[**]

Описаны трициклические соединения ингибиторы PI3K формулы I с противораковой активностью, противовоспалительной активностью или иммунорегуляторными свойствами и, более конкретно, с модулирующей или ингибирующей PI3 киназу активностью. Описаны способы применения трициклических ингибиторов-соединений PI3K формулы I для in vitro, in situ и in vivo диагностики или лечения клеток млекопитающего, организмов или связанных патологических состояний.

Соединения формулы I, включая их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и фармацевтически приемлемые соли. Прерывистая линия обозначает возможную двойную связь и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью. Заместители являются такими, как описано в описании.

(57) Реферат / Формула:

Описаны трициклические соединения ингибиторы PI3K формулы I с противораковой активностью, противовоспалительной активностью или иммунорегуляторными свойствами и, более конкретно, с модулирующей или ингибирующей PI3 киназу активностью. Описаны способы применения трициклических ингибиторов-соединений PI3K формулы I для in vitro, in situ и in vivo диагностики или лечения клеток млекопитающего, организмов или связанных патологических состояний.

Соединения формулы I, включая их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и фармацевтически приемлемые соли. Прерывистая линия обозначает возможную двойную связь и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью. Заместители являются такими, как описано в описании.

---

Евразийское (21) 201390879 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки (51) Int. Cl. C07D 487/14 (2006.01)
2013.09.30 C07D 491/14 (2006.01)
C07D 495/14 (2006.01)
(22) Дата подачи заявки C07D 498/14 (2006.0l)
2011.12.15 A61K31/519 (2006.01)
A61P35/00 (2006.01)
(54) ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ИНГИБИТОРЫ PI3K И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
(31) 61/423,694
(32) 2010.12.16
(33) US
(86) PCT/US2011/065101
(87) WO 2012/082997 2012.06.21
(71) Заявитель: Ф.ХОФФМАНН-ЛЯ РОШ АГ (CH)
(72) Изобретатель:
Дотсон Дженафер (US), Хилд Роберт Эндрю (GB), Хеффрон Тимоти (US), Джонс Грэхэм Элджин, Кринтел Сасси Лерш, Маклин Невиль Джэймс (GB), Ндубаку Чуди, Оливеро Алан Г., Салфати Лоран, Ваш Лан, Вей БинКинг (US)
(74) Представитель:
Липатова И.И., Рыбаков В.М., Хмара М.В., Новоселова С.В., Дощечкина В.В. (RU)
(57) Описаны трициклические соединения ингибиторы PI3K формулы I с противораковой активностью, противовоспалительной активностью или иммунорегуляторными свойствами и, более конкретно, с модулирующей или ингибирующей PI3 киназу активностью. Описаны способы применения трициклических ингибиторов-соединений PI3K формулы I для in vitro, in situ и in упюдиагно-стики или лечения клеток млекопитающего, организмов или связанных патологических состояний.
Соединения формулы I, включая их стереоизоме-ры, геометрические изомеры, таутомеры и фармацевтически приемлемые соли. Прерывистая линия обозначает возможную двойную связь и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью. Заместители являются такими, как описано в описании.
ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ ИНГИБИТОРЫ PI3K И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ
ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
Настоящая безусловная заявка, поданная согласно 37 CFR §1.53(b), 5 испрашивает приоритет согласно 35 USC §119(e) предварительной заявки US № 61/ 423,694 поданной 16 декабря 2010, которая во всей полноте включена посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
В основном, настоящее изобретение относится к соединениям с
10 противоопухолевой или противовоспалительной активностью, и, более конкретно, к соединениям, которые ингибируют активность киназы PI3K. Настоящее изобретение также относится к способам применения соединений для in vitro, in situ, и in vivo диагностики или лечения клеток млекопитающих или ассоциированных патологических состояний.
15 УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Фосфатидилинозитол является одним из фосфолипидов, содержащихся в клеточных мембранах, которые играют важную роль во внутриклеточной сигнальной трансдукции. Клеточный сигналинг через З'-фосфорилированные фосфоинозитиды вовлечен в различные клеточные процессы, например
20 злокачественную трансформацию, сигналинг факторов роста, воспаление и иммунитет (Rameh и др. (1999) J. Biol Chem, 274:8347-8350). Фермент, отвечающий за генерацию этих фосфорилированных сигналинговых продуктов, фосфатидилинозитол-3-киназа (также называемая Р13-киназы или PI3K), первоначально был идентифицирован по активности, связанной с вирусными
25 онкобелками и тирозинкиназами рецептора фактора роста, которая фосфорилирует фосфатидилинозитол (PI) и его фосфорилированные производные по З'-гидроксилу на инозитольном кольце (Panayotou и др. (1992) (1992) Trends Cell Biol 2:358-60).
Фосфоинозитид-З-киназы (PI3K) являются липидкиназами, которые
30 фосфорилируют липиды по 3-гидроксильному остатку инозитолового кольца (Whitman и др. (1988) Nature, 332:664). 3-фосфорилированные фосфолипиды (PIP3s), генерированные Р13-киназами действуют как вторичные мессенджеры, запуская киназы с липидсвязывающими доменами (в том числе домены гомологичные плекстрину (РН)), такие как Akt и фосфоинозитид-зависимуюй
35 киназу-1 (PDK1). Связывание Akt с мембранными PIP3s вызывает перемещение Akt на плазматическую мембрану, приводя Akt в контакт с PDK1, которая отвечает
за активацию Akt. Фосфатаза супрессор опухоли PTEN дефосфорилирует PIP3 и, следовательно, действует как негативный регулятор активации Akt. Р13-киназы Akt и PDK1 играют важную роль в регуляции многих клеточных процессов, включая регуляции клеточного цикла, пролиферацию, выживаемость, апоптоз и 5 подвижность и являются важными компонентами молекулярных механизмов таких заболеваний, как рак, диабет и иммунное воспаление (Vivanco др. (2002) Nature Rev. Cancer 2:489; Phillips и др. (1998) Cancer 83:41).
Основной изоформой Р13-киназы при раке явлется Р13-киназа класса I, р110 а (альфа) (US 5824492; US 5846824; US 6274327). Другие изоформы вовлечены в
10 сердечно-сосудистые и иммуно-воспалительные заболевания (Workman Р (2004) Biochem Soc Trans 32:393-396; Patel и др. (2004) Proceedings of the American Association of Cancer Research (Abstract LB-247) 95th Annual Meeting, March 27-31, Orlando, Florida, USA; Ahmadi К and Waterfield MD (2004) Encyclopedia of Biological Chemistry (Lennarz W J, Lane M D eds) Elsevier/Academic Press). Путь PI3
15 киназа/Akt/PTEN является привлекательной мишенью для создания противораковых препаратов, поскольку от таких модуляторов или ингибирующих агентов можно было бы ожидать ингибирования пролиферации, возвращения репрессии апоптоза и подавления сопротивления к цитостатикам в раковых клетках (Folkes et al (2008) J. Med. Chem. 51:5522-5532; Yaguchi et al (2006) Jour, of
20 the Nat. Cancer Inst. 98(8):545-55).
Злокачественные глиомы являются наиболее распространенными первичными опухолями головного мозга у взрослых. При глиобластоме (GBM), наиболее агрессивном подтипе глиомы, образование и рост опухоли, по-видимому, обусловлены амплификацией или сверхэкспрессией продуктов генов, участвующих
25 в сигнальной трансдукции, инициируемой факторами роста, действующих совместно с генетическими изменениями, нарушающими контроль клеточного цикла (Holland ЕС (2001) Nat Rev Genet 2:120-129). Среди геномных изменений описанных при GBM, мутации и/или делеции гена PTEN являются наиболее распространенными, с частотой встречаемости 70-90% (Nutt С, Louis DN (2005)
30 Cancer of the Nervous System (McGraw-Hill, New York), 2nd Ed, pp 837-847). Эти данные, наряду с прогностическим значением PTEN статуса для случаев GBM (Phillips HS, и соавт. (2006) Cancer Cell 9:157-163), предполагают важность сигнального пути фосфоинозитид-3-киназа (Р13К)/Акт в активации очень агрессивных глиальных злокачественных новообразований, а также возможность
35 для лечения ингибиторами PI3K, которые могут проникать через гематоэнцефалический барьер.
Злокачественные глиомы лечат комбинацией хирургии, радиации и темозоломида (TEMODAR (tm)), но эти способы в конечном итоге неэффективны из-за рецидива опухоли. Дополнительные способы лечения необходимы для доставки эффективной концентрации эффективных препаратов в мозг для лечения 5 гиперпролиферативных заболеваний, таких как глиобластома и метастатический рак мозга.
КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к трициклическим соединениям-ингибиторам PI3K формулы I с противоопухолевой активностью, противовоспалительной
10 активностью, или иммунорегуляторными свойствами, а более конкретно с активностью, модулирующей или ингибирующей PI3 киназу. Некоторые гиперпролиферативные нарушения характеризуются модуляцией функции PI3 киназы, например, мутацией или сверхэкспрессией белков. Соответственно, соединения по изобретению могут быть полезны при лечении
15 гиперпролиферативных заболеваний, таких как рак. Соединения могут ингибировать рост опухоли у млекопитающих и могут быть полезны для лечения больных раком людей.
Изобретение также относится к способам применения трициклических соединений-ингибиторов PI3K формулы I для in vitro, in situ, и in vivo диагностики
20 или лечения клеток, организма млекопитающего или ассоциированных патологических состояний.
Соединения Формулы I включают:
тог
и их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и 25 фармацевтически приемлемые соли. Прерывистая линия обозначает возможную двойную связь, и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью. Заместители являются такими, как здесь описано.
В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая трициклические соединения-ингибиторы PI3K Формулы I
и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция также может содержать один или более дополнительных терапевтических агентов.
В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы ингибирования активности PI3 киназы, включающие приведение в контакт PI3 5 киназы с эффективным ингибиторным количеством соединения Формулы I.
В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы профилактики или лечения гиперпролиферативных заболеваний или нарушений, модулируемых PI3 киназами, включающие введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему эффективного количества соединения Формулы I. 10 Примеры таких гиперпролиферативных заболеваний или нарушений включают, без ограничения,опухоли.
В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы профилактики или лечения гиперпролиферативного заболевания, включающие введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему эффективного 15 количества соединения Формулы I, самостоятельно или в комбинации с одним или более дополнительным соединением, обладающим антигиперпролиферативными свойствами.
В еще одном аспекте в настоящем изобретении предложен способ применения соединения по настоящему изобретению для лечения 20 гиперпролиферативного заболевания или состояния, модулируемых PI3 киназой, у млекопитающего.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение
соединения по настоящему изобретению для лечения опухоли (злокачественного
новообразования), модулируемой PI3 киназой, у млекопитающего.
25 Дополнительным аспектом настоящего изобретения является соединение
по настоящему изобретению для применения в качестве терапевтически активного вещества.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для лечения опухоли, модулируемой PI3 30 киназой, у млекопитающего.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения опухоли, модулируемой PI3 киназой, у млекопитающего.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является соединение 35 по настоящему изобретению для применения при лечении опухоли, модулируемой PI3 киназой, у млекопитающего.
Другой аспект настоящего изобретения включает наборы, содержащие соединение формулы I, контейнер, и, возможно, вкладыш или этикетку, указывающую лечение.
Другой аспект настоящего изобретения включает способы получения, 5 способы разделения и способы очистки соединений формулы I.
Другой аспект настоящего изобретения включает новые промежуточные соединения, применяемые для получения соединений формулы I.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЕ
10 Далее будет сделана подробная отсылка на определенные воплощения
изобретения, примеры которого проиллюстрированы на прилагаемых структурах и формулах. В то время как изобретение будет описано с использованием перечисленных воплощений, необходимо понимать, что они не предназначены для ограничения изобретения этими воплощениями. Напротив, изобретение
15 охватывает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем настоящего изобретения, как определено формулой изобретения. Специалисту в данной области техники будут очевидны многочисленные способы и материалы, подобные или эквивалентные описанным здесь, которые могут быть использованы при осуществлении настоящего
20 изобретения. Настоящее изобретение никоим образом не ограничивается описанными способами и материалами. В случае, если один или более документов из включенной литературы, патентов и аналогичных материалов отличается от или противоречит настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь, определенные термины, использование терминов, описанные способы или т. п.,
25 настоящее изобретение является главным.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Термин "алкил", используемый здесь, относится к насыщенному линейному или с разветвленной цепью одновалентному углеводородному радикалу, из одного
30 - двенадцати атомов углерода (С1-С12), где алкильный радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителями, описанными ниже. В другом воплощении алкильный радикал состоит из одного - восьми атомов углерода (Ci-C8), или одного - шести атомов углерода (d-C6). Примеры алкильных групп включают, без ограничения, метил (Me, -СН3), этил (Et, -СН2СН3), 1-пропил (п-
35 Рг, н-пропил, -СН2СН2СН3), 2-пропил (i-Pr, изопропил, -СН(СН3)2), 1-бутил (n-Bu, н-бутил, -СН2СН2СН2СН3), 2-метил-1-пропил (i-Bu, изобутил, -СН2СН(СН3)2), 2-бутил
(s-Bu, втор-бутил, -CH(CH3)CH2CH3), 2-метил-2-пропил (t-Bu, трет-бутил, -С(СН3)3), 1-пентил (n-пентил, -СН2СН2СН2СН2СН3), 2-пентил (-СН(СН3)СН2СН2СН3), 3-пентил (-СН(СН2СН3)2), 2-метил-2-бутил (-С(СН3)2СН2СН3), З-метил-2-бутил (-СН(СН3)СН(СН3)2), З-метил-1-бутил (-СН2СН2СН(СН3)2), 2-метил-1-бутил (5 СН2СН(СН3)СН2СН3), 1-гексил (-СН2СН2СН2СН2СН2СН3), 2-гексил (-СН(СН3)СН2СН2СН2СН3), 3-гексил (-СН(СН2СН3)(СН2СН2СН3)), 2-метил-2-пентил (-С(СН3)2СН2СН2СН3), З-метил-2-пентил (-СН(СН3)СН(СН3)СН2СН3), 4-метил-2-пентил (-СН(СН3)СН2СН(СН3)2), З-метил-З-пентил (-С(СН3)(СН2СН3)2), 2-метил-З-пентил (-СН(СН2СН3)СН(СН3)2), 2,3-диметил-2-бутил (-С(СН3)2СН(СН3)2), 3,310 диметил-2-бутил (-СН(СН3)С(СН3)3, 1-гептил, 1-окстил, и т.п.
Термин "алкилен", используемый здесь, относится к насыщенному линейному или с разветвленной цепью двухвалентному углеводородному радикалу из одного - двенадцати атомов углерода (С!-С12), где алкиленовый радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителей описанных 15 далее. В другом воплощении, алкиленовый радикал состоит из одного - восьми атомов углерода (Ci-C8), или одного - шести атомов углерода (Ci-Сб). Примеры алкиленовых групп включают, без ограничения, метилен (-СН2-), этилен (-СН2СН2-), пропилен (-СН2СН2СН2-), и т.п..
Термин "алкенил" относится к линейному или с разветвленной цепью 20 одновалентному углеводородному радикалу из двух - восьми атомов углерода (С2-С8) с по меньшей мере одним ненасыщенным участком, т.е., углерод-углерод, sp2 двойной связью, где алкениловый радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителем, здесь описанными, и включает радикалы, имеющие "цис" и "транс" ориентации, или, альтернативно, "Е" и "Z" 25 ориентации. Примеры включают, без ограничения, этиленил или винил (-СН=СН2), аллил (-СН2СН=СН2), и т.п..
Термин "алкенилен" относится к линейному или с разветвленной цепью двухвалентному углеводородному радикалу из двух - восьми атомов углерода (С2-С8) с по меньшей мере одним ненасыщенным участком, т.е., углерод-углерод, sp2 30 двойной связью, где алкениловый радикал может быть возможно замещен, и включает радикалы, имеющие "цис" и "транс" ориентации, или, альтернативно, "Е" и "Z" ориентации. Примеры включают, без ограничения, этиленилен или винилен (-СН=СН-), аллил (-СН2СН=СН-), и т.п.
Термин "алкинил" относится к линейному или с разветвленной цепью 35 одновалентному углеводородному радикалу из двух - восьми атомов углерода (С2-
С8) с по меньшей мере одним ненасыщенным участком, т.е., углерод-углерод, sp тройной связью, где алкиниловый радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителем, описанным здесь. Примеры включают, без ограничения, этинил (-С=СН), пропинил (пропаргил, -СН2С=СН), и 5 т.п.
Термин "алкинилен" относится к линейному или с разветвленной цепью двухвалентному углеводородному радикалу из двух - восьми атомов углерода (С2-С8) с по меньшей мере одним ненасыщенным участком, т.е., углерод-углерод, sp тройной связью, где алкиниловый радикал может быть возможно замещен 10 независимо одним или более заместителем, описанным здесь. Примеры включают, без ограничения, этинилен (-С=С-), пропинилен (пропаргилен, -СН2С=С-), и т.п.
Термины "карбоцикл", "карбоциклил", "карбоциклическое кольцо" и "циклоалкил" относятся к одновалентному неароматическому, насыщенному или
15 частично ненасыщенному кольцу, имеющему от 3 до 12 атомов углерода (С3-С12) в случае моноциклического кольца или от 7 до 12 атомов углерода в случае бициклического кольца. Бициклические карбоциклы, содержащие от 7 до 12 атомов могут быть образованы, например, в виде бицикло [4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] систем, и бициклические карбоциклы, имеющие 9 или 10 атомов в кольце, могут быть
20 образованы как бицикло [5,6] или [6,6] системы, или как мостиковые системы, такие как бицикло[2.2.1]гептан, бицикло[2.2.2]октан и бицикло[3.2.2]нонан. Примеры моноциклических карбоциклов включают, без ограничения, циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-З-енил, циклогексил, 1-циклогексен-1-енил, 1 циклогекс-2-енил, 1-циклогекс-З-енил,
25 циклогексадиенил, циклогептил, циклооктил, циклононил, циклодецил, циклоундецил, циклододецил, и т.п..
"Арил" означает ароматический одновалентный углеводородный радикал из 6-20 атомов углерода, (С6-С20), полученный удалением одного атома водорода от одного кольцевого атома углерода ароматической системы родительского
30 соединения. Некоторые арильные группы представлены в структурах соединений как "Аг". Арил включает бициклические радикалы, содержащие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или ароматическим карбоциклическим кольцом. Типичные арильные группы включают, без ограничения, радикалы, полученные из бензола (фенил), замещенных
35 бензолов, нафталина, антрацена, бифенила, инденила, инданила, 1,2
дигидронафталина, 1,2,3,4-тетрагидронафтила, и т.п. Арильные группы могут быть возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными здесь.
"Арилен" означает двухвалентный ароматический углеводородный радикал 5 из 6-20 атомов углерода (С6-С20), полученный удалением двух атомов водорода от двух кольцевых атомов углерода ароматической системы родительского соединения. Некоторые ариленовые группы представлены в структурах соединений как "Аг". Арилен включает бициклические радикалы, содержащие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично
10 ненасыщенным кольцом, или ароматическим карбоциклическим кольцом. Типичные ариленовые группы включают, без ограничения, радикалы, полученные из бензола (фенилен), замещенных бензолов, нафталина, антрацена, бифенилена, инденилена, инданилена, 1,2-дигидронафталина, 1,2,3,4-тетрагидронафтила, и т.п. Ариленовые группы возможно независимо замещены одним или более
15 заместителями, описанными здесь.
Термины "гетероцикл", "гетероциклил" и "гетероциклическое кольцо" используются здесь взаимозаменяемо и относятся к насыщенному или частично ненасыщенному (т.е. имеющему одну или несколько двойных и/или тройных связей в кольце) карбоциклическому радикалу, содержащему от 3 до примерно 20
20 кольцевых атомов, в котором по меньшей мере один кольцевой атом представляет собой гетероатом, выбранный из азота, кислорода, фосфора и серы, а остальные кольцевые атомы представляют собой С, где один или несколько кольцевых атомов возможно замещен независимо одним или более заместителями, описанными ниже. Гетероцикл может быть моноциклом, содержащим от 3 до 7
25 кольцевых атомов (от 2 до 6 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из N, О, Р и S) или бициклом, содержащим от 7 до 10 кольцевых атомов (от 4 до 9 атомов углерода и от 1 до 6 гетероатомов, выбранных из N, О, Р и S), например, бицикло [4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] система. Гетероциклы описаны у Paquette, Leo А.; "Principles of Modern Heterocyclic Chemistry" (W.A. Benjamin, New York, 1968), в
30 частности, главы 1, 3, 4, 6, 7 и 9; "The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs" (John Wiley & Sons, New York, 1950 по настоящее время), в частности главы 13, 14, 16, 19 и 28, а также в J. Am. Chem. Соц. (1960) 82:5566. "Гетероциклил" также включает радикалы, где гетероциклические радикалы конденсированы с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или
35 ароматическим карбоциклическим или гетероциклическим кольцом. Примеры гетероциклических колец включают в себя, без ограничения, морфолин-4-ил,
пиперидин-1-ил, пиперазинил, пиперазин-4-ил-2-он, пиперазин-4-ил-З-он,
пирролидин-1-ил, тиоморфолин-4-ил, 8-диоксотиоморфолин-4-ил, азокан-1-ил,
азетидин-1 -ил, октагидропиридо[1,2-а]пиразин-2-ил, [1,4]диазепан-1 -ил,
пирролидинил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиенил, 5 тетрагидропиранил, дигидропиранил, тетрагидротиопиранил, пиперидино, морфолино, тиоморфолино, тиоксанил, пиперазинил, гомопиперазинил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, гомопиперидинил, оксепанил, тиепанил, оксазепинил, диазепинил, тиазепинил, 2-пирролинил, 3 - пирролинил, индолинил, 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил,
10 дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, пиразолидинил,
имидазолинил, имидазолидинил, 3-азабицикло[3.1.0]гексанил, 3-
азабицикло[4.1.0]гептанил, азабицикло[2.2.2]гексанил, ЗН-индолилхинолизинил и N-пиридилмочевина. Спиро фрагменты также входят в объем этого определения. Примеры гетероциклических групп, в которых два кольцевых атома замещены оксо
15 (= О) остатками являются пиримидинонил и 1,1-диоксотиоморфолинил. Гетероциклические группы в данном описании, возможно замещены независимо одним или более заместителями, описанными здесь.
Термин "гетероарил" относится к одновалентному ароматическому радикалу 5-, 6- или 7-членных колец, и включает конденсированные кольцевые системы (по
20 меньшей мере одно из которых является ароматическим) из 5-20 атомов, содержащие один или более гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. Примерами гетероарильных групп являются пиридинил (включая, например, 2-гидроксипиридинил), имидазолил, имидазопиридинил, пиримидинил (включая, например, 4-гидроксипиримидинил), пиразолил, триазолил,
25 пиразинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксадиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидроизохинолинил, индолил, бензимидазолил, бензофуранил, циннолинил, индазолил, индолизинил, фталазинил, пиридазинил, триазинил, изоиндолил, птеридинил, пуринил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, тиадиазолил,
30 фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил и фуропиридинил. Гетероарильные группы возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными здесь.
Гетероциклическая или гетероарильная группа может быть присоединена по 35 углероду (углерод-связанный) или по азоту (азот-связанный), где такое возможно. В качестве примера, без ограничения, гетероциклы или гетероарилы
присоединенные по углероду могут быть присоединены в положении 2, 3, 4, 5 или 6 пиридина, положении 3, 4, 5 или 6 пиридазина, в положении 2, 4, 5 или 6 пиримидина, в положении 2, 3, 5 или 6 пиразина, в положении 2, 3, 4 или 5 фурана, тетрагидрофурана, тиофурана, тиофена, пиррола или тетрагидропиррола, в 5 положении 2, 4 или 5 оксазола, имидазола или тиазола, положении 3, 4 или 5 изоксазола, пиразола, или изотиазола, положении 2 или 3 азиридина, положении 2, 3 или 4 азетидина, в положении 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 хинолина или положении 1,3,4, 5, 6, 7 или 8 изохинолина.
В качестве примера, а не ограничения, азот-связанные гетероциклы или
10 гетероарилы присоединены в положении 1 азиридина, азетидина, пиррола, пирролидина, 2-пирролин-З-пирролина, имидазола, имидазолидина, 2-имидазолина, 3-имидазолина, пиразола, пиразолина, 2-пиразолина, 3-пиразолина, пиперидина, пиперазина, индола, индолина, 1Н-индазола, положении 2 изоиндола или изоиндолина, положении 4 морфолина и положении 9 карбазола, или р-
15 карболина.
Термины "лечить" и "лечение" относятся как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам, для которых целью является предотвратить или замедлить (уменьшить) нежелательные физиологические изменения или нарушения, такие, как развитие или распространение рака. Для
20 целей настоящего изобретения благоприятные или желаемые клинические результаты включают, без ограничения, облегчение симптомов, уменьшение степени болезни, стабилизированное (т.е. без ухудшения) состояния болезни, задержку или замедление прогрессирования заболевания, улучшение или временное облегчение состояния болезни, и ремиссию (частичную или полную),
25 как детектируемые, так и скрытые. "Лечение" может также означать продление выживаемости по сравнению с ожидаемым выживанием при неполучении лечения. Те, кто нуждается в лечении, включают тех, которые уже с состоянием или расстройством, а также склонны иметь состояние или расстройство, и тех, у которых состояние или расстройство должно быть предотвращено.
30 Фраза "терапевтически эффективное количество" означает количество
соединения по настоящему изобретению, которое (i) лечит или предотвращает конкретное заболевание, состояние или расстройство, (и) ослабляет, улучшает, или устраняет один или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, или (iii) предотвращает или задерживает начало одного или более
35 симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, описанного здесь. В случае рака, терапевтически эффективное количество лекарственного
средства может уменьшать число раковых клеток; уменьшать размер опухоли; ингибировать (т.е. замедлять до некоторой степени и, предпочтительно, останавливать) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; ингибировать (т.е. замедлять до некоторой степени и, предпочтительно, 5 останавливать) метастазирование опухоли; подавлять, в некоторой степени, рост опухоли, и/или облегчать до некоторой степени один или более симптомов, ассоциированных с раком. В тех случаях, когда, лекарственное средство может предотвращать рост и/или убивать существующие раковые клетки, это действие может быть цитостатическим и/или цитотоксическим. Для противораковой терапии,
10 эффективность может быть оценена, например, путем оценки времени до прогрессирования заболевания (ТТР) и/или определения степени ответа (RR).
Термин "рак" относится к, или описывает физиологическое состояние у млекопитающих, которое обычно характеризуется неконтролируемым ростом клеток. "Опухоль" включает одну или несколько раковых клеток. Примеры рака
15 включают, без ограничения, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз или лимфоидные злокачественные опухоли. Более конкретные примеры таких опухолей включают плоскоклеточный рак (например, эпителиальный плоскоклеточный рак), рак легких, включая мелкоклеточный рак легких, немел коклеточный рак легкого ("NSCLC"), аденокарциному легких и
20 плоскоклеточный рак легких , рак брюшной полости, гепатоцеллюлярный рак, рак желудка, включая рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластомы, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатомы, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки, рак эндометрия или матки, карциному слюнной железы,
25 рак почек, рак, рак простаты, рак вульвы, рак щитовидной железы, карциному печени, анальные карциномы, рак полового члена, а также рак головы и шеи.
"Химиотерапевтический агент" представляет собой химическое соединение, используемое для лечения рака, независимо от механизма действия. Классы химиотерапевтических агентов включают, без ограничения: алкилирующие агенты,
30 антиметаболиты, веретенный яд, растительные алкалоиды,
цитотоксические/противоопухолевые антибиотики, ингибиторы топоизомераз, антитела, фотосенсибилизаторы и ингибиторы киназ. Химиотерапевтические агенты включают соединения, используемые в "целевой терапии" и традиционной химиотерапии. Примеры химиотерапевтических агентов включают: эрлотиниб
35 (TARCEVA (r), Genentech/OSI Pharm.), Доцетаксел (Таксотер (r), Sanofi-Aventis), 5-FU (фторурацил, 5-фторурацил, CAS № 51-21-8), гемцитабин (GEMZAR (r), Lilly), PD
0325901 (CAS № 391210-10-9, Pfizer), цисплатин (цис-диамин, дихлорплатина (II), CAS № 15663-27-1), карбоплатин (CAS № 41575 - 94-4), паклитаксел (таксол (r), Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.), пеметрексед (ALIMTA (r), Eli Lilly), трастузумаб (Герцептин (r), Genentech), темозоломид (4-метил-5-оксо-2,3,4,6,8-5 пентазабицикло[4.3.0]нона-2,7,9-триен-9-карбоновая кислота, CAS № 85622-93-1, ТЕМОДАР (r), ТЕМОДАЛ (r), Schering Plough), тамоксифен ((Z)-2-[4-(1,2-дифенилбутил-1-енил)фенокси]-М, N-диметилэтанамин, NOLVADEX (r), ISTUBAL (r), VALODEX (r)) и доксорубицин (ADRIAMYCIN (r)), Akti-1/2, HPPD и рапамицин.
Дополнительные примеры химиотерапевтических агентов включают:
10 оксалиплатин (Элоксатин (r), Sanofi), бортезомибом (VELCADE (r), Millennium Pharm), сутент (Сунитиниб (r), SU11248, Pfizer), летрозол (FEMARA (r), Novartis), иматиниба мезилат (Gleevec (r), Novartis), XL-518 (Mek ингибитор, Exelixis, WO 2007/044515), ARRY-886 (МЭК ингибитор AZD6244, Array BioPharma, Astra Zeneca), SF-1126 (ингибитор PI3K, Semafore Pharmaceuticals), BEZ-235 (ингибитор PI3K , Novartis),
15 XL-147 (ингибитор PI3K, Exelixis), PTK787/ZK 222584 (Novartis), фулвестрант (Faslodex(r), AstraZeneca), лейковорин (фолиевая кислоты), рапамицин (сиролимус, Rapamune(r), Wyeth), лапатиниб (Tykerb(r), GSK572016, Glaxo Smith Kline), лонафарниб (SARASAR(tm), SCH 66336, Schering Plough), сорафениб (Нексавар(r), BAY43-9006, Bayer Labs), гефитиниб (IRESSA (r), AstraZeneca), иринотекан
20 (CAMPTOSAR (r), CPT-11, Pfizer), типифарниб (ZARNESTRA(tm), Johnson & Johnson), ABRAXANE(tm) (свободный от кремофора), альбумин-инженерные композиции наночастиц паклитаксела (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, II), вандетаниб (rINN, ZD6474, ZACTIMA (r), AstraZeneca), хлорамбуцил, AG1478, AG1571 (SU 5271; Sugen), темсиролимус (Torisel (r), Wyeth), пазопаниб
25 (GlaxoSmithKline), канфосфамид (TELCYTA(r), Telik), тиотепа и циклофосфамид (CYTOXAN(r), NEOSAR(r)); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилмеламин;
30 ацетогенины (в частности буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включая синтетический аналог топотекан); бриостатин; каллистатин, СС-1065 (включая его синтетические аналоги адозелесин, карзелесин и бизелесин), криптофицины (в частности, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги, KW-2189 и СВ1-ТМ1), элеутеробин; панратистатин;
35 саркодиктиин; спонгистатин, азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, хлорфосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлоретамин,
гидрохлорид оксида мехлоретамина, мелфалан, новембехин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урамустин, нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимнустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин, калихеамицин гамма11, 5 калихеамицин омегаИ (Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33:183-186); динемицин, динемицин А, бисфосфонаты, такие как клодронат; эсперамицином, а также хромофор неокарциностатина и родственные хромобелковые энедииновые антибиотик хромофоры), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, карминомицин, карцинофилин,
10 хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-Ь норлейцин, морфолино-доксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин-доксорубицин и деоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, неморубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин С, микофеноловая кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин,
15 порфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонирин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, циностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-ФУ), аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; пуриновые аналоги, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина,
20 такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидеоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, пропионат дромостанолона, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; анти-адренергические агенты, такие как аминоглютетимид, митотан, трилостан; компенсаторы фолиевой кислоты, такие как фролиновая кислота; ацеглатон;
25 альдофосфамидные гликозиды; аминолевулиновая кислота; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бизантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; эльфорнитин; эллиптиния ацетат; эпотилоном; этоглуцид; нитрат галлия; гидроксимочевина; лентинан; лонидайнин; майтанзиноиды, такие как майтансин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин;
30 фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; подофилиновая кислота, 2-этилгидразид; прокарбазин; PSK(r) комплекс полисахаридов (JHS Natural Products, Eugene, OR); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновая кислота; триазиквон; 2,2',2"-трихлортриэтиламин; трихотецены, верракурин А, роридин А и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол;
35 пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-С"); циклофосфамид, тиотепа, 6-тиогуанин, меркаптопурин, метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и
карбоплатин; винбластин; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин, винорелбин (Navelbine(r)); новантрон; тенипозид; эдатрексат; даунорубицин, аминоптерин; капецитабин (XELODA(r), Roche), ибандронат, СРТ-11; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как 5 ретиноевая кислота, и их фармацевтически приемлемых соли, кислоты и производные любого из вышеуказанных.
Также включенными в определение "химиотерапевтический агент" являются: (I) анти-гормональные препараты, которые действуют, регулируя или ингибируя действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены и селективные
10 модуляторы рецептора эстрогена (СМРЭ), включая, например, тамоксифен (включая NOLVADEX(r); тамоксифен цитрат), ралоксифен, дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY117018, онапристон и FARESTON(r) (торемифин цитрат), (II), ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазу, которая регулирует продукцию эстрогена в надпочечниках,
15 такие как, например, 4 (5)-имидазолы, аминоглютетимид, MEGASE(r) (мегестролацетат), Аромазин(r) (экземестан, Pfizer), форместан, фадрозол, RIVISOR(r) (ворозол), FEMARA(r) (летрозол; Novartis) и Аримидекс(r) (анастрозол; AstraZeneca), (III), антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и гозерелин, а также троксацитабин (1,3-диоксолан нуклеозида
20 цитозиновый аналог), (IV) ингибиторы протеинкиназ, такие как ингибиторы МЕК (WO 2007/044515), (V) ингибиторы липидкиназ; (VI) антисмысловые олигонуклеотиды, в частности те, которые ингибируют экспрессию генов сигнальных путей, участвующих в аберрантной пролиферацией клеток, например, РКС-альфа, Raf и H-Ras, такие как облимерсен (Genasense (r), Genta Inc.), (VII)
25 рибозимы, такие как ингибиторы экспрессии VEGF (например, ANGIOZYME(r)) и ингибиторы экспрессии HER2; (VIII) вакцины, такие как вакцины для генной терапии, например, ALLOVECTIN(r), LEUVECTIN(r), и VAX ID(r); Пролекин(r) рИЛ-2; ингибиторы топоизомеразы 1, такие как LURTOTECAN(r); абареликс(r) rmRH; (ix) антиангиогенные агенты, такие как бевацизумаб (Avastin(r), Genentech), и его
30 фармацевтически приемлемые соли, кислоты и производные любого из вышеперечисленных.
Также включены в определение "химиотерапевтический агент" терапевтические антитела, такие как алемтузумаб (Campath), бевацизумаб (Avastin(r), Genentech), цетуксимаб (ERBITUX(r), Imclone); панитумумабом (Vectibix(r),
35 Amgen), ритуксимаб (RITUXAN (r), Genentech/ iogen Idee), пертузумаб (OMNITARG(tm), 2C4, Genentech), трастузумаб (Герцептин (r), Genentech), тозитумомаб (Bexxar,
Corixia), и лекарственные конъюгаты антител, гемтузумаб озогамицина (Mylotarg (r), Wyeth).
Гуманизированные моноклональные антитела с терапевтическим потенциалом в качестве химиотерапевтических агентов в комбинации с 5 ингибиторами PI3K по изобретению, включают: алемтузумаб, аполизумаб, азелизумаб, атлизумаб, бапинейзумаб, бевацизумаб, биватузумаба мертанзин, кантузумаба мертанзин, цеделизумаб, цертолизумаб пегол, цидфузитузумаб, цидтузумаб, даклизумаб, экулизумаб, эфализумаб, эпратузумаб, эрлизумаб, фелвизумаб, фонтолизумаб, гемтузумаб озогамицин, инотузумаб озогамицин,
10 ипилимумаб, лабетузумаб, линтузумаб, матузумаб, меполизумаба, мотавизумаб, мотовизумаб, натализумаб, нимотузумаб, ноловизумаб, нумавизумаб, окрелизумаб, омализумаб, паливизумаб, пасколизумаб, пекфузитузумаб, пектузумаб, пертузумаб, пекселизумаб, раливизумаб, ранибизумаб, ресливизумаб, реслизумаб, ресивизумаб, ровелизумаб, руплизумаб, сибротузумаб, сиплизумаб, сонтузумаб,
15 такатузумаб тетраксетан, тадоцизумаб, тализумаб, тефибазумаб, тоцилизумаб, торализумаб, трастузумаб, тукотузумаб целмолейкин, тукуситузумаб, умавизумаб, уртоксазумаб и визилизумаб.
"Метаболит" представляет собой продукт, полученный в процессе метаболизирования в теле указанного соединения или его соли. Метаболиты
20 соединений могут быть определены с использованием обычных способов, известных в данной области техники, и их активность определяется с помощью тестов, таких как описано здесь. Такие продукты могут быть результатом, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификация, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п. вводимого
25 соединения. Соответственно, изобретение включает метаболиты соединений по настоящему изобретению, включая соединения, полученные способом, включающему контактирование соединения по настоящему изобретению с млекопитающему в течение преиода времени, достаточного для получения продукта его метаболизма.
30 Термин "вкладыш" используется для обозначения инструкций, обычно
включаемых в коммерческие упаковки терапевтических продуктов, которые содержат информацию о показаниях, использовании, дозировке, введении, противопоказаниях и/или предупреждениях, касающихся применения таких терапевтических продуктов.
35 Термин "хиральный" относится к молекулам, которые обладают свойством
не-наложимости зеркального отображения партнера, в то время как термин
"ахиральный" относится к молекулам, которые совмещаются с зеркальным отображением их партнера.
Термин "стереоизомеры" относится к соединениям, которые имеют одинаковый химический состав, но отличаются в отношении расположения атомов 5 или групп в пространстве.
"Диастереомер" относится к стереоизомеру с двумя или более центрами хиральности, и чьи молекулы не являются зеркальными отражениями друг друга. Диастереоизомеры обладают различными физическими свойствами, например, температурами плавления, температурами кипения, спектральными свойствами и 10 реакционной способностью. Смеси диастереомеров можно разделить с помощью аналитическихспособов с высоким разрешением, таких как электрофорез и хроматография.
"Энантиомеры" относятся к двум стереоизомеров соединения, которые не являются зеркальными отражениями друг друга.
15 Стереохимические определения и условные обозначения, используемые
здесь, как правило, соответствуют S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; and Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Соединения по изобретению могут содержать асимметричные или хиральные
20 центры и, следовательно, существовать в различных стереоизомерных формах. Предполагается, что все стереоизомерные формы соединений по изобретению, включая, без ограничения, диастереомеры, энантиомеры и атропизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, являются частью настоящего изобретения. Многие органические соединени существуют в оптически активных
25 формах, т.е. они обладают способностью вращать плоскость линейно поляризованного света. При описании оптически активных соединений префиксы D и L или R и S используются для обозначения абсолютной конфигурации молекулы относительно ее хирального центра (ов). Префиксы d и I или (+) и (-) используются для обозначения знака вращения плоскости поляризованного света соединением,
30 причем (-) или 1 означает, что соединение является левовращающим. Соединение с префиксом (+) или d является правовращающим. Для данной химической структуры эти стереоизомеры являются идентичными за исключением того, что они являются зеркальными отражениями друг друга. Конкретный стереоизомер может также упоминаться как энантиомером, а смесь таких изомеров часто называют
35 энантиомерной смесью. 50:50 смесь энантиомеров называют рацемической смесью или рацематом, которые могут иметь место в случаях, когда
стереоселективность или стереоспецифичность отсутствовала при химической реакции или процессе. Термины "рацемическая смесь" и "рацемат" относятся к эквимолярной смеси двух видов энантиомеров, лишенной оптической активности. Термин "таутомер" или "таутомерная форма" относится к структурным 5 изомерам с различной энергией, которые могут превращаться друг в друга через низкий энергетический барьер. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) включают взаимопревращения через миграцию протонов, такие как кето-енольная и имин-енамин изомеризации. Валентные таутомеры включают взаимопревращения путем реорганизации некоторых
10 связывающих электронов.
Выражение "фармацевтически приемлемая соль", используемая здесь, относится к фармацевтически приемлемым органическим или неорганическим солям соединения по настоящему изобретению. Примеры солей включают, без ограничения, сульфат, цитрат, ацетат, оксалат, хлорид, бромид, иодид, нитрат,
15 бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, лактат, салицилат, кислый цитрат, тартрат, олеат, таннат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкуронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат "мезилат", этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат и памоат (т.е. 1,1'-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоат)). Фармацевтически
20 приемлемые соли могут содержать включение другой молекулой, такой как ацетат-ион, сукцинат-ион или другой противоион. Противоион может быть любым органическим или неорганическим фрагментом, который стабилизирует заряд на исходном соединении. Кроме того, фармацевтически приемлемая соль может иметь более чем один заряженный атом в своей структуре. В случаях, когда
25 многозарядные атомы являются частью фармацевтически приемлемой соли, она может иметь несколько противоионов. Таким образом, фармацевтически приемлемая соль может иметь один или несколько заряженных атомов и/или один или более противоионов.
