[RU]

Изобретение относится к новым замещенным хинолиновым производным общей формулы (Ia) или (Ib)

в том числе к их любой стереохимически изомерной форме, их фармацевтически приемлемой соли, их N-оксидной форме или их сольвату. Заявленные соединения являются применимыми для лечения бактериальной инфекции. Также заявляется композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество заявленных соединений, применение заявленных соединений или композиций для производства медикамента для лечения бактериальной инфекции и способ получения заявленных соединений.

(57) Реферат / Формула:

Изобретение относится к новым замещенным хинолиновым производным общей формулы (Ia) или (Ib)

в том числе к их любой стереохимически изомерной форме, их фармацевтически приемлемой соли, их N-оксидной форме или их сольвату. Заявленные соединения являются применимыми для лечения бактериальной инфекции. Также заявляется композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество заявленных соединений, применение заявленных соединений или композиций для производства медикамента для лечения бактериальной инфекции и способ получения заявленных соединений.

---

2420-519361ЕА/072 АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ ХИНОЛИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ
Настоящее изобретение относится к новым замещенным хинолиновым производным, применимым для лечения бактериальных заболеваний, в том числе без ограничения заболеваний, вызванных патогенной микобактерией, такой как Mycobacterium tuberculosisr М. bovis, М. leprae, М. avium и М. marinum, или патогенной Staphylococci или Streptococci.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Mycobacterium tuberculosis является возбудителем туберкулеза (ТВ), тяжелой и потенциально смертельной инфекции, распространенной во всем мире. Оценки Всемирной организации здравоохранения показывают, что каждый год ТВ заболевают более 8 миллионов людей, и 2 миллиона людей ежегодно умирают от туберкулеза. В последнее десятилетие число случаев ТВ возросло на 2 0% во всем мире с самым высоким уровнем в наиболее бедных странах. Если эта тенденция сохранится, то распространенность ТВ возрастет на 41% в следующие двадцать лет. Через пятьдесят лет с момента внедрения эффективной химиотерапии ТВ остается после AIDS ведущей инфекционной причиной смертности взрослого населения в мире. Эпидемия ТВ осложняется увеличением штаммов с устойчивостью к нескольким лекарственным средствам и смертоносным симбиозом с HIV. Люди, являющиеся HIV-позитивными и инфицированными ТВ, в 3 0 раз более склонны к развитию активной формы ТВ, чем люди, являющиеся HIV-отрицательными, и ТВ является причиной смерти одного из каждых трех человек, страдающих HIV/AIDS, во всем мире
Все существующие подходы к лечению туберкулеза предусматривают комбинацию нескольких средств. Например, режим, рекомендованный Службой здравоохранения США, представляет собой комбинацию изониазида, рифампицина и пиразинамида в течение двух месяцев, с последующим изониазидом и рифампицином отдельно в течение следующих четырех месяцев. Эти лекарственные средства назначаются в течение следующих семи месяцев пациентам, инфицированным HIV. Для пациентов, инфицированных устойчивыми к нескольким лекарственным средствам штаммами М. tuberculosis, к
комбинированным видам терапии добавляют средства, такие как этамбутол, стрептомицин, канамицин, амикацин, капреомицин, этионамид, циклосерин, ципрофоксацин и офлоксацин. Не существует ни одного средства, эффективного в клиническом лечении туберкулеза, ни какой-либо комбинации средств, обладающих возможностью лечения длительностью менее шести месяцев.
В медицине существует острая потребность в новых лекарственных средствах, которые улучшают имеющееся лечение, обеспечивая режимы, облегчающие соблюдение режима лечения для пациента и врача. Для достижения этого наилучшим путем являются более короткие режимы и требующие меньшее наблюдение. Наибольшая польза от лечения наступает в первые 2 месяца интенсивной или бактерицидной фазы, когда четыре лекарственных средства принимают одновременно; бактериальная нагрузка значительно снижается, и пациенты становятся неинфекционными. Требуется 4-6 месяцев, или фаза стерилизации, для устранения сохраняющихся бацилл и сведения к минимуму риска рецидива. Сильнодействующее стерилизующее лекарственное средство, которое уменьшает продолжительность лечения до 2 месяцев или менее, было бы чрезвычайно полезно. Также необходимы лекарственные средства, которые облегчат соблюдение режима терапии за счет того, что они требуют меньшего тщательного наблюдения врача. Очевидно, что соединение, которое уменьшает как общую продолжительность лечения, так и частоту приема лекарственного средства, принесло бы наибольшую пользу.
Эпидемия ТВ осложняется все возрастающим числом случаев заражения устойчивыми к нескольким лекарственным средствам штаммами или MDR-TB. Вплоть до четырех процентов всех случаев заражения по всему миру рассматриваются как заражение MDR-TB, устойчивым к самым эффективным лекарственным средствам стандарта из четырех лекарственных средств, изониазиду и рифампину. Инфекция MDR-TB является летальной при отсутствии лечения и не может лечиться надлежащим образом с помощью стандартной терапии, поэтому лечение требует приема лекарственных средств "второй линии" вплоть до 2 лет. Эти
лекарственные средства часто являются токсичными, дорогими и малоэффективными. В отсутствие эффективной терапии инфицированные MDR-TB пациенты продолжают распространять заболевание, продуцируя новые инфекции MDR-TB штаммами. В медицине существует большая потребность в новом лекарственном средстве с новым механизмом действия, которое, вероятно, проявит активность в отношении устойчивых к лекарственным средствам штаммов, в частности MDR штаммов.
Термин "устойчивый к лекарственным средствам", как используется выше и ниже в настоящем изобретении, является термином, понятным специалисту в микробиологии. Микобактерией, устойчивой к лекарственному средству, является микобактерия, которая больше не является чувствительной, по меньшей мере к одному ранее эффективному лекарственному средству; которая развила способность выдерживать антибиотическое действие, по меньшей мере одного ранее эффективного лекарственного средства. Штамм, устойчивый к лекарственному средству, может передавать эту способность выдерживать действие лекарственного средства своему потомству. Упомянутая устойчивость может быть результатом случайных генетических мутаций в бактериальной клетке, которые изменяют чувствительность к одному лекарственному средству или различным лекарственным средствам. MDR туберкулез является особой формой туберкулеза, устойчивого к лекарственным средствам, благодаря бактериальной устойчивости по меньшей мере к изониазиду и рифампицину (с устойчивостью к другим лекарственным средствам или без таковой), которые являются в настоящее время двумя самыми мощными лекарственными средствами против ТВ. Таким образом, при применении выше и ниже в настоящем документе "устойчивый к лекарственным средствам" предусматривает устойчивость к нескольким лекарственным средствам.
Другим фактором в контроле эпидемии ТВ является проблема латентного ТВ. Несмотря на десятилетия проведения программ по борьбе с туберкулезом (ТВ) около 2 миллиардов людей инфицированы
М. tuberculosis, хотя и бессимптомно. Около 10% из этих
индивидуумов подвержены риску развития активного ТВ в течение их жизни. Всемирной эпидемии ТВ способствует заражение ВИЧ пациентов ТВ и появление штаммов ТВ с множественной лекарственной устойчивостью (MDR-TB). Реактивация латентного ТВ является фактором с высокой степенью риска развития заболевания и обуславливает 32% смертей HIV-инфицированных индивидуумов. Для борьбы с эпидемией ТВ необходимо открытие новых лекарственных средств, которые могут уничтожать "дремлющие" или латентные бациллы. "Дремлющие" ТВ могут становиться реактивированными, вызывая заболевание, несколькими факторами, например подавлением иммунитета хозяина при применении иммунодепрессивных лекарственных средств, подобных антителам к
фактору некроза опухолей а или интерферона-у. В случае пациентов, зараженных ВИЧ, единственным профилактическим лечением, пригодным для латентного ТВ, являются двух - трехмесячные режимы приема рифампицина, пиразинамида. Эффективность режима лечения еще не установлена, и, кроме того, продолжительность лечения является важным ограничивающим фактором в среде с ограниченными ресурсами. Следовательно, существует большая необходимость в разработке новых лекарственных средств, которые могут действовать в качестве химиопрофилактических средств для индивидуумов, зараженных латентными бациллами ТВ.
Туберкулезные бациллы проникают в тела здоровых людей при вдыхании; они подвергаются фагоцитозу альвеолярными макрофагами легких. Это приводит к мощному иммунному ответу и образованию гранулем, которые состоят из макрофагов, инфицированных М. tuberculosis, окруженных Т-клетками. После б-8-недельного периода иммунный ответ хозяина вызывает смерть инфицированных клеток путем некроза и накопления казеозного материала с определенными внеклеточными бациллами, окруженными макрофагами, эпителиоидными клетками и слоями лимфоидной ткани на периферии. В случае здоровых индивидов большая часть микобактерий уничтожается в таком окружении, но небольшая часть бацилл все же выживает, и полагают, что они существуют в нереплицируемом
состоянии пониженного метаболизма и являются устойчивыми к уничтожению лекарственными средствами против ТВ, подобными изониазиду. Эти бациллы могут сохраняться в измененной физиологической среде даже в течение жизни отдельного человека без проявления каких бы то ни было клинических симптомов заболевания. Однако в 10% из этих случаев эти латентные бациллы могут реактивироваться, вызывая заболевание. Одной из гипотез о развитии этих устойчивых бактерий является гипотеза о патофизиологической среде при патологических изменениях у человека, а именно пониженном давлении кислорода, ограничении в питательных веществах и кислом рН. Допускают, что эти факторы приводят к тому, что эти бактерии становятся фенотипически выносливыми к основным антимикобактериальным лекарственным средствам.
Кроме контроля эпидемии ТВ, возникла проблема
устойчивости к антибиотикам первой линии. Некоторые важные
примеры включают пенициллин-устойчивый Streptococcus
pneumoniae, ванкомицин-устойчивые энтерококки, метицилин-устойчивый стафилококк золотистый, устойчивую к нескольким лекарственным средствам сальмонеллу.
Последствия устойчивости к антибиотикам являются
серьезными. Инфекции, вызванные устойчивыми микробами, не
поддаются лечению, приводя в результате к увеличению
продолжительности заболевания и большему риску смерти.
Неудачные результаты лечения также приводят к более длительным
периодам инфективности, которая увеличивает число
инфицированных людей, взаимодействующих в обществе, и, таким образом, подвергает все слои населения риску заражения устойчивыми штаммами. Больницы являются крайне важным компонентом проблемы антимикробной резистентности по всему миру. Комбинация высоко восприимчивых пациентов, интенсивного и продолжительного антимикробного лечения и перекрестной инфекции привела в результате к инфекциям с чрезвычайно устойчивыми бактериальными патогенными микроорганизмами.
Самолечение противомикробными лекарственными средствами является другим важным фактором, вносящим вклад в приобретение
устойчивости. Противомикробные лекарственные средства при самолечении могут быть ненужными, часто неадекватно дозируемыми или могут не содержать достаточных количеств активных лекарственных средств.
Соблюдение пациентом рекомендованного лечения является другой важной проблемой. Пациенты забывают принять лекарственное средство, прерывают свое лечение, когда начинают чувствовать себя лучше, или могут быть не способны провести полный курс, что ведет к созданию идеальной среды для микробов, скорее для приспособления, чем для уничтожения.
Из-за возникновения устойчивости к нескольким антибиотикам лечащие врачи борются с инфекциями, для которых не существует эффективной терапии. Распространенность болезни, смертность и финансовые расходы на такие инфекции накладывают на системы медицинского обслуживания по всему миру все возрастающую нагрузку.
Следовательно, существует большая необходимость в новых соединениях для лечения бактериальных инфекций, особенно микобактериальных инфекций, включая латентные микобактериальные инфекции, устойчивые к лекарственным средствам, а также других бактериальных инфекций, особенно инфекций, вызванных устойчивыми бактериальными штаммами.
WO2004/011436, WO2005/070924, WO2005/070430, WO2005/075428 и W020 07/01488 5 описывают определенные замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении Mycobacteria, в частности в отношении Mycobacterium tuberculosis. WO2005/117875 описывает замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении устойчивых микобактериальных штаммов. WO2006/067048 описывает замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении латентного туберкулеза. Одно конкретное соединение из этих замещенных хинолиновых производных описывается в Science (2005), 307, 223-227, и его способ действия описывается в WO2006/035051.
WO2006/131519, WO2007/000434, WO2007/000435,
WO2007/000436, W02007/014934, WO2007/014940 и WO2007/014941 описывают определенные замещенные хинолиновые производные,
обладающие активностью в отношении бактерий, таких как Staphylococcus и Streptococcus.
WO2008/068266,
WO2008/068267,
WO2008/068268,
WO2008/068269, WO2008/068270 и WO2008/068272 описывают определенные замещенные хинолиновые производные, обладающие активностью в отношении Mycobacteria, в частности против Mycobacterium tuberculosisг а также в отношении бактерий, таких как Staphylococcus и Streptococcus.
Другие замещенные хинолины описываются в патенте США № 5965572 (Соединенные Штаты Америки) для лечения устойчивых к антибиотикам инфекций и в WO00/342 65 для ингибирования роста бактериальных микроорганизмов.
Цель настоящего изобретения заключается в обеспечении
новыми соединениями, в частности замещенными хинолиновыми
производными, обладающими способностью ингибировать
бактериальный рост, особенно стрептококков, стафилококков или микобактерий, и, следовательно, пригодными для лечения бактериальных заболеваний, особенно тех заболеваний, которые вызваны патогенными бактериями, такими как Streptococcus pneumonia, Staphylococcus aureus или Mycobacterium tuberculosis (в том числе латентного заболевания и в том числе устойчивыми к лекарственным средствам штаммами М. tuberculosis) r М. bovisr М. leprae,. М. avium и М. marinum.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
включая их любые стереохимически изомерные формы, где
р представляет собой целое число, равное 1, 2, 3 или 4;
Настоящее изобретение относится к новым замещенным хинолиновым производным согласно формуле (1а) или (lb):
п представляет собой целое число, равное 1 или 2; при условии, что если п равняется 2, то оба заместителя R5 соединены с одним и тем же атомом углерода пиперидинового фрагмента;
R1 представляет собой водород, циано, цианоСЧ-балкил, формил, карбоксил, галоген, Ci-балкил, Сг-балкенил, Сг-балкинил, полигалогенСЧ-балкил, гидрокси, гидроксиСЧ-балкил, Ci-балкилокси, С1-балкилоксиС1-балкил, Ci-балкилтио, СЧ-балкилтиоСЧ-балкил, -C=N-0R11, амино, моно или ди (Ci-балкил) амино, аминоСЧ-балкил, моно или ди (Ci-балкил) аминоС1-балкил, СЧ-балкилкарбониламиноСЧ-балкил, R9bR10bN-C (=0) -, арилСЧ-балкил, арилкарбонил, R9aR10aN-Cl-6aлкил, ди (арил) Ci-балкил, арил, Сз-бДиклоалкил, R9aR10aN-, R9aR10aN-C (=0) -,
С^алкил-Б (=0) г- или Het;
R2 представляет собой водород, С1-6алкилокси, арил, арилокси, гидрокси, меркапто, С1-балкилоксиС1-балкилокси, Ci_ 6алкилтио, моно или ди(Ci-балкил)амино, амино, пирролидино или
радикал с формулой v , где Y представляет собой СН2, О, S, NH или IV-Ci-балкил;
R3 представляет собой водород, галоген, Ci-балкил, арил или
Het;
R4 представляет собой арил1 или Het;
R5 представляет собой арил, арилС1-балкил, Сз-бДиклоалкил, Сз-бДиклоалкилС1-балкил, Het,
HetCi-балкил, С1-6алкил, гидроксиС1-6алкил, аминоС1-6алкил, моно- или ди (С1-4алкил) аминоС1-балкил, арил-ЫН-С1-балкил, Het-NH-Ci-балкил,
С2-балкенил или галоген;
R6 представляет собой водород, С1-6алкил, арилС1-6алкил, Het1, Het1Cl-6aлкил или -C(=NH)-NH2;
R7 представляет собой водород или С1-6алкил;
R8 представляет собой оксо; или
R7 и R8BMecTe образуют радикал -CH=CH-N=;
R9a и R10a вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют радикал, выбранный из группы, состоящей
из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-
тиоморфолинила, 2,3-дигидроизоиндол-1-ила, тиазолидин-3-ила,
1,2,3,б-тетрагидропиридила, гексагидро-1Я-азепинила,
гексагидро-1Я-1, 4-диазепинила, гексагидро-1,4-оксазепинила,
1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ила, пирролинила, пирролила,
имидазолидинила, пиразолидинила, 2-имидазолинила, 2-
пиразолинила, имидазолила, пиразолила, триазолила, пиридинила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила и триазинила, при этом каждый радикал необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из Ci-6алкила, полигалогенСЧ-балкила, галогена, арилС^алкила, гидрокси, Ci-балкилокси, амино, моно- или ди (Ci-балкил) амино, Ci-балкилтио, алкилтиоС1-балкила, арила, пиридила или пиримидинила;
R9b и R10b каждый независимо представляет собой водород, Ci_ 6алкил, арил или Het;
R11 представляет собой водород или С1-6алкил;
арил представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС!-6алкила, галогена, циано, цианоС1-балкила, нитро, амино, моно-или ди (Ci-балкил) амино, Ci-балкила, С2-балкенила, необязательно замещенного фенилом, полиС1-6галогеналкила, С^алкилокси, Ci_ 6алкилоксиС1-6алкил, полигалогенС1-6алкилокси, карбоксил, Ci_ 6алкилоксикарбонила, аминокарбонила, морфолинила или моно- или ди (Ci-балкил) аминокарбонила;
арил1 представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС!-балкила, галогена, циано, цианоС1-балкила, нитро, амино, моно-или ди (Ci-балкил) амино, Ci-балкила, полигалогенС1-балкила, Ci-6алкилокси, С1-балкилоксиС1-балкила, Ci-балкилтио, полигалогенС!-6алкилокси, карбоксила, Ci-балкилоксикарбонила, аминокарбонила, Het, моно- или ди (Ci-балкил) аминокарбонила или С^алкил-Б (=0) 2~;
Het представляет собой моноциклический гетероцикл,
выбранный из ЛЬфеноксипиперидинила, пиперидинила, пиперазинила,
морфолинила, 4-тиоморфолинила, пирролила, пиразолила,
имидазолила, фуранила, тиенила, оксазолила, изоксазолила,
тиазолила, изотиазолила, пиридинила, пиримидинила, пиразинила
или пиридазинила; или бициклический гетероцикл, выбранный из
хинолинила, хиноксалинила, индолила, бензимидазолила,
бензоксазолила, бензизоксазолила, бензотиазолила,
бензизотиазолила, бензофуранила, бензотиенила, 2,3-
дигидробензо[1,4]диоксинила или бензо[1,3]диоксолила; при этом каждый моноциклический и бициклический гетероцикл необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из галогена, гидрокси, Ci-балкила CV 6алкилокси;
Het1 представляет собой моноциклический, насыщенный гетероцикл, выбранный из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, имидазолидинила, пиразолидинила; при этом каждый моноциклический, насыщенный гетероцикл является необязательно замещенным Ci-балкилом или арилС1-балкилом; их N-оксидам, их фармацевтически приемлемым солям или их сольватам.
Всякий раз при использовании в данном документе подразумевают, что выражение "соединения формулы (1а) или (1Ь)" или "соединения по настоящему изобретению" также включает их фармацевтически приемлемые соли, или их ЛЬоксидные формы, или их сольваты.
Соединения формулы (1а) и (lb) взаимосвязаны в том, что, например, соединение согласно формуле (lb) с R8, представляющим собой оксо, и R7, представляющим собой водород, является таутомерным аналогом соединения согласно формуле (1а) с R2, представляющим собой гидрокси (кето-енольный таутомеризм).
В определении Het подразумевают, что он включает все возможные изомерные формы гетероциклов, к примеру, пирролил включает 1Я-пирролил и 2Я-пирролил.
Арил, aryl1 или Het, перечисленные в определениях заместителей соединений формулы (1а) или (lb) (см., например, R4 или R6) , как упомянуто выше или ниже в данном документе,
могут быть присоединены к остатку молекулы формулы (1а) или (lb) через любой атом углерода кольца или гетероатом, при необходимости, если не указано иное. Таким образом, например, если Het представляет собой имидазолил, он может быть 1-имидазолилом, 2-имидазолилом, 4-имидазолилом и т.п.
Линии, проведенные от заместителей к кольцевым системам, указывают на то, что заместитель может быть присоединен к любому подходящему атому кольца.
Подразумевают, что фармацевтически приемлемые соли,
упоминаемые выше и ниже в данном документе, включают
нетоксичные терапевтически активные формы соли присоединения
кислоты, которые могут быть образованы соединениями формулы
(1а) или формулы (lb) . Упомянутые соли присоединения кислоты
можно получить путем обработки основной формы соединений
формулы (1а) или формулы (lb) подходящими кислотами, например
неорганическими кислотами, как например, галогенводородной
кислотой, в частности, хлористоводородной кислотой,
бромистоводородной кислотой, серной кислотой, азотной кислотой
и фосфорной кислотой; органическими кислотами, например,
уксусной кислотой, гидроксиуксусной кислотой, пропионовой
кислотой, молочной кислотой, пировиноградной кислотой,
щавелевой кислотой, малоновой кислотой, янтарной кислотой,
малеиновой кислотой, фумаровой кислотой, яблочной кислотой,
винной кислотой, лимонной кислотой, метансульфокислотой,
этансульфокислотой, бензолсульфокислотой, п-
толуолсульфокислотой, цикламиновой кислотой, салициловой кислотой, п-аминосалициловой кислотой и памовой кислотой.
Соединения формулы (1а) или (lb), содержащие кислотные протоны, можно превращать в их терапевтически активные формы солей присоединения нетоксичного металла или амина путем обработки соответствующими органическими и неорганическими основаниями. Подразумевают, что фармацевтически приемлемые соли, упоминаемые выше и ниже в данном документе, также включают терапевтически активные нетоксичные формы солей присоединения металла или амина (формы соли присоединения основания), которые могут быть образованы соединениями формулы
(la) или формулы (lb) . Соответствующие формы солей
присоединения основания включают, например, соли аммония, соли
щелочных и щелочно-земельных металлов, например, соли лития,
натрия, калия, магния, кальция и т.п., соли с органическими
основаниями, например, с первичными, вторичными и третичными
алифатическими и ароматическими аминами, такими как метиламин,
этиламин, пропиламин, изопропиламин, четыре изомера бутиламина,
диметиламин, диэтиламин, диэтаноламин, дипропиламин,
диизопропиламин, ди-н-бутиламин, пирролидин, пиперидин, морфолин, триметиламин, триэтиламин, трипропиламин, хинуклидин, пиридин, хинолин и изохинолин, бензатин, ЛЬметил-О-глюкамин, 2-амино-2-(гидроксиметил)-1,3-пропандиол, гидрабаминовые соли и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и т.п.
И наоборот, упомянутые формы солей присоединения кислоты и основания можно превратить в свободные формы путем обработки соответствующим основанием или кислотой.
Термин фармацевтически приемлемая соль также включает
четвертичные аммониевые соли (четвертичные амины), которые
способны образовывать соединения формулы (1а) или (lb) путем
реакции между основным азотом соединения формулы (1а) или (lb)
и соответствующим кватернизирующим агентом, таким как,
например, необязательно замещенный Ci-балкилгалогенид, арилС1-
6алкилгалогенид, С1-6алкилкарбонилгалогенид,
арилкарбонилгалогенид, HetCi-балкилгалогенид или
Het-карбонилгалогенид, например, метилйодид или бензилйодид. Предпочтительно, Het представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из фуранила или тиенила; или бициклический гетероцикл, выбранный из бензофуранила или бензотиенила; при этом каждый моноциклический и бициклический гетероцикл может необязательно быть замещенным 1, 2 или 3 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из группы галогена, алкила и арила. Предпочтительно, кватернизирующий агент представляет собой Ci-балкилгалогенид. Можно также использовать другие реагенты с легко уходящими группами, такими как С1-6алкилтрифторметансульфонаты, С1-6алкилметансульфонаты и
Ci-балкил-п-толуолсульфонаты. Четвертичный амин имеет
положительно заряженный атом азота. Фармацевтически приемлемые противоионы включают хлор, бром, йод, трифторацетат, ацетат, трифлат, сульфат, сульфонат. Предпочтительно, противоионом является йод. Предпочтительный противоион можно ввести, используя ионообменные смолы.
Предпочтительно, выражение фармацевтически приемлемые соли означает фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты и основания, как упомянуто в данном документе выше.
Выражение "сольват" включает гидраты и формы присоединения растворителя, которые могут образовывать соединения формулы
(1а) или (lb), а также их соли. Примерами таких форм являются, например, гидраты, алкоголяты и т.п.
В рамках настоящей заявки предусматривают, что соединение в соответствии с настоящим изобретением в сущности содержит все комбинации своих стереохимически изомерных форм. Выражение "стереохимически изомерные формы", используемое выше и ниже в данном документе, обозначает все возможные стереоизомерные формы, которыми могут обладать соединения формулы (1а) и (lb) и их N-оксиды, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или физиологически активные производные. Если не упомянуто или указано иное, химические обозначения соединений означают смесь всех возможных стереохимически изомерных форм. В частности, стереогенные центры могут иметь R- или S-конфигурацию; заместители на двухвалентных циклических (частично) насыщенных радикалах могут иметь как цис-, так и транс-конфигурацию. Соединения, содержащие двойные связи, могут обладать Е
(entgegen-напротив) или Z (zusammen-вместе) стереохимией при упомянутых двойных связях. Выражения "цис", "транс", "R", "S", "Е" и "Z" хорошо известны специалистам в данной области. Разумеется, стереохимически изомерные формы соединений формулы
(1а) и (lb) предназначены для включения в объем настоящего изобретения.
Особый интерес представляют собой соединения формулы (1а) или (lb), которые являются стереохимически чистыми.
Следуя условным обозначениям CAS-номенклатуры, если в
молекуле присутствуют два стереогенных центра известной абсолютной конфигурации, тогда присваивают обозначение R или S (на основании правила последовательности Канна-Ингольда-Прелога) хиральному центру с наименьшим номером, представляющий собой базовый центр.
Если абсолютная конфигурация стереогенного центра не известна, то такие центры обозначают в настоящем документе произвольно как R* или S*, если соответствующее соединение является стереохимически чистым, или как RS*, если соединение представляет собой стереохимическую смесь. Во многих случаях соединения в соответствии с настоящим изобретением конфигурация атома углерода на пиперидиновом кольце с заместителем R5, известна из литературы или из способа синтеза пиперидинового фрагмента; в этом случае соответствующий атом углерода обозначают как R или S согласно известной стереохимической конфигурации атома. С помощью стандартных аналитических методов легко установить, что заместитель R5 и 4-гидрокси-заместитель на пиперидиновом кольце находятся в одной плоскости (т.е. цис) или в противоположных плоскостях (т.е. транс), что обеспечивает одну абсолютную конфигурацию для атома углерода в 4-положении пиперидинового кольца, т.е. R или S; т.е. этот атом углерода идентифицируют как R* или S*, что указывает на неизвестную абсолютную конфигурацию. Атом углерода, расположенный между пиперидиновым кольцом и хинолином, условно обозначают как R* или S*, если конфигурация неизвестна.
Если указана конкретная стереоизомерная форма, это означает, что указанная форма практически чистая, т.е. связана с менее 50%, предпочтительно менее 20%, более предпочтительно менее 10%, еще более предпочтительно менее 5%, в частности предпочтительно менее 2% и наиболее предпочтительно менее 1% других изомеров. Таким образом, если соединение формулы (1а) или (lb) указано, например, как конкретный энантиомер, это означает, что соединение практически не содержит других энантиомеров.
Соединения любой из формул (1а) и (lb), а также некоторые другие промежуточные соединения неизменно имеют по меньшей мере
два стереогенных центра в своей структуре, что может приводить к образованию по меньшей мере 4 стереохимически отличающихся структур. В структурах, приведенных ниже, по меньшей мере два стереогенных центра отмечены *.
За исключением тех соединений формулы (la) или (lb), где n равняется 2, и два заместителя R5 являются идентичными, соединения в соответствии с настоящим изобретением также имеют неизменный дополнительный хиральный центр на атоме углерода пиперидинового фрагмента, несущего заместитель(и) R5. Это предполагает по меньшей мере 8 стереохимически разных структур.
Соединения любой из формул (1а) и (lb) можно синтезировать в форме смесей, в частности рацемических смесей, энантиомеров, которые можно отделить друг от друга согласно известным из уровня техники процедурам разделения. Соединения любой из формул (1а) и (lb), можно превращать в формы соответствующей диастереомерной соли путем реакции с подходящей хиральной кислотой. Указанные формы диастереомерной соли затем разделяют, например, с помощью селективной или фракционной кристаллизации, а энантиомеры выделяют оттуда с помощью щелочи. Альтернативный способ отделения энантиомерных форм соединений любой из формул (1а) и (lb) включает жидкостную хроматографию с использованием хиральной неподвижной фазы. Указанные чистые стереохимические изомерные формы также можно получить из соответствующих чистых стереохимических изомерных форм подходящих исходных материалов при условии, что реакция протекает стереоспецифично. Если необходим определенный стереоизомер, предпочтительно, чтобы указанное соединение было синтезировано стереоспецифическими способами получения. В этих способах преимущественно используют
энантиомерно чистые исходные материалы.
Подразумевается, что таутомерные формы соединений формулы (1а) или (lb) включают такие соединения формулы (1а) или (lb), где, например, енольная группа превращается в кетогруппу (кето-енольный таутомеризм). Таутомерные формы соединений формул (1а) и (lb) или промежуточных соединений в соответствии с настоящим изобретением предназначены для включения в объем настоящего изобретения.
Подразумевается, что ЛЬоксидные формы соединений по настоящему изобретению включают соединения формулы (1а) или (lb), где один или несколько третичных атомов азота окислены до так называемого N-оксида.
Соединения формулы (1а) и (lb) могут быть превращены в
соответствующие ЛЬоксидные формы согласно известным из уровня
техники процедурам превращения трехвалентного азота в его N-
оксидную форму. Указанную реакцию ЛЬокисления можно обычно
осуществлять путем реакции исходного материала формулы (1а) или
(lb) с подходящим органическим или неорганическим пероксидом.
Подходящие неорганические пероксиды включают, например,
пероксид водорода, пероксиды щелочных и щелочноземельных
металлов, например, пероксид натрия, пероксид калия; подходящие
органические пероксиды могут включать пероксикислоты, такие
как, например, бензолкарбопероксикислоты или галогензамещенные
бензолкарбопероксикислоты, например 3-
хлорбензолкарбопероксикислота, пероксиалкановые кислоты,
например пероксиуксусная кислота, алкилгидропероксиды, например трет-бутилгидропероксид. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например, этанол и подобные, углеводороды, например, толуол, кетоны, например, 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например, дихлорметан, и смеси этих растворителей.
В рамках настоящей заявки предусматривается, что соединение в соответствии с настоящим изобретением в сущности содержит все комбинации изотопов его химических элементов. В рамках настоящей заявки химический элемент, в частности при упоминании соединения согласно формуле (1а) или (lb),
подразумевает все изотопы и смеси изотопов этого элемента, либо встречающиеся в природе, либо полученные синтезом, либо с природным изотопным составом, либо в изотопно-обогащенной форме. В частности при упоминании водорода также подразумеваются 1Н, 2Н, 3Н и их смеси; при упоминании углерода также подразумеваются 11С, 12С, 13С, 14С и их смеси; при упоминании азота также подразумеваются 13N, 14N, 15N и их смеси; при упоминании кислорода также подразумеваются 140, 150, 160, 170, 180 и их смеси; а при упоминании фтора также подразумеваются 18F, 19F и их смеси.
Соединение в соответствии с настоящим изобретением, следовательно, в сущности включает соединение с одним или несколькими изотопами одного или нескольких элементов и их смеси, включая радиоактивное соединение, также называемое меченным радиоактивным изотопом соединением, при этом один или несколько нерадиоактивных атомов были замещены одним из его радиоактивных изотопов. Под выражением "меченное радиоактивным изотопом соединение" понимают любое соединение формулы (1а) или (lb), его фармацевтически приемлемую соль или его N-оксидную форму, или его сольват, которое содержит по меньшей мере один радиоактивный атом. Например, соединение может быть меченным позитрон- или гамма-активными радиоактивными изотопами. Для методик радиолигандного анализа (анализа связывания с рецепторами мембраны) 3Н-атом или 1251-атом является предпочтительным атомом для замены. Для получения изображения наиболее широко используемыми позитрон-активными (PET) радиоактивными изотопами являются 11С, 18F, 150 и 13N, все из которых получают при помощи ускорителя частиц и имеют периоды полураспада 20, 100, 2 и 10 минут, соответственно. Поскольку периоды полураспада этих радиоактивных изотопов настолько коротки, то их можно использовать только в учреждениях, в которых есть ускоритель частиц в месте их получения, что таким образом ограничивает их применение. Наиболее широко используемыми среди них являются 18F, 99шТс, 201TI И 1231. Манипуляция с этими радиоактивными изотопами, их получение, выделение и встраивание в молекулу известны специалистам в
данной области.
В частности, радиоактивный атом выбран из группы водорода, углерода, азота, серы, кислорода и галогена. Предпочтительно, радиоактивный атом выбран из группы водорода, углерода и галогена.
В частности, радиоактивный изотоп выбран из группы 3Н, 11С, 18F, 1221 , 1231 , 1251 , 1311 , 75Вг, 76Вг, 77Вг и 82Вг. Предпочтительно, радиоактивный изотоп выбран из группы 3Н, 11С и 18F.
В рамках настоящей заявки Ci-балкил представляет прямой или разветвленный предельный углеводородный радикал с 1-6 атомов углерода, такой как, например, метил, этил, пропил, 2-метил-этил, пентил, гексил и т.п. Предпочтительной подгруппой Ci-балкила является С^алкил, который представляет собой прямой или разветвленный предельный углеводородный радикал с 1-4 атомами углерода, такой как, например, метил, этил, пропил, 2-метил-этил и т.п.
В рамках настоящей заявки Сг-балкенил представляет собой прямой или разветвленный углеводородный радикал с 2-6 атомами углерода, содержащий двойную связь, такой как этенил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил и т.п.; Сг-валкинил прямой или разветвленный углеводородный радикал с 2-6 атомами углерода, содержащий тройную связь, такой как этинил, пропинил, бутинил, пентинил, гексинил и т.п.; Сз-бПиклоалкил представляет собой циклический предельный углеводород с 3-6 атомами углерода и являющийся типичным в отношении циклопропила, циклобутила, циклопентила и циклогексила.
В рамках настоящей заявки галоген представляет собой заместитель, выбранный из группы фтора, хлора, брома и йода. Предпочтительно, галоген представляет собой бром, фтор или хлор; в частности хлор или бром.
В рамках настоящей заявки полигалогенСЧ-балкил определен как моно- или полигалогензамещенный Ci-балкил, например, метил с одним или несколькими атомами фтора, например, дифторметил или трифторметил, 1,1-дифтор-этил и т.п. В случае более одного атома галогена, присоединенного к Ci-балкильной группе, в определении полигалогенС1-балкила они могут быть одинаковыми или
различными.
Представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), имеющему следующую формулу
Представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), имеющему следующую формулу
Представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), где R1 представляет собой водород, циано, карбоксил, галоген, С1-6алкил, С2-балкенил, полигалогенС1-6алкил, гидроксил, гидроксиС1-6алкил, Ci-балкилокси, С1-6алкилтио, амино, моно- или ди (Ci-балкил) амино, аминоС1-балкил, моно- или дтл (С±-6алкил) аминоС1-6алкил, R9bR10bN-C (=0) -, арил, R9aR10aN-, R9aR10aN-С(=0)-, С^алкил-Б (=0) 2~ или Het, в частности R1 представляет собой водород, циано, карбоксил, галоген, С1-6алкил, С2-балкенил, полигалогенС1-балкил, гидроксиС1-балкил, Ci-балкилокси, Ci-6алкилтио, аминоС1-балкил, R9bR10bN-C (=0) -, арил, С^алкил-Б (=0) г~
или Het; более конкретно R1 представляет собой водород, карбоксил, галоген, Ci-балкилтио, аминоСЧ-балкил или Het.
Второй представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или его подгруппе, как упоминается в настоящем документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где р равняется 1 или 2; в частности р равняется 1.
Третий представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (la), (1а-1) или (1а-2), или любой его подгруппе, как упоминается в настоящем документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где R2 представляет собой водород, Ci-балкилокси, Ci-балкилтио, моно-
или ди (Ci-балкил) амино, амино или радикал с формулой , где Y представляет собой СН2, О, S, NH или iV-Ci-балкил; в частности R2 представляет собой Ci-балкилокси, Ci-балкилтио,
моно- или ди (Ci-балкил) амино или радикал с формулой , где
Y представляет собой СН2 или О; более конкретно R2 представляет собой Ci-балкилокси или Ci-балкилтио; конкретнее R2 представляет собой Ci-балкилокси, особенно метилокси.
Четвертый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где R3 представляет собой водород, галоген или Ci-балкил; в частности R3 представляет собой водород.
