(57) Реферат / Формула:
В изобретении предложены способы получения фенилацетата L-орнитина. Указанный способ может включать, например, смешивание галогенидной соли L-орнитина с фенилацетатом серебра. Способ также может включать получение фенилацетатной соли in situ. Заявка также относится к различным композициям, полученным согласно данным способам, содержащим кристаллические формы.
Евразийское (21) 201390403 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2013.09.30
(22) Дата подачи заявки 2011.10.05
(51) Int. Cl.
C07C 227/18 (2006.01) C07C 229/26 (2006.01) C07C 57/46 (2006.01) A61K31/198 (2006.01) A61K31/192 (2006.01) A61P1/16 (2006.01)
(54) СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕНИЛАЦЕТАТА L-ОРНИТИНА
(31) 61/390,585
(32) 2010.10.06
(33) US
(86) PCT/US2011/054983
(87) WO 2012/048043 2012.04.12
(71) Заявитель:
ОСЕРА ТЕРАПЬЮТИКС, ИНК. (US)
(72) Изобретатель:
Андерсон Кейт Х., Белинг Джим (US), Дуган Кристин Хендерсон, Ватт Стивен Уильям (GB), Манини Питер, Фиджини Аттилия (CH)
(74) Представитель:
Нилова М.И. (RU)
(57) В изобретении предложены способы получения фенилацетата L-орнитина. Указанный способ может включать, например, смешивание гало-генидной соли L-орнитина с фенилацетатом серебра. Способ также может включать получение фе-нилацетатной соли in внн.Заявка также относится к различным композициям, полученным согласно данным способам, содержащим кристаллические формы.
Цценщы
СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ ФЕНИЛАЦЕТАТА L-ОРНИТИНА
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ [0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании заявки США № 61/390585, поданной 6 октября 2010 года, полное содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Область техники
[0002] Настоящая заявка относится к области фармацевтической химии, биохимии и медицины. В частности, она относится к способам получения фенилацетатных солей L-орнитина. Описание
[0003] Гипераммониемия является признаком заболевания печени и характеризуется избытком аммиака в кровотоке. Основным клиническим последствием прогрессирующей гипераммониемии является печеночная энцефалопатия, представляющая собой сложный нейропсихиатрический синдром, который может осложнять острую или хроническую печеночную недостаточность. Данное заболевание характеризуется изменениями психического состояния, включая широкий спектр нейропсихиатрических симптомов: от незначительных признаков изменения функции головного мозга до явных психиатрических и/или неврологических симптомов, или даже глубокой комы. Накопление неметаболизированного аммиака считается основным фактором, вовлеченным в патогенез печеночной энцефалопатии, но с ней могут быть связаны и дополнительные механизмы.
[0004] Для применения для лечения гипераммониемии и печеночной энцефалопатии подходят моногидрохлорид L-орнитина и другие соли L-орнитина. Например, в публикации заявки США № 2008/0119554, полное содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки, описаны композиции L-орнитина и фенилацетата для лечения печеночной энцефалопатии. L-орнитин был получен методами ферментативного превращения. Например, в патентах США №№ 5405761 и 5591613, полное содержание каждого из которых включено в настоящее описание посредством ссылки, описано ферментативное превращение аргинина с получением солей L-орнитина. Фенилацетат натрия коммерчески доступен и, кроме того, доступен в виде раствора для инъекций для лечения острой гипераммониемии. Указанный раствор для инъекций продается под названием АММОНУЛ (AMMONUL).
[0005] Хотя солевые формы могут обладать улучшенными свойствами в отношении разложения, некоторые соли, в частности, натриевые или хлоридные соли, могут быть нежелательными при лечении пациентов с заболеваниями, связанными с заболеванием печени, таким как печеночная энцефалопатия. Например, высокое потребление натрия может быть опасным для пациентов с циррозом печени, подверженных асциту, гиперволемии и электролитному дисбалансу. Аналогичным образом, некоторые соли трудно вводить внутривенно из-за повышенного осмотического давления, то есть их раствор является гипертоническим. При высоких концентрациях избыточной соли может быть необходимым разбавление больших объемов раствора для внутривенного введения, что, в свою очередь, приводит к чрезмерной перегрузке жидкостью. Соответственно, существует потребность в получении L-орнитина и фенилацетатных солей, подходящих для лечения печеночной энцефалопатии или других состояний, при которых преобладают гиперволемия и электролитный дисбаланс.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ [0006] Некоторые варианты реализации, описанные в настоящем документе, включают способ получения фенилацетата L-орнитина.
[0007] Некоторые варианты реализации, описанные в настоящем документе, включают способ получения фенилацетатной соли L-орнитина, включающий смешивание L-орнитина или его соли и фенилуксусной кислоты или ее соли.
[0008] Некоторые варианты реализации включают способ получения фенилацетатной соли L-орнитина, включающий смешивание фенилацетатной соли, бензоата L-орнитина и растворителя; и выделение композиции, содержащей по меньшей мере 70 масс.% кристаллического фенилацетата L-орнитина.
[0009] В некоторых вариантах реализации указанный способ дополнительно включает получение бензоата L-орнитина путем смешивания соли L-орнитина, бензоатной соли и первого растворителя с получением промежуточного раствора.
[00010] В некоторых вариантах реализации указанный способ дополнительно включает удаление по меньшей мере части соли из указанного промежуточного раствора перед смешиванием фенилацетатной соли, при этом указанная соль не представляет собой соль L-орнитина.
[00011] В некоторых вариантах реализации соль, удаляемая из промежуточного раствора, содержит анион, полученный по меньшей мере частично из соли L-орнитина, и катион, полученный по меньшей мере частично из бензоатной соли.
[00012] В некоторых вариантах реализации соль L-орнитина представляет собой гидрохлорид L-орнитина, а указанный анион представляет собой хлорид. [00013] В некоторых вариантах реализации бензоатная соль представляет собой бензоат серебра, а указанный катион представляет собой ион серебра.
[00014] В некоторых вариантах реализации указанный способ дополнительно включает добавление соляной кислоты перед удалением по меньшей мере части соли. [00015] В некоторых вариантах реализации из промежуточного раствора удаляют по меньшей мере примерно 90 масс.% соли.
[00016] В некоторых вариантах реализации указанный способ дополнительно включает получение бензоата L-орнитина путем смешивания соли L-орнитина, бензоатной соли и растворителя с получением промежуточного раствора, и выделение бензоата L-орнитина из указанного промежуточного раствора.
[00017] В некоторых вариантах реализации указанный способ дополнительно включает удаление по меньшей мере части соли из промежуточного раствора перед выделением бензоата L-орнитина, при этом указанная соль не представляет собой соль L-орнитина. [00018] В некоторых вариантах реализации указанный способ дополнительно включает добавление соляной кислоты перед удалением по меньшей мере части соли. [00019] В некоторых вариантах реализации выделение бензоата L-орнитина включает кристаллизацию бензоата L-орнитина из промежуточного раствора.
[00020] В некоторых вариантах реализации фенилацетатную соль диспергируют в растворе, который смешивают с бензоатом L-орнитина и растворителем. [00021] Некоторые варианты реализации включают способ получения фенилацетатной соли L-орнитина, включающий: приготовление раствора фенилацетатной соли путем смешивания фенилуксусной кислоты и соответствующего основания в первом растворителе; смешивание бензоата L-орнитина с раствором фенилацетатной соли; и выделение композиции, содержащей фенилацетат L-орнитина.
[00022] В некоторых вариантах реализации указанное соответствующее основание выбрано из группы, состоящей из гидроксида щелочного металла и алкоксида щелочного металла.
[00023] В некоторых вариантах реализации указанный способ дополнительно включает получение бензоата L-орнитина путем смешивания соли L-орнитина, бензоатной соли и второго растворителя с получением промежуточного раствора.
[00024] В некоторых вариантах реализации композиция содержит по меньшей мере примерно 0,10 масс.% бензоатной соли.
[00025] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 5 масс.% бензоатной соли.
[00026] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 3 масс.% бензоатной соли.
[00027] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 1 масс.% бензоатной соли.
[00028] В некоторых вариантах реализации соль L-орнитина представляет собой гидрохлорид L-орнитина.
[00029] В некоторых вариантах реализации бензоатная соль представляет собой бензоат серебра.
[00030] В некоторых вариантах реализации композиция дополнительно содержит по меньшей мере 10 ррт серебра.
[00031] В некоторых вариантах реализации композиция содержит по меньшей мере 20 ррт серебра.
[00032] В некоторых вариантах реализации композиция содержит по меньшей мере 25 ррт серебра.
[00033] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 600 ррт серебра.
[00034] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 100 ррт серебра.
[00035] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 65 ррт серебра.
[00036] В некоторых вариантах реализации фенилацетат представляет собой соль щелочного металла.
[00037] В некоторых вариантах реализации указанная соль щелочного металла представляет собой фенилацетат натрия.
[00038] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 100 ррт натрия.
[00039] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 20 ррт натрия. [00040] В некоторых вариантах реализации соль L-орнитина представляет собой галогенидную соль.
[00041] В некоторых вариантах реализации галогенидная соль L-орнитина представляет собой гидрохлорид L-орнитина.
[00042] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 0,1 масс.% хлорида.
[00043] В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более 0,01 масс.% хлорида.
[00044] Некоторые варианты реализации включают способ получения фенилацетатной соли L-орнитина, включающий: увеличение значения рН смеси, содержащей соль L-орнитина, по меньшей мере до выпадения промежуточной соли в осадок, при этом указанная промежуточная соль не представляет собой соль L-орнитина; выделение промежуточной соли из указанной смеси; смешивание фенилуксусной кислоты с указанной смесью; и выделение фенилацетатной соли L-орнитина из указанного раствора. [00045] В некоторых вариантах реализации значение рН увеличивают по меньшей мере до 8,0.
[00046] В некоторых вариантах реализации значение рН увеличивают по меньшей мере до 9,0.
[00047] В некоторых вариантах реализации увеличение значения рН включает добавление модификатора рН, выбранного из группы, состоящей из гидроксида натрия, гидроксида калия, гидроксида цезия, гидроксида лития, гидроксида кальция, гидроксида магния, гидроксида бария, гидроксида аммония, карбоната натрия, бикарбоната натрия, карбоната калия, бикарбоната калия, карбоната кальция, карбоната магния, карбоната бария, метоксида натрия, mpem-бутоксида калия, дибутиламина, триптамина, гидрида лития, гидрида натрия, гидрида кальция, бутиллития, этилмагнийбромида или их комбинаций. [00048] В некоторых вариантах реализации промежуточная соль содержит анион, полученный по меньшей мере частично из соли L-орнитина.
[00049] В некоторых вариантах реализации промежуточная соль содержит катион, полученный по меньшей мере частично из модификатора рН.
[00050] В некоторых вариантах реализации модификатор рН выбран из группы, состоящей из гидроксида натрия, метоксида натрия, гидроксида кальция, карбоната кальция и гидроксида бария.
