EA201400983A1 20150227 Номер и дата охранного документа [PDF] EAPO2015\PDF/201400983 Полный текст описания [**] EA201400983 20130305 Регистрационный номер и дата заявки EP12158253.0 20120306 Регистрационные номера и даты приоритетных заявок EP2013/054449 Номер международной заявки (PCT) WO2013/131931 20130912 Номер публикации международной заявки (PCT) EAA1 Код вида документа [pdf] eaa21502 Номер бюллетеня [**] АМИНОМЕТИЛЕНПИРАЗОЛОНЫ С ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Название документа [8] C07D417/04, [8] C07D417/14, [8] A61K 31/4184, [8] A61K 31/428, [8] A61K 31/4439, [8] A61K 31/4436, [8] A61P 35/00 Индексы МПК [NL] Хоэй Ван Онно, [NL] Схалкен Якобус Антониус, [NL] Витор Хендрик Энгелбертус, [NL] Пит Деннис Патрик, [NL] Мас Петрус Эмманюэл Мария, [NL] Тейхёйс Йоханн Хейнрих, [NL] Деренберг Сирик, [NL] Спренкелс Нанда Элизабет, [NL] Тан Сиу Ха Сведения об авторах [NL] КОМПАУНД ХЭНДЛИНГ Б.В., [NL] СТИХТИНГ КАТОЛИКЕ УНИВЕРСИТЕЙТ Сведения о заявителях
 

Патентная документация ЕАПВ

 
Запрос:  ea201400983a*\id

больше ...

Термины запроса в документе

Реферат

[RU]

Соединение, имеющее структуру в соответствии с формулой III

в котором X представляет собой NH или S; R 1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил; R 2 представляет собой (1С-4С)алкил, фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, при этом алкил, фенил или ароматическое кольцо являются необязательно замещенными одной или несколькими группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро; R 3 и R 4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (3С-6С)циклоалкил, фенил, моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, моноциклическое неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, фенилом, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пиразинилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим один или более N-, О- или S-атомов в кольце, в котором каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом; или R 3 и R 4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето(1С-4С)алкилом; R 5 представляет собой Н, Cl, F, Br, Me, NO 2 , т-бутил, OCF 3 , ОСН 3 , CF 3 ; R 6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген; R 7 представляет собой Н, F, Cl, Br, Me, NO 2 , т-бутил, OCF 3 , ОСН 3 , CF 3 ; или его фармацевтически приемлемые соли присоединения для применения в лечении карциномы, в частности для задержки, предотвращения или реверсирования развития метастаз при раке предстательной железы.


Полный текст патента

(57) Реферат / Формула:

Соединение, имеющее структуру в соответствии с формулой III

в котором X представляет собой NH или S; R 1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил; R 2 представляет собой (1С-4С)алкил, фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, при этом алкил, фенил или ароматическое кольцо являются необязательно замещенными одной или несколькими группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро; R 3 и R 4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (3С-6С)циклоалкил, фенил, моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, моноциклическое неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, фенилом, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пиразинилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим один или более N-, О- или S-атомов в кольце, в котором каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом; или R 3 и R 4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето(1С-4С)алкилом; R 5 представляет собой Н, Cl, F, Br, Me, NO 2 , т-бутил, OCF 3 , ОСН 3 , CF 3 ; R 6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген; R 7 представляет собой Н, F, Cl, Br, Me, NO 2 , т-бутил, OCF 3 , ОСН 3 , CF 3 ; или его фармацевтически приемлемые соли присоединения для применения в лечении карциномы, в частности для задержки, предотвращения или реверсирования развития метастаз при раке предстательной железы.


1411445
АМИНОМЕТИЛЕНПИРАЗОЛОНЫ С ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области медикаментозного лечения карциномы, в частности, с применением соединения с базовой структурой аминометиленпиразолона.
Предшествующий уровень техники
Карциномы, которые являются раковыми опухолями, происходящими из эпителиальных тканей, включают в себя наиболее опасные виды рака. Рак желудка, мочевого пузыря и пищевода являются примерами карцином эпителиального происхождения. Железистая ткань часто имеет эпителиальное происхождение, так что рак молочной железы, рак простаты и рак поджелудочной железы также принадлежат к группе раковых новообразований эпителиального происхождения.
Если карцинома диагностирована на ранней стадии и еще локализована, заболевание излечимо хирургической операцией, лучевой терапией с или без (нео)адъюванта, и вероятность выживания высокая (> 90%). Однако, на ранних стадиях раковые опухоли могут расти медленно и могут оставаться ограниченными локально в течение многих лет, не вызывая выраженных симптомов. Печально известным в этом отношении является рак предстательной железы. Поэтому такие виды рака часто остаются недиагностированными до тех пор, пока раковые клетки уже не распространились за пределы предстательной железы в окружающие ткани (местное распространение) или впоследствии мигрировали (метастазировали) через кровоток или лимфатическую систему в другие участки тела.
Прогрессивный рост эпителиального рака и инвазивное метастазирование подразумевают многоступенчатый процесс. Опухоли могут в целом не увеличиваться свыше определенного размера из-за отсутствия кислорода и других необходимых питательных веществ. Однако, опухоли стимулируют рост кровеносных сосудов с помощью секреции различных факторов роста, которые стимулируют рост капилляров в опухоль для подачи питательных веществ, что позволяет опухоли распространяться. Этот физиологический процесс называется ангиогенезом. Ангиогенез является нормальным и жизненно важным процессом роста и развития, например, при заживлении ран, но также является основной ступенью в перерождении опухолей из небольших безвредных скоплений клеток в злокачественную опухоль. Ангиогенез также необходим для распространения или метастазирования опухоли. Отдельные раковые клетки могут
отрываться от развившейся солидной опухоли, входить в кровеносный сосуд и переноситься в удаленные места, где они могут внедряться и приводить к началу роста вторичной опухоли. Такое распространение в другие ткани (метастазирование) включает инвазию в другие части тела мезенхимальных клеток. Инвазия и распространение раковых клеток определяются эпителиально-мезенхимальным переходом (ЕМТ). Распространению в другие ткани предшествует переход эпителиальных клеток в мезенхимальные клетки, обозначаемый как эпителиально-мезенхимальный переход (ЕМТ). Вследствие этого клетки рака в начальной стадии приобретают мезенхимальные, фибробластоподобные свойства и проявляют пониженную межклеточную адгезию и повышенную подвижность, наделяя клетки рака в начальной стадии инвазивными и метастатическими свойствами. При обратном процессе, мезенхимально-эпителиальном переходе (МЕТ), образуются новые вторичные опухоли в других местах. Много пациентов умирает, когда диагностирована агрессивная форма рака, при которой раковые клетки распространились или метастазировали.
Важно повысить эффективность медикаментозного лечения с помощью создания соединений, которые могут создавать помехи метастазированию клеток, в частности соединений, которые могут реверсировать ЕМТ или препятствовать процессу ЕМТ.
Существует несколько методов лечения карцином, но они имеют ограниченный успех и не обеспечивают стойкого выздоровления. Для рака предстательной железы или молочной железы эндокринная терапия, также называемая терапией гормональной депривацией, уже давно рассматривается в качестве основной супрессивной терапии для контроля новообразований. Ее цель заключается в ограничении выработки организмом гормонов. Тем не менее, существующая эндокринная терапия не вылечивает рак предстательной или молочной железы. Кроме того, стало очевидно, что экспансивный рост раковых клеток, которые становятся невосприимчивыми (резистентными) к доступным в настоящий момент методам эндокринной терапии, является неизбежным. Кроме того, было обнаружено, что в большинстве раковых заболеваний на поздних стадиях сигнальный путь, опосредованный гормональным рецептором, по-прежнему активен, даже при чрезвычайно низких уровнях гормонов. На этих стадиях рак больше не может быть вылечен с помощью существующей терапии и часто приводит к прогрессированию в заболевание со смертельным исходом.
Разрабатываются новые химиотерапевтические препараты, демонстрирующие улучшенное быстродействие и пролонгированную выживаемость. Одним из примеров является доцетаксел (Таксотер). К сожалению, химиотерапия достигает всех частей организма, а не только раковых клеток. Установлено, что данные терапевтические методы
имеют серьезные побочные эффекты. Пациентам будут обеспечены низкое число клеток
крови, тошнота, рвота, боли в животе, понос, выпадение волос, импотенция, недержание и
другие нежелательные симптомы. В результате, побочные эффекты значительно снижают
качество жизни пациентов. Многие ученые убеждены, что данная терапия не оставляет
места для будущих усовершенствований и вплотную подошла к концу жизненного цикла
своего продукта. Доцетаксел представляет собой существующий стандарт лечения
пациентов, которые являются невосприимчивыми к имеющимся в настоящее время
методам эндокринной терапии. Ввиду ограниченного терапевтического потенциала
доцетаксела, а также с учетом лучшего понимания этиологии заболевания и
усовершенствованной ранней диагностики, существует неотложная потребность в новых
терапевтических стратегиях для профилактики прогрессирования, лечения опухоли и
предотвращения метастазирования. В настоящем изобретении новые соединения и новое
применение таких соединений в этих новых терапевтических стратегиях обнаружены в
химической группе с базовой структурой 4-(аминометилен)-2-(2-бензотиазолил)-2,4-
дигидро-ЗЯ-пиразол-З-она или 4-(аминометилен)-2-(1Я-бензимидазол-2-ил)-2,4-дигидро-
ЗЯ-пиразол-З-она. В работе Wu et al (J. Med. Chem, vol. 55 - 2597-2605; 2012) соединение
2-(2-бензотиазо лил)-4- [ 1 - [ [(3,4-дихлорфенил)метил] амино] этилиден] -2,4-дигидро-5-
(трифторметил)-ЗЯ-пиразол-З-он показано в таблице, при этом в одном из
использованных биохимических анализов проявляется некоторая слабая активность при
ингибировании 5-липоксигеназы. Данная активность не подтверждается вторым анализом,
так что гипотетическая связь с какой-либо терапевтической активностью не может быть
подтверждена на основе этой информации. В опубликованных текстах по предложенным
ингибиторам О-связанного и N-связанного гликозилирования гликана две структуры
соединений в данной химической группе, а именно 2-(2-бензотиазолил)-4-[1-[(2-
этоксифенил)амино]этилиден]-2,4-дигадро-5-фенил-ЗЯ-пиразол-3-он и 2-(2-
бензотиазолил)-2,4-дигидро-4-[[[(4-метоксифенил])метил]амино]метилен]-5-фенил-ЗЯ-пиразол-3-он, изображены без указания способа синтеза. В данном контексте обсуждается возможность терапевтической активности таких ингибиторов, но такая цель достоверно не подтверждена в качестве модели для любой цели лечения. Соединения с указанными выше базовыми структурами, видимо, также прошли скрининговые тесты с мишенями для антибактериального действия (US 20030229065), "увеличения продолжительности жизни" (WO 2009086303, US 2009163545), гербицидной и фунгицидной активности (ЕР 0274642), мышечной дистрофии (WO 2007/091106) и противовоспалительного действия с помощью ингибирования фосфодиэстеразы (PDE4) (WO 2008/045664). В WO 2005/094805 соединение 2-(2-бензотиазолил)-4-[(диметиламино)метилен]-2,4-дигидро-5-метил-ЗЯ-
пиразол-3-он используется в качестве промежуточного продукта синтеза. В соединениях, описанных Reis et.al. (Eur. J. Med. Chem., Vol. 46, pp. 1448-1452, 2011)), структура аминометиленпиразолона может быть выявлена в фиксированной структуре пиразолохинолинов. Ни одно из этих описаний не связано с настоящим изобретением.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение предлагает соединения, имеющие структуру в соответствии с формулой I,
в которых:
X представляет собой NH или S;
R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил;
R представляет собой (1С-4С)алкил, фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, при этом алкил, фенил или ароматическое кольцо являются необязательно замещенными одной или несколькими группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро;
R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (ЗС-бС)циклоалкил, фенил, моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, моноциклическое неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, фенилом, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пиразинилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим один или более N-, О или S-атомов в кольце, при этом каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом; или
R3 и R4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил,
пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидин, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето( 1 С-4С)алкилом;
R5 представляет собой Н или CF3;
R6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген;
и их фармацевтически приемлемые соли присоединения.
