[**]

Настоящее изобретение в общем относится к терапевтическим наночастицам. Примерные наночастицы, описанные в настоящем изобретении, могут содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 40 вес.% терапевтического агента и от приблизительно 10 до приблизительно 90 вес.% диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля или диблоксополимера полимолочной-сополигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 до приблизительно 90 кДа, или диблоксополимер полимолочной-сополигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную-сополигликолевую кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 до приблизительно 90 кДа.

(57) Реферат / Формула:

Настоящее изобретение в общем относится к терапевтическим наночастицам. Примерные наночастицы, описанные в настоящем изобретении, могут содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 40 вес.% терапевтического агента и от приблизительно 10 до приблизительно 90 вес.% диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля или диблоксополимера полимолочной-сополигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 до приблизительно 90 кДа, или диблоксополимер полимолочной-сополигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную-сополигликолевую кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 до приблизительно 90 кДа.

---

Евразийское (21) 201390600 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2013.09.30
(22) Дата подачи заявки 2011.10.24
(51) Int. Cl.
A61K 9/16 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) A61K 47/30 (2006.01) A61K 47/36 (2006.01)
A61K 31/337 (2006.01)
(54) ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ НАНОЧАСТИЦЫ С СОПОЛИМЕРАМИ С БОЛЬШИМ МОЛЕКУЛЯРНЫМ ВЕСОМ
(31) 61/405,778; 61/490,778
(32) 2010.10.22; 2011.05.27
(33) US
(86) PCT/US2011/057498
(87) WO 2012/054923 2012.04.26
(88) 2012.07.05
(71) Заявитель:
БАЙНД ТЕРАПЬЮТИКС, ИНК. (US)
(72) Изобретатель:
Дьюитт Дэвид, Фигуэйредо Мария, Ван Хун, Трояно Грег, Сонг Йоунг-Хо
(US)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
(57) Настоящее изобретение в общем относится к терапевтическим наночастицам. Примерные наночастицы, описанные в настоящем изобретении, могут содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 40 вес.% терапевтического агента и от приблизительно 10 до приблизительно 90 вес.% диблоксополимера полимолочной кисло-ты-полиэтиленгликоля или диблоксополимера по-лимолочной-сополигликолевой кислоты-полиэти-ленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 до приблизительно 90 кДа, или диблоксополимер по-лимолочной-сополигликолевой кислоты-полиэти-ленгликоля содержит полимолочную-сополиглико-левую кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 до приблизительно 90 кДа.
2420-195475ЕА/062 ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ НАНОЧАСТИЦЫ С СОПОЛИМЕРАМИ С БОЛЬШИМ
МОЛЕКУЛЯРНЫМ ВЕСОМ Перекрестная ссылка на родственные заявки
По настоящей заявке испрашивается приоритет
предварительной патентной заявки № 61/405778, поданной 22 октября 2010, и предварительной патентной заявки № 61/490778, поданной 27 мая 2011, обе из которых включены в настоящее изобретение с помощью ссылки во всей своей полноте.
Уровень техники настоящего изобретения
Системы, которые доставляют определенные лекарственные средства пациенту (например, направленно доставляемые в конкретную ткань или тип клеток или направленно доставляемые в конкретную пораженную ткань, но не в нормальную ткань), или которые контролируют высвобождение лекарственных средств, давно считаются полезными. Например, терапевтические средства, которые содержат активное лекарственное вещество и которые способны локализоваться в конкретной ткани или типе клеток, например, конкретной пораженной ткани, могут снижать количество лекарственного средства в тканях тела, для которых не требуется лечение. Это является особенно важным при лечении заболевания, такого как рак, когда желательно, чтобы цитотоксическая доза доставлялась в раковые клетки, не уничтожая окружающие их нераковые ткани. Кроме того, данные терапевтические средства могут ослаблять нежелательные и иногда угрожающие жизни побочные эффекты, распространенные среди противораковой терапии. Например, терапевтические средства на основе наночастиц могут, из-за их небольшого размера, избегать узнавание в теле, создавая возможность для направленной и контролируемой доставки при, например, сохранении стабильности в течение эффективной продолжительности времени.
Терапевтические средства, которые обеспечивают такую
терапию и/или контролируемое высвобождение, и/или направленную
терапию, должны также быть способны доставлять эффективное
количество лекарственного средства. Получение систем
наночастиц, которые содержат подходящее количество
лекарственного средства, содержащееся в каждой частице, поддерживая размер наночастиц достаточно небольшим, чтобы они обладали полезными свойствами доставки, может быть трудной задачей. Например, когда желательно наполнять наночастицу большим количеством терапевтического агента, получение наночастиц, в котором применяют загрузку лекарственного средства, которая является слишком большой, будет приводить в результате к наночастицам, которые будут слишком большими для практического терапевтического применения. Кроме того, может быть желательным, чтобы терапевтические наночастицы сохранялись стабильными для того чтобы, например, по существу ограничивать быстрое или немедленное высвобождение терапевтического агента.
Соответственно, существует необходимость в новых составах наночастиц и способах получения данных наночастиц и композиций, которые могут доставлять терапевтические концентрации лекарственных средств для лечения заболеваний, таких как рак, также ослабляя побочные эффекты у пациента.
Сущность настоящего изобретения
В одном аспекте, настоящее изобретение относится к
терапевтической наночастице, которая содержит терапевтический
агент, например, таксан, и диблоксополимер полимолочной
кислоты-полиэтиленгликоля (PLA-PEG) или диблоксополимер
полимолочной-со-полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля (PLGA-
PEG), где диблоксополимер полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую
среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 3 0 кДа до
приблизительно 90 кДа, или диблоксополимер полимолочной-со-
полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную-
со-полигликолевую кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную
массу от приблизительно 30 кДа до приблизительно 90 кДа. В
другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к
терапевтической наночастице, которая содержит терапевтический
агент, например, таксан, и диблоксополимер полимолочной
кислоты-полиэтиленгликоля или диблоксополимер полимолочной-со-
полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер
полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит блок
полимолочной кислоты, имеющий среднечисловую молекулярную массу
от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа (например,
приблизительно 4 5 кДа, 4 7 кДа, 7 0 кДа, 60 кДа или 3 0 кДа), или
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля содержит блок полимолочной-со-полигликолевой кислоты, имеющий среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа.
Например, настоящее изобретение относится к
терапевтической наночастице, содержащей от приблизительно 0,1
до приблизительно 40% вес. терапевтического агента и от
приблизительно 10 до приблизительно 95, или от приблизительно
10 до приблизительно 90% вес. диблоксополимера полимолочной
кислоты-полиэтиленгликоля или диблоксополимера полимолочной-со-
полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля. В одном варианте
осуществления, указанный диблоксополимер полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую
среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 3 0 кДа до
приблизительно 90 кДа или от приблизительно 4 0 кДа до
приблизительно 90 кДа. В другом варианте осуществления
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля содержит блок полимолочной-со-полигликолевой
кислоты, имеющий среднечисловую молекулярную массу от
приблизительно 30 кДа до приблизительно 90 кДа или от
приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа. В одном
варианте осуществления блок полимолочной кислоты или
полимолочной-со-полигликолевой кислоты имеет среднечисловую
молекулярную массу от приблизительно 50 кДа до приблизительно
8 0 кДа. В другом варианте осуществления полимолочная кислота
или полимолочная-со-полигликолевая кислота имеет среднечисловую
молекулярную массу приблизительно 50 кДа. В еще другом варианте
осуществления полимолочная кислота или полимолочная-со-
полигликолевая кислота имеет среднечисловую молекулярную массу
приблизительно 3 0 кДа. В следующем варианте осуществления
диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля или
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля содержит полиэтиленгликоль, имеющий
молекулярную массу от приблизительно 5 до приблизительно 15 кДа, или от приблизительно 4 кДа до приблизительно б кДа. Например, полиэтиленгликоль может иметь среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа, 7,5 кДа или приблизительно 10кДа.
В одном примерном варианте осуществления терапевтическая
наночастица может содержать от приблизительно 0,1% до
приблизительно 40% вес. терапевтического агента и от 10% до
приблизительно 90% вес. диблоксополимера полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую
среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 50 кДа до
приблизительно 8 0 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий
среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа. В
другом варианте осуществления терапевтическая наночастица может
содержать от приблизительно 0,1% до приблизительно 40% вес.
терапевтического агента и от 10% до приблизительно 90% вес.
диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля, где
диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит
полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу
приблизительно 50 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий
среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа. В еще
другом варианте осуществления терапевтическая наночастица может
содержать от приблизительно 0,1% до приблизительно 40% вес.
терапевтического агента и от 10% до приблизительно 90% вес.
диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля, где
диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит
полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу
приблизительно 3 0 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий
среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа. В
следующем варианте осуществления, терапевтическая наночастица
может содержать от приблизительно 1% до приблизительно 20% вес.
терапевтического агента и от 50% до приблизительно 90% вес.
диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля или
диблоксополимера полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля .
Настоящее изобретение также относится к терапевтическим наночастицам, содержащим терапевтические агенты, выбранные из алкалоидов барвинка, нестероидных противовоспалительных лекарственных средств, агентов на основе азотистого иприта, таксанов, платиновых химиотерапевтических агентов, mTOR ингибиторов, соединений, являющихся боронатными эфирами или пептидбороновой кислотой, и эпотилона. Например, предполагаемые терапевтические наночастицы могут содержать терапевтические агенты, такие как цисплатина, оксалиплатина, кеторолак, рофекоксиб, целекоксиб, диклофенак, дигексаноат Pt(IV), винбластин, винорелбин, виндезин, винкристин, доцетаксел, сиролимус, темсиролимус, эверолимус, бортезомиб и эпотилон. В одном варианте осуществления терапевтический агент может представлять собой доцетаксел.
Настоящее изобретение относится к композициям, таким как
композиции, содержащие большое количество описанных наночастиц
и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. В
некоторых вариантах осуществления, биосовместимые,
терапевтические полимерные наночастицы, которые образуют часть предполагаемой композиции, имеют температуру перехода в стеклообразное состояние от приблизительно 42°С до приблизительно 50 °С или от приблизительно 38 °С до приблизительно 42°С. В некоторых вариантах осуществления, после введения пациенту, биосовместимые, терапевтические полимерные наночастицы, описанные в настоящем изобретении, циркулируют в плазме пациента в течение, по меньшей мере, приблизительно 2 4 часов, например, от приблизительно 24 часов до приблизительно 48 часов, и/или например, после введения пациенту, биосовместимые, терапевтические полимерные наночастицы высвобождают терапевтический агент in-vivo в течение, по меньшей мере, 24 часов.
Настоящее изобретение также относится к способам получения описанных наночастиц и способам лечения рака (например, рака груди, легкого или простаты), включающим введение пациенту, нуждающемуся в лечении, описанной частицы или композиции.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение
относится к терапевтической наночастице с контролируемым
высвобождением, содержащей от приблизительно 0,2 до
приблизительно 2 0% вес. (например, от приблизительно 2 до
приблизительно 20% вес.) терапевтического агента или его
фармацевтически приемлемой соли, и диблоксополимер полимолочной
кислоты-полиэтиленгликоля, где блок полимолочной кислоты
диблоксополимера имеет среднечисловую молекулярную массу от
приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 8 0 кДа (например, от
приблизительно 4 5 до приблизительно 7 5 кДа или от
приблизительно 4 0 до приблизительно 60 кДа, и где указанный
терапевтический агент высвобождается при контролируемой
скорости высвобождения. В еще другом варианте осуществления
настоящее изобретение относится к терапевтической наночастице с
контролируемым высвобождением, содержащей, например, от
приблизительно 0,2 до приблизительно 2 0% вес. (например, от
приблизительно 2 до приблизительно 10 или от приблизительно 3
до приблизительно 15% вес.) терапевтического агента или его
фармацевтически приемлемой соли, и диблоксополимер
полимолочной-со-полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля, где блок полимолочной-со-полигликолевой кислоты диблоксополимера имеет среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 8 0 кДа, и где указанный терапевтический агент высвобождается при контролируемой скорости высвобождения. Например, блок полиэтиленгликоля может иметь среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 кДа до приблизительно 16 кДа, от 5 кДа до приблизительно 12кДа, или приблизительно 7,5 кДа, или приблизительно 10 кДа. В одном варианте осуществления указанная терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением высвобождает терапевтический агент в течение, по меньшей мере, 1 дня или более при введении пациенту. В другом варианте осуществления указанная терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением высвобождает терапевтический агент в течение, по меньшей мере, от 1 дня до приблизительно 4 дней или более при введении пациенту. Краткое описание чертежей
Фигура 1 представляет собой блок-схему для эмульсионного
способа для получения описанных наночастиц.
Фигуры 2А и 2В показывают технологическую схему для описанного эмульсионного способа.
Фигура 3 показывает in vitro высвобождение доцетаксела из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении.
Фигура 4 показывает in vitro высвобождение бортезомиба из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении.
Фигура 5 показывает in vitro высвобождение винорелбина из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении.
Фигура б показывает in vitro высвобождение винкристина из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении.
Фигура 7 показывает in vitro высвобождение бендамустина-НС1 из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении.
Фигура 8 показывает in vitro высвобождение диклофенака из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении.
Фигура 9 показывает in vitro высвобождение кеторолака из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении.
Фигура 10 показывает in vitro высвобождение рофекоксиба из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении.
Фигура 11 показывает in vitro высвобождение целекоксиба из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении, и влияние загрузки лекарственного средства.
Фигура 12 показывает in vitro высвобождение целекоксиба из различных наночастиц, описанных в настоящем изобретении, с низкой загрузкой лекарственного средства.
Подробное описание настоящего изобретения
Настоящее изобретение в общем относится к полимерным наночастицам, которые содержат терапевтический агент или лекарственное средство, и способам получения и применения данных терапевтических наночастиц. В общем, "наночастица" относится к любой частице, имеющей диаметр, меньший чем 1000 нм, например, от приблизительно 10 нм до приблизительно 2 50 нм. Описанные терапевтические наночастицы могут включать наночастицы, имеющие диаметр от приблизительно 60 до приблизительно 190 нм, или от приблизительно 7 0 до
приблизительно 190 нм, или от приблизительно 60 до приблизительно 180 нм, от приблизительно 7 0 нм до приблизительно 180 нм или от приблизительно 50 нм до приблизительно 2 50 нм.
Описанные наночастицы могут содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 4 0% вес, от приблизительно 0,1 до приблизительно 30% вес, от приблизительно 0,1 до приблизительно 2 0% вес, от приблизительно 0,2 до приблизительно 2 0% вес. или от приблизительно 1 до приблизительно 30% вес. терапевтического агента, такого как противоопухолевый агент, например, таксановый агент (например, доцетаксел).
Наночастицы, описанные в настоящем изобретении, содержат
один или более биосовместимых и/или биоразлагаемых полимеров,
например, высокомолекулярный диблоксополимер полимолочной
кислоты-полиэтиленгликоля или высокомолекулярный
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля. Диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 3 0 кДа до приблизительно 90 кДа или от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа. Диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную-со-полигликолевую кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 кДа до приблизительно 90 кДа или от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа. Например, предполагаемая наночастица может содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 40% вес. терапевтического агента и от приблизительно 10 до приблизительно 90% вес. диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 кДа до приблизительно 90 кДа или от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа. В одном варианте осуществления полимолочная кислота имеет среднечисловую молекулярную массу приблизительно 3 0 кДа. В
другом варианте осуществления полимолочная кислота имеет
среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 50 кДа до
приблизительно 8 0 кДа. В еще другом варианте осуществления
полимолочная кислота имеет среднечисловую молекулярную массу
приблизительно 50 кДа. В некоторых вариантах осуществления
диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля или
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля содержит полиэтиленгликоль, имеющий молекулярную массу от приблизительно 4 кДа до приблизительно б кДа. Например, полиэтиленгликоль может иметь среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа.
Характерные черты и другие детали настоящего описания будут далее описаны более подробно. Перед дальнейшим описанием настоящего изобретения, определенные термины, применяемые в описании, примерах и прилагаемой формуле изобретения, собраны в настоящем описании. Данные определения следует читать в свете оставшегося описания, и они являются понятными специалисту в данной области техники. Если не определено иначе, все технические и научные термины, применяемые в настоящем изобретении, имеют те же значения, которые общеизвестны специалисту в данной области техники.
Определения
"Лечение" включает любой эффект, например, ослабление, снижение, модулирование или устранение, которое приводит в результате к улучшению состояния, заболевания, расстройства и подобного.
"Фармацевтически или фармакологически приемлемый" описывает молекулярные вещества и композиции, которые не оказывают побочные, аллергические или другие нежелательные реакции при введении млекопитающему или человеку, в случае необходимости. Что касается введения людям, препараты должны удовлетворять стандартам стерильности, пирогенности, общей безопасности и чистоты, как требует FDA Office of Biologies standards.
Термин "фармацевтически приемлемый носитель" или "фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество", как
применяют в настоящем изобретении, относится к любому и всем
растворителям, диспергаторам, покрытиям, изотоническим и
замедляющим поглощение агентам, и подобным, которые являются
совестимыми с фармацевтическим введением. Применение данных
сред и агентов для фармацевтически активных веществ является
известным в данной области техники. Композиции могут также
содержать другие активные соединения, придающие
вспомогательные, дополнительные или улучшенные терапевтические свойства.