Пятый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в настоящем документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где R4
представляет собой арил1; в частности R4 представляет собой фенил или нафтил, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из галогена, циано, Ci-балкила, полигалогенСЧ-балкила, Ci-балкилокси, Ci-балкилтио, С1-4алкил-Б (=0) г-; более конкретно R4 представляет собой фенил, необязательно замещенный 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из галогена, циано, Ci-балкила, полигалогенСЧ-балкила, Ci-балкилокси, CV 6алкилтио или С^алкил-Б (=0) г~; конкретнее R4 представляет собой фенил, необязательно замещенным 1 заместителем, при этом указанный заместитель выбран из галогена, циано, С^алкил-S(=0)2_ или Ci-балкилтио.
Шестой представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в настоящем документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где R4 представляет собой Het; в частности R4 представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из ЛЬфеноксипиперидинила, пиперидинила, пиперазинила, пирролила, пиразолила, имидазолила, фуранила, тиенила, оксазолила, изоксазолила, тиазолила, изотиазолила, пиридинила, пиримидинила, пиразинила или пиридазинила; при этом каждый моноциклический гетероцикл необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из галогена, гидрокси, С^алкила или Ci-балкилокси; более конкретно R4 представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из пиперидинила, пиразолила, фуранила или пиридинила, особенно пиразолила или пиридинила; при этом каждый моноциклический гетероцикл необязательно замещен 1 заместителем, выбранным из галогена, гидрокси, Ci-балкила или Ci-балкилокси, в частности гидрокси.
Седьмой представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в настоящем документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где R5
представляет собой арил, арилС1-6алкил, С3-6циклоалкилС1-6алкил, HetCi-балкил, Ci-балкил, гидроксиС^алкил или Сг-балкенил; в частности R5 представляет собой арил, арилС^алкил, Сз-бЦиклоалкилСЧ-балкил, HetCi-балкил, или R5 представляет собой CV 6алкил, гидроксиС1-балкил или Сг-балкенил; более конкретно R5 представляет собой арил или арилС1-балкил; конкретнее R5 представляет собой необязательно замещенный фенил, необязательно замещенный нафтил или фенилС1-балкил, где указанный фенил необязательно замещен; еще конкретнее R5 представляет собой фенил, фенил, замещенный 1 или 2 заместителями, при этом каждый независимо выбран из галогена или Ci-балкила, нафтила, нафтила, замещенного 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или Ci-балкила, фенилС1-6алкила или фенилС1-6алкила, где указанный фенил замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или Ci-балкила; еще конкретнее R5 представляет собой фенил; фенил, замещенный 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или Ci-балкила; фенилС1-6алкила или фенилС1-6алкила, где указанный фенил замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или Ci-балкила; в частности R5 представляет собой фенил; фенил, замещенный 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или Ci-балкила; бензила или бензила, в котором фенильный фрагмент замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или Ci-балкила.
Восьмой представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где R6 представляет собой водород, Ci-балкил, арилС1-балкил, Het1 или -C(=NH)-NH2; в частности R6 представляет собой водород, Ci-балкил или арилС1-6алкил; более конкретно R6 представляет собой водород, С1-6алкил или арилС1-6алкил, где арил представляет собой необязательно замещенный фенил; конкретнее R6 представляет собой водород, Ci_
6алкил или фенилС1-6алкил; еще
водород, Ci-балкил или бензил;
конкретнее R6 представляет собой и особенно R6 представляет собой
водород.
Девятый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где R7 представляет собой водород или этил, a R8 представляет собой оксо; в частности R7 представляет собой водород, a R8 представляет собой оксо.
Десятый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где соединение представляет собой соединение формулы (1а).
Одиннадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где соединение представляет собой соединение формулы (lb).
Двенадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где R1 находится в положении б хинолинового кольца.
Тринадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-
В рамках настоящей заявки хинолиновое кольцо соединений формулы (1а) или (lb) пронумеровано следующим образом:
1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве первого представляющего интерес варианта осуществления, где п равняется 1.
Четырнадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где п равняется 2; и в частности R5 представляет собой Ci-балкил.
Пятнадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где п равняется 1, и R5 находится в положении 2 пиперидинового кольца.
Шестнадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где п равняется 1, и R5 находится в положении 3 пиперидинового кольца.
Семнадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где арил представляет собой нафтил или фенил, более предпочтительно фенил, при этом каждый необязательно замещен одним или двумя заместителями, каждый независимо выбран из галогена, например, хлора; циано; алкила, например, метила; или алкилокси, например, метилокси.
Восемнадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где арил1 представляет собой
нафтил или фенил, более предпочтительно фенил, при этом каждый необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из галогена, например, хлора; Ci-балкила, например, метила; алкилокси, например, метилокси; Ci-балкилтио, например, метилтио; или С^алкил-Б (=0) г-г например, метил-S (=0) г-•
Девятнадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или (lb), (Ia-1) или (Ib-1), или (Ia-2), или (Ib-2), или любой его подгруппе, как упоминается в данном документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, где Het представляет собой пиридинил или пиразолил.
Двадцатый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (1а) или любой его подгруппе, как упоминается в настоящем документе выше, в качестве представляющего интерес варианта осуществления, к которому применимы одно или несколько, предпочтительно все, из следующих определений:
р равняется 1;
п равняется 1;
R1 представляет собой галоген, в частности бром, хлор или фтор; Ci-балкилтио, в частности метилтио; С^алкил-Б (=0) 2~ i в частности метил-S(=0) г-; или Het, в частности пиридинил;
R2 представляет собой Ci-балкилокси, в частности метилокси;
R3 представляет собой водород;
R4 представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном, например, хлором, либо в 3-, либо в 4-положении;
R5 представляет собой арил, в частности фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из галогена, например, фтора, и Ci-балкила, например, метила; арилС1-балкил, например, бензил, необязательно замещенный на фенильном кольце одним или двумя заместителями, выбранными из галогена, например, фтора, и Ci-балкила, например, метила; Сз-бЦиклоалкилС1-балкил, например, Сз-бЦиклоалкилметил, в частности циклогексилметил; HetCi-балкил, например, HetMeTun, в частности пиридинилметил; или Ci-балкил, например, метил; и где R5 находится в положении 2 пиперидинового кольца; и
R6 представляет собой водород.
Двадцать первый представляющий интерес вариант осуществления относится к соединению формулы (lb) или любой его подгруппе, как упоминается в настоящем документе выше в качестве представляющего интерес варианта осуществления, к которому применимы одно или несколько, предпочтительно все, из следующих определений:
р равняется 1;
п равняется 1;
R1 представляет собой галоген, в частности бром, хлор или
фтор;
R3 представляет собой водород;
R4 представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном, например, хлором, либо в 3-, либо в 4-положении;
R5 представляет собой С3-6циклоалкилС1-6алкил, например, С3-6циклоалкилметил, в частности циклогексилметил;
R6 представляет собой водород;
R7 представляет собой водород; а
R8 представляет собой оксо.
Как указано выше, соединение формулы (1а) или (lb) имеет два или три хиральных центра и поэтому способно формировать, соответственно, четыре или восемь энантиомеров. Если соединение формулы (1а) или (lb) получают реакцией хинолинового производного и пиперидонового производного, как описано ниже, то конфигурация заместителя R5 на пиперидиновом кольце может быть известна либо из литературы, либо из способа синтеза, т.е. представляет собой R или S конфигурацию для чистого соединения, или может быть неизвестна, т.е. представляет собой R* или S* конфигурацию для чистого соединения, в результате потенциальные стереоизомеры ограничиваются максимум до четырех, что таким образом облегчает разделение и выделение таких изомеров.
Цис и транс конфигурацию чистых изомеров определяют протонным ЯМР. Такие чистые изомеры обозначают в настоящем документе как 1, 2, 3 или 4 согласно порядку, в котором их разделяют и выделяют в протоколе синтеза, например, путем хроматографии. Такие обозначения делают в отношении либо
протокола синтеза, осуществляемого в последнем этапе, если разделение и выделение происходит во время этого этапа, либо протокола, осуществляемого на более раннем этапе, если разделение и выделение происходит на этом этапе, и на последнем этапе используют отделенный и выделенный чистый стереоизомер. Для однозначной идентификации соответствующего стереоизомера протокол синтеза, в частности условия хроматографии, при которых отделяют и выделяют соответствующий стереоизомер, приводят в настоящем документе для каждого такого соединения.
Соединения формулы (1а) или (lb) также могут быть получены в виде смеси двух энантиомеров. Предпочтительно получать соединения стереоспецифическим способом так, что, например, асимметричный атом углерода, несущий заместитель(и) R5 на пиперидиновом кольце, имеет известную абсолютную конфигурацию (например, 2R или 2S) или неизвестную чистую абсолютную конфигурацию (например, 2R* или 2S*), в результате потенциальные стереоизомеры ограничиваются максимум до четырех, что таким образом облегчает разделение и выделение таких изомеров. Если чистые изомеры не разделяется физически, то смесь двух энантиомеров обозначают как А или В. А или В зависит либо от первого выделенного в протоколе синтеза (т.е. А), либо от второго (т.е. В).
В некоторых случаях можно получать смесь двух изомеров неопределенной абсолютной конфигурации. Такие смеси могут быть идентифицированы как Ml, М2, МЗ или М4, если атом углерода, несущий заместитель R5 на пиперидиновом кольце, характеризуется смесью RS изомеров.
Такие смеси могут быть идентифицированы как S1 или S2, если атом углерода, несущий два идентичных заместителя R5, на пиперидиновом кольце, характеризуется смесью неизвестных изомеров. Эти смеси нумеруют согласно порядку, в котором их разделяют и выделяют в протоколе синтеза.
Предпочтительные соединения в соответствии с настоящим изобретением выбраны из следующих соединений:
[он
ll 1 T \ NH
I с
\ /NH
N^J
(2R),транс-3
(2R*),цис-1
CI F
T он [R*
Br - -iviA
L J\ J\ L /NH
//NH
|s*
(3R*) , (B)
(2S*),цис-1
[CH
ll 1 1 x-^/K4"-1 \^^^^^r^o A
\ /NH y*R
(2R),транс-3
(2R*),цис-2
T OH
1. /X. L ^NH
JMH
(2S*),цис-2
(2R),цис-1
;2R*),цис-3
!2S) ,цис-4
в том числе их любая стереохимически изомерная форма; их Л/-оксид, их фармацевтически приемлемая соль или их сольват. ФАРМАКОЛОГИЯ
Было показано, что соединения согласно настоящему изобретению можно применять для лечения бактериальной инфекции, включая микобактериальную инфекцию, особенно заболеваний, вызванных патогенными микобактериями, такими как Mycobacterium tuberculosis (включая его латентную и устойчивую к лекарственным средствам форму), М. bovis, М. avium, М. leprae и М. marinum. Таким образом, настоящее изобретение также относится к соединениям формулы (1а) или (lb), как определено в настоящем документе выше, и их стереохимически изомерным формам, их фармацевтически приемлемым солям или их N-оксидным формам, или их сольватам для использования в качестве лекарственного препарата, в частности, для использования в качестве лекарственного препарата для лечения бактериальной инфекции, включая микобактериальную инфекцию.
Кроме того, настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (1а) или (lb) и его стереохимически изомерных форм, его фармацевтически приемлемых солей или его ЛЬоксидных форм, или его сольватов, а также к их применению в качестве любой из фармацевтических композиций, как описано выше в данном документе, для производства лекарственного препарата для лечения бактериальной инфекции, включая микобактериальную инфекцию.
Соответственно, в другом аспекте настоящее изобретение предлагает способ лечения пациента, страдающего от бактериальной инфекции, включая микобактериальную инфекцию, или
подверженному риску таковой, который предусматривает введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением.
Помимо их активности в отношении микобактерий соединения в
соответствии с настоящим изобретением также активны в отношении
других бактерий. В общем, бактериальные патогены можно
классифицировать либо как грамположительные, либо как
грамотрицательные патогены. Соединения-антибиотики с
активностью в отношении как грамположительных, так и
грамотрицательных патогенов обычно рассматривают как обладающие
широким спектром действия. Соединения по настоящему изобретению
рассматривают как активные в отношении грамположительных и/или
грамотрицательных бактериальных патогенов, в частности в
отношении грамположительных бактериальных патогенов. В
частности, соединения по настоящему изобретению являются
активными в отношении по меньшей мере одной грамположительной
бактерии, предпочтительно в отношении нескольких
грамотрицательных бактерий, более предпочтительно в отношении одной или нескольких грамположительных бактерий и/или одной или нескольких грамотрицательных бактерий.
Соединения по настоящему изобретению обладают бактерицидной или бактериостатической активностью.
Примеры грамположительных и грамотрицательных аэробных и анаэробных бактерий включают Staphylococci, например S. aureus; Enterococci, например Е.faecalis; Streptococci, например, S. pneumoniae, S. mutans, S. pyogens; Bacilli, например Bacillus subtilis; Listeria, например Listeria monocytogenes; Haemophilus, например Я. influenza; Moraxella, например M. catarrhalis; Pseudomonas, например Pseudomonas aeruginosa; и Escherichia, например E. coli.
Грамположительные патогены, например, Staphylococci, Enterococci и Streptococci, особенно важны из-за развития устойчивости штаммов, которые трудно как лечить, так и искоренять, например, в больничной среде, при их возникновении. Примерами таких штаммов являются метициллин-устойчивый
Staphylococcus aureus (MRSA), метициллин-устойчивые коагулаза-отрицательные стафилококки (MRCNS), пенициллин-устойчивый Streptococcus pneumoniae и устойчивый к нескольким лекарственным средствам Enterococcus faecium.
Соединения по настоящему изобретению также демонстрируют активность в отношении устойчивых бактериальных штаммов.
Соединения в соответствии с настоящим изобретением особенно активны против Streptococcus pneumoniae и Staphylococcus aureus, в том числе устойчивого Staphylococcus aureus, такого как, например, метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus (MRSA).
Следовательно, настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (1а) или (lb) и его стереохимически изомерных форм, его фармацевтически приемлемых солей или его N-оксидных форм, или его сольватов, а также к их применению в качестве любой из фармацевтических композиций, как описано выше в данном документе, для производства лекарственного препарата для лечения бактериальной инфекции, включая инфекцию, вызванную Staphylococci и/или Streptococci.
Соответственно, в другом аспекте настоящее изобретение
предлагает способ лечения пациента, страдающего от
бактериальной инфекции, включая инфекцию, вызванную
Staphylococci и/или Streptococci, или подверженный риску
таковых, который предусматривает введение пациенту
терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением.
Без привязки к какой-либо теории можно предположить, что активность соединений по настоящему изобретению основана на ингибировании FlFO-АТФ-синтазы, в частности, ингибировании комплекса F0 в FlFO-АТФ-синтазе, более конкретно, ингибировании субъединицы с комплекса F0 в FlFO-АТФ-синтазе, приводя к уничтожению бактерий путем истощения уровней клеточной АТФ бактерий. Поэтому, в частности соединения по настоящему изобретению активны в отношении тех бактерий, жизнеспособность которых зависит от нормального функционирования FIFO-АТФ
синтазы.
Бактериальные инфекции, которые можно лечить соединениями
по настоящему изобретению, включают, например, инфекции
центральной нервной системы, инфекции наружного уха, инфекции
среднего уха, такие как острый средний отит, инфекции черепных
пазух, глазные инфекции, инфекции ротовой полости, такие как
инфекции зубов, десен и слизистой оболочки, инфекции верхних
дыхательных путей, инфекции нижних дыхательных путей,
мочеполовые инфекции, желудочно-кишечные инфекции,
гинекологические инфекции, септицемию, инфекции костей и
суставов, инфекции кожи и подкожной клетчатки, бактериальный
эндокардит, ожоги, антибактериальную профилактику хирургической
операции и антибактериальную профилактику у пациентов с
ослабленным иммунитетом, таких как пациенты, получающие
противораковую химиотерапию, или пациенты с
трансплантированными органами.
Всякий раз, когда в данном документе выше или ниже идет речь о том, что соединения могут лечить бактериальную инфекцию, это означает, что соединения могут лечить инфекцию, вызванную одним или несколькими бактериальными штаммами.
Настоящее изобретение также относится к композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с настоящим изобретением. Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть сформулированы в различных фармацевтических формах в целях введения. В качестве подходящих композиций могут быть упомянуты все композиции, обычно используемые для системного введения лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций по настоящему изобретению эффективное количество конкретного соединения, необязательно в форме соли присоединения, в качестве активного ингредиента объединяется в однородную смесь с фармацевтически приемлемым носителем, при этом носитель может принимать широкое разнообразие форм в зависимости от формы препарата, требуемого для введения. Эти фармацевтические композиции желательны в форме единичных доз,
пригодных, в частности для введения перорально или путем парентерального введения. Например, при получении композиций в пероральной лекарственной форме, может быть использована любая из обычных фармацевтических сред, например, вода, гликоли, масла, спирты и тому подобные, в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как воски, сахара, каолин, разбавители, смазывающие вещества, связующие, разрыхлители и тому подобные, в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Из-за простоты их введения, таблетки и капсулы представляют наиболее удобные пероральные единицы дозирования, в таком случае, очевидно, используют твердые фармацевтические носители. Для парентеральных композиций носитель будет, как правило, по меньшей мере в значительной степени содержать стерильную воду, хотя может содержать и другие ингредиенты, например, для улучшения растворимости. Например, могут быть получены растворы для инъекций, в которых носитель включает физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Также могут быть получены суспензии для инъекций, в случае которых могут использоваться подходящие жидкие носители, суспендирующие средства и т.п. Также включены препараты в твердой форме, которые предназначены для преобразования, непосредственно перед применением, в препараты в жидкой форме.
В зависимости от режима введения фармацевтическая композиция будет предпочтительно содержать от 0,05 до 99 вес. %, более предпочтительно от 0,1 до 70 вес. %, еще более предпочтительно от 0,1 до 50 вес. % соединения формулы (I), и от 1 до 99,95 вес. %, более предпочтительно от 30 до 99,9 вес. %, еще более предпочтительно от 50 до 99,9 вес. % фармацевтически приемлемого носителя, при этом все процентные соотношения берутся, исходя из общего веса композиции.
Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать другие разнообразные ингредиенты, известные в данной области техники, например, смазка, стабилизирующий агент, буферный агент, эмульгатор, агент, регулирующий вязкость, поверхностно
активное средство, консервант, ароматизатор или краситель.
Особенно предпочтительно составление вышеуказанных фармацевтических композиций в единичной лекарственной форме для простоты введения и равномерности дозирования. Единичная лекарственная форма, применяемая в настоящем документе, относится к физически отдельным единицам, подходящим в качестве единичных доз, при этом каждая единица содержит предварительно установленное количество активного ингредиента, рассчитанное для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных лекарственных форм являются таблетки (включая делимые таблетки или таблетки, покрытые оболочкой), капсулы, пилюли, пакеты для порошкообразного продукта, пластинки, суппозитории, инъекционные растворы или суспензии и т.п., и их отдельное кратное количество.
Суточная доза соединения в соответствии с настоящим изобретением будет, конечно, варьировать в зависимости от используемого соединения, режима введения, требуемого лечения и от указанного микобактериального заболевания. Однако, в целом, удовлетворительные результаты будут получены, если соединение в соответствии с настоящим изобретением вводится в дневной дозе, не превышающей 1 грамм, например, в диапазоне от 10 до 50 мг/кг массы тела.
Учитывая тот факт, что соединения формулы (1а) или формулы (lb) активны в отношении бактериальных инфекций, соединения по настоящему изобретению можно комбинировать с другими антибактериальными средствами в целях эффективной борьбы с бактериальными инфекциями.
Следовательно, настоящее изобретение также относится к комбинации (а) соединения в соответствии с настоящим изобретением и (Ь) одного или нескольких других антибактериальных средств.
Настоящее изобретение также относится к комбинации (а) соединения в соответствии с настоящим изобретением и (Ь) одного или нескольких других антибактериальных средств для использования в качестве лекарственного препарата.
Настоящее изобретение также относится к применению комбинации или фармацевтической композиции, как указано непосредственно выше, для лечения бактериальной инфекции.
Фармацевтическая композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного ингредиента, терапевтически эффективное количество (а) соединения в соответствии с настоящим изобретением и (Ь) один или несколько других антибактериальных средств, также включена в настоящее изобретение.
Весовое соотношение (а) соединения в соответствии с настоящим изобретением и (Ь) другого антибактериального средства(средств), если дано в виде комбинации, может быть определено специалистом в данной области техники. Указанное соотношение и точная дозировка, и частота введения зависит от конкретного применяемого соединения в соответствии с настоящим изобретением и другого антибактериального средства (средств), конкретного состояния, лечение которого осуществляют, тяжести состояния, лечение которого осуществляют, возраста, веса, пола, диеты, времени введения и общего физического состояния конкретного пациента, режима введения, также как другие лекарственные средства, которые индивидуум может применять, как хорошо известные специалисту в данной области техники. Более того, является очевидным, что эффективное суточное количество может быть снижено или увеличено в зависимости от реакции подвергаемого лечению субъекта и/или в зависимости от оценки врача, назначающего соединения настоящего изобретения. Конкретное весовое соотношение для данного соединения формулы (1а) или (lb) и другого антибактериального средства может варьировать от 1/10 до 10/1, более предпочтительно от 1/5 до 5/1, даже более предпочтительно от 1/3 до 3/1.
Соединения в соответствии с настоящим изобретением и одно или несколько других антибактериальных средств можно сочетать в единой лекарственной форме или их можно составлять в отдельных лекарственных формах таким образом, чтобы вводить одновременно, раздельно или последовательно. Таким образом, настоящее изобретение также относится к продукту, содержащему (а)
соединение в соответствии с настоящим изобретением и (Ь) одно или несколько других антибактериальных средств, в качестве комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении бактериальных инфекций.
Другие антибактериальные средства, которые можно
комбинировать с соединениями формулы (1а) или (lb), являются,
например, антибактериальными средствами, известными в уровне
техники. Другие антибактериальные средства включают антибиотики
группы |3-лактамов, такие как пенициллины природного
происхождения, полусинтетические пенициллины, цефалоспорины
природного происхождения, полусинтетические цефалоспорины,
цефамицины, 1-оксацефемы, клавулановые кислоты, пенемы,
карбапенемы, нокардицины, монобактамы; тетрациклины,
ангидротетрациклины, антрациклины; аминогликозиды; нуклеозиды, такие как ЛЬнуклеозиды, С-нуклеозиды, карбоциклические нуклеозиды, бластицидин S; макролиды, такие как макролиды с 12-членным кольцом,
макролиды с 14-членным кольцом, макролиды с 1б-членным
кольцом; ансамицины; пептиды, такие как блеомицины,
грамицидины, полимиксины, бацитрацины, пептидные антибиотики с
большим кольцом, содержащие лактоновые связи, актиномицины,
амфомицин, капреомицин, дистамицин, ендурацидины, микамицин,
неокарциностатин, стендомицин, БИОМИЦИН, виргиниамицин;
циклогексимид; циклосерин; вариотин; саркомицин А; новобиоцин;
гризеофульвин; хлорамфеникол; митомицины; фумагиллин;
моненсины; пирролнитрин; фосфомицин; фузидовая кислота; D- (п-гидроксифенил)глицин; D-фенилглицин; энедиины.
Конкретными антибиотиками, которые можно комбинировать с
соединениями по настоящему изобретению формулы (1а) или (lb),
являются, например, бензилпенициллин (калия, прокаин,
бензатин), феноксиметилпенициллин (калия), фенетициллин калия,
пропициллин, карбенициллин (динатрия, фенилнатрия,
инданилнатрия), сулбенициллин, тикарциллин динатрия, метициллин натрия, оксациллин натрия, клоксациллин натрия, диклоксациллин, флюклоксациллин, ампициллин, мезлоциллин, пиперациллин натрия,
амоксициллин, циклациллин, гектациллин, сульбактам натрия,
талампициллин гидрохлорид, бакампициллин гидрохлорид,
пивмециллинам, цефалексин, цефаклор, цефалоглицин, цефадроксил,
цефрадин, цефроксадин, цефапирин натрия, цефалотин натрия,
цефацетрил натрия, цефсулодин натрия, цефалоридин, цефатризин,
цефоперазон натрия, цефамандол, цефотиама гидрохлорид,
цефазолин натрия, цефтизоксим натрия, цефотаксим натрия,
цефменоксима гидрохлорид, цефуроксим, цефтриаксон натрия,
цефтазидим, цефокситин, цефметазол, цефотетан, латамоксеф,
клавулановая кислота, имипенем, азтреонам, тетрациклин,
хлортетрациклина гидрохлорид, деметилхлортетрациклин,
окситетрациклин, метациклин, доксициклин, ролитетрациклин,
миноциклин, даунорубицина гидрохлорид, доксорубицин,
акларубицин, канамицина сульфат, беканамицин, тобрамицин,
гентамицина сульфат, дибекацин, амикацин, микрономицин,
рибостамицин, неомицина сульфат, паромомицина сульфат,
стрептомицина сульфат, дигидрострептомицин, дестомицин А,
гигромицин В, апрамицин, сизомицин, нетилмицина сульфат,
спектиномицина гидрохлорид, астромицина сульфат, валидамицин,
касугамицин, полиоксин, бластицидин S, эритромицин,
эритромицина эстолат, олеандомицина фосфат,
трацетилолеандомицин, китасамицин, джозамицин, спирамицин,
тилозин, ивермектин, мидекамицин, блеомицин сульфат, пепломицин
сульфат, грамицидин S, полимиксин В, бацитрацин, колистина
сульфат, колистинметансульфонат натрия, энрамицин, микамицин,
виргиниамицин, капреомицин сульфат, БИОМИЦИН, ЭНВИОМИЦИН,
ванкомицин, актиномицин D, неокарциностатин, бестатин,
пепстатин, монензин, лазалоцид, салиномицин, амфотерицин В,
нистатин, натамицин, трикомицин, митрамицин, линкомицин,
клиндамицин, клиндамицина пальмитат гидрохлорид,
флавофосфолипол, циклосерин, пецилоцин, гризеофульвин, хлорамфеникол, хлорамфеникола пальмитат, митомицин С, пирролнитрин, фосфомицин, фузидовая кислота, бикозамицин, тиамулин, сикканин.
Другими антимикобактериальными средствами, которые можно комбинировать с соединениями формулы (1а) или (lb), являются,
например, рифампицин (=рифампин); изониазид; пиразинамид;
амикацин; этионамид; этамбутол; стрептомицин; пара-
аминосалициловая кислота; циклосерин; капреомицин; канамицин;
тиоацетазон; РА-824; хинолоны/фторхинолоны, такие как,
например, моксифлоксацин, гатифлоксацин, офлоксацин,
ципрофлоксацин, спарфлоксацин; макролиды, такие как, например, клэритромицин, клофазимин, амоксициллин с клавулановой кислотой; рифамицины; рифабутин; рифапентин; соединения, раскрытые в WO2004/011436. ОБЩЕЕ ПОЛУЧЕНИЕ
Соединения согласно настоящему изобретению в большинстве случаев можно получать при помощи последовательности этапов, каждый из которых известен квалифицированному специалисту.
Соединения формулы (1а), где R6 представляет собой
водород, при этом указанные соединения, представленные формулой
(1а-1), можно получить путем удаления защитной группы
промежуточного соединения формулы (11-а), где Р1 представляет
собой подходящую защитную группу, такую как Ci_
6алкилоксикарбонильную группу, а именно трет-
бутоксикарбонильную группу, с помощью, например, подходящей
кислоты, такой как трифторуксусная кислота или
хлористоводородная кислота, в подходящем растворителе, таком как дихлорметан или изо-пропанол; альтернативно, Р1 может представлять собой арилС1-балкилоксикарбонильную группу, такую как бензилоксикарбонил, и снятие защитной группы можно провести путем обработки трибромидом бора в подходящем растворителе, таком как дихлорметан.
Соединения формулы (lb), где R представляет собой водород, R7 представляет собой водород и R8 представляет собой оксо, при этом указанные соединения, представленные формулой (Ib-2), можно получить путем удаления защитных групп
промежуточного соединения формулы (На) с помощью подходящей
кислоты, например, хлористоводородной кислоты или
трифторуксусной кислоты, в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран или изо-пропанол.
Соединения формулы (1а), где R5 представляет собой
гидроксиметильную группу, при этом указанные соединения
представлены формулой (Ia-З), могут быть получены путем
обработки промежуточного соединения формулы (IV-a), где Р3
представляет собой приемлемую защитную группу, такую как
алкилсилильная группа, например, трет-бутилдиметилсилильная
группа, солью четвертичного аммония, такой как
тетрабутиламмония хлорид, в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран.
Соединения формулы (1а) можно получить путем реакции промежуточного соединения формулы (Va) с соединением формулы (Via), например, в присутствии н-бутил-лития в гексане в системе растворителей, содержащих, например, диизопропиламин в тетрагидрофуране. В качестве альтернативы, реакцию можно выполнять в присутствии, например, н-бутил-лития в растворе N-(1-метилэтил)-2-пропанамина в тетрагидрофуране. Обе реакции предпочтительно выполняют при низкой температуре, например, от приблизительно -7 0° до -7 8°С.
(Va) (Via) (la)
Принято считать, что специалисту в данной области известны соответствующие температуры, разбавления и время реакций для оптимизации указанных выше реакций в целях получения желаемого соединения.
Соединения формулы (1а) или (lb) можно, кроме того, получать путем превращения соединений формулы (1а) или (lb) друг в друга согласно известным в уровне техники реакциям превращения.
Соединения формулы (1а) или (lb) могут быть превращены в
соответствующие ЛЬоксидные формы в соответствии с известными в
уровне техники процедурами для превращения трехвалентного азота
в его ЛЬоксидную форму. Указанную реакцию ЛЬокисления можно
обычно осуществлять путем реакции исходного материала формулы
(1а) или (lb) с подходящим органическим или неорганическим
пероксидом. Соответствующие неорганические пероксиды включают,
например, пероксид водорода, пероксиды щелочных металлов или
щелочноземельных металлов, например, пероксид натрия, пероксид
калия; соответствующие органические пероксиды могут включать
пероксикислоты, такие как, например, бензолкарбопероксокислота
или галоген-замещенная бензолкарбопероксокислота, например 3-
хлорбензолекарбопероксокислота, пероксоалкановые кислоты,
например, пероксоуксусная кислота, алкилгидропероксиды,
например, гидро-пероксид трет-бутила. Подходящими
растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например, этанол и подобные, углеводороды, например, толуол, кетоны, например, 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например, дихлорметан, и смеси этих растворителей.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет галоген, например бром, могут быть превращены в соединение формулы (1а) или (lb), где R1 представляет Het, путем реакции с
Het-B(OH)2 в присутствии приемлемого катализатора, такого как, например, Рс1(0Ас)2 или Рс1(РРпз)4, в присутствии приемлемого основания, такого как, например, К3РО4 или ЫагСОз, и приемлемого растворителя, такого как, например, толуол или 1,2-диметоксиэтан (DME).
Аналогичным образом, соединения формулы (1а) или (lb), в которых R1 представляет собой галоген, например бром, могут быть превращены в соединения формулы (1а) или (lb), в которых R1 представляет собой алкил, например, метил, путем обработки соответствующим алкилирующим средством, таким как СНзВ(ОН)г или (СНз)4Бп, в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, Рс1(РРпз)4, в подходящем растворителе, таком как, например, толуол или 1,2-диметоксиэтан (DME).
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой галоген, в частности бром или арилС^алкил, могут быть превращены в соединение (1а) или (lb), где R1 представляет собой водород, путем реакции с HCOONH4 в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, палладий/на угле, и в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например, метанол. В качестве альтернативы, такое превращение можно выполнять с использованием, например, н-бутил-лития в подходящем растворителе, таком как диэтиловый эфир.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой галоген, в частности бром или хлор, a R6 представляет собой отличное от водорода, например, арилС^алкильную группу, такую как 1-этилфенил, могут быть превращены в соединение формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой водород и R6 представляет собой водород, путем гидрогенизации с палладием/на угле в присутствии уксусной кислоты в подходящем растворителе, таком как метанол.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой галоген, в частности бром, могут быть так же превращены в соединение, где R1 представляет собой формил, путем реакции с N, ЛЬдиметилформамидом в присутствии н-бутил-лития и подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран. Затем эти
соединения можно превращать в соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой -СНг-ОН, путем реакции с подходящим восстановителем, таким как, например, ЫаВЩ, и в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, спирт, например метанол, и тетрагидрофурана.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой Сг-балкенил, можно получить путем реакции соединения с формулой (1а) или (lb), где R1 представляет собой галоген, например, бром и т.п., с трибутил(Сг-балкенил)оловом, таким как, например, трибутил(винил)олово, в присутствии подходящего катализатора, такого как, например, Рс1(РРпз)4, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, N, N-диметилформамид. Предпочтительно данную реакцию проводят при повышенной температуре.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет
собой R9aR10aN-, могут быть получены из соединения формулы (1а)
или (lb), где R1 представляет собой галоген, например бром и
т.п., путем реакции с R9aR10aNH или его функциональным
производным в присутствии подходящего катализатора, такого как,
например, трис(дибензилиденацетон)палладий, подходящего
лиганда, такого как, например, 2-(ди-т-бутилфосфино)бифенил,
подходящего основания, такого как, например, натрия т-бутоксид,
и подходящего растворителя, такого как, например, толуол.
Например, если R1 представляет собой пиридинил, то исходное
указанное соединение формулы (1а) или (lb) может вступать в
реакцию с соединением на основе пиридина, таким как сложный
1,3-пропандиоловый циклический эфир бороновой кислоты, в
присутствии подходящего катализатора, такого как
тетракис(трифенилфосфин)-палладий, и подходящего основания, такого как карбонат калия, и в подходящем растворителе, таком как 1,2-диметоксиэтан.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой -C=N-OR11, можно получить из соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой формил, путем реакции с гидроксиламина гидрохлоридом или Ci-балкоксиламина гидрохлоридом в присутствии подходящего растворителя, такого как, например,
пиридин.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет
собой -CH2-NH2, могут быть получены из соединения формулы (1а)
или (lb), где К1представляет собой формил, путем восстановления
в присутствии Н2, подходящего катализатора, такого как,
например, палладий/на угле, и подходящего растворителя, такого
как, например, NH3/спирт, например ЫНз/метанол. Соединения
формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой -CH2-NH2, могут
быть превращены в соединение формулы (1а) или (lb), где R1
представляет собой -CH2-N (Ci-балкил) 2, путем реакции с подходящим
альдегидным или кетонным реагентом, таким как, например,
параформальдегид или формальдегид, в присутствии
цианоборгидрида натрия, укусусной кислоты и подходящего растворителя, такого как, например, ацетонитрил.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой R9aR10aN-CH2-, могут быть получены путем реакции соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой формил, с подходящим реагентом формулы R9aR10aN-H в присутствии подходящего восстановителя, такого как, например, BH3CN, подходящего растворителя, такого как, например, ацетонитрил и тетрагидрофуран, и подходящей кислоты, такой как, например, уксусная кислота.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой амино, могут быть получены путем реакции соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой карбоксил, с подходящим азидом, таким как, например, дифенилфосфорилазид (DPPA), в подходящем растворителе, таком как, например, толуол. Полученный продукт подвергают реакции Курциуса, и путем добавления триметилсилилэтанола образуется карбаматное промежуточное соединение. В следующем этапе осуществляют реакцию данного промежуточного соединения с тетрабутиламмония бромидом (ТВАВ) в подходящем растворителе, таком как, например, тетрагидрофуран, для получения аминопроизводного.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой аминокарбонил, моно или ди(алкил)аминокарбонил или R9aR10aN-C (=0) -, могут быть получены путем реакции соединения
формулы (la) или (lb), где R1 представляет собой карбоксил, с подходящим амином, подходящим связывающим реагентом, таким как, например, гидроксибензотриазол, подходящим активирующим реагентом, таким как, например, 1,1'-карбонилдиимидазол, или N,N'-дициклогексилкарбодиимид, или 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид, подходящим основанием, таким как, например, триэтиламин, и подходящим растворителем, таким как, например, тетрагидрофуран и метиленхлорид.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой арилкарбонил, могут быть получены путем реакции в первом этапе (а) соединения формулы (1а) или (lb), где R1 представляет собой галоген, например бром и т.п., путем реакции с подходящим арилальдегидом в присутствии н-бутил-лития и подходящего растворителя, такого как, например, тетрагидрофуран. Данную реакцию предпочтительно проводят при низкой температуре, такой как, например, -70°С. В следующем этапе (Ь) продукт, полученный в этапе (а), подвергают окислению подходящим окислителем, таким как, например, оксид марганца, в присутствии подходящего растворителя, такого как, например, метиленхлорид.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R4 представляет собой фенил, замещенный галогеном, могут быть превращены в соединение формулы (1а) или (lb), где R4 представляет собой фенил, замещенный Het, путем реакции с Het-B(OH)2 в присутствии подходящего катализатор, такого как, например, Pd(PPh3)4, в присутствии подходящего основания, такого как, например, Na2CC> 3, а также подходящего растворителя, такого как, например, толуол или 1,2-диметоксиэтан (DME), и спирта, например метанола.
Соединения формулы (1а), где R2 представляет собой
метокси, могут быть превращены в соответствующее соединение
формулы (lb), где R8 представляет собой водород, a R9
представляет собой оксо, путем гидролиза в присутствии
соответствующей кислоты, такой как, например,
хлористоводородная кислота, и подходящего растворителя, такого как, например, диоксан или тетрагидрофуран.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R6 представляет собой водород, могут быть превращены в соответствующие
соединения формулы (la) или (lb), где R6 представляет собой отличное от водорода, с использованием стандартных методик. Например, соединение формулы (1а) или (lb), где R6 представляет собой Ci-балкил, может быть получено путем алкилирования соединения формулы (1а) или (lb), где R6 представляет собой водород, например, в случае, если R6 представляет собой метил, путем обработки водным раствором формальдегида в присутствии триацетоксиборгидрида натрия в подходящем растворителе, таком как дихлорметан.
