[**]

Новые производные пиридазина имеют неожиданные лекарственные свойства в качестве ингибиторов протеинкиназ, особенно против ALK, и полезны для лечения нарушений, связанных с аномальной активностью протеинкиназ, как, например, рак, неврологические и психологические заболевания.

(57) Реферат / Формула:

Новые производные пиридазина имеют неожиданные лекарственные свойства в качестве ингибиторов протеинкиназ, особенно против ALK, и полезны для лечения нарушений, связанных с аномальной активностью протеинкиназ, как, например, рак, неврологические и психологические заболевания.

---

Евразийское (21) 201390520 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2013.09.30
(22) Дата подачи заявки 2011.10.07
(51) Int. Cl.
C07D 403/12 (2006.01) C07D 403/10 (2006.0l) C07D 413/12 (2006.0l)
C07D 401/14 (2006.01) C07D 403/14 (2006.01)
A61K 31/501 (2006.0l) A61K 31/53 77 (2006.01) A61P35/00 (2006.01)
(54) ЗАМЕЩЕННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ПИРИДАЗИНКАРБОКСАМИДА
(31) 61/391,423
(32) 2010.10.08
(33) US
(вв) PCT/US2011/055428
(87) WO 2012/048259 2012.04.12
(вв) 2012.06.28
(71) Заявитель: ИКСКАВЕРИ ХОЛДИНГ КАМПАНИ, ЛЛС (US)
(72) Изобретатель:
Лианг Конгксин (US)
(74) Представитель:
Квашнин В.П. (RU)
(57) Новые производные пиридазина имеют неожиданные лекарственные свойства в качестве ингибиторов протеинкиназ, особенно против ALK, и полезны для лечения нарушений, связанных с аномальной активностью протеинкиназ, как, например, рак, неврологические и психологические заболевания.
8821ЕА
ЗАМЕЩЕННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ПИРИДАЗИНКАРБОКСАМИДА
Описание
Родственные заявки
Настоящая заявка заявляет приоритет предварительной заявки на патент США 61/391,423, поданной 8 октября 2010 г., содержание которой включено в настоящую заявку в полном объеме.
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к новым производным пиридазина, их солям, сольватам, гидратам и полиморфам. Настоящее изобретение также обеспечивает композиции, содержащие соединение по настоящему изобретению, и применение таких композиций в лечения заболеваний и состояний, связанных с модуляцией протеинкиназ.
Уровень техники
Протеинкиназы представляют собой ферменты, которые катализируют фосфорилирование гидроксильных групп тирозинового, серинового и треонинового остатков белков. Многие аспекты клеточной жизни (например, рост клетки, дифференциация, пролиферация, клеточный цикл и жизнеспособность) зависят от активности протеинкиназ. Кроме того, аномальная активность протеинкиназ была связана с заболеваниями хозяина, такими как рак и воспаление. Поэтому рассматриваемая попытка была направлена на идентификацию путей модуляции активностей протеинкиназ. В частности, было
сделано множество попыток идентифицировать маленькие молекулы, которые действуют в качестве ингибиторов протеинкиназ.
c-Met прото-онкоген кодирует Met рецептор тирозинкиназ. Met рецептор представляет собой гликозилированный димерный комплекс массой 190 кДа, состоящий из альфа-цепи массой 50 кДа, дисульфидно связанной с бета-цепью, массой 145 кДа. Альфа-цепь располагается внеклеточно, тогда как бета-цепь содержит трансмембранные и цитозольные домены. Met синтезируется в качестве предшественника и протеолитически расщепляется с получением зрелых альфа и бета субъединиц. В этом заключается структурное подобие с семафоринами и плексинами, семейство лигандов-рецепторов, которое участвует во взаимодействии клетка-клетка. Лигандом для Met является фактор роста гепатоцитов (HGF), член семейства факторов рассеивания, и он имеет такую же гомологию, что и плазминоген (Longati, P. et al., Curr. Drug Targets 2001, 2, 41-55); Trusolino, L. and Comoglio, P. Nature Rev. Cancer 2002, 2, 289-300].
Met функционирует при онкогенезе и метастазировании опухолей. Экспрессия Met наряду с лигандом HGF является трансформирующейся, онкогенной и метастатической (Jeffers, М. et al, Oncogene 1996, 13, 853-856; Michieli, P. et al, Oncogene 1999, 18, 5221-5231). MET сверхэкспрессируется в значительной степени в раковых клетках человека и амплифицируется в ходе перехода от первичных опухолей к метастазам. Множество исследований показали корреляцию между экспрессией с-МЕТ и/или HGF/SF и состоянием развития заболевания различных типов рака (включая рак легких, ободочной кишки, молочной железы, простаты, печени, поджелудочной железы, мозга, почек, яичек, желудка, кожи и костей). Кроме того, сверхэкспрессия с-МЕТ или HGF, как было показано, коррелирует с неблагоприятным прогнозом и исходом заболевания в ряде основных раковых заболеваний человека, включая рак легких, печени, желудка и молочной железы. с-МЕТ также был непосредственно связан с раком без успешного режима лечения, как например, рак поджелудочной железы, глиома и гепатоцеллюлярная карцинома.
Мутанты Met, проявляющие повышенную киназную активность, были идентифицированы как в наследственных, так и в спорадических формах папиллярной ренальной карциномы (Schmidt, L. et al, Nat. Genet. 1997, 16, 68-73; Jeffers, M. et al, Proc. Nat. Acad. Sci. 1997, 94, 11445-11500). HGF/Met, как было показано, ингибирует аноикис, суспензия-индуцируемую запрограммированную клеточную смесь (апоптоз), в клетках плоскоклеточного рака головы и шеи. Резистентность к аноикису и якорь-независимая жизнеспособность являются признаком онкогенной трансформации эпителиальных клеток (Zeng, Q. et al, J. Biol. Chem. 2002, 277, 25203-25208).
Повышенная экспрессия Met/HGF наблюдается во многих метастазирующих опухолях, включая рак ободочной кишки (Fazekas, К. et al, Clin. Exp. Metastasis 2000, 18, 639-649), рак молочной железы (Elliott, В. Е. et al, 2002, Can. J. Physiol. Pharmacol. 80, 91-102), рак простаты (Knudsen, В. S. et al, Urology 2002, 60, 11131117), рак легких (Siegfried, J. M. et al, Ann. Thorac. Surg. 1998, 66, 1915-1918) и рак желудка (Amemiya, H. et al, Oncology 2002, 63, 286-296). HGF-Met сигнальный путь также был связан с повышенным риском атеросклероза (Yamamoto, Y. et al, J. Hypertens. 2001, 19, 1975-1979; Morishita, R. et al, Endocr. J. 2002, 49, 273-284) и усиленным фиброзом легких (Crestani, В. et al, Lab. Invest. 2002, 82, 1015-1022).
Axl принадлежит семейству тирозинкиназных рецепторов (RTK), которое также включает ТугоЗ и Мег. Первоначально он клонировался из генома пациентов с хронической миелогенной лейкемией, и при сверхэкспрессии он проявляет способность к трансформации. Сверхэкспрессия Axl наблюдалась при множестве раковых заболеваний человека и связана с инвазивностью и метастазом при раке легких, простаты, молочной железы и желудка, а также при ренальной клеточной карциноме и глиобластоме. Недавнее исследование показало, что сверхэкспрессия Axl через " включение тирозинкиназ" приводит к резистентности к иматинибу в желудочно-кишечных стромальных опухолях. Экспрессия Axl индуцируется химиотерапевтическими лекарственными средствами, сверхэкспрессия Axl приводит к резистентности к лекарственному средству при острой миелоидной лейкемии. Axl, как было показано, регулирует миграцию эндотелиальных клеток
и образование опухоли. Эти заключения позволяют предположить, что Axl может участвовать в регуляции множества аспектов онкогенеза (для обзора смотрите Li et at, Oncogene 2009, 28: 3442).
Анапластическая лимфомная киназа (ALK) принадлежит суперсемейству киназинтиразных рецепторов (RTK) протеинкиназ. Экспрессия ALK в нормальных тканях взрослого человека ограничена эндотелиальными клетками, перицитами и редкими нервными клетками. Онкогенные конститутивно активные ALK слитые белки экспрессируются в анапластической крупноклеточной лимфоме (ALCL) и воспалительных миофибробластных опухолях (IMT) из-за t2; хромосомальных транслокаций. ALK, как недавно было обнаружено, участвует в качестве онкогена в маленькой фракции немелкоклеточного рака легких и нейробластомах (Choi et al, Cancer Res 2008; 68: (13); Webb et al, Expert Rev. Anticancer Ther. 9(3), 331-356, 2009).
Анапластические крупноклеточные лимфомы (АЕСЕ)представляют собой подтип высшего класса неходжкинского семейства лимфом с отличной морфологией, иммунофенотипом и прогнозом. ALCL, как постулируется, происходят из Т клеток и в редких случаях могут также проявлять фенотип В клеток. Кроме того, в 40% случаев клетка происхождения остается не известной, и они классифицируются как "ноль". Первоначально описанные как гистологические объекты автором Stein et al. на основе экспрессии CD30 (Ki-1), ALCL присутствует как системное заболевание, поражающее кожу, кости, твердые ткани и другие органы, с вовлечением лимфатических узлов или без этого. ALCL может подразделяться на по меньшей мере два подтипа, характеризующиеся присутствием или отсутствием хромосомальных перестановок между генным локусом анапластической лимфомной киназы (ALK) и различными партнерами слияния, такими как нуклеофозмин (NPM). Около 50-60% случаев ALCL связаны с хромосомальными транслокациями t(2;5;)(p23;q35), которые создают гибридный ген, состоящий из внутриклеточного домена ALK тирозинкиназного рецептора, соединенного с NPM. Полученный слитый белок NPM-ALK имеет конститутивную тирозинкиназную активность и, как было показано, трансформирует различные гематопоэтические клеточные типы in vitro и
поддерживает образование опухоли in vivo. Другие более редкие слитые белки ALK, например, тропомиозин-3 и тяжелая цепь клатрина, также были идентифицированы в ALCL, а также в СОЗО-отрицательной диффузионной крупноклеточной лимфоме. Несмотря на незначительные различия в передаче сигнала и некоторых биологических функциях, все слитые белки, как оказалось, трансформируют фибробласты и гематопоэтические клетки. Обширный анализ лейкемогенного потенциала NPM-ALK на животных моделях еще раз подтвердил важность перерасположения NPM-ALK и других ALK для развития ALK-положительной ALCL и других заболеваний.
Слитые белки ALK были также обнаружены в клеточных линиях и/или первичных образцах, соответствующих многообразию других опухолей, включая воспалительную миофибробластную опухоль (IMT), нейроэктодермальные опухоли, глиобластомы, меланома, рабдомиосаркомы и плоскоклеточный рак пищевода (смотрите обзор Webb TR, Slavish J, et al. Anaplastic lymphoma kinase: role in cancer pathogenesis and small-molecule inhibitor development for therapy. Expert Rev Anticancer Ther. 2009; 9(3): 331-356). Недавно также было обнаружено, что ALK связано с небольшой долей рака молочной железы и колоректального рака (Lin Е, Li L, et al. Exon Array Profiling Detects EML4-ALK Fusion in Breast, Colorectal, and Non-Small Cell Lung Cancers. Mol Cancer Res 2009; 7(9): 1466-76).
Кроме того, ALK участвует в неврологических заболеваниях. Развитие взрослых гомозигот ALK, где ALK киназный домен был удален, показывает зависимое от возраста повышение пролиферации базального гиппокампального предшественника и изменения в поведенческих тестах, согласующихся с ролью этого рецептора в мозге взрослого организма (Bilsland JG, Wheeldon A, Mead A, et al. Behavioral and neurochemical alterations in mice deficient in anaplastic lymphoma kinase suggest therapeutic potential for psychiatric indications. Neuropsychopharmacology 2008; 33:685-700). Эти животные с ALK-нокаутом показывали повышенное время борьбы в тесте подвешивания за хвост и тесте принудительного плавания Просолта и повышенную эффективность в тесте распознавания новых объектов. Нейрохимический анализ демонстрирует повышение селективности базальной допаминергической передачи сигнала в
лобной корке. Эти результаты позволяют предположить, что функции ALK в головном мозге взрослого человека состоят в регуляции функции лобной корки и гиппокампа, и идентифицируют ALK как новую мишень для психиатрических индикаций, как например шизофрения, депрессия и пагубная привычка к веществу (кокаин).
2-амино-пиридины, такие как PF-2341066, были обнаружены в качестве потенциальных ингибиторов тирозинкиназного рецептора HGF (c-Met) и ALK (J. G. Christensen, et al. Abstract LB-271, AACR 2006 meeting; H. Y. Zou et al. Cancer Res 2007; 67: 4408; раскрытие сущности запатентованного изобретения: WO 2004076412, WO 2006021881, WO 2006021886).
PF-234,1066
При испытании фазы I PF-02341066 (кризотиниб), существенная 60% радиографическая скорость отклика наблюдалась у NSCLC пациентов с EML4-ALK (Kwak EL, Camidge DR, Clark J, et al. Clinical activity observed in a phase I dose escalation trial of an oral c-met and ALK inhibitor, PF-02341066. J Clin Oncol 2009; 27:15s abstract 3509). Последующее обширное исследование подтвердило эту активность: из 50 обследованных пациентов у 64% был достигнут объективный ответ (ORR) по RECIST, и у 90% наблюдался контроль заболевания (Bang Y, Kwak KL, Shaw DR, et al. Clinical activity of the oral ALK inhibitor, PF-02341066, in ALK-positive patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). J Clin Oncol 2010; 28:7s, suppl; abstr 3). Отмечают, что существенный ответ наблюдался у пациентов, на которых не оказала воздействие химиотерапия и EGFR ингибиторы. Кроме того, у большинства пациентов наблюдались лишь незначительные побочные эффекты, что позволяет предположить, что ингибирование ALK хорошо переносится. Эти результаты твердо утверждают
ALK в качестве безопасной и эффективной мишени для этой подгруппы NSCLC пациентов, на которых не применялись никакие эффективные альтернативные параметры лечения.
К сожалению, существенный отклик на PF-02341066 был лишь временным. У большинства пациентов развилась резистентность, и наблюдался прогресс заболевания через около 6-18 месяцев лечения. В частности, у значительной доли пациентов развились метастазы головного мозга, которые не поддаются лечению с помощью PF-02341066.
Ранее уже были описаны замещенные соединения пиридазинкарбоксамида в качестве ингибиторов протеинкиназ (WO 2009/154769). Большинство этих соединений потенциально ингибируют c-Met и ALK с IC50 <100 нМ. Так как еще существует неудовлетворенная потребность в способах лечения опосредованных киназами заболеваний, таких как NSCLC с ALK слитыми белками, как описано выше, авторы настоящего изобретения оптимизировали соединения пиридазина для удовлетворения медицинских нужд.
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение относится к соединениям производным пиридазина (например, соединения с приведенными в настоящей заявке формулами), композициями, содержащим эти соединения, и способам применения соединений и композиций соединений. Соединения и композиции, содержащие их, полезны для лечения или профилактики заболеваний или симптомов заболеваний, включая опосредованные модуляцией активности протеинкиназ или связанные с ней.