Если соединение по изобретению представляет собой основание,
30 необходимые фармацевтически приемлемые соли могут быть получены любым подходящим способом, доступным в данной области техники, например, обработкой свободного основания неорганической кислотой, такой как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, метансульфоновая кислота, фосфорная кислота и т.п., или органической кислотой,
35 такой как уксусная кислота, трифторуксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота,
пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранозидиловой кислотой, такой как глюкуроновая или галактуроновая кислоты, альфа гидроксикислотой, такой как лимонная кислота или винная кислота, аминокислотой, такой как аспарагиновая кислота и глутаминовая кислота, 5 ароматической кислотой, такой как бензойная кислота или коричная кислота, сульфоновой кислотой, такой как п-толуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота, и т. п.
Если соединение по изобретению представляет собой кислоту, необходимая фармацевтически приемлемая соль может быть получена любым
10 подходящим способом, например, обработкой свободной кислоты неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный) гидроксидом щелочного металла или гидроксидом щелочноземельного металла и т.д. Иллюстративные примеры подходящих солей включают, без ограничения, органические соли, полученные из аминокислот, таких как глицин и
15 аргинин, аммиака, первичных, вторичных и третичных амином, и циклических аминов, таких как пиперидин, морфолин и пиперазин, и неорганические соли, полученные из натрия, кальция, калия, магния, марганца, железа, меди, цинка, алюминия и лития.
Фраза "фармацевтически приемлемый" означает, что вещество или 20 композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, содержащими композиции и/или млекопитающим, подвергаемым лечению этим веществом или композицией.
"Сольват" относится к ассоциату или комплексу из одного или более молекул растворителя и соединения по настоящему изобретению. Примерами 25 растворителей, которые образуют сольваты включают, без ограничения, воду, изопропанол, этанол, метанол, ДМСО, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин.
Термины "соединение настоящего изобретения" и "соединения по настоящему изобретению" и "соединения формулы I" включает соединения формулы I и их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, сольваты, 30 метаболиты и фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Любая формула или структура, приведенные здесь, в том числе соединения формулы I, также подразумевают гидраты, сольваты и полиморфные формы таких соединений и их смесей.
35 ТРИЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ-ИНГИБИТОРЫ PI3K ФОРМУЛЫ I
В настоящем изобретении предложены трициклические соединения
ингибиторы PI3K Формулы I, и их фармацевтические композиции, которые являются потенциально полезными при лечении заболеваний, состояний и/или нарушений, модулируемых PI3 киназами. Более конкретно, в настоящем изобретении предложены соединения Формулы I:
тог
и их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и фармацевтически приемлемые соли, где:
прерывистая линия обозначает возможную двойную связь, и по меньшей
мере одна прерывистая линия является двойной связью;
10 X1 представляет собой S, О, N, NRa, CR1, C(R1)2, или -C(R1)20- ;
X2 представляет собой С, CR2 или N;
X3 представляет собой С, CR3 или N;
А представляет собой 5, 6 или 7-членое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, объединенное с X2 и X3, возможно замещенное одной
15 или более R5 группами;
Ra is Н, Ci-C12 алкил, С2-С8 алкенил, С2-С8 алкинил, -(С!-С12 алкилен)-(С3-С12 карбоциклил), -(Ci-C12 алкилен)-(гетероциклил, обладающий 3-20 кольцевыми атомами), -(Ci-Ci2 алкилен)-С(=0)-(гетероциклил, обладающий 3-20 кольцевыми атомами), -(Ci-Ci2 алкилен)-(С6-С20 арил), и -(Ci-Ci2 алкилен)-(гетероарил,
20 обладающий 5-20 кольцевыми атомами), где алкил, алкенил, алкинил, алкилен, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил возможно замещены одной или более трупами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -С02СН3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -
25 NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино, и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила;
R1, R2, и R3 независимо выбраны из Н, F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -
30 СОС(СН3)3, -С02СН3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -
NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино, и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила; R4 выбран из С6-С20 арила, гетероциклила, обладающего 3-20 кольцевыми 5 атомами и гетероарила, обладающего 5-20 кольцевыми атомами, каждый из котторых возможно замещен одной или более R6 трупами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН(СН3)2, -СН2СН(СН3)2, -СН2СН3, -CH2CN, -CN, -CF3, -СН2ОН, -C02H, -CONH2, -CONH(CH3), -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -NHCOCH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3,
10 OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3,
NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(=0)OC(CH3)3, -S(0)2CH3, бензила, бензилокси, морфолинила, морфолинометила, и 4-метилпиперазин-1-ила; и
R5 независимо выбран из Ci-Ci2 алкила, С2-С8 алкенила, С2-С8 алкинила, -(Ci-С12 алкилен)-(С3-С12 карбоциклила), -(Ci-Ci2 алкилен)-(гетероциклил,
15 обладающий 3-20 кольцевыми атомами), -(Ci-C12 алкилен)-С(=0)-(гетероциклил, обладающий 3-20 кольцевыми атомами), -(Ci-C12 алкилен)-(С6-С20 арила), и -(d-Ci2 алкилен)-(гетероарил, обладающий 5-20 кольцевыми атомами); или две, присоединенных к одному и тому же атому, R5 группы образуют 3, 4, 5, или 6-членный карбоциклил или гетероциклил, где алкил, алкенил, алкинил, алкилен,
20 карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил возможно замещены одной или более группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -C02H, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -
25 N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино, и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила;
mor выбран из:
0 .О. .О. /О о.
й й В й
N N N N
1 I I I I
v/WT ОЛЛЛ уЛЛГ ЧЛЛ/4 ЧЛЛГ
S CX> СЮ С"
II II
v/W4 vA/W чААЛА vAAAA
возможно замещенных одной или более R7 трупами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН2СН2СН3, -СН(СН3)2, -С(СН3)3, -5 СН2ОСН3, -CHF2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -СН2СН2ОН, -СН2С(СН3)2ОН, -СН(СН3)ОН, -СН(СН2СН3)ОН, -СН2СН(ОН)СН3, -С(СН3)2ОН, -С(СН3)2ОСН3, -CH(CH3)F, -C(CH3)F2, -CH(CH2CH3)F, -C(CH2CH3)2F, -C02H, -CONH2, -CON(CH2CH3)2, -COCH3, -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH2CH2OH, -NHCH2CH2OCH3, -NHCOCH3, -NHCOCH2CH3, -10 NHCOCH2OH, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)S(0)2CH3, =0, -OH, -0CH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -S(0)CH3, -S(0)CH2CH3, -S(0)2CH3, -S(0)2NH2, -S(0)2NHCH3, -S(0)2N(CH3)2, и -CH2S(0)2CH3.
Более конкретно, в настоящем изобретении предложены соединения Формулы I:
и их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и фармацевтически приемлемые соли, где:
прерывистая линия обозначает возможную двойную связь, и по меньшей
мере одна прерывистая линия является двойной связью;
20 X1 представляет собой S, О, N, NRa, CR1, C(R1)2, или -C(R1)20- ;
X2 представляет собой С, CR2 или N;
X3 представляет собой С, CR3 или N;
А представляет собой 5, 6 или 7-членое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, объединенное с X2 и X3, возможно замещенное одной или более R5 группами^3 представляет собой Н, С1-С12 алкил, С2-С8 алкенил, С2-С8 алкинил, -(d-C12 алкилен)-(С3-С12 карбоциклил), -(d-C12 алкилен)-(С2-С2о 5 гетероциклил), -(d-C12 апк]лпеи)-С(=О)-(С2-С20 гетероциклил), -(d-C12 алкилен)-(С6-С20 арил), и -(d-C12 алкилен)-(С1-С20 гетероарил), где алкил, алкенил, алкинил, алкилен, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил возможно замещен одной или более группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)з, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -
10 CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино, и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила;
15 R1, R2, и R3 независимо выбраны из Н, F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -
СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -С02СН3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3,
20 циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино, и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила;
R4 выбран из С6-С2о арила, С2-С20 гетероциклила и d-C20 гетероарила, каждый из которых возможно замещен одной или более R6 группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН(СН3)2, -СН2СН(СН3)2, -СН2СН3, -CH2CN, -CN, -CF3, -СН2ОН, -C02H, -CONH2, -CONH(CH3), -CON(CH3)2, -N02, -
25 NH2, -NHCH3, -NHCOCH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3,
OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -NHC(=0)NHCH(CH3)2, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(=0)OC(CH3)3, -S(0)2CH3, бензила, бензилокси, морфолинила, морфолинометила, и 4-метилпиперазин-1-ила; и
R5 независимо выбран из Ci-Ci2 алкила, С2-С8 алкенила, С2-С8 алкинила, -
30 (d-C12 алкилен)-(С3-С12 карбоциклил), -(d-C12 алкилен)-(С2-С20 гетероциклил), -(d-C12 алкилен)-С(=О)-(С2-С20 гетероциклил), -(d-C12 алкилен)-(С6-С20 арил), и -(d-C12 алкилен)-(С1-С20 гетероарил); или две, присоединенных к одному и тому же атому, R5 группы образуют 3, 4, 5, или 6-членный карбоциклил или гетероциклил, где алкил, алкенил, алкинил, алкилен, карбоциклил, гетероциклил,
арил, и гетероарил возможно замещены одной или более группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -5 N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2,
N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино, и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила; mor выбран из:
() й В В й
I I I I I
J\J\r *S\J\r sJXIXT vA/VT v/W1
S CD со CO
II II
v/WP vS\S\S\r чЛА/\Л чЛЛЛЛ
10 возможно замещенных одной или более R7 трупами, независимо
выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН2СН2СН3, -СН(СН3)2, -С(СН3)3, -СН2ОСН3, -CHF2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -СН2СН2ОН, -СН2С(СН3)2ОН, -СН(СН3)ОН, -СН(СН2СН3)ОН, -СН2СН(ОН)СН3, -С(СН3)2ОН, -С(СН3)2ОСН3, -CH(CH3)F, -C(CH3)F2, -CH(CH2CH3)F, -C(CH2CH3)2F, -C02H, -CONH2, -
15 CON(CH2CH3)2, -COCH3, -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH2CH2OH, -NHCH2CH2OCH3, -NHCOCH3, -NHCOCH2CH3, -NHCOCH2OH, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -S(0)CH3, -S(0)CH2CH3, -S(0)2CH3, -S(0)2NH2, -S(0)2NHCH3, -S(0)2N(CH3)2, и -CH2S(0)2CH3.
20 Кроме того, необходимо понимать, что любое воплощение изобретения,
относящееся к конкретным значениям групп X1, X2, X3, A, Ra, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 и mor, как здесь раскрыто, может быть объединено с любым другим воплощением,, относящимся к другим значениям групп X1, X2, X3, A, Ra, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 и mor, как здесь раскрыто.
25 Воплощения изобретения в качестве примеров включают соединения
Формул la-n:
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более R5 группами.
5 Конкретные воплощения соединений Формулы 1а включают:
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более R5 группами.
Конкретное соединение Формулы 1а включает: тог
5 где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более R5
группами.
В некоторых соединениях Формулы I А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной, двумя или тремя группами R5.
В некоторых соединениях Формулы I А гетероциклическое кольцо возможно 10 замещено двумя группами R5.
Типичные соединения Формулы I включают:
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более R5 группами.
15 Некоторые соединения Формулы I включают такие, в которых R4
представляет собой фенил, замещенный одной или более группами, выбранными
из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН(СН3)2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -C02H, -CONH2, -
CONH(CH3), -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -NHCOCH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3,
-OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3,
20 NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(=0)OC(CH3)3, и -S(0)2CH3.
Некоторые соединения Формулы I включают такие, в которых R4 представляет собой возможно замещенную бициклическую гетероарильную группу, выбранную из 1Н-индазола, 1Н-индола, индолин-2-она, 1-(индолин-1-ил)-этанола, 1 Н-бензо[с1][1,2,3]триазола, 1 Н-пиразоло[3,4-Ь]пиридина, 1 Н-пиразоло[3,4-с1]
пиримидина, 1 Н-бензо[с1]имидазола, 1Н-бензо[с1]имидазол-2(ЗН)-она, 1Н-пиразоло[3,4-с]пиридина, 1 Н-пирроло[2,3-с]пиридина, ЗН-имидазо[4,5-с]пиридина, 7Н-пирроло[2,3-с1]пиримидина, 7Н-пурина, 1Н-пиразоло[4,3-с1]пиримидина, 5Н-пирроло[3,2-с1]пиримидина, 2-амино-1 Н-пурин-6(9Н)-она, хинолина, хиназолина, 5 хиноксалина, изохинолина, изохинолин-1(2Н)-она, 3,4-дигидроизохинолин-1 (2Н)-она, 3,4-дигидрохинолин-2(1Н)-она, хиназолин-2(1Н)-она, хиноксалин-2(1Н)-она, 1,8-нафтиридина, пиридо[3,4-с1]пиримидина и пиридо[3,2-Ь]пиразина.
Некоторые соединения Формулы I включают такие, в которых возможно замещенный R4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения. Некоторые соединения Формулы I включают такие, в которых возможно 5 замещенный R4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения. В одном из воплощений настоящего изобретения R4 представляет собой 1Н-индазол-4-ил.
Некоторые соединения Формулы I включают такие, в которых R4 представляет собой возможно замещенную моноциклическую гетероарильную группу выбранную из пиридила, пиримидинила или пиразолила.
Некоторые соединения Формулы I включают такие, в которых R4 5 пердставляет собой возможно замещенный пиримидинил.
Некоторые соединения Формулы I включают такие, в которых R4
представляет собой возможно замещенную моноциклическую гетероарильную
группу, выбранную из 2-фуранила, 3-фуранила, 2-имидазолила, 4-имидазолила, 3-
изоксазолила, 4-изоксазолила, 5-изоксазолила, 2-оксазолила, 4-оксазолила, 5-
10 оксазолила, 3-пиразолила, 4 - пиразолила, 2-пиразинила, 3-пиридазинила, 4-
пиридазинила, 5-пиридазинила, 2-пиримидинила, 5-пиримидинила, 6-
пиримидинила, 2-пиридила, 3-пиридила, 4-пиридила, 2-пирролила, 3-пирролила, 2-
тиенила, 3-тиенила, 5-тетразолила, 1 -тетразолила, 2-тетразолила, 2-тиазолила, 4-
тиазолила, 5-тиазолила, 3-триазолил и 1-триазолила.
15 В одном из воплощений настоящего изобретения R4 представляет собой 2-
аминопиримидин-5-ил.
Примеры соединений Формулы I включают те, в которых возможно замещенный R4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения. Примеры соединений Формулы I включают те, в которых возможно замещенный R4:
где волнистая линия обозначает место присоединения. Примеры соединений Формулы I включают в себя две геминальные группы R5, которые образуют циклопропил, циклобутил, циклопентил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, оксетанил, азетидинил, пирролидинил, пиперидил, 10 пиперазинил, циклогексил, морфолино или 1,1-диоксо-тиопиран-4-ил.
Примеры соединений Формулы I включают mor:
где волнистая линия обозначает место присоединения, возможно замещенный одной или более R7 трупами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -
15 СН3, -СН2СН3, -СН2СН2СН3, -СН(СН3)2, -С(СН3)3, -СН2ОСН3, -CHF2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -СН2СН2ОН, -СН2С(СН3)2ОН, -СН(СН3)ОН, -СН(СН2СН3)ОН, -СН2СН(ОН)СН3, -С(СН3)2ОН, -С(СН3)2ОСН3, -CH(CH3)F, -C(CH3)F2, -CH(CH2CH3)F, -C(CH2CH3)2F, -C02H, -CONH2, -CON(CH2CH3)2, -COCH3, -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH2CH2OH, -NHCH2CH2OCH3, -
20 NHCOCH3, -NHCOCH2CH3, -NHCOCH2OH, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -S(0)CH3, -S(0)CH2CH3, -S(0)2CH3, -S(0)2NH2, -S(0)2NHCH3, -S(0)2N(CH3)2, and -
CH2S(0)2CH3.
В одном из воплощений настоящего изобретения одна или более R5 групп представляют собой СГС12 алкил, возможно замещенный одной или более группами, выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -5 СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила.
10 В одном из воплощений настоящего изобретения R5 представляет собой
метил, возможно замещенный одной или более группами, как определено здесь. В одном из вопложений такие заместители представляют собой F, ОН и =0.
В одном из воплощений настоящего изобретения одна или более R5 групп независимо выбраны из
15 F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -
СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -С02СН3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила,
20 оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила.
Соединения формулы I по изобретению могут содержать асимметричные или хиральные центры и, следовательно, существовать в различных стереоизомерных формах. Предполагается, что все стереоизомерные формы соединений по изобретению, включая, без ограничения, диастереомеры,
25 энантиомеры и атропизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, составляют часть настоящего изобретения.
Кроме того, настоящее изобретение охватывает все геометрические и позиционные изомеры. Например, если соединение формулы I содержит двойную связь или конденсированное кольцо, цис-и транс-формы, а также их смеси
30 включены в объем настоящего изобретения. Как единичные позиционные изомеры, так и смеси позиционных изомеров также входят в объем настоящего изобретения.
В структурах, показанных здесь, где стереохимия любого конкретного хирального атома не указана, все стереоизомеры рассматриваются и включены в качестве соединений по изобретению. В случаях, когда стереохимия показана
сплошным "клином" или пунктирной линией, отражающими конкретную конфигурацию, тогда именно этот стереоизомер уточнен и определен.
Соединения по настоящему изобретению могут существовать как в несольватированных, так и в сольватированных формах с фармацевтически 5 приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п., и предполагается, что изобретение охватывает как сольватированные, так и несольватированные формы.
Соединения по настоящему изобретению могут также существовать в различных таутомерных формах, и все такие формы включены в объем данного
10 изобретения. Термин "таутомер" или "таутомерная форма" относится к структурным изомерам с различной энергией, которые превращаются друг в друга через низкий энергетический барьер. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) включают взаимопревращения через миграцию протонов, такие как кето-енольная и имин-енамин изомеризации.
15 Валентные таутомеры включают взаимопревращения путем реорганизации некоторых связывающих электронов.
Настоящее изобретение также охватывает меченные изотопами соединения по настоящему изобретению, которые идентичны соединениям, приведенным в настоящем изобретении, за исключением того, что один или более атомов
20 заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличные от атомной массы или массового числа обычно встречающихся в природе. Все изотопы любого конкретного атома или элемента, как указано, рассматриваются в рамках соединений по изобретению и их применения. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по изобретению, включают изотопы водорода,
25 углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора, хлора и йода, такие, как 2Н (D), 3Н, 11С, 13С, 14С, 13N, 15N, 150, 170, 180, 32Р, 33Р, 35S, 18F, 36CI, 123l and 1251. Некоторые меченные изотопами соединения по настоящему изобретению (например, соединения, меченные 3Н и 14С) являются полезными в анализах тканевого распределения соединения и/или субстрата. Изотопы тритий (3Н) и углерод-14 (14С)
30 могут быть использованы вследствие легкости их получения и обнаружения. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (например, 2Н), может давать определенные терапевтические преимущества в результате большей метаболической стабильности (например, увеличенный в естественных условиях период полураспада или снижение требуемой дозировки) и,
35 следовательно, может быть предпочтительным в некоторых обстоятельствах. Позитронно излучающие изотопы, такие как 150, 13N, 11С и 18F могут использоваться
в исследованиях с помощью позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) для изучения количества рецепторов, занятых субстратом. Меченные изотопами соединения по настоящему изобретению могут быть получены согласно следующим способам, аналогичным описанным на схемах и/или примерах, данных 5 ниже, посредством замены не меченного изотопом реагента на меченный изотопом реагент.
БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА
Определение активности соединений формулы I на PI3 киназу возможно 10 рядом прямых и косвенных способв обнаружения. Некоторые типичные соединения, описанные здесь, анализировали на их связывающую активность в отношении р110а (альфа) и другие изоформы PI3K (Пример 901) и активность in vitro в отношении опухолевых клеток (Пример 902). Некоторые типичные соединения по настоящему изобретению обладают IC50 значениями связывающей 15 активности PI3K менее 10 нМ. Некоторые соединения по настоящему изобретению имеют значения ЕС50 активности в отношении опухолевых клеток менее чем 100 нМ.
Цитотоксическую или цитостатическую активности типичных соединений формулы I измеряли следующим образом: получение пролиферирующей
20 опухолевой клеточной линии млекопитающих в среде для культивирования клеток, добавление соединения формулы I, культивирования клеток в течение от приблизительно 6 часов до 5 дней и измерение жизнеспособности клеток (пример 902). Клеточный in vitro анализ использовали для измерения жизнеспособности, т.е. пролиферации (IC50), цитотоксичности (ЕС50) и индукции апоптоза (активации
25 каспазы).
Активность in vitro типичных соединений формулы I измеряли с помощью анализа пролиферации клеток, CellTiter-Glo(r) Luminescent Cell Viability Assay, коммерчески доступный от Promega Corp., Madison, Wl (Пример 902). Этот гомогенный способ анализа основан на рекомбинантной экспрессии люциферазы
30 Coleoptera (US 5583024, US 5674713, US 5700670) и определяет количество жизнеспособных клеток в культуре на основе количества присутствующей АТФ, индикатора метаболически активных клеток (Crouch et al (1993) J. Immunol. Meth. 160:81-88; US 6602677). Анализ CellTiter-Glo (r) проводится в форматах 96 или 384-луночных планшет, что делает его подходящим для автоматизированного
35 высокопроизводительного скрининга (HTS) (Cree et al (1995) Anticancer Drugs 6:398-404). Гомогенный способ анализа включает добавление одного реагента
(CellTiter-Glo(r) Reagent) непосредственно к клеткам, культивируемым среде с добавлением сыворотки. Промывка клеток, удаление среды и несколько стадий пипетирования не требуется. Система обнаруживает от 15 клеток/лунку в 384-луночном формате в течение 10 минут после добавления реагента и 5 перемешивания.
Гомогенный формат "добавить-смешать-измерить" приводит к лизису клеток и генерации люминесцентного сигнала, пропорционального количеству присутствующего АТФ. Количество АТФ прямо пропорционально количеству клеток в культуре. CellTiter-Glo(r) Assay генерирует "светящийся" люминесцентный сигнал,
10 генерируемый люциферазной реакцией, который имеет период полужизни обычно больше, чем пять часов, в зависимости от типа клеток и используемого носителя. Жизнеспособные клетки показаны в относительных единицах люминесценции (RLU). Субстрат, люциферин жука, подвергается окислительному декарбоксилированию рекомбинантной люциферазой светлячка с сопутствующим
15 преобразованием АТФ до АМФ и генерацией фотонов. Увеличенный период полужизни исключает необходимость использовать инжекторы реагентов и обеспечивает гибкость для непрерывного или периодического режима обработки нескольких планшет. Этот анализ пролиферации клеток может быть использован с различными мультилуночными форматами, например, 96- или 384- луночный
20 формат. Данные могут быть записаны люминометром или устройством отображения с CCD камерой. Выход люминесценции представлен в виде относительных световых единиц (RLU), измеренный стечением времени.
Антипролиферативные эффекты типичных соединений формулы I измеряли с помощью CellTiter-Glo(r) Assay (Пример 902) против нескольких опухолевых
25 клеточных линий. ЕС50 значения активности были установлены для исследуемых соединений. Диапазон in vitro активности в отношении клеток составлял приблизительно от 100 нМ до 10 мкМ. Некоторые тестируемые соединения обладали значениями ЕС50 менее 1 микромоль (1 мкМ) в остановке пролиферации некоторых линий опухолевых клеток.
30 Некоторые ADME свойства были измерены для некоторых типичных
соединений с помощью анализов, включающих: Сасо-2 проницаемость (пример 903), клиренс гепатоцитов (пример 904), ингибирование цитохрома Р450 (пример 905), индуцирование цитохрома Р450 (пример 906), связывание белков плазмы (пример 907), а блокада hERG канала (пример 908).
35 Некоторые типичные соединения были протестированы на эффективность в
исследованиях эскалации дозы на опухолевых моделях "голых" мышей Taconic
NCR (пример 909). Мышиную модель подкожного ксенотрансплантата U-87 MG Merchant (местный вариант полученный из клеток U-87 MG из АТСС, Manassas, VA) использовали для тетстирования соединений формулы I в возрастающих дозах вместе носителем (МСТ, отрицательный контроль). Задержку роста опухоли 5 измеряли один раз в день после перорального приема в течение <28 дней. Изменение массы тела в течение курса лечения измеряли как показатель безопасности. Дозо- и время-зависимые фармакокинетический и фармакодинамический ответы на введение препарата в той же модели подкожного ксенотрансплантата опухоли также исследовали (пример 913).
10 Потенциал проникновения через гематоэнцефалический барьер
[проникающие свойства] был оценен in vitro с использованием MDCK клеток, стабильно трансфицированных Р-гликопротеином (MDR1) или bcrpl (пример 911). Мозговая проницаемость была определена in vivo путем измерения концентрации соединения (пример 912) и/или путем измерения модуляции сигнального пути PI3K
15 (пример 913) в головном мозге мышей после однократной внуривенной или пероральной доз. Эффективность в отношении опухоли головного мозга была измерена в примере 914 с помощью GS-2 (мультиформная глиобластома человека (GBM), сконструированная для экспрессии люциферазы). Эффект одноразового перорального приема в день соединений на рост GS-2 внутричерепных
20 имплантатов оценивали с помощью магнитно-резонансной томографии (МРТ). Мышам с ксенотрансплантатами опухоли клеток U-87 MG вводили лекарственное средство или носитель и образцы анализировали с помощью РК, PD и/или IHC способами (пример 915).
Примеры соединений формулы I № 101-177 в таблице 1 были получены,
25 охарактеризованы и протестированы на ингибирование PI3K альфа (IC50 или К, связывание р110 альфа менее 1 мкмоль, мкМ) и селективность в соответствии со способами по настоящему изобретению, и имеют следующие структуры и соответствующие зназвания (ChemBioDraw Ultra, Version 11.0, CambridgeSoft Corp., Cambridge MA).
106
О n*Vx
N NH2
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагид ропиридо[2,1 -е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00388
107
N NH2
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагид ропиридо[2,1 -е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин
0.0507
108
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6h-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-(трифторметил)пиридил-2-амин
0.0112
109
N NH2
5-(4-морфолино-7,8-дигидро-
6п-пирроло[2,1-е]пурин-2-
ил)пиримидин-2-амин
0.00826
6,6-диметил-4-морфолино-2-
(1 Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-5-
ил)-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
0.0140
111
kN^NH2
5-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиридин-2-амин
0.0186
112
N NH2
5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1 '-циклопропан]-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00137
113
О n
N NH2
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6h-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00432
114
N NH2
5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан]-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00245
115
N NH2
5-(7,7-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-7п-
[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-
ил)пиримидин-2-амин
0.00509
116
N NH2
5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин
0.0452
117
N NH2
5-(6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6п-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00259
118
N NH2
(8)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00311
119
5-(6,6,9-триметил-4-
морфолино-6п-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиримидин-2-амин
0.00473
120
О мГх
N NH2
(Р1)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00596
121
°^ lNANH2
5-(1 -морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагид po-8h-7,10-д иокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрен-3-ил)-пиримидин-2-иламин
0.00572
122
N^NH2
5-((8)-6-морфолин-4-ил-2,3,За,4-тетрагидро-1 Я-5-окса-7,9,9Ь-триаза-
циклопента[а]нафтален-8-ил)-пиримидин-2-иламин
0.0779
123
4-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)анилин
0.541
124
н н
1 -(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Я-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-метилмочевина
0.00671
125
N TNH N
6,6-диметил-4-морфолино-2-(1 Н-пиразол-4-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
0.382
126
0> vJiN
4-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиридин-2-амин
0.685
127
6,6-диметил-2-(1 -метил-1Н-
пиразол-4-ил)-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
128
3-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)фенол
0.00458
129
О N тОЗ
2-(1 Н-индазол-5-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
130
N 1
6,6-диметил-2-(2-(4-метилпиперазин-1-ил) иридин-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
131
HN^
М-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)метансульфонамид
0.638
132
6,6-диметил-4-морфолино-2-(6-морфолинопиридин-3-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
133
2-(1-бензил-1 Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
134
2-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
135
М-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетамид
> 0.695
136
l^'_JL Al
2-(3,5-диметил-1 Н-пиразол-4-
ил)-6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
137
5-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиридин-2-ол
> 0.695
138
6-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиридин-3-амин
> 0.695
139
F F N С" N-^N^Y^N
w l Л
N NH2
(Р)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00357
140
F F N
F\- <'NTfS
N NH2
(8)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.00345
141
2-(1 -этил-1 Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
142
4-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
1\1,1\1-диметилбензамид
> 0.695
143
трет-бутил 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил(метил)сагЬата1е
> 0.695
144
O> S*nY^N 'I'
L ^ 11. Л J
2-(3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетонитрил
> 0.695
145
C°)
6,6-диметил-4-морфолино-2-(3-морфолинофенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
146
О л
6,6-диметил-4-морфолино-2-(3-(морфолинометил)фенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
147
2-(3-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
148
2-(1-изобутил-1 Н-пиразол-4-
ил)-6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
149
6,6-диметил-2-(6-(4-метилпиперазин-1 -ил)иридин-3-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
150
О N тОг
2-(1 Н-индазол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
0.0198
151
4-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)бензонитрил
> 0.695
152
o> 5-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)никотинамид
0.0352
153
5-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
N-метилпиколинамид
> 0.695
154
2-(4-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
155
3-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
1\1,1\1-диметиламин
> 0.695
156
6,6-диметил-2-(4-(4-метилпиперазин-1 -ил)фенил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
157
6,6-диметил-4-морфолино-2-(4-(пиперидин-1 -ил)фенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
> 0.695
158
М-(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид
0.0490
159
NH2
5-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиколинамид
160
6-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиридин-3-ол
161
(4-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)фенил)(4-метилпиперазин-
1-ил)метанон
> 0.695
162
М-циклопропил-3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)бензамид
> 0.695
163
5-(6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
М,М-диметилпиразин-2-амин
> 0.695
164
^ N Ы А ^
Н Н
1 -(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-этилмочевина
0.0417
165
н н
1 -(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-изопропилмочевина
0.337
166
N NH2
(2-(2-аминопиримидин-5-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,6-диил)диметанол
0.0128
167
N r^N
ЧЛмН2
2-(2-аминопиримидин-5-ил)-7-метил-4-морфолино-8,9-дигидропиразино[2,1-е]пурин-6(7Н)-он
0.0215
168
1 /S^J| N
N NH2
5-(8,8-диметил-1 -морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-2,4-диаза-флуорен-3-ил)-пиримидин-2-иламин
0.00100
169
2-(1 Н-индазол-4-ил)-4-
морфолино-б-(трифторметил)-
8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
0.0452
170
F F N
3-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6H-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенол
0.0797
171
N"^NH2
5-(4-((2S,6R)-2,6-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.01398
172
°w N | N
NT*^NH2
5-(4-(2,2-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.201
173
М-(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-ил)ацетамид
0.242
174
N NH2
5-(4-((1S,4S)-2-OKca-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
0.394
175
N r^N
HV N^NH2 0
2-(2-аминопиримидин-5-ил)-6-метил-4-морфолино-6,7-дигидропиразино[2,1-е]пурин-8(9Н)-он
0.00428
176
N r^N
4ANH2
5-(6,7-диметил-4-морфолино-6,7,8,9-
тетрагид ропиразино[2,1 -
е]пурин-2-ил)пиримидин-2-
амин
0.00689
177
°w nVN
N"^NH2
5-(8,8-диметил-1 -морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триаза-флуорен-3-ил)-пиримидин-2-иламин
0.000831
ВВЕДЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I
Соединения формулы I по изобретению могут быть введены любым способом, соответствующим состоянию, подлежащему лечению. Подходящие 5 способы включают пероральный, парентеральный (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное, внутриартериальное, внутрикожное, интратекальное и эпидуральное введение), трансдермальный, ректальный, назальный, местный (включа буккальный и сублингвальный), вагинальный, внутрибрюшинный, внутрилегочный и интраназальный. Для местной
10 иммуносупрессивной терапии соединения могут быть введены внутриочаговым способом, в том числе перфузией или иным способом контактирования трансплантата с ингибитором перед трансплантацией. Следует понимать, что предпочтительный путь может изменяться в зависимости от, например, состояния реципиента. Когда соединение вводят перорально, оно может быть приготовлено в
15 виде пилюли, капсулы, таблетки и т.д. вместе с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом. В случае, когда соединение вводят парентерально, его можно приготовить с фармацевтически приемлемым парентеральным носителем и в единичной дозированной формы для инъекций, как подробно описано ниже.
20 Доза для лечения людей может составлять от приблизительно 10 мг до
приблизительно 1000 мг соединения формулы I. Обычная доза может составлять от приблизительно 100 мг до приблизительно 300 мг соединения. Доза может быть введена один раз в день (QID), два раза в день (BID) или чаще, в зависимости от фармакокинетических и фармакодинамических свойств, включая всасывание,
распределение, метаболизм и выведение конкретного соединения. Кроме того, на дозировку и режим введения могут оказывать влияние факторы токсичности. При пероральном введении пилюли, капсулы или таблетки могут поступать в организм ежедневно или реже в течение определенного периода времени. Лечение можно 5 повторить в виде нескольких циклов терапии.
СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ СОЕДИНЕНИЯМИ ФОРМУЛЫ I Соединения формулы I по настоящему изобретению являются полезными для лечения гиперпролиферативных заболеваний, состояний и/или расстройств,
10 включая, без ограничения, характеризующиеся сверхэкспрессией липидкиназ, например, PI3 киназы. Соответственно, один аспект настоящего изобретения относится к способам лечения или профилактики заболеваний или состояний, которые можно лечить или предупреждать посредством ингибирования липидкиназ, в том числе PI3. В одном воплощении способ включает введение млекопитающему,
15 нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы I, или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера или фармацевтически приемлемой соли.
Один вариант осуществления изобретения включает способ лечения рака у пациента, содержащий введение указанному пациенту терапевтически
20 эффективного количества соединения по настоящему изобретению, где рак представляет собой рак молочной железы, яичника, шейки матки, предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани, глиобластому, нейробластому, желудка, кожи, кератоакантому, легкого, плоскоклеточный рак, крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), мелкоклеточный рак,
25 аденокарциному легких, костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярную карциному, недифференцированную карциному, папиллярную карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков, карциному почки, рак почек, рак поджелудочной железы, миелоидные нарушения,
30 лимфому, "волосатые" клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, болезнь Ходжкина и лейкемию.
В одном варианте осуществления рак представляет собой рак мозга.
В одном из воплощений настоящего изобретения, способ дополнительно
35 включает введение указанному пациенту дополнительного терапевтического агента, выбранного из химиотерапевтического агента, антиангиогенного
терапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистые заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для 5 лечения иммунодефицитных состояний.
В одном из воплощений настоящего изобретения дополнительный терапевтический агент представляет собой бевацизумаб.
В одном из воплощений пациента, который является человеком, лечат соединением формулы I и фармацевтически приемлемым носителем, адъювантом 10 или наполнителем, где соединение формулы I присутствует в количестве, при котором ингибирование активность киназы PI3 является обнаруживаемым.
Соединения формулы I также могут быть полезны для лечения гиперпролиферативных заболеваний, характеризующихся сверхэкспрессией протеинкиназ, таких как, кодируемые PIM; генами Pim-1, Pim-2 и Pim-3 (Proviral 15 Insertion, Moloney), которые вовлечены в развитие лимфомы и твердых опухолей (Cuypers et al. (1984) Cell, vol. 37 (1) pp. 141-50; Selten et al. (1985) EMBO J. vol. 4 (7) pp. 1793-8; van der Lugt et al. (1995) EMBO J. vol. 14 (11) pp. 2536-44; Mikkers et al. (2002) Nature Genetics, vol. 32 (1) pp. 153-9; van Lohuizen et al. (1991) Cell, vol. 65 (5) pp. 737-52).
20 Раковые заболевания, которые можно лечить в соответствии со способами
настоящего изобретения, включают, без ограничения, рак молочной железы, яичника, шейки матки, предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани, глиобластомы, нейробластомы, рак желудка, кожи, кератоакантому, легкого, плоскоклеточный рак, крупноклеточный рак,
25 немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), мелкоклеточный рак, аденокарциному легких, костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярную карциному, недифференцированную карциному, папиллярную карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков,
30 карциному почки, рак почек, рак поджелудочной железы, миелоидные нарушения, лимфому, "волосатые" клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, болезнь Ходжкина и лейкемию.
Соединения формулы I могут быть полезны для in vitro, in situ и in vivo
35 диагностики или лечения клеток млекопитающего, организмов или связанных патологических состояний, таких как системное и местное воспаление, иммуно
воспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит, иммуносупрессия, отторжение трансплантатов органов, аллергия, язвенный колит, болезнь Крона, дерматит, бронхиальная астма, системная красная волчанка, синдром Шегрена, рассеянный склероз, склеродермия/системный склероз, идиопатическая 5 тромбоцитопеническая пурпура (ITP), цитоплазматические антитела к нейтрофилам (ANCA), васкулит, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), псориаз, а также для общих совместных защитных эффектов.
Соединения формулы I могут быть полезны для лечения заболеваний головного мозга и центральной нервной системы, для которых необходим
10 транспорт через гематоэнцефалический барьер. Некоторые соединения формулы I обладают благоприятными проникающими свойствами через гематоэнцефалический барьер для доставки в мозг. Мозговые нарушения, которые можно эффективно лечить соединениями формулы I включают метастатические и первичные опухоли головного мозга, такие как глиобластома и меланома.
15 Соединения формулы I могут быть полезны для лечения глазных
заболеваний, таких как влажная и сухая макулярная дистрофия (AMD) и отек сетчатки посредством локализованной доставки в глаз. Некоторые соединения формулы I обладают благоприятными свойствами для доставки и поглощения в глазах. Некоторые соединения формулы I могут повысить эффективность и
20 увеличить продолжительность ответа для лечения влажной AMD в сочетании с ранибизумабом (Lucentis (r), Genentech, Inc) и бевацизумабом (Avastin (r), Genentech, Inc.)
В другом аспекте настоящего изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения при лечении заболеваний или
25 состояний, описанных здесь, у млекопитающего, например, человека, страдающего от такого заболевания или состояния. Предложено также применение соединения по настоящему изобретению при изготовлении лекарственного средства для лечения заболеваний и состояний, описанных здесь, у теплокровного животного, такого как млекопитающее, например, человека, страдающего от такого
30 расстройства.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является соединение по настоящему изобретению для применения в качестве терапевтически активного вещества.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение 35 соединения по настоящему изобретению для лечения рака.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для получения лекарственного средства для лечения рака.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является соединение 5 по настоящему изобретению для применения при лечении рака.
В другом аспекте настоящего изобретения рак представляет собой рак молочной железы, яичника, шейки матки, предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани, глиобластому, нейробластому, рак желудка, кожи, кератоакантому, рак легкого, плоскоклеточный рак, 10 крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), мелкоклеточную карциному, аденокарциному легких, костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярный рак, недифференцированную карциному, папиллярную карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных 15 протоков, карциному почки, рак почек, поджелудочной железы, миелоидные нарушения, лимфому, "волосатые" клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, лимфому или лейкемию.
В другом аспекте настоящего изобретения рак является раком мозга.
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ
Для того чтобы использовать соединение формулы I для терапевтического лечения (включая профилактическое лечение) млекопитающих, включая человека, оно обычно приготовлено в соответствии со стандартной фармацевтической
25 практикой в виде фармацевтической композиции. В соответствии с этим аспектом изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая соединение по настоящему изобретению в сочетании с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Один вариант осуществления изобретения относится к фармацевтической
30 композиции, содержащей соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество, разбавитель или эксципиент.
Один вариант осуществления изобретения включает способ получения фармацевтической композиции, который включает объединение соединения по 35 настоящему изобретению с фармацевтически приемлемым носителем.
Один из вариантов осуществления изобретение включает фармацевтическую композицию, как описано выше, дополнительно содержащую дополнительный терапевтический агент, выбранный из химиотерапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, 5 нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
Типичную композицию получают смешиванием соединения формулы I и
10 носителя, разбавителя или эксципиента. Подходящие носители, разбавители и эксципиенты хорошо известны специалистам в данной области техники и включают материалы, такие как углеводы, воски, водорастворимые и/или набухающие в воде полимеры, гидрофильные или гидрофобные материалы, желатин, масла, растворители, воду и т.п. Использование конкретного носителя, разбавителя или
15 эксципиента будет зависеть от средств и цели, для которой соединение по настоящему изобретению применяется. Растворители обычно выбирают на основе растворителей, признанных специалистами в данной области техники как безопасные (GRAS) для введения млекопитающим. В общем, безопасные растворители являются нетоксичными водными растворителями, такими как вода и
20 другие нетоксичные растворители, которые растворяются или смешиваются с водой. Подходящие водные растворители включают воду, этанол, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль (например, ПЭГ 400, ПЭГ 300), и т.д. и их смеси. Композиции могут также включать один или более буферов, стабилизирующих агентов, поверхностно-активных веществ, смачивающих агентов,
25 смазывающих агентов, эмульгаторов, суспендирующих агентов, консервантов, антиоксидантов, кроющие агенты, скользящие вещества, технологические добавки, красители, подсластители, отдушки, ароматизаторы и другие известные добавки, обеспечивающие улучшенные потребительские качества препарата (то есть, соединения по настоящему изобретению или его фармацевтической композиции)
30 или помощь в изготовлении фармацевтического продукта (т.е. лекарственного средства).
