|
|
больше ...
Термины запроса в документе
Реферат
[RU] Настоящее изобретение относится к твердым формам фидаксомицина, способам получения твердых форм, а также фармацевтическим композициям и составам, содержащим одну или более из твердых форм фидаксомицина, и способам получения композиций и составов. Твердые формы настоящего изобретения обладают полезными свойствами, такими как повышенная надежность и воспроизводимость получения и обработки и стабильность в композициях.
Полный текст патента
(57) Реферат / Формула:
Настоящее изобретение относится к твердым формам фидаксомицина, способам получения твердых форм, а также фармацевтическим композициям и составам, содержащим одну или более из твердых форм фидаксомицина, и способам получения композиций и составов. Твердые формы настоящего изобретения обладают полезными свойствами, такими как повышенная надежность и воспроизводимость получения и обработки и стабильность в композициях.
2420-520209ЕА/011 ТВЕРДЫЕ ФОРМЫ ФИДАКСОМИЦИНА И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
По настоящей заявке испрашивается приоритет на основании предварительных патентных заявок № 61/645214, поданной 10 мая 2012 г.; 61/662542, поданной 21 июня 2012 г.; 61/693445, поданной 27 августа 2012 г.; и 61/718286, поданной 25 октября 2012 г., содержание которых включено в настоящее изобретение с помощью ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ НАСТОЯЩЕЕ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к твердым формам фидаксомицина, способам получения твердых форм и композициям, содержащим одну или более из твердых форм.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Фидаксомицин, 3- ( ( ( б-дезокси-4-0-(3,5-дихлор-2-этил-4, 6-дигидроксибензоил) -2-0-метил-(3-В-маннопиранозил) окси) метил) -12(R)-[(б-дезокси-5-С-метил-4-0-(2-метил-1-оксопропил)-b-D-ликсогексопиранозил)окси]-11(S)-этил-8(S)-гидрокси-18(S)-(1(R)-гидроксиэтил)-9,13,15-триметилоксациклооктадека-З,5,9,13,15-пентаен-2-он, (IUPAC), имеет следующую химическую формулу:
формула I.
Фидаксомицин, первоначально известный как ОРТ 80, PAR 01, PAR 101, R-тиакумицин В, тиакумицин В, липиармайцин, липиармицин и липиармицин A3, представляет собой природный 18-членный макроцикл, который получен в результате ферментации Dactylosporangium aurantiacum подвидов hamdenesis.
Фидаксомицин разрабатывается Optimer Pharmaceuticals в
качестве перорального антибактериального препарата широкого спектра действия. В частности, фидаксомицин проявляет активность против Clostridium difficile.
Фидаксомицин и способ его получения описаны в Journal of Antibiotics, т. XL, no. 5, страницы 575-588 (1987). Несколько твердых форм смесей, содержащих фидаксомицин, а также другие тиакумицины, описаны в US 7378508 и его европейском эквиваленте ЕР 2125850 В1. В частности, описаны две полиморфные формы, названные формой А и формой В "фидаксомицина" (содержащие различные количества структурных аналогов), и заявитель утверждал в процессе рассмотрения, что заявленная гидратированная форма А имеет отличные термодинамические свойства и является более стабильной по сравнению с этилацетатной сольватной формой В. Твердые формы фидаксомицина, описанные в настоящем изобретении, получали способом, который требует от приблизительно 3 до приблизительно 14 дней. В любом случае, полиморфные формы, описанные в данных патентах, состоят из смесей фидаксомицина с вплоть до 15% или более других структурно родственных тиакумицинов.
Полиморфизм, возникновение различных кристаллических форм, представляет собой свойство некоторых молекул и молекулярных комплексов. Одна молекула, подобная фидаксомицину, может давать ряд полиморфов, обладающих различными кристаллическими структурами и физическими свойствами, подобными температуре плавления, термическому поведению (например, измеренному термогравиметрическим анализом - "TGA" или дифференциальной сканирующей калориметрией - "DSC"), порошковой рентгеновской дифрактограмме (PXRD), характерным линиям поглощения в инфракрасной части спектра и твердофазному ЯМР спектру. Один или более из данных способов можно применять для того, чтобы отличить различные полиморфные формы соединения.
Различные твердые формы (включая сольватированные формы) активного фармацевтического ингредиента могут обладать различными свойствами. Данные изменения свойств различных твердых форм и сольватов могут давать основу для улучшения формулирования, например, обеспечивая лучшие характеристики
обработки или манипулирования, изменяя профиль растворения в благоприятном направлении, или увеличивая стабильность (полиморфную, а также химическую стабильность) и длительность хранения. Данные изменения свойств различных твердых форм могут также обеспечивать улучшенные характеристики конечной лекарственной формы, например, если они служат для улучшения биодоступности. Различные твердые формы и сольваты активного фармацевтического ингредиента могут также давать ряд полиморфов или кристаллических форм, которые могут, в свою очередь, давать дополнительные возможности для оценки изменений свойств и характеристик твердого активного фармацевтического ингредиента.
Обнаружение новых полиморфных форм и сольватов фармацевтического продукта может давать материалы, имеющие требуемые технологические свойства, такие как простота манипулирования, простота обработки, низкая гигроскопичность, стабильность при хранении и простота очистки, или требуемые промежуточные кристаллические формы, которые облегчают превращение в другие полиморфные формы. Новые полиморфные формы и сольваты фармацевтически пригодного соединения или его соли могут также давать возможность улучшить эксплуатационные характеристики фармацевтического продукта (профиль растворения, биодоступность и т.д.). Это расширяет набор материалов, которые ученый, занимающийся формулированием, имеет в наличии для оптимизации формулирования, например, обеспечивая продукт с отличными свойствами, например, отличной кристаллической формой, большей кристалличностью или полиморфной стабильностью, которые могут обеспечивать лучшие характеристики обработки или манипулирования, улучшенный профиль растворения или увеличенную длительность хранения. Наконец, новые полиморфные формы можно получить с повышенной надежностью и воспроизводимостью при получении и обработке по сравнению с другими формами, например, с точки зрения кристалличности или полиморфной чистоты.
СУЩНОСТЬ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к твердым формам
фидаксомицина, способам получения твердых форм,
фармацевтическим композициям и составам, содержащим одну или
более из твердых форм фидаксомицина, и способу их получения.
Настоящее изобретение также относится к способу лечения инфекции, вызванной Clostridium difficile, или CDI, также известного как заболевание, вызванное Clostridium difficile, или CDAD, включающему введение терапевтически эффективного количества одной или более из твердых форм фидаксомицина настоящего изобретения, или терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, содержащей одну или более из твердых форм фидаксомицина настоящего изобретения, и необязательно, по меньшей мере, одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, нуждающемуся в лечении пациенту.
Настоящее изобретение также относится к применению
указанных твердых форм фидаксомицина в получении
фармацевтических композиций и составов. Таким образом,
настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции,
содержащей одну или более из твердых форм фидаксомицина
настоящего изобретения. Данная фармацевтическая композиция
может дополнительно содержать, по меньшей мере, одно
фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество,
посредством этого образуя фармацевтический состав, который можно, например, вводить нуждающимся в лечении пациентам.
Настоящее изобретение включает способ получения приведенных выше фармацевтических композиций. Способ включает смешение одной или более из твердых форм фидаксомицина настоящего изобретения или фармацевтической композиции, содержащей указанные одну или более из твердых форм фидаксомицина, по меньшей мере, с одним фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.
Твердые формы, как определено в настоящем изобретении, а также фармацевтические композиции и составы фидаксомицина, можно применять в качестве лекарственных средств, в частности для лечения инфекции, вызванной Clostridium difficile, или CDI, также известного как заболевание, вызванное Clostridium difficile, или CDAD.
Настоящее изобретение также относится к применению твердых форм фидаксомицина, или, по меньшей мере, одной из приведенных
выше фармацевтических композиций или составов настоящего изобретения в получении лекарственного средства для лечения инфекции, вызванной Clostridium difficile, или CDI, также известного как заболевание, вызванное Clostridium difficile, или CDAD.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На Фиг. 1 показана характерная порошковая рентгеновская дифрактограмма для кристаллической формы Z фидаксомицина (модификация ацетоном).
На Фиг. 2 показана характерная кривая ДСК для кристаллической формы Z фидаксомицина (модификация ацетоном).
На Фиг. 3 показана характерная кривая ТГА для кристаллической формы Z фидаксомицина (модификация ацетоном).
На Фиг. 4 показана характерная порошковая рентгеновская дифрактограмма для кристаллической формы Z1 фидаксомицина.
На Фиг. 5 показана характерная кривая ДСК для кристаллической формы Z1 фидаксомицина.
На Фиг. б показана характерная кривая ТГА для кристаллической формы Z1 фидаксомицина.
На Фиг. 7 показана характерная порошковая рентгеновская дифрактограмма для кристаллической формы С фидаксомицина.