[00051] Некоторые варианты реализации включают способ получения фенилацетатной соли L-орнитина, включающий смешивание соли L-орнитина, фенилацетатной соли и растворителя с получением раствора, и выделение фенилацетата L-орнитина из указанного раствора.
[00052] В некоторых вариантах реализации соль L-орнитина представляет собой галогенидную соль. В некоторых вариантах реализации указанная галогенидная соль не представляет собой гидрохлорид L-орнитина.
[00053] В некоторых вариантах реализации фенилацетатная соль представляет собой фенилацетат серебра.
[00054] В некоторых вариантах реализации соль L-орнитина представляет собой гидрохлорид L-орнитина.
[00055] Некоторые варианты реализации включают композиции фенилацетата L-орнитина, полученные в соответствии со способами, описанными в настоящем документе.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ [00056] ФИГ. 1 представляет собой порошковую рентгеновскую дифрактограмму Формы I.
[00057] На ФИГ. 2 представлены результаты дифференциальной сканирующей калориметрии для Формы I.
[00058] На ФИГ. 3 представлены результаты термогравиметрического гравиметрического/дифференциального термического анализа Формы I. [00059] На ФИГ. 4 представлен спектр ХН ядерного магнитного резонанса, полученный для образца Формы I.
[00060] На ФИГ. 5 представлены результаты динамической сорбции паров для Формы I. [00061] ФИГ. 6 представляет собой порошковую рентгеновскую дифрактограмму Формы П.
[00062] На ФИГ. 7 представлены результаты дифференциальной сканирующей калориметрии для Формы П.
[00063] На ФИГ. 8 представлены результаты термогравиметрического гравиметрического/дифференциального термического анализа Формы П. [00064] На ФИГ. 9 представлен спектр ХН ядерного магнитного резонанса, полученный для образца Формы П.
[00065] На ФИГ. 10 представлены результаты динамической сорбции паров для Формы П. [00066] ФИГ. 11 представляет собой порошковую рентгеновскую дифрактограмму Формы III.
[00067] На ФИГ. 12 представлены результаты дифференциальной сканирующей калориметрии для Формы III.
[00068] На ФИГ. 13 представлены результаты термогравиметрического гравиметрического/дифференциального термического анализа Формы III. [00069] На ФИГ. 14 представлен спектр ХН ядерного магнитного резонанса, полученный для образца Формы III.
[00070] На ФИГ. 15 представлены результаты динамической сорбции паров для Формы III.
[00071] ФИГ. 16 представляет собой порошковую рентгеновскую дифрактограмму Формы V.
[00072] На ФИГ. 17 представлены результаты дифференциальной сканирующей калориметрии для Формы V.
[00073] На ФИГ. 18 представлены результаты термогравиметрического гравиметрического/дифференциального термического анализа Формы V. [00074] На ФИГ. 19 представлен спектр ХН ядерного магнитного резонанса, полученный для образца Формы V.
[00075] На ФИГ. 20 представлены результаты динамической сорбции паров для Формы V. [00076] На ФИГ. 21 представлен спектр ХН ядерного магнитного резонанса, полученный для образца бензоата L-орнитина.
[00077] На ФИГ. 22 представлен спектр ХН ядерного магнитного резонанса, полученный для образца фенилацетата L-орнитина.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ [00078] Некоторые варианты реализации, описанные в настоящем документе, включают способ получения фенилацетатной соли L-орнитина. Фенилацетат L-орнитина может быть получен, например, через промежуточную соль, такую как бензоат L-орнитина. Как показано на Схеме 1, соль L-орнитина Формулы I можно подвергать реакции с бензоатной солью Формулы II с получением промежуточного бензоата L-орнитина.
Схема I
[00079] В соединении Формулы I могут быть использованы различные соли L-орнитина и, следовательно, X в Формуле I может представлять собой любой ион, способный образовывать соль с L-орнитином, отличный от бензойной кислоты или фенилуксусной кислоты. X может представлять собой одноатомный анион, такой как, но не ограничиваясь им, галогенид (например, фторид, хлорид, бромид и йодид). X также может представлять собой многоатомный анион, такой как, но не ограничиваясь ими, ацетат, аспартат, формиат, оксалат, бикарбонат, карбонат, сульфат, нитрат, изоникотинат, салицилат, цитрат, тартрат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкаронат, сахарат, глутамат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат, памоат (т.е. 1,1'-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоат)), фосфат и т.п. X может представлять собой органическую или неорганическую группу. В некоторых вариантах реализации X представляет собой одновалентный ион. В некоторых вариантах реализации X представляет собой хлорид. [00080] Подобным образом, бензоатная соль Формулы II не является особенно ограниченной и, следовательно, Y в Формуле II может представлять собой любой подходящий ион, способный образовывать соль с бензойной кислотой. В некоторых вариантах реализации Y может представлять собой одноатомный катион, такой как ион щелочного металла (например, Li+, Na+ и К+) и другие одновалентные ионы (например, Ag+). Y также может представлять собой многоатомный катион, такой как аммоний, L-аргинин, диэтиламин, холин, этаноламин, Ш-имидазол, троламин и т.п. В некоторых вариантах реализации Y представляет собой неорганический ион. В некоторых вариантах реализации Y представляет собой серебро.
[00081] Многие другие возможные соли L-орнитина и бензойной кислоты могут быть использованы для соединений Формул I и II соответственно, и они могут быть легко получены специалистом в данной области техники. См., например, Bighley L.D., et al., "Salt forms of drags and absorption," In: Swarbrick J., Horlan J.C., eds. Encyclopedia of pharmaceutical technology, Vol. 12. New York: Marcel Dekker, Inc. pp. 452-499, полное содержание которого включено в настоящее описание посредством ссылки. [00082] Промежуточный бензоат L-орнитина (т.е. Формула III) может быть получен путем смешивания растворов, содержащих соединения Формул I и П. В качестве примера, соединения Формул I и II могут быть по отдельности растворены в воде и диметилсульфоксиде (ДМСО) соответственно. Затем эти два раствора могут быть смешаны для того, чтобы привести L-орнитин и бензойную кислоту в реакцию с получением соли Формулы III. В качестве альтернативы, указанные два соединения, представляющие собой соли, могут быть напрямую растворены с получением одного
раствора. В некоторых вариантах реализации L-орнитин и бензойную кислоту растворяют в отдельных растворителях, а затем смешивают. В некоторых вариантах реализации L-орнитин растворяют в водном растворе, бензойную кислоту растворяют в органическом растворителе, а затем смешивают растворы L-орнитина и бензойной кислоты. [00083] Неограничивающие примеры растворителей, которые могут быть использованы при смешивании L-орнитина и бензоатных солей, включают ацетонитрил, диметилсульфоксид (ДМСО), циклогексан, этанол, ацетон, уксусную кислоту, 1-пропанол, диметилкарбонат, ТЧ-метил-2-пирролидон (NMP), этилацетат (ЕЮАс), толуол, изопропиловый спирт (IPА), диизопропиловый эфир, нитрометан, воду, 1,4-диоксан, диэтиловый эфир, этиленгликоль, метилацетат (МеОАс), метанол, 2-бутанол, кумол, этилформиат, изобутилацетат, З-метил-1 -бутанол, анизол и их комбинации. В некоторых вариантах реализации раствор бензоата L-орнитина содержит воду. В некоторых вариантах реализации раствор бензоата L-орнитина содержит ДМСО. [00084] После смешивания L-орнитина и бензоатных солей противоионы X и Y могут образовывать осадок, который может быть удален из перемешиваемого раствора с использованием известных способов, таких как фильтрация, центрифугирование и т.п. В некоторых вариантах реализации X представляет собой хлорид, Y представляет собой серебро и в результате реакции получают осадок, содержащий AgCl. Хотя на Схеме 1 показаны соединения Формул I и II в виде солей, в объем настоящей заявки также входит смешивание свободного основания L-орнитина и бензойной кислоты с получением промежуточного соединения, бензоата L-орнитина. Следовательно, получение и выделение осадка не является обязательным.
[00085] Относительное количество L-орнитина и бензоатных солей, которые смешивают, не ограничено; однако молярное отношение L-орнитина к бензойной кислоте может находиться в диапазоне от примерно 10:90 до 90:10. В некоторых вариантах реализации молярное отношение бензоата L-орнитина может находиться в диапазоне от примерно 30:70 до 70:30. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к бензоату может находиться в диапазоне от примерно 40:60 до 60:40. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к бензоату составляет примерно 1:1.
[00086] В вариантах реализации, в которых X и Y оба представляют собой неорганические ионы (например, X и Y представляют собой хлорид и серебро соответственно), могут быть добавлены дополнительные количества Х-содержащей соли для способствования дополнительному осаждению противоиона Y. Например, если X представляет собой хлорид, и Y представляет собой серебро, молярное отношение
гидрохлорида L-орнитина к бензоату серебра может быть больше 1:1 для того, чтобы присутствовал избыток хлорида относительно серебра. Соответственно, в некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к бензойной кислоте больше примерно 1:1. Тем не менее, не требуется получения дополнительной хлоридной соли из соли L-орнитина (например, гидрохлорида L-орнитина). Например, к раствору могут быть добавлены разбавленные растворы соляной кислоты для дополнительного удаления серебра. Хотя время добавления дополнительной Х-содержащей соли не является особенно ограниченным, ее предпочтительно добавляют перед первоначальным выделением AgCl.
[00087] Как показано на Схеме 2, бензоат L-орнитина может реагировать с фенилацетатной солью Формулы IV с получением фенилацетата L-орнитина. Например, фенилацетат натрия может быть смешан с раствором бензоата L-орнитина с получением фенилацетата L-орнитина. Могут быть использованы различные соли фенилацетата и, следовательно, Z в Формуле IV может представлять собой любой катион, способный образовывать соль с фенилацетатом, отличный от бензойной кислоты или L-орнитина. В некоторых вариантах реализации Z может представлять собой одноатомный катион, такой как ион щелочного металла (например, Li+, Na+ и К+) и другие одновалентные ионы (например, Ag+). Z также может представлять собой многоатомный катион, такой как аммоний, L-аргинин, диэтиламин, холин, этаноламин, Ш-имидазол, троламин и т.п. В некоторых вариантах реализации Z представляет собой неорганический ион. В некоторых вариантах реализации Z представляет собой натрий.
[00088] Фенилацетатная соль может быть получена в растворе с использованием фенилуксусной кислоты и соответствующего основания. Данный раствор может быть смешан с бензоатом L-орнитина с получением фенилацетата L-орнитина, как описано выше. В качестве примера, фенилуксусная кислота может быть смешана с гидроксидом натрия в изопропаноле с получением раствора фенилацетата натрия. Затем раствор фенилацетата натрия может быть смешан с раствором бензоата L-орнитина. В качестве альтернативы, фенилацетатная соль может быть выделена в виде твердого вещества до смешивания с бензоатом L-орнитина.