Кмпозиции могут быть приготовлены с использованием обычных процедур растворения и смешивания. Например, нерасфасованная лекарственная форма (например, соединение по настоящему изобретению или стабилизированные 35 формы соединения формулы I (например, комплекс с производным циклодекстрина или другим известным агентом комплексообразования)
растворяют в подходящем растворителе в присутствии одного или более эксципиентов, описанных выше. Соединение по настоящему изобретению обычно приготавливают в виде фармацевтических дозированных форм для обеспечения легко контролируемую дозировку препарата и обеспечить соблюдение пациентом 5 предписанного режима.
Фармацевтическая композиция (или состав) могут быть упакованы различными способами, в зависимости от способа введения препарата. Как правило, товар для распространения включает в себя контейнер, с размещенной в нем для хранения фармацевтической композиции в соответствующей форме.
10 Подходящие контейнеры хорошо известны специалистам в данной области техники и включают такие материалы, как бутылки (пластик и стекло), саше, ампулы, пластиковые мешки, металлические цилиндры, и т.п. Контейнер может также включать в себя защитный механизм для предотвращения неосторожного доступа к содержимому упаковки. Кроме того, на контейнере может находиться
15 этикетка, которая описывает содержимое контейнера. Этикетка может также включать соответствующие предупреждения.
Фармацевтические композиции соединений по настоящему изобретению могут быть получены для различных путей и типов введения. Например, соединение формулы I, имеющее желаемую степень чистоты, возможно может
20 быть смешано с фармацевтически приемлемыми разбавителями, носителями, эксципиентами или стабилизаторами (Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) 16th edition, Osol, A. Ed.), в виде лиофилизированной композиции, измельченного порошка или водного раствора. Композиция может быть получена путем смешивания при температуре окружающей среды при соответствующем рН и в
25 нужной степени чистоты, с физиологически приемлемым носителем, то есть носители, которые являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозах и концентрациях. РН композиции в основном зависит от конкретного применения и концентрации соединения, но может варьироваться от примерно 3 до примерно 8. Композиция в ацетатном буфере при рН 5 является подходящим воплощением.
30 Соединение по настоящему изобретению для применения в настоящем
изобретении, предпочтительно, стерильны. В частности, композиции, которые будут применяться для введения in vivo, должны быть стерильными. Такую стерилизацию легко осуществлять фильтрацией через стерильные фильтрующие мембраны.
35 Соединение обычно может храниться в виде твердой композиции,
лиофилизированной композиции или в виде водного раствора.
Фармацевтические композиции по изобретению, содержащие соединение формулы I будут приготовлены, дозированы и введены таким образом, т.е. в количествах, концентрации, графиках, курсами, носителями и путями введения, в соответствии с надлежащей медицинской практикой. Факторы для рассмотрения в 5 данном контексте включают конкретное заболевание, подлежащее лечению, конкретного млекопитающего, подвергаемого лечению, клиническое состояние конкретного пациента, причину расстройства, место доставки агента, способ введения, схему введения и другие факторы, известные практикующим врачам. "Терапевтически эффективное количество" соединения для введения будет
10 определяться указанными факторами и минимальным количеством, необходимым для профилактики, облегчения или лечения заболеваний, связанных с факторами свертывания крови. Такое количество предпочтительно ниже токсичного количества для пациента или количества, делающего пациента значительно более восприимчивым к кровотечению.
15 В качестве общего предложения, начальное фармацевтически эффективное
количество соединения формулы I. вводимого парентерально на одну дозу будет находиться в диапазоне от приблизительно 0,01-100 мг/кг, в частности от приблизительно 0,1 до 20 мг/кг веса тела пациента в день, при этом типичный первоначальный диапазон используемого соединения от 0,3 до 15 мг/кг/день.
20 Приемлемые разбавители, носители, эксципиенты и стабилизаторы
являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозах и концентрациях и включают буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты, антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как хлорид октадецилдиметилбензиламмония; хлорид гексаметония; хлорид
25 бензалкония, хлорид бензетония; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен, катехол, резорцин, циклогексанол, 3-пентанол и м-крезол); полипептиды с низкой молекулярной массой (приблизительно менее 10 остатков); белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как
30 поливинилпирролидон, аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу и декстрины; хелатирующие агенты, такие как EDTA; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, Zn-белок), и/или
35 неионные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN(tm), или PLURONICS(tm) или полиэтиленгликоль (ПЭГ). Активные фармацевтические
ингредиенты могут быть также заключены в микрокапсулы, полученные, например, способами коацервации или путем межфазной полимеризации, например гидроксиметилцеллюлозные или желатиновые микрокапсулы и поли(метилметакрилатные) микрокапсулы, соответственно, в коллоидные системы 5 доставки лекарственных средств (например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсии. Такие способы описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980).
Могут быть получены препараты соединений формулы I с замедленным
10 высвобождением. Подходящие примеры препаратов с замедленным высвобождением включают полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, содержащие соединение формулы I, где матрицы находятся в виде формованных изделий, например, пленок или микрокапсул. Примеры матриц с замедленным высвобождением включают сложные полиэфиры, гидрогели
15 (например, поли(2-гидроксиэтил-метакрилат) или поли(виниловый спирт)), полилактиды (US 3773919), сополимеры L-глутаминовой кислоты и гамма-этил-L-глутамата, неразлагающийся этилен-винилацетат, разлагаемые сополимеры молочной и гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT(tm) (инъецируемые микросферы, состоящие из сополимера молочной и гликолевой кислот и ацетата
20 лейпролида), и поли-0-(-)-3-гидроксимасляную кислоту.
Композиции включают такие, которые подходят для способов введения описанных в настоящем изобретении. Композиции могут быть удобно представлены в виде единичной дозированной форме и могут быть приготовлены любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики. Способы и
25 композиции, в основном, можно найти в Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA). Такие способы включают стадию ассоциации активного ингредиента с носителем, который состоит из одного или нескольких вспомогательных ингредиентов. В общем, композиции получают путем равномерного и тщательного смешивания активного ингредиента с жидкими
30 носителями или тонко измельченными твердыми носителями или и теми и другими, а затем, если необходимо, формованием продукта.
Композиции соединение формулы I, пригодные для перорального введения могут быть приготовлены в виде отдельных единиц, таких как пилюли, капсулы, сашеты или таблетки, каждая из которых содержит определенное количество
35 соединения формулы I.
Прессованные таблетки могут быть получены прессованием в соответствующем аппарате активного ингредиента в свободно-текучей форме, такой как порошок или гранулы, возможно смешанного со связующим веществом, смазывающим веществом, инертным разбавителем, консервантом, поверхностно-5 активным или диспергирующим агентом. Формованные таблетки могут быть изготовлены формованием в соответствующем аппарате смеси порошкообразного активного ингредиента, увлажненного инертным жидким разбавителем. Таблетки необязательно можно покрывать оболочкой или наносить на них бороздки и, возможно, приготовить таким образом, чтобы обеспечить замедленное или
10 контролируемое высвобождение активного ингредиента из них.
Таблетки, пастилки, таблетки для рассасывания, водные или масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые или мягкие капсулы, например желатиновые капсулы, сиропы или эликсиры могут быть приготовлены для перорального применения. Композиции соединений формулы I,
15 предназначенные для перорального применения, могут быть получены в соответствии с любым способом, известным в данной области для производства фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или более агентов, в том числе подсластители, ароматизаторы, красители и консерванты для обеспечения приятного вкуса препарата. Таблетки, содержащие
20 активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемым эксципиентом, который подходит для изготовления таблеток, являются приемлемыми. Эти наполнители могут представлять собой, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция или карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие агенты, такие как
25 кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, такие как крахмал, желатин или камедь; и смазывающие агенты, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут быть непокрытыми или могут быть покрыты оболочкой известными способами, в том числе микрокапсулирования для задержки дезинтеграции и адсорбции в желудочно-кишечном тракте и, тем самым,
30 обеспечения пролонгированного действия в течение более длительного периода. Например, может быть использован материал для временной задержки, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, самостоятельно или вместе с воском.
Для лечения глаз или других наружных тканей, например рта и кожи, 35 композиции могут применяться в качестве местной мази или крема, содержащих активный ингредиент(ы) в количестве, например, от 0,075 до 20% мас./мас. При
приготовлении в виде мази, активные ингредиенты могут быть использованы либо с парафиновой или смешивающейся с водой мазевой основой. Альтернативно, активные ингредиенты могут быть приготовлены в виде крема с основой масло-вводе.
5 Если необходимо водная фаза кремовой основы может содержать
многоатомный спирт, т.е. спирт, имеющий две или более гидроксильные группы, такие как пропиленгликоль, бутан-1,3-диол, маннит, сорбит, глицерин и полиэтиленгликоль (включая ПЭГ 400) и их смеси. Композиции для местного применения могут при необходимости включать соединение, которое увеличивает
10 поглощение или проникновение активного ингредиента через кожу или другие пораженные участки. Примеры таких усилителей проникновения через кожу включают диметилсульфоксид и родственные аналоги.
Масляная фаза эмульсий по настоящему изобретению может быть составлена из известных ингредиентов известным способом. В то время как фаза
15 может содержать только эмульгатор, она желательно содержит смесь по меньшей мере одного эмульгатора с жиром или маслом, или и с жиром и маслом. Предпочтительно, гидрофильный эмульгатор включают вместе с липофильным эмульгатором, который действует в качестве стабилизатора. Вместе эмульгатор(ы) с или без стабилизатора(ов) образует так называемый эмульгирующий воск и воск
20 вместе с маслом и жиром образуют так называемую эмульгирующую основу мази, которая образует масляную дисперсную фазу кремовых композиций. Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, пригодные для использования в композиции по изобретению, включают Tween(r) 60, Span(r) 80, цетостеариловый спирт, бензиловый спирт, миристиловый спирт, глицерилмоностеарат и лаурилсульфат
25 натрия.
Водные суспензии соединений формулы I содержат активные вещества в смеси с эксципиентами, подходящими для получения водных суспензий. Такие эксципиенты включают суспендирующий агент, такой как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, кроскармеллоза, повидон, метилцеллюлоза,
30 гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и гуммиарабик, и диспергирующие или смачивающие агенты, такие как природные фосфатиды (например, лецитин), продукты конденсации алкиленоксида с жирной кислотой (например, полиоксиэтиленстеарат), продукт конденсации этиленоксида с длинноцепочечным алифатическим спиртом
35 (например, гептадекаэтиленоксицетанол), продукты конденсации этиленоксида с неполным эфиром жирной кислоты и гекситангидрида (например, моноолеат
полиоксиэтиленсорбитана). Водная суспензия может также содержать один или
более консервантов, таких как этил- или н-пропил- п-гидроксибензоат, один или
более красителей, один или более ароматизирующих агентов и один или более
подсластителей, таких как сахароза или сахарин.
5 Фармацевтические композиции соединений формулы I могут быть в форме
стерильного инъекционного препарата, например стерильной водной или маслянистой суспензии для инъекций. Эти суспензии могут быть получены в соответствии с известными способами с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, которые
10 были упомянуты выше. Стерильный инъекционный препарат может также представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-бутандиоле или приготовлен в виде лиофилизированного порошка. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые можно
15 использовать, можно указать воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, обычно могут быть использованы стерильные нелетучие масла в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для данной цели может быть использовано любое мягкое нелетучее масло, в том числе синтетические моно-или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как
20 олеиновая кислота, также могут быть использованы при получении препаратов для инъекций.
Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с материалом носителя для получения единичной дозированной формы, будет варьироваться в зависимости от подвергаемого лечению субъекта и конкретного
25 способа введения. Например, композиция с замедленным высвобождением, предназначенная для перорального введения человеку, может содержать приблизительно от 1 до 1000 мг активного вещества, смешанного с соответствующим и подходящим количеством материала носителя, которое может варьировать от примерно 5 до примерно 95% от общей композиции (мас.:мас.).
30 Фармацевтическая композиция может быть приготовлена для предоставления легко измеримых количеств для введения. Например, водный раствор, предназначенный для внутривенной инфузии может содержать от приблизительно 3 до 500 мкг активного ингредиента на миллилитр раствора для проведения инфузии подходящего объема со скоростью примерно 30 мл/ч.
35 Композиции, пригодные для парентерального введения включают водные и
неводные стерильные инъекционные растворы, которые могут содержать
антиоксиданты, буферы, бактериостатические факторы и растворенные вещества,
которые придают композиции изотоничность с кровью предполагаемого
реципиента, а также водные и неводные стерильные суспензии, которые могут
включать суспендирующие агенты и загустители.
5 Композиции, пригодные для местного введения в глаз, включают также
глазные капли, в которых активный ингредиент растворен или суспендирован в подходящем носителе, особенно в водном растворителе для активного ингредиента. Активный компонент предпочтительно присутствует в таких композициях в концентрации от приблизительно 0,5 до 20% мас./мас.,
10 приблизительно от 0,5 до 10% мас./мас, или приблизительно 1,5% мас./мас.
Композиции, пригодные для местного применения в полости рта, включают таблетки для рассасывания, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, обычно сахарозе и гуммиарабике или трагаканте, пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин
15 и глицерин, или сахарозе и гуммиарабике; и растворы полоскания, содержащие активный ингредиент в соответствующем жидком носителе.
Композиции для ректального введения могут быть представлены в виде суппозиториев с подходящим основанием, содержащих, например, масло какао или салицилат.
20 Композиции, подходящие для внутрилегочного или назального введения
обладают, например, размером частиц в диапазоне от 0,1 до 500 мкм (в том числе размером частиц в диапазоне между 0,1 и 500 мкм с шагом, таким как 0,5, 1, 30 мкм, 35 мкм, и т.д.), которые вводят путем быстрой ингаляции через носовой ход или при вдыхании через рот так, чтобы достигать альвеолярных мешочков.
25 Подходящие композиции включают водные или масляные растворы активного ингредиента. Композиции, пригодные для аэрозольного введения или введения в виде сухого порошка могут быть получены в соответствии с обычными способами и могут доставляться с другими терапевтическими агентами, такими как соединения, до сих пор использующиеся при лечении или профилактике расстройств, как
30 описано ниже.
Композиции, пригодные для вагинального введения, могут быть представлены в виде вагинальных суппозиториев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спреев, содержащих в дополнение к активному ингредиенту такие носители, которые известны в данной области техники как подходящие.
35 Композиции могут быть упакованы в однодозовый или в многодозовый
контейнеры, например, запечатанные ампулы и флаконы, и могут храниться в
высушенном сублимацией (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например, воды, для инъекций непосредственно перед использованием. Приготовленные для немедленного приема растворы и суспензии для инъекций получают из стерильных порошков, 5 гранул и таблеток ранее описанного вида. Предпочтительные единичные дозированные формы представляют собой те, которые содержат дневную дозу или единичную дневную суб-дозу, как описано выше, или соответствующую ее часть, активного ингредиента.
В настоящем изобретении также предложены ветеринарные композиции,
10 содержащие по меньшей мере один активный ингредиент, как определено выше, вместе с ветеринарным носителем. Ветеринарными носителями являются вещества, используемые для введения композиции, они могут быть твердыми, жидкими или газообразными веществами, которые также являются инертным или приемлемыми в ветеринарии и совместимыми с активным ингредиентом. Эти
15 ветеринарные композиции могут быть введены парентерально, перорально или любым другим желаемым способом.
КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ
Соединения формулы I могут применяться самостоятельно или в
20 комбинации с другими терапевтическими агентами для лечения заболевания или расстройства, описанного здесь, например, гиперпролиферативных расстройств (например, рака). В некоторых воплощениях соединение формулы I комбинируют в фармацевтической комбинированной композиции или режиме дозирования в качестве комбинированной терапии, со вторым соединением, которое обладает
25 противовоспалительными свойствами или которое является полезным для лечения гиперпролиферативных расстройств (например, рака). Второе соединение фармацевтической комбинированной композиции или режима дозирования предпочтительно имеет взаимодополняющую активность по отношению к соединению формулы I, таким образом, что они не оказывают отрицательного
30 влияния друг на друга. Такие соединения предпочтительно присутствуют в комбинации в количествах, которые эффективны для заданных целей. В одном воплощении композиция по изобретению включает соединение формулы I в комбинации с химиотерапевтическим агентом, таким как здесь описано.
Комбинированное лечение можно проводить в виде одновременного или
35 последовательного режима. При последовательном введении комбинации можно вводить в два или более приемов. Комбинированное введение включает
совместное введение с использованием отдельных препаратов или одного
фармацевтического препарата и последовательное введение в любом порядке, где
предпочтительно имеется период времени, когда оба (или все) активные средства
одновременно проявляют свои биологические активности.
5 Подходящие дозировки для любого из вышеуказанных совместно вводимых
агентов являются такими, как здесь применяются и могут быть снижены за счет комбинированного действия (синергии) нового идентифицированного агента и других химиотерапевтических агентов или лечения.
Комбинированная терапия может обеспечить "синергию" и оказаться
10 "синергичной", т.е. достигнутый эффект в случае, когда активные ингредиенты используются вместе, больше, чем сумма эффектов полученных при использовании соединений по отдельности. Синергетический эффект может достигаться в случаях, когда активные ингредиенты являются: (1) совместно приготовлены и введены одновременно или доставлены в комбинированной
15 единичной дозированной форме, (2) доставляются чередованием или одновременно в виде отдельных препаратов, или (3) при некоторых других режимах. При доставке чередующейся терапией, синергетический эффект может быть достигнут при последовательных введении или доставке соединений, например, разными инъекциями с помощью отдельных шприцов, отдельными
20 таблетками или капсулами, или отдельными инфузиями. В общем, во время чередующейся терапии эффективную дозу каждого активного ингредиента вводят последовательно, то есть сериями, тогда как в комбинированной терапии, эффективные дозы двух или более активных ингредиентов вводят вместе.
В одном из воплощений анти-раковой терапии, соединение формулы I, или
25 его стереоизомер, геометрический изомер, таутомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемая соль или пролекарство, могут быть комбинированы с другими химиотерапевтическими агентами, гормональными агентами или антителами, такими как описано здесь, а также в комбинации с хирургической терапией и лучевой терапией. Комбинированная терапия по настоящему
30 изобретению включает, таким образом, введение, по меньшей мере, одного соединения формулы I, или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера, сольвата, метаболита или фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, а также использование по меньшей мере одного другого способа лечения рака. Количества соединения(ий) формулы I и другого фармацевтически
35 активного химиотерапевтического агента(ов) и относительный временной режим
введения будут выбраны для достижения желаемого комбинированного терапевтического эффекта.
МЕТАБОЛИТЫ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I
5 Кроме того, подпадающими под объем настоящего изобретения являются
продукты метаболизма in vivo соединений формулы I, описанных здесь. Такие продукты могут быть результатом, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п., вводимого соединения. Соответственно,
10 изобретение включает метаболиты соединений формулы I, в том числе соединений, полученных способом, включающим контактирование соединения по настоящему изобретению с млекопитающим в течение времени, достаточном для получения его метаболического продукта.
Метаболиты обычно определяются путем получения меченого (например,
15 14С или 3Н) изотопом соединения по настоящему изобретению, его введения парентерально в детектируемой дозе (например, больше чем примерно 0,5 мг/кг) животному, такому как крыса, мышь, морская свинка, обезьяна или человеку, выдерживание достаточного времени для обмена веществ (обычно около от 30 секунд до 30 часов) и выделения продуктов его переработки из мочи, крови или
20 других биологических образцов. Эти продукты легко выделить поскольку они являются мечеными (другие выделяют с помощью антител, способных связывать эпитопы, оставшиеся в метаболитах). Структуры метаболитов определяются обычным образом, например, MS, LC/MS или ЯМР-анализом. В общем, анализ метаболитов осуществляется таким же образом, как и обычные исследования
25 метаболизма лекарств, хорошо известные специалистам в данной области техники. Метаболиты, до тех пор, пока для них не нашли другого в живом организме, могут быть полезны в диагностических анализах для терапевтического дозирования соединений по изобретению.
30 ГОТОВЫЕ ИЗДЕЛИЯ
В другом воплощении изобретения предложено изделие, или "набор",
содержащие вещества, пригодные для лечения заболеваний и расстройств,
описанных выше. Набор включает контейнер, содержащий соединение формулы I.
Этот набор может дополнительно включать этикетку или листок-вкладыш на или 35 вместе с контейнером. Термин "листок-вкладыш" используется для обозначения
инструкций, обычно включаемых в коммерческие упаковки терапевтических
продуктов, которые содержат информацию о показаниях, использовании, дозировке, введении, противопоказаниях и/или предупреждениях, касающихся применения таких терапевтических продуктов.
Одно воплощения настоящего изобретения включает набор для лечения 5 Р13К-опосредованного состояния, включающий соединение по настоящему изобретению и инструкции по применению.
Подходящие контейнеры включают, например, бутылки, флаконы, шприцы, блистерную упаковку и т.п. Контейнер может быть выполнен из различных материалов, таких как стекло или пластик. Контейнер может содержать соединение
10 формулы I или его композицию, которые являются эффективными для лечения состояния, и может иметь стерильное входное отверстие (например, контейнер может представлять собой пакет для внутривенного раствора или флакон, имеющий пробку, прокалываемую иглой для подкожной инъекции). По меньшей мере один активный агент в композиции представляет собой соединение формулы
15 I. На этикетке или вкладыше указывается, что композиция используется для лечения выбранного состояния, такого как рак. Кроме того, этикетка или вкладыш могут указывать, что пациент, подлежащий лечению, обладает расстройством, таким как гиперпролиферативные расстройства, нейродегенерация, гипертрофия сердца, боль, мигрень или нейротравматические заболевания или случаи. В одном
20 варианте осуществления этикетка или вкладыш указывает, что композиция, содержащая соединение формулы I, может быть использована для лечения расстройства являющегося результатом аномального роста клеток. На этикетке или вкладыше также может быть показано, что композиция может быть использована для лечения других расстройств. Альтернативно или дополнительно,
25 изделие может также включать второй контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая вода для инъекций (BWFI), фосфатно-солевой буфер, раствор Рингера и раствор декстрозы. Он может дополнительно включать другие вещества, желательные с коммерческой точки зрения и точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители,
30 фильтры, иглы и шприцы.
Набор может дополнительно содержать инструкции по введению соединения формулы I, и, если присутствует, второй фармацевтической композиции. Например, если набор содержит первую композицию, содержащую соединение формулы I, и вторую фармацевтическую композицию, набор может
35 дополнительно содержать инструкции для одновременного, последовательного
или раздельного введения первой и второй фармацевтических композиций пациенту, нуждающемуся в этом.
В другом воплощении, наборы подходят для доставки твердых пероральных форм соединения формулы I, например, таблеток или капсул. Такой набор 5 предпочтительно включает множество единичных доз. Такие наборы могут включать в себя карты, содержащие дозы, ориентированные в порядке их предполагаемого использования. Примером такого набора является "блистер". Блистерные упаковки хорошо известны в упаковочной промышленности и широко используются для упаковки фармацевтических единичных дозированных форм.
10 При желании может быть предложена памятка, например, в виде цифр, букв или другой маркировки или с календарем-вкладышем, обозначающим дни в графике лечения, согласно которому могут вводиться дозы.
Согласно одному воплощению набор может включать: (а) первый контейнер, с соединением формулы I, содержащиеся в нем, и, возможно, (б) второй контейнер
15 со второй фармацевтической композицией, содержащейся в нем, причем вторая фармацевтическая композиция содержит второе соединение с анти-гиперпролиферативной активностью. Альтернативно или дополнительно, набор может также содержать третий контейнер, включающий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая воде для инъекций (BWFI),
20 фосфатно-солевой буфер, раствор Рингера и раствор декстрозы. Он может дополнительно включать другие вещества, желательные с коммерческой точки зрения или точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы и шприцы.
В некоторых других воплощениях, где набор содержит композицию
25 формулы I и второй терапевтический агент, набор может включать контейнер для содержания отдельных композиций, такой как разделенный флакон или разделенный пакет из фольги, однако, отдельные композиции могут также содержаться в одном, цельном контейнере. Обычно набор включает инструкции по введению отдельных компонентов. Форма в виде набора особенно желательна,
30 когда отдельные компоненты предпочтительно вводить в различных дозированных формах (например, пероральной и парентеральной), вводятся с различными интервалами дозирования, или при необходимости титрования отдельных компонентов комбинации лечащим врачом.
ПОЛУЧЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I
Трициклические соединения формулы I могут быть синтезированы способами синтеза, которые включают процессы аналогичные хорошо известным в области химии, в частности, в свете содержащегося здесь описания. Исходные 5 материалы, как правило, доступны из коммерческих источников, таких как Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI) или могут быть легко получены с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области (например, получение способами, в основном, описанными в Louis F. Fieser и Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-23, Wiley, N.Y. (1967-2006 ed.), или Beilsteins
10 Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin, включая дополнения (также доступно через онлайн базу данных Beilstein).
В некоторых воплощениях, соединения Формулы I могут быть без труда получены с использованием хорошо известных способов получения пуриновых соединений (Hammarstrom et al (2007) Tetrahedron Lett. 48(16):2823-2827; Cerna et
15 al (2006) Organic Letters 8(23):5389-5392; Chang et al (2006) J. Med. Chem. 49(10):2861-2867; Yang et al (2005) J. Comb. Chem. 7:474-482; Liu et al (2005) J. Comb. Chem. 7:627-636; Hocek et al (2004) Synthesis 17:2869-2876; Hammarstrom et al (2003) Tetrahedron Lett. 44:8361-8363; Hammarstrom et al (2002) Tetrahedron Lett. 43:8071-8073; Booth et al (1987) J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1: Organic and Bio-
20 Organic Chem. 7:1521-1526; Booth et al (1981) J. Chem. Soc, Chemical Communications 15:788-789; Yoneda et al (1976) J. Chem. Soc, Perkin Trans. 1: Organic and Bio-Organic Chem. 14:1547-1550; Taylor et al (1971) J. Org. Chem. 36(21 ):3211-3217; Lister, J. H.; Fenn, M. D. The Purines, Supplementary 1, John Wiley & Sons, 1996, Volume 54; The Chemisty of Heterocyclic Compounds, Editors
25 Weissberger, A.; Taylor E. C, Wiley Interscience, 1971, Volume 24; Legraverend, M.; Grierson, D. S. (2006) Bioorg. Med. Chem. 14:3987-4006; Hocek, M. (2003) Eur. J. Org. Chem. 245-254;US 7122665; US 6743919; US 5332744; US 4728644; US 3016378; US 2008/0058297; US 2003/0139427; WO 2008/043031); и других гетероциклов, которые описаны в: Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky and Rees,
30 Elsevier, 1997, e.g. Volume 3; Liebigs Annalen der Chemie, (9):1910-16, (1985); Helvetica Chimica Acta, 41:1052-60, (1958); Arzneimittel-Forschung, 40(12):1328-31, (1990).
Соединения формулы I могут быть получены отдельно или в виде библиотек соединений, содержащих по меньшей мере 2, например от 5 до 1000 35 соединений, или от 10 до 100 соединений. Библиотеки соединений формулы I могут быть получены путем комбинаторного подхода "разделение и смешивание"
или несколькими параллельными синтезами с использованием либо жидкофазной либо твердофазной химии, по методикам, известным специалистам в данной области. Таким образом, согласно еще одному аспекту изобретения предложена библиотека соединений, содержащая по меньшей мере два соединения или их 5 фармацевтически приемлемые соли.
С целью иллюстрирования Общие Методики показывают общие способы, которые могут использоваться для получения соединений формулы I, а также ключевых промежуточных соединений. Разделы Схемы и Примеры содержат более подробное описание отдельных стадий реакций. Специалистам в данной
10 области техники должно быть понятно, что другие способы синтеза могут быть использованы для синтеза соединений по изобретению. Несмотря на то, что некоторые исходные материалы и пути синтеза изображены на Схемах, в Общих Методиках и Примерах, исходные материалы и пути синтеза могут быть заменены другими аналогичными для получения различных производных и/или условий
15 реакции. Кроме того, многие из соединений, полученных способами, описанными ниже, могут быть далее модифицированы в свете данного описания с использованием обычных химических реакций, хорошо известных специалистам в данной области.
При получении соединений формулы I, может быть необходима защита 20 функциональных групп (например, первичных или вторичных аминов) промежуточных соединений. Необходимость такой защиты будет варьироваться в зависимости от природы функциональной группы и условий способов получения. Подходящие амино-защитных группы включают ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (ВОС), бензилоксикарбонил (Cbz) и 925 флуоренметиленоксикарбонил (Fmoc). Необходимость в такой защите может быть легко определена специалистом в данной области. Для общего описания защитных групп и их использования, см. Т. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, Third Ed., 1999.
30 СПОСОБЫ РАЗДЕЛЕНИЯ
В способах получения соединений по данному изобретению, может быть предпочтительным разделение продуктов реакции друг от друга и/или от исходных материалов. Целевые продукты каждой стадии или ряда стадий отделяют и/или очищают (далее разделяют) до желаемой степени однородности по общим
35 методикам в данной области. Обычно такое разделение включает многофазную экстракцию, кристаллизацию из растворителя или смеси растворителей,
дистилляцию, сублимацию или хроматографию. Хроматография может включать в себя любое количество способов, включая, например, обратнофазовую и с нормальной фазой; гель-фильтрацию, ионнообменную, высокого, среднего и низкого давления жидкостную хроматографию и устройства; аналитическую в 5 малом масштабе; хроматографию псевдодвижущегося слоя (SMB) и препаративную тонкослойную хроматографию, а также способы тонкослойной хроматографии малого масштаба и флеш-хроматографию.
Другой класс способов разделения включает обработку смеси реагентом, избирательно связывающим или другим способом, делающим желаемый продукт,
10 непрореагировавший исходный материал, продукт реакции т. п. отделяемым. Такие реагенты включают адсорбенты или абсорбенты, такие как активированный уголь, молекулярные сита, ионообменные среды и т. п. В альтернативном варианте реагенты могут быть кислотами в случае оснований, оснований, в случае кислотного материала, связывающими реагентами, такими как антитела, белки,
15 селективными хелатирующими агентами, такими как краун-эфиры, жидкими/ жидкими ионными реагентами экстракции (LIX) и т. п.
Выбор соответствующих способов разделения, зависит от природы используемых материалов. Например, температура кипения и молекулярный вес при дистилляции и сублимации, наличие или отсутствие полярных
20 функциональных групп при хроматографии, стабильность материалов в кислой и щелочной среде в многофазной экстракции, и т.п. Специалисты в данной области техники будут применять способы наиболее подходящие для достижения желаемого разделения.
Смеси диастереомеров могут быть разделены на индивидуальные
25 диастереомеры на основе их физических и химических различий способами, хорошо известными специалистам в данной области техники, например, с помощью хроматографии и/или фракционной кристаллизации. Энантиомеры могут быть разделены путем превращения энантиомерной смеси в диастереомерную смесь реакцией с соответствующим оптически активным соединением (например,
30 хиральным вспомогательным агентом, таким как хиральный спирт или хлорангидрид кислоты Мошера), разделением диастереомеров и преобразованием (например, гидролизом) отдельных диастереомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Кроме того, некоторые из соединений по настоящему изобретению могут быть атропизомерами (например, замещенные биарилы) и рассматриваются
35 в рамках объема настоящего изобретения. Энантиомеры могут быть разделены с использованием колонки хиральной ВЭЖХ.
Отдельный стереоизомер, например, энантиомер, по существу свободный от его стереоизомеров может быть получен разделением рацемической смеси с использованием такого способа, как образование диастереомеров с использованием оптически активного разделяющего агента (Eliel, Е. and Wilen, S. 5 "Stereochemistry of Organic Compounds," John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994; Lochmuller, С. H., (1975) J. Chromatogr., 113(3):283-302). Рацемические смеси хиральных соединений по изобретению могут быть разделены и выделены любым подходящим способом, включая: (1) формирование ионных диастереомерных солей с хиральными соединениями и разделение путем фракционной
10 кристаллизации или других способов, (2) образование диастереомерных соединений с хиральными дериватизирующими реагентами, разделение диастереомеров и превращение в чистые стереоизомеры, и (3) разделение, по существу чистых или обогащенных стереоизомеров непосредственно в хиральных условиях. См.: "Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology," Irving W.
15 Wainer, Ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1993)
По способу (1), диастереомерные соли могут быть получены реакцией энантиомерно чистых хиральных оснований, таких как бруцин, хинин, эфедрин, стрихнин-метил-б-фенилэтиламина (амфетамин), и т.п. с асимметричными соединениями, несущими кислотную функциональную группу, таких как
20 карбоновые кислоты и сульфоновые кислоты. Диастереомерные соли могут быть активированы для разделения фракционной кристаллизацией или ионной хроматографией. Для разделения оптических изомеров аминосоединений, добавление хиральных карбоновых или сульфоновых кислот, таких как камфорсульфоновой кислоты, винной кислоты, миндальной кислоты или молочной
25 кислоты может привести к образованию диастереомерных солей.
Альтернативно, по способу (2), субстрат для разделения подвергают взаимодействию с одним энантиомером хирального соединения с образованием диастереомерной пары (Е. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322). Диастереомерные соединения могут быть
30 получены реакцией ассиметричных соединений с энантиомерно чистыми хиральными дериватизирующими реагентами, такими как ментилпроизводные, с последующим разделением диастереомеров и гидролизом с получением чистого или обогащенного энантиомера. Способ определения оптической чистоты включает получение хиральных сложных эфиров рацемической смеси, например,
35 ментиловых эфиров, например, с (-)ментилхлорформиатом, в присутствии
основания, или эфира Мошера, альфа-метокси-альфа-
(трифторметил)фенилацетата (Jacob III. J. Org. Chem. (1982) 47:4165) и анализа спектра ЯМР 1Н в присутствии двух атропизомерных энантиомеров или диастереомеров. Стабильные диастереомеры атропизомерных соединений могут быть разделены и выделены нормальной и обращеннофазовой хроматографией в 5 соответствии со способами разделения атропизомерных нафтил-изохинолинов (WO 1996/015111). По способу (3), рацемическая смесь двух энантиомеров может быть разделена с помощью хроматографии с использованием хиральной неподвижной фазы ("Chiral Liquid Chromatography" (1989) W. J. Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513:375-378). Обогащенные или 10 очищенные энантиомеры можно выделить способами, используемыми для разделения других хиральных молекул с асимметричными атомами углерода, такими как оптическое вращение и круговой дихроизм.
ОСНОВНЫЕ МЕТОДИКИ ПОЛУЧЕНИЯ
15 Основная методика А Реакция Сузуки:
20 Реакция сочетания по типу Сузуки используется для присоединения
моноциклического гетероарила, конденсированного бициклического гетероцикла, а конденсированного бициклического гетероарила, или фенила по 2 позиции пиримидинового кольца 2-хлор-пурина 21. Например, 21 можно объединить с 1.5 эквивалентами 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)1 Н-индазола 24, и
растворить в приблизительно 3 эквивалентах карбоната натрия в виде
приблизительно 1 молярного раствора в воде и приблизительно эквивалентном
объеме ацетонитрила. Добавили каталитическое количество, или более,
низковалентного палладиевого реагента, такого как
5 бис(трифенилфосфин)палладий(И) дихлорид. Различные бороновые кислоты или бороновые эфиры могут использоваться вместо показанного индазолборонового эфира. Также альтернативно, азот в составе индазола может быть защищен, например, N-THP защитным соединением 41. В некоторых случаях используют ацетат палладия вместо карбоната натрия для доведения рН водного слоя.
10 Реакция связывания Сузуки в присутствии палладия может быть оптимизирована и/или ускорена в условиях микроволнового излучения. Реакцию можно нагревать до приблизительно 100-150 °С под давлением в микроволновой печи, такой как Biotage Optimizer (Biotage, 1пс.)в течение приблизительно 10-30 минут. Содержимое охлаждают, концентрируют, и экстрагируют этилацетатом, или другим
15 органическим растворителем. После эвапорации органического слоя продукты сочетания Сузуки 6,8,9-замещенный 2-(1 Н-индазол-4-ил)-пурин 22, или 6,8,9-замещенный 2-(5-пиримидин-2-амин)-пурин 23, можно очистить на силикагеле или обратнофазовой ВЭЖХ. Заместители R2, R3 могут быть R2, R3 как определено, или их защищенные формы или предшественники.
20 Различные палладиевые катализаторы могут использоваться на стадии
сочетания Сузуки с образованием соединений, включая иллюстративные воплощения 22 и 23. Сочетание Сузуки представляет собой палладий катализируемую реакцию кросс-сочетания арилгалида, такого как 21, с бороновой кислотой или эфиром, таким как 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-
25 1 Н-индазол 24 или 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин 25. Низковалентные, Pd(ll) и Pd(0) катализаторы могут использоваться в реакции сочетания Сузуки, включая PdCI2(PPh3)2, Pd(t-Bu)3, PdCI2 dppf CH2CI2, Pd(PPh3)4, Pd(OAc)/PPh3, CI2Pd[(Pet3)]2, Pd(DIPHOS)2, CI2Pd(Bipy), [PdCI(Ph2PCH2PPh2)]2, CI2Pd[P(o-tol)3]2, Pd2(dba)3/P(o-tol)3, Pd2(dba)/P(furyl)3,
30 CI2Pd[P(furyl)3]2, CI2Pd(PMePh2)2, CI2Pd[P(4-F-Ph)3]2, CI2Pd[P(C6F6)3]2, CI2Pd[P(2-COOH-Ph)(Ph)2]2, CI2Pd[P(4-COOH-Ph)(Ph)2]2, и инкапсулированные катализаторы Pd EnCat(tm) 30, Pd EnCat(tm) TPP30, и Pd(ll)EnCat(tm) BINAP30 (US 2004/0254066). Одним из таких палладиевых катализаторов для реакции Сузуки является [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(И), комплекс с дихлорметаном,
35 обозначенный как Pd (dppf)CI2.
Общая методика В С-6 азот замещение
К 2,6-дихлорпуриновому промежуточному соединению 27 в растворителе, таком как этанол добавили морфолиноамин (mor, 1.1 экв.) и ненуклеофильное основание, такое как триэтиламин (NEt3, 1.5 экв.). Альтернативно, ацетонитрил может быть использован в качестве растворителя, а карбонат калия может быть использован в качестве основания. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение приблизительно 1 часа или в течение ночи, летуче компоненты удаляют под вакуумом и остаток разделяют между ДХМ и солевым раствором. Если смесь является нерастворимой, она может быть подвергнута воздействию ультразвуком и твердый продукт собирают фильтрацией. Высушивание над сульфатом мания и эвапорация растворителя приводит к N'-(2-хлорпурин-6-ил)-амин замещенному промежуточному соединению 28, часто в виде кристаллического осадка, или с помощью тритурирования. Заместители R2 и R3 могут быть R2 и R3 как определено, или их защищенные формы или предшественники.
Общая методика С N-9 азотное алкилирование
9-Н пуриновое промежуточное соединение 29 развели в ДМФ и в реакционную смесь добавили 2 экв. карбоната цезия, реакцию нагрели до 50 °С после чего добавили к реакционной смеси 3 эквивалента алкилгалида R2-X. За протеканием реакции следят с помощью ТСХ или LC/MS и перемешивают до завершения, обычно несколько часов. Реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс и водой, и органический слой высушили, отфильтровали и сконцентрировали с получением неочищенного 9-алкилированного пурина 30, который сразу используют в следующей реакции или очищают обратнофазовой ВЭЖХ.
Заместители R2, R3 и R4 могут быть R2, R3 и R4 как определено, или их защищенные формы или предшественники.
В основном, N-9-тетрагидропиранил замещенное соединение 31 можно обработать каталитическим количеством пара-толуолсульфоновой кислоты (PTSA) в растворе метанола и нагревать при приблизительно 50 °С до тех пор, пока не отсоединится тетрагидропирановая группа (ТНР) с получением соединения 32. За протеканием реакции следят с помощью LC-MS или ТСХ. Заместители R3 и R4 могут быть R3 и R4 как определено, или их защищенные формы или предшественники.
Общая методика Е Вое депротекция
В основном, Вос-замещенные соединения 33 обрабатывают ТФУ или 4н. HCI для удаления трет-бутоксикарбонильной группы (групп) и за протеканием реакции следят с помощью LC-MS до завершения. Неочищенный продукт затем концентрируют и очищают обратнофазовой ВЭЖХ с получением продукта 34 в виде чистого осадка. Заместители R2 и R3 могут быть R2 и R3 как определено, или их защищенные формы или предшественники.
2,6,8 замещенный, 9-алкилкарбоксилпурин 35, где п представляет собой 1 -3, обработали 1.5 экв. HATU (2-(7-аза-1 Н-бензотриазол-1 -ил)-1,1,3,3-5 тетраметилурония гексафторфосфат), избытком (таким как 3 экв.) алкиламина (HNR10R11) и избытком (таким как 3 экв.) карбоната цезия в диметилформамиде (DMF). Альтернативно, может быть использован другой связывающий реагент. Реакционную смесь перемешивали до завершения реакции и экстрагировали этилацетатом с насыщенным раствором бикарбоната. Органический слой 10 высушили, отфильтровали и сконцентрировали с получением ацилированного, неочищенного промежуточного соединения, которое очистили с помощью обратнофазовой ВЭЖХ с получением продукта 36. Заместители R3 и R4 могут быть R3 и R4 как определено, или их защищенные формы или предшественники.
