
2,01,
V3018V3001
Способ 24
1Н ЯМР (400 МГц, flMCO-de) 5 9,88 (уш. с, 1Н), 8,24 (д, J=5,6 Гц, 1Н), 7,28 (д, J=l,5 Гц, 1Н), 6,79 (дд, J=l,5, 5,6 Гц, 1Н), б,46 (уш. с, 2Н), 4,92 (с, 2Н), 4,44 (т, J=6,3 Гц, 2Н), 4,05-4,16 (м, 2Н) , 1,621,78 (м, 2Н), 1,49-1,63 (м, 2Н), 1,19-1,37 (м, 2Н)
гЯ ЯМР (500 МГц, ДМСО-с16) 5
9,93 (уш. с, 1Н) , 6,98 (д,
J=7, 2 Гц, 1Н) , 6,91 (т,
NH, 1
J=7,2 Гц, 1Н), б,70 (д,
1 I Vой
) °u
357, 1
358
2,2,
V3018V3001
Способ 23 Способ 25 (реакция метатезиса)
J=7,2 Гц, 1Н), б,31 (уш. с, 2Н) , 4,92 (д, J=13,5 Гц, 1Н), 4,82 (д, J=13,5 Гц, 1Н), 4,47-4,61 (м,
1Н), 4,31-4,46 (м, 1Н),
3, 87-3, 98 (м, 1Н) , 3,83 (с, ЗН) , 3,46-3,61 (м, 1Н), 1,47-1,77 (м, 2Н), 1, 04-1, 36 (м, 2Н)
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5
NH,
9,92 (с, 1Н) , 7,84 (с,
1 I Vой
1Н), 6,86 (д, J=8,0 Гц,
355, 1
356
1,93,
V3018V3001
Способ 23
1Н) , 6, 81 (д, J=8,0 Гц, 1Н) , 6,41 (уш. с, 2Н) , 5, 26-5, 47 (м, 2Н) , 4,995,23 (м, 2Н) , 4,75-4,91 (м, 2Н), 4,71 (с, 2Н), 3,71 (с, ЗН)
2,15,
V3018V3001
2,15,
V3018V3001
Способ 25
Способ 25
1Н) ,
гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,95 (уш. с, 1Н) , 6,807,03 (м, 2Н) , 6,63 (д, J=6,6 Гц, 1Н), 6,33 (уш.
с, 2Н), 5,76-5,90
2Н) ,
5, 04 (дд, J=5,8, 16,0 Гц, 1Н) , 4, 92 (q, J=14, 1 Гц,
2Н), 4,69-4,84
4,44 (д, J=13,6 Гц, 1Н), 3,86-3,98 (м, 1Н), 3,78 (с, ЗН)
1Е ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 9,90 (с, 1Н) , 6,79-6,88
2Н) , 6, 69-6, 77 (м,
1Н) , 5,32-5,46
5, 81
1Н) , 6,31 (с, 2Н) , 5,60-
(м,
2Н) , 5,19-5,31
1Н) , 4, 92 (д, J=13, 6 Гц, 1Н), 4,80 (д, J=13,6 Гц, 1Н), 4,27-4,40 (м, 1Н), 4,10-4,26 (м, 1Н), 3,83 (с, ЗН)
355, 1
356
2, 05,
V3018V3001
Способ 25
2Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,91 (уш. с, 1Н) , 6,99 (д, J=2, 5 Гц, 1Н) , 6,87 (дд, J=2,5, 9, 0 Гц, 1Н) , 6,82 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 6,41 (уш. с, 2Н), 5,62 (дт, J=6, 6, 16,0 Гц, 1Н) , 5, 34 (дт, J=3,5, 16,0 Гц, 1Н), 4,79 (с, 2Н), 4,72 (д, J=3,5 Гц, 2Н), 4,33 (д, J=6,6 Гц, 2Н), 3,68 (с, ЗН)
341, 1
342
2,13,
V3018V3001
Способ 18 Способ 24
4Н)
^ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,79 (уш. с, 1Н), 7,16 (с, 1Н) , 6, 88 (т, J=7,7 Гц, 1Н) , 6,62 (дд, J=l,9, 7,7 Гц, 1Н) , 6,36 (д, J=7,7 Гц, 1Н), 6,25 (уш. с, 2Н), 4,26-4,34 (м, 2Н), 4,164,25 (м, 2Н) , 3,97-4,11 (м, 2Н), 2,90-3,00 (м,
2Н), 1,49-1,70
355, 1
356
2,19,
V3018V3001
Способ 25
(м, 2Н) ,
гЯ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 10,00 (уш. с, 1Н) , 7, 52 (с, 1Н), 6,43 (с, ЗН), 6,35 (с, 1Н) , 5,25-5,50
2Н) , 4,96-5,22
2Н), 4,74-4,85 (м, 4,72 (с, 2Н), 3,68 (с, ЗН)
NH2
1 I Vой
355, 2
356
2,58,
V3018V3001
Способ 23
XH ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,89 (уш. с, 1Н) , 7,55 (уш. с, 1Н), 6,96 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 6,83 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 6,32 (уш. с, 2Н), 4,78 (с, 2Н), 3,97-4,34 (м, 2Н), 3,71 (с, ЗН), 2,56-2,67 (м, 2Н), 1,53-1,82 (м, 2Н), 1,14-1,45 (м, 4Н)
NH2
1 I Vой
353, 1
354
2, 53,
V3018V3001
Способ 23
гН ЯМР (400 МГц, flMCO-d6) 5 9,88 (уш. с, 1Н), 7,79 (уш. с, 1Н), 7,12 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 6,87 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 6,40 (уш. с, 2Н) , 5,66 (дт, J=8,0, 10,7 Гц, 1Н), 5,57 (дт, J=7,1, 10,7 Гц, 1Н), 4,75 (с, 2Н) , 4,46 (т, J=8,0 Гц, 2Н) , 3,74 (с, ЗН) , 3,21 (д, J=7,1 Гц, 2Н), 2,16-2,40 (м, 2Н)
353, 1
354
2,5,
V3018V3001
Способ 23
1Н) , 1Н) , 1Н) , 5, 69 1Н) ,
гН ЯМР (400 МГц, flMCO-d6) 5 9,83 (уш. с, 1Н) , 8,10 (с, 7, 12 (д, J=8, 1 Гц, 6, 81 (д, J=8, 1 Гц, 6,38 (уш. с, 2Н) ,
(дт, J=8,0, 15,7 Гц, 5, 43
(дт, J=7,l, 15,7 Гц, 1Н), 4,76 (с, 2Н), 4,62-4,73 (м, 2Н), 3,73 (с, ЗН), 3,08 (д, J=7,l Гц, 2Н), 2,36-2,46 (м, 2Н)
355, 2
356
2, 53,
V3018V3001
Способ 23
"Н ЯМР (400 МГц, flMCO-d6) 9,82 (уш. с, 1Н) , 7,39 (уш. с, 1Н), 7,03 (д, J=8, 1 Гц, 1Н) , 6,81 (д, J=8,1 Гц, 1Н), 6,30 (уш. с, 2Н) , 4,83 (с, 2Н) , 3,87-4,24 (м, 2Н), 3,64 (с, ЗН), 2,54-2,70 (м, 2Н), 1,52-1,78 (м, 2Н), 1,10-1,36 (м, 4Н)
357, 1
358
2,14,
V3018V3001
Способ 25 Способ 24
ХН ЯМР (400 МГц, flMCO-d6) 5 9,78 (уш. с, 1Н), 7,77 (уш. с, 1Н), 6,84 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 6,77 (дд, J=2,5, 8,5 Гц, 1Н), 6,31 (уш. с, 2Н), 4,85 (с, 2Н), 4,38 (т, J=7,1 Гц, 2Н), 4,07-4,27 (м, 2Н), 3,66 (с, ЗН), 1,57-1,69 (м, 2Н), 1,40-1,56 (м, 2Н)
2,34,
V3018V3001
2,47,
V3018V3001