Соединения формулы (1а) или (lb), где R6 представляет собой отличное от водорода, могут быть превращены в соответствующее соединение формулы (1а) или (lb), где R6 представляет собой водород, с использованием стандартных методик. Например, соединение формулы (1а) или (lb), где R6 представляет собой арилС^алкильную группу, например этил-1-фенильную группу, может быть превращен в соответствующее соединение формулы (1а) или (lb), где R6 представляет собой водород, путем гидрогенизации в присутствии палладия/на угле в подходящем растворителе, таком как метанол.
Очевидно, что в предыдущих и в последующих реакциях продукты реакции можно выделить из реакционой среды и при необходимости подвергнуть дополнительной очистке в соответствии с методиками, которые в целом известны в уровне техники, как например, экстракция, кристаллизация и хроматография. Кроме того, очевидно, что продукты реакции, которые существуют в более, чем одной энантиометрической форме, могут быть выделены из их смеси путем известных методик, в частности препаративной хроматографией, такой как препаративная HPLC, хиральная хроматография. Отдельные диастереоизомеры или отдельные энантиомеры могут также быть получены путем сверхкритической жидкостной хроматографии (SCF).
Исходные вещества и промежуточные соединения являются соединениями, которые либо коммерчески доступны, либо могут быть получены в соответствии со стандартными реакционными процедурами, общеизвестными в уровне техники. Соединения пиперидона, используемые в качестве исходных материалов в
вышеупомянутых
способах,
можно
получить,
например,
соответствии с процедурами, описанными в Xiaocong М. Ye el, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 20 (2010) 2195-2199, Michel Guillaume et al, Organic Process Research and Development 2007, 11, 1079-1086 и WO 2005/123081. Различные процедуры получения соединений, используемых в качестве исходных материалов на основе хинолина, раскрыты в WO описаниях, на которые ссылаются выше.
В частности, промежуточные соединения (II-а) могут быть получены в соответствии со следующей схемой реакции (1):
Схема 1
(с)
В реакционной схеме (1) соединение хинолина вступает в реакцию с производным пиперидин-4-она, например, с н-бутил-литием в гексане в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
Исходный материал хинолина, используемый в схеме (1), может быть получен стандартным способом, например, согласно следующей схеме (1-а), если R3 представляет собой водород:
Схема 1-а
В схеме (1-а) этап (а) предусматривает циклизацию соединения бензолпропанамида с превращением оксогруппы в галогеновую (Hal) группу, предпочтительно хлор, например, путем обработки оксихлорида фосфора в подходящем растворителе, таком как диметилформамид.
На этапе (Ь) полученную галогеновую (Hal) группу можно превратить в соответствующую R2-rpynny при помощи стандартного способа, например, обработкой соединением алкоксида, таким как
метилат натрия, с образованием Ci-балкилокси-группы, в частности метилокси-группы, в подходящем растворителе, таком как метанол.
Исходный материал хинолина, используемый в схеме (1), может быть получен стандартным способом, например, согласно следующей схеме (1-а), если R3 представляет собой галоген, в частности хлор:
реакцию
Схема 1-Ь
производного аминобензола с производным гидрокоричной кислоты в присутствии галогенирующего средства, в частности хлорирующего средства, такого как трихлорид фосфора, при повышенной
температуре в течение, например, приблизительно 80°С.
На этапе (Ь) 2-Hal группа может быть превращена в требуемую R2-rpynny с помощью стандартного способа, например, с помощью соответствующего алкоксилирующего средства, такого как алкоголят натрия, например метилата натрия, для введения алкилоксигруппы, предпочтительно в подходящем растворителе, таком как метанол.
Исходный материал хинолина, используемый в схеме (1), может быть получен согласно следующей схеме (1-е), если R3 представляет собой алкил, арил или Het:
Схема 1-е
В схеме (1-е) этап (а) предусматривает реакцию аминофенилалканона с соответствующим сложным алкиловым (alk) эфиром |3-оксобензол (или гетероциклил) -пропановой кислоты, предпочтительно сложным эфиром бензолпропановой кислоты, например сложным этиловым эфиром, при повышенной температуре, например приблизительно 18 0°С.
На этапе (Ь) полученное производное хинолина восстанавливают с превращением оксо-группы, соединенной в 3-положении хинолинового ядра с метиленовой (-СН2-) группой, например, путем реакции с гидразином в подходящем растворителе, таком как 1,2-этандиол, предпочтительно при повышенной температуре, такой как приблизительно 100°С, с последующим присоединением основания, такого как гидроксид калия.
На этапе (с) 2-оксо-группа может быть превращена в галогеновую (Hal) группу, например хлор-группу, при помощи стандартного способа путем обработки соответствующим галогенирующим средством, таким как оксихлорид фосфора, в присутствии бензилтриметиламмония хлорида в соответствующем растворителе, таком как ацетон, предпочтительно при повышенной температуре, такой как 80°С.
На этапе (с!) 2-галогеновая группа может быть превращена в требуемую R2-rpynny с помощью соответствующего алкоксилирующего средства, такого как алкоголят натрия, например метилата натрия, для введения алкилоксигруппы, предпочтительно в
подходящем растворителе, таком как метанол.
Производные пиперидин-4-она, используемые в схеме (1), в общем известны и могут быть получены с помощью способов, известных в литературе или аналогичных известным. Например, такие производные могут быть получены в соответствии со следующей схемой реакции (2).
Схема 2
(R5)n (R5)n (R5)n
На этапе (а) производное пиперидина, в котором Р4, представляющий группу-предшественник для оксо-группы, такой как С^алкилендиоксидиокси-группа, в частности 1,2-этилендиокси-группа, обрабатывают для превращения группы-предшественника в требуемую оксо-группу, например, путем обработки кислотой, такой как хлористоводородная кислота, для осуществления превращения С^алкилдиокси-группы в оксо-группу. На этапе (Ь) защитная группа Р1 может быть введена стандартным способом. Таким образом, например, если группа Р1 представляет собой CV балкилоксикарбонильную группу, то соединение пиперидин-4-она может вступать в реакцию с соответствующим ди-Ci-балкилдикарбонатом, таким как ди-трет-бутилдикарбонат, в присутствии основания, такого как триэтиламин, и в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
Этот способ особенно приемлем для получения соединения, в котором R5 представляет собой циклогексилметильную группу, при этом исходное соединение, полученное путем восстановления соответствующего фенилметильного соединения, например, путем гидрогенизирования в присутствии катализатора рений/алюминия оксид и в приемлемом растворителе, таком как метанол.
В качестве альтернативы, вышеуказанное производное пиперидин-4-она может быть получено путем восстановления соответствующего соединения 3,4-дигидропиридина в соответствии со схемой реакции (3):
(R5)n (R!)"
В данной реакции соединение 3,4-дигидропиридина
восстанавливают, например, с помощью восстановителя, такого как
гидротрис(1-метилпропил)(1-)борат лития, в подходящем
растворителе, таком как тетрагидрофуран, предпочтительно при температуре приблизительно -7 8°С.
Вышеуказанное соединение пиперидин-4-она, где
К5представляет собой Сг-балкенильную группу, особенно этенильную группу, может быть получено согласно реакционной схеме (4), в которой Rb представляет собой С^алкильную группу:
Схема 4
С2_6 алкенил С2_6 алкенил
На этапе (а) исходное пиридиновое соединение обрабатывают для введения защитной группы Р1 традиционным способом. Таким образом, например, если защитной группой Р1 является CV 6алкилоксикарбонильная группа, то пиридиновое соединение может реагировать с приемлемым ди-С1-балкилбикарбонатом, таким как ди-трет-бутилдикарбонат, в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран. Затем осуществляют реакцию защищенного соединения с приемлемым алкенилмагний галогенидным реагентом Гриньяра, таким как винилмагния бромид, в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран. Затем полученное в результате соединение может быть восстановлено на этапе (Ь) до пиперидин-4-она, как описано выше.
Вышеупомянутые промежуточные соединения алкенилпиперидин-4-она, в которых R5 представляет собой винил, могут быть использованы для получения промежуточных соединений формулы (На), в которых R5 представляет собой гидроксиметильную группу, согласно следующей реакционной схеме (5):
На этапе (а) осуществляют реакцию соединения пиперидин-4-она с приемлемым хинолином, как описано выше, с использованием, например, н-бутил-лития в гексане с системе растворителей, содержащей, например, диизопропиламин в тетрагидрофуране. Реакцию предпочтительно выполняют при низкой температуре например, при приблизительно -7 8°С.
На этапе (Ь) превращение этинильной группы в 1,2-дигидроксиэтильную группу может быть осуществлено путем окисления, например, обработкой оксидом осмия в н-бутаноле в присутствии основания, такого как 4-метилморфолин-4-оксид, и приемлемого растворителя, такого как тетрагидрофуран.
На этапе (с) 1,2-дигидроксиэтильную группу превращают в альдегидную группа путем обработки, например, периодатом натрия, в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран.
На этапе (с!) альдегидное соединение восстанавливают до гидроксиметильного соединения, например, восстанавливающим средством, таком как боргидрид натрия, в приемлемом растворителе, таком как метанол.
Соединения пиперидин-4-она, в которых R5 находится в 2-положении и представляет собой, например, Het группу, такую как пиридил, особенно 3-пиридил, a R6 представляет собой, например, фенил-1-этиловую группу, могут быть получены согласно следующей
реакционной схеме (б):
Схема 6
(а)
(с)
На этапе (а) осуществляют реакцию исходного метанамина со смесью ЗА молекулярного сита, 1,1-би-2-нафтола и трифенилбората в приемлемом растворителе, таком как дихлорметан, и полученную в результате реакционную смесь смешивают с 1-метилокси-З-(триметилсилилокси)-1,3-бутадиеном и осуществляют реакцию при низкой температуре, например, -7 8°С.
На этапе (Ь) осуществляют превращение путем обработки исходного материала с L-селектридом (лития три-втор-бутил(гидридо)боратом(1-)) в приемлемом растворителе, таком как тетрагидрофуран, при низкой температуре, например, при приблизительно -7 8°С, для восстановления двойной связи в пиперидиновом кольце и превращения оксогруппы в гидроксигруппу.
На этапе (с) окисляют гидроксисоединение, например, путем обработки периодинаном Десс-Мартина (1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензиодоксол-З(1Н)-он) в приемлемом растворителе, например, в дихлорметане.
Соединения формулы (IVa) могут быть получены согласно следующей реакционной схеме (7):
Схема 7
R -NH
¦ X с ¦ г
Р (а) 0
N-R°
ООС^цал кил
(Ъ)
5^A-R6
^^COOCi калкил
(с)
(d)
N-R
N-R
(е)
(f)
На этапе (а) пиперидин-4-он получают путем реакции вышеупомянутых реагентов, а именно R6-NH2, глиоксилатный сложный эфир и бутандиеновое производное, в котором Р7 представляет собой защитную группу, такую как триС^алкил(например, метил)силильная группа, в присутствии трифторуксусной кислоты, трифторида бора и 3 А молекулярного сита в приемлемом растворителе, таком как дихлорметан, предпочтительно при низкой
температуре, такой как приблизительно -78°С.
На этапе (Ь) защитную оксогруппу Р5, такую как 4,4-ди-С1-
балкильная (например, этильная) группа, вводят, например, путем
обработки три-С1-балкил(например, этил)ортоформиатом в
присутствии кислоты, такой как п-толуолсульфокислота, в приемлемом растворителе, таком как этанол.
На этапе (с) защищенное пиперидиновое соединение восстанавливают с превращением сложноэфирной группы в гидроксиметильную группу, например, с помощью литий-алюминия гидрида, в приемлемом растворителе, таком как диэтиловый эфир.
На этапе (с!) , защитную группу Р5 удаляют, например, обработкой кислотой, такой как трифторуксусная кислота, в приемлемом растворителе, например, в воде.
На этапе (е) гидроксиметильную группу защищают, например,
три-С^алкил(например, трет-бутилдиметил)силильной группой,
которая может быть введена, например, обработкой приемлемым
три-С^алкил(например, трет-бутилдиметил)силилгалогенидом,
например, хлоридом, в присутствии, например, имидазола, в приемлемом растворителе, таком как диметилформамид.
На этапе (f) осуществляют реакцию защищенного пиперидинового соединения, полученного на этапе (е) , с хинолиновым производным традиционным способом, как описано выше.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Следующие примеры иллюстрируют настоящее изобретение. Экспериментальная часть
Далее "BuLi" означает н-бутиллитий, "цикло" означает циклогексан, "DCM" означает дихлорметан, "DIPE" означает
диизопропиловый эфир, "DME" означает 1,2-диметоксиэтан, "DMF" означает N,N-диметилформамид, "ETIP" означает смесь 1:1 этанола и 2-пропанола, "EtOAc" означает этилацетат, "EtOH" означает этанол, "iPA" означает изопропиламин, "iPrOH" означает 2-пропанол, "МеОН" означает метанол, "TFA" означает трифторуксусную кислоту, "THF" означает тетрагидрофуран, "SFC" означает сверхкритическую жидкостную хроматографию. Если не указано иное, SFC проводят с использованием подвижной фазы со скоростью потока 50 мл/минута, при этом колонку выдерживают при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар.
А. Получение промежуточных соединений
Пример А1
а) Получение промежуточного соединения 1
DMF (12,45 мл) каплями добавляли в оксихлорид фосфора 99% (755, 015 ммоля) при 5°С, затем порциями добавляли 4-хлор-N-(4-хлорфенил)бензолпропанамид (107, 8 59 ммоля) при 5°С. Полученную в результате смесь нагревали при 8 0°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду со льдом. Осадок отфильтровывали, промывали водой и помещали в DIPE. Осадок отфильтровывали и сушили (вакуум, 60°С) , получая 32,1 г промежуточного соединения 1.
Ь) Получение промежуточного соединения 2
Метилат натрия 30% в МеОН (132,7 мл, 0,696 моля) добавляли в раствор промежуточного соединения 1 (32,1 г, 0,1 моля) в МеОН
(623 мл) . Смесь перемешивали при 80°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и растворитель выпаривали
при пониженном давлении. Смесь выливали в воду со льдом и осадок отфильтровывали, а затем промывали водой. Порошок сушили в вакууме при 60°С с получением коричневого твердого вещества. Этот остаток (26,31 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 400 г, DCM/Cyclo: 50/50). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха с получением желтого твердого вещества, получая 15,7 г промежуточного соединения 2. с) Получение промежуточного соединения 3
BuLi 1,6М в гексане (4,7 мл, 7,54 ммоля) медленно
добавляли при -2 0°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина
(1,06 мл, 7,54 ммоля) в THF (11 мл) . Смесь перемешивали при -
2 0°С в течение 2 0 минут, затем охлаждали до -7 0°С. Медленно
добавляли раствор промежуточного соединения 2 (2 г, 6,2 85
ммоля) в THF (20 мл) . Смесь перемешивали при 7 0°С в течение
1,30 часа. Медленно добавляли раствор (2R)-2-(4-фтор-2-
метилфенил)-4-оксо-1-пиперидинкарбоновойкислоты 1, 1-
диметилэтилового сложного эфира (2,32 г, 7,54 ммоля) в THF (23 мл) . Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -3 0°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Неочищенный продукт (4,3 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc 85/15). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 3,8 г промежуточного соединения 3. Остаток не был чистым на 100%, но его использовали без дополнительной очистки.
Пример А2
а) Получение промежуточного соединения 4
Следующий способ и обработку выполняли дважды. Смесь 7-(фенилметил)-1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декана (0,375 моля) в МеОН (500 мл) гидрогенизировали в течение 16 часов при 125°С (давление Н2: 100 атм. ) с 5% Rh/Al203 (15 г) в качестве катализатора. После поглощения Н2 (3 экв.) катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали, получая 178 г (99%) промежуточного соединения 4, используемого в следующем реакционном этапе без дополнительной очистки. Ь) Получение промежуточного соединения 5
н . НС1
Промежуточное соединение 4 (41,0 ммоля) в
хлористоводородной кислоте (100 мл) перемешивали с обратным холодильником в течение 4 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в лед и подкисляли 10% водным раствором карбоната калия. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха, получая 9,3 г промежуточного соединения 5.
с) Получение промежуточных соединений б и 7
Промежуточное соединение 6 (2S*) Промежуточное соединение 7 (2R*)
Раствор промежуточного соединения 5 (9,3 г, 4 7,6 ммоля), ди-трет-бутилбикарбоната (10,4 г, 47,6 ммоля) и триэтиламина (13,2 мл, 95,2 ммоля) в THF (100 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем смесь выливали в воду и
экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (12,9 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 8 0/2 0) . Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха состояния. Остаток (9,8 г) очищали с помощью SFC на
колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/минут, при этом колонку выдерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижная фаза представляет собой СОг 90%, МеОН 10% в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 4,34 г промежуточного соединения б и 4,4 7 г промежуточного соединения 7. с!) Получение промежуточных соединений 8 и 9
BuLi 1,бМ в гексане (4,74 мл, 7,58 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,07 мл, 7,58 ммоля) в THF (10 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (2,29 г, 6,32 ммоля) в THF (23 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Раствор промежуточного соединения б (2,24 г, 7,58 ммоля) в THF (22 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 2 часов при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, а затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (4.8 г) очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 200 г, Cyclo/EtOAc 90/10) . Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая, соответственно,
1 г фракции F1 и 0,4 5 г фракции F2. F1 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Irregular SiOH 1540 мкм 300 г MERCK) с подвижной фазой (DCM 98%, EtOAc 2%), получая 0,62 8 г промежуточного соединения 9 и 0,21 г промежуточного соединения 8. Пример A3
Получение промежуточных соединений 10, 11, 12 и 13
BuLi 1,6М в гексане (0,0056 моля) медленно добавляли при -
20°С к раствору N-(1-метилэтил)-2-пропанамина (0,0056 моля) в
THF (8 мл) в потоке N2. Смесь перемешивали при -2 0°С в течение
20 минут, затем охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор
б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (0,0047 моля)
в THF (17 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1 часа 30
минут. Медленно добавляли раствор (2R)2-(4-фтор-2-метилфенил)-
4-оксо-1-пиперидинкарбоновойкислоты 1,1-диметилэтилового
сложного эфира (0,0052 ммоля) в THF (16 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов, выливали в ледяную воду при -30°С и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, сушили (MgSO,}) , фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: Cyclo/EtOAc 90/10; 15-40 мкм) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая, соответственно, F1 0,8 г промежуточного соединения 11 и 0,8 г F2. F2 очищали с помощью SFC (элюент: C02/iPrOH/MeOH/iPA 85/7,5/7,5/0,3). Собирали три фракции и растворитель выпаривали, получая, соответственно,
0,111 г (3,5%) промежуточного соединения 10, 0,303 г (10%) промежуточного соединения 12 и 0,083 г (3%) промежуточного соединения 13. Пример А4
а) Получение промежуточного соединения 14
но.
(l'S,2S)
Раствор (2S)-4,4-диэтокси-1-[(1S)-1-фенилэтил]-2-
пиперидинметанола (1,4 г, 4,55 ммоля) в TFA (6,5 мл) и воде (0,5 мл) перемешивали при 0°С в течение 4 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 (основный рН) . Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха, получая 1 г (94%) промежуточного соединения 14.
Ь) Получение промежуточного соединения 15
" ' (l'S, 2S)
Раствор промежуточного соединения 14 (1,0 г, 4,29 ммоля), трет-бутилдиметилсилилхлорида (0,775 г, 5,14 ммоля) и имидазола (0,35 г, 5,14 ммоля) в DMF (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Смесь выливали в воду, экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха. Остаток (1,44 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo 100 - Cyclo/EtOAc 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,2 г промежуточного соединения 15.
с) Получение промежуточного соединения 16
BuLi 1,6М в гексане (2,81 мл, 4,49 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,631 мл, 4,49 ммоля) в THF (6 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 2 (1,32 г, 4,14 ммоля) в THF (13 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Добавляли раствор промежуточного соединения 15 (1,2 г, 3,45 ммоля) в THF (12 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,42 г (61,8%) промежуточного соединения 16.
Пример А5
а) Получение промежуточных соединений 17 и 18
Промежуточное соединение 17 (*R) Промежуточное соединение 18 (*S)
Лития гидротрис(1-метилпропил)борат (1-) (1:1) (28,539 ммоля) каплями добавляли в азоте к раствору 3,4-дигидро-2-метил-4-оксо-1(2Я)-пиридинкарбоновой кислоты, фенилметилового сложного эфира (28,539 ммоля) в THF при -78°С и реакционную смесь перемешивали в течение 5 часов при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc при -7 8°С. Органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (11,9 г) очищали
колоночной хроматографией на силикагеле (S1O2 20-45 мкм, элюент: Cyclo/EtOAc: 75/25). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха с получением 4,1 г смеси энантиомеров. Чистую смесь очищали хиральной SFC (Chiralpack AD-H, элюент: СОг/МеОН: 8 0/2 0). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,7 г (24,1%) промежуточного соединения 17 и 1,9 г (27,0%) промежуточного соединения 18.
Ь) Получение промежуточных соединений 19 и 20
BuLi 1,6М в гексане (1,6 М) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина в безводном THF (8 мл) при -2 0°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (4,718 ммоля) в THF (17 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 2 часов. Раствор промежуточного соединения 17 (5,661 ммоля) в THF (14 мл) добавляли при -7 8°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc при -7 8°С. Органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (3,1 г) очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc: 85/15). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха с получением 1,45 г смеси, содержащей три изомера 56/40/4. Эту смесь разделяли на ее энантиомеры с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм, 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/минута, при этом колонку выдерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижная фаза представляет собой СОг 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% (в метаноле) в
изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 0,72 г промежуточного соединения 20 и 0,46 г промежуточного соединения 19. Пример Аб
а) Получение промежуточного соединения 21
Ди-трет-бутил бикарбонат (58,333 ммоля) порциями добавляли в атмосфере N2 и при энергичном перемешивании к раствору 4-метоксипиридина (58, 333 ммоля) в THF (60 мл) . Смесь охлаждали до 0°С, каплями добавляли винилмагния бромид (70 ммоль) и смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. Добавляли НС1 (1н) (приблизительно 150 мл) при 5°С (комнатной температуры 2 5°С) и смесь перемешивали в течение 10 минут. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали 10% водным раствором ЫаНСОз, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и выпаривали досуха, получая 10,7 г (82,1%) промежуточного соединения 21.
Ь) Получение промежуточных соединений 22 и 2 3
Промежуточное соединение 22 (2R*) Промежуточное соединение 23 (2S*)
Лития гидротрис(1-метилпропил)борат (1-) (1:1) (47,9 мл, 4 7,9 ммоля) каплями добавляли в N2 к раствору промежуточного соединения 21 (10,7 г, 47,9 ммоля) в THF (110 мл) при -78°С и смесь перемешивали при той же температуре в течение 3 часов. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (19,5 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX), подвижной фазой (80% Cyclo, 20% EtOAc).
Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (4,3 г) разделяли на его энантиомеры хиральной SFC на Chiralpak
AD-H, 5 мкм, 250x20 мм, подвижная фаза (90% С02, 10% МеОН) .
Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха,
получая 1,9 г (17,6%) промежуточного соединения 22 и 1,5 г (13,9%) промежуточного соединения 23.
с) Получение промежуточного соединения 2 4
BuLi 1,6М в гексане (5,27 мл, 8,43 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,19 мл, 8,43 ммоля) в THF (12 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 2 (2,24 г, 7,03 ммоля) в THF (22 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Раствор промежуточного соединения 22 (1,9 г, 8,43 ммоля) в THF (19 мл) добавляли при -7 8°С, затем перемешивали в течение 2 часов при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (4,5 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo 100/0 - Cyclo/EtOAc 90/10, затем Cyclo/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,15 г промежуточного соединения 24, смесь (2R*).
с!) Получение промежуточного соединения 2 5
Раствор промежуточного соединения 2 4 (3,238 ммоля), оксида осмия в бутаноле 2,5% (0,0486 ммоля) и 4-метилморфолин-4-оксида (4, 857 ммоля) в THF (16 мл) и воде (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор выливали в насыщенный раствор ЫагЭгОз, затем экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,8 г (96,2%) промежуточного соединения 25.
е) Получение промежуточного соединения 2 6
Периодат натрия (3,584 ммоля) добавляли к раствору промежуточного соединения 25 (3,117 ммоля) в THF (20 мл) и воде (10 мл) при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение 3 часов. Добавляли воду и EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой и солевым раствором, сушили (MgS04) , фильтровали и выпаривали досуха. Остаток 1,86 г (109%) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo 100/0 - Cyclo/EtOAc 8 0/2 0). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,47 г (86,5%) промежуточного соединения 26.
Боргидрид натрия (36,4 мг, 0,962 ммоля) добавляли к раствору промежуточного соединения 2 6 (7 00 мг, 1,2 8 ммоля) в МеОН (10 мл) при 0°С, затем перемешивали в течение одного часа при 0°С. Добавляли воду и EtOAc. Органический слой отделяли,
промывали солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха. Остаток (0,66 г) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-Н, 5 мкм, 250x20 мм; подвижная фаза (0,3% iPA, 70% С02, 30% EtOH 50%, iPrOH 50%). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 212 мг (30,2%) промежуточного соединения 28 и 383 мг (54,5%) промежуточного соединения 27. Пример А7
а) Получение промежуточного соединения 2 9
Этилглиоксилат (85,083 ммоля) нагревали с обратным холодильником в течение 30 минут до деполимеризации реагента, затем его выливали в N2 в суспензию молекулярного сита (4А, 2 5 г) в DCM (150 мл) при 0°С. Добавляли (S) - (-) -а-метилбензиламин (85,083 ммоля) при 0°С, смесь перемешивали в течение 45 минут при 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Последовательно добавляли TFA (85,083 ммоля), трифторид бора диэтилэтерат (85,083 ммоля) и триметил[(1-метилен-2-пропен-1-ил)окси]-силан (85,083 ммоля) при -7 8°С при перемешивании с периодом 5 минут между каждым добавлением. Реакционную смесь перемешивали при -7 8°С, затем обеспечивали достижение -30°С и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при -30°С. Добавляли воду (40 мл) и смесь перемешивали в течение 3 0 минут. Добавляли дополнительное количество воды (50 мл) и обеспечивали отстаивание смеси в течение ночи. Порциями добавляли КН2РО4 до рН 4-5. Реакционную смесь фильтровали через прокладку целита, которую промывали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgS04) и выпаривали досуха.
Остаток очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (2 0-4 5 мкм, 1000 г MATREX); подвижной фазой (8 0% Cyclo, 2 0% EtOAc). Очищенные фракции собирали и
растворитель выпаривали, получая 7,7 г фракции F1 и 5,5 г фракции F2.
Фракцию F2 помещали в DCM и НС1 3 н и полученный в результате раствор перемешивали в течение 30 минут затем выливали в 10% водный раствор К2СО3 (основный). Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха, получая 5,9 г промежуточного соединения 29.
Ь) Получение промежуточных соединений 3 0 и 31
Промежуточное соединение 30 (1'S,2R) Промежуточное соединение 31 (1'S,2S)
Смесь промежуточного соединения 29 (5,9 г, 21,43 ммоля), триэтилортоформиата (35,7 мл, 0,214 моля) и п-толуолсульфокислоты моногидрат (5,54 г, 32,14 ммоля) в EtOH (60 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь нейтрализовали бикарбонатом натрия (рН=7-8) и дважды экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO-i) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 200 г, Cyclo 100 - Cyclo/EtOAc 90/10) с получением двух фракций, которые собирали, и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 4,75 г промежуточного соединения 30 и 1,5 г промежуточного соединения 31.
с) Получение промежуточного соединения 32
(l'S,2R)
Раствор промежуточного соединения 30 (4,75 г, 13,6 ммоля) в диэтиловом эфире (30 мл) каплями добавляли в потоке N2 к
суспензии лития-алюминия гидрида (0,774 г, 20,4 ммоля) в диэтиловом эфире (20 мл) , с такой скоростью, при которой раствор осторожно нагревался с обратным холодильником. Затем реакционную смесь затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, EtOAc (50 мл), затем осторожно добавляли воду (15 мл) . После перемешивания в течение 10 минут реакционную смесь фильтровали через короткую прокладку целита, промывали с помощью EtOAc. Фильтрат промывали солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха, получая 4,2 г промежуточного соединения 32. с!) Получение промежуточного соединения 33
(l'S,2R)
Раствор промежуточного соединения 32 (1,9 г, 6,18 ммоля) в TFA (9 мл) и воде (1 мл) перемешивали при 0°С в течение 4 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 (основный рН). Органический слой отделяли, промывали водой, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха, получая 2,7 г промежуточного соединения 33.
е) Получение промежуточного соединения 34
(l'S,2R)
Раствор промежуточного соединения 33 (4,5 г, 19,3 ммоля), трет-бутилдиметилсилилхлорида (3,49 г, 23,1 ммоля) и имидазола (1,58 г, 23,1 ммоля) в DMF (45 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в воду, экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на
силикагеле (15-40 мкм, 200 г, Cyclo 100/0 - Cyclo/EtOAc 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 5,3 г промежуточного соединения 34.
f) Получение промежуточного соединения 35
Смесь (2R) изомеров 65/35
BuLi (1,бМ в гексане, 13,3 мл, 21,2 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (2,98 мл, 21,2 ммоля) в THF (30 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 37 (6,41 г, 21,2 ммоля) в THF (65 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Раствор промежуточного соединения 34 (6,15 г, 17,7 ммоля) в THF (60 мл) добавляли при -7 8°С, затем перемешивали в течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (13,4 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 400 г, DCM 100/0 - DCM/EtOAc 97/3, затем 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток очищали хроматографией с нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX) ; подвижной фазой (градиент от 95% DCM, 5% EtOAc до 90% DCM, 10% EtOAc, затем толуол/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 1,02 г промежуточного соединения 35.
Пример А8
а) Получение промежуточного соединения 3 6
Медленно каплями добавляли DMF (17,7 мл, 0,23 моля) к оксихлориду фосфора (100 мл,1,06 моля) при 0°С. Порциями добавляли 4-хлор-N-(4-фторфенил)бензолпропанамид (42,2 г, 0,15 моля) при 0°С, а затем обеспечивали достижение смесью комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение ночи при 85°С, а затем охлаждали до 4 0°С во избежание осаждения и порциями выливали в воду со льдом при поддержании температуры ниже 25°С. Смесь перемешивали в течение 1 часа, затем осадок отфильтровывали, помещали в 2-пропанол при 5°С, снова отфильтровывали и сушили при 60°С с получением желтого твердого вещества с выходом 33,7 6 г промежуточного соединения 36.
Ь) Получение промежуточного соединения 37
Метилат натрия 30% в МеОН (148 мл, 0,77 моля) добавляли к раствору промежуточного соединения 36 (33,76 г, 0,11 ммоля) в МеОН (550 мл) . Смесь перемешивали при 60°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Добавляли воду, осадок отфильтровывали и промывали с помощью iPrOH. Порошок сушили в вакууме при 60°С, получая 24,54 г промежуточного соединения 37. Фильтрат экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали, получая 4,33 г промежуточного соединения 37.
Пример А9
а) Получение промежуточного соединения 3 8
1,1'би-2-нафтол (5,48 г) и трифенилборат (5,56 г) добавляли к суспензии активированного порошка 4А молекулярного сита (50 г) в DCM (200 мл) в потоке N2 при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 2 часов, а затем охлаждали до 0°С, добавляли раствор а-метил-N-(3-пиридинилметилен) бензолметанамина (ocR) (4,03 г) в DCM (20 мл) и перемешивали в течение 10 минут при 0°С. Смесь охлаждали до -78°С, каплями добавляли 1-метилокси-З-(триметилсилокси)-1,3-бутадиен (4,86 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при -7 8°С и в течение ночи при -2 0°С. Добавляли воду и смесь фильтровали через короткую прокладку целита. Органический слой отделяли и добавляли НС1 Зн. Эту смесь перемешивали в течение 5 минут. Водный слой подкисляли К2СОз (твердое вещество) и обратно экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли и сушили (MgSO,}) . Остаток (3,1 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г) из DCM DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,6 г промежуточного соединения 38.
Ь) Получение промежуточного соединения 3 9
L-Селектрид (R) (6,9 мл, 6,9 ммоля) каплями добавляли в N2 к раствору промежуточного соединения 38 (1,6 г, 5,75 ммоля) в THF (30 мл) при -7 8°С и смесь перемешивали при той же температуре в течение 2 часов. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на
силикагеле (15-40 мкм, 90 г) из DCM 100/0 - DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 2,1 г промежуточного соединения 39.
с) Получение промежуточного соединения 4 0
Добавляли периодинан Десс-Мартина (27,3 мл, 13,1 ммоля) к раствору промежуточного соединения 39 (1,85 г, 6,55 ммоля) в DCM (40 мл) при 0°С и смесь перемешивали при 0°С в течение 3 0 минут и при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли 10% водный раствор К2СО3, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток помещали в DCM, осадок отфильтровывали и фильтрат очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г) из DCM 100/0 - DCM/MeOH 99/1) . Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 0,9 г промежуточного соединения 40.
Пример А10
Получение промежуточных соединений 41, 42, 43 и 44
BuLi 1,6М в гексане (26,7 ммоля; 16,7 мл) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (26,7 ммоля; 3,8 мл) в THF (55 мл) при -20°С. Смесь перемешивали 20 минут при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор б-бром-3
[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (24,75 ммоля, 9 г) в
THF (90 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа.
Добавляли раствор (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1-
пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира
(19,04 ммоля; 5,51 г) в THF (55 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc при -50°С. Выполняли очистку остатка (6,17 г) флэш-хроматографией на силикагеле (20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10) . Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая, соответственно, 3,45 г фракции промежуточного соединения 41 и 3,3 г фракции F2 (смесь).
Фракцию F2 очищали с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-НТМ (5 мкм 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/минута, при этом колонку поддерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижная фаза представляет собой СОг 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая, соответственно, 0,60 г промежуточного соединения 42, 0,45 г промежуточного соединения 43 и 2,25 г промежуточного соединения 44 .
Пример Al1
Получение промежуточных соединений 45, 46 47 и 48
BuLi 1,6М в гексане (9,19 ммоля) каплями добавляли в
потоке N2 к раствору диизопропиламина (9,19 ммоля) в THF (19
мл) при -2 0°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С,
затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина в THF (30 мл), затем перемешивали при -7 8°С в течение 1 часа. Добавляли раствор
(2S)-4-ОКСО-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты, сложного 1,1-диметилэтилового эфира (10 ммоль) в THF (29 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1,5 часа при -78°С. Добавляли воду и EtOAc при -50°С. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (6,1 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле
(БЮг 15-40 мкм, элюент: DCM:100). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 1,0 г
(18%) промежуточного соединения 46 и 1,1 г фракции F2 (смесь 3 изомеров).
F2 очищали с помощью SFC (Chiralpack AD-H, C02/MeOH/iPrOH/IPA: 70/15/15/0,3). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 0,11 г (2%) промежуточного соединения 45, 0,03 г промежуточного соединения 46, 0,07 г (1,3%) промежуточного соединения 47 и 0,55 г (10%) промежуточного соединения 48. Пример А12
Получение промежуточных соединений 4 9, 50 и 51
Промежуточное соединение 49 (2R),U,HC,(A) Промежуточное соединение 50 (2R),U,HC,(B)
Промежуточное соединение 51, смесь изомеров
Каплями добавляли BuLi 1,6М в гексане (9,1 ммоля) в потоке N2 к раствору дииз о про пил амин а (9,1 ммоля) в THF (20 мл) при -2 0°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор б-бром-3-[(3
хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (8,27 ммоля) в THF (30 мл),
затем перемешивали при -7 8°С в течение 1 часа. Добавляли
раствор (2R) -4-ОКСО-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой
кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (8,27 ммоля) в THF
(25 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc при -50°С. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле
(Merck 200 г, Si02 15-40 мкм, элюент: Cyclo/EtOAc: 85/15) . Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (3,15 г, 59%) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (Si02 15-40 мкм, элюент: DCM 100) . Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 1,1 г (20%) промежуточного соединения 49, 0,5 г (9%) промежуточного соединения 51 (смесь изомеров) и 1,0 г (19%) промежуточного соединения 50. Пример А13
Получение промежуточных соединений 52, 53, 54 и 55
Промежуточное соединение 52 (2R),транс,(В)-3 Промежуточное соединение 53 (2R),транс,(А)-1
Промежуточное соединение 54 (2R),U,HC,(A)-2 Промежуточное соединение 55 (2R),U,HC,(B)-4
Медленно добавляли BuLi 1,6М в гексане (7,07 мл, 11,31 ммоля) при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,59 мл, 11,31 ммоля) в THF (16 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 минут, а затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 2 (3 г, 9,4 3 ммоля) в THF (30 мл). Смесь перемешивали при 70°С в течение 1,5 часа.
Медленно добавляли раствор (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира
(3,27 г, 11,31 ммоля) в THF (33 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (6,21 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией на SiOH с зернами неправильной формы
(20-45 мкм, 450 г MATREX) ; подвижной фазой (цикло 90%, EtOAc 10%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая, соответственно, 1300 мг фракции F1 и 1300 мг фракции F2.
