(57) Реферат / Формула:
Описан способ стереоселективного и региоселективного синтеза 3 α-гидрокси, 3 β-метил-5 α-прегнан-20-она (ганаксолона), включающий реагирование 5 α-прегнан-3,20-диона с органометаллическим метилирующим агентом в инертном растворителе и получение соединения формулы
Евразийское (21) 201270241 (13) A1
патентное
ведомство
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ЕВРАЗИЙСКОЙ ЗАЯВКЕ
(43) Дата публикации заявки 2013.09.30
(22) Дата подачи заявки 2010.08.11
(51) Int. Cl.
C07J 5/00 (2006.01) C07J9/00 (2006.0l) A61K 31/57 (2006.01) A61K31/575 (2006.01) A61P 25/28 (2006.01)
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 3а-ГИДРОКСИ, 3р-МЕТИЛ-5а-ПРЕГНАН-20-ОНА (ГАНАКСОЛОНА)
(31) 61/233,553
(32) 2009.08.13
(33) US
(86) PCT/US2010/045176
(87) WO 2011/019821 2011.02.17
(88) 2011.06.16
(71) Заявитель:
ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "НОВАМЕДИКА" (RU)
(72) Изобретатель:
Шо Кеннес, Хатчисон Алан (US)
(74) Представитель:
Ловцов С.В. (RU)
(57) Описан способ стереоселективного и региосе-лективного синтеза 3а-гидрокси, 3р-метил-5а-пре-гнан-20-она (ганаксолона), включающий реагирование 5а-прегнан-3,20-диона с органометалличе-ским метилирующим агентом в инертном растворителе и получение соединения формулы
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Зсх-ГИДРОКСИ, ЗР- МЕТИЛ-5а-ПРЕГНАН-20-ОНА
(ГАНАКСОЛОНА)
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Ряд стероидных производных За-гидрокси, ЗР-замещенных-5а-прегнан-20-онов оказались эффективными для модулирования хлоридного ионофорного GABA рецепторного комплекса (GR комплекс) in vitro и проявляют полезные терапевтические эффекты в животных моделях расстройств человеческой ЦНС. Самым главным среди них является За-гидрокси-3р-метил-5а-прегнан-20-он (Ганаксолон, GNX,1), который показал стимулирование GR комплекса и продемонстрировал ряд целебных физиологических эффектов in vivo. Ганаксолон 1 тестируется в продвинутых клинических испытаниях для эпилепсии и может быть полезным для ряда других расстройств ЦНС. Из-за высоких доз ганаксолона, требуемых для эффективного лечения людей (> 1 г/день), требуется эффективный и дешевый процесс его производства (Nohria and Giller, J. Am. Soc. Exp. Neurotherapeutics, (2007) 4: 102-105).
3-гидрокси, 3-метил-5-прегнан-20-он Ганаксолон (1)
Наиболее прямым подходом к синтезу ганаксолона является региоселективная и стереоселективная атака С-3 карбонила 5а-прегнан-3,20-диона (Дион 2) органометаллическим метилирующим агентом, таким как метальный реагент Гриньяра или метиллитий. Непосредственное метилирование 5а-прегнан 3,20-диона метальным реагентом Гриньяра или метиллитием для получения ганаксолона невозможен, поскольку необратимая атака обеих карбонильных групп СЗ и С20 углеродным анионом дает сложную смесь продуктов.
5а-прегнан-3,20-дион (Дион!)
Так как нежелательные продукты метилирования диона 2 имеют похожие физические свойства с ганаксолоном, необходимо получить ганаксолон реакцией органометаллического метилирования Диона 2 с содержанием менее чем 10% побочных продуктов, чтобы избежать множественных этапов очистки, которые также понижают эффективный выход и повышают стоимость производства фармацевтически чистого ганаксолона (загрязнения > 0.1%).
Стандартный подход к синтезу Ганаксолона 1 включает защиту карбонила С-20 За-гидрокси-5а-прегнан 20-она перед окислением, чтобы органометаллический метилирующий агент реагировал по положению 3 для введения ЗР-метильной группы с последующим гидролизом кеталя при С-20 (Hogenkamp et al., /. Med. Chem., (1997) 40: 61-72). Недостатком этого подхода является то, что добавляется, по меньшей мере, два дополнительных этапа к общей схеме синтеза: защита карбонила С-20, удаление защитной группы после введения ЗР-метильной группы.
Более важно то, что получают низкую стереоселективность, За и ЗР изомеры получают приблизительно в равных количествах. Это повышает себестоимость и сложность синтеза и понижает общий выход процесса.
Другой способ синтеза ганаксолона (1) представлен в патенте США No. 5,319,115 и в литературе (Не et. al., Zhongguo Xinyao Zazhi (2005), 14(8),1025-1026), где дион 2 реагирует с реагентом Кори (иодид триметилсульфоксония) и трет-бутоксидом калия в тетрагидрофуране посредством обратимой термодинамически контролируемой реакции (Johnson et al, J. Am. Chem. Soc, (1973), 95 (22), 7424-7431) для получения более стабильного эпоксидного изомера (1-((2'R,5S,8R,9S,10S,13S,14S,17S)-10,13-диметилгексадекагидроспиро [циклопента[а]фенантрен-3,2'-оксиран]-17-ил)этанон) при СЗ. Эпоксид восстанавливают в ряде условий, включающих нуклеофильное
раскрытие эпоксида иодидом калия и восстановление полученного иодида посредством гидрирования, и получают ганаксолон 1. Этот синтез требует разделения и очистки промежуточного эпоксида, а также умелого обращения и дорогостоящего этапа гидрирования, каждый из которых содействует удорожанию и удлинению процесса. Реакция реагента Кори с Дионом 2 с последующим восстановлением эпоксида дает побочный продукт 17-гидроксиганаксолон 8, который трудно удалить. Получая очищенный ганаксолон посредством схемы Кори, часто получают содержание 17-гидроксиганаксолона > 0.1% по ВЭЖХ.
Остается необходимость в эффективном, более дешевом синтезе, посредством которого получали бы ганаксолон высокой чистоты.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к простому и эффективному в финансовом отношении способу производства ганаксолона из 5а-прегнан-3,20-диона.
Авторы с удивлением обнаружили, что органометаллическое прибавление к 3,20-диону (2) можно проводить с неожиданно хорошими региоселективностью и стереоселективностью. Авторы обнаружили, что возможно достичь региоселективной реакции у СЗ карбонила Диона 2, при которой С-20 карбонил немного реагирует или не реагирует совсем, подбором подходящих реагентов и реакционных условий. Далее изобретатели подтвердили то, что подходящий выбор реагентов и условий может дать высокую стереоселективность экваториальной атаки метилирующего агента, чтобы получить желаемый бета-метиловый изомер ганаксолона. Таким образом, в первом аспекте изобретение относится к способу получения ганаксолона, включающего реагирование 5а-прегнан-3,20-диона (Дион 2) с органометаллическим метилирующим агентом в инертном растворителе с получением соединения формулы
(Ганаксолон),
где чистота ганаксолона более 80 процентов по ВЭЖХ.