[00089] Основание для получения фенилацетатной соли не является особенно ограниченным и будет выбрано отчасти исходя из желаемой фенилацетатной соли. В качестве примера, фенилацетат натрия может быть получен путем добавления гидроксида натрия или метоксида натрия. Основание может представлять собой неорганическое основание или органическое основание. В некоторых вариантах реализации основание представляет собой основание щелочного металла. Например, указанное основание может
включать гидроксид лития, гидроксид натрия и гидроксид калия. В некоторых вариантах реализации основание представляет собой соль щелочноземельного металла. В качестве примера, основание может включать гидроксид кальция, гидроксид магния и гидроксид бария. В некоторых вариантах реализации основание является водорастворимым. Неограничивающие примеры оснований включают гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид кальция, гидроксид магния, метоксид натрия, метоксид калия, метоксид кальция, метоксид магния, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия, трет-бутоксид кальция и трет-бутоксид магния.
[00090] Относительное количество соли L-орнитина и фенилацетатной соли, которые смешивают, также не ограничено; однако молярное отношение L-орнитина к фенилацетату может находиться в диапазоне от примерно 10:90 до 90:10. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к фенилацетату может находиться в диапазоне от примерно 30:70 до 70:30. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к фенилацетату может находиться в диапазоне от примерно 40:60 до 60:40. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к фенилацетату составляет примерно 1:1.
Схема 2
[00091] Затем фенилацетат L-орнитина Формулы V может быть выделен из раствора с использованием известных методик. Например, путем выпаривания любого растворителя до кристаллизации фенилацетата L-орнитина или, в качестве альтернативы, путем
добавления антирастворителя, смешиваемого с раствором фенилацетата L-орнитина, до осаждения фенилацетата L-орнитина из раствора. Другой возможный способ выделения фенилацетата L-орнитина заключается в регулировке температуры раствора (например, понижение температуры) до осаждения фенилацетата L-орнитина.
[00092] Способ выделения фенилацетата L-орнитина влияет на получаемую кристаллическую форму. Кристаллические формы дополнительно рассмотрены ниже, а также описаны в трех родственных заявках: (Г) предварительной заявке США № 61/166676, поданной 3 апреля 2009 года; (ii) PCT/US2010/029708, поданной на английском языке 1 апреля 2010 года; и (iii) заявке США № 12/753763, поданной 2 апреля 2010 года. Полное содержание данных заявок включено в настоящее описание посредством ссылки. [00093] Выделенный фенилацетат L-орнитина может быть подвергнут различной дополнительной обработке, такой как сушка и т.п. В некоторых вариантах реализации фенилацетат L-орнитина затем может быть смешан с разбавленным раствором HC1 с осаждением остаточного серебра. Фенилацетат L-орнитина снова может быть выделен из раствора с использованием схожих способов, описанных выше.
[00094] Как очевидно специалисту в данной области техники в соответствии с идеями, изложенными в настоящей заявке, фенилацетат L-орнитина может быть получен подобным образом с использованием промежуточной соли, отличной от бензоата L-орнитина. Таким образом, например, L-орнитин или его соль (например, гидрохлорид L-орнитина) могут быть смешаны с раствором, содержащим уксусную кислоту. Затем ацетат L-орнитина может быть смешан с фенилуксусной кислотой или ее солью (например, фенилацетатом натрия) с получением фенилацетата L-орнитина. Схема 3 иллюстрирует один из примеров способа получения фенилацетата L-орнитина с использованием ацетата L-орнитина в качестве промежуточной соли.
[00095] Могут быть использованы другие соли помимо бензоата и ацетата. В некоторых вариантах реализации промежуточная соль может представлять собой фармацевтически приемлемую соль L-орнитина. Например, промежуточная соль L-орнитина может представлять собой ацетат, аспартат, формиат, оксалат, бикарбонат, карбонат, сульфат, нитрат, изоникотинат, салицилат, цитрат, тартрат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкаронат, сахарат, бензоат, глутамат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат, памоат (т.е. 1,1'-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоат)) или фосфат. Свободная кислота промежуточного соединения предпочтительно представляет собой более слабую кислоту по сравнению с фенилуксусной кислотой. В некоторых вариантах реализации промежуточное соединение представляет собой соль L-орнитина с анионным компонентом, демонстрирующим
значение рКа выше значения рКа фенилуксусной кислоты. В качестве примера, для ацетата L-орнитина уксусная кислота и фенилуксусная кислота демонстрируют значения рКа, равные примерно 4,76 и 4,28 соответственно.
[00096] В некоторых вариантах реализации фенилацетат L-орнитина также может быть получен без образования промежуточной соли, такой как бензоат L-орнитина. Схема 4 иллюстрирует типичный способ получения фенилацетата L-орнитина без промежуточной соли. К раствору соли L-орнитина (например, показанной на Схеме 4 соединением Формулы I) может быть добавлен модификатор рН до осаждения соли из раствора, при этом указанная соль не представляет собой соль L-орнитина. В качестве примера, метоксид натрия (NaOMe) может быть добавлен к смеси гидрохлорида L-орнитина до осаждения хлорида натрия из раствора, в результате чего остается свободное основание L-орнитина. Осадок может быть выделен из раствора с использованием известных методик, таких как фильтрация, центрифугирование и т.п. Свободное основание L-орнитина (например, показанное на Схеме 4 соединением Формулы I-а) может быть смешано с фенилуксусной кислотой или ее солью (например, показанной на Схеме 4 соединением
[00097] Модификатор рН может включать основное соединение или его безводный предшественник и/или химически защищенное основание. Неограничивающие примеры модификаторов рН включают гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид цезия, гидроксид лития, гидроксид кальция, гидроксид магния, гидроксид бария, гидроксид аммония, карбонат натрия, бикарбонат натрия, карбонат калия, бикарбонат калия, карбонат кальция, карбонат магния, карбонат бария, метоксид натрия, метоксид калия, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия, дибутиламин, триптамин, гидрид лития, гидрид натрия, гидрид кальция, бутиллитий, этилмагнийбромид и их комбинации. Количество добавляемого модификатора рН также не является особенно ограниченным; однако молярное отношение L-орнитина к модификатору рН может находиться в диапазоне от примерно 10:90 до 90:10. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к модификатору рН может находиться в диапазоне от примерно 30:70 до 70:30. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к модификатору рН может находиться в диапазоне от примерно 40:60 до 60:40. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к модификатору рН составляет примерно 1:1. В некоторых вариантах реализации модификатор рН может быть добавлен для доведения значения рН до по меньшей мере примерно 8,0; по меньшей мере примерно 9,0; или по меньшей мере примерно 9,5.
[00098] В некоторых вариантах реализации другой способ получения фенилацетата L-орнитина включает осуществление реакции галогенидной соли L-орнитина с
фенилацетатом серебра (Схема 5). В качестве примера, гидрохлорид L-орнитина может быть смешан с фенилацетатом серебра и растворителем. Затем может осаждаться AgCl и его возможно выделяют из раствора. Оставшаяся часть фенилацетата L-орнитина также может быть выделена с использованием известных способов. Данный процесс может быть завершен с использованием, в целом, тех же методик и условий, указанных выше. [00099] Относительное количество соли L-орнитина и фенилацетатной соли, которые смешивают, также не ограничено; однако молярное отношение L-орнитина к фенилацетату может находиться в диапазоне от примерно 10:90 до 90:10. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к фенилацетату может находиться в диапазоне от примерно 30:70 до 70:30. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к фенилацетату может находиться в диапазоне от примерно 40:60 до 60:40. В некоторых вариантах реализации молярное отношение L-орнитина к фенилацетату составляет примерно 1:1.
[000100] Затем фенилацетат L-орнитина может быть выделен из раствора с использованием известных методик. Например, путем выпаривания любого растворителя до кристаллизации фенилацетата L-орнитина или, в качестве альтернативы, путем добавления антирастворителя, смешиваемого с раствором фенилацетата L-орнитина, до осаждения фенилацетата L-орнитина из раствора. Другой возможный способ выделения фенилацетата L-орнитина заключается в регулировке температуры раствора (например, понижение температуры) до осаждения фенилацетата L-орнитина.
[000101] Композиции, полученные в соответствии со способами, описанными в настоящем документе, могут быть преобразованы в различные формы (например, кристаллическую Форму 2, аморфную и т.д.), также рассмотренные ниже. И композиция может быть изготовлена в форме для различных путей введения. В некоторых вариантах
реализации композиции могут быть использованы для лечения или уменьшения гипераммониемии, или печеночной энцефалопатии.
Композиции фенилацетата L-орнитина [000102] В настоящем документе также описаны композиции фенилацетата L-орнитина, которые могут быть получены способом, описанным в настоящем документе. Композиции, описанные в настоящей заявке, предпочтительно содержат маленькие количества неорганических солей, в частности, солей щелочных металлов и/или галогенидных солей и, следовательно, особенно подходят для перорального и/или внутривенного введения пациентам с печеночной энцефалопатией. Между тем, данные композиции могут демонстрировать схожие характеристики стабильности по сравнению с другими солями (например, смеси гидрохлорида L-орнитина и фенилацетата натрия). В некоторых вариантах реализации композиции могут быть получены одним из способов, описанных в настоящей заявке. Например, любой из описанных способов с использованием бензоата L-орнитина в качестве промежуточного соединения может позволить получить композиции, описанные в настоящей заявке.
[000103] В некоторых вариантах реализации композиции могут содержать кристаллическую форму фенилацетата L-орнитина (например, Формы I, II, III и/или V, описанные в настоящем документе). В некоторых вариантах реализации композиция может содержать по меньшей мере примерно 20 масс.% кристаллической формы фенилацетата L-орнитина (предпочтительно по меньшей мере примерно 50 масс.% и более предпочтительно по меньшей мере примерно 80 масс.%). В некоторых вариантах реализации композиция по существу состоит из кристаллической формы фенилацетата L-орнитина. В некоторых вариантах реализации композиция содержит смесь по меньшей мере двух (например, двух, трех или четырех форм) Форм I, II, III и V. [000104] В некоторых вариантах реализации композиции содержат Форму П. Например, композиции могут содержать по меньшей мере примерно 20%; по меньшей мере примерно 50%; по меньшей мере примерно 90%; по меньшей мере примерно 95%; или по меньшей мере примерно 99% Формы П. Подобным образом, композиции также могут содержать, например, Формы I, III или V. Композиции могут содержать по меньшей мере примерно 20%; по меньшей мере примерно 50%; по меньшей мере примерно 90%; по меньшей мере примерно 95%; или по меньшей мере примерно 99% Форм I, II, III и/или V. [000105] В объем настоящей заявки также входят аморфные формы фенилацетата L-орнитина. В данной области техники известны различные способы получения аморфных форм. Например, раствор фенилацетата L-орнитина может быть высушен под вакуумом
путем лиофилизации с получением аморфной композиции. См. заявку Р.СТ. WO 2007/058634, опубликованную на английском языке и с указанием на США, включенную в настоящее описание посредством ссылки, для описания способов лиофилизации. [000106] Предпочтительным является содержание в композиции маленьких количеств (если вообще есть) ионов или солей щелочных металлов и галогена, в частности, натрия и хлорида. В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более примерно 100 ррт щелочных металлов (предпочтительно не более примерно 20 ррт и наиболее предпочтительно не более примерно 10 ррт). В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более примерно 100 ррт натрия (предпочтительно не более примерно 20 ррт и наиболее предпочтительно не более примерно 10 ррт). В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более примерно 0,1 масс.% галогенидов (предпочтительно не более примерно 0,01 масс.%). В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более примерно 0,1 масс.% хлорида (предпочтительно не более примерно 0,01 масс.%)).