"Индивид", "пациент" или "субъект" применяют
взаимозаменяемо и включают любое животное, включая млекопитающих, таких как мыши, крысы, другие грызуны, кролики, собаки, кошки, свиньи, крупный рогатый скот, овцы, лошади или приматы, и самое предпочтительное люди. Соединения и композиции настоящего изобретения можно вводить млекопитающему, такому как человек, но также другим млекопитающим, таким как животное, нуждающееся в ветеринарном лечении, например, домашним животным (например, собакам, кошкам и подобным), сельскохозяйственным животным (например, коровам, овцам, свиньям, лошадям и подобным) и лабораторным животным (например, крысам, мышам, морским свинкам и подобным). "Модулирование" включает антагонизм (например, ингибирование), агонизм, частичный антагонизм и/или частичный агонизм.
В настоящем описании термин "терапевтически эффективное
количество" обозначает количество рассматриваемого соединения
или композиции, которое будет вызывать биологический или
медицинский ответ ткани, системы, животного или человека,
которого добивается исследователь, ветеринар, врач или другой
клиницист. Соединения и композиции настоящего изобретения
вводят в терапевтически эффективных количествах для лечения
заболевания. Альтернативно, терапевтически эффективное
количество соединение представляет собой количество, требуемое
для достижения требуемого терапевтического и/или
профилактического эффекта.
Термин "фармацевтически приемлемая соль(соли)", как применяют в настоящем изобретении, относится к солям кислых или
основных групп, которые могут присутствовать в соединениях, применяемых в настоящих композициях. Соединения, включенные в настоящие композиции, которые являются основными по свойствам, способны образовывать большое разнообразие солей с различными органическими и неорганическими кислотами. Кислоты, которые можно применять для получения фармацевтически приемлемых солей присоединения кислоты данных основных соединений, представляют собой кислоты, которые образуют нетоксичные соли присоединения кислоты, т.е., соли, содержащие фармакологически приемлемый анион, включая, но не ограничиваясь, малатные, оксалатные, хлоридные, бромидные, иодидные, нитратные, сульфатные, бисульфатные, фосфатные, гидрофосфатные, изоникотинатные, ацетатные, лактатные, салицилатные, цитратные, тартратные, олеатные, таннатные, пантотенатные, битартратные, аскорбатные, сукцинатные, малеатные, гентизинатные, фумаратные, глюконатные, глюкаронатные, сахаратные, формиатные, бензоатные, глутаматные, метансульфонатные, этансульфонатные, бензолсульфонатные, п-толуолсульфонатные и памоатные (т.е. 1,1'-метилен-бис(2-гидрокси-3-нафтоатные)) соли. Соединения, включенные в настоящие композиции, которые могут содержать аминогруппу, могут образовывать фармацевтически приемлемые соли с различными аминокислотами, в добавление к солям, приведенным выше. Соединения, включенные в настоящие композиции, которые являются кислыми по свойствам, способны образовывать соли с различными фармакологически приемлемыми катионами. Примеры данных солей включают соли щелочных и щелочноземельных металлов, такие как соли кальция, магния, натрия, лития, цинка, калия и железа. Терапевтические частицы
Предусмотренные биосовместимые, терапевтические полимерные наночастицы содержат биоразлагаемый полимер, например, высокомолекулярный диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 3 0 кДа до приблизительно 90 кДа или от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа, например, от приблизительно 45 до
приблизительно 65 кДа, или от приблизительно 45 до 55 кДа.
Настоящее изобретение также относится к биосовместимым,
терапевтическим полимерным наночастицам, которые содержат
биоразлагаемый полимер, например, высокомолекулярный
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную-со-полигликолевую кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 кДа до приблизительно 90 кДа или от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа.
В одном варианте осуществления биосовместимая, терапевтическая полимерная наночастица, предусмотренная настоящим изобретение, содержит терапевтический агент и высокомолекулярный диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля или диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля. В одном примерном варианте осуществления частица может содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 40% вес. терапевтического агента (например, от приблизительно 1 до приблизительно 2 0% вес, от приблизительно 2 до приблизительно 20% вес, от приблизительно 3 до приблизительно 6% вес, от приблизительно 4 до приблизительно 10% вес. или от приблизительно б до приблизительно 10% вес. терапевтического агента), и от приблизительно 10 до приблизительно 90 (или от приблизительно 7 0 до приблизительно 95, или от приблизительно 8 0 до приблизительно 99% вес.) % вес. диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу приблизительно 3 0 кДа. В другом примерном варианте осуществления частица может содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 40% вес. терапевтического агента и от приблизительно 10 до приблизительно 90% вес. диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу приблизительно 50 кДа. В
другом варианте осуществления частица может содержать от
приблизительно 0,1 до приблизительно 40% вес. терапевтического
агента и от приблизительно 10 до приблизительно 90% вес.
диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля, где
диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит
полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу
приблизительно 8 0 кДа. В определенных вариантах осуществления,
диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля или
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля содержит полиэтиленгликоль, имеющий молекулярную массу от приблизительно 4 кДа до приблизительно 2 0 кДа, от приблизительно 4 кДа до приблизительно 15 кДа, или от приблизительно б кДа до приблизительно 12 кДа. Например, полиэтиленгликоль может иметь среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа, 7,5 кДа или 10 кДа.
В некоторых вариантах осуществления предусмотренные наночастицы могут дополнительно содержать биосовместимый гомополимер, такой как полимолочная кислота, или полимер, такой как полимолочная-со-полигликолевая кислота. Например, предусмотренные наночастицы могут дополнительно содержать полимолочную кислоту или PLGA со среднечисловой молекулярной массой от приблизительно 50 кДа до приблизительно 100 кДа, от приблизительно 30 кДа до приблизительно 100 кДа, от приблизительно 50 кДа до приблизительно 90 кДа, от приблизительно 60 до приблизительно 8 0 кДа.
Кроме того, описанными в настоящем изобретении являются
композиции, содержащие несколько биосовместимых,
терапевтических полимерных наночастиц, как описано в настоящем изобретении, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
Описанные наночастицы могут иметь по существу сферическую (т.е., частицы в большинстве, по-видимому, являются сферическими) или несферическую форму. Например, частицы, после разбухания или сжимания, могут принимать несферическую форму.
Описанные наночастицы могут иметь определяющий размер меньше, чем приблизительно 1 микрометр, где определяющий размер
частицы представляет собой диаметр идеальной сферы, имеющий тот же объем, как частица. Например, частица может иметь определяющий размер частицы, который может быть меньшим, чем приблизительно 3 00 нм, меньшим, чем приблизительно 2 00 нм, меньшим, чем приблизительно 150 нм, меньшим, чем приблизительно 100 нм, меньшим, чем приблизительно 50 нм, меньшим, чем приблизительно 3 0 нм, меньшим, чем приблизительно 10 нм, меньшим, чем приблизительно 3 нм, или меньшим, чем приблизительно 1 нм, в некоторых случаях. В конкретных вариантах осуществления описанные наночастицы могут иметь диаметр от приблизительно 70 нм до приблизительно 250 нм или от приблизительно 7 0 нм до приблизительно 180 нм, от приблизительно 8 0 нм до приблизительно 17 0 нм, от приблизительно 8 0 нм до приблизительно 130 нм.
В некоторых вариантах осуществления, описанные терапевтические частицы и/или композиции содержат агент, осуществляющий направленную доставку, такой как красители, например, синий Эванса. Данные красители можно связывать или соединять с терапевтической частицей, или описанные композиции могут содержать данные красители. Например, можно применять синий Эванса, который может связываться или присоединяться к альбумину, например, альбумину плазмы.
Описанные терапевтические частицы, могут, в некоторых
вариантах осуществления, содержать группу, осуществляющую
направленную доставку, т.е., группу, способную связываться или
иначе соединяться с биологическими объектами. Термин
"связываться" или "связывание", как применяют в настоящем
изобретении, относится к взаимодействию между соответствующей
парой молекул или их частями, которые обладают взаимным
сродством или связывающей способностью, обычно в результате
специфического или неспецифического связывания или
взаимодействия, включая, но не ограничиваясь, биохимические,
физиологические и/или химические взаимодействия.
Терапевтические композиции, описанные в настоящем изобретении, можно, например, вводить местно в указанную область, такую как кровеносный сосуд.
Например, настоящее изобретение относится к
терапевтической полимерной наночастице, содержащей первый
нефункционализированный полимер; необязательный второй
нефункционализированный полимер; необязательный
функционализированный полимер, содержащий группу,
осуществляющую направленную доставку; и терапевтический агент. В одном варианте осуществления, первый нефункционализированный полимер представляет собой PLA, PLGA или PEG, или их сополимер, например, диблоксополимер PLA-PEG или диблоксополимер PLGA-PEG. Например, примерная наночастица может содержать PEG, обработанный коронным зарядом, с плотностью приблизительно 0, 065 г/см3, или от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,10 г / см3.
В одном наборе вариантов осуществления частицы могут иметь
внутреннюю часть и поверхность, где поверхность имеет состав,
отличный от внутренней части, т.е., может иметься, по меньшей
мере, одно соединение, присутствующее во внутренней части, но
отсутствующее на поверхности (или наоборот), и/или, по меньшей
мере, одно соединение присутствует во внутренней части и на
поверхности при различных концентрациях. Например, в одном
варианте осуществления соединение, такое как молекула,
осуществляющая направленную доставку (т.е., низкомолекулярный
лиганд), полимерного конъюгата настоящего изобретения, может
присутствовать и во внутренней части, и на поверхности частицы,
но при большей концентрации на поверхности, чем во внутренней
части частицы, хотя в некоторых случаях, концентрация во
внутренней части частицы может по существу не равняться нулю,
т.е., имеется детектируемое количество соединения,
присутствующего во внутренней части частицы.
В некоторых случаях, внутренняя часть частицы является более гидрофобной, чем поверхность частицы. Например, внутренняя часть частицы может быть относительно гидрофобной по сравнению с поверхностью частицы, и лекарственное средство или другое наполнение может быть гидрофобным, и легко связывающимся с гидрофобным центром частицы. Таким образом, лекарственное средство или другое наполнение может содержаться во внутренней
части частицы, которая может защищать его от внешнего окружения частицы (или наоборот). Например, лекарственное средство или другое наполнение, содержащееся в частицы, вводимой субъекту, будет защищено от тела субъекта, и тело может также по существу быть отделено от лекарственного средства в течение, по меньшей мере, некоторого периода времени.
Описанные наночастицы могут быть стабильными, например, в растворе, который содержит сахарид, в течение, по меньшей мере, приблизительно 24 часов, приблизительно 2 дней, 3 дней, приблизительно 4 дней или, по меньшей мере, приблизительно 5 дней при комнатной температуре или при 25°С.
Наночастицы, описанные в настоящем изобретении, могут
обладать свойствами контролируемого высвобождения, например,
могут быть способны доставлять некоторое количество активного
агента пациенту, например, в конкретное место пациента, в
течение длительного периода времени, например в течение 1 дня,
1 недели или более. Например, настоящее изобретение относится к
терапевтической наночастице с контролируемым высвобождением,
содержащей от приблизительно 0,2 до приблизительно 2 0% вес.
терапевтического агента или его фармацевтически приемлемой
соли, и диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля,
где блок полимолочной кислоты диблоксополимера имеет
среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 0 кДа до
приблизительно 60 кДа, и где указанный терапевтический агент
высвобождается при контролируемой скорости высвобождения. Кроме
того, настоящее изобретение относится к терапевтической
наночастице с контролируемым высвобождением, содержащей от
приблизительно 0,2 до приблизительно 2 0% вес. терапевтического
агента или его фармацевтически приемлемой соли, и
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля, где блок полимолочной-со-полигликолевой кислоты диблоксополимера имеет среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 60 кДа, и где указанный терапевтический агент высвобождается при контролируемой скорости высвобождения. В одном варианте осуществления указанная терапевтическая наночастица с
контролируемым высвобождением высвобождает терапевтический агент в течение, по меньшей мере, 1 дня или более при введении пациенту. В другом варианте осуществления, указанная терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением высвобождает терапевтический агент в течение, по меньшей мере, от 1 дня до приблизительно 4 дней или более при введении пациенту.
Например, после введения пациенту (например, системно (например, внутривенно или подкожно), описанные наночастицы могут циркулировать в плазме пациента в течение, по меньшей мере, 24 часов (например, от приблизительно 18 часов до приблизительно 4 8 часов или от приблизительно 2 4 часов до приблизительно 3 6 часов), и могут высвобождать терапевтический агент в течение 24 часов или более, например, в течение приблизительно 1 дня, 2 дней, 24-36 часов.
В одном варианте осуществления, настоящее изобретение включает наночастицу, содержащую 1) полимерный матрикс и 2) амфифильное соединение или слой, который окружает или диспергирован в полимерном матриксе, образуя непрерывную или прерывистую оболочку для частицы. Амфифильный слой может ослаблять проникновение воды в наночастицу, посредством этого увеличивая эффективность инкапсулирования лекарственного средства и замедляя высвобождение лекарственного средства. Кроме того, данные наночастицы, защищенные амфифильным слоем, могут давать терапевтическое преимущество высвобождением инкапсулированного лекарственного средства и полимера в подходящие моменты времени.
Как применяют в настоящем изобретении, термин "амфифильный" относится к свойству, когда молекула содержит и полярную и неполярную часть. Амфифильное соединение часто содержит полярную головку, соединенную с длинным гидрофобным концом. В некоторых вариантах осуществления полярная часть является растворимой в воде, тогда как неполярная часть является нерастворимой в воде. Кроме того, полярная часть может иметь или формальный положительный заряд или формальный отрицательный заряд. Альтернативно, полярная часть может
содержать и формальные положительный и отрицательный заряд и может быть цвиттерионной или внутренней солью. Примерное амфифильное соединение включает, например, одно или несколько из следующих: природные липиды, поверхностно-активные вещества или синтетические соединения и с гидрофильным и с гидрофобным фрагментами.
Конкретные примеры амфифильных соединений включают, но не ограничиваются, фосфолипиды, такие как 1,2 дистероил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин (DSPE), дипальмитоилфосфатидилхолин
(DPPC), дистероилфосфатидилхолин (DSPC) ,
диарахидоилфосфатидилхолин (DAPC), дибегеноилфосфатидилхолин
(DBPC), дитрикозаноилфосфатидилхолин (DTPC) и
дилигноцероилфатидилхолин (DLPC), введенные при соотношении
0,01 -60 (вес липида/вес полимера), самое предпочтительное 0,1-
3 0 (вес липида/вес полимера). Фосфолипиды, которые можно
применять, включают, но не ограничиваются, фосфатидные кислоты,
фосфатидилхолины с насыщенными и ненасыщенными липидами,
фосфатидилэтаноламины, фосфатидилглицерины, фосфатидилсерины,
фосфатидилинозитолы, лизофосфатидильные производные,
кардиолипин и р-ацил-у~алкилфосфолипиды. Примеры фосфолипидов включают, но не ограничиваются, фосфатидилхолины, такие как диолеоилфосфатидилхолин, димиристоилфосфатидилхолин, дипентадеканоилфосфатидилхолин, дилауроилфосфатидилхолин, дипальмитоилфосфатидилхолин (DPPC), дистероилфосфатидилхолин
(DSPC), диарахидоилфосфатидилхолин (DAPC),
дибегеноилфосфатидилхолин (DBPC), дитрикозаноилфосфатидилхолин
(DTPC), дилигноцероилфетидилхолин (DLPC); и
фосфатидилэтаноламины, такие как диолеоилфосфатидилэтаноламин или 1-гексадецил-2-пальмитоилглицерофосфоэтаноламин. Можно также применять синтетические фосфолипиды с ассиметрическими ацильными цепями (например, с одной ацильной цепью с б атомами углерода и другой ацильной цепью с 12 атомами углерода).
В конкретном варианте осуществления, амфифильный компонент может включать лецитин и/или, в частности, фосфатидилхолин. Полимеры
Предусмотренными в настоящем изобретении являются
наночастицы, содержащие высокомолекулярные полимеры, например, высокомолекулярные сополимеры. В одном варианте осуществления молекулярный вес полимера можно оптимизировать для эффективного лечения, как описано в настоящем изобретении. Например, вес полимера может влиять на скорость разрушения частицы, растворимость, поглощение влаги и кинетику высвобождения лекарственного средства. Молекулярный вес полимера можно регулировать так, чтобы частица биоразлагалась в субъекте, подвергаемом лечению, в течение подходящего периода времени (в диапазоне от нескольких часов до 1 -2 недель, 3-4 недель, 5-6 недель, 7-8 недель и т.д.) Например, описанная частица может содержать сополимер PLA и PEG или PLGA и PEG, где PLA или PLGA часть может иметь среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 30 кДа до приблизительно 90 кДа или от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа, и PEG часть может иметь молекулярный вес от приблизительно 4 кДа до приблизительно б кДа. В одном примерном варианте осуществления PLA или PLGA часть может иметь среднечисловую молекулярную массу 30 кДа, 50 кДа, 55 кДа, 47 кДа, 65 кДа или 80 кДа. PEG часть может иметь молекулярную массу от приблизительно 2,5 кДа до приблизительно 2 0 кДа, например, от приблизительно 5 до приблизительно 15 кДа или приблизительно 5 кДа, 7,5 кДа, 10 кДа.
Широкий набор высокомолекулярных полимеров и способов получения частиц из них являются известными в области доставки лекарственных средств. Описанные наночастицы могут содержать один или более высокомолекулярных полимеров, например, первый полимер, который может представлять собой сополимер, например, диблоксополимер, и необязательно полимер, который может представлять собой, например, гомополимер. В некоторых вариантах осуществления, описанные наночастицы содержат матрикс полимеров. Описанные терапевтические наночастицы могут содержать терапевтический агент, который может быть связан с поверхностью, инкапсулирован в, окружен и/или диспергирован по всему полимерному матриксу.