Такие соединения могут предпочтительно применяться для терапии, т.е. для профилактики или лечения заболевания. Более конкретно, они могут применяться для профилактики или лечения карциномы. Еще более конкретно, соединения по изобретению могут применяться для лечения или предотвращения метастазирования карциномы.
Термин "карцинома" употребляется в настоящем документе, чтобы указать на рак эпителиального происхождения, более конкретно, - на заболевание, выбранное из группы, состоящей из рака желудка, рака мочевого пузыря, рака пищевода, рака молочной железы, рака предстательной железы или рака поджелудочной железы. В частности, предпочтительным является применение для лечения или профилактики метастаз рака предстательной железы.
В более конкретном варианте осуществления изобретение относится к соединению, имеющему структуру и значения символов в соответствии с формулой I, и в котором R3 и R4 независимо представляют собой водород, метил, этил или пропил или группу, как представлено в следующем перечне структур:
или R и R образуют вместе необязательно замещенное кольцо, как представлено в следующих структурах
Другие варианты осуществления изобретения представляют собой соединения в соответствии с определенными выше вариантами осуществления, но в них R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил; R2 представляет собой (1С-4С)алкил, фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, при этом алкил, фенил или ароматическое кольцо являются необязательно замещенными одной или несколькими группами, выбранными из (1С-4С)алкила, OCF3 или галогена; и R5 и R6 представляют собой водород; или их фармацевтически приемлемые соли присоединения.
Предпочтительными вариантами осуществления изобретения являются варианты, определенные выше, но в которых X обозначает S.
Другими предпочтительными вариантами осуществления являются определенные выше варианты, в которых R1 представляет собой Н или (1С-4С) алкил, и в которых R2 представляет собой (1С-4С)алкил или фенил.
Другие предпочтительные варианты осуществления являются определенными выше вариантами, в которых и R3 и R4 представляют собой метил или в которых R3 представляет собой водород, и R4 определен выше в соответствующих вариантах осуществления.
Более конкретными вариантами осуществления являются определенные выше
варианты, но в которых R6 представляет собой (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген.
Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение в соответствии с формулой II
Формула II
или его фармацевтически приемлемую соль присоединения.
В другом варианте осуществления изобретения предложено соединение, имеющее структуру в соответствии с формулой I,
в котором:
X представляет собой NH или S;
R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил;
R^ представляет собой -Z или -Y-Z, где Y обозначает -СН2- ИЛИ -СН2-СН2~, и Z обозначает фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, которые необязательно замещены одной или более группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро,
или Z обозначает тиен-2-ил, необязательно замещенный в положении 3, 4 или 5 галогеном;
или Z обозначает N-метилпиррол-З-ил или бензо[Ь]тиен-2-ил или 2-нафталинил;
R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (ЗС-бС)циклоалкил, фенил, моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, моноциклическое неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, фенилом, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пиразинилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим один или более N-, О или S-атомов в кольце, причем каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси,
галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом;
или R3 и R4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето( 1 С-4С)алкилом;
R5 представляет собой Н или CF3;
R6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген;
или его фармацевтически приемлемые соли присоединения.
В предпочтительном варианте осуществления предложено соединение, имеющее структуру в соответствии с формулой I, в которой X обозначает S; R1 представляет собой Н; R представляет собой Z, и Z обозначает фенил, необязательно замещенный в мета- или параположении или в обоих положениях, одним или двумя заместителями, выбранными из перечня, состоящего из -NO2, галогена, CF3, (1С-4С)алкила и метокси; или Z обозначает тиен-2-ил, необязательно замещенный в положении 3, 4 или 5 галогеном; или Z обозначает N-метилпиррол-З-ил или бензо[Ь]тиен-2-ил или 2-нафталинил; R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или СН3, СН3; R5 является Н; и R6 является Н, галогеном или метокси.
В другом варианте осуществления соединение определяется как в предыдущем
параграфе, но R представляет собой фенил, необязательно замещенный в мета- или параположении или в обоих положениях, одним или двумя заместителями, выбранными из перечня, состоящего из галогена, CF3, (1С-4С)алкила и метокси, или R представляет собой тиен-2-ил, необязательно замещенный в положении 3, 4 или 5 галогеном, или R2 представляет собой N-метилпиррол-З-ил или бензо[Ь]тиен-2-ил или 2-нафталинил.
в котором:
X представляет собой NH или S;
R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил;
В другом варианте осуществления изобретения предложено соединение, имеющее структуру в соответствии с формулой III,
R представляет собой -Z или -Y-Z, где Y обозначает -СНг- или -СН2-СН2-, и Z обозначает фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, которые необязательно замещены одной или более группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро,
или Z обозначает тиен-2-ил, необязательно замещенный в положении 3, 4 или 5 галогеном;
или Z обозначает N-метилпиррол-З-ил или бензо[Ь]тиен-2-ил или 2-нафталинил;
R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (ЗС-бС)циклоалкил, фенил, моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, моноциклическое неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, фенилом, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пиразинилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим один или более N-, О или S-атомов в кольце, причем каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом;
или R3 и R4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето( 1 С-4С)алкилом;
R5 представляет собой Н, CI, F, Br, Me, N02, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3;
R6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген;
R7 представляет собой Н, F, CI, Br, Me, NO2, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3;
или его фармацевтически приемлемые соли присоединения.
В более конкретном варианте осуществления предложено соединение, имеющее структуру, соответствующую формуле III, в которой X представляет собой S; R1 представляет собой Н; R представляет собой Z, и Z обозначает фенил, необязательно замещенный в мета- или параположении или в обоих положениях, одним или двумя заместителями, выбранными из перечня, состоящего из -NO2, галогена, CF3, (1С-4С)алкила и метокси; или Z обозначает тиен-2-ил, необязательно замещенный в
положении 3,4 или 5 галогеном; или Z обозначает N-метилпиррол-З-ил, или бензо[Ь]тиен-2-ил, или 2-нафталинил; R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или СНз,СНз; R5 является Н; и R является Н, галогеном или метокси; R является Н или С1.
Во всех описанных выше вариантах осуществления, за исключением тех вариантов, в которых R6 является Н, соединение предпочтительно включает R6, являющийся метокси.
Другой более конкретный вариант осуществления изобретения представляет собой соединение в соответствии с формулой III,
в котором X представляет собой S;
R1 представляет собой Н, СНз;
R представляет собой CF3, СНз, фенилэтил, v-^, в/ , VJ , ^вг
"CcRa
или ^^R", где Ra обозначает Н, F, CI, Br, I, NO2, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и Rb обозначает Н, О или СНз;
R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или СН3, СНз, или один из R3 или R4 является -CN
или п-метоксифенилметилом, или R3 и R4 вместе представляют кольцоС^, включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 и R4 вместе представляют
кольцо^--/, включающее азот формулы III, представляющее пирролидинил, или R
4 /4> с|
является метилом, и R является дихлорбензилом а ;
R5 представляет собой Н, CI, F, Br, Me, N02, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3;
R6 представляет собой Н, F, CI, Br, N02, СН3, т-бутил, ОСН3, OCF3, CF3;
R7 представляет собой Н, F, CI, Br, Me, N02, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3.
Более предпочтительный вариант осуществления представляет собой соединение в соответствии с формулой III, в котором
X представляет собой S;
R1 представляет собой Н, СНз;
R представляет собой CF3, СН3, фенилэтил, ^^> , V--1, в/, YJ , ^вг
или ^^R", где Ra обозначает Н, F, CI, Br, I, N02, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и Rb обозначает Н, С1 или СНз;
R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или СНз, СНз, или один из R3 или R4 является -CN
или п-метоксифенилметилом, или R3 и R4 вместе представляют кольцо С^, включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 и R4 вместе представляют кольцо
, включающее азот формулы III, представляющее пирролидинил, или R3 является
метилом, и R является дихлорбензилом а ; R5 представляет собой Н, О;
R6 представляет собой Н, F, CI, NO2, СНз, т-бутил, ОСНз или OCF3; R7 представляет собой Н, О.
Другой более предпочтительный вариант осуществления представляет собой соединение в соответствии с формулой III, в котором X представляет собой S; R1 представляет собой Н;
R представляет собой CF3, СНз, фенилэтил, ^V, вк , \J , вг или
,R"
4RB, где Ra обозначает Н, F, CI, Br, I, NO2, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и Rb обозначает Н, С1 или СНз;
R3, R4 являются Н, Н, или Н, СНз, или вместе представляют кольцо включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 является метилом, и
R является дихлорбензилом а ; R5 представляет собой Н;
R6 представляет собой Н, CI, N02, СН3, ОСН3, OCF3; R7 представляет собой Н.
Другой более конкретный предпочтительный вариант осуществления представляет собой соединение в соответствии с формулой III, в которой X представляет собой S; R1 представляет собой Н;
, <0, i\ -О * ^Х, ГДе R-
R2 представляет собой CF3, СН3 обозначает Н, F, CI, Br, I, NO2, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и Rb обозначает Н, О или СНз;
R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или вместе представляют кольцо
включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R является метилом, и
4 /^0~°
R является дихлорбензилом а ; R5 представляет собой Н;
R6 представляет собой Н, CI, N02, СН3, ОСН3, OCF3;
R представляет собой Н.
Во всех вариантах осуществления указанные соединения содержат также их фармацевтически приемлемые соли присоединения.
Дополнительным вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение в соответствии с формулой III и определенное как в вариантах осуществления с формулой III выше, но в котором R3 или R4 не является п-метоксифенилметилом.
Соединение согласно изобретению также представляет собой соединение для применения при лечении карциномы в соответствии с формулой I,
в котором:
X представляет собой NH или S;
R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил;
R представляет собой -Z или -Y-Z, где Y обозначает -СН2- или -СН2-СНг- и Z обозначает фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, которые необязательно замещены одной или более группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро,
или Z обозначает тиен-2-ил, необязательно замещенный в положении 3, 4 или 5 галогеном;
или Z обозначает N-метилпиррол-З-ил или бензо[Ь]тиен-2-ил или 2-нафталинил;
R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (ЗС-бС)циклоалкил, моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, моноциклическое неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пиразинилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим один или более N-, О или S-атомов в кольце, при этом каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом;
или R3 и R4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, шшеразинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето( 1 С-4С)алкилом;
R5 представляет собой Н или CF3;
R6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген;
или его фармацевтически приемлемые соли присоединения.
Другой вариант осуществления изобретения представляет собой соединение в соответствии с формулой I, в которой:
X представляет собой NH или S;
R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил;
R2 представляет собой моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, при этом ароматическое кольцо является необязательно замещенным одной или несколькими группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро;
R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (ЗС-бС)циклоалкил, моноциклическое неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, в котором каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксолом, образующими кольцо; или
R3 и R4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето( 1 С-4С)алкилом;
R5 представляет собой Н или CF3;
R6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген;
и его фармацевтически приемлемые соли присоединения.
Более конкретным вариантом осуществления изобретения является соединение в соответствии с формулой III,
в котором X представляет собой S;
R1 представляет собой Н, СНз;
." ...- - <0. 73. Чгвг. А
R представляет собой фенилэтил, ^V, ^-, вг , XJ , ^вг или
, где Ra обозначает Н, F, CI, Br, I, NO2, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и Rb обозначает Н, О или СН3;
R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или СНз, СНз, или один из R3 или R4 является -CN
или п-метоксифенилметилом, или R3 и R4 вместе представляют кольцо 0^, включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 и R4 вместе представляют кольцо
^~-~У, включающее азот формулы III, представляющее пирролидинил, или R является
метилом, и R является дихлорбензилом ci ;
R5 представляет собой Н, CI, F, Вг, Me, N02, т-бутил, OCF3, ОСН3; предпочтительно R5 является Н, С1;
R6 представляет собой Н, F, CI, Вг, N02, СН3, т-бутил, ОСН3, OCF3, CF3;
R7 представляет собой Н, F, CI, Вг, Me, N02, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3; предпочтительно R7 является Н или С1.
