EA201491697A1 20150227 Номер и дата охранного документа [PDF] EAPO2015\PDF/201491697 Полный текст описания [**] EA201491697 20130312 Регистрационный номер и дата заявки US13/421,769 20120315 Регистрационные номера и даты приоритетных заявок US2013/030551 Номер международной заявки (PCT) WO2013/138352 20130919 Номер публикации международной заявки (PCT) EAA1 Код вида документа [pdf] eaa21502 Номер бюллетеня [**] СОСТАВЫ АГОНИСТОВ ГУАНИЛАТЦИКЛАЗЫ С И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ Название документа [8] A61K 38/10, [8] A61P 1/00, [8] A61P 1/10 Индексы МПК [US] Комиски Стефен, [US] Фэн Жун, [US] Фосс Джон, [US] Шайлубхай Кунвар Сведения об авторах [US] СИНЕРДЖИ ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ ИНК. Сведения о заявителях
 

Патентная документация ЕАПВ

 
Запрос:  ea201491697a*\id

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

Изобретение представляет низкодозированные составы пептидных агонистов гуанилатциклазы С ("GCC") и способы их применения. Составы изобретения могут вводиться или отдельно, или в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими средствами, предпочтительно с ингибитором cGMP-зависимой фосфодиэстеразы или слабительным.


Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

Изобретение представляет низкодозированные составы пептидных агонистов гуанилатциклазы С ("GCC") и способы их применения. Составы изобретения могут вводиться или отдельно, или в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими средствами, предпочтительно с ингибитором cGMP-зависимой фосфодиэстеразы или слабительным.


2420-519048ЕА/050 СОСТАВЫ АГОНИСТОВ ГУАНИЛАТЦИКЛАЗЫ С И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ
РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
Эта заявка испрашивает приоритет заявки на патент США № 13/421769, поданной 15 марта 2012 года, содержание которой включено посредством ссылки в ее полном объеме.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к низкодозированным составам пептидных агонистов гуанилатциклазы С, применимым для лечения и предупреждения различных заболеваний и нарушений.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Гуанилатциклаза С является трансмембранной формой гуанилатциклазы, которая представлена на различных клетках, в том числе эпителиальных клетках желудочно-кишечного тракта
(рассматриваемой в Vaandrager 2002 Mol. Cell. Biochem. 230: 7383). Первоначально она была обнаружена как рецептор в кишечнике для пептидов термостабильных токсинов (ST), которые секретируются кишечными бактериями и которые являются причиной диареи. Пептиды ST имеют сходную первичную аминокислотную структуру с двумя пептидами, выделенными из слизистой оболочки кишечника и мочи, гуанилином и урогуанилином (Currie, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 59: 947-951 (1992); Hamra, et al. , Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 90: 10464-10468 (1993); Forte, L., Reg. Pept. 81: 25-39 (1999); Schulz, et al. , Cell 3: 941-948
(1990); Guba, et al., Gastroenterology 777: 1558-1568 (1996); Joo, et al., Am. J. Physiol. 274: G633-G644 (1998)).
В кишечнике гуанилин и урогуанилин функционируют как регуляторы водного или электролитного баланса. В ответ на пероральный прием большого количества соли эти пептиды высвобождаются в просвет кишечника, где они связываются с гуанилатциклазой С, расположенной на люминальной мембране энтероцитов (клетках простого столбчатого эпителия тонкой кишки и ободочной кишки). Связывание пептидов гуанилина с гуанилатциклазой С индуцирует экскрецию электролитов и воды в просвет кишечника посредством сложного внутриклеточного каскада передачи сигналов, который стимулируется в результате
увеличения циклического гуанозинмонофосфата (cGMP).
cGMP-опосредованная передача сигналов, которая
стимулируется пептидами гуанилина, важна для нормального
функционирования пищеварительного тракта. Любая аномалия этого
процесса могла бы привести к нарушениям желудочно-кишечного
тракта, таким как синдром раздраженной толстой кишки (IBS) и
воспалительные заболевания кишечника. Воспалительное
заболевание кишечника является общим названием, данным группе нарушений, которые являются причиной становления кишечника воспаленным, характеризующихся красной и опухшей тканью. Примеры включают неспецифический язвенный колит и болезнь Крона. Болезнь Крона является серьезным воспалительным заболеванием, которое преимущественно поражает подвздошную кишку и ободочную кишку, но также может встречаться в других отделах желудочно-кишечного тракта. Неспецифический язвенный колит является воспалительным заболеванием только ободочной кишки и толстой кишки. В отличие от болезни Крона, при которой вовлечены все слои кишечника в патологический процесс и при которой может быть нормальный здоровый кишечник между очагами пораженного заболеванием кишечника, неспецифический язвенный колит поражает только внутреннюю выстилку (слизистую оболочку) ободочной кишки непрерывным образом. В зависимости от того, какая часть желудочно-кишечного тракта вовлечена в патологический процесс, болезнь Крона может называться илеитом, регионарным энтеритом, колитом и т.д. Болезнь Крона и неспецифический язвенный колит отличаются от спастической толстой кишки или синдрома раздраженной толстой кишки, которые являются нарушениями сократительной способности желудочно-кишечного тракта. Воспаление желудочно-кишечного тракта может быть хроническим состоянием. В соответствии с оценкой вплоть до 1000000 американцев поражены воспалительным заболеванием кишечника, при этом мужчины и женщины, по-видимому, поражаются в равной степени. Большинство случаев диагностируется до возраста 30 лет, но болезнь может возникать в шестое, седьмое десятилетие жизни или позже.
IBS и хронический идиопатический запор являются
патологическими состояниями, которые могут быть причиной большого дискомфорта в кишечнике и расстройства кишечника, но в отличие от воспалительных заболеваний кишечника, IBS не является причиной серьезного воспаления или изменения ткани кишечника, и он, как полагают, не увеличивает риск колоректального рака. Раньше воспалительное заболевание кишечника, глютеновая болезнь и IBS рассматривались как полностью обособленные нарушения. Теперь, с описанием воспаления, хотя и низкой степени, при IBS и перекрытия симптомов IBS и глютеновой болезни, это утверждение стало под вопросом. Острый бактериальный гастроэнтерит является самым сильным фактором риска, идентифицированным в настоящее время для последующего развития постинфекционного синдрома раздраженной толстой кишки. Клинические факторы риска включают пролонгированное острое заболевание и отсутствие рвоты. Наследственная чувствительность к воспалительным стимулам может быть также фактором риска развития синдрома раздраженной толстой кишки. Лежащая в основе патофизиология указывает на увеличенную проницаемость кишечной стенки и воспаление низкой степени, а также измененную сократительную способность и висцеральную чувствительность. Серотонин (5-гидрокситриптамин [5-НТ]) является основным модулятором функции пищеварительного тракта и, как известно, играет основную роль в патофизиологии IBS. Активность 5-НТ регулируется с помощью cGMP.
Хотя точные причины IBS и воспалительных заболеваний кишечника (IBD) неизвестны, нарушение процесса непрерывного обновления слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта может вносить вклад в патологию заболевания IBD и усиливать IBS. Процесс обновления выстилки желудочно-кишечного тракта является эффективным и динамическим процессом, включающим непрерывную пролиферацию и компенсацию нежелательных поврежденных клеток. Скорости пролиферации клеток, выстилающих слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, являются очень высокими, уступающими первенство только гемопоэтической системе. Гомеостаз желудочно-кишечного тракта зависит как от пролиферации, так и от запрограммированной гибели клеток
(апоптоза) эпителиальных клеток, выстилающих слизистую оболочку пищеварительного тракта. Клетки постоянно уходят с ворсинки в просвет пищеварительного тракта и компенсируются по существу с равной скоростью за счет пролиферации клеток в криптах, с последующим их перемещением вверх к ворсинке. Скорости пролиферации и апоптоза клеток в эпителии пищеварительного тракта могут увеличиваться или уменьшаться в ряде случаев, например, в ответ на физиологические стимулы, такие как старение, воспалительные сигналы, гормоны, пептиды, факторы роста, химические вещества и пищевые привычки. Кроме того, увеличенная скорость пролиферации часто сопровождается уменьшением времени обновления и расширением зоны пролиферации. Индекс пролиферации намного выше при патологических состояниях, таких как неспецифический язвенный колит и другие нарушения желудочно-кишечного тракта. Гиперплазия кишечника является основным активатором воспаления желудочно-кишечного тракта. Апоптоз и пролиферация клеток вместе регулируют количество клеток и определяют индекс пролиферации. Уменьшенные скорости апоптоза часто сопровождаются анормальным ростом, воспалением и малигнизацией. Таким образом, и увеличенная пролиферация, и/или уменьшенная гибель клеток могут увеличить индекс пролиферации кишечной ткани, что может в свою очередь привести к воспалительным заболеваниям желудочно-кишечного тракта.
Помимо роли урогуанилина и гуанилина в качестве модуляторов секреции жидкости и ионов в просвет кишечника, эти пептиды могут быть также вовлечены в непрерывное обновление слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта посредством сохранения баланса между пролиферацией и апоптозом. Например, пептиды урогуанилин и гуанилин, по-видимому, активируют апоптоз посредством контролирования клеточного ионного потока. Принимая во внимание широкую распространенность воспалительных состояний в западных обществах, существует необходимость в усовершенствовании возможных вариантов лечения воспалительных состояний, в частности, желудочно-кишечного тракта.
Пептидные агонисты гуанилатциклазы С ("агонисты GCC") описаны в патентах США №№ 7041786 и 7799897 и публикациях
заявок на патенты США №№ US2009/0048175, US 2010/0069306, US 2010/0120694, US 2010/0093635 и US 2010/0221329. Однако препарат пептидов для фармацевтической доставки вызывает ряд особых проблем. Например, пептиды подвергаются структурным модификациям с помощью множества механизмов деградации приводящих к проблемам химической и физической нестабильности состава.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящим изобретением предоставляются низкодозированные составы пептидных агонистов гуанилатциклазы С ("GCC") и способы их применения для лечения и предупреждения заболеваний и нарушений у человека, таких как нарушение двигательной активности желудочно-кишечного тракта, синдром раздраженной толстой кишки, функциональное нарушение желудочно-кишечного тракта, желудочно-пищеводный рефлюкс, функциональная изжога, диспепсия, функциональная диспепсия, неязвенная диспепсия, парез желудка, хроническая псевдонепроходимость кишечника, псевдонепроходимость ободочной кишки; болезнь Крона, неспецифический язвенный колит, воспалительное заболевание кишечника, псевдонепроходимость ободочной кишки, ожирение, застойная сердечная недостаточность и доброкачественная гиперплазия предстательной железы. В некоторых вариантах осуществления составы устойчивы к химической деградации пептида. Низкодозированные составы настоящего изобретения обладают непредвиденной эффективностью у людей в диапазоне доз, который не был прогнозирован на основе исследований на приматах. Составы настоящего изобретения особенно применимы для лечения или предупреждения хронического идиопатического запора. В некоторых вариантах осуществления агонисты GCC являются аналогами урогуанилина и пептидов бактериальных ST. В предпочтительных вариантах осуществления аналоги обладают лучшими свойствами, чем встречающиеся в природе пептиды или пептиды "дикого типа". Примеры таких лучших свойств включают высокую устойчивость к деградации на N-конце и С-конце за счет карбоксипептидаз, аминопептидаз и/или под действием других протеолитических ферментов, присутствующих в кишечных соках
людей и желудочных соках людей после стимуляции их выделения. Примеры агонистов GCC, которые могут использоваться в составах и способах настоящего изобретения, описаны подробнее ниже и в патентах США №№ 7041786 и 7799897 и публикациях заявок на патенты США №№ US 2009/0048175, US 2010/0069306, US 2010/0120694, US 2010/0093635 и US 2010/0221329, все из которых включены сюда посредством ссылки в их полных объемах.
Настоящим изобретением предоставляются дозированные составы для перорального применения, включающие один или более фармацевтически приемлемых наполнителей и по меньшей мере один пептид-агонист GCC, причем количество пептида-агониста GCC в каждой стандартной дозе составляет от 0,01 до 10 мг, и причем пептид-агонист GCC выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-54 и 56-249. В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC имеет хроматографическую степень чистоты, составляющую не менее 90%, не менее 90,5%, не менее 91%, не менее 92%, не менее 93%, не менее 94%, не менее 95%, не менее 96%, не менее 97%, не менее 98% или не менее 99%. Хроматографическая степень чистоты пептида-агониста GCC определяется как процентная величина площади с помощью ВЭЖХ. В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 8, 9 или 56. В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1 и 9. В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8 и 9. В одном варианте осуществления количество пептида-агониста GCC в каждой стандартной дозе составляет 0,1, 0,3, 0,6, 1,0, 3,0, 6,0, 9,0 или 9,5 мг.
В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC имеет общее содержание примесей, составляющее не более 10%, не более 9,5%, не более 9%, не более 8%, не более 7%, не более 6%, не более 5%, не более 4%, не более 3%, не более 2% или не более 1%. Общее содержание примесей определяется как процентные величины всех площадей примесей с помощью ВЭЖХ. Примеси не включают какой-либо фармацевтически приемлемый наполнитель, используемый для состава. В одном варианте осуществления состав по существу не содержит неорганические кислоты и карбоновые
кислоты, например, НС1, фосфорную кислоту или уксусную кислоту. В этом контексте карбоновые кислоты не включают аминокислоты или пептиды. В этом контексте "по существу" не содержат кислоты означает, что содержание кислот в составе во время упаковки составляет предпочтительно менее 0,2%, менее 0,1%, менее 0,05%, менее 0,01%, менее 0,005% или менее 0,001% общего веса состава. В одном варианте осуществления состав не содержит НС1.
В одном варианте осуществления состав является твердым
составом. В одном варианте осуществления состав находится в
форме порошка, гранулы, саше, пастилки, таблетки или капсулы. В
другом варианте осуществления состав является жидким составом,
и пептид-агонист GCC находится в растворе или суспензии в
липофильной жидкости. В одном варианте осуществления жидкостью
является рафинированное масло специального назначения или
среднецепочечный триглицерид или родственный сложный эфир. В
одном варианте осуществления рафинированное масло специального
назначения выбирают из арахисового масла, касторового масла,
хлопкового масла, кукурузного масла, оливкового масла,
кунжутного масла, соевого масла и подсолнечного масла. В одном
варианте осуществления среднецепочечным триглицеридом или
родственным сложным эфиром является AKOMED Е, AKOMED R, САРТЕХ
355, LABRAFAC СС, LABRAFAC PG, LAUROGLYCOL FCC, MIGLYOL 810,
MIGLYOL 812, MIGLYOL 829, MIGLYOL 840 и SOFTISAN 645. В одном
варианте осуществления жидкость выбирают из группы, состоящей
из среднецепочечных триглицеридов, пропиленгликоля
дикаприлокапрата, витамина Е, соевого масла, Cremaphor, PG и PG
400. В одном варианте осуществления стандартной дозой является
порошок, таблетка или капсула. В одном варианте осуществления
стандартной дозой является заполненная жидкостью капсула. В
одном варианте осуществления капсула или таблетка находится в
блистерной упаковке или блистерном стрипе. Предпочтительно
блистерная упаковка или блистерный стрип изготовлена из
материала, который является непроницаемым для водяного пара и
кислорода. В одном варианте осуществления блистерная упаковка
состоит из металлической фольги. В одном варианте осуществления
блистерной упаковкой является блистерная упаковка
фольга/фольга. В одном варианте осуществления емкость блистерной упаковки продувают инертным газом, таким как азот или аргон. В одном варианте осуществления емкость, кроме того, включает десиккант. В предпочтительном варианте осуществления десиккантом является цеолит. В одном варианте осуществления стандартная доза находится во флаконе из полиэтилена высокой плотности (HDPE) с изоляцией. В одном варианте осуществления флакон, кроме того, включает десиккант. В одном варианте осуществления флакон, кроме того, включает поглотитель кислорода или цеолит. В одном варианте осуществления флакон является почти непроницаемым для кислорода и водяных паров (например, намного более непроницаемым, чем флакон из HDPE), такой как флакон OxyGuard.
В одном варианте осуществления один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включает инертный носитель. В одном варианте осуществления инертный носитель выбирают из маннита, лактозы, микрокристаллической целлюлозы или крахмала. В одном варианте осуществления инертный носитель имеет размер частиц, составляющий от 50 до 900 микрон, от 50 до 800 микрон, от 50 до 300 микрон, от 50 до 200 микрон, от 75 до 150 микрон, от 75 до 200 микрон или от 75 до 300 микрон.
В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC является устойчивым к химической или физической деградации в течение периода времени, составляющего по меньшей мере 18 месяцев при 30°С и 65% относительной влажности или по меньшей мере 18 месяцев при 25°С и 60% относительной влажности, или по меньшей мере 18 месяцев при 2-8°С.
В одном варианте осуществления один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включает соль двухвалентного катиона, такую как хлорид кальция. В одном варианте осуществления один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включает аминокислоту, такую как лейцин, гистидин или аргинин, или амин, такой как TRIS или TRIS/HC1.
В одном варианте осуществления дозированный состав для
перорального применения состоит из пептида-агониста GCC, описанного здесь, инертного носителя (например, Celphere SCP-100, Avicel РН 102 или Avicel РН 112) и смазывающего вещества
(например, стеарата магния). В одном варианте осуществления состав состоит из пептида-агониста GCC, инертного носителя
(например, Avicel РН 200), соли двухвалентного катиона
(например, хлорида кальция или аскорбата кальция), аминокислоты
(например, лейцина, гистидина или аргинина) или обладающего защитным действием амина (например, TRIS), покровного вещества
(например, Methocel ES Premium LV) и необязательно смазывающего вещества (например, стеарата магния) или другой добавки
(например, трегалозы). В одном варианте осуществления состав состоит из пептида-агониста GCC, связующего вещества (например, Provsolv SMCC 90 LM) и агента, вызывающего дезинтеграцию
(например, Explotab). В одном варианте осуществления состав состоит из пептида-агониста GCC, разбавителя (например, Mannogem EZ), связующего вещества (например, Provsolv SMCC 90 LM) , агента, вызывающего дезинтеграцию (например, Explotab), смазывающего вещества (например, Pruv).
Настоящим изобретением также предоставляется способ производства дозированных составов для перорального применения, описываемых здесь, причем способ включает стадию сухого гранулирования, влажного гранулирования или нанесения покрытия методом распыления с последующей сушкой. В другом варианте осуществления способ включает стадию сухого смешения. В предпочтительном варианте осуществления стадия сухого смешения включает геометрическое смешивание. В одном варианте осуществления способ включает стадию непосредственного прессования. В одном варианте осуществления способ производства дозированных составов для перорального применения, описываемых здесь, является процессом нанесения покрытия методом распыления - сушки, который включает (а) предоставление водного раствора, включающего: пептид-агонист GCC, выбираемый из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-54 и 56-249, и один или более фармацевтически приемлемых наполнителей, причем концентрация пептида-агониста GCC находится в диапазоне от 10 до 60 мг/мл; и
(b) нанесение водного раствора на фармацевтически приемлемый носитель для создания покрытого пептидом-агонистом GCC носителя.
В одном варианте осуществления процесса нанесенения покрытия методом распыления - сушки, отмеченного выше, один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включает соль двухвалентного катиона, причем двухвалентный катион выбирают из Са2+, Mg2+, Zn2+ и Мп2+. В одном варианте осуществления один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включает аминокислоту, выбираемую из лейцина, изолейцина и валина. В одном варианте осуществления один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включает покровное вещество (такое как гипромеллоза Methocel Е5 PremLV). В одном варианте осуществления водный раствор имеет рН выше 4 (например, 4,55,5, 5-6, приблизительно 5 или выше 5) и даже выше 7. В одном варианте осуществления водный раствор по существу не содержит неорганические кислоты и карбоновые кислоты. В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 8, 9 и 56. В одном варианте осуществления процесс дополнительно включает сушку покрытого пептидом-агонистом GCC носителя.
Настоящим изобретением дополнительно предоставляется дозированный состав для перорального применения, изготовленный способом, описываемым здесь. Предпочтительно, созданный пептид-агонист GCC устойчив к химической или физической деградации в течение периода времени, составляющего по меньшей мере 18 месяцев при 30°С и 65% относительной влажности, или по меньшей мере 18 месяцев при 25°С и 60% относительной влажности, или по меньшей мере 18 месяцев при 2-8°С.
Настоящим изобретением также предоставляется способ лечения или предупреждения заболевания или нарушения у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту дозированного состава для перорального применения, включающего по меньшей мере один пептид-агонист GCC, причем количество пептида-агониста GCC в каждой стандартной дозе составляет от
0. 01 до 10 мг, и причем пептид-агонист GCC выбирают из группы,
состоящей из SEQ ID N0: 1-54 и 56-249. Предпочтительно
субъектом является человек. В одном варианте осуществления
пептид-агонист GCC выбирают из группы, состоящей из SEQ ID N0:
1, 8, 9 или 56. В одном варианте осуществления пептид-агонист
GCC выбирают из группы, состоящей из SEQ ID N0: 1 и 9. В одном
варианте осуществления количество пептида-агониста GCC в каждой
стандартной дозе составляет 0,1, 0,3, 0,6, 1,0, 3,0, 6,0, 9,0,
9,5 или 10 мг.
В одном варианте осуществления заболеванием или нарушением
является заболевание или нарушение желудочно-кишечного тракта,
выбираемое из группы, состоящей из синдрома раздраженной
толстой кишки, неязвенной диспепсии, хронической
псевдонепроходимости кишечника, функциональной диспепсии, псевдонепроходимости ободочной кишки, дуоденогастрального рефлюкса, желудочно-пищеводного рефлюкса, запора, пареза желудка, изжоги, рака желудка и Н. pylori инфекции. В предпочтительном варианте осуществления заболеванием или нарушением желудочно-кишечного тракта является хронический идиопатический запор.
В одном варианте осуществления способ дополнительно включает введение субъекту эффективного количества ингибитора cGMP-специфической фосфодиэстеразы. В одном варианте осуществления ингибитор cGMP-специфической фосфодиэстеразы выбирают из группы, состоящей сульдинаксульфона, запринаста и мотапизона, варденафила и силденафила.
В одном варианте осуществления способ дополнительно включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного слабительного. В одном варианте осуществления по меньшей мере одно слабительное выбирают из группы, состоящей из SENNA, MIRALAX, PEG или кальция поликарбофила.
В одном варианте осуществления способ дополнительно включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного противовоспалительного средства.
Настоящим изобретением также предоставляются
фармацевтические композиции, включающие составы, описываемые
здесь.
Другие признаки и преимущества настоящего изобретения будут очевидны на основе следующего подробного описания и формулы изобретения и охватываются ими.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг.1: Лечение плеканатидом (SP-304) уменьшало время до первой дефекации после суточной дозы.
Фиг.2: Эффект ежедневного лечения плеканатидом на самопроизвольные дефекации (SBM) у пациентов с хроническим запором.
Фиг.3: Эффект ежедневного лечения плеканатидом на полные самопроизвольные дефекации (CSBM) у пациентов с хроническим запором.
Фиг.4: Эффект ежедневного лечения плеканатидом на оценки по Бристольской шкале стула/формы кала (BSFS) у пациентов с хроническим запором.
Фиг.5: Эффект ежедневного лечения плеканатидом на оценки усилия у пациентов с хроническим запором.
Фиг.б: Процент субъектов, сообщающих об улучшениях оценок желудочно-кишечного дискомфорта через 14 дней ежедневного лечения плеканатидом.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящим изобретением предоставляются фармацевтические
составы пептидных агонистов GCC. Предполагается, что составы
настоящего изобретения являются "фармацевтическими" составами,
что означает, что они подходят для фармацевтического
применения. Соответственно, используемый здесь термин
"составы", как подразумевается, включает фармацевтические
составы, даже если слово "фармацевтические" не указано прямо.
Фармацевтические композиции, включающие составы, описываемые
здесь, также предоставляются настоящим изобретением. Составы
настоящего изобретения предпочтительно обеспечивают
устойчивость к химической и физической деградации пептида, например, плеканатида (т.е. SEQ ID N0: 1).
Настоящее изобретение основывается частично на обнаружении того, что маннит смешивается очень эффективно с пептидами
агонистами GCC, описываемыми здесь, и обеспечивает устойчивость к деградации, что позволяет составить смесь пептидов в очень низких дозах. Настоящее изобретение также основывается частично на обнаружении того, что очень низкие дозы пептидов-агонистов GCC, описываемых здесь, являются эффективными для лечения заболеваний и нарушений у людей. Диапазон доз, который, как установлено, является эффективным, не был прогнозирован на основе исследований на животных. Настоящее изобретение также основывается частично на обнаружении того, что двухвалентный катион (например, Са2+) и/или аминокислота (например, лейцин или аргинин) стабилизируют пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, во время процесса (например, процесса нанесения покрытия методом распыления-сушки) производства состава пептидов-агонистов GCC и обеспечивают устойчивость к деградации во время и процесса производства, и хранения состава.
Плеканатид является заряженным пептидом вследствие
присутствия четырех карбоксильных групп и одной аминогруппы с
рассчитанным значением рКа, составляющим приблизительно 3,5. По
этой причине плеканатид, вероятно, взаимодействует с ионами в
растворе или в твердом состоянии. Плеканатид является
гигроскопическим пептидом, для которого требуется
контролирование воды во время производства и хранения для поддержания длительной стабильности. Плеканатид подвержен деградации в результате окисления в присутствии остаточных пероксидов или примесей формальдегида, которые образуются за счет реакции пероксидов с полимерными наполнителями. В настоящем изобретении раскрывается способ производства и сухие твердые композиции, включающие состав, которые сводят к минимуму содержание воды. Составы состоят из компонентов, которые минимизируют уровни остаточных формальдегида и пероксидов, обычно обнаруживаемых во многих фармацевтических наполнителях. В настоящем изобретении также раскрыты добавки (т.е. СаС1г) , которые могут функционировать как десикканты с местным действием в составе. Соли двухвалентных катионов, такие как аскорбат кальция, МдС1г, ZnCl2, МпС1г и СаС1г, связываются с плеканатидом и стерически препятствуют вызову деградации под
действием реактивных молекул, таких как вода или кислород, плеканатида в результате молекулярного замещения. Настоящее изобретение дополнительно включает акцепторы остаточного формальдегида (амины, такие как TRIS или TRIS/HC1, или аминокислоты, такие как лейцин, изолейцин и валин), и раскрывает формы упаковок, которые минимизируют воздействие кислорода и водяной пар во время хранения. В настоящем изобретении также раскрыт способ неизменяемого производства, состоящий из первоначального растворения плеканатида в холодной воде для минимизации деградации в растворе, с последующим нанесением покрытия методом распыления раствора пептида на частицы и сушкой для удаления влаги.
Составы настоящего изобретения, в частности, применимы для лечения или предупреждения заболевания или нарушения желудочно-кишечного тракта, выбираемого из группы, состоящей из синдрома раздраженной толстой кишки, неязвенной диспепсии, хронической псевдонепроходимости кишечника, функциональной диспепсии, псевдонепроходимости ободочной кишки, дуоденогастрального рефлюкса, желудочно-пищеводного рефлюкса, хронического идиопатического запора, пареза желудка, изжоги, рака желудка и Н. pylori инфекции
В одном варианте осуществления составы настоящего изобретения используются в способе лечения запора. Клинически принятые критерии, которые определяют запор, простираются от частоты дефекаций, консистенции фекалий и легкости дефекации. Одним распространенным определением запора является менее трех дефекаций в неделю. Другие определения включают аномально твердый стул или дефекация, для которой требуется чрезмерное усилие. Запор может быть идиопатическим (функциональный запор или гипокинетический запор) или на фоне других причин, включающих неврологические, метаболические или эндокринные нарушения. Эти нарушения включают сахарный диабет, гипотиреоз, гипертиреоз, гипокальциемию, рассеянный склероз, болезнь Паркинсона, повреждения спинного мозга, нейрофиброматоз, автономную невропатию, болезнь Чагаса, болезнь Гиршпрунга и муковисцидоз. Запор может также быть результатом хирургического
вмешательства или из-за применения лекарственных средств, таких
как анальгетики (вроде синтетических наркотических составов),
антигипертензивные средства, противосудорожные средства,
антидепрессанты, антиспазматические средства и
антипсихотические средства. В предпочтительном варианте осуществления запором является хронический идиопатический запор.
Стабилизированные составы настоящего изобретения включают
по меньшей мере один пептид-агонист GCC в смеси с одним или
более наполнителей, так что пептид является устойчивым к
химической деградации. Химическая деградация пептидов является
следствием ряда механизмов, включающих окисление,
опосредованную водой деградацию и реакцию с альдегидами или редуцирующими сахарами. Идеальный наполнитель или комбинация наполнителей будет негигроскопическим, не содержать или содержать мало редуцирующих Сахаров и по существу не содержать примеси, такие как железо, пероксид и формальдегид. Составы настоящего изобретения предпочтительно по существу не содержат воду. В этом контексте "по существу" не содержат воду означает, что содержание воды в составе во время упаковки составляет предпочтительно менее 7%, менее 5%, менее 1% или менее 0,5% от общего веса состава. В одном варианте осуществления количество воды находится между 0,1 и 5% от общего веса состава. В одном варианте осуществления количество воды в составе настоящего изобретения, изготовленном с помощью процесса нанесения покрытия методом распыления, составляет менее 0,5% (например, приблизительно 0,47%) .
В связи с составами настоящего изобретения, термин "стабильный" или "стабилизированный" относится к устойчивости пептида к химической или физической деградации в течение долгого времени. Предпочтительно в стабильном составе настоящего изобретения сохраняется в течение долгого времени количество пептида, которое составляет по меньшей мере 90%, предпочтительно по меньшей мере 95% и наиболее предпочтительно 99% от количества пептида, первоначально присутствующего в составе. В одном варианте осуществления стабильный в течение
долгого времени (например, 18 месяцев) состав настоящего изобретения имеет прирост общего содержания примесей, не превышающий 8%, не превышающий 7%, не превышающий 6%, не превышающий 5%, не превышающий 4%, не превышающий 3%, не превышающий 2% или не превышающий 1%. В одном варианте осуществления пептид является химически стабильным в составе в течение периода времени, который составляет по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 2 0 месяцев или по меньшей мере 2 4 месяцев, при хранении при 25 градусах Цельсия (25°С) и 60% относительной влажности. В одном варианте осуществления пептид является химически стабильным в составе в течение периода времени, который составляет по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 2 0 месяцев или по меньшей мере 2 4 месяцев, при хранении при 2-8 градусах Цельсия (2-8°С). В одном варианте осуществления пептид является химически стабильным в составе в течение периода времени, который составляет по меньшей мере 3, 12, 18 месяцев и предпочтительно 24 месяца, при хранении при 25 градусах Цельсия (25°С) и 60% относительной влажности. В одном варианте осуществления пептид является химически стабильным в составе в течение периода времени, который составляет по меньшей мере 3, 18 месяцев и предпочтительно 24 месяца, при хранении при 30 градусах Цельсия (30°С) .
Низкодозированные составы настоящего изобретения включают
количество по меньшей мере одного пептида-агониста GCC в каждой
стандартной дозе, составляющее менее 10 мг. Особенно
преимущественным является приготовление композиций для
перорального применения в стандартной лекарственной форме для
легкости введения и постоянства дозы. Используемый здесь термин
"стандартная лекарственная форма" относится к физически
дискретным единицам, подходящим в качестве однократных доз для
субъекта, подвергаемого лечению; при этом каждая единица
содержит заданное количество активного соединения, рассчитанное
для вызова желаемого терапевтического эффекта, совместно с
необходимым фармацевтическим носителем. Спецификация
стандартных лекарственных форм настоящего изобретения
продиктована уникальными свойствами активного соединения и конкретным терапевтическим эффектом, который должен быть достигнут, и непосредственно зависит от них. В одном варианте осуществления стандартной лекарственной формой является таблетка или капсула.
В одном варианте осуществления низкодозированных составов настоящего изобретения количество пептида-агониста GCC в каждой стандартной дозе составляет от 0,01 до 10 мг. В одном варианте осуществления количество пептида-агониста GCC в каждой стандартной дозе составляет 0,1, 0,3, 0,6, 1,0, 3,0, 6,0, 9,0, 9,5 или 10 мг.
В одном варианте осуществления низкодозированный состав содержит носитель, который является негигроскопическим. В одном варианте осуществления носитель выбирают из маннита и мальтозы
(например, ADVANTOSE 100).
В одном варианте осуществления носителем является целлюлоза, предпочтительно микрокристаллическая целлюлоза
(например, Avicel РН 102, Avicel РН 112 с низким содержанием влаги, Avicel РН 200 или Celphere SCP-100). В одном варианте осуществления носителем является фосфат кальция или сульфат кальция. В другом варианте осуществления носителем является сахарид. Используемый здесь термин "сахарид" также относится к полисахаридам. Таким образом, термин "сахарид", как подразумевается, включает полисахариды. В одном варианте осуществления сахарид выбирают из маннита, трегалозы, лактозы, сахарозы, сорбита и мальтозы. В предпочтительном варианте осуществления сахаридом является маннит. Предпочтительно сахарид имеет низкое содержание воды, небольшой размер частиц и узкое распределение частиц по размерам.
Предпочтительными являются носители с небольшими размерами частиц, и/или сферической формы, и узким распределением частиц по размерам. Частицы менее 2 0 микрон характеризуются относительно высоким соотношением площади поверхности к объему, что приводит к доминированию сил притяжения между частицами и к оказанию сопротивления текучести массы. Более большие частицы
(больше 100 микрон) обычно перекатываются или скользят друг по
другу и демонстрируют лучшие свойства, относящиеся к текучести массы, чем небольшие частицы. Узкое распределение частиц по размерам уменьшает упаковку частиц и увеличивает текучесть. В одном варианте осуществления размер частиц (определяемый по наибольшему диаметру частицы, в среднем) находится между 2 0 и 500 микрон. В одном варианте осуществления небольшой размер частиц и узкое распределение частиц по размерам относится к частицам с диапазоном размеров 20-300, 50-200 или 75-150 микрон. В некоторых вариантах осуществления носитель имеет по существу сферическую форму, такую, которая может быть получена с помощью процесса распылительной сушки.
В одном варианте осуществления низкодозированным составом является твердый состав, а стандартная доза находится в форме таблетки или капсулы. В одном варианте осуществления низкодозированным составом является жидкий состав, а стандартной лекарственной формой является заполненная жидкостью капсула. В одном варианте осуществления жидкий состав находится в форме раствора или суспензии пептида-агониста GCC в липофильной жидкости. Примеры подходящих жидкостей включают среднецепочечные триглицериды (например, LABRAFAC Lipophile), пропиленгликоль дикаприлокапрат (например, LABRAFAC PG) , витамин Е (например, а-токоферол), ПЭГ 400 (например, полиэтиленгликоль с низкой М.м. (жидкость)), пропиленгликоль, соевое масло и касторовое масло. В одном варианте осуществления жидкость выбирают из группы, состоящей из среднецепочечных триглицеридов, пропиленгликоля дикаприлокапрата, витамина Е и соевого масла. В одном варианте осуществления рафинированное масло специального назначения выбирают из арахисового масла, касторового масла, хлопкового масла, кукурузного масла, оливкового масла, кунжутного масла, соевого масла и подсолнечного масла. В одном варианте осуществления среднецепочечным триглицеридом или родственным сложным эфиром является AKOMED Е, AKOMED R, САРТЕХ 355, LABRAFAC СС, LABRAFAC PG, LAUROGLYCOL FCC, MIGLYOL 810, MIGLYOL 812, MIGLYOL 829, MIGLYOL 840 и SOFTISAN 645.
Состав в соответствии с настоящим изобретением может содержаться в блистерной упаковке. В конкретном варианте осуществления порошок, таблетка или капсула, включающая состав, содержится в блистерной упаковке. Предпочтительно блистерная упаковка изготовлена из материала, который допускает лишь минимальное проникновение водяного пара и кислорода. В одном варианте осуществления блистерная упаковка состоит из металлической фольги. В одном варианте осуществления блистерная упаковка состоит из ACLAR. В одном варианте осуществления емкость блистерной упаковки продувают инертным газом, таким как азот или аргон. В одном варианте осуществления емкость, кроме того, включает десиккант. В одном варианте осуществления десиккантом является хлорид кальция. В одном варианте осуществления десиккантом является цеолит.
Хотя любой агонист GCC, известный в данной области техники, может быть в составе состава в соответствии с настоящим изобретением, аналоги урогуанилина и пептидов бактериальных ST являются предпочтительными. В некоторых вариантах осуществления аналоги урогуанилина и пептидов бактериальных ST обладают лучшими свойствами, чем встречающиеся в природе пептиды или пептиды "дикого типа". Например, пептиды урогуанилин и бактериальные ST для применения в настоящем изобретении являются предпочтительно модифицированными для увеличения их устойчивости к деградации на N-конце и С-конце за счет карбоксипептидаз, аминопептидаз и/или под действием других протеолитических ферментов, присутствующих в кишечных соках людей и желудочных соках людей после стимуляции их выделения. В некоторых вариантах осуществления состав агониста GCC включает пептид, по существу состоящий из аминокислотной последовательности, выбираемой из SEQ ID N0: 1-249. В предпочтительном варианте осуществления пептид по существу состоит из аминокислотной последовательности, выбираемой из SEQ ID N0: 1, 8, 9, 55 м 56. Термин "по существу состоит из" относится к пептиду, который идентичен ссылочному пептиду по своей аминокислотной последовательности, и к пептиду, который не отличается значительно на основании или структуры, или
функции от ссылочного пептида. Пептид отличается значительно от ссылочного пептида, если его первичная аминокислотная последовательность отличается более тремя аминокислотами от ссылочного пептида, или если активации им клеточной продукции cGMP уменьшена на более чем 50% по сравнению со ссылочным пептидом. Предпочтительно по существу сходные пептиды отличаются не более двумя аминокислотами и на не более чем приблизительно 2 5%, что касается активации продукции cGMP. В предпочтительных вариантах осуществления агонистом GCC является пептид, включающий по меньшей мере 12 аминокислотных остатков и наиболее предпочтительно включающий между 12 и 26 аминокислот. Неограничивающие примеры таких аналогов пептидов урогуанилина и бактериальных ST описаны в разделе 1.2 ниже.
Настоящим изобретением предоставляются способы лечения или предупреждения некоторых заболеваний и нарушений и способы увеличения сократительной способности желудочно-кишечного тракта у субъекта, нуждающегося в этом, посредством введения субъекту эффективного количества состава агониста GCC. Используемый здесь термин "лечение" относится к уменьшению, частичному улучшению, уменьшению интенсивности или ослаблению по меньшей мере одного клинического симптома, связанного с нарушениями желудочно-кишечного тракта, подвергаемыми лечению. Термин "предупреждение" относится к подавлению или отсрочке начала или прогрессирования по меньшей мере одного клинического симптома, связанного с нарушениями желудочно-кишечного тракта, которые предотвращают. Используемый здесь термин "эффективное количество" относится к количеству, которое обеспечивает некоторое улучшение или приносит пользу субъекту. В некоторых вариантах осуществления эффективным количеством является количество, которое обеспечивает некоторое облегчение, ослабление и/или уменьшение по меньшей мере одного клинического симптома нарушения желудочно-кишечного тракта, подвергаемого лечению. В других вариантах осуществления эффективным количеством является количество, которое обеспечивает некоторое подавление или отсрочку начала или прогрессирования по меньшей мере одного клинического симптома, связанного с нарушением
желудочно-кишечного тракта, которое предотвращают. Не требуется, чтобы терапевтические эффекты были полными или целебными, при условии, что субъекту приносится некоторая польза. Термин "субъект" предпочтительно относится к человеку, но может также относиться к не являющемуся человеком примату или другому млекопитающему, предпочтительно выбираемому из числа мыши, крысы, собаки, кошки, коровы, лошади или свиньи.
В соответствии со способами настоящего изобретения состав
агониста GCC может вводиться отдельно или в комбинации с одним
или более дополнительных терапевтических средств для
предупреждения или лечения воспаления, рака и других нарушений,
в особенности желудочно-кишечного тракта. В предпочтительном
варианте осуществления состав агониста GCC вводят для лечения
хронического запора. В одном варианте осуществления состав
агониста GCC вводят в комбинации с одним или более
дополнительных терапевтических средств, выбираемых из группы,
состоящей из ингибиторов фосфодиэстеразы, циклических
нуклеотидов (таких как cGMP и сАМР), слабительного (такого как
SENNA, METAMUCIL, MIRALAX, PEG или кальция поликарбофил),
размягчителя стула, направленной против фактора некроза
опухолей-альфа терапии для IBD (такой как REMICADE, ENBREL или
HUMAIRA), и противовоспалительных средств (таких как ингибиторы
СОХ-2, сульфасалазин, производные 5-ASA и NSAIDS). В некоторых
вариантах осуществления состав агониста GCC вводят в комбинации
с эффективной дозой ингибитора cGMP-специфической
фосфодиэстеразы (cGMP-PDE) или одновременно, или
последовательно с указанным агонистом GCC. Ингибиторы cGMP-PDE включают, например, сульдинаксульфон, запринаст, мотапизон, варденафил и силденафил. В другом варианте осуществления, состав агониста GCC вводят в комбинации с ингибиторами транспортеров циклических нуклеотидов.
1.1. Составы
Составы настоящего изобретения содержат один или более
пептидов-агонистов GCC, описываемых здесь, в сочетании с одним
или более фармацевтически приемлемыми носителями (также
называемыми разбавителями) и/или наполнителями. В
предпочтительном варианте осуществления составы настоящего изобретения включают инертный носитель. Инертный носитель является предпочтительно негигроскопичным. В одном варианте осуществления носитель в составе не содержит или содержит мало редуцирующих Сахаров и по существу не содержит примесей, включающих, но без ограничения, железо, пероксид и формальдегид. В одном варианте осуществления носитель выбирают из группы, состоящей из сорбита, маннита, EMDEX и крахмала. В одном варианте осуществления носителем является маннит
(например, MANNOGEM) или микрокристаллическая целлюлоза
(например, PROSOLV, CELPHERE, сферы CELPHERE).