Способ 16 (реакция метатезиса) Способ 23 (D6 и 56)
Способ 23
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 10,00 (уш. с, 1Н) , 7,91 (с, 1Н), 7,14 (т, J=7,7 Гц, 1Н), 6,79 (д, J=7,7 Гц, 1Н), 6,74 (дд, J=l,9, 7,7 Гц, 1Н), 6,44 (уш. с, 2Н), 4,96 (д, J=13,9 Гц, 1Н), 4,87-4,93 (м, 1Н), 4, 67 (д, J=13,9 Гц, 1Н) , 4,48-4,61 (м, 1Н), 4,014,15 (м, 1Н), 3,78-3,88 (м, 1Н), 1,66-1,79 (м, 1Н), 1,48-1,61 (м, 2Н), 0,85 (д, J=6,9 Гц, ЗН)
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 9,85 (уш. с, 1Н) , 7,92 (д, J=2, 0 Гц, 1Н) , 7, 07 (дд, J=2, 0, 8,1 Гц, 1Н) , 6,86
(д, J=8,1 Гц, 1Н), 6,38
(с, 2Н), 5,71 (дт, J=8,0, 10,7 Гц, 1Н), 5,39 (дт, J=7,6, 10,7 Гц, 1Н), 4,88
(с, 2Н), 4,25-4,39 (м, 2Н) , 3,73 (с, ЗН) , 3,24
(д, J=7,6 Гц, 2Н), 2,252,40 (м, 2Н)
гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5
9,95 (уш. с, 1Н) , 7,61 (д,
N Н2
J=2,0 Гц, 1Н), 7,01 (дд,
J=2,0, 8,1 Гц, 1Н), 6,84
(д, J=8,1 Гц, 1Н), 6,43
353, 1
354
2,48,
V3018V3001
Способ 23
(уш. с, 2Н), 5,56 (дт, J=7,0, 15,7 Гц, 1Н), 5,28
(дт, J=6,6, 15,7 Гц, 1Н),
4,89 (с, 2Н), 4,41-4,59 (м, 2Н), 3,78 (с, ЗН), 3,07 (д, J=6,6 Гц, 2Н), 2,22-2,37 (м, 2Н)
гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5
NH, 1 ^
9,85 (уш. с, 1Н) , 7,81
(уш. с, 1Н), 6,83 (д,
355, 1
356
2,11,
V3018V3001
Способ 25
J=8,6 Гц, 1Н), 6,78 (д, J=8,6 Гц, 1Н), 6,38 (уш. с, 2Н) , 5,29-5,49 (м, 2Н) , 4,95-5,15 (м, 2Н) , 4,82 (уш. с, 2Н), 4,65-4,78 (м, 2Н) , 3,68 (с, ЗН)
NH2
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) ?
N/^> T'N
9,97 (уш. с, 1Н) , 7,17 (с,
1Н) , 6,49 (уш. с, 2Н) ,
355, 1
356
2,16,
V3018V3001
Способ 25
6,42 (с, 1Н) , 6,37 (с, 1Н) , 5,63-5,71 (м, 2Н) , 4,75-4,80 (м, 2Н), 4,73 (с, 2Н) , 4,56 (д, J=4,6 Гц, 2Н), 3,65 (с, ЗН)
327, 1
328
2,33,
V3018V3001
Способ 23 (D6 и 56)
7,24 6, 96 6, 88 6, 34 2Н) ,
(т,
(Д, (т, (с,
4,14-4,30 (м,
1Н) , 1Н) , (уш. 2Н) , 1,77-
2Н) ,
4Н)
1Е ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 9,86 (уш. с, 1Н) , 7,49 (дд, J=l,5, 7,6 Гц, 1Н), J=7,6 Гц, 1Н), J=7, 6 Гц, J=7, 6 Гц, 2Н) , 4,88
325, 1
326
2,19,
V3018V3001
Способ 25
ХН ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6)
9,90 (уш. с, 1Н) , 7,35
(дд, J=l, 5, 7, 6 Гц, 1Н) ,
7,22 (т, J=7,6 Гц, 1Н),
