[RU]

Изобретение относится к новым соединениям формулы I

или их фармацевтически приемлемым солям, где переменные являются такими, как определено в описании. Заявленные соединения являются применимыми для лечения бактериальной инфекции. Также заявляется композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество заявленных соединений, применение заявленных соединений или композиций для получения лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции и способ получения заявленных соединений.

(57) Реферат / Формула:

Изобретение относится к новым соединениям формулы I

или их фармацевтически приемлемым солям, где переменные являются такими, как определено в описании. Заявленные соединения являются применимыми для лечения бактериальной инфекции. Также заявляется композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество заявленных соединений, применение заявленных соединений или композиций для получения лекарственного средства для лечения бактериальной инфекции и способ получения заявленных соединений.

---

2420-519437ЕА/011 НОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И НОВОЕ ПРИМЕНЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к соединениям, применимым для лечения заболевания, вызванного бактериями, в частности заболеваний, вызванных Staphylococcus aureus, определенной бактерией, не относящейся к микобактериям. Соединения могут быть применимыми для любого млекопитающего (например, человека или животного). Настоящее изобретение также относится к новым соединениям, композициям, способам и применениям.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Бактериальные инфекции являются широко распространенными в мире, и существует острая потребность в соединениях, которые лечат бактериальные инфекции. Известно несколько существующих типов/штаммов бактерий, и особой целью в области медицины является нахождение соединения, которое селективно активно против определенных типов/штаммов бактерий.
Уже существует несколько лекарственных средств, которые,
как известно, характеризуются активностью против бактерий, не
относящихся к микобактериям, но сохраняется потребность в таких
соединениях, в частности, из-за того, что бактерии могут
приобретать устойчивость к определенным
соединениям/лекарственным средствам. Соединения, которые характеризуются селективной активностью против определенных типов/штаммов бактерий, явно будут полезными, например, эти соединения могут иметь преимущество в том, что у бактерий не может развиваться устойчивость в сравнении с другими штаммами бактерий.
Несомненно, целью настоящего изобретения является получение соединений, которые характеризуются селективной активностью против конкретных бактерий, не относящихся к микобактериям, в частности, Staphylococcus aureus.
Некоторые пиримидиновые соединения являются общедоступными или были описаны с помощью Химической реферативной службы, но такие соединения не имели какого-либо конкретного применения, приписываемого им. В международной патентной заявке W0
2005/070899 и заявке на патент США US 2005/182073 раскрыты некоторые пиримидины, которые могут быть применимыми для контроля вредных организмов (например, организмов, атакующих растения). В международной патентной заявке WO 2003/077656 раскрыты некоторые пиримидины, которые могут быть применимыми в качестве антибактериальных средств. В этих документах раскрыты лишь некоторые типы пиримидинов.
В патенте США US 6887870 В1 раскрыты разнообразные соединения, такие как ингибиторы натрий-протонного обмена, но не раскрыты такие соединения, которые применяются в лечении бактериальных инфекций. В международных патентных заявках WO 2011/073378, WO 2011/060976 и WO 2011/061214 ясно раскрыты некоторые соединения для применения в качестве антибактериальных средств, но эти документы раскрывают только ограниченный диапазон соединений.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
где
Y представляет собой
(ii) -CF3;
(iii) -N (Ci-балкил) 2 (например, -N(CH3)2); или
(iv) Сз-бЦиклоалкил (например, циклопропил) ;
Предусматривается соединение формулы I для применения в качестве медикамента/фармацевтического средства, где формула I представляет собой
Nv, Nw, Nx, NY и Nz независимо представляют собой -N= или -C(H)= (или -С(А4)=), но при этом только максимум три из Nv, Nw, Nx, NY и Nz могут представлять собой -N=;
п равно 0, 1 или 2 (а предпочтительно равно 0);
X1 и X2 независимо представляют собой -N- или -С(Н)-;
если X1 представляет собой -N-, то Q1 представляет собой прямую связь, -С(О)- или -S(0)2_;
если X1 представляет собой -С(Н)-, то Q1 представляет собой прямую связь или -N(RZ)-;
Rz представляет собой водород или Ci-балкил;
Rx представляет собой Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) , арил или гетероарил (при этом каждая из последних двух групп необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из А2 и А3, соответственно);
RY, Ryl и Ry2 независимо представляют собой водород, галоген, -CN, -OR10, -N(R11) (R12) или С1-6алкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора));
А1, А2, А3 и А4 независимо представляют собой галоген, -CN, -OR1, -S (О) о-гС^-залкил, С1-6алкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), гетероциклоалкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из Ci-залкила и галогена), арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из В1 и В2, соответственно);
каждый из R1 и R10 независимо представляет собой водород, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, Ci-залкила и -O-CV залкила);
R11 и R12 независимо представляют собой водород или Ci_ 6алкил;
В1 и В2 независимо представляют собой галоген (например,
хлор или фтор), -CN, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)), -ОН или -O-Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)),
или его фармацевтически приемлемая соль.
Вышеупомянутые соединения формулы I (которые применимы в качестве медикаментов) могут называться в данном документе "соединениями согласно настоящему изобретению".
Соединения согласно настоящему изобретению, которые можно упомянуть, включают определенные выше в данном документе, но (а) при условии, что соединение не представляет собой
или
(Ь) где Y представляет собой
(i)
(ii) -CF3; или
(iii) Сз-бДиклоалкил (например, циклопропил) . Фармацевтически приемлемые соли включают соли
присоединения кислоты и соли присоединения основания. Такие соли можно образовать с помощью обычных средств, например, при взаимодействии соединения формулы I в форме свободной кислоты или свободного основания с одним или несколькими эквивалентами соответствующей кислоты или основания, необязательно в растворителе или в среде, в которой соль является нерастворимой, с последующим удалением указанного растворителя или указанной среды с использованием стандартных методик
(например, in vacuo, с помощью лиофилизации или фильтрации). Соли также можно получить путем обмена противоионов соединения согласно настоящему изобретению в форме соли с другим противоионом, например, с использованием подходящей ионообменной смолы.
В контексте настоящего изобретения сольваты, пролекарства, N-оксиды и стереоизомеры соединений согласно настоящему изобретению также включены в объем настоящего изобретения.
Термин "пролекарство" соответствующего соединения согласно настоящему изобретению включает любое соединение, которое после перорального или парентерального введения метаболизируется in vivo с образованием того соединения в экспериментально выявляемом количестве и в течение предварительно заданного времени (например, в течение интервала между введением доз от б до 24 часов (т.е. от одного до четырех раз ежедневно)) . Во избежание неоднозначности толкования, термин "парентеральное" введение включает все формы введения, кроме перорального введения.
Пролекарства соединений согласно настоящему изобретению можно получить с помощью такой модификации присутствующих в соединении функциональных групп, что данные модификации расщепляются in vivo, когда такое пролекарство вводят млекопитающему. Модификации обычно получают путем синтеза исходного соединения с пролекарством-заместителем. Пролекарства включают соединения согласно настоящему изобретению, в которых гидроксильная, амино-, сульфгидрильная, карбоксильная или карбонильная группы в соединении согласно настоящему изобретению связана с любой группой, которая может расщепляться in vivo с регенерацией свободной гидроксильной, амино-, сульфгидрильной, карбоксильной или карбонильной группы, соответственно.
Примеры пролекарств включают без ограничения сложные эфиры и карбаматы для гидроксильных функциональных групп, сложноэфирные группы для карбоксильных функциональных групп, Гладильные производные и N-основания Манниха. Общую информацию о пролекарствах можно найти, например, в Bundegaard, Н. "Design
of Prodrugs" p. 1-92, Elesevier, New York-Oxford (1985).
Соединения согласно настоящему изобретению могут содержать двойные связи и, следовательно, могут существовать в виде геометрических Е- (entgegen) и Z- (zzusammen) изомеров по каждой отдельной двойной связи. Позиционные изомеры также могут охватываться соединениями согласно настоящему изобретению. Все эти изомеры (например, если соединение согласно настоящему изобретению содержит двойную связь или конденсированное кольцо, охватываются цис- и транс-формы) и их смеси включены в объем настоящего изобретения (например, отдельные позиционные изомеры и смеси позиционных изомеров могут быть включены в объем настоящего изобретения).
Соединения согласно настоящему изобретению также могут
проявлять таутомерию. Все таутомерные формы (или таутомеры) и
их смеси включены в объем настоящего изобретения. Термин
"таутомер" или "таутомерная форма" относится к структурным
изомерам с разными энергиями, которые являются
взаимопревращаемыми вследствие низкого энергетического барьера. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) включают взаимопревращения вследствие миграции протона, такие как кето-енольная и имин-енаминная изомеризация. Валентные таутомеры включают взаимопревращения посредством перегруппировки некоторых связывающих электронов.
Соединения согласно настоящему изобретению также могут
содержать один или несколько асимметричных атомов углерода и,
следовательно, могут проявлять оптическую и/или
диастереоизомерию. Диастереоизомеры можно разделить с использованием традиционных методик, например, хроматографии или фракционной кристаллизацией. Разнообразные стереоизомеры можно выделить путем разделения рацемической или другой смеси соединений с использованием традиционных методик, например, фракционной кристаллизации или HPLC. В качестве альтернативы, необходимые оптические изомеры можно получить с помощью взаимодействия соответствующих оптически активных исходных материалов в условиях, которые не будут вызывать рацемизацию или эпимеризацию (т.е. способ "хиральных пулов"), с помощью
взаимодействия соответствующего исходного материала с "хиральным вспомогательным веществом", которое впоследствии может быть удалено на подходящей стадии путем дериватизации
(т.е. разделения, в том числе динамического разделения), например, с гомохиральной кислотой с последующим разделением производных-диастереоизомеров с помощью традиционных способов, таких как хроматография, или с помощью взаимодействия с соответствующим хиральным реактивом или хиральным катализатором в условиях, известных специалисту.
Все стереоизомеры (в том числе без ограничения диастереоизомеры, энантиомеры и атропоизомеры) и их смеси
(например, рацемические смеси) включены в объем настоящего изобретения.
В структурах, приведенных в данном документе, если
стереохимическая структура любого конкретного хирального атома
не указана, то все стереоизомеры рассматриваются и включены как
соединения согласно настоящему изобретению. Если
стереохимическая структура представлена с помощью сплошной клиновидной линии или пунктирной линии, представляющих конкретную конфигурацию, то такой стереоизомер описан и определен таким образом.
Соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в несольватированной, а также в сольватированной формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п., и предполагается, что настоящее изобретение охватывает как сольватированную, так и несольватированную формы.
Настоящее изобретение также охватывает меченные изотопами соединения согласно настоящему изобретению, которые идентичны приведенным в данном документе за исключением того, что один или несколько атомов замещены атомом с атомной массой или массовым числом, отличным от атомной массы или массового числа, обычно встречающих в природе (или наиболее распространенных из встречающихся в природе). Все изотопы каждого конкретного атома или элемента, который указан в данном документе, рассматриваются в объеме соединений согласно настоящему
изобретению. Иллюстративные изотопы, которые могут быть включены в соединения согласно настоящему изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора, хлора и йода, такие как 2Н, 3Н, г1С, 13С, 14С, 13N, 150, 170, 180, 32Р, 33Р, 35S, 18F, 36С1, 1231 и 1251. Определенные меченные изотопами соединения согласно настоящему изобретению (например, меченные 3Н и 14С) применимы в соединениях и для анализа распределения субстрата в тканях. Замещенные тритием (3Н) и углеродом-14 (14С) изотопы применимы вследствие легкости их получения и выявляемое(tm). Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (т.е. 2Н могут давать определенные терапевтические преимущества в результате более высокой метаболической стабильности (например, увеличенный период полувыведения in vivo или уменьшенную необходимую дозу) и, следовательно, могут быть предпочтительными в некоторых случаях. Позитронно-активные изотопы, такие как 150, 13N, 11С и 18F, применимы для исследования с помощью позитронно-эмиссионной томографии (PET) для оценки степени занятости рецептора лигандом. Меченные изотопами соединения согласно настоящему изобретению обычно можно получить с помощью следующих процедур, аналогичных раскрытым в схеме 1 и/или в примерах в данном документе ниже, путем замены меченных изотопами реактивов реактивами, не меченными изотопами.
Если не указано иное, Ci-далкильные группы (где q является верхней границей диапазона), определенные в данном документе, могут представлять собой линейную цепь или могут представлять собой разветвленную цепь, если присутствует достаточное количество (т.е. минимум два или три, в зависимости от конкретного случая) атомов углерода, и/или могут быть циклическими (таким образом образуя Сз-чциклоалкильную группу). Такие циклоалкильные группы могут являться моноциклическими или бициклическими и могут быть дополнительно соединены мостиком. Кроме того, если присутствует достаточное количество (т.е. минимум 4) атомов углерода, такие группы также могут быть частью циклической. Такие алкильные группы также могут быть насыщенными или, если имеется достаточное количество (т.е.
минимум 2) атомов углерода, могут быть ненасыщенными (образуя, например, Сг-далкенильную или Сг-далкинильную группу) .
Сз-дЦиклоалкильные группы (где q является верхней границей диапазона), которые можно специально упомянуть, могут представлять собой моноциклические или бициклические алкильные группы, при этом циклоалкильные группы могут быть дополнительно соединены мостиком (таким образом образуя, например, конденсированные кольцевые системы, такие как циклоалкильные группы с тремя конденсированными кольцами). Такие циклоалкильные группы могут быть насыщенными или ненасыщенными, содержащими одну или несколько двойных связей (образуя, например, циклоалкенильную группу). Заместители могут быть присоединены в любой точке на циклоалкильной группе. Кроме того, в случае, когда присутствует достаточное количество (т.е. минимум четыре) таких циклоалкильных групп, они также могут быть частью циклической.
Термин "галоген", когда он используется в данном документе, предпочтительно включает фтор, хлор, бром и йод.
Гетероциклоалкильные группы, которые можно упомянуть,
включают неароматические моноциклические и бициклические
гетероциклоалкильные группы, в которых по меньшей мере один
(например, от одного до четырех) атом в кольцевой системе
является отличным от углерода (т.е. гетероатомом) и в которых
общее количество атомов в кольцевой системе составляет от 3 до
2 0 (например, от трех до десяти, например, от 3 до 8, как
например, 5-8) . Такие гетероциклоалкильные группы также могут
быть соединены мостиком. Кроме того, такие гетероциклоалкильные
группы могут быть насыщенными или ненасыщенными, содержащими
одну или несколько двойных и/или тройных связей, образуя,
например, С2-дгетероциклоалкенильную (где q является верхней
границей диапазона) группу. Сг-дГетероциклоалкильные группы,
которые можно упомянуть, включают 7-азабицикло[2.2.1]гептанил,
б-азабицикло[3.1.1]гептанил, б-азабицикло[3.2.1]-октанил, 8-
азабицикло-[3.2.1]октанил, азиридинил, азетидинил,
дигидропиранил, дигидропиридил, дигидропирролил (в том числе 2,5-дигидропирролил), диоксоланил (в том числе 1,3
диоксоланил), диоксанил (включая 1,3-диоксанил и 1,4-
диоксанил), дитианил (в том числе 1,4-дитианил), дитиоланил (в
том числе 1,3-дитиоланил), имидазолидинил, имидазолинил,
морфолинил, 7-оксабицикло[2.2.1]гептанил, б-оксабицикло-
[3.2.1]октанил, оксетанил, оксиранил, пиперазинил, пиперидинил,
неароматический пиранил, пиразолидинил, пирролидинонил,
пирролидинил, пирролинил, хинуклидинил, сульфоланил, 3-
сульфоленил, тетрагидропиранил, тетрагидрофуранил,
тетрагидропиридил (такой как 1,2, 3,4-тетрагидропиридил и 1,2,3,б-тетрагидропиридил), тиэтанил, тииранил, тиоланил, тиоморфолинил, тритианил (в том числе 1,3,5-тритианил), тропанил и т.п. Заместители на гетероциклоалкильных группах могут, в соответствующих случаях, быть расположены на любом атоме в кольцевой системе, в том числе на гетероатоме. Точка присоединения в гетероциклоалкильных группах может находиться на любом атоме в кольцевой системе, в том числе (в соответствующих случаях) на гетероатоме (таком как атом азота), или на атоме в любом конденсированном карбоциклическом кольце, которое может присутствовать в виде части кольцевой системы. Гетероциклоалкильные группы также могут присутствовать в N- или S-окисленной форме. Гетероциклоалкил, упомянутый в данном документе, может быть представлен, в частности, как моноциклический или бициклический.