Низкодозированные составы настоящего изобретения содержат не более 10 мг на стандартную дозу пептида-агониста GCC. Оставшаяся часть состава состоит из носителя и одного или более необязательных наполнителей. В одном варианте осуществления количество носителя составляет по меньшей мере 90% от общего веса состава. В другом варианте осуществления количество носителя составляет по меньшей мере 95% или по меньшей мере 98% от общего веса состава. В одном варианте осуществления количество носителя находится между 90 и 99,9% от общего веса состава. В одном варианте осуществления один или более необязательных наполнителей включает агент, вызывающий дезинтеграцию, который присутствует в количестве от 1 до 5% от общего веса состава. В одном варианте осуществления один или более необязательных наполнителей включает смазывающее вещество, которое присутствует в концентрации от 0,02 до 5% от общего веса состава. В одном варианте осуществления один или более необязательных наполнителей включает аминокислоту, такую как аргинин, лейцин, изолейцин, валин, гистидин, фенилаланин, аланин, глютаминовая кислота, аспарагиновая кислота, глютамин, метионин, аспарагин, тирозин, треонин, триптофан или глицин, которая присутствует в количестве от 0,1 до 4% (например, 0,11%) от общего веса состава. В одном варианте осуществления молярное соотношение между аминокислотой и пептидом-агонистом GCC составляет от приблизительно 2:1 до приблизительно 30:1 или от приблизительно 2:1 до приблизительно 20:1 (например, 5:1). В
одном варианте осуществления один или более необязательных наполнителей включает стабилизатор, такой как соль двухвалентного катиона, конкретнее водорастворимая соль двухвалентного катиона (например, хлорид кальция, хлорид магния, хлорид цинка, хлорид марганца или аскорбат кальция), которая присутствует в количестве от 0,1 до 12% (например, 0,14%) от общего веса состава. В одном варианте осуществления молярное соотношение между солью и пептидом-агонистом GCC составляет от приблизительно 5:1 до приблизительно 20:1
(например, 10:1) .
Составы могут содержать другие необходимые добавки, в том числе, например, лактозу, глюкозу, фруктозу, галактозу, трегалозу, сахарозу, мальтозу, рафинозу, мальтит, мелицитозу, стахиозу, лактит, палатинит, крахмал, ксилит, маннит, миоинозит и т.п., и их гидраты, и аминокислоты, например, аланин, глицин и бетаин, и полипептиды и белки, например, яичный белок.
Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых носителей и наполнителей включают, но без ограничения, связующие вещества, наполнители, агенты, вызывающие дезинтеграцию, смазывающие вещества, противомикробные средства, антиоксидант и покровные вещества, такие как: СВЯЗУЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА: кукурузный крахмал, картофельный крахмал, другие крахмалы, желатин, природные и синтетические смолы, такие как аравийская камедь, ксантановая камедь, альгинат натрия, альгиновая кислота, другие альгинаты, порошкообразная трагакантовая камедь, гуаровая камедь, целлюлоза и ее производные (например, этилцеллюлоза, ацетат целлюлозы, кальций-карбоксиметилцеллюлоза, натрий-карбоксиметилцеллюлоза) , поливинилпирролидон (например, повидон, кросповидон, коповидон и т.д.), метилцеллюлоза, Methocel, пептизированный крахмал
(например, STARCH 1500(r) и STARCH 1500 LM(r), продаваемый
Colorcon, Ltd.), гидроксипропилметилцеллюлоза,
микрокристаллическая целлюлоза (FMC Corporation, Marcus Hook, РА, США), Emdex, Plasdone или их смеси, НАПОЛНИТЕЛИ: тальк, карбонат кальция (например, гранулы или порошок),
дикальцийортофосфат, трикальцийфосфат, сульфат кальция
(например, гранулы или порошок), микрокристаллическая
целлюлоза, порошкообразная целлюлоза, декстраты, каолин,
маннит, кремниевая кислота, сорбит, крахмал, пептизированный
крахмал, декстроза, фруктоза, мед, ангидрат лактозы, моногидрат
лактозы, лактоза и аспартам, лактоза и целлюлоза, лактоза и
микрокристаллическая целлюлоза, мальтодекстрин, мальтоза,
маннит, микрокристаллическая целлюлоза и гуаровая камедь,
меласса, сахароза или их смеси; ВЫЗЫВАЮЩИЕ ДЕЗИНТЕГРАЦИЮ
АГЕНТЫ: агар-агар, альгиновая кислота, карбонат кальция,
микрокристаллическая целлюлоза, кроскармелоза натрия,
кросповидон, полакрилин калия, натрия гликолят крахмала (такой
как Explotab), картофельный или маниоковый крахмал, другие
крахмалы, пептизированный крахмал, глины, другие альгины,
другие целлюлозы, смолы (вроде геллановой камеди),
низкозамещенная гидроксипропилцеллюлоза, полипласдон, или их
смеси; СМАЗЫВАЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА: стеарат кальция, стеарат магния,
минеральное масло, легкое минеральное масло, глицерин, сорбит,
маннит, полиэтиленгликоль, другие гликоли, Compritol,
стеариновая кислота, натрия лаурилсульфат, натрия
стеарилфумарат (такой как Pruv), смазывающее вещество в виде жирных кислот на основе растений, тальк, гидрогенизированное растительное масло (например, арахисовое масло, хлопковое масло, подсолнечное масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло), стеарат цинка, этилолеат, этиллаурат, агар, силикагель Syloid (AEROSIL 200, W.R. Grace Co., Baltimore, MD, США), коагулированный аэрозоль синтетического диоксида кремния (Deaussa Co., Piano, ТХ, США), пирогенный кремнезем (CAB-O-SIL, Cabot Co., Boston, MA, США), или их смеси; АНТИКОМКОВАТЕЛИ: силикат кальция, силикат магния, диоксид кремния, диоксид кремния коллоидный, тальк или их смеси; ПРОТИВОМИКРОБНЫЕ СРЕДСТВА: бензалкония хлорид, бензетония хлорид, бензойная кислота, бензиловый спирт, бутилпарабен, цетилпиридиния хлорид, крезол, хлорбутанол, дегидроуксусная кислота, этилпарабен, метилпарабен, фенол, фенилэтиловый спирт, феноксиэтанол, ацетат фенилртути, нитрат
фенилртути, сорбат калия, пропилпарабен, бензоат натрия,
дегидроацетат натрия, пропионат натрия, сорбиновая кислота,
тимерсол, тимол или их смеси; АНТИОКСИДАНТЫ: аскорбиновая
кислота, ВНА, ВНТ, EDTA, или их смеси; и ПОКРОВНЫЕ ВЕЩЕСТВА:
натрий-карбоксиметилцеллюлоза, ацетатфталат целлюлозы,
этилцеллюлоза, желатин, фармацевтическая глазурь,
гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза
(гипромеллоза), гидроксипропилметилцеллюлозы фталат,
метилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, поливинилацетата фталат, шеллак, сахароза, диоксид титана, карнаубский воск, микрокристаллический воск, геллановая камедь, мальтодекстрин, метакриалаты, микрокристаллическая целлюлоза и каррагенин или их смеси.
Состав может также включать другие наполнители и их
классы, в том числе, но без ограничения, Pluronic(r), Полоксамеры
(такие как Lutrol(r) и Полоксамер 188), аскорбиновую кислоту,
глутатион, ингибиторы протеаз (например, соевый ингибитор
трипсина, органические кислоты), снижающие рН агенты, кремы и
лосьоны (вроде мальтодекстрина и каррагенинов); материалы для
жевательных таблеток (вроде декстрозы, фруктозы, моногидрата
лактозы, лактозы и аспартама, лактозы и целлюлозы,
мальтодекстрина, мальтозы, маннита, микрокристаллической
целлюлозы и гуарововой камеди, сорбита кристаллического);
средства для парентерального применения (вроде маннита и
повидона); пластификаторы (вроде дибутилсебаката,
пластификаторов для покрытия, поливинилацетата фталата); порошковые смазывающие вещества (вроде глицерилбехената); мягкие желатиновые капсулы (вроде особого раствора сорбита); сферы для покрытия (вроде сахарных сфер); агенты для сферонизации (вроде глицерилбехената и микрокристаллической целлюлозы); суспендирующие/гелеобразующие агенты (вроде каррагенина, геллановой камеди, маннита, микрокристаллической целлюлозы, повидона, натрия гликолята крахмала, ксантановой камеди); подсластители (вроде аспартама, аспартама и лактозы, декстрозы, фруктозы, меда, мальтодекстрина, мальтозы, маннита,
мелассы, сорбита кристаллического, особого раствора сорбита,
сахарозы); агенты для влажной грануляции (вроде карбоната
кальция, безводной лактозы, моногидрата лактозы,
мальтодекстрина, маннита, микрокристаллической целлюлозы,
повидона, крахмала), жженый сахар, натрий-
карбоксиметилцеллюлозу, вишнево-сливочный ароматизатор и вишневый ароматизатор, безводную лимонную кислоту, лимонную кислоту, кондитерский сахар, D &C красный № 33, D &C желтый № 10 Aluminum Lake, динатрия эдетат, этиловый спирт 15%, FD &C желтый № б Aluminum Lake, FD &C синий № 1 Aluminum Lake, FD &C синий № 1, FD &C синий № 2 Aluminum Lake, FD &C зеленый № 3, FD &C красный № 40, FD &C желтый № 6 Aluminum Lake, FD &C желтый № б, FD &C желтый № 10, глицеролпальмитостеарат, глицерилмоностеарат, индигокармин, лецитин, маннит, метил- и пропилпарабены, моноаммония глицирризинат, природный и искусственный апельсиновые ароматизатор, фармацевтическая глазурь, Полоксамер 188, полидекстозу, полисорбат 20, полисорбат 80, поливидон, пептизированный кукурузный крахмал, пептизированный крахмал, красную окись железа, сахарин натрия, натрий-карбоксиметиловый эфир, хлорид натрия, цитрат натрия, фосфат натрия, клубничный ароматизатор, синтетическую черную окись железа, синтетическую красную окись железа, диоксид титана и белый воск.
Твердые лекарственные формы для перорального применения могут быть необязательно обработаны с использованием систем покрытия (например, системы фиксированного пленочного покрытия Opadry(r), например, Opadry(r) синий (OY-LS-20921), Opadry(r) белый (YS-2-7063), Opadry(r) белый (YS-1-7040) и черной краски (S-1-8 106) .
Агенты или в их свободной форме, или в виде соли могут быть объединены с полимером, таким как сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты (PLGA), сополимер (I) молочной, гликолевой и винной кислот (P(I)LGT) (WO 01/12233), полигликолевая кислота (патент США № 3773919), полимолочная кислота (патент США № 4767628), поли-8-капролактон и полиалкиленоксид (U.S. 20030068384) для создания состава с
длительным высвобождением. Другие составы с длительным высвобождением и полимеры для применения в композициях и способах настоящего изобретения описаны в ЕР 0467389 А2, WO 93/24150, патенте США № 5612052, WO 97/40085, WO 03/075887, WO 01/01964А2, патенте США № 5922356, WO 94/155587, WO 02/074247А2, WO 98/25642, патенте США № 5968895, патенте США № 6180608, U.S. 20030171296, U.S. 20020176841, патенте США № 5672659, патенте США № 5893985, патенте США № 5134122, патенте США № 5192741, патенте США № 5192741, патенте США № 4668506, патенте США № 4713244, патенте США № 5445832, патенте США № 4931279, патенте США № 5980945, WO 02/058672, WO 97/26015, WO 97/04744 и US2002001944б . В таких составах с длительным высвобождением микрочастицы (Delie and Blanco-Prieto 2005 Molecule 10: 65-80) полипептида объединены с микрочастицами полимера. В патенте США № 601101 и в WO 94/06452 описывается состав с длительным высвобождением, привнося или полиэтиленгликоли (т.е. ПЭГ 300 и ПЭГ 400), или триацетин. В WO 03/053401 описывается состав, который может и увеличить биодоступность, и обеспечить контролируемое высвобождение агента в желудочно-кишечном тракте. В WO 02/38129, ЕР 326151, патенте США № 5236704, WO 02/30398, WO 98/13029; U.S. 20030064105, U.S. 20030138488А1, U.S. 20030216307А1, патенте США № 6667060, WO 01/49249, WO 01/49311, WO 01/49249, WO 01/49311 и патенте США № 5877224 описаны дополнительные составы с контролируемым высвобождением, материалы этих составов могут включать те, которые описаны в WO04041195 (в том числе защитное и энтеросолюбильное покрытие, описываемое здесь), и чувствительные к рН покрытия, которые осуществляют доставку в ободочную кишку, в том числе те, которые описаны в патенте США № 4910021 и WO9001329. В патенте США № 4910021 описывается использованием чувствительного к рН материала для покрытия капсулы. В WO9001329 описывается использованием чувствительных к рН покрытий на сферах, содержащих кислоту, причем кислота в ядре сферы пролонгирует растворение чувствительного к рН покрытия. В патенте США № 5175003 описывается смесь полимеров с двойным механизмом действия, состоящая из чувствительных к рН
энтеросолюбильных материалов и пленкообразующих
пластификаторов, способных придать энтеросолюбильным материалам проницаемость, для применения в системах доставки лекарственных средств; матричная гранула, состоящая из смеси полимеров с двойным механизмом действия, пропитанной лекарственным средством и иногда покрывающей фармацевтически нейтральное ядро; покрытая оболочкой гранула, включающая матричную гранулу, покрытую оболочкой из смеси полимеров с двойным механизмом действия с тем же или отличным составом; и фармацевтическая лекарственная форма, содержащая матричные гранулы. Матричная гранула высвобождает кислоторастворимые лекарственные средства в результате диффузии при кислом рН и в результате дезинтеграции при уровнях рН, составляющих номинально приблизительно 5,0 или выше.
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут быть
включены в состав рН-запускаемых систем для направленного
контролируемого высвобождения, описанных в WO04 052 33 9.
Описываемые здесь агенты могут включены в состав в соответствии
с методологией, описанной в любой(ом) из WO03105812
(экструдированные гидратируемые полимеры); WO0243767
(расщепляемые ферментами мембранные транслокаторы); WO03007913 и WO03086297 (мукоадгезивные системы); WO02072075 (двухслойный состав, включающий снижающий рН агент и усилитель всасывания); WO04064769 (амидированные полипептиды); WO05063156 (суспензия твердое тело-жидкость с псевдотропными и/или тиксотропными свойствами при плавлении); WO03035029 и WO03035041 (подверженные эрозии, сохраняющиеся в желудке лекарственные формы); патенте США № 5007790 и патенте США № 5972389 (лекарственные формы с длительным высвобождением); WO04112711 (композиции с отсроченным высвобождением для перорального применения); WO05027878, WO02072033 и WO02072034 (композиции с отсроченным высвобождением с природной или синтетической смолой); WO0503 0182 (составы с контролируемым высвобождением с возрастающей скоростью высвобождения); WO05048998 (система микрокапсулирования); патенте США № 5952314 (биополимер); патенте США № 5108758 (доставка стеклообразной матрицы
амилозного типа); патенте США № 5840860 (доставка на основе модифицированного крахмала), JP 10324642 (система доставки, включающая хитозан и устойчивый к желудочному соку материал, такой как глиадин пшеницы или зеин) ; патенте США № 5866619 и патенте США № 6368629 (сахарид-содержащий полимер); патенте США № 6531152 (описывается система доставки лекарственного средства, содержащая водорастворимое ядро (пектинат Са или другие нерастворимые в воде полимеры) и внешнее покрытие, которое разрывается (например, гидрофобный полимер-Eudragrit)); патенте США № 6234464; патенте США № 6403130 (покрытие полимером, содержащим казеин и высокометоксилированный пектин); WO0174175 (продукт реакция Майяра); WO05063206 (увеличивающий растворимость состав); WO04019872 (переносящие гибридные белки).
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут быть включены в состав, используя технологию систем удержания в желудочно-кишечном тракте (GIRES; Merrion Pharmaceuticals). GIRES включает лекарственную форму с контролируемым высвобождением внутри надуваемого мешка, который размещен в лекарственной капсуле для перорального введения. Оболочка капсулы может представлять собой НРМС оболочку капсулы или желатиновую оболочку капсулы. После растворения капсулы газогенерирующая система надувает мешок в желудке, где он сохраняется в течение 16-24 часов, все время высвобождая описываемые здесь агенты.
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут быть также включены в состав, используя технологию многоматричных систем (ММХ).
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут быть включены в состав осмотического устройства, в том числе тех, которые описаны в патенте США № 4503030, патенте США № 5609590 и патенте США № 5358502. В патенте США № 4503030 описывается осмотическое устройство для освобождения лекарственного средства в определенных областях рН желудочно-кишечного тракта. Конкретнее, настоящее изобретение относится к осмотическому устройству, включающему стенку, созданную из полупроницаемой,
чувствительной к рН композиции, которая окружает компартмент, содержащий лекарственное средство, с проходом через стенку, соединяющим внешнюю область устройства с компартментом. Устройство доставляет лекарственное средство с контролируемой скоростью в область желудочно-кишечного тракта, имеющую рН ниже 3,5, и устройство саморазрушается и высвобождает все свое лекарственное средство в области желудочно-кишечного тракта, имеющей рН выше 3,5, в силу чего обеспечивается общая доступность для всасывания лекарственного средства. В патентах США с 5609590 и 5358502 описывается осмотически разрывающееся устройство для освобождения целебного средства в водной среде. Устройство включает целебное средство и осмотически эффективное растворенное вещество, окруженные по меньшей мере частично полупроницаемой оболочкой. Целебное средство может также функционировать как осмотически эффективное растворенное вещество. Полупроницаемая оболочка проницаема для воды и по существу непроницаема для целебного средства и осмотически эффективного растворенного вещества. Пусковое средство присоединено к полупроницаемой оболочке (например, соединяет две половины капсулы). Пусковое средство активируется при рН от 3 до 9 и запускает конечную, но внезапную, доставку целебного средства. Эти устройства делают возможной рН-запускаемое высвобождение из ядра, содержащего целебное средство, в виде ударной дозы в результате осмотического разрыва.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, маннит, силицифицированную микрокристаллическую целлюлозу, натрия гликолят крахмала и натрия стеарилфумарат. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4%, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 0,23% в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Маннит присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 60% в весовом
отношении, по меньшей мере 65% в весовом отношении, по меньшей
мере 70% в весовом отношении, по меньшей мере 75% в весовом
отношении или по меньшей мере 8 0% в весовом отношении. В
некоторых вариантах осуществления маннит присутствует в
концентрации, составляющей приблизительно 7 9% в весовом
отношении (например, 79,77%). Предпочтительно маннитом является
Mannogem EZ. Силицифицированная микрокристаллическая целлюлоза
присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 5% в
весовом отношении, по меньшей мере 10% в весовом отношении или
по меньшей мере 15% в весовом отношении. В некоторых вариантах
осуществления концентрация силицифицированной
микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 15% в
весовом отношении. Предпочтительно силицифицированной
микрокристаллической целлюлозой является Prosolv SMCC 90 LM. Натрия гликолят крахмала присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 1% в весовом отношении, по меньшей мере 2% в весовом отношении, по меньшей мере 3% в весовом отношении или по меньшей мере 4% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация натрия гликолята крахмала составляет приблизительно 4% в весовом отношении. Предпочтительно натрия гликолятом крахмала является Explotab. Натрия стеарилфумарат присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,2% в весовом отношении, по меньшей мере 0,5% в весовом отношении, по меньшей мере 0,7% в весовом отношении, по меньшей мере 0,8% в весовом отношении, по меньшей мере 0,9 или по меньшей мере 1% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация натрия стеарилфумарата составляет приблизительно 1% в весовом отношении. Предпочтительно натрия стеарилфумаратом является Pruv.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, силицифицированную микрокристаллическую целлюлозу и натрия гликолят крахмала. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В
некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC
присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 0,3% в
весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является
предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Силицифицированная микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации,
составляющей по
меньшей мере 10% в
весовом отношении,
меньшей
мере 2 0%
в весовом отношении,
по меньшей мере 30%
весовом
отношении
, по меньшей мере 4 0%
в весовом отношении,
меньшей
мере 50%
в весовом отношении,
по меньшей мере 60%
весовом
отношении
, по меньшей мере 7 0%
в весовом отношении,
меньшей
мере 8 0%
в весовом отношении,
по меньшей мере 90%
весовом
отношении
или по меньшей мере
95% в весовом отношении.
В некоторых вариантах осуществления концентрация
силицифицированной микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 95,7% в весовом отношении. Предпочтительно силицифицированной микрокристаллической целлюлозой является Prosolv SMCC 90 HD. Натрия гликолят крахмала присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 1% в весовом отношении, по меньшей мере 2% в весовом отношении, по меньшей мере 3% в весовом отношении или по меньшей мере 4% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация натрия гликолята крахмала составляет 4% в весовом отношении. Предпочтительно натрия гликолятом крахмала является Explotab.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, микрокристаллическую целлюлозу, дигидрат хлорида кальция, лейцин и гипромеллозу. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 0,3246% в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 50% в весовом отношении, по меньшей мере 60% в весовом
отношении, по меньшей мере 7 0% в весовом отношении, по меньшей мере 80% в весовом отношении, по меньшей мере 90% в весовом отношении, по меньшей мере 95% в весовом отношении или по меньшей мере 99% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 99,10% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Celphere SCP-100. Дигидрат хлорида кальция присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация дигидрата хлорида кальция составляет приблизительно 0,2622% в весовом отношении. Лейцин присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,05% в весовом отношении, по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,12% в весовом отношении или по меньшей мере 0,15% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация лейцина составляет приблизительно 0,12% в весовом отношении. Гипромеллоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гипромеллозы составляет приблизительно 0,2% в весовом отношении. Предпочтительно гипромеллозой является Methocel Е5 PremLV.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, микрокристаллическую целлюлозу, дигидрат хлорида кальция, лейцин, гипромеллозу и стеарат магния. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей
приблизительно 0,3 6% в весовом отношении. Пептидом-агонистом
GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9.
Микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации,
составляющей по меньшей мере 50% в весовом отношении, по
меньшей мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 7 0% в
весовом отношении, по меньшей мере 8 0% в весовом отношении, по
меньшей мере 90% в весовом отношении, по меньшей мере 95% в
весовом отношении или по меньшей мере 99% в весовом отношении.
В некоторых вариантах осуществления концентрация
микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 98,75% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Avicel РН 102. Дигидрат хлорида кальция присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении, по меньшей мере 0,25% в весовом отношении или по меньшей мере 0,3% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация дигидрата хлорида кальция составляет приблизительно 0,2 9% в весовом отношении. Лейцин присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,05% в весовом отношении, по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,12% в весовом отношении или по меньшей мере 0,15% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация лейцина составляет приблизительно 0,13% в весовом отношении. Гипромеллоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гипромеллозы составляет приблизительно 0,22% в весовом отношении. Предпочтительно гипромеллозой является Methocel Е5 PremLV. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в
весовом отношении.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-
агонист GCC, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния.
Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5%
в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в
весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в
весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее
0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления
пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей
приблизительно 0,32% в весовом отношении. Пептидом-агонистом
GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9.
Микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации,
составляющей по меньшей мере 50% в весовом отношении, по
меньшей мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 7 0% в
весовом отношении, по меньшей мере 8 0% в весовом отношении, по
меньшей мере 90% в весовом отношении, по меньшей мере 95% в
весовом отношении или по меньшей мере 99% в весовом отношении.
В некоторых вариантах осуществления концентрация
микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 99,43% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Avicel РН 102. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в весовом отношении.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 0,32% в весовом отношении, приблизительно 1,18%
в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является
предпочтительно SEQ N0: 1 или SEQ N0: 9. Микрокристаллическая
целлюлоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей
мере 30% в весовом отношении, по меньшей мере 40% в весовом
отношении, по меньшей мере 50% в весовом отношении, по меньшей
мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 70% в весовом
отношении, по меньшей мере 8 0% в весовом отношении, по меньшей
мере 90% в весовом отношении, по меньшей мере 95% в весовом
отношении или по меньшей мере 99% в весовом отношении. В
некоторых вариантах осуществления концентрация
микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 98,57% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Avicel РН 102. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в весовом отношении.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 1,18% в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 30% в весовом отношении, по меньшей мере 4 0% в весовом отношении, по меньшей мере 50% в весовом отношении, по меньшей мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 7 0% в весовом отношении, по меньшей мере 8 0% в весовом отношении, по меньшей мере 90% в весовом отношении, по меньшей мере 95% в весовом отношении или по меньшей мере 99% в
весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 97,09% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Avicel РН 112. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в весовом отношении.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, гранулы трегалозы, гипромеллозу, гистидин, аскорбат кальция, порошковую трегалозу, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 1,18% в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Гранулы трегалозы присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 50% в весовом отношении, по меньшей мере 55% в весовом отношении, по меньшей мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 65% в весовом отношении, по меньшей мере 7 0% в весовом отношении или по меньшей мере 75% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гранул трегалозы составляет 55-75% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация гранул трегалозы составляет 70,48% в весовом отношении. Гипромеллоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении, по меньшей мере 0,3% в весовом отношении, по меньшей мере 0,4% в весовом отношении или по меньшей мере 0,5% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гипромеллозы составляет 0,2-2% в
весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация гипромеллозы составляет приблизительно 0,5% в весовом отношении. Предпочтительно гипромеллозой является Methocel ES Premium LV. Гистидин присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,6% в весовом отношении, по меньшей мере 0,8% в весовом отношении, по меньшей мере 0,9% в весовом отношении, по меньшей мере 1% в весовом отношении, по меньшей мере 3% в весовом отношении или по меньшей мере 5% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гистидина составляет 1-6% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация аргинина составляет 1,48% в весовом отношении. Аскорбат кальция присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,05% в весовом отношении, по меньшей мере 0,07% в весовом отношении, по меньшей мере 0,09% в весовом отношении или по меньшей мере 0,1% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация аскорбата кальция составляет 0,05-10% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация аскорбата кальция составляет приблизительно 0,1% в весовом отношении. Порошковая трегалоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,5% в весовом отношении, по меньшей мере 0,7% в весовом отношении, по меньшей мере 0,8% в весовом отношении, по меньшей мере 0,9% в весовом отношении, по меньшей мере 1% в весовом отношении или по меньшей мере 1,2% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация порошковой трегалозы составляет 0,5-4% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация порошковой трегалозы составляет 1,02% в весовом отношении. Микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 10% в весовом отношении, по меньшей мере 20% в весовом отношении или по меньшей мере 25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет 2 0-4 0% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет 2 5% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической
целлюлозой является Avicel РН 200. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация стеарата магния составляет 0,2-1% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в весовом отношении.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, гранулы трегалозы, гипромеллозу, аргинин, аскорбат кальция, порошковую трегалозу, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 1,17% в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Гранулы трегалозы присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 50% в весовом отношении, по меньшей мере 55% в весовом отношении, по меньшей мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 65% в весовом отношении, по меньшей мере 7 0% в весовом отношении или по меньшей мере 75% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гранул трегалозы составляет 55-75% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация гранул трегалозы составляет 70,31% в весовом отношении. Гипромеллоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении, по меньшей мере 0,3% в весовом отношении, по меньшей мере 0,4% в весовом отношении или по меньшей мере 0,5% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гипромеллозы составляет 0,2-2% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления
концентрация гипромеллозы составляет приблизительно 0,5% в
весовом отношении. Предпочтительно гипромеллозой является
Methocel ES Premium LV. Аргинин присутствует в концентрации,
составляющей по меньшей мере 0,5% в весовом отношении, по
меньшей мере 1% в весовом отношении, по меньшей мере 1,5% в
весовом отношении или по меньшей мере 2% в весовом отношении. В
некоторых вариантах осуществления концентрация аргинина
составляет 1-6% в весовом отношении. В конкретном варианте
осуществления концентрация аргинина составляет 1,66% в весовом
отношении. Аскорбат кальция присутствует в концентрации,
составляющей по меньшей мере 0,05% в весовом отношении, по
меньшей мере 0,07% в весовом отношении, по меньшей мере 0,09% в
весовом отношении или по меньшей мере 0,1% в весовом отношении.
В некоторых вариантах осуществления концентрация аскорбата
кальция составляет 0,05-10% в весовом отношении. В конкретном
варианте осуществления концентрация аскорбата кальция
составляет приблизительно 0,1% в весовом отношении. Порошковая
трегалоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей
мере 0,5% в весовом отношении, по меньшей мере 0,7% в весовом
отношении, по меньшей мере 0,8% в весовом отношении, по меньшей
мере 0,9% в весовом отношении, по меньшей мере 1% в весовом
отношении или по меньшей мере 1,2% в весовом отношении. В
некоторых вариантах осуществления концентрация порошковой
трегалозы составляет 0,5-4% в весовом отношении. В конкретном
варианте осуществления концентрация порошковой трегалозы
составляет 1,02% в весовом отношении. Микрокристаллическая
целлюлоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей
мере 10% в весовом отношении, по меньшей мере 20% в весовом
отношении или по меньшей мере 2 5% в весовом отношении. В
некоторых вариантах осуществления концентрация
микрокристаллической целлюлозы составляет 2 0-4 0% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет 25% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Avicel РН 200. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом
отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация стеарата магния составляет 0,2-1% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в весовом отношении.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, гранулы трегалозы, гипромеллозу, TRIS, аскорбат кальция, порошковую трегалозу, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 1,17% в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Гранулы трегалозы присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 50% в весовом отношении, по меньшей мере 55% в весовом отношении, по меньшей мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 65% в весовом отношении, по меньшей мере 7 0% в весовом отношении или по меньшей мере 75% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гранул трегалозы составляет 55-75% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация гранул трегалозы составляет 70,81% в весовом отношении. Гипромеллоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении, по меньшей мере 0,3% в весовом отношении, по меньшей мере 0,4% в весовом отношении или по меньшей мере 0,5% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация гипромеллозы составляет 0,2-2% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация гипромеллозы составляет приблизительно 0,5% в весовом отношении. Предпочтительно гипромеллозой является
Methocel ES Premium LV. TRIS присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,6% в весовом отношении, по меньшей мере 0,8% в весовом отношении, по меньшей мере 0,9% в весовом отношении или по меньшей мере 1% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация TRIS составляет 0,5-6% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация аргинина составляет 1,15% в весовом отношении. Аскорбат кальция присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,05% в весовом отношении, по меньшей мере 0,07% в весовом отношении, по меньшей мере 0,1% в весовом отношении или по меньшей мере 1% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация аскорбата кальция составляет 0,0510% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация аскорбата кальция составляет приблизительно 0,1% в весовом отношении. Порошковая трегалоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,5% в весовом отношении, по меньшей мере 0,7% в весовом отношении, по меньшей мере 0,8% в весовом отношении, по меньшей мере 0,9% в весовом отношении, по меньшей мере 1% в весовом отношении или по меньшей мере 1,2% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация порошковой трегалозы составляет 0,54% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация порошковой трегалозы составляет 1,02% в весовом отношении. Микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 10% в весовом отношении, по меньшей мере 2 0% в весовом отношении или по меньшей мере 25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет 20-40% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет 25% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Avicel РН 200. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах
осуществления концентрация стеарата магния составляет 0,2-1% в весовом отношении. В конкретном варианте осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в весовом отношении.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 1,10% в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 30% в весовом отношении, по меньшей мере 4 0% в весовом отношении, по меньшей мере 50% в весовом отношении, по меньшей мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 7 0% в весовом отношении, по меньшей мере 8 0% в весовом отношении, по меньшей мере 90% в весовом отношении, по меньшей мере 95% в весовом отношении или по меньшей мере 99% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 98,64% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Avicel РН 102. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в весовом отношении.
В одном варианте осуществления состав содержит пептид-агонист GCC, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния. Агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей менее 5% в весовом отношении, менее 4% в весовом отношении, менее 3% в весовом отношении, менее 2% в весовом отношении, менее 1% в
весовом отношении, менее 0,5% в весовом отношении или менее 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC присутствует в концентрации, составляющей приблизительно 3,32% в весовом отношении. Пептидом-агонистом GCC является предпочтительно SEQ NO: 1 или SEQ N0: 9. Микрокристаллическая целлюлоза присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 30% в весовом отношении, по меньшей мере 4 0% в весовом отношении, по меньшей мере 50% в весовом отношении, по меньшей мере 60% в весовом отношении, по меньшей мере 7 0% в весовом отношении, по меньшей мере 8 0% в весовом отношении, по меньшей мере 90% в весовом отношении, по меньшей мере 95% в весовом отношении или по меньшей мере 99% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация микрокристаллической целлюлозы составляет приблизительно 96,43% в весовом отношении. Предпочтительно микрокристаллической целлюлозой является Avicel РН 102. Стеарат магния присутствует в концентрации, составляющей по меньшей мере 0,1% в весовом отношении, по меньшей мере 0,15% в весовом отношении, по меньшей мере 0,2% в весовом отношении или по меньшей мере 0,25% в весовом отношении. В некоторых вариантах осуществления концентрация стеарата магния составляет приблизительно 0,25% в весовом отношении. 1.2. Агонисты GCC
Агонисты GCC для применения в составах и способах
настоящего изобретения связываются с гуанилатциклазой С и
стимулируют внутриклеточную продукцию cGMP. Необязательно
агонисты GCC индуцируют апоптоз и ингибируют пролиферацию
эпителиальных клеток. Термин "гуанилатциклаза С" относится к
трансмембранной форме гуанилатциклазы, которая функционирует
как рецептор в кишечнике для пептидов термостабильных токсинов
(ST) , которые секретируются кишечными бактериями.
Гуанилатциклаза С является также рецептором для встречающихся в природе пептидов гуанилина и урогуанилина. Вероятность того, что могут существовать различные рецепторы для каждого из этих пептидов, не была исключена. Следовательно, термин "гуанилатциклаза С" может также охватывать класс
трансмембранных рецепторов гуанилатциклаз, представленных на эпителиальных клетках, выстилающих слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта.
Термин "агонист GCC" относится и к пептидам, и к не являющимся пептидами соединениям, например, которые связываются с гуанилатциклаза С кишечника и стимулируют внутриклеточную продукцию cGMP. Если агонистом GCC является пептид, термин охватывает биологически активные фрагменты таких пептидов и пропептиды, которые связываются с гуанилатциклазой С и стимулируют внутриклеточную продукцию cGMP.
Предпочтительно, когда агонисты GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения стимулируют внутриклеточную продукцию cGMP на более высоких уровнях, чем встречающиеся в природе агонисты GCC, такие как урогуанилин, гуанилин и пептиды ST. В некоторых вариантах осуществления агонисты GCC стимулируют внутриклеточную продукцию cGMP на более высоких уровнях, чем пептид, обозначенный SP-304 (SEQ ID N0: 1). В конкретных вариантах осуществления агонист GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения стимулирует больше на 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 75%, 90% или более внутриклеточного cGMP, чем урогуанилин, гуанилин, лимфогуанилин, линаклотид, пептиды ST или SP-304. Термины "индуцируют" или "стимулируют" используются взаимозаменяемо на всем протяжении этого описания.
Предпочтительно, когда агонисты GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения более стабильны, чем встречающиеся в природе агонисты GCC, такие как урогуанилин, гуанилин и пептиды ST. В некоторых вариантах осуществления агонисты GCC более стабильны, чем пептид, обозначенный SP-304. "Стабильность" в этом контексте относится к устойчивости к деградации в желудочно-кишечном соке и/или кишечном соке (или желудочно-кишечном соке и/или кишечном соке после стимуляции их выделения) по сравнению со ссылочным пептидом. Например, агонисты GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения предпочтительно подвергаются деградации меньше на 2%, 3%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%, 75%, 90% или более,
чем встречающиеся в природе агонисты GCC и/или SP-304.
Предпочтительно агонистами GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения являются пептиды. В некоторых вариантах осуществления длина пептида-агониста GCC составляет менее 3 0 аминокислот. В конкретных вариантах осуществления длина пептида-агониста GCC равна или составляет менее 30, 25, 20, 15, 14, 13, 12, 11, 10 или 5 аминокислот. Примеры пептидов-агонистов GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения включают те, которые описаны в заявках на патенты США с серийными № 12/133344, поданной 4 июня 2 008 года; 12/478505, поданной 4 июня 2 009 года; 12/478511, поданной 4 июня 2 009 года; 12/504288, поданной 16 июля 2 009 года; и предварительных заявках на патенты США с серийными № 60/933194, поданной 4 июня 2 0 07 года; 61/058888, поданной 4 июня 2 008 года; 61/058892, поданной 4 июня 2008 года; и 61/081289, поданной 16 июля 2 008 года, каждая из которых включена сюда посредством ссылки в ее полном объеме.
Конкретные примеры пептидов-агонистов GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения включают те, которые описаны в таблицах I-VII ниже. Используемые в таблицах I-VII термины "PEG3" или "3PEG" относятся к полиэтиленгликолю, такому как аминоэтилоксиэтилоксиуксусная кислота (АееА) и ее полимерам. Термин "Хаа" относится к любой природной или неприродной аминокислоте или аналогу аминокислоты. Термин "Маа" относится к цистеину (Cys), пеницилламину (Реп), гомоцистеину или 3-меркаптопролину. Термин "Xaani", как подразумевается, обозначает аминокислотную последовательность из любой природной или неприродной аминокислоты или аналога аминокислоты, длина которой составляет один, два или три остатка; "Хаап2", как подразумевается, обозначает аминокислотную последовательность, длина которой составляет нуль или один остаток; и "Хаап3", как подразумевается, обозначает аминокислотную последовательность, длина которой составляет нуль, один, два, три, четыре, пять или шесть остатков. Кроме того, любая аминокислота, представленная Xaan, Xaani; Хаап2 или Хаап3, может быть L-аминокислотой, D-аминокислотой, метилированной аминокислотой или любой их
комбинацией. Необязательно любой пептид-агонист GCC, представленный формулами I-XX в таблицах, может содержать один или более полиэтиленгликолевых остатков на N-конце, С-конце или на обоих концах.
В некоторых вариантах осуществления состав агониста GCC настоящего изобретения включает пептид, выбираемый из SEQ ID N0: 1-249, последовательности которых представлены ниже в таблицах I-VII. В одном варианте осуществления состав агониста GCC включает пептид, определяемый SEQ ID N0: 1, 8, 9, 55 или 56.
В некоторых вариантах осуществления состав агониста GCC настоящего изобретения включает пептид, который по существу эквивалентен пептиду, выбираемую из SEQ ID N0: 1-24 9. Термин "по существу эквивалентный" относится к пептиду, который имеет аминокислотную последовательность, эквивалентную таковой связывающего домена, причем некоторые остатки могут быть делетированы или замещены другими аминокислотами без уменьшения способности пептида к связыванию с рецептором гуанилатциклазой в кишечнике и стимуляции транспорт жидкости и электролитов.
1.2.1. Пептиды-агонисты GCC
В предпочтительном варианте осуществления агонисты GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения являются пептидными агонистами GCC. В некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC являются аналогами урогуанилина или пептида бактериального ST. Урогуанилин является циркулирующим пептидным гормоном с натрийуретической активностью. Пептид ST является членом семейства термостабильных токсинов (пептидов ST) , секретируемых патогенными штаммами Е. coli и другими кишечными бактериями, которые активируют рецептор гуанилатциклазу и являются причиной секреторной диареи. В отличие от пептидов бактериальных ST, связывание урогуанилина с рецептором гуанилатциклазой зависит от физиологического рН пищеварительного тракта. По этой причине предполагается, что урогуанилин регулирует транспорт жидкости и электролитов рН-зависимым образом и без вызова тяжелой диареи.
Пептиды-агонисты GCC для применения в составах и способах
настоящего изобретения могут быть полимерами L-аминокислот, D-аминокислот или комбинации и тех, и других. Например, в различных вариантах осуществления пептиды являются D ретро-инверсо-пептидами. Термин "ретро-инверсо-изомер" относится к изомеру линейного пептида, в котором направление последовательности является обратным, а хиральность каждого аминокислотного остатка является инвертированной. Смотрите, например, Jameson et al., Nature, 368, 744-746 (1994); Brady et al, Nature, 368, 692-693 (1994) . Конечным результатом объединения D-энантиомеров и обратного синтеза является то, что положения карбонильной группы и аминогруппы в каждой амидной связи переставляются, в то время как положение групп боковой цепи у каждого альфа-углерода сохраняется. Кроме особо оговоренных случаев, предлагается, что любая конкретная L-аминокислотная последовательность настоящего изобретения может быть превращена в D ретро-инверсо-пептид посредством синтеза обратной последовательности для соответствующей природной L-аминокислотной последовательности.
Пептиды-агонисты GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения способны индуцировать внутриклеточную продукцию cGMP в клетках и тканях, экспрессирующих гуанилатциклазу С. В некоторых вариантах осуществления пептид-агонист GCC стимулирует больше на 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 75%, 90% или более внутриклеточного cGMP, чем встречающиеся в природе агонисты GCC, такие как урогуанилин, гуанилин или пептиды ST. Необязательно пептид-агонист GCC стимулирует больше на 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 75%, 90% или более внутриклеточного cGMP, чем SP-304 (SEQ ID NO: 1) . В дальнейших вариантах осуществления пептид-агонист GCC стимулирует апоптоз, например, запрограммированную гибель клеток, или активирует регулятор трансмембранной проводимости при муковизцидозе (CFTR).
В некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC для применения в составах и способах настоящего изобретения более стабильны, чем встречающиеся в природе агонисты GCC и/или SP-304 (SEQ ID NO: 1), SP-339 (линаклотид) (SEQ ID NO: 55) или
SP-340 (SEQ ID NO: 56) . Например, пептид-агонист GCC
подвергается деградации меньше на 2%, 3%, 5%, 10%, 15%, 20%,
30%, 40%, 50%, 75%, 90% или более, чем встречающиеся в природе
агонисты GCC и/или SP-304, SP-339 (линаклотид) или SP-340. В
некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC для
применения в составах и способах настоящего изобретения более
стабильны к протеолитической деградации, чем встречающиеся в
природе агонисты GCC и/или SP-304 (SEQ ID NO: 1), SP-339
(линаклотид) (SEQ ID NO: 55) или SP-340 (SEQ ID NO: 56) . В
одном варианте осуществления пептид-агонист GCC подвергают
ПЭГилированию, чтобы сделать пептиды более устойчивыми к
протеолизу под действием ферментов желудочно-кишечного тракта.