Изобретение имеет также преимущество в получении ганаксолона с высоким выходом и по существу свободного от реакционных примесей. При подходящем использовании
органометаллического метилирующего агента это превращение может обладать неожиданно высоким химическим выходом с высоким региоселективным и стереоселективным контролем. При применении данного изобретения, не требуется защита С20 карбонила, и общее превращение осуществляется в одну стадию без необходимости отделять какие-либо интермедиаты.
Далее изобретение относится к способу получения ганаксолона, включающего реагирование 5а-прегнан-3,20-диона с органометаллическим метилирующим агентом в инертном растворителе для получения ганаксолона с чистотой, по меньшей мере, 99,5% по ВЭЖХ. В определенном воплощении, после одной стадии очистки полученный ганаксолон содержит менее 0,1 процента площади по ВЭЖХ любой реакционной примеси формул
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
ФИГУРА 1. Возможные продукты Органометаллического Присоединения Диона 2. Предыдущие способы получения ганаксолона непосредственным метилированием СЗ кетона диона 2 дают ганксолон и множество реакционных примесей, как изображено здесь.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Терминология
Перед изложением изобретения в деталях может быть полезным определение некоторых терминов, используемых здесь. Соединения настоящего изобретения описываются, используя стандартную номенклатуру.
Термин "или" означает "и/или". Термины "охватывающий", "имеющий", "включающий" и "содержащий" надо толковать как незавершенные термины (означающие "включающий, но не ограниченный"). Перечисление диапазонов значений служит просто в качестве краткого способа индивидуальной ссылки на каждое отдельное значение внутри диапазона, если не указано иначе, и каждое отдельное значение воплощено в определении как, если бы оно было бы индивидуально перечислено здесь. Предельные значения всех диапазонов включены в диапазон и сами по себе сочетаемы. Все описанные здесь способы могут приводиться в соответствующем порядке, если не указано иначе или если отчетливо не противоречат контексту. Использование любого или всех примеров или выражения (например, "такой как") предназначено для лучшего раскрытия изобретения и не ограничивает притязания, если не заявлено иначе. Выражения в детализации не нужно толковать как указывающие любые незаявленные элементы, как существенные к применению изобретения, как используется здесь. Если не определено иначе, технические и научные термины, используемые здесь, имеют те же значения, которые, в общем, понятны специалисту в данной области техники, к которой относится изобретение. "Низший алкокси" обычно имеет от 1 до около 6 атомов углерода и в некоторых предпочтительных воплощениях от 1 до около 3 атомов. "Съеденный комплекс" является солью, образованной реакцией кислоты Льюиса и основанием, где центральный атом в солевом комплексе повышает свою валентность. Примеры "съеденных комплексов" включают (CH3)3FeLi и (CH^FeMgCl. Используемый здесь термин "галогенид" является хлорид, бромид или иодид. Используемый здесь ВЭЖХ означает высокоэффективная жидкостная хроматография с детектором, основанным на обнаружении коэффициента оптического преломления, который описан в Экспериментальном Разделе.
"Процентно чистый" ("% чистота") относится к процентам площади, полученным делением площади ВЭЖХ пика ганаксолона на сумму площадей ВЭЖХ пика ганаксолона и ВЭЖХ пиков каждой реакционной примеси и умноженным на 100. "Процентный выход или выделенный выход (% выход)" является массой выделенного продукта(ов), деленного на молекулярную массу ганаксолона, деленную на количество молей исходного материала, используемого в реакции.
"Реакционные примеси" являются примесями процесса (побочные продукты), включающими все примеси исходных веществ, примеси промежуточных веществ и другие реакционные продукты, кроме обнаруженного ВЭЖХ ганаксолона. FDA
(Комиссия по контролю за лекарствами и питательными веществами) использует термин "связанные с процессом примеси" для описания примесей, производных от производственного процесса.
"Региоселективный" относится к любой органометаллической реакции метилирования с 5а-прегнан-3,20-дионом, в результате которой получают менее 10% С20 аддукта 6, указанного на фигуре 1.
"Стереоселективный" относится к любой органометаллической реакции метилирования с 5а-прегнан-3,20-дионом, в результате которой получают менее 10% нежелательного эпимерного побочного продукта 3 на Фигуре 1.
Переходные фразы "включающий", "в основном состоящий из" и "состоящие из" имеют значения, согласованные с терминами нынешнего патентного законодательства. Все воплощения, заявленные с одной из переходных фраз, могут также быть заявлены, используя другие переходные фразы. Например, воплощение, заявленное с "охватывающий" в качестве переходной фразы, также включает воплощения, которые могут быть заявлены с переходными выражениями "в основном состоящий из" или "состоящие из" и наоборот. Химическое описание
Данный предмет обсуждения страдает из-за существования способов синтеза ганаксолона, наиболее эффективным по себестоимости способ производства ганаксолона заключается в непосредственном метилировании СЗ кетона диона 2. Не очевидно то, что стереоселективная и региоселективная атака СЗ реагентом Кори посредством обратимого термодинамического процесса может быть применима к прямому необратимому присоединению органометаллического агента к диону 2. В результате этой реакции предполагают получение смеси продуктов. Это предположение вывели, исходя из Примера 1 Экспериментального Раздела, в котором дион 2 реагирует с метиллитием в тетрагидрофуране с получением сложной смеси продуктов (см. Фигура 1), которая содержит только около 11% желаемого продукта ганаксолона. Примесь процесса 7, представляют возможные олефиновые продукты дегидратации, тогда как примеси 4 и 5 относятся к кислотной среде, которая может индуцировать дегидратацию С21-гидроксигруппы. Примесь процесса 9 представляют собой возможно олефин, полученный дегидратацией С21-гидрокси группы в структуре 6 при добавлении кислоты.
Изобретатели раскрыли одноэтапный региоселективный и стереоселективный способ синтеза для получения ганаксолона. Исходными материалами для этого процесса
являются 5a -прегнан-3,20-дион, эффективный и дешевый способ получения которого известен. Реакцией предпочтительного органометаллического метилирующего агента в инертном растворителе с 5а -прегнан-3,20-дионом получают соответствующий ганаксолон в одну химическую стадию без всяких отделяемых промежуточных продуктов. Предпочтительный органометаллический метилирующий агент может быть очищенным и хорошо охарактеризованным материалом или смесь органометаллических веществ, полученных in situ. Реакцию можно проводить в любом инертном растворителе (или сочетания инертных растворителей), но более предпочтительно в простых эфирных растворителях такие как тетрагидрофуран, глим, трет-бутилметиловый эфир, 1,4-диоксан, диметоксиэтан или диэтиловый эфир. Также преимущественным является добавление неорганических солей, таких как галогениды лития, к реакционной смеси для дальнейшего улучшения реакционного выхода и уменьшения вязкости реакции, позволяющие использовать меньше инертного растворителя и увеличивать количество реагирующих веществ в реакционном сосуде. В общем региоселективность и стереоселективность реакции является функцией растворителя, температуры и состава металлоорганического метилирующего реагента. В одном воплощении изобретение включает способ получения ганаксолона, заключающийся во взаимодействии 5а-прегнан-3,20-диона с органометаллическим метилирующим агентом в инертном растворителе. В определенных воплощениях %выход ганаксолона составляет, по меньшей мере, 45%, по меньшей мере, 55%, по меньшей мере, 70%, по меньшей мере, по меньшей мере, 80%, по меньшей мере, 85%, по меньшей мере, 90% выхода. В определенных воплощениях чистота продукта За-гидрокси, Зр-метил-5а- прегнан-20-он составляет, по меньшей мере, 70%, по меньшей мере, 80%, по меньшей мере, 90% по меньшей мере, 95%, по ВЭЖХ. В определенных воплощениях количество реакционных примесей 3 - 8 на Фигуре 1 в виде процента от общих реакционных продуктов по ВЭЖХ составляет не более (НБ)20%, или НБ 10%, или НБ 5%, НБ 2%, НБ 1%> . Предпочтительно выход примесей составляет НБ 2% каждой, более предпочтительным НБ 1% каждой и еще более предпочтительным НБ 0,1%) по площади ВЭЖХ. Также предпочтительным является то, что выход примесей 5 и 6 взятых вместе составляет НБ 1%.
