EA201492016A1 20150227 Номер и дата охранного документа [PDF] EAPO2015\PDF/201492016 Полный текст описания [**] EA201492016 20130503 Регистрационный номер и дата заявки US61/643,483 20120507 Регистрационные номера и даты приоритетных заявок US2013/039389 Номер международной заявки (PCT) WO2013/169578 20131114 Номер публикации международной заявки (PCT) EAA1 Код вида документа [pdf] eaa21502 Номер бюллетеня [**] C-17 БИЦИКЛИЧЕСКИЕ АМИНЫ ТРИТЕРПЕНОИДОВ С ИНГИБИТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ СОЗРЕВАНИЯ ВИЧ Название документа [8] C07J 63/00, [8] A61K 31/56, [8] A61P 31/18 Индексы МПК [US] Син Ни, [US] Лю Чжэн, [US] Свидорски Джейкоб, [US] Сит Син-Юэнь, [US] Чэнь Цзе, [US] Чэнь Янь, [US] Минвелл Николас А., [US] Регуэйро-Рен Алисия Сведения об авторах [US] БРИСТОЛ-МАЙЕРС СКВИББ КОМПАНИ Сведения о заявителях
 

Патентная документация ЕАПВ

 
Запрос:  ea201492016a*\id

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

Описаны соединения, имеющие лекарственные и биоактивные свойства, их фармацевтические композиции и способы применения. В частности, С-17 бициклические амины тритерпеноидов, которые обладают уникальной противовирусной активностью, описаны в качестве ингибиторов созревания ВИЧ, которые представлены соединениями формул I, II и III. Эти соединения являются пригодными для лечения ВИЧ и СПИД.


Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

Описаны соединения, имеющие лекарственные и биоактивные свойства, их фармацевтические композиции и способы применения. В частности, С-17 бициклические амины тритерпеноидов, которые обладают уникальной противовирусной активностью, описаны в качестве ингибиторов созревания ВИЧ, которые представлены соединениями формул I, II и III. Эти соединения являются пригодными для лечения ВИЧ и СПИД.


С-17 БИЦИКЛИЧЕСКИЕ АМИНЫ ТРИТЕРПЕНОИДОВ С ИНГИБИТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ СОЗРЕВАНИЯ ВИЧ
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННУЮ ЗАЯВКУ Настоящая непредварительная заявка испрашивает приоритет согласно непредварительной заявке на патент США, серийный номер 13/799,479, поданной 13 марта 2013, и предварительной заявке на патент США, серийный номер 61/643,483, поданной 7 мая 2012.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к новым соединениям, пригодным против ВИЧ, и, в частности, к соединениям, полученным из бетулиновой кислоты и других структурно родственных соединений, которые являются пригодными в качестве ингибиторов созревания ВИЧ, и к фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, а также к способам их получения.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
ВИЧ-1 (вирус иммунодефицита человека 1 типа) инфекция остается одной из главных медицинских проблем, принимая во внимание, что, по оценкам, к концу 2010 года во всем мире количество инфицированных составляло 45-50 млн. человек. Число случаев ВИЧ и СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) резко возросло. В 2005 году было зарегистрировано около 5,0 миллионов новых случаев инфицирования, и 3,1 млн. человек умерли от СПИДа. Имеющиеся в настоящее время лекарственные средства для лечения ВИЧ-инфекции включают нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (RT) или утвержденные композиции в одной таблетке: зидовудин (или AZT, или Retrovir(r)), диданозин (или Videx(r)), ставудин (или Zerit(r)), ламивудин (или ЗТС или Epivir(r)), зальцитабин (или DDC или Hivid(r)), абакавир сукцинат (или Ziagen(r)), тенофовира дизопроксилфумарат соль (или Viread(r)), эмтрицитабин (или FTC - Emtriva(r)), Комбивир (r) (содержит - ЗТС плюс AZT), Trizivir(r) (содержит абакавир, ламивудин и зидовудин), Epzicom(r) (содержит абакавир и ламивудин), Truvada(r) (содержит Viread(r) и Emtriva(r)); ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы, невирапин (или Viramune(r)), делавирдин (или Rescriptor(r)) и эфавиренз (или Sustiva(r)), Atripla (r) (Truvada(r) + Sustiva(r)) и этравирин, и пептидомиметические ингибиторы протеазы или утвержденные композиции: саквинавир, индинавир, ритонавир, нелфинавир, ампренавир, лопинавир, Kaletra(r)
(лопинавир и ритонавир), дарунавир, атазанавир (Reyataz(r)) и типранавир (Aptivus(r)), и ингибиторы интегразы, такие как ралтегравир (Isentress(r)), и ингибиторы входа, такие как энфувиртид (Т-20) (Fuzeon(r)) и маравирок (Selzentry(r)).
Каждое из этих лекарственных средств может лишь временно сдерживать репликацию вируса, если используется в монотерапии. Однако при применении в комбинации, эти лекарственные средства имеют огромное влияние на вирусемию и прогрессирование заболевания. В действительности, значительные снижения смертности среди пациентов, больных СПИДом, недавно были документированы как следствие широкого применения комбинированной терапии. Однако, несмотря на эти впечатляющие результаты, для 30 -50% пациентов комбинированная лекарственная терапия может в конечном итоге не дать результатов. Недостаточная действенность лекарственного средства, несовместимость, ограниченное проникновение в ткани и определенные лекарственные ограничения в пределах определенных типов клеток (например, большинство аналогов нуклеозидов не могут быть фосфорилированы в дремлющих клетках) могут быть причиной неполного подавления поддающихся лечению вирусов. Кроме того, высокая скорость репликации и циркуляции ВИЧ-1 в сочетании с частым включением мутаций, приводит к появлению лекарственно-устойчивых вариантов, и при неоптимальных концентрациях лекарственных средств наблюдаются терапевтические неудачи. Таким образом, новые лекарственые средства против ВИЧ, представляющие различные формы противодействия и благоприятную фармакокинетику, а также профили безопасности, являются необходимыми для обеспечения новых возможностей лечения. Улучшенные ингибиторы слияния ВИЧ и антагонисты корецепторов входа ВИЧ представляют собой два примера новых классов анти-ВИЧ агентов, которые также изучаются рядом исследователей. Ингибиторы прикрепления ВИЧ являются другим подклассом противовирусных соединений, которые связываются с поверхностным гликопротеином ВИЧ gpl20, и препятствуют взаимодействию между поверхностным белком gpl20 и рецептором CD4 клетки хозяина. Таким образом, они препятствуют прикреплению ВИЧ к CD4 Т-клеткам человека, и блокируют репликацию ВИЧ на первой стадии жизненного цикла ВИЧ. Свойства ингибиторов прикрепления ВИЧ были улучшены с целью получения соединений с максимальной полезностью и эффективностью в качестве противовирусных препаратов. В частности, в патентах США US 7,354,924 и US 2005/0209246 демонстрируются ингибиторы прикрепления ВИЧ.
Другим перспективным классом соединений для лечения ВИЧ-инфекции являются соединения, называемые ингибиторами созревания ВИЧ. Созревание является последней
из 10 или более стадий репликации ВИЧ или жизненного цикла ВИЧ, в которых ВИЧ становится инфекционным после нескольких расщеплений, опосредованных протеазой ВИЧ в gag белке, что, в конечном итоге, приводит к высвобождению капсидного (СА) белка. Ингибиторы созревания препятствуют правильной сборке капсида ВИЧ и созреванию, образованию защитной наружной оболочки, или выходу из клеток человека. Вместо этого образуются неинфекционные вирусы, предотвращая последующие циклы ВИЧ-инфекции.
Некоторые производные бетулиновой кислоты, как уже показано в настоящее время, обладают потенциальной анти-ВИЧ активностью как ингибиторы созревания ВИЧ. Например, в патенте США US 7,365,221 раскрываются моноацилированный бетулин и производные дигидробетулина, а также их использование в качестве анти-ВИЧ соединений. Как отмечается в ссылке '221, этерификация бетулиновой кислоты (1) с некоторыми замещенными ацильными группами, такими как группы З',3'-диметилглутарил и З',3'-диметилсукцинил, приводит к получению производных, обладающих повышенной активностью (Kashiwada, Y., et al, J. Med. Chem. 39:1016-1017 (1996)). Ацилированная бетулиновая кислота и призводные дигидробетулиновой кислоты, которые являются потенциальными соединениями, обладающими анти-ВИЧ активностью, также описаны в патенте США US No. 5,679,828. Этерификация гидроксила на 3 атоме углерода бетулина с янтарной кислотой также дает соединение, способное ингибировать ВИЧ-1 активность (Pokrovskii, A. G., et al, Gos. Nauchnyi Tsentr Virusol. Biotekhnol. "Vector" 9:485-491 (2001)).
Другие ссылки на использование для лечения ВИЧ-инфекции соединений, полученных из бетулиновой кислоты, включают патенты США 2005/0239748 и 2008/0207573, также как и WO2006/053255, WO2009/100532 и WO2011/007230.
Одно соединение, ингибирующее созревание ВИЧ, которое находится в разработке, было идентифицировано как бевиримат (Bevirimat) или РА-457, с химической формулой СзбН5бОб, и обозначением по номенклатуре ШРАС 3(3-(3-карбокси-3-метил-бутаноилокси) луп-20 (29)-ен-28-оевая кислота.
В настоящем документе также делается ссылка на предварительные заявки Bristol-Myers Squibb, озаглавленные "МОДИФИЦИРОВАННЫЕ С-3 ПРОИЗВОДНЫЕ БЕТУЛИНОВОЙ КИСЛОТЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ СОЗРЕВАНИЯ ВИЧ" USSN 13/151,706, поданную 2 июня 2011 г. (US 2012-0142707) и "С-28 АМИДЫ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ С-3 БЕТУЛИНОВОЙ кислоты в КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ СОЗРЕВАНИЯ ВИЧ" USSN 13/151,722, поданную 2 июня 2011 г. (US 2012-0142653). Также делается ссылка на предварительную заявку,
озаглавленную "С-28 АМИНЫ С-3 МОДИФИЦИРОВАННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ БЕТУЛИНОВОЙ КИСЛОТЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ СОЗРЕВАНИЯ ВИЧ" USSN 13/359,680, поданную 27 января 2012 г. (US 2013-0029954), а также заявку, озаглавленную "С-17 и С-3 МОДИФИЦИРОВАННЫЕ ТРИТЕРПЕНОИДЫ С ИНГИБИТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ СОЗРЕВАНИЯ ВИЧ" USSN 13/359,727, поданную 27 января 2012 (US 2013-0035318). Кроме того, делается ссылка на заявку, озаглавленную "НОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ БЕТУЛИНОВОЙ КИСЛОТЫ С ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ" USSN 61/537,099, поданную 21 сентября 2011, а также заявку, озаглавленную "С-3 ЦИКЛОАЛКИЕНИЛЬНЫЕ ТРИТЕРПЕНОИДЫ С ИНГИБИТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ СОЗРЕВАНИЯ ВИЧ" USSN 61/599,040, поданную 15 февраля 2012. То, что сейчас является необходимым в данной области, это создание новых соединений, которые являются пригодными в качестве ингибиторов созревания ВИЧ, а также новых фармацевтических композиций, содержащих эти соединения.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ Настоящее изобретение относится к нижеприведенным соединениям Формул I, II и III, включая их фармацевтически приемлемые соли, их фармацевтические композиции и их применение для пациентов, страдающих или восприимчивых к вирусу, такому как ВИЧ. Соединения Формул I - III представляют собой эффективные противовирусные вещества, в частности, в качестве ингибиторов ВИЧ. Они пригодны для лечения ВИЧ-инфекции и СПИДа.
Один вариант осуществления настоящего изобретения относится к соединению, включая его фармацевтически приемлемые соли, которое выбрано из группы:
где Ri представляет собой изопропенил или изопропил;
J и Е каждый независимо представляет собой -Н или -СНз, и Е отсутствует, когда присутствует двойная связь;
и для соединений Формул II и III, X также может представлять собой
X выбран из группы, состоящей из фенила, гетероарильного кольца, С4.8 циклоалкила, С4.8 циклоалкенила, С4.9 спироциклоалкила, С4.9 спироциклоалкенила, С4.8 оксациклоалкила, С4-8 диоксациклоалкила, Сб-8 оксациклоалкенила, Сб-8 диоксациклоалкенила, Сб циклодиалкенила, Св оксациклодиалкенила, Св-9 оксаспироциклоалкила и Св-9 оксаспироциклоалкенильного кольца; X также может быть выбран из группы:
где X замещен А, и А представляет собой, по меньшей мере, один член, выбранный из группы -Н, -гало, -гидроксила, -Сьб алкила, -Ci-б алкокси, -Ci-б галоалкила, -NR2R2, -COOR2, -C(0)NR2R2, -C(0)NR2S02R3, -S02NR2R2, -NR2S02R2, -S02NR2R2, -Cw циклоалкил-СО(Ж2, -C2-6 aлкeнил-COOR2, -C2-6 aлкинил-COOR2, -Ci-6 aлкил-COOR2, -NHC(0)(CH2)n-COOR2, -S02NR2C(0)R2, -тетразола и -бициклического гетероарил-СООЯг; Y выбран из группы -COOR2, -C(0)NR2S02R3, - C(0)NHS02NR2R2, -NR2S02R3, -S02NR2R2, -C3-6 циклоалкил-СО(Ж2, -C2-6 aлкeнил-COOR2, -C2-6 алкинил-СО(Ж2, -Ci-6 aлкил-COOR2, -NHC(0)(CH2)n-COOR2, -S02NR2C(0)R2, .тетразола и -CONHOH, где n=l - 6;
W представляет собой -CH2 или -СО;
V выбран из группы -CRgRsr, -SO2-, -О- и -NR10-; U выбран из группы -CR8R9-, -SO2- и -NR10-;
М выбран из группы -CHR8R9, -S02R4, -SO2NR3R3, -ОН и -NRW R11S
R2 представляет собой -Н, -Ci-б алкил, -алкилзамещенный Ci-б алкил или -арилзамещенный Ci-б алкил;
R3 представляет собой -С\.в алкил или -алкилзамещенный С\.в алкил;
R4 выбран из группы, состоящей из -Ci-б алкил а, -алкилзамещенного С\.в алкила, - С3.6
циклоалкила, -арила и -гетероарила;
R5 выбран из группы, состоящей из -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила и -Ci-6 алкил-ОН;
R" и R7 каждый независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила, -CO2R2, -СН2ОН, -CHF2 и -CF3;
Rg и R9 каждый независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила, -SO2R3, -SO2NR2R2 или -ОН, -NR2R2, -NR2SO2R3, -NR2COR3 и -NR2CONR2R2;
при условии, что только один из Re и R9 может быть выбран из группы, состоящей из -ОН, -NR2R2, -NR2SO2R3, -NR2COR3 и -NR2CONR2R2; и
Rio и Rn каждый независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Сьб алкила, -С 1.3 алкиларила, Сьзалкилгетероарила, -CO2R2 и -SO2R3; при условии, что только один из Rio и Rn может быть выбран из группы, состоящей из -C02R2 или -SO2R3.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения предлагается способ лечения млекопитающих, зараженых вирусом, особенно, если указанный вирус представляет собой ВИЧ, включающий введение указанному млекопитающему эффективного количества противовирусного соединения, которое выбрано из группы соединений Формул I, II, III, указанных выше, и одного или более фармацевтически приемлемых носителей, наполнителей или разбавителей. Необязательно, соединения Формул I, II и/или III могут быть введены в комбинации с эффективным количеством другого противовирусного агента для лечения СПИДа, выбранного из группы, состоящей из: (а) противовирусного средства против СПИДа, (Ь) противоинфекционного средства; (с) иммуномодулятора и (d) других ингибиторов входа ВИЧ.
Другой вариант осуществления настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую эффективное количество противовирусного соединения, которое выбрано из группы соединений Формул I, II и III и одного или более фармацевтически приемлемых носителей, наполнителей и разбавителей, и, необязательно, в сочетании с эффективным количеством противовирусного агента для лечения СПИДа, выбранного из группы, состоящей из: (а) противовирусного средства против СПИДа, (Ь) антибактериального средства; (с) иммуномодулятора, и (d) других ингибиторов входа ВИЧ.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения в настоящем документе предлагается один или более способов получения соединений Формул I, II и III. Также в настоящем документе предлагаются промежуточные соединения, пригодные для приготовления соединений Формул I, II, и III, указанных здесь.
Настоящее изобретение относится к этим, а также другим важным конечным продуктам, описанным ниже.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Поскольку соединения по настоящему изобретению могут иметь асимметричные центры и, следовательно, встечаются в виде смесей диастереомеров и энантиомеров, настоящее изобретение включает в себя отдельные диастереоизомерные и энантиомерные формы соединений Формул I, II, III в дополнение к их смесям.
Определения
Если другое не сформулировано конкретно в каком-либо месте в этой заявке, то один или более из следующих терминов могут быть использованы в настоящем документе, и будут иметь следующие значения:
"Н" относится к водороду, в том числе к его изотопам, таким как дейтерий.
Термин "Ci-б алкил", используемый здесь и в Формуле изобретения (если не указано иное),
означает алкильные группы с прямой или разветвленной цепью, такие как метил, этил,
пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, амил, гексил и тому подобное.
"Cj-C^ фторалкил" относится к F-замещенному С1-С4 алкилу, в котором, по меньшей мере,
один атом водорода замещен атомом F, и каждый атом Н может быть независимо замещен
атомом F.
"Галоген" относится к хлору, брому, йоду или фтору.
"Арил" или "Ар" группа относится к моноциклическим или полициклическим конденсированным кольцевым (т. е. к кольцам, которые разделяют смежные пары атомов углерода) группам, имеющим полностью сопряженную пи-электронную систему. Примеры, без ограничения, арильных групп представляют собой фенил, нафталенил и антраценил. Арильная группа может быть замещеной или незамещенной. В случае замещения, замещенная группа (группы), предпочтительно, одна или более выбраны из алкила, циклоалкила, арила, гетероарила, гетероалицикло, гидрокси, алкокси, арилокси, гетероарилокси, гетероалициклокси, тиогидрокси, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероалициклокси, циано, галогена, нитро, карбонила, О-карбамила, N-карбамила, С-амидо, N-амидо, С-карбокси, О-карбокси, сульфинила, сульфонила, сульфонамидо, тригалометил, уреидо, амино и -NRxRy, где Rx и Ry независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, алкила, циклоалкила, арила, карбонила, С-карбокси, сульфонила, тригалометила, и объединенного пяти- или шестичленного гетероалициклического кольца.
Используемый здесь термин "гетероарильная" группа относится к моноциклической или конденсированной кольцевой (т. е. кольцам, которые разделяют пары соседних атомов) группе, имеющей в кольце (кольцах) один или более атомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы и, кроме того, имеющей полностью сопряженную пи-электронную систему. Если не указано иное, то гетероарильная группа может быть присоединена к любому атому углерода или азота в пределах гетероарильной группы. Следует отметить, что термин гетероарил, как предполагается, охватывает N-оксид исходного гетероарила, если такой N-оксид является химически возможным, как известно в данной области. Примеры, без ограничения, гетероарильных групп представляют собой фурил, тиенил, бензотиенил, тиазолил, имидазолил, оксазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, бензотиазолил, триазолил, тетразолил, изоксазолил, изотиазолил, пирролил, пиранил, тетрагидропиранил, пиразолил, пиридил, пиримидинил, хинолинил, изохинолинил, пуринил, карбазолил, бензоксазолил, бензимидазолил, индолил,
изоиндолил, пиразинил, диазинил, пиразин, триазинил, тетразинил и тетразолил. В случае замещения, замещенная группа(ы), предпочтительно, одна или более, выбраны из алкила, циклоалкила, арила, гетероарила, гетероалицикло, гидрокси, алкокси, арилокси, гетероарилокси, гетероалициклокси, тиоалкокси, тиогидрокси, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероалициклокси, циано, галогена, нитро, карбонила, О-карбамила, N-карбамила, С-амидо, N-амидо, С-карбокси, О-карбокси, сульфинила, сульфонила, сульфонамидо, тригалометила, уреидо, амино и -NRxRy, где RxnRy такие, как определены выше.
Используемый здесь термин "гетероалициклическая группа" относится к группе, представляющей собой моноциклическое или конденсированное кольцо и имеющей в кольце (кольцах) один или несколько атомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы. Кольца выбраны из тех, которые обеспечивают устойчивое распределение связей, и, как предполагается, не включают системы, которые не могли бы существовать. Кольца также могут иметь одну или несколько двойных связей. Однако кольца не имеют полностью сопряженной пи-электронной системы. Примеры, без ограничения, гетероалицикло групп представляют собой азетидинил, пиперидил, пиперазинил, имидазолинил тиазолидинил, З-пирролидин-1-ил, тиоморфолинил и тетрагидропиранил. В случае замещения, замещенная группа, предпочтительно, одна или несколько, выбраны из алкила, циклоалкила, арила, гетероарила, гетероалицикло, гидрокси, алкокси, арилокси, гетероарилокси, гетероалициклокси, тиогидрокси, тиоалкокси, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероалициклокси, циано, галогена, нитро, карбонила, тиокарбонила, О-карбамила, N-карбамила, О-тиокарбамила, N-тиокарбамила, С-амидо, С-тиоамидо, N-амидо, С-карбокси, О-карбокси, сульфинила, сульфонила, сульфонамидо, тригалометансульфонамидо, тригалометансульфонила, силила, гуанила, гуанидино, уреидо, фосфонила, амино и -NRxRy, где Rx и Ry такие, как определены выше.
Группа "алкил" относится к насыщенному алифатическому углеводороду, включая группы с прямыми и разветвленными цепями. Предпочтительно, алкильная группа имеет от 1 до 20 атомов углерода (когда здесь устанавливается числовой диапазон, например, "120", это означает, что группа, в данном случае алкильная группа, может содержать 1 атом углерода, 2 атома углерода, 3 атома углерода, и т.д. вплоть до 20 атомов углерода). Более предпочтительно, это средний размер алкила, имеющего от 1 до 10 атомов углерода. Наиболее предпочтительно, чтобы это был низший алкил, имеющий от 1 до 4 атомов углерода. Алкильная группа может быть замещеной или незамещенной. В случае замещения, замещающая группа(ы), предпочтительно, представляет собой одну или
несколько групп, отдельно выбранных из тригалоалкила, циклоалкила, арила,
гетероарила, гетероалицикло, гидрокси, алкокси, арилокси, гетероарилокси,
гетероалициклокси, тиогидрокси, тиоалкокси, тиоарилокси, тиогетероарилокси,
тиогетероалициклокси, циано, гало, нитро, карбонила, тиокарбонила, О-карбамила, N-
карбамила, О-тиокарбамила, N-тиокарбамила, С-амидо, С-тиоамидо, N-амидо, С-
карбокси, О-карбокси, сульфинила, сульфонила, сульфонамидо,
тригалометансульфонамидо, тригалометансульфонила, и объединенного, пяти- или шести-членного гетероалициклического кольца.
Группа "циклоалкил" относится к полностью углеродной моноциклической или конденсированной кольцевой (т. е. кольцам, которые делят смежную пару атомов углерода) группе, где одно или несколько колец не имеют полностью сопряженной пи-электронной системы. Примерами, без ограничения, "циклоалкильной" группы являются циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклопентен, циклогексан, циклогексен, циклогептан, циклогептен и адамантан. Циклоалкильная группа может быть замещенной или незамещенной. В случае замещения, замещающая группа(ы) представляет собой, предпочтительно, одну или несколько отдельно выбранных из алкила, арила, гетероарила, гетероалицикло, гидрокси, алкокси, арилокси, гетероарилокси, гетероалициклокси, тиогидрокси, тиоалкокси, тиоарилокси, тиогетероарилокси, тиогетероалициклокси, циано, гало, нитро, карбонила, тиокарбонила, О-карбамила, N-карбамила, О-тиокарбамила, N-тиокарбамила, С-амидо, С-тиоамидо, N-амидо, С-карбокси, О-карбокси, сульфинила, сульфонила, сульфонамидо, тригалометансульфонамидо, тригалометансульфонила, силила, амидино, гуанидино, уреидо, фосфонила, амино и -NRxRy, где Rx и Ry такие, как определены выше.
Группа "алкенил" относится к алкильной группе, как здесь определено, имеющей, по меньшей мере, два атома углерода и, по меньшей мере, одну углерод-углеродную двойную связь.
Группа "алкинил" относится к алкильной группе, как здесь определено, имеющей, по меньшей мере, два атома углерода и, по меньшей мере, одну углерод-углеродную тройную связь.
Группа "гидрокси" относится к -ОН группе.
Группа "алкокси" относится как к -О-алкильной, так и к -О-циклоалкильной группе, как здесь определено.
Группа "арилокси" относится как к -О-арильной, так и к -О-гетероциклоалкильной группе, как здесь определено.
Группа "гетероарилокси" относится к гетероарил-О- группе с гетероарилом, как здесь определено.
Группа "гетероалициклокси" относится к гетероалицикло-О- группе с гетероалицикло, как здесь определено.
Группа "тиогидрокси" относится к -SH группе.
Группа "тиоалкокси" относится как к S-алкильной, так и к -S-циклоалкильной группе, как здесь определено.
Группа "тиоарилокси" относится как к S-арильной, так и к -S-гетероарильной группе, как здесь определено.
Группа "тиогетероарилокси" относится к гетероарил-S- группе с гетероарилом, как здесь определено.
Группа "тиогетероалициклокси" относится к гетероалицикло-S- группе с гетероалицикло, как здесь определено.
Группа "карбонил" относится к -C(=0)-R" группе, где R" выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, арила, гетероарила (связанного посредством углеродного кольца) и гетероалициклической группы (связанной посредством углеродного кольца), как каждый определен в настоящем документе. Группа "альдегид" относится к карбонильной группе, где R" представляет собой водород. Группа "тиокарбонил" относится к -C(=S)-R" группе, с R" как здесь определено. Группа "кето" относится к -СС(=0)С- группе, в которой углерод на одной, или на обеих сторонах С=0 может быть алкилом, циклоалкилом, арилом, или углеродом гетероарильной или гетероалициклической группы.
Группа "тригалометанкарбонил" относится к 2зСС(=0)- группе, в которой указанный Z является галогеном.
Группа "С-карбокси" относится к -C(=0)0-R", в которой R" такой, как здесь определено. Группа "О-карбокси" относится к R"C(-0)0- группе, в которой R" такой, как здесь определено.
Группа "карбоновая кислота" относится к С-карбокси группе, в которой R" представляет собой водород.
Группа "тригалометил" относится к -CZ3, группе, в которой Z представляет собой группу галогена, как здесь определено.
Группа "тригалометансульфонил" относится к Z3CS(=0)2- группам, в которых Z такой, как определен выше.
Группа "тригалометансульфонамидо" относится к Z3CS(=0)2NRX- группе в которой Z такой, как определен выше, и Rx представляет собой Н или (С1-б)алкил.
Группа "сульфинил" относится к -S(=0)-R" группе, в которой R" представляет собой (Ci_ б)алкил.
Группа "сульфонил" относится к -S(=0)2R" группе, в которой R" представляет собой (Ci_ б)алкил.
Группа "S-сульфонамидо" относится к -S(=0)2NRXRY, в которой Rx и RY независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил.
Группа "N-сульфонамидо" относится к R"S(=0)2NRx- группе, в которой Rx представляет собой Н или (С1-б)алкил.
Группа "О-карбамил" относится к -OC(=0)NRxRy группе, в которой Rx и RY независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил.
Группа "N-карбамил" относится к RxOC(=0)NRy группе, в которой Rx и RY независимо представляют собой Н или (С1-б)алкил.
Группа "О-тиокарбамил" относится к -OC(=S)NRxRy группе, в которой Rx и RY независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил.
Группа "N-тиокарбамил" относится к RxOC(=S)NRy- группе, в которой Rx и RY независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил. Группа "амино" относится к -NH2 группе.
Группа "С-амидо" относится к -C(=0)NRxRy группе, в которой Rx и RY независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил.
Группа "С-тиоамидо" относится к -C(=S)NRxRy группе, в которой Rx и RY независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил.
Группа "N-амидо" относится к RxC(=0)NRy- группе, в которой Rx и RY независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил.
Группа "уреидо" относится к -NRxC(=0)NRyRy2 группе, в которой Rx, Ry и Ry2 независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил.
Группа "гуанидино" относится к -RxNC(=N)NRyRy2 группе, в которой Rx, Ry и Ry2 независимо представляют собой Н или (С1-б)алкил.
Группа "амидино" относится к RxRyNC(=N)- группе, в которой Rx и Ry независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил. Группа "циано" относится к -CN группе.
Группа "силил" относится к -Si(R")3, в которой R" представляет собой (С1_б)алкил или фенил.
Группа "фосфонил" относится к P(=0)(ORx)2 в которой Rx представляет собой (С1_б)алкил. Группа "гидразино" относится к -NRxNRyRy2 группе, в которой Rx, Ry и Ry2 независимо представляют собой Н или (С1_б)алкил.
Любые две смежные R группы могут объединяться с образованием дополнительного арильного, циклоалкильного, гетероарильного или гетероциклического кольца, конденсированного с кольцом, изначально несущим эти R группы.
Как известно в данной области, атомы азота в гетероарильных системах могут "принимать участие в гетероарильной кольцевой двойной связи", и это относится к образованию двойных связей в двух таутомерных структурах, которые содержат пятичленные кольцевые гетероарильные группы. Это определяет возможность замещения атомов азота, как хорошо понимали химики в данной области. Описание настоящего изобретения и Формула избретения основаны на известных общих принципах образования химической связи. Понятно, что Формула избретения не охватывает структуры, которые, как известно, являются нестабильными или не могут существовать, как следует из литературы. Фармацевтически приемлемые соли и пролекарства соединений, описанных здесь, находятся в пределах объема изобретения. Термин "фармацевтически приемлемая соль", как используется здесь и в Формуле изобретения, предназначен для включения нетоксичных солей присоединения основания. Подходящие соли включают соли, полученные из органических и неорганических кислот, таких как, без ограничения, хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота, метансульфоновая кислота, уксусная кислота, винная кислота, молочная кислота, сульфиновая кислота, лимонная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, сорбиновая кислоты, аконитовая кислота, салициловая кислота, фталевая кислота, и тому подобные. Термин "фармацевтически приемлемая соль", используемый здесь, также предназначен для включения солей кислотных групп, таких как карбоксилат, с такими противоионами как аммоний, соли щелочных металлов, в частности натрия или калия, соли щелочноземельных металлов, в частности кальция или магния, и соли с подходящими органическими основаниями, такими как низшие алкиламины (метиламин, этиламин, циклогексиламин и подобные), или с замещенными низшими алкиламинами (например, гидроксил-замещенные алкиламины, такие как диэтаноламин, триэтаноламин или трис(гидроксиметил)-аминометан), или с основаниями, такими как пиперидин или морфолин.
