[**]

Замещенные бициклические гетероарилы и содержащие их композиции для лечения общего воспаления, артрита, ревматических заболеваний, остеоартрита, воспалительных заболеваний кишечника, воспалительных глазных болезней, воспалительных заболеваний мочевого пузыря или нестабильного мочевого пузыря, псориаза, жалоб на кожные заболевания с воспалительной составляющей, хронических воспалительных состояний, включая, но не ограничиваясь этим, аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка (SLE), миастения гравис, ревматоидный артрит, острый рассеянный энцефаломиелит, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, рассеянный склероз, синдром Шегрена и аутоиммунную гемолитическую анемию, аллергических состояний, включая все формы гиперчувствительности. Настоящее изобретение также включает способы лечения рака, опосредованного, зависящего или связанного с активностью р110 δ, включая, но не ограничиваясь этим, лейкозы, такие как острый миелоидный лейкоз (AML), миелодиспластический синдром (MDS), миелопролиферативные заболевания (MPD), хронический миелоидный лейкоз (CML), острый лимфобластный лейкоз Т-клеток (T-ALL), острый лимфобластный лейкоз В-клеток (B-ALL), неходжкинская лимфома (NHL), лимфома В-клеток, а также твердых опухолей, таких как рак молочной железы.

(57) Реферат / Формула:

Замещенные бициклические гетероарилы и содержащие их композиции для лечения общего воспаления, артрита, ревматических заболеваний, остеоартрита, воспалительных заболеваний кишечника, воспалительных глазных болезней, воспалительных заболеваний мочевого пузыря или нестабильного мочевого пузыря, псориаза, жалоб на кожные заболевания с воспалительной составляющей, хронических воспалительных состояний, включая, но не ограничиваясь этим, аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка (SLE), миастения гравис, ревматоидный артрит, острый рассеянный энцефаломиелит, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, рассеянный склероз, синдром Шегрена и аутоиммунную гемолитическую анемию, аллергических состояний, включая все формы гиперчувствительности. Настоящее изобретение также включает способы лечения рака, опосредованного, зависящего или связанного с активностью р110 δ, включая, но не ограничиваясь этим, лейкозы, такие как острый миелоидный лейкоз (AML), миелодиспластический синдром (MDS), миелопролиферативные заболевания (MPD), хронический миелоидный лейкоз (CML), острый лимфобластный лейкоз Т-клеток (T-ALL), острый лимфобластный лейкоз В-клеток (B-ALL), неходжкинская лимфома (NHL), лимфома В-клеток, а также твердых опухолей, таких как рак молочной железы.

---

Евразийское (21) 201291005 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2013.09.30
(22) Дата подачи заявки 2011.04.01
(51) Int. Cl.
C07D 401/14 (2006.01) C07D 403/12 (2006.01) C07D 471/04 (2006.01) C07D 409/12 (2006.01) C07D 473/34 (2006.01) C07D 487/04 (2006.01) A61K31/506 (2006.01) A61P29/00 (2006.01)
(54) ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
(31) 61/320,378
(32) 2010.04.02
(33) US
(86) PCT/US2011/030888
(87) WO 2011/123751 2011.10.06
(71) Заявитель: ЭМДЖЕН ИНК. (US)
(72) Изобретатель:
Кашин Тимоти Д., Дукветт Джейсон А., Хэ Сяо, Ломан Джулия Винслоу, Шин Йоунгсоок (US)
(74) Представитель:
Медведев В.Н. (RU)
(57) Замещенные бициклические гетероарилы и содержащие их композиции для лечения общего воспаления, артрита, ревматических заболеваний, остеоартрита, воспалительных заболеваний кишечника, воспалительных глазных болезней, воспалительных заболеваний мочевого пузыря или нестабильного мочевого пузыря, псориаза, жалоб на кожные заболевания с воспалительной составляющей, хронических воспалительных состояний, включая, но не ограничиваясь этим, аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка (SLE), миастения гравис, ревматоидный артрит, острый рассеянный энцефаломиелит, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, рассеянный склероз, синдром Шегрена и аутоиммунную гемолитическую анемию, аллергических состояний, включая все формы гиперчувствительности. Настоящее изобретение также включает способы лечения рака, опосредованного, зависящего или связанного с активностью р1105, включая, но не ограничиваясь этим, лейкозы, такие как острый миелоидный лейкоз (AML), мие-лодиспластический синдром (MDS), миелопроли-феративные заболевания (MPD), хронический миелоидный лейкоз (CML), острый лимфобластный лейкоз Т-клеток (T-ALL), острый лимфобластный лейкоз В-клеток (B-ALL), неходжкинская лимфома (NHL), лимфома В-клеток, а также твердых опухолей, таких как рак молочной железы.
2420-189831ЕА/050 ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
Настоящая заявка заявляет о приоритете предварительной заявки на патент США № 61/320378, поданной 2 апреля 2010 года, которая включена в настоящий документ путем ссылки.
Настоящее изобретение относится, в основном, к ферментам фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) и, более конкретно, к селективным ингибиторам активности PI3K и способам применения таких материалов.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Клеточный сигналинг через 3'-фосфорилированные
фосфоинозитиды вовлечен в различные клеточные процессы, например, злокачественные преобразования, сигналинг фактора роста, воспаление и иммунитет (см. публикацию Rameh et al., J. Biol. Chem., 274: 8347-8350 (1991), где представлен обзор). Фермент, ответственный за образование этих фосфорилированных сигнальных продуктов, фосфатидилинозитол-3-киназа (киназа PI3; PI3K), был изначально определен как вещество, обладающее активностью в отношении вирусных онкогенных белков и рецепторных тирозинкиназ фактора роста, который фосфорилирует фосфатидилинозитол (PI) и его фосфорилированные производные по 3'-гидроксилу инозитольного кольца (Panayotou et al., Trends Cell Biol. 2: 358-60 (1992)).
Уровень фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфата (PIP3),
первичного продукта активации Р13-киназы, увеличивается при
обработке клеток различными раздражителями. Это включает
сигналинг через рецепторы для большинства факторов роста и
многих воспалительных раздражителей, гормонов,
нейротрансмиттеров и антигенов, и поэтому активация PI3K представляет одно, если не самое главное, событие сигнальной трансдукции, связанное с активацией рецептора поверхности клеток млекопитающих (Cantley, Science 296: 1655-1657 (2002); Vanhaesebroeck et al. Annu. Rev. Biochem., 70: 535-602 (2001)). Поэтому активация Р13-киназы участвует в широком ряде клеточных реакций, включая клеточный рост, миграцию, дифференцировку и апоптоз (Parker et al. , Current Biology, 5: 577-99 (1995); Yao
et al. , Science, 267: 2003-05 (1995)). Хотя нисходящие мишени фосфорилированных липидов, образованных после активации PI3-киназы, еще не полностью описаны, известно, что белки, содержащие домен плекстрин-гомологии (РН) и домен выступа FYVE, активируются при связывании с различными липидами фосфатидилинозитола (Sternmark et al., J. Cell Sci., 112: 417583 (1999); Lemmon et al., Trends Cell Biol., 7: 237-42 (1997)). Две группы РН-домена, содержащие эффекторы PI3K, были исследованы в контексте сигналинга иммунных клеток, членов семейства тирозинкиназ ТЕС и серин/треонинкиназ семейства AGC. Члены семейства Тес, содержащие домены РН, с явной селективностью в отношении Ptdlns (3,4,5)Рз, включают Tec, Btk, Itk и Etk. Связывание РН с Р1Рз является критическим для активности тирозинкиназ членов семейства Tec (Schaeffer and Schwartzberg, Curr. Opin. Immunol. 12: 282-288 (2000)). Члены семейства AGC, которые регулируются при помощи PI3K, включают фосфоинозитид-зависимую киназу (PDK1), АКТ (также называемую РКВ) и некоторые изоформы протеинкиназы С (РКС), а также киназу S6. Существует три изоформы АКТ, и активация АКТ тесно связана с Р13К-зависимой пролиферацией и сигналами выживания. Активация АКТ зависит от фосфорилирования с помощью PDK1, которая также имеет 3-фосфоинозитид-селективный домен РН для его захвата в мембрану, где он взаимодействует с АКТ. Другими важными субстратами PDK1 являются РКС и киназа S6 (Deane and Fruman, Annu. Rev. Immunol. 22_563-598 (2004)). In vitro некоторые изоформы протеинкиназы С (РКС) напрямую активируются при помощи PIP3 (Burgering et al., Nature, 376: 599-602 (1995)).
В настоящее время семейство ферментов Р13-киназ делится на три класса на основании их субстратной специфичности. Класс I PI3K может фосфорилировать фосфатидилинозитол (PI), фосфатидилинозитол-4-фосфат и фосфатидилинозитол-4,5-бифосфат (PIP2) с образованием фосфатидилинозитол-3-фосфата (PIP), фосфатидилинозитол-3,4-бифосфата и фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфата, соответственно. Класс II PI3K фосфорилирует PI и фосфатидилинозитол-4-фосфат, тогда как класс III PI3K может фосфорилировать только PI.
Первоначальная очистка и молекулярное клонирование PI3-киназы выявили, что она является гетеродимером, состоящим из субъединиц р85 и pllO (Otsu et al. , Cell, 65: 91-104 (1991); Hiles et al. , Cell, 70: 419-29 (1992)). Поэтому было идентифицировано четыре разных PI3K класса I, обозначаемые как PI3K а, (3, 8 и у, каждая состоит из отдельной каталитической субъединицы размером 110 кДа и регуляторной субъединицы. Более конкретно, три из каталитических субъединиц, то есть каждая из pllOa, рИОр и р1108 взаимодействуют с одной и той же регуляторной субъединицей, р85; тогда как рНОу взаимодействует с другой регуляторной субъединицей, р101. Как описано ниже, пути экспрессии каждой из этих PI3K в клетках и тканях человека также являются различными. Хотя за последнее время было накоплено много информации о клеточных функциях Р13-киназ в целом, роли, которые играют отдельные изоформы, понятны не до конца.
Было описано клонирование бычьего рПОа. Этот белок был определен как родственный белку Saccharomyces cerevisiae: Vps34p, белку, участвующему в вакуолярном процессинге белка. Было также обнаружено, что рекомбинантный продукт рПОа связывается с р85а с образованием вещества, обладающего активностью PI3K в трансфицированных клетках COS-1. См. публикацию Hiles et al., Cell, 70, 419-29 (1992).
Клонирование второй изоформы человека pllO, обозначенной рИОр, описано в публикации Ни et al., Mol. Cell Biol., 13: 7677-88 (1993). Указывается, что эта изоформа связывается с р85 в клетках и экспрессируется убиквитарно, поскольку рИОр мРНК был обнаружен во многих тканях человека и мышей, а также в эндотелиальных клетках аллантоисной вены человека, лейкозных Т-клетках Jurkat человека, эмбриональных клетках почек человека 2 93, фибробластах мышей ЗТЗ, клетках HeLa и клетках карциномы мочевого пузыря крыс NBT2. Такая распространенная экспрессия позволяет предположить, что эта изоформа является явно важной в сигнальных путях.
Идентификация изоформы р1108 Р13-киназы описана в
публикации Chantry et al. , J Biol Chem, 272: 19236-41 (1997). Замечено, что изоформа pll08 человека экспрессируется в пределах ткани. Она экспрессируется в высоких концентрациях в лимфоцитах и лимфоидных тканях, и было обнаружено, что она играет ключевую роль в Р13-киназа-опосредованном сигналинге в иммунной системе (Al-Alwan etl al. Л 178: 2328-2335 (2007); Okkenhaug et al. JI, 177: 5122-5128 (2006); Lee et al. PNAS, 103: 1289-1294 (2006)). Также было обнаружено, что P110S в более низких концентрациях экспрессируется в клетках молочной железы, меланоцитах и эндотелиальных клетках (Vogt et al. Virology, 344: 131-138 (2006) и поэтому участвует в сообщении свойств селективной миграции раковым клеткам молочной железы
(Sawyer et al. Cancer Res. 63: 1667-1675 (2003)). Детали, касающиеся изоформы pi108, также можно найти в патентах США № 5858753; 5822910 и 5985589, см. также публикацию Vanhaesebroeck et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 94: 4330-5 (1997) и международную публикацию WO 97/46688.
В каждом подтипе PI3Ka, р и 8 субъединица р8 5 действует для локализации Р13-киназы в плазматической мембране путем взаимодействия ее домена SH2 с фосфорилированными остатками тирозина (присутствующими в контексте соответствующей последовательности) белков-мишеней (Rameh et al., Cell, 83: 821-30 (1995)). Было идентифицировано пять изоформ р85 (р85а, р85р, р55у, р55а и р50а), кодируемых тремя генами. Альтернативные транскрипты гена Pik3rl кодируют белки р85а, р55а и р50а (Deane and Fruman, Annu. Rev. Immunol. 22: 563-598
(2004)). р85а экспрессируется убиквитарно, тогда как р85р, в основном, находится в мозговой и лимфоидной тканях (Volinia et al., Oncogene, 7: 789-93 (1992)). Связывание субъединицы р85 с каталитическими субъединицами рПОа, р или 8 Р13-киназы является необходимым для каталитической активности и устойчивости этих ферментов. Кроме того, связывание белков Ras также повышающе регулирует активность Р13-киназы.
Клонирование рНОу выявило еще большую сложность семейства ферментов PI3K (Stoyanov et al. , Science, 269: 690-93 (1995)).
Изоформа pllOy тесно связана с рПОа и рИОр (45-48% идентичности в каталитическом домене), но как отмечалось, она не использует р85 в качестве целевой субъединицы. Вместо этого pllOy связывается с регуляторной субъединицей р101, которая также связывается с субъединицами ру гетеротримерных белков G. Регуляторная субъединица р101 для Р13Кгамма была изначально клонирована на свиньях, а затем был идентифицирован ортолог человека (Krugmann et al., J. Biol. Chem., 274: 17152-8
(1999)). Известно, что взаимодействие между N-концевой областью plOl с N-концевой областью pllOy активирует Р13Ку через Gpy. Недавно был идентифицирован гомолог plOl, р84 или р87Р1КАР
(адаптерный белок Р13Ку размером 8 7 кДа), который связывается с
pllOy (Voigt et al. JBC, 281: 9977-9986 (2006), Suire et al. Curr. Biol. 15: 566-570 (2005)). p87PIKAP является гомологом plOl в областях, которые связывают pllOy и Gpy и также опосредует активацию последующих pllOy рецепторов, связанных с G-белком. В отличие от plOl, р87Р1КАР в высокой степени экспрессируется в сердце и может быть критичным для сердечной функции Р13Ку.
Конститутивно активный полипептид PI3K описан в международной публикации WO 96/25488. В этой публикации описано получение химерного гибридного белка, в котором фрагмент из 102 остатков р85, известный как область интер-БН2 (иБН2), связан через линкерную область с N-концом мышиного pllO. Домен iSH2 р85, очевидно, способен активировать действие PI3K, таким же образом сравнимым с интактным р85 (Klippel et al. , Mol. Cell Biol., 14: 2675-85 (1994)).
Поэтому Р13-киназы могут быть определены по их аминокислотной идентичности или по их активности. Дополнительные члены этого растущего семейства генов включают более отдаленно родственные липид- и протеинкиназы, включая Vps34 TORI и TOR2 Saccharomyces cerevisiae (и их гомологи для млекопитающих, такие как FRAP и mTOR), генный продукт атаксия-телеангиэктазии (ATR) и каталитическую субъединицу ДНК-зависимой протеинкиназы (ДНК-РК). См. в основном, публикацию
Hunter, Cell, 83: 1-4 (1995).
Р13-киназа также участвует в ряде аспектов активации лейкоцитов. Обнаружено, что активность Р13-киназы, связанная с р8 5, физически связана с цитоплазматическим доменом CD2 8, который является важной со-стимулирующей молекулой активации Т-клеток в ответ на антиген (Pages et al., Nature, 369: 327-29 (1994); Rudd, Immunity, 4: 527-34 (1996)). Активация Т-клеток посредством CD2 8 снижает порог активации антигеном и увеличивает величину и продолжительность пролиферативной реакции. Эти эффекты связаны с усилением транскрипции ряда генов, включая интерлейкин-2 (IL2), важный фактор роста Т-клеток (Fraser et al. , Science, 251: 313-16 (1991)). Мутация CD28, не позволяющая ему более взаимодействовать с Р13-киназой, приводит к сбою инициации выработки IL2, позволяя предположить критическую роль Р13-киназы в активации Т-клеток.
Специфические ингибиторы против отдельных членов семейства ферментов дают бесценные инструменты для расшифровки функций каждого фермента. Два соединения, LY294002 и вортманнин, широко используются как ингибиторы Р13-киназы. Однако эти соединения являются неспецифичными ингибиторами PI3K, поскольку они не различают четыре члена Р13-киназ класса I. Например, значения IC50 вортманнина против каждой из различных Р13-киназ класса I находятся в диапазоне 1-10 нМ. Точно так же, значения IC50 для LY294002 против каждой из этих Р13-киназ составляют около 1 мкМ (Fruman et al., Ann. Rev. Biochem., 67: 481-507 (1998)). Следовательно, пригодность этих соединений в исследовании роли отдельных Р13-киназ класса I является ограниченной.
На основании исследований с использованием вортманнина, стало понятно, что функция Р13-киназы также необходима для некоторых аспектов сигналинга лейкоцитов через рецепторы, связанные с G-белком (Thelen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91: 4960-64 (1994)) . Более того, было обнаружено, что вортманнин и LY2 94 0 02 блокируют миграцию нейтрофилов и выделение супероксида. Однако поскольку эти соединения не различают разнообразные изоформы PI3K, данные исследования не проясняют, какая конкретная изоформа или изоформы PI3K
участвуют в этих явлениях и какие функции выполняют различные ферменты PI3K класса I в нормальных и больных тканях в целом. Совместная экспрессия нескольких изоформ PI3K в большинстве тканей до сих пор затрудняла попытки разделить действия каждого фермента.
Недавно было достигнуто разделение активностей различных
изозимов PI3K после появления генетически управляемых мышей,
что позволило изучить изоформа-специфических нокаутных и
нокинных мышей с неактивной dead-формой киназы, а также
разработать более селективные ингибиторы для некоторых из этих
разных изоформ. Были выведены нокаутные мыши рПОа и рИОр, оба
варианта являются эмбрионально летальными, но от этих мышей
можно получить лишь немного информации относительно экспрессии
и функции pllO альфа и бета (Bi et al. Mamm. Genome, 13: 169-
172 (2002); Bi et al. J. Biol. Chem. 274: 10963-10968 (1999)).
Позже были выведены нокинные мыши с неактивной dead-формой
киназы рПОа с одной точкой мутации в мотиве DFG АТФ-
связывающего кармана (pll0aD933A) , которая ослабляет активность
киназы, но сохраняет экспрессию мутантной киназы pllOa. В
отличие от нокаутных мышей, нокинный подход стехиометрически
сохраняет сигналинговый комплекс, поддерживает функции и
имитирует низкомолекулярные подходы более реалистично, чем
нокаутные мыши. Аналогично мышам pllOa КО, гомозиготные мыши
pll0aD933A являются эмбрионально летальными. Однако
гетерозиготные мыши являются жизнеспособными и фертильными, но обладают сильно притуплённым сигналингом через белки инсулин-рецепторного субстрата (IRS), основные медиаторы инсулина, инсулин-подобный фактор роста-1 и действие лептина. Поврежденная восприимчивость к этим гормонам приводит к гиперинсулинемии, нарушению толерантности к глюкозе, гиперфагии, повышенной тучности и снижению общего роста в гетерозиготах (Foukas, et al. Nature, 441: 366-370 (2006)). Эти исследования выявили определенную релевантную роль pllOa как интермедиата в сигналинге IGF-1, инсулина и лептина, которая не заменяется другими изоформами. Авторы ожидают описание нокинных мышей с неактивной dead-формой киназы рИОр для дальнейшего
понимания функции этой изоформы (мыши были получены, но результаты еще не опубликованы; Vanhaesebroeck).
Были выведены нокаутные и нокинные мыши с неактивной dead-формой киназы pllOy, и в целом они показали схожие и слабые фенотипы с первичными дефектами миграции клеток врожденной иммунной системы, а также дефект тимусного развития Т-клеток (Li et al. Science, 287: 1046-1049 (2000), Sasaki et al. Science, 287: 1040-1046 (2000), Patrucco et al. Cell, 118: 375387 (2004) ) .
Аналогично pllOy были выведены нокаутные и нокинные мыши с неактивной dead-формой киназы PI3K дельта, и они являются жизнеспособными со слабыми и схожими фенотипами. pll08D910A мутантные нокинные мыши демонстрируют важную роль дельта в развитии и действии В-клеток с почти не обнаруживаемой краевой зоной В-клеток и CD5+ В1 клеток, а также в рецепторном сигналинге антигенов В- и Т-клеток (Clayton et al. J. Exp. Med. 196: 753-763 (2002); Okkenhaug et al. Science, 297: 1031-1034 (2002)) . Широко исследовались мыши pll08D910A, и с их помощью удалось объяснить многообразную роль, которую играет дельта в иммунной системе. Иммунные реакции, зависящие от Т-клеток и не зависящие от Т-клеток, сильно аттенуированы в pll05D910A, и секреция цитокина ТН1 (INF-y) и ТН2 (IL-4, IL-5) является сниженной (Okkenhaug et al. J. Immunol. 177: 5122-5128 (2006)). Также недавно были описаны люди-пациенты с мутацией в р1108. Представлен тайваньский мальчик с первичным иммунодефицитом В-клеток и гамма-гипоглобулинемией ранее неизвестной этиологии с заменой одной пары оснований, с m.3256G на А в кодоне 1021 в эксоне 24 белка pllOS. Эта мутация является результатом бессмысленной аминокислотной замены (с Е на К) в кодоне 1021, который расположен в высоко консервативном каталитическом
домене белка pllOS. У пациента не обнаружено других идентифицированных мутаций, и его фенотип согласуется с дефицитом р1108 у мышей, насколько это было изучено. (Jou et al. Int. J. Immunogenet. 33: 361-369 (2006)).
С различным успехом были разработаны изоформа-селективные низкомолекулярные соединения для всех изоформ Р13-киназ класса I (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut., 321: 1-8 (2007)). Желательными являются ингибиторы для альфа, поскольку мутации в рПОа были идентифицированы в некоторых твердых опухолях; например, мутация амплификации альфа связана с 50% случаев рака яичников, шейки матки, легких и молочной железы, и мутация активации была описана более чем в 50% случаев рака кишечника и 25% случаев рака молочной железы (Hennessy et al. Nature Reviews, 4: 988-1004 (2005)) . Компания Yamanouchi разработала соединение YM-024, которое в равной степени ингибирует альфа и дельта и является в 8 и 28 раз более селективным для бета и гамма, соответственно (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut., 321: 1-8 (2007)).
PllOp участвует в образовании тромбов (Jackson et al. Nature Med. 11: 507-514 (2005)), а низкомолекулярные ингибиторы, специфичные для этой изоформы, предполагается затем использовать для индикации, включающей нарушения свертываемости (TGX-221: 0,007 мкМ у бета; 14-кратно селективный для дельта и более чем 500-кратно селективный для гамма и альфа (Ito et al. J. Pharm. Exp. Therapeut., 321: 1-8 (2007)).
Было разработано несколько групп селективных по отношению к pllOy соединений в качестве иммуноподавляющих агентов для лечения аутоиммунных заболеваний (Rueckle et al. Nature Reviews, 5: 903-918 (2006)). Следует отметить, что было обнаружено, что AS 605240 является эффективным в модели ревматоидного артрита на мышах (Camps et al. Nature Medicine, 11: 936-943 (2005)) и замедляет начало заболевания в модели системной красной волчанки (Barber et al. Nature Medicine, 11: 933-935 (2005)).
Недавно были описаны также дельта-селективные ингибиторы. Наиболее селективные соединения включают ингибиторы хиназолинон пурина (PIK39 и IC87114). IC87114 ингибирует р1108 в высоко наномолярном диапазоне (трехзначное число) и имеет более чем 100-кратную селективность против pllOa, является 52-кратно
селективным против pllOp, но имеет недостаточную селективность
против pllOy (примерно 8-кратную). Он не обладает активностью
против каких-либо исследованных протеинкиназ (Knight et al.
Cell, 125: 733-747 (2006)) . Используя дельта-селективные
соединения или генетически управляемых мышей (pll08D910A) было
показано, что помимо выполнения ключевой роли в активации В и Т
клеток, дельта также частично участвует в миграции нейтрофилов
и первичном нейтрофильном респираторном бурсте и приводит к
частичному блокированию дегрануляции мастоцитов, опосредованной
антиген-IgE (Condliffe et al. Blood, 106: 1432-1440 (2005); Ali
et al. Nature, 431: 1007-1011 (2002)). Следовательно, рНОб
выступает как важный медиатор многих основных воспалительных
реакций, которые, как известно, также участвуют в аберрантных
воспалительных состояниях, включая, но не ограничиваясь этим,
аутоиммунные заболевания и аллергию. Подкрепляя это замечание,
существует растущее количество данных, подтверждающих мишень
рНОб, полученных из исследований с использованием генетических
инструментов и фармакологических средств. Так, с использованием
дельта-селективного соединения 1С 87114 и мышей pll08D910A, Ali
et al. (Nature, 431: 1007-1011 (2002)) наглядно показано, что
дельта играет критическую роль в мышиной модели аллергического
заболевания. При отсутствии функциональной дельты пассивная
кожная анафилаксия (РСА) существенно снижается, что можно
приписать снижению аллерген-IgE-индуцированной активации и
дегрануляции мастоцитов. Кроме того, ингибирование дельта при
помощи 1С 87114 показало существенное улучшение течения
воспаления и заболевания в мышиной модели астмы с
использованием овальбумин-индуцированного воспаления
дыхательных путей (Lee et al. FASEB, 20: 455-465 (2006). Эти данные, полученные с использованием рассматриваемых соединений, были подтверждены различными группами на мутантных мышах pll08D910A с применением такой же модели аллергического воспаления дыхательных путей (Nashed et al. Eur. J. Immunol. 37: 416-424 (2007)).
Существует необходимость в дальнейшей характеристике
функции PI3K8 в воспалительной и аутоиммунной регуляции. Кроме того, понимание PI3K8 требует дополнительного уточнения структурных взаимодействий рНОб, как с его регуляторной субъединицей, так и с другими белками в клетке. Также остается необходимость в более мощных и селективных или специфических ингибиторах PI3K дельта во избежание потенциальной токсичности, связанной с действием на изозимы pllO альфа (сигналинг инсулина) и бета (активация тромбоцитов). В частности, селективные или специфические ингибиторы PI3K8 необходимы для дальнейшего изучения роли этого изозима в разработке фармацевтических средств лучшего качества в целях модулирования активности этого изозима. Сущность изобретения
В настоящем изобретении представлен новый класс соединений, имеющих общую формулу
которые являются пригодными для ингибирования биологической активности PI3K8 человека. В другом аспекте настоящего изобретения представлены соединения, которые селективно ингибируют PI3K8, в то же время обладая относительно
низкой ингибирующей способностью против других изоформ PI3K. В другом аспекте настоящего изобретения представлены способы характеристики функций PI3K8 человека. В другом аспекте настоящего изобретения представлены способы селективного модулирования активности PI3K8 человека и ускорения таким образом медицинского лечения заболеваний, опосредованных дисфункцией PI3K8. Другие аспекты и преимущества настоящего изобретения легко понятны квалифицированным специалистам в данной области.
Подробное описание изобретения
Один аспект настоящего изобретения относится к соединениям, имеющим структуру:
или любым их фармацевтически приемлемым солям, где
является
(R10)
или
является
(R12)
или
является
или
является
или
является
или
является
или
где
и X6 являются С;
Y является N(R8), О или S; Z является S, О или NR11; п равен 0, 1, 2 или 3;
R1 является связанным напрямую, С^алкил-связанным, OCi-
2алкил-связанным, С1-2алкил0-связанным или О-связанным
насыщенным, частично насыщенным или ненасыщенным 3-, 4-, 5-, б-
или 7-членным моноциклическим или 8-, 9-, 10- или 11-членным
бициклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома,
выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного атома О
или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо
выбранными из галогена, Ci-балкила, СЧ^галогеналкила, циано,
нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -ORa, -
OC(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилШ^а, -
ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa,
-NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa,
N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-
6aлкилNRaRa и -NRaC2-6aлкилORa; где доступные углеродные атомы
кольца дополнительно замещены 0, 1 или 2 оксо- или
тиоксогруппами; и где это кольцо дополнительно замещено 0 или 1
насыщенным 5- или б-членным моноциклическим кольцом, содержащим
1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не
более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3
заместителями, независимо выбранными из галогена, С^алкила, Ci_
4галогеналкила или циано; или R1 является С^алкилом, замещенным
1 или 2 заместителями, выбранными из циано, нитро, -C(=0)Ra, -
C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra,
0C(=0)NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилЖ^а, -ОС2-6алкш^а,
-SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -
S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra,
-N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa,
N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖ^а и -NRaC2-6алкилОКа;
R2 выбран из H, галогена, С^алкила, С^галогеналкила, циано, нитро, 0Ra, NRaRa, -C(=0)Ra, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -
С (=NRa) NRaRa, -S(=0)Ra, -S (=0) 2Ra, -S (=0) 2NRaRa,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa;
R3 выбран из H, галогена, нитро, циано, С^алкила, OCi-4алкила, ОС^галогеналкила, ШС^алкила, N (С^алкил) С^алкила, С1-4галогеналкила, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилт^а, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-6aлкилNRaRa и -NRaC2-6aлкилORa; или R3 является ненасыщенным 5-, б- или 7-членным моноциклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, С^алкила, Ci-згалогеналкила, -OCi-4алкила, -NH2, -ШС^алкила, -N (С^алкил) С^алкила;
R4 в каждом случае независимо является галогеном, нитро, циано, С1-4алкилом, ОС^алкилом, ОС^галогеналкилом, NHCi-4алкилом, N (С1-4алкил) С1-4алкилом или С^галогеналкилом;
R5 в каждом случае независимо является Н, галогеном, Ci_ 6алкилом, С1-4галогеналкилом или Ci-балкилом, замещенным 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, циано, ОН, ОС^алкила, С1-4алкила, Ci-згалогеналкила, ОС^алкила, NH2, ЫНС1-4алкила, N(Ci_ 4алкил) С1-4алкила; или обе группы R5 вместе образуют Сз-6спироалкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, циано, ОН, ОС^алкила, С^алкила, Ci_ згалогеналкила, 0С1-4алкила, NH2, ЫНС1-4алкила, N (С1-4алкил) Ci-4алкила;
R6 является Н, галогеном, NHR9 или ОН;
R7 выбран из Н, галогена, С^галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилЖ^а, -0C2-6aлкилORa, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2
6алкилШ^а, -ЫКаС2-балкилОКа и С^алкила, где Ci-балкил замещен О,
1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, CV
4галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -
С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra,
-ОС2-6алкилШ^а, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra,
S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra,
N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra,
N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖ^а и -ЖаС2-балкилОКа, и Ci-еалкил
дополнительно замещен 0 или 1 насыщенным, частично насыщенным
или ненасыщенным 5-, б- или 7-членным моноциклическим кольцом,
содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но
содержащим не более одного О или S, где доступные углеродные
атомы кольца замещены 0, 1 или 2 оксо- или тиоксогруппами, где
это кольцо замещено 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо
выбранными из галогена, нитро, циано, С^алкила, ОС^алкила,
0С1-4галогеналкила, ШС^алкила, N (С^алкил) С^алкила и Ci_
4галогеналкила; или R7 и R8 вместе образуют мостик -C=N-, где
атом углерода замещен Н, галогеном, циано или насыщенным,
частично насыщенным или ненасыщенным 5-, б- или 7-членным
моноциклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома,
выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного О или S,
где доступные углеродные атомы кольца замещены 0, 1 или 2 оксо-
или тиоксогруппами, где это кольцо замещено 0, 1, 2, 3 или 4
заместителями, выбранными из галогена, С^алкила, Ci_
4галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -
С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra,
-ОС2-6алкилШ^а, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra,
S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra,
N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra,
N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -таС2-6алкилт^а и -ЖаС2-6алкш^а; или R7 и R9 вместе образуют мостик -N=C-, где атом углерода замещен Н, галогеном, Ci-балкилом, С^галогеналкилом, циано, нитро, 0Ra, NRaRa, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -S (=0) Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa;
R является H или Ci-балкилом;
R9 является Н, Ci-балкилом или С^галогеналкилом; R10 является Н, галогеном, Ci-залкилом, Ci-згалогеналкилом или циано;
R11 является Н или С^алкилом; R12 является Н или С^алкилом;
Ra в каждом случае независимо является Н или Rb; и Rb в каждом случае независимо является фенилом, бензилом или Ci-балкилом, фенил, бензил и Ci-балкил замещены 0, 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, С^алкила, CV згалогеналкила, -ОС^алкила, -NH2, -ШС^алкила, -N (С^алкил) Ci-4алкила.
(R4)n
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структурой является
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структурой является
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, X3 является С; X4 является С; X5 является С; и X6 является С.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, X3 является N; X4 является С; X5 является С; и X6 является С.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, X3 является С; X4 является N; X5 является С; и X6 является С.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, X3 является С; X4 является С; X5 является N; и X6 является С.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, X3 является С; X4 является С; X5 является С; и X6 является N.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является связанным напрямую, С^алкил-связанным, OCi-галкил-связанным, Ci-галкилО-связанным или О-связанным насыщенным, частично насыщенным или ненасыщенным 3-, 4-, 5-, б- или 7-членным моноциклическим или 8-, 9-, 10- или 11-членным бициклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, Ci-балкила, СЧ^галогеналкила, циано,
нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -OC(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилт^а, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-6aлкилNRaRa и -NRaC2-6aлкилORa; где доступные углеродные атомы кольца дополнительно замещены 0, 1 или 2 оксо- или тиоксогруппами; и где это кольцо дополнительно замещено 0 или 1 насыщенным 5- или б-членным моноциклическим кольцом, содержащим 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, Ci-балкила, Ci-4галогеналкила или циано.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является связанным напрямую, С^алкил-связанным, 0С1-2алкил-связанным, С1-2алкил0-связанным или О-связанным насыщенным, частично насыщенным или ненасыщенным 3-, 4-, 5-, б- или 7-членным моноциклическим или 8-, 9-, 10- или 11-членным бициклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, С^алкила, С^галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилШ^а, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-6aлкилNRaRa и -NRaC2-6aлкилORa; где доступные углеродные атомы кольца дополнительно замещены 0, 1 или 2 оксо- или тиоксогруппами; и где это кольцо дополнительно замещено насыщенным 5- или б-членным моноциклическим кольцом, содержащим 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3
заместителями, независимо выбранными из галогена, С^алкила, d-4галогеналкила или циано.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является связанным напрямую, С^алкил-связанным, °С1-2алкил-связанным, С1-2алкил0-связанным или О-связанным насыщенным, частично насыщенным или ненасыщенным 3-, 4-, 5-, б- или 7-членным моноциклическим или 8-, 9-, 10- или 11-членным бициклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, Ci-балкила, СЧ^галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -ORa, -OC(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилШ^а, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-6aлкилNRaRa и -NRaC2-6aлкилORa; где доступные углеродные атомы кольца дополнительно замещены 0, 1 или 2 оксо- или тиоксогруппами; и где это кольцо дополнительно замещено фенилом или пиридилом, любой из которых замещен 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, С^алкила, Ci_ 4галогеналкила или циано.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является связанным напрямую фенилом или пиридилом, любой из которых замещен 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, Ci-балкила, С^галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0)Ra, -0C (=0) NRaRa, -0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилт^а, -ОС2-балкил(Жа, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-6алкилЖаКа и -ШаС2-6алкш^а.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения,
R1 является связанным напрямую фенилом или пиридилом, любой из
которых замещен 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными
из галогена, Ci-балкила, СЧ^галогеналкила, циано, нитро,
C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -ORa, -ОС (=0) Ra, -
0C(=0)NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилЖ^а, -ОС2-6алкш^а,
-SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -
S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra,
-N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa,
N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖ^а и -NRaC2-6aлкилORa.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является связанным напрямую фенилом или пиридилом.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является связанным напрямую фенилом или пиридилом, любой из которых замещен 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, -SRa, -S(=0)Ra и -S(=0)2Ra.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения,
R1 является связанным напрямую фенилом или пиридилом, любой из
которых замещен 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными
из галогена, С^алкила, С^галогеналкила, циано, нитро,
C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra, -
0C(=0)NRaRa, -0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилЖ^а, -ОС2-6алкш^а,
-SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -
S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra,
-N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa,
N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖ^а и -NRaC2-6aлкилORa.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является С^алкилом, замещенным 1 или 2 заместителями, выбранными из циано, нитро, -C(=0)Ra, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -
С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra,
-ОС2-6алкилШ^а, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra,
S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra,
N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra,
N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖ^а и -ЖаС2-балкилОКа .
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является С2-4алкилом, замещенным -0Ra.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения,
R1 является связанным напрямую, С^алкил-связанным, ОС^алкил-
связанным, С1-2алкил0-связанным или О-связанным циклопропилом,
замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными
из галогена, С1-6алкила, С^галогеналкила, циано, нитро,
C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra, -
0C(=0)NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилШ^а, -ОС2-балкил(Жа,
-SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -
S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra,
-N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa,
N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖаКа и -ЖаС2-балкилОЯа; где доступные углеродные атомы кольца дополнительно замещены 0, 1 или 2 оксо- или тиоксогруппами; и где это кольцо дополнительно замещено 0 или 1 насыщенным 5- или б-членным моноциклическим кольцом, содержащим 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, Ci-балкила, С^галогеналкила или циано.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является циклопропилом.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является циклопропилметилом.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения,
X1 является N.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, X2 является N.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, X2 является С (R12) .
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, Y является N(R8) .
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения,
R1 является связанным напрямую насыщенным, частично насыщенным
или ненасыщенным 5-, б- или 7-членным моноциклическим или 8-,
9-, 10- или 11-членным бициклическим кольцом, содержащим 0, 1,
2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более
одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями,
независимо выбранными из галогена, С^алкила, С^галогеналкила,
циано, нитро, -C(=0)Ra, -С (=0) ORa, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -
0Ra, -0C(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -0C2-
t^KraiNRaRa, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra,
S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra,
N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra,
N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-e^KraiNRaRa и -NRaC2-e^ra^n0Ra, где доступные углеродные атомы кольца дополнительно замещены 0, 1 или 2 оксо- или тиоксогруппами.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является связанным напрямую ненасыщенным б-членным моноциклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, 0 и S, но содержащим не более одного атома 0 или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, С^алкила, С^галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0)Ra, -0C (=0) NRaRa, -0C (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -0C2-^KraiNRaRa, -
ОС2-балкил(Жа, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa,
-NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa,
N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-
6алкилЖаКа и -ЖаС2-6алкш^а.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является фенилом, пиридилом или пиримидинилом, все из которых замещены 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, Ci-балкила, СЧ^галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилт^а, -ОС2-балкил(Жа, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-6aлкилNRaRa и -ЫКаС2_6алкилОКа.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения,
R1 является фенилом, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями,
независимо выбранными из галогена, С^алкила, С^галогеналкила,
циано, нитро, -C(=0)Ra, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -
0Ra, -0C(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -0C2-
6алкилЖ^а, -ОС2-6алкил(Жа, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra,
S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra,
N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra,
N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖ^а и -ЫКаС2-6алкилОКа.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является фенилом, пиридилом или пиримидинилом, все из которых замещены 1, 2 или 3 заместителями, независимо выбранными из галогена, Ci-балкила и С^галогеналкила.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R1 является фенилом, который замещен 1, 2 или 3 заместителями,
независимо выбранными из галогена, С^алкила и CV 4галогеналкила.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R2 является Н.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R3 выбран из Н и галогена.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения,
R3 выбран из галогена, нитро, циано, С^алкила, ОС^алкила, OCi-
4галогеналкила, ШС^алкила, N (С^алкил) С^алкила, CV
4галогеналкила, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилШ^а, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-6aлкилNRaRa и -ЖаС2-балкилОКа.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R5 в каждом случае независимо является Н, галогеном, С^алкилом и С1-4галогеналкилом.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, один R5 является Н, а другой R5 является Ci-балкилом.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, один R5 является Н, а другой R5 является метилом.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, один R5 является Н, а другой R5 является (R)-метилом.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, один R5 является Н, а другой R5 является (S)-метилом.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R6 является NHR9.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R7 является циано.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с
представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения,
R7 и R8 вместе образуют мостик -C=N-, где атом углерода замещен
Н, галогеном, циано или насыщенным, частично насыщенным или
ненасыщенным 5-, б- или 7-членным моноциклическим кольцом,
содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но
содержащим не более одного О или S, где доступные углеродные
атомы кольца замещены 0, 1 или 2 оксо- или тиоксогруппами, где
это кольцо замещено 0, 1, 2, 3 или 4 заместителями, выбранными
из галогена, С^алкила, С^галогеналкила, циано, нитро,
C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra, -
0C(=0)NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилЖ^а, -ОС2-6алкш^а,
-SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -
S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra,
-N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa,
N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖ^а и -NRaC2-6алкилОЯа.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R7 и R9 вместе образуют мостик -N=C-, где атом углерода замещен Н, галогеном, С^алкилом, С^галогеналкилом, циано, нитро, 0Ra, NRaRa, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -S (=0) Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, R7 и R9 вместе образуют мостик -N=C-, где атом углерода замещен Н или галогеном.
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структура имеет общую формулу:
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структура имеет общую формулу:
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структура имеет общую формулу:
В другом представленными структура имеет
варианте воплощения изобретения, выше и ниже вариантами воплощения общую формулу:
в связи с изобретения,
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структура имеет общую формулу: NH2
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структура имеет общую формулу:
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структура имеет общую формулу:
В другом варианте воплощения изобретения, в связи с представленными выше и ниже вариантами воплощения изобретения, структура имеет общую формулу:
Другой аспект настоящего изобретения относится к способу лечения Р13К-опосредованных состояний или нарушений.
В некоторых вариантах воплощения изобретения PI3K-опосредованное состояние или нарушение выбрано из ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилоартрита, остеоартрита, псориатического артрита, псориаза, воспалительных заболеваний и аутоиммунных заболеваний. В других вариантах воплощения изобретения Р13К-опосредованное состояние или нарушение выбрано из сердечно-сосудистых заболеваний, атеросклероза, гипертензии, тромбоза глубоких вен, приступа, инфаркта миокарда, нестабильной стенокардии, тромбоэмболии, эмболии легочной артерии, тромболитических заболеваний, острой артериальной ишемии, периферийной тромботической окклюзии и заболевания коронарной артерии. В других вариантах воплощения изобретения Р13К-опосредованное состояние или нарушение выбрано из рака,
рака толстой кишки, глиобластомы, карциномы эндометрия, гепатоцеллюлярного рака, рака легких, меланомы, почечно-клеточной карциномы, карциномы щитовидной железы, клеточной лимфомы, лимфопролиферативных нарушений, мелкоклеточного рака легких, плоскоклеточной карциномы легких, глиомы, рака молочной железы, рака предстательной железы, рака яичников, рака шейки матки и лейкемии. В других вариантах воплощения изобретения Р13К-опосредованное состояние или нарушение выбрано из диабетов II типа. В других вариантах воплощения изобретения PI3K-опосредованное состояние или нарушение выбрано из респираторных заболеваний, бронхита, астмы и хронической обструктивной болезни легких. В некоторых вариантах воплощения изобретения пациентом является человек.
Другой аспект настоящего изобретения относится к лечению ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилоартрита, остеоартрита, псориатического артрита, псориаза, воспалительных заболеваний или аутоиммунных заболеваний, включающему стадию введения соединения по любому из представленных выше вариантов воплощения изобретения.
Другой аспект настоящего изобретения относится к лечению
ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилоартрита,
остеоартрита, псориатического артрита, псориаза, воспалительных
заболеваний и аутоиммунных заболеваний, воспалительных
заболеваний кишечника, воспалительных глазных болезней,
воспалительных заболеваний мочевого пузыря или нестабильного
мочевого пузыря, жалоб на кожные болезни с воспалительной
составляющей, хронических воспалительных состояний,
аутоиммунных заболеваний, системной красной волчанки (SLE),
миастении гравис, ревматоидного артрита, острого рассеянного
энцефаломиелита, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры,
рассеянного склероза, синдрома Шегрена и аутоиммунной
гемолитической анемии, аллергических состояний и
гиперчувствительности, включающему стадию введения соединения по любому из представленных выше или ниже вариантов воплощения изобретения.
Другой аспект настоящего изобретения относится к лечению
рака, опосредованного, зависящего или связанного с активностью рНОб, включающему стадию введения соединения по любому из представленных выше или ниже вариантов воплощения изобретения.
Другой аспект настоящего изобретения относится к лечению
рака, выбранного из острого миелоидного лейкоза,
миелодиспластического синдрома, миелопролиферативных
заболеваний, хронического миелоидного лейкоза, острого лимфобластного лейкоза Т-клеток, острого лимфобластного лейкоза В-клеток, неходжкинской лимфомы, лимфомы В-клеток, твердых опухолей и рака молочной железы, включающему стадию введения соединения по любому из представленных выше или ниже вариантов воплощения изобретения.
Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, включающей соединение по любому из представленных выше вариантов воплощения изобретения и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения по любому из представленных выше вариантов воплощения изобретения в качестве лекарственного средства.
Другой аспект настоящего изобретения относится к применению соединения по любому из представленных выше вариантов воплощения изобретения в производстве лекарственных средств для лечения ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилоартрита, остеоартрита, псориатического артрита, псориаза, воспалительных заболеваний и аутоиммунных заболеваний.
Соединения настоящего изобретения могут иметь, в общем, несколько центров асимметрии, и они обычно изображаются в форме рацемических смесей. Настоящее изобретение охватывает рацемические смеси, частично рацемические смеси и отдельные энантиомеры и диастереомеры.
Если не указано иное, то к терминам, содержащимся в описании и формуле изобретения, применяются следующие обозначения:
"Са-ралкил" обозначает алкиловую группу, включающую не менее а и не более р углеродных атомов в разветвленной, циклической или линейной связи, или любой комбинации из этих трех, где аир представляют целые числа. Алкиловая группа, описанная в этом разделе, также может содержать одну или две двойные или тройные связи. Примеры Ci-балкилов включают, но не ограничиваясь этим, следующие:
"Бензогруппа", отдельно или в комбинации, обозначает
двухвалентный радикал С4Щ=, одним из примеров которого является
-СН=СН-СН=СН-, который при виниловом присоединении к другому
кольцу образует бензол-подобное кольцо, например,
тетрагидронафталин, индол и тому подобные.
Термины "оксо" и "тиоксо" представляют группы =0 (как в карбониле) и =S (как в тиокарбониле), соответственно.
"Галоген" обозначает атомы галогена, выбранные из F, С1, Вг и I.
"Су^галогеналкил" обозначает алкиловую группу, как описано выше, в которой любое количество, но не менее одного, атомов водорода, присоединенных к алкиловой цепи, заменено F, CI, Вг или I.
"Гетероцикл" обозначает кольцо, включающее по меньшей мере один углеродный атом и по меньшей мере один атом, выбранный из N, О и S. Примеры гетероциклов, которые могут встречаться в формуле изобретения, включают, но не ограничиваясь этим, следующие:
б б б &60Јr°CfCf
о о о о о ow
N O
"Доступные атомы азота" являются такими атомами азотами, которые являются частью гетероцикла и которые соединены двумя одинарными связями (например, пиперидин), оставляя внешнюю связь доступной для замещения, например, Н или СН3.
"Фармацевтически приемлемая соль" обозначает соль, полученную обычными средствами, хорошо известными специалистам в данной области. "Фармакологически приемлемые соли" содержат основные соли неорганических и органических кислот, включая, но не ограничиваясь этим, хлороводородную кислоту, бромоводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, метансульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, яблочную кислоту, уксусную кислоту, щавелевую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, молочную кислоту, фумаровую кислоту, янтарную кислоту, малеиновую кислоту, салициловую кислоту, бензойную кислоту, фенилуксусную кислоту, миндальную кислоту и тому подобное. Если соединения настоящего изобретения включают кислотную функциональную группу, такую как карбоксигруппа, то соответствующие фармацевтически приемлемые катионные пары для
карбоксигруппы хорошо известны специалистам в данной области и включают щелочные, щелочноземельные, аммониевые, четвертичные аммониевые катионы и тому подобное. Дополнительные примеры "фармакологически приемлемых солей" представлены ниже и в публикации Berge et al., J. Pharm. Sci. 66: 1 (1977).
"Насыщенный, частично насыщенный или ненасыщенный" включает заместители, насыщенные водородом, заместители, полностью ненасыщенные водородом, и заместители, частично насыщенные водородом.
"Уходящая группа", в общем, относится к группам, легко
замещаемым нуклеофилами, такими как аминный, тиоловый или
спиртовой нуклеофил. Такие уходящие группы хорошо известны в
данной области. Примеры таких уходящих групп включают, но не
ограничиваются этим, N-гидроксисукцинимид, N-
гидроксибензотриазол, галогениды, трифлаты, тозилаты и тому подобное. В настоящем документе указаны предпочтительные уходящие группы, где это уместно.
"Защитная группа" обычно относится к группам, хорошо
известным в данной области, которые используются для
предотвращения участия выбранных химически активных групп,
таких как карбокси, амино, гидрокси, меркапто и тому подобных,
в нежелательных реакциях, таких как нуклеофильные,
электрофильные, окисление, восстановление и тому подобные. В
настоящем документе указаны предпочтительные защитные группы,
где это уместно. Примеры защитных групп для аминогрупп
включают, но не ограничиваясь этим, аралкил, замещенный
аралкил, циклоалкенилалкил и замещенный циклоалкенилалкил,
аллил, замещенный аллил, ацил, алкоксикарбонил,
аралкоксикарбонил, силил и тому подобные. Примеры аралкила включают, но не ограничиваясь этим, бензил, орто-метилбензил, тритил и бензгидрил, которые могут быть необязательно замещены галогеном, алкилом, алкокси, гидрокси, нитро, ациламино, ацилом и тому подобным, а также солями, такими как соли фосфония и аммония. Примеры ариловых групп включают фенил, нафтил, инданил, антраценил, 9-(9-фенилфлуоренил), фенантренил, дуренил и тому подобные. Примеры циклоалкенилалкилового или замещенного
циклоалкенилалкилового радикалов, предпочтительно имеющих 6-10 углеродных атомов, включают, но не ограничиваясь этим, циклогексенилметил и тому подобные. Пригодные ациловые, алкоксикарбониловые и аралкоксикарбониловые группы включают бензилоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, изобутоксикарбонил, бензоил, замещенный бензоил, бутирил, ацетил, трифторацетил, трихлорацетил, фталоил и тому подобные. Может использоваться смесь защитных групп для защиты одних и тех же аминогрупп, как, например, первичная аминогруппа может быть защищена как аралкиловой группой, так и аралкоксикарбониловой группой. Защитные группы для аминогрупп также могут образовывать гетероциклическое кольцо с азотом, к которому они присоединены, например, 1,2-бис(метилен)бензол, фталимидил, сукцинимидил, малеимидил и тому подобное, и где эти гетероциклические группы могут дополнительно включать соседнее ариловое или циклоалкиловое кольцо. Кроме того, гетероциклические группы могут быть моно-, ди- или тризамещенными, такими как нитрофталимидил. Аминогруппы также могут быть защищены против нежелательных реакций, таких как окисление, за счет образования соли присоединения, такой как гидрохлорид, толуолсульфоновая кислота, трифторуксусная кислота и тому подобное. Многие из защитных групп для аминогрупп также являются пригодными для защиты карбокси, гидрокси и меркаптогрупп. Например, аралкиловые группы. Алкиловые группы также являются пригодными группами для защиты гидрокси и меркаптогрупп, такие как трет-бутил.