У-А (||А)
Cl^ "NT "CI основание,
растворитель
(II)
но^ °v^N п1^°(tm):(tm)". HCN hov^N
растворитель
> АЛ
(IN)
(IV)
Связывающий агент, фосфин, растворитель или
MsCI, основание, растворитель
m = 1 or 2 n = 0, 1 or 2
A=CH2, если n=1 или N или О, если n=2
Я=подходящий заместитель Аг=арил, гетероарил или гетеробиарил РС=защитная группа
Г-н,
(VI)
ArM, катализатор,
основание,
растворитель
(In)
Схема 1
Пиримидооксазины формулы (In) получены в соответствии с реакциями, описанными далее и показанными на Схеме 1 выше, или способами, известными из уровня техники. Защищенные трихлорпиримидины формулы (II) можно получить с использованием способов, описанных в литературе. Трихлориды могут взаимодействовать с циклическими аминами формулы (НА) в присутствии основания, такого как триэтиламин в растворителе, таком как этанол при околокомнатной температуре с получением дихлоридов формулы (III). Метоксипиримидин может быть подвергнут депротекции с использованием реагента, такого как LiCI, в растворителе, таком как ДМФ под воздействием
микроволнового излучения, при PG = Me, или обработкой кислотой, такой как ТФУ в растворителе, таком как ДХМ, когда PG= р-метоксибензил с получением фенолов формулы (IV). Трициклические пиримидооксазины формулы (V) затем могут быть получены из диолов формулы (IV) с азосоединением, таким как DIAD, в 5 присутствии фосфина, такого как трифенилфосфин в растворителе, таком как 1,4-диоксан. Альтернативно, образование соединений (V) может быть достигнуто первоначальным трансформированием гидроксильной группы в подходящую покидающую группу с последующей внутримолекулярной реакцией замещения, катализируемой реакцией с реагентом таким как метансульфонилхлорид в
10 присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как ТГФ. Соединения формулы (VI) можно получить из соединений (V) взаимодействием с производным морфолина (содержащим подходящие заместители R) в присутствии основания, такого как триэтиламин в растворителе, таком как этанол при повышенной температуре. Для п = 2, А = О, добавление морфолина происходит
15 региоспецифичным образом, тогда как для п = 1, А = СН2, эта реакция может также приводить к образованию нежелательного региоизомера. Пиримидооксазины формулы (I) могут быть образованы взаимодействием соединений формулы (VI) с арил- или гетероарил- металлированным реагентом, таким как гетероарилбороновая кислота, бороновый эфир или станнан в присутствии
20 катализатора на основе переходного металла, такого как Pd(PPh3)2CI2, и основания, такого как водный раствор карбоната натрия в растворителе, таком как ацетонитрил, под воздействием микроволнового излучения при температурах вплоть до 150 °С.
Альтернативно, пиримидооксазины формулы (In) можно получить в 25 соответствии со Схемой 2 ниже. Защищенные трихлорпиримидины формулы (II) могут быть получены из соединений формулы (VII) (полученные в соответствии со способами, описанными в уровне техники) взаимодействием со спиртом, таким как п-метоксибензиловый спирт в присутствии азосоединения, такого как DIAD, в присутствии фосфина, такого как трифенилфосфин в растворителе, таком как 1,4-30 диоксан. Альтернативно, образование соединений (II) может быть достигнуто обработкой соединения (VII) силилгалидом, таким как трет-бутилхлордифенилсилан в присутствии основания, такого как триэтиламин, с добавкой, такой как 1\1,1\1-диметиламинопиридин в растворителе, таком как ДМФ. Трихлорпиримидины (II) могут взаимодействовать с циклическим амином формулы 35 (НА) в присутствии основания, такого как триэтиламин в растворителе, таком как этанол, при температуре окружающей среды с получением дихлоридов формулы
(VII). Соединения формулы (IX) можно получить путем взаимодействия соединений формулы (VIII) с арил- или гетероарил- металлированным реагентом, таким как гетероарилбороновая кислота, бороновый эфир или станнан в присутствии катализатора на основе переходного металла, такого как Pd(PPh3)2CI2 и основания, 5 такого как водный раствор карбоната натрия в растворителе, таком как ацетонитрил, под воздействием микроволнового излучения при температурах вплоть до 150 ° С. Для больших защитных групп, например, PG = п-метоксибензол или PG = трет-бутилдифенилсилан это замещение может произойти с региоспецифичным контролем, давая 2-арил или 2-гетероарильные соединения
10 формулы (IX). Фенолы формулы (X) могут быть образованы путем удаления защитной группы из соединения (IX) с использованием кислоты, такой как ТФУ, в растворителе, таком как ДХМ, при комнатной температуре. Соединения формулы (X) могут быть превращены в соединения формулы (XI) с помощью способов, описанных для превращения соединений формулы (IV) в соединения формулы (V)
15 на Схеме 1. Наконец, пиримидооксазины формулы (In) можно получить путем взаимодействия соединений формулы (XI) посредством реакции с морфолином (содержащим соответствующие заместители R) в присутствии основания, такого как триэтиламин в растворителе, таком как этанол, при температурах вплоть до температуры кипения.
PGOH, связывающий агент, фосфин, растворитель
CI или CI
нп X PGCI, основание, Q I
II N растворитель PG ^| N
C|^NXC| CI^N^CI
(VII) (И)
ArM,катализатор,
основание,
растворитель
PG CI
'1.ХХ
N Аг
НО. R
<4
N'^Ar
(IX)
(X)
Связывающий агент, фосфин, растворитель или
MsCI, основание, растворитель
N Н
основание, нагрев
(XI)
m = 1 or 2 n = 0, 1 or 2
А=СН2, если п=1 или N или О, если п=2
Я^подходящий заместитель Аг=фенил или подходящее ароматическое кольцо М=металл
РС=защитная группа
Схема 2
ПРИМЕРЫ
Химические реакции, описанные в Примерах, могут быть легко адаптированы для получения ряда других ингибиторов PI3K согласно настоящему изобретению, а также альтернативные способы получения соединений настоящего 5 изобретения, считаются входящими в объем настоящего изобретения. Например, синтез не приведенных в примерах соединений согласно изобретению может быть успешно проведен модификациями, очевидными для специалистов в данной области техники, например, путем соответствующей защиты реакционноспособных функциональных групп, за счет использования других подходящих реагентов,
10 известных в данной области техники, отличных от описанных, и/или путем обычных модификаций условий реакции. Альтернативно, другие реакции, раскрытые здесь или известные в данной области могут применяться для получения других соединений по изобретению.
В описанных ниже примерах, если не указано иное, все температуры
15 приведены в градусах Цельсия. Реагенты были приобретены у коммерческих поставщиков, таких как Sigma Aldrich Chemical Company, Lancaster, TCI или Maybridge, и были использованы без дополнительной очистки, если не указано иное. Реакции, изложенные ниже, обычно проводились при положительном давлении азота или аргона или с хлоркальциевой трубкой (если не указано иначе)
20 в безводных растворителях, и реакционные колбы обычно снабжены резиновыми перегородками для введения субстратов и реагентов через шприц. Посуда была высушена в печи и/или при температуре. Колоночную хроматографию проводили на системе Biotage (производитель: Dyax Corporation), имеющей колонку с силикагелем, или на силикагелевом картридже SEP РАК(r) (Waters). 1Н ЯМР-
25 спектры были получены при 400 МГц в дейтерированном CDCI3, d6-DMSO, CH3OD или de-ацетона растворах (в м.д.) с использованием хлороформа в качестве эталона (7,25 м.д.). Когда наблюдалось наложение пиков, использовались следующие сокращения: s (синглет), d (дублет), t (триплет), m (мультиплет), br (расширенный), dd (двойной дублет), dt (дублет триплетов). Константы
30 взаимодействия, когда они приведены, даны в герцах (Гц).
ВЭЖХ проводилась следующими иллюстративными способами: (А) ВЭЖХ короткий способ - 10 мин продолжительность ВЭЖХ-Agilent 1200
Подвижная фаза А Вода с 0.05%ТФУ Подвижная фаза В Ацетонитрил с 0.05%ТФУ
Agilent ZORBAX SD-C18, 1.8 мкм,
Колонка 2.1*30 мм
Температура
колонки 40 градусов С
ЖХ градиент 3-95%В - 8.5 мин, 95% - 2.5 мин
ЖХ скорость
потока 400 мкл/мин
Длина волны 220нм и 254нм
Масс-спектрометр - Agilent quadrupole 6140
Ионизация Электроспрей положительная
Диапазон
сканирования 110-800 а.е.м.
(В) Waters Acquity/LCT длинный способ - 20 мин
продолжительность
Waters Acquity
СВЭЖХ
Подвижная фаза А Вода с 0.05%ТФУ
Подвижная фаза В Ацетонитрил с 0.05%ТФУ
Acquity UPLC ВЕН С18, 1.7 мкм,
Колонка 2.1*50мм
Температура
колонки 40 градусов С
ЖХ градиент 2-98%В - 17.0 мин, 98% - 1.5 мин
ЖХ скорость
потока 600 мкл/мин
Длина волны 254 нм
Масс-спектрометр - Waters LCT Premier ХЕ
Ионизация Электроспрей положительная
Диапазон
сканирования 110-800 а.е.м.
(С) ЖХМС 2.5 мин хиральный способ Подвижная фаза А: С02 Подвижная фаза В: метанол Условия изократичности: 25%В 5 Скорость потока: 5 мл/мин Выпускное давление: 120 Бар Температура: 40 градусов С Колонка: ChiralCel OJ (4.6x50 мм, 3 мкм) Длина волны: 230 нм 10 Прибор: Berger Analytical SFC/MS
Хиральная очистка: Условия А:
Подвижная фаза А: С02 15 Подвижная фаза В: метанол
Условия изократичности: 25%В
Скорость потока: 60 мл/мин
Выпускное давление: 100 Бар
Температура: 40 градусов С 20 Колонка: ChiralCel OJ (21.2x250 мм, 5 мкм)
Длина волны: 230 нм
Прибор: Berger MGII
2,6-дихлор-9-метил-9Н-пурин 4
Пример 1
О О
H2SQ4 N-| H2N N"\
^N^NH2
CN N-/
^N^NH2 I
1 2
0 Ci
"NXXH ^ . tri
N О кипение с обратным N^^N^^QI холодильником / 3 4
Циангруппу 5-амино-1-метил-1Н-имидазол-4-карбонитрила 1 гидролизовали 5 до амида в серной кислоте с получением 5-амино-1-метил-1 Н-имидазол-4-карбоксамида 2, который циклизовали с мочевиной до 9-метил-1 Н-пурин-2,6(ЗН,9Н)-диона 3. Хлорирование соединения 3 дало 2,6-дихлор-9-метил-9Н-пурин 4.
Пример 2 4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазол 10 24 - путь 1
К раствору З-бром-2-метиланилина (5.0 г, 26.9 ммоль) в хлороформе (50 мл) добавили ацетат калия (1.05 экв., 28.2 ммоль, 2.77 г). Добавили уксусный ангидрид (2.0экв., 53.7 ммоль, 5.07 мл) с сопутствующим охлаждением на ледяной воде.
15 Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут после чего сформировался белый желатинообразный осадок. 18-краун-6 (0.2 экв., 5.37 ммоль, 1.42 г) добавили с последующим изоамилнитритом (2.2 экв., 59.1 ммоль, 7.94 мл) и смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 18 ч. Реакционной смеси дали остыть и разделили между хлороформом (3 х 100 мл) и
20 насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (100 мл). Объединенные органические экстракты промыли солевым раствором (100 мл), разделили и
высушили (MgS04). Неочищенный продукт эвапорировали на силикагеле и очистили хроматографией, элюируя от 20% до 40% EtOAc-бензин, с получением 1-(4-бром-индазол-1-ил)-этанона А (3.14 г, 49%) в виде оранжевого осадка, и 4-бром-1 Н-индазола В (2.13 г, 40%) в виде бледно-оранжевого осадка. А 1Н NMR (400 MHz, 5 CDCI3) 2.80 (ЗН, s), 7.41 (1 Н, t, J=7.8Hz), 7.50 (1Н, d, J=7.8Hz), 8.15 (1Н, s), 8.40 (1 Н, d, J=7.8Hz). В: 1H NMR (400 MHz, CDCI3) 7.25 (1H, t, J=7.3Hz), 7.33 (1H, d, J=7.3Hz), 7.46 (1H, d, J=7.3Hz), 8.11 (1H, s), 10.20 (1H, br s).
К раствору 1-(4-бром-индазол-1-ил)-этанона A (3.09 г, 12.9 ммоль) в МеОН (50 мл) добавили 6 н. водную HCI (30 мл) и смесь перемешивали при комнатной 10 температуре в течение 7 ч. МеОН эвапорировали и смесь разделили между ЕЮАс (2 х 50 мл) и водой (50 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (50 мл), разделили и высушили (MgS04). Растворитель удалили эвапорацией при пониженном давлении с получением 4-бром-1 Н-индазола В (2.36 г, 93%).
15 К раствору 4-бром-1 Н-индазола В (500 мг, 2.54 ммоль) и
бис(пинаколато)дибора (1.5 экв., 3.81 ммоль) в ДМСО (20 мл) добавили ацетат калия (3.0 экв., 7.61 ммоль, 747 мг; высушенный в пистолете для сушки) и PdCI2(dppf)2 (3 моль%, 0.076 ммоль, 62 мг). Смесь дегазировали аргоном и нагревали при 80 °С в течение 40 ч. реакционной смеси дали остыть и разделили
20 между водой (50 мл) и эфиром (3 X 50 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (50 мл), разделили и высушили (MgS04). Неочищенный материал очистили хроматографией, элюируя от 30% до 40% EtOAc-бензин, с получением неразделимой 3:1 смеси 4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазола 24 (369 мг, 60%) и индазола (60 мг, 20%),
25 выделенных в виде желтой смолы, которая при хранении отвердевала с получением серо-белого осадка. 1Н NMR (400 MHz, c/6-DMSO) 1.41 (12Н, s), 7.40 (1Н, dd, J=8.4Hz, 6.9Hz), 7.59 (1H, d, J=8.4Hz), 7.67 (1H, d, J=6.9Hz), 10.00 (1H, br s), 8.45 (1H, s), and индазол: 7.40 (1H, t), 7.18 (1H, t, J=7.9Hz), 7.50 (1H, d, J=9.1Hz), 7.77 (1H, d, J=7.9Hz), 8.09 (1H, s); примесь при 1.25.
К раствору 2-метил-З-нитроанилина (2.27 г, 14.91 ммоль) в уксусной кислоте 5 (60 мл) добавили раствор нитрита натрия (1.13 г, 1.1 экв.) в воде (5 мл). Через 2 ч, темно-красный раствор влили в лед/вода и полученный преципитат собрали фильтрацией с получением 4-нитро-1 Н-индазола С (1.98 г, 81%).
Смесь 4-нитро-1 Н-индазола С (760 мг, 4.68 ммоль), палладия на угле (10%, cat.) и этанола (30 мл) перемешивали под водородом в течение 4 ч. Реакционную 10 смесь затем отфильтровали через целит, и растворитель удалили под вакуумом с получением 1Н-индазол-4-иламина D (631 мг, 100%).
Водный раствор нитрита натрия (337 мг, 4.89 ммоль) в воде (2 мл) добавили по каплям к суспензии 1 Н-индазол-4-иламина D (631 мг, 4.74 ммоль) в 6М соляной кислоте (7.2 мл) при температуре ниже 0 °С. После перемешивания в течение 30 15 минут, в реакционную смесь добавили тетрафторборат натрия (724 мг). Образовался вязкий раствор, который отфильтровали и быстро промыли водой с получением 1Н-индазол-4-диазониевой соли тетрафторбората Е (218 мг, 20%) в виде темно-красного осадка.
Безводный метанол (4 мл) продули аргоном в течение 5 минут. К нему
20 добавили 1 Н-индазол-4- диазониевую соль тетрафторбората (218 мг, 0.94 ммоль),
бис-пинаколатодибор (239 мг, 1.0 экв.) и [1,1'-
бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладий (II) хлорид (20мг). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч и затем отфильтровали через целит. Остаток очистили с использованием флеш-хроматографии с получением 4-(4,4,5,525 тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазола 24 (117 мг).
Стадия А: Получение 4-хлор-1 Н-индазола: К 250 мл колбе с магнитным 5 якорем добавили 2-метил-З-хлоранилин (8.4 мл, 9.95 г, 70.6 ммоль), ацетат калия (8.3 г, 84.7 ммоль) и хлороформ (120 мл). Эту смесь охладили до 0 °С при перемешивании. К охлажденной смеси добавили уксусный ангидрид (20.0 мл, 212 ммоль) по каплям в течение 2 минут. Реакционную смесь нагрели до 25 °С и перемешивали в течение 1 часа. В это время, реакцию нагревали до 60 °С.
10 Добавили изоамилнитрит (18.9 мл, 141 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 60 °С. После завершения добавили воду (75 мл) и ТГФ (150 мл) и реакционную смесь охладили до 0 °С. LiOH (20.7 г, 494 ммоль) добавили и реакционную смесь перемешивали при 0 °С в течение 3 часов. Воду (200 мл) добавили и продукт экстрагировали ЕЮАс (300 мл, 100 мл). Органические
15 слои объединили, высушили над MgS04 и сконцентрировали под вакуумом с получением 4-хлор-1 Н-индазола 11.07 г (100%) в виде оранжевого осадка. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.18 (d, J= 1 Hz, 1H), 7.33 (d, J= 8 Hz 1H), 7.31 (t, J= 7 Hz, 1H), 7.17 (dd, J= 7 Hz, 1 Hz 1H). LCMS (ESI pos) m/e 153 (M+1).
Стадия В: Получение 4-хлор-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1 Н-индазола: В
20 1 л колбу с механической мешалкой добавили 4-хлор-1 Н-индазол (75.0 г, 0.492 моль), п-толуолсульфонат пиримидиния (1.24 г, 4.92 ммоль), CH2CI2 (500 мл) и 3,4-дигидро-2Н-пиран (98.6 мл, 1.08 моль). При перемешивании, эту смесь нагревали до 45 °С в течение 16 часов. Анализ реакционной смеси показал продукцию двух изомеров продукта. Реакционную смесь охладили до 25 °С и добавили CH2CI2 (200
25 мл). Промыли раствор водой (300 мл) и насыщенным NaHC03 (250 мл). Высушили органику над MgS04 и сконцентрировали досуха. Очистили неочищенный продукт растворением в ЕЮАс/гексаны (4:6, 1 L) и добавили Si02 (1.2 L). Смесь отфильтровали и остаток промыли ЕЮАс/гексаны (4:6, 2 L). Органические слои сконцентрировали под вакуумом с получением 4-хлор-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-
30 ил)-1 Н-индазола 110.2 г (95%) в виде оранжевого осадка. Изомер 1: 1Н NMR (400
MHz, CDCI3) 5 8.10 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 9 Hz, 1 Hz 1H), 7.29 (dd, J = 9 Hz, 8 Hz 1H), 7.15 (dd, J= 8 Hz, 1 Hz 1H) 5.71 (dd, J= 9 Hz, 3 Hz 1H) 4.02 (m, 1H) 3.55 (m, 1H) 2.51 (m, 1H) 2.02 (m, 2H) 1.55 (m, 3H). LCMS (ESI pos) m/e 237 (M+1); Изомер 2: 1H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.25 (d, J = 1 Hz, 1H), 7.62 (dd, J= 9 Hz, 1 Hz 1H), 7.20 5 (dd, J= 9 Hz, 8 Hz 1H), 7.06 (dd, J= 8 Hz, 1 Hz 1H) 5.69 (dd, J= 9 Hz, 3 Hz 1H) 4.15 (m, 1H) 3.80 (m, 1H) 2.22 (m, 2H) 2.05 (m, 1H) 1.75 (m, 3H). LCMS (ESI pos) m/e 237 (M+1).
Стадия С: Получение 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазола: В 500 мл колбу с магнитным якорем
10 добавили 4-хлор-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1 Н-индазол (10.0 г, 42.2 ммоль), ДМСО (176 мл), PdCI2(PPh3)2 (6.2 г, 8.86 ммоль), трициклогексилфосфин (0.47 г, 1.69 ммоль), бис(пинаколато)дибор (16.1 г, 63.4 ммоль) и ацетат калия (12.4 г, 0.127 моль). При перемешивании, смесь нагревали до 130 °С в течение 16 часов. Реакционную смесь охладили до 25 °С и добавили ЕЮАс (600 мл) и промыли
15 водой (2 х 250 мл). Органические слои высушили над MgS04 и сконцентрировали под вакуумом досуха. Неочищенный продукт очистили с помощью слоя Si02 (120 г), элюируя 10% ЕЮАс/гексаны (1 л) и 30% ЕЮАс/гексаны (1 л). Фильтрат сконцентрировали под вакуумом с получением 13.9 г (100%) 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазола в виде
20 20% (мас./мас.) раствора в этилацетате. 1Н NMR показал присутствие приблизительно 20 % (мас./мас.) бис(пинаколато)дибора. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.37 (s, 1Н), 7.62 (dd, J = 14 Hz, 2 Hz 1H), 7.60 (dd, J= 7 Hz, 1 Hz 1H), 7.31 (dd, J = 8 Hz, 7 Hz 1H) 5.65 (dd, J= 9 Hz, 3 Hz 1H) 4.05 (m, 1H) 3.75 (m, 1H) 2.59 (m, 1H) 2.15 (m, 1H) 2.05 (m, 1H) 1.75 (m, 3H) 1.34 (s, 12H). LCMS (ESI pos) m/e 245 (M+1).
25 Пример 5 1-(Тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2
Стадия А: Получение 4-нитро-1 Н-индазола: Смесь 2-метил-З-нитроанилина (200 г, 1.315 моль), уксусной кислоты (8000 мл) охладили до 15-20° С и медленно, в 30 течение 30 минут, добавили раствор нитрита натрия (90.6 г, 1.315 моль) в воде
диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазол (Путь В)
(200 мл). После добавления, реакционную температуру увеличили до 25-30° С и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 2-3 ч. За протеканием реакции следили с помощью ТСХ и после завершения реакционный продукт отфильтровали и остаток промыли уксусной кислотой (1000 мл). Уксусную 5 кислоту выпарили под вакуумом (550 мм рт.ст.) при температуре ниже 80 °С и добавили воду (8000 мл), охладили до 25-30 °С и перемешивали в течение 30 мин. Суспензию отфильтровали и промыли водой (1000 мл). Неочищенный продукт высушили при нагревании до 70-80 °С в течение 2 часов, затем растворили в 5% растворе этилацетат/н-гексан (100:2000 мл) и перемешивали в течение 1-1.5 ч при
10 комнатной температуре. Суспензию отфильтровали и промыли 5% смесью этилацетат/н-гексан (25:475 мл). Полученный продукт высушили под вакуумом при температуре ниже 80 °С в течение 10 -12 ч с получением 4-нитро-1 Н-индазола в виде коричневого осадка (150 г, 70%): тр: 200-203 °С; 1Н NMR (200 MHz, CDCI3) 5 13.4 (br, 1Н), 8.6 (s, 1Н), 8.2-7.95 (dd, 2Н), 7.4 (т, 1Н). ESMS m/z 164 (М+1). Чистота:
15 95% (ВЭЖХ)
Стадия В: Получение 4-амино-1 Н-индазола: Смесь 4-нитро-1 Н-индазола (200 г, 1.22 моль) и 10% палладия на угле (20.0 г,) в ЕЮН (3000 мл) гидрогенезировали при комнатной температуре (реакция была изотермической и температура увеличилась до 50 °С). После завершения реакции, катализатор
20 удалили фильтрацией. Растворитель эвапорировали под вакуумом при температуре ниже 80 °С и охладили до комнатной температуры и н-гексан (1000 мл) добавили к остатку и перемешивали в течение 30 мин. Выделенный осадок отфильтровали и промыли н-гексаном (200 мл). Продукт высушили под вакуумом при 70-80 °С в течение 10-12 ч с получением 4-амино-1 Н-индазола в виде
25 коричневого осадка (114 г, 70%), т. пл.: 136-143 °С. 1Н NMR (200 MHz, CDCI3) 5 12 (br, 1Н), 8.0 (s, 1Н), 7.1-7.0 (dd, 2Н), 6.5 (d, 1Н), 3.9 (m, 2Н). ESMS m/z 134 (M+1). Чистота 90-95% (ВЭЖХ)
Стадия С: Получение 4-йодо-1 Н-индазола: Смесь 4-амино-1 Н-индазола (50.0 г, 0.375 моль) в воде (100 мл) и конц. соляной кислоты (182 мл) охладили до -
30 10 °С. К этому добавили раствор нитрита натрия (51.7 г, 0.75 моль) в воде (75 мл) по каплям при -10 °С в течение приблизительно 30 -60 мин. (во время добавления наблюдалось пенообразование). В другой колбе приготовили смесь йодида калия (311 г, 1.87 моль) в воде (3000 мл) при комнатной температуре и к ней добавляли охлажденную выше соль диазония при 30-40 °С в течение приблизительно 30-40
35 мин. Реакцию выдерживали при 30 °С в течение 1 ч и после завершения реакции, добавили этилацетат (500 мл) и реакционную смесь отфильтровали через целит.
Слои разделили и водный слой экстрагировали этилацетатом (2 X 500 мл). Объединенные органические слои промыли 5% раствором гипосульфита (2 х 500 мл), солевым раствором (500 мл), высушили (Na2S04) и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили хроматографией (силикагель, гексан, 15-20% 5 этилацетат/гексан) с получением 4-йодо-1 Н-индазола в виде оранжевого осадка (23.0 г, 25%). т. пл.: 151 - 177 С: 1Н NMR (200 MHz, CDCI3) 5 12.4 (br, 1Н), 8.0 (s, 1Н), 7.6 (dd, 2Н), 7.1 (d, 1Н). ESMS m/z 245 (M+1). Чистота: 95-98% (ВЭЖХ).
Стадия D: Получение 4-йодо-1-(2-тетрагидропиранил)индазол: Смесь 4-амино-1 Н-индазола (250.0 г, 1.024 моль), 3,4-дигидро-2Н-пирана (126.0 г, 1.5 моль)
10 и PPTS (2.57 г, 0.01 моль) в CH2CI2 (1250 мл) нагревали при 50 °С в течение 2 ч. Реакцию охладили до комнатной температуры и влили в воду (625 мл), слои разделили, and водный слой экстрагировали CH2CI2 (250 мл). Объединенные органические слои промыли водой (625 мл), высушили (Na2S04) и сконцентрировали. Неочищенный остаток очистили хроматографией (силикагель,
15 гексан, 5-10% этилацетат/гексан) с получением 4-йодо-1-(2-тетрагидропиранил)индазола в виде масла (807.0 г, 60%). 1Н NMR (200 MHz, CDCI3) 5 8.5 (s, 1Н), 7.8 (m, 1Н), 7.6 (d, 1Н), 7,.25 (m, 1Н), 5.7 (dd, 1Н), 4.2-3.8 (dd, 1Н), 2.22.0 (m, 4Н) 2.0-1.8 (m, 4Н). ESMS m/z 329 (M+1).
Стадия E: Получение 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-
20 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазола: Смесь 4-йодо-1-(2-
тетрагидропиранил)индазола (100 г, 0.304 моль), биспинаколатобиборана (96.4 г, 0.381 моль), PdCI2 (dppf) (8.91 г, 0.012 моль) и ацетата калия (85.97 г, 0.905 моль) в ДМСО (500 мл) нагревали при 80 °С в течение 2-3 ч. После завершения, реакцию охладили до комнатной температуры и добавили воду (1500 мл). Реакционную
25 массу экстрагировали этилацетатом (3 х 200 мл) и объединенные органические слои выпарили, высушили (Na2S04) и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью колончатой хроматографии (силикагель, гексан, 5-10% этилацетат/гексан) с получением 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазола в виде вязкого коричневого
30 масла (70.0 г, 70%). 1Н NMR (CDCI3) 5 8.5 (s, 1Н), 7.8 (m, 1Н), 7.6 (d, 1Н), 7.25 (m, 1Н), 5.7 (dd, 1Н), 4.2-3.8 (dd, 1Н), 2.2-2.0 (m, 4Н) 2.0-1.8 (m, 4Н) 1.4-1.2 (s, 12Н). ESMS m/z 329 (M+1)
Пример 6 4-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил(1,3,2-диоксаборолан-2-ил)) пиримидин-2-иламин
NBS
CHCU
"NT "NH2
К раствору 4-метилпиримидин-2-иламина (8.0 г, 0.073 моль) в хлороформе (320 мл) добавили N-бромсукцинимид (13.7 г, 0.077 моль). Реакционную смесь перемешивали в темноте в течение 18 ч. LC/MS показала завершение реакции. Смесь разбавили ДХМ, затем промыли 1н NaOH водным раствором и солевым раствором, высушили над MgS04, отфильтровали и сконцентрировали с получением 5-бром-4-метилпиримидин-2-иламина (12 г, Yield: 86%).
9-1-
Смесь 5-бром-4-метилпиримидин-2-иламина (5.0 г, 26 ммоль), ацетата калия
10 (7.83 г, 79.8 ммоль), 4,4,5,5-тетраметил-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-
диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолана (7.43 г, 29.2 ммоль) в диоксане (140 мл) перемешивали в течение 20 мин в атмосфере азота. 1,1'-бис(дифенилфосфино) ферроцен палладий (II) хлорида дихлорметановый аддукт (1.08 г, 1.33 ммоль) добавили в реакционную смесь. Реакционную смесь нагревали при 115 °С в 15 течение 18 ч в атмосфере азота. После завершения реакции, смесь охладили и добавили ЕЮАс. Получившуюся смесь обработали ультразвуком и отфильтровали. Использовали дополнительное количество ЕЮАс для промывания осадка. Объединенные органические экстракты промыли водой, высушили над MgS04, отфильтровали и сконцентрировали. Неочищенный продукт 20 очистили хроматографией, элюируя 20-100% ЕЮАс/гексан с получением 4.5 г 4-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил (1,3,2-диоксаборолан-2-ил))пиримидин-2-иламина (выход: 74%). 1H-NMR (ДМСО, 400 MHz): 5 8.28 (s, 1Н), 6.86 (br s, 2Н), 2.35 (s, 3 Н), 1.25 (s, 12 Н). MS (ESI) m/e (M+H+) 236.15, 154.07.
Пример 7 2,4,6-трихлор-5-гидрокси-пиримидин CI
25 CI^N^CI
Стадия 1: 6-гидрокси-5-метокси-1 Н-пиримидин-2,4-дион, натриевая соль
I 0
HO^N^O Na Н
В атмосфере азота металлический натрий (1.15 г, 0.05 моль) добавили порциями к этанолу (высушенному над 4 А молекулярными ситами, 50 мл) при 5 40°С и смесь перемешивали до образования раствора. Добавили мочевину (3.0 г, 0.05 моль) и смесь нагревали при 100°С в течение 15 минут до полного растворения. Реакционной смеси дали немного остыть и добавили метоксиметилмалонат (8.1 г, 0.05 моль), почти сразу образовался розовый/белый преципитат. Дополнительное количество сухого метанола (10 мл) добавили к 10 перемешиваемой смеси. Получившуюся суспензию нагревали при 100°С (кипение с обратным холодильником) в течение 4 часов. Реакционную смесь сконцентрировали под вакуумом и остаток высушили в глубоком вакууме с получением 6-гидрокси-5-метокси-1 Н-пиримидин-2,4-диона, натриевой соли в виде розового/белого осадка, использовавшегося на следующей стадии без анализа и 15 очистки.
Стадия 2: 2,4,6-трихлор-5-метокси-пиримидин
CI^N^CI
6-гидрокси-5-метокси-1 Н-пиримидин-2,4-дион, натриевую соль (21 ммоль) суспендировали в хлорокиси фосфора (20 мл) и смесь разделили между двумя two
20 20 мл пробирками для микроволновой печи. Реакционный смеси нагревали при 130-140°С (~ 10-12 бар) в течение 30 минут, используя микроволновое облучение (достоверное увеличение давления). Охлажденные реакционные смеси осторожно объединили и влили в теплую (приблизительно 40°С) воду и получившуюся месь экстрагировали дважды этилацетатом, Объединенные органические экстракты
25 высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2,4,6-трихлор-5-метокси-пиримидина в виде кристаллического желтого/коричневого осадка (3.75 г, 84%). 1Н NMR (CDCI3): 3.98 (ЗН, s).
Стадия 3: В атмосфере азота раствор 2,4,6-трихлор-5-метокси-пиримидина (4.0 г, 18.7 ммоль) в ДХМ (200 мл) охладили до 0°С и обработали
30 трибромидом бора (чистый, 6.6 мл, 65 ммоль) по каплям. После перемешивания в течение 18 часов при комнатной температуре LCMS анализ показал завершение
реакции. Реакционную смесь охладили и осторожно разбавили метанолом (25 мл) и реакционную смесь разбавили водой (200 мл). Водный слой промыли ДХМ и объединенные органические экстракты высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2,4,6-трихлор-5-гидрокси-пиримидина в виде бледно=рыжего осадка (2.55 г, 71%). 13С NMR (ДМСО-с16): 149.23 (С), 145.25 (С), 145.08 (С). LCMS: RT= 2.65/2.77 [М-Н] = 197/199.
Пример 101 1 -[4-(За,8-диметил-7-морфолин-4-ил-3,За,8,8а-
тетрагидро-2И-1-окса-4,6,8-триаза-циклопента[а]инден-5-ил)-фенил]-3-этил-мочевина 101
NACI
NaH/DMF Mel
(35-62 %) или CsC03 / DMF
(87 %)
N^CI
N H
DIPEA/ DMF
(94 %)
* x
/N-Tl "
NH+ Br3 (53%)
Zn / HOAc
(38-49 %) или
1) 1.0 M LHMDS in THF
(99.6%)
Zn / NH4CI THF/HzO
(28-36 %)
Стадия1: Смесь 2,4-дихлор-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидина (2.67 г, 14.2 ммоль), метилового эфира метансульфоновой кислоты (1.26 мл, 14.9 ммоль) и карбоната цезия (9.25 г, 28.4 ммоль) в безводном Л/,Л/-диметилформамиде (21 мл) перемешивали при КТ (комнатной температуре) в атмосфере N2 в течение 15ч. 5 Реакционную смесь разбавили этилацетатом, и органический слой промыли смесью 1:1 вода/солевой раствор (ЗХ) и солевой раствор (1Х), высушили над Na2S04, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле с получением 2.50 г (87.1%) 2,4-дихлор-5-метил-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидина в виде белого осадка. MS(ESI)
10 m/z: 202.2/204.1 [М+1]+.
Стадия 2: Смесь 2,4-дихлор-5-метил-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидина (1.25 г, 6.19 ммоль), морфолина (1.08 мл, 12.37 ммоль), и Л/,Л/-диизопропилэтиламин (2.37 мл, 13.61 ммоль) в Л/,Л/-диметилформамиде (36 мл) перемешивали при КТ в атмосфере N2 в течение 15 ч. Реакционную смесь разбавили смесью 1:1
15 диэтиловый эфир/этилацетат, и органический слой промыли смесью 1:1 вода/солевой раствор (ЗХ) и солевым раствором (1Х), высушили над Na2S04, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле с получением 1.47 г (94.0%) 4-(2-хлор-5-метил-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидин-4-ил)морфолина в виде белого
20 осадка. MS(ESI) m/z: 253.1/255.1 [М+1]+.
Стадия 3: К перемешиваемой смеси 4-(2-хлор-5-метил-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидин-4-ил)морфолина (1.46 г, 5.78 ммоль) в трет-бутиловом спирте (50 мл) и воде (20 мл) при КТ добавили NBS (3.08 г, 17.33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30 °С в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавили
25 этилацетатом и органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Na2S04, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле с получением 2.45 г (99.4 %) 7,7-дибром-2-хлор-5-метил-4-морфолино-5Я-пирроло[3,2-с/|пиримидин-6(7/-/)-она в виде осадка. MS(ESI) m/z: 427 [М+1]+.
30 Стадия 4: К 7,7-дибром-2-хлор-5-метил-4-морфолино-5Я-пирроло[3,2-
с/]пиримидин-6(7Н)-ону (1.70 г, 3.99 ммоль) в 2М водном растворе хлорида аммония (9.96 мл, 19.9 ммоль) и ТГФ (40 мл) при 0 °С добавили цинковую пыль (573.4 мг, 8.775 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 30 минут и затем разбавили ДХМ (40 мл). Реакционную смесь отфильтровали через
35 слой целита. Слои разделили, и органический слой промыли насыщенным водным раствором NaHC03, водой, и солевым раствором, высушили над Na2S04,
отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт
очистили с помощью хроматографии на силикагеле с получением 679 мг (63.4 %)
2-хлор-5-метил-4-морфолино-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидин-6(7/-/)-на в виде осадка.
MS(ESI) m/z: 269.2 [М+1]+.
5 Стадия 5: К 2-хлор-5-метил-4-морфолино-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидин-
6(7Н)-ону (466.0 мг, 1.73 ммоль) в безводном ТГФ (25 мл) в атмосфере N2 при -78 °С добавили по каплям 1.0 М гексаметилдисилазид лития в ТГФ (3.8 мл, 3.8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78 °С в атмосфере N2 в течение 60 минут. Затем добавили метилйодид (0.32 мл, 5.20 ммоль), и реакционную смесь
10 перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь погасили насыщенным водным раствором NH4CI и разбавили этилацетатом. Органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Na2S04, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле с элюцией 20 - 100% этилацетат/гептан дала два
15 соединения: 2-хлор-5,7,7-триметил-4-морфолино-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидин-6(7Н)-он (169.0 мг, 32.8%) в качестве первого элюанта; MS(ESI) m/z. 297.0 [М+1]+, и 2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-5/-/-пирроло[3,2-с/|пиримидин-6(7/-/)-он в качестве второго элюанта (63.8 мг, 13.0 %); MS(ESI) m/z: 283.2 [М+1]+.
Стадия 6: К 2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-5Я-пирроло[3,2-
20 с/]пиримидин-6(7Н)-ону (92.0 мг, 0.32 ммоль) в безводном ТГФ (5 мл) в атмосфере N2 при -78 °С добавили по каплям 1.0 М гексаметилдисилазид лития в ТГФ (0.65 мл, 0.65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78 °С в атмосфере N2 в течение 60 минут. Добавили аллилбромид (0.062 мл, 0.72 ммоль), растворенный в 0.5 мл ТГФ, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в
25 течение 16 ч. Реакционную смесь погасили насыщенным водным раствором NH4CI и разбавили этилацетатом. Органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Na2S04, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле с элюцией 10 - 100% этилацетат/гептан дала 84.3 мг (80.3 %) 7-аллил-2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-
30 5Я-пирроло[3,2-фиримидин-6(7Н)-он. MS(ESI) m/z. 323.1 [М+1]+.
Стадия 7: К перемешанному раствору 7-аллил-2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-5Н-пирроло[3,2-с/]пиримидин-6(7/-/)онаопе (80.0 мг, 0.25 ммоль) в безводном ТГФ (3.0 мл) и воде (1.0 мл), охлажденному до 0°С, добавили N-метилморфолин Л/-оксид (34.8 мг, 0.29 ммоль), с последующими 2.5%
35 тетраоксидом осмия в трет-бутаноле. (0.033 мл, 0.025 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 16 ч. Затем
добавили сульфит натрия (312.4 мг, 2.48 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавили водой и затем экстрагировали этилацетатом (2х). Объединенные органические слои высушили над Na2S04, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. 5 Неочищенное промежуточное соединение затем разбавили безводным ТГФ (3.0 мл) и водой (1.0). Добавили периодат натрия (79.5 мг, 0.372 ммоль), и реакционную смесь обработали ультразвуком в течение 1 минуты и затем перемешивали при КТ в течение 2 дней. Реакционную смесь разбавили этилацетатом, и органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Na2S04, отфильтровали,
10 и сконцентрировали под вакуумом с получением 80.4 мг (99%) 2-(2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-6-оксо-6,7-дигидро-5Я-пирроло[3,2-с/]пиримидин-7-ил)ацетальдегида. MS(ESI) m/z: 325.1 [М+1]+.
Стадия 8: К перемешанному раствору 2-(2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-6-оксо-6,7-дигидро-5/-/-пирроло[3,2-с/|пиримидин-7-ил)ацетальдегида
15 (80.4 мг, 0.248 ммоль) в ТГФ (3.7 мл) и метаноле (0.25 мл) при 0 °С добавили борогидрид натрия (20.6 мг, 0.55 ммоль) за одну порцию. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 5 ч и затем разбавили этилацетатом. Органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Na2S04, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. Очистка
20 с помощью хроматографии на силикагеле с элюцией 15-100% этилацетат/гептан дала 76 мг (99%) 4-(2-хлор-5-метил-{За,6-диметилгексагидро-2Я-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-с/|пиримидин-4-ил)морфолин. MS(ESI) m/z: 311.2 [М+1]+.
Стадия 9: В пробирку для микроволновой печи поместили 4-(2-хлор-5-метил-{За,6-диметилгексагидро-2/-/-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-с/]пиримидин-4-
25 ил)морфолин (70.0 мг, 0.225 ммоль), 4-нитрофенилбороновой кислоты пинаколиновый эфир (70.1 мг, 0.281 ммоль), тетракис (трифенилфосфин)палладий(О) (18.2 мг, 0.016 ммоль), карбонат натрия (41.1 мг, 0.38 ммоль), и карбонат калия (49.8 мг, 0.36 ммоль). Добавили дегазированный ацетонитрил (3.5 мл) и дегазированную воду (1.0). Реакционную смесь подвергали
30 микроволновому излучению при 120°С в течение 15 минут. Охлажденную реакционную смесь разбавили этилацетатом, и реакционную смесь отфильтровали через слой целита для удаления избытка Pd. Органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Na2S04, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле с элюцией от 10
35 до 100% этилацетат/гептан дала 75.3 мг (84.1 %) 4-(5-метил-2-(4-нитрофенил)
{За,6-диметилгексагидро-2Я-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-с/]пиримидин-4-ил)морфолина. MS(ESI) m/z: 398.3 [M+1]+.