Настоящее изобретение обеспечивает решение поставленных выше задач с помощью выделенного соединения формулы I
или его соли; или пролекарства, или соли его пролекарства; или гидрата, сольвата, или его полиморфа; где:
Ri, R2, R3, R4, R5 каждый независимо представляют собой Н, алкил или Z1;
R6 представляет собой алкил, OR7, NR7R8, арил или гетероарил, насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, где R6 необязательно замещен 1-3 группами, независимо выбранными из алкила, циклоалкила, гетероциклила, алкокси, гидроксиалкила, HZ1;
R7 и R8 каждый независимо выбираются из Н, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинил, арила, гетероциклила, гетероарила, или R7 и Rg вместе с атомом азота образуют моно- или бициклический гетероциклил или гетероарил;
Каждый Z1 представляет собой галоген, CN, N02, OR15, SR15, S(0)2OR15, NR15R16,
C1-C2 перфторалкил, C1-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15,
C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16,
NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17, S(0)R17, S(0)2R17, R16, OKCO, C(0)R16, C(0)(CH2)mOH, (CH2)mOR15, (CH2)mC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где в каждом случае m независимо равно 0-6;
Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Сб циклоалкил;
Каждый R независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Сб циклоалкил, ар ил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенный Сз-Сб циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом; и
Каждый R17 независимо представляет собой Сз-Сб циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом;
при условии, что R6 не представляет собой метилпиперазинил, пирролидинил, метанамино или пиперазинил.
Соединения согласно настоящему изобретению и композиции, содержащие их, предназначены для лечения или уменьшения серьезности связанных с модуляцией активности протеинкиназ заболеваний, нарушений или их симптомов, нарушений, которые эффективно лечатся с помощью ингибиторов протеинкиназ, например, c-met, ron, Axl, ALK и их слитые белки, такие как EML4-ALK и NPM-ALK.
Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения заболевания или симптомов заболевания у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту эффективного количества соединения с любой из приведенных в настоящей заявке формул, или его фармацевтической соли, сольвата или гидрата (или его композиции). Заболевание или симптом заболевания могут быть любыми из вызванных протеинкиназой (например, c-met, ron, Axl, ALK и их слитые белки, как например EML4-ALK и NPM-ALK). Заболеванием или симптомом заболевания может быть, например, рак или пролиферативное заболевание или нарушение (например, включая перечисленные в настоящей заявке).
Краткое описание чертежей
На Фиг. 1 показан апоптоз клеток Н3122, обработанных либо с помощью PF-2341066, либо с помощью соединения по приведенному в настоящей заявке
примеру 1.
Подробное описание изобретения Определения
Термины "уменьшение" и "лечение" применяются взаимозаменяемо и оба означают уменьшение, подавление, ослабление, убавление, задерживание или стабилизацию развития или прогресса заболевания (например, заболевания или нарушения перечисленных в настоящей заявке).
Термин "заболевание" означает любое состояние или нарушение, которое нарушает нормальные функции клетки, ткани или органа, или вмешивается в них.
Термин "маркер" означает любое изменение, которое связано с заболеванием или нарушением. Например, любой белок или полинуклеотид, имеющий изменение в уровне экспрессии или активности, которое связано с заболеванием или нарушением.
В описании настоящего изобретения термины "содержит", "содержащий", "включающий" и "имеющий" и подобные могут иметь значения, приписываемые им в Патентном законе США и могут означать " включает", "включая", и тому подобное; термины "состоящий по существу из" или "состоит по существу из" подобным образом имеют значения, приписываемые им в Патентном законе США, и представляют собой открытый термин, позволяющий присутствие более того, что ограничено, поскольку основные или новые характеристики того, что ограничено не изменяются в случае присутствия более того, что ограничено, но исключают варианты, известные из уровня техники.
Термин "соединение", как применяется в описании настоящего изобретения, как подразумевается, включает соли, пролекарства и соли пролекарств соединения с приведенными в настоящей заявке формулами. Термин также включает любые сольваты, гидраты и полиморфы любого из вышеизложенного. Конкретное
указание "пролекарство", "соль пролекарства", "сольват", "гидрат" или "полиморф" в определенных объектах настоящего изобретения, описанных в настоящей заявке, не должно интерпретироваться как преднамеренное опущение этих форм в других объектах настоящего изобретения, где термин "соединение" применяется без упоминания этих других форм.
Соль соединения согласно настоящему изобретению между кислотой и основной группой соединения, как например функциональная аминогруппа, или основанием кислотной группой соединения, как например функциональная карбоксильная группа. Согласно другому предпочтительному варианту выполнения настоящего изобретения соединение представляет собой фармацевитчески приемлемую соль присоединения кислоты.
Как применяется в описании настоящего изобретения, если иного не указано, термин "пролекарство" означает производную соединения, которая может гидролизоваться, окисляться или реагировать иным образом в биологических условиях (in vitro или in vivo) с получением соединения согласно настоящему изобретению. Пролекарства могут стать активными только при такой реакции при биологических условиях, или они могут иметь активность в их непрореагировавших формах. Примеры пролекарств, рассматриваемых в настоящем изобретении, включают, но без ограничения к этому, аналоги или производные соединений одной из формул, раскрытых в настоящей заявке, которые содержат биогидролизуемые составляющие, такие как амиды, сложные эфиры, карбаматы, карбонаты и фосфатные аналоги. Пролекарства могут, как правило, быть получены с применением хорошо известных способов, таких как описанные Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery (1995) 172-178, 949982 (Manfred E. Wolff ed., 5th ed); смотрите Goodman and Gilman's, The Pharmacological basis of Therapeutics, 8th ed., McGraw-Hill, Int. Ed. 1992, "Biotransformation of Drugs".
Как применяется в описании настоящего изобретения, если иного не указано, термин "биогидролизуемая составляющая" означает функциональную группу (например, амид, сложный эфир, карбамат, карбонат или фосфатный аналог,
который либо: 1) не нарушает биологическую активность соединения и обеспечивает предпочтительные свойства соединения in vivo, такие как усвоение, продолжительность действия или начало действия; либо 2) само по себе биологически не активно, но превращается in vivo в биологически активное соединение.
Соль пролекарства представляет собой соединение, образованное между кислотой и основной группой пролекарства, как например функциональная аминогруппа, или основанием и кислотной группой пролекарства, как например функциональная карбоксильная группа. В одном варианте выполнения настоящего изобретения соль пролекарства представляет собой фармацевтически приемлемую соль.
Особенно предпочтительными пролекарствами и солями пролекарств являются те, которые повышают биодоступность соединений согласно настоящему изобретению, когда такие соединения вводятся млекопитающему (например, обеспечивая при пероральном введении соединения более быструю абсорбцию в крови) или которые повышают доставку родоначального соединения в биологический компартмент (например, головной мозг или центральная нервная система) относительно родоначальных видов. Предпочтительные пролекарства включают производные, в которых группа, которая усиливает растворимость в воде или транспорт через мембрану пищеварительного тракта, присоединяется к структуре приведенных в настоящей заявке формул. Смотрите, например, Alexander, J. et al. Journal of Medicinal Chemistry 1988, 31, 318-322; Bundgaard, H. Design of Prodrugs; Elsevier: Amsterdam, 1985; pp 1-92; Bundgaard, H.; Nielsen, N. M. Journal of Medicinal Chemistry 1987, 30, 451-454; Bundgaard, H. A Textbook of Drug Design and Development; Harwood Academic Publ: Switzerland, 1991; pp 113191; Digenis, G. A. et al. Handbook of Experimental Pharmacology 1975, 28, 86-112; Friis, G. J.; Bundgaard, H. A Textbook of Drug Design and Development; 2 ed.; Overseas Publ.: Amsterdam, 1996; pp 351-385; Pitman, I. H. Medicinal Research Reviews 1981, 1, 189-214.
Термин "фармацевтически приемлемый", как применяется в настоящем изобретении, относится к компоненту, который с медицинской точки зрения подходит для контакта с тканями человека и других млекопитающих без неспецифической токсичности, раздражения, аллергической реакции и тому подобного, и являются соразмерными в соответствии с разумным отношением преимущество/риск. Термин "фармацевтически приемлемая соль" означает любую нетоксичную соль, которая при введении реципиенту способна обеспечивать, либо напрямую, либо косвенным образом, соединение или пролекарство соединения согласно настоящему изобретению.
Кислоты, обычно применяемые для формирования фармацевтически приемлемых солей, включают неорганические кислоты, такие как сероводород, соляная кислота, бромистоводоордная кислота, иодистоводоордная кислота, серная и фосфорная кислота, а также органические кислоты, такие как, пара-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, винная кислота, дивинная кислота, аскорбиновая кислота, малеиновая кислота, безиловая кислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, глюкуроновая кислота, муравьиная кислота, глутаминовая кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, молочная кислота, щавелевая кислота, пара-бромфенилсульфоновая кислота, карбоновая кислота, сукциновая кислота, лимонная кислота, бензойная кислота и уксусная кислота, и родственные неорганические и органические кислоты. Такие фармацевтически приемлемые соли, таким образом, включают сульфат, пиросульфат, бисульфат, сульфит, бисульфит, фосфат, моногидрофосфат, дигидрофосфат, метафосфат, пирофосфат, хлорид, бромид, иодид, ацетат, пропионат, деканоат, каприлат, акрилат, формиат, изобутират, капрат, гептаноат, пропиолат, оксалат, малонат, сукцинат, суберат, себакат, фумарат, малеат, бутин-1,4-диоат, гексин-1,6-диоат, бензоат, хлорбензоат, метилбензоат, динитробензоат, гидроксибензоат, метоксибензоат, фталат, терефталат, сульфонат, ксилолсульфонат, фенилацетат, фенилпропионат, фенилбутират, цитрат, лактат, (3-гидроксибутират, гликолят, малеат, тартрат, метансульфонат, пропансульфонат, нафталин-1-сульфонат, нафталин -2-сульфонат, манделат и подобные соли. Предпочтительные фармацевтически приемлемые соли добавления кислота включают образованные с минеральными
кислотами, такими как соляная кислота и бромистоводородная кислота, и особенно сформированные с органическими кислотами, такими как малеиновая кислота.
Подходящие основания для образования фармацевтически приемлемых солей с
кислотными функциональными группами пролекарств согласно настоящему
изобретению включают, но без ограничения к этому, гидроксиды щелочных
металлов, таких как натрий, калий и литий; гидроксиды щелочноземельных
металлов, таких как кальций и магний; гидроксиды других металлы, таких как
алюминий и цинк; аммиак и органические амины, такие как незамещенные или
гидроксизамещенные моно-, ди- или триалкиламины; дициклогексиламины;
трибутиламин; пиридин; ТчГ-метил^-этиламин; диэтиламин; триэтиламин; моно-,
бис- или трис-(2-гидрокси-низший алкил амины), такие как моно-, бис- или трис-
(2-гидроксиэтил)амин, 2-гидрокси-трет-бутиламин или трис-
(гидроксиметил)метиламин-ГчГ, Тч^-ди-низший алкил-ГЧ-(гидрокси-низший алкил)-амины, такие как Тч^ТЧ-диметил-ГЧ-^-гидроксиэтил^мин или три-(2-гидроксиэтил)амин; ТчГ-метил-О-глюкамин; и аминокислоты, такие как аргинин, лизин и тому подобное.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "гидрат" означает соединение, которое дополнительно включает стехиометрическое или нестехиометрическое количество воды, связанной нековалентными межмолекулярными силами.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "сольват" означает соединение, которое дополнительно включает стехиометрическое или нестехиометрическое количество растворителя, такого как вода, ацетон, этанол, метанол, дихлорметан, 2-пропанол или тому подобное, связанного нековалентными межмолекулярными силами.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "полиморф" означает твердые кристаллические формы соединения или его комплекс, которые могут быть охарактеризованы с помощью физических средств, таких как,
например, порошковая рентгеновская дифрактограмма или инфракрасная спектроскопия. Различные полиморфы одного и того же соединения могут проявлять различные физические, химические и/или спектроскопические свойства. Различные физические свойства включают, но без ограничения к этому, стабильность (например, к нагреванию, свету или влаге), сжимаемость и плотность (важны при формировании и производстве продукта), гигроскопичность, растворимость и скорости растворения (которые могут влиять на биодоступность). Различия в стабильности могут приводить к различиям в химической реакционной способности (например, дифференциальное окисление, так что лекарственная форма обеспечивается более быстро по сравнению с одним полиморфом, чем по сравнению с другим полиморфом) или механические характеристики (например, таблетки крошатся при хранении, так как кинетически преимущественный полиморф превращается в термодинамически более стабильный полиморф) или и то и другое (например, таблетки одного полиморфа более чувствительны к разрушению при высокой влажности). Различные физические свойства полиморфов могут влиять на их обработку. Например, один полиморф может более легко образовывать сольваты или может быть более сложным для фильтрации, или отмывки от примесей, чем другой из-за, например, формы или распределения по размеру частиц в нем.
Термин "по существу свободный от других стереоизомеров", как применяется в описании настоящего изобретения, означает присутствие менее 25% других стереоизомеров, предпочтительно менее 10% других стереоизомеров, более предпочтительно менее 5% других стереоизомеров и наиболее предпочтительно менее 2% других стереоизомеров или менее "Х"% других стереоизомеров (где X представляет собой число от 0 до 100, включительно). Способы получения или синтеза диастереоизомеров хорошо известны специалистам в данной области техники и могут применяться как для конечных соединений, так и для исходных материалов или промежуточных соединений. Другими вариантами выполнения настоящего изобретения являются те, в которых соединение представляет собой выделенное соединение. Термин "по меньшей мере Х% энантиомернообогащенный", как применяется в описании настоящего изобретения, означает, что по меньшей мере Х% соединения представляет собой
одну энантиомерную форму, где X представляет собой число от 0 до 100, включительно.
Термин "стабильное соединение", как применяется в описании настоящего изобретения, относится к соединениям, которые обладают стабильностью, достаточной для возможности получения, и которые сохраняют целостность соединения в течение периода времени, достаточно, чтобы быть полезными в целях настоящего изобретения (например, включение в терапевтические продукты, промежуточные соединения для применения в производстве терапевтических соединений, выделяемые и непортящиеся промежуточные соединения, лечение заболевания или состояния, отвечающего на терапевтические средства).
Термин "стереоизомер" относится как к энантиомерам, так и к диастереомерам.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "гало" или "галоген" относится к любому радикалу фтора, хлора, брома или иода.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "алк" или "алкил" относится к углеводородным группам с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющим от 1 до 12 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 8 атомов углерода. Выражение "низший алкил" относится к алкильным группам с 1 - 4 атомами углерода (включительно).
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "арилалкил" относится к составляющей, в которой атом водорода алкила замещен арильной группой.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "алкенил" относится к углеводородным группам с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющим от 2 до 10, предпочтительно от 2 до 4, атомов углерода, имеющим по меньшей мере одну двойную связь. Где алкенильная группа связана с атомом азота, предпочтительно такая группа не связана напрямую через атом углерода,
несущий двойную связь.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "алкокси" относится к -О-алкильному радикалу. Термин "алкилендиоксо" относится к двухвалентным видам структуры -0-R-0-, в которой R представляет собой алкилен.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "алкинил" относится к углеводородным группам с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющим от 2 до 10, предпочтительно от 2 до 4, атомов углерода, имеющим по меньшей мере одну тройную связь. Где алкинильная группа связана с атомом азота, предпочтительно такая группа не связана напрямую через атом углерода, несущий тройную связь.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин "алкилен" относится к двухвалентному мостику с прямой цепью из 1 - 5 атомов углерода, присоединяемому простыми связями (например, -(СН2)Х-, где х равно 1 - 5), который может быть замещен 1-3 низшими алкильными группами.