В одном воплощении органометаллический метилирующий агент получают добавлением от 2 до 5 эквивалентов галогенида метилмагния или метиллития к безводному хлориду железа (FeCb) (Reetz, М., et al., Tetrahedron Lett., (1192) 33(46): 6963-6966 and Reetz, M.T., et al, / . Chem. Soc, Chem. Comm., (1993) 328-330.) или к
безводному FeCl2 (Kauffmann, Т., et al., Chem. Ber. (1992) 125: 163-169) в инертной системе растворителей. Это дает несколько индивидуальных метилирующих реагентов, зависящие от стехиометрии, особенно MeFeCl, Me2Fe, МезРе- Y+ и Ме4 Fe^2"-* 2Y+ где Y является Li и/или MgX (Х= CI, Вг или I) в зависимости от того, используют метилмагний галогенид или метиллитий (или их сочетание) для получения реагента.
В другом воплощении железный метилирующий комплекс получают добавлением 3-4 эквивалентов галогенида метилмагния к раствору безводного хлорида железа в тетрагидрофуране, содержащем от 0 до 3 эквивалентов хлорида лития (на основе FeCb). Первый эквивалент галогенида метилмагния восстанавливает FeCb до FeCb. Когда используют 4 эквивалента галогенида метилмагния (на основе FeCb) метилирующий агент_предположительно представляет собой (МезРе- MgX+), хотя возможно метилирующий агент представляет собой более сложную смесь реагентов и противоионов.
В другом предпочтительном воплощении изобретения органометаллический метилирующий агент получают добавлением от 0.5 до 2 эквивалентов хлорида железа (на основе Диона 2), 3-4 эквивалента метилмагния хлорида (на основе FeCb) к раствору 0-2 эквивалентов LiCl (на основе FeCb) в тетрагидрофуране и поддерживая температуру ниже около -15°С.
В другом предпочтительном воплощении изобретения органометаллический метилирующий агент получают добавлением 3 эквивалентов галогенида метилмагния или метиллития к раствору/суспензии безводного хлорида железа в тетрагидрофуране при температуре ниже -15°С. В определенных воплощениях температуру реакции поддерживают от около -35°С до около -15°С пока реакция завершается. Метилирующий агент представляет собой предположительно (M^Fe), но может быть более сложной смесью разновидностей соединений железа. Оптимальной температурой реакции с Дионом 2 является температура от около -25°С до около 40°С. В другом предпочтительном воплощении изобретения органометаллический метилирующий агент получают добавлением от одного до четырех эквивалентов галогенида метилмагния или метиллития к титановому реагенту TiXYZT где X, Y, Z и Т одинаковые или разные и могут быть галогеном или алкокси с условием, что максимальное количество эквивалентов добавленного органометаллического реагента не больше количества галогенов в исходном титановом реагенте. Последующая
реакция с дионом 2 проводится в инертном растворителе и температура реакции между -40°С и 70°С.
В некоторых воплощениях способ синтеза ганксолона дополнительно охватывает добавление от около 2 до 4 эквивалентов галогенида метилмагния или метиллития к раствору безводного галогенида железа (III) или (II) в органическом растворителе и образование посредством этого органометаллического метилирующего агента(ов). В некоторых воплощениях способ синтеза ганксолона дополнительно охватывает добавление от около 0.1 до около 4 эквивалентов хлорида лития (на основе FeCb) к инертному растворителю до добавления 3-4 эквивалентов метилмагния хлорида (на основе FeCb) к инертному растворителю.
В некоторых воплощениях способ синтеза ганксолона дополнительно охватывает добавление около 1 эквивалента галогенида метилмагния или метиллития (на основе титана) к раствору три(СгС3алкокси)титана хлориду в органическом растворителе и получение вследствие этого органометаллического метилирующего агента. В некоторых воплощениях органометаллическим метилирующим агентом является диметилжелезо, метил триэтоксититан, хлорид метил диэтоксититана ((CH3)Cl(CH3CH20)2Ti), метил трихлоридтитан (СН3СЬTi), тетраметилтитан ((CH3)4Ti), диметилдихлортитан ((СН3)2 CbTi), тирметилхлортитан ((CH3)3ClTi), или метилжелезохлорид (CH3FeCl).
В других воплощениях органометаллический метилирующий агент является "съеденным комплексом", содержащим (CH3)3Fe~ анион и либо литий, либо MgX в качестве катиона, где X является галогеном.
В некоторых воплощениях способ синтеза ганаксолона дополнительно включает добавление около 1 эквивалента галогенида метилмагния или метиллития к раствору безводного дихлорида ди(СгС3алкокси) титана в органическом растворителе, получая тем самым органометаллический метилирующий агент.
В некоторых воплощениях способ синтеза За-гидрокси-Зр-метил-5а- прегнан-20-она дополнительно включает получение метилирующего агента, образованного добавлением от около 1 до около 4 эквивалентов галогенида метилмагния или метиллития к раствору TiCb в органическом растворителе.
В другом предпочтительном воплощении изобретения от 0,75 до 4 эквивалентов железосодержащего органометаллического метилирующего агента (на основе Диона 2) реагирует с дионом 2 в инертном растворителе.
В другом предпочтительном воплощении изобретения сырой ганаксолон очищают перемешиванием сырого продукта в горячем этилацетате, чтобы эффективно удалить реакционные примеси.
В Экспериментальном Разделе Таблица 1 подводит итог различных реакционных условий и стехиометрии с различными органометаллическими реагентами. Полезное преобразование Диона 2 в ганаксолон может производиться с использованием различных органометаллических реагентов в различных реакционных условиях. Таблица 2 резюмирует оптимизацию параметров, касающихся очистки неочищенного ганаксолона.
ПРИМЕРЫ
Аналитические методы Масс-спектрометрия
Масс-спектры получали в LC/MS системе, состоящей из HP 1100 LC модуля разделения, снабженного Thermo Finnigan LCQ-Deca масс детектором. Ионным источником является ESI+/MS. Условия LC (жидкостная хроматография) приведены ниже.
Колонка: Waters Sunfire CI8, 4.6(ID) x 250(L) мм, 5 мкм
Подвижная фаза: ACN/MeOH/H20 = 65/5/30 (Isocratic)
Время прохождения: 40 мин
Скорость потока: 1 мл/мин
Температура колонки: окружающей среды
Детектор: RI
Температура детектора: 40°С Объем введения: 50 мкл.
ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография)
Анализы ВЭЖХ проводились на системе HITACHI L-2000 или на разделительном модуле Waters 2695, снабженном рефракционным детектором (RI). Условия приведены ниже:
Колонка: Waters Sunfire С18, 4.6(ID) х 250(L) мм, 5 мкм Подвижная фаза: ACN/MeOH/H20 = 65/5/30 (Isocratic) Время прохождения: 40 мин Скорость потока: 1 мл/мин Температура: окружающей среды
Температура детектора: 40°C Объем введения: 50 мкл
Концентрации вводимого образца составляет от 0,1 до 1мг/мл в метаноле. ЯМР спектроскопия
ЯМР спектры получали на Bruker Avance 400 или на спектрометре Oxford 300 NMR в
CDCb или в других дейтерированных растворителях.
Чистота
Чистота сырого и очищенного ганаксолона выражается процентом площади для каждой реакционной примеси и относительным временем удерживания (ОВУ) по анализу ВЭЖХ желаемого продукта. Выходы (%) выражены как выделенные конечные продукты. Пример 1.
Безводный тетрагидрофуран (190 г) и 5а-прегнан-3,20-дион (1.0 г, 3.16 ммоль) загружали в трехгорлую кругл о донную колбу в атмосфере азота, чтобы получить прозрачный раствор. После этого колбу охлаждали до -30 °С (внутренняя температура), при этой температуре добавляли раствор метиллития в диэтоксиэтане (ЗМ, 1.1 мл, 3.3 ммоль) через шприц. Реакцию перемешивали при температуре от -25 до -20 °С в атмосфере азота один час. Смесь гасили 3N НС1 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали 3N NaOH и водой. Удаление растворителя давало белое твердое вещество, которое растворяли в метаноле и анализировали с помощью ВЭЖХ (Таблица 1, способ 1). Пример 2.
Трет-бутил метиловый эфир (безводный, 30 мл) охлаждали до -10° С и добавляли по каплям к хорошо перемешиваемой суспензии 5а-прегнан-3, 20-диона (1.9 г, 6 ммоль). Реакционную смесь выдерживали при температуре от 0°С до 10°С 4 часа и 12 часов при температуре 10-15°С. Реакционную смесь гасили добавлением 100 мл 2N НС1 и продукт экстрагировали 200 мл этилацетата. Органический слой промывали 2N NaOH и рассолом, растворитель удаляли под пониженным давлением и получали сложную смесь продуктов, содержащую 30,1% ганаксолона 1 по ВЭЖХ наряду с 0,99% исходного 5а-прегнан-3, 20-диона 2 (Таблица 1, способ 2). Пример 3.
Тетрахлорид титана (350 мл, 3.2 ммоль) прикапывали к раствору тетраэтоксида титана (2.42 г, 10.6 ммоль) в тертагидрофуране (безводный, 30 мл) охлажденного до 0°С. После перемешивания в течение 20 мин при 0°С прикапывали раствор хлорида
метилмагния в тетрагидрофуране, поддерживая температуру ниже 5°С. После дополнительного перемешивания в течение 20 минут при 5°С добавляли одной порцией 5а-прегнан-3, 20-дион (2.53 г, 8 ммоль). Реакцию нагревали до 40°С и перемешивали 4 часа. Реакционную смесь гасили 20 мл метанола и растворитель удаляли в вакууме. Реакционную смесь распределяли между 100 мл 3N НС1 и 100 мл этилацетата. Органический слой промывали 1N гидроксидом натрия и рассолом и растворитель упаривали под пониженным давлением, получая сырой ганаксолон в виде белого твердого вещества с содержанием ганаксолона 75,9% по ВЭЖХ (Таблица 1, способ 3). Пример 4.
Раствор хлорида железа (III) (безводный, 2.14 г, 13 ммоль) в терагидрофуране (безводный, 40 мл) охлаждали до -50°С. К этой смеси прикапывали хлорид метилмагния (ЗМ, 17.6 мл, 52.8 ммоль) в тетрагидрофуране, поддерживая внутреннюю температуру ниже -40°С. После 10 мин выдерживания при -40°С добавляли одной порцией 5а-прегнан-3, 20-дион (3.48 г, 11 ммоль) при перемешивании. Температуру подводили к -20°С в течение 30 минут и перемешивали 2 часа. Реакционную смесь гасили 100мл 2N НС1 и продукт экстрагировали 100 мл этилацетата. Органический слой промывали 2N NaOH и рассолом и растворитель упаривали в вакууме, получая сырой ганаксолон (80,2% чистоты по ВЭЖХ (Таблица 1, способ 4). Пример 5.
Смесь хлорида железа (III) (безводный, 1.63 г, 10.6 ммоль) и терагидрофурана (безводный, 35 мл) охлаждали до -50°С в атмосфере азота. Метиллитий (ЗМ, 3.4 мл, 10.2 ммоль) в диэтоксиметане добавляли к смеси хлорида железа (III), поддерживая температуру ниже -40°С. После завершения этого добавления раствор хлорида метилмагния (ЗМ, 10.1 мл, 30.18 ммоль) в тетрагидрофуране добавляли, поддерживая внутреннюю температуру ниже -40°С. После 10 мин выдерживания при -40°С добавляли одной порцией 5а-прегнан-3, 20-дион (2.84 г, 9 ммоль) при перемешивании. Температуру подводили к -20°С и перемешивали 3,5 часа. Реакцию гасили добавлением 3 мл уксусной кислоты и упаривали тетрагидрофуран при пониженном давлении. Остаток распределяли между 100 мл 3N НС1 и 200мл этилацетата. Органический слой промывали 1N гидроксидом натрия и рассолом и упаривали растворитель при пониженном давлении, получая сырой ганаксолон (94,8% чистоты по ВЭЖХ (Таблица 1, способ 5).
Пример 6.
В колбу заливали безводный раствор хлорида лития в тетрагидрофуране (0.5М, 100 мл, 50 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли безводный хлорид железа (III) (5.61 г, 34.6 ммоль) по частям, поддерживая температуру ниже 10°С. Полученный бледно-зеленый раствор охлаждали до -35°С и добавляли раствор хлорида метилмагний в тетрагидрофуране (ЗМ, 47 мл, 141 ммоль), поддерживая температуру ниже -30°С. После завершения прибавления, реакционную смесь охлаждали до -35°С и добавляли 5а-прегнан-3, 20-дион (10 г, 31.65 ммоль) при перемешивании, поддерживая температуру ниже -25°С. Реакции давали нагреться до -20°С и перемешивали при температуре от -18°С до -22°С 3 часа. К этому времени в реакционной смеси присутствовало 0,96% исходного материала по ВЭЖХ и 94,46%) ганаксолона (Таблица 1, способ 6). Реакцию гасили медленным добавлением 225 мл 3N НС1, поддерживая температуру ниже 25°С. После завершения прибавления, полученная суспензия ганаксолона гранулировалась в течение ночи в атмосфере азота. Реакционную смесь фильтровали и осадок промывали поочередно 50 мл 20% TTO/3N НС1, 50 мл 3N НС1 и дважды по 50 мл воды. Осадок высушивали в вакуумной печи при 70°С, получая 9,54 г (91% выход) 99% чистого ганаксолона 1 в виде белого твердого вещества. Пример 7.