Стадия 10: К перемешанному раствору 4-(5-метил-2-(4-нитрофенил)-{За,6-диметилгексагидро-2/-/-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-с/|пиримидин-4-ил)морфолина 5 (78.0 мг, 0.196 ммоль), растворенному в этаноле (4.7 мл) и воде (3.1 мл) добавили хлорид аммония (210 мг, 3.93 ммоль) с последующим железом (54.8 мг, 0.982 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 95°С в течение 2 ч. и затем разбавили 10% МеОН/ДХМ и насыщенным водным раствором NaHC03. Реакционную смесь обработали ультразвуком и затем отфильтровали через слой
10 целита для удаления железа. Фильтрат экстрагировали ДХМ (Зх), и объединенные органические слои промыли солевым раствором, высушили над Na2S04, отфильтровали, и сконцентрировали под вакуумом с получением 68.0 мг (94.2%) 4-(5-метил-4-морфолино-{За,6-диметилгексагидро-2Я-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-с/]пиримидин-2-ил)анилина в виде белой пены. MS(ESI) m/z: 368.2 [М+1]+.
15 Стадия 11: К перемешанному раствору 4-(5-метил-4-морфолино-{За,6-
диметилгексагидро-2/-/-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-с/|пиримидин-2-ил)анилина (17.4 мг, 0.047 ммоль) в безводном 1,2-дихлорэтане (1.4 мл) добавили этилизоцианат (0.037 мл, 0.47 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 50 °С в атмосфере N2 в течение 2 ч. Реакцию погасили МеОН (1 мл). Летучий растворитель удалили при
20 пониженном давлении, и неочищенный продукт очистили с помощью ВЭЖХ с получением 11.50 мг (55.4%) соединения 101 в виде неустойчиво белого осадка. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.57 (s, 1Н), 8.14 (d, J = 8.8 Hz, 2Н), 7.45 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.12 (t, J = 5.6 Hz, 1 H), 4.98 (s, 1 H), 3.87 (t, J = 7.0 Hz, 1 H), 3.84 - 3.66 (m, 4H), 3.60 -3.48 (m, 2H), 3.43 - 3.36 (m, 1H), 3.34 - 3.28 (m, 2H), 3.16 - 3.06 (m, 2H), 2.81 (s, 3H),
25 2.15 (dd, J = 12.2, 3.4 Hz, 1 H), 2.03 - 1.88 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.06 (t, J = 7.2 Hz, 3H). MS(ESI) m/z: 439.2 [M+1]+.
Пример 102 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6И-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-метилпиримидин-2-амин 102
Смесь
2-(2-(2-амино-4-метилпиримидин-5-ил)-9-(2-гидроксиэтил)-6-
морфолино-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ола (550 мг, 1.3 ммоль) и ТФУ (0.36 мл, 4.7 ммоль) в толуоле (9 мл) нагревали при 110 °С и перемешивали 4 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и сконцентрировали под вакуумом. 5 Аналитическая LC-MS показала конверсию превращение в циклический продукт, а также удаление побочного продукта, 2-(2-(2-амино-4-метилпиримидин-5-ил)-6-морфолино-8-(проп-1 -ен-2-ил)-9Н-пурин-9-ил)этанола. Неочищенный остаток растворили в ДМФ (1 мл) и очистили препаративной оф-ВЭЖХ. Этот процесс обеспечил 302 мг (57% выход) of 102. MS (ESI+): m/z 397.4 (М+Н+). 1Н NMR (400
10 MHz, ДМСО) 5 8.79 (s, 1 Н), 6.78 (s, 2Н), 4.20 (s, 4Н), 4.12 (s, 4Н), 3.74 (s, 5Н), 2.63 (s, 4Н), 1.58 (s, 7Н)
Пример 103
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6И-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 103
Стадия 1: 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-15 пурин-8-ил)пропан-2-ол
4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолин (20.0 г, 0.062 моль) охладили до -42 °С в ТГФ (400 мл). Раствор н-бутиллития (2.5 М в гексанах, 48 мл, 0.12 моль) добавили порциями в течение 10 мин. Смесь
20 постепенно стала желтой. Реакционную смесь затем оставили перемешиваться при -42 °С в течение 30 минут и затем одной порцией добавили безводный ацетон (10 мл, 0.1 моль). Получившуюся реакционную смесь медленно нагрели до 0 °С в течение 2 часов. Смесь последовательно погасили водой, экстрагировали ЕЮАс и высушили над MgS04. Суспензию отфильтровали и сконцентрировали под
25 вакуумом с получением 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ола (23 г, 98%) в виде желтого осадка. MS (ESI+): m/z 382.1 (М+Н+)2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол
Стадия 2: 30 [1,4]оксазино[3,4-е]пурин
2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол (23 г, 0.06 моль) суспендированный в МеОН (270 мл) и добавили каталитическое количество моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (1.22 г, 7.1 5 ммоль). Реакционную смесь нагрели до 50 °С и перемешивали в течение 16 ч. Раствор стал гомогенным при дальнейшем нагревании. LC-MS показала полную конверсию в продукт без ТНР-защитной группы. Реакционную смесь сконцентрировали дляя полного удаления МеОН и полученный осадок последовательно разбавили водой и ЕЮАс. Фазы разделили и водную фазу
10 экстрагировали три раза ЕЮАс, высушили над MgS04, отфильтровали и сконцентрировали. Неочищенный 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол (са. 15.0 г, 50.4 ммоль) обработали 1,2-дибромэтаном (8.7 мл, 100 ммоль) и карбонатом цезия (41.0 г, 126 ммоль) в ДМФ (200 мл). Реакционную смесь нагревали при 90 °С в течение 1.5 ч. LC-MS показала полную конверсию в
15 циклический продукт с ~10% присутствием продукта отщепления Е2. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и влили в разделительную воронку, содержащую 1 н. HCI и ЕЮАс (50:50). Водный слой экстрагировали несколько раз ЕЮАс и объединенные органические части промыли один раз водой. Последующая сушка над MgS04 с дальнейшей фильтрацией и концентрированием
20 дала неочищенный маслянистый осадок. Этот материал загрузили на 300-г ISCO колонку и очистили посредством флеш-колончатой хроматографии с медленным градиентом (15-30% ЕЮАс в гептане). Фракции, содержащие целевой продукт сконцентрировали и высушили в глубоком вакууме в течение ночи с получением соединения 14.3 г (88% выход) 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
25 [1,4]оксазино[3,4-е]пурина. MS (ESI+): m/z 324.2 (М+Н+). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 4.07 (m, 8Н), 3.72 (т, 4Н), 1.57 (s, 6Н)
Стадия 3:
2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурину (180 мг, 0.56 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (5.1 мл) добавили 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин 25 30 (180 мг, 0.83 ммоль) и 1.0 М карбоната цезия в воде (1.7 мл). Реакционную смесь дегазировали в течение 5 минут и снова поместили в атмосферу азота. Далее добавили 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладий(И) хлорид (54 мг, 0.067
ммоль), и смесь дегазировали и снова поместили в атмосферу азота. Реакционную пробирку затем подвергли микроволновому излучению в течение 20 минут при 140 °С. Твердый преципитат, который образовался в течение реакции отфильтровали и промыли избытком воды. Преципитат растворили в ДХМ и очистили посредством 5 FCC (40 г, 0.5-4% МеОН в ДХМ, медленный градиент) с выделением соединения 103 в виде бронзового порошка (56 мг, 27% выход). MS (ESI+): m/z 383.1 (М+Н+). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.09 (s, 2Н), 7.00 (s, 2Н), 4.23 (m, 4Н), 4.13 (т, 4Н), 3.79 -3.68 (т, 4Н), 2.50 (s, 6Н)
Пример 104 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6И-
10 [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-(трифторметил)пиридил-2-амин 104
2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (180 мг, 0.56 ммоль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амин (240 мг, 0.83 ммоль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с
15 получением 104 (204 мг, 70% выход). LC/MS (ESI+): m/z 450 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.47 (s, 1Н), 6.82 (s, 1Н), 6.70 (s, 2Н), 4.19 (s, 4Н), 4.11 (s, 4Н), 3.71 (s, 4Н), 1.59 (s, 6Н)
Пример 105 5-(4-морфолино-8,9-дигидро-7И-[1,3]оксазино[2,3-
е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 105
20 Стадия 1: 4-(2-хлор-8-йодо-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-
пурин-6-ил)морфолин
К раствору 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-
ил)морфолина (1.0 г, 3.1 ммоль) и Л/,Л/,Л/',Л/'-тетраметилендиамина (0.7 мл, 4.6
25 ммоль) в безводном ТГФ (23 мл) при -42 °С по каплям добавили 2.5 М раствор н-бутиллития в гексане (4.3 мл, 11.0 ммоль) капая по краю реакционной колбы. Реакционную смесь перемешивали при низкой температуре и выдерживали в течение 1 ч перед добавлением 1-хлор-2-йодэтана (1.4 мл, 15 ммоль). Перемешивание продолжили в течение 1.5 ч периода. LC-MS показала, что
30 реакция прошла с полной конверсией в желаемый продукт. Реакционную смесь
последовательно погасили и обработали насыщенным водным раствором NH4CI, который экстрагировали ЕЮАс (3 раза), высушили над MgS04, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 4-(2-хлор-8-йодо-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (1.4 г, 84% выход), с чистотой, 5 определенной с помощью LC-MS более > 90%. MS (ESI+): m/z 450.1 (М+Н+) Стадия 2: 4-(2-хлор-8-йодо-9-(3-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)пропил)-9Н-пурин-6-ил)морфолин
К суспензии 4-(2-хлор-8-йодо-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-
10 ил)морфолина (0.655 г, 1.46 ммоль) в метаноле (6 мл) добавили каталитическое количество п-толуолсульфоновой кислоты (25 мг, 0.14 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50 °С в течение ночи. После этого времени, смесь охладили до комнатной температуры и объем метанола уменьшили с помощью вакуумной эвапорации. Получившийся остаток разбавили насыщенным водным раствором
15 NaHC03. Образовавшийся преципитат собрали фильтрацией. В общем, 295 мг (56%) 4-(2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолина получили в виде белого осадка, который растворили в безводном ДМФ (2.5 мл). Карбонат цезия (0.53 г, 1.61 ммоль) добавили и смесь перемешивали вместе 10 мин при 23 °С. После этого в смесь добавили 1-(2Н-3,4,5,6-тетрагидропиран-2-илокси)-3-бромпропан (0.54 г, 2.42
20 ммоль). Получившуюся реакционную смесь нагревали при 50 °С в течение 2 ч. Полную конверсию наблюдали в конце указанного периода. Реакцию продолжили разбавлением 1 н. HCI и ЕЮАс. Фазы разделили и водный слой экстрагировали дважды ЕЮАс. Объединенные органические части высушили над MgS04, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством
25 FCC (40 г колонка с силикагелем, 0-50% ЕЮАс в гептане) с получением 385 мг (94% выход) 4-(2-хлор-8-йодо-9-(3-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)пропил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина в виде бледно-желтого осадка. MS (ESI+): m/z 508.0 (М+Н+)
К 4-(2-хлор-8-йодо-9-(3-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)пропил)-9Н-пурин-6-ил)морфолину (0.39 г, 0.8 ммоль) в метаноле (5 мл) добавили п-5 толуолсульфоновую кислоту (10 мг, 0.08 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50 °С в течение 30 мин, до тех пор пока не наблюдалась преципитация, свидетельствующая об окончании реакции. Это было подтверждено аналитической LC-MS. Реакционную смесь сконцентрировали под вакуумом с получением 3-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропан-1-ола. Йодид меди (I) (9 мг, 0.05
10 ммоль), пиколиновую кислоту (10 мг, 0.09 ммоль) и фосфат калия (0.4 г, 1.9 ммоль) смешали в высушенной в печи 50-мл круглодонной колбе и заполнили ей атмосферой N2. После 3-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропан-1-ол растворили в безводном диметилсульфоксиде (6.7 мл) и добавили через шприц. Всю смесь нагревали при 80 °С в течение 20 ч. LC-MS показала хорошую
15 конверсию в желаемый продукт. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры, разбавили водой и ЕЮАс, высушили над MgS04, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством FCC (40 г колонка с силикагелем, 0-100% ЕЮАс в гептане) с получением 112 мг 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурина (40%). MS (ESI+): m/z 296.2
20 (М+НГ)
Стадия 4: 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-
е]пурин (112 мг, 0.38 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин 25 (0.1 г, 0.454 ммоль), 1 М карбонат цезия в воде (0.8 мл, 0.8 ммоль) и ацетонитрил (0.8 мл) поместили в 10-мл СЕМ реакционную пробирку
25 для микроволновой печи и закрыли. Колбу медленно продули под вакуумом и заменили атмосферу на азотную. Тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (43.8 мг, 0.038 ммоль) добавили и цикл продувки/1Ч2 повторили. Реакционную смесь облучали в микроволновой печи при 140 °С в течение 20 мин. LC-MS показала полную конверсию. Смесь отфильтровали через тонкий слой Celite(r), элюируя
30 ЕЮАс и после сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили с помощью оф-ВЭЖХ с получением соединения 105 (62.3 мг, 46% выход). MS (ESI+): m/z 355.1 (М+НГ)
Пример 106 5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1 -е]пурин-
2-ил)пиримидин-2-амин 106
Стадия 1: 4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолин
Раствор 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (Пример 118) (5.0 г, 15 ммоль) и N, N, N', N'-тетраметилэтилендиамина (3.5 мл, 23 ммоль) в ТГФ (110 мл) охладили до -42°С и обработали раствором 2.5М н-бутиллития в гексане (22 мл, 54 ммоль) по каплям в течение 5 минут. Через 30
10 минут при -42 °С, добавили 1,4-дибром-бутан (8.9 мл, 75 ммоль) и реакционную смесь медленно нагрели до 0 °С в течение 1 ч. и затем нагрели до комнатной температуры в течение 90 минут. Смесь погасили насыщенным раствором NH4CI, и разбавили этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом (Зх), и объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия,
15 отфильтровали, и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина в виде белого осадка (1.1 г, 15%). LC/MS (ESI+): m/z 459 (М+Н).
Стадия 2: 4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9Н-пурин-6-ил)морфолин
20 Br^
Суспензию 4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (1.1 г, 2.4 ммоль) в метаноле (10 мл) обработали п-толуолсульфоновой кислотой (40 мг, 0.24 ммоль) и нагревали в течение ночи при 50°С. Растворитель удалили под вакуумом с получением 4-(8-(4-бромбутил)-2-25 хлор-9Н-пурин-6-ил)морфолина в виде белого осадка, which использовали на
следующей стадии без дополнительной очистки (880 мг, колич). LC/MS (ESI+): m/z 375 (М+Н)
Стадия 3: 4-(2-хлор-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-4-ил)морфолин
Суспензию 4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9Н-пурин-6-ил)морфолина (880 мг, 2.4 ммоль) в ДМСО (6.7 мл) обработали карбонатом цезия (1.5 г, 4.7 ммоль) и нагревали при 50°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и ДХМ и слои разделили. Водную фазу
10 экстрагировали ДХМ (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 4-(2-хлор-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-4-ил)морфолина в виде белого осадка (460 мг, 67%). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 4.28 - 4.03 (m, 4Н), 4.00 (т, 2Н), 3.69 (т, 4Н), 2.90 (т, 2Н), 2.01-1.86 (т, 4Н). LC/MS (ESI+): m/z 294
15 (М+Н)
Стадия 4: Следуя Общей Методике А, 4-(2-хлор-6,7,8,9-
тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-4-ил)морфолин (310 мг, 1.0 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (300 мг, 1.4 ммоль), и тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (61 мг, 52 мкмоль, 5.0 mol%)
20 суспендированный в MeCN (2.6 мл) и 1.0М Na2C03 (2.0 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140 °С в течение 15 минут. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 106 в виде белого осадка (220 мг, 60%). 1Н NMR (500 MHz, ДМСО) 5 9.09 (s, 2Н), 7.01 (s,
25 2Н), 4.23 (s, 4Н), 4.08 (s, 2Н), 3.73 (s, 4Н), 2.92 (s, 2Н), 2.00 (s, 2Н), 1.93 (s, 2Н). LCMS: RT = 6.13 мин, М+Н+ = 353.1
Пример 107 5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1 -е]пурин-
2-ил)пиридин-2-амин 107
4-(2-хлор-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-4-ил)морфолин, из Примера
30 106 (150 мг, 0.50 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-амин (140 мг, 0.64 ммоль), и тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (29 мг, 25 мкмоль, 5.0 моль%) суспендированный в MeCN (1.2 мл) и 1.0М Na2C03(BoflH) (0.94
мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140 °С в течение 15 минут. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением 107 в виде белого осадка (170 мг, 63%). 1Н NMR (500 MHz, ДМСО) 5 8.91 (s, 1Н), 8.27 (d, J 5 = 8.6 Hz, 1Н), 6.48 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.27 (s, 2H), 4.22 (s, 4H), 4.07 (s, 2H), 3.73 (s, 4H), 2.91 (s, 2H), 2.01 (s, 2H), 1.92 (s, 2H). LCMS: RT = 6.23 мин, M+H+ = 352.1
Пример 108 5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6И-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-(трифторметил)пиридил-2-амин 108
2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (80 мг, 0.0003
10 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-4-
(трифторметил)пиридин-2-амин (120 мг, 0.0004 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и под микроволновым излучением с получением 108 (40 мг, 40% выход). LC/MS (ESI+): m/z 422 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.56 - 8.42 (т, 1Н), 6.81 (s, 1Н), 6.76 (s, 2Н), 4.93 (s, 2Н), 4.16 (d, J = 15 20.6 Hz, 8Н), 3.80-3.58 (т,4Н)
Пример 109 5-(4-морфолино-7,8-дигидро-6И-пирроло[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 109
Стадия 1: 4-(9-аллил-2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолин
/О.
N^N^CI
20 4-(2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолин (500 мг, 1.0 ммоль)
перемешивали вместе с карбонатом цезия (890 мг, 2.7 ммоль) в ДМФ (4.2 мл) при комнатной температуре в течение 10 минут. Добавили аллилбромид (0.36 мл, 4.1 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч. Смесь охладили до комнатной температуры и разбавили солевым раствором и ДХМ и слои разделили.
25 Водную фазу экстрагировали ДХМ (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 4-(9-аллил-2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолина в виде белой пены (480 мг, 90%). 1Н NMR (500 MHz, ДМСО) 5 5.94 (d, J = 10.6 Hz, 2Н), 5.76 (s, 1Н), 5.19 (d, J = 10.3 Hz, 2H), 4.79 (d, J= 16.9 Hz, 2H), 4.69 (s, 2H), 3.73
30 (s, 4H). LC/MS (ESI+): m/z 406 (M+H)
4-(9-аллил-2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолин (230 мг, 0.57 ммоль) добавили к раствору 0.50М 9-борабицикло[3.3.1]нонана в гексане (1.7 мл) при 5 комнатной температуре. ТГФ добавили для растворения реакционной смеси. Добавление 0.50М 9-борабицикло[3.3.1]нонана в гексане (1.7 мл) не вызвало конверсии и реакционную смесь перемешивали в течение 15 ч. Добавили моногидрат фосфата калия (200 мг, 0.85 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)-палладий(О) (16 мг, 14 мкмоль, 2.5 моль%) и реакционную смесь нагревали при
10 60°С в течение 15 ч. Смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 4-(2-хлор-7,8-дигидро-6Н-пирроло[2,1-е]пурин-4-ил)морфолина в виде осадка (32 мг, 20%). LC/MS (ESI+): m/z
15 280 (М+Н)
Стадия 3: 4-(2-хлор-7,8-дигидро-6Н-пирроло[2,1-е]пурин-4-ил)морфолин (32 мг, 0.11 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (33 мг, 0.15 ммоль), и тетракис(трифенилфосфин)-палладий(О) (6.6 мг, 5.7 мкмоль, 5.0 моль%) суспендированный в MeCN (0.28 мл) и
20 1 .ОМ Na2C03 (0.22 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 минут. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 109 в виде белого осадка (1.7 мг, 4.4%).1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.99 (s, 1Н), 7.75 (s, 1Н), 6.95 (d, J = 1.5 Hz, 1Н),
25 6.92 (s, 1Н), 6.88 (s, 1Н), 6.02 (s, 1Н), 5.85 (hept, J = 6.6 Hz, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.50 -4.36 (m, 6H), 3.73 (s, 6H), 2.24 (s, 3H), 1.44 (d, J = 6.6 Hz, 6H). LCMS: RT = 3.48 мин, M+H+ = 339.1
Пример 110 6,6-диметил-4-морфолино-2-(1 Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-5-ил)-
8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 110
30 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
(100 мг, 0.0003 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин (110 мг, 0.00046 моль) взаимодействовали в условиях для
реакции Сузуки с палладием и под микроволновым излучением с получением соединения 110 (54 мг, 50% выход). LC/MS (ESI+): m/z 406 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 11.75 (s, 1Н), 9.27 (d, J= 1.8 Hz, 1Н), 8.88 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.60 -7.41 (m, 1H), 6.57 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 4.29 (s, 4H), 4.17 (dd, J= 18.0, 5.1 Hz, 4H), 3.88-3.69 (m, 4H), 1.60 (s, 6H)
Пример 111 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин 111
2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (100 мг, 0.0003 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-амин (110 мг, 0.0005 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением соединения 111 (75 мг, 70% выход). LC/MS (ESI+): m/z 382 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.92 (d, J = 2.1 Hz, 1Н), 8.27 (dd, J= 8.7, 2.2 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 6.49 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.26 (s, 2H), 4.22 (s, 4H), 4.12 (s, 4H), 3.86 - 3.65 (m, 4H), 1.57 (s, 6H)
Пример 112 5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-
е]пурин-7,1'-циклопропан]-2-ил)пиримидин-2-амин 112
Стадия 1: 1 -(2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанол
Раствор этил 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноата (500 мг, 1.5 ммоль) в диэтиловом эфире (37 мл) обработали этоксидом титана (IV) (31 мкл, 0.15 ммоль) с последующим добавлением по каплям З.ОМ этилмагния бромида в эфире (0.98 мл, 2.9 ммоль) при комнатной температуре в течение 90 минут. Частичная конверсия потребовала добавления этоксида титана (IV) (31 мкл, 0.15 ммоль) и З.ОМ этилмагния бромида в эфире (0.98 мл, 2.9 ммоль). Через 2 ч реакционную смесь погасили водным раствором 1.0М HCI (20 мл) и отфильтровали через слой целита, промыли этилацетатом. Смесь разбавили водой и этилацетатом и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали, и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 1-(2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9
ил)этил)циклопропанола в виде бесцветного масла (220 мг, 46%). LC/MS (ESI+): m/z 324 (М+Н)
Стадия 2: 1-(2-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанол
Раствор 1 -(2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанол (220 мг, 0.68 ммоль) и 1\1,1\1,г\Г,1\Г-тетраметилэтилендиамин (0.15 мл, 1.0 ммоль) в ТГФ (4.9 мл) охладили до -42 °С и обработали раствором 2.5М н-бутиллития в гексане (1.5 мл, 3.7 ммоль) по каплям в течение 5 минут. Через 30 минут при -42 °С, 110 хлор-2-йодэтан (0.31 мл, 3.3 ммоль) добавили и реакционную смесь медленно нагрели до 0°С в течение 1 ч. Смесь погасили насыщенным раствором NH4CI и разбавили этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом (Зх), и объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, отфильтровали, и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-15 хроматографии с получением 1-(2-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанола в виде бесцветного масла (220 мг, 71%). LC/MS (ESI+): m/z 450 (М+Н)
Стадия 3: 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1 '-циклопропан]
Йодид меди (I) (4.6 мг, 24 мкмоль), пинаколиновую кислоту (6.0 мг, 48 мкмоль) и фосфат калия (210 мг, 0.97 ммоль) смешали в высушенной в печи круглодонной колбе и продули N2 (Зх). После, раствор 1 -(2-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанола (220 мг, 0.48 ммоль), 25 растворенный в ДМСО (3.4 мл) добавили через шприц. Реакционную смесь нагревали при 80 °С в течение 20 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной
температуры и разбавили водой и этилацетатом и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали, и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-5 циклопропана] в виде желтого осадка (41 мг, 26%). LC/MS (ESI+): m/z 322 (М+Н) Стадия 4: 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-циклопропан] (37 мг, 0.11 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (33 мг, 0.15 ммоль), и тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (6.6 мг, 5.7 мкмоль, 5.0 моль%)
10 суспендированный в MeCN (0.28 мл) и 1.0М Na2C03 (0.22 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 минут. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 112 в виде белого осадка (22 мг, 50%). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.07 (s, 2Н), 6.96 (s,
15 2Н), 4.22 (t, J = 6.0 Hz, 2Н), 4.11 (s, 4Н), 3.75 - 3.65 (m, 4Н), 2.26 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 1.08 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 0.90 (t, J = 6.6 Hz, 2H). LCMS: RT = 3.57 мин, M+H+ = 381.1.
Пример 113 5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6И-[1,4]оксазино[3,4-
е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 113
Стадия 1: 2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-
20 пурин-8-карбальдегид
К смеси 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (5 г, 20 ммоль) в ТГФ (100 мл) при -78 °С добавили тетраметилэтилендиамин (3.5 мл, 23 ммоль) с последующим 2.5 М H-BuLi (9.3 мл, 23 ммоль) по каплям.
25 Реакционную смесь перемешивали при -78 °С в течение 1 часа и затем добавили ^^диметилформамид (2.4 мл, 31 ммоль), продолжили перемешивание в течение 1 часа при -78 °С. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный материал тритурировали с ЕЮАс с
30 получением чистого 2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин
8-карбальдегида в виде белого осадка (4.5 г, 80% выход). LC/MS (ESI+): m/z 353 (М+Н)
Стадия 2: (2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)метанол
2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбальдегид (3.8 г, 11 ммоль) в МеОН (22 мл) обработали тетрагидроборатом натрия (0.817 г, 22 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические 10 экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили с помощью колонки ISCO с 0-80% ЕЮАс/гексан с получением чистого (2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)метанола (3.4 г, 89% выход). LC/MS (ESI+): m/z 354 (М+Н)
15 Стадия 3: (2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)метанол
(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)метанол (3.4 г, 0.0096 моль) в МеОН (20 мл) обработали каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (0.25 г, 0.00144 моль). Реакционную смесь нагревали 20 при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали досуха с получением (2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)метанола (2.6 г, 100% выход). LC/MS (ESI+): m/z 271 (М+Н)
Смесь (2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)метанола (1 г, 0.004 моль), 1,2-дибромэтан (0.64 мл, 0.0074 моль) и карбонат цезия (3.6 г, 0.011 моль) in ДМФ (14 5 мл) нагревали at 90 °С в течение 12 часов. Реакционную смесь отфильтровали и разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором и высушили над MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью колонки ISCO с 0-50% ЕЮАс/гексан с получением 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина (0.7 г, 60%). LC/MS 10 (ESI+): m/z 297 (М+Н)
Стадия 5: 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (160 мг, 0.00056 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (180 мг, 0.00083 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением 15 соединения 113 (40 мг, 15% выход) вместе с некоторым количеством побочного продукта, (2-(2-аминопиримидин-5-ил)-6-морфолино-9-винил-9Н-пурин-8-ил)метанола (7 мг) . LC/MS (ESI+): m/z 355 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.10 (s, 2Н), 7.00 (s, 2Н), 4.91 (s, 2Н), 4.34 - 4.07 (m, 8Н), 3.90 - 3.63 (т, 4Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.10 (s, 2Н), 7.35 (dd, J= 15.9, 9.5 Hz, 1Н), 7.05 (s, 2Н), 6.47 (d, J = 20 15.9 Hz, 1H), 5.73 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 4.71 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.27 (s, 4H), 3.88-3.63 (m,4H)
Пример 114 5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан]-2-ил)пиримидин-2-амин 114
Стадия 1: 3-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-25 пурин-8-ил)оксетан-3-ол
3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ол
К смеси 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (2.9 г, 9 ммоль) в ТГФ (50 мл) при -78 °С добавили 2.5 М n-BuLi (9 мл, 22 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при -78 °С в течение 30 минут и затем добавили 3-оксетанон (1.3 мл, 18 ммоль), продолжили перемешивание в течение 2 5 часов при -78°С. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили с помощью Isco хроматографии с 0-100% ЕЮАс/гексан с получением чистого 3-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ола в виде 10 белого осадка (2.5 г, 70% выход). LC/MS (ESI+): m/z 397 (М+Н)
3-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ол (1.8 г, 0.0045 моль) в МеОН (50 мл) обработали каталитическим
15 количеством п-толуолсульфоновой кислоты (78 мг, 0.00044 моль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали досуха с получением 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-
20 ил)оксетан-3-ола (1.2 г, 84% выход). LC/MS (ESI+): m/z 312 (М+Н)
Стадия 3: 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан]
Смесь 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ола (356 мг, 0.0011
25 моль), 1,2-дибромэтана (0.21 мл, 0.0024 моль) и карбоната цезия (1.13 г, 0.0034 моль) в ДМФ (4 мл) нагревали при 90°С в течение 12 часов. Реакционную смесь отфильтровали и разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором и высушили над MgS04 и сконцентрировали.
Неочищенный продукт очистили с помощью ISCO хроматографии с 0-80%
EtOAc/гексан с получением 2-хлор-4-морфолино-8,9-
дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетана] (0.34 г, 85%). LC/MS (ESI+): m/z 339 (М+Н)
5 Стадия 4: 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-
е]пурин-6,3'-оксетан] (200 мг, 0.0006 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (210 мг, 0.00095 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением соединения 114 (0.123 мг, 60% выход). LC/MS (ESI+): m/z 397 (М+Н). 10 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.10 (s, 2Н), 7.02 (s, 2Н), 4.97 (d, J= 7.1 Hz, 2Н), 4.72 (d, J= 7.1 Hz, 2H), 4.29 (s, 4H), 4.16 (s, 4H), 3.90 - 3.62 (m, 4H)
Пример 115 5-(7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7И-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 115
Стадия 1: этил 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноат
А раствор 4-(2-хлор-9Н-пурин-6-ил)морфолина (3.0 г, 13 ммоль) в ДМФ (39 мл) обработали карбонатом цезия (8.2 г, 25 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Добавили 3-бромпропановой кислоты этиловый эфир (6.8 г, 38 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч.
20 Частичная конверсия потребовала добавления карбоната цезия (8.2 г, 25 ммоль) и 3-бромпропановой кислоты этилового эфира (6.8 г, 38 ммоль), и реакционную смесь нагревали при 70°С. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили солевым раствором и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали,
25 и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением этил 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноата в виде белого осадка (3.5 г, 83%). LC/MS (ESI+): m/z 340 (М+Н)
4-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ол
Раствор этил 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноата (500 мг, 1.5 ммоль) в ТГФ (30 мл) при 0 °С обработали по каплям раствором З.ОМ метилмагния 5 хлорида в ТГФ (2.0 мл). Через 90 минут при 0 °С, реакционную смесь обработали насыщенным раствором NH4CI и разбавили солевым раствором и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали, и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 4-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-10 метилбутан-2-ола в виде белой пены (452 мг, 94%). LC/MS (ESI+): m/z 326 (М+Н) Стадия 3: 4-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-
2-ол
Раствор 4-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ола (360 мг,
15 1.1 ммоль) и N, N, N', N'-тетраметилэтилендиамина (0.25 мл, 1.7 ммоль) в ТГФ (8.1 мл) охладили до -42°С и обработали раствором 2.5М п-бутиллития в гексане (BuLi, 2.0 мл, 5.0 ммоль) по каплям в течение 5 минут. Через 30 минут при -42°С, 1-хлор-2-йодэтан (0.51 мл, 5.4 ммоль) добавили и реакционную смесь медленно нагрели до 0°С в течение 1 ч. Смесь погасили насыщенным раствором NH4CI и разбавили
20 этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом (Зх) и объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 4-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ола в виде белой пены (390 мг, 78%). LC/MS (ESI+): m/z 452 (М+Н)
Йодид меди (I) (3.2 мг, 17 мкмоль), пинаколиновую кислоту (4.1 мг, 33 5 мкмоль), и фосфат калия (140 мг, 0.67 ммоль) смешали в высушенной в печи круглодонной колбе и продули N2 (Зх). После этого раствор 4-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ола (150 мг, 0.33 ммоль), растворенного в ДМСО (2.4 мл) добавили через шприц. Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 20 ч. Частичная конверсия потребовала добавления
10 йодида меди (I) (3.2 мг, 17 мкмоль), пинаколиновой кислоты (4.1 мг, 33 мкмоль) и фосфат калия (140 мг, 0.67 ммоль) и реакционную смесь продолжили перемешивать при 80°С в течение 20 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и этилацетатом и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (Зх), высушили над сульфатом натрия,
15 отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 2-хлор-7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурина в виде белого осадка (61 мг, 56%). LC/MS (ESI+): m/z 324 (М+Н)
Стадия 5: 2-хлор-7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-
20 [1,3]оксазино[2,3-е]пурин (61 мг, 0.19 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-
диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (54 мг, 0.24 ммоль) и
тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (11 мг, 9.4 мкмоль, 5.0 моль%),
суспендированный в MeCN (0.46 мл) и 1.0М Na2C03(BoflH) (0.36 мл), нагревали под
воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 минут.
25 Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом.
Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 115 в
виде белого осадка (27 мг, 37%). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.06 (s, 2Н), 6.95 (s,
2Н), 4.18 - 4.06 (m, 6Н), 3.75 - 3.65 (т, 4Н), 2.15 (t, J = 6.2 Hz, 2Н), 1.46 (s, 6Н).
LCMS: Rj = 2.75 мин, M+H+ = 383.1
30 Пример 116 5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин 116
2-хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, из Примеров 139 и 140 (100 мг, 0.0003 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-амин (120 мг, 0.00055 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с 5 получением соединения 116 (56 мг, 56% выход). LC/MS (ESI+): m/z 422 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.94 (d, J= 2.0 Hz, 1Н), 8.28 (dd, J= 8.7, 2.2 Hz, 1H), 6.50 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.32 (s, 2H), 5.87 (q, J= 6.9 Hz, 1H), 4.49-4.10 (m, 8H), 3.75 (t, J = 4.6 Hz, 4H)
Пример 117 5-(6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6И-10 [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 117
Стадия 1: 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтерио-пропан-2-ол
К смеси 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина 15 (5 г, 0.02 моль) в ТГФ (100 мл) при -78 °С добавили 2.5 М n-BuLi (12 мл, 0.031 моль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при -78 °С в течение 30 минут и затем добавили ацетон^б (2.5 мл, 0.034 моль), продолжили перемешивание в течение 2 часов при -78 °С. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили 20 над MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили с помощью Isco хроматографии с 0-100% ЕЮАс/гексан с получением чистого 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтерио-пропан-2-ола в виде белого осадка (5.7 г, 95% выход). LC/MS (ESI+): m/z 389 (М+Н) Стадия 2: 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтерио-25 пропан-2-ол
2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтерио-пропан-2-ол (5.7 г, 0.015 моль) в МеОН (59 мл) обработали каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (253 мг, 0.00147 моль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали 5 при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали досуха с получением 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтерио-пропан-2-ола (4.5 г, 100% выход). LC/MS (ESI+): m/z 304 (М+Н)
10 Стадия 3: 2-хлор-6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
Смесь 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтерио-пропан-2-ола (2 г, 0.006 моль), 1,2-дибромэтана (1.13 мл, 0.013 моль) и карбоната цезия (6.4
15 г, 0.02 моль) в ДМФ (4 мл) нагревали при 90 °С в течение 12 часов. Реакционную смесь отфильтровали и разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором и высушили над MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью ISCO хроматографии с 0-80% ЕЮАс/гексан с получением чистого 2-хлор-6,6-(гексадейтерио)диметил-4-
20 морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина (1.64 г, 82%). LC/MS (ESI+): m/z 331 (М+Н)
Стадия 4: 2-хлор-6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (1.6 г, 0.0048 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (1.6 г, 0.00073 моль) взаимодействовали в 25 условиях для реакции Сузуки с палладием с получением соединения 117 (600 мг, 32% выход). LC/MS (ESI+): m/z 389 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.09 (s, 1Н), 7.00 (S, 1 Н), 4.23 (s, 2Н), 4.10 (t, J = 13.7 Hz, 2Н), 3.85 - 3.67 (m, 2Н)
Пример 118 (8)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 118
Раствор 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (5.0 г, 15 ммоль) в ТГФ (100 мл) охладили до -42°С и обработали раствором 2.5М n-Бутиллития (n-BuLi) в гексане (12.35 мл, 31 ммоль) по каплям в течение 5 минут. Через 15 мин при -42°С, добавили 2-бутанон (3.1 мл, 34 ммоль) и реакционную смесь медленно нагрели до 0°С в течение 2 ч. Смесь погасили водой и разбавили этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом (Зх), и объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ола в виде желто-оранжевой пены (колич.). LC/MS (ESI+): m/z 396 (М+Н)
Стадия 2: 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ол
Суспензию 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ола (3.87 г, 9.8 ммоль) в метаноле (110 мл) обработали п-толуолсульфоновой кислотой (170 мг, 0.98 ммоль) и нагревали в течение ночи при 50°С. Растворитель удалили под вакуумом с получением 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ола в виде белого осадка, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки (3.0 г, колич). LC/MS (ESI+): m/z 312 (М+Н)
2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ол (1.0 г, 3.3 ммоль) 5 растворили в ДМФ (13 мл) и обработали 1,2-дибромэтаном (0.57 мл, б.бммоль) и карбонатом цезия (3.2 г, 9.9 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 2 ч и охладили до комнатной температуры. Смесь разбавили водой и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с 10 помощью флеш-хроматографии с получением 2-хлор-6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина в виде белого осадка (730 мг, 66%). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 4.22 (m, 4Н), 4.01 (т, 2Н), 3.78 - 3.63 (т, 4Н), 2.01 (s, 2Н), 1.87 - 1.73 (т, 2Н), 1.49 (s, ЗН), 0.77 (t, J = 7.4 Hz, ЗН). LC/MS (ESI+): m/z 338 (М+Н)
15 Стадия 4: 2-хлор-6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (730 мг, 2.2 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (620 мг, 2.8 ммоль), и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (120 мг, 0.11 ммоль, 5.0 моль%), суспендированный в MeCN (5.2 мл) и 1.0М Na2C03(BoflH) (4.1 мл), нагревали под
20 воздействием микроволнового излучения при 140 °С в течение 15 минут. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью SFC (условия А) в течение 30 мин, 35 мл/мин] для разделения двух энантиомеров 118 и 120 с получением 118 в виде белого осадка (120 мг и 116 мг, 30%). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.09 (s, 2Н), 7.00
25 (s, 2Н), 4.29 - 4.01 (m, 8Н), 3.80 - 3.68 (т, 4Н), 2.00 (dq, J = 14.5, 7.3 Hz, 1 Н), 1.84 (dt, J = 14.4, 7.2 Hz, 1H), 1.52 (s, 3H), 0.82 (t, J = 7.3 Hz, 3H). LCMS: RT = 9.49 мин, M+H+ = 397.1. Энантиомеры 118 и 120 анализировались и разделялись хиральной LCMS, время хроматографирования = 1.20 мин и 1.65 мин с подвижной фазой А = С02, подвижная фаза В = метанол, изократический 25% В,скорость потока 5 мл/мин, 40
30 °С, ChiralCel OJ (4.6 х 50 мм, 3 микрон частицы, 230 нм УФ детекция, Berger Analytical SFC/MS.
Пример 119 5-(6,6,9-триметил-4-морфолино-6п-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 119
Стадия 1: метил 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноат
2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол ( 4.6 г, 15 ммоль) растворили в ДМФ (16 мл), обработали карбонатом цезия (10 г, 31 ммоль) и метил 2-бромпропаноатом (7.6 г, 46 ммоль), и нагревали при 50 °С в течение 3 ч. Частичная конверсия потребовала добавления карбоната цезия (10 г, 31 ммоль) и
10 метил 2-бромпропаноата (7.6 г, 46 ммоль), и реакционную смесь нагревали при 50 °С в течение 20 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и этилацетатом и слои разделили. Водную фазу экстрагировали этилацетатом (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с
15 получением метил 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноата в виде желтой пены (1.6 г, 26%). LC/MS (ESI+): m/z 384 (М+Н)
Стадия 2: 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаналь
20 Метил 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-
ил)пропаноат (1.6 г, 4.1 ммоль) растворили в ТГФ (30 мл) и охладили до -78 °С. Реакционную смесь обработали 1 .ОМ раствором лития тетрагидроалюмината в ТГФ (8.6 мл) и перемешивали при -78 °С в течение 1 ч. Насыщенный раствор NH4CI добавили и смесь разбавили ДХМ. Реакционную смесь обработали
насыщенным раствором сегнетовой соли и перемешивали на свету (on high) при комнатной температуре в течение 1 ч. Слои разделили и водную фазу экстрагировали ДХМ/МеОН (Зх), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с 5 получением 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаналя в виде белой пены (900 мг, 62%). LC/MS (ESI+): m/z 384 (М+Н)
Стадия 3: 2-хлор-6,6,9-триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
10 А раствор 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-
ил)пропаналя (900 мг, 2.5 ммоль) в толуоле (8.1 мл) обработали трифторуксусной кислотой (0.58 мл, 7.6 ммоль) и нагревали при 110°С в течение 4 ч. Частичная конверсия потребовала добавления трифторуксусной кислоты (1.0 мл) и смесь оставили перемешиваться в течение ночи при 110°С. Реакционную смесь охладили
15 до комнатной температуры и сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток перерастворили в ДХМ и абсорбировали на целите для очистки с помощью флеш-хроматографии с получением 2-хлор-6,6,9-триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина в виде осадка (190 мг, 22%). LC/MS (ESI+): m/z 336/338 (М+Н)
20 Стадия 4: 2-хлор-6,6,9-триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-
е]пурин (190 мг, 0.55 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (160 мг, 0.71 ммоль), и тетракис(трифенилфосфин)-палладий(О) (32 мг, 27 мкмоль, 5.0 моль%), суспендированный в MeCN (1.3 мл) и 1.0М Na2C03(BOflH) (1.0 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения
25 при 140 °С в течение 15 минут. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 119 в виде белого осадка (120 мг, 54%). LC/MS (ESI+): m/z 395 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.06 (s, 2Н), 7.03 (s, 2Н), 6.34 (s, 1Н), 4.24 (s, 4Н), 3.80 - 3.70 (m, 4Н), 2.52 (s, ЗН), 1.62 (s, 6Н). LCMS: RT =
30 4.57 мин, М+Н+ = 395.2
Пример 120 (Р)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 120
В соответствии со способом Примера 118, был выделен R-энантиомер 120.