Любой высокомолекулярный полимер можно применять согласно
настоящему изобретению. Данные полимеры могут быть природными или неприродными (синтетическими) полимерами. Полимеры могут представлять собой гомополимеры или сополимеры, содержащие два или более мономеров. С точки зрения последовательности, сополимеры могут быть статистическими, блочными или содержать комбинацию статистических и блочных последовательностей. Предусмотренные полимеры могут быть биосовместимыми и/или биоразлагаемыми.
Описанные частицы могут содержать высокомолекулярные сополимеры, которые, в некоторых вариантах осуществления, описывают два или более полимеров (таких как полимеры, описанные в настоящем изобретении), которые соединены друг с другом, обычно ковалентной связью двух или более полимеров вместе. Таким образом, сополимер может содержать первый полимер и второй полимер, которые конъюгированы вместе, образуя блочный сополимер, где первый полимер может представлять собой первый блок блоксополимера, и второй полимер может представлять собой второй блок блоксополимера. Конечно, специалисту в данной области техники ясно, что блоксополимер может, в некоторых случаях, содержать несколько блоков полимера, и что "блоксополимер", как применяют в настоящем изобретении, не ограничивается только блоксополимерами, содержащими только один первый блок и один второй блок. Например, блоксополимер может содержать первый блок, содержащий первый полимер, второй блок, содержащий второй полимер, и третий блок, содержащий третий полимер или первый полимер, и т.д. В некоторых случаях, блоксополимеры могут содержать любое количество первых блоков первого полимера и вторых блоков второго полимера (и в определенных случаях, третьи блоки, четвертые блоки и т.д.). Кроме того, следует отметить, что блоксополимеры можно также получить, в некоторых случаях, из других блоксополимеров. Например, первый блоксополимер может быть конъюгирован с другим полимером (который может представлять собой гомополимер, биополимер, другой блоксополимер и т.д.), образуя новый блоксополимер, содержащий несколько типов блоков и/или с другими молекулами (например, с неполимерными молекулами).
В некоторых вариантах осуществления высокомолекулярный полимер (например, сополимер, например, блоксополимер) может быть амфифильным, т.е., содержащим гидрофильную часть и гидрофобную часть, или относительно гидрофильную часть и относительно гидрофобную часть. Гидрофильный полимер может обычно представлять собой полимер, который притягивает воду, и гидрофобный полимер может представлять собой полимер, который обычно отталкивает воду. Гидрофильный или гидрофобный полимер можно определить, например, получением образца полимера и измерением его угла смачивания водой (обычно, гидрофильный полимер будет иметь угол смачивания, меньший чем 60°, тогда как гидрофобный полимер будет иметь угол смачивания, больший чем 60°). В некоторых случаях, гидрофильность двух или более полимеров можно измерить относительно друг друга, т.е., первый полимер может быть более гидрофильным, чем второй полимер. Например, первый полимер может иметь меньший угол смачивания, чем второй полимер.
В одном ряде вариантов осуществления высокомолекулярный полимер (например, сополимер, например, блоксополимер), предусмотренный настоящим изобретением, включает биосовместимый полимер, т.е., полимер, который обычно не вызывает нежелательной реакции при вставке или инъекции живому субъекту, например, без значительного воспаления и/или острого отторжения полимера иммунной системой, например, Т-клеточной реакцией. Соответственно, терапевтические частицы, предусмотренные настоящим изобретением, могут быть неиммуногенными. Термин неиммуногенный, как применяют в настоящем изобретении, относится к эндогенному фактору роста в его нативном состоянии, который обычно не вызывает, или только в незначительной степени, циркуляцию антител, Т-клеток или реакционноспособных иммуноцитов, и который обычно не вызывает на себя иммунный ответ у индивида.
Биосовместимость обычно относится к острому отторжению материала, по меньшей мере, частью иммунной системы, т.е., небиосовместимый материал, имплантированный субъекту, вызывает иммунную реакцию у субъекта, которая может быть достаточно
сильной, так что отторжение материала иммунной системой нельзя
в достаточной степени контролировать, и часто она имеет такую
степень, что материал должен быть удален из субъекта. Один
простой способ определения биосовместимости может заключаться в
воздействии полимером на клетки in vitro; биосовместимые
полимеры представляют собой полимеры, которые обычно не будут
приводить в результате к значительной смерти клеток при
умеренных концентрациях, например, при концентрациях 50
микрограмм/1О6 клеток. Например, биосовместимый полимер может
вызывать меньше, чем приблизительно 20% смерть клеток при
воздействии на клетки, такие как фибробласты или эпителиальные
клетки, даже при фагоцитозе или другом поглощении данными
клетками. Неограничивающие примеры биосовместимых полимеров,
которые могут быть пригодными в различных вариантах
осуществления настоящего изобретения, включают полидиоксанон
(PDO), полигидроксиалканоат, полигидроксибутират,
поли(глицеринсебакат), полигликолид, полилактид, PLGA, PLA, поликапролактон, или сополимеры или производные, содержащие данные и/или другие полимеры.
В определенных вариантах осуществления предусмотренные биосовместимые полимеры могут быть биоразлагаемыми, т.е., полимер способен разрушаться, химически и/или биологически, в физиологическом окружении, таком как в теле. Как применяют в настоящем изобретении, "биоразлагаемые" полимеры представляют собой полимеры, которые, при введении в клетки, разрушаются клеточным аппаратом (биологически разлагаемые) и/или химическим способом, таким как гидролиз (химически разлагаемые), до компонентов, клетки которых могут или применять повторно, или удалять без значительного токсического эффекта на клетки. В одном варианте осуществления биоразлагаемый полимер и продукты его разложения могут быть биосовместимыми.
Например, предполагаемый полимер может представлять собой полимер, который самопроизвольно гидролизуется при воздействии воды (например, в субъекте), полимер может разлагаться при воздействии тепла (например, при температурах приблизительно 37 °С) . Разложение полимера может протекать при различных
скоростях в зависимости от применяемого полимера или сополимера. Например, время полуразложения полимера (время, за которое 50% полимера может разложиться до мономеров и/или других неполимерных молекул) может быть порядка дней, недель, месяцев, или лет, в зависимости от полимера. Полимеры могут разлагаться биологически, например, ферментативной активностью или клеточным аппаратом, в некоторых случаях, например, при воздействии лизоцимом (например, имеющим относительно низкую рН). В некоторых случаях, полимеры могут разрушаться до мономеров и/или других неполимерных молекул, клетки которых могут или применять повторно или удалять без значительного токсичного эффекта на клетки (например, полилактид может гидролизоваться, образуя молочную кислоту, полигликолид может гидролизоваться, образуя гликолевую кислоту, и т.д.).
В некоторых вариантах осуществления, полимеры могут представлять собой полиэфиры, включая сополимеры, содержащие звенья молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как полимолочная-со-полигликолевая кислота, поли(молочоная кислота-со-гликолевая кислота) и поли(лактид-со-гликолид), называемые вместе в настоящем изобретении "PLGA"; и гомополимеры, содержащие звенья гликолевой кислоты, называемые в настоящем изобретении "PGA", и звенья молочной кислоты, такие как поли-L-молочная кислота, поли-Б-молочная кислота, поли-D,L-молочная кислота, поли-Ь-лактид; поли-Б-лактид и поли-D,L-лактид, называемые в настоящем изобретении вместе "PLA". В некоторых вариантах осуществления, примерные полиэфиры включают, например, полигидроксикислоты или полиангидриды.
В других вариантах осуществления, предусмотренные полиэфиры для применения в описанных наночастицах, могут представлять собой диблоксополимеры, например, ПЭГилированные полимеры и сополимеры (содержащие поли(этиленгликоль) повторяющиеся звенья), такие как лактида и гликолида (например, ПЭГилированный PLA, ПЭГилированный PGA, ПЭГилированный PLGA), ПЭГилированный поли(капролактон) и их производные. Например, "ПЭГилированный" полимер может способствовать контролю воспаления и/или иммуногенности (т.е., способности вызывать
иммунный ответ) и/или снижать скорость выведения из кровеносной системы ретикулоэндотелиальной системой (RES), благодаря наличию поли(этиленгликольных) групп.
ПЭГилирование можно также применять, в некоторых случаях,
для снижения взаимодействия зарядов между полимером и
биологическим объектом, например, созданием гидрофильного слоя
на поверхности полимера, который может защищать полимер от
взаимодействия с биологическим объектом. В некоторых случаях,
присоединение поли(этиленгликольных) повторяющихся звеньев
может увеличивать время полужизни полимера в плазме (например,
сополимера, например, блоксополимера), например, снижением
поглощения полимера фагоцитной системой при снижении
эффективности трансфекции/поглощения клетками. Специалисту в
данной области техники известны способы и методики
ПЭГилирования полимера, например, применяя EDC (гидрохлорид 1-
этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид) и NHS (N-
гидроксисукцинимид) для реакции полимера с ПЭГ группой, содержащей концевой амин, способом полимеризации с раскрытием кольца (ROMP), или подобными.
Другие предусмотренные полимеры, которые могут
образовывать часть описанной наночастицы, могут включать
поли(ортоэфир), ПЭГилированный поли(ортоэфир), полилизин,
ПЭГилированный полилизин, поли(этиленимин), ПЭГилированный
поли(этиленимин), поли(L-лактид-со-Ъ-лизин), поли(сериновый
эфир), поли(4-гидрокси-Ъ-пролиновый эфир), поли[а-(4-
аминобутил)-L-гликолевую кислоту], и их производные. В других вариантах осуществления, полимеры могут представлять собой разлагаемые полиэфиры, содержащие катионные боковые цепи. Примеры данных полиэфиров включают поли(L-лактид-со-Ъ-лизин), поли(сериновый эфир), поли(4-гидрокси-Ь-пролиновый эфир).
В других вариантах осуществления полимеры могут
представлять собой один или более акриловых полимеров. В
определенных вариантах осуществления акриловые полимеры
включают, например, сополимеры акриловой кислоты и метакриловой
кислоты, метилметакрилатные сополимеры, этоксиэтилметакрилаты,
цианоэтилметакрилат, аминоалкилметакрилатный сополимер,
поли(акриловую кислоту), поли(метакриловую кислоту), сополимер
метакриловой кислоты и алкиламида, поли(метилметакрилат) ,
полиметакриловую кислоту, полиакриламид,
аминоалкилметакрилатный сополимер, глицидилметакрилатные
сополимеры, полицианоакрилаты, и комбинации, содержащие один или более приведенных выше полимеров. Акриловый полимер может включать полностью-полимеризованные сополимеры эфиров акриловой и метакриловой кислоты с низким содержанием четвертичных аммониевых групп.
PLGA, предусмотренный для применения, как описано в
настоящем изобретении, можно характеризовать отношением
молочной кислоты к гликолевой кислоте, например, приблизительно
85:15, приблизительно 75:25, приблизительно 60:40,
приблизительно 50:50, приблизительно 40:60, приблизительно 25:75, или приблизительно 15:85. В некоторых вариантах осуществления отношение мономеров молочной кислоты к мономерам гликолевой кислоты в полимере частицы (например, PLGA блоксополимер или PLGA-PEG блоксополимер) можно выбрать для оптимизации различных параметров, так можно оптимизировать поглощение влаги, высвобождение терапевтического агента и/или кинетику разложения полимера. В других вариантах осуществления концевая группа PLA полимерной цепи может представлять собой карбоксильную группу, аминогруппу или кэппированную концевую группу, например, алкильной группой с длинной цепью или холестерином.
Частицы, описанные в настоящем изобретении, могут содержать или не содержать ПЭГ. Кроме того, определенные варианты осуществления могут относиться к сополимерам, содержащим поли(сложный эфир-эфир)ы, например, полимерам, содержащим повторяющиеся звенья, соединенные сложноэфиными связями (например, R-C(О)-0-R' связями) и/или эфирными связями (например, R-0-R' связями). Предусмотренным в настоящем изобретении, в определенных вариантах осуществления, является биоразлагаемый полимер, такой как гидролизуемый полимер, содержащий карбоксильные группы, которые можно конъюгировать с поли(этиленгликольными) повторяющимися звеньями, получая
поли(сложный эфир-эфир).
В одном варианте осуществления описанная наночастица имеет
температуру перехода в стеклообразное состояние, например, в
описанном водном растворе, которая составляет от приблизительно
37 °С до приблизительно 39°С, или от приблизительно 37 °С до
приблизительно 38°С. В другом варианте осуществления водная
суспензия наночастиц может иметь температуру перехода в
стеклообразное состояние, которая может составлять от
приблизительно 38°С до приблизительно 42°С (например, от
приблизительно 39 °С до приблизительно 41°С), или может
составлять от приблизительно 42°С до приблизительно 50°С
(например, приблизительно 41-45°С, например, для частиц с
медленным высвобождением). Температуру перехода в
стеклообразное состояние можно измерить или дифференциальной сканирующей калориметрией с горячим потоком или дифференциальной сканирующей калориметрией с компенсацией мощности.
В определенных вариантах осуществления один или более полимеров описанной частицы могут быть конъюгированы с липидом. Полимер может представлять собой, например, ПЭГ с липидом на конце. Как описано ниже, липидную часть полимер можно применять для самосборки с другим полимером, облегчая образование частицы. Например, гидрофильный полимер можно конъюгировать с липидом, который будет самособираться с гидрофобным полимером.
В некоторых вариантах осуществления, липиды могут представлять собой масла. В общем, любое масло, известное в данной области техники, можно конъюгировать с полимерами, применяемыми в настоящем изобретении. В некоторых вариантах осуществления масло может содержать одну или более групп жирных кислот или их солей. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может содержать перевариваемый длинноцепочечный (например, Cs-Cso) замещенный или незамещенный углеводород. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может представлять собой Сю-Сго жирную кислоту или ее соль. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может представлять собой С15-С20 жирную кислоту или ее соль. В
некоторых вариантах осуществления жирная кислота может быть ненасыщенной. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может быть мононенасыщенной. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может быть полиненасыщенной. В некоторых вариантах осуществления двойная связь группы ненасыщенной жирной кислоты может иметь цис конформацию. В некоторых вариантах осуществления двойная связь группы ненасыщенной жирной кислоты может иметь транс конформацию.
В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты
может быть одной или более из масляной, капроновой, каприловой,
каприновой, лауриновой, миристиновой, пальмитиновой,
стеариновой, арахидоновой, бегеновой или лигноцериновой кислот. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может быть одной или более из пальмитолеиновой, олеиновой, вакценовой, линолевой, альфа-линоленовой, гамма-линолевой, арахидоновой, гадолеиновой, арахидоновой, эйкозапентаеновой, докозагексаеновой или эруковой кислот.
В одном варианте осуществления, липид может иметь формулу
и его соли, где каждый R независимо представляет собой CV зо алкил. В одном варианте осуществления формулы V липид может представлять собой 1,2 дистероил-зп-глицеро-З-фосфоэтаноламин (DSPE), и его соли, например, натриевую соль.
Получение наночастиц
Другой аспект настоящего изобретения относится к системам и способам получения описанных наночастиц.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения нескольких биосовместимых,
терапевтических полимерных наночастиц, включающему: смешение терапевтического агента (например, доцетаксела или бортезомиба) и биоразлагаемого высокомолекулярного сополимера (например, PLA-PEG или PLGA-PEG), с органическим растворителем, получая первую органическую фазу; смешение первой органической фазы с первым водным раствором, получая вторую фазу; эмульгирование второй фазы, получая эмульсионную фазу; добавление вещества, способствующего растворению лекарственного средства, к эмульсионной фазе, получая солюбилизированную фазу; и выделение биосовместимых, терапевтических полимерных наночастиц.
В одном варианте осуществления обеспечивают способ
получения наноэмульсии, такой как способ, показанный на фигурах
1 и 2. Например, терапевтический агент и высокомолекулярный
сополимер (например, PLA-PEG или PLGA-PEG) смешивают с
органическим раствором, получая первую органическая фаза.
Данная первая фаза может содержать от приблизительно 5 до
приблизительно 50% вес. твердых веществ, например, от
приблизительно 5 до приблизительно 4 0% твердых веществ или от
приблизительно 10 до приблизительно 30% твердых веществ,
например, приблизительно 10%, 15%, 20% твердых веществ. Первую
органическую фазу можно смешивать с первым водным раствором,
получая вторую фазу. Органический раствор может содержать,
например, ацетонитрил, тетрагидрофуран, этилацетат,
изопропиловый спирт, изопропилацетат, диметилформамид, хлористый метилен, дихлорметан, хлороформ, ацетон, бензиловый спирт, Tween 80, Span 8 0 или подобные, и их комбинации. В одном варианте осуществления, органическая фаза может содержать бензиловый спирт, этилацетат, и их комбинации. Вторая фаза может содержать приблизительно 1-50% вес, например, 5-40% вес. твердых веществ. Водный раствор может представлять собой воду, необязательно в комбинации с одним или более из холата натрия, этилацетата и бензилового спирта.
Например, в масляной или органической фазе можно применять растворитель, который только частично смешивается с нерастворителем (водой). Следовательно, при смешении при достаточно низком отношении и/или при применении воды,
предварительно насыщенной органическими растворителями,
масляная фаза остается жидкой. Масляную фазу можно
эмульгировать в водным растворе и, в виде жидких капель,
расщеплять на наночастицы, применяя, например,
высокоэнергетические системы для диспергирования, такие как гомогенизаторы или ультразвуковые аппараты. Водная часть эмульсии, иначе известная как "водная фаза", может представлять собой раствор поверхностно-активного вещества, содержащий холат натрия, и предварительно насыщенный этилацетатом и бензиловым спиртом.