Защитными группами для силиловых групп являются атомы
кремния, необязательно замещенные алкиловыми, ариловыми и
аралкиловыми группами. Пригодные группы для защиты силиловых
групп включают, но не ограничиваясь этим, триметилсилил,
триэтилсилил, триизопропилсилил, трет-бутилдиметилсилил,
диметилфенилсилил, 1, 2-бис(диметилсилил)бензол, 1,2-
бис(диметилсилил)этан и дифенилметилсилил. Силилирование аминогрупп дает моно- или дисилиламиногруппы. Силилирование аминоспиртовых соединений может дать N,N,О-трисилиловое производное. Удаление силиловой функциональной группы из
функциональной группы простого силилового эфира легко выполняется обработкой, например, реактивом гидроксида металла или фторида аммония, как по отдельным стадиям реакции, так и in situ в ходе реакции со спиртовой группой. Пригодными силилирующими агентами являются, например, триметилсилил хлорид, трет-бутил-диметилсилилхлорид, фенилдиметилсилилхлорид, дифенилметилсилилхлорид или продукты их комбинирования с имидазолом или ДМФ. Способы силилирования аминов и удаления защитных групп у силиловых групп хорошо известны специалистам в данной области. Способы получения этих аминных производных из соответствующих аминокислот, амидов аминокислот или сложных эфиров аминокислот также хорошо известны специалистам в области органической химии, включая химию аминокислот/сложных эфиров аминокислот или аминоспиртов.
Защитные группы снимаются в условиях, которые не влияют на остальную часть молекулы. Эти способы хорошо известны в данной области и включают кислотный гидролиз, гидрогенолиз и тому подобное. Предпочтительный способ включает снятие защитной группы, такое как снятие бензилоксикарбониловой группы гидрогенолизом с использованием палладия на углероде в соответствующей системе растворителей, такой как спирт, уксусная кислота и тому подобное или их смеси. Трет-бутоксикарбониловая защитная группа может быть снята с использованием неорганической или органической кислоты, такой как НС1 или трифторуксусная кислота, в соответствующей системе растворителей, такой как диоксан или метиленхлорид. Полученная аминосоль может быть легко нейтрализована для получения свободного амина. Защитная группа для карбоксигрупп, такая как метил, этил, бензил, трет-бутил, 4-метоксифенилметил и тому подобное, может быть снята в условиях гидролиза и гидрогенолиза, хорошо известных специалистам в данной области.
Следует отметить, что соединения настоящего изобретения могут содержать группы, которые могут существовать в таутомерных формах, таких как циклические и ациклические амидиновые и гуанидиновые группы, гетероариловые группы, замещенные гетероатомом (Y'=0, S, NR.), и подобных, которые
II" =S== I NHR' ^NHR" R"4R" RHN^NR"
J 4
иллюстрируются следующими примерами: NR' NHR
NR' " _^ Л> NHR1 ^NHR" RN^^NHR"
ОН О 0 0 О OH
R' R R' R
и хотя в настоящем документе называется, описывается, изображается и/или заявляется одна форма, предполагается, что все таутомерные формы, по сути, включены в это название, описание, изображение и/или формулу изобретения.
В настоящем изобретении также рассматриваются пролекарства
соединений настоящего изобретения. Пролекарство является
активным или неактивным соединением, которое химически
модифицируется за счет физиологического действия in vivo,
такого как гидролиз, метаболизм и тому подобное, в соединение
настоящего изобретения после введения пролекарства пациенту.
Соответствие и способы получения и применения пролекарств
хорошо известны специалистам в данной области. Полное
исследование пролекарств, включающих сложные эфиры,
представлено в книгах Svensson and Tunek Drug Metabolism
Reviews 165 (1988) и Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier
(1985). Примеры замаскированных карбоксилат-анионов включают
различные сложные эфиры, такие как алкиловые (например,
метиловые, этиловые), циклоалкиловые (например,
циклогексиловые), аралкиловые (например, бензиловые, п-
метоксибензиловые) и алкилкарбонилоксиалкиловые (например,
пивалоилоксиметиловые). Амины маскируются как
арилкарбонилоксиметил-замещенные производные, которые
расщепляются эстеразами in vivo, выделяя свободное
лекарственное средство и формальдегид (Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989)). Также лекарственные средства, содержащие кислотную NH группу, такую как имидазол, имид, индол и тому подобное, маскируются N-ацилоксиметиловыми группами (Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985)). Гидроксильные группы маскируются как сложные и простые эфиры. В ЕР 039051 (Sloan and Little, 4/11/81) описаны пролекарства гидроксамовых кислот оснований Манниха, их получение и применение.
Описание и формула изобретения содержат перечень частиц, с использованием выражения "выбран из ... и ..." и "является . . . или ..." (иногда упоминаются как группы Маркуша). При использовании этого выражения в настоящей заявке, если не указано иное, оно включает эту группу в целом или любого из ее отдельных членов, или любую ее подгруппу. Это выражение используется только в целях краткости и никоим образом не обозначает ограничение удаления отдельных элементов или подгрупп, при необходимости.
Настоящее изобретение включает также меченные изотопом соединения, являющиеся идентичными перечисленным в настоящем документе, за исключением того, что один или более атомов замещены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, которые могут внедряться в соединения настоящего изобретения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как 2Н, 3Н, 13С, 14С, 15N, 160, 170, 31Р, 32Р, 35S, 18F и 36С1.
Настоящим изобретением охвачены соединения настоящего изобретения, содержащие вышеупомянутые изотопы и/или другие изотопы других атомов. Некоторые меченные изотопами соединения настоящего изобретения, например, те, в которые внедрены радиоактивные изотопы, такие как 3Н и 14С, используются для анализа распределения лекарственного средства и/или субстрата в тканях. Изотопы трития, то есть, 3Н, и углерода-14, то есть, 14С, являются наиболее предпочтительными, благодаря простоте получения и обнаружения. Кроме того, замена на более тяжелые
изотопы, такие как дейтерий, то есть 2Н, может давать определенное терапевтическое преимущество из-за более высокой метаболической устойчивости, например, увеличенного периода полувыведения in vivo или снижения необходимых дозировок, и поэтому это может быть более выгодно в некоторых условиях. Соединения настоящего изобретения, меченные изотопами, могут, как правило, быть получены замещением легкодоступных меченных изотопами реагентов на реагенты, не меченные изотопами.
Экспериментальная часть
Используются следующие аббревиатуры:
АсОН - ледяная уксусная кислота
aq. - водный
BINAP - 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтил
конц. - концентрированный
ДХМ - дихлорметан
DIEA - N,N-диизопропилэтиламин
ДМФ - N,N-диметилформамид
ДМС - диметилсульфид
EDC -НС1 N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимид
гидрохлорид
экв. - эквивалент
Et20 - диэтиловый эфир
EtOAc - этилацетат
EtOH - этиловый спирт
ч - час(ы)
мин - минуты
MeОН - метиловый спирт
MsCl - метансульфонил хлорид
NaOAc - ацетат натрия
rt - комнатная температура
насыщ. - насыщенный
ТФК - трифторуксусная кислота
ТГФ - тетрагидрофуран
Общая информация
Реактивы и растворители, используемые ниже, могут быть приобретены из коммерческих источников. Спектры 1Н ЯМР были
записаны на ЯМР спектрометре Bruker 400 МГц и 500 МГц. Существенные пики табулированы в следующем порядке: мультиплетность (с, синглет; д, дублет; т, триплет; к, квартет; м, мультиплет; уш.с, уширенный синглет), константа(ы) взаимодействия в герцах (Гц), и количество протонов. Результаты масс-спектрометрии записаны как отношение массы к заряду, с последующей относительной распространенностью каждого иона (в скобках масс-спектрометрический анализ с электрораспылительной ионизацией (ESI) был выполнен на ЖХ/МС электрораспылительном масс-спектрометре Agilent серии 1100) . Все соединения можно проанализировать в положительном режиме ESI с использованием ацетонитрила:воды с 0,1% муравьиной кислоты в качестве растворителя доставки. Обращенно-фазовую аналитическую ВЭЖХ выполнили с использованием прибора Agilent серии 1200 на колонке Agilent Eclipse XDB-C18 5 мкм (4,6x150 мм) в качестве неподвижной фазы и элюируя ацетонитрилом:водой с 0,1% ТФК. Обращенно-фазовую полупрепаративную ВЭЖХ выполнили с использованием прибора Agilent серии 1100 на С18 колонке Phenomenex Gemini(tm) 10 мкм (250x21,20 мм) в качестве неподвижной фазы и элюируя ацетонитрилом:водой с 0,1% ТФК. Полупрепаративную хроматографию со сверхкритической подвижной фазой (SFC) выполнили с использованием прибора Thar 350 SFC с колонкой Daicel(tm) AD-H (250x30 мм) в качестве неподвижной фазы и элюируя метанолом (20 мМ NH3) : С02 в качестве подвижной фазы. Общие способы
Получение (S)-бензил 4-бром-3-оксобутан-2-илкарбамата (А) О О
hoV B'-V
NHCbz NHCbz
К раствору N-{ (бензилокси)карбонил} L-аланина (20 г, 89,64 ммоль) в ТГФ (400 мл) при -20°С добавили NMM (13,5 г, 133,2 ммоль), а затем изобутил хлорформиат (14,6 г, 107 ммоль). После перемешивания в течение 1,5 часов при -20°С эту смесь отфильтровали при охлаждении, а фильтрат обработали избытком свежеприготовленного раствора flna3OMeTaH/Et20 (полученного из
30,0 г N-метил нитрозомочевины, 200 мл 40% КОН/100 мл Et20) при перемешивании до сохранения желтого цвета. Смесь оставили нагреваться до 0°С, а затем раствор нагрели до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа, повторно охладили до 0°С и обрабатывали раствором НВг (45% водный)/АсОН (1/1 (об./об.), 50 мл) в течение 30 минут, реакцию контролировали по ТСХ, после завершения реакции реакционную массу разбавили EtOAc (500 мл) и водой (200 мл). Органическую фазу отделили, промыли водой, высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией на силикагеле, используя гексаны/EtOAc (2:1) в качестве элюента, для получения заданного продукта, (S)-бензил 4-бром-З-оксобутан-2-илкарбамата: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-сУ : 5 7, 35-7, 38 (м, 5Н) , 5 5,4 (уш.с, 1Н) , 5 5,0-5,1 (с, 2Н) , 5 4,6-4,7 (кв, 1Н), 5 4,01-4,09 (кв, 2Н), 5 1,41-1,43 (д, ЗН); ЖХ-МС (ESI) m/z 300, 11 [М+Н (79Вг)]+и 302, 12 [М+Н (81Вг)] + .
Получение 4-амино-6-хлор-5-пиримидинкарбонитрила (В)
ОН CI CI
чАон vA, vA,
CI NH2
VA, VA,
4,6-Дихлор-5-пиримидинкарбальдегид CI
СНО
Смесь ДМФ (64 мл) и РОС1з (200 мл) при 0°С перемешивали в течение 1 часа, обработали 4,б-пиримидиндиолом (50,0 г, 446 ммоль) и перемешивали в течение 0,5 часа при комнатной температуре, а затем нагревали с дефлегматором в течение 3 часов. Летучие вещества удалили при пониженном давлении, а остаток вылили в ледяную воду и шесть раз экстрагировали Et20. Органическую фазу промыли насыщенным водным раствором ЫаНСОз и водой, высушили над Na2S04, концентрировали и кристаллизовали
(EtOAc-петролейный
эфир)
для
получения
4,б-дихлор-5-
пиримидинкарбальдегида; ЖХ-МС (ESI) m/z 177 [М+Н]
Смесь 4, б-дихлор-5-пиримидинкарбальдегида (8,00 г, 44,8 ммоль), NaOAc (3,7 г, 1,0 экв.) и NH2OH.HCl (3,1 г, 1,0 экв.) в EtOH (32 0 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь отфильтровали, концентрировали и очистили колоночной хроматографией на силикагеле (сухая загрузка, сначала ДХМ, затем ДХМ/EtOAc, 1/9) для получения 4,6-дихлор-5-пиримидинкарбальдегид оксима в виде твердого белого вещества.
4,6-Дихлор-5-пиримидинкарбонитрил
4,б-Дихлор-5-пиримидинкарбальдегид оксим (8 г) растворили
в СНС1з (40 мл) и обрабатывали SOCI2 (б мл) в течение 2 часов
при комнатной температуре. Растворитель удалили, а остаток
растирали с ДХМ (5 мл) для получения твердого белого вещества,
которое затем отфильтровали и промыли ДХМ (5 мл). Фильтрат
концентрировали при пониженном давлении и очистили колоночной
хроматографией на силикагеле (сухая загрузка, ДХМ/гексан, 3/1)
для получения твердого белого вещества. Две партии твердого
вещества объединили для получения 4,б-дихлор-5-
пиримидинкарбонитрила.
Твердое белое вещество, 4, б-дихлор-5-пиримидинкарбонитрил (5,82 г, 33,5 ммоль) растворили в ТГФ (бб,9 мл) в 500 мл
4-Амино-6-хлор-5-пиримидинкарбонитрил (В)
круглодонной колбе и продували газообразный аммоний (0,57 0 г, 33,5 ммоль) 3 минуты каждые 10 минут в течение 50 минут при перемешивании. Образовался белый осадок (хлорид аммония). Осадок отфильтровали и промыли ТГФ (100 мл) . К фильтрату добавили силикагель и концентрировали при пониженном давлении. Смесь очистили колоночной хроматографией на 12 0 г колонке Redi-Sep, используя градиент от 0 до 100% EtOAc в гексане в течение 27 минут, а затем 100% изократический состав EtOAc в гексане в течение 2 0 минут в качестве элюента, для получения 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила в виде не совсем белого твердого вещества. Грязновато-белое твердое вещество суспендировали в EtOAc-гексане (1:1, 20 мл), отфильтровали, промыли EtOAc-гексаном (1:1, 3 0 мл) и высушили для получения 4-амино-б-хлор-5-пиримидинкарбонитрила (В) в виде твердого белого вещества: 1Н
ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,91-8,77 (ЗН, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 154,9 [М+Н]+.
Общий способ С для аналогов имидазопиридина
NHCbz
CbzHN
HpN
' 3 Стадия C1 C-1
^-N ^ Стадия C2 ^ R3
C-2
NHCbz N
NHo
В N' "NH
Стадия C4
Ri N\=^-o Стадия С5
С-4
С-5
С-6
Стадия С1. Синтез С-2. Смесь (S)-бензил 4-бром-З-оксобутан-2-илкарбамата (23,32 ммоль) и С-1 (23,32 ммоль) в EtOH нагревали с дефлегматором в течение ночи. После завершения
реакции смесь охладили до комнатной температуры. EtOH удалили при пониженном давлении, а остаток растворили в EtOAc. Органический слой промыли насыщенным водным раствором NaHC03, высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле (100-200 меш), используя градиент от 0 до 8% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для получения С-2.
Стадия С2. Синтез С-3. К раствору С-2 (12,11 ммоль) в ацетонитриле добавили N-йодсукцинимид (12,11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции по ТСХ смесь разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли насыщенным водным раствором ЫаНСОз, высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали. Полученный неочищенный остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле (100-200 меш), используя градиент от 0 до 50% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения С-3 в виде твердого вещества.
Стадия СЗа. Связывание Стилле. Синтез С-4. Смесь С-3 (1 экв.), реагента олова (1,2 экв.) и Pd(PPh3)4 (1,0 экв.) в 1,4-диоксане перемешивали при 110°С в течение ночи. После завершения реакции по ТСХ реакционную смесь охладили до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении для получения коричневатой жидкости. Коричневатую жидкость очистили с использованием Biotage Companion(tm) с 100 г силикагелевой колонкой и элюируя градиентом от 0 до 4 0% EtOAc в гексане для получения С-4 в виде твердого вещества.
Стадия СЗЬ. Реакция Сузуки. Синтез С-4. Смесь бороновой кислоты (0,854 ммоль), С-3 (0,569 ммоль), Pd(Ph3P)4 (0,028 ммоль) и ИагСОз (1,138 ммоль) в ацетонитриле-воде (3:1) нагревали при 100°С в течение 2 часов. Реакционную смесь разделили между водой и EtOAc. Органический слой отделили, высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали. Остаток растворили в ДХМ и загрузили на силикагелевый картридж. Соединение очистили колоночной хроматографией на 12 г колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от 0 до 70% EtOAc в гексане в качестве элюента. Заданные фракции объединили и концентрировали
для получения вязкого остатка янтарного цвета, С-4. Стадия С4. Синтез С-5
Смесь С-4 (1,16 ммоль) и ДМС (0,4 мл в ТФК (1,6 мл)) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции, согласно ТСХ, смесь концентрировали в вакууме, растворили в EtOAc (100 мл) и промыли насыщенным водным раствором ЫаНСОз, Органический слой высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали для получения неочищенного продукта С-6, который использовали в неочищенном виде, без очистки, на следующей стадии.
Стадия С5. Синтез С-6
Смесь 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (В) (1,0 экв.), С-5 (1,0 экв.) и DIEA (3,0 экв.) в н-бутаноле перемешивали при 110°С в течение ночи. Реакцию контролировали по ТСХ, после завершения реакции реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для получения С-6.
Общий способ D для аналогов бензимидазола
02N
Стадия D2
D-1
12IN
H2N HN х
R; \=NR3 Стадия D3
D-3
D-2
NHBoc
тлА Стадия 04
4 R3 D-4
NH2
NHAc (илиВос)
D-5
N NH
NH2
Стадия D5a
D-6
с использованием ТФК NH2
с использованием HCI R^ \ у/
R3 Стадия D5b 1 ' R3
^N NH
Стадия D6
NH2 к,
R1 \=> C
D-7
D-7R
D-7S
Стадия Dl. Синтез D-2. Смесь D-1 (16,02 ммоль) и замещенного анилина (16,02 ммоль) перемешивали при 130°С. Через 92 часа смесь охладили до комнатной температуры, образовалось твердое черное вещество. Смесь, содержащую твердое черное вещество, растворили в ДХМ (50 мл) и промыли насыщенным водным раствором ЫаНСОз (30 мл * 1) . Органический слой высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Смесь очистили колоночной хроматографией на 12 0 г колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от 0 до 50% EtOAc в гексане за 27 минут, а затем 50% изократический состав EtOAc в гексане за 27 минут в качестве элюента, для получения D-2.
Стадия D2. Синтез D-3. Смесь D-2 (2,80 ммоль) и хлорида олова (II) дигидрата (14,00 ммоль) в EtOAc (18,67 мл) нагревали с дефлегматором при перемешивании. Через 5 часов смесь охладили до комнатной температуры и вылили в ЮМ водный раствор NaOH
(50 мл) . Смесь экстрагировали EtOAc (50 мл * 2) . Объединенные органические слои промыли водой (50 мл * 2) и насыщенным солевым раствором (50 мл * 1), высушили над МдгБО,}, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на 4 0 г колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от 0 до 20% EtOAc в гексане за 14 минут, а затем 20% изократический состав EtOAc в гексане за 14 минут в качестве элюента, для получения D-3.
Стадия D3. Синтез D-4 . К охлажденному до -10°С раствору
(NaCl-ледяная баня) Boc-L-Ala-OH (0,965 г, 5,10 ммоль) и N-метилморфолина (0,589 мл, 5,35 ммоль) в ДХМ (12,75 мл) добавили изобутил хлорформиат (0,667 мл, 5,10 ммоль). Полученную мутную бесцветную смесь перемешивали при -10°С. Через 1 час к смеси добавили раствор D-3 (2,55 ммоль) в ДХМ (12,75 мл) . Полученную смесь перемешивали при -10°С в течение 4 0 минут, затем оставили нагреваться до комнатной температуры. Через 24 часа к смеси добавили насыщенный водный раствор NH4C1 (50 мл) и отделили органический слой. Водную смесь экстрагировали ДХМ (50 мл * 1) . Объединенные органические слои высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения розового твердого вещества. Розовое твердое вещество очистили колоночной хроматографией на 40 г колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от 0 до 20% EtOAc в гексане за 14 минут, а затем изократический состав EtOAc в гексане за 14 минут, затем градиент от 20 до 50% EtOAc в гексане за 14 минут, а затем 50% изократический состав EtOAc в гексане за 14 минут в качестве элюента, для получения D-4.
Стадия D4. Синтез D-5a или D-5b. Раствор D-4 (2,4 85 ммоль) в АсОН (8,28 мл) нагревали при 100°С при перемешивании. Через 92 часа смесь охладили до комнатной температуры и вылили в ДХМ
(50 мл) и насыщенный водный раствор ЫаНСОз (50 мл). Водный слой отделили. Органический слой промыли насыщенным водным раствором ЫаНСОз (50 мл * 1), промыли водой (50 мл * 1) и насыщенным солевым раствором (50 мл * 1), высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения D-5a или D-5b. Во время циклизации произошла
эпимеризация, Вос-защитная группа расщепилась, и свободный амин повторно защитили ацетиловой группой в ходе реакции для получения D-5b.
Стадия D5a. Синтез D-6. Раствор D-5a (2,117 ммоль) и 2 н. НС1 (16,94 мл, 33,9 ммоль) нагревали при 100°С. Через 22 часа смесь охладили до комнатной температуры. Кислотно-водную смесь промыли ДХМ (30 мл х 2) для удаления органических примесей, а затем подщелачивали до ~рН 10 при помощи 10 н. NaOH (3,5 мл), экстрагировали ДХМ (50 мл * 3) . Объединенные органические слои промыли водой (100 мл х 1), насыщенным солевым раствором (100 мл х 1) и высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения D-6. Неочищенный продукт D-6 использовали без очистки на следующей стадии.
Стадия D5b. Синтез D-6. К смеси D-5b (1, 58 9 ммоль) в ДХМ (10,59 мл) по каплям добавили ТФК (138 ммоль) при комнатной температуре при перемешивании. Реакционная смесь стала прозрачной, и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часов. Затем смесь концентрировали при пониженном давлении для получения желтого сиропообразного вещества. Сиропообразное вещество растворили в ДХМ (50 мл), промыли насыщенным водным раствором ЫаНСОз (50 мл х 1), водой (50 мл х 1), насыщенным солевым раствором (50 мл х 1), высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения D-6. Неочищенный продукт D-6 использовали без очистки на следующей стадии.
Стадия D6. Синтез D-7. Смесь 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (В) (0,257 г, 1,662 ммоль), D-6 (1,662 ммоль) и DIEA (0, 868 мл, 4,99 ммоль) в н-бутаноле (16,62 мл) перемешивали при 120°С. Через 24 часа нагрев прекратили и оставили смесь при комнатной температуре. После охлаждения смесь концентрировали при пониженном давлении для получения твердого коричневого вещества, которое суспендировали и воде (50 мл), обработали ультразвуком, отфильтровали и промыли водой (100 мл) для получения светло-коричневого твердого вещества. Светло-коричневое твердое вещество суспендировали в EtOAc-гексане (1:4, 20 мл), отфильтровали, промыли EtOAc-гексаном
(1:4, 20 мл) и высушили для получения D-7 в виде рацемической смеси.
Пример 1: Получение 4-амино-6-((1-(6-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила, 4-амино-6-(((1R)-1-(6-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
5-Фтор-Ы-(3-(метилсульфонил)фенил)-2-нитроанилин 02N
S02Me
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D с
использованием 2,4-дифторнитробензола (0,571 мл, 5,20 ммоль) и 3-(метилсульфонил)анилина (0,891 г, 5,20 ммоль) для получения 5-фтор-Ы-(3-(метилсульфонил)фенил)-2-нитроанилина в виде ярко-желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 9,65 (1Н, с), 8,25 (1Н, дд, J=9,6, 6,1 Гц), 7, 85-7, 89 (1Н, м) , 7,647,75 (ЗН, м) , 6,98 (1Н, дд, J=ll,4, 2,6 Гц), 6, 79-6, 87 (1Н, м) , 3,24 (ЗН, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 311,0 [М+Н]+.
5-Фтор-Ы1-(3-(метилсульфонил)фенил)бензол-1,2-диамин H,N
S02Me
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с
использованием 5-фтор-Ы-(3-(метилсульфонил)фенил)-2-
нитроанилина (0,805 г, 2,59 ммоль) для получения 5-фтор-Ы1-(3-
(метилсульфонил)фенил)бензол-1,2-диамина в виде бесцветного сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 7,82
(1Н, с), 7, 36-7, 43 (1Н, м) , 7,18-7,25 (2Н, м) , 7,01 (1Н, ддд,
J=8,2, 2,2, 1,1 Гц), 6, 83-6, 89 (1H, м) , 6,71-6,79 (2H, м) , 4,71 (2Н, с), 3,14 (ЗН, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 281,0 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(4-фтор-2-(3-
(метилсульфонил)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-
илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 5-фтор-Ы1-(3-(метилсульфонил)фенил)бензол-1, 2-диамина для получения (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(3-(метилсульфонил)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде твердого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 9,40 (1Н, с), 7,86 (1Н, с), 7,48 (2Н, кв, J=8,0 Гц), 7,40 (1Н, уш.с), 7,35 (1Н, д, J=7,3 Гц), 7,23 (1Н, д, J=7,8 Гц), 7,13 (1Н, д, J=6,4 Гц), 7,09 (1Н, дд, J=10,5, 2,7 Гц), 6,87 (1Н, тд, J=8,2, 1,5 Гц), 4,05-4,11 (1Н, м), 3,16 (ЗН, с), 1,35 (9Н, с), 1,16-1,21 (ЗН, м) ; ЖХ-МС (ESI) положительный режим m/z 452,1 [М+Н]+и отрицательный режим m/z 450,1 [М-Н]~.
N-(1-(6-Фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамид
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(3-
(метилсульфонил)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (0,9788 г, 2,168 ммоль) для получения N-(1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2
ил)этил)ацетамида в виде розового твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 8,40 (1Н, д, J=8,0 Гц), 8,07-8,14 (1Н, м), 8,04 (1Н, уш.с), 7,89 (2Н, д, J=4,5 Гц), 7,75 (1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7,15 (1Н, ддд, J=9, 9, 8,9, 2,5 Гц), 7,01 (1Н, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 4,98-5,13 (1Н, м) , 3,32 (ЗН, с), 1,59 (ЗН, с), 1,45 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 376, 0 [М+Н] + . Во время циклизации произошла эпимеризация.
1-(6-Фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[с1]имидазол-2-ил)этанамин
NH2 S02Me
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием (S)-N- (1- (б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил) -1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,6713 г, 1,788 ммоль)
для получения 1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде твердого белого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,16-8,20 (1Н, м) , 8,09-8,15 (1Н, м) , 7, 97-8, 03 (1Н, м) , 7, 89-7, 95 (1Н, м) , 7,71
(1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7,12 (1Н, ддд, J=10,0, 8,8, 2,5 Гц), 7,01 (1Н, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 3,96 (1Н, кв, J=6,7 Гц), 3,35
(ЗН, с), 1,95 (2Н, уш.с), 1,36 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 334,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-((-1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием
(S)-(1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,2992 г, 0,897 ммоль) для получения 4-амино-б-(1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о1б) 5 м.д. 8,14 (1Н, т, J=l,9 Гц), 8,03 (1Н, дт, J=7,8, 1,4 Гц), 7, 87-7, 96 (1Н, м) , 7,84 (1Н, с), 7, 72-7, 83 (ЗН, м) , 7,09-7,25
(ЗН, м), 6,97 (1Н, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 5,50 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 3,26 (ЗН, с), 1,55 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0
[М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (190,63 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке OD-H: (R)-4-амино-б-(1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил в виде светло-желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 8,14 (1Н, т, J=2,0 Гц), 8,03 (1Н, ддд, J=8,0, 1,3, 1,1 Гц), 7,91 (1Н, д, J=7,2 Гц), 7,84 (1Н, с), 7,80 (1Н, т, J=7,9 Гц), 7,71-7,78 (2Н, м) , 7, 08-7, 25 (ЗН, м) , 6,97 (1Н, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 5,45-5,55 (1Н, м) , 3,26 (ЗН, с), 1,55 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452, 0 [М+Н]+.
Второй пик на колонке OD-H: (S)-4-амино-б-(1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2
ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил в виде светло-желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 8,14 (1Н, т, J=l,9 Гц), 8,00-8,05 (1Н, м), 7,91 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,84 (1Н, с), 7,80 (1Н, т, J=7,9 Гц), 7, 72-7, 78 (2Н, м) , 7,10-7,24 (ЗН, м) , 6,97 (1Н, дд, J=8,7, 2,4 Гц), 5,50 (1Н, квд, J=6,9, 6,7 Гц), 3,26 (ЗН, с), 1,55 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452, 0 [М+Н]+.
Пример 2: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-З-(3-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом С для получения 4-амино-6-( ( (IS)-1- (6-фтор-З-(3-
(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (4 00 МГц, MeOH-d4) 5 м.д. 8,31 (с, 1Н), 8,13-8,16 (м, 1Н), 8,07-8,11 (м, 1Н), 8,00 (с, 1Н), 7,877,90 (м, 1Н) , 7, 79-7, 85 (м, 1Н) , 7, 62-7, 67 (м, 1Н) , 7,34-7,41 (м, 1Н) , 5,61 (кв, J=7,30 Гц, 1Н) , 3,21 (с, ЗН) , 1,63 (д, J=7,04 Гц, ЗН); ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+.
Пример 3: Получение 4-амино-6-((1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила, 4-амино-6-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
5-Фтор-Ы-(3-(метилтио)фенил)-2-нитроанилин
02N HN-\ > -F
SMe
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D с
использованием 1,4-дифтор-2-нитробензола (3,251 г, 20,43 ммоль) и 3-(метилтио)анилина (2,52 мл, 2 0,43 ммоль) для получения 5-фтор-N-(3-(метилтио)фенил)-2-нитроанилина в виде оранжевого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 9,17 (1Н, с), 7,93 (1Н, дд, J=9,2, 3,1 Гц), 7,49 (1Н, ддд, J=9,4, 7,5, 3,2 Гц), 7, 25-7, 34 (2Н, м) , 7,17 (1Н, т, J=2,0 Гц), 7,01-7,07 (2Н, м), 2,47 (ЗН, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 277,0 [М-Н]". 4-Фтор-Ы1-(3-(метилтио)фенил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с
использованием 4-фтор-Ы- (3-(метилтио)фенил)-2-нитроанилина
(1,7261 г, 6,20 ммоль) для получения 4-фтор-Ы1-(3-
(метилтио)фенил)бензол-1,2-диамина в виде оранжевого
сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 7,13 (1Н, с), 7,03 (1Н, т, J=7,9 Гц), 6,93 (1Н, дд, J=8,4, 6,3 Гц),
6, 46-6, 55 (ЗН, м) , 6,37 (1Н, ддд, J=8,l, 2,2, 1,0 Гц), 6,31 (1Н, тд, J=8,5, 2,9 Гц), 5,08 (2Н, с), 2,38 (ЗН, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 249,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(5-фтор-2-(3-
(метилтио)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 4-фтор-Ы1-(3-(метилтио)фенил)бензол-1,2-диамина (1,0765 г, 4,34 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(5-фтор-2-(3-(метилтио)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде не совсем белого сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 9,31 (1Н, уш.с), 7,76 (1Н, дд, J=10,9, 2,2 Гц), 7,34 (1Н, с), 7,15-7,26 (2Н, м) , 7,08 (1Н, т, J=7,9 Гц), 6,95 (1Н, тд, J=8,5, 3,0 Гц), 6, 60-6, 66 (1Н, м) , 6,57 (1Н, уш.с), 6, 42-6, 49 (1Н, м) , 4,06-4,15 (1Н, м, J=7,3, 7,0, 6,9, 6,9 Гц), 2,38 (ЗН, с), 1,33 (9Н, с), 1,12-1,19 (ЗН, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 420,1 [М+Н]+.
трет-Бутил 1-(5-фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(5-фтор-2-(3-
(метилтио)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (1, 6781 г, 4,00 ммоль) для получения трет-бутил 1-(5-фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 7, 48-7, 57 (2Н, м) , 7, 39-7, 46 (2Н, м) , 7,36 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,26 (1Н, д, J=7,8 Гц), 7,02-7,10 (2Н, м), 4,79 (1Н, дкв, J=7,l, 6,9 Гц), 2,52 (ЗН, с), 1,38 (ЗН, д, J=6,7 Гц), 1,29 (9Н, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 402,1 [М+Н]+. Во время циклизации произошла эпимеризация.
1-(5-Фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией D5b в Общем способе D с
использованием трет-бутил 1-(5-фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (0,2878 г, 0,717 ммоль) для получения 1-(5-фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде светло-желтого сиропообразного вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,56 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,437,52 (ЗН, м) , 7,33 (1Н, д, J=7,6 Гц), 7,02-7,14 (2Н, м) , 3,95 (1Н, кв, J=6,7 Гц), 2,53 (ЗН, с), 1,96 (2Н, с), 1,34 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 302,0 [М+Н]+. Неочищенное светло-желтое сиропообразное вещество использовали без очистки на следующей стадии.
4-Амино-6-((1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием
1-(5-фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,1816 г, 0,603 ммоль) для
получения
4-амино-б-(1-(5-фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,68 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,54 (1Н, ддд, J=9,6, 2,2, 0,8 Гц), 7,44 (1Н, т, J=7,9 Гц), 7,39 (1Н, т, J=l,9 Гц), 7,32 (1Н, д, J=8,2 Гц), 7,24-7,28 (1Н, м), 7,03-7,22 (4Н, м) , 5,54 (1Н, т, J=6,7 Гц), 2,48 (ЗН, с), 1,52 (ЗН, д, J=6, 8
Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 420,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (127,49 мг) разделили на колонке IA с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке IA: (R)-4-амино-б-(1-(5-фтор-1-(3-
(метилтио)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,69 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,55 (1Н, ддд, J=9,7, 2,1, 0,8 Гц), 7,44 (1Н, т, J=7,9 Гц), 7,39 (1Н, т, J=l,9 Гц), 7,32 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,26 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,17 (2Н, уш.с), 7,04-7,12 (2Н, м) , 5,49-5,59
(1Н, м) , 2,48 (ЗН, с), 1,52 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 420, 1 [М+Н]+.
Второй пик на колонке IA: (S)-4-амино-б-(1-(5-фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,69 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,55 (1Н, ддд, J=9,6, 2,1, 0,7 Гц), 7,44 (1Н, т, J=7,8 Гц), 7,39 (1Н, т, J=l,8 Гц), 7,32 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,26 (1Н, д, J=7,6 Гц), 7,17 (2Н, уш.с), 7,04-7,12 (2Н, м) , 5,50-5,59 (1Н, м) , 2,48 (ЗН, с), 1,52 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 420, 1 [М+Н]+.
Пример 4: Получение 4-амино-6-((-1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила, 4-амино-6-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
трет-Бутил 1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
К смеси трет-бутил 1-(5-фтор-1-(3-(метилтио)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (0,7397 г, 1,842 ммоль) в
ТГФ (13,82 мл) и воде (4,61 мл) добавили оксон (2,83 г, 4,61
ммоль) и перемешивали смесь при комнатной температуре. Через 3
часа к смеси добавили воду (50 мл) и экстрагировали ДХМ (50 мл
х 2). Объединенные органические слои высушили над Na2S04,
отфильтровали, концентрировали при пониженном давлении для
получения твердого белого вещества, которое очистили колоночной
хроматографией на 24 г колонке Redi-Sep(tm) Gold с использованием
градиента от 0 до 50% EtOAc в гексане за 5 минут, а затем 50%
изократическим составом EtOAc в течение 2 0 минут в качестве
элюента, для получения трет-бутил 1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата в виде твердого белого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 8,05-8,15 (2Н, м) , 7,90 (2Н, д, J=4,9 Гц), 7,56 (1Н, дд, J=9,5, 2,2 Гц), 7,35 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,06-7,18 (2Н, м) , 4,82-4,95
(1Н, м) , 3,33 (ЗН, с), 1,44 (ЗН, д, J=6, 8 Гц), 1,23 (9Н, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 434,0 [М+Н]+.
1-(5-Фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
NH2
№ Vf
S02Me
Получили в соответствии со Стадией D5b в Общем способе D с
использованием трет-бутил 1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (0,6889 г, 1,589 ммоль) для получения 1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в
виде белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д.
8,18 (1Н, т, J=l,7 Гц), 8,11-8,15 (1Н, м) , 7, 98-8, 03 (1Н, м) ,
7,93 (1Н, т, J=7,8 Гц), 7,53 (1Н, дд, J=9,7, 2,4 Гц), 7,13-7,19 (1Н, м), 7,05-7,12 (1Н, м), 3,96 (1Н, кв, J=6,7 Гц), 3,35 (ЗН,
с), 1,98 (2Н, с), 1,37 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 334,0 [М+Н]+. Неочищенное твердое белое вещество использовали без
очистки на следующей стадии.
4-Амино-6-((1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-
бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
S02Me
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 1- (5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,4657 г, 1,397 ммоль) для
получения твердого коричневого вещества. Коричневое твердое
вещество суспендировали в EtOAc-гексане (1:4, 10 мл),
отфильтровали, промыли EtOAc-гексаном (1:4, 20 мл) и высушили
для получения 4-амино-б-((-1-(5-фтор-1-(3-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5
пиримидинкарбонитрила в виде светло-коричневого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,15 (1Н, т, J=l,9 Гц), 8,04 (1Н, дт, J=7,8, 1,4 Гц), 7,93 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,75-7,87 (ЗН, м), 7,58 (1Н, дт, J=9,2, 1,3 Гц), 7,06-7,27 (4Н, м) , 5,50 (1Н, кв.д, J=6,9, 6,7 Гц), 3,26 (ЗН, с), 1,56 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (3 67,3 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке AD-H: (R)-4-амино-б-(1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил в виде коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,15 (1Н, т, J=l,9 Гц), 8,04 (1Н, дт, J=7,9, 1,4 Гц), 7,92 (1Н, д, J=7,0 Гц), 7, 74-7, 86 (ЗН, м) , 7, 55-7, 60 (1Н, м) , 7, 07-7, 26 (4Н, м) , 5,50 (1Н, кв.д, J=7,0, 6,8 Гц), 3,26 (ЗН, с), 1,56 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+.
Второй пик на колонке AD-H: (S)-4-амино-б-(1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил в виде коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,15 (1Н, т, J=l,9 Гц), 8,01-8,06 (1Н, м) , 7,92 (1Н, д, J=7,6 Гц), 7,74-7,86 (ЗН, м) , 7, 54-7, 60 (1Н, м) , 7, 05-7, 27 (4Н, м) , 5,50 (1Н, кв, J=6,8 Гц), 3,26 (ЗН, с), 1,56 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС (ESI)
m/z 452,0 [М+Н]
Пример
Получение
4-амино-6-(((IS)-1-(3-(3,5-
Получили в соответствии с Общим способом С для получения 4-амино-б-(((lS)-l-(3-(3,5-дифторфенил)-б-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 5 м.д. 8, 40-8, 47 (м, 1Н) , 8,01 (с, 1Н) , 7,88-7,94 (м, 1Н), 7,79-7,86 (м, 1Н), 7,20-7,33 (м, ЗН), 5,68 (д, J=7,04 Гц, 1Н), 1,71 (д, J=7,24 Гц, ЗН); ЖХ-МС (ESI) 410,0 [М+Н]+.
Пример 6: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-З-(4-фторфенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом С для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(4-фторфенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 5 м.д. 8, 00-8, 05 (м, 1Н) , 7,92 (с, 1Н) , 7,59-7,64 (м, 1Н), 7,50-7,57 (м, 2Н), 7,27-7,36 (м, ЗН), 5,58 (кв, J=7,04 Гц, 1Н), 1,61 (д, J=6,85 Гц, ЗН); ЖХ-МС (ESI) 392,2 [М+Н]+.
Пример 7: Получение 4-амино-6-((-1-(1-(3,5-дифторфенил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-6-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
N-(3,5-Дифторфенил)-5-фтор-2-нитроанилин 0,N HN
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D с
использованием 2,4-дифторнитробензола (1,757 мл, 16,02 ммоль) и 3,5-дифторанилина (2,069 г, 16,02 ммоль) для получения N-(3,5-дифторфенил)-5-фтор-2-нитроанилина в виде оранжевого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 9,48 (1Н, с), 8,23 (1Н, дд, J=9,4, 6,1 Гц), 7,05-7,17 (ЗН, м) , 6,99 (1Н, тт, J=9,4, 2,3 Гц), 6,84-6,91 (1Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 267, 0 [М-НГ
N1-(3,5-Дифторфенил)-5-фторбензол-1,2-диамин HN
-0 F
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с
использованием N- (3,5-дифторфенил)-5-фтор-2-нитроанилина
(0,7511 г, 2,80 ммоль) для получения N1-(3,5-дифторфенил)-5-
фторбензол-1,2-диамина в виде светло-желтого сиропообразного
вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,85 (1Н, с), 6,85 (1Н, дд, J=10,0, 2,3 Гц), 6,72-6,81 (2Н, м) , 6,41 (1Н, тт,
J=9,4, 2,3 Гц), 6, 24-6, 33 (2Н, м) , 4,71 (2Н, с); ЖХ-МС (ESI)
m/z 239, 1 [М+Н] + .
(S)-трет-Бутил 1-(2-(3,5-дифторфениламино)-4-
фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием N1- (3,5-дифторфенил)-5-фторбензол-1,2-диамина (0, 6074 г, 2,55 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(2-(3,5-дифторфениламино)-4-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 9,41 (1Н, уш.с), 7,87 (1Н, уш.с), 7,50 (1Н, дд, J=8,6, 6,5 Гц), 7, 07-7, 20 (2Н, м) , 6, 87-6, 96 (1Н, м) , 6, 43-6, 62 (ЗН, м) , 3,95-4,13 (1Н, м) , 1,37 (9Н, с), 1,17 (ЗН, д, J=7,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,2 [М+Н]+.
N-(1-(1-(3,5-Дифторфенил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этил)ацетамид
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(3, 5-дифторфениламино)-4-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (1,0173 г, 2,485 ммоль) для получения N-(1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 8,38 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,72 (1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7,51 (1Н, тт, J=9,5, 2,3 Гц), 7,41 (2Н, дд, J=7,9, 1,7 Гц), 7,13 (1Н, ддд, J=9,8, 8,8, 2,5 Гц), 7, 03-7, 09 (1Н, м) , 5,07 (1Н, кв.д, J=7,l, 6,8 Гц), 1,64 (ЗН, с), 1,44 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 334,1 [М+Н]+. Во время циклизации произошла эпимеризация. 1-(1-(3,5-Дифторфенил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2
ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- (1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,7057 г, 2,117 ммоль)
для получения 1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде розового твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 7,69 (1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7, 49-7, 58 (ЗН, м) , 7,04-7,15 (2Н, м) , 4,01 (1Н, кв, J=6,6 Гц), 1,95 (2Н, уш.с), 1,36 (ЗН, д, J=6,5 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 292,0 [М+Н]+. Неочищенное твердое розовое вещество использовали без очистки.
4-Амино-6-((-1-(1-(3,5-дифторфенил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
NH2 N
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 1- (1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,4841 г, 1,662 ммоль) для
получения 4-амино-б-((-1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 7,87 (1Н, с), 7, 68-7, 77 (2Н, м) , 7,29-7,41 (ЗН, м) , 7,09-7,25 (ЗН, м), 7,05 (1Н, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 5,59-5,70 (1Н, м) , 1,56 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,0 [М+Н] + . 4-Амино-6-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-6-фтор-1Н
бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (471 мг) разделили на колонке IA, используя препаративную SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке IA и второй пик на колонке OD-H: 4-
амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,87 (1Н, с), 7, 68-7, 78 (2Н, м) , 7, 29-7, 40 (ЗН, м) , 7, 09-7, 25 (ЗН, м) , 7,05 (1Н, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 5, 60-5, 69 (1Н, м, J=7,l, 7,1, 6,9, 6,7 Гц), 1,56 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,0 [М+Н]+.
Второй пик на колонке IA и первый пик на колонке OD-H: 4-
амино-б-(((IS)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,87 (1Н, с), 7, 68-7, 78 (2Н, м) , 7, 29-7, 40 (ЗН, м) , 7, 09-7, 24 (ЗН, м) , 7,05 (1Н, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 5, 59-5, 69 (1Н, м) , 1,56 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,0 [М+Н]+.
Пример 8: Синтез 4-амино-6-(((8-хлор-З-фенилимидаЗо[1,2-aJ пиридин-2-ил) метил) амино)-5-пиримидинкарбонитрила
3-Бром-8-хлор-2-(хлорметил)имидазо[1,2-а]пиридин
Ацетонитрил (8,5 мл) добавили к 8-хлор-2-
(хлорметил)имидазо[1,2-а]пиридину (341 мг, 1,7 ммоль). Добавили N-бромсукцинимид (302 мг, 1,7 мл) и перемешивали смесь при комнатной температуре до завершения реакции. Реакционную смесь разделили между EtOAc и насыщенным водным раствором МаНСОз, Органические слои высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток поглотили ДХМ и очистили хроматографией на 2 3 г силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 70% EtOAc в гексане. Заданные фракции объединили и концентрировали при пониженном давлении для получения 3-бром-8-хлор-2-(хлорметил)имидазо[1,2-а]пиридина в виде белого кристаллического вещества.
2-((З-Бром-8-хлоримидаЗо[1,2-а]пиридин-2-ил)метил)изоиндолин-1,3-дион
ДМФ (4,6 мл) добавили к смеси 3-бром-8-хлор-2-(хлорметил)имидазо[1,2-а]пиридина (258 мг, 0,922 ммоль), фталимида (136 мг, 0,922 ммоль) и К2СОз (55,6 мкл, 0,922 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 8 0°С. После завершения реакции смесь сначала разделили между EtOAc и водой, но продукт легко не растворился. Продукт собрали фильтрацией смеси для получения 2-((З-бром-8-хлоримидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)метил)изоиндолин-1,3-диона в виде твердого белого вещества.
(8-Хлор-З-фенилимидаЗо[1,2-а]пиридин-2-ил)метанамин
2-((З-Бром-8-хлоримидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)метил)изоиндолин-1,3-дион прореагировал с фенилбороновой кислотой в соответствии со Стадией СЗЬ в Общем способе С. В
условиях реакции наблюдался частичный гидролиз фталимида.
Неочищенное промежуточное соединение обрабатывали ДХМ и ТФК в
течение недели. Реакционную смесь концентрировали при
пониженном давлении и очистили обращенно-фазовой
полупрепаративной ВЭЖХ. Фракции, содержащие заданный продукт, лиофилизировали. Лиофилят разделили между насыщенным водным раствором ЫаНСОз и EtOAc. Водный слой три раза экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения (8-хлор-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)метанамина.
4-Амино-6-(((8-хлор-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)метил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
4-Амино-б-(((8-хлор-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)метил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил получили из (8-хлор-З-фенилимидазо [ 1 , 2-а] пиридин-2-ил) метанамина в соответствии со
Стадией С5 в Общем способе С: 1Н ЯМР (50 0 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д.
4,69 (д, J=5,38 Гц, 2Н) , 6,88 (т, J=7,09 Гц, 1Н) , 7,18 (уш.с, 2Н) , 7,47-7,51 (м, 2Н) , 7, 53-7, 59 (м, 2Н) , 7, 59-7, 65 (м, ЗН) , 7,92 (с, 1Н) , 8,15 (дд, J=7, 09, 0, 98 Гц, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 376, 1 [М+Н]+.
Пример 9: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(3-(4-(хлорфенил)-6-фторимидаЗо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом С для получения 4-амино-б-(((lS)-l-(3-(4-(хлорфенил)-б-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) : 5 8,2 (м, 1Н) , 7,9 (с, 1Н) , 7,71-7,74 (м, 1Н) , 7,6 (с, 4Н) , 7,3-7,4 (м, 1Н) , 7,2 (уш.с, 2Н) , 6,9 (д, 1Н) , 5,4 (м, 1Н), 1,5 (д, ЗН); ЖХ-МС (ESI) m/z 407,11 [М+Н]+.
Пример 10: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-З-(2-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом С, включая окисление оксона между Стадией СЗа и Стадией С4, для получения 4-амино-б-( ( (1S)-(б-фтор-3-(2-
(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде смеси атропизомеров, которые можно разделить на колонке Chiralpak(tm) OJ с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке OJ: Н ЯМР (50 0 МГц, МеОН-о!4) 8 м.д.
8,18-8,23 (1Н, м) , 7, 75-7, 82 (ЗН, м) , 7,68-7,71 (1Н, м) , 7,64 (1Н, дд, J=9,9, 5,0 Гц), 7, 52-7, 55 (1Н, м) , 7,35 (1Н, ддд, J=10,0, 7,9, 2,3 Гц), 5,65 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 2,92 (ЗН, с), 1, 65 (ЗН, д, J=6,8 Гц) ;
Первый пик на колонке 0J: 1Н ЯМР (50 0 МГц, MeOH-d4) 5 м.д. 8, 25-8, 30 (1Н, м) , 7,88 (1Н, с), 7, 76-7, 82 (1Н, м) , 7,59-7,69 (ЗН, м) , 7,37 (1Н, ддд, J=10,0, 7,9, 2,4 Гц), 7,25 (1Н, дд, J=7,6, 1,2 Гц), 5,58 (1Н, кв, J=7,l Гц), 2,87 (ЗН, с), 1,70 (ЗН, д, J=7,l Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+.
Пример 11: Получение 4-амино-6-((-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила, 4-амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(4-
фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-(б-фтор-1-(4-
фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
5-Фтор-Ы-(4-фторфенил)-2-нитроанилин OzN
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D с
использованием 2,4-дифторнитробензола (2,0 68 мл, 18,86 ммоль) и 4-фторанилина (1,811 мл, 18,86 ммоль) для получения 5-фтор-Ы-
(4-фторфенил)-2-нитроанилина в виде оранжевого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 9,56 (1Н, с), 8,24
(1Н, дд, J=9,5, 6,2 Гц), 7, 36-7, 44 (2Н, м) , 7, 25-7, 33 (2Н, м) , 6, 67-6, 74 (1Н, м) , 6,64 (1Н, дд, J=ll,8, 2,6 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 251,1 [М+Н]+ .
5-Фтор-Ы1-(4-фторфенил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с
использованием 5-фтор-Ы-(4-фторфенил)-2-нитроанилина (3,7432 г, 14,96 ммоль) для получения 5-фтор-Ы1-(4-фторфенил)бензол-1,2
диамина в виде коричневого сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 7,18 (1Н, с), 6, 98-7, 07 (2Н, м) , 6,81-6,90 (2Н, м) , 6, 65-6, 76 (2Н, м) , 6, 54-6, 62 (1Н, м) , 4,61 (2Н, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 221,1 [М+Н]+.
(S)-(9Н-Флуорен-9-ил)метил 1-(4-фтор-2-(4-
фторфениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат NHFmoc
К охлажденному до -10°С раствору (NaCl-ледяная баня) Fmoc-L-Ala-OH (4,45 г, 14,30 ммоль) и N-метилморфолина (1,57 3 мл, 14,30 ммоль) в ДХМ (34,1 мл) добавили изобутилхлорформиат
(1,782 мл, 13,62 ммоль). Полученную мутную бесцветную смесь перемешивали при -10°С в течение 3 0 минут. К этой смеси затем добавили раствор 5-фтор-Ы1-(4-фторфенил)бензол-1,2-диамина
(1,500 г, 6,81 ммоль) в ДХМ (12,75 мл) . Полученную смесь перемешивали при -10°С в течение 1 часа, и к этой холодной смеси добавили насыщенный водный раствор NH4CI (100 мл). Осадок собрали фильтрацией и промыли водой (100 мл) для получения (S)-
(9Н-флуорен-9-ил)метил 1- (4-фтор-2-(4-
фторфениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 9,42 (1Н, с), 7,89 (2Н, д, J=7,6 Гц), 7, 63-7, 78 (ЗН, м) , 7,22-7,46 (6Н, м), 6,96-7,14 (4Н, м), 6,83 (1Н, дд, J=ll,2, 2,7 Гц), 6,67 (1Н, тд, J=8,5, 2,8 Гц), 4,11-4,33 (4Н, м), 1,28 (ЗН, д, J=7,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 514,2 [М+Н]+. Неочищенное твердое грязновато-белое вещество использовали без очистки.