Формула I соединение Формулы II
соединение Формулы III
Как было установлено выше, соединения по изобретению включают также "пролекарства". Термин "пролекарства", используемый здесь, включает в себя как термин "пролекарственные сложные эфиры", так и термин "пролекарственные простые эфиры". Как указано выше, настоящее изобретение относится к соединению, включая его фармацевтически приемлемые соли, которое выбрано из группы: соединение Формулы I
где Ri представляет собой изопропенил или изопропил;
J и Е каждый независимо представляет собой -Н или -СНз, и Е отсутствует, когда присутствует двойная связь;
X выбран из группы, состоящей из фенила, гетероарильного кольца, С4.8 циклоалкила, С4.8 циклоалкенила, С4.9 спироциклоалкила, С4.9 спироциклоалкенила, С4.8 оксациклоалкила, С4-8 диоксациклоалкила, Сб-8 оксациклоалкенила, Сб-8 диоксациклоалкенила, Св циклодиалкенила, Св оксациклодиалкенила, Св-9 оксаспироциклоалкила и Св-9 оксаспироциклоалкенильного кольца;
и для соединений Формулы II и III X также может представлять собой / °
где X замещен А, и А представляет собой, по меньшей мере, один член, выбранный из группы, состоящей из -Н, -гало, -гидроксила, -Ci-б алкила, -Ci-б алкокси, -Ci-б галоалкила, -NR2R2, -COOR2, -C(0)NR2R2, -C(0)NR2S02R3, -S02NR2R2, -NR2S02R2, -S02NR2R2, -Cw циклoaлкил-COOR2, -C2-6 алкенил-СО(Ж2, -C2-6 aлкинил-COOR2, -Ci-6 aлкил-COOR2, -NHC(0)(CH2)n-COOR2, -S02NR2C(0)R2, -тетразола и -бициклического гетероарил-СООК2; Y выбран из группы, состоящей из -COOR2, -C(0)NR2S02R3, - C(0)NHS02NR2R2, -NR2S02R3, -S02NR2R2, -C3.6 циклоалкил-СО(Ж2, -С2_б aлкeнил-COOR2, -C2-6 алкинил-COOR2, -С 1-е aлкил-COOR2, -NHC(0)(CH2)n-COOR2, -S02NR2C(0)R2, .тетразола и -CONHOH, где п=1 - 6;
W представляет собой -СН2 или -СО; Z выбран из группы:
V выбран из группы -CRgRsr, -SO2-, -О- и -NR10-; U выбран из группы -CRgRsr, -SO2- и -NR10-;
М выбран из группы -CHR8R9, -S02R4, -SO2NR3R3, -ОН и -NRW R11-;
R2 представляет собой -Н, -Ci-б алкил, -алкилзамещенный Ci-б алкил или -арилзамещенный Ci-б алкил;
R3 представляет собой -С\.в алкил или -алкилзамещенный Ci-б алкил;
R4 выбран из группы, состоящей из -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила, - С3.6 циклоалкила, -арила и -гетероарила;
R5 выбран из группы, состоящей из -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила и -Ci-6 алкил-ОН;
R6 и R7 каждый независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила, -CO2R2, -СН2ОН, -CHF2 и -CF3;
Rg и R9 каждый независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила, -SO2R3, -SO2NR2R2 или -ОН, -NR2R2, -NR2SO2R3, -NR2COR3 и -NR2CONR2R2;
при условии, что только один из Re и R9 может быть выбран из группы, состоящей из -ОН, -NR2R2, -NR2SO2R3, -NR2COR3 и -NR2CONR2R2; и
Rio и Rn каждый независимо выбран из группы, состоящей из -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного С ьб алкила, -С 1.3 алкиларила, Сьзалкилгетероарила, -CO2R2 и -SO2R3; при условии, что только один из Rio и Rn может быть выбран из группы, состоящей из -C02R2 или -SO2R3.
Более предпочтительными являются соединения, включающие такие, которые охватываются Формулой I. Из них те, в которых X представляет собой фенильное кольцо, являются даже более предпочтительными. Также предпочтительными являются соединения Формулы I, где X представляет собой фенильное кольцо и Y находится в пара-положении. Также предпочтительными являются соединения, в которых X представляет собой -С4.8 циклоалкенил.
Также предпочтительными являются соединения Формулы I, где А представляет собой, по меньшей мере, один член, выбранный из группы, состоящей из -Н, -ОН, -гало, -С 1.3 алкила и -Ci-залкокси, где -гало выбран из группы, состоящей из -CI, -F и -Вг, с более предпочтительным -F. В некоторых вариантах осуществления является предпочтительным, что А представляет собой -Н.
Также предпочтительными являются соединения Формулы I, где Y представляет собой -COOR2, и, более предпочтительно, -СООН.
Также предпочтительным является то, что R5 представляет собой -Н.
В дополнение, является предпочтительным, что Rio представляет собой -С 1.3 алкиларил. Более предпочтительно, алкиларил представляет собой алкилфенил. Даже более предпочтительно, алкилфенил представляет собой метилфенил.
Также является предпочтительным, что Z представляет собой Re , и более
предпочтительно, где R6 представляет собой -Н и R7 представляет собой -Н. Предпочтительно, V представляет собой -О-.
В другом варианте осуществления изобретения является предпочтительным, что соединение имеет формулу:
В дополнительном варианте осуществления изобретения является предпочтительным, что соединение имеет формулу:
В еще одном варианте осуществления соединение по изобретению будет иметь следующую формулу:
ноос
Другие соединения, включая их фармацевтически приемлемые соли, которые являются предпочтительными как часть настоящего изобретения, включают следующие:
Другие предпочтительные соединения, включая их фармацевтически приемлемые соли, включают следующие:
Соединения по настоящему изобретению, согласно всем различным вариантам осуществления, описанным выше, могут быть введены перорально, парентерально (включая подкожные инъекции, внутривенные, внутримышечные, внутригрудинные инъекции или вливания), посредством ингаляции или ректально, и с помощью других средств, в виде композиций в единице дозирования, содержащих нетоксичные фармацевтически приемлемые носители, наполнители и разбавители, имеющиеся в распоряжении специалистов в данной области. Также могут быть включены одно или более вспомогательных средств.
Таким образом, в соответствии с настоящим изобретением дополнительно описываются способ лечения и фармацевтическая композиция для лечения вирусных инфекций, таких как ВИЧ-инфекция и СПИД. Лечение включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, фармацевтической композиции, которая содержит противовирусное эффективное количество одного или нескольких соединений Формул I, II и/или III, вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, наполнителями или разбавителями. Используемый здесь термин "противовирусное эффективное количество" означает общее количество каждого активного компонента композиции и способ, который является достаточным, чтобы показать значимые преимущества для пациента, то есть, замедление, улучшение или исцеление острого состояния, характеризующегося торможением ВИЧ-инфекции. Применительно к отдельному активному ингредиенту, вводимому отдельно, термин относится к этому одному ингредиенту. При применении к комбинации, термин относится к объединенным количествам активных ингредиентов,
которые в результате обеспечивают терапевтический эффект, независимо от того, вводят их в комбинации, последовательно или одновременно. Термин "лечить, лечение", используемый здесь и в Формуле изобретения, означает предупреждение, облегчение или исцеление заболеваний, связанных с ВИЧ-инфекцией.
Фармацевтические композиции по изобретению могут быть в форме перорально вводимых суспензий или таблеток, а также назальных спреев, стерильных инъецируемых препаратов, например, стерильных инъецируемых водной или масляной суспензий или суппозиториев. Фармацевтически приемлемые носители, наполнители или разбавители могут быть использованы в фармацевтических композициях, и являются такими, которые используются в области фармацевтических препаратов.
При пероральном введении в виде суспензии, эти композиции получают с помощью технических приемов, как правило, известных в области технологии приготовления лекарственных средств, и они могут содержать микрокристаллическую целлюлозу для придания объема, альгиновую кислоту или альгинат натрия в качестве суспендирующего агента, метилцеллюлозу для увеличения вязкости, и подсластители/ароматизаторы, известные в данной области. Как таблетки немедленного высвобождения, эти композиции могут содержать микрокристаллическую целлюлозу, дикальцийфосфат, крахмал, стеарат магния и лактозу и/или другие наполнители, связующие вещества, удешевляющие добавки, разрыхлители, разбавители и смазывающие вещества, известные в данной области.
Инъецируемые растворы или суспензии могут быть приготовлены в соответствии с известными в данной области способами, с использованием подходящих нетоксичных, парентерально приемлемых разбавителей или растворителей, таких как маннитол, 1,3-бутандиол, вода, раствор Рингера или изотонический раствор хлорида натрия, или подходящих диспергирующих или смачивающих и суспендирующих агентов, таких как стерильные легкие нелетучие масла, включая синтетические моно- или диглицериды, и жирные кислоты, включая олеиновую кислоту.
Соединения, представленные здесь, могут быть введены человеку перорально в диапазоне доз от около 1 до 100 мг/кг массы тела небольшими дозами, как правило, в течение длительного периода времени, например, дней, недель, месяцев или даже лет. Один предпочтительный диапазон доз составляет от около 1 до 10 мг/кг массы тела перорально небольшими дозами. Другой предпочтительный диапазон доз составляет от около 1 до около 20 мг/кг массы тела небольшими дозами. Следует понимать, однако, что конкретный уровень доз и частота введения дозы для каждого конкретного пациента может изменяться и будет зависеть от ряда факторов, включая активность конкретного
используемого соединения, метаболическую стабильность и продолжительность действия этого соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, диету, режим и время введения, скорость выведения, лекарственной комбинации, тяжесть конкретного состояния и пациента, проходящего курс лечения.
Кроме того, в настоящем изобретении описываются комбинации соединений Формул I, II и/или III, предлагаемых здесь, вместе с одним или более другими веществами, используемыми при лечении СПИДа. Например, соединения по настоящему изобретению можно эффективно вводить или в периоды предъинфекционные, и/или постконтактные, в комбинации с эффективным количеством противовирусных препаратов против СПИДа, иммуномодуляторов, противомикробных средств или вакцин, таких, как показано в следующей неограничивающей Таблице:
ПРОТИВОВИРУСНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Наименование
Производитель
Показание
лекарственного средства
097
Hoechst/Bayer
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы (RT))
Ампренавир
141 W94
GW 141
Glaxo Wellcome
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC (ингибитор протеазы)
Абакавир (1592U89)
GW 1592
Glaxo Wellcome
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC (RT ингибитор)
Ацеманнан
Carrington Labs (Irving, TX)
ARC
Ацикловир
AD-439
Burroughs Wellcome
AD-519
Tanox Biosystems
Tanox Biosystems
AL-721
Адефовир дипивоксил Gilead Sciences
Ethigen
(Los Angeles, CA)
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
ВИЧ инфекция, ARC, ПГЛ,
ВИЧ-положительный, СПИД
Альфа-интерферон
Ансамицин LM 427
Glaxo Wellcome
Adria Laboratories (Dublin, OH) Erbamont (Stamford, CT)
Саркома Капоши, ВИЧ в комбинаци с Ретровиром
ARC
Антитело, которое нейтрализует рН лабильный аберрантный альфа-интерферон
Advanced Biotherapy Concepts (Rockville, MD)
СПИД, ARC
AR177
Бета-фтор-ddA
Aronex Pharm
Nat'l Cancer Institute
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
Спид-ассоциированный синдром
BMS-234475 (CGP-61755)
Bristol-Myers Squibb/ Novartis
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор протеазы)
CI-1012 Цидофовир
Курдлан сульфат
Цитомегаловирус Иммун глобин
Цитовен
Ганцикловир
Дарунавир
Делавиридин
Декстран-сульфат
ddC
Дидеоксицитидин ddl
Дидеоксиинозин
Warner-Lambert Gilead Science
АЛ Pharma USA Medlmmune
Syntex
Tibotec- J & J
Pharmacia-Upj ohn
Ueno Fine Chem. Ind. Ltd. (Osaka, Japan)
Hoffman-La Roche Bristol-Myers Squibb
ВИЧ-1 инфекция
ЦМВ ретинит, герпес, папилломавирус
ВИЧ-1 инфекция WVD ретинит
Угроза потери зрения
ЦМВ периферический ЦМВ ретинит
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор протеазы)
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC (RT ингибитор)
СПИД, ARC ВИЧ
позитивный
бессимптомный
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC; Комбинация с
AZT/d4T
DMP-450
AVID
(Camden, NJ)
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор протеазы)
Эфавиренц
(DMP 266, Sustiva(r))
(-)6-xnop-4-(S)-
циклопропилэтинил-4(8)-трифтор-метил-1,4-дигидро-2Н-3,1-бензоксазин-2-он, STOCRINE
Bristol Myers Squibb
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ненуклеозидный RT ингибитор)
EL10
Elan Corp, PLC (Gainesville, GA)
ВИЧ инфекция
Этравирин
Tibotec/ J & J
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы)
Фамцикловир
GS 840
Smith Kline
Gilead
Герпес зостер, простой герпес
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор обратной транскриптазы)
HBY097
Hoechst Marion Roussel
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ненуклеозидный
ингибитор обратной транскриптазы)
Гиперицин
VIMRx Pharm.
Рекомбинантный Triton Biosciences
интерферон бета человека (Almeda, СА)
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
СПИД, саркома Калоши ARC
Интерферон альфа-пЗ
Interferon Sciences
ARC, СПИД
Индинавир
Merck
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC, бессимптомный ВИЧ-положительный, также в комбинации с AZT/ddl/ddC
ISIS 2922
ISIS Pharmaceuticals
ЦМВ ретинит
KNI-272
Ламивудин, ЗТС
Nat'l Cancer Institute
Glaxo Wellcome
ВИЧ-ассоциированные заболевания
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор обратной транскриптазы); также с AZT
Лобукавир Нелфинавир
Bristol-Myers Squibb
Agouron Pharmaceuticals
ЦМВ инфекция
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор протеазы)
Невирапин
Boeheringer Ingleheim
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор RT)
Новапрен Пептид Т
Последовательность октапетида Тринатрий фосфоноформат
PNU-140690
Пробукол RBC-CD4 Ритонавир
Саквинавир
Ставудин; d4T
Дидегидродеокси-
тимидин
Типранавир
Novaferon Labs, Inc. (Akron, ОН)
Peninsula Labs (Belmont. CA)
Astra Pharm. Продукте, Inc.
Pharmacia Upjohn Vyrex
Sheffield Med. Tech (Houston, TX)
Abbott
Hoffmann-LaRoche
Bristol-Myers Squibb Boehringer Ingelheim
ВИЧ ингибитор СПИД
ЦМВ ретинит, ВИЧ инфекция, другие ЦМВ инфекции
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор протеазы) ВИЧ инфекция, СПИД
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор протеазы)
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор протеазы)
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
(ингибитор протеазы)
Валацикловир
Glaxo Wellcome
Генитальный ВПГ и ЦМВ Инфекции
Виразол Рибавирин
Viratek/ICN (Costa Mesa, СА)
бессимптомный ВИЧ-положительный, LAS (ЛАС), ARC
VX-478
Залцитабин
Зидовудин; AZT
Vertex
Hoffmann-LaRoche
Glaxo Wellcome
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC. с AZT
ВИЧ инфекция, СПИД, ARC, саркома Капоши в комбинации с другими терапиями
Тенофовира дизопроксил Gilead фумарат соль (Viread(r))
Emtriva(r) (Эмтрицитабин) Gilead (FTC)
ВИЧ инфекция, СПИД,
(ингибитор обратной
транскриптазы)
ВИЧ инфекция, СПИД,
(ингибитор обратной
транскриптазы)
Combivir(r)
GSK
ВИЧ инфекция, СПИД, (ингибитор обратной транскриптазы)
Абакавир сукцинат GSK (или Ziagen(r))
ВИЧ инфекция, СПИД, (ингибитор обратной транскриптазы)
Reyataz(r) Bristol-Myers Squibb ВИЧ инфекция, СПИД,
(или атазанавир) (ингибитор протеазы)
Fuzeon(r) Roche/Trimeris (Энфувиртид или Т-20)
ВИЧ инфекция. СПИД, (ингибитор виру сного слияния
Lexiva
(или Фосампренавир кальция)
GSK/Vertex
ВИЧ инфекция, СПИД, ингибитор вирусной протеазы
Selzentry Pfizer Маравирок; (UK 427857)
ВИЧ инфекция, СПИД, (CCR5 антагонист, в стадии разработки)
Trizivir
GSK
ВИЧ инфекция
СПИД, (композиция из трех
лекарственных средств)
Sch-417690 (викривирок) Schering-Plough ВИЧ инфекция СПИД, (CCR5
антагонист, в стадии разработки)
ТАК-652
Takeda
ВИЧ инфекция СПИД, (CCR5 антагонист, в стадии разработки)
GSK 873140 (ONO-4128)
GSK/ONO
ВИЧ инфекция СПИД, (CCR5 антагонист в стадии разработки)
Ингибитор интегразы
МК-0518
Ралтегравир
Merck
ВИЧ инфекция СПИД
Truvada
Gilead
Композиция соли Тенофовира дизопроксил фумарат (Viread(r)) и
Етптуа(r)(Эмтрицитабин)
Ингибитор интегразы
GS917/JTK-303
Элвитегравир
Композиция из трех лекарственных средств Atripla(r)
Gilead/Japan Tobacco
Gilead/Bristol-Myers Squibb
ВИЧ инфекция СПИД
в стадии разработки
Композиция соли тенофовира дизопроксил фумарат (Viread(r)),
Emtriva(r)(Эмтрицитабин) и Sustiva(r) (Эфаверенц)
Festinavir
4'-этинил^4Т
Oncolys BioPharma Bristol-Myers Squibb
ВИЧ инфекция
ВИЧ инфекция СПИД в стадии разработки
СМХ-157
Липидный конъюгат
нуклеотидного
тенофовира
Chimerix
ВИЧ инфекция СПИД
GSK1349572 Ингибитор интегразы
GSK
ВИЧ инфекция СПИД
ИММУНОМОДУЛЯТОРЫ
Наименование лекарственного средства
AS-101
Бропиримин
Ацеманнан
CL246J38
FP-21399
Гамма интерферон
Производитель
Wyeth-Ayerst
Pharmacia Upjohn
Carrington Labs, Inc. (Irving, TX)
Wyeth Lederle Labs
Fuki ImmunoPharm
Genentech
Показание
СПИД
Запущенный СПИД СПИД, ARC
СПИД, саркома Капоши
Blocks HIV слияния с CD4+ клетки
ARC, в комбинации с TNF (фактор некроза опухоли)
СПИД
СПИД
Гранулоцит
колониестимулирующий фактор макрофагов
Schering-Plough
СПИД,
комбинация с AZT
Иммуностимулятор коровой частицы ВИЧ
Rorer
Серопозитивность по ВИЧ
IL-2
интерлейкин-2
Cetus
СПИД, в комбинации с AZT
IL-2
интерлейкин-2
Hoffman-LaRoche Immunex
СПИД, ARC, ВИЧ в комбинацииия с AZT
IL-2
интерлейкин-2 (альдеслейкин)
Chiron
СПИД, увеличение подсчета клеток CD4
Иммуноглобулин (человека)
Cutter Biological (Berkeley, СА)
Детский СПИД, в комбинациии с AZT
IMREG-1
Imreg
(New Orleans, LA)
СПИД, Саркома Калоши, ARC, PGL
IMREG-2
Imreg
(New Orleans, LA)
СПИД, Саркома Калоши, ARC, PGL
Иммутиол
диэтилдитиокарбамат
Merieux Institute
СПИД, ARC
Альфа-2 интерферон
Schering Plough
Саркома Капоши с AZT, СПИД
Метионин-энкефалин
TNI Pharmaceutical СПИД, ARC
(Chicago, IL)
MTP-PE Ciba-Geigy Corp. Саркома Капоши
Мурамил-трипептид
Гранулоцит Amgen СПИД, в комбинациии с AZT
колониестимулирующий
фактор
Ремун Immune Response Corp. Иммунотерапия
rCD4
Растворимые рекомбинантные CD4 человека
rCD4-IgG гибриды
Растворимые рекомбинантные CD4 человека
Интерферон альфа 2а
SK &F 106528 Растворимые Т4
Genentech
Biogen
Hoffman-La Roche
Smith Kline
СПИД, ARC
СПИД, ARC СПИД, ARC
Саркома Капоши
СПИД, ARC,
в комбинации с AZT
ВИЧ инфекция
Тимопентин
Immunobiology Research Institute (Annandale, NJ)
ВИЧ инфекция
Фактор некроза опухоли; Genentech TNF
ARC, в комбинации с гамма интерфероном
ПРОТИВОИНФЕКЦИОННЫЕ СРЕДСТВА
Наименование Производитель Показания
лекарственных средств
Клиндамицин с Pharmacia Upjohn РСР (плазмоклеточная
Примакином пневмония)
Флуконазол
Pfizer
Криптококковый менингит, кандидоз
Пастилка Squibb Corp.
Нистатиновая пастилка
Предупреждение орального кандидоза
Орнидил Эфлорнитин
Merrell Dow
РСР
Пентамидин Изетионат (IM & IV)
LyphoMed (Rosemont, IL)
РСР лечение
Триметоприм
Антибактериальное средство
Триметоприм/су л ьф а
Антибактериальное средство
Пиритрексим
Burroughs Wellcome РСР лечение
Пентамидин Изетионат для Ингаляции
Fisons Corporation
РСР профилактика
Спирамицин
Rhone-Poulenc diarrhea
Криптоспоридия
Интраконазол-R51211
Janssen-Pharm.
Гистоплазмоз; криптококковый менингит
Триметрексат
Warner-Lambert
РСР
Даунорубицин
NeXstar, Sequus
Саркома Капоши
Рекомбинантный
человеческий
эритропоэтин
Ortho Pharm. Corp.
Анемия тяжелой степени, ассоциированная с AZT терапией
Рекомбинантный человеческий самотропный гормон
Serono
СПИД-связанное истощение, кахексия
Мегестрол ацетат
Тестостерон
Bristol-Myers Squibb
Alza, Smith Kline
Лечение анорексии, связанной со СПИД
СПИД-связанное истощение
Общее энтеральное питание
Norwich Eaton Pharmaceuticals
Диарея и малабсорбция, связанные со СПИД
Кроме того, соединения по изобретению, предложенные здесь, могут применяться в комбинации с ингибиторами входа ВИЧ. Примеры таких ингибиторов входа ВИЧ обсуждаются в DRUGS OF THE FUTURE 1999, 24(12), pp. 1355-1362; CELL, Vol. 9, pp. 243-246, Oct. 29, 1999; и DRUG DISCOVERY TODAY, Vol. 5, No. 5, May 2000, pp. 183-194 и Inhibitors of the entry of HIV into host cells, Meanwell, Nicholas A.; Kadow, John F. Current Opinion in Drug Discovery & Development (2003), 6(4), 451-461. Например, соединения могут быть использованы в комбинации с ингибиторами присоединения, ингибиторами слияния и антагонистами хемокиновых рецепторов, нацеленными либо на CCR5, либо на CXCR4 корецептор. Ингибиторы присоединения ВИЧ также предлагаются в патентах США 7,354,924 и 2005/0209246.
Следует иметь в виду, что объем комбинаций соединений по данному изобретению с противовирусными препаратами против СПИДа, иммуномодуляторами, противоинфекционными средствами, ингибиторами входа ВИЧ или вакцинами не ограничивается списком в Таблице выше, но включает, в принципе, любые комбинации с любой фармацевтической композицией, пригодной для лечения СПИДа. Предпочтительные комбинации представляют собой одновременное или альтернативное лечение соединением по настоящему изобретению и ингибитором протеазы ВИЧ и/или ненуклеозидным ингибитором обратной транскриптазы ВИЧ. Необязательный четвертый компонент в комбинации представляет собой нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы ВИЧ, такой как AZT, ЗТС, ddC или ddl. Предпочтительным ингибитором протеазы ВИЧ является Reyataz(r) (активный ингредиент Атазанавир). Обычно доза от 300 до 600 мг вводится один раз в сутки. Она может вводиться совместно с низкой дозой ритонавира (от 50 до 500 мг). Другой предпочтительный ингибитор протеазы ВИЧ представляет собой Калетра(r). Еще одним пригодным ингибитором протеазы ВИЧ является индинавир, который представляет собой сульфатую соль Н-(2(К)-гидрокси-1-(8)-инданил)-2(К)-фенилметил-4-(8)-гидрокси-5-(1-(4-(3-пиридил-метил)-2(8)-Н'-(1-бутилкарбоксамидо)-пиперазинил))-пентанамид этанолят, и синтезируется согласно патенту США 5,413,999. Индинавир обычно вводится в дозе 800 мг три раза в сутки. Другие предпочтительные ингибиторы протеазы представляют собой нелфинавир и ритонавир. Еще один предпочтительный ингибитор протеазы ВИЧ представляет собой саквинавир, который вводится в дозе 600 или 1200 мг три раза в сутки. Предпочтительные ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы ВИЧ включают эфавиренз. Эти комбинации могут иметь неожиданное влияние на ограничение распространения и степень инфицирования ВИЧ. Предпочтительные комбинации включают следующие: (1) индинавир с эфавирензом, и, необязательно, с AZT и/или ЗТС и/или ddl и/или DDC; (2) индинавир, и любой из AZT и/или ddl, и/или ddC, и/или ЗТС, в частности, индинавир и AZT и ЗТС; (3) ставудин и ЗТС и/или зидовудин; (4) тенофовира дизопроксила фумарата соль и эмтрицитабин.
В таких комбинациях соединения по настоящему изобретению и другие активные вещества могут вводиться по отдельности или совместно. При этом введение одного элемента может осуществляться до, одновременно или после введения другого вещества (веществ).
ОБЩАЯ ХИМИЯ (СПОСОБЫ СИНТЕЗА) Настоящее изобретение включает соединения Формул I, II и III, их фармацевтические композиции и их применение для пациентов, страдающих или восприимчивых к ВИЧ инфекции. Соединения Формулы I, II и III также включают их фармацевтически приемлемые соли. Общие способы для построения соединений Формул I, II и III и промежуточных соединений, используемых для их синтеза, описаны в следующих схемах (после Сокращений).
Сокращения
Одно или более следующих сокращений, большинство из которых являются обычными сокращениями, хорошо известными специалистам в данной области, могут быть использованы в описании изобретения и примеров: Bz20 = бензойный ангидрид
TBTU = 0-(бензотриазол-1-ил)-ДДЛ^'Л^'-тетраметилурония тетрафторборат
HATU = 2-(1Н-7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилуроний гексафторфосфат
метаналю миния
DCE = дихлорэтан
DCM = дихлорметан
CDI = карбонилдиимидазол
препаративная ВЭЖХ = препаративная высокоэффективная жидкостная хроматография
rt = комнатная температура
DIPEA = диизопропилэтиламин
DMAP = 4-диметиламинопиридин
DMSO = диметилсульфоксид
THF = тетрагидрофуран
KHMDS = калия бис(триметилсилил)амид
min = минута(ы)
h = час(ы)
sat. = насыщенный
TEA = триэтиламин
ЕЮ Ас = этилацетат
TFA = трифторуксусная кислота
РСС = пиридиний хлорхромат
TLC = тонкослойная хроматография
Tf2NPh = (трифторметилсульфонил)метансульфонамид
диоксан = 1.4-диоксан
PG = защитная группа
атм = атмосфера(ы)
моль = моль(и)
ммоль= миллимоль(и)
мг = миллиграмм(ы)
мкг = микрограмм(ы)
мкл = микролитр(ы)
мкм = микрометр(ы)
мм = миллиметр(ы)
НО Ас = уксусная кислота
МеОН = метанол
DMF = ДТУ-диметилформамид
TBAF = тетрабутиламмония фторид
TBDMSC1 = т/> е/и-бутилдиметилсилил хлорид
Та же нумерация сохраняется по отношению к сериям соединений в схемах и общих описаниях способов.
Термины "С-3" и "С-28" относятся к определенным позициям тритерпенового ядра, котрые пронумерованы в соответствии с правилами ШРАС (позиции изображены ниже по отношению к иллюстративному тритерпену: бетулину):
Общехимические Схемы получения соединений Формул I, II и III:
Соединения Формулы I могут быть получены из коммерчески доступной (Aldrich, др.) бетулиновой кислоты посредством химических реакций, описанных в следующих схемах. Соединения Формул II и III описаны далее. Общие схемы реакций представлены следующим образом:
Соединения Формулы I могут быть получены из бетулиновой кислоты, как описано на Схеме 1. Перегруппировка Курциуса бетулиновой кислоты может быть выполнена без защиты С-3 гидроксильной группы для получения С-17 изоцианата, который в результате гидролиза кислоты дает С-17 амин. С-17 амин селективно защищают защитной группой амина (т.е., F-moc, Вое), чтобы затем выполнить окисление С-3 гидроксильной группы до кетона в стандартных условиях (т.е., РСС, реагент Десс-Мартина, и т.д.). В случае Вос-защищенных С-17 аминов возможно получить их непосредственно из изоцианата без изоляции С-17 амина, подавлением перегруппировки Курциуса трет-бутанолом вместо воды. Превращение кетона в его трифлат может быть выполнено с помощью способов, известных специалистам в данной области. Защитную группу в аминогруппе затем
убирают, чтобы получить С-17 незамещенный амин. Присоединение С-3 фрагмента осуществляется путем сочетания Сузуки трифлата с соответствующей бороновой кислотой или сложным эфиром, как описано выше. В качестве альтернативы, связывание трифлата с соответствующей бороновой кислотой может быть выполнено перед снятием защиты с С-17 амина. После снятия защиты, С-17 аминогруппа затем может быть дополнительно дериватизирована способами, известными специалистам в данной области, такими как алкилирование, восстановительное аминирование, ацилирование, и т.д. Некоторые из этих способов описаны в приведенных ниже Схемах (Схемы 3 - 7). В некоторых случаях, необходима дополнительная стадия, чтобы раскрыть любую функциональную группу, которая может быть функционализирована защитной группой (т.е., когда Y представляет собой СООН, он всегда маскируется как соответствующий сложный эфир COOR до этой последней стадии).