Наиболее предпочтительным является соединение в соответствии с формулой III,
в котором X представляет собой S;
R1 представляет собой Н;
R2 представляет собой ^^\^, в/ , YJ или ^^R" , где Ra обозначает F, С1, Br, I, метил, этил, изопропил, т-бутил, или CF3, и Rb обозначает Н, О или СНз;
R3, R4 являются Н, Н или Н, СН3, или вместе представляют кольцо 0^, включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 является метилом, и
4 ^Qra
R является дихлорбензилом а ; R5 представляет собой Н;
R6 представляет собой Н, CI, N02, СН3, ОСН3, OCF3; R7 представляет собой Н.
Если варианты осуществления определены как характеристики соединения, данное изобретение также предусматривает применение соединений в терапии, в частности, карциномы, такой как рак желудка, рак мочевого пузыря, рак пищевода, рак молочной железы, рак предстательной железы или рак поджелудочной железы, и в частности, для пациентов, у которых диагностировано метастазирование карциномы, в частности, рака
предстательной железы.
Осуществление изобретения
Термины, используемые в описании, имеют следующее значение:
Префикс (1С-4С) относится к числу 1-4 атомов углерода в алкильной, алкенильной
или алкинильной группе. Данное определение включает в себя, среди прочего, метил,
этил, пропил, изопропил, бутил, третичный бутил, винил, этинил, циклопропил и
пропинил.
Гало или галоген означает фтор, хлор, бром, йод.
Галоалкил, галоалкенил или галоалкинил означают соответственно алкил, алкенил и алкинил, замещенные одним или несколькими галогенами.
Фармацевтически приемлемая соль присоединения является известной в области фармацевтики, такой как хлорид, малеат, лактат и т.д.
Следует понимать, что соединения в соответствии с изобретением существуют в таутомерных формах, когда R3 и/или R4 являются водородом. Как показано в формулах А, В и С ниже, система с двойной связью в области аминометиленпиразолона [А] может сдвигаться к иминометилпиразолону в [В], таким образом делокализация, представленная в формуле [С], будет эквивалентным образом отражать соединения по изобретению. В любом случае, эти таутомерные формы подпадают под определение соединений по изобретению, как описано с помощью формул.
Кроме того, двойная связь у метилена, или метилидена, если R обозначает алкил, и имино-связь может находиться в конфигурации Z или Е. Соединение по изобретению не определено относительно данной изомерии. Только результат синтеза указанных соединений определяет и, тем самым, косвенно выявляет эту характеристику конкретных соединений.
Соединение по изобретению может быть получено, например, начиная с получения ядра 2,4-дигидропиразол-З-она, который синтезировали путем реакции конденсации-циклизации соответствующих гидразинов и сложных ацетоацетатных эфиров или в этаноле или в смесях этанол/уксусная кислота при температурах кипения, где X=S, и в метаноле, содержащем каталитическое количество концентрированной НС1, где X=N. Продукт циклизации обычно собирают с помощью фильтрации, промывая осадок на фильтре этанолом и высушивая под вакуумом.
На второй стадии реакции, полученный таким образом 1,2-дигидропиразол-З-он подвергают реакции аминометиленирования в THF при комнатной температуре. Выпавший в осадок продукт может быть очищен с помощью фильтрации, промывая осадок на фильтре подходящим растворителем и высушивая под вакуумом.
На третьей и последней стадии аминометилиденпиразол-3-он очищают подходящим первичным амином в метаноле или этаноле при комнатной температуре или при любой температуре, доводимой до температуры кипения растворителя реакции. Продукт может быть очищен с помощью фильтрации и промывки метанолом или этанолом и высушивания под вакуумом.
Фармацевтически приемлемая соль присоединения соединения может быть получена в соответствии с общепринятыми способами. Соли обычно получают путем объединения свободного основания с неорганическими или органическими кислотами, такими как соляная, фумаровая, малеиновая, лимонная или янтарная кислота.
Терапевтический или профилактический эффект соединения по изобретению могут быть получены с помощью введения соединения пациенту (человеку или животному, мужского или женского пола), нуждающемуся в лечении, путем введения соединения или наружно, местно или системно. Любой энтеральный или парентеральный путь, как, например, трансдермальный, трансмукозальный, пероральный, ректальный, интравенозный, внутримышечный или подкожный, может быть выбран в качестве наиболее подходящего в зависимости от состояния пациента и местоположения раковых клеток. Введению будет значительно способствовать производство фармацевтических композиций, содержащих соединение по изобретению. Фармацевтическая лекарственная форма соединения по изобретению может быть получена в соответствии со способами, известными в области техники, варьируя от обычных драже, таблеток и растворов до более сложных лекарственных форм для депо-препаратов или препаратов, адаптированных для конкретных путей введения. Резорбция соединения по изобретению пациентом может быть облегчена или замедлена с помощью фармацевтических добавок.
При терапевтическом применении можно выбрать определенные режимы введения для непрерывного или многократного суточного дозирования, или для четко определенных режимов лечения в течение некоторого периода времени, например недели, месяца или других непрерывных или перемежающихся периодов. В области терапии рака часто необходимо или предпочтительно использовать более одного способа для борьбы с заболеванием. Соединение по изобретению подходит для комплексного лечения вместе с другими видами терапии.
Подбор дозы зависит от путей введения, типа и состояния пациента, проходящего терапию. Эффективная однократная или суточная доза обычно находится в диапазоне от 0,001-1000 мг на одного пациента или выраженная в количестве на кг веса пациента, в частности, учитывая пациентов с малым весом (например, детей или животных), - от 0,0001 до 100 мг/кг. Предпочтительным диапазоном является 0,01-5 мг/кг или 1-350 мг для среднего пациента-человека.
Не желая останавливаться на теории применения изобретения, было установлено, что важный вклад в терапевтический механизм соединений по изобретению может заключаться во вмешательстве в процесс инвазии в здоровую ткань, как, например, взаимодействие между клетками рака предстательной железы и микросредой костной
ткани.
Для определения эффективности соединений по изобретению авторы использовали модельный анализ, основанный на миграции клеток в камере миграции. Данная модель является принятой в области техники как предоставляющая репрезентативные данные относительно способности клеток метастазировать.
Авторы обнаружили, что предпочтительное соединение по изобретению ингибирует инвазию опухолевых клеток более чем на 25%. Особенно предпочтительное соединение также демонстрирует дозозависимую антиинвазивную активность свыше 40%. Соединения по изобретению, таким образом, способны препятствовать приобретению инвазивного фенотипа рака предстательной железы у человека с помощью ингибирования процесса ЕМТ. Более сильнодействующие соединения для данного эффекта являются наиболее предпочтительными ввиду уменьшения дозы, необходимой для применения в
75%
Лечение мышей 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-фенил-2,4-дигидро-пиразол-3-оном сопровождалось уменьшением количества поражений костей и массы опухолевых метастаз. Раковые клетки и опухолевая масса контролировались с помощью биолюминесцентной визуализации всего тела. Данные показывают, что соединение по изобретению влияет на образование de novo скелетных метастаз клетками PC-3M-Pro41uc+ in vivo. Такое тестирование in vivo может привести к дальнейшему отбору, предпочтению, деселекции или отбраковыванию отдельных соединений для дальнейших программ
разработки соединения для применения в рецептурном лекарственном средстве. Конкретным соединением, представляющим интерес для такого передового тестирования, является 4-(аминометилен)-2-(2-бензотиазолил) -2,4-дигидро-5-(3-хлорфенил)-3#-пиразол-3-он. Примеры
Пример 1. Получение 4-[1-аминометилиден1-2-бензотиазол-2-ил-5-(2-метоксифенилУ2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 1,00 г (4,45 ммоль) этил(2-метоксибензоил)ацетата И 743 мг (4,45 ммоль) 2-гидразинобензотиазола в 15 мл этанола, содержащий несколько капель АсОН, кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота. После выпаривания растворителя реакции и замены его простым диэтиловым эфиром, содержащим небольшое количество ацетона, осадок фильтровали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 1,33 г (4,11 ммоль, 92%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(2-метоксифенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСО-ёб): 5 12,40 (bs, 1Н), 8,05 (d, 1Н), 7,90 (d, Ш), 7,80 (s, Ш), 7,50 (m, 2Н), 7,40 (t, 1Н), 7,20 (d, 1Н), 7,10 (m, Ш), 6,05 (s, 1Н), 3,90 (s, ЗН).
К раствору 722 мг (2,23 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(2-метоксифенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 15 мл THF добавляли диметилацеталь Ы,> 1-диметилформамида (326 мкл, 2,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего реакционную смесь разбавляли небольшим количеством простого диэтилового эфира. Твердые вещества отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 824 мг (2,18 ммоль, 98%) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-(2-метоксифенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСОч16): 8 8,00 (d, 1Н), 7,75 (d, Ш), 7,50 (t, Ш), 7,40 (m, 2Н), 7,30 (m, 2Н), 7,20 (d, 1Н), 7,10 (t, 1Н), 3,80 (s, ЗН), 3,70 (s, ЗН), 3,35 (s, ЗН).
Суспензию 625 мг (1,65 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-(2-метоксифенил)-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл этанола и 10 мл 25% аммиачного раствора нагревали до 60°С в атмосфере азота в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли небольшим количеством воды, твердую фазу отфильтровывали, промывали этанолом и высушивали с получением 481 мг (1,37 ммоль, 83%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2 -ил-5-(2-метоксифенил) -2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМССМб): 5 9,40 (bs, 2Н), 8,00 (d, Ш), 7,80 (d, 1Н), 7,70 (s, 1Н), 7,45 (т, ЗН), 7,30 (t, 1Н), 7,20 (d, 1Н), 7,10 (t, 1Н), 3,80 (s, ЗН). Пример 2. Получение 4-Г1-аминометилиден1-2-бензотиазол-2-ил-5-фенил-2,4-дигидро-пиразол-3-она.
Раствор 1,75 г (9,08 ммоль) этилбензоилацетата и 1,50 г (9,08 ммоль) 2-гидразинобензотиазола в 30 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 4 часов в атмосфере азота. После охлаждения до комнатной температуры, осадок отфильтровывали, промывали холодным этанолом, простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 1,66 г (5,66 ммоль, 62%) 2-бензотиазол-2-ил-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она в виде белого твердого вещества. !Н-ЯМР (ДМСО-с16): 5 12,90 (bs, 1Н), 8,05 (d, 1Н), 7,90 (ш, ЗН), 7,50 (m, 4Н), 7,30 (t, 1Н), 6,10 (s, Ш).
К раствору 190 мг (0,648 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь Ы^-диметилформамида (90 мкл, 0,680 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре в атмосфере азота, твердую фазу отфильтровывали, промывали ацетоном и высушивали с получением 125 мг (0,359 ммоль, 55%) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в виде желтого твердого вещества. 1 Н-ЯМР (ДМСО-d6): 5 8,00 (d, 1Н), 7,80 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,65 (m, 2H), 7,55 (m, 3H), 7,40 (t, 1H), 7,30 (t, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,40 (s, 3H).
Суспензию 100 мг (0,287 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в 5 мл 25% аммиачного раствора нагревали до 120°С в сосуде под давлением в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали водой и высушивали с получением 48 мг (0,150 ммоль, 52%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-фенил-2,4-дигидро-пиразол-3-она в виде желтого твердого вещества. !Н-ЯМР ОЩСО-йб): 8 9,05 (bs, 2Н), 8,00 (m, 2Н), 7,85 (d, 1Н), 7,75 (m, 2Н), 7,55 (т, ЗН), 7,45 (t, 1Н), 7,30 (t, Ш).