Арильные группы, которые можно упомянуть, включают Св-20/ такие как Сб-12 (например, Сб-ю) арильные группы. Такие группы могут быть моноциклическими, бициклическими или трициклическими и иметь от б до 12 (например, 6-10) атомов углерода в кольце, при этом по меньшей мере одно кольцо является ароматическим. Сб-юарильные группы включают фенил, нафтил и т.п., как например, 1,2,3,4-тетрагидронафтил. Точка присоединения арильной группы может находиться на любом атоме кольцевой системы. Например, если арильная группа является полициклической, точка присоединения может находиться на атоме, в том числе на атоме неароматического кольца. Тем не менее, если арильные группы являются полициклическими (например, бициклическими или трициклическими), они предпочтительно соединены с остальной
части молекулы через ароматическое кольцо.
Если не указано иное, термин "гетероарил", когда он используется в данном документе, относится к ароматической группе, содержащей один или несколько гетероатомов (например, от одного до четырех гетероатомов), предпочтительно выбранных из N, О и S. Гетероарильные группы включают те, которые имеют от 5 до 20 членов (например, от 5 до 10), и могут быть моноциклическими, бициклическими или трициклическими при условии, что по меньшей мере одно из колец является ароматическим (таким образом образуя, например, моно-, би- или трициклическую гетероароматическую группу). Если гетероарильная группа является полициклической, точка присоединения может находиться на любом атоме, в том числе на атоме неароматического кольца. Тем не менее, если гетероарильные группы являются полициклическими (например, бициклическими или трициклическими), они предпочтительно соединены с остальной частью молекулы через ароматическое кольцо. Гетероарильные группы, которые можно упомянуть, включают 3,4-дигидро-1Я-изохинолинил, 1, 3-дигидроизоиндолил, 1, 3-дигидроизоиндолил
(например, 3,4-дигидро-1Я-изохинолин-2-ил, 1,3-дигидроизоиндол-2-ил, 1,З-дигидроизоиндол-2-ил; т.е. гетероарильные группы, которые соединены через неароматическое кольцо) или, предпочтительно, акридинил, бензимидазолил, бензодиоксанил, бензодиоксепинил, бензодиоксолил (в том числе 1,3-бензодиоксолил), бензофуранил, бензофуразанил, бензотиадиазолил
(в том числе 2,1,3-бензотиадиазолил), бензотиазолил,
бензоксадиазолил (в том числе 2, 1, 3-бензоксадиазолил),
бензоксазинил (в том числе 3,4-дигидро-2Я-1,4-бензоксазинил),
бензоксазолил, бензоморфолинил, бензоселенадиазолил (в том
числе 2, 1, 3-бензоселенадиазолил), бензотиенил, карбазолил,
хроманил, циннолинил, фуранил, имидазолил, имидазо[1,2-
а]пиридил, индазолил, индолинил, индолил, изобензофуранил,
изохроманил, изоиндолинил, изоиндолил, изохинолинил,
изотиазиолил, изотиохроманил, изоксазолил, нафтиридинил (в том числе 1,б-нафтиридинил или, предпочтительно, 1,5-нафтиридинил и 1,8-нафтиридинил), оксадиазолил (в том числе 1,2,3
оксадиазолил, 1, 2, 4-оксадиазолил и 1,3,4-оксадиазолил),
оксазолил, феназинил, фенотиазинил, фталазинил, птеридинил,
пуринил, пиранил, пиразинил, пиразолил, пиридазинил, пиридил,
пиримидинил, пирролил, хиназолинил, хинолинил, хинолизинил,
хиноксалинил, тетрагидроизохинолинил (в том числе 1,2,3,4-
тетрагидроизохинолинил и 5,б,7,8-тетрагидроизохинолинил),
тетрагидрохинолинил (в том числе 1,2,3,4-тетрагидрохинолинил и
5,б,7,8-тетрагидрохинолинил), тетразолил, тиадиазолил (в том
числе 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил и 1,3,4-
тиадиазолил), тиазолил, тиохроманил, тиофенетил, тиенил, триазолил (в том числе 1, 2,3-триазолил, 1, 2,4-триазолил и 1,3,4-триазолил) и т.п. Заместители на гетероарильных группах могут, в соответствующих случаях, быть расположены на любом атоме в кольцевой системе, в том числе на гетероатоме. Точка присоединения гетероарильной группы может находиться на любом атоме в кольцевой системе, в том числе (в соответствующих случаях) на гетероатоме (таком как атом азота), или на атоме в любом конденсированном карбоциклическом кольце, который может присутствовать в виде части кольцевой системы. Гетероарильные группы также могут быть в N- или S-окисленной форме. Гетероарильные группы, упомянутые в данном документе, могут быть представлены, в частности, как моноциклические или бициклические. Если гетероарильные группы являются полициклическими, в которых присутствует неароматическое кольцо, это неароматическое кольцо может быть замещено одной или несколькими группами =0.
Может быть, в частности, указано, что гетероарильная группа является моноциклической или бициклической. В случае, если указано, что гетероарил является бициклическим, он может состоять из пяти-, шести- или семичленного моноциклического кольца (например, моноциклического гетероарильного кольца), конденсированного с другим пяти-, шести- или семичленным кольцом (например, моноциклическим арильным или гетероарильным кольцом).
Гетероатомы, которые можно упомянуть, включают фосфор, кремний, бор и, предпочтительно, кислород, азот и серу.
Во избежание неоднозначности толкования, если в данном документе указано, что группа (например, Ci-балкильная группа) может быть замещена одним или несколькими заместителями (например, выбранными из А1), эти заместители (например, определенные в А1) являются независимыми друг от друга. То есть, такие группы могут быть замещены тем же заместителем (например, определенным в А1) или другим заместителем (определенным в А1) .
Все отдельные признаки (например, предпочтительные признаки), упомянутые в данном документе, можно рассматривать по отдельности или в комбинации с любым другим признаком (в том числе с предпочтительным признаком), упомянутым в данном документе (следовательно, предпочтительные признаки можно рассматривать в сочетании с другими предпочтительными свойствами или независимо от них).
Специалисту в данной области техники будет понятно, что соединения согласно настоящему изобретению, которые являются объектом настоящего изобретения, включают те, которые являются стабильными. То есть, соединения согласно настоящему изобретению включают те, которые являются достаточно устойчивыми, чтобы выдержать выделение, например, из реакционной смеси с пригодной степенью чистоты.
Соединения согласно настоящему изобретению, которые можно упомянуть, включают те, среди которых есть соединение формулы I, как указано в данном документе, но
при условии, что если Y представляет собой 2-хлорфенил, Ryl представляет собой -ОСН2СН3, оба из RY и Ry2 представляют собой водород, оба из X1 и X2 представляют собой N, Q1 представляет собой прямую связь, то Rx не представляет собой -С(О)О-трет-бутил.
Далее будут описаны предпочтительные соединения согласно настоящему изобретению.
Предпочтительные соединения согласно настоящему
изобретению включают те, в которых
-Q1-Rx не представляет собой -СН3;
например, если X представляет собой -N-, и Q1 представляет
собой прямую связь, и Rx представляет собой алкил, то он предпочтительно представляет собой Сг-6- (например, Сз-б) алкил
(необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) ;
если X представляет собой -N-, и Q1 представляет собой прямую связь, то Rx предпочтительно представляет собой С2-6-
(например, Сз-б) алкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) , арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из А2 и А3, соответственно) ;
если Rx представляет собой алкил, то он предпочтительно представляет собой С2-6- (например, Сз-б) алкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) .
Предпочтительные соединения согласно настоящему
изобретению включают те, в которых следующая субструктура формулы I:
является той, в которой предпочтительно
ни один, один или два из Nv, Nw, Nx, NY и Nz (предпочтительно один, Nx или NY) представляют собой -N=, а другие представляют собой -С(Н)=, или, например, в случае, если вышеуказанное кольцо представляет собой фенил, один из Nv, Nw, Nx, NY и Nz представляют собой -С(А4)=;
если два из Nv, Nw, Nx, NY и Nz представляют собой -N=, то ими предпочтительно являются Nw и NY (таким образом образуя 5-пиримидинильную группу);
п равно 0, 1 или 2 (а предпочтительно равно 0);
А4 (который может присутствовать на любом из атомов углерода в ароматическом кольце, в том числе, если NX/NY/NZ представляет собой -С(Н)=) представляет собой галоген
(например, фтор или бром) , -CN, -OCi-залкил (например, -ОСН3) , -S (О) гСЧ-залкил или Ci-залкил (необязательно содержащий ненасыщенную связь, таким образом образуя, например, -С=С), хотя А4 предпочтительно не присутствует;
более предпочтительно, вышеуказанная субструктура представляет собой пиримидинил или пиридил (предпочтительно, пиридил), необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из А4;
наиболее предпочтительно, вышеуказанная субструктура представляет собой пиридил (предпочтительно незамещенный пиридил, например, 2-пиридил или, предпочтительно, 3-пиридил или 4-пиридил) или замещенный фенил.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения
Y представляет собой Ы"-Ы2-кольцо, которое определено в данном документе (это является наиболее предпочтительным).
В другом варианте осуществления настоящего изобретения
Y представляет собой -N (Ci-балкил) 2 (например, -N(CH3)2). В другом варианте осуществления настоящего изобретения
Y представляет собой Сз-бЦиклоалкил (например, циклопропил).
В другом варианте осуществления настоящего изобретения
Y представляет собой -CF3.
Более предпочтительные соединения согласно настоящему изобретению включают те, в которых
если X1 представляет собой -N-, то Q1 представляет собой прямую связь;
X2 представляет собой -С(Н)-, и X1 представляет собой -N-(таким образом образуя 4-пиперидинильную группу);
X2 представляет собой -N-, и X1 представляет собой -С(Н)-(таким образом образуя 1-пиперидинильную группу);
X1 и X2 представляют собой -N-, таким образом образуя пиперазинильную группу.
Кроме того, предпочтительные соединения согласно настоящему изобретению включают те, в которых
А1 представляет собой гетероциклоалкил (например,
оксетанил), или, более предпочтительно, А1 представляет собой галоген (например, фтор) , -CN, Ci-балкил (например, Сз-бциклоалкил), арил (необязательно замещенный одним или несколькими (например, одним) заместителями, выбранными из В1) , гетероарил (необязательно замещенный одним или несколькими (например, одним) заместителями, выбранными из В2) или -OR1;
если А1 представляет собой арил, то он предпочтительно представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или несколькими (например, одним или двумя) заместителями, выбранными из В1;
если А1 представляет собой арил, замещенный одним или несколькими (например, одним) В1 заместителями, то присутствует по меньшей мере один заместитель, расположенный в мета-положении в фенильной группе (и, в общей сложности, присутствуют предпочтительно один или два В1 заместителя);
если А1 представляет собой необязательно замещенный гетероарил, он предпочтительно представляет собой 5- или 6-членную гетероарильную группу, предпочтительно содержащую один, два или три (например, один) гетероатома, предпочтительно выбранных из азота, серы и кислорода (например, серы и/или кислорода) , таким образом образуя, например, тиенильную (например, 2-тиенильную или 3-тиенильную) или фуранильную (например, 2-фуранильную) группу;
если А1 представляет собой необязательно замещенный гетероарил, то он является необязательно замещенным одним или двумя (например, одним) заместителями, выбранными из В2;
если А1 представляет собой Сз-бЦиклоалкил, то он предпочтительно представляет собой циклогексил;
81 представляет собой галоген (например, фтор или хлор), -
CN, -ОН или Ci-залкил (метил; необязательно замещенный одним или
несколькими атомами галогена, например фтора, таким образом
образуя, например, -CF3 группу);
82 предпочтительно представляет собой С^алкил (например,
Ci-галкил, такой как метил) ;
А1 представляет собой галоген (например, фтор), -CN, тиенил (например, 2- или 3-тиенил, такой как 3-метил,2-тиенил
или незамещенный 3-тиенил), фуранил (например, 2-фуранил), Сз_ бциклоалкил (например, циклогексил) или -0-фенил;
R1 представляет собой арил (например, незамещенный фенил);
если Q1 представляет собой -N(RZ)-, то Rx представляет собой Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1), таким образом образуя, например, -С(0)-С(Н) (СН3)-0-фенил;
Rz представляет собой водород;
если Q1 представляет собой прямую связь или -С(0)-, то Rx предпочтительно представляет собой
Ci-балкил (например, ациклический Ci-балкил или Сз-бциклоалкил), необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и/или А1, и необязательно содержащий одну или несколько (например, одну) двойных связей
(таким образом образуя С2-балкенильную группу) или тройных
связей (таким образом образуя С2-балкинильную группу), таким
образом образуя, например, -СН2-С (СН3) 3, -СН2СН (СН3) 2,
циклопропил, -CH2-CF3, -CH2-C(H)F2, -СН2С (СН3) 2-CN, -С (0)-С (СН3) 3,
-CH2-CF2CH3, -СН2-[3-метил, 2-тиенил] , -СН2-С (СН3) =СНСН3, -СН2-[3-
фторфенил], -СН2-[3-тиенил], -СН2-[3-хлор-б-ОН-фенил], -СН2-[3-
гидроксифенил], -СН2-[2-гидроксифенил], -СН2-[ 2-гидрокси-4-хлор-
фенил], -СН2-[2-гидрокси-5-хлорфенил], -СН2-фенил, -СН2-
циклогексил, -СН2-[2-тиенил], -СН2-[2-фуранил], -С(0)-С(Н) (СН3)-
0-фенил, -СН2-С(Н)(СН3)2, -циклопропил, -СН2-[4-фторфенил],
С(0)-С(СН3) з, -СН2-(3-трифторметил-фенил), -СН2-(3-цианофенил),
-СН2-(4-цианофенил), -СН2-(2, 4-дифторфенил), -СН2-(3-
метилфенил), -СН2- (4-метилфенил), -СН2- (2-фторфенил), -СН2-(2-цианофенил), -СН2-(3, 4-дифторфенил), -СН2-(4-хлорфенил), -СН2-
(3-хлорфенил), -СН2-(2-трифторметил-фенил), -СН2-(2,б-
дифторфенил), -СН2-(3, 5-дифторфенил), -СН2-С=СН или -СН2-С(СН2) (3-оксетанил) (наиболее предпочтительно, Rx представляет собой -СН2-С (СН3) з, -CH2-CF3, -CH2-C(H)F2, -СН2С (СН3) 2-CN, -С(0)-С(СН3)з или -CH2-CF2CH3) ; или
Rx представляет собой арил (например, фенил), необязательно замещенный одним или несколькими (например, одним
или двумя) заместителями, выбранными из А2, таким образом образуя, например, незамещенный фенил;
R10 представляет собой С^алкил (например, Ci-галкил, такой как метил);
R11 и R12 независимо представляют собой водород или, предпочтительно, Ci-залкил (например, метил) ;
либо все из RY, Ryl и Ry2 представляют собой водород, либо, более предпочтительно, по меньшей мере один из RY, Ryl и Ry2 (предпочтительно, Ry) представляет собой заместитель, отличный от водорода, а другие (предпочтительно, Ryl и Ry2) представляют собой водород (т.е. существует предпочтительно один заместитель, присутствующий на фенильном кольце предпочтительно в мета-положении);
если один из Ry, Ryl и Ry2 (например, Ry) представляет собой заместитель, то он предпочтительно выбран из галогена, -ОСН3, -N(CH3)2, -CN или С1-Залкила, необязательно замещенного одним или несколькими атомами фтора;
Ry представляет собой водород или, предпочтительно, галоген (например, фтор или, предпочтительно, хлор), -ОСН3, N(CH3)2, -CN или С1-Залкил (например, -СН3) , необязательно замещенный одним или несколькими атомами фтора (например, CF3), и наиболее предпочтительно, Ry представляет собой -ОСН3 или -CN;
Ryl представляет собой водород, или, если Ry представляет собой водород, он может представлять собой заместитель, выбранный из -ОСН3 и Ci-залкила (например, метила) ;
Ry2 представляет собой водород, или, если Ry и Ryl представляет собой водород, он может представлять собой заместитель, выбранный из галогена (например, фтора) и Ci-залкила (например, метила);
R1 представляет собой водород;
А2 и А3 независимо представляют собой галоген (например, хлор) или -OR1 (например, -ОН).