В качестве альтернативы, ключевой промежуточный С-17 первичный амин может быть получен из бетулиновой кислоты, как описано на Схеме 2. Карбоновую кислоту, присутствующую в бетулиновой кислоте, защищают подходящей защитной группой. Стандартным окислением (т.е. РСС, реагент Десс-Мартина) С-3 гидроксильной группы получают С-3 кетон, который затем превращают в трифлат, применяя условия, известные специалистам в данной области. Катализируемой палладием реакцией перекрестного сочетания с производным бороновой кислоты (также может быть использовано сочетание Стилле с использованием станнанов) получают соответствующие С-З-модифицированные производные бетулиновой кислоты. Со С-28 сложного эфира карбоновой кислоты затем избирательно снимают защиту и подвергают условиям перегруппировки Курциуса с получением С-17 первичного амина. Эта реакция может быть проведена в одну стадию или постадийно путем выделения промежуточного изоцианата, как показано на Схеме 2. С-17 первичный амин может быть дополнительно модифицирован с использованием стандартных способов, известных специалистам в данной области. Некоторые примеры показаны на следующих схемах.
С-17 амиды могут быть получены взаимодействием карбоновой кислоты с С-17 первичным амином в присутствии соответствующего связывающего реагента, такого как HATU, DCC, и другие, известные специалистам в данной области, в присутствии основания, такого как основание Хунига, TEA, и т.д., в подходящем растворителе (DCM, THF, DMF, и т.д.). Гидролизом сложного эфира карбоновой кислоты получают бензойную кислоту. В качестве альтернативы, некоторые амиды могут быть получены путем обработки С-17 первичного амина соответствующим реагентом хлоридом карбоновой кислоты вместо кислоты. Аналогичным образом, сульфонамины и сульфонамиды могут быть получены из С-17 первичного амина с использованием сульфонилхлорида в качестве сульфонилирующего агента.
С-17 первичный амин может быть обработан альдегидом в условиях восстановительного аминирования (например, NaBH(OAc)3) в присутствии NaOAc/AcOH или Ti(OPr)4 в растворителе, таком как THF, 1,4-диоксан, DCE или DCM) с получением С-17 вторичных аминов.
Схема 5
Некоторые С-17 амины могут быть получены алкилированием С-17 первичного амина с алкилирующим агентом (R-LG), где LG представляет собой уходящую группу, такую, но не ограничиваясь ими, как Br, CI, I, мезилат, тозилат или трифлат, в присутствии основания. В некоторых случаях может потребоваться нагревание. Гидролизом сложного эфира карбоновой кислоты получают продукт бензойной кислоты.
В некоторых случаях, при увеличении продолжительности времени реакции и нагревании реакционной смеси, также может образовываться диалкилированный продукт.
В качестве альтернативы, С-17 амин может быть преобразован в его азиридин путем обработки основанием и 1,2-дизамещенным этаном (где заместители представляют собой уходящие группы, такие как Br, CI, I, TSO, и т.д.) при нагревании. Далее дециклизацией азиридина с амином получают соответствующий замещенный С-17 амин.
С-17 амин также может быть моноалкилирован 1,2-дизамещенным этаном, как показано на Схеме 8. Оставшаяся уходящая группа в боковой цепи может быть замещена амином с получением соответствующего С-17 амин-этил-амина.
Заместители R, R' и R" могут содержать функциональные группы (например, СООН, COOR, ОН, NHR), которые могут быть дополнительно модифицированы с помощью способов, известных специалистам в данной области. Модификация может быть осуществлена до или после окончательного снятия защиты с карбоновой кислоты и осуществляется в зависимости от природы функциональной группы.
В качестве альтернативы, С-17 вторичный амин может быть дополнительно модифицирован (например, алкилированием, ацилированием, сульфонилированием, и т.д.), используя некоторые из способов, описанных выше, или другие стандартные методики, известные специалистам в данной области.
Соединения Формулы II могут быть получены с использованием химических методик, описанных выше для соединений Формулы I, с одной дополнительной стадией, которая состоит из насыщения двойных связей, как показано на Схемах 9 и 10.
В качестве альтернативы, гидрирование олефинов можно регулировать, чтобы сохранить ненасыщенность А-кольца, как показано на Схеме 10.
Соединения Формулы III могут быть получены тем же способом, описанным выше для соединений Формулы I и II, с использованием олеаноловой или урсоловая кислоты в качестве исходных материалов вместо бетулиновой кислоты.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры иллюстрируют типовые синтезы соединений Формул I, II и III, как описано в общем выше. Эти примеры являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения раскрытия любым способом. Реагенты и исходные материалы легко доступны любому специалисту в данной области.
ХИМИЯ
Типовые способы и анализ выбранных примеров:
Если не указано иное, растворители и реагенты использовались непосредственно такими, какие были получены из коммерческих источников, и реакции проводились в атмосфере азота. Флэш-хроматография проводилась на силикагеле марки 60 (размер частиц 0,0400,063; ЕМ Science). Спектры ХН ЯМР записывали с помощью спектрометра Bruker DRX-500f при частоте 500 МГц (или Bruker AV 400 МГц, Bruker DPX-300B или Varian Gemini 300 при частоте 300 МГц, как указано). Химические сдвиги были приведены в ррт (миллионных долях) на шкале 5 относительно 5TMS = 0. Следующие внутренние ссылки использовались для остаточных протонов в следующих растворителях: CDCb (5н 7.26), CD3OD (5Н 3.30), Acetic-d4 (Уксусная кислота d4) (5Н 11.6, 2.07), DMSOmix или DMSO-D6_CDC13 (5Н 2.50 и 8.25) (соотношение 75%:25%) и DMSO-D6 (5Н 2.50). Для описания множества образцов использовались стандартные сокращения: s (синглет), br. s (широкий синглет), d (дублет), t (триплет), q (квартет), m (мультиплет), b (широкий), арр (кажущийся). Константа связывания (J) измеряется в герцах. Все данные жидкостной хроматографии (LC) были получены на жидкостном хроматографе Shimadzu LC-10AS с использованием детектора SPD-10AV UV-Vis и данных масс-спектрометрии (MS), полученных с использованием Micromass Platform для ЖХ в режиме электрораспыления.
Методы ЖХ/МС Метод 1
Начальная концентрация растворителя В (%) = 0, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 2 минуты, удерживание при 100% В Скорость потока = 4 мл/мин
Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 95% вода, 5% метанол, 10 мМ ацетат аммония Растворитель В = 5% вода, 95% метанол, 10 мМ ацетат аммония Колонка = Phenomenex Luna С18, 5 мкм, 3.0 х 50 мм
Метод 2
Начальная концентрация растворителя В (%) = 0, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 2 минуты, удерживание при 100% В Скорость потока = 1 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 95% вода, 5% ацетонитрил, 10 мМ ацетат аммония Растворитель В = 5% вода, 95% ацетонитрил, 10 мМ ацетат аммония Колонка = Phenomenex Luna С18, 3 мкм, 2.0 х 30 мм
Метод 3
Начальная концентрация растворителя В (%) = 0, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 2 минуты, удерживание при 100% В Скорость потока = 1 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода, 10% метанол, 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода, 90% метанол, 0.1% TFA Колонка = Phenomenex Luna С18, 3 мкм, 2.0 х 30 мм
Метод 4
Начальная концентрация растворителя В (%) = 0, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 2 минуты, удерживание при 100% В Скорость потока =0.8 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода, 10% ацетонитрил, 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода, 90% ацетонитрил, 0.1% TFA Колонка = Phenomenex LUNA С18, 3 мкм, 2.0 х 50 мм
Метод 5
Начальная концентрация растворителя В (%) = 0, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 2 минуты, удерживание при 100% В
Скорость потока = 1 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода, 10% метанол, 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода, 90% метанол, 0.1% TFA Колонка = Phenomenex LUNA С18, 3 мкм, 2.0 х 30 мм
Метод 6
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 2 минуты, удерживание при 100% В Скорость потока =0.8 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода, 10% метанол, 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода, 90% метанол, 0.1% TFA Колонка = Xbridge Phenyl, 2.5 мкм, 2.1 х 50 мм
Метод 7
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 2 минуты, удерживание при 100% В Скорость потока = 1 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% метанол - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% метанол - 0.1% TFA Колонка 1 = (1) PHENOMENEX-LUNA 2.0 х 30 мм Змкм
Метод 8
Начальная концентрация растворителя В (%) = 30, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 4 минуты, удерживание при 100% В Скорость потока = 8 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% метанол - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% метанол - 0.1% TFA Колонка 2 = (2) PHENOMENEX-LUNA 2.0 х 50 мм 3 мкм
Метод 9
Начальная концентрация растворителя В (%) = 40, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 4 минуты, удерживание при 100% В Скорость потока = .8 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% метанол - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% метанол - 0.1% TFA Колонка 2 = (2) PHENOMENEX-LUNA 2.0 х 50 мм Змкм
Методы препаративной ВЭЖХ Метод 1 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 8 минут, удерживание при 100% В в течение 10 мин Скорость потока =50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 5% ACN: 95% вода: 10 мМ ацетат аммония Растворитель В = 95% ACN: 5% вода: 10 мМ ацетат аммония Колонка = Waters Sunfire С18, 5 мкм, 30 х 150 мм
Метод 2 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20% В до 100% В на протяжении 8 мин, удерживание при 100% В в течение 10 мин Скорость потока = 50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А= 90% Н20 + 10% MeCN + 0.1%TFA Растворитель В = 10% Н20 + 90% MeCN + 0.1%TFA Колонка = Waters Sunfire CI8, 5 мкм, 30 x 50 мм
Метод 3 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 4 минуты, удерживание при 100% В в течение 15 мин Скорость потока = 50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% метанол - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% метанол - 0.1% TFA Колонка = Waters Sunfire С18, 5 мкм, 30 х 150 мм
Метод 4 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 15, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 4 минуты, удерживание при 100% В в течение 4 мин Скорость потока =50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% метанол - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% метанол - 0.1% TFA Колонка = Waters Sunfire С18, 5 мкм, 30 х 150 мм
Метод 5 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 15 минут, удерживание при 100% В в течение 5 мин Скорость потока =50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% метанол - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% метанол - 0.1% TFA Колонка = Waters Sunfire С18, 5 мкм, 30 х 150 мм
Метод 6 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 15 минут, удерживание при 100% В в течение 10 мин Скорость потока = 50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% ацетонитрил - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% ацетонитрил - 0.1% TFA Колонка = Waters Sunfire С18, 5 мкм, 30 х 150 мм
Метод 7 препаративной ВЭЖХ 7
Начальная концентрация растворителя В (%) = 0, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 15 минут, удерживание при 100% В в течение 4 мин Скорость потока =50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% метанол - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% метанол - 0.1% TFA
Колонка = Waters Sunfire CI8, 5 мкм, 30 x 150 мм Метод 8 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 25, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 15 минут, удерживание при 100% В Скорость потока = 40 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 10% MeCN - 90% Н20 - 0.1% TFA Растворитель В = 90% MeCN - 10% Н20 - 0.1% TFA Колонка = Waters Sunfire 30 х 100 мм S5
Метод 9 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20, Конечная концентрация растворителя В
(%) = 80 в течение градиента 20 минут, удерживание при 80% В
Скорость потока = 40 мл/мин
Растворитель А = 10% ACN - 90% Н20 - 0.1% TFA
Растворитель В = 90% ACN - 10% Н20 - 0.1% TFA
Колонка = Waters Sunfire 30 х 100 мм S5
Метод 10 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 20. Конечная концентрация растворителя В (%) = 75 в течение градиента 25 минут, удерживание при 75% В Скорость потока = 40 мл/мин
Растворитель А = 10% ACN - 90% Н20 - 0.1% TFA Растворитель В = 90% ACN - 10% Н20 - 0.1% TFA Колонка = Waters Sunfire 30 х 100 мм S5
Метод 11 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 10, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 10 минут, удерживание при 100% В в течение 5 мин Скорость потока = 25 мл/мин
Растворитель А =5% ACN - 95% Н20 -10 мМ ацетат аммония Растворитель В = 95% ACN - 5% Н20 - 10 мМ ацетат аммония
Колонка = препаративная X-bridge OBD shield RP18 19xl00 мм 5 мкм Метод 12 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 10, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 4 минуты Скорость потока = 40 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 10% ацетонитрил - 90% Н20 (0.1% TFA) Растворитель В = 90% ацетонитрил - 10% Н20 (0.1% TFA) Колонка = Waters Sunfire 30 х 100 мм S5
Метод 13 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 0, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 15 минут, удерживание при 100% В в течение 4 мин Скорость потока =50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 90% вода - 10% ACN - 0.1% TFA Растворитель В = 10% вода - 90% ACN - 0.1% TFA Колонка = Waters Sunfire С18, 5 мкм, 30 х 150 мм
Метод 14 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 15, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 4 минуты, удерживание при 100% В в течение 4 мин Скорость потока = 50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Парные растворители = вода - МеОН - бикарбонат аммония Растворитель А = 95% вода - 5% МеОН - 10 мМ бикарбонат аммония Растворитель В = 5% вода - 95% МеОН - 10 мМ бикарбонат аммония Колонка = Xbridge Phenyl CI8, 5 мкм, 30 х 100 мм
Метод 15 препаративной ВЭЖХ
Начальная концентрация растворителя В (%) = 30, Конечная концентрация растворителя В (%) = 100 в течение градиента 12 минут, удерживание при 100% В в течение 6 мин Скорость потока = 50 мл/мин Длина волны = 220 нм
Растворитель А = 10% ACN: 90% вода: 0.1% TFA Растворитель В = 90% ACN: 10% вода: 0.1% TFA Колонка = Waters Sunfire С18, 5 мкм, 30 х 150 мм
ПОЛУЧЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ
Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-
пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-
октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
Стадия 1. Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-6eH3Hii 9-гидрокси-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата
К суспензии бетулиновой кислоты (12 г, 26.3 ммоль) и карбоната калия (7.26 г, 52.6 ммоль) в DMF (150 мл) добавляли бензилбромид (3.28 мл, 27.6 ммоль). Смесь нагревали до 60°С в течение 3.5 ч, и затем ее охлаждали до комнатной температуры. При охлаждении твердые вещества начали выпадать в осадок. Смесь разбавляли 200 мл воды, и образовавшиеся твердые вещества собирали путем фильтрования с получением (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR, 13aR,13bR)-6eH3iui 9-гидрокси-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата
(13.92 г, выход 97%) в виде белого твердого вещества. ХН ЯМР (500 МГц, хлороформ-cf) 5 ррш 7.39-7.28 (ш, 5 Н), 5.16-5.06 (ш, 2 Н), 4.71 (d, ./=1.83 Гц, 1 Н), 4.59 (s, 1 Н), 3.17 (ddd, ./=11.44, 5.65, 5.49 Гц, 1 Н), 3.01 (td, J=10.99, 4.88 Гц, 1 Н), 2.27 (ddd,/=12.36, 3.20, 3.05 Гц, 1 Н), 2.21-2.13(m, 1 Н), 1.93 - 1.81 (т, 2 Н), 1.67 (s, 3 Н), 0.95 (s, 3 Н), 0.93 (s, 3 Н), 1.71 -0.82 (т, 20 Н), 0.79 (s, 3 Н), 0.75 (s, 3 Н), 0.74 (s, 3 Н).
Стадия 2. Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-6eH3ffii 5a,5b,8,8,lla-пентаметил-9-оксо-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро- 1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-6eroffii 9-гидрокси-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата (7.1 г, 12.98 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли РСС (4.20 г, 19.48 ммоль). После перемешивания в течение пяти минут смесь становилась глубокого малинового цвета. Смесь дополнительно перемешивали в течение 5.5 ч. Смесь фильтровали через слой целита и силикагеля, который промывали дихлорметаном и затем смесью 1:1 этилацетаттексаны. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением (!R,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-6eH3ffii 5a,5b,8,8,l 1а-пентаметил
9-оксо-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата (6.92 г, выход 98%) в виде белой пены. ХН ЯМР (500 МГц, хлороформ-йГ) 5 ррт 7.38 - 7.28 (т, 5 Н), 5.17 - 5.06 (т, 2 Н), 4.72 (d, ./=1.83 Гц, 1 Н), 4.59 (s, 1 Н), 3.01 (td, ./=10.99, 4.88 Гц, 1 Н), 2.51 - 2.43 (т, 1 Н), 2.42 - 2.34 (т, 1 Н), 2.28 (dt, J=12.59, 3.17 Гц, 1 Н), 2.21 (td, J=12.28, 3.51 Гц, 1 Н), 1.94 - 1.82 (т, 3 Н), 1.67 (s, 3 Н), 1.05 (s, 3 Н), 1.01 (s, 3 Н), 1.73 - 0.95 (т, 17 Н), 0.94 (s, 3 Н), 0.89 (s, 3 Н), 0.78 (s, 3 Н).
Стадия 3. Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-6eH3Hii 5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-9-(трифторметил сульфонил окси)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата
Раствор (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-6eH3Hii 5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-9-
оксо-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата (29.0 г, 53.2
ммоль) в THF (объем: 200 мл) охлаждали до -78°С. К раствору добавляли KHMDS (0.5 М
в толуоле) (213 мл, 106 ммоль). Желтый раствор перемешивали при -78°С в течение 25
минут, и раствор 1,1,1-трифтор-Н-фенил-К-(трифторметил)сульфонил
метансульфонамида (20.92 г, 58.6 ммоль) в THF (70 мл) и толуола (30 мл) добавляли через канюлю. Раствор перемешивали при -78°С в течение 3 ч. TLC показала, что еще оставался исходный материал. Добавляли дополнительный 1,1,1-трифтор-тУ-фенил-тУ-(трифторметил)сульфонил метансульфонамид (1 г), и смесь перемешивали при -78°С. Через 1 ч перемешивания смесь останавливали водой (300 мл), и смесь экстрагировали этилацетатом (3 х 200 мл). Объединенные органические слои высушивали MgS04. Осушающее вещество удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-6eH3Hii 5a,5b,8,8,l 1а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-9-(трифторметилсульфонилокси)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата (40.0 г, выход 111%) в виде желтого твердого вещества. Продукт Rf = 0.57, 5% ЕЮАс в гексанах, визуализирование с помощью окрашивания Ханессиана. ХН ЯМР (500 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 ррт 0.77 (s, 3 Н), 0.88 (s, 3 Н), 0.91 - 1.77 (т, 17 Н),
0.94 (s, 3 H), 1.00 (s, 3 H), 1.10 (s, 3 H), 1.67 (s, 3 H), 1.81 - 1.96 (m, 2 H), 2.14 (dd, ./=17.09, 6.71 Гц, 1 H), 2.22 (td, J=12.21, 3.36 Гц, 1 H), 2.25 - 2.31 (m, 1 Н), 3.02 (td, J=10.99, 4.58 Гц, 1 H), 4.59 (s, 1 Н), 4.72 (d, ./=1.53 Гц, 1 Н), 5.05 - 5.12 (m, 1 Н), 5.13-5.18 (m, 1 Н), 5.54 (dd, ./=6.71, 1.53 Гц, 1 Н), 7.29 - 7.41 (т, 5 Н).
Стадия 4. Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-6eH3ffii 9-(4-(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата
В круглодонную колбу, содержащую раствор (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13bR)-
бензил 5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-9-(трифторметилсульфонилокси)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-
За-карбоксилата (6.21 г, 9.18 ммоль) в диоксане (25 мл) добавляли 2-пропанол (25 мл) и
воду (15 мл) с последующим добавлением карбоната натрия моногидрата (3.42 г, 27.5
ммоль), 4-метоксикарбонилфенилбороновой кислоты (2.478 г, 13.77 ммоль) и
тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (0.318 г, 0.275 ммоль). Колбу присоединяли к
обратному холодильнику, продували N2 и нагревали с обратным холодильником в течение
ночи. После нагревания смеси в течение 14.5 ч ее охлаждали до комнатной температуры и
разбавляли водой (75 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (3 х 75 мл) и промывали
насыщенным солевым раствором. Объединенные органические слои высушивали MgS04,
фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Остаток адсорбировали на
силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием градиента 0-
20% этилацетата в гексанах. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли
и концентрировали под пониженным давлением с получением указанного в заголовке
соединения, (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR 13bR)-6eH3ffii 9-(4-
(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата (4.16 г, выход 68.4%), в виде белой пены. ХН ЯМР (500 МГц,
ХЛОРОФОРМ-d) 5 ppm 7.92 (d, ./=8.24 Гц, 2 H), 7.40 - 7.29 (m, 5 H), 7.19 (d, J=8.24 Гц, 2 H), 5.28 (dd, J=6.10, 1.83 Гц, 1 H), 5.19 - 5.07 (m, 2 H), 4.73 (d, J=1.83 Гц, 1 H), 4.60 (s, 1 H), 3.90 (s, 3 H), 3.04 (td, J=10.91, 4.73 Гц, 1 H), 2.20 - 2.32 (m, 2 H), 2.09 (dd, J=17.24, 6.26 Гц, 1 H), 1.95 - 1.82 (m, 2 H), 1.69 (s, 3 H), 0.97 (s, 3 H), 0.95 (s, 3 H), 0.92 (s, 3 H), 0.91 (s, 3 H), 1.75 - 0.87 (m, 17 H), 0.82 (s, 3 H).
Стадия 5. Получение (1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-трет-бутилдиметилсилил 9-(4-(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-6eH3^ 9-(4-
(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил )-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-
За-карбоксилата (3.82 г, 5.76 ммоль) в дихлорэтане (100 мл) добавляли триэтиламин (1.285
мл, 9.22 ммоль), трет-бутилдиметилсилан (1.912 мл, 11.52 ммоль) и ацетат палладия (II)
(0.647 г, 2.88 ммоль). Смесь продували N2 и нагревали до 60°С. Через 2 ч реакционную
смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали через слой целита и силикагеля
для удаления твердых веществ, которые промывали 25% EtOAc в гексанах. Фильтрат
концентрировали под пониженным давлением и обрабатывали 20 мл уксусной кислоты,
10 мл THF и 3 мл воды. После перемешивания в течение 1 ч образовавшиеся твердые
вещества собирали путем фильтрования и промывали водой с получением
(lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR, 13aR,13bR)-Tper-6ymiwHMeTffiicmntii 9-(4-
(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил )-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата (3.62 г, выход 91%) в виде белого твердого вещества. ХН ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 ррт 7.94 (d, J=8.28 Гц, 2 Н), 7.21 (d, J=8.28 Гц, 2 Н), 5.30 (dd, J=6.15, 1.63 Гц, 1 Н), 4.75 (d, ./=1.76 Гц, 1 Н), 4.62 (s, 1 Н), 3.92 (s, 4 Н), 3.08 (td, ./=10.92, 4.27 Гц, 1
Н), 2.35 - 2.22 (m, 2 Н), 2.17 - 2.06 (m, 1 Н), 2.02 - 1.84 (m, 2 Н), 1.71 (s, 3 Н), 1.01 (s, 6 Н), 0.99 (br. s., 3 H), 0.98 (s, 9 H), 0.94 (s, 6 H), 1.78 - 0.90 (m, 16 H), 0.32 - 0.28 (m, 6 H).
Стадия 6. Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-9-(4-
(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоновой кислоты
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR, 13aR,13bR)-TpeT-6y(tm)rmHMemiiCffiiffii 9-(4-(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоксилата (3.12 г, 4.54 ммоль) в диоксане (25 мл) добавляли TBAF (75% масс, в воде) (2.375 г, 6.81 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем разбавляли 1 н. НС1 (25 мл) и водой (5 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3 х 100 мл). Объединенные органические слои высушивали Na2S04, фильтровали и частично концентрировали под пониженным давлением до около 10 мл в объеме. К частично концентрированной смеси добавляли 1 н. НС1 (50 мл). Образовавшиеся твердые вещества собирали путем фильтрования и промывали водой. Предполагаемый продукт, (1 R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 11 bR, 13aR, 13bR)-9-(4-(MeTOKCHKap6oHmf^effltii)-5a,5b,8,8,11 a-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоновую кислоту (2.58 г, выход 99%), выделяли в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 571.47 (М-Н)", 3.60 мин (метод 1). *Н ЯМР (500 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 ррт 9.80 (br. s., 1 Н), 7.92 (d, ./=8.24 Гц, 2 Н), 7.18 (d, ./=8.24 Гц, 2 Н), 5.32 - 5.26 (т, 1 Н), 4.75 (s, 1 Н), 4.62 (br. s., 1 Н), 3.90 (s, 3 Н), 3.07 - 2.99 (т, 1 Н), 2.33 - 2.21 (т, 2 Н), 2.10 (dd, J=17.09, 6.10 Гц, 1 Н), 2.06 - 1.94 (т, 2 Н), 1.70 (s, 3 Н), 1.01 (br. s., 3 Н), 1.00 (br. s., 3 Н), 0.98 (s, 3 Н), 0.91 (s, 6 Н), 1.79 - 0.89 (т, 17 Н).
Стадия 7. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-roo4HaHaTO-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата.
К кашице (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,l laS,l lbR,13aR,13bR)-9-(4-(MeTOKCHKap6offlw^effliii)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоновой кислоты (10 г, 17.46 ммоль) в 1,4-диоксане (200 мл) добавляли триэтиламин (4.38 мл, 31.4 ммоль) с последующим добавлением дифенилфосфорилазида (5.82 мл, 26.2 ммоль). Полученную в результате белую кашицу нагревали до 100°С. Через 5 ч реакцию оставляли охлаждаться до комнатной температуры и затем разбавляли ЕЮ Ас и промывали 1 н. NaOH (2 х 70 мл). Объединенный водный слой экстрагировали ЕЮ Ас (2 х 150 мл). Объединенный органический слой высушивали над Na2S04, фильтровали и концентрировали до кашицы (около 75 мл), которую хранили в холодильнике в течение ночи. Кашицу фильтровали, и белый твердый продукт промывали Et20. Жидкий фильтрат концентрировали до желтой кашицы, которую фильтровали и промывали Et20 с получением еще белого твердого продукта. Две порции белого твердого вещества объединяли и высушивали под пониженным давлением с получением метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-изoциaнaтo-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-l-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (8.6 г, выход 86%) в виде белого твердого вещества. *Н ЯМР (500 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 ррт 8.0 (2 Н, d, ./=8.2 Гц), 7.2 (2 Н, d, J=8.2 Гц), 5.3 (1 Н, d, J=4.6 Гц), 4.8 (1 Н, s), 4.7 (1 Н, s), 3.9 (3 Н, s), 2.6 (1 Н, td, J=10.8, 5.8 Гц), 2.1 - 2.2 (2 Н, т), 1.8 - 2.0 (4 Н, т), 1.7 - 1.8 (1 Н, т), 1.7 (3 Н, s), 1.5 - 1.7 (5 Н, т), 1.4 - 1.5 (5 Н, т), 1.3 - 1.4 (2 Н, т), 1.2 - 1.3 (2 Н, т), 1.1 (3 Н, s), 1.1 - 1.1 (1 Н, т), 1.0 (3 Н, s), 1.0 (3 Н, s), 1.0 (3 Н, br. s.), 1.0 (3 Н, br. s.). 13С ЯМР (ХЛОРОФОРМ-d) 5 ррт 14.2, 15.4, 16.2, 19.2, 19.5,
20.8, 21.0, 24.7, 27.4, 29.0, 29.2, 33.3, 36.0, 37.2, 39.0, 39.0, 40.3, 41.5, 41.8, 47.8, 49.0, 49.2, 51.7, 52.6, 66.8, 71.3, 110.2, 121.3, 123.7, 127.6, 128.2, 129.8, 146.0, 148.4, 148.6, 166.9.
Стадия 8. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,ll а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата.
К мутному раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-roo4HaHaro-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-
9-ил)бензоата (5.47 г, 9.60 ммоль) в THF (100 мл) добавляли концентрированную соляную
кислоту (19.83 мл, 240 ммоль). Полученную в результате гомогенную смесь
перемешивали при комнатной температуре. Через 72 ч реакционную смесь
концентрировали досуха с получением метил 4-
((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-l-(npon-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, НС1 (4.98 г, выход 89%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 544.5 (М+Н)+, 3.26 мин (метод 2). *Н ЯМР (500 МГц, 1:1 CDCkMeOD) 5 ррт 7.9 (2 Н, d, ./=8.5 Гц), 7.3 (1 Н, t, J=7.8 Гц), 7.2 (2 Н, d, ./=8.5 Гц), 7.1 (1
H, t, J=7.3 Гц), 5.3 (1 Н, d, J=4.6 Гц), 4.8 (1 Н, s), 4.7 (1 Н, br. s.), 3.9 (2 Н, s), 3.6 (2 Н, dt,
./=15.6, 6.6 Гц), 3.3 (1 Н, dt, ./=3.1, 1.6 Гц), 2.6 (1 Н, td, ./=11.0, 6.1 Гц), 2.1 (1 Н, dd, ./=17.1,
6.4 Гц), 2.0 (1 Н, d, J=13.4 Гц), 1.9 - 2.0 (1 Н, т), 1.8 - 1.9 (2 Н, т), 1.7 - 1.7 (3 Н, т), 1.6 -
I. 7 (3 Н, т), 1.5 - 1.6 (3 Н, т), 1.5 - 1.5 (2 Н, т), 1.4 (1 Н, br. s.), 1.3 - 1.4 (1 Н, т), 1.2 - 1.3 (1
Н, т), 1.1 - 1.2 (2Н, т), 1.1 - 1.1 (1 Н, т), 1.0 (3 Н, s), 1.0 (3 Н, s), 0.9 (3 Н, s), 0.9 (3 Н, s).
Ключевое промежуточное соединение 1 получали с помощью следующих способов:
Способ 1: Промежуточное соединение 1
Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната
Стадия 1: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-H30i(HaHaTO-5a,5b,8,8,l 1а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ола
К суспензии бетулиновой кислоты (10 г, 21.90 ммоль) в 1,4-диоксане (100 мл) добавляли триэтиламин (9.16 мл, 65.7 ммоль) и дифенилфосфоразидат (7.08 мл, 32.8 ммоль). Смесь нагревали до появления конденсации. При нагревании все твердые вещества растворились. После нагревания смеси в течение 26 ч, смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под пониженным давлением. Остаток разбавляли 100 мл воды и экстрагировали дихлорметаном (3 х 100 мл). Объединенные органические слои высушивали сульфатом натрия. Осушающее вещество удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием градиента 0-15% ЕЮ Ас в гексанах и 240 г силикагелевой колонки Thomson. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением. Вторую порцию менее чистого продукта концентрировали и повторно очищали, используя 240 г колонку Thomson и такой же градиент. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли с первой порцией с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (7.76 г, 17.10 ммоль, выход 78%). *Н ЯМР (400 МГц,
хлороформ-d) 5 = 4.75 (s, Ш), 4.67 - 4.62 (m, Ш), 3.20 (dt, ./=11.3, 5.6 Гц, Ш), 2.55 (td, ./=10.9, 5.9 Гц, Ш), 2.17 - 2.03 (т, Ш), 1.92 - 1.76 (т, 4Н), 1.69 (s, ЗН), 1.06 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.95 (s, ЗН), 0.85 (s, ЗН), 0.78 (s, ЗН), 1.74 - 0.66 (т, 20Н).