7, 13 (д, J=7,6 Гц, 1Н) ,
6, 89 (т, J=7,6 Гц, 1Н) ,
6,34 (с, 2Н) , 6,04 (дт,
J=8,0, 10,7 Гц, 1Н), 5,66
(дт, J=7,0, 10,7 Гц, 1Н),
4,83 (уш. с, 6Н)
324, 1
325
2, 03,
V3018V3001
Способ 2 6
^ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 8,15 (д, J=4,0 Гц, 1Н), 7,81 (с, 1Н) , 7,41 (д, J=8,0 Гц, 1Н), 7,34 (дд, J=4,0, 8,0 Гц, 1Н), 7,02 (с, 2Н) , 6,3 (дт, J=7,0, 15,7 Гц, 1Н), 5,65 (дт, J=5,1, 15,7 Гц, 1Н), 5,40 (с, 2Н) , 4,42-4,57 (м, 2Н), 4,37 (д, J=5,1 Гц, 2Н), 2,35-2,45 (м, 2Н)
2,11,
V3018V3001
2, 03,
V3018V3001
Способ 2 6
Способ 27
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 8, 15 (д, J=4,1 Гц, 1Н) , 8,11 (с, 1Н), 7,52 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 7,30 (дд, J=4,1, 8,2 Гц, 1Н), 7,14 (уш. с, 2Н), 5,95 (дт, J=7,0, 10,7 Гц, 1Н), 5,80 (дт, J=7,б, 10,7 Гц, 1Н), 5,40 (уш. с, 2Н), 4,59 (д, J=7,0 Гц, 2Н), 4,24 (т, J=7,6 Гц, 2Н), 2,55-2,62 (м, 2Н)
7,72
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!б) 10,48 (уш. с, 1Н) , 7,34-
2Н) , 7,26 (т,
J=7, 3 Гц, 1Н) , 7, 07 (д, J=7,3 Гц, 1Н), 6,98 (с, 1Н) , 6,90 (дд, J=2,5, 7,3 Гц, 1Н) , 4,87 (с, 2Н) , 4,75 (с, 2Н), 4,21-4,14
2Н)
2Н), 3,41-3,50 (м,
2Н), 1,75-1,90
2,31,
V3018V3001
2,45,
V3018V3001
Способ 16
(04) Способ 23 (реакция метатезиса и конечная циклизация)
Способ 18
(D5) Способ 14
(15)
ХН ЯМР (500 МГц, ДМС0-о!6) 5 9,95 (уш. с, 1Н) , 7,12 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 6,83 (д, J=8,2 Гц, 2Н), 6,29 (уш. с, 2Н) , 5,53 (дт, J=6,6, 15,7 Гц, 1Н), 5,27 (дт, J=5,4, 15,7 Гц, 1Н), 4,87 (с, 2Н) , 4,67 (д, J=5,4 Гц, 2Н) , 3,59 (т, J=6,6 Гц, 2Н), 1,90-2,10 (м, 2Н), 1,53-1,71 (м, 2Н)
с, 1Н), 7,12 (с, (т, J=7,2 Гц, (д, J=7,2 Гц, (д, J=7,2 Гц, (уш. с, 2Н), J=5,7, 15,5 Гц, (дт, J=4,9, 15,5 т, J=4,9 т, J=5,7
4Н) ,
2Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,81 (уш. 1Н) , 6,99 1Н) , 6,84 1Н) , 6,76 1Н) , 6,29 5,52 (дт, 1Н) , 5,15 Гц, 1Н), 4,45 Гц, 2Н), 4,04
2,57,
V3018V3001
2,28,
V3018V3001
Способ 24
Способ 18
гЯ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,85 (уш. с, 1Н), 7,23 (с, 1Н) , 6,79-6,91 (м, 2Н) , 6, 42-6, 53 (м, 1Н) , 6,24 (уш. с, 2Н), 4,08 (т, J=6,5 Гц, 2Н) , 3,91-4,01
2Н), 2,85-2,97
1,2!
.кв.