Термин "алкенилен" относится к мостику с прямой цепью из 2 - 5 атомов углерода, имеющему одну или две двойные связи, присоединяемому простыми связями, и который может быть замещен 1-3 низшими алкильными группами. Примерами алкениленовых групп являются -СН=СН-СН=СН-, -СН2-СН=СН-, -СН2-СН=СН-СН2-, -С(СН3)2СН=СН- и -СН(С2Н5)-СН=СН-.
Термин "алкинилен" относится к мостику с прямой цепью из 2 - 5 атомов углерода, имеющему тройную связь, присоединяемому простыми связями, и который может быть замещен 1-3 низшими алкильными группами. Примерами алкиниленовых групп являются -С=С-, -СН2-С=С-, -СН(СНз)С=С- и -С=С-СН(С2Н5)СН2-.
Термины "циклоалкил" и "циклоалкенил", как применяется в описании настоящего изобретения, включают насыщенные и частично ненасыщенные
циклические, соответственно углеводородные группы, имеющие от 3 до 12 атомов углерода, предпочтительно от 3 до 8 атомов углерода и более предпочтительно от 3 до 6 атомов углерода.
Термины "Аг" или "арил" относятся к ароматическим циклическим группам (например, 6-ти членные моноциклические, 10-ти членные бициклические или 14-трициклические кольцевые системы), которые содержат от 6 до 14 атомов углерода. Примерные арильные группы включают фенил, нафтил, бифенил и антрацен.
Термин "гетероарил " относится к моноциклическому или сопряженному кольцу (то есть, кольца, которые разделяют смежную пара атомов) из 5 - 12 кольцевых атомов, содержащему один, два, три или четыре кольцевых гетероатома, выбранные из N, О или S, причем оставшиеся атомы кольца представляют собой атомы С, и, кроме того, имеющему полностью сопряженную пи-электронную систему, где 0, 1, 2, 3 или 4 атома каждого кольца могут быть замещены заместителем. Примерами гетероарильных групп, без ограничения к этому, являются пирол, фуран, тиофен, имидазол, оксазол, тиазол, пиразол, пиридин, пиримидин, хинолин, хиназолин, изохинолин, пурин и карбазол.
Термины "гетероцикл", "гетероциклический" или "гетероцикло" относятся к полностью насыщенным или частично ненасыщенным циклическим группам, например, 3-7 членным моно циклическим, 7-12 членным бициклическим или 10 - 15 членным трициклическим кольцевым системам, которые имеют по меньшей мере один гетероатом в по меньшей мере одном кольце, где 0, 1, 2 или 3 атома каждого кольца могут быть замещены заместителем. Каждое кольцо гетероциклической группы, содержащей гетероатом, может иметь 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных их атомов азота, атомов кислорода и/или атомов серы, где гетероатомы кислорода и серы могут при необходимости быть окислены, и атомы азота могут быть при необходимости кватернизированы. Гетероциклическая группа может быть присоединена к любому гетероатому или атому углерода кольца или кольцевой системы.
Термин "гетероциклил" относятся к полностью насыщенным или частично ненасыщенным циклическим группам, например, 3-7 членным моноциклическим, 7 - 12 членным бициклическим или 10 - 15 членным трициклическим кольцевым системам, которые имеют по меньшей мере один гетероатом в по меньшей мере одном кольце, где 0, 1, 2 или 3 атома каждого кольца могут быть замещены заместителем. Каждое кольцо гетероциклильной группы, содержащей гетероатом, может иметь 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных их атомов азота, атомов кислорода и/или атомов серы, где гетероатомы кислорода и серы могут при необходимости быть окислены, и атомы азота могут быть при необходимости кватернизированы. Гетероциклильная группа может быть присоединена к любому гетероатому или атому углерода кольца или кольцевой системы.
Термин "заместители" относится к "замещающей" группе при любой
функциональной группе, определенной в описании настоящего изобретения,
например, алкильная, алкенильная, алкинильная, циклоалкильная,
циклоалкенильная, арильная, гетероциклильная или гетероарильная группа при
любом атоме этой группы. Подходящие заместители включают, но без
ограничения к этому, галоген CN, N02, OR15, SR15, S(0)2OR15, NR15R16, Ci-C2
перфторалкил, Ci-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15,
C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16,
NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17, S(0)R17, S(0)2R17, R16, оксо, C(0)R16, C(0)(CH2)nOH, (CH2)nOR15, (CH2)nC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где n независимо равно 0-6 включительно. Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Сб циклоалкил. Каждый R16 независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Св циклоалкил, ар ил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св
циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом. Каждый R независимо представляет собой Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом. Каждый Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил и С1-С4 алкил в каждом R15, R16 и R17 может быть необязательно замещен галогеном, CN, С1-С4 алкилом, ОН, С1-С4 алкокси, NH2,
С1-С4 алкиламино, С1-С4 диалкиламино, С1-С2 перфторалкил, С1-С2 перфторалкокси или 1,2-метилендиокси.
Термин "оксо" относится к атому кислорода, который образует карбонил при присоединении к атому углерода, N-оксид при присоединении к атому азота и сульфоксид или сульфон при присоединении к атому серы.
Термин "ацил" относится к алкилкарбонильному, циклоалкилкарбонильному, арилкарбонильному, гетероциклил карбонильному или гетероарилкарбонильноиу заместителю, любой из которых может быть дополнительно замещен заместителями.
Как применяется в описании настоящего изобретения термин белковые "изменения", как определяется, означает отклонения от нормальных физиологических условий. Пример изменений включает мутацию (мутации), усечение (усечения), слияние (слияния) с другим белком (другими белками), сверхэкспрессию или пониженную экспрессию.
Повторение перечисления химических групп в любом определении переменной в описании настоящего изобретения включает определения этой переменной как любой единичной группы или комбинации перечисленных групп. Декламация варианта выполнения настоящего изобретения для переменной в описании настоящего изобретения включает этот вариант выполнения настоящего изобретения в качестве любой единичной формы варианта выполнения настоящего изобретения или в комбинации с любыми другими вариантами выполнения настоящего изобретения или их частями. Декламация варианта выполнения настоящего изобретения в описании настоящего изобретения включает этот вариант выполнения настоящего изобретения в качестве любой единичной формы варианта выполнения настоящего изобретения или в комбинации с любыми другими вариантами выполнения настоящего изобретения или их частями.
Соединения согласно настоящему изобретению могут содержать один или более
ассиметрических центров и, таким образом, находятся в виде рацематов и рацемических смесей, единичных энантиомеров, отдельных диастереомеров и смесей диастереомеров. Все такие изомерные формы этих соединений специальным образом включены в настоящее изобретение. Соединения согласно настоящему изобретению также могут быть представлены в качестве множественных таутомерных форм, в таких случаях, настоящее изобретение специальным образом включает все таутомерные формы соединений, описанных в настоящем изобретении. Все такие изомерные формы таких соединений специальным образом включены в настоящее изобретение. Все кристаллические формы соединений, описанных в настоящей заявке, специальным образом включены в настоящее изобретение.
Соединения согласно настоящему изобретению
Одним объектом настоящего изобретения является соединение формулы I:
или его соль; или пролекарство, или соль его пролекарства; или его гидрат, сольват или полиморф; где:
Ri, R2, R3, R4, R5 каждый независимо представляют собой Н, алкил или Z1;
R6 представляет собой алкил, OR7, NR7R8, арил или гетероарил, насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, где R6 необязательно замещен 1-3 группами, независимо выбранными из алкила, циклоалкила, гетероциклила, алкокси, гидроксиалкила, HZ1;
R.7 и R.8 каждый независимо выбираются из Н, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинил, арила, гетероциклила, гетероарила, или R7 и вместе с атомом азота образуют моно- или бициклический гетероциклил или гетероарил;
Каждый Z1 представляет собой галоген, CN, N02, OR15, SR15, S(0)2OR15, NR15R16,
C1-C2 перфторалкил, C1-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15,
C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16,
NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17, S(0)R17, S(0)2R17, R16, OKCO, C(0)R16, C(0)(CH2)mOH, (CH2)mOR15, (CH2)mC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где в каждом случае m независимо равно 0-6;
Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Св циклоалкил;
Каждый R16 независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом; и
Каждый R17 независимо представляет собой Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом;
При условии, что R6 не представляет собой метилпиперазинил, пирролидинил, метанамино или пиперазинил.
В одном варианте выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы I, где R7 и Rg вместе с атомом азота образуют бициклический гетероциклил или гетероарил, необязательно замещенный 1-3 группами Z .
В другом варианте выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы II:
или его соль; или пролекарство, или соль его пролекарства; или его гидрат, сольват или полиморф; где:
Ri, R2, R3, R4, R5 каждый независимо представляют собой Н, алкил или Z1;
R6 представляет собой алкил, OR7, NR7R8, арил или гетероарил, насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, где R6 необязательно замещен 1-3 группами, независимо выбранными из алкила, циклоалкила, гетероциклила, алкокси, гидроксиалкила, HZ1;
R7 и R8 каждый независимо выбираются из Н, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероциклила, гетероарила, или R7 и Rg вместе с атомом азота образуют моно- или бициклический гетероциклил или гетероарил;
Каждый Z1 представляет собой галоген, CN, N02, OR15, SR15, S(0)2OR15, NR15R16,
Ci-C2 перфторалкил, Ci-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15,
C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16,
NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17, S(0)R17, S(0)2R17, R16, OKCO, C(0)R16, C(0)(CH2)mOH, (CH2)mOR15, (CH2)mC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где в каждом случае m независимо равно 0-6;
Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Св циклоалкил;
Каждый R независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом; и
Каждый R17 независимо представляет собой Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом.
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы III:
III
или его соль; или пролекарство, или соль его пролекарства; или его гидрат, сольват или полиморф; где:
п равно 0-2;
R5 и Rn каждый независимо представляет собой Н, алкил или Z1; R9 представляет собой алкил или Z1; Rio представляет собой Н, алкил или Z1;
каждый Z1 независимо представляет собой галоген, CN, NO2, OR15, SR15,
S(0)2OR15, NR15R16, С1-С2 перфторалкил, Ci-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15, C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16, NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17,
S(0)R17, S(0)2R17, R16, оксо, C(0)R16, C(0)(CH2)mOH, (CH2)mOR15, (CH2)mC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где в каждом случае m независимо равно 0-6;
Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Св циклоалкил;
Каждый R16 независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом; и
Каждый R17 независимо представляет собой Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом.
Репрезентативные соединения согласно настоящему изобретению приведены в таблицах 1 и 2. В этих примерах стереохимия при хиральных атомах углерода независимо представляет собой RS, R или S, если иного не указано. Структуры, приведенные здесь, включая структуры, приведенные в Таблицах 1 и 2, могут содержать определенные -NH-, -NH2 (амино) и -ОН (гидроксил) группы, где соответствующий атом водорода (атомы водорода) не показаны явным образом; однако их необходимо читать как -NH-, -NH2 или -ОН в зависимости от обстоятельств. В определенных структурах показана связь в виде прямой линии, которая означает метильную группу.
Таблица 1
Таблица 2
Соответствующие соединения согласно настоящему изобретению перечислены ниже:
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-метилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(1S)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] -6-аминопиридазин-З -ил } -N- { 4- [(4-метилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{6-амино-5-[(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридазин-3-ил}-М-[4-(морфолин-4-илкарбонил)фенил] карбоксамид;
{ 6-амино-5- [(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } -N-(4- {[4-(2-
гидроксиэтил)пиперазинил] карбонил } фенил)карбоксамид;
{ 6-амино-5- [(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-
пирролидинилпиперидил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 6-амино-5- [(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-
этилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 6-амино-5- [(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-
циклопропилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
N-(4-{[(27?)-2-(пирролидинилметил) пирролидинил] карбонил}фенил){6-амино-5-[(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } карбоксамид;
N- { 4- [((3?, 5R)-3,5 -диметилпиперазинил)карбонил] фенил } { 6-амино-5- [(2,6-
дихлор-3 -фторфенил)этокси]пиридазин-3 -ил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 3 -фтор-4- [(4-метилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N-(4- {[4-(4-метилпиперазинил)пиперидил] карбонил } фенил)карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N-[4-(4-пиридилкарбонил)фенил]карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(3,6-диазабицикло [4.3.0]нон-3 -ил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(3 -оксопиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-метил(1,4-диазапергидроэпинил))карбонил] фенил}карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N-[4-( 1,4-диазапергидроэпинилкарбонил)фенил]карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(3,3 -диметилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4-[((3S, 5R)-3,5-диметилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-гидроксипиперидил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N-(4- {N- [2-(диэтиламино)этил]карбамоил}фенил)карбоксамид.
Синтез соединений приведенных формул может быть легко осуществлен с помощью синтетической химии, известной специалисту в данной области
техники. Релевантные методики и промежуточные соединения раскрываются, например, в настоящей заявке. Каждый из патентов, заявок на патент и публикаций, либо в традиционных журналах, либо доступных с помощью интернета, упомянутые в настоящей заявке, включены в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки.
Другие подходы к синтезу соединений приведенных формул могут быть легко адаптированы на основе приведенных ссылок. Вариации этих методик и их оптимизация практикуются специалистами в данной области техники.
Конкретные подходы и описанные выше соединения не являются ограничивающими. На приведенных химических схемах показаны переменные, которые, таким образом, определяются в соответствии с определениями химических групп (составляющие, атомы и т.д.) соответствующего положения в соединениях приведенных в настоящем изобретении формул, идентифицируются ли они такими же именами переменных (например, R1, R2, R, R, X и т.д.) или нет. Пригодность химической группы в структуре соединения для применения в синтезе другой структуры соединения известна специалистам в данной области техники. Дополнительные способы синтеза соединений приведенных в настоящей заявке формул и их синтетические предшественники, включая предшественники, используемые в путях синтеза, не показанных на приведенных схемах, относятся к средствам синтеза специалистов в данной области техники. Способы оптимизации условий реакции, если необходимо уменьшить конкурирующие побочные продукты, известны в данной области техники. Описанные в настоящей заявке способы могут также дополнительно включать стадии, либо до, либо после стадий, конкретно описанных в настоящей заявке, для добавления или удаления подходящих защитных групп, чтобы в конечном счете обеспечить синтез соединений согласно настоящему изобретению. Кроме того, различные стадии способа могут быть осуществлены в альтернативной последовательности или альтернативном порядке с получением желательных соединений. Методы трансформации и введения защитных групп синтетической химии (защита и депротонирование), полезные в синтезе подходящих соединений, известны в данной области техники и включают, например, описанные в R. Larock,
Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3 Ed., John Wiley and Sons (1999); L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995), и их последующих изданиях.
Способы, описанные в описании настоящего изобретения, предполагают превращение соединений одной формулы в соединения другой формулы. Способ превращения относится к одной или более химическим трансформациям, которые могут осуществляться in situ, или с выделением промежуточных соединений. Трансформации могут включать реакцию исходных соединений или промежуточных соединений с дополнительными реагентами, применяя методики и протоколы, известные в данной области техники, включая описанные в ссылочных документах. Промежуточные соединения могут применяться с очисткой или без нее (например, фильтрация, дистилляция, сублимация, кристаллизация, растирание в порошок, твердофазная экстракция и хроматография).