Пример 3. Получение 4-[1-аминометилиден]-2-(1Н-бензоимидазол-2-ил)-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 500 мг (3,37 ммоль) 2-гидразино-1Н-бензимидазола и 713 мг (3,70 ммоль) этилбензоилацетата в 15 мл метанола, содержащий каталитическое количество концентрированной НС1. Реакционную смесь перемешивали при 65°С в атмосфере азота в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры, осадок отфильтровывали и высушивали с получением 966 мг (3,09 ммоль, 92%) 2-(1Н-бензоимидазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-З-она в качестве хлористоводородной соли. !Н-ЯМР (ДМСОч16): 8 7,95 (m, 2Н), 7,65 (т, 2Н), 7,45 (т, ЗН), 7,20 (т, 2Н), 6,10 (s, 1Н).
К суспензии 100 мг (0,36 ммоль) хлористоводородной соли 2-(1Н-бензоимидазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она в 5 мл диоксана добавляли диметилацеталь N,N-диметилформамида (52 мкл, 0,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч
при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и разбавляли небольшим количеством простого диэтилового эфира. Твердую фазу отфильтровывали, промывали диэтиловым эфиром и высушивали с получением 99 мг (0,30 ммоль, 83%) 2-(1Н-бензоимидазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в виде желтого твердого вещества. !Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 13,40 (bs, 1Н), 8,55 (bs, 2Н), 7,70 (s, 1Н), 7,65 (m, 2Н), 7,55 (т, ЗН), 7,20 (т, 2Н), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 50 мг (0,15 ммоль) 2-(1Н-бензоимидазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в 3 мл 25% аммиачного раствора нагревали до 65°С в атмосфере азота в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали и высушивали с получением 32 мг (0,11 ммоль, 70%) 4-[1-аминометилиден]-2-(1Н-бензоимидазол-2-ил)-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в виде желтого твердого вещества. 'Н-ЯМР (ДМСО-ёб): 8 12,20 (bs, 1Н), 9,40 (bs, 2Н), 8,05 (m, 1Н), 7,70 (m, 2Н), 7,50 (m, 5Н), 7,10 (m, 2Н). Пример 4. Получение 4-[1-аминометилиден1-2-(4-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3 -она.
4-хлоробензотиазол-2-иламин (5,04 г, 27,29 ммоль) суспендировали в 35 мл этиленгликоля при комнатной температуре в атмосфере азота. Гидразингидрат (3,98 мл, 81,87 ммоль) добавляли с последующим добавлением концентрированной соляной кислоты (2,24 мл, 27,29 ммоль), и полученную реакционную смесь нагревали на масляной бане до 150°С. После 1,5 ч формировался осадок, и нагревание продолжали в течение еще 1,5 ч, после чего смесь охлаждали, добавляли воду и полученную твердую фазу отфильтровывали, промывали водой и высушивали с получением 5,33 г (26,69 ммоль, 98%) (4-хлоробензотиазол-2-ил)гидразина. 'Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 9,40 (bs, Ш), 7,62 (d, Ш), 7,25 (d, Ш), 6,95 (t, 1Н), 5,15 (bs, 2Н).
Раствор 1,09 г (5,46 ммоль) (4-хлоробензотиазол-2-ил)гидразина и 1,15 г (6,01 ммоль) этилбензоилацетата в 30 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 2 дней в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали и осадок собирали с помощью фильтрации, промывали небольшим количеством EtOH и высушивали с получением 1,56 г (4,76 ммоль, 87%) 2-(4-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ЦМСО-с1б): 8 12,80 (bs, Ш), 8,05 (d, 1Н), 7,85 (m, 2Н), 7,60-7,40 (т, 4Н), 7,35 (t, 1Н), 6,15 (s, 1Н).
К раствору 657 мг (2,00 ммоль) 2-(4-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она в 20 мл THF добавляли диметилацеталь !Ч,> 1-диметилформамида (293 мкл, 2,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной
температуре в атмосфере азота, после чего твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 681 мг (1,78 ммоль, 89%) 2-(4-хлоробензотиазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она. *Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 7,95 (d, Ш), 7,60 (т, ЗН), 7,55 (т, 4Н), 7,25 (t, Ш), 3,75 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 545 мг (1,42 ммоль) 2-(4-хлоробензотиазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N аммиачного раствора в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством EtOH и высушивали с получением 460 мг (1,37 ммоль, 91%) 4-[1-аминометилиден]-2-(4-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР ЩМСО-аб): 8 9,45 (bs, 2Н), 8,00 (m, 2Н), 7,75 (т, 2Н), 7,50 (т, 4Н), 7,35 (t, Ш). Пример 5. Получение 4-[1-аминометилиден]-2-(5-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3 -она.
5-хлорбензотиазол-2-тиол (5,21 г, 25,83 ммоль) растворяли в 50 мл DMF при комнатной температуре в атмосфере азота. К реакционной смеси добавляли 4,28 г (31.00 ммоль) карбоната калия и 1,93 мл (31,00 ммоль) метилиодида, и перемешивание продолжали в течение ночи, после чего ТСХ (силикагель, 25% ЕЮАс в РЕ 40/60) показывала полное расходование исходного материала. Воду добавляли к реакционной смеси и полученную твердую фазу отфильтровывали, промывали водой и высушивали с получением 5,35 г (24,80 ммоль, 96%) 5-хлоро-2-метилсульфанилбензотиазола. !Н-ЯМР (ДМСО-с1б): 8 8,05 (d, 1Н), 7,90 (s, Ш), 7,40 (d, Ш), 2,75 (s, ЗН).
Смесь 5-хлоро-2-метилсульфанилбензотиазола (5,03 г, 23,32 ммоль) и гидразингидрата (11,33 мл, 233,17 ммоль) в 5 мл ЕЮН нагревали в атмосфере азота до 100°С. После 3 ч в реакционной смеси формировался обильный осадок, после чего суспензию охлаждали, добавляли воду и полученную твердую фазу собирали, промывали водой и высушивали с получением 4,43 г (22,83 ммоль, 95%) (5-хлоробензотиазол-2-ил)гидразина. !Н-ЯМР {ДМСО-с16)\ 8 9,10 (bs, Ш), 7,65 (d, Ш), 7,30 (s, 1Н), 6,95 (d, Ш), 5,10(bs,2H).
Раствор 935 г (4,68 ммоль) (5-хлоробензотиазол-2-ил)гидразина и 990 мг (5,15 ммоль) этилбензоилацетата в 30 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали и осадок собирали с помощью фильтрации, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 970 мг (2,96 ммоль, 63%) 2-(5-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМС0-с16): 8 13,00 (bs, 1Н), 8,05 (d, 1Н), 7,90 (т, ЗН),
7,50 (m, ЗН), 7,40 (t, 1H), 6,10 (s, 1H).
К раствору 800 мг (2,44 ммоль) 2-(5-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она в 20 мл THF добавляли диметилацеталь И,> 1-диметилформамида (357 мкл, 2,68 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего добавляли простой эфир и твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 790 мг (2,06 ммоль, 85%) 2-(5-хлоробензотиазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСО-Лб): 8 8,05 (d, 1Н), 7,85 (s, Ш), 7,70 (s, Ш), 7,60-7,40 (m, 5Н), 7,35 (d, 1Н), 3,75 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 650 мг (1,70 ммоль) 2-(5-хлоробензотиазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N аммиачного раствора в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение 24 ч. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 439 мг (1,38 ммоль, 82%) 4-[1-аминометилиден]-2-(5-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР ЩМСО-йб): 8 9,50 (bs, 2Н), 8,05 (m, 2Н), 7,90 (s, 1Н), 7,75 (т, 2Н), 7,50 (т, ЗН), 7,40 (t, Ш).
Пример 6. Получение 4-Г1-аминометилиден"|-2-(6-хлоробензотиазол-2-илУ5-фенил-2,4-дигидропиразол-3 -она.
6-хлоробензотиазол-2-иламин (5,44 г, 27,84 ммоль) суспендировали в 35 мл этиленгликоля при комнатной температуре в атмосфере азота. Гидразингидрат (4,06 мл, 83,52 ммоль) добавляли с последующим добавлением концентрированной соляной кислоты (2,28 мл, 27,84 ммоль), и полученную реакционную смесь нагревали на масляной бане до 150°С. После 3 ч смесь охлаждали, выливали на воду и полученную твердую фазу отфильтровывали, промывали водой и высушивали с получением 4,98 г (24,94 ммоль, 90%) (6-хлоробензотиазол-2-ил)гидразина. 'Н-ЯМР (ДМСО-dG): 8 9,15 (bs, Ш), 7,70 (s, 1Н), 7,25 (d, 1Н), 7,15 (d, Ш), 5,05 (bs, 2Н).
Раствор 1,06 г (5,28 ммоль) (6-хлоробензотиазол-2-ил)гидразина и 1,01 г (5,82 ммоль) этилбензоилацетата в 25 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 5 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь отфильтровывали теплой, промывали ЕЮН и высушивали с получением 580 мг (4,76 ммоль, 34%) 2-(6-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО^б): 8 13,00 (bs, Ш), 8,20 (s, Ш), 7,90 (ш, ЗН), 7,50 (m, 4Н), 6,10 (s, Ш).
К раствору 580 мг (1,77 ммоль) 2-(6-хлоробензотиазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она в 20 мл THF добавляли диметилацеталь ^К-диметилформамида
(282 мкл, 2,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 628 мг (1,78 ммоль, 93%) 2-(6-хлоробензотиазол-2-ил)-4- [ 1 -диметиламинометилиден] -5 -фенил-2,4-дигидропиразол-3 -она. !Н-ЯМР (ДМСО-йб): 5 8,15 (s, Ш), 7,80 (d, Ш), 7,70 (s, Ш), 7,60 (m, 2Н), 7,50 (т, ЗН), 7,45 (d, Ш), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 420 мг (1,10 ммоль) 2-(6-хлоробензотиазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N аммиачного раствора в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение 24 ч. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 275 мг (0,775 ммоль, 70%) 4-[ 1 -аминометилиден] -2-(6-хлоробензотиазол-2-ил)-5 -фенил-2,4-дигидропиразол-3 -она. 1Н-ЯМР (ДМСО-йб): 6 9,50 (2bs, 2Н), 8,20 (s, 1Н), 8,00 (bs, Ш), 7,80 (d, 1Н), 7,70 (m, 2Н), 7,50 (m, 4Н).
Пример 7. Получение 4-[1-аминометилиден|-2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-5-(3-трифторметилфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она.
6-метоксибензотиазол-2-иламин (7,20 г, 40,00 ммоль) суспендировали в 40 мл этиленгликоля при комнатной температуре в атмосфере азота. Гидразингидрат (5,80 мл, 120,00 ммоль) добавляли с последующим добавлением концентрированной соляной кислоты (3,28 мл, 40,00 ммоль), и полученную реакционную смесь нагревали на масляной бане до 150°С. После 2,5 ч смесь охлаждали, добавляли воду и полученную твердую фазу отфильтровывали, промывали водой и высушивали с получением 7,09 г (36,31 ммоль, 91%) (6-метоксибензотиазол-2-ил)гидразина. !Н-ЯМР ЩМСО-йб): 5 8,75 (s, Ш), 7,30 (s, Ш), 7,20 (d, 1Н), 6,80 (d, 1Н), 4,90 (bs, 2Н), 3,70 (s, ЗН).
Раствор 789 мг (4,04 ммоль) (6-метоксибензотиазол-2-ил)гидразина и 9,95 мг (4,04 ммоль) метил(3-трифторбензоил)ацетата в 30 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 1,06 г (2,71 ммоль, 67%) 2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-5-(3-трифторметилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР ЩМСО-йб): 8 12,80 (bs, 1Н), 8,20 (m, 2Н), 7,80 (т, 2Н), 7,70 (t, 1Н), 7,60 (s, 1Н), 7,10 (d, Ш), 6,20 (s, Ш), 3,80 (s, ЗН).