2Н), 2,53-2,60 (м, 2Н), 1,66 (кв, J=6,8 Гц, 2Н),
J=6,8 Гц, 2Н),
1,12 (кв, J=6,8 Гц, 2Н)
^ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 10,09 (уш. с, 1Н) , 7, 42 (с, 1Н) , 7,07 (т, J=7,6 Гц, 1Н), 6,63 -6,77 (м, 2Н) , 6,55 (уш. с, 2Н) , 5,64 (дт, J=4,7, 11,5 Гц, 1Н), 5,54 (дт, J=5,7, 11,5 Гц, 1Н), 4,89-5,12 (м, 2Н), 4,75 (д, J=5,7 Гц,
;т, J=6,8 Гц, ;т, J=6,8 Гц,
2,2,
V3018V3001
2,2,
V3018V3001
Способ 28
Способ 29
7,22
1Н) , 1Н) , 1Н) , 1Н) , 4,79
ХН ЯМР (50 0 МГц, ДМСО-с16) 9,63 (с, 1Н) , 8,04 (с,
J=7,2 Гц,
7,16 (д, J=7,2 Гц, 7,10 (д, J=7,2 Гц, 6,07 (уш. с, 2Н) , (с, 2Н), 4,25-4,31
(м, 2Н) , 3,76-4,19
[с, 2Н) , 3,00
2Н) , 3,63 (с, ЗН)
2Н) , 2Н) ,
ГЦ, ГЦ,
4, 32 3, 97 2, 96 2,22-2,40
ХН ЯМР (50 0 МГц, ДМСО-с16) 5 9,71 (с, 1Н) , 6,86 (т, J=7, 7 Гц, 1Н) , 6,77 (с, 1Н) , 6,62 (дд, J=l,9, 7,7 Гц, 1Н), 6,33 (д, J=7,7 Гц, 1Н), 6,21 (с, 2Н), 5, 63 (дт, J=6,3, 15,4 Гц, 1Н), 5,55 (дт, J=4,4, 15,4 Гц, 1Н), 4,57 (д, J=4,4
;т, J=5,2 0 IT, J=6,0
;т, J=6,o
2Н)
343, 1
344
2,18,
V3018V3001
Способ 30
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5
9,99 (уш. с, 1Н) , 7,63
(дд, J=l,9, 8,2 Гц, 1Н),
7,11 (дд, J=8,2, 11,0 Гц,
1Н) , 6, 70-6, 96 (м, 1Н) ,
6,46 (уш. с, 2Н) , 5,76
(дт, J=6,3, 16,1 Гц, 1Н),
5,65 (дт, J=3,8, 16,1 Гц,
1Н), 4,78-4,85 (м, 2Н),
4,77 (с, 2Н), 4,57 (д,
J=6,3 Гц, 2Н)
343, 1
344
2,18,
V3018V3001
Способ 30
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) (
10,02 (уш. с, 1Н), 8,05
(д, J=8,2 Гц, 1Н) , 7,11
(дд, J=8,2, 11,2 Гц, 1Н) ,
6, 72-6, 93 (м, 1Н) , 6,48
(уш. с, 2Н) , 5, 32-5,50 (м,
2Н) , 4, 98-5, 28 (м, 2Н) ,
4,81-4,97 (м, 2Н) , 4,79
(с, 2Н)
NH2
rArVoH
isr^isr^N.