Определенные соединения согласно настоящему изобретению, раскрытые в данном документе, могут быть новыми per se. И, следовательно, в дополнительном варианте осуществления
ни один или один из Nv, Nw, Nx, NY и Nz (предпочтительно, один, например, Nx или NY) представляет собой -N=, а другие представляют собой -С(Н)=;
п равно 0 или 1;
X1 и X2 независимо представляют собой -N- или -С(Н)-; если X1 представляет собой -N-, то Q1 представляет собой прямую связь;
если X1 представляет собой -С(Н)-, то Q1 представляет собой прямую связь или -N(RZ)-;
Rz представляет собой водород или Ci-балкил;
Rx представляет собой Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) , арил или гетероарил (при этом каждая из последних двух групп необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из А2 и А3, соответственно);
RY, Ryl и Ry2 независимо представляют собой водород, галоген, -CN, -OR10, -N(R11) (R12) или Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора));
А1, А2, А3 и А4 независимо представляют собой галоген, -CN, -OR1, -S (0) 0-гС1-залкил, С1-6алкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), гетероциклоалкил
(необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из Ci-залкила и галогена), арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из В1 и В2, соответственно);
каждый из R1 и R10 независимо представляет собой водород, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, Ci-залкила и -O-Ci-залкила);
R11 и R12 независимо представляют собой водород или Ci-6алкил;
В1 и В2 независимо представляют собой галоген (например, хлор или фтор), -CN, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)), -ОН или -O-Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)),
Предпочтительными новыми соединениями согласно настоящему
или его фармацевтически приемлемая соль при условии, что соединение не представляет собой
ФАРМАКОЛОГИЯ
Как было неожиданно показано, соединения согласно настоящему изобретению являются подходящими для лечения определенных инфекций, не относящихся к микобактериальным инфекциям, в частности, Staphylococcus aureus. Следовательно, они применимы в качестве медикаментов/фармацевтических средства.
Кроме того, настоящее изобретение также относится к применению соединений согласно настоящему изобретению, их фармацевтически приемлемых солей или их N-оксидных форм, а также к любой из их фармацевтических композиций, которые описаны в данном документе далее, для получения лекарственного средства для лечения определенной инфекции, не относящейся к микобактериальным инфекциям, в частности, Staphylococcus aureus.
Соответственно, в другом аспекте настоящее изобретение предусматривает способ лечения пациента, страдающего от определенной инфекции, не относящейся к микобактериальным инфекциям, в частности, Staphylococcus aureus, или подверженного риску ее возникновения, который предусматривает введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению.
Было показано, что соединения согласно настоящему изобретению не только являются подходящими для лечения состояния, вызванного определенной бактерией, Staphylococcus aureus, не относящейся к микобактериям, но, как было показано, характеризуются селективной активностью против них. Следовательно, когда "лечение" состояния, вызванного определенной бактерией, не относящейся к микобактериям, упоминается в данном описании, оно предпочтительно означает "селективное лечение", например, оно характеризуется активностью против такой бактерии {Staphylococcus aureus), но может характеризоваться отсутствием или минимальной (или меньшей) активностью против других бактерий. Может быть преимущественным, если соединение/лекарственное средство
является селективным только против Staphylococcus aureus, тогда не может развиваться устойчивость у других штаммов и устраняется потребность в ненужной антибактериальной обработке.
Бактериальные инфекции, которые можно лечить с помощью
соединений согласно настоящему соединению, включают, например,
инфекции центральной нервной системы, инфекции наружного уха,
инфекции среднего уха, такие как острый средний отит, инфекции
черепных пазух, глазные инфекции, инфекции ротовой полости,
такие как инфекции зубов, десен и слизистой оболочки, инфекции
верхних дыхательных путей, инфекции нижних дыхательных путей,
инфекции мочеполовой системы, инфекции желудочно-кишечного
тракта, гинекологические инфекции, септицемия, инфекции костей
и суставов, инфекции кожи и кожной структуры, бактериальные
эндокардиты, ожоги, антибактериальную профилактику
хирургического вмешательства и антибактериальную профилактику у
пациентов с иммуносупрессией, таких как пациенты, получающие
противораковую химиотерапию, или пациенты с
трансплантированными органами.
В тех случаях, когда в данном документе выше или ниже говорится о том, соединения могут лечить бактериальную инфекцию, это означает, что соединения могут лечить инфекцию, относящуюся к определенным инфекциям, вызванным бактерией, не относящейся к микобактериям, в частности, Staphylococcus aureus.
Настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество соединения согласно настоящему изобретению. Соединения согласно настоящему изобретению могут быть составлены в различные фармацевтические формы с целью введения. В качестве подходящих композиций могут быть упомянуты все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме соли присоединения, в качестве активного ингредиента объединяют в однородную смесь с фармацевтически
приемлемым носителем, при этом носитель может принимать широкий спектр форм в зависимости от формы препарата, требуемого для введения. Эти фармацевтические композиции желательны в форме единичных доз, пригодных, в частности, для перорального введения или парентерального введения. Например, при получении композиций в пероральной лекарственной форме может быть использована любая из обычных фармацевтических сред, например, вода, гликоли, масла, спирты и т.п., в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как воски, сахара, каолин, разбавители, смазывающие средства, связующие, средства, улучшающие распадаемость, и т.п. в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Вследствие простоты их введения таблетки и капсулы являются наиболее преимущественными пероральными единичными лекарственными формами, при этом в таком случае, очевидно, используют твердые фармацевтические носители. Для парентеральных композиций носитель обычно будет содержать стерильную воду, по меньшей мере в значительной степени, хотя могут быть включены другие ингредиенты, например, для улучшения растворимости. Например, можно приготовить инъекционные растворы, в которых носитель включает физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Также можно приготовить инъекционные суспензии, в этом случае можно использовать соответствующие жидкие носители, суспендирующие средства и т.п. Также включены препараты в твердой форме, которые предназначены для преобразования непосредственно перед применением в препараты в жидкой форме.
В зависимости от способа введения фармацевтическая композиция будет предпочтительно содержать от 0,05 до 99% по весу, более предпочтительно от 0,1 до 70% по весу, еще более предпочтительно от 0,1 до 50% по весу активного ингредиента(ов) и от 1 до 99,95% по весу, более предпочтительно от 30 до 99,9% по весу, еще более предпочтительно от 50 до 99, 9% по весу фармацевтически приемлемого носителя, все процентные соотношения берутся, исходя из общего веса композиции.
Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать разнообразные другие ингредиенты, известные в уровне техники, например, смазывающее средство, стабилизирующее средство, буферное средство, эмульгирующее средство, средство, регулирующее вязкость, поверхностно-активное вещество, консервант, ароматизатор или краситель.
Особенно предпочтительно составление вышеуказанных
фармацевтических композиций в единичной лекарственной форме для
простоты введения и равномерности дозирования. Единичная
лекарственная форма, как используется в данном документе,
относится к физически отдельным единицам, подходящим в качестве
единичных доз, при этом каждая единица содержит предварительно
установленное количество активного ингредиента, рассчитанное
для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с
необходимым фармацевтическим носителем. Примерами таких
единичных лекарственных форм являются таблетки (включая делимые
таблетки или таблетки с покрытием), капсулы, пилюли, пакеты для
порошкообразного продукта, пластинки, суппозитории,
инъекционные растворы или суспензии и т.п., а также их отдельное кратное количество.
Суточная доза соединения согласно настоящему изобретению будет, конечно, варьировать в зависимости от используемого соединения, способа введения, желаемого лечения и от указанного заболевания, вызванного микобактериями. Тем не менее, в целом, удовлетворительные результаты будут получены, если соединение согласно настоящему изобретению вводят в суточной дозе, не превышающей 1 грамм, например, в диапазоне от 10 до 50 мг/кг массы тела.
Учитывая тот факт, что соединения согласно настоящему изобретению активны против бактериальных инфекций (например, определенного типа, как определено в данном документе), соединения согласно настоящему изобретению могут быть объединены с другими антибактериальными средствами с целью эффективной борьбы с бактериальными инфекциями.
Следовательно, настоящее изобретение также относится к комбинации (а) соединения согласно настоящему изобретению и (Ь)
одного или нескольких других антибактериальных средств.
Настоящее изобретение также относится к комбинации (а) соединения согласно настоящему изобретению и (Ь) одного или нескольких других антибактериальных средств для применения в качестве лекарственного препарата.
Настоящее изобретение также относится к применению комбинации или фармацевтической композиции, которая определена непосредственно выше, для лечения (например, селективного лечения) бактериальной инфекции (например, определенного типа, как определено в данном документе, Staphylococcus aureus).
Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и в качестве активного ингредиента терапевтически эффективное количество (а) соединения согласно настоящему изобретению и (Ь) один или несколько других антибактериальных средств, также включена в настоящее изобретение, в частности, для применения в лечении определенной бактериальной инфекции, как определено в данном документе.
Весовое соотношение (а) соединения согласно настоящему изобретению и (Ь) другого антибактериального средства(средств) при применении в виде комбинации может определить специалист в данной области техники. Указанное соотношение и точная дозировка, а также частота введения зависят от применяемых конкретного соединения согласно настоящему изобретению и другого антибактериального средства(средств), конкретного состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, подлежащего лечению, возраста, веса, пола, рациона, времени введения и общего физического состояния конкретного пациента, способа введения, а также другой лекарственной терапии, которую может получать индивид, как хорошо известно специалисту в данной области техники. Более того, очевидно, что эффективное суточное количество может быть снижено или увеличено в зависимости от реакции подвергаемого лечению субъекта и/или в зависимости от оценки врача, назначающего соединения согласно настоящему изобретению. Конкретное весовое соотношение для данного соединения формулы (1а) или (lb) и другого антибактериального средства может находиться в диапазоне от 1/10 до 10/1, более
предпочтительно от 1/5 до 5/1, даже более предпочтительно от 1/3 до 3/1.
Соединения согласно настоящему изобретению и одно или несколько других антибактериальных средств можно объединить в одном препарате или их можно составить в отдельных препаратах так, чтобы их можно было вводить одновременно, раздельно или последовательно. Таким образом, настоящее изобретение также относится к продукту, содержащему (а) соединение согласно настоящему изобретению и (Ь) один или несколько других антибактериальных средств, в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении бактериальной инфекции.
ОБЩЕЕ ПОЛУЧЕНИЕ
Соединения согласно настоящему изобретению, как правило, можно получить с помощью последовательности этапов, каждый из которых известен специалисту и/или описан ниже в следующих общих схемах:
Общая схема 1
Предполагается, что специалисту в данной области техники известны соответствующие температуры, разбавления и время реакций для оптимизации вышеуказанных реакций с целью получения желаемого соединения.
Соединения формулы I можно преобразовать в соответствующие Л/-оксидные формы, следуя известным в уровне техники процедурам для преобразования трехвалентного азота в его ЛЬоксидную форму. Описанную реакцию ЛЬокисления, как правило, можно осуществлять путем взаимодействия исходного материала формулы I с соответствующим органическим или неорганическими пероксидом. Соответствующие неорганические пероксиды включают, например, пероксид водорода, пероксиды щелочных металлов или щелочноземельных металлов, например, пероксид натрия, пероксид калия; соответствующие органические пероксиды могут включать
перкислоты, такие как, например, бензолкарбопероксовая кислота или галогензамещенная бензолкарбопероксовая кислота, например 3-хлорбензолкарбопероксовая кислота, пероксоалкановые кислоты, например пероксоуксусная кислота, алкилгидропероксиды, например трет-бутил-гидропероксид. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например, этанол и т.п., углеводороды, например толуол, кетоны, например 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например дихлорметан, и смеси таких растворителей.
Например, соединения формулы I, в которой Y представляет собой Ы"-Ы2-содержащее кольцо, можно получить с помощью следующих способов:
(i) для соединений формулы I, в которой X1 представляет собой -N-, взаимодействие соединения формулы II,
где Nv, Nw, Nx, Ny, Nz, X2, Ry, Ryl, Ry2, А4 и n являются такими, как указано в данном документе выше,
(a) соединением формулы III,
iZ-Cr-R* III,
где L1 представляет собой подходящую уходящую группу, такую как хлор, бром, йод или сульфонатная группа;
(b) для соединений формулы I, в которой Q1 представляет
собой прямую связь, и Rx представляет собой группу,
присоединенную к Q1 фрагментом -CH2-RXX (при этом, в
совокупности, эта группа представляет собой фрагмент Rx)
0=С (Н) (Rxx) IV,
где Rxx представляет собой часть фрагмента Rx (Rx определен в данном документе выше), и при этом данную реакцию проводят в реакционных условиях восстановительного аминирования, например,
в условиях, известных специалисту в данной области техники,
например, как реакцию в "одном сосуде", например, в присутствии
селективного восстанавливающего средства (которое
восстанавливает иминное промежуточное соединение, а не альдегидный исходный материал), такого как цианоборгидрид натрия или, предпочтительно, триацетоксиборгидрид натрия, например, в присутствии слабой кислоты (например, уксусной кислоты), в подходящем растворителе (например, дихлорметане). Также можно использовать альтернативные условия, например, вначале реакция конденсации с последующей реакцией в присутствии восстанавливающего средства (которое не должно быть "имин"-селективным, например, можно использовать боргидрид натрия, если реакцию осуществляют в два этапа);
(ii) для соединений формулы I, в которой соответствующий пиримидин присоединен к X2, при этом X2 представляет собой -N-, взаимодействие соединения формулы V,
где L2 представляет собой подходящую уходящую группу, такую как галоген (например, хлор), с соединением формулы VI,
> VI
-х1
4 X
где X1, Q1 и Rx являются такими, как определено в данном документе выше, в реакционных условиях ароматического нуклеофильного замещения, например, таких как известные в уровне техники, например, в присутствии основания (такого как органическое основание, например, диалкиламиновое основание, например N,N-диизопропилэтиламин);
(iii) для соединений, в которых присутствует фрагмент -
СН2-, восстановление соответствующего соединения, в котором присутствует фрагмент -С(О)-, в присутствии подходящего восстанавливающего средства, например LiAlH.4;
(iv) взаимодействие с соединением формулы VII,
VII
где L3 представляет собой подходящую уходящую группу
(предпочтительно амино-фрагмент, такой как -N(CH3)2), и переменные (например, RY, Ryl, Ry2, Q1, Rx, X1 и X2) являются такими, как определено в данном документе выше, с соединением формулы VIII,
NH2
или его производным (например, солью, такой как соль НС1), при этом переменные (например, Nv, Nw, Nx, NY, Nz, А4 и n являются такими, как определено в данном документе выше), в условиях реакции, которые способствуют циклизации (например, в присутствии основания, такого как неорганическое основание, например, tBuOK, и подходящего растворителя, такого как спиртовой растворитель, например этанол, при этом реакцию можно осуществлять при повышенной температуре);
(v) для соединений, содержащих фрагмент -C(F)2-,
взаимодействие соответствующего соединения, содержащего
фрагмент -С(О)-, с соответствующим "фторидным" реактивом
(например, диэтиламиносульфотрифторидом; например, в
присутствии подходящего растворителя, такого как дихлорметан).
Соединения формулы II можно получить путем реакции соединения формулы IX,
или его производного (такого как защищенное производное, например, защищенное по -N(H)- фрагменту, например, Вое группой) , где переменные (например, L3, RY, Ryl, Ry2, Q1, Rx и X2) являются такими, как определено в данном документе выше, с соединением формулы VIII, которое определено в данном документе выше.
Соединения формулы V можно получать в соответствии с процедурами, описанными в данном документе.
Соединения формул VII и IX можно получать путем реакции соответствующего соединения формулы X,
где X а представляет собой -X -Q -Rx (в случае получения соединения формулы VII) или -N(H)- (в случае получения соединения формулы IX или их защищенный фрагмент, например, N(Boc)-), а другие переменные (например, X2, RY, Ryl и Ry2) являются такими, как определено в данном документе выше, с соединением формулы XI,
0=С(Н)-L3 XI,
в котором L3 является таким, как определено в данном документе выше (и, в частности, представляет собой аминогруппу, такую как -Ы(СНз)г, таким образом образуя, например, DMF) , например, реакция DMF-DMA в присутствии подходящего растворителя (например, ароматического растворителя, такого как толуол) при нагревании с обратным холодильником.
Соединения формулы X можно получать в соответствии с
процедурами, описанными в данном документе.
Очевидно, что в предыдущих и в последующих реакциях продукты реакции можно выделить из реакционой среды и при необходимости подвергнуть дополнительной очистке в соответствии с методиками, которые в целом известны в уровне техники, как например, экстракция, кристаллизация и хроматография. Кроме того, очевидно, что реакционные продукты, которые существуют в более чем одной энантиомерной форме, можно выделить из их смеси с помощью известных методик, в частности, препаративной хроматографии, такой как препаративная HPLC, хиральная хроматография. Отдельные диастереоизомеры или отдельные энантиомеры можно также получить с помощью сверхкритической флюидной хроматографии (SCF).