К раствору 458 мг (1,17 ммоль) 2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-5-(3-трифторметилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 20 мл THF добавляли диметилацеталь Ы^-диметилформамида (171 мкл, 1,29 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляли простой
диэтиловый эфир, чтобы вызвать осаждение. После дополнительного часа перемешивания, объем реакционной смеси концентрировали до приблизительно 10% от первоначального объема, добавляли простой диэтиловый эфир, и твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 450 мг (1,00 ммоль, 86%) 2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-(3-трифторметилфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСО-(16): 5 8,00-7,80 (т, ЗН), 7,80-7,70 (т, ЗН), 7,55 (s, 1Н), 7,05 (d, Ш), 3,80 (s, ЗН), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 355 мг (0725 ммоль) 2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-4-[1-
диметиламинометилиден]-5-(3-трифторметилфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N
аммиачного раствора в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение ночи.
После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали,
промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 280 мг (0,669
ммоль, 92%) 4-[1-аминометилиден]-2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-5-(3-
трифторметилфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР ЩМСО-йб): 5 9,50 (2bs, 2Н), 8,10 (т, ЗН), 7,85 (d, 1Н), 7,75 (т, 2Н), 7,60 (s, 1Н), 7,05 (d, 1Н), 3,80 (s, ЗН).
Пример 8, Получение 4- [ 1 -аминометилиден] -2-бензотиазол-2-ил-5 -(3 -
трифторметилфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она.
Раствор 1,80 г (7,31 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,21 г (7,31 ммоль) сложного метилового эфира 3-(3-трифторметилфенил)-3-оксопропионовой кислоты в 50 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 2,12 г (5,87 ммоль, 80%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-трифторметилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-с16): 5 13,00 (bs, 1Н), 8,20 (m, 2Н), 8,05 (d, 1Н), 7,90 (d, 1Н), 7,80 (s, Ш), 7,70 (m, Ш), 7,50 (t, Ш), 7,40 (t, 1Н), 6,25 (s, 1Н).
К раствору 414 мг (1,15 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-трифторметилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь 1Ч,М-диметилформамида (160 мкл, 1,20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляли небольшое количество простого диэтилового эфира и твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 398 мг (0,956 ммоль, 83%) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден] -5-(3 -трифторметилфенил)-2,4-дигидропиразол-3 -она. 1 Н-ЯМР ЩМСО-йб): 5 8,00-7,70 (м, 7Н), 7,50 (t, Ш), 7,45 (t, 1Н), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 239 мг (0,574 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-(3-трифторметилфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N аммиачного раствора в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение ночи.
После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 163 мг (0,420 ммоль, 73%) 4-[1 -аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-трифторметилфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. *Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 9,60 (bs, 2Н), 8,10 (m, 4Н), 7,90 (т, 2Н), 7,80 (т, Ш), 7,45 (t, 1Н), 7,30 (t, Ш).
Пример 9. Получение 4-["1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-хлорфенил)-2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 1,00 г (4,20 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 730 мг (4,20 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3-хлорфенил)-3-оксопропионовой кислоты в 20 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 1,25 г (3,81 ммоль, 91%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-хлорфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 13,00 (bs, Ш), 8,10 (d, 1Н), 8,00-7,80 (ш, ЗН), 7,50 (ш, ЗН), 7,40 (t, 1Н), 6,20 (s, 1Н).
К раствору 647 мг (1,97 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-хлорфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 15 мл THF добавляли диметилацеталь МД^-диметилформамида (288 мкл, 2,17 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре в атмосфере азота. Твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 706 мг (1,84 ммоль, 94%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-хлорфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 8,00 (d, Ш), 7,80 (d, Ш), 7,70 (2s, 2Н), 7,60 (ш, ЗН), 7,40 (t, 1Н), 7,30 (t, Ш), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 424 мг (1,11 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-хлорфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 5 мл ЕЮН и 20 мл 25% водного аммиачного раствора нагревали до 60°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 386 мг (1,09 ммоль, 98%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-хлорфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-йб): 8 9,60 (bs, 2Н), 8,10 (s, Ш), 8,00 (d, Ш), 7,90 (s, 1Н), 7,85 (d, 1Н),7.65 (m, 2Н), 7,45 (т, 2Н), 7,30 (t, Ш).
Пример 10. Получение 4-[1-аминометилиден"|-2-бензотиазол-2-ил-5- (3-метилфенил)-2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 801 мг (4,85 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,00 г (4,20 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3-метилфенил)-3-оксопропионовой кислоты в 25 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 22 ч в атмосфере азота, охлаждали,
твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством холодного ЕЮН и высушивали с получением 1,41 г (4,59 ммоль, 95%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-метилфенил)-1,2-дигидропиразол-З-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 12,90 (bs, 1Н), 8,10 (d, 1Н), 7,90 (d, Ш), 7,75 (s, Ш), 7,70 (d, 1Н), 7,50 (t, 1Н), 7,40-7,20 (m, 4Н), 6,10 (s, 1Н), 2,40 (s, ЗН).
К раствору 525 мг (1,71 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-метилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь Ы^-диметилформамида (238 мкл, 1,79 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 565 мг (1,56 ммоль, 91%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-метилфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСО-с16): 5 8,00 (d, 1Н), 7,80 (d, 1Н), 7,70 (s, Ш), 7,50-7,20 (м, 6Н), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН), 2,40 (s, ЗН).
Суспензию 350 мг (0,966 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-метилфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N аммиачного раствора в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 300 мг (0,897 ммоль, 93%) 4-[1-аминометилиден] -2-бензотиазол-2-ил-5-(3 -метилфенил)-2,4-дигидропиразол-3 -она. 1Н-ЯМР {ДМСО-с16): б 9,45 (bs, 2Н), 8,00 (m, 2Н), 7,80 (d, Ш), 7,60 (s, 1Н), 7,55 (d, Ш), 7,457,30 (т, 4Н), 2,40 (s, ЗН).
Пример 11. Получение 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5- (3-метоксифенил)-2,4-дигидропиразол-З -она.
Раствор 1,23 г (7,44 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,65 г (7,44 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3-метоксифенил)-3-оксопропионовой кислоты в 40 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 1,68 г (5,20 ммоль, 70%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-метоксифенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР ЩМСО-йб): 5 13,00 (bs, 1Н), 8,10 (d, 1Н), 7,90 (d, Ш), 7,55-7,30 (m, 5Н), 7,05 (m, 1Н), 6,10 (s, 1Н),3,85 (s, ЗН).
К раствору 504 мг (1,56 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-метоксифенил)-1,2-
дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь М,К-диметилформамида
(217 мкл, 1,64 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной
температуре в атмосфере азота. Твердую фазу отфильтровывали, промывали ацетоном и
высушивали с получением 549 мг (1,45 ммоль, 93%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-
метоксифенил)-4- [ 1 -диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3 -она. 1 Н-ЯМР
{ДМСО-de): 8 8,00 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,45 (m, 2H), 7,30 (t, 1H), 7,15 (m, 2H), 7,10 (d, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 3,40 (s, 3H).
Суспензию 266 мг (0,703 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-метоксифенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N аммиачного раствора в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 168 мг (0,479 ммоль, 68%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-метоксифенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. 1Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 9,40 (bs, 2Н), 8,00 (m, 2Н), 7,85 (d, 1Н), 7,45 (m, 2Н), 7,40-7,20 (т, ЗН), 7,10 (d, 1Н), 3,80 (s, ЗН).
Пример 12. Получение 4-|"1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бром-4-метилфенил> 2,4-дигидропиразол-3-она.
К суспензии 376 мг NaH (9,39 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в 30 мл сухого THF в атмосфере азота медленно добавляли диэтилкарбонат (1,14 мл, 9,39 ммоль) и З-бром-4-метилацетофенон (1,00 г, 4,69 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 4 часов, после чего ТСХ (силикагель, ЕЮАс/РЕ 40-60 2:3) показывала полное расходование исходного материала. Смесь охлаждали, медленно добавляли 20 мл воды с последующим добавлением 10 капель АсОН и экстракцией 2x200 мл ЕЮ Ас. Объединенные органические слои промывали 20 мл воды, 20 мл насыщенного солевого раствора, высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением 1,34 г сложного этилового эфира 3-(3-бром-4-метилфенил)-3-оксопропионовой кислоты, который использовали без дальнейшей очистки. 'Н-ЯМР (CDC13): 8 8,15 (s, 1Н), 7,80 (d, Ш), 7,40 (d, Ш), 4,20 (q, 2Н), 3,90 (s, 2Н), 2,50 (s, ЗН), 1,30 (t, ЗН).
Раствор 776 мг (4,70 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,34 г (4,70 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3-бром-4-метилфенил)-3-оксопропионовой кислоты в 15 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством холодного ЕЮН и высушивали с получением 1,80 г (4,66 ммоль, 99%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бром-4-метилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР ЩМСО-йб): 8 12,90 (bs, Ш), 8,10 (s, 1Н), 8,05 (d, Ш), 7,90 (d, 1Н), 7,80 (d, 1Н), 7,50 (m, 2Н), 7,40 (t, 1Н), 6,15 (s, Ш), 2,40 (s, ЗН).
К раствору 630 мг (1,63 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бром-4-метилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь И^-диметилформамида (240 мкл, 1,79 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Твердую фазу отфильтровывали, промывали простым
диэтиловым эфиром и высушивали с получением 610 мг (1,38 ммоль, 85%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бром-4-метилфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСО-dS): 8 8,00 (d, Ш), 7,80 (m, 2Н), 7,70 (s, 1Н), 7,50 (m, 2Н), 7,45 (t, 1Н), 7,30 (t, 1Н), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН), 2,40 (s, ЗН).
Суспензию 250 мг (0,583 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бром-4-метилфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 5 мл ЕЮН и 5 мл 25% водного аммиачного раствора нагревали до 60°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 185 мг (0,448 ммоль, 77%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бром-4-метилфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-d6): 8 9,50 (bs, 2Н), 8,10 (s, 1Н), 8,05 (d, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,85 (d, 1H),7.65 (d, 1H), 7,50 (m, 2H), 7,35 (t, 1H), 2,40 (s, 3H).
Пример 13. Получение 4-[1-аминометилиден"|-5-бензо|"Ь"1тиофен-2-ил-2-бензотиазол-2-ил-2,4-ДИгидропиразол-З -она.
К суспензии 452 мг NaH (11,30 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в 30 мл сухого THF в атмосфере азота медленно добавляли диэтилкарбонат (1,38 мл, 11,30 ммоль) и 2-ацетилбензо[Ь]тиофен (1,00 г, 5,67 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 3 ч, охлаждали, медленно добавляли 20 мл воды с последующим добавлением 10 капель АсОН, и смесь экстрагировали 3x200 мл ЕЮ Ас. Объединенные органические слои промывали 20 мл воды, 100 мл насыщенного солевого раствора, высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением 1,47 г сложного этилового эфира 3-бензо[Ь]тиофен-2-ил-3-оксопропионовой кислоты, который использовали без дальнейшей очистки. ^-ЯМР (ДМСО-йб): 8 8,20 (s, 1Н), 8,05 (2d, 2Н), 7,55 (t, Ш), 7,50 (t, 1Н), 4,25 (s, 2Н), 4,10 (q, 2Н), 1,20 (t, ЗН).
Раствор 665 мг (4,03 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,0 г (4,70 ммоль) сложного этилового эфира 3-бензо[Ь]тиофен-2-ил-3-оксопропионовой кислоты в 10 мл этанола и 2 мл НОАс кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством холодного ЕЮН и высушивали с получением 240 мг (0,689 ммоль, 17%") 5-бензо[Ь]тиофен-2-ил-2-бензотиазол-2-ил-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 8 12,90 (bs, Ш), 8,10-7,80 (m, 5Н), 7,55 (t, Ш), 7,40 (т, ЗН), 6,10 (s, 1Н).