(S)-(9Н-Флуорен-9-ил)метил 1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
NHFmoc
Гетерогенную смесь (S)-(9Н-флуорен-9-ил)метил 1-(4-фтор-2-(4-фторфениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (3, 500 г, 6,82 ммоль) в уксусной кислоте (45,4 мл) нагревали при 100°С при перемешивании. Через 2 6 часов смесь охладили до комнатной температуры и вылили в ДХМ (100 мл) и насыщенный водный раствор ЫаНСОз (100 мл) . Водный слой удалили, а органический слой промыли насыщенным водным раствором ЫаНСОз (100 мл * 1), водой (100 мл х 1) и насыщенным солевым раствором (100 мл х 1), высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения (S)-(9Н-флуорен-9-ил)метил 1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата в виде темно-коричневого сиропообразного вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 496,1 [М+Н]+. Во время циклизации произошла эпимеризация, а темно-коричневое сиропообразное вещество использовали далее без дополнительной очистки.
1-(6-Фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
К раствору (9Н-флуорен-9-ил)метил 1-( б-фтор-1-(4-
фторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (3,38 г, 6,82 ммоль) в ДХМ (34,1 мл) добавили пиперидин (0,809 мл, 8,19 ммоль) и перемешивали смесь при комнатной температуре. Через 4 дня смесь концентрировали при пониженном давлении для получения коричневого твердого вещества. Коричневое твердое вещество очистили колоночной хроматографией на 12 0 г колонке Redi-Sep, используя градиент от 0 до 100% ДХМ: МеОН: NH4OH (89:9:1) в ДХМ за 27 минут, а затем 100% изократический состав ДХМ:МеОН:NH4OH
(89:9:1) в течение 5 минут в качестве элюента, для получения 1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина за
три стадии в виде розового сиропообразного вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 7,67 (ЗН, тд, J=8,8, 5,0 Гц), 7,48 (2Н, т, J=8,8 Гц), 7,09 (1Н, ддд, J=9,8, 8,8, 2,5 Гц), 6,88 (1Н, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 3,93 (1Н, кв, J=6, 8 Гц), 1,92 (2Н,
уш.с), 1,33 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 274,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-((-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 1- (б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,8570 г, 3,14 ммоль) для получения 4-амино-б-((1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде не совсем белого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,72
(1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7,67 (1Н, д, J=7,2 Гц), 7, 54-7, 63 (2Н, м) , 7,36 (2Н, т, J=8,8 Гц), 7,19 (2Н, уш.с), 7,10 (1Н, ддд, J=9,8, 8,9, 2,4 Гц), 6,86 (1Н, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 5,46 (1Н, кв, J=6,9 Гц), 1,52 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 392,0
[М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(6-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (953,8 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке SFC AD-H и второй пик на аналитической колонке AD-H: 4-Амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,72 (1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7,67 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7, 54-7, 63 (2Н, м) , 7,36 (2Н, т, J=8,8 Гц), 7,19 (2Н, уш.с), 7,10 (1Н, ддд, J=9, 9, 8,9, 2,5 Гц), 6,86 (1Н, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 5,46 (1Н, кв, J=6,9 Гц), 1,52 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 392,0 [М+Н]+.
Второй пик на колонке SFC AD-H и первый пик на аналитической колонке AD-H: 4-Амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,72 (1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7,67 (1Н, д, J=7,2 Гц), 7, 55-7, 63 (2Н, м) , 7,36 (2Н, т, J=8,8 Гц), 7,19 (2Н, уш.с), 7,10 (1Н, ддд, J=9,7, 8,9, 2,5 Гц), 6,86 (1Н, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 5,46 (1Н, кв, J=6,9 Гц), 1,52 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 392,0 [М+Н]+.
Пример 12: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-З-(2-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом С для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(2-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде твердого белого вещества: 1Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) : 8 м.д. 9,1 (д, 1Н) , 8,8 (д, 1Н) , 8,0 (м, 2Н) , 7,7-7,8 (м, 2Н) , 7,5 (м, 2Н) , 7,3 (уш.с, 2Н) , 6,8 (м, 1Н) , 5,7 (м, 1Н) , 1,49 (д, ЗН) : ЖХ-МС (ESI) m/z 374,14 [М+Н]+.
Пример 13: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(3-(З-хлор-5-фторфенил)-6-фторимидаЗо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом С для получения 4-амино-б-(((lS)-l-(3-(З-хлор-5-фторфенил)-б-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) : 5 8,4 (д, 1Н) , 7,9 (с, 1Н) , 7,71-7,74 (м, 1Н) , 7,4-7,5 (м, 4Н) , 7,3 (уш.с, 2Н) , 7,0 (д, 1Н) , 5,4 (м, 1Н) , 1,5 (д, ЗН); ЖХ-МС (ESI) m/z 425,12 [М+Н]+.
Пример 14: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(3-(4-
хлорфенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом С для получения 4-амино-б-(((lS)-l-(3-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) : (400 МГц, MMCO-d6) : 5 8,16 (д, 1Н) , 7,9 (с, 1Н) , 7,57-7,67 (м, 5Н) , 7,3 (дд, 1Н) , 7,2 (уш.с, 2Н) , 6,8 (м, 2Н) , 5,4 (м, 1Н), 1,4 (д, ЗН); ЖХ-МС (ESI) m/z 389,12 [М+Н]+.
Пример 15: Получение 4-амино-6-((-1-(б-фтор-1-(3-(2-
пиридинил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила, 4-амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-(2-
пиридинил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
4-Амино-6-((-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии с Общим способом D для получения 4-амино-б-((-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 м.д. 8,70 (1Н, д, J=4,5 Гц), 8,17 (2Н, д, J=7,6 Гц), 7,98 (1Н, с), 7, 65-7, 84 (4Н, м) , 7,48 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,30 (1Н, ддд, J=6,7, 4,9, 1,7 Гц), 7,02-7,10 (1Н, м) , 6,87 (1Н, дд, J=8,4, 2,3 Гц), 6,23 (1Н, д, J=7,8 Гц), 5,63
(1Н, кв, J=7,l Гц), 5,37 (2H, уш.с), 1,62 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 451,33 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (29 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке SFC AD-H и второй пик на колонке
Chiralpak(tm) AD-H: 4-Амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-(2-
пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 м.д. 8,70 (1Н, д, J=4,5 Гц), 8,17 (2Н, д, J=7,6 Гц), 7,98 (1Н, с), 7, 65-7, 84 (4Н, м) , 7,48 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,30 (1Н, ддд, J=6,7, 4,9, 1,7 Гц), 7,027,10 (1Н, м) , 6,87 (1Н, дд, J=8,4, 2,3 Гц), 6,23 (1Н, д, J=7,8 Гц), 5,63 (1Н, кв, J=7,l Гц), 5,37 (2Н, уш.с), 1,62 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 451,1 [М+Н]+.
Второй пик на колонке SFC AD-H и первый пик на колонке
Chiralpak(tm) AD-H: 4-Амино-6-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(2-
пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) 5 м.д. 8,70 (1Н, д, J=4,7 Гц), 8,17 (2Н, д, J=7,6 Гц), 7,98 (1Н, с), 7, 66-7, 84 (4Н, м) , 7,48 (1Н, д, J=7,2 Гц), 7,30 (1Н, ддд, J=6,7, 4,9, 1,7 Гц), 7,06 (1Н, тд, J=9,2, 2,3 Гц), 6,87 (1Н, дд, J=8,6, 2,3 Гц), 6,24 (1Н, д, J=7,6 Гц), 5,63 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 5,38 (2Н, уш.с), 1,62 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 451,1 [М+Н]+.
Пример 16: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-1-фенил
1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил
1-(6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-
ил)этилкарбамат
Boc-L-Ala-OH (3,00 г, 15,86 ммоль) и 3,4-диамино-1-фторбензол (2,00 г, 15,86 ммоль) смешали в пиридине (52,9 мл) . Добавили EDCHC1 (9,12 г, 47,6 ммоль) и перемешивали смесь при температуре окружающей среды в течение 2 0 минут. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, 1,0 н. НС1 и насыщенным солевым раствором. Органический слой высушили над Na2S04, отфильтровали и концентрировали. Неочищенный остаток очистили колоночной хроматографией на 12 0 г колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от 0 до 100% EtOAc в гексане в качестве элюента. Заданные фракции объединили и концентрировали при пониженном давлении для получения неочищенного амидного промежуточного соединения. Амид растворили в АсОН (26,9 мл) и нагревали на масляной бане при 7 0°С около 3 0 минут. Реакционную смесь разбавили EtOAc и осторожно нейтрализовали водным раствором К2С03. Органический слой промыли NaCl, высушили над Na2S04 и отфильтровали. Фильтрат концентрировали до сухости для получения (S)-трет-бутил 1-(б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил) этилкарбамата: гЯ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 12,23 (1Н, уш.с), 7,15-7,61 (ЗН, м) , 6,98 (1Н, т, J=8,5 Гц), 4,78-4,89 (1Н, м) , 1,46 (ЗН, д, J=7,0 Гц), 1,40 (9Н, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 280, 1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил
1-(6-фтор-1-фенил-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этилкарбамат
(S)-трет-бутил
1-(5-фтор-1-фенил-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
(S)-трет-Бутил
1- ( б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этилкарбамат (200 мг, 0,716 ммоль), фенилбороновую кислоту (175 мг, 1,4 32 ммоль), ДХМ (9,5 мл) и пиридин (116 мкл, 1,4 32 ммоль) поместили в стеклянную пробирку. Добавили ацетат меди (II) (104 мкл, 1,074 ммоль), и неплотно закрытую пробирку оставили перемешиваться при температуре окружающей среды на 5 дней. Реакционную смесь разделили между насыщенным водным раствором NH4CI и ДХМ. Органический слой промыли насыщенным водным раствором NH4CI и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворили в МеОН и очистили обращенно-фазовой полупрепаративной ВЭЖХ. Фракции, содержащие заданный продукт, объединили для получения 3 8 мг после лиофилизации. Региоизомеры разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первую фракцию определили как (S)-трет-бутил 1-(б-фтор-1-фенил-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат на основе спектра NOESY для обеих фракций. Фракцию концентрировали при пониженном давлении для получения 12 мг твердого белого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, МеОН-о!4) 5 м.д. 7,66 (м, ЗН) , 7, 58-7, 64 (м, 1Н) , 7,52 (уш.с, 2Н) , 7,07 (м, 1Н) , 6,78 (дд, J=8, 68, 2, 32 Гц, 1Н), 1,45 (д, J=7,09 Гц, ЗН), 1,37 (с, 9Н). Метиновый сигнал маскировался контрольным пиком.
Вторую фракцию концентрировали при пониженном давлении для получения 12 мг (S)-трет-бутил 1-(5-фтор-1-фенил-1Н-
бензо [d] имидазол-2-ил) этилкарбамата: Н ЯМР (500 МГц, МеОН-о!4) 8 м.д. 7, 58-7, 68 (м, ЗН) , 7,53 (уш.с, 2Н) , 7,38 (дд, J=9,29, 1,71 Гц, 1Н) , 7, 00-7, 08 (м, 2Н) , 1,45 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 1,33-1,41 (м, 9Н). Метиновый сигнал маскировался контрольным пиком.
4,0 М НС1 в 1,4-диоксане (1,0 мл) добавили к раствору (S)-
трет-бутил 1- ( б-фтор-1-фенил-1Н-бензо[d]имидазол-2-
(S)-1-(6-Фтор-1-фенил-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
ил) этилкарбамата (12 мг, 0, 034 ммоль) в ДХМ (1 мл) . Через ~2
часа реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении
до сухости. Полученное твердое вещество разделили между ДХМ и
насыщенным водным раствором ЫаНСОз. Водный слой экстрагировали
ДХМ. Органические слои объединили, высушили при помощи Na2S04,
отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для
получения (S)-1- ( б-фтор-1-фенил-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этанамина: ЖХ-МС (ESI) m/z 256,1 [М+Н]+. Неочищенный продукт использовали без очистки.
4-Амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-1-фенил-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием (S)-1- ( б-фтор-1-фенил-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этанамина для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-фенил-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (500 МГц, МеОН-о!4) 5 м.д. 7,86 (с, 1Н) , 7,67 (уш.с, 1Н) , 7, 56-7, 62 (м, 2Н) , 7, 46-7, 56 (м, ЗН) , 7,07 (тд, J=9,17, 2,45 Гц, 1Н) , 6,79 (дд, J=8, 68, 2, 57 Гц, 1Н) , 5,59 (кв, J=7,01 Гц, 1Н), 1,62 (д, J=7,09 Гц, ЗН); ЖХ-МС (ESI) m/z 374,1 [М+Н]+.
Получили в соответствии со способом Примера 16 с
Пример 17: Получение 4-амино-6-(((IS)-1-(5-фтор-1-фенил-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
использованием (S)-трет-бутил 1-(5-фтор-1-фенил-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата для получения 4-амино-б-
( ( (IS)-1- (5-фтор-1-фенил-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (50 0 МГц, MeOH-d.4) 8 м.д. 7,86 (с, 1Н) , 7, 57-7,62 (м, 2Н) , 7, 46-7, 57 (м, ЗН) , 7,38 (дд, J=8,93, 1,83 Гц, 1Н), 7,00-7,09 (м, 2Н), 5,56 (кв, J=6,93 Гц, 1Н), 1,62
(д, J=7,09 Гц, ЗН); ЖХ-МС (ESI) m/z 374,1 [М+Н]+.
Пример 18: Получение 4-амино-6-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-6-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-
(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
4-Амино-6-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
NH= N
N NH
Получили в соответствии с Общим способом D для получения 4-амино-б-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 5 м.д. 7,87 (1Н, с), 7,77 (1Н, д, J=7,6 Гц), 7, 32-7, 42 (ЗН, м) , 7,14-7,27 (ЗН, м) , 7,07-7,14 (1Н, м) , 7,02 (1Н, дд, J=8,0, 0,6 Гц), 5,64 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,59 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (2 08 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке SFC AD-H, первый пик на колонке Chiralpak(tm) AD-H и второй пик на колонке Chiralcel(tm) OD-H: 4-
амино-б-( ( (1R) -1-(1-(3, 5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде светло-коричневого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,87 (1Н, с), 7,77 (1Н, д, J=7,6 Гц), 7, 32-7, 42 (ЗН, м) , 7,14-7,27 (ЗН, м) , 7,07-7,14 (1Н, м) , 7,02 (1Н, дд, J=8,0, 0,6 Гц), 5,64 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,59 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,0 [М+Н]+.
Второй пик на колонке SFC AD-H, второй пик на колонке Chiralpak(tm) AD-H и первый пик на колонке Chiralcel(tm) OD-H: 4-
амино-б-( ( (IS) -1-(1-(3, 5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде светло-коричневого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,87 (1Н, с), 7,77 (1Н, д, J=7,8 Гц), 7, 32-7, 42 (ЗН, м) , 7,14-7,27 (ЗН, м) , 7,07-7,14 (1Н, м) , 7,02 (1Н, дд, J=8,2, 0,8 Гц), 5,64 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,59 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,0 [М+Н]+.
Пример 19: Получение 4-амино-6-((1-(6-фтор-1-(2-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила, 4-амино-6-(((1R)-1-(6-фтор-1-(2-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((1R)-1-(6-фтор-1-(2-
(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
5-Фтор-Ы-(2-(метилтио)фенил)-2-нитроанилин
02N
<^ ^-SMe F
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D с
использованием 2,4-дифторнитробензола (3,46 мл, 31,5 ммоль) и 2-(метилтио)анилина (3,88 мл, 31,5 ммоль) для получения 5-фтор-N-(2-(метилтио)фенил)-2-нитроанилина в виде оранжевого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 9,52 (1Н, с), 8,26 (1Н, дд, J=9,4, 6,1 Гц), 7, 34-7, 45 (ЗН, м) , 7, 26-7, 32 (1Н, м) , 6, 67-6, 75 (1Н, м) , 6,35 (1Н, дд, J=ll,6, 2,6 Гц), 2,43 (ЗН, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 279, 0 [М+Н]+ при 2,176 мин.; m/z 277, 0 [М-НГ при 2,169 мин.
5-Фтор-Ы1-(2-(метилтио)фенил)бензол-1,2-диамин
H2N
Л" м
f J- SMe F
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с
использованием 5-фтор-Ы- (2-(метилтио)фенил)-2-нитроанилина
(3,7956 г, 13,64 ммоль) для получения 5-фтор-Ы1-(2-(метилтио)фенил)бензол-1,2-диамина в виде бледно-желтого
сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 7,35 (1Н, дд, J=7,7, 1,5 Гц), 7,11 (1Н, тд, J=7,7, 1,5 Гц), 6,91 (1Н, тд, J=7,5, 1,2 Гц), 6,78 (1Н, дд, J=8,0, 1,4 Гц), 6,71
(1Н, дд, J=8,6, 5,9 Гц), б,65 (1Н, с), 6, 52-6, 62 (2Н, м) , 4,61 (2Н, с), 2,40 (ЗН, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 249, 0 [М+Н]+ при 2,275 мин.
(S)-трет-Бутил 1-(4-фтор-2-(2-
(метилтио)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
NHBoc NH
SMe F
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 5-фтор-Ы1-(2-(метилтио)фенил)бензол-1,2-диамина (3,0658 г, 12,35 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(2-(метилтио)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 9,56 (1Н, уш.с), 7,36 (1Н, дд, J=7,8, 1,4 Гц), 7,26 (1Н, дд, J=8,6, 6,3 Гц), 7,12-7,19 (1Н, м) , 7,10 (1Н, д, J=6,8 Гц), 6, 97-7, 07 (ЗН, м) , 6,70 (1Н, тд, J=8,2, 2,3 Гц), 6,61 (1Н, д, J=11,0 Гц), 4,14 (1Н, кв, J=6,8 Гц), 2,37 (ЗН, с), 1,34 (9Н, с), 1,26 (ЗН, д, J=7,2 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 420,1 [М+Н]+ при 2, 506 мин.
N-(1-(6-Фтор-1-(2-(метилтио)фенил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этил)ацетамид
NHAc ,N
^ j^SMe F
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(2-
(метилтио)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (4, 8685 г, 11,61 ммоль) для получения N-(1-(б-фтор-1-(2-(метилтио)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде
розового твердого вещества: ЖХ-МС (ESI)] m/z 344,0 [М+Н]+.
N-(1-(6-Фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамид
NHAc V^^S02Me F
К смеси N-(1-(б-фтор-1-(2-(метилтио)фенил)-1H-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (1,1697 г, 3,41 ммоль) в ТГФ (25,5 мл) и воде (8,52 мл) добавили оксон (5,23 г, 8,52 ммоль) и перемешивали смесь при комнатной температуре. Через 4 8 часов к смеси добавили воду (50 мл) и экстрагировали ДХМ (50 мл х 2). Объединенные органические слои высушили над Na2S04, отфильтровали, объединили с твердым белым веществом и концентрировали при пониженном давлении для получения N-(l-(6-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде оранжевого твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 376,0 [М+Н]+. Неочищенное твердое оранжевое вещество использовали без очистки.
1-(6-Фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензо Г^]имидазол-2-ил)этанамин
NH2
VA~S02Me F
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- ( б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (1,2419 г, 3,31 ммоль) для
получения 1- (б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил) -1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина, включая его атропизомер, в виде твердого светло-коричневого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 334, 0 [М+Н]+.
4-Амино-6-((1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н
бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием
1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,5316 г, 1,595 ммоль) для получения 4-амино-б-((1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде твердого желтого вещества в виде смеси атропизомеров и стереоизомеров: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) , 1Н-ЯМР показала два набора пиков из-за присутствия двух атропизомеров; ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Смесь (403,9 мг) атропизомеров и стереоизомеров разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения четырех фракций:
Первый пик на колонке SFC AD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(6-
фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде коричневого
твердого вещества: Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 8,05-8,11 (1Н, м), 7,78 (1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7,66-7,73 (2Н, м), 7,607,65 (2Н, м) , 7, 44-7, 52 (1Н, м) , 7,04-7,18 (ЗН, м) , 6,89 (1Н,
дд, J=8,9, 2,4 Гц), 5,63-5,72 (1Н, м), 2,85 (ЗН, с), 1,56 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+.
Второй пик на колонке SFC AD-H: 4-амино-б-(((IS)-1-(6-
фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
виде
коричневого
твердого вещества: Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 8,05-8,11 (1Н, м), 7,78 (1Н, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 7,66-7,73 (2Н, м), 7,607,66 (2Н, м) , 7,45-7,51 (1Н, м) , 7,13 (ЗН, ддд, J=9,8, 8,9, 2,4 Гц), 6,88 (1Н, дд, J=8,8, 2,5 Гц), 5,62-5,72 (1Н, м), 2,85 (ЗН, с), 1,56 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+.
Третий пик на колонке SFC AD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(6-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде коричневого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,20 (1Н, дд, J=7,7, 1,7 Гц), 7, 87-7, 99 (ЗН, м) , 7, 75-7, 83 (2Н, м) , 7,32 (2Н, уш.с), 7,15 (1Н, ддд, J=9,8, 8,9, 2,4 Гц), 6,92 (1Н, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 6,86 (1Н, д, J=7,2 Гц), 5,36 (1Н, кв, J=6, 6 Гц), 2,88 (ЗН, с), 1,43 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452, 0 [М+Н]+.
Четвертый пик на колонке SFC AD-H: 4-амино-б-(((IS)-1-(6-
фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде коричневого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,20 (1Н, дд, J=7,7, 1,7 Гц), 7, 86-8, 00 (ЗН, м) , 7, 74-7, 84 (2Н, м) , 7,32 (2Н, уш.с), 7,10-7,20 (1Н, м) , 6,92 (1Н, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 6,86 (1Н, д, J=5,5 Гц), 5,36 (1Н, кв, J=6, 1 Гц), 2,88 (ЗН, с), 1,43 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+.
Пример 20: Получение 2-( (IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидаЗол-7-карбоксамида
2-(Циклопропиламино)-N-метил-З-нитробензамид
К раствору 2-бром-З-нитробензойной кислоты (0,974 г, 3,96 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавили метиламин, 2,0 М раствор в тетрагидрофуране (2,97 мл, 5,94 ммоль), 1,1'-диметилтриэтиламин (1,38 мл, 7,92 ммоль) и (1Н-бензо[d] [ 1,2,3]триазол-1-илокси)трипирролидин-1-илфосфония гексафторфосфат (V) (2,47 г, 4,7 5 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой и насыщенным солевым раствором, высушили над MgS04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя flXM/EtOAc-flMX (1:1) в качестве элюента, для получения 2-бром-Ы-метил-3-нитробензамида: ЖХ-МС (ESI) m/z 261,0 [М+Н]+.
Смесь 2-бром-Ы-метил-3-нитробензамида (830 мг, 3,20 ммоль), циклопропанамина (666 мкл, 9,61 ммоль) в ТГФ (10 мл) в атмосфере N2 нагревали при 60°С в течение 18 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой и насыщенным солевым раствором, высушили над MgS04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя ДХМ-EtOAc (1:1) в качестве элюента, для получения 2-(циклопропиламино)-N-метил-З-
нитробензамида: гЯ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 8, 54-8, 47 (м, 2Н) , 7,95 (дд, J=8, 4 Гц, 1Н) , 7,64 (дд, J=8, 4 Гц, 1Н) , 6,77 (дд, J=8, 4 Гц, 1Н) , 2,76 (д, J=8 Гц, ЗН) , 2, 68-2, 62 (м, 1Н) , 0,670,60 (м, 2Н), 0,44-0,40 (м, 2Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 236,1 [М+Н]+.
3-Амино-2-(циклопропиламино)-N-метилбензамид
К раствору 2-(циклопропиламино)-N-метил-З-нитробензамида (1,76 г, 7,48 ммоль) в МеОН (25 мл) добавили 10% вес. палладий-на-углероде (180 мг, 7 5 мкмоль) в атмосфере N2, После продувания колбы N2 в течение 2 минут, раствор перемешивали под баллоном Н2 в течение 3 часов. Данные ЖХ-МС показали, что реакция завершена. Реакционную смесь отфильтровали и собрали фильтраты,
промыли их МеОН и концентрировали. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя EtOAc:ДХМ (1:1) в качестве элюента, для получения З-амино-2-(циклопропиламино)-N-метилбензамида: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) 8 6, 85-6, 80 (м, ЗН) , 6,20 (уш., 1Н) , 5,94 (уш., 1Н) , 4,07 (уш., 1Н) , 2,98 (д, J=4 Гц, ЗН) , 2, 63-2, 55 (м, 1Н) , 0, 65-0, 53 (м, 4Н); LCMS (ESI) m/z 206,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-
(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
NHBoc
К раствору З-амино-2-(циклопропиламино)-N-метилбензамида (1,31 г, 6,38 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавили Boc-L-Ala-OH (1,21 г, 6,38 ммоль), 1,1'-диметилтриэтиламин (2,22 мл, 12,8 ммоль) и (1Н-бензо[d][1,2,3]триазол-1-илокси)трипирролидин-1-илфосфония гексафторфосфат (V) (3,99 г, 7,66 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором и высушили над сульфатом магния. После концентрирования при пониженном давлении, остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя EtOAc:ДХМ (1:1) в качестве элюента, для получения (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 8,56 (уш.с, 1Н), 8,14 (д, J=8 Гц, 1Н), 7,18 (д, J=8 Гц, 1Н), 6,99 (дд, J=8, 8 Гц, 1Н) , 6,24 (уш.с, 1Н) , 6,01 (уш.с, 1Н) , 4,38 (уш.с, 1Н) , 3,00 (д, J=4 Гц, ЗН) , 2,58 (уш.с, 1Н) , 1,60 (с, ЗН) , 1,48 (с, 9Н) , 0, 64-0,59 (м, 2Н) , 0, 54-0, 49 (м, 2Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 377,2 [М+Н]+.
(S)-2-(1-Аминоэтил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид
Перемешанный раствор (S)-трет-бутил 1-(2-
(циклопропиламино)-3-(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (1,1 г, 2,9 ммоль) в АсОН (30 мл) нагревали при 65°С в течение 2 часов и охладили до комнатной температуры. После концентрирования при пониженном давлении остаток обработали 4 М НС1 в 1,4-диоксане (20 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 0 минут. Смесь концентрировали при пониженном давлении и растворили в воде (5 мл), подщелачивали 1 н. NaOH до рН 9,5. Смесь концентрировали и растерли с МеОН-ДХМ (1:1). Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя ДХМ-МеОН-ЫЩОН (9:1:0,05) в качестве элюента, для получения (S)-2-(1-аминоэтил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамида: гЕ ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 7, 80 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,33 (д, J=8 Гц, 1Н), 7,23 (дд, J=8, 8 Гц, 1Н), 6,09 (уш., 1Н), 4,61 (т, J=8 Гц, 1Н), 3,53-3,46 (м, 1Н), 3,11 (д, J=4 Гц, ЗН), 1,63 (д, J=8 Гц, ЗН) , 1, 22-1, 07 (м, 2Н) , 1, 02-0, 94 (м, 1Н) , 0,90-0,83 (м, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 259,1 [М+Н]+.
2-((IS)-1-((6-Амино-5-и^ано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-N-метил-1Н-бензимидазол- 7 -карбоксамид
Смесь (S)-2-(1-аминоэтил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксамида (95 мг, 0,37 ммоль), 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (56,8 мг, 0,368 ммоль) и 1,1'-диметилтриэтиламина (128 мкл, 0,74 ммоль) в н-бутаноле (2 мл)
перемешивали при 120°С в течение 5 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) в качестве элюента, для получения 2-((lS)-l-
((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 8, 45-8, 40 (м, 1Н) , 8,05 (с, 1Н) , 7,66 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,62
(д, J=4 Гц, 1Н) , 7,31 (уш., 2Н) , 7,24 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,19
(дд, J=8, 8 Гц, 1Н) , 5,89-5,81 (м, 1Н) , 2,83 (д, J=4 Гц, ЗН) , 1,62 (д, J=8 Гц, ЗН), 1,12-1,04 (м, 2Н), 0,95-0,79 (м, 2Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 377,2 [М+Н]+.
Пример 21: Получение 2-( (IS)-1-((6-амино-5-(4-
(метилсульфонил)фенил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-N-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида 6-Хлор-5-йодпиримидин-4-амин
К суспензии 6-хлорпиримидин-4-амина (5,29 г, 40,8 ммоль) и трифторметансульфоновой кислоты (40 мл, 4 52 ммоль) добавили N-йодсукцинимид (9,19 г, 40,8 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 часов при комнатной температуре. Смесь вылили в 50 мл льда, содержащего 15 г NaOH, при перемешивании за 10 минут. Полученный осадок отфильтровали, промыли водой, растерли в ДХМ и собрали фильтрацией для получения б-хлор-5-йодпиримидин-4-амина: гЕ ЯШ (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8,11 (с, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 255, 9 [М+Н]+.
(S)-2-(1-(6-Амино-5-йодпиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-N-метил-1Н-бензо[d]имидаЗол-7-карбоксамид
CONHMe
Смесь
(S)-2-(1-аминоэтил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксамида (Полученного в Примере 20, 190 мг, 0,74 ммоль), б-хлор-5-йодпиримидин-4-амина (188 мг, 0,736 ммоль) и 1,1'-диметилтриэтиламина (256 мкл, 1,4 7 ммоль) в н-бутаноле (2 мл) перемешивали при 120°С. Через 18 часов смесь охладили до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) в качестве элюента, для получения (S)-2-(l-(6-амино-5-йодпиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензо [d] имидазол-7-карбоксамида: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!6) 8 8,46-8,40 (м, 1Н), 7,87 (с, 1Н), 7,67 (д, J=8 Гц, 1Н), 7,24 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,20 (дд, J=8, 8 Гц, 1Н) , 6,46 (м, 1Н) , 6,37 (д, J=8 Гц, 1Н) , 5, 82-5, 75 (м, 1Н) , 2,84 (д, J=4 Гц, ЗН) , 1,60 (д, J=8 Гц, ЗН) , 1,14-1,04 (м, 2Н) , 0, 93-0, 90 (м, 1Н) , 0,85-0,76 (м, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 478,0 [М+Н]+.
2-((IS)-1-((б-Амино-5-(4-(метилсульфонил)фенил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидаЗол-7-карбоксамид
Смесь (S)-2-(1-(б-амино-5-йодпиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамида (Полученного в Примере 20, 50,4 мг, 0,106 ммоль), 1,1'-бис (дифенилфосфино)ферроцен-палладия дихлорида (17,25 мг, 0,021
ммоль),
Na2C03
(О,026
мл,
0, 634
ммоль),
(метансульфонил)бензолбороновой кислоты (52,8 мг, 0,264 ммоль) в безводном 1,2-диметоксиэтане (5 мл) и воде (1 мл) нагревали до 8 0°С в атмосфере N2. Через 1 час смесь охладили до комнатной температуры и отфильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) в качестве элюента, для получения 2-((lS)-l-
((б-амино-5-(4-(метилсульфонил)фенил)-4-
пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8, 42-8, 37 (м, 1Н) , 8,06 (д, J=8 Гц, 2Н), 8,01 (с, 1Н), 7,61 (д, J=8 Гц, 2Н), 7,56 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,20 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,15 (дд, J=8, 8 Гц, 1Н) , 5, 85-5,75 (м, 2Н) , 3,28 (с, ЗН) , 2,83 (д, J=4 Гц, ЗН) , 1,49 (д, J=8 Гц, ЗН) , 1,18-1,08 (м, 2Н) , 0, 98-0, 92 (м, 1Н) , 0,83-0,75 (м, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 506,0 [М+Н]+.
Пример 22: Получение 4-амино-б-((1-(б-фтор-1-(3-
фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-
фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-
фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
5-Фтор-Ы-(3-фторфенил)-2-нитроанилин
К раствору 3-фторанилина (1,813 мл, 18,86 ммоль) и 2,4-дифтор-1-нитробензола (1,723 мл, 15,71 ммоль) в ДМФ (26,2 мл) добавили трет-бутоксид калия (3,53 г, 31,4 ммоль) в атмосфере газообразного аргона. Раствор перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, вылили в воду и экстрагировали ДХМ. Объединенные органические экстракты очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от
5 до 10% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения оранжевого твердого вещества, которое растерли в EtOAc:гексане (1:1) и отфильтровали для получения 5-фтор-Ы-(3-фторфенил)-2-нитроанилина в виде твердого оранжевого вещества: ЖХ-МС (ESI), m/z 251,1 [М+Н]+.
5-Фтор-Ы1-(3-фторфенил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с использованием 5-фтор-Ы-(3-фторфенил)-2-нитроанилина (0,820 г, 3,28 ммоль) для получения 5-фтор-Ы1-(3-фторфенил)бензол-1,2-диамина в виде оранжевого маслянистого вещества: ЖХ-МС (ESI), m/z 221,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(4-фтор-2-(3-фторфениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
NHBoc
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 5-фтор-Ы1-(3-фторфенил)бензол-1,2-диамина (0,501 г, 2, 275 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(3-фторфениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде твердого белого вещества: ЖХ-МС (ESI), m/z 390,1 [М+Н]+.
N-(1-(6-Фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этил)ацетамид
NHAc
использованием градиента от 0 до 10% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для получения рацемической смеси 4-амино-б-((1-(6-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде не совсем белого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,54 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 5,56 (кв.д, J=6,91, 6,65 Гц, 1Н) , 6,93 (дд, J=9, 00, 2,35 Гц, 1Н), 7,08-7,15 (м, 1Н), 7,17 (уш.с, 2Н), 7,31 (тд, J=8,41, 2,15 Гц, 1Н), 7,35-7,40 (м, 1Н), 7,48 (д, J=9,59 Гц, 1Н), 7,56
(тд, J=8,12, 6,65 Гц, 1Н) , 7,69 (д, J=7,63 Гц, 1Н) , 7,73 (дд, J=8, 80, 4, 89 Гц, 1Н) , 7,86 (с, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 392,1
[М+Н]+. Рацемическую смесь (0,085 г) разделили хиральным разделением, используя SFC, для получения двух фракций:
Первый элюированный энантиомер на колонке AD-H: 4-амино-6-
(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде твердого белого вещества (0, 020 г, выход 47%): гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,54 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 1, 59-1, 59 (м, ОН), 5,56 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н) , 6,94 (дд, J=8, 90, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,13 (тд, J=9,83, 8,95, 2,54 Гц, 1Н), 7,18 (уш.с, 2Н), 7,31 (тд, J=8,56, 2,45 Гц, 1Н) , 7,38 (дд, J=7, 92, 0, 88 Гц, 1Н) , 7,48 (д, J=9,59 Гц, 1Н) , 7,57 (тд, J=8,12, 6,65 Гц, 1Н) , 7,70 (д, J=7,43 Гц, 1Н) , 7,74
(дд, J=8,80, 4,89 Гц, 1Н), 7,86 (с, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 392,2
[М+Н]+.
Второй элюированный энантиомер на колонке AD-H: 4-амино-6-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде твердого белого вещества (0, 024 г, выход 57%): гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,54 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,57 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н) , 6,94 (дд, J=8, 90, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,13 (тд, J=9, 34, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,18 (уш.с, 2Н), 7,31 (тд, J=8,51, 2,35 Гц, 1Н), 7,38 (д, J=7,83 Гц, 1Н) , 7,49 (д, J=9,39 Гц, 1Н) , 7, 53-7, 62 (м, 1Н) , 7,70 (д, J=7,43 Гц, 1Н) , 7,74 (дд, J=8, 80, 4, 89 Гц, 1Н) , 7,87 (с, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 392,2 [М+Н]+.
Пример 23: Получение N-((1R)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-амина и N-((IS)-1-(б-фтор-1
(3-фторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-амина
В пробирку для микроволновых реакций поместили б-хлорпурин
(0,113
0, 732
ммоль),
1- (б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин (полученный в примере 22, 0,200 г, 0, 732 ммоль) и DIEA (0, 256 мл, 1,46 ммоль) в н-бутаноле
(3,66 мл) . Раствор перемешивали при 120°С в течение 3 часов, отфильтровали, а полученный осадок промыли EtOAc:гексаном (1:4) для получения не совсем белого твердого вещества. Твердое вещество очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 10 до 90% ДХМ: МеОН :NH.40H
(90:10:1)- в ДХМ в качестве элюента, для получения не совсем белого твердого вещества. Этот материал растерли в EtOAc:гексане (1:3), и отфильтровали суспензию для получения N-
(1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,60 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 5,57 (уш.с, 1Н), 6,94 (дд, J=8,90, 2,25 Гц, 1Н), 7,11 (тд, J=9,39, 2,35 Гц, 1Н) , 7,29 (т, J=7,04 Гц, 1Н) , 7, 40-7, 47 (м, 1Н) , 7, 47-7, 63 (м, 2Н) , 7,70 (дд, J=8, 80, 4, 89 Гц, 1Н) , 7,94 (с, 1Н) , 8,07 (с, 1Н) , 8,12 (с, 1Н) , 12,78 (уш.с, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 392,1
[М+Н]+.
Рацемическую смесь (0,090 г) разделили хиральным разделением, используя SFC, для получения двух фракций: Первый элюированный энантиомер на колонке AD-H: N-( (1R)-1-(б-фтор-1-
(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 1,59
(д, ЗН) , 5,56 (уш.с, 1Н) , 6,93 (д, J=8,41 Гц, 1Н) , 7,10 (т, J=8,71 Гц, 1Н) , 7,28 (уш.с, 1Н) , 7,43 (д, 1Н) , 7, 47-7, 60 (м, 2Н) , 7,69 (дд, J=8,51, 4,79 Гц, 1Н) , 7,94 (с, 1Н) , 8,01-8,21
(м, 2Н) , 12,88 (уш.с, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 392,2 [М+Н]+.
Второй элюированный энантиомер на колонке AD-H: N-((1S)-1-
(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 1,61 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,58 (уш.с, 1Н) , 6,95 (дд, J=8, 80, 2, 35 Гц, 1Н) , 7,04-7,19 (м, 1Н) , 7,29 (т, J=6,26 Гц, 1Н) , 7,44 (д, J=8,00 Гц, 1Н) , 7, 48-7, 63 (м, 2Н) , 7,71 (дд, J=8, 80, 4, 89 Гц, 1Н) , 7,98 (уш.с, 1Н) , 8,08 (с, 1Н) , 8,13
(уш.с, 1Н), 12,89 (уш.с, 1Н). Масс-спектр (ESI) m/z 392,1
[М+Н]+.
Пример 24: Получение 4-амино-б-(((1R)-1-(6-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(6-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
5-Хлор-Ы-(3,5-дифторфенил)-2-нитроанилин
К раствору 4-хлор-2-фтор-1-нитробензола (2,500 г, 14,24 ммоль) и 3,5-дифторанилина (2,206 г, 17,09 ммоль) в ДМФ (22,61 мл) добавили трет-бутоксид калия (3,20 г, 28,5 ммоль) в атмосфере аргона и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение ночи. Раствор вылили в воду и экстрагировали ДХМ, а органические экстракты очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 5 до 10% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения 5-хлор-И-(3,5-дифторфенил)-2-нитроанилина в виде твердого оранжевого
вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 6,98 (тт, J=9,34, 2,20 Гц, 1Н), 7,02-7,11 (м, ЗН), 7,35 (д, J=2,15 Гц, 1Н), 8,14 (д, J=9,00 Гц, 1Н), 9,40 (с, 1Н)-.
5-Хлор-Ы1-(3,5-дифторфенил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с использованием 5-хлор-Ы-(3,5-дифторфенил)-2-нитроанилина (0,890 г, 3,13 ммоль) для получения 5-хлор-Ы1-(3,5-дифторфенил)бензол-1,2-диамина в виде светло-пурпурного твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 355,1,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(4-хлор-2-(3,5-
дифторфениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 5-хлор-Ы1-(3,5-дифторфенил)бензол-1,2-диамина (0,780 г, 3,06 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(4-хлор-2-(3,5-дифторфениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в
виде твердого белого вещества (1,12 г, выход 86%): ЖХ-МС (ESI),
m/z 424,0 [М+Н]+.
N-(1-(6-Хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-
ил)этил)ацетамид
NHAc
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(4-хлор-2-(3,5-
дифторфениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (1,118 г, 2,63 ммоль) для получения N-(1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)
1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде белого твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 350,0 [М+Н]+.
1-(6-Хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,920 г, 2,63 ммоль) для получения 1-(б-(хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде не совсем белого твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 308,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(6-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(6-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 1- ( б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,200 г, 0,650 ммоль) для
получения 4-амино-б-((1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 1,58 (д, ЗН), 5,64 (квд, J=7,04, 6,85 Гц, 1Н), 7,20 (уш.с, 2Н), 7,25-7,44 (м, 5Н), 7,75 (т, J=7,83 Гц, 2Н), 7,88 (с, 1Н): ЖХ-МС (ESI) m/z 426,0 [М+Н]+.
Рацемическую
смесь
(0,116
разделили
хиральным
разделением, используя SFC, для получения двух фракций:
Первый элюированный энантиомер на колонке AD-H: 4-амино-6-
(((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил (0,041 г, выход 71%) в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,58 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,63 (кв, J=6, 90 Гц, 1Н) , 7,18 (уш. с, 2Н) , 7,26-7,41 (м, 5Н) , 7, 70-7, 78 (м, 2Н) , 7,88
(с, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 426,2 [М+Н]+.
Второй элюированный энантиомер на колонке AD-H: 4-амино-6-
( ( (IS)-1- ( б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,56 (д, ЗН) , 5,63 (кв, J=6,90 Гц, 1Н) , 7,15 (уш.с, 2Н) , 7, 24-7, 43 (м, 5Н) , 7, 67-7, 77 (м, 2Н) , 7,86 (с, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI), m/z 426,2
[М+Н]+.
Пример 25: Получение 4-амино-б-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом D для получения 4-амино-б-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-с!6) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,72 (1Н, д, J=7,0 Гц), 7,58 (2Н, дд,
4-Амино-6-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
J=8,0, 0,6 Гц), 7,14-7,37 (5H, м), 7,04-7,12 (1Н, м), 5,56 (1Н, кв, J=6,5 Гц), 1,57 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI)] m/z 410,25 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (32 9 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций:
Первый пик на колонке SFC AD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(1-
(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде светло-коричневого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,72
(1Н, д, J=7,2 Гц), 7,58 (2Н, дд, J=8,l, 0,7 Гц), 7,14-7,38 (5Н, м) , 7,04-7,12 (1Н, м) , 5,56 (1Н, кв, J=6, 6 Гц), 1,57 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,0 [М+Н]+.
Второй пик на колонке SFC AD-H: 4-амино-б-(((IS)-1-(1-
(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде светло-коричневого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,72
(1Н, д, J=7,0 Гц), 7,58 (2Н, дд, J=8,0, 0,6 Гц), 7,14-7,37 (5Н, м) , 7,04-7,12 (1Н, м) , 5,56 (1Н, кв, J=6,5 Гц), 1,57 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 410,0 [М+Н]+.
Пример 26: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-
(циклопропилметил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(1-
(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил 1-(1-(циклопропилметил)-6-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат и (S)-трет-бутил 1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
К раствору (S)-трет-бутил 1-(б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (полученного в Примере 16, 0,500 г, 1,790 ммоль) в безводном ДМФ (8,95 мл) добавили карбонат цезия (1,167 г, 3,58 ммоль). Добавили (бромметил)циклопропан (0,208 мл, 2,14 8 ммоль) и перемешивали раствор при комнатной температуре в течение двух часов. Раствор вылили в воду и экстрагировали ДХМ. Органический слой концентрировали и очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 10 до 60% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения смешанных региоизомеров (S)-трет-бутил 1-(1-(циклопропилметил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата и (S)-трет-бутил 1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата в виде твердого белого вещества.
(S)-1-(1-(Циклопропилметил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-
ил)этанамин и (S)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией D5b в Общем способе D,
используя смешанные региоизомеры (S)-трет-бутил 1-(1-
(циклопропилметил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
и (S)-трет-бутил 1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат (0,514 г, 1,542 ммоль) для
получения смеси (S)-1-(1-(циклопропилметил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина и (S)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил) этанамина в виде светло-желтого маслянистого вещества: ЖХ-МС (ESI), m/z 234,2 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрил
В пробирку для микроволновых реакций поместили смесь (S)-
1-(1-(циклопропилметил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этанамина и (S)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,280 г, 1,20 ммоль) в бутан-
1- оле (6,0 мл), 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрил (0,186 г, 1,2 00 ммоль) и DIEA (0,2 52 мл, 1,4 4 ммоль). Полученный раствор перемешивали при 12 0°С под микроволновым излучением в течение 3 часов и очистили смесь колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для получения смеси региоизомеров 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-
2- ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(( (IS)-1-
(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 0, 29-0, 59 (м, 8Н) , 1,17-1,32 (м, 2Н) , 1,62 (д, J=6,85 Гц, 6Н) , 4, 04-4, 23 (м, 4Н) , 5, 64-5, 79 (м, 2Н) , 6,97-7,15 (м, 2Н), 7,32 (уш.с, 4Н), 7,43 (дд, J=9,78, 2,54 Гц, 1Н) , 7,52 (дд, J=9, 49, 2, 45 Гц, 1Н) , 7, 59-7, 67 (м, 2Н) , 7,76
(д, J=2,74 Гц, 1Н) , 7,78 (д, J=2,54 Гц, 1Н) , 8,06 (с, 1Н) , 8,06
(с, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 352,2 [М+Н]+.
Рацемическую смесь (32 0 мг) разделили хиральным разделением, используя SFC, для получения двух фракций:
Первый элюированный энантиомер на колонке: 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил (0,112 г, выход 81%) в
виде белого твердого вещества: Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 0,31-0,57 (м, 4Н) , 1,18-1,32 (м, 1Н) , 1,62 (д, J=6,65 Гц, ЗН) , 4,05-4,21 (м, 2Н), 5,73 (кв, J=6,26 Гц, 1Н), 7,04 (ддд, J=9,88, 8,90, 2,54 Гц, 1Н), 7,32 (уш.с, 2Н), 7,52 (дд, J=9,49, 2,45 Гц, 1Н) , 7,62 (дд, J=8, 80, 4, 89 Гц, 1Н) , 7,76 (д, J=6, 65 Гц, 1Н) , 8,06 (с, 1Н); ЖХ-МС (ESI), m/z 352,2 [М+Н]+.
Второй элюированный энантиомер на колонке: 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил (0,102 г, выход 73%) : 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 0, 29-0, 60 (м, 4Н) , 1,12-1,34 (м, 1Н) , 1,62 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 4, 07-4, 25 (м, 2Н) , 5, 64-5, 80 (м, 1Н), 7,10 (тд, J=9,29, 2,54 Гц, 1Н), 7,31 (уш.с, 2Н), 7,43 (дд, J=9,78, 2,54 Гц, 1Н), 7,63 (дд, J=8,80, 4,89 Гц, 1Н), 7,77 (д, J=3,91 Гц, 1Н), 8,06 (с, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 352,2 [М+Н]+.
Пример 27: Получение 2-( (IS)-1-((6-амино-5-(трифторметил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида
Смесь
(S)-2-(1-аминоэтил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксамида (Полученного в Примере 20, 150
мг, 0,581 ммоль), б-хлор-5-(трифторметил)пиримидин-4-амина (172 мг, 0,871 ммоль) и 1,1'-диметилтриэтиламина (202 мкл, 1,161 ммоль) в н-бутаноле (2 мл) перемешивали при 12 0°С. Через 42 часа смесь охладили до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) с 0,2% NH4OH в качестве элюента, для получения 2-((IS)-1-((б-амино-5-(трифторметил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол
7-карбоксамида: гЯ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 8, 50-8, 41 (м, 1Н) , 8,05 (с, 1Н) , 7,66 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,28-7,18 (м, 2Н) , 6,906,78 (м, 2Н) , 5,89-5,81 (м, 1Н) , 3, 40-3, 33 (м, 1Н) , 2,82 (д, J=4 Гц, ЗН), 1,60 (д, J=8 Гц, ЗН), 1,16-1,03 (м, 2Н), 0,95-0,75 (м, 2Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 420,1 [М+Н]+.
Пример 28: Получение N-((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-
дифторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-амина и N-((IS)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-амина
Получили по способу Примера 23, используя 1-(6-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин (полученный в Примере 24, 0,143 г, 0,465 ммоль) для получения N-(1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина (смеси энантиомеров) в виде светло-розового твердого вещества (0, 083 г, выход 42%): 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО~о16) 5 м.д. 1,64 (д, ЗН) , 5,65 (уш.с, 1Н) , 7,18-7,34 (м, ЗН) , 7,41 (д, J=6,26 Гц, 2Н) , 7,72 (д, J=8,61 Гц, 1Н) , 8,01 (уш.с, 1Н) , 8,06 (с, 1Н) , 8,08 (с, 1Н) , 12,89 (с, 1Н) : ЖХ-МС (ESI) m/z 426,2 [М+Н]+.
Рацемическую смесь (0,083 г) разделили хиральным разделением, используя SFC, для получения двух фракций:
Первый элюированный энантиомер на колонке AD-H: N-((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,64 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,65 (уш.с, 1Н) , 7,207,33 (м, ЗН), 7,41 (д, J=6,85 Гц, 2Н), 7,71 (д, J=8,61 Гц, 1Н), 7,97 (уш.с, 1Н) , 8,06 (с, 1Н) , 8,10 (с, 1Н) , 12,75 (уш.с, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 426,1 [М+Н]+.
Второй элюированный энантиомер на колонке AD-H: N-((1S)-1
(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,64 (д, J=6,60 Гц, ЗН) , 5,65 (уш.с, 1Н) , 7,177,35 (м, ЗН), 7,41 (д, J=6,ll Гц, 2Н), 7,71 (д, J=8,56 Гц, 1Н), 7,97 (уш.с, 1Н) , 8,06 (с, 1Н) , 8,11 (с, 1Н) , 12,87 (уш.с, 1Н) . Масс-спектр (ESI), т/е=426,2 [М+Н]+.
Пример 29: Получение 2-( (IS)-1-((6-амино-5-
(метилсульфонил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида
К смеси трифлата меди(II) (7,6 мг, 0,021 ммоль), метансульфината натрия (25,7 мг, 0,251 ммоль), (S)-2-(l-(6-амино-5-йодпиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамида (полученного в Примере 21, 100 мг, 0,210 ммоль) в атмосфере N2, добавили N,N'-диметилэтилендиамин (4,52 мкл, 0, 042 ммоль) и ДМСО (1 мл) . Смесь поместили на 110°С масляную баню. После перемешивания в течение 18 часов при 110°С смесь охладили до комнатной температуры, разбавили EtOAc и отфильтровали через слой силикагеля. Фильтрат промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) с 0,2% NH4OH в качестве элюента, для получения 2-((IS)-1-((6-амино-5-(метилсульфонил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) 8, 02-7, 97 (м, 2Н) , 7,65 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,22 (д, J=8 Гц, 1Н), 7,12 (дд, J=8, 8 Гц, 1Н), 6,01-5,92 (м, 2Н), 3,453,40 (м, 2Н) , 3,16 (с, ЗН) , 3,01 (д, J=4 Гц, ЗН) , 1,61 (д, J=4 Гц, ЗН) , 1,22-1,10 (м, 2Н) , 1, 04-0, 96 (м, 1Н) , 0, 80-0, 73 (м,
1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 430,1 [M+H]+.
Пример 30 : Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил 1-(1-циклопропил-6-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат и (S)-трет-бутил 1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
К раствору (S)-трет-бутил 1-( б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (0,500 г, 1,790 ммоль), циклопропилбороновой кислоты (0,308 г, 3,58 ммоль) и карбоната цезия (1,167 г, 3,58 ммоль) в дихлорэтане (5,97 мл) добавили 2,2'-бипиридил (0,280 г, 1,790 ммоль) и ацетат меди(II) (0,173 мл, 1,790 ммоль). Раствор перемешивали при 70 °С в течение 90 минут, а затем при комнатной температуре в течение ночи. Раствор вылили в 10% водный раствор NH4C1 и экстрагировали ДХМ. Объединенные органические экстракты очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для получения смеси (S)-трет-бутил 1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата и (S)-трет-бутил 1- (1-циклопропил-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата в виде твердого светло-коричневого вещества.