F1 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией
(Chiralpak 1С 5 мкм 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0,3%; С02 60%, iPrOH 40%) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 150 мг промежуточного соединения 53 и 1020 мг промежуточного соединения 54.
F2 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией
(Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0,3%; СО2 70%, iPrOH 30%), получая 120 мг промежуточного соединения 52 и 8 00 мг промежуточного соединения 55. Пример А14
а) Получение промежуточного соединения 5 6
Каплями добавляли BuLi 1,6М в гексане (66,2 ммоля, 41,3 мл) в N2 к раствору б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (55,1 ммоля; 20 г) в THF (135 мл) при -70°С, затем смесь перемешивали в течение 1,5 часа. Добавляли раствор метилдисульфида (137,8 ммоля; 12,4 мл) в THF (15 мл) при -78°С, затем обеспечивали достижение смесью комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. К смеси добавляли воду и EtOAc. Органический слой экстрагировали, промывали водой, затем
солевым раствором, сушили над MgSC> 4 и растворитель выпаривали. Остаток кристаллизовали при отстаивании и помещали в DIPE, отфильтровывали и сушили (вакуум, 60°С) , получая 11,23 г промежуточного соединения 56. Фильтрат выпаривали и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, DCM/цикло 30/7 0). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 5,45 г промежуточного соединения 56. Ь) Получение промежуточных соединений 57 и 58
Дважды осуществляли следующие реакции.
BuLi 1,6М в гексане (23 мл, 8,37 ммоля) медленно добавляли
при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,17 мл,8,37
ммоля) в THF (12 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20
минут, затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор
промежуточного соединения 56 (2,3 г, 6,97 ммоля) в THF (23 мл).
Смесь перемешивали при 7 0°С в течение 1,5 часа. Медленно
добавляли раствор (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1-
пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (3,03 г, 10,46 ммоля) в THF (30 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали.
Остаток очищали хроматографией с нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX); подвижной фазой (90% цикло, 10% EtOAc), получая, соответственно, фракцию F1, содержащую 0,73 г промежуточного соединения 58, фракцию F2, содержащую смесь изомеров, и фракцию
F3, содержащую исходный материал (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложный 1,1-диметилэтиловый эфир.
Фракцию F2 очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H (5 мкм 250x20 мм); подвижной фазой (0,3% iPA, 65% С02, 35% EtOH), получая, соответственно фракцию F2/1, содержащую 280 мг (2R),транс,(А)-2 изомера, фракцию F2/2, содержащую 980 мг (11,4%) промежуточного соединения 57, и фракцию F2/3, содержащую 370 мг (2R),транс, (В)-4 изомера.
Смесь промежуточного соединения 57 (0,98 г, 1,58 ммоля) и 3-хлорпероксибензойной кислоты (1,17 г, 4,7 5 ммоля) в DCM (20 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,02 г (99,0%) промежуточного соединения 59.
Пример А15
Получение промежуточных соединений 60, 61 и 62
Медленно добавляли BuLi 1,бМ в гексане (5,17 мл, 8,27 ммоля) при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,16 мл, 8,27 ммоля) в THF (12 мл) . Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 минут, затем охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 66 (2,5 г, 6,89 ммоля) в THF (25 мл) . Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 часа. Медленно добавляли раствор б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (2,47 г, 7,58 ммоля) в THF (25 мл) . Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (4,15 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (15-40 мкм, 450 г), Cyclo/EtOAc, 80/20. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 1,18 г фракции F1 и 1,04 г промежуточного соединения 62.
F1очищали с помощью SFC (элюент: МеОН/С02/1РА, 30/70/0,3, Chiralpack AD-H). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 100 мг промежуточного соединения 61 и 730 мг промежуточного соединения 60 .
Пример А1б
а)Получение промежуточных соединений 63 и 64
Смесь 7- [ (3,4-дифторфенил)метил]-1,4-диокса-8-
азаспиро[4.5]декан (0,657 моля) в МеОН (200 мл) концентрировали
при 60°С и полученный в результате остаток (177 г) разделяли на
энантиомеры хиральным разделением (Chiralpak AD, элюент:
гептан/EtOH 30/70). Две фракции продукта собирали и
растворители выпаривали, получая, соответственно, 80,0 г (90%)
промежуточного соединения 63 (R) и 84 г (95%) промежуточного
(R)
Промежуточное соединение 63 (11 ммоль) в НС1 бн (30 мл) перемешивали при 7 5°С в течение ночи. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре и выливали в стеклянную емкость. Раствор подкисляли NaOH (30%) (порциями). Смесь экстрагировали с помощью DCM, сушили с MgSC> 4 и концентрировали при пониженном давлении, получая 3,б г (96%) промежуточного соединения 65.
с) Получение промежуточного соединения 6 6
(R)
К раствору промежуточного соединения 65 (3,7 г, 16,43 ммоля) в THF (164 мл) добавляли триэтиламин (2,29 мл, 16,43 ммоля), затем ди-трет-бутилбикарбонат (3,59 г, 16,43 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли воду и EtOAc. органический слой промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая 5,3 г (99,2%) промежуточного соединения 66.
Пример А17
Получение промежуточных соединений 67 и 68
Медленно добавляли BuLi 1,бМ в гексане (5,17 мл, 8,27 ммоля) при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,16 мл, 8,27 ммоля) в THF (12 мл) . Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 минут, а затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (2,5 г, 6,8 9 ммоля) в THF (25 мл). Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 часа. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 70 (S) (2,47 г, 7,58 ммоля) в THF (25 мл) . Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (4,6 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: Cyclo/EtOAc, 95/5, 15-40 мкм, 450 г) . Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 310 мг промежуточного соединения 67 и 720 мг промежуточного соединения 68.
Пример А18
а) Получение промежуточного соединения 69
(S)
Промежуточное соединение 64 (11 ммоль) в НС1 бн (30 мл) перемешивали при 7 5°С в течение ночи. Затем смесь перемешивали
при комнатной температуре и выливали в стеклянную емкость. Раствор подкисляли NaOH (30%) (порциями). Смесь экстрагировали с помощью DCM, сушили с MgSC> 4 и концентрировали при пониженном давлении, получая 4,32 г (99%) промежуточного соединения 69. Ь) Получение промежуточного соединения 7 0
К раствору промежуточного соединения 69 (4,32 г, 19,18 ммоля) в THF (192 мл) добавляли триэтиламин (2,67 мл, 19,18 ммоля), затем ди-трет-бутилбикарбонат (4,19 г, 19,18 ммоля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли воду и EtOAc. Органический слой промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая 6,1 г (97,8%) промежуточного соединения 70.
Пример А19
Каплями добавляли BuLi 1,6М в гексане (0,829 ммоля) в
потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,829 ммоля) в THF (1
мл) при -2 0°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С,
а затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор б-бром-3-[(4-
хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (0,691 ммоля) в THF (2 мл),
затем перемешивали при -7 8°С в течение 2 часов. Добавляли
раствор (3R)-4-оксо-З-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой
кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (0,691 ммоля) в THF (2 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 2 часов при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc при -7 8°С. Органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,45 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (Kromasil 10 мкм, элюент: Cyclo/EtOAc: 90/10). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 43 мг (9,5%) промежуточного соединения 71 и 80 мг (17,8%) промежуточного соединения 72 [смесь 3 изомеров].
Пример А2 0
а) Получение промежуточного соединения 7 3
(RS)
2-(4-Фтор-2-метилфенил)-3,4-дигидро-4-оксо-1(2Я)-пиридинкарбоновой кислоты сложный 1,1-диметилэтиловый эфир (21 г, 68,774 ммоля) в EtOAc (400 мл) гидрогенизировали при давлении Н2 1 бар с Pd 10% (3 г) в качестве катализатора. Катализатор фильтровали через прокладку целита, а затем промывали с EtOAc. Фильтрат выпаривали. Остаток (22,9 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 400 г, Cyclo/EtOAc: 90/10-85/15) . Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 17,4 г (82%) промежуточного соединения 73.
Ь) Получение промежуточных соединений 73 и 74 и 75
Промежуточное соединение 74 (R)
Промежуточное соединение 75 (S)
Промежуточное соединение 73 (84 г, 273,291 ммоля) очищали хроматографией на Chiralpak ADTM (20 мкм, 450 г) со скоростью потока 8 0 мл/минута. Подвижная фаза представляет собой гептен/изопропанол 98,5/1,5. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 41 г промежуточного соединения 7 4 и 41,1 г промежуточного соединения 75.
Медленно добавляли BuLi 1,6М в гексане (13,6 мл, 21,7 ммоля) при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (3,05 мл, 21,7 ммоля) в THF (31 мл) . Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 минут, а затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 81 (5,5 г, 16,67 ммоля) в THF (55 мл) . Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 часа. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 75 (6,15 г, 20,01 ммоля) в THF (61 мл). Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc: 80/20) . Желаемые фракции собирали и выпаривали досуха, получая 2,15 г промежуточного соединения 7 6 и 1,7 3 г фракции F3.
Выполняли очистку фракции F3 с помощью SFC на колонке
Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм) со скоростью потока 50
мл/минута, при этом колонку держали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижной фазой служила СОг 8 5%, iPrOH 15% и iPA 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Желаемые чистые фракции собирали и выпаривали досуха, получая, соответственно, 355 мг промежуточного соединения 78, 411 мг промежуточного соединения 77 и 250 мг промежуточного соединения 79.
с!) Получение промежуточного соединения 8 0
Раствор промежуточного соединения 79 (0,25 г, 0,39 ммоля) и 3-хлорпербензойной кислоты (0,29 г, 1,18 ммоля) в DCM (2,5 мл) перемешивали в течение ночи. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 255 мг (97,1%) промежуточного соединения 80.
Пример А21
Каплями добавляли BuLi 1,6М в гексане (20,7 мл, 33,09 ммоля) к раствору б-бром-3-[(3-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (10 г, 27,57 ммоля) в THF (100 мл) при -70°С в потоке N2 и смесь перемешивали в течение 1,5 часа. Затем медленно добавляли раствор метилдисульфида (6,21 мл, 68,94 ммоля) в THF
(30 мл) при -70°С, обеспечивали достижение смесью комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. Добавляли воду и EtOAc при комнатной температуре. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из DIPE и осадок отфильтровывали, получая 6,4 г (70%) промежуточного соединения 81. Пример А22
Получение промежуточных соединений 82, 8 3 и 8 4
Медленно добавляли BuLi 1,6М в гексане (6,9 мл, 11,09 ммоля) при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (1,6 мл, 11,1 ммоля) в THF (16 мл) . Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 минут, а затем охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор б-бром-2-метокси-З-(фенилметил)хинолина (2,8 г, 8,53 ммоля) в THF (28 мл) . Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 часа. Медленно добавляли раствор (2R)-2-(4-фтор-2-метилфенил)-4-оксо-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (3,15 г, 10,24 ммоля) в THF (31 мл) . Данную смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -3 0°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (6,39 г) очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 450 г, Cyclo//EtOAc 90/10). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая, соответственно, фракции F1 (2,64
г), F2 (0,125 г) и F3 (0,174 г). Выполняли очистку F1 с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм, 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/минута, при этом колонку держали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижной фазой служила СОг 75%, этанол 25% и iPA 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая соответственно 1,393 г промежуточного соединения 82, 514 мг промежуточного соединения 8 3 и 192 мг промежуточного соединения 84 .
Пример А2 3
BuLi 1,6М в гексане (13,6 мл, 21,7 ммоля) медленно добавляли при -2 0°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина
(3,05 мл, 21 ммоля) в THF (31 мл). Смесь перемешивали при -20°С в течение 20 минут и охлаждали до -70°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 81 (5,5 г, 16,7 ммоля) в THF
(55 мл) . Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 часа. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 7 4 (6,15 г, 2 0 ммоля) в THF (61 мл). Данную смесь перемешивали при -7 0°С в течение 2 часов, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (12 г) очищали хроматографией на силикагеле
(15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 98/2). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 7,87 г (74%) промежуточного соединения 86.
Ь) Получение промежуточного соединения 8 7
Раствор промежуточного соединения 8 6 (5,8 г, 9,1 ммоля) и 3-хлор-бензолкарбопероксовую кислоты (6,73 г, 27,31 ммоля) в DCM (58 мл) перемешивали в течение ночи. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха с получением б,07 г промежуточного соединения 87.
Пример А2 4
а) Получение промежуточного соединения 8 8
NaH 60% в масле (0,62 г, 15,48 ммоля) порциями добавляли к раствору 1,3-(4-оксо-пиперидин)дикарбоновой кислоты сложного 1-(1,1-диметилэтил)-3-этилового эфира (2 г, 7,37 ммоля), суспендированного в THF (20 мл), охлаждали при 0°С. Смесь перемешивали в течение 30 минут при 0°С, а затем обеспечивали нагревание до комнатной температуры и перемешивали еще 1 час. Добавляли 3-фторбензилбромид (1,36 мл, 11,06 ммоля) и полученный в результате раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем добавляли воду и EtOAc. Органический слой экстрагировали, промывали солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Остаток (2,78 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г); подвижной фазой (85% гептан, 15% EtOAc). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 1 г (35,7%) промежуточного соединения 88.
Раствор промежуточного соединения 88 (1 г, 2,64 ммоля) в НС1 бн (8 мл) и МеОН (1,5 мл) нагревали до температуры флегмы при перемешивании в течение 2 0 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли до рН 10 с помощью NaOH бн (2,5 мл) и экстрагировали с помощью DCM (3 раза) . Объединенные органические слои сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали, к остатку добавляли НС1 бн (8 мл) и МеОН (1,5 мл) , полученную в результате смесь затем нагревали до температуры флегмы и перемешивали в течение 2 0 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли до рН 10 с помощью NaOH бн (2,5 мл) и экстрагировали с помощью DCM (3 раза) . Объединенные органические слои сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали, получая 260 мг (47,6%) промежуточного соединения 89.
с) Получение промежуточных соединений 90 и 91
Раствор промежуточного соединения 89 (10,4 г, 42,7 ммоля), ди-трет-бутилбикарбоната (9,31 г, 42,7 ммоля) и триэтиламина (11,9 мл, 85,3 ммоля) в THF (100 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (13,1 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 8 0/2 0). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток (12 г) очищали с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм 20x250 мм) со скоростью потока 50
мл/минута, колонку выдерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижной фазой служил СОг 95%, метанол 5% и изопропиламин 0,3% (в метаноле) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 4,8 г (35,6%) промежуточного соединения 90 и 5,2 г (39,6%) промежуточного соединения 91.
с!) Получение промежуточных соединений 92 и 93
BuLi 1,6М в гексане (4,14 мл, 6,62 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,93 мл, 6,62 ммоля) в THF (10 мл) при -20°С. Смесь перемешивали 20 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор 6-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (2 г, 5,52 ммоля) в THF (20 мл) , затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Добавляли раствор промежуточного соединения 90 (2 г, 6,62 ммоля) в THF (20 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 2 часов при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха.
Остаток (4,2 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (SiOH с зернами неправильной формы (2 0-45 мкм, 4 50 г, MATREX) ; подвижной фазой (DCM 8 0%/цикло 2 0%) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая, соответственно, 950 мг промежуточного соединения 93 и 1500 мг промежуточного соединения 92.
Пример А2 5
а) Получение промежуточных соединений 94 и 95
Промежуточное соединение 95 (3S*),(B)-2
BuLi 1,6М в гексане (4,14 мл, б, 62 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,93 мл, б, 62 ммоля) в THF (10 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (2 г, 5,52 ммоля) в THF (20 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Раствор промежуточного соединения 91 (2 г, б,62 ммоля) в THF (20 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в
течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (4,3 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 4 50 г MATREX) ; подвижной фазой (DCM 8 0%/цикло 2 0%) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая, соответственно, 820 мг промежуточного соединения 94 и 1,6 г промежуточного соединения 95.
Пример А2 б
а) Получение промежуточного соединения 9 6
BuLi 1,ЗМ в Cyclo (70 мл, 91 ммоля) каплями добавляли к
раствору
4,4-(этилендиокси)-1-трет-бутоксикарбонилпиперидина
(17 г, 70 ммолей) и N, N, N', N'-тетраметилэтилендиамина (10,5 мл, 100 ммолей) в диэтиловом эфире (110 мл) при -70°С и смесь
перемешивали при -70°С в потоке N2 в течение 3 часов. Добавляли раствор 2,4-дифторбензальдегида (8,4 мл, 77 ммолей) в диэтиловом эфире (15 мл) с такой скоростью, что сохранялась температура -60°С. Смесь перемешивали в течение 3 часов при -70°С. Добавляли 10% водный раствор NH4CI (130 мл), затем добавляли EtOAc и органический слой отделяли, сушили (MgS04) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием Cyclo/EtOAc 70/30 в качестве элюента. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 9,3 г промежуточного соединения 96.
Ь) Получение промежуточного соединения 97
Смесь промежуточного соединения 96 (6,7 г, 17,4 ммоля) и третбутоксид калия (0,2 г, 1,74 ммоля) в iPrOH (20 мл) перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов и затем охлаждали до комнатной температуры. Добавляли воду и остаток экстрагировали с помощью DCM, декантировали, сушили над MgS04 и концентрировали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием Cyclo/EtOAc 70/30 в качестве элюента. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 4,4 г (81,3%) промежуточного соединения 97.
с) Получение промежуточного соединения 98
Раствор промежуточного соединения 97 (7,5 г, 24,1 ммоля) в МеОН (150 мл) гидрогенизировали (3 бар) при 50°С с Pd/C 10% (2 г) в качестве катализатора в течение 12 часов. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием
DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0,1 в качестве элюента. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 1,5 г (23,1%) промежуточного соединения 98.
с!) Получение промежуточного соединения 99
Промежуточное соединение 98 (4,2 г, 15,6 ммоля) в НС1 бн (80 мл) перемешивали с обратным холодильником в течение 12 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали на лед, подкисляли и насыщали раствором К2СОз. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха, получая 3,5 г (99,6%) промежуточного соединения 99.
е) Получение промежуточных соединенийЮО и 101
Раствор промежуточного соединения 99 (3,5 г, 15,5 ммоля), ди-трет-бутил бикарбоната (3,4 г, 15,5 ммоля) и триэтиламина (2,2 мл, 15,5 ммоля) в THF (50 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм) ; подвижной фазой (iPA 0%; С02 90%, МеОН 10%) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 2900 мг промежуточного соединения 100 и 2700 мг промежуточного соединения 101.
f) Получение промежуточного соединения 102 и 103
BuLi 1,бМ в гексане (6,1 ммоля; 3,85 мл) каплями добавляли
в потоке N2 к раствору диизопропиламина (6,1 ммоля; 0,90 мл) в
THF (15 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 20 минут
при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор
промежуточного соединения 81 (5,12 ммоля, 1,7 г) в THF (30 мл),
затем перемешивали при -7 8°С в течение 1 часа. Добавляли
раствор промежуточного соединения 101 (6,14 ммоля; 2 г) в THF
(30 мл) при -78°С, затем перемешивали в течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc при -7 0°С. Органический слой отделяли, промывали водой и солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (Cyclo/EtOAc: 90/10). Очищенную смесь собирали и выпаривали досуха. Остаток очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiracel OD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0%; С02 70%, МеОН 30%), получая, соответственно, 95 мг фракции F1, содержащей
(2S*),транс,(А)-3 и (2S*),транс,(В)-4 изомеры, фракции F2, содержащей 500 мг промежуточного соединения 102, и фракции F3, содержащей 730 мг промежуточного соединения 103. Пример А2 7
Получение промежуточных соединений 104, 105, 106 и 107
y=y^F
Промежуточное соединение 104 (2R),транс,(A)1 Промежуточное соединение 105 (2R*),транс,(В)-2 Промежуточное соединение 106 (2R*),U,HC,(A)-3 Промежуточное соединение 107 (2R*),U,HC,(B)-4
BuLi 1,6М в гексане (6,1 ммоля; 3,85 мл) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (6,1 ммоля; 0,90 мл) в THF (15 мл) при -20°С. Смесь перемешивали 20 минут при -20°С, затем охлаждали до -78°С. Добавляли раствор б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (5,12 ммоля, 1,86 г) в THF (30 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Раствор промежуточного соединения 100 (6,14 ммоля, 2 г) в THF (30 мл) добавляли при -7 8°С, затем перемешивали в течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc at -7 0°С. Органический слой отделяли, промывали водой и солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией на силикагеле (Cyclo/EtOAc 90/10) . Очищенную смесь собирали и выпаривали досуха. Остаток (1,7 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0%; С02 70%, EtOH 15%, iPrOH 15%), получая 38 мг промежуточного соединения 104, 18 мг промежуточного соединения 105, 670 мг промежуточного соединения 106 и 4 60 мг промежуточного соединения 107.
Пример А2 8
Получение промежуточного соединения 108
BuLi 1,бМ в гексане (3,76 мл, б ммоль) медленно добавляли
при -20°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,84 мл, б
ммоль) в THF (9 мл) . Смесь перемешивали при -2 0°С в течение 2 0
минут, а затем охлаждали при -70°С. Медленно добавляли раствор
промежуточного соединения 37 (1,5 г, 4,9 ммоля) в THF (15 мл) .
Смесь перемешивали при -70°С в течение 1,5 часа. Медленно
добавляли раствор (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1-
пиперидинкарбоновой кислоты сложного 1,1-диметилэтилового эфира (1,85 г, б ммоль) в THF (19 мл). Данную смесь перемешивали при
BuLi 1,бМ в гексане (7,28 ммоля; 4,6 мл) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (7,28 ммоля; 1,02 мл) в
-70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc, 90/10) . Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 1,3 г промежуточного соединения 108. Пример А2 9
THF (10 мл) при -2 0°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 56 (2,6 ммоля, 2 г) в THF (20 мл), затем перемешивали при -7 8°С в течение 1 часа. Добавляли раствор промежуточного соединения 117 (7,28 ммоля, 2,24 г) в THF (20 мл) при -7 8°С, затем перемешивали в течение 1 часа при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc при -7 0°С. Органический слой отделяли, промывали водой и солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc 80/20). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая 2,3 г промежуточного соединения 109.
Ь) Получение промежуточного соединения 110
Смесь промежуточного соединения 109 (2,3 г, 3,609 ммоля) и 3-хлор-бензолкарбопероксовой кислоты (1,87 г, 10,9 ммоля) в DCM (100 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха с получением 2,6 г промежуточного соединения 110.
Пример A30
Получение промежуточных соединений 111 и 112
BuLi 1,бМ в гексане (1,37 мл, 2,19 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,31 мл, 2,19 ммоля) в THF (3 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор б-бром-3-[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (0,79 г, 2,19 ммоля) в THF (8 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 40 минут. Раствор промежуточного соединения 123 (0,53 г, 1,83 ммоля) в THF (5 мл) добавляли при -78°С, затем перемешивали в течение 4 0 минут при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (1,3 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (SiOH с зернами неправильной формы 15-40 мкм, 300 г MERCK); подвижной фазой (цикло 80% EtOAc 20%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая, соответственно, 0,29 г промежуточного соединения 111 и 0,35 г промежуточного соединения 112.
Пример А31
а) Получение промежуточного соединения 113
BuLi 1,ЗМ в Cyclo (70 мл, 91 ммоль) каплями добавляли в N2 к раствору 4,4-(этилендиокси)-1-трет-бутоксикарбонилпиперидина (17 г, 7 0 ммоль) и N, N, N', N '-тетраметилэтилендиамина (10,5 мл,
7 0 ммоль) в диэтиловом эфире (110 мл) при -7 0°С. Смесь перемешивали при -7 0°С в течение 3 часов. Добавляли раствор 4-фторбензальдегида (7,4 мл, 77 ммолей) в диэтиловом эфире (15 мл) с такой скоростью, что сохранялась температура ниже -60°С, а затем смесь перемешивали в течение 3 часов при -7 0°С. Добавляли 10% водный раствор NH4CI (130 мл) . Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Осадок отфильтровывали и сушили (60°С, вакуум). Остаток очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (SiOH с зернами неправильной формы 2 0-4 5 мкм, 4 50 г MATREX); подвижной фазой (цикло 60%, EtOAc 4 0%) . Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 11 г промежуточного соединения 113 .
Ь) Получение промежуточного соединения 114
Смесь промежуточного соединения 113 (12,9 г, 35,11 ммоля) и третбутоксида калия (0,394 г, 3,511 ммоля) в iPrOH (80 мл) перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов, затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную в результате суспензия охлаждали до 0°С, перемешивали в течение 30 минут и отфильтровали. Осадок промывали холодным iPrOH (20 мл) и сушили (50°С, вакуум). Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем S1O2 (15-40 мкм, 450 г) Cyclo/EtOAc 60/40. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 2 г промежуточного соединения 114.
Раствор промежуточного соединения 114 (8,5 г, 37,17 ммоля)
с) Получение промежуточного соединения 115
в МеОН (120 мл) гидрогенизировали (3 бар) при 50°С с сухим Pd/C 10% (3 г) в качестве катализатора в течение 4 часов. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали, получая 7,1 г (97,5%) промежуточного соединения 115.
d) Получение промежуточного соединения 116
Промежуточное соединение 115 (18,3 ммоля) в НС1 бн (50 мл) перемешивали с обратным холодильником в течение 4 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали на лед и подкисляли 10% водным раствором К2СО3. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха, получая 9,4 г (82,6%) промежуточного соединения 116.
е) Получение промежуточных соединений 117 и 118
Раствор промежуточного соединения 116 (7,5 г, 36,19 ммоля), ди-трет-бутилбикарбоната (7,9 г, 36,19 ммоля) и триэтиламина (5,03 мл, 36,19 ммоля) в THF (85 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (14,7 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией на SiOH с зернами неправильной формы 2 0-4 5 мкм, 1000 г MATREX; подвижной фазой (цикло 7 0%, EtOAc 3 0%) . Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (12,4 г) очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5
мкм, 250x20 мм) ; подвижной фазой (iPA 0%; С02 90%, МеОН 10%) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 5,2 г (37,3%) промежуточного соединения 117 и 5,4 г (38,7%) промежуточного соединения 118. Пример A32
а) Получение промежуточного соединения 119
BuLi 1,бМ в гексане (8,29 мл, 13,3 ммоля) каплями добавляли к раствору 2-бромпиридина (1,26 мл, 13,3 ммоля) в диэтиловом эфире (15 мл) при -78°С в потоке N2, затем смесь перемешивали 45 минут при -78°С. Каплями добавляли раствор 7-
формил-1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декан-8-карбоновой
кислоты
сложный 1,1-диметилэтиловый эфир (3 г, 11,1 ммоля) в диэтиловом эфире (30 мл), затем смесь перемешивали при -78°С в течение 4 часов. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха.
Остаток очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 200 г), DCM/MeOH/NH4OH: 97/3/0,1. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 1,4 г промежуточного соединения 119.
Ь) Получение промежуточного соединения 12 0
Смесь промежуточного соединения 119 (1,1 г, 3,14 ммоля) и третбутоксида калия (0,035 г, 0,314 ммоля) в iPrOH (4 мл) перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов, а затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили
над MgSC> 4, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,74 г (85,3%) промежуточного соединения 120. с) Получение промежуточного соединения 121
Раствор промежуточного соединения 120 (0,74 г, 2,68 ммоля) в МеОН (10 мл) гидрогенизировали (3 бар) при 50°С с сухим Pd/C 10% (0,1 г) в качестве катализатора в течение 2 часов. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали, получая 0,52 г (82,9%) промежуточного соединения 121.
d) Получение промежуточного соединения 122
Промежуточное соединение 121 (1,15 г, 4,91 ммоля) в НС1 бн (10 мл) перемешивали при 100°С в течение 5 часов, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали в NaOH Зн и экстрагировали с помощью DCM (три раза). Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,6 г (67,1%) промежуточного соединения 122.
е) Получение промежуточных соединений 12 3 и 12 4
Раствор промежуточного соединения 122 (0,6 г, 3,15 ммоля), ди-трет-бутилбикарбоната (0,69 г, 3,15 ммоля) и триэтиламина (0,44 мл, 3,15 ммоля) в THF (10 мл) выдерживали в течение ночи при комнатной температуре, затем смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04,
фильтровали и растворитель выпаривали досуха.
Остаток очищали хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 30 г), DCM/MeOH/NH4OH: 97/3/0,1. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,45 г) объединяли с фракцией, полученной подобным путем, а затем очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (С02 90%, МеОН 10%). Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 533 мг промежуточного соединения 12 3 и 50 6 мг промежуточного соединения 124.
Пример АЗЗ
BuLi 1,6М в гексане (3,41 мл, 5,46 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,7 67 мл, 5,46 ммоля) в THF (8 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 56 (1,5 г, 4,55 ммоля) в THF (15 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Добавляли раствор 3,3-диметил-4-оксо-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложный 1,1-диметилэтиловый эфир (1,24 г, 5,46 ммоля) в THF (12 мл) при -7 8°С, затем перемешивали в течение 2 часов при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (2,8 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г, Merck, подвижной фазой (85% цикло,15% EtOAc). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток
(2 г) очищали хиральной SFC on Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (iPA 0,3%, 70% С02, 30% EtOH) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 0,58 г (22,9%) промежуточного соединения 125 и 0,87 г (34,3%) промежуточного соединения 12 6. Пример A34
Получение промежуточного соединения 12 7
Раствор промежуточного соединения 26 (0,917 ммоля), триацетоксиборгидрида натрия (1,833 ммоля) и N-метилпропиламина (1,8 33 ммоля) в THF (10 мл) и уксусной кислоты (2,75 ммоля) перемешивали в течение 4 часов. Добавляли 10% водный раствор К2СО3 и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,49 г (88,7%) промежуточного соединения 127.
Пример A35
а) Получение промежуточного соединения 12 8
Раствор 4-оксо-З-(2-пиридинилметил)-1, 3-
пиперидиндикарбоновой кислоты, сложного 1-(1,1-диметилэтил)-3-этилового эфира (13 г, 35, 869 ммоля) в НС1 бн (88 мл) и МеОН (15 мл) нагревали до температуры флегмы при перемешивании в течение 2 0 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли до рН 10 с помощью NaOH бн (2,5 мл) и экстрагировали с помощью DCM (3 раза). Объединенные
органические слои сушили над MgSC> 4, фильтровали и
концентрировали, получая 4,52 г промежуточного соединения 128.
Ь) Получение промежуточных соединений 12 9 и 130
Триэтиламин (6,61 мл, 47,52 ммоля), а затем ди-трет-бутилбикарбонат (5,2 г, 2 3,8 ммоля) добавляли к раствору промежуточного соединения 128 (4,52 г, 23,76 ммоля) в THF (60 мл) . Полученную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Раствор выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (6,8 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г, Merck); подвижной фазой (90% С02, 10% (МеОН 50% iPrOH 50%)). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток очищали хиральной SFC на Chiralpak AD; подвижной фазой (90% С02, 5% МеОН, 5% iPrOH, 0,3% iPa) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 2,2 г (31,89%) промежуточного соединения 129 и 2 г (29,0%) промежуточного соединения 130.
BuLi 1,6М в гексане (1,94 мл, 3,1 ммоля) медленно добавляли при -2 0°С в потоке N2 к раствору диизопропиламина
с) Получение промежуточного соединения 131
(0,43 мл, 3,1 ммоля) в THF (4,5 мл) . Смесь перемешивали при -2 0°С в течение 2 0 минут, затем охлаждали до -7 0°С. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 56 (0,85 г, 2,58 ммоля) в THF (9 мл) . Смесь перемешивали при -70°С в течение 90 минут. Медленно добавляли раствор промежуточного соединения 129
(0,9 г, 3,11 ммоля) в THF (9 мл). Данную смесь перемешивали при
-70°С в течение 2 часов, гидролизовали при -30°С с помощью ледяной воды и экстрагировали, используя EtOAc. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (30 г, 15-40 ц, Cyclo/EtOAc 85/15). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 0,9 г (56,1%) промежуточного соединения 131. с!) Получение промежуточного соединения 132
Смесь промежуточного соединения 131 (0,9 г, 1,45 ммоля) и хлорпероксибензойной кислоты (1,07 г, 4,35 ммоля) в DCM (20 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 805 мг (83%) промежуточного соединения 132.
Пример A3 б
а) Получение промежуточного соединения 133
б-Бром-2-метокси-З-метил-хинолин (7,9 г, 31,34 ммоля), N-бромсукцинимид (5,58 г; 31,34 ммоля) и бензоилпероксид (0,76 г, 3,13 ммоля) добавляли в 1,2-дихлорэтан (79 мл) . Смесь
перемешивали при 8 0°С в течение ночи, выливали в воду, подкисляли 10% водным раствором К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой сушили над MgS04, фильтровали и выпаривали при пониженном давлении досуха. Остаток (10,08 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г, Matrex) ; подвижной фазой, градиент от 90% гептана, 10% EtOAc до 85% гептана, 15% EtOAc. Очищенные фракции собирали и концентрировали, получая 5,90 г промежуточного соединения 133.
Ь) Получение промежуточного соединения 134
Раствор промежуточного соединения 133 (1,49 г, 0,0045 моля), пиразола (0,34 г, 0,005 моля), К2СО3 (0,68 г, 0,005 моля) в ацетонитриле перемешивали и нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Раствор охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду. Добавляли DCM и органический слой экстрагировали, сушили над MgS04, отфильтровывали и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (гептан/EtOAc 8 0/2 0) . Чистые фракции собирали и выпаривали с получением 1,2 г (82%) промежуточного соединения 134.
с) Получение промежуточного соединения 135
BuLi 1,6М в гексане (1,9 мл, 3,1 ммоля) каплями добавляли в дииз о про пил амин (0,43 мл, 3,1 ммоля) в THF (3 мл), перемешивали в N2 при -2 0°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Каплями добавляли
промежуточное соединение 134 (0,82 г, 2,6 ммоля) в THF (8 мл) и полученный в результате красный раствор перемешивали при -7 8°С в течение 1 часа. Добавляли (2R)-4-оксо-2-(фенилметил)-1-пиперидинкарбоновой кислоты сложный 1, 1-диметилэтиловый эфир
(0,89 г, 3,1 ммоля) в THF (8 мл) и смесь перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Добавляли воду. Водный слой экстрагировали с помощью EtOAc. Объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток (1,83 г) очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы
(15-40 мкм, 300 г, MERCK); подвижной фазой 90% цикло, 10% EtOAc. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (0,486 г) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой, градиент от 0,3% iPa, 75% С02, 25% МеОН до 0,3% iPa, 75% С02, 25% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 20,18 г промежуточного соединения 135.
В. Получение конечных соединений Пример В1
Получение соединений 1, 2, 3 и 4
Трифторуксусную кислоту (12 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 3 (3,8 г, 6,07 ммоля) в DCM (38 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов и подкисляли 10% водным раствором карбоната калия. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Остаток (3,6 г)
очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Cartridge, 15-40 мкм, 90 г); подвижной фазой (NH4OH 0,3%; DCM 95%, МеОН 5%), получая, соответственно, 160 мг фракции F1 и 2,7 г фракции F2 .
Фракцию F2 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм) ; подвижной фазой (iPA 0,3%; СОг 60%, МеОН 40%), получая, соответственно, 2,15 г фракции F2/1 и 150 мг соединения 1.
Фракцию F2/1 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм) ; подвижной фазой (iPA 0,3%; С02 75%, МеОН 12,5%, iPrOH 12.5%), получая, соответственно, 1,2 г соединения 2, температура плавления 12б°С, 620 мг соединения 3, температура плавления 14б°С, и 135 мг соединения 4.
Соединение 1: оптическое вращение: -153,8° (589 нм, с 0,342% масса/объем, DMF, 20°С)
Соединение 2: оптическое вращение: +76,76° (589 нм, с 0,37% масса/объем, DMF, 20°С)
Соединение 3: оптическое вращение: -182,79° (589 нм, с 0,3835% масса/объем, DMF, 20°С)
Соединение 4: оптическое вращение: +140,04° (589 нм, с 0,2835% масса/объем, DMF, 20°С)
Пример В2
Раствор соединения 37 (0,052 г, 0,102 ммоля) и хлористоводородной кислоты (3 N, 0,6 мл) в THF (0,6 мл)
Получение соединения 5
перемешивали в течение ночи при 7 0°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры и осадок фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С, получая 41 мг соединения 5, температура плавления: > 250°С. Пример ВЗ
Получение соединения б
(2S*),(A) .0.97 НС1
Смесь промежуточного соединения 8 (0,45 г, 0,684 ммоля) в хлористоводородной кислоте (5 мл) и THF (5 мл) перемешивали при 60°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Осадок отфильтровывали и сушили (вакуум, 60°С) , получая 0,165 г соединения б, температура плавления: > 250°С.