К раствору 400 мг (1,15 ммоль) 5-бензо[Ь]тиофен-2-ил-2-бензотиазол-2-ил-1,2-дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь Н^-диметилформамида (170 мкл, 1,26 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота. Твердую фазу отфильтровывали, промывали THF и
высушивали с получением 286 мг (0,707 ммоль, 61%) 5-бензо[Ь]тиофен-2-ил-2-
бензотиазол-2-ил-4-[ 1 -диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. 1 Н-ЯМР
ЩМСО-йб): 5 8,10 (s, Ш), 8,05 (m, 2Н), 7,90 (т, ЗН), 7,50 (т, ЗН), 7,35 (t, Ш), 3,75 (s, ЗН), 3,55 (s, ЗН).
Суспензию 100 мг (0,247 ммоль) 5-бензо[Ь]тиофен-2-ил-2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 4 мл ЕЮН и 4 мл 25% водного аммиачного раствора нагревали до 60°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 55 мг (0,146 ммоль, 59%) 4-[1-аминометилиден]-5-бензо[Ь]тиофен-2-ил-2-бензотиазол-2-ил-2,4-дигидропиразол-3-она. ^-ЯМР (ДМСО-с16): 8 9,70 (bs, 2Н), 8,50 (s, 1Н), 8,10 (s, Ш), 8,05 (m, 2Н), 7,90 (m, 2Н), 7,50 (т, ЗН), 7,35 (t, 1Н). Пример 14. Получение 4-[1-аминометилиден1-2-бензотиазол-2-ил-5-тиофен-2-ил-2,4-дигидропиразол-3 -она.
К суспензии 630 мг NaH (15,85 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в 40 мл сухого толуола в атмосфере азота медленно добавляли диэтилкарбонат (1,92 мл, 15,85 ммоль) и 2-ацетилтиофен (1,00 г, 7,93 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 1 ч, охлаждали, медленно добавляли 200 мл воды с последующим добавлением 2 мл АсОН, и смесь экстрагировали 3x200 мл ЕЮАс. Объединенные органические слои промывали 100 мл воды, 300 мл насыщенного солевого раствора, высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением неочищенного масла, которое очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 10% ЕЮАс в РЕ 40-60) с получением 1 г (5,04 ммоль, 64%) сложного этилового эфира З-тиофен-2-ил-З-оксопропионовой кислоты. 'Н-ЯМР (CDC13): 5 8,15 (s, Ш), 7,55 (m, 1Н), 7,35 (m, Ш), 4,20 (q, 2Н), 3,90 (s, 2Н), 1,25 (t, ЗН).
Раствор 870 мг (5,25 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,04 г (5,25 ммоль) сложного этилового эфира З-тиофен-2-ил-З-оксопропионовой кислоты в 15 мл этанола кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством холодного ЕЮН и высушивали с получением 1,38 г (4,61 ммоль, 88%) 2-бензотиазол-2-ил-5-тиофен-2-ил-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР ЩМСО- <16)\ 5 12,90 (bs, 1Н), 8,05 (d, Ш), 7,90 (d, 1Н), 7,65 (m, 2Н), 7,50 (t, 1Н), 7,40 (t, Ш), 7,10 (s, 1Н), 5,95 (s, 1Н).
К раствору 720 мг (2,41 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-тиофен-2-ил-1,2-дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь Ы,М-диметилформамида (350 мкл, 2,56 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляли простой диэтиловый эфир, чтобы вызвать
осаждение, после чего твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 753 мг (2,12 ммоль, 88%) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-тиофен-2-ил-2,4-дигидропиразол-3-она в виде смеси изомеров. Чтобы получить один из изомеров в чистом виде, 5 мл DCM добавляли к твердой смеси изомеров, тщательно перемешивали и декантировали жидкость от оставшейся твердой фазы. Жидкость концентрировали, твердую фазу отфильтровывали и промывали 2 мл DCM. Объединенная твердая фаза после двух циклов промывки DCM весила 82 мг и состояла из одного изомера. !Н-ЯМР ЩМСО-йб): 8 8,00 (m, 2Н), 7,85 (т, Ш), 7,75 (s, 1Н), 7,50 (s, 1Н), 7,45 (т, Ш), 7,30 (т, 1Н), 7,25 (s, Ш), 3,75 (s, ЗН), 3,50 (s, ЗН).
Суспензию 500 мг (1,41 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-тиофен-2-ил-2,4-дигидропиразол-3-она в 5 мл ЕЮН и 5 мл 25% водного аммиачного раствора нагревали до 60°С в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 357 мг (1,09 ммоль, 78%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-тиофен-2-ил-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-йб): б 9,40 (bs, 2Н), 8,30 (s, Ш), 8,05 (d, 1Н), 7,90 (d, 1Н), 7,75 (d, 1Н), 7,65 (m, 1Н), 7,50 (t, 1Н), 7,35 (t, Ш), 7,25 (т, Ш). Пример 15. Получение 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(5-бромтиофен-2-ил)-2,4-дигидропиразол-З -она.
К суспензии 597 мг NaH (14,92 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в 75 мл сухого THF в атмосфере азота медленно добавляли диэтилкарбонат (1,81 мл, 14,92 ммоль) и 2-ацетил-5-бромтиофен (1,53 г, 7,46 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 2 ч, охлаждали, вливали в ледяную воду и подкисляли АсОН. Смесь дважды экстрагировали ЕЮАс и объединенные органические слои промывали водой, насыщенным солевым раствором, высушивали над сульфатом магния и выпаривали с получением 1,82 г (6,57 ммоль, 88%) сложного этилового эфира 3-(5-бромтиофен-2-ил)-3-оксопропионовой кислоты. 'Н-ЯМР (CDC13): 8 7,5 (d, 1Н), 7,30 (s, Ш), 7,15 (d, 1Н), 4,20 (q, 2Н),3,85 (s, 2Н), 1,25 (t, ЗН).
Раствор 1,08 г (6,57 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,82 г (6,57 ммоль) сложного этилового эфира 3-(5-бромтиофен-2-ил)-3-оксопропионовой кислоты в 25 мл этанола, содержащий 5 мл АсОН, кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством холодного ЕЮН и высушивали с получением 1,58 г (4,18 ммоль, 64%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(5-бромтиофен-2-ил)-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 13,00 (bs, 1Н), 8,05 (d, 1Н), 7,90 (d, Ш), 7,50 (m, 2Н), 7,40 (t, 1Н), 7,30 (s, Ш), 6,05 (s, Ш).
К раствору 793 мг (2,10 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(5-бромтиофен-2-ил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 15 мл THF добавляли диметилацеталь К,М-диметилформамида (292 мкл, 2,20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин при комнатной температуре в атмосфере азота. Твердую фазу отфильтровывали, промывали THF и высушивали с получением 621 мг (1,43 ммоль, 68%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(5-бромтиофен-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. 1 Н-ЯМР (ДМСО-с16): 5 8,00 (d, Ш), 7,95 (s, Ш), 7,85 (d, 1Н), 7,45 (t, 1Н), 7,40-7,30 (т, ЗН), 3,70 (s, ЗН), 3,45 (s, ЗН).
Суспензию 260 мг (0,60 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(5-бромтиофен-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N аммиачного раствора в МеОН перемешивали при комнатной температуре в закрытой колбе в течение 2 дней с последующим выпариванием растворителя, с получением 241 мг (0,59 ммоль, 99%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5- (5-бромтиофен-2-ил)-2,4-дигидропиразол-3-она. *Н-ЯМР (ДМСОЛб): 8 9,60 (bs, 2Н), 8,30 (s, Ш), 8,05 (d, Ш), 7,90 (d, Ш), 7,55 (m, Ш), 7,50 (t, 1Н), 7,35 (т, 2Н).
Пример 16. Получение 4-[Т-аминометилиден"|-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромфенилУ2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 609 мг (3,69 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,00 г (3,69 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3-бромфенил)-3-оксопропионовой кислоты в 20 мл ЕЮН кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, добавляли 2 мл воды и твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 1,23 г (3,30 ммоль, 90%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСОЛб): 8 12,90 (bs, Ш), 8,10 (m, 2Н), 7,90 (т, 2Н), 7,65 (т, Ш), 7,50-7,30 (т, ЗН), 6,20 (s, 1Н).
К раствору 470 мг (1,26 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь М,1М-диметилформамида (185 мкл, 1,39 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляли небольшое количество простого диэтилового эфира и твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 487 мг (1,13 ммоль, 90%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. ^-ЯМР (ДМСОЛб): 8 8,00 (d, Ш), 7,80 (m, 2Н), 7,70 (т, 2Н), 7,65 (d, Ш), 7,45 (2t, 2Н), 7,35 (t, Ш), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 467 мг (1,09 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N NH3 в МеОН нагревали
до 100°С в сосуде под давлением в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 382 мг (0,957 ммоль, 88%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСОЛб): 8 9,60 (bs, 2Н), 8,10 (s, Ш), 8,00 (d, 1Н), 7,90 (d, Ш), 7,80 (s, Ш), 7,70 (m, Ш), 7,55 (т, 2Н), 7,45 (t, 1Н), 7,30 (t, 1Н).
Пример 17. Получение 4-[1-шинометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-иодфенил~)-2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 519 мг (3,14 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,00 г (3,14 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3-иодфенил)-3-оксопропионовой кислоты в 20 мл ЕЮН кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, добавляли 2 мл воды и твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 1,14 г (2,71 ммоль, 86%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-иодфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 8 13,00 (bs, Ш), 8,25 (s, 1Н), 8,05 (d, 1Н), 7,90 (m, 2Н), 7,80 (т, Ш), 7,50 (t, 1Н), 7,40 (t, Ш), 7,30 (t, Ш), 6,20 (s, 1Н).
К раствору 393 мг (0,94 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-иодфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 20 мл THF добавляли диметилацеталь М,1Ч-диметилформамида (137 мкл, 1,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляли простой диэтиловый эфир и твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 424 мг (0,89 ммоль, 95%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-иодфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 8,00 (m, 2Н), 7,90 (d, Ш), 7,80 (d, Ш), 7,70 (s, 1Н), 7,60 (d, Ш), 7,40 (t, Ш), 7,30 (т, 2Н), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 196 мг (0,413 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-иодфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 3 мл 7N NH3 в МеОН нагревали до 50°С в течение 1,5 ч и оставляли охлаждаться в течение ночи. Твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 137 мг (0,307 ммоль, 74%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-иодфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 8 9,50 (bs, 2Н), 8,10 (s, 1Н), 8,00 (m, 2Н), 7,85 (m, 2Н), 7,80 (d, 1Н), 7,45 (t, 1Н), 7,30 (m, 2Н).
Пример 18. Получение 4-[1-аминометилиден]-2-бензотаазол-2-ил-5-(3-фторфенил)-2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 786 мг (4,76 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,00 г (4,76 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3-фторфенил)-3-оксопропионовой кислоты в 25 мл ЕЮН
кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч в атмосфере азота, охлаждали и твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 870 мг (2,79 ммоль, 59%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-фторфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСОЛб): 8 13,00 (bs, Ш), 8,10 (d, Ш), 7,90 (d, Ш), 7,75 (m, 2Н), 7,50 (т, 2Н), 7,40 (t, 1Н), 7,30 (т, 1Н), 6,20 (s, Ш).
К раствору 480 мг (1,54 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-фторфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 10 мл THF добавляли диметилацеталь > 1,1Ч-диметилформамида (225 мкл, 1,70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре в атмосфере азота. Добавляли простой диэтиловый эфир и твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 520 мг (1,42 ммоль, 92%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-фторфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-йб): 8 8,00 (d, 1Н), 7,80 (d, Ш), 7,70 (s, Ш), 7,60 (m, Ш), 7,50-7,40 (т, ЗН), 7,40-7,30 (т, 2Н), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 360 мг (0,819 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-фторфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 3 мл 7N NH3 в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 249 мг (0,736 ммоль, 90%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-фторфенил)-2,4-дигидропиразол-3-она. *Н-ЯМР (ДМСО-с16): 8 9,40 (bs, 2Н), 8,10 (s, 1Н), 8,00 (d, 1Н), 7,85 (d, 1Н), 7,60 (т, ЗН), 7,45 (t, Ш), 7,35 (т, 2Н). Пример 19. Получение 4-П-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-т-бутилфенил)-2,4-дигидропиразол-3 -она.