В предпочтительном варианте осуществления пептид-агонист GCC
подвергают ПЭГилированию за счет группы
аминоэтилоксиэтилоксиуксусной кислоты (Аееа) на его С-конце, на его N-конце, или на обоих концах.
Конкретные примеры пептидов-агонистов GCC, которые могут использоваться способах и составах настоящего изобретения, включают пептид, выбираемый из группы, определяемой SEQ ID NO: 1-249.
В одном варианте осуществления пептидом-агонистом GCC является пептид, имеющий аминокислотную последовательность любой одной из формул X-XVII (например, SEQ ID NO: 87-98).
В некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC включают пептиды, имеющие аминокислотную последовательность формулы I, причем по меньшей мере одной аминокислотой формулы I является D-аминокислота или метилированная аминокислота, и/или аминокислотой в положении 16 является серии. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 16 формулы I является D-аминокислота или метилированная аминокислота. Например, аминокислотой в положении 16 формулы I является D-лейцин или D-серин. Необязательно одной или более аминокислот в положениях 1-3 формулы I являются D-аминокислоты или метилированные аминокислоты, или комбинация D-аминокислот или метилированных аминокислот. Например, Asn1, Asp2 или Glu3 (или их комбинация) формулы I представляет собой D-аминокислоту или метилированную
аминокислоту. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении Хаа6 формулы I является лейцин, серии или тирозин.
В альтернативных вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC включают пептиды, имеющие аминокислотную последовательность формулы II, причем по меньшей мере одной аминокислотой формулы
II является D-аминокислота или метилированная аминокислота.
Предпочтительно, когда аминокислотой, обозначенной ХааП2,
формулы II является D-аминокислота или метилированная
аминокислота. В некоторых вариантах осуществления
аминокислотой, обозначенной ХааП2, формулы II является лейцин,
D-лейцин, серии или D-серин. Предпочтительно, когда одной или
более аминокислот, обозначенных ХааП2, формулы II является D-
аминокислота или метилированная аминокислота. Предпочтительно,
когда аминокислотой в положении Хаа6 формулы II является
лейцин, серии или тирозин.
В некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC включают пептиды, имеющие аминокислотную последовательность формулы III, причем по меньшей мере одной аминокислотой формулы
III является D-аминокислота или метилированная аминокислота,
и/или Маа не является цистеином. Предпочтительно, когда
аминокислотой, обозначенной ХааП2/ формулы III является D-
аминокислота или метилированная аминокислота. В некоторых
вариантах осуществления аминокислотой, обозначенной ХааП2/
формулы III является лейцин, D-лейцин, серии или D-серин.
Предпочтительно, когда одной или более аминокислот,
обозначенных ХааП2/ формулы III является D-аминокислота или
метилированная аминокислота. Предпочтительно, когда
аминокислотой в положении Хаа6 формулы III является лейцин,
серии или тирозин.
В других вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC включают пептиды, имеющие аминокислотную последовательность формулы IV, причем по меньшей мере одной аминокислотой формулы
IV является D-аминокислота или метилированная аминокислота,
и/или Маа не является цистеином. Предпочтительно, когда ХааП2
формулы IV является D-аминокислота или метилированная
аминокислота. В некоторых вариантах осуществления
аминокислотой, обозначенной ХааП2/ формулы IV является лейцин, D-лейцин, серии или D-серин. Предпочтительно, когда одной или более аминокислот, обозначенных Xaani, формулы IV является D-аминокислота или метилированная аминокислота. Предпочтительно, когда аминокислотой, обозначенной Хаа6, формулы IV является лейцин, серии или тирозин.
В дальнейших вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC включают пептиды, имеющие аминокислотную последовательность формулы V, причем по меньшей мере одной аминокислотой формулы V является D-аминокислота или метилированная аминокислота. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 16 формулы V является D-аминокислота или метилированная аминокислота. Например, аминокислотой в положении 16 (т.е. Хаа16) формулы V является D-лейцин или D-серин. Необязательно одной или более аминокислот в положениях 1-3 формулы V являются D-аминокислоты или метилированные аминокислоты, или комбинация D-аминокислот или метилированных аминокислот. Например, Asn1, Asp2 или Glu3 (или их комбинация) формулы V представляет собой D-аминокислоту или метилированную аминокислоту. Предпочтительно, когда аминокислотой, обозначенной Хаа6, формулы V является лейцин, серии или тирозин.
В дополнительных вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC включают пептиды, имеющие аминокислотную последовательность формулы VI, VII, VIII или IX. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении б формулы VI, VII, VIII или IX является лейцин, серии или тирозин. В некоторых аспектах аминокислотой в положении 16 формулы VI, VII, VIII или IX является лейцин или серии. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 16 формулы V является D-аминокислота или метилированная аминокислота.
В дополнительных вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC включают пептиды, имеющие аминокислотную последовательность формулы X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI или XVII. Необязательно одной или более аминокислот формул X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI или XVII является D-аминокислота или метилированная аминокислота. Предпочтительно, когда аминокислотой на С-конце
пептидов в соответствии с формулами X, XI, XII, XIII, XIV, XV,
XVI или XVII является D-аминокислота или метилированная аминокислота. Например, аминокислотой на С-конце пептидов в соответствии с формулами X, XI, XII, XIII, XIV, XV, XVI или
XVII является D-тирозин.
Предпочтительно, когда аминокислотой, обозначенной Хаа6, формулы XIV является тирозин, фенилаланин или серии. Наиболее предпочтительно, когда аминокислотой, обозначенной Хаа6, формулы XIV является фенилаланин или серии. Предпочтительно, когда аминокислотой, обозначенной Хаа4, формулы XV, XVI или
XVII является тирозин, фенилаланин или серии. Наиболее предпочтительно, когда аминокислотой, обозначенной Хаа4, формулы V, XVI или XVII является фенилаланин или серии.
В некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC
включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность
формулы XVIII. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении
1 формулы XVIII является глютаминовая кислота, аспарагиновая
кислота, глютамин или лизин. Предпочтительно, когда
аминокислотой в положениях 2 и 3 формулы XVIII является
глютаминовая кислота или аспарагиновая кислота.
Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 5 является глютаминовая кислота. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении б формулы XVIII является изолейцин, валин, серии, треонин или тирозин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 8 формулы XVIII является валин или изолейцин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 9 формулы
XVIII является аспарагин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 10 формулы XVIII является валин или метионин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 11 формулы XVIII является аланин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 13 формулы XVIII является треонин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 14 формулы XVIII является глицин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 16 формулы XVIII является лейцин, серии или треонин.
В альтернативных вариантах осуществления пептиды-агонисты
GCC включают пептиды, содержащие аминокислотную
последовательность формулы XIX. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 1 формулы XIX является серии или аспарагин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 2 формулы XIX является гистидин или аспарагиновая кислота. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 3 формулы XIX является треонин или глютаминовая кислота. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 5 формулы XIX является глютаминовая кислота. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении б формулы XIX является изолейцин, лейцин, валин или тирозин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 8, 10, 11 или 13 формулы XIX является аланин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 9 формулы XIX является аспарагин или фенилаланин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 14 формулы XIX является глицин.
В дальнейших вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC
включают пептиды, содержащие аминокислотную последовательность
формулы XX. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 1
формулы XX является глютамин. Предпочтительно, когда
аминокислотой в положении 2 или 3 формулы XX является
глютаминовая кислота или аспарагиновая кислота.
Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 5 формулы XX является глютаминовая кислота. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении б формулы XX является треонин, глютамин, тирозин, изолейцин или лейцин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 8 формулы XX является изолейцин или валин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 9 формулы XX является аспарагин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 10 формулы XX является метионин или валин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 11 формулы XX является аланин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 13 формулы XX является треонин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 1 формулы XX является глицин. Предпочтительно, когда аминокислотой в положении 15 формулы XX является тирозин. Необязательно аминокислота в положении 15 формулы XX имеет длину в две аминокислоты и представляет собой цистеин (Cys), пеницилламин
(Pen), гомоцистеин или 3-меркаптопролин и серин, лейцин или треонин.
В некоторых вариантах осуществления одна или более
аминокислот пептидов-агонистов GCC заменена не встречающейся в
природе аминокислотой или аналогом встречающейся или не
встречающейся в природе аминокислоты. Такие аминокислоты и
аналоги аминокислот известны в данной области техники.
Смотрите, например, Hunt, "The Non-Protein Amino Acids," in
Chemistry and Biochemistry of the Amino Acids, Barrett, Chapman
and Hall, 1985. В некоторых вариантах осуществления
аминокислота замена на встречающуюся в природе, заменимую
аминокислоту, например, таурин. Неограничивающие примеры
встречающихся в природе аминокислот, которые могут быть замены
небелковыми аминокислотами, включают следующие: (1)
ароматическая аминокислота может быть замена 3,4-дигидрокси-Ъ-
фенилаланином, З-йод-Ъ-тирозином, трийодтиронином, L-
тироксином, фенилглицином (Phg) или нор-тирозином (норТуг); (2) Phg и норТуг, и другие аминокислоты, в том числе Phe и Туг, могут быть замещенными с использованием, например, галогена, -СН3, -ОН, -CH2NH3, -С(0)Н, -СН2СН3, -CN, -СН2СН2СН3, -SH или другой группы; (3) остаток глютамина может быть заменен на гамма-гидрокси-Glu или гамма-карбокси-Glu; (4) остаток тирозина может быть заменен альфа-замещенной аминокислотой, такой как L-альфа-метилфенилаланин или аналогами, такими как З-амино-Туг; Туг(СНз); Туг (Р03 (СН3) 2) ; Tyr(S03H); бета-циклогексил-А1а; бета-(1-циклопентенил)-Ala; бета-циклопентил-Ala; бета-циклопропил-А1а; бета-хинолил-Ala; бета-(2-тиазолил)-Ala; бета-(триазол-1-ил)-Ala; бета-(2-пиридил)-Ala; бета-(3-пиридил)-Ala; амино-Phe; фтор-Phe; циклогексил-Gly; tBu-Gly; бета-(3-бензотиенил)-Ala; бета-(2-тиенил)-Ala; 5-метил-Тгр и альфа-метил-Тгр; (5) остатки пролина могут быть заменены гомоРго (L-пипеколиновой кислотой); гидрокси-Рго; 3,4-дегидро-Рго; 4-фтор-Рго; или альфа-метил-Рго или подвергнутым N(альфа)-С(альфа)-циклизации аминокислотным аналогом со структурой: n=0, 1, 2, 3; и (б) остатки аланина могут быть заменены альфа-замещенной или N-метилированной аминокислотой, такой как альфа-аминоизомасляная кислота (aib),
L/D-альфа-этилаланин (L/D-изовалин), L/D-метилвалин или L/D-альфа-метиллейцин, или неприродной аминокислотой, такой как бета-фтор-Ala. Аланин может быть также замещенным с использованием n=0, 1, 2, 3. Остатки глицина могут быть заменены альфа-аминоизомасляной кислотой (aib) или L/D-альфа-этилаланином (L/D-изовалином).
Дальнейшие примеры неприродных аминокислот включают:
неприродный аналог тирозина; неприродный аналог глютамина;
неприродный аналог фенилаланина; неприродный аналог серина;
неприродный аналог треонина; алкил-, арил-, ацил-, азидо-,
циано-, галоген-, гидразин-, гидразин-, гидроксил-, алкенил-,
алкинил-, простая эфирная группа-, тиол-, сульфонил-, селено-,
сложноэфирная группа-, тиокислота-, борат-, боронат-, фосфо-,
фосфоно-, фосфин, гетероциклическая группа-, энон-, имин-,
альдегид-, гидроксиламин-, кето- или амино-замещенную
аминокислоту, или любую их комбинацию; аминокислоту с
фотоактивируемым сшиванием; спин-меченную аминокислоту;
флуоресцентную аминокислоту; аминокислоту с новой
функциональной группой; аминокислоту, которая ковалентно или
нековалентно взаимодействует с другой молекулой;
металлсвязывающую аминокислоту; аминокислоту, которая является
амидированной в положении, которое не является в природе
амидированным, металлосодержащую аминокислоту; радиоактивную
аминокислоту; фотоактивированную и/или подвергаемую
фотоизомеризации аминокислоту; содержащую биотин или аналог биотина аминокислоту; гликозилированную или углевод-модифицированную аминокислоту; кето-содержащую аминокислоту; аминокислоты, включающие полиэтиленгликоль или полиэфир; замещенную тяжелым атомом аминокислоту (например, аминокислоту, содержащую дейтерий, тритий, 13С, 15N или 180) ; химически расщепляемую или фоторазрушаемую аминокислоту; аминокислоту с удлиненной боковой цепью; аминокислоту, содержащую токсичную группу; сахар-замещенную аминокислоту, например, сахар-замещенный серии или т.п.; связанную с углеродом,
сахарсодержащую аминокислоту; редоксактивную аминокислоту; а
гидрокси-содержащую аминокислоту; содержащую аминотиокислоту
аминокислоту; а,а-дизамещенную аминокислоту; [3-аминокислоту;
циклическую аминокислоту, отличную от пролина; О-метил-L-
тирозин; L-3-(2-нафтил)аланин; 3-метил-фенилаланин; п-ацетил-L-
фенилаланин; 0-4-аллил-Ъ-тирозин; 4-пропил-Ъ-тирозин; три-О-
ацетил-61сЫАс-|3-серин; L-допу; фторсодержащий фенилаланин;
изопропил-Ъ-фенилаланин; п-азидо-Ъ-фенилаланин; п-ацил-L-
фенилаланин; п-бензоил-Ъ-фенилаланин; L-фосфосерин;
фосфоносерин; фосфонотирозин; п-йодфенилаланин; 4-
фторфенилглицин; п-бромфенилаланин; п-амино-Ъ-фенилаланин;
изопропил-Ъ-фенилаланин; L-3-(2-нафтил)аланин; D-3-(2-
нафтил)аланин (dNal); амино-, изопропил- или О-аллил-содержащие
аналоги фенилаланина; допу, О-метил-Ъ-тирозин;
гликозилированную аминокислоту; п-(пропаргилокси)фенилаланин; диметиллизин; гидроксипролин; меркаптопропионовую кислоту; метиллизин; 3-нитротирозин; норлейцин; пироглютаминовую кислоту; Z (карбобензоксил) ; s-ацетиллизин; (3-аланин; аминобензоильное производное; аминомасляную кислоту (Abu); цитруллин; аминокапроновую кислоту; аминоизомасляную кислоту (AIB) ; циклогексилаланин; D-циклогексилаланин; гидроксипролин; нитроаргинин; нитрофенилаланин; нитротирозин; норвалин; октагидроиндолкарбоксилат; орнитин (Огп); пеницилламин (PEN); тетрагидроизохинолин; ацетамидометил-защищенные аминокислоты и ПЭГилированные аминокислоты. Дополнительные примеры неприродных аминокислот и аналогов аминокислот можно найти в U.S. 20030108885, U.S. 20030082575, US20060019347 (параграфах 410418) и приведенных в них ссылках. Полипептиды настоящего изобретения могут включать дополнительные модификации, в том числе те, которые описаны в US20060019347, параграфе 589. Приводимые в качестве примера пептиды-агонисты GCC, которые включают не встречающуюся в природе аминокислоту, включают, например, SP-368 и SP-369.
В некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC являются циклическими пептидами. Являющиеся агонистами GCC циклические пептиды можно получить с помощью способов,
известных в данной области техники. Например, макроциклизацию часто осуществляют посредством образования амидной связи между N- и С-концами пептида, между боковой цепью и N- или С-концом
[например, с использованием K3Fe(CN)6 при рН 8,5] (Samson et al. , Endocrinology, 137: 5182-5185 (1996)), или между двумя боковыми цепями аминокислоты, такой как цистеин. Смотрите, например, DeGrado, Adv Protein Chem, 39: 51-124 (1988) . В различных вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC являются
[4,12,7,15]бициклами.
В некоторых вариантах осуществления один или более остатков Cys, которые обычно образуют дисульфидную связь в пептиде-агонисте GCC, заменяют гомоцистеином, пеницилламином, 3-меркаптопролином (Kolodziej et al. 1996 Int. J. Pept. Protein Res. 48:274), |3, (3-диметилцистеином (Hunt et al. 1993 Int. J. Pept. Protein Res. 42: 249) или диаминопропионовой кислотой
(Smith et al. 1978 J. Med. Chem. 2 1: 117) для образования альтернативных внутренних сшивок в положениях нормальных дисульфидных связей.
В некоторых вариантах осуществления одну или более дисульфидных связей в пептиде-агонисте GCC заменяют альтернативными ковалентными сшивками, например, амидной связью
(-СН2СН (О) NHCH2- или - CH2NHCH (О) СН2-) , сложноэфирной связью, тиоэфирной связью, лактамным мостиком, карбамоильной связью, мочевинной связью, тиомочевинной связью, фосфонатной связью, алкильной связью (-СН2СН2СН2СН2-) , алкенильной связью (-СН2СН=СНСН2-) , простой эфирной связью (-СН2СН2ОСН2- или СН2ОСН2СН2-) , тиоэфирной связью (-CH2CH2SCH2- или -CH2SCH2CH2-) , аминной связью (-CH2CH2NHCH2- или -CH2NHCH2CH2-) или тиоамидной связью (-СН2СН (S) HNHCH2- или -CH2NHCH (S) СН2-) . Например, Ledu et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. 100: 11263-78, 2003) описывают способ создания лактамных и амидных сшивок. Приводимые в качестве примера пептиды-агонисты GCC, которые включают лактамный мостик, включают, например, SP-370.
В некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC имеют одну или более обычных полипептидных связей, замененных
альтернативной связью. Такие замены могут увеличить стабильность полипептида. Например, замена полипептидной связи между амино-концевым остатком и ароматическим остатком (например, Туг, Phe, Тгр) альтернативной связью может уменьшить расщепление карбоксипептидазами и может увеличить полупериод существования в пищеварительном тракте. Связи, которые заменяют полипептидные связи, включают: ретро-инверсо-связь (C(O)-NH вместо NH-C(O); восстановленную амидную связь (NH-CH2) ; тиометиленовую связь (S-CH2 или CH2-S); оксометиленовую связь (0-СН2 или СН2-0) ; этиленовую связь (СН2-СН2) ; тиоамидную связь (C(S)-NH); транс-олефиновую связь (СН=СН); фтор-замещенную транс-олефиновую связь (CF=CH); кетометиленовую связь (C(O)-CHR или CHR-C(O), где R представляет собой Н или СН3; и фторкетометиленовую связь (C(O)-CFR или CFR-C(O), где R представляет собой Н или F или СН3.
В некоторых вариантах осуществления пептиды-агонисты GCC
модифицируют, используя стандартные модификации. Модификации
могут встречаться на амино- (N-), карбоксильном (С-) конце,
внутри или являться комбинацией любых из предыдущих. В одном
аспекте, описываемом здесь, в полипептиде может быть более одно
типа модификации. Модификации включают, но без ограничения,
ацетилирование, амидирование, биотилирование,
циннамоилирование, фарнезилирование, формилирование,
миристоилирование, пальмитоилирование, фосфорилирование (Ser,
Туг или Thr) , стеароилирование, сукцинилирование,
сульфурилирование и циклизацию (через дисульфидные мостики или циклизацию за счет амидных групп) и модификацию с использованием Cys3 или Cys5. Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, можно также модифицировать с использованием 2,4-динитрофенила (DNP), DNP-лизин, модификации с использованием 7-амино-4-метилкумарина (АМС), флуоресцеина, NBD (7-нитробенз-2-окса-1,3-диазола), п-нитроанилида, родамина В, EDANS (5-( (2-аминоэтил)амино)нафталин-1-сульфокислоты), dabcyl, dabsyl, dansyl, техасского красного, FMOC и Tamra (тетраметилродамина). Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, можно также конъюгировать, например, с полиэтиленгликолем (ПЭГ); алкильными
группами (например, С1-С20 неразветвленными или разветвленными алкильными группами); жирнокислотными радикалами; комбинациями ПЭГ, алкильных групп и жирнокислотных радикалов (смотрите патент США № 6309633; Soltero et al. , 2001 Innovations in Pharmaceutical Technology 106-110); BSA и KLH (гемоцианином лимфы улитки). Добавление ПЭГ и других полимеров, которые могут использоваться для модификации полипептидов настоящего изобретения, описано в US2006019347, разделе IX.
Пептид-агонист GCC может также представлять собой производные описываемого здесь пептида-агониста GCC. Например, производное включает гибридные и модифицированные формы пептидов-агонистов GCC, в которых определенные аминокислоты были делетированы или замещены. Модификация может также включать гликозилирование. Предпочтительно, если модификацией является аминокислотная замена, она является консервативной заменой в одном или более положений, которые, как предсказывают, являются несущественными аминокислотными остатками для биологической активности пептида. "Консервативной заменой" является замена, в случае которой аминокислотный остаток заменяют аминокислотным остатком, имеющим схожую боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющих схожие боковые цепи, были определены в данной области техники. Эти семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислотными боковыми цепями (например, аспарагиновую кислоту, глютаминовую кислоту), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глютамин, серии, треонин, тирозин, цистеин), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).
В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC, описываемый здесь, подвергают неспецифическому мутагенезу для идентификации мутантов, обладающих биологической активностью.
В одном варианте осуществления пептид-агонист GCC по
существу гомологичен описываемую здесь пептиду, являющемуся агонистом GCC. Такие по существу гомологичные пептиды можно выделить на основании перекрестной реактивности с антителами против пептида-агониста GCC, описываемого здесь.
Дополнительные примеры пептидов-агонистов GCC, которые могут использоваться в способах и составах настоящего изобретения, встречаются в таблицах I-VII ниже.
Пептиды-агонисты GCC можно приготовить, используя принятые в данной области техники методы, такие как молекулярное клонирование, синтез пептидов или сайт-направленный мутагенез.
Синтез пептидов можно выполнить, используя стандартные методы жидкофазного или твердофазного синтеза пептидов или комбинацию обоих методов, в случае которой сегменты синтезируют с использованием твердой фазы и подвергают конденсации в жидкой фазе, в которой пептидная связь возникает через непосредственную конденсацию аминогруппы одной аминокислоты с карбоксильной группой другой аминокислоты с выделением молекулы воды. Для синтеза пептидной связи с помощью непосредственной конденсации, как изложено выше, необходимо подавление реакционно-способного характера аминогруппы первой аминокислоты и карбоксильной группы второй аминокислоты. Маскирование замещающих групп должно дать возможность для их легкого удаления, без индукции разрушения лабильной пептидной молекулы.
В случае жидкофазного синтеза широкий ряд методов сочетания и защитных групп может использоваться (Смотрите Gross and Meienhofer, eds., "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology," Vol. 1-4 (Academic Press, 1979); Bodansky and Bodansky, "The Practice of Peptide Synthesis," 2d ed. (Springer Verlag, 1994)). Кроме того, возможна промежуточная очистка и линейное увеличение масштаба. Специалистам со средним уровнем компетентности в данной области техники будет понятно, что в случае жидкофазного синтеза необходимо принятие во внимание защитных групп для основной цепи и боковой цепи и способа активации. Кроме того, необходим тщательный отбор сегментов для минимизации рацемизации во время конденсации сегментов.
1.2.2. Приготовление пептидов-агонистов GCC
Принимаемым во внимание фактором также является растворимость. В случае твердофазного синтеза пептидов используется нерастворимый полимер для опоры во время органического синтеза. Пептидная цепь на полимерной опоре позволяет использовать простые стадии промывки и фильтрации вместо трудоемких очисток на промежуточных стадиях. Твердофазный синтез пептидов может, как правило, выполняться в соответствии со способом Merrifield et al, J. Am. Chem. Soc, 1963, 85: 2149, который включает сборку линейной пептидной цепи на полимерной опоре, используя защищенные аминокислоты. В случае твердофазного синтеза пептидов типично используется стратегия с использованием или Вое, или Fmoc, которая хорошо известна в данной области техники.
Специалисты со средним уровнем компетентности в данной области техники специалистам признают, что, в случае твердофазного синтеза, реакции снятия защиты и сочетания должны идти до конца, а блокирующие боковые цепи группы должны быть стабильны на всем протяжении синтеза. Кроме того, твердофазный синтез является, как правило, наиболее подходящим, когда пептиды должны быть созданы в небольшом масштабе.
Ацетилирование N-конца может выполняться за счет реакции конечного пептида с уксусным ангидридом до отщепления от полимера. С-амидирование выполняют, используя подходящий полимер, такой как метилбензгидриламинная смола, используя Вое технологию.
Альтернативно пептиды-агонисты GCC продуцируют с помощью современных методов клонирования. Например, пептиды-агонисты GCC продуцируют или в бактериях, в том числе, но без ограничения, Е. coli, или в других существующих системах для продукции полипептидов или белков (например, Bacillus subtilis, бакуловирусных экспрессионных системах, используя клетки Drosophila Sf9, системах экспрессии в дрожжах или мицелиальных грибах, системах экспрессии в клетках млекопитающих), или они могут быть синтезированы химически. Если пептид-агонист GCC или вариант пептида должен быть продуцирован в бактериях, например, Е. coli, молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид,
может также кодировать лидерную последовательность, которая делает возможной секрецию зрелого полипептида из клетки. Таким образом, последовательность, кодирующая полипептид, может включать препоследовательность и пропоследовательность, например, встречающегося в природе бактериального ST полипептида. Секретированный зрелый полипептид можно очистить из культуральной среды.
Последовательность, кодирующую пептид-агонист GCC,
описываемый здесь, можно встроить в вектор, способный
доставлять и сохранять молекулу нуклеиновой кислоты в
бактериальной клетке. Молекулу ДНК можно встроить в автономно
реплицирующийся вектор (подходящие векторы включают, например,
pGEM3Z и pcDNA3, и их производные). Векторной нуклеиновой
кислотой может быть бактериальная или бактериофаговая ДНК,
такая как бактериофаг лямбда или М13 и их производные. За
конструированием вектора, содержащего нуклеиновую кислоту,
описываемую здесь, может следовать трансформация клетки-
хозяина, такой как бактерия. Подходящие бактериальные клетки-
хозяева включают, но без ограничения, Е. coli, В. subtilis,
Pseudomonas, Salmonella. Генетическая конструкция также
включает, помимо кодирующей молекулы нуклеиновой кислоты,
элементы, которые делают возможной экспрессию, такие как
промотор и регуляторные последовательности. Экспрессионные
векторы могут содержать контролирующие транскрипцию
последовательности, которые контролируют инициацию
транскрипции, такие как промотор, энхансеры и
последовательности-репрессоры.
Множество контролирующих транскрипцию последовательностей хорошо известно специалистам в данной области техники. Экспрессионный вектор может также включать регулирующую трансляцию последовательность (например, нетранслируемую 5' последовательность, нетранслируемую 3' последовательность или участок внутренней посадки рибосомы). Вектор может быть способен к автономной репликации, или он может интегрироваться в ДНК хозяина для обеспечения стабильности во время продукции полипептида.
Кодирующая белок последовательность, которая включает
пептид-агонист GCC, описываемый здесь, может быть также слита с
нуклеиновой кислотой, кодирующей аффинную метку полипептида,
например, глютатион-Б-трансферазу (GST), связывающийся с
мальтозой Е белок, белок А, FLAG-метку, гексагистидин, тус-
метку или метку в виде НА вируса гриппа, для облегчения
очистки. Слияние с аффинной меткой или репортером соединяет
рамку считывания представляющего интерес полипептида с рамкой
считывания гена, кодирующего аффинную метку, так что создается
трансляционный гибрид. Экспрессия гибридного гена приводит к
трансляции одного полипептида, который включает и
представляющий интерес полипептид, и аффинную метку. В
некоторых случаях использования аффинных меток,
последовательность ДНК, кодирующая сайт распознавания протеазой, будет слита между рамками считывания для аффинной метки и представляющего интерес полипептида.
Генетические конструкции и способы, подходящие для продукции незрелых и зрелых форм пептидов-агонистов GCC и вариантов, описываемых здесь, в системах экспрессии белков, отличных от бактерий, и хорошо известные квалифицированным в данной области техники специалистам, могут также использоваться для продукции полипептидов в биологической системе.
Описываемые здесь пептиды можно модифицировать посредством присоединения второй молекулы, которая придает пептиду желаемое свойство, такое как увеличенный полупериод существования в организме, например, ПЭГилирования. Такие модификации также находятся в рамках термина "вариант", используемого здесь.
SP-350
C4:C12, C7:C15
n3r3-dAsn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Leu*-Cys/-Val8-Asny-Vallu-Ala11-Cys12-Thr13-Gly1+-Cys15-d
SP-352
C4:C12, C7:C15
Asn'-Asp^Glu^Cys'-Glu'-Leu'-Cys'-Val^^
SP-358
C4:C12,C7:C15
rorS-dAsn'-dAsp'-dGlu'-Cys^Glu'-L^
ПЭГЗ
SP-359
C4:C12,C7:C15
mn^sn'-dAsp'-dGlu'-Cys'-Glu'-Leu6^
SP-360
C4:C12, C7:C15
dAsn'-dAsp2-dGlu3-Cys4-Glu3-Leu6-Cys'-V^
SP-361
C4:C12, C7:C15
dAsn'-dAsp'-Glu^Cys'-Glu'-Leu^-Cys'^ -ПЭГЗ
SP-362
C4:C12, C7:C15
n3r3-dAsn1-dAsp'-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cysy-Val5-Asny-Val'u-Ala''-CysI'-Thr"-Gly'4-C
SP-368
C4:C12, C7:C15
dAsn'-Asp^-Glu'-Cys'-Glu'-Leu^Cys'^^^
SP-369
C4:C12, C7:C15
dAsn'-Asp^Glu'-Cys'-Glu'-Leu'-Cys'-AIB^-Asn'-AIB^-Ala'^Cys^-Thr^-Gly^-Cys^-dLeu16
SP-370
C4:C12, C7:C15
dAsn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Leu6-Asp[Lactam]7-Vals-Asns-Vallu-Ala11-Cys12-Thr"
SP-371
C4:C12,C7:C15
dAsn'-Asp^Glu'-Cys'-Glu'-Tyr^Cys^
SP-372
C4:C12,C7:C15
dAsn'-Asp^Glu'-Cys'-Glu'-Ser'-Cys^al8^^
C4:C12,C7:C15
ron^lAsn'-Asp^-Glu'-Cys^Glu'-Tyr^ -ПЭГЗ
C4:C12,C7:C15
ron-dAsn'-Asp^-Glu'-Cys^Glu'-Tyr6^
C4:C12,C7:C15
dAsn'-Asp^Glu'-Cys'-Glu'-Tyr^Cys^^
C4:C12,C7:C15
ron^lAsn'-Asp^Glu'-Cys^Glu'-Ser^^
C4:C12,C7:C15
ron^lAsn'-Asp^-Glu'-Cys^Glu'-Ser^^
C4:C12,C7:C15
dAsn'-Asp^-Glu'-Cys'-Glu'-Ser^Cys'A^^
C4:C12,C7:C15
Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Leu(,-Cys7-Val8-Asn!'-Vallu-Alan-Cys12-Thria-Gly14-Cys13-Ser16
C4:C12,C7:C15
n3r3-W-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Le^
C4:C12,C7:C15
n3r3-Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Leu6-Cys'-Val8-Asny-Vallu-Alau-Cyslz-Thr13-Gly14-Cys13-Se
N10
C4:C12,C7:C15
Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Leu°-Cys'-Val8-Asnv-Vallu-Ala11-Cyslz-Thri;,-Gly14-Cysi:'-SerI(,-n3r3
N11
С4:С12,С7:С15
ror3-W-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Leu6-Cys7^^^
N12
С4:С12,С7:С15
ror3-W-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Leu6-Cys7^^^
N13
С4:С12,С7:С15
Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu3-Leu*-Cys'-Val8-Asnv-Vallu-Alan-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-dSerIb-n3r3
Формула I
С4:С12,С7:С15
Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Xaa3-Xaa6-Cys/-Xaa8-Xaay-Xaa'u-Xaau-Cys'2-Xaa13-Xaa14-Cysi:,-Xaalf'
Формула II
С4:С12,С7:С15
Xaanl-Cys4-Xaa1-Xaa6-Cys/-Xaa8-Xaay-Xaa1U-Xaa11-Cys12-Xaa13-Xaa14-Cysi:,-Xaa112i(,
Формула III
4:12,7:15
Xaani-Maa4-Glu5-Xaa6-Maa/-Val8-Asny-ValLU-Ala,,-Maa,2-Thr13-Gly14-Maa13- Xaa"2
Формула IV
4:12,7:15
Xaaoi - Маа4-Хаа3-Хаа6- Maa '-XaaVXaa'-Xaa^-Xaa11- Маа 12-Xaa13-Xaa14- Maa "-Xaa^
Формула V
С4:С12,С7:С15
AsIl1-Asp2-Asp3-Cys4-Xaa:,-Xaa,,-Cys/-Xaa!i-Asn;'-Xaa1U-Xaa11-Cys12-Xaa13-Xaa14-Cysl:,-Xaa1',
Формула
С4:С12,С7:С15
dAsn1-Glu2-Glu3-Cys4-Xaas-Xaa6-Cys7-X38-Asny-Xaalu-Xaau-Cys12-Xaa13-Xaa14-Cys15-d-Xaa1^
Формула
VII
С4:С12,С7:С15
aV^sn1-dGlu2-Asp3-Cys4-Xaa5-Xaa6-Cys7-Xaa8-Asny-Xaalu-Xaa1I-Cys12-Xaa13-XaaL4-Cys15-d-Xaa1^
Формула VII
С4:С12,С7:С15
dAsn1-dAsp2-Glu3-Cys4-Xaa5-Xaaй-Cys7-Xaa8-Asny-Xaall,-Xaa11-CysIZ-Xaa13-Xaa14-Cys13-d-Xaa1(,
Формула VIII
С4:С12,С7:С15
dAsn1-dAsp2-dGlu3-Cys4-Xaa3-Xaa6-Cys7-Xaas-Tyry-Xaalu-Xaa11-Cys12-Xaa13-Xaa14-Cys15-d-Xaa
Формула
С4:С12,С7:С15
dAsn1-dGlu2-dGlu3-Cys4-Xaa5-Xaa6-Cys7-Xaa8-Tyry-Xaalu-Xaa11-Cys12-Xaa13-Xaa14-Cys15-d-Xaa1^
SP-382
C3:C8, C4:C12, C7:15
dAsn'-Phe'-Cys'-Cys'-Glu'-Phe'-Cys'-^^
SP-383
C3:C8, C4:C12, C7:15
dAsn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Phe6-Cys'-Cyss-Asny-Pro10-Ala,,-Cys12-Thr,a-Gly,4-Cysn
SP384
C1:C6, C2:C10, C5:13
Cys1-Cys2-GluJ-Tyr4-Cysi-Cys(,-Asn/-Pro!!-Alas'-Cyslu-Thru-Gly12-Cysi3-Tyr14-n3r3
N14
C1:C6, C2:C10, C5:13
n3r3-Cys1-Cys2-Glu3-Tyr4-Cys5-Cys(,-Asn'-Pro8-Ala!'-Cysll,-Thr11-Gly12-Cys13-n3r3
N15
C1:C6, C2:C10, C5:13
n3r3-Cys'-Cys"-GluJ-Tyr4-Cys:> -Cysf,-Asii/-Pro!!-Ala!'-Cyslu-Thr11-Gly'2-Cys1J
N16
C1:C6, C2:C10, C5:13
Cys1-Cys2-Glu3-Tyr4-Cys5-Cys6-Asn7-Pros-Alatf-Cys10-ThrL1-Gly12-CysI3-n3r3
N17
C3:C8, C4:C12, C7:15
ПЭГЗ- Asn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glu3-Ser('-Cys/-Cys!i-Asii!'-Prolu-Ala1 '-Cyslz-Thr13-Gly14-Cys13-Tyr16-PEG3
N18
C3:C8, C4:C12, C7:15
ПЭГЗ- Asn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Ser6-Cys7-Cys!i-Asn9-Prolu-Ala1 '-Cys^-Thr^-Gly^-Cys13-Tyr16
N19
C3:C8, C4:C12, C7:15
Asn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glu3-Serb-Cys7-Cys8-Asny-Prolu-Ala11-Cys12-Thr13-Glyi4-Cys15-Tyrlf'-ПЭГЗ
N20
C3:C8, C4:C12, C7:15
n3r3-Asn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Phe6-Cys7-Cyss-Asny-Prolw-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Туг16-ПЭГЗ
N21
C3:C8, C4:C12, C7:15
n3r3-Asn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Phe6-Cys7-Cys!i-Asny-Prolu-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-
ГТ1 16
Tyr
N22
C3:C8, C4:C12, C7:15
Asn'-Phe'-Cys'-Cys'-Glu'-Phe'-Cys'-Cys'-Asn'-Pro^-Ala'^Cys^-Thr^-Gly^-Cys^-Tyr1*-ПЭГЗ
N23
C3:C8, C4:C12, C7:15
n3r3-Asn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Tyr6-Cys7-Cyss-Asn!'-Prolu-Alau-Cys12-Thr13-Glyi4-Cys13-Туг16-ПЭГЗ
N24
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
n3r3-Asn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glui-Tyr(,-Cysv-Cyss-Asny-Prolu-Ala11-Cys12-Thri;5-Gly14-Cysi:'-Туг16
N25
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
Asn'-Phe2-Cysa-Cys4-Glu> -Tyr6-Cys^
пэгз
N26
С1:С6, С2:С10, С5:13
Cys1-Cys2-Glu3-Ser4-Cys5-Cys6-Asn7-Pro8-Ala!'-CysiU-Thru-Gly12-Cys13-Tyr14
N27
С1:С6, С2:С10, С5:13
Cys1-Cys2-GluЗ-Phe4-Cys5-Cys^,-Asn/-Pro8-Ala!'-Cysш-Thгu-Gly12-Cys13-Tyг,4
N28
С1:С6, С2:С10, С5:13
Cys1-Cys2-Glu3-Ser4-Cys3-Cys6-Asn'-Pro!S-Alai'-CysiU-Thru-Gly12-Cys13-
N29
С1:С6, С2:С10, С5:13
Cys1-Cys2-Glu3-Phe4-Cys5-Cys <'-Asn/-Pro!i-Ala!'-CysI,> -Thru-Gly12-Cys13
N30
1:6, 2:10, 5:13
Pen'-Pen2-Glu3-Tyr4-Pen5-Pen <,-Asn/-Pro8-Alay-Pen'u-Thr''-Gly12-Pen13-Tyr14
N31
1:6, 2:10, 5:13
Pen'-Pen2-Glu3-Tyr4-Pen5-Peii <,-Asn/-Pro8-Alay-Pen'u-Thr"-Gly12-Pen13
Формула X
С9:С14, С10:С18, С13:21
Xaa1-Xaa2_Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6- Asn7-Tyr8-Cys9-Cyslc-Xaa11-Tyr12-Cys13-Cys14-Xaa15-Xaa16-Xaa17-Cys18- Xaa19-Xaa20-Cys21-Xaa22
Формула XI
С9:С14, С10:С18, С13:21
Xaa1-Xaa2^aa3-Xaa4-Xaai-Xaa6-Asn7- Phe8-Cysy-Cyslu -XaaH-Phe12- Cys^-Cys^-Xaa^-Xaa16-Xaa17-Cys18- Xaa19-Xaa20-Cys21-Xaa22
Формула XII
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
Asn1- Phe2-Cys3-Cys4 - Xaa5-Pheb-Cys7-Cys8 - Xaay-Xaalu- Xaa11_Cys12- Xaa3-Xaa14_Cys15-Xaa16
Формула XIII
3:8, 4:12, С:15
Asn1- Phe2-Pen3-Cys4 - Xaa'-Phe^-Cys'Ten8 - Xaay-Xaalu- Xaau"Cysl2- Xaa13-Xaai4~Cys15-Xaa16
Формула XIV
3:8, 4:12, 7:15
Asn1- Phe2-Maa3-Maa4 - Xaa'-Xaa^Maa'TVIaa8 - Xaay-Xaalu- XaaH"Maa12- Xaa13-Xaa14"Maa15-Xaa16
Формула XV
1:6, 2:10, 5:13
Maa1-Maa2-Glu3-Xaa4-Maa5-Maab-Asn7-Pro,i-Alay-Maalu-Thr11-Gly12-Maa13-Tyr14
Формула
XVI
1:6, 2:10, 5:13
Maa1-Maa2-Glu3-Xaa4-Maa5-Maa('-Asn7-Pro,i-Alas'-Maa1,,-Thr11-Gly12-Maa13-
Формула
XVII
1:6, 2:10, 5:13
Xaarf-Maa1-Maa2-Xaa3-Xaa4-Maa5-Maa6-Xaa'-Xaa8-Xaay-Maalu-Xaa11-Xaa12-Maa13-Xa^
Аналоги SP-304, урогуанилин и аналоги урогуанилина
Название
Положение
дисульфидных
связей
Структура
SEQ ID NO
Формула XVIII
С4:С12, С7:С15
Хаа1- Хаа2- Хаа3 -Маа4-Хаа5-Хаа6-Маа7-Хаа8-Хаа9-Хаа10-Хаап-Маа12-Хаа13-Хаа14-Маа15-Хаа16
108
Урогуанилин
С4:С12, С7:С15
AsnI-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leuь-Cys/-Val8-Asny-Val1U-Ala11-Cys12-Thг13-Gly14"Cysl:> -Leu1,,
109
N32
С4:С12, С7:С15
Glu1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
110
N33
С4:С12, С7:С15
Glu1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
111
N34
С4:С12, С7:С15
Glu1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
112
N35
С4:С12, С7:С15
Glu1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
113
N36
С4:С12, С7:С15
Asp1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
114
N37
С4:С12, С7:С15
Asp'-Asp2-Glu3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
115
N38
С4:С12,
Asp1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
116
С7:С15
N39
С4:С12, С7:С15
Asp1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
117
N40
С4:С12, С7:С15
Gln'-Asp^Asp3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
118
N41
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
119
N42
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
120
N43
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
121
N44
С4:С12, С7:С15
Lys1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
122
N45
С4:С12, С7:С15
Lys1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
123
N46
С4:С12, С7:С15
Lys1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
124
N47
С4:С12, С7:С15
Lys1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
125
N48
С4:С12, С7:С15
Glu'-Asp2-Asp3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
126
N49
С4:С12, С7:С15
Glu1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
127
N50
С4:С12, С7:С15
Glu1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
128
N51
С4:С12, С7:С15
Glu1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
129
N52
С4:С12, С7:С15
Asp1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
130
N53
С4:С12, С7:С15
Asp1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
131
N54
С4:С12, С7:С15
Asp1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
132
N55
С4:С12, С7:С15
Asp1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
133
N56
С4:С12, С7:С15
Gln'-Asp^Asp3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
134
N57