Пример В4
Получение соединения 7
Смесь промежуточного соединения 10 (0,0002 моля) и трифторуксусной кислоты (0,004 моля) в DCM (1,6 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, выливали в 10% водный раствор карбоната калия и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой промывали водой, сушили (MgSO,}) , фильтровали и растворитель выпаривали досуха. К осадку
порциями добавляли 0,037 г фумаровой кислоты (в 2-пропаноне). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Осадок отфильтровывали, промывали 2-пропаноном и сушили при 60°С в вакууме. Остаток (0,073 г) растворяли в DCM. Смесь подкисляли 10% водным раствором карбоната калия и растворяли в диэтиловом эфире. Каплями добавляли НС1 5н (в 2-пропаноне). Смесь отфильтровывали и сушили в вакууме. Остаток растворяли в THF (1 мл) и добавляли НС1 Зн (1 мл) . Смесь перемешивали при 7 0°С в течение ночи и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли лед и воду. Смесь перемешивали при 0°С в течение 15 минут. Осадок отфильтровывали и сушили при 60°С в вакууме, получая 0,02 г (20%) соединения 7, оптическое вращение: +78,57° (589 нм, с 0, 224% масса/объем, DMF, 20°С) . Пример В5
а) Получение соединений 8 и 9
Раствор промежуточного соединения 16 (0,52 г, 0,781 ммоля) и тетрабутиламмония фторида 1М в THF (0,781 мл, 0,781 ммоля) в THF (10 мл) перемешивали при 0°С в течение 2 часов. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,52 г) очищали хиральной SFC (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм) ; подвижной фазой (градиент от 0,3% iPA, 60% С02, 40% EtOH до 0,3% iPA, 60% С02, 40% EtOH) . Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 134 мг соединения 8 и 193 мг Fl. F1 кристаллизовали из МеОН, получая 135 мг (31,3%) соединения 9, температура плавления 182°С.
Ь) Получение соединения 10
Смесь соединения 8 (0,243 ммоля) в МеОН (5 мл) и EtOAc (5 мл) гидрогенизировали (Patm) при комнатной температуре с Pd/C (25 мг) в качестве катализатора в течение 1,30 часа, затем 2 часов и в течение ночи. Катализатор фильтровали через тонкую подушку из целита, целит промывали с помощью EtOAc, фильтрат промывали 10% водным раствором карбоната калия, затем солевым раствором, сушили (MgSO,}) и выпаривали досуха. Остаток очищали хроматографией с обращенной фазой на Nucleodur-Sphinx гр 5 мкм 21x150 мм; подвижной фазой (градиент от 30% NH4HCO3 0,5%, 70% МеОН до 0% NH4HCO3 0,5%, 100% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 27 мг соединения 10. Пример Вб
Получение соединения 11
Трибромид бора (3,77 мл, 3,77 ммоля) каплями добавляли к
раствору промежуточного соединения 19 (0,46 г, 0,7 54 ммоля) в
DCM (10 мл) при 5°С, реакционную смесь перемешивали в течение 3
часов и обеспечивали достижение приблизительно 15°С. Реакционную смесь выливали в 10% водный раствор карбоната калия и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха.
Остаток очищали хроматографией на колонке с SiOH (3,5 мкм, 30x150 мм); от DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0,2 до DCM/MeOH/NH4OH 90/10/1). Очищенные фракции собирали и выпаривали до сухого состояния. Остаток (0,11 г) кристаллизовали из DIPE, получая 0,054 г соединения 11, температура плавления 143°С, оптическое вращение: +189,15° (589 нм, с 0, 3225% масса/объем, DMF, 20°С) . Пример В7
Получение соединения 12
Раствор промежуточного соединения 2 7 (0,7 ммоля) в HCl/iPrOH 5-бМ (4 мл) перемешивали при 0°С в течение 2 часов. Гелеобразный остаток помещали в EtOAc и 10% водный раствор карбоната калия. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из DIPE, получая 137 мг соединения 12, температура плавления: 135°С, оптическое вращение: -134,65° (589 нм, с 0,303% масса/объем, DMF, 20°С) .
Пример В8
Раствор промежуточного соединения 35 (1,02 г, 1,571 ммоля)
Получение соединений 13 и 14
и тетрабутиламмония фторида 1М в THF (1,57 мл, 1,57 ммоля) в THF (20 мл) перемешивали при 0°С в течение 2 часов. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,9 г) очищали хиральной SFC (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм); подвижной фазой (0,3% iPA, 70% СОг, 30% EtOH). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая, соответственно, 0,245 г соединения 13, оптическое вращение +99,45° (589 нм, с 0,2735% масса/объем, DMF, 20°С) , и 0,4 г соединение 14, температура плавления 162°С, оптическое вращение -87,9° (589 нм, с 0,281% масса/объем, DMF, 20°С) .
Пример В9
Получение соединения 15
Смесь соединения 34 (0,362 ммоля), пиридин-3-бороновой кислоты сложного 1,3-пропандиолового циклического эфира (0,544 ммоля), тетракис(трифенилфосфин)палладия (0,0362 ммоля) и карбоната калия 2М (0,725 ммоля) в DME перемешивали в N2 при 90°С в течение 2 часов, затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Неочищенный продукт кристаллизовали из МеОН, получая 0,075 г соединения 15, температура плавления: 22 0°С.
Пример В10
Получение соединения 16
Раствор соединения 248 (0,15 г, 0,28 ммоля), аммония формиата (0,088 г, 1,401 ммоля) и Pd/C (0,15 г, 1,41 ммоля) в МеОН (3 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем раствор фильтровали через целит и промывали с помощью DCM. Фильтрат промывали водой и солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Фумаровую кислоту (0,056 г, 0,48 ммоля) порциями добавляли к раствору чистого продукта (0,110 г, 0,24 ммоля) в ацетоне (4 мл). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном и сушили в вакууме при 60°С, получая 0,085 г соединения 16, температура плавления 1бб-1б8°С.
Пример В11
Получение соединений 17 и 18
(2R), цис-1 Соединение 18. 1.97 С4Н404 Соединение 17. Основание
Промежуточное соединение 41 лишали защитной группы способом, аналогичным таковому в примере В1. Лишенное защитной группы соединение (0,0009 моля) смешивали с формальдегидом (0,0038 моля) в DCM (9 мл) и перемешивали при комнатной
температуре в течение 15 минут. Добавляли триацетоксиборгидрид натрия (0,0023 моля). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду. Смесь экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, сушили (MgS04) , фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток (0,416 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: DCM/MeOH 97/3; 15-40 мкм) . Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая соединение 17 (0,1 г), которое превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты. Осадок фильтровали, промывали с помощью DIPE и сушили в вакууме, получая 0,078 г соединения 18. Пример В12
Получение соединения 19
Промежуточное соединение 41 лишали защитной группы способом, аналогичным таковому в примере Bl. BuLi (0,0025 моля)
каплями добавляли при -7 8°С к раствору лишенного защитной группы соединения (0, 0007 моля) в диэтиловом эфире (4 мл) . Раствор перемешивали при -78°С в течение 4 часов. Добавляли воду. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, сушили (MgS04) , фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток (0,357 г) очищали хроматографией с обращенной фазой на силикагеле (элюент: DCM/MeOH/NH4HC03 0, 5% от 80/20 до 100/0; Sunfire 5 мкм). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на Kromasil, 10 мкм (элюент: DCM/MeOH/NH4OH 96/4/0,1). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 0,046 г соединения
Раствор промежуточного соединения 2 8 (0,387 ммоля) в HCl/iPrOH (2 мл) перемешивали при 0°С в течение 2 часов и затем выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из диэтилового эфира. Остаток помещали в EtOAc и 10% водный раствор карбоната калия, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из диэтилового эфира, получая б мг соединения 20, температура плавления: 232°С.
Пример В14
Получение соединений 21, 22, 23 и 24
BuLi 1,бМ в гексане (1,93 мл, 3,09 ммоля) каплями добавляли в потоке N2 к раствору диизопропиламина (0,434 мл, 3,091 ммоля) в THF (4 мл) при -20°С. Смесь перемешивали в течение 2 0 минут при -2 0°С, затем охлаждали до -7 8°С. Добавляли раствор промежуточного соединения 2 (0,757 г, 2,38 ммоля) в THF (4 мл), затем перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Раствор
промежуточного соединения 40 (0,8 г, 2,85 ммоля) в THF (4 мл) добавляли при -7 8°С, затем перемешивали в течение 3 часов при -7 8°С. Добавляли воду и EtOAc, органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 50 г, от DCM 100/0 до DCM/MeOH/NH4OH: 98,5/1,5/0,1). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм; подвижной фазой (0,3% iPA, 50% СОг, 50% ETIP), получая, соответственно, 0,089 г соединения 21, 0,124 г соединения 22, 0,177 г соединения 23 и 0,218 г соединения 24.
Пример В15
Получение соединений 25 и 26
Соединение 25 (А). 1.94 С4Н404 Соединение 26 (В). 1.24 С4Н404
BuLi 1,бМ в гексане (0,0033 моля) каплями добавляли при -
20°С к раствору N- (1-метилэтил)-2-пропанамина (0, 0033 моля) в
THF (7 мл) в потоке N2. Смесь перемешивали при -2 0°С в течение
20 минут, затем охлаждали до -70°С. Добавляли раствор б-бром-3-
[(4-хлорфенил)метил]-2-метокси-хинолина (0,0027 моля) в THF (10 мл) . Смесь перемешивали при -70°С в течение 1 часа. Каплями добавляли раствор З-метил-1-(фенилметил)-4-пиперидинона (0,003 моля) в THF (б мл) . Смесь перемешивали при -70°С в течение 2 часов. Добавляли воду. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой промывали насыщенным раствором NaCl, сушили
(MgS04) , фильтровали и растворитель выпаривали. Остаток (1,3 г) очищали с помощью SFC (элюент: C02/MeOH/iPA 90/10/0,5).
Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 0,16 г (10%) фракции F1 и 0,2 г (13%) фракции F2. Фракцию F1 растворяли в бутендиовой кислоте (0,066 г) и превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты с 2-пропаноном (4 мл) . Осадок помещали в диэтиловый эфир, отфильтровывали и сушили, получая 0,115 г (5%) соединения 25, температура плавления 154°С. Фракцию F2 растворяли в бутендиовой кислоте (0,082 г) и превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты с 2-пропаноном (4 мл). Осадок помещали в диэтиловый эфир, отфильтровывали, получая 0,24 (12%) соединения 26, температура плавления 238°С. Пример В16
Получение соединений 2 7 и 2 8
Смесь соединения 23 (0,296 ммоля) в МеОН (5 мл) и уксусной кислоты (0,4 мл) гидрогенизировали (Patm) при комнатной температуре с сухим Pd/C 10% (35 мг) в качестве катализатора в течение 3 часов. Добавляли 10% водный раствор карбоната калия и EtOAc, смесь фильтровали через тонкую подушку из целита, органический слой отделяли, промывали солевым раствором, сушили (MgS04) и выпаривали досуха. Остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 10 г, от DCM до DCM/MeOH/NH4OH: 90/10/0,2). Очищенные фракции собирали и
выпаривали досуха. Остаток очищали хроматографией с обращенной фазой на Х-Тегга-С18 (10 мкм, 19x150 мм); подвижной фазой, градиент от 30% NH4HC03 0, 5%, 70% МеОН до 0% NH4HC03 0, 5%, 100% МеОН), получая 20 мг соединения 27 и 25 мг соединения 28. Пример В17
а) Получение соединения 2 9
Смесь соединения 14 (0, 654 ммоля) в МеОН (5 мл) гидрогенизировали (Patm) при комнатной температуре с Pd/C (35 мг) в качестве катализатора в течение 90 минут. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали досуха. Остаток (2 60 мг) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H, 5 мкм 250x20 мм; подвижной фазой (0,3% iPA, 70% С02, 30% EtOH). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (225 мг) кристаллизовали из DIPE, получая 166 мг соединения 29, температура плавления: 135°С.
Ь) Получение соединения 3 0
Смесь соединения 13 (0, 374 ммоля) в МеОН (5 мл) и THF (2 мл) гидрогенизировали (Patm) при комнатной температуре с Pd/C (20 мг) в качестве катализатора в течение 90 минут. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали досуха. Остаток (14 0 мг) очищали хроматографией с нормальной фазой на стабильном оксиде
кремния 5 мкм 150x30,0 мм); подвижной фазой (градиент от 0,4% NH4OH, 96% DCM, 4% МеОН до 1,5% NH4OH, 85% DCM, 15% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали, получая 55 мг соединения 30. Пример В18
Получение соединения 31
Раствор промежуточного соединения 44 (3,76 ммоля, 2,45 г) в TFA (8 мл) и DCM (25 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из МеОН, получая 1 г соединения 31. Фильтрат повторно кристаллизовали из МеОН, получая еще 0,7 г соединения 31, температура плавления: 18 3°С.
Пример В19
Получение соединения 32
Раствор промежуточного соединения 42 (0,0002 моля) в TFA (1,5 мл) и DCM (1,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли,
промывали водой, сушили над MgSC> 4, отфильтровывали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,115 г (91%) соединения 32.
Пример В2 0
Получение соединения 33
Раствор промежуточного соединения 4 8 в TFA и DCM перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,47 г, 100%) кристаллизовали из DIPE, получая 0,317 г (71%) соединения 33, температура плавления 177°С, оптическое вращение: +232,66° (589 нм, с 0,297% масса/объем, DMF, 20°С). Пример В21
Получение соединения 34
Раствор промежуточного соединения 50 в TFA и DCM перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,86 г, 100%) очищали посредством колоночной хроматографии на
силикагеле (Si02, 15-40 мкм), элюент: DCM/iPrOH/NH4OH: 97/3/0,1) . Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая, соответственно, 0,63 г фракции F1 и 0,25 г фракции F2. F2 очищали с помощью SFC (элюент: С0г/Ме0Н/1РА: 70/30/0,5). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,025 г F2/1 и 0,188 г F2/2. F1 объединяли с F2/2 с получением 0,818 г соединения 34. Пример В22
.1.21 С4Н4О4 (2Р.),цис-1
Раствор промежуточного соединения 49 (1,69 ммоля) в TFA (2,2 мл) и DCM (11 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,95 г, 100%) (0,4 г, 0,72 ммоля) растворяли в 2-пропаноне (4 мл) и превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты (1 экв., 0,085 г), растворенную в ацетоне/EtOH: 50/50, 2 мл, получая 0,40 г соединения 35, температура плавления: 14 5°С.
Ь) Получение соединения 3 6
Смесь соединения 35 (0,525 ммоля), пиридин-3-бороновой кислоты сложного 1, 3-пропандиолового циклического эфира (0,788 ммоля), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (0,0525 ммоля) и
K2C03 2М (1,051 ммоля) в DME (4 мл) перемешивали в N2 при 90°С в течение 2 часов, затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой, затем солевым раствором, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,32 г) очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (Si02, 3,5 мкм), элюент: DCM/MeOH/NH4OH водный: 98/2/0,2-92/8/0,8. Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,225 г, 77,8%) кристаллизовали из DIPE, получая 0,107 г (37,0%) соединения 36, температура плавления: 120°С. Пример В2 3
Получение соединения 37
Трифторуксусную кислоту (0,36 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 52 (0,12 г, 0,198 ммоля) в DCM (1,2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов и подкисляли 10% водным раствором К2СО3. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Часть (50 мг) остатка (100 мг) кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С, получая 25 мг соединения 37, температура плавления: 107°С. Пример В2 4
Получение соединения 3 8
Трифторуксусную кислоту (3 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 59 (1,02 г, 1,57 ммоля) в DCM (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов и подкисляли 10% водным раствором К2СОз. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Остаток кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С. Остаток (966 мг) очищали хроматографией с нормальной фазой на Cartridge (15-40 мкм, 30 г); подвижной фазой (0,5% NH4OH, 95% DCM, 5% МеОН). Очищенные фракции собирали и растворитель выпаривали. Остаток (67 0 мг) кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С, получая 0,535 г (62,0%) соединения 38, температура плавления 130°С.
Пример В2 5
Получение соединения 3 9
Раствор промежуточного соединения 60 (730 мг, 1,06 ммоля) и TFA (1,96 мл, 25, 46 ммоля) в DCM (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Продукт кристаллизовали из МеОН, получая 4 92 мг (79%) соединения 39,
температура плавления 10б°С, оптическое вращение: -115,3° (589 нм, с 0, 3365% масса/объем, DMF, 20°С) . Пример В2 6
Получение соединения 4 0
.0.96 НС1
(28*),цис-1
Раствор промежуточного соединения 67 (1,18 ммоля) и TFA (2,18 мл, 28,26 ммоля) в DCM (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток растворяли в диэтиловом эфире (6 мл) и НС1 5н в iPrOH медленно каплями добавляли к полученному белому осадку. Твердое вещество отфильтровывали и сушили в вакууме, в качестве продукта была смесь хинолина и хинолона (60/40) . Остаток растворяли в THF (6 мл), добавляли
НС1 Зн (6 мл) и смесь перемешивали при 7 0°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду со льдом. Раствор перемешивали в течение 15 минут при 0°С, осадок фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 415 мг (61%) соединения 40, температура плавления 224°С, оптическое вращение: +48,62° (589 нм, с 0,3435% масса/объем, DMF, 20°С). Пример В2 7
Получение соединения 41
(3*S),(A)
Раствор промежуточного соединения 71 (65 мг, 0,0997 ммоля) в TFA (0,2 мл) и DCM (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 40 мг (72,8%) соединений 41.
Пример В2 8
Получение соединения 42
0,77 HCI (23),цис-4
Раствор промежуточного соединения 80 (255 мг, 0,38 ммоля) и НС1 Зн (2,6 мл) в THF (2,6 мл) перемешивали в течение ночи при 7 0°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду. Раствор перемешивали 3 0 минут и осадок фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С. Остаток кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 211 мг (95,0%) соединения 42, температура плавления > 250°С.
Пример В2 9
а) Получение соединения 61
(2Р.),транс-2
Трифторуксусную кислоту (1,5 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 83 (0,514 г, 0,809 ммоля) в DCM (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов и подкисляли 10% водным раствором К2СОз. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Часть (240 мг) остатка (430 мг) кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С, получая 161 мг соединения 61.
Ь) Получение соединения 4 3
.0.84 НС1
(2Р.),транс-2
Раствор соединения 61 (0,24 г, 0,448 ммоля) и НС1 Зн (2,5 мл) в THF (2,5 мл) перемешивали в течение ночи при 7 0°С. Смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в ледяную воду. Раствор перемешивали в течение 30 минут и осадок фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме при 60°С. Остаток кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 215 мг (86,9%) соединения 43, температура плавления: > 250°С.
Пример ВЗО
Получение соединений 44, 45, 46 и 47
Соединение 44 (2R),транс-1 Соединение 45 (2Р.),транс-2 Соединение 46 (2Р.),цис-3 Соединение 47 (2Р.),цис-4
Трифторуксусную кислоту (20 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 87 (6,07 г, 9,07 ммоля) в DCM (61 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов и подкисляли 10% водным раствором К2СОз. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Остаток (5,15 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 90 г, DCM/MeOH/NH4OH: 97/3/0,1). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток (3,6 г) очищали с помощью SFC на колонке Chiralpak AD-HTM (5 мкм, 20x250 мм) со скоростью потока 50 мл/минута, при этом колонку выдерживали при температуре 35°С и выходном давлении 100 бар. Подвижная фаза представляет собой С02 65%, EtOH 17,5%, iPrOH 17.5% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха, получая, соответственно, 1,52 г соединения 44, температура плавления: 148°С, оптическое вращение: +46,5° (589 нм, с 0, 329% масса/объем, DMF, 20°С; 900 мг соединения 45, температура плавления: 160°С, оптическое вращение: -162,08° (589 нм, с 0,327% масса/объем, DMF, 20°С; 250 мг фракции F3 и 180 мг фракции F4.
Часть (12 5 мг) фракции F3 кристаллизовали из DIPE и сушили при 60°С в вакууме, получая 61 мг соединения 4 6, температура плавления: 145°С, оптическое вращение: +126,22° (589 нм, с 0,286% масса/объем, DMF, 20°С.
Часть (90 мг) фракции F4 кристаллизовали из DIPE и сушили
при 60°С в вакууме, получая 51 мг соединения 47, температура плавления: 174°С, оптическое вращение: -141,92° (589 нм, с 0,291% масса/объем, DMF, 20°С. Пример В31
Получение соединения 4 8
(3R*),(B)
Раствор промежуточного соединения 92 (1,1 г, 1,64 ммоля) в
TFA (3,5 мл) и DCM (11 мл) перемешивали при комнатной
температуре в течение 4 часов. Смесь выливали в 10% водный
раствор К2СО3 и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой
отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и
растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,95 г)
кристаллизовали из DIPE, отфильтровывали и сушили (вакуум, 60°С) , получая 0,718 г соединения 48, температура плавления: 221°С.
Пример В32
Получение соединения 4 9
0.24 НС1 (3S*), (А)
Смесь промежуточного соединения 94 (0,4 г, 0,597 ммоля) в НС1 Зн (4 мл) и THF (4 мл) перемешивали при 60°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Смесь выливали
в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью EtOAc. Органический слой отделяли, промывали водой затем солевым раствором, сушили (MgSO,}) , фильтровали и выпаривали досуха. Остаток кристаллизовали из DIPE, получая 0,27 г (80%) соединения 49, температура плавления: 18 3°С. Пример ВЗЗ
Получение соединения 50
.1.47 C2HF3O2 (23*),цис-2
При 0°С TFA (0,3 мл) каплями добавляли в смесь промежуточного соединения 103 (0,1 г, 0,153 ммоля) в DCM (10 мл) . Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в DIPE и осадок отфильтровывали, получая 102 мг (84,1%) соединения 50, температура плавления: 208°С, оптическое вращение: +109,94° (589 нм, с 0, 322% масса/объем, DMF, 20°С) .
Пример В34
Получение соединения 51
(2Р.*),цис-3
.1.33 C2HF3O2
При 0°С TFA (1 мл) каплями добавляли в смесь
промежуточного соединения 106 (0,31 г, 0,451 ммоля) в DCM (15
мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12
часов. Растворитель выпаривали. Остаток помещали в DIPE и
осадок отфильтровывали, сушили на воздухе, получая 290 мг (87%)
соединения 51,температура плавления 17б°С, оптическое вращение:
-101,43° (589 нм, с 0,28% масса/объем, DMF, 20°С).
Пример В35
Получение соединений 52, 53, 54 и 55
Соединение 52 (2R),цис-1 Соединение 53 (2Р),цис-2 Соединение 54 0,6C4H4O4, (2R),TpaHC-3 Соединение 55 1,1 С4Н4О4, (2R),TpaHC-4
Трифторуксусную кислоту (4 мл) добавляли к раствору
промежуточного соединения 108 (1,3 г, 2,2 ммоля) в DCM (13 мл).
Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в
течение 3 часов и подкисляли 10% водным раствором К2СО3.
Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над
MgS04, фильтровали и концентрировали. Остаток (0,95 г) очищали
высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5
мкм, 250x20 мм), подвижной фазой: iPA 0,3%; С02 60%, EtOH 20%,
iPrOH 20%, получая, соответственно, 263 мг фракции F1 и 550 мг
фракции F2.
Фракцию F2 очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм) , подвижной фазой: iPA 0,3%, С02 70%, EtOH 15%, iPrOH 15%, получая 49 мг фракции F2/1, 273 мг фракции F2/2, 55 мг фракции F2/3 и 98 мг фракции F2/4.
Часть F1 (197 мг) кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 97 мг соединения 52,
температура плавления: 17б°С.
Часть F2/2 (199 мг) кристаллизовали из DIPE, фильтровали и
сушили в вакууме при 60°С, получая 167 мг соединения 53,
температура плавления: 102°С.
Фумаровую кислоту (0,013 г, 0,112 ммоля) порциями добавляли к раствору чистого продукта F2/3 (0,055 г, 0,112 ммоля) в ацетоне (1 мл) . Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном и сушили в вакууме при 60°С, получая 3 6 мг соединения
54, температура плавления: 2 0 9°С.
Фумаровую кислоту (0,023 г, 0,199 ммоля) порциями добавляли к раствору чистого продукта F2/4 (0,098 г, 0,199 ммоля) в ацетоне (1 мл) . Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Осадок отфильтровывали, промывали ацетоном и сушили в вакууме при 60°С, получая 63 мг соединения
55, температура плавления: 120°С.
Пример ВЗб
Получение соединений 56, 57, 58 и 59
Соединение 56 (2R*),цис-1 Соединение 57 (2Р*),цис-2 Соединение 58 (2R*),транс-3 Соединение 59 (2R*),TpaHC-4
ммоля) и НС1 Зн (НС1 Зн, 5 мл) в THF течение ночи при 7 0°С. Смесь
Раствор промежуточного соединения 110 (1,15 г, 1,718
до комнатной до достижения
5 мл) перемешивали в при /ire. Смесь охлаждали
температуры, добавляли DCM и порошок К2СОз основного рН. Органическую фазу собирали, сушили с помощью MgS04 и растворитель выпаривали. Часть остатка (990 мг) осаждали в DCM. Остаток очищали хроматографией с нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы, 15-4 0 мкм, 300 г, MERCK; подвижной фазой (NH4OH 1%, 90% DCM, 10% МеОН) с получением, соответственно, фракции F1 (160 мг) , затем F2 (165
мг). Фильтрат очищали нормальной фазой на SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г, MERCK); подвижной фазой (NH4OH 1%, 90% DCM, 10% МеОН) с получением, соответственно, фракции F3 (90 мг), затем фракции F4 (60 мг).
Фракции Fl, F2, F3 и F4 кристаллизовали в CHsCN/DiPE, получая, соответственно, 133 мг соединения 56, температура плавления: 140°С, оптическое вращение: -65,4° (589 нм, с 0,367% масса/объем, DMF, 20°С); 116 мг соединения 57, температура плавления: 100°С, оптическое вращение: +121,07° (589 нм, с 0,261% масса/объем, DMF, 20°С); 46 мг соединения 58, температура плавления: 192°С, оптическое вращение: +59,23° (589 нм, с 0, 287% масса/объем, DMF, 20°С) ; и 49 мг соединения 59, температура плавления: 182°С, оптическое вращение: -7 0,18° (58 9 нм, с 0,285% масса/объем, DMF, 20°С.
Пример В37
Получение соединения 60
Раствор промежуточного соединения 111 (0,29 г, 0,444
ммоля) в TFA (0,9 мл) и DCM (5 мл) перемешивали при комнатной
температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в 10% водный
раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой
отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и
растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,25 г)
кристаллизовали из DIPE с получением 0,11 г (44,8%) соединения 60, температура плавления: 161°С, оптическое вращение: +245,07° (589 нм, с 0, 2685% масса/объем, DMF, 20°С) . Пример В3 8
Получение соединения 62
(SI)
Раствор промежуточного соединения 125 (0,2 г, 0,359 ммоля) в TFA (0,6 мл) и DCM (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха, получая 0,088 г (53,6%) соединения 62.
Пример В3 9
Получение соединений 63 и 64
Соединение 63 (2R*),цис-1 Соединение 64 (2К*),цис-2, .1.1 С4Н404
TFA (1,5 мл) добавляли к смеси промежуточного соединения 127 (0,813 ммоля) в DCM при 0°С, затем реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выливали в 10% водный раствор К2СОз и экстрагировали с помощью DCM. Органический слой отделяли, промывали водой, сушили над MgS04, фильтровали и растворитель выпаривали досуха. Остаток (0,45 г) очищали флэш-хроматографией на силикагеле (15-40 мкм, 30 г, от DCM до DCM/CH3OH/NH4OH: 92/8/0,5). Очищенные фракции собирали и выпаривали досуха. Остаток (0,3 г) очищали хиральной SFC на Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), подвижной фазой, 0,3% iPA, 60% С02, 40% EtOH. Собирали две фракции и растворитель
выпаривали, получая 98 мг фракции 1 и 120 мг фракции 2.
Фракции 1 кристаллизовали из DIPE с получением 34 мг соединения 63.
Фракции 2 растворяли в 2-пропаноне и превращали в соль (Е)-2-бутендиовой кислоты (1:2) с раствором (Е)-2-бутендиовой кислоты в 2-nponaHOHe/EtOH (1/1) с получением соединения 64.
Пример В4 0
Получение соединений 65 и 66
Соединение 65 (3R*),(A) Соединение 66 (3R*),(B)
Трифторуксусную кислоту (2,4 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 132 (0,805 г, 1,2 ммоля) в DCM (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов и подкисляли 10% водным раствором К2СО3. Органический слой экстрагировали с помощью DCM, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали. Остаток кристаллизовали из DIPE и сушили в вакууме при 60°С.
Остаток (689 мг) очищали нормальной фазой на Cartridge (15-40 мкм, 30 г); подвижной фазой, 0,5% NH4OH, 95% DCM, 5% МеОН. Собирали две фракции и растворитель выпаривали, получая 17 0 мг фракции 1 и 24 0 мг фракции 2. Фракцию 1 кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 138 мг соединения 65.
Фракцию 2 кристаллизовали из DIPE, фильтровали и сушили в вакууме при 60°С, получая 164 мг соединения 66.
Пример В41
Получение соединения 67
(2R),(A)
. 0.74 C4H4O4
(0,11 г, 0,17 ммоля) в TFA (0,3 мл) и DCM (1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Смесь подкисляли 10% водным раствором К2СОз. Водный слой экстрагировали с помощью DCM. Объединенные органические слои промывали 10% водным раствором К2СОз, сушили над MgS04, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток (0,09 г) разбавляли ацетоном (0,9 мл) . Добавляли фумаровую кислоту (20 мг) в EtOH/ацетоне 1/1 (0,6 мл) . Осадок отфильтровывали и сушили при пониженном давлении (60°С), получая 71 мг (68,6%) соединения 67.
Следующие конечные соединения были получены в соответствии
со способами, описанными выше. Соединения, описанные в примерах
в разделе В выше, обозначены звездочкой напротив
соответствующего примера В; другие соединения получены
способом, аналогичным соответственно указанному примеру В.
Условия хроматографии, используемые для получения
соответствующих соединений, либо на конечном этапе, либо на более раннем этапе, указаны ниже соответствующих формул. Если указаны два или более условий хроматографии, то они выполняются последовательно в указанном порядке.
Таблица 1
SFC (C02/MeOH/iPA 90/10/0,5) Соед. 25; фумарат; (A); Пр. B15* Соед. 26; фумарат; (В); Пр. В15*
Силикагель, DCM/MeOH 98/2; 15-40
мкм, затем MeOH/NH4HC03 0, 5%,
8 8/12; 5 мкм
Соед. 68; (В); Пр. В31
Соед. 69; (А); Пр. В31
Силикагель, 15-40 мкм, Cyclo/DCM: 30/70
Соед. 70; (2R),цис-1; Пр. В18
SFC (Chiralpak AD-H, C02/iPrOH/iPA: 70/30/0,3)
Соед. 31; (2Я),цис-4; Пр. В18* Соед. 71; (2R),транс-3; Пр. В19 Соед. 32; (2R),транс-2; Пр. В19*
SFC (Chiralpak AD-H,
C02/EtOH/iPA: 80/20/0,3) Соед. 72; (2R),цис-1; Пр. В18 Соед. 73; (2R),транс-2; Пр. В19 Соед. 74; (2R),4HC-3; Пр. В18
SFC (Chiralpak AD-H, C02/iPrOH/iPA: 70/30/0,3)
Соед. 75; (2R),UHC-4; Пр. В14
Si02 15-40 мкм, Cyclo/DCM: 30/70 Соед. 76; фумарат; (2R),цис-1; Пр. В14
Силикагель, 15-40 мкм, DCM: 100 Соед. 77; фумарат; (2S),цис-1; Пр. В2 0
SFC (Chiralpak AD-H,
C02/MeOH/iPrOH/iPA: 70/15/15/0,3) Соед. 78; (2S),транс-2; Пр. В18 Соед. 79; (2S),транс-3; Пр. В18 Соед. 33; (2Б),цис-4; Пр. В20*
Силикагель, SI60, 15-40 мкм, 25 г, DCM/MeOH 9 0/10
Соед. 80; (2R),цис-1; Пр. В9
Силикагель, SI60, 15-40 мкм, 25
г, DCM/MeOH 8 5/15
Соед. 81; (2R),цис-1; Пр. В26
Sunfire С18-5мкм-19х150 MeOH/NH4HC03 85/15 Соед. 82; (2R),4HC-2; Пр. В2 Соед. 83; (2R),цис-1; Пр. В2
мм;
Chromasil 10 мкм, 65
DCM/MeOH/NH4OH 96/4/0,1
Соед. 19; (2R),цис-1; Пр. B12J
Силикагель (Merck 200 г, Si02 15-40 мкм, Cyclo/DCM: 30/70-10/90). Соед. 84; (2R), цис-1; Пр. В2
Силикагель (Merck 200 г, Si02 1540 мкм, Cyclo/DCM: 30/70-10/90). Соед. 17; фумарат; (2R), цис-1; Пр. В11*
Соед. 18;; AAA; (2R), цис-1; Пр. В11*
Т он
Ч. ЧЧ, L /NH ^ N О yR
\ OH
Силикагель, 15-40 мкм, DCM 100 Соед. 35; фумарат; (2R),цис-1; Пр. В22*
Соед. 34; (2Я),цис-4; Пр. В21*
Силикагель, 15-40 мкм, DCM 100 Соед. 85; гидрохлорид; (2R),4HC-1; Пр. B2
Соед. 86; гидрохлорид; (2R),4HC-4; Пр. В2
I он
ч'^чч'01
,N. ЧЧ
Силикагель, Cyclo/EtOAc 80/20 и
затем SFC Chiralpak AD, С02 50%,
EtOH 50%, iPA 0,3%
Соед. 87; (2Я),цис-3; Пр. В20
Соед. 88; фумарат; (2R),транс-2;
Пр. В19
Соед. 89; (2R),цис-1; Пр. В20
Силикагель, 15-40 мкм, DCM 100 Соед. 36; (2R),цис-1; Пр. В22* Соед. 15; (2R),4HC-4; Пр. В9*
Т ОН
Ч а\/ч^чч%^1^-У~~~д
ll 1^ 1
Силикагель, 15-40 мкм, Cyclo/EtOAc
Силикагель, 20-45 мкм, 450 г;
: 90/10
Cyclo 90%, EtOAc 10%, затем SFC
Соед. 90; фумарат; (2R),цис-1; Пр.
Chiralpak AD-H, 5 мкм, 250x20 мм
ВЗЗ
iPA 0,3%; С02 70%, iPrOH 30% Соед. 37; (2R),транс-3; Пр. В23*
SFC (Chiralpack AD-H, C02/EtOH/iPA:
Соед. 94; фумарат; (2R),4HC-4;
65/35/0,3)
Пр. В2 0
Соед. 91; (2Я),цис-2; Пр. ВЗЗ
Соед. 92; (2R),транс-3; Пр. В19
SiOH 20-45 мкм, 450 г; Cyclo 90%, EtOAc 10%, затем Chiralpak 1С 5
Si02, 15-40 мкм, Cyclo/EtOAc: 90/10
мкм, 250x20 мм, iPA 0,3%; С02
Соед. 93; фумарат; (2R),транс-4;
60%, iPrOH 40%
Пр. В19
Соед. 95; фумарат; (2R),4HC-2; Пр. В18
Соед. 96; (2R),транс-1; Пр. В23
0 г
1 он
ofl \ 1
Ч чк k /NH
Чэ ук
1 он
Ч J\ лк \ /МН
Силикагель, 20-45 мкм, 450 г; Cyclo
SFC (Chiralpak AD-H,
90%, EtOAc 10%, затем Chiralpak 1С,
C02/EtOH/iPA: 70/30/0,3)
5 мкм, 250x20 мм, iPA 0,3%; С02
Соед. 98; (2R),LL.HC-2; Пр. В18
60%, iPrOH 40%
Соед. 99; (2R),UHC-3; Пр. В18
Соед. 97; (2R),цис-1; Пр. В24
Соед. 100; (2R),транс-4; Пр. В19 Соед. 101; (2R),транс-1; Пр. В19
SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20
мм). Подвижной фазой (0,3% iPA, 65%
С02, 35% EtOH)
SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20
мм, 0,3% iPA, 65% С02, 35% EtOH)
Соед. 38; (2Р),цис-3; Пр. В24*
SFC (Chiralpak AD-H, C02/EtOH/iPA: 70/30/0,3)
Соед. 102; (2Рч),цис-2; Пр. B18 Соед. 103; (2Рч),цис-3; Пр. В18
Силикагель, 15-4 0 мкм,
Cyclo/EtOAc, 90/10
Соед. 104; (2R),транс-1; Пр. В1
SFC (Chiralpak AD,
C02/iPOH/MeOH/iPA
75/12,5/12,5/0,3)
Соед. 105; (2R),транс-3; Пр. В1
Силикагель, 15-40 мкм, Cyclo/EtOAc, 90/10,
Соед. 106; гидрохлорид; (2S), транс-1; Пр. В4
SFC (Chiralpak AD,
C02/iPOH/MeOH/iPA 85/7,5/7,5/0,3) Соед. 107; гидрохлорид; (2S),UHC-4; Пр. В4
Со 7; гидрохлорид; (2S),UHC-2; Пр. В4*
Соед. 108; фумарат; (2S),транс-3; Пр. В4
SFC (Chiralpak AD,
C02/iPOH/MeOH/iPA
75/12,5/12,5/0,3)
Соед. 109; гидрохлорид; (2R),UHC-4; Пр. В4
Соед. 110; гидрохлорид; (2R),UHC-2; Пр. В4
Силикагель, Cyclo/EtOAc, 80/20,154 0 мкм, 450 г
Соед. Ill; (2R*),транс-3; Пр. В25
SFC (Chiralpak AD-H: MeOH/C02/iPA, 30/70/0,3)
Соед. 39; (2Я*),цис-2; Пр. В25* Соед. 112; (2R*),цис-1; Пр. В25
Силикагель, В-6720, Cyclo/EtOAc, 95/5,15-40 мкм, 450 г Соед. 113; фумарат; (2Б*),цис-2; Пр. В2 5
Силикагель, В6778, Kromasil 10 мкм,
Cyclo/EtOAc : 90/10
Соед. 114; (3R*),(A); Пр. В27
Силикагель, 15-4 0 мкм, Cyclo /EtOAc: 80/20
Соед. 115; фумарат; (2R),4HC-2; Пр. В18
Соед. 116; (2R),цис-1; Пр. В18
Kromasil, 10 мкм, Cyclo/EtOAc:
90/10
Соед. 41; (3S*), (А); Пр. В27*
Соед. 117; смесь; Пр. В27
Силикагель Flash, В6927, 20-45
мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10
Соед. 118; трифторацетат;
(2R),цис-1; Пр. В18
0 г
1 он
oil ]
Ч ,-44. кч к ^NH
^ чэ Y н
I он
Силикагель, 15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10
Соед. 119; фумарат; (2R), цис-1; Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм) С02 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% Соед. 120; (2И),цис-4; Пр. В28
Силикагель, 15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10, затем SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3%
Соед. 121; гидрохлорид; (2R),транс-2; Пр. В26 Соед. 122; гидрохлорид; (2R),4HC-4; Пр. В2 6
Т он
\^ч^\^У\/^\
1 /I /1 I .NH ^ Н О j*R
Т он
ч. чХ /ЧЧ. L /NH
\ч^\^\о ys
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), С02 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% Соед. 123; (2R*),транс-1; Пр. Вб Соед. 11; (2РЧ),цис-2; Пр. Вб*
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3%
Соед. 124; (2S*),цис-1; Пр. Вб Соед. 125; (2S*),транс-2; Пр. Вб
1 он н 6
I он
Й-^^^/^ЛЧЛ
ХДчДчо V" н
SFC Chiralpak AD-HTM (5 мкм, 20x250 мм) C02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 126; гидрохлорид;
(2S*),транс-2; Пр. B26
Соед. 127; гидрохлорид;
(2S*),транс-3; Пр. В26
Cyclo/EtOAc, 95/5, 15-40 мкм
Соед. 40; гидрохлорид; (2S*),цис-1;
Прим. В2 6*
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме Соед. 12 8; гидрохлорид; (2R),транс-3; Пр. В2
о Т он
о Т он
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3%, затем SFC (B6817), Chiralpak AD- H
(5 мкм, 20x250 мм), C02 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Соед. 129; гидрохлорид;
(2R*),транс-1; Пр. ВЗ
Соед. 130; гидрохлорид; (2R*),4HC-2; Пр. ВЗ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм 20x250 мм), С02 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3%, затем SFC (В6817), Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), С02 50%, iPrOH 50% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме.