На Фиг. 8 показана характерная порошковая рентгеновская дифрактограмма для кристаллической формы Z фидаксомицина (модификация ацетонитрилом).
На Фиг. 9 показан характерный ИК-спектр с Фурье-преобразованием формы Z1 фидаксомицина.
На Фиг. 10 показан характерный твердофазный С13 ЯМР спектр формы Z1 фидаксомицина.
На Фиг. 11 показан характерный спектр Рамана формы Z1 фидаксомицина.
На Фиг. 12 показана характерная порошковая рентгеновская дифрактограмма для кристаллической формы Z1 фидаксомицина (измененный масштаб).
На Фиг. 13 показан характерный спектр Рамана формы Z1 фидаксомицина (измененный масштаб).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к твердым формам фидаксомицина, способам получения твердых форм и композиций, содержащих одну или более из твердых форм, и способу их получения.
Известные твердые формы фидаксомицина, названные формой А и формой В, описаны в виде смесей, содержащих фидаксомицин, а также вплоть до 15% или более смеси других, структурно родственных тиакумицинов. Настоящее изобретение относится к твердым формам фидаксомицина, которые являются не только полиморфно чистыми, но также химически чистыми.
В зависимости от того, с какими другими твердыми формами
их смешивают, твердые формы настоящего изобретения могут
обладать полезными свойствами, выбранными, по меньшей мере, из
одного из: химической или полиморфной чистоты, повышенной
кристалличности, растворимости, скорости растворения,
биодоступности, морфологии или структуры кристаллов, удельной
поверхности и пикнометрической плотности, стабильности - такой
как химическая стабильность, а также термической и механической
стабильности относительно полиморфного превращения,
стабильности к разрушению и/или стабильности при хранении,
низкой степени гигроскопичности, низкого содержания остаточных
растворителей и улучшенных эксплуатационных и
транспортировочных характеристик, таких как прессуемость, текучесть и отношение насыпной плотности к плотности утряски.
Твердые формы фидаксомицина включают кристаллические формы фидаксомицина. Как применяют в настоящем изобретении, твердые формы, кристаллические формы, полиморфы и полиморфные формы применяют взаимозаменяемо.
Кристаллическую форму можно рассматривать в настоящем изобретении как характеризующуюся графическими данными "по существу как показано на" фигуре. Данные включают, например, порошковые рентгеновские дифрактограммы и твердофазные ЯМР спектры. Графические данные потенциально дают дополнительную техническую информацию, дополнительно определяя соответствующую твердофазную форму, которую нельзя заведомо или легко описать
со ссылкой на числовые величины для положений пиков и/или относительных интенсивностей. В любом случае, специалисту в данной области техники ясно, что данные графические представления данных могут подвергаться небольшим изменениям, например, относительных интенсивностей пиков и положений пиков из-за факторов, таких как изменения характеристик прибора и изменения концентрации образца и чистоты, которые являются хорошо известными специалисту в данной области техники. Тем не менее, специалист в данной области техники легко сможет сравнить графические данные на фигурах в настоящем изобретении с графическими данными, полученными для неизвестной кристаллической формы и подтвердить, характеризуют ли два набора графических данных одну кристаллическую форму или две различные кристаллические формы.
Как применяют в настоящем изобретении, если не указано иначе, измерения порошковой рентгеновской дифракции осуществляют, применяя длину волны Ка излучения меди 1,5406 А.
Как применяют в настоящем изобретении, выражение "разница химических сдвигов" относится к разнице химических сдвигов между эталонным сигналом и другим сигналом в одном ЯМР спектре. Данная разница химических сдвигов служит для предоставления дополнительного аналитического измерения для вещества, например, кристаллической формы фидаксомицина настоящего изобретения, который будет компенсировать явление, которое может возникать при ЯМР спектроскопии, при котором наблюдают сдвиг в твердофазном ЯМР спектре. Данный сдвиг ЯМР пиков может возникать, например, как результат изменений в измерительном приборе, температуры или способа калибровки, применяемого в ЯМР анализе. Данный сдвиг в твердофазном ЯМР спектре, имеющем резонансы химических сдвигов в определенных положениях, является таким, что даже если отдельные химические сдвиги сигналов переместились, все пики в спектре перемещаются на такую же величину, так что разница между химическим сдвигами одного и другого сигнала сохраняется. Таким образом, данный сдвиг можно применять в качестве надежной характеристики анализируемого материала.
В настоящей патентной заявке разницу химических сдвигов рассчитывали вычитанием величины химического сдвига сигнала, имеющего наименьший химический сдвиг (эталонный сигнал) в твердофазном 13С ЯМР спектре в диапазоне 100-18 0 ррт из величины химического сдвига другого (наблюдаемого) сигнала в том же 13С ЯМР спектре в диапазоне О - 180 ррт.
Твердофазную форму можно рассматривать в настоящем изобретении как характеризующуюся данными, выбранными из двух или более различных групп данных, например, порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащий группу специфических пиков; или порошковой рентгеновской дифрактограммой, как показано на фигуре, изображающей дифрактограмму, или "их комбинацией (или "их комбинациями", или "любой их комбинацией", или "комбинацией данных"). Данные выражения, например, "любая их комбинация", предполагают, что специалист в данной области техники может охарактеризовать кристаллическую форму, применяя любую комбинацию перечисленных характеристических аналитических данных. Например, специалист в данной области техники может охарактеризовать кристаллическую форму, применяя группу, например, четырех или пяти характеристичных пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы, и дополнить данные характеристики одной или более дополнительными характеристиками, наблюдаемыми на порошковой рентгеновской дифрактограмме, например, дополнительным пиком, формой характеристического пика, интенсивностью пика или даже отсутствием пика в определенном положении на порошковой рентгеновской дифрактограмме. Альтернативно, специалист в данной области техники может, в некоторых случаях, охарактеризовать кристаллическую форму, применяя группу, например, четырех или пяти характеристических пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы, и дополнить данные характеристические данные одной или более дополнительными характеристиками, наблюдаемыми, применяя другой аналитический способ, например, применяя один или более характеристических пиков на твердофазном ЯМР спектре, или характеристиками ДСК термограммы кристаллической формы, которую охарактеризовывают.
Кристаллическую форму (или полиморф) можно рассматривать в
настоящем изобретении как чистую, в высокой степени чистую или
по существу несодержащую любые другие кристаллические (или
полиморфные) формы. Как применяют в настоящем изобретении в
данном контексте, подразумевается, что выражение "по существу
несодержащая любые другие формы" обозначает то, что
кристаллическая форма содержит 2 0% или меньше, 10% или меньше,
5% или меньше, 2% или меньше, или 1% или меньше любых других
форм заявленного соединения, как измерено, например, порошковой
рентгеновской дифракцией. Таким образом, полиморфы
фидаксомицина, описанные в настоящем изобретении как по
существу несодержащие других полиморфных форм, следует понимать
как содержащие больше чем 80% (w/w), больше чем 90% (w/w),
больше чем 95% (w/w) , больше чем 98% (w/w) или больше чем 99%
(w/w) заявленной полиморфной формы фидаксомицина.
Соответственно, в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения, описанные полиморфы фидаксомицина могут содержать 1%-20% (w/w), 5%-20% (w/w) или 5%-10% (w/w) одной или более других кристаллических форм фидаксомицина.
Как применяют в настоящем изобретении, выражение "комнатная температура" относится к температуре от приблизительно 2 0°С до приблизительно 30°С. Обычно, комнатная температура находится в диапазоне от приблизительно 20°С до приблизительно 25°С.
Как применяют в настоящем изобретении, термин "в течение ночи" относится к периоду от приблизительно 15 до приблизительно 2 0 часов, обычно от приблизительно 16 до приблизительно 2 0 часов.
Как применяют в настоящем изобретении, выражение "влажная кристаллическая форма" относится к полиморфу, который не высушен, применяя любые общепринятые способы удаления остаточного растворителя. Данные общепринятые способы включают, но не ограничиваются, упаривание, вакуумную сушку, сушку в сушильном шкафу, сушку в потоке азота и т.д.
Как применяют в настоящем изобретении, выражение "сухая кристаллическая форма" относится к полиморфу, который высушен,
применяя любые общепринятые способы удаления остаточного растворителя. Данные общепринятые способы включают, но не ограничиваются, упаривание, вакуумную сушку, сушку в сушильном шкафу, сушку в потоке азота и т.д.
Как применяют в настоящем изобретении, и если не указано иначе, термин "безводный" относительно кристаллического фидаксомицина относится к кристаллическому фидаксомицину, который содержит не более 1% (w/w) или воды или органических растворителей, как измерено ТГА. Безводная форма твердых форм фидаксомицина настоящего изобретения относится к форме, которая не содержит кристаллической воды (или других растворителей) в определенном, стехиометрическом количестве в кристалле.