Комбинации заместителей и переменных согласно настоящему изобретению представляют собой единственные, которые приводят к образованию стабильных соединений.
Настоящее изобретение обеспечивает композиции, содержащие эффективное количество соединения любой приведенной в настоящей заявке формулы или фармацевтически приемлемой соли, сольвата, гидрата, полиморфа или пролекарства, если применимо, указанного соединения; и приемлемый носитель. Предпочтительно, композиция согласно настоящему изобретению получена для фармацевтического применения ("фармацевтическая композиция"), где носитель представляет собой фармацевтически приемлемый носитель. Носитель(и) должны быть "приемлемыми" с точки зрения совместимости с другими ингредиентами композиции и, в случае фармацевтически приемлемого носителя, не должны быть вредны для реципиента в количествах, как правило применяемых в лекарственных средствах.
Фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и среды, которые могут применяться в фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению, включают, но без ограничения к этому, ионообменники, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, белки сыворотки крови, такие как человеческий сывороточный альбумин, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновая кислота, сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как протамин сульфат, гидрофосфат динатрия, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный диоксид кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, натрий карбоксиметилцеллюлоза, полиакрилаты, воски, полиэтилен-полиоксипропилен-блок полимеры, полиэтиленгликоль и ланолин.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению включают подходящие для перорального, ректального, назального, местного (включая буккальное и сублингвальное), вагинального или парентерального (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное и чрескожное) введение. В определенных вариантах выполнения настоящего изобретения, соединение формулы, приведенной в настоящем изобретении, вводится трансдермально (например, с применением трансдермального пластыря). Другие композиции могут быть представлены удобным образом в форме единичной дозы, как например, таблетки и капсулы с продолжительным высвобождением, и в липосомах, и могут быть получены любыми способами, хорошо известными в фармацевтической области. Смотрите, например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Philadelphia, PA (17th ed. 1985).
Такие способы получения включают стадию получения ассоциата молекулы, которая подлежит введению, и ингредиентов, таких как носитель, который составляет один или более вспомогательных ингредиентов. В общем, композиции получают путем равномерного и тесного связывания ингредиентов с жидкими носителями, липосомами или тонкоизмельченными твердыми носителями, или и тем и другим, и затем, если необходимо, формованием продукта.
В определенных предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения соединение вводится перорально. Композиции согласно настоящему изобретению, подходящие для перорального введения, могут присутствовать в виде дискретных единиц, таких как капсулы, саше или таблетки, которые содержат предопределенное количество активного ингредиента; в виде порошка или гранул; в виде раствора или суспензии в водной жидкости или неводной жидкости; или в виде жидкой эмульсии масло-в-воде или жидкой эмульсии вода-в-масле, или упакованными в липосомы или в виде болюсов и т.д. Твердые желатиновые капсулы могут быть полезными для включения таких суспензий, которые могут предпочтительно повышать скорость абсорбции соединения.
Таблетка может быть получена путем прессования или формовки, при необходимости с одним или более вспомогательными ингредиентами. Прессованные таблетки могут быть получены путем прессования на подходящем устройстве активного ингредиента в сыпучей форме, такой как порошок или гранулы, при необходимости смешанного со связующим веществом, смазочным веществом, инертным разбавителем, консервантом, поверхностно-активным веществом или диспергирующим веществом. Формованные таблетки могут быть получены путем формования в подходящем устройстве смеси порошкообразного соединения, увлажненного инертным жидким разбавителем. Таблетки при необходимости могут быть покрыты или сделаны рифлеными и могут быть получены таким образом, чтобы высвобождение активного ингредиента было медленным или контролируемым. Способы формирования такого медленного или контролируемого высвобождения композиций фармацевтически активных ингредиентов, таких как описанные в настоящем изобретении, и других соединений, известных в данной области техники, известны в данной области техники и описаны в нескольких выданных патентах США, некоторые из которых включают, но без ограничения к этому, патент США № 4,369,172 и 4,842,866, и процитированные в них ссылки. Покрытия могут применяться для доставки соединений в кишечник (смотрите, например, патенты США № 6,638,534, 5,217,720 и 6,569,457, 6,461,631, 6,528,080, 6,800,663, и процитированные в них ссылки). Применяемая композиция для соединений согласно настоящему изобретению, находится в форме энтеральных гранул,
энтеральный слой которых содержит гидроксипропилметилцеллюлозы ацетат сукцинат.
В случае таблеток для перорального применения, носители, которые в общем применяются, включают лактозу и кукурузный крахмал. Смазывающие вещества, такие как стеарат магния, также, как правило, добавляются. Для перорального введения в форме капсулы полезные разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. Когда водные суспензии вводятся перорально, активный ингредиент объединяется с эмульгирующими или суспендирующими средствами. Если желательно, могут добавляться определенные подсластители и/или придающие вкус вещества и/или окрашивающие вещества.
Композиции, подходящие для местного введения включают лепешки, содержащие ингредиенты в придающей вкус основе, как правило, сахароза и акация или трагакант; и пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин, или сахароза и акация.
Композиции, подходящие для парентерального введения включают водные и неводные стерильные инъецируемые растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатики и растворенные вещества, которые делают композицию изотонической относительно крови предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие средства и загустители. Композиции могут присутствовать в виде контейнеров с однократной дозой или с многократными дозами, например, запаянные ампулы и пузырьки, и могут храниться в высушенном сублимацией состоянии (лиофилизация), требующем только добавление стерильного жидкого носителя, например воды для инъекций, непосредственно перед применением. Импровизированные инъекционные растворы и суспензии могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток.
Такие инъекционные растворы могут быть в форме, например, стерильной инъекционной водной или маслянистой суспензии. Эта суспензия может быть
получена согласно методикам, известным в данной области техники, с применением подходящих диспергирующих или смачивающих агентов (таких как, например, Tween 80) и суспендирующих агентов. Стерильный инъецируемый препарат может также представлять собой стерильный инъецируемый раствор или суспензию в нетоксичном парентерально-приемлемом разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых сред и растворителей, которые можно применять, упоминаются маннит, вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные жирные масла обычно применяются в качестве растворителя или суспендирующей среды. С этой целью могут применяться любые легкие жирные масла, включая синтетические моно- или диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, и их глицеридные производные подходят для получения инъецируемых препаратов, как и природные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло или касторовое масло, особенно в их полиоксиэтилированных видах. Эти масляные растворы или суспензии могут также содержать длинноцепочечные спиртовые разбавители или диспергирующие вещества.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут вводиться в форме суппозиториев для ректального введения. Эти композиции могут быть получены путем смешивания соединения согласно настоящему изобретению с подходящим нераздражающим эксципиентом, который является твердым при комнатной температуре, но становится жидким при ректальной температуре, поэтому будет расплавляться в прямой кишке с высвобождением активных компонентов. Такие материалы включают, но без ограничения к этому, масло какао, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут вводиться в виде назального аэрозоля или путем ингаляции. Такие композиции получают согласно методикам, хорошо известным в области фармацевтических композиций, и могут быть получены в виде растворов в физиологическом растворе, с применением бензилового спирта или других подходящих консервантов, промотеров абсорбции для усиления биодоступности,
фторуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих средств, известных в данной области техники.
Местное введение фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению особенно полезно, когда желательное лечение включает области или органы, легко доступные для местного введения. Для местного применения на коже фармацевтическая композиция должна быть получена в виде подходящей мази, содержащей активные компоненты, суспендированные или растворенные в носителе. Носители для местного введения соединений согласно настоящему изобретению включают, но без ограничения к этому, минеральное масло, жидкий нефтяной газ, медицинский вазелин, пропиленгликоль, соединения полиоксиэтилена и полиоксипропилена, эмульгирующий воск и воду. Альтернативно, фармацевтическая композиция может быть получена в виде подходящего лосьона или крема, содержащего активное соединение, суспендированное или растворенное в носителе. Подходящие носители включают, но без ограничения к этому, минеральное масло, моностеарат сорбитана, полисорбат 60, воск из сложных цетиловых эфиров, цетеариловый спирт, 2-октилдодеканол, бензиновый спирт и воду. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению могут также местно вводиться в нижнюю часть кишечного тракта с помощью композиции в виде ректальных суппозиториев или композиции в виде подходящей клизмы. Трансдермальные пластыри для местного применения и ионофоретическое введение также охватываются настоящим изобретением.
Особенно предпочтительные производные и пролекарства представляют собой те, которые повышают биодоступность соединений согласно настоящему изобретению, когда такие соединения вводятся млекопитающему (например, путем обеспечения быстрой абсорбции соединения в крови при пероральном введении) или которые повышают доставку родоначального соединения в биологический компартмент (например, головной мозг или центральная нервная система) относительно родоначального вида. Предпочтительные пролекарства включают производные, в которых группа, которая усиливает растворимость в воде или активный транспорт через мембрану желудочно-кишечного тракта,
присоединяется к структуре формул, описанных в настоящей заявке. Смотрите, например, Alexander, J. et al. Journal of Medicinal Chemistry 1988, 31, 318-322; Bundgaard, H. Design of Prodrugs; Elsevier: Amsterdam, 1985; pp 1-92; Bundgaard, H.; Nielsen, N. M. Journal of Medicinal Chemistry 1987, 30, 451-454; Bundgaard, H. A Textbook of Drug Design and Development; Harwood Academic Publ.: Switzerland, 1991; pp 113-191; Digenis, G. A. et al. Handbook of Experimental Pharmacology 1975, 28, 86-112; Friis, G. J.; Bundgaard, H. A Textbook of Drug Design and Development; 2 ed.; Overseas Publ.: Amsterdam, 1996; pp 351-385; Pitman, I. H. Medicinal Research Reviews 1981, 1, 189-214.
Применение терапевтических средств субъектом может быть локальным с введением с представляющее интерес место. Могут применяться различные методики для введения композиций согласно настоящему изобретению в представляющее интерес место, такие как инъекция, применение катетеров, троакаров, пуль, геля плюроника, стентов, полимеров для продолжительного высвобождения лекарственного средства или других устройств, которые обеспечивают внутренний доступ.
Согласно другому варианту выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает способ импрегнирования имплантируемого устройства для высвобождения лекарственного средства, содержащий стадию контакта указанного устройства для высвобождения лекарственного средства с соединением или композицией согласно настоящему изобретению. Имплантируемые устройства для высвобождения лекарственного средства, включают, но без ограничения к этому, биоразлагаемые полимерные капсулы или пули, неразлагаемые способные к диффузии полимерные капсулы и биоразлагаемые полимерные пластины.
Согласно другому варианту выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает имплантируемое медицинское устройство, покрытое соединением или композицией, содержащей соединение согласно настоящему изобретению, так что указанное соединение является терапевтически активным.
В другом варианте выполнения настоящего изобретения композиция согласно настоящему изобретению дополнительно содержит второе терапевтическое средство. Второе терапевтическое средство включает любое соединение или терапевтическое средство, которое как известно, имеет или которое демонстрирует предпочтительные свойства при введении отдельно или с соединением любой приведенной в настоящем изобретении формулы. Лекарственные средства, которые могли бы быть полезным образом объединены с этими соединениями, включают другие киназные ингибиторы и/или другие химиотерапевтические средства для лечения заболеваний или нарушений, рассмотренных выше.
Такие агенты подробно описаны в данной области техники. Предпочтительно второе терапевтическое средство представляет собой средство, полезное для лечения или профилактики заболевания или состояния, выбранного из раковых.
Даже более предпочтительно второе терапевтическое средство, включаемое в препарат совместно с соединением согласно настоящему изобретению, представляет собой средство, полезное для лечения заболеваний/нарушений, опосредованных c-met, ron, Axl или ALK и их слитыми белками, такими как EML4-ALK и NPM-ALK.
В другом варианте выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает отдельные лекарственные формы соединения согласно настоящему изобретению и второго терапевтического средства, которые связаны друг с другом. Выражение "связаны друг с другом", как понимается в настоящей заявке, означает, что отдельные лекарственные формы упакованы вместе или иначе соединены друг с другом, так что очевидно, что отдельные лекарственные формы предназначаются для совместной продажи и введения (в течение по меньшей мере 24 часов после введения одного должно вводиться второе, последовательно или одновременно).
В фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению соединение согласно настоящему изобретению присутствует в эффективном количестве. Как
применяется в описании настоящего изобретения термин "эффективное количество" относится к количеству, которое вводится согласно соответствующему режиму дозирования, достаточному для уменьшения или улучшения серьезности, продолжительности или развития нарушения, подлежащего лечению, предотвращения развития нарушения, подлежащего лечению, вызова регрессии нарушения, подлежащего лечению, или усиления или улучшения профилактического или терапевтического эффекта (эффектов) другой терапии.
Взаимосвязь доз для животных и человека (исходя из миллиграмм на квадратный метр площади поверхности тела) описывается в Freireich et al, (1966) Cancer Chemother Rep 50: 219. Площадь поверхности тела может быть приблизительно определена исходя из роста и веса пациента. Смотрите, например, Scientific Tables, Geigy Pharmaceuticals, Ardley, N.Y., 1970, 537. Эффективное количество соединения согласно настоящему изобретению может лежать в интервале от около 0.001 мг/кг до около 500 мг/кг, более предпочтительно от 0.01 мг/кг до около 50 мг/кг, более предпочтительно от около 0.1 мг/кг до около 2.5 мг/кг. Эффективные дозы также будут варьироваться, как известно специалистам в данной области техники, в зависимости от подлежащих лечению заболеваний, серьезности заболевания, пути введения, пола, возраста и общего состояния здоровья пациента, возможности совместного применения с другими терапевтическими средствами, такими как применение других средств, и решения лечащего врача.
Для фармацевтических композиций, которые содержат второе терапевтическое средство, эффективное количество второго терапевтического средства составляет от около 20% до около 100% дозы, как правило применяемой при монотерапевтическом режиме с использованием только этого средства. Предпочтительно, эффективное количество от около 70% до около 100% нормальной монотерапевтической дозы. Нормальные монотерапевтические дозы этих вторых терапевтических средств известны в данной области техники. Смотрите, например, Wells et al, eds., Pharmacotherapy Handbook, 2nd Edition, Appleton and Lange, Stamford, Conn. (2000); PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket
Pharmacopoeia 2000, Deluxe Edition, Tarascon Publishing, Loma Linda, Calif. (2000), каждый из которых включен в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки.
Ожидается, что некоторые из вторых терапевтических средств, перечисленных выше, будут действовать синергетически с соединениями согласно настоящему изобретению. Когда это происходит, это позволяет уменьшить эффективную дозу второго терапевтического средства и/или соединения согласно настоящему изобретению по сравнению с той, которая требуется в монотерапии. Это предпочтительно минимизирует токсические побочные эффекты либо второго терапевтического средства, либо соединения согласно настоящему изобретению, приводит к синергетическим улучшениям эффективности, облегчает введение или применение и/или уменьшает общий расход соединения или композиции.
Способы лечения
Согласно другому варианту выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает способ лечения субъекта, страдающего от или склонного к заболеванию или нарушению или их симптому (например, описанным в настоящей заявке), содержащий стадию введения указанному субъекту эффективного количества соединения или композиции согласно настоящему изобретению. Такие заболевания хорошо известны в данной области техники и раскрываются в настоящей заявке.