Стадия 2: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,l 1а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ола, НС1
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-H304HaHaTO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ола (7.76 г, 17.10 ммоль) в 1,4-диоксане (100 мл) добавляли НС1 (37%) (21.07 мл, 257 ммоль). Смесь нагревали до 60°С в течение 15 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под пониженным давлением. Остаток растворяли в дихлорметане и метаноле и концентрировали два дополнительных раза с получением (1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S, 11 aR, 11 bR, 13aR, 13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ола, HC1 (7.75 г, 16.7 ммоль, выход 98%) в виде не совсем белой пены. Сырой продукт применяли на следующей стадии без очистки.
Стадия 3: Получение трет-бутил ((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-9-гидрокси-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро- Ш-циклопента[а]хризен-За-ил)карбамата
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-
пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ола, НС1 (7.75 г, 16.7
ммоль) в 1,4-диоксане (100 мл) добавляли воду (25 мл), бикарбонат натрия (4.21 г, 50.2
ммоль) и Вос-ангидрид (5.82 мл, 25.08 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной
температуре в течение 16 ч, затем смесь разбавляли 100 мл воды и экстрагировали
этилацетатом (3 х 100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным
солевым раствором, высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали
под пониженным давлением с получением трет-бутил
((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-9-гидpoкcи-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-l-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)карбамата в виде не совсем белой пены. *Н ЯМР (500 МГц, хлороформ-d) 5 = 4.74 (d, ./=1.6 Гц, Ш), 4.64 - 4.62 (m, Ш), 4.34 (br. s., Ш), 3.24 - 3.18 (m, Ш), 2.63 - 2.35 (т, ЗН), 2.06 - 1.93 (т, Ш), 1.71 (s, ЗН), 1.46 (s, 9Н), 1.04 (s, ЗН), 0.99 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.86 (s, ЗН), 0.79 (s, ЗН), 1.77 - 0.68 (т, 22Н).
Стадия 4: Получение трет-бутил ((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,ll а-пентаметил-9-оксо-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро-1 Н-цикл опента[а]хризен-За-ил)карбамата
К раствору полученного в результате трет-бутил
((lRЗaS,5aR,5bR7aR,9S,llaRllbR,13aR13bR)-9-гидpoкcи-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-l-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)карбамата в дихлорметане (100 мл) добавляли хлорхромат пиридиния (4.69 г, 21.74 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч, затем добавляли дополнительный 1.0 г РСС, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь фильтровали через слой силикагеля и целита, который промывали раствором 25% этилацетата в гексанах. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением трет-бутил ((lRЗaS,5aR,5bR,7aRllaR,llbR13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-9-oкco-l-(пpoп-l-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)карбамата в виде светло-желтой пены. *Н ЯМР (500 МГц, хлороформ-d) 5 = 4.74 (d, J=\.l Гц, Ш), 4.63 (t, J=\.l Гц, Ш), 4.34 (br. s., Ш), 2.65 - 2.34 (m, 5Н), 2.05 - 1.88 (т, 2Н), 1.71 (s, ЗН), 1.47 (s, 9Н), 1.10 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.05 (s, ЗН), 0.99 (s, ЗН), 0.96 (s, ЗН), 1.76- 0.93 (т, 18Н).
Стадия 5: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-((TpeT-бутоксикарбонил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната
Раствор полученного в результате трет-бутил
((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11аК,11ЬК,13аК,13ЬК)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-9-оксо-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)карбамата в THF (100 мл) охлаждали до -78°С. К раствору добавляли KHMDS (0.91 М в THF) (40.4 мл, 36.8 ммоль). Смесь перемешивали в течение 20 минут при -78°С, затем добавляли через канюлю раствор 1,1,1-трифтор-Н-фенил-1Ч-(трифторметил)сульфонил метансульфонамида (7.47 г, 20.90 ммоль) в THF (100 мл). Смесь перемешивали при -78°С в течение 5 ч, затем останавливали 100 мл воды и экстрагировали этилацетатом (3 х 75 мл). Объединенные органические слои высушивали сульфатом магния. Осушающее вещество удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением. Остаток переносили в небольшое количество DCM и метанола и образовавшиеся желтые твердые вещества удаляли фильтрованием. Фильтрат снова концентрировали и обрабатывали метанолом, и образовавшиеся твердые вещества снова удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали и адсорбировали на силикагеле и затем очищали с помощью флэш-хроматографии, используя градиент 0-50% этилацетата в гексанах и 240 г силикагелевую колонку Thomson. Фракции, содержащие продукт с удаленной защитой, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением смеси продуктов. Эту смесь повторно очищали с помощью флэш-хроматографии, используя градиент 0-10% EtOAc в гексанах и 240 г силикагелевую колонку Thomson. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением (1R, 3 aS, 5 aR, 5bR, 7 aR, 11 aR, 11 bR, 13 aR, 13 bR)-3 а-((трет-бу токсикарбонил )амино)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната (1.31 г, 1.99 ммоль, 11.9% за 3 стадии). *Н ЯМР (500 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 = 5.57 (dd, ./=6.7, 1.8 Гц, Ш), 4.73 (s, Ш), 4.62 (s, Ш), 4.32 (br. s., Ш), 2.64 - 2.31 (m, ЗН), 2.16 (dd, J=17.0, 6.8 Гц, Ш), 2.04 - 1.94 (m, Ш), 1.70 (s, ЗН), 1.45 (s, 9Н), 1.13 (s, ЗН), 1.06 (s, ЗН), 1.03 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 1.82 - 0.86 (m, 18Н).
Стадия 6: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-((TpeT-
бутоксикарбонил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната (0.2 г, 0.304 ммоль) в дихлорметане (2 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (0.5 мл, 6.49 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч, затем концентрировали под пониженным давлением. Остаток разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия (20 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3 х 20 мл). Объединенные органические слои высушивали сульфатом натрия. Осушающее вещество удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали и адсорбировали на силикагеле и очищали, применяя градиент 12-100% этилацетата в гексанах и 12 г силикагелевую колонку Thomson. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeTM-l-(npon-l-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната (0.109 г, 0.195 ммоль, выход 64.3%) в виде не совсем белого твердого вещества. ХН ЯМР (500 МГц, хлороформ-d) 5 = 5.57 (dd, ./=6.8, 1.9 Гц, Ш), 4.73 (d, J=l.6 Гц, Ш), 4.63 - 4.60 (m, Ш), 2.54 (td, ./=10.9, 5.3 Гц, Ш), 2.17 (dd, ./=17.1, 6.9 Гц, Ш), 2.08 - 1.99 (т, Ш), 1.70 (s, ЗН), 1.13 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.03 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 1.82 - 0.91 (т, 20Н).
Способ 2: Промежуточное соединение 1
Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната
Стадия 1: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-9-оксо-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро- 1Н-циклопента[а]хризен-3 а-карбальдегида
К суспензии (1 R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S, 11 aR, 1 IbR, 13aR, 1 3bR)-3a-(n^poKCHMemri)-5a,5b,8,8,l 1а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ола (20 г, 45.2 ммоль) в ацетонитриле (200 мл) и DCM (300 мл) добавляли молекулярные сита 4 ангстрем (5 г), и смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре. К смеси затем добавляли NMO (15.88 г, 136 ммоль) и TP АР (0.794 г, 2.259 ммоль). Темно-зеленую смесь перемешивали в атмосфере азота в течение ночи. Добавляли дополнительные количества NMO (2.0 г) и TP АР (0.08 г), и смесь перемешивали при
комнатной температуре в течение 7 ч. Смесь фильтровали через слой силикагеля и целита, который промывали дихлорметаном, затем 25% ЕЮ Ас в гексанах. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением и очищали с использованием 240 г силикагелевой колонки Thomson и градиента 15-20% этилацетата в гексанах. Указанный в заголовке продукт выделяли в виде белой пены (17.6 г, 40.1 ммоль, 89%). ХН ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 = 9.68 (d, J=1.5 Гц, Ш), 4.77 (d, J=2.0 Гц, Ш), 4.66 - 4.63 (m, Ш), 2.89 (td, ./=11.2, 5.8 Гц, Ш), 2.56 - 2.36 (т, 2Н), 2.16 - 2.03 (т, 2Н), 1.97 - 1.84 (т, 2Н), 1.71 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.03 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 1.83 - 0.87 (т, 18Н).
Стадия 2: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-9-оксо-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро- 1Н-циклопента[а]хризен-3 а-карбоновой
КИСЛОТЫ
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-9-OKCO-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбальдегида (17.6 г, 36.1 ммоль) в t-BuOH (100 мл) добавляли 2-метил-2-бутен (40 мл, 476 ммоль). Раствор хлорита натрия (15 г, 133 ммоль) и одноосновного фосфата натрия моногидрата (25 г, 181 ммоль) в воде (200 мл) добавляли по каплям на протяжении 1.25 ч, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение дополнительных 45 минут. Смесь разбавляли насыщенным водным хлоридом аммония (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 х 125 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над сульфатом натрия. Осушающее вещество удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с использованием 300 г силикагелевой колонки Thomson и градиента 10-50% этилацетата в гексанах. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,ll а-пентаметил-9-оксо-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро-1 Н-циклопента[а]хризен-
За-карбоновой кислоты в виде белой пены (16.4 г, 36.1 ммоль, 100%). ЖХ/МС: т/е 453.2 (М-Н)\ 2.61 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 = 10.02 (br. s., Ш), 4.75 (d, ./=1.8 Гц, Ш), 4.64 - 4.61 (m, Ш), 3.02 (td, J=10.8, 4.8 Гц, Ш), 2.55 - 2.36 (т, ЗН), 2.33
2.19 (m, 2H), 2.08 - 1.86 (m, 4H), 1.70 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.02 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 1.82 - 0.90 (m, 15H).
Стадия 3: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-roo4HaHaro-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9(5ЬН)-она
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,l 1а-пентаметил-9-оксо-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-карбоновой кислоты (16.41 г, 36.1 ммоль) в 1,4-диоксане (200 мл) добавляли триэтиламин (15.09 мл, 108 ммоль) и дифенилфосфоразидат (11.67 мл, 54.2 ммоль). Смесь нагревали до появления конденсации в течение 18.5 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под пониженным давлением. Остаток разделяли на две порции и очищали с использованием градиента 0-15% этилацетата в гексанах и 240 г силикагелевой колонки Thomson для очистки каждой порции. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением
(lR,3aS,5aR,5bR,7aR,l laR,l lbR,13aR,13bR)-3a-roonHaHaro-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9(5ЬН)-она (10.3 г, 22.80 ммоль, выход 63.2%) в виде не совсем белой пены. ХН ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 = 4.75 (d, ./=2.0 Гц, Ш), 4.66 - 4.63 (m, Ш), 2.60 - 2.36 (т, 4Н), 2.17 - 2.04 (т, Ш), 1.69 (s, ЗН), 1.10 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.04 (s, ЗН), 0.95 (s, 6Н), 2.01 - 0.71 (т, 20Н).
Стадия 4: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9(5ЬН)-она, НС1
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-H30i(HaHaTO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9(5ЬН)-она (10.3 г, 22.80 ммоль) в 1,4-диоксане (100 мл) добавляли НС1 (37%) (28.1 мл, 342 ммоль). Смесь нагревали до 60°С в течение 15.5 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под пониженным давлением. Остаток разбавляли насыщенным водным бикарбонатом натрия (150 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3 х 100 мл). Объединенные органические слои высушивали сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием градиента 20-60% этилацетата в гексанах с 0.1% триэтиламина, добавленного к смеси. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeTM-l-(npon-l-ен-2-ил)октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9(5ЬН)-она, НС1 (5.4 г, 11.68 ммоль, выход 51.2%) в виде желтой пены. ЖХ/МС: т/е 426.5 (М+Н)+ 1.59 мин (метод 1). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 = 4.73 (d, ./=2.3 Гц, Ш), 4.60 (dd, J=2A, 1.4 Гц, Ш), 2.58 -2.37 (ш, ЗН), 2.11 - 1.98 (m, Ш), 1.94 - 1.87 (m, Ш), 1.69 (d, J=0.5 Гц, ЗН), 1.09 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.03 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 1.79 - 0.91 (m, 20Н).
Стадия 5: Получение трет-бутил ((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,ll а-пентаметил-9-оксо-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро-1 Н-циклопента[а]хризен-За-ил)карбамата
К раствору (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9(5ЬН)-она (5.25 г, 12.33 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) добавляли гидроксид натрия (1 н.) (24.67 мл, 24.67 ммоль) с последующим добавлением ди-трет-бутил дикарбонат (3.15 мл, 13.57 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем добавляли 30 мл метанола, 50 мл дихлорметана и 20 мл воды, чтобы способствовать растворению смеси. После перемешивания в течение 1.5 ч при комнатной температуре, реакция не была завершена, поэтому добавляли ди-трет-бутил дикарбонат (0.3 г), и смесь перемешивали
при комнатной температуре в течение 3 ч. Снова добавляли ди-трет-бутил дикарбонат (0.3 г), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Так как следы исходного материала еще присутствовали, к смеси добавляли ди-трет-бутил дикарбонат (1 г), и перемешивание продолжали в течение 6 ч, в результате чего TLC показала отсутствие исходного материала. Смесь разбавляли водой (75 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3 х 100 мл). Объединенные органические слои промывали водой (100 мл), затем высушивали сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с использованием градиента 0-10% этилацетата в гексанах и 240 г силикагелевой колонки. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением трет-бутил ((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11аК,11ЬК,13аК,13ЬК)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-9-оксо-1-(проп-1-
ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)карбамата (5.85 г, 11.13 ммоль, выход 90%) в виде белой пены. *Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 = 4.72 (s, Ш), 4.62 (s, Ш), 4.33 (br. s., Ш), 2.64 - 2.32 (m, 5Н), 2.06 - 1.84 (m, 2Н), 1.69 (s, ЗН), 1.45 (s, 9Н), 1.08 (s, ЗН), 1.06 (s, ЗН), 1.03 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 1.74 - 0.86 (т, 18Н).
Стадия 6: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-((TpeT-бутоксикарбонил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната
Колбу, содержащую раствор трет-бутил ((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,ll а-пентаметил-9-оксо-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро-1 Н-цикл опента[а]хризен-За-ил)карбамата (1.2 г, 2.282 ммоль) и 1,1,1-трифтор-М-фенил-М-(трифторметил)сульфонил метансульфонамида (1.019 г, 2.85 ммоль) в THF (20 мл), охлаждали до -78°С. К раствору добавляли KHMDS (0.91 М в THF) (5.52 мл, 5.02 ммоль). Смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. Реакцию затем останавливали насыщенным водным хлоридом аммония (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 х 30 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния. Осушающее вещество удаляли
фильтрованием, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением. Сырой материал очищали с использованием градиента 0-12% этилацетата в гексанах и 80 г силикагелевой колонки Thomson. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением (1R, 3 aS, 5 aR, 5bR, 7 aR, 11 aR, 11 bR, 13 aR, 13 bR)-3 а-((трет-бу токсикарбонил )амино)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфоната (0.9 г, 1.368 ммоль, выход 59.9%) в виде белой пены. ХН ЯМР (500 МГц, хлороформ-d) 5 = 5.57 (dd, ./=6.7, 1.8 Гц, Ш), 4.73 (s, Ш), 4.62 (s, Ш), 4.32 (br. s., Ш), 2.64 - 2.31 (ш, ЗН), 2.16 (dd, ./=17.0, 6.8 Гц, Ш), 2.04 - 1.94 (m, Ш), 1.70 (s, ЗН), 1.45 (s, 9Н), 1.13 (s, ЗН), 1.06 (s, ЗН), 1.03 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 1.82 - 0.86 (т, 18Н).
Стадия 7: Такая же экспериментальная методика описана для Стадии 6 в способе 1 выше.
В качестве альтернативы, промежуточное соединение,
(lR,3aS,5aR,5bR,7aR,l laR,l lbR,13aR,13bR)-3a-roonHaHaro-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9(5ЬН)-он, может быть получено из бетулиновой кислоты в соответствии со схемой, представленной ниже:
Стадия 1: Получение (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-roo4HaHaro-5a,5b,8,8,l 1а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ола. Указанное в заголовке соединение получали, используя те же условия, которые описаны выше в Стадии 1, способ 1, применяя бетулиновую кислоту в качестве исходного материала.
Стадия 2: К раствору 24 г сырого (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-изоцианато-5 a,5b, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро-1Н
циклопента[а]хризен-9-ола в дихл op метане (200 мл) добавляли РСС (11.80 г, 54.8 ммоль) тремя порциями на протяжении 45 минут. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем добавляли дополнительный 1 г РСС, и смесь дополнительно перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь фильтровали через слой силикагеля и целита, и слой промывали раствором 1:1 этилацетаттексаны. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением сырого продукта, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ХН ЯМР (500 МГц, Хлороформ-d) 5 = 4.76 - 4.74 (m, Ш), 4.65 -4.63 (т, Ш), 2.62 - 2.36 (т, ЗН), 2.16 - 2.03 (т, Ш), 1.69 (s, ЗН), 1.10 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.04 (s, ЗН), 0.96 (s, 6Н), 1.95 - 0.91 (т, 21Н).
Получение и очистка (R)- и (8)-бензил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата
Стадия 1. Получение бензил 4-(((трифторметил)сульфонил)окси)циклогекс-3-енкарбоксилата
Из круглодонной колбы, содержащей бензил 4-оксоциклогексанкарбоксилат (6.0 г, 25.8 ммоль) (для получения смотри Bioorg. Med. Chem. Lett. 2008, 18, 5107-5110.) и 1,1,1-трифтор-Н-фенил-К-((трифторметил)сульфонил)метансульфонамид (10.15 г, 28.4 ммоль), откачивали и снова заполняли азотом три раза. Смесь разбавляли THF (100 мл) и охлаждали до -78°С. К смеси медленно добавляли KHMDS (0.5 М в толуоле) (64.6 мл, 32.3 ммоль) на протяжении 20 минут. Смесь перемешивали при -78°С в течение 30 минут,
затем ледяную баню удаляли, и смесь перемешивали в течение 1.5 ч при комнатной температуре. Смесь разбавляли водой (150 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 х 150 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением сырого бензил 4-(((трифторметил)сульфонил)окси)циклогекс-3-енкарбоксилата в виде светло-красного масла. Сырой продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ХН ЯМР (500 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 = 7.42 - 7.29 (rn, 5Н), 5.79 - 5.76 (m, Ш), 5.18-5.13 (m, 2Н), 2.70 - 2.61 (m, Ш), 2.52 - 2.34 (т, 4Н), 2.20 - 2.13 (т, Ш), 1.99 - 1.90 (т, Ш).
Стадия 2. Получение бензил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата
В колбу, содержащую сырой бензил 4-(((трифторметил)сульфонил)окси)циклогекс-3-енкарбоксилат (9.40 г, 25.8 ммоль), добавляли бис(пинаколато)диборон (6.88 г, 27.1 ммоль), ацетат калия (6.33 г, 64.5 ммоль) и 1,Г-бис(дифенилфосфино)ферроцен палладий (II) дихлорид (0.637 г, 0.774 ммоль). Смесь вакуумировали и заполняли азотом 3 раза, затем разбавляли 1,4-диоксаном (100 мл) и нагревали до 70°С в течение 21.5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (100 мл), и экстрагировали этилацетатом (3 х 100 мл). Органические слои промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием градиента 0-30% этилацетата в гексанах и 300 г силикагелевой колонки. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением 4.26 г продукта в виде прозрачного бесцветного масла. Образец разделяли, и одну порцию (1.0 г) очищали второй раз с помощью флэш-хроматографии, используя градиент 0-7% ацетона в гексанах. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением 0.7 г бензил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата в виде прозрачного бесцветного масла. Вторую порцию (2.9 г) очищали с помощью хиральной SFC (хиральная SFC, метод 2) с получением двух разделенных энантиомеров: энантиомер 1: (Ру)-бензил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-3-енкарбоксилат: 0.883 г; и энантиомер 2: (З)-бензил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-3-енкарбоксилат: 0.932 г. ХН ЯМР (500 МГц, хлороформ-d) 5 = 7.42 - 7.32 (rn, 5Н), 6.59 - 6.55 (rn, Ш), 5.15 (s, 2Н), 2.65 - 2.58 (m, Ш), 2.42 - 2.37 (m, 2Н), 2.34 - 2.26 (rn, Ш), 2.20 - 2.03 (rn, 2Н), 1.71 - 1.59 (m, Ш), 1.28 (s, 12Н).
Получение (Я)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата
В виалу, содержащую (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфонат (0.65 г, 1.165 ммоль), добавляли фосфорную кислоту, соль калия (0.742 г, 3.50 ммоль), (R)-6eH3ffii 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-3-енкарбоксилат (0.8 г, 2.338 ммоль) (энантиомер 1, полученный выше), 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметокси-1,Г-бифенил (S-фос) (0.072 г, 0.175 ммоль) и ацетат палладия (II) (0.026 г, 0.117 ммоль). Смесь разбавляли 1,4-диоксаном (10 мл) и водой (1 мл), продували азотом, затем виалу герметично закрывали и нагревали до 75°С. Через 6 ч нагревания смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (20 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл), и экстрагировали дихлорметаном (5 х 40 мл). Органические слои высушивали сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием градиента 10-60% этилацетата в гексанах и 40 г силикагелевой колонки. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением (R)-6eH3ffii 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,l laS,l lbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,ll а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (0.488 г, 0.782 ммоль, выход 67.1%) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 624.65 (М+Н)+, 2.18 мин (метод 1). 1Н ЯМР (500 МГц, хлороформ-d) 5 = 7.40 - 7.30 (m, 5Н), 5.35 (br. s., Ш), 5.18 (dd, J=6.2, 1.8 Гц, Ш), 5.14 (s, 2Н), 4.73 (d, J=2.0 Гц, Ш), 4.60 (s, Ш), 2.65 - 2.50 (m, 2Н), 2.38 - 2.30 (m, 2Н), 2.25 - 1.94
(m, 5H), 1.70 (s, ЗН), 1.07 (s, ЗН), 0.96 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.92 (s, ЗН), 0.86 (s, ЗН), 1.80 -0.83 (m,23H).
Получение (8)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата
В виалу, содержащую (lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-
пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-
октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфонат (0.05 г, 0.090
ммоль), добавляли фосфорную кислоту, соль калия (0.057 г, 0.269 ммоль), (8)-бензил 4-
(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-3-енкарбоксилат (0.062 г, 0.181
ммоль) (энантиомер 2, полученный выше), 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметокси-1,Г-
бифенил (S-фос) (5.52 мг, 0.013 ммоль) и ацетат палладия (II) (2.013 мг, 8.96 мкмоль).
Смесь разбавляли 1,4-диоксаном (1 мл) и водой (0.1 мл), продували азотом, затем
герметично закрывали и нагревали до 75°С. Через 6 ч нагревания смесь охлаждали до
комнатной температуры, разбавляли дихлорметаном, и высушивали сульфатом натрия.
Осушающее вещество удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали под
пониженным давлением. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с
использованием градиента 10-60% этилацетата в гексанах и 12 г силикагелевой колонки.
Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под
пониженным давлением с получением (8)-бензил 4-
((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-l-(npon-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (0.042 г, 0.067 ммоль, выход 75%) в виде не совсем белого твердого вещества. ХН ЯМР (500 МГц, хлороформ-d) 5 = 7.42 -7.31 (rn, 5Н), 5.37 (br. s., Ш), 5.21 - 5.17 (m, Ш), 5.16 (s, 2Н), 4.75 (d, J=1.9 Гц, Ш), 4.62 (s, Ш), 2.65 - 2.52 (m, 2Н), 2.39 - 2.32 (m, 2Н), 2.22 - 2.15 (m, 2Н), 2.10 - 1.96 (m, ЗН), 1.71 (s, ЗН), 1.09 (s, ЗН), 0.98 (s, 6Н), 0.91 (s, ЗН), 0.88 (s, ЗН), 1.82-0.83 (m, 23Н).
Стадия 1. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4R)-2-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aRllaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, НС1 (100 мг, 0.172 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламина (0.120 мл, 0.689 ммоль) в DCM (3 мл) добавляли 2-((lS,4R)-2-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)уксусную кислоту (40.1 мг, 0.258 ммоль) и 2-(ЗН-[1,2,3]триазоло[4,5-Р]пиридин-3-ил)-1,1,3,3-тетраметилизоуроний гексафторфосфат (V) (111 мг, 0.293 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, растворяли в смеси THF (1 мл) и МеОН (0.5 мл) и очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, применяя условия 7 ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением метил 4
((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4R)-2-a3a6HyHi^o[2.2.1]renTaH-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, TFA (80.6 мг, выход 58.8%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 681.7 (М+Н)+, 3.65 мин (метод 2).
Стадия 2. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4R)-2-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4R)-2-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (69.6 мг, 0.102 ммоль) в THF (5 мл) добавляли 0.753 молярный раствор LiOH Н20 (17.16 мг, 0.409 ммоль) в Н20. Реакцию нагревали до 75°С в течение 6.5 ч. Реакцию концентрировали досуха, и сырой остаток растворяли в смеси THF (1.0 мл) и МеОН (0.5 мл), фильтровали и очищали с использованием метода 2 ВЭЖХ и высушивали под вакуумом с получением 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4R)-2-азабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, TFA (51.3 мг, выход 61.1%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 667.6 (М+Н)+, 2.68 мин (метод 2). *Н ЯМР (500 МГц ,1:1 CDCl3:MeOD) 5 = 7.92 (d, J= 8.2 Гц, 2 Н), 7.38 (s, 1 Н), 7.20 (d,J= 8.2 Гц, 2 Н), 5.29 (d, J= 4.6 Гц, 1 Н), 4.76 (br. s., 1 Н), 4.65 (br. s., 1 Н), 4.00 - 3.84 (ш, 2 Н), 3.52 - 3.41 (m, 1 Н), 2.98 (t, J= 12.1 Гц, 1 Н), 2.76 (br. s., 1 Н), 2.71 - 2.61 (т, 2 Н), 2.36 (dd, J= 7.8, 12.1 Гц, 1 Н), 2.13 (dd, J= 6.4, 17.1 Гц, 1 Н), 2.06 - 1.95 (т, 2 Н), 1.94 - 1.83 (т, 4 Н), 1.78 (d,J= 13.4 Гц, 1 Н), 1.74 (br. s., 1 Н), 1.72 (s, 3 Н), 1.70 - 1.65 (т, 1 Н), 1.59 - 1.31 (т, 12 Н), 1.26 (br. s., 1 Н), 1.19 - 1.12 (т,
1 Н), 1.10 (s, 3 Н), 1.09 (br. s., 1 H), 1.03 (s, 3 H), 1.01 (s, 3 H), 0.95 (br. s., 3 H), 0.94 (br. s., 3 H).
Пример 2
Получение 4-((l R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 11 bR 13aR 13bR)-3a-(2-((l 8,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13аДЗЬ-октадекагидро-Ш-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
Стадия 1. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-бромацетамидо)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата.
К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aRllaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, НС1 (403 мг, 0.694 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли ДтУ-диизопропилэтиламин (0.484 мл, 2.78 ммоль), бромуксусную
кислоту (106 мг, 0.764 ммоль) и 2-(ЗН-[1,2,3]триазоло[4,5-Р]пиридин-3-ил)-1,1,3,3-тетраметилизоуроний гексафторфосфат (V) (317 мг, 0.833 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч. Затем реакцию концентрировали, и сырой остаток растворяли в THF (3.0 мл), фильтровали и очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, используя метод 2 ВЭЖХ, с получением метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 11 bR, 13aR, 1 31^)-За-(2-бромацетамидо)-5a,5b,8,8,ll а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (148.9 мг, выход 32.3%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 664.6 (М+Н)+, 2.41 мин (метод 3).
Стадия 2. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата.
К раствору метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(2-бpoмaцeтaмидo)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-
9-ил)бензоата (95 мг, 0.143 ммоль) в THF (2 мл) в реакционной пробирке для
микроволнового реактора добавляли ДтУ-ди-изо-пропилэтиламин (0.125 мл, 0.715 ммоль)
с последующим добавлением (15',45)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида,
гидробромида (98 мг, 0.429 ммоль). Полученную в результате кашицу нагревали до 155°С
в микроволнах. Через 5 ч реакционную смесь разбавляли МеОН (1 мл), фильтровали и
очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, используя метод
препаративной ВЭЖХ 1 с получением метил 4-
((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-тиa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата в виде белого твердого вещества (65.5 мг, выход 61%) после сушки в вакуумной печи в течение ночи при 50°С. ЖХ/МС: т/е 731.3 (М+Н)+, 2.88 мин (метод 1). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.92 (d, ./=8.3 Гц, 2Н), 7.19 (d, ./=8.3 Гц, 2Н), 6.93 (s, Ш), 5.29 (d, ./=4.9 Гц, Ш), 4.80 (s, Ш), 4.65 (s, Ш), 3.90 (s, ЗН), 3.81 (br. s., Ш), 3.64 (br. s., Ш), 3.59 (d, ./=11.2 Гц, Ш), 3.45 (d, J=16.1 Гц, Ш), 3.29 (d, J=12.7 Гц, Ш), 3.23 (d, ./=16.1 Гц, Ш), 3.07 (dd, J=12.5, 2.9 Гц, 2H), 2.72 - 2.58 (m, 2Н), 2.56 - 2.38 (m, ЗН), 2.11 (dd, ./=17.1, 6.4 Гц, Ш), 1.92 - 1.75 (m, 2Н), 1.71 (s, ЗН), 1.65 (d, J=5.6 Гц, 2Н), 1.59 - 1.40 (m, 8Н), 1.40 - 1.20 (m, 4Н), 1.13 (d, ./=13.0 Гц, 2Н), 1.03 (s, ЗН), 1.01 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.92 (s, 6Н). 13С ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 168.0, 167.1, 148.9, 148.5, 146.2, 130.0, 128.4, 127.9, 123.9, 110.6, 64.4, 62.2, 61.0, 59.8, 59.4, 54.3, 52.6, 51.9, 49.2, 49.0, 48.0, 42.0, 41.6, 40.5, 38.5, 37.4, 36.2, 35.1, 34.5, 33.2, 29.6, 29.4, 28.7, 27.2, 25.0, 21.3, 21.0, 19.6, 19.1, 16.4, 15.7, 14.4
Стадия 3. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (60 мг, 0.082 ммоль) в THF (3 мл) и МеОН (1.00 мл) добавляли раствор гидроксида лития моногидрата (6.84 мкл, 0.246 ммоль) в воде (0.50 мл). Реакционную смесь нагревали до 75°С. Через 4 ч реакцию концентрировали досуха. Материал повторно растворяли в смеси THF (1.75 мл), МеОН (1 мл) и 1 н. НС1 (0.250 мл) и очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 4 препаративной ВЭЖХ. Объединенные после препаративной ВЭЖХ фракции
обрабатывали 1 и. НС1 (1 мл), концентрировали и высушивали под пониженным давлением с получением 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, НС1 (50.2 мг, выход 79%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 717.5 (М+Н)+, 1.88 мин (метод 1). ХН ЯМР (400 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 7.90 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 7.42 (br. s., Ш), 7.18 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 5.27 (d, J=4.9 Гц, Ш), 4.76 (br. s., Ш), 4.63 (br. s., Ш), 4.47 (br. s., 1H), 4.05 (br. s., 1H), 3.68 (br. s., 1H), 3.53 - 3.45 (m, 1H), 3.42 - 3.34 (m, 1H), 2.84 - 2.56 (m, 4H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 2.11 (dd, ./=17.0, 6.2 Гц, 1H), 2.00 - 1.74 (m, 4H), 1.70 (s, 3H), 1.68 - 1.64 (m, 1H), 1.60 - 1.29 (m, 12H), 1.24 (br. s., 1H), 1.08 (br. s., 3H), 1.01 (br. s., 3H), 0.99 (br. s., 3H), 0.92 (br. s., 3H), 0.92 (br. s., ЗН). 13C ЯМР (101 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 209.8, 169.8, 150.0, 149.5, 147.1, 130.8, 129.5, 129.1, 124.7, 111.0, 78.65 - 78.52, 66.7, 66.6, 65.4, 60.4, 55.7, 53.7, 50.2, 49.9, 47.8, 42.7, 42.5, 41.4, 41.21 - 41.02, 38.4, 38.2, 37.0, 35.4, 34.3, 30.1, 30.0, 29.4, 28.0, 26.0, 22.1, 21.6, 20.5, 19.5, 17.1, 16.4, 14.9.