Как применяют в настоящем изобретении и если не указано иначе, термин "негигроскопичный" относительно кристаллического фидаксомицина относится к меньше чем 0,5% и предпочтительно меньше чем 0,2% (w/w) поглощению воды, например, воды из атмосферы, кристаллическим фидаксомицином, как определено согласно Ph.Eur. часть 5.11 ("гигроскопичность").
Термин "сольват", как применяют в настоящем изобретении и
если не указано иначе, относится к кристаллической форме,
которая включает растворитель в кристаллическую структуру.
Когда растворитель представляет собой воду, сольват часто
называют "гидратом". Растворитель в сольвате может
присутствовать или в стехиометрическом или в
нестехиометрическом количестве.
Как применяют в настоящем изобретении, и если не указано иначе, термин "порошок" или "порошкообразный" относится к твердому соединению в виде частиц или гранул, где частицы или гранулы можно пересыпать. Предпочтительно, порошки представляют собой твердые, свободные и сухие частицы.
Как применяют в настоящем изобретении, и если не указано иначе, термин "полиморфная стабильность" относительно кристаллических форм фидаксомицина обозначает то, что имеется меньше чем 20%, 10%, 5%, 1%, 0,5% или 0,1% превращения кристаллического фидаксомицина в любую другую твердофазную форму фидаксомицина в конкретных условиях, как измерено
порошковой рентгеновской дифракцией. В некоторых вариантах осуществления, превращение составляет 0,5%-20%, 0,5%-10% или 0,5%-5% или 0,5%-1% или 0,1%-1% или 0,1%-0,5%.
Как применяют в настоящем изобретении, и если не указано иначе, термин "фидаксомицин" относится к по существу химически чистой молекуле формулы I. По существу чистая, в контексте настоящего изобретения, обозначает химическую чистоту, по меньшей мере, 95%, > 98%, > 98,5% или даже > 99%, как измерено ВЭЖХ (% площади, детектирование при 230 нм).
ВЭЖХ аналитические способы обычно разрабатывают для применения УФ поглощения при указанной длине волны для регистрации наличия и количества соединения в образце, проходящем через детектор в любой указанный момент времени. Например, вывод первичной информации любого ВЭЖХ прогона со стандартным оборудованием будет представлять собой процент площади соответствующего пика на хроматограмме с УФ детекцией, т.е., площадь под кривой (AUC). Особенно при отсутствии любой подробной информации об удельном коэффициенте экстинкции указанного соединения, величины площади в процентах, полученные ВЭЖХ, обычно являются соразмерными с величиной "% по весу", т.е. без применения любого поправочного коэффициента. Например, величина AUC в процентах для одного пика (элюирующегося при определенном времени удерживания) будет, затем, соответствовать доли в процентах по весу соединения в образце.
Как применяют в настоящем изобретении, термин "эталонный стандарт" относится к соединению, которое можно применять и для количественного и для качественного анализа активного фармацевтического ингредиента. Например, время удерживания соединения по ВЭЖХ дает возможность установки относительного времени удерживания, таким образом, делая возможным качественный анализ. Концентрация соединения в растворе перед введением в колонку для ВЭЖХ дает возможность сравнения площадей под пиками на хроматограмме ВЭЖХ, таким образом, делая возможным количественный анализ.
Хотя некоторые из эталонных стандартов, которые известны в данной области техники, описаны в общих терминах до этого
момента, специалисту в данной области техники также ясно, что показание детектора может представлять собой, например, высоты пиков или интегрированные площади пиков полученной хроматограммы, например, УФ детектированием или детектированием показателя преломления элюента ВЭЖХ системы или, например, детектированием ионизацией в пламени или детектированием теплопроводимости элюента газового хроматографа, или другим показанием детектора, например, УФ поглощением пятен на флуоресцентной ТСХ пластинке. Положение эталонного стандарта можно применять для расчета относительного времени удерживания для соединения и других примесей.
Как применяют в настоящем изобретении, и если не указано иначе, термин 'vvm' относится к объему воздуха (нм3/час), который достигает выброженного полуфабриката (кг - объем) в течение (минут) процесса ферментации, например, 0,5 vvm обозначает то, что аэрация в процессе ферментации, в котором выброженный полуфабрикат составляет 100 кг, составляет 50 нл/мин (3 нм3/час) .
Настоящее изобретение включает кристаллическую форму
фидаксомицина, обозначенную как форма Z. Форму Z можно
охарактеризовать данными, выбранными из одной или более
следующих характеристик: порошковая рентгеновская
дифрактограмма, содержащая пики при: 4,2, 7,7, 8,2, 11,2 и 15,6 градуса два тета ±0,2 градуса два тета; порошковая рентгеновская дифрактограмма, по существу как показано на фигуре 1; и сочетаниями этих данных.
Альтернативно, форму Z можно охарактеризовать данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: порошковая рентгеновская дифрактограмма, содержащая пики при: 4,1, 9,7, 10,2, 11,2 и 15,6 градуса два тета ±0,2 градуса два тета; порошковая рентгеновская дифрактограмма, по существу как показано на фигуре 8; и сочетаниями этих данных.
Форму Z можно дополнительно охарактеризовать данными, выбранными из: порошковой рентгеновской дифрактограммы, содержащей пики при 4,2, 7,7, 8,2, 11,2 и 15,6 градуса два тета ±0,2 градуса два тета и также содержащей один, два, три или
четыре дополнительных пика, выбранные из пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы при: 9,8, 10,3, 14,3 и 18,8 градуса два тета ±0,2 градуса два тета; ДСК термограммы, по существу как показано на фигуре 2; ДСК эндотермического пика при приблизительно 115-120°С и начала плавления по ДСК при приблизительно 1бО-1б5°С; ТГА термограммы, по существу как показано на фигуре 3; и сочетаний этих данных. Описанные выше ДСК и ТГА данные измеряли, когда форму Z получали из ацетона.
Альтернативно, форму Z можно охарактеризовать данными, выбранными из: порошковой рентгеновской дифрактограммы, содержащей пики при 4,1, 9,7, 10,2, 11,2 и 15,6 градуса два тета ±0,2 градуса два тета ±0,2 градуса два тета и также содержащей любые один, два или три дополнительных пика, выбранные из пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы при: 7,8, 14,1 и 18,7 градуса два тета ±0,2 градуса два тета.
Форму Z можно охарактеризовать любой комбинацией приведенных выше данных.
Форма Z может представлять собой сольват ацетона или сольват ацетонитрила.
Предпочтительно, форма Z фидаксомицина содержит фидаксомицин с химической чистотой, по меньшей мере, 95%, или даже, по меньшей мере, 98% (ВЭЖХ).
Как обсуждалось выше, форма Z фидаксомицина обладает полезными свойствами. В частности, кристаллическая форма Z фидаксомицина настоящего изобретения, по-видимому, является хорошим промежуточным соединением для получения формы Z1, которая сама обладает полезными свойствами, как дополнительно описано в настоящем изобретении.
Настоящее изобретение также включает кристаллическую форму фидаксомицина, обозначенную как форма Z1.
Настоящее изобретение включает кристаллическую форму фидаксомицина, обозначенную как форма Z1. Форму Z1 можно охарактеризовать данными, выбранными из: порошковой рентгеновской дифрактограммы, содержащей пики при: 4,3, 8,2 и 11,2±0,2 градуса два тета; порошковой рентгеновской дифрактограммы, по существу как показано на фигуре 4;
твердофазного 13С ЯМР спектра, содержащего характеристические пики при 163,8, 129,1, 108,6, 94,4 и 60,3±0,2 ррт; твердофазного 13С ЯМР спектра, имеющего разницу химических сдвигов между указанными характеристическими пиками и пиком при 100,2±0,2 ррт 63, 6, 28, 9, 8, 4, -5, 8 и -39,9±0,1 ррт, соответственно; твердофазного 13С ЯМР спектра, по существу как показано на фигуре 10; спектра Рамана, содержащего характеристические пики при 2993, 2974, 1749, 1721, 1649, 1594, 1572, 1451, 1257 и 587±4 см-1; спектра Рамана, по существу как показано на фигуре 11; и их комбинациями.
Форму Z1 можно охарактеризовать порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащей пики при 4,3, 8,2 и 11,2 градуса два тета ±0,2 градуса два тета и также содержащей любой один, два, три, четыре или пять дополнительных пика, выбранные из пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы при: 9,7, 10,2, 15,6, 18,8 и 19,0 градуса два тета ±0,2 градуса два тета.
Форму Z1 можно дополнительно охарактеризовать данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: твердофазный 13С ЯМР спектр, содержащий характеристические пики при 163, 8, 129, 1, 108, 6, 94, 4 и 60,3±0,2 ррт; твердофазный 13С ЯМР спектр, содержащий разницы химических сдвигов между указанными характеристическими пиками и пиком при 100,2±0,2 ррт 63,6, 28,9, 8,4, -5,8 и -39,9±0,1 ррт, соответственно; твердофазный 13С ЯМР спектр, по существу как показано на фигуре 10; и сочетаниями этих данных.