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
135
N58
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
136
N59
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
137
N60
С4:С12, С7:С15
Lys'-Asp^Asp3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
138
N61
С4:С12,
Lys1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
139
С7:С15
N62
С4:С12, С7:С15
Lys1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
140
N63
С4:С12, С7:С15
Lys1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Val8-Asn9-Val10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
141
N65
С4:С12, С7:С15
Glu1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
142
N66
С4:С12, С7:С15
Glu1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
143
N67
С4:С12, С7:С15
Glu1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
144
N68
С4:С12, С7:С15
Glu1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
145
N69
С4:С12, С7:С15
Asp'-Asp^Asp3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
146
N70
С4:С12, С7:С15
Asp1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
147
N71
С4:С12, С7:С15
Asp'-Glu2-Asp3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
148
N72
С4:С12, С7:С15
Asp1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
149
N73
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
150
N74
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
151
N75
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
152
N76
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu5-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
153
N77
С4:С12, С7:С15
Lys1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
154
N78
С4:С12, С7:С15
Lys1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
155
N79
С4:С12, С7:С15
Lys^Glu^Asp3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Alan-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
156
N80
С4:С12, С7:С15
Lys1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Leu16
157
N81
С4:С12, С7:С15
Glu1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
158
N82
С4:С12, С7:С15
Glu1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
159
N83
С4:С12, С7:С15
Glu1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
160
N84
С4:С12, С7:С15
Glu1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
161
N85
С4:С12,
Asp1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
162
С7:С15
N86
С4:С12, С7:С15
Asp1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
163
N87
С4:С12, С7:С15
Asp1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
164
N88
С4:С12, С7:С15
Asp1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
165
N89
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
166
N90
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
167
N91
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
168
N92
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
169
N93
С4:С12, С7:С15
Lys1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
170
N94
С4:С12, С7:С15
Lys1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
171
N95
С4:С12, С7:С15
Lys^Glu^Asp3 -Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Alan-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
172
N96
С4:С12, С7:С15
Lys1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Leu6-Cys7-Ile8-Asn9-Met10-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Ser16
173
N108
С4:С12, С7:С15
Ser1- His^-Thr" -Cys4-Glu:,-Tyr,,-Cys/-Alas-Asny-Alalu-Alau-Cys12-AlaI3-GlyI4-Cys15
187
N109
С4:С12, С7:С15
Ser1- His2-Thr* -Cys'-Glu'-Ile'-Cys '-Ala^Asn^-Ala^-Ala1 '-Cys^-Ala^-Gly^-Cys15
188
N110
С4:С12, С7:С15
Ser1-Hisz-Thr,-Cys4-Glu5-Leut,-Cys'-Ala5-Asn!'-Alalu-Ala11-Cyslz-Ala1:i-Gly14-Cys15
189
N111
С4:С12, С7:С15
Ser1-His2-Thr'-Cys4-Glu5-Valb-Cys'-Ala8-Asny-Alalu-Ala11-Cys,2-Ala';i-Gly'4-Cys15
190
N112
С4:С12, С7:С15
Ser1-His2-Th^-Cys4-Glu5-Tyr6-Cys7-Ala8-Asny-Alalu-Ala11-Cys,2-Ala,:i-Gly,4-Cys15
191
N113
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu;i-Cys4-Glu:> -Ile(,-Cys/-Ala!i-Asny-Ala1U-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cys,:,
192
N114
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu;,-Cys4-Glu:,-Leu(> -Cys/-Ala8-Asny-Ala1U-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cysl:,
193
N115
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu;'-Cys4-Glu:'-Val <'-Cys'-Ala8-Asny-Ala10-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cysl:,
194
N116
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp'-Glu'-Cys4-Glu:,-Tyr <'-Cys'-Ala'-Asn'-Ala^-Ala'^Cys^-Ala^-Gly^-Cys15
195
N117
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Ilet'-Cys7-Alas-Asns'-Alalu-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cys15
196
N118
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glua-Cys4-Glu:,-Leu <,-Cys7-Ala8-Asn!'-Alalu-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cysi:>
197
N119
С4:С12, С7:С15
Asn1-Aspz-Glu;,-Cys4-Glu:,-Valf'-Cys'-Ala8-Asny-Alalu-Ala11-Cys12-Alai;i-Gly14-Cysi:>
198
N120
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Tyr6-Cys7-Ala8-Asns-Ala1,,-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cys15
199
N121
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu;'-Cys4-Glu:,-Ile(,-Cys/-Ala!i-Asn!'-Ala1U-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cysl:,
200
N122
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu:,-Leu <,-Cys/-Ala8-Asny-Ala1U-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cysl:,
201
N123
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu;i-Cys4-Glu:,-Valf'-Cys'-Ala8-Asny-Alalu-Ala11-Cys12-Ala13-Gly14-Cys13
202
N124
С4:С12, С7:С15
Asn1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu:> -Tyrf,-Cys7-Ala8-Asny-Ala1U-Ala11-Cys12-Alal:i-Gly14-Cysl:,
203
N125
С4:С12, С7:С15
AsnI-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Ile('-Cys/-Ala!i-Asn!'-Alalu-Ala11-CysI2-Ala13-Gly14-CysIi
204
N126
С4:С12, С7:С15
AsnI-Asp2-Glu3-Cys4-Glu:,-Leu^,-Cys/-Ala8-Asny-Ala1U-Alaи-Cys12-Ala13-Gly14-Cysl:,
205
N127
С4:С12, С7:С15
AsnI-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Valt,-Cys'-Ala8-Asny-Alalu-Ala11-CysI2-Alai;,-Gly14-Cysi:>
206
N128
С4:С12, С7:С15
Asn'- Asp2-Glu3 -Cys4-Glu5-Tyr''-Cys'-Ala8-Asny-Alalu-Alau-Cys'2-Ala0-Gly14-Cys':'
207
Таблица
Лимфогуанилин и аналоги
Название
Положение
дисульфидных
связей
Структура
SEQ ID NO
Формула XX
4:12,7:15
Хаа1- Хаа2- Хаа3 -Маа4-Хаа5-Хаа6-Маа7-Хаа8-Хаау-Хаа10-Хаа11-Маа12-Хаа13-Хаа14-Хаап115
208
Лимфогуанилин
С4:С12
Gln1-Glu2-Glu-3Cys4-Glu:,-Leuf,-Cys/-Ile8-Asny-Met1U-Ala11-Cys12-Thг13-Gly14-Tyrl:,
209
N129
С4:С12
Gln1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Thr <,-Cys'-Ile8-Asny-Metlu-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Tyr15
210
N130
С4:С12
Gln1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Thr^Cys/-Ile8-Asny-Met1U-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Tyrl:,
211
N131
С4:С12
Gln1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-ThT^Cys7-Ile8-Asny-Metlu-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Tyri:'
212
N132
С4:С12
Gln'-Glu2-Asp3 -Cys4-Glu5-Thr <,-Cys7-Ile8-Asny-Metlu-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Tyrl:>
213
N133
С4:С12
Gln1-Glu2-Glu;i-Cys4-Glu!,-Gluf'-Cys7-Ile!i-Asny-Metlu-Ala'1-Cys12-Thr';i-Gly'4-Tyr15
214
N134
С4:С12
Gln1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu^Glu6-Cys/-Iles-Asny-Metlu-Ala11-Cys12-Thr1"-Gly14-Tyri:'
215
N135
С4:С12
Gln'-Asp2- Asp3 -Cys4-Glu:,-Glu <,-Cys/-Ile8-Asn!'-Met1U-Alau-CysI2-Thr1"-Gly14-Tyrl:,
216
N136
С4:С12
Gln'-Glu2-Asp' -Cys4-Glu:)-Glut'-Cys/-Ile8-Asn!'-Metlu-Ala11-Cys1/-Thr1J-Gly14-Tyri:>
217
N137
С4:С12
Gln1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu3-Tyr6-Cys/-Ile8-Asny-Metlu-Ala11-Cys'2-Trtf°-Gly14-Tyr15
218
N138
С4:С12
Gln'-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Tyrb-Cys7^^^^^
219
N139
С4:С12
Gln'-Asp2-Asp"-Cys4-Glu5-Tyrb-Cys'-11е8-А8пу-Ме11и-А1аИ-Су812-ТЫ-'3-01у'4-Туг15
220
N140
С4:С12
Gln'-Glu2-Asp3 -Cys4-Glu:'-Tyr <,-Cys'-Ile8-Asn!'-Met1U-Ala"-Cys12-Thr'3-Gly'4-Tyгl:,
221
N141
С4:С12
Gln1-Glu2-Glu3-Cys4-Glui-Ileь-Cys/-Ile8-Asny-Met1U-AlaИ-Cys12-Thг13-Gly14-Tyrl:,
222
N142
С4:С12
Gln1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu:'-Ile <> -Cys/-Ile8-Asny-Met1U-Alaи-Cys,2-Thr'3-Gly'4-Tyrl:,
223
N143
С4:С12
Gln1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Ileb-Cys7-Ile8-Asny-Metlu-Alan-Cys12-Thr13-Gly14-Tyr13
224
N144
С4:С12
Gln'-Glu2- Asp3 -Cys4-Glu5-Ile6-Cys7-Ile8-Asn;'-Metlu-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Tyrl:>
225
N145
С4:С12, С7:С15
Gln'-Glu2-Glu"-Cys4-Glu3-Thr6-Cys4^
226
N146
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Thrb-Cys7-Ile8-Asny-Metlu-Ala11-Cys12-Tbj13-Gly14-Cys15-Ser1('
227
N147
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Asp3-Cys4-Glu5-Thr6-Cys'-Ile8-Asny-Metlu-Ala1I-Cys12-ThrI3-GlyI4-Cysi:> -Ser1(>
228
N148
С4:С12,
Gln'-Glu2-Asp3 -Cys4-Glu5-Thr(,-Cys'-Ile8-Asny-Metlu-AlaI1-Cys12-ThrI3-GlyI4-Cysi:,-Ser1,>
229
С7:С15
N149
С4:С12, С7:С15
Gln'-Glu2- Glu3 -Cys4-Glu5-Glu(,-Cys/-Ile!i-Asns'-Metlu-Alau-Cys12-ThrI3-GlyI4-Cysi:,-Serlb
230
N150
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Glu"-Cys4-Glu3-Glu6-Cys/^les-Asny-Metlu-Ala11-Cys12-Thr1;,-Gly14-Cysl:i-Ser
231
N151
С4:С12, С7:С15
Gln'-Asp2- Asp3 -Cys4-Glu5-Glu(,-Cys/-Ile8-Asny-Met1U-Alau-CysI2-Thг13-Gly14-Cysl:'-Ser1,,
232
N152
С4:С12, С7:С15
Gln'-Glu2-Asp" -Cys4-Glu:,-Glu6-Cys/-Ile,i-Asny-Metlu-AlaИ-Cys12-Thr1J-Gly14-Cys':'-Ser'f,
233
N153
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu'-Glu3-Cys4-Glu5-Tyr6-Cys/-Ile8-Asny-MetJU-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cys'b-Ser16
234
N154
С4:С12, С7:С15
Gln'-Asp2-Glu3-Cys4-Glu5-Tyr6^
235
N155
С4:С12, С7:С15
Gln'-Asp2- Asp3 -Cys4-Glu5-Tyrf'-Cys/-Ile8-Asii;'-Metlu-Alau-Cys12-Thr13-Gly14-Cysli-Ser1'>
236
N156
С4:С12, С7:С15
Gln'-Glu2-Asp3 -Cys4-Glu5-Tyr6-Cys7-Ile8-Asn!'-Met1U-AlaII-Cys12-ThгIЗ-GlyI4-Cys15-Ser1 <,
237
N157
С4:С12, С7:С15
Gln1-Glu2-Glu3-Cys4-Glu5-Ile(,-Cys7-Ile8-Asns'-Met1U-AlaИ-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Seг1',
238
N158
С4:С12, С7:С15
Gln1-Asp2-Glu"-Cys4-Glu:'-Ile <,-Cys/-nes-Asny-MetJU-Ala11-CysI2-ThrI"-Gly14-Cysi:> -Ser16
239
N159
С4:С12, С7:С15
GlnI-Asp2-Asp3-Cys4-Glus-ne6-Cys7-nes-Asnv-Metlu-Alan-Cys12-Thrl;i-Gly14-Cysls-Ser16
240
N160
С4:С12, С7:С15
Gln'-Glu2-Asp3 -Cys4-Glu5-Ile <,-Cys'-Ile8-Asn!'-MetJU-Ala11-Cys'2-Thr'3-Gly,4-Cys15-Ser1 <>
241
Таблица VII
Пептиды ST и аналоги
Название
Положение
дисульфидных
связей
Структура
SEQ ID NO
Пептиды ST
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
Asn1- Sei^-Ser3-Asn4-Ser5-Ser6-Asn7-Tyr8-Cys^ Thr^-Gl^-Cys^-Tyr22
242
N161
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
n3r3-Asn'-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Thr6-^
243
N162
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
n3r3-Asn'-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Thrb-Cy^^^
244
N163
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
Asn'-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Thr6-Cys7-Cys^
245
N164
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
Asn1-Phe2-Cys3-Cys4-Glu5-Tyr6-Cys7-Cys8-Asny-Prolu-Ala11-Cys12-Thr13-Gly14-Cys15-Tyr16
246
N165
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
aVLsn1-Phe'-Cys"-Cys4-Glu5-Tyr6-Cys/-Cyse-Asny-ProIU-Ala11-Cys12-Thr13-Gly1^
247
N166
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
Asn'-Phe2-Cys"-Cys4-Glu5-Tyr^Cys/-Cys8-Asnv-Prolu-Alan-Cys12-Thr'"-Gly'4-Cys'5-dTyr1(>
248
N167
СЗ:С8, С4:С12, С7:15
dAsn'-Phe'-Cys'-Cys'-Glu'-Tyr^
249
1.3. Способы применения
Настоящим изобретением предоставляются способы лечения или
предупреждения нарушений желудочно-кишечного тракта и способы
увеличения сократительной способности желудочно-кишечного
тракта у субъекта, нуждающегося в этом, посредством введения
субъекту эффективного количества состава агониста GCC.
Неограничивающие примеры нарушений желудочно-кишечного тракта,
которые можно лечить или предупреждать в соответствии со
способами настоящего изобретения, включают синдром раздраженной
толстой кишки (IBS), неязвенную диспепсию, хроническую
псевдонепроходимость кишечника, функциональную диспепсию,
псевдонепроходимость ободочной кишки, дуоденогастральный
рефлюкс, желудочно-пищеводный рефлюкс (GERD), непроходимость
кишечника (например, послеоперационную непроходимость
кишечника), парез желудка, изжогу (высокую кислотность в желудочно-кишечном тракте), запор (например, запор, связанный с приемом лекарственных средств, таких как синтетические наркотические составы, лекарственные средства против остеоартрита или лекарственные средства против остеопораза); запор после хирургического вмешательства, запор, связанный с невропатическими нарушениями, болезнь Крона и неспецифический язвенный колит.
В одном варианте осуществления настоящим изобретением
обеспечиваются способы лечения или предупреждения нарушений
сократительной способности желудочно-кишечного тракта, синдрома
раздраженной толстой кишки, функционального нарушения
желудочно-кишечного тракта, желудочно-пищеводного рефлюкса,
дуоденогастрального рефлюкса, функциональной изжоги, диспепсии,
функциональной диспепсии, неязвенной диспепсии, пареза желудка,
хронической псевдонепроходимости кишечника,
псевдонепроходимости ободочной кишки, ожирения, застойной сердечной недостаточности или доброкачественной гиперплазии предстательной железы.
В одном варианте осуществления настоящим изобретением обеспечиваются способы лечения или предупреждения запора и/или увеличения сократительной способности желудочно-кишечного
тракта у субъекта, нуждающегося в этом, посредством введения субъекту эффективного количества состава агониста GCC. Клинически принятые критерии, которые определяют запор, простираются от частоты дефекаций, консистенции фекалий и легкости дефекации. Одним распространенным определением запора является менее трех дефекаций в неделю. Другие определения включают аномально твердый стул или дефекация, для которой требуется чрезмерное усилие (Schiller 2001 Aliment Pharmacol Ther 15: 749-763). Запор может быть идиопатическим
(функциональный запор или гипокинетический запор) или на фоне
других причин, включающих неврологические, метаболические или
эндокринные нарушения. Эти нарушения включают сахарный диабет,
гипотиреоз, гипертиреоз, гипокальциемию, рассеянный склероз,
болезнь Паркинсона, повреждения спинного мозга,
нейрофиброматоз, автономную невропатию, болезнь Чагаса, болезнь
Гиршпрунга и муковисцидоз. Запор может также быть результатом
хирургического вмешательства или из-за применения лекарственных
средств, таких как анальгетики (вроде синтетических
наркотических составов), антигипертензивные средства,
противосудорожные средства, антидепрессанты, антиспазматические средства и антипсихотические средства.
В различных вариантах осуществления запор связан с применением терапевтического средства; запор связан с невропатическим нарушением; запор является запором после хирургического вмешательства; запор связан с желудочно-кишечным нарушением; запор является идиопатическим (функциональный запор или гипокинетический запор); запор связан с невропатическим, метаболическим или эндокринным нарушением (например, сахарным диабетом, гипотиреозом, гипертиреозом, гипокальциемией, рассеянным склерозом, болезнью Паркинсона, повреждениями спинного мозга, нейрофиброматозом, автономной невропатией, болезнью Чагаса, болезнью Гиршпрунга или муковисцидозом). Запор может также быть результатом хирургического вмешательства или из-за применения лекарственных средств, таких как анальгетики
(например, синтетические наркотические составы),
антигипертензивные средства, противосудорожные средства,
антидепрессанты, антиспазматические средства и
антипсихотические средства.
В одном варианте осуществления настоящим изобретением обеспечиваются способы лечения или предупреждения хронического идиопатического запора и увеличения сократительной способности желудочно-кишечного тракта у субъекта, нуждающегося в этом, посредством введения субъекту эффективного количества состава агониста GCC.
Используемый здесь термин "лечение" относится к уменьшению, частичному улучшению, уменьшению интенсивности или ослаблению по меньшей мере одного клинического симптома, связанного с нарушениями желудочно-кишечного тракта, подвергаемыми лечению. Термин "предупреждение" относится к подавлению или отсрочке начала или прогрессирования по меньшей мере одного клинического симптома, связанного с нарушениями желудочно-кишечного тракта, которые предотвращают. Используемый здесь термин "эффективное количество" относится к количеству, которое обеспечивает некоторое улучшение или приносит пользу субъекту. В некоторых вариантах осуществления эффективным количеством является количество, которое обеспечивает некоторое облегчение, ослабление и/или уменьшение по меньшей мере одного клинического симптома нарушения желудочно-кишечного тракта, подвергаемого лечению. В других вариантах осуществления эффективным количеством является количество, которое обеспечивает некоторое подавление или отсрочку начала или прогрессирования по меньшей мере одного клинического симптома, связанного с нарушением желудочно-кишечного тракта, которое предотвращают. Не требуется, чтобы терапевтические эффекты были полными или целебными, при условии, что субъекту приносится некоторая польза. Термин "субъект" предпочтительно относится к человеку, но может также относиться к не являющемуся человеком примату или другому млекопитающему, предпочтительно выбираемому из числа мыши, крысы, собаки, кошки, коровы, лошади или свиньи.
Настоящим изобретением также обеспечиваются способы лечения рака желудочно-кишечного тракта у субъекта, нуждающегося в этом, посредством введения субъекту эффективного
количества состава агониста GCC. Неограничивающие примеры раков желудочно-кишечного, которые можно лечить в соответствии со способами настоящего изобретения, включают рак желудка, рак пищевода, рак поджелудочной железы колоректальный рак, рак кишечника, рак анального канала, рак печени, рак желчного пузыря или рак ободочной кишки.
Настоящим изобретением также обеспечиваются способы лечения нарушений липидного метаболизма, заболеваний желчевыводящих путей, воспалительных заболеваний, заболеваний легкого, рака, сердечных нарушений, в том числе сердечнососудистых нарушений, заболеваний глаз, заболеваний ротовой полости, заболеваний крови, заболеваний печени, заболеваний кожи, заболеваний предстательной железы, эндокринных нарушений и ожирения.
Нарушения липидного метаболизма включают, но без
ограничения, дислипидемию, гиперлипидемию, гиперхолестеринемию,
гипертриглицеридемию, ситостеролемию, наследственную
гиперхолестеринемию, ксантому, комбинированную гиперлипидемию, дефицит лецитин-холестерин-ацилтрансферазы, танжерскую болезнь, абеталипопротеинемию, эректильную дисфункцию, жировую дистрофию печени и гепатит.
Заболевания желчевыводящих путей включают заболевания желчного пузыря, такие как, например, желчные конкременты, рак желчного пузыря, холангит или первичный склерозирующий холангит; или заболевания желчных протоков, такие как, например, холецистит, рак желчных протоков или фасциолез.
Воспалительные заболеваний включают воспаление тканей и органов, такое как воспаление почки (например, нефрит), воспаление желудочно-кишечной системы (например, болезнь Крона и неспецифический язвенный колит); некротизирующий энтероколит (NEC); воспаление поджелудочной железы (например, пакреатит), воспаление легкого (например, бронхит или астму) или воспаление кожи (например, псориаз, экзему).
Заболевания легких включают, например, хроническое обструктивное заболевание легких (COPD) и фиброз.
Рак включает процесс образования злокачественной опухоли
ткани или органа, в том числе метастазы, такой как, например, желудочно-кишечный рак (например, рак желудка, рак пищевода, рак поджелудочной железы, колоректальный рак, рак кишечника, рак анального канала, рак печени, рак желчного пузыря или рак ободочной кишки); рак легкого; рак щитовидной железы; рак кожи (например, меланому); рак ротовой полости; рак мочевых путей (например, рак мочевого пузыря или рак мочки); рак крови (например, миелому или лейкоз) или рак предстательной железы.
Сердечные нарушения включают, например, застойную сердечную недостаточность, гипертонию с тахикардией, высокий уровень холестерина или высокий уровень триглицеридов. Сердечнососудистые нарушения включают, например, аневризму, стенокардию, атеросклероз, острое нарушение мозгового кровообращения (инсульт), нарушение мозгового кровообращения, застойную сердечную недостаточность, болезнь коронарных артерий, инфаркт миокарда (сердечный приступ) или болезнь периферических сосудов.
Заболевания печени включают, например, цирроз и фиброз. Кроме того, агонист GCC может также применяться для способствования регенерации печени у пациентов, подвергнутых трансплантации печени. Заболевания глаз включают, например, увеличенное внутриглазное давление, глаукому, сухость глаз, дегенеративные изменения сетчатки, нарушения слезных желез или воспаление глаза. Заболевания кожи включают, например, ксероз. Заболевания ротовой полости включают, например, сухость во рту (ксеростомию), синдром Гужеро-Шегрена, пародонтит (например, периодонтит) или закупоривание или нарушение функции протока слюнной железы. Заболевания предстательной железы включают, например, доброкачественную гиперплазию предстательной железы (ВРН) . Эндокринные нарушения включают, например, сахарный диабет, гипертиреоз, гипотиреоз и муковисцидоз. 1.3.1. Терапевтически эффективные дозы
Нарушения подвергают лечению, предупреждают или облегчают посредством введения субъекту, например, млекопитающему, такому как человек, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективной дозы пептида-агониста GCC. Настоящее изобретение основывается
частично на неожиданных результатах клинических испытаний на людях, которые показали, что составы настоящего изобретения терапевтически эффективны в намного более низких дозах, чем предсказывалось на основе исследований на животных. В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения терапевтически эффективная доза находится между 0,01 миллиграмм (мг) и 10 мг на стандартную дозу. Термин "стандартная доза" относится к одной структуре для доставки лекарственного средства, например, таблетке, капсуле, раствору или ингаляционному составу. В одном варианте осуществления эффективная доза находится между 0,01 и 9 мг. В другом варианте осуществления эффективная доза находится между 0,01 и 5 мг. В другом варианте осуществления эффективная доза находится между 0,01 и 3 мг. В другом варианте осуществления эффективная доза находится между 0,10 и 5 мг. В другом варианте осуществления эффективная доза находится между 0,10 и 3 мг. В одном варианте осуществления стандартная доза составляет 0,01, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0, 5 или 10 мг. В одном варианте осуществления стандартная доза составляет 0,3, 1,0, 3,0, 9,0 или 9, 5 мг .
Пептиды-агонисты GCC могут находиться в фармацевтической композиции в стандартной лекарственной форме, вместе с одним или более фармацевтически приемлемых наполнителей. Количество присутствующего пептида должно быть достаточным для вызова положительного терапевтического эффекта после введения пациенту. То, что является "положительным терапевтическим эффектом", будет зависеть от конкретного состояния, подвергаемого лечению, и будет включать любое значительное улучшение состояния, без труда распознаваемое квалифицированным в данной области техники специалистом.
Агонисты GCC для применения в способах, описанных выше, предпочтительно вводят перорально. Лекарственные формы включают растворы, суспензии, эмульсии, таблетки и капсулы.
Суммарная суточная доза может назначаться пациенту в однократном дозе, или во множестве субдоз. Типично субдозы могут назначаться два-шесть раз в день, предпочтительно два
четыре раза в день и даже более предпочтительно два-три раза в день. Предпочтительно назначается однократная суточная доза.
Агонисты GCC могут вводиться или в виде единственного активного агента, или в комбинации с одним или более дополнительных активных агентов. Во всех случаях дополнительные активные агенты должны вводиться в дозе, которая является терапевтически эффективной, используя существующий уровень техники в качестве руководства. Агонисты GCC могут вводиться в одной композиции или последовательно с одним или более дополнительных активных агентов. В одном варианте осуществления агонист GCC вводят в комбинации с одним или более ингибиторов cGMP-зависимой фосфодиэстеразы, таких как сульдинаксульфон, запринаст, мотапизон, варденафил или силденафил. В другом варианте осуществления агонист GCC вводят в комбинации с одним или более химиотерапевтических средств. В другом варианте осуществления агонист GCC вводят в комбинации с одним или более противовоспалительных средств, таких как стероиды или нестероидные противовоспалительные средства (NSAIDS), такие как аспирин.
Комбинированной терапии можно достичь посредством введения двух или более агентов, например, пептида-агониста GCC, описываемого здесь, и другого соединения, каждое из которых входит в композицию отдельного состава и вводится по отдельности, или посредством введения двух или более агентов в одном составе. Другие комбинации также охватываются комбинированной терапией. Например, два агента могут входить вместе в один состав и вводиться вместе с отдельным составом, содержащим третий агент. Хотя два или более агентов в комбинированной терапии могут вводиться, это не обязательно требуется для них. Например, введение первого агента (или комбинации агентов) может быть впереди введения введению второго агента (или комбинации агентов) на минуты, часы, дни или недели. Таким образом, два или более агентов могут вводиться с интервалом, составляющим минуты, друг от друга или с интервалом, составляющим 1, 2, 3, б, 9, 12, 15, 18 или 24 часа, друг от друга или с интервалом, составляющим 1, 2, 3, 4,
5, б, 7, 8, 9, 10, 12, 14 дней, друг от друга или с интервалом, составляющим 2, 3, 4, 5, б, 7, 8, 9 или 10 недель, друг от друга. В некоторых случаях возможны даже более длинные интервалы. Хотя во многих случаях желательным является присутствие двух или более агентов, используемых в комбинированной терапии, в организме пациента в одно и то же время, это может и не быть.
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут быть объединены с ингибиторами фосфодиэстеразы, например, сульдинаксульфоном, запринастом, силденафилом, варденафилом или тадалафилом, для дополнительного увеличения уровней cGMP в тканях- или органах-мишенях.
Комбинированная терапия может также включать два или более введений одного или более агентов, используемых в комбинации. Например, если агент X и агент Y используются в комбинации, они могли бы вводиться последовательно в любом комбинации один или более раз, например, в порядке X-Y-X, X-X-Y, Y-X-Y, Y-Y-X, Х-Х-Y-Y и т.д.
1.3.2. Приводимые в качестве примера агенты для комбинированной терапии
Составы агонистов GCC настоящего изобретения могут вводиться отдельно или в комбинации с одним или более дополнительных терапевтических средств в качестве части терапевтической схемы лечения или предупреждения заболевания или нарушения желудочно-кишечного тракта. В некоторых вариантах осуществления состав агониста GCC включает один или более дополнительных терапевтических средств. В других вариантах осуществления состав агониста GCC создают отдельно от одного или более дополнительных терапевтических средств. В соответствии с этим вариантом осуществления агонист GCC вводят или одновременно, последовательно, или в отличное от времени введения одного или более дополнительных терапевтических средств время. В одном варианте осуществления состав агониста GCC вводят в комбинации с одним или более дополнительных терапевтических средств, выбираемых из группы, состоящей из ингибиторов фосфодиэстеразы, циклических нуклеотидов (таких как
cGMP и cAMP), слабительного (такого как SENNA или METAMUCIL),
размягчителя стула, направленной против фактора некроза
опухолей-альфа терапии для IBD (такой как REMICADE, ENBREL или
HUMAIRA), и противовоспалительных средств (таких как ингибиторы
СОХ-2, сульфасалазин, производные 5-ASA и NSAIDS). В некоторых
вариантах осуществления состав агониста GCC вводят в комбинации
с эффективной дозой ингибитора cGMP-специфической
фосфодиэстеразы (cGMP-PDE) или одновременно, или
последовательно с указанным агонистом GCC. Ингибиторы cGMP-PDE включают, например, сульдинаксульфон, запринаст, мотапизон, варденафил и силденафил. В другом варианте осуществления, состав агониста GCC вводят в комбинации с ингибиторами транспортеров циклических нуклеотидов. Дополнительные примеры терапевтических средств, которые могут вводиться в комбинации с составами агонистов GCC настоящего изобретения, приведены в следующих разделах.
1.3.2.1. Агенты для лечения рака желудочно-кишечного тракта
Составы агонистов GCC, описываемые здесь, могут использоваться в комбинации с одним или более противоопухолевых средств, включающих, но без ограничения, алкилирующие агенты, эпиподофиллотоксины, нитромочевины, антиметаболиты, алкалоиды барвинка, антрациклиновые антибиотики, соединения на основе азотистого иприта и т.п. Конкретные противоопухолевые средства включают тамоксифен, таксол, этопозид и 5-фторурацил. В одном варианте осуществления составы агонистов GCC используются в комбинации с противовирусным средством или моноклинальным антителом.
Неограничивающие примеры противоопухолевых средств, которые могут использоваться в комбинации с составами агонистов GCC настоящего изобретения для лечения рака ободочной кишки, включают антипролиферативные средства, агенты для модификации или репарации ДНК, ингибиторы синтеза ДНК, регуляторы транскрипции ДНК/РНК, ингибиторы процессирования РНК, агенты, оказывающие влияние на экспрессию белков, их синтез и стабильность, агенты, оказывающие влияние на локализацию белков
или на их способность проявлять свое физиологическое действие, агенты, мешающие белок-белковым взаимодействиям или взаимодействиям белков с нуклеиновыми кислотами, агенты, которые действуют посредством РНК-интерференции, связывающиеся с рецепторами молекулы любой химической природы (в том числе небольшие молекулы и антитела), направленные токсины, активаторы ферментов, ингибиторы ферментов, регуляторы генов, ингибиторы HSP-90, молекулы, вносящие помехи в образование микротрубочек или функционирование других компонентов цитоскелета, или адгезию и подвижность клеток, агенты для фототерапии и вспомогательные средства для терапии.
Репрезентативные антипролиферативные средства включают N-
ацетил-Б-сфингозин (C 2 керамид), апигенин, берберина
хлорид, динатриевую соль дихлорметилендифосфокислоты, Алоэ-
эмодин, эмодин, НА 14-1, Ы-гексаноил-Б-сфингозин (C 6
керамид), 7Ь-гидроксихолестерол, 25-гидроксихолестерол,
гиперфорин, партенолид и рапамицин.
Репрезентативные агенты для модификации или репарации ДНК
включают афидиколин, блеомицина сульфат, карбоплатин,
кармустин, хлорамбуцил, циклофосфамида моногидрат,
циклофосфамида моногидрат ISOPAC.RTM., цис-
дихлордиаминплатину(II) (цисплатин), эскулетин, мелфалан, метоксиамина гидрохлорид, митомицин С, митоксантрона дигидрохлорид, оксалиплатин и стрептозоцин.
Репрезентативные ингибиторы синтеза ДНК включают (+-
)аметоптерин (метотрексат), З-амино-1,2,4-бензотриазина 1,4-
диоксид, аминоптерин, цитозин-р-Б-арабинофуранозид (Ага-С),
цитозин-р-Б-арабинофуранозида (Ara-С) гидрохлорид, 2-
фтораденин-р-Б-арабинофуранозид (флударабина фосфат; F-ara-A),
5-фтор-5'-дезоксиуридин, 5-фторурацил, ганцикловир,
гидроксимочевину, б-меркаптопурин и б-тиогуанин.
Репрезентативные регуляторы транскрипции ДНК/РНК включают
актиномицин D, даунорубицина гидрохлорид, 5, б-
дихлорбензимидазол-1-р-В-рибофуранозид, доксорубицина гидрохлорид, гомогаррингтонин и идарубицина гидрохлорид.
Репрезентативные активаторы и ингибиторы ферментов включают форсколин, DL-аминоглутетимид, апицидин, ингибитор Баумана-Бирка, бутеин, (S)-(+)-камптотецин, куркумин, (-)-дегуэлин, (-)-депудецин, доксициклин гиклат, этопозид, форместан, натриевую соль фостриецина, гиспидин, 2-имино-1-имидазолидинуксусную кислоту (циклокреатин), оксамфлатин, 4-фенилмасляную кислоту, росковитин, натрия вальпроат, трихостатин А, тирфостин AG 34, тирфостин AG 879, фрагмент ингибитора трипсина из мочи, вальпроевую кислоту (2-пропилпентановую кислоту) и ХК4 69.
Репрезентативные регуляторы генов включают 5-аза-2'-
дезоксицитидин, 5-азацитидин, холекальциферол (витамин D3),
циглитизон, ципротерона ацетат, 15-дезокси-Б <зир> 12,14-
простагландин J 2, эпитестостерон, флутамид, аммониевую
соль глицирризиновой кислоты (глицирризин), 4-
гидрокситамоксифен, мифепристон, прокаинамида гидрохлорид, ралоксифена гидрохлорид, полностью транс-ретиналь (альдегид витамина А), ретиноевую кислоту (витамин А в форме кислоты), 9-цис-ретиноевую кислоту, 13-цис-ретиноевую кислоту, ретиноевую кислоту п-гидроксианилид (витамин А) , тамоксифен, тамоксифена цитрат, тетрадецилтиоуксусную кислоту и троглитазон.
Репрезентативные ингибиторы HSP-90 включают 17-(аллиламино)-17-деметоксигелданамицин и гелданамицин.
Репрезентативные ингибиторы образования микротрубочек включают колхицины, доластатин 15, нокодазол, таксаны и, в частности, паклитаксел, подофиллотоксин, ризоксин, винбластина сульфат, винкристана сульфат, и виндесина сульфат и дитартрат винорелбина (навелбин).
Репрезентативные агенты для выполнения фототерапии
включают светочувствительные порфириновые кольца, гиперицин, 5-
метоксипсорален, 8-метоксипсорален, псорален и
урсодезоксихолевую кислоту.
Репрезентативные агенты, применимые в качестве вспомогательных средств для терапии, включают амифостин, 4-амино-1,8-нафталимид, брефелдин А, циметидин, динатриевую соль фосфомицина, ацетат лейпролида (лейпрорелина), ацетат
лютеинизирующий гормон-релизинг-гормонона (LH-RH), лектин, папаверина гидрохлорид, пифитрин-а, (-)-скополамина гидробромид и тапсигаргин.
Агентами также могут агенты против VEGF (фактора роста сосудистого эндотелия), как таковые известные в данной области техники. Несколько антител и небольших молекул, которые функционируют посредством ингибирования VEGF, такие как Авастин
(Бевацизумаб), SU5416, SU11248 и BAY 43-9006, находятся в настоящее время на стадии клинических испытаний или были одобрены. Агенты могут также быть направлены против рецепторов факторов роста, таких как рецепторы семейства EGF/Erb-B, такие как рецептор EGF (Иресса или Гефитиниб, и Тарцева или Эрлотиниб), рецептор Erb-B2 (Герцептин или Транстузумаб), других рецепторов (такие как Ритуксимаб или Ритуксан/МабТера), тирозиновых киназ, нерецепторных тирозиновых киназ, клеточных серии/треониновых киназ (в том числе МАР-киназы) и различных других белков, дерегулирование которых вносит вклад в онкогенез
(таких как малые G белки (семейство Ras) и большие/гетеротримерные G белки). Некоторые антитела и небольшие молекулы, мишенями которых являются эти молекулы, находятся в настоящее время на различных стадиях разработки (в том числе разрешены для лечения или в клинических испытаниях).
В предпочтительном варианте осуществления настоящим
изобретением предоставляется способ лечения рака ободочной
кишки у субъекта, нуждающегося в этом, посредством введения
субъекту состава агониста GCC в комбинации с одним или более
противоопухолевых средств, выбираемых из группы, состоящей из
паклитаксела, доцетаксела, тамоксифена, винорелбина,
гемцитабина, цисплатина, этопозида, топотекана, иринотекана,
анастрозола, ритуксимаба, трастузумаба, флударабина,
циклофосфамида, гентузумаба, карбоплатина, интерферонов и доксорубицина. В конкретном варианте осуществления противоопухолевым средством является паклитаксел. В дальнейшем варианте осуществления способ дополнительно включает противоопухолевое средство, выбираемое из группы, состоящей из 5-FU, доксорубицина, винорелбина, цитоксана и цисплатина.
1.3.2.2. Агенты для лечения болезни Крона
В одном варианте осуществления состав агониста GCC настоящего изобретения вводят в качестве части комбинированной терапии с одним или более дополнительных терапевтических средств для лечения болезни Крона. Неограничивающие примеры одного или более дополнительных терапевтических средств включают сульфасалазин и другие месаламин-содержащие лекарственные средства, общеизвестные как агенты 5-ASA, такие как Асакол, Дипентум или Пентаза, или инфликсимаб (REMICADE). В некоторых вариантах осуществления одним или более дополнительных средств является кортикостероид или иммунодепрессант, такой как б-меркаптопурин или азатиоприн. В другом варианте осуществления одним или более дополнительных средств является средство от поноса, такое как дифеноксилат, лоперамид или кодеин.
1.3.2.3. Агенты для лечения неспецифического язвенного колита
В одном варианте осуществления состав агониста GCC настоящего изобретения вводят в качестве части комбинированной терапии с одним или более дополнительных терапевтических средств для лечения неспецифического язвенного колита. Средства, которые используются для лечения неспецифического язвенного колита, перекрываются с теми, которые используются для лечения болезни Крона. Неограничивающие примеры одного или более дополнительных терапевтических средств, которые могут использоваться в комбинации с составом агониста GCC настоящего изобретения, включают аминосалицилаты (лекарственные средства, содержащие 5-аминосалициловую кислоту (5-ASA)), такие как сульфасалазин, олсалазин, месаламин и балсалазин. Другие терапевтические средства, которые могут использоваться, включают кортикостероиды, такие как преднизон и гидрокортизон, иммуномодуляторы, такие как азатиоприн, б-меркаптопурин (б-МР), цитокины, интерлейкины и лимфокины, и агенты против ФНО-альфа, в том числе тиазолидиндионы или глитазоны, такие как росиглитазон и пиоглитазон. В одном варианте осуществления одно или более дополнительных терапевтических средств включают и
циклоспорин А, и б-МР или азатиоприн для лечения активного, тяжелого неспецифического язвенного колита.
1.3.2.4. Агенты для лечения запора/синдрома раздраженной
толстой кишки
В одном варианте осуществления состав агониста GCC настоящего изобретения вводят в качестве части комбинированной терапии с одним или более дополнительных терапевтических средств для лечения запора, такого как запор, связанный с синдромом раздраженной толстой кишки. Неограничивающие примеры одного или более дополнительных терапевтических средств включают слабительные, такие как SENNA, MIRALAX, LACTULOSE, PEG или кальция поликарбофил, размягчители стула (такие как минеральное масло или COLACE), наполнители (такие как METAMUCIL или отруби), такие агенты, как ZELNORM (также называемый тегасеродом, и антихолинергические средства, такие как BENTYL и LEVSIN.
1.3.2.5. Агенты для лечения послеоперационной
непроходимости кишечника
В одном варианте осуществления состав агониста GCC настоящего изобретения вводят в качестве части комбинированной терапии с одним или более дополнительных терапевтических средств для лечения послеоперационной непроходимости кишечника. Неограничивающие примеры одного или более дополнительных терапевтических средств включают ENTEREG (алвимопан; раньше называемый adolor/ADL 8-2698), кониваптан и родственные агенты, описанные в патенте США № 6645959.