Эмульгирование второй фазы, получая эмульсионную фазу, можно осуществлять на одной или двух стадиях эмульгирования. Например, можно получить первичную эмульсию, и затем эмульгировать, получая тонкодисперсную эмульсию. Первичную эмульсию можно получить, например, применяя простое смешение, гомогенизатор высокого давления, зондовый ультразвуковой аппарата, магнитную мешалку или гомогенизатор с системой ротор/статор. Первичную эмульсию можно получить в виде тонкодисперсной эмульсии при применении, например, зондового ультразвукового аппарата или гомогенизатора высокого давления, например, применяя 1, 2, 3 или более проходов через гомогенизатор. Например, при применении гомогенизатора высокого давления, применяемое давление может составлять от приблизительно 4000 до приблизительно 8000 пси (фунт/кв.дюйм), или от приблизительно 4000 до приблизительно 5000 пси, например, 4 00 0 или 50 0 0 пси.
Или упаривание растворителя или разбавление могут быть необходимы для завершения экстракции и отверждения частиц. Для лучшего контроля кинетики экстракции и лучшего масштабирования способа можно применять разбавление растворителя охлаждающей водой. Например, эмульсию можно разбавлять холодной водой до концентрации, достаточной для растворения всего органического растворителя, получая охлажденную фазу. Охлаждение можно осуществлять, по меньшей мере, частично при температуре приблизительно 5°С или меньше. Например, вода, применяемая в охлаждении, может иметь температуру, которая является меньшей
чем комнатная температура (например, от приблизительно 0 до приблизительно 10°С или от приблизительно 0 до приблизительно 5°С) .
В некоторых вариантах осуществления не весь терапевтический агент инкапсулирован в частицы на данной стадии, и агент, способствующий растворению лекарственного средства, добавляют к охлажденной фазе, получая солюбилизированную фазу. Агент, способствующий растворению лекарственного средства, может представлять собой, например, Tween 80, Tween 20, поливинилпирролидон, циклодекстран, додецилсульфат натрия или холат натрия. Например, Tween-80 можно добавлять к охлажденной суспензии наночастиц, растворяя свободное лекарственное средство и предотвращая образование кристаллов лекарственного средства. В некоторых вариантах осуществления, отношение агента, способствующего растворению лекарственного средства, к терапевтическому агенту составляет от приблизительно 100:1 до приблизительно 10:1.
Солюбилизированную фазу можно фильтровать, выделяя
наночастицы. Например, мембраны для ультрафильтрации можно
применять для концентрирования суспензии наночастиц и по
существу устранять органический растворитель, свободное
лекарственное средство и другие вспомогательные вещества для
способа (поверхностно-активные вещества). Стандартную
фильтрацию можно осуществлять, применяя систему для тангенциальной поточной фильтрации. Например, применяя мембрану с размером пор, подходящим для удерживания наночастиц, при этом позволяя проходить растворенным компонентам, мицеллам и органическому растворителю, можно селективно выделить наночастицы. Можно применять стандартные мембраны с задержкой молекулярных весов приблизительно 300-500 кДа (-5-25 нм) .
Диафильтрацию можно осуществлять, применяя подход с постоянным объемом, т.е. диафильтрат (холодная деионизированная вода, например, от приблизительно 0°С до приблизительно 5°С, или от 0 до приблизительно 10°С) можно добавлять к подаваемой суспензии при той же скорости, с которой фильтрат удаляют из суспензии. В некоторых вариантах осуществления фильтрование
может включать первое фильтрование, применяя первую температуру от приблизительно 0°С до приблизительно 5°С, или 0°С до приблизительно 10°С, и вторую температуру от приблизительно 20°С до приблизительно 30°С, или от 15°С до приблизительно 35°С. Например, фильтрование может включать обработку от приблизительно 1 до приблизительно б диаобъемов при от приблизительно 0°С до приблизительно 5°С, и обработку, по меньшей мере, одного диаобъема (например, от приблизительно 1 до приблизительно 3 или от приблизительно 1 до 2 диаобъемов) при от приблизительно 20°С до приблизительно 30°С.
После очистки и концентрирования суспензии наночастиц, частицы можно пропускать через один, два или более стерилизующих и/или пористых фильтров, например, применяя ~0,2 мкм пористый фильтр грубой очистки.
В примерном варианте осуществления получения наночастиц,
образуется органическая фаза, состоящая из смеси
терапевтического агента, например, доцетаксела или бортезомиба,
и высокомолекулярного сополимера (например, PLA-PEG или PLGA-
PEG) . Органическую фазу можно смешивать с водной фазой при
приблизительно 1:5 соотношении (масляная фаза:водная фаза),
когда водная фаза состоит из поверхностно-активного вещества и
необязательно растворенного растворителя. Затем, можно получить
первичную эмульсию смешением двух фаз при простом перемешивании
или при применении гомогенизатора с системой ротор/статор.
Затем, первичную эмульсию превращают в мелкодисперсную
эмульсию, применяя, например, гомогенизатор высокого давления.
Затем, данную тонкодисперсную эмульсию можно охлаждать,
например, добавлением деионизированной воды при перемешивании.
Примерное соотношение вода для охлаждения:эмульсия может
составлять приблизительно 8:1. Затем, раствор Tween (например,
Tween 80) можно добавлять к охлажденной смеси, получая,
например, приблизительно 2% Tween в сумме, который может
служить для растворения свободного, неинкапсулированного
лекарственного средства. Затем, полученные наночастицы можно
выделить или центрифугированием, или
ультрафильтрацией/диафильтрацией.
Терапевтические агенты
Согласно настоящему изобретению, любые агенты, включая, например, терапевтические агенты (например, противораковые агенты), диагностические агенты (например, контрастные агенты; радионуклиды; и флуоресцентные, люминесцентные и магнитные молекулы), профилактические агенты (например, вакцины) и/или нутрицевтики (например, витамины, минералы и т.д.) можно доставлять описанными наночастицами. Примеры соединений, которые будут доставлять согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются, небольшие молекулы (например цитотоксические агенты), нуклеиновые кислоты (например , миРНК, РНКи и микроРНК агенты), белки (например, антитела), пептиды, липиды, сахара, гормоны, металлы, радиоактивные элементы и соединения, лекарственные средства, вакцины, иммунологические агенты и т.д., и/или их комбинации. В некоторых вариантах осуществления, агент, который будут доставлять, представляет собой агент, пригодный для лечения рака (например, рака груди, легкого или простаты).
Описанные терапевтические наночастицы могут содержать от приблизительно 0,1 до приблизительно 40% вес. терапевтического агента, например, от приблизительно 1 до приблизительно 15% вес, например, от приблизительно 3 до приблизительно 10% вес. (например, от приблизительно 3 до приблизительно б% вес.) например, от приблизительно 2 до приблизительно 2 0 (например, от приблизительно б до приблизительно 10% вес.) или от приблизительно 3 до приблизительно 15, или от приблизительно 4 до приблизительно 12% вес. терапевтического агента.
Активный агент или лекарственное средство могут
представлять собой терапевтический агент, такой как mTor
ингибиторы (например, сиролимус, темсиролимус или эверолимус),
алкалоиды барвинка (например, винорелбин или винкристин),
дитерпеновое производное, таксан (например, паклитаксел или его
производные, такие как DHA-паклитаксел или PG-пакслитакселор,
или доцетаксел), соединение, являющееся бороновым эфиром или
пептидбороновой кислотой (например, бортезомиб),
сердечнососудистое средство (например, диуретик,
сосудорасширяющий агент, ангиотензин-превращающий фермент, бета-блокатор, антагонист альдостерона или антикоагулянт), кортикостероид, антиметаболит или антифолатный агент (например, метотрексат), химиотерапевтический агент (например, эпотилон В) , агент на основе азотистого иприта (например, бендамустин), или активный агент или лекарственное средство может представлять собой миРНК.
В одном ряде вариантов осуществления наполнение
представляет собой лекарственное средство или комбинацию более
одного лекарственного средства. Данные частицы могут быть
пригодны, например, в вариантах осуществления, когда можно
применять молекулу, осуществляющую направленную доставку, для
доставки частицы, содержащей лекарственное средство в
конкретное место в субъекте, например, обеспечивая
локализованную доставку лекарственного средства. Примеры
терапевтических агентов включают химиотерапевтические агенты,
такие как доксорубицин (адриамицин), гемцитабин (гемзар),
даунорубицин, прокарбазин, митомицин, цитарабин, этопозид,
метотрексат, 5-фторурацил (5-FU), алкалоиды барвинка, такие как
винбластин, винорелбин, виндезин или винкристин; блеомицин,
таксаны, такие как паклитаксел (таксол) или доцетаксел
(таксотер), MTOR ингибиторы, такие как сиролимус, темсиролимус
или эверолимус, алдеслейкин, аспарагиназа, соединения,
являющиеся боронатными эфирами или пептидбороновой кислотой,
такие как бортезомиб, бусульфан, карбоплатина, кладрибин,
камптотецин, СРТ-11, 10-гидрокси-7-этилкамптотецин (SN38),
дакарбазин, S-I капецитабин, фторафур, 5'-дезоксифторуридин,
UFT, энилурацил, дезоксицитидин, 5-азацитозин, 5-
азадезоксицитозин, аллопуринол, 2-хлораденозин, триметрексат,
аминоптерин, метилен-10-деазаминоптерин (MDAM), оксалиплатину,
пикоплатину, тетраплатину, сатраплатину, платину-DACH,
дигексаноат платины (IV), ормаплатину, CI-973, JM-216,
эпирубицин, этопозидфосфат, 9-аминокамптотецин, 10,11-
метилендиоксикамптотецин, каренитецин, 9-нитрокамптотецин, TAS 103, L-фенилаланиновый иприт, ифосфамид, мефосфамид, перфосфамид, трофосфамидкармустин, семустин, бендамустин,
эпотилоны А-Е, томудекс, б-меркаптопурин, б-тиогуанин, амсакрин, каренитецин, ацикловир, валацикловир, ганцикловир, амантадин, римантадин, ламивудин, зидовудин, бевацизумаб, трастузумаб, ритуксимаб, будесонид, и их комбинации, или терапевтический агент может представлять собой миРНК.
Неограничивающие примеры потенциально подходящих
лекарственных средств включают противораковые агенты, включая,
например, доцетаксел, митоксантрон и гидрохлорид митоксантрона.
В другом варианте осуществления наполнение может представлять
собой противораковое лекарственное средство, такое как 20-эпи-
1,25-дигидроксивитамин D3,4-ипомеанол, 5-этинилурацил, 9-
дигидротаксол, абиратерон, ацивицин, акларубицина, гидрохлорид
акодазола, акронин, ацилфульвен, адеципенол, адозелезин,
алдеслейкин, полностью^к-антагонисты, альтретамин, амбамустин,
амбомицин, аметантронацетат, амидокс, амифостин,
аминоглютетимид, аминолевулиновая кислота, амрубицин, амсакрин,
анагрелид, анастрозол, андрографолид, ингибиторы ангиогенеза,
антагонист D, антагонист G, антареликс, антрамицин, анти-
дорсализирующий морфогенетический белкок-1, антиэстроген,
антинеопластон, антисмысловые олигонуклеотиды,
афидиколинглицинат, модуляторы генов апоптоза, регуляторы
апоптоза, апуриновая кислота, ARA-CDP-DL-PTBA,
аргининдеаминаза, аспарагиназа, асперлин, азулакрин, атаместан, атримустин, аксинастатин 1, аксинастатин 2, аксинастатин 3, азацитидин, азасетрон, азатоксин, азатирозин, азетепа, азотомицин, производные баккатина III, баланол, батимастат, бензохлорины, бензодепа, бензоилстауроспорин, производные бета-лактамов, бета-алетин, бетакламицин В, бетулиновая кислота, BFGF ингибитор, бикалутамид, бизанртен, гидрохлорид бизантрена, бизазуидинил спермин, биснафид, бимнафиддимезилат, бистратен, бизелецин, блеомицин, блеомицинсульфат, BRC/ABL антагонисты, брефлат, бреквинар натрия, бропиримин, будотитан, бусульфан, бутионинсульфоксимин, кактиномицин, кальципотриол, калфостин С, калустерон, производные камптотецина, канарипокс IL-2, капецитабин, карацераид, карбетимер, карбоплатина, карбоксамид-аминотриазол, карбоксиамидотриазол, карест МЗ, кармустин, эрн
700, ингибитор, полученный из хрящей, гидрохлорид карубицина,
карзелезин, ингибиторы казеинкиназы, кастаноспермин, цекропин
В, цедефингол, цетрореликс, хлорамбуцил, хлорины,
хлорхиноксалинсульфонамид, цикапрост, циролемузин, цисплатина,
цис-порфирин, кладрибин, аналоги кломифена, клотримазол,
коллисмуцин, коллисмуцин В, комбретастатин А4, аналоги
комбретастатина, конагенин, крамбесцидин 816, криснатол,
криснатолмезилат, криптофицин 8, производные криптофицина,
курацин, циклопентантрахиноны, циклофосфамид, циклоплатам,
ципемицин, цитарабин, цитарабинокфосфат, цитолитический фактор,
цитостатин, дакарбазин, дакликсимаб, дактиномицин, гидрохлорид
даунорубицина, децитабин, дегидродидемнин В, деслорелин,
дексифосфамид, дексормаплатина, дексразоксан, дексверапамил,
дезагуанин, дезгуанинмезилат, диазиквон, дидемнин В, дидокс,
диэтихиорспермин, дигидро-5-азацитидин, диоксамицин,
дифенилспиромустин, доцетаксел, докозанол, доласетрон,
доксифлуридин, доксорубицин, доксорубицингидрохлорид,
дролоксифен, дролоксифенцитрат, дромостанолонпропионат,
дронабинол, дуазомуцин, дуоканницин SA, эбселен, экомустин,
эдатрексат, эделфозин, эдреколомаб, эфломитин, гидрохлорид
эфломитина, элемен, элсарнитруцин, эмитефур, энлоплатина,
энпромат, эпипропидин, эпирубицин, гидрохлорид эпирубицина,
эпристерид, эрбулозол, векторная система для эритроцитной
генной терапии, гидрохлорид эзорубицина, эстрамустин, аналоги
эстрамустина, эстрамустинфосфат натрия, агонисты эстрогена,
антагонисты эстрогена, этанидазол, этопозид, этопозидфосфат,
этоприн, экземестан, фадрозол, гидрохлорид фадрозола,
фазарабин, фенретинид, филграстим, финастерид, флавопиридол,
флезеластин, флоксуридин, флуастерон, флударабин,
флударабинфосфат, гидрохлорид фтордаунорубицина, фторурацил,
флуроцитабин, форфенимекс, форместан, фосквидон, фостриецин,
фостриецин натрия, фотемустин, тексафирин гадолиния, нитрат
галлия, галоцитабин, ганиреликс, ингибиторы желатиназы,
гемцитабин, гидрохлорид гемцитабина, ингибиторы глутатиона,
хепсульфам, герегулин, гексаметиленбисацетамид,
гидроксимочевина, гиперицин, ибандроновая кислоты, идарубицин,
гидрохлорид идарубицина, идоксифен, идрамантон, ифосфамид,
ихнофозин, иломастат, имидазоакридоны, имиквимод,
иммуностимулирующие пептиды, ингибитор рецептора
инсулиноподобного фактора роста-1, агонисты интерферона,
интерферон альфа-2А, интерферон альфа-2В, интерферон альфа-Nl,
интерферон альфа-ЫЗ, интерферон бета-IA, интерферон гамма-ЕВ,
интерфероны, интерлейкины, йобенгуан, йододоксорубицин,
ипроплатм, иринотекан, гидрохлорид иринотекана, ироплакт,
ирсогладин, изобенгазол, изогомохаликондрин В, итазетрон,
ясплакинолид, кахалалид F, ламелларин-N триацетат, ланреотид,
ланреотидацетат, лейнамицин, ленограстим, лентинансульфат,
лептолстатин, летрозол, фактор, ингибирующий лейкемию,
лейкоцитарный альфа-интерферон, лейпролидацетат,
лейпролид/эстроген/прогестерон, лейпрорелин, левамизол,
лиарозол, гидрохлорид лиарозола, линейный полиаминовый аналог,
липофильный дисахаридный пептид, липофильные платиновые
соединения, лиззоклинамид, либаплатина, ломбрицин, лометрексол,
лометрексол натрия, ломустин, лонидамин, лозоксантрон,
гидрохлорид лозоксантрона, ловастатин, локсорибин, луртотекан,
тексафирин лютеция, лизофиллин, литические пептиды, маитанзин,
манностатин А, маримастат, мазопрокол, маспин, ингибиторы
матрилизина, ингибиторы матриксной металлопротеазы, майтанзин,
гидрохлорид меклоретамина, мегестролацетат, меленгестролацетат,
мелфалан, меногарил, мербарон, меркаптопурин, метерелин,
метиониназа, метотрексат, метотрексат натрия, метоклопрамид,
метоприн, метуредепа, ингибиторы протеникиназы С
микроводоросли, MIF ингибитор, мифепристон, милтефозин,
миримостим, неокмлпементарные двухцепочечные РНК, митиндомид,
митокарцин, митокромин, митогиллин, митогуазон, митолактол,
митомалцин, митомицин, митомициновые аналоги, митонафид,
митоспер, митотан, митотоксиновый фактор роста фибробластов-
сапорин, митоксантрон, гидрохлорид митоксантрона, мофаротен,
молграмостим, моноклональные антитела, хорионический
гонадотропный гормон, монофосфориллипид а/микобактериальная клеточная стенка SK, мопидамол, ингибитор гена множественной лекарственной устойчивости, терапия на основе множественного
опухолевого супрессора 1, ипритные противораковые агенты,
микапероксид В, экстракт микробактериальных клеточных стенок,
микофеноловая кислота, мириапорон, н-ацетилдиналин, нафарелин,
нагрестип, налоксон/пентазоцин, напавин, нафтерпин,
нартограстим, недаплатин, неморубицин, неридроновая кислота,
нейтральная эндопептидаза, нилутамид, низамуцин, модуляторы
оксида азота, нитроксидный антиоксидант, нитруллин, нокодазол,
ногаламицин, N-замещенные бензамиды, 0б-бензилгуанин,
октреотид, окиценон, олигонуклеотиды, онапристон, ондансетрон,
орацин, пероральный индуктор цитокинов, ормаплатина, озатерон,
оксалиплатина, оксауномицин, оксисуран, паклитаксел, аналоги
паклитаксела, производные паклитаксела, палауамин,
пальмитоилризоксин, памидроновая кислота, панакситриол,
паномифен, парабактин, пазеллиптин, пегаспаргаза, пелдезин,
пелиомицин, пентамустин, пентозанполисульфат натрия,
пентостатин, пентрозол, пепломицинсульфат, перфлуброн, перфосфамид, периллиловый спирт, феназиномицин, фенилацетат, ингибиторы фосфатазы, пицибанил, гидрохлорид пилокарпина, пипоброман, пипосульфан, пирарубицин, пиритрексим, гидрохлорид пироксантрона, плацетин, плацетин В, ингибитор активатора плазминогена, комплекс платины, соединения платины, комплекс платина-триамин, пликамицин, пломестан, порфимер натрия, порфиромицин, преднимустин, гидрохлорид прокарбазина, пропил бис-акридон, простагландин J2, антиандрогены для лечения рака предстательной железы, ингибиторы протеасомы, иммуномодулятор на основе белка А, ингибитор протеинкиназы С, ингибиторы протеинтирозинфосфатазы, ингибиторы пуриннуклеозидфосфорилазы, пуромицин, гидрохлорид пуромицина, пурпурины, пиразорурин, пиразолоакридин, конъюгат пиридооксилированного гемоглобина и полиоксиэтилена, антагонисты raf, ралтитрексед, рамосетрон, ингибиторы RAS фарнезилпротеинтрансферазы, ингибиторы RAS, ингибитор RAS-GAP, ретеллиптин деметилированный, рений Re 18 6 этидронат, ризоксин, рибоприн, рибозимы, RH ретинамид, РНКи, роглетимид, рохитукин, ромуртид, роквинимекс, рубигинон В1, рубоксил, сафингол, гидрохлорид сафингола, сайнтопин, саркну, саркофитол А, сарграмостим, SDI1 миметики, семустин, ингибитор
старения 1, смысловые олигонуклеотиды, ингибиторы сигнальной
трансдукции, модуляторы сигнальной трансдукции, симтразен,
белок, связывающийся с одноцепочечным антителом, сизофиран,
собузоксан, борокаптат натрия, фенилацетат натрия, солверол,
соматомедин-связывающий белок, сонермин, спарфозав натрия,
спарфосиновая кислота, спарзомицин, спикамицин D, гидрохлорид
спирогермания, спиромустин, спироплатина, спленопептин,
спонгистатин 1, скваламин, ингибитор стволовых клеток,
ингибитор деления стволовых клеток, стипиамид, стрептонигрин,
стрептозоцин, ингибиторы стромелизина, сульфинозин, сулофенур,
суперактивный вазоактивный кишечный пептидный антагонист,
сурадиста, сурамин, свайнсонин, синтетические
гликозаминогликаны, тализомутин, таллимустин, тамоксифен
метйодид, тауромустин, тазаротен, текогалан натрий, тегафур,
теллурапирилиум, ингибиторы теломеразы, гидрохлорид
телоксантрона, темопорфин, темозоломид, тенипозид, тероксирон,
тестолактон, тетрахлордекаоксид, тетразомин, талибластин,
талидомид, тиамиприн, тиокоралин, тиогуанин, тиотэпа,
тромбопоэтин, тромбопоэтиновый миметик, тималфазин,
тимопоэтиновый рецепторный агонист, тимотринан, тироид-
стимулирующий гормон, тиазофурин, этилэтиопурпурин олова,
тирапазамин, титаноцен дихлорид, гидрохлорид топотекана,
топсентин, торемифен, торемифенцитрат, фактор тотипотентных
стволовых клеток, ингибиторы трансляции, трестолонацетат,
третиноин, триацетилуридин, трицирибин, трицирибинфосфат,
триметрексат, триметрексатглюкуронат, трипторелин, трописетрон,
гидрохлорид тубуллозола, туростерид, ингибиторы тирозинкиназы,
тирфостины, UBC ингибиторы, убенимекс, урамустин, уредепа,
фактор ингибирования роста из мочеполового синуса, антагонисты
рецептора урокиназы, вапреотид, вариолин В, веларезол, верамин,
вердинс, вертепорфин, винбластинсульфат, винкристинсульфат,
виндезин, виндезинсульфат, винепидинсульфат,
винглицинатсульфат, винлеурозинсульфат, винорелбин или
винорелбинтартрат, винрозидинсульфат, винксалтин,
винзолидинсульфат, витаксин, ворозол, занотерон, зениплатина, зиласкорб, зиностатин, стималам.