Исходные материалы и промежуточные соединения являются соединениями, которые либо являются коммерчески доступными, либо их можно получить в соответствии с традиционными реакционными процедурами, общеизвестными в уровне техники.
Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение без ограничения его объема.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
К раствору А-1 (100 г, 0,64 моля) и Et3N (64, 37 г, 0,64 моля) в THF (1000 мл) добавляли ВосгО (138,82 г, 0,64 моля) при 0°С, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. После этого реакционную смесь выливали в Н20 (1000 мл) и экстрагировали EtOAc (500 мл х 3) . Объединенные органические слои высушивали над безводным ЫагЭ04 и концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения В-1 (138,10 г, выход: 84%) .
2. Синтез промежуточного соединения С-1:
К раствору В-1 (138 г, 0,54 моля) в 1 л THF и 1 л Н20 добавляли LiOH.H20 (67,51 г, 1,61 моля) при 0 °С. После добавления смесь перемешивали при 2 5°С в течение 15 часов. Органический растворитель удаляли при пониженном давлении. Смесь экстрагировали EtOAc (500 мл х 3), и водный слой отделяли и обрабатывали 0,5 М водным раствором НС1 для доведения до рН = 3, и экстрагировали CH2CI2 (1 л х 3) . Объединенные органические слои высушивали над безводным ЫагЭ04 и концентрировали с получением промежуточного соединения С-1 (80 г, 65%) в виде твердого вещества белого цвета.
3. Синтез промежуточного соединения D-1.
'О'
I | CDI, DCM .
С-1
D-1
К перемешиваемому раствору С-1 (80 г, 0,35 моля) в 1 л безводного СН2С1г добавляли CDI (62,24 г, 0,38 моля) в атмосфере N2 при 0°С. После добавления смесь перемешивали при 2 5°С в течение 1 часа, наблюдалось образование газа. Добавляли Et3N (42,37 г, 42 моль), смесь перемешивали при 25°С в течение 30 минут, после чего добавляли О,N-диметилгидроксиламина гидрохлорид (42,54 г, 0,44 моля). После добавления смесь перемешивали при 2 5°С в течение 15 часов. Смесь промывали водой, водным раствором ЫаНСОз и водным раствором моногидрата лимонной кислоты. Органический слой отделяли, высушивали над безводным ЫагЭ04 и концентрировали с получением промежуточного соединения D-1 (80 г, 95%) в виде твердого вещества белого цвета.
4. Синтез промежуточного соединения F-1:
К перемешиваемому раствору D-1 (20 г, 73,44 ммоля) в 500 мл безводного THF добавляли Е-1 (350 мл, 88 ммоль) в атмосфере
N2 при 0°С. После добавления смесь перемешивали при 0°С в течение 2 часов и при 15°С в течение б часов. Затем смесь фильтровали. Твердое вещество растворяли в NH4C1 (100 мл) и экстрагировали EtOAc (2 00 мл х2). Объединенные органические
слои промывали рассолом (200 мл х2), высушивали над MgSC> 4, фильтровали и концентрировали с получением 16,2 г промежуточного соединения F-1 в виде твердого вещества белого цвета.
5. Синтез промежуточного соединения G-1:
F-1
Перемешиваемый раствор F-1 (15 г, 4 5 ммоль) и DMF-DMA (9 мл, 67,48 моля) в 300 мл безводного толуола перемешивали при 110°С в атмосфере N2 в течение 4 ч. После этого растворитель испаряли при пониженном давлении с получением 12,15 г промежуточного соединения G-1.
6. Синтез промежуточного соединения 1-1:
, HCI Н-1
,
tBuOK, ЕЮН, 80'С. не ч.
90%
[1,5 г, 9,65 ммоля) с
К перемешиваемому раствору G-1 этаноле (24 мл) добавляли при изоникотинимидамида гидрохлорид Н-1 последующим добавлением трет-бутоксида калия (1,44 г, 12,9 ммоля).
Реакционную смесь затем нагревали до 8 0°С в течение 16 часов. После 100% расхода соединения G-1 (отслеживаемого с помощью LCMS) реакционной смеси давали остыть при комнатной
температуре и концентрировали в вакууме. Осадок затем разбавляли дихлорметаном (150 мл) и обрабатывали водой (150 мл). Неочищенную водную смесь экстрагировали дихлорметаном (2x150 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение затем очищали на силикагеле с использованием дихлорметана/этилацетата: 50/50 с получением желаемого промежуточного соединения 1-1 в виде твердого вещества светло-белого цвета (2,58 г, 90% выход). 7. Синтез промежуточного соединения J-1:
J-1
К раствору 1-1 (2,8 г, 6,25 ммоля) в дихлорметане (31 мл) добавляли трифторуксусную кислоту (5,7 мл) при комнатной температуре. Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После полного расхода 1-1 (отслеживаемого с помощью TLC) реакционную смесь концентрировали в вакууме с получением осадка, который поглощали в дихлорметане (100 мл) и обрабатывали насыщенным водным раствором карбоната калия (100 мл) . Неочищенную водную смесь экстрагировали дихлорметаном (2x100 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого промежуточного соединения J-1 виде твердого вещества бежевого цвета (2 г, 92%), которое использовали на следующем этапе без какой-либо дальнейшей очистки.
Общая схема 2:
Вг.
THF
К перемешиваемому раствору D-1 (30 г, 104 ммоль) в 500 мл безводного THF добавляли К-1 (500 мл, 125 ммоль) в атмосфере N2 при 0°С. Смесь перемешивали при 15°С в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавляли NH4CI (250 мл) и EtOAc (500 мл) . Органический слой промывали рассолом, высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали. Осадок очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат = 20:1) с получением 15,12 г промежуточного соединения L-1.
2. Синтез промежуточного соединения М-1:
Я0А0
М-1
Смесь L-1 (14,20 г, 37,14 ммоля), Zn(CN)2 (6,54 г, 55,72
ммоля) и Pd(PPh3)4 (2,15 г, 1,86 ммоля) в DMF (140 мл) перемешивали при 100°С в течение 18 ч. Раствор ЫаНСОз (200 мл) добавляли после охлаждения смеси до комнатной температуры.
Полученную в результате смесь экстрагировали EtOAc (200 мл х 2) . Объединенные органические слои промывали ЫаНСОз (100 мл), рассолом (100 мл), высушивали над MgS04, фильтровали и концентрировали. Осадок очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат = 10:1) с получением промежуточного соединения М-1 (12,04 г) в виде твердого вещества белого цвета.
3. Синтез промежуточного соединения N-1:
Перемешиваемый раствор М-1 (12,00 г, 36,54 ммоля) и DMF-DMA (6,53 г, 58,81 ммоля) в 300 мл безводного толуола перемешивали при 110°С в течение 4ч. в атмосфере N2. После этого растворитель испаряли при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью хроматографии на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат = 1:1) с получением промежуточного соединения N-1 (10,05 г) в виде твердого вещества белого цвета.
4. Синтез соединение Р-1:
К перемешиваемому раствору N-1 (800 мг, 2,0 ммоль) в ацетонитриле (8 мл) при комнатной температуре добавляли изоникотинимидамида гидрохлорид Н-1 (657 мг, 4,1 ммоля), а затем DBU (0,93 мл, 6,2 ммоля). Реакционную смесь затем нагревали в запечатанной пробирке до 110°С в течение 16 часов. После полного расхода N-1 (отслеживаемого с помощью LCMS), реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры и обрабатывали водой (30 мл). Неочищенную водную смесь экстрагировали дихлорметаном (3x30 мл) . Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение (1,3 г) затем очищали на силикагеле с использованием раствора дихлорметана/метанола/гидроксида аммония (33% в Н20) : 98/2/0,1 с получением желаемого промежуточного соединения 0-1 в виде твердого вещества светло-желтого цвета (800 мг, 87% выход).
5. Синтез промежуточного соединения Р-1:
К раствору 0-1 (800 мг, 1,8 ммоля) в дихлорметане (10 мл) добавляли при комнатной температуре трифторуксусную кислоту
(2,15 мл) . Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После полного расхода 0-1
(отслеживаемого с помощью TLC), реакционную смесь обрабатывали насыщенным водным раствором карбоната натрия (30 мл) . Неочищенную водную смесь экстрагировали дихлорметаном (3x30 мл) . Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого промежуточного соединения Р-1 в виде твердого вещества светло-желтого цвета (695 мг, количественный выход), которое использовали на следующем этапе без какой-либо
Смесь Q-1 (150 г, 1,53 моля) и трибромида пиридиния (635 г, 1,99 моля) в CH2CI2 (2 л) перемешивали при 20°С в течение 96 часов. После этого реакционную смесь промывали водным раствором ЫагЭгОз (2x1 л) и рассолом (1 л), высушивали над MgSC> 4, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения R-1 (380 г, 96%) в виде желтой жидкости.
2. Синтез промежуточного соединения S-1:
К смеси R-1 (170 г, 1,08 моля), Н-1 (334,00 г, 1,29 моля) и NaHC03 (362,45 г, 4,31 моля) в 2,5 л безводного МеОН перемешивали при 8 0°С в течение 12 часов в атмосфере N2. После этого смесь охлаждали и фильтровали, фильтрат концентрировали.
Осадок очищали с помощью хроматографии на силикагеле (CH2CI2: МеОН=10:1) с получением промежуточного соединения S-1 (170 г) в виде твердого вещества коричневого цвета.
3. Синтез промежуточного соединения U-1:
В перемешиваемую смесь S-1 (150 г, 595,08 ммоля) и Т-1 (131,16 г, 892,62 ммоля) в 1500 мл EtOH и 300 мл Н20 добавляли NaHC03 (189, 21 г, 1,79 моля) и Pd (PPh3) 2С12 (15 г) в атмосфере N2. Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 8 часов в атмосфере N2. Затем смесь фильтровали и растворитель испаряли при пониженном давлении. Осадок промывали с EtOAc с получением промежуточного соединения U-1. Неочищенное соединение использовали непосредственно на следующем этапе. 4. Синтез промежуточного соединения V-1:
В перемешиваемую суспензию U-1 (100 г, неочищенное) в 1500 мл безводного СН2С12 добавляли по каплям оксалилдихлорид (462,77 г, 3,65 моля) при 0°С в атмосфере N2. Затем добавляли DMF (53,30 г, 7,2 9 моля) и реакционную смесь перемешивали при 15°С в течение 4ч. в атмосфере N2. После этого растворитель испаряли при пониженном давлении. Осадок растворяли в EtOAc (1л) и водном ЫаНСОз (1 л) . Органический слой промывали рассолом, высушивали над MgS04 и концентрировали. Осадок очищали с помощью хроматографии на силикагеле (СН2С12: МеОН=20:1) с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт промывали EtOH с получением 9,4 г промежуточного соединения V-1 в виде
твердого вещества коричневого цвета и использовали непосредственно на следующем этапе. Синтез конечного соединения 6:
К раствору J-1 (250 мг, 0,722 ммоля) в дихлорэтане (10 мл) добавляли уксусную кислоту (0,124 мл, 2,17 ммоля) и 2,2-диметилпропаналь (0,157 мл, 1,45 ммоля). Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли триацетоксиборгидрид натрия (428 мг, 2 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Для полного завершения реакции добавляли 2,2-диметилпропаналь (0,157 мл, 1,45 ммоля) и уксусную кислоту (0,124 мл, 2,17 ммоля) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. перед добавлением триацетоксиборгидрида натрия (428 мг, 2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов, а затем разбавляли дихлорметаном и обрабатывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Водный слой экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение затем очищали на силикагеле с использованием раствора дихлорметана/метанола/гидроксида аммония (33% в Н20) : 98/2/0,1 с получением желаемого соединения 6 в виде твердого вещества белого цвета (156 мг, 52% выход).
К раствору J-1 (0,15 г, 0,433 ммоля) и 4-хлор-2-гидроксибензальдегида (0,068 г, 0,433 ммоля) в дихлорметане (4 мл) в атмосфере N2 добавляли триацетоксиборгидрид натрия (0,138 г, 0,649 ммоля) одной порцией. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь непосредственно загружали на пластинки для препаративной TLC и элюировали четыре раза [гептан(1):EtOAc(2)]. Основную полоску соскребали и элюировали с Si02 с использованием [EtOAc(9):МеОН(1)]. Элюат испаряли до высыхания с выходом 0,139 г соединение 9 (66%).
Синтез конечного соединения 12:
К раствору J-1 (0,1 г, 0,289 ммоля) в метаноле (очень сухом) (3 мл) и уксусной кислоте (0,1 мл) в атмосфере N2 добавляли (1-этоксициклопропокси)триметилсилан (0,061 мл, 0,303 ммоля) одной порцией. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч, после чего добавляли цианоборгидрид натрия (0,027 г, 0,433 ммоля) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи, после
чего ей давали остыть до комнатной температуры и перемешивали 2 4 ч. Реакционную смесь непосредственно загружали на пластинку для препаративной TLC и элюировали [СН2С1г(95) : МеОН(5) ] . Основную полоску соскребали и элюировали из S1O2 с использованием [EtOAc(9): МеОН(1)]. Элюаты испаряли до высыхания с выходом 0, 089 г конечного соединения 12 (54%) .
Смесь J-1 (100 мг, 0,289 ммоля), 2-феноксипропионовой кислоты (62,4 мг, 0,375 ммоля), EDCI (83 мг, 0,433 ммоля), НОВТ
(58,5 мг, 0,433 ммоля) и NEt3 (61 мкл, 0,433 ммоля) в CH2CI2 (5 мл) перемешивали при RT в течение ночи. Добавляли воду и слои декантировали. Органический слой промывали водой, высушивали над MgS04, фильтровали и растворитель испаряли. Неочищенное соединение очищали с помощью хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 30 г) с использованием CH2Cl2/MeOH/NH4OH 97,5/2,5/0,1. Растворитель испаряли с получением конечного соединения 20
(64%) .
Синтез конечного соединения 21:
Промежуточное соединение W-1 синтезировали в соответствии с процедурой, описанной для промежуточного соединения V-1, с использованием (3-метоксифенил)борной кислоты вместо Т-1.
Раствор W-1 (99 мг, 0,333 ммоля), Х-1 (77 мг, 0,399 ммоля) и N,N-диизопропилэтиламина (0,142 мл, 0,831 ммоля) в THF (20 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение ночи. Для завершения реакции Х-1 (236 мг, 1,22 ммоля) и N,N-диизопропилэтиламин (0,63 мл, 3,7 ммоля) добавляли порционно в течение 2 дней и реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником. Реакционной смеси позволяли достичь RT и растворители удаляли в вакууме. Оставшееся коричневое масло (примерно 0,5 г) растворяли в МеОН/СНгСИг и твердые вещества отфильтровывали. С помощью препаративной TLC (гептан/диэтиловый эфир, 4:1 [Зх], 9:1 [Зх]) получали 8 0 мг бесцветного масла. Материал растворяли в DIPE и добавляли гептан. Удалением растворителя в вакууме получали соединение 21 в виде бесцветного твердого вещества (70 мг, 56%) .
Синтез конечного соединения 25:
Раствор J-1 (100 мг, 0,29 ммоля), триметилацетилхлорида (35,5 мкл, 0,29 ммоля), NEt3 (40 мкл, 0,29 ммоля) в СН2С12 (4 мл) перемешивали в течение ночи при RT. Смесь выливали в водный раствор NaHC03 и экстрагировали CH2CI2. Объединенные органические слои высушивали, фильтровали и концентрировали с получением 120 мг. Неочищенное соединение очищали с помощью колоночной хроматографии (нормальная фаза на стабильном
диоксиде кремния (5 мкм, 150x30,0 мм), градиент подвижной фазы 0% NH4OH, 100% DCM, от 0% МеОН к 0,6% NH4OH, 94% DCM, 6% МеОН).
Твердое вещество кристаллизовали в диизопропиловом эфире и высушивали при пониженном давлении при 70°С с получением соединения 25 (81 мг, 65%).
Синтез конечного соединения 2 6:
\- : / Щ /
3(GH)g
о о
DMF. CH2CI2
Y-1
' Сочетание по Оузтукм 31%
В атмосфере азота к суспензии S-1 в CH2CI2 (50 мл) добавляли оксалилхлорид (0,22 мл, 2,55 ммоля). DMF (0,02 мл) добавляли по каплям (экзотермическая реакция) и реакционную смесь перемешивали при RT в течение 3 ч. Растворители удаляли в вакууме. Неочищенный материал Y-1 использовали непосредственно на следующем этапе.