Тетрагидрофуран (безводный, 35 мл) охлаждали до 10°С и одной порцией добавляли 907 мг (21.4 ммоль) хлорида лития (безводный). Смесь перемешивали 10 минут, после чего получали прозрачный раствор. К этой смеси добавляли хлорид железа (III) (безводный, 1.62 г, 10 ммоль) одной порцией и дополнительно перемешивали 5 минут. После этого реакционную смесь охлаждали до -35°С и прикапывали хлорид метилмагния (ЗМ, 13.3 мл, 40 ммоль) в тетрагидрофуране, поддерживая внутреннюю температуру между -35°С и -30°С. После завершения прибавления, перемешивание продолжали 10 минут при -30°С и добавляли одной порцией 5а-прегнан-3, 20-дион 2 (2.85 г, 9 ммоль) при перемешивании. Внутренней температуре позволяли подняться до -20°С и поддерживали ее между -15°С и -20°С в течении 2 часов. ВЭЖХ анализ показал наличие 1,2% исходного материала и 95,3% ганаксолона (Таблица 1, способ 7).
Пример 8.
Хлорид лития (1.43 г, 33.8 ммоль) добавляли к тетрагидрофурану (безводный, 40 мл) при 10°С и перемешивали до получения раствора. Добавляли хлорид железа (III) (безводный, 1.63 г, 10.06 ммоль) и перемешивали 5 минут. Потом реакционную смесь
охлаждали до -35°C и добавляли раствор хлорида метилмагния (ЗМ, 13.4 мл, 40.24 ммоль) в тетрагидрофуране, поддерживая внутреннюю температуру между -35°С и -25°С. После добавления продолжали перемешивание в течение 10 минут при -30°С и добавляли одной порцией 5а-прегнан-3, 20-дион (3.0 г, 9.5 ммоль) при перемешивании. Внутренней температуре позволяли подняться до -20°С и поддерживали ее между -15°С и -20°С при перемешивании в течение 2 часов. ВЭЖХ анализ показал наличие 1,47% исходного материала и 94,25% ганаксолона (Таблица 1, способ 8). Пример 9.
ТГФ (безводный, 190 г), LiCl (безводный, 4.2 г, 0.100 моль), и FeCl3 (безводный, 10.8 г, 0.066 моль) загружали в сухую трехгорлую круглодонную колбу объемом 500 мл в атмосфере азота. Добавляли MeMgCl (ЗМ, 84.4 мл, 0.253 моль) в тетрагидрофуране, поддерживая внутреннюю температуру между 0°С и 15°С. После завершения прибавления добавляли одной порцией 5а-прегнан-3,20-дион (20 г, 0.0633 моль) и образующуюся смесь перемешивали, поддерживая температуру между 0°С и 15 °С в атмосфере N2. За ходом реакции наблюдали по ВЭЖХ следующим образом: порцию гасили 3N НС1 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали 3N NaOH и водой. Растворитель упаривали и получали белое твердое вещество, которое растворяли в метаноле и анализировали при помощи ВЭЖХ (Таблица 1, способ 9). Пример 10.
ТГФ (безводный, 80 г) и LiCl (безводный, 2.12 г, 50 ммоль) загружали в сухую трехгорлую круглодонную колбу объемом 500 мл. Колбу охлаждали до -10 °С и добавляли FeCb (безводный, 5.63 г, 34.8 ммоль). Смесь охлаждали до -35 °С в атмосфере азота. Добавляли медленно раствор MeMgCl в тетрагидрофуране (ЗМ, 58 мл, 174 ммоль), поддерживая внутреннюю температуру между -27°С и -35°С во время прибавления. После прибавления, добавляли 5а-прегнан-3,20-дион (Юг, 31.6 ммоль) одной порцией и полученную смесь перемешивали при температуре от -25°С до -20 °С в атмосфере азота. За ходом реакции наблюдали по ВЭЖХ следующим образом: набирали порцию, гасили 3N НС1 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали 3N NaOH и водой и упаривали до сухого состояния. Белый остаток растворяли в метаноле и анализировали при помощи ВЭЖХ (Таблица 1, способ 10).
Пример 11.
ТГФ (безводный, 120 г) и LiCl (безводный, 2.12 г, 50 ммоль) загружали в сухую трехгорлую круглодонную колбу объемом 500 мл. Колбу охлаждали до -10 °С и добавляли FeCb (безводный, 1.28 г, 7.9 ммоль). Смесь охлаждали до -35 °С в атмосфере азота. Добавляли медленно раствор MeMgCl в тетрагидрофуране (ЗМ, 13.3 мл, 39.9 ммоль), поддерживая внутреннюю температуру между -27°С и -35°С во время прибавления. После прибавления, добавляли 5а-прегнан-3,20-дион (Юг, 31.6 ммоль) одной порцией и полученную смесь перемешивали при температуре от -25°С до -20 °С в атмосфере азота. За ходом реакции наблюдали по ВЭЖХ следующим образом: набирали порцию, гасили 3N НС1 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали 3N NaOH, водой и упаривали до сухого состояния. Белый остаток
растворяли в метаноле и анализировали при помощи ВЭЖХ (Таблица 1, способ 11).
Пример 12A.
ТГФ (безводный, 9.65 кг) и LiCl (безводный, 0.21 кг) загружали в 50-ти литровый реактор Hastelloy, который продували N2. Смесь охлаждали до -10°С и перемешивали в атмосфере N2 в течении 1 часа. FeCh (безводный, 0.515 кг) загружали в реактор при перемешивании и реакционную смесь охлаждали до -35°С. MeMgCl (3.0М, 4.04 кг) в тетрагидрофуране медленно загружали в реактор при перемешивании, поддерживая внутреннюю температуру -35°С. После завершения прибавления реакцию перемешивали при -35°С один час. 5а-Прегнан-3, 20-дион (1.00 кг) загружали в реактор, поддерживая внутреннюю температуру около -35°С. После добавления реакцию нагревали до -21°С в течение одного часа и перемешивали при этой же температуре в течение одного часа. Ледяную уксусную кислоту медленно загружали в реактор (1 час) и реакцию нагревали до около 25°С (1 час). ТГФ упаривали при уменьшенном давлении при температуре рубашки 35°С до конечного объема реакции 7,8 л. Остаток охлаждали до около 0°С с последующим медленным добавлением 3N НС1 (13.86 кг), поддерживая внутреннюю температуру ниже 25°С. Реакционную смесь перемешивали при 25°С 6 часов. Твердое вещество собирали фильтрованием и осадок промывали один раз 25% ТГФ в воде (вес/вес, 4.89 кг) и четыре раза водой (5.0 кг), за которой следовала последняя промывка 25%> ТГФ/вода (вес/вес, 4.86 кг). Влажный осадок высушивали в вакууме при 50°С и получали сырой ганаксолон (0.983кг) 95.5% чистоты по ВЭЖХ (Таблица 2, способ 1). Пример 12В.