Форму Z1 можно дополнительно охарактеризовать данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: спектр Рамана, содержащий характеристические пики при 2993, 2974, 1749, 1721, 1649, 1594, 1572, 1451, 1257 и 587±4 см-1; спектр Рамана, по существу как показано на фигуре 11; и их сочетаниями.
Форму Z1 можно дополнительно охарактеризовать данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: ДСК термограмма, по существу как показано на фигуре 5; ДСК эндотермический пик при приблизительно 127-130°С и начало плавления по ДСК при приблизительно 164°С; ТГА термограмма, по
существу как показано на фигуре б; и сочетаниями этих данных.
Форму Z1 можно дополнительно охарактеризовать данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: ИК-спектр с Фурье-преобразованием, содержащий характеристические пики при 3551, 3437, 1738 и 1721±4 см-1; ИК-спектр с Фурье-преобразованием, по существу как показано на фигуре 9; и их сочетаниями.
Кристаллы формы Z1 можно дополнительно охарактеризовать триклинной пространственной группой Р1 с двумя симметричными независимыми молекулами фидаксомицина, имеющими элементарную ячейку с параметрами а=14,2839 А, Ь=20,8214 А, с=9,5188 А, а=91,02°, (3=90, 55°, у=Ю0,59° и объемом ячейки 2782, 1 А3, как определено синхротронным излучением при длине волны 0,43046 А при температуре 275 К; или триклинной пространственной группой Р1 с двумя симметричными независимыми молекулами фидаксомицина, имеющими элементарную ячейку с параметрами а=14,280 А, Ь=20,821 А, с=9, 530 А, а=91,73°, (3=90, 39° и у=Ю0И6°, как определено аппроксимацией способом Ле-Беля при температуре окружающей среды.
Предпочтительно, форма Z1 фидаксомицина содержит фидаксомицин с химической чистотой о> 95%, > 98% или даже > 99% (ВЭЖХ).
Описанную выше форму Z1 можно получить десольватацией формы Z.
Форму Z1 можно охарактеризовать любой комбинацией приведенных выше данных.
Форма Z1 может представлять собой безводную форму.
Как обсуждалось выше, форма Z1 фидаксомицина обладает полезными свойствами. В частности, кристаллическая форма Z1 фидаксомицина настоящего изобретения является негигроскопичной. При проведении испытания на гигроскопичность согласно европейской фармакопее 5.11, увеличение массы формы Z1 было меньше приблизительно 0,2%. Полезность формы Z1 в качестве негигроскопичного материала обеспечивает лучшие технологические характеристики фидаксомицина в композиции, например, она
является менее липкой и стабильной после гранулирования.
Кроме того, форма Z1 обладает превосходной стабильностью в
составах. Способность сохранять безводный полиморф
предоставляет возможность улучшить эксплуатационные
характеристики в составе, например, профиль растворения и биодоступность.
Настоящее изобретение включает кристаллическую форму
фидаксомицина, обозначенную как форма С. Форму С фидаксомицина
можно охарактеризовать данными, выбранными из одной или более
следующих характеристик: порошковая рентгеновская
дифрактограмма, содержащая пики при: 6,8, 7,9, 10,0, 10,2, 12,2, 13,4, 14,6, 15,4, 16,4, 17,5, 18,4 и 23,1 градуса два тета ±0,1 градуса два тета; порошковая рентгеновская дифрактограмма, по существу как показано на фигуре 7; и сочетаниями этих данных.
Предпочтительно, форма С фидаксомицина является в высокой степени химически чистой и в высокой степени кристаллической, т.е., форма С фидаксомицина содержит фидаксомицин с химической чистотой > 98%, > 99% или даже > 99,3% (ВЭЖХ).
Как обсуждалось выше, форма С фидаксомицина обладает полезными свойствами. В частности, форму С фидаксомицина настоящего изобретения можно получить с высоким качеством, т.е., химической и полиморфной чистотой. Порошковую рентгеновскую дифрактограмму формы С получают с высокой кристалличностью, как показано порошковой рентгеновской дифрактограммой высокого разрешения с относительно четкими, определенными пиками. Кроме того, форма С является стабильной в экстремальных условиях.
Описанную выше форму С фидаксомицина можно получить способом, включающим:а) обеспечение раствора фидаксомицина, имеющего химическую чистоту > 95% или предпочтительно > 98% ВЭЖХ в метаноле, Ь) нагревание указанного раствора до температуры от приблизительно 55°С до приблизительно 60°С, с) добавление воды к нагретому раствору, d) поддержание температуры нагретого раствора равной от приблизительно 55°С до приблизительно 60°С в течение приблизительно одного часа и е) охлаждение нагретого
раствора до температуры приблизительно 15°С, с получением суспензии, содержащей кристаллическую форму С. Суспензию можно дополнительно выдерживать при 15 °С в течение приблизительно 2 часов.
Добавляемая вода на стадии Ь) может быть при соотношении от приблизительно 1:2 до приблизительно 1:3 к метанолу на стадии а), соответственно.
Приведенный выше способ получения кристаллической формы С
фидаксомицина может дополнительно включать выделение указанной
кристаллической формы С из суспензии. Выделение можно
осуществлять, например, фильтрованием суспензии, содержащей
указанную кристаллическую форму С, промывкой и сушкой
кристаллического продукта. Предпочтительно, промывку
осуществляют смесью метанол:вода. Предпочтительно, сушку осуществляют в вакууме. Предпочтительно, сушку проводят при температуре приблизительно 50°С. Предпочтительно, сушку осуществляют в течение ночи.
Настоящее изобретение также включает кристаллический безводный фидаксомицин.
Настоящее изобретение включает кристаллический сольват фидаксомицина и ацетона.
Настоящее изобретение включает кристаллический сольват фидаксомицина и ацетонитрила.
Приведенные выше твердые формы фидаксомицина можно применять для получения фармацевтических композиций и фармацевтических составов.
Настоящее изобретение дополнительно включает 1) фармацевтическую композицию, содержащую одну или более из твердых форм, описанных в настоящем изобретении; 2) фармацевтический состав, содержащий одну или более из твердых форм, описанных в настоящем изобретении, или фармацевтическую композицию, содержащую одну или более из твердых форм, описанных в настоящем изобретении, и, по меньшей мере, одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество; 3) способ получения данных композиций, включающий смешение описанных выше твердых форм или фармацевтических композиций и, по меньшей
мере, одного фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества; 4) применение одной или более из твердых форм, описанных в настоящем изобретении в получении фармацевтической композиции или состава; и 5) способ лечения инфекции, вызванной Clostridium difficile, или CDI, также известного как заболевание, вызванное Clostridium difficile, или CDAD. Фармацевтическая композиция может быть пригодной для получения лекарственного средства. Настоящее изобретение также относится к применению кристаллических форм или фармацевтических композиций, как описано в настоящем изобретении, для применения в качестве лекарственного средства.
Настоящее изобретение также включает составы, содержащие фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению. Примеры состава включают лекарственные средства в виде таблеток или капсул, содержащих фармацевтическую композицию, пригодную для лечения субъекта, страдающего от инфекции, вызванной Clostridium difficile, или CDI, также известного как заболевание, вызванное Clostridium difficile, или CDAD.
Описав настоящее изобретение со ссылкой на определенные предпочтительные варианты осуществления, другие варианты осуществления будут очевидны специалисту в данной области техники после рассмотрения описания. Настоящее изобретение дополнительно определяют, ссылаясь на следующие примеры, подробно описывающие получение композиции, и способы применения настоящего изобретения. Специалисту в данной области техники ясно, что многие модификации, и способов и материалов, можно осуществлять на практике, не выходя за пределы объема настоящего изобретения.
Способ порошковой рентгеновской дифракции (PXRD)
Пики порошковой рентгеновской дифрактограммы, указанные во всем описании и в примерах ниже, получали, применяя ARL порошковый рентгеновский дифрактометр модели X'TRA-030, снабженный источником Си излучения =1,5405бА, детектором Пельтье, применяли круглый стандартный алюминиевый держатель образца с круглой кварцевой пластиной с нулевым фоном. Параметры сканирования: диапазон: 2-4 0 градусов два тета,
непрерывное сканирование, скорость: 3 градуса/мин. Точность положений пиков определяют как ±0,2 градуса из-за экспериментальных различий, подобных измерительным приборам, получению образцов и т.д. Пики порошковой рентгеновской дифрактограммы корректировали Si стандартом.
Способ дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) DSC 822V700, Mettler Toledo, вес образца: 3-5 мг. Скорость нагревания: 10°С/мин., количество отверстий в тигеле: 3.