Пример 121 5-(1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8п-7,10-диокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрен-3-ил)-пиримидин-2-иламин 121
Стадия 1: [4-(2,6-Дихлор-5-метокси-пиримидин-4-ил)-морфолин-3-ил]-метанол
Смесь 2,4,6-трихлор-5-метокси-пиримидина (1 г, 4.68 ммоль), морфолин-3-10 ил-метанола гидрохлорида (0.86 г, 5.6 ммоль) и триэтиламина (0.9 мл, 6.5 ммоль) в IMS (30 мл) перемешивали при КТ в течение 3 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, 0 - 50% этилацетат в циклогексане) с получением [4-(2,6-Дихлор-5-метокси-пиримидин-4-ил)-морфолин-3-ил]-метанола (614 мг, 45%). LCMS (способ A): RT = 15 2.63 мин, [М+Н]+ = 294/296.
Стадия 2: 1,3-Дихлор-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрен
Смесь [4-(2,6-дихлор-5-метокси-пиримидин-4-ил)-морфолин-3-ил]-метанола 20 (614 мг, 2.09 ммоль) и хлорида лития (246 мг, 5.80 ммоль) в безводном ДМФ (5 мл) нагревали при 160 °С в течение 10 минут в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом с получением 2,4-дихлор-6-(3-гидроксиметил-морфолин-4-ил)-пиримидин-5-ола. DIAD (452 мкл, 2.3 ммоль) добавили к раствору 2,4-дихлор-6-(3-гидроксиметил-морфолин-4-ил)-пиримидин-5-ола (2 ммоль) и 25 трифенилфосфина (603 мг, 2.3 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, 0 -50% этилацетат в циклогексане) с получением 1,3-дихлор-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрена (200 мг, 37%). LCMS (способ A): RT = 2.91 30 мин, [М+Н]+ = 262/264.
Стадия 3: З-хлор-1 -морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрен
Смесь
1,3-дихлор-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триаза-
5 фенантрена (100 мг, 0.38 ммоль), морфолина (80 мкл, 0.92 ммоль) и триэтиламина (70 мкл, 0.50 ммоль) в IMS (5 мл) нагревали при 140 °С в течение 25 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, от 0 - 10 до 15 -25% этилацетат в пентане) с получением З-хлор-1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-
10 тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрена (45 мг, 38%). LCMS (способ A): RT = 2.92 мин, [М+Н]+ = 313. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 4.37 (1Н, dd, J = 13.2, 3.0 Hz), 4.19 (1H, dd, J = 10.8, 3.3 Hz), 3.99 (1H, dd, J = 11.1, 3.9 Hz), 3.88 (1H, dd, J = 10.8, 3.2 Hz), 3.80 (dd, J = 11.1, 8.4 Hz ), 3.75 (4H, m), 3.66-3.53 (6H, m), 3.24 (1H, t, J = 11.1 Hz), 3.00 (1H, m).
15 Стадия 4: Смесь З-хлор-1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-
диокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрена (45 мг, 0.144 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-пиримидин-2-иламина (60 мг, 0.271 ммоль), PdCI2(PPh3)2 (10 мг, 0.014 ммоль) и карбоната натрия (460 мкл, 0.46 ммоль, 1М водный раствор) в ацетонитриле (2 мл) дегазировали и нагревали при 120 °С в
20 течение 30 минут в микроволновой печи. Реакционную смесь загрузили на картридж Isolute(r) SCX-2, который промыли метанолом и продукт элюировали 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратнофазовой ВЭЖХ (Phenomenex Gemini 5мкм С18, 0.1% НС02Н в воде на градиенте ацетонитрила 5-98%) с
25 получением соединения 121 в виде белого осадка (3 мг, 6%). LCMS (Способ В): RT = 3.08 мин, [М+Н]+ = 372. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 9.11 (2Н, s), 5.18 (2Н, broad s), 4.55 (1Н, dd, J = 13.5, 2.4 Hz), 4.22 (1H, dd, J = 10.8, 3.1 Hz), 4.05 (1H, dd, J = 11.5, 3.5 Hz), 3.88 (2H, m), 3.81 (4H, m), 3.69-3.56 (6H, m), 3.29 (1 H, t, J = 11.5 Hz), 3.02 (1H, m).
Пример 122 5-((8)-6-морфолин-4-ил-2,3,За,4-тетрагидро-1 Я-5-окса-7,9,9Ь-триаза-циклопента[а]нафтален-8-ил)-пиримидин-2-иламин 122
Стадия 1: [(S)-1 -(2,6-дихлор-5-метокси-пиримидин-4-ил)-пирролидин-2-ил]-метанол
Смесь 2,4,6-трихлор-5-метокси-пиримидина (1.2 г, 5.62 ммоль), (S)-1-пирролидин-2-ил-метанола (1.1 мл, 11.3 ммоль) и триэтиламина (1.08 мл, 7.75 ммоль) в IMS (36 мл) перемешивали при КТ в течение 20 минут, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, 0 - 50% этилацетат в циклогексане) с получением [(S)-1 -(2,6-дихлор-5-метокси-пиримидин-4-ил)-пирролидин-2-ил]-метанола (1.08 мг, 70%). LCMS (способ A): RT = 2.98 мин, [М+Н]+ = 278/280.
Стадия 2: (5)-6,8-дихлор-2,3,За,4-тетрагидро-1 Н-5-окса-7,9,9Ь-триаза-циклопента[а]нафтален
Смесь
[(3)-1-(2,6-дихлор-5-метокси-пиримидин-4-ил)-пирролидин-2-ил]-
метанол (900 мг, 3.24 ммоль) и хлорида лития (360 мг, 8.48 ммоль) в безводном ДМФ (10 мл) нагревали при 160 °С в течение 10 минут в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом с получением 2,4-дихлор-6-((5)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-пиримидин-5-ола. DIAD (700 мкл, 3.56 ммоль) добавили к раствору 2,4-дихлор-6-((8)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-пиримидин-5-ола (3 ммоль) и трифенилфосфина (900 мг, 3.43 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, 0 - 20% этилацетат в циклогексане) с получением (8)-6,8-дихлор-2,3,За,4-тетрагидро-1 Н-5-окса-7,9,9Ь-триаза-циклопента[а]нафталена. LCMS (способ A): RT = 2.98 мин, [М+Н]+ = 246/248.
Стадия 3: Смесь (8)-6,8-дихлор-2,3,За,4-тетрагидро-1 Н-5-окса-7,9,9Ь-триаза-циклопента[а]нафталена (290 мг, 1.18 ммоль), морфолина (275 мкл, 3.14 ммоль) и триэтиламина (242 мкл, 1.74 ммоль) в IMS (11 мл) нагревали при 140 °С в
течение 20 минут в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток перерастворили в ацетонитриле (2 мл) и добавили 5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-пиримидин-2-иламин (500 мг, 2.26 ммоль), PdCI2(PPh3)2 (88 мг, 0.125 ммоль) и карбонат натрия (4 мл, 4.0 ммоль, 1М 5 водный раствор). Реакционную смесь дегазировали и нагревали при 120 °С в течение 30 минут в микроволновой печи. Реакционную смесь загрузили на картридж Isolute(r) SCX-2, который промыли метанолом и продукт элюировали 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратнофазовой ВЭЖХ (Phenomenex
10 Gemini 5мкм С18, 0.1% НС02Н в воде градиент ацетонитрила 5-60%) с получением соединения 122 в виде белого осадка (30 мг, 8%). LCMS (Способ В): RT = 3.34 мин, [М+Н]+ = 356. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 9.15 (2Н, s), 5.14 (2Н, broad s), 4.48 (1Н, dd, J = 10.4, 3.5 Hz), 3.87-3.68 (ЮН, m), 3.62 (1H, m), 3.31 (1H, t, J = 10.1 Hz), 2.211.94 (3H, m), 1.50 (1H, m).
15 Также был выделен региоизомер, 5-((5)-8-морфолин-4-ил-2,3,За,4-
тетрагидро-1 Н-5-окса-7,9,9Ь-триаза-циклопента[а]нафтален-6-ил)-пиримидин-2-иламин (25 мг, 6%). LCMS (Способ В): RT = 2.47 мин, [М+Н]+ = 356. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 9.09 (2Н, s), 5.14 (2Н, broad s), 4.49 (1Н, dd, J = 10.8, 3.8 Hz), 3.803.65 (1 OH, m), 3.66 (1H, m), 3.34 (1H, t, J = 9.7 Hz), 2.20-1.94 (3H, m), 1.48 (1H, m).
Пример 123 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6И-[1,4]оксазино[3,4-
е]пурин-2-ил)анилин 123
К 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-
е]пурину из Примера 103 и, следуя Общей Методике А (266 мг, 0.82 ммоль), в 25 ацетонитриле (2.5 мл) добавили 4-аминофенилбороновой кислоты пинаколовый
эфир (270 мг, 1.2 ммоль) и 1.0 М карбоната цезия в воде (2.5 мл). Реакционную
смесь дегазировали в течение 5 минут и снова поместили в атмосферу азота.
После этого, добавили бис(ди-трет-бутил(4-
диметиламинофенил)фосфин)палладий(И) дихлорид (29 мг, 0.041 ммоль), и смесь 30 дегазировали и снова дегазировали. Реакционную пробирку затем подвергли
микроволновому излучению в течение 25 минут при 100 °С. Пробирку охладили до
комнатной температуры и экстрагировали дважды ЕЮАс. Высушили над MgS04, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Очистили посредством оф-ВЭЖХ с получением соединения 123 (151 мг, 48% выход). MS (ESI+): m/z 381.2 (М+НГ). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.08 (d, J= 8.5 Hz, 1Н), 6.59 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 5 5.42 (s, 1 H), 4.22 (s, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.80 - 3.67 (m, 2H), 1.57 (s, 3H) Пример 124 1 -(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6И-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-метилмочевина 124
К раствору 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)анилина 123 (0.44 г, 1.2 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (10 мл) добавили
10 триэтиламин (0.35 мл, 2.5 ммоль) и реакционную смесь охладили до 0 °С. Трифосген (0.17 г, 0.57 ммоль) добавили медленно и смесь затем нагрели до 70 °С в течение 1 ч. Реакционную смесь затем охладили до комнатной температуры для добавления 2.0 М метиламина в ТГФ (2.2 мл, 4.4 ммоль) и получившуюся реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. LC-
15 MS показала полную конверсию и в завершение реакционную смесь разбавили водой и ЕЮАс. Фазы разделили и водный слой экстрагировали Зх ЕЮАс. Органические экстракты собрали и высушили над MgS04, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Очистили посредством оф-ВЭЖХ с получением соединения 124 (122 мг, 25% выход). MS (ESI+): m/z 438.2 (М+Н+). 1Н NMR (400
20 MHz, ДМСО) 5 8.68 (s, 1Н), 8.24 (d, J = 8.7 Hz, 2Н), 7.48 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.04 (q, J = 4.4 Hz, 1H), 4.25 (s, 4H), 4.14 (d, J= 3.4 Hz, 4H), 3.82 - 3.67 (m, 4H), 2.66 (d, J= 4.6 Hz, 3H), 1.58 (s, 6H)
Пример 125 6,6-диметил-4-морфолино-2-(1 Н-пиразол-4-ил)-8,9-дигидро-6H-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 125
25 Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-пиразол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 125. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5
30 12.98 (s, 1Н), 8.23 (s, 1Н), 8.01 (s, 1Н), 4.22 (s, 4Н), 4.10 (s, 4Н), 3.80 -3.67 (m, 4Н), 1.57 (s, 6Н). LCMS: RT = 3.67 мин, М+Н+ = 356
Пример 126 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин 126
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
35 6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-амин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4
диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 126. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 7.99 (d, J = 5.3 Hz, 1Н), 7.41 (s, 1Н), 7.38 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 5.97 (s, 2H), 4.27 (s, 4H), 4.15 (d, J = 3.5 Hz, 4H), 3.82 - 3.71 (m, 4H), 1.59 (s, 6H). LCMS: RT = 3.64 мин, M+H+ = 5 382
Пример 127 6,6-диметил-2-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 127
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-
10 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 H-pyrazole (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 127. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.23 (s, 1Н), 7.93 (s, 1Н), 4.21 (s, 4Н), 4.10 (s, 4Н), 3.88 (s, ЗН), 3.73 (dd, J = 12.3, 7.7 Hz, 4Н), 1.57 (s, 6Н). LCMS: RT = 3.94 мин, M+H+ = 370
15 Пример 128 3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-
е]пурин-2-ил)фенол 128
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-
20 диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 128. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.41 (s, 1 Н), 7.82 (dd, J = 4.5, 2.5 Hz, 2Н), 7.28 - 7.20 (m, 1 Н), 6.82 (dd, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 4.26 (s, 4H), 4.19 - 4.08 (m, 4H), 3.82 - 3.71 (m, 4H), 1.59 (s, 6H). LCMS: RT = 4.46 мин, M+H+ = 382
25 Пример 129 2-(1 Н-индазол-5-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6H-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 129
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-
30 диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 129. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 13.11 (s, 1Н), 8.81 (s, 1Н), 8.48 - 8.43 (т, 1Н), 8.19 (s, 1Н), 7.58 (d, J = 8.8 Hz, 1Н), 4.29 (s, 4Н), 4.17 (dd, J = 16.1, 5.1 Hz, 4H), 3.82 - 3.74 (m, 4H), 1.60 (s, 6H). LCMS: RT = 4.47 мин, M+H+ = 406
Пример 130 6,6-диметил-2-(2-(4-метилпиперазин-1 -ил)пиридин-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 130
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-метил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-5 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 130. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5
8.21 (d, J = 4.7 Hz, 1Н), 7.68 (s, 1Н), 7.56 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 4.27 (s, 4H), 4.16 (d, J =
26.1 Hz, 4H), 3.77 (s, 4H), 3.55 (s, 4H), 2.46 (s, 4H), 2.25 (s, 3H), 1.59 (s, 6H). LCMS:
10 RT = 3.40 мин, M+H+ = 465
Пример 131 М-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)метансульфонамид 131
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), М-(2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-15 диоксаборолан-2-ил)фенил) метансульфонамид (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 131. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 12.87 (s, 1Н), 8.58 (d, J = 8.0 Hz, 1Н), 7.60 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.48 (t, J = 7.5 Hz, 1H),
7.22 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.26 (s, 4H), 4.16 (s, 4H), 3.78 (s, 4H), 3.07 (s, 3H), 1.62 (d, J =
20 11.5 Hz, 6H). LCMS: RT = 5.36 мин, M+H+ = 459
Пример 132 6,6-диметил-4-морфолино-2-(6-морфолинопиридин-3-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 132
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-25 диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)морфолин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 132. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.11 (s, 1Н),8.42 (d, J = 8.7 Hz, 1Н), 6.89 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.24 (s, 4H), 4.14 (s, 4H), 3.74 (d, J= 14.7 Hz, 8H), 3.55 (d, J = 3.9 Hz, 4H), 1.60 (d, J = 15.6 Hz, 6H). LCMS: RT = 30 3.79 мин, M+H+ = 452
Пример 133 2-(1-бензил-1 Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 133
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-бензил-4-(4,4,5,5-тетраметил-35 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-пиразол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль)
взаимодействовали с получением соединения 133. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.37 (s, 1Н), 7.99 (s, 1Н), 7.35 (d, J = 7.6 Hz, 2Н), 7.29 (d, J = 6.9 Hz, ЗН), 5.37 (s, 2H), 4.21 (s, 4H), 4.09 (s, 4H), 3.74 (s, 4H), 1.58 (d, J = 9.4 Hz, 6H). LCMS: RT = 4.82 мин, M+H+ = 446
5 Пример 134 2-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-
дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 134
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 2-изопропокси-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-10 диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 134. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.20 (S, 1 Н), 8.03 (d, J = 7.2 Hz, 1 Н), 7.07 - 6.99 (m, 1 Н), 5.43 - 5.31 (m, 1 Н), 4.22 (s, 4Н), 4.11 (s, 4Н), 3.73 (s, 4Н), 1.59 (s, 6Н), 1.26 (d, J = 6.1 Hz, 6H). LCMS: RT = 4.56 мин, M+H+ = 425
15 Пример 135 М-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетамид 135
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), М-(2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)ацетамид (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-
20 диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 135. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 12.45 (s, 1Н), 8.53 (d, J = 8.2 Hz, 1Н), 8.44 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.40 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.23 (t, J = 18.4 Hz, 4H), 4.16 (s, 2H), 3.78 (s, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.62 (d, J = 10.6 Hz, 6H). LCMS: RT = 5.16 мин, M+H+ = 423
25 Пример 136 2-(3,5-диметил-1 Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-
8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 136
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 3,5-диметил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-пиразол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-
30 бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 136. LCMS: RT = 3.81 мин, М+Н+ = 384
Пример 137 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-
е]пурин-2-ил)пиридин-2-ол 137
35 Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2
диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 137. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 11.82 (s, 1 Н), 8.34 (d, J = 9.7 Hz, 1 Н), 8.27 (s, 1Н), 6.41 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.22 (s, 4H), 5 4.12 (s, 4H), 3.75 (s, 4H), 1.57 (s, 6H). LCMS: RT = 3.95 мин, M+H+ = 383
Пример 138 6-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-3-амин 138
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-10 диоксаборолан-2-ил)пиридин-3-амин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 138. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.20 (s, 1Н), 8.91 (s, 1Н), 8.22 (d, J = 8.4 Hz, 1Н), 8.07 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 8.1, 4.3 Hz, 1H), 4.25 - 3.97 (m, 8H), 3.74 (d, J = 3.9 Hz, 4H), 1.55 (s, 6H). LCMS: RT = 15 3.44 мин, M+H+ = 382
Примеры 139 и 140 (Р)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 139 и (5)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 140
20 Стадия 1: 1-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-
пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанон
К смеси 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (1 г, 9 ммоль) в ТГФ (25 мл) при -78°С добавили тетраметилэтилендиамин (0.93 мл,
25 0.0062 моль) с последующим 2.5 М n-BuLi (2.5 мл, 0.0062 моль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 минут и затем добавили этилтрифторацетат (0.74 мл, 0.0062 моль), продолжили перемешивание в течение 2 часов при -78°С. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над
30 MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили с помощью ISCO
хроматографии с 0-100% ЕЮАс/гексан с получением чистого 1-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанона в виде белого осадка (2.5 г, 70% выход). LC/MS (ESI+): m/z 421 (М+Н)
Стадия 2: 1-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-5 пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанол
1-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанон (1.5 г, 0.0036 моль) в МеОН (22 мл) обработали тетрагидроборатом натрия (0.27 г, 0.0072 моль), и перемешивали при комнатной температуре в
10 течение 1 часа. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили хроматографией ISCO с 0-80% ЕЮАс/гексан с получением чистого 1-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанола (1.3 г, 86%
1-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанол
15 выход). LC/MS (ESI+): m/z 423 (М+Н)
1-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанол (1.3 г, 0.0031 моль) в МеОН (12 мл) обработали каталитическим
20 количеством п-толуолсульфоновой кислоты (53 мг, 0.00031 моль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали досуха с получением 1-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-
25 2,2,2-трифторэтанола (1 г, 100% выход). LC/MS (ESI+): m/z 338 (М+Н)
Смесь 1-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанола (1 г, 0.003 моль), 1,2-дибромэтана (0.51 мл, 0.006 моль) и карбоната цезия (2.9 г, 0.089 моль) в ДМФ (18 мл) нагревали при 90°С в течение 12 часов. Реакционную смесь отфильтровали и разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором и высушили над MgS04 и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии ISCO с 0-50% ЕЮАс/гексан с получением чистого 2-хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина (0.3 г, 30%). LC/MS (ESI+): m/z 364 (М+Н)
Стадия 5: 2-хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (140 мг, 0.0004 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (130 мг, 0.00058 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением рацемата 5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амина (36 мг, 32% выход), который разделили на (R) энантиомер 139 и (S) энантиомер 140. LC/MS (ESI+): m/z 423 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.11 (s, 2Н), 7.05 (s, 2Н), 5.88 (d, J= 6.8 Hz, 1 Н), 4.38 (t, J = 12.2 Hz, 2H), 4.35 - 4.09 (m, 6H), 3.76 (s, 4H)
Пример 141 2-(1 -этил-1 Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 141
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-этил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-пиразол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 141. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.26 (s, 1Н), 7.95 (s, 1Н), 4.28-4.12 (m, 6Н), 4.10 (s, 4Н), 3.78-3.69 (т, 4Н), 1.58 (s, 6Н), 1.40 (t, J = 7.3 Hz, ЗН). LCMS: RT = 4.13 мин, M+H+ = 384
Пример 142 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-1\1,1\1-диметилбензамид 142
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), М,М-диметил-4-(4,4,5,5-
5 тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-
бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль)
взаимодействовали с получением соединения 142. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5
8.42 (d, J = 8.2 Hz, 2Н), 7.49 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 4.28 (s, 4H), 4.16 (m, 4H), 3.81 - 3.73
(m, 4H), 3.06 - 2.87 (m, 6H), 1.60 (s, 6H). LCMS: RT = 4.60 мин, M+H+ = 437
10 Пример 143 трет-бутил 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6H-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил(метил)карбамат 143
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), трет-бутил метил (4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)карбамат (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-15 бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 143. LCMS: RT = 6.07 мин, М+Н+ = 495
Пример 144 2-(3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетонитрил 144
20 Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 2-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)ацетонитрил (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 144. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5
25 8.37 (s, 1Н), 8.35 (d, J = 7.8 Hz, 1Н), 7.50 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.28 (s, 4H), 4.21 - 4.11 (m, 6H), 3.84 - 3.70 (m, 4H), 1.59 (s, 6H). LCMS: RT = 5.11 мин, M+H+ = 405
Пример 145 6,6-диметил-4-морфолино-2-(3-морфолинофенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 145
30 Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)морфолин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 145. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5
35 7.96 (s, 1Н), 7.86 (d, J = 7.7 Hz, 1Н), 7.32 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 8.1, 2.2 Hz,
1Н), 4.25 (s, 4Н), 4.15 (m, 4Н), 3.77 (m, 8Н), 3.21 - 3.12 (m, 4Н), 1.59 (s, 6Н). LCMS: RT = 4.66 мин, M+H+ = 451
Пример 146 6,6-диметил-4-морфолино-2-(3-(морфолинометил)фенил)-8,9-
дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 146
5 Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)морфолин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 146. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 10 8.30 (s, 1Н), 8.27 (d, J = 7.3 Hz, 1Н), 7.46 - 7.34 (m, 2Н), 4.27 (s, 4Н), 4.16 (m, 4Н),
3.83 - 3.72 (m, 4Н), 3.58 (m, 4Н), 3.55 (s, 2Н), 2.38 (m, 4Н), 1.59 (s, 6Н). LCMS: RT =
3.84 мин, M+H+ = 465
Пример 147 2-(3-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 147
15 Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 2-(3-(бензилокси)фенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 147. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5
20 8.00 - 7.94 (m, 2Н), 7.50 (d, J = 7.2 Hz, 2Н), 7.44 - 7.37 (т, ЗН), 7.37 - 7.30 (т, 1Н), 7.14 - 7.07 (т, 1 Н), 5.20 (s, 2Н), 4.21 (s, 4Н), 4.15 (т, 4Н), 3.82 - 3.69 (т, 4Н), 1.59 (s, 6Н). LCMS: RT = 6.33 мин, М+Н+ = 472
Пример 148 2-(1-изобутил-1 Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 148
25 Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-изобутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-пиразол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 148. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5
30 8.24 (s, 1 Н), 7.95 (d, J = 8.5 Hz, 1 Н), 4.22 (s, 4Н), 4.10 (s, 4Н), 3.95 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.78 - 3.69 (m, 4H), 2.15 (dp, J = 13.8, 6.8 Hz, 1H), 1.57 (s, 6H), 0.86 (d, J = 6.7 Hz, 6H). LCMS: RT = 4.67 мин, M+H+ = 412
Пример 149 6,6-диметил-2-(6-(4-метилпиперазин-1 -ил)пиридин-3-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 149
35 Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-метил-4-(5-(4,4,5,5-тетраметил
1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)пиперазин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 149. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.08 (d, J = 2.3 Hz, 1Н), 8.39 (dd, J = 9.0, 2.3 Hz, 1H), 6.89 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 4.24 (s, 5 4H), 4.14 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.81 - 3.70 (m, 4H), 3.64 - 3.52 (m, 4H), 2.44 - 2.36 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.58 (s, 6H). LCMS: RT = 3.45 мин, M+H+ = 465
Пример 150 2-(1 Н-индазол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-
дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 150
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
10 6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазол 24 (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 150. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 13.16 (d, J = 20.9 Hz, 1Н), 8.91 (s, 1Н), 8.20 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 8.3 Hz, 1H),
15 7.45 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.28 (m, 6H), 4.17 (m, 2H), 3.85 - 3.75 (m, 4H), 1.61 (s, 6H). LCMS: RT = 4.61 мин, M+H+ = 406
Пример 151 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)бензонитрил 151
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
20 6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрил (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 151. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.54 (d, J = 8.5 Hz, 2Н), 7.94 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.28 (m, 4H), 4.16 (m, 4H), 3.77 (m,
25 4H), 1.60 (s, 6H). LCMS: RT = 5.53 мин, M+H+ = 391
Пример 152 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)никотинамид 152
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-
30 диоксаборолан-2-ил)никотинамид (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 152. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.61 (dd, J = 5.2, 2.0 Hz, 1Н), 9.08 (t, J = 2.7 Hz, 1H), 9.02 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.65 (s, 1H),4.30 (s, 4H), 4.18 (dt, J = 9.7, 4.5 Hz, 4H), 3.81 -3.71 (m, 4H), 1.60 (s,
35 6H). LCMS: RT = 3.71 мин, M+H+ = 410
Пример 153 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-1Ч-метил пикол инамид 153
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), М-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-5 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиколинамид (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 153. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.51 (S, 1 Н), 8.81 (d, J = 6.1 Hz, 1Н), 8.79 - 8.72 (m, 1 Н), 8.13 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.28 (m, 4H), 4.17 (m, 4H), 3.78 (m, 4H), 2.86 (d, J = 4.9 Hz, 3H), 1.60 (s, 6H). LCMS: RT = 10 4.64 мин, M+H+ = 424
Пример 154 2-(4-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 154
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 2-(4-(бензилокси)фенил)-4,4,5,515 тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 154. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.31 (t, J = 7.6 Hz, 2Н), 7.48 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.41 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.34 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 5.17 (s, 2H), 4.25 (s, 4H), 4.14 (dd, J = 6.7, 2.6 Hz, 4H), 20 3.81 - 3.71 (m, 4H), 1.58 (s, 6H). LCMS: RT = 6.21 мин, M+H+ = 472
Пример 155 3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-1\1,1\1-диметиланилин 155
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), М,М-диметил-3-(4,4,5,525 тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 155. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 7.80 (s, 1Н), 7.71 (d, J = 7.7 Hz, 1Н), 7.26 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 8.2, 2.5 Hz, 1H), 4.25 (s, 4H), 4.23 - 4.06 (m, 4H), 3.84 - 3.69 (m, 4H), 2.96 (s, 6H), 1.59 (s, 6H). 30 LCMS: RT = 3.88 мин, M+H+ = 409
Пример 156 6,6-диметил-2-(4-(4-метилпиперазин-1 -ил)фенил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 156
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-метил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-35 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)пиперазин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль)
взаимодействовали с получением соединения 156. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.22 (d, J = 8.9 Hz, 2Н), 6.98 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 4.24 (s, 4H), 4.13 (d, J = 3.2 Hz, 4H),
3.80 - 3.72 (m, 4H), 3.26 - 3.20 (m, 4H), 2.48 - 2.43 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 1.58 (s, 6H). LCMS: RT = 3.76 мин, M+H+ = 464
5 Пример 157 6,6-диметил-4-морфолино-2-(4-(пиперидин-1-ил)фенил)-8,9-
дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 157
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)пиперидин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-10 диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 157. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.21 (d, J = 8.9 Hz, 2Н), 6.96 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.23 (s, 4H), 4.13 (t, J = 4.8 Hz, 4H),
3.81 - 3.69 (m, 4H), 3.27 - 3.21 (m, 4H), 1.61 (m, 6H), 1.58 (s, 6H). LCMS: RT = 4.13 мин, M+H+ = 449
15 Пример 158 М-(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид 158
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), М-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-
20 диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 158. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 10.64 (s, 1Н), 9.23 (d, J = 2.2 Hz, 1Н), 8.63 (dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.27 (s, 4H), 4.15 (dd, J = 15.2, 5.1 Hz, 4H), 3.81 -3.71 (m, 4H), 2.12 (s, 3H), 1.59 (s, 6H). LCMS: RT = 3.95 мин, M+H+ = 424
25 Пример 159 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-
е]пурин-2-ил)пиколинамид 159
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиколинамид (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-
30 диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 159. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.52 (d, J = 1.8 Hz, 1Н), 8.81 (dd, J = 8.2, 2.1 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 4.29 (s, 4H), 4.18 (m, 4H), 3.83-3.71 (m, 4H), 1.60 (s, 6H). LCMS: RT = 4.39 мин, M+H+ = 410
Пример 160 6-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-3-ол 160
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-
5 диоксаборолан-2-ил)пиридин-3-ол (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-
диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль)
взаимодействовали с получением соединения 160. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5
8.24 (m, 2Н), 7.24 (dd, J = 8.6, 2.9 Hz, 1Н), 6.62 (s, 1Н), 4.25 (s, 4Н), 4.14 (d, J = 2.5 Hz,
4H), 3.81 - 3.70 (m, 4H), 1.59 (s, 6H). LCMS: RT = 3.73 мин, M+H+ = 383
10 Пример 161 (4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанон 161
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), (4-метилпиперазин-1-ил)(4-
(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метанон (0.31 ммоль), и
15 бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16
мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 161. 1Н NMR (400 MHz,
ДМСО) 5 8.43 (d, J = 8.2 Hz, 2Н), 7.47 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 4.28 (s, 4H), 4.21 - 4.08 (m,
4H), 3.82 - 3.71 (m, 4H), 3.62 (s, 4H), 2.33 (s, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.60 (s, 6H). LCMS: RT
= 3.64 мин, M+H+ = 492
20 Пример 162 М-циклопропил-3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)бензамид 162
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), М-циклопропил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-25 бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 162. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 8.77 (s, 1Н), 8.53 (d, J = 4.0 Hz, 1Н), 8.50 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.53 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 4.28 (s, 4H), 4.17 (dt, J = 9.5, 4.4 Hz, 4H), 3.84 - 3.70 (m, 4H), 2.88 (tq, J = 7.8, 4.0 Hz, 1H), 0.76 - 0.67 (m, 2H), 0.64 - 0.54 (m, 2H). LCMS: RT = 4.68 30 мин, M+H+ = 449
Пример 163 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-1\1,1\1-диметилпиразин-2-амин 163
Следуя Общей Методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), М,М-диметил-5-(4,4,5,535 тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразин-2-амин (0.31 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий (II) (11 мг, 16 мкмоль)
взаимодействовали с получением соединения 163. 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 9.04 (s, 1 Н), 8.21 (s, 1 Н), 4.24 (s, 4Н), 4.14 (t, J = 5.3 Hz, 4Н), 3.81 - 3.66 (m, 4Н), 3.15 (s, 6Н), 1.59 (s, 6Н). LCMS: RT = 3.93 мин, M+H+ = 411
Пример 167 2-(2-аминопиримидин-5-ил)-7-метил-4-морфолино-8,9-5 дигидропиразино[2,1-е]пурин-6(7Н)-он 167
Стадия 1: 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламид
Раствор
2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурина
10 (0.50 г, 1.55 ммоль) и N,N,N',N- тетраметилэтилендиамина (0.35 мл, 2.33 ммоль) в безводном ТГФ (14 мл) охладили до -78°С. По каплям добавили бутиллитий (2.5М в гексанах, 1.22 мл, 3.05 ммоль) и темно-желтый раствор перемешивали при -78 °С в течение 45 мин. Добавили N-сукцинимидила N-метилкарбамат (0.4 г, 2.33 ммоль) в виде суспензии в небольшом объеме ТГФ и смесь оставили нагреваться до 15 комнатной температуры с перемешиванием в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавили водой, нейтрализовали 1М соляной кислотой и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные экстракты высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергли флеш-хроматографии (Si02, градиент 0-100% этилацетат в циклогексане) с получением 220 хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламида (104 мг, 18%). LCMS RT= 3.26, [М+Н]+= 381/383
Стадия 2:
2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-карбоновой
кислоты
метиламид
2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламид (104 мг, 0.27 ммоль) суспендировали в метаноле (6 мл) и
добавили моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (10 мг, 0.05 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 68 ч, затем разбавили водой и нейтрализовали водным бикарбонатом натрия. Твердый преципитат отфильтровали и высушили при 50°С под вакуумом с получением 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламида (56 мг, 70%). LCMS RT= 2.43, [М+Н]+= 297/299
Стадия 3: 3-хлор-7-метил-1 -морфолин-4-ил-6,7-дигидро-5Н-2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорен-8-он -О.
-N N^N^CI
10 Смесь 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты
метиламида (56 мг, 0.19 ммоль), 1,2-дибромэтана (0.058 мл, 0.68 ммоль) и карбоната цезия ( 0.25 г, 0.76 ммоль) в ДМФ (2 мл) нагревали при 100 °С в течение 2 ч, затем охладили, разбавили водой и экстрагировали пять раз этилацетатом. Объединенные экстракты высушили (Na2S04) и сконцентрировали под вакуумом.
15 Получившийся остаток тритурировали дважды с диэтиловым эфиром и осадок высушили под вакуумом с получением 3-хлор-7-метил-1-морфолин-4-ил-6,7-дигидро-5Н-2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорен-8-она (47 мг, 77%). LCMS RT= 2.36, [М+Н]+= 323/325.
Стадия 4: Смесь 3-хлор-7-метил-1-морфолин-4-ил-6,7-дигидро-5Н-
20 2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорен-8-она (47 мг, 0.15 ммоль), 2-аминопиримидин-5-
бороновой кислоты пинаколового эфира (39 мг, 0.18 ммоль), и карбоната цезия
(131 мг, 0.40 ммоль) в 1,4-диоксане (1.5 мл) и воде ( 1.5 мл) продули аргоном.
Тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (9 мг, 0.008 ммоль) добавили, смесь снова
продули аргоном и затем нагревали при 100 °С в течение ночи. Смесь охладили и
25 разбавили водой. Преципитат отфильтровали, промыли водой, и затем
тритурировали с этанолом. Осадок отфильтровали и высушили (вакуум, 50°С) с
получением соединения 167 (15 мг, 26%). LCMS RT= 2.47, [М+Н]+= 382. 1Н NMR
(flMCO-d6 + dl-ТФУ, 400MHz): 5 9.38 (2Н, s), 4.79 -4.06 (4Н, v. broad), 4.44 (2Н, t, J =
6.0 Hz), 3.90 ( 2H, t, J = 6.0 Hz), 3.80 ( 4H, t, J = 4.7 Hz), 3.11 (3H, s).
30 Пример 168 5-(8,8-диметил-1 -морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-
2,4-диаза-флуорен-3-ил)-пиримидин-2-иламин 168
Тиено[3,2-с1]пиримидин-2,4(1 Н,ЗН)-дион (10.38 г, 61.72 ммоль) растворили в уксусной кислоте (230 мл) и добавили бром (11.13 мл, 216 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80 °С в течение 3.5 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью LCMS. Реакционную смесь медленно влили в ледяную воду и отфильтровали преципитат, который высушили в течение ночи под вакуумом с получением 7-бромтиено[3,2-с1]пиримидин-2,4(1 Н,ЗН)-диона (9.1 г, 60% выход)
Стадия 2: 7-бром-2,4-дихлортиено[3,2-с!]пиримидин
7-Бромтиено[3,2-с1]пиримидин-2,4(1 Н,ЗН)-дион (9.1 г, 37 ммоль) растворили в POCI3 (140 мл, 1500 ммоль) и нагревали при 110 °С с конденсационной колонкой vigreux, присоединенной на 20 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью LCMS. Медленно влили в ледяную воду и отфильтровали преципитат. Продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0 - 100% этилацетат/гептаны) на системе CombiFlash(r) (Teledyne Isco Co.) Rf и сконцентрировали под вакуумом с получением 7-бром-2,4-дихлортиено[3,2^]пиримидина (8.4 г, 80% выход)
Стадия 3: 4-(7-бром-2-хлортиено[3,2^]пиримидин-4-ил)морфолин
7-бром-2,4-дихлортиено[3,2^]пиримидин (2.9 г, 10.0 ммоль) растворили в метаноле (100 мл, 2000 ммоль) и добавили морфолин (2 мл, 22 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение 1.5 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью LCMS. Сконцентрировали под вакуумом и разбавили водой. Экстрагировали ДХМ и сконцентрировали под вакуумом снова. Продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0 - 100% этилацетат/гептаны) на системе CombiFlash(r) Rf и сконцентрировали под вакуумом с получением 4-(7
бром-2-хлортиено[3,2-с1]пиримидин-4-ил)морфолина (1.2 г, 35% выход). 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.78 (s, 1Н), 4.01 (m, 4Н), 3.85 (m, 4Н)
Стадия 4: 4-(2-хлор-7-винилтиено[3,2-с!]пиримидин-4-ил)морфолин
4-(7-бром-2-хлортиено[3,2-с1]пиримидин-4-ил)морфолин (3.55 г, 10.6 ммоль), (2-этенил)три-п-бутилолово (3.41 мл, 11.7 ммоль), Pd(PPh3)4 (613 мг, 0.53 ммоль), и 1,4-диоксан (30 мл, 400 ммоль) смешали в закрытой пробирке и нагревали при 100° С 19.5 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью LCMS. Сконцентрировали под вакуумом и очистили посредством хроматографии на силикагеле (0 - 50% этилацетат/гептаны) на системе CombiFlash(r) Rf и сконцентрировали под вакуумом с получением 4-(2-хлор-7-винилтиено[3,2-о!]пиримидин-4-ил)морфолина (1.18 г, 39.5% выход)
Стадия 5: 2-(2-хлор-4-морфолинотиено[3,2-с!]пиримидин-7-ил)этанол
4-(2-хлор-7-винилтиено[3,2-с1]пиримидин-4-ил)морфолин (170 мг, 0.6 ммоль) растворили в тетрагидрофуране (10 мл, ЮОммоль) и охладили до 0 °С в атмосфере азота. 0.5 М 9-BBN в гексанах (3.4 мл, 2 ммоль) добавили и реакционную смесь оставили нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. LCMS показало большее количество исходных веществ, так что реакционную смесь охладили до 0 °С снова и добавили 0.5 М 9-BBN в гексанах (8.0 мл, 4 ммоль) и оставили нагреваться до комнатной температуры и снова перемешивали в течение ночи. Добавили 20 М пероксид водорода (1.4 мл, 20 ммоль) с последующим 5 М гидроксидом натрия в воде (2.4 мл, 10 ммоль). Реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали этилацетатом, высушили над сульфатом магния и сконцентрировали под вакуумом и очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0 - 50% этилацетат/гептаны)
на системе CombiFlash(r) Rf и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-(2-хлор-4-морфолинотиено[3,2-с1]пиримидин-7-ил)этанола (110 мг, 61% выход)
Стадия 6: 2-(2-хлор-7-(2-гидроксиэтил)-4-морфолинотиено[3,2-с!]пиримидин-6-ил)пропан-2-ол
5 но
2-(2-хлор-4-морфолинотиено[3,2-с1]пиримидин-7-ил)этанол (70 мг, 0.2 ммоль) растворили в тетрагидрофуране (5 мл, бОммоль) и охладили до -40° С в атмосфере азота. Добавили 2.5 М n-BuLi в гексанах (370 мл, 0.93 ммоль) и оставили перемешиваться на 1 ч. Добавили ацетон (86 мкл, 1.2 ммоль) и снова
10 перемешивали при -40° С в течение 5 ч. Реакция не завершилась и её погасили насыщенным хлоридом аммония и экстрагировали этилацетатом, высушили над сульфатом магния и сконцентрировали под вакуумом с получением неочищенной смеси исходных веществ и 2-(2-хлор-7-(2-гидроксиэтил)-4-морфолинотиено[3,2-с1]пиримидин-6-ил)пропан-2-ола (30 мг)
15 Стадия 7: 3-хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-
тиа-2,4-диаза-флуорен
Загрязненный 2-(2-хлор-7-(2-гидроксиэтил)-4-морфолинотиено[3,2-с1]пиримидин-6-ил)пропан-2-ол (30 мг) растворили в толуоле (5 мл, 50 ммоль).