Пример 3
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-5-6eH3^-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты
Стадия 1. К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-бромацетамидо)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (150 мг, 0.226 ммоль) в THF (3 мл) в 5 мл пробирке для микроволнового реактора добавляли М-этил-М-изопропилпропан-2-амин (0.197 мл, 1.128 ммоль) и (1S,4S)-2-бензил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан, гидробромид (121 мг, 0.451 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 150°С в микроволнах в течение 8 ч. Реакцию фильтровали, и сырой
жидкий фильтрат очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 4 ВЭЖХ, с получением метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-5-6eH3^-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, 2 TFA (68.7 мг, выход 29.8%) в виде светло-коричневой пены. ЖХ/МС: т/е 772.4 (М+Н)+, 2.53 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.94 (d, ./=8.3 Гц, 2Н), 7.54 (br. s., 2Н), 7.49 (br. s., ЗН), 7.20 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 6.73 (br. s., Ш), 5.30 (d, ./=4.6 Гц, Ш), 4.76 (br. s., Ш), 4.65 (s, 1Н), 4.46 - 4.27 (m, 4H), 4.09 (br. s., 2H), 3.92 (s, 4H), 3.82 -3.76 (m, 1H), 3.57 (br. s., 1H), 3.36 (br. s., 1H), 2.58 (d, ./=11.7 Гц, ЗН), 2.44 - 2.34 (m, 1H), 2.11 (dd, J=17.2, 6.2 Гц, 1H), 1.89 (dt, ./=6.7, 3.2 Гц, 1H), 1.72 (br. s., 2H), 1.70 (s, 3H), 1.65 (br. s., 1H), 1.58 - 1.20 (m, 13H), 1.15 - 1.05 (m, 2H), 0.99 (s, 3H), 0.97 (s, 6H), 0.94 (br. s., 3H), 0.93 (br. s., 3H).
Стадия 2. К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-
5-бензил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-
(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (56 мг, 0.073 ммоль) в THF (3 мл) и МеОН (1 мл)
добавляли раствор гидроксида лития моногидрата (8.06 мкл, 0.290 ммоль) в воде (1 мл).
Реакционную смесь нагревали до 75°С в течение 6 ч и концентрировали досуха. Материал
растворяли в 2 мл THF, 2 мл Н20, 0.5 мл 1 н. НС1, и смесь экстрагировали 2 х 15 мл 1:1
THF:EtOAc. Объединенный органический слой высушивали над MgS04 фильтровали,
концентрировали и высушивали с получением 4-
((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-5-6eH3^-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 НС1 (37.1 мг, выход 61.6%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 758.4 (М+Н)+, 2.40 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 СОС13:МЕТАНОЛ-d4) 5 7.90 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 7.56 (dd, J=6.5, 3.1 Гц, 2Н), 7.48 - 7.41 (т, ЗН), 7.21 (br. s., Ш), 7.18 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 5.27 (d, J=4.9 Гц, Ш), 4.75 (br. s., Ш), 4.62 (s, Ш), 4.46 - 4.40 (т, Ш), 4.31 (d, ./=13.2 Гц, Ш), 4.28 (br. s., Ш), 4.13 (br. s., Ш), 3.83 (d, J=15.9 Гц, Ш), 3.75 -3.61 (т, ЗН), 3.37 (d, ./=12.2 Гц, 2Н), 2.58 (dd, J=9.8, 3.7 Гц, 2Н), 2.52 - 2.45 (т, Ш), 2.41 -2.31 (т, 2Н), 2.10 (dd, ./=17.0, 6.2 Гц, Ш), 1.95 - 1.82 (т, Ш), 1.75 (d, .7=11.0 Гц, 2Н), 1.69 (s, ЗН), 1.67 - 1.62 (т, Ш), 1.51 - 1.38 (т, 8Н), 1.37 - 1.28 (т, ЗН), 1.27 - 1.20 (т, ЗН), 1.16 -1.06 (т, 2Н), 1.00 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.92 (br. s., ЗН), 0.91 (br. s., ЗН). 13С ЯМР
(101 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОJI-d4) 5 169.8, 167.3, 150.0, 149.5, 147.1, 131.3, 130.9, 130.8, 130.4, 130.2, 129.4, 129.0, 124.7, 110.9, 78.56 - 78.52, 66.3, 64.1, 63.5, 57.3, 56.3, 53.6, 50.1, 49.9, 47.9, 42.7, 42.4, 41.3, 38.6, 38.2, 37.0, 35.3, 34.2, 33.5, 30.8, 30.3, 30.1, 29.9, 29.4, 28.0, 26.0, 22.0, 21.6, 20.4, 19.6, 17.0, 16.3, 14.9.
Пример 4
Получение 4-((1 S,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 11 bR, 13aR, 13bR)-3a-(2-((l 8,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-1-изопропил-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
К раствору 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-
тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-
ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты (15 мг, 0.021 ммоль) в смеси THF (4 мл) и
МеОН (1 мл) в атмосфере N2 (газообразный) добавляли гидроксид палладия на угле (3.67
мг, 5.23 мкмоль). Реакционную смесь продували Нг (газообразный) и перемешивали в
атмосфере Н2 (газообразный). Через 6 ч реакционную смесь фильтровали и промывали
DCM и концентрировали с получением коричневого твердого вещества. Материал затем
пропускали через силикагелевую колонку (3 г), элюировали 90:10 DCM:MeOH,
концентрировали и высушивали с получением 4-
((lS,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(2-((lS,4S)-2,2^HOKCHflo-2-THa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)ацетамидо)-1-изопропил-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты (11.5 мг, выход 76%) в виде светло-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 719.3 (М+Н)+, 2.61 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 7.90 (d, ./=7.3 Гц, 2Н), 7.30 - 7.21 (m, Ш), 7.18 (d, J=7.3 Гц, 2Н), 5.28 (d, J=4.9 Гц, Ш), 4.09 (br. s., Ш), 3.77 (br. s., Ш), 3.65 (d, J=6.6 Гц, 2H), 2.59 (d, ./=12.7 Гц, 4Н), 2.32 (d, ./=11.2 Гц, Ш), 2.13 (dd, J=17.0, 5.7 Гц, Ш), 1.97 - 1.82 (т, ЗН), 1.78 - 1.67
(m, ЗН), 1.60 - 1.42 (m, 12H), 1.39 (br. s., 1H), 1.24 (br. s., 4H), 1.13 (br. s., 1H), 1.07 (br. s., 3H), 1.00 (br. s., 6H), 0.92 (br. s., 6H), 0.88 (d, J=6.4 Гц, ЗН), 0.78 (d, J=6.4 Гц, ЗН).
Примеры 5 и 6
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,2-AHOKCHAO-2-
тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-
ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты и 4-
((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-тиa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)(2-гидроксиэтил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 НС1.
Стадия 1. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-
2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-
1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, TFA и метил 4-
((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-тиa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)(2-гидроксиэтил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, TFA.
К кашице метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-
пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-
октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, НС1 (0.350 г, 0.603 ммоль) в
ацетонитриле (5 мл) в 75 мл колбе под средним избыточным давлением добавляли
фосфорную кислоту, соль калия (0.563 г, 2.65 ммоль), KI (0.270 г, 1.629 ммоль) с
последующим добавлением раствора (18,48)-5-(2-хлорэтил)-2-тиа-5-
азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида (0.152 г, 0.724 ммоль) (полученного как описано выше) в ацетонитриле (5 мл). Реакционную смесь продували N2 (газообразный) и нагревали до 120°С в течение 24 ч. Реакцию оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Твердое вещество удаляли фильтрованием и промывали DCM. Жидкий фильтрат концентрировали до белой пасты. Сырой материал растворяли в смеси THF/MeOH и очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 3 препаративной ВЭЖХ, с получением смеси метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-тиa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, TFA и метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)(2-гидроксиэтил)амино)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, TFA (0.125 г, выход 24.94%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 717.3 (М+Н)+, 2.37 мин, ЖХ/МС: т/е 761.3 (М+Н)+, 2.37 мин (метод 3). Материал сразу использовали на следующей стадии.
Стадия 2. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,2-
диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-
(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2НС1 и 4-
((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,2-AHOKCHAO-2-THa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)(2-гидроксиэтил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 НС1.
К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,2-
диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-
(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, TFA и метил 4-
((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-тиa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)(2-гидроксиэтил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, TFA (122 мг, 0.170 ммоль) в THF (5 мл) и МеОН (2 мл) добавляли раствор гидроксида лития моногидрата (0.014 мл, 0.510 ммоль) в воде (1 мл). Реакционную смесь нагревали до 75°С в течение 8 ч. Смесь затем концентрировали досуха. Материал повторно растворяли в THF (1.75 мл), МеОН (1 мл), 0.250 мл 1 н. НС1 и очищали с использованием метода 1 препаративной ВЭЖХ. Объединенные ВЭЖХ фракции концентрировали, и материал растворяли в смеси THF (2 мл) и НгО (2 мл) и экстрагировали смесью 1:1 THF:EtOAc (2 х 20 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали. Сырую смесь очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, используя ВЭЖХ метод 1. Объединенные ВЭЖХ фракции для каждого пика обрабатывали 1 н. НС1, концентрировали и высушивали под вакуумом с получением 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-тиa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен
9-ил)бензойной кислоты, 2 НС1 (20.5 мг, выход 15.0%) и 4-((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-За-((2-((18,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)(2-гидроксиэтил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 НС1 (36.9 мг, выход 26.7%), обе в виде белого твердого веществаз. ЖХ/МС: т/е 703.6 (М+Н)+, 1.84 мин (метод 2). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 7.90 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 7.18 (d, J=8.1 Гц, 2Н), 6.93 (s, Ш), 5.28 (d, J=4.9 Гц, Ш), 4.85 (br. s., Ш), 4.15 (br. s., Ш), 3.69 (br. s., Ш), 3.40 (br. s., 2H), 3.25 (br. s., 2H), 3.07 (d, J=13.0 Гц, ЗН), 2.60 (d, J=12.0 Гц, 1H), 2.45 (d, ./=10.8 Гц, 1H), 2.22 (s, 1H), 2.12 (dd, ./=17.0, 6.2 Гц, 2H), 2.06 - 1.95 (m, 2H), 1.92 - 1.77 (m, 2H), 1.73 (s, 3H), 1.66 -1.43 (m, 10H), 1.41 - 1.37 (m, 6H), 1.24 (br. s., 2H), 1.15 (br. s., 4H), 1.09 (s, 3H), 1.01 (s, 3H), 0.94 (br. s., 3H), 0.93 (br. s., ЗН). 13C ЯМР (101 МГц, /:/ CDCl3: МЕТАНОЛ^) 5 169.8, 149.4, 148.2, 147.1, 137.8, 130.8, 129.5, 129.2, 126.0, 124.6, 112.2, 61.5, 53.8, 53.6, 50.0, 49.4, 46.2, 42.9, 42.4, 41.6, 38.2, 38.1, 37.0, 35.0, 34.4, 33.1, 30.8, 30.0, 28.9, 27.8, 26.9, 25.9, 21.8, 21.6, 21.5, 20.5, 19.6, 17.1, 16.8, 14.9. ЖХ/МС: m/e 747.3 (M+H)+, 2.22 мин (метод 3). lH ЯМР (400 МГц, /:/ CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 7.90 (d, ./=8.1 Гц, 2H), 7.18 (d, ./=8.3 Гц, 2Н), 5.27 (d, J=4.6 Гц, Ш), 4.71 (s, Ш), 4.59 (br. s., Ш), 4.33 - 4.22 (m, 2Н), 4.11 - 3.95 (m, Ш), 3.81 (br. s., Ш), 3.61 (dd, ./=11.1, 3.8 Гц, Ш), 3.28 - 3.13 (m, 2Н), 2.94 - 2.74 (m, 2Н), 2.69 -2.55 (m, 2Н), 2.43 (d, .7=11.5 Гц, Ш), 2.11 (dd, ./=17.2, 6.5 Гц, Ш), 1.98 - 1.77 (m, 4Н), 1.72 (br. s., 2Н), 1.69 (s, ЗН), 1.64 (br. s., 2Н), 1.63 - 1.51 (т, ЗН), 1.49 (br. s., 2Н), 1.43 (d, .7=11.7 Гц, 2Н), 1.40 - 1.29 (т, ЗН), 1.28 - 1.22 (т, 2Н), 1.18 (dd, ./=12.7, 10.0 Гц, 2Н), 1.11 (br. s., ЗН), 1.10 - 1.06 (т, Ш), 1.01 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН).
Получение (15',45)-5-(2-хлорэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида
Na2S, DMSO Ph"
> -
110 °c
Стадия 1
mCPBA
^>
DCM
Стадия 2
HBr/AcOH
(c) (c) Br H2N .CI cu
н fo
Стадия 3
Стадия 1. Получение (^^^-бензил 2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-карбоксилата
.О.
(28,4К)-Бензил 4-(тосилокси)-2-((тосилокси)метил)пирролидин-1-карбоксилат (10 г, 17.87 ммоль) и сульфид натрия (1.125 мл, 26.8 ммоль) объединяли в DMSO (80 мл) в 150 мл колбе под средним избыточным давлением. Реакционную смесь продували N2 (газообразный) и полученную в результате кашицу нагревали до 110°С в атмосфере N2 (газообразный). Реакция немедленно становилась глубокого синего цвета. Через 17 ч полученную в результате черную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли 1:1 EtOAc:Et20 (150 мл) и промывали Н2О (100 мл). Водный слой экстрагировали 1:1 EtOAc:Et20 (100 мл). Объединенный органический слой промывали 1 н. НС1 (100 мл), насыщенным солевым раствором, высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали с получением темно-красного вязкого масла. Сырой материал загружали на силикагелевую колонку (60 г) и элюировали смесью 3:1 гексан:ЕЮАс с получением (^^^-бензил 2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-карбоксилата (2.7 г, выход 61%) в виде красного вязкого масла. ЖХ/МС: т/е 250.0 (М+Н)+, 2.22 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.39 - 7.31 (m, 5Н), 5.18 - 5.06 (т, 2Н), 4.79 - 4.65 (т, Ш), 3.64 (d, .7=7.8 Гц, 2Н), 3.59 (br. s., Ш), 3.22 - 3.04 (т, Ш), 3.04-2.96 (т, Ш), 2.16 (t, .7=10.0 Гц, Ш), 1.88 (d, .7=10.3 Гц, Ш).
Стадия 2. Получение (^^^-бензил 2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-карбоксилат 2,2-диоксида
К раствору (18,48)-бензил 2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-карбоксилата (2.7 г, 10.83 ммоль) в DCM (50 мл) добавляли /w-хлорпербензойную кислоту (4.67 г, 27.1 ммоль) порциями для контроля за выделением газа. Реакцию была слегка экзотермической на ощупь. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Реакцию медленно останавливали 10% ИагвОз (50 мл). Водный слой экстрагировали DCM (2 х 50 мл). Объединенный органический слой промывали 10% ИаНСОз, Н2О (25 мл), насыщенным солевым раствором, высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали до коричневого вязкого масла. Материал очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Si02, 90 г), элюировали смесью 1:2 гексан:ЕЮАс с получением (^^^-бензил 2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-карбоксилат 2,2-диоксида
(1.52 г, выход 49.9%) в виде белой пены. *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.36 - 7.19 (m, 5Н), 5.15 - 4.99 (т, 2Н), 4.69 - 4.51 (т, Ш), 3.99 - 3.89 (т, Ш), 3.57 (br. s., Ш), 3.50 -3.40 (т, Ш), 3.24 - 3.05 (т, Ш), 3.04 - 2.94 (т, Ш), 2.43 (d, .7=12.2 Гц, Ш), 2.30 - 2.17 (т, Ш).
Стадия 3. Получение (15',45)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида, гидробромида
Br H2N
(18,48)-Бензил 2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-карбоксилат 2,2-диоксид (1.4 г, 4.98 ммоль) обрабатывали гидробромноватой кислотой (33% в уксусной кислоте) (20 мл, 116 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре. Через 18 ч белый осадок фильтровали, промывали ледяной уксусной кислотой (5 мл), и высушивали под пониженным давлением с получением (15',45)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида, гидробромида (1.01 г, выход 85%) в виде белого твердого вещества. гН ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 9.49 (br. s., 2Н), 4.60 (br. s., Ш), 4.15 (br. s., 1H), 3.67 - 3.51 (m, 2H), 3.49 - 3.32 (m, 2H), 2.34 (d, .7=13.2 Гц, 1H). 13C ЯМР (101 МГц, DMSO-d6) 5 57.7, 56.7, 55.3, 44.2, 33.5.
Стадия 4. Получение (15',45)-5-(2-хлорэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида
Cl- ^
- N
К раствору (15',45)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида, гидробромида (0.5 г, 2.192 ммоль) в DMF (25 мл) добавляли карбонат калия (0.397 мл, 6.58 ммоль) с последующим добавлением 1-бром-2-хлорэтана (0.927 мл, 10.96 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 30 ч реакционную смесь выливали в воду (20 мл) и экстрагировали EtOAc (2 х 50 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали до светло-коричневого вязкого масла. Сырой материал загружали на силикагелевую колонку, элюировали смесью 1:2 гексан:ЕЮАс с получением (15',45)-5-(2-хлорэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида (150 мг, выход 32.6%) в виде прозрачного стеклообразного материала. ЖХ/МС: т/е 210.0 (М+Н)+, 0.240 мин (метод 3).
Пример 7
Стадия 1. Получение (18,48)-5-(2-хлорэтил)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептана
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты и метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
Твердую смесь (18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептана, НС1 (0.5 г, 3.69 ммоль) и карбоната цезия (4.25 г, 12.91 ммоль) высушивали в вакуумной печи при 50°С в течение 20 мин, и колбу снова заполняли N2 (газообразный). К смеси добавляли THF (45 мл) с последующим добавлением 1-бром-2-хлорэтана (0.936 мл, 11.06 ммоль). Полученную в результате кашицу перемешивали при 50°С в течение 19 ч. Затем, избыток карбоната цезия отфильтровывали и промывали EtOAc (2 х 25 мл). Жидкий фильтрат концентрировали и светло-желтое сырое вещество очищали с помощью колоночной
флэш-хроматографии (SiC> 2, 25 г, элюируя 95:5 DCMMeOH) и быстро высушивали под пониженным давлением с получением (18,48)-5-(2-хлорэтил)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептана (129 мг, выход 19.48%) в виде прозрачного вязкого масла. ХН ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 4.33 (s, Ш), 3.93 (d, .7=8.1 Гц, 1Н), 3.57 (dd, .7=8.1, 1.7 Гц, Ш), 3.46 (d, .7=6.8 Гц, ЗН), 2.92 (dd, .7=10.1, 1.6 Гц, Ш), 2.90 - 2.79 (m, 2Н), 2.50 (dd, .7=9.8, 1.0 Гц, Ш), 1.79 (dd, .7=9.8, 2.0 Гц, Ш), 1.71 - 1.63 (m, Ш). 13С ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 76.6, 69.1, 61.8, 61.0, 55.5, 42.8, 35.6.
Стадия 2. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-OKca-
5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-
9-ил)бензойной кислоты, 2 НС1 и метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-
((2-((18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-
1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, 2НС1.
Метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-
1- (проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоат (434 мг, 0.798 ммоль), иодид калия (530 мг, 3.19 ммоль) и фосфат калия (847 мг, 3.99 ммоль) помещали в 75 мл колбу под средним избыточным давлением, измельчали, высушивали в 50°С вакуумной печи в течение 30 минут и снова заполняли N2 (газообразный). Твердую смесь заливали раствором (18,48)-5-(2-хлорэтил)-
2- окса-5-азабицикло[2.2.1]гептана (129 мг, 0.798 ммоль) в MeCN (10 мл) и нагревали до 120°С. Через 48 ч реакцию оставляли охлаждаться до комнатной температуры, обрабатывали Н2О (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Не совсем белое твердое вещество фильтровали и промывали Н2О (10 мл). Сырой продукт очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, применяя метод 5 ВЭЖХ, с получением 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 НС1 (35.6 мг, 0.048 ммоль, выход 6.1%) в виде белого твердого вещества. *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 ХЛОРОФОРМ-йМЕТАНОЛЩ 5 7.91 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 7.19 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 5.29 (d, .7=4.9 Гц, Ш), 4.87 (s, Ш), 4.74 - 4.64 (m, 4Н), 4.49 (br. s., Ш), 4.30 (br. s., Ш), 3.84 (d, .7=9.8 Гц, 2Н), 3.48 (br. s., 2Н), 2.85 (br. s., Ш), 2.30 (br. s., 1H), 2.24 - 1.97 (m, 7H), 1.88 (d, .7=13.7 Гц, 1H), 1.81 - 1.76 (m, 1H), 1.74 (s, 3H), 1.70 (br. s., 1H), 1.65 (d, .7=8.3 Гц, 2H), 1.62 - 1.46 (m, 7H), 1.45 - 1.35 (m, 3H), 1.27 (d, .7=9.0 Гц, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 1.03 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.94 (br. s., ЗН). ЖХ/МС: m/e 669.6 (M+H)+, 2.40 мин (метод 3).
Пример 8
Получение 4-((lS,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-1-изопропил-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
К раствору 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты (12 мг, 0.018 ммоль) в смеси THF (1 мл) и МеОН (1 мл) добавляли гидроксид палладия (II) (6.43 мг, 9.16 мкмоль). Реакционную смесь продували Нг (газообразный) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Нг (газообразный) в течение 18 ч. Катализатор удаляли фильтрованием и промывали DCM. Фильтрат концентрировали и высушивали с получением 4-((1 S,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 11 bR, 13aR, 13bR)-3a-((2-((l S,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-1-изопропил-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 НС1 (11 мг, выход 76%) в виде белой пены. ЖХ/МС: т/е 657.6
(М+Н)+, 2.30 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 7.91 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 7.19 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.29 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.36 (t, .7=7.0 Гц, Ш), 4.26 (t, .7=6.4 Гц, Ш), 3.79 (ddd, .7=19.0, 9.1, 4.4 Гц, 2Н), 3.68 - 3.60 (m, Ш), 3.12 - 3.06 (т, Ш), 2.87 (s, Ш), 2.54 - 2.47 (т, Ш), 2.26 (dd, .7=16.4, 8.6 Гц, Ш), 2.15 (dd, .7=16.8, 6.0 Гц, 2Н), 2.01 (d, .7=5.4 Гц, ЗН), 1.89 - 1.85 (т, Ш), 1.84 - 1.67 (т, 7Н), 1.63 - 1.53 (т, 5Н), 1.50 - 1.43 (т, ЗН), 1.42 - 1.36 (т, 2Н), 1.31 - 1.23 (т, 4Н), 1.21 (br. s., ЗН), 1.07 (s, ЗН), 1.03 (s, ЗН), 0.94 (br. s., ЗН), 0.93 (br. s., ЗН), 0.92 (br. s., ЗН), 0.83 (d, .7=6.8 Гц, ЗН).
Пример 9
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-5-6eH3^-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
CI.
"N Bn
Твердую смесь (18,48)-2-бензил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептана, 2НВг (0.973 г, 2.78 ммоль) и карбоната цезия (3.20 г, 9.73 ммоль) высушивали в вакуумной печи в течение 15 минут, и колбу заполняли N2 (газообразный). К смеси добавляли THF (50 мл) с последующим добавлением 1-бром-2-хлорэтана (0.705 мл, 8.34 ммоль). Полученную в
результате мутную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч и затем нагревали при 52°С в течение 26 ч. Реакционную смесь фильтровали, и образовавшееся твердое вещество промывали ЕЮ Ас. Жидкий фильтрат концентрировали до прозрачного вязкого масла, которое очищали с помощью колоночной хроматографии (SiC> 2, 40 г картридж, элюируя 95:5 DCM:MeOH), высушивали под пониженным давлением с получением (18,48)-2-бензил-5-(2-хлорэтил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептана (275 мг, выход 35.5%) в виде прозрачного вязкого масла. ЖХ/МС: т/е 251.1 (М+Н)+, 0.45
мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.40 - 7.29 (m, 4Н), 7.28 - 7.20 (т, Ш), 3.82 - 3.65 (т, 2Н), 3.58 - 3.50 (т, 2Н), 3.41 - 3.28 (т, 2Н), 3.03 - 2.92 (т, Ш), 2.90 -2.77 (т, 4Н), 2.68 (dd, ./=10.0, 2.4 Гц, Ш), 1.84 - 1.69 (т, 2Н). 13С ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 139.6, 128.4, 128.2 , 126.8, 62.8, 61.4, 58.3, 57.1, 56.2, 56.0, 43.1, 34.1.
Стадия 2. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-5-бензил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
Метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоат, НС1 (579 мг, 0.998 ммоль), фосфорную кислоту, калиевую соль (1059 мг, 4.99 ммоль) и иодид калия (0.212 мл, 3.99 ммоль) объединяли в 75 мл пробирке под средним избыточным давлением. Твердую смесь высушивали под вакуумом при 50°С в течение 10 мин, затем помещали в атмосферу N2 (газообразный). Твердую смесь обрабатывали раствором (18,48)-2-бензил-5-(2-хлорэтил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептана (250 мг, 0.998 ммоль) в MeCN (10 мл). Полученную в результате кашицу нагревали до 120°С в течение 19 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, обрабатывали Н2О (15 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Образовавшееся коричневое твердое вещество
измельчали, фильтровали, промывали НгО (15 мл) и сохраняли для анализа. Жидкий фильтрат экстрагировали 3 х 25 мл DCM. Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали. ЖХ/МС показала, что коричневое твердое вещество (1 г) является смесью продукта и исходного материала. Жидким фильтрованием получали около 100 мг продукта и исходного материала. 50 мг сырого материала очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 6 ВЭЖХ, с получением 23 мг метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-5-6eH3^-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, бис-TFA соль, в виде белого твердого вещества, которую использовали для определения характеристик. Остаток коричневого твердого вещества, полученного выше, очищали с помощью колоночной хроматографии (Si02, 90 г картридж) и элюировали 95:5 DCM:MeOH для удаления исходного материала, и затем элюировали 90:10 DCM:MeOH с получением метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-5-6eH3^-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (172 мг, 0.206 ммоль, выход 57.2% на основании удаления исходного материала) в виде светло-желтого масла.
ЖХ/МС: т/е 758.7 (М+Н)+, 2.30 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.94 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 7.53 - 7.42 (m, 5Н), 7.20 (d, ./=8.3 Гц, 2Н), 5.30 (d, /=4.6 Гц, Ш), 4.77 (s, Ш), 4.68 (s, Ш), 4.30 - 4.18 (т, 2Н), 4.14 - 4.04 (т, 2Н), 3.91 (s, ЗН), 3.35 - 3.08 (т, 4Н), 3.08 - 2.84 (т, ЗН), 2.78 (br. s., Ш), 2.24 - 2.05 (т, 4Н), 1.98 - 1.87 (т, 4Н), 1.70 (s, ЗН), 1.65 (br. s., 2Н), 1.59 - 1.41 (т, 7Н), 1.40 - 1.31 (т, 4Н), 1.24 (dd, ./=11.5, 6.6 Гц, 2Н), 1.14 (s, ЗН), 1.05 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.93 (s, 6Н).
Стадия 3. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-5-бензил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
К раствору метил 4-((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-За-((2-((18,48)-5-бензил-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, 2 TFA (22 мг, 0.022 ммоль) в смеси THF (1 мл) и МеОН (0.5 мл) добавляли раствор гидроксида лития моногидрата (4.68 мг, 0.112 ммоль) в воде (0.5 мл). Полученную в результате смесь нагревали до 75°С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали с получением белой пасты. Сырой продукт растворяли в смеси THF (0.5 мл), МеОН (0.4 мл) и 1 н. НС1 (0.1 мл) и очищали с использованием метода 6 ВЭЖХ. Объединенную фракцию ВЭЖХ обрабатывали 1 мл 1.0 н. НС1, концентрировали и высушивали под пониженным давлением с получением 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-5-6eH3^-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 3 НС1 (8 мг, выход 38.7%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 744.7 (М+Н)+, 2.18 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 СООЗ.МЕТАНОЛ-d4) 5 7.91 (d, ./=8.3 Гц, 2Н), 7.57 (dd, ./=6.5, 2.8 Гц, 2Н), 7.48 - 7.41 (т, ЗН), 7.18 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 5.28 (d, J=4.6 Гц, Ш), 4.81 (s, Ш), 4.38 - 4.23 (т, 2Н), 4.08 (br. s., Ш), 3.93 (s, Ш), 3.77 - 3.65 (т, Ш), 3.22 - 3.10 (т, 5Н), 3.08 - 2.83 (т, ЗН), 2.31 (d, .7=11.5 Гц, Ш), 2.18 - 2.07 (т, ЗН), 2.06 - 1.94 (т, ЗН), 1.88 - 1.75 (т, 2Н), 1.72 (s, ЗН), 1.68 (d, ./=5.4 Гц, Ш), 1.63 - 1.49 (т, 6Н), 1.48 - 1.33 (т, 6Н), 1.26 (d, J=12.5 Гц, 2Н), 1.13 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.01 (s, ЗН), 0.99 - 0.96 (т, Ш), 0.94 (br. s., ЗН), 0.93 (br. s., ЗН).