Со.131; гидрохлорид; (2S*),цис-1; Пр. ВЗ
Со.132; гидрохлорид; (2S*),TpaHC-2; Пр. ВЗ
1 он
ДД-До Ут н
Т он
Силикагель, 15-40 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc: 90/10, затем Kromasil 10 мкм, 60 г, DCM/cyclo: 50/50 Соед. 133; гидрохлорид; (2Рч*),цис-1; Пр. В2 6
Соед. 134; гидрохлорид; (2Рч*),цис-2; Пр. В2 6
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 75%, EtOH 25% и iPA 0,3%
Соед. 135; гидрохлорид; (2Б),цис-4; Пр. В4
Соед. 136; гидрохлорид; (2S),транс-3; Пр. В4 Соед. 137; гидрохлорид; (2Б),цис-2; Пр. В4
от Cyclo/EtOAc 100:0 до Cyclo/EtOAc 70:30
Соед. 138; гидрохлорид; (2S),транс-1; Пр. В4
I он
Ч /Ч ЧЛ \ /NH F
Т ОН
L Jx чХ LR/NH
Силикагель, Cyclo/EtOAc, 95/5,15-40 мкм
Соед. 139; фумарат; (2S*),цис-1; Пр. В34
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% Соед. 140; (2Б*),цис-4; Пр. В34
Силикагель, 15-40 мкм, 90 г, Cyclo/EtOAc 97/3
Соед. 141; фумарат; (2R),цис-1; Пр. В2 4
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 21x250 мм), С02 80% МеОН 20% и iPA 0,3%
Соед. 142; (2И),цис-4; Пр. В24
ууч0 Т он
Ч.чХ /X L чМН
I он
|| 1^^ 1 \ /ш
SFC Chiralpak AD-H
(5 мкм, 20x250
SFC Chiralpak AD-H (5
мкм, 21x250
MM), C02 65%, iPrOH 35% и iPA 0,3%
мм), C02 85%, iPrOH
15% и iPA
Соед. 143; гидрохлорид; (2Рч),цис-4;
0,3%
Пр. В4
Соед. 147; (2Б),транс-
2; Пр. В1
Соед. 144; гидрохлорид; (2Рч),цис-3;
Пр. В4
Силикагель, 15-40 мкм, 450 г,
Соед. 145; гидрохлорид; (2И),транс-
Cyclo/EtOAc: 80/20
2; Пр. В4
Соед. 148; (2Б),транс-
1; Пр. В1
Kromasil, 10 мкм, 15
-4 0 мкм, 9 0 г,
DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1
Соед. 146; гидрохлорид; (2И),транс-
1; Пр. В4
1ч>
о -г
1 он
^3ХЧ^Ч> Ч^ЧУ\
о I I I
\/-NH
^ > Г ЧЭ
SFC Chiralpak AD-H
(5 мкм, 20x250
Силикагель, 15-40 мкм, 90 г,
мм), С02 75%, EtOH 25%
и iPA 0,3%
Cyclo/EtOAc 97/3
Соед. 14 9; фумарат;
(2Б)цис-4; Пр.
Соед. 153; (2R),цис-1;
Пр. ВЗб
Соед. 150; фумарат;
(2S),транс-3 ;
SFC Chiralpak AD-H (5
мкм, 21x250
Пр. В1
мм), С02 80%, МеОН 20% iPA 0,3%
Соед. 151; фумарат;
(2S) ,цис-2; Пр.
(в МеОН)
Соед. 154; (2И),транс-
2; Пр. ВЗб
Соед. 155; (2И),транс-
3; Пр. ВЗб
Силикагель, от Cyclo/EtOAc 100:0 до
Соед. 156; (2И),цис-4;
Пр. ВЗб
Cyclo/EtOAc 70:30
Соед. 152; фумарат;
(2S),транс-1;
Пр. В1
.01
О У;
о ~г
1 он
^\^Y:./^YY
о 1 I Т
О 1 1 \
\ чж
~ Ь( о
\ч \N-' \0 н
Силикагель, 15-40
мкм, 9 0 г,
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250
Cyclo/EtOAc 97/3
мм), С02 85%, iPrOH 15% и iPA
Соед. 157; (2R),цис-1;
Пр. В2 4
0,3% (в МеОН)
Соед. 159; гидрохлорид; (2Б),цис-
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250
3; Пр. В2 8
мм), С02 80%, МеОН 20%, iPA 0,3% (в
Соед. 42; гидрохлорид; (2Б),цис-
МеОН)
4; Пр. В2 8*
Соед. 158; (2И),цис-4;
Пр. В2 4
сдд1
I он
Til
V /ш
|| ^ j у" NH
/0 дд
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250
мм), С02 85%, iPrOH 15% и iPA 0,3%
мм), С02 70%, iPrOH 15%, МеОН 15%
(в МеОН)
и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 160; гидрохлорид; (2Б),транс-
Соед. 163; (2R),транс-1; Пр. В1
2; Пр. В2 8
Соед. 164; фумарат; (2И),цис-3;
Соед. 161; гидрохлорид; (2Б),цис-3;
Пр. В1
Пр. В2 8
Соед. 165; фумарат; (2И),цис-4;
Пр. В1
Силикагель, 15-40 мкм, 450 г,
Соед. 166; фумарат; (2R),транс-2;
Cyclo/EtOAc: 80/20
Пр. В1
Соед. 162; гидрохлорид; (2Б),транс-
1; Пр. В2 8
о г
1 он
XXX д
о|| ^ \ \ /Ш
/ \
/0 "ХД
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250
мм), C02 65%, EtOH 17,5%, iPrOH
17,5% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 167; (2S),транс-1; Пр. B24
Соед. 168; (2S),транс-2; Пр. В24
Соед. 169; фумарат; (2Б),цис-3; Пр.
В24
Соед. 170; фумарат; (2Б),цис-4; Пр. В24
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм), С02 85%, iPrOH 15% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме
Соед. 171; (2S),транс-2; Пр. ВЗО Соед. 172; (2S),транс-1; Пр. ВЗО
Силикагель Kromasil, 10 мкм, 15-40 мкм, 90 г, DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1 Соед. 173; (2R),транс-1; Пр. В1
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм,
20x250 мм), С02 70%, МеОН 30% и
iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 174; (2R),цис-1; Пр. В28
Соед. 175; (2R),4HC-2; Пр. В28
Соед. 176; (2R),транс-3; Пр. В28
Соед. 177; гидрохлорид;
(2R),транс-4; Пр. В28
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 178; (2S),транс-1; Пр. В28 Соед. 179; (2S),транс-2; Пр. В28 Соед. 180; (2Б),цис-3; Пр. В28 Соед. 181; (2Б),цис-4; Пр. В28
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250 мм), С02 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 182; гидрохлорид;
(2R),транс-1; Пр. В28
Соед. 183; гидрохлорид;
(2R),транс-3; Пр. В28
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 184; (2R),транс-1; Пр. ВЗО Соед. 185; (2R),4HC-2; Пр. ВЗО Соед. 186; (2R),транс-3; Пр. ВЗО Соед. 187; (2R),UMC-4; Пр. ВЗО
Силикагель, Cyclo/EtOAc 80/20 и затем SFC Chiralpak AD, С02 50%, EtOH 50%, iPA 0,3%
Соед. 188; фумарат; (2S*),цис-1; Пр. ВЗЗ
Соед. 189; (2Б*),цис-4; Пр. ВЗЗ
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250
мм), С02 60%, EtOH 20%, iPrOH 20% и
iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 190; (2R*),цис-1; Пр. ВЗЗ
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250
мм), С02 95%, МеОН 5% и iPA 0,3% (в
МеОН)
Соед. 191; (2R*),m*c-3; Пр. ВЗЗ
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 75%, EtOH 25% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 192; гидрохлорид;
(2R),транс-1; Пр. В29
Соед. 43; гидрохлорид;
(2R),транс-2; Пр. В29*
SFC Chiralpak AD- H
(5 мкм, 20x250
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 21x250
MM), C02 75%, EtOH
25% и iPA 0,3%
мм), С02 60%, iPrOH 40% и iPA
(в МеОН)
0,3% (в МеОН)
Соед. 193; (2R),транс-1; Пр. Bl
Соед. 195; (2R),транс-1; Пр. ВЗЗ
Соед. 61; (2Я),транс-
-2; Пр. В29*
Соед. 196; (2И),цис-2; Пр. ВЗЗ
Соед. 194; (2Р0,цис-3; Пр. В1
Соед. 197; (2R),транс-3; Пр. ВЗЗ
Соед. 198; (2И),цис-4; Пр. ВЗЗ
0 Y'
1 с
Т он
\/4\ чл
\ ^NH
V 4Ч4 чЧ> - L /NH
SFC Chiralpak AD- Н
(5 мкм, 20x250
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм 20x250
мм), С02 60%, EtOH
40% и iPA 0,3%
мм), C02 60%, EtOH 20% iPrOH 20%
(в МеОН)
и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 199; (2S),транс-2; Пр. ВЗО
Соед. 203; (2S*),цис-1; Пр. ВЗЗ
SFC Chiralpak AD- Н
(5 мкм, 20x250
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм,
мм) , С02 75%, EtOH
25% и iPA 0,3%
20x250 мм), C02 95%, MeOH 5% и
(в МеОН)
iPA 0,3% (в MeOH)
Соед. 200; (2S),транс-4; Пр. ВЗО
Соед. 204; гидрохлорид;
Силикагель, 15-40
мкм, 9 0 г,
(2S*),4HC-4; Пр. ВЗЗ
DCM/MeOH/NH4OH: 97/3/0,1
Соед. 2 01; фумарат;
(2S),цис-1; Пр.
ВЗО
SFC Chiralpak AD- Н
(5 мкм, 20x250
мм), С02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3%
Соед. 202; (2Б),цис-3; Пр. ВЗО
о г II он
\.4NH
oil т'^ Т^^ ("^ 1
Ч /Ч Чч k ,-NH
^ ° у
Si02, 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10
Соед. 205; гидрохлорид; (2Б*),цис-1; Пр. ВЗб
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 95%, МеОН 5% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Соед. 2 06; гидрохлорид; (2S*),транс-3; Пр. ВЗб
Силикагель, 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10
Соед. 207; гидрохлорид; (2S*),транс-2; Пр. ВЗб
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 95%, МеОН 5% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 208; гидрохлорид; (2Б*),цис-4;
Пр. ВЗб
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 70%, EtOH 30% и iPA 0,3%(в MeOH)
Соед. 209; (2R*),цис-1; Пр. B24 Соед. 210; (2R*),m*c-3; Пр. В24
о г II он
"oYYYT^
V/k/^V k/NH
о г II 1 он
oil 1^^ 1^^ l"^ 1 н R*
Силикагель 20-45 мкм, 450 г,
Cyclo/EtOAc 90/10
Соед. 211; (2*S),цис-1; Пр. В24
Силикагель, 20-45 мкм, 450 г, Cyclo/EtOAc 90/10
Соед. 212; гидрохлорид;
(2R*),транс-2; Пр. ВЗб
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 213; фумарат; (2R*),TpaHC-4; Пр. ВЗб
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм,
20x250 мм), С02 70%, EtOH 30% и
iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 214; фумарат; (2R*),цис-1;
Пр. ВЗб
Соед. 215; фумарат; (2R*),4HC-3;
Пр. ВЗб
SFC Chiralpack AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 65%, EtOH 17,5%, iPrOH 17,5% и iPA 0,3% (в МеОН) Соед. 44; (2R),транс-1; Пр. ВЗО* Соед. 45; (2R),транс-2; Пр. ВЗО* Соед. 46; (2Р),цис-3; Пр. ВЗО* Соед. 47; (2Р),цис-4; Пр. ВЗО*
Силикагель, 15-40 мкм, 300 г, DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1 Соед. 216; (2R),цис-1; Пр. ВЗО Соед. 217; (2R),транс-2; Пр. ВЗО
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 218; (2R),транс-3; Пр. ВЗО Соед. 219; (2R),4HC-4; Пр. ВЗО
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 75%, EtOH 25% и iPA 0,3% (в MeOH)
Соед. 220; гидрохлорид; (2S),TpaHC-4;
Пр. B2 8
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в MeOH)
Соед. 221; гидрохлорид; (2S),UHC-3; Пр. B2 8
Соед. 222; гидрохлорид; (2S),TpaHC-2; Пр. В2 8
Силикагель, 15-40 мкм, 90 г, DCM/MeOH/NH4OH: 97/3/0,1 Соед. 223; гидрохлорид; (2S),цис-1; Пр. В2 8
Силикагель, 15-40 мкм, 300 г,
DCM/MeOH/NH4OH: 95/5/0,1
Соед. 224; гидрохлорид; (2Рч),транс-
Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 225; гидрохлорид; (2Рч),транс-3;
Пр. В2 8
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX), DCM 80%/cyclo 20% Соед. 226; (3S*),(B); Пр. В31
Соед. 227; (3S*),(A); Пр. В31
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX), DCM 80%/Cyclo 20% Соед. 48; (3R*),(B); Пр. В31* Соед. 228; (3R*),(A); Пр. В31
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы
20-45 мкм, 450 г MATREX), DCM 80%/cyclo 20%
Соед. 49; гидрохлорид; (3S*),(А); Пр. В32*
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX), DCM 80%/cyclo 20% Соед. 229; гидрохлорид; (3R*) , (В) ; Пр. В32
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм 20x250
мм), 3 мл/мин, 35°С, 100 бар, С02
50%, МеОН 25% и iPrOH 25%
Соед. 230; гидрохлорид; (2S*),UHC-
Пр. В2 8
Si02, 15-40 мкм, 300 г, Cyclo/EtOAc от 95/5 до 85/15
Соед. 231; гидрохлорид;
(2S*),транс-2; Пр. В2 8
Соед. 232; гидрохлорид;
(2S*),транс-1; Пр. В28
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250
мм), 3 мл/мин, 35°С, 100 бар, С02
60%, МеОН 20% и iPrOH 20%
Соед. 233; гидрохлорид; (2R*),UHC-
Пр. В2 8
Силикагель, 15-40 мкм, 300 г, Cyclo/EtOAc 85/15
Соед. 234; гидрохлорид;
(2R*),транс-1; Пр. В28
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), 3 мл/мин, 35°С, 100 бар, С02 60%, МеОН 20% и iPrOH 20% Соед. 235; гидрохлорид; (2R*),UHC-2; Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 75%, EtOH 25% и iPA 0,3% (в MeOH) в изократическом режиме Соед. 236; гидрохлорид; (2Рч),транс-1;
Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, iPrOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 237; гидрохлорид; (2Рч),транс-
Пр. В2 8
Соед. 238; гидрохлорид; (2Рч),транс-
Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 70%, iPrOH 30% Соед. 239; гидрохлорид; (2Рч),цис-4; Пр. В2
Соед. 5; гидрохлорид; (2R),транс-3; Пр. В2*
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 60%, iPrOH 40% Соед. 240; гидрохлорид; (2Рч),цис-2; Пр. В2
Соед. 241; гидрохлорид; (2Рч),транс-1;
Пр. В2
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 70%, EtOH 15%, IPrOH 15% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 242; (2S),транс-1; Пр. ВЗЗ Соед. 243; (2S),UHC-2; Пр. ВЗЗ
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 244; (2S),UHC-3; Пр. ВЗЗ Соед. 245; (2S),транс-4; Пр. ВЗЗ
Силикагель (В6927, 20-45 мкм, 450
г, Cyclo/EtOAc 90/10)
Соед. 246; (2R),цис-1; Пр. В20
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 65%, EtOH 35% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 247; (2S),транс-1; Пр. В1
Соед. 248; (2S),транс-2; Пр. В1 Соед. 249; (2Б),цис-3; Пр. В1 Соед. 250; (2Б),цис-4; Пр. В1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, МеОН 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 251; (2S),цис-1; Пр. ВЗО
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), С02 50%, МеОН 50% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 252; (2S),транс-2; Пр. ВЗО
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-45 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2% Соед. 254; гидрохлорид; (2R*) , (А) ; Пр. ВЗ
Соед. 255; гидрохлорид; (2R*) , (В) ; Пр. ВЗ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), С02 65%, МеОН 35% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 253; (2S),транс-4; Пр. ВЗО
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2% Соед. 256; (2R*),(A); Пр. В18 Соед. 257; (2R*),(B); Пр. В18
Высокоэффективная жидкостная
хроматография (SiOH с зернами
неправильной формы, 15-40 мкм, 300
г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2%
Соед. 6; гидрохлорид;
41873312(2S*),(А);
Пр. ВЗ*
Соед. 258; гидрохлорид; (2S*), (В) ; Пр. ВЗ
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2% Соед. 259; (2S*),(A); Пр. В18
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 65%, iPrOH 35% Соед. 260; (2R*),транс-1; Пр. В24 Соед. 261; (2R*),UHC-2; Пр. В24 Соед. 262; (2R*),UHC-4; Пр. В24
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250
мм), C02 50%, MeOH 50% и iPA 0,3%
(в MeOH)
Соед. 263; гидрохлорид; (2S),TpaHC-
Пр. B2 8
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250
мм), C02 65%, MeOH 35% и iPA 0,3%
(в MeOH)
Соед. 264; гидрохлорид; (2S),UHC-3;
Пр. B2 8
Соед. 265; гидрохлорид; (2S),TpaHC-
4; Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 60%, EtOH 40% и iPA 0,3% (в MeOH)
Соед. 266; гидрохлорид; (2S),TpaHC-4;
Пр. B2 8
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250 мм), C02 70%, EtOH 15% iPrOH 15% и iPA 0,3% (в MeOH)
Соед. 267; гидрохлорид; (2S),UHC-2; Пр. B2 8
Соед. 268; гидрохлорид; (2S),TpaHC-1; Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм, 20x250
мм), C02 65%, EtOH 17,5% iPrOH
17,5% и iPA 0,3% (в MeOH)
Соед. 269; гидрохлорид; (2Рч),цис-4;
Пр. В2 8
Соед. 270; гидрохлорид; (2Рч),цис-3;
Пр. В2 8
Соед. 271; гидрохлорид; (2Рч),транс-
Пр. В2 8
Соед. 272; гидрохлорид; (2Рч),транс-
Пр. В2 8
Силикагель, 15-40 мкм, 300 г, DCM/MeOH/NH4OH: 97,5/2,5/0,1 Соед. 273; (2R),цис-1; Пр. ВЗО
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, МеОН 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 274; (2R),UHC-2; Пр. ВЗО
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), С02 60%, МеОН 40% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 275; (2R),транс-3; Пр. ВЗО Соед. 276; (2R),транс-4; Пр. ВЗО
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250
мм), С02 60%, МеОН 40% и iPA 0,3%
(в МеОН)
Соед. 277; гидрохлорид; (2Рч),транс-
Пр. В2 8
Соед. 278; гидрохлорид; (2Рч),транс-
Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD- Н (5 мкм, 20x250 мм), С02 65%, EtOH 35% и iPA 0,3% (в МеОН)
Соед. 279; гидрохлорид; (2S),TpaHC-2; Пр. В2 9
Соед. 280; гидрохлорид; (2S),TpaHC-1; Пр. В2 9
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 65%, EtOH 35% Соед. 281; гидрохлорид; (2Рч*),цис-2;
Пр. В2 6
Соед. 282; гидрохлорид; (2Рч*),цис-4;
Пр. В2 6
Высокоэффективная жидкостная
хроматография (SiOH с зернами
неправильной формы, 15-40 мкм, 300
г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2%
Соед. 283; (3R*),(A); Пр. В31
Соед. 284; фумарат; (3R*),(B); Пр.
В31
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%/EtOAc 2% Соед. 285; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 286; фумарат; (3S*),(B); Пр. В27
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-40 мкм, 450 г MERCK), Cyclo 90% EtOAc 10% Соед. 287; (2S*),(B); Пр. В20 Соед. 288; фумарат; (2S*),(A); Пр. В2 0
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-40 мкм, 450 г MERCK), Cyclo 90%, EtOAc 10% Соед. 289; фумарат; (2R*),(A); Пр. В18
Соед. 290; (2R*),(B); Пр. В18
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г, MERCK), DCM 98%, EtOAc 2% Соед. 291; (3R*),(A); Пр. В31 Соед. 292; (3R*),(B); Пр. В31
жидкостная с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%, EtOAc 2% Соед. 293; (3S*),(A); Пр. В31 Соед. 294; (3S*),(B); Пр. В31
жидкостная с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MERCK), Cyclo 90%, EtOAc 10% Соед. 295; гидрохлорид; (2R*) , (А) ; Пр. ВЗ
Соед. 296; гидрохлорид; (2R*) , (В) ; Пр. ВЗ
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г MATREX), Cyclo 90%, EtOAc 10% Соед. 297; гидрохлорид; (2S*) , (В) ; Пр. ВЗ
Соед. 298; гидрохлорид; (2S*) , (А) ; Пр. ВЗ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 70%, EtOH 30% Соед. 299; (2S*),транс-1; Пр. ВЗЗ Соед. 300; (2S*),UHC-2; Пр. ВЗЗ Соед. 301; (2S*),UHC-3; Пр. ВЗЗ Соед. 302; (2S*),транс-4; Пр. ВЗЗ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 75%, iPrOH 12,5% Соед. 303; гидрохлорид; (2R),TpaHC-3; Пр. В4
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 60%, МеОН 40% Соед. 304; гидрохлорид; (2R),TpaHC-2;
Пр. В4
SFC Chiralcel OD-H (5 мкм, 250x20
мм), iPA 0%; С02 70%, МеОН 30%
Соед. 305; трифторацетат;
(2S*),UHC-2; Пр. В24
Соед. 306; трифторацетат;
(2S*),цис-1; Пр. В24
SFC Chiralcel OD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; C02 70%, MeOH 30% Соед. 307; гидрохлорид; (2S*),UHC-2; Пр. ВЗб
Соед. 308; гидрохлорид; (2S*),UHC-1; Пр. ВЗб
SFC Chiralcel OD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; С02 70%, МеОН 30% Соед. 309; гидрохлорид; (23*),цис-2; Пр. ВЗб
Соед. 310; гидрохлорид; (2S*),UHC-1; Пр. ВЗб
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
мм), iPA 0%; С02 70%, iPrOH 30%
Соед. 311; гидрохлорид;
(2S*),транс-4; Пр. ВЗб
Соед. 312; гидрохлорид;
(2S*),транс-3; Пр. ВЗб
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; С02 70%, EtOH 15%, iPrOH 15%
Соед. 313; трифторацетат;
(2R*),цис-4; Пр. В34
Соед. 51; трифторацетат; (2И*),цис-3; Пр. В34*
SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм), iPA 0%; С02 70%, EtOH 15%, iPrOH 15%
Соед. 314; гидрохлорид; (2Рч*),цис-4; Пр. В2 8
Соед. 315; гидрохлорид; (2Рч*),цис-3; Пр. В2 8
Соед. 316; гидрохлорид; (2R*), транс -1; Пр. В2 8.
Соед. 317; гидрохлорид; (2R*),транс -2; Пр. В2 8.
SFC
Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
мм) ,
iPA 0%; С02 70%, iPrOH 30%
мм), iPA 0,3%; С02 60%, МеОН 40%
Соед
. 50; трифторацетат; (23*),цис-
Соед. 1; (2R),цис-1; Пр. В1*
2; Пр. ВЗЗ*
Соед
. 318; (2S*),цис-1; Пр. ВЗЗ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
мм), iPA 0,3%; С02 75%, МеОН 12,5
iPrOH 12,5%
Соед. 2; (2R),транс-2; Пр. В1*
Со 3.; (2R),транс-3; Пр. В1*
Соед. 4; (2R),4HC-4; Пр. В1*
Т он
Т он
Ч Ч^\ J\ k /NH
Y 0 j*s
SFC
Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20
мм) ,
iPA 0,3%; C02 70%, MeOH 15%
мм), iPA 0,3%; С02 70%, МеОН 15%
iPrOH 15%
iPrOH 15%
Соед
319; трифторацетат;
Соед. 321; гидрохлорид; (23*),цис-
(2S*
),цис-2; Пр. B34
2; Пр. В2 8
Соед
. 320; (2S*),цис-1; Пр. В34
Соед. 322; гидрохлорид; (23*),цис-
1; Пр. В2 8
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
мм), iPA 0%; С02 70%, EtOH 30%
Соед. 323; гидрохлорид;
(2S*),транс-4; Пр. В28
Соед. 324; гидрохлорид;
(2S*),транс-3; Пр. В28
4^*4/°
о г
о г
1 он
1 он
ofl ] "l"^ ] 1
оТ| i' 1
к /ЧЧ. /к/ k /NH
к /к/ кч к ^NH
ЧЧ \^ Чэ
4=^/~~F
SFC
Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20
мм) ,
iPA 0%; С02 80%,
МеОН 2 0%
мм), iPA 0%; C02 80%,
МеОН 2 0%
Соед
325;
трифторацетат;
Соед. 327; гидрохлорид; (2R*),4HC-
(2R*
),цис-3; Пр. В24
3; Пр. ВЗб
SFC
Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
SFC Chiralpak AD-H
(5 мкм, 250x20
мм) ,
iPA 0%; С02 70%,
iPrOH 30%
MM), iPA 0%; C02 70%,
iPrOH 30%
Соед
326;
трифторацетат;
Соед. 328; гидрохлорид; (2R*),UHC-
(2R*
),цис-2; Пр. В24.
2; Пр. ВЗб
Т с
|он
К /kl/~~4
\ ^NH
y-*R
SFC
Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
SFC Chiralpak AD-H
(5 мкм, 250x20
мм) ,
iPA 0%; С02 70%,
iPrOH 30%
MM), iPA 0,3%; C02 60%, iPrOH 40%
Соед
329;
гидрохлорид;
Соед. 33 0; фумарат;
(2R),транс-1;
(2R*
),транс-1; Пр. В26
Пр. B35
Соед. 331; фумарат;
(2R),транс-2 ;
Пр. В35
Соед. 332; фумарат; (2R),цис-3; Пр.
В35
ХД-Х^о ^ н
JMH
Ву^^^^к^
DH J*R
SFC
Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
Высокоэффективная
жидкостная
мм) ,
iPA 0,3%; С02 70%, EtOH 30%
хроматография (SiOH с зернами
Соед
333; гидрохлорид; (23*),цис-
неправильной формы,
20-45 мкм, 450
3; Пр. В2 6
г MATREX). Подвижной фазой (DCM
Соед
334; гидрохлорид; (2S*),UHC-
80%/cyclo 20%)
2; Пр. В2 6
Соед. 335; (3R*),(А);
Пр. В32
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 20-45 мкм, 450 г, MATREX), DCM 80%/cyclo 20% Соед. 336; (3S*),(B); Пр. В32
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; C02 60%, EtOH 20%, iPrOH 20%
Соед. 337; (2R*),транс-1; Пр. B25 Соед. 338; (2R*),UHC-2; Пр. В25 Соед. 339; (2R*),транс-3; Пр. В25 Соед. 340; (2R*),UHC-4; Пр. В25.
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
мм), iPA 0,3%; С02 60%, EtOH 20%,
iPrOH 20%
Соед. 341; гидрохлорид; (2R*),UHC-
2; Пр. В2 6
Соед. 342; гидрохлорид; (2R*),UHC-
4; Пр. В2 6
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм 250x20 мм), iPA 0,3%; градиент С02/ЕТ1Р от 80/20 до 60/40)
Соед. 343; гидрохлорид; (2R*),UHC-4; Пр. В2
Соед. 344; гидрохлорид; (2R*),UHC-2; Пр. В2
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм 250x20 мм), iPA 0,3%; градиент C02/ETIP от 80/20 до 60/40)
Соед. 345; фумарат; (2R*),транс-1; Пр. В2 3
Соед. 346; фумарат; (2R*),4HC-2; Пр. В2 3
Соед. 347; фумарат; (2R*),транс-3; Пр. В2 3
Соед. 348; фумарат; (2R*),UHC-4; Пр. В2 3
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 60%, iPrOH 40% Соед. 349; гидрохлорид; (2R),TpaHC-1; Пр. В2
Соед. 350; гидрохлорид; (2R),TpaHC-2; Пр. В2
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 60%, iPrOH 40% Соед. 351; (2R),транс-1; Пр. В1 Соед. 352; (2R),транс-2; Пр. В1 Соед. 353; фумарат; (2R),цис-3; Пр. В1
Соед. 354; фумарат; (2R),UHC-4; Пр. В1
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 80%, ETIP 20% Соед. 355; (2S*),цис-1; Пр. В25 Соед. 356; (23*),цис-2; Пр. В25 Соед. 357; (2S*),транс-3; Пр. В25 Соед. 358; (2S*),транс-4; Пр. В25
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 70%, EtOH 15%, iPrOH 15%
Соед. 359; гидрохлорид; (2S*) , (А) ; Пр. Вб
Соед. 360; гидрохлорид; (2S*) , (В) ; Пр. Вб
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 70%, EtOH 30% Соед. 361; гидрохлорид; (2R*) , (А) ; Пр. Вб
Соед. 362; гидрохлорид; (2R*) , (В) ; Пр. Вб
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 80%, ETIP 20% Соед. 363; гидрохлорид; (2S*),UHC-1; Пр. В2 6
Соед. 364; гидрохлорид;
(2S*),транс-4; Пр. В26 Соед. 365; гидрохлорид; (2S*),UHC-2; Пр. В2 6
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 65%, EtOH 17,5%, iPrOH 17,5%
Соед. 366; (2R) , транс-1; Пр. В1 Соед. 367; (2R),транс-2; Пр. В1 Соед. 368; фумарат; (2R),цис-3; Пр. В1
Соед. 369; фумарат; (2R),4HC-4; Пр. В1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 70%, EtOH 15%, iPrOH 15%
Соед. 52; (2R),цис-1; Пр. В35* Соед. 53; (2Р0,цис-2; Пр. В35* Соед. 54; фумарат; (2R),транс-3; Пр. В35*
Соед. 55; фумарат; (2R),транс-4; Пр. В35*
Высокоэффективная жидкостная хроматография (SiOH с зернами неправильной формы, 15-40 мкм, 300 г MERCK), DCM 98%, EtOAc 2% Соед. 370; (В); Пр. В1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
SFC Chiralpak AD-H
(5 мкм, 250x20
мм), iPA 0,3%; C02 70%, EtOH 15%,
мм), iPA 0,3%; С02 70%, EtOH 30%
iPrOH 15%
Соед. 373; (2R*),(А);
Пр. Вб
Соед. 371; (2S*),(A); Пр. Вб
Соед. 374; (2R*),(В);
Пр. Вб
Соед. 372; (2S*),(B); Пр. Вб
0 г
1 он
Тон
о]| \ \ \ \
кч^ч <-"
V /NH
Нормальная фаза SiOH с зернами
SFC Chiralpak ALPAK
AD-H (5 мкм,
неправильной формы (15-40 мкм, 300
250x20 мм), iPA 0,3%; С02 70%, EtOH
г MERCK), NH4OH 1%, 90% DCM, 10%
15%, iPrOH 15%
МеОН
Соед. 375; гидрохлорид; (2R),4HC-2;
Соед. 56; (2R*),цис-1; Пр. ВЗб*
Пр. ВЗб
Соед. 57; (2Р*),цис-2; Пр. ВЗб*
Соед. 376; гидрохлорид; (2R),цис-1;
Пр. ВЗб
Нормальная фаза SiOH с зернами
неправильной формы (15-40 мкм, 300
г MERCK), NH4OH 1%, 90% DCM, 10%
МеОН
Соед. 58; (2R*),транс-3; Пр. ВЗб*
Соед. 59; (2R*),транс-4; Пр. ВЗб*
|он
а\чч^-^Ч/^-4^~~А
Т с
Вг ^ ^ X
|| } } \ NH
ii Т'^ Т^^
ЧА-Ао X Н ХТ^
\ ,NH yR
ычТ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
SFC SiOH с зернами неправильной
мм), iPA 0,3%; С02 65%, EtOH 17,5%,
формы (15-40 мкм,
300 г MERCK),
iPrOH 17,5%
Cyclo 80%, EtOAc 20%
Соед. 377; гидрохлорид; (2R),TpaHC-
Соед. 60; (2R*),цис-1; Пр. В37*
2; Пр. В4
Соед. 379; (2R*),4HC-
2; Пр. В37
Соед. 378; гидрохлорид; (2R),TpaHC-
1; Пр. В4
Высокоэффективная жидкостная хроматография SiOH с зернами неправильной формы (15-40 мкм, 300 г MERCK), Cyclo 80%, EtOAc 20% Соед. 380; фумарат; (2S*),цис-1; Пр. В37
Соед. 381; (23*),цис-2; Пр. В37
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 75%, МеОН 25% Соед. 382; (2R),4HC-4; Пр. ВЗЗ Соед. 383; (2R),цис-1; Пр. ВЗЗ Соед. 384; (2R),транс-2; Пр. ВЗЗ Соед. 385; (2R),транс-3; Пр. ВЗЗ
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; С02 75%, МеОН 25% Соед. 386; (2R),цис-1; Пр. В24 Соед. 387; (2R),4HC-4; Пр. В24
Силикагель (15-40 мкм, 300 г
MERCK), NH4OH 0,5%, 92% DCM, 8%
МеОН
Соед. 388; (2R*),цис-1; Пр. В24
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; 65% С02, 35% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 389; (2R*),транс-2; Пр. В24 Соед. 390; (2R*),цис-3; Пр. В24 Соед. 391; (2R*),транс-4; Пр. В24
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% C02, 30% iPrOH Соед. 392; (3R*),(A); Пр. B31 Соед. 393; (3R*),(B); Пр. B31
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% С02, 30% iPrOH Соед. 394; (3R*),(A); Пр. В31 Соед. 395; (3R*),(B); Пр. В31
SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% C02, 30% EtOH Соед. 62; (SI); Пр. B38* Соед. 396; (S2); Пр. B38
SFC (Chiralpak AD-H 5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 70% С02, 30% EtOH Соед. 397; (S1); Пр. В38 Соед. 398; (S2); Пр. В38
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; 60% C02, 40% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 399; фумарат; (2R),транс-1; Пр. В12
Соед. 400; фумарат; (2R),транс-2; Пр. В12
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 65% С02, 35% EtOH Соед. 401; фумарат; (2R),цис-3; Пр. В12
Соед. 402; фумарат; (2R),4HC-4; Пр. В12
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 65% С02, 35% МеОН Соед. 403; фумарат; (2R*),цис-1; Пр. В1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 65% С02, 35% EtOH Соед. 404; фумарат; (2R*),транс-2; Пр. В1
Соед. 405; фумарат; (2R*),цис-3; Пр. В1
|он
ll 1 1 Ч^/Ж
j (
\4'NH
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0% iPA 0,3%, 75% C02, 25% EtOH Соед. 406; (2S),транс-1; Пр. Bl Соед. 407; (2S),транс-2; Пр. Bl
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 65% С02, 35% iPrOH Соед. 408; фумарат; (2R),цис-1; Пр. В23
T он AR
ч X\ чХ L /NH
I С
С1Чч^Ч> ч/^ч> чА. 44i^Nf?4(-)
зн As
/ NH
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%; 70% C02, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 409; фумарат; (3R*),(A); Пр.