20 Добавили трифторуксусную кислоту (0.5 мл, 6 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 120 °С в течение двух часов. Завершение реакции подтвердили с помощью LCMS. Разбавили водой и экстрагировали этилацетатом, высушили над сульфатом магния, сконцентрировали под вакуумом и очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0 - 100% этилацетат/гептаны) на системе
25 CombiFlash(r) Rf, используя аминную колонку и сконцентрировали под вакуумом с
получением 3-хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-2,4-диаза-флуорена (10 мг, 10% выход)
Стадия 8: 3-хлор-8,8-диметил-1 -морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-2,4-диаза-флуорен (10 мг, 0.03 ммоль) растворили в ацетонитриле (2 мл, 40 5 ммоль) и добавили 1 М карбонат натрия в воде (2 мл, 2 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3-диоксолан-2-ил)пиримидин-2-амин (9.0 мг, 0.041 ммоль), и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(И) (1.1 мг, 0.001 бммоль). Реакционную смесь поместили в микроволновую печь Biotage при 120 °С в течение 15 минут. Водный слой удалили пипеткой и органический слой 10 сконцентрировали под вакуумом и очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0 - 100% этилацетат/гептаны) на системе CombiFlash(r) Rf, используя колонку с щелочным оксидом алюминия и сконцентрировали под вакуумом с получением (85% чистота) соединения 168 (2.7 мг, 20% выход). М+1: 399.3. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) 5 9.30 (s, 2Н), 5.34 (brs, 2Н), 4.08 (t, 2Н), 4.01 (m, 4Н), 3.87 (m, 4Н), 15 2.95 (t, 2Н), 1.62 (s, 6Н)
Пример 169 2-(1 Н-индазол-4-ил)-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 169
Стадия 1: 4-морфолино-2-(1 -(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1 Н-индазол-4-ил)-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
2-хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, из Примеров 139 и 140 (90 мг, 0.0002 моль) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1 Н-индазол (160 мг, 0.0005
25 моль) взаимодействовали с Pd(dppf)CI2 ([1,1'-
бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(И), комплекс с дихлорметаном) и карбонатом цезия в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением 4-морфолино-2-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1 Н-индазол-4-ил)-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина (90 мг,
30 90% выход). LC/MS (ESI+): m/z 530 (М+Н)
Стадия 2: 4-морфолино-2-(1 -(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1 Н-индазол-4-ил)-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (100 мг, 0.0002
моль) в МеОН (1 мл) обработали каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (3 мг, 0.02 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50 °С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, 5 солевым раствором, высушили над MgS04 и сконцентрировали досуха с получением соединения 169 (13 г, 16% выход). LC/MS (ESI+): m/z 446 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 13.16 (s, 1Н), 8.92 (s, 1Н), 8.22 (d, J= 7.2 Hz, 1Н), 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 7.47 (t, J= 7.8 Hz, 1 H), 5.93 (q, J= 6.8 Hz, 1H), 4.55 - 4.17 (m, 8H), 3.80 (t, J =4.6 Hz, 4H)
10 Пример 170 3-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенол 170
2-хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-
е]пурин, из Примеров 139 и 140 (50 мг, 0.00015 моль) и 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-
диоксаборолан-2-ил)фенол (76 мг, 0.00034 моль) взаимодействовали с Pd(dppf)CI2
15 и карбонатом цезия в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым
излучением с получением соединения 170 (10 мг, 15% выход). LC/MS (ESI+): m/z
422 (М+Н). 1Н NMR (400 MHz, ДМСО) 5 7.96 - 7.74 (m, 2Н), 7.26 (t, J = 8.1 Hz, 1Н),
6.83 (dt, J = 23.4, 11.6 Hz, 1H), 5.89 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.51 - 4.08 (m, 8H), 3.77 (t, J =
4.6 Hz, 4H), 1.23-0.98 (m, 1 H)
20 Пример 171 5-(4-((28,6Р)-2,6-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-
дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 171
Стадия 1: 2,6-Дихлор-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин CI
Смесь 2,6-дихлор-9Н-пурина (10.0 г, 53 ммоль), 3,4-дигидро-2Н-пирана (9.5 25 мл, 93 ммоль) и моногидрата п-толуолульфоновой кислоты (1.0 г, 5.0 ммоль) в ТГФ (100 мл) нагревали при 100 °С в течение 18 ч, затем охладили до КТ и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, 0 -10% этилацетат в циклогексане) с получением 2,6-дихлор-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурина в виде кремообразного осадка 30 (10.9 г, 75%). 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 8.33 (1Н, s), 5.77 (1Н, dd, J = 10.4, 2.4 Hz),
4.19 (1Н, m), 3.78 (1Н, dt, J = 11.6, 2.9 Hz), 2.17 (1H, m), 2.09 (1H, m), 1.98 (1H, m), 1.87-1.69 (3H, m).
Стадия 2: 2-[2,6-дихлор-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-пропан-2-ол
BuLi (20 мл, 40.0 ммоль, 2MB пентане) добавили по каплям к раствору 2,6-дихлор-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурина (8.0 г, 29.3 ммоль) и TMEDA (6.4 мл, 42.4 ммоль) в безводном ТГФ (100 мл) при - 78 °С. Получившийся темный раствор перемешивали при - 78 °С в течение 45 мин, затем добавили ацетон (4 мл, 54.5 10 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при - 78 °С в течение 30 мин, затем при КТ в течение 30 минут. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (MgS04) и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, 0 - 20% этилацетат в циклогексане) с получением 15 2-[2,6-дихлор-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-пропан-2-ола в виде темного осадка (6.0 г, 62%). 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 6.19 (1Н, dd, J = 11.2, 2.8 Hz), 4.26 (1H, m), 3.77 (1H, m), 2.87 (1H, m), 2.09 (1H, m), 1.90-1.71 (11H, m). Стадия 3: 2-(2,6-дихлор-9Н-пурин-8-ил)-пропан-2-ол CI
НО N N^CI
20 HCI (5 мл, 5 ммоль, 1 M водный раствор) добавили к раствору 2-[2,6-дихлор-
9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-пропан-2-ола (6.0 г, 20.66 ммоль) в смеси ДХМ (15 мл) и метанола (15 мл) и получившийся раствор перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, градиент 0 - 50% метанол в
25 ДХМ) с получением 2-(2,6-дихлор-9Н-пурин-8-ил)-пропан-2-ола в виде темного осадка (3.38 г, 66%). LCMS (способ A): RT = 2.12 мин, [М-Н] = 245/247. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 1.50 (6Н, s)
Карбонат цезия (9.3 г, 28.5 ммоль) и 1,2-дибромэтан (4.1 мл, 47.6 ммоль) 5 добавили к раствору 2-(2,6-дихлор-9Н-пурин-8-ил)-пропан-2-ола (3.3 г, 13.36 ммоль) в ДМФ (100 мл) и реакционную смесь нагревали при 100 °С в течение 2 ч, затем разделили между водой и этилацетатом. Органический экстракт отделили и промыли солевым раствором, затем высушили (MgS04) и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии 10 (Si02, 0 до 10 - 20% этилацетат в циклогексане) с получением 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорена в виде желтого осадка (1.0 г, 27%). 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 4.26 (2Н, dd, J = 6, 4 Hz), 4.19 (2H, dd, J = 6, 4 Hz).
Стадия 5: З-хлор-1 -((2Н!,68)-2,6-диметил-морфолин-4-ил)-8,8-диметил-15 5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорен
Смесь 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорена (100 мг, 0.366 ммоль), (2В;,68)-2,6-диметил-морфолина (84 мг, 0.732 ммоль) и триэтиламина (77 мкл, 0.55 ммоль) в IMS (2 мл) нагревали при 140 °С в
20 течение 20 минут в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, 10% этилацетат в циклогексане) с получением З-хлор-1-((2R,6S)-2,6-диметил-морфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорена в виде белого осадка (128 мг, 99%). LCMS (способ A): RT = 3.62 мин, [М+Н]+ = 352.
25 Стадия 6: Смесь З-хлор-1-((2R,6S)-2,6-диметил-морфолин-4-ил)-8,8-
диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорена (128 мг, 0.36 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-пиримидин-2-иламина (121 мг, 0.55 ммоль), PdCI2(PPh3)2 (26 мг, 0.036 ммоль) и карбоната натрия (1 мл, 1.0 ммоль, 1М водный раствор) в ацетонитриле (4 мл) дегазировали и нагревали при 120 °С в
течение 30 минут в микроволновой печи, затем просто нагревали при 100 °С в
течение 18 часов. Реакционную смесь загрузили на колонку Isolute(r) SCX-2,
которую промыли метанолом и продукт элюировали 2М аммиаком в метаноле.
Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся
5 остаток очистили обратнофазовой ВЭЖХ (Phenomenex Gemini 5мкм С18, 0.1%
НС02Н в воде градиент 5-98% ацетонитрил) с получением соединения 171 в виде
белого осадка (10 мг, 7%). LCMS (Способ В): RT = 4.14 мин, [М+Н]+ = 411. 1Н NMR
(400 MHz, CDCI3): 5 9.26 (2Н, s), 5.49-5.30 (2Н, v. broad s), 5.20 (2Н, broad s), 4.21
(2H, m), 4.15 (2H, m), 3.75 (2H, m), 2.80 (2H, m), 1.67 (6H, s), 1.30 (6H, d, J = 6.8 Hz)
10 Пример 172 5-(4-(2,2-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 172
Стадия 1: З-хлор-1-(2,2-диметил-морфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорен
Смесь
1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-
флуорена (100 мг, 0.366 ммоль), 2,2-диметил-морфолина (84 мг, 0.732 ммоль) и триэтиламина (77 мкл, 0.55 ммоль) в IMS (2 мл) нагревали при 140 °С в течение 20 минут в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, 10% 20 этилацетат в циклогексане) с получением З-хлор-1-(2,2-диметил-морфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорена в виде белого осадка (110 мг, 85%). LCMS (способ A): RT = 3.51 мин, [М+Н]+ = 352.
Стадия 2: Смесь З-хлор-1-(2,2-диметил-морфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорена (110 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,525 тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-пиримидин-2-иламина (104 мг, 0.47 ммоль), PdCI2(PPh3)2 (22 мг, 0.031 ммоль) и карбоната натрия (1 мл, 1.0 ммоль, 1М водный раствор) в ацетонитриле (4 мл) дегазировали и нагревали при 120 °С в течение 30 минут в микроволновой печи, затем нагревали при 100 °С в течение 18 часов. Реакционную смесь загрузили на колонку Isolute(r) SCX-2, которую промыли 30 метанолом и продукт элюировали 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратнофазовой ВЭЖХ (Phenomenex Gemini 5мкм С18, 0.1% НС02Н в воде
градиент 5-98% ацетонитрил) с получением соединения 172 в виде белого осадка (11 мг, 9%). LCMS (Способ В): RT = 4.00 мин, [М+Н]+ = 411. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 9.25 (2Н, s), 5.20 (2Н, broad s), 4.46-4.13 (8Н, m), 3.88 (2Н, m), 1.66 (6Н, s), 1.28 (6Н, s).
5 Пример 174 5-(4-((15,45)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)-6,6-
диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 174
Стадия 1: 3-хлор-8,8-диметил-1-(15,45)-2-окса-5-аза-бицикло[2.2.1]гепт-5-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорен
10 Смесь 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-
флуорена (100 мг, 0.366 ммоль), (18,48)-2-окса-5-аза-бицикло[2.2.1]гептана (73 мг, 0.732 ммоль) и триэтиламина (77 мкл, 0.55 ммоль) в IMS (2 мл) нагревали при 140 °С в течение 20 минут в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии
15 (Si02, 10% этилацетат в пентане) с получением 3-хлор-8,8-диметил-1-(18,48)-2-окса-5-аза-бицикло[2.2.1]гепт-5-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорена в виде желтого осадка (120 мг, 98%). LCMS (способ A): RT = 2.81 мин, [М+Н]+ = 336.
Стадия 2: Смесь 3-хлор-8,8-диметил-1-(18,48)-2-окса-5-аза-20 бицикло[2.2.1]гепт-5-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетрааза-флуорена (120 мг, 0.36 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-пиримидин-2-иламина (87 мг, 0.39 ммоль), Pd(PPh3)4 (21 мг, 0.018 ммоль) и карбоната цезия (163 мг, 0.5 ммоль) в смеси 1,4-диоксана (1.5 мл) и воды (0.5 мл) дегазировали и нагревали при 130 °С в течение 20 минут в микроволновой печи. Реакционную 25 смесь загрузили на колонку Isolute(r) SCX-2, которую промыли метанолом и продукт элюировали 2М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратнофазовой ВЭЖХ (Phenomenex Gemini 5мкм С18, 0.1% НС02Н в воде градиент 5-98% ацетонитрил) с получением соединения 174 в виде белого осадка (45 мг, 32%). 30 LCMS (Способ В): RT = 3.31 мин, [М+Н]+ = 395. 1Н NMR (400 MHz, flMCO-d6, 80 °С): 5 9.08 (2Н, s), 6.54 (2Н, broad s), 5.75 (1Н, broad s), 4.71 (1Н, s), 4.12 (4Н, m), 3.87
(1H, dd, J= 7.4, 1.4 Hz), 3.79 (2H, s), 3.75 (1H, d, J = 7.4 Hz), 1.95 (2H, s), 1.59 (6H, d, J = 6.7 Hz)
Пример 175 2-(2-аминопиримидин-5-ил)-6-метил-4-морфолино-6,7-
дигидропиразино[2,1-е]пурин-8(9Н)-он 175
5 Стадия 1: 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-
пурин-8-ил]-этанон
Раствор 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурина (0.50 г, 1.55 ммоль) и N,N,N',N- тетраметилэтилендиамина (0.35 мл, 2.33 ммоль) в
10 безводном ТГФ (14 мл) охладили до -78 °С. n-BuLi (2.5М в гексанах, 1.22 мл, 3.05 ммоль) добавили по каплям и смесь перемешивали при -78 °С в течение 40 мин. 1\1-метил-1\1-метоксиацетамид (0.25 мл, 2.33 ммоль) добавили по каплям и смесь перемешивали при -78 °С в течение 1.5 ч, затем дали нагреться до -30 °С. Добавили воду и затем 1М водную HCI и смесь экстрагировали семь раз
15 этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергли флеш-хроматографии (Si02), градиент 0-50% этилацетат в циклогексане с получением 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этанона (0.47 г, 83%). LCMS RT= 3.57 мин, [М+Н]+= 366/368
20 Стадия 2: 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-
пурин-8-ил]-этанол
К перемешанной суспензии 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этанона (0.47 г, 1.29 ммоль) в этаноле (8 мл) и ТГФ (8 25 мл) добавили борогидрид натрия (49 мг, 1.30 ммоль). Реакционную смесь
перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток растворили в этилацетате и водном бикарбонате натрия и фазы разделили. Водную фазу экстрагировали дважды этилацетатом. Объединенные органические фракции высушили (Na2S04), 5 отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этанола (0.50 г, количественно). LCMS RT= 3.20 мин, [М+Н]+= 368/370
Стадия 3: 8-(1 -Азидо-этил)-2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин
1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этанол (0.37 г, 1.01 ммоль) растворили в безводном толуоле (5.6 мл) и ДМФ (0.9 мл) и раствор охладили на льду. Добавили дифенилфосфорилазид (0.56 мл, 2.54 ммоль) и после по каплям добавили 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (0.37 мл, 2.54
15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем разбавили этилацетатом с последующей водой и фазы разделили. Водную фазу экстрагировали дважды этилацетатом и объединенные органические фракции высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток, вместе с неочищенным продуктом реакции, проведенной в
20 меньшем масштабе (0.10 г, 0.27 ммоль 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этанола), подвергли флеш-хроматографии (Si02) градиент 0-50% этилацетат в циклогексане с получением 8-(1-Азидо-этил)-2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурина в виде двух разделенных пар диастереомеров (0.25 г и 0.27 г, всего 0.52 г, 100%). LCMS RT= 4.05 мин,
25 [М+Н]+= 393/395. LCMS RT= 4.16 мин, [М+Н]+= 393/395
К раствору 8-(1 -азидо-этил)-2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-5 ил)-9Н-пурина (0.47 г, 1.20 ммоль) в ТГФ (13 мл) и воде (4 мл) добавили трифенилфосфин (0.33 г, 1.28 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70 °С в течение 2 ч, затем охладили до КТ. Этилацетат добавили и фазы разделили. Водную фазу экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические фракции высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом.
10 Получившийся остаток, вместе с неочищенным продуктом реакции, проведенной в меньшем масштабе (0.05 г, 0.14 ммоль 8-(1-азидо-этил)-2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурина), подвергли флеш-хроматографии (Si02) градиент 0-10% метанол в ДХМ). Элюированный материал, содержащий соединение, указанное в заголовке, и трифенилфосфиноксид подвергли флеш-
15 хроматографии (Si02) (градиент 0-20% метанол в ТВМЕ), и чистый материал с двух колонок объединили с получением 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этиламина (0.41 г, 84%, смесь двух пар диастереомеров). LCMS RT= 2.15 мин и 2.19 мин, [М+Н]+= 367/369
Стадия 5: 2-6poM-N-{1 -[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-
20 ил)-9Н-пурин-8-ил]-этил}-ацетамид
К раствору 1 -[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этиламина (0.25 г, 0.68 ммоль) в безводном ДХМ добавили бромид бромацетила (62 мкл, 0.74 ммоль) и триэтиламин (0.13 мл, 0.93 ммоль). Смесь 25 перемешивали при КТ. Через 2 ч, добавили другую порцию бромида бромацетила
(12 мкл) и перемешивание продолжили в течение 1.5 ч. Добавили воду, фазы разделили и водную фазу экстрагировали дважды ДХМ. Объединенные органические фракции высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-бром-1Ч-{1-[2-хпор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-5 пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этил}-ацетамида (385 мг, смесь двух пар диастереомеров), который использовали на следующей стадии без очистки. LCMS RT= 3.45 мин и 3.52 мин, [М+Н]+= 487/489/491
Стадия 6:
2-бром-М-[1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)-этил]-
2-бром-М-{1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этил}-ацетамид (неочищенный со стадии 5, 385 мг) растворили в метаноле (15 мл) и добавили моногидрат п-толуолульфоновой кислоты (35 мг). Смесь перемешивали при КТ в течение 16 ч. Добавили воду, водный бикарбонат натрия
15 добавили с получением рН 7 и отфильтровали преципитат, промыли водой и высушили (под вакуумом, 50 °С) с получением 2-бром-1Ч-[1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)-этил]-ацетамида (207 мг, 76%). Водный фильтрат экстрагировали три раза этилацетатом. Органический слой разделили и высушили (Na2S04), затем сконцентрировали под вакуумом с получением дополнительной
20 порции менее чистого 2-бром-г\1-[1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)-этил]-ацетамида (39 мг). LCMS RT= 2.57 мин, [М+Н]+= 403/405/407
Стадия 7: 3-хлор-8-метил-1 -морфолин-4-ил-7,8-дигидро-2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорен-6-он
Смесь 2-6poM-N-[1 -(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)-этил]-
ацетамида (275 мг, 0.68 ммоль) и карбоната цезия (0.48 г, 1.36 ммоль) в безводном ДМФ (10 мл) перемешивали при КТ в течение 2 ч, затем разбавили водой и
экстрагировали пять раз этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергали флеш-хроматографии (Si02) (градиент 0-5% метанол в ДХМ) с получением 3-хлор-8-метил-1-морфолин-4-ил-7,8-дигидро-5 2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорен-6-она (93 мг, 42%). LCMS RT= 2.41 мин, [М+Н]+= 323/325
Стадия 8:
Смесь
3-хлор-8-метил-1-морфолин-4-ил-7,8-дигидро-
2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорен-6-она (46 мг, 0.14 ммоль), 2-аминопиримидин-5-бороновой кислоты пинаколового эфира (78 мг, 0.36 ммоль), фторида калия (46 мг,
10 0.80 ммоль) и Pd(PPh3)4 (18 мг, 0.016 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (5 мл) нагревали при 100 °С в течение 16 ч. После охлаждения до КТ, смесь разбавили водой и образовавшийся преципитат отфильтровали и промыли водой. Осадок тритурировали с метанолом, ДХМ и в заключение с ацетонитрилом с получением соединения 175 (8 мг, 15%). LCMS RT= 2.59 мин, [М+Н]+= 382. 1Н NMR (flMCO-d6,
15 400 MHz): 5 9.11 (2Н, s), 8.68 (1Н, s), 7.05 (2Н, s), 4.84 (1Н, q, J = 6.9 Hz), 4.76 (1H, d, J = 17.2 Hz), 4 69 (1H, d, J = 17.2 Hz), 4.25 (4H, broad), 3.75 (4H, t, J = 4.5 Hz), 1.56 (3H, d, J = 6.9 Hz).
Пример 176 5-(6,7-диметил-4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиразино[2,1-
е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 176
20 Стадия 1: {1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-
пурин-8-ил]-этил}-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир
К раствору 1 -[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этиламина (0.41 г, 1.12 ммоль) в безводном ДХМ (10 мл) добавили
25 триэтиламин (0.17 мл, 1.23 ммоль) и ди-трет-бутил дикарбамат (0.268 г, 1.23 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч, затем промыли 10% водной лимонной кислотой. Водную фазу экстрагировали три раза ДХМ, и объединенные органические фракции высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток тритурировали с диэтиловым эфиром,
30 собрали фильтрацией и высушили (под вакуумом, 50 °С) с получением {1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этил}-карбаминовой
кислоты трет-бутилового эфира (0.425 г, 81%, смесь двух пар диастереомеров). LCMS RT= 4.06 и 4.13 мин, [М+Н]+= 467/469
Стадия 2: {1 -[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этил}-метил-карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир
Раствор {1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этил}-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (218 мг, 0.47 ммоль) в безводном ТГФ (15 мл) охладили до 0 °С. Добавили гидрид натрия (60% суспензия в масле, 22 мг, 0.56 ммоль) и смесь перемешивали при 0 °С в течение 30 мин.
10 Добавили йодометан (10 об.% раствор в ТГФ , 0.35 мл, 0.56 ммоль) и смесь перемешивали в течение 16 ч при КТ. Реакционную смесь смешали с другой смесью, полученной аналогичным образом из 210 мг карбамата исходного вещества, и разбавили водой. После доведения рН до 7 добавлением 1М водной HCI и водного бикарбоната натрия, смесь экстрагировали три раза этилацетатом.
15 Объединенные экстракты высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом, с получением смеси 2:1 соединения, указанного в заголовке, и карбамата исходного вещества (0.46 г). Эту смесь растворили в безводном ТГФ (20 мл) и обработали гидридом натрия (19 мг) и йодометаном (10 об.% раствор в ТГФ , 0.29mL) как и ранее. После добавления дополнительного йодометана (чистый,
20 0.050 мл) и перемешивания дополнительно в течение 8 ч, реакционную смесь разбавили водой, нейтрализовали и экстрагировали как указано ранее. Органические экстракты высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергли флеш-хроматографии (Si02) (градиент 0-20% этилацетат в циклогексане) с получением {1-[2-хлор-6-морфолин-
25 4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этил}-метил-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (316 мг, 72%). LCMS RT= 4.48 мин, [М+Н]+= 481/483
Стадия 3:
[1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)-этил]-метил-амин
- N
N Н
Смесь {1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидро-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]-этил}-метил-карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (316 мг, 0.66 ммоль) 5 и моногидрата п-толуолульфоновой кислоты (30 мг) в метаноле перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем оставили на 56 ч. Реакционную смесь сконцентрировали под вакуумом до небольшого объема, затем добавили ДХМ (3 мл) и трифторуксусную кислоту (3 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 4.75 ч при КТ. Другую порцию трифторуксусной кислоты (3 мл) добавили и
10 перемешивание продолжили в течение 2 ч. Смесь сконцентрировали под вакуумом и получившийся остаток тритурировали три раза с диэтиловым эфиром. Получившийся осадок разделили между 10% раствором метанола в ДХМ и водным бикарбонатом натрия. Фазы разделили, и водную фазу экстрагировали четыре раза 10% раствором метанола в ДХМ. Объединенные органические фракции
15 высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением [1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)-этил]-метил-амина (0.19 г, 97%). LCMS RT= 1.68 мин, [М+Н]+= 297
Стадия 4: 3-хлор-7,8-диметил-1 -морфолин-4-ил-5,6,7,8-тетрагидро-2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорен
Смесь: [1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)-этил]-метил-амина (95 мг, 0.32 ммоль), карбоната цезия (652 мг, 2 ммоль) и 1,2-дибромэтана (0.030 мл, 0.35 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при КТ в течение 4 ч. Другую порцию 1,2-дибромэтана (0.030 мл, 0.35 ммоль) добавили и перемешивание продолжили в 25 течение 20 ч. Реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали семь раз эфиром. Объединенные органические экстракты высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергли флеш-хроматографии (Si02) (градиент 0-4% метанол в ДХМ) с
получением 3-хлор-7,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6,7,8-тетрагидро-2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорена (76 мг, 74%). LCMS RT= 1.82 мин, [М+Н]+= 323/325
Стадия 5: Смесь 3-хлор-7,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6,7,8-тетрагидро-2,4,4Ь,7,9-пентааза-флуорена (70 мг, 0.22 ммоль), 2-аминопиримидин-5 5-бороновой кислоты пинаколового эфира (57 мг, 0.26 ммоль) и карбоната цезия (216 мг, 0.66 ммоль) в 1,4-диоксане (2.5 мл) и воде (2.5 мл) продули аргоном. Добавили Pd(PPh3)4 (12 мг, 0.011 ммоль), смесь продули аргоном снова и затем нагревали при 100 °С в течение 16 ч. Добавили дополнительную порцию боронатного эфира (29 мг) и Pd(PPh3)4 (6 мг) и нагревание продолжили в течение
10 5.5 ч. Смесь разбавили водой и экстрагировали пять раз этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (Na2S04), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергали флеш-хроматографии (Si02) (градиент 0-10% метанол в ДХМ) с получением соединения 176 (58 мг, 69%). LCMS RT= 2.11 мин, [М+Н]+= 382. 1Н NMR (flMCO-d6, 400 MHz: 5
15 9.08 (2Н, s), 7.01 (2Н, s), 4.24 (4Н, broad), 4.20 (1Н, т), 4.00 (1Н, т), 3.75 (4Н, t, J = 4.8 Hz), 3.55 (1Н, q, J = 6.6 Hz), 3.21 (1H, m), 2.78 (1H, m), 2.43 (3H, s), 1.50 (3H, d, J = 6.6 Hz).
Пример 177 5-(8,8-диметил-1 -морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-
триаза-флуорен-3-ил)-пиримид ин-2-иламин 177
20 Стадия 1: 7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин
Раствор 2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3^]пиримидина (1 г, 5.3 ммоль) в безводном ТГФ (5 мл) добавили к суспензии гидрида натрия (234 мг, 5.83 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в безводном ТГФ (15 мл) при 0 °С.
25 Получившуюся смесь перемешивали при 0 °С в течение 45 мин, и бензолсульфонилхлорид (1.12 г, 6.36 ммоль) добавили по каплям. Реакционную смесь оставили нагреваться до комнатной температуры и перемешивали при КТ в течение 1 ч. Реакционную смесь погасили насыщенным водным хлоридом аммония и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили
30 (Na2S04) и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток тритурировали с циклогексаном с получением 7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3
с1]пиримидина в виде желтого осадка (1.52 г, 87%). 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 8.24 (2Н, m), 7.76 (1Н, d, J = 4.0 Hz), 7.69 (1H, m), 7.58 (2H, m), 6.69 (1H, d, J = 4.0 Hz).
Стадия 2: 2-(2,4-Дихлор-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-6-ил)-пропан-2-ол CI
Лития диизопропиламид (2 мл, 4.0 ммоль, 2MB ТГФ ) добавили по каплям к раствору 7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3^]пиримидина (656 мг, 2.0 ммоль) в безводном ТГФ (15 мл) при - 78 °С. Получившийся раствор перемешивали при - 78 °С в течение 90 мин, затем добавили ацетон (0.4 мл, 5.5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при - 78 °С в течение 30 мин. Реакционную смесь погасили насыщенным водным хлоридом аммония и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (MgS04) и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-(7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-6-ил)-пропан-2-ола. К раствору 2-(7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-6-ил)-пропан-2-ола (2 ммоль) в смеси изопропилового спирта (11 мл) и воды (3 мл) добавили гидроксид натрия (6 мл, 36 ммоль, 6М водный раствор). Получившуюся смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, градиент 0 - 40% этилацетат в циклогексане) с получением 2-(2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-d]nnpHMHflHH-6-nn)-nponaH-2-ona (304 мг, 64%). LCMS (способ A): RT = 2.70 мин, [М]~ = 244/246.
Стадия 3: 3-хлор-8,8-диметил-1 -морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триаза-флуорен
Карбонат цезия (1.2 г, 3.7 ммоль) и 1,2-дибромэтан (316 мкл, 3.7 ммоль) добавили к раствору 2-(2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3^]пиримидин-6-ил)-пропан-2-ола (304 мг, 1.23 ммоль) в ДМФ (4 мл) и реакционную смесь нагревали при 100 °С в течение 45 мин, затем разделили между водой и этилацетатом. Органический экстракт отделили и промыли солевым раствором, затем высушили (Na2S04) и
сконцентрировали под вакуумом с получением 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триаза-флуорена. Смесь 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триаза-флуорена (1.23ммоль), морфолина (236 мкл, 2.69 ммоль) и триэтиламина (342 мкл, 2.46 ммоль) в IMS (3 мл) нагревали до кипения с 5 обратным холодильником в течение 3 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, градиент 0 - 40% этилацетат в циклогексане) с получением 3-хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триаза-флуорена (159 мг, 40%). LCMS (способ A): RT = 3.13 мин, [М+Н]+ = 323.
10 Стадия 4: Смесь 3-хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-
окса-2,4,4Ь-триаза-флуорена (75 мг, 0.23 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-пиримидин-2-иламина (115 мг, 0.52 ммоль), бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)-фосфин)дихлорпалладия(И) (25 мг, 0.035 ммоль) и карбоната натрия (1 мл, 1.0 ммоль, 1М водный раствор) в ацетонитриле
15 (3 мл) дегазировали и нагревали при 150 °С в течение 30 минут в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (Si02, градиент 0 - 75% этилацетат в циклогексане) с последующей обратнофазовой ВЭЖХ (Phenomenex Gemini 5мкм С18, 0.1% НС02Н в воде на градиенте ацетонитрила 5-98%) с получением
20 соединения 177 в виде серо-белого осадка (13 мг, 15%). LCMS (Способ В): RT = 3.50 мин, [М+Н]+ = 382. 1Н NMR (400 MHz, CDCI3): 5 9.27 (2Н, s), 6.12 (1Н, s), 5.27 (2Н, broad s), 4.21 (2Н, m), 4.14 (2Н, m), 3.97 (4Н, m), 3.88 (4Н, m), 1.62 (6Н, s) Пример 901 Анализ связывания р110а (альфа) PI3K
Анализы связывания: Первоначальные эксперименты поляризации 25 проводились на Analyst НТ(r) 96-384 (Molecular Devices Corp, Sunnyvale, CA.). Образцы для измерения аффинности флуоресцентной поляризации готовили добавлением 1:3 серийных разведений р110 альфа PI3K (Upstate Cell Signaling Solutions, Charlottesville, VA), начиная с конечной концентрации 20 мкг/мл в поляризационном буфере (10 мМ Трис, рН 7,5, 50 мМ NaCI, 4 мМ MgCI2, 0,05% 30 chaps, и 1 мМ DTT) до 10 мм PIP2 (Echelon-lnc., Salt Lake City, UT.) конечной концентрации. После инкубации в течение 30 минут при комнатной температуре, реакции остановили добавлением GRP-1 и Р1РЗ-ТАМРА-зонда (Echelon-lnc, Salt Lake City, UT.) 100 нм и 5 нм конечные концентрации соответственно. Считывали со стандартными пороговыми фильтрами для родаминового флуорофора (Аех = 35 530 нм; Лет = 590 нм) в 384-луночных черных планшетах малого объема Proxiplates (r) (PerkinElmer, Wellesley, MA). Значения флуоресцентной поляризации
были нанесены в виде функции концентрации белка, а значения ЕС50 были получены путем аппроксимации данных 4-параметрическом уравнении с использованием программного обеспечение KaleidaGraph(r) (Synergy Software, Reading, PA). Этот эксперимент также установил соответствующую концентрацию 5 белка для использования в последующих экспериментах конкуренции с ингибиторами.
Значения 1С50 ингибиторов определили путем добавления 0,04 мг/мл р110 альфа PI3K (конечная концентрация) в комбинации с PIP2 (10 мМ конечная концентрация) в лунки, содержащие 1:3 серийные разведения антагонистов в
10 конечной концентрации 25 мМ АТФ (Cell Signaling Technology , Inc, Danvers, MA) в поляризационном буфере. После инкубации в течение 30 минут при комнатной температуре, реакции остановили добавлением GRP-1 и PIPS-TAMRA-зонда (Echelon-lnc, Salt Lake City, UT.) 100 нм и 5 нм конечные концентрации соответственно. Считывали со стандартными пороговыми фильтрами для
15 родаминового флуорофора (Аех = 530 нм; Лет = 590 нм) в 384-луночных черных планшетах малого объема Proxiplates (r) (PerkinElmer, Wellesley, MA). Значения флуоресцентной поляризации были нанесены в зависимости от концентрации антагониста, а величины 1С50 были получены путем аппроксимации данных 4-параметрическом уравнении с использованием программного обеспечение Assay
20 Explorer (r) (MDL, San Ramon, СА.).
Альтернативно, ингибирование PI3K определяли с помощью радиометрического анализа с использованием очищенного, рекомбинантного фермента и АТФ в концентрации 1 мкМ. Соединения Формулы I последовательно разводили в 100% ДМСО. Киназную реакцию инкубировали в течение 1 часа при
25 комнатной температуре, и реакцию останавливали добавлением PBS. Значения IC50 впоследствии определялись с использованием аппроксимации сигмоидальной кривой доза-реакция (переменным наклоном). Примеры приведены в таблице 1. Пример 902 In vitro анализ пролиферации клеток
Эффективность соединений формулы I измеряли с помощью анализа 30 клеточной пролиферации в соответствии со следующим протоколом (Promega Corp. Technical Bulletin TB288; Mendoza et al (2002) Cancer Res. 62:5485-5488):
1. Аликвоту 100 мл клеточной культуры, содержащей приблизительно
104 клеток (РСЗ, Detroit562, или MDAMB361.1) в среде разлили в каждую лунку 384-
луночного планшета с непрозрачными стенками.
35 2. Контрольные лунки содержали среду и не содержали клеток.
3. Соединение добавили в экспериментальные лунки и инкубировали в течение 3-5 дней.
4. Планшеты доводили до комнатной температуры в течение приблизительно 30 минут.
5 5. Добавили объем реагента CellTiter-Glo(r) эквивалентный объему
клеточной среды, присутствующей в каждой лунке.
6. Содержимое перемешивали в течение 2 минут на орбитальном шейкере
для индукции лизиса клеток.
7. Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 10 минут
10 для стабилизации сигнала люминесценции.
8. Люминесценцию записали и выразили на графиках как RLU =
относительные единицы люминесценции.
Альтернативно, клетки высевали при оптимальной плотности в 96-луночный планшет и инкубировали в течение 4 дней в присутствии тестируемого соединения.
15 Впоследствии к среде для анализа добавили Alamar Blue(tm), и клетки инкубировали в течение 6 часов перед считыванием при 544 нм длине волны возбуждения, 590 нм эмиссии. ЕС50 значения были рассчитаны с использованием аппроксимации сигмоидальной кривой доза-эффект. Термин ЕС50 относится к половине максимальной эффективной концентрации и представляет собой концентрацию,
20 при которой лекарственное средство вызывает ответ на полпути между базовой линией и максимумом после некоторого заданного времени экспозиции. Он широко используется в качестве меры активности лекарственных средств.
Антипролиферативное действие типичных соединений формулы I измеряли с помощью CellTiter-Glo (r) Assay против различных опухолевых клеточных линий,
25 включая следующие:
Соединение №.
Клеточная линия: MDA-МВ-361.1
Тип ткани:грудная Изменения: PI3K ЕС50 (мкмоль)
Клеточная линия: РСЗ Тип ткани: prostate Изменения: PTEN ЕС50 (мкмоль)
101
0.315
0.208
103
0.269
0.44
115
0.958
1.8
121
0.36
122
3.2
138
10+
10+
139
0.424
0.697
148
10+
10+
163
10+
10+
165
1.2
1.3
168
0.237
0.215
169
4.4
6.9
170
0.92
1.1
171
3.1
3.8
172
1.5
1.4
174
3.4
3.6
176
0.889
1.9
177
0.094
0.185
Пример 903 Сасо-2 проницаемость
Сасо-2 клетки высевали на планшеты Millipore Multiscreen(r) при 5 концентрации 1 х 105 клеток/см2 и культивировали в течение 20 дней. Затем проводились оценка проницаемости соединений. Соединения наносили на апикальную поверхность (А) и монослоя клеток и измерялось проникновение соединений в базолатеральный компартмен (В). Аналогично делали для обратного направления (В-А), чтобы исследовать активный транспорт. Рассчитывали 10 значение коэффициента проницаемости, Рарр, для каждого соединения, скорость проникновения соединения через мембрану. Соединения сгруппировали в группы с низким (Рарр /= 1.0 х 106 см/с) потенциалом
абсорбции, основанном на сравнении с контрольными соединениями с известной абсорбцией для человека.
Для оценки способности соединения подвергаться активному выведению, определялось отношение базолатерального (В) к апикальному (А) транспорту по 5 сравнению с А к В. Значения ВА/АВ> /= 1,0 указывают на наличие активного клеточного выведения.
Пример 904 Клиренс гепатоцитов
Использовали суспензии криоконсервированных гепатоцитов человека. Инкубацию проводили при концентрации соединения 1 мМ или Змкм при плотности
10 клеток 0,5 * 106 живых клеток/мл. Конечная концентрация ДМСО в инкубационном объеме составляла около 0,25%. Контрольные инкубации также выполняются в отсутствие клеток для обнаружения любой неферментативной деградации. Повторы проб (50 мкл) удаляют из инкубационной смеси через 0, 5, 10, 20, 40 и 60 минут (контрольный образец только на 60 минут) и добавили к метанол
15 содержащему внутреннему стандарту (100 мкл) - остановить реакцию. Толбутамид, 7-гидроксикумарин и тестостерон могут быть использованы в качестве контрольных соединений. Образцы центрифугировали и надосадочную жидкость в каждый момент времени собирали для анализа LC-MS. Из графика In соотношения площади пиков (площадь пика исходного соединения/ площадь пика внутреннего
20 стандарта) от времени, собственный клиренс (CLint) рассчитывается следующим образом: CLint (мкл/мин/млн клеток) = V х к, где к - константа скорости элиминации, полученная из градиента концентрации In в зависимости от времени; V является
объемом, полученным из инкубационного объема и выражается как мкл 106 клеток"
25 Пример 905 Ингибирование цитохрома Р450
Соединения формулы I могут быть подвергнуты скринингу против CYP450 целей (1А2, 2С9, 2С19, 2D6, ЗА4) примерно при 10 концентрациях в повторе, с максимальной концентрацией около 100 мкм. Стандартные ингибиторы (фурафиллин, сульфафеназол, транилципромин, хинидин, кетоконазол) могут быть 30 использованы в качестве контроля. Планшеты могут быть считаны с помощью прибора LabTechnologies PolarStar(tm) в режиме флуоресценции. Пример 906 Индукция цитохрома Р450
Свежевыделенные гепатоциты человека от одного донора можно культивировать в течение приблизительно 48 часов перед добавлением 35 соединения формулы I в трех концентрациях и инкубировать в течение 72 часов. Зонды субстраты для CYP3A4 и CYP1A2 добавили в течение 30 минут и 1 часа до
завершения инкубации. Через 72 часа, клетки и среду удаляют и степень
метаболизма каждого субстрата зонда подсчитывают количественно с помощью
LC-MS/MS. Эксперимент контролируют с помощью индукторов отдельных
цитохромов Р450 инкубированных при одной концентрации в трех повторах.
5 Пример 907 Связывание протеинов плазмы
Растворы соединений формулы I (5 мкм, 0,5% конечная концентрация ДМСО) готовят в буфере и 10% плазме (об/об в буфере). 96-луночные планшеты НТ для диализа собраны таким образом, что каждая лунка разделена на две полупроницаемой целлюлозной мембраной. Буферный раствор добавляют с одной
10 стороны мембраны и раствор плазмы с другой стороны, затем проводят инкубацию при 37 ° С в течение 2 часов в трех повторах. Лунки последовательно освобождают, и растворы для каждой партии соединений объединяют в две группы (свободную от плазмы и плазмасодержащую), затем анализируют с помощью LC-MS/MS, используя два набора калибровочных стандартов для свободного от плазмы
15 раствора (6 баллов) и плазмасодержащего раствора (7 баллов). Рассчитывают значение несвязавшейся фракции.