[000107] Пониженное содержание щелочных металлов и галогенидов приводит к получению композиции, подходящей для приготовления концентрированных изотонических растворов. Соответственно, данные композиции могут быть более легко введены внутривенно по сравнению, например, с введением смесей гидрохлорида L-орнитина и фенилацетата натрия. В некоторых вариантах реализации раствор фенилацетата L-орнитина от примерно 45 до примерно 55 мг/мл в воде (предпочтительно примерно 50 мг/мл) является изотоническим по отношению к жидкостям организма (например, указанный раствор обладает осмоляльностью в диапазоне от примерно 280 до примерно 330 мОсм/кг).
[000108] Композиции также могут содержать остаточные количества аниона из промежуточной соли, полученной в процессе получения композиции фенилацетата L-орнитина. Например, некоторые из способов, описанных в настоящем документе, позволяют получать композиции, содержащие бензойную кислоту или ее соль. В некоторых вариантах реализации композиция содержит по меньшей мере примерно 0,01 масс.% бензойной кислоты или ее соли (предпочтительно по меньшей мере примерно 0,05% масс.% и более предпочтительно примерно 0,1 масс.%). В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более примерно 3 масс.% бензойной кислоты или ее соли (предпочтительно не более примерно 1 масс.% и более предпочтительно не более примерно 0,5 масс.%). В некоторых вариантах реализации композиция содержит соль или кислоту в диапазоне от примерно 0,01 масс.% до примерно 3 масс.% (предпочтительно, от примерно 0,1% до примерно 1%), при этом указанная соль выбрана из ацетата, аспартата,
формиата, оксалата, бикарбоната, карбоната, сульфата, нитрата, изоникотината, салицилата, цитрата, тартрата, пантотената, битартрата, аскорбата, сукцината, малеата, гентизината, фумарата, глюконата, глюкароната, сахарата, формиата, бензоата, глутамата, метансульфоната, этансульфоната, бензолсульфоната, п-толуолсульфоната, памоата (т.е. 1,Г-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоата)) или фосфата.
[000109] Подобным образом, композиция, полученная с использованием ацетатного промежуточного соединения, может содержать остаточные количества уксусной кислоты или ацетата. В некоторых вариантах реализации композиция содержит по меньшей мере примерно 0,01 масс.% уксусной кислоты или ацетата (предпочтительно по меньшей мере примерно 0,05% масс.% и более предпочтительно примерно 0,1 масс.%). В некоторых вариантах реализации композиция содержит не более примерно 3 масс.% уксусной кислоты или ацетата (предпочтительно не более примерно 1 масс.% и более предпочтительно не более примерно 0,5 масс.%).
[000110] Композиции также могут содержать маленькие количества серебра. В типичных способах, описанных в настоящем документе, используют, например, бензоат серебра, но указанные способы по-прежнему позволяют получать композиции с удивительно маленькими количествами серебра. Таким образом, в некоторых вариантах реализации композиция содержит не более примерно 600 ррт серебра (предпочтительно не более примерно 100 ррт и более предпочтительно не более примерно 65 ррт). В некоторых вариантах реализации композиция содержит по меньшей мере примерно 10 ррт серебра (в качестве альтернативы по меньшей мере примерно 20 или 25 ррт серебра).
Фармацевтические композиции [000111] Композиции фенилацетата L-орнитина, полученного способами, описанными выше, также могут быть изготовлены в форме для введения субъекту (например, человеку). Фенилацетат L-орнитина и, соответственно, композиции, описанные в настоящем документе, могут быть изготовлены для введения совместно с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Таким образом, фенилацетат L-орнитина может быть получен в качестве лекарственного средства совместно со стандартным фармацевтически приемлемым носителем (носителями) и/или наполнителем (наполнителями), что является рутинной процедурой в области фармации. Точная природа состава будет зависеть от нескольких факторов, включая желаемый путь введения. Как правило, фенилацетат L-орнитина изготавливают в форме для перорального, внутривенного, внутрижелудочного, подкожного, внутрисосудистого или интраперитонеального введения.
[000112] Фармацевтический носитель или разбавитель может представлять собой, например, воду или изотонический раствор, такой как 5% раствор декстрозы в воде или физиологический раствор. Твердые пероральные формы могут содержать наряду с активным соединением разбавители, например, лактозу, глюкозу, сахарозу, целлюлозу, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; смазывающие вещества, например, диоксид кремния, тальк, стеариновую кислоту, стеарат магния или кальция, и/или полиэтиленгликоли; связующие вещества, например, крахмалы, аравийскую камедь, желатин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливинилпирролидон; разрыхляющие агенты, например, крахмал, альгиновую кислоту, альгинаты или крахмалгликолят натрия; вспенивающиеся смеси; красители; подсластители; смачивающие агенты, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; и, в целом, нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, используемые в фармацевтических составах. Такие фармацевтические препараты могут быть изготовлены известными способами, например, посредством способов смешивания, гранулирования, таблетирования, покрытия сахаром или нанесения пленочного покрытия. [000113] Жидкие дисперсии для перорального введения могут представлять собой сиропы, эмульсии или суспензии. Сиропы могут содержать в качестве носителей, например, сахарозу или сахарозу с глицерином и/или маннитолом, и/или сорбитолом. [000114] Суспензии и эмульсии могут содержать носитель, например, природную камедь, агар, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт. Суспензии или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать наряду с фенилацетатом L-орнитина фармацевтически приемлемый носитель, например, стерильную воду, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например, пропиленгликоль и при необходимости подходящее количество гидрохлорида лидокаина. [000115] Лекарственное средство может по существу состоять из фенилацетата L-орнитина и фармацевтически приемлемого носителя. Следовательно, такое лекарственное средство по существу не содержит других аминокислот помимо L-орнитина и фенилацетата. Кроме того, такое лекарственное средство содержит незначительные количества других солей в дополнение к фенилацетату L-орнитина.
[000116] Составы для перорального введения, в целом, могут содержать дозы фенилацетата L-орнитина в диапазоне от примерно 500 мг до примерно 100 г. Соответственно, в некоторых вариантах реализации состав для перорального введения содержит композиции фенилацетата L-орнитина, описанные в настоящем документе, в диапазоне от примерно 500 мг до примерно 50 г. В некоторых вариантах реализации состав для перорального введения по существу не содержит солей щелочных металлов и
галогенидов (например, содержит не более чем следовые количества солей щелочных металлов и галогенидов).
[000117] Составы для внутривенного введения также, в целом, могут содержать дозы фенилацетата L-орнитина в диапазоне от примерно 500 мг до примерно 100 г (предпочтительно от примерно 1 г до примерно 50 г). В некоторых вариантах реализации состав для внутривенного введения по существу не содержит солей щелочных металлов и галогенидов (например, содержит не более чем следовые количества солей щелочных металлов и галогенидов). В некоторых вариантах реализации состав для внутривенного введения имеет концентрацию фенилацетата L-орнитина от примерно 5 до примерно 300 мг/мл (предпочтительно от примерно 25 до примерно 200 мг/мл и более предпочтительно от примерно 40 до примерно 60 мг/мл).
[000118] Композиция или лекарственное средство, содержащее указанную композицию, могут быть помещены в герметичную упаковку. Указанная герметичная упаковка может уменьшать или препятствовать контакту влаги и/или окружающего воздуха с композицией или лекарственным средством. В некоторых вариантах реализации упаковка включает герметичное уплотнение. В некоторых вариантах реализации упаковку герметизируют под вакуумом или герметизируют внутри упаковки инертным газом (например, аргоном). Соответственно, упаковка может ингибировать или уменьшать скорость распада композиции или лекарственного средства, хранимого внутри упаковки. В данной области техники известны различные типы герметичной упаковки. Например, в патенте США № 5560490, содержание которого полностью включено в настоящее описание посредством ссылки, описана типичная герметичная упаковка для лекарственных средств.
Кристаллические формы фенилацетата L-орнитина [000119] В настоящем документе также описаны кристаллические формы фенилацетата L-орнитина и, в частности, кристаллическая Форма I, Форма II, Форма III и Форма V. В некоторых вариантах реализации фенилацетат L-орнитина может быть получен с использованием способов, описанных выше, а затем кристаллизован с использованием любого из способов, описанных в настоящем документе.
Форма I
[000120] Конкретные условия получения кристаллической Формы I могут быть определены эмпирически, и возможно лишь привести ряд способов, которые, как было обнаружено, подходят для использования на практике.
[000121] Таким образом, например, кристаллическая Форма I, в целом, может быть получена путем кристаллизации фенилацетата L-орнитина в контролируемых условиях. В качестве примера, путем осаждения фенилацетата L-орнитина из насыщенного раствора путем добавления этанола при пониженных температурах (например, 4° или -21°С). Типичные растворители для раствора, которые позволяют получить кристаллическую Форму I после добавления этанола, включают, но не ограничиваются ими, циклогексанон, 1-пропанол, диметилкарбонат, N-метилпирролидин (NMP), диэтиловый эфир, 2-бутанол, кумол, этилформиат, изобутилацетат, З-метил-1 -бутанол и анизол.
[000122] Соответственно, в контексте способов получения фенилацетата L-орнитина, описанных выше, указанный способ может позволить получить Форму I путем использования конкретных способов выделения. Например, фенилацетат L-орнитина может быть выделен путем добавления этанола при пониженной температуре с получением Формы I.