4-Фенилпиперидин (0,089 г, 0,549 ммоля) добавляли к
суспензии Y-1 (0, 099 г, 0, 366 ммоля) в THF (8 мл) . После
добавления твердые вещества растворялись и цвет менялся от
коричнево-желтого до фиолетового. Добавляли N,N-
диизопропилэтиламин (0,188 мл, 1,098 ммоля) и реакционную смесь перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение ночи. Добавляли воду и EtOAc. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты высушивали с Na2S04 и растворители удаляли в вакууме. Неочищенное соединение очищали с помощью флеш-хроматографии (СН2С1г, 2% МеОН) с получением промежуточного соединения Z-1 в виде желтого масла (66 мг, 46%) .
Суспензию Z-1 (0,066 г, 0,167 ммоля), 2-метоксифенилборной кислоты (0,038 г, 0,25 ммоля) и карбоната натрия (0,060 г, 0, 566 ммоля) в DME (8 мл)/Н20 (2 мл) продували аргоном в
течение 5 мин. Добавляли хлорид транс-
бис(трифенилфосфин)палладия (II) (б мг, 8,6 мкмоля) и суспензию продували аргоном в течение 5 мин. Реакционную смесь (суспензию) перемешивали при 60°С в атмосфере аргона в течение 2 ч. Добавляли ЩО и EtOAc. Твердые вещества отфильтровывали. Слои разделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои промывали рассолом и высушивали с Na2S04. Растворители удаляли в вакууме. Материал растворяли в CH2CI2. Добавляли воду и смесь энергично перемешивали в течение ночи. Слои разделяли. Водный слой экстрагировали CH2CI2. Объединенные органические экстракты высушивали с Na2S04. Растворители удаляли в вакууме. Материал совместно выпаривали с CH2CI2. Et20 добавляли к желтому маслу. Материал затвердевал. Суспензию перемешивали в Et20 в течение ночи. Твердое вещество отфильтровывали, промывали Et20 и Н20 и высушивали с получением конечного соединения 26 (31%) .
Синтез конечного соединения 4 9:
J-1 (100 мг, 0,289 ммоля), К2С03 (80 мг, 0,57 ммоля), пропаргил-бромид (раствор 80% по весу в толуоле, 39 мкл, 0,35 ммоля) в CH3CN (4 мл) перемешивали при RT в течение ночи. Добавляли Н20 и CH2CI2, органическую фазу декантировали, высушивали над порошком MgS04, фильтровали и растворитель испаряли. Неочищенное соединение очищали с помощью колоночной хроматографии на колонке с силикагелем (15-40 мкм, 30 г) в CH2Cl2/MeOH/NH4OH 97/3/0,5 с получением 20 мг соединения 49 после кристаллизации в СНзСЫ/диизопропиловом эфире (18%).
J-1 (200 мг, 0,58 ммоля), трифторуксусный ангидрид (177 мкл, 1,27 ммоля), NEt3 (642 мкл, 4,62 ммоля) в CH2CI2 (4 мл) перемешивали при RT в течение 12 ч. Смесь выливали в водный раствор ЫаНСОз и экстрагировали CH2CI2. Объединенные органические слои высушивали, фильтровали и концентрировали с получением 248 мг промежуточного соединения Z-1. Неочищенное соединение использовали непосредственно на следующем этапе.
В потоке N2 при -70°С Et20 (5 мл) добавляли к AICI3 (97 мг, 0,7 3 ммоля), после чего смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин. LiAlH4 (1,12 мл, 2,24 ммоля) добавляли по каплям при 0°С и смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин. Z-1 (248 мг, 0,56 ммоля) в THF (5 мл) добавляли по каплям и смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Реакцию гасили льдом и добавляли EtOAc. Слои декантировали. Органический слой промывали водой, высушивали над MgS04, фильтровали и растворитель испаряли. Неочищенное соединение очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 30 г) в СНгС^/МеОН/ИЩОН 98/2/0,1. Соединение затем очищали с помощью хиральной сверхкритической флюидной хроматографии на 2-этилпиридине б мкм, 150x21,2 мм (подвижная фаза 92% СОг, 8% МеОН) с получением соединения 55 (45 мг, 19%).
Синтез конечного соединения 56:
К раствору J-1 (250 мг, 0,72 ммоля) в дихлорметане (3,6 мл) добавляли при комнатной температуре 2,2-дифторэтилтрифлат (230 мг, 1,0 8 ммоля) с последующим добавлением триэтиламина (0,36 мл, 2,16 ммоля, 3 экв) . Реакционную смесь затем перемешивали при 50°С в течение 16 часов и обрабатывали водой (5 мл) . Неочищенную водную смесь экстрагировали дихлорметаном (3x10 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме (300 мг). Неочищенное соединение затем очищали на силикагеле с использованием этилацетата (100%) с получением желаемого соединения 56 в виде твердого вещества белого цвета (200 мг, 67% выход).
Синтез конечного соединения 57:
К раствору J-1 (250 мг, 0,72 ммоля) в дихлорметане (3,6
мл) добавляли при комнатной температуре А-2 (247 мг, 1,08
ммоля) с последующим добавлением триэтиламина (0,36 мл, 2,16
ммоля). Реакционную смесь затем перемешивали при 50°С в течение
16 часов и обрабатывали водой (5 мл) . Неочищенную водную смесь
экстрагировали дихлорметаном (3x10 мл). Объединенные
органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали
и концентрировали в вакууме (650 мг). Неочищенное соединение
затем очищали на силикагеле с использованием
этилацетата/дихлорметана: 70/30 с получением желаемого соединения 57 в виде твердого вещества белого цвета (260 мг, 84% выход).
К раствору Q-1 (200 мг, 0,58 ммоля) в дихлорметане (3 мл)
добавляли при комнатной температуре 2,2,2-трифторэтилтрифлат
(0,13 мл, 0,88 ммоля) с последующим добавлением триэтиламина
(0,24 мл, 1,76 ммоля). Реакционную смесь затем перемешивали при
нагревании с обратным холодильником в течение 2 часов. После
80% расхода Q-1 (отслеживаемого с помощью LCMS) реакционную
смесь обрабатывали водой (5 мл) . Неочищенную водную смесь
экстрагировали дихлорметаном (3x10 мл). Объединенные
органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали
и концентрировали в вакууме (185 мг). Неочищенное соединение
затем очищали на силикагеле с использованием
этилацетата/петролейного эфира 50/50 с получением желаемого соединения 58 в виде твердого вещества белого цвета (100 мг, 4 0% выход).
Синтез конечного соединения 64:
К перемешиваемому раствору N-1 (800 мг, 2,0 ммоля) в ацетонитриле (8 мл) добавляли при комнатной температуре 2,2,2-трифторацетимидамида гидрохлорид В-2 (62 0 мг, 4,1 ммоля) с последующим добавлением DBU (0,93 мл, 6,2 ммоля). Реакционную смесь затем нагревали в запечатанной пробирке до 110°С в течение 38 часов. После 54% расхода N-1 (отслеживаемого с помощью LCMS) реакционной смеси давали остыть до комнатной
температуры, разбавляли дихлорметаном (30 мл) и обрабатывали водой (30 мл) . Неочищенную водную смесь экстрагировали дихлорметаном (3x30 мл) . Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение затем очищали на силикагеле с использованием петролейного эфира/этилацетата 70/30 с получением желаемого промежуточного соединения С-2 в виде твердого вещества светло-желтого цвета (315 мг, 35% выход).
К раствору С-2 (465 мг, 1,08 ммоля) в дихлорметане (5 мл) добавляли при комнатной температуре трифторуксусную кислоту (1 мл) . Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. После полного расхода С-2
(отслеживаемого с помощью TLC) реакционную смесь концентрировали в вакууме с получением осадка, который поглощали в дихлорметане (30 мл) и обрабатывали насыщенным водным раствором карбоната калия (30 мл). Неочищенную водную смесь экстрагировали дихлорметаном (3x30 мл) . Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого промежуточного соединения D-2 в виде твердого вещества светло-желтого цвета (340 мг, 94% выход), которое использовали на следующем этапе без какой-либо дальнейшей очистки.
К раствору D-2 (340 мг, 1,02 ммоля) в дихлорэтане (13 мл) добавляли при комнатной температуре уксусную кислоту (0,19 мл, 4,59 ммоля) с последующим добавлением 2,2-диметилпропаналя
(0,33 мл, 3,07 ммоля). Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов перед добавлением триацетоксиборгидрида натрия (867 мг, 4,08 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 8 часов, а затем разбавляли дихлорметаном (30 мл) и обрабатывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (30 мл). Водный слой экстрагировали дихлорметаном (3x4 0 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме (4 00 мг). Неочищенное соединение затем очищали на силикагеле с использованием раствора
дихлорметана/метанола/гидроксида аммония (33% в Н20) : 99/1/0,1 с получением желаемого соединения 64 в виде твердого вещества белого цвета (260 мг, 63% выход).
Синтез конечного соединения 70:
К перемешиваемому раствору J-1 (8 00 мг, 2,3 ммоля) в ацетонитриле (9,2 мл) и дихлорметане (4,8 мл) добавляли при комнатной температуре хлорацетон Е-2 (0,27 мл, 3,45 ммоля) с последующим добавлением карбоната калия (0,64 г, 4,6 ммоля). Реакционную смесь затем нагревали при нагревании с обратным холодильником в течение 8 часов. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры, разбавляли дихлорметаном (30 мл) и обрабатывали водой (30 мл) . Неочищенную водную смесь экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого промежуточного соединения F-2 в виде красного масла (93 0 мг, 100% выход), которое использовали на следующем этапе без какой-либо дальнейшей очистки.
К раствору F-2 (93 0 мг, 2,3 ммоля) в дихлорметане (115 мл), добавляли по каплям диэтиламиносульфотрифторид (DAST) (0,57 мл, 6,9 ммоля) при -78°С. Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (50 мл) и обрабатывали насыщенным водным раствором карбоната натрия (50 мл) при 0°С. Водную неочищенную смесь экстрагировали дихлорметаном (2x50 мл) . Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенное соединение вначале очищали на силикагеле с использованием раствора дихлорметана/метанола/гидроксида аммония (33% в ЩО) : 99/1/0,1, затем проводили другую очистку с
использованием дихлорметана/этилацетата: 80/20. Наконец, осадок растирают в порошок с пентаном с получением желаемого соединения 70 в виде смолистого твердого вещества коричневого цвета (60 мг, 6%).
Синтез конечного соединения 89:
К смеси промежуточного соединения G-2 (0,15 г, 0,38 ммоля)
в дихлорметане (20 мл) добавляли триэтиламин (0,12 г, 1,14
ммоля) с последующим добавлением соединения 1-2 (0,053 г, 0,38
ммоля) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в
атмосфере N2 в течение 15 часов. Смесь разбавляли дихлорметаном
и промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия. Водный слой
повторно экстрагировали дихлорметаном. Объединенные
органические слои промывали рассолом, высушивали и выпаривали с получением промежуточного соединения 1-2 (0,16 г, 90%).
К раствору промежуточного соединения 1-2 (0,16 г, 0,35 ммоля) в дихлорметане (15 мл) добавляли т-СРВА (0,066 г, 0,38 ммоля) порционно при 0°С. Смесь перемешивали при 15°С в течение 2 0 часов. Твердое вещество осаждали и фильтровали через подушечку целита и промывали дихлорметаном. Фильтрат был очищен с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с получением соединения 89 (16 мг, 12%).
Триэтилсилилацетилен (38 мг, 0,2 7 ммоля) добавляли к раствору соединения 90 (0,12 г, 0,18 ммоля), Ро!(РРпз)4 (21 мг,
Синтез конечного соединения 91:
0,018 ммоля), триэтиламина (0,22 г, 2,16 ммоля) и йодида меди(I) (3 мг, 0,011 ммоля) в DMF (3 мл) при комнатной температуре в атмосфере N2 в сосуде для микроволновой обработки. Сосуд закрывали крышкой и облучали при 110°С в течение 4 0 минут. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и осадок разбавляли этилацетатом (30 мл) и водой (10 мл). Органические слои отделяли, высушивали над Na2S04 и растворитель удаляли при пониженном давлении. Неочищенный продукт высушивали в вакууме и использовали непосредственно на следующем этапе. Получали 0,15 г неочищенного промежуточного соединения J-2.
Промежуточное соединение J2 (неочищенное, 0,18 ммоля) в сухом THF (35 мл) добавляли к раствору фторида тетра-бутиламмония (1 М в THF, 7,5 мл) . Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и неочищенный продукт непосредственно очищали с помощью базовой препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии (колонка: С18, элюент: CH3CN/H20 97/3, 0,05% NH3.H20) . Необходимую фракцию собирали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Продукт высушивали в вакууме с получением соединения 91 (10 мг, 13%).