К суспензии 984 мг NaH (24,60 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в 15 мл сухого бензола в атмосфере азота медленно добавляли диэтилкарбонат (2,10 мл, 16,40 ммоль) и 3-т-бутилацетофенон (1,45 г, 8,20 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 30 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры, медленно добавляли 3 мл АсОН с последующим добавлением воды и экстракцией ЕЮАс. Органический слой высушивали над сульфатом магния, выпаривали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, РЕ (40-60) / ЕЮАс 20:1) с получением 1,45 г (5,84 ммоль, 71%) сложного этилового эфира 3-(3-т-бутилфенил)-3-оксопропионовой кислоты.
Раствор 964 мг (5,84 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,45 г (5,84 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3 -т-бутилфенил)-3-оксопропионовой кислоты в 5 мл ЕЮН и 5 мл НОАс кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота,
охлаждали и твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 1,70 г (4,86 ммоль, 83%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-т-бутилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 13,05 (bs, 1Н), 8,10 (d, Ш), 7,90 (m, 2Н), 7,70 (d, 1Н), 7,55-7,30 (m, 4Н), 6,10 (s, Ш), 1,35 (s, 9Н).
К раствору 1,00 г (2,86 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-т-бутилфенил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 20 мл THF добавляли диметилацеталь Ы^-диметилформамида (4,20 мкл, 3,15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 690 мг (1,70 ммоль, 60%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-т-бутилфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. *Н-ЯМР (ДМСО- <16): 5 8,00 (d, 1Н), 7,80 (d, Ш), 7,65 (s, 1Н), 7,60 (s, 1Н), 7,55 (ш, Ш), 7,45 (т, ЗН), 7,30 (t, 1Н), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН), 1,35 (s, 9Н).
Суспензию 150 мг (0,371 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-т-бутилфенил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 5 мл 7N NH3 в МеОН нагревали до 60°С в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 114 мг (0,302 ммоль, 82%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-т-бутилфенил)-2,4-дигидропиразол-З-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 6 9,45 (bs, 2Н), 8,05 (d, Ш), 7,95 (s, Ш), 7,85 (d, 1Н), 7,70 (s, 1Н), 7,60-7,40 (т, ЗН), 7,30 (т, 2Н), 1,35 (s, 9Н).
Пример 20. Получение 4-[1-аминометилиден]-2-(6-метоксибензотиазол-2-илУ5-фенил-2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 1,33 г (6,81 ммоль) (6-метоксибензотиазол-2-ил)гидразина и 1,44 г (7,49 ммоль) этилбензоилацетата в 40 мл ЕЮН кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота. Твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 1,96 г (6,06 ммоль, 89%) 2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР ЩМСОЛб): 5 12,85 (bs, Ш), 7,85 (m, 2Н), 8,00 (d, 1Н), 7,65 (d, Ш), 7,45 (m, 2Н), 7,10 (d, Ш), 6,10 (s, Ш), 3,80 (s, ЗН).
К раствору 364 мг (1,13 ммоль) 2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-5-фенил-1,2-дигидропиразол-3-она в 15 мл THF добавляли диметилацеталь М,К-диметилформамида (164 мкл, 1,24 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 372 мг (0,983 ммоль, 87%") 2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСО-йб): 5 7,70-7,45 (м, 8Н), 7,00 (d, Ш), 3,80 (s, ЗН), 3,70 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 240 мг (0,634 ммоль) 2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она в 10 мл 7N NH3 в МеОН нагревали до 100°С в сосуде под давлением в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 192 мг (0,548 ммоль, 86%) 4-[1-аминометилиден]-2-(6-метоксибензотиазол-2-ил)-5-фенил-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР ЩМСО-йб): 5 9,45 (bs, 2Н), 8,00 (bs, 1Н), 7,70 (ш, ЗН), 7,60 (s, 1Н), 7,50 (ш, ЗН), 7,05 (d, Ш), 3,80 (s, ЗН).
Пример 21. Получение 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромтиофен-2-ил)-2,4-дигидропиразол-З-она.
К суспензии 628 мг NaH (15,70 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в 25 мл THF в атмосфере азота медленно добавляли диэтилкарбонат (1,90 мл, 15,70 ммоль) и 1-(3-бромтиофен-2-ил)этанон (1,61 г, 7,85 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 2 ч, охлаждали до комнатной температуры, вливали в ледяную воду с последующим добавлением некоторого количества АсОН и экстрагировали 2х ЕЮАс. Объединенные органические слои трижды промывали водой, промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над сульфатом магния и выпаривали, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 25% ЕЮАс в РЕ 40/60) с получением 1,54 г (5,84 ммоль, 71%) сложного этилового эфира 3-(3-бромтиофен-2-ил)-3-оксопропионовой кислоты.
Раствор 918 мг (5,56 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,54 г (5,56 ммоль) сложного этилового эфира 3-(3-бромтиофен-2-ил)-3-оксопропионовой кислоты в 25 мл ЕЮН/АсОН (1:1) кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 711 мг (1,88 ммоль, 34%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромтиофен-2-ил)-1,2-дигидропиразол-3-она.1 Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 13,00 (bs, Ш), 8,10 (d, 1Н), 7,90 (d, 1Н), 7,70 (s, 1Н), 7,50 (t, Ш), 7,40 (t, 1Н), 7,20 (м, 1 Н), 6,30 (s, 1Н).
К раствору 700 мг (1,85 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромтиофен-2-ил)-1,2-дигидропиразол-3-она в 7 мл THF добавляли диметилацеталь М,К-диметилформамида (258 мкл, 1,94 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 550 мг (1,26 ммоль, 69%) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромтиофен-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 8,00 (d, Ш), 7,90 (d, Ш), 7,80 (d, Ш), 7,60 (s, 1Н), 7,45 (t, 1Н), 7,30 (m, 2Н), 3,80 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН).
Суспензию 210 мг (0,485 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромтиофен-2-ил)-4-[1-диметиламинометилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она в 5 мл 7N NH3 в МеОН нагревали до 60°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры твердую фазу отфильтровывали, промывали небольшим количеством ЕЮН и высушивали с получением 198 мг (0,472 ммоль, 97%) 4-[1-аминометилиден]-2-бензотиазол-2-ил-5-(3-бромтиофен-2-ил)-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 9,25 (bs, 2Н), 8,05 (d, 1Н), 7,85 (т, ЗН), 7,45 (t, Ш), 7,30 (т, 2Н).
Пример 22. Получение 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-метиламинометилиден1 -5-тиофен-2-ил-2,4-дигидропиразол-З -она.
К суспензии 628 мг NaH (15,70 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в 10 мл THF в атмосфере азота медленно добавляли диэтилкарбонат (1,90 мл, 15,70 ммоль) и 2-ацетилтиофен (1,00 г, 7,92 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 1 ч, охлаждали до комнатной температуры, вливали в ледяную воду, добавляли АсОН и реакционную смесь дважды экстрагировали простым диэтиловым эфиром. Объединенные органические слои промывали водой, насыщенным солевым раствором, высушивали над сульфатом магния и выпаривали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, DCM) с получением 1,27 г (6,41 ммоль, 80%) сложного этилового эфира З-оксо-З-тиофен-2-ил-пропионовой кислоты.
Раствор 1,06 г (6,41 ммоль) бензотиазол-2-ил-гидразина и 1,27 г (6,41 ммоль) сложного этилового эфира З-оксо-З-тиофен-2-ил-пропионовой кислоты в 15 мл ЕЮН кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, твердую фазу отфильтровывали, промывали ЕЮН и высушивали с получением 1,30 г (4,34 ммоль, 68%) 2-бензотиазол-2-ил-5-тиофен-2-ил-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 13,00 (bs, 1Н), 8,05 (d, Ш), 7,90 (d, Ш), 7,70 (m, 2Н), 7,50 (t, Ш), 7,40 (t, Ш), 7,20 (s, 1 h), 6,00 (s, 1Н).
К раствору 137 мг (0,458 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-тиофен-2-ил-1,2-дигидропиразол-3-она в 6 мл THF добавляли диметилацеталь НЫ-диметилформамида (64 мкл, 0,480 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин при комнатной температуре в атмосфере азота, после чего твердую фазу отфильтровывали, промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 162 мг (0458 ммоль, 100%) 2-бензотиазо Л-2-ИЛ-4- [ 1 -диметиламинометилиден] -5 -тиофен-2-ил-2,4-дигидропиразол-3 -она. 'Н-ЯМР (ДМСОЛб): 6 8,00 (m, 2Н), 7,85 (d, 1Н), 7,75 (d, Ш), 7,55 (m, 1Н), 7,45 (t, Ш), 7,30 (t, Ш), 7,20 (т, Ш), 3,80 (s, ЗН), 3,45 (s, ЗН).
Суспензию 162 мг (0,458 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-тиофен-2-ил-2,4-дигидропиразол-3-она в 5 мл 33% MeNH2 в
EtOH перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч, твердую фазу отфильтровывали, промывали EtOH и высушивали с получением 47 мг (0,138 ммоль, 30%)
2- бензотиазол-2-ил-4-[1-метиламинометилиден] -5-тиофен-2-ил-2,4-дигидропиразол-3-она. 'Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 9,95 (bs, Ш), 8,20 (s, Ш), 8,00 (d, Ш), 7,85 (d, 1Н), 7,75 (т, 2Н), 7,45 (t, Ш), 7,35 (t, Ш), 7,20 (s, 1Н), 3,30 (s, ЗН).
Пример 23. Получение 2-бензотиазол-2-ил-5-метил-4-[1-пиперидин-1-илметилиден1-2,4-дигидропиразол-3 -она.
Раствор 2,00 г (12,10 ммоль) бензотиазол-2-илгидразина и 1,62 мл (12,71 ммоль) этилацетоацетата в 40 мл уксусной кислоты кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 2,5 часов и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли 50 мл воды и осадок собирали фильтрованием, промывали водой и высушивали с получением 2,68 г (11,59 ммоль, 96%) 2-бензотиазол-2-ил-5-метил-1,2-дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 12,80 (bs, 1Н), 8,00 (d, 1Н), 7,80 (d, 1Н), 7,50 (t, 1Н), 7,35 (t, 1Н), 5,25 (s, Ш), 2,20 (s, ЗН).
К суспензии 220 мг (0,951 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-метил-1,2-дигидропиразол-
3- она в 20 мл толуола добавляли диметилацеталь Ы,К-диметилформамида (135 мкл, 1,00
ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре в
атмосфере азота, после чего растворитель выпаривали и оставшуюся твердую фазу
промывали простым диэтиловым эфиром и высушивали с получением 180 мг (0,629
ммоль, 66%) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-метил-2,4-
дигидропиразол-3-она. !Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 7,95 (d, 1Н), 7,75 (d, 1Н), 7,65 (s, 1Н), 7,40 (t,
1Н), 7,25 (t, Ш), 3,75 (s, ЗН), 3,40 (s, ЗН), 2,20 (s, ЗН).
К суспензии 1,80 г (6,29 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-4-[1-диметиламинометилиден]-5-метил-2,4-дигидропиразол-3-она в смеси 15 мл толуола и 10 мл DMF добавляли 5 мл 4N раствора NaOH. Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 4 ч, после чего твердую фазу отфильтровывали и высушивали под вакуумом с получением 2-бензотиазол-2-ил-5-метил-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-пиразол-4-карбальдегида (6,29 ммоль; 100%). *Н-ЯМР (ДМСОЛб): 5 9,30 (s, Ш), 8,45 (s, 1Н), 7,90 (d, Ш), 7,70 (d, Ш), 7,40 (t, Ш), 7,20 (t, Ш), 2,20 (2, ЗН).