Одним объектом настоящего изобретения является способ лечения, который включает лечение нарушения, которое опосредовано протеинкиназой, например, c-met, ron. Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения, который включает лечение нарушения, которое опосредовано киназами c-met, ron, Axl или ALK, или их слитыми белками, такими как EML4-ALK и NPM-ALK. В определенных вариантах выполнения настоящего изобретения заболевание опосредовано киназами c-met, ron, Axl или ALK или их слитыми белками, такими
как EML4-ALK и NPM-ALK, или изменениями одной или более из c-met, ron, Axl и ALK киназ.
Одним объектом настоящего изобретения является способ лечения заболевания у субъекта, содержащий введение субъекту соединения любой приведенной в настоящей заявке формулы.
Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения заболевания у субъекта, содержащий введение субъекту композиции, содержащей соединение любой приведенной в настоящей заявке формулы.
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения заболевание опосредовано киназами c-met или ron.
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения, заболеванием является рак или пролиферативное заболевание.
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения, заболеванием является рак легких, ободочной кишки, молочной железы, простаты, печени, поджелудочной железы, мозга, почек, яичек, желудка, кожи и костей, рак желудка, рак молочных желез, рак поджелудочной железы, глиома, нейробластома и гепатоцеллюлярная карцинома, папиллярная ренальная карцинома или плоскоклеточный рак головы и шеи.
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения, заболеванием является немелкоклеточный рак легких (NSCLC), резистентный к лечению с помощью PF-2341066.
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения, заболеванием является немелкоклеточный рак легких (NSCLC) с метастазами в головной мозг.
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения, заболеванием является психиатрическое, как например шизофрения, депрессия и пагубная привычка к веществу (например, кокаин, табак или алкоголь) или злоупотребление, или родственные заболевания (например, ожирение, диабет, сердечно-сосудистые заболевания).
В одном варианте выполнения настоящего изобретения, способ согласно настоящему изобретению применяется для лечения субъекта, страдающего от или склонного к заболеванию или состоянию. Такие заболевания, нарушения или их симптомы включают, например, вызываемые протеинкиназами (например, c-met, ron, Axl, ALK и их слитые белки, такие как EML4-ALK и NPM-ALK). Заболеванием или симптомом заболевания может быть, например, рак или пролиферативное заболевание или нарушение. Заболеванием или симптомом заболевания может быть рак легких, ободочной кишки, молочной железы, простаты, печени, поджелудочной железы, мозга, почек, яичек, желудка, кожи и костей, рак желудка, рак молочных желез, рак поджелудочной железы, глиома, нейробластома и гепатоцеллюлярная карцинома, папиллярная ренальная карцинома или плоскоклеточный рак головы и шеи. Способы, определенные в настоящей заявке, включают те, в которых субъект идентифицируется как нуждающийся в конкретно установленном лечении. Идентификация субъекта, как нуждающегося в таком лечении, может быть осуществлена субъектом или лечащим врачом и может быть субъективной (например, мнение) или объективной (например, проводится тест или диагностический способ).
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения, соединения приведенных в настоящем изобретении формул (и их композиции) могут применяться для лечения субъектов, имеющих заболевание или нарушение, которое лечили с помощью других терапевтических средств и которое стало резистентным к другим терапевтическим средствам (например, противораковое средство, средств против нервных заболеваний, средство против психиатрических заболеваний, сердечно-сосудистое средство, средство против ожирения или противодиабетические средства. Согласно одному варианту выполнения настоящего изобретения способы согласно настоящему изобретению включают
те, в которых когда субъект резистентен к лечению с помощью PF-2341066 (или идентифицируется как имеющий развитую резистентность к PF-2341066) вводится соединение приведенных в настоящем изобретении формул (или их композиция). В других вариантах, субъект, таким образом, отвечает на такое лечение, так что нарушение модулируется или улучшается относительно лечения согласно уровню техники в случае лечения соединением с приведенной в настоящем изобретении формулой.
В другом варианте выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает способ модуляции активности протеинкиназ (например, протеинтирозинкиназ, перечисленных в настоящем изобретении киназ) в клетке, содержащий контакт клетки с одним или более соединением любой из приведенных в настоящем изобретении формул.
В другом варианте выполнения настоящего изобретения, вышеприведенный
способ лечения содержит следующую стадию совместного введения указанному
пациенту одного или более вторых терапевтических средств. Выбор второго
терапевтического средства может быть сделан из любого второго
терапевтического средства, известного как полезное для указанных в настоящем
изобретении нужд. Дополнительные терапевтические средства включают, но без
ограничения к этому, средства лечения заболеваний, нарушений или их
симптомов, включая, например, противораковые средства, антипролиферативные
средства, антинеопластические средства, противоопухолевые средства,
антиметаболического типа/тимидилатсинтаза ингибирующие
антинеопластические средства, атинеопластические агенты алкилирующего типа, антинеопластические агенты антибиотического типа, или любые другие средства, как правило, вводимые в качестве первичного или адъювантного агента в протоколах лечения рака (например, против морской болезни, против анемии и т.д.), включая, например, винбластин сульфат, винкристин, виндезин, винестрамид, винорелбин, винтриптол, винзолидин, тамоксифен, торемифен, ралоксифен, дролоксифен, иодоксифен, мегестрол ацетат, анастрозол, летразол, боразол, эксеместан, флутамид, нилутамид, бикалутамид, кипротерон ацетат, гозерелин ацетат, липролид, финастерид, герцептин, метотрексат, 5-фторурацил,
цитозин арабинозид, доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, митомицин-С, дактиномицин, митрамицин, цисплатин, карбоплатин, мелфалан, хлорамбуцил, бисульфан, циклофосфамид, ифосфамид, нитрозомочевины, тиотефан, винкристин, таксол, таксотер, этопозид, тенипозид, амсакрин, иринотекан, топотеканэпотилон, иресса, авастин, OSI-774, ингибиторы ангиогенеза, EGFR ингибиторы, МЕК ингибиторы, VEGFR ингибиторы, CDK ингибиторы, Herl и Нег2 ингибиторы и моноклональные антитела.
Термин "совместное введение", как применяется в настоящем изобретении, означает, что второе терапевтическое средство может вводиться вместе с соединением согласно настоящему изобретению в качестве части одной лекарственной формы (так как композиция согласно настоящему изобретению содержит соединение согласно настоящему изобретению и второе терапевтическое средство как описано выше) или по отдельности в виде многократных лекарственных форм. Альтернативно дополнительное средство может вводиться до, одновременно или после введения соединения согласно настоящему изобретению. При такой комбинаторной терапии как соединения согласно настоящему изобретению, так и второе терапевтическое средство (средства) вводятся обычными способами. Введение субъекту композиции согласно настоящему изобретению, содержащей как соединение согласно настоящему изобретению, так и второе терапевтическое средство не препятствует раздельному введению субъекту этого же терапевтического средства, любого другого второго терапевтического средства или любого соединения согласно настоящему изобретению в другой момент времени в ходе курса лечения.
Эффективные количества вторых терапевтических средств хорошо известны специалистам в данной области техники, и руководство по дозированию можно найти в патентах и опубликованных заявках на патент, на которые приводятся ссылки в описании настоящего изобретения, а также в Wells et al, eds., Pharmacotherapy Handbook, 2nd Edition, Appleton and Lange, Stamford, Conn. (2000); PDR Pharmacopoeia, Tarascon Pocket Pharmacopoeia 2000, Deluxe Edition, Tarascon Publishing, Loma Linda, Calif. (2000), и других медицинских тестах. Однако специалистам в данной области техники хорошо известно как определить
оптимальный диапазон эффективных количеств второго терапевтического средства.
В одном варианте выполнения настоящего изобретения, где второе терапевтическое средство вводится субъекту, эффективное количество соединения согласно настоящему изобретению меньше его эффективного количества, которое вводилось бы, если бы второе терапевтическое средство не вводилось. В другом варианте выполнения настоящего изобретения, эффективное количество второго терапевтического средства меньше, чем его эффективное количество, которое применялось бы, если бы соединение согласно настоящему изобретению не применялось. В таком случае, нежелательные побочные эффекты, связанные с высокими дозами любого средства могут быть минимизированы. Другие предпочтительные преимущества (включая, без ограничения к этому, улучшенные режимы дозирования и/или уменьшенную стоимость лекарственного средства) будут очевидны в данной области техники.
В еще одном варианте выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает применение соединение любой из приведенных в настоящем изобретении формул отдельно или вместе с одним или более вышеописанными вторыми терапевтическими средствами в производстве лекарственного средства, либо в виде единичной композиции, либо в виде отдельных лекарственных форм, для лечения или профилактики у субъекта заболевания, нарушения или симптома, указанных выше. Другим объектом настоящего изобретения является соединение приведенных в настоящем изобретении формул для применения при лечении или профилактики у субъекта заболевания, нарушения или симптома, указанных выше.
В других вариантах способы согласно настоящему изобретению включают те, которые дополнительно содержат мониторинг ответа субъекта на применяемое лечение. Такой мониторинг может включать периодическое взятие проб ткани субъекта, жидкостей, образцов, клеток, белков, химических маркеров, генетических материалов и т.д. в качестве маркеров или индикаторов режима лечения. В других вариантах выполнения настоящего изобретения субъект
предварительно исследуется или идентифицируется в качестве нуждающегося в таком лечении путем оценки на релевантный маркер или индикатор пригодности такого лечения.
В одном варианте выполнения настоящего изобретения, настоящее изобретение обеспечивает способ мониторинга прогресса лечения. Способ включает стадию определения уровня диагностического маркера (Маркер) (например, любая мишень или клеточный тип, указанные в описании настоящего изобретения, модулируемые соединением согласно настоящему изобретению) или диагностические измерения (например, скрининг, анализ) у субъекта, страдающего от или склонного к нарушению или его симптомам, указанным в описании настоящего изобретения, когда субъекту вводится терапевтическое количество соединения согласно настоящему изобретению, достаточное для лечения заболевания или его симптомов. Уровень маркера, определенный способом, может быть сравнен с известными уровнями маркера либо для здоровых нормальных контролей, либо для других страдающих пациентов, для установления статуса заболевания субъекта. В предпочтительном варианте выполнения настоящего изобретения, второй уровень маркера у субъекта определяется в момент времени, более поздний, чем для определения первого уровня, и два уровня сравниваются для контроля хода заболевания или эффективности терапии. В определенных предпочтительных вариантах выполнения настоящего изобретения, предшествующий лечению уровень маркера у субъекта определяется до начала лечения, соответствующего настоящему лечению; этот предшествующий лечению уровень маркера может затем быть сравнен с уровнем маркера у субъекта после начала лечения, для определения эффективности лечения.
В определенных вариантах способов согласно настоящему изобретению, уровень маркера или активности маркера у субъекта определяется по меньшей мере один раз. Сравнение уровней маркера, например, с другим измерением уровня маркера, полученным до или после у того же пациента, другого пациента или здорового субъекта, может быть полезно для определения оказывает ли терапия согласно настоящему изобретению желательный эффект, и, таким образом, позволяет
установить соответствующие уровня доз. Определение уровней маркера может осуществляться с применением любого подходящего способа отбора проб/анализа экспрессии, известного в данной области техники или описанного в описании настоящего изобретения. Предпочтительно, образец ткани или жидкости сначала берется у субъекта. Примеры подходящих образцов включают кровь, мочу, ткань, клетки из ротового отверстия или щеки, и образцы волос, содержащие корни. Другие подходящие образцы известны специалистам в данной области техники. Определение уровней белков и/или уровней мРНК (например, уровни маркера) в образце могут быть определены с применением любой подходящей методики, известной в данной области техники, включая, но без ограничения к этому, ферментативный иммуноанализ, ELISA, методики введение радиоактивных меток/анализа, способы блоттинга/хемилюминесценции, ПЦР в режиме реального времени и тому подобное.
Настоящее изобретение также обеспечивает набор для применения для лечения заболеваний, нарушений или их симптомов, включая определенные в настоящем изобретении. Эти наборы содержат: а) фармацевтическую композицию содержащую соединение любой из приведенных в настоящем изобретении формул или его соль; или пролекарство, или соль его пролекарства; или гидрат, сольват, или его полиморф, где указанная фармацевтическая композиция находится в контейнере; и Ь) инструкции, описывающие способ применения фармацевтической композиции для лечения заболевания, нарушения или его симптомов, включая раскрытые в описании настоящего изобретения.
Контейнер может представлять собой любой сосуд или другое запаянное или запаиваемое устройство, которое может содержать указанную фармацевтическую композицию. Примеры включают бутылки, разделенные или поделенные на камеры бутылки, где каждое отделение или камера содержит одну дозу композиции, разделенную упаковочную фольгу, где каждое отделение содержит одну дозу указанной композиции, или распределительное устройство, которое дозирует одну дозу указанной композиции. Контейнер может иметь любую подходящую форму или вид, которые известны в данной области техники, изготовленные из фармацевтически приемлемого материала, например, в виде
бумажной или картонной коробки, стеклянной или пластиковой бутылки или банки, повторно запаиваемого мешка (например, чтобы хранить "наполнение" таблеток для помещения в другой контейнер), или блистерную упаковку с отдельными дозами для выдавливания упаковки согласно графику лечения. Применяемый контейнер может зависеть от содержимого, например, обычная картонная коробка, как правило, не применяется для хранения жидкой суспензии. Возможно, что более одного контейнера может применяться вместе в одной упаковке для продажи одной лекарственной формы. Например, таблетки могут содержаться в таблетке, которая, в свою очередь, содержится в коробке. Предпочтительно контейнер представляет собой блистерную упаковку.
Набор может дополнительно содержать информацию и/или инструкции для лечащего специалиста, фармацевта или субъекта. Такие устройства представления включают множество напечатанного текста на каждой камере или делении, содержащем дозу, соответствующего дням режима, когда указанные таблетки или капсулы должны применяться, или дням недели, напечатанным на каждой камере или делении, или карту, которая содержит такой же тип информации.
Соединения, описанные в настоящей заявке, могут быть оценены в отношении их биологической активности с применением протоколов, известных в данной области техники, включая, например, описанные в настоящей заявке. Определенные соединения, описанные в настоящей заявке, демонстрируют неожиданно превосходные признаки (например, ингибирование Р450, метаболическая стабильность, Met, Ron и т.д.; фармакокинетические свойства и т.д.), что делает их наилучшими кандидатами в потенциальные терапевтические средства.
Все приведенные в настоящей заявке ссылочные документы, в напечатанной форме, электронной форме, носителе, читаемом компьютером, или в другой форме, включены в настоящую заявку путем ссылки в полном объеме, включая, но без ограничения к этому, рефераты, статьи, журналы, публикации, тексты, трактаты, листки технической информации, web-сайты, базы данных, патенты, заявки на патент и публикации патентов.
Примеры
Синтез 5- [(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] -6- {(трет-бутокси)-]Ч- [(трет-бутил) оксикарбонил] карбониламино}пиридазин-3-карбоновой кислоты(А)
Стадия 1: Суспензию А1 (400 г, 2.68 моль) в 25% гидроксиде аммония (3 л) нагревали при 130°С в течение 12 часов в запаянной пробирке. После охлаждения пробирки до 0°С, смесь отфильтровали. Полученное твердое вещество промыли водой несколько раз и высушили в вакууме с получением соединения А2 (284 г, 82%).