342, 1
343
2,14,
V3018V3001
Способ 31
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!б) 5 9,66 (уш. с, 1Н) , 8,10 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 7,09 (дд, J=8,2, 11,2 Гц, 1Н), 6,626,90 (м, 1Н) , 6,29 (т, J=6,8 Гц, 1Н), 6,02 (уш. с, 2Н) , 5,12-5,45 (м, 2Н) , 4, 77-5, 06 (м, 2Н) , 4,70 (с, 2Н), 3,52-4,32 (м, 2Н)
342, 1
343
2,13,
V3018V3001
Способ 31
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,64 (уш. с, 1Н), 7,75 (дд, J=l,7, 8,4 Гц, 1Н), 7,07 (дд, J=8,4, 11,2 Гц, 1Н) , 6, 72-6, 93 (м, 1Н) , 6,48 (т, J=5,5 Гц, 1Н), 5,98 (с, 2Н) , 5,68 (дт, J=6,0, 15,8 Гц, 1Н), 5,59 (дт, J=3,8, 15,8 Гц, 1Н), 4,70 (с, 2Н), 4,59 (д, J=6,0 Гц, 2Н) , 3,63-3,86 (м, 2Н)
N^rNw 1 I VOH
345, 1
346
2,21,
V3018V3001
Способ 32
6, 91
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,92 (уш. с, 1Н) , 8,08 (д, J=8,2 Гц, 1Н), 7,09 (дд, J=8,2, 11,7 Гц, 1Н), 6,62-
1Н), 6,41 (уш. с,
2Н) , 4,81 (с, 2Н) , 4,57
(т, J=6,5 Гц, 2Н), 4,35
(т, J=6,8 Гц, 2Н), 1,62-
1,74 (м, 2Н), 1,50-1,60
(м, 2Н)
344, 1
345
2,2,
V3018V3001
Способ 32
ХН ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,58 (с, 1Н) , 8,16 (д, J=8,5 Гц, 1Н), 7,08 (дд, J=8,5, 11,7 Гц, 1Н), 6,596,88 (м, 1Н) , 6, 23 (т, J=6,5 Гц, 1Н), 5,94 (с, 2Н), 4,74 (с, 2Н), 4,29 (т, J=7,3 Гц, 2Н), 3,383,57 (м, 2Н), 1,53-1,72 (м, 2Н), 1,26-1,47 (м, 2Н)
Биологическая активность соединений формулы (I) Описание анализов биологической активности Оценка активности TLR7 и TLR8
Способность соединений активировать TLR7 и TLR8 человека оценивали в анализе репортерного гена с использованием клеток НЕК2 93, временно трансфицированных вектором экспрессии TLR7 или TLR8 и репортерной конструкцией NFKB-IUC. Кратко, клетки НЕК293 выращивали в культуральной среде (DMEM, обогащенная 10% FCS и 2 мМ глутамина). Для трансфекции клеток в 10 см чашках клетки отделяли трипсином-EDTA, трансфицировали смесью плазмиды CMV-TLR7 или TLR8 (7 50 нг), плазмиды NFKB-IUC (37 5 нг) и трансфекционного реагента и инкубировали 4 8 часов при 37°С в увлажненной атмосфере 5% СОг. Далее трансфицированные клетки отслаивали трипсином-EDTA, промывали в PBS и ресуспендировали в среде до плотности 1,б7х105 клеток/мл. Тридцать микролитров клеток затем распределяли в каждую лунку в 3 8 4-луночных планшетах, где уже содержалось 10 мкл соединения в 4% ДМСО. После б часов инкубации при 37°С, 5% СОг, определяли люциферазную активность путем добавления 15 мкл субстрата Steady Lite Plus (Perkin Elmer) в каждую лунку и считывали показания, полученные на устройстве для считывания микропланшетов ViewLux ultraHTS (Perkin Elmer). Кривые зависимости доза-эффект были составлены исходя из измерений, выполненных в четырех повторах. Для каждого соединения определяли значения наиболее низких эффективных концентраций (LEC), определенных как концентрация, которая вызывает эффект, который по меньшей мере в два раза выше допустимого отклонения анализа.
Параллельно подобные серии разведений соединения использовали (10 мкл соединения в 4% ДМСО) с 3 0 мкл на лунку клеток, трансфицированных только репортерной конструкцией NFKB-luc (1,б7х105 клеток/мл). После шести часов инкубации при 37°С, 5% СОг определяли люциферазную активность путем добавления 15 мкл субстрата Steady Lite Plus (Perkin Elmer) в каждую лунку и считывали показания, полученные на устройстве для считывания
микропланшетов ViewLux ultraHTS (Perkin Elmer). Данные обратного скрининга регистрировали как LEC.