(S)-1-(1-Циклопропил-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин и (S)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензо |^]имидаЗол-2-ил)этанамин:
Получили в соответствии со Стадией D5b в Общем способе D,
используя (S)-трет-бутил 1-(1-циклопропил-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат и (S)-трет-бутил 1-(1
циклопропил-5-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
(смешанные региоизомеры, 0,220 г, 0,688 ммоль) для получения
смеси (S)-1-(1-циклопропил-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этанамина и (S)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде светло-коричневого твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 220,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(1-циклопропил-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрил
В пробирку для микроволновых реакций поместили смесь (S)-1-(1-циклопропил-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина и (S)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (смешанные региоизомеры, 0,142 г, 0,648 ммоль) в н-бутаноле (2,159 мл), а затем DIEA (0,136 мл, 0,777 ммоль) и 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрил (0,100 г, 0,648 ммоль). Суспензию перемешивали при 120°С в течение 3 часов под микроволновым излучением и очистили смесь колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 8% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для получения смеси 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-( ( (IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 0, 96-1, 28 (м, 8Н) , 1,62 (д, J=6, 85 Гц, 6Н) , 3, 34-3, 40 (м, 2Н) , 5, 73-5, 87 (м, 2Н) , 6,99-7,15 (м, 2Н) , 7,30 (уш.с, 4Н) , 7,37 (дд, J=9, 39, 2, 54 Гц, 1Н) , 7,42 (дд, J=9, 68, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,53-7,64 (м, 2Н), 7,70 (д, J=7,24 Гц, 2Н), 8,05 (с, 1Н), 8,05 (с, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 338,2 [М+Н]+.
Пример 31: Получение 4-амино-б-((1-(б-фтор-1-(2-
пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-((1-(5-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-(амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-(5-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
1-(6-Фтор-1-(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин и 1-(5-фтор-1-(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
В пробирку для микроволновых реакций поместили (S)-трет-
бутил 1-(б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
(полученный в Примере 16, 0,5126 г, 1,835 ммоль), N,N-
диметилацетамид (4,08 мл), 2-фторпиридин (0,189 мл, 2,202
ммоль) и карбонат цезия (1,196 г, 3,67 ммоль). Смесь нагревали
в течение 4 0 минут в микроволновом реакторе (температура:
150°С. Давление: 92-94 psi, мощность: 8~10 Вт)-. Затем смесь
вылили в EtOAc (100 мл), отфильтровали, а затем концентрировали
в высоком вакууме для удаления большей части DMA. Остаток
очистили силикагелевой колоночной хроматографией на 4 0 г
колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от 0 до 2 0% EtOAc в
гексане за 14 минут, затем 20% EtOAc в гексане за 14 минут,
затем градиент от 20 до 50% EtOAc в гексане за 14 минут, а
затем 50% EtOAc в гексане за 14 минут в качестве элюента, для
получения смеси четырех изомеров двух региоизомеров и двух
стереоизомеров каждого региозиомера, 1-(б-фтор-1-(пиридин-2-
ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина и 1-(5-фтор-1-(пиридин-
2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,1486 г, 0,580 ммоль, выход 31,6%) в виде желтого сиропообразного вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 257,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-((1-(6-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-б-((1-(5-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D,
используя смесь 1-(б-фтор-1-(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-
2-ил)этанамина и 1-(5-фтор-1-(пиридин-2-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,1428 г, 0,557 ммоль) для получения смеси четырех изомеров 4-амино-б-((1-(б-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-( (1- (5-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила (0,1038 г, 0,227 ммоль, выход 49,8%) в виде светло-желтого
твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,58-8,63 (2Н, м) , 8,06 (2Н, тдд, J=7,7, 7,7, 4,5, 2,0 Гц), 7,86 (2Н, д, J=3,3 Гц), 7, 67-7, 78 (5Н, м) , 7,57 (1Н, дд, J=9,5, 2,4 Гц), 7,48-7,54 (2Н, м), 7,35 (1Н, дд, J=8,9, 4,8 Гц), 7,08-7,24 (7Н, м) , 5, 76-5, 87 (2Н, м) , 1,53 (6Н, дд, J=6,7, 4,6 Гц), отношение двух региоизомеров -1:1; ЖХ-МС (ESI)] m/z 375,1 [М+Н]+. Время удержания двух региоизомеров было одинаковым на ЖХ-МС и ВЭЖХ.
4-Амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-6-(((1R)-1-(5-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-
Рацемическую смесь (94 мг) разделили с использованием препаративной SFC на колонке AD-H для получения трех фракций: 1а, 2а и За, а затем фракцию 1а, которая содержала два изомера, дополнительно разделили на колонке OJ для получения двух фракций 1с и 2с.
Фракция 1с (из 1а) : Первый пик на колонке SFC AD-H и первый пик на колонке SFC OJ-H: (R)-4-амино-б-(1-(б-фтор-1-
(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8, 58-8, 62 (1Н, м) , 8,06 (1Н, тд, J=7,8, 1,9 Гц), 7,86 (1Н, с), 7,75 (1Н, дд, J=8,7, 4,8 Гц), 7,70 (2Н, д, J=8,0 Гц), 7,50 (1Н, ддд, J=7,5, 4,9, 0,9 Гц), 7,11-7,22 (4Н, м) , 5,82 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,53 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI)] m/z 375,1 [М+Н]+;
Фракция 2с (из 1а) : Первый пик на колонке SFC AD-H и второй пик на колонке SFC OJ-H: (R)-4-амино-б-(1-(5-фтор-1-
(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил (0,01796 г, 0,048 ммоль, выход 19,11%) в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 8, 59-8, 63 (1Н, м) , 8,07 (1Н, тд, J=7,7, 2,0 Гц), 7,85
(1Н, с), 7,70 (2Н, дд, J=7,8, 2,3 Гц), 7,57 (1Н, дд, J=9,6, 2,3 Гц), 7,51 (1Н, ддд, J=7,5, 4,9, 0,9 Гц), 7,35 (1Н, дд, J=8,8, 4,7 Гц), 7,10-7,21 (ЗН, м) , 5,80 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,54 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 375, 1 [М+Н]+;
Фракция 2а: Второй пик на колонке SFC AD-H: (S)-4-амино-6-
(1-(б-фтор-1-(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил (0,0217 г, 0,058 ммоль, выход 23,09%) в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н
ЯМР (400 МГц, ДМСО-с16) 5 м.д. 8,60 (1Н, дт, J=3,8, 1,0 Гц),
8.6 (1Н, тд, J=7,7, 2,0 Гц), 7,86 (1Н, с), 7,75 (1Н, дд, J=8,7, 4,8 Гц), 7,70 (2Н, д, J=8,0 Гц), 7,50 (1Н, ддд, J=7,5, 4,9, 0,9 Гц), 7,10-7,25 (4Н, м) , 5,82 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,53 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI)] m/z 375,1 [М+Н]+;
Фракция За: Третий пик на колонке SFC AD-H: (S)-4-амино-6-(1-(5-фтор-1-(пиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил (0,01998 г, 0,053 ммоль, выход 21,26%) в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 8,61 (1Н, дд, J=4,8, 1,3 Гц),
8.7 (1Н, тд, J=7,7, 1,8 Гц), 7,85 (1Н, с), 7, 67-7, 74 (2Н, м) , 7,57 (1Н, дд, J=9,6, 2,3 Гц), 7,51 (1Н, ддд, J=7,5, 4,9, 0,9 Гц), 7,35 (1Н, дд, J=8,9, 4,8 Гц), 7,08-7,26 (ЗН, м), 5,80 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,54 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 375,1 [М+Н] +;
[ПРИМЕЧАНИЕ]: Региохимию каждого изомера подтвердили по данным HSQC, NOESY и COSY ЯМР.
Пример 32: Получение 1-циклопропил-Ы-метил-2-((IS)-1-(9Н-пурин-6-иламино)этил)-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида
Получили по Способу в Примере 23, используя (S)-2-(l-аминоэтил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид (полученный в Примере 20, 91,8 мг, 0,335 ммоль) для
получения
1-циклопропил-Ы-метил-2-((IS)-1-(9Н-пурин-б-
иламино)этил)-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида (45 мг, 0,120 ммоль, выход 33,6%): гЕ ЯМР (400 МГц, MeOH-d4) 5 8,13 (с, 1Н) , 8,01 (с, 1Н) , 7,56 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,24 (д, J=8 Гц, 1Н), 7,15
(дд, J=8,8 Гц, 1Н) , 3, 43-3, 35 (м, 1Н) , 2,88 (с, ЗН) , 1,70 (д, J=8 Гц, ЗН) , 1, 38-1, 30 (м, 1Н) , 1,16-0,98 (м, 2Н) , 0,92-0,83
(м, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 377,0 [М+Н]+.
Пример 33: Получение 4-амино-б-((1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
5-Фтор-Ы-(4-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амин
К раствору 2,4-дифтор-1-нитробензола (1,723 мл, 15,71 ммоль) и З-амино-5-фторпиридина (1,468 г, 13,10 ммоль) в ДМФ (21,83 мл) добавили трет-бутоксид калия (2,94 г, 26,2 ммоль). Раствор перемешивали в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение ночи. Раствор вылили в воду и экстрагировали EtOAc, органические экстракты высушили над сульфатом магния и концентрировали до коричневого твердого вещества. Коричневое твердое вещество очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 5 до 30% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения 5-фтор-N-(4-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина в виде оранжевого твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 252,2 [М+Н]+.
4-Фтор-Ы1-(5-фторпиридин-З-ил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с
использованием
5-фтор-Ы-(4-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина
(1,17 г, 4,66 ммоль) для получения 4-фтор-Ы1-(5-фторпиридин-З-ил) бензол-1,2-диамина в виде твердого желтого вещества.
(S)-трет-Бутил
1-(4-фтор-2-(5-фторпиридин-З-
иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 4-фтор-Ы1-(5-фторпиридин-З-ил)бензол-1,2-диамина (0,752 г, 3,40 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(5-фторпиридин-З-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (1,274 г, выход 98%) в виде твердого оранжевого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 393,2 [М+Н]+.
N-(1-(6-Фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-
ил)этил)ацетамид
NHAc -N
N F
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(5-фторпиридин-З-иламино) фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (1,27 г, 3,24 ммоль) для получения N-(1-(б-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде твердого розового вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 317,2 [М+Н]+.
1-(6-Фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- (б-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,520 г, 1,644 ммоль) для получения 1- ( б-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол
2-ил)этанамина в виде розового пенистого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 275,2 [М+Н]+.
4-Амино-6-((1-(6-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
В пробирку для микроволновых реакций поместили 4-амино-6-
хлорпиримидин-5-карбонитрил (0,075 г, 0,486 ммоль), DIEA (0,162
мл, 0, 926 ммоль) и 1-(б-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин (0,127 г, 0,463 ммоль) в н-
бутаноле (2,315 мл). Раствор перемешивали при 120°С в течение 4
часов под микроволновым излучением, а затем очистили колоночной
хроматографией на силикагелевой колонке с использованием
градиента от 0 до 10% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для
получения 4-амино-б-((1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,59 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,60 (квд, J=7,04, 6,85 Гц, 1Н), 7,08 (дд, J=9,00, 2,35 Гц, 1Н), 7,15 (тд, J=9, 78, 8, 90, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,25 (уш.с, 2Н) , 7,69-7,81 (м, 2Н) , 7,84 (с, 1Н) , 8,08 (д, J=9, 00 Гц, 1Н) , 8,63 (с, 1Н) , 8,67 (д, J=2,54 Гц, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н]+.
Получили по способу Примера 23, используя 1-(б-хлор-1-(5-
Пример 34: Получение N-(1-(б-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-амина
фторпиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин (полученный в Примере 33, 0,160 г, 0,583 ммоль) для получения N-(1-(б-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 5 м.д. 1,66 (д, ЗН) , 5,61 (уш.с, 1Н) , 7,05 (д, J=9,00 Гц, 1Н) , 7,14 (т, J=9,19 Гц, 1Н) , 7,73 (дд, J=8,71, 4,79 Гц, 1Н) , 7,98-8,16 (м, 4Н), 8,56 (уш.с, 1Н), 8,64 (с, 1Н), 12,89 (уш.с, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 393,1 [М+Н]+.
Пример 35: Получение N-((IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-амина
З-Фторбензол-1,2-диамин
H2N.
К раствору 2-фтор-б-нитроанилина (2 г, 12,8 ммоль) в МеОН (15 мл) добавили 10% вес. палладий-на-углероде (180 мг, 75 мкмоль) в атмосфере N2. После продувания колбы N2 в течение 2 минут, раствор перемешивали под баллоном Н2. Через б часов смесь отфильтровали через слой целита, промыли МеОН и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя EtOAc:ДХМ (1:1) в качестве элюента, для получения 3-фторбензол-1,2-диамина: ЖХ-МС (ESI) m/z 127,2 [М+Н]+.
N-((IS)-1-(7-Фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-
амин
NHBoc
К раствору З-фторбензол-1,2-диамина (1,53 г, 12,1 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавили Boc-L-Ala-OH (2,29 г, 12,1 ммоль), 1,1'-диметилтриэтиламин (4,22 мл, 24,3 ммоль) и (1Н-бензо[d][1,2,3]триазол-1-илокси)трипирролидин-1-илфосфония
гексафторфосфат (V) (6,31 г, 12,1 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой и насыщенным солевым раствором, высушили над MgS04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя EtOAc:ДХМ (1:1) в качестве элюента, для получения N-( (IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-
ил) этил)-9Н-пурин-6-амина: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 9,31 (уш., 1Н) , 7,12 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,00 (д, J=8 Гц, 1Н) , 6,946,87 (м, 1Н) , 6, 58-6, 52 (м, 1Н) , 4,83 (уш., 1Н) , 4,17-4,05 (м, 1Н), 1,40 (с, 9Н), 1,28 (д, J=8 Гц, ЗН).
(S)-1-(7-Фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
H2N N.
Перемешанный раствор (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (2,08 г, 7,00 ммоль) в АсОН (30 мл) нагревали при 65°С в течение 2 часов и охладили до комнатной температуры. После концентрирования при пониженном давлении, остаток обработали 4 М НС1 в 1,4-диоксане (20 мл) . Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 0 минут. Смесь концентрировали при пониженном давлении и растворили в воде (10 мл), а затем подщелачивали 1 н. NaOH до рН 9,5. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток растерли с МеОН-ДХМ (1:1). Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя ДХМ-МеОН-ЫН4ОН (9:1:0,05) в качестве элюента, для получения (S)-1-(7-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-этанамина: ЖХ-МС (ESI) m/z 180,1 [М+Н]+.
N-((IS)-1-(7-Фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-
амин
Получили по способу в Примере 23, с использованием (S)-l-(7-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (113,0 мг, 0,631 ммоль) для получения N-( (IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-
ил) этил)-9Н-пурин-6-амина: гЕ ЯМР (400 МГц, CD30D) 5 8, 26 (с, 1Н) , 8,15 (с, 1Н) , 7,30 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,20-7,14 (м, 1Н) , 6, 92-6, 80 (м, 1Н) , 1,84 (д, J=8 Гц, ЗН) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 298,0 [М+Н]+.
Пример 36: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с использованием (S)-1- (7-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (полученного в Примере 35, 178,8 мг, 0,998 ммоль) для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 12,5 (уш.,1Н), 8,03 (с, 1Н) , 7,74 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,28 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,16-7,10 (м, 1Н) , 6, 97-6, 92 (м, 1Н) , 5, 65-5, 57 (м, 1Н) , 1,64 (д, J=8 Гц, ЗН); ЖХ-МС (ESI) m/z 298,1 [М+Н]+.
Пример 37: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
N-Циклопропил-2-фтор-6-нитроанилин
Смесь 2-бром-1-фтор-3-нитробензола (2,0 г, 9,1 ммоль), циклопропанамина (1,26 мл, 18,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в атмосфере N2 нагревали при 60°С в течение 4 дней. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой и насыщенным солевым раствором, высушили над MgS04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя гексан-EtOAc (8,5:1,5) в качестве элюента, для получения Ы-циклопропил-2-фтор-6-нитроанилина.
Nl-Циклопропил-б-фторбензол-!,2-диамин
К раствору Ы-циклопропил-2-фтор-б-нитроанилина (650 мг, 3,31 ммоль) в МеОН (15 мл) добавили 10% вес. палладий-на-углероде (176 мг, 0,166 ммоль) в атмосфере N2. После продувания колбы с N2 в течение двух минут раствор перемешивали под баллоном Н2. Через б часов смесь отфильтровали через слой целита, промыли МеОН и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя EtOAc:ДХМ (1:1) в качестве элюента, для получения Nl-циклопропил-б-фторбензол-1,2-диамина: ЖХ-МС (ESI) m/z 167,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
К раствору Ы1-циклопропил-б-фторбензол-1,2-диамина (392,7 мг, 2, 363 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавили Boc-L-Ala-OH (447 мг, 2,363 ммоль), 1,1'-диметилтриэтиламин (822 мкл, 4,73 ммоль) и
(1Н-бензо[d][1,2,3]триазол-1-илокси)трипирролидин-1-илфосфония гексафторфосфат (V) (1,23 мг, 2,36 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой и насыщенным солевым раствором, высушили над MgS04 и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя EtOAc:ДХМ (1:1) в качестве элюента, для получения (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 338,2 [М+Н]+.
(S)-1-(1-Циклопропил-7-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
H2N N
Перемешанный раствор (S)-трет-бутил 1-(2-
(циклопропиламино)-3-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (651,7 мг, 1, 932 ммоль) в АсОН (20 мл) нагревали при 60°С в течение 3 0 минут, и после концентрирования при пониженном давлении остаток обработали 4 М НС1 в 1,4-диоксане (20 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 0 минут. Смесь концентрировали при пониженном давлении и растворили в воде (5 мл), а затем подщелачивали 1 н. NaOH до рН 9,5. Смесь концентрировали при пониженном давлении и растерли с МеОН-ДХМ (1:1). Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя ДХМ-МеОН-ЫН4ОН (9:1:0,05) в качестве элюента, для получения (S)-1-(1-циклопропил-7-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина: ЖХ-МС (ESI) m/z 220,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием (S)-1-(1-циклопропил-7-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (176,5 мг, 0,805 ммоль) для получения 4-амино-б-( ( (IS)-1-(1-циклопропил-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 5 8, 03 (с, 1Н) , 7,41 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,22-7,16 (м, 1Н) , 7, 05-7, 00 (м, 1Н) , 6, 00-5, 95 (м, 1Н) , 3, 60-3, 55 (м, 1Н) , 1,73
(д, J=8 Гц, ЗН) , 1, 52-1, 45 (м, 1Н) , 1,35-1,15 (м, ЗН) ; ЖХ-МС
(ESI) m/z 338,2 [М+Н]+.
Пример 38: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(4-фтор-1-метил-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-6-(((IS)-1-(7-фтор-1-метил-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрила
Смесь 4-амино-б-(((IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила (полученного в Примере
36, 110 мг, 0,370 ммоль), йодметана (0,023 мл, 0,370 ммоль) и карбоната калия (51,1 мг, 0, 370 ммоль) в ДМФ (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в закупоренной колбе в течение 24 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили над MgS04, и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) с 0,2% NH4OH в качестве элюента, для получения смеси 4-амино-б-(((IS)-1-(4
фтор-1-метил-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-( ( (IS) -1-(7-фтор-1-метил-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) 5 8, 05 (д, J=8 Гц, 2Н) , 7,43 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,34 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7, 29-7, 23 (м, 1Н) , 7,22-7,16 (м, 1Н) , 7, 04-6, 95 (м, 2Н) , 5, 84-5, 74 (м, 2Н) . 4,09 (с, ЗН) , 3,93 (с, ЗН), 1,72 (д, J=8 Гц, 6Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 312,1 [М+Н]+.
Пример 39: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(4-фтор-1-(2-метоксиэтил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(7-фтор-1-(2-
метоксиэтил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрила
Получили по способу в Примере 38, используя 4-амино-б-(((IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил (полученный в Примере 36, 104 мг, 0,350 ммоль) и 2-бромэтил-метиловый эфир (0,033 мл, 0,351 ммоль) для получения смеси 4-амино-б-(((IS)-1-(4-фтор-1-(2-метоксиэтил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(7-фтор-1-(2-метоксиэтил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, CD30D) 5 8, 07 (д, J=8 Гц, 2Н) , 7,46 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,37 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,29-7,19 (м, 2Н) , 7, 06-6, 95 (м, 2Н) , 5, 86-5, 78 (м, 2Н) , 4,88-4,78 (м, 2Н), 4,62-4,53 (м, 1Н), 4,52-4,33 (м, 1Н), 3,823,73 (м, 4Н) , 3,30 (с, 6Н) , 1,73 (д, J=8 Гц, 6Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 356, 0 [М+Н] + .
Пример 40: Получение 4-амино-б-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом D для получения 4-амино-б-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,75 (1Н, д, J=7,0 Гц), 7, 29-7, 43 (ЗН, м) , 7,17 (ЗН, тд, J=10,6, 2,2 Гц), 6,97 (1Н, дд, J=8,4, 2,2 Гц), 5,63 (1Н, кв, J=6,6 Гц), 1,57 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС (ESI)] m/z 427,84 [М+Н]+.
К смеси 3-бромтианафтена (Sigma-Aldrich Chemical Company,
Пример 41: Получение 4-амино-б-((1-(З-фенил-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
2,000 мл, 9,3 9 ммоль) и хлорида алюминия (1,0 02 мл, 9,3 9 ммоль)
в ДХМ (50 мл), охлажденной на ледяной бане, через шприц, за
одну минуту добавили ацетилхлорид (0,667 мл, 9,39 ммоль).
Полученный интенсивно-оранжевый реакционный раствор
перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь вылили в лед и разделили между водой и ДХМ. Водный слой экстрагировали ДХМ, и промыли объединенные экстракты 50 мл 5% водного гидроксида натрия, 50 мл насыщенного солевого раствора и перемешивали над безводным сульфатом магния, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения 1-(3-бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанона в виде бледно-желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!б) 5 2,77 (с, ЗН), 7,57-7,65 (м, 2Н), 7,95 (дд, J=7,7, 1,1 Гц, 1Н), 8,10 (дд, J=7,l, 1,3 Гц, 1Н); ЖХ-МС (ESI)] m/z 254,9 [М+Н]+. 1-(З-Фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанон .0
Смесь транс-дихлорбис(трифенилфосфин)палладия (ii) (0,138 г, 0,196 ммоль), фенилбороновой кислоты (0,717 г, 5,88 ммоль), 1-(3-бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанона (0,50 г, 1,960 ммоль) и 2,0 н. водного карбоната натрия (2,94 мл, 5,88 ммоль) в толуоле
(10 мл) продули азотом и нагревали до 110°С в течение ночи. Через 16 часов реакционную смесь разделили между EtOAc и водой. Органический слой перемешивали над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения красного маслянистого вещества. Продукт очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 2 0 до 4 0% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения 1-
(3-фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанона в виде бесцветного маслянистого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 2,12 (с, ЗН), 7,30-7,35 (м, 1Н), 7,38-7,42 (м, 2Н), 7,42-7,49 (м, 2Н), 7,527,58 (м, ЗН) , 7,87 (д, J=8,2 Гц, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) ] m/z 253,1
[М+Н]+.
К перемешанному раствору 1-(3-фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанона (430 мг, 1,704 ммоль), растворенного в МеОН (5 мл), при комнатной температуре добавили боргидрид натрия (0,093 мл, 2,64 ммоль). Через 5 минут не осталось исходного материала. Реакционную смесь разделили между водой и EtOAc, и экстрагировали водный слой EtOAc. Объединенные органические слои промыли насыщенным солевым раствором, затем перемешивали над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения 1-(3-фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанола в виде бесцветного кристаллического вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 1,46 (д, J=6,3 Гц, ЗН) , 2,19 (уш.с, 1Н) , 5,09 (кв, J=6,5 Гц, 1Н), 7,16-7,40 (м, 8Н), 7,70-7,77 (м, 1Н)-.
2-(1-(З-Фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)изоиндолин-1,3-дион
К раствору трифенилфосфора (0,401 мл, 1,730 ммоль),
растворенного в ТГФ (12 мл), охлажденному на ледяной бане,
через шприц, за одну минуту добавили диизопропил
азодикарбоксилат (0,340 мл, 1,730 ммоль). Раствор уравновесили
до комнатной температуры, образовался бесцветный осадок. Через
2 0 минут реакционную смесь снова охладили до температуры
ледяной бани и последовательно добавили 1-(3-
фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанол (400 мг, 1,573 ммоль) и фталимид (255 мг, 1,730 ммоль). Холодную баню убрали, а реакционную смесь уравновесили до комнатной температуры.
Реакционную смесь оставили перемешиваться в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Заданный продукт, 2-(1-(3-фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)изоиндолин-1,3-дион выделили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 2 до 5% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для получения 2-(1-(3-фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)изоиндолин-
1,3-диона: ХН ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 1,94 (д, J=7,2 Гц, ЗН) , 5,92 (д, J=7,2 Гц, 1Н) , 7, 27-7, 53 (м, 8Н) , 7,67 (дд, J=5, 6, 3,03 Гц, 2Н), 7,73-7,79 (м, 2Н), 7,84 (д, J=8,0 Гц, 1Н); ЖХ-МС (ESI)] m/z 406,1 [M+Na]+.
1-(З-Фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанамин
NH2 S
Смесь 2-(1-(3-фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)изоиндолин-
1,3-диона (17 0 мг, 0,443 ммоль) и гидразина моногидрата (0,215 мл, 4,43 ммоль) в EtOH (5 мл) нагревали до 50°С в течение ночи. Через 18 часов образовался осадок. Осадок удалили фильтрацией, промыли EtOH и концентрировали при пониженном давлении. Концентрат растворили в ДХМ, абсорбировали на силикагель и очистили колоночной хроматографией, используя 10% МеОН в ДХМ в качестве элюента, для получения 1-(3-фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанамина в виде бесцветного кристаллического вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 1,51 (д, J=6,5 Гц, ЗН) , 1,74 (уш.с, 2Н) , 4,55 (кв, J=6,5 Гц, 1Н) , 7, 30-7, 38 (м, 2Н) , 7,41-7,57 (м, 6Н) , 7,87-7,91 (м, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) ] m/z 237, 1 [М-16Г.
4-Амино-6-((1-(3-фенил-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D,
используя 1-(3-фенилбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанамин (56 мг, 0,221 ммоль), для получения 4-амино-б-((1-(3-фенил-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 5 1,47 (д, J=7,0 Гц, ЗН) , 5,63 (т, J=6, 9 Гц, 1Н) , 7,24 (уш.с, 2Н) , 7, 32-7, 37 (м, ЗН) , 7, 43-7, 48 (м, 1Н) , 7, 50-7, 58 (м, 4Н) , 7,84 (д, J=6,8 Гц, 1Н) , 7,93 (с, 1Н) , 7, 94-7, 98 (м, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI)] m/z 372,0 [М+Н]+.
Пример 42: Получение 4-амино-б-((1-(3-(3,5-дифторфенил)-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(Е)-N-(1-(З-Бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этилиден)-2-метилпропан-2-сульфинамид
Смесь этоксида титана (IV) (2,272 мл, 10,97 ммоль), 2-метил-2-пропансульфинамида (0,665 г, 5,49 ммоль) и 1-(3-бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этанона (1,40 г, 5,49 ммоль) в ТГФ (15 мл) нагревали с дефлегматором в течение ночи. Через 24 часа реакционную смесь уравновесили до комнатной температуры и вылили в 100 мл насыщенного солевого раствора. Твердое вещество удалили фильтрацией через целит, и этот слой промыли 100 мл EtOAc. Органический слой перемешивали над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения оранжевого маслянистого вещества. Продукт очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 2 0 до 4 0% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения
(Е)-N-(1-(3-бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этилиден)-2-метилпропан-2-сульфинамида в виде оранжевого маслянистого вещества: 1Н ЯМР
(400 МГц, CDCI3) 5 1,34 (с, 9Н) , 2,98 (с, ЗН) , 7, 35-7, 45 (м, 2Н), 7,65-7,73 (м, 1Н), 7,83 (дд, J=7,3, 2,1 Гц, 1Н).
N-(1-(З-Бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)-2-метилпропан-2-сул ь финами д
К раствору (Е)-N-(1-(3-бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этилиден)-
2-метилпропан-2-сульфинамида (1,35 г, 3,77 ммоль),
растворенного в ТГФ (30 мл) и воде (0,612 мл), охлажденному на водно-ледяной бане, добавили боргидрид натрия (0,265 мл, 7,54 ммоль), весь одной порцией. Реакционную смесь перемешивали при низкой температуре в течение 30 минут и решили, что реакция
завершена. К реакционному раствору добавили насыщенный водный ЫаНСОз, и полученную смесь энергично перемешивали до прекращения выделения газа. Водный слой экстрагировали EtOAc, промыли насыщенным солевым раствором, перемешивали над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения красного маслянистого вещества. Продукт выделили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 30 до 70% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения N-(1-(3-бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида в виде бледно-желтого маслянистого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 1,24 (с, ЮН), 1,63 (д, J=6,5 Гц, ЗН) , 3,85 (д, J=2,9 Гц, 1Н) , 5,16 (дд, J=6,7, 3,5 Гц, 1Н) , 7,35 (т, J=7,7 Гц, 1Н), 7,41 (т, J=7,7 Гц, 1Н), 7,76 (т, J=7,0 Гц, 2Н).
N-(1-(3-(3,5-Дифторфенил)бензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамид
Смесь 3,5-дифторфенилбороновой кислоты (2 92 мг, 1,84 8 ммоль), фосфата калия (0,204 мл, 2,464 ммоль), 2-дициклогексилфосфино-2',б'-диметокси-1,1'-бифенила (12 6 мг, 0,308 ммоль), ацетата палладия (II) (27,7 мг, 0,123 ммоль) и N-(1-(3-бромбензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (444 мг, 1,232 ммоль) в толуоле (10 мл) продували N2 в течение 2 минут, затем нагревали до 1Ю°С в течение ночи. Через 19 часов реакционную смесь разделили между водой и EtOAc. Органический слой перемешивали над MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении для получения маслянистого вещества янтарного цвета. Продукт очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя градиент от 20 до 40% EtOAc в гексане в качестве элюента, для получения N-(1-(3-(3,5-дифторфенил)бензо[Ь]тиофен-2-ил)этил)-2
метилпропан-2-сульфинамида в виде бесцветного стекловидного вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 1,13 (с, 9Н) , 1,50 (д, J=6,7 Гц, ЗН) , 4, 64-4, 73 (м, 1Н) , 5,91 (д, J=4,7 Гц, 1Н), 7,21 (дд, J=8,4, 2,3 Гц, 2Н) , 7, 34-7, 45 (м, 4Н) , 8,02 (ддд, J=7,5, 1,4, 1,1 Гц, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 394,0 [М+Н]+.
1-(3-(3,5-Дифторфенил)бензо[Ь]тиофен-2-ил)этанамин
NH2
К раствору N-(1-(3-(3,5-дифторфенил)бензо[b]тиофен-2-
ил)этил)-2-метилпропан-2-сульфинамида (392 мг, 0,996 ммоль) в
ТГФ (7 мл) при комнатной температуре добавили НС1 (1,0 мл,
11,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной
температуре в течение 10 минут, после чего данные ЖХ-МС
показали отсутствие исходного материала. Реакционную смесь
вылили в насыщенный водный ЫаНСОз и два раза экстрагировали
EtOAc. Объединенные органические экстракты перемешивали над
MgS04, отфильтровали и концентрировали при пониженном давлении
для получения 1-(3-(3,5-дифторфенил)бензо[Ь]тиофен-2-
ил)этанамина в виде бесцветного маслянистого вещества: 1Н ЯМР
(500 МГц, CDC13) 5 1,35 (д, J=6,7 Гц, ЗН) , 1,60 (уш.с, 2Н) , 4,39 (кв, J=6,6 Гц, 1Н) , 6, 73-6, 86 (м, ЗН) , 7,19-7,24 (м, 2Н) , 7, 30-7, 36 (м, 1Н) , 7,71-7,77 (м, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) ] m/z 273,0
[М+Н]+.
4-Амино-6-((1-(3-(3,5-дифторфенил)-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D,
используя 1-(3-(3,5-дифторфенил)бензо[Ь]тиофен-2-ил)этанамин
(280 мг, 0, 968 ммоль), для получения 4-амино-б-( (1-(3-(3,5-дифторфенил)-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 1,52 (д, J=7,0 Гц, ЗН) , 5,62 (кв, J=6,9 Гц, 1Н) , 7,17-7,42 (м, 8Н) , 7, 88-7, 94 (м, 2Н) , 7,95-8,01 (м, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) ] m/z 408,0 [М+Н]+.
Пример 43: Получение 4-амино-б-((1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с Общим способом D для получения 4-амино-б-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,28 (1Н, дд, J=4,7, 1,4 Гц), 8,16 (1Н, дд, J=8,0, 1,4 Гц), 7,89 (1Н, с), 7,75 (1Н, д, J=7,8 Гц), 7, 28-7, 39 (4Н, м) , 7,19 (2Н, уш.с), 5,72 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 393,1 [М+Н]+.
Смешанные региоизомеры (104 мг) очистили при помощи SFC
Пример 44: 4-Амино-6-(((IS)-1-(1-циклопропил-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
для получения двух фракций. Первый элюированный пик: Повторно очистили обращенно-фазовой аналитической ВЭЖХ (элюировали градиентом 10-60% MeCN в воде с 0,1% ТФК) для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде твердого белого вещества. гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 0, 97-1, 29 (м, 4Н) , 1,62 (д, J=6,65 Гц, ЗН) , 3, 34-3, 40 (м, 1Н) , 5,81 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н), 7,06-7,16 (м, 1Н), 7,30 (уш.с, 2Н), 7,40-7,45 (м, 1Н), 7,57 (дд, J=8, 80, 4, 70 Гц, 1Н) , 7,70 (д, J=7,24 Гц, 1Н) , 8,05
(с, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 336,1 [М-Н]~. Второй элюированный пик: 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,04-1,34
(м, 4Н) , 1,68 (д, J=6,85 Гц, ЗН), 3,41-3,44 (м, 1Н) , 5,87 (кв, J=6,91 Гц, 1Н) , 7,11 (ддд, J=9, 90, 8, 80, 2, 57 Гц, 1Н) , 7,37
(уш.с, 2Н) , 7,44 (дд, J=9, 29, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,67 (дд, J=8,80, 4,89 Гц, 1Н) , 7,77 (д, J=7,09 Гц, 1Н) , 8,12 (с, 1Н) . ЖХ-МС
(ESI) m/z 338,2 [М+Н]+.
Пример 45: 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-
пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил и 4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Синтез представлен в Примере 33. Рацемическую смесь (100 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций: Первый пик на колонке OD-H: Получили твердое белое вещество, которое растерли в воде и отфильтровали для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5
пиримидинкарбонитрила в виде твердого белого вещества. Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,59 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 5,60 (кв,
J=6,99 Гц, 1Н) , 7,08 (дд, J=9, 00, 2, 54 Гц, 1Н) , 7,15 (ддд,
J=9,78, 8,80, 2,54 Гц, 1Н), 7,20 (уш.с, 2Н), 7,71-7,81 (м, 2Н),
7,84 (с, 1Н) , 8,08 (д, J=8,61 Гц, 1Н) , 8,63 (с, 1Н) , 8,67 (д,
J=2,54 Гц, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 393, 0 [М+Н] + . Второй пик на
колонке OD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-
пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил в виде белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,59 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 5,60 (кв, J=6,94 Гц, 1Н) , 7,08 (дд, J=9, 00, 2, 35 Гц, 1Н) , 7,15 (тд, J=9,29, 2,54 Гц, 1Н), 7,21 (уш.с, 2Н), 7,72-7,80 (м, 2Н), 7,83 (с, 1Н), 8,08 (д, J=7,63 Гц, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 8,67 (д, J=2,74 Гц, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 383,1 [М+Н]+.
Пример 46: N-((1R)-1-(6-Фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-амин и N-((IS)-1-(6-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)-9Н-пурин-6-амин
Синтез представлен в Примере 34. Рацемическую смесь (78 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций: Первый пик на колонке OD-H: N-((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин в виде не совсем белого твердого
вещества. гЕ ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,66 (д, J=6,85 Гц, ЗН), 5,61 (уш.с, 1Н), 7,06 (дд, J=9,05, 2,45 Гц, 1Н), 7,13 (тд, J=9,29, 2,45 Гц, 1Н), 7,73 (дд, J=8,80, 4,89 Гц, 1Н), 7,93-8,05 (м, 2Н) , 8,09 (уш.с, 2Н) , 8,58 (уш.с, 1Н) , 8,64 (с, 1Н) , 12,77 (уш.с, 1Н) . MS (ESI) m/z 393, 1 [М+Н] + . Второй пик на колонке OD-H: N-((1S)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол
2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин в виде не совсем белого твердого вещества. гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,66 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 5,61 (уш.с, 1Н) , 7,06 (дд, J=9, 00, 2, 54 Гц, 1Н) , 7,14 (ддд, J=9, 78, 8, 80, 2, 54 Гц, 1Н) , 7,74 (дд, J=8, 90, 4, 79 Гц, 1Н), 7,99 (уш.с, 1Н), 8,02 (с, 1Н), 8,05-8,17 (м, 2Н), 8,58 (д, J=l,57 Гц, 1Н), 8,64 (с, 1Н), 12,75 (уш.с, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 393, 1 [М+Н]+.
Пример 47: Получение 2-( (IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-циклопентил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида
2-(Циклопропиламино)-3-нитробензойная кислота
Смесь 2-бром-З-нитробензойной кислоты (1,0 г, 4,1 ммоль), циклопропанамина (0,85 мл, 12,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в атмосфере N2 нагревали при 60°С в течение 1 дня. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором и высушили над сульфатом магния. Органическую фазу концентрировали in vacuo. Остаток, в виде неочищенной 2-(циклопропиламино)-3-нитробензойной кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 223,0 [М+Н]+. Неочищенный продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Метил 2-(циклопропиламино)-3-нитробензоат
Неочищенную 2-(циклопропиламино)-3-нитробензойную кислоту (0,90 г, 4,1 ммоль) растворили в МеОН (15 мл) и добавили 2 мл H2SO4 (98%). Смесь нагревали с дефлегматором в течение 18 часов. Смесь охладили, концентрировали in vacuo и очистили колоночной
хроматографией на силикагелевой колонке, используя ДХМ в качестве элюента, для получения метил 2-(циклопропиламино)-3-нитробензоата: ЖХ-МС (ESI) m/z 237,1 [М+Н]+.
Метил З-амино-2-(циклопропиламино)бензоат
К раствору метил 2-(циклопропиламино)-3-нитробензоата (1,1
г, 4,5 ммоль) в МеОН (4 мл) добавили 10% вес. палладий-на-
углероде (0,24 г, 0,23 ммоль) в атмосфере N2. После продувания
колбы N2 несколько раз раствор перемешивали под баллоном Н2 в
течение б часов. Данные ЖХМС показали, что реакция завершена.
После фильтрования реакционной смеси и промывания МеОН фильтрат
собрали и концентрировали in vacuo. В результате очистки
остатка флэш-хроматографией на силикагелевой колонке, с
использованием 0-2 0% градиента ДХМ-МеОН-ЫЩОН (9:1:0,05) в ДХМ
в качестве элюента, получили З-амино-2-
(циклопропиламино)бензоат: ЖХ-МС (ESI) m/z 207,1 [М+Н]+.
(S)-Метил 3-(2-(трет-бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-
(циклопропиламино)бензоат
К раствору метил З-амино-2-(циклопропиламино)бензоата (510 мг, 2,5 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавили boc-1-аланин (470 мг, 2,5 ммоль), 1,1'-диметилтриэтиламин (0,87 мл, 5,0 ммоль) и PYBOP (1,3 г, 2,5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом магния и концентрировали in vacuo. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагелевой колонке с
использованием градиента от 0 до 50% EtOAc:ДХМ (1:1) в ДХМ в
качестве элюента, получили (S)-метил 3-(2-(трет-
бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоат: гЕ ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 м.д. 8,43 (1Н, с), 8,15 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,74 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,09 (1Н, с), 6,91 (1Н, т, J=8,0 Гц), 5,03 (1Н, уш.), 4,39 (1Н, уш. ) , 3,88 (ЗН, с), 2,71 (1Н, м) , 1,50 (ЗН, д, J=8,0 Гц), 1,48 (9Н, с), 0, 74-0, 68 (2Н, м) , 0,63-0,55 (2Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 378,1 [М+Н]+.
(S)-Метил 2-(1-аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксилат
Перемешанный раствор (S)-метил 3-(2-(трет-
бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата
(60 0 мг, 1,6 ммоль) в НОАс (20 мл) нагревали при 60 °С в течение 1,5 часов и охладили до комнатной температуры. После концентрирования смеси in vacuo остаток обработали 4 М НС1 в диоксане (10 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 0 минут. Смесь концентрировали in vacuo, растворили в воде (5 мл) и подщелачивали 1 н. NaOH до рН 9,5, Смесь концентрировали и добавили к остатку МеОН-ДХМ (1:1) для получения заданного продукта в растворе. Раствор концентрировали in vacuo, а остаток очистили колоночной хроматографией на силикагелевой колонке, используя ДХМ-МеОН-NH4OH (9:1:0,05) в качестве элюента, для получения (S)-метил 2-
(1-аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата: гЕ ЯМР (400 МГц, CDCI3) 5 7, 86 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,63 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,27 (1Н, т, J=8,0 Гц), 4,62 (1Н, кв, J=8,0 Гц), 4,01 (ЗН, с), 3, 58-3, 50 (ЗН, м) , 1,65 (ЗН, д, J=8,0 Гц), 1,221,06 (2Н, м) , 0, 95-0, 65 (2Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 260, 0 [М+Н] + .
(S)-Метил 2-(1-(6-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилат
Смесь (S)-метил 2-(1-аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксилата (140 мг, 0,54 ммоль), 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (83 мг, 0,54 ммоль) и 1,1'-диметилтриэтиламина (190 мкл, 1,1 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) перемешивали при 120°С. Через 18 часов смесь охладили до комнатной температуры и концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) с 0,2% NH40H в качестве элюента, для получения (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата: ЖХ-МС (ESI) m/z 378,1 [М+Н]+.
(S)-2-(1-(6-Амино-5-и^анопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоновая кислота
Раствор (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-
иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата (137 мг, 0,3 6 ммоль) и йодида лития (14 6 мг, 1,1 ммоль) в пиридине (5 мл) нагревали с дефлегматором при 100°С в течение 4 8 часов. Добавили еще одну порцию йодида лития (14 6 мг, 1,1 ммоль) и нагревали смесь при 100°С еще 4 8 часов. Смесь концентрировали in vacuo и использовали для следующей реакции без дополнительной очистки: ЖХ-МС (ESI) m/z 364,1 [М+Н]+.
2-((IS)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-циклопентил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
К раствору неочищенной (S)-2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоновой кислоты (132 мг, 0,36 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавили циклопентанамин (0,10 мл, 1,0 ммоль), Ы-этил-Ы-изопропилпропан-2-амин (0,060 мл, 0,36 ммоль) и 1Н-бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфоний (190 мг, 0,36 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом магния и концентрировали in vacuo. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) с 0,2% NH4OH в качестве элюента, получили 2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-Ы-циклопентил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид: 1Н ЯМР (400 МГц, MeOH-d4) 5 8, 03 (1Н, с), 7,70 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,37 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,28 (1Н, т, J=8,0 Гц), 6,03 (1Н, кв, J=8,0 Гц), 4, 45-4, 38 (1Н, м) , 4,11 (1Н, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 3,53-3,44 (1Н, м), 2,15-2,05 (2Н, м), 1,88-1,78 (2Н, м), 1,751,60 (4Н, м), 1,38-1,10 (ЗН, м), 1,00-0,92 (1Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 431,2 [М+Н]+.
Пример 48: Получение 2-((IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N,1-дициклопропил-1Н-бензимидаЗол-7-карбоксамида
Ы-Циклопропил-2-(циклопропиламино)-3-нитробензамид
К раствору 2-бром-З-нитробензойной кислоты (500 мг, 2,03 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавили циклопропиламин (0,14 мл, 2,03 ммоль), Ы-этил-Ы-изопропилпропан-2-амин (0,34 мл, 2,03 ммоль) и
(1Н-бензо[d][1,2,3]триазол-1-илокси)трипирролидин-1-илфосфония гексафторфосфат (V) (1,27 г, 2,44 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 4 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом магния и концентрировали in vacuo. Остаток обработали флэш-хроматографией на силикагелевой колонке с использованием градиента от 0 до 100% EtOAc:ДХМ (1:1) в ДХМ в качестве элюента и получили неочищенную смесь продуктов. К неочищенной смеси в ТГФ (10 мл) добавили циклопропиламин (0,141 мл, 2,03 ммоль) и полученную смесь нагревали в атмосфере N2 при 60°С в течение 18 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором и высушили над сульфатом магния. После концентрирования in vacuo остаток очистили флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 100% EtOAc:ДХМ (1:1) в ДХМ в качестве элюента, для получения N-циклопропил-2-(циклопропиламино)-3-нитробензамида: 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 8, 27 (1Н, с), 8,01 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,45 (1Н, д, J=8,0 Гц), б, 62 (1Н, т, J=8,0 Гц), 5,98 (1Н, с), 2,90-2,65
(2Н, м) , 0, 90-0, 78 (2Н, м) , 0, 75-0, 65 (2Н, м) , 0, 58-0, 50 (2Н, м) , 0, 48-0, 40 (2Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 262, 1 [М+Н] + .
3-Амино-Ы-циклопропил-2-(циклопропиламино)бензамид
Используя общий способ синтеза для метил З-амино-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили З-амино-N-циклопропил-2-(циклопропиламино)бензамид с использованием N-циклопропил-2-(циклопропиламино)-3-нитробензамида: 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 6, 85-6, 77 (ЗН, м) , 6,31 (1Н, уш. ) , 5,97 (1Н, уш.), 4,07 (2Н, уш.), 2, 93-2, 85 (1Н, м) , 2, 65-2, 57 (1Н, м) , 0, 92-0, 85 (2Н, м) , 0, 86-0, 54 (6Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 232,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-
(циклопропилкарбамоил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 3-(2-(трет-бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-(циклопропилкарбамоил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат с использованием 3-амино-Ы-циклопропил-2-
(циклопропиламино) бензамида: 1Н ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 8 7,39 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,24 (1Н, д, J=8,0 Гц), 6,82 (1Н, т, J=8,0
Гц), 4,18 (1Н, кв, J=4,0 Гц), 2,88-2,82 (1Н, м), 2,74-2,67 (1Н,
м) , 1,50 (9Н, с), 1,43 (ЗН, д, J=8,0 Гц), 0, 84-0, 79 (2Н, м) ,
0,64-0,42 (6Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 403,1 [М+Н]+.
(S)-2-(1-Аминоэтил)-N,1-дициклопропил-1Н-бензо[Ы]имидаЗол-
7-карбоксамид
H2N
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата
примере 47, получили (S)-2-(1-аминоэтил)-N,1-дициклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-(циклопропилкарбамоил)фениламино)-1-
оксопропан-2-илкарбамата: Н ЯМР (400 МГц, MeOH-d4) 5 7, 72 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,35 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,29 (1Н, т, J=8,0 Гц), 4,69 (1Н, кв, J=8,0 Гц), 3, 49-3, 43 (1Н, м) , 3, 03-2, 96 (1Н, м) , 1,60 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,25-1,18 (2Н, м) , 1, 08-1, 02 (1Н, м) , 0, 97-0, 82 (ЗН, м) , 0, 74-0, 67 (2Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 285,1 [М+Н]+.
2-((IS)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N, 1-дициклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 2-((lS)-1-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N,1-дициклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид с использованием (S)-2-(1-аминоэтил)-N,1-дициклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-
карбоксамида: ХЯ ЯМР (400 МГц, MeOH-d4) 5 8, 03 (1Н, с), 7,70 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,35 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,27 (1Н, т, J=8,0 Гц), 6,03 (1Н, кв, J=8,0 Гц), 3,53-3,43 (1Н, м), 3,03-2,96 (1Н, м) , 1,74 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1, 40-1, 30 (1Н, м) , 1,30-1,15 (2Н,
м) , 1, 00-0, 93 (1Н, м) , 0, 90-0, 83 (2Н, м) , 0, 74-0, 67 (2Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 403,1 [М+Н]+.
Пример 49: Получение 2-( (IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-Ы-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида
2-Бром-Ы-трет-бутил-З-нитробензамид
К раствору 2-бром-З-нитробензойной кислоты (500 мг, 2,03 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавили трет-бутиламин (0,22 мл, 2,04 ммоль), 1,1'-диметилтриэтиламин (0,71 мл, 4,1 ммоль) и (1Н-бензо[d][1,2,3]триазол-1-илокси)трипирролидин-1-илфосфония гексафторфосфат (V) (1,27 г, 2,44 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом магния и концентрировали in vacuo. Остаток очистили флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 100% EtOAc:ДХМ (1:1) в ДХМ в качестве элюента, для получения 2-бром-Ы-трет-бутил-3-нитробензамида: гЕ ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 7,74 (1Н, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 7,62 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,51 (1Н, т, J=8,0 Гц), 5,62 (1Н, уш.), 1,52 (9Н, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 301,0 [М+Н]+.
Смесь 2-бром-Ы-трет-бутил-3-нитробензамида (460 мг, 1,52
Ы-трет-Бутил-2-(циклопропиламино)-3-нитробензамид
ммоль) и циклопропанамина (350 мкл, 4,55 ммоль) в ТГФ (10 мл) нагревали при 60°С в течение 18 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом магния и концентрировали in vacuo. Остаток очистили флэш-хроматографией на силикагеле, используя EtOAc:ДХМ (1:1) в качестве элюента, для получения N-трет-бутил-2-(циклопропиламино)-3-нитробензамида: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) 8 8,26 (1Н, уш.), 8,09 (1Н, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 7,57 (1Н, д, J=8,0 Гц), 6,72 (1Н, т, J=8,0 Гц), 5,81 (1Н, уш. ) , 2,98-2,92 (1Н, м) , 1,49 (9Н, с), 0, 82-0, 76 (2Н, м) , 0, 58-0, 52 (2Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 278,2 [М+Н]+.
З-Амино-N-трет-бутил-2-(циклопропиламино)бензамид
Используя общий способ синтеза для метил З-амино-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили З-амино-N-трет-бутил-2-(циклопропиламино)бензамид с использованием N-трет-бутил-2-(циклопропиламино)-3-нитробензамида: ЖХ-МС (ESI) m/z 248,2 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(3-(трет-бутилкарбамоил)-2-
(циклопропиламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 3-(2-(трет-
бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата
в примере 47, получили (S)-трет-бутил 1-(3-(трет-
бутилкарбамоил ) -2-(циклопропиламино)фениламино)-1-оксопропан-2-
илкарбамат с использованием 3-амино-Ы-трет-бутил-2-
(циклопропиламино)бензамида: ЖХ-МС (ESI) m/z 419,2 [М+Н]+.
(S)-2-(1-Аминоэтил)-Ы-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-2-(1-аминоэтил)-Ы-трет-бутил-1-
циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид с использованием
(S)-трет-бутил 1- (3-(трет-бутилкарбамоил)-2-
(циклопропиламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: 1Н ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 5 7, 70 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,38 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,28 (1Н, т, J=8,0 Гц), 4,69 (1Н, кв, J=8,0 Гц), 3,49-3,43 (1Н, м), 1,60 (ЗН, д, J=8,0 Гц), 1,53 (9Н, с), 1,321,15 (2Н, м) , 1,10-1,02 (1Н, м) , 0, 99-0, 92 (1Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 301,1 [М+Н]+.
2-((IS)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 2-((lS)-
1- ((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-Ы-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид с использованием (S)-
2- (1-аминоэтил)-Ы-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол
7-карбоксамида: гЯ ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 5 8, 03 (1Н, с), 7,68 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,38 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,27 (1Н, т, J=8,0 Гц), 6,04 (1Н, кв, J=8,0 Гц), 3,55-3,43 (1Н, м), 3,03-2,96 (1Н, м) , 1,73 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,53 (9Н, с), 1, 40-1, 30 (1Н, м) , 1,30-1,15 (2Н, м) , 1,10-0,93 (1Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 419,2 [М+Н]+.
Пример 50: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(3,5-
дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-
дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
N-(3,5-Дифторфенил)-3,5-дифтор-2-нитроанилин
К раствору 2,4,б-трифторнитробензола (1,37 г, 7,74 ммоль) и 3, 5-дифторанилина (1 г, 7,74 ммоль) в ТГФ (23 мл) добавили трет-бутоксид калия (1,3 г, 11,6 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 4 часов. После завершения реакции добавили воду (50 мл) и экстрагировали органическую фазу EtOAc (200 мл), высушили над сульфатом натрия и очистили колоночной хроматографией, используя 100-200 меш силикагель и 0-10% EtOAc в гексане для получения N-(3,5-дифторфенил)-3,5-дифтор-2-нитроанилина: ЖХ-МС (ESI) m/z 284,9 [М+Н]+.