В потоке N2: скорость потока = 40 мл/мин.
Диапазон сканирования: 30-250°С, скорость нагревания 10 °С/минута.
Способ термогравиметрического анализа (ТГА)
TGA/SDTA 851е, Mettler Toledo, вес образца 7-15 мг.
Скорость нагревания: 10°С/мин., в потоке N2: скорость потока = 50 мл/мин.
Диапазон сканирования: 30-250°С.
Анализы ГХ проводили, применяя AGILENT 68 90N прибор, снабженный Head Space 7 694 и FID детектором.
Температуру плавления определяли, применяя BUCHI-B-545 прибор со скоростью нагревания 1°С/мин.
ИК спектроскопия с Фурье-преобразованием
Данные собирали, применяя Perkin-Elmer Spectrum One спектрометр, при разрешении 4 см-1 с 16 сканами в диапазоне 4000-400 см-1. Образец анализировали в КВг пеллете. Спектры регистрировали, применяя пустую ячейку в качестве фона.
Твердофазная 1С ЯМР спектроскопия
угла: 11 кГц.
Импульсная программа: ср с tppml5 при развязке. Время задержки: 5 с. Количество сканов: 1024. Параметры элементарной ячейки
Порошковую дифрактограмму формы Z1 фидаксомицина измеряли в 1,5 мМ капиллярах, полученных из нерассеивающего стекла, применяя синхротронное излучение при длине волны 0,43046 А при 275 К. Индексирование независимо получали программами DICVOL и N-TREOR.
Аппроксимация по способу Ле-Беля лабораторной порошковой дифрактограммы давала параметры элементарной ячейки при температуре окружающей среды.
Рамановская спектроскопия
Порошкообразные образцы заполняли в конический держатель для образца, и рамановские спектры регистрировали на Nicolet 67 0 0 FT-IR спектрометре с NXR FT-Raman модулем, снабженным 10 64 нм Nd:YV04 возбуждающим лазером, CaF2 расщепителем луча и Ge детектором.
Параметры прибора:
Спектральный диапазон: 4 000-155 см-1. Разрешение: 4,0 см-1. Количество сканов: 12 8.
Увеличение веса образца: автоматически.
Оптическая скорость: 0,4747.
Щель: 58,84.
Мощность лазера: 1 Вт.
Хроматографические условия I:
Колонка: Zorbax Eclipse XDB-C8, 4,6x150 мм, 3,5 мкм. Температура колонки: 25°С. Температура образца: 15°С.
Подвижная фаза: А: 0,1% уксусная кислота в воде. В: 0,1% уксусная кислота в ацетонитриле. Скорость потока: 1,0 мл/мин. Длина волны детектирования: 230 нм.
Вводимый объем: 10 мкл.
Продолжительность детектирования: 25 минут. Дилюент: ацетонитрил.
Хроматографические условия II:
Колонка: Zorbax Eclipse XDB-C8, 4,6x150 мм, 3,5 мкм. Температура колонки: 15°С. Температура образца: 15°С.
Подвижная фаза: А: рН=2,5 Н3РО4 раствор (применяют концентрированную Н3РО4 для оптимизации рН).
В: Н3РО4 в ацетонитриле (добавляют равный объем концентрированной Н3РО4 в качестве элюента А).
Скорость потока: 1,0 мл/мин.
Длина волны детектирования: 230 нм.
Вводимый объем: 10 мкл.
Продолжительность детектрирования: 23 минут. Дилюент: ацетонитрил.
Стандартный базовый раствор:
Точно взвешивали приблизительно 10,0 мг эталонного стандарта, фидаксомицина, в 20,0 мл мерной колбе, растворяли и доводили его до требуемого объема ацетонитрилом.
Стандартный раствор:
Отбирали пипеткой 5,0 мл базового раствора в 10,0 мл мерную колбу и доводили до требуемого объема ацетонитрилом. Получение образца:
Точно взвешивали приблизительно 10,0 мг образца фидаксомицина в 2 0,0 мл мерной колбе, растворяли и доводили его до требуемого объема ацетонитрилом.
Отбирали пипеткой 5,0 мл базового раствора в 10,0 мл мерную колбу и доводили до требуемого объема ацетонитрилом.
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Общий способ получения неочищенного фидаксомицина
Фидаксомицин получали:
i) выращиванием микроорганизмов в питательной среде, накапливая фидаксомицин в питательной среде;
ii) выделением неочищенного фидаксомицина из питательной среды способами, известными в данной области техники;
iii) очисткой фидаксомицина обращено-фазовой
хроматографией, применяя смесь ацетонитрила, воды и уксусной
кислоты в качестве элюента; и
iv) выделением очищенного фидаксомицина из фракций.
Actionplanes deccanenesis применяли в процессе
выращивания. Питательная среда содержит следующую комбинацию на весовой основе: от приблизительно 0% до приблизительно 5% сахарозы; от приблизительно 0% до приблизительно 3% крахмала; от приблизительно 0,1% до приблизительно 1,0 % соевого пептона; от приблизительно 2% до приблизительно 5% муки семян хлопчатника; от приблизительно 0,01% до приблизительно 0,1% дигидрофосфата калия; от приблизительно 0,05% до приблизительно
0,5% гидрофосфата дикалия; от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% противовспенивающего агента; от приблизительно 0% до приблизительно 2% амберлитовой смолы XAD-16N. Предпочтительная температура выращивания составляет 2 832°С, и рН составляет 6,0-8,0. В процессе выращивания непрерывно подавали источник С.
Ферментативное получение фидаксомицина можно также осуществлять следующим способом:
Ферментативное получение фидаксомицина может включать стадию посева, с последующей ферментацией следующим образом:
от от от
посев: штамм Actinoplanes deccanenesis высевали в среду для посева. Параметры посева регулировали и поддерживали до переноса инокулята к основной ферментации. Посевная среда содержит: от приблизительно 0 до приблизительно 5% глюкозы, от приблизительно 0 до приблизительно 1% экстракта дрожжей, от приблизительно 0 до приблизительно 1% соевого пептона, от приблизительно 0 до приблизительно 0,5% СаСОз, приблизительно 0 до приблизительно 0,2% MgS04-7H20, приблизительно 0 до приблизительно 0,2% К2НРО4, приблизительно 0 до приблизительно 0,2% КС1, от приблизительно 0 до приблизительно 0,3% полипропиленгликоля. рН регулировали добавлением хлористоводородной кислоты и/или гидроксида натрия/калия.
Параметры посева:
Параметр
Окружная скорость
1,5-4 м/с
Температура
30±2°С
Давление
0,3-0,6+0,2 бар
Скорость аэрации
0,5+0,4 vvm
Продолжительность посева: 40-48±24 часов.
В конце посева инокулят (или его часть) переносили в стерильную среду для ферментации при соотношении 8-15±5%.
Ферментация: среда для ферментации содержит: от
приблизительно 0 до приблизительно 10%
сахарозы/гидролизованного крахмала, от приблизительно 0 до приблизительно 1% соевого пептона, от приблизительно 0 до приблизительно 5% муки семян хлопчатника, от приблизительно О до приблизительно 0,3% К2НРО4, от приблизительно 0 до приблизительно 0,2% КН2РО4, от приблизительно 0 до приблизительно 1% КС1, от приблизительно 0 до приблизительно 0,5% полипропиленгликоля (PPG). рН регулировали добавлением хлористоводородной кислоты и/или гидроксида натрия/калия.
Стерильную среду для ферментации засевали инокулятом.
Питание:
С-источник подавали в процессе ферментации. Что касается С-источника питания, можно применять сахарозу или гидролизованный крахмал. Суммарное количество поданного С-источника составляет 0-15% относительно первоначального объема.
Параметры ферментации:
Параметр
Температура
30±2°С
Давление
0,3-0,5+0,2 бар
Скорость аэрации
0,5-1,0+0,3 vvm
Перемешивание (окружная скорость)
3-11 м/с
В случае пенообразования следует применять стерильный противовспенивающий агент.
Продолжительность ферментации: 1б8-192±24 часов.
Среда для посева/ферментации может также содержать от приблизительно 0% до приблизительно 2% амберлитовой XAD-16N смолы.
После завершения ферментации, фидаксомицин экстрагируют из выброженного полуфабриката органическим растворителем, таким как, например, этилацетат, изобутилацетат или изобутанол. Органическую фазу концентрируют, и фидаксомицин осаждают добавлением антирастворителя, такого как, например, н-гексан. Осадок можно необязательно суспендировать во втором антирастворителе. После фильтрации и сушки получают неочищенный
фидаксомицин.