В двухлитровую трехгорлую круглодонную колбу, снабженную механической мешалкой, градуированной капельной воронкой на 500 мл и термометром для низких температур, загружали безводный тетрагидрофуран (ТГФ) (950 г) в атмосфере азота. Колба охлаждалась в холодной бане до около 0 °С (внутренняя температура), после чего загружали одной порцией хлорид лития (безводный, 21.2 г, 0.5001 моль). Смесь перемешивали, чтобы твердые вещества растворились, охлаждая в то же время до -30 °С. Хлорид метилмагния (ЗМ, 394.2 г, 1.171 моль) в тетрагидрофуране добавляли медленно через капельную воронку, поддерживая внутреннюю температуру между -30°С и -25 °С. 5а-Прегнан-3, 20-дион (100 г, 0.3165 моль) добавляли в одну порцию и реакцию перемешивали при температуре от -25 °С до -20 °С в атмосфере азота до ее завершения (5 часов) ( <3%> площади по ВЭЖХ).
После завершения реакции добавляли уксусную кислоту (320 мл). Смесь перемешивали до образования раствора. ТГФ упаривали при пониженном давлении и
получали кашеобразную смесь (1016 г), которую перемешивали в 3N НО (1250 мл) в течении 6 часов. Полученную суспензию охлаждали на водно-ледяной бане в течение 2 часов и фильтровали на вакуумном фильтре. Сырой осадок промывали холодным 20% ТГФ раствором в воде (вес/вес, 100мл) и водой (200 мл х 3), получая сырой ганаксолон в виде мокрого белого твердого вещества (144 г) 97.33% чистоты по ВЭЖХ (Таблица 2, способ 4). Пример 12С.
ТГФ (безводный, 106 мл), LiCl (безводный, 2.1 г, 0.050 моль) и FeCb (безводный, 5.1 г, 0.0317 моль) загружали в сухую трехгорлую круглодонную колбу объемом 250 мл. Смесь перемешивали в атмосфере азота, охлаждая ее в то же время до около -25 °С. Исходное вещество 5а-прегнан-3, 20-дион (10 г, 0.0316 моль) добавляли одной порцией и полученную суспензию перемешивали 5 минут. Реагент Гриньяра MeMgCl (ЗМ, 39 мл, 0.117 моль) в тетрагидрофуране добавляли медленно, поддерживая внутреннюю температуру между -25°С и -20 °С. После добавления темно-коричневую реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота при этой же температуре всю ночь. Анализ ВЭЖХ показал завершение реакции с содержанием остаточного диона менее 1,37% и ганаксолона 92.71%.
Реакцию гасили добавлением уксусной кислоты (32 мл). Темно-коричневую смесь перемешивали, до нагревания, и получали светло-коричневый раствор. Раствор концентрировали на роторном испарителе и получали зеленоватый остаток (82 г), который перемешивали в 3N НС1 (125 мл) при температуре окружающей среды в течение часа. Суспензию фильтровали под вакуумом. Мокрый осадок промывали водой (50 мл х 2) и сушили высасыванием. Мокрый ганаксолон-сырец растворяли в ТГФ (са 70%). Во время кипячения с обратным холодильником добавляли воду (150 мл). Белую суспензию кипятили с обратным холодильником при перемешивании 10 минут. Потом ее охлаждали на ледяной бане в течение часа. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили высасыванием.
К мокрому твердому веществу добавляли этилацетат (50 мл) с получением кашицы нагревали при 70 °С 8 часов и охлаждали на ледяной бане 1 час. Твердое вещество отфильтровывали и промывали холодным этилацетатом (10 мл). После высушивания при 50 °С в вакууме, получали очищенный ганаксолон (8.3 г, 79% выход). Пример 13А. Очистка неочищенного ганаксолона
Неочищенный ганаксолон из Примера 12А (20 г) перемешивали с этилацетатом (120 мл) при 70 °С в течение 18 часов. Продукт отфильтровывали, промывали 20 мл смесью
2-пропанол/вода (1:1, об/об), сушили и получали 16,6 г ганаксолона. Чистота очищенного ганаксолона была 99,71% с одной большой примесью в количестве 0,07%> (Таблица 2, способ 2). Пример 13В. очищенный ганаксолон
Очищенный ганаксолон, полученный способом, представленным в Примере 13А (100 г) растворяли в горячем ТГФ (700 мл). Раствор отфильтровывали горячим через фильтр размера 0,45мкм (для удаления нерастворимых материалов). Раствор концентрировали удалением около 370 мл ТГФ и остаток нагревали для получения прозрачного раствора. Во время кипячения с обратным холодильником добавляли медленно воду (450 мл) для осаждения. Нагревание прекращали и реакцию перемешивали при 25°С в течение 2 часов. Реакцию далее перемешивали при 0°С в течение 2 часов. Твердое вещество собирали фильтрованием, сушили и получали 96 г ганаксолона 97,2% чистоты. Порцию очищенного ганаксолона (20 г) дополнительно очищали перемешиванием в этилацетате (100 мл) при 70°С в течении 19 часов. Ганаксолон охлаждали, перемешивали при 5°С в течение около 2 часов и фильтровали. После высушивания получали чистый ганаксолон (17 г) чистотой 99,83%, в котором одна самая большая примесь составляла 0,07%> (Таблица 2, способ 3). Пример 13С.
Мокрый неочищенный ганаксолон (140 г) из Примера 12В перемешивали в смеси этилацетата (630 мл) и 2-пропанола (70 мл) при 55 °С в течение 8 часов, охлаждали до температуры окружающей среды и далее охлаждали на бане лед-вода в течение 2 часов. Суспензию отфильтровывали под вакуумом, промывали 50 мл холодной смеси этил ацетат/2-пропанол/вод а (9:1:0.7, об/об/об), сушили в вакуумной печи при 60°С до постоянной массы (76.2 г, 74.4% выход ). Чистота составляет 99,81%, где одна самая большая примесь составляет 0,07% (Таблица 2, способ 5). Пример 13D.
Неочищенный ганаксолон (9 г) с показателями чистоты, указанными в Таблице 2, способ 6, полученный способом подобным тому, который описан в Примере 12А, растворяли в смеси этилацетата (27 мл) и 2-пропанола (63 мл) при кипячении с обратным холодильником. Добавляли очищенную воду (45 мл) и полученную суспензию перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 10 минут. Нагревание прекращали и суспензию охлаждали на ледяной бане в течение 1 часа. Твердое вещество отфильтровывали. Мокрый осадок промывали 40 мл смеси 2-пропанол/вода(1/2, об/об), сушили при 60°С в вакууме в течение 63 часов и получали
7,78 г очищенного ганаксолона. Его чистота составляла 99,81%, где одна самая большая примесь составляла 0,07% (Таблица 2, способ 7). Пример 13Е.
Неочищенный ганаксолон с характеристикой чистоты, указанной в Таблице 2, способ 8, получали способом подобным тому, который описан в Примере 12А, за исключением того, что добавляли меньше FeCb. Сырой продукт (30 г) растворяли в тетрагидрофуране (210 мл) при кипячении с обратным холодильником. Раствор фильтровали горячим через фильтровальную бумагу, чтобы удалить нерастворимые материалы. Прозрачный фильтрат концентрировали при пониженном давлении до того, как оставалось приблизительно 100 г тетрагидрофурана. Взвесь кипятили с обратным холодильником до растворения. Медленно добавляли воду (135 г) при кипячении с обратным холодильником. Белую суспензию перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 30 минут и прекращали нагревание. Суспензию охлаждали до комнатной температуры и далее охлаждали на ледяной бане в течение 1 часа. Твердое вещество отфильтровывали, сушили при 50 °С в вакууме в течение ночи и получали продукт с выходом 28, 5 г.