Пример 10
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
К раствору 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-5-6eH3^-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 3 НС1 (6 мг, 7.03 мкмоль) в смеси THF (1 мл) и МеОН (1 мл) добавляли гидроксид палладия (II) (4.94 мг, 7.03 мкмоль). Реакционную смесь продували Н2 (газообразный) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Нг (газообразный) в течение 16 ч. Катализатор удаляли фильтрованием и промывали DCM, и жидкий фильтрат концентрировали. Сырой продукт очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 6 ВЭЖХ. ВЭЖХ фракцию продукта обрабатывали 1 н. НС1 (0.5 мл), концентрировали и высушивали под вакуумом с получением 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 3 НС1 (2.5 мг, выход 42.9%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 654.6 (М+Н)+, 2.15 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 СОС13:МЕТАНОЛ-d4) 5 7.90 (d, ./=8.3 Гц, 2Н), 7.18 (d, ./=8.3 Гц, 2Н), 5.28 (d, ./=4.6 Гц, Ш), 4.85 (s, Ш), 4.74 (br. s., Ш), 4.40 (br. s., Ш), 3.84 - 3.65 (m, Ш), 3.50 (d, J=17.1 Гц, 2Н), 3.41 - 3.34 (т, 2Н), 3.28 - 3.22 (т, Ш), 2.93 (br. s., Ш), 2.35 (br. s., Ш), 2.24 - 2.08 (т, 4Н), 2.07 - 1.98 (т, 2Н), 1.98 - 1.79 (т, ЗН), 1.73 (s, 4Н), 1.69 (br. s., Ш), 1.66 - 1.34 (т, 12Н), 1.26 (d, J=9.8 Гц, 2Н), 1.18 (s, ЗН), 1.14 (br. s., Ш), 1.09 (s, ЗН), 1.02 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.93 (br. s., ЗН).
Пример 11
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((1S ,48)-5-(метилсульфонил)-2,5 -диазабицикло [2.2.1 ]гептан-2-ил)этил)амино)-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
Стадия 1. Получение (18,48)-трет-бутил 5-(2-хлорэтил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата
(18,48)-Трет-бутил 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилат (525 мг, 2.65 ммоль) и фосфат калия (1686 мг, 7.94 ммоль) объединяли в 75 мл колбе под средним избыточным давлением, продували в 50°С вакуумной печи в течение 10 минут и помещали в атмосферу N2 (газообразный). Добавляли THF (30 мл) с последующим добавлением 1-бром-2-хлорэтана (1.124 мл, 13.24 ммоль), и смесь нагревали до 55°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, обрабатывали еще 1-бром-2-хлорэтаном (0.043 мл, 0.517 ммоль) и снова нагревали до 55°С в течение 68 ч. Реакцию фильтровали и промывали DCM. Жидкий фильтрат концентрировали до вязкого коричневого масла, которое очищали с помощью колоночной хроматографии (SiCh, 40 г картридж, элюируя 95:5 DCM:MeOH), высушивали под вакуумом с перемешиванием с получением (18,48)-трет-бутил 5-(2-хлорэтил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2
карбоксилата (465 мг, 1.783 ммоль, выход 67.3%) в виде вязкого светло-коричневого масла. 1Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.37 (s, Ш), 4.36 (br. s., Ш), 4.24 (br. s., Ш), 3.44 (d, J=9.5 Гц, Ш), 3.17 (t, ./=8.8 Гц, Ш), 3.08 - 2.94 (m, Ш), 2.93 - 2.85 (m, 2Н), 2.67 (d, J=9.5 Гц, Ш), 2.53 (d, J=9.5 Гц, Ш), 1.82 (d, ./=6.4 Гц, Ш), 1.71 (dd, ./=15.9, 9.8 Гц, Ш), 1.46 (s, 9Н).
Стадия 2. Получение (18,48)-трет-бутил 5-(2-
(((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-9-(4-(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь,8,8,11а-
пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-
октад екагидро-1 Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-2,5-диазабицикло [2.2.1] гептан-
2-карбоксилата
Метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоат (500 мг, 0.919 ммоль), фосфат калия (683 мг, 3.22 ммоль) и иодид калия (458 мг, 2.76 ммоль) объединяли в 100 мл колбе под средним избыточным давлением, продували в 50°С вакуумной печи в течение 30 минут и помещали в атмосферу N2 (газообразный). К твердому веществу добавляли DMSO (5 мл) с последующим добавлением раствора (18,48)-трет-бутил 5-(2-хлорэтил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата (455 мг, 1.745 ммоль) в DMSO (10 мл). Полученную в результате реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение ночи. Образовавшиеся твердые частицы удаляли фильтрованием и промывали DCM. Жидкий фильтрат концентрировали (при 60°С) с получением темно-коричневого вязкого масла. Небольшое количество сырого материала подвергали очистке с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ для определения характеристик. Остаток сырого материала очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (Si02, 80 г картридж, элюируя 97:3 DCM:MeOH) с получением 419 мг смеси (18,48)-трет-бутил 5-(2-(((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-9-(4-(мeтoкcикapбoнил)фeнил)-5a,5b,8,8,lla
пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата и метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, который переносили на следующую стадию без дополнительной очистки.
В качестве альтернативы, (18,48)-трет-бутил 5-(2-
(((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-9-(4-(мeтoкcикapбoнил)фeнил)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилат может быть получен в две стадии из метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(aзиpидин-l-ил)-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, как описано ниже:
Стадия а. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(a3HpHflHH-l-ил)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата.
К твердой смеси метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,ll а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, НС1 (500 мг, 0.862 ммоль), и фосфата калия (914 мг, 4.31 ммоль) добавляли ацетонитрил (25 мл) с последующим добавлением 1-бром-2-хлорэтана (0.717 мл, 8.62 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 120°С в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и твердое вещество удаляли с помощью вакуумного фильтрования и промывали DCM (2 х 25 мл). Жидкий фильтрат концентрировали с получением метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(азиридин-1 -ил)-5 а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (486 мг, выход 99%) в виде светло-желтого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 570.5 (М+Н)+, 2.38 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.93 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 7.21 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 5.34 - 5.25 (m, Ш), 4.78 (br. s., Ш), 4.62 (br. s., Ш), 3.91 (s, ЗН), 2.74 - 2.55 (т, 2Н), 2.18 - 2.01 (т, 2Н), 1.81 (d, .7=11.7 Гц, Ш), 1.69 (s, ЗН), 1.67 (br. s., Ш), 1.62 - 1.34 (т, 18Н), 1.26 - 1.21 (т, Ш), 1.15 (br. s., 2Н), 1.09 (s, ЗН), 1.00 (br. s., ЗН), 0.99 (br. s., ЗН), 0.94 (s, 6H).
Стадия b. Метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(aзиpидин-l-ил)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоат (82 мг, 0.144 ммоль) и (18,48)-трет-бутил 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилат (86 мг, 0.432 ммоль) объединяли в одной мензурке, с последующим добавлением THF (1 мл) и ДтУ-диизопропилэтиламина (0.175 мл, 1.007 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 14 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и сырой материал очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, применяя метод 7 ВЭЖХ, с получением (18,48)-трет-бутил 5-(2-(((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-9-(4-(мeтoкcикapбoнил)фeнил)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата, 2 TFA (51.9 мг, выход 36.2%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 768.7 (М+Н)+, 2.43 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 8 8.14 (br. s., 2Н), 7.93 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 7.19 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.29 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.78 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 4.65 - 4.49 (m, Ш), 4.28 (br. s., Ш), 3.91 (s, ЗН), 3.70 (d, .7=11.7 Гц, ЗН), 3.55 - 3.35 (т, 4Н), 2.78 - 2.62 (т, Ш), 2.23 - 1.97 (т, 6Н), 1.94 (d, .7=12.0 Гц, Ш), 1.86 (t, .7=12.0 Гц, Ш), 1.80 - 1.71 (т, 2Н), 1.69 (s, ЗН), 1.67 - 1.61 (т, 2Н), 1.54 (dd, .7=15.5, 3.5 Гц, 5Н), 1.46 (s, 9Н), 1.43 - 1.28 (т, 4Н), 1.27 - 1.17 (т, Ш), 1.10 (s, ЗН), 1.04 (s, ЗН), 0.99 (s, ЗН), 0.93 (br. s.,
ЗН), 0.93 (br. s., ЗН). 13C ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 167.3, 148.6, 146.6, 146.3, 130.0, 128.5, 127.9, 123.8, 117.2, 114.3, 112.1, 81.5, 77.2, 73.5, 52.8, 52.0, 49.3, 48.9, 45.4, 42.0, 41.7, 40.7, 38.6, 37.5, 37.4, 36.2, 33.4, 32.4, 29.4, 28.2, 28.0, 27.5, 26.3, 25.0, 21.0, 20.8, 19.6, 18.8, 16.4, 15.4, 14.5.
Стадия 3. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, 3 TFA.
К раствору (18,48)-трет-бутил 5-(2-(((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-9-(4-(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил )-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-карбоксилата (419 мг, 0.545 ммоль) в DCM (10 мл) добавляли TFA (2 мл, 26.0 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали, и темно-коричневое вязкое масло высушивали для удаления всей TFA. Материал очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, применяя метод 6 ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, 3 TFA (75.2 мг, выход 12.28%) в виде светло-коричневого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 668.7 (М+Н)+, 2.36 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 9.77 (br. s., Ш), 9.49 (br. s., Ш), 7.92 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 7.19 (d, J=8.1 Гц, 2Н), 5.28 (d, J=4.4 Гц, Ш), 4.76 (br. s., Ш), 4.69 (br. s., Ш), 4.31 (br. s., 1H), 3.96 (br. s., 1H), 3.90 (s, 3H), 3.66 (br. s., 1H), 3.40 - 3.10 (m, 5H), 3.09 - 2.89 (m, 2H), 2.81 (br. s., 1H), 2.23 -2.06 (m, 4H), 2.05 - 1.91 (m, 3H), 1.85 (br. s., 1H), 1.78 - 1.73 (m, 1H), 1.69 (br. s., 3H), 1.65 (br. s., 1H), 1.62 - 1.30 (m, 11H), 1.26 - 1.17 (m, 2H), 1.11 (br. s., 3H), 1.05 (br. s., 3H), 0.99
(br. s., ЗН), 0.93 (br. s., 6H). 13C ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 167.2, 148.5, 147.1, 146.2, 130.0, 128.5, 127.9, 123.8, 114.8, 111.6 , 77.24 - 77.18, 71.3, 65.8, 60.9, 57.7, 54.4, 52.7, 52.0, 49.2, 48.7, 48.62 - 48.49, 46.3, 45.0, 42.0, 41.6, 40.6, 37.4, 37.0, 36.2, 33.6, 32.5, 29.4, 28.0, 27.3, 25.8, 25.0, 20.9, 20.8, 19.5, 19.1, 16.3, 15.9, 15.2, 14.4.
Стадия 4. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-За-((2-((18,48)-5-(метилсульфонил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (75.2 мг, 0.113 ммоль) и триэтиламина (0.078 мл, 0.563 ммоль) в DCM (3 мл) добавляли метансульфонилхлорид (10.67 мкл, 0.135 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 1.5 ч реакционную смесь разбавляли DCM (25 мл) и промывали НгО (2 мл). Водный слой экстрагировали DCM (15 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали с получением метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((lS,4S)-5-(метилсульфонил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата в виде светло-коричневого твердого вещества (69.0 мг, выход 78%). ЖХ/МС: т/е 746.8 (М+Н)+, 246 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.88 (d, ./=8.1 Гц, 2Н), 7.15 (d, J=8.1 Гц, 2Н), 5.25 (d, J=4.6 Гц, Ш), 4.71 (s, Ш), 4.57 (s, Ш), 4.26 (s, Ш), 3.86 (s, ЗН), 3.69 (br. s., Ш), 3.58 (d, J=9.5 Гц, Ш), 3.19 (dd, J=9.4, 1.8 Гц, Ш), 2.97 (dd, J=9.8, 2.0 Гц, Ш), 2.85 (s, ЗН), 2.80 (dd, J=8.3, 4.2 Гц, 2Н), 2.65 (d, J=9.8 Гц, Ш), 2.61 -
2.44 (m, 2Н), 2.07 (dd, .7=17.1, 6.4 Гц, 2Н), 1.95 - 1.68 (m, 6Н), 1.66 (s, ЗН), 1.65 - 1.37 (m, 9Н), 1.31 - 1.06 (m, 7Н), 1.04 (s, ЗН), 0.96 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.89 (s, 6Н).
Стадия 5. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-За-((2-((18,48)-5-(метилсульфонил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 TFA.
К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-За-((2-((18,48)-5-(метилсульфонил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (65 мг, 0.087 ммоль) в THF (2 мл) и МеОН (1 мл) добавляли раствор гидроксида лития моногидрата (14.62 мг, 0.348 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивали при 75°С. Через 1 ч реакционную смесь концентрировали и повторно растворяли в смеси THF (1.5 мл) и МеОН (0.5 мл) и очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 6 ВЭЖХ, с получением 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((lS,4S)-5-(метилсульфонил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 TFA (46.6 мг, выход 54.6%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 732.7 (М+Н)+, 2.22 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 СОС13:МЕТАНОЛ-d4) 5 7.90 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 7.18 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 5.27 (d, .7=4.9 Гц, Ш), 4.82 (s, Ш), 4.71 (br. s., Ш), 4.45 (br. s., Ш), 4.14 (br. s., Ш), 3.72 (d, .7=10.5 Гц, Ш), 3.56 (dt, .7=9.8, 6.5 Гц, Ш), 3.41 (d, .7=10.0 Гц, ЗН), 3.29 - 3.09 (m, ЗН), 2.97 (s, ЗН), 2.85 (td, .7=11.0, 5.1 Гц, Ш), 2.22 - 1.96 (m, 7Н), 1.93 - 1.75 (т, ЗН), 1.72 (s, ЗН), 1.68 (br. s., Ш), 1.66 - 1.47 (т, 8Н), 1.47 - 1.32 (т, 4Н), 1.26 (d, .7=10.5 Гц, Ш), 1.16 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.01 (s, ЗН), 0.93 (br. s., ЗН), 0.92 (br. s., ЗН). 13С ЯМР (101 МГц, 1:1 CDCl3: МЕТАНОЛ^) 5 169.8, 149.4, 148.2, 147.2, 130.8, 129.5, 129.1, 124.6, 112.3, 78.7, 73.1, 64.9, 61.7 (br. s., 1С), 60.1, 53.6, 50.1, 46.4, 42.9,
42.5, 41.6, 38.8, 38.2, 38.2, 37.0, 34.4, 33.1, 30.5, 30.0, 28.9, 27.9, 27.0, 25.9, 21.8, 21.6, 20.4, 19.4, 17.1, 16.7, 15.0.
Пример 12
Получение 4-((18,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-1-изопропил-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-За-((2-((18,48)-5-(метилсульфонил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
К раствору 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((1S ,48)-5-(метилсульфонил)-2,5 -диазабицикло [2.2.1 ]гептан-2-ил)этил)амино)-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 TFA (10 мг, 10.42 мкмоль), в смеси THF (1.5 мл) и МеОН (0.5 мл) добавляли гидроксид палладия на угле (14.63 мг, 0.021 ммоль). Полученную в результате кашицу продували Н2 (газообразный) и перемешивали в атмосфере Н2 (газообразный) в течение 16 ч. Смесь обрабатывали целитом (15 мг), фильтровали, промывали THF и концентрировали. Серый остаток растворяли в THF (1 мл) и МеОН (0.5 мл), очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 6 ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением 4-((lS,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-l-H3onpon^-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((18,48)-5-(метилсульфонил)-2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил)этил)амино)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 TFA (6.2 мг, выход 60.6%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 734.6 (М+Н)+, 2.25 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 СОС13:МЕТАНОЛ-d4) 5 7.91 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 7.19 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.29 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.35 (s, Ш), 3.82 (s, Ш), 3.61 (d, .7=10.3 Гц, Ш), 3.28 (d, .7=1.7 Гц, Ш), 3.15 (d, .7=11.7 Гц, Ш), 3.10 - 3.00 (т, ЗН), 2.92 (s, ЗН), 2.82 (d, .7=10.0 Гц, Ш), 2.14 (dd, .7=17.1, 6.4 Гц, Ш), 2.09 - 2.03 (т, Ш), 2.02 - 1.86 (т, 5Н), 1.85 - 1.64 (т, 7Н), 1.57 (dd, .7=17.4, 11.7 Гц, 5Н), 1.51 - 1.40 (т, 4Н),
1.39 - 1.21 (m, 4H), 1.15 (s, ЗН), 1.07 (s, ЗН), 1.02 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 0.90 (d, .7=6.8 Гц, ЗН), 0.81 (d, .7=6.6 Гц, ЗН).
Пример 13
Получение высушенной с выходом 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((Ж,58)-8-(трет-бутоксикарбонил)-3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-3-ил)этил)амино)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
Метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(aзиpидин-l-ил)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоат (95.0 мг, 0.167 ммоль) и (1R,5S)-трет-бутил 3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-8-карбоксилат (53.1 мг, 0.250 ммоль) объединяли в одной мензурке и загружали THF (1 мл) и МДЧ-диизо-пропилэтиламин (0.145 мл, 0.834 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2.5 ч. К смеси добавляли дополнительный (Ж,58)-трет-бутил 3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-8-карбоксилат (53.1 мг, 0.250 ммоль) и продолжали перемешивание при 100°С в течение 23 ч. Реакционную смесь очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 7 ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением (Ж,58)-трет-бутил 3-(2-(((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-9-(4-(мeтoкcикapбoнил)фeнил)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-
октад екагидро-1 Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-3,8-диазабицикло [3.2.1] октан-8-карбоксилата, 2 TFA (108.5 мг, выход 63.1%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 782.8 (М+Н)+, 2.48 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.94 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 7.20 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.29 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.79 (s, Ш), 4.71 (s, Ш), 4.37 (br. s., 2Н), 3.92 (s, ЗН), 3.57 - 3.29 (m, 6Н), 2.94 (d, .7=10.8 Гц, 2Н), 2.72 (br. s., Ш), 2.18 - 1.90 (m, 9Н), 1.87 (d, .7=12.0 Гц, Ш), 1.75 (d, .7=12.7 Гц, Ш), 1.71 - 1.68 (m, ЗН), 1.64 (br. s., Ш), 1.61
- 1.51 (m, 4H), 1.49 (s, 9H), 1.47 - 1.43 (m, ЗН), 1.42 - 1.34 (m, ЗН), 1.32 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 1.25 - 1.18 (m, Ш), 1.12 (s, ЗН), 1.04 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.93 (br. s., ЗН).
К раствору (lR,5S)-TpeT-6yTiM 3-(2-(((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-9-(4-(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-8-карбоксилата, 2 TFA (30 мг, 0.030 ммоль) в THF (0.75 мл) и МеОН (0.25 мл) добавляли раствор гидроксида лития (1 н.) (0.148 мл, 0.148 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 75°С. Через 1 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 7 ВЭЖХ, и высушивали с получением 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-8-(TpeT-бутоксикарбонил)-3,8-диазабицикло[3.2.1]октан-3-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, 2 TFA (22.2 мг, 0.021 ммоль, выход 69.0%) в виде светло-желтого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 768.8 (М+Н)+, 2.34 мин (метод 3). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.96 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 7.21 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.13 (d, .7=5.4 Гц, Ш), 4.84 (br. s., Ш), 4.68 (s, Ш), 4.36 (br. s., 2Н), 3.68 - 3.32 (m, 6Н), 2.98 (d, .7=10.3 Гц, 2Н), 2.70 (br. s., Ш), 2.08 (br. s., 7H), 1.97 - 1.82 (m, 2H), 1.70 (d, .7=5.9 Гц, Ш), 1.66 (s, ЗН), 1.63 - 1.51 (m, 5H), 1.49 (s, 9H), 1.47 - 1.39 (m, 5H), 1.39 - 1.27 (m, 4H), 1.27 - 1.15 (m, ЗН), 1.11 (s, ЗН), 1.02 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.97 - 0.94 (m, ЗН), 0.89 (s, 4H).
Пример 14
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((Ж,58)-6-(метилсульфонил)-3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-3-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
Стадия 1. Получение (1Я,58)-трет-бутил 3-(2-
(((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-9-(4-(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь,8,8,11а-
пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-
октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-
6-карбоксилата
Метил 4-((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-За-(азиридин-1-ил)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоат (250 мг, 0.439 ммоль) и (lR,5S)-TpeT-бутил 3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-6-карбоксилат (435 мг, 2.194 ммоль) объединяли в 20 мл сцинтилляционном сосуде, растворяли в THF (5 мл) и обрабатывали ДтУ-диизо-пропилэтиламином (0.764 мл, 4.39 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 100°С. Через 112 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, очищали с помощью
обращенно-фазовой ВЭЖХ, используя метод 13 препаративной ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (126.6 мг, 0.127 ммоль, выход 29.0%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 768.5 (М+Н)+, 2.41 мин (метод 7). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.94 (d, .7=8.6 Гц, 2Н), 7.20 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.30 (d, .7=4.4 Гц, Ш), 4.79 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 4.17 (d, .7=5.9 Гц, 2Н), 3.92 (s, ЗН), 3.62 (d, .7=11.7 Гц, Ш), 3.56 - 3.44 (т, ЗН), 3.43 - 3.31 (т, 5Н), 2.85 - 2.72 (т, Ш), 2.66 - 2.56 (т, Ш), 2.12 (dd, .7=17.0, 6.5 Гц, 2Н), 2.07 - 1.89 (т, 5Н), 1.75 (d, .7=11.5 Гц, Ш), 1.70 (s, ЗН), 1.65 (br. s., Ш), 1.60 - 1.50 (т, 5Н), 1.48 (s, 9Н), 1.46 - 1.34 (т, 5Н), 1.26 - 1.19 (т, Ш), 1.13 (s, ЗН), 1.05 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.94 (br. s., ЗН). 13С ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 167.2, 154.9, 148.6, 146.9, 146.3, 130.0, 128.5, 128.0, 123.9, 111.8, 81.7, 77.2, 72.4, 58.3, 53.9, 52.8, 52.0, 49.4, 49.0, 45.3, 42.1, 41.8, 40.7, 37.9, 37.5, 37.2, 36.2, 33.5, 32.6, 29.4, 28.3, 28.3, 27.8, 26.3, 25.4, 25.1, 21.0, 20.9, 19.6, 19.1, 16.5, 15.8, 14.6.
Стадия 2. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-3-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
К раствору (Ж,58)-трет-бутил 3-(2-(((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-9-(4-(метоксикарбонил)фенил)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил )-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-6-карбоксилата (123 мг, 0.160 ммоль) в DCM (3 мл) добавляли TFA (0.5 мл, 6.49 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Полученную в результате коричневую реакционную смесь разбавляли DCE (3 мл) и концентрировали до светло-коричневой пены. Материал растворяли в DCM (2 мл) и DCE (2 мл) и обрабатывали 2 н. НС1 в Et20 (0.5 мл, 1.0 ммоль). Полученную в результате кашицу концентрировали и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (108.1 мг, 0.139 ммоль, выход 87%) в виде светло-серого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 668.5 (М+Н) , 2.28 мин (метод 3). *Н ЯМР
(400 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 7.89 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 7.18 (d, /=8.6 Гц, 2Н), 5.27 (d, .7=4.4 Гц, Ш), 4.85 (s, Ш), 4.71 (s, Ш), 4.39 (d, .7=5.4 Гц, 2Н), 3.88 (s, ЗН), 3.76 (br. s., Ш), 3.59 (br. s., Ш), 3.48 (q, .7=7.1 Гц, ЗН), 3.40 -3.33 (m, 2Н), 3.07-2.91 (m, 2Н), 2.37 (d, .7=10.3 Гц, Ш), 2.25 - 1.89 (m, 7Н), 1.83 (d, .7=12.0 Гц, Ш), 1.77 (br. s., Ш), 1.73 - 1.71 (m, ЗН), 1.67 (br. s., Ш), 1.65 - 1.58 (m, 2Н), 1.57 - 1.38 (m, 8Н), 1.37 - 1.29 (m, Ш), 1.27 - 1.22 (m, Ш), 1.13 (s, ЗН), 1.08 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.92 (s, ЗН), 0.91 (s, ЗН).
Стадия 3. К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-3-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (108 мг, 0.139 ммоль) в DCM (3 мл) добавляли триэтиламин (0.097 мл, 0.695 ммоль) и метансульфонилхлорид (0.032 мл, 0.417 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, перед тем как ее останавливали МеОН (0.5 мл), концентрировали и высушивали под вакуумом в течение 15 минут. ЖХ/МС: т/е 746.6 (М+Н)+, 4.30 мин (метод 8).
Полученный выше коричневый остаток растворяли в THF (2.5 мл) и МеОН (0.5 мл), обрабатывали 3 н. гидроксидом лития (0.463 мл, 1.389 ммоль) и перемешивали при 75°С. Через 2.5 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, используя метод 13 препаративной ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (81.7 мг, 0.083 ммоль, выход 60.0%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 632.5 (М+Н)+, 3.91 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 СОС13:МЕТАНОЛ-d4) 5 7.90 (d, .7=8.6 Гц, 2Н), 7.17 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.27 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.79 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 4.32 (d, .7=4.6 Гц, 2Н), 3.41 - 3.32 (m, 2Н), 3.23 - 3.06 (т, 6Н), 2.98 (s, ЗН), 2.89 - 2.73 (т, 2Н), 2.17 - 1.94 (т, 5Н), 1.92 - 1.85 (т, 2Н), 1.81 - 1.74 (т, 2Н), 1.71 (s, ЗН), 1.67 (s, Ш), 1.64 - 1.37 (т, ЮН), 1.33 (dd, .7=12.5, 3.7 Гц, Ш), 1.24 (d, .7=10.0 Гц, Ш), 1.11 (s, ЗН), 1.07 (s, ЗН), 0.99 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 0.92 (s, ЗН). 13С ЯМР (101 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 169.0, 148.5, 147.2, 146.3, 129.9, 128.7, 128.3, 123.7, 111.6, 77.6, 72.0, 63.0, 62.9, 53.7, 53.6, 52.7, 52.69 - 52.62 (т, 1С), 49.2, 45.3, 42.1, 41.6, 41.2, 40.7, 39.7, 37.4, 37.1, 36.2, 33.6, 32.4, 30.9, 29.2, 28.0, 27.5, 26.4, 25.0, 20.9, 20.8, 19.6, 18.6, 16.3, 15.9, 14.2.
Пример 15
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-(2-(метилсульфонил)-2,6-диазаспиро[3.4]октан-6-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-
4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-(2-(метил сульфонил)-2,6-диазаспиро [3.4] октан-6-ил)этил)амино)-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойную кислоту получали с выходом 24% из метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(aзиpидин-l-ил)-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-
1- (проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, следуя способу, применявшемуся для получения 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((lR,5S)-6-(метилсульфонил)-3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-3-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты; кроме того, что на стадии 1 трет-бутил 2,6-диазаспиро[3.4]октан-
2- карбоксилат, НС1, использовали вместо (Ж,58)-трет-бутил 3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-6-карбоксилата. ЖХ/МС: гп/е 746.5 (М+Н)+, 3.91 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 7.90 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 7.18 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.27 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.79 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 3.99 - 3.91 (m, 2Н), 3.90 - 3.85 (m, 2Н), 3.29 (d, J=\.l Гц, Ш), 3.25 - 3.14 (ш, ЗН), 3.08 (d, .7=4.6 Гц, 2Н), 2.91 (s, ЗН), 2.77 - 2.66 (m, Ш), 2.33 - 2.24 (rn, 2Н), 2.18 - 1.98 (m, 4Н), 1.98 - 1.92 (m, Ш), 1.89 - 1.82 (m, Ш), 1.80 - 1.75 (т, Ш), 1.71 (s, ЗН), 1.68 - 1.65 (т, Ш), 1.64 - 1.30 (т, ПН), 1.25 (d, .7=9.3 Гц, Ш), 1.20 - 1.13 (т, Ш), 1.10 (s, ЗН), 1.07 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.92 (s, ЗН). 13С ЯМР (101 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 169.8, 149.4, 148.1, 147.1, 130.7, 129.4, 129.0, 124.5, 112.3, 78.5,
64.1, 61.6, 61.5, 54.3, 53.6, 52.2, 50.0, 46.4, 42.8, 42.4, 41.5, 40.4, 39.5, 38.2, 38.1, 36.9, 36.8,
36.1, 34.3, 33.1, 29.9, 28.8, 28.1, 27.1, 25.8, 21.7, 21.6, 20.4, 19.3, 17.0, 16.3, 15.0.
Пример 16
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-(6-(метилсульфонил)-2,6-диазаспиро[3.3]гептан-2-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)
4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-(6-(метил сульфонил)-2,6-диазаспиро [3.3] гептан-2-ил)этил)амино)-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойную кислоту получали с выходом 5% из метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(aзиpидин-l-ил)-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, следуя способу, применявшемуся для получения 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((lR,5S)-6-(метилсульфонил)-3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-3-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты; кроме того, что на стадии 1 трет-бутил 2,6-диазаспиро[3.3]гептан-2-карбоксилат (261 мг, 1.316 ммоль) использовали вместо (1R,5S)-трет-бутил 3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-6-карбоксилата. ЖХ/МС: т/е 732.5 (М+Н)+, 3.92 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 CDCl3:METAHOJl-d4) 5 7.90 (d, .7=8.6 Гц, 2Н), 7.18 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.28 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.78 (s, Ш), 4.69 (s, Ш), 4.11 - 4.00 (ш, ЗН), 3.84 (br. s., 4Н), 3.79 - 3.74 (m, Ш), 3.13 (br. s., Ш), 3.10 - 3.01 (m, 2Н), 2.98 - 2.92 (m, Ш), 2.89 (s, ЗН), 2.70 (dt, .7=11.0, 5.7 Гц, Ш), 2.12 (dd, .7=17.1, 6.4 Гц, Ш), 2.07 - 1.88 (m, 4Н), 1.86 -1.74 (т, 2Н), 1.71 (s, ЗН), 1.68 (br. s., Ш), 1.64 - 1.30 (т, 12Н), 1.25 (d, .7=10.0 Гц, Ш), 1.14 (s, ЗН), 1.07 (s, ЗН), 1.01 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН).