Пример 2: способ получения формы Z фидаксомицина Фидаксомицин (253,5 мг, содержание основного вещества: 89,1%, чистота: 94,9%, аморфный), полученный тем же способом, как описано в примере 10, и 1 мл смеси ацетон/вода (3/1) помещали в пробирку. Пробирку закрывали и помещали в баню с водой при 50°С. После растворения фидаксомицина, раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 4 дней, получая кристаллический осадок. Кристаллы выделяли из раствора фильтрованием и промывали смесью ацетон/вода (3/1). Продукт сушили при 50°С в вакуумном сушильном шкафу в течение ночи, и затем анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были > 99% и 98,7%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, продукт представлял собой форму Z.
Пример 3: способ получения формы Z фидаксомицина Фидаксомицин (496,2 мг, содержание основного вещества: 85,7%, чистота: 96,4%, аморфный), полученный тем же способом очистки, как описано в примере 2 или 10, и 2 мл смеси ацетон/вода (3/1) помещали в пробирку. Пробирку закрывали и помещали в водяную баню при 55°С. После растворения фидаксомицина раствор быстро охлаждали погружением пробирки в ледяную воду. Затем, раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 7 дней. Образовывались кристаллы, и их выделяли фильтрованием и сушили при 50°С в вакуумном сушильном шкафу в течение ночи. Продукт анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были 89,4% и 96,4%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, полученный продукт представлял собой форму Z.
Пример 4: способ получения формы Z фидаксомицина Фидаксомицин (0,4 г, содержание основного вещества: 94,0%, чистота: 95,3%), полученный тем же способом очистки, как описано в примере 2 или выделенный из других экспериментов по кристаллизации, 4,8 мл ацетона и 0,5 мл деионизированной воды помещали в пробирку. Пробирку закрывали и помещали в водяную
баню при 55°С. После растворения фидаксомицина, добавляли дополнительные 2,7 мл деионизированной воды, и раствор перемешивали в баню при 55°С. После перемешивания в течение 60 минут возникали первые кристаллы. Суспензию перемешивали в течение дополнительных 165 минут, и кристаллы отфильтровывали и сушили при 50°С в вакуумном сушильном шкафу в течение ночи. Высушенные кристаллы анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были 97,6% и 98,3%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, полученная форма представляла собой форму Z.
Пример 5: способ получения формы Z фидаксомицина Фидаксомицин (7,5 г, содержание основного вещества: 95,5%, чистота: 98,4%), полученный тем же способом очистки, как описано в примере 11, 72 мл ацетона и 8 мл деионизированной воды помещали в круглодонную колбу, которую нагревали в водяной бане при 55°С. После растворения фидаксомицина, к раствору добавляли по каплям дополнительные 4 0 мл деионизированной воды при перемешивании в 55°С бане. Через 130 минут, кристаллы не образовывались. Некоторое количество влажных кристаллов фидаксомицина (полученные из смеси ацетон/вода (60/40), как описано в способе примера 2 или 3) добавляли к раствору, и полученную в результате смесь перемешивали в течение дополнительных 3 часов. Кристаллы образовывались, и их отфильтровывали, промывали 20 мл смеси ацетон/вода (60/40) и сушили при 50° С в вакуумном сушильном шкафу в течение приблизительно б часов. Высушенные кристаллы (3,07 г) анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были 94,9% и 99,4%, соответственно. На основе порошковой дифракции рентгеновских лучей, полученная форма представляла собой форму Z (сольват ацетона) в смеси с формой Z1 (фигура 1).
Пример 6: Способ получения формы Z1 фидаксомицина Фидаксомицин (5,0 г, содержание основного вещества: 97,7% и чистота: 98,3%), полученный, следуя тому же способу очистки, как описано в примере 5 или 11, добавляли, вместе с 4 5 мл ацетона и 5 мл DI воды в круглодонную колбу. Колбу нагревали в
водяной бане при 55°С. После растворения фидаксомицина, добавляли по каплям дополнительные 4 0 мл DI воды при перемешивании в бане при 55°С. Первые кристаллы появлялись после добавления 36,5 мл воды. Полученную в результате суспензию перемешивали в течение дополнительных 2 часов (в водяной бане при 50°С), с последующим фильтрованием. Собранные кристаллы промывали 15 мл смеси ацетон/вода (50/50). Затем кристаллы сушили в вакууме при 50° С в течение 4 0 часов, при 60°С в течение 48 часов, при 80°С в течение 48 часов и, наконец, при 100°С в течение 2 4 часов. Высушенные кристаллы анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были > 99% и 99,4%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, продукт представлял собой форму Z1.
Пример 7: способ получения формы Z1 фидаксомицина Фидаксомицин (10,0 г, содержание основного вещества: 97,7%, чистота: 98,3%), полученный тем же способом очистки, как описано в примере б или 11, добавляли, вместе с 90 мл ацетона и 10 мл DI воды в круглодонную колбу. Колбу нагревали в водяной бане при 55°С. После растворения фидаксомицина, добавляли по каплям дополнительные 8 0 мл DI воды при перемешивании в бане при 55°С. Первые кристаллы образовывались после добавления 72 мл воды. Полученную в результате суспензию перемешивали в течение дополнительных 2 часов (температура?), с последующим фильтрованием. Собранные кристаллы промывали 3 0 мл смеси ацетон/вода (50/50). Затем, кристаллы сушили в вакууме при 60°С в течение 4 часов, получая 8,59 г фидаксомицина. Часть (7,96 г) данного материала дополнительно сушили при 100°С в течение 16 часов. Высушенные кристаллы (7,92 г) анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были > 99% и 99,6%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, продукт представлял собой форму Z1. Пример 8: Способ получения формы Z1 фидаксомицина Неочищенный фидаксомицин очищали обращено-фазовой хроматографией частями, применяя колонку, заполненную 4 00 г Diasogel SP-100-15-ODS-P и элюируя ацетонитрил/НгО/АсОН
(45/55/0,055) или ацетонитрил/Н20/АсОН (50/50/0,05). Собранные фракции объединяли и концентрировали до половины первоначального объема, получая осадок. Осадок фильтровали, промывали водой и сушили при высоком вакууме. ВЭЖХ анализ грязно-белого порошка показал, что содержание основного вещества составляло 96,7%, и чистота составляла 98,9%. 1,0 г часть данного фидаксомицина и 10 мл смеси ацетонитрил/вода
(9/1) добавляли к пробирке. После перемешивания в течение нескольких минут, фидаксомицин растворялся, давая в результате непрозрачный раствор. Добавляли дополнительные 0,5 г фидаксомицина, и полученную в результате суспензию выдерживали при температуре окружающей среды в течение ночи. Кристаллы образовывались, и их фильтровали и промывали 5 мл смеси ацетонитрил/вода (9/1). Затем, кристаллы сушили при 50°С в вакууме в течение ночи. Высушенные кристаллы (1,0 г) анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были > 99% и 99,2%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, полученная форма представляла собой форму Z1.
Пример 9: способ получения кристаллической формы С фидаксомицина
Фидаксомицин (22,0 г, содержание основного вещества: 95,8, ВЭЖХ чистота: 98,1%), полученный тем же способом, как описано в примере б или 11, растворяли в 130 мл метанола. Раствор грели при 55°С и добавляли 60 мл DI воды в течение 20 минут. Смесь выдерживали при 55°С в течение часа, с последующим охлаждением до 15°С в течение 150 минут. Образовавшуюся суспензию выдерживали при 15 °С в течение дополнительных 2 часов. Кристаллы образовывались, и их фильтровали и промывали смесью 2 6 мл метанола и 12 мл DI воды. Затем, кристаллы сушили при 50°С в вакууме в течение ночи. Полученный в результате материал (19,3 г) анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были 99,5% и 99,1%, соответственно.
Пример 10: способ очистки фидаксомицина
Неочищенный фидаксомицин очищали обращено-фазовой хроматографией частями, применяя колонку, заполненную Merck
LiChroprep RP-18 (15-25u) и элюировали смесью
ацетонитрил/Н20/АсОН (45/55/0,055). Собранные фракции,
содержащие > 90% фидаксомицина, объединяли, и ацетонитрил упаривали при комнатной температуре, и оставшуюся суспензию экстрагировали три раза половиной объема этилацетата. Верхние слои объединяли, и этилацетат упаривали. Остаток, грязно-белый порошок, сушили при высоком вакууме. ВЭЖХ анализ объединенных порошков показал, что содержание основного вещества составляет 89,1%, и чистота составляет 94,9%. Анализ порошковой дифракцией рентгеновских лучей показал, что порошок был аморфным. Пример 11: Способ очистки фидаксомицина
Неочищенный фидаксомицин очищали обращено-фазовой
хроматографией, применяя 8 л колонку, заполненную Diasogel SP-
100-15-ODS-P, и элюируя смесью ацетонитрил/НгО/АсОН
(50/50/0,05). Собранные фракции, содержащие > 93% фидаксомицина, объединяли и концентрировали до приблизительно половины первоначального объема, получая осадок. Осадок фильтровали, промывали водой и сушили при высоком вакууме. ВЭЖХ анализ грязно-белого порошка показал, что содержание основного вещества составляет 95,5%, и чистота составляет 98,4%.