B31
Соед. 410; фумарат; (3R*),(B); Пр. В31
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 80% С02, 20% EtOH Соед. 411; фумарат; (3S*),(A); Пр.
В27
Соед. 412; фумарат; (3S*),(B); Пр.
В27
Т ОН
Ч чХ L /NH ^ N 0 y*R
] он
ЧчХ ЧЧ \ЧШ
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
мм), iPA 0,3%, 70% C02, 30% MeOH
Соед. 413; фумарат; (2R*),цис-1;
Пр. BIO
Соед. 414; фумарат; (2R*),4HC-2;
Пр. В10
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20
мм), iPA 0,3%, 70% C02, 30% iPrOH
Соед. 415; фумарат; (2R*),транс-1;
Пр. В10
SFC Chiralpak AD- H (5 мкм 20 x 250 MM), C02 65% EtOH 35% и iPA 0,3% (в MeOH) в изократическом режиме. Соед. 16; фумарат; (2S),транс-2; Пр. В10*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 20x250 мм), С02 75% EtOH 25% и iPA 0,3% (в МеОН) в изократическом режиме. Соед. 416; фумарат; (2R),транс-1; Пр. В10
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 75% С02, 25% EtOH Соед. 417; (2S),транс-1; Пр. В1 Соед. 418; фумарат; (23),цис-2; Пр. В1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), iPA 0,3%, 60% С02, 40% EtOH Соед. 419; (2S),транс-2; Пр. В1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 25% С02, 75% МеОН Соед. 420; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 421; (3S*),(B); Пр. В27
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 60% С02, 40% iPrOH Соед. 422; (3R*),(A); Пр. В27 Соед. 423; (3R*),(B); Пр. В27
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), градиент от 0,3% iPA, 60% С02, 40% EtOH до 0,3% iPA, 60% С02, 40% EtOH
Соед. 8; (l'S, 2S*),UHC-2; Пр. В5* Соед. 9; (l'S, 2S*),цис-1; Пр. В5*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), градиент от 0,3% iPA, 60% С02, 40% EtOH до 0,3% iPA, 60% С02, 40% EtOH
Соед. 10; (23*),цис-2; Пр. В5* Соед. 424; (2S*),цис-1; Пр. В5
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), градиент от 0,3% iPA, 70% С02, 30% iPrOH до 0,3% iPA, 70% С02, 30% iPrOH
Соед. 425; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 426; (3S*),(B); Пр. В27
Нормальная фаза на SiOH с зернами
неправильной формы (20-45 мкм, 450
г MATREX); градиент от 0,1% NH4OH,
99% DCM, 1% МеОН до 0,1% NH4OH, 96%
DCM, 4% МеОН
Соед. 427; фумарат; (2R),цис-1; Пр.
В35
Соед. 428; фумарат; (2R),цис-3; Пр.
В35
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), градиент от 0,3% iPA, 75% C02, 25% MeOH до 0,3% iPA, 75% C02, 25% MeOH)
Соед. 67; фумарат; (2R),(A); Пр. B41*
Соед. 429; фумарат; (2R),(B); Пр. В41.
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 60% C02, 40% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 430; фумарат; (2R*),транс-1; Пр. Bl
Соед. 431; фумарат; (2R*),4HC-2; Пр. Bl
Соед. 432; фумарат;
(2R*),цис/транс, 25/75; Пр. В1
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 3% iPA, 70% С02, 30% EtOH Соед. 13; (2R*),цис-1; Пр. В8* Соед. 14; (2Р*),цис -2; Пр. В8*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 3% iPA, 60% С02, 40% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 433; (3R*), (А); Пр. В27 Соед. 434; (3R*), (В); Пр. В27
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% С02, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 12; (2Р*),цис-2; Пр. В7*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% С02, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 435; (2S*),цис-1; Пр. В7
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 3% iPA, 80% C02, 20% iPrOH Соед. 436; (2S*),транс-2; Пр. B8 Соед. 437; (2S*),цис-3; Пр. В8
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% С02, 30% EtOH Соед. 29; (2И*),цис-2; Пр. В17* Соед. 30; (2R*),цис-1; Пр. В17*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% С02, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 20; (2R*),цис-1; Пр. В13*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 60% С02, 40% (EtOH 50%, iPrOH 50%) Соед. 438; (3S*),(A); Пр. В27 Соед. 439; (3S*),(B); Пр. В27
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 65% С02, 35% МеОН Соед. 440; (2S*),цис-1; Пр. В1 Соед. 441; (23*),цис-2; Пр. В1 Соед. 442; фумарат; (2S*),транс-1; Пр. В1
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% С02, 30% МеОН Соед. 443; (3RS*),(M1); Пр. В27
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 65% С02, 35% МеОН Соед. 444; (3RS*),(M3); Пр. В27 Соед. 445; (3RS*),(M4); Пр. В27
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% C02, 30% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 446; (2S*),UHC-2; Пр. B13
Силикагель (15-40 мкм, 30 г), 0,5% NH4OH, 95% DCM, 5% МеОН Соед. 65; (3R*),(A); Пр. В40*. Соед. 66; (3R*),(B); Пр. В40*
Силикагель (Cartridge 15-40 мкм, 30 г), 0,5% NH4OH, 95% DCM, 5% MeOH Соед. 447; (3S*),(A); Пр. B40 Соед. 448; (3S*),(B); Пр. B40.
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% С02, 25% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 449; (3R*),UHC -2; Пр. В27
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% С02, 30% iPrOH Соед. 450; (3R*),UHC -3; Пр. В27
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% С02, 25% МеОН Соед. 451; (3R*),транс-1; Пр. В27
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% С02, 30% iPrOH Соед. 452; (3R*),транс-2; Пр. В27
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% C02, 25% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 453; (3S*),цис-1; Пр. B27
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% C02, 30% iPrOH Соед. 454; (3S*),4HC-4; Пр. B27
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 70% C02, 30% iPrOH Соед. 455; ( 3S*),транс-3; Пр. B27 Соед. 456; (3S*),транс-4; Пр. В27
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% С02, 25% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 457; гидрохлорид; (3S*),UHC-1; Пр. В32
SFC Chiralpak 1С (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 75% С02, 25% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 458; гидрохлорид; (ЗРч*),цис-2; Пр. В32
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% С02, 50% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 22; (2S),транс-2; Пр. В14* Соед. 23; (2S),цис-3; Пр. В14* Соед. 24; (23),цис-4; Пр. В14* Соед. 21; (2S),транс-1; Пр. В14*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% C02, 50% iPrOH Соед. 459; (2R*),цис-1; Пр. B24
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 55% C02, 45% iPrOH Соед. 460; (2R*),4HC-2; Пр. B24 Соед. 461; (2R*),транс-1; Пр. В24
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% C02, 50% iPrOH Соед. 462; (2R*),транс-2; Пр. B24
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 60% С02, 40% EtOH Соед. 63; (2R*),цис-1; Пр. В39* Соед. 64; фумарат; (2R*),4HC-2; Пр. В39* .
Нормальная фаза на SiOH с зернами неправильной формы (20-45 мкм, 450 г MATREX) ; градиент от 97% NH4OH, 3% DCM, 0,1% МеОН до 93% NH4OH, 7% DCM, 0,5% МеОН
Соед. 463; (2S*),цис-1; Пр. ВЗб Соед. 464; (23*),цис-2; Пр. ВЗб Соед. 465; (2S*),транс-3; Пр. ВЗб
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 65% С02, 35% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 466; (2S*),транс-4; Пр. ВЗб
Силикагель, (15-40 мкм, 437 мг), Cyclo/EtOAc 60/40
Соед. 467; (2S*), цис-смесь 45/55; Пр. В37
Силикагель, (15-40 мкм, 540 мг),
Cyclo/EtOAc 60/40
Соед. 468; (2R*), цис-смесь 60/40;
Пр. В37
Силикагель, (15-40 мкм, 400 г), от Cyclo 100 до Cyclo/EtOAc 90/10 Соед. 469; (2R*), цис; Пр. В39.
Силикагель, (15-40 мкм, 400 г), от Cyclo 100 до Cyclo/EtOAc 90/10) Соед. 470; (2S*), цис; Пр. В39.
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% С02, 50% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 471; (2S), цис-4; Пр. В16 Соед. 28; (2S), цис-3; Пр. В16*
SFC Chiralpak AD-H (5 мкм, 250x20 мм), 0,3% iPA, 50% С02, 50% (EtOH 50%, iPrOH 50%)
Соед. 27; (2S), цис-3; Пр. В16*
С. Аналитические способы С 1. LCMS
Массу некоторых соединений регистрировали с помощью LCMS (жидкостная хроматография-масс-спектрометрия) . Ниже описаны используемые способы.
Общая процедура А
HPLC измерения осуществляли с применением системы Alliance НТ 2795 (Waters), содержащей четвертичный насос с дегазатором, автодозатор, диодно-матричный детектор (DAD) и колонку, как указано в соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при температуре 30°С. Поток из колонки разделялся для MS
спектрометра. MS-детектор был оснащен источником ионизации электрораспылением. Напряжение капиллярной иглы составляло 3 кВ, а температуру источника поддерживали на уровне 100°С на LCT (времяпролетный масс-спектрометр с интерфейсом Zspray(tm) от Waters - для способа 1) и 3,15 кВ при 110°С на ZQ(tm) (простой квадрупольный масс-спектрометр с интерфейсом Zspray(tm)OT Waters -для способов 2 и 3). В качестве газа-распылителя применяли азот. Сбор и обработку данных проводили с помощью системы обработки данных Waters-Micromass MassLynx-Openlynx. Общая методика В
LC измерения осуществляли с применением системы UPLC
(сверхэффективной жидкостной хроматографии) Acquity (Waters),
содержащей бинарный насос с дегазатором, автодозатор, диодно-
матричный детектор (DAD) и колонку, как указано в
соответствующих способах ниже, колонку поддерживают при
температуре 4 0°С. Поток из колонки направляли на МС-детектор.
MS-детектор был оснащен источником ионизации
электрораспылением. Напряжение капиллярной иглы составляло 3 кВ, и температуру в Quattro (тройном квадрупольном масс-спектрометре от Waters) поддерживали равной 130°С. В качестве газа-распылителя применяли азот. Сбор и обработку данных проводили с помощью системы обработки данных Waters-Micromass MassLynx-Openlynx. Метод 1
В дополнение к общей методике А: Обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке Kromasil С18 (5 мкм, 4,6x150 мм) со скоростью потока 1,0 мл/мин. Использовали три подвижные фазы (подвижная фаза А: 100% 7 мМ ацетат аммония; подвижная фаза В: 10 0% ацетонитрил; подвижная фаза С: 0,2% муравьиной кислоты + 99,8% воды сверхвысокой очистки) использовали для соблюдения условия градиента от 30% А, 40% В и 30% С (удерживание в течение 1 минуты) до 100% В за 4 минуты, 100% В в течение 5 минут и повторно уравновешивали с исходными условиями в течение 3 минут. Использовали объем вводимой пробы 5 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной
ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 900 за 0,8 секунды с использованием времени задержки 0,08 секунды между сканированиями. Метод 2
В дополнение к общей методике А: Обращенно-фазовую HPLC выполняли на колонке X-Bridge С18 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) со скоростью потока 0,8 мл/минута. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 100% 7 мМ ацетат аммония; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил); применяли для соблюдения условия градиента от 8 0% А, 20% В (удерживание в течение 0,5 минуты) до 10% А, 90% В в течение 4,5 минут, удерживание при 10% А и 90% В в течение 4 минут и повторно уравновешивали с исходными условиями в течение
3 минут. Использовали объем вводимой пробы 10 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,4 секунды с использованием времени задержки 0,3 секунды между сканированиями.
Метод 3
В дополнение к общей методике А: Обращенно-фазовую HPLC проводили на колонке Sunfire С18 (3,5 мкм, 4,6x100 мм) со скоростью потока 0,8 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 35% 6,5 мМ ацетат аммония+30% ацетонитрил+35% муравьиная кислота (2 мл/л); подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для соблюдения условия градиента от 100% А (удерживание в течение 1 минуты) до 100% В в течение 4 минут, удерживание при 100% В при скорости потока 1,2 мл/мин в течение
4 минут и повторно уравновешивали с исходными условиями в течение 3 минут. Использовали объем вводимой пробы 10 мкл. Режим положительной ионизации использовали с четырьмя различными напряжениями на конусе (20, 40, 50, 55 В) . Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,4 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями.
Метод 4
В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC
проводили на колонке Waters Acquity ВЕН (мостиковый гибрид этилсилоксана/силикагеля) С18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,35 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 90% А и 10% В (удерживание в течение 0,5 минут) до 8% А и 92% В, удерживание в течение 2 минут, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями. Метод 5
В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Waters Acquity ВЕН (мостиковый гибрид этилсилоксана/силикагеля) С18 (1,7 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,35 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 90% А и 10% В (удерживание в течение 0,5 минут) до 8% А и 92% В, удерживание в течение 2 минут, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжения на конусе составляли 20, 30, 45, 60 В для режима положительной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями.
Метод б
В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Thermo Hypersil Gold С18 (1,9 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,4 0 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 72% А и 28% В (удерживание в течение 0,5
минут) до 8% А и 92% В за 3,5 минуты, удерживание в течение 2 минут, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями. Метод 7
В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Thermo Hypersil Gold С18 (1,9 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,4 0 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 72% А и 28% В (удерживание в течение 0,5 минут) до 8% А и 92% В за 3,5 минуты, удерживание в течение 2 минут, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжения на конусе составляли 20, 30, 45, 60 В для режима положительной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями.
Метод 8
В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC проводили на колонке Thermo Hypersil Gold С18 (1,9 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,50 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 40% А и 60% В (удерживание в течение 0,5 минут) до 5% А и 92% В за 3,5 минуты, удерживание в течение 2 минут, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями.
Метод 9
В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC выполняли на колонке Waters HSS (высокопрочный диоксид кремния) С18 (1,8 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,40 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 72% А и 28% В (удерживание в течение 0,5 минут) до 8% А и 92% В за 3,5 минуты, удерживание в течение 2 минут, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,5 минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями.
Метод 10
В дополнение к общей методике В: обращенно-фазовую UPLC выполняли на колонке Waters HSS (высокопрочный диоксид кремния) С18 (1,8 мкм, 2,1x100 мм) со скоростью потока 0,40 мл/мин. Две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетат аммония/5% ацетонитрил; подвижная фаза В: 100% ацетонитрил) использовали для выполнения условия градиента от 50% А и 50% В (удерживание в течение 0,5 минут) до 3% А и 92% В за 3,5 минуты, удерживание в течение 4,5 минут, и возвращение к начальным условиям через 0,5 мин, удерживание в течение 1,0 минут. Использовали объем вводимой пробы 2 мкл. Напряжение на конусе составляло 2 0 В для режима положительной и отрицательной ионизации. Масс-спектры получали сканированием от 100 до 1000 за 0,2 секунды с использованием времени задержки 0,1 секунды между сканированиями.
Если соединение является смесью изомеров, которые дают различные пики в способе LCMS, то в таблице LCMS приводится только время удерживания основного компонента.
В следующей таблице данные LCMS приводятся как (МН+) , протонированный молекулярный ион (свободного основания), и
время удерживания (Rt, в минутах). С2. Оптическое вращение
Оптическое вращение измеряли с использованием поляриметра. [a]D20 указывает на оптическое вращение, измеренное со светом при длине волны D-линии натрия (58 9 нм) при температуре 2 0°С. Длина оптического пути кюветы составляет 1 дм. Далее указаны [a]D20 значения температуры, концентрации и растворителя раствора, использованного для измерения оптического вращения.
СЗ. Точки плавления
Для некоторых соединений точки плавления получали с помощью столика Кофлера, состоящего из нагреваемой пластины с линейным температурным градиентом, скользящего указателя и температурной шкалы в градусах Цельсия.
192
5,4
641
148
5,36
641
-108,52° (589 нм, с 0,399% масса/объем, DMF, 20°С)
155
4,21
553
+132,15° (589 нм, с 0,311% масса/объем, DMF, 20°С)
130
4, 18
553
-141,91° (589 нм, с 0,241% масса/объем, DMF, 20°С)
4, 14
551
+232,66° (589 нм, с 0,297% масса/объем, DMF, 20°С)
177
4,28
551
3, 95
550
233
3, 02
537
230
4, 11
565
219
4, 08
567
3, 68
473
238
3,34
551
4,77
567
+77,49° (589 нм, с 0,422% масса/объем, DMF, 20°С)
145
4, 6
553
-188,97° (589 нм, с 0,435% масса/объем, DMF, 20°С)
152
4,71
553
> 260
3, 19
539
> 260
3, 54
539
227
5, 08
569
194
5, 91
569
4,75
569
120
3, 6
550
220
3,74
550
+ 123, 45° (589 нм, DMF, 20°С)
140
4,26
519
-312,78° (589 нм, DMF, 20°С)
214
4,42
519
-168,5° (589 нм, DMF, 20°С)
114
4,4
519
+ 170,91° (589 нм, DMF, 20°С)
> 250
4,44
519
107
3, 91
507
168
4, 61
507
+67,75° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)
5, 02
507
114
3, 88
507
120
1, 12
551
130
3, 02
551
+175,98° (589 нм, с 0,358% масса/объем, DMF, 20°С)
4,58
565
-277,47° (589 нм, с 0,435% масса/объем, DMF, 20°С)
214
4, 61
565
100
-172,22° (589 нм, с 0,36% масса/объем, DMF, 20°С)
143
4, 65
565
101
3,71
565
102
145
3, 04
597
103
135
2, 8
597
104
+77,22° (589 нм, с 0,259% масса/объем, DMF, 20°С)
160
4, 65
571
105
-200,57° (589 нм, с 0,348% масса/объем, DMF, 20°С)
149
4, 57
571
106
+7,14° (589 нм, с 0,364% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 92
557
107
4,24
555
+78,57° (589 нм, с 0,224% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 96
557
108
+129,48° (589 нм, с 0,363% масса/объем, DMF, 20°С)
4, 57
571
109
3, 83
575
110
-59,06° (589 нм, с 0,254% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 95
557
111
+185,84° (589 нм, с 0,353% масса/объем, DMF, 20°С)
111
5, 05
589
-115,3° (589 нм, с 0,3365% масса/объем, DMF, 20°С)
106
4, 98
589
112
+78,52° (589 нм, с 0,284% масса/объем, DMF, 20°С)
124
5, 24
589
113
-178,74° (589 нм, с 0,334% масса/объем, DMF, 20°С)
130
5, 07
589
114
3,9
553
115
4,39
542
116
153
4,26
544
3,9
553
117
3, 82
553
118
2,48
517
119
215
1,76
537
120
-109, 96° (589 нм, с 0,281% масса/объем, DMF, 20°С)
5, 33
537
121
> 260
3, 93
539
122
> 260
3, 96
539
123
-182,89° (589 нм, с 0,339% масса/объем, DMF, 20°С)
210
3,33
477
+189,15° (589 нм, с 0,3225% масса/объем, DMF, 20°С)
143
3,34
477
124
-203,73° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)
164
3, 32
477
125
+183° (589 нм, с 0,3235% масса/объем, DMF, 20°С)
210
3, 32
477
126
> 260
2, 96
575
127
> 260
3, 09
575
+48,62° (589 нм, с 0,3435% масса/объем, DMF, 20°С)
224
3,74
575
128
3, 84
539
129
240
3,39
463
130
200
3,44
463
131
241
3,45
463
132
244
3,39
463
133
-57,52° (589 нм, с 0,412% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 81
575
134
+32,2° (589 нм, с 0,1615% масса/объем, DMF, 20°С)
233
4, 04
575
135
> 250
3,49
557
136
> 250
3,26
557
137
> 250
3,26
557
138
> 250
3, 06
557
139
130
3, 66
509
140
3, 6
509
141
155
3,35
485
142
190
3,43
485
143
> 250
3,44
557
144
> 250
3,2
557
145
> 250
3,2
557
146
> 250
557
147
4, 19
537
148
4,22
537
149
178
4, 85
571
150
184
4, 52
571
151
156
4, 89
571
152
170
4, 65
571
153
+63,31° (589 нм, с 0,387% масса/объем, DMF, 20°С)
183
2, 54
503
154
+63,19° (589 нм, с 0,288% масса/объем, DMF, 20°С)
250
2, 94
503
155
-67,85° (589 нм, с 0,3095% масса/объем, DMF, 20°С)
194
2, 65
503
156
-128,4° (589 нм, с 0,3715% масса/объем, DMF, 20°С)
254
2, 94
503
157
+85,21° (589 нм, с 0,311% масса/объем, DMF, 20°С)
100
2,28
517
158
-202,71° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)
198
2, 53
517
159
> 250
3, 05
555
> 250
3,44
555
160
> 250
3, 99
523
161
> 250
3, 8
523
162
> 250
3,78
523
163
4,24
537
164
170
4, 55
537
165
168
4, 57
537
166
168
5, 01
537
167
3,74
503
168
169
3,79
503
169
169
4, 15
503
170
176
4,1
503
171
161
3,29
569
172
170
3, 11
569
173
4,7
571
174
171
3,79
523
175
194
4, 05
523
176
192
3,78
523
177
> 250
4, 01
523
178
> 250
3,7
489
179
> 250
3, 52
489
180
186
3,75
489
181
173
3, 52
489
182
-5,55° (589 нм, с 0, 3605% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,58
489
183
-93, 86° (589 нм, с 0,3175% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,72
489
184
172
2,71
535
185
162
3, 17
535
186
166
2, 88
535
187
167
3,1
535
188
-129,97° (589 нм, с 0,397% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 99
555
189
+286,5° (589 нм, с 0,4185% масса/объем, DMF, 20°С)
160
3, 95
555
190
+143,71° (589 нм, с 0,318% масса/объем, DMF, 20°С)
555
191
-281,85° (589 нм, с 0,336% масса/объем, DMF, 20°С)
162
3, 94
555
192
-16,33° (589 нм, с 0, 3735% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 69
523
-94,13° (589 нм, с 0,4685% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 84
523
193
+23,43° (589 нм, с 0,397% масса/объем, DMF, 20°С)
147
4, 18
537
-153,89° (589 нм, с 0,3535% масса/объем, DMF, 20°С)
141
4, 06
537
194
+109,12° (589 нм, с 0,34% масса/объем, DMF, 20°С)
149
4,42
537
195
+ 50, 76° (589 нм, с 0,461% масса/объем, DMF, 20°С)
153
3, 8
503
196
+163,61° (589 нм, с 0,2995% масса/объем, DMF, 20°С)
4, 11
503
197
-195,04° (589 нм, с 0,282% масса/объем, DMF, 20°С)
138
3,78
503
198
-173,72° (589 нм, с 0,293% масса/объем, DMF, 20°С)
187
4,16
503
199
-61,7° (589 нм, с 0,4895% масса/объем, DMF, 20°С)
192
3, 13
569
200
+171,12° (589 нм, с 0,4225% масса/объем, DMF, 20°С)
187
3,34
569
201
+130,34° (589 нм, с 0,267% масса/объем, DMF, 20°С)
195
3, 52
569
202
-131,7° (589 нм, с 0,265% масса/объем, DMF, 20°С)
186
3, 61
569
203
-72,45° (589 нм, с 0,363% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,7
541
204
+38,18° (589 нм, с 0,4165% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 93
541
205
-53,25° (589 нм, с 0,4% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
2, 98
573
206
+31,72° (589 нм, с 0,476% масса/объем, DMF, 20°С)
245
3, 13
573
207
-73, 96° (589 нм, с 0, 3975% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,39
573
208
+38,88° (589 нм, с 0,2855% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,31
573
209
+111,67° (589 нм, с 0,3385% масса/объем, DMF, 20°С)
2, 98
587
210
-180,75° (589 нм, с 0,3325% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 04
587
211
-113,84° (589 нм, с 0,419% масса/объем, DMF, 20°С)
150
2, 98
587
212
+71,23° (589 нм, с 0,2485% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,39
573
213
-27,33° (589 нм, с 0,3% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 12
573
214
+58,16° (589 нм, с 0,392% масса/объем, DMF, 20°С)
213
2, 99
573
215
-43,95° (589 нм, с 0,43% масса/объем, DMF, 20°С)
3,29
573
+ 46,5° (589 нм, с 0, 329% масса/объем, DMF, 20°С)
148
3, 12
569
-162,08° (589 нм, с 0,327% масса/объем, DMF, 20°С)
160
3,3
569
+126,22° (589 нм, с 0,286% масса/объем, DMF, 20°С)
145
3, 6
569
-141,92° (589 нм, с 0,291% масса/объем, DMF, 20°С)
174
3,51
569
216
-164,98° (589 нм, с 0,277% масса/объем, DMF, 20°С)
152
3, 53
569
217
-169,84° (589 нм, с 0,368% масса/объем, DMF, 20°С)
169
3,35
569
218
+66,54° (589 нм, с 0,272% масса/объем, DMF, 20°С)
174
3, 13
569
219
+ 105, 06° (589 нм, с 0, 336% масса/объем, DMF, 20°С)
156
3, 61
569
220
-27,88° (589 нм, с 0,452% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 09
555
221
+33,44° (589 нм, с 0,311% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,49
555
222
+ 30, 1° (589 нм, с 0, 4485% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 08
555
223
+72,28° (589 нм, с 0,368% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 09
555
224
-95,7° (589 нм, с 0,3835% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,46
555
225
-25,06° (589 нм, с 0,423% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 07
555
226
+198,48° (589 нм, с 0,394% масса/объем, DMF, 20°С)
221
3, 91
571
227
-41,67° (589 нм, с 0,312% масса/объем, DMF, 20°С)
196
4, 08
572
-207,64° (589 нм, с 0,275% масса/объем, DMF, 20°С)
221
3, 88
571
228
+41,36° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)
196
4,1
571
183
4, 09
557
229
-114,24° (589 нм, с 0,344% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 92
557
230
-32,93° (589 нм, с 0,1154% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 82
491
231
+107,46° (589 нм, с 0,228% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 92
491
232
+19,57° (589 нм, с 0,1022% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 64
491
233
+25,99° (589 нм, с 0,277% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 82
491
234
-29,57° (589 нм, с 0,1116% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 64
491
235
-46, 73° (589 нм, с 0, 0749% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,4
491
236
> 250
3, 06
520
237
-100,34° (589 нм, с 0,294% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,16
521
238
-38,06° (589 нм, с 0,31% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
2, 81
521
239
> 250
3, 94
493
> 250
3, 93
103
240
> 250
3, 67
493
241
> 250
3,78
493
242
+ 235, 76° (589 нм, с 0, 302% масса/объем, DMF, 20°С)
4,3
537
243
-89,78° (589 нм, с 0,186% масса/объем, DMF, 20°С)
140
3,16
553
244
+217,8° (589 нм, с 0,337% масса/объем, DMF, 20°С)
205
4,58
537
245
-98,05° (589 нм, с 0,257% масса/объем, DMF, 20°С)
147
4,28
537
246
100
2,38
468
247
+144,41° (589 нм, с 0,286% масса/объем, DMF, 20°С)
132
4, 05
537
248
-53,47° (589 нм, с 0,303% масса/объем, DMF, 20°С)
134
4,16
537
249
+136,02° (589 нм, с 0,2485% масса/объем, DMF, 20°С)
178
4,2
537
250
-148,58° (589 нм, с 0,2645% масса/объем, DMF, 20°С)
125
4,42
537
251
+115,43° (589 нм, с 0,324% масса/объем, DMF, 20°С)
183
3, 08
535
252
-35,99° (589 нм, с 0,439% масса/объем, DMF, 20°С)
152
2,71
535
253
+ 136,81° (589 нм, с 0, 432% масса/объем, DMF, 20°С)
167
2, 88
535
254
+40,58° (589 нм, с 0,067% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 54
545
255
-42,8° (589 нм, с 0,0514% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
545
256
+153,1° (589 нм, с 0,258% масса/объем, DMF, 20°С)
118
4, 63
559
257
-181,51° (589 нм, с 0,292% масса/объем, DMF, 20°С)
108
4, 57
559
> 250
3, 94
545
258
-64,24° (589 нм, с 0,0576% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,58
545
259
+186,75° (589 нм, с 0,302% масса/объем, DMF, 20°С)
168
4, 63
559
260
+154,66° (589 нм, с 0,247% масса/объем, DMF, 20°С)
104
3,7
537
261
+298,07° (589 нм, с 0,2845% масса/объем, DMF, 20°С)
122
3, 81
537
262
-142,69° (589 нм, с 0,253% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 83
537
263
+ 35, 09° (589 нм, с 0, 2565% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
2, 61
521
264
+ 30, 18° (589 нм, с 0, 275% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 02
521
265
+98,69° (589 нм, с 0,306% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
2, 94
521
266
+ 10,59° (589 нм, с 0,34% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,5
523
267
+28,99° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,86
539
268
+ 98,19° (589 нм, с 0, 3035% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,72
523
269
-67,05° (589 нм, с 0,349% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
2, 94
555
270
-43,13° (589 нм, с 0,2365% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,29
555
271
-105,62° (589 нм, с 0,267% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 19
555
272
-36,69° (589 нм, с 0,357% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
2, 85
555
273
-206,07° (589 нм, с 0,2635% масса/объем, DMF, 20°С)
204
4,58
537
274
4,56
537
275
+95,58° (589 нм, с 0,407% масса/объем, DMF, 20°С)
140
4,26
537
276
-246, 45° (589 нм, с 0,31% масса/объем, DMF, 20°С)
4,29
537
277
-96,53° (589 нм, с 0,259% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,73
523
278
-16,47° (589 нм, с 0,3035% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,51
523
279
> 250
3,37
523
280
+91,43° (589 нм, с 0,28% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,49
523
281
+42,67° (589 нм, с 0,3% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,5
523
282
-78,27° (589 нм, с 0,382% масса/объем, DMF, 20°С)
206
3,35
523
283
+54,55° (589 нм, с 0,297% масса/объем, DMF, 20°С)
184
3, 84
537
284
-180,15° (589 нм, с 0,393% масса/объем, DMF, 20°С)
163
3,73
537
285
-57,81° (589 нм, с 0,384% масса/объем, DMF, 20°С)
184
3,78
537
286
+190,64° (589 нм, с 0,299% масса/объем, DMF, 20°С)
177
3,74
537
287
+255,83° (589 нм, с 0,283% масса/объем, DMF, 20°С)
185
4,26
525
288
-139,37° (589 нм, с 0,287% масса/объем, DMF, 20°С)
150
4,2
525
289
+139,65° (589 нм, с 0,401% масса/объем, DMF, 20°С)
150
4, 18
525
290
-253,69° (589 нм, с 0,298% масса/объем, DMF, 20°С)
185
4,29
525
291
+34,21° (589 нм, с 0,342% масса/объем, DMF, 20°С)
150
2, 91
569
292
-172,52° (589 нм, с 0,262% масса/объем, DMF, 20°С)
150
2, 97
610
293
-31,14° (589 нм, с 0,411% масса/объем, DMF, 20°С)
150
2,9
569
294
+175,47° (589 нм, с 0,322% масса/объем, DMF, 20°С)
150
2, 96
610
295
+61,22° (589 нм, с 0,294% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,49
511
296
-42,04° (589 нм, с 0,3235% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 88
511
297
+35,65° (589 нм, с 0,2805% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3, 88
511
298
-61,26° (589 нм, с 0, 302% масса/объем, DMF, 20°С)
> 250
3,49
511
299
+206,14° (589 нм, с 0,342% масса/объем, DMF, 20°С)
110
3,76
537
300
+185,42° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 87
537
301
-233,7° (589 нм, с 0,3175% масса/объем, DMF, 20°С)
170
3, 8
537
302
-118,37° (589 нм, с 0,283% масса/объем, DMF, 20°С)
120
3,72
537
303
> 250
3,78
511
304
> 250
3,59
511
305
+80,67° (589 нм, с 0,269% масса/объем, DMF, 20°С)
133
2, 95
587
306
-75, 99° (589 нм, с 0, 2645% масса/объем, DMF, 20°С)
157
3, 06
587
307
+50,35° (589 нм, с 0,286% масса/объем, DMF, 20°С)
232
2,76
573
308
-31,76° (589 нм, с 0, 2645% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 08
573
309
+85,04° (589 нм, с 0,254% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3,42
541
310
-30,37° (589 нм, с 0,349% масса/объем, DMF, 20°С)
126
3,59
541
311
-45,25° (589 нм, с 0,263% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3,46
541
312
> 260
3, 57
541
313
+100° (589 нм, с 0,25% масса/объем, DMF, 20°С)
147
4,34
589
-101,43° (589 нм, с 0,28% масса/объем, DMF, 20°С)
176
4,35
589
314
+ 39, 29° (589 нм, с 0, 3385% масса/объем, DMF, 20°С)
234
3, 69
575
315
-69, 76° (589 нм, с 0,3125% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 54
575
316
+45,65° (589 нм, с 0,23% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 57
575
317
> 260
3, 68
575
+109,94° (589 нм, с 0,322% масса/объем, DMF, 20°С)
208
4, 01
555
318
-243,94° (589 нм, с 0,264% масса/объем, DMF, 20°С)
133
4, 03
555
-153,8° (589 нм, с 0,342% масса/объем, DMF, 20°С)
4,79
525
+ 76, 76° (589 нм, с 0,37% масса/объем, DMF, 20°С)
126
4, 53
525
-182,79° (589 нм, с 0,3835% масса/объем, DMF, 20°С)
146
4,5
525
+140,04° (589 нм, с 0,2835% масса/объем, DMF, 20°С)
4,76
525
319
+103,95° (589 нм, с 0,329% масса/объем, DMF, 20°С)
169
4,36
589
320
-188,97° (589 нм, с 0,3625% масса/объем, DMF, 20°С)
159
4,34
589
321
+ 70, 56° (589 нм, с 0, 3685% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 55
575
322
-37, 96° (589 нм, с 0, 3925% масса/объем, DMF, 20°С)
248
3,71
575
323
-46, 53° (589 нм, с 0, 303% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 57
575
324
+83,03° (589 нм, с 0,2505% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 69
575
325
-73,27° (589 нм, с 0,318% масса/объем, DMF, 20°С)
144
2, 96
587
326
+71,7° (589 нм, с 0,3975% масса/объем, DMF, 20°С)
166
3, 07
587
327
-52, 79° (589 нм, с 0, 3675% масса/объем, DMF, 20°С)
248
2,76
573
328
+29,8° (589 нм, с 0,2685% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 08
573
329
+41,8° (589 нм, с 0,244% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3,46
541
330
+28,89° (589 нм, с 0,27% масса/объем, DMF, 20°С)
170
4, 07
509
331
-89,4° (589 нм, с 0,3255% масса/объем, DMF, 20°С)
166
4, 08
509
332
-89,97° (589 нм, с 0,289% масса/объем, DMF, 20°С)
164
4,39
509
333
-37° (589 нм, с 0,327% масса/объем, DMF, 20°С)
3,4
523
334
+69,77° (589 нм, с 0,354% масса/объем, DMF, 20°С)
232
3,38
523
335
Вращение: 0
180
3, 62
226
336
+84,24° (589 нм, с 0,311% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 54
557
337
+121,82° (589 нм, с 0,307% масса/объем, DMF, 20°С)
186
4, 01
571
338
+228,63° (589 нм, с 0,255% масса/объем, DMF, 20°С)
198
4, 15
571
339
176
4, 03
571
340
-121,01° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)
132
4, 17
571
341
+ 35, 29° (589 нм, с 0, 136% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 66
557
342
-66, 76° (589 нм, с 0, 3655% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3,49
557
343
> 250
3,42
511
344
> 250
3,59
511
345
+ 66,41° (589 нм, с 0, 262% масса/объем, DMF, 20°С)
152-154
3, 92
525
346
+120,83° (589 нм, с 0,36% масса/объем, DMF, 20°С)
151-153
4, 02
525
347
-117,61° (589 нм, с 0,301% масса/объем, DMF, 20°С)
148-150
3, 93
525
348
-98,33° (589 нм, с 0,3% масса/объем, DMF, 20°С)
145
4, 06
525
349
> 250
3, 57
523
350
> 250
3,7
523
351
128-130
4,39
537
352
123-125
4,23
537
353
166-168
4, 63
537
354
168-170
4,49
537
355
-225,37° (589 нм, с 0,339% масса/объем, DMF, 20°С)
190
4, 17
571
356
+129,45° (589 нм, с 0,2835% масса/объем, DMF, 20°С)
4,2
571
357
104
4, 05
571
358
-110,02° (589 нм, с 0,2945% масса/объем, DMF, 20°С)
138
4, 07
571
359
+24,72° (589 нм, с 0,267% масса/объем, DMF, 20°С)
3,26
475
360
-35,65° (589 нм, с 0,345% масса/объем, DMF, 20°С)
3,33
475
361
+40,13° (589 нм, с 0,309% масса/объем, DMF, 20°С)
3,33
475
362
-23,46° (589 нм, с 0,2515% масса/объем, DMF, 20°С)
3,26
475
363
-40,04° (589 нм, с 0,1124% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3, 61
557
364
-34,57° (589 нм, с 0,269% масса/объем, DMF, 20°С)
> 260
3,51
557
365
+62,08° (589 нм, с 0,3415% масса/объем, DMF, 20°С)
242
3,45
557
366
146
3,43
569
367
175
3, 03
569
368
144
3,29
569
369
138
3,71
569
176
3, 6
491
102
3, 57
491
209
3,42
491
120
3,34
491
370
3, 63
491
371
+146,51° (589 нм, с 0,258% масса/объем, DMF, 20°С)
158
3,72
489
372
-224,56° (589 нм, с 0,285% масса/объем, DMF, 20°С)
194
3, 81
489
373
+226,53° (589 нм, с 0,2865% масса/объем, DMF, 20°С)
193
3, 82
489
374
-146,07° (589 нм, с 0,28% масса/объем, DMF, 20°С)
162
3,72
489
-65,4° (589 нм, с 0, 367% масса/объем, DMF, 20°С)
2,77
555
+121,07° (589 нм, с 0,261% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 08
555
+59,23° (589 нм, с 0,287% масса/объем, DMF, 20°С)
2, 87
555
-70, 18° (589 нм, с 0, 285% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 11
555
375
> 250
3, 19
477
376
> 250
3,42
477
377
2, 97
555
378
3,1
555
+245,07° (589 нм, с 0,2685% масса/объем, DMF, 20°С)
161
3, 64
554
379
-104, 1° (589 нм, с 0, 293% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 65
554
380
+71,83° (589 нм, с 0,284% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 67
554
381
-228,26° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)
3, 65
554
382
+142,29° (589 нм, с 0,253% масса/объем, DMF, 20°С)
4, 53
547
383
-267, 89° (589 нм, с 0, 246% масса/объем, DMF, 20°С)
4, 53
547
384
-138,01° (589 нм, с 0,271% масса/объем, DMF, 20°С)
4,34
547
385
+168,79° (589 нм, с 0,282% масса/объем, DMF, 20°С)
4,42
547
386
-211,7° (589 нм, с 0,2735% масса/объем, DMF, 20°С)
125
3,38
579
387
+118,66° (589 нм, с 0,343% масса/объем, DMF, 20°С)
204
3,22
579
388
+188,25° (589 нм, с 0,3065% масса/объем, DMF, 20°С)
103
2, 92
569
389
+ 97, 98° (589 нм, с 0, 3225% масса/объем, DMF, 20°С)
128
2,76
569
390
-112,32° (589 нм, с 0,276% масса/объем, DMF, 20°С)
170
2, 81
569
391
-131,97° (589 нм, с 0,2925% масса/объем, DMF, 20°С)
120
2, 94
569
392
162-164
3, 66
503
393
159-161
3, 55
503
394
3, 53
457
395
150-152
3,45
457
212
4, 01
457
396
4, 06
457
397
180
3,16
489
398
3,36
489
399
222-224
3, 68
439
400
157
3,7
439
401
240
3,7
439
402
175-177
3,75
439
403
176
4,4
493
404
168
4,1
493
405
184
4,38
493
406
206
3, 84
522
407
3, 93
521
408
135
3, 67
469
409
190
4,34
493
410
155
4,24
493
411
168
4,21
493
412
166
4,34
493
413
> 250
3, 84
425
414
196
3, 84
425
415
160
3, 69
425
166-168
3,4
457
416
160-162
3,4
457
417
150
2, 64
553
418
164-166
3,28
553
419
154
3, 01
553
420
3, 19
431
421
3,24
431
422
3,25
431
423
174
3,16
431
2, 61
413
424
2, 61
413
425
125
2, 98
441
426
174
3,1
443
427
174
3,51
520
428
217
3, 63
520
245
4, 06
509
429
> 260
4, 06
509
430
184
4,71
543
431
178
4, 87
543
432
167
4, 67
543
+99,45° (589 нм, с 0,2735% масса/объем, DMF, 20°С)
162
4, 67
535
-87,9° (589 нм, с 0,281% масса/объем, DMF, 20°С)
4, 69
535
433
114
3, 55
508
434
197
3,71
508
-134,65° (589 нм, с 0,303% масса/объем, DMF, 20°С)
135
3, 8
447
435
+132,68° (589 нм, с 0,306% масса/объем, DMF, 20°С)
140
3, 13
447
436
135
4, 02
535
437
4, 62
535
135
2,29
397
2,74
431
232
3, 08
433
438
188
3, 69
508
439
132
3, 52
508
440
4,86
543
441
4, 89
543
442
178
4,78
543
443
156
3, 05
494
444
172
2, 93
494
445
154
3, 08
494
446
210
3, 08
433
240
2, 09
568
184
2,1
568
447
234
2, 09
568
448
182
2, 09
568
449
+195,05° (589 нм, с 0,283% масса/объем, DMF, 20°С)
190
3,76
435
450
+163,97° (589 нм, с 0,297% масса/объем, DMF, 20°С)
200
3,78
435
451
-216,99° (589 нм, с 0, 1825% масса/объем, DMF, 20°С)
110
3, 6
435
452
-179,09° (589 нм, с 0,1865% масса/объем, DMF, 20°С)
114
3, 68
435
453
-160,6° (589 нм, с 0,302% масса/объем, DMF, 20°С)
210
3,78
435
454
-180,34° (589 нм, с 0,295% масса/объем, DMF, 20°С)
186
3,77
435
455
+179,5° (589 нм, с 0,161% масса/объем, DMF, 20°С)
118
3, 69
435
456
+224,84° (589 нм, с 0,153% масса/объем, DMF, 20°С)