[000123] Кристаллическую Форму I характеризовали с использованием различных методик, более подробно описанных в разделе экспериментальных методов. На ФИГ. 1 представлена кристаллическая структура Формы I, определенная путем дифракции рентгеновских лучей на порошке (XRPD). Форма I, которая может быть получена способами, описанными выше, демонстрирует характеристические пики при углах 20 приблизительно 4,9°, 13,2°, 17,4°, 20,8° и 24,4°. Таким образом, в некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина имеет один или более характеристических пиков (например, один, два, три, четыре или пять характеристических пиков), выбранных из приблизительно 4,9°, 13,2°, 17,4°, 20,8° и 24,4° 20. [000124] Как очевидно в данной области техники, из-за вариабельности результатов экспериментов, появляющейся когда рентгеновские дифрактограммы получают на разных приборах, положения пиков принято считать идентичными, если значения два-тета (20) совпадают в пределах 0,2° (т.е. ± 0,2°). Например, в Фармакопее США указано, что если угловая установка 10 самых сильных дифракционных пиков совпадает в пределах ± 0,2° с угловой установкой 10 самых сильных дифракционных пиков эталонного вещества, и относительные интенсивности указанных пиков отличаются не более чем на 20%, то идентичность подтверждается. Соответственно, полагают, что положения пиков в пределах 0,2° положений, указанных в настоящем описании, являются идентичными. [000125] На ФИГ. 2 представлены результаты, полученные путем дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) для Формы I. Данные результаты указывают на эндотерму при 35° С, которая, возможно, связана с десольватацией и/или дегидратацией, приводящей к Форме П. Второй переход при примерно 203° С указывает на температуру
плавления для кристалла. Для исследования возможного существования перехода в результате десольватации и/или дегидратации Форму I анализировали путем термогравиметрического гравиметрического/дифференциального термического анализа (TG/DTA), результаты которого представлены на ФИГ. 3. Форма I демонстрирует потерю массы, составляющую 11,28%, при примерно 35° С и, следовательно, данные результаты также позволяют предположить, что Форма I демонстрирует переход в результате десольватации и/или дегидратации при примерно 35° С. Температуру плавления, равную примерно 203° С, также можно было наблюдать путем тестирования методом термогравиметрического анализа (TGA). Соответственно, в некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина характеризуется с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии как имеющая эндотерму при примерно 35° С. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина демонстрирует потерю массы, составляющую 11%, при примерно 35° С, определенную путем TGA. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина демонстрирует температуру плавления, равную примерно 203° С.
[000126] На ФИГ. 4 показаны интегралы и химические сдвиги ядерного магнитного резонанса (ЯМР) для Формы I. Интегралы подтверждают присутствие фенилацетата L-орнитина: 7,5 (ароматическая CH), 3,8 (CH, смежная с NH2), 3,6 (фрагмент СН2 фенилацетата), 3,15 (СН2, смежная с NH2) и 1,9 (алифатические фрагменты СН2) ррт (интегралы: 5:1:2:2:4 протонов; 1,2, 0,25, 0,5, 0,5, 1,0). Аминные протоны и гидроксильные протоны не наблюдали из-за протонного обмена как на цвиттерионе, так и на участке солеобразования. Между тем, на ФИГ. 5 представлены результаты динамической сорбции паров (DVS) для Формы I и показано водопоглощение, составляющее примерно 0,2 масс.%. Результаты XRPD после анализа DVA (не показаны) подтверждают, что Форма I не переходит в другую полиморфную форму. Следовательно, Форма I может быть охарактеризована как негигроскопичная и стабильная в широком диапазоне влажности. [000127] Исследование стабильности Формы I в течение 7 дней при 40°С/относительная влажность (ОВ) 75% показало, что в данных условиях происходит превращение в Форму П. Форма I также превращается в Форму II при повышенных температурах (например, 80° или 120° С) с или без использования вакуума через 7 или 14 дней. Соответственно, Форма I является метастабильной.
[000128] Дифракцию рентгеновских лучей на монокристалле (SXRD) также использовали для определения структуры Формы I при -20° и -123° С, и данные результаты суммированы в ТАБЛИЦАХ 1 и 2. Данные результаты подтверждают, что Форма I
представляет собой сольват, содержащий молекулы этанола и воды внутри элементарной ячейки. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина может быть представлена формулой C15H28N2O6. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина может быть представлена формулой [C5Hi3N202][CsHv02]EtOH.H20. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина демонстрирует рентгеноструктурный анализ монокристалла с параметрами кристалла, приблизительно равными следующим: размеры элементарной ячейки а=5,3652(4) А, Ь=7,7136(6) А, с=20,9602(18) А, а=90°, р=94,986(6)°, у=90°; моноклинная кристаллическая система и пространственная группа Р2ь
Форма II
[000129] Конкретные условия получения кристаллической Формы II могут быть определены эмпирически, и возможно лишь привести ряд способов, которые, как было обнаружено, подходят для использования на практике.
[000130] Таким образом, например, кристаллическая Форма II может быть получена путем кристаллизации в контролируемых условиях. Кристаллическая Форма II может быть получена, например, путем выпаривания насыщенного органического раствора фенилацетата L-орнитина. Неограничивающие примеры органических растворителей, которые могут быть использованы для получения Формы II, включают этанол, ацетон, бензонитрил, дихлорметан (ДХМ), диметилсульфоксид (ДМСО), этилацетат (ЕЮАс), ацетонитрил (MeCN), метилацетат (МеОАс), нитрометан, трет-бутилметиловый эфир (TBME), тетрагидрофуран и толуол. Другие растворители могут давать смесь Формы I и II, такие как, но не ограничиваясь ими, 1,4-диоксан, 1-бутанол, циклогексан, IPA, ТГФ, МЕК, МеОАс и вода.
[000131] Форма II также может быть получена путем осаждения фенилацетата L-орнитина из насыщенного органического раствора путем добавления антирастворителя для фенилацетата L-орнитина, такого как IPA. Форма II может осаждаться в широком диапазоне температур (например, комнатная температура, 4° С и -21° С). Неограничивающие примеры подходящих растворителей для насыщенного органического раствора включают циклогексанон, 1-пропанол, диметилкарбонат, N-метилпирролидон (NMP), диизопропиловый эфир, диэтиловый эфир, этиленгликоль, диметилформамид (ДМФА), 2-бутанол, кумол, изобутилацетат, 3-метил-1-бутанол и анизол. В качестве альтернативы, те же перечисленные растворители (например, циклогексанон) могут быть использованы для получения раствора фенилацетата L-орнитина, и Форма II может быть осаждена путем добавления этанола в условиях окружающей среды. В качестве другого примера, Форма II также может быть получена путем приготовления суспензии фенилацетата L-орнитина с перечисленными органическими растворителями и циклического воздействия температуры от 25° до 40° С каждые 4 часа на протяжении 18 циклов (или 72 часов).
[000132] Соответственно, в контексте способов получения фенилацетата L-орнитина, описанных выше, указанный способ может позволить получить Форму II путем использования конкретных способов выделения. Например, фенилацетат L-орнитина может быть выделен путем добавления IPA или выпаривания органического растворителя с получением Формы П.
[000133] На ФИГ. 6 представлена кристаллическая структура Формы II, определенная путем XRPD. Форма II, которая может быть получена способами, описанными выше, демонстрирует характеристические пики при углах 20 приблизительно 6,0°, 13,9°, 14,8°, 17,1°, 17,8° и 24,1°. Таким образом, в некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина имеет один или более характеристических пиков (например, один, два, три, четыре, пять или шесть характеристических пиков), выбранных из приблизительно 66,0°, 13,9°, 14,8°, 17,1°, 17,8° и 24,1° 9.
[000134] На ФИГ. 7 представлены результаты, полученные путем дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) для Формы П. Данные результаты указывают на температуру плавления, равную примерно 202° С, которая приблизительно равна температуре плавления для Формы I. Это позволяет предположить, что Форма I переходит в Форму II после нагревания при температуре выше примерно 35° С. Форму II также анализировали с использованием TG/DTA, как показано на ФИГ. 8, и она демонстрирует потерю массы, составляющую примерно 9,7%, связанную с остаточным растворителем. Температуру плавления, равную примерно 202° С, также можно было наблюдать путем тестирования TGA. Соответственно, в некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина демонстрирует температуру плавления, равную примерно 202° С.
[000135] Исследование стабильности Формы II в течение 7 дней при 40°С/ОВ 75% не показывало наблюдаемого фазового превращения. В действительности, Форма II была стабильна на протяжении 14 дней при подвергании повышенным температурам, различным рН, УФ-излучению или кислороду. Соответственно, Форма II считается стабильной.
[000136] На ФИГ. 9 показаны интегралы и химические сдвиги ядерного магнитного резонанса (ЯМР) для Формы П. Интегралы подтверждают присутствие фенилацетата L-орнитина: 7,5 (ароматическая CH), 3,8 (CH, смежная с NH2), 3,6 (фрагмент СН2 фенилацетата), 3,15 (СН2, смежная с NH2) и 1,9 (алифатические фрагменты СН2) ррт (интегралы: 5:1:2:2:4 протонов; 7,0, 1,4, 2,9, 3,0, 5,9). Аминные протоны и гидроксильные протоны не наблюдали из-за протонного обмена как на цвиттерионе, так и на участке солеобразования. Между тем, на ФИГ. 10 представлены результаты динамической сорбции паров (DVS) для Формы II и показано водопоглощение, составляющее примерно 0,3 масс.%. Результаты XRPD после анализа DVA (не показаны) подтверждают, что Форма II не переходит в другую полиморфную форму. Следовательно, Форма II может быть охарактеризована как негигроскопичная и стабильная в широком диапазоне влажности.
[000137] Дифракцию рентгеновских лучей на монокристалле (SXRD) также использовали для определения структуры Формы II при 23° и -123° С, и данные результаты суммированы в ТАБЛИЦАХ 3 и 4. Данные результаты демонстрируют, что Форма II является безводной и, следовательно, структурно отличается от Формы I. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина может быть представлена формулой C13H20N2O4. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина может быть представлена формулой [C5H13N2O2HC8H7O2]. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина демонстрирует рентгеноструктурный анализ монокристалла с параметрами кристалла, приблизительно равными следующим: размеры элементарной ячейки а = 6,594(2) А, а= 90°, b = 6,5448(18) А, р=91,12(3)°, с = 31,632(8) А, у=90°; моноклинная кристаллическая система; и пространственная группа Р2ь
Форма III
[000138] Конкретные условия получения кристаллической Формы III могут быть определены эмпирически, и возможно лишь привести ряд способов, которые, как было обнаружено, подходят для использования на практике.
[000139] Таким образом, например, Форма III может быть получена путем помещения насыщенного раствора фенилацетата L-орнитина в охлажденную среду с температурой примерно -21° С, при этом указанный раствор представляет собой смесь ацетона и воды (например, равные объемные части ацетона и воды). В качестве другого примера, добавление IPA к насыщенному раствору фенилацетата L-орнитина в 2-бутаноле может позволить получить Форму III при выполнении процедуры в условиях окружающей среды. Кроме того, Форма III может быть получена, например, путем добавления IPA к насыщенному раствору фенилацетата L-орнитина в изобутилацетате при выполнении процедуры при пониженных температурах примерно -21° С.
[000140] Соответственно, в контексте способов получения фенилацетата L-орнитина, описанных выше, указанный способ может позволить получить Форму III путем использования конкретных растворителей и способов выделения. Например, фенилацетат L-орнитина может быть получен в смеси ацетона и воды, а затем помещен в охлажденную среду с температурой примерно -21° С с получением Формы III.