СТРУКТУРА
Масса, точное значение
Масса, выявленное значение [М+Н]
Время удержания для LCMS, способ
Способ синтеза
MP (°С)
456, 20
457
1,53 В5501
промежуточное соединение Л
конечное соединение 9
\ A
414,24
415
1,46 В5501
промежуточное соединение Л
конечное соединение 9
\ A
454,22
455
4,23 MERC22
промежуточное соединение Л
конечное соединение 9
111-114
442,18
443
4,3
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
135 (К)
486,18
487
4,23 MERC22
промежуточное соединение Л
конечное соединение 9
227-228
416,26
417
5,45
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
118 (К)
* У-~-/У Л
N^\V У
промежуточное
422,21
423
1,43 B5501
соединение Jl
конечное соединение 9
436,23
437
4,47 MERC2 0
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 9
149-151
промежуточное
486,18
487
4,29 MERC22
соединение J1
конечное соединение 9
119-123
452,22
453
4, 17
MERC22
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 9
142-146
402,24
403
4,3
MERC22
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
105-106
386,21
387
4,06 MERC22
промежуточное соединение Л
конечное соединение 12
153-156
470,19
469 (М-Н)
4,42 MERC22
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 9
180-181
438,22
439
4,38 MERC22
промежуточное соединение Л
конечное соединение 9
195-196
400,26
401
4, 62 MERC22
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
123-127
436,23
437
4, 63
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 9
174 (К)
442,27
443
4,86 V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
130 (К)
426, 21
427
4,23 V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
120 (К)
442,18
443
4, 65
V3007V3001 промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
130 (К)
494,23
495
4,1
V3007V3001 промежуточное соединение Л
конечное соединение 2 0
417,25
418
4, 63 MERC22
промежуточное соединение XI
конечное соединение 21
117-120
Q -
509,24
510
3,19 MERC2 6
промежуточное соединение XI
конечное соединение 21
106-108
\y~~-OH
486,18
487
4,16 MERC27
промежуточное соединение Л
конечное соединение 9
165-166
\ А
416,26
417
4,89 MERC27
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
222-224
430,24
431
4, 05
V3007V3001 промежуточное соединение Л
конечное соединение 25
165 (К)
422,21
423
4,4
MERC2 8
конечное соединение 2 6
157-159
494,23
495
3,77
MERC2 8
промежуточное соединение Л
конечное соединение 2 0
138-140
F ~\ F
504,21
505
5,08 V3007V3001
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 6
156 (К)
454,22
455
4, 67
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
152 (К)
iJ3 x
431,27
432
4,86 MERC27
конечное соединение 2 6
137-138
461,22
462
4,5
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
140 (К)
472,21
473
4,82 V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
138 (К)
450,24
451
4,86 V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
160 (К)
\ А
461,22
462
4,5
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
168 (К)
450,24
451
4,77
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
141 (К)
N^\\l /-У
416,26
417
4, 95 MERC25
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
154-156
429, 29
430
5,22 MERC30
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 6
140-142
400,26
401
5, 6
MERC27
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
170-171
420,21
421
5,48 MERC27
промежуточное соединение Л
конечное соединение б
119-121
454,23
455
5, 32 MERC27
промежуточное соединение Л
конечное соединение б
112-114
\ A
454,22
455
4,74
V3007V3001
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 6
139 (К)
\ A
461,22
462
4,57
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
158 (К)
\ A
F \ F
472,21
473
4,87 V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
158 (К)
470,19
471
5,09
V3007V3001
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 6
131 (К)
\ A
470,19
471
5, 15
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
133 (К)
504,21
505
5,38 V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
144 (К)
\ А
472,21
473
4, 99
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
184 (К)
\ А
472,21
473
4, 99
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
181 (К)
384,20
385
3, 92
V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 4 9
160 (К)
промежуточное
400,26
401
5, 91
V3007V3001
соединение Jl
конечное соединение 6
208 (К)
370,25
371
6,08 B5301
\ \ CI
386,22
387
6, 65
B5301
/Ч\ _
382,27
383
5,85 B5301
411,24
412
4,7
V3007V3001
промежуточное соединение Ql
конечное соединение 6
155 (К)
428,18
429
4,49 V3007V3001
промежуточное соединение Л
конечное соединение 55
410,19
411
11, 52
NOVA1
промежуточное соединение Л
конечное соединение 5 6
123 (В)
nC^4)
\ A
427,24
428
11, 77
N0VA1
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 57
117 (В)
423,17
424
11, 73
NOVA1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 5 8
168-172 (В)
N / |\
423,17
424
12, 3
NOVA1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 5 8
163-164 (В)
УУ\
промежуточное
12, 46
соединение Ql
52-92
ill
423,17
424
NOVA1
конечное соединение 5 8
(В)
|IJ^^^N
промежуточное
11, 74
соединение Ql
65-153
411,24
412
N0VA1
конечное соединение 6
(В)
промежуточное
11, 98
соединение Q1
57-113
III
411,24
412
NOVA1
конечное соединение 6
(В)
V I1
374,25
375
13, 38 NOVA1
конечное соединение 64
125-126 (В)
V "
402,20
403
13, 63
NOVA1
конечное соединение 64
114-116 (В)
Q "
435,24
436
14, 25
NOVA1
промежуточное соединение Q1 конечное
247-249 (В)
соединение 6
428,24
429
14, 62
NOVA1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 6
154-158 (В)
441,25
442
14, 14
N0VA1
промежуточное соединение Ql
конечное соединение б
144-145
412,24
413
13, 13
N0VA1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение б
163-170
411,24
412
11, 88 NOVA1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение б
148-150
424,21
425
11,7
NOVA1
промежуточное соединение Л
конечное соединение 7 0
445,18
446
4, 95
WUXI2
промежуточное соединение Л
конечное соединение 5 8
425,22
426
3,7
WUXI1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение б
386,22
387
2,85 WUXI2
промежуточное соединение XI
конечное соединение 21
412,24
413
2,7
WUXI2
промежуточное соединение XI
конечное соединение 21
155-164 (WRS-2A)
422,22
423
3,82 WUXI1
промежуточное соединение Ql
конечное соединение 57
79-87 (WRS-2A)
N^?^^\ \\
440,16
441
4, 64
WUXI2
промежуточное соединение Ql
конечное соединение 5 8
157-158 (WRS-2A)
N-^s^\ \\
442,22
443
6,72 WUXI1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 25
75-80 (WRS-2A)
444,23
445
4,04 WUXI2
промежуточное соединение Л
конечное соединение 57
119 (WRS-2A)
458,19
459
4,5
WUXI2
промежуточное соединение Jl
конечное соединение 5 8
439,22
440
3, 91
WUXI2
промежуточное соединение Ql
конечное соединение 57
171 (WRS-2A)
457,25
458
3,47
WUXI14
промежуточное соединение Л
конечное соединение 57
423,22
424
4,23 WUXI1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 57
182 (WRS-2A)
452,18
453
4, 69
WUXI2
промежуточное соединение Л
конечное соединение 5 8
180-182 (WRS-2A)
447,17
448
4,45
WUXI2
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 5 8
249-251 (WRS-2A)
Ч/ ^
452,23
453
4,85 WUXI1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 57
165 (WRS-2A)
"Ч> 4\^
451,24
452
3, 94
WUXI2
промежуточное соединение Л
конечное соединение 57
207 (WRS-2A)
499,20
500
4, 62
WUXI1
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 57
101-122 (WRS-2A)
504,15
505
4,25
WUXI2
промежуточное соединение Л
конечное соединение 57
Ч/ ^
\ о
478,18
479
5,1
WUXI2
промежуточное соединение Q1
конечное соединение 8 9
493,17
494
3,27
WUXI3
промежуточное соединение Л
конечное соединение 6
439,26
440
4,41
WUXI2
конечное соединение 91
АХ )
450,24
451
4,27
WUXI2
конечное соединение 91
451,19
452
5,18
WUXI2
конечное соединение 91
Аналитические способы
Все соединения характеризовали с помощью LC-MS. Применяли следующие способы LC-MS:
Общая процедура NOVA (для способов NOVАх)
Способ NOVA1 В дополнение к общей процедуре NOVA: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке Nucleosil С18 (3 мкм, 3x150 мм) с объемной скоростью потока 0,42 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 0,1% TFA в воде; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) прогоняли при условиях градиента от 98% А в течение 3 минут к 100% В за 12 минут, 100% В в течение 5 минут, затем обратно к 98% А за 2 минуты и проводили повторное уравновешивание 98% А в течение б минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на капилляре составляло 2 кВ, коронный разряд удерживали при 1 мкА и температуру источника поддерживали при 250°С. Для фрагментора использовали изменяющееся напряжение. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением и APCI в режиме положительной ионизации при сканировании от 100 до 1100 а.е.м.
Способ N0VA2 В дополнение к общей процедуре NOVA: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке Agilent Eclipse С18 (5 мкм, 4,6x150 мм) с объемной скоростью потока 1 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 0,1% TFA в воде; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) прогоняли при условиях градиента от 98% А в течение 3 минут к 100% В за 12 минут, 100% В в течение 5 минут, затем обратно к 98% А за 2 минуты и проводили
Измерение с помощью HPLC проводили с использованием системы для HPLC 1100/1200 (Agilent) , содержащей насос для четырехкомпонентных смесей с дегазатором, автоматический пробоотборник, детектор на диодной матрице (DAD) и колонку, которая определена в соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при комнатной температуре. MS-детектор (простой квадрупольный MS-Agilent) настраивали с APCI источником ионизации с электрораспылением. В качестве газа-распылителя применяли азот. Сбор и обработку данных проводили с помощью системы обработки данных Chemstation.
повторное уравновешивание 98% А в течение б минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на капилляре составляло 2 кВ, коронный разряд удерживали при 1 мкА и температуру источника поддерживали при 250°С. Для фрагментора использовали изменяющееся напряжение. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением и APCI в режиме положительной ионизации при сканировании от 80 до 1000 а.е.м.
Способ NOVA3 В дополнение к общей процедуре NOVA: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке Phenomenex Gemini С18 (3 мкм, 3x30 мм) с объемной скоростью потока 0,7 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 0,1% TFA в воде; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) прогоняли при условиях градиента от 98% А до 100% В за 2 минуты, 100% В в течение 0,5 минуты, затем обратно к 98% А за 0,1 минуты и проводили повторное уравновешивание 98% А в течение 2,4 минуты. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на капилляре составляло 2 кВ, коронный разряд удерживали при 1 мкА и температуру источника поддерживали при 250°С. Для фрагментора использовали изменяющееся напряжение. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением и APCI в режиме положительной ионизации при сканировании от 80 до 1000 а.е.м.
Общая процедура В (для способов Вхххх)
Измерение с помощью HPLC проводили с использованием системы для HPLC Alliance 2695 (Waters), содержащей насос для четырехкомпонентных смесей с дегазатором, автоматический пробоотборник, детектор на диодной матрице (DAD), CLND детектор
(Antek) и колонку, которая определена в соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при 4 0°С. Детектор MS
(простой квадрупольный ZQ-Waters) настраивали с источником ионизации с электрораспылением. В качестве газа-распылителя применяли азот. Сбор данных проводили с помощью системы обработки данных Masslynx-Openlynx.
Способ В5301 В дополнение к общей процедуре В: обращенно-фазовую HPLC осуществляли на колонке Xterra MS CI 8 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) при объемной скорости потока 1,6 мл/мин. Две
подвижные фазы (подвижная фаза А: вода с 0,1% муравьиной кислотой: 95/метанол: 5%; подвижная фаза В: 100% метанол) прогоняли при условиях градиента от 100% А до 5% А/95% В за 12 минут и обратно к 100% А в течение 1 минуты. Использовали объем вводимой пробы 10 мкл. Напряжение на конусе составляло 3 0 В как для режима положительной, так и режима отрицательной ионизации. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением и APCI в режиме положительной ионизации при сканировании от 100 до 1500 а.е.м.
Способ В5501 В дополнение к общей процедуре В: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке ВЕН С18 (1,7 мкм, 2,1x50 мм) с объемной скоростью потока 0,7 мл/мин. Две подвижные фазы
(подвижная фаза А: метанол, В: 10 мМ ацетат аммония в воде: 90%/ацетонитрил: 10%) прогоняли при условиях градиента от 5% А/95% В до 95% А/5% В за 1,3 минуты с выдерживанием в течение 0,2 минуты и обратно к 5% А/95% В за 0,2 минуты с выдерживанием в течение 0,3 минуты. Применяли объем вводимой пробы 0,75 мл. Напряжение на конусе составляло 3 0 В как для режима положительной, так и режима отрицательной ионизации. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением при сканировании от 160 до 1000 а.е.м.
Общая процедура VDR2 (для способов УЗООхУЗОхх) Измерения с помощью LC осуществляли с применением системы для UPLC (сверхэффективной жидкостной хроматографии) Acquity
(Waters), содержащей насос для двухкомпонентных смесей с дегазатором, автоматический пробоотборник, детектор на диодной матрице (DAD) и колонку, которая определена в соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при температуре 4 0°С. Поток из колонки подводили к детектору MS. Детектор MS настраивали с источником ионизации с электрораспылением. Напряжение на капилляре составляло 3 кВ и температуру источника в Quattro
(тройном квадрупольном масс-спектрометре от Waters) поддерживали при 130°С. В качестве газа-распылителя применяли азот. Сбор данных проводили с помощью системы обработки данных Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.
Способ V3007V3001 в дополнение к общей процедуре VDR2: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Waters Acquity ВЕН
(гибридный наполнитель из мостикового этилсилоксана/диоксида кремния) С18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм) с объемной скоростью потока 0,35 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/ 5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) прогоняли при условиях градиента от 90% А и 10% В
(выдерживание в течение 0,5 минут) до 8% А и 92% В, выдерживание в течение 2 минут и обратно к начальным условиям через 0,5 мин, выдерживание в течение 1,5 минут. Применяли объем вводимой пробы 2 мл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали при сканировании от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки между сканированиями 0,1 секунды.
Общая процедура Wuxi (для способов WUXIx)
Измерение с помощью HPLC проводили с использованием системы для HPLC 1100/1200 (Agilent) , содержащей насос для четырехкомпонентных смесей с дегазатором, автоматический пробоотборник, детектор на диодной матрице (DAD) и колонку, которая определена в соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при 50°С. Детектор MS (Agilent G1946C или 6110) настраивали с электрораспылением или APCI источником ионизации. В качестве газа-распылителя применяли азот. Сбор данных проводили с помощью системы обработки данных Agilent Chemstation.
Способ WUXI1 В дополнение к общей процедуре WUXI: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке YMC-PACK ODS-AQ С18 (5 мкм, 2 х 50 мм) с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: вода с 0,1% трифторуксусной кислотой; подвижная фаза В: ацетонитрил с 0,05% трифторуксусной кислотой) прогоняли при условиях градиента от 100% А с выдерживанием в течение 1 минуты до 4 0% А/60% В за 4 минуты с выдерживанием в течение 2,5 мин., затем обратно до 100% А за 0,5 минуты. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение
на капилляре составляло 2,5 кВ для режима положительной ионизации и 3 кВ для режима отрицательной ионизации, коронный разряд удерживали при 4 мкА, если температуру APCI и температуру источника поддерживали при 2 00°С. Для фрагментора использовали напряжение 70V. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением или APCI в режиме положительной ионизации при сканировании от 100 до 1000 а.е.м.
Способ WUXI2 В дополнение к общей процедуре WUXI: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке YMC-PACK ODS-AQ С18 (5 мкм, 2 х 50 мм) с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: вода с 0,1% трифторуксусной кислотой; подвижная фаза В: ацетонитрил с 0,05% трифторуксусной кислотой) прогоняли при условиях градиента от 90% А/10% В с выдерживанием в течение 0,8 минуты до 20% А/80% В за 3,7 минуты с выдерживанием в течение 3 мин., затем обратно к исходным условиям за 0,5 минуты. Напряжение на капилляре составляло 2,5 кВ для режима положительной ионизации и 3 кВ для режима отрицательной ионизации, коронный разряд удерживали при 4 мкА, если температуру APCI и температуру источника поддерживали при 200°С. Для фрагментора использовали напряжение 70 В. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением или APCI в режиме положительной ионизации при сканировании от 100 до 1000 а.е.м.
Способ WUXI3 В дополнение к общей процедуре WUXI: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке YMC-PACK ODS-AQ С18 (5 мкм, 2 х 50 мм) с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: вода с 0,1% трифторуксусной кислотой; подвижная фаза В: ацетонитрил с 0,05% трифторуксусной кислотой) прогоняли при условиях градиента от 7 0% А/30% В с выдерживанием в течение 0,8 минуты до 10% А/90% В за 3,2 минуты с выдерживанием в течение 3,5 мин, затем обратно к исходным условиям за 0,5 минуты. Напряжение на капилляре составляло 2,5 кВ для режима положительной ионизации и 3 кВ для режима отрицательной ионизации, коронный разряд удерживали при 4 мкА, если температуру APCI и температуру источника поддерживали при 200°С. Для фрагментора использовали напряжение 70 В. Масс
спектры получали при ионизации с электрораспылением или APCI в режиме положительной ионизации при сканировании от 100 до 1000 а.е.м.
Способ WUXI4 В дополнение к общей процедуре WUXI: обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке Agilent С18 (5 мкм, 2,1 х 50 мм) с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: вода с 0,1% трифторуксусной кислотой; подвижная фаза В: ацетонитрил с 0,05% трифторуксусной кислотой) прогоняли при условиях градиента от 90% А/10% В с выдерживанием в течение 0,8 минуты до 20% А/80% В за 3,7 минуты с выдерживанием в течение 3 мин, затем обратно к исходным условиям за 2 минуты. Напряжение на капилляре составляло 2,5 кВ для режима положительной ионизации и 3 кВ для режима отрицательной ионизации, коронный разряд удерживали при 4 мкА, если температуру APCI и температуру источника поддерживали при 200°С. Для фрагментора использовали напряжение 70 В. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением или APCI в режиме положительной ионизации при сканировании от 100 до 1000 а.е.м.
Общая процедура Mercachem (для способов MERCx) Измерение с помощью HPLC проводили с использованием системы для HPLC 1100/1200 (Agilent), содержащей насос для четырехкомпонентных смесей с дегазатором, автоматический пробоотборник, детектор на диодной матрице (DAD) и колонку, которая определена в соответствующих способах ниже. Детектор MS
Способ MERC20 В дополнение к общей процедуре MERC: обращенно-фазовую HPLC осуществляли на колонке Waters X-bridge
(3,5 мкм, 2,1x100 мм), поддерживаемой при 25°С, с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: ацетонитрил с 10 мМ аммиаком; подвижная фаза В: вода с 10 мМ аммиаком) прогоняли при условиях градиента от 2% А, до 98% А/2% В за 3,5 минуты с выдерживанием в течение 2,5 мин. Масс-спектры
(Agilent MSD-SL) настраивали с источником ионизации с электрораспылением. Сбор данных проводили с помощью системы обработки данных Agilent Chemstation.
получали при ионизации с электрораспылением в режиме положительной и отрицательной ионизации при сканировании от 22 0 до 800 а.е.м.
Способ MERC22 В дополнение к общей процедуре MERC: обращенно-фазовую HPLC осуществляли на колонке Waters X-bridge (3,5 мкм, 2,1x100 мм), поддерживаемой при 25°С, с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% метанола/5% 10 мМ бикарбоната аммония в воде; подвижная фаза В: 10 мМ бикарбонат аммония в воде) прогоняли при условиях градиента от 10% А, до 98% А/2% В за 2,5 минуты с выдерживанием в течение 3,5 мин. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением в режиме положительной и отрицательной ионизации при сканировании от 220 до 800 а.е.м.