Полученное выше твердое вещество (28,5 г) перемешивали в этилацетате (285 мл) при 70°С в течение 4 часов. Твердое вещество перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и охлаждали на ледяной бане в течение 2 часов. Твердое вещество отфильтровывали, промывали холодным этилацетатом (10 мл), сушили при 50 °С в вакууме в течение ночи и получали 21,5 г продукта. Этот материал перемешивали дополнительно два раза в этилацетате (5 мл/г твердого вещества, 4 часа перемешивания) при 70°С с последующим охлаждением до 10°С, фильтровали и получали 17,5 г (58,3% выход) очищенного ганаксолона. Его чистота составляла 99,86%, где одна самая большая примесь составляла 0,06%> (Таблица 2, способ 9).
го сэ
го со 20
5' ф
Q. ГО
Таблица 2. Характеристики чистоты партий Ганаксолона до и после очистки
Характеристики чистоты
Прегнанолон*
20-диметил-20-гидрокси-5а-прегнан-3-ол**
З-Эпи (3)
3,20-дион 2
З-Эпи С-20
Метилир
ование
(5)
С-20
метилиро вание(б)
GNX 1
7***
способ
RRT
0.57
0.63
0.68
0.75
0.82
0.9
1.00
1.09
1.44
1.63
1.77
2.27
2.41
2.78
Пример 12А (неочищенный)
0.46
0.08
0.86
0.20
95.57
1.35
0.08
0.43
0.12
0.47
0.33
Пример 13А (очищенный)
0.05
0.07
0.05
0.03
99.71
0.07
Пример 1ЗВ (очищенный)
0.02
0.07
0.01
99.83
0.07
Пример 12В (неочищенный)
0.43
0.07
0.68
0.08
97.33
0.59
0.06
0.08
0.67
Пример 1ЗС (очищенный)
0.03
0.04
0.05
99.81
0.06
Пример 13D (неочищенный)
0.27
0.08
0.45
0.45
97.97
0.31
0.09
0.38
Пример 13D (очищенный)
0.07
0.08
0.07
0.03
99.69
0.06
Пример 1ЗЕ (очищенный)
0.45
0.03
0.59
0.57
0.05
0.03
88.79
9.23
0.06
0.07
0.12
Пример13Е (очищенный)
0.03
0.06
99.86
0.06
* Полученный из 5а-Прегнан-3, 20-диона; ** Вероятно полученный метилированием С20 карбонила прегнанолона; *** 20-ОН продукт дегидратации примеси 4; НП: Неизвестный продукт; ND: Не обнаружен
о го
6 со
го о
го го о
-si
о го
Пример 14.
5а-Прегнан 3,20-дион (10 г) вводили в реакцию с реагентом, полученным реакцией FeCb (5.2 г) и MeMgCl (4 эквивалента, на основе FeCb) в безводном тетрагидрофуране (200 мл) при -25°С в течение 3 часов. Реакцию гасили уксусной кислотой (32 мл). Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток перемешивали с 3N НС1 в течение 6 часов. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой, сушили при 50 °С в вакууме и получали неочищенный ганаксолон. Неочищенный продукт растворяли в ТГФ (33 мл) при кипячении с обратным холодильником и отфильтровывали горячим. К фильтрату добавляли воду (45 мл) и получали суспензию, которую отфильтровывали, промывали водой и сушили. Далее сухой продукт перемешивали с этилацетатом (50 мл) с получением суспензии и нагревали при 70 °С в течение 19 часов. Суспензию охлаждали до 0 °С, фильтровали, промывали холодным этилацетатом, сушили и получали ганаксолон. Пример 15.
5а-Прегнан 3,20-дион (10 г) вводили в реакцию с реагентом, полученным реакцией FeCb (5.2 г) и MeMgCl (4 эквивалентов, на основе FeCb) в диоксане (безводный, 200 мл) при -25°С в течение 5 часов. Реакцию гасили уксусной кислотой (32 мл). Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток перемешивали с 3N НС1 в течение 6 часов. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой, сушили при 50°С в вакууме и получали неочищенный ганаксолон. Неочищенный продукт растворяли в ТГФ (33 мл) при кипячении с обратным холодильником и отфильтровывали горячим. К фильтрату добавляли воду (45 мл) и получали суспензию, которую отфильтровывали, промывали водой и сушили. Далее сухой продукт перемешивали с этилацетатом (50 мл) с получением суспензии и нагревали при 70 °С в течение 19 часов. Суспензию охлаждали до 0 °С, фильтровали, промывали холодным этилацетатом. Стадию с суспензией в этилацетате повторяли еще раз и получали очищенный ганаксолон. Пример 16.
5а-Прегнан-3,20-дион (10 г) вводили в реакцию с реагентом, полученным реакцией FeCb (5.2 г) и MeMgCl (4 эквивалентов, на основе FeCb) в трет-бутил метиловом эфире (безводный, 200 мл) при -25°С в течение 3 часов. Реакцию гасили уксусной кислотой (32 мл). Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток
перемешивали с 3N HC1 в течение 6 часов. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой, сушили при 50 °С в вакууме и получали неочищенный ганаксолон. Неочищенный продукт растворяли в ТГФ (33 мл) при кипячении с обратным холодильником и отфильтровывали горячим. К фильтрату добавляли воду (45 мл) и получали суспензию, которую отфильтровывали, промывали водой и сушили. Далее сухой продукт перемешивали с этилацетатом (50 мл) с получением суспензии и нагревали при 70 °С в течение 19 часов. Суспензию охлаждали до 0 °С и отфильтровывали, промывали холодным этилацетатом. Стадию с суспензией в этилацетате повторяли и получали очищенный ганаксолон. Пример 17.
Хлорид железа (II) (4 г) вводили в реакцию с MeMgCl (3 эквивалента, на основе FeCl2) в ТГФ (безводный, 200 мл) при -25 °С в атмосфере азота. К этой смеси потом добавляли 5а-прегнан 3,20-дион (10 г). Смесь перемешивали при -25 °С в течение 4 часов и гасили добавлением уксусной кислоты (32 мл). Смесь концентрировали в вакууме и остаток перемешивали в 3N НС1 (200 мл) в течение 6 часов. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили. Неочищенный продукт растворяли в ТГФ (33 мл) при кипячении с обратным холодильником и фильтровали горячим. Фильтрат перемешивали с водой (45 мл), твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили. Далее твердое вещество перемешивали с этилацетатом (50 мл) с получением суспензии и нагревали при 70 °С в течение 19 часов. Суспензию охлаждали до 5°С, отфильтровывали, промывали холодным этилацетатом, сушили и получали ганаксолон. Пример 18.