[000141] На ФИГ. 11 представлена кристаллическая структура Формы III, определенная путем XRPD. Форма III, которая может быть получена способами, описанными выше, демонстрирует характеристические пики при углах 20 приблизительно 5,8°, 14,1°, 18,6°, 19,4°, 22,3° и 24,8°. Таким образом, в некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина имеет один или более характеристических пиков (например, один, два, три, четыре, пять или шесть характеристических пиков), выбранных из приблизительно 5,8°, 14,1°, 18,6°, 19,4°, 22,3° и 24,8° 29.
[000142] На ФИГ. 12 представлены результаты, полученные путем дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) для Формы III. Данные результаты указывают на температуру плавления, равную примерно 203° С, которая приблизительно равна температурам плавления для Формы I и Формы П. Кроме того, Форма III демонстрирует эндотерму при примерно 40° С. Форму III также анализировали с использованием TG/DTA, как показано на ФИГ. 13, и она не демонстрировала значительной потери массы до температуры плавления. Следовательно, Форма III может быть охарактеризована как безводная. Температуру плавления, равную примерно 203° С, также можно было наблюдать путем тестирования TGA. Соответственно, в некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина демонстрирует температуру плавления, равную примерно 203° С. В некоторых вариантах реализации кристаллическую форму фенилацетата L-орнитина характеризуют путем дифференциальной сканирующей калориметрией как имеющую эндотерму при примерно 40° С. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина является безводной. [000143] Исследование стабильности Формы III в течение 7 дней при 40°С/ОВ 75% показывало, что в данных условиях происходило превращение в Форму П. Форма II, наоборот, является стабильной при повышенных температурах с вакуумом или без него на протяжении периодов времени, составляющих 7 или 10 дней. Соответственно, наиболее вероятно, что Форма III является метастабильной, но более стабильной, чем Форма I. [000144] На ФИГ. 14 показаны интегралы и химические сдвиги ядерного магнитного резонанса (ЯМР) для Формы III. Интегралы подтверждают присутствие фенилацетата L-орнитина: 7,5 (ароматическая CH), 3,8 (CH, смежная с NH2), 3,6 (фрагмент СН2 фенилацетата), 3,15 (СН2, смежная с NH2) и 1,9 (алифатические фрагменты СН2) ррт (интегралы: 5:1:2:2:4 протонов; 4,2, 0,8, 1,7, 1,7, 3,0). Аминные протоны и гидроксильные протоны не наблюдали из-за протонного обмена как на цвиттерионе, так и на участке солеобразования. Между тем, на ФИГ. 15 представлены результаты динамической сорбции паров (DVS) для Формы III и показано водопоглощение, составляющее примерно 2,0 масс.%. Результаты XRPD после анализа DVS (не показаны) подтверждают, что Форма
III не переходит в другую полиморфную форму. Следовательно, Форма III демонстрирует большее водопоглощение по сравнению с Формами I и II; однако Форма III все же может быть охарактеризована как негигроскопичная и стабильная в широком диапазоне влажности при комнатной температуре.
Форма V
[000145] Конкретные условия получения кристаллической Формы V могут быть определены эмпирически, и возможно лишь привести ряд способов, которые, как было обнаружено, подходят для использования на практике.
[000146] Таким образом, например, Форма V может быть получена путем помещения насыщенного раствора фенилацетата L-орнитина в охлажденную среду с температурой примерно -21° С, при этом указанный раствор представляет собой циклогексанон. В качестве другого примера, такой же насыщенный раствор может позволить получить Форму V при выпаривании растворителя.
[000147] Форма V также образуется из насыщенных растворов фенилацетата L-орнитина, содержащих диизопропиловый эфир в качестве растворителя. Например, насыщенный раствор, имеющий соотношение растворителей диизопропилового эфира и IPA, равное примерно 1 к 2, позволит получить Форму V при помещении в охлажденную среду с температурой примерно 4° С. Подобным образом, раствор, содержащий только растворитель диизопропиловый эфир, может позволить получить Форму V при помещении в охлажденную среду с температурой примерно -21° С.
[000148] На ФИГ. 16 представлена кристаллическая структура Формы V, определенная путем XRPD. Форма V, которая может быть получена способами, описанными выше, демонстрирует характеристические пики при углах 20 приблизительно 13,7°, 17,4°, 19,8°, 20,6° и 23,7°. Таким образом, в некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина имеет один или более характеристических пиков (например, один, два, три, четыре или пять характеристических пиков), выбранных из приблизительно 13,7°, 17,4°, 19,8°, 20,6° и 23,7° 29.
[000149] На ФИГ. 17 представлены результаты, полученные путем дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC) для Формы V. Данные результаты указывают на температуру плавления, равную примерно 196° С, которая ниже температуры плавления других форм. Форма V также демонстрирует эндотерму при примерно 174° С. Форму V также анализировали с использованием термогравиметрического анализа (TGA), как показано на ФИГ. 18, и она не демонстрирует значительной потери массы до температуры плавления. Следовательно, Форма V может быть охарактеризована как безводная.
Температуру плавления, равную примерно 196° С, также можно было наблюдать путем тестирования TGA. Соответственно, в некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина демонстрирует температуру плавления, равную примерно 196° С. В некоторых вариантах реализации кристаллическую форму фенилацетата L-орнитина характеризуют путем дифференциальной сканирующей калориметрией как имеющую эндотерму при примерно 174° С. В некоторых вариантах реализации кристаллическая форма фенилацетата L-орнитина является безводной. [000150] На ФИГ. 19 показаны интегралы и химические сдвиги ядерного магнитного резонанса (ЯМР) для Формы V. Интегралы подтверждают присутствие фенилацетата L-орнитина: 7,5 (ароматическая CH), 3,8 (CH, смежная с NH2), 3,6 (фрагмент СН2 фенилацетата), 3,15 (СН2, смежная с NH2) и 1,9 (алифатические фрагменты СН2) ррт (интегралы: 5:1:2:2:4 протонов; 4,2, 0,8, 1,7, 1,7, 3,0). Аминные протоны и гидроксильные протоны не наблюдали из-за протонного обмена как на цвиттерионе, так и на участке солеобразования. Между тем, на ФИГ. 19 представлены результаты динамической сорбции паров (DVS) для Формы V и показано водопоглощение, составляющее примерно 0,75 масс.%. Результаты XRPD после анализа DVS (не показаны) позволяют предположить, что Форма V переходила в Форму II, но химический состав не менялся. Следовательно, Форма V характеризуется как негигроскопичная, но нестабильная в широком диапазоне влажности.
[000151] Исследование стабильности Формы V в течение 7 дней при 40°С/ОВ 75% показывало, что в данных условиях происходило превращение в Форму II; однако химический состав не менялся. Соответственно, наиболее вероятно, что Форма V является метастабильной.
ПРИМЕРЫ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ [000152] В следующих примерах, которые никоим образом не ограничивают объем формулы изобретения, более подробно описаны дополнительные варианты реализации.
Пример 1: Мелкосерийный способ получения фенилацетата L-орнитина [000153] Примерно 8,4 г (0,049 моль) гидрохлорида L-орнитина растворяли в 42 мл Н20 и отдельно примерно 11,4 г бензоата серебра растворяли в 57 мл ДМСО. Затем раствор бензоата серебра добавляли к раствору гидрохлорида L-орнитина. Объединение указанных двух смесей приводило к немедленному экзотермическому осаждению твердого вещества кремово-белого цвета (AgCl). Указанное твердое вещество удаляли путем вакуумной фильтрации и сохраняли фильтрат (бензоат L-орнитина в растворе). К
фильтрату добавляли 200 мл IPA и смесь охлаждали до 4 °С. Через примерно 3 часа происходило осаждение кристаллического твердого вещества (бензоат L-орнитина), которое выделяли путем вакуумной фильтрации. Выход: 60%.
[000154] 7,6 г (0,03 моль) бензоата L-орнитина растворяли в 38 мл Н20 и примерно 4,4 г фенилацетата натрия растворяли в 22 мл Н20. Затем раствор фенилацетата натрия добавляли к раствору бензоата L-орнитина и оставляли перемешиваться в течение примерно 10 минут. Добавляли примерно 240 мл ЕРА IPA (1РА:Н20 8:2) и раствор перемешивали в течение 30 минут перед охлаждением до 4 °С. Через примерно 3 часа при 4 °С происходило осаждение кристаллического твердого вещества (фенилацетат L-орнитина). Осадок выделяли путем вакуумной фильтрации и промывали 48-144 мл IPA. Выход: 57%.
Пример 2: Крупносерийный способ получения фенилацетата L-орнитина [000155] Две отдельные партии фенилацетата L-орнитина получали следующим образом: [000156] Примерно 75 кг моногидрохлорида L-орнитина растворяли в 227 кг воды. К полученному раствору добавляли 102 кг бензоата серебра, растворенного в 266 кг ДМСО, при комнатной температуре в течение 2 часов. Вначале наблюдали сильный экзотермический эффект и происходило осаждение хлорида серебра. Затем резервуар, содержащий раствор, промывали 14 кг ДМСО, который добавляли к реакционной массе. Для удаления образовавшегося хлорида серебра реакционную массу фильтровали через линзовый фильтр, полученный с помощью 10 кг Целита, и 1 мм фильтр GAF. После фильтрации фильтр промывали дополнительными 75 кг воды. После фильтрации реакционную массу помещали в другой реактор для предотвращения загрязнения остаточным хлоридом серебра. Затем реакционную массу нагревали при 35 ± 2 °С и добавляли 80 кг фенилацетата натрия. На этой стадии реакционную массу перемешивали при 35 ± 2 °С в течение по меньшей мере 30 минут.
[000157] Для осаждения конечного продукта к реакционной массе добавляли 353 кг IPA. Затем реакционную массу охлаждали до 0 ± 3 °С в течение 6 часов, перемешивали в течение 1 часа, а затем продукт выделяли в центрифуге.
[000158] Получали примерно 86 кг конечного влажного продукта. Затем указанный продукт сушили при 40 ± 5 °С в течение примерно 6,5-8 часов с получением примерно 75 кг фенилацетата L-орнитина. Выход: 63,25%. В ТАБЛИЦЕ 5 суммированы измерения, относящиеся к конечному продукту.
Пример 3: Приготовление раствора фенилацетата натрия In Situ
[000159] Фенилуксусную кислоту (РАА) растворяли в растворе изопропанола. К указанному раствору добавляли примерно 1 молярный эквивалент гидроксида натрия и перемешивали. Полученный раствор по каплям добавляли к раствору, содержащему примерно 1 молярный эквивалент бензоата L-орнитина. Фенилацетат L-орнитина осаждали из данного раствора с использованием, в целом, тех же процедур, описанных в Примере 2. Выход: 53,5%. Затем белый порошок характеризовали и результаты суммированы в ТАБЛИЦЕ 6 под заголовком "Исследование А".