N1-(3,5-Дифторфенил)-3,5-дифторбензол-1,2-диамин
К раствору N-(3,5-дифторфенил)-3,5-дифтор-2-нитроанилина (1 г, 3,49 ммоль) в АсОН (10,5 мл) добавили порошок железа (585 мг, 10,48 ммоль) и нагревали реакционную смесь до 100°С в течение 1 часа. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и добавили воду. Органический слой экстрагировали
EtOAc и подщелачивали при помощи насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo для получения Nl-(3,5-дифторфенил)-3,5-дифторбензол-1,2-диамина. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.
(S)-трет-Бутил 1- (2-(3,5-дифторфениламино)-4,6-
дифторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Boc-L-Ala-OH (1 г, 5,46 ммоль) и изобутил хлорформиат (0,745 г, 5,46 ммоль) суспендировали в ДХМ (5 мл) и при перемешивании добавили N-метилморфолин (0,58 г, 5,73 ммоль) при -10°С. Через 30 минут к смеси добавили N1-(3,5-дифторфенил)-3, 5-дифторбензол-1,2-диамин (0,7 г, 2,73 ммоль) в ДХМ (2 мл) . Реакционную смесь перемешивали при -10°С в течение 3 0 минут и при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции добавили воду и экстрагировали органический слой ДХМ, высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo для получения неочищенного продукта. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя 100-200 меш силикагель и 30% EtOAc в гексане для получения (S)-трет-бутил 1-(2-(3,5-дифторфениламино)-4,б-дифторфениламино-1-оксопропан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 428,1 [М+Н]+.
трет-Бутил 1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-
Раствор (S)-трет-бутил 1-(2-(3,5-дифторфениламино)-4, 6-дифторфениламино-1-оксопропан-2-илкарбамата (0,5 г, 1,16 ммоль)
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
в АсОН (3,5 мл) перемешивали при 100°С в течение ночи. После завершения реакции смесь охладили до комнатной температуры и подщелачивали при помощи насыщенного раствора бикарбоната натрия. Органический слой экстрагировали EtOAc (75 мл), высушили над сульфатом натрия, концентрировали для получения трет-бутил-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,б-дифтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата. Неочищенный продукт
использовали без дополнительной очистки.
1-(1-(3,5-Дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил]этанамин
Раствор
трет-бутил-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,б-дифтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (0,4 г) перемешивали в 2 н. НС1 (4 мл) при 120°С в течение 4 часов. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и подщелачивали насыщенным раствором бикарбоната натрия (20 мл). Органический слой экстрагировали EtOAc, высушили над сульфатом натрия и концентрировали для получения 1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.
4-Амино-6-(1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
1-(1-(3,5-Дифторфенил)-4,б-дифтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин (0,25 г, 0,8 ммоль) и 4-хлорпиримидин-5-карбонитрил
(0,125 г, 0,8 ммоль) растворили в н-бутаноле (8 мл) и к этой смеси добавили диизопропилэтиламин (0,313 г, 2,42 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 120°С в течение ночи. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и добавили воду. Смесь экстрагировали EtOAc, высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя 100-200 меш силикагель и 0-50% EtOAc в гексане, для получения 4-амино-б-(1-(1-(3, 5-дифторфенил)-4,б-дифтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил) этиламино) пиримидин-5-карбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б с D20) 5 1, 570 (д, J=6,8 Гц, ЗН) , 5, 578-5, 628 (м, 1Н) , 6,924 (дд, J=2 Гц, J=8 Гц, 1Н), 7,109-7,166 (м, 1Н), 7,275-7,316 (м, ЗН) , 7, 838 (с, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 428, 0 [М+Н] + .
4-Амино-6-(((IS)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6- ( ( (1R) -1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь 4-амино-б-(1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила (0,185 г) разделили на колонке 1С, используя препаративную SFC, для получения двух фракций:
Первый пик на колонке SFC 1С (первый пик на колонке Chiralcel OD-H и второй пик на колонке Chiralpak AD-H): 4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-4,б-дифтор-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил (0,083 г, выход 44,9%) в виде белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 7,86 (1Н, с), 7,75 (1Н, д, J=7,2 Гц), 7,30-7,42 (ЗН, м) , 7,17 (ЗН, тд, J=10,5, 2,2 Гц), 6,97 (1Н, дд, J=8,6,
2,2 Гц), 5,63 (1Н, кв, J=6,7 Гц), 1,57 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 428, 0 [М+Н]+. Второй пик на колонке SFC 1С (второй пик на колонке Chiralcel OD-H и первый пик на колонке Chiralpak
AD-H):
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,б-дифтор-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 7,86
(1Н, с), 7,75 (1Н, д, J=7,0 Гц), 7, 29-7, 43 (ЗН, м) , 7,17 (ЗН, тд, J=10,6, 2,2 Гц), 6,97 (1Н, дд, J=8,4, 2,2 Гц), 5,63 (1Н, кв, J=6,6 Гц), 1,57 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 428,0
[М+Н]+ . Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили (S)-2-(1-аминоэтил)-Ы-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид с использованием
(S)-трет-бутил 1- (3-(трет-бутилкарбамоил)-2-
(циклопропиламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: 1Н ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 5 7, 70 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,38 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,28 (1Н, т, J=8,0 Гц), 4,69 (1Н, кв, J=8,0 Гц), 3,49-3,43 (1Н, м), 1,60 (ЗН, д, J=8,0 Гц), 1,53 (9Н, с), 1,321,15 (2Н, м) , 1,10-1,02 (1Н, м) , 0, 99-0, 92 (1Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 301,1 [М+Н]+.
2-((IS)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 2-((lS)-
1- ((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-Ы-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид с использованием (S)-
2- (1-аминоэтил)-Ы-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамида: гЕ ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 5 8, 03 (1Н, с), 7,68
(1Н, д, J=8,0 Гц), 7,38 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,27 (1H, т, J=8,0 Гц), 6,04 (1H, кв, J=8,0 Гц), 3,55-3,43 (1H, м), 3,03-2,96 (1H, м) , 1,73 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,53 (9H, с), 1, 40-1, 30 (1H, м) , 1,30-1,15 (2H, м) , 1,10-0,93 (1Н, м) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 419,2
[М+Н]+.
Пример 51: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(7-
(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
3-(Метилсульфонил)-2-нитроанилин
К смеси трифлата меди(II) (0,83 г, 2,3 ммоль), метансульфината натрия (2,8 г, 27,6 ммоль), З-бром-2-нитроанилина (5,0 г, 2 3 ммоль) в атмосфере N2 добавили DIEA (0,50 мл, 4,6 ммоль) и ДМСО (10 мл) . Перемешанную смесь нагревали на предварительно нагретой масляной бане при 110°С в течение 18 часов. Смесь охладили до комнатной температуры, разбавили EtOAc и отфильтровали через слой Celite(tm). Фильтрат промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили и концентрировали in vacuo. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ с 0,2% NH4OH в качестве элюента, получили 3-(метилсульфонил)-2-нитроанилин: 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 7,44 (1Н, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 7,35 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,02 (1Н, дд, J=8,0,4,0 Гц), 5,04 (2Н, уш. ) , 3,36 (ЗН, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 217,0 [М+Н]+.
3-(Метилсульфонил)бензол-1,2-диамин
Me02S
H2N
NH2
Используя общий способ синтеза для метил З-амино-2-
(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили 3-
(метилсульфонил)бензол-1,2-диамин с использованием 3-(метилсульфонил)-2-нитроанилина: ЖХ-МС (ESI) m/z 187,0 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-амино-3-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 3-(2-(трет-бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат с использованием 3-(метилсульфонил)бензол-1,2-диамина: 1Н ЯМР
(400 МГц, CDC13) 5 7, 90 (1Н, с), 7,70 (1Н, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 7,51 (1Н, д, J=8,0 Гц), 6,84 (1Н, т, J=8,0 Гц), 5,46 (2Н, уш.), 5,06 (1Н, д, J=8,0 Гц), 4,29-4,21 (2Н, м) , 3,08 (ЗН, с), 1,50
(9Н, с), 1,48 (ЗН, д, J=8,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 358,1 [М+Н]+.
(S)-1-(7-(Метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-1-(7-(метилсульфонил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 240,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-
амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 4-амино-
6-(((IS)-1-(7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино-
5-пиримидинкарбонитрил с использованием (S)-l-(7-
(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 12,79 (0,8Н, с), 12,60 (0,2Н, с), 8,03 (0,8Н, д, J=8,0 Гц), 7,97 (0,2Н, д, J=8,0 Гц), 7,81 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,73-7,65 (1Н, м), 7,45-7,25 (ЗН, м), 5,78-5,60 (1Н, м) , 3,50 (ЗН, с), 1,69 (ЗН, д, J=8,0 Гц), 1,62 (1Н, д, J=8,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 358,0 [М+Н]+.
Пример 52: Получение 4-амино-б-(((1R)-1-(3-(3,5-
дифторфенил)-ЗН-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(3-(3,5-
дифторфенил)-ЗН-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
N-(3,5-Дифторфенил)-З-нитропиридин-2-амин
К дегазированному раствору 2-хлор-З-нитропиридина (2,7 г, 17,03 ммоль) и 3,5-дифторанилина (2,0 г, 15,5 ммоль) в диметилацетамиде (50 мл) добавили карбонат цезия (10 г, 30,98 ммоль) и дополнительно дегазировали азотом в течение 10 минут. К этой смеси добавили ксантфос (44 8 мг, 0,7 7 ммоль) и Pd2 (dba)3 (8 51 мг, 0,92 ммоль) и перемешивали при 100°С в течение 16 часов. После завершения реакции добавили воду (100 мл) и экстрагировали смесь EtOAc (50 0 мл). Органическую фазу высушили
над сульфатом натрия и концентрировали для получения неочищенного материала, который очистили колоночной хроматографией, используя 0-5% EtOAc в гексане для получения N-(3,5-дифторфенил)-З-нитропиридин-2-амина: ЖХ-МС (ESI) m/z 250,1 [М-Н]
N1-(3,5-Дифторфенил)пиридин-2,3-диамин NH2
К раствору N-(3,5-дифторфенил)-З-нитропиридин-2-амина (2,0
г, 7,96 ммоль) в АсОН (24 мл) добавили порошок железа (1,33 г,
2 3,8 ммоль) и нагревали реакционную смесь до 100°С в течение 1
часа. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и
добавили воду (70 мл). Органический слой экстрагировали EtOAc
(350 мл) и подщелачивали при помощи насыщенного раствора
бикарбоната натрия (150 мл), высушили над сульфатом натрия и
концентрировали in vacuo для получения Nl-(3,5-
дифторфенил)пиридин-2,3-диамина. Неочищенный продукт
использовали без дополнительной очистки.
(S)-трет-Бутил 1-(2-(3,5-дифторфениламино)пиридин-3-
иламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Boc-L-Ala-OH (2,05 г, 10,8 ммоль) и изобутил хлорформиат (1,4 г, 10,8 ммоль) растворили в ДХМ (20 мл) и добавили N-метилморфолин (1,14 г, 11,3 ммоль) при -10°С и перемешивали в течение 30 минут. К смеси добавили N1-(3,5-дифторфенил)пиридин-2, 3-диамин (1,2 г, 5,42 ммоль), растворенный в ДХМ (10 мл) . Реакционную смесь перемешивали при -10°С в течение 3 0 минут, а затем при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции добавили воду (100 мл) и экстрагировали
органический слой ДХМ (200 мл), высушили над сульфатом натрия и концентрировали для получения неочищенного продукта, который очистили колоночной хроматографией, используя 100-200 меш силикагель и 35% EtOAc в гексане для получения (S)-трет-бутил-1-(2-(3,5-дифторфениламино)пиридин-3-иламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 393,2 [М+Н]+.
трет-Бутил 1-(3-(3,5-Дифторфенил)-ЗН-имидаЗо[4,5-
Ь]пиридин-2-ил)этилкарбамат
Раствор (S)-трет-бутил 1-(2-(3,5-дифторфениламино)пиридин-
3-иламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (1,7 г, 4,33 ммоль) в
АсОН (12 мл) перемешивали при 100°С в течение ночи. После
завершения реакции смесь охладили до комнатной температуры и
подщелачивали насыщенным раствором бикарбоната натрия (60 мл) .
Органический слой экстрагировали EtOAc (150 мл), высушили над
сульфатом натрия и концентрировали in vacuo для получения трет-
бутил 1-(3-(3, 5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-
ил)этилкарбамата. Неочищенный продукт использовали без
дополнительной очистки.
1-(-(3,5-Дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этиламин
Раствор трет-бутил 1-(3-(3, 5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этилкарбамата (1,10 г, 2,94 ммоль) перемешивали в метанольном растворе НС1 (100 мл) при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения реакции растворитель удалили in vacuo, а полученное твердое вещество растворили в воде.
Раствор экстрагировали EtOAc (100 мл), промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo для
получения
1-(-(3, 5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-
ил)этиламина: ЖХ-МС (ESI) m/z 275,1 [М+Н]+. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.
4-Амино-6-(1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
1- (- (3,5-Дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-
ил)этиламин (60 0 мг, 2,18 ммоль) и 4-хлорпиримидин-5-
карбонитрил (300 мг, 2,18 ммоль) растворили в н-бутаноле (30
мл) . После прибавления DIPEA (422 мг, 3,2 8 ммоль) реакционную
смесь нагревали при 120°С в течение ночи. Смесь охладили до
комнатной температуры и добавили воду (50 мл) . Смесь
экстрагировали EtOAc (300 мл), высушили над сульфатом натрия и
концентрировали in vacuo для получения неочищенного продукта.
Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией,
используя 100-200 меш силикагель и 0-50% EtOAc в гексане, для
получения 4-амино-б- (1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-
Ь]пиридин-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 1, 580 (д, J=6, 8 Гц, ЗН) , 5, 683-5, 753 (м, 1Н) , 7, 205 (уш.с, 2Н) , 7, 307-7, 367 (м, 4Н) , 7, 768 (д, J=8 Гц, 1Н) , 7,888 (с, 1Н), 8,149-8,172 (м, 1Н), 8,276-8,292 (м, 1Н); ЖХ-МС
(ESI) m/z 393,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-
(((IS)-1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь 4-амино-б-(1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо [4,5-Ь]пиридин-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила
(0,427 г, 1,09 ммоль) разделили на колонке AD-H, используя препаративную SFC, для получения двух фракций: Первый пик на колонке SFC AD-H (второй пик на колонке Chiralcel OD-H и второй пик на колонке Chiralpak AD-H): 4-амино-б-(((1R)-1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил (0,1809 г, выход 42,4%) в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 8,28 (1Н, дд, J=4,7, 1,4 Гц), 8,16 (1Н, дд, J=8,0, 1,4 Гц), 7,89 (1Н, с), 7,75 (1Н, д, J=7,8 Гц), 7, 28-7, 39 (4Н, м) , 7,19
(2Н, уш.с), 5,72 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 393, 1 [М+Н]+. Второй пик на колонке SFC AD-H
(первый пик на колонке Chiralcel OD-H и первый пик на колонке Chiralpak AD-H): 4-амино-6-(((IS)-1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо [4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
(0,144 г, выход 33,8%) в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 8,28 (1Н, дд, J=4,8, 1,5 Гц), 8,16 (1Н, дд, J=8,0, 1,4 Гц), 7,89 (1Н, с), 7,75 (1Н, д, J=7,6 Гц), 7, 28-7, 39 (4Н, м) , 7,19 (2Н, уш.с), 5,66-5,77
(1Н, м), 1,58 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 393,1 [М+Н]+. Пример 53: б-Фтор-N-(5-фтор-2-нитрофенил)пиридин-2-амин
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D,
используя б-фторпиридин-2-амин (1,762 г, 15,71 ммоль) для
получения б-фтор-N-(5-фтор-2-нитрофенил)пиридин-2-амина в виде твердого оранжевого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 251,9 [М+Н]+. 5-Фтор-Ы1-(6-фторпиридин-2-ил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с использованием б-фтор-N-(5-фтор-2-нитрофенил)пиридин-2-амина (3,95 г, 15,73 ммоль), для получения 5-фтор-Ы1-(б-фторпиридин-2-ил)бензол-1,2-диамина в виде твердого желтого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 222,1 [М+Н]+.
трет-Бутил-1-(4-фтор-2-(6-фторпиридин-2-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
BocHN^ s
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 5-фтор-Ы1-(б-фторпиридин-2-ил)бензол-1,2-диамина (1, 200 г, 5,42 ммоль) для получения трет-бутил 1-(4-фтор-2-(6-фторпиридин-2-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 393,2 [М+Н]+.
N-(1-(6-Фтор-1-(6-фторпиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этил)ацетамид
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием трет-бутил 1-(4-фтор-2-(б-фторпиридин-2-
иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (2,10 г, 5,35 ммоль) для получения N- (1-( б-фтор-1-(б-фторпиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде твердого розового вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 317,1 [М+Н]+.
1-(6-Фтор-1-(6-фторпиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- (б-фтор-1-(б-фторпиридин-2-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (1,200 г, 3,79 ммоль) для получения 1- ( б-фтор-1-(б-фторпиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде розового твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 275,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(1-(б-фтор-1-(6-фторпиридин-2-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
NH2
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 1- (б-фтор-1-(б-фторпиридин-2-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,300 г, 1,094 ммоль) для
получения 4-амино-б- (1-(б-фтор-1-(б-фторпиридин-2-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 1,60 (д, J=6,85 Гц, ЗН), 5,85 (кв, J=7,03 Гц, 1Н), 7,17 (тд, J=9,23, 2,57 Гц, ЗН), 7,27 (ддд, J=ll,43, 8,86, 2,20 Гц, 2Н), 7,64 (дд, J=7,46, 1,10 Гц, 1Н), 7,73 (д, J=7,83 Гц, 1Н), 7,77 (дд,
J=8, 80, 4, 89 Гц, 1H) , 7,87 (с, 1H) , 8,20 (кв, J=8,23 Гц, 1H) . ЖХ-МС (ESI) m/z 393,1 [M+H]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-1-(6-фтор-2-пиридинил)-1H-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((1R)-1-(6-фтор-1-(6-фтор-2-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (2 61 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций: Первый пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(6-фтор-2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде белого твердого вещества: 1Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-dg) 5 м.д. 1,60 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,86 (уш.с, 1Н), 7,17 (ддд, J=9,78, 8,80, 2,35 Гц, ЗН), 7,23-7,32 (м, 2Н), 7,65 (дд, J=7, 53, 1, 47 Гц, 1Н) , 7,73 (уш.с, 1Н) , 7,77 (дд, J=8, 90, 4, 99 Гц, 1Н) , 7,87 (с, 1Н) , 8,21 (кв, J=8,22 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 393, 0 [М+Н]+. Второй пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(б-фтор-2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 1,59
(д, J=6,85 Гц, ЗН), 5,85 (кв, J=6,99 Гц, 1Н), 7,17 (тд, J=9,24, 2,45 Гц, ЗН), 7,27 (тд, J=8,95, 2,45 Гц, 2Н), 7,64 (дд, J=7,53, 1,47 Гц, 1Н), 7,71-7,81 (м, 2Н), 7,86 (с, 1Н), 8,20 (кв, J=8,22 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н]+.
Пример 54: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопентил-4-
(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Смесь
4-амино-б-(((IS)-1-(7-(метилсульфонил)-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила (110 мг, 0,31 ммоль) и карбоната цезия (100 мг, 0,31 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 0 минут в ДМФ (2 мл) . В это время добавили бромциклопентан (92 мкл, 0,62 ммоль) . Смесь перемешивали при 110°С в закрытой колбе в течение 18 часов. Смесь охладили до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) с 0,2% NH4OH в качестве элюента, получили 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопентил-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил: 1Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-de) 5 8, 09 (1Н, с), 7,95 (1Н, с), 7,94 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,72 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,43 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,35 (2Н, уш.), 5, 93-5, 85 (1Н, м) , 5, 03-4, 95 (1Н, м) , 3,54 (ЗН, с), 2, 70-2, 66 (1Н, м) , 2, 35-2, 32 (1Н, м) , 2,18-1,94 (6Н, м) , 1,67 (ЗН, д, J=8,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 426,1 [М+Н]+.
Пример 55: N-(5-Фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амин
N02
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D,
используя пиридин-3-амин (1,479 г, 15,71 ммоль) для получения
N-(5-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина
виде
твердого
оранжевого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 234,1 [М+Н]
5-Фтор-Ы1-(пиридин-3-ил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с
использованием N-(5-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина (1,24 г, 5,32 ммоль) для получения 5-фтор-Ы1-(пиридин-3-ил)бензол-1,2-диамина в виде темного маслянистого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 204,2 [М+Н]+.
трет-Бутил-1-(4-фтор-2-(пиридин-3-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 5-фтор-Ы1-(пиридин-3-ил)бензол-1,2-диамина
(0,810 г, 3,99 ммоль) для получения трет-бутил 1-(4-фтор-2-(пиридин-3-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в
виде твердого желтого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 375,2 [М+Н] N-(1-(6-Фтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-
ил)этил)ацетамид
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием трет-бутил 1-(4-фтор-2-(пиридин-3-
иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (0,610 г, 1,63
ммоль) для получения N- (1-( б-фтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде коричневого стекловидного вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 299,1 [М+Н]+.
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1-(б-фтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,486 г, 1,63 ммоль) для
получения 1- ( б-фтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этанамина в виде маслянистого светло-коричневого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 257,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(1-(б-фтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо |^]имидаЗол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 1- ( б-фтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,160 г, 0,624 ммоль) для получения 4-амино-б-(1- ( б-фтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде твердого светло-коричневого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-сУ 5 м.д. 1,57 (д, J=6,65 Гц, ЗН) , 5,49 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н, 6,95 (дд, J=9,00, 2,35 Гц, 1Н), 7,08-7,17 (м, 1Н), 7,19 (уш.с, 2Н), 7,57 (дд, J=7,92, 4,60 Гц, 1Н), 7,68-7,80 (м, 2Н), 7,83 (с, 1Н), 8,01 (д, J=8,22 Гц, 1Н) , 8,66 (дд, J=4, 79, 1, 47 Гц, 1Н) , 8,74 (д, J=2,35 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 375,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-
Рацемическую смесь (160 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций: Первый пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-dg) 5 м.д. 1,63 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,56
(кв, J=6,99 Гц, 1Н), 7,01 (дд, J=8,90, 2,45 Гц, 1Н), 7,21 (ддд, J=9,88, 8,90, 2,54 Гц, 1Н), 7,25 (уш.с, 2Н), 7,63 (ддд, J=8,12, 4,79, 0,78 Гц, 1Н), 7,75-7,86 (м, 2Н), 7,89 (с, 1Н), 8,08 (дт, J=8,31, 1,71 Гц, 1Н), 8,72 (дд, J=4,79, 1,47 Гц, 1Н), 8,81 (д, J=2,15 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 375, 1 [М+Н] + . Второй пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-dg) 8 м.д. 1,57 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,50 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н) , 6,95
(дд, J=8, 90, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,14 (ддд, J=9, 78, 8, 80, 2, 54 Гц, 1Н) , 7,19 (уш.с, 2Н) , 7,54-7,61 (м, 1Н) , 7,76 (дд, J=8,80, 5,09 Гц, 2Н) , 7,83 (с, 1Н) , 8,01 (дт, J=8,31, 1,71 Гц, 1Н) , 8,66
(дд, J=4,79, 1,47 Гц, 1Н). 8,75 (д, J=2,15 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 375,1 [М+Н]+.
Пример 56: Получение 4-амино-б-(((1R)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила N-(2-Нитропиридин-З-ил)пиридин-2-амин
К раствору З-фтор-2-нитропиридина (3,32 г, 23,38 ммоль) и 2-аминопиридина (2,0 г, 21,25 ммоль) в ДМФ (35,4 мл) добавили трет-бутоксид калия (4,77 г, 42,5 ммоль). Раствор перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение ночи. Через 22 часа смесь вылили в воду (100 мл) и экстрагировали EtOAc (2x100 мл) . После высушивания с помощью MgS04, раствор отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения неочищенного материала в виде оранжевого твердого вещества. Оранжевое твердое вещество очистили хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (80 г) , элюируя градиентом от 0 до 50% EtOAc в гексане, для получения N-(2-нитропиридин-3-ил)пиридин-2-амина в виде
твердого оранжевого вещества: Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 9,53 (1Н, с), 8,58 (1Н, дд, J=8,4, 1,6 Гц), 8,15 (1Н, дд, J=4,3, 1,4 Гц), 8,10-8,14 (1Н, м), 7,66-7,76 (2Н, м), 7,05 (1Н, дт, J=8,4, 0,8 Гц), 6,93 (1Н, ддд, J=7,2, 5,0, 0,9 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 217,0 [М+Н]+.
N3-(Пиридин-2-ил)пиридин-2,3-диамин
Гетерогенную смесь N-(2-нитропиридин-3-ил)пиридин-2-амина (2,46 г, 11,38 ммоль) и дигидрата хлорида олова(II) (12,84 г, 56,9 ммоль) в EtOAc (76 мл) нагревали с дефлегматором при перемешивании. Через 5 часов смесь охладили до комнатной температуры. К охлажденной смеси добавили ЮМ водный раствор NaOH (100 мл) . Смесь экстрагировали EtOAc (3x50 мл) . Органический экстракт промыли водой (1x100 мл), насыщенным раствором NaCl (1x100 мл) и высушили над MgSO,}. Раствор
отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения твердого коричневого вещества. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией на 80 г колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от 0 до 50% ДХМ:МеОН:NH4OH (89:9:1) в ДХМ за 25 минут, а затем 50% изократический состав ДХМ:МеОН:NH40H (89:9:1) в ДХМ в течение 2 0 минут в качестве элюента, для получения N3-(пиридин-2-ил)пиридин-2,3-диамина в виде твердого коричневого вещества: 1Н
ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 8, 03-8, 09 (1Н, м) , 7,92 (1Н, с), 7,79 (1Н, дд, J=7,6, 1,6 Гц), 7,69 (1Н, дд, J=4,9, 1,6 Гц), 7, 48-7, 56 (1Н, м) , 6, 66-6, 74 (2Н, м) , 6,56 (1Н, дд, J=7,7, 4,8 Гц), 5,67 (2Н, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 187,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил
1-оксо-1-(3-(пиридин-2-иламино)пиридин-2-
К охлажденному до -10°С раствору (NaCl-ледяная баня) Вос-L-Ala-OH (1,214 г, 6,42 ммоль) и N-метилморфолина (0,741 мл, 6,74 ммоль) в ДХМ (16,04 мл) добавили изобутил хлорформиат (0,839 мл, 6,42 ммоль). Полученную мутную светло-желтую смесь перемешивали при -10°С. Через 15 минут при -10°С к смеси добавили раствор N3-(пиридин-2-ил)пиридин-2,3-диамина (0,5974 г, 3,21 ммоль) в ДХМ (16 мл) при -10°С при перемешивании. Полученную смесь оставили нагреваться до комнатной температуры при перемешивании. Через 15,5 часов при комнатной температуре к смеси добавили насыщенный раствор NH4C1 (50 мл). Отделили органический слой. Водную смесь экстрагировали ДХМ (50 мл * 1). Объединенные органические слои высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Остаток очистили силикагелевой колоночной хроматографией на 4 0 г колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от 0 до 50% EtOAc в гексане за 14 минут, затем 50% изократический состав EtOAc в гексане в
течение 14 минут, затем градиент от 50 до 100% EtOAc в гексане за 14 минут, и затем 100% изократический состав EtOAc а течение 30 минут в качестве элюента для получения (S)-трет-бутил 1-оксо-1-(3-(пиридин-2-иламино)пиридин-2-иламино)пропан-2-илкарбамата в виде светло-розового пенистого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 358,1 [М+Н]+.
трет-Бутил 1-(1-(пиридин-2-ил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этилкарбамат
NHBoc
Раствор (S)-трет-бутил 1-оксо-1-(З-пиридин-2-
иламино)пиридин-2-иламино)пропан-2-илкарбамата (0,5432 г, 1,520
ммоль) в АсОН (5,07 мл) нагревали при 100°С при перемешивании.
Через 3 дня смесь концентрировали in vacuo для получения трет-
бутил 1-(1-(пиридин-2-ил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-
ил)этилкарбамата в виде коричневого сиропообразного вещества.
ЖХ-МС (ESI) m/z 340,1 [М+Н]+. Произошла эпимеризация.
Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.
1-(1-(Пиридин-2-ил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этанамин
NH2
К смеси трет-бутил 1-(1-(пиридин-2-ил)-1Н-имидазо[4,5-
Ь]пиридин-2-ил)этилкарбамата (0,516 г, 1,520 ммоль) в ДХМ
(10,14 мл) по каплям добавили ТФК (10,14 мл, 132 ммоль) при
комнатной температуре при перемешивании. Через 50 минут смесь
концентрировали in vacuo и совместно выпарили с триэтиламином и
МеОН. Нейтрализованную неочищенную смесь очистили
хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (40 г), элюируя градиентом от 0% до 100% ДХМ:МеОН:NH40H (89:9:1) в ДХМ, для получения 1-(1-пиридин-2
ил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этанамина в виде коричневого сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 8,688,76 (1Н, м) , 8,49 (1Н, дд, J=4,7, 1,6 Гц), 8,19 (1Н, тд, J=7,7, 2,0 Гц), 7, 79-7, 92 (2Н, м) , 7,63 (1Н, ддд, J=7,6, 4,8, 0,9 Гц), 7,32 (1Н, дд, J=8,l, 4,8 Гц), 4,47 (1Н, кв, J=6,7 Гц), 1,45 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 240,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(1-(1-пиридин-2-ил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
Смесь 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (0,235 г,
1,521 ммоль), 1-(1-(пиридин-2-ил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-
ил)этанамина (0,364 г, 1,521 ммоль) и DIEA (1,32 5 мл, 7,61
ммоль) в бутан-1-оле (15,21 мл) перемешивали при 120°С. Через
17,5 часов смесь сняли с нагрева. Смесь охладили и
концентрировали in vacuo для получения твердого коричневого
вещества. Твердое коричневое вещество суспендировали в воде (50
мл) и экстрагировали ДХМ (50 мл) . Органическую фазу промыли
водой (30 мл), высушили над MgS04, отфильтровали и
концентрировали in vacuo для получения твердого коричневого
вещества. Остаток очистили силикагелевой колоночной
хроматографией на 40 г колонке Redi-Sep(tm), используя градиент от
0 до 100% ДХМ: МеОН :NH4OH (89:9:1) в ДХМ за 14 минут, а затем
100% изократический состав ДХМ:МеОН:NH4OH (89:9:1) в ДХМ в
течение 30 минут в качестве элюента, для получения твердого
коричневого вещества. Твердое коричневое вещество
суспендировали в EtOAc-гексане (1:1) и отфильтровали для
получения 4-амино-б-(1-(1-(пиридин-2-ил)-1Н-имидазо[4,5-
Ь]пиридин-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде
светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б)
5 м.д. 8,63 (1Н, дд, J=4,9, 1,2 Гц), 8,48 (1Н, дд, J=4,7, 1,4 Гц), 8,09 (1Н, тд, J=7,8, 1,9 Гц), 7,85 (1Н, с), 7,80 (1Н, дд, J=8,l, 1,5 Гц), 7,77 (1Н, д, J=7,6 Гц), 7,73 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7, 50-7, 57 (1Н, м) , 7,30 (1Н, дд, J=8,l, 4,8 Гц), 7,20 (2Н, уш.с), 5,84 (1Н, кв, J=6,9 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=6, 8 Гц); ЖХ-МС
(ESI) m/z 358,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-
(((IS)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
NH ^N NH
Полученную выше рацемическую смесь (227,63 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций: Первый пик на колонке SFC AD-H (второй пик на колонке Chiralcel(tm) OD-H и первый пик на колонке Chiralpak(tm) AD-H): 4-амино-б-(((1R)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде светло-желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 8, 60-8, 66 (1Н, м) , 8,48 (1Н, дд, J=4,7, 1,6 Гц), 8,09
(1Н, тд, J=7,7, 2,0 Гц), 7,85 (1Н, с), 7,80 (1Н, дд, J=8,2, 1,6 Гц), 7,77 (1Н, д, J=7,4 Гц), 7,73 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,53 (1Н, ддд, J=7,6, 4,8, 0,9 Гц), 7,30 (1Н, дд, J=8,l, 4,8 Гц), 7,20
(2Н, уш.с), 5,84 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) ] m/z 358, 1 [М+Н]+. Второй пик на колонке SFC AD-H
(первый пик на колонке Chiralcel(tm) OD-H и второй пик на колонке Chiralpak(tm) AD-H): 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде светло-желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 8, 60-8, 65 (1Н, м) , 8,48 (1Н, дд, J=4,7, 1,6 Гц), 8,09
(1Н, тд, J=7,7, 2,0 Гц), 7,85 (1Н, с), 7,80 (1Н, дд, J=8,2, 1,6
Гц), 7,76 (1Н, д, J=7,6 Гц), 7,73 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,53 (1Н, ддд, J=7,6, 4,9, 1,0 Гц), 7,30 (1Н, дд, J=8,l, 4,8 Гц), 7,20 (2Н, уш.с), 5,84 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI)] m/z 358,1 [М+Н]+.
Пример 57: Получение 4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-
дифторфенил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(3,5-
дифторфенил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(3,5-Дифторфенил)-(2-нитропиридин-З-ил)амин
К дегазированному раствору З-хлор-2-нитропиридина (1,35 г, 8,51 ммоль) и 3,5-дифторанилина (1,0 г, 7,7 4 ммоль) в диметилацетамиде (23,2 мл) добавили карбонат цезия (6,34 г, 19,35 ммоль) и дополнительно дегазировали реакционную смесь азотом в течение 15 минут. К реакционной смеси добавили ксантофос (267 мг, 0,46 ммоль) и РсЬ (о!Ьа)з (212 мг, 0,23 ммоль) и перемешивали смесь при 100°С в течение 12 часов. После завершения реакции реакционную смесь разбавили водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x25 мл) . Органический слой высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo для получения неочищенного материала, который очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-30% EtOAc в гексане, для получения (3, 5-дифторфенил)-(2-нитропиридин-3-ил) амина: 1Н ЯМР (ДМСО-о!6, 400 МГц) 5 6, 856-6, 980
(м, ЗН) , 7, 659-7, 691 (м, 1Н) , 8,017 (дд, J=l,6 Гц, J=l,6 Гц, 1Н) , 8, 126-8, 140 (м, 1Н) , 9, 094 (с, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 252,0
[М+Н]+.
N3-(3,5-Дифторфенил)пиридин-2,3-диамин
К раствору (3, 5-дифторфенил)-(2-нитропиридин-З-ил)амина (900 мг, 3,58 ммоль) в EtOH (10,7 мл) добавили дигидрат хлорида олова(II) (3,23 г, 14,33 ммоль) и 35% НС1 (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивали при 75°С в течение 2 часов, затем ее подщелачивали при помощи водного раствора аммиака и экстрагировали EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo для получения N3-(3,5-дифторфенил) пиридин-2, 3-диамина: 1Н ЯМР (4 00 МГц, ДМС0-о!6) 8 5, 703 (уш.с, 2Н) , 6, 227-6, 289 (м, 2Н) , 6, 383-6, 442 (м, 1Н) , 6,564-6,595 (м, 1Н), 7,333 (дд, J=l,6 Гц, J=l,6 Гц, 1Н), 7,7847,791 (м, 2Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 222,0 [М+Н]+.
{1-[3-(3,5-Дифторфениламино)пиридин-2-илкарбамоил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир
\ ,4NHBoc
N3-(3,5-Дифторфенил)пиридин-2,3-диамин (750 мг, 3,39
ммоль), Boc-L-Ala-OH (640 мг, 3,39 ммоль) и HATU (2,57 г, 6,78
ммоль) суспендировали в ДХМ-ДМФ (1:1) (10,2 мл) . К реакционной
смеси добавили DIEA (874,6 мг, 6,7 8 ммоль) и перемешивали при
комнатной температуре в течение 8 часов. После завершения
реакции реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали
EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом натрия и
концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили
колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и
0-10% МеОН в ДХМ для получения {1-[3-(3,5-
дифторфениламино)пиридин-2-илкарбамоил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира: ЖХ-МС (ESI) m/z 393,2 [М+Н]+.
{1-[1-(3,5-Дифторфенил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-
ил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир
Раствор
{1- [3- (3,5-дифторфениламино)пиридин-2-
илкарбамоил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (50 0 мг, 1,2 7 ммоль) в АсОН (4,0 мл) перемешивали при 100°С в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь охладили до комнатной температуры, подщелачивали насыщенным раствором бикарбоната натрия (25 мл) и экстрагировали EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo для получения смеси {1-[1-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира и N-{1-[1-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил]этил}ацетамида.
1-[1-(3,5-Дифторфенил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил]этиламин
Неочищенную смесь {{1-[ 1-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4, 5-Ь]пиридин-2-ил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира
N-{1-[1-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-
ил]этил}ацетамида (300 мг) суспендировали в метанольном растворе НС1 (3 мл) . Реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение 12 часов. После завершения реакции растворитель удалили в вакууме. Остаток суспендировали в воде и подщелачивали при помощи насыщенного раствора бикарбоната натрия и экстрагировали
EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo для получения 1-[ 1-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил]этиламина: ЖХ-МС (ESI) m/z 275,1 [М+Н]+. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.
4-Амино-6-{1-[1-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидаЗо[4,5-Ь]пиридин-2-ил]этиламино}пиримидин-5-карбонитрил
К раствору 1-[1-(3, 5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-
Ь]пиридин-2-ил]этиламина (200 мг, 0,729 ммоль) и 4-
хлорпиримидин-5-карбонитрила (112 мг, 0,729 ммоль) в н-бутаноле
(2,18 мл) добавили DIEA (282 мг, 2,187 ммоль) при комнатной
температуре. Реакционную смесь нагревали при 120°С в течение
ночи. После завершения реакции реакционную смесь разбавили
EtOAc, и полученное твердое вещество собрали фильтрацией для
получения 4-амино-б-{1-[1-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-
Ь]пиридин-2-ил]этиламино}пиримидин-5-карбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 1, 597 (д, J=6, 8 Гц, ЗН) , 5, 631-5, 698 (м, 1Н) , 7,201 (уш.с, 2Н) , 7, 255-7, 287 (м, 1Н) , 7, 363-7, 409 (м, ЗН) , 7, 663 (д, J=7,6 Гц, 1Н) , 7, 759 (д, J=7,6 Гц, 1Н) , 7, 882 (с, 1Н), 8,462 (д, J=3,6 Гц, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 393,1 [М+Н]+.
Пример 58: Получение 4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-
дифторфенил)-1Н-имидаЗо[4,5-с]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(3,5-
дифторфенил)-1Н-имидаЗо[4,5-с]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Получили в соответствии с примером 57 для получения 4-амино-б-((1-(1-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 5 1, 597 (д, J=6,8 Гц, ЗН) , 5, 669-5, 738 (м, 1Н) , 7,194 (уш.с, 2Н), 7,274 (д, J=5,б Гц, 1Н), 7,344-7,389 (м, ЗН), 7,752 (д, J=7,6 Гц, 1Н) , 7, 874 (с, 1Н) , 8, 347 (д, J=5, б Гц, 1Н) , 9, 022 (с, 1Н) .
Пример 59: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Смесь 4-амино-б-(((IS)-1-(7-(метилсульфонил)-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила (36 мг, 0,10 ммоль), карбоната калия (21 мг, 0,15 ммоль) и 4-фторбензилбромида (15 мкл, 0,12 ммоль) в ДМФ (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в закрытой колбе в течение 18 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагеле, используя 2,5% МеОН в ДХМ в качестве элюента, получили 4-амино-б-(((1S)
1-(1-(4-фторбензил)-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) 8 8,08 (1Н, с), 7,88 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,44 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,31 (1Н, т, J=8,0 Гц), 6,93 (4Н, т, J=8,0 Гц), 6,19 (1Н, т, J=8,0 Гц), 5,80-5,71 (1Н, м) , 5,52 (1Н, д, J=16,0 Гц), 5,50
(1Н, д, J=16,0 Гц), 5,31 (2Н, уш.), 3,47 (ЗН, с), 1,62 (ЗН, д, J=8,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 466,0 [М+Н]+.
Пример 60: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил 1- (2-(4-фторбензиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в примере 59, получили
(S)-трет-бутил 1- (2- (4-фторбензиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат с
использованием (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (полученного в примере 51): ЖХ-МС (ESI) m/z 466,1 [М+Н]+. (S)-1-(1-(4-Фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-1-(1-(4-фторбензил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
использованием
(S)-трет-бутил
1-(2-(4-фторбензиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата:
ЖХ-МС
(ESI) m/z 348,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрил
использованием
(S)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-
бензо [d] имидазол-2-ил) этанамина: Н ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 8,16 (1Н, д, J=8,0 Гц), 8,15 (1Н, с), 8,05 (1Н, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 7,50 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7, 05-6, 98 (2Н, м) , 6,88-6,81 (2Н, м) , 6,32 (1Н, д, J=16,0 Гц), 6,20 (1Н, уш.), 6,14 (1Н, д, J=16,0 Гц), 5,80-5,71 (1Н, м), 5,57 (2Н, уш.), 2,70 (ЗН, с), 1,67 (ЗН, д, J=8,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 466,0 [М+Н]+.
Пример 61: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(3,5-
дифторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил 1-(2-(3,5-дифторбензиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в примере 59, получили
(S)-трет-бутил 1- (2-(3,5-дифторбензиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат с
использованием (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (полученного в примере 51): ЖХ-МС (ESI) m/z 484,1 [М+Н]+. (S)-1-(1-(3,5-Дифторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-1-(1-(3,5-дифторбензил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(3,5-дифторбензиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: ЖХ-МС
(ESI) m/z 366,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторбензил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 4-амино
6-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрил с использованием (S)-1-(1-(3,5-дифторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина: 1Н ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 8,16 (1Н, д, J=8,0 Гц), 8,16 (1Н, с), 8,05 (1Н, дд, J=8,0, 4,0 Гц), 7,51 (1Н, т, J=8,0 Гц), 6,79-6,71 (1Н, м) , 6, 50-6, 45 (2Н, м) , 6,37 (1Н, д, J=16,0 Гц), 6,26 (1Н, уш.), 6,11 (1Н, д, J=16,0 Гц), 5,75 (2Н, уш.), 5, 72-5, 62 (1Н, м) , 3,52 (ЗН, с), 1,70 (ЗН, д, J=8,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 484,0 [М+Н]+.
Пример 62: б-Фтор-N-(4-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амин
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D,
используя 5-фторпиридин-З-амин (2,114 г, 18,86 ммоль) для получения 5-фтор-Ы-(4-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина в виде твердого оранжевого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 252,1 [М+Н]+. 4-Фтор-Ы1-(5-фторпиридин-З-ил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с использованием 5-фтор-Ы-(4-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина (1,42 г, 5,64 ммоль) для получения 4-фтор-Ы1-(5-фторпиридин-З-ил) бензол-1,2-диамина в виде красного маслянистого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 222,1 [М+Н]+.
трет-Бутил 1-(5-фтор-2-(5-фторпиридин-З-
иламино) фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 4-фтор-Ы1-(5-фторпиридин-З-ил)бензол-1,2-диамина (0, 890 г, 4,02 ммоль) для получения трет-бутил 1-(5-фтор-2-(5-фторпиридин-3-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде белого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 393,2 [М+Н]+.
N-(1-(5-Фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этил)ацетамид
NHAc
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием трет-бутил 1-(5-фтор-2-(5-фторпиридин-З-
иламино) фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (0,500 г, 1,274 ммоль) для получения N-(1-(5-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде твердого светло-коричневого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 317,1 [М+Н]+.
1-(5-Фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- (5-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,110 г, 0,348 ммоль) для получения 1-(5-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол
2-ил)этанамина в виде светло-коричневого пенистого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 275,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(1-(5-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 1-(5-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,095 г, 0,346 ммоль) для
получения 4-амино-б-(1-(5-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил) -1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде твердого белого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 1,59 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,59 (кв, J=6, 99 Гц, 1Н) , 7, 02-7, 39 (м, 4Н) , 7,60 (дд, J=9, 59, 2, 35 Гц, 1Н) , 7,77 (д, J=7,63 Гц, 1Н) , 7,84 (с, 1Н) , 8,10 (д, J=9,19 Гц, 1Н) , 8,63 (с, 1Н) , 8,68 (д, J=2,74 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (96 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций. Первый пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(5
фтор-3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде светло-желтого твердого вещества. гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,60 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,59
(кв, J=6,99 Гц, 1Н) , 7,01-7,34 (м, 4Н) , 7,60 (дд, J=9,59, 2,35 Гц, 1Н), 7,77 (д, J=7,63 Гц, 1Н), 7,84 (с, 1Н), 8,10 (д, J=9,00 Гц, 1Н), 8,64 (с, 1Н), 8,69 (д, J=2,54 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 393, 0 [М+Н]+. Второй пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(( (IS)-1-
(5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде светло-желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,59 (д, J=6,65 Гц, ЗН) , 5,59 (кв, J=6, 90 Гц, 1Н) , 7,01-7,35 (м, 4Н) , 7,60 (дд, J=9, 59, 2, 54 Гц, 1Н) , 7,77 (д, J=7,82 Гц, 1Н) , 7,84
(с, 1Н), 8,10 (д, J=9,19 Гц, 1Н), 8,63 (с, 1Н), 8,68 (д, J=2,54 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н]+. Пример 63
(S)-Бензил 1-(6-фтор-З-(5-фторпиридин-З-ил)имидазо[1,2-
а]пиридин-2-ил)этилкарбамат
Раствор 5-фторпиридин-З-илбороновой кислоты (0,096 г, 0,68
ммоль),
(S)-бензил
1-(б-фтор-3-йодимидазо[1,2-а]пиридин-2-
ил)этилкарбамата (0,200 г, 0,455 ммоль), карбоната натрия (0,145 г, 1,366 ммоль) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен палладия (II) хлорида, комплекс 1:1 с ДХМ (0,019 г, 0,023 ммоль) в диоксане (2,53 мл) и воде (0,50 мл) перемешивали при 110°С под микроволновым излучением в течение 2 часов. В результате очистки ЖХСД (элюировали градиентом 10-60% EtOAc в гексанах) получили неочищенный (S)-бензил 1-(6-фтор-З-(5-фторпиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этилкарбамат в виде не совсем белого пенистого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 409,1 [М+Н]+.
(S)-1-(6-Фтор-З-(5-фторпиридин-З-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-
Получили в соответствии со Стадией С4 в Общем способе С,
используя (S)-бензил 1-(6-фтор-З-(5-фторпиридин-З-
ил) имидазо [1, 2-а] пиридин-2-ил) этилкарбамат (0,142 г, 0,348
ммоль) для получения (S)-1-(б-фтор-3-(5-фторпиридин-З-
ил) имидазо [ 1, 2-а] пиридин-2-ил) этанамина в виде светло-коричневого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 275,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-З-(5-фтор-З-пиридинил) имидазо [1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Получили в соответствии со Стадией С5 в Общем способе С с
использованием (S)-1- (б-фтор-3-(5-фторпиридин-З-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этанамина (0,095 г, 0,346 ммоль) для получения (S)-4-амино-б-(1-(б-фтор-3-(5-фторпиридин-З-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде не совсем белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!б) 5 м.д. 1,54 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,47 (кв, J=6, 90 Гц, 1Н) , 7,09 (д, J=7,24 Гц, 1Н) , 7,22 (уш.с, 2Н) , 7, 39-7, 48 (м, 1Н) , 7,74 (дд, J=9,78, 5,28 Гц, 1Н), 7,89 (с, 1Н), 8,00 (дт, J=9,73, 1,98 Гц, 1Н), 8,43 (дд, J=4,50, 2,15 Гц, 1Н), 8,56 (с, 1Н), 8,66 (д, J=2,74 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н]+. Пример 64
(S)-Бензил 1-(6-фтор-З-фенилимидаЗо[1,2-а]пиридин-2-
ил)этилкарбамат
пробирку
ДЛЯ
микроволновых
реакции
поместили
фенилбороновую кислоту (0,104 г, 0,852 ммоль), (S)-бензил 1-(б-
фтор-3-йодимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этилкарбамат
(0,250
0,568 ммоль), карбонат натрия (0,181 г, 1,74 ммоль) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен палладия (II) хлорид, комплекс 1:1 с ДХМ (0,023 г, 0,028 ммоль) в диоксане (3,44 мл) и воде (0,34 мл) . Суспензию перемешивали при 110°С под микроволновым излучением в течение 2 часов. В результате очистки ЖХСД (элюировали градиентом 0-6% МеОН в ДХМ) получили (S)-бензил 1-(б-фтор-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этилкарбамат в виде коричневого маслянистого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 390,1 [М+Н]+.
(S)-1-(6-Фтор-З-фенилимидаЗо[1,2-а]пиридин-2-ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией С4 в Общем способе С, используя (S)-бензил 1-(б-фтор-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этилкарбамат (0,142 г, 0,365 ммоль) для получения (S)-l-(6-фтор-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этанамина в виде желтого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 256,1 [М+Н]+.
(S)-4-амино-б-(1-(6-фтор-З-фенилимидаЗо[1,2-а]пиридин-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
Получили в соответствии со Стадией С5 в Общем способе С с
использованием (S)-1- ( б-фтор-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-
ил)этанамина (0,093 г, 0,364 ммоль) для получения (Б)-4-амино-б-(1-(б-фтор-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-
ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде бежевого твердого вещества. гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,50 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 5,47 (кв, J=6,85 Гц, 1Н) , 6,91 (д, J=7,43 Гц, 1Н) , 7,27 (уш.с, 2Н), 7,41 (ддд, J=10,03, 8,07, 2,45 Гц, 1Н), 7,51 (дкв, J=8,85, 4,22 Гц, 1Н), 7,58 (д, J=4,30 Гц, 4Н), 7,75 (дд, J=9,78, 5,28 Гц, 1Н), 7,97 (с, 1Н), 8,25 (дд, J=4,50, 2,35 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 374, 1 [М+Н]+-
Пример 65 : Получение 2-((1R)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-Ы-метил-1Н-бензимидаЗол-7-карбоксамида и 2-( (IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида
2-(5-Фторпиридин-З-иламино)-N-метил-З-нитробензамид
Смесь карбоната цезия (1,55 г, 4,75 ммоль), ксантфоса (550
мг, 0,950 ммоль), 2-бром-Ы-метил-3-нитробензамида (820 мг, 3,17
ммоль) (полученного в примере 20),
трис(дибензилиденацетон)дипалладия (0) (580 мг, 0,63 ммоль), 5-фторпиридин-3-амина (532 мг, 4,75 ммоль) в толуоле (15 мл) в атмосфере N2 нагревали при 100°С в течение 18 часов. Смесь охладили до комнатной температуры и разбавили EtOAc. Смесь отфильтровали, а фильтраты концентрировали in vacuo. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагеле, используя EtOAc в качестве элюента, получили 2-(5-фторпиридин-З-иламино ) -N-метил-З-нитробензамид : 1Н ЯМР (400 МГц, CDCI3) 8 9,29 (1Н, с), 8,23 (1Н, с), 8,21 (1Н, д, J=8,0 Гц), 8,16 (1Н,
с), 7,89 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,26 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,04 (1Н, д, J=8,0 Гц), 6,41 (1Н, уш.), 2,78 (ЗН, д, J=4,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 291,1 [М+Н]+.