115
3,58
435
457
> 250
3,35
421
458
> 250
3,29
421
4, 83
598
4, 69
598
4, 68
598
459
211
3, 65
587
460
197
3, 83
587
461
208
3,38
587
462
192
3, 6
587
157
4,24
502
141
4,25
502
463
160
2, 57
587
464
154
2, 8
587
465
168
2, 19
587
466
188
2,49
587
467
148
2, 19
508
468
148
2,2
508
469
3,49
523
470
3,48
523
471
3, 84
494
3, 83
494
3,31
460
D. Фармакологические примеры
D. 1.
In-vitro
способ
испытания
антибактериальной
активности в отношении штамма М. Smegmatis АТСС607
Пластиковые
стерильные
9б-луночные
титрационные
микропланшеты с плоским дном заполняли 180 мкл стерильной деионизированной воды, обогащенной 0,25% BSA. Затем исходные растворы (7,8 х конечная испытуемая концентрация) соединений добавляли в объемах 4 5 мкл к серии дублирующих лунок в столбце
2 так, чтобы обеспечить оценку их влияния на бактериальный
рост. Последовательные пятикратные разведения (45 мкл в 180
мкл) осуществляли непосредственно в титрационных микропланшетах
из столбца 2 в 11, используя специализированную
роботизированную систему (Zymark Corp., Хопкинтон,
Массачусетс). Наконечники микродозаторов заменяли после каждых
3 разведений, чтобы снизить до минимума ошибки дозирования высокогидрофобных соединений. Необработанные контрольные образцы с (столбец 1) и без (столбец 12) инокулята вносили в каждый титрационный микропланшет. Приблизительно 250 КОЕ бактерий на лунку, в объеме 100 мкл в 2,8х бульонной среде Мюллера-Хинтона, добавляли в ряды А-Н за исключением столбца 12. Тот же объем бульонной среды без инокулята вносили в столбец 12 в рядах А-Н. Культуры инкубировали при 37°С в течение 4 8 часов во влажной атмосфере с 5% С02 (инкубатор с открытым воздушным клапаном и непрерывной вентиляцией). В конце инкубирования, через два дня после инокуляции, бактериальный рост количественно оценивали флуорометрией. В связи с этим во все лунки добавляли краситель Alamar Blue (10х) в объеме 20 мкл и планшеты инкубировали еще в течение 2 часов при 50°С.
Флуоресценцию измеряли компьютеризированным флуорометром (Cytofluor, Biosearch) при длине волны возбуждения, равной 530 нм, и длине волны эмиссии, равной 590 нм (прирост 30). Ингибирование роста в процентах, достигнутое при использовании соединений, рассчитывали согласно стандартным способам и выражали в виде ICgo (мкг/мл), которое определяет концентрацию для 90% ингибирования бактериального роста. Результаты показаны
в таблице 3.
D.2. In-vitro способ испытания антибактериальной активности соединений в отношении штаммов, не являющихся микобактериальными
Получение бактериальных суспензий для испытания на чувствительность
Используемые в данном исследовании бактерии выращивали в течение ночи в колбах, содержащих 100 мл бульона Mueller-Hinton (Becton Dickinson - № по кат. 275730) в стерильной деионизированной воде, при встряхивании при 37°С.
Приготовленные растворы (0,5 мл/пробирка) хранили при -70°С до использования. Титрование бактерий проводили в титрационных микропланшетах для определения TCID50, где TCID50 представляет разбавление, которое приводит к бактериальному росту в 50% инокулированных культур.
Для испытания на чувствительность использовали, как правило, концентрацию инокулята приблизительно 100 TCID50.
Испытание на антибактериальную чувствительность: Определение 1С90
Анализ на титрационном микропланшете
Пластиковые стерильные 9б-луночные титрационные
микропланшеты с плоским дном заполняли 180 мкл стерильной деионизированной воды, обогащенной 0,25% BSA. Затем исходные растворы (7,8 х конечная испытуемая концентрация) соединений добавляли в объемах 4 5 мкл к серии дублирующих лунок в столбце 2. Последовательные пятикратные разведения (45 мкл в 180 мкл) осуществляли непосредственно в титрационных микропланшетах из столбца 2, достигая столбца 11. Необработанные контрольные образцы с (столбец 1) и без (столбец 12) инокулята вносили в каждый титрационный микропланшет. В зависимости от типа бактерий, приблизительно от 10 до 60 КОЕ бактерий на лунку (100 TCID50), в объеме 100 мкл в 2,8х бульонной среде Мюллера-Хинтона, добавляли в ряды А-Н за исключением столбца 12. Тот же объем бульонной среды без инокулята вносили в столбец 12 в рядах А-Н. Культуры инкубировали при 37°С в течение 2 4 часов в
нормальной атмосфере (инкубатор с открытым воздушным клапаном и непрерывной вентиляцией). В конце инкубирования, через один день после инокуляции, бактериальный рост количественно оценивали флуорометрией. В связи с этим во все лунки через 3 часа после инокуляции добавляли резазурин (0,6 мг/мл) в объеме 2 0 мкл и планшеты повторно инкубировали в течение ночи. Изменение цвета с синего на розовый указывало на рост бактерий.
Флуоресценцию измеряли компьютеризированным флуорометром (Cytofluor, Biosearch) при длине волны возбуждения, равной 530 нм, и длине волны эмиссии, равной 590 нм. Достигнутый соединениями % ингибирования роста рассчитывали согласно стандартным методам. IC90 (выраженное в мкг/мл) определяли как 90% концентрацию ингибирования бактериального роста. Результаты показаны в таблице 3.
Способ с разведением в агаре
Значения MICgg (минимальная концентрация для получения 99% ингибирования бактериального роста) можно определить путем проведения стандартной методики разбавления в агаре согласно стандартам* NCCLS, в которых используемая среда содержит агар Мюллера-Хинтона.
*Clinical laboratory standard institute. 2005. Methods for dilution Antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grows Aerobically: approved standard -sixth edition
Анализы зависимости гибели бактерий от времени
Бактерицидную или бактериостатическую активность соединений можно определить в анализе зависимости гибели бактерий от времени, используя методику микроразведения в бульоне*. В анализе зависимости гибели бактерий от времени со Staphylococcus aureus концентрация исходного инокулята S. aurues составляет 106 КОЕ/мл в бульоне Мюллера-Хинтона. Антибактериальные соединения использовали при концентрации 0,1 до 10-кратной MIC (т.е. IC90, как определено в анализе на титрационном микропланшете). Лунки без антибактериального средства составляли группу для контроля роста культуры. Планшеты, содержащие микроорганизм и испытуемые соединения,
инкубировали при 37°С. Через 0, 3, б и 24 часов после инкубирования отбирали образцы для определения количества жизнеспособных микроорганизмов последовательным разведением (10_1-10~6) в стерильном PBS и нанесением (200 мкл) на агар Мюллера-Хинтона. Планшеты инкубировали при 37°С в течение 2 4 часов и определяли число колоний. Кривые лизиса можно провести, строя график 1одюКОЕ на мл в зависимости от времени. Бактерицидное действие обычно определяют как 3-1одю снижение в единицах КОЕ на мл в сравнении с необработанным инокулятом. Возможный остаточный эффект лекарственных средств устраняли последовательными разведениями и подсчетом колоний при наиболее высоком разведении, используемом для построения графика.
*Zurenko, G.E. et al. In vitro activities of U-100592 and U-100766, novel oxazolidinone antibacterial agents. Antimicrob. Agents Chemother. 40, 839-845 (1996) .
Определение уровней клеточного ATP
Для анализа изменения в общей концентрации клеточного АТР (используя ATP bioluminescence Kit, Roche), анализ проводили путем выращивания культуры S. aureus (АТСС2 9213) в 100 мл колбах с бульоном Мюллера-Хинтона, и их инкубировали в шейкере-инкубаторе в течение 24 ч при 37°С (300 об/мин) . Измеряли OD405 и рассчитывали КОЕ/мл. Разбавляли культуры до 1x106 КОЕ/мл (конечная концентрация для измерения АТР: 1x105 КОЕ/100 мкл на лунку) и добавляли испытуемое соединение при 0,1-10 кратном MIC (т.е. IC90, как определено в анализе на титрационном микропланшете). Инкубировали данные колбы в течение 0, 30 и 60 минут при 300 об/мин и 37°С. Использовали 0,6 мл бактериальной суспензии из пробирок с защелкивающимся колпачком и добавляли в новые 2 мл пробирки эппендорф. Добавляли 0,6 мл реагента для лизиса клеток (Roche kit), встряхивали при максимальной скорости и инкубировали в течение 5 минут при комнатной температуре. Охлаждали на льду. Позволяли люминометру нагреться
до 30°С (Luminoskan Ascent Labsystems с инжектором). Наполняли одну колонку (=6 лунок) 100 мкл того же образца. Добавляли 100 мкл реагента люциферазы в каждую лунку, используя систему
инжекции. Измеряли люминесценцию в течение 1 сек.
Значения IC90 (мкг/мл) .
1, 64
6, 54
1, 64
3, 18
5, 66
2, 01
1, 14
0, 90
3, 13
4, 95
1,76
> 13,84
13, 84
3,48
6, 94
3,48
1,78
6, 32
1, 12
1,78
6, 32
1,42
100
7, 09
7, 09
109
1,49
1,49
101
3,56
6, 32
1,59
102
3,76
7,50
3,76
103
14, 96
14, 96
107
1, 87
2, 65
104
1, 80
1, 14
106
1, 87
<0, 93
1,49
0, 94
108
2,41
1,36
110
1, 87
1, 87
105
1, 80
0, 90
1, 17
5, 24
0, 93
3,42
6, 83
1, 93
113
2, 02
4, 04
1, 01
112
1, 66
6, 60
0, 93
2, 02
1,43
114
1,75
4,38
0, 98
115
3,30
4,16
2, 08
116
3,42
6, 83
1,72
3,48
6, 95
3,48
117
3,48
5, 52
2,77
118
> 20,58
> 20,58
119
> 16,90
> 16,90
121
3, 62
3, 62
3, 62
122
2, 88
3, 62
3, 62
3, 00
3, 00
124
3, 00
3, 00
125
3, 00
3, 00
126
3, 85
3, 06
127
1, 93
3, 06
128
4,56
3, 62
129
12, 52
7, 90
130
11, 60
5, 81
131
> 6, 27
4, 98
132
9,21
133
3, 85
3, 06
134
3, 07
3,86
120
6,76
5, 37
135
1, 84
1, 84
136
2, 08
1,47
137
3, 69
1, 65
138
2,35
1, 18
141
7,77
4,37
139
2, 00
1,78
140
2, 55
0,72
142
3, 06
2,16
143
1, 82
2, 04
144
3, 63
3,24
145
2, 92
2, 32
146
2,35
1, 87
147
3,39
1,51
148
3,39
1,70
149
5, 63
2, 52
150
2, 63
1, 66
151
5,26
2,35
152
2,78
1,76
153
> 12,63
> 12,63
157
> 12,98
> 12,98
154
> 12,63
> 12,63
155
> 12,63
> 12,63
156
> 12,63
11,25
158
> 12,98
> 12,98
159
> 14,69
> 14,69
160
3,51
2,48
162
3, 52
2,49
7,34
2, 60
163
1,70
1,20
164
4,23
2,38
165
5, 10
3, 61
166
3, 09
1, 95
161
6, 90
6, 90
167
3, 17
1,26
168
3, 17
1,42
169
4, 96
3, 94
170
5, 27
4, 69
171
7,16
5, 69
173
2,86
3,20
174
3,30
3,30
175
2,34
3,30
176
3,30
3,30
177
1,76
2,78
178
6, 15
4, 89
179
8, 69
6, 15
180
3, 08
3, 08
181
6, 15
9, 75
172
7,16
3,59
182
6, 60
6, 60
184
13,43
13,43
185
13,43
8,47
186
9, 51
8,47
187
> 13,43
13,43
188
2,20
2,77
190
1,39
1,76
189
1,76
2,78
191
3,50
3,50
183
3,31
3,31
192
7, 00
13, 96
3,48
3,48
193
5, 35
5, 35
1, 69
0, 85
194
1, 69
2, 68
195
3, 17
2, 00
196
3, 17
2, 52
197
1,59
1,59
198
3, 17
3, 17
199
7,16
7,16
200
5, 69
5, 69
201
> 19,28
> 19,28
202
1, 80
2,27
203
10, 80
6, 81
204
3, 63
7,23
205
> 15,22
> 15,22
209
14,75
14,75
213
> 17,31
> 17,31
206
> 15,08
> 15,08
207
3, 83
3, 83
208
7, 60
9, 57
212
7, 60
6, 04
210
1,86
2, 94
211
14,75
7,39
214
> 17,57
> 17,57
215
13, 66
17, 19
7,16
3,59
1, 80
1, 14
3,59
1, 80
14,30
5, 69
216
7,16
5, 69
217
1,27
0, 90
218
5, 69
2, 85
219
3,59
1, 80
220
> 14,80
> 14,80
221
3,73
2, 96
222
> 14,78
> 14,78
223
> 14,83
> 14,83
224
3,73
5, 92
225
> 14,77
> 14,77
226
1, 80
0, 90
227
1, 80
2,86
0, 90
0,72
228
1, 80
2,86
2,25
1,79
229
1,86
3,31
230
1, 67
1, 18
231
3,30
2, 62
232
6, 65
5, 93
233
1, 67
1, 32
234
5, 24
3,71
236
10,26
7,26
237
> 13,93
11, 06
238
> 13,99
> 13,99
1, 60
1, 01
239
1, 67
2, 97
1, 67
1, 67
240
6, 67
4,21
241
4,72
3,34
242
1,51
1,20
243
2, 14
2,40
244
2,40
1,51
245
1, 91
1, 07
246
> 11,75
> 11,75
247
3,38
1, 69
248
3,38
2, 68
249
1, 69
1, 07
250
1, 69
1,35
251
13,43
10, 67
252
> 13,43
> 13,43
253
> 13,43
> 13,43
235
4, 17
6, 60
254
3, 60
3, 60
256
2,49
2,22
1, 83
9, 18
258
3, 66
3, 66
259
1,76
1,40
257
4, 97
3, 14
260
3,39
3,39
261
1,70
1,70
262
7,59
3,39
263
> 13,89
> 13,89
264
> 13,88
3,49
265
> 13,92
13, 92
266
2,50
2,22
267
1,76
1,40
268
1,76
1,40
269
> 14,75
> 14,75
270
7,42
5, 89
271
7,42
9, 34
272
> 14,78
> 14,78
273
3,39
1,70
274
1, 91
1, 07
275
0, 85
1,35
276
1,70
1, 07
277
1,76
1,40
278
1,77
1,40
279
7, 00
7, 00
280
1,75
1, 10
281
3, 53
7, 03
283
3,39
3,39
284
4,25
3,38
285
> 13,49
> 13,49
286
4,22
2, 12
287
3,31
2, 63
289
4,23
3,36
290
2,35
2, 63
288
4,29
3,41
255
3, 65
7,28
291
7,16
7,16
292
7,16
5, 69
293
7,16
7,16
294
11,36
14,30
295
3,43
3,43
296
3,43
6, 85
297
3,43
13, 65
298
6, 88
6, 88
282
7, 02
7, 02
299
1,70
1,35
300
1, 07
1,70
301
6,76
6,76
302
2, 14
1,35
303
6, 88
5, 47
304
3,45
1,73
305
18,76
18,76
307
> 15,12
> 15, 12
1, 15
1, 15
309
14,50
11, 52
310
3, 62
3, 62
313
2,40
1, 91
314
3, 05
4, 83
2,34
1, 17
315
3, 84
3, 84
316
3, 84
3, 05
308
7, 65
6, 08
311
7,24
3, 63
312
3, 62
3, 62
317
1, 92
1, 92
306
4,70
4,70
318
1,76
1,76
3, 32
1, 66
13,20
13,20
0, 83
0, 83
2, 63
2, 09
319
2,40
2,40
320
3,71
2, 95
321
15, 33
12, 18
322
2,43
3, 85
323
7, 68
6, 10
324
1, 93
3,43
325
> 19,04
19, 04
327
> 15,31
> 15,31
326
5, 37
4,78
328
15, 31
12,16
329
7,27
7,27
330
2, 08
1, 04
331
1, 06
0, 94
332
4,38
2,20
333
2,50
3, 53
334
8, 87
7, 04
335
1,76
2,21
336
3,51
7, 00
337
1, 80
0, 90
338
1, 80
1,43
339
3, 60
1, 80
340
2,86
1,43
341
2,36
4,71
343
6, 90
4,35
344
3,46
8, 68
345
4,38
3,48
346
2, 13
1, 69
347
4,27
1,70
348
4, 19
1, 67
349
7, 04
7, 04
350
2, 80
1,77
351
1,70
1,35
352
1,70
0, 85
353
2, 18
1,73
354
3, 95
3, 14
342
7,46
3,74
355
3, 60
1,43
356
1, 80
1, 80
357
5,70
3, 60
358
3, 60
1,43
359
12, 82
10, 18
360
12, 82
6, 42
361
12, 82
6, 42
362
12, 82
10, 18
363
1, 87
3,74
364
3,74
2, 97
366
7,16
3,59
367
7,16
5, 69
368
17,71
14, 06
369
9, 12
4, 57
1,23
0, 62
1, 55
2,46
3, 54
1,77
6, 19
3, 90
370
3, 09
1, 55
371
3, 08
2,44
372
6, 14
3, 08
373
3, 08
3, 08
374
3, 08
1,23
365
3,74
3,74
> 13,94
> 13,94
3,50
3,50
> 13,94
> 13,94
6, 99
5, 55
375
> 12,90
12, 90
376
3,24
2, 57
377
> 14,86
> 14,86
378
14,86
11, 80
2,77
1,39
379
3,49
2,77
380
5,16
4, 10
381
3,49
1,75
382
3,45
2, 18
383
3,45
2,74
384
3,45
2, 18
385
1,73
1,37
386
3, 65
2, 90
387
14, 55
7,29
388
1, 80
3,59
389
7,16
7,16
390
14,30
11,36
391
3,59
1, 80
392
6, 32
3, 17
393
10, 01
6, 32
394
2, 89
2,29
395
5,76
2, 89
5, 75
4, 57
396
5, 75
5, 75
397
> 12,28
> 12,28
398
> 12,28
> 12,28
399
> 12,47
> 12,47
400
> 12,47
> 12,47
401
> 12,77
> 12,77
402
> 12,47
12,47
403
9, 72
8, 66
404
2, 99
1, 68
405
5,26
2, 63
406
3,29
2, 61
407
1, 65
1, 17
408
> 19,18
> 19,18
409
2, 01
6,36
410
12,25
7,73
411
4, 10
6, 50
412
4, 02
2, 02
413
18,24
18,24
414
18,39
18,39
415
15, 47
> 15,47
7,21
9, 08
416
9, 25
9, 25
417
> 13,88
> 13,88
418
> 17,6721
17, 67
419
11, 03
11, 03
420
5, 43
5, 43
421
5, 43
5, 43
422
7, 67
8, 61
423
5, 43
3,43
4, 92
3,48
> 10,37
> 10,37
424
> 10,37
> 10,37
425
> 11,09
> 11,09
426
> 11,09
> 11,09
427
> 16,08
> 16,08
428
15, 06
10, 66
14, 90
7,47
429
7,72
3, 87
430
3,39
3,39
431
8, 60
7, 66
432
7,41
5, 24
8,48
4,77
6, 74
3,79
442
11,37
3, 60
433
6,40
4, 04
434
3,21
3,21
7, 09
2, 82
435
5, 63
3, 99
436
13,44
> 9, 96
> 10,89
437
13,44
> 10,82
438
3,21
439
12,77
440
8, 61
441
12, 17
443
4,41
444
12,42
445
3,50
446
10, 89
5,46
> 14,27
> 14,27
> 14,27
> 14,27
447
> 14,27
> 14,27
448
> 14,27
> 14,27
453
5,48
2,75
449
5,48
2,75
450
8, 69
4,35
454
10, 94
4,35
451
5,48
2, 18
452
9, 75
4,35
455
7,74
5,48
456
10, 94
10, 94
457
11,50
5,76
458
11,50
11,50
> 15,036
> 15,036
> 15,036
> 15,036
> 15,036
> 15,036
459
13, 14
3,70
460
3,70
1,86
461
2, 62
1,47
462
1,86
0, 93
3, 17
1,59
7, 93
3, 98
463
14,75
2,34
464
1,47
1, 17
465
5, 87
2, 62
466
3,70
1,47
467
3,21
2, 55
468
3,21
3,21
469
8,30
4,16
470
5, 23
3, 08
471
4, 94
2, 91
11, 55
7,29
6, 22
3, 12
STA В29213 означает Staphylococcus aureus (АТСС29213); MSM 6305 означает Mycobacterium smegmatis (ATCC607); АТСС означает Американская коллекция типовых культур.
в том числе его любая стереохимически изомерная форма, где р представляет собой целое число, равное 1, 2, 3 или 4; п представляет собой целое число, равное 1 или 2; при условии, что если п равняется 2, то оба заместителя R5 соединены с одним и тем же атомом углерода пиперидинового фрагмента;
R1 представляет собой водород, циано, цианоСЧ-балкил, формил, карбоксил, галоген, Ci-балкил, Сг-балкенил, Сг-валкинил, полигалогенС1-балкил, гидрокси, гидроксиС^алкил, Ci-балкилокси, С1-балкилоксиС1-балкил, Ci-балкилтио, С1-балкилтиоС1-балкил, -C=N-0R11, амино, моно- или ди (Ci-балкил) амино, аминоС1-балкил, моно-или ди (Ci-балкил) аминоС1-балкил, С1-балкилкарбониламиноС1-балкил, R9bR10bN-C (=0) -, арилС1-балкил, арилкарбонил, R9aR10aN-Cl-6aлкил, ди (арил) Ci-еалкил, арил, С3-бСус1оалкил, R9aR10aN-, R9aR10aN-C (=0) -,
С1-4алкил-Б (=0) г- или Het;
R2 представляет собой водород, Ci-балкилокси, арил, арилокси, гидрокси, меркапто, С1-балкилоксиС1-балкилокси, Ci-балкилтио, моно или ди(Ci-балкил)амино, амино, пирролидино или
радикал с формулой v , где Y представляет собой СН2, О, S, NH или IV-Ci-балкил;
R3 представляет собой водород, галоген, Ci-балкил, арил или
Het;
представляет собой арил1 или Het;
R5 представляет собой арил, арилС1-6алкил, С3-6циклоалкил,
С3-бЦиклоалкилС1-6алкил, Het, HetCi-балкил, С^алкил, гидроксиС!-6алкил, аминоС1-балкил, моно- или ди (С^алкил) аминоС1-балкил, арил-ЫН-С1-балкил, Het-NH-Ci-балкил, Сг-балкенил или галоген;
R6 представляет собой водород, Ci-балкил, арилС1-балкил, Het1, Не^С1-6алкил или -C(=NH)-NH2;
R7 представляет собой водород или Ci-балкил;
R8 представляет собой оксо; или
R7 и R8 вместе образуют радикал -CH=CH-N=;
R9a и R10a вместе с атомом азота, к которому они
присоединены, образуют радикал, выбранный из группы, состоящей
из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-
тиоморфолинила, 2,3-дигидроизоиндол-1-ила, тиазолидин-3-ила,
1,2,3,б-тетрагидропиридила, гексагидро-1Н-азепинила,
гексагидро-1Н-1,4-диазепинила, гексагидро-1,4-оксазепинила,
1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ила, пирролинила, пирролила,
имидазолидинила, пиразолидинила, 2-имидазолинила, 2-
пиразолинила, имидазолила, пиразолила, триазолила, пиридинила, пиридазинила, пиримидинила, пиразинила и триазинила, при этом каждый радикал необязательно замещен 1, 2, 3 или 4 заместителями, каждый заместитель независимо выбран из Ci_ 6алкила, полигалогенС1-6алкила, галогена, арилС1-6алкила, гидрокси, Ci-балкилокси, амино, моно- или ди (Ci-балкил) амино, Ci_ 6алкилтио, алкилтиоС1-балкила, арила, пиридила или пиримидинила;
R9b и R10b, каждый независимо представляет собой водород, Ci-балкил, арил или Het;
R11 представляет собой водород или С1-6алкил;
арил представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиС!-балкила, галогена, циано, цианоС1-балкила, нитро, амино, моно-или ди (Ci-балкил) амино, Ci-балкила, Сг-валкенила, необязательно замещенного фенилом, полиС1-бгалогеналкила, Ci-балкилокси, Ci-6алкилоксиС1-6алкила, полигалогенС1-6алкилокси, карбоксила, Ci_ 6алкиоксикарбонила, аминокарбонила, морфолинила или моно- или ди (Ci-балкил) аминокарбонила;
арил1 представляет собой гомоциклическое ядро, выбранное из фенила, нафтила, аценафтила или тетрагидронафтила, при этом каждый необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из гидрокси, гидроксиСЧ-балкила, галогена, циано, цианоС^-балкила, нитро, амино, моно-или ди (Ci-балкил) амино, Ci-балкила, полигалогенСЧ-балкила, CV 6алкилокси, С1-балкилоксиС1-балкила, Ci-балкилтио, полигалогенС!-балкилокси, карбоксила, Ci-балкилоксикарбонила, аминокарбонила, Het, моно- или ди (Ci-балкил) аминокарбонила или С^алкил-Б (=0) г-;
Het представляет собой моноциклический гетероцикл,
выбранный из ЛЬфеноксипиперидинила, пиперидинила, пиперазинила,
морфолинила, 4-тиоморфолинила, пирролила, пиразолила,
имидазолила, фуранила, тиенила, оксазолила, изоксазолила,
тиазолила, изотиазолила, пиридинила, пиримидинила, пиразинила
или пиридазинила; или бициклический гетероцикл, выбранный из
хинолинила, хиноксалинила, индолила, бензимидазолила,
бензоксазолила, бензизоксазолила, бензотиазолила,
бензизотиазолила, бензофуранила, бензотиенила, 2,3-
дигидробензо[1,4]диоксинила или бензо[1,3]диоксолила; при этом каждый моноциклический и бициклический гетероцикл необязательно замещен 1, 2 или 3 заместителями, при этом каждый заместитель независимо выбран из галогена, гидрокси, Ci-балкила Ci_ 6алкилокси;
Het1 представляет собой моноциклический, насыщенный гетероцикл, выбранный из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила, 4-тиоморфолинила, имидазолидинила, пиразолидинила; при этом каждый моноциклический, насыщенный гетероцикл необязательно замещен Ci-балкилом или арилС1-балкилом;
его N-оксид, его фармацевтически приемлемая соль или его сольват.
2. Соединение по п.1, где R1 представляет собой водород, карбоксил, галоген, Ci-балкилтио, аминоС1-балкил или Het.
3. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где р равняется 1.
4. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R2 представляет собой С1-6алкилокси.
2.
5. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R3 представляет собой водород.
6. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R4 представляет собой фенил, необязательно замещенный 1 заместителем, при этом указанный заместитель выбран из галогена, циано, С^алкил-Б (=0) г- или Ci-балкилтио.
7. Соединение по любому из пп.1-5, где R4 представляет собой моноциклический гетероцикл, выбранный из пиперидинила, пиразолила, фуранила или пиридинила, особенно пиразолила или пиридинила; при этом каждый моноциклический гетероцикл необязательно замещен 1 заместителем, выбранным из галогена, гидрокси, Ci-балкила или Ci-балкилокси.
8. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R5 представляет собой фенил; при этом фенил замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или Ci-балкила; бензил или бензил, в котором фенильный фрагмент замещен 1 или 2 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена или Ci-балкила.
9. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R6 представляет собой водород, С1-6алкил или бензил.
10. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R7 представляет собой водород, a R8 представляет собой оксо.
11. Соединение по любому из пп.1-9, где соединением является соединение формулы (1а).
12. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где R1 находится в положении б хинолинового кольца.
13. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где п равняется 1.
14. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где арил представляет собой фенил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена; циано; алкила или алкилокси.
15. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где Het представляет собой пиридинил или пиразолил.
16. Соединение по любому из предыдущих пунктов, где
р равняется 1;
п равняется 1;
R1 представляет собой галоген; Ci-балкилтио; С^алкил-Б (=0) г или Het;
R2 представляет собой Ci-балкилокси; R3 представляет собой водород;
R4 представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном;
R5 представляет собой арил; арилС1-балкил; Сз-бЦиклоалкилС1-6алкил; HetCi-балкил; или Ci-балкил; и где R5 находится в положении 2 пиперидинового кольца; а
R6 представляет собой водород.
17. Соединение по п.1, где соединение выбрано из следующих
|он
С|^^ч> /Ч^ч^тч
АЛ v
H )
Т он
Ч J\ Ч\ L ^NH
(2R), транс-3
(2S), цис-4
,N. \Д
ДчХч\
ХчХ\^\^^
(2R), цис-4
(2R), цис-4
0 г
1 он
Вг^^^А
)Н [*s
(2R), транс-2
(3S*), (А)
Т он н s
ХААо
\^ ,NH F
(2S*), (А)
(2R), транс-2
;2R*), цис-2
!2R*), цис-3
!2S), цис-4
включая их любую стереохимически изомерную форму; их N-оксид, их фармацевтически приемлемую соль или их сольват.
18. Соединение по любому из предыдущих пунктов для применения в качестве лекарственного препарата.
19. Соединение по любому из пп.1-17 для применения в качестве лекарственного препарата для лечения бактериальной инфекции.
20. Фармацевтическая композиция, содержащая
фармацевтически приемлемый носитель и, в качестве активного
ингредиента, терапевтически эффективное количество соединения,
определенного в любом из пп.1-17.
21. Применение соединения по любому из пп.1-17 для производства медикамента для лечения бактериальной инфекции.
22. Применение по п.21, где бактериальная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную грамположительной бактерией.
23. Применение по п.22, где грамположительная бактерия представляет собой Streptococcus pneumoniae.
24. Применение по п.22, где грамположительная бактерия представляет собой Staphylococcus aureus.
21.
25. Применение по п.24, где грамположительная бактерия представляет собой метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus.
26. Применение по п.21, где бактериальная инфекция представляет собой микобактериальную инфекцию.
27. Применение по п.2 6, где микобактериальная инфекция представляет собой инфекцию, вызванную Mycobacterium tuberculosis.
28. Комбинация (а) соединения по любому из пп.1-17 и (Ь) одного или несколько других антибактериальных средств.
29. Продукт, содержащий (а) соединение по любому из пп.1-17 и (Ь) одно или несколько других антибактериальных средств, в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения в лечении бактериальной инфекции.
30. Способ получения соединения по п.1, отличающийся следующими этапами:
а) удаления защитной группы промежуточного соединения формулы (11-а), где Р1 представляет собой подходящую защитную группу
для получения соединений формулы (1а), где R6 представляет собой водород, при этом указанные соединения представлены формулой (1а-1);
для получения соединений формулы (lb), где R6 представляет собой водород, R7 представляет собой водород, a R8 представляет
Ь) удаления защитной группы промежуточного соединения формулы (На) подходящей кислотой
собой оксо, при этом указанные соединения представлены формулой (Ib-2) ;
с) обработки промежуточного соединения формулы (IV-a), где Р3 представляет собой подходящую защитную группу, солью четвертичного аммония
(IVa)
для получения соединений формулы (1а), где R5 представляет собой гидроксиметильную группу, при этом указанные соединения представлены формулой (1а-3);
с) реакции промежуточного соединение формулы (Va) с соединением формулы (Via)
для получения соединений формулы (1а);
или, при необходимости, превращения соединений формулы (1а) или (lb) друг в друга, следуя известным из уровня техники преобразованиям, и, кроме того, при необходимости, превращения соединений формулы (1а) или (lb) в терапевтически активную нетоксичную соль присоединения кислоты путем обработки кислотой, или в терапевтически активную нетоксичную соль присоединения основания путем обработки основанием, и наоборот, превращения формы соли присоединения кислоты в свободное основание путем обработки щелочью, или соли присоединения основания в свободную кислоту путем обработки кислотой; и, при необходимости, получение их стереохимически изомерных форм или их N-оксидных форм.
По доверенности
Схема 3
Схема 3
Схема 5
Схема 5
101
101
109
112
112
117
117
19.
19.
118
118
119
119
126
125
129
129
134
134
134
134
136
135
138
138
169
169
169
169
230
230
231
231
251
251
251
251
251
251