Стадия 2: К раствору соединения А2 (284 г, 2.19 моль) в метаноле (3.5 л) добавили NaHCCh (368.4 г, 4.38 моль) при комнатной температуре, а затем по каплям добавили бромин (350 г, 2.19 моль). После завершения добавления смесь перемешивали в течение 20 часов, затем отфильтровали и промыли метанолом несколько раз. Фильтрат сконцентрировали, и остаток растворили в воде (2 л) и
экстрагировали этилом несколько раз (2 лх3). Объединенную органическую фазу промыли 10% водным раствором трисульфата натрия (2 л), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2 л) и соляным раствором (2 л), высушили над безводным сульфатом магния и выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (ЕА:РЕ=2:1) с получением соединения A3 (159.8 г, 35%).
Стадия 3: К раствору соединения А4 (150 г, 0.72 моль) в метаноле (800 мл), охлажденному до 0°С, добавили NaBFLt (66 г, 1.74 моль) по частям. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение около одного часа и выпарили. К остатку добавили воду (1л) при 0°С, а затем добавили ЗН НС1 до достижения рН=6. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (400 мл х4). Объединенную органическую фазу высушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и сконцентрировали с получением соединения А5 (148.6 г, 98%).
Стадия 4: К раствору соединения А5 (147.6 г, 0.71 моль) в THF (3 л) добавили 60% NaH (28.4 г, 0.71 моль) при 0°С, полученную смесь перемешивали при этой температуре в течение 30 минут, затем быстро добавили соединение A3 (147 г, 0.71 ммоль). Полученную смесь нагревали с возвратом флегмы всю ночь и выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (РЕ:ЕА=4:1) с получением близкого к конечному промежуточного соединения А6 (89.3 г, 37.6%).
Стадия 5: К раствору соединения А6 (97 г, 0.288 моль) в DMF (1 л) добавили В0С2О (113 г, 0.519 моль) и DMAP (7 г, 58 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре всю ночь и выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (РЕ:ЕА=10:1) с получением соединения А7 (136 г, 88%).
Стадия 6: Ацетат натрия (41 г, 0.50 моль) добавили к раствору соединения А7 (136 г, 0.25 моль) в этаноле/DMF [(5:1) (1200 мл)]. Смесь дегазировали, затем добавили Pd(dppf)Ci2.CH2Cl2 (18.63 г, 22.5 ммоль). Полученную смесь нагревали в атмосфере СО при 90°С в течение 5 часов, затем выпарили. Остаток очистили с
помощью колоночной хроматографии (РЕ:ЕА=1:4) с получением соединения А8 (141 г, 97%).
Стадия 7: К раствору соединения А8 (141 г, 0.246 моль) в THF (650 мл) добавили Ш водный раствор LiOH (390 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре все выходные, затем подкислили с помощью 2Н НС1 до рН=5, экстрагировали этилацетатом (300 млх5). Объединенную органическую фазу высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали с получением соединения А (134 г, 99%).
Синтез 6-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-[(1/?)-1-(2,6-дихлор-3-фтор-фенил)этокси]пиридазин-3-карбоновой кислоты (В)
Стадия 1: К раствору соединения А5 (219 г, 1.05 моль) в 1,2-дихлорэтане (3500 мл) добавили Boc-D-Pro (141 г, 0.65 моль), а затем добавили EDCI (163 г, 0.85 моль) и DMAP (21.57 г, 0.18 моль) при 0 °С. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре всю ночь и затем добавили воду (3500 мл) и разделили, водную фазу экстрагировали с помощью DCM(1500 мл хЗ), высушили над MgS04, сконцентрировали и очистили с помощью колоночной хроматографии (РЕ:ЕА=30:1) с получением соединения В1 (55.96 г, выход: 51.1%)
Стадия 2: К раствору соединения В1 (59.96 г, 268 ммоль) в THF (1200 мл) добавили 60% NaH (10.71 г, 268 ммоль) при 0°С, полученную смесь перемешивали при этой температуре в течение 30 минут, затем быстро добавили соединение A3 (55.82 г, 268 ммоль). Полученную смесь нагревали с возвратом флегмы всю ночь и выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (РЕ:ЕА=4:1) с получением близкого к конечному соединению промежуточного соединения В2 (33.95 г, 37.7%). Ш-ЯМР (300МГц, CDC13): 5=1.87 (д, ЗН), 5.08 (с, 2Н), 6.03-6.09 (м, Ш), 6.42 (с, Ш), 7.14 (т, Ш), 7.35 (дд, Ш). LC-MS [М+Н]+: 336.0.
Стадия 3: К раствору соединения В2 (33.95 г, 101 ммоль) в DMF (400 мл) добавили ВОС20 (39.59 г, 182 ммоль) и DMAP (2.46 г, 20.2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре всю ночь и выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (РЕ:ЕА=10:1), и остаток обработали с помощью РЕ:ЕА=10:1 с получением соединения ВЗ (46.9 г, 86.7%).
Стадия 4: Ацетат натрия (14.34 г, 175 ммоль) добавили к раствору соединения ВЗ (46.9 г, 87.4 ммоль) в этаноле/DMF [(5:1) (480 мл)]. Смесь дегазировали, затем добавили Pd(dppf)Ci2.CH2Ci2 (7.14 г, 8.74 ммоль). Полученную смесь нагревали в атмосфере СО при 90°С всю ночь, затем выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (РЕ:ЕА=4:1) с получением соединения В4 (47.1 г, 94.0%). Ш-ЯМР (300МГц, CDC13): 5=1.38 (с, 18Н), 1.46 (т, ЗН), 1.88 (д, ЗН), 4.454.53 (м, 2Н), 6.18 (кв, Ш), 7.13 (т, Ш), 7.34 (дд, Ш), 7.57 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 574.0.
Стадия 5: К раствору соединения В4 (47.1 г, 82.1 ммоль) в THF (400 мл) добавили Ш водный раствор LiOH (98.5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре все выходные, затем подкислили с помощью 2Н НС1 до рН=5, экстрагировали этилацетатом (400 мл хЗ). Объединенную органическую фазу высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали с получением соединения В (45.94 г, -100%).
Синтез 6-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино]-5-[(1Л)-1-(2,6-дихлор-3-фтор-фенил)этокси]пиридазин-3-карбоновой кислоты (С)
С4 С
Стадия 1: К раствору соединения А5 (41.8 г, 200 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (800 мл) добавили Boc-L-Pro (26.9 г, 125 ммоль), а затем добавили EDCI (31.1 г, 163 ммоль) и DMAP (4.12 г, 33.8 ммоль) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре всю ночь и затем добавили воду (350 мл) и разделили, водную фазу экстрагировали с помощью DCM(150 млх3), высушили над MgSC> 4, концентрировали и очистили с помощью колоночной хроматографии (РЕ:ЕА=30:1) с получением соединения С1 (13.72 г, выход: 65.6%).
Стадия 2: Методику от С1 до С осуществляли подобно методике от В1 до В (9.46 г, выход: 26.4% из О).
Пример 1: Синтез {5-[(1/?)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-
аминопиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[(4-метилпиперазинил)карбонил]фенил}
карбоксамида
Стадия 1: Смесь соединения В (10.92 г, 20.0 ммоль), HATU (9.12 г, 24.0 ммоль) и DIEA (3.87 г, 30.0 ммоль) в DMF (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 0.5 часа, затем добавили 1а (5.26 г, 24.0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0.5 часа и выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (ЕА:МеОН=5:1) с получением соединения lb (12.43 г, 83.2%).
Стадия 2: соединение lb (12.43 г, 16.7 ммоль) растворили в смеси DCM (90 мл) и TFA (30 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и выпарили. Остаток с помощью насыщенного Na2C03 довели до рН=8 и экстрагировали с помощью DCM (150 млх5). Объединенную органическую фазу высушили над MgS04 и концентрировали. Остаток растерли в порошок с метанолом и отфильтровали, затем твердое вещество растворили в DCM и добавили раствор НС1 в ШгО, смесь перемешивали при комнатной температуре всю ночь, затем концентрировали и высушили с помощью масляного насоса с получением соединения 1 (8.31 г, 80.5%). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): 5=1.84 (д, ЗН), 2.76 (д, ЗН), 3.02-3.10 (м, 2Н), 3.37-3.53 (м, 5Н), 3.40-4.26 (м, Ш), 6.27 (кв, Ш), 7.11 (с, Ш), 7.42-7.51 (м, ЗН), 7.58-7.62 (м, Ш), 7.86-7.88 (м, 2Н). LC-MS [М+Н]+: 547.2.
Пример 2: Синтез {5-[(1Л)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-
аминопиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[(4-метилпиперазинил)карбонил]фенил}
2а 2
Синтез осуществляли согласно методике, описанной в примере 1 (1.30 г). Ш-ЯМР
(300МГц, DMSO-d6): (5=1.86 (д, ЗН), 2.48-2.52 (м, 2Н), 2.76 (д, ЗН), 3.02-3.12 (м,
карбоксамида
2Н), 3.33-3.47 (м, 4Н) 6.31 (кв, Ш), 7.12 (с, Ш), 7.43-7.66 (м, 4Н), 7.91 (д, 2Н), 8.22 (уш.с, 2Н), 10.81 (с, Ш), 11.22 (уш.с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 547.1
Пример 3: Синтез {6-амино-5-[(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридазин-3-ил}-]4- [4-(морфолин-4-илкарбонил)фенил] карбоксамида
ЗЬ 3
Синтез осуществляли согласно методике, описанной в примере 1 (60 мг, 87% для
конечной стадии). Ш-ЯМР (300МГц, CDC13): 5=1.90 (д, ЗН), 3.58-3.72 (м, 8Н), 5.40 (с, 2Н), 6.25 (кв, Ш), 7.07-7.12 (м, Ш), 7.32-7.37 (м, Ш), 7.40-7.45 (м, ЗН), 7.73-7.76 (м, 2Н), 9.90 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 534.0.
Пример 4: Синтез {6-амино-5-[(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридазин-3-ил}-^(4-{[4-(2-гидроксиэтил)пиперазинил]карбонил}фенил)карбоксамида
Стадия 1: Смесь соединения 4а (0.5 г, 2.7 ммоль), соединения 4Ь (0.34 г, 2.7 ммоль) и К2СО3 (0.74 г, 5.36 ммоль) в CH3CN (25 мл) нагревали с обратным
холодильником в течение 2.5 часов. Твердое вещество отфильтровали, фильтрат выпарили в вакууме. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии с получением соединения 4с (0.4 г, 65%).
Стадия 2: 4с (400 мг, 1.74 ммоль) растворили в смеси DCM (5 мл) и TFA (1.5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и выпарили с получением соединения 4d.
Стадия 3: К раствору соединения 4е (500 мг, 3 ммоль), HATU (1.71 г, 4.5 ммоль) и DIEA(1.16 г, 9 ммоль) в DMF добавили соединение 4d (320 мг, 4.5 ммоль). Смесь перемешивали всю ночь при комнатной температуре. После выпаривания остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (ЕА:МеОН=4:1) с получением соединения 4f (0.52 г, 79%).
Стадия 4: К раствору соединения 4f (370 мг) в МеОН добавили 10% Pd/C (200 мг). Смесь гидрогенизировали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь отфильтровали, и фильтрат выпарили с получением соединения 4g (276 мг, 86.5%).
Стадия 5: Методику от 4g до 4 осуществили подобно описанной в примере 1 (45 мг, 25% из соединения 4d). Ш-ЯМР (300МГц, CDC13): 5=1.90 (д, ЗН), 2.85-2.89 (м, 6Н), 3.82 (т, 6Н), 5.53 (с, 2Н), 6.25 (кв, Ш), 7.07-7.12 (м, Ш), 7.32-7.37 (м, Ш), 7.40-7.45 (м, ЗН), 7.75-7.77 (м, 2Н), 9.90 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 577.0.
Пример 5: Синтез {6-амино-5-[(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[(4-пирролидинилпиперидинил)карбонил]фенил} карбоксамида
конечной стадии). Ш-ЯМР (300МГц, CDC13): 5=1.50-1.58 (м, ЗН), 1.77-2.00 (м, 7Н), 1.90 (д, ЗН), 2.22-2.29 (м, Ш), 2.55-2.59 (м, 4Н), 2.94-3.02 (м, 2Н)" 5.38 (с, 2Н), 6.25 (кв, Ш), 7.06-7.12 (м, Ш), 7.32-7.41 (м, 4Н), 7.71-7.74 (м, 2Н), 9.87 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 601.0.
Пример 6: Синтез {6-Амино-5-[(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[(4-этилпиперазинил)карбонил]фенил}карбоксамида
Синтез осуществляли согласно методике, описанной в примере 1 с получением соединения 6 (305 мг). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): (5=1.25 (т, ЗН), 1.87 (д, ЗН), 2.48-2.51 (м, 2Н), 2.98-3.15 (м, 4Н), 3.37-3.47 (м, 4Н), 6.27 (кв, Ш), 7.10 (с, Ш), 7.43-7.64 (м, 4Н), 7.90 (д, ЗН), 10.76 (с, Ш), 11.07 (уш.с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 560.8.
ПРИМЕР 7: Синтез {6-амино-5-[(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридазин-3-ил}-]Ч-{4-|(4-циклопропилпиперазинил)карбонил|фенил} карбоксамида
Синтез осуществляли согласно методике, описанной в примере 1 с получением соединения 7 (280 мг). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): (5=0.79 (д, 2Н), 1.17 (т, ЗН), 1.86 (д, ЗН), 2.78-2.86 (м, Ш), 3.27-3.55 (м, 6Н), 4.03-4.30 (м, Ш), 6.29 (кв, Ш), 7.13 (с, Ш), 7.44-7.54 (м, 2Н), 7.60-7.65 (м, Ш), 7.90 (д, 2Н), 8.22 (уш.с, Ш), 10.79
(с, Ш), 11.50 (уш.с, Ш). LC-MS [М+Н]+:572.7.
ПРИМЕР 8: Синтез ]Ч-(4-{[(2К)-2-(пирролидинилметил) пиррол ид инил] карбонил}фенил){6-амино-5-[(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридазин-3-ил} карбоксамид а
Синтез осуществляли согласно методике, описанной в примере 1 с получением соединения 8 (547 мг). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): (5=1.69-1.79 (м, Ш), 1.851.98 (м, 9Н), 2.09-2.16 (м, Ш), 3.04-3.22 (м, 2Н), 3.30-3.47 (м, ЗН), 3.54-3.74 (м, ЗН), 4.42-4.50 (м, Ш), 6.30 (кв, Ш), 7.13 (с, Ш), 7.48-7.65 (м, 4Н), 7.87-7.90 (м, 2Н), 8.40 (уш.с, 2Н), 10.45 (уш.с, Ш), 10.79 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 600.7.