Активный агент или лекарственное средство может представлять собой НПВП или его фармацевтически приемлемую соль. Например, НПВП может представлять собой производное уксусной кислоты, производное пропионовой кислоты, салицилат, селективный СОХ-2 ингибитор, сульфонанилиды, производное фенаминовой кислоты или производное эноловой кислоты. Неограничивающие примеры НПВН включают диклофенак, кеторолак, аспирин, дифлунизал, салсалат, ибупрофен, напроксен, фенопрофен, кетопрофен, флурбипрофен, оксапрозина, локсопрофен, индометацин, сулиндак, этодолак, кеторолак, диклофенак, набуметон, пироксикам, мелоксикам, теноксикам, дроксикам, лорноксикам, изоксикам, мефенамовую кислоту, меклофенамовую кислоту, флуфенамовую кислоту, толфенамовую кислоту, целекоксиб, рофекоксиб, валдекоксиб, парекоксиб, лумиракоксиб, эторикоксиб, фирококсиб, нимесулид и ликофелон.
В одном варианте осуществления активный агент может (или в другом варианте осуществления, может не быть) быть конъюгирован, например, с описанным гидрофобным полимером, который образует часть описанной наночастицы, например, активный агент, такой как НПВП может быть конъюгирован (например, ковалентно связан, например, непосредственно или через линкерную группу, такую как линкерная группа, содержащая, например, -NH-алкилен-С(О)-, -NH-алкилен-О-алкилен-С(О)-, -NH-алкилен-С(О)-О-алкилен-С(О)- или -ЫН-алкилен-Б-) с PLA или PGLA, или PLA или PLGA частью сополимера, такого как PLA-PEG или PLGA-PEG, или гидрохлоридом зорубицина.
Композиции и способы лечения
Наночастицы, описанные в настоящем изобретении, можно комбинировать с фармацевтически приемлемыми носителями, получая фармацевтическую композицию. Как ясно специалисту в данной области техники, носители можно выбрать на основе пути введения, как описано ниже, расположения ткани-мишени, лекарственного средства, которое будут доставлять, динамики доставки лекарственного средства и т.д.
Фармацевтические композиции и частицы, описанные в настоящем изобретении, можно вводить пациенту любым способом,
известным в данной области техники, включая пероральные и парентеральные пути. Термин "пациент", как применяют в настоящем изобретении, относится к людям, а также другим животным, включая, например, млекопитающих, птиц, рептилий, амфибий и рыб. Например, животное, отличное от человека, может быть млекопитающим (например, грызуном, мышью, крысой, кроликом, обезьяной, собакой, кошкой, приматом или свиньей). В определенных вариантах осуществления парентеральные пути являются желательными, поскольку они избегают контакт с пищеварительными ферментами, которые присутствуют в желудочно-кишечном тракте. Согласно данным вариантам осуществления композиции настоящего изобретения можно вводить инъекцией
(например, внутривенно, подкожно или внутримышечно, интраперитонеальной инъекцией), ректально, вагинально, местно
(в виде порошков, кремов, мазей или капель) или ингаляцией (в виде спрея).
В конкретном варианте осуществления описанные наночастицы можно вводить субъекту, нуждающемуся в лечении, системно, например, внутривенным вливанием или инъекцией.
Инъецируемые препараты, например, стерильные инъецируемые водные или масляные суспензии можно формулировать согласно известному уровню техники, применяя подходящие диспергирующие или смачивающие агенты и суспендирующие агенты. Стерильный инъецируемый препарат может также представлять собой стерильный инъецируемый раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Приемлемые среды и растворители, которые можно применять, включают воду, раствор Рингера, U.S.Р. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные жирные масла традиционно применяют в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для данной цели можно применять любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, можно применять в получении инъецируемых препаратов. В одном варианте осуществления конъюгат настоящего изобретения суспендируют в жидком носителе, содержащем 1% (w/v)
карбоксиметилцеллюлозу натрия и 0,1% (v/v) TWEEN(tm) 80. Инъецируемые составы можно стерилизовать, например, фильтрованием через фильтр, задерживающий бактерии, или введением стерилизующих агентов в виде стерильных твердых композиций, которые можно растворять или диспергировать в стерильной воде или другой стерильной инъецируемой среде перед применением.
Твердые лекарственные формы для перорального введения
включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В данных
твердых лекарственных формах, инкапсулированный или
неинкапсулированный конъюгат смешивают, по меньшей мере, с
одним инертным, фармацевтически приемлемым вспомогательным
веществом или носителем, таким как цитрат натрия или фосфат
дикальция и/или (а) наполнителями или разбавителями, такими как
крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннитол и кремниевая
кислота, (Ь) связующими, такими как, например,
карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин,
поливинилпирролидон, сахароза и камедь, (с) увлажнителями, такими как глицерин, (d) разрыхлителями, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или маниоковый крахмал, альгиновая кислота, определенные силикаты и карбонат натрия, (е) агентами, замедляющими растворение, такими как парафин, (f) ускорителями поглощения, такими как четвертичные аммониевые соединения, (д) увлажняющими агентами, такими как, например, цетиловый спирт и глицеринмоностеарат, (h) абсорбентами, такими как каолин и бентонитовая глина, и (i) смазывающими агентами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль, лекарственная форма может также содержать буферы.
Описанные наночастицы можно формулировать в виде единичных лекарственных форм для простоты введения и однородности дозирования. Выражение "единичная лекарственная форма", как применяют в настоящем изобретении, относится к физически дискретной единице наночастицы, подходящей для пациента, которого будут подвергать лечению. Для любой наночастицы,
терапевтически эффективную дозу можно оценить первоначально или анализами на клеточных культурах или в моделях животных, обычно мышей, кроликов, собак или свиней. Животную модель можно также применять для получения требуемого диапазона концентраций и пути введения. Затем, данную информацию можно применять для определения подходящих доз и путей введения людям. Терапевтическую эффективность и токсичность наночастиц можно определить стандартными фармацевтическими способами на культурах клеток или экспериментальных животных, например, ED50 (доза является терапевтически эффективной для 50% популяции) и LD50 (доза является смертельной для 50% популяции). Отношение дозы токсического к терапевтическому эффекту представляет собой терапевтический индекс, и его можно выразить как отношение LD50/ED50. Фармацевтические композиции, которые имеют большие терапевтические индексы, могут быть пригодными в некоторых вариантах осуществления. Данные, полученные на культурах клеток и в исследованиях на животных, можно применять для получения диапазоне доз для применения на человеке.
В одном примерном варианте осуществления описывают фармацевтическую композицию, которая содержит большое количество наночастиц, причем каждая содержит терапевтический агент и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
В некоторых вариантах осуществления предусмотрена
композиция, подходящая для замораживания, содержащая
наночастицы, описанные в настоящем изобретении, и раствор,
пригодный для замораживания, например, раствор сахара
(например, сахарозы) добавляют к суспензии наночастиц. Сахароза
может, например, действовать как криопротектор, предотвращающий
агрегацию частиц при замораживании. Например, настоящее
изобретение относится к составу наночастиц, содержащему большое
количество описанных наночастиц, сахарозу и воду; где,
например, наночастицы/сахароза/вода присутствуют при
соотношении приблизительно 5-10%/10-15%/80-90% (w/w/w).
В некоторых вариантах осуществления терапевтические частицы, описанные в настоящем изобретении, можно применять для лечения, облегчения, амелиорации, облегчения, замедления
возникновения, ингибирования развития, снижения тяжести и/или снижение частоты возникновения одного или более симптомов или признаком заболевания, расстройства и/или состояния. Например, описанные терапевтические частицы, которые содержат таксан, например, доцетаксел, можно применять для лечения рака, такого как рак груди, легкого или простаты у пациента, нуждающегося в лечении. Другие типы опухолевых и раковых клеток, которые можно лечить терапевтическими частицами настоящего изобретения, включают все типы солидных опухолей, такие как солидные опухоли, которые связаны со следующими типами рака: легкого, плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ), поджелудочной железы, толстой кишки, ректальный, пищевода, простаты, молочной железы, яичников, почки, лимфома и меланома. Опухоль может быть связана с раком (т.е., расположена в) полости рта и глотки, пищеварительной системы, дыхательной системы, костей и суставов (например, костные метастазы), мягких тканей, кожи (например, меланома), молочной железы, половой системы, мочеполовой системы, глаза и глазницы, мозга и нервной системы (например, глиома) или эндокринной системы (например, щитовидной железы), и не обязательно являться первичной опухолью. Ткани, связанные с полостью рта, включают, но не ограничиваются, язык и ткани рта. Рак может возникать в тканях пищеварительной системы, включая, например, пищевод, желудок, тонкую кишку, толстую кишку, прямую кишку, анус, печень, желчный пузырь и поджелудочную железу. Рак респираторной системы может воздействовать на гортань, легкое и бронхи и включает, например, немелкоклеточный рак легкого. Опухоли могут возникать в шейке матки, теле матки, яичниках, вульве, влагалище, простате, яичках и половом члене, которые образуют мужскую и женскую половую систему, и мочевом пузыре, почке, почечной лоханке, мочеточнике, которые образуют мочевыделительную систему.
Описанные способы лечения рака (например, рака груди или простаты) могут включать введение терапевтически эффективного количества описанных терапевтических частиц субъекту, нуждающемуся в лечении, в таких количествах и в течение такого
периода времени, которые необходимы для получения требуемого результата. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения "терапевтически эффективное количество" обозначает количество, эффективное для лечения, облегчения, амелиорации, облегчения, замедления возникновения, ингибирования развития, снижения тяжести и/или снижения частоты возникновения одного или более симптомов или признаков, например, рака, который лечат.
Настоящее изобретение также относится к терапевтическим протоколам, которые включают введение терапевтически эффективного количества описанной терапевтической частицы здоровому индивиду (т.е., субъекту, который не проявляет симптомов рака и/или которому не поставлен диагноз рак). Например, здоровые индивиды могут быть "иммунизированы" частицами настоящего изобретения с направленной доставкой перед развитием рака и/или возникновением симптомов рака; индивидов группы риска (например, пациенты, которые имеют семейную историю рака; пациенты, несущие одну или более генетических мутаций, связанных с развитием рака; пациенты, имеющие генетический полиморфизм, связанный с развитием рака; пациенты, инфицированные вирусом, связанным с развитием рака; пациенты с привычками и/или образом жизни, связанными с развитием рака, и т.д.) можно лечить по существу одновременно (например, в течение 48 часов, в течение 24 часов или в течение 12 часов) с возникновением симптомов рака. Конечно, индивиды, о которых известно, что они страдают от рака, подвергаются лечению настоящего изобретения в любое время.
В других вариантах осуществления описанные наночастицы можно применять для ингибирования роста раковых клеток, например, раков клеток груди. Как применяют в настоящем изобретении, термин "ингибировать рост раковых клеток " или "ингибирование роста раковых клеток" относится к любому замедлению скорости пролиферации и/или миграции раковых клеток, остановке пролиферации и/или миграции раковых клеток, или уничтожению раковых клеток, так что скорость роста раковых клеток снижается по сравнению с наблюдаемой или предсказанной
скоростью роста необработанных контрольных клеток. Термин "ингибировать рост" может также относится к снижению размера или исчезновению раковых клеток или опухоли, а также к снижению их метастического потенциала. Предпочтительно, данное ингибирование на клеточном уровне может снижать размер, сдерживать рост, снижать агрессивность, или предотвращать или ингибировать метастаз рака у пациента. Специалист в данной области техники легко определит любым из ряда подходящих признаков, ингибируется ли рост раковых клеток.
Ингибирование раковых клеток может быть очевидным, например, остановкой раковых клеток в конкретной фазе клеточного цикла, например, остановкой на G2/M фазе клеточного цикла. Ингибирование роста раковых клеток может также быть очевидным из прямого или косвенного измерения раковых клеток или размера опухоли. У пациентов, являющихся людьми с раком, данные измерения обычно осуществляют, применяя известные способы получения изображения, такие как магнитно-резонансная томография, аксиальная компьютерная томография и рентгеновский анализ. Рост раковых клеток можно также определить косвенно, например, определением концентрации циркулирующего в крови карциноэмбрионального антигена, специфического антигена простаты или других специфических для рака антигенов, которые связаны с ростом раковых клеток. Ингибирование раковых клеток также обычно коррелирует с длительным выживанием и/или улучшенным здоровьем и хорошим состоянием субъекта.
ПРИМЕРЫ
Т.к. настоящее изобретение в настоящее время описано в общем, оно будет более понятно исходя из следующих примеров, которые включены только с целью иллюстрации определенных аспектов и вариантов осуществления настоящего изобретения, и не предполагается, что они ограничивают настоящее изобретение любым способом.