1.3.2.6. Средства против ожирения
В одном варианте осуществления состав агониста GCC
настоящего изобретения вводят в качестве части комбинированной
терапии с одним или более дополнительных терапевтических
средств для лечения ожирения. Неограничивающие примеры одного
или более дополнительных терапевтических средств включают
ингибиторы 11|3 HSD-I (11-бета-гидрокси-стероид-дегидрогеназы
типа 1), такие как BVT 3498, BVT 2733, 3-(1-адамантил)-4-этил-
5-(этилтио)-4Н-1,2,4-триазол, 3-(1-адамантил)-5-(3,4,5-
US5081122,
US6028084,
W098/31227,
W098/43636,
WO01/58869,
US5112820, US6509367, W098/33765, WO99/02499, WO01/64632,
US5624941, WO97/29079, W098/43635, WO01/09120, WO01/70700,
триметоксифенил)-4-метил-4Н-1, 2, 4-триазол, 3-адамантанил-4,5,6,7,8,9,10,11,12,За-декагидро-1,2,4-триазоло[4,3-а][11]аннулен, и соединения, описанные в WO01/90091, WO01/90090, WO01/90092 и WO02/072084; антагонисты 5НТ, такие как соединения, описанные в WO03/037 871, WO03/037 8 87, и т.п.; модуляторы 5НТ1а, такие как карбидопа, бенсеразин и соединения, описанные в патенте США 6207699, WO03/031439, и т.п.; агонисты 5НТ2с (рецептора 2с серотонина), такие как BVT933, DPCA37215, IK264, PNU 22394, WAY161503, R-1065, SB 243213 (Glaxo Smith Kline) и YM 348 и соединения, описанные в патенте США 3914250, WO00/77010, WO02/36596, WO02/48124, WO02/10169, WO01/66548, WO02/44152, WO02/51844, WO02/40456 и WO02/40457; модуляторы рецептора 5НТ6, такие как соединения, описанные в WO03/030901, WO03/035061, WO03/039547, и т.п.; ацил-эстрогены, такие как олеоилэстрон, описанный в del Mar-Grasa, М. et al, Obesity Research, 9: 202-9 (2001) и заявке на патент Японии № JP 2000256190; анорексигенные бициклические соединения, такие как 1426 (Aventis) и 1954 (Aventis), и соединения, описанные в WO00/18749, WO01/32638, WO01/62746, WO01/62747 и WO03/015769; антагонисты/обратные агонисты рецептора СВ 1 (каннабиноидов 1), такие как римонабант (Acomplia; Sanofi), SR-147778 (Sanofi), SR-141716 (Sanofi), BAY 65-2520 (Bayer) и SLV 319 (Solvay), и описанные в патентных публикациях US4973587, US5013837,
W096/33159, W098/41519, WO00/10968, WO01/64634,
US5292736, US5532237, US6509367, WO98/37061, WO00/10967, WO01/64633,
WO01/96330, WO02/076949, WO03/006007, WO03/007887, WO03/020217,
WO03/026647, WO03/026648, WO03/027069, WO03/027076,
WO03/027114, WO03/037332, WO03/040107, WO03/086940, WO03/084943 и ЕР658546; агонисты ССК-А (холецистокинина-А) , такие как AR-R 15849, GI 181771 (GSK), JMV-180, А-71378, А-71623 и SR146131 (Sanofi), и описанные в патенте США US5739106; CNTF (цилиарные нейротрофические факторы), такие как GI-181771 (Glaxo-SmithKline), SRI 46131 (Sanofi Synthelabo), бутабиндид, PD
170292 и PD 149164 (Pfizer); производные CNTF, такие как
Axokine(r) (Regeneron) и описанные в WO94/09134, W098/22128 и
W099/43813; ингибиторы дипептидилпептидазы IV (DP-IV), такие
как изолейцинтиазолидид, валинпирролидид, NVP-DPP72 8, LAF2 37,
Р93/01, Р 3298, TSL 225 (триптофил-1,2,3,4-
тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота, описанная Yamada et
al, Bioorg. & Med. Chem. Lett. 8 (1998) 1537-1540), TMC-
2A/2B/2C, ингибиторы CD26, FE 999011, P9310/K364, VIP 0177, SDZ
274-444, 2-цианопирролидиды и 4-цианопирролидиды, описанные
Ashworth et al, Bioorg. & Med. Chem. Lett., Vol. 6, No. 22, pp
1163-1166 и 2745-2748 (1996), и соединения описанные в
патентных публикациях WO99/38501, W099/46272, W099/67279
(Probiodrug), W099/67278 (Probiodrug), W099/61431 (Probiodrug),
WO02/083128, WO02/062764, WO03/000180, WO03/000181,
WO03/000250, WO03/002530, WO03/002531, WO03/002553,
WO03/002593, WO03/004498, WO03/004496, WO03/017936,
WO03/024942, WO03/024965, WO03/033524, WO03/037327 и ЕР1258476;
агонисты/антагонисты усиливающих секрецию гормона роста
рецепторов, такие как NN703, гексарелин, МК-0677 (Merck), SM-
130686, СР-424391 (Pfizer), LY 444711 (Eli Lilly), L-692429 и
L-163255, и, например, описанные в USSN 09/662448,
предварительной заявке на патент США 60/203335, патенте США
6358951, US2002049196, US2002/022637, WO01/56592 и WO02/32888;
антагонисты/обратные агонисты НЗ (гистамина НЗ), такие как
тиоперамид, 3-(1Н-имидазол-4-ил)пропил-N-(4-пентенил)карбамат),
клобенпропит, иодфенпропит, имопроксифан, GT2394 (Gliatech), и
А331440, О-[3-(1Н-имидазол-4-ил)пропанол]карбаматы (Kiec-
Kononowicz, К. et al. , Pharmazie, 55: 349-55 (2000)), пиперидин-содержащие антагонисты рецептора гистамина НЗ (Lazewska, D. et al., Pharmazie, 56: 927-32 (2001), производные бензофенона и родственные соединения (Sasse, A. et al., Arch. Pharm. (Weinheim) 334: 45-52 (2001)), замещенные N-фенилкарбаматы (Reidemeister, S. et al., Pharmazie, 55: 83-6 (2000)), и производные проксифана (Sasse, A. et al., J. Med. Chem.. 43: 3335-43 (2000)) и модуляторы рецептора гистамина НЗ,
такие как описанные в WO02/15905, WO03/024928 и WO03/024929; производные лептина, такие как описанные в US5552524, US5552523, US5552522, US5521283, W096/23513, W096/23514, W096/23515, W096/23516, W096/23517, W096/23518, W096/23519 и WO96/23520; лептин, в том числе рекомбинантный лептин человека (PEG-OB, Hoffman La Roche) и рекомбинантный метиониллептин человеческий (Amgen); ингибиторы липазы, такие как тетрагидролипстатин (Orlistat/Xenical(r)), тритон WR1339, RHC8 02 67, липстатин, чайный сапонин, диэтилумбеллиферилфосфат, FL-386, WAY-121898, Bay-N-3176, валилактон, эстерацин, эбелактон А, эбелактон В, и RHC8 02 67, и описанные в патентных публикациях WO01/77094, US4598089, US4452813, USUS5512565, US5391571, US5602151, US4405644, US4189438 и US4242453; модуляторы липидного метаболизма, такие как маслиновая кислота, эритродиол, урсоловая кислота, уваол, бетулиновая кислота, бетулин и т.п., и соединения, описанные в WO03/011267; агонисты Мс4г (рецептора меланокортина 4), такие как CHIR86036 (Chiron), МЕ-10142, МЕ-10145 и HS-131 (Melacure), и описанные в публикациях РСТ-заявок № WO99/64002, WO00/74679, WO01/991752, WO01/25192, WO01/52880, WO01/74844, WO01/70708, WO01/70337, WO01/91752, WO02/059095, WO02/059107, WO02/059108, WO02/059117, WO02/06276, WO02/12166, WO02/11715, WO02/12178, WO02/15909, WO02/38544, WO02/068387, WO02/068388, WO02/067869, WO02/081430, WO03/06604, WO03/007949, WO03/009847, WO03/009850, WO03/013509 и WO03/031410; модуляторы Мс5г (рецептора меланокортина 5), такие как описанные в W097/19952, WO00/15826, WO00/15790, US20030092041; антагонисты рецептора меланинконцентрирующего гормона 1 (MCHR), такие как Т-226296 (Takeda), SB 568849, SNP-7941 (Synaptic) и описанные в патентных публикациях WO01/21169, WO01/82925, WO01/87834, WO02/051809, WO02/06245, WO02/076929, WO02/076947, WO02/04433, WO02/51809, WO02/083134, WO02/094799, WO03/004027, WO03/13574, WO03/15769, WO03/028641, WO03/035624, WO03/033476, WO03/033480, JP13226269 и JP1437059; модуляторы mGluR5, такие как описанные в WO03/029210, WO03/047581, WO03/048137, WO03/051315, WO03/051833, WO03/053922, WO03/059904 и т.п.; серотонинергические средства, такие как фенфлурамин
(такой как Pondimin(r)) (Бензолэтанамин, N-этил-альфа-метил-З-
(трифторметил)-, гидрохлорид), Robbins), дексфенфлурамин (такой
как Redux(r)) (Бензолэтанамин, N-этил-альфа-метил-З-
(трифторметил)-, гидрохлорид), Interneuron) и сибутрамин ((Meridia(r), Knoll/Reductil(tm)) , в том числе рацемические смеси, как например оптически чистые изомеры (+) и (-), и его фармацевтически приемлемые соли, сольваты, гидраты, клатраты и пролекарства, в том числе его соль - сибутрамина гидрохлорида моногидрат, и соединения, описанные в US4746680, US4806570 и US5436272, US20020006964, WO01/27068 и WO01/62341; ингибиторы транспорта NE (норэпинефрина), такие как GW 320659, деспирамин, талсупрам и номифенсин; антагонисты NPY 1, такие как BIBP322 6, J-115814, BIBO 3304, LY-357897, СР-671906, GI-264879A и описанные в US6001836, WO96/14307, WO01/23387, WO99/51600, WO01/85690, WO01/85098, WO01/85173 и WO01/89528; антагонисты NPY5 (нейропептида Y5) , такие как 152804, GW-569180A, GW-594884А, GW-587081X, GW-548118X, FR235208, FR226928, FR240662, FR252384, 1229U91, GI-264879A, CGP71683A, LY-377897, LY-366377, PD-160170, SR-120562A, SR-120819A, JCF-104 и Н409/22, и соединения, описанные в патентных публикациях US6140354, US6191160, US6218408, US6258837, US6313298, US6326375, US6329395, US6335345, US6337332, US6329395, US6340683, ЕР01010691, ЕР-01044970, W097/19682, WO97/20820, WO97/20821, WO97/20822, WO97/20823, WO98/27063, WO00/107409, WO00/185714, WO00/185730, WO00/64880, WO00/68197, WO00/69849, WO/0113917, WO01/09120, WO01/14376, WO01/85714, WO01/85730, WO01/07409, WO01/02379, WO01/23388, WO01/23389, WOO1/44201, WO01/62737, WO01/62738, WO01/09120, WO02/20488, WO02/22592, WO02/48152, WO02/49648, WO02/051806, WO02/094789, WO03/009845, WO03/014083, WO03/022849, WO03/028726 и Norman et al, J. Med. Chem. 43: 4288-4312 (2000); антагонисты опиоидных рецепторов, такие как налмефен (REVEX(r)) , 3-метоксиналтрексон, метилналтрексон, налоксон и налтрексон (например, РТ901; Pain Therapeutics, Inc.) и описанные в US20050004155 и WO00/21509; антагонисты орексина, такие как SB-334867-A и соединения, описанные в
патентных публикациях WO01/96302, WOO1/68609, WO02/44172, WO02/51232, WO02/51838, WO02/089800, WO02/090355, WO03/023561, WO03/032991 и WO03/037847; ингибиторы PDE (например, соединения, которые замедляют деградацию циклического AMP (сАМР) и/или циклического GMP (cGMP) в результате ингибирования фосфодиэстераз, которое приводит к относительному увеличению внутриклеточной концентрации сАМР и cGMP; возможными ингибиторами PDE в основном являются те вещества, которые должны быть причислены к классу, состоящему из ингибиторов PDE3, классу, состоящему из ингибиторов PDE4, и/или классу, состоящему из ингибиторов PDE5, в частности, те вещества, которые можно назвать смешанными типами ингибиторов PDE3/4 или
смешанными
типами ингибиторов PDE3/4/5)
, такие как
описанные
патентных
публикациях
DE1470341,
DE2108438,
DE2123328
DE2305339,
DE2305575,
DE2315801,
DE2402908,
DE2413935
DE2451417,
DE2459090,
DE2646469,
DE2727481,
DE2825048
DE2837161,
DE2845220,
DE2847621,
DE2934747,
DE3021792
DE3038166,
DE3044568,
ЕР000718,
ЕР0008408,
ЕР0010759
ЕР0059948,
ЕР0075436,
ЕР0096517,
ЕР0112987,
ЕР0116948
ЕР0150937,
ЕР0158380,
ЕР0161632,
ЕР0161918,
ЕР0167121
ЕР0199127,
ЕР0220044,
ЕР0247725,
ЕР0258191,
ЕР0272910
ЕР0272914,
ЕР0294647,
ЕР0300726,
ЕР0335386,
ЕР0357788
ЕР0389282,
ЕР0406958,
ЕР0426180,
ЕР0428302,
ЕР0435811
ЕР0470805,
ЕР0482208,
ЕР0490823,
ЕР0506194,
ЕР0511865
ЕР0527117,
ЕР0626939,
ЕР0664289,
ЕР0671389,
ЕР0685474
ЕР0685475,
ЕР0685479,
JP92234389, JP94329652,
JP95010875
US4963561,
US5141931,
W09117991,
WO9200968,
W09212961
WO9307146,
W09315044,
WO9315045,
WO9318024,
WO9319068
WO9319720,
W09319747,
W09319749,
W09319751,
W09325517
WO9402465,
WO9406423,
W09412461,
WO9420455,
W09422852
W09425437,
W09427947,
WO9500516,
WO9501980,
WO9503794
WO9504045,
WO9504046,
WO9505386,
WO9508534,
WO9509623
WO9509624,
WO9509627,
WO9509836,
W09514667,
WO9514680
W09514681,
W09517392,
W09517399,
W09519362,
WO9522520
W09524381,
W09527692,
W09528926,
W09535281,
W09535282
WO9600218,
WO9601825,
WO9602541,
W09611917,
DE3142982
DE1116676, DE2162096, ЕР0293063, ЕР0463756, ЕР0482208, ЕР0579496, ЕР0667345 US6331543, US20050004222 (в том числе те, которые представлены в формулах I-XIII и параграфах 37-39, 850545 и 557-577), WO9307124, ЕР0163965, ЕР0393500, ЕР0510562, ЕР0553174, WO9501338 и WO9603399, а также ингибиторы PDE5
(такие как RX-RA-69, SCH-51866, КТ-734, веснаринон, запринаст,
SKF-96231, ER-21355, BF/GP-385, NM-702 и силденафил (Viagra(tm)),
ингибиторы PDE4 (такие как этазолат, ICI63197, RP73401,
имазолидинон (RO-20-1724), MEM 1414 (R1533/R1500; Pharmacia
Roche), денбуфиллин, ролипрам, оксагрелат, нитраквазон, Y-590,
DH-6471, SKF-94120, мотапизон, ликсазинон, индолидан, олпринон,
атизорам, KS-506-G, дипамфиллин, BMY-43351, атизорам,
арофиллин, филаминаст, PDB-093, UCB-29646, CDP-840, SKF-107806,
пикламиласт, RS-17597, RS-25344-000, SB-207499, TIBENELAST, SB-
210667, SB-211572, SB-211600, SB-212066, SB-212179, GW-3600,
CDP-840, мопидамол, анагрелид, ибудиласт, амринон, пимобендан,
цилостазол, квазинон и N-(3,5-дихлорпирид-4-ил)-3-
циклопропилметокси-4-дифторметоксибензамид, ингибиторы PDE3
(такие как ICI153, 100, беморандан (RWJ 22867), MCI-154, UD-CG 212, сульмазол, ампизон, цилостамид, карбазеран, пироксимон, имазодан, CI-930, сигуазодан, адибендан, сатеринон, SKF-95654, SDZ-MKS-492, 349-U-85, эморадан, EMD-53998, EMD-57033, NSP-306, NSP-307, ревизинон, NM-702, WIN-62582 и WIN-63291, эноксимон и милринон, ингибиторы PDE3/4 (такие как бенафентрин, треквинсин, ORG-30029, зардаверин, L-686398, SDZ-ISQ-844, ORG-20241, EMD-54 622, и толафентрин) и другие ингибиторы PDE (такие как винпоцетин, параверин, энпрофиллин, циломиласт, феноксимон,
пентоксифиллин, рофлумиласт, тадалафил (Cialis(r)) , теофиллин и варденафил (Levitra(r)) ) ; агонисты нейропептида Y2 (NPY2) включают, но без ограничения, полипептид YY и его фрагменты и варианты (например, YY3-36 (PYY3-36) (N. Engl. J. Med. 349: 941, 2003; IKPEAPGE DASPEELNRY YASLRHYLNL VTRQRY (SEQ ID NO: XXX)) и агонисты PYY, такие как описанные в WO02/47712, WO03/026591, WO03/057235 и WO03/027637; ингибиторы обратного захвата серотонина, такие как пароксетин, флуоксетин (Prozac(tm)) ,
флувоксамин, сертралин, циталопрам и имипрамин, и описанные в US6162805, US6365633, WO03/00663, WO01/27060 и WO01/162341; бета-агонисты гормонов щитовидной железы, такие как КВ-2 611
(KaroBioBMS) и описанные в WO02/15845, W097/21993, WO99/00353, GB98/284425, предварительной заявке на патент США № 60/183223 и заявке на патент Японии № JP 2000256190; активаторы UCP-1
(разобщающего белка-1), 2 или 3, такие как фитановая кислота, 4-[(Е)-2-(5,6,7,8-тетрагидро-5,5,8,8-тетраметил-2-нафталинил)-1-пропенил]бензойная кислота (TTNPB), ретиноевая кислота и описанные в WO99/00123; рз-агонисты (агонисты бета-адренергического рецептора 3), такие как AJ9677/TAK677
(Dainippon/Takeda), L750355 (Merck), СР331648 (Pfizer), CL-316243, SB 418790, BRL-37344, L-796568, BMS- 196085, BRL-35135A, CGP12177A, BTA-243, GW 427353, Трекадрин, Зенека D7114, N-5984 (Nisshin Kyorin), LY-377604 (Lilly), SR 59119A и описанные в US5541204, US5770615, US5491134, US5776983, US488064, US5705515, US5451677, W094/18161, W095/29159, W097/46556, WO98/04526 и W098/32753, WO01/74782, WO02/32897, WO03/014113, WO03/016276, WO03/016307, WO03/024948, WO03/024953 и WO03/037881; норадренергические составы, включающие, но без ограничения, диэтилпропион (такой как Tenuate(r) (1-пропанон, 2-
(диэтиламино)-1-фенил-, гидрохлорид), Merrell),
декстроамфетамин (также известный как декстроамфетамин сульфат, дексамфетамин, декседрин, Дексампекс, Ферндекс, Оксидесс II, Робез, Спансап #1), мазиндол ((или 5-(пара-хлорфенил)-2,5-
дигидро-ЗН-имидазо[2,1-а]изоиндол-5-ол), такой как Sanorex(r),
Novartis или Mazanor(r), Wyeth Ayerst), фенилпропаноламин (или
Бензолметанол, альфа-(1-аминоэтил)-, гидрохлорид), фентермин
((или фенол, 3-[[4,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил)этил](4-
метилфенил)амино], моногидрохлорид), такой как Adipex-P(r), Lemmon, FASTIN(r), Smith-Kline Beecham и Ionamin(r), Medeva), фендиметразин ((или (2S,3S)-3,4-диметил-2-фенилморфолин-Ь-(+)-тартрат (1:1)), такой как Metra(r) (Forest), Plegine(r) (Wyeth-Ayerst), Prelu-2(r) (Boehringer Ingelheim) и Statobex(r) (Lemmon),
фендамина тартрат (такой как Thephorin(r) (2,3,4,9-тетрагидро-2-метил-9-фенил-1Н-инденол[2,1-е]пиридин-L-(+)-тартрат (1:1)), Hoffmann-LaRoche), метамфетамин (такой как Desoxyn(r), Abbot
((S)-N, (альфа)-диметилбензолэтанамина гидрохлорид)) и
фендиметразина тартрат (такой как капсулы с медленным высвобождением Bontril(r), Амарин (-3,4-диметил-2-фенилморфолина тартрат); усилители/индукторы окисления жирных кислот, такие как Famoxin(r) (Genset); ингибиторы моноаминоксидазы, включающие, но без ограничения, бефлоксатон, моклобемид, брофаромин, феноксатин, эсупрон, бефол, толоксатон, пирлиндол, амифламин, серклоремин, базинаприн, лазабемид, милацемид, кароксазон и некоторые другие соединения, описанные в WO01/1217б; и другие средства от ожирения, такие как агонисты 5НТ-2, ингибиторы АСС
(ацетил-КоА-карбоксилазы), такие как описанные в WO03/072197, альфа-липоевая кислота (альфа-LA), AOD9604, подавители аппетита, такие как описанные в WO03/40107, ATL-962 (Alizyme PLC) , бензокаин, бензфетамина гидрохлорид (Дидрекс), ламинария
(фокус пузырчатый), агонисты BRS3 (рецептора бомбезина подтипа
3), бупропион, кофеин, агонисты ССК, хитозан, хром, линолевая
кислота с сопряженными двойными связями, агонисты
кортикотропин-релизинг-гормона, дегидроэпиандростерон,
ингибиторы DGAT1 (диацилглицерин-ацилтрансферазы 1), ингибиторы
DGAT2 (диацилглицерин-ацилтрансферазы 2), ингибиторы
транспортера дикарбоксилата, эфедра, эксендин-4 (ингибитор glp-
1), ингибиторы FAS (синтазы жирных кислот) (такие как Церуленин
и С75), ингибиторы всасывания и утилизации жира (такие как
описанные в WO03/053451, и т.п.), ингибиторы транспортера
жирных кислот, природные водорастворимые волокна (такие как
псиллиум, подорожник, гуар, овес, пектин), антагонисты
галанина, козлятник аптечный (козлятник лекарственный, French
Lilac), гарциния камбоджийская, дубровник (Teucrium
chamaedrys), антитела против грелина и антагонисты грелина
(такие как описанные в WO01/87335 и WO02/08250), полипептиды-гормоны и их варианты, которые оказывают воздействие на секрецию инсулоцитами, такие как гормоны семейства генов
секретина/желудочного ингибиторного полипептида
(GIP)/вызоактивного кишечного полипептида (VIP)/гипофизарного
активирующего аденилатциклазу полипептида
(РАСАР)/глюкагоноподобного полипептида II (GLP-
II)/глицентина/глюкагона и/или гормоны семейства генов
адреномедуллина/амилина/родственного гену кальцитонина
полипептида (CGRP), в том числе агонисты GLP-1
(глюкагоноподобного полипептида 1) (например, (1) эксендин-4,
(2) те молекулы GLP-I, которые описаны в US20050130891, в том
числе GLP-l(7-34), GLP-1(7-35), GLP-1(7-36) или GLP-1 (7-37) в
его карбоксилированной или амидированной на С-конце форме или в
виде модифицированных полипептидов GLP-1, и используются его
модификации, включающие те, которые описаны в параграфах 17-44
US20050130891, и производные, происходящие из GLP-1-(7-34)СООН
и соответствующего амида кислоты, которые имеют следующую общую
формулу: R-NH-HAEGTFTSDVSYLEGQAAKEFIAWLVK-CONH2, где R
представляет собой Н или органическое соединение, имеющее от 1 до 10 атомов углерода. Предпочтительно R представляет собой остаток карбоновой кислоты. Особенно предпочтительными являются следующие остатки карбоновых кислот: формил, ацетил, пропионил, изопропионил, метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил) и glp-1 (глюкагоноподобный полипептид-1), антагонисты глюкокортикоидов, ингибиторы транспортера глюкозы, стимуляторы секреции гормонов роста (такие как те, которые раскрыты и в особенности описаны в US5536716), интерлейкин-б
(IL-6) и его модуляторы (например, описанные в WO03/057237, и т.п.), L-карнитин, агонисты МсЗг (рецептора меланокортина 3), агонисты/антагонисты MCH2R (рецептора меланинконцентрирующего гормона 2), антагонисты меланинконцентрирующего гормона, агонисты меланокортина (такие как Меланотан II или описанные в WO99/64002 и WO00/74679), трава Cassia nomame, ингибиторы транспортера фосфата, растительное лекарственное соединение 57
(CP 644673), пируват, ингибиторы SCD-I (стеароил-КоА-десатуразы-1), Т71 (Tularik, Inc., Boulder СО), Топирамат
(Topimax(r), прописываемый как противосудорожное средство,
которое, как было показано, увеличивает потерю веса), модуляторы факторов транскрипции (такие как описанные в WO03/02657б) , ингибиторы р-гидроксистероид-дегидрогеназы-1 (|3-HSD-I), р-гидрокси-р-метилбутират, р57 (Pfizer), Зонисамид (Zonegran(tm), прописываемый как антиэпилептическое средство, которое, как было показано, приводит к потере веса) и агенты, которые описаны в US20030119428, параграфах 20-26. 1.3.2.7. Ингибиторы фосфодиэстеразы
В некоторых вариантах осуществления схема комбинированной терапии включает введение одного или более ингибиторов фосфодиэстеразы ("PDE"). Ингибиторы PDE замедляют деградацию циклического AMP (сАМР) и/или циклического GMP (cGMP) в результате ингибирования фосфодиэстераз, которое приводит к относительному увеличению внутриклеточной концентрации сАМР и/или cGMP. Неограничивающие примеры ингибиторов PDE, которые могут использоваться в комбинации с агонистами GCC настоящего изобретения, включают ингибиторы PDE3, ингибиторы PDE4 и/или ингибиторы PDE5, в частности, те вещества, которые можно назвать смешанными типами ингибиторов PDE3/4 или смешанными типами ингибиторов PDE3/4/5. Неограничивающие примеры таких
ингибиторов
PDE описаны
в следующих
заявках на
патенты и
патентах:
DE1470341,
DE2108438,
DE2123328,
DE2305339,
DE2305575,
DE2315801,
DE2402908,
DE2413935,
DE2451417,
DE2459090,
DE2646469,
DE2727481,
DE2825048,
DE2837161,
DE2845220,
DE2847621,
DE2934747,
DE3021792,
DE3038166,
DE3044568,
ЕР000718,
ЕР0008408,
ЕР0010759,
ЕР0059948,
ЕР0075436,
ЕР0096517,
ЕР0112987,
ЕР0116948,
ЕР0150937,
ЕР0158380,
ЕР0161632,
ЕР0161918,
ЕР0167121,
ЕР0199127,
ЕР0220044,
ЕР0247725,
ЕР0258191,
ЕР0272910,
ЕР0272914,
ЕР0294647,
ЕР0300726,
ЕР0335386,
ЕР0357788,
ЕР0389282,
ЕР0406958,
ЕР0426180,
ЕР0428302,
ЕР0435811,
ЕР0470805,
ЕР0482208,
ЕР0490823,
ЕР0506194,
ЕР0511865,
ЕР0527117,
ЕР0626939,
ЕР0664289,
ЕР0671389,
ЕР0685474,
ЕР0685475,
ЕР0685479, JP92234389, JP94329652, JP95010875, патентах США № 4963561, 5141931, W09117991, WO9200968, W09212961, WO9307146,
WO9315044,
WO9315045,
WO9318024,
WO9319068,
WO9319720,
W09319747,
W09319749,
W09319751,
W09325517,
WO9402465,
WO9406423,
W09412461,
WO9420455,
W09422852,
W09425437,
W09427947,
WO9500516,
WO9501980,
WO9503794,
WO9504045,
WO9504046,
WO9505386,
WO9508534,
WO9509623,
WO9509624,
WO9509627,
WO9509836,
W09514667,
WO9514680,
W09514681,
W09517392,
W09517399,
W09519362,
WO9522520,
W09524381,
W09527692,
W09528926,
W09535281,
W09535282,
WO9600218,
WO9601825,
WO9602541,
W09611917,
DE3142982,
DEI 116676,
DE2162096,
ЕР0293063,
ЕР0463756,
ЕР0482208,
EP0579496,
EP0667345, патенте США 6331543, US20050004222 (в том числе те,
которые представлены в формулах I-XIII и параграфах 37-39, 85-
0545 и 557-577) и WO9307124, ЕР0163965, ЕР0393500, ЕР0510562,
ЕР0553174, WO9501338 и WO9603399. Ингибиторами PDE5, которые
можно упомянуть в качестве примера, являются RX-RA-69, SCH-
51866, КТ-734, веснаринон, запринаст, SKF-96231, ER-21355,
BF/GP-385, NM-702 и силденафил (Viagra(r)) . Ингибиторами PDE4,
которые можно упомянуть в качестве примера, являются RO-2 0-
1724, MEM 1414 (R1533/R1500; Pharmacia Roche), денбуфиллин,
ролипрам, оксагрелат, нитраквазон, Y-590, DH-6471, SKF-94120,
мотапизон, ликсазинон, индолидан, олпринон, атизорам, KS-50 6-G,
дипамфиллин, BMY-43351, атизорам, арофиллин, филаминаст, PDB-
093, UCB-29646, CDP-840, SKF-107806, пикламиласт, RS-17597, RS-
25344-000, SB-207499, тибенеласт, SB-210667, SB-211572, SB-
211600, SB-212066, SB-212179, GW-3600, CDP-840, мопидамол,
анагрелид, ибудиласт, амринон, пимобендан, цилостазол, квазинон
и N-(3,5-дихлорпирид-4-ил)-З-циклопропилметокси-4-
дифторметоксибензамид. Ингибиторами PDE3, которые можно упомянуть в качестве примера, являются сульмазол, ампизон, цилостамид, карбазеран, пироксимон, имазодан, CI-930, сигуазодан, адибендан, сатеринон, SKF-95654, SDZ-MKS-492, 349-U-85, эморадан, EMD-53998, EMD-57033, NSP-306, NSP-307, ревизинон, NM-702, WIN-62582 и WIN-63291, эноксимон и милринон. Ингибиторами PDE3/4, которые можно упомянуть в качестве примера, являются бенафентрин, треквинсин, ORG-30029,
зардаверин, L-686398, SDZ-ISQ-844, ORG-20241, EMD-54622 и толафентрин. Другие ингибиторы PDE включают циломиласт, пентоксифиллин, рофлумиласт, тадалафил (Cialis(r)), теофиллин и варденафил (Levitra(r)) , запринаст (РОЕ5-специфический) . 1.3.2.8. Анальгетики
В некоторых вариантах осуществления схема комбинированной терапии включает введение одного или более анальгетиков, например, болеутоляющего соединения или болеутоляющего полипептида. В некоторых вариантах осуществления состав агониста GCC вводят одновременно или последовательно с одним или более анальгетиков. В других вариантах осуществления агонист GCC ковалентно связывают с анальгетиком и присоединяют к нему для создания терапевтического конъюгата. Неограничивающие примеры анальгетиков, которые могут использоваться, включают блокаторы кальциевых каналов, антагонисты рецепторов 5НТ (например, антагонисты рецепторов 5НТЗ, 5НТ4 и 5НТ1), агонисты опиоидных рецепторов (лоперамид, федотозин и фентанил), антагонисты NKl-рецепторов, агонисты рецепторов ССК (например, локсиглумид), антагонисты NKl-рецепторов, антагонисты ЫКЗ-рецепторов, ингибиторы обратного захвата норэпинефрина-серотонина (NSRI), агониста ванилоидных и каннабаноидных рецепторов и сиалорфин. Дополнительные примеры анальгетиков различных классов известны в данной области техники.
В одном варианте осуществления анальгетиком является болеутоляющий полипептид, выбираемый из группы, состоящей из родственных сиалорфину полипептидов, включая те, которые включают аминокислотную последовательность QHNPR (SEQ ID NO: 239), включая: VQHNPR (SEQ ID NO: 240); VRQHNPR (SEQ ID NO: 241); VRGQHNPR (SEQ ID NO: 242); VRGPQHNPR (SEQ ID NO: 243); VRGPRQHNPR (SEQ ID NO: 244); VRGPRRQHNPR (SEQ ID NO: 245) и RQHNPR (SEQ ID NO: 24 6) . Родственные сиалорфину полипептиды связываются с неприлизином и ингибируют неприлизин-опосредованную деградацию вещества Р и Met-энкефалина. Таким образом, соединения или полипептиды, которые являются
ингибиторами неприлизина, являются применимыми анальгетиками, которые можно вводить с агонистами GCC, описываемыми здесь, или ковалентно соединить с агонистом GCC для образования терапевтического конъюгата. Сиалорфин и родственные полипептиды описаны в патенте США № 6589750; U.S. 20030078200 Al и WO 02/051435 А2.
В другом варианте осуществления состав агониста GCC настоящего изобретения вводят в качестве части комбинированной терапии с антагонистом или агонистом опиоидных рецепторов. В одном варианте осуществления агонист GCC и антагонист или агонист опиоидных рецепторов связаны ковалентной связью. Неограничивающие примеры антагонистов опиоидных рецепторов включают налоксон, налтрексон, метилналозон, налмефен, ципридим, бета-фунилтрексамин, налоксоназин, налтриндол, норбиналторфимин, энкефалин-пентапептид (НОЕ825; Tyr-D-Lys-Gly-Phe-L-гомосерин) , тримебутин, вазоактивный кишечный полипептид, гастрин, глюкагоны. Неограничивающие примеры агонистов опиоидных рецепторов включают федотозин, азимадолин и кетоциклазоцин, соединения, описанные в WO03/097051 и WO05/007626, морфин, дифенилоксилат, фракефамид (H-Tyr-D-Ala-Phe(F)-Phe-NH2; WO 01/019849 Al) и лоперамид.
Дополнительные неограничивающие примеры анальгетиков, которые могут использоваться в схеме комбинированной терапии вместе с составами агонистов GCC настоящего изобретения, включают дипептид Tyr-Arg (киоторфин); происходящий из хромогранина полипептид (СдА 47-66; Смотрите, например, Ghia et al. 2004 Regulatory polypeptides 119: 199); агонисты рецепторов CCK, такие как каерулеин; конотоксины-полипептиды; пептидные аналоги тимулина (заявка на патент Франции 2830451); антагонисты рецепторов ССК (ССКа или ССКЬ), включая локсиглумид и декслоксиглумид (R-изомер локсиглумида) (WO 88/05774); агонисты 5-НТ4, такие как тегасерод (Zelnorm(r)), мосаприд, метоклопрамид, закоприд, цизаприд, рензаприд, производные бензимидазолона, такие как BIMU 1 и BIMU 8, и лирексаприд; блокаторы кальциевых каналов, такие как циконотид и родственные
соединения, описанные, например, в ЕР625162В1, патентах США № 5364842, 5587454, 5824645, 5859186, 5994305, 6087091, 6136786, WO 93/13128 А1, ЕР 1336409 А1, ЕР 835126 А1, ЕР 835126 В1, патентах США № 5795864, 5891849, 6054429, WO 97/01351 А1; антагонисты NK-I-рецепторов, такие как апрепитант (Merck & Со Inc) , вофопитант, эзлопитант (Pfizer, Inc.), R-673 (Hoffmann-La Roche Ltd), SR-48968 (Sanofi Synthelabo), CP-122721 (Pfizer, Inc.), GW679769 (Glaxo Smith Kline), TAK-637 (Takeda/Abbot), SR-14 033 и родственные соединения, описанные, например, в ЕР 873753 Al, US 20010006972 Al, US 20030109417 Al, WO 01/52844 Al (для обзора смотрите Giardina et al. 2003. Drugs 6: 758); антагонисты NK-2-рецепторов, такие как непадутант (Menarini Ricerche SpA), саредутант (Sanofv-Synthelabo), GW597599 (Glaxo Smith Kline), SR-144190 (Sanofi-Synthelabo) и UK-290795 (Pfizer Inc); антагонисты ЫКЗ-рецепторов, такие как озанетант (SR-142801; Sanofi-Synthelabo), SSR-241586, талнетант и родственные соединения, описанные, например, в WO 02/094187 А2, ЕР 876347 Al, WO 97/21680 А1, патенте США № 6277862, WO 98/11090, WO 95/28418, W0 97/19927 и Boden et al. (J Med Chem. 39: 1664-75, 1996) ; ингибиторы обратного захвата норэпинефрина-серотонина (NSRI), такие как милнаципран и родственные соединения, описанные в WO 03/077897; и антагонисты ванилоидных рецепторов, такие как арванил и родственные соединения, описанные в WO 01/64212 А1.
Помимо родственных сиалорфину полипептидов, болеутоляющие полипептиды включают AspPhe, эндоморфин-1, эндоморфин-2, ноцистатин, даларгин, лупрон, циконотид и вещество Р.
1.3.2.9. Инсулин и модулирующие эффект/уровень инсулина средства
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут использоваться в комбинированной терапии с инсулином и родственными соединениями, включая инсулин примата, грызуна или кролика, включая его биологически активные варианты, включая аллельные варианты, более предпочтительно инсулин человека, доступный в рекомбинантной форме. Источники инсулина человека включают фармацевтически приемлемые и стерильные составы, такие
как те, которые доступны от Eli Lilly (Indianapolis, Ind. 46285) как Humulin(tm) (инсулин человека с происхождением с рекомбинантной ДНК) . Смотрите THE PHYSICIAN'S DESK REFERENCE, 55.sup.th Ed. (2001) Medical Economics, Thomson Healthcare (описывающую другие подходящие инсулины человека).
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут также использоваться в комбинированной терапии с агентами, которые могут повысить эффекты или уровни инсулина у субъекта после введения, например, глипизидом и/или росиглитазоном. Полипептиды и агонисты, описываемые здесь, могут использоваться в комбинированной терапии с SYMLIN(r) (прамлинтида ацетатом) и Exenatide(r) (синтетическим эксендином-4; 3 9-амиокислотным полипептидом).