Стадия 1: Раствор соединения 4е (732 мг, 4.38 ммоль), HATU (2.50 г, 6.57 ммоль) и
ПРИМЕР 9: Синтез ]Ч-{4-[((38,5К)-3,5-диметилпиперазинил)карбонил] фенил} {6-амино-5- [(2,6-д ихл ор-3-фторфенил)этокси] пирид азин-3-ил} карбоксамида
DIEA(1.13 г, 8.8 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 0.5 часа, затем по каплям добавили к раствору соединения 9а (1.0 г, 8.8 ммоль) в DMF (50 мл) при 0°С в течение 1 часа. После завершения реакции смесь выпарили, и остаток растворили в DCM (50 мл) и промыли насыщенным NaiCCh. Органический слой отделили, высушили над безводным MgS04 и выпарили с получением соединения 9Ь (808 мг, 70%).
Стадия 2: Методику от 9Ь до 9с осуществили подобно методику от 4f до 4g с получением соединения 9с, которое применялось на следующей стадии без очистки.
Стадия 3: синтез 9 из 9с был подобен синтезу, описанному в примере й, с получением соединения 9 (125 мг). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): (5=1.25 (д, 6Н), 1.86 (д, ЗН), 2.95-3.16 (м, 2Н), 3.46-3.60 (м, 4Н), 6.30 (кв, Ш), 7.13 (с, Ш), 7.487.65 (м, 4Н), 7.87 (с, 2Н). LC-MS [М+Н]+: 560.8.
ПРИМЕР 10: Синтез {5-[(1Л)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3-ил}-^{3-фтор-4-[(4-метилпиперазинил)карбонил] фенил} карбоксамида
Синтез осуществляли согласно методике, описанной в примере 1, с получением соединения 10 (265 мг). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): 5=1.82 (д, ЗН), 2.79 (д, ЗН), 2.92-3.09 (м, 2Н), 3.16-3.49 (м, 4Н), 3.60-3.65 (м, Ш), 4.48-4.59 (м, Ш), 6.22 (кв, Ш), 7.05 (с, Ш), 7.37-7.50 (м, 2Н), 7.56-7.61 (м, Ш), 7.74-7.87 (м, 2Н). LC-MS [М+Н]+:565.2.
ПРИМЕР 11: Синтез {5-[(1/г)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3-ил}-]Ч-(4-{[4-(4-метилпиперазинил)пиперидил]карбонил} фенил )карбоксамида
Синтез осуществляли согласно методике, описанной в примере 1, с получением соединения 11 (425 мг). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): 5=1.63-1.71 (м, 2Н), 1.82 (д, ЗН), 2.03-2.25 (м, 2Н), 2.69-3.08 (м, 6Н), 3.46-3.82 (м, 8Н), 4.40-4.60 (м, Ш), 6.24 (кв, Ш), 7.10 (с, Ш), 7.36-7.59 (м, 4Н), 7.81 (д, 2Н). LC-MS [М+Н]+:630.3.
ПРИМЕР 12: Синтез {5-[(1/г)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3-ил}-^[4-(4-пиридилкарбонил)фенил]карбоксамида
Стадия 1: Смесь соединения В (567 мг, 1.04 ммоль), HATU (475 мг, 1.25 ммоль) и DIEA (216 мг, 2.08 ммоль) в DMF (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 0.5 часа, затем добавили соединение 12а (247 мг, 1.25 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0.5 часа и выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (ЕА:МеОН=5:1) с получением соединения 12Ь (260 мг, 34.4%).
Стадия 2: Раствор соединения 12Ь (260 мг, 0.36 ммоль) в смеси DCM (10 мл) и TFA (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и выпарили. Значение рН остатка с помощью насыщенного NaiCCh довели до рН=8 и экстрагировали с помощью DCM (10 млх5). Объединенную органическую фазу высушили над MgS04 и концентрировали. Остаток растерли в порошок с метанолом и отфильтровали с получением соединения 12 (120 мг, 63.7%). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): 5=1.82 (д, ЗН), 3.41 (с, ЗН), 6.21 (кв, Ш), 7.02 (с, 2Н), 7.47 (т, Ш), 7.58-7.63 (м, ЗН), 7.77 (д, 2Н), 8.09 (д, 2Н), 8.80 (д, 2Н), 10.95 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 526.1
ПРИМЕР 13: Синтез {5-[(1Л)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] -6-аминопиридазин-3-ил}-^{4-[(3,6-диазабицикло[4.3.0]нон-3-ил)карбонил] фенил} карбоксамида
Методика была подобна описанной в Примере 1 (35 мг). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): (5=1.86 (д, ЗН), 1.65-2.44 (м, 5Н), 3.21-3.53 (м, 8Н), 5.00 (уш.с, 2Н) 6.29 (кв, Ш), 7.11 (с, Ш), 7.43-7.54 (м, ЗН), 7.60-7.65 (м, Ш), 7.90 (д, 2Н), 8.27 (уш.с, 2Н), 10.81 (с, Ш) 11.64 (д, Ш). LC-MS [М+Н]+: 573.2.
ПРИМЕР 14: Синтез {5-[(1Л)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-
аминопиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[(3-оксопиперазинил)карбонил]фенил}
карбоксамида
Методика была подобна описанной в Примере 1 (23.3 мг). Ш-ЯМР (300МГц, CDC13): (5=1.86 (д, ЗН), 3.47 (т, 2Н), 3.79-3.88 (м, 2Н), 4.26 (с, 2Н), 5.55 (уш.с, 2Н), 6.25 (кв, Ш), 6.56 (кв, Ш), 7.09 (т, Ш), 7.32-7.47 (м, 4Н), 7.78 (д, 2Н), 9.92 (с, Ш),. LC-MS [М+Н]+: 546.1.
ПРИМЕР 15: Синтез {5-[(1/г)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[(4-метил(1,4-диазапергидроепинил))карбонил] фенил} карбоксамида
Стадия 1: Смесь соединения В (1.09 г, 2.0 ммоль), HATU (0.99 г, 2.6 ммоль) и DIE А (516 мг, 4.0 ммоль) в DMF (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 0.5 часа, затем добавили соединение 15а (939 мг, 2.6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0.5 часа и выпарили. Остаток очистили с помощью колоночной хроматографии (РЕ/ЕА=10:1) с получением соединения 15Ь (1.05 г, 77.6%).
Стадия 2: К раствору соединения 15Ь (1.05 г, 1.55 ммоль) в THF добавили Ш LiOH (1.86 мл, 1.86 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 5 часов, реакционную смесь подкислили с помощью Ш НС1 до достижения рН=5~6. Органический растворитель выпарили, и остаток экстрагировали с помощью DCM (30 млх3). Объединенную органическую фазу высушили над безводным MgS04, отфильтровали и концентрировали с получением соединения 15с (0.95 г, 92.2%).
Методика от 15с до 15 подобна методике от 12а до 12 (30 мг, выход: 35.7% из соединения 15с). Ш-ЯМР (300МГц, CDC13): (5=1.90 (д, ЗН), 2.02-2.08 (м, 2Н), 2.382.39 (м, Ш), 2.49-2.55 (м, 2Н), 2.58-2.62 (м, Ш), 2.67-2.76 (м, ЗН), 2.91-2.93 (м, Ш), 3.51-3.59 (м, 2Н), 3.77-3.87 (м, 2Н), 5.51 (с, 2Н), 6.23 (кв, Ш), 7.10 (т, Ш), 7.32-7.45 (м, 4Н), 7.75 (д, 2Н), 9.89 (уш.с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 561.2
ПРИМЕР 16: Синтез {5-[(1Я)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-
аминопиридазин-3-ил}-]Ч-[4-(1,4-диазапергидроепинилкарбонил)фенил]
карбоксамида
Методика от 15с до 16 была подобна методике от 12а до 12 (86 мг, выход: 93.9% из соединения 15с). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): (5=1.83 (д, ЗН), 1.90-2.07 (м, 2Н), 3.13-3.24 (м, 4Н), 3.36-3.46 (м, Ш), 3.63-3.66 (м, Ш), 3.78-3.82 (м, Ш), 4.66 (уш.с, ЗН), 6.28 (кв, Ш), 7.11 (с, Ш), 7.41-7.54 (м, ЗН), 7.60-7.64 (м, Ш), 7.87 (д, 2Н), 8.18 (уш.с, Ш), 9.35 (уш.с, 2Н),10.75 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 547.1
ПРИМЕР 17: Синтез {5-[(1Л)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-
аминопиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[(3,3-диметилпиперазинил)карбонил]фенил}
карбоксамида
Методика от 15с до 17 была подобна методике от 12а до 12 с получением соединения 17 (37 мг, выход: 28.7% из соединения 15с). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): (5=1.41-1.70 (м, 6Н), 1.89 (д, ЗН), 3.17-3.21 (м, 2Н), 3.68-4.01 (м, 4Н), 5.43 (с, 2Н), 6.26 (кв, Ш), 7.10 (т, Ш), 7.32-7.43 (м, 4Н), 7.78 (д, 2Н), 9.93 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 561.2.
ПРИМЕР 18: Синтез {5-[(1Л)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[((3"У,5/?)-3,5-диметилпиперазинил)карбонил] фенил} карбоксамида
Методика от 15с до 18 была подобна методике от 12а до 12 с получением соединения 18 (31 мг, 24.6% из соединения 15с). Ш-ЯМР (300МГц, CDC13): 5=1.25-1.43 (м, 6Н), 1.91 (д, ЗН), 3.15-3.48 (м, 4Н), 3.66-3.89 (м, 0.5Н), 4.55-4.78 (м, 0.5Н), 5.49 (с, 2Н), 6.26 (кв, Ш), 7.10 (т, Ш), 7.33-7.44 (м, 4Н), 7.78 (д, 2Н), 9.93 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 561.2.
ПРИМЕР 19: Синтез {5-[(1/г)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] -6-
аминопиридазин-3-ил}-]Ч-{4-[(4-гидроксипиперидилл)карбонил]фенил}
карбоксамида
Методика от 15с до 19 подобна методике от 12а до 12 с получением соединения 19 (30.3 мг, выход: 30.3% из соединения 15с). Ш-ЯМР (300МГц, DMSO-d6): (5=1.53-1.59 (м, 2Н), 1.88-1.94 (м, 5Н), 3.21-3.33 (м, 2Н), 3.66-3.75 (м, Ш), 3.93-3.99 (м, Ш), 5.89 (уш.с, 2Н) 6.25 (кв, Ш), 7.06-7.09 (м, Ш), 7.32-7.41 (м, 4Н), 7.73 (д, 2Н), 9.80 (с, Ш). LC-MS [М+Н]+: 548.1
ПРИМЕР 20: Синтез {5-[(1/г)-1-(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3-ил}-]Ч-(4-{]Ч-[2-(диэтиламино)этил]карбамоил} фенил) карбоксамид
Методика от 15с до 20 была подобна методике от 12а до 12 с получением соединения 20 (35.4 мг, выход: 35.5% из соединения 15с). Ш-ЯМР (300МГц, CD3OD): (5=1.25-1.39 (м, 6Н), 1.89 (д, ЗН)" 3.26-3.38 (м, 6Н), 3.74 (т, 2Н) 6.26 (кв, Ш), 7.18 (с, Ш), 7.22-7.27 (м, Ш), 7.43-7.47 (м, Ш), 7.82-7.90 (м, 4Н). LC-MS [М+Н]+: 563.2.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ
ПРИМЕР 21: Биохимический анализ Met, ALK, Axl
Киназный анализ. Анализ осуществляется как описано в Fabian et al. (2005) Nature Biotechnology, vol. 23, p.329 и в Karaman et al. (2008) Nature Biotechnology, vol. 26, p. 127.
Для большинства анализов, нацеленные на киназы штаммы фага Т7 выращивали параллельно в 24-луночных блоках в Е. coli хозяине, полученном из штамма BL21. Е. coli выращивали на фазе log и инфицировали фагом Т7 из замороженного стока (многочисленность инфекции ~ 0.1) и инкубировали при встряхивании при 32 °С до лизиса (~90 минут). Лизаты центрифугировали (6,000 х g) и отфильтровали (0.2 мм) для удаления обломков клеток. Остальные киназы продуцировали в клетках НЕК-293 и последовательно пометили ДНК для обнаружения qlll IP Покрытые стрептавидином магнитные шарики обрабатывали лигандами биотинилированными маленькими молекулами в течение 30 минут при комнатной температуре для получения аффинных смол для киназного анализа. Лигандированные шарики блокировали избытком биотина и промыли блокирующим буфером (SeaBlock (Pierce), 1 % BSA, 0.05 % Tween 20, 1 мМ DTT) для удаления несвязанного лиганда и для уменьшения неспецифического связывания фага. Реакции связывания запускались комбинацией киназ, лигандированных аффинных шариков и тестируемых соединений в 1х связывающим буфером (20 % SeaBlock, 0.17х PBS, 0.05 % Tween 20, 6 мМ DTT). Тестируемые соединения получили в виде 40х стоков в 100% DMSO и непосредственно разбавляли при анализе. Все реакции осуществляли в полипропиленовых 384-луночных планшетах с конечным объемом 0.04 мл. Аналитические планшеты инкубировали при комнатной температуре при встряхивании в течение 1 часа, и аффинные шарики промыли промывочным буфером (lx PBS, 0.05 % Tween 20). Шарики затем повторно суспендировали в элюирующем буфере (lx PBS, 0.05 % Tween 20, 0.5 мМ небиотинилированного лиганда аффинности) и инкубировали при комнатной температуре со
встряхиванием в течение 30 минут. Концентрация киназ в элюатах измерялась с помощью qlTHP.
Большинство соединений являются очень сильными ингибиторами ALK со значениями IC50 <Ю нМ, и некоторые со значениями <1 нМ. Некоторые соединения также показали потенциал к ингибированию c-Met и Axl со значением IC50 <20 нМ. Напротив, подобные соединения без карбонилфенил-замещенного карбоксамидом, например а (пиридин-замещенный карбоксамид), b (метоксифенил-замещенный карбоксамид) или с (морфолинофенил-замещенный карбоксамид), показали намного более слабые ALK ингибирующие активности (IC50 > 10нМ), хотя они все еще способны ингибировать c-Met (IC50 <20нМ).
а b с
Также раскрывается, что 7?-энантиомер является активным изомером против ALK.
Тогда как Пример 1 показал IC50 менее 1нМ, чем изомер (Пример 2) был неактивным до 50нМ против ALK в анализе.
Некоторые соединения согласно настоящему изобретению (например, согласно Примерам 1, 13, 15, 16, 17, 18) были более сильными ингибиторами ALK, чем PF-2341066, и, таким образом, они обладают потенциалом преодолеть резистентность к PF-2341066 (Таблица 3).
Множество соединений согласно настоящему изобретению демонстрируют очень хороший потенциал. Кроме того, некоторые соединения (например, по Примеру 16 и 18) являются более сильными, чем соединения, как раскрывается в WO 2009/154769. Например, Пример 6 в WO 2009/154769 показал 1С50 17нМ в этом
анализе, по сравнению с <1нМ для Примеров 16 и 18 согласно настоящему изобретению.
ПРИМЕР 22: Анализ жизнеспособности опухолевых клеток со слитыми белками ALK
Для экспериментов по жизнеспособности, опухолевые клетки со слитыми белками ALK (Н3122, Н2228) высеяли в 96-луночные планшеты при 25%-33% слиянии и подвергли лекарственному средству отдельно или в комбинации на следующий день. Через 72 часа после добавления лекарственного средства добавили реагент Cell Titer Blue (Promega, Madison, WI) добавили, и флуоресценцию измерили на спектрофотометре Spectramax (Molecular Devices, Sunnyvale, CA) согласно инструкциям производителя. Все экспериментальные точки установили в hextuplicate репликатах и осуществили по меньшей мере в два независимые моменты времени. IC50 вычислили с применением GraphPad Prism версия 5 для Windows. Получили кривые с применением нелинейной регрессионной модели с log (ингибитор) относительно формулы ответа.