Пример 1 Получение PLA-PEG
Получение осуществляют полимеризацией с раскрытием кольца d,1-лактида а-гидрокси-о-метоксиполи(этиленгликолем) в качестве макроинициатора, и проводят при повышенной температуре,
Полимер очищают растворением полимера в дихлорметане, осаждением его в смеси гексана и диэтилового эфира. Полимер, выделенный на данной стадии, сушат в сушильном шкафу.
Пример 2 Наночастицы доцетаксела
Наночастицы доцетаксела, содержащие различные PLA-PEG сополимеры, получают, применяя следующий состав: 10% (w/w) теоретическое лекарственное средство и 90% (w/w) полимер-PEG (16-5, 30-5, 50-5 или 80-5 PLA-PEG). % суммарный твердых веществ = 30%. Применяемыми растворителями являются 21% бензиловый спирт и 7 9% этилацетат (w/w). Для порции 1 грамм, 100 мг лекарственного средства смешивают с 900 мг полимера-PEG (16-5, 30-5, 50-5 или 80-5 PLA-PEG).
Наночастицы доцетаксела получают следующим образом. Для того чтобы получить раствор лекарственное средство/полимер, подходящие количества доцетаксела и полимера добавляют в стеклянную пробирку вместе с подходящими количествами этилацетата и бензилового спирта. Смесь перемешивают до полного растворения лекарственного средства и полимера.
Получают водный раствор. 16-5 PLA-PEG состав содержит 0,5% холата натрия, 2% бензилового спирта и 4% этилацетата в воде. 30-5 PLA-PEG состав содержит 5% холата натрия, 2% бензилового спирта и 4% этилацетата в воде, % суммарный твердых веществ = 20%. 50-5 PLA-PEG состав содержит 5% холата натрия, 2% бензилового спирта и 4% этилацетата в воде, % суммарный твердых веществ = 20%. 80-5 PLA-PEG состав содержит 5% холата натрия, 2% бензилового спирта и 4% этилацетата в воде, % суммарный твердых веществ = 20%. При применении полимер-PEG с большим молекулярным весом (т.е. 30-5, 50-5 или 80-5 PLA-PEG),
концентрацию холата натрия, являющегося поверхностно-активным веществом, в водной фазе повышают с 0,5% до 5% для того чтобы получить наночастицы с размерами, аналогичными размерам частиц, содержащих 16-5 PLA-PEG. Конкретно, подходящие количества холата натрия и DI воды добавляют в пробирку и смешивают, применяя плитку для магнитной мешалки до их растворения. Затем, подходящие количества бензилового спирта и этилацетата добавляют к смеси холат натрия/вода и смешивают, применяя плитку для магнитной мешалки до их полного растворения.
Эмульсию получают смешением органической фазы с водным раствором при соотношении 5:1 (водная фаза:масляная фаза). Органическую фазу выливают в водный раствор и гомогенизируют, применяя ручной гомогенизатор при комнатной температуре, получая грубую эмульсию. Затем, раствор пропускают через гомогенизатор с высоким давлением (110S), получая наноэмульсию.
Эмульсию охлаждают в холодной DI воде при <5°С при перемешивании на плитке для магнитной мешалки. Отношение охлаждающей воды к эмульсии составляет 8:1. Затем, добавляют Tween 80 в воде к охлажденной эмульсии при соотношении 25:1 (Tween 80:лекарственное средство).
Наночастицы концентрируют с помощью тангенциальной поточной фильтрации (TFF), с последующей диафильтрацией, удаляя растворители, неинкапсулированное лекарственное средство и агент, способствующий растворению. Охлажденную эмульсию первоначально концентрируют через TFF, применяя 300 кДа Pall кассету (2 мембраны) до приблизительно 100 мл объема. За этим следует диафильтрация, применяя приблизительно 2 0 диаобъемов (2 л) холодной DI воды. Объем сокращают добавлением 100 мл холодной воды в емкость и прокачивают через мембрану для промывки. Приблизительно 100-18 0 мл материала собирают в стеклянную пробирку. Наночастицы дополнительно концентрируют, применяя меньший TFF до конечного объема приблизительно 10-2 0 мл.
Для того чтобы определить концентрацию твердых веществ неотфильтрованной конечной суспензии, объем конечной суспензии добавляют в тарированый 2 0 мл сцинтилляционный флакон и сушат в
вакууме в лиофилизаторе/сушильном шкафу. Затем определяют вес наночастиц в объеме лиофилизированной суспензии. Добавляют концентрированную сахарозу (0,ббб г/г) к образцу конечной суспензии, получая конечную концентрацию 10% сахарозы.
Для того чтобы определить концентрацию твердых веществ
0,45 мкм отфильтрованной конечной суспензии, часть образца
конечной суспензии фильтруют перед добавлением сахарозы,
применяя 0,45 мкм шприцевой фильтр. Затем, объем
отфильтрованного образца добавляют в тарированный 2 0 мл
сцинтилляционный флакон и сушат в вакууме в
лиофилизаторе/сушильном шкафу. Оставшийся образец
неотфильтрованной конечной суспензии замораживают с сахарозой.
В таблице А показаны размер частиц и загрузка лекарственного средства наночастиц доцетаксела, полученных, как описано выше.
Таблица А
Полимер
Загрузка DTXL %
Размер (нм)
16/5 PLA/PEG
4, 05
110,70
3 0/5 PLA/PEG
1,48
129,00
50/5 PLA/PEG
2,75
170,60
8 0/5 PLA/PEG
3, 83
232,00
Как показано в таблице А, наночастицы доцетаксела, содержащие 50-5 PLA-PEG и 8 0-5 PLA-PEG, дают загрузку лекарственного средства приблизительно 2,75% и 3,83%, соответственно.
Испытание на in vitro высвобождение осуществляют для наночастиц доцетаксела, описанных выше. Как показано на фигуре 3, введение 50-5 PLA-PEG или 80-5 PLA-PEG замедляет высвобождение доцетаксела из наночастиц по сравнению с наночастицами, содержащими PLA-PEG с меньшим молекулярным весом.
Пример 3 Наночастицы бортезомиба
Наночастицы бортезомиба, содержащие различные PLA-PEG сополимеры, получают, применяя следующий состав: 30% (w/w) теоретическое лекарственное средство и 70% (w/w) полимер-PEG
(16/5, 30-5, 50-5, 65-5 или 80-5 PLA-PEG). % суммарный твердых веществ = 20%. Применяемыми растворителями являются 21% бензиловый спирт и 7 9% этилацетат (w/w). Для порции 1 грамм, 300 мг лекарственного средства смешивают с 7 00 мг полимер-PEG
(16/5, 30-5, 50-5, 65-5 или 80-5 PLA-PEG).
Наночастицы бортезомиба получают, применяя способ, аналогичный способу, описанному выше для наночастиц доцетаксела.
В таблице В приведены размер частиц и загрузка лекарственного средства наночастиц бортезомиба, полученных, как описано выше.
Испытание на in vitro высвобождение осуществляют для наночастиц бортезомиба, описанных выше. Как показано на фигуре 4, введение 50-5 PLA-PEG замедляло высвобождение бортезомиба из наночастиц.
Пример 4 Наночастицы винорелбина
Наночастицы винорелбина, содержащие или 16-5 или 50-5 PLA-PEG сополимер, получают, применяя следующий состав: 20% (w/w) теоретическое лекарственное средство и 80% (w/w) полимер-PEG (16/5 или 50-5 PLA-PEG) . Для наночастиц, содержащих 16-5 PLA-PEG: % суммарный твердых веществ = 2 0%; для наночастиц, содержащих 50-5 PLA-PEG: % суммарный твердых веществ = 30%. Для всех наночастиц: применяемые растворители представляют собой 21% бензиловый спирт и 79% этилацетат (w/w).
Наночастицы винорелбина получают применяя способ, аналогичный способу, описанному выше для наночастиц доцетаксела.
В таблице С приведены размер частиц и загрузка
лекарственного средства наночастиц винорелбина, полученных, как описано выше.
Испытание на in vitro высвобождение осуществляют для наночастиц винорелбина, описанных выше. Как показано на фигуре 5, введение 50-5 PLA-PEG замедляло высвобождение винорелбина из наночастиц.
Пример 5 Наночастицы винкристина
Наночастицы винкристина, содержащие или 16-5 или 50-5 PLA-PEG сополимер, получают применяя следующий состав: 20% (w/w) теоретическое лекарственное средство и 80% (w/w) полимер-PEG (16/5 или 50-5 PLA-PEG) . Для наночастиц, содержащих 16-5 PLA-PEG: % суммарный твердых веществ = 4 0%; для наночастиц, содержащих 50-5 PLA-PEG: % суммарный твердых веществ = 2 0%. Для всех наночастиц: применяемые растворители представляют собой 21% бензиловый спирт и 7 9% этилацетат (w/w).
Наночастицы винкристина получают применяя способ, аналогичный способу, описанному выше для наночастиц доцетаксела.
В таблице D приведены размер частиц и загрузка лекарственного средства наночастиц винкристина, полученных, как описано выше.
наночастиц винкристина, описанных выше. Как показано на фигуре б, введение 50-5 PLA-PEG замедляло высвобождение винкристина из наночастиц.
Пример 6 Наночастицы бендамустина
Наночастицы бендамустина НС1, содержащие или 16-5 или 50-5 PLA-PEG сополимер, получают применяя следующий состав: 17% (w/w) теоретическое лекарственное средство и 83% (w/w) полимер-PEG (16/5 или 50-5 PLA-PEG) при 20% (w/w) концентрации полимера в хлористом метилене. Бендамустин НС1 комплектуют с тетрафенилборатом натрия при 1:1 соотношении. % суммарный твердых веществ = 40%. Применяемые растворители представляют собой 32% бензиловый спирт и 68% хлористый метилен (w/w).
Наночастицы бендамустина получают применяя способ, аналогичный способу, описанному выше для наночастиц доцетаксела.
В таблице Е приведены размер частиц и загрузка лекарственного средства наночастиц бендамустина, полученных, как описано выше.
Испытание на in vitro высвобождение осуществляют для наночастиц бендамустина, описанных выше. Как показано на фигуре 7, введение 50-5 PLA-PEG замедляло высвобождение винкристина из наночастиц.
Пример 7 Наночастицы диклофенака
Наночастицы диклофенака получают, применяя способ, аналогичный способу, описанному выше для наночастиц доцетаксела. Для определения in vitro высвобождение диклофенака из наночастиц, наночастицы суспендируют в среде для высвобождения 10% Tween 2 0 в PBS и выдерживают на водяной бане при 37°С в условиях достаточного разбавления. Образцы собирают
в определенные моменты времени. Способ ультрацентрифугирования применяли для отделения высвободившегося лекарственного средства из наночастиц.
Таблица F
Состав диклофенака, применяя PLA/PEG сополимеры с различными
Фигура 8 показывает in vitro высвобождение диклофенака из наночастиц из таблицы F. Высвобождение диклофенака осуществляется полностью в пределах приблизительно 1-2 часов.
Пример 8 Наночастицы кеторолака
Наночастицы кеторолака получают, применяя способ, аналогичный способу, описанному выше для наночастиц доцетаксела.
Таблица G
Состав кеторолака, применяя PLA/PEG сополимеры с различными молекулярными весами и разбавление гомополимером PLA.
Состав
API
теоретическая загрузка (%)
Концентрация
твердых веществ (%)
Загрузка кеторолака
(%)
Размер (нм)
16/5 PLA/PEG
4,50
116, 4
16/5 PLA/PEG
4,86
99, 8
50/5 PLA/PEG
0, 13
109, 7
16/5 PLA/PEG +80 кДа PLA разбавленный
0, 17
105, 6
Полимерные наночастицы, полученные из сополимера PLA и PEG, применяли в качестве носителя, в которых захватывалось вплоть до 30% w/w кеторолака (свободная кислота), давая состав. Как можно видеть из таблицы G, найдено, что загрузка лекарственного средства составляет приблизительно 4,5% для 16/5 PLA/PEG полимерных составов, показывая 15-24% эффективность захвата лекарственного средства. При формулировании наночастиц с 50/5 PLA/PEG, эффективность захвата кеторолака составляла 0,13% загрузки лекарственного средства и, таким образом, 0,43% эффективность инкапсулирования. Разбавление высокомолекулярным PLA гомополимером (80 кДа) 16/5 PLA/PEG также показывало 0,17% загрузку лекарственного средства. Фигура 9 показывает in vitro высвобождение кеторолака из наночастиц из таблицы G. Высвобождение кеторолака осуществлялось полностью в пределах приблизительно 2 часов.
Таблица Н
Влияние концентрации твердых веществ и концентрации холата натрия (SC) на загрузку кеторолака с 50/5 PLA/PEG
сополимерами.
Состав
API
теоретическая загрузка (%)
Концентрация
твердых веществ (%)
Загрузка кеторолака
(%)
Размер (нм)
% SC & # проходов через гомогенизатор
50/5 PLA/PEG
1,76
136,1
0, 48% 5 проходов
50/5 PLA/PEG
0,59
136, 0
1,1% 3 прохода
50/5 PLA/PEG
0,53
142,7
1,78% 3 прохода
Составы с концентрациями твердых веществ 10%, 15% и 20% с фиксированным отношением лекарственного средства к полимеру (30:70) получали для исследования влияния концентрации твердых веществ на загрузку лекарственного средства (Таблица Н) . По мере снижения концентрации твердых веществ, концентрация холата натрия (SC) также снижалась, давая подходящий размер частиц. Состав с 10% концентрацией твердых веществ с меньшей SC давал большую загрузку лекарственного средства, чем составы с 15 и 2 0% концентрацией твердых веществ.
Пример 9 Наночастицы рофекоксиба
Рофекоксиб инкапсулировали, применяя способы, приведенные выше. Таблица I и фигура 10 показывают высвобождение лекарственного средства из наночастиц, полученных из 16/5 PLA/PEG, 50/5 PLA/PEG, 65/5 PLA/PEG и 65/5 PLA/PEG с 80кДа PLA. Испытание на in vitro высвобождение проводили в 10% Т2 0 в PBS среде для высвобождения, применяя способ центрифугирования.
Таблица I
Состав рофекоксиба в PLA/PEG сополимере с различным молекулярным весом и разбавление гомополимером PLA
Состав
API
теоретическая загрузка (%)
Концентрация
твердых веществ (%)
Загрузка рофекоксиба
(%)
Размер (нм)
16/5 PLA/PEG
10%
1,8
130
50/5 PLA/PEG
10%
2, 8
151
65/5 PLA/PEG
10%
3, 0
159
65/5 PLA/PEG + 8 0 кДа PLA
10%
3, 0
183
Пример 10 Наночастицы целекоксиба
Наночастицы целекоксиба инкапсулировали, применяя способы, описанные выше, с 20%-30% (w/w) теоретического лекарственного средства, % вес, 70-80% (w/w) полимер-PEG и/или гомополимеров (D,L форма), % вес, % суммарный твердых веществ = 20% и 30%% вес; растворители: 21% (ВА) бензиловый спирт, 79% (ЕА) этилацетат (w/w), за исключением, когда указано, (МеС1г) хлористый метилен, % вес. Таблица J показывает влияние молекулярного веса PLA (полимолочной кислоты) и добавления смесей PLA/PLA-PEG на загрузку лекарственного средства и in vitro высвобождение:
16k-5k PLA-PEG/80k PLA lakeshore (35:35)
30%
20%
15, 3
134
50k/5k PLA/PEG:80k PLA Lakeshore blend (20:60)
20%
20%
12, 68
189,2
88,1
16k-5k PLA-PEG/50k-5k
PLA-PEG (17,5:52,5)
30%
20%
17, 6
156
16k/5k PLA-PEG (L-форма) , BA:MeCl2
(21:79 отношение растворителей)
20%
20%
2,58
251,3
94, 9
Добавление PLA-PEG с различным молекулярным весом, смесей 16k-5k PLA-PEG, 50k-5k PLA-PEG, 80k PLA к составам приводило в результате к загрузкам лекарственного средства 13-18%, с in vitro высвобождение 70-98%, высвобождение лекарственного средства через один час выдерживания при 37°С с круговым качанием в условиях достаточного разбавления.
Состав, полученный с L-формой 16k-5k PLA-PEG (т.е. поли(1-молочная)кислота-PEG), полученный с соотношением смеси растворителей бензиловый спирт:хлористый метилен (21:79 w/w), давал в результате значительно меньшую загрузку лекарственного средства 2,58%, с in vitro высвобождением через один час, равным 94,9%. Добавление L-формы 16k-5k PLA-PEG, который является кристаллическим относительно D,L-формы, которая является аморфной, значительно уменьшал инкапсулирование лекарственного средства.