Пример 12: Способ получения формы Z и Z1 фидаксомицина Фидаксомицин (10,0 г, содержание основного вещества: 95,6%, чистота: 95,2%), полученный тем же способом очистки, как описано в примере 11, суспендировали в смеси ацетонитрил/вода (10/4, v/v) при комнатной температуре и оставляли на столе на ночь. На следующее утро его разбавляли 2 5 мл смеси ацетонитрил/вода (10/4, v/v), кристаллы отфильтровывали и промывали 25 мл смеси ацетонитрил/вода (10/4, v/v) . Влажный продукт отбирали и анализировали порошковой рентгеновской дифракцией; на основе данного анализа влажный продукт представлял собой форму Z (фигура 8). Затем, кристаллы сушили в вакууме при 60°С в течение б часов. Высушенные кристаллы (7,35 г) анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были > 99% и 98,3%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, высушенные продукт представлял собой форму Z1.
Пример 13: Способ получения формы Z1 фидаксомицина
Партии фидаксомицина(77 0 г, содержание основного вещества:
97,1%, чистота: 99,7% и 362,3 г, содержание основного вещества:
95,1%, чистота: 99,7%), очищенные обращено-фазовой
хроматографией (полученные тем же способом очистки, как писано в примере 11: партии объединяли частями приблизительно по 20 г после обращено-фазовой хроматографии, как описано в примере 11, применяя 4 л колонку и объединяя фракции, содержащие > 98% фидаксомицина), растворяли в 9 л смеси ацетон/вода (9/1, v/v) . Раствор фильтровали, и фильтр промывали 1 л смеси ацетон/вода (9/1) . Раствор нагревали вплоть до 50°С, и добавляли 8,95 л деионизированной воды. Первые кристаллы образовывались после добавления 7,3 л воды. Полученную в результате суспензию перемешивали в течение дополнительных 2 часов, с последующим фильтрованием. Собранные кристаллы промывали 3 л смеси ацетон/вода (50/50). Затем, кристаллы сушили в вакууме при 60°С в течение 2 часов и при 100°С в течение 40 часов. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были 99,1% и 99,5%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, продукт представлял собой форму Z1.
Пример 14: способ получения кристаллической формы С фидаксомицина
Партии фидаксомицина (742,3 г, содержание основного вещества: 95,9%, чистота: 99,7% и 388 г, содержание основного вещества: 95,1%, чистота: 99,7%), очищенные обращено-фазовой хроматографией (полученные тем же способом очистки, как писано в примере 11: партии объединяли частями приблизительно по 20 г после обращено-фазовой хроматографии, как описано в примере 11, применяя 4 л колонку и объединяя фракции, содержащие > 98% фидаксомицина), растворяли в 5,5 л метанола при 40°С. Раствор фильтровали, и фильтр промывали 1,1 л метанола. Раствор грели при 55°С и добавляли 2750 мл DI воды в течение 25 минут. Смесь выдерживали при 55°С в течение часа, с последующим охлаждением до 15 °С в течение 145 минут. Образовавшуюся суспензию выдерживали при 15° С в течение дополнительных 2 часов. Кристаллы образовывались, и их фильтровали и промывали смесью
880 мл метанола и 42 0 мл DI воды. Затем, кристаллы сушили при
60 °С в вакууме в течение 16,5 часов. Полученный в результате
материал (10 66 г) анализировали ВЭЖХ. Содержание основного
вещества и ВЭЖХ чистота были 98,0% и 99,7%, соответственно.
Пример 15: Способ получения формы Z1 фидаксомицина
Фидаксомицин (80,74 г, содержание основного вещества:
> 99%, чистота: 99,6%), очищенный обращено-фазовой
хроматографией (полученный тем же способом очистки, как описано в примере 11: партии объединяли частями приблизительно по 20 г после обращено-фазовой хроматографии, как описано в примере 11, применяя 4 л колонку и объединяя фракции, содержащие > 98% фидаксомицина) растворяли в 8 00 мл ацетонитрила и 2 00 мл воды при 60 °С. Раствор фильтровали и добавляли 600 мл DI воды в течение 2 0 минут. Первые кристаллы образовывались после добавления 450 мл воды. Суспензию перемешивали в течение 2 часов, с последующим отфильтровыванием кристаллов и сушкой при 60°С в вакууме в течение 16 часов. Полученный в результате материал анализировали ВЭЖХ. Содержание основного вещества и ВЭЖХ чистота были 99,4% и 99,8%, соответственно. На основе анализа порошковой дифракции рентгеновских лучей, продукт представлял собой форму Z1.
Пример 16: Способ получения формы Z1 фидаксомицина Партии фидаксомицина (4 02 г, содержание основного вещества: 97,7 %, чистота: 99,6% и 884,6 г, содержание основного вещества: 99,2%, чистота: 99,1%), очищенные обращено-фазовой хроматографией (полученные тем же способом очистки, как писано в примере 11: партии объединяли частями приблизительно по 2 0 г после обращено-фазовой хроматографии, как описано в примере 11, применяя 4 л колонку и объединяя фракции, содержащие > 98% фидаксомицина), растворяли в 16 л смеси ацетонитрил/вода (4/1, v/v) при 60°С. Раствор фильтровали, и фильтр промывали 1 л смеси ацетонитрил/вода (4/1, v/v) и добавляли 10 л DI воды, предварительно нагретой до 35°С. Смесь выдерживали при 35° С в течение 4 часов, с последующим отфильтровыванием кристаллов. Кристаллы промывали смесью 1 л ацетонитрила и 1 л DI воды. Затем, кристаллы сушили при 60°С в
вакууме в течение 18 анализировали ВЭЖХ. чистота были 98,7% и порошковой дифракции собой форму Z1.
часов. Полученный в результате материал Содержание основного вещества и ВЭЖХ 99,5%, соответственно. На основе анализа рентгеновских лучей, продукт представлял
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Кристаллическая форма фидаксомицина, где
кристаллическая форма представляет собой кристаллическую форму
фидаксомицина, обозначенную как форма Z1, характеризующуюся
данными, выбранными из одной или более следующих характеристик:
порошковая рентгеновская дифрактограмма, содержащая пики при:
4,3, 8,2 и 11,2 градуса два тета ±0,2 градуса два тета;
порошковая рентгеновская дифрактограмма, по существу как
показано на фигуре 4; и сочетаниями этих данных;
кристаллическую форму Z фидаксомицина, характеризующуюся
данными, выбранными из одной или более следующих характеристик:
порошковая рентгеновская дифрактограмма, содержащая пики при:
4,1, 9,7, 10,2, 11,2 и 15,6 градуса два тета ±0,2 градуса два
тета; порошковая рентгеновская дифрактограмма, по существу как
показано на фигуре 8; и сочетаниями этих данных; или
кристаллическую форма фидаксомицина, обозначенную как форма С,
характеризующуюся данными, выбранными из одной или более
следующих характеристик: порошковая рентгеновская
дифрактограмма, содержащая пики при: 6,8, 7,9, 10,0, 10,2, 12,2, 13,4, 14,6, 15,4, 16,4, 17,5, 18,4 и 23,1 градуса два тета ±0,1 градуса два тета; порошковая рентгеновская дифрактограмма, по существу как показано на фигуре 7; и сочетаниями этих данных.
2. Кристаллическая форма фидаксомицина по п. 1, где
кристаллическая форма представляет собой форму Z1 по п. 1,
характеризующуюся данными, выбранными из одной или более
следующих характеристик: порошковая рентгеновская
дифрактограмма, содержащая пики при: 4,3, 8,2 и 11,2 градуса
два тета ±0,2 градуса два тета; порошковая рентгеновская
дифрактограмма, по существу как показано на фигуре 4; и
сочетаниями этих данных.
3. Кристаллическая форма Z1 по п. 1 или п. 2, где указанная кристаллическая форма Z1 характеризуется порошковой рентгеновской дифрактограммой, содержащая пики при 4,3, 8,2 и 11,2 градуса два тета ±0,2 градуса два тета и также содержит любые один, два, три, четыре или пять дополнительных пиков,
2.
выбранных из пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы при: 9,7, 10,2, 15,6, 18,8 и 19,0 градуса два тета ±0,2 градуса два тета.
4. Кристаллическая форма Z1 по п. 2 или п. 3, дополнительно характеризующаяся данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: твердофазный 13С ЯМР спектр, содержащий характеристические пики при 163,8, 129,1, 108,6, 94,4 и 60,3±0,2 ррт; твердофазный 13С ЯМР спектра, имеющий разницу химических сдвигов между указанными характеристическими пиками и пиком при 10 0,2±0,2 ррт 63,6, 28,9, 8,4, -5,8 и -39,9 ±0,1 ррт, соответственно; твердофазный 13С ЯМР спектра, по существу как показано на фигуре 10; и сочетаниями этих данных.