3-Амино-2-(5-фторпиридин-З-иламино)-N-метилбензамид
H2N
Используя общий способ синтеза для метил З-амино-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили З-амино-2-(5-фторпиридин-3-иламино)-N-метилбензамид с использованием 2-(5-фторпиридин-3-иламино)-N-метил-З-нитробензамида: ЖХ-МС (ESI) m/z 261,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-(5-фторпиридин-З-иламино)-3-
(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
СГ NHMe
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 3-(2-(трет-бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили (S)-трет-бутил 1-(2-(5-фторпиридин-З-иламино) -3-(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат с использованием З-амино-2-(5-фторпиридин-З-иламино ) -N-метилбензамида : гЕ ЯМР (400 МГц, CDC13) 5 8, 60 (1Н, уш.), 8,43 (1Н, уш.), 8,34 (1Н, д, J=8,0 Гц), 8,13 (1Н, уш. ) , 8,00 (1Н, с), 7, 42-7, 32 (2Н, м) , 6,73 (1Н, д, J=8,0 Гц), 6,47 (1Н, уш.), 4,84 (1Н, уш.), 4,24 (1Н, уш. ) , 2,94 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,41 (9Н, с), 1,28 (ЗН, д, J=4,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 432,1 [М+Н]+.
(S) -2- (1-Аминоэтил) -1- (5-фторпиридин-З-ил) -N-метил-Ш-бензо[d]имидаЗол-7-карбоксамид и (R)-2-(1-аминоэтил)-1-(5-
Перемешанную суспензию (S)-трет-бутил 1-(2-(5-фторпиридин-З-иламино) -3-(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (260 мг, 0,60 ммоль) и НОАс (3 мл) в закрытой Q-пробирке нагревали при 14 0°С в течение 2 часов. Смесь охладили до комнатной температуры и концентрировали in vacuo. К остаточной смеси добавили 37% НС1 (10 мл) . Смесь нагревали с дефлегматором в течение 3 часов, охладили до комнатной температуры и концентрировали in vacuo. Остаток растворили в воде (5 мл) и подщелачивали 1 н. NaOH до рН 9,5. Смесь концентрировали in vacuo и растерли с МеОН-ДХМ (1:1) . Неочищенный продукт в растворе концентрировали in vacuo. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент от 6 до 15% МеОН в ДХМ-EtOAc (1:1) с 0,2% NH4OH в качестве элюента, получили рацемическую смесь (S)-2-(l-аминоэтил)-1-(5-фторпиридин-З-ил)-Ы-метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид и (R)-2-(1-аминоэтил)-1-(5-фторпиридин-З-ил)-N-метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид: 1Н ЯМР (400 МГц, МеОН-о!4) 8,72 (1Н, д, J=4,0 Гц), 8,59 (0,5Н, с), 8,49 (0,5Н, с), 7, 97-7, 92 (0, 5Н, м) , 7, 88-7, 82 (1, 5Н, м) , 7,41 (0,5Н, д, J=8,0 Гц), 7,39 (0,5Н, д, J=8,0 Гц), 7,34 (1Н, д, J=8,0 Гц), 4,053,98 (1Н, м), 2,50 (ЗН, с), 1,48 (ЗН, дд, J=4,0, 4,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 314,2 [М+Н]+.
2-((1R)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-Ы-метил-1Н-бензимидаЗол-7-карбоксамид и 2-((IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил) -Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-
амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили
рацемическую смесь 2-( (1R)-1-( (б-амино-5-циано-4-
пиримидинил) амино) этил) -1- (5-фтор-З-пиридинил) -N-метил-Ш-бензимидазол-7-карбоксамида и 2-( (IS)-1-( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил) амино) этил) -1- (5-фтор-З-пиридинил) -N-метил-Ш-бензимидазол-7-карбоксамида с использованием рацемической смеси
(S) -2- (1-аминоэтил) -1- (5-фторпиридин-З-ил) -N-метил-Ш-бензо[d]имидазол-7-карбоксамида и (R)-2-(1-аминоэтил)-1-(5-фторпиридин-3-ил)-Ы-метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамида: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8, 60 (0, 5Н, уш. ) , 8,54 (1Н, уш. ) , 8,33 (0,5Н, уш.), 8,20-8,14 (1Н, м) , 8,04 (0,5Н, д, J=8,0 Гц), 7,84-7,73 (ЗН, м), 7,64 (0,5Н, д, J=8,0 Гц), 7,30 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,25-7,15 (ЗН, м) , 5, 55-5, 40 (1Н, м) , 2,24 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=4,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 432,1 [М+Н]+.
Рацемическую смесь разделили хиральным разделением с использованием SFC для получения двух фракций: Первый элюированный энантиомер на колонке AD-H: 2-((1R)-1-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-N-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8,60
(0,5Н, уш.), 8,54 (1Н, уш.), 8,33 (0,5Н, уш. ) , 8,20-8,14 (1Н, м), 8,04 (0,5Н, д, J=8,0 Гц), 7,84-7,73 (ЗН, м), 7,64 (0,5Н, д, J=8,0 Гц), 7,30 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,25-7,15 (ЗН, м), 5,55-5,40
(1Н, м) , 2,24 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=4,0 Гц); ЖХ-МС
(ESI) m/z 432,1 [М+Н]+. Второй элюированный энантиомер на
колонке AD-H: 2-( (IS)-1-( (6-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-Ы-метил-1Н
бензимидазол-7-карбоксамид: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8,60
(0,5Н, уш.), 8,54 (1Н, уш.), 8,33 (0,5Н, уш. ) , 8,20-8,14 (1Н, м), 8,04 (0,5Н, д, J=8,0 Гц), 7,84-7,73 (ЗН, м), 7,64 (0,5Н, д, J=8,0 Гц), 7,30 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,25-7,15 (ЗН, м), 5,55-5,40
(1Н, м) , 2,24 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=4,0 Гц); ЖХ-МС
(ESI) m/z 432,1 [М+Н]+.
Пример 66: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-
(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
К смеси (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (полученного в примере 51) (440 мг, 1,23 ммоль), ледяной АсОН (0,43 мл, 7,4 ммоль) и циклопропанкарбальдегида (0,18 мл, 2,5 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (5 мл) добавили триацетоксиборгидрид натрия (780 мг, 3,7 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в атмосфере N2 в течение 18 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом магния и концентрировали in vacuo. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагелевой колонке с использованием градиента от 10 до 2 0% EtOAc:ДХМ (1:1) в ДХМ в качестве элюента получили (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат: ЖХ-МС (ESI) m/z 412,1 [М+Н]+.
(S)-1-(1-(Циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-1-(1-(циклопропилметил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: ЖХ-МС
(ESI) m/z 294,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((lS)-l-(l-(циклопропилметил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрил с использованием (S)-1- (1-(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо [d] имидазол-2-ил) этанамина: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!6) 5 8,06 (1Н, с), 8,03 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,89 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,76 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,43 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,34 (2Н, уш.), 5,84-5,76 (1Н, м), 4,82 (1Н, дд, J=12,0, 4,0 Гц), 4,55 (1Н, дд, J=12,0, 4,0 Гц), 3,44 (ЗН, с), 1,66 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,341,26 (1Н, м), 0,55-0,35 (4Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 412,0 [М+Н]+.
Пример 67: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(3-(2-
пиридинил)имидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этил)амино)-5-
Смесь пиримидин-2-иламина (3 г, 31,5 ммоль) и бензилового эфира (3-бром-1-метил-2-оксопропил)карбаминовой кислоты (9,4 г, 31,54 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали с дефлегматором в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь охладили до комнатной температуры и удалили EtOH in vacuo. Остаток растворили в EtOAc и промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100200 меш) и 0-5% МеОН в ДХМ для получения бензилового эфира (1-имидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил-этил)карбаминовой кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 297,1 [М+Н]+.
[1-(З-Йодимидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты бензиловый эфир
CbzHN
К раствору бензилового эфира (1-имидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил-этил)карбаминовой кислоты (5,3 г, 17,90 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) добавили N-йодсукцинимид (4,0 г, 17,90 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции смесь разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100200 меш) и 0-4% МеОН в ДХМ для получения бензилового эфира [1-
(3-йодимидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этил]карбаминовой
кислоты:
ЖХ-МС (ESI) m/z 422,8 [М+Н]
[1-(З-Пиридин-2-ил-имидаЗо[1,2-а]пиримидин-2-
ил)этил]карбаминовой кислоты бензиловый эфир
NHCbz
эфира
[1-(3-йодимидазо[1,2-
а]пиримидин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты (5,0 г, 14,21 ммоль) и 2-трибутилстаннил-пиридина (15,6 г, 42,63 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) добавили Pd(PPh3)4 (1,6 г, 1,4 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 110°С. После завершения реакции смесь концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-40% ацетона в гексане для получения бензилового эфира [1-(3-йодимидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 374,1 [М+Н]+.
1-(З-Пиридин-2-ил-имидаЗо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этиламин
NH2 ^1
Смесь бензилового эфира [1-(3-йодимидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты (90 0 мг, 2,4 ммоль) и диметилсульфида (0,9 мл) в ТФК (4,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали in vacuo, растворили в EtOAc, промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения 1-(3-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этиламина: ЖХ-МС (ESI) m/z 240,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-[1-(3-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пиримидин-2-
К смеси 1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этиламина (800 мг, 3,34 ммоль) и 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (520 мг, 3,34 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) добавили DIEA (1,7 мл, 10,04 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение ночи. Смесь концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-30% ацетона в гексане для получения 4-амино-б-[1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этиламино]пиримидин-5-карбонитрила: гЕ ЯМР : {ДМСО-о!6, 400 МГц) 5 1, 547 (д, J=6,4 Гц, ЗН) , 5, 807-5, 841 (уш.с, 1Н) , 7, 150-7, 176 (м, 1Н) , 7, 289 (уш.с, 2Н) , 7, 429-7, 466 (м, 2Н) , 7, 847-7, 867 (м, 1Н) , 7, 998 (с, 2Н) , 8, 653 (с, 1Н) , 8, 789 (с, 1Н) , 9,419 (д, J=6,4 Гц, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 358,2 [М+Н]+.
Пример 68
(S)-Метил 2-(1-(бензилоксикарбониламино)этил)-3-(5-
фторпиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
Получили в соответствии со Стадией СЗЬ в Общем способе С,
используя (S)-метил 2-(1-(бензилоксикарбониламино)этил)-3-йодимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат (0,350 г, 0,730 ммоль) и 5-фторпиридин-З-илбороновую кислоту (0,154 г, 1,10 ммоль) для получения (S)-метил 2-(1-(бензилоксикарбониламино)этил)-3-(5-фторпиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата в виде светло-коричневого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 449,1
[М+Н] +-
(S)-Метил 2-(1-аминоэтил)-3-(5-фторпиридин-З-
ил) имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
Получили в соответствии со Стадией С4 в Общем способе С, используя (S)-метил 2-(1-(бензилоксикарбониламино)этил-3-(5-фторпиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат (0,215 г, 0,479 ммоль) для получения (S)-метил 2-(1-аминоэтил)-3-(5-фторпиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата. ЖХ-МС (ESI) m/z 315,0 [М+Н]+-
Метил 2- ( (IS)-1-((6-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-3-(5-фтор-З-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
Раствор (S)-метил 2-(1-аминоэтил)-3-(5-фторпиридин-З-ил) имидазо [ 1, 2-а] пиридин-5-карбоксилата (0,151 г, 0,480 ммоль), 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (0,089 г, 0,576 ммоль) и DIEA (0,252 мл, 1,441 ммоль) в н-бутаноле (2,40 мл) перемешивали при 110°С в течение 2 часов. Смесь загрузили на силикагель и очистили при помощи ЖХСД (элюировали градиентом 07% МеОН в ДХМ) для получения метил 2-( (IS)-1-( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил-3-(5-фтор-З-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества. гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,55 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 3,33 (с, ЗН) , 5,41 (кв, J=6, 65 Гц, 1Н) , 7,16 (д, J=7,24 Гц, 1Н), 7,23 (уш.с, 2Н), 7,38-7,50 (м, 2Н), 7,75-7,90 (м, 2Н),
7,95 (дд, J=8,61, 1,57 Гц, 1Н) , 8,42 (уш.с, 1Н) , 8,62 (д, J=2,74 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 433,1 [M+H]+.
Пример 69: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((1R)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
2-Бром-Ы-циклопропил-6-нитроанилин
Смесь 1-бром-2-фтор-3-нитробензола (4,1 г, 18,6 ммоль) и циклопропанамина (1,29 мл, 18,6 ммоль) в ТГФ (10 мл) перемешивали в атмосфере N2 при 60 °С в течение 18 часов. Реакционную смесь разбавили EtOAc, промыли водой, отфильтровали через слои Целита , промыли насыщенным солевым раствором и высушили над сульфатом магния. Раствор концентрировали in vacuo. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагелевой колонке с использованием градиента от 30 до 50% ДХМ в гексане в качестве элюента, получили 2-бром-Ы-циклопропил-6-нитроанилин: ЖХ-МС (ESI) m/z 259,0 [М+Н]+.
Ы-Циклопропил-2-(метилсульфонил)-6-нитроанилин
^ SOzMe
Используя общий способ синтеза для 3-(метилсульфонил)-2-нитроанилина в примере 51, получили Ы-циклопропил-2-(метилсульфонил)-б-нитроанилин с использованием 2-бром-Ы-циклопропил-б-нитроанилина: ЖХ-МС (ESI) m/z 257,0 [М+Н]+.
S02Me
Используя общий способ синтеза для метил З-амино-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили N1-циклопропил-б-(метилсульфонил)бензол-1,2-диамин с использованием Ы-циклопропил-2-(метилсульфонил)-б-нитроанилина: ЖХ-МС (ESI) m/z 227,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1- (2- (циклопропиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
S02Me
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 3-(2-(трет-
бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата
в примере 47, получили (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропиламино)-
3-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат с
использованием Nl-циклопропил-б-(метилсульфонил)бензол-1, 2-
диамина: ЖХ-МС (ESI) m/z 398,0 [М+Н]+.
(S)-1-(1-Циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин и (R)-1-(1-циклопропил-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
HoN
Используя общий способ синтеза для синтеза (S)-2-(l-
аминоэтил) -1- (5-фторпиридин-З-ил) -N-метил-Ш-бензо [d] имидазол-
7-карбоксамида и (R)-2-(1-аминоэтил)-1-(5-фторпиридин-З-ил)-N-
метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамида в примере 65, получили
рацемическую смесь (S)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина и (R)-1-(1-циклопропил-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина с
использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата: ЖХ-МС
(ESI) m/z 280,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((1R)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили рацемическую смесь 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино-5-пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((1R)-1-(1-циклопропил-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила с использованием рацемической смеси (S)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина и (R)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо [d] имидазол-2-ил) этанамина: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!6) 8 8,05 (1Н, с), 7,94 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,90 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,76 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,39 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,32 (2Н, уш.), 5, 97-5, 90 (1Н, м) , 3, 70-3, 62 (1Н, м) , 3,52 (ЗН, с), 1,62 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,28-0,97 (4Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 398,0 [М+Н]+. Рацемическую смесь разделили хиральным разделением с использованием SFC для получения двух фракций:
Первый элюированный энантиомер на колонке AD-H: 4-Амино-6-
(((1R)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 8,05 (1Н, с), 7,94 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,90 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,76 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,39 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,32 (2Н, уш.),
5, 97-5, 90 (1Н, м) , 3, 70-3, 62 (1H, м) , 3,52 (ЗН, с), 1,62 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,28-0,97 (4Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 398,0 [М+Н]+.
Второй элюированный энантиомер на колонке AD-H: 4-амино-6-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил) этил) амино)-5-пиримидинкарбонитрил: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 8,05 (1Н, с), 7,94 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,90 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,76 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,39 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,32 (2Н, уш.), 5, 97-5, 90 (1Н, м) , 3, 70-3, 62 (1Н, м) , 3,52 (ЗН, с), 1,62 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,28-0,97 (4Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 398,0 [М+Н]+.
Пример 7 О
(S)-2-(1-((З-Амино-2-цианофенил)амино)этил)-3-(5-фторпиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоновая кислота
Раствор метил 2-( (IS)-1-( (б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-3-(5-фтор-З-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата (0,060 г, 0,139 ммоль) и йодида лития (0,056 г, 0,416 ммоль) в пиридине (0,73 мл) перемешивали при 100°С в течение б часов. Летучие вещества удалили при пониженном давлении для получения (S)-2-(1-( (З-амино-2-цианофенил)амино)этил)-3-(5-фторпиридин-З-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоновой кислоты в виде темного остатка. ЖХ-МС (ESI) m/z 419,1 [М+Н]+.
2-((IS)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-3-(5-фтор-З-пиридинил)-N-метилимидаЗо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамид
К раствору (S)-2-(1-((З-амино-2-цианофенил)амино)этил)-3-
(5-фторпиридин-З-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоновой кислоты
(0,058 г, 0,139 ммоль) в ДМФ (0,93 мл) добавили бензотриазол-1-
илокситрипирролидинфосфония гексафторфосфат (РуВОР) (181 мг,
0,34 8 ммоль), а затем DIEA (0,04 9 мл, 0,27 8 ммоль) и метиламин
(2,0 М раствор в ТГФ, 0,174 мл, 0,348 ммоль). Раствор
перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем
загрузили на силикагель и очистили при помощи ЖХСД (элюировали
градиентом 0-8% МеОН в ДХМ) для получения светло-желтого
твердого вещества. Повторно очистили при помощи ЖХСД
(элюировали градиентом 0-90% (раствор 1:10:90 NH4OH:МеОН:ДХМ) в
ДХМ) для получения 2-( (IS)-1-( (6-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-3-(5-фтор-З-пиридинил)-N-метилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамида в виде твердого белого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,55 (уш.с, ЗН) , 2,28 (д, J=4,70 Гц, ЗН) , 5,35 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н) , 7,00 (дд, J=6,75, 0,88 Гц, 1Н), 7,08 (д, J=7,43 Гц, 1Н), 7,22 (уш.с, 2Н) , 7,39 (дд, J=9, 00, 6, 85 Гц, 1Н) , 7,67 (уш.с, 1Н) , 7,78 (дд, J=9,10, 0,88 Гц, 1Н) , 7,87 (с, 1Н) , 8,31 (уш.с, 1Н) , 8,57 (д, J=2,74 Гц, 1Н), 8,73 (кв, J=4,30 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 432,0 [М+Н]+.
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D,
Пример 71: 3-(5-Фтор-2-нитрофениламино)бензонитрил
используя 3-аминобензонитрил (1,00 г, 8,4 6 ммоль) для получения 3- (5-фтор-2-нитрофениламино)бензонитрила в виде твердого оранжевого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 256,1 [М-Н]". 3-(2-Амино-5-фторфениламино)бензонитрил F
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D,
используя 3-(5-фтор-2-нитрофениламино)бензонитрил (0,538 г,
2,09 ммоль) для получения 3-(2-амино-5-
фторфениламино)бензонитрила в виде твердого желтого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 228,1 [М+Н]+.
трет-Бутил 1-(2-(3-цианофениламино)-4-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 3-(2-амино-5-фторфениламино)бензонитрила (0,451 г, 1,985 ммоль) для получения трет-бутил 1-(2-(3-цианофениламино)-4-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в виде твердого желтого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 421,1 [M+Na]+.
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием трет-бутил 1-(2-(3-цианофениламино)-4-
N-(1-(1-(З-Цианофенил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этил)ацетамид
фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (0,783 г, 1,97
ммоль) для получения N- (1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде белого твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 323,1 [М+Н]+.
3-(2-(1-Аминоэтил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-1-ил)бензонитрил
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- (1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,247 г, 0,766 ммоль) для
получения 3- (2- (1-аминоэтил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-
ил)бензонитрила бесцветного маслянистого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 281,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(1-(1-(3-цианофенил)-6-фтор-1Н-бензо|^]имидаЗол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
NH2
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 3-(2-(1-аминоэтил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)бензонитрила (0,215 г, 0,767 ммоль) для получения 4-амино-б-(1-(1-(3-цианофенил)- б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,57 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,61 (кв, J=6,85 Гц, 1Н) , 7,00 (дд, J=8,90, 2,45 Гц, 1Н), 7,09-7,17 (м, 1Н), 7,18 (уш.с, 2Н), 7,63-7,79 (м, ЗН), 7,81-7,94 (м, ЗН), 8,07 (уш.с, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 399,0
[М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(1-(3-цианофенил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(3-цианофенил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (0,182 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций. Первый пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил (62 мг) . ЖХ-МС (ESI) m/z 399, 0 [М+Н] + . 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,58 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 5,555,68 (м, 1Н) , 7,01 (дд, J=9, 00, 2, 35 Гц, 1Н) , 7, 09-7, 25 (м, ЗН) , 7, 67-7, 74 (м, 2Н) , 7,76 (дд, J=8, 80, 4, 70 Гц, 1Н) , 7,827,88 (м, 2Н), 7,90 (дт, J=7,68, 1,25 Гц, 1Н), 8,08 (уш.с, 1Н). Второй пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил (60 мг) . ЖХ-МС (ESI) m/z 399, 0 [М+Н] + . 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,58 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 5,61 (кв, J=6,90 Гц, 1Н), 7,01 (дд, J=9,00, 2,35 Гц, 1Н), 7,08-7,25 (м, ЗН) , 7, 67-7, 74 (м, 2Н) , 7,76 (дд, J=8, 90, 4, 79 Гц, 1Н) , 7,83-7,88 (м, 2Н), 7,90 (дт, J=7,63, 1,27 Гц, 1Н), 8,08 (уш.с, 1Н) .
Пример 72: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(3-(2-
пиридинил)имидазо[1,2-а]пираЗин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(1-Имидазо[1,2-а]пираЗин-2-ил-этил)карбаминовой кислоты бензиловый эфир
Смесь бензилового эфира пиразин-2-иламина (3 г, 31,5
ммоль) и (3-бром-1-метил-2-оксопропил)карбаминовой кислоты (12
г, 41,05 ммоль) в EtOH (20 мл) нагревали с дефлегматором в
течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь
охладили до комнатной температуры. EtOH удалили in vacuo.
Остаток растворили в EtOAc и промыли насыщенным раствором
бикарбоната натрия. Органический слой высушили над сульфатом
натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный
продукт очистили колоночной хроматографией, используя
силикагель (100-200 меш) и 0-5% МеОН в ДХМ для получения
бензилового эфира (1-имидазо[1,2-а]пиразин-2-ил-
этил)карбаминовой кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 297,2 [М+Н]+.
[1-(З-Йодимидазо[1,2-а]пираЗин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты бензиловый эфир
CbzHN
К раствору бензилового эфира (1-имидазо[1,2-а]пиразин-2-ил-этил)карбаминовой кислоты (1,7 г, 5,74 ммоль) в ацетонитриле
(10 мл) добавили N-йодсукцинимид (1,3 г, 5,7 4 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции смесь разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100200 меш) и 0-4% МеОН в ДХМ для получения бензилового эфира [1-
(3-йодимидазо[1,2-а]пиразин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 422,9 [М+Н]+.
[1-(З-Пиридин-2-ил-имидаЗо[1,2-а]пираЗин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты бензиловый эфир
NHCbz
эфира
[1-(3-йодимидазо[1,2-
а]пиразин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты (1,6 г, 3,79 ммоль) и 2-трибутилстаннил-пиридина (4,1 г, 11,37 ммоль) в 1,4-диоксане
(20 мл) добавили Pd(PPh3)4 (50 мг, 0,4 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 110°С. После завершения реакции смесь концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-40% ацетона в гексане для получения бензилового эфира [1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пиразин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 374,1
[М+Н]+.
1-(З-Пиридин-2-ил-имидаЗо[1,2-а]пираЗин-2-ил)этиламин
Смесь бензилового эфира [1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1, 2-а]пиразин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты (450 мг, 1,2 ммоль) и диметилсульфида (1,0 мл) в ТФК (4,0 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали in vacuo, и растворили остаток в EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения 1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пиразин-2-ил)этиламина: ЖХ-МС (ESI) m/z 240,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-[1-(3-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пираЗин-2-ил)этиламино]пиримидин-5-карбонитрил
К смеси 1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пиразин-2-
ил)этиламина (250 мг, 1,04 ммоль) и 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (160 мг, 1,04 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) добавили DIEA (1,7 мл, 10,04 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение ночи. Смесь концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-40% ацетона в гексане для получения 4-амино-б-[1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-а]пиразин-2-ил)этиламино]пиримидин-5-карбонитрила: гЕ ЯМР : (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 1, 537 (д, J=6, 8 Гц, ЗН) , 5, 8375, 906 (м, 1Н) , 7, 269 (уш.с, 2Н) , 7, 471-7, 502 (м, 1Н) , 7, 5727,594 (м, 1Н), 7,887-7,907 (м, 1Н), 7,983-8,043 (м, ЗН), 8,8148, 826 (м, 1Н) , 8, 928-8, 944 (м, 1Н) , 9,180 (д, J=l,2 Гц, 1Н) ; ЖХ-МС (ESI) m/z 358,2 [М+Н]+.
Пример 73: Получение метил 2-((IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-3-фенилимидаЗо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата
(S)-Метил-2-(1-(((бензилокси)карбонил)амино)этил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
CbzHN
МеООС
Смесь б-аминопиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (1 г, 6,57 ммоль) и (S)-бензил (4-бром-3-оксобутан-2-ил) карбамата (2,3 г, 7,88 ммоль) в EtOH (25 мл) нагревали с дефлегматором в течение ночи. После завершения реакции
реакционную смесь охладили до 25°С. EtOH удалили in vacuo.
Остаток растворили в EtOAc и промыли насыщенным раствором
бикарбоната натрия. Органический слой высушили над сульфатом
натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный
продукт очистили колоночной хроматографией, используя
силикагель (100-200 меш) и 0-55% ацетона в гексане для
получения (S)-метил-2-(1-
(((бензилокси)карбонил)амино)этил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата: гЕ ЯМР: (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 1, 4745 (д, J=6, 8 Гц, ЗН) , 3, 962 (с, ЗН) , 4, 878-4, 951 (м, 1Н) , 5, 053 (с, 2Н) , 6,282
(уш.с, 1Н) , 7, 312-7, 380 (м, 5Н) , 7, 782-7, 803 (м, 1Н) , 7,8517,899 (2Н, м), 8,264 (м, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 354,1 [М+Н]+.
(S)-Метил 2-(1-(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-
йодимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
CbzHN
МеООС
К раствору (S)-метил-2-(1-
(((бензилокси)карбонил)амино)этил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата (5,5 г, 7,93 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) добавили N-йодсукцинимид (2,3 г, 10,3 ммоль) при 25 °С. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. После завершения реакции смесь разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100200 меш) и 0-50% EtOAc в гексане для получения (S)-метил 2-(1-(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-йодимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата: гЕ ЯМР {CDC13, 400 МГц) 5 1, 547 (д, J=6, 8 Гц, ЗН) , 4, 048 (с, ЗН) , 5, 067-5, 200 (м, ЗН) , 5, 805 (д, J= 7,2 Гц, 1Н), 7,229-7,260 (м, 2Н), 7,292-7,350 (м, 5Н), 7,675-7,708 (м, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 479,9 [М+Н]+.
(S)-Метил 2-(1-(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-
фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
NHCbz
К раствору (S)-метил 2-(1-
(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-йодимидазо[1,2-а]пиридин-
5-карбоксилата (900 мг, 1,87 ммоль) и фенилбороновой кислоты
(275 мг, 2,25 ммоль) в ацетонитриле-воде (12 мл) добавили
карбонат натрия (4 00 мг, 3,35 ммоль) при 25°С. Реакционную
смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. К смеси добавили
Pd(PPh3)4 (217 мг, 0,18 ммоль) при 25 °С. Реакционную смесь
перемешивали при 95°С в течение ночи. После завершения реакции
к реакционной смеси добавили воду и экстрагировали EtOAc.
Органический слой высушили над сульфатом натрия и
концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной
хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-70%
EtOAc в гексане для получения (S)-метил 2-(1-
(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата: ЖХ-МС (ESI) m/z 430,0 [М+Н]+.
(S)-Метил 2-(1-аминоэтил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
Смесь (S)-метил 2-(1-(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата (600 мг, 1,3 ммоль) и диметилсульфида (0,4 мл) в ТФК (1,2 мл) перемешивали при 25°С в течение ночи. Смесь концентрировали in vacuo, а остаток растворили в EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия,
отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения (S)-
метил 2-(1-аминоэтил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-
карбоксилата (400 мг) : ЖХ-МС (ESI) m/z 296, 2 [М+Н]+. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.
(S)-Метил 2-[1-((6-амино-5-цианопиримидин-4-
ил)амино)этил]-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
К неочищенному (S)-метил 2-(1-аминоэтил)-3-
фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилату (500 мг, 1,69 ммоль)
и 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрилу (268 мг, 1,69 ммоль) в
н-бутаноле (5 мл) добавили DIEA (0,5 мл, 2,54 ммоль) при 25°С.
Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 5-6 часов.
Смесь экстрагировали EtOAc. Органический слой высушили над
сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo.
Остаток очистили колоночной хроматографией, используя
силикагель (100-200 меш) и 0-40% ацетона в гексане для
получения (S)-метил 2-[ 1-( (б-амино-5-цианопиримидин-4-
ил)амино)этил]-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 1,471 (д, J=6, 8 Гц, ЗН) , 3,111 (с, ЗН), 5,352-5,420 (м, 1Н), 6,935-6,954 (м, 1Н), 7,259-7,518 (м, 9Н), 7,882-7,941 (м, 2Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 414,1 [М+Н]+.
Пример 74: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(3-(2-
пиридинил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(1-ИмидаЗо[1,2-Ь]пиридаЗин-2-ил-этил)карбаминовой кислоты бензиловый эфир
Смесь пиридазин-3-иламина (2 г, 21,05 ммоль) и бензилового
эфира (3-бром-1-метил-2-оксопропил)карбаминовой кислоты (7,5 г,
25,26 ммоль) в EtOH (25 мл) нагревали с дефлегматором в течение
ночи. После завершения реакции реакционную смесь охладили до
комнатной температуры. EtOH удалили in vacuo. Остаток
растворили в EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом
натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный
продукт очистили колоночной хроматографией, используя
силикагель (100-200 меш) и 0-5% МеОН в ДХМ для получения
бензилового эфира (1-имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил-
этил)карбаминовой кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 297,3 [М+Н]+.
[1-(З-Йодимидазо[1,2-Ь]пиридаЗин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты бензиловый эфир
CbzHN
К раствору бензилового эфира (1-имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил-этил)карбаминовой кислоты (2,5 г, 8,44 ммоль) в ацетонитриле
(30 мл) добавили N-йодсукцинимид (2,3 г, 10,13 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции смесь разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100200 меш) и 0-5% МеОН в ДХМ для получения бензилового эфира [1-
(3-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 422,9 [М+Н]+.
[1-(З-Пиридин-2-ил-имидаЗо[1,2-Ь]пиридаЗин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты бензиловый эфир
К раствору бензилового эфира [1-(3-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты (3,0 г, 7,1 ммоль) и 2-трибутилстаннилпиридина (7,8 г, 21,32 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавили Pd(PPh3)4 (82 0 мг, 0,71 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 110°С. После завершения реакции смесь концентрировали in vacuo. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-40% ацетона в гексане для получения бензилового эфира [1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты: ЖХ-МС (ESI) m/z 374, 1 [М+Н]+.
1-(З-Пиридин-2-ил-имидаЗо[1,2-Ь]пиридаЗин-2-ил)этиламин
Смесь бензилового эфира [ 1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1, 2-Ь]пиридазин-2-ил)этил]карбаминовой кислоты (60 0 мг, 1,6 ммоль) и диметилсульфида (1,2 мл) в ТФК (7,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали in vacuo. Остаток растворили в EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения 1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)этиламина (450 мг): ЖХ-МС (ESI) m/z 240,0 [М+Н]+.
К смеси 1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)этиламина (450 мг, 2,09 ммоль) и 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (325 мг, 2,09 ммоль) в н-бутаноле (8 мл) добавили DIEA (0,6 мл, 3,01 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение ночи. Смесь концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-60% ацетона в гексане для получения 4-амино-б-[1-(З-пиридин-2-ил-имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)этиламино]пиримидин-5-карбонитрила: гЕ ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-о!6) 5 1,272 (д, J=6,4 Гц, ЗН) , 6, 047-6, 118 (м, 1Н) , 7, 375 (уш.с, 2Н) , 7, 446-7, 477 (м, 2Н), 8,022-8,060 (м, 2Н), 8,230-8,280 (м, 1Н), 8,400-8,490 (м, 2Н), 8,727 (с, 1Н), 8,878 (с, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 358,2 [М+Н]+.
Пример 75: 3-(5-Фтор-2-нитрофениламино)-N-метилбензамид
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D,
используя 3-аминобензоилметиламид (2,360 г, 15,71 ммоль) для получения 3-(5-фтор-2-нитрофениламино)-N-метилбензамида в виде твердого оранжевого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 290,0 [М+Н]+. 3-(2-Амино-5-фторфениламино)-N-метилбензамид
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D, используя 3-(5-фтор-2-нитрофениламино)-N-метилбензамид (0,600 г, 2,07 ммоль) для получения 3-(2-амино-5-фторфениламино)-N-метилбензамида в виде твердого оранжевого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 260, 1 [М+Н] + .
(S)-трет-Бутил 1-(4-фтор-2-(3-
(метилкарбамоил)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
"^NHBoc
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 3-(2-амино-5-фторфениламино)-N-метилбензамида (0,538 г, 2,08 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(3-(метилкарбамоил)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-
илкарбамата в виде желтого пенистого вещества, предположительно
с количественным выходом. ЖХ-МС (ESI) m/z 453,0 [M+Na]+.
3-(2-(1-Ацетамидоэтил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-1-ил)-N-
ме тил б енз амид
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(4-фтор-2-(3-
(метилкарбамоил)фениламино)фениламино)-1-оксопропан-2-ил-карбамата (0,893 г, 2,074 ммоль) для получения 3-(2-(1
ацетамидоэтил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)-N-метилбензамида. ЖХ-МС (ESI) m/z 355,1 [М+Н]+.
3-(2-(1-Аминоэтил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-1-ил)-N-ме тил б енз амид
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием 3- (2-(1-ацетамидоэтил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-1-ил)-N-метилбензамида (0,630 г, 1,78 ммоль) для получения 3-(2-(1-аминоэтил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)-N-метилбензамида в виде твердого оранжевого вещества. MS (ESI) m/z 313,1 [М+Н]+.
3-(2-(1-(6-Амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-1-ил)-N-метилбензамид
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 3- (2- (1-аминоэтил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)-N-метилбензамида (430 мг, 1,3 8 ммоль) для получения 3-(2-
(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)-N-метилбензамида в виде твердого белого вещества. гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,52 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 2,81 (д, J=4,30 Гц, ЗН) , 5, 32-5, 59 (м, 1Н) , 6,92 (д, J=8,80 Гц, 1Н) , 7,08-7,17 (м, 1Н) , 7,19 (уш.с, 2Н) , 7,56-7,78
(м, 4Н) , 7,83 (с, 1Н) , 7,91-8,10 (м, 2Н) , 8,49 (д, J=4,50 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 431,0 [М+Н]+.
3-(2-((1R)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-1-ил)-N-метилбензамид и 3-(2-((IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-1-ил)-N-метилбензамид
Рацемическую смесь (0,383 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций. Первый пик на колонке OD-H: 3-(2-( (IS)-1-( (6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-
метилбензамид. гЯ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,52 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 2,81 (д, J=4,50 Гц, ЗН), 5, 39-5, 52 (м, 1Н) , 6,92 (дд, J=8, 90, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,14 (ддд, J=9, 78, 8, 80, 2, 54 Гц, 1Н) , 7,19 (уш.с, 2Н), 7,59-7,72 (м, ЗН), 7,75 (дд, J=8,80, 4,89 Гц, 1Н), 7,83 (с, 1Н), 7,92-8,06 (м, 2Н), 8,49 (кв, J=4,37 Гц, 1Н), ЖХ-МС (ESI) m/z 431,1 Второй пик на колонке OD-H: 3-(2-( (1R)-1-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамид. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!6) 5 м.д. 1,52 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 2,81 (д, J=4,50 Гц, ЗН) , 5,375,55 (м, 1Н), 6,92 (дд, J=8,90, 2,45 Гц, 1Н), 7,14 (ддд, J=9,78, 8,80, 2,54 Гц, 1Н), 7,19 (уш.с, 2Н), 7,60-7,72 (м, ЗН), 7,75 (дд, J=8, 80, 4, 69 Гц, 1Н) , 7,83 (с, 1Н) , 7, 92-8, 05 (м, 2Н), 8,49 (кв, J=4,30 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 431,1 [М+Н]+.
Раствор (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-
иламино)этил)-1-фенил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата (0,244 г, 0,590 ммоль) и йодида лития (0,237 г, 1,771 ммоль) в пиридине (3,11 мл) перемешивали при 100°С в течение ночи. Раствор концентрировали при пониженном давлении для получения (S)-2 - (1- ( (б-амино-5-цианопиримидин-4-ил)амино)этил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоновой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 400,1 [М+Н]+'
2-((IS)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-метил-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамид
К раствору DIEA (0,207 мл, 1,18 ммоль), РуВОР (0,768 г,
1, 475 ммоль) и (S)-2-(1-( (б-амино-5-цианопиримидин-4-
ил)амино)этил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоновой кислоты (0,236 г, 0,590 ммоль) в ДМФ (3,93 мл) добавили метанамин (2,0 М в ТГФ, 0,738 мл, 1,48 ммоль). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем загрузили на силикагель и очистили при помощи ЖХСД (элюировали градиентом 0-10% МеОН в ДХМ) для получения твердого вещества,
которое очистили обращенно-фазовой аналитической ВЭЖХ (элюировали градиентом 10-60% MeCN в воде с 0,1% ТФК) для получения (S)-2-(1-((б-амино-5-цианопиримидин-4-ил)амино)этил)-N-метил-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамида в виде светло-желтого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!б) 5 м.д. 1,44 (д, J=6,65 Гц, ЗН) , 2,16 (д, J=4,70 Гц, ЗН) , 5,29 (кв, J=6,90 Гц, 1Н) , 6,83 (д, J=7,63 Гц, 1Н) , 6,93 (дд, J=6, 85, 1,17 Гц, 1Н) , 7,18-7,46 (м, 8Н) , 7,74 (дд, J=9,00, 1,17 Гц, 1Н) , 7,94 (с, 1Н) , 8,51 (кв, J=4,56 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 413,1 [М+Н]+-
Пример 77: б-Фтор-N-(З-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амин
N02
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D,
используя З-амино-5-фторпиридин (2,114 г, 18,86 ммоль) для получения 5-фтор-Ы-(З-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина в виде твердого оранжевого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 252,1 [М+Н]+. З-Фтор-Nl-(5-фторпиридин-З-ил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с использованием 5-фтор-Ы-(З-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина (3,40 г, 13,54 ммоль) для получения З-фтор-Nl-(5-фторпиридин-З-ил) бензол-1,2-диамина (2,92 г, 13,20 ммоль, выход 98%) в виде твердого желтого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 222,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-фтор-6-(5-фторпиридин-З-
иламино) фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием З-фтор-Nl-(5-фторпиридин-З-ил)бензол-1,2-диамина (2,92 г, 13,20 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(2-фтор-б-(5-фторпиридин-З-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата
в виде бежевого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н]+.
N-(1-(4-Фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этил)ацетамид
NHAc F
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(2-фтор-б-(5-фторпиридин-З-
иламино) фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (3,07 г, 7,82
ммоль) для получения N-(1-(4-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде твердого
коричневого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 317,1 [М+Н]+.
1-(4-Фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
NH2 F
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- (4-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (2,30 г, 7,27 ммоль) для получения 1- (4-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде черного маслянистого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 275,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(1-(4-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
N^V-CN ^N NH
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием 1- (4-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,380 г, 1,39 ммоль) для
получения 4-амино-б-(1-(4-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил) -1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде твердого не совсем белого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 1,62 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,60 (кв, J=6, 99 Гц, 1Н) , 7,02 (дд, J=8,12, 0,68 Гц, 1Н) , 7,08-7,17 (м, 1Н) , 7,17-7,34 (м, ЗН) , 7,75-7,91 (м, 2Н) , 8,12 (д, J=8,61 Гц, 1Н) , 8,65 (с, 1Н), 8,70 (д, J=2,54 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(4-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(4-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
NH2 NH2
SANH N^NH
F F
Рацемическую смесь (0,22 0 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций. Первый пик на колонке OD-H: 4-Амино-б-(((1R)-1-(4-фтор-1-(5-фтор-3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил. ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н]+. гЕ ЯМР (400 МГц, MMCO-d6) 5 м.д. 1,61 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,59 (кв, J=6, 94
Гц, 1Н) , 7,02 (д, J=8,02 Гц, 1Н) , 7,13 (дд, J=10, 76, 7, 82 Гц,
1Н), 7,17-7,29 (м, ЗН), 7,75-7,87 (м, 2Н), 8,12 (д, J=8,22 Гц,
1Н) , 8,64 (с, 1Н) , 8,70 (д, J=2,74 Гц, 1Н) . Второй пик на
колонке OD-H: 4-Амино-б-(((IS)-1-(4-фтор-1-(5-фтор-З-
пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил (73 мг, 66,4%) . ЖХ-МС (ESI) m/z 393,0 [М+Н] + . гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,61 (д, J=6,85 Гц,
ЗН) , 5,59 (кв, J=6,90 Гц, 1Н) , 7,02 (д, J=8,02 Гц, 1Н) , 7,13 (дд, J=10, 96, 8, 02 Гц, 1Н) , 7,17-7,33 (м, ЗН) , 7, 72-7, 90 (м,
2Н), 8,12 (д, J=7,43 Гц, 1Н), 8,64 (с, 1Н), 8,70 (д, J=2,54 Гц,
1Н)
Пример 78: 4-Амино-6-(((IS)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-
пиридинил) -1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбоксамид
К раствору (S)-4-амино-б-(1-(б-фтор-1-(5-фторпиридин-З-ил) -1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила
(0,040 г, 0,10 ммоль) в ДМСО (1,02 мл) добавили карбонат калия
(0,017 г, 0,122 ммоль), а затем перекись водорода (31% в воде, 0, 635 мл, 6,42 ммоль) . После перемешивания в течение 2 часов раствор вылили в воду и экстрагировали EtOAc. Органические экстракты концентрировали и очистили при помощи ЖХСД
(элюировали 0-100% (1:10:90 NH4OH:МеОН:ДХМ) в ДХМ) для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбоксамида в виде твердого белого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 1,51
(д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,34 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н) , 6,57 (с, 2Н) , 7,04-7,22 (м, 2Н), 7,43 (уш.с, 2Н), 7,67-7,80 (м, 2Н), 7,92 (д, J=7,63 Гц, 1Н) , 8,21 (дт, J=9,29, 2,10 Гц, 1Н) , 8,71 (с, 1Н) ,
8,81 (д, J=2,74 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 411,0 [M+H]+.
Пример 79: Получение 2-((IS)-1-((5-амино-1,3,4-тиадиаЗол-2-ил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидаЗол-7-карбоксамида
Смесь (S)-2-(1-аминоэтил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксамида (полученного в примере 20)
(63,5 мг, 0,25 ммоль), карбоната цезия (80 мг, 0,25 ммоль) и 2-амино-5-бром-[1,3,4]тиадиазола (44,3 мг, 0,25 ммоль) в EtOH (5 мл) в атмосфере N2 перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь концентрировали in vacuo. Остаток разбавили EtOAc, промыли водой, насыщенным солевым раствором, высушили над сульфатом магния и концентрировали in vacuo. В результате очистки остатка флэш-хроматографией на силикагеле, используя градиент от 0 до 10% МеОН в ДХМ с 0,2% NH4OH в качестве элюента, получили 2-((IS)-1-((5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8, 468,39 (1Н, м) ; 7,62 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,44 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,24-7,16 (2Н, м) ; 6,22 (2Н, с), 5, 46-5, 37 (1Н, м) , 3,40-3,30
(1Н, м) , 2,82 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,55 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 1,221,15 (1Н, м) , 1,12-1,04 (1Н, м) , 1,01-0,92 (1Н, м) , 0,83-0,74
(1Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 358,0 [М+Н]+.
Пример 80: Получение 4-амино-б-(((1R)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила и 4-амино-б-(((IS)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
К раствору 1-бром-2-фтор-3-нитробензола (5,69 г, 25,9
ммоль) и З-амино-5-фторпиридина (2,6373 г, 23,53 ммоль) в ДМФ
(39,2 мл) добавили трет-бутоксид калия (5,28 г, 47,1 ммоль) и
перемешивали раствор в атмосфере азота при комнатной
температуре в течение ночи. Еще через 5 часов смесь вылили в
воду (150 мл) и экстрагировали EtOAc (2 * 100 мл). Органический
экстракт высушили над MgSO,}, Раствор отфильтровали и
концентрировали in vacuo для получения неочищенного продукта в
виде оранжевого твердого вещества. Оранжевое твердое вещество
очистили хроматографией через предварительно упакованную
силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (120 г), элюируя градиентом от
0 до 50% EtOAc в гексане, для получения N-(2-бром-б-
нитрофенил)-5-фторпиридин-З-амина в виде оранжевого
сиропообразного вещества: Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,73 (1Н, с), 8,09 (1Н, дд, J=8,l, 1,5 Гц), 8,03 (1Н, дд, J=8,2, 1,4 Гц), 7,97 (1Н, д, J=2,5 Гц), 7,88 (1Н, т, J=l,9 Гц), 7,44 (1Н, т, J=8,l Гц), 6,77 (1Н, дт, J=ll,2, 2,3 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 312,0 [М+Н (79Вг)]+и 313,9 [М+Н (81Вг)] + .
б-Бром-Nl-(5-фторпиридин-З-ил)бензол-1,2-диамин
Смесь N-(2-бром-б-нитрофенил)-5-фторпиридин-З-амина (5,686 г, 18,22 ммоль) и дигидрата хлорида олова(II) (20,56 г, 91 ммоль) в EtOAc (121 мл) нагревали с дефлегматором при перемешивании. Через 2,5 часа смесь охладили до комнатной температуры. Охлажденную смесь вылили в ЮМ водный раствор NaOH (150 мл) . Смесь экстрагировали EtOAc (100 мл х2), промыли
водой (100 мл х2), насыщенным солевым раствором (100 мл х1), высушили над Mg2S04, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный материал абсорбировали на слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (120 г), элюируя градиентом от 0% до 30% EtOAc в гексане, для получения б-бром-Nl-(5-фторпиридин-3-ил)бензол-1,2-диамина в виде коричневого сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 7,84
(1Н, с), 7, 76-7, 82 (2Н, м) , 6,91-6,98 (1Н, м) , 6,81-6,87 (1Н, м) , 6,77 (1Н, дд, J=8,0, 1,4 Гц), 6,39 (1Н, дт, J=ll,7, 2,3 Гц), 5,28 (2Н, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 282, 0 [М+Н (79Вг)]+ и 283,9
[М+Н (81Вг)]+.
(S)-трет-Бутил 1-(З-бром-2-(5-фторпиридин-З-
иламино) фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
К охлажденному до -10°С раствору (NaCl-ледяная баня) Вос-
L-Ala-OH (6,36 г, 33,6 ммоль) и N-метилморфолина (3,88 мл, 35,3
ммоль) в ДХМ (84 мл) добавили изобутилхлорформиат (4,40 мл,
33,6 ммоль). Полученную мутную бесцветную смесь перемешивали
при -10°С в течение 3 0 минут. К этой смеси затем добавили
раствор б-бром-Nl-(5-фторпиридин-З-ил)бензол-1,2-диамина
(4,7437 г, 16,81 ммоль) в ДХМ (84 мл). Полученную смесь оставили нагреваться до комнатной температуры при перемешивании. Через 2 0 часов к смеси добавили насыщенный раствор NH4C1 (100 мл) . Мутный органический слой отделили. Водную смесь экстрагировали ДХМ (1хЮ0 мл) и концентрировали органические экстракты in vacuo для получения неочищенного продукта. Неочищенный материал абсорбировали на слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep (120 г), элюируя градиентом от
0% до 100% ДХМ:МеОН:NH4OH (89:9:1) в ДХМ, для получения (S) -трет-бутил 1- (З-бром-2-(5-фторпиридин-З-иламино)фениламино) -1-оксопропан-2-илкарбамата в виде твердого оранжевого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 453, 0 [М+Н (79Вг)]+ и 455, 0 [М+Н (81Вг)] + .
N-(1-(7-Бром-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этил)ацетамид
Раствор (S)-трет-бутил 1-(З-бром-2-(5-фторпиридин-З-
иламино) фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (2, 4253 г, 5,35 ммоль) в АсОН (17,83 мл) нагревали при 100°С при перемешивании. Через 5 дней нагревание прекратили и смесь вылили в двухфазную смесь ДХМ (100 мл) и насыщенного раствора бикарбоната натрия
(100 мл) . Смесь подщелачивали 10 н. NaOH (10 мл) . Органический слой промыли водой (100 мл хЗ) и насыщенным солевым раствором
(100 мл х1), высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения N-(1-(7-бром-1-(5-фторпиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде темно-коричневого твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 376,9
[М+Н (79Вг)]+и 379 [М+Н (81Вг)] + .
1-(7-Бром-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Раствор N- (1- (7-бром-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (1,5652 г, 4,15 ммоль) и 2 н. НС1 (31,1 мл, 62,2 ммоль) нагревали при 100°С. Через б часов смесь охладили до комнатной температуры и разделили между ДХМ
(50 мл) и водой (50 мл) . Кислотно-водную смесь промыли ДХМ (50 мл х4) для удаления органических примесей, а затем подщелачивали до ~рН 12 при помощи 10 н. NaOH (б мл) и экстрагировали ДХМ (50 мл * 3) . Объединенные органические слои промыли водой (100 мл х1), насыщенным солевым раствором (100 мл х 1), высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения темно-красного сиропообразного вещества. Неочищенный материал абсорбировали на слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (80 г), элюируя градиентом от 0% до 50% ДХМ: МеОН :NH4OH (89:9:1) в ДХМ, для получения 1-(7-бром-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде коричневого сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (4 00 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 8,86 (1Н, т, J=2,8 Гц), 8,73 (1Н, дт, J=13,5, 1,4 Гц), 8,23-8,33 (1Н, м), 7,75 (1Н, дд, J=8,0, 1,0 Гц), 7,41
(1Н, д, J=7,4 Гц), 7,21 (1Н, т, J=7,9 Гц), 3,76 (1Н, кв, J=6,7 Гц), 1,93 (2Н, уш.с), 1,36 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 334, 9 [М+Н (79Вг)]+ и 337 [М+Н (81Вг)] + .
4-Амино-6-(1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Смесь 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (0,368 г,
2,381 ммоль), 1-(7-бром-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,798 г, 2,38 ммоль) и DIEA (1,24 мл, 7,14 ммоль) в 1-бутаноле (23,8 мл) перемешивали при 120°С. Через 23 часа нагревание прекратили, и смесь оставили при комнатной температуре. После охлаждения смесь концентрировали in vacuo для получения темно-пурпурного твердого вещества. К темно-пурпурному твердому веществу
добавили воду (50 мл), а затем обработали ультразвуком. Полученный осадок собрали фильтрацией, промыли водой и высушили на воздухе для получения продукта. Твердое вещество абсорбировали на слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (80 г), элюируя градиентом от 0% до 50% ДХМ: МеОН :NH4OH
(89:9:1) в ДХМ, для получения пурпурного твердого вещества.
Пурпурное твердое вещество суспендировали в EtOAc-гексане (1:5,
10 мл), отфильтровали и промыли EtOAc-гексаном (1:5, 40 мл) для
получения 4-амино-б- (1-(7-бром-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде пурпурного твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 8, 47-8, 79 (2Н, м) , 7, 88-8, 34 (1Н, м) , 7, 67-7, 85 (ЗН, м) , 7,44
(1Н, дд, J=7,8, 0,8 Гц), 7,22 (ЗН, т, J=7,9 Гц), 5,29-5,47 (1Н, м) , 1,57 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 453, 0 [М+Н (79Вг)] + и 454, 9 [М+Н (81Вг) ]+ .