Смесь 160 мг (0,617 ммоль) 2-бензотиазол-2-ил-5-метил-3-оксо-2,3-дигидро-1Н-пиразол-4-карбальдегида, пиперидина (720 мкл, 7,35 ммоль) и 2 капли концентрированной НС1 кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере азота, охлаждали, выпаривали досуха и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 4% метанола в дихлорметане) с получением 100 мг (0,306 ммоль, 50%") 2-бензотиазол-2-ил-5-метил-4-[ 1 -пиперидин-1 -ил-метилиден]-2,4-дигидропиразол-3-она. *Н-
ЯМР (ДМСОЛб): 5 7,95 (d, Ш), 7,75 (d, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,40 (t, 1H), 7,25 (t, 1H), 4,50 (bs, 2H), 3,75 (bs, 2H), 2,00 (s, 3H), 1,70 (bs, 4H), 1,65 (bs, 2H). Пример 24. Биологические способы
Линию клеток рака предстательной железы РС-3 (АТСС # CRL-1435) выдерживали в среде RPMI-1640 (Invitrogen, 31870), дополненной 10% фетальной бычьей сывороткой (Sigma, F7524), L-глутамином (Invitrogen 25030-024). Клетки рассаживали раз в неделю в соотношении 1:10.
Пример 25. Анализ клеточной инвазии
Для анализа клеточной инвазии РСЗ клетки инкубировали в присутствии соединения по изобретению (10 мкМ) в течение 4 дней, до проведения анализа инвазии. Сорок тысяч клеток высевали в инвазионные камеры BD Biocoat Matrigel (8 мкм, BD 354480) в бессывороточной среде. Инвазионную камеру помещали в 24-луночный планшет, содержащий среду с 10% эмбриональной телячьей сывороткой в качестве хемоаттрактанта. В качестве контроля, то же самое количество клеток высевали в 24-луночных культуральных планшетах. После 48 часов инкубации клетки из инвазионной камеры удаляли с помощью аспирации и очистки внутреннего отделения с помощью ватной палочки. Инвазионную камеру далее помещали в реагент для определения жизнеспособности клеток CellTiter-GLO (CTG, Promega-G7571), инкубировали в течение 15 мин, и далее анализировали на люминометре Victor3. Клеточную инвазию рассчитывали как CTG активность на нижней части мембраны, деленную на CTG активность клеток, выращенных в 24-луночном планшете. Ингибирование клеточной инвазии конкретным соединением оценивали с помощью сравнения величины инвазии клеток, обработанных соединением, по сравнению с клетками, обработанными ДМСО.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Соединение для применения при лечении карциномы, имеющее структуру в соответствии с формулой III,
R7 R1
формула III
в котором:
X представляет собой NH или S;
R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил;
R2 представляет собой (1С-4С)алкил, фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S- атомов в кольце, при этом алкил, фенил или ароматическое кольцо являются необязательно замещенными одной или несколькими группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро;
R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (ЗС-бС)циклоалкил, фенил, моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S- атомов в кольце, моноциклическое неароматическое. кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, фенилом, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пиразинилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим один или более N-, О или S- атомов в кольце, в котором каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом;
или R3 и R4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето(1 С-4С)алкилом;
R5 представляет собой Н, CI, F, Вг, Me, NO2, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3; R6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)ал1силокси, нитро или галоген;
R7 представляет собой Н, F, CI, Br, Me, NO2, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3; или его фармацевтически приемлемая соль присоединения.
2. Соединение для применения по п.1, в котором R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой водород, метил, этил или пропил или группу, как представлено в следующем перечне структур:
3. Соединение для применения по п.1 или п.2, характеризующееся тем, что: R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил;
R представляет собой (1С-4С)алкил, фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S- атомов в кольце, при этом алкил, фенил или ароматическое кольцо являются необязательно замещенными одной или несколькими группами, выбранными из (1С-4С)алкила или галогена;
R5HR6 представляют собой водород; R представляет собой Н.
4. Соединение для применения по любому из п.п.1-3, характеризующееся тем, что X представляет собой S.
5. Соединение для применения по любому из п.п.1-4, характеризующееся тем, что R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил, и R2 представляет собой (1С-4С)алкил или фенил.
6. Соединение для применения по любому из п.п.1-5, характеризующееся тем, что R3 является водородом.
7. Соединение для применения по любому из п.п.1-5, характеризующееся тем, что и R3 и R4 представляют собой метил, или R3 является водородом.
8. Соединение, имеющее структуру в соответствии с формулой II,
Формула II
или его фармацевтически приемлемая соль присоединения. 9. Соединение в соответствии с формулой I,
в котором:
X представляет собой NH или S;
R1 представляет собой Н или (1С-4С)алкил;
RZ представляет собой -Z или -Y-Z, где Y обозначает -СНг- или -СН2-СН2-, и Z обозначает фенил или моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S- атомов в кольце, которые необязательно замещены одной или более группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С
4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро,
или Z обозначает тиен-2-ил, необязательно замещенный в положении 3, 4 или 5 галогеном;
или Z обозначает N-метилпиррол-З-ил или бензо[Ь]тиен-2-ил или 2-нафталинил;
R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, пиано, (ЗС-бС)циклоалкил, моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, моноциклическое неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пиразинилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим один или более N-, О или S-атомов в кольце, при этом каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом;
или R3 и R4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето( 1 С-4С)алкилом;
R5 представляет собой Н или CF3;
R6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген;
или его фармацевтически приемлемая соль присоединения. 10. Соединение в соответствии с формулой I, в котором:
X представляет собой NH или S;
R1 представляет собой Н или (1 С-4С)алкил;
R2 представляет собой моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, при этом ароматическое кольцо является необязательно замещенным одной или несколькими группами, выбранными из (1С-4С)алкила, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкила, гало(1С-4С)алкилокси, фенилокси, фенилтио, галогена или нитро;
R3 и R4 независимо друг от друга представляют собой Н, (1С-6С)алкил, (2С-6С)алкенил, (2С-6С)алкинил, циано, (ЗС-бС)циклоалкил, моноциклическое
неароматическое кольцо, содержащее один или более N-, О- или S-атомов в кольце, каждый из которых необязательно замещен гидроксилом, (1С-4С)алкокси, циклоалкилом, пиперидилом, пиперазинилом, фурилом, тиенилом, пирролилом, 2Н-пирролилом, пиразолилом, изоксазолилом, изотиазолилом, пирролидонилом, пирролинилом, имидазолинилом, имидазолилом, в котором каждый из этих необязательных заместителей необязательно дополнительно замещен (1С-4С)алкилом, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкилом, гало(1С-4С)алкилокси, галогеном, нитро или (1С-2С)диоксол, образующим кольцом; или
R3 и R4 образуют вместе пирролил, имидазолил, пиразолил, пирролидинил, пирролинилимидазолидинил, имидазолинил, пиперидил, пиперазинилморфолинил, каждый из которых необязательно замещен (1С-6С)алкилом, фенил(1С-4С)алкилом, фенилкето( 1 С-4С)алкилом;
R5 представляет собой Н или CF3;
R6 представляет собой Н, (1С-4С)алкил, (1С-4С)алкилокси, гало(1С-4С)алкил, гало(1С-4С)алкилокси, нитро или галоген;
или его фармацевтически приемлемая соль присоединения.
11. Соединение по п.9, характеризующееся тем, что X представляет собой S;
R1 представляет собой Н;
R2 представляет собой Z, и Z обозначает фенил, необязательно замещенный в мета-или параположении или в обоих положениях, одним или двумя заместителями, выбранными из перечня, состоящего из -NO2, галогена, CF3, (1С-4С)алкила и метокси;
или Z обозначает тиен-2-ил, необязательно замещенный в положении 3, 4 или 5 галогеном,
или Z обозначает N-метилпиррол-З-ил или бензо[Ь]тиен-2-ил или 2-нафталинил; R3, R4 представляют собой Н, Н или Н, СНз, или СНз, СНз;
R представляет собой Н; R6 представляет собой Н, галоген или метокси; или его фармацевтически приемлемая соль присоединения.
12. Соединение по любому из п.п. 9-11, характеризующееся тем, что R6
представляет собой метокси.
13. Соединение в соответствии с формулой III,
в котором X представляет собой S;
R1 представляет собой Н, СНз;
R2 представляет собой CF3, СН3, фенилэтил
или ^^R", где Ra обозначает Н, F, CI, Br, I, NO2, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и R обозначает Н, О или СНз;
R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или СН3, СНз, или один из R3 или R4 является -CN
или п-метоксифенилметилом, или R и R вместе представляют кольцо включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 и R4 вместе представляют кольцо
^~~У, включающее азот формулы III, представляющее пирролидинил, или R3 является
метилом, и R является дихлорбензилом а ;
R5 представляет собой Н, CI, F, Br, Me, NO2, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3;
R6 представляет собой Н, F, CI, Br, N02, СН3, т-бутил, ОСН3, OCF3, CF3;
R представляет собой Н, F, CI, Br, Me, NO2, т-бутил, OCF3, ОСН3, CF3;
или его фармацевтически приемлемая соль присоединения.
14. Соединение по п. 13,
в котором X представляет собой S;
R1 представляет собой Н, СНз;
R представляет собой CF3, СНз, фенилэтил.
или ^^R", где R обозначает Н, F, CI, Вг, I, NO2, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и Rb обозначает Н, О или СН3;
или п-метоксифенилметилом, или R и R вместе представляют кольцо включающее азот
R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или СН3, СНз, или один из R3 или R4 является -CN
азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 и R4 вместе представляют кольцо
3"D4 О.
включающее азот формулы III, представляющее пирролидинил, или R является
/-O-ci
метилом, и R является дихлорбензилом о ; R5 представляет собой Н, С1;
R6 представляет собой Н, F, CI, NO2, СНз, т-бутил, ОСНз или OCF3; R представляет собой Н, О.
или его фармацевтически приемлемая соль присоединения.
15. Соединение по п. 13,
в котором X представляет собой S;
R1 представляет собой Н;
R2 представляет собой CF3, СНз, фенилэтил, ^V, вг' , \J , или (а
4R", где Ra обозначает Н, F, CI, Br, I, NO2, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и Rb обозначает Н, О или СНз;
R3, R4 являются Н, Н или Н, СНз, или вместе представляют кольцо С^, включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 является метилом, и
R является дихлорбензилом а ; R5 представляет собой Н;
R6 представляет собой Н, CI, N02, СН3, ОСН3, OCF3; R представляет собой Н.
16. Соединение по п. 13,
в котором X представляет собой S; R1 представляет собой Н;
R2 представляет собой CF3, СН3, вР~Ч!Х ши^^нь, где Ra
обозначает H, F, CI, Br, I, NO2, метил, этил, изопропил, т-бутил, метокси или CF3, и Rb
1чает Н, F, CI, Br, I, обозначает Н, С1 или СНз;
R3, R4 являются Н, Н или Н, СН3, или вместе представляют кольцо С^, включающее азот формулы III, представляющее пиперидил, или R3 является метилом, и
R является дихлорбензилом ci ; R5 представляет собой Н;
R6 представляет собой Н, CI, N02, СН3, ОСН3, OCF3; R7 представляет собой Н.
17. Соединение по любому из пп. 8-16 для применения в качестве лекарственного средства или в способе лечения или профилактики заболевания.
18. Соединение для применения по п. 17, где заболевание является раком, таким как карцинома.
19. Соединение для применения по п. 18, характеризующееся тем, что карцинома выбрана из группы, состоящей из рака желудка, рака мочевого пузыря, рака пищевода, рака молочной железы, рака предстательной железы или рака поджелудочной железы.
20. Соединение для применения по п. 19, где карцинома является раком предстательной железы.
17.
21. Соединение для применения по любому из п.п. 17-20, характеризующееся тем, что способ лечения направлен на задержку, предотвращение, лечение или реверсирование развития метастаз.
22. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из п.п. 1-16.
23. Фармацевтическая композиция по п.22, отличающаяся тем, что композиция содержит один или несколько дополнительных соединений с терапевтическими эффектами в лечении карциномы.