Получали наночастицы с различной загрузкой лекарственного средства, применяя 5-30% (w/w) теоретическое лекарственное средство, % вес, 70-95% (w/w) полимер-PEG и/или гомополимеры (D,L-форма), % вес. % суммарный твердых веществ = 20% и 30% вес. Растворители: 21% (ВА) бензиловый спирт, 79% (ЕА)
этилацетат (w/w), % вес, как показано в таблице К
Таблица К
Влияние загрузки лекарственного средства, являющегося целекоксибом, на загрузку лекарственного средства и in vitro высвобождение:
Теоретическая
загрузка лекарственного средства (%)
% твердых веществ
Загрузка
(%)
Размер (нм)
о о
высвобождение Т=1 час
: 50/5 PLA/PEG
20%
3,48
146,2
: 16/5 PLA/PEG
20%
2,89
128, 9
75/5 PLA/PEG
20%
4,47
223, 9
16-5 PLA-PEG
30%
15, 3
122
50-5 PLA-PEG
20%
18,3
133
65/5 PLA/PEG
20%
14, 49
196, 3
Таблица К показывает, что загрузка лекарственного средства наночастиц влияет на высвобождение лекарственного средства. 505 и 65-5/75-5 PLA-PEG полимер-PEG подвергались влиянию загрузки лекарственного средства, тогда как с 16-5 PLA-PEG, загрузка лекарственного средства не влияла на высвобождение. 16-5 PLA-PEG полимеры с аналогичным размером частиц 122 и 12 9 нм приводили в результате к 98-99% высвобождению лекарственного средства, несмотря на загрузку лекарственного средства. С 50-5 PLA-PEG полимером, меньшая загрузка, 3,48%, приводила в результате к высвобождению лекарственного средства 79% через один час, тогда как при большей загрузке, 18,3%, высвобождение лекарственного средства составляло 96%, оба при одинаковом размере частиц. Составы 65-5 и 75-5 PLA-PEG с 14,49% и 4,47% загрузкой лекарственного средства, соответственно, и высвобождением лекарственного средства 71% и 44%, соответственно, приводили в результате к наименьшему
высвобождению лекарственного средства, но с большими размерами частиц данных партий. Фигура 11 показывает полное высвобождение лекарственного средства.
Наночастицы с низкой загрузкой лекарственного средства, также получали из 5% (w/w) теоретического лекарственного средства, % вес; 95% (w/w) полимер-PEG и/или гомополимеров, % вес, % суммарный твердых веществ = 20-30%, % вес. Растворители: 21% (ВА) бензиловый спирт, 79% (ЕА) этилацетат (w/w), % вес..
Таблица L
Влияние размера наночастиц на in vitro высвобождение при низкой загрузке лекарственного средства:
Теоретическая
загрузка лекарственного средства (%)
% твердых веществ
Загрузка
(%)
Размер (нм)
о о
высвобождение Т=1 час
50-5 PLA-PEG
20%
4, 82
310,7
50-5 PLA-PEG
20%
4, 05
195, 0
50/5 PLA/PEG
20%
3,48
146,2
16-5 PLA-PEG
30%
3,51
164, 0
16-5 PLA-PEG
30%
4, 60
370, 4
Таблица L показывает, что размер частиц влияет на высвобождение лекарственного средства, по мере увеличения размера частиц in vitro высвобождение замедляется при одинаковых загрузках лекарственного средства. При увеличении размера частиц 50-5 PLA-PEG полимера от 146 нм до 310 нм, высвобождение лекарственного средства в течение одного часа снижается с 79% до 28%. Кроме того, данная тенденция наблюдается с 16-5 PLA-PEG. С частицами 164 нм высвобождение в течение одного часа лекарственного средства составляло 96%, тогда как с 37 0 нм частицами высвобождение лекарственного средства составляет 7 6%. Фигура 12 показывает полное
высвобождение.
Пример 11 Дигексаноат Pt(IV)
Наночастицы дигексаноата платины инкапсулировали, применяя способы, описанные выше, с бензиловым спиртом (растворимость лекарственного средства в ВА составляет б, 1 мг/мл) в качестве растворителя полимера и лекарственного средства, с 5% (w/w) теоретической загрузкой лекарственного средства; 95% (w/w) полимер-PEG, 45-5 PLA-PEG; % суммарный твердых веществ = 10%; Растворители: 100% бензиловый спирт. 1 граммовая партия: 50 мг лекарственного средства; 950 мг полимер-PEG: 45-5 PLA-PEG, как показано в таблице М, с данными об in-vitro высвобождении, показанными в таблице Ml.
Таблица М
Параметры состава и свойства наночастиц, применяя только ВА в
Таблица Ml
In vitro высвобождение
Время (часов)
Суммарное высвобождение
(%)
12, 0
65, 6
74,3
80,2
82,20
Для повышения загрузки наночастиц лекарственным средством, можно применять большую теоретическую загрузку лекарственного средства. Несмотря на то, что дигексаноат Pt(IV) имеет растворимость б,1 мг/мл в ВА, самая большая теоретическая загрузка лекарственного средства ограничена меньше, чем б%,
которая может не обеспечивать наночастицы с большей загрузкой лекарственного средства.
Установлено в испытаниях, что растворимость дигексаноата Pt(IV) в DMF является > 112 мг/мл. По сравнению с применением только ВА, дигексаноат Pt(IV) имеет гораздо большую растворимость при смешении DMF с ВА/ЕА. В другом синтетическом исследовании, смеси (21/7 9 ВА/ЕА) и DMF при различных соотношениях применяли в качестве растворителя органической фазы с целью увеличить теоретическую загрузку лекарственного средства увеличением растворимости лекарственного средства. Условия формулирования являются следующими: теоретическая загрузка лекарственного средства: 10% и 20% (w/w); полимер-PEG, 45-5 PLA-PEG: 90% и 80% (w/w); % суммарный твердых веществ: 10%; Растворители: 78% (21/79 бензиловый спирт/этилацетат) + 22% DMF, и 90% (21/79 бензиловый спирт/этилацетат) + 10% DMF. Размер партии 0,5 грамм: 50 мг и 100 мг лекарственного средства, 450 мг и 400 мг полимер-PEG, 45-5 PLA-PEG. BA/DMF смесь применяли в качестве растворителя органической фазы. Получение осуществляли следующим образом:
Получение раствора лекарственного средства/полимера
1.1 В 2 0 мл стеклянную пробирку добавляют дигексаноат Pt(IV), 100 мг
1.2 Добавляют 450 мг диметилформамида к лекарственному средству и перемешивают до образования прозрачного раствора.
1.3 Получают 21/79 ВА/ЕА смесь взвешиванием: 21 г ВА и 79
г ЕА.
1.4 Добавляют 400 мг полимер-PEG в новую 20 мл стеклянную пробирку.
1.5 Добавляют 4 050 мг 21/7 9 ВА ЕА смеси к полимеру и перемешивают до его растворения.
1.6 Смешивают раствор лекарственного средства и полимера перед формулированием добавлением раствора полимера в раствор лекарственного средства и встряхивают.
Получение водного раствора: 0,25% холат натрия, 2% бензиловый спирт, 4% этилацетат в воде:
1.7 В 1 л емкость добавляют 2,5 г холата натрия и 937,5 г
1.7
DI воды и перемешивают на плитке для магнитной мешалки до растворения.
1.8 Добавляют 2 0 г бензилового спирта и 40 г этилацетата к
холату натрия/воде и перемешивают на плитке для магнитной
мешалки до растворения
Получение эмульсии. Отношение водной фазы к масляной фазе составляет 5:1:
1.9 Выливают органическую фазу в водный раствор и гомогенизируют, применяя ручной гомогенизатор, в течение 10 секунд при комнатной температуре, получая грубую эмульсию
1.10 Пропускают раствор через гомогенизатор высокого давления (110S), устанавливая давление на 30 пси на измерителе для 1 прогона.
Получение наночастиц
1.11 Выливают эмульсию в охлаждающую воду (D.I. вода) при <5С при перемешивании на плитке для магнитной мешалки. Отношение охлаждающей воды к эмульсии составляет 5:1
Добавляют 35% (w/w) Tween 8 0 в воде для охлаждения при соотношении 150:1 Tween 80 к лекарственному средству. Концентрирование наночастиц TFF
1.12 Концентрирование охлаждающей воды на TFF с ЗООкДа Pall кассетой (2 мембраны) до -200 мл.
1.13 Диафильтруют ~30 диаобъемов (6 литров) холодной DI воды. Доводят объем до минимального объема.
1.14 Добавляют 100 мл холодной воды в сосуд и прокачивают через мембрану для промывки.
1.15 Собирают материал в стеклянную пробирку, 50-100 мл
Определение концентрации твердых веществ неотфильтрованной
конечной суспензии:
1.16 В тарированный 2 0 мл сцинтилляционный флакон добавляют объем конечной суспензии и сушат в вакууме при 8 0 °С в вакуумном сушильном шкафу.
1.17 Определяют вес наночастиц в данном объеме лиофилизованной суспензии
1.18 Добавляют концентрированную сахарозу (0,111 г/г) к образцу конечной суспензии, получая 10% сахарозу.
1.16
Определение концентрации твердых веществ 0,4 5 мкм отфильтрованной конечной суспензии:
1.19 Фильтруют часть образца конечной суспензии перед добавлением сахарозы через 0,45 мкм шприцевой фильтр
1.2 0 В тарированный 2 0 мл сцинтилляционный флакон добавляют объем отфильтрованного образца и сушат в вакууме при 8 0°С в вакуумном сушильном шкафу.
Замораживают оставшийся образец нефильтрованной конечной суспензии с сахарозой. Таблица МЗ показывает in vitro высвобождение лекарственного средства из наночастицы.
45-5 PLA/PEG, 9/1 (ВА/ЕА)/DMF, 0, 5 г масштаб
10%
10%
0, 89%
125, 1
0,37%, 1@30 пси
4,75
45-5 PLA/PEG, 9/1 (ВА/ЕА)/DMF, 0, 5 г масштаб
10%
10%
1, 53%
136, 5
0,25%, 1@30 пси
5, 15
In-vitro высвобождение
Время (часов)
Суммарное высвобождение (%)
29, 8
24, 0
19, 3
11,5
77,7
49, 9
45, 0
36, 7
87,2
54, 0
51,2
44,2
90,4
58, 8
56, 2
49, 6
94, 7
73,7
25, 8
68, 8
66, 5
74,3
80, 9
76,9
98,3
83,3
78, 1
123, 1
83, 1
82, 1
169, 6
87,4
85, 7
240,3
93, 2
89, 2
338,3
93, 3
93, 7
Дигексаноат Pt(IV) инкапсулировали в PLA-PEG наночастицы способом наноэмульсии. Применяя только ВА в качестве растворителя органической фазы, загружали 0,23% лекарственного средства, что было достаточно небольшой загрузкой и было трудно значительно повысить ее из-за низкой растворимости лекарственного средства в ВА. Наблюдали быстрое in vitro высвобождение при 37°С для данного состава: 65,6% лекарственного средства высвобождались через 1 час, и 80,2% лекарственного средства высвобождались через 4 часа. Применяя ВА смесь с DMF, можно получить составы с большей теоретической загрузкой лекарственного средства. С целью получения 10% и 2 0% загрузки лекарственного средства, сохраняя 10% твердых веществ, получали четыре состава с повышенной загрузкой лекарственного средства. Лот 1 показал быстрое высвобождение с 77,7% лекарственного средства, высвободившимися через 1 час, и 90,4%, высвободившимися через 4 часа. При снижении содержания DMF с 22% до 10%, наночастицы всех лотов 2-41 дают профили с более медленным высвобождением при аналогичных in vitro условиях. Высвобождение после первого часа находится в диапазоне 33% -50%, и высвобождение через 4 часа находится в диапазоне 50% -60%, значительно ниже 80%. Через 24 часа еще оставалось приблизительно 30% невысвободившегося лекарственного средства, которое постепенно высвобождается вплоть до 14 дня.
Из-за ограниченной растворимости в ВА и ЕА, загрузка лекарственного средства является относительно низкой при применении только ВА в качестве органического растворителя. Для дополнительного увеличения загрузки лекарственного средства, (21/7 9 ВА/ЕА) смесь с DMF с успехом внедряли в качестве органического растворителя полимера и лекарственного средства. Наночастицы с повышенной загрузкой лекарственного средства формулировали, применяя способ наноэмульсии. Высвобождение лекарственного средства из наночастиц можно оптимизировать регулированием соотношение компонентов смеси растворителей.
Пример 12 Наночастицы оксалиплатины
Растворимость оксалиплатины в стандартных органических растворителях для наноэмульсии, бензиловом спирте, этилацетате
и хлористном метилене, для всех была ниже 250 мкг/мл. Оксалиплатина является растворимой в воде при ~ 10 мг/мл. Очень низкая растворимость в органическом растворителе и относительно высокая растворимость в воде требует отличных параметров получения для инкапсулирования оксалиплатины в PLA-PEG наночастицы способом наноэмульсии; проблемы, касающиеся загрузки лекарственного средства, оксалиплатины, включают низкую теоретическую загрузку лекарственного средства из-за низкой растворимости в органической фазе и быстрое и значительное просачивание лекарственного средства в процессе эмульгирования из-за высокой растворимости в воде. Применяли следующий способ получения раствора лекарственное средство/полимер:
В 2 0 мл стеклянную пробирку добавляют 300 мг оксалиплатины; 1000 мг диметилформамида добавляют к лекарственному средству и встряхивают до образования прозрачного раствора. Смесь 21/79 ВА (бензиловый спирт)/ЕА (этилацетат) получают взвешиванием: 21 г ВА и 79 г ЕА.
7 00 мг полимер-PEG добавляют в новую 2 0 мл стеклянную пробирку. 3000 мг 21/7 9 ВА/ЕА смеси добавляют к полимеру и встряхивают до его растворения. Растворы лекарственного средства и полимера смешивают перед формулированием добавлением раствора полимера в раствор лекарственного средства и встряхивают.
Водный раствор 1% холата натрия, 45% тетрагидрофурана в воде получают, применяя 500 мл емкость и добавляя 5 г холата натрия и 27 0 г DI воды, и перемешивают на плитке для магнитной мешалки до растворения. 225 г тетрагидрофурана добавляют к смеси холат натрия/вода и перемешивают на плитке для магнитной мешалки до растворения.
Эмульсию получают с отношением водной фазы к масляной фазе 5:1. Органическую фаза выливают в водный раствор и гомогенизируют, применяя ручной гомогенизатор, в течение 10 секунд при комнатной температуре, получая грубую эмульсию. Раствор пропускают через гомогенизатор высокого давления (110S), устанавливая давление на 2 0 пси на измерителе для 1
прохода. Наночастицы получают выливанием эмульсии в охлаждающую воду (D.I. вода) при <5С при перемешивании на плитке для магнитной мешалки. Отношение охлаждающей воды к эмульсии составляет 5:1. Наночастицы концентрируют TFF концентрированием охлаждающей жидкости на TFF с 300 кДа Pall кассетой (2 мембраны) до -200 мл и диафильтруют ~20 диаобъемов (4 литра) холодной DI воды. Объем уменьшают до минимального объема; добавляют 100 мл холодной воды в емкость и прокачивают через мембрану для промывки; и собирают материал в стеклянную пробирку: 50-100 мл. Определение концентрации твердых веществ нефильтрованной конечной суспензии осуществляют добавлением объема конечной суспензии в тарированные 2 0 мл сцинтилляционный флакон и сушат в вакууме при 8 0°С в вакуумном сушильном шкафу. Вес наночастиц определяют в данном объеме лиофилизированной суспензии и добавляют концентрированную сахарозу (0,111 г/г) к образцу конечной суспензии, получая 10% сахарозу.
Концентрацию твердых веществ 0,45 мкм отфильтрованной конечной суспензии определяли фильтрованием части образца конечной суспензии перед добавлением сахарозы через 0,4 5 мкм шприцевой фильтр; объем отфильтрованного образца добавляли в тарированный 2 0 мл сцинтилляционный флакон и сушили в вакууме при 8 0°С в вакуумном сушильном шкафу. Оставшийся образец нефильтрованной конечной суспензии замораживали с сахарозой.
Для увеличения растворимости лекарственного средства в органической фазе и применения большей теоретической загрузки лекарственного средства, смеси ВА с DMSO или (21/7 9 ВА/ЕА) с DMSO применяли в качестве органического растворителя. Поскольку оксалиплатина является очень хорошо растворимой в DMSO, более 500 мг/мл, смесь ВА или (21/79 ВА/ЕА) с DMSO может растворять гораздо больше оксалиплатины, чем только ВА или 21/79 ВА/ЕА. Кроме того, состав водной фазы изменяли добавлением 45% THF. Растворимость оксалиплатины в смеси 1/1 вода/THF составляет ~ 1 мг/мл, что является гораздо меньшим, чем ее растворимость в воде, ~10 мг/мл. Состав получали, применяя измененные органическую и водную фазы: 30% (w/w) теоретическая загрузка лекарственного средства; 70% (w/w) полимер-PEG, 45-5 PLA-PEG; %
суммарный твердых веществ = 20%; смеси растворителей 75% бензилового спирта и 25% DMSO. размер порции 1 грамм: 300 мг лекарственного средства; 700 мг полимер-PEG: 45-5 PLA-PEG
Таблица N
Параметры состава и свойства наночастиц
Описание
Теоретическая
загрузка лекарственного средства (%)
Концентрация твердых веществ
DMF (% вес. )
Загрузка
о о
Размер (нм)
% SC, прогон# @ пси#
NP твердых веществ (мг/мл)
50-5 PLA-PEG, 1/1 THF/ вода с 1% SC, 3/1 (ВА/ЕА)/DMSO
20%
0, 19%
141,7
1%, 1@20 пси
5, 625
Увеличив растворимость оксалиплатины в органической фазе и уменьшив растворимость в водной фазе, оксалиплатину инкапсулировали в PLA-PEG наночастицы способом наноэмульсии в модифицированных условиях: смесь ВА/ЕА с DMSO в качестве растворителя органической фазы и смесь воды с THF в качестве растворителя водной фазы. В данных условиях были получены подходящие рабочие размеры частиц и концентрация твердых веществ для конечного продукта.