Измерение продуцирования интерферона в РВМС человека
Активация TLR7 человека приводит к усиленному образованию
интерферона плазмацитоидными дендритными клетками,
присутствующими в крови человека. Способность соединения
индуцировать выработку интерферона оценивали посредством
определения интерферона в кондиционированных средах из
мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС). Наличие
интерферона в образцах определяли с помощью репортерной
клеточной линии для выявления интерферона, стабильно
экспрессирующей репортерную конструкцию с интерферон-
стимулируемыми реагирующими элементами (ISRE)-luc. Элемент ISRE
с последовательностью GAAACTGAAACT высокочувствителен к
транскрипционному фактору STAT1-STAT2-IRF9, который
активируется при связывании IFN-I с рецептором IFN. Вкратце, РВМС получали из лейкоцитарных пленок от по меньшей мере двух доноров с применением стандартного протокола центрифугирования с фиколлом. Выделенные РВМС ресуспендировали в среде RPMI, дополненной 10% АВ-сывороткой человека, и 2x105 клеток/лунка распределяли в 3 8 4-луночные планшеты, содержащие соединения (общий объем 7 0 мкл) . После инкубации в течение ночи 10 мкл супернатанта переносили в 384-луночные планшеты, содержащие 5х103 клеток HEK-ISREluc/лунка в 30 мкл (высеянных за день до этого) . После 24 часов инкубации активацию элементов ISRE определяли посредством проведения анализа на люциферазную активность с применением 4 0 мкл/на лунку субстрата Steady Lite Plus (Perkin Elmer) и определяли посредством микропланшет-ридера с возможностью визуализации ViewLux ultraHTS (Perkin Elmer). Стимулирующую активность для каждого соединения на клетки HEK-ISRE-luc представили как LEC. LEC в свою очередь свидетельствует о степени активации ISRE при переносе определенного количества среды культивирования РВМС. Рекомбинантный интерферон альфа-2а (Roferon-A) применяли в качестве стандартного контрольного соединения.
Значения LEC для соединений в таблице 2 на TLR8-NFKB-1UC НЕК293 составляли > 10 мкм для соединения б, 20,46 мкм для соединения 39, > 19,4 9 мкм для соединения 40, 11,16 мкм для соединения 41, > 10 мкм для соединения 44, 5,4 8 мкм для соединения 47, > 10 мкм для соединения 63, 0,2 7 мкм для соединения 75 и > 25 мкм для всех остальных соединений.
Значения LEC для соединений в таблице 2 на NFKB-IUC НЕК2 93 превышали наибольшую тестируемую концентрацию (> 10 мкм для соединений б, 44 и 63 и > 25 мкм для всех остальных соединений).
H2N
NHVOH
N X
0,24
0, 044
H2N
"tCr°H
HN /-O
^\ О
> 10
1,73
NH2
X X X ^0H
/ H J
0, 87
0,31
NH2
x X / OH
HN^N^N
2,42
0, 68
H2N
0,30
0, 098
NH2
/ H /
5,26
0, 53
NH, 1
и T VOH O^N^N
0, 050
0, 022
H2N
¦НУн
° i
0,39
0, 043
H2N
- i
14, 69
4,7
H2N
NHV°H
1, 68
0,51
H2N
Atv-
0, 12
0, 016
NH,
0,375
0, 11
NH, 1
0, 067
0, 013
NH2
HO N-^N^N
\ _0
0, 82
0, 056
NH2
HO N-^N^N
2,24
0, 14
NH,
и J \)HOH O^N^N
X о
0,74
0, 15
NH, 1 2
ХХч^он
x о
0,3
0, 05
N H, 1 2
O^N^N
0, 12
0, 054
NH, 1 2
и Г \^он
O^N^N
\ -o
0, 043
0, 012
NH2
1, 05
0, 15
NH2
20,22
3, 61
NH2
0, 027
0, 093
NH2
\ __-o
1,31
0, 11
N H2
0,77
0,26
NH2
0, 81
0, 15
N Н2
XX Уон
0, 87
0,56
NH2
1,36
0, 263
NH2
0, 92
0, 12
NH2
\ ~"\ о
0, 17
0, 11
N H2
9, 81
0, 032
NH2
HNA^N'
1, 68
0,41
N Н 2
12,45
0, 68
NH2
0, 8
0, 12
NH2
0, 53
0, 027
NH2
1,16
0,22
N H2
NXtn\v_