Способ MERC25 В дополнение к общей процедуре MERC: обращенно-фазовую HPLC осуществляли на колонке Waters X-bridge (3 мкм, 2,1x50 мм), которую поддерживали при 25°С, с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% ацетонитрила/5% 10 мМ бикарбоната аммония в воде; подвижная фаза В: 10 мМ бикарбонат аммония в воде) прогоняли при условиях градиента от 10% А к 98% А/2% В за 3,5 минуты с выдерживанием в течение 2,5 мин. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением в режиме положительной и отрицательной ионизации при сканировании от 100 до 800 а.е.м.
Способ MERC26 В дополнение к общей процедуре MERC: обращенно-фазовую HPLC осуществляли на колонке Waters X-bridge (3,5 мкм, 2,1x100 мм), поддерживаемой при 25°С, с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; подвижная фаза В: 0,1% муравьиная кислота в воде) прогоняли при условиях градиента от 2% А до 98% А/2% В за 3,5 минуты с выдерживанием в течение 2,5 мин. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением в режиме положительной и отрицательной ионизации при сканировании от 100 до 800 а.е.м.
Способ MERC2 7 В дополнение к общей процедуре MERC: обращенно-фазовую HPLC осуществляли на колонке Waters X-bridge
(3,5 мкм, 2,1x100 мм), поддерживаемой при 25°С, с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% ацетонитрила/5% 10 мМ бикарбоната аммония в воде; подвижная фаза В: 10 мМ бикарбонат аммония в воде) прогоняли при условиях градиента от 2% А к 98% А/2% В за 3,5 минуты с выдерживанием в течение 4,5 мин. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением в режиме положительной и отрицательной ионизации при сканировании от 100 до 800 а.е.м.
Способ MERC28 В дополнение к общей процедуре MERC: обращенно-фазовую HPLC осуществляли на колонке Waters X-bridge
(3,5 мкм, 2,1x100 мм), поддерживаемой при 25°С, с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% ацетонитрила/5% 10 мМ бикарбоната аммония в воде; подвижная фаза В: 10 мМ бикарбонат аммония в воде) прогоняли при условиях градиента от 2% А к 98% А/2% В за 3,5 минуты с выдерживанием в течение 2,5 мин. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением в режиме положительной и отрицательной ионизации при сканировании от 100 до 800 а.е.м.
Способ MERC30 В дополнение к общей процедуре MERC: обращенно-фазовую HPLC осуществляли на колонке Waters X-bridge
(3 мкм, 2,1x50 мм), поддерживаемой при 25°С, с объемной скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% ацетонитрила/5% 10 мМ бикарбоната аммония в воде; подвижная фаза В: 10 мМ бикарбонат аммония в воде) прогоняли при условиях градиента от 2% А к 98% А/2% В за 3,5 минуты с выдерживанием в течение 4,5 мин. Масс-спектры получали при ионизации с электрораспылением в режиме положительной и отрицательной ионизации при сканировании от 100 до 800 а.е.м. Н1 ЯМР анализ конечных соединений: Соединение б
гЕ ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 8,81 (д, J=5, 67 Гц, 2Н) , 8,77 (с, 1Н) , 8,31 (д, J=5,67 Гц, 2Н) , 7,46 (т, J=7,88 Гц, 1Н) , 7,07 (д, J=7,88 Гц, 1Н) , 6, 98-7, 04 (м, 2Н) , 3,81 (с, ЗН) , 2,79-2,89 (м, ЗН) , 1,96-2,15 (м, 6Н) , 1,66 (д, J=ll,98 Гц, 2Н) , 0,86 (с, 9Н) .
Соединение 55
гЕ ЯМР (500 МГц, DMSO-d6) 5 8, 74-8, 85 (м, ЗН) , 8,33 (д, J=4,73 Гц, 2Н) , 7,46 (т, J=7,88 Гц, 1Н) , 6,97-7,11 (м, ЗН) , 3,82 (с, ЗН) , 3,16 (кв, J=9,98 Гц, 2Н) , 2,99 (д, J=ll,03 Гц, 2Н) , 2,90 (т, J=ll,03 Гц, 1Н) , 2,27 (т, J=ll,66 Гц, 2Н) , 2,02 (кв, J=ll,66 Гц, 2Н) , 1,72 (д, J=ll,66 Гц, 2Н) .
Соединение 58
гЕ ЯМР (400 МГц, хлорформ-d) 5 8, 86 (д, J=5,31 Гц, 2Н) , 8,67 (с, 1Н) , 8,44 (д, J=5,31 Гц, 2Н) , 7,86 (д, J=7,83 Гц, 1Н) , 7, 67-7, 76 (м, 2Н) , 7,64 (д, J=7,83 Гц, 1Н) , 3,02-3,17 (м, 4Н) , 2,80 (с, 1Н) , 2, 37-2, 47 (м, 2Н) , 2, 22-2, 37 (м, 2Н) , 1,75 (д, J=13,39 Гц, 2Н)
Соединение 7 0
гЕ ЯМР (400 МГц, хлорформ-d) 5 8, 85 (д, J=6,06 Гц, 2Н) , 8,69 (с, 1Н), 8,41-8,46 (м, 2Н), 7,48 (т, J=8,08 Гц, 1Н), 7,07 (дд, J=2, 02, 8, 08 Гц, 1Н) , 6,96 (д, J=7,33 Гц, 1Н) , 6,90 (с, 1Н) , 3,93 (с, ЗН) , 3,03-3,14 (м, 2Н) , 2,90-3,01 (м, 1Н) , 2,73 (т, J=13,64 Гц, 2Н) , 2,18-2,32 (м, 4Н) , 1,74 (с, 2Н) , 1,62 (уш.с, ЗН) .
Соединение 67
гЕ ЯМР (400 МГц, хлорформ-d) 5 9,31 (д, J=2,27 Гц, 1Н) , 8,60 (дд, J=2, 27, 8, 59 Гц, 1Н) , 8,43 (с, 1Н) , 7,69 (д, J=7,58 Гц, 1Н) , 7, 53-7, 60 (м, 2Н) , 7, 45-7, 52 (м, 1Н) , 6,80 (д, J=8,59 Гц, 1Н) , 3,97 (с, ЗН) , 2,80 (д, J=6, 82 Гц, 2Н) , 2,57 (уш.с, 1Н) , 2,01-2,16 (м, 4Н) , 1,96 (с, 2Н) , 1, 49-1, 58 (м, 2Н) , 0,81 (с, 9Н) .
Соединение 57
гЕ ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 8, 76-8, 85 (м, ЗН) , 8,29-8,37 (м, 2Н) , 7, 42-7, 52 (м, 1Н) , 6,97-7,12 (м, ЗН) , 3,83 (с, ЗН) , 3,02 (д, J=ll,12 Гц, 2Н) , 2,89 (т, J=ll,10 Гц, 1Н) , 2,44 (с, 2Н) , 2,14-2,27 (м, 2Н) , 1,94-2,12 (м, 2Н) , 1,72 (д, J=12,63 Гц, 2Н) , 1,29 (с, 6Н) .
Соединение 6 6
гЕ ЯМР (400 МГц, хлорформ-d) 5 8,62 (дд, J=5,81, 8,84 Гц, 2Н) , 8,57 (с, 1Н) , 7,82 (д, J=7,58 Гц, 1Н) , 7, 66-7, 73 (м, 2Н),
7,61 (с, 1Н) , 7,25 (т, J=8,84 Гц, 2Н) , 2,94 (д, J=7,58 Гц, 2Н) , 2, 60-2, 78 (м, 1Н) , 2,13-2,31 (м, 4Н) , 2,09 (с, 2Н) , 1,64 (д, J=8,34 Гц, 2Н) , 0,95 (с, 9Н) . Соединение 65
гЕ ЯМР (400 МГц, хлорформ-d) 5 8, 73 (д, J=8,34 Гц, 2Н) , 8,63 (с, 1Н) , 7, 80-7, 90 (м, ЗН) , 7, 66-7, 74 (м, 2Н) , 7,60-7,65 (м, 1Н), 2,94 (д, J=6,57 Гц, 2Н), 2,65-2,79 (м, 1Н), 2,14-2,30 (м, 4Н) , 2,09 (с, 2Н) , 1,65 (д, J=4,80 Гц, 2Н) , 0,95 (с, 9Н) .
Соединение 71
гЕ ЯМР (400 МГц, хлорформ-d) 5 8,49-8,61 (м, ЗН), 7,41 (т, J=8,03 Гц, 1Н) , 7,17 (т, J=8,03 Гц, 2Н) , 7,00 (дд, J=2,01, 8,03 Гц, 1Н) , 6,90 (д, J=8,03 Гц, 1Н) , 6,81-6,86 (м, 1Н) , 3,87 (с, ЗН) , 2,84-3,11 (м, 5Н) , 2,16-2,42 (м, 4Н) , 1,70 (д, J=13,05 Гц, 2Н) .
Соединение 3 9
гЕ ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 8, 73-8, 90 (м, ЗН) , 8,32 (д, J=6,06 Гц, 2Н) , 7, 53-7, 68 (м, ЗН) , 7, 40-7, 50 (м, 1Н) , 2,84 (д, J=ll,12 Гц, 2Н), 2,68-2,79 (м, 1Н), 1,92-2,17 (м, 6Н), 1,66 (д, J=12,13 Гц, 2Н) , 0,86 (с, 9Н) .
Соединение 21
гЕ ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 8, 69-8, 79 (м, 2Н) , 8,36 (с, 1Н) , 8,19-8,28 (м, 2Н) , 7, 34-7, 48 (м, 1Н) , 7,04-7,15 (м, 2Н) , 6,97 (дд, J=l, 77, 8, 34 Гц, 1Н) , 3,81 (с, ЗН) , 3, 36-3, 40 (м, ЗН) , 2,46 (т, J=4,55 Гц, ЗН) , 2,04 (с, 2Н) , 1,23 (уш.с, 2Н) , 0,83 (с, 9Н)
Соединение 4 0
гЕ ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) 5 8, 75-8, 96 (м, ЗН) , 8,33 (д, J=6,06 Гц, 2Н) , 7,89 (уш.с, 2Н) , 7, 72-7, 85 (м, 2Н) , 2,84 (д, J=9,35 Гц, 2Н), 2,63-2,77 (м, 1Н), 1,93-2,17 (м, 6Н), 1,56-1,78 (м, 2Н) , 0, 85 (с, 9Н) .
Следующие шесть соединений/примеров также были получены в соответствии с процедурами, описанными в данном документе.
Биологические примеры
In vitro способ для исследования соединений в отношении антибактериальной активности против различных штаммов бактерий
Получение бактериальных суспензий для исследования чувствительности
Использовали следующие бактерии: Staphylococcus aureus АТСС 2 9213, устойчивый к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA) АТСС 700788 и Escherichia coli АТСС 35218. Используемые в данном исследовании бактерии выращивали в течение ночи в колбах, содержащих 100 мл бульона Мюллера-Хинтона (Difco, кат. №0757-17) в стерильной деионизированной воде, со встряхиванием при 37°С. Полученный материал хранили при -7 0°С до момента использования.
Бактерии инкубировали на плашке триптон-соевого агара, содержащей 5% овечьей крови (Becton Dickinson, кат. №254053), в течение 18-24 часов при 35°С в аэробных условиях (первый пассаж). Для второго пассажа свежий бульон Мюллера-Хинтона инокулируют 5-10 колониями и выращивают в течение ночи при 35°С до появления помутнения (достижения log-фазы роста) в аэробных условиях. Бактериальную суспензию затем доводят до плотности 0,5 по МакФарланду и дополнительно разбавляют 1:100 в среде бульона Мюллера-Хинтона. Ее используют в качестве посевного материала.
Исследование чувствительности к антибактериальному средству: определение IC90
Исследования MIC (минимальных ингибирующих концентраций) проводили с использованием методики микроразбавления бульона в
формате 9б-луночного планшета (микротитровальный планшет с плоским дном) с конечным объемом бульона Мюллера-Хинтона 0,1 мл, содержащим двукратное последовательное разведение соединений, и инокулированными 5x105 КОЕ/мл бактерий (стандартный объем посевного материала согласно руководствам CLSI). Концентрации ингибиторов, как правило, варьируют в диапазоне от 63 до 0,4 9 мкМ. Конечная концентрация DMSO в исследовании составляла 1,25% (максимально переносимая концентрация DMSO = 6%) . В анализах, в которых исследовали воздействие человеческой сыворотки на активность соединений против S. aureus, человеческую сыворотку добавляли в конечной концентрации 10%. Планшеты инкубировали при 35°С в течение 162 0 часов. В конце инкубирования бактериальный рост количественно оценивали флуориметрически. Для этого во все лунки добавляли резазурин и планшеты повторно инкубировали. Время инкубирования зависит от типа бактерии. Изменение цвета с синего на розовый указывает на рост бактерий. Флуоресценцию измеряли на флуориметре с компьютерным управлением (Fluoroskan Ascent FL, Labsystems) при длине волны возбуждения 54 0 нм и длине волны эмиссии 590 нм. Достигнутый с соединениями процент подавления роста рассчитывали согласно стандартным способам. IC90 (выраженная в мкг/мл) определяли как концентрацию, подавляющую рост 90% бактерий. Одновременно исследовали набор эталонных соединений с целью подтверждения контролем качества. Анализы цитотоксичности
Цитотоксичность соединений оценивали с использованием МТТ-анализа. Человеческие клетки HelaM, выращиваемые в 9б-луночных планшетах, подвергали воздействию последовательных разведений исследуемых соединений (конечный объем 0,2 мл) и инкубировали в течение 72 часов при 37 °С и при 5% С02. Концентрации ингибиторов обычно варьируют в диапазоне от 25 до 0,8 мкМ. Конечная концентрация DMSO в анализе составляет 0,5%. Добавляли МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия бромид, тетразол), и он восстанавливался до фиолетового формазана только в живых клетках. Солюбилизация кристаллов формазана
достигалась при добавлении 100 мкл 2-пропанола. Жизнеспособность клеток определяли с помощью измерения поглощения восстановленного формазана, дающего пурпурную окраску, при 54 0 нм и 690 нм. Значение поглощения, измеренное при 690 нм, автоматически вычиталось из значения поглощения при 54 0 нм для исключения воздействия неспецифического поглощения. Достигнутый с соединениями процент цитотоксичности рассчитывали согласно стандартным способам. Цитотоксичность выражали как СС50 - концентрацию, которая вызывает 50% снижение жизнеспособности клеток.
Протокол для определения Ml С для соединений в отношении ЕСО/РАЕ/SТА в микропланшетах
• Добавить 4-5 колоний с плашки, выращиваемой в течение ночи, к 5 мл среды Мюллера-Хинтона
• Инкубировать в течение 3-6 часов при 37°С в инкубаторе с шейкером (300 об./мин.)
• Измерить OD при 600 нм (OD600 = 1 -> 109 КОЕ/мл)
• Развести бактерии до 105 КОЕ/мл в среде
• Приготовить 2-кратные разведения в микропланшетах в 100 мкл среды Мюллера-Хинтона (конечная концентрация от 64 до 0,125 мкг/мл)
• Добавить 100 мкл разведенного раствора бактерий в каждую
лунку
• Инкубировать в течение 18-20 часов при 37°С
• Проверить рост в сравнении с контролем визуально
MIC представляет собой самую низкую концентрацию, при которой отсутствует рост (90% подавление роста) Результаты биологических анализов
Соединение согласно примерам/настоящему изобретению исследуются/исследовались при помощи анализов чувствительности к антибактериальному средству и/или цитотоксичности, описанных выше. Соединения согласно примерам/настоящему изобретению, как было выявлено, проявляли значение IC90 менее 50 мкг/мл (например, менее 15 мкг/мл), значение СС50 менее 50 мкг/мл (например, менее 15 мкг/мл) и/или MIC90 менее 10 мкг/мл (например, менее 1 мкг/мл) в соответствующих анализах.
Определенные соединения проявляли значение IC90 менее 10 мкг/мл (например, менее 1 мкг/мл) или значение СС50 менее 10 мкг/мл (например, менее 5 мкг/мл) и/или значение MIC90 менее 0,5
мкг/мл в соответствующих анализах.
Определенные соединения могут быть доступны из коммерчески
Соединения формулы (I)
доступных источников, например, CHEMBRIDGE.