4-Амино-6-(((1R)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (0,1 г) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций: Первый пик на колонке SFC AD-H: 4-Амино-6-(((1R)-1-(7-бром-1-
(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонатрил в виде твердого розового вещества: 1Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8, 50-8, 78 (2Н, м) , 7, 87-8, 34 (1Н, м) , 7,71-7,84 (ЗН, м) , 7,44 (1Н, дд, J=7,8, 0,8 Гц), 7,22 (ЗН, т, J=7,9 Гц), 5, 30-5, 47 (1Н, м) , 1,57 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС
(ESI) m/z 453, 0 [М+Н (79Br)]+ и 455, 0 [М+Н (81Br)]+. Второй пик на колонке SFC AD-H: 4-Амино-б-(((IS)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил в виде розового твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,51-8,77 (2Н, м) , 7, 88-8, 33 (1Н, м) ,
7,71-7,84 (ЗН, м) , 7,44 (1Н, дд, J=7,8, 0,8 Гц), 7,22 (ЗН, т,
J=7,9 Гц), 5, 30-5, 46 (1Н, м) , 1,57 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 453, 0 [М+Н (79Вг)]+ и 455, 0 [М+Н (81Вг)]+ при 1,650
мин.
Пример 81: Получение метил 2-((IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-3-(3-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата
(S)-Метил 2-(1-(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-
(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
К раствору (S)-метил 2-(1-
(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-йодимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата (полученного в примере 73, 4,00 г, 8,35 ммоль) и пиридин-3-илбороновой кислоты (1,00 г, 10,2 ммоль) в толуоле (48 мл), EtOH (32 мл) и воде (16 мл) добавили карбонат натрия (4,38 г, 41,8 ммоль) при 25°С. Реакционную смесь дегазировали азотом в течение 3 0 минут, и при 25 °С к реакционной смеси добавили ди(трифенилфосфин)палладия(II) хлорид (22 мг, 0,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 12 0°С в течение ночи. После завершения реакции к реакционной смеси добавили воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной хроматографией, используя нейтральный оксид алюминия и 0-70% EtOAc в гексане для получения (S)-метил 2-(1-(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилатного эфира: ЖХ-МС (ESI) m/z 431,0
Смесь (S)-метил 2-(1-(((бензилокси)карбонил)амино)этил)-3-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата (450 мг, 1,04 ммоль) и диметилсульфида (0,4 мл) в ТФК (1,2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали in vacuo. Остаток растворили в EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения (S)-метил 2-(1-аминоэтил)-3-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата: ЖХ-МС (ESI) m/z 297,2 [М+Н]+. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.
(S)-Метил 2-(1-((6-амино-5-цианопиримидин-4-
ил)амино)этил)-3-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
К смеси (S)-метил 2-(1-аминоэтил)-3-(пиридин-З-
ил) имидазо [ 1, 2-а] пиридин-5-карбоксилата (300 мг, 1,013 ммоль) и 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (156 мг, 1,013 ммоль) в н-бутаноле (3 мл) добавили DIEA (0,3 мл, 1,519 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение б часов и нагревали при 110°С. Смесь разбавили и экстрагировали
EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-40% ацетон в гексане для получения (S)-метил 2-(1-((б-амино-5-цианопиримидин-4-ил)амино)этил)-3-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-а] пиридин-5-карбоксилата: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 1,514 (д, J=5,6 Гц, ЗН) , 3, 226 (с, ЗН) , 5, 313-5, 382 (м, 1Н) , 7, 064-7, 082 (м, 1Н) , 7, 220 (уш.с, 2Н) , 7, 346-7, 363 (м, 1Н) , 7, 397-7, 437 (м, 1Н) , 7, 486-7, 518 (м, 1Н) , 7, 765 (уш.с, 1Н) , 7, 875-7, 926 (м, 2Н), 8,552-8,605 (м, 2Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 414,1 [М+Н]+.
Пример 82: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-
(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
3-(Трифторметил)бензол-1,2-диамин
H2N
Используя общий способ синтеза для метил З-амино-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили 3-(трифторметил)бензол-1,2-диамин с использованием 2-нитро-З-аминотрифтортолуола: ЖХ-МС (ESI) m/z 177,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-амино-З-(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 3-(2-(трет-бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат с использованием 3-(трифторметил)бензол-1,2-диамина и Boc-abu-OH: ЖХ-МС (ESI) m/z 362,0 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-
(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в примере 66, получили (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-амино-3-(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 416,0 [М+Н]+.
(S)-1-(1-(Циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амин
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-1-(1-(циклопропилметил)-7-
(трифторметил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амин с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 298,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((lS)-l-(l-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 4-амино-6-(((lS)-l-(l-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-Не-
бензимидазол-2-ил)пропил)амино-5-пиримидинкарбонитрил
использованием (S)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензо [d] имидазол-2-ил) пропан-1-амина : 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8,06 (1Н, с), 8,01 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,70-7,64 (2Н, м), 7,40
(1Н, т, J=8,0 Гц), 7,34 (2Н, уш.), 5,70-5,60 (1Н, м), 4,39 (1Н, дд, J=16,0, 4,0 Гц), 4,38 (1Н, дд, J=16,0, 4,0 Гц), 2,15- 2,06
(2Н, м) , 1,20-2,10 (1Н, м) , 1,66 (ЗН, т, J=8,0 Гц), 0,58-0,48
(ЗН, м), 0,43-0,35 (1Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 416,0 [М+Н]+.
Пример 83: Получение 2-((IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)пропил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида
(S)-трет-Бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-
(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 3-(2-(трет-бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропиламино)-
3-(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат
использованием
З-амино-2-(циклопропиламино)-N-метилбензамида
(полученного в примере 20): ЖХ-МС (ESI) m/z 391,1 [М+Н]
(S)-2-(1-Аминопропил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксамид
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-2-(1-аминопропил)-1-циклопропил-Ы-
метил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксамид с использованием (S)-
трет-бутил 1-(2-(циклопропиламино)-3-
(метилкарбамоил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 273,1 [М+Н]+.
2-((IS)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)пропил)-1-циклопропил-N-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 2-((lS)-1-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)пропил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8,46-8,40 (1Н, м); 8,03 (1Н, с), 7,66 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,44 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,32 (2Н, уш.), 7,26-7,16 (2Н, м); 5,80-5,72 (1Н, м) , 2,82 (ЗН, д, J=4,0 Гц), 2,13-2,02 (2Н, м) , 1,20-1,08 (2Н, м), 1,00-0,92 (4Н, м), 0,82-0,74 (1Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z 391,1 [М+Н]+.
Пример 84
4-Амино-6-(((IS)-1-(5-((4-метил-l-пиперазинил)карбонил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Раствор N-метилпиперазина (0,040 мл, 0,356 ммоль), (S)-2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-3-
фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоновой кислоты (0,071 г, 0,178 ммоль), РуВОР (0,185 г, 0,356 ммоль) и DIEA (0,062 мл, 0,356 ммоль) в ДМФ (1,78 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Раствор загрузили на силикагель и очистили при помощи ЖХСД (элюировали градиентом 0-10% МеОН в ДХМ) для получения не совсем белого твердого вещества, которое повторно очистили при помощи ЖХСД (элюировали градиентом 0-80% раствора
(1:10:90 NH40H:МеОН:ДХМ) в ДХМ) для получения 4-амино-б-(((1S)-1- (5- ( (4-метил-1-пиперазинил)карбонил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде твердого белого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,43
(дд, J=14,18, 6,75 Гц, ЗН) , 1,88-2,01 (м, 1Н) , 2,03-2,10 (м, 1Н) , 2,12-2,44 (м, 6Н) , 3,00-3,14 (м, 1Н) , 3,22 (м, J=9,19 Гц, 1Н) , 3,40 (д, J=4,30 Гц, 1Н) , 5,13-5,34 (м, 1Н) , 6, 75-6, 98 (м, 2Н), 7,16-7,53 (м, 8Н), 7,75 (м, J=9,00, 5,09 Гц, 1Н), 7,94 (д, J=6,85 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 482,1 [М+Н]+.
Пример 85: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил 1- (2-(4-фторбензиламино)-3-
(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в примере 59, получили
(S)-трет-бутил 1- (2-(4-фторбензиламино)-3-
(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат с
использованием (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-
(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата (полученного в примере 82): ЖХ-МС (ESI) m/z 470,2 [М+Н]+. (S)-1-(1-(4-Фторбензил)-7-(трифторметил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амин
H2N N^?\
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(трифторметил)-
1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амин с использованием (S)-
трет-бутил 1- (2- (4-фторбензиламино)-3-
(трифторметил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 352,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино-5-пиримидинкарбонитрил с использованием (S)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(трифторметил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил) пропан-1-амина: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8, 09 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,97 (1Н, с), 7,69-7,63 (2Н, м), 7,44 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,18 (2Н, уш.), 7,04 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,01 (1Н, д, J=8,0 Гц), 6, 83-6, 76 (2Н, м) , 5,85 (2Н, уш. ) , 5, 53-5, 45 (1Н, м) , 2,10-2,02 (1Н, м) , 1,20-1,14 (1Н, м) , 0,78 (ЗН, т, J=8,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 470,0 [М+Н]+.
Пример 8 6:
2-((IS)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-циклопропил-З-фенилимидаЗо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамид
Раствор DIEA (0,062 мл, 0,356 ммоль), циклопропиламина (0,025 мл, 0,36 ммоль), (S)-2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-фенил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоновой кислоты (0,071 г, 0,18 ммоль) и РуВОР (0,185 г, 0, 356 ммоль) в ДМФ (1,18 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1
часа. Раствор загрузили прямо на силикагель и очистили при
помощи ЖХСД (элюировали 0-8% МеОН в ДХМ) для получения не
совсем белого твердого вещества, которое повторно очистили при
помощи ЖХСД (элюировали 0-10 0% раствора (1:10:90
NH4OH:MeOH:ДХМ) в ДХМ) для получения 2-( (IS)-1-( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-циклопропил-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамида в виде твердого белого вещества. гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 0,16-0,25 (м, 2Н) , 0, 37-0, 49 (м, 2Н) , 1,44 (д, J=6, 65 Гц, ЗН) , 2,05 (ткв, J=7,25, 3,64 Гц, 1Н), 5,29 (кв, J=6,80 Гц, 1Н), 6,84 (д, J=7,24 Гц, 1Н) , 6,94 (д, J=6,85 Гц, 1Н) , 7,12-7,51 (м, 8Н) , 7,75 (д, J=9,00 Гц, 1Н) , 7,95 (с, 1Н) , 8,67 (д, J=3,52 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 439, 1 [М+Н]+-
Пример 87: Получение 2-((IS)-1-((6-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-
7-карбонитрила и 2-((1R)-1-((6-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-7-карбонитрила
К перемешанному раствору 4-амино-б-(1-(7-бром-1-(5-фторпиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила (полученного в примере 80, 0,157 г, 0,346 ммоль) в ДМФ (1,73 мл) в 3-горлой круглодонной колбе, оснащенной конденсатором, добавили предварительный катализатор Xphos(tm) (0,031 г, 0,042 ммоль) и гидрофосфат калия (0,066 г, 0,38 ммоль) и нагревали смесь при 120°С в течение 2 минут. К смеси по каплям добавили трибутиластаннан-карбонитрил (0,109 г, 0,346 ммоль) в ДМФ (1,73 мл) за 10 минут, и нагревали смесь до 120°С при перемешивании. Через 2 4 часа смесь охладили до комнатной
температуры и разделили между EtOAc (50 мл) 1,0 М водным раствором LiCl (50 мл) . Отделенный водный слой экстрагировали EtOAc (1x50 мл) и объединенные органические экстракты промыли 1,0 М водным раствором LiCl (50 мл), высушили над MgS04, и концентрировали in vacuo. Неочищенный материал абсорбировали на слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (40 г), элюируя градиентом от 0% до 100% ДХМ: МеОН :NH4OH (89:9:1) в ДХМ, для получения твердого вещества. Твердое вещество суспендировали EtOAc-гексане (1:5, 10 мл), отфильтровали и промыли EtOAc-гексаном (1:5, 50 мл) для получения 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбонитрила в виде светло-коричневого твердого вещества: гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,58-8,84 (2Н, м) , 7, 97-8, 39 (2Н, м) , 7, 69-7, 87 (ЗН, м) , 7,45 (1Н, т, J=7,8 Гц), 7,22 (2Н, уш.с), 5, 43-5, 57 (1Н, м) , 1,60 (ЗН, т, J=6,5 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 400,0 [М+Н]+.
Рацемическую смесь (0,05 г) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций: Первый пик на колонке SFC AD-H: 2-( (IS)-1-( (6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-7-карбонитрил в виде не совсем белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8, 58-8, 84 (2Н, м) , 7, 98-8, 38 (2Н, м) , 7, 70-7, 86 (ЗН, м) , 7,45 (1Н, т, J=7,9 Гц), 7,23 (2Н, уш.с), 5, 42-5, 57 (1Н, м) , 1,60 (ЗН, т, J=6,5 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 400, 0 [М+Н] + . Второй пик на колонке SFC AD-H: 2-( (1R)-1-( (6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-7-карбонитрил в виде не совсем белого твердого
вещества: гЯ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8, 60-8, 84 (2Н, м) , 7, 98-8, 39 (2Н, м) , 7,71-7,86 (ЗН, м) , 7,45 (1Н, т, J=7,9 Гц), 7,22 (2Н, уш.с), 5,42-5,57 (1Н, м), 1,60 (ЗН, т, J=6,5 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 400,0 [М+Н]+.
Пример 88: Получение N-((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)-9Н-пурин-6-амина
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-
амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-
бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили N-((1S)-
1-(1-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидазол-2-
ил)пропил)-9Н-пурин-б-амин с использованием (S)-l-(l-
(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил) пропан-1-амина (полученного в примере 82) : 1Н ЯМР (400 МГц,
ДМСО-о16) 5 12,94 (1Н, уш.), 8,25 (1Н, с), 8,18 (1Н, с), 8,00 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,94 (2Н, уш.), 7,67 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,39 (1Н, т, J=8,0 Гц), 5,79 (1Н, уш. ) , 4,45 (1Н, уш. ) , 2,23- 2,12 (2Н, м) , 1,25-1,15 (1Н, м) , 1,02 (ЗН, т, J=8,0 Гц), 0,68-0,58 (1Н, м), 0,58-0,48 (2Н, м), 0,48-0,38 (1Н, м); ЖХ-МС (ESI) m/z
416,0 [М+Н]+.
Пример 89: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-
(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 3-(2-(трет-
(S)-трет-Бутил 1-(2-амино-З-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат
бутоксикарбониламино)пропанамидо)-2-(циклопропиламино)бензоата в примере 47, получили (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат с
использованием 3-(метилсульфонил)бензол-1,2-диамина
(полученного в примере 51) и Boc-abu-OH: ЖХ-МС (ESI) m/z 372,1
[М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в примере 66, получили (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-амино-3-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 426,1 [М+Н]+.
(S)-1-(1-(Циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амин
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-1-(1-(циклопропилметил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амин с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(циклопропилметиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата: ЖХ-МС
(ESI) m/z 308,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((lS)-l-(l-(циклопропилметил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 4-амино-
6- (((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино-5-пиримидинкарбонитрил с использованием (S)-1- (1-(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амина: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) 5 8, 08 (1Н, с), 8,04 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,90 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,62 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,44 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,34 (2Н, уш.), 5, 75-5, 66 (1Н, м) , 4,82 (1Н, дд, J=16,0,4,0 Гц), 4,59
(1Н, дд, J=16,0,4,0 Гц), 3,44 (ЗН, с), 2,17-2,06 (2Н, м), 1,341,27 (1Н, м) , 0,97 (ЗН, т, J=8,0 Гц), 0, 59-0, 35 (4Н, м) ; ЖХ-МС
(ESI) m/z 426,1 [М+Н]+.
Пример 90: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-
7- (метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил 1- (2-(4-фторбензиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат
Используя общий способ синтеза для 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в примере 59, получили
(S)-трет-бутил 1- (2- (4-фторбензиламино)-3-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамат с
использованием (S)-трет-бутил 1-(2-амино-З-
(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата (полученного в примере 89): ЖХ-МС (ESI) m/z 480,1 [М+Н]+.
(S)-1-(1-(4-Фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амин
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-
аминоэтил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в
примере 47, получили (S)-1-(1-(4-фторбензил)-7-
(метилсульфонил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)пропан-1-амин с использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(4-фторбензиламино)-3-(метилсульфонил)фениламино)-1-оксобутан-2-илкарбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 362,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(1-(4-фторбензила)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Используя общий способ синтеза для (S)-метил 2-(1-(б-амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-1-циклопропил-1Н-бензо[d]имидазол-7-карбоксилата в примере 47, получили 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино-5-пиримидинкарбонитрил с использованием (S)-1- (1- (4-фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензо [d] имидазол-2-ил) пропан-1-амина : 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 8,14 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,99 (1Н, с), 7,90 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,65 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,50 (1Н, т, J=8,0 Гц), 7,21 (2Н, уш.), 7,08 (1Н, д, J=8,0 Гц), 7,06 (1Н, д, J=8,0 Гц), 6,88-6,81 (2Н,
м) , б,Об (2Н, уш.), 5,51-5,46 (1Н, м) , 3,00 (ЗН, с), 2,06-1,95 (2Н, м), 0,76 (ЗН, т, J=8,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 480,1 [М+Н]+. Пример 91: б-Бром-N-(5-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амин ,N02
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D,
используя З-амино-5-бромпиридин (5,00 г, 28,9 ммоль) для получения 5-бром-Ы-(5-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина в виде твердого коричневого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 314,0 [М+Н]+. Метил 5-(2-амино-5-фторфениламино)никотинат ,NH2
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с использованием 5-бром-Ы-(5-фтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина (6,4 г, 20,5 ммоль) для получения N1-(5-бромпиридин-З-ил)-5-фторбензол-1,2-диамина в виде неочищенного черного твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 282,0 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(2-(5-бромпиридин-З-иламино)-4-
фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Н HN^
NHBoc
Получили соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием метил 5-(2-амино-5-фторфениламино)никотината (5,50 г, 21,1 ммоль) для получения (S)-трет-бутил 1-(2-(5-бромпиридин-3-иламино)-4-фторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата. ЖХ-МС (ESI) m/z 455,0 [М+Н]+.
N-(1-(1-(5-Бромпиридин-З-ил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием (S)-трет-бутил 1-(2-(5-бропиридин-З-иламино)-4-
фторфениламино-1-оксопропан-2-илкарбамата (5,32 г, 11,74 ммоль)
для получения N-(1-(1-(5-бромпиридин-З-ил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде маслянистого коричневого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 377,0 [М+Н]+.
1-(1-(5-Бромпиридин-З-ил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Получили соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- (1- (5-бромпиридин-З-ил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,980 г, 2,60 ммоль) для получения 1-(1-(5-бромпиридин-З-ил)- б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде коричневого маслянистого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 337,0 [М+Н]+.
Получили соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
4-Амино-6-(1-(1-(5-бромпиридин-З-ил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
использованием 1- (1- (5-бромпиридин-З-ил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,769 г, 2,29 ммоль) для
получения 4-амино-б-(1-(1-(5-бромпиридин-З-ил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила в виде твердого светло-коричневого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!б) 5 м.д. 1,59 (д, J=6,85 Гц, ЗН), 5,63 (кв, J=6,70 Гц, 1Н), 7,09
(дд, J=8,90, 2,45 Гц, 1Н), 7,11-7,18 (м, 1Н), 7,19 (уш.с, 2Н), 7,71-7,80 (м, 2Н) , 7,84 (с, 1Н) , 8,33 (уш.с, 1Н) , 8,70 (д, J=l,17 Гц, 1Н) , 8,72 (д, J=l,96 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 452,9
[М+Н]+.
Пример 92: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(5,6-дифтор-1-СБ-фтор -3-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-трет-Бутил 1-(2-амино-4,5-дифторфениламино)-1-
оксопропан-2-илкарбамат
HzN^^S
К смеси 1,2-диамино-4,5-дифторбензола (2,00 г, 13,9
ммоль), Boc-L-Ala-OH (2,63 г, 13,9 ммоль) и 1-(3-
диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (5,85 г,
30,5 ммоль) в ДХМ (139 мл) добавили триэтиламин (6,00 мл, 43,0
ммоль) при комнатной температуре и перемешивали в течение 3
часов. Затем смесь концентрировали in vacuo, абсорбировали на
слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно
упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (80 г), элюируя
градиентом от 0 до 100% EtOAc в гексане, для получения (S)-
трет-бутил 1- (2-амино-4,5-дифторфениламино)-1-оксопропан-2-
илкарбамата в виде твердого оранжевого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 9,16 (1Н, с), 7,21 (1Н, дд, J=ll,9, 8,8 Гц), 7,11 (1Н, д, J=6,7 Гц), 6,65 (1Н, дд, J=12,9, 8,0 Гц), 5,04 (2Н, уш.с), 4,04-4,14 (1Н, м), 1,39 (9Н, с), 1,25 (ЗН, д, J=7,0 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 338, 0 [М+Ыа]+и m/z 314,0 [М-НГ.
Смесь (S)-трет-бутил 1-(2-амино-4,5-дифторфениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (3,454 г, 10,96 ммоль) в АсОН (21,91 мл) нагревали при 75°С. Через 50 минут смесь концентрировали in vacuo. Остаток растворили в ДХМ (100 мл), промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл х2), водой (100 мл * 1) и насыщенным солевым раствором (100 мл * 1) . Продукт выпал в осадок из ДХМ. Для растворения остатка добавили EtOAc (100 мл). Объединенные органические слои высушили над MgS04, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Остаток абсорбировали на слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep (80 г) , элюируя градиентом от 0 до 100% EtOAc в гексане, для получения (S)-трет-бутил 1-(5,б-дифтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (2,5025 г, 8,42 ммоль, выход 77%) в виде твердого оранжевого вещества. Твердое оранжевое вещество суспендировали в ДХМ-гексане (1:1) и отфильтровали для получения (S)-трет-бутил 1-(5,б-дифтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (2,0003 г, 6,73 ммоль, выход 61,4%) в виде розового твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-de) 5 м.д. 12,34 (1Н, уш.с), 7, 47-7, 57 (2Н, м) , 7,38 (1Н, д, J=7,2 Гц), 4,83 (1Н, кв, J=6,6 Гц), 1,45 (ЗН, д, J=7,0 Гц), 1,40 (9Н, с); ЖХ-МС (ESI) m/z 298,1 [М+Н]+.
(S)-трет-Бутил 1-(5,6-дифтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
В колбу поместили (S)-трет-бутил 1-(5,б-дифтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат
бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамат (0,506 г, 1,70 ммоль), 5-
фторпиридин-3-бороновую кислоту (0,480 г, 3,40 ммоль), ДХМ
(22,7 мл), пиридин (0,28 мл, 3,4 ммоль) и ацетат меди (II)
(0,4 64 г, 2,55 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной
температуре в течение 57 дней. Затем смесь разделили между
насыщенным водным раствором хлорида аммония (50 мл) и ДХМ (50
мл) . Органический слой промыли насыщенным водным раствором
хлорида аммония (1x50 мл). Органический слой высушили над
сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo.
Неочищенный материал абсорбировали на слой силикагеля и
очистили хроматографией через предварительно упакованную
силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (40 г), элюируя градиентом от
0% до 20% EtOAc в гексане, для получения смеси (S)-трет-бутил
1-(5,б-дифтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-
ил)этилкарбамата и (S)-трет-бутил 1-(5,б-дифтор-1-(5-
фторпиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата в виде твердого вещества: ЖХ-МС (ESI) m/z 393,1 [М+Н]+.
(S)-1-(5,6-Дифтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамин
Смесь (S)-трет-бутил 1-(5,б-дифтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этилкарбамата (0,460 г, 1,17 ммоль) в хлороводородной кислоте, 4 М раствор в 1,4-диоксане (5,86 мл, 2 3,45 ммоль) перемешивали при комнатной температуре. Через 4 часа смесь разделили между ДХМ (50 мл) и водой (50 мл) . Водный слой промыли ДХМ (1x50 мл) для удаления органических примесей. Водный слой обработали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и экстрагировали ДХМ (1x50 мл) . Органический слой высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Неочищенный материал абсорбировали на слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно
упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (40 г), элюируя
градиентом от 0% до 50% ДХМ: МеОН :NH4OH (89:9:1) в ДХМ, для
получения (S)-1- (5,б-дифтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде бесцветного
сиропообразного вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 м.д. 8,84 (1Н, д, J=2,7 Гц), 8,75 (1Н, с), 8,24 (1Н, дт, J=9,4, 2,3 Гц), 7,79 (1Н, дд, J=11,0, 7,4 Гц), 7,40 (1Н, дд, J=10,4, 7,2 Гц), 3,96 (1Н, кв, J=6,6 Гц), 2,00 (2Н, д, J=4,5 Гц), 1,37 (ЗН, д, J=6,7 Гц); ЖХ-МС (ESI) m/z 293,0 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((IS)-1-(5,б-дифтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил NH2
Смесь 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрила (0,014 г,
0,091 ммоль), (S)-1-(5,б-дифтор-1-(5-фторпиридин-З-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,0266 г, 0,091 ммоль) и DIEA (0,048 мл, 0,273 ммоль) в н-бутаноле (0,910 мл) перемешивали при 120°С. Через 20 часов нагрев прекратили, и смесь концентрировали in vacuo. К остатку добавили воду (50 мл) и экстрагировали водную смесь ДХМ (2x50 мл) . Органический экстракт высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo для получения неочищенного материала. Неочищенный материал абсорбировали на слой силикагеля и очистили хроматографией через предварительно упакованную силикагелевую колонку Redi-Sep(tm) (40 г), элюируя градиентом от 0% до 50% ДХМ:МеОН:NH4OH (89:9:1) в ДХМ, для получения 4-амино-6- ( ( (IS)-1-(5,б-дифтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила в виде твердого коричневого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 8,67 (1Н, д, J=2,5 Гц), 8,61 (1Н, с), 8,06 (1Н, д, J=8,2 Гц), 7,86 (1Н,
дд, J=11,0, 7,4 Гц), 7,82 (1Н, с), 7,75 (1Н, д, J=7,8 Гц), 7,39 (1Н, дд, J=10,4, 7,2 Гц), 7,19 (2Н, уш.с), 5,57 (1Н, кв, J=7,0 Гц), 1,58 (ЗН, д, J=6,8 Гц); ЖХ-МС (ESI)] m/z 411,0 [М+Н]+. Пример 93
4-Амино-6-(1-(1-(5-бромпиридин-З-ил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
В пробирку для микроволновых реакций поместили 4-амино-б-(1-(1-(5-бропиридин-З-ил)- б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил (0,130 г, 0,287 ммоль), ацетат палладия(II) (3,22 мг, 0,014 ммоль), 2-три-н-бутилстаннилпиридин (0,158 мл, 0,430 ммоль) и 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',б'-триизопропил-1,1'-бифенил (0,014 г, 0,029 ммоль) в диоксане (1,91 мл). Раствор продували азотом в течение 10 минут, а затем перемешивали при 120°С под микроволновым излучением в течение 2 часов. Раствор загрузили прямо на силикагель и очистили при помощи ЖХСД (элюировали 0-8% МеОН в ДХМ) для получения не совсем белого твердого вещества. В результате очистки ЖХСД (элюировали 0-6% МеОН в ДХМ) получили 4-амино-б-(1-(1-(5-бромпиридин-З-ил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил (0,130 г, 0,287 ммоль) (рацемат) в виде твердого белого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 452,2 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(1-(2,3'-бипиридин-5'-ил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(1-(2,3'-бипиридин-5'-ил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемат 4-(1-(1-(2,3'-бипиридин-5'-ил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)-б-аминопиримидин-5-карбонитрила (0,104 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций. Первый пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(1-(2,3'-бипиридин-5'-ил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде бежевого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,60 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,51-5,71 (м, 1Н) , 6, 94-7, 26 (м, 4Н) , 7,46 (ддд, J=7, 43, 4, 89, 0, 98 Гц, 1Н), 7,66 (уш.с, 1Н), 7,74-7,86 (м, 2Н), 7,96 (тд, J=7,73, 1,76 Гц, 1Н), 8,06 (д, J=8,02 Гц, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 8,72 (д, J=4,ll Гц, 1Н) , 8,78 (д, J=l,37 Гц, 1Н) , 9,33 (д, J=l,76 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 452,0 [М+Н]+. Второй пик на колонке OD-H: 4-амино-6- ( ( ( (S)-4- (1-(1-(2,3'-бипиридин-5'-ил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)-б-аминопиримидин-5-карбонитрил в виде твердого бежевого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМС0-о!б) 5 м.д. 1,60 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,63 (уш.с, 1Н) , 6, 98-7, 20 (м, 4Н) , 7,46 (ддд, J=7, 43, 4, 89, 0, 98 Гц, 1Н) , 7,66 (уш.с, 1Н) , 7, 74-7, 84 (м, 2Н) , 7,96 (тд, J=7, 73, 1, 76 Гц, 1Н) , 8,06 (д, J=8,02 Гц, 1Н) , 8,62 (с, 1Н) , 8,72 (дт, J=4, 79, 0, 83 Гц, 1Н) , 8,78 (д, J=l,37 Гц, 1Н) , 9,33 (д, J=l,96 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 452,1 [М+Н]+.
Пример 94
N-(1-(6-Фтор-1-(5-(метилсульфонамидо)пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамид
NHAc .N
Me02SHN-^y^f \-^ ^N' F
В пробирку для микроволновых реакций поместили карбонат цезия (1,30 г, 3,98 ммоль), Ро!2(о!Ьа)з (0,146 г, 0,159 ммоль), ксантфос (0,230 г, 0,398 ммоль), N-(1-(1-(5-бромпиридин-З-ил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамид (0,600 г, 1,59 ммоль) и метансульфонамид (0,166 г, 1,75 ммоль) в диоксане
(7,95 мл) . Суспензию продували азотом в течение 5 минут, затем
перемешивали при 120°С в течение 3 часов под микроволновым
излучением. Раствор загрузили прямо на силикагель, затем
очистили при помощи ЖХСД (элюировали градиентом 0-10% МеОН в
ДХМ) для получения N-(1-( б-фтор-1-(5-
(метилсульфонамидо)пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 392,1 [М+Н]+.
N-(5-(2-(1-Аминоэтил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидаЗол-1-ил)пиридн-3-ил)метансульфонамид
Me02SHN-^^ \-^
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1- (б-фтор-1-(5-(метилсульфонамидо)пиридин-3-
ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (0,389 г, 0,994
ммоль) для получения N-(5-(2-(1-аминоэтил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-1-ил)пиридин-3-ил)метансульфонамида в виде маслянистого светло-коричневого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 350,1 [М+Н]+.
N-(5-(2-(1-Амино-5-цианопиримидин-4-иламино)этил)-6-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)пиридн-3-ил)метансульфонамид
W Jl
N NH /L^N
MeOzSHNw/^f 4=/
V >
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием N- (5- (2-(1-аминоэтил)-б-фтор-1Н-
бензо[d]имидазол-1-ил)пиридин-3-ил)метансульфонамида (0,175 г,
0,501 ммоль) для получения N-(5-(2-(1-(б-амино-5-
цианопиримидин-4-ил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)пиридин-3-ил)метансульфонамида в виде не совсем белого твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,57 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 3,15 (с, ЗН) , 5,50 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н) , 7,04
(дд, J=8,90, 2,45 Гц, 1Н), 7,10-7,18 (м, 1Н), 7,20 (уш.с, 2Н), 7, 69-7, 82 (м, ЗН) , 7,86 (с, 1Н) , 8,48 (д, J=2,15 Гц, 2Н) , 10,39
(уш.с, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 468,0 [М+Н]+.
N-(5-(2-((1R)-1-((6-Амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-1-ил)-3-пиридинил)метансульфонамид и N- (5-(2-( (IS)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-6-фтор-1Н-бензимидаЗол-1-ил)-3-пиридинил)метансульфонамид
NH2 К1 Г2
k.JL.. N NH
MeO.SHN^^'^^Q Me02SHN^^'N"*^
Рацемическую смесь (54 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций. Первый пик на колонке OD-H: (R)-N-(5-(2-(1-((б-амино-5-цианопиримидин-4-ил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)пиридин-3-ил)метансульфонамид в виде светло-коричневого
твердого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,56 (д,
J=6,65 Гц, ЗН) , 3,14 (с, ЗН) , 5,50 (кв, J=6, 90 Гц, 1Н) , 7,04 (дд, J=8, 90, 2, 25 Гц, 1Н) , 7,14 (тд, J=9, 29, 2, 35 Гц, 1Н) , 7,20 (уш.с, 2Н) , 7,69-7,81 (м, ЗН) , 7,85 (с, 1Н) , 8,47 (д, J=l,37 Гц, 2Н), 10,39 (уш.с, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 468,2 [М+Н]+. Второй пик на колонке OD-H: (S)-N-(5-(2-(1-((б-амино-5-цианопиримидин-4-ил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензо[d]имидазол-1-ил)пиридин-Зил ) метансульфонамид в виде светло-коричневого твердого вещества. гЕ ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,56 (д, J=6,85 Гц, ЗН), 3,14 (с, ЗН), 5,50 (кв, J=6,94 Гц, 1Н), 6,99-7,07 (м, 1Н), 7,08-7,17 (м, 1Н), 7,20 (уш.с, 2Н), 7,67-7,81 (м, ЗН), 7,85 (с, 1Н) , 8,46 (с, 2Н) , 10,39 (уш.с, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 468,2 [М+Н]+.
Пример 95
4-Амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбоксамид
К ледяному раствору карбоната калия (0,027 г, 0,19 ммоль)
(S)-4-амино-б-(1-(б-фтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила (0,060 г, 0,16 ммоль) в ДМСО (1,60 мл) по каплям добавили перекись водорода (31,3% в воде, 0,078 мл, 0,80 ммоль) в атмосфере азота. Раствор перемешивали при 0°С в течение 1 часа, затем разделили между водой и EtOAc. Органические экстракты концентрировали при пониженном давлении, затем очистили при помощи ЖХСД (элюировали 0-10% МеОН в ДХМ) для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбоксамида в виде не совсем белого пенистого вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,48 (д, J=6,85 Гц, ЗН) , 5,26 (кв, J=6, 94 Гц, 1Н) , 6,57 (с, 2Н) , 6,98 (дд, J=8, 90, 2, 45 Гц, 1Н) , 7,14 (ддд, J=9, 78, 8, 80, 2, 54 Гц,
1Н) , 7,46 (с, 2H) , 7, 65-7, 70 (м, 1Н) , 7,74 (дд, J=8,80, 4,89 Гц, 1Н) , 7,77 (с, 1Н) , 7,94 (д, J=7,63 Гц, 1Н) , 8,05-8,12 (м, 1Н) , 8,78 (дд, J=4, 79, 1, 47 Гц, 1Н) , 8,82 (д, J=2,15 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 393,2 [М+Н]+. Пример 9 6
N-(3,5-Дифтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амин Е
Получили в соответствии со Стадией D1 в Общем способе D,
используя 1,3,5-трифтор-2-нитробензол (5,28 мл, 45,2 ммоль) и пиридин-3-амин (4,25 г, 45,2 ммоль) для получения N-(3,5-дифтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина в виде твердого желтого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 252,1 [М+Н]+.
3,б-Дифтор-Nl-(пиридин-3-ил)бензол-1,2-диамин
Получили в соответствии со Стадией D2 в Общем способе D с использованием N-(3,5-дифтор-2-нитрофенил)пиридин-3-амина (6,7 г, 26,7 ммоль) для получения 3,5-дифтор-Ы1-(пиридин-Зил) бензол-1,2-диамина в виде коричневого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 222,2 [М+Н]+.
трет-Бутил 1-(2,4-дифтор-6-(пиридин-3-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамат
Получили в соответствии со Стадией D3 в Общем способе D с
использованием 3, 5-дифтор-Ы1-(пиридин-3-ил)бензол-1,2-диамина (5,1 г, 23,06 ммоль) для получения трет-бутил 1-(2,4-дифтор-б-(пиридин-3-иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата в
виде твердого розового вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 393,2 [М+Н]+. N-(1-(4,6-Дифтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-
ил)этил)ацетамид
Получили в соответствии со Стадией D4 в Общем способе D с
использованием трет-бутил 1-(2,4-дифтор-б-(пиридин-3-
иламино)фениламино)-1-оксопропан-2-илкарбамата (5,44 г, 13,86 ммоль) для получения N-(1-(4, б-дифтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида в виде светло-коричневого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 317,1 [М+Н]+.
1-(4,6-Дифтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидаЗол-2-ил)этанамин
Получили в соответствии со Стадией D5a в Общем способе D с
использованием N- (1-(4,б-дифтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этил)ацетамида (1,29 г, 4,08 ммоль) для получения 1- (4,б-дифтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина в виде темно-пурпурного твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 275,1 [М+Н]+.
4-Амино-6-(1-(4,б-дифтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрил
Получили в соответствии со Стадией D6 в Общем способе D с
использованием
1- (4,б-дифтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этанамина (0,820 г, 2,99 ммоль) для
получения
4-амино-б-(1-(4,б-дифтор-1-(пиридин-3-ил)-1Н-
бензо[d]имидазол-2-ил)этиламино)пиримидин-5-карбонитрила (0, 850 г, выход 72,5%) в виде твердого светло-розового вещества. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 5 м.д. 1,57 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,47 (кв, J=6,94 Гц, 1Н), б,86 (дд, J=8,41, 2,15 Гц, 1Н), 7,11-7,29 (м, ЗН) , 7, 54-7, 60 (м, 1Н) , 7, 78-7, 85 (м, 2Н) , 8,02 (д, J=8,02 Гц, 1Н) , 8,66 (дд, J=4, 79, 1, 47 Гц, 1Н) , 8,75 (д, J=2,15 Гц, 1Н). ЖХ-МС (ESI) m/z 393,2 [М+Н]+.
4-Амино-6-(((1R)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил и 4-амино-6-(((IS)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидаЗол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
Рацемическую смесь (300 мг) разделили на колонке AD-H с использованием препаративной SFC для получения двух фракций. Первый пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((1R)-1-(4,б-дифтор-1-
(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде белого твердого вещества. 1Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,58 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,47 (кв, J=6,94 Гц, 1Н) , 6,87 (дд, J=8,51, 2,05 Гц, 1Н) , 7,10-7,28 (м,
ЗН) , 7,57 (дд, J=8,12, 4,79 Гц, 1Н) , 7, 77-7, 85 (м, 2Н) , 8,02 (д, J=8,02 Гц, 1Н) , 8,67 (дд, J=4, 79, 1, 47 Гц, 1Н) , 8,75 (д, J=2,15 Гц, 1Н) . ЖХ-МС (ESI) m/z 391,1 [М-НГ. Второй пик на колонке OD-H: 4-амино-б-(((IS)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил в виде белого твердого вещества. ЖХ-МС (ESI) m/z 391,1 [М-НГ. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о16) 5 м.д. 1,58 (д, J=6, 85 Гц, ЗН) , 5,47 (кв, J=6,94 Гц, 1Н) , 6,87 (дд, J=8,51, 2,05 Гц, 1Н) , 7, 08-7, 29 (м, ЗН) , 7,57 (дд, J=8, 02, 4, 89 Гц, 1Н) , 7, 76-7, 87 (м, 2Н) , 8,02 (д, J=7,83 Гц, 1Н) , 8,67 (дд, J=4, 69, 1, 37 Гц, 1Н) , 8,75 (д, J=l, 96 Гц, 1Н) .
Пример 97: Получение 4-амино-б-(((IS)-1-(6-фтор-З-(3-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила
(S)-Бензил (1-(6-фторимидаЗо[1,2-а]пиридин-2-илкарбамат
CbzHN
Раствор 2-амино-5-фторпиридина (0,50 г, 4,45 ммоль) и (S)-бензил (4-бром-3-оксобутан-2-ил)карбамата (1,3 г, 4,4 ммоль) в EtOH (25 мл) нагревали с дефлегматором в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь охладили до 25°С и удалили EtOH in vacuo. Остаток растворили в EtOAc и промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали. Неочищенный материал очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-7% МеОН в ДХМ для получения (S)-бензил (1-(б-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-илкарбамата: 1Н ЯМР
(400 МГц, ДМСО-о!6) 5 1, 502 (д, J=6, 8 Гц, ЗН) , 4, 946-4, 980 (м, 1Н), 5,014-5,107 (м, 2Н), 7,344-7,373 (м, 5Н), 7,751-7,842 (м, 2Н), 8,012-8,070 (м, 2Н), 9,025 (с, 1Н); ЖХ-МС (ESI) m/z 313,9
[М+Н]+.
(S)-Бензил 1-(6-фтор-З-йодимидаЗо[1,2-а]пиридин-2-
ил)этил)карбамат
К раствору (S)-бензил 1-(б-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-илкарбамата (1,2 г, 3,8 ммоль) в ацетонитриле (19 мл) добавили N-йодсукцинимид (0,861 г, 3,82 ммоль) при 25°С. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 25°С. После завершения реакции смесь разбавили водой и экстрагировали EtOAc. Органический слой промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-40% EtOAc в гексане для получения (S)-бензил (1-(б-фтор-3-йодимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)карбамата: ЖХ-МС (ESI)] m/z 439, 8 [М+Н]+.
(S)-Бензил 1-(6-фтор-З-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-
а]пиридин-2-ил)этил)карбамат
К раствору (S)-бензил (1-(б-фтор-3-йодимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)карбамата (100 мг, 0,22 ммоль) и пиридин-3-илбороновой кислоты (30,7 мг, 0,25 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) добавили фторид цезия (бб,8 мг, 0,44 0 ммоль) при 25°С. Реакционную смесь дегазировали азотом в течение 3 0 минут, а затем добавили тетракис трифенилфосфин палладий (0) (13 мг, 0,011 ммоль) при 25°С. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 100°С. После завершения реакции добавили воду и экстрагировали смесь EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом натрия и концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-4% МеОН в ДХМ для получения (S)-бензил (1-(б-фтор-3-(пиридин
3-ил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)карбамата: ЖХ-МС (ESI) m/z 391,0 [М+Н]+.
(S)-Метил 2-(1-аминоэтил)-3-фенилимидазо[1, 2-а]пиридин-5-карбоксилат
Смесь (S)-бензил (1-(б-фтор-3-(пиридин-3-ил)имидазо[1, 2-
а]пиридин-2-ил)этил)карбамата (300 мг, 0,760 ммоль) и ДМС (0,3
мл) в ТФК (1 мл) перемешивали при 25°С в течение ночи. Смесь
концентрировали in vacuo. Остаток растворили в EtOAc и промыли
насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой
промыли насыщенным раствором бикарбоната натрия, высушили над
сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo для
получения (S)-метил 2-(1-аминоэтил)-3-фенилимидазо[1,2-
а]пиридин-5-карбоксилата. Неочищенный продукт использовали без дополнительной очистки.
4-Амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-З-(3-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2-(1-аминоэтил)-3-
неочищенному (S)-метил
фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилату (190 мг, 0,74 ммоль) и 4-амино-б-хлорпиримидин-5-карбонитрилу (114 мг, 0,74 ммоль) в н-бутаноле (4,4 мл) добавили DIEA (0,36 мл, 2,2 ммоль) при 25°С. Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение ночи. К реакционной смеси добавили воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и концентрировали in vacuo. Остаток очистили колоночной хроматографией, используя силикагель (100-200 меш) и 0-3% МеОН
в ДХМ для получения 4-амино-б-(((IS)-1-(6-фтор-З-(3-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила (25 мг) : 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-о!6) 8 1,522
(д, J=6,8 Гц, ЗН) , 5, 398-5, 466 (м, 1Н) , 7, 036 (д, 1Н, J=7,6 Гц), 7, 229 (уш.с, 2Н) , 7, 395-7, 446 (м, 1Н) , 7, 550-7, 581 (м, 1Н) , 7, 728-7, 765 (м, 1Н) , 8, 008 (д, 1Н, J=8 Гц), 8,317-8,333
(м, 1Н) , 8, 663-8, 675 (м, 1Н) , 8,717 (д, 1Н, J=l,2 Гц); ЖХ-МС
(ESI)] m/z 375,16 [М+Н]+. Биологические анализы Рекомбинантная экспрессия PI3K
Первичные полноразмерные субъединицы pllO PI3K а, (3 и 8, меченные на N-концах при помощи маркера polyHis, совместно экспрессировали с р85 с векторами экспрессии вируса Baculo в клетках насекомых sf9. Гетеродимеры р110/р85 последовательно очистили методом Ni-NTA, Q-HP и хроматографией Superdex-100, Очищенные а, р и 8 изомеры хранились при -2 0°С в 2 0 мМ растворе Tris, рН 8, 0,2 М растворе NaCl, 50% глицерине, 5 мМ растворе DTT, 2 мМ растворе холата Na. Укороченную Р13Ку, остатки 1141102, меченную на N-концах при помощи маркера polyHis, экспрессировали вирусом Baculo в клетках насекомых Hi5. Изозим у последовательно очистили методом Ni-NTA, Superdex-200 и хроматографией Q-HP. Изозим у хранился замороженным при -8 0°С в растворе NaH2P04, рН 8, 0,2 М растворе NaCl, 1% этиленгликоле, 2 мМ растворе р-меркаптоэтанола.
Альфа
Бета
Дельта
Гамма
50 мМ Tris
рН 8
рН 7, 5
рН 7, 5
рН 8
MgCl2
15 мМ
10 мМ
10 мМ
15 мМ
Холат Na
2 мМ
1 мМ
0, 5 мМ
2 мМ
DTT
2 мМ
1 мМ
1 мМ
2 мМ
АТФ
1 мкМ
0,5 мкМ
0,5 мкМ
1 мкМ
PIP2
нет
2,5 мкМ
2,5 мкМ
нет
время
1 час
2 часа
2 часа
1 час
[Фермент]
15 нМ
4 0 нМ
15 нМ
50 нМ
Анализы ферментов in vitro
Анализы выполнили в 2 5 мкл с представленными выше конечными концентрациями компонентов в белых полипропиленовых планшетах (Costar 3355). Фосфатидил инозитол фосфоакцептор, Ptdlns(4,5)Р2 Р4508, приобрели у компании Echelon Biosciences. В этих условиях активность АТФазы альфа- и гамма-изозимов не сильно стимулировалась при помощи Ptdlns(4,5)Р2 и поэтому ее исключили из анализа этих изозимов. Исследуемые соединения растворили в диметилсульфоксиде и разбавили трехкратными серийными разбавлениями. Соединение в ДМСО (1 мкл) поместили в каждую исследуемую лунку и определили ингибирование относительно реакционных смесей, не содержащих соединение, с ферментом и без фермента. После инкубирования образца при комнатной температуре реакцию остановили и определили остаточное содержание АТФ при помощи люминометра AnalystGT путем добавления равного объема имеющегося в продаже АТФ биолюминесцентного набора (Perkin Elmer EasyLite) в соответствии с инструкциями производителя.
Пролиферация В-клеток человека, стимулированная анти-IgM
Человеческие В-клетки изолята:
РВМС изолята приобрели у компании Leukopac или выделили из свежезаготовленной крови человека. Выделили человеческие В-клетки с использованием протокола Miltenyi и набора выделения В-клеток II. В-клетки человека очистили с использованием колонки AutoMacs.
Активация В-клеток человека
Использовали 9б-луночный плоскодонный планшет, поместили 50000/лунка очищенных В-клеток в В-клеточной пролиферативной среде (DMEM + 5% FCS, 10 мМ Hepes, 50 мкМ 2-меркаптоэтанола) ; 150 мкл среды содержит 250 нг/мл рекомбинантного белка CD40L -LZ (Amgen) и 2 мкг/мл анти-человеческого антитела IgM (Jackson ImmunoReseach Lab.#109-006-129), смешанного с 50 мкл В-клеточной среды, содержащей ингибиторы PI3K, и инкубировали в течение 72 часов в инкубаторе при 37°С. Через 72 часа выполнили
импульсное мечение В-клеток при помощи 0,5-1 мкКи/лунка 3Н тимидина в течение ночи ~18 часов и собрали клетки с использованием коллектора ТОМ.
Пролиферация В-клеток человека, стимулированная IL-4
Человеческие В-клетки изолята:
РВМС изолята человека приобрели у компании Leukopac или выделили из свежезаготовленной крови человека. Выделили человеческие В-клетки с использованием протокола Miltenyi и набора выделения В-клеток. В-клетки человека очистили с использованием колонки AutoMacs.
Активация В-клеток человека
Используя 9б-луночный плоскодонный планшет, поместили 50000 очищенных В-клеток на лунку в В-клеточной пролиферативной среде (DMEM + 5% FCS, 50 мкМ 2-меркаптоэтанола, 10 мМ Hepes) . Среду (150 мкл), содержащую 250 нг/мл рекомбинантного белка CD40L-LZ (Amgen) и 10 нг/мл IL-4 (R &D system # 204-IL-025) , смешали с 50 150 мкл В-клеточной среды, содержащей исследуемые соединения, и инкубировали в течение 72 часов в инкубаторе при 37°С. Через 72 часа, выполнили импульсное мечение В-клеток при помощи 0,5-1 мкКи/лунка ЗН тимидина в течение ночи ~18 часов и собрали клетки с использованием коллектора ТОМ.
Анализ пролиферации РВМС человека, индуцированной специфическим Т-антигеном (столбнячным токсоидом)
РВМС человека приготовили из замороженного сырья или очистили из свежезаготовленной крови человека, используя градиент Фиколла. Использовали 9б-луночный круглодонный планшет и поместили 2> <105 РВМС/лунка с культуральной средой (RPMI1640 + 10% FCS, 50 мкМ 2-меркаптоэтанола, 10 мМ Hepes) . Для определения IC50 ингибиторы PI3K испытывали в диапазоне от 10 мкМ до 0,001 мкМ с полу-log приращениями и в трех экземплярах. Столбнячный токсоид, специфичный антиген Т-клеток (University of Massachusetts Lab) добавили в концентрации 1 мкг/мл и инкубировали в течение б дней в инкубаторе при 37°С. Надосадочные жидкости собрали через б дней для анализа ELISA IL2, затем выполнили импульсное мечение клеток 3Н-тимидином в течение ~18 для измерения пролиферации.
Анализ GFP для определения ингибирования класса 1а и класса III PI3K
АКТ1 (РКВа) регулируется классом la PI3K, активируемым митогенными факторами (IGF-1, PDGF, инсулин, тромбин, NGF и тому подобными). В ответ на митогенные стимулы АКТ1 транслоцируется из цитозоля в плазматическую мембрану.
Forkhead (FKHRL1) является субстратом для АКТ1, Он является цитоплазматическим при фосфорилировании при помощи АКТ (выживание/рост). Ингибирование АКТ (стаз/апоптоз) транслокация Forkhead в ядерные домены FYVE, связанные с Р1(3)Р. Большинство создается конститутивным действием PI3K класса III.
Анализ колебания мембраны АКТ (клетки CHO-IR-AKT1-EGFP/GE Healthcare)
Промыли клетки аналитическим буфером. Обрабатывали исследуемыми соединениями в аналитическом буфере в течение 1 часа. Добавили 10 нг/мл инсулина. Зафиксировали через 10 минут при комнатной температуре и визуализировали.
Анализ транслокации Forkhead (клетки MDA МВ4 68 Forkhead-DiversaGFP)
Обрабатывали клетки исследуемым соединением в среде роста в течение 1 часа. Зафиксировали и визуализировали.
Анализ Р1(3)Р класса III (клетки U20S EGFP-2XFYVE/GE Healthcare)
Промыли клетки аналитическим буфером. Обрабатывали исследуемыми соединениями в аналитическом буфере в течение 1 часа. Зафиксировали и визуализировали.
Контролем для всех 3 анализов является 10 мкМ вортманнин:
АКТ является цитоплазматическим
Forkhead является ядерным
Р1(3)Р расходуется из эндосом
Биомаркерный анализ: Рецепторная стимуляция В-клеток экспрессии CD69 или В7.2 (CD86)
Гепаринизированную цельную кровь человека стимулировали 10 мкг/мл анти-IgD (Southern Biotech, #9030-01). Аликвоты по 90 мкл стимулированной крови затем поместили в каждую лунку 9 6
луночного планшета и обрабатывали 10 мкл блокирующего соединения в различных концентрациях (от 10 до 0, 0003 мкМ) , разбавленного в IMDM + 10% FBS (Gibco). Образцы инкубировали вместе в течение 4 часов (для экспрессии CD69) или б часов (для экспрессии В7.2) при 37°С. Обработанную кровь (50 мкл) перенесли в 9б-луночный планшет с глубокими лунками (Nunc) для окрашивания антител при помощи CD45-PerCP (BD Biosciences, #347464), CD19-FITC (BD Biosciences, #340719) и CD69-PE (BD Biosciences, #341652), no 10 мкл каждого. Вторые 50 мкл обработанной крови перенесли во второй 9б-луночный планшет с глубокими лунками для окрашивания антител при помощи CD19-FITC
(BD Biosciences, #340719) и CD86-PeCy5 (BD Biosciences, #555666), по 10 мкл каждого. Все окрашивания выполняли в течение 15-30 минут в темноте при комнатной температуре. Затем кровь лизировали и зафиксировали при помощи 4 50 мкл лизирующего раствора FACS (BD Biosciences, #349202) на 15 минут при комнатной температуре. Затем образцы промыли 2Х в PBS + 2% FBS перед анализом FACS. Образцы рассортировали на CD45/CD19 дважды положительные клетки для окрашивания CD69 или CD19-положительные клетки для окрашивания CD8 6.