Пример 17
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-(6-(метилсульфонамидо)-3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-(6-(метил сульфонамидо)-3 -азабицикл о[3.1.0] гексан-3 -ил)этил)амино)-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойную кислоту получали с выходом 12% на протяжении трех стадий из метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(aзиpидин-l-ил)-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата, следуя способу, применявшемуся при получении 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-3a-((2-((lR,5S)-6-(метилсульфонил)-3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-3-ил)этил)амино)-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты; кроме того, что на стадии 1 трет-бутил 3-азабицикло[3.1.0]гексан-6-илкарбамат использовали вместо (Ж,58)-трет-бутил 3,6-диазабицикло[3.1.1]гептан-6-карбоксилата. ЖХ/МС: гп/е 732.5 (М+Н)+, 3.86 мин (метод 8).
*Н ЯМР (400 МГц, 7:7 CDCl3: МЕТАНОЛ^) 5 7.90 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 7.18 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.28 (d, .7=4.9 Гц, Ш), 5.23 (s, Ш), 5.13 (s, Ш), 4.85 (s, Ш), 4.72 (br. s., Ш), 3.85 (br. s., 2Н), 3.72 (br. s., 2H), 3.48 (br. s., 4H), 3.09 (br. s., 1H), 3.03 (s, 3H), 2.81 (d, J=10.3 Гц, 1H), 2.25 -1.97 (m, 8H), 1.87 (d, .7=11.5 Гц, 1H), 1.79 - 1.60 (m, 6H), 1.53 (d, .7=16.1 Гц, 6H), 1.44 - 1.33 (m, 4H), 1.30 - 1.23 (m, 2H), 1.21 (br. s., 3H), 1.11 - 1.04 (m, 3H), 1.02 (s, 3H), 0.94 (s, 3H), 0.93 (br. s., 3H).
Пример 18
Получение 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lR,4R)-2,2-диoкcидo-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
К раствору метил 4-((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-За-(азиридин-1-ил)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (250 мг, 0.439 ммоль) в THF (5 мл) добавляли ДтУ-диизопропилэтиламин (0.535 мл, 3.07 ммоль) и (1К,4К)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксид (323 мг, 2.194 ммоль). Полученную в результате мутную реакционную смесь перемешивали при 100°С. Через 71 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. К реакционной смеси добавляли МеОН (2 мл) и 3 н. гидроксид лития (1.462 мл, 4.39 ммоль). Смесь перемешивали при 75°С в течение 4 ч, затем ее охлаждали до комнатной температуры и концентрировали под вакуумом. Сырой материал очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, используя метод 14 ВЭЖХ, и концентрировали с получением продукта с некоторым количеством бикарбоната аммония. Материал, полученный выше, повторно подвергали ВЭЖХ, метод 13, концентрировали и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (25.5 мг, 0.026 ммоль, выход 5.99%). ЖХ/МС: т/е 703.4 (М+Н)+, 3.95 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 СОС13:МЕТАНОЛ-d4) 5 7.90 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 7.18 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.27 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.80 (s, Ш), 4.71 (s, Ш), 3.81 (br. s., Ш), 3.64 (br. s., Ш), 3.42 (d, .7=11.2 Гц, Ш), 3.28 (d, .7=2.4 Гц, Ш), 3.22 -3.12 (m, 2Н), 3.06 (dd, .7=13.2, 3.4 Гц, Ш), 3.02 - 2.88 (т, ЗН), 2.84 - 2.75 (т, Ш), 2.53 (d, .7=12.2 Гц, Ш), 2.38 (d, .7=10.8 Гц, Ш), 2.20 - 1.95 (т, 5Н), 1.89 - 1.79 (т, Ш), 1.77 (br. s., Ш), 1.72 (s, ЗН), 1.68 (br. s., Ш), 1.65 - 1.46 (т, 9Н), 1.43 (d, .7=12.7 Гц, Ш), 1.37 (d, .7=3.9 Гц, Ш), 1.25 (d, .7=6.6 Гц, Ш), 1.19 (s, ЗН), 1.17 - 1.11 (т, Ш), 1.08 (s, ЗН), 1.01 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.92 (s, ЗН).
Пример 19
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
Стадия 1. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
Метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(aзиpидин-l-ил)-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоат (200 мг, 0.351 ммоль), (lS,4S)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан, НС1 (238 мг, 1.755 ммоль), и молекулярные сита4°А (250 мг, 0.351 ммоль) объединяли в 20 мл сцинтилляционном флаконе. Смесь высушивали в 50°С вакуумной печи в течение 1 ч. Добавляли THF (5 мл) и М,М-диизопропилэтиламин (0.428 мл, 2.457 ммоль). Раствор продували N2 (газообразный) и перемешивали при 100°С. Через 68 ч реакционную смесь концентрировали до вязкого коричневого масла, которое очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, применяя метод 6 ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (104 мг, 0.114 ммоль, выход 32.4%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 669.5 (М+Н)+, 4.42 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.91 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 7.18 (d, .7=8.1 Гц, 2Н), 5.28 (d, .7=4.9 Гц, Ш), 4.78 (s, Ш), 4.69 (s, Ш), 4.64 (br. s., Ш), 4.28 (br. s., Ш), 4.17 (d,
.7=9.8 Гц, Ш), 3.90 (s, ЗН), 3.79 (d, J=9.5 Гц, Ш), 3.74 - 3.61 (m, Ш), 3.44 (br. s., 2Н), 3.36 (br. s., Ш), 2.77 (d, .7=6.8 Гц, Ш), 2.27 - 1.99 (m, 6Н), 1.98 - 1.83 (m, 2Н), 1.77 (d, .7=12.2 Гц, Ш), 1.69 (s, ЗН), 1.66 - 1.61 (m, 1Н), 1.59 - 1.30 (m, 13H), 1.21 (d, .7=6.4 Гц, Ш), 1.10 (s, ЗН), 1.04 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.93 (s, 6H). 13C ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 167.2, 148.5, 146.8, 146.2, 130.0, 128.5, 127.9, 123.8, 111.9 (br. s., 1С), 74.9, 73.1 (br. s., 1С), 64.3 (br. s., 1С), 61.3 (br. s., 1С), 54.1, 52.8, 51.9, 49.3, 49.0, 45.4, 42.0, 41.7, 40.7, 38.8 (br. s., 1С), 37.4, 37.3, 36.2, 33.5, 32.5, 29.4, 28.0, 27.5, 26.3, 25.0, 20.9, 20.8, 19.6, 18.8, 18.4, 17.2, 16.4, 15.4, 14.5, 11.8.
Стадия 2. К раствору метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (99 мг, 0.148 ммоль) в THF (2 мл) и МеОН (0.5 мл) добавляли 3 н. гидроксид лития (0.197 мл, 0.592 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 75°С. Через 3.5 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали до белой пасты, которую очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя препаративный метод 6, и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (81.4 мг, 0.088 ммоль, выход 59.2%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 655.5 (М+Н)+, 3.76 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, 7:7 ХЛОРОФОРМЛ:МЕТАНОЛЛ4) 5 7.90 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 7.18 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.35 - 5.23 (m, Ш), 4.79 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 4.58 (br. s., Ш), 4.08 (d, .7=9.0 Гц, Ш), 4.02 (br. s., Ш), 3.76 (dd, .7=9.3, 1.5 Гц, Ш), 3.30 - 3.21 (т, 2Н), 3.16 (d, .7=10.3 Гц, 2Н), 3.00 (br. s., Ш), 2.74 (td, .7=11.1, 5.5 Гц, Ш), 2.18-1.94 (т, 7Н), 1.91 -1.84 (т, Ш), 1.82 - 1.75 (т, Ш), 1.71 (s, ЗН), 1.70 - 1.63 (т, 2Н), 1.63 - 1.30 (т, ПН), 1.28 -1.17 (т, 2Н), 1.14 (s, ЗН), 1.07 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 0.92 (br. s., ЗН).
Пример А1
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3-OKca-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
Стадия 1. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-гидроксиэтил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
МеООС
Смесь метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (1500 мг, 2.76 ммоль), 2-бромэтанола (1034 мг, 8.27 ммоль), фосфата калия (1756 мг, 8.27 ммоль) и иодида калия (916 мг, 5.52 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) нагревали до 120°С в течение 15 ч. Реакционную смесь выливали в дистиллированную воду (40 мл). Белый осадок фильтровали и промывали дистиллированной водой (100 мл). Белое твердое вещество высушивали под пониженным давлением с получением указанного в заголовке
соединения (1.4 г, 86%), которое переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. ЖХ/МС: т/е 588.5 (М+Н)+, 2.40 мин (метод 5).
Стадия 2. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-хлорэтил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
МеООС
Смесь метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-гидpoкcиэтил)aминo)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (1400 мг, 2.381 ммоль) и тионилхлорида (1.738 мл, 23.81 ммоль) в дихлорэтане (15 мл) нагревали до 60°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением с получением целевого продукта в виде коричневого твердого вещества (1.3 г, 90%), которое переносили на следующую стадию без дополнительной очистки. ЖХ/МС: т/е 606.48 (М+Н)+, 2.46 мин (метод 5).
Стадия 3. Получение метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3-окса-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата
МеООС
Смесь метил 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-xлopэтил)aминo)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата (20 мг, 0.033 ммоль), (Ж,58)-3-окса-9-азабицикло[3.3.1]нонана (16.78 мг, 0.132 ммоль) и основания Хунига (0.029 мл, 0.165 ммоль) в DMSO (1 мл) нагревали до 120°С в течение 1 ч. Реакционную смесь останавливали дистиллированной водой (2 мл), экстрагировали дихлорметаном (2x2 мл), высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением метил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3-OKca-9-азабицикл о[3.3.1] нонан-9-ил)этил)амино)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензоата в виде коричневого твердого вещества, которое переносили на следующую стадию без дополнительной очистки.
Стадия 4. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3-окса-9-азабицикл о[3.3.1] нонан-9-ил)этил)амино)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты
ноос
К эфирному промежуточному соединению, полученному выше, в 1,4-диоксане (1 мл) добавляли 1 н. NaOH (0.143 мл, 0.143 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (3 мг, 13%). ЖХ/МС: т/е 683.7 (М+Н)+, 2.13 мин (метод 4). 1Н ЯМР (500 МГц, АЦЕТОНИТРШЫз) 5 7.93 (d, .7=8.4 Гц, 2Н), 7.28 (d, .7=8.4 Гц, 2Н), 5.32 (dd, .7=6.1, 1.7 Гц, Ш), 4.81 (s, Ш), 4.71 (s, Ш), 4.11 (t, .7=14.1 Гц, 2Н), 4.01 - 3.84 (m, 2Н), 3.44 -2.97 (т, 6Н), 2.91 - 2.73 (т, Ш), 2.45 (qd, .7=13.2, 6.2 Гц, Ш), 2.30 - 1.15 (т, 27Н), 1.75 (s, ЗН), 1.21 (s, ЗН), 1.09 (s, ЗН), 1.05 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.96 (s, ЗН).
Пример А2
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-(8-OKca-3-азабицикло[3.2.1]октан-3-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
ноос
Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной выше для синтеза 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3-OKca-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, применяя (Ж,58)-8-окса-3-азабицикло[3.2.1]октан в качестве алкилирующего амина на стадии 3. Продукт выделяли в виде белого твердого вещества (8 мг, 28%). ЖХ/МС: т/е 669.7 (М+Н)+, 2.11 мин (метод 4). *Н ЯМР (500 МГц, АЦЕТОНИТРИЛ-(1з) 5 8.17 - 7.83 (m, 2Н), 7.43 - 7.12 (т, 2Н), 5.32 (dd, .7=6.2, 1.8 Гц, Ш), 4.80 (d, .7=1.7 Гц, Ш), 4.72 (d, .7=1.4 Гц, Ш), 4.37 (br. s., 2Н), 3.14 (br. s., 4Н), 2.99 (br. s., 4H), 2.92 - 2.81 (m, Ш), 2.68 - 2.44 (m, 2H), 2.27 - 1.15 (m, 24H), 1.75 (s, ЗН), 1.21 (s, ЗН), 1.09 (s, ЗН), 1.05 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.96 (s, ЗН).
Пример A3
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5R)-3,7^HOKca-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
НООС
Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной выше для синтеза 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3-OKca-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, применяя (18,58)-3,7-диокса-9-азабицикло[3.3.1]нонан в качестве алкилирующего амина на стадии 3. Продукт выделяли в виде белого твердого вещества (2.4 мг, 7%). ЖХ/МС: т/е 685.6 (М+Н)+, 2.30 мин (метод 5). JH ЯМР (500 МГц, АЦЕТОНИТРИЛ-(1з) 5 8.04 - 7.74 (m, 2Н), 7.28 (d, .7=8.4 Гц, 2Н), 5.32 (dd, .7=6.2, 1.8 Гц, Ш), 4.81 (s, Ш), 4.73 (s, Ш), 4.11 (d, .7=11.7 Гц, 2Н), 4.02 (d, .7=11.7 Гц, 2Н), 3.84 (t, .7=12.5 Гц, 4Н), 3.56 - 3.38 (т, Ш), 3.22 - 2.97 (т, 4Н), 2.94 (dd, .7=11.1, 5.9 Гц, 2Н), 2.70 - 1.15 (т, 22Н), 1.76 (s, ЗН), 1.26 (s, ЗН), 1.10 (s, ЗН), 1.06 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.96 (s, ЗН).
Пример А4
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,3S,5S)-3-^poKCH-3-метил-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты.
ноос
Указанное в заголовке соединение получали, следуя методике, описанной выше для синтеза 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,5S)-3-OKca-9-азабицикло[3.3.1]нонан-9-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бензойной кислоты, применяя (Ж,Зг,58)-3-метил-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ол в качестве алкилирующего амина на стадии 3. Продукт выделяли в виде белого твердого вещества (2.5 мг, 30%). ЖХ/МС: т/е 697.65 (М+Н)+, 1.40 мин (метод 4). *Н ЯМР (400 МГц, АЦЕТОНИТРШМз) 5 7.89 (d, .7=8.0 Гц, 2Н), 7.23 (d, .7=8.3 Гц, 2Н), 5.27 (d, J=4.5 Гц, Ш), 4.74 (s, Ш), 4.63 (br. s., Ш), 3.90 (br. s., 2Н), 3.52 - 2.99 (m, 4Н), 2.88 - 2.64 (m, Ш),
2.53 -1.08 (m, ЗОН), 1.69 (s, ЗН), 1.18 (s, ЗН), 1.13 (s, ЗН), 1.03 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 0.91 (s, ЗН).
Пример Bl
Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-(2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты, TFA.
Стадия 1. Получение этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3 -енкарбоксилата
В колбу, содержащую этил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)циклогекс-3-
енкарбоксилат (0.801 г, 2.86 ммоль), добавляли
(lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeTM-l-(npon-l-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил трифторметансульфонат (1.45 г, 2.60 ммоль), карбонат натрия гидрат (0.967 г, 7.80 ммоль) и тетракис палладия (0.090 г, 0.078 ммоль). Смесь разбавляли 1,4-диоксаном (20 мл) и водой (5 мл). Затем ее продували азотом и нагревали до 85°С на масляной бане. После нагревания смеси в течение 16 ч, ее охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3 х 30 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием градиента 10-80% этилацетата в гексанах и 80 г силикагелевой колонки. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением. Так как примеси еще присутствовали, последовала повторная очистка с использованием градиента 20-70% EtOAc в гексанах и 80 г силикагелевой колонки. Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением указанного в заголовке соединения (0.655 г, 1.17 ммоль, выход 45%) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 562.7 (М+Н)+, 2.17 мин (метод 5).
Стадия 2. Получение этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(a3HpHflHH-l-ил)-5а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата
В герметичный сосуд добавляли этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-амино-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилат (0.2 г, 0.356 ммоль), 1-бром-2-хлорэтан (0.295 мл, 3.56 ммоль) и фосфорную кислоту, калиевую соль (0.378 г, 1.780 ммоль). Смесь разбавляли
ацетонитрилом (5 мл), продували азотом, затем герметично закрывали и нагревали до 120°С. Через 24 ч нагревания смесь охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали для удаления твердых веществ, затем твердые вещества промывали дихлорметаном, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением указанного в заголовке соединения (0.21 г, 0.357 ммоль, выход 100%) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 588.7 (М+Н)+, 2.21 мин (метод 5).
Стадия 3. Получение этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-(2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата
В виалу, содержащую суспензию этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(азиридин-1 -ил)-5 а,5Ь, 8,8,11 а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (0.05 г, 0.085 ммоль) в THF (1 мл), добавляли N,N-диизопропилэтиламин (0.089 мл, 0.510 ммоль) с последующим добавлением 2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептана, НС1 (0.035 г, 0.255 ммоль). Виалу герметично закрывали, и смесь нагревали до 100°С. Через 16 ч нагревания смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли метанолом и 1,4-диоксаном и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (метод 8). Фракции, содержащие предполагаемый продукт, концентрировали под пониженным давлением с получением этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-(2-OKca-5-a3a6H4Hioio[2.2.1]renTaH-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (0.0152 г, 0.022 ммоль, выход 26.0%) в виде не совсем белой пены. ЖХ/МС: т/е 687.7 (М+Н)+, 1.96 мин (метод 5).
Стадия 4. Получение 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-(2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты, TFA.
К раствору этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-(2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (0.0152 г, 0.022 ммоль) в 1,4-диоксане (1 мл) добавляли NaOH (1 н.) (0.2 мл, 0.200 ммоль). Смесь нагревали до 75°С в течение 5 ч, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли метанолом и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (метод 8). Фракции, содержащие предполагаемый продукт, объединяли и концентрировали под пониженным давлением с получением 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-(2-OKca-5-a3a6H4Hioio[2.2.1]renTaH-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты, TFA (9.1 мг, 0.012 ммоль, выход 55%). ЖХ/МС: т/е 659.7 (М+Н)+, 1.59 мин (метод 5). *Н ЯМР (500 МГц, Уксусная кислота-а4) 5 = 5.41 (br. s., Ш), 5.27 - 5.23 (m, Ш), 4.86 (s, Ш), 4.77 (s, Ш), 4.75 (s, Ш), 4.64 (s, Ш), 4.23 (d, .7=10.2 Гц, Ш), 4.04 - 3.96 (т, Ш), 3.92 - 3.82 (т, 2Н), 3.77 - 3.51 (т, 4Н), 2.86 - 2.78 (т, Ш), 2.67 - 2.58 (т, Ш), 1.76 (s, ЗН), 1.15 (s, ЗН), 1.10 (s, ЗН), 1.05 - 0.97 (т, 6Н), 0.95 (s, ЗН), 2.44 -0.91 (т, ЗОН).
Пример В2
Получение 4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты, TFA.
Стадия 1. Получение этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата
В герметичный сосуд, содержащий суспензию этил 4-
((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-(aзиpидин-l-ил)-5a,5b,8,8,lla-пeнтaмeтил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (0.05 г, 0.085 ммоль) в THF (1 мл), добавляли DIEA (0.089 мл, 0.510 ммоль) и (18,48)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксид, НС1 (0.047 г, 0.255 ммоль). Виалу герметично закрывали, и суспензию нагревали до 100°С. После нагревания смеси в течение 16 ч, ее охлаждали до комнатной температуры, разбавляли 1,4-диоксаном и метанолом, и твердые вещества удаляли фильтрованием. Фильтрат очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (метод 8) с
получением указанного в заголовке соединения с оставшимися примесями (общее количество 29 мг), которое будет перенесено на следующую стадию для очистки. ЖХ/МС: т/е 735 (М+Н)+, 2.08 мин (метод 5).
Стадия 2. К сырому раствору этил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (29 мг) в 1,4-диоксане (1 мл) добавляли NaOH (1 н.) (0.2 мл, 0.200 ммоль). Смесь нагревали до 75°С в течение 15 ч, и затем ее охлаждали до комнатной температуры, разбавляли 1,4-диоксаном и метанолом и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (метод 9). Фракции, содержащие продукт, концентрировали под пониженным давлением. Соединение очищали второй раз с помощью препаративной ВЭЖХ (метод 10) с получением указанного в заголовке соединения (4.7 мг, 5.7 мкмоль, выход 6.7% после 2 стадий) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 707.6 (М+Н)+, 1.72 мин (метод 5). 1Н ЯМР (500 МГц, уксусная кислота-сЦ) 5 = 5.38 (br. s., Ш), 5.27 - 5.19 (m, Ш), 4.81 (s, Ш), 4.71 (s, Ш), 4.12 (br. s., Ш), 3.72 (br. s., Ш), 3.48 - 3.34 (m, ЗН), 3.29 - 3.18 (m, 2H), 3.16 - 3.05 (m, ЗН), 2.93 - 2.83 (m, Ш), 2.66 - 2.54 (m, 2H), 2.50 - 2.42 (m, Ш), 1.73 (s, ЗН), 1.18 (s, ЗН), 1.09 (s, ЗН), 2.41 - 0.84 (m, 37H).
Стадия 4. К раствору этил 3-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS)2,2-
диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-
(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-9-ил)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоксилата (28 мг, 0.03 ммоль) в
1,4-диоксане (2 мл) добавляли гидроксид натрия (1 н.) (0.149 мл, 0.149 ммоль). Смесь
нагревали до 70°С. После нагревания смеси в течение 16 ч, ее охлаждали до комнатной
температуры и подкисляли добавлением 1 мл 1 н. НС1. Затем добавляли воду до тех пор,
пока не образовывались твердые вещества. Твердые вещества собирали путем
фильтрования, растворяли в 1,4-диоксане и метаноле и очищали с помощью
препаративной ВЭЖХ (метод 12) с получением 3-
((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lR,4R)-2,2-диoкcидo-2-тиa-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоновой кислоты в виде двух различных изомеров (изомер 1, 16.5%, и изомер 2, 11.5%).
Пример В4: Изомер 1: МС: т/е 705.6 (М+Н)+, 2.393 мин (метод 6). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 5.83 (s, Ш), 5.46 (m, Ш), 4.79 (s, Ш), 4.73 (s, Ш), 4.09 (br. s., Ш), 3.60 (br. s., Ш), 3.42 - 3.08 (т, 6Н), 3.07 - 2.71 (т, 4Н), 2.69 - 2.54 (т, ЗН), 2.42 (d, .7=12.5 Гц, Ш), 2.28 (td, .7=6.7, 3.1 Гц, Ш), 2.24 - 1.84 (т, 7Н), 1.72 (s, 4Н), 1.65 - 1.28 (т, 14Н), 1.14 (br. s., Ш), 1.11 (s, ЗН), 1.05 (т, 9Н), 0.86 (s, ЗН).
Пример В5: Изомер 2: МС: т/е 705.6 (М+Н)+, 2.638 мин (метод 6). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 5.89 (s, Ш), 5.47 (d, J=4.5 Гц, Ш), 4.81 (s, Ш), 4.72 (s, Ш), 4.14 (br. s., Ш), 3.60 (br. s., Ш), 3.47 - 3.17 (m, 5Н), 3.15 - 2.85 (m, 5Н), 2.82 - 2.57 (m, ЗН), 2.44 (d, .7=12.3 Гц, Ш), 2.34 - 2.20 (m, 2Н), 2.16 - 1.90 (m, 6Н), 1.77-1.70(m, Ш), 1.71 (s, ЗН), 1.67 -1.24 (m, 14Н), 1.14 (s, 6Н),1.12-1.03( m, Ш), 1.05 (s, ЗН), 1.02 (s, ЗН), 0.78 (s, ЗН).
Пример В6 и Пример В7
Получение 3-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,l laS,l lbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS)-2-OKca-5-
Стадия 1. Получение этил 3-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-
азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоновой кислоты (изомер 1 и изомер 2).
Указанное в заголовке соединение получали с количественным выходом, следуя
методике, описанной выше для получения этил 3-
((1К,За8,5аК,5ЬК,7аК,11а8,11ЬК,13аК,13ЬК)-За-((2-((18)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоксилата, применяя рацемический (lS)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан гидрохлорид в качестве реактанта. МС: т/е 685.6 (М+Н)+, 2.83 мин (метод 6). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 5.80 (br. s., Ш), 5.51 - 5.37 (m, Ш), 4.73 (d, .7=2.0 Гц, Ш), 4.59 (dd, .7=2.3, 1.5 Гц, Ш), 4.42 (s, Ш), 4.18 - 4.10 (m, 2Н), 4.07 (d, .7=7.8 Гц, Ш), 3.65 (dd, .7=7.7, 1.6 Гц, Ш), 3.50 (s, Ш), 2.95(dd, .7=9.8, 1.5 Гц, Ш), 2.95 -2.40 (т, 8Н)" 2.18 (dt, .7=6.5, 3.3 Гц, Ш), 2.09 - 1.96 (т, ЗН), 1.92 - 1.72 (т, 6Н), 1.71 (s, ЗН), 1.68 - 1.31 (т, 9Н), 1.30 - 1.10 (т, ЮН), 1.08-0.8 (т, 16).
Стадия 2. Этил 3-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS)-2-OKca-5-
азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-
9-ил)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоксилат получали из этил 3-
((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоксилата, применяя условия, описанные выше на стадии 4 получения 3-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lR,4R)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоновой кислоты, с получением
указанного в заголовке соединения в виде двух различных изомеров (изомер 1, 29.5% и изомер 2, 22.01%) после очистки с помощью препаративной ВЭЖХ (метод 11).
Пример В6: Изомер 1: МС: т/е 657.55 (М+Н)+, 2.663 мин (метод 6). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 5.79 (s, Ш), 5.49 (d, .7=4.8 Гц, Ш), 4.81 (s, Ш), 4.72 (s, Ш), 4.67 (s, Ш), 4.35 (s, Ш), 4.21 (d, .7=10.3 Гц, Ш), 3.84 (d, .7=9.3 Гц, 2Н), 3.76 - 3.28 (m, 5Н), 2.90 (dd, .7=18.2, 5.6 Гц, Ш), 2.73 - 2.57 (т, 2Н), 2.54 - 2.47 (т, Ш), 2.33 (td, .7=6.5, 3.0 Гц, Ш), 2.27 -1.93 (т, 7Н), 1.91 (т, 2Н), 1.79 (d, .7=12.0 Гц, Ш), 1.70 (s, ЗН), 1.64 - 1.21 (т, 14Н), 1.2-1.16(т, Ш), 1.14 - 1.09 (т, ЗН), 1.02 (т, 7Н), 0.95 - 0.88 (т, ЗН), 0.76 (s, ЗН). Пример В7: Изомер 2: МС: т/е 657.55 (М+Н)+, 2.696 мин (метод 6). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 6.01 (s, Ш), 5.53 (d, .7=5.0 Гц, Ш), 4.84 (s, Ш), 4.73 (s, Ш), 4.68 (s, Ш), 4.38 (s, Ш), 4.21 (d, .7=10.5 Гц, Ш), 3.93 - 3.79 (m, 2Н), 3.74 - 3.17 (т, 5Н), 2.94 (dd, .7=17.1, 6.3 Гц, Ш), 2.84 - 2.32 (т, 2Н), 2.28 - 1.78 (т, ЮН), 1.70 (s, ЗН), 1.66 - 1.24 (т, 13Н), 1.20 (d, .7=3.3 Гц, 6Н), 1.16 - 1.04 (т, ЗН), 1.01 (d, J=4.5 Гц, 6Н), 0.97 - 0.93 (т, Ш), 0.65 (s, ЗН).
Пример В 8
Получение (S)-4-((l R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 1 IbR, 13aR, 13bR)-3a-((2-((l S,4S)-2,2-
диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты.
Стадия 1. Получение (18,48)-5-(2-гидроксиэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида
НО'
Смесь (18,48)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида (65 мг, 0.442 ммоль), фосфата калия (375 мг, 1.766 ммоль), 2-бромэтанола (221 мг, 1.766 ммоль) и иодида калия (147 мг, 0.883 ммоль) в ацетонитриле (2 мл) нагревали при 120°С в течение 4 часов. Реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением и очищали на силикагеле с 0-15% метанол/этилацетат с получением указанного в заголовке продукта (60 мг, выход 71%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 192.07 (М+Н)+, 0.87 мин (метод 2)
Стадия 2. Получение (18,48)-5-(2-хлорэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксид гидрохлорида
Смесь (18,48)-5-(2-гидроксиэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида (80 мг, 0.418 ммоль) и тионилхлорида (0.153 мл, 2.092 ммоль) в дихлорметане (2 мл) перемешивали при 20°С в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрировали под пониженным давлением с получением указанного в заголовке соединения (90 мг, выход 87%) в виде желтого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 210.02 (М+Н)+, 1.76 мин (метод 2).
Стадия 3. Получение (8)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата
OBn
Смесь (8)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (10 мг, 0.016 ммоль), (18,48)-5-(2-хлорэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида (3.36 мг, 0.016 ммоль), фосфата калия (17.01 мг, 0.080 ммоль) и иодида калия (5.32 мг, 0.032 ммоль) в ацетонитриле (1 мл) нагревали при 120°С в течение 16 часов. Реакционную смесь затем фильтровали и очищали с помощью ВЭЖХ с получением целевого продукта (5 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 797.8 (М+Н)+, 2.31 мин (метод 5).
Стадия 4. Смесь (8)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (5 мг, 6.27 мкмоль) и гидроксида натрия (0.063 мл, 0.063 ммоль) в ацетонитриле (1 мл) нагревали при 80°С в течение 3 часов. Реакционную смесь фильтровали и очищали с помощью ВЭЖХ с получением (S)-4-((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-Зa-((2-((lS,4S)-2,2-диoкcидo-2-тиa-5
азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,1 lb, 12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты (2.2 мг, выход 47%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 707.8 (М+Н)+, 1.82 мин (метод 5). *Н ЯМР (400 МГц, Уксусная кислота) 5 5.37 (br. s., Ш), 5.22 (d, .7=4.3 Гц, Ш), 4.80 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 4.10 (br. s., Ш), 3.79 - 3.65 (m, Ш), 3.50 - 3.32 (m, ЗН), 3.28 - 3.00 (m, 5Н), 2.93 - 2.75 (m, Ш), 2.56 (d, .7=12.3 Гц, 2Н), 2.49 - 2.39 (m, Ш), 2.32 (br. s., 2Н), 2.23 - 1.10 (m, 26Н), 1.72 (s, ЗН), 1.16 (s, ЗН), 1.07 (s, ЗН), 1.00 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.92 (s, ЗН).