Пример 4: Соотношения растворителей вода/IP А для выделения фенилацетата L-орнитина [000160] Выполняли несколько исследований для рассмотрения влияния композиции растворителей на выход и чистоту продукта. Исследования выполняли с использованием протокола, схожего с Примерами 2 и 3, и они более подробно описаны в ТАБЛИЦЕ 6. [000161] Исследования А, В и D включают различные соотношения вода/IPA и показывают, что выход может быть увеличен путем увеличения относительного количества IPA. В исследовании D кристаллизовали продукт после перемешивания IPA, тогда как исследования А и В включают охлаждение раствора с получением продукта. Кроме того, исследование F показывает, что уменьшение объема реакционной массы также может облегчить осаждение конечного продукта.
[000162] Исследования С, Е и G включают этап дистилляции для удаления воды из реакционной массы перед добавлением IPA. Выход для исследований С, Е и G составлял 70,0%о, 51,2%о и 68,0%) соответственно.
К заявке №201390403
Пример 5: Уменьшение содержания серебра в фенилацетате L-орнитина [000164] Партия 2 из Примера 2 демонстрировала более высокие количества серебра (157 ррт) и, следовательно, тестировали методики, направленные на уменьшение содержания серебра. Выполняли девять исследований; каждое исследование, в целом, включало растворение примерно 20 г фенилацетата L-орнитина из Партии 2 в 1,9 частях воды, а затем последующее добавление 10,8 частей IPA. Кристаллическую форму выделяли при 0 °С путем фильтрации.
[000165] Для четырех исследований к водному раствору добавляли 8,0 мг или 80 мг поглотителей тяжелых металлов SMOPEX 102 или SMOPEX 112 и перемешивали в течение 2 часов. Указанные поглотители не уменьшали содержание серебра ниже 126
ррт. В другом исследовании фенилацетат L-орнитина выделялся в растворе IPA, а не кристаллизовался; однако данное исследование также не приводило к уменьшению содержания серебра ниже 144 ррт.
[000166] Последние три исследования включали добавление разбавленной НС1 к раствору с осаждением остаточного количества серебра в виде AgCl. Затем осадок удаляли путем фильтрации. Три исследования включали добавление: (1) 1,0 г 0,33% НС1 при 20° С; (2) 1,0 г 0,33% НС1 при 30° С; и (3) 0,1 г 3,3% НС1 при 20° С. В данных трех исследованиях содержание серебра уменьшалось до 30 ррт, 42 ррт и 33 ррт соответственно, и в каждом исследовании получали выход фенилацетата L-орнитина более 90%. Соответственно, добавление НС1 эффективно уменьшало количество остаточного серебра.
Пример 6: Способ получения фенилацетата L-орнитина из свободного основания L-орнитина путем использования основания, алкоксида щелочного металла [000167] В качестве общей методики, гидрохлорид L-орнитина суспендировали в растворителе. Затем нагревали реакционную массу и добавляли основание, метоксид натрия. Образовывался NaCl и его удаляли из системы путем фильтрации. Охлаждали реакционную массу и к реакционной массе добавляли молярный эквивалент фенилуксусной кислоты с образованием фенилацетата L-орнитина. Выделяли, промывали и сушили конечный продукт. Резюме исследований для данного способа приведено в ТАБЛИЦЕ 7.
[000168] Было обнаружено, что полученный фенилацетат L-орнитина демонстрирует высокие количества хлорида (по меньшей мере примерно 1 масс.%) и, предположительно, содержит схожие количества натрия. Выходы составляли примерно 50% для Исследований 2, 4 и 5.
Пример 7: Способ получения фенилацетата L-орнитина без промежуточной соли [000169] Выполняли дополнительные исследования с использованием, в целом, такой же методики, что и в Примере 6. Результаты представлены в ТАБЛИЦЕ 8:
Пример 8: Способ получения фенилацетата L-орнитина из свободного основания L-орнитина путем использования карбонатного основания
[000170] 1 часть гидрохлорида L-орнитина по молю суспендировали в примерно 10,6 частях этанола. Затем реакционную массу (суспензию) нагревали до примерно 50 °С и добавляли примерно 1 часть карбоната кальция. Реакционную массу перемешивали в течение примерно 2 часов. Свободное основание L-орнитина выделяли путем фильтрации с получением порошка, тогда как СаС12 оставался в растворе. Отфильтрованный порошок растворяли в воде и фильтровали с удалением непрореагировавшего карбоната кальция. Примерно 1 часть фенилуксусной кислоты по молю в изопропаноле смешивали с водным раствором L-орнитина. Конечный продукт осаждался из раствора и его выделяли, промывали и сушили. Выход: 44,5%.
Пример 9: Способ получения фенилацетата L-орнитина из свободного основания L-орнитина путем использования неорганического основания
[000171] 1 часть гидрохлорида L-орнитина по молю суспендировали в примерно 10,6 частях этанола. Затем реакционную массу (суспензию) нагревали до примерно 50 °С и добавляли примерно 0,5 части гидроксида кальция по молю. Реакционную массу перемешивали в течение примерно 1,5 часов. Свободное основание L-орнитина выделяли
путем фильтрации и промывали этанолом. Отфильтрованное твердое вещество растворяли в воде и к водному раствору L-орнитина по каплям добавляли фенилуксусную кислоту (1,0 эквивалент) в изопропаноле при комнатной температуре. После перемешивания при комнатной температуре в течение по меньшей мере 30 минут добавляли IP А с осаждением конечного продукта. Конечный продукт выделяли, промывали и сушили. Выход: 43,95%. [000172] В качестве альтернативы, свободное основание L-орнитина также получали в водном растворе. 1 часть гидрохлорида L-орнитина по молю растворяли в примерно 4,1 частях воды. Затем к раствору добавляли примерно 0,5 части гидроксида кальция по молю и перемешивали в течение примерно 30 минут. После этого свободное основание L-орнитина не выделяли путем фильтрации. Затем примерно 1 часть фенилуксусной кислоты в изопропаноле смешивали с водным раствором L-орнитина. Конечный продукт, осажденный из раствора, выделяли, промывали и сушили. Выход: > 100%.
Пример 10: Способ получения фенилацетата L-орнитина из свободного основания L-орнитина путем использования гидроксида бария
[000173] К 1,0 эквиваленту гидрохлорида L-орнитина в водном растворе добавляли 2,7 молярных эквивалента гидроксида бария. Затем реакционную массу нагревали в колбе с обратным холодильником в течение 2 часов, а затем охлаждали до комнатной температуры. Медленно добавляли серную кислоту (6Н) для подкисления полученной реакционной массы до достижения рН, равного примерно 1,5. Полученный нерастворимый сульфат бария отфильтровывали путем использования 0,2 мкм фильтра. Затем фильтрат концентрировали путем дистилляции и нейтрализовали до рН 7-7,5 путем добавления раствора гидроксида бария. Полученную соль сульфата бария снова удаляли. Наконец, к полученному раствору при 35 °С добавляли раствор фенилуксусной кислоты (1,13 эквивалента) с гидроксидом натрия в IPA при 35 °С. Добавляли IPA и реакционную смесь охлаждали до 0 °С для осаждения конечного продукта. Конечный продукт выделяли путем фильтрации, промывали смесью воды и IPA, и сушили. Выход: 37,2%.
Пример 11: Способ получения фенилацетата L-орнитина через ацетатное промежуточное соединение
[000174] 25 мг гидрохлорида L-орнитина растворяли в 5 объемах НгО, а затем добавляли избыток уксусной кислоты (примерно 5 объемов) с получением суспензии. Суспензию подвергали циклическому воздействию температуры от 25 °С до 40 °С каждые 4 часа в течение примерно 3 дней. Добавляли 1 эквивалент фенилуксусной кислоты (по отношению к L-орнитину) и перемешивали в течение примерно 4-6 часов (возможно
нагревание). В качестве антирастворителя использовали IP А, добавляли достаточное количество для получения соотношения 70:30 (1РА:Н20). Выделяли продукт путем вакуумной фильтрации и сушили в течение примерно 4-8 часов при 80 °С с удалением остаточной уксусной кислоты.
Пример 12: Способ получения фенилацетата L-орнитина из галогенидной соли L-орнитина и фенилацетатной соли
[000175] Моногидрохлорид L-орнитина растворяли в воде в концентрации 300 - 350 г/кг (~3 объема воды). К полученному раствору добавляли 1 молярный эквивалент фенилацетата серебра в 2,5 объемах ДМСО (0,4 г/г) при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем резервуар, содержащий раствор, промывали ДМСО, который добавляли к реакционной массе. Полученный хлорид серебра можно было фильтровать через линзовый фильтр, полученный с помощью Целита, и фильтр GAF. После фильтрации фильтр промывали дополнительным объемом воды.
[000176] Для осаждения конечного продукта IP А добавляли к реакционной массе до конечного диапазона концентрации 65-95% IPA. Затем реакционную массу охлаждали до 0 ± 3 °С в течение 6 часов, перемешивали в течение 1 часа, а затем продукт выделяли в центрифуге.
[000177] Выделенный влажный продукт повторно растворяли в водном разбавленном растворе НС1 (0,33%), представляющим собой 1-3,5 мольных эквивалента НС1. Реакционную массу фильтровали через линзовый фильтр, полученный с помощью Целита, и фильтр GAF, с удалением полученного хлорида серебра. После фильтрации фильтр промывали дополнительным объемом воды.
[000178] Для осаждения конечного продукта IP А снова добавляли к реакционной массе до конечного диапазона концентрации 60-80% IPA. Затем реакционную массу охлаждали до 0 ± 3 °С в течение 6 часов, перемешивали в течение 1 часа, а затем продукт выделяли в центрифуге. Затем сушили конечный продукт при 40 ± 5 °С в течение примерно 6,5-8 часов с получением кристаллического фенилацетата L-орнитина.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ получения фенилацетатной соли L-орнитина, включающий:
получение раствора фенилацетатной соли путем смешивания фенилуксусной кислоты и основания в растворителе;
смешивание бензоата L-орнитина с раствором фенилацетатной соли; и выделение композиции, содержащей фенилацетат L-орнитина.
2. Способ по п. 1, дополнительно включающий получение бензоата L-орнитина, при этом получение бензоата L-орнитина включает смешивание соли L-орнитина, бензоатной соли и первого растворителя с получением промежуточного раствора.
3. Способ по п. 2, дополнительно включающий удаление по меньшей мере части соли из указанного промежуточного раствора перед смешиванием с фенилацетатной солью, при этом указанная удаляемая соль не представляет собой соль L-орнитина.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что указанная удаляемая соль содержит анион, полученный по меньшей мере частично из соли L-орнитина, и катион, полученный по меньшей мере частично из бензоатной соли.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что соль L-орнитина представляет собой гидрохлорид L-орнитина, а указанный анион представляет собой хлорид.
6. Способ по любому из пп. 4-5, отличающийся тем, что бензоатная соль представляет собой бензоат серебра, а катион представляет собой ион серебра.
7. Способ по любому из пп. 3-6, отличающийся тем, что указанный способ дополнительно включает добавление соляной кислоты перед указанным удалением по меньшей мере части соли.