Обратный скрининг гамма: Стимуляция моноцитов человека для экспрессии фосфо-АКТ
Клеточную линию моноцитов человека, ТНР-1, выдерживали в RPMI + 10% FBS (Gibco) . За один день до стимуляции клетки подсчитали исключением трипанового синего на гемоцитометре и суспендировали при концентрации 1> <106 клеток на мл среды. Затем аликвоты по 100 мкл клеток плюс среда (ПО5 клеток) поместили в каждую лунку 4-9б-луночных планшетов с глубокими лунками
(Nunc) для изучения восьми различных соединений. Клетки находились в покое в течение ночи перед обработкой различными концентрациями (от 10 до 0,0003 мкМ) блокирующего соединения. Исследуемое соединение, разбавленное в среде (12 мкл), добавили к клеткам на 10 минут при 37°С. МСР-1 (12 мкл, R &D Diagnostics, #2 7 9-МС) человека разбавили в среде и добавили в каждую лунку при конечной концентрации 50 нг/мл. Стимуляция продолжалась 2 минуты при комнатной температуре. В каждую лунку добавили
предварительно нагретый буфер FACS Phosflow Lyse/Fix (1 мл при температуре 37°С) (BD Biosciences, #558049) . Затем планшеты инкубировали при 37°С еще 10-15 минут. Планшеты вращали при скорости 1500 об./мин в течение 10 минут, надосадочную жидкость аспирировали и добавили 1 мл ледяного 90% МеОН в каждую лунку при энергичном встряхивании. Затем планшеты инкубировали в течение ночи при -70°С или на льду в течение 30 минут перед окрашиванием антител. Планшеты вращали и промыли 2Х в PBS + 2% FBS (Gibco). Промывочный раствор аспирировали, а клетки суспендировали в оставшемся буфере. К каждому образцу добавили рАКТ кроликов (50 мкл, Cell Signaling, #4058L) в концентрации 1:100, на 1 час при комнатной температуре при встряхивании. Клетки промыли и вращали при 150 0 об./мин в течение 10 минут. Надосадочную жидкость аспирировали, а клетки суспендировали в оставшемся буфере. Вторичное антитело, анти-кроличье Alexa 647 коз (50 мкл, Invitrogen, #А21245), в концентрации 1:500 добавили на 3 0 минут при комнатной температуре при встряхивании. Затем клетки промыли IX в буфере и суспендировали в 150 мкл буфера для анализа FACS. Клетки следует тщательно диспергировать пипетированием перед прогоном на поточном цитометре. Клетки прогнали на приборе LSR II (Becton Dickinson) и рассортировали на прямое и боковое светорассеяние для определения уровней экспрессии рАКТ в популяции моноцитов.
Обратный скрининг гамма: Стимуляция моноцитов для экспрессии фосфо-АКТ в костном мозге мышей
Бедренные кости мышей вырезали из пяти самок мышей BALB/c (Charles River Labs.) и поместили в среду RPMI + 10% FBS (Gibco). Костный мозг мышей удалили отрезанием окончаний бедренных костей и промыванием 1 мл среды с использованием иглы 2 5 калибра. Затем костный мозг диспергировали в среде с использованием иглы 21 калибра. Объем среды увеличили до 2 0 мл и подсчитали клетки исключением трипанового синего на гемоцитометре. Суспензию клеток затем увеличили до 7,5x106 клеток на 1 мл среды и аликвоты по 100 мкл (7,5хЮ5 клеток) поместили в 4-9б-луночные планшеты с глубокими лунками (Nunc)
для исследования восьми различных соединений. Клетки находились в покое при 37°С в течение 2 часов перед обработкой различными концентрациями (от 10 до 0,0003 мкМ) блокирующего соединения. Исследуемое соединение, разбавленное в среде (12 мкл), добавили к клеткам костного мозга на 10 минут при 37°С. МСР-1 мышей (12 мкл, R &D Diagnostics, #479-JE) разбавили в среде и добавили в каждую лунку при конечной концентрации 50 нг/мл. Стимуляция продолжалась 2 минуты при комнатной температуре. В каждую лунку добавили 1 мл предварительно нагретого до 37 °С буфера FACS Phosflow Lyse/Fix (BD Biosciences, #558049). Затем планшеты инкубировали при 37°С еще 10-15 минут. Планшеты вращали со скоростью 1500 об./мин в течение 10 минут. Надосадочную жидкость аспирировали и добавили 1 мл ледяного 90% МеОН в каждую лунку при энергичном встряхивании. Затем планшеты инкубировали в течение ночи при -7 0°С или на льду в течение 3 0 минут перед окрашиванием антител. Планшеты вращали и промыли 2Х в PBS + 2% FBS (Gibco). Промывочный раствор аспирировали, а клетки суспендировали в оставшемся буфере. Затем в каждую лунку добавили блок Fc (2 мкл, BD Pharmingen, #553140) на 10 минут при комнатной температуре. После блокирования 50 мкл первичных антител, разбавленных в буфере; CD11Ь-А1еха488 (BD Biosciences, #557672) при концентрации 1:50, CD64-PE (BD Biosciences, #558455) при концентрации 1:50 и рАКТ кроликов (Cell Signaling, #4058L) при концентрации 1:100, добавили к каждому образцу на 1 час при комнатной температуре при встряхивании. К клеткам добавили промывочный буфер и вращали при 1500 об./мин. в течение 10 минут. Надосадочную жидкость аспирировали, а клетки суспендировали в оставшемся буфере. Вторичное антитело; антикроличье Alexa 647 коз (50 мкл, Invitrogen, #А21245), при концентрации 1:500 добавили на 30 минут при комнатной температуре при встряхивании. Затем клетки промыли IX в буфере и суспендировали в 100 мкл буфера для анализа FACS. Клетки прогнали на приборе LSR II (Becton Dickinson) и рассортировали на CDllb/CD64 дважды положительные клетки для определения уровней экспрессии рАКТ в популяции моноцитов.
Носитель и исследуемые соединения вводили перорально (0,2 мл) через желудочный зонд (Oral Gavage Needles Popper & Sons, New Hyde Park, NY) мышам (трансгенная линия 3751, самки, 10-12 недель, Amgen Inc, Thousand Oaks, CA) за 15 минут до внутривенной инъекции (0,2 мл) анти-IgM FITC (50 мкг/мышь)
(Jackson Immuno Research, West Grove, PA). Через 45 минут мышей умертвили в СОг камере. Кровь слили пункцией сердца (0,3 мл) (1 см3 25 г шприцы, Sherwood, St. Louis, МО) и перенесли в 15 мл коническую пробирку (Nalge/Nunc International, Denmark). Кровь сразу зафиксировали при помощи б,0 мл буфера BD Phosflow Lyse/Fix (BD Bioscience, San Jose, CA), ЗХ перевернули и поместили на водяную баню при 37°С. Половину селезенки удалили и перенесли в пробирку Эппендорфа, содержащую 0,5 мл PBS
(Invitrogen Corp, Grand Island, NY) . Селезенку измельчили при помощи гомогенизатора тканей (Pellet Pestle, Kimble/Kontes, Vineland, NJ) и сразу зафиксировали при помощи б,0 мл буфера BD Phosflow Lyse/Fix, ЗХ перевернули и поместили на водяную баню при 37°С. После сбора тканей мышам свернули шеи и отправили тушки на утилизацию. Через 15 минут 15 мл конические пробирки сняли с 37 °С водяной бани и поместили на лед до дальнейшей переработки тканей. Гомогенизированные селезенки отфильтровали через 70 мкм ячеечное сито (BD Bioscience, Bedford, MA) в другую 15 мл коническую пробирку и промыли 9 мл PBS. Спленоциты и кровь вращали при 2 000 об./мин в течение 10 минут (холодными) и аспирировали буфер. Клетки повторно суспендировали в 2,0 мл холодного (-20°С) 90% метилового спирта (Mallinckrodt Chemicals, Phillipsburg, NJ) . МеОН медленно добавляли во время быстрого перемешивания конической пробирки на вортексе. Затем ткани хранили при -2 0°С до окрашивания клеток для анализа FACS. Многократная иммунизация TNP
Кровь собрали отбором ретроорбитальной глазной крови у 7-8-недельных самок мышей BALB/c (Charles River Labs.) на 0 день перед иммунизацией. Кровь оставили свертываться на 30 минут и вращали при 10000 об./мин в микропробирках для сыворотки (Becton Dickinson) в течение 10 минут. Собрали сыворотку,
перенесли аликвоты в пробирки Matrix (Matrix Tech. Corp.) и хранили при -70°С до выполнения анализа ELISA. Мышам вводили исследуемое соединение перорально перед иммунизацией и в последующие интервалы времени на основании долговечности молекулы. Затем мышей иммунизировали 50 мкг TNP-LPS (Biosearch Tech., #Т-5065), 50 мкг TNP-Ficoll (Biosearch Tech., #F-1300) или 100 мкг TNP-KLH (Biosearch Tech., #T-5060) плюс 1% квасцов
(Brenntag, #3501) в PBS. TNP-KLH плюс раствор квасцов приготовили осторожным переворачиванием смеси 3-5 раз каждые 10 минут в течение 1 часа перед иммунизацией. На 5 день после последней обработки мышей умертвили в атмосфере СОг и выполнили пункцию сердца. Кровь оставили свертываться на 30 минут и вращали при 10000 об./мин в микропробирках для сыворотки в течение 10 минут. Собрали сыворотку, перенесли аликвоты в пробирки Matrix и хранили при -70°С до дальнейшего выполнения анализа. Затем при помощи ELISA измерили уровни TNP-специфичных IgGl, IgG2a, IgG3 и IgM в сыворотке. Для сбора TNP-специфичных антител использовали TNP-BSA (Biosearch Tech., #Т-5050). TNP-BSA (10 мкг/мл) использовали для покрытия 384-луночных планшетов ELISA (Corning Costar) в течение ночи. Затем планшеты промыли и блокировали в течение 1 часа при помощи 10% блокирующего раствора BSA ELISA (KPL). После блокирования планшеты ELISA промыли и серийно разбавили образцы сыворотки/контрольные образцы, и оставили связываться с планшетами на 1 час. Планшеты промыли, a Ig-HRP конъюгированные вторичные антитела (анти-мышиный IgGl коз, Southern Biotech #1070-05, анти-мышиный IgG2a коз, Southern Biotech #1080-05, анти-мышиный IgM коз, Southern Biotech #1020-05, анти-мышиный IgG3 коз, Southern Biotech #1100-05) разбавили при концентрации 1:5000 и инкубировали на этих планшетах в течение 1 часа. Для визуализации антител использовали раствор ТМВ пероксидазы
(SureBlue Reserve ТМВ производства KPL) . Планшеты промыли, а образцы оставили расти в растворе ТМВ примерно на 5-2 0 минут в зависимости от анализированного Ig. Реакцию остановили 2 М серной кислотой и считывали планшеты на OD при 4 50 нм.
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
0,0071
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-3-(5-фтор-З-пиридинил)-N-метилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамид
0,08110
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-N,1-дициклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
0,01750
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-Ы-циклопентил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
0,01840
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-циклопропил-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамид
0,01740
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-метил-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамид
0,02620
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-Ы-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
0,07380
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)пропил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамид
0,03900
3- (2- ( (1R)-1-( (б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамид, 3-(2-((lS)-l-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамид
0,03060
3- (2- ( (1R)-1-( (б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамид
4,67000
3-(2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамид
0,01830
4-амино-б-(((lR)-l-(l-(2,3'-бипиридин-5'-ил)- 6-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,19000
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-( ( (IS)-1- (1-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2,90000
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
определен
4-амино-б-(((lR)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,34400
4-амино-б-(((lR)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
11,10000
4-амино-б-(((lR)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,25100
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
4,1800
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0013
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0390
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0232
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,0600
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-( ( (IS)-1- (1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,02880
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,41100
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(5-бром-З-пиридинил)-6-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(5-бром-3-пиридинил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,04610
4-амино-б-(((1R)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-6-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00376
4-амино-б-(((1R)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,00000
4-амино-б-(((1R)-1-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо [4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
определен
4-амино-б-(((1R)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-( ( (IS)-1- (4,6-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,02220
4-амино-б-(((1R)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,29000
4-амино-б-(((1R)-1-(4-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-( ( (IS)-1- (4-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,08610
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0070
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0, 1280
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
3,7400
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
> 125
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-( ( (IS)-1- (5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,14800
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2,82000
4-амино-б-(((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0022
4-амино-б-(((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,3100
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,1110
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
7,0300
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2,0600
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,1320
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0402
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
9, 15
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,3620
4- амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-( ( (IS)-1-( б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-
5- пиримидинкарбонитрил
0,01390
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,85000
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0028
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2,4800
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0072
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,52700
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(б-фтор-2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-( ( (IS)-1-(б-фтор-1-(б-фтор-2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,02470
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(б-фтор-2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,75500
4-амино-б-(((1R)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б-(((IS)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,06970
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(2,3'-бипиридин-5'-ил)- 6-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,24800
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,62000
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,29500
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-4,6-дифтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00260
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0064
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0021
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0002
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0037
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,01880
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2,41000
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,02680
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,02740
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,46400
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0060
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0258
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0031
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00220
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00219
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,05310
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопентил-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,44000
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0017
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,03150
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00096
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00283
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0122
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(2-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиразин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2,16000
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(2-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиримидин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,58000
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(2-пиридинил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2,01000
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо [4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,13800
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(3,5-дифторфенил)- б-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0114
4-амино-б-(((IS)-1-(3-(З-хлор-5-фторфенил)-6-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0088
4-амино-б-(((IS)-1-(3-(4-хлорфенил)-6-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0251
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0740
4-амино-б-(((IS)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00674
4-амино-б-(((IS)-1-(4-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,04700
4-амино-б-(( (IS)-1- (5- ( (4-метил-1-
пиперазинил)карбонил)-3-фенилимидазо[1,2-
а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,01180
4-амино-б-(((IS)-1-(5,б-дифтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,05750
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0441
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,4770
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0876
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,09640
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-фенил-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0017
4-амино-б-(((IS)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0027
4-амино-б-(( (IS)-1- (б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0535
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
2,0800
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0089
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0038
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0342
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0008
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0004
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00805
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбоксамид
0,06990
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0018
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00942
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбоксамид
0,15400
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(б-фтор-2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00889
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-фенил-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0002
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(2-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0904
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(2-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0401
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(2-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
1,0100
4- амино-6-(((IS)-1-(6-фтор-З-(2-
пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-
5- пиримидинкарбонитрил
0,0099
4-амино-б-(((IS)-1-(6-фтор-З-(3-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,0561
4- амино-б-(((IS)-1-(6-фтор-З-(3-
пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-
5- пиримидинкарбонитрил
0,30600
4- амино-б-(((IS)-1-(6-фтор-З-(4-
фторфенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-
5- пиримидинкарбонитрил
0,0083
4- амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(5-фтор-З-
пиридинил) имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-
5- пиримидинкарбонитрил
0,28600
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-фенилимидазо[1,2-
а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,05440
4-амино-б-(((IS)-1-(7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,04550
4-амино-б-(((IS)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,04810
4-амино-б-(((IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,1730
4-амино-б-(((8-хлор-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)метил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,2300
4-амино-б-((1-(3-(3,5-дифторфенил)-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00333
4-амино-б-((1-(3-фенил-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил
0,00266
метил 2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-3-(5-фтор-З-пиридинил) имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
0,31400
метил 2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-3-(3-
пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
0,14700
метил 2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилат
0,03900
N-((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,0128
N-((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
2,1600
N-((1R)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,0015
N-((1R)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,3950
N-((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,0145
N-((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,41800
N-((1S)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)-9Н-пурин-б-амин
0,10000
N- ( (IS)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,0084
N-((IS)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,0027
N- ( (IS)-1- (б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,00377
N- ( (IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амин
0,6500
N- (5- (2- ( (1R)-1-( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-3-пиридинил)метансульфонамид, N-(5-(2-( (1S)-1-( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)- 6-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-3-пиридинил)метансульфонамид
0,01440
N- (5- (2- ( (1R)-1-( (б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-
ил)-3-пиридинил)метансульфонамид
0,60000
N- (5- (2-( (IS)-1- ( (б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-
ил)-3-пиридинил)метансульфонамид
0,01190
Для лечения PI3K8 -опосредованных заболеваний, таких как
ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилоартрит,
остеоартрит, псориатический артрит, псориаз, воспалительные заболевания и аутоиммунные заболевания, соединения настоящего изобретения могут вводиться перорально, парентерально, ингаляцией спрея, ректально или местно, в композициях лекарственных форм, содержащих обычные фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и среды. Термин "парентерально", используемый в настоящем документе, включает подкожные, внутривенные, внутримышечные, надчревные инъекции или инфузионные способы, или интраперитонеальное введение.
Лечение заболеваний и нарушений, упоминавшееся в настоящем документе, включает также профилактическое введение соединения настоящего изобретения, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции пациенту (то есть, животному, предпочтительно млекопитающему, наиболее предпочтительно человеку), который, предположительно, нуждается в превентивном лечении таких заболеваний, как, например, ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилоартрит, остеоартрит, псориатический артрит, псориаз, воспалительные заболевания и аутоиммунные заболевания и так далее.
Схема приема для лечения Р13Кб-опосредованных заболеваний, рака и/или гипергликемии при помощи соединений настоящего изобретения и/или композиций настоящего изобретения основана на различных факторах, включая тип заболевания, возраст, вес, пол, медицинское состояние пациента, степени его состояния, способа введения и конкретного используемого соединения. Поэтому схема приема может широко варьироваться, но может быть легко определена стандартными способами. Уровни дозировки, порядка от
около 0,01 мг до 30 мг на килограмм веса тела в день, предпочтительно от около 0,1 мг до 10 мг/кг, более предпочтительно от около 0,25 мг до 1 мг/кг, являются пригодными для всех способов применения, описанных в настоящем документе.
Фармацевтически активные соединения настоящего изобретения могут быть переработаны в соответствии с обычными способами фармации для получения медицинских средств для введения пациентам, включая людей и других млекопитающих.
Для перорального введения фармацевтическая композиция
может быть, например, в форме капсулы, таблетки, суспензии или
жидкости. Фармацевтическая композиция предпочтительно
изготавливается в форме единицы дозирования, содержащей заданное количество активного компонента. Например, они могут содержать количество активного компонента от около 1 до 2000 мг, предпочтительно от около 1 до 500 мг, более предпочтительно от около 5 до 150 мг. Подходящая дневная доза для человека или другого млекопитающего широко варьируется в зависимости от состояния пациента и других факторов, но она может быть установлена обычными способами.
Активный компонент может также вводиться инъекциями в виде композиции с соответствующими носителями, включая солевой раствор, декстрозу или воду. Дневная парентеральная схема введения может составлять от около 0,1 до около 30 мг/кг общего веса тела, предпочтительно от около 0,1 до около 10 мг/кг и более предпочтительно от около 0,25 мг до 1 мг/кг.
Препараты для инъекций, такие как стерильные водные или масляные суспензии для инъекций, могут составляться в соответствии с известными в данной области способами с использованием пригодных диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих средств. Стерильные композиции для инъекций могут также быть стерильным раствором или суспензией в нетоксичном, приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе, например, раствором в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых сред и растворителей, которые можно использовать, - вода, раствор Рингера и изотонический
раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные жирные масла обычно используются в качестве растворителей или суспендирующей среды. Для этой цели могут использоваться любые безвкусные жирные масла, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, в производстве композиций для инъекций находят применение жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.
Суппозитории для ректального введения лекарственных средств могут быть получены путем смешивания лекарственного средства с соответствующим нераздражающим формообразующим средством, таким как масло какао и полиэтиленгликоли, которые являются твердыми при обычных температурах, но жидкими при ректальной температуре, и поэтому плавятся в прямой кишке и высвобождают лекарственное средство.
Пригодная доза для местного применения активного компонента соединения настоящего изобретения составляет от 0,1 мг до 150 мг, которая вводится от одного до четырех раз, предпочтительно один или два раза в день. Для местного введения активный компонент может включать от 0,001% до 10% вес./вес, например, от 1% до 2% по весу композиции, и хотя он может составлять целых 10% вес./вес, предпочтительно не более 5% вес./вес. и более предпочтительно от 0,1% до 1% композиции.
Композиции, пригодные для местного введения, включают жидкие и полужидкие композиции, пригодные для проникновения через кожу (например, линименты, лосьоны, мази, кремы или пасты), а также капли, пригодные для введения в глаза, уши или нос.
Для введения соединения настоящего изобретения обычно комбинируются с одним или более адъювантами, подходящими для указанного способа введения. Соединения могут смешиваться с лактозой, сахарозой, порошком крахмала, целлюлозными эфирами карбоновых кислот, стеариновой кислотой, тальком, стеаратом магния, оксидом магния, натриевыми и кальциевыми солями фосфорной и серной кислот, аравийской камедью, желатином, альгинатом натрия, поливинилпирролидоном и/или поливиниловым спиртом, а затем таблетироваться или инкапсулироваться для удобного введения. Альтернативно, соединения настоящего
изобретения могут быть растворены в солевом растворе, воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, этаноле, кукурузном масле, арахисовом масле, хлопковом масле, кунжутном масле, трагакантовой камеди и/или различных буферах. Другие адъюванты и способы введения являются хорошо известными в фармацевтической области. Носитель или разбавитель может включать материал для временной задержки, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат отдельно или с воском или другими материалами, хорошо известными в данной области.
Фармацевтические композиции могут быть изготовлены в твердой форме (включая гранулы, порошки или суппозитории) или в жидкой форме (например, растворы, суспензии или эмульсии). Фармацевтические композиции могут быть подвергнуты обычным фармацевтическим действиям, таким как стерилизация, и/или могут содержать обычные адъюванты, такие как консерванты, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, буферы и так далее.
Твердые лекарственные формы для перорального введения могут включать капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активный компонент может смешиваться по меньшей мере с одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие лекарственные формы могут также включать, как в обычной практике, дополнительные вещества, отличные от инертных разбавителей, например, смазывающие агенты, такие как стеарат магния. В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственные формы могут также включать буферные агенты. Кроме того, таблетки и пилюли могут быть приготовлены с энтеральными покрытиями.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения могут включать фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как вода. Такие композиции могут также включать адъюванты, такие как смачивающие агенты, подсластители, ароматизаторы и отдушки.
Соединения настоящего изобретения могут иметь один или несколько асимметричных атомов углерода и поэтому могут
существовать в форме оптических изомеров, а также в форме их
рацемических или нерацемических смесей. Оптические изомеры
могут быть получены разделением рацемических смесей в
соответствии с обычными способами, например, образованием
диастереоизомерных солей, обработкой оптически активной
кислотой или основанием. Примерами соответствующих кислот
являются винная, диацетилвинная, дибензоилвинная,
дитолуоилвинная и камфорсульфоновая кислота, и дальнейшее разделение смеси диастереомеров кристаллизацией с последующим выделением оптически активных оснований из этих солей. Различные способы разделения оптических изомеров включают применение хиральной хроматографической колонки, оптимально подобранной для максимального разделения энантиомеров. Другой доступный способ включает синтез ковалентных диастереоизомерных молекул взаимодействием соединений настоящего изобретения с оптически чистой кислотой в активированной форме или оптически чистым изоцианатом. Синтезированные диастереоизомеры могут быть разделены обычными средствами, такими как хроматография, дистилляция, кристаллизация или сублимация, а затем гидролизованы для получения энантиомерно чистого соединения. Подобным образом могут быть получены оптически активные соединения настоящего изобретения с использованием активных исходных материалов. Эти изомеры могут быть в форме свободной кислоты, свободного основания, сложного эфира или соли.
Точно так же, соединения настоящего изобретения могут существовать в виде изомеров, то есть соединений одной молекулярной формулы, но в которых атомы по-разному расположены относительно друг друга. В частности, алкиленовые заместители соединений настоящего изобретения обычно и предпочтительно расположены и включены в молекулы так, как указано в определениях для каждой из этих групп, читая слева направо. Однако в некоторых случаях специалист в данной области может понять возможность приготовления соединений настоящего изобретения, в которых эти заместители имеют обратную ориентацию относительно других атомов в молекуле. То есть заместитель, подлежащий внедрению, может быть таким же, как
указано выше, за исключением того, что он внедряется в молекулу в обратной ориентации. Специалист в данной области поймет, что эти изомерные формы соединений настоящего изобретения следует толковать как входящие в рамки настоящего изобретения.
Соединения настоящего изобретения могут использоваться в
форме солей, полученных из неорганических или органических
кислот. Такие соли включают, но не ограничиваясь этим,
следующие: ацетат, адипинат, альгинат, цитрат, аспартат,
бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат,
камфорсульфонат, диглюконат, циклопентанпропионат,
додецилсульфат, этансульфонат, глюкогептаноат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, метансульфонат, никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат, 2-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, тиоцианат, тозилат, мезилат и ундеканоат. Также, основные азотсодержащие группы могут быть кватернизованы такими агентами как низшие алкилгалогениды, такие как метил, этил, пропил и бутилхлориды, бромиды и йодиды; диалкилсульфаты, такие как диметил, диэтил, дибутил и диамилсульфаты, длинноцепочечные галогениды, такие как децил, лаурил, миристил и стеарилхлориды, бромиды и йодиды, аралкилгалогениды, такие как бензил и фенетилбромиды, и другими. Таким образом, получаются водо- или маслорастворимые или диспергируемые продукты.
Примеры кислот, которые могут использоваться для образования фармацевтически приемлемых солей присоединения кислот, включают такие неорганические кислоты, как хлороводородная кислота, серная кислота и фосфорная кислота, и такие органические кислоты, как щавелевая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота и лимонная кислота. Другие примеры включают соли с щелочными металлами или щелочноземельными металлами, такими как натрий, калий, кальций или магний, или с органическими основаниями.
Также рамками настоящего изобретения охватываются фармацевтически приемлемые сложные эфиры карбоновых кислот или
гидроксил-содержащих групп, включая метаболически лабильные сложные эфиры или пролекарственные формы соединения настоящего изобретения. Метаболически лабильный сложный эфир является сложным эфиром, который может давать, например, повышенные уровни в крови и пролонгированную эффективность соответствующей не эстерифицированной формы соединения. Пролекарственная форма является формой, которая не является активной формой молекулы при введении, но которая становится терапевтически активной после некоторого действия in vivo или биотрансформации, такой как метаболизм, например, ферментативное или гидролитическое расщепление. Полное исследование пролекарств, включающее сложные эфиры, представлено в книгах Svensson and Tunek Drug Metabolism Reviews 165 (1988) и Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985). Примеры замаскированных карбоксилат-анионов включают различные сложные эфиры, такие как алкиловые
(например, метиловые, этиловые), циклоалкиловые (например,
циклогексиловые), аралкиловые (например, бензиловые, п-
метоксибензиловые) и алкилкарбонилоксиалкиловые (например,
пивалоилоксиметиловые). Амины маскируются как
арилкарбонилоксиметил-замещенные производные, которые
расщепляются эстеразами in vivo, выделяя свободное лекарственное средство и формальдегид (Bungaard J. Med. Chem. 2503 (1989)) . Также лекарственные средства, содержащие кислотную NH группу, такую как имидазол, имид, индол и тому подобные, маскируются N-ацилоксиметиловыми группами (Bundgaard Design of Prodrugs, Elsevier (1985)) . Гидроксильные группы маскируются как сложные и простые эфиры. В публикации ЕР 03 9051
(Sloan and Little, 4/11/81) описаны пролекарства гидроксамовых кислот оснований Манниха, их получение и применение. Сложные эфиры соединений настоящего изобретения могут включать, например, метиловые, этиловые, пропиловые и бутиловые сложные эфиры, а также другие подходящие сложные эфиры, образованные между кислотной группой и гидроксил-содержащей группой. Метаболически лабильные сложные эфиры могут включать, например, метоксиметил, этоксиэтил, изопропоксиметил, сх-метоксиэтил,
группы, такие как ос-( (С1-С4) алкокси) этил, например,
метоксиэтил, этоксиэтил, пропоксиэтил, изопропоксиэтил и так
далее; 2-оксо-1,З-диоксолен-4-илметиловые группы, такие как 5-
метил-2-оксо-1,З-диоксолен-4-илметил и так далее; С1-С3
алкилтиометиловые группы, например, метилтиометил,
этилтиометил, изопропилтиометил и так далее; ацилоксиметиловые группы, например, пивалоилоксиметил, ос-ацетоксиметил и так далее; этоксикарбонил-1-метил; или а-ацилокси-ос-замещенные
метиловые группы, например, ос-ацетоксиэтил.
Кроме того, соединения настоящего изобретения могут существовать в виде кристаллических твердых веществ, которые могут кристаллизоваться из обычных растворителей, таких как этанол, N,N-диметилформамид, вода и тому подобное. Поэтому кристаллические формы соединений настоящего изобретения могут существовать как полиморфы, сольваты и/или гидраты исходных соединений или их фармацевтически приемлемых солей. Точно так же все такие формы следует толковать как входящие в рамки настоящего изобретения.
Хотя соединения настоящего изобретения могут вводиться как единственное активное фармацевтическое средство, они также могут использоваться в комбинации с одним или несколькими соединениями настоящего изобретения или другими агентами. При введении в виде комбинации терапевтические средства могут быть составлены в отдельные композиции, которые вводятся одновременно или в разное время, или эти терапевтические средства могут вводиться в виде единой композиции.
Все вышеизложенное является лишь иллюстрацией настоящего изобретения и не подразумевает ограничения настоящего изобретения до описанных соединений. Варианты и изменения, которые являются очевидными для специалистов в данной области, подразумеваются входящими в рамки и сущность настоящего изобретения, которые определены в приложенной формуле изобретения.
Из изложенного выше описания, специалист в данной области может легко определить основные характеристики настоящего
изобретения и, не отклоняясь от его общей идеи и рамок, может сделать различные изменения и модификации настоящего изобретения для адаптации его для различных применений и условий.
или любая его фармацевтически приемлемая соль, где
X1 является C(R10) или N;
X2 является C(R12) или N;
X3 является С или N;
X4 является С или N;
X5 является С или N;
X6 является С или N; где по меньшей мере два из X3, X4, X5 и X6 являются С;
Y является N(R8), О или S; Z является S, О или NR11; п равен 0, 1, 2 или 3;
R1 является связанным напрямую, С^алкил-связанным, OCi-
галкил-связанным, С^адкилО-связанным или О-связанным
насыщенным, частично насыщенным или ненасыщенным 3-, 4-, 5-, били 7-членным моноциклическим или 8-, 9-, 10- или 11-членным бициклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, независимо
выбранными из галогена, С^алкила, С^галогеналкила, циано,
нитро, -C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -
OC(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОСг-еалкилШ^, -
ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2R% -S (=0) 2NRaRa,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa,
-NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa,
N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-
6aлкилNRaRa и -NRaC2-6aлкилORa; где доступные углеродные атомы
кольца дополнительно замещены 0, 1 или 2 оксо- или
тиоксогруппами; и где это кольцо дополнительно замещено 0 или 1
насыщенным 5- или б-членным моноциклическим кольцом, содержащим
1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не
более одного атома О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3
заместителями, независимо выбранными из галогена, С^алкила, Ci_
4галогеналкила или циано; или R1 является С^алкилом, замещенным
1 или 2 заместителями, выбранными из циано, нитро, -C(=0)Ra, -
C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra,
0C(=0)NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилШаКа, -ОС2-6алкил(Жа,
-SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -
S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra,
-N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa,
N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2_6алкилЖ^а и -NRaC2-6алкилОКа;
R2 выбран из H, галогена, С^алкила, С^галогеналкила,
циано, нитро, 0Ra, NRaRa, -C(=0)Ra, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -
С (=NRa) NRaRa, -S(=0)Ra, -S (=0) 2Ra, -S (=0) 2NRaRa,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa;
R3 выбран из H, галогена, нитро, циано, С^алкила, OCi-4алкила, ОС^галогеналкила, ЖС^алкила, N (С^алкил) С^алкила, С1-4галогеналкила, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -0C(=0)Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-6алкилЫ11аКа, -ОС2-6алкил(Жа, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa, S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa, N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-6aлкилNRaRa и -ЖaC2-6aлкилORa; или R3 является ненасыщенным 5-,
б- или 7-членным моноциклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного О или S, замещенным 0, 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, С^алкила, Ci-згалогеналкила, -OCi-4алкила, -NH2, -ШСЧ^алкила, -N (СЧ^алкил) СЧ^алкила;
R4 в каждом случае независимо является галогеном, нитро, циано, С1-4алкилом, 0С1-4алкилом, 0С1-4галогеналкилом, NHCi-4алкилом, N (С1-4алкил) С1-4алкилом или С1-4галогеналкилом;
R5 в каждом случае независимо является Н, галогеном, CV балкилом, С1-4галогеналкилом или Ci-балкилом, замещенным 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, циано, ОН, 0С1-4алкила, С1-4алкила, Ci-згалогеналкила, 0С1-4алкила, NH2, ШС^алкила, N(Ci-4алкил) С1-4алкила; или обе группы R5 вместе образуют Сз-бспироалкил, замещенный 0, 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, циано, ОН, 0С1-4алкила, С1-4алкила, Ci_ згалогеналкила, 0С1-4алкила, NH2, ЫНС1-4алкила, N (С1-4алкил) Ci_ 4алкила;
R6 является Н, галогеном, NHR9 или ОН;
R7 выбран из Н, галогена, С1-4галогеналкила, циано, нитро,
-C(=0)Ra, -C(=0)ORa, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra,
-ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra, -ОС2-балкилШ^а, -0C2-
6алкилОКа, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa,
-NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra, -N (Ra) С (=0) NRaRa,
N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra, -N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -NRaC2-
6алкилШ^а, -NRaC2-6aлкилORa и Сь6алкила, где С1-6алкил замещен О,
1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, Ci-
4галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -С (=0) 0Ra, -C(=0)NRaRa, -
С (=NRa) NRaRa, -0Ra, -ОС (=0) Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra,
-OC2-6aлкилNRaRa, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra,
S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra,
N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra,
N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -Ж^г-балкилЖ^ и -NRaC2-6aлкилORa, и СЬ6алкил является дополнительно замещенным 0 или 1 насыщенным, частично насыщенным или ненасыщенным 5-, б- или 7-членным
моноциклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4 атома,
выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного О или S,
где доступные углеродные атомы кольца замещены 0, 1 или 2 оксо-
или тиоксогруппами, где это кольцо замещено 0, 1, 2 или 3
заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, циано,
С^алкила, ОС^алкила, ОСЧ^галогеналкила, ШС^алкила, N(Ci-
4алкил) С^алкила и СЧ^галогеналкила; или R7 и R8 вместе образуют
мостик -C=N-, где атом углерода замещен Н, галогеном, циано или
насыщенным, частично насыщенным или ненасыщенным 5-, б- или 7-
членным моноциклическим кольцом, содержащим 0, 1, 2, 3 или 4
атома, выбранных из N, О и S, но содержащим не более одного О
или S, где доступные углеродные атомы кольца замещены 0, 1 или
2 оксо- или тиоксогруппами, где это кольцо замещено 0, 1, 2, 3
или 4 заместителями, выбранными из галогена, С^алкила, d-
4галогеналкила, циано, нитро, -C(=0)Ra, -С (=0) ORa, -C(=0)NRaRa, -
С (=NRa) NRaRa, -ORa, -ОС (=0) Ra, -ОС (=0) NRaRa, -ОС (=0) N (Ra) S (=0) 2Ra,
-ОСг-еалкилШ'ЧГ1, -ОС2-6алкш^а, -SRa, -S(=0)Ra, -S(=0)2Ra,
S(=0)2NRaRa, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) Ra, -S (=0) 2N (Ra) С (=0) 0Ra,
S (=0) 2N (Ra) С (=0) NRaRa, -NRaRa, -N (Ra) С (=0) Ra, -N (Ra) С (=0) 0Ra,
N (Ra) С (=0) NRaRa, -N (Ra) С (=NRa) NRaRa, -N (Ra) S (=0) 2Ra,
N (Ra) S (=0) 2NRaRa, -ЖаС2-6алкилЖ^а и -ЖаС2-6алкш^а; или R7 и R9 вместе образуют мостик -N=C-, где атом углерода замещен Н, галогеном, С^алкилом, С^галогеналкилом, циано, нитро, 0Ra, NRaRa, -C(=0)Ra, -C(=0)0Ra, -C(=0)NRaRa, -С (=NRa) NRaRa, -S (=0) Ra, -S(=0)2Ra, -S (=0) 2NRaRa;
R8 является H или Ci-балкилом;
R9 является H, Ci-балкилом или С^галогеналкилом; R10 является H, галогеном, Ci-залкилом, Ci-згалогеналкилом или циано;
R11 является Н или С^алкилом; R12 является Н или С^алкилом;
Ra в каждом случае независимо является Н или Rb; и Rb в каждом случае независимо является фенилом, бензилом или Ci-балкилом, фенил, бензил и Ci-балкил замещены 0, 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из галогена, С^алкила, Ci_ згалогеналкила, -0С1-4алкила, -NH2, -ЫНС1-4алкила, -N (С1-4алкил) Ci_
(R4)n.
4. Соединение по п.1, отличающееся тем, что это соединение выбрано из
1- циклопропил-Ы-метил-2-((IS)-1-(9Н-пурин-б-иламино)этил)-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2- ((1R)-1-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-
(5-фтор-З-пиридинил)-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида, 2-( (IS)-1- ( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил) -Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((1R)-1-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((1R)-1-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-7-карбонитрила, 2- ( (IS) -1-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил) -1Н-бензимидазол-7-карбонитрила,
2-((1R)-1-((6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-7-карбонитрила,
2-((lS)-l-((б-амино-5-(4-(метилсульфонил)фенил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-(метилсульфонил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-(трифторметил)-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-7-карбонитрила,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-3-(5-фтор-З-пиридинил)-N-метилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N,1-дициклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-циклопентил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-циклопропил-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-метил-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксамида,
2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-N-трет-бутил-1-циклопропил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
2- ((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)пропил)-1-циклопропил-Ы-метил-1Н-бензимидазол-7-карбоксамида,
3- (2- ( (1R)-1-( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-
б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамида, 3- (2- ( (IS)-1-
((б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-
бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамида,
2-
3- (2- ( (1R)-1-( (6-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамида,
3- (2- ( (IS)-1- ( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-N-метилбензамида,
4- амино-б-(((lR)-l-(l-(2,3'-бипиридин-5'-ил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lR)-l-(l-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((lS)-l-(l-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lR)-l-(l-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lR)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-
b] пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lR)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-
c] пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-1Н-имидазо[4,5-с]пиридин-2-
ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4,б-дифтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрил, 4-амино-б- ( ( (IS)-1- (1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-(5-бром-З-пиридинил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((IS)-1-(1-(5-бром-З-пиридинил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lR)-l-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б-(((IS)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(4-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б- ( ( (IS)-1- (4-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила, 4-амино-б- ( ( (IS)-1- (5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ( (
1R)-1-(5-фтор-
1- (5-фтор-З-пиридинил)
-1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ( (
1R)-1-(б-хлор-
1-(3,5-дифторфенил)-1Н
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(б-хлор-
1-(3,5-дифторфенил)-1Н
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(6-фтор-
1-(2-(метилсульфонил)ф
енил)-
1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(6-фтор-
1-(2-(метилсульфонил)ф
енил)-
1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(б-фтор-
1-(2-(метилсульфонил)ф
енил)-
1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(б-фтор-
1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(б-фтор-
1-(3-(метилсульфонил)ф
енил)-
1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(б-фтор-
1-(3-(метилсульфонил)ф
енил)-
1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(б-фтор-
1- (3-фторфенил)-1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
1R)-1-(б-фтор-
1-(3-пиридинил)-1Н-
бензимидазол-
-ил)
этил)амино)-5-
пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
б- ( ( (IS)-1- (б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(4-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((1R)-1-(б-фтор-1-(б-фтор-2-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
( ( |
;is)-1-(б-фтор-
¦1- (б-фтор-2-пиридинил)
-1Н-
бензимидазол-
¦2-
¦ил)
этил)амино)-5-
¦пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
( ( |
IIR)-1-(6-фтор-
¦1- (б-фтор-2-пиридинил)
-1Н-
бензимидазол-
¦2-
¦ил)
этил)амино)-5-
¦пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
((1
IIR)-1-(7-бром-
¦1- (5-фтор-З-пиридинил)
-1Н-
бензимидазол-
¦2-
¦ил)
этил)амино)-5-
¦пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
((1
HS) -1- (7-бром-
¦1- (5-фтор-З-пиридинил)
-1Н-
бензимидазол-
¦2-
¦ил)
этил)амино)-5-
¦пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
((1
;iS)-1- (1- (2,3'
-бипиридин-5'-ил)-б-фтор-1Н-
бензимидазол-
¦2-
¦ил)
этил)амино)-5-
¦ пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
((1
[ IS)-1-(1-(2-пиридинил)-1Н-имидазо[4,
Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторбензил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-4,б-дифтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-4-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(l-(3,5-дифторфенил)-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(3-цианофенил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-4-(метилсульфонил) 1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил) 1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(метилсульфонил) 1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(4-фторбензил)-7-(трифторметил)-1 бензимидазол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопентил-4-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-5-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-б-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(1-циклопропил-7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(2-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиразин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(2-пиридинил)имидазо[1,2-
a] пиримидин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(2-пиридинил)имидазо[1,2-
b] пиридазин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(3,5-дифторфенил)-ЗН-имидазо[4,5-Ь]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(3,5-дифторфенил)-б-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(3-(З-хлор-5-фторфенил)-б-
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(4-хлорфенил)- б-фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(3-(4-хлорфенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(4,б-дифтор-1-(3-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(4-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((lS)-l-(5-((4-метил-1-пиперазинил)карбонил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(5,б-дифтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфанил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(5-фтор-1-фенил-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(2-(метилсульфонил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(2-пиридинил)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-1-(3-(метилсульфонил)фенил)-1Н-
бензимидазол-
-ил 1
)этил)амино)-5-
¦ пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ( (
(1S)-1-(б-фтор-
¦1- (3-фторфенил)-1Н-
бензимидазол-
-ил ]
)этил)амино)-5-
¦ пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
(1S)-1-(б-фтор-
¦1-(3-фторфенил)-1Н-
бензимидазол-
-ил ]
)этил)амино)-5-
¦ пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
(1S)-1-(б-фтор-
¦1-(3-пиридинил)-1Н-
бензимидазол-
-ил ]
)этил)амино)-5-
¦ пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
(1S)-1-(б-фтор-
¦1-(3-пиридинил)-1Н-
бензимидазол-
-ил ]
)этил)амино)-5-
¦пиримидинкарбоксамида,
4-амино-
- ((
(1S)-1-(б-фтор-
¦1- (4-фторфенил)-1Н-
бензимидазол-
-ил ]
)этил)амино)-5-
¦ пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
(1S)-1-(б-фтор-
¦1-(5-фтор-З-пиридинил)-
1Н-
бензимидазол-
-ил ]
)этил)амино)-5-
¦пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
(1S)-1-(б-фтор-
¦1-(5-фтор-З-пиридинил)-
1Н-
бензимидазол-
-ил ]
)этил)амино)-5-
¦пиримидинкарбоксамида,
4-амино-
- ((
(1S)-1-(б-фтор-
¦1-(б-фтор-2-пиридинил)-
1Н-
бензимидазол-
-ил ]
)этил)амино)-5-
¦пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ((
(1S)-1-(б-фтор-
¦1-фенил-1Н-бензимидазол
-2-
ил)этил)амино)
-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-
- ( (
(1S)-1-(б-фтор-
¦3- (2-
(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(2-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(2-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(2-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-( ( (IS)-1- (б-фтор-3-(3-(метилсульфонил)фенил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(3-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(4-фторфенил)имидазо[1,2-
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-(5-фтор-З-пиридинил) имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(б-фтор-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(7-(метилсульфонил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(7-бром-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-(((8-хлор-З-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)метил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-((1-(3-(3,5-дифторфенил)-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
4-амино-б-((1-(3-фенил-1-бензотиофен-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
метил 2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-3-(5-фтор-З-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата,
метил 2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-3-(3-пиридинил)имидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата,
метил 2-((lS)-l-((б-амино-5-циано-4-
пиримидинил)амино)этил)-3-фенилимидазо[1,2-а]пиридин-5-карбоксилата,
N-((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N-((1R)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N-((1R)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N-((1R)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N-((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-
N-((1R)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N-((1S)-1-(1-(циклопропилметил)-7-(трифторметил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пропил)-9Н-пурин-б-амина,
N- ( (IS)-1-(б-хлор-1-(3,5-дифторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N- ( (IS)-1-(б-фтор-1-(3-фторфенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N- ( (IS)-1-(б-фтор-1-(5-фтор-З-пиридинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N- ( (IS)-1-(7-фтор-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
N- (5-(2-( (1R)-1-( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-3-пиридинил)метансульфонамида, N-(5-(2-( (IS)-1- ( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-3-пиридинил)метансульфонамида,
N- (5- (2-( (1R)-1-( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-3-пиридинил)метансульфонамида и
N- (5- (2-( (IS)-1- ( (б-амино-5-циано-4-пиримидинил)амино)этил)-б-фтор-1Н-бензимидазол-1-ил)-3-пиридинил)метансульфонамида, а также любых их фармацевтически приемлемых солей.
5. Соединение по любому из пп.1-4 для лечения
ревматоидного артрита, анкилозирующего спондилоартрита,
остеоартрита, псориатического артрита, псориаза, воспалительных
заболеваний и аутоиммунных заболеваний, воспалительных
заболеваний кишечника, воспалительных глазных болезней,
воспалительных заболеваний мочевого пузыря или нестабильного
мочевого пузыря, жалоб на кожные заболевания с воспалительной
составляющей, хронических воспалительных состояний,
аутоиммунных заболеваний, системной красной волчанки (SLE), миастении гравис, ревматоидного артрита, острого рассеянного энцефаломиелита, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры,
рассеянного склероза, синдрома Шегрена и аутоиммунной
гемолитической анемии, аллергических состояний и
гиперчувствительности, включающего стадию введения соединения по п. 1.
6. Соединение по любому из пп.1-4 для лечения раковых заболеваний, опосредованных, зависящих или связанных с
активностью рНОб, включающего стадию введения соединения по п.1.
7. Фармацевтическая композиция, включающая соединение по п.1 и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
По доверенности
Заявитель: ЭМДЖЕН ИНК.
[~J Некоторые пункты формулы не подлежат поиску (см. раздел I дополнительного листа)
D Единство изобретения не соблюдено (см. раздел II дополнительного листа)
A. КЛАССИФИКАЦИЯ ПРЕДМЕТА ИЗОБРЕТЕНИЯ:
см. дополнит, лист
Согласно международной патентной классификации (МПК) Б. ОБЛАСТЬ ПОИСКА:
Минимум просмотренной документации (система классификации и индексы МПК)
C07D 401/14, 403/12, 409/12, 409/14, 471/04, 487/04, 495/04, А61К 31/381, 31/4184, 31/4188, 31/506, 31/519, А61Р 17/06,
19/02, 29/00, 35/00, 43/00
Другая проверенная документация в той мере, в какой она включена в область поиска:
B. ДОКУМЕНТЫ, СЧИТАЮЩИЕСЯ РЕЛЕВАНТНЫМИ
Категория' Ссылки на документы с указанием, где это возможно, релевантных частей Относится к пункту №
X WO 2008/112156 Al (METASTATIX, INC.) 18.09.2008, реферат, с. 1, строка 14, с. 371, 1-7
строки 11-28, с. 436, строки 15-24, соединения формулы 1Н-1, табл. 7 на с. 583-584
A US 2009/0023761 Al (YI CHEN et al.) 22.01.2009, реферат, параграф [0002], формула 1-7
A RU 2326881 C2 (БАЙЕР ФАРМАСЬЮТИКАЛС КОРПОРЕЙШН) 20.06.2008, реферат 1-7
I [последующие документы указаны в продолжении графы В Ц данные о патентах-аналогах указаны в приложении
* Особые категории ссылочных документов: "А" документ, определяющий общий уровень техники
"Е" более ранний документ, но опубликованный на дату подачи евразийской заявки или после нее
"О" документ, относящийся к устному раскрытию, экспонированию и т.д.
"Р" документ, опубликованный до даты подачи евразийской
заявки, но после даты испрашиваемого приоритета "D" документ, приведенный в евразийской заявке
"Т" более поздний документ, опубликованный после даты приоритета и приведенный для понимания изобретения
"X" документ, имеющий наиболее близкое отношение к предмету
поиска, порочащий новизну или изобретательский уровень,
взятый в отдельности
"Y" документ, имеющий наиболее близкое отношение к предмету
поиска, порочащий изобретательский уровень в сочетании с
другими документами той же категории
" &" документ, являющийся патентом-аналогом
"L" документ, приведенный в других целях
Дата действительного завершения патентного поиска:
08 мая 2013 (08.05.2013)
Наименование и адрес Международного поискового oprai Федеральный институт промышленной собственности
РФ, 123995,Москва, Г-59, ГСП-5,Бережковская наб., 30-1. Факс: 243-3337, телетайп: 114818 ПОДАЧА
Уполномоченное лицо :
- О. А. Николаева
Телефон № (499) 240-25-91
ОТЧЕТ О ПАТЕНТНОМ ПОИСКЕ
Номер евразийской заявки: 201291005
КЛАССИФИКАЦИЯ ПРЕДМЕТА ИЗОБРЕТЕНИЯ:
СОЮ 401/14 (2006.01) C07D 403/12 (2006.01) C07D 409/12 (2006.01) C07D 409/14 (2006.01) C07D 471/04 (2006.01) C07D 487/04 (2006.01) C07D 495/04 (2006.01) А61К 31/381 (2006.01) А61К31/4184 (2006.01) А61К31/4188 (2006.01) А61К31/506 (2006.01) А61К31/519 (2006.01)
А61Р17/06 (2006.01)
А61Р19/02 (2006.01)
А61Р29/00 (2006.01)
А61Р35/00 (2006.01)
А61Р43/00 (2006.01)
Дополнительный лист
(19)
(19)
(19)
103
103
103
103
112
112
112
112
112
112
112
112
140
140
140
140
146
146
146
146
159
159
159
159
159
159
159
159
164
164
164
164
170
170
170
170
170
170
179
179
179
179
181
181
181
181
181
181
181
181
183
183
183
183
187
188
пиримидинкарбонитрила
189
188
пиримидинкарбонитрила
189
188
пиримидинкарбонитрила
189
188
пиримидинкарбонитрила
189
188
пиримидинкарбонитрила
189
188
пиримидинкарбонитрила
189
188
пиримидинкарбонитрила
190
ил)этиламино]пиримидин-5-карбонитрил
190
ил)этиламино]пиримидин-5-карбонитрил
191
191
193
Nl-Циклопропил-б-(метилсульфонил)бензол-1,2-диамин
192
195
195
201
201
201
201
211
212
Пример 7 6
214
214
215
215
215
215
217
218
N-(2-Бром-6-нитрофенил)-5-фторпиридин-З-амин
220
220
239
ил)этил)ацетамид
238
241
241
248
248
248
248
NH2
251
250
NH2
251
250
NH2
251
250
253
253
261
262
Анализ рАКТ in vivo
264
264
287
1. Соединение, имеющее структуру:
286
289
289
291
4алкила.
290
293
293
297
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
297
бензимидазол-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
298
фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
298
фторимидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
299
299
300
а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
300
а]пиридин-2-ил)этил)амино)-5-пиримидинкарбонитрила,
301
2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
301
2-ил)этил)-9Н-пурин-б-амина,
302
302