Пример В9
Получение (R)-4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты.
Стадия 1. Получение (R)-6eH3ra 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата, 2 TFA.
К смеси (Я)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(a3HpHAHH-l-^)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (50 мг, 0.077 ммоль), молекулярных сит 4°А (100 мг, 0.077 ммоль) и М,М-диизопропилэтиламина (0.094 мл, 0.538 ммоль) в THF (2 мл) добавляли (75',45)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан, НС1 (52.2 мг, 0.385 ммоль). Реакцию перемешивали при 100°С. Через 70 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, применяя метод 15 препаративной ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом при 50°С с получением указанного в заголовке соединения (47.2 мг, 0.048 ммоль, выход 62.8%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 749.6 (М+Н)+, 4.62 мин (метод 9). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.75 - 7.44 (m, 2Н), 7.43 - 7.29 (т, 5Н), 5.35 (br. s., Ш), 5.17 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 5.14 (s, 2Н), 4.78 (s, Ш), 4.69 (s, Ш), 4.65 (br. s., Ш), 4.27 (br. s., Ш), 4.18 (d, .7=10.3 Гц, Ш), 3.81 (d, .7=9.8 Гц, Ш), 3.71 (d, .7=16.1 Гц, 2Н), 3.51 - 3.28 (т, ЗН), 2.81 - 2.67 (т, Ш), 2.65 - 2.54 (т, Ш), 2.34 (br. s., 2Н), 2.26 - 2.10 (т, 4Н), 2.10 - 1.80 (т, 6Н), 1.79 -1.71 (т, 2Н), 1.69 (s, ЗН), 1.64 - 1.23 (т, 12Н), 1.07 (s, ЗН), 1.01 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 0.92 (s, ЗН), 0.86 (s, ЗН).
Стадия 2. К раствору (R)-6eH3iui 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (47.2 мг, 0.048 ммоль) в THF (1.5 мл) и МеОН (0.5 мл) добавляли 1 н. гидроксид лития (0.193 мл, 0.193 ммоль). Реакцию перемешивали при 75°С. Через 3 ч реакционную смесь концентрировали, и сырой материал растворяли в THF (2 мл)/Н20 (150 мкл), очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 15 препаративной ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением (R)-4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1
(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты (32.9 мг, 0.036 ммоль, выход 75%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 659.5 (М+Н)+, 4.14 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 CDC13:МЕТАНОЛ-а4) 5 5.33 (br. s., Ш), 5.22 - 5.08 (m, Ш), 4.78 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 4.54 (s, Ш), 4.04 (d, .7=8.8 Гц, Ш), 3.84 (br. s., Ш), 3.73 (dd, .7=8.8, 1.5 Гц, Ш), 3.23 - 2.96 (m, 5Н), 2.88 - 2.63 (m, 2Н), 2.58 - 2.40 (m, Ш), 2.35 - 2.09 (m, 5Н), 2.08 - 1.90 (m, 8Н), 1.83 - 1.75 (m, Ш), 1.71 (s, ЗН), 1.70 - 1.61 (m, 2Н), 1.61 - 1.42 (m, 8Н), 1.41 -1.36 (m, Ш), 1.35 (s, Ш), 1.33 - 1.23 (m, Ш), 1.10 (s, ЗН), 1.05 (s, ЗН), 0.95 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 0.88 (s, ЗН)
Пример В10
Получение (S)-4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((lS,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3 -енкарбоновой кислоты.
Стадия 1. Получение (8)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата.
К смеси (8)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-(a3HpHAHH-l-^)-5a,5b,8,8,l 1 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-
2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (50 мг, 0.077 ммоль), молекулярных сит 4°А (100 мг, 0.077 ммоль) и М,М-диизопропилэтиламина (0.094 мл, 0.538 ммоль) в THF (2 мл) добавляли (75',45)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан, НС1 (52.2 мг, 0.385 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 100°С. Через 70 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, очищали с помощью препаративной ВЭЖХ, применяя метод 15 препаративной ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом при 50°С с получением указанного в заголовке соединения (27.9 мг, 0.029 ммоль, выход 37.1%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 749.6 (М+Н)+, 4.65 мин (метод 9). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.90 (br. s., ЗН), 7.44 - 7.29 (m, 5Н), 5.35 (br. s., Ш), 5.20 - 5.09 (m, ЗН), 4.78 (br. s., Ш), 4.67 (d, .7=18.1 Гц, 2H), 4.27 (br. s., Ш), 4.18 (d, .7=10.0 Гц, Ш), 3.81 (d, .7=9.8 Гц, Ш), 3.71 (d, .7=19.8 Гц, 2Н), 3.53 - 3.26 (m, 4Н), 2.87 - 2.67 (т, Ш), 2.64 - 2.51 (т, Ш), 2.34 (br. s., 2Н), 2.15 (br. s., 5Н), 2.07 - 1.89 (т, 5Н), 1.88 - 1.72 (т, ЗН), 1.69 (s, ЗН), 1.63 - 1.21 (т, 13Н), 1.07 (br. s., ЗН), 1.01 (s, ЗН), 0.96 (s, ЗН), 0.89 (s, ЗН), 0.86 (s, ЗН).
Стадия 2. К раствору (8)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата в THF (1.5 мл) и МеОН (0.5 мл) добавляли 1 н. гидроксид лития (0.115 мл, 0.115 ммоль). Реакцию перемешивали при 75°С. Через 3 ч реакционную смесь концентрировали, и сырой материал растворяли в THF (2 мл)/НгО (150 мкл) и очищали с помощью обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, применяя метод 15 препаративной ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с получением (S)-4-((1 R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 1 IbR, 13aR, 13bR)-3a-((2-((l S,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен
9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты (21 мг, 0.023 ммоль, выход 80%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 659.5 (М+Н)+, 34.14 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, 1:1 CDCl3:МЕТАНОЛ^) 5 5.33 (br. s., Ш), 5.17 (d, .7=4.6 Гц, Ш), 4.78 (s, Ш), 4.70 (br. s., Ш), 4.52 (s, Ш), 4.03 (d, .7=8.6 Гц, Ш), 3.75 (br. s., Ш), 3.72 (d, .7=8.6 Гц, Ш), 3.18 - 3.09 (m, 2Н), 3.09 - 2.92 (m, 4Н), 2.79 - 2.64 (m, 2Н), 2.53 - 2.42 (m, Ш), 2.31 - 2.23 (m, 2Н), 2.16 (br. s., 2Н), 2.04 - 1.93 (m, 8Н), 1.81 - 1.73 (m, 2Н), 1.72 (s, ЗН), 1.69 - 1.63 (m, Ш), 1.61 - 1.33 (m, 12Н), 1.30 (dd, .7=12.2, 3.4 Гц, Ш), 1.24 (br. s., Ш), 1.20 - 1.14 (m, Ш), 1.12 - 1.09 (m, ЗН), 1.05 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.90 (s, ЗН), 0.88 (s, ЗН).
Пример Bll
Получение (R)-4-((l R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 11 bR, 13aR, 13bR)-3a-((2-((l S,4S)-2,2-
диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11 а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты.
Стадия 1. Получение (R)-6eH3ra 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата.
OBn
В 15 мл колбу под средним избыточным давлением добавляли (Я)-бензил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-aMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-l-(npon-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилат (70 мг, 0.112 ммоль), фосфорную кислоту, калиевую соль (119 мг, 0.561 ммоль), (18,48)-5-(2-хлорэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксид (70.6 мг, 0.337 ммоль) и иодид калия (55.9 мг, 0.337 ммоль). Твердую смесь высушивали при 50°С вакуумной печи в течение 15 минут, и заполняли N2 (газообразный). Добавляли ацетонитрил (3 мл), и смесь нагревали при 120°С. Через 22 ч полученную в результате кремообразную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Полученную светло-желтую пасту промывали DCM (25 мл). Жидкий фильтрат концентрировали с получением сырого продукта в виде светло-коричневого твердого вещества, которое очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ, применяя метод 15 препаративной ВЭЖХ, с получением указанного в заголовке соединения (67.2 мг, 0.062 ммоль, выход 55.5%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 797.6 (М+Н)+, 4.68 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 7.42 - 7.32 (m, 5Н), 5.35 (br. s., Ш), 5.18 (d, .7=4.4 Гц, Ш), 5.14 (s, 2Н), 4.78 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 4.18 (br. s., Ш), 3.58 (br. s., Ш), 3.37 (dd, .7=13.4, 2.7 Гц, Ш), 3.32 -3.22 (т, 2Н), 3.21 - 3.15 (т, Ш), 3.07 (d, .7=13.0 Гц, Ш), 3.00 (dd, .7=13.2, 3.2 Гц, Ш), 2.93 -2.74 (т, 2Н), 2.67 - 2.54 (т, 2Н), 2.45 - 2.29 (т, 8Н), 2.27 - 2.11 (т, 4Н), 2.07 - 1.88 (т, 6Н), 1.80 - 1.73 (т, Ш), 1.70 (s, ЗН), 1.67 (br. s., Ш), 1.60 - 1.42 (т, 8Н), 1.38 (d, .7=10.8 Гц, 2Н), 1.31 (br. s., Ш), 1.10 (s, ЗН), 1.04 (s, ЗН), 0.94 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 0.87 (s, ЗН). 13С ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 175.7, 148.1, 147.2, 139.3, 136.2, 128.5, 128.1, 128.0, 122.6, 121.0, 111.4, 77.2, 70.5, 66.1, 61.5, 60.7, 56.2, 53.0, 52.7, 49.3, 49.2, 48.8, 44.8, 42.1, 41.7, 40.83 - 40.72, 40.7, 39.0, 37.5, 36.9, 36.1, 33.8, 32.8, 31.6, 29.6, 28.3, 27.7 (br. s., 1С), 27.70 -27.57, 25.9, 25.8, 25.2, 21.5, 20.9, 19.6, 19.4, 16.4, 16.1, 14.5.
Стадия 2. К раствору (R)-6eH3ra 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,llaS,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-
((18,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-
пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь
октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоксилата (65.2 мг, 0.082
ммоль) в THF (1.5 мл) и МеОН (0.5 мл) добавляли 3 н. гидроксид лития (0.136 мл, 0.409
ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 75°С в течение 3 ч и затем охлаждали до
комнатной температуры. Реакционную смесь подвергали очистке с помощью обращенно-
фазовой ВЭЖХ, используя метод 6 препаративной ВЭЖХ, и высушивали под вакуумом с
получением (R)-4-((l R,3aS,5aR,5bR,7aR, 11 aS, 11 bR, 13aR, 13bR)-3a-((2-((l S,4S)-2,2-
диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)-2,3,За,4,5,5а,5Ь,6,7,7а,8,11,11а,11Ь,12,13,13а,13Ь-октадекагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)циклогекс-3-енкарбоновой кислоты (48.2 мг, 0.049 ммоль, выход 59.9%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 707.5 (М+Н)+, 4.07 мин (метод 8). 1Н ЯМР (400 МГц, 1:1 СОС13:МЕТАНОЛ-с}4) 5 5.33 (br. s., Ш), 5.21 - 5.13 (ш, Ш), 4.77 (s, Ш), 4.70 (s, Ш), 3.98 (br. s., Ш), 3.64 (br. s., Ш), 3.40 - 3.34 (m, Ш), 3.30 - 3.24 (m, Ш), 3.16 (dd, .7=11.4, 3.8 Гц, 2Н), 3.11 - 3.05 (m, 2Н), 3.05 - 2.94 (m, 2Н), 2.83 - 2.70 (m, Ш), 2.58 (d, .7=12.2 Гц, Ш), 2.48 (ddt, .7=17.4, 6.1, 2.9 Гц, Ш), 2.44 - 2.36 (m, Ш), 2.32 - 2.22 (m, 2Н), 2.21 - 2.12 (m, 2Н), 2.11 - 2.04 (m, 2Н), 2.03 - 1.91 (m, 5Н), 1.87 - 1.72 (m, ЗН), 1.71 (s, ЗН), 1.68 - 1.53 (m, 5Н), 1.52 - 1.37 (m, 7Н), 1.34 (s, Ш), 1.32 - 1.23 (m, Ш), 1.09 (s, ЗН), 1.05 (s, ЗН), 0.95 (s, ЗН), 0.93 (s, ЗН), 0.87 (s, ЗН).
Пример В12
Получение 4-(((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S, 11 aR, 11 bR, 13aR, 13bR)-3a-((2-((l S,4S)-2,2-
диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты.
Стадия 1. Получение (lS,4S)-5-(2-(((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-9-
гидрокси-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-
циклопента[а]хризен-3а-ил)амино)этил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида.
(lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-AMHHO-5a,5b,8,8,lla-neHTaMeT^-l-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ол, НС1 (350 мг, 0.754 ммоль), (18,48)-5-(2-хлорэтил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксид, НС1 (278 мг, 1.131 ммоль), фосфорную кислоту, калиевую соль (800 мг, 3.77 ммоль) и иодид калия (376 мг, 2.262 ммоль) объединяли в колбе под средним избыточным давлением. Реакционную колбу вакуумировали в вакуумной печи при 50°С в течение 15 минут, и заполняли N2 (газообразный), затем в нее загружали ацетонитрил (10 мл). Полученную в результате кашицу перемешивали при 120°С. Через 48 ч реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Образовавшееся твердое вещество удаляли фильтрованием и несколько раз промывали DCM (100 мл). Жидкий фильтрат промывали Н2О (25 мл). Водный слой экстрагировали DCM (50 мл). Объединенный органический слой
высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали до коричневого твердого вещества. Сырой материал очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (40 г, элюировали от 0% В до 50% В 5 объемами колонки, затем удерживание при 50% более 20 объемов колонки; растворитель А = гексан, растворитель В = ЕЮ Ас) и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (0.25 г, 0.416 ммоль, выход 55.2%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 601.4 (М+Н)+, 3.00 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 4.70 (d, .7=1.7 Гц, Ш), 4.59 (s, Ш), 3.82 (br. s., Ш), 3.51 (br. s., Ш), 3.41 (dd, .7=12.8, 2.8 Гц, Ш), 3.28 - 3.23 (m, Ш), 3.22 - 3.15 (m, 2Н), 2.90 (dd, .7=13.0, 3.4 Гц, Ш), 2.87 - 2.82 (m, Ш), 2.80 - 2.72 (т, Ш), 2.60 (td, .7=10.9, 5.1 Гц, Ш), 2.56 - 2.48 (т, 2Н), 2.47 - 2.41 (т, Ш), 2.41 - 2.34 (т, Ш), 2.02 - 1.93 (т, Ш), 1.87 (d, .7=13.4 Гц, Ш), 1.76 (dd, .7=12.0, 8.3 Гц, 2Н), 1.69 (s, ЗН), 1.67 - 1.64 (т, Ш), 1.62 (dd, .7=8.7, 3.8 Гц, 2Н), 1.59 - 1.48 (т, 8Н), 1.47 - 1.36 (т, 5Н), 1.33 - 1.25 (т, 4Н), 1.22 (dd, .7=13.4, 3.9 Гц, 2Н), 1.13 - 1.05 (т, 2Н), 1.02 (s, ЗН), 0.98 (s, ЗН), 0.97 (s, ЗН), 0.91 (d, .7=4.2 Гц, Ш), 0.84 (s, ЗН). 13С ЯМР (101 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 150.9, 109.3, 78.9, 77.2 (br. s., 1С), 62.6, 60.9, 55.7, 55.3, 53.6, 51.7, 50.5, 49.8, 47.4, 42.0, 40.9, 40.1, 38.9, 38.7, 37.2, 36.7, 35.5, 34.3, 30.1, 28.4, 28.0, 27.4, 26.7, 25.1, 21.0, 19.6, 18.3, 16.1, 15.4, 14.4.
Стадия 2. Получение 1-трет-бутил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил) 2,2-диметилсукцината.
К раствору (lS,4S)-5-(2-(((lR,ЗaS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-9-гидpoкcи-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-За-ил)амино)этил)-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан 2,2-диоксида (73 мг, 0.121 ммоль) в DCM (2 мл) добавляли МДЧ-диизопропилэтиламин (0.063 мл, 0.364 ммоль), 4-(трет-бутокси)-3,3-диметил-4-оксобутановую кислоту (49.1 мг, 0.243 ммоль) (полученную как описано в WO 2004014881), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид (47.5 мг, 0.243 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (29.7 мг, 0.243 ммоль). Полученную в результате смесь растворов перемешивали при комнатной температуре. Через 3.5 ч реакционную
смесь разбавляли DCM (30 мл) и промывали 0.1 и. НС1 (5 мл). Водный слой экстрагировали DCM (25 мл). Объединенный органический слой промывали 10% ИаНСОз, насыщенным солевым раствором, высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали. Сырой материал очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (12 г, элюирование 97:3 DCM:MeOH) и высушивали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (83.2 мг, выход 87%) в виде белого твердого вещества. ЖХ/МС: т/е 785.6 (М+Н)+, 4.15 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 4.71 (br. s., 1Н), 4.59 (s, Ш), 4.48 (dd, .7=10.6, 5.5 Гц, Ш), 3.89 (br. s., Ш), 3.51 (br. s., 1H), 3.40 (dd, .7=13.0, 2.7 Гц, 1H), 3.27 - 3.21 (m, 1H), 3.20 (d, .7=3.9 Гц, 1H), 2.90 (dd, .7=13.1, 3.1 Гц, 1H), 2.86 (br. s., 1H), 2.74 - 2.60 (m, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.51 (d, .7=7.3 Гц, 2H), 2.41 - 2.32 (m, 1H), 2.02 (d, .7=17.4 Гц, 1H), 1.86 (d, .7=13.4 Гц, 1H), 1.82 - 1.73 (m, 2H), 1.68 (s, 3H), 1.66 - 1.50 (m, 7H), 1.43 (s, 11H), 1.42 - 1.30 (m, 6H), 1.26 (d, .7=8.1 Гц, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.12 - 1.04 (m, 2H), 1.01 (s, 3H), 0.95 (s, 3H), 0.84 (s, 6H), 0.83 (s, 3H), 0.78 (d, .7=9.5 Гц, 1H).
Стадия 3. К раствору l-трет-бутил 4-((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1-(проп-1-ен-2-ил)икосагидро-1Н-циклопента[а]хризен-9-ил) 2,2-диметилсукцината (55.2 мг, 0.070 ммоль) в DCM (1 мл) добавляли TFA (0.3 мл, 3.89 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре, и она становилась пурпурно-красного цвета. Через 1 ч TLC (95:5 DCM:MeOH) показала, что реакция завершена. Реакционную смесь разбавляли DCE (2 мл) и концентрировали до красного твердого вещества. Сырой материал повторно растворяли в DCM (0.5 мл). Добавляли Et20 для получения дополнительного осадка, который фильтровали и промывали Et20 с получением 4-(((lR,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,llaR,llbR,13aR,13bR)-3a-((2-((18,48)-2,2-диоксидо-2-тиа-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)этил)амино)-5а,5Ь,8,8,11а-пентаметил-1 -(проп-1 -ен-2-ил)икосагидро-1 Н-цикл опента[а]хризен-9-ил)окси)-2,2-диметил-4-оксобутановой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества (9.5 мг, выход 18.8%). ЖХ/МС: т/е 729.5 (М+Н)+, 3.49 мин (метод 8). *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 4.79 (br. s., Ш), 4.68 (s, Ш), 4.54 - 4.43 (m, Ш), 4.23 (br. s., Ш), 3.58 (br. s., Ш), 3.49 - 3.31 (m, 2H), 3.29 - 3.13 (m, ЗН), 3.11 - 2.91 (m, 4H), 2.79 (br. s., 1H), 2.72 -2.64 (m, 1H), 2.59 (s, 1H), 2.56 (d, .7=6.4 Гц, 1H), 2.39 (d, .7=11.5 Гц, 1H), 2.28 (br. s., 1H), 1.93 (br. s., 4H), 1.70 (s, 3H), 1.69 - 1.49 (m, 9H), 1.48 - 1.40 (m, 3H), 1.35 (br. s., 2H), 1.31 (br. s., 3H), 1.30 (br. s., 3H), 1.09 (br. s., 3H), 1.03 (s, 3H), 1.00 - 0.89 (m, 2H), 0.86 (br. s., 3H), 0.85 (s, 3H), 0.83 (s, 3H), 0.79 - 0.73 (m, 1H).
Получение этил 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен 6-карбоксилата
Стадия 1: Получение (1S,5S,6R)-3THT 3-
(((трифторметил)сульфонил)окси)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоксилата
3=0
Указанное в заголовке соединение получали с выходом 34.5% следуя способу, описанному в WO 2012/003497, применяя (±)-(1R,5S,6R)-3THT 3-оксобицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат (рацемический фрагмент, если не указано иное) в качестве реактанта, и (±)-(1R,5S,6R)-3THII 3-оксобицикло[3.1.0]гексан-6-карбоксилат получали, следуя способу, описанному в WO 2011/075515. МС: т/е 301.05 (М+Н)+, 2.689 мин (метод 8) *Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 5.89 (d, .7=1.8 Гц, Ш), 4.24 - 4.05 (m, 2Н), 3.01 (ddd, .7=18.1, 7.2, 1.8 Гц, Ш), 2.70 (d, .7=18.3 Гц, Ш), 2.41 (dq, .7=7.1, 2.6 Гц, Ш), 2.19 (td, .7=7.2, 3.3 Гц, Ш), 1.41 - 1.33 (т, Ш), 1.30 - 1.20 (т, ЗН), 19F ЯМР (376 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 -73.22 (s, 3F).
Стадия 2: Указанное в заголовке соединение получали с количественным выходом, следуя методике, описанной на стадии 2 для получения метил 6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)спиро[3.3]пер!-5-ен-2-карбоксилата, применяя (±)-(1S,5S,6R)-3THT 3-(((трифторметил)сульфонил)окси)бицикло[3.1.0]гекс-2-ен-6-карбоксилат в качестве реактанта. ХН ЯМР (500 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 6.67 (q, .7=2.0 Гц, Ш), 4.27 - 3.98 (m, 2Н), 2.89 - 2.72 (т, Ш), 2.63 - 2.53 (т, Ш), 2.54 - 2.41 (т, Ш), 2.28 (td, .7=6.2, 3.3 Гц, Ш), 1.33 -1.15 (т, 16Н).
Биологические данные для Примеров
• "мкМ" означает микромоль;
• "мл" означает миллилитр;
• "мкл" означает микролитр;
• "мг" означает миллиграмм;
• "мкг" означает микрограмм.
Материалы и экспериментальные способы, используемые для получения результатов, представленных в Таблицах 1-2, описаны ниже.
Анализ культуры клеток ВИЧ- МТ-2 клетки и 293Т клетки были получены по Программе исследования NIH СПИД и референтных реагентов. МТ-2 клетки были размножены в среде RPMI 1640, дополненной 10% инактивированной нагреванием эмбриональной бычьей сывороткой, 100 мкг/мл пенициллина G и до 100 единиц/мл стрептомицина. 293Т клетки были размножены в среде DMEM, дополненной 10% инактивированной нагреванием эмбриональной бычьей сывороткой (FBS), 100 единиц/мл пенициллина G и 100 мкг/мл стрептомицина. Клон провирусной ДНК NL4.3 был получен по Программе исследования NIH СПИД и референтных реагентов. Рекомбинантный вирус NL4.3, в котором часть nef гена из NL4.3 была заменена на ген люциферазы Renilla, применялся в качестве эталонного вируса. Дополнительно, остаток Gag Р373 был преобразован в P373S. В нескольких словах, рекомбинантный вирус получали путем трансфекции измененного провирусного клона NL4.3. Трансфекции проводили в клетках 293Т с использованием LipofectAMHH PLUS от Invitrogen (Carlsbad, СА), в соответствии с инструкцией изготовителя. Вирус титровали в МТ-2 клетках с использованием ферментативной активности люциферазы в качестве маркера. Количественный анализ люциферазы проводили с использованием двойного набора люциферазы от Promega (Madison, WI), с изменениями в протоколе производителя. Разбавленный раствор Passive Lysis предварительно смешивали с повторно суспендированным химическим реагентом люциферазы и повторно суспендированным субстратом Stop & Glo (отношение 2:1:1). Пятьдесят (50) мкл смеси добавляли в каждую аспирированную лунку на аналитических планшетах и сразу же измеряли активность люциферазы на Wallac TriLux (Перкт-Elmer). Противовирусные активности ингибиторов по отношению к рекомбинантному вирусу количественно определяли путем измерения активности люциферазы в клетках, инфицированных в течение 4-5 дней NLRluc рекомбинантами в присутствии серийных
разведений ингибитора. Значения ЕС50 для соединений показаны в Таблице 2. Таблица 1 является ключом для данных в Таблице 2.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Jd б
HOOC^^^
0.071
HOOC^^^
0.083
^. AN он
f 1 f I ^ J^NH^^ N/
HOOC^^^
8.80E-03
H ГЛ к JH
J^V/V^^^ н о
1.18E-03
Вышеизложенное описание является всего лишь иллюстративным и в любом случае не должно пониматься как ограничение объема или основных принципов изобретения.
Действительно, различные модификации изобретения в дополнение к тем, которые показаны и описаны здесь, станут очевидными для специалистов в данной области из следующих примеров и приведенного выше описания. Такие модификации также находятся в пределах объема прилагаемой формулы изобретения.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение, включая его фармацевтически приемлемые соли, которое выбрано из группы:
соединение Формулы II
соединение Формулы III
соединение Формулы I
где Ri представляет собой изопропенил или изопропил;
J и Е каждый независимо представляет собой -Н или -СНз, и Е отсутствует, когда присутствует двойная связь;
X выбран из группы, состоящей из фенила, гетероарильного кольца, С4.8 циклоалкила, С4.8 циклоалкенила, С4.9 спироциклоалкила, С4.9 спироциклоалкенила, С4.8 оксациклоалкила, С4-8 диоксациклоалкила, Сб-8 оксациклоалкенила, Сб-8 диоксациклоалкенила, Св
циклодиалкенила, Св оксациклодиалкенила, Св-9 оксаспироциклоалкила и Св-9 оксаспироциклоалкенильного кольца; X также может быть выбран из группы:
и для соединений Формулы II и III X также может представлять собой
где X замещен А, и А представляет собой, по меньшей мере, один член, выбранный из группы -Н, -гало, -гидроксила, -Ci-б алкила, -Ci-б алкокси, -Ci-б галоалкила, -NR2R2, -COOR2, -C(0)NR2R2, -C(0)NR2S02R3, -S02NR2R2, -NR2S02R2, -S02NR2R2, -C,.6 циклoaлкил-COOR2, -C2-6 aлкeнил-COOR2, -C2-6 aлкинил-COOR2, -Ci-6 aлкил-COOR2, -NHC(0)(CH2)n-COOR2, -S02NR2C(0)R2, -тетразола и -бициклического гетероарил-СООЯг; Y выбран из группы -COOR2, -C(0)NR2S02R3, - C(0)NHS02NR2R2, -NR2S02R3, -SO2NR2R2, -C3.6 циклоалкил-СОСЖг, -С2-6 aлкeнил-COOR2, -С2-6 aлкинил-COOR2, -Ci-6 aлкил-COOR2, -NHC(0)(CH2)n-COOR2, -S02NR2C(0)R2, .тетразола и -CONHOH, где n=l-6;
W представляет собой -CH2 или -СО; Z выбран из группы:
V выбран из группы -CRgRsr, -SO2-, -О- и -NR10-; U выбран из группы -CRgRsr, -SO2- и -NR10-;
М выбран из группы -CHR8R9, -S02R4, -SO2NR3R3, -ОН и -NRW R11S
R2 представляет собой -Н, -Ci-б алкил, -алкилзамещенный Ci-б алкил или -арилзамещенный Ci-б алкил;
R3 представляет собой -Ci-б алкил или -алкилзамещенный Ci-б алкил;
R4 выбран из группы -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила, - С3.6 циклоалкила, -арила и -гетероарила;
R5 выбран из группы -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-б алкила и -Ci-б алкил-ОН; R6 и R7 каждый независимо выбран из группы -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного С1-6 алкила, -C02R2, -СН2ОН, -CHF2 и -CF3;
R8 и R9 каждый независимо выбран из группы -Н, -С i-б алкила, -алкилзамещенного С1-6 алкила, -SO2R3, -S02NR2R2 или -ОН, -NR2R2, -NR2S02R3, -NR2COR3 и -NR2CONR2R2; при условии, что только один из Re и R9 может быть выбран из группы -ОН, -NR2R2, -NR2SO2R3, -NR2COR3 и -NR2CONR2R2; и
Rio и Rn каждый независимо выбран из группы -Н, -Ci-б алкила, -алкилзамещенного Ci-6 алкила, -С1.3 алкиларила, С1.3 алкилгетероарила, -CO2R2 и -SO2R3;
при условии, что только один из Rio и Rn может быть выбран из группы -CO2R2 или -SO2R3.
2. Соединение по п. 1, где указанное соединение имеет Формулу I.
3. Соединение по п. 2, где X представляет собой -фенил или -С4.8 циклоалкенил.
4. Соединение по п. 3, где А представляет собой -Н.
5. Соединение по п. 1, где R5 представляет собой -Н.
6. Соединение по п. 1, где Y представляет собой -COOR2.
7. Соединение по п. 6, где Y представляет собой -СООН.
8. Соединение по п. 1, где Rio представляет собой -С 1.3 алкиларил.
9. Соединение по п. 8, где указанный алкиларил представляет собой алкилфенил.
10. Соединение по п. 9, где алкил представляет собой метил.
11. Соединение по п. 1, где Z представляет собой Re
12. Соединение по п. 6, где Z представляет собой 6 , и, дополнительно, где Кв
15. Соединение по п. 1, имеющее формулу:
представляет собой -Н и R7 представляет собой -Н.
ноос
16. Соединение, включая его фармацевтически приемлемые соли, которое выбрано группы:
17. Соединение, включая его фармацевтически приемлемые соли, которое выбрано группы:
Схема 1
Схема 1
Схема 4
Схема 4
Схема 7
Схема 7
109
112
112
138
137
140
140
161
161
161
161
161
161
161
161
165
165
168
168
169
169
172
172