1.3.2.10. Антигипертензивные средства
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут также использоваться в комбинированной терапии с антигипертензивным средством, включающим, но без ограничения: (1) диуретики, такие как тиазиды, включая хлорталидон, хлортиазид, дихлорфенамид, гидрофлуметиазид, индапамид, политиазид и гидрохлортиазид; петлевые диуретики, такие как буметанид, этакриновая кислота, фуросемид и торасемид; калийсберегающие средства, такие как амилорид и триамтерен; ингибиторы карбоангидраты, осмотические диуретики (такие как глицерин) и антагонисты альдостерона, такие как спиронолактон, эпиренон и т.п.; (2) блокаторы бета-адренергических рецепторов, такие как ацебутолол, атенолол, бетаксолол, бевантолол, бисопролол, бопиндолол, картеолол, карведилол, целипролол, эсмолол, инденолол, метапролол, надолол, небиволол, пенбутолол, пиндолол, пропанолол, соталол, тертатолол, тилисолол, тимолол, и т.п.; (3) блокаторы кальциевых каналов, такие как амлодипин, аранидипин, азелнидипин, барнидипин, бенидипин, бепридил, циналдипин, клевидипин, дилтиазем, эфонидипин, фелодипин, галлопамил, исрадипин, лацидипин, лемилдипин, лерканидипин, никардипин, нифедипин, нилвадипин, номодепин, нисолдипин, нитрендипин, манидипин, пранидипин, верапамил и т.п.; (4) ингибиторы
ангиотензинпревращающего фермента (АСЕ), такие как беназеприл; каптоприл; церанаприл; цилазаприл; делаприл; эналаприл; эналоприл; фозиноприл; имидаприл; лизиноприл; лозиноприл; моэксиприл; хинаприл; хинаприлат; рамиприл; периндоприл; периндроприл; кваниприл; спираприл; тенокаприл; трандолаприл, зофеноприл и т.п.; (5) ингибиторы нейтральной эндопептидазы, такие как омапатрилат, кадоксатрил и экадотрил, фосидотрил, сампатрилат, AVE7688, ER4030 и т.п.; (б) антагонисты эндотелина, такие как тезосентан, А308165, YM62899 и т.п.; (7) вазодилататоры, такие как гидралазин, клонидин, миноксидил, никотиниловый спирт и т.п.; (8) антагонисты рецептора ангиотензина II, такие как апросартан, кандесартан, эпросартан, ирбесартан, лосартан, олмесартан, пратосартан, тазосартан, телмисартан, валсартан, и ЕХР-3137, FI6828K, RNH6270 и т.п.;
(9) блокаторы а/р адренергических рецепторов, такие как нипрадилол, аротинолол, амосулалол и т.п.; (10) альфа 1-блокаторы, такие как теразозин, урапидил, празозин, тамсулозин, буназозин, тримазозин, доксазозин, нафтопидил, индорамин, WHIP 164, XEN010 и т.п.; (11) альфа 2-агонисты, такие как лофексидин, тиаменидин, моксонидин, рилменидин, гуанобенз и т.п.; и (12) ингибиторы альдостерона и т.п., и (13) связывающиеся с ангиопоэтином-2 агенты, такие как описанные в WO03/030833. Конкретные антигипертензивные средства, которые могут использоваться в комбинации с полипептидами и агонистами, описываемыми здесь, включают, но без ограничения диуретики, такие как тиазиды (например, хлорталидон, циклотиазид (CAS RN 2259-96-3), хлортиазид (CAS RN 72956-09-3, который может быть приготовлен как описано в US2809194), дихлорфенамид, гидрофлуметиазид, индапамид, политиазид, бендрофлуметазид, метиклотазид, политиазид, трихлорметазид, хлорталидон, индапамид, метолазон, хинетазон, алтиазид (CAS RN 5588-16-9, который может быть приготовлен как описано в патенте Великобритании № 902658), бензтиазид (CAS RN 91-33-8, который может быть приготовлен как описано в US3108097), бутиазид
(который может быть приготовлен как описано в патенте
Великобритании № 861367), и гидрохлортиазид), петлевые диуретики (например, буметанид, этакриновая кислота, фуросемид и торасемид), калийсберегающие средства (например, амилорид и триамтерен (CAS № 396-01-0)), и антагонисты альдостерона
(например, спиронолактон (CAS № 52-01-7), эпиренон и т.п.); блокаторы |3-адренергических рецепторов, такие как Амиодарон
(Кордарон, Расегопе), бутанала гидрохлорид (CAS RN 31969-05-8, Parke-Davis), ацебутолол (+N-[З-ацетил-4-[2-гидрокси-З-[(1-
метилэтил)амино]пропокси]фенил]-бутанамид, или (±)-3'-ацетил-4'-[2-гидрокси-З-(изопропиламино)пропокси]бутиранилид), ацебутолола гидрохлорид (например Sectral(r), Wyeth-Ayerst), альпренола гидрохлорид (CAS RN 13707-88-5, смотрите заявку на патент Нидерландов № 6605692), атенолол (например, Tenormin(r), AstraZeneca), картеолола гидрохлорид (например, Cartrol(r) Filmtab(r)) , Abbott), целипролола гидрохлорид (CAS RN 57470-78-7, смотрите также в US4034009), цетамолола гидрохлорид (CAS RN 77590-95-5, смотрите также US4059622), лабетанола гидрохлорид (например, Normodyne(r), Schering), эсмолола гидрохлорид (например, Brevibloc(r), Baxter), левобетаксолола гидрохлорид (например, офтальмологическая суспензия Betaxon(tm), Alcon), левобунолола гидрохлорид (например, Betagan(r) Liquifilm(r) с С
CAP(r) Compliance Cap, Allergan), надолол (например, Nadolol,
Mylan), практолол (CAS RN 6673-35-4, смотрите также US3408387),
пропранолола гидрохлорид (CAS RN 318-98-9), соталола
гидрохлорид (например, Betapace AF(tm), Berlex), тимолол (2-
пропанол, 1- [ (1,1-диметилэтил)амино]-3-[[4-4(4-морфолинил)-
1,2,5-тиадиазол-З-ил]окси]-, гемигидрат, (S)-, CAS RN 91524-16-
2), тимолола малеат (S)-1-[(1,1-диметилэтил)амино]-3-[[4-(4-
морфолинил)-1,2,5-тиадиазол-З-ил]окси]-2-пропанол-(Z)-2-
бутендиоат (1:1) (соль), CAS RN 26921-17-5), бисопролол (2-
пропанол, 1- [4 - [ [2 - (1-метилэтокси)этокси]-метил]феноксил] -3-
[(1-метилэтил)амино]-, ( + ) , CAS RN 66722-44-9), бисопролола
фумарат (такой как (±)-1-[4-[[2-(1-
метилэтокси)этокси]метил]фенокси]-3-[(1-метилэтил)амино]-2
пропанол (Е)-2-бутендиоат (2:1) (соль), например, Zebeta(tm), Lederle Consumer), небивалол (2Н-1-бензопиран-2-метанол, а,а'-
[иминобис(метилен)]бис[б-фтор-3,4-дигидро-, CAS RN 99200-09-6
смотрите также патент США № 4654362), циклопролола гидрохлорид,
такой как 2-пропанол, 1-[4-[2-
(циклопропилметокси)этокси]фенокси]-3-[1-метилэтил)амино]-,
гидрохлорид, A.A.S. RN 63686-79-3), декспропранолола
гидрохлорид (2-пропанол, 1-[1-метилэтил)-амино]-3-(1-
нафталинокси)-гидрохлорид (CAS RN 13071-11-9), диацетолола
гидрохлорид (ацетамид, N-[З-ацетил-4-[2-гидрокси-З-[(1-
метилэтил)амино]пропокси][фенил]-, моногидрохлорид CAS RN 69796-04-9), дилевалола гидрохлорид (бензамид, 2-гидрокси-5-[1-гидрокси-2-[1-метил-З-фенилпропил)амино]этил]-,
моногидрохлорид, CAS RN 75659-08-4), эксапролола гидрохлорид
(2-пропанол, 1-(2-циклогексилфенокси)-3-[(1-метилэтил)амино]-,
гидрохлорид CAS RN 59333-90-3), флестолола сульфат (бензойная
кислота, 2-фтор-, 3-[[2-[аминокарбонил)амино]-
диметилэтил]амино]-2-гидроксипропиловый эфир, (+)-сульфат (1:1)
(соль), CAS RN 88844-73-9; металола гидрохлорид
(метансульфонамид, N- [4- [ 1-гидрокси-2-
(метиламино)пропил]фенил]-, моногидрохлорид CAS RN 7701-65-7),
метопролол (2-пропанол, 1-[4-(2-метоксиэтил)фенокси]-3-[1-
метилэтил)амино]-; CAS RN 37350-58-6), метопролола тартрат
(такой как 2-пропанол, 1-[4-(2-метоксиэтил)фенокси]-3-[(1-
метилэтил)амино]-, например, Lopressor(r), Novartis), паматолола
сульфат (карбамовая кислота, [2-[4-[2-гидрокси-З-[(1-
метилэтил)амино]пропоксил]фенил]-этил]-, метиловый эфир, (±)
сульфат (соль) (2:1), CAS RN 59954-01-7), пенбутолола сульфат
(2-пропанол, 1-(2-циклопентилфенокси)-3-[1, 1-
диметилэтил)амино]-, (S)-, сульфат (2:1) (соль), CAS RN 38363-
32-5), практолол (ацетамид, N-[4-[2-гидрокси-З-[(1-
метилэтил)амино]-пропокси]фенил]-, CAS RN 6673-35-4;)
типренолола гидрохлорид (пропанол, 1-[(1-метилэтил)амино]-3-[2-
(метилтио)-фенокси]-, гидрохлорид, (+-), CAS RN 39832-43-4),
толамолол (бензамид, 4-[2-[[2-гидрокси-З-(2-метилфенокси)-
пропил]амино]этоксил]-, CAS RN 38103-61-6), бопиндолол,
инденолол, пиндолол, пропанолол, тертатолол, тилизолол и т.п.;
блокаторы кальциевых каналов, такие как безилат амлодипина
(такой как 3-этил-5-метил-2-(2-аминоэтоксиметил)-4-(2-
хлорфенил)-1,4-дигидро-б-метил-3,5-пиридиндикарбоксилат бензолсульфонат, например, Norvasc(r), Pfizer), клентиазема малеат (1,5-бензотиазепин-4(5Н)-он, 3-(ацетилокси)-8-хлор-5-[2-(диметиламино)этил]-2,З-дигидро-2-(4-метоксифенил)-(2Б-цис)-, (Z)-2-бутендиоат (1:1), смотрите также US4567195), исрадипин (3,5-пиридиндикарбоновая кислота, 4-(4-бензофуразанил)-1, 4-дигидро-2,б-диметил-, метил-1-метилэтиловый эфир, (±)-4(4-бензофуразанил)-1,4-дигидро-2,б-диметил-3,5-
пиридиндикарбоксилат, смотрите также US4466972); нимодипин
(такой как изопропил(2-метоксиэтил)1,4-дигидро-2,б-диметил-4-
(3-нитрофенил)-3,5-пиридиндикарбоксилат, например, Nimotop(r),
Bayer), фелодипин (такой как этилметил-4-(2,3-дихлорфенил)-1, 4-
дигидро-2,б-диметил-3,5-пиридиндикарбоксилат, например,
Plendil(r) с длительным высвобождением, AstraZeneca LP),
нилвадипин (3, 5-пиридиндикарбоновая кислота, 2-циано-1,4-
дигидро-б-метил-4-(3-нитрофенил)-, З-метил-5-(1-метилэтиловый)
эфир, также смотрите US3799934), нифедипин (такой как 3,5-
пиридиндикарбоновая кислота, 1,4-дигидро-2,б-диметил-4-(2-
нитрофенил)-, диметиловый эфир, например, таблетки с длительным
высвобождением Procardia XL(r), Pfizer), дилтиазема гидрохлорид
(такой как 1, 5-бензотиазепин-4(5Н)-он, 3-(ацетилокси)-5[2-
(диметиламино)этил]-2,З-дигидро-2(4-метоксифенил)-,
моногидрохлорид, (+)-цис, например, Tiazac(r), Forest),
верапамила гидрохлорид (такой как бензолацетонитрил, (альфа)-
[[3-[[2-(3,4-диметоксифенил)этил]метиламино]пропил]-3,4-
диметокси-(альфа)-(1-метилэтил) гидрохлорид, например, Isoptin(r)
SR, Knoll Labs), телудипина гидрохлорид (3,5-
пиридиндикарбоновая кислота, 2-[ (диметиламино)метил]4-[2-[ (1Е)-
3-(1,1-диметилэтокси-3-оксо-1-пропенил]фенил]-1,4-дигидро-6-
метил-, диэтиловый эфир, моногидрохлорид) CAS RN 108700-03-4),
белфосдил (фосфокислота, [2-(2-феноксиэтил)-1,3-пропан-
диил]бис-, тетрабутиловый эфир CAS RN 103486-79-9), фостедил
(фосфокислота, [[4-(2-бензотиазолил)фенил]метил]-, диэтиловый
эфир CAS RN 75889-62-2), аранидипин, азелнидипин, барнидипин,
бенидипин, бепридил, циналдипин, клевидипин, эфонидипин,
галлопамил, лацидипин, лемилдипин, лерканидипин, монатепила
малеат (1-пиперазинбутанамид, N-(6,11-
дигидродибензо(Ь,е)тиепин-11-ил)4-(4-фторфенил)-, (+)-, (Z)-2-бутендиоат (1:1) (±) -N- ( б,11-дигидродибензо(Ь,е)тиепин-11-ил) -4-(п-фторфенил)-1-пиперазинбутирамид малеат (1:1) CAS RN 132 04 6-0 6-1), никардипин, нисолдипин, нитрендипин, манидипин, пранидипин и т.п.; антагонисты кальциевых каналов Т-типа, такие как мибефрадил; ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (АСЕ), такие как беназеприл, беназеприла гидрохлорид (такой как 3-[[1-(этоксикарбонил)-3-фенил-(1S)-пропил]амино]-2,3,4,5-тетрагидро-2-оксо-1Н-1-(3S)-бензазепин-1-усксусной кислоты
моногидрохлорид, например, Lotrel(r), Novartis), каптоприл (такой как 1-[(2S)-З-меркапто-2-метилпропионил]-L-пролин, например, Каптоприл, Mylan, CAS RN 62571-86-2 и другие, описанные в US4046889), церанаприл (и другие, описанные в US4452790), цетаприл (алацеприл, Dainippon, описанный в Eur. Therap. Res. 39: 671 (1986); 40: 543 (1986)), цилазаприл (Hoffman-LaRoche), описанный в J. Cardiovasc. Pharmacol. 9: 39 (1987), индалаприл
(делаприла гидрохлорид (2Н-1,2,4-бензотиадиазин-7-сульфонамид, 3-бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил-б-хлор-3,4-дигидро-, 1,1-диоксид CAS RN 2259-96-3), описанный в US4385051), эналаприл (и другие, описанные в патенте США № 4374829), эналоприл, эналоприлат, фозиноприл ((такой как L-пролин, 4-циклогексил-1-[[[2-метил-1-
(1-оксопропокси)пропокси](4-фенилбутил)фосфинил]ацетил]-, натриевая соль, например, Моноприл, Bristol-Myers Squibb и другие, описанные в патенте США № US4168267), натрий-фозиноприл
(L-пролин, 4-циклогексил-1-[[(R)-[(1S)-2-метил-1-(1-
оксопропокси)пропокс), имидаприл, индолаприл (Schering, описанный в J. Cardiovasc. Pharmacol. 5: 643, 655 (1983)), лизиноприл (Merck), лозиноприл, моэксиприл, моэксиприла гидрохлорид (3-изохинолинкарбоновая кислота, 2-[ (2S)-2-[ [ (1S)
1-(этоксикарбонил)-3-фенилпропил]амино]-1-оксопропил]-1-2, 3, 4-тетрагидро-б,7-диметокси-, моногидрохлорид, (3S)- CAS RN 8258652-5), хинаприл, хинаприлат, рамиприл (Hoechsst), описанный в ЕР 79022 и Curr. Ther. Res. 40: 74 (1986), периндоприла эрбумин
(такой как 2S,3aS,7aS-1- [ (S)-N-[(S)-1-
карбоксибутил)аланил)гексагидро]-индолинкарбоновая кислота, 1-этиловый эфир, соединение с трет-бутиламином (1:1), например, Aceon(r), Solvay), периндоприл (Servier, описанный в Eur. J. clin. Pharmacol. 31: 519 (1987)), кваниприл (описанный в патенте США № 4344949), спираприл (Schering, описанный в Acta. Pharmacol. Toxicol. 59 (Supp. 5): 173 (1986)), тенокаприл; трандолаприл, зофеноприл и другие, описанные в патенте США № 4316906), рентиаприл (фентиаприл, описанный в Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 10: 131 (1983)), пивоприл, YS980, тепротид
(потенцирующее брадикинин вещество ВРР9а CAS RN 35115-60-7),
BRL 36378 (Smith Kline Beecham, смотрите ЕР80822 и ЕР60668),
МС-838 (Chugai, смотрите СА. 102:72588v и Jap. J. Pharmacol.
40: 373 (1986), CGS 14824 (Ciba-Geigy, 3- ([1-этоксикарбонил-З-
фенил-(IS)-пропил]амино)-2,3,4,5-тетрагидро-2-оксол-2-(3S)-
бензазепин-1-уксусной кислоты НС1, смотрите патент
Великобритании № 2103614), CGS 16617 (Ciba-Geigy, 3(S)-[[(1S)-5-амино-1-карбоксипентил]амино]-2,3,4-5-тетрагидро-2-оксо-1Н-1-бензазепин-1-уксусная кислота, смотрите патент США №4473575), Ru 44570 (Hoechst, смотрите Arzneimittelforschung 34: 1254
(1985)), R 31-2201 (Hoffman-LaRoche смотрите FEBS Lett. 165:2 01 (1984)), CI925 (Pharmacologist 26: 243, 266 (1984)), WY-44221 (Wyeth, смотрите J. Med. Chem. 26:394 (1983)), и описанные в US2003006922 (параграфе 28), US4337201, US4432971
(фосфонамидаты); ингибиторы нейтральной эндопептидазы, такие как омапатрилат (Vanlev(r)) , CGS 30440, кадоксатрил и экадотрил, фосидотрил (также известный как аладотрил или алатриоприл), сампатрилат, миксанприл и гемопатрилат, AVE7688, ER4030 и описанные в US5362727, US5366973, US5225401, US4722810, US5223516, US4749688, US5552397, US5504080, US5612359, US5525723, ЕР0599444, ЕР0481522, ЕР0599444, ЕР0595610,
ЕР0534363, ЕР534396, ЕР534492, ЕР0629627; антагонисты эндотелина, такие как тезосентан, А308165, YM62899 и т.п.; вазодилататоры, такие как гидралазин (апрезолин), клонидин
(клонидина гидрохлорид (1Н-имидазол-2-амин, N-(2,6-
дихлорфенил)4,5-дигидро-, моногидрохлорид CAS RN 4205-91-8),
катапрез, миноксидил (лонитен), никотиниловый спирт (рониакол),
дилтеазема гидрохлорид (такой как 1, 5-бензотиазепин-4(5Н)-он,
3-(ацетилокси)-5[2-(диметиламино)этил]-2,З-дигидро-2(4-
метоксифенил)-, моногидрохлорид, ( + )-цис, например, Tiazac(r)) ,
Forest), изосорбида динитрат (такой как 1, 4:3,б-диангидро-D-
глюцитол-2,5-динитрат, например, Isordil(r) Titradose((r), Wyeth-
Ayerst), сосорбида мононитрат (такой как 1,4:3,б-диангидро-D-
глюцито-1,5-нитрат, органический нитрат, например, Ismo(r),
Wyeth-Ayerst), нитроглицерин (такой как 2,3-
пропантриолтринитрат, например, Nitrostat(r) Parke-Davis), верапамила гидрохлорид (такой как бензолацетонитрил, (±) -
(альфа) [3-[[2-(3,4 диметоксифенил)этил]метиламино]пропил]-3,4-диметокси-(альфа)-(1-метилэтил)гидрохлорид, например, Covera HS(r) с длительным высвобождением, Searle), хромонар (который может быть приготовлен как описано в US3282938), клонитат
(Annalen 1870 155), дропрениламин (который может быть приготовлен как описано в DE2521113), лидофлазин (который может быть приготовлен как описано в патенте США 3267104); прениламин
(который может быть приготовлен как описано в патенте США № 3152173), пропатилнитрат (который может быть приготовлен как описано в патенте Франции № 1103113), миофлазина гидрохлорид
(1-пиперазинацетамид, 3-(аминокарбонил)4-[4,4-бис(4-
фторфенил)бутил]-N-(2,б-дихлорфенил)-, дигидрохлорид CAS RN
83898-67-3), миксидин (бензолэтанамин, 3,4-диметокси-Ы-(1-
метил-2-пирролидинилиден)-пирролидин, 2- [ (3,4-
диметоксифенэтил)имино]-1-метил-1-метил-2-[(3,4-
диметоксифенетил)имино]пирролидин CAS RN 27737-38-8),
молсидомин (1,2,3-оксадиазолий, 5-[ (этоксикарбонил)амино]-3-(4-морфолинил)-, инертная соль CAS RN 25717-80-0), изосорбита мононитрат (D-Глюцитол, 1,4:3,б-диангидро-, 5-нитрат CAS RN
16051-77-7), эритритилтетранитрат (1,2,3,4-бутантетрол,
тетранитрат, (2R,3S)-rel-CAS RN 7297-25-8), клонитрат (1,2-
пропандиол, 3-хлор-, динитрат (7CI, 8CI, 9CI) CAS RN 2612-33-
1), дипиридамол (этанол, 2,2',2",2"'- [ (4,8-ди-1-
пиперидинилпиримидо[5,4-d]пиримидин-2,6-
диил)динитрило]тетракис- CAS RN 58-32-2), никорандил (CAS RN
65141-46-03-), пиридинкарбоксамид (N-[2-(нитроокси)этил]-
нисолдипин (3,5-пиридиндикарбоновая кислота, 1,4-дигидро-2,6-
диметил-4-(2-нитрофенил)-, метил-2-метилпропиловый эфир CAS RN
63675-72-9), нифедипин (3,5-пиридиндикарбоновая кислота, 1,4-
дигидро-2,б-диметил-4-(2-нитрофенил)-, диметиловый эфир CAS RN
21829-25-4), пергексилина малеат (пиперидин, 2-(2,2-
дициклогексилэтил)-, (2Z)-2-бутендиоат (1:1) CAS RN 6724-53-4),
окспренолола гидрохлорид (2-пропанол, 1-[(1 метилэтил)амино]-3-
[2-(2-пропенилокси)фенокси]-, гидрохлорид CAS RN 6452-73-9),
пентринитрол (1,3-пропандиол, 2,2-бис[(нитроокси)метил]-,
мононитрат (сложный эфир) CAS RN 1607-17-6), верапамил
(бензолацетонитрил, а- [3- [ [2-(3,4-диметоксифенил)этил]-
метиламино]пропил]-3,4-диметокси-а-(1-метилэтил)- CAS RN 52-539) и т.п.; антагонисты рецептора ангиотензина II, такие как апросартан, золасартан, олмесартан, пратосартан, FI6828K, RNH6270, кандесартан (1Н-бензимидазол-7-карбоновая кислота, 2-этоксиу-1-[[2'-(1Н-тетразол-5-ил1)[1,1'-бифенил]4-ил]метил]-CAS RN 139481-59-7), кандесартан цилексетил ((+/-)-1-
(циклогексилкарбонилокси)этил-2-этокси-1-[[2'-(1Н-тетразол-5-
ил)бифенил-4-ил]-1Н-бензимидазолкарбоксилат, CAS RN 145040-37-
5, US5703110 и US5196444), эпросартан (3-[1-4-
карбоксифенилметил)-2-н-бутилимидазол-5-ил]-(2-
тиенилметил)пропеновая кислота, US5185351 и US5650650),
ирбесартан (2-н-бутил-3-[[2'-(1Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-
ил]метил]1,3-диазоспиро[4,4]нон-1-ен-4-он, US5270317 и
US5352788), лосартан (2-Ы-бутил-4-хлор-5-гидроксиметил-1-[(2'-(1Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил)-метил]имидазол, калиевая соль, US5138069, US5153197 и US5128355), тасосартан (5,8-дигидро-2,4-диметил-8-[(2'-(1Н-тетразол-5-ил)[1,г-бифенил]4-ил)метил]
пиридо[2,З-d]пиримидин-7(6Н)-он, US5149699), телмисартан (4'-
[ (1,4-диметил-2'-пропил-(2,6'-би-1Н-бензимидазол)-г-ил) ] - [ 1, 1' -
бифенил]-2-карбоновая кислота, С AS RN 144701-48-4, US5591762),
милфасартан, абитесартан, валсартан (Diovan(r) (Novartis), (S)-N-
валерил-N-[[2'-(1Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил)метил]валин,
US5399578), ЕХР-3137 (2-Ы-бутил-4-хлор-1-[(2'-(1Н-тетразол-5-
ил)бифенил-4-ил)-метил]имидазол-5-карбоновая кислота,
US5138069, US5153197 и US5128355), 3-(2'-(тетразол-5-ил)-1,г-
бифен-4-ил)метил-5,7-диметил-2-этил-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин,
4'[2-этил-4-метил-б-(5,6,7,8-тетрагидроимидазол[1,2-а]пиридин-
2-ил]-бензимидазол-1-ил]-метил]-1,1'-бифенил]-2-карбоновая
кислота, 2-бутил-б-(1-метокси-1-метилэтил)-2-[2'-)1Н-тнтразол-
5-ил)бифенил-4-илметил]хиназолин-4(ЗН)-он, 3- [ 2 ' -
карбоксибифенил-4-ил)метил]-2-циклопропил-7-метил-ЗН-
имидазо[4,5-Ь]пиридин, 2-бутил-4-хлор-1-[(2'-тетразол-5-
ил)бифенил-4-ил)метил]имидазол-карбоновая кислота, 2-бутил-4-
хлор-1-[[2'-(1Н-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил]-1Н-
имидазол-5-карбоновая кислота-1-(этоксикарбонилокси)этилового
эфира калиевая соль, дикалия 2-бутил-4-(метилтио)-1-[[2-
[[[(пропиламино)карбонил]амино]-сульфонил](1,1'-бифенил)-4-
ил] метил]-1Н-имидазол-5-карбоксилат, метил-2-[[4-бутил-2-
метил-б-оксо-5-[[2'-(1Н-тетразол-5-ил)-[1,1'-бифенил]-4-
ил]метил]-1-(6Н)-пиримидинил]метил]-3-тиофенкарбоксилат, 5-
[(3,5-дибутил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)метил]-2-[2-(1Н-тетразол-5-
илфенил)]пиридин, б-бутил-2-(2-фенилэтил)-5[[2'-(1Н-тетразол-5-
ил)[1,1'-бифенил]-4-метил]пиримидин-4-(ЗН)-он Б,Ъ-лизин (соль),
5-метил-7-н-пропил-8-[[2'-(1Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-
ил]метил]-[1,2,4]-триазоло[1,5-с]пиримидин-2(ЗН)-он, 2,7-
диэтил-5-[[2'-(5-тетразолил)бифенил-4-ил]метил]-5Н-
пиразоло[1,5-Ь][1,2,4]триазола калиевая соль, 2-[2-бутил-4,5-
дигидро-4-оксо-З-[2'-(1Н-тетразол-5-ил)-4-бифенилметил]-ЗН-
имидазол[4,5-с]пиридин-5-илметил]бензойная кислота, этиловый
эфир, калиевая соль, З-метокси-2,б-диметил-4-[[2'(1Н-тетразол-
5-ил)-1,1'-бифенил-4-ил]метокси]пиридин, 2-этокси-1-[[2'-(5-
оксо-2,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-З-ил)бифенил-4-ил]метил]-1Н
бензимидазол-7-карбоновая кислота, 1-[N-(2'-(1Н-тетразол-5
ил)бифенил-4-ил-метил)-N-валероиламинометил)циклопентан-1-
карбоновая кислота, 7-метил-2н-пропил-3-[[2'(1Н-тетразол-5
ил)бифенил-4-ил]метил]-ЗН-имидазо[4,5-6]пиридин, 2- [5- [ (2
этил-5,7-диметил-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-3-ил)метил-2-хинолинил]натрий бензоат, 2-бутил-б-хлор-4-гидроксиметил-5 метил-3-[[2'-(1Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил]пиридин, 2
[[[2-бутил-1-[(4-карбоксифенил)метил]-1Н-имидазол-5-
ил]метил1]амино]бензойная кислота тетразол-5-ил)бифенил-4
ил]метил]пиримидин-б-он, 4(S)-[4-(карбоксиметил)фенокси]-N-
[2(R)-[4-(2-сульфобензамидо)имидазол-1-ил]октаноил]-L-пролин,
1-(2,б-диметилфенил)-4-бутил-1,З-дигидро-3-[[б-[2-(1Н-тетразол-
5-ил)фенил]-3-пиридинил]метил]-2Н-имидазол-2-он, 5,8-этано-5, 8
диметил-2-н-пропил-5,б,7,8-тетрагидро-1-[[2'(1Н-тетразол-5-
ил)бифенил-4-ил]метил]-1Н,4Н-1,3,4а,8а-тетрациклопентанфтален-
9-он, 4-[1-[2'-(1,2,3,4-тетразол-5-ил)бифен-4-ил)метиламино]
5,6,7,8-тетрагидро-2-трифилхиназолин, 2- (2-хлорбензоил)имино-5
этил-3-[2'-(1Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил)метил-1,3,4-
тиадиазолин, 2- [5-этил-З-[2-(1Н-тетразол-5-ил)бифенил-4
ил]метил-1,3,4-тиазолин-2илиден]аминокарбонил-1-
циклопентенкарбоновой кислоты дикалиевая соль и 2-бутил-4-[N-метил-N-(3-метилкротоноил)амино]-1-[[2'-(1Н-тетразол-5-ил)бифенил-4-ил]метил]-1Н-имидазол-5-карбоновой кислоты 1 этоксикарбонилоксиэтиловый эфир, те, которые описаны
патентных
публикациях
ЕР475206,
ЕР497150,
ЕР539086,
ЕР539713
ЕР535463,
ЕР535465,
ЕР542059,
ЕР497121,
ЕР535420,
ЕР407342
ЕР415886,
ЕР424317,
ЕР435827,
ЕР433983,
ЕР475898,
ЕР490820
ЕР528762,
ЕР324377,
ЕР323841,
ЕР420237,
ЕР500297,
ЕР426021
ЕР480204,
ЕР429257,
ЕР430709,
ЕР434249,
ЕР446062,
ЕР505954
ЕР524217,
ЕР514197,
ЕР514198,
ЕР514193,
ЕР514192,
ЕР450566
ЕР468372,
ЕР485929,
ЕР503162,
ЕР533058,
ЕР467207
ЕР399731
ЕР399732,
ЕР412848,
ЕР453210,
ЕР456442,
ЕР470794,
ЕР470795
ЕР495626,
ЕР495627,
ЕР499414,
ЕР499416,
ЕР499415,
ЕР511791
ЕР516392,
ЕР520723,
ЕР520724,
ЕР539066,
ЕР438869,
ЕР505893
ЕР530702,
ЕР400835,
ЕР400974,
ЕР401030,
ЕР407102,
ЕР411766
ЕР409332,
ЕР412594,
ЕР419048,
ЕР480659,
ЕР481614,
ЕР490587
ЕР467715,
ЕР479479, ЕР502725, ЕР503
338, ЕР50509
3, ЕР505111
ЕР513,979
ЕР507594, ЕР510812, ЕР511767, ЕР512675
, ЕР512676,
ЕР512870,
ЕР517357, ЕР537937, ЕР534706, ЕР527534
, ЕР540356,
ЕР461040,
ЕР540039, ЕР465368, ЕР498723, ЕР498722
, ЕР498721,
ЕР515265,
ЕР503785, ЕР501892, ЕР5198
31, ЕР532410
, ЕР498361,
ЕР432737,
ЕР504888, ЕР50
8393, ЕР508445, ЕР403159
, ЕР403158,
ЕР425211,
ЕР427463, ЕР437103, ЕР481448, ЕР488532
, ЕР501269,
ЕР500409,
ЕР540400, ЕР005528, ЕР0288
34, ЕР028833
, ЕР411507,
ЕР425921,
ЕР430300, ЕР434038, ЕР442473, ЕР443568
, ЕР445811,
ЕР459136,
ЕР483683, ЕР51
8033, ЕР520423, ЕР531876
, ЕР531874,
ЕР392317,
ЕР468470, ЕР470543, ЕР502314, ЕР529253
, ЕР543263,
ЕР540209,
ЕР449699, ЕР465323, ЕР52176
8, ЕР415594,
W092/14468,
WO93/08171
, WO93/08169,
WO91/00277,
WO91/00281,
W091/14367,
WO92/00067
, WO92/00977,
WO92/20342,
WO93/04045,
WO93/04046,
WO91/15206
, W092/14714,
WO92/09600,
W092/16552,
WO93/05025,
WO93/03018
, WO91/07404,
WO92/02508,
W092/13853,
W091/19697,
W091/11909
, WO91/12001,
W091/11999,
WO91/15209,
W091/15479,
WO92/20687
, WO92/20662,
WO92/20661,
WO93/01177,
W091/14679,
WO91/13063
, W092/13564,
W091/17148,
W091/18888,
W091/19715,
WO92/02257
, WO92/04335,
WO92/05161,
WO92/07852,
W092/15577,
WO93/03033
, W091/16313,
WO92/00068,
WO92/02510,
WO92/09278,
WO9210179,
WO92/10180,
WO92/10186,
WO92/10181,
WO92/10097,
WO92/10183
, WO92/10182,
WO92/10187,
WO92/10184,
WO92/10188,
WO92/10180
, WO92/10185,
WO92/20651,
WO93/03722,
WO93/06828,
WO93/03040
, W092/19211,
W092/22533,
WO92/06081,
WO92/05784,
WO93/00341
, WO92/04343,
WO92/04059,
US5104877,
US5187168,
US5149699,
US5185340,
US4880804,
US5138069,
US4916129,
US5153197,
US5173494,
US5137906,
US5155126,
US5140037,
US5137902,
US5157026,
US5053329,
US5132216,
US5057522,
US5066586,
US5089626,
US5049565,
US5087702,
US5124335,
US5102880,
US5128327,
US5151435,
US5202322,
US5187159,
US5198438,
US5182288,
US5036048,
US5140036,
US5087634,
US5196537,
US5153347,
US5191086,
US5190942,
US5177097,
US5212177,
US5208234,
US5208235,
US5212195,
US5130439,
US5045540,
US5041152 и
US5210204,
и их фармацевтически
приемлемые соли и сложные эфиры; блокаторы а/р адренергических
рецепторов, такие как нипрадилол, аротинолол, амосулалол,
бретилия тозилат (CAS RN: 61-75-6), дигидроэргтамина мезилат
(такой как эрготамин-3',б',18-трион, 9,-10-дигидро-12'-
гидрокси-2'-метил-5'-(фенилметил)-, (5'(а))-,
монометансульфонат, например, состав для инъекции DHE 45(r), Novartis), карведилол (такой как (±)-1-(карбазол-4-илокси)-3-
[[2-(о-метоксифенокси)этил]амино]-2-пропанол, например, Coreg(r),
SmithKline Beecham), лабетанол (такой как 5-[ 1-гидрокси-2-[(1-
метил-3-фенилпропил)амино]этил]салициламида могогидрохлорид,
например, Normodyne(r), Schering), бретилия тозилат
(бензолметанаминий, 2-бром-Ы-этил-Ы,N-диметил-, соль с 4-
метилбензолсульфокислотой (1:1) CAS RN 61-75-6), фентоламина
мезилат (фенол, 3-[ [ (4,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил)метил] (4-
метилфенил)амино]-, монометансульфонат (соль) CAS RN 65-28-1),
солипертина тартрат (5Н-1,3-диоксоло[4,5-f]индол, 7-[2-[4-(2-
метоксифенил)-1-пиперазинил]этил]-, (2R,3R)-2,3-
дигидроксибутандиоат (1:1) CAS RN 5591-43-5), золертина
гидрохлорид (пиперазин, 1-фенил-4-[2-(1Н-тетразол-5-ил)этил]-,
моногидрохлорид (8С1, 9С1) CAS RN 7241-94-3) и т.п.; блокаторы
а-адренергических рецепторов, такие как альфузозин (CAS RN:
81403-68-1), теразозин, урапидил, празозин (Minipress(r)) ,
тамсулозин, бутазозин, тримазозин, доксазозин, нафтопидил,
индорамин, WHP 164, XENOIO, фенспирида гидрохлорид (который
может быть приготовлен как описано в патенте США № 3399192),
пророксан (CAS RN 33743-96-3) и лабетанола гидрохлорид и их
комбинации; а2-агонисты, такие как метилдопа, метилдопы НС1,
лофексидин, тиаменидин, моксонидин, рилменидин, гуанобенз и
т.п.; ингибиторы альдостерона и т.п., ингибиторы ренина, в том
числе Алискирен (SPPIOO; Novartis/Speedel); связывающиеся с
ангиопоэтином-2 агенты, такие как описанные в WO03/030833;
средства от стенокардии, такие как ранолазин (гидрохлорид 1-
пиперазинацетамид, N-(2,б-диметилфенил)-4-[2-гидрокси-З-(2-
метоксифенокси)пропил]-, дигидрохлорид CAS RN 95635-56-6),
бетаксолола гидрохлорид (2-пропанол, 1-[4-[2
(циклопропилметокси)этил]фенокси]-3-[(1-метилэтил)амино]-,
гидрохлорид CAS RN 63659-19-8), бутопрозина гидрохлорид
(метанон, [4-[3(дибутиламино)пропокси]фенил](2-этил-З-
индолизинил)-, моногидрохлорид CAS RN 62134- 34-3), цинепазета малеат (1-пиперазинуксусная кислота, 4-[1-оксо-З-(3,4,5-триметоксифенил)-2-пропенил]-, этиловый эфир, (2Z)-2-бутендиоат (1:1) CAS RN 50679-07-7), тосифен (бензолсульфонамид, 4-метил-N-[[[(1S)-1-метил-2-фенилэтил]амино]карбонил]- CAS RN 32295184), верапамила гидрохлорид (бензолацетонитрил, а-[3-[[2-(3,4-
диметоксифенил)этил]метиламино]пропил]-3,4-диметокси-а-(1-
метилэтил)-, моногидрохлорид CAS RN 152-114), молсидомин
(1,2,3-оксадиазолий, 5-[(этоксикарбонил)амино]-3-(4-
морфолинил)-, внутренняя соль CAS RN 25717-80-0) и ранолазина
гидрохлорид (1-пиперазинацетамид, N-(2,б-диметилфенил)4-[2-
гидрокси-3-(2-метоксифенокси)пропил]-, дигидрохлорид CAS RN
95635-56-6); тосифен (бензолсульфонамид, 4-метил-Ы-[[ [ (IS)-1-
метил-2-фенилэтил]амино]карбонил]- CAS RN 32295-184);
стимуляторы адренергических рецепторов, такие как гуанфацина
гидрохлорид (такой как Ы-амидино-2-(2,б-дихлорфенил)ацетамида
гидрохлорид, например, таблетки Тепех(r), доступные от Robins);
метилдопа-гидрохлортиазид (такой как лево-3-(3,4-
дигидроксифенил)-2-метилаланин) в комбинации с
гидрохлортиазидом (таким как б-хлор-3,4-дигидро-2Н-1,2,4-
бензотиадиазин-7-сульфонамидом 1,1-диоксидом, например,
комбинация, такая как, например, таблетки Aldoril(r), доступные
от Merck), метилдопа-хлортиазид (такая как б-хлор-2Н-1,2,4-
бензотиадиазин-7-сульфонамид 1,1-диоксид и метилдопа, описанная
выше, например, Aldoclor(r), Merck), клонидина гидрохлорид (такой
как 2-(2,б-дихлорфениламино)-2-имидазолина гидрохлорид и
хлорталидон (такой как 2-хлор-5-(1-гидрокси-3-оксо-1-
изоиндолинил)бензолсульфонамид), например, Combipres(r),
Boehringer Ingelheim), клонидина гидрохлорид (такой как 2-(2,6-
дихлорфениламино)-2-имидазолина гидрохлорид, например,
Catapres(r), Boehringer Ingelheim), клонидин (1Н-имидазол-2-амин,
N-(2,6-дихлорфенил)4,5-дигидро- CAS RN 4205-90-7), Гизаар (Merck; комбинация лосартана и гидрохлортиазида), Ко-Диован (Novartis; комбинация валсартана и гидрохлортиазида, Лотрел (Novartis; комбинация беназеприла и амлодипина) и Кадуэт (Pfizer; комбинация амлодипина и аторвастатина), и те агенты, которые описаны в US20030069221.
1.3.2.11. Агенты для лечения респираторных нарушений
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут
использоваться в комбинированной терапии с одним или более из
следующих агентов, применимых для лечения респираторных и
других нарушений, включающих, но без ограничения (1) |3-
агонисты, включая, но без ограничения, альбутерол (PROVENTIL(r),
SALBUTAMOl(r), VENTOLIN(r), бамбутерол, битотерол, кленбутерол,
фенотерол, формотерол, изоэтарин (BRONKOSOL(r), BRONKOMETER(r)) ,
метапротеренол (ALUPENT(r), METAPREL(r)) , пирбутерол (MAXAIR(r)) ,
репротерол, римитерол, сальметерол, тербуталин (BRETHAIRE(r),
BRETHINE(r), BRICANYL(r)) , адреналин, изопротеренол (ISUPREL(r)) ,
эпинефрина битартрат (PRIMATENE(r)) , эфедрин, орципренлин,
фенотерол и изоэтарин; (2) стероиды, включая, но без
ограничения, беклометазон, беклометазона дипропионат,
бетаметазон, будесонид, бунедосид, бутиксокорт, дексаметазон,
флунизолин, флуокортин, флутиказон, гидрокортизон,
метилпреднизон, мометазон, предонизолон, предонизол, типредан,
тиксокортал, триамцинолон и триамцинолона ацетонид; (3)
комбинации [32-агонист-кортикостероид [например, сальметерол-
флутиказон (ADVAIR(r)) , формотерол-будесонид (SYMBICORT(r)) ] ; (4)
антагонисты рецепторов лейкотриена Б4/антагонисты
лейкотриенов/антагонисты LTD4 (т.е. любое соединение, способное блокировать, ингибировать, уменьшать или иначе мешать взаимодействие(ю) между лейкотриенами и Cys LTI-рецептором), включая, но без ограничения, зафгиукаст, монтелукаст, монтелукаст натрий (SINGULAIR(r)) , пранлукаст, иралукаст, побилукаст, SKB-106203 и соединения, описанные как обладающие антагонистической в отношении LTD4 активностью, описанные в
патенте США № 55 654 7 3; (5) ингибиторы 5-липоксигеназы и/или
ингибиторы биосинтеза лейкотриенов [например, зилеутон и
BAY1005 (СА регистрационный № 128253-31-6)]; (6) антагонисты
рецептора гистамина HI/антигистамины (т.е. любое соединение,
способное блокировать, ингибировать, уменьшать или иначе мешать
взаимодействие(ю) между гистамином и его рецептором), включая,
но без ограничения, астемизол, акривастин, антазолин, азатадин,
азеластин, астамизол, бромфенирамин, бромфенирамина малеат,
карбиноксамин, каребастин цетиризин, хлорфенирамин,
хлорфенирамина малеат, циметидин клемастин, циклизин,
ципрогептадин, дескарбоэтоксилоратадин, дексхлорфенирамид,
диметинден, дифенгидрамин, дифенилпиралин, доксиламина
сукцинат, доксиларнин, эбастин, эфлетиризин, эпинастин,
фамотидин, фексофенадин, гидроксизин, гидроксизин, кетотифен,
левокабастин, левоцетиризин, левоцетиризин, лоратадин,
меклизин, мепирамин, мехитазин, метдилазин, миансерин,
мизоластин, ноберастин, норастернизол, норазтемизол,
фениндамин, фенирамин, пикумаст, прометазин, пинламин, пириламин, ранитидин, темеластин, терфенадин, тримепразин, трипеленамин и трипролидин; (7) антихолинергический состав, включая, но без ограничения, атропин, бензтропин, бипериден, флутропий, гиосциамин (например Levsin(r); Levbid(r); Levsin/SL(r), Anaspaz(r), Levsinex timecaps(r), NuLev(r)) , илутропий, ипратропий, ипратропия бромид, метскополамин, оксибутинин, риспензепин, скополамин и тиотропий; (8) антитуссивное вещество, включая, но без ограничения, дектрометорфан, кодеин и гидроморфон; (9) противозастойное средство, включая но без ограничения, псевдоэфедрин и фенилпропаноламин; (10) отхаркивающее средство, включая, но без ограничения, гуайфенезин, гуайколсульфат, терпин, аммония хлорид, глицеролгуайколат и иодированный глицерин; (11) бронходилататоры, включая, но без ограничения, теофиллин и аминофиллин; (12) противовоспалительное средство, включая, но без ограничения, флурибипрофен, диклофенак, индометацин, кетопрофен, S-кетопрофен, теноксикам (13) ингибитор PDE (фосфодиэстеразы), включая, но без ограничения,
те, которые здесь описаны; (14) рекомбинантное гуманизированное моноклональное антитело [например, ксолаир (также называемый омализумабом, rhuMab, и тализумабом]; (15) гуманизированный легочный поверхностно-активный белок, включая рекомбинантные формы поверхностно-активных белков SP-B, SP-C или SP-D
[например, SURFAXIN(r), раньше называемый dsc-04 (Discovery Laboratories)], (16) агенты, которые ингибирует натриевые каналы в эпителиальных клетках (ENaC), такие как амилорид и родственные соединения; (17) противомикробные средства, используемые для лечения легочных инфекций, такие как ацикловир, амикацин, амоксициллин, доксициклин, триметоприн сульфаметоксазол, амфотерицин В, азитромицин, клэритромицин, рокситромицин, клэритромицин, цефалоспорины (цеффокситин, цефметазол и т.д.), ципрофлоксазин, этамбитол, гентимицин, ганцикловир, имипенем, изониазид, итраконазол, пенициллин, рибавирин, рифампин, рифабутин, амантадин, римантидин, стрептомицин, тобрамицин и ванкомицин; (18) агенты, которые активируют секрецию хлорида через Са++-зависимые хлоридные каналы (такие как агонисты пуринергических рецепторов (P2Y(2));
(19) агенты, уменьшающие вязкость мокроты, такие как
рекомбинантная ДНКаза 1 человека (Pulmozyme(r)) ; (20)
нестероидные противовоспалительные средства (ацеметацин,
ацетаминофен, ацетилсалициловая кислота, алклофенак,
алминопрофен, апазон, аспирин, беноксапрофен, безпиперилон, буклоксовая кислота, карпрофен, клиданак, диклофенак, диклофенак, дифлунизал, дифлузинал, этодолак, фенбуфен, фенбуфен, фенклофенак, фенклозовая кислота, фенопрофен, фентиазак, фепразон, флуфенамовая кислота, флуфенизал, флуфенизал, флупрофен, флурбипрофен, флурбипрофен, фурофенак, ибуфенак, ибупрофен, индометацин, индометацин, индопрофен, изоксепак, изоксикам, кетопрофен, кетопрофен, кеторолак, меклофенамовая кислота, меклофенамовая кислота, мефенамовая кислота, мефенамовая кислота, миропрофен, мофебутазон, набуметон оксапрозин, напроксен, напроксен, нифлуминовая кислота, оксапрозин, окспинак, оксифенбутазон, фенацетин,
фенилбутазон, фенилбутазон, пироксикам, пироксикам, пирпрофен, пранопрофен, судоксикам, теноксикам, сульфасалазин, сулиндак, сулиндак, супрофен, тиапрофеновая кислота, тиопинак, тиоксапрофен, толфенамовая кислота, толметин, толметин, цидометацин, зомепирак и зомепирак); и (21) аэрозольные антиоксидантные терапевтические средства, такие как S-нитрозоглутатион.