1,3
0, 15
NH2
1, 93
0,48
NH2
II I y-°"
2,28
0,5
NH2
0, 11
0, 034
NH2
X^\\
5, 77
0, 62
NH2
0, 108
0, 01
NH2
6,49
1, 13
N H2
3,43
2,34
NH2
0, 64
2, 04
NH2
b°xV
0,21
0,16
NH2
1, 19
0,24
NH,
I JLVOH
0,74
0, 069
NH2
7, 96
4,8
NH2
l I Vой
0, 029
0, 01
NH2
0, 041
0, 026
NH2
> 25
15, 31
N H2
1 I VОЙ
0, 056
0, 01
NH2
0, 08
0, 021
NH2
0, 63
0, 086
N H2
1 I VОЙ
4,41
1, 92
NH2
1 I VОЙ
0, 088
0, 033
NH2
0A^/
S H
4,7
4, 98
NH2
7,26
2, 03
NH2
N I VOH
vxX
0, 12
0, 031
NH2
JTiVOH
1,49
0,5
NH2
l I Vой
0, 038
0, 03
NH2
1 I Vой
0, 032
0, 018
N H2
1 I Vой
0,0024
0,0028
NH2
1 I Vой
0, 006
0,0057
NH2
1 I Vой
0,2
0, 039
NH2
1 I V0H
Ь1Х]
0, 15
0, 04
NH2
J| Г ^OH cAN^V
\ RS
0, 12
0, 04
NH2
1 I Vой
0, 018
0,0029
NH2
0, 045
0, 01
NH2
1 I Vой
0,1
0, 044
N H2
0,0068
0,0026
N H2
0, 12
0, 064
NH2
jfX4/~°H
0, 53
0,1
NH2
9, 68
> 25
NH2
Ti t\
2,34
1,78
NH2
I IVOH
clcpr
cr -
0, 041
0, 087
NH2
' о
4,59
0, 63
NH2
3, 95
NH2
> 25
2, 66
NH2
NXrNw
0, 14
N H 2
0,47
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение, характеризующееся формулой (I):
NH2
(I)
Y представляет собой ароматическое кольцо или гетероциклическое кольцо, содержащее по меньшей мере азот, необязательно замещенное одним или несколькими заместителями, независимо выбранными из Ci-балкила, С^алкокси, трифторметила или галогена,
Z представляет собой насыщенный или ненасыщенный Ci_ юалкил, необязательно замещенный алкилом или алкилгидроксилом;
или Z представляет собой С1-6алкил-Ш-С (О) -С1-6алкил- или Ci_ 6алкил-Ш-С (О) -Ci-балкил-О-;
или Z представляет собой Ci-юалкил-О-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом,
или Z представляет собой С1-балкил-0-С1-балкил-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом,
или Z представляет собой С1-балкил-0-С1-балкил-0-, где указанный алкил является ненасыщенным или насыщенным и необязательно может быть замещен алкилом или алкилгидроксилом.
2. Соединение по п.1, характеризующееся одной из следующих формул, выбранных из группы
или
3. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение
формулы (I) по п.1 или п. 2 или его фармацевтически приемлемую
соль, сольват или полиморф вместе с одним или несколькими
фармацевтически приемлемыми эксципиентами, разбавителями или
носителями.
4. Применение соединения формулы (I) по п.1 или п. 2 или
его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или полиморфа или фармацевтической композиции по п.З в качестве лекарственного препарата.
5. Применение соединения формулы (I) по п.1 или п. 2 или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или полиморфа или фармацевтической композиции по п.З при лечении нарушения, в которое вовлечена модуляция TLR7.
По доверенности
Общая схема получения конечных продуктов: способ 2 8
Общая схема получения конечных продуктов: способ 2 8
Общая схема получения конечных продуктов: способ 2 8
100
101
Общая схема получения конечных продуктов: способ 2 9
103
103
Общая схема получения конечных продуктов: способ 3 0
Общая схема получения конечных продуктов: способ 3 0
104
104
109
109
109
109
109
109
113
113
113
113
113
113
114
114
117
117
117
117
118
118
119
119
120
120
120
120
120
120
122
122
123
123
124
124
125
125
127
127
131
131
134
134
135
135
136
136
137
137
140
140
141
141
142
142
143
143
147
147
147
147
148
148
166
166
166
166