Хлорид железа (II) (4 г) вводили в реакцию с MeLi (3 эквивалента, на основе FeCb) в толуоле (безводный, 200 мл) при -25 °С в атмосфере азота. К этой смеси потом добавляли 5а-прегнан-3,20-дион (10 г). Смесь перемешивали при -25 °С в течение 5 часов. Реакцию гасили добавлением уксусной кислоты (32 мл). Смесь концентрировали в вакууме и остаток перемешивали в 3N НС1 (200 мл) в течение 6 часов. Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили. Неочищенный продукт растворяли в ТГФ (33 мл) при кипячении с обратным холодильником и фильтровали горячим. Фильтрат перемешивали с водой (45 мл), твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили. Далее твердое вещество перемешивали с этилацетатом (50 мл) с получением суспензии и нагревали при 70 °С в течение 8
Printed: 24-07-2013 DESCRUS 201270241
часов. Суспензию охлаждали до 5°С, отфильтровывали, промывали холодным этилацетатом, сушили и получали ганаксолон.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Способ получения За-гидрокси-Зр-метил-5а- прегнан-20-она (ганаксолона), включающий взаимодействие 5а-прегнан-3,20-диона (Дион 2) с органометаллическим метилирующим агентом в инертном растворителе с получением ганаксолона, в котором чистота ганаксолона составляет более 80 процентов по площади ВЭЖХ.
2. Способ получения За-гидрокси-ЗР-метил-5сх- прегнан-20-она (ганаксолона), включающий взаимодействие 5а-прегнан-3,20-диона (Дион 2) с органометаллическим метилирующим агентом в инертном растворителе с получением ганаксолона, где выход ганаксолона составляет более 80%.
3. Способ получения За-гидрокси-ЗР-метил-5а- прегнан-20-она (ганаксолона), включающий взаимодействие 5а-прегнан-3,20-диона (Диона 2) с органометаллическим метилирующим агентом в инертном растворителе с получением ганаксолона, где полученный ганаксолон содержит менее чем 2% по площади ВЭЖХ любой реакционной примеси.
6. Способ по п. 4, в котором полученный ганаксолон содержит менее чем 0.1% по площади ВЭЖХ примеси формулы
4. Способ по п. 3, дополнительно включающий нагревание полученного ганаксолона в органическом растворителе для получения очищенного ганаксолона, где очищенный ганаксолон содержит менее чем 0.1 % по площади ВЭЖХ любой реакционной примеси.
5. Способ по п. 4, в котором полученный ганаксолон содержит менее чем 0.1% по площади ВЭЖХ примеси формулы
1.
7. Способ по п. 4, в котором полученный ганаксолон содержит менее чем 0.5% по площади ВЭЖХ примеси формулы
Н3С й
8. Способ по п. 4 , в котором инертным растворителем является этилацетат, и количество используемого этилацетата составляет от 4 до 15 раз больше массы ганаксолона, который должен быть очищен.
9. Способ по п. 1, дополнительно включающий нагревание полученного ганаксолона в органическом растворителе, в котором чистота полученного очищенного ганаксолона составляет более 99% по ВЭЖХ.
10. Способ по п. 1, дополнительно включающий нагревание полученного ганаксолона в органическом растворителе, при этом процентный выход очищенного ганаксолона составляет более чем 55%.
11. Способ по п. 1, дополнительно включающий добавление от около 2 до около 4 эквивалентов галогенида метилмагния или метиллития к раствору безводного хлорида железа (III) или безводного хлорида железа (II) в органическом растворителе, при этом образуется органометаллический метилирующий агент(ы).
12. Способ по п. 1, дополнительно включающий добавление от 0.1 до 4 эквивалентов хлорида лития (на основе FeCb) к галогениду железа в инертном растворителе перед добавлением органометаллического метилирующего агента.
13. Способ по п. 1, дополнительно включающий образование органометаллического метилирующего агента добавлением около 1 эквивалента галогенида метилмагния или метиллития к раствору хлорида три(С1-Сзалкокси) титана в органическом растворителе, при этом образуется органометаллический метилирующий агент.
14. Способ по п. 1, где органометаллическим метилирующим агентом является диметилжелезо (Me2Fe), метил триэтоксититан, метил диэтоксититана хлорид ((СНз)С1(СНзСН20)2Т1), метилтитантрихлорид (CH3CI3T1), тетраметилтитан ((СНз^ТГ), диметил титана дихлорид ((CFb^Ti), триметил титана хлорид ((СНз)зСГП), или метил железа хлорид (CFbFeCl).
15. Способ по п. 1, в котором органометаллический метилирующий агент представляет собой "съеденный комплекс", содержащий анион (Ме)зРе' и или литий или MgX в качестве катиона, где X является галогенидом.
16. Способ по п. 1, дополнительно включающий добавление около 1 эквивалента галогенида метилмагния или метиллития к раствору безводного ди(Сг Сзалкокси) титана дихлорида в органическом растворителе, при этом образуется органометаллический метилирующий агент.
17. Способ по п. 1, дополнительно включающий добавление от около 1 до около 4 эквивалентов галогенида метилмагния или метиллития к раствору TiCL; в органическом растворителе, при этом образуется органометаллический метилирующий агент.
18. Способ по п. 1, в котором инертным растворителем является тетрагидрофуран, глим, трет-бутил метиловый эфир, 1,4-диоксан, диметоксиэтан или диэтиловый эфир.
10.
19. Способ по п. 1, в котором хлорид метилмагния используют для получения метилирующего агента.
20. Способ по п. 1, в котором метиллитий используют для получения метилирующего агента.
21. Способ по п. 1, в котором температуру инертного растворителя поддерживают от около -40°С до около 35°С в ходе реакции.
22. Способ по п. 1, в котором инертным растворителем является тетрагидрофуран и его температура поддерживается менее, чем около -15°С в ходе реакции.
10.
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
1/23
02-03-2012
1/23
02-03-2012
(19)
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
1/23
02-03-2012
1/23
02-03-2012
(19)
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
1/23
02-03-2012
1/23
02-03-2012
(19)
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
1/23
02-03-2012
1/23
02-03-2012
(19)
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
2/23
02-03-2012
1/23
02-03-2012
(19)
Printed: 24-07-2013 DESCRUS 201270241
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
3/23
02-03-2012
2/23
02-03-2012
Printed: 24-07-2013 DESCRUS 201270241
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
3/23
02-03-2012
2/23
02-03-2012
Printed: 24-07-2013 DESCRUS 201270241
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
3/23
02-03-2012
4/23
02-03-2012
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
5/23
02-03-2012
5/23
02-03-2012
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
15/23
02-03-2012
15/23
02-03-2012
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
DESCRUS
201270241
Printed: 24-07-2013
16/23
02-03-2012
16/23
02-03-2012
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
DESCRUS
Printed: 24-07-2013
21/23
02-03-2012
21/23
02-03-2012
23/23
02-03-2012
23/23
02-03-2012
201270241
CLMSRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
CLMSRUS
Printed: 24-07-2013
1/4
02-03-2012
1/4
02-03-2012
201270241
CLMSRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
CLMSRUS
Printed: 24-07-2013
2/4
02-03-2012
2/4
02-03-2012
201270241
CLMSRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
CLMSRUS
Printed: 24-07-2013
3/4
02-03-2012
3/4
02-03-2012
201270241
CLMSRUS
Printed: 24-07-2013
201270241
CLMSRUS
Printed: 24-07-2013
4/4
02-03-2012
4/4
02-03-2012