1.3.2.12. Противодиабетические средства
Пептиды-агонисты GCC, описываемые здесь, могут использоваться в терапевтической комбинации с одним или более противодиабетических средств, включающих, но без ограничения, агонисты PPARy, такие как глитазоны (например, WAY-120744, AD 5075, балаглитазон, циглитазон, дарглитазон (СР-86325, Pfizer), энглитазон (СР-68722, Pfizer), изаглитазон (MIT/J &J), МСС-555 (Mitsibishi, описанный в патенте США № 5594016), пиоглитазон (такой как пиоглитазон Actos(tm); Takeda), розиглитазон (Avandia(tm); Smith Kline Beecham), розиглитазона малеат, троглитазон (Rezulin(r), описанный в патенте США № 4572912), ривоглитазон (CS-01 1, Sankyo), GL-262570 (Glaxo Welcome), BRL49653 (описанный в WO98/05331), CLX-0921, 5-BTZD, GW-0207, LG- 100641, JJT-501 (JPNT/P &U), L-895645 (Merck), R-119702 (Sankyo/Pfizer), N-2344 (Dr. Reddy/NN), YM-440 (Yamanouchi), LY-300512, LY-519818, R483 (Roche), T131 (Tularik) и т.п., и соединения, описанные в US4687777, US5002953, US5741803, US5965584, US6150383, US6150384, US6166042, US6166043, US6172090, US6211205, US6271243, US6288095, US6303640, US6329404, US5994554, W097/10813, W097/27857, W097/28115, W097/28137, W097/27847, WO00/76488, WO03/000685, WO03/027112, WO03/035602, WO03/048130, WO03/055867 и их фармацевтически приемлемые соли; бигуаниды, такие как метформина гидрохлорид (N,N-диметилимидодикарбонимиддиамина гидрохлорид, такой как Glucophage(tm), Bristol-Myers Squibb); метформина гидрохлорид с глибуридом, такой как Glucovance(tm), Bristol-Myers Squibb); буформин (имидодикарбонимиддиамид, N-бутил-); этоформин (1-бутил-2-этилбигуанид, Schering A. G.); другие формы солей
мелформина (в том числе, когда соль выбирают из группы ацетата,
бензоата, цитрата, фумарата, эмбоната, хлорфеноксиацетата,
гликолята, пальмоата, аспартата, метансульфоната, малеата,
пара-хлорфеноксиизобутирата, формата, лактата, сукцината,
сульфата, тартрата, циклогексанкарбоксилата, гексаноата,
октаноата, деканоата, гексадеканоата, октодеканоата,
бензолсульфоната, триметоксибензоата, пара-толуолсульфоната,
адамантанкарбоксилата, гликоксилата, глютарната,
пирролидонкарбоксилата, нафталинсульфоната, 1-глюкозофосфата, нитрата, сульфита, дитионата и фосфата) и фенформин; ингибиторы белка тирозинфосфатазы-1В (РТР-IB), такие как А-401674, KR 61639, ОС-060062, ОС-83839, ОС-297962, МС52445, МС52453, ISIS 113715 и описанные в W099/585521, W099/58518, W099/58522, W099/61435, WO03/032916, WO03/032982, WO03/041729, WO03/055883, WO02/26707, WO02/26743, JP2002114768, их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры; сульфонилмочевины, такие как ацетогексамид (например, Dymelor, Eli Lilly), карбутамид, хлорпропамид (например, Diabinese(r), Pfizer), глиамилид
(Pfizer), гликлазид (например, Diamcron, Servier Canada Inc) , глимепирид (например, описанный в патенте США № 4379785, такой как Amaryl, Aventis), глипентид, глипизид (например, Glucotrol или Glucotrol XL с длительным высвобождением, Pfizer), глихидон, глизоламид, глибурид/глибенкламид (например, Micronase или Glynase Prestab, Pharmacia & Upjohn и Diabeta, Aventis), толазамид (например, Tolinase) и толбутамид
(например, Orinase), и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры; меглитиниды, такие как репаглинид (например, Pranidin(r), Novo Nordisk), KADI 229 (PF/Kissei) и натеглинид
(например, Starlix(r), Novartis), и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры; ингибиторы а-глюкозидазы (или глюкозидные ингибиторы), такие как акарбоза (например, Precose(tm), Bayer, описанный в патенте США № 4904769), миглитол (такой как GLYSET(tm), Pharmacia & Upjohn, описанный в патенте США № 4639436), камиглибоза (метил-б-дезокси-б-[(2R,3R,4R,5S)-3,4,5-тригидрокси-2-(гидроксиметил)пиперидино]-альфа-D
глюкопиранозид, Marion Merrell Dow), воглибоза (Takeda),
адипозин, эмиглитат, прадимицин-Q, сальбостатин, CKD-711, MDL-
25637, MDL-73945 и MOR 14, и соединения, описанные в патентах
США № 4062950, 4174439, 4254256, 4701559, 4639436, 5192772,
4634765, 5157116, 5504078, 5091418, 5217877, 51091 и в
WO01/47528 (полиамины); ингибиторы а-амилазы, такие как
тендамистат, трестатин и А1-3688, и соединения, описанные в
патентах США № 4451455, 4623714 и 4273765; ингибиторы SGLT2,
включающие те, которые описаны в патентах США № 6414126 и
6515117; ингибитор аР2, например, описанный в патенте США №
6548529; усиливающие секрецию инсулина вещества, такие как
линоглирид, А-4166, форскилин, дибутирл сАМР,
изобутилметилксантин (IBMX), и их фармацевтически приемлемые
соли и сложные эфиры, ингибиторы окисления жирных кислот, такие
как кломоксир и этомоксир, и их фармацевтически приемлемые соли
и сложные эфиры; антагонисты А2, такие как мидаглизол,
изаглидол, дериглидол, идазоксан, эароксан и флупароксан, и их
фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры; инсулин и
родственные соединения (например, миметики инсулина), такие как
биота, LP-100, новарапид, инсулин детемир, инсулин лиспро,
инсулин гларгин, суспензия инсулин-цинк (ленте и ультраленте),
Lys-Pro-инсулин, GLP-I (1-36) амид, GLP-I (73-7)
(инсулинтропин, описанный в патенте США № 5614492), LY-315902 (Lilly), GLP-I (7-36)-NH2), AL-401 (Autoimmune), некоторые композиции, описанные в US4579730, US4849405, US4963526, US5642868, US5763396, US5824638, US5843866, US6153632, US6191105 и WO 85/05029, и инсулин примата, грызуна или кролика, включая его биологически активные варианты, включая аллельные варианты, более предпочтительно инсулин человека, доступный в рекомбинантной форме (источники инсулина человека включают фармацевтически приемлемые и стерильные составы, такие как те, которые доступны от Eli Lilly (Indianapolis, Ind. 46285) как Humulin(tm) (инсулин человека с происхождением с рекомбинантной ДНК), также смотрите THE PHYSICIAN'S DESK REFERENCE, 55.sup.th Ed. (2001) Medical Economics, Thomson
Healthcare (описывающую другие подходящие инсулины человека);
не являющиеся тиазолидиндионами агенты, такие как JT-501 и
фарглитазар (GW-2570/GI-262579), и их фармацевтически
приемлемые соли и сложные эфиры; двойные агонисты PPARa/y,
такие как AR-H039242 (Aztrazeneca), GW-409544 (Glaxo-Wellcome),
BVT-142, CLX-0940, GW-1536, GW-1929, GW-2433, KRP-297 (Kyorin
Merck; 5-[ (2,4-диоксо тиазолидинил)метил]метокси-N-[[4-
(трифторметил)фенил]метил]бензамид), L-796449, LR-90, МК-0767
(Merck/Kyorin/Banyu), SB 219994, мураглитазар (BMS),
тезаглитазар (Astrazeneca), реглитазар (JTT-501) и описанные в
W099/16758, W099/19313, WO99/20614, WO99/38850, WO00/23415,
WO00/23417, WO00/23445, WO00/50414, WO01/00579, WO01/79150,
WO02/062799, WO03/004458, WO03/016265, WO03/018010,
WO03/033481, WO03/033450, WO03/033453, WO03/043985, W0 031053976, заявке на патент США с серийным № 09/664598, поданной 18 сентября 2000 года, Murakami et al. Diabetes 47, 1841-1847 (1998), и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры; другие инсулин-сенсибилизирующие лекарственные средства; агонисты рецепторов VPAC2; модуляторы GLK, такие как описанные в WO03/015774; являющиеся ретиноидами модуляторы, такие как описанные в WO03/000249; ингибиторы GSK Зр/GSK 3, такие как 4-[2-(2-бромфенил)-4-(4-фторфенил-1Н-имидазол-5-ил]пиридин и соединения, описанные в WO03/024447, WO03/037869, WO03/037877, WO03/037891, WO03/068773, ЕР1295884, ЕР1295885 и т.п.; ингибиторы гликогенфосфорилизы (HGLPa), такие как СР-3 682 96, СР-316819, BAYR34 01, и соединения, которые описаны в WO01/94300, WO02/20530, WO03/037864, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры; активаторы потребления АТФ, такие как описанные в WO03/0 07 990; ингибиторы TRB3; лиганды ванилоидных рецепторов, такие как описанные в WO03/049702; гипогликемические средства, такие как описанные в WO03/015781 и WO03/04 0114; ингибиторы киназы гликогенсинтазы 3, такие как описанные в WO03/035663, такие агенты, как те, которые описаны в W099/51225, US20030134890, WO01/24786 и WO03/059870; инсулинзависимый ДНК-связывающий белок-1 (IRDBP-I), описанный в
WO03/057827, и т.п.; антагонисты аденозина А2, такие как описанные в WO03/035639, WO03/035640, и т.п.; агонисты PPAR5, такие как GW 501516, GW 590735 и соединения, описанные в JP10237049 и WO02/14291; ингибиторы дипептидилпептидазы IV (DP-IV), такие как изолейцинтиазолидин, NVP-DPP728A (1-[[[2-[(5-цианопиридин-2-ил)амино]этил]амино]ацетил]-2-циано-(S)-пирролидин, описанный в Hughes et al, Biochemistry, 38(36), 11597-11603, 1999), P32/98, NVP-LAF-237, P3298, TSL225
(триптофил-1,2,3,4-тетрагидро-изохинолин-З-карбоновая кислота, описанная в Yamada et al, Bioorg. & Med. Chem. Lett. 8 (1998) 1537-1540), валинпирролидин, TMC-2A/2B/2C, ингибиторы CD-26, FE999011, P9310/K364, VIP 0177, DPP4, SDZ 274-444, 2-цианопирролидиды и 4-цианопирролидиды, описанные в Ashworth et al, Bioorg. & Med. Chem. Lett., Vol. 6, No. 22, pp 1163-1166 и 2745-2748 (1996), и соединения описанные в патентах США № 6395767, 6573287, 6395767 (описанные соединения включают BMS-477118, BMS-471211 и BMS 538305), WO99/38501, W099/46272, W099/67279, W099/67278, W099/61431, WO03/004498, WO03/004496, ЕР1258476, WO02/083128, WO02/062764, WO03/000250, WO03/002530, WO03/002531, WO03/002553, WO03/002593, WO03/000180 и WO03/000181; агонисты GLP-I, такие как эксендин-3 и эксендин-4
(в том числе представляющий собой 3 9-аминокислотный полипептид
синтетический эксендин-4, называемый Exenatide(r)) , и соединения,
описанные в US2003087821 и NZ 504256, и их фармацевтически
приемлемые соли и сложные эфиры; пептиды, включающие амлинтид и
Symlin(r) (прамлинтида ацетат); и активаторы гликокиназы, такие
как описанные в US2002103199 (конденсированные
гетероароматические соединения) и WO02/48106 (изоиндолин-1-он-замещенные пропионамидные соединения). ПРИМЕРЫ
Пример 1: Клиническое исследование безопасности и эффективности у людей в случае лечения хронического идиопатического запора
Рандомизированное, двойное-слепое, плацебо-контролируемое, 14-дневное исследование с использованием диапазона многократных
пероральных доз проводилось на пациентах с хроническим идиопатическим запором (CIC). Основной целью этого исследования была оценка безопасности SP-304 (1, 0, 3, 0, 9, 0 и 0,3 мг) в течение 14 дней для пациентов с CIC. Одной дополнительной целью была оценка фармакокинетического профиля SP-304 в плазме. Другие дополнительные цели включали оценки фармакодинамических эффектов (эффективности) на такие параметры, как время до первой дефекации после ежедневного введения дозы SP-304, ритм дефекаций в динамике по времени - например, самопроизвольные дефекации (SBM), полные самопроизвольные дефекации (CSBM), и консистенцию стула [используя Бристольскую шкалу стула/формы кала (BSFS)] - и другие сообщаемые пациентами последствия, такие как желудочно-кишечный дискомфорт.
Исследование включало пять групп с назначаемыми вмешательствами, указанными в представленной ниже таблице.
Группы
Вмешательства
SP-304 1,0 мг: Экспериментальная
Субъекты, получающие 1,0 мг SP-304 в течение 14 календарных дней
SP-304 3,0 мг: Экспериментальная
Субъекты, получающие 3,0 мг SP-304 в течение 14 календарных дней
SP-304 9,0 мг: Экспериментальная
Субъекты, получающие 9,0 мг SP-3 04 в течение 14 календарных дней
Плацебо: состав сравнения - плацебо
Субъекты, получающие плацебо в течение 14 календарных дней
SP-304 0,3 мг: Экспериментальная
Субъекты, получающие 0,3 мг SP-304 в течение 14 календарных дней
Субъектов, у которых был диагностирован CIC, отбирали в ожидаемые 4 группы для получения в результате 8 0 рандомизированных субъектов для включения в исследование. Было четыре группы доз (1,0, 3,0, 9,0 и 0,3 мг) с 2 0 субъектами в каждой группе [коэффициент рандомизации 3:1 (15 получателей SP-304: 5 получателей плацебо)]. Субъекты, которые продолжали удовлетворять всем критериям включения в исследование и заполнять дневник для записей, касающихся дефекаций (ВМ) до лечения, получали, двойным-спепым, рандомизированным образом, SP-304 или соответствующее плацебо. Критерии включения в исследование включали (1) удовлетворение критериям с
изменениями ROME III для хронического запора (СС); (2) отсутствие значимого обнаружения при колоноскопии в пределах последних 5 лет; (3) хорошее здоровье, определяемое с помощью объективного обследования, истории болезни, основных показателей состояния организма, ЭКГ, клинического химического исследования, гематологии, анализа мочи, тестирования на запрещенные составы и серологических оценок; и (4) во время 14-дневного периода до лечения, сообщение субъектами меньше б SBM и меньше 3 CSBM в каждую неделю до лечения. Все субъекты, получающие по меньшей мере одну дозу SP-304 или соответствующее плацебо, считались подлежащими оценке в отношении конечного результата, относящегося к безопасности (всего 78) . Если субъект не отклонялся от основного протокола, получал лечение исследования в течение по меньшей мере 5 дней каждую неделю и имел соответствующие записи, касающиеся ритма дефекаций, он считался подлежащим оценке в отношении параметров эффективности (всего 54-55).
Демографические данные субъектов в исследовании суммированы в представленной ниже таблице.
Плацебо
0,3 мг
1,0 мг
3,0 мг
9,0 мг
Возраст
47,7 (14,6)
51,1 (12,0)
50,5 (10,6)
48,5 (16,1)
47,3 (12,7)
Пол
Женский
18 (90,0%)
12 (85,7%)
14 (100%)
13 (86,7%)
12 (80%)
Мужской
2 (10,0%)
2 (14,3%)
2 (13,3%)
3 (20%)
Раса
Е вропеоидная
17 (85,0%)
13 (92,9%)
12 (85,7%)
14 (93,3%)
12 (80,0%)
Афроамериканская
1 (5,0%)
1 (7,1%)
2 (13,3%)
Монголоидная
1 (5,0%)
1 (7,1%)
1 (7,1%)
1 (6,7%)
Американоидная
1 (5,0%)
Другие
1 (6,7%)
Значения для возраста представляют собой средние значения (среднеквадратическое отклонение); значения для пола и возраста представляют собой числа (процент от экспериментальной группы).
Результаты
Фармакокинетика и безопасность
Не было выявляемого системного всасывания плеканатида (чувствительность анализа больше или равно 10 нг/мл). Не были зарегистрированы серьезные неблагоприятные явления (SAE) у субъектов, получающих плеканатид, и в этом исследовании не было зарегистрированных смертей. 10% (2/20) субъектов, которые получали плацебо, и 17,2% (10/58) субъектов, которые получали SP-304, сообщали о неблагоприятных явлениях, считающихся связанными с лечением. Большая часть неблагоприятных явлений была явлениями легкой/средней степени тяжести и кратковременными по природе. 10% (2/20) субъектов, которые получали плацебо, и 5,2% (3/58) субъектов, которые получали SP-304, сообщали о связанных с желудочно-кишечным трактом неблагоприятных явлениях, считающихся связанными с лечением. Не сообщалось о диареи у какого-либо субъекта, получающего SP-304. Представленная ниже таблица представляет собой сводку связанных с желудочно-кишечным трактом неблагоприятных явлений (АЕ).
Эффективность
Лечение SP-304 (плеканатидом) уменьшало время до первой дефекации, увеличивало частоту стула (SBM и CSBM), улучшало консистенцию стула и уменьшало усилие и желудочно-кишечный дискомфорт. Смотрите фиг.1-6.
Очищенная вода (охлажденная до 5°С) , USP
Не применимо
Explotab (Натрия гликолят крахмала)
Агент, вызывающий дезинтеграцию
4,0
Всего
100
Пример 4: Совместимость наполнителей
Двухкомпонентные смеси SP-304 готовили и хранили в стеклянных пузырьках. В случае твердых наполнителей двухкомпонентные смеси состояли из 9,1 или 50% наполнителя. Стеклянные пузырьки хранили при 4 0°С/7 5% относительной влажности открытыми или закрытыми. Степень чистоты, в процентах (определяемая с помощью ВЭЖХ) пептида-агониста GCC (SP-304) после хранения в течение периода времени, указанного в каждом столбце, (т.е. 1, 2 или 3 месяца в случае закрытых пузырьков и 0,5, 1, 2 или 3 месяца в случае открытых пузырьков), указана с использованием численных значений.
Желатиновая капсула
91,5
88,3
84,3
84,3
90,5
86,7
83, б
Жидкость для заполненной жидкостью капсулы
Среднецепочечный триглицерид
90,4
Пропиленгликоль дикаприлокапрат
89, 3
Витамин Е
Соевое масло
89, б
Cremaphor
79, 7
Пропиленгликоль
3,4
Пропиленгликоль 4 00
0,7
Пример 5: Геометрическая сухая смесь для содержащей 0,3 мг пептида капсулы
Добавляли 12 г маннита в ступку. Добавляли 4 г SP-304 и осторожно смешивали до получения визуально однородного порошка. Переносили в смеситель Turbula. Подвергали ступку смывке с использованием маннита и переносили смывку в смеситель Turbula и смешивали при высокой скорости в течение 10 минут. Добавляли приблизительно 150 г маннита в смеситель с V-образным корпусом емкостью в 4 кварты (3,8 л). Переносили содержимое смесителя Turbula в V-образный корпус и добавляли 150 г смеси маннита. Выгружали содержимое V-образного корпуса и пропускали через сито в 40 меш и засыпали обратно в смеситель. Добавляли 586 г маннита в смеситель и смешивали в течение 2 0 минут.
Пример 6: Процесс влажной грануляции
Партию 017-10005, состоящую из маннита и PROSOLV LM90 (0,33 г/мл) с низкой влажностью (2,4%), подвергали разбрызгиванию раствора SP-304 и сушке в псевдоожиженном слое, приводившей к содержанию воды в грануле, составляющему 0,35%. Конечная смесь содержала 1% воды, обладала достаточной сыпучестью и хорошо заполняла капсулы. Второй прототип 017100 6, состоявший из тех же компонентов, корректировали для получения целевой массы наполнения 10 0-мг капсулы на основе результатов первой партии. Воду разбрызгивали на порошковую смесь с SP-304. Температура на входе составляла 50°С, и гранулу подвергали сушке в течение 1,5 часа, и процесс прекращали, когда температура продукта достигала Зб°С. В третьем (партии 017-10006) и четвертом (партии 017-10007) прототипах капсул использовали PROSOLV HD90, который является материалом с большей плотностью, с лучшими свойствами сыпучести и большим содержанием влаги, составляющим 5,5%, чем PROSOLV LM90. Содержание влаги в PROSOLV HD90 легко удалялось с помощью сушки в псевдоожиженном слое. Плотность PROSOLV HD90 составляла приблизительно 0,55 г/мл. Смазывающее вещество PRUV исключали для этих партий.
Пример 7: Стабильность влажной грануляции
SP-304 экстрагировали из капсул посредством обработки ультразвуком или при комнатной температуре (КТ), или при низкой температуре, и количество пептида определяли с помощью ВЭЖХ. Первоначальные процентные содержания основывали на количествах, указанных на этикетке.
Партия
% пептида (первоначальный)
% пептида (1 месяц при комнатной температуре)
017-10006
101,1 (с обработкой ультразвуком при комнатной температуре)
97,6 (с обработкой ультразвуком при низкой температуре)
017-10008
97,5 (с обработкой ультразвуком при комнатной температуре)
108,2 (с обработкой ультразвуком при низкой температуре)
Пример 8: Стабильность в течение 1 месяца капсул во флаконах из HDPE
Капсулы содержали 0,3 мг SP-304, при этом остальную часть массы наполнения (вплоть до 5 мг) составлял маннит (Perlitol 300 DC) . Каждая капсула содержала 1,5% по весу SP-304 и 98,5% маннита. Оболочка капсулы состояла из НРМС. Количества представляют собой количества по отношению к количеству, указанному на этикетке (т.е. 0,30 мг пептида). Указанное количество капсул помещали во флакон из полиэтилена с высокой плотностью с индукционным запаиванием и десиккантом цеолитом на
1 месяц или при 2-8°С (первые два столбца) , или 25°С и 60% относительной влажности (последние два столбца). Первоначальное количество присутствующего пептида составляло 101% от содержания, заявленного на этикетке. В последнем ряду представлено количество пептида, остающееся после хранения в течение 1 месяца при указанной температуре, как определено с помощью ВЭЖХ.
2-8°С
2-8°С
25°С/60% относительная влажность
25°С/60% относительная влажность
1 капсула на флакон
6 капсул на флакон
1 капсула на флакон
6 капсул на флакон
100%
92%
92%
98%
Пример 9: Композиция партии 1528-2855-RD (капсул) и процесс нанесения покрытия методом распыления и сушки
элемента
Ингредиент
Количество на единицу (мг)
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
0,3246
0,3246
Микрокристаллическая целлюлоза (Selphere SPC-100)
99, 10
99, 10
Дигидрат хлорида кальция
0,2622
0,2622
Лейцин USP
0,1171
0,1171
Гипромеллоза (Methocel Е5 PremLV)
0,2000
0,2000
Очищенная вода, USP
7,2 мл*
Не применимо
Всего
100
100
*: Количество воды рассчитано на основе использования 119,0 мл очищенной воды на всю партию, содержащую 5,356 г SP-304.
Процесс распылительной сушки производства партии 2 8 55-RD описан ниже.
Приготовление дисперсии для покрытия
Очищенную воду добавляли в стеклянный сосуд и перешивали так, чтобы создавалось вихревое движение жидкости без введения воздуха. Затем в воду медленно добавляли дигидрат хлорида кальция. Смесь перемешивали до растворения соли или ее достаточного диспергирования. Затем медленно добавляли лейцин, и результирующую смесь перемешивали до растворения аминокислоты или ее достаточного диспергирования. Потом медленно добавляли метоцел, и смесь перешивали до полного растворения метоцела. Раствор можно было бы нагреть для растворения метоцела, в необходимых случаях. Допускали охлаждение результирующего раствора наполнителей до комнатной температуры, и раствор пропускали через сито в 80 меш. Затем 127,9 г пропущенного через сито раствора наполнителей добавляли в стеклянный сосуд и помещали в ледяную баню на 0,5-1 час до достижения раствором
0°С. Затем в холодный раствор наполнителей добавляли SP-304. Смесь энергично перемешивали, чтобы сделать возможным растворение пептида в холодном растворе. Результирующий раствор пептида сохраняли на холоде - в ледяной бане в качестве раствора для распыления/нанесения покрытия. Наслаивание лекарственного средства
Сушилку с псевдоожиженным слоем Glatt GPCG-2 (с колонной с верхними брызгалами) с перегородкой Вурстера настраивали на наслаивание лекарственного средства на гранулы Celphere SCP-100. После загрузки колонны Вурстера гранулами Celphere SCP-100, температуру псевдоожиженного слоя повышали до 35°С и сохраняли в течение 3 0 минут с минимальным псевдоожижением гранул. Температуру псевдоожиженного слоя понижали до достижения температуры выпуска 35°С. Рукав используемого перистальтического насоса наполняли посредством движения по замкнутой цепи раствора для распыления, упомянутого выше. После настраивания устройства для распыления для получения удовлетворительной формы распыла, раствор для покрытия распыляли на гранулы Celphere SCP-100 до тех пор, пока не распыляли весь раствор для покрытия. Записывали рабочие параметры. Температуру псевдоожиженного слоя и псевдоожижение сохраняли до тех пор, пока гранулы не становились достаточно сухими. Затем псевдоожижение уменьшали при сохранении
температуры псевдоожиженного слоя, равной 35°С, в течение 10 минут. Отбирали образец гранул весом 2 г для анализа влаги, когда температуру псевдоожиженного слоя сохраняли равной 35°С. Когда влажность отбираемых в качестве образцов гранул достигала меньше 5%, гранулы с покрытием выгружали и загружали в сухой контейнер. LOD (потери при сушке)=2,399%.
Пример 10: Композиция партии 1528-2851-RD (таблеток) и процесс нанесения покрытия методом распыления и сушки
элемента
Ингредиент
Количество на единицу (мг)
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
0,3246
0,3607
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 102)
88, 88
98,75
Дигидрат хлорида кальция
0,2622
0,2913
Лейцин USP
0,1171
0,1301
Гипромеллоза (Methocel Е5 PremLV)
0,2000
0,2222
Стеарат магния
0,225
0,2500
Очищенная вода, USP
7,2 мл*
Не применимо
Всего
90, 0
100
*: Количество воды рассчитано на основе использования 119,0 мл очищенной воды на всю партию, содержащую 5,356 г SP-304.
Процесс нанесения покрытия методом распыления и сушки производства партии 2851-RD описан ниже.
Приготовление дисперсии для покрытия
Очищенную воду добавляли в стеклянный сосуд и перешивали так, чтобы создавалось вихревое движение жидкости без введения воздуха. Затем в воду медленно добавляли дигидрат хлорида кальция. Смесь перемешивали до растворения соли или ее достаточного диспергирования. Затем медленно добавляли лейцин, и результирующую смесь перемешивали до растворения аминокислоты или ее достаточного диспергирования. Потом медленно добавляли метоцел, и смесь перешивали до полного растворения метоцела. Раствор можно было бы нагреть для растворения метоцела, в необходимых случаях. Допускали охлаждение результирующего раствора наполнителей до комнатной температуры, и раствор пропускали через сито в 80 меш. Затем 127,9 г пропущенного через сито раствора наполнителей добавляли в стеклянный сосуд и помещали в ледяную баню на 0,5-1 час до достижения раствором 0°С. Затем в холодный раствор наполнителей добавляли SP-304. Смесь энергично перемешивали, чтобы сделать возможным растворение пептида в холодном растворе. Результирующий раствор пептида сохраняли на холоде - в ледяной бане в качестве раствора для распыления/нанесения покрытия.
Наслаивание лекарственного средства
Сушилку с псевдоожиженным слоем Glatt GPCG-2 (с колонной с
верхними брызгалами) с перегородкой Вурстера настраивали на
наслаивание лекарственного средства на гранулы Avicel РН 102.
После загрузки колонны Вурстера гранулами Avicel РН 102
температуру повышали до 35°С и сохраняли в течение 3 0 минут с
минимальным псевдоожижением гранул. Температуру
псевдоожиженного слоя понижали до достижения температуры выпуска 35°С. Рукав используемого перистальтического насоса наполняли посредством движения по замкнутой цепи раствора для распыления, упомянутого выше. После настраивания устройства для распыления для получения удовлетворительной формы распыла, раствор для покрытия распыляли на гранулы Avicel РН 102 до тех пор, пока не распыляли весь раствор для покрытия. Записывали рабочие параметры. Температуру псевдоожиженного слоя, и псевдоожижение сохраняли до тех пор, пока гранулы не становились достаточно сухими. Затем псевдоожижение уменьшали при сохранении температуры псевдоожиженного слоя, равной 35°С, в течение 10 минут. Отбирали образец гранул весом 2 г для анализа влаги, когда температуру псевдоожиженного слоя сохраняли равной 35°С. Когда влажность отбираемых в качестве образцов гранул достигала меньше 5%, гранулы с покрытием выгружали и загружали в сухой контейнер. LOD (потери при сушке) меньше 5%.
Чистый вес покрытой смеси определяли для расчета количества стеарата магния, необходимого для пластификации смеси. Затем стеарат магния добавляли в покрытую смесь, и смесь перешивали в течение 1 минуты.
Прессование
Настраивали таблеточный пресс Fette. Затем смесь загружали в бункер для пресс-порошка, и устанавливали инструментальную оснастку. Вес каждой таблетки задавали на значении 90 мг ±5%, а твердость должна была составлять 4-6 единиц твердости по Кнупу. Вес, твердость и толщину таблеток определяли и записывали каждые 5-10 минут. Также выполняли измерения ломкости для
обеспечения удовлетворительного продукта.
Пример 11: Композиция партии 1528-2850-RD (капсул) и процесс
ниже,
Смешивание
Avicel РН 102 пропускали через сито в 60 меш. V-образные смесители (емкостью в 1 кварту (lQt), 4 и 16Qt (0,9, 3,8 и 15,1 л)) затем запыляли пропущенной через сито Avicel РН 102. SP-304 пропускали через сито в 200 меш и загружали в 1-Qt (0,9-л) А-образный смеситель. Затем приблизительно 80 г Avicel РН 102 добавляли в 1-Qt (0,9-л) смеситель, и смесь перемешивали в течение 10 минут со скоростью, составляющей 25 об./мин. Затем смесь переносили в 4-Qt (3,8-л) V-образный смеситель, который был предварительно запылен пропущенной через сито Avicel РН 102. Смеситель емкостью в 1 Qt (0,9 л) подвергали смывке с использованием Avicel, и смывку переносили в 4-Qt (3,8-л) смеситель. Смывку повторяли до переноса всего SP-304 в 4-Qt (3,8-л) смеситель. Приблизительно 200 г Avicel добавляли в 4-Qt (3,8-л) V-образный смеситель, и смесь перешивали в течение 10 минут. Результирующую смесь затем пропускали через сито в 60 меш, а затем переносили в предварительно запыленный 16-Qt (15,1-л) смеситель (запыленный 1500 г Avicel). Смеситель емкостью в 4 Qt (3,8-л) подвергали смывке с использованием Avicel, и материал смывки переносили в 16-Qt (15,1-л) смеситель. Остающийся Avicel добавляли в 16-Qt (15,1-л) смеситель, и смесь перешивали в течение 10 минут. Результирующую смесь затем пропускали через Comil, а затем
возвращали в 16-Qt (15,1-л) смеситель, и осуществляли дополнительное перемешивание в течение 5 минут. Соответствующее количество стеарата магния отвешивали, пропускали через сито в 60 меш и добавляли в 16-Qt (15,1-л) смеситель. Результирующую смесь перешивали в течение 2 минут. Инкапсуляция
Настраивали устройство для наполнения капсул MG2 Planeta. Определяли средний вес пустых капсульных оболочек, и рассчитывали целевую массу наполнения капсул (±5%). Смесь из вышеуказанного процесса добавляли в бункер устройства для наполнения капсул, и начинали инкапсуляцию. Выполняемые параметры массы настраивали вручную. Результирующие капсулы затем отсортировали в соответствии с целевой массой наполнения.
Пример 12: Композиция партии 1528-2850B-RD (таблеток) и процесс
№ элемента
Ингредиент
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
0,3246
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 102)
99, 43
Стеарат магния
0,2500
Всего
100
Процесс сухого смешения производства партии 2 850B-RD описан ниже.
Смешивание
Avicel РН 102 пропускали через сито в 60 меш. V-образные смесители (емкостью в 1, 4 и 16Qt (0,9, 3,8 и 7,1 л)) затем запыляли пропущенной через сито Avicel РН 102. SP-304 пропускали через сито в 200 меш и загружали в 1-Qt (0,9-л) V-образный смеситель. Затем приблизительно 80 г Avicel РН 102 добавляли в 1-Qt (0,9-л) смеситель, и смесь перемешивали в течение 10 минут со скоростью, составляющей 25 об./мин. Затем смесь переносили в 4-Qt (3,8-л) V-образный смеситель, который был предварительно запылен пропущенной через сито Avicel РН 102. Смеситель емкостью в 1 Qt (0,9 л) подвергали смывке с использованием Avicel, и смывку переносили в 4-Qt (3,8-л)
смеситель. Смывку повторяли до переноса всего SP-304 в 4-Qt (3,8-л) смеситель. Приблизительно 200 г Avicel добавляли в 4-Qt (3,8-л) V-образный смеситель, и смесь перешивали в течение 10 минут. Результирующую смесь затем пропускали через сито в 60 меш, а затем переносили в предварительно запыленный 16-Qt (7,1л) смеситель (запыленный 1500 г Avicel). Смеситель емкостью в 4 Qt (3,8 л) подвергали смывке с использованием Avicel, и смывку переносили в 16-Qt (7,1-л) смеситель. Остающийся Avicel добавляли в 16-Qt (7,1-л) смеситель, и смесь перешивали в течение 10 минут. Результирующую смесь затем пропускали через Comil, а затем возвращали в 16-Qt (7,1-л) смеситель, и осуществляли дополнительное перемешивание в течение 5 минут. Соответствующее количество стеарата магния отвешивали, пропускали через сито в 60 меш и добавляли в 16-Qt (7,1-л) смеситель. Результирующую смесь перешивали в течение 2 минут. Прессование
Настраивали таблеточный пресс Fette. Затем смесь загружали в бункер для пресс-порошка, и устанавливали инструментальную оснастку. Вес каждой таблетки задавали на значении 90 мг ±5%, а твердость должна была составлять 4-6 единиц твердости по Кнупу. Вес, твердость и толщину таблеток определяли и записывали каждые 5-10 минут. Также выполняли измерения ломкости для обеспечения удовлетворительного продукта.
Пример 13: Композиция таблетированного состава 1528-3161-RD, изготовляемого из сухой смеси, 1 мг для вакуумной сушки
№ элемента
Ингредиент
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
1,176
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 102)
98, 57
Стеарат магния
0,2500
Всего
100
Пример 14: Композиция таблетированного состава 1528-3162-
RD, изготовляемого из сухой смеси, 1 мг с целлюлозой с низким содержанием влаги
№ элемента
Ингредиент
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
1,176
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 112)
97, 09
Стеарат магния
0,2500
Всего
100
Пример 15: Композиция таблетированного состава 1528-3170-RD, изготовляемого с использованием гранул трегалозы, покрытых методом распыления, 1 мг
№ элемента
Ингредиент
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
1,176
Гранулы трегалозы
70,48
Methocel Е5 Premium LV
0,50
Гистидин (в растворе для покрытия)
0,9225
Аскорбат кальция
0, 100
Очищенная вода
Не применимо
Порошковая трегалоза (в растворе для покрытия)
1,0176
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 200)
25, 00
Гистидин
0,5535
Стеарат магния
0,2500
Всего
100
Процесс производства таблетированного препарата 1528-3170-RD, изготовляемого с использованием гранул трегалозы, покрытых методом распыления, описан ниже.
Приготовление дисперсии для покрытия
Добавляли очищенную воду в маркированный сосуд и начинали перемешивание. Перемешивали так, чтобы создавалось вихревое движение жидкости без введения воздуха. Медленно добавляли в раствор метоцел. Перемешивали до полного растворения метоцела.
Нагревали раствор, если это необходимо для растворения метоцела ( <50°С) . Раствор при необходимости охлаждали до добавления других материалов. Добавляли в раствор трегалозу. Перемешивали до растворения материалов. Добавляли в раствор аскорбат натрия. Перемешивали до растворения материалов. Доводили рН до 7,0 с помощью 1 н. раствора NaOH, если рН> 7,0. Записывалие рН после доведения. Помещали раствор для покрытия в ледяную баню и оставляли в ледяной бане в течение 0,5-1 часа до достижения им температуры образования льда. Проверяли с помощью термометра для гарантии температуры образования льда. Отвешивали порции требуемого количества API в лодочке для взвешивания и добавляли каждую порцию осторожно в холодный раствор наполнителей. Осуществляли энергичное перемешивание, чтобы сделать возможным смачивание и растворение пептида в холодном растворе. Общее количество пептида было равно 14,107 г. Продолжали перемешивание раствора так, чтобы создавалось вихревое движение жидкости без введения воздуха. Перемешивали до полного растворения плеканатида. Сохраняли раствор пептида все время на холоде - в ледяной бане. Добавляли в раствор гистидин. Перемешивали не более 10 минут для растворения материалов. Измеряли конечный рН раствора для покрытия. Измеряли чистый вес раствора для покрытия. Раствор для покрытия использовался в пределах 3 0 мин во избежание окрашивания. Наслаивание лекарственного средства
Настраивали Glatt GPCG-2 с перегородкой Вурстера в соответствии с SOP EQP-OCM-064 для наслаивания лекарственного средства на гранулы трегалозы с использованием дисперсии для покрытия. Использовали технологическую форму Glatt GPCG2, "EQP-ОСМ-064-Fl", для записи информации в ходе процесса. Включали устройство и предварительно нагревали колонну. Сушилка с псевдоожиженным слоем: Glatt GPCG-2. Фильтр: 200-мкм сито. Контейнер для продукта: 4" перегородка Вурстера, нержавеющая сталь. Высота перегородки от дна: 1". Направление распыления: верхние брызгала. Размер сопла для жидкости/тип: 1 мм. Насос: перистальтический, Master Flex LS. Рукав: Nalge #14 силикон.