Пример 13 Наночастицы с терапевтическими агентами Следующие наночастицы, показанные в таблице О, получают, применяя приведенные выше способы:
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического
% вес. полимера
агента
Диклофенак
30:5 PLA-PEG или
Частицы А. 5%
Частицы А. 95%
30:5PLGA-PEG
В. 4%
В. 96%
С. 7%
С. 97%
D. 10%
D90%
Е. 12%
Е. 88%
F. 15%
F85%
Диклофенак
50:5 PLA-PEG или
А. 5
А. 95
50:5PLGA-PEG
В. 4
В. 96
С. 7
С. 97
D. 10
D90
Е. 12
Е. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
80:5 PLA-PEG или
А. 5
А. 95
80:5PLGA-PEG
В. 4
В. 96
С. 7
С. 97
D. 10
D90
Е. 12
Е. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
75:5 PLA-PEG или
А. 5
А. 95
75:5PLGA-PEG
В. 4
В. 96
С. 7
С. 97
D. 10
D90
Е. 12
Е. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
47:5 PLA-PEG или
А. 5
А. 95
47.-5PLGA-PEG
В. 4
В. 96
С. 7
С. 97
D. 10
D90
Е. 12
Е. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
45:5 PLA-PEG или
А. 5
А. 95
45:5PLGA-PEG
В. 4
В. 96
С. 7
С. 97
D. 10
D90
Е. 12
Е. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
65:5 PLA-PEG или
А. 5
А. 95
65:5PLGA-PEG
В. 4
В. 96
С. 7
С. 97
D. 10
D90
Е. 12
Е. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес.терапевтического агента
% вес. полимера
Оксаплатина
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
B.4
В. 96
C.7
С. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F 85%
Оксаплатина
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Диклофенак
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Оксаплатина
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического агента
% вес. полимера
Цисплатина
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
B.4
В. 96
C.7
С. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Цисплатина
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического агента
% вес. полимера
Дигексаноат Pt
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
B.4
В. 96
С. 7
С. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F 85%
Дигексаноат Pt
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Дигексаноат Pt
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического агента
% вес. полимера
Винорелбин
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
B.4
B.96
С. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50.-7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винорелбин
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического агента
% вес. полимера
Винкристин
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
B.4
B.96
С. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C.97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Винкристин
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического агента
% вес. полимера
Бендамустин
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
B.4
В. 96
C.7
С. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
С. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5 PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Бендамустин
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического агента
% вес. полимера
Кеторолак
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
В. 4
В. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Кеторолак
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического агента
% вес. полимера
Рофекоксиб
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
B.4
B.96
С. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:I0PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C.7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Рофекоксиб
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Терапевтический агент
Полимер
% вес. терапевтического агента
% вес. полимера
Доксетаксел
30:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:5PLGA-PEG
B.4
B.96
С. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
50:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
80:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
75:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
47:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B.4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
45:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
65:5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
30:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
50:10 PLA-PEG или 50:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
80:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
75:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:10PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
47:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
45:10 PLA-PEG или 45:10
A. 5
A. 95
PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
65:10 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:10PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
30:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
30:7.5PLGA-PEG
B. 4
B. 96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
50:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
50:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
80:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
80:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
75:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
75:7.5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
47:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
47:5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
45:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
45:5PLGA-PEG
B.4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
Доксетаксел
65:7.5 PLA-PEG или
A. 5
A. 95
65:7.5PLGA-PEG
B. 4
B.96
C. 7
C. 97
D. 10
D90
E. 12
E. 88%
F. 15
F85%
ЭКВИВАЛЕНТЫ
Специалисту в данной области техники ясны или он может определить, применяя только стандартные эксперименты, многие эквиваленты конкретным вариантам осуществления настоящего изобретения, описанным в настоящем изобретении. Предполагается, что данные эквиваленты включены следующей формулой изобретения.
ВКЛЮЧЕНИЕ С ПОМОЩЬЮ ССЫЛКИ
Полное содержание всех патентов, опубликованных патентных заявок, вебсайтов и других ссылок, приводимых в настоящем изобретении, включены явно полностью с помощью ссылки.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица, содержащая:
от приблизительно 0,1 до приблизительно 40% вес. терапевтического агента; и
от приблизительно 10 до приблизительно 95% вес. биосовместимого полимера, где биосовместимые полимер выбран из группы, состоящей из:
a) диблоксополимера полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую
среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 3 0 кДа до
приблизительно 90 кДа; и
b) диблоксополимера полимолочной-со-полигликолевой
кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной-со-
полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную-
со-полигликолевую кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную
массу от приблизительно 30 кДа до приблизительно 90 кДа.
2. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по п. 1, где биосовместимый полимер выбран из группы, состоящей из:
a) диблоксополимера полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую
среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 0 кДа до
приблизительно 90 кДа; и
b) диблоксополимера полимолочной-со-полигликолевой
кислоты-полиэтиленгликоля, где диблоксополимер полимолочной-со-
полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную-
со-полигликолевую кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную
массу от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 90 кДа.
3. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица
по п.1 или 2, где диблоксополимер полимолочной кислоты-
полиэтиленгликоля или диблоксополимер полимолочной-со-
полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля содержит
полиэтиленгликоль, имеющий молекулярную массу от приблизительно
3.
4 кДа до приблизительно б кДа.
4. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-3, где указанный диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 50 кДа до приблизительно 8 0 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа.
5. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-3, где указанный диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 60 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа.
6. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-5, где указанный диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу приблизительно 50 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа.
7. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-5, где указанный диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу приблизительно 4 5 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа.
8. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по п.1 или 2, где указанный диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля содержит полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу приблизительно 3 0 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу приблизительно 5 кДа.
9. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-8, где терапевтический агент выбран из группы, состоящей из алкалоидов барвинка, платиновых
4.
химиотерапевтических агентов, агентов на основе азотистого
иприта, таксанов, mTOR ингибиторов, нестероидных
противовоспалительных лекарственных средств, соединений, являющихся боронатными эфирами или пептидбороновой кислотой, и эпотилона.
10. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица
по любому из пунктов 1-9, где терапевтический агент выбран из
группы, состоящей из винбластина, винорелбина, виндезина,
винкристина, доцетаксела, сиролимуса, темсиролимуса,
эверолимуса, бортезомиба, цисплатины, оксалиплатины,
дигексаноата Pt и эпотилона.
11. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-10, где терапевтический агент представляет собой доцетаксел.
12. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-9, где терапевтический агент выбран из группы, состоящей из кеторолака, диклофенака, рофекоксиба и целекоксиба.
13. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-12, содержащая от приблизительно 1 до приблизительно 20% вес. терапевтического агента и от приблизительно 50 до приблизительно 90% вес. диблоксополимера.
14. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-13, содержащая от приблизительно 2 до приблизительно 20% вес. терапевтического агента.
15. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-13, содержащая от приблизительно 3 до приблизительно 6% вес. терапевтического агента.
16. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-13, содержащая от приблизительно 4 до приблизительно 10% вес. терапевтического агента.
17. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-13, содержащая от приблизительно б до приблизительно 10% вес. терапевтического агента.
18. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по любому из пунктов 1-13, дополнительно содержащая
10.
полимолочную кислоту или полимолочную-со-полигликолевую кислоту.
19. Биосовместимая терапевтическая полимерная наночастица по п.14, где полимолочная кислота имеет среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 50 кДа до приблизительно 100 кДа.
20. Фармацевтическая композиция, включающая множество биосовместимых, терапевтических полимерных наночастиц по любому из пунктов 1-15, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
21. Фармацевтическая композиция по п.20, где биосовместимые терапевтические полимерные наночастицы имеют температуру перехода в стеклообразное состояние (стеклования) от приблизительно 42°С до приблизительно 50°С.
22. Фармацевтическая композиция по п.20, где биосовместимые терапевтические полимерные наночастицы имеют температуру перехода в стеклообразное состояние от приблизительно 38°С до приблизительно 42°С.
23. Фармацевтическая композиция по п.20, где после введения пациенту, биосовместимые терапевтические полимерные наночастицы циркулируют в плазме пациента, по меньшей мере, в течение приблизительно 24 часов.
24. Фармацевтическая композиция по п.20, где после введения пациенту, биосовместимые терапевтические полимерные наночастицы высвобождают терапевтический агент in-vivo, по меньшей мере, в течение 24 часов.
25. Фармацевтическая композиция по п. 2 3 или 24, где после введения пациенту, биосовместимые терапевтические полимерные наночастицы циркулируют в плазме пациента в течение от приблизительно 24 часов до приблизительно 48 часов.
26. Способ лечения солидной опухоли, включающий введение пациенту, нуждающемуся в лечении, эффективного количества любой из биосовместимых, терапевтических полимерных наночастиц или композиций по любому из пунктов 1-25.
27. Способ по п.2 6, где указанная солидная опухоль
представляет собой рак груди, легкого или простаты.
28. Терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением, содержащая:
от приблизительно 2 до приблизительно 15% вес. терапевтического агента или его фармацевтически приемлемой соли, и
диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля или
диблоксополимер полимолочной-со-полигликолевой кислоты-
полиэтиленгликоля,
где блок полимолочной кислоты указанного диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля имеет среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 0 кДа до приблизительно 8 0 кДа, или блок полимолочной-со-полигликолевой кислоты указанного диблоксополимера полимолочной-со-полигликолевой кислоты-полиэтиленгликоля имеет среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 40 кДа до приблизительно 90 кДа; и
где указанный терапевтический агент высвобождается при контролируемой скорости высвобождения.
29. Терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением по п.28, где указанный терапевтический агент высвобождается в течение, по меньшей мере, 1 дня или более при введении пациенту.
30. Терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением по п.28, где указанный терапевтический агент высвобождается в течение, по меньшей мере, от 1 дня до приблизительно 4 дней или более при введении пациенту.
31. Терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением по любому из пунктов 2 8-3 0, содержащая диблоксополимер полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля, где блок полимолочной кислоты указанного диблоксополимера полимолочной кислоты-полиэтиленгликоля имеет среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 5 до приблизительно 7 5 кДа.
32. Терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением по любому из пунктов 2 8-31, где блок полиэтиленгликоля имеет среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 кДа до приблизительно 16 кДа.
29.
33. Терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением по любому из пунктов 2 8-31, где блок полиэтиленгликоля имеет среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 5 кДа до приблизительно 12 кДа.
34. Терапевтическая наночастица с контролируемым высвобождением по любому из пунктов 2 8-3 3, где блок полиэтиленгликоля имеет среднечисловую молекулярную массу приблизительно 4 кДа, приблизительно 7,5 кДа или приблизительно 10 кДа.
По доверенности
195475
непрерывная фаза вода
холат натрия этилацетат бензиловый спирт
диспергированная фаза . полимеры* . терапевтический агент
• этилацетат
• бензиловый спирт
получение раствора
полимеры* включают PLA-PEG, PLGA-PEG
грубая эмульсия
высокоэнергетическое эмульгирование (гомогенизатор высокого давления)
эмульгирование
мелкодисперсная эмульсия
охлаждающий раствор
* холодная вода
• TWEEN 80
охлаждение частиц
охлаждение
отвержденные частицы
холодная вода
фильтрование
тангенциальным
потоком ультрафильтрация/ диафильтрация
очищенные частицы
стерилизующая фильтрация фильтрация
стерильные частицы
вода, сахароза конечная
суспензия
частиц
конечное формулирование
пробирки для замораживания или лиофилизации
ФИГ.1
водная фаза
органическая фаза
(Ч)добавление водной фазы и начало встряхивания
мешалка с большими сдвиговыми усилиями
(2) добавление масляной фазы при встряхивании с большими сдвиговыми усилиями
J (5) добавление агента,
способствующего растворению лекарственного средства
(3) получение (4) перенесение в емкость
тонкодисперсной эмульсии для охлаждения
давления
6) к последующей обработке
ФИГ.2А
емкость с грубой эмульсией
диафильтрат (DIвода)
f~7
1) концентрирование от ~10 до ~30 мг/мл
2) 5X холодная диафильрация (99% снижение количества растворенных компонентов)
3) нагревание до 25С и добавление дополнительного агента, способствующего растворению лекарственного средства
4) дополнительная 15Х диафильтрация (99,99% снижение количества растворенных компонентов)
5) концентрирование от ~30 мг/мл до ~100 мг/мл
6) сбор конечной концентрированной суспензии
охлаждаю щи иу \
-*-jp сборник
ретентат
к устройству для фильтрования
TFF
насос
фильтрат на выброс
ФИГ.2В
30 80 70 60
40 30 20 10
*1S/S PLA/PE6
. & 30/S PLA/PEG 83-127-1-5
"30/5 PLA/PEG
A. 30/5 PLA/PEG
H50/5PLA/PEG
* SO/5 PLA/PE6 33-127-1-6
10 15 20
Время (часов)
# 16/5 PLA/PEG 180/5 PLA/PEG X30/5 PLA/PEG it 50/5 PLA/PEG
15 20 Время (часов)
In vitro высвобождение винорелбина 16-5 по сравнению с 50-5 PLA-PEG
5 .^^^^^-^ЧЧЧЧЧччччч SSSS
ф 80.0 ; ш* ^s^^
70.о ; # € ж:
о са о
? 30.0 % -загрузка,-1UI нм
I 20.0 Л
88-67-3-5, 50-5 PLA-PEG, 8.40 загрузка, 103 нм
10.0 |
0.0 ^
О 50 100 150 200 250 300 350
Время (часов)
In vitro высвобождение винкристина 16-5 по сравнению с 50-5 PLA-PEG
I го S0.00 i О) со
" 70.00 :
о ^ ю ?
g о 60.00 i /
0 О : /
? о 50.00 "Ф""?.8-101-1-5.. S0-5 PLA-
(r) 5 Р?С.,2.75%загрузка.122 нм
1 m 40.00 ^
°- 5 f / > ¦:. )h-"> *i:\.*n;
S g" 30.00 5/, 2.86^ загрузка,! 03- НМ > > 4
" c; 20.00 t
10.00 0.00
0 50 100 150 200 250 .300 350
Время (часов)
о II
In vitro бендамустин"НС1 16-5 по сравнению с 50-5 PLA-PEG
ч: го * са о Ь
s 120.00 Й 100.00
со о
О) о
0 I
1 i
о. О)
го со
> > го
О is
.о ф
80.00
60.00
X X
40.00
го са о со
1 20.00 #^ о. о
Ь 0,00
-76-77-3-5 16-5PLA-PEG, 3.5%
загрузка, 9 7 НМ
-83-41-7-5 STf-f: 50-5 PLA-PEG, МеС.2,2.05%
загрузка,202 НМ
Время (часов)
120
Диклофенак IVR
S 100
Ф 16/5 PLA/PEG нм)
/5 PLA/PEG ib.79%. 104нм)
о 60
A. 50/5 PLA/PEG (3.4Щ 122 нм)
S 40 I;
: 16/5 PLA/PEG+SOkDa PLA В,2да 155 нм)
: SO/5 PLA/PEG {5.S(i%.. 02,2 нм)
^ 50/5 PLA/PEG {§.f"5%, 140.30 нм)
:10 15
Время (часов)
го it го с; о
100
Q. О I-0)
| 80
Кеторолак IVR
са о
<о 40
Q. ГО
I и
* 16/5Р1А/РЕ6 (4Ж,31б;4нм! 10S-165-1
16/5 PLA/PEG (4.Sir*,. 99.8НМ. 3 <Ш концентрация твердых веществ! 105-165-. .4: 50/5 PLA/PEG (1.76%, 131НМД0?"твердых веществ} 101 .-138-1
10 15
Время (часов)
120 ¦
Высвобождение рофекоксиба
го ю
* 10 " 4 чХ4
о ^ *
а) Ш а
¦8-
О "is
О. 80 ; *
? * * 130-76-1 (16/5 PLA/PE6,l,S'*s рофекоксиб,
х \ 130 нм i
М( [ Ш30-76-2 < 50/5 PLA/PEG. 2.854 рофекоксиб,
О 1М НМ;
Ш А.150-76-4 (65/5 PLA/PEG. 3.0% рофекоксиб,
^ ч> - 159 нм)
? 40 1
ф X 130-76-5 (65/5 PLA/PEG-fiOkDa PLA, i.№i
0 : рофекоксиб,183 нм)
1 т
О : : с
0 12 3 4 5
Время (часов)
in vitro: влияние целекоксиба на загрузку лекарственного средства
^ччч, 118-151-1: 50/5 PLA/PEG, 3.48%
загрузка, 14-Ь.2 нм
1IS-I5I-2; 16/5 PLA/PEG, 2.39%
загрузка, 12S,У нм
---^--liS-ISi-3: 75-5/5 P.A/PEG, 4.47%
загрузка, 2 2.3.9 нм
"ll?.3%3arpy3KaX22iHM, 16"S PLA^
PEG
(19)
(19)
(19)
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
1/13
4/13
ФИГ.З
4/13
ФИГ.З
4/13
ФИГ.З
4/13
ФИГ.З
5/13
ФИГ.4
5/13
ФИГ.4
5/13
ФИГ.4
5/13
ФИГ.4
6/13
ФИГ.5
6/13
ФИГ.5
6/13
ФИГ.5
6/13
ФИГ.5
6/13
ФИГ.5
6/13
ФИГ.5
7/13
ФИГ.6
7/13
ФИГ.6
8/13
ФИГ.7
8/13
ФИГ.7
8/13
ФИГ.7
8/13
ФИГ.7
8/13
ФИГ.7
8/13
ФИГ.7
8/13
ФИГ.7
8/13
ФИГ.7
9/13
ФИГ.8
9/13
ФИГ.8
9/13
ФИГ.8
9/13
ФИГ.8
9/13
ФИГ.8
9/13
ФИГ.8
10/13
ФИГ.9
10/13
ФИГ.9
10/13
ФИГ.9
10/13
ФИГ.9
10/13
ФИГ.9
10/13
ФИГ.9
11/13
ФИГ. 10
11/13
ФИГ. 10
12/13
ФИГ. 11
12/13
ФИГ. 11
12/13
ФИГ. 11
12/13
ФИГ. 11
13/13
ФИГ.12
13/13
ФИГ.12