5. Кристаллическая форма Z1 по любому из пп. 2-4, дополнительно характеризующаяся данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: спектр Рамана, содержащий характеристические пики при 2993, 2974, 1749, 1721, 1649, 1594, 1572, 1451, 1257 и 587±4 см-1; спектр Рамана, по существу как показано на фигуре 11; и их сочетаниями.
6. Кристаллическая форма Z1 по любому из пп. 2-5, дополнительно характеризующаяся данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: ДСК термограмма, по существу как показано на фигуре 5; ДСК эндотермический пик при приблизительно 127-130°С и начало плавления по ДСК при приблизительно 164°С; ТГА термограмма, по существу как показано на фигуре 6; и сочетаниями этих данных.
7. Кристаллическая форма Z1 по любому из пп. 2-6, дополнительно характеризующаяся данными, выбранными из одной или более следующих характеристик: ИК-спектр с Фурье-преобразованием, содержащий характеристические пики при 3551, 3437, 1738 и 1721±4 см-1; ИК-спектр с Фурье-преобразованием, по существу как показано на фигуре 9; и их сочетаниями.
8. Кристаллическая форма Z1 по любому из пп. 2-7, дополнительно характеризующаяся триклинной пространственной группой PI с двумя симметричными независимыми молекулами фидаксомицина, имеющей элементарную ячейку с параметрами а=14, 2839 А, Ь=20, 8214 А, с=9,5188 А, а=91,02°, (3=90, 55°,
4.
Y=100,59°, и объем ячейки 2782,1 А3, как определено синхротронным излучением при длине волны 0,43046 А при температуре 275 К; или триклинной пространственной группой PI с двумя симметричными независимыми молекулами фидаксомицина, имеющей элементарную ячейку с параметрами а=14,280 А, Ь=20,821 А, с=9, 530 А, а=91,73°, (3=90, 39° и у=100Иб°, как определено аппроксимацией способом Ле-Беля при комнатной температуре.
9. Кристаллическая форма Z1 по любому из пп. 2-8, где указанная кристаллическая форма Z1 содержит фидаксомицин с химической чистотой ВЭЖХ > 95%, предпочтительно > 98% или даже > 99%.
10. Кристаллическая форма Z1 по любому из пп. 2-9, где указанная кристаллическая форма Z1 представляет собой безводную форму.
11. Кристаллическая форма фидаксомицина по п. 1 , где
кристаллическая форма представляет собой форму Z,
характеризующуюся данными, выбранными из одной или более
следующих характеристик: порошковая рентгеновская
дифрактограмма, содержащая пики при: 4,1, 9,7, 10,2, 11,2 и
15,6 градуса два тета ±0,2 градуса два тета; порошковая
рентгеновская дифрактограмма, по существу как показано на
фигуре 8; и сочетаниями этих данных.
12. Кристаллическая форма Z по п. 11, где указанная кристаллическая форма Z характеризуется данными, выбранными из: порошковой рентгеновской дифрактограммы, содержащей пики при 4,1, 9,7, 10,2, 11,2 и 15,6 градуса два тета ±0,2 градуса два тета ±0,2 градусах два тета и также содержащей любой один, два или три дополнительных пика, выбранные из пиков порошковой рентгеновской дифрактограммы при: 7,8, 14,1 и 18,7±0,2 градуса два тета.
13. Кристаллическая форма Z по любому из пп. 11-12, где указанная кристаллическая форма Z представляет собой сольват с ацетоном или сольват с ацетонитрилом.
14. Кристаллическая форма Z по любому из пп. 11-13, где указанная кристаллическая форма Z содержит фидаксомицин с химической чистотой ВЭЖХ, по меньшей мере, 95%,
9.
предпочтительно, по меньшей мере, 98%.
15. Кристаллическая форма фидаксомицина по п. 1, где
кристаллическая форма представляет собой форму С,
характеризующуюся данными, выбранными из одной или более
следующих характеристик: порошковая рентгеновская
дифрактограмма, содержащая пики при: 6,8, 7,9, 10,0, 10,2,
12,2, 13,4, 14,6, 15,4, 16,4, 17,5, 18,4 и 23,1 градуса два
тета ±0,1 градуса два тета; порошковая рентгеновская
дифрактограмма, по существу как показано на фигуре 7; и
сочетаниями этих данных.
16. Кристаллическая форма С по п. 15, где указанная кристаллическая форма С содержит фидаксомицин с химической чистотой (ВЭЖХ) > 98%, предпочтительно > 99% или > 99,3%.
17. Кристаллическая форма С по любому из пп. 15-16, где указанную кристаллическую форму С получают способом, включающим:
a) обеспечение раствора фидаксомицина, имеющего химическую
чистоту > 95%, или > 98% ВЭЖХ в метаноле;
b) нагревание указанного раствора до температуры от
приблизительно 55°С до приблизительно 60°С;
c) добавление воды к нагретому раствору;
d) поддержание температуры нагретого раствора при от
приблизительно 55°С до приблизительно 60°С в течение
приблизительно одного часа;
e) охлаждение нагретого раствора до температуры
приблизительно 15°С, с получением суспензии, содержащей
кристаллическую форму С; и
f) необязательно выдерживание суспензии при приблизительно
15°С в течение приблизительно 2 часов.
18. Безводная кристаллическая форма фидаксомицина.
19. Кристаллический сольват фидаксомицина, где сольват представляет собой сольват ацетона или сольват ацетонитрила.
20. Применение кристаллической формы фидаксомицина по любому из пп. 1-19 в получении фармацевтической композиции.
21. Фармацевтическая композиция, содержащая одну или более из кристаллических форм фидаксомицина по любому из пп. 1-19.
18.
22. Фармацевтический состав, содержащий одну или более из кристаллических форм фидаксомицина по любому из пп. 1-19, или фармацевтическую композицию по п. 21, и, по меньшей мере, одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
23. Способ получения фармацевтического состава, включающий смешение одной или более кристаллических форм фидаксомицина по любому из пп. 1-19, или фармацевтической композиции по п. 21, и, по меньшей мере, одного фармацевтически приемлемого вспомогательного вещества.
24. Кристаллическая форма фидаксомицина по любому из пп. 1-19 или фармацевтическая композиция или состав по п. 21 или 22 для применения в качестве лекарственного средства.
25. Кристаллическая форма фидаксомицина по любому из пп. 1-19 или фармацевтическая композиция или состав по п. 21 или 22 для применения в лечении инфекции, вызванной Clostridium difficile или заболевания, вызванного Clostridium difficile.
26. Способ лечения субъекта, страдающего от инфекции, вызванной Clostridium difficile или заболевания, вызванного Clostridium difficile, включающий введение терапевтически эффективного количества одной или более из кристаллических форм фидаксомицина по любому из пп. 1-19 или фармацевтической композиции или состава по п. 21 или 22.
По доверенности
520209
о см
Д 1
^ СП О О О О -э о о о о
^ . ^ со со
• 5 CsJ ГО СП
Y ОО csj CN J- 5
о ¦о
о • со
СМ ю
с; го
CL i_ CD
'5 О
-О Ш
x го
i т
го го
СО X
с; го
CL О
CD ш го
CL о о
.о со
r-O
о I
CP CSl CM
to Г-" 06 I I
о о
о о ОО со
-- о
О СМ
CD с[
с[ CD
CD Q-
CL 1=
_o m
m ro
Q-C
о I
co 01
О Ю
о I
О о
о о
Ю LO СП ¦
СМ Г"-
^ 1 О ОО
о о
см о
-Г" ОО СП
LZ90'3l
2ZЈЈ'8l KSQ-33 0Z69T3 36Z0Y3
G9Zl*SЈ
ЗШШ 1263*3 u
Z098'93l
t603'gei
9609'8Јl 9^8'OQl Ј69/'Ј9l
013Г09 3Ј6Z"69 LZ384Z
1С ЯМР спектры регистрировали при 125 МГц, применяя Bruker Avance 11+ 500 прибор. SB исследовали, применяя 4 мм роторы. Магический угол устанавливали, применяя КВг. Гомогенность магнитного поля проверяли, применяя адамантин. Параметры кросс-поляризации оптимизировали, применяя глицин. Спектральный стандарт устанавливали согласно глицину в качестве внешнего стандарта (176,03 ррт) для карбоксильного сигнала в слабом поле.
Параметры сканирования: скорость вращения магического
1/13
1/13
2/13
2/13
3/13
3/13
4/13
4/13
5/13
5/13
5/13
5/13
5/13
5/13
5/13
5/13
6/13
6/13
6/13
6/13
7/13
7/13
8/13
8/13
9/13
9/13
10/13
10/13
11/13
11/13
12/13
12/13
13/13
13/13
|