Температура псевдоожиженного слоя: <4 0°С. Температура воздуха
на входе: регулировали для достижения цели температуры
псевдоожиженного слоя. Температура воздуха на выходе:
контролировали и записывали. Скорость распыления:
первоначальная скорость 4-6 г/мин, регулировали при необходимости. Давление распыляемого воздуха: 2 0 фунтов на кв. дюйм (138 кПа) . Скорость воздуха: 60 см/ч и регулировали для псевдоожижения. Приготавливали двойные полиэтиленовые мешки, достаточно большие для хранения гранул с наслоением лекарственного средства. Загружали колонну трегалозой. Повышали
температуру псевдоожиженного слоя до 35°С и сохраняли в течение
3 0 минут с минимальным псевдоожижением гранул. Понижали температуру псевдоожиженного слоя до достижения температуры выпуска 35°С. Наполняли рукав насоса посредством движения по замкнутой цепи раствора для распыления; не использовали более
4 0 г для заполнения рукава. Настраивали устройство для распыления для получения удовлетворительной формы распыла. Вес раствора для покрытия после наполнения был больше 317 г. Регистрировали первоначальный вес всюду в дальнейшем до распыления на трегалозу. Начинали распыление раствора для покрытия на гранулы трегалозы. Записывали рабочие параметры в технологической форме для псевдоожиженного слоя. Останавливали распыление после распыления 297,2 г раствора для покрытия. Сохраняли температуру псевдоожиженного слоя и продолжали псевдоожижение до тех пор, пока гранулы не становились достаточно сухими. Уменьшали псевдоожижение и сохраняли
температуру псевдоожиженного слоя равной 35°С, в течение 10 минут. Не охлаждайте гранулы. Отбирайте образец, равный 2 г, для анализа влаги до тех пор, пока влажность не становилась ниже 1%. Выгружали покрытые гранулы в предварительно приготовленный и маркированный контейнер (с весом тары), выложенный изнутри двойными полиэтиленовыми мешками. Рассчитывали чистый вес гранул с наслаиванием лекарственного средства. Настраивали лиофилизатор в соответствии с SOP EQP-ОСМ-00002. Загружали гранулы с наслаиванием лекарственного
средства в лоток Lyoguard (сохраняли мешки). Использовали способ 3 для высушивания смеси в течение ночи. Разгружали высушенную смесь в сохраненные полиэтиленовые мешки. Регистрировали конечное значение влажности (меньше 5%) . Рассчитывали чистый вес высушенных гранул. Смешивание
Отбирали необходимую Avicel и пропускали через сито в 60 меш. Настраивали 4-qt (3,8-л) V-образный смеситель в соответствии с SOP EQP-OCM-00056. Отвешивали необходимое количество гистина и смешивали с небольшим количеством отвешенной Avicel. Загружали в 4-qt (3,8-л) V-образный смеситель. Переносили высушенные гранулы с плеканатидом в V-образный смеситель. 2-3 смывали с лотка Lyoguard со стадии 24 с использованием соответствующего количества отвешенной Avicel. Переносили смывки в 4-qt (3,8-л) V-образный смеситель. Переносиливсю остающуюся предварительно отвешенную/отобранную Avicel в V-образный смеситель. Перемешивали в течение 15 минут. Отвешивали стеарат магния и пропускали его через сито в 60 меш. Загружали стеарат магния в 4-qt (3,8-л) V-образный смеситель. Обеспечивали, чтобы крышка была надежно надета без возможной утечки порошка во время перемешивания. Перемешивали в течение 2 минут.
Прессование
Настраивали таблеточный пресс Korsch в соответствии с SOP EQP-OCM-00087. Устанавливали инструментальную оснастку для 0,250" (6,35 мм) стандартной двояковыпуклой круглой таблетки. Получали результаты анализа смеси и рассчитывали целевой вес таблетки. Приемлемый размах колебаний веса таблеток составляет ±5%. Загружали конечную смесь в бункер для пресс-порошка. Дозагружали при необходимости. Регулировали массу наполнения для получения таблеток в диапазоне 95,0-105,0 мг и твердости в диапазоне 4-6 единиц твердости по Кнупу. Проверяли, чтобы ломкость составляла не более 1,0%. Периодически, каждые 5-10 мин, проверяли веса 5 таблеток для гарантии того, чтобы вес таблетки находился в пределах диапазона, и записывали его в
форме QRA-DOC-00011-F6. После записи веса таблеток измеряли, и записывали твердость и толщину 3 таблеток во время периодической проверки веса. Продолжали прессование подходящих таблеток до исчерпания смеси. Когда прессование проходило должным образом с достижением спецификаций, отмеченных выше, выполняли конечный тест на ломкость и записывали результаты (спецификация: не более 1,0%) .
Пример 16: Композиция таблетированного состава 1528-3171-RD, изготовляемого с использованием гранул трегалозы, покрытых методом распыления, 1 мг
№ элемента
Ингредиент
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
1, 167
Гранулы трегалозы
70,31
Methocel Е5 Premium LV
0,50
Аргинин
1, 657
Аскорбат кальция
0, 100
Очищенная вода
Не применимо
Порошковая трегалоза (в растворе для покрытия)
1,0176
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 200)
25, 00
Стеарат магния
0,2500
Всего
100
Процесс производства таблетированного состава 1528-3171-RD, изготовляемого с использованием гранул трегалозы, покрытых методом распыления, описан ниже.
Приготовление раствора для покрытия
Добавляли очищенную воду (элемент 6) в маркированный сосуд и начинали перемешивание. Перемешивали так, чтобы создавалось вихревое движение жидкости без введения воздуха. Медленно добавляли в раствор метоцел. Перемешивали до полного растворения метоцела. Нагревали раствор, если это необходимо для растворения метоцела (меньше или равно 50°С) . Записывали вид раствора. Раствор при необходимости охлаждали до добавления других материалов. Добавляли в раствор трегалозу. Перемешивали
до растворения материалов. Записывали вид раствора. Добавляли в раствор аргинин. Перемешивали до растворения материалов. Записывали вид раствора. Добавляли в раствор аскорбат кальция. Перемешивали до растворения материалов. Записывали вид раствора. Доводили рН раствора до 8,5-8,6 с помощью концентрированной НС1 с последующим доведением рН до 8,3-8,4 с помощью 10 н. НС1. Записывали конечный рН после доведения. Помещали раствор для покрытия в ледяную баню и оставляли в ледяной бане в течение 0,5-1 часа до достижения им температуры образования льда. Проверяли с помощью термометра для гарантии температуры образования льда. Отвешивали порции требуемого количества API в лодочке для взвешивания, и осторожно добавляли каждую порцию в холодный раствор наполнителей. Энергично перемешивали, чтобы сделать возможным смачивание и растворение пептида в холодном растворе. Общее количество пептида было равно 14,006 г. Продолжали перемешивание раствора так, чтобы создавалось вихревое движение жидкости без введения воздуха. Перемешивали до полного растворения плеканатида. Сохраняли раствор пептида все время на холоде - в ледяной бане. Отвешивали 5,0 г WFI для смывания с контейнера для API. Осторожно смывали со стенки сосуда для раствора для покрытия и полностью перенесили смывку обратно в сосуд для раствора для покрытия. Измеряли конечный рН раствора для покрытия. Измеряли чистый вес раствора для покрытия (приблизительно 360,3 г). Раствор для покрытия использовался в возможно короткие сроки. Наслаивание лекарственного средства
Настраивали Glatt GPCG-2 с перегородкой Вурстера в соответствии с SOP EQP-OCM-064 для наслаивания лекарственного средства на гранулы трегалозы с использованием дисперсии для покрытия. Использовали технологическую форму Glatt GPCG2, "EQP-ОСМ-064-Fl", для записи информации в ходе процесса. Включали устройство, и предварительно нагревали колонну.
Сушилка с псевдоожиженным слоем: Glatt GPCG-2. Фильтр: 200-мкм сито. Контейнер для продукта: 4" (10,16-см) перегородка Вурстера, нержавеющая сталь. Высота перегородки от дна: 1" (2,54 см) . Направление распыления: верхние брызгала. Размер
сопла для жидкости/тип: 1 мм. Насос: перистальтический, Master Flex LS. Рукав: Nalge #14 силикон. Температура псевдоожиженного слоя: меньше или равна 4 0°С. Температура воздуха на входе: регулировали для достижения цели температуры псевдоожиженного слоя. Температура воздуха на выходе: контролировали и записывали. Скорость распыления: первоначальная скорость 4-6 г/мин, регулировали в необходимых случаях. Давление распыляемого воздуха: 2 0 фунтов на кв. дюйм (138 кПа). Скорость воздуха: 60 см/ч, и регулировали для псевдоожижения. Загружали колонну трегалозой G. Повышали температуру псевдоожиженного слоя до 35°С и сохраняли в течение 3 0 минут с минимальным псевдоожижением гранул. Понижали температуру псевдоожиженного слоя до достижения температуры выпуска 35°С. Наполняли рукав насоса раствором для покрытия. Использовали не более 4 0 г для заполнения рукава. Настраивали устройство для распыления для получения удовлетворительной формы распыла. Регистрировали первоначальный вес всюду в дальнейшем до распыления на трегалозу. Начинали распыление раствора для покрытия на гранулы трегалозы. Записывали рабочие параметры в технологической форме для псевдоожиженного слоя. Останавливали распыление после распыления 300,3 г раствора для покрытия. Сохраняли температуру псевдоожиженного слоя и продолжали псевдоожижение до тех пор, пока гранулы не становились достаточно сухими. Уменьшали псевдоожижение, и сохраняли температуру псевдоожиженного слоя, равной 35°С, в течение 10 минут. Гранулы не охлаждали. Отбирали образец, равный 2 г, для анализа влаги до тех пор, пока влажность не становилась ниже 1%. Выгружали покрытые гранулы в предварительно приготовленный и маркированный контейнер (с весом тары), выложенный изнутри двойными полиэтиленовыми мешками. Рассчитывали чистый вес гранул с наслаиванием лекарственного средства. Если влажность была больше 1%, смесь подвергали вакуумной сушке, как указано ниже: Настраивали лиофилизатор в соответствии с SOP EQP-OCM-00002. Загружали гранулы с наслаиванием лекарственного средства в лоток Lyoguard. Использовали способ 3 для высушивания смеси в течение
ночи. Разгружали высушенную смесь в сохраненные полиэтиленовые мешки. Измеряли конечное значение влажности высушенных гранул. Рассчитывали чистый вес высушенных гранул. Смешивание
Отбирали необходимую Avicel и пропускали через сито в 60 меш. Настраивали 4-qt (3,8-л) V-образный смеситель. Переносили высушенные гранулы с плеканатидом в V-образный смеситель. Сохраняли мешок для выгрузки конечной смеси. 2-3 раза смывали с лотка Lyoguard и мешка с использованием соответствующего количества отвешенной Avicel. Переносили смывки в 4-qt (3,8-л) V-образный смеситель. Переносили всю остающуюся предварительно отвешенную/отобранную Avicel в V-образный смеситель. Перемешивали в течение 2 0 минут. Отвешивали стеарат магния и пропускали его через сито в 60 меш. Загружали стеарат магния в 4-qt (3,8-л) V-образный смеситель. Обеспечивали, чтобы крышка была надежно надета без возможной утечки порошка во время перемешивания. Перемешивали в течение 2 минут. Отбирали образцы 3x350 мг смеси в трех местах. Определяли точный вес каждого образца, который был перенесен во флакон для образца.
Прессование
Настраивали таблеточный пресс Korsch в соответствии с SOP EQP-OCM-00087. Устанавливали инструментальную оснастку для 0,250" (6,35 мм) стандартной двояковыпуклой круглой таблетки. Получали результаты анализа смеси, и рассчитывали целевой вес таблетки. Приемлемый размах колебаний веса таблеток составлял ±5%. Загружали конечную смесь в бункер для пресс-порошка. Дозагружали, при необходимости. Регулировали массу наполнения для получения таблеток в диапазоне 95,0-105,0 мг и твердости в диапазоне 4-6 единиц твердости по Кнупу. Проверяли, чтобы ломкость составляла не более 1,0%. Периодически, каждые 5-10 мин, проверяли веса 5 таблеток для гарантии того, что вес таблетки находился в пределах диапазона. После записи веса таблеток измеряли и записывали твердость и толщину 3 таблеток во время периодической проверки веса. Продолжали прессование подходящих таблеток до исчерпания смеси. Когда прессование
проходило должным образом с достижением спецификаций, отмеченных выше, выполняли конечный тест на ломкость и записывали результаты (спецификация: не более 1,0%) .
Пример 17: Композиция таблетированного состава 1528-3172, изготовляемого с использованием гранул трегалозы, покрытых методом распыления, 1 мг
№ элемента
Ингредиент
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
1, 167
Гранулы трегалозы
70,881
Methocel Е5 Premium LV
0,50
TRIS
1,1524
Аскорбат кальция
0, 100
Очищенная вода
Не применимо
Порошковая трегалоза (в растворе для покрытия)
1,0176
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 200)
25, 00
Стеарат магния
0,2500
Всего
100
Процесс производства таблетированного состава 1528-3172, изготовляемого с использованием гранул трегалозы, покрытых методом распыления, описан ниже.
Приготовление раствора для покрытия
Добавляли очищенную воду в маркированный сосуд и начинали перемешивание. Перемешивали так, чтобы создавалось вихревое движение жидкости без введения воздуха. Медленно добавляли в раствор метоцел. Перемешивали до полного растворения метоцела. Нагревали раствор, если это необходимо для растворения метоцела (меньше или равно 50°С) . Записывали вид раствора.
Раствор при необходимости охлаждали до добавления других материалов. Добавляли в раствор трегалозу. Перемешивали до растворения материалов. Записывали вид раствора. Добавляли в раствор TRIS. Перемешивали до растворения материалов. Записывали вид раствора. Добавляли в раствор аскорбат кальция. Перемешивали до растворения материалов. Записывали вид
раствора. Достигали рН раствора: доводили рН раствора до 7,87,9 с помощью концентрированной НС1 с последующим доведением рН до 7,7-7,6 с помощью 10 н. НС1. Записывали конечный рН после доведения. Помещали раствор для покрытия в ледяную баню и оставляли в ледяной бане в течение 0,5-1 часа до достижения им температуры образования льда. Проверяли с помощью термометра для гарантии температуры образования льда. Отвешивали порции требуемого количества API в лодочке для взвешивания и осторожно добавляли каждую порцию в холодный раствор наполнителей. Энергично перемешивали, чтобы сделать возможным смачивание и растворение пептида в холодном растворе. Общее количество пептида было равно 14,00 6 г. Продолжали перемешивание раствора так, чтобы создавалось вихревое движение жидкости без введения воздуха. Перемешивали до полного растворения плеканатида. Сохраняли раствор пептида все время на холоде - в ледяной бане. Отвешивали 5,0 г WFI для смывания с контейнера для API. Осторожно смывали со стенки сосуда для раствора для покрытия и полностью переносили смывку обратно в сосуд для раствора для покрытия. Измеряли конечный рН раствора для покрытия. Измеряли чистый вес раствора для покрытия (приблизительно 354,2 г) . Раствор для покрытия использовался в возможно короткие сроки.
Процессы смешивания и прессования для партии 1528-3172-RD схожи с указанными, которые описаны выше для партии 1528-3171-RD.
Пример 18: Композиция содержащего 1 мг пептида таблетированного состава 1528-2925-RD, изготовляемого из сухой смеси
№ элемента
Ингредиент
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
1, 106
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 102)
98, 64
Стеарат магния
0,2500
Всего
100
Пример 19: Композиция содержащего 3 мг пептида таблетированного состава 1528-2926, изготовляемого из сухой смеси
№ элемента
Ингредиент
Концентрация, % в весовом отношении
SP304
3,318
Микрокристаллическая целлюлоза (Avicel РН 102)
96, 43
Стеарат магния
0,2500
Всего
100
Другие партии были приготовлены способами, схожими с теми, которые были описаны в примерах 9-12. Их композиции перечислены ниже.
Партия 500-55: 0,33% плеканатида, 95,17%
микрокристаллической целлюлозы, 4,0% натрия гликолята крахмала и 0,5% стеарата магния.
Партии 1528-2907-RD и 2010F 100А: 3,318% плеканатида, 96,43% Avicel и 0,25% стеарата Мд.
Партии 1528-2906-RD и 2010F099A: 1,106% плеканатида, 98,65% Avicel и 0,25% стеарата Мд.
Партии 1528-2890-RD и 2010F101A: 0,3246% плеканатида, 99,43% Avicel и 0,25% стеарата Мд.
Формульные композиции партий 11Н141, 11Н152 и 11Н14 0 в представленной ниже таблице (не описываемых ранее) являются одинаковыми с формульными композициями партий 2 010F101A, 2010F099A и 2010F100A, соответственно, для проверки стабильности в соответствии с надлежащей производственной практикой.
Пример 20: Стабильность содержащих плеканатид таблеток и капсул
Капсулы и таблетки различных партий были проверены в отношении их стабильности, и были предоставлены результаты. Кроме особо оговоренных случаев, 1М, 2М, ЗМ или 4М в представленных ниже таблетках означает, что измерения проводились в конце 1, 2, 3 или 4 месяцев периода хранения.
Сводка активностей
Эти проверки проводили посредством взятия составного образца из приблизительно 5 единиц для определения средней активности образца. В представленной ниже таблице приведена стабильность капсул или таблеток по показателю активности (% от количества, указанного на этикетке).
сухую смесь капсула)
11Н152 (1 мг, содержащая сухую смесь капсула)
102
Blister strip
11Н140(Змг, содержащая сухую смесь капсула)
105
Blister strip
152S-2925-RD (1 иг, изготовленная из сухой смеси таблетка)
Oxyguard 40 см3 с
PhamaKeep
103
1528-2926-RD (3 мг, изготовленная из сухой смеси таблетка)
100
Oxyguard 40 см3 с
PhamaKeep
1528-2907-RD (3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
1528-2907-RD (1 мг, содержащая сухую смесь капсула)
1528-2890-RD (0,3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
*Смесь.
Как доказывается представленной выше таблицей, не было или было незначительное поддающееся оценке уменьшение активности после хранения в условиях ускоренной деградации (40°С/75% относительной влажности или 30°С/65% относительной влажности), что позволяет предположить, что эти капсулы или таблетки могут быть стабильными при комнатной температуре в течение 18 месяцев или в течение более длительных периодов времени при хранении в холодильнике или при 2 5°С.
В представленной ниже таблице показано, что содержание воды было неизменным в течение периода проверки в упаковках, оцененных для различных составов в форме капсул/таблеток. Это дополнительно свидетельствовало о том, что продукты были стабильными.
Сводка содержания воды
Партия
Вода (в ходе процесса)
Упаковка
Содержание воды в упакованном продукте
Первона чальное
."""-относительная 4uu/ J J влажность
апг,/"относительная зииоз влажность
25С/60относительная влажность
8.5М
1528-2850-RD
(0,3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
32-номер; флакон из HDPE, 60 см3, N2, 2 г цеолита
5.03
5.64
3.00
2.22
2.39
5.48
1.8
32-номер, флакон OxyGuard, 40 см3, PharmaKeep KD-20
5.07
5.24
4.28
5.33
4.08
5.31
3.7
Блистер, N2
4.21
4.87
5.80
4.76
4.31
4.09
2.8
1528-2855-RD
(0,3 мг, содержащая покрытые гранулы капсула)
2.40
32-номер; флакон из HDPE, 60 см3, N2, 2 г цеолита
0.57
0.47
1.63
0.68
0.42
0.2
32-номер, флакон OxyGuard, 40 см3, PharmaKeep KD-20
2.10
1.05
1.29
2.07
0.30
0.8
Блистерный стрип
0.73
2.11
0.54
0.58
0.32
0.3
500-55 (0,3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Флакон из HDPE
5.63
4.19
5.51
5.79
2.98
2.7
Флакон OxyGuard
5.78
4.69
5.90
5.66
2.99
2.8
Блистерный стрип
4.09
5.78
4.17
5.53
6.16
3.12
2.9
1528-2850-B-RD
(0,3 мг, изготовленная из сухой смеси таблетка)
32-номер; флакон из HDPE, 60 см3, N2, 2 г цеолита
4.09
4.03
6.28
6.10
2.86
2.1
32-номер, флакон OxyGuard, 40 см3, PharmaKeep KD-20
4.81
4.91
6.15
6.30
4.05
3.4
1528-2851-RD (0,3 мг, изготовленная с использованием покрытых частиц таблетка)
3.32
32-номер; флакон из HDPE, 60 см3, N2, 2 г цеолита
4.33
4.50
5.09
5.90
2.55
1.5
32-номер, флакон OxyGuard, 40 см3, PharmaKeep KD-20
5.15
4.88
5.82
6.02
4.34
3.0
2010F100A(3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
4.7
4.5
4.6
4.4
4.5
4.7
4.4
4.5
4.8
4.4
4.5
4.8
4.5
2010F101A (0,3 мг, содержа щая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
4.5
4.8
4.7
4.7
4.5
4.7
4.3
4.4
4.7
4.3
4.5
4.7
4.2
2010F099A(1 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
4.6
4.4
4.6
4.4
4.5
4.5
4.3
4.4
4.6
4.4
4.2
4.7
4.3
11Н141 (0,3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
4.8
4.9
4.9
5.1
4.9
4.8
5.0
5.0
4.9
5.0
4.9
4.9
11Н152 (1 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
5.2
4.8
4.9
4.8
4.8
4.8
4.9
4.8
4.8
4.9
5.0
4.9
4.8
11Н140 (3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
5.2
5.0
5.0
5.0
4.9
5.0
5.0
4.9
5.0
4.9
4.9
4.9
4.8
1528-2925-RD(1i4r, изготовленная из сухой смеси таблетка)
Oxyguard 40 см3 с PhamaKeep
4.9
4.0
1528-2926-RD (3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Oxyguard 40 см3 с PhamaKeep
4.0
4.0
1528-2907-RD (3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Капсула без упаковки
4.78
1528-2906-RD (1 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Капсула без упаковки
4.84
1528-2890-RD
Капсула без упаковки
4.8
Сводка примесей
В представленной ниже таблице приведена стабильность продукта по показателю определяемого с помощью ВЭЖХ или UPLC общего содержания примесей в зависимости от времени и условий хранения. Представленные в таблице данные говорят о том, что увеличение общего содержания примесей в проверенных партиях, за исключением партии 500-55, не превышает 7% при комнатной температуре через 18 месяцев. Они также говорят о том, что увеличение общего содержания примесей во всех проверенных партиях 1528-2855-RD в различных упаковках не превышает 7% при 3 0°С через 18 месяцев. Также было отмечено, что увеличение примесей в партии 1528-2855-RD было меньше, чем в партии 1528-2850-RD, или партия 1528-2855-RD была более стабильной, чем партия 1528-2850-RD.
капсула)
11Н141 (0,3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
1.3
3.3
4.2
4.5
2.5
3.6
3.3
2.0
2.8
2.9
1.4
1.5
1.8
11Н152 (1 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
2.4
3.6
4.2
4.1
2.6
3.2
3.1
2.6
3.1
2.9
2.3
2.3
2.1
11Н140 (3 мг, содержащая сухую смесь капсула)
Блистерный стрип
2.1
3.5
3.7
4.5
2.6
2.7
3.3
2.5
2.7
2.9
2.3
2.2
1.8
1528-2925-RD (1 мг, изготовленная из сухой смеси таблетка)
Oxyguard 40 см3 с PhamaKeep
2.7
1.7
1528-2926-RD
(Змг, содержащая сухую смесь капсула)
Oxyguard 40 см3 с PhamaKeep
2.6
1528-2906-RD
Флакон из HDPE
1.83
5.18
1528-2907-RD
Флакон из HDPE
1.85
4.58
1528-2890-RD
Масса
1.9
Постоянство содержания
Эту проверку проводили посредством помещения 10 отдельных единиц капсул/таблеток в 10 отдельных флаконов, обладают ли отдельные капсулы или таблетки одинаковой активность (% (% от количества, указанного на этикетке).
0,3 мг, изготовленная из сухой смеси таблетка 1528-2850-B-RD
Образец
% от количества, указанного на этикетке
1528-2850-B-RD (сухие таблетки)
78, 62
91,43
86, 52
90, 9
84, 83
95, 29
75, 69
76, 87
84, 92
86,9
Среднее значение
85,2
Среднеквадратическое отклонение
6, 51
% относительного среднеквадратического отклонения
7,64
0,3 мг, изготовленная с использованием покрытых частиц
таблетка 1528-2851-RD
Образец
Вес (мг)
% от количества, указанного на этикетке
88,86
69, 5
94, 41
88, 89
94, 34
88, 6
72, 18
88,37
142,52
88, 6
149,44
89, 42
78, 8
88,56
131,08
89, 08
102,55
88,78
99, 13
Среднее значение
103,4
Среднеквадратическое отклонение
28, 53
% относительного среднеквадратического отклонения
27,59
0,3 мг, содержащая сухую смесь капсула 1528-2890
3 мг, содержащая сухую смесь капсула 1528-2907-RD
1 мг, содержащая сухую смесь капсула 1528-2906-RD
Образец
% от количества, указанного на этикетке
Образец
% от количества, указанного на этикетке
Образец
% от количества, указанного на этикетке
87,2
94,5
98,1
94,6
101,2
101,8
92,6
97,9
93,1
94,2
94,5
97,5
93,5
95,9
97,9
91,7
95,2
97,1
91,6
96,1
94,5
100,1
91,8
93,8
98,1
92,1
93,4
97,9
Среднее значение
92,8
Среднее значение
96,2
Среднее значение
97,6
Относительное среднеквадратическое отклонение
3,20%
Относительное среднеквадратическое отклонение
2,60%
Относительное среднеквадратическое отклонение
2,50%
AV(10)***
12,8
AV(10)
8,4
AV(10)
6,8
***AV = допустимое значение, используемое для постоянства содержания в Фармакопеи США <905> . В идеале AV не должно быть меньше 15, чтобы превысить значение для постоянства содержания в Фармакопеи США <905> .
0,3 мг, содержащая сухую смесь капсула 1528-2850-RD
Образец
Первоначальное приготовление, % от количества, указанного на этикетке
Повторное приготовление, % от количества, указанного на этикетке
82,73
85, 87
84, 57
89, 45
80,29
91,39
84, 88
88,45
85, 2
86, 96
82, 9
84, 84
84,75
86,21
86, 58
91,37
84,34
88,79
88, 82
84,75
Среднее значение
84,51
87, 81
Среднеквадратическое отклонение
2,288445
2,467121
% относительного среднеквадратического отклонения
2,7
2, 8
Образец Contel528-2855-RD
% от количества, указанного на этикетке
Образец 1528-2850B-RD
% от количества, указанного на этикетке
88,82
78,62
93,73
91,43
89,06
86,52
84,94
90,9
89,93
84,83
88,7
95,29
88,71
75,69
86,85
76,87
86,92
84,92
91,33
86,9
Среднее значение
88,9
Среднее значение
85,2
Среднеквадратическое отклонение
2,45
Среднеквадратическое отклонение
6,51
% относительного среднеквадратического отклонения
2,76
% относительного среднеквадратического отклонения
7,64
500-55
Образец
% от количества, указанного на этикетке
96,90%
99,40%
103,20%
96,90%
100,00%
99,60%
96,90%
102,80%
96,80%
93,90%
Среднее значение
98,60%
Среднеквадратическое отклонение
2, 91
Относительное среднеквадратическое отклонение
3, 00%
7,1 (превышающее значение)
Представленные в таблицах данные показывают, что партии достигают очень хорошего постоянства содержания, приемлемого для промышленного продукта.
Сводка растворения при 50 об./мин
В представленных ниже таблицах приведена сводка растворения лекарственного средства из капсул или таблеток в необычном устройстве небольшого объема, необходимом для определения небольшого количества лекарственного средства в единицах, используя медленное перемешивание, для поиска изменений растворения в динамике во времени. Проверка проводилась посредством помещения одной единицы в очень маленький объем воды при 37°С с использованием лопастной
мешалки со скоростью 50 об./мин (которая является медленной), и данные получали через 15, 30, 45 и 60 минут для выявления скорости высвобождения лекарственного средства в динамике во времени. Эти проверенные продукты являются твердыми лекарственными формами с "немедленным высвобождением" для перорального применения, и общепринятым требованием является высвобождение приблизительно 75% через приблизительно 45 минут. В таблицах суммированы результаты, полученные через 4 5 минут, и они указывают на то, что растворение было постоянным в динамике
Растворение (% от количества, указанного на этикетке через 45 минут)
Первона чальное
/1п/7с; относительная 4и/'° влажность
QrwR(- относительная JU/OO влажность
25С
Партия (описание)
Масса
1528-2855-RD (содержащая
покрытые гранулы капсула V-cap,
флакон из HDPE)
Сосуд
104
100
Сосуд
Сосуд
Сосуд
Сосуд
Сосуд
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
9.7
1528-2855RD (содержащая
покрытые гранулы капсула V-cap,
флакон OxyGuard)
Сосуд
104
Сосуд
Сосуд
Сосуд
Сосуд
Сосуд
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
5.3
12.1
1528-2855-RD (содержащая
покрытые гранулы капсула V-cap,
блистерный стрип)
Сосуд
104
100
Сосуд
Сосуд
Сосуд
Сосуд
Сосуд
102
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
22.4
9.2
Растворение (% от количества, указанного на этикетке через 45 минут)
Партия (описание)
Первоначальное
40°С/75% относительной влажности
30° С/6 5% относительной влажности
Масса
1528-1850B-RD (изготовленная с использованием покрытых частиц таблетка, флакон из HDPE)
Сосуд 1
90%
Сосуд 2
69%
Сосуд 3
83%
100
Сосуд 4
94%
Сосуд 5
88%
Сосуд 6
92%
Среднее значение
86%
Относительное среднеквадратическое отклонение
11%
8,2
5,6
1528-2850B-RD (изготовленная с
использованием покрытых частиц таблетка, флакон OxyGuard)
Сосуд 1
90%
Сосуд 2
69%
Сосуд 3
83%
Сосуд 4
94%
Сосуд 5
88%
Сосуд 6
92%
Среднее значение
86%
Относительное
среднеквадратическое
11%
9,6
4,0
отклонение
Растворение (% от количества, указанного на этикетке через 45 минут)
Первоначальное
40С/75относительная влажность
^ПГ /"^относительная ои^/и^влажность
25С
Партия (описание)
Масса
500-55 (содержащая сухую смесь капсула V-cap Plus, флакон из HDPE)
Сосуд 1
Сосуд 2
Сосуд 3
Сосуд 4
100
Сосуд 5
Сосуд 6
104
100
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
13.1
6.2
2.4
3.6
9.1
500-55 (содержащая сухую смесь капсула V-cap Plus, флакон OxyGuard)
Сосуд 1
103
Сосуд 2
101
103
Сосуд 3
Сосуд 4
Сосуд 5
100
101
Сосуд 6
104
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
13.1
5.3
2.7
2.7
4.3
500-55 (содержащая сухую смесь капсула V-cap Plus, блистерный стрип)
Сосуд 1
Сосуд 2
101
Сосуд 3
107
Сосуд 4
Сосуд 5
Сосуд 6
104
Среднее значение
100
Относительное :реднеквадратическоЕ отклонение
13.1
3.8
11.8
4.3
5.5
Сухая смесь 3 мг, партия 1528-2907-RD 500 мл
15 мин
3 0 мин
4 5 мин
60 мин
Сосуд 1
Сосуд 2
Сосуд 3
Сосуд 4
102
100
100
Сосуд 5
Сосуд 6
Среднее значение
Относительное
среднеквадратическое
2,7
2,5
1,1
1,4
отклонение
Сухая смесь 1 мг, партия 1528-2906-RD 150 мл
15 мин
3 0 мин
4 5 мин
60 мин
Сосуд 1
Сосуд 2
Сосуд 3
Сосуд 4
101
102
Сосуд 5
Сосуд 6
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
18, 8
2, 8
2,4
Сухая смесь 0,3 мг, партия 1528-2890-RD 50 мл
15 мин
3 0 мин
4 5 мин
60 мин
Сосуд 1
100
105
Сосуд 2
100
105
Сосуд 3
Сосуд 4
101
Сосуд 5
106
Сосуд 6
Среднее значение
102
Относительное среднеквадратическое отклонение
15, 6
2, 8
3,4
4,5
Растворение капсулы через 45 минут
Состояние при поступлении
25С
зос
40С
Партия (эффективность)
2011F101A(0,3 мг)
98%
99%
95%
95%
95%
92%
95%
94%
93%
97%
93%
90%
92%
2011F099A(1 мг)
96%
95%
95%
95%
91%
93%
94%
93%
90%
95%
95%
92%
93%
2011F100A (3 мг)
99%
101%
97%
97%
100%
95%
95%
98%
95%
95%
96%
93%
95%
11Н141 (0,3 мг)
101%
102%
101%
101%
105%
96%
106%
102%
97%
103%
99%
96%
98%
11Н152 (1 мг)
96%
96%
99%
97%
96%
99%
97%
96%
96%
98%
96%
96%
98%
11Н140 (3 мг)
102%
102%
102%
101%
105%
100%
97%
102%
99%
102%
101%
99%
96%
Растворение при 75 об./мин
В представленных ниже таблицах приведено несколько примеров, в которых скорость перемешивания была слегка увеличена до 75 об./мин для предоставления более непротиворечивых результатов, и они указывают на постоянное растворение после хранения в условиях ускоренной деградации в течение 1 или 2 месяцев при 40°С и 75% относительной влажности.
Сухая смесь 0,3 мг, партия 1528-2850-RD 1 месяц, 40°С/75% относительной влажности, 75 об./мин, 50 мл
15 мин
3 0 мин
4 5 мин
60 мин
Сосуд 1
Сосуд 2
Сосуд 3
Сосуд 4
Сосуд 5
Сосуд 6
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
10,3
4,5
2,3
2,2
Сухая смесь 1 мг, партия 1528-2906A-RD 2 месяца, 40°С/75% относительной влажности, 75 об./мин, 50 мл
15 мин
3 0 мин
4 5 мин
60 мин
Сосуд 1
Сосуд 2
Сосуд 3
Сосуд 4
Сосуд 5
Сосуд б
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
7,2
6, 4
3,3
3, 8
Растворение 2855-RD
Все представленные ниже таблицы являются профилями растворения партии 1528-2850-RD, и они указывают на постоянное
1М 40С/75относительная влажность Блистерная упаковка
2М 30С765относительная влажность Блистерная упаковка
Сосуд
мин
мин
мин
мин
мин
мин
мин
мин
100
100
ЗМ 30С/65относительная влажность OxyGuard
ЗМ 25С/60относительная влажность OxyGuard
мин
мин
мин
мин
мин
мин
мин
мин
103
11.7
5.7
5.3
4.6
20.1
17.4
12.1
10.4
ЗМ 30С/65относительная влажность HDPE
ЗМ 25С/60относительная влажность HDPE
мин
мин
мин
мин
мин
мин
мин
мин
22.6
9.7
7.3
30.6
19.6
13.3
ЗМ 30С/65относительная влажность Блистерная упаковка
ЗМ 25С/60относительная влажность Блистерная упаковка
мин
мин
мин
мин
мин
мин
мин
мин
100
102
100
104
100
100
100
102
104
Среднее значение
Относительное среднеквадратическое отклонение
40.5
32.1
22.4
14.9
37.0
17.0
9.2
5.3
Партии 2850-RD, 2850B-RD, 2851-RD и 500-55 были также проверены схожим образом, и все они продемонстрировали постоянное высвобождение лекарственного средства в динамике времени.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Дозированный состав для перорального применения, включающий по меньшей мере один пептид-агонист GCC и один или более фармацевтически приемлемых наполнителей, причем количество пептида-агониста GCC в каждой стандартной дозе составляет от 0,01 до 10 мг, и пептид-агонист GCC выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO: 9 и 8.
2. Дозированный состав для перорального применения, включающий по меньшей мере один пептид-агонист GCC и один или более фармацевтически приемлемых наполнителей, причем количество пептида-агониста GCC в каждой стандартной дозе составляет от 0,01 до 10 мг, пептид-агонист GCC выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-54 и 56-249, и пептид-агонист GCC имеет хроматографическую степень чистоты, составляющую не менее 91%.
3. Дозированный состав для перорального применения по п.2, в котором пептид-агонист GCC имеет хроматографическую степень чистоты, составляющую не менее 92% или не менее 95%.
4. Дозированный состав для перорального применения по п.2, в котором пептид-агонист GCC имеет общее содержание примесей, составляющее не более 9, 7, б или 5%.
5. Дозированный состав для перорального применения по п.2, который по существу не содержит неорганические кислоты и карбоновые кислоты.
6. Дозированный состав для перорального применения по п.2, в котором пептид-агонист GCC выбран из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 8, 9 и 56.
7. Дозированный состав для перорального применения по п.2, в котором количество пептида-агониста GCC в каждой стандартной дозе составляет 0,1, 0,3, 1,0, 3,0, 6,0, 9,0 или 9,5 мг.
8. Дозированный состав для перорального применения по п.2, где состав представляет собой твердый состав, и стандартной дозой является порошок, гранула, саше, пастилка, таблетка или капсула.
9. Дозированный состав для перорального применения по п.2, в котором один или более фармацевтически приемлемых
3.
наполнителей включают инертный носитель.
10. Дозированный состав для перорального применения по п. 9, в котором инертный носитель выбран из маннита, лактозы, микрокристаллической целлюлозы или крахмала.
11. Дозированный состав для перорального применения по п. 10, в котором инертный носитель имеет размер частиц, составляющий от 50 до 900 микрон.
12. Дозированный состав для перорального применения по п.2, в котором один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включают соль двухвалентного катиона.
13. Дозированный состав для перорального применения по п. 12, в котором солью является хлорид кальция или аскорбат кальция.
14. Дозированный состав для перорального применения по п.2, в котором один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включают аминокислоту или амин, и молярное соотношение между аминокислотой и пептидом-агонистом GCC составляет от 2:1 до 30:1.
15. Дозированный состав для перорального применения по п. 14, в котором аминокислотой является лейцин, гистидин или аргинин.
16. Дозированный состав для перорального применения по п. 2, который состоит из пептида-агониста GCC, инертного носителя и смазывающего вещества.
17. Дозированный состав для перорального применения по п. 2, который состоит из пептида-агониста GCC, инертного носителя, соли двухвалентного катиона, аминокислоты, покровного вещества и необязательно смазывающего вещества.
18. Дозированный состав для перорального применения по
п.17, в котором инертным носителем является
микрокристаллическая целлюлоза, а смазывающим веществом
является стеарат магния.
19. Дозированный состав для перорального применения по п.18, в котором солью двухвалентного катиона является хлорид кальция или аскорбат кальция, аминокислотой является лейцин, гистидин или аргинин, а покровным веществом является
10.
гипромеллоза.
20. Дозированный состав для перорального применения по п. 2, в котором пептид-агонист GCC устойчив к деградации в течение периода времени, составляющего по меньшей мере 18 месяцев, при 30°С и 65% относительной влажности или по меньшей мере 18 месяцев при 25°С и 60% относительной влажности, или по меньшей мере 18 месяцев при 2-8°С.
21. Дозированный состав для перорального применения по п.2, который находится в форме капсулы или таблетки.
22. Дозированный состав для перорального применения по п. 21, где капсула или таблетка находится в блистерной упаковке или блистерном стрипе.
23. Дозированный состав для перорального применения по п.22, где пептид-агонист GCC находится в растворе или суспензии в липофильной жидкости.
24. Дозированный состав для перорального применения по п.23, где стандартной дозой является заполненная жидкостью капсула.
25. Дозированный состав для перорального применения по п.2, где жидкостью является рафинированное масло специального назначения или среднецепочечный триглицерид или родственный сложный эфир.
26. Способ производства дозированного состава для перорального применения, включающего по меньшей мере один пептид-агонист GCC, включающий:
(a) предоставление водного раствора, включающего: пептид-
агонист GCC, выбираемый из группы, состоящей из SEQ ID N0: 1-54
и 56-24 9, и одного или более фармацевтически приемлемых
наполнителей, причем концентрация пептида-агониста GCC
находится в диапазоне от 10 до 60 мг/мл; и
(b) нанесение водного раствора на фармацевтически
приемлемый носитель для создания покрытого пептидом-агонистом
GCC носителя.
27. Способ по п.2 6, в котором один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включают соль
27.
двухвалентного катиона, причем двухвалентный катион выбирают из Са2+, Mg2+, Zn2+ и Мп2+.
28. Способ по п.26, в котором один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включают аминокислоту, выбираемую из лейцина, гистидина и аргинина.
29. Способ по п.26, в котором один или более фармацевтически приемлемых наполнителей включают покровное вещество.
30. Способ по п.29, в котором покровным веществом является гипромеллоза.
31. Способ по п.2 6, в котором водный раствор имеет рН выше 4 или 5.
32. Способ по п.2 6, в котором пептид-агонист GCC выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 8, 9 и 56.
33. Способ по п.2 6, в котором водный раствор по существу не содержит неорганические кислоты и карбоновые кислоты.
34. Способ по п.2 6, который дополнительно включает сушку покрытого пептидом-агонистом GCC носителя.
35. Дозированный состав для перорального применения, изготовленный способом по п.2 6, в котором пептид-агонист GCC устойчив к деградации в течение периода времени, составляющего по меньшей мере 18 месяцев при 30°С и 65% относительной влажности или по меньшей мере 18 месяцев при 25°С и 60% относительной влажности, или по меньшей мере 18 месяцев при 2-8°С.
36. Способ лечения или предупреждения заболевания или нарушения у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту дозированного состава для перорального применения по п. 2 .
37. Способ по п.36, в котором заболеванием или нарушением является заболевание или нарушение желудочно-кишечного тракта, выбираемое из группы, состоящей из синдрома раздраженной толстой кишки, хронического идиопатического запора, неязвенной диспепсии, хронической псевдонепроходимости кишечника, функциональной диспепсии, псевдонепроходимости ободочной кишки,
30.
дуоденогастрального рефлюкса, желудочно-пищеводного рефлюкса, запора, пареза желудка, изжоги, рака желудка и инфекции Н. pylori.
38. Способ по п.36, в котором пептид-агонист GCC выбирают
из группы, состоящей из SEQ ID N0: 1, 8, 9 или 56.
39. Способ по п.3 6, который дополнительно включает введение субъекту эффективного количества ингибитора cGMP-специфической фосфодиэстеразы.
40. Способ по п.3 6, который дополнительно включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного слабительного.
41. Способ по п.3 6, который дополнительно включает введение субъекту эффективного количества по меньшей мере одного противовоспалительного средства.
42. Фармацевтическая композиция, содержащая дозированный состав для перорального применения по п.2.
По доверенности
ю о ш о ш о
(|човь) ииИемэфэУ иоао!эи
Otf BIAieda 99Htf0dQ
519048
ошэНэн a |/\ias оиэиь ээнНэс)э
(ииэ^эн a lAiaSO оиоиь ээнИэсф
SdSa ou exHeho кенчиэУэнэжэ BbHtfedo
шшиэЛ емнэГю деняиэНэнэжэ tftrntfado
BidocjDiAiOMOi/itT' ojOHhamMH-OHhotfAL/aMt иинэтьЛиЛ go xkitncHetngooo 'ао±> .эч.дЛэ %
Таблица I
Таблица I
Таблица
Таблица I
Таблица I
Таблица IV
Таблица IV
Таблица V
Таблица V
Таблица V
136
136
137
137
138
138
139
139
167
170
170
1/6
1/6
2/6
2/6
3/6
3/6
4/6
4/6