В анализе жизнеспособности клеток, некоторые соединения согласно настоящему изобретению (например, по Примерам 1, 16, 18) были более способны к ингибированию роста опухолевых клеток Н3122 и Н2228, чем PF-2341066, и, таким образом, они имеют потенциал к преодолению резистентности к PF-2341066 (Таблица 4).
Множество соединений согласно настоящему изобретению показали очень хороший потенциал. Кроме того, Примеры 16 и 18 согласно настоящему изобретению более эффективны, чем Примеры 25 и 26, раскрытые в WO 2009/154769, которые показали IC50 of > 50нМ в этом анализе.
ПРИМЕР 23: Анализ апоптоза опухолевых клеток со слитыми белками ALK
Для исследований на апоптоз клетки высеяли в 12-ти луночных планшетах при 25% слиянии и трижды обработали ALK TKI. Через 72 часа после добавления лекарственного средства, клетки собрали, промыли PBS и окрасили с помощью аннексина V и иодида пропидия согласно инструкциям производителя (Vybrant Apooptosis Assay Kit, Invitrogen, Carlsbad, CA). Данные собрали на FACSCanto II (BD Biosciences, San Jose, CA) и обработали с помощью программного обеспечения WinList flow cytometry (Verity Software, Topsham, ME).
В анализе апоптоза Пример 1 был более эффективным при ингибировании апоптоза в клетках Н3122, чем PF-2341066 при такой же концентрации (Фиг. 1).
Пример 24. Анализ фосфорилирования рецептора c-Met
А549 клетки применялись в этом анализе. Клетки высеяли с плотностью 40,000 клеток/лунка в среде для роста (RPMI+10% FBS) в 24-луночных планшетах и культивировали всю ночь при 37°С для присоединения. Клетки подвергли среде голодания (RPMI + 1% BSA). Разбавления тестовых соединений добавили в планшеты и инкубировали при 37°С в течение 1 часа. Клетки затем охладили до комнатной температуры в течение 15 минут с последующей стимуляцией с помощью 40нг/мл HGF в течение 15 минут. Клетки промыли один раз охлажденной льдом PBS и затем лизировали с помощью ПОмкл/лунку лизисного буфера (Сигнализирование клеток #9803 +0.2% протеазного ингибитора, Sigma PI 860) в течение 1 часа при 4°С. Клеточные лизаты перенесли в микроцентрифужные пробирки и центрифугировали при 10000 оборотах в минуту в течение 10 минут при 4°С, и фосфорилированный HGFR количественно
проанализировали с помощью набора Human Phospho-HGF R/c-Met ELISA (R &D, DYC2480) согласно инструкциям производителя.
Пример 25. Микросомальная стабильность человека
Объединенные микросомы печени человека (1 мг/мл) инкубировали при 37°С в фосфатном буфере (рН 7.4) с тестируемым соединением (1 мкМ). Реакцию запустили добавлением NADPH (1 мМ конечная концентрация). Инкубацию остановили через 0, 5, 10, 20, 40, 60 минут добавлением органического растворителя. Погашенные образцы проанализировали на неизмененное тестируемое соединение с помощью LC/MS/MS обнаружения. Процентный оборот определили с помощью отношения количества (площадь пика) неизмененного тестируемого соединения, оставшегося в проинкубированных образцах, к количеству неизмененного тестируемого соединения в непроинкубированных образцах (0 минут). Период полураспада вычислили на основе данных процентного оборота.
В этом анализе Пример 16 (соединение формулы III с п=2) и Пример 18 (соединение формулы III, где R9 и Rio представляют собой метил) имели больший период полураспада, чем аналогичное соединение, Пример 25, как раскрывается в WO 2009/154769.
Пример 26. Проникновение в головной мозг
Для определения пересекает ли соединение гематоэнцефалитический барьер (ВВВ), мышам ввели дозы тестируемого соединения. Через два часа после дозирования мышей умертвили, и собрали кровь и ткани головного мозга и проанализировали на концентрацию тестируемого соединения. Проникновение в головной мозг определили как отношение концентрации соединения в тканях головного мозга к концентрации в плазме.
В этом анализе Пример 18 (соединение формулы III, где R9 и Rio представляют собой метил, и Rn представляет собой водород) имело более высокое
проникновение в головной мозг, чем Пример 1, где R9 и Rio представляет собой водород, и Rn представляет собой метил, показывая, что Пример 18 будет более вероятно ингибировать ALK в головном мозге, чем Пример 1.
Пример 27. In vivo противоопухолевая эффективность кризотиниба (PF-1066) и Примера 18 в SH-SY5Y внутричерепной модели опухоли
Способ: Balb/C голых мышей анестезировали с помощью интраперитонеальной инъекции пентобарбитал натрия (100 мг/кг массы тела). Один миллион SH-SY5Y клеток в объеме 10 мкл насыщенной культуральной среды ввели путем инъекции в область дорсального стриатума, применяя стереотаксическое устройство для маленьких животных. На седьмой день после имплантации несущих опухоль мышей разделили на 4 группы, PF-1066, низкую дозу Примера 18, высокую дозу Примера 18 и среду давали мышам дважды в день (BID) перорально, лечения проводили до смерти животных. Выживших животных и массу тела обследовали и регистрировали.
Результат: после непрерывного лечения среднее время выживания (MST) контрольной группы, принимающей среду, PF-1066 при 50 мг/кг дважды в день (BID), Пример 18 при 25 и 50 мг/кг BID, составляло 25 дней, 28 дней, 25 дней и 34.5 дней (Р <0.01), соответственно. Таким образом, Пример 18 пролонгировал жизнь этих мышей, несущих опухоль, при 50мг/кг BID со статическим показателем, тогда как кризотиниб незначительно пролонгировал жизнь при такой же дозе, без статического показателя.
Было описано множество вариантов выполнения настоящего изобретения, однако, очевидно, что основные примеры могут быть изменены с получением других вариантов выполнения настоящего изобретения, в которых применяются соединения и способы согласно настоящему изобретению. Поэтому, будет очевидно, что объем настоящего изобретения скорее определяется приложенной формулой изобретения, чем конкретными вариантами выполнения настоящего изобретения, которые были представлены посредством примеров.
Содержания всех ссылок (включая литературные ссылки, выданные патенты, опубликованные заявки на патент и совместно поданные заявки на патент), процитированных в настоящей заявке, включены в настоящее изобретение в полном объеме посредством ссылок. Если иного не указано, все технические и научные термины, применяемые в описании настоящего изобретения, соответствуют значениям, общеизвестным специалистам в данной области техники.
или его соль; или пролекарство, или соль его пролекарства; или его гидрат, сольват или полиморф; где:
Ri, R2, R3, R4, R5 каждый независимо представляют собой Н, алкил или Z1;
R6 представляет собой алкил, OR7, NR7R8, арил или гетероарил, насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, где R6 необязательно замещен 1-3 группами, независимо выбранными из алкила, циклоалкила, гетероциклила, алкокси, гидроксиалкила, HZ1;
R7 и R8 каждый независимо выбираются из Н, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероциклила, гетероарила, или R7 и Rs вместе с атомом азота образуют моно- или бициклический гетероциклил или гетероарил;
Каждый Z1 представляет собой галоген, CN, N02, OR15, SR15, S(0)2OR15, NR15R16,
C1-C2 перфторалкил, C1-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15,
C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16,
NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17, S(0)R17, S(0)2R17, R16, OKCO, C(0)R16, C(0)(CH2)mOH, (CH2)mOR15, (CH2)mC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где в каждом случае m независимо равно 0-6;
Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Сб циклоалкил;
Каждый R независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом; и
Каждый R17 независимо представляет собой Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом;
при условии, что R6 не представляет собой метилпиперазинил, пирролидинил, метанамино или пиперазинил.
2. Соединение формулы II:
или его соль; или пролекарство, или соль его пролекарства; или его гидрат, сольват или полиморф; где:
Ri, R2, R3, R4, R5 каждый независимо представляют собой Н, алкил или Z1;
R6 представляет собой алкил, OR7, NR7R8, арил или гетероарил, насыщенный или ненасыщенный гетероциклил, где R6 необязательно замещен 1-3 группами, независимо выбранными из алкила, циклоалкила, гетероциклила, алкокси, гидроксиалкила, HZ1;
R7 и R8 каждый независимо выбираются из Н, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероциклила, гетероарила, или R7 и Rs вместе с атомом азота образуют моно- или бициклический гетероциклил или гетероарил;
Каждый Z1 представляет собой галоген, CN, N02, OR15, SR15, S(0)2OR15, NR15R16,
C1-C2 перфторалкил, C1-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15,
C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16,
NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17, S(0)R17, S(0)2R17, R16, OKCO, C(0)R16, C(0)(CH2)mOH, (CH2)mOR15, (CH2)mC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где в каждом случае m независимо равно 0-6;
Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Св циклоалкил;
Каждый R16 независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом; и
Каждый R17 независимо представляет собой Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом.
или его соль; или пролекарство, или соль его пролекарства; или его гидрат, сольват или полиморф; где:
п равно 0-2;
R5 и Rn каждый независимо представляет собой Н, алкил или Z1; R9 представляет собой алкил или Z1;
Rio представляет собой Н, алкил или Z ;
каждый Z1 независимо представляет собой галоген, CN, NO2, OR15, SR15, S(0)2OR15, NR15R16, С1-С2 перфторалкил, Ci-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15, C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16, NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17, S(0)R17, S(0)2R17, R16, OKCO, C(0)R16, C(0)(CH2)mOH, (CH2)mOR15, (CH2)mC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где в каждом случае m независимо равно 0-6;
Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Св циклоалкил;
Каждый R16 независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом; и
Каждый R17 независимо представляет собой Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом.
4. Соединение формулы III
или его соль; или пролекарство, или соль его пролкарства; или его гидрат, сольват или полиморф; где: п равно 2;
R5, R9, Rio, R11 каждый независимо представляет собой Н, алкил или Z1;
каждый Z1 независимо представляет собой галоген, CN, NO2, OR15, SR15, S(0)2OR15, NR15R16, С1-С2 перфторалкил, Ci-C2 перфторалкокси, 1,2-метилендиокси, C(0)OR15, C(0)NR15R16, OC(0)NR15R16, NR15C(0)NR15R16, C(NR16)NR15R16, NR15C(NR16)NR15R16, S(0)2NR15R16, R17, C(0)R17, NR15C(0)R17, S(0)R17, S(0)2R17, R16, OKCO, C(0)R16, C(0)(CH2)mOH, (CH2)mOR15, (CH2)mC(0)NR15R16, NR15S(0)2R17, где в каждом случае m независимо равно 0-6;
Каждый R15 независимо представляет собой водород, С1-С4 алкил или Сз-Св циклоалкил;
Каждый R16 независимо представляет собой водород, алкенил, алкинил, Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом; и
Каждый R17 независимо представляет собой Сз-Св циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, С1-С4 алкил или С1-С4 алкил, замещенные Сз-Св циклоалкилом, арилом, гетероциклилом или гетероарилом.
5. Соединение формулы I по п. 1, где R7 и Rg вместе с атомом азота образуют бициклический гетероциклил или гетероарил, необязательно замещенный 1-3 группами Z .
6. Соединение по п. 3, где Rn представляет собой водород.
7. Соединение по п. 4, где Rn представляет собой водород.
8. Соединение, выбранное из следующих:
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-метилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид; и
{ 5 - [(1S)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] -6-аминопиридазин-З -ил } -N- { 4- [(4
метилпиперазинил)карбонил]фенил}карбоксамид.
9. Соединение по п. 1, где соединение выбирается из следующих:
{6-амино-5-[(2,6-дихлор-3-фторфенил)этокси] пиридазин-3-ил}-М-[4-(морфолин-4-илкарбонил)фенил] карбоксамид;
{ 6-амино-5- [(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } -N-(4- {[4-(2-
гидроксиэтил)пиперазинил] карбонил } фенил)карбоксамид;
{ 6-амино-5- [(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-
пирролидинилпиперидил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 6-Амино-5- [(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-
этилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 6-Амино-5- [(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-
циклопропилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
N-(4-{[(2К)-2-(пирролидинилметил) пирролидинил] карбонил}фенил){6-амино-5-[(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси] пиридазин-3 -ил } карбоксамид; и
N- { 4- [((3 S, 5R)-3,5-диметилпиперазинил)карбонил] фенил } { 6-амино-5- [(2,6-
дихлор-3-фторфенил)этокси]пиридазин-3-ил}карбоксамид.
10. Соединение по п. 2, где соединение выбирается из следующих:
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 3 -фтор-4- [(4-метилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N-(4- {[4-(4-метилпиперазинил)пиперидил] карбонил } фенил)карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N-[4-(4-пиридилкарбонил)фенил]карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(3,6-диазабицикло [4.3.0]нон-3 -ил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(3 -оксопиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-метил(1,4-диазапергидроэпинил))карбонил] фенил}карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N-[4-( 1,4-диазапергидроэпинилкарбонил)фенил]карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(3,3 -диметилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4-[((3S, 5R)-3,5-диметилпиперазинил)карбонил] фенил } карбоксамид;
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N- { 4- [(4-гидроксипиперидил)карбонил] фенил } карбоксамид; и
{ 5 - [(IR)-1 -(2,6-дихлор-З -фторфенил)этокси]-6-аминопиридазин-3 -ил } -N-(4- {N- [2-(диэтиламино)этил]карбамоил}фенил)карбоксамид.
11. Способ лечения заболевания у субъекта, содержащий введение субъекту соединения по одному из п.п. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10.
12. Способ лечения заболевания у субъекта, содержащий введение субъекту композиции, содержащей соединение по одному из п.п. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или
11.
13. Способ по п. 11, где заболевание опосредовано киназами c-met, ron, Axl или ALK или их слитыми белками, такими как EML4-ALK и NPM-ALK, или модификациями одной или более из киназ c-met, ron, Axl и ALK.
14. Способ по п. 11, где заболеванием является рак или пролиферативное заболевание.
15. Способ по п. 11, где заболеванием является рак легких, ободочной кишки, молочной железы, простаты, печени, поджелудочной железы, головного мозга, почек, яичек, желудка, кожи и костей, рак желудка, рак молочных желез, рак поджелудочной железы, глиома, лимфома, нейробластома и гепатоцеллюлярная карцинома, папиллярная ренальная карцинома или плоскоклеточный рак головы и шеи.
16. Способ по п. 11, где заболеванием является немелкоклеточный рак легких (NSCLC), резистентный к лечению с помощью PF-2341066.
17. Способ по п. 11, где заболеванием является немелкоклеточный рак легких (NSCLC) с метастазами в головной мозг.
18. Способ по п. 11, где заболеванием является неврологическое заболевание, психиатрическое заболевание, как например шизофрения, депрессия и пагубная привычка к веществу (например, кокаин, табак или алкоголь) или злоупотребление, или родственные заболевания (например, ожирение, диабет, сердечно-сосудистые заболевания).
11.
(19)
(19)
(19)
15е 15
15е 15
16Ь
16Ь
19Ь
10.
10.