8. Способ по любому из пп. 3-7, отличающийся тем, что удаляют по меньшей мере примерно 90 масс.% указанной удаляемой соли.
9. Способ по п. 1, дополнительно включающий получение бензоата L-орнитина, при этом получение бензоата L-орнитина включает:
смешивание соли L-орнитина, бензоатной соли и первого растворителя с получением промежуточного раствора; и
выделение бензоата L-орнитина из указанного промежуточного раствора.
10. Способ по п. 9, дополнительно включающий удаление по меньшей мере части соли из указанного промежуточного раствора перед выделением бензоата L-орнитина, при этом указанная удаляемая соль не представляет собой соль L-орнитина.
11. Способ по п. 10, дополнительно включающий добавление соляной кислоты перед указанным удалением по меньшей мере части соли.
12. Способ по любому из пп. 9-11, отличающийся тем, что выделение бензоата L-орнитина включает кристаллизацию бензоата L-орнитина из указанного промежуточного раствора.
13. Способ по любому из пп. 1-12, отличающийся тем, что основание выбрано из группы, состоящей из гидроксида щелочного металла и алкоксида щелочного металла.
14. Способ по любому из пп. 1-13, дополнительно включающий получение бензоата L-орнитина, при этом получение бензоата L-орнитина включает смешивание соли L-орнитина, бензоатной соли и второго растворителя с получением промежуточного раствора.
15. Способ по любому из пп. 1-14, отличающийся тем, что указанная композиция содержит по меньшей мере примерно 0,10 масс.% бензоатной соли.
16. Способ по любому из пп. 1-15, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 5 масс.% бензоатной соли.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 3 масс.% бензоатной соли.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 1 масс.% бензоатной соли.
10.
19. Способ по любому из пп. 14-18, отличающийся тем, что соль L-орнитина представляет собой гидрохлорид L-орнитина.
20. Способ по любому из пп. 14-19, отличающийся тем, что бензоатная соль представляет собой бензоат серебра.
21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что указанная композиция дополнительно содержит по меньшей мере 10 ррт серебра.
22. Способ по п. 21, отличающийся тем, что указанная композиция содержит по меньшей мере 20 ррт серебра.
23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что указанная композиция содержит по меньшей мере 25 ррт серебра.
24. Способ по любому из пп. 1-23, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 600 ррт серебра.
25. Способ по п. 24, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 100 ррт серебра.
26. Способ по п. 25, отличающийся тем, что композиция содержит не более 65 ррт серебра.
27. Способ по любому из пп. 1-26, отличающийся тем, что фенилацетатная соль представляет собой соль щелочного металла.
28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что соль щелочного металла представляет собой фенилацетат натрия.
29. Способ по п. 28, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 100 ррт натрия.
30. Способ по п. 29, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 20 ррт натрия.
10.
31. Способ по любому из пп. 1-30, отличающийся тем, что композиция содержит не более 0,1 масс.% хлорида.
32. Способ по п. 31, отличающийся тем, что композиция содержит не более 0,01 масс.% хлорида.
33. Способ по любому из пп. 1-32, отличающийся тем, что композиция содержит кристаллическую форму, порошковая рентгеновская дифрактограмма которой содержит по меньшей мере один характеристический пик, при этом указанный характеристический пик выбран из группы, состоящей из приблизительно 6,0°, 13,9°, 14,8°, 17,1°, 17,8° и 24,1° 29.
34. Способ получения фенилацетатной соли L-орнитина, включающий: смешивание соли L-орнитина, фенилацетата серебра и растворителя с получением раствора; и
выделение композиции, содержащей фенилацетат L-орнитина, из указанного раствора.
35. Способ по п. 34, отличающийся тем, что соль L-орнитина представляет собой галогенидную соль.
36. Способ по п. 35, отличающийся тем, что соль L-орнитина представляет собой гидрохлорид L-орнитина.
37. Способ по п. 35, отличающийся тем, что соль L-орнитина не представляет собой гидрохлорид L-орнитина.
38. Способ по любому из пп. 34-37, дополнительно включающий получение фенилацетата серебра путем смешивания фенилуксусной кислоты и основания в растворителе.
39. Способ по любому из пп. 34-38, дополнительно включающий добавление соляной кислоты к раствору перед выделением фенилацетата L-орнитина из раствора.
35.
40. Способ по любому из пп. 34-39, отличающийся тем, что указанная композиция дополнительно содержит по меньшей мере 10 ррт серебра.
41. Способ по п. 40, отличающийся тем, что указанная композиция содержит по меньшей мере 20 ррт серебра.
42. Способ по п. 40, отличающийся тем, что указанная композиция содержит по меньшей мере 25 ррт серебра.
43. Способ по любому из пп. 34-42, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 600 ррт серебра.
44. Способ по п. 43, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 100 ррт серебра.
45. Способ по п. 43, отличающийся тем, что композиция содержит не более 65 ррт серебра.
46. Способ по любому из пп. 34-45, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 100 ррт натрия.
47. Способ по п. 46, отличающийся тем, что указанная композиция содержит не более 20 ррт натрия.
48. Способ по любому из пп. 34-47, отличающийся тем, что композиция содержит не более 0,1 масс.% хлорида.
49. Способ по любому из пп. 34-48, отличающийся тем, что композиция содержит не более 0,01 масс.%> хлорида.
50. Способ по любому из пп. 34-49, отличающийся тем, что композиция содержит кристаллическую форму, порошковая рентгеновская дифрактограмма которой содержит по меньшей мере один характеристический пик, при этом указанный характеристический пик выбран из группы, состоящей из приблизительно 6,0°, 13,9°, 14,8°, 17,1°, 17,8° и 24,1° 29.
35.
51. Композиция, полученная в соответствии со способом по любому из пп. 1-50.
Еденицы
Положение [°2 Тега] Порошковая рентгеновская дифрактограмма Формы I
- &57 ив
?Я -^7 -
& & -
_i_
_Д_
_l_
ФИГ. 2
/*й i? ^ &о. &
Температура, градусы Цельсия
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы I
so. a
f@a & /же 2cw.#
Температура, градусы Цельсия
Результаты термогравиметрическопо гравиметрического/дисрференциальнопо термического анализа
Формы I
1 Н 200.0НН2МГЦ
График изотермической кривой DVS -•-Цикл 1 сорбция -и-Цикп 1 десорбция
Темп: SS.^'C Способ: выбор сопи, 5 мг
Едениць
A0PD21О
/0 ?0 3 & 40 5 &
Положение [°2 Тега]
~? &?.00е?/
-5.00
-/0.00
-/500
-?0.00
-?5.00
-30.00
-55.00
-40.00 -
-45.00 -
-50.00 Ь. ?0.0
_1_
_1_
40.0 S0.0
S0.0 /00.0 /Ш0 /40.0 /$0.0
Температура, градусы Цельсия
/Ш0 ?00.0 ??0.0
О СЛ О
1X1
Результаты термоправиметрического гравиметрическсго/дифф^^ термического анализа Формы I
PPM
Спектр1Н ядерного мапнитнопо резонанса, полученнь й для Формь ill 11
График изотермической кривой DVS
-#- Цикл 1 сорбция ш Цикл 1 десорбция
Темп: 2S.Ј> *C Способ: выбор сопи, 5 мг
Результаты динамической сорбции паров для Формы II
Еденицы
Положение [°2 Тега]
ФИГ. 11
ФИГ. 12
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы I
Результаты термогравиметрического гравиметрическсго/дис(эс(эерен14^аль1-юго термического анализа Формы III
1Н 200.0МГц
Результаты динамической сорбции паров для Формы III
ЕдеНИЦЫ Ш? &7/5_ SJL /
000
~\-|-I-I-|-I-I-I-I 1-I-:-Г
Положение [°2 Тега] Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы V
о ся о
-/5.00 --?0.00 -?5.00 -30.00 -35.00
-45.00 -50.00
40.0 50.0 30.0 /00.0 /?0.0 /40 0
Температура, градусы Цельсия
/?0.0 /30.0 ?00.0 ??0.0
Результаты термофавиметрического гравиметрического/ди^^ термического анализа Формы V
Н 200.0МЩ
| I I I I L ¦ ¦ ¦ ¦ | ¦¦ I I I I I I I |l II I I I Ill|l4ll|llll| 1111|1111|1111|1111|1111|Р111|1111|||Г1|1111|1111|1111|Ы11|ГП1| llll|lll^illl
/4.0 /30 /20 //.0 /0.0 9.0 е.0 7.0 $.0 5.0 4.0 30
РРЫ
?.0 /.0 0.0
1Н 20О.амгц
К заявке №201390403
К заявке №201390403
(19)
К заявке №201390403
К заявке №201390403
(19)
К заявке №201390403
К заявке №201390403
(19)
К заявке №201390403
К заявке №201390403
(III)
К заявке №201390403
К заявке №201390403
К заявке №201390403
К заявке №201390403
К заявке №201390403
К заявке №201390403
К заявке №201390403
ФИГ. 1
ФИГ. 1
ФИГ.З
ФИГ.З
ФИГ.З
ФИГ.З
ФИГ.З
ФИГ. 5
Результаты динамической сорбции паров для Формы I
ФИГ. 5
Результаты динамической сорбции паров для Формы I
ФИГ. 5
Результаты динамической сорбции паров для Формы I
ФИГ. 5
Результаты динамической сорбции паров для Формы I
Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы II
ФИГ. 6
Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы II
ФИГ. 6
Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы II
ФИГ. 6
Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы II
ФИГ. 6
ФИГ. 7
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы II
ФИГ. 7
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы II
ФИГ. 10
ФИГ. 10
ФИГ. 10
ФИГ. 10
Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы I
Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы I
Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы I
Порошковая рентгеновская дифракгограмма Формы I
ФИГ. 15
ФИГ. 15
ФИГ. 16
ФИГ. 16
ФИГ. 16
ФИГ. 16
ФИГ. 16
ФИГ. 16
ФИГ. 17
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы V
ФИГ. 17
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы V
ФИГ. 17
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы V
ФИГ. 17
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы V
ФИГ. 17
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы V
ФИГ. 17
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы V
ФИГ. 17
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы V
ФИГ. 17
Результаты цифровой сканирующей калориметрии для Формы V
ФИГ. 19 Спектр1Н ядерного мапнитного резонанса, полученный для Формы V
ФИГ. 19 Спектр1Н ядерного мапнитного резонанса, полученный для Формы V
ФИГ. 19 Спектр1Н ядерного мапнитного резонанса, полученный для Формы V
ФИГ. 19 Спектр1Н ядерного мапнитного резонанса, полученный для Формы V
Результаты динамической сорбции паров для Формы V
Результаты динамической сорбции паров для Формы V
ФИГ. 21
Типичные 1Н спектры бензоата L-орнитина
ФИГ. 21
Типичные 1Н спектры бензоата L-орнитина
ФИГ. 22
Типичные 1H спектры бензоата L-орнитина
ФИГ. 22
Типичные 1H спектры бензоата L-орнитина