XjX~on
2, 10
6, 3
1, 05
> 10, 5
XXX
14, 32
5, 50
> 4, 4
0, 97
5,9
\^X~OH
1, 68
9, 9
5,49
> 10, 1
5,78
> 9, 7
1,71
5, 2
9,16
> 11, 0
1,49
> 10, 1
6, 92
> 11, 0
13,37
> 11, 1
*^УхХ
13, 03
> 10, 7
5, 57
> 11, 1
7, 15
8,1
"сч
0,39
5,9
Q -
5,16
8,5
\y~~-OH
7,37
4,4
\ А
1, 68
> 11, 4
3,27
> 10, 8
"^ЧЧ^
/^^^ 0
7,51
5,7
9, 10
7,1
0 f ~\
5,28
4,7
3,45
8,5
5, 19
8, 8
7, 32
4,2
3,27
5, 5
13, 15
7, 6
\ A
6, 99
8,7
13,3
7,7
N^\\l /-У
2, 98
> 10, 5
3, 04
9,2
5, 04
> 4, 0
IX 7 \ A cl
0,76
7,3
N \
0, 52
7,0
\ A
8, 66
7,7
"^> tx
\ A
6, 75
5,1
\ A
F \ F
2,24
6, 2
2,23
7,0
\ A
3,49
4, 9
4, 10
4,2
\ A
1,74
2,1
"ЧЧл
3,16
2,2
12,16
> 9, 7
9, 61
> 4, 0
/ЫУУУХ
N=z/ \ \\
13,45
7,8
X"\^
\ \ CI
1,28
6,7
NX^~X9 jk
5, 47
7,5
Wk 7
1,29
> 10, 3
0,39
6, 3
\ А
1,49
> 10, 3
\ А
0,39
7,3
0, 69
> 10, 6
NХ |\
к=/-Чг/'Ч'Х
> 26, 7
> 10, 6
\* Ч^ F
> 26, 7
> 10, 6
4^\^NX
> 25, 9
> 10, 3
> 25, 9
> 10, 3
V I1
2,74
> 9, 4
V N
1,46
> 10, 1
Q * x1
0, 13
> 4, 4
<0, 21
8, 8
N /Ч-ХЧ Ч
0, 81
> 11, 1
6, 10
> 10, 4
^хЧ)
Ч^ ^
3, 02
> 10, 3
0, 64
6,7
'^ЧхХ
<0, 22
25, 94
N^ <^^T^ \\
0,25
4v3
0, 125
0, 125
0, 125
0, 125
лХЗ
\Ч/
0, 125
О, 125
О, 125
О, 125
О, 125
О, 125
0,25
"СЧ"\^
0,5
0, 125
0, 125
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
где
Y представляет собой
1. Соединение формулы I для применения в качестве лекарственного средства, где формула I представляет собой
(ii) -CF3;
(iii) -N (Ci-балкил) 2 (например, -N(CH3)2); или
(iv) С3-бДиклоалкил (например, циклопропил);
Nv, Nw, Nx, NY и Nz независимо представляют собой -N= или -С(Н)=, но при этом только максимум три из Nv, Nw, Nx, NY и Nz могут представлять собой -N=;
п равно 0, 1 или 2 (а предпочтительно равно 0);
X1 и X2 независимо представляют собой -N- или -С(Н)-;
если X1 представляет собой -N-, то Q1 представляет собой прямую связь, -С(О)- или -S(0)2_;
если X1 представляет собой -С(Н)-, то Q1 представляет собой прямую связь или -N(RZ)-;
Rz представляет собой водород или С1-6алкил;
Rx представляет собой Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) , арил или гетероарил (при этом каждая из последних двух групп необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из А2 и А3, соответственно);
RY, Ryl и Ry2 независимо представляют собой водород,
галоген, -CN, -OR10, -N(R11) (R12) или С^алкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора));
А1, А2, А3 и А4 независимо представляют собой галоген, -CN, -OR1, -S (О) о-гС1-залкил, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), гетероциклоалкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из Ci-залкила и галогена) , арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из В1 и В2, соответственно);
каждый из R1 и R10 независимо представляет собой водород, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, Ci-залкила и -O-Ci-Залкила);
R11 и R12 независимо представляют собой водород или Ci_ 6алкил;
В1 и В2 независимо представляют собой галоген (например, хлор или фтор), -CN, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)), -ОН или -O-Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)),
или его фармацевтически приемлемая соль при условии, что соединение не
2. Соединение формулы I для применения в качестве
представляет собой
лекарственного средства, где формула I представляет собой
где
Y представляет собой
(1)
(ii) -CF3; или
(iii) Сз-бДиклоалкил (например, циклопропил);
Nv, Nw, Nx, NY и Nz независимо представляют собой -N= или -С(Н)=, но при этом только максимум три из Nv, Nw, Nx, NY и Nz могут представлять собой -N=;
п равно 0, 1 или 2 (а предпочтительно равно 0);
X1 и X2 независимо представляют собой -N- или -С(Н)-;
если X1 представляет собой -N-, то Q1 представляет собой прямую связь, -С(О)- или -S(0)2_;
если X1 представляет собой -С(Н)-, то Q1 представляет собой прямую связь или -N(RZ)-;
Rz представляет собой водород или С1-6алкил;
Rx представляет собой Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) , арил или гетероарил (при этом каждая из последних двух групп необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из А2 и А3, соответственно);
RY, Ryl и Ry2 независимо представляют собой водород, галоген, -CN, -OR10, -N(R11) (R12) или Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора));
А1, А2, А3 и А4 независимо представляют собой галоген, -CN, -OR1, -S (О) о-гСЧ-залкил, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), гетероциклоалкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из Ci-залкила и галогена) , арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из В1 и В2, соответственно);
каждый из R1 и R10 независимо представляет собой водород, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, Ci-залкила и -O-Ci-Залкила);
R11 и R12 независимо представляют собой водород или Ci_ 6алкил;
В1 и В2 независимо представляют собой галоген (например, хлор или фтор), -CN, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)), -ОН или -O-Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)),
или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Соединение для применения по п. 1 или п. 2, где
следующая субструктура формулы I:
является той, в которой предпочтительно
ни один, один или два из Nv, Nw, Nx, NY и Nz (предпочтительно ни один или один, например, Nx или NY) представляет(ют) собой -N=, а другие представляют собой -С(Н)=;
если два из Nv, Nw, Nx, NY и Nz представляют собой -N=, то ими предпочтительно являются Nw и NY (таким образом образуя 5-пиримидинильную группу);
п равно 0, 1 или 2 (но предпочтительно равно 0 или 1);
А4 (который может присутствовать на любом из атомов углерода в фенильном кольце, в том числе, если NX/NY/NZ представляет собой -С(Н)=) представляет собой галоген (например, фтор) , -CN, -OCi-залкил (например, -ОСН3) ;
наиболее предпочтительно, вышеуказанная субструктура представляет собой пиримидинил, или, предпочтительно, фенил, или, более предпочтительно, пиридил (предпочтительно, 3- или 4-пиридил), необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из А4 (например, незамещенный или замещенный одним заместителем).
4. Соединение для применения по любому из пп. 1-3, где
А1 представляет собой галоген (например, фтор), -CN, Ci-6алкил (например, С3-6циклоалкил) , арил (необязательно замещенный одним или несколькими (например, одним) заместителями, выбранными из В1) , гетероарил (необязательно замещенный одним или несколькими (например, одним) заместителями, выбранными из В2) или
-OR1;
если А1 представляет собой арил, то он предпочтительно представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или несколькими (например, одним) заместителями, выбранными из В1;
если А1 представляет собой арил, замещенный одним или несколькими (например, одним) В1 заместителями, то присутствует по меньшей мере один (например, один) заместитель, расположенный в мета-положении в фенильной группе;
если А1 представляет собой необязательно замещенный гетероарил, он предпочтительно представляет собой 5- или б-членную гетероарильную группу, предпочтительно содержащую один, два или три (например, один) гетероатома, предпочтительно выбранных из азота, серы и кислорода (например, серы и/или кислорода) , таким образом образуя, например, тиенильную (например, 2-тиенильную или 3-тиенильную) или фуранильную (например, 2-фуранильную) группу;
если А1 представляет собой необязательно замещенный гетероарил, то он является необязательно замещенным одним или
двумя (например, одним) заместителями, выбранными из В2.
5. Соединение для применения по любому из предыдущих пунктов, где
81 представляет собой галоген (например, фтор или хлор), -
CN, -ОН или Ci-залкил (необязательно замещенный одним или
несколькими атомами галогена, например фтора, таким образом
образуя, например, -CF3 группу);
82 предпочтительно представляет собой С^алкил (например,
Ci-галкил, такой как метил) ;
R1 представляет собой арил (например, незамещенный фенил);
если Q1 представляет собой -N(RZ)-, то Rx представляет собой Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1), таким образом образуя, например, -С(0)-С(Н) (СН3)-0-фенил,
Rz представляет собой водород;
если Q1 представляет собой прямую связь или -С(0)-, то Rx предпочтительно представляет собой
Ci-балкил (например, ациклический Ci-балкил или Сз_ 6циклоалкил), необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и/или А1, и необязательно содержащий одну или несколько (например, одну) двойную связь (таким образом образуя Сг-валкенильную группу) ; или
Rx представляет собой арил (например, фенил), необязательно замещенный одним или несколькими (например, одним или двумя) заместителями, выбранными из А2, таким образом образуя, например, незамещенный фенил.
6. Соединение для применения по любому из предыдущих пунктов, где
R10 представляет собой С^алкил (например, Ci-галкил, такой как метил);
R11 и R12 независимо представляют собой водород или, предпочтительно, Ci-залкил (например, метил) ;
либо все из RY, Ryl и Ry2 представляют собой водород, либо, более предпочтительно, по меньшей мере один из Ry, Ryl и Ry2 (предпочтительно, Ry) представляет собой заместитель, отличный от водорода, а другие (предпочтительно, Ryl и Ry2) представляют
собой водород (т.е. существует предпочтительно один заместитель, присутствующий на фенильном кольце предпочтительно в мета-положении);
RY представляет собой водород или, предпочтительно, галоген (например, хлор), -ОСН3, -N(CH3)2, -CN или С1-Залкил (например, -СН3) , необязательно замещенный одним или несколькими атомами фтора (например, -CF3) , и наиболее предпочтительно, RY представляет собой -ОСН3;
Ryl представляет собой водород, или, если RY представляет собой водород, он может представлять собой заместитель, выбранный из -ОСН3 и Ci-залкила (например, метила) ;
Ry2 представляет собой водород, или, если RY и Ryl представляет собой водород, он может представлять собой заместитель, выбранный из галогена (например, фтора) и Ci_ Залкила (например, метила);
R1 представляет собой водород;
А2 представляет собой галоген (например, хлор) или -OR1 (например, -ОН).
7. Соединение для применения по п. 1 или п. 2, где Y представляет собой
8. Соединение для применения по п. 1, п. 2 или п. 7, где
X1 представляет собой -N-, и Q1 представляет собой прямую связь.
9. Соединение для применения по п. 1, п. 2, п. 7 или п. 8,
где
Rx представляет собой С^алкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 или А1) .
10. Соединение для применения по п. 1 или п. 2, где
соединение представляет собой
или их фармацевтически приемлемую соль.
11. Соединение для применения по любому из пп. 1-10, где применение заключается в лечении (например, селективном лечении) бактериальной инфекции.
12. Соединение для применения по п. 11, где бактериальная инфекция вызвана Staphylococcus aureus.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая
фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного
ингредиента, терапевтически эффективное количество соединения
по любому из пп. 1-10.
14. Применение соединения по любому из пп. 1-10 для получения лекарственного средства для лечения (например, селективного лечения) бактериальной инфекции, например, где бактериальная инфекция вызвана Staphylococcus aureus.
15. Способ лечения бактериальной инфекции, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-10.
16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что бактериальная инфекция вызвана Staphylococcus aureus.
17. Соединение формулы I:
ни один или один из Nv, Nw, Nx, NY и Nz (предпочтительно один, например, Nx или NY) представляет собой -N=, а другие представляют собой -С(Н)=;
п равно 0 или 1;
X1 и X2 независимо представляют собой -N- или -С(Н)-; если X1 представляет собой -N-, то Q1 представляет собой прямую связь;
если X1 представляет собой -С(Н)-, то Q1 представляет собой прямую связь или -N(RZ)-;
Rz представляет собой водород или Ci-балкил;
Rx представляет собой Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) , арил или гетероарил (при этом каждая из последних двух групп необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из А2 и А3, соответственно);
RY, Ryl и Ry2 независимо представляют собой водород, галоген, -CN, -OR10, -N(R11) (R12) или Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора));
А1, А2, А3 и А4 независимо представляют собой галоген, -CN, -OR1, -S (0) о-гС1-залкил, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями-галогенами), гетероциклоалкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из Ci-залкила и галогена) , арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из В1 и В2, соответственно);
каждый из R1 и R10 независимо представляет собой водород, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими
заместителями-галогенами), арил или гетероарил (при этом две последние группы необязательно замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из галогена, Ci-залкила и -O-Ci-залкила);
R11 и R12 независимо представляют собой водород или Ci-6алкил;
В1 и В2 независимо представляют собой галоген (например, хлор или фтор), -CN, Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)), -ОН или -O-Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими атомами галогена (например, фтора)),
или его фармацевтически приемлемая соль при условии, что соединение не представляет собой
18. Соединение по п. 17, где
X1 представляет собой -N-;
X2 представляет собой -С(Н)-;
Rx представляет собой Ci-балкил (необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из =0 и А1) ;
А4 (который предпочтительно присутствует на атоме углерода в фенильном кольце и находится предпочтительно в пара
положении) представляет собой галоген (например, фтор), -CN или -OCi-залкил (например, -ОСН3) ;
А1 представляет собой галоген (например, фтор), -CN, CV 6алкил или -OR1;
либо все из RY, Ryl и Ry2 представляют собой водород, либо, более предпочтительно, по меньшей мере один из RY, Ryl и Ry2 (предпочтительно, Ry) представляет собой заместитель, отличный от водорода, а другие (предпочтительно, Ryl и Ry2) представляют собой водород (т.е. существует предпочтительно один заместитель, присутствующий на фенильном кольце предпочтительно в мета-положении);
если Ry является отличным от водорода, то он предпочтительно представляет собой галоген (например, хлор), -ОСН3 или
-CN; и/или
R1 представляет собой водород.
19. Соединение по п. 17, где соединение представляет собой
или их фармацевтически приемлемую соль.
20. Комбинация (а) соединения по любому из пп. 1-10, 17, 18 или 19 и (Ь) одного или нескольких других антибактериальных средств.
21. Продукт, содержащий (а) соединение по любому из пп. 110, 17, 18 или 19 и (Ь) одно или несколько других антибактериальных средств, в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении (например, селективном лечении) бактериальной инфекции.
22. Способ получения соединения формулы I по пп. 1, 2, 17, 18 или 19, в котором (в случае, если это применимо) Y
20.
представляет собой Ы"-Ы2-содержащее кольцо, включающий:
(i) для соединений формулы I, в которой X1 представляет собой -N-, взаимодействие соединения формулы II,
где Nv, Nw, Nx, Ny, Nz, X2, Ry, Ryl, Ry2, А4 и n являются
такими, как указано в п. 1, с
(a) соединением формулы III,
iZ-Cr-R* III,
где L1 представляет собой подходящую уходящую группу;
(b) для соединений формулы I, в которой Q1 представляет
собой прямую связь, и Rx представляет собой группу,
присоединенную к Q1 фрагментом -CH"2-RXX (при этом, в
совокупности, эта группа представляет собой фрагмент Rx) ,
взаимодействие с соединением формулы IV,
0=С (Н) (Rxx) IV,
где Rxx представляет собой часть фрагмента Rx (Rx определен в п. 1) ;
(ii) для соединений формулы I, в которой соответствующий пиримидин присоединен к X2, при этом X2 представляет собой -N-, взаимодействие соединения формулы V,
где L представляет собой подходящую уходящую группу, с соединением формулы VI,
Н N-
\-х'
где X1, Q1 и Rx являются такими, как определено в п. 1;
(iii) для соединений, в которых присутствует фрагмент -
СН2-, восстановление соответствующего соединения, в котором
присутствует фрагмент -С(О)-;
(iv) взаимодействие с соединением формулы VII,
где L3 представляет собой подходящую уходящую группу, и переменные RY, Ryl, Ry2, Q1, Rx, X1 и X2 являются такими, как определено в п. 1, с соединением формулы VIII,
N|^ /N2
N%Nv4^NH
NH,
или его производным, в котором переменные Nv, Nw, Nx, NY, Nz, А4 и n являются такими, как определено в данном документе выше ;
(v) для соединений, содержащих фрагмент -С{F) 2~, взаимодействие соответствующего соединения, содержащего фрагмент -С(О)-, с соответствующим "фторидным" реактивом.
По доверенности
110
110
110
110
112
112
112
112
113
113
125
125
125
125
126
126
126
126