Пример 908 Блокада каналов hERG
Соединения формулы I оценивали на способность модулировать отток рубидия из НЕК-294 клеток, стабильно экспрессирующие hERG калиевые каналы с
20 использованием установленной методологии потока. Клетки готовят в среде, содержащей RbCI, высевают на 96-луночные планшеты и выращивают в течение ночи, чтобы сформировать монослои. Эксперимент оттока инициируется аспирацией среды и промывания каждой лунки 3 х 100 мкл преинкубационного буфера (содержащего мало [К+]) при комнатной температуре. После
25 заключительной аспирации, 50 мкл рабочего стока (2х) соединения добавили в каждую лунку и инкубировали при комнатной температуре в течение 10 минут. Затем добавили стимулирующий буфер 50мкл (с высоким содержанием [К+]) в каждую лунку с получением конечных концентраций тестируемого соединения. Планшеты затем инкубировали при комнатной температуре в течение еще 10
30 минут. Супернатант 80мкл из каждой лунки затем переносят в эквивалентные лунки 96-луночного планшета и анализируют методом атомно-эмиссионной спектроскопии. Соединение подвергают скринингу как 10-точечные кривые IC50 в повторе, п = 2, от верхней концентрации 100 мкМ.
Пример 909 Ксенотрансплантат опухоли In Vivo
35 NCR "голым" мышам (Taconic Farms, IN) вводили подкожно в правый
боковой отдел грудной клетки 5 млн клеток U-87 MG Merchant (внутренний вариант,
полученный из варианта U-87 MG клеток из АТСС, Manassas, VA) в HBSS/Matrigel (1:1, об/об). Мышам с ксенотрансплантатами опухоли ежедневно вводили перорально через желудочный зонд в течение <28 дней лекарство или носитель и после разделили на различные дозовые группы по похожим размерам опухолей. 5 Размеры опухолей записывали по меньшей мере два раза в неделю в течение всего исследования. Веса тел мышей также записывали по меньшей мере дважды в неделю, и мышей наблюдали ежедневно. Измеряют объем опухоли в двух перпендикулярных измерениях (ширина и длина), используя ультра CAL IV штангенциркули (модель 54-10-111; Fred V. Fowler Co., Inc.; Newton, MA) и 10 анализировали с помощью Excel v.11.2 (Microsoft Corporation; Redmond, WA). Графики ингибирования опухоли строили с применением GraphPad Prism (tm), версия 5.0с (GraphPad Software, Inc.; La Jolla, CA). Объем опухоли рассчитывали по формуле: размер опухоли (мм3) = (большее измерение х меньшее измерение2) х 0,5.
15 Веса тела животных измеряли с помощью весов Adventurer Pro(tm) AV812
(Ohaus Corporation; Pine Brook, NJ). Графики были получены с использованием GraphPad Prism (tm), версия 5.0с. Изменение массы в процентах вычисляют по формуле: индивидуальный процент изменения веса = ((новый вес / начальный вес) -1) х 100.
20 Мыши, у которых объем опухоли превысил 2000 ммЗ или чьи потери массы
тела превышали 20% от их начального веса были подвергнуты эвтаназии в соответствии с нормативным руководством.
Процент ингибирования роста опухоли (% TGI) в конце исследования (EOS) рассчитывали по формуле:
25 % TGI= (1-[(АиС/день)обработка * (АиС/день)контроль]) X 100, где AUC/день
представляет собой площадь под аппроксимированной кривой роста опухоли в естественном масштабе, деленном на количество дней исследования. Log2 (объем опухоли) следы роста были аппроксимированы на каждую дозовую группу с ограниченными кубическими сплайнами для фиксированного времени и эффекта
30 дозы в каждой группе. Аппроксимация была сделана с помощью линейной модели смешанных эффектов, с помощью R пакета 'nlme', версия 3.1-97 (11) в версии R 2.12.0 (R Development Core Team 2008; R Foundation for Statistical Computing; Vienna, Austria).
Частичный ответ (PR) была определен как> 50% снижение начального 35 объема опухоли, которая никогда не даст полный ответ (CR) в любой день исследования. CR был определен как 100%-ное снижение начального объема
опухоли в любой день исследования. Исследование частоты опухолей (STI) отражает количество животных в группе с измеримой опухолью для их последнего измерения объема опухоли.
Линейный анализ смешанных эффектов также использовался для 5 моделирования процентного изменения веса тела с течением времени и в ответ на дозу.
Пример 910 анализ индукции фосфо АКТ.
В 6-луночные планшеты для культивирования тканей клетки засевали при плотности 5 х 105 клеток на лунку в течение ночи. Клетки обработали ЕС8о
10 соединения формулы I. После обработки клетки промыли один раз холодным PBS и лизировали в 1Х клеточного буфера для экстракции от Biosource (Carlsbad, СА) с добавлением ингибиторов протеаз (Roche, Mannheim, Germany), 1 мМ PMSF, и коктейлей ингибиторов фосфатазы 1 и 2 от Sigma (St. Louis, МО). Определение концентрации белка проводили с использованием Pierce ВСА Protein Assay Kit
15 (Rockford, IL). Уровни pAkt (Ser473) и общей Akt оценивались с помощью комплектов шариков Biosource (Carlsbad, СА) и системы Luminex(tm) Bio-Plex (Bio-Rad, Hercules, СА).
Пример 911 Анализ проницаемости/активности гематоэнцефалического барьера MDCKI-MDR1 и MDCKII-Bcrpl тестированием.
20 Madin-Darby клетки почек собак (MDCK), гетерологично экспрессирующие
либо человеческий гликопротеин Р или мышиный Всгр1 использовали для определения того, являются ли соединения субстратами для указанных транспортеров, и таким образом оценить потенциал для проникновения через гематоэнцефалический барьер. MDR1-MDCKI клетки получили от NCI
25 (Национальный институт рака, Bethesda, MD), Bcrpl-MDCKII клетки получили от Института рака Нидерланд (Амстердам, Нидерланды). Клетки высевали на 24-луночные фильтровальные планшеты Millipore за 4 дня перед использованием (полиэфирная мембрана, размер пор 1 мкм; Millipore, Billerica, MA) при плотности посева 1.3x105 клеток/мл. Соединения тестировали при концентрации 5 мкм в
30 апикально базолатеральном (АВ) и базолатерально апикальном (ВА) направлениях. Соединения растворяли в транспортном буфере, состоящем из сбалансированного солевого раствора Хэнка (HBSS) с 10 мМ HEPES (Invitrogen Corporation, Grand Island, NY). Lucifer Yellow (Sigma-Aldrich, St Louis, MO) использовали в качестве параклеточного маркера. Эффективная проницаемость
35 (Рарр) в А-В и В-А направлениях была рассчитана после 2-часовой инкубации с использованием следующего уравнения:
Papp = (dQ/dt) х 1/СоХ 1/А
где dQ/dt является скоростью появление соединения в принимающем компартменте, С0 является концентрацией в донорском компартменте и А является площадью поверхности вставки. Коэффициент оттока, определяемый как Рарр (В. 5 А)/Рарр А-В)> использовался для оценки масштабов активного оттока соединений с тестируемым транспортером (Р-гликопротеин или bcrpl). Соединения анализировали с помощью LC-MS/MS
Пример 912 Определение концентрации соединения в мозге
Мозги собрали через 1 и 6 часов после введения доз у 3 различных 10 животных в каждый момент времени, промыли ледяным солевым раствором, взвешивали и хранили при температуре -80 0 С до анализа. Для количественного определения соединение, мозг мыши гомогенизировали в 3 объемах воды. Гомогенатах экстрагировали путем осаждения белка с ацетонитрилом, содержащим внутренний стандарт. Проводили LC-MS/MS анализ. Концентрации в 15 гомогенатах мозга были преобразованы в мозговые концентрации для расчета соотношения мозга к плазме.
Пример 913 Измерение модуляции сигнального пути PI3K в мозге.
Для анализа модуляции сигнального пути PI3K буфер экстракции клеток (Invitrogen, Camarillo, СА), содержащей 10 мМ Трис, рН 7,4, 100 мМ NaCI, 1 мМ 20 ЭДТА, 1 мМ EGTA, 1 мМ NaF, 20 мМ Na4P207, 2 мМ Na3V04, 1% Тритон Х-100, 10% глицерина, 0,1% SDS, и 0,5% дезоксихолата дополнили фосфатазой, ингибиторами протеаз (Sigma, St Louis, МО) и 1 мМ PMSF и добавили к замороженным биоптатам мозга. Мозги, собранные через 1 и 6 часов после введения дозы, гомогенизировали небольшим пестиком (Konte Glass Company, Vineland, NJ), быстро обработали 25 ультразвуком на льду и центрифугировали при 20000 g в течение 20 минут при 4 0 С. Концентрацию белка определяли с помощью белкового анализа ВСА (Pierce, Rockford, IL). Белки разделяли с помощью электрофореза и переносили на NuPAGE нитроцеллюлозные мембраны (Invitrogen, Camarillo, СА). Использовали инфракрасную систему обнаружения Licor Odyssey(tm) (Licor, Lincoln, NE) для 30 количественной оценки экспрессии белка. Маркеры сигнального пути PI3K были оценены с помощью иммуноблоттинга с использованием антител против pAktser473 и общего Akt (Invitrogen, Camarillo, СА и Cell Signaling, Danvers, MA).
Пример 914 Анализ эффективности in vivo на опухоли мозга.
CD-1 "голые" мышам (Charles River Laboratories, Hollister, СА) были привиты 35 интракраниально с помощью стереотаксической хирургией клетки GS-2 (мультиформная глиобластома человека), созданные самостоятельно для
экспрессии люциферазы в HBSS. Мыши с подтвержденными ксенотрансплантатами мозга посредством магнитно-резонансной томографии (МРТ) на четвертой неделе после введения клеток получали один раз в день перорально через желудочный зонд в течение 28 дней лекарство или носитель и 5 после были разделены на группы с аналогичными размерами опухолей. MPT (4.7Т, Varian, Inc, Palo Alto, СА) повторили в конце 28-дневного периода дозирования для оценки реакции на лечение.
Веса тел мышей записывали по меньшей мере дважды в неделю, и мышей наблюдали ежедневно. Веса тел животных были измерены с помощью весов
10 Adventurer Pro(tm) AV812 (Ohaus Corporation; Pine Brook, NJ). Графики были получены с использованием GraphPad Prism, версия 5.0с. Изменение веса тела в процентах вычисляют по формуле: индивидуальный процент изменения веса = ((новый вес / начальный вес) -1) х 100. Мышей, потеря массы тела которых превышала 20% от их начального веса были подвергнуты эвтаназии в
15 соответствии с нормативным руководством.
Изменение объема опухоли было смоделировано как линейное за два раза, при котором каждое животное подвергалось МРТ. Линейная модель смешанных эффектов аппроксимировалась на эти данные с помощью 'nlme' пакета R версии 3.1-97, версия R 2.12.0 (R Development Core Team 2010; R Foundation for Statistical
20 Computing; Vienna, Austria). Модель смешанных эффектов учитывает повторные измерения на отдельных мышах в течение долгого времени и обрабатывает внутримышинные корреляции соответствующим образом. Линейный анализ смешанных эффектов также использовали для моделирования процентного изменения веса тела стечением времени.
25 Образцы плазмы и мозга собрали через 2 и 8 часов после введения
последнего лечения для фармакокинетического (РК), фармакодинамического (PD), и/или иммуногистохимического (IHC) анализа.
Пример 915 исследование In Vivo опухолевого ксенотрансплантата PK/PD показателей
30 NCR "голым" мышам (Taconic Farms, IN) вводили подкожно в правый
боковой отдел грудной клетки 5 млн клеток U-87 MG Merchant (внутренний вариант, полученный из варианта U-87 MG клеток из АТСС, Manassas, VA) в HBSS/Matrigel (1:1, об/об). Мышам с опухолевыми ксенотрансплантатами > 600 ммЗ вводили однократно лекарство или носитель после их разделили на группы с одинаковыми
35 размерами опухолей. Плазму, подкожный ксенотрансплантат опухоли, скелетные
мышцы, и образцы мозга собрали через 1, 4, 12 и 24 часа после лечебного введения для анализа РК, PD, и/или IHC.
Слова "содержит", "содержащий", "включает", "включающий" и "включает" при использовании в данном описании и в формуле изобретения, предназначены 5 для определения присутствия заявленных признаков, целых чисел, компонентов или стадий, при этом они не исключают наличия или добавления одного или более других признаков, целых чисел, компонентов, стадий или их групп.
Формула изобретения
Соединение, выбранное из Формулы I:
изомеры,
таутомеры
5 фармацевтически приемлемые соли, где:
прерывистая линия обозначает возможную двойную связь и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью;
X1 представляет собой S, О, N, NRa, CR1, C(R1)2, или -C(R1)20- ;
X2 представляет собой С, CR2 или N;
10 X3 представляет собой С, CR3 или N;
А представляет собой 5, 6 или 7-членое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, объединенное с X2 и X3, возможно замещенное одной или более группами R5;
Ra представляет собой Н, С1-С12 алкил, С2-С8 алкенил, С2-С8 алкинил, -(Ci-15 С12 алкилен)-(С3-С12 карбоциклил), -(С1-С12 алкилен)-(гетероциклил, обладающий 3-20 кольцевыми атомами), -(Ci-Ci2 алкилен)-С(=0)-(гетероциклил, обладающий 3-20 кольцевыми атомами), -(Ci-Ci2 алкилен)-(С6-С20 арил), и -(Ci-Ci2 алкилен)-(гетероарил, обладающий 5-20 кольцевыми атомами), где алкил, алкенил, алкинил, алкилен, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил возможно замещены
20 одной или более группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)з, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСНз, -СОС(СН3)з, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -
25 SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила;
R1, R2, и R3 независимо выбраны из Н, F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)з, -С02СН3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -
NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила; R4 выбран из С6-С20 арила, гетероциклила, обладающего 3-20 кольцевыми 5 атомами и гетероарила, обладающего 5-20 кольцевыми атомами, каждый из которых возможно замещен одной или более R6 группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН(СН3)2, -СН2СН(СН3)2, -СН2СН3, -CH2CN, -CN, -CF3, -СН2ОН, -C02H, -CONH2, -CONH(CH3), -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -NHCOCH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3,
10 OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -NHC(=0)NHCH(CH3)2, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(=0)OC(CH3)3, -S(0)2CH3, бензила, бензилокси, морфолинила, морфолинометила и 4-метилпиперазин-1-ила; и
R5 независимо выбран из Ci-Ci2 алкила, С2-С8 алкенила, С2-С8 алкинила, -(Ci-С12 алкилен)-(С3-С12 карбоциклила), -(Ci-С12 алкилен)-(гетероциклила,
15 обладающего 3-20 кольцевыми атомами), -(С^С^ алкилен)-С(=0)-(гетероциклила, обладающего 3-20 кольцевыми атомами), -(С^С^ алкилен)-(С6-С20 арила), и -(Ci-С12 алкилен)-(гетероарила, обладающего 5-20 кольцевыми атомами); или две, присоединенных к одному и тому же атому, R5 группы образуют 3, 4, 5, или 6-членный карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, где алкил, алкенил,
20 алкинил, алкилен, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил возможно замещены одной или более группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)з, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -
25 NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила; mor выбран из:
0 .о. .о. о.
С) Й В В Й
N N N N
1 I I I I
yf\J\r */W v/W4 v/W4 v/W4
ф Oo CO 00
II II
v/W4 ^f\nj\r v/WVP
возможно замещенных одной или более R7 группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН2СН2СН3, -СН(СН3)2, -С(СН3)3, -СН2ОСН3, -CHF2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -СН2СН2ОН, -СН2С(СН3)2ОН, -5 СН(СН3)ОН, -СН(СН2СН3)ОН, -СН2СН(ОН)СН3, -С(СН3)2ОН, -С(СН3)2ОСН3, -CH(CH3)F, -C(CH3)F2, -CH(CH2CH3)F, -C(CH2CH3)2F, -C02H, -CONH2, -CON(CH2CH3)2, -COCH3, -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH2CH2OH, -NHCH2CH2OCH3, -NHCOCH3, -NHCOCH2CH3, -NHCOCH2OH, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)S(0)2CH3, =0, -OH, -0CH3, -OCH2CH3, -10 OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -S(0)CH3, -S(0)CH2CH3, -S(0)2CH3, -S(0)2NH2, -S(0)2NHCH3, -S(0)2N(CH3)2 и -CH2S(0)2CH3.
2. Соединение по п.1, выбранное из Формул la-n:
3. Соединение по п. 1 или п. 2, где соединение выбрано из: la, lb, Id, lj и In.
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более группами R5.
5 5. Соединение по любому из пп. 1-4, где Формула la выбрана из
структур:
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более группами R5.
10 6. Соединение по любому из пп. 1-5, где Формула la представляет
собой:
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более группами R5.
15 7. Соединение по п. 1 или п. 2, где Формула If выбрана из структур:
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более группами R5.
8. Соединение по любому из пп. 1-7, где R4 представляет собой фенил,
5 замещенный одной или более группами, выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3,
-СН(СН3)2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -C02H, -CONH2, -CONH(CH3), -CON(CH3)2, -N02, -
NH2, -NHCH3, -NHCOCH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3,
OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3,
NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(=0)OC(CH3)3, и -S(0)2CH3.
10 9. Соединение по любому из пп. 1-7, где R4 представляет собой
возможно замещенную бициклическую гетероарильную группу, выбранную из 1Н-
индазола, 1Н-индола, индолин-2-она, 1-(индолин-1-ил)-этанола, 1Н-
бензо[с1][1,2,3]триазола, 1 Н-пиразоло[3,4-Ь]пиридина, 1 Н-пиразоло[3,4-с1]
пиримидина, 1 Н-бензо[о!]имидазола, 1Н-бензо[с1]имидазол-2(ЗН)-она, 1Н-
15 пиразоло[3,4-с]пиридина, 1Н-пирроло[2,3-с]пиридина, ЗН-имидазо[4,5-с]пиридина, 7Н-пирроло[2,3-с1]пиримидина, 7Н-пурина, 1Н-пиразоло[4,3-о!]пиримидина, 5Н-пирроло[3,2-с1]пиримидина, 2-амино-1Н-пурин-6(9Н)-она, хинолина, хиназолина, хиноксалина, изохинолина, изохинолин-1(2Н)-она, 3,4-дигидроизохинолин-1(2Н)-она, 3,4-дигидрохинолин-2(1Н)-она, хиназолин-2(1Н)-она, хиноксалин-2(1Н)-она,
20 1,8-нафтиридина, пиридо[3,4-с1]пиримидина и пиридо[3,2-Ь]пиразина.
10. Соединение по любому из пп. 1-7, где возможно замещенный R4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения.
11. Соединение по п. 9 или п. 10, где R4 представляет собой 1Н-индазол-
5 Фил.
12. Соединение по любому из пп. 1-7, где R4 представляет собой
возможно замещенную моноциклическую гетероарильную группу, выбранную из 2-
фуранила, 3-фуранила, 2-имидазолила, 4-имидазолила, 3-изоксазолила, 4-
изоксазолила, 5-изоксазолила, 2-оксазолила, 4-оксазолила, 5-оксазолила, 3-
10 пиразолила, 4 - пиразолила, 2-пиразинила, 3-пиридазинила, 4-пиридазинила, 5-
пиридазинила, 2-пиримидинила, 5-пиримидинила, 6-пиримидинила, 2-пиридила, 3-
пиридила, 4-пиридила, 2-пирролила, 3-пирролила, 2-тиенила, 3-тиенила, 5-
тетразолила, 1-тетразолила, 2-тетразолила, 2-тиазолила, 4-тиазолила, 5-
тиазолила, 3-триазолила и 1-триазолила.
15 13. Соединение по п. 12, где R4 представляет собой 2-аминопиримидин-
5-ил.
14. Соединение по любому из пп. 1-7, где возможно замещенный R4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения.
15. Соединение по любому из пп. 1-14, где одна или более групп R5
5 независимо выбрана из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -СН2СН2ОН,
-С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -
C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -
N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2,
N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, 10 циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила.
16. Соединение по любому из пп. 1-15 где две геминальные группы R5
образуют циклопропил, циклобутил, циклопентил, тетрагидрофуранил,
тетрагидропиранил, оксетанил, азетидинил, пирролидинил, пиперидил,
пиперазинил, циклогексил, морфолино или 1,1-диоксо-тиопиран-4-ил.
iy. Соединение по любому из пп.1-16, где mor представляет собой
чЛЛР
где волнистая линия обозначает место присоединения, возможно замещенный одной или более R7 трупами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -
5 СНз, -СН2СНз, -СН2СН2СНз, -СН(СН3)2, -С(СН3)з, -СН2ОСН3, -CHF2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -СН2СН2ОН, -СН2С(СН3)2ОН, -СН(СН3)ОН, -СН(СН2СН3)ОН, -СН2СН(ОН)СН3, -С(СН3)2ОН, -С(СН3)2ОСН3, -CH(CH3)F, -C(CH3)F2, -CH(CH2CH3)F, -C(CH2CH3)2F, -С02Н, -CONH2, -CON(CH2CH3)2, -COCH3, -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH2CH2OH, -NHCH2CH2OCH3, -10 NHCOCH3, -NHCOCH2CH3, -NHCOCH2OH, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -S(0)CH3, -S(0)CH2CH3, -S(0)2CH3, -S(0)2NH2, -S(0)2NHCH3, -S(0)2N(CH3)2, и -CH2S(0)2CH3.
15 18. Соединение по любому из пп. 1-17, выбранное из группы, состоящей
из:
1-[4-(За,8-диметил-7-морфолин-4-ил-3,За,8,8а-тетрагидро-2г1-1-окса-4,6,8-триаза-циклопента[а]инден-5-ил)-фенил]-3-этил-мочевина,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-20 4-метилпиримидин-2-амин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-(трифторметил)пиридил-2-амин, 25 5-(4-морфолино-8,9-дигидро-7г1-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-
амин,
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин, 30 5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-(трифторметил)пиридил-2-амин,
5-(4-морфолино-7,8-дигидро-6г1-пирроло[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-5-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин, 5 5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-циклопропан]-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6Г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-
амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан]-2-10 ил)пиримидин-2-амин,
5-(7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Г1-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин, 15 5-(6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
(8)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(6,6,9-триметил-4-морфолино-6Г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-20 ил)пиримидин-2-амин,
(Р)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Г1-7,10-диокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрен-3-ил)-пиримидин-2-иламин, 25 5-((Б)-6-морфолин-4-ил-2,3,За,4-тетрагидро-1/-/-5-окса-7,9,9Ь-триаза-циклопента[а]нафтален-8-ил)-пиримидин-2-иламин,
4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6/-/-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)анилин,
1-(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6/-/-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-30 ил)фенил)-3-метилмочевина,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(1Н-пиразол-4-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин,
35 6,6-диметил-2-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
3- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)фенол,
2-(1Н-индазол-5-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
5 6,6-диметил-2-(2-(4-метилпиперазин-1-ил) 13 уп'сНпе-4-ил)-4-морфолино-8,9-
дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
Ы-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)метансульфонамид,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(6-морфолинопиридин-3-ил)-8,9-дигидро-6Н-10 [1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(1-бензил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, 15 Ы-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетамид,
2-(3,5-диметил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
20 ил)пиридин-2-ол,
6- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиридин-3-амин,
(Р)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин, 25 (Б)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
2-(1-этил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
4- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
30 Ы,Ы-диметилбензамид,
трет-бутил 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил(метил)карбамат,
2-(3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетонитрил, 35 6,6-диметил-4-морфолино-2-(3-морфолинофенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(3-(морфолинометил)фенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(3-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, 5 2-(1-изобутил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
6,6-диметил-2-(6-(4-метилпиперазин-1-ил) 14 уп'а!те-3-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(1Н-индазол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-10 [1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
4- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)бензонитрил,
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)никотинамид,
15 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-N-метилпиколинамид,
2- (4-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
3- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
20 Ы.Ы-диметиланилин,
6,6-диметил-2-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(4-(пиперидин-1-ил)фенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, 25 Ы-(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид,
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиколинамид,
6- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
30 ил)пиридин-3-ол
(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанон,
Ы-циклопропил-3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)бензамид, 35 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-Ы,Ы-диметилпиразин-2-амин,
1-(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-этилмочевина,
1- (4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-изопропилмочевина,
5 2-(2-аминопиримидин-5-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,6-диил)диметанол,
2- (2-аминопиримидин-5-ил)-7-метил-4-морфолино-8,9-дигидропиразино[2,1-е]пурин-6(7Н)-он,
5-(8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-2,4-диаза-10 флуорен-3-ил)-пиримидин-2-иламин,
2- (1Н-индазол-4-ил)-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
3- (4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенол,
15 5-(4-((28,6Р)-2,6-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-(2,2-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
Ы-(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-20 ил)пиримидин-2-ил)ацетамид,
5-(4-((18,4Б)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
2-(2-аминопиримидин-5-ил)-6-метил-4-морфолино-6,7-дигидропиразино[2,1-е]пурин-8(9Н)-он,
25 5-(6,7-диметил-4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиразино[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин; и
(5-(8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триаза-флуорен-3-ил)-пиримидин-2-иламин.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому
30 из пп. 1-18 и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество,
разбавитель или эксципиент.
20. Фармацевтическая композиция по п. 19, также содержащая
дополнительный терапевтический агент, выбранный из химиотерапевтического
агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента,
35 нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для
лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
21. Способ лечения рака у пациента, включающий введение указанному
5 пациенту терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 1-
18, где рак представляет собой собой рак молочной железы, яичника, шейки матки,
предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани,
глиобластому, нейробластому, рак желудка, кожи, кератоакантому, рак легкого,
плоскоклеточный рак, крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого
10 (NSCLC), мелкоклеточный рак, аденокарциному легких, рак костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярную карциному, недифференцированную карциному, папиллярную карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков, карциному почки, рак почек, рак поджелудочной железы,
15 миелоидные нарушения, лимфому, "волосатые" клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, болезнь Ходжкина и лейкемию.
22. Способ по п. 21, где рак представляет собой рак мозга.
20 23. Способ по п. 21 или п. 22, также включающий введение пациенту
дополнительного терапевтического агента , выбранного из химиотерапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для
25 лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
24. Способ по п. 23, где дополнительный терапевтический агент
представляет собой бевацизумаб.
25. Соединение по любому из пп. 1-18 для применения в качестве 30 терапевтически активного вещества.
26. Применение соединения по любому из пп. 1-18 для лечения рака.
27. Применение соединения по любому из пп. 1-18 для получения
лекарственного средства для лечения рака.
28. Соединение по любому из пп. 1-18 для применения при лечении рака.
35 29. Изобретение как здесь раскрыто.
и его стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и 5 фармацевтически приемлемые соли, где:
прерывистая линия обозначает возможную двойную связь и по меньшей
мере одна прерывистая линия является двойной связью;
X1 представляет собой N, CR1 или -C(R1)20- ;
X2 представляет собой N;
10 X3 представляет собой С, CR3;
А представляет собой 5, 6 или 7-членое карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, объединенное с X2 и X3, возможно замещенное одной или более группами R5;
R1 и R3 независимо выбраны из Н, F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -
15 СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -
СОС(СН3)3, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -
NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -
N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3,
циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила;
20 R4 выбран из С6-С20 арила, гетероциклила, обладающего 3-20 кольцевыми
атомами и гетероарила, обладающего 5-20 кольцевыми атомами, каждый из которых возможно замещен одной или более R6 группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН(СН3)2, -СН2СН(СН3)2, -СН2СН3, -CH2CN, -CN, -CF3, -СН2ОН, -C02H, -CONH2, -CONH(CH3), -CON(CH3)2, -N02, -25 NH2, -NHCH3, -NHCOCH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3,
OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -NHC(=0)NHCH(CH3)2, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(=0)OC(CH3)3, -S(0)2CH3, бензила, бензилокси, морфолинила, морфолинометила и 4-метилпиперазин-1-ила; и
R5 независимо выбран из Ci-Ci2 алкила, С2-С8 алкенила, С2-С8 алкинила, -30 (С!-С12 алкилен)-(С3-С12 карбоциклила), -(С!-С12 алкилен)-(гетероциклила,
обладающего 3-20 кольцевыми атомами), -(С1-С12 алкилен)-С(=0)-(гетероциклила, обладающего 3-20 кольцевыми атомами), -(С1-С12 алкилен)-(С6-С2о арила), и -(С1-С12 алкилен)-(гетероарила, обладающего 5-20 кольцевыми атомами); или две, присоединенных к одному и тому же атому, R5 группы образуют 3, 4, 5, или 65 членный карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, где алкил, алкенил, алкинил, алкилен, карбоциклил, гетероциклил, арил, и гетероарил возможно замещены одной или более группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СНз, -С(СН3)з, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)з, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -10 CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила; mor выбран из:
0 .(X .О. /О о.
й В й й
N N N
1 I I I I
v/W4 v/W4 v/W4 v/W4 JW
0 CO CO CO
15 v/W4 v/VVV4 vA/W4 yJ\nj\r
возможно замещенных одной или более R7 группами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН2СН2СН3, -СН(СН3)2, -С(СН3)3, -СН2ОСН3, -CHF2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -СН2СН2ОН, -СН2С(СН3)2ОН, -СН(СН3)ОН, -СН(СН2СН3)ОН, -СН2СН(ОН)СН3, -С(СН3)2ОН, -С(СН3)2ОСН3, -
20 CH(CH3)F, -C(CH3)F2, -CH(CH2CH3)F, -C(CH2CH3)2F, -C02H, -CONH2, -CON(CH2CH3)2, -COCH3, -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH2CH2OH, -NHCH2CH2OCH3, -NHCOCH3, -NHCOCH2CH3, -NHCOCH2OH, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -S(0)CH3, -S(0)CH2CH3, -
25 S(0)2CH3, -S(0)2NH2, -S(0)2NHCH3, -S(0)2N(CH3)2 и -CH2S(0)2CH3.
mor
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более группами R5.
где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более группами R5.
5. Соединение по п. 2, где Формула 1а представляет собой: тог
5 где А гетероциклическое кольцо возможно замещено одной или более
группами R5.
6. Соединение по любому из пп. 1-5, где R4 представляет собой фенил, замещенный одной или более группами, выбранными из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН(СН3)2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -C02H, -CONH2, -CONH(CH3), -CON(CH3)2, -N02, -
10 NH2, -NHCH3, -NHCOCH3, -OH, -OCH3, -OCH2CH3,
OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3,
NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(=0)OC(CH3)3, и -S(0)2CH3.
7. Соединение по любому из пп. 1-5, где R4 представляет собой возможно замещенную бициклическую гетероарильную группу, выбранную из 1Н-
15 индазола, 1Н-индола, индолин-2-она, 1-(индолин-1-ил)-этанола, 1Н-бензо[о!][1,2,3]триазола, 1 Н-пиразоло[3,4-Ь]пиридина, 1 Н-пиразоло[3,4-с1] пиримидина, 1 Н-бензо[с1]имидазола, 1Н-бензо[с1]имидазол-2(ЗН)-она, 1Н-пиразоло[3,4-с]пиридина, 1 Н-пирроло[2,3-с]пиридина, ЗН-имидазо[4,5-с]пиридина, 7Н-пирроло[2,3-с1]пиримидина, 7Н-пурина, 1Н-пиразоло[4,3-с1]пиримидина, 5Н-
20 пирроло[3,2-с1]пиримидина, 2-амино-1Н-пурин-6(9Н)-она, хинолина, хиназолина, хиноксалина, изохинолина, изохинолин-1(2Н)-она, 3,4-дигидроизохинолин-1(2Н)-она, 3,4-дигидрохинолин-2(1Н)-она, хиназолин-2(1Н)-она, хиноксалин-2(1Н)-она, 1,8-нафтиридина, пиридо[3,4-с!]пиримидина и пиридо[3,2-Ь]пиразина.
8. Соединение по любому из пп. 1-5, где возможно замещенный R4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения.
9. Соединение по п. 7, где R4 представляет собой 1Н-индазол-4-ил.
5 10. Соединение по любому из пп. 1-5, где R4 представляет собой
возможно замещенную моноциклическую гетероарильную группу, выбранную из 2-фуранила, 3-фуранила, 2-имидазолила, 4-имидазолила, 3-изоксазолила, 4-изоксазолила, 5-изоксазолила, 2-оксазолила, 4-оксазолила, 5-оксазолила, 3-пиразолила, 4 - пиразолила, 2-пиразинила, 3-пиридазинила, 4-пиридазинила, 510 пиридазинила, 2-пиримидинила, 5-пиримидинила, 6-пиримидинила, 2-пиридила, 3-пиридила, 4-пиридила, 2-пирролила, 3-пирролила, 2-тиенила, 3-тиенила, 5-тетразолила, 1-тетразолила, 2-тетразолила, 2-тиазолила, 4-тиазолила, 5-тиазолила, 3-триазолила и 1-триазолила.
11. Соединение по п. 10, где R4 представляет собой 2-аминопиримидин-
15 5-ил.
12. Соединение по любому из пп. 1-5, где возможно замещенный R4 выбран из:
5 где волнистая линия обозначает место присоединения.
13. Соединение по любому из пп. 1-12, где одна или более групп R5 независимо выбрана из F, CI, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -С(СН3)3, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -СН2ОСН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -С02Н, -СОСН3, -СОС(СН3)3, -C02CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -N02, -NH2, -NHCH3, -
10 N(CH3)2, -NHCOCH3, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2,
N(CH3)CH2CH2S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -S(0)2N(CH3)2, -SCH3, -S(0)2CH3, циклопропила, циклобутила, оксетанила, морфолино и 1,1-диоксо-тиопиран-4-ила.
14. Соединение по любому из пп. 1-13 где две геминальные группы R5 образуют циклопропил, циклобутил, циклопентил, тетрагидрофуранил,
15 тетрагидропиранил, оксетанил, азетидинил, пирролидинил, пиперидил, пиперазинил, циклогексил, морфолино или 1,1-диоксо-тиопиран-4-ил.
15. Соединение по любому из пп.1-14, где mor представляет собой
v/WP
где волнистая линия обозначает место присоединения, возможно замещенный одной или более R7 трупами, независимо выбранными из F, CI, Br, I, -
5 СНз, -СН2СН3, -СН2СН2СНз, -СН(СН3)2, -С(СН3)3, -СН2ОСН3, -CHF2, -CN, -CF3, -СН2ОН, -СН2ОСН3, -СН2СН2ОН, -СН2С(СН3)2ОН, -СН(СН3)ОН, -СН(СН2СН3)ОН, -СН2СН(ОН)СН3, -С(СН3)2ОН, -С(СН3)2ОСН3, -CH(CH3)F, -C(CH3)F2, -CH(CH2CH3)F, -C(CH2CH3)2F, -C02H, -CONH2, -CON(CH2CH3)2, -COCH3, -CON(CH3)2, -N02, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH2CH2OH, -NHCH2CH2OCH3, -10 NHCOCH3, -NHCOCH2CH3, -NHCOCH2OH, -NHS(0)2CH3, -N(CH3)S(0)2CH3, =0, -OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -SH, -NHC(=0)NHCH3, -NHC(=0)NHCH2CH3, -S(0)CH3, -S(0)CH2CH3, -S(0)2CH3, -S(0)2NH2, -S(0)2NHCH3, -S(0)2N(CH3)2, и -CH2S(0)2CH3.
15 16. Соединение по п. 1, выбранное из группы, состоящей из:
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
4-метилпиримидин-2-амин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиримидин-2-амин,
20 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-(трифторметил)пиридил-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-7г1-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-
амин,
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-
25 амин,
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин, 5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-
(трифторметил)пиридил-2-амин,
5-(4-морфолино-7,8-дигидро-6г1-пирроло[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин, 30 6,6-диметил-4-морфолино-2-(1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-5-ил)-8,9-дигидро-
6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-циклопропан]-2-ил)пиримидин-2-амин, 5 5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6Г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан]-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Г1-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-10 ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин,
5-(6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин, 15 (8)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(6,6,9-триметил-4-морфолино-6Г1-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
(Р)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-20 е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Г1-7,10-диокса-2,4,4Ь-триаза-фенантрен-3-ил)-пиримидин-2-иламин,
5-((Б)-6-морфолин-4-ил-2,3,За,4-тетрагидро-1/-/-5-окса-7,9,9Ь-триаза-циклопента[а]нафтален-8-ил)-пиримидин-2-иламин, 25 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6/-/-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)анилин,
1-(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6/-/-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-метилмочевина,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(1Н-пиразол-4-ил)-8,9-дигидро-6Н-30 [1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин,
6,6-диметил-2-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, 35 3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенол,
2-(1Н-индазол-5-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
6,6-диметил-2-(2-(4-метилпиперазин-1-ил) 11 уп'сНпе-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, 5 Ы-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)метансульфонамид,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(6-морфолинопиридин-3-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(1-бензил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-10 [1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
Ы-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетамид,
15 2-(3,5-диметил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиридин-2-ол,
6- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
20 ил)пиридин-3-амин,
(Р)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
(Б)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин, 25 2-(1-этил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-Ы,Ы-диметилбензамид,
трет-бутил 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-30 е]пурин-2-ил)фенил(метил)карбамат,
2-(3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетонитрил,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(3-морфолинофенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, 35 6,6-диметил-4-морфолино-2-(3-(морфолинометил)фенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(3-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(1-изобутил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
5 6,6-диметил-2-(6-(4-метилпиперазин-1-ил) 12 уп'сНпе-3-ил)-4-морфолино-8,9-
дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2- (1Н-индазол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
4- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
10 ил)бензонитрил,
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)никотинамид,
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
N-метилпиколинамид,
15 2-(4-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
3- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-
Ы,Ы-диметиланилин,
6,6-диметил-2-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)-4-морфолино-8,9-дигидро-20 6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(4-(пиперидин-1-ил)фенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
Ы-(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид, 25 5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиколинамид,
6- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-
ил)пиридин-3-ол
(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-30 ил)фенил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанон,
Ы-циклопропил-3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)бензамид,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-Ы,Ы-диметилпиразин-2-амин, 35 1-(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-этилмочевина,
1- (4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3-изопропилмочевина,
2- (2-аминопиримидин-5-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,6-диил)диметанол,
5 2-(2-аминопиримидин-5-ил)-7-метил-4-морфолино-8,9-дигидропиразино[2,1-е]пурин-6(7Н)-он,
2- (1Н-индазол-4-ил)-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-
[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
3- (4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-
10 2-ил)фенол,
5-(4-((28,6Р)-2,6-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-(2,2-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин, 15 Ы-(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-ил)ацетамид,
5-(4-((18,4Б)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
2-(2-аминопиримидин-5-ил)-6-метил-4-морфолино-6,7-дигидропиразино[2,1-20 е]пурин-8(9Н)-он,
5-(6,7-диметил-4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиразино[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин; и
(5-(8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триаза-
флуорен-3-ил)-пиримидин-2-иламин.
25 17. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому
из пп. 1-16 и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество, разбавитель или эксципиент.
18. Фармацевтическая композиция по п. 17, также содержащая дополнительный терапевтический агент, выбранный из химиотерапевтического 30 агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
19. Способ лечения рака у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективное количество соединения по любому из пп. 116, где рак представляет собой собой рак молочной железы, яичника, шейки матки, предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани,
5 глиобластому, нейробластому, рак желудка, кожи, кератоакантому, рак легкого, плоскоклеточный рак, крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), мелкоклеточный рак, аденокарциному легких, рак костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярную карциному, недифференцированную карциному, папиллярную
10 карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков, карциному почки, рак почек, рак поджелудочной железы, миелоидные нарушения, лимфому, "волосатые" клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, болезнь
15 Ходжкина и лейкемию.
20. Способ по п. 19, где рак представляет собой рак мозга.
21. Способ по п. 19 или п. 20, также включающий введение пациенту дополнительного терапевтического агента , выбранного из химиотерапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента,
20 нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
22. Способ по п. 21, где дополнительный терапевтический агент
25 представляет собой бевацизумаб.
23. Соединение по любому из пп. 1-16 для применения в качестве терапевтически активного вещества.
24. Применение соединения по любому из пп. 1-16 для лечения рака.
25. Применение соединения по любому из пп. 1-16 для получения 30 лекарственного средства для лечения рака.
26. Соединение по любому из пп. 1-16 для применения при лечении рака.
27. Изобретение как здесь раскрыто.
(19)
-2-
-2-
-24-
-24-
-25-
-25-
-31-
-31-
-31-
-31-
-77-
-76-
-79-
-79-
-80-
-80-
-80-
-80-
-80-
-80-
-80-
-80-
-80-
-80-
-80-
-80-
-81-
-81-
-82-
-82-
-83-
-83-
-84-
-84-
-93-
-93-
-93-
-93-
-93-
-93-
-93-
-93-
-98-
-98-
-98-
-98-
-98-
-98-
-98-
-98-
-99-
-99-
-99-
-99-
-110-
-110-
-Ill-
-Ill-
-112-
-112-
-123-
-123-
-123-
-123-
-124-
-124-
-124-
-124-
-139-
-139-
-139-
-139-
-139-
-139-
-139-
-139-
-153-
-153-
-153-
-153-
-154-
-154-
-154-
-154-
-156-
-156-
-156-
-156-
-156-
-156-
-2-
-2-
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
-3-
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
-3-
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
-5-
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
-6-
-6-
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
-10-
-li-
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
-13-
-13-
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод первоначальной формулы изобретения
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
-2-
-2-
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
-3-
-3-
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
-5-
-5-
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
-6-
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
-9-
-9-
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ
Перевод формулы изобретения, измененной по